(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンゴスチン果皮から低級アルコールを含む抽出溶媒によって抽出した抽出物をレジオネラ属菌に対する抗菌成分としたことを特徴とする抗レジオネラ属菌組成物。
【請求項２】
請求項１記載の抗レジオネラ属菌組成物を含有することを特徴とするレジオネラ属菌用抗菌剤。
【請求項３】
請求項１記載の抗レジオネラ属菌組成物を含有することを特徴とするレジオネラ感染源に対するレジオネラ属菌除菌剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗レジオネラ属菌組成物、これを含有するレジオネラ属菌用抗菌剤、およびレジオネラ感染源に対するレジオネラ属菌除菌剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
レジオネラ属菌は水系、土壌など自然界に広く分布するブドウ糖非発酵グラム陰性桿菌であり、肺炎を主徴とする細菌感染症を惹起する。本菌は細胞内増殖菌であり、生体の中ではマクロファージなどの貪食細胞の中で殺菌されずに増殖することが可能である。また、β−ラクタマーゼ産生菌であるため、一部のβラクタム剤に耐性を示す。
【０００３】
感染症の多くは外来性に進入した菌により発症する。感染源としては空調用冷却水、温泉水、老朽化した給水設備による水溜まり等が挙げられている。さらに最近ではいわゆる２４時間風呂でのレジオネラ菌増殖が問題視されている。歴史的には、１９７６年米国フィラデルフィア市内で全米在郷軍人大会が開催された際、原因不明の重傷肺炎が集団発生し、そのうち２９名が死亡したが、その後の調査によってレジオネラ菌（レジオネラ・ニューモフィラ）が原因菌であることが明らかになった。我が国においては１９８１年、レジオネラ肺炎の第一例が報告されて以来、病院での院内感染等多数の報告がなされている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
レジオネラ属菌にはエリスロマイシン等の抗生物質が有効であるといわれているが、これらの抗生物質を日常的に使用することは耐性菌の出現や副作用の点で好ましくない。空調用冷却水等の感染源に対する殺菌剤として、塩素やアルコール類、界面活性剤等が挙げられるが、これらの殺菌剤は安全性の点で問題があり、飲食物等に配合することはできない。
【０００５】
このような状況にあって、レジオネラ属菌の感染を予防するという考え方が広がりつつあり、手軽に使用でき、安全性に問題のない抗菌活性素材の開発が望まれているところ、柑橘類果物の種子抽出物、好ましくはグレープフルーツの種子抽出物が抗レジオネラ属菌活性を有するということが特開平６−２３３９８６号公報に開示されている。しかし、その効果はレジオネラ属菌の増殖を完全に抑えるほど高いものとは認められない。
【０００６】
そこで、発明者らは、日常的に使用しても副作用がなく、飲食物等に含有させても安全性があり、しかも、レジオネラ属菌の増殖を強力に阻止できる抗レジオネラ属菌組成物を求め、古来より副作用がなく安全性が高いとの評価を得て広く利用されている植物に注目して鋭意研究し、それらのうちのある種の植物の抽出物にレジオネラ属菌増殖阻害作用があることを見出し、本発明を完成するに至ったものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
すなわち、本発明に係る抗レジオネラ属菌組成物は、マンゴスチン果皮から低級アルコールを含む抽出溶媒によって抽出した抽出物をレジオネラ属菌に対する抗菌成分としたものである。
【０００８】
マンゴスチン果皮から低級アルコールを含む抽出溶媒によって抽出した抽出物の安全性については全く問題がないものであり、また、本発明抗レジオネラ属菌組成物は、レジオネラ属菌の増殖を阻害することにより、レジオネラ属菌感染を防ぐのに有効にしてかつ安全なものである。
【０００９】
マンゴスチン果皮からの抽出物の抽出には、水、メタノール、エタノール、ブタノール等の低級アルコール、ヘキサン、エーテル、酢酸エチル等の有機溶媒の１種または２種以上を適宜混合して使用することができる。また、抽出条件は高温、室温、低温のいずれでもよいが、５０〜８０℃、１〜５時間程度が好ましい。抽出液は、濾過され、抽出溶媒の留去が行われた後、減圧下で濃縮するかあるいは凍結乾燥されて、目的の抽出物となる。
【００１０】
その抽出物は、そのまま抗レジオネラ属菌組成物として使用することができる。
【００１１】
レジオネラ属菌抗菌剤は、マンゴスチン果皮からの抽出物を所要の製剤用担体ないし希釈剤と任意に混合し、たとえば、経口投与剤として、マウスウォッシュ、トローチ剤、吸入剤、噴霧剤等とする。マウスウォッシュやトローチ剤の場合、口腔内に侵入したレジオネラ菌に対して、その感染を予防することが可能である。吸入剤として用いれば、口腔内および気道内におけるレジオネラ菌に対して同様の効果が期待できる。また、噴霧剤として直接感染源や生体に噴霧することにより、その除菌が可能である。レジオネラ属菌抗菌剤における抽出物の添加量は、最終製品の形態によっても異なるが、その効果の発現を考慮すると０．００１％以上の添加が好ましい。
【００１２】
また、レジオネラ属菌除菌剤としては、空調用冷却水の除菌剤、除菌効果を有する入浴剤等を例示することができる。空調用冷却水の除菌剤は、抽出物を無機担体に吸着させ、耐水性ポリマーに分散し成型することによって、安定した除菌力を長期間維持し得る製品を製造することが可能である。レジオネラ菌除菌剤における抽出物の濃度については、実際の使用にあたりその濃度が０．００１％以上になることが好ましい。
【００１３】
本発明による抗レジオネラ属菌組成物は、チューインガム、キャンディ、チョコレート、ビスケット等の菓子、清涼飲料等の飲食物に添加しても安全である。これを添加した飲食物を飲食することにより、口腔内に侵入したレジオネラ菌に対し、その感染を予防することが可能である。その添加量は、最終製品の形態によっても異なるが、その効果の発現を考慮すると０．００１％以上の添加が好ましく、また嗜好性の面から５％以下の添加が好ましい。
【００１４】
【発明の実施の形態】
前記抽出物を使用し、レジオネラ属菌用抗菌剤としてマウスウォッシュ、トローチ剤を、レジオネラ属菌感染予防用飲食物としてチューインガム、キャンディ、錠菓、飲料を、レジオネラ感染源に対する除菌剤として入浴剤を実施例として示す。ただし、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００１５】
〔植物抽出物の調製〕
破砕した各種植物それぞれ１００ｇに５倍量の抽出溶媒（水、メタノール、エタノール、ブタノール等の低級アルコール、ヘキサン、エーテル、酢酸エチル等の有機溶媒の一種または二種以上を適宜混合）を加え、３時間還流させて抽出した。濾過により得られた抽出液を濃縮または凍結乾燥することにより、目的の抽出物を得た。表１は、ユーカリ葉、マンゴスチン果皮、オオバンガジュツおよびグアバ葉について、抽出溶媒と抽出物の収率の関係を個別に示したものである。
【００１６】
【表１】
0003978517.tif 000002
【００１７】
表２は、上記ユーカリ葉、マンゴスチン果皮、オオバンガジュツおよびグアバ葉およびその他の植物について、使用した抽出溶媒を個別に示したものである。収率は５〜２５％であった。
【００１８】
【表２】
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【００１９】
〔試験１〕 レジオネラ属菌に対する抽出物の抗菌活性試験
供試菌株  レジオネラ・ニューモフィラ(Legionella pneumophila) ATCC 33152
試料  表２に示した抽出物３７種類を用いた。
試験方法  供試菌をバッファード・スターチ・イーストエキス（Ｂ−ＳＹＥ）液体培地で好気的条件下、２４時間振盪培養を行い、これを菌液とした。
９６穴マイクロプレートを用い各ウェル中で試料溶液（１００μｌ）の２倍希釈系列を調製した。２倍濃度で調製したＢ−ＳＹＥ液体培地に上記菌液を接種し、その１００μｌを各ウェルに添加した。好気的条件下で３７℃、４８〜７２時間培養後マイクロプレートリーダーを用いて５５０ｎｍにおける各ウェルの濁度を測定し、菌の生育を判定し、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を求めた。試験結果を表３に示した。
【００２０】
【表３】
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【００２１】
〔試験２〕 抽出物のレジオネラ属菌除菌試験（シェークフラスコ法）
供試菌株  レジオネラ・ニューモフィラ(Legionella pneumophila) ATCC 33152
試料  ユーカリ葉エタノール抽出物、マンゴスチン果皮エタノール抽出物オオバンガジュツエタノール抽出物、グアバ葉エタノール抽出物
試験方法  供試菌をバッファード・スターチ・イーストエキス（Ｂ−ＳＹＥ）液体培地で好気的条件下３７℃、２４時間振盪培養を行い、その後、菌数１〜２×１０5 個／ｍｌとなるように調製し、これを菌液とした。
滅菌したリン酸緩衝液に試料を懸濁し、この緩衝液に、菌液を菌数１〜２×１０4 個／ｍｌとなるように加え、１時間振盪した。振盪前と振盪後の緩衝液（菌液添加済）をＢ−ＳＹＥ寒天培地に塗抹し、好気的条件下３７℃、４８時間培養した。培地上のコロニーを計数し、試験菌の除菌率を以下の式により求めた。
除菌率＝（Ａ−Ｂ）／Ａ×１００Ａ；振盪前生菌数Ｂ；振盪後生菌数試験結果を表４に示す。
【００２２】
【表４】
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【００２３】
上記の試験結果から、これらの抽出物はレジオネラ属菌を除菌することが可能であるが、特にマンゴスチン果皮からの抽出物がレジオネラ属菌に対して最も活性が高いことが確認された。
【００２４】
【発明の効果】
すなわち、本発明抗レジオネラ属菌組成物によれば、日常的に使用しても副作用がなく、飲食物等に含有させても安全性があるとともに、レジオネラ属菌の増殖を強力に阻害する作用がある。したがって、本発明レジオネラ属菌抗菌剤によれば、その使用により口腔または気道内に侵入したレジオネラ菌に対して、その感染を予防することができ、直接感染源や生体に噴霧することによりその除菌が可能である。本発明レジオネラ属菌感染予防用飲食物によれば、これを飲食することによって、口腔内に侵入したレジオネラ菌に対し、その感染を予防することが可能である。本発明レジオネラ属菌除菌剤によれば、空調用冷却水の除菌や風呂等における除菌が可能であるとともに、安定した除菌力を長期間維持し得る。
【００２５】
【実施例】
以下の処方によりマウスウォッシュ、トローチ剤、チューインガム、キャンディ、錠菓、飲料、入浴剤を製造した。
【００２６】
実施例１ マウスウォッシュ
エタノール                      ２０．０％
香料                              １．０
サッカリン                        ０．０５
銅クロロフィリンナトリウム        ０．１
マンゴスチン果皮エタノール抽出物  ０．１
ユーカリ葉エタノール抽出物        ０．１
水                              ７８．６５
１００．０％
【００２７】
実施例２ トローチ剤
ブドウ糖                        ７２．８％
乳糖                            １９．０
アラビアゴム                      ６．０
香料                              １．０
モノフルオロリン酸ナトリウム      ０．７
ユーカリ葉エタノール抽出物        ０．５
１００．０％
【００２８】
実施例３ チューインガム
ガムベース                      ２０．０％
砂糖                            ５５．０
グルコース                      １５．０
水飴                              ９．３
ペパーミントオイル                ０．４
オオバンガジュツエタノール抽出物  ０．３
１００．０％
【００２９】
実施例４  キャンディ
砂糖                            ５０．０
水飴                            ３３．７５
クエン酸                          １．０
ペパーミントオイル                ０．１５
マンゴスチン果皮エタノール抽出物  ０．３
水                              １４．８
１００．０％
【００３０】
実施例５  錠菓
砂糖                            ７６．４％
グルコース                      １９．０
ショ糖脂肪酸エステル              ０．２
エンメイソウエタノール抽出物      ０．１
グアバ葉エタノール抽出物          ０．１
水                                ４．２
１００．０％
【００３１】
実施例６  飲料
オレンジ果汁                    ３０．０％
異性化糖                        １５．２４
クエン酸                          ０．１
ビタミンＣ                        ０．０４
香料                              ０．１
ローズマリーエタノール抽出物      ０．０２
ユーカリ葉エタノール抽出物        ０．０２
マンゴスチン果皮エタノール抽出物  ０．０２
水                              ５４．４６
１００．０％
【００３２】
実施例７  入浴剤
コハク酸                        ４０．０％
炭酸水素ナトリウム              ３８．０
デキストリン                    １８．０
香料                              １．０
マンゴスチン果皮エタノール抽出物  １．０
ローズマリーエタノール抽出物      １．０
カンキョウエタノール抽出物        １．０
１００．０％