(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳製品をプロテアーゼ処理し、次いでグルタミン酸デカルボキシラーゼ産生能を有するラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７及び／又はラクトバチルス・カゼイＣ−３を接種して培養することを特徴とするγ−アミノ酪酸含有発酵乳の製造方法。
【請求項２】
乳製品をプロテアーゼ処理し、該プロテアーゼ処理と同時もしくは処理の後に乳製品をグルタミナーゼ処理し、次いでグルタミン酸デカルボキシラーゼ産生能を有するラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７及び／又はラクトバチルス・カゼイＣ−３を接種して培養することを特徴とするγ−アミノ酪酸含有発酵乳の製造方法。
【請求項３】
プロテアーゼがエキソプロテアーゼとエンドプロテアーゼの混合物であり、該プロテアーゼの５０％以上がエキソプロテアーゼであることを特徴とする請求項１又は２記載の製造方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項記載の製造方法により得られるγ−アミノ酪酸含有発酵乳。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）を含有する発酵乳の製造方法及び該方法により得られるＧＡＢＡ含有発酵乳に関する。
【０００２】
【従来の技術】
哺乳類においては、ＧＡＢＡは、脳や脊椎に存在する抑制性の神経伝達物質であり、その生理効果については、脳の血流を活発にさせ、酸素供給量を増大させて脳の代謝機能を亢進する、脊椎の血管運動中枢に作用して血圧を降下させる、抗利尿ホルモンであるバソプレッシンの分泌を抑制して、血管を拡張して血圧を下げる、ＴＣＡサイクルの導入部に必要なヘキソキナーゼ活性を高め、糖代謝を促進させることに関与することなど（新編脳代謝賦活剤大友栄一編、医薬ジャーナル社（１９８７））が報告され、脳代謝賦活を目的に医薬品としても利用されている。
【０００３】
従って、ＧＡＢＡを食品として摂取することにより高血圧症の改善や精神の安定化作用が期待できることから、適当な処理を食品に施すことにより、ＧＡＢＡ含有量を増強させた食品もいくつか提唱されている。例えば、ＧＡＢＡ富化コメ胚芽（オリザ油化（株））（コメ胚芽を嫌気処理してＧＡＢＡ含有量を０．３％に高めた食品）；ギャバロン茶（多社）（茶葉を嫌気処理してＧＡＢＡ含量を処理前の数十倍の２２０mg％に高めた茶）等が知られている。
【０００４】
一方、微生物を利用してＧＡＢＡを富化した食品の製造方法として、牛乳にグルタミン酸（塩）を添加し、ＧＡＢＡを生成する能力を持つ乳酸菌を接種し培養してＧＡＢＡを含有する発酵食品を得る方法（特開平７−２２７２４５号）、またグルタミン酸（ナトリウム）に酵母又はクロレラの細胞破砕液を作用させてＧＡＢＡを富化した食品素材を製造する方法（特開平９−２３８８５０号）などがある。更に、特開平１０−２９５３９４号公報には、発酵乳製品中の乳酸菌の脱炭酸酵素作用によりγ−アミノ酪酸を生成する方法が開示されている。しかしながら、これらの方法を用いても、グルタミン酸を添加しなければ、満足し得る量のＧＡＢＡを得ることはできなかった。
このように、従来の微生物を利用したＧＡＢＡ含有飲食品の製造法においては、いずれもグルタミン酸又はその塩を添加しなければ、満足し得る効果を得ることはできなかった。
【０００５】
しかし、グルタミン酸の添加は、食品の味を変化させてしまう、殺菌時などに熱が加わるとグルタミン酸と還元糖（糖質）がアミノカルボニル反応を起こし変色してしまう、作業性が悪く製造コストも高くなってしまう等の問題があった。また、グルタミン酸は溶解性が低いため、液状の発酵乳へ添加する際には、通常グルタミン酸ナトリウムを用いて作業性を向上させているが、この場合ナトリウムが残存し、ナトリウムの血圧上昇作用が危惧されることとなる。更に、グルタミン酸を食品添加物として製品に用いた場合には、昨今の消費者に対しても、好ましからざるイメージを与えてしまうこともデメリットであった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的はグルタミン酸を添加することなく、風味、色調が良好なＧＡＢＡ含有発酵乳を製造する方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、原料となる乳製品をプロテアーゼ処理した後に、グルタミン酸デカルボキシラーゼ産生能を有する乳酸菌及び／又はビフィドバクテリウム属細菌を接種して培養すれば、ＧＡＢＡを豊富に含有し、かつ風味、色調が良好で、菌数も増加した発酵乳が得られることを見出し、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は、乳製品をプロテアーゼ処理し、次いでグルタミン酸デカルボキシラーゼ産生能を有するラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７及び／又はラクトバチルス・カゼイＣ−３を接種して培養することを特徴とするＧＡＢＡ含有発酵乳の製造方法を提供するものである。
【０００９】
また、本発明は、乳製品をプロテアーゼ処理し、該プロテアーゼ処理と同時もしくは処理後に乳製品をグルタミナーゼ処理し、次いでグルタミン酸デカルボキシラーゼ産生能を有するラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７及び／又はラクトバチルス・カゼイＣ−３を接種して培養することを特徴とするＧＡＢＡ含有発酵乳の製造方法を提供するものである。更に、本発明は、上記の方法により得られることを特徴とするＧＡＢＡ含有発酵乳を提供するものである。
【００１０】
【発明の実施の形態】
本発明の発酵乳とは、乳製品をそのままあるいは必要に応じて希釈した溶液中で、乳酸菌及び／又はビフィドバクテリウム属細菌を培養した溶液もしくはその殺菌処理物のことであり、乳等省令により定められている発酵乳、乳製品乳酸菌飲料等の生菌含有タイプの飲料、それらを殺菌した乳性飲料等を包含するものである。ここで、乳製品とは乳蛋白質を含有するものをさし、具体的には、牛乳・山羊乳などの生乳、脱脂粉乳、全脂粉乳、生クリーム等のことである。
【００１１】
本発明においては、まず、乳製品をプロテアーゼ処理することにより、乳蛋白由来の各種ペプチドやアミノ酸を遊離させる。用いる乳製品は特に限定されないが、牛由来の脱脂粉乳又は全脂粉乳を用いることが好ましい。乳製品の使用量も特に限定されず、最終製品の形態、乳及び乳製品の成分規格に関する省令への適応等を考慮して決定すればよいが、ＳＮＦ（無脂乳固形分）換算で、３〜２５重量％、特に４〜１０重量％とすることが、最終製品としての呈味性や物性、また乳等省令の規格の点から好ましい。なお、本明細書中において％とは、後述するＧＡＢＡ変換率を除き質量％（重量％）を示す。
【００１２】
処理に用いるプロテアーゼは、微生物、植物、動物由来のものをいずれも好適に使用できる。具体的には、ペプチド鎖のＮ末端からアミノ酸を１残基づつ遊離するアミノペプチダーゼ、ペプチド類のＣ末端から遊離するカルボキシペプチダーゼ等のエキソプロテアーゼ及びペプチド結合鎖の中間から分解するセリンプロテアーゼ、チオールプロテアーゼ、メタロプロテアーゼ等のエンドプロテアーゼ等が挙げられる。これらは１種又は２種以上を組み合わせて使用することができ、中でもエキソプロテアーゼとエンドプロテアーゼを併用した場合発酵乳中のＧＡＢＡ含量が高まり、乳酸菌の生残性が向上し、風味も良好となるため好ましい。また、使用する酵素量は力価として１０，０００Ｕ／ｇ程度のものを酵素蛋白質の総量として、ミルク蛋白質に対し、０．５〜３．０％、特に０．５％〜１．０％が最終製品におけるＧＡＢＡ量、調整コスト等の点から好ましい。更に、両者の比率はエキソプロテアーゼをエンドプロテアーゼよりも高い力価で使用することがグルタミン酸の遊離量の点から好ましく、力価が同程度である場合には、酵素蛋白量としてエキソプロテアーゼとエンドプロテアーゼの比率を７：３〜５：５、特に６：４〜５：５とすることがＧＡＢＡ産生量の点から好ましい。従ってプロテアーゼがエキソプロテアーゼとエンドプロテアーゼの混合物である場合、該プロテアーゼの５０％以上がエキソプロテアーゼであることが好ましい。
【００１３】
また、本発明の製造法においては、プロテアーゼの処理の際、pH調整剤を用いることは好ましいことではない。従って、乳が中性であることから、上記プロテアーゼは中性プロテアーゼであることが望ましく、また次のステップである乳酸菌の作用によりＧＡＢＡに変換する効率を高めるためにも中性領域で処理することが好ましい。
【００１４】
このような食品加工用の（中性）プロテアーゼとしては例えばアクチナーゼ（科研製薬社製）、ウマミザイム（天野製薬社製）、プロテアーゼ「アマノ」Ｇ（天野製薬社製）、フレーバーザイム（ノボロルディクスバイオインダストリー）、パンチダーゼＮＰ−２（ヤクルト薬品工業社製）などが挙げられる。
更にＧＡＢＡ含有量の高い発酵乳を調製するためには、乳製品をプロテアーゼ処理し、該プロテアーゼ処理と同時もしくは処理の後に乳製品をグルタミナーゼ処理することが好ましい。グルタミナーゼは、プロテアーゼ処理により遊離したグルタンをＧＡＢＡのプレカーサーとなるグルタミン酸に変換する。このようなグルタミナーゼで食品加工用のものとしては、例えばグルタミナーゼＦ「アマノ」１００、グルタミナーゼ（大和化成社製）、グルタミナーゼ１００ＦＧ（ナガセ生化学工業社製）等が挙げられる。この中で、グルタミナーゼ「アマノ」１００が最も効率的にグルタミンをグルタミン酸に変換するので好ましい。
【００１５】
酵素の処理条件としては、最終製品である発酵乳製品におけるＧＡＢＡ含量、最終製品の風味、調製コスト、また一連の作業性の点から、上記のとおり、３〜２５％の乳製品を用い、ミルク蛋白質に対して０．５％〜３．０％の酵素蛋白質を使用し、３０〜７０℃、pH無調整で１２〜２４時間処理することが好ましい。その後８０〜１００℃で３〜２０分間程度加熱し、酵素を失活させる方法が最も効率がよい処理条件である。
このような条件の範囲外で調製を行ってもなんら問題はなく、乳製品濃度や酵素量を増減させ、遊離するグルタミン酸量を調節してもよい。
また、こうして得られる酵素処理後の乳製品は、これを単独で用いてもよいが、その他の乳製品と混合してから、後の発酵工程に供することが好ましい。その際の使用量は、後工程で用いる乳酸菌等のＧＡＢＡ変換率を鑑み、最終製品において設定されているＧＡＢＡ量にあわせて適宜決定すればよいが、本発明では、上記の条件にて調製された処理済み乳製品を全乳製品中５〜５０％、特に１０〜２０％程度使用することが、風味面、製造コスト等の点から好ましい。例えば、フレーバーザイムを用い上記の条件で乳製品を処理したところ、ミルク蛋白質に含まれるグルタミン酸の約１６％が遊離し、これを全乳製品に対し１０％使用して製造した発酵乳製品は、ＧＡＢＡ含量も高く、風味も良好である。
【００１６】
プロテアーゼ処理物は、グルタミン酸デカルボキシラーゼ産生能を有する乳酸菌及び／又はビフィドバクテリウム属細菌を接種して培養することにより、ＧＡＢＡ含有発酵乳とすることができる。
【００１７】
ここで用いるグルタミン酸デカルボキシラーゼ産生能を有する乳酸菌又はビフィドバクテリウム属細菌としては、ラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７及び／又はラクトバチルス・カゼイＣ−３が優れたＧＡＢＡ生産量、乳酸菌増殖能が得られ、発酵乳の風味も向上するため好ましい。また、乳酸菌又はビフィドバクテリウム属細菌のグルタミン酸デカルボキシラーゼ産生能としては、グルタミン酸又はその塩を１２０mg／１００ml含有する培地において２５〜４０℃で４８時間培養したときのＧＡＢＡ変換率が２０％以上であることが好ましく、特に７０％以上生産する能力を持つものが好ましい。２０％未満では生理効果が得られる程度までＧＡＢＡを産生させるには、培養時間が長くなるため作業効率が低下してしまい、また、その間の酸産生によって発酵乳の風味が劣化する場合もあるからである。なお、１ｇのグルタミン酸を１００％変換した場合のＧＡＢＡ量は約０．７１ｇであるため、本明細書でいうＧＡＢＡ変換率とは、前記１００％を基準とした相対値を指す。このような変換率を有する菌株としては、例えばラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７が挙げられる。
【００１８】
前記プロテアーゼ処理された乳製品に、グルタミン酸デカルボキシラーゼ生産能を有する乳酸菌又はビフィドバクテリウム属細菌から選ばれる１種又は２種以上を接種して培養する際には、用いた菌に適した培養条件を適宜選択すればよい。一般には３０〜３７℃程度で、１日〜１週間程度培養すればよい。より詳細には、例えば、ラクトコッカス  ラクティスであれば乳製品に接種後３０℃〜３７℃程度でpH４．３〜４．５程度まで培養を行えばよく、ビフィドバクテリウム属細菌であれば、３７℃程度で２０〜２２時間程度、pH４．５〜４．７程度まで培養すればよい。培養方法は、静置培養、攪拌培養、振盪培養、通気培養等用いる微生物の培養に適した方法を適宜選択して用いればよい。
【００１９】
このような菌の培養によって、プロテアーゼ処理された乳製品においては、遊離したグルタミン酸が直接ＧＡＢＡに変換するのに加え、遊離している各種のペプチドやアミノ酸（グルタミン酸を除く）をも間接的にＧＡＢＡへと変換しているものと考えられる。
【００２０】
こうして得られる本発明の発酵乳には、その他の食品素材、すなわち、各種糖質や乳化剤、増粘剤、甘味料、酸味料、果汁等を配合してもよい。具体的には、蔗糖、異性化糖、グルコース、フラクトース、パラチノース、トレハロース、ラクトース、キシロース等の糖類；ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、ラクチトール、パラチニット、還元水飴、還元麦芽糖水飴等の糖アルコール；蔗糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、レシチン等の乳化剤；寒天、ゼラチン、カラギーナン、グァーガム、キサンタンガム、ペクチン、ローカストビーンガム等の増粘（安定）剤；ヨーグルト系、ベリー系、オレンジ系、花梨系、シソ系、シトラス系、アップル系、ミント系、グレープ系、アプリコット系、ペア、カスタードクリーム、ピーチ、メロン、バナナ、トロピカル、ハーブ系、紅茶、コーヒー系等のフレーバー類が挙げられる。この他にも、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＥ等の各種ビタミン類やカルシウム、鉄、マンガン、亜鉛等のミネラル類を配合しても、優れた風味の発酵乳を得ることができる。
【００２１】
本発明の発酵乳を用い、発酵乳製品の製造は常法により行えばよい。例えば、まず前記の如くして発酵乳を得る。次いで、各種甘味素材等を含むシロップ溶液を添加混合し、更にフレーバーを添加して最終製品に仕上げればよい。また、寒天、ゼラチン等の各種増粘剤をシロップ液中もしくは別途増粘剤として調製し、これを添加して固形状の発酵乳にしてもよい。
【００２２】
本発明の発酵乳は、プレーンタイプ、フレーバードタイプ、フルーツタイプ、甘味タイプ等、いずれの種類の製品とすることも可能であり、また、プレーンタイプ、ソフトタイプ、ドリンクタイプ、固形（ハード）タイプ、フローズンタイプ等、いずれの形態の製品とすることも可能である。また、発酵終了後、シロップ液との混合前等の段階で発酵乳に殺菌処理を施し、死菌含有タイプの製品としてもよい。
【００２３】
【発明の効果】
本発明は、乳製品へプロテアーゼ処理を施すことにより、乳蛋白質から各種のペプチド、グルタミン酸を遊離させ、遊離したペプチド、グルタミン酸をグルタミン酸デカルボキシラーゼ生産能を有する乳酸菌又はビフィドバクテリウム属細菌の作用によりＧＡＢＡに変換させるものである。このような処理を行うことにより、食品添加物であるグルタミン酸を添加する必要がないため、味、色調が変化せず、ＧＡＢＡ含量の高い発酵乳が安価に得られる。
また、プロテアーゼ処理により生成するペプチド類は多岐にわたるものと考えられ、その中には苦味等風味上好ましくないものも含まれると考えられたが、実際には、プロテアーゼ処理した乳製品を乳酸菌で発酵させることにより、わずかに存在した苦味やえぐみといったものが消失し、まろやかで風味の良好な発酵乳が得られる。
【００２４】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお「％」は「重量％」を示す。
【００２５】
実施例１
３０％脱脂粉乳溶液に、乳蛋白質に対して１％の酵素蛋白質を添加し、５０℃で２４時間保温した。このプロテアーゼ処理溶液を１０％添加した２０％脱脂粉乳溶液を培地として、加熱滅菌後、ラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７を接種し、３０℃で７２時間培養し、発酵乳中のＧＡＢＡ含量を測定した。ＧＡＢＡ及びグルタミン酸の測定は自動アミノ酸分析装置（日本電子製）を用いた。
酵素としては、エキソプロテアーゼとエンドプロテアーゼの２種類の酵素が複合している中性プロテアーゼを用いた。具体的には、エキソプロテアーゼの比率の高いフレーバーザイム（ノボノルディスクバイオインダストリー社製）あるいはウマミザイム（天野製薬社製）、エンドプロテアーゼの比率の高いアクチナーゼＡＳ（科研製薬社製）、プロテアーゼＡ「アマノ」Ｇ（天野製薬社製）を用いた。
【００２６】
【表１】
0003888811.tif 000002
【００２７】
その結果、酵素処理を施したものは全て高いＧＡＢＡ量を示した（表１）。また、上記の条件で、酵素としてエンドプロテアーゼ（シグマ社製）とエキソプロテアーゼ（シグマ社製）とをそれぞれ単独で使用した場合には、発酵乳中のＧＡＢＡ量は無処理より多いものの、併用に比べて少なかった。
【００２８】
実施例２
３０％脱脂粉乳溶液に、乳蛋白質に対して０．１％あるいは１％の酵素蛋白質量のプロテアーゼを添加し、更にプロテアーゼの１／５量の０．０２％あるいは０．２％のグルタミナーゼを添加して５０℃で４８時間保温した。プロテアーゼはウマミザイム（天野製薬社製）、プロテアーゼＡ「アマノ」Ｇ（天野製薬社製）、あるいはフレーバーザイム（ノボノルディスクバイオインダストリー社製）を使用し、またグルタミナーゼはグルタミナーゼＦアマノ１００（天野製薬社製）を使用した。このプロテアーゼとグルタミナーゼで処理した溶液を１０％添加した２０％脱脂粉乳溶液を培地として、加熱滅菌後、ラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７を接種し、３０℃で７２時間培養し、発酵乳中のＧＡＢＡ含量を測定した。結果を表２に示す。
【００２９】
【表２】
0003888811.tif 000003
【００３０】
その結果、プロテアーゼにグルタミナーゼを併用処理したミルクを用いることにより、更にＧＡＢＡ濃度が増加することが明らかとなった。
【００３１】
実施例３
３０％濃度の脱脂粉乳溶液に蛋白質に対して酵素蛋白質量として１％のフレーバーザイムと０．２％のグルタミナーゼＦ「アマノ」１００を添加し、pH調製剤を添加することなく、５０℃で２４時間反応を継続した。９０℃で５分間加熱して酵素を失活させ、この処理液を２０％脱脂粉乳溶液に１０％添加した。この基質は１２０mg／１００mlのグルタミン酸を含有し、ＧＡＢＡは含有されていなかった。基質に表３に示す各種乳酸菌を接種し３０〜３７℃で７２時間培養し発酵乳を調製した。得られた発酵乳中のＧＡＢＡ含量及び用いた乳酸菌のＧＡＢＡ変換率を測定した。
また、これらの発酵乳を均質化処理した後、３０％のシロップ溶液と混合し、ガラス瓶に充填して発酵乳製品を製造した。これらを専門パネラー５名で官能評価し、風味を比較した。なお、風味評価の指標は以下のとおりである。結果を表３に示す。
＋２：風味がよい、＋１：風味がややよい、０：普通、−１：やや風味が悪い、−２：風味が悪い
【００３２】
【表３】
0003888811.tif 000004
【００３３】
その結果、ラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７、ラクトバチルス・カゼイＣ−３を用いた場合にＧＡＢＡ産生能、風味の両方共に良好で、特にラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７が良好であった。
【００３４】
実施例４
以下３通りの方法で発酵乳を製造した。
実施品１；３０％濃度の脱脂粉乳溶液に蛋白質に対して酵素蛋白質量として１％のフレーバーザイムと０．２％のグルタミナーゼＦ「アマノ」１００を添加し、pH調整剤を添加することなく、５０℃で２４時間反応を継続した。９０℃で５分間加熱して酵素を失活させ、この処理液を２０％脱脂粉乳溶液に１０％添加した。このときのグルタミン酸濃度は１２０mg／１００mlであった。１２１℃で３秒間加熱滅菌後、ラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７を１％接種し、３０℃で、７２時間培養した。
比較品１；２０％脱脂粉乳溶液に、グルタミン酸量として１２０mg／１００mlとなる量のグルタミン酸ナトリウムを添加し、加熱滅菌後、ラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７を１％接種し、３０℃で、７２時間培養した。
比較品２；２０％脱脂粉乳溶液を加熱滅菌後、ラクトコッカス・ラクティスＹＩＴ２０２７を１％接種し、３０℃で、７２時間培養した。
こうして得られた発酵乳各々のＧＡＢＡ含量、風味、生菌数を比較した。ＧＡＢＡ含量、生菌数は実施例１と同様に測定した。結果を表４に示す。
【００３５】
【表４】
0003888811.tif 000005
【００３６】
実施品ＧＡＢＡ含量は、比較品２の１０倍以上であり、またプロバイオティックスとして重要な生菌数は比較品１の３倍でありながら、風味はまろやかで良好であった。
【００３７】
実施例５
実施例４の実施品１として調製した発酵乳７kgを１５０kg／cm2 で均質化後、別途加熱滅菌した１０％ショ糖及び０．０２％ビタミンＣを含む溶液３kgと混合し、更にヨーグルトフレーバー（ヤクルトマテリアル株式会社製）を０．１％添加した。これをポリスチレン溶液に充填し、ドリンクタイプの発酵乳製品を製造した。
この発酵乳製品は、まろやかで良好な風味を有し、１０℃、３週間の静置保存後も沈殿、分離等は見られず、安定な物性を保ち、ＧＡＢＡ含量も低下することはなかった。
【００３８】
実施例６
３０％濃度と脱脂粉乳溶液に蛋白質に対して酵素蛋白質量として１．０％のウマミザイムと０．２％のグルタミナーゼＦ「アマノ」１００を添加し、pH調整剤を添加することなく、４５℃で２４時間反応を継続した。８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、この処理液を２０％脱脂粉乳溶液に１０％添加した。このときのグルタミン酸濃度は１１０mg／１００mlであった。１２１℃で３秒間加熱滅菌後、ラクトバチルス・カゼイＣ−３を０．５％接種し、３７℃で、７２時間培養した。
こうして得られた発酵乳を７kgを１５０kg／cm2 で均質化後、別途加熱滅菌した１０％グルコース溶液３kgと混合し、更に寒天溶液（寒天１．５％）を添加し、バニラフレーバー（ヤクルトマテリアル株式会社製）を０．１％添加して紙容器に充填した。容器に蓋をし低温にて固化させ、ハードヨーグルトタイプの発酵乳製品を製造した。
この発酵乳製品は、まろやかで良好な風味を有し、１０℃、３週間の静置保存後も沈殿、分離等は見られず、安定な物性を保っていた。また、ＧＡＢＡ含量も低下することなく、菌の増殖、生残性も良好であった。