(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0004012579.tif 000081
〔式中、
Ｒ1及びＲ2は、各々互いに独立して、水素又は保護基であるか、又は、Ｒ1は、これらの意義を有し、Ｒ2は、式（Ｐ１）又は（Ｐ２）：
【化５】
0004012579.tif 000082
（式中、
Ｙaは、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ6−Ｃ12アリール、Ｃ7−Ｃ20アラルキル、Ｃ7−Ｃ20アルカリ−ル、−ＯＲb、−ＳＲb、−ＮＨ2、第一級アミノ、第二級アミノ、Ｏ-Ｍ+又はＳ-Ｍ+であり；
Ｘaは、酸素又は硫黄であり；
Ｒaは、水素、Ｍ+、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ2−Ｃ12アルケニル、又はＣ6−Ｃ12アリール、或いはＲaＯ−基は、５員環で１乃至３の窒素原子を有するＮ−ヘテロアリール−Ｎ−イルであり；
Ｒbは、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル又はＣ6−Ｃ12アリールであり；そして
Ｍ+は、Ｎａ+、Ｋ+、Ｌｉ+、ＮＨ4+又は第一級、第二級、第三級若しくは第四級アンモニウムであり；
Ｙa、Ｒa及びＲbにおけるアルキル、アリール、アラルキル及びアルカリールは、非置換又はアルコキシ、アルキルチオ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、フェニル、ニトロフェニル若しくはハロフェニルで置換される）
で示される、リンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基であり；
Ｂは、式（II）又は（IIｅ）：
【化３】
0004012579.tif 000083
（式中、
Ｒb1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ1−Ｃ12アルキルであり；
Ｒb2及びＲb3は、各々互いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ12アルキル）2、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1−Ｃ12アルキルチオを示し、このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換され；或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ若しくは炭素数２乃至３０の第二級アミノであり；そして
Ｒb6は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルである）で示される基であるプリン基又は
式（III）、（IIIａ）、（IIIｂ）又は（IIIｃ）：
【化４】
0004012579.tif 000084
〔式中、Ｒb6は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルであり、Ｒb8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ12アルキル）2、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1−Ｃ12アルキルチオであり（このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換される）、或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ、炭素数２乃至３０の第二級アミノ、Ｃ2−Ｃ12アルケニル又はＣ2−Ｃ12アルキニルであり、式（IIIｂ）におけるＮＨ2は、非置換又はＣ1−Ｃ6アルキル、ベンゾイル若しくは保護基によって置換される〕で示されるウラシル、チミン又はシトシンの基、並びに式（III）、（IIIａ）、（IIIｂ）及び（IIIｃ）の基のジヒドロ誘導体であるピリミジン基であり；そして
Ｒ3は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）：
【化２】
0004012579.tif 000085
（式中、
Ｒ4は、水素、Ｃ1−Ｃ21アルキル、Ｃ2−Ｃ21アルケニル、Ｃ2−Ｃ21アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）−アルキルであり；
Ｒ5は、水素、Ｃ1−Ｃ10アルキル、−ＣＨ2−Ｏ−Ｒ6又は式（Ｉｂ）の基であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1−Ｃ22アルキル、Ｃ3−Ｃ21アルケニル、又は部分的に若しくは完全にフッ素置換されたＣ1−Ｃ10アルキル又は−〔（ＣＨ2）2−Ｏ〕m−Ｒ7であり；
Ｒ7は、水素又はＣ1−Ｃ21アルキルであり；
Ｚは、−Ｃ（ＣＨ３）２−であり；
ｎは、１乃至１２の数であり；そして
ｍは、１乃至４の数であり、但し、ｎ＝１及びＲ5＝水素の場合、Ｒ4は水素ではない）で示される基である〕で示される化合物。
【請求項２】
Ｒ1及びＲ2の各々が、水素である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1及びＲ2が、同一の保護基である請求項１記載の化合物。
【請求項４】
式（II）及び（IIｅ）における、ヒドロキシ及びアミノ基の保護基が、Ｃ1−Ｃ8アシルである請求項１記載の化合物。
【請求項５】
式（II）及び（IIｅ）における、第一級アミノが、１乃至１２の炭素原子を有し、第二級アミノが、２乃至１２の炭素原子を有する請求項１記載の化合物。
【請求項６】
式（II）及び（IIｅ）における、第一級アミノ及び第二級アミノが、式：Ｒa1Ｒa2Ｎ〔式中、Ｒa1は、水素又は、独立して、Ｒa2の定義を有し、Ｒa2は、Ｃ1−Ｃ20アルキル、Ｃ1−Ｃ20アミノアルキル又はＣ1−Ｃ20ヒドロキシアルキル；カルボキシアルキル又はカルバルコキシアルキル（このカルバルコキシ基は、２乃至８の炭素原子を有し、アルキル基は、１乃至６の炭素原子を有する）；Ｃ2−Ｃ20−アルケニル；フェニル、モノ−又はジ−（Ｃ1−Ｃ4アルキル又はＣ1−Ｃ4アルコキシ）フェニル、ベンジル、モノ−又はジ−（Ｃ1−Ｃ4アルキル又はＣ1−Ｃ4アルコキシ）ベンジル；又はイミダゾリル−Ｃ1−Ｃ6アルキル、或いはＲa1及びＲa2は、一緒になって、テトラ−又はペンタ−メチレン、３−オキサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ2−ＮＲa3−ＣＨ2ＣＨ2−又は−ＣＨ2ＣＨ2−ＮＲa3−ＣＨ2ＣＨ2−（式中、Ｒa3は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルである）であり、アミノアルキルのアミノ基は、非置換又は一又は二個のＣ1−Ｃ4アルキル若しくはＣ1−Ｃ4ヒドロキシアルキル基で置換されており、ヒドロキシアルキルのヒドロキシ基は、非置換又はＣ1−Ｃ4アルキルでエーテル化されている〕で示される基である請求項１記載の化合物。
【請求項７】
第一級アミノ又は第二級アミノが、メチル−アミノ、エチル−アミノ、ジメチル−アミノ、ジエチル−アミノ、アリル−アミノ、モノ−若しくはジ−（ヒドロキシエタン−２−イル）−アミノ、フェニル−アミノ、ベンジル−アミノ、アセチル−アミノ、イソブチリル−アミノ又はベンゾイル−アミノである請求項５記載の化合物。
【請求項８】
式（II）及び（IIｅ）におけるＲb1が、水素である請求項１記載の化合物。
【請求項９】
式（II）におけるＲb2及びＲb3が、各々互いに独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ2、メチルアミノ、ジメチルアミノ、ベンゾイルアミノ、イソブチルアミノ、メトキシ、エトキシ及びメチルチオである請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
プリン基としてＢが、プリン又は、アデニン、Ｎ−メチルアデニン、Ｎ−ベンゾイルアデニン、２−メチルチオアデニン、２−アミノアデニン、６−ヒドロキシプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、２−アミノ−６−メチルチオプリン、グアニン及びＮ−イソブチリルグアニンから選ばれるアデニン系の基である請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
式（III）、（IIIｂ）及び（IIIｃ）におけるＲb8が、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル又はＣ1−Ｃ6ヒドロキシアルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル又はＣ2−Ｃ6アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ2、ベンゾイルアミノ又はモノ−若しくはジ−Ｃ1−Ｃ6アルキルアミノである請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
式（III）、（IIIｂ）及び（IIIｃ）におけるＲb8が、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル又はＣ1−Ｃ6アルコキシ又はＣ1−Ｃ6ヒドロキシアルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル又はＣ2−Ｃ6アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ2、ベンゾイルアミノ又はモノ−若しくはジ−Ｃ1−Ｃ6アルキルアミノである請求項１記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒb8が、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ2、ＮＨＣＨ3、Ｎ（ＣＨ3）2、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ2−Ｃ4アルケニル又はＣ2−Ｃ4アルキン−１−イルである請求項１１記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒb8が、水素、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ2−Ｃ4アルケニル、Ｃ2−Ｃ4アルキン−１−イル、ＮＨ2、ＮＨＣＨ3、又は（ＣＨ3）2Ｎである請求項１２記載の化合物。
【請求項１５】
ピリミジン基としてのＢが、ウラシル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、５−クロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウラシル、５−メチルシトシン、５−（２−プロピニル）チミン及び５−（２−プロピニル）シトシンから誘導される請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒaがβ−シアノエチルであり、Ｙaがジ（イソプロピル）アミノである請求項１記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ3が式（Ｉａ）の基である請求項１記載の化合物。
【請求項１８】
ｎが１乃至８の数である請求項１７記載の化合物。
【請求項１９】
ｎが１乃至６の数である請求項１８記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ4が、水素、Ｃ1−Ｃ21アルキル、Ｃ2−Ｃ21アルケニル又はＣ2−Ｃ21アルキニルである請求項１７記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ4が、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルである請求項２０記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ5が、水素、Ｃ1−Ｃ5アルキル又は−ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ2−Ｏ−Ｃ1−Ｃ22アルキル又は−ＣＨ2−Ｏ〔（ＣＨ2）2−Ｏ〕m−Ｃ1−Ｃ10アルキル（式中、ｍは１乃至４の数である）である請求項１７記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ5が、水素、メチル又は−ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ2−Ｏ−Ｃ1−Ｃ22アルキル又は−ＣＨ2−Ｏ〔（ＣＨ2）2−Ｏ〕m−Ｃ1−Ｃ10アルキル（式中、ｍは１乃至４の数である）である請求項２２記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ3が式（Ｉｂ）の基である請求項１記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ3が式（Ｉｃ）の基である請求項１記載の化合物。
【請求項２６】
式（Ｉ）：
【化６】
0004012579.tif 000086
［式中、Ｒ1及びＲ2は、各々互いに独立して、水素又は保護基、又はＲ1はこれらの定義を有し、Ｒ2は、式（Ｐ１）又は（Ｐ２）：
【化２５】
0004012579.tif 000087
（式中、
Ｙaは、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ6−Ｃ12アリール、Ｃ7−Ｃ20アラルキル、Ｃ7−Ｃ20アルカリ−ル、−ＯＲb、−ＳＲb、−ＮＨ2、第一級アミノ、第二級アミノ、Ｏ-Ｍ+又はＳ-Ｍ+であり；
Ｘaは、酸素又は硫黄であり；
Ｒaは、水素、Ｍ+、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ2−Ｃ12アルケニル、又はＣ6−Ｃ12アリールであり、或いはＲaＯ−基は、５員環で１乃至３の窒素原子を有するＮ−ヘテロアリール−Ｎ−イルであり；
Ｒbは、水素、Ｃ1−Ｃ12アルキル又はＣ6−Ｃ12アリールであり；そして
Ｍ+は、Ｎａ+、Ｋ+、Ｌｉ+、ＮＨ4+又は第一級、第二級、第三級若しくは第四級アンモニウムであり；
Ｙa、Ｒa及びＲbにおけるアルキル、アリール、アラルキル及びアルカリールは、非置換又はアルコキシ、アルキルチオ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2、フェニル、ニトロフェニル若しくはハロフェニルで置換される）
で示される、リンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基であり；
Ｂは、式（II）又は（IIｅ）：
【化２３】
0004012579.tif 000088
（式中、
Ｒb1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ1−Ｃ12アルキルであり；
Ｒb2及びＲb3は、各々互いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ12アルキル）2、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1−Ｃ12アルキルチオを示し、このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換され；或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ若しくは炭素数２乃至３０の第二級アミノであり；そして
Ｒb6は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルである）で示される基であるプリン基又は
式（III）、（IIIａ）、（IIIｂ）又は（IIIｃ）：
【化２４】
0004012579.tif 000089
〔式中、Ｒb6は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルであり、Ｒb8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ12アルキル）2、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1−Ｃ12アルキルチオであり（このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換される）、或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ、炭素数２乃至３０の第二級アミノ、Ｃ2−Ｃ12アルケニル又はＣ2−Ｃ12アルキニルであり、式（IIIｂ）におけるＮＨ2は、非置換又はＣ1−Ｃ6アルキル、ベンゾイル若しくは保護基によって置換される〕で示されるウラシル、チミン又はシトシンの基、並びに式（III）、（IIIａ）、（IIIｂ）及び（IIIｃ）の基のジヒドロ誘導体であるピリミジン基である］で示される化合物の製造法であって；
（ａ）Ｒ3が、式（Ｉａ）：
【化７】
0004012579.tif 000090
（式中、
Ｒ4は、水素、Ｃ1−Ｃ21アルキル、Ｃ2−Ｃ21アルケニル、Ｃ2−Ｃ21アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）アルキルであり；
Ｒ5は、水素、Ｃ1−Ｃ10アルキル、−ＣＨ2−Ｏ−Ｒ6又は式（Ｉｂ）の基であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1−Ｃ22アルキル、Ｃ3−Ｃ21アルケニル、又は部分的に若しくは完全にフッ素置換されたＣ1−Ｃ10アルキル若しくは−〔（ＣＨ2）2〕m−Ｒ7であり；
Ｒ7は、水素又はＣ1−Ｃ21アルキルであり；
ｎは、１乃至１２の数であり；そして
ｍは、１乃至４の数であり、但しｎ＝１及びＲ5＝水素の場合、Ｒ4は水素でない）で示される基である場合、その製造法は、式（IVａ）：
【化８】
0004012579.tif 000091
（式中、Ｒ14及びＲ15は、同一又は異なる保護基であり、Ｂは、上記と同義であり、この塩基基Ｂ中の官能基は保護基で保護されている）で示される化合物を、不活性溶媒中、式（Ａ）：
【化９】
0004012579.tif 000092
（式中、Ｒ4、Ｒ5及びｎは、上記と同義であり、Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏである）で示される化合物と反応させることよりなり；
（ｂ）Ｒ3が、式（Ｉｃ）：
【化１０】
0004012579.tif 000093
で示される基である場合、その製造法は、式（IVａ）で示される化合物を、不活性溶媒中、式（Ｂ）：
【化１１】
0004012579.tif 000094
（式中、Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏである）で示される化合物と反応させることよりなり；
（ｃ）Ｒ3が、式（Ｉｂ）：
【化１２】
0004012579.tif 000095
（式中、
Ｒ5は、水素、Ｃ1−Ｃ10アルキル、−ＣＨ2−Ｏ−Ｒ6又は式（Ｉｂ）の基であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1−Ｃ22アルキル、Ｃ3−Ｃ21アルケニル、又は部分的に又は完全にフッ素置換されたＣ1−Ｃ10アルキル若しくは−〔（ＣＨ2）2−Ｏ〕m−Ｒ7であり；
Ｒ7は、水素又はＣ1−Ｃ21アルキルであり；
Ｚは、−Ｃ（ＣＨ３）２−であり；そして
ｍは、１乃至４の数である）で示される基である場合、その製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、Ｈ2Ｏ及びＢＦ3の存在下に開環し、それを、式：Ｘ’−Ｚ−Ｘ’（式中、Ｚは、上記と同義であり、Ｘ’は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏである）の化合物で閉環して新しい環を形成することよりなり：
（ｄ）Ｒ3が、式（Ｉａ）で示される基である場合、その製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、Ｒ6ＯＨ及びＢＦ3の存在下に反応させ、適当な場合には、遊離の水酸基をエーテル又はエステルに変換することよりなり；
（ｅ）Ｒ3が、式（Ｉａ）で示される基である場合、その製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、ＢＦ3及びＮａＢＨ4の存在下に水素化し、適当な場合には、遊離の水酸基をエーテル又はエステルに変換することよりなり；
（ｆ）Ｒ3が、式（Ｉａ）で示される基である場合、その製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、アルキルアニオン部分がＣ1−Ｃ９アルキルアニオンであるグリニャ−ル試薬と反応させ、適当な場合には、遊離の水酸基をエーテル又はエステルに変換することよりなり；又は
（ｇ）Ｒ3が、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）で示される基である場合、その製造法は、（ａ）乃至（ｆ）に記載した方法の一つによって、式（IVｂ）：
【化１３】
0004012579.tif 000096
（式中、Ｒ14及びＲ15は、上記と同義であり、Ａは離脱基である）で示される化合物を２’−ＯＨ基において置換し、塩基Ｂを置換によって導入し；適当な場合には、保護基Ｒ14及びＲ15を除去して、リンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基を導入することよりなる。
【請求項２７】
請求項１に記載の化合物を使用することを特徴とする、式（Ｉ）で示される化合物の同一又は異なるモノマー単位を含むか，又は他の天然又は合成ヌクレオシドのモノマー単位と一緒に、式（Ｉ）で示される少なくとも一個のモノマー単位を含むオリゴヌクレオチドで、２乃至２００のモノマー単位よりなるオリゴヌクレオチドの製造方法。
【請求項２８】
オリゴヌクレオチドが、２乃至１００のモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドである、請求項２７記載の製造方法。
【請求項２９】
オリゴヌクレオチドが、２乃至５０のモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドである、請求項２８記載の製造方法。
【請求項３０】
オリゴヌクレオチドが、４乃至３０のモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドである、請求項２９記載の製造方法。
【請求項３１】
オリゴヌクレオチドが、式（Ｉ）の化合物の同一又は異なるモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドである、請求項２７記載の製造方法。
【請求項３２】
オリゴヌクレオチドが、式（Ｉ）の化合物の同一モノマー単位及び天然又は合成ヌクレオシドのモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドである、請求項２７記載の製造方法。
【請求項３３】
式（Ｖ）：
【化１４】
0004012579.tif 000097
｛式中、ｘは、０乃至２００の数であり、Ｙは、−Ｐ（Ｏ）Ｏ-−、−Ｐ（Ｏ）Ｓ-−、−Ｐ（Ｓ）Ｓ-−、−Ｐ（Ｏ）Ｒ16−、−Ｐ（Ｏ）ＮＲ17Ｒ18−又は−ＣＨ2−（式中、Ｒ16は、水素又はＣ1−Ｃ6アルキルであり、Ｒ17及びＲ18は、各々互いに独立して、Ｒ16の意義を有する）で示されるヌクレオチド架橋基であり；Ｕ、Ｖ及びＷは、各々独立して、天然又は合成ヌクレオシドの同一又は異なる基を示し、Ｕ、Ｖ及び／又はＷの少なくとも一個は、式（VI）：
【化１５】
0004012579.tif 000098
〔式中、
Ｂは、式（II）又は（IIｅ）：
【化３３】
0004012579.tif 000099
（式中、
Ｒb1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ1−Ｃ12アルキルであり；
Ｒb2及びＲb3は、各々互いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ12アルキル）2、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1−Ｃ12アルキルチオを示し、このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換され；或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ若しくは炭素数２乃至３０の第二級アミノであり；そして
Ｒb6は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルである）で示される基であるプリン基又は
式（III）、（IIIａ）、（IIIｂ）又は（IIIｃ）：
【化３４】
0004012579.tif 000100
〔式中、Ｒb6は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルであり、Ｒb8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ12アルキル）2、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1−Ｃ12アルキルチオであり（このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換される）、或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ、炭素数２乃至３０の第二級アミノ、Ｃ2−Ｃ12アルケニル又はＣ2−Ｃ12アルキニルであり、式（IIIｂ）におけるＮＨ2は、非置換又はＣ1−Ｃ6アルキル、ベンゾイル若しくは保護基によって置換される〕で示されるウラシル、チミン又はシトシンの基、並びに式（III）、（IIIａ）、（IIIｂ）及び（IIIｃ）の基のジヒドロ誘導体であるピリミジン基であり；そして
Ｒ3は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）：
【化１６】
0004012579.tif 000101
（式中、
Ｒ4は、水素、Ｃ1−Ｃ21アルキル、Ｃ2−Ｃ21アルケニル、Ｃ2−Ｃ21アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）アルキルであり；
Ｒ5は、水素、Ｃ1−Ｃ10アルキル、−ＣＨ2−Ｏ−Ｒ6又は式（Ｉｂ）の基であり；
Ｒ6は、水素、Ｃ1−Ｃ22アルキル、Ｃ3−Ｃ21アルケニル、又は部分的に若しくは完全にフッ素置換されたＣ1−Ｃ10アルキル若しくは−〔（ＣＨ2）2−Ｏ〕m−Ｒ7であり；
Ｒ7は、水素又はＣ1−Ｃ21アルキルであり；
Ｚは、−Ｃ（ＣＨ３）２−であり；
ｎは、１乃至１２の数であり；そして
ｍは、１乃至４の数である）で示される基である〕で示される基である｝で示されるオリゴヌクレオチド。
【請求項３４】
架橋基Ｙが、−Ｐ（Ｏ）Ｏ-−である請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３５】
ｘが、０乃至１００の数である請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３６】
ｘが、０乃至５０の数である請求項３５記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３７】
ｘが、３乃至２９の数である請求項３６記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３８】
式（VI）の基が、末端及び／又はヌクレオチド配列に結合されている請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３９】
式（VI）の基が、天然又は合成ヌクレオシド基の間に結合されている請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４０】
式（VI）の２乃至５個の同一又は異なる基が、互いに続いている、請求項３８又は３９に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４１】
全体が、４乃至３０のヌクレオシド単位及び式（VI）の１乃至１２の基よりなる請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４２】
Ｂが、式（II）又は（IIｅ）：
【化１７】
0004012579.tif 000102
（式中、
Ｒb1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ1−Ｃ12アルキルであり；
Ｒb2及びＲb3は、各々互いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ12アルキル）2、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1−Ｃ12アルキルチオを示し、このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換され；或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ又は炭素数２乃至３０の第二級アミノであり；そして
Ｒb6は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルである）で示される基である請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４３】
Ｂが、式（III）、（IIIａ）、（IIIｂ）又は（IIIｃ）：
【化１８】
0004012579.tif 000103
〔式中、Ｒb6は、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルであり、Ｒb8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2、ＮＨＮＨ2、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ12アルキル）2、−Ｎ＝ＣＨ−ＮＨ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1−Ｃ12アルキルチオであり（このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換される）、或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ、炭素数２乃至３０の第二級アミノ、Ｃ2−Ｃ12アルケニル又はＣ2−Ｃ12アルキニル、そして式（IIIｂ）におけるＮＨ2基は、非置換又はＣ1−Ｃ6アルキル、ベンゾイル若しくは保護基によって置換される〕で示されるウラシル、チミン又はシトシンの基、又は式（III）、（IIIａ）、（IIIｂ）又は（IIIｃ）の基のジヒドロ誘導体である請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４４】
Ｒ3が式（Ｉａ）の基である請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４５】
ｎが１乃至８の数である請求項４４記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４６】
ｎが１乃至６の数である請求項４５記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４７】
Ｒ4が、水素、Ｃ1−Ｃ21アルキル、Ｃ2−Ｃ21アルケニル又はＣ2−Ｃ21アルキニルである請求項４４記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４８】
Ｒ4が、水素又はＣ1−Ｃ4アルキルである請求項４７記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４９】
Ｒ5が、水素、Ｃ1−Ｃ5アルキル又は−ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ2−Ｏ−Ｃ1−Ｃ22アルキル又は−ＣＨ2−Ｏ−〔（ＣＨ2）2−Ｏ〕m−Ｃ1−Ｃ10アルキル（式中、ｍは、１乃至４の数である）である請求項４４記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５０】
Ｒ5が、水素、メチル又は−ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ2−Ｏ−Ｃ1−Ｃ22アルキル又は−ＣＨ2−Ｏ−〔（ＣＨ2）2−Ｏ〕m−Ｃ1−Ｃ10アルキル（式中、ｍは、１乃至４の数である）である請求項４９記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５１】
Ｒ3が式（Ｉｂ）の基である請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５２】
Ｒ3が式（Ｉｃ）の基である請求項３３記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項５３】
式（Ｖ）のオリゴヌクレオチドを有効成分として含有する、ウイルス感染性疾患又は遺伝性疾患の検出における診断のための組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、その２’−ＯＨ基がポリオール誘導体でエーテル化されたリボヌクレオシド類似体、その製造法、これらのヌクレオシドを有するオリゴヌクレオチド、及び分子中に同一又は異なるヌクレオシド単位を有するオリゴヌクレオチドの製造法におけるヌクレオシドの用途に関する。
【０００２】
ヌクレオシド及びオリゴヌクレオチドは、両者共に抗ウイルス活性成分として、そして核酸と相互反応する活性（「アンチセンス」オリゴヌクレオチド）、さらにそれと関連した生物学的活性の故に、大きな関心を惹いている；例えば、Uhlmann, E., Peyman, A., Chemical Reviews 90:543-584(1990)参照。新しい性質を有するヌクレオシドを生成し、又はアンチセンスオリゴヌクレオチドと天然の核酸との相互反応を改善し、ヌクレアーゼに対する安定性を増加するために、ヌクレオシド（又はオリゴヌクレオチドのヌクレオチド単位）の糖基又はオリゴヌクレオチド中のヌクレオチド間のリン酸エステル結合は、多種多様な方法で修飾されている；例えば、Marquez, V. E., Lim, M. I., Medicinal Research Reviews 6:1-40(1986), Helene, C., Toulme, J. J., Biochimica et Biophysica Acta 1049:99-125(1990), Englisch, U., Gauss, D. H., Angewandte Chemie 103:629-646(1991), Matteucci, M. D., Bischofberger, N., Annual Reports in Medicinal Chemistry 26:87-296(1991)参照。Cook, P. D., Anti-Cancer Drug Design 6:585-607(1991)及びＷＯ第91/06556号明細書は、糖の２’−ＯＨ基が修飾されたヌクレオシドを記載している。記載された修飾は、ヌクレアーゼ抵抗性を増加している；アルキル基が長くなるにつれて、ヌクレアーゼ抵抗性は強くなる。かくして、メチル、エチル又はプロピルのような短いアルキル基では、結合親和性に僅かな増加が認められるが、比較的長い鎖では、結合親和性は劇的に低下する。２’−ＯＨ基の側鎖としてポリオール誘導体を有するヌクレオシドは未知であり、これまでオリゴヌクレオチドに導入されたことがない。驚くべきことであるが、本発明の修飾は、比較的短い鎖のみならず比較的長い鎖においても、相補的なＲＮＡに対する結合親和性を増加する。この結果は、既存のデータを基にしては考えられないことであった。２’−ＯＨを修飾したオリゴリボヌクレオチドと同様に、本発明の化合物は、さらにヌクレアーゼに対する顕著な抵抗性の特色がある。加えて、本発明のヌクレオシドを含むオリゴヌクレオチドは、増加した細胞内取込みがあり、従って生体内での生物学的利用能及び活性が大きい。
【０００３】
本発明は、式（Ｉ）：
【化１９】
0004012579.tif 000002
〔式中、
Ｒ1 及びＲ2 は、各々互いに独立して、水素若しくは保護基であるか、又は、Ｒ1 はこれらの意義を有し、Ｒ2 はリンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基であり；
Ｂは、プリン又はピリミジン基、又はそれらの類似体の基；そして
Ｒ3 は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）：
【化２０】
0004012579.tif 000003
（式中、
Ｒ4 は、水素、Ｃ1 −Ｃ21アルキル、Ｃ2 −Ｃ21アルケニル、Ｃ2 −Ｃ21アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル；
Ｒ5 は、水素、Ｃ1 −Ｃ10アルキル、−ＣＨ2 −Ｏ−Ｒ6 又は式（Ｉｂ）の基；
Ｒ6 は、水素、Ｃ1 −Ｃ22アルキル、Ｃ3 −Ｃ21アルケニル、又は部分的に若しくは完全にフッ素置換されたＣ1 −Ｃ10アルキル若しくは−〔（ＣＨ2 ）2 −Ｏ〕m −Ｒ7 ；
Ｒ7 は、水素又はＣ1 −Ｃ21アルキル；                                    Ｚは、−（ＣＨ2 ）p −又は−（ＣＨ2 −ＣＨ2 −Ｏ）q −ＣＨ2 ＣＨ2 −であり、−ＣＨ2 −の場合のＺは、非置換、又はＣ1 −Ｃ10アルキル、Ｃ5 −Ｃ6 シクロアルキル及び非置換若しくはＣ1 −Ｃ4 アルキル置換フェニルから選ばれる一個以上の同一若しくは異なる置換基によって置換されていてもよい；
ｎは、１乃至１２の数；
ｍは、１乃至４の数；
ｐは、１乃至１０の数であり；そして
ｑは、１乃至４の数である、但し、ｎ＝１及びＲ5 ＝水素の場合、Ｒ4 は水素ではない）の基である〕に示された化合物に関する。
【０００４】
好適な態様において、Ｒ4 は、水素、Ｃ1 −Ｃ21アルキル、Ｃ2 −Ｃ21アルケニル又はＣ2 −Ｃ21アルキニルである。より好適な態様において、Ｒ4 は、水素、Ｃ1 −Ｃ8 アルキル、Ｃ2 −Ｃ8 アルケニル又はＣ2 −Ｃ8 アルキニルである。特に好適な態様において、Ｒ4 は、水素又はＣ1 −Ｃ4 アルキルである。Ｒ4 の例としては、メチル、エチル、ｎ−及びｉｓｏ−プロピル、ｎ−、ｉｓｏ−及びｔｅｒｔ−ブチル、並びにペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシル、ウンデシルの異性体、ビニル、アリル、ブタ−３−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ペンテニル、オクテニル、ドデセニル、オクタデセニル、エチニル、プロパ−１−イン−１−イル、プロパ−１−イン−３−イル、ブタ−１−イン−１−イル又はブタ−１−イン−４−イルが挙げられる。特に好適なＲ4 の基は、水素、メチル、エチル、ｎ−若しくはｉｓｏ−プロピル、又はｎ−ブチルである。ｎの値は、好適には１乃至８、より好適には１乃至６、特に好適には１乃至３である。
【０００５】
好適な態様において、Ｒ5 は、水素、Ｃ1 −Ｃ5 アルキル又は−ＣＨ2 −Ｏ−Ｒ6 、特に水素、メチル又は−ＣＨ2 −ＯＨ、−ＣＨ2 −Ｏ−Ｃ1 −Ｃ22アルキル又は−ＣＨ2 −Ｏ−〔（ＣＨ2 ）2 −Ｏ〕m −Ｃ1 −Ｃ10アルキル（式中、ｍは１乃至４の数である）である。
【０００６】
好適な態様において、Ｒ1 及びＲ2 は、水素である。
【０００７】
保護基及びかかる保護基を有する水酸基の誘導法は、糖及びヌクレオチド化学で一般に公知であり、例えばGreene, B. T. による、 Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley Interscience, New York (1991)、 Sonveaux, E.によるBioorganic Chemistry 14:274-325(1986) 、又はBeaucage, S. L., Iyer, R. による、Tetrahedron 48:2223-2311(1992)中に記載されている。かかる保護基の例としては、ベンジル、メチルベンジル、ジメチルベンジル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジル、ブロモベンジル、２，４−ジクロロベンジル；ジフェニルメチル、ジ（メチルフェニル）メチル、ジ（ジメチルフェニル）メチル、ジ（メトキシフェニル）メチル、ジ（ジメトキシフェニル）メチル、トリフェニルメチル、トリス−４，４’，４”−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルメチル、ジ−ｐ−アニシルフェニルメチル、トリ（メチルフェニル）メチル、トリ（ジメチルフェニル）メチル、メトキシフェニル（ジフェニル）メチル、ジ（メトキシフェニル）フェニルメチル、トリ（メトキシフェニル）メチル、トリ（ジメトキシフェニル）メチル；トリフェニルシリル、アルキル基が１乃至２０、好適には１乃至１２、特に１乃至８の炭素原子を有するアルキルジフェニルシリル、ジアルキルフェニルシリル及びトリアルキルシリル、例えばトリメチルシリル、トリエチルシリル、トリ−ｎ−プロピルシリル、イソプロピル−ジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチル−ジフェニルシリル、ｎ−オクチル−ジメチルシリル、（１，１，２，２−テトラメチルエチル）−ジメチルシリル；−（Ｃ1 −Ｃ8 アルキル）2 Ｓｉ−Ｏ−Ｓｉ（Ｃ1 −Ｃ8 アルキル）2 −（式中、アルキルは、例えばメチル、エチル、ｎ−及びｉｓｏ−プロピル、又はｎ−、ｉｓｏ−及びｔｅｒｔ−ブチル）；Ｃ2 −Ｃ12アシル、特にＣ2 −Ｃ8 アシル、例えばアセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ベンゾイル、メチルベンゾイル、メトキシベンゾイル、クロロベンゾイル及びブロモベンゾイル；ＲS1−ＳＯ2 −（式中、ＲS1は、Ｃ1 −Ｃ12アルキル、特にＣ1 −Ｃ6 アルキル、Ｃ5 −若しくはＣ6 −シクロアルキル、フェニル、ベンジル、Ｃ1 −Ｃ12アルキルフェニル、特にＣ1 −Ｃ4 アルキルフェニル、又はＣ1 −Ｃ12アルキルベンジル、特にＣ1 −Ｃ4 アルキルベンジル、又はハロフェニル若しくはハロベンジル、例えばメチル−、エチル−、プロピル−、ブチル−、フェニル−、ベンジル−、ｐ−ブロモ−、ｐ−メトキシ−及びｐ−メチルフェニル−スルホニル；非置換、又はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1 −Ｃ4 アルコキシ、トリ（Ｃ1 −Ｃ4 アルキル）シリル若しくはＣ1 −Ｃ4 アルキルスルホニルで置換されたＣ1 −Ｃ12アルコキシカルボニル、好適には  1 −Ｃ8 アルコキシカルボニル、例えばメトキシ−、エトキシ−、ｎ−若しくはｉｓｏ−プロポキシ−又はｎ−、ｉｓｏ−若しくはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、２−トリメチルシリルエトキシカルボニル、２−メチルスルホニルエトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、又は、非置換、又はアルコキシカルボニルと同様に置換されたフェノキシカルボニル若しくはベンジルオキシカルボニル、例えばメチル−若しくはメトキシ−若しくはクロロ−フェノキシカルボニル又はメチル−若しくはメトキシ−若しくはクロロ−ベンジルオキシカルボニル、及び９−フルオレニルメトキシカルボニルが挙げられる。Ｒ1 及び／又はＲ2 が、アルキルである場合、これらは、フッ素、塩素、臭素、Ｃ1 −Ｃ4 アルコキシ、フェノキシ、クロロフェノキシ、メトキシフェノキシ、ベンジルオキシ、メトキシベンジルオキシ又はクロロフェノキシで置換されてもよい。式（Ｉ）におけるＲ1 及びＲ2 は、同一又は異なる保護基であり得る。
【０００８】
特に好適な態様において、保護基としてのＲ1 及びＲ2 は、ベンジル、メチルベンジル、ジメチルベンジル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジル、ハロゲン化ベンジル、特にブロモベンジル；ジフェニルメチル、ジ（メチルフェニル）メチル、ジ（ジメチルフェニル）メチル、ジ（メトキシフェニル）メチル、ジ（メトキシフェニル）（フェニル）メチル、トリフェニルメチル、トリス−４，４’，４”−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルメチル、ジ−ｐ−アニシルフェニルメチル、トリ（メチルフェニル）メチル、トリ（ジメチルフェニル）メチル、トリ（メトキシフェニル）メチル、トリ（ジメトキシフェニル）メチル；トリメチルシリル、トリエチルシリル、トリ−ｎ−プロピルシリル、イソプロピルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル、ｎ−オクチルジメチルシリル、（１，１，２，２−テトラメチルエチル）ジメチルシリル；−（ＣＨ3 ）2 Ｓｉ−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ3 ）2 −、−（ｉｓｏ−Ｃ3 Ｈ7 ）2 Ｓｉ−Ｏ−Ｓｉ（ｉｓｏ−Ｃ3 Ｈ7 ）2 −；アセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ベンゾイル、メチルベンゾイル、メトキシベンゾイル、クロロベンゾイル及びブロモベンゾイル；メチル−、エチル−、プロピル−、ブチル−、フェニル−、ベンジル−、ｐ−ブロモ−、ｐ−メトキシ−及びｐ−メチル−フェニルスルホニル；メトキシ−、エトキシ−、ｎ−若しくはｉｓｏ−プロポキシ−又はｎ−、ｉｓｏ−若しくはｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニル、或いはフェノキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、メチル−又はメトキシ−又はクロロ−フェノキシカルボニル、或いはメチル−又はメトキシ−又はクロロ−ベンジルオキシカルボニル、或いは９−フルオレニルメトキシカルボニルであり得る。この場合、Ｒ1 及びＲ2 が同一の保護基であるのが好都合である。
【０００９】
リンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基としてのＲ2 は、式（Ｐ１）又は（Ｐ２）：
【化２１】
0004012579.tif 000004
（式中、
Ｙa は、水素、Ｃ1 −Ｃ12アルキル、Ｃ6 −Ｃ12アリール、Ｃ7 −Ｃ20アラルキル、Ｃ7 −Ｃ20アルカリール、−ＯＲb 、−ＳＲb 、−ＮＨ2 、第一級アミノ、第二級アミノ、Ｏ- Ｍ+ 又はＳ- Ｍ+ ；
Ｘa は、酸素又は硫黄；
Ｒa は、水素、Ｍ+ 、Ｃ1 −Ｃ12アルキル、Ｃ2 −Ｃ12アルケニル、又はＣ6 −Ｃ12アリール、或いはＲa Ｏ−の基は、５員環で１乃至３の窒素原子を有するＮ−ヘテロアリール−Ｎ−イル；
Ｒb は、水素、Ｃ1 −Ｃ12アルキル又はＣ6 −Ｃ12アリールであり；そして
Ｍ+ は、Ｎａ+ 、Ｋ+ 、Ｌｉ+ 、ＮＨ4 + 、又は第一級、第二級、第三級若しくは第四級アンモニウムであり；Ｙa 、Ｒa 及びＲb におけるアルキル、アリール、アラルキル及びアルカリールは、非置換又はアルコキシ、アルキルチオ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ2 、フェニル、ニトロフェニル若しくはハロフェニルで置換される）に該当する。
【００１０】
Ｙa は、第一級アミノとして、１乃至１２、特に１乃至６の炭素原子を含み、第二級アミノとして、好適には２乃至１２、特に２乃至６の炭素原子を含む。
【００１１】
第一級アミノ及び第二級アミノは、例えば式：Ｒc Ｒd Ｎ（式中、Ｒc は水素又は、独立して、Ｒd の意義を有し、Ｒd は、Ｃ1 −Ｃ20−アルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −アルキル）、Ｃ1 −Ｃ20−アミノアルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −アミノアルキル）、又はＣ1 −Ｃ20−ヒドロキシアルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −ヒドロキシアルキル）；カルボキシアルキル又はカルバルコキシアルキル（このカルバルコキシ基は、２乃至８の炭素原子を有し、アルキル基は、１乃至６、好適に１乃至４の炭素原子を有する）；Ｃ2 −Ｃ20−アルケニル（好適にはＣ2 −Ｃ12−、特にＣ2 −Ｃ6 アルケニル）；フェニル、モノ−若しくはジ−（Ｃ1 −Ｃ4 アルキル又はＣ1 −Ｃ4 アルコキシ）フェニル、ベンジル、モノ−若しくはジ−（Ｃ1 −Ｃ4 アルキル又はＣ1 −Ｃ4 アルコキシ）ベンジル；又は１，２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−Ｃ1 −Ｃ6 アルキル、或いはＲc 及びＲd は、一緒になって、テトラ−又はペンタ−メチレン、３−オキサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ2 −ＮＲe −ＣＨ2 ＣＨ2 −又は−ＣＨ2 ＣＨ2 −ＮＲ19−ＣＨ2 ＣＨ2 −（式中、Ｒe は水素又はＣ1 −Ｃ4 アルキルである）の基をなす。アミノアルキルにおけるアミノ基は、一又は二個のＣ1 −Ｃ4 アルキル又はＣ1 −Ｃ4 ヒドロキシアルキル基で置換されてもよい。ヒドロキシアルキルにおけるヒドロキシ基は、Ｃ1 −Ｃ4 アルキルでエーテル化されてもよい。
【００１２】
Ｍ+ の定義と関連して、Ｙa の第一級、第二級、第三級及び第四級アンモニウムは、式：Ｒf Ｒg Ｒh Ｒi Ｎ〔式中、Ｒf は、Ｃ1 −Ｃ20−アルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −アルキル）、Ｃ1 −Ｃ20−アミノアルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −アミノアルキル）、Ｃ1 −Ｃ20−ヒドロキシアルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −ヒドロキシアルキル）；カルボキシアルキル又はカルバルコキシアルキル（このカルバルコキシ基は、２乃至８の炭素原子、アルキル基は、１乃至６、好適には１乃至４の炭素原子を含む）；Ｃ2 −Ｃ20−アルケニル（好適にはＣ2 −Ｃ12−、特にＣ2 −Ｃ6 −アルケニル）；フェニル、モノ−若しくはジ−（Ｃ1 −Ｃ4 アルキル又はＣ1 −Ｃ4 アルコキシ）フェニル、ベンジル、モノ−若しくはジ−（Ｃ1 −Ｃ4 アルキル又はＣ1 −Ｃ4 アルコキシ）ベンジル；又は１，２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−Ｃ1 −Ｃ6 アルキルであり、Ｒg 、Ｒh 及びＲi は、各々互いに独立して、水素又はＲf の意義を有し、或いはＲf 及びＲg は、一緒になって、テトラ−若しくはペンタ−メチレン、３−オキサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ2 −ＮＲe −ＣＨ2 ＣＨ2 −、又は−ＣＨ2 ＣＨ2 −ＮＲe −ＣＨ2 ＣＨ2 −（式中、Ｒe は、水素又はＣ1 −Ｃ4 アルキルである）、そしてＲh 及びＲi は、各々互いに独立して、Ｒf の意義を有する〕のイオンであると理解されるものである。アミノアルキルにおけるアミノ基は、一又は二個のＣ1 −Ｃ4 アルキル若しくはＣ1 −Ｃ4 ヒドロキシアルキル基で置換されてもよい。ヒドロキシアルキルにおけるヒドロキシ基は、Ｃ1 −Ｃ4 アルキルでエーテル化されてもよい。
【００１３】
カルボキシアルキルの例としては、カルボキシメチル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル及びカルボキシブチル；そして、カルバルコキシアルキルの例としては、メチル又はエチルでエステル化された上記のカルボキシアルキルが挙げられる。アルケニルの例としては、アリル、ブタ−１−エン−３−イル又は−４−イル、ペンタ−３−又は−４−エン−１−イル又は−２−イル、ヘキサ−３−又は−４−又は−５−エン−１−イル又は−２−イルが挙げられる。アルキル−及びアルコキシ−フェニル及びアルキル−及びアルコキシ−ベンジルの例としては、メチルフェニル、ジメチルフェニル、エチルフェニル、ジエチルフェニル、メチルベンジル、ジメチルベンジル、エチルベンジル、ジエチルベンジル、メトキシフェニル、ジメトキシフェニル、エトキシフェニル、ジエトキシフェニル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジル、エトキシベンジル及びジエトキシベンジルが挙げられる。アルキル基が好適に２乃至４の炭素原子を含む、イミダゾリルアルキルの例は、１，２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−エチル又は−ｎ−プロピル又は−ｎ−ブチルである。Ｒ19は、好適には水素、メチル又はエチルである。
【００１４】
第一級アミノ及び第二級アミノの好適な例は、メチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル、ジイソプロピル、モノ−又はジ（１−ヒドロキシ−エタ−２−イル）−、フェニル−及びベンジル−アミノ、アセチルアミノ及びベンゾイルアミノ及びピペリジニル、ピペラジニル及びモルホリニルである。
【００１５】
第一級及び第二級アンモニウムの好適な例は、メチル−、エチル−、ジメチル、ジエチル−、ジイソプロピル−、モノ又はジ（１−ヒドロキシ−エタ−２−イル）−、フェニル−及びベンジル−アンモニウムである。
【００１６】
アルキルとしてのＹa 、Ｒa 及びＲb の例は、メチル、エチル及びプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル及びオクチルの異性体；アリールとしてのＹa 、Ｒa 及びＲb の例は、フェニル及びナフチル；アルケニルとしてのＲa の例は、アリル及び（Ｃ1 −Ｃ4 アルキル）ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2 −；アラルキルとしてのＹa の例は、フェニル−Ｃn Ｈ2n−であり、特にベンジル（式中、ｎは１乃至６の数である）；アルカリールとしてのＹa の例は、モノ−、ジ−及びトリ−（Ｃ1 −Ｃ4 アルキル）フェニルである。好適な置換基は、塩素、臭素、メトキシ、−ＮＯ2 、−ＣＮ、２，４−ジクロロフェニル及び４−ニトロフェニルである。Ｒb の例は、２，２，２−トリクロロエチル、４−クロロフェニル、２−クロロフェニル及び２，４−ジクロロフェニル；そして、Ｎ−ヘテロアリールとしてのＲb Ｏ−の例は、ピロール−Ｎ−イル、トリアゾール−Ｎ−イル及びベンゾトリアゾール−Ｎ−イルである。
【００１７】
特に好適な態様において、Ｒa はβ−シアノエチルであり、Ｙa はジ（イソプロピルアミノ）である。
【００１８】
Ｂがプリン基又はその類似体の基である場合、Ｂは、式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、（IIｄ）、（IIｅ）又は（IIｆ）：
【化２２】
0004012579.tif 000005
〔式中、
Ｒb1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ1 −Ｃ12アルキル；
Ｒb2、Ｒb3及びＲb5は、各々互いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2 、ＮＨＮＨ2 、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1 −Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1 −Ｃ12アルキル）2 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1 −Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1 −Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1 −Ｃ12アルキル、Ｃ1 −Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1 −Ｃ12アルキルチオを示し、このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換される；或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ又は炭素数２乃至３０の第二級アミノ；
Ｒb4は、水素、ＣＮ又は−Ｃ≡Ｃ−Ｒb7であり；そして
Ｒb6及びＲb7は、水素又はＣ1 −Ｃ4 アルキルである〕で示される基である。
【００１９】
適切な保護基は、上記の基である。好適な保護基は、Ｃ1 −Ｃ8 アシル基、例えばアセチル、プロピオニル、ブチロイル及びベンゾイルである。Ｒb6は、好適には、水素又はメチルである。
【００２０】
第一級アミノは、好適には１乃至１２、特に１乃至６の炭素原子を含み、第二級アミノは、好適に２乃至１２、特に２乃至６の炭素原子を含む。
【００２１】
好適には１乃至６の炭素原子を有するアルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキルの幾つかの例として、メチル、エチル、及びプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル及びドデシルの異性体、及びそれらに対応するアルコキシ、アルキルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキル基が挙げられる。アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキルは、特に１乃至４の炭素原子を含む。好適なアルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキル基は、メチル、エチル、ｎ−及びｉｓｏ−プロピル、ｎ−、ｉｓｏ−及びｔｅｒｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、メチルチオ及びエチルチオ、アミノメチル、アミノエチル、ヒドロキシメチル及びヒドロキシエチルである。
【００２２】
第一級アミノ及び第二級アミノは、例えば、式：Ｒa1Ｒa2Ｎ〔式中、Ｒa1は、水素又は、独立して、Ｒa2の意義を有し、Ｒa2は、Ｃ1 −Ｃ20−アルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −アルキル）、Ｃ1 −Ｃ20−アミノアルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −アミノアルキル）、Ｃ1 −Ｃ20−ヒドロキシアルキル（好適にはＣ1 −Ｃ12−、特にＣ1 −Ｃ6 −ヒドロキシアルキル）；カルボキシアルキル又はカルバルコキシアルキル（このカルバルコキシ基は、２乃至８の炭素原子を有し、アルキル基は、１乃至６、好適には１乃至４の炭素原子を有する）；Ｃ2 −Ｃ20−アルケニル（好適にはＣ2 −Ｃ12−、特にＣ2 −Ｃ6 −アルケニル）；フェニル、モノ−又はジ−（Ｃ1 −Ｃ4 −アルキル若しくはＣ1 −Ｃ4 アルコキシ）フェニル、ベンジル、モノ−又はジ（Ｃ1 −Ｃ4 アルキル又はＣ1 −Ｃ4 アルコキシ）ベンジル；又は１，２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−Ｃ1 −Ｃ6 アルキル、或いはＲa1及びＲa2は、一緒になって、テトラ−若しくはペンタ−メチレン、３−オキサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ2 −ＮＲa3−ＣＨ2 ＣＨ2 −、又は−ＣＨ2 ＣＨ2 −ＮＲa3−ＣＨ2 ＣＨ2 −（式中、Ｒa3は、水素又はＣ1 −Ｃ4 アルキルである）である〕で示される基である。アミノアルキルにおけるアミノ基は、一又は二個のＣ1 −Ｃ4 アルキル若しくはＣ1 −Ｃ4 ヒドロキシアルキル基で置換されてもよい。ヒドロキシアルキルにおけるヒドロキシ基は、Ｃ1 −Ｃ4 アルキルでエーテル化されてもよい。
【００２３】
アルキルの例は、上記のアルキルである。アミノアルキルの例は、アミノメチル、アミノエチル、１−アミノプロパ−２−イル又は−３−イル、１−アミノ−ブタ−２−イル又は−３−イル又は−４−イル、Ｎ−メチル−又はＮ，Ｎ−ジメチル−又はＮ−エチル−又はＮ，Ｎ−ジエチル−又はＮ−２−ヒドロキシエチル−又はＮ，Ｎ−ジ−２−ヒドロキシエチル−アミノメチル又は−アミノエチル又は−アミノプロピル又は−アミノブチルである。ヒドロキシアルキルの例は、ヒドロキシメチル、１−ヒドロキシ−エタ−２−イル、１−ヒドロキシ−プロパ−２−又は−３−イル及び１−ヒドロキシブタ−２−イル、−３−イル又は−４−イルである。カルボキシアルキルの例は、カルボキシメチル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル及びカルボキシブチルであり、カルバルコキシアルキルの例は、メチル又はエチルによってエステル化されたカルボキシアルキル基である。アルケニルの例は、アリル、ブタ−１−エン−３−イル又は−４−イル、ペンタ−３−又は−４−エン−１−イル又は−２−イル、ヘキサ−３−又は−４−又は−５−エン−１−イル又は−２−イルである。アルキル−及びアルコキシ−フェニル、及びアルキル−及びアルコキシ−ベンジルの例は、メチルフェニル、ジメチルフェニル、エチルフェニル、ジエチルフェニル、メチルベンジル、ジメチルベンジル、エチルベンジル、ジエチルベンジル、メトキシフェニル、ジメトキシフェニル、エトキシフェニル、ジエトキシフェニル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジル、エトキシベンジル及びジエトキシベンジルである。アルキル基が、好適には２乃至４の炭素原子を有する、イミダゾリルアルキルの例は、１，２−、１，３−又は１，４−イミダゾリル−エチル又は−ｎ−プロピル又は−ｎ−ブチルである。Ｒa3は、好適には、水素、メチル又はエチルである。
【００２４】
第一級アミノ及び第二級アミノの好適な例は、メチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、アリル−、モノ−又はジ−（１−ヒドロキシ−エタ−２−イル）−、フェニル−及びベンジル−アミノ、アセチルアミノ、イソブチリルアミノ及びベンゾイルアミノである。
【００２５】
好適な態様において、Ｒb1は水素である。別の好適な態様において、Ｒb5は水素である。更なる好適な態様において、Ｒb2及びＲb3は、各々互いに独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2 、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ2 、メチルアミノ、ジメチルアミノ、ベンゾイルアミノ、イソブチリルアミノ、メトキシ、エトキシ及びメチルチオである。
【００２６】
プリン系類似体の幾つかの例としては、プリンの他に、キサンチン、ヒポキサンチン、アデニン、Ｎ−メチルアデニン、Ｎ−ベンゾイルアデニン、２−メチルチオアデニン、２−アミノアデニン、６−ヒドロキシプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、２−アミノ−６−メチルチオプリン、グアニン、Ｎ−イソブチリルグアニンが挙げられる。アデニン、２−アミノアデニン及びグアニン、並びにこれらの塩基が保護された誘導体は、特に好ましい。
【００２７】
式（Ｉ）におけるＢがピリミジン基である場合、Ｂは、好適には、式（III ）、  （III ａ）、（III ｂ）又は（III ｃ）：
【化２３】
0004012579.tif 000006
〔式中、Ｒb6は、水素又はＣ1 −Ｃ4 アルキルであり、Ｒb8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ2 、ＮＨＮＨ2 、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ1 −Ｃ12アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ1 −Ｃ12アルキル）2 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ1 −Ｃ12アルキル、ヒドロキシ−Ｃ1 −Ｃ12アルキル、アミノ−Ｃ1 −Ｃ12アルキル、Ｃ1 −Ｃ12アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ1 −Ｃ12アルキルチオであり（このヒドロキシ及びアミノ基は、非置換又は保護基で置換される）、或いはフェニル、ベンジル、炭素数１乃至２０の第一級アミノ、炭素数２乃至３０の第二級アミノ、Ｃ1 −Ｃ12アルケニル又はＣ1 −Ｃ12アルキニルであり、そして式（III ｂ）におけるＮＨ2 基は、非置換又はＣ1 −Ｃ6 アルキル、ベンゾイル若しくは保護基によって置換される〕で示されるウラシル、チミン又はシトシンの基、又は式（III ）、（III ａ）、（III ｂ）又は（III ｃ）で示される基のジヒドロ誘導体である。式（III ）におけるＲb8は、好適には、水素、Ｃ1 −Ｃ6 アルキル又はＣ1 −Ｃ6 ヒドロキシアルキル、Ｃ2 −Ｃ6 アルケニル又はＣ2 −Ｃ6 アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ2 、ベンゾイルアミノ又はモノ−又はジ−Ｃ1 −Ｃ6 アルキルアミノである。式（III ｂ）及び（III ｃ）におけるＲb8は、好適には、水素、Ｃ1 −Ｃ6 アルキル又はＣ1 −Ｃ6 アルコキシ又はＣ1 −Ｃ6 ヒドロキシアルキル、Ｃ2 −Ｃ6 アルケニル又はＣ2 −Ｃ6 アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ2 、ベンゾイルアミノ、又はモノ−若しくはジ−Ｃ1 −Ｃ6 アルキルアミノである。
【００２８】
Ｒb6は、好適には、水素又はメチルである。式（III ）におけるＲb8は、好適には、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ2 、ＮＨＣＨ3 、Ｎ（ＣＨ3 ）2 、Ｃ1 −Ｃ4 アルキル、Ｃ2 −Ｃ4 アルケニル、又はＣ2 −Ｃ4 アルキン−１−イルである。式（III ｂ）及び（III ｃ）におけるＲb8は、好適には、水素、Ｃ1 −Ｃ4 アルキル（特にメチル）、Ｃ2 −Ｃ4 アルケニル（特にビニル）、Ｃ2 −Ｃ4 アルキン−１−イル（特に１−プロピン−１−イル）、ＮＨ2 、ＮＨＣＨ3 、又は（ＣＨ3 ）2 Ｎである。
【００２９】
ピリミジン類似体の幾例として、ウラシル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、５−クロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウラシル、５−メチルシトシン、５−プロピンチミン及び５−プロピンシトシンが挙げられる
【００３０】
本発明はまた、式（Ｉ）：
【化２４】
0004012579.tif 000007
（式中、Ｒ1 及びＲ2 は、各々互いに独立して、水素若しくは保護基、又はＲ1 はこれらの意義を有し、Ｒ2 はリンを含むヌクレオチド架橋基を形成する基；Ｂは、プリン若しくはピリミジン基であるか又はそれらの類似体の基である）で示される化合物の製造法にも関する；そして
（ａ）Ｒ3 が、式（Ｉａ）：
【化２５】
0004012579.tif 000008
（式中、
Ｒ4 は、水素、Ｃ1 −Ｃ21アルキル、Ｃ2 −Ｃ21アルケニル、Ｃ2 −Ｃ21アルキニル又は−Ｃ（＝Ｏ）アルキル；
Ｒ5 は、水素、Ｃ1 −Ｃ10アルキル、−ＣＨ2 −Ｏ−Ｒ6 又は式（Ｉｂ）の基；
Ｒ6 は、水素、Ｃ1 −Ｃ22アルキル、Ｃ3 −Ｃ21アルケニル、又は部分的に若しくは完全にフッ素置換されたＣ1 −Ｃ10アルキル若しくは−〔（ＣＨ2 ）2 −Ｏ〕m −Ｒ7 ；
Ｒ7 は、水素又はＣ1 −Ｃ21アルキル；
ｎは、１乃至１２の数；
ｍは、１乃至４の数である；但しｎが１及びＲ5 が水素の場合は、Ｒ4 は水素ではない）で示される基である場合、その製造法は、式（IVａ）：
【化２６】
0004012579.tif 000009
（式中、Ｒ14及びＲ15は、同一又は異なる保護基であり、Ｂは、プリン若しくはピリミジン基又はそれらの類似体の基であり、塩基Ｂ中の官能基は、保護基で保護されている）で示される化合物を、不活性溶媒中、式（Ａ）：
【化２７】
0004012579.tif 000010
（式中、Ｒ4 、Ｒ5 及びｎは、上記と同義であり、Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏである）で示される化合物と反応させることよりなり；
（ｂ）Ｒ3 が、式（Ｉｃ）：
【化２８】
0004012579.tif 000011
で示される基である場合、その製造法は、式（IVａ）で示される化合物を、不活性溶媒中、式（Ｂ）：
【化２９】
0004012579.tif 000012
（式中、Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏである）で示される化合物と反応させることよりなり；
（ｃ）Ｒ3 が、式（Ｉｂ）：
【化３０】
0004012579.tif 000013
〔式中、
Ｒ5 は、水素、Ｃ1 −Ｃ10アルキル、−ＣＨ2 −Ｏ−Ｒ6 又は式（Ｉｂ）の基；
Ｒ6 は、水素、Ｃ1 −Ｃ22アルキル、Ｃ3 −Ｃ21アルケニル、又は部分的若しくは完全にフッ素置換されたＣ1 −Ｃ10アルキル若しくは−〔（ＣＨ2 ）2 −Ｏ〕m −Ｒ7 ；
Ｒ7 は、水素又はＣ1 −Ｃ21アルキル；
Ｚは、−（ＣＨ2 ）p −又は−（ＣＨ2 −ＣＨ2 −Ｏ）q −ＣＨ2 ＣＨ2 −であり、−ＣＨ2 −の場合のＺは、非置換又はＣ1 −Ｃ10アルキル、Ｃ5 −Ｃ6 シクロアルキル、及び非置換又はＣ1 −Ｃ4 アルキル置換フェニルから選ばれる一つ以上の同一又は異なる置換基で置換されていてもよい；
ｍは、１乃至４の数；
ｐは、１乃至１０の数であり；そして
ｑは、１乃至４の数である〕で示される基である場合、その製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、Ｈ2 Ｏ及びＢＦ3 の存在で開環し、式：Ｘ’−（ＣＨ2 ）q −Ｘ’又はＸ’−（ＣＨ2 −ＣＨ2 −Ｏ）r −Ｘ’（式中、Ｘ’は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏである）で示される化合物を用いて閉環し、新しい環を形成することよりなり；
（ｄ）Ｒ3 が、式（Ｉａ）で示される基である場合、
その製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、Ｒ6 ＯＨ及びＢＦ3 の存在下に反応させ、適当な場合には、遊離の水酸基をエーテル又はエステルに変換することよりなり；
（ｅ）Ｒ3 が、式（Ｉａ）で示される基である場合、
その製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、ＢＦ3 及び、例えばＮａＢＨ4 の存在下に水素化し、適当な場合には、遊離の水酸基をエーテル又はエステルに変換することよりなり；
（ｆ）Ｒ3 が、式（Ｉａ）で示される基である場合、
その製造法は、（ｂ）で得られたエポキシドを、適切なグリニャール試薬と反応させ、適当な場合には、遊離の水酸基をエーテル又はエステルに変換することよりなり；又は
（ｇ）Ｒ3 が、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）で示される基である場合、
その製造法は、（ａ）乃至（ｆ）に記載した方法の一つによって、式（IVｂ）：
【化３１】
0004012579.tif 000014
（式中、Ｒ14及びＲ15は、上記と同義であり、Ａは離脱基、好適にはアルコキシ、アシルオキシ、メシル−Ｏ、トシル−Ｏ、特にＯＣＨ3 、ＯＣＯＣＨ3 及びベンゾイルオキシである）で示される化合物を２’−ＯＨ基において置換し、次いで、それ自体が公知の方法で、置換によって塩基基Ｂを導入し〔Lukevics, E., Zablocka, A., Nucleoside Synthesis, Ellis Horwood, New York (1991)〕、適当な場合には、保護基Ｒ14及びＲ15を除去し、リンを含むヌクレオチド架橋基を導入することよりなる。
【００３１】
式（Ｉ）（式中、Ｒ5 は水素でありｎ＝１である）で示される化合物もまた、式（IVａ）で示される化合物を、式：Ｘ−ＣＨ2 −ＣＯ−ＯＲの化合物と反応させ、次いでＣＯ基をＣＨ2 ＯＨ基に還元し、アルキル化することによって得られる。
【００３２】
式（IVａ）及び（IVｂ）で示される化合物、Ａ及びＢは公知である；これらの幾つかの化合物は市販されているか又は、公知又は類似の方法で作られる。
【００３３】
不活性溶媒は、例えば炭化水素、ハロゲン化炭化水素、アルキル化されたカルボン酸アミド及びラクタム、エーテル、アセトニトリルのようなニトリル、ジアルキルスルホン又はジアルキルスルホキシド又は環状スルホン及びスルホキシドである。
【００３４】
反応工程（ａ）乃至（ｇ）における反応温度は、−５０°から２００℃、好適には０°から９０℃である。
【００３５】
反応は、塩基、例えばアルカリ金属水素化物、アルコラート、水酸化物、炭酸塩、トリアルキルアミン又はジアザビシクロウンデセンの存在下に、好都合に行なわれる。
【００３６】
反応は、例えば触媒を用い、又は水素化ホウ素を用いて行なわれる。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物は、それ自体が公知の方法、例えば沈殿又は結晶化及び濾過並びにクロマトグラフィー法によって単離、精製される。
【００３８】
式（Ｉ）の化合物は、核酸との相互反応の故に、有益な生物学的活性を示すオリゴヌクレオチドを構築するのに用いられ、薬学的に活性な成分として又は診断薬として使用することができる。
【００３９】
本発明はまた、式（Ｉ）で示される化合物の同一又は異なるモノマ−単位を含むが、他の天然の又は合成ヌクレオシドのモノマ−単位と一緒に、式（Ｉ）で示される少なくとも１個のモノマ−単位を含む、オリゴヌクレオチドで、２乃至２００のモノマ−単位よりなる、オリゴヌクレオチドの製造における、式（Ｉ）で示される化合物の用途にも関する。このオリゴヌクレオチドは、好適には、２乃至１００、特に好適には２乃至５０、最も好適には４乃至３０のモノマー単位を含む。式（Ｉ）で示される化合物の同一又は異なるモノマー単位を含むオリゴヌクレオチドが好ましい。その他、Ｄ−リボース又はＤ−デオキシリボースから誘導される合成又は天然ヌクレオシドのモノマー単位を付加的に含むオリゴヌクレオチドも好ましい。
【００４０】
本発明は、式（Ｖ）：
【化３２】
0004012579.tif 000015
（式中、ｘは０乃至２００の数であり、Ｙはヌクレオチド架橋基、Ｕ、Ｖ及びＷは、各々独立して、天然又は合成ヌクレオシドの同一又は異なる基を示し、Ｕ、Ｖ及び／又はＷの少なくとも一個は、式（VI）：
【化３３】
0004012579.tif 000016
で示される基、Ｂ及びＲ3 は、好適な意義及び例示を含めて、式（Ｉ）の化合物で定義したものである）で示されるオリゴヌクレオチドにも関する。
【００４１】
好適な架橋基Ｙは、天然オリゴヌクレオチドに存在する−Ｐ（Ｏ）Ｏ- −で示される基である。別の架橋基の例としては、−Ｐ（Ｏ）Ｓ- −、−Ｐ（Ｓ）Ｓ- −、−Ｐ（Ｏ）Ｒ16−、Ｐ（Ｏ）ＮＲ17Ｒ18及び−ＣＨ2 −（式中、Ｒ16は、水素又はＣ1 −Ｃ6 アルキルであり、Ｒ17及びＲ18は、各々互いに独立して、Ｒ16の意義を有する）が挙げられる。式（Ｖ）において、ｘは、好適には０乃至１００の数、特に１乃至５０の数、より特に３乃至２９の数である。式（VI）で示される基は、末端又はヌクレオチド配列中に結合され、式（VI）のすべて又は幾つか、例えば２乃至５個の基を、互いに連続させることが可能であり、或いは式（VI）の基は、天然又は合成ヌクレオチドの基の間に結合され、或いはこれらの配置の混合した形がヌクレオチド配列に存在し得る。
【００４２】
特に好適な態様は、式（Ｖ）〔式中、ｘは２乃至５０、好適には２乃至３０、Ｙは、−Ｐ（Ｏ）Ｏ- −で示される基、Ｕ、Ｖ及びＷは、各々独立して、天然ヌクレオシドの同一又は異なる基であり、Ｕ、Ｖ又はＷで示される基の少なくとも一個は、式（VI）に該当する〕で示されるオリゴヌクレオチドである。適切な天然ヌクレオシドは、アデノシン、シチジン、グアノシン、ウリジン、２−アミノアデニン、５−メチルシトシン、２’−デオキシアデノシン、２’−デオキシシチジン、２’−デオキシグアノシン及びチミジンである。天然ヌクレオシド塩基としては、特にアデニン、シトシン、グアニン、チミン及びウラシルが挙げられる。式（VI）で示される基は、末端又はヌクレオチド配列中に結合され、式（VI）のすべて又は幾つか、例えば２乃至５個の同一又は異なる基を、互いに連続させることが可能であり、或いは式（VI）の同一又は異なる基が、天然ヌクレオシドの基の間に結合され、或いはこれらの配置の混合した形がヌクレオチド配列に存在し得る。式（Ｖ）で示されるオリゴヌクレオチドの別の好適な態様において、Ｕ、Ｖ及びＷで示されるすべての基は、式（VI）の同一又は異なる基である。ｘは、好適には３乃至２９の数であり、式（VI）で示される基の全数は、好適には１乃至１２である。
【００４３】
本発明のオリゴヌクレオチドは、それ自体が公知の方法で、使用説明書と共に市販されている随意に自動化されたＤＮＡ合成装置を用いて各種の方法で作られる。−Ｐ（Ｏ）Ｏ- −の架橋基の場合、例えばリン酸トリエステル法、亜リン酸トリエステル法又はＨ−ホスホン酸エステル法が用いられ、これらは、当業者によく知られているものである。亜リン酸トリエステル法は、例えば次のように行なわれる：式（Ｉ）（式中、Ｒ1 及びＲ2 の各々は水素である）で示されるヌクレオシドは、保護基試薬、例えば塩化４，４’−ジメトキシトリフェニルメチルと反応させ、式（Ｄ）：
【化３４】
0004012579.tif 000017
で示されるヌクレオシドを生成し、式（Ｄ）の化合物は、「リンカー」、例えば無水コハク酸によって担体、例えば長鎖のアルキルアミノ基を有する制御ポアグラス（ＣＰＧ）に結合させる。別の方法では、式（Ｄ）の化合物のヒドロキシ基は、例えばＲ’ＯＰ〔Ｎ（イソプロピル）2 〕2 を用いてホスホルアミダイトに誘導し、式（Ｅ）：
【化３５】
0004012579.tif 000018
（式中、Ｒ’は、例えばβ−シアノエチルである）で示される化合物を形成する。
【００４４】
担体に結合する物質であるＤＭＴ基のような保護基を除去する場合、カップリングは、−Ｎ（ｉｓｏ−Ｃ3 Ｈ7 ）2 の除去を伴って、式（Ｄ）で示される化合物に起こり、遊離の水酸基は何れもブロックされ（キャッピング）、生成した亜リン酸はリン酸に酸化される。二量体は保護基を外され、モノマー単位の所望の数が合成されるまで、式（Ｅ）で示される化合物を用いて反応サイクルを繰り返し、そして生成物は担体から除去される。このようにして、式（Ｖ）のＵ、Ｖ及びＷで示される基すべてが、式（VI）で示される基よりなるオリゴヌクレオチドが得られる。同じ方法は、任意の所望の配列で任意の所望のモノマー単位を有するオリゴヌクレオチドを製造するためにも用いられ、この単位とその配列は、どのような合成及び天然ヌクレオシド基礎単位及び本発明のヌクレオシド基礎単位を個々の反応サイクルで用いられるかによって異なる。
【００４５】
本発明の式（Ｉ）（式中、Ｒ1 及びＲ2 の各々は水素である）で示される化合物は、抗ウイルス性及び抗増殖性を有し、従って医薬品として用いることができる。加えて、本発明のオリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼによる分解に対して高度な安定性を有している。特に驚くべきことは、相補性核酸鎖、特にＲＮＡ型のそれとの優れた対合性である。その他、本発明のオリゴヌクレオチドには、予想以上の高い細胞性取込みがある。従って、本発明のオリゴヌクレオチドは、アンチセンス工学、すなわちｍＲＮＡの適切な相補性ヌクレオチド配列に結合させることによって望ましくない蛋白生成物の発現を阻害するのに特に適している（欧州特許第266,099 号、ＷＯ第87/07300及び89/08146号各明細書）。このオリゴヌクレオチドは、例えば核酸（例えば腫瘍形成因子）段階での生物学的活性蛋白の発現を阻害することによって感染症及び疾患の治療に用いることができる。本発明のオリゴヌクレオチドはまた、診断薬としても適しており、一本鎖又は二本鎖核酸段階における選択的な相互作用により、ウイルス感染又は遺伝性疾患の探知に遺伝子探針として用いることができる。特に、ヌクレアーゼに対する高い安定性のために、生体外のみならず生体内（例えば、組織検体、血液プラズマ及び血液血清）においても診断的に用いることができる。このような用途は、例えばＷＯ第91/06556号明細書に記載されている。
【００４６】
本発明はまた、ウイルス感染又は遺伝性疾患の検出における診断薬としての本発明のオリゴヌクレオチドの用途にも関する。
【００４７】
本発明は、体内においてヌクレオチド配列を不活性化することによって、ヒトを含む温血動物における疾患の治療法における、本発明の式（Ｉ）で示されるヌクレオシド及び式（Ｖ）で示されるオリゴヌクレオチドの用途にも関する。約７０kgの体重がある温血動物への投与の場合の用量は、例えば１日当り、０．０１乃至１０００mgである。投与は、好適には製剤成分の形態で、非経口的に、例えば静脈内又は腹腔内に投与される。
【００４８】
本発明はさらに、式（Ｉ）のヌクレオシド若しくは式（Ｖ）のオリゴヌクレオチド単独の有効量又はその他の活性成分、薬剤担体及び、適当な場合には、賦形剤と一緒に、その有効量を含む薬学組成物に関する。
【００４９】
本発明の薬理学的に活性なヌクレオシド及びオリゴヌクレオチドは、非経口的に投与できる製剤又は注射液の形で用いられる。かかる溶液は、好適には等張性の水溶液又は懸濁液であり、例えば活性成分単独又は担体、例えばマンニトールを一緒に含む凍結乾燥成分の場合、液剤又は懸濁剤のために用時調整することができる。薬学組成物は滅菌され、そして／又は賦形剤、例えば保存剤、安定剤、湿潤剤及び／又は乳化剤、溶解剤、浸透圧及び／又は緩衝液を調整するための塩類を加えてもよい。所望により、別の薬理活性物質、例えば抗生物質を含む薬学組成物は、それ自体が公知の方法、例えば通常の溶解又は凍結乾燥法によって製造され、約０．１％乃至９０％、特に約０．５％乃至約３０％、例えば１％ないし５％の活性成分を含む。
【００５０】
【実施例】
以下の実施例により、本発明を説明する。1 Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、次の環式炭素構造式における炭素原子の番号付けに基づいている：
原料化合物：
【化３６】
0004012579.tif 000019
ヌクレオシド（例）：
【化３７】
0004012579.tif 000020
【００５１】
明細書本文及び構造式で用いた略語：
ＤＭＦ            ジメチルホルムアミド
ＣｌＢｎＣｌ2   塩化２，４−ジクロロベンジル
Ｂｎ              ベンジル
Ａｃ              アセチル
φ                フェニル
ＢＳＡ            Ｎ，Ｎ−ビストリメチルシリルアセトアミド
ＤＢＵ            ジアザビシクロ〔５・４・０〕ウンデカ−７−エン
ＢＯＭ−Ｃｌ      塩化ベンジルオキシメチル
ＤＭＴＣｌ        塩化４，４’−ジメトキシトリチル
ＴＨＦ            テトラヒドロフラン
【００５２】
Ａ）ヌクレオシド類似体の製法
実施例  Ａ１
１−メチルリボース２８．０g を、ＤＭＦ１３０mlに懸濁したＮａＨ１３．５g に６０℃で滴下し、Ｈ2 の発生が終了後、１１０．０g のＣｌＢｎＣｌ2 を滴下した。次いで、反応混合物を２５℃で１６時間撹拌した。未反応のＮａＨを分解するため、メタノールを注意して滴下し、反応混合物を氷水に注加した。塊状の沈殿を濾取し、アセトニトリルでよく洗い、化合物（Ａ１）：
【化３８】
0004012579.tif 000021
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): H-C(1) のプロトンは5.0ppmにシングレットを示した。
MS: 638 (M+).
【００５３】
実施例  Ａ２
実施例Ａ１で得られた生成物６５．９g を塩化メチレン６００mlに溶解し、０℃に冷却し、８００mlの塩化メチレンに溶解した１２１mlのＳｎＣｌ4 を滴下した。反応混合物を３℃で２６時間放置した後、さらに２mlのＳｎＣｌ4 を加えた。合計して３５時間後、注意しながら、反応液をＮａＣＯ3 飽和水溶液７００mlに注加した。４００mlの塩化メチレンで希釈して、Ｓｎを含む沈殿を濾去した。濾液の有機層をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮して化合物（Ａ２）：
【化３９】
0004012579.tif 000022
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): H-C(1)のプロトンは4.90ppm にJ=5 Hzのダブレットを示した。
【００５４】
実施例  Ａ３
実施例Ａ２で得られた生成物１２５．９g をピリジン１リットルに溶解し、２０℃で無水酢酸２５．５g 及び４−ジメチルアミノピリジン１g を加えた。反応混合物を１７時間撹拌し、水１リットルに注加して濃塩酸で酸性にし、酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮した。濃縮液をヘキサンで結晶化して化合物（Ａ３）：
【化４０】
0004012579.tif 000023
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 5.15 [d, J=4.5 Hz, H-C(1)]; 3.50 (s, OCH3); 2.17 (s, OCOCH3);
MS: 522 (M +).
[ α ]Na(D)= 87.4 ±1.0゜ (0.998%).
【００５５】
実施例  Ａ４
チミン２４g を１，２−ジクロロエタン１００ml中に懸濁させ、ＢＳＡ１１６．４g を加えて、透明な溶液が得られるまで反応混合物を還流加熱した。反応混合物を５０℃に冷却し、実施例Ａ３で得られた生成物５０g 及びトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルエステル２７．５g を加えた。反応混合物を７０℃で２０時間撹拌し、次いでＮａＨＣＯ3 水溶液３００mlに注加し、撹拌した。ジクロロエタンの抽出後、反応混合物をＭｇＳＯ4 で乾燥し、濃縮した。濃縮物にメタノールを加えて結晶化させ、化合物（Ａ４）：
【化４１】
0004012579.tif 000024
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 8.25 (s, NH); 6.10 [d, J=4.5 Hz, H-C(1')]; 2.13 (s, OCOCH3); 1.66 (s, CH3).
MS: 616 (M+).
【００５６】
実施例  Ａ５
実施例Ａ４で得られた生成物８５g をアセトニトリル８５０mlに懸濁させ、室温でＤＢＵ２４．２g 及び２４．９g のＢＯＭ−Ｃｌを滴下した。反応混合物を２０時間撹拌し、水中に注加して酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥して蒸発濃縮し、化合物（Ａ５）：
【化４２】
0004012579.tif 000025
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 6.05 [d, J=4.5 Hz, H-C(1')]; 5.5 (AB, CH2); 5.37 (dd, H-C(2')]; 2.13 (s, OCOCH3); 1.55 (s, CH3).
MS: 736 (M+).
【００５７】
実施例  Ａ６
実施例Ａ５で得られた生成物１０６g をＴＨＦ１リットルに懸濁させ、３０％ＮａＯＣＨ3 ／ＣＨ3 ＯＨ溶液２６g を滴下した。２．５時間撹拌した後、反応混合物を水中に注加し、塩化ナトリウム飽和水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。ＭｇＳＯ4 で乾燥後、抽出物を濃縮して化合物（Ａ６）：
【化４３】
0004012579.tif 000026
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 5.93 [d, J=5 Hz, H-C(1')]; 5.5 (AB, CH2); 3.03 (d, J=6.5 Hz, OH); 1.72 (s, CH3).
MS: 694 (M +).
【００５８】
実施例  Ａ７
実施例Ａ６で得られた生成物２０．３g をＴＨＦ２００mlに溶解し、この溶液にＮａＨ０．７３g を加えた。反応混合物を３０分間沸騰させ、次いで、２−クロロエチルメチルエーテル２．８９g を加え、反応混合物を、さらに２４時間沸騰させた。その後、更にＮａＨ０．５g 及び２−クロロエチルメチルエーテル１．７g を加え、３２時間、加熱し続けた後、反応混合物を水中に注加して酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮した。濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し、トルエン／酢酸エチル（４：１）で溶出して化合物（Ａ７）：
【化４４】
0004012579.tif 000027
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 7.65 [s, H-C(6)]; 5.93 [s, H-C(1')]; 5.5 (s, CH2); 3.33 (s, OCH3); 1.6 (s, CH3).
MS: 752 (M+).
【００５９】
実施例  Ａ８
実施例Ａ７で得られた生成物７９．４g をＴＨＦ８００mlに溶解し、この溶液にＮａＨ３．３g を加えた。短時間、反応混合物を沸騰させ、次いで４０℃で、ブロモ酢酸メチルエステル２１g を滴下した。反応混合物を６０℃で合計２７時間撹拌し、１６時間後と２０時間後に、ＮａＨ１g とブロモ酢酸メチルエステル２mlを加えた。最後に、反応混合物を水中に注加して酢酸エチルで抽出した。抽出物をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮して化合物（Ａ８）：
【化４５】
0004012579.tif 000028
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 7.70 [s, H-C(6)]; 5.92 [s, H-C(1')]; 5.48 (AB, CH2); 3.75 (s, OCH3); 1.58 (s, CH3).   MS: 766 (M+).
【００６０】
実施例  Ａ９
（ａ）実施例Ａ８で得られた生成物３７g をＴＨＦ４００mlに溶解し、この溶液に２０℃で、ＬｉＢＨ4 １．５g を小量づつ加え、反応混合物を１時間撹拌した。注意しながら、反応混合物を水５００mlに注加し、２Ｎ塩酸水溶液３２mlで中和した。酢酸エチルで抽出し、蒸発濃縮して化合物（Ａ９）：
【化４６】
0004012579.tif 000029
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 7.65 [s, H-C(6)]; 5.96 [s, H-C(1')]; 5.50 (AB, CH3); 2.57 (broad s, OH); 1.60 (s, CH3).
MS: 738 (M+).
【００６１】
（ｂ）化合物（Ａ９）を、ＴＨＦ中７０℃で、ＮａＨの存在下、ＣＨ3 Ｉでメチル化した。８時間後、実施例Ａ７と同様に後処理して、化合物（Ａ７）を得た。
【００６２】
実施例  Ａ１０
実施例Ａ７で得られた生成物２０．０g をＴＨＦ２００mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５％）２g を加えて、２５℃、常圧で４．５時間水素化した（Ｈ2 の吸収は１０２％）。濾過後、濾液を蒸発濃縮して、濃縮物をメタノール１７０mlに溶解し、３０％ＮａＯＣＨ3 ／ＣＨ3 ＯＨ溶液を加えてpHを１１に調整した。２４時間後、反応混合物を水２５０mlに注加し、２Ｎ塩酸水溶液で酸性にして酢酸エチルで抽出した。抽出物をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮して化合物（Ａ１０）：
【化４７】
0004012579.tif 000030
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 8.75 (s, NH); 7.65 [s, H-C(6)]; 5.97 [s, H-C(1')]; 3.33 (s, OCH3); 1.60 (s, CH3).
MS: 632 (M+).
【００６３】
実施例  Ａ１１
実施例Ａ１０で得られた生成物１５g をメタノール２５０mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５％）の５g を加えて、無水酢酸ナトリウム９．２５g の存在下、５０℃、常圧で水素化した。４６時間後、水素化混合物を濾過し、濾液を蒸発濃縮した。塩類を除去するため、濃縮物を、シリカゲルを持つ小さなフリットによるクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル／メタノール９：１）、化合物（Ａ１１）：
【化４８】
0004012579.tif 000031
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 11.5 (s, NH); 7.95 [s, H-C(6)]; 6.00 [d, J=6 Hz, H-C(1')]; 5.33 (broad s, OH); 5.20 (d, OH); 3.32 (s, OCH3); 1.92 (s, CH3).
MS: 316 (M+).
【００６４】
実施例  Ａ１２
実施例Ａ１１で得られた生成物０．４５g を、ピリジンに溶解し、蒸発濃縮した。この操作を２度繰り返した後、再度、ピリジン１８mlに溶解し、トリエチルアミン０．２g 、０．５５g のＤＭＴＣｌ及び４−ジメチルアミノピリジン２５mgを順次加えた。反応混合物を室温で１６時間撹拌してから、酢酸エチル５０mlで希釈し、水５０mlに注加した。有機層をＭｇＳＯ4 で乾燥し、濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（ヘキサン／酢酸エチル／トリエチルアミン８６：１０：４）、化合物（Ａ１２）：
【化４９】
0004012579.tif 000032
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 7.62 [s, H-C(6)]; 6.02 [d, J=4 Hz, H-C(1')]; 3.38 (s, OCH3); 1.36 (s, CH3).
【００６５】
実施例  Ａ１３
実施例Ａ１２で得られた生成物３３０mgを、ジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド１１０mg、２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトライソプロピルホスホラスジアミダイト１７８mg及び塩化メチレン６mlの混合物に加えた。反応混合物を、室温で１７時間撹拌してから、ＮａＨＣＯ3 飽和水溶液に注加した。有機層をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付した（エタノール／酢酸エチル４：１にトリエチルアミンを１％添加）。得られた泡状物質を、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１mlに溶解し、０℃でペンタンを滴下して化合物（Ａ１３）：
【化５０】
0004012579.tif 000033
（ジアステレオマー、１：１）を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 7.70 [s, H-C(6)]及び 7.63 [s, H-C(6)]; 6.08 [d, J=4 Hz, H-C(1)]; 6.02 [d, J=4 Hz, H-C(1')].
【００６６】
実施例  Ａ１４
実施例Ａ２で得られた生成物２４．２g をＴＨＦ２５０mlに溶解し、この溶液にブロモ酢酸メチルエステル８．７６g とＮａＨ１．３８g を加え、反応混合物を６０℃で３．５時間撹拌した。さらに、ＮａＨ０．１４g とブロモ酢酸メチルエステル０．５３mlを加えた後、反応混合物を６０℃で３時間撹拌した。次いで、この懸濁液を水３００mlに注加し、２Ｎ塩酸水溶液で中和してから酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮して化合物（Ａ１４）：
【化５１】
0004012579.tif 000034
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 5.05 [d, J=4 Hz, H-C(1')]; 3.50 (s, OCH3); 3.75 (s, OCH3).
MS: 552 (M+).
【００６７】
実施例  Ａ１５
（ａ）実施例Ａ１４で得られた生成物５．０g をアセトニトリル６０mlに溶解し、ビシリル化チミン４．８８g を加え、６０℃で撹拌した。この混合液に、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルエステル２．６g を滴下した。３．５時間撹拌した後、反応液を冷却し、ＮａＨＣＯ3 飽和水溶液に注加して撹拌し、酢酸エチルで抽出した。有機層をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トルエン／酢酸エチル１：１）、化合物（Ａ１５）：
【化５２】
0004012579.tif 000035
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 8.36 (s, NH); 7.70 [s, H-C(6)]; 5.94 [d, J=1.5 Hz, H-C(1')]; 3.73 (s, OCH3); 1.58 (s, CH3).
MS: 646 (M+).
【００６８】
（ｂ）上記の生成物を塩化ベンジルオキシメチルと反応させ、化合物（Ａ８）を得た。
【００６９】
実施例  Ａ１６
上記の方法に準じて、各種の２’−ＯＨ修飾を行なった、これらの結果を第１表に示す。
【００７０】
【表１】
0004012579.tif 000036
【００７１】
【表２】
0004012579.tif 000037
【００７２】
【表３】
0004012579.tif 000038
【００７３】
【表４】
0004012579.tif 000039
【００７４】
【表５】
0004012579.tif 000040
【００７５】
【表６】
0004012579.tif 000041
【００７６】
【表７】
0004012579.tif 000042
【００７７】
実施例  Ａ１７
実施例Ａ６で得られた生成物５．０g をＴＨＦ５０mlに溶解し、ＮａＨ０．２１g を加えた後、反応混合物を６０℃で４５分間撹拌した。次いで、ジエチレングリコールクロロエチルメチルエーテル１．５７g を加えた。最後に、６０℃で合計５４時間撹拌した。その８時間及び４２時間後に、さらにＮａＨ０．０５g とジエチレングリコールクロロエチルメチルエーテル０．４g を加えた。反応混合物を冷却してから水中に注加して酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮して得られた化合物（Ａ１７）：
【化５３】
0004012579.tif 000043
を、さらにヘキサン／酢酸エチル（１：１）を用いてシリカゲルのクロマトグラフィーに付し、精製した。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 1.60 (s, CH3); 3.33 (s, OCH3); 5.47 (AB, CH 2); 5.93 [d, H-C(1')]; 7.65 [s, H-C(6)].
MS: 840 (M-).
【００７８】
実施例  Ａ１８
実施例Ａ１７で得られた生成物３．２g をテトラヒドロフラン３５mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５％）０．６g を加えて、常圧下、２２℃で水素化した。１時間後（水素吸収９６％）、水素化混合物の濾液が透明になるまで濾過し、その後濾液を蒸発濃縮した。濃縮物をメタノール３０mlに溶解し、メタノール中３０％ＮａＯＣＨ3 溶液３．５mlを加えた。２０℃で２４時間撹拌した後、反応混合物を水中に注加して酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮して化合物（Ａ１８）：
【化５４】
0004012579.tif 000044
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 1.60 (s, CH3); 3.55 (s, OCH3); 5.96 [d, J=2 Hz, H-C(1')]; 7.62 [s, H-C(6)]; 8.96 (s, NH).
MS: 720/722/724 (M+).
【００７９】
実施例  Ａ１９
実施例Ａ１８で得られた生成物２．３g をメタノール７５mlに溶解し、酢酸ナトリウム１．１５g 及びＰｄ／Ｃ（５％）１．０g を加えて、３５℃で水素化した。４３時間後、触媒を濾去し、濾液を濃縮した。塩類を除去するため、酢酸エチル／メタノール（４：１）を用い、濃縮物をシリカゲルを通して濾過し、化合物（Ａ１９）：
【化５５】
0004012579.tif 000045
を得た。
1H-NMR (250 MHz,メタノ−ル(D4)): 1.72 (s, CH3); 3.22 (s, OCH3); 5.80 [d, J=5 Hz, H-C(1')]; 7.78 [s, H-C(6)].
MS: 404 (M+).
【００８０】
実施例  Ａ２０
実施例Ａ１９で得られた生成物４００mgを無水ピリジン８mlに溶解し、２０℃で、ＤＭＴＣｌの０．３４g を加えた。反応混合物を２０時間撹拌してから塩化メチレン３０mlで希釈し、水中に注加した。有機層を２回水洗し、乾燥（ＭｇＳＯ4 ）し蒸発濃縮した。濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル／トリエチルアミン（９７：３）で溶出して化合物（Ａ２０）：
【化５６】
0004012579.tif 000046
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 1.40 (s, CH3); 3.35 (s, OCH3); 3.70 (s, 2xOCH3); 6.02 [s, H-C(1')]; 7.66 [s, H-C(6)] （全部のシグナルは幅広い）.
MS: 705 (M-H).
【００８１】
実施例  Ａ２１
塩化メチレン２．５mlに溶解した実施例Ａ２０で得られた生成物０．３９g の溶液を、無水の塩化メチレン２．５mlに溶解したジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド０．１２g 及びシアノエチルテトライソプロピルホスホラスアミダイト０．２０g の溶液に滴下し、２０℃で２８時間撹拌した。反応溶液を、ＮａＨＣＯ3 飽和水溶液に注加し、塩化メチレンで抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し、酢酸エチル／トリエチルアミン（９７：３）で溶出して化合物（Ａ２１）：
【化５７】
0004012579.tif 000047
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): H-C(1')のプロトンは、6.02及び6.07 ppmにダブレットとして現れた。
31P-NMR (CDCl3): 149.95, 149.88 ppm
【００８２】
実施例  Ａ２２
ジクロロエタン２５０mlに懸濁したウラシル２１．４g に、ＢＳＡ１１６g を加え、反応混合物を８０℃に３０分間加熱して溶液とした。この溶液を４０℃に冷却し、ジクロロエタン３５０mlに溶解した実施例Ａ３で得られた生成物５０．０g とＳｎＣｌ4 ２７．４g を加え、この溶液を５時間８０℃に保持した。冷却して、ＮａＨＣＯ3 飽和水溶液に注加した。得られた２相の懸濁液を濾過し、有機層を分離し、水層を、再びＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出した。抽出液を合わせ、ＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮し、濃縮物をアセトニトリル中で温浸し、化合物（Ａ２２）：
【化５８】
0004012579.tif 000048
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 2.22 (s, OAc); 5.35 [t, H-C(2')]; 6.07 [d, J=4 Hz, H-C(1')]; 5.53及び7.23 (各々 d, J=8 Hz, H-C(5)及びH-C(6)]; 8.57 (s, NH).
MS: 602
【００８３】
実施例  Ａ２３
６０℃で、ＴＨＦ３００mlに溶解した実施例Ａ４で得られた生成物３５．６g の溶液に、ＴＨＦ６０ml及びＮａＨ（１００％）１．４７g を加え、得られた混合物に１時間加熱を続けた。これに、Ｒ−（−）グリシジルトシラート１４．０g を加え、２．５時間後、さらにＮａＨ０．１g を加えた。反応混合物を４時間加熱し、冷却してから氷に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、シリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トルエン／酢酸エチル９：１）、化合物（Ａ２３）：
【化５９】
0004012579.tif 000049
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.59 (s, CH3); 5.48 (AB、 CH2); 5.92 [s, 1.5 Hz, H-C(1')]; 7.62 [s, H-C(6)].
FAB-MS: 751 (M+H)
【００８４】
実施例  Ａ２４
実施例Ａ２３で得られた生成物５．１g と１−ヘキサデカノール４．９３g を、ＣＨ2 Ｃｌ2 ５０mlに溶解し、三フッ化ホウ素ジエチルエーテラート（d=1.13g/ml）０．９６g を加え、反応混合物を室温で１９時間撹拌した。次いで、Ｈ2 Ｏに注ぎ、ＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル／ヘキサン１：１）、化合物（Ａ２４）：
【化６０】
0004012579.tif 000050
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.60 (s, CH3); 5.47 (AB、 CH2); 5.93 [d, J=1.5 Hz, H-C(1')]; 7.63 [s, H-C(6)].
FAB-MS: 1027 (M+Cl)-.
【００８５】
実施例  Ａ２５
ＴＨＦ３５mlに溶解した実施例Ａ２４で得られた生成物３．４５g の溶液に、ＮａＨ（１００％）０．１５g を加えて、６０℃に４５分間加熱した。次いで、ＭｅＩ０．６３g を加え、反応混合物を、さらに１．５時間加熱した。その後、反応混合物を冷却し、水中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮物にトルエンを用いて、シリカゲルの短いカラムを通して濾過し、化合物（Ａ２５）：
【化６１】
0004012579.tif 000051
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.59 (s, CH3); 5.45 (AB、 CH2); 5.93 [d, J=1.5 Hz, H-C(1')]; 7.63 [s, H-C(6)].
MS (DCl): 1024 (M+NH4)+
【００８６】
実施例  Ａ２６
実施例Ａ２５で得られた生成物３．３g を、ＴＨＦ７０ml中、Ｐｄ／Ｃを０．７g を加えて水素化した（３３時間、Ｈ2 の吸収１０４％）。反応混合物を濾過し、濾液を蒸発濃縮した。濃縮物をＴＨＦ１０mlとメタノール１０mlの混液に溶解し、ＮａＯＣＨ3 ／ＨＯＣＨ3 溶液（３０％）を加えて、室温で２４時間撹拌した。次いで、約半量にまで濃縮し、水中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮液をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル／トルエン１：２）、化合物（Ａ２６）：
【化６２】
0004012579.tif 000052
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.62 (s, CH3); 3.40 (s, OCH3); 5.98 [d, J=2 Hz, H-C(1')]; 7.62 [s, H-C(6)]; 8.57 (s, NH).
MS (DCl): 886.
【００８７】
実施例  Ａ２７
実施例Ａ２６で得られた生成物１．２１g を、メタノール５０mlとトルエン５mlの混液中、Ｐｄ／Ｃ（１０％）を０．２g 、ＭｇＯを０．２５８g 加えて水素化した（２時間、Ｈ2 の吸収２２０ml）。反応混合物を濾過し、濾液を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルを通して濾過（Ｍｇ塩の除去）して化合物（Ａ２７）：
【化６３】
0004012579.tif 000053
を得た。
NMR (250 MHz, DMSO-d6): 1.72 (s, CH3); 5.05 (d, OH); 5.18 (t, OH); 5.84 [d, J=6 Hz, H-C(1')]; 7.77 [s, H-C(6)].
FAB-MS: 569 (M-H).
【００８８】
実施例  Ａ２８
実施例Ａ２７で得られた生成物０．８３g を、ピリジン５０mlに溶解し、この溶液を蒸発濃縮した。濃縮物にピリジン８ml及び０．６g のＤＭＴＣｌを加え、得られた混合物を、室温で４４時間撹拌した。反応混合物をＨ2 Ｏ中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トルエン／酢酸エチル１：１＋１％ＮＥｔ3 ）、化合物（Ａ２８）：
【化６４】
0004012579.tif 000054
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.35 (s, CH3); 3.47 (s, OCH3); 3.80 (s, OCH3); 6.03 [d, J=4 Hz, H-C(1')]; 7.64 [s, H-C(6)]; 8.20 (s, NH).
FAB-MS: 873 (M+H).
【００８９】
実施例  Ａ２９
ＣＨ2 Ｃｌ2 １０ml、ジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド０．２４５g 及びシアノエチルテトライソプロピルホスホラスジアミダイト０．３９g を、実施例Ａ２８で得られた生成物０．９５g に加え、室温で、３日間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ3 飽和水溶液に注加し、ＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トルエン／酢酸エチル２：１＋１％ＮＥｔ3 ）、化合物（Ａ２９）：
【化６５】
0004012579.tif 000055
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 5.97及び6.05 [各々 d, J=4 Hz, 各々 H-C(1)]; 7.62及び7.70 [各々 s, H-C(6)].
P-NMR (250 MHz, CDCl3): 150.012及び150.102.
FAB-MS: 1071 (M-H).
【００９０】
実施例  Ａ３０
ヒポキサンチン１５．６g とＢＳＡ４６．６g を、ジクロロエタン３００ml中で還流下に加熱し、３０分後に溶液を得た。この溶液に、実施例Ａ３で得られた生成物３０．０g 及びＴＭＳトリフラート１６．５g を加え、さらに１６時間加熱を続けた。反応混合物を冷却し、ＮａＨＣＯ3 飽和水溶液に注加し、得られた懸濁液を濾過した。濾液をＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出し、有機層をＭｇＳＯ4 で乾燥して蒸発濃縮した。濃縮物をクロマトグラフィーに付し（メタノール／酢酸エチル１：１）、化合物（Ａ３０）：
【化６６】
0004012579.tif 000056
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 6.22 [d, 3 Hz, H-C(1')]; 8.14 及び 8.37 [each s, H-C(2) 及び H-C(8)].
FAB-MS: 625 (M-H).
【００９１】
実施例  Ａ３１
実施例Ａ３０で得られた生成物３．８g を、ＣＨ2 Ｃｌ2 １５０mlに加え、沸騰させながら、ＳＯＣｌ2 ４．８ml及びＤＭＦ２．４mlの混液を滴下した。反応混合物を、更に３時間沸騰させてから、さらにＳＯＣｌ2 １．２mlとＤＭＦ０．６mlを加えた。反応混合物を、合計で５．５時間沸騰させ、ＮａＨＣＯ3 飽和水溶液に注加し、２０分間撹拌してＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥して蒸発濃縮し、化合物（Ａ３１）：
【化６７】
0004012579.tif 000057
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 5.83 [dd, H-C(2')]; 6.33 [d, J=3 Hz, H-C(1')]; 8.47及び8.73 [各々 s, H-C(2)及び H-C(8)].
MS: 664
【００９２】
実施例  Ａ３２
実施例Ａ３１で得られた生成物３０．４g を、メタノール２００mlとＴＨＦ１００mlの混合溶媒に溶解し、３０％ＮａＯＭｅ／メタノール溶液１６．９g を滴下した。反応混合物を３時間撹拌し、Ｈ2 Ｏに注加して酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥して蒸発濃縮し、化合物（Ａ３２）：
【化６８】
0004012579.tif 000058
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 4.20 (s, OCH3); 6.10 [d, J=6 Hz, H-C(1')]; 8.17及び 8.48 [each s, H-C(2) 及び H-C(8)].
MS: 598.
【００９３】
実施例  Ａ３３
ＴＨＦ２５０mlに溶解した実施例Ａ３２で得られた生成物２５．４g の溶液に、ＮａＨ（１００％）１．１７g を加え、沸騰させながら、２−ブロモエチルメチルエーテル６．７６g を滴下した。反応混合物を、さらに６時間沸騰させ、次いでＮａＨ０．５g と臭化物１．９mlを加えた。２３時間後、反応混合物を冷却し、Ｈ2 Ｏ中に注加して酢酸エチルで抽出し、抽出液を蒸発濃縮した。濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（ヘキサン／アセトン２：１）、化合物（Ａ３３）：
【化６９】
0004012579.tif 000059
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 3.27 (OCH3); 4.20 (OCH3); 6.27 [d, J=5Hz, H-C(1')]; 8.24及び8.52 [各々 s, H-C(2)及び H-C(8)].
MS (DCl): 656.
【００９４】
実施例  Ａ３４
実施例Ａ３３で得られた生成物２．２g を、メタノール４５ml中、Ｐｄ／Ｃ（１０％）を０．６６g 、及びＭｇＯを４０２mg加えて水素化した。１３時間後（Ｈ2 の吸収は４８５．５ml）、混合物を濾過して得られた透明な濾液を蒸発濃縮した。マグネシウム塩を除去するため、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル／メタノール９：１）、化合物（Ａ３４）：
【化７０】
0004012579.tif 000060
を得た。
NMR (250 MHz, DMSO(-d6)): 4.4 (t, OH); 5.23 (OH); 5.94 [d, J=6.5 Hz, H-C(1')]; 8.40及び 8.55 [each s, H-C(2) 及び H-C(8)].
FAB-MS: 339 (M-H)-.
【００９５】
実施例  Ａ３５
メタノール８０mlに溶解した実施例Ａ３４で得られた生成物２．４６g の溶液をオートクレーブに入れ、ＮＨ3 ２０g を導入し、装置を１２時間１２０℃に維持した（内圧：１７bar ）。反応混合物を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル／メタノール）、化合物（Ａ３５）：
【化７１】
0004012579.tif 000061
を得た。
NMR (250 MHz, DMSO-D6): 5.32 (d, OH); 5.60 (t, OH); 6.15 [d, J=6 Hz, H-C(1')]; 8.33及び 8.57 [each s, H-C(2) 及び H-C(8)].
MS (DCI): 326 (M+H).
【００９６】
実施例  Ａ３６
メタノール５mlに溶解した実施例Ａ３５で得られた生成物０．４８g の溶液に、Ｎ−メチル−２，２−ジメトキシピロリジン０．２８g を加え、反応混合物を１８時間撹拌してから蒸発濃縮した。濃縮物にピリジンを加え濃縮することを２度繰り返した後、残った濃縮物をピリジン１０mlに溶解し、ＤＭＴＣｌを０．５g 加えて、室温で４０時間撹拌した。反応混合物をＨ2 Ｏに注加し、ＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出した。抽出液を蒸発濃縮して、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル／メタノール９：１）、化合物（Ａ３６）：
【化７２】
0004012579.tif 000062
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 3.09 (s, NMe); 3.72 (s, OCH3); 6.08 [d, J=6 Hz, H-C(1')]; 7.98 及び 8.43 [each s, H-C(2) 及び H-C(8)].
FAB MS: 709 (M+H).
【００９７】
実施例  Ａ３７
ＣＨ2 Ｃｌ2 ６mlに溶解した実施例Ａ３６で得られたトリチル誘導体０．６３g の溶液を、ＣＨ2 Ｃｌ2 ６mlに溶解したシアノエチルテトライソプロピルホスホラスジアミダイト０．３８g とジイソプロピルアンモニウムテトラゾリド０．２４g の溶液に加え、反応混合物を４０時間撹拌した後、ＮａＨＣＯ3 飽和水溶液中に注加し、ＣＨ2 Ｃｌ2 で抽出した。抽出液を蒸発濃縮して、濃縮物をクロマトグラフィーに付し（酢酸エチル＋１％ＮＥｔ3 ）、化合物（Ａ３７）：
【化７３】
0004012579.tif 000063
を得た。
31P-NMR (250 MHz, CDCl3): 149.8及び150.4.
FAB-MS: 909 (M+H).
【００９８】
実施例  Ａ３８
ＴＨＦ７０mlに溶解した実施例Ａ２３で得られたエポキシド７．１g の溶液に、ＮａＢＨ4 ０．４３g を加え、反応混合物を室温で撹拌し、ＢＦ3 ・ＯＥｔ2 ０．５g を加えた。合計で２６時間撹拌した後、反応混合物を水中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮して化合物（Ａ３８）：
【化７４】
0004012579.tif 000064
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.16 (d, J=7.5 Hz, CH3); 1.61 (s, CH3); 5.48 (AB, CH2); 5.92 [d, J=1 Hz, H-C(1')]; 7.69 [s, H-C(6)].
FAB-MS: 787 (M+Cl)-.
【００９９】
実施例  Ａ３９
実施例Ａ３８で得られたアルコール６．９g を、ＴＨＦ７０ml中、ＮａＨ（１００％）１．５６g とＭｅＩ１．５６g でメチル化した（６０℃、５時間）。常法により後処理して化合物（Ａ３９）：
【化７５】
0004012579.tif 000065
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.13 (d, J=7.5 Hz, CH3); 1.60 (s, CH3); 3.33 (s, OCH3); 5.49 (AB, CH2); 5.95 [d, J=2 Hz, H-C(1')]; 7.64 [s, H-C(6)].
MS (DCI): 766 (M-).
【０１００】
実施例  Ａ４０
実施例Ａ４で得られた誘導体１４．４g を、ＴＨＦ１５０ml中、ＮａＨ（１００％）０．６５g を加えて３０分間、６０℃で加熱した。反応混合物を２５℃に冷却し、Ｄ−α，β−イソプロピリデングリセロール−γ−トシラート５．９２g を加えた。１．５時間後、反応混合物を、６０℃で、さらに３時間撹拌した。反応混合物を冷却し、水中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トルエン／酢酸エチル４：１）、化合物（Ａ４０）：
【化７６】
0004012579.tif 000066
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.34 及び 1.41 (each s, each CH3); 1.58 (s, CH 3); 5.48 (AB, CH2); 5.92 [d, J=1.5 Hz, H-C(1')]; 7.68 [s, H-C(6)].
MS (DCI): 843 (M+Cl)-.
【０１０１】
実施例  Ａ４１
アセトニトリル５０mlに溶解した実施例Ａ１３で得られたホスホラスアミダイト３．１３g の溶液に、ＮＥｔ3 ９．４ml及び１，２，４−トリアゾール６．１７g を加えた。撹拌下、温度が３０℃を越えないようにしながら、ＰＯＣｌ3 １．５３g を滴下した。反応混合物を、室温で、更に４時間撹拌してから、１Ｎ  ＮａＨＣＯ3 水溶液（１５０ml）に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮して、濃縮物を少量のＣＨ2 Ｃｌ2 に溶解し、ｎ−ペンタン１００mlと混合し撹拌した。化合物（Ａ４１）：
【化７７】
0004012579.tif 000067
を沈殿物として得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 6.02及び6.06 [各々 d, J=1.5 Hz, H-C(1')]; 8.44及び8.47 [各々 s, H-C(6)]; 8.07 及び 9.35 (each s, triazole H).
31P-NMR (250 MHz, CDCl3): 149.433及び150.253.
MS (DCI): 869 (M-).
【０１０２】
実施例  Ａ４２
Ｎ2 −イソブチリル−Ｏ6 −ベンジルグアニン〔Jenny, T. F., Schneider, K. C., Benner, S. A., Nucleosides and Nucleotides 11:1257-1261(1992) の方法に準じて合成〕８．８８g とＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド３４．８g をトルエン１３０mlに懸濁し、溶液になるまで１００℃に加熱した。この溶液に、５０℃で、実施例Ａ３で得られたリボース誘導体１３．０g 及びトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルエステル６．３３g を加えた。無色の溶液を１００℃で４時間撹拌し、冷却して、次いでＮａＨＣＯ3 飽和水溶液２００mlに注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮した。濃縮物をシリカゲル１．２kgのクロマトグラフィーに付し（トルエン／酢酸エチル４：１）、化合物（Ａ４２）：
【化７８】
0004012579.tif 000068
を得た。
1H-NMR (250 MHz, CDCl3): 1.26 (d, J=7.5 Hz, CH3); 2.23 (s, OAc); 5.61 (AB, OCH2); 5.78 [dd, H-C(2')]; 6.19 [d, J=3 Hz, H-C(1')]; 7.83 (s, NH); 8.00 [s, H-C(8)].
MS (DCI): 801 (M-).
【０１０３】
実施例  Ａ４３
メタノール８０mlに溶解した実施例Ａ４２で得られた生成物７．４g の溶液に、３０％ＮａＯＭｅ／メタノール溶液０．８３g を加え、室温で３０分撹拌した。反応溶液をＨ2 Ｏに注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ4 で乾燥し、蒸発濃縮して化合物（Ａ４３）：
【化７９】
0004012579.tif 000069
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 1.29 (d, J=7.5 Hz, CH3); 5.61 (AB, OCH2); 5.99 [d, J=6 Hz, H-C(1')]; 7.97 (s, NH); 8.04 [s, H-C(8)].
MS (DCI): 760 (M+H)+.
【０１０４】
実施例  Ａ４４
ＮａＨ（１００％）６３０mgを、ＴＨＦ１００mlに溶解した実施例Ａ４３で得られた化合物９．０g の溶液に加え、反応混合物を１５分間撹拌した。次いで、２−ブロモエチルメチルエーテル１．９７g を、反応混合物に添加した。２５時間後、更に臭化物２．０g を加えた。反応混合物を合計で４８時間撹拌してから、水中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を蒸発濃縮し、濃縮物をシリカゲルのクロマトグラフィーに付し（トルエン／酢酸エチル４：１）、化合物（Ａ４４）：
【化８０】
0004012579.tif 000070
を得た。
NMR (250 MHz, CDCl3): 3.28 (s, OCH3); 5.56 (AB, OCH2); 6.10 [d, J=5 Hz, H-C(1')]; 7.90 [s, H-C(8)].
FAB-MS: 748 (M+H)+.
【０１０５】
実施例  Ａ４５
化合物（Ａ３）を原料として、各種の塩基を導入した。第２表に生成物を示す。
【０１０６】
【表８】
0004012579.tif 000071
【０１０７】
【表９】
0004012579.tif 000072
【０１０８】
【表１０】
0004012579.tif 000073
【０１０９】
実施例  Ｂ
オリゴヌクレオチドの製造
オリゴヌクレオチドを、本発明のジメトキシトリチル化、３’−活性化〔３’−（β−シアノエトキシ−ジ（イソプロピルアミノ）ホスホラスアミダイト）〕ヌクレオシド、又は同様に活性化された天然のヌクレオシドを用いて、固体担体（制御ポアグラス、ＣＰＧ）に結合させ、合成は、製造業者の標準プロトコール〔"Oligonucleotide synthesis, a practical approach" M. J. Gait; IRL Press 1984 (Oxford-Washington DC) 参照〕に準拠して、ＤＮＡシンセサイザー（Applied Biosystems, Model 380 B, standard phosphorus amidite chemistry and iodoxidation ）により行なった。最終のヌクレオシド基礎単位をカップリングした後、濃アンモニア水溶液で一夜処理することによって、すべてのその他の保護基を同時に除去し、５’位が保護されたオリゴヌクレオチドを担体から離し、次いで、５０mM酢酸アンモニウム緩衝液（pH７）／アセトニトリルを用いて逆相ＨＰＬＣによって精製した。８０％酢酸水溶液で２０分間処理して、５’−ジメトキシトリチル保護基を除去し、エタノールでオリゴヌクレオチドを沈殿させ、遠心分離によって単離した。オリゴヌクレオチドの純度は、ゲル電気泳動（ポリアクリルアミド）で測定し、マトリックスアシストレーザー脱離飛行時間質量分析法（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ）によって同定した。
【０１１０】
実施例  Ｃ１
親和性；オリゴヌクレオチド（アンチセンス）と相補性オリゴリボヌクレオチド配列（センス）との相互反応
オリゴヌクレオチドと、天然のリボヌクレオチドの相当する塩基相補性オリゴマーとの相互反応は、ＵＶ融解曲線を記録して特徴付け、この曲線からＴm 値を決定した。その標準法は、例えばMarky, L. A., Breslauer, K. J., Biopolymers 26:1601-1620(1987)に記載されている。
【０１１１】
１０mMリン酸緩衝液、１００mMＮａＣｌ溶液、０．１mMＥＤＴＡ溶液（pH＝７．０）中におけるオリゴヌクレオチド及び相当する塩基相補性天然オリゴリボヌクレオチド溶液（ｃ＝４ｘ１０-6Ｍ／オリゴヌクレオチド）を調製し、２６０nmにおける吸光度の変化を、温度（１５乃至９５℃）の関数として記録した。融解曲線から、Ｔm 値を算出した（第３表）。
【０１１２】
【表１１】
0004012579.tif 000074
【０１１３】
【表１２】
0004012579.tif 000075
【０１１４】
【表１３】
0004012579.tif 000076
【０１１５】
【表１４】
0004012579.tif 000077
【０１１６】
【表１５】
0004012579.tif 000078
【０１１７】
実施例  Ｃ２
特異性；オリゴヌクレオチドと、誤ったヌクレオシド（Ｙ）が組み込まれている塩基相補性オリゴリボヌクレオチドとの相互反応
１０mMリン酸緩衝液、１００mMＮａＣｌ溶液、０．１mMＥＤＴＡ溶液（pH＝７．０）中のオリゴヌクレオチドは、配列：ｒ（ＧＧＡ  ＣＣＧ  ＧＡＡ  ＹＧＧＴＡＣ  ＧＡＧ）を有する相当する塩基相補性オリゴリボヌクレオチドを加えて調製し（ｃ＝４ｘ１０- ６Ｍ／オリゴヌクレオチド）、２６０nmにおける吸光度の変化を、温度（１５℃乃至９５℃）の関数として記録した。この曲線からＴm 値を算出した。結果を第４表に示す。
【０１１８】
【表１６】
0004012579.tif 000079
【０１１９】
実施例  Ｃ３
ヌクレアーゼ安定性；配列：ｄ（ＴＣＣ  ＡＧＧ  ＴＧＴ  ＣＣＧ  ｔｔｔ  Ｃ）を有する各種のオリゴヌクレオチドの酵素的加水分解
合成オリゴヌクレオチド１４μg 及び相当する天然オリゴマー１４μg を、ウシ胎児の１０％熱不活性化血清２００μl （ｃ＝７０μg/ml）中、３７℃で培養した。０．５、１、２、４、６、２４及び４８時間後、反応溶液１５μl に、９Ｍ尿素及びトリスボレート緩衝液（pH７）の２５μl を加えて反応を停止し、測定するまで−２０℃で保存した。停止させた反応溶液を、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法によって分離し、開裂した生成物をリン含量（リン画像法）によって決定した。時間ｔ＝０において十分に完全なオリゴヌクレオチドの初期濃度（ｃn (0) ）に対する、与えられた時間ｔにおける十分に完全なオリゴヌクレオチド濃度（ｃn (t) ）及び３’末端から天然のＣ基礎単位の除去によって形成されたフラグメント濃度（ｃn-1(t)）の和の比Ｒ、すなわちＲ＝（ｃn (t) ＋ｃn -1(t) ）／ｃn(0)を、時間に対してグラフにプロットした。測定された半減期τ1/2 、すなわちＲ＝０．５となる時間を、以下に示す：
【０１２０】
【化８１】
0004012579.tif 000080