(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウリナスタチンを有効成分とする妊娠中毒患者用の血圧降下剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は血圧降下剤に関し、さらに詳しくは本発明はウリナスタチンを有効成分とする血圧降下剤に関するものである。ウリナスタチンは細胞内Ｃａ流入を抑制し、血圧降下作用を有する。
【０００２】
【従来の技術】
症候性高血圧症や本態性高血圧症は、近年ますます増加傾向にある。これらに対する降圧剤としては、α−ブロッカー、β−ブロッカー、Ｃａチャンネルブロッカー、血管拡張剤、利尿剤、およびＡＣＥ阻害剤などがある。これらはそれぞれ特徴があり、高血圧症に対して種々選択されて使用されている。なかでも、Ｃａチャンネルブロッカーは虚血性心疾患の治療薬として開発された経緯から、狭心症などの冠動脈疾患を合併する高血圧に対して特に有効である。また、脳血管の拡張作用を有することから、脳血管性疾患を合併した高血圧症の治療にも適している。また腎血流を減少させにくいので、腎疾患を合併する場合でも使用が可能である。反面、Ｃａチャンネルブロッカーの短所として心筋抑制作用、降圧時の頻脈、めまい、頭痛等があるが、特に心筋抑制作用は、場合によっては心不全に症状を呈することもあり、注意を要する。また、今まで開発されているＣａブロッカーとしてはジヒドロピリジン系、非ジヒドロピリジン系の薬剤が知られているが、これらは化学的に合成された薬剤で生理的物質ではない。
【０００３】
【発明が解決しようとする問題点】
細胞が刺激を受けると様々なレセプターを介して細胞内に情報が伝達される。その過程で、細胞膜に存在するＣａチャンネルが開き、また小胞体からのＣａの流出が起こる。その結果細胞内Ｃａレベルは上昇する。しかし生体には過度に刺激が伝達されないように、また上昇した細胞内Ｃａの消去系も存在するはずである。すなわち天然のＣａアンタゴニストが生体には備わっているものと考えられる。しかし、いままで生理的な天然のＣａブロッカーは全く知られていなかった。現在存在する全てのＣａブロッカーは生体には存在しない物質であることから、心筋抑制作用、頻脈、頭痛等の副作用や妊娠の場合には使用しにくい等の問題点がある。また、従来のＣａブロッカーは、電位依存性Ｃａチャンネルに入り込み、Ｃａの流入を抑制するだけの作用で、細胞の保護作用、調節因子という側面は持ち合わせていない。生体には様々な刺激で細胞内のＣａの変化が起こり、それに対する調節機序も存在する。この生理的なＣａ調節機序を利用した、あるいはそれを補うＣａブロッカーがあれば副作用の軽減にもなるし、より安全な使用が可能になると思われる。
本発明は以上のようなＣａチャンネルブロッカーの現状を踏まえ、より安全で副作用の少ないＣａブロッカーを提供することを目的とするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明はウリナスタチンを有効成分とする血圧降下剤からなる。本発明において有効成分として使用されるウリナスタチンは、ヒトの尿から分離、精製することにより得られる分子量６７,０００の糖蛋白である。ウリナスタチンはトリプシンのみならず種々の膵酵素に対して阻害活性を有することが知られており、急性膵炎、急性循環不全の治療薬として既に使用されている〔日薬理誌（Folia pharmacol. japon), 81, 235〜244 (1983)〕。しかしながら細胞内Ｃａ流入抑制作用および血圧降下作用を有することは知られていない。
【０００５】
本発明の血圧降下剤は、通常、成人男子、１日１万〜５０万単位、好ましくは２０万〜３０万、１回１万〜１０万単位を静注または点滴により投与する。製剤はバイアル当たり１万〜３０万単位のウリナスタチンを常法により静注用または輸液用基剤に加えることにより製造される。
ウリナスタチンの毒性は極めて低く、３００万単位／５０ml／kgをマウスおよびラットに投与しても、静脈内、腹腔内、皮下および経口のいずれの投与経路においても死亡例は認められない。
【０００６】
【実施例】
以下に実施例により本発明をさらに具体的に説明する。
実施例１  ウリナスタチンによる細胞内カルシウム流入抑制作用
ヒト好中球細胞において、エンドトキシン（ＬＰＳ）による刺激に対して、ウリナスタチンが細胞内カルシウム濃度の上昇を抑制するか否かを検討した。
内壁をヘパリンでぬらした注射器で採血したヒト静脈血１０mlに生理食塩水を加えて混和し室温で３０分間放置した。上部の血漿・白血球の層を取り、あらかじめファイコール密度勾配液の入った遠心管の上に静かに重層した。
これを５分間遠心し、密度勾配により分離された血小板層を吸引した。さらに白血球層を取り、ファイコール密度勾配液により分離された多核球層を取り、生理食塩水で洗浄後、ハンクス液に懸濁浮遊させた。この懸濁浮遊液を、液が漏れないように囲ってあるスライドガラスであるFlexipem Disc上に、１０5個になるように調整した。
【０００７】
この細胞液の培地を無血清培地に換えてこれらにカルシウムイオンと特異的に結合する蛍光色素 Fura2-AM を添加し、遮光下で６０分間ＣＯ2インキュベーター内で培養した。その後、細胞液にウリナスタチンを１００mcMの濃度になるように培地に添加した。その後、ＬＰＳを１００mcg／mlの濃度になるように細胞液培地に添加した。Nikon TMD 蛍光顕微鏡（落射蛍光装置付き）（Nikon社製）で、経時的に、任意に選択した単一細胞５個のカルシウムの濃度変化を蛍光強度３４０nmおよび３８０nm（Ｆ340／Ｆ380）にて測定した。一方、上記の細胞液にウリナスタチンを添加せず、ＬＰＳによる刺激のみを加えたものを同様にカルシウム濃度測定し、これをコントロール（対象）とした。
【０００８】
その結果、ウリナスタチンを添加した細胞ではＬＰＳの刺激に対して、細胞内カルシウム濃度の上昇を完全に抑制した。
図１に単一細胞５個のそれぞれにおけるＬＰＳ刺激に対するウリナスタチンの細胞内カルシウム流入効果を示した。図１(Ａ)および(Ｂ)はウリナスタチンを添加した場合の細胞内カルシウム濃度を示す。
また、上記のヒト好中球細胞における場合と同様にして、白血病セルラインであるＵ−９３７、ＨＬ６０およびヒト正常線維芽細胞のそれぞれでＬＰＳ刺激に対するカルシウム流入抑制効果を測定し、同様の結果が得られた。
【０００９】
実施例２  臨床試験
重症の妊娠中毒患者２例にウリナスタチンを１０〜２０万単位／日を静注投与し、血圧の変化を観察した。
妊娠中毒症の重症度スコアである Gestosis Index（GI)（血圧、浮腫、蛋白尿によってスコアリングしたもの）により重症と判定された２例の患者にウリナスタチンを静注投与した。投与の前後にわたって血圧の他、安静時の浮腫および蛋白尿を観察した。１例は妊娠３７〜３９週および３９〜４１週の各２週にわたってウリナスタチンを１０万蛋白／日／投与し、４１週目に帝王切開を行い、もう１例は妊娠３１週２日目から４日間２０万単位／日投与し、投与終了後６日目で帝王切開にて出産した。
投与中、明らかに血圧が拡張期、収縮期とも低下したことが観察された。
図２および図３に各例の血圧およびGestosis Indexを示す。
【００１０】
【発明の効果】
本発明の血圧降下剤によれば、細胞内Ｃａ流入が抑制され血圧が降下する。有効成分として使用されるウリナスタチンは生体内物質であり、生体内における生理的なＣａ調節機序を利用あるいは補なうＣａブロッカーであるので副作用が少なく、従来の合成Ｃａブロッカーに比較してより安全に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】単一細胞におけるLPS刺激に対するウリナスタチンの細胞内カルシウム流入抑制効果を示すグラフであり、(Ａ)はウリナスタチンを使用しない場合（対照）、(Ｂ)はウリナスタチンを使用した場合の効果を示す。
【図２】妊娠中毒患者にウリナスタチンを静注した場合の血圧の変化を示すグラフである。
【図３】別の妊娠中毒患者にウリナスタチンを静注した場合の血圧の変化を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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