(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式（IV）のチオ酸：
R4SH          (IV)
（ここで、R4は直鎖または分岐した脂肪族アシル基を表すか、芳香族アシル基を表す）
に下記の式（V）のα−置換されたアクリルアミド誘導体：
【化１】
0003965450.tif 000012
（ここで、
R１はフェニル基または3,4−メチレンジオキシフェニル基を表し、
R2は水素原子または低級アルキル基を表し、
R3は水素原子、低級アルキル基または低級フェニルアルキレン基を表す）
をミカエル（Michael）付加する段階（Ｂ）を含むことを特徴とする、下記の式(I)の化合物の製造方法：
【化２】
0003965450.tif 000013
（ここで、Rl、R2、R3、R4は上記の意味を有する）
【請求項２】
R4基がアセチル基CH3−CO−、ベンゾイル基C6H5−CO−またはピバロイル基（CH3)3C−CO−基を表す請求項1に記載の方法。
【請求項３】
下記の式（VI）のアクリル酸：
【化３】
0003965450.tif 000014
（ここで、Rlは式(I)と同じ意味を有する）
を下記の式（VIII）のアミノエステル：
【化４】
0003965450.tif 000015
（ここで、R2とR3は式(I)に記載の意味を有する）
とカップリングすることによって上記の式（V）のα−置換されたアクリルアミド誘導体を得る段階(A)を上記段階（B）の前に行う請求項1に記載の方法。
【請求項４】
上記段階(A)が下記の段階(Al)と(A2)から成る請求項3に記載の方法：
(Al)  式（VI）のα−置換されたアクリル酸に塩素化無機酸を反応をさせて下記式（VII）の酸クロリドを作り：
【化５】
0003965450.tif 000016
（ここで、R１は式(I)の意味を有する）
(A2)  得られた式（VII）の酸クロリドに塩基の存在下で式（VIII）のアミノエステルをカップリング反応させる。
【請求項５】
塩素化無機酸をSOCl2、ClCOCOCl、PCl3およびPCl5の中から選択する請求項4に記載の方法。
【請求項６】
段階（A2）で用いる前に、段階（A1）で得られた上記の式(VII)の酸クロリドを蒸留する段階を有する請求項4または5に記載の方法。
【請求項７】
段階（A2）で用いる塩基を有機アミンにする請求項4〜6のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
段階（A2）で用いるアミノエステルを下記の式(VIlla)の塩：
【化６】
0003965450.tif 000017
（ここで、R2およびR3は式(I)に記載の意味を有し、XはHCl、CH3SO3Hおよび4−メチルフェニル−SO3Hの中から選択される)
の形で導入する請求項4〜7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
段階（A2）をトルエン、ジクロロメタン、1、2−ジクロロエタン、クロロホルム、N,N−ジメチルホルムアミド、1、4−ジオキサン、N−メチルピロリドン、N,N−ジメチルアセトアミド、酢酸ブチル、酢酸エチル、酢酸イソブチル、イソプロピルアセテ−ト、酢酸メチル、酢酸プロピルおよびテトラヒドロフランの中から選択される有機溶媒の存在下で行う請求項4〜8のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
段階（B）で用いる化合物（V）をR2が低級アルキル基であるキラル化合物とし、この化合物（V）の少なくとも半分はＳ形にするか、少なくとも半分がＲ形にする請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
化合物（V）として光学的に純粋なＳ形を用いる請求項10に記載の方法。
【請求項１２】
化合物（V）を天然アミノ酸に由来する式（VIII）のアミノエステルと上記式（VI）のアクリル酸との縮合反応で得る請求項11に記載の方法。
【請求項１３】
段階（B）でキラリティインデュ−サを用いる請求項10〜12のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
(B)段階の後に、段階（B）で得られたジアステレオ異性体を分離する最終段階(C)をさらに有する請求項10〜12のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
式(I)の化合物が下記の式（II）のN−（RS）−[2−アセチルチオメチル−l−オキソ−3−フェニルプロピル]−ベンジルグリシネートである請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法：
【化７】
0003965450.tif 000018
【請求項１６】
式(I)の化合物が下記の式（III）のN−(S)−[2−アセチルチオメチル−1−オキソ−3−(3，4−メチレンジオキシフェニル）−プロピル]ベンジル−(S)−アラニネートである請求項1〜１４のいずれか一項に記載の方法：
【化８】
0003965450.tif 000019
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明が属する技術分野】
本発明は、α−置換されたアクリル酸からN−（メルカプトアシル）アミノ酸誘導体を製造するための工業プロセスに関するものである。
本発明は特に、下記一般式(I)のN−(メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の新規な合成方法に関するものである：
【０００２】
【化９】
0003965450.tif 000002
【０００３】
（ここで、
R１はフェニル基または3,4−メチレンジオキシフェニル基を表し、
R2は水素原子または低級アルキル基を表し、
R3は水素原子、低級アルキル基または低級フェニルアルキレン基を表し、
R4は直鎖または分岐した脂肪族アシル基を表すか、芳香族アシル基を表す）
【０００４】
本発明で「低級アルキル基」とは1〜6の炭素原子、好ましくは1〜４の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖を有するアルキル基を意味する。同様に、本発明で「低級アルキレン基」は1〜6の炭素原子、好ましくは1〜４の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖を有するアルキレン基を意味する。
【０００５】
【従来の技術】
式(I)の化合物は有利な薬理学的性質を有する。すなわち、式(I)の化合物は特定の酵素、例えば中性エンドペプチダ−ゼ（EC 3.4.24.11）およびアンギオテンシン変換酵素（EC 3.4.15.1）を阻害する性質を有する。従って、式(I)の化合物を投与することによってエンケファリンおよび心房ナトリウム排泄増加因子の失活およびアンギオテンシンIのアンギオテンシンIIへの変換に関与するこれら酵素の活性を低下または抑制させることができる。これらの化合物は腸管の抗分泌活性または抗高血圧活性を有し、慢性心不全の治療に用いられる。これらの化合物は国際特許出願公開第WO94/21242号に記載のように骨粗鬆症の処理にも用いることができよう。
【０００６】
特に有利な式(I)の化合物として下記の二つの化合物を挙げることができる：
1）  式（II）で表されるラセカドトリル（racecadotril）（N−（RS）−[2−アセチルチオメチル−l−オキソ−3−フェニルプロピル]ベンジルグリシネイト）：
【０００７】
【化１０】
0003965450.tif 000003
【０００８】
2）  式（III）で表されるファシドトリル（fasidotril）（N−(S)−[2−アセチルチオメチル−l−オキソ−3−（3,4−メチレンジオキシフェニル）プロピル]−(S)−ベンジルアラニネ−ト）：
【０００９】
【化１１】
0003965450.tif 000004
【００１０】
式（II）のラセカドトリル（racecadotril）型の式(I)の化合物の製造方法およびその治療用途は欧州特許出願第EP 0038758号に記載されている。
同様に、式（III）の（ファシドトリル（fasidotril）型の式(I)の化合物の製造方法およびその治療用途は欧州特許出願第EP 0419327号に記載されている。
α−置換されたアクリル酸誘導体から式(I)の化合物を製造するより一般的な方法は欧州特許出願第EP0729936号に記載されている。この特許に記載の方法はアクリル酸の不飽和基：C＝C−C＝Oにチオ酸をミカエル付加する第１段階を有し、第2段階でDCC（ジシクロヘキシルカルボジイミド）のようなカップリング剤の存在下でアミノエステルを−COOH基にペプチド結合する。
【００１１】
欧州特許出願第EP0729936にはさらに効率的な合成プロセスが記載されている。この特許の方法で用いるは出発材料は高価でないので、コストが安いという点でも有利である。しかし、第2段階でカップリング剤を使用するためこの方法でもジシクロヘキシル尿素のような副生成物ができてしまう。この副生成物はクロマトグラフィで精製でき、この精製方法は実験室規模では問題にはならないが、工業的スケ−ルで考えた場合、この副生成物を除去するのは極めて困難である。
【００１２】
従って、カップリング剤の使用に起因する副生成物の形成を避けるためにペプチド結合段階の種類を変える試みが行われている。すなわち、その一つの代案は例えば−COOH基を酸クロリド基に代え、カップリング剤無しにカップリングを行う方法である。しかし、この代案でジシクロヘキシル尿素のような副生成物の生成を避けようとすると、酸クロリドの製造段階で他の副生成物、例えばジスルフィドのチオ−ルが無視し得ない量生じ、この化合物を工業的スケ−ルで分離するのは困難である。
【００１３】
従って、α−置換されたアクリル酸からチオ酸のミカエル付加し、アミノエステルをペプチド結合してN−(メルカプトアシル）アミノ酸誘導体を製造する方法は実験室規模では有利であるが、この反応を工業用に適応するのは一般に難しいということは明らかである。
【００１４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者達は、驚くことに、ミカエル付加段階前にペプチド結合段階を実行することによって必要な精製段階が容易になり、上記プロセスを工業用に適用できるということを見出した。すなわち、発明者達の研究によって、チオ酸の付加を予め行った後に得られた酸クロリド中間体を工業的スケ−ルで精製することはできないが、アクリル酸から直接得られた酸クロリドは蒸留可能である、それによってN-(メルカプトアシル）アミノ酸誘導体の純度を工業的プロセスで良くすることができるということが分かった。
【００１５】
本発明者達はさらに、使用するアミノエステルのアミノ基−NH2が結合している炭素が不斉炭素であるときに、アミノエステルとの予備的カップリングによって次のミカエル付加反応での対掌体選択性が得られるということも見出し。この特徴は式(I)でR2が低級アルキル基である化合物、例えば式（III）のファシドトリル（fasidotril）を合成する場合に有利である。すなわち、不斉炭素（S）を含むアミノエステルを用いることによって、ミカエル付加において治療上重要な式(I)の化合物の（Ｓ,Ｓ）形が優先的に合成できる。
【００１６】
この発見に基づく本発明の第１の目的は、式(I)のN−(メルカプトアシル）アミノ酸誘導体を工業的スケ−ルで製造でき、しかも、上記化合物をコスト面、収率面および純度の面で有利に製造することができる方法を提供することにある。
本発明の他の目的は、R2が低級アルキル基である式(I)の化合物、好ましくは下記の（S,S）形の式(I)の化合物が優先的に得られるエナンチオ選択的な方法を提供することにある：
【００１７】
【化１２】
0003965450.tif 000005
【００１８】
（ここで、R1、R2、R3およびR4は上記の意味を有する）
【００１９】
【発明が解決しよとする課題】
本発明の一つの対象は、下記式(I)の一つの化合物を製造する方法にある：
【００２０】
【化１３】
0003965450.tif 000006
【００２１】
（ここで、R1、R2、R3およびR4は上記の意味を有する）
本発明方法は式(IV)のチオ酸：
R4SH                  (IV)
（ここで、R4は上記の定義を有する）
を下記の式(V)のα−置換されたアクリルアミド誘導体：
【００２２】
【化１４】
0003965450.tif 000007
（ここで、R1、R2およびR3は式(I)と同じ意味を有する）
ミカエル付加（Michaek addition）することから成る段階（B）を有する。
【００２３】
このミカエル付加段階（B）は溶媒の存在下または不存在下で実行できる。必要に応じて用いられる溶媒としてはトルエン、ジクロルメタン、1、2−ジクロルエタン、水、クロロホルム、N,N−ジメチルホルムアミド、1,4−ジオキサン、N−メチルピロリドン、N、N−ジメチルアセトアミド、酢酸ブチル、酢酸エチル、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、酢酸プロピル、テトラヒドロフラン、1、4−ジオキサン、シクロヘキサン、イソプロパノ−ル、n−プロパノ−ル、アセトン、1−ブタノ−ルおよび2−ブタノ−ルの中から選択するのが好ましい。
【００２４】
段階（B）は−20℃〜130℃の温度、好ましくは15℃〜115℃の追ん出で、一般に1〜24時間、好ましくは1〜6時間で行われる。段階（B）で得られた式(I)の化合物は当業者に周知の任意の手段で反応媒体から分離できる。例えば溶媒を用いた場合にはその溶媒を部分的に蒸発させ、得られた式(I)の化合物を他の溶媒、例えばイソプロピルアルコ−ルおよび／またはイソプロピルエ−テル中で結晶化させ、濾過および洗浄する。
【００２５】
段階（B）のミカエル付加で用いる式（IV）のチオ酸はチオ酢酸、チオ安息香酸またはチオピバル酸であるのが好ましい。換言すれば、基R4がアセチル基CH3−CO−、ベンゾイル基C6H5−CO−またはピバロイル基（CH3)3C−CO−を表すのが好ましい。
段階（B）で用いる式（V）のα−置換されたアクリルアミドは一般に式（VI）のα−置換されたアクリル酸から得られる：
【００２６】
【化１５】
0003965450.tif 000008
【００２７】
（ここで、Rlは上記の定義を有する）
なお、この式（VI）のアクリル酸は合成し易い安価な化合物である。この化合物の有利な製造法に関する詳細は欧州特許出願第EP0729936号を参照されたい。
この場合には式（V）のα−アクリルアミドは一般に（B）段階の前に行う(A)段階で得られる。この(A)段階は上記式（VI）のアクリル酸を下記式（VIII）のアミノエステルと結合させる段階である：
【００２８】
【化１６】
0003965450.tif 000009
【００２９】
（ここで、R2およびR3は上記の定義を有する）
一般に、アクリル酸（VI）は欧州特許出願第EP0038758号に基の方法で得るのが好ましい。
アクリル酸とアミノエステルとのカップリング段階(A)は当業者に公知の任意の手段で実施することができるが、高純度のα−置換されたアクリルアミドを成形するためには、段階(A)を下記の(Al)および(A2)からなる一連の段階で構成するのが好ましい：
【００３０】
(Al)  式（VI）のα−置換されたアクリル酸に塩素化無機酸を反応をさせて下記式（VII）の酸クロリドを作る：
【００３１】
【化１７】
0003965450.tif 000010
【００３２】
（ここで、R１は式(I)の意味を有する）
(A2)  得られた式（VII）の酸クロリドに塩基の存在下で式（VIII）のアミノエステルをカップリング反応させる。
【００３３】
一般に段階（A1）で用いられる塩素化無機酸はSOCl2、ClCOCOCl、PCl3およびPCl5の中から選択する。これらの塩素化無機酸は単独または有機溶剤存在下で用いることができる。有機溶剤はトルエン、ジクロロメタンまたは1,2-ジクロロエタンの中から選択することができる。トルエンを用いた場合には反応をトルエン還流下で行う。
どのような塩素化無機酸を用いた場合でも、段階（A1）はO℃〜130℃、好ましくは15℃〜120℃の間の温度で行う。この酸のクロル化反応は塩素化無機酸を５分〜7時間かけて少しづづ加えて行うか、塩素化無機酸を直接加えて行うことができる。
【００３４】
いずれの場合も一般に無機酸を過剰量用い、好ましくは無機酸をアクリル酸に対して１〜２モル当量過剰に用いる。反応は一般にハロゲン化酸の添加後30分〜5時間続ける。
段階（A1）で得られた式（VII）の酸クロリドは段階（A2）を行う前に精製段階で処理するのが好ましい。この場合、段階（A1）で得られた式（VII）の酸クロリドは、その化学構造から、段階（A2）のカップリング反応の前に蒸留段階で処理する必要がある。この蒸留段階は工業実施に適しているということは理解できよう。事実には、段階（A2）の前に酸クロリド（VII）を一般に減圧下、好ましくは100〜3000 Pa（0.001〜0.03バール）の圧力で70℃〜160℃の温度で蒸留する。
この蒸留が可能になることによって塩素化処理段階後に存在する可能性のある副生成物を完全に除去することができ、最終的に純度の高い式(I)の化合物を得ることができる。
【００３５】
ペプチド結合の形成段階（A2）は塩基の存在下で行う。この塩基は有機塩基であり、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンの中から選択される有機アミンであるのが好ましい。
さらに、カップリング収率を改善するために段階（A2）で用いるアミノエステルは塩の形であるのが好ましく、特に式（VIlla）の塩が好ましい：
【００３６】
【化１８】
0003965450.tif 000011
【００３７】
（ここで、R2とR3は上記定義を有し、XはHCl、CH3SO3H、4−メチルフェニル−SO3Hの中から選択される）
段階（A2）は一般に有機溶剤の存在下で行われる。この有機溶剤はトルエン、ジクロロメタン、l,2−ジクロエタン、クロロホルム、N,N−ジメチルホルムアミド、1,4−ジオキサン、N，N−メチルピロリドン、N,N−ジメチルアセトアミド、酢酸ブチル、酢酸エチル、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、酢酸プロピルおよびテトラヒドロフランの中から選択される。
【００３８】
段階（A2）で行れるアミノエステル（VIII）またはその塩（VIIIa）への酸クロリド（VII）の付加反応は一般に非常に大きな発熱反応である。従って、段階（A2）の反応は一般に低温、好ましくは−10℃〜25℃の温度で行い、一般には酸クロリド（VII）を少しづつ加えて、アミノエステルまたはアミノエステル塩と塩基を含む媒体を所望の反応温度に維持して行うのが好ましい。一般に、塩基は導入した酸クロリドの量に対して2モル当量過剰に用いる。アミノエステル（VIII）は酸クロリド（VII）に対してわずかに過剰な量、酸クロリドに対して1〜1.2モル当量だけ過剰な量を用いるのが好ましい。酸クロリドは30分〜3時間かけて加えるのが好ましい。付加反応は一般に選択された使用温度で15分〜3時間行うのが有利である。
【００３９】
一般に、付加反応終了後、反応で生じた生成物（VI）を単離する。必要な場合には反応媒体を水および／または酸性の水溶液で洗浄し、有機相を分離する。次いで、有機相を水および／または水溶液、好ましくは酸性水溶液で洗浄する。存在する溶媒を除去、例えば蒸着および／または化合物（VI）の結晶化で除去し、濾過および乾燥する。
【００４０】
本発明方法の特に有利な実施例では、段階（Ｂ）で用いる化合物（V）を、R2が例えばこの基R2を含む式（VIII）のキラルなアミノエステルを式（VI）のアクリル酸とカップリングすることによって得られる低級アルキル基を意味するキラルな化合物にする。すなわち、この場合、R2が水素原子でないときには基R2が結合している炭素原子は不斉炭素である。従って、化合物（V）はキラル化合物になる。従って、この化合物の基R2の向きによって次の段階（B）のミカエル反応は立体選択性を示す。従って、少なくとも大半がS形であるか、少なくとも大半がR形である化合物（V）を用いるのが好ましい。
【００４１】
化合物（V）の基R2が結合した不斉炭素はS形の炭素であるのが特に好ましい。この場合、段階（B）の後に主として得られる式(I)の化合物は治療上有利な活性、特に中性エンドペプチダ−ゼのようなある種の酵素やアンギオテンシン変換酵素の阻害活性するを有する（S,S）形の化合物(I)である。従って、式（III）のファシドトリル（fasidotril）を製造する場合には式（VIII）のアミノエステルとしての（Ｓ）−ベンジルアラニネートを用いて対応する好ましい形の化合物(I)を優先的に作り、半分以上を（S,S）形の式（III）の化合物とし、治療上価値の無い（R,S）形は半分以下の量にする。
同様に、（R）形の化合物（V）を用いて半分以上を（R,R）形の化合物(I)にすることができる。しかし、この（R,R）化合物は一般に有利な治療活性を有しない。
【００４２】
従って、光学上純粋のＳ形の化合物（V）を用いて好ましい（S,S）形の化合物(I)の形成を促進するのが好ましい。この場合、化合物（V）は一般に天然に存在するS形の炭素に結合した低級アルキル基を有するアラニンのような天然のアミノ酸に由来する式（VIII）のアミノエステルを式（VI）のアクリル酸と縮合反応させて作る。
段階（B）のミカエル反応の立体選択性を定量化するために、段階（B）で得られる式(I)の化合物に対して下記のモル比率で表される鏡像体過剰率S：Rを定義することことができる：
(nS−nR) / （nS+nR）
(ここで、
nSは基−CH2−Rlが結合している炭素がS形である化合物(I)のモル数を表し、
nRは基−CH2−Rlが結合している炭素がR形である化合物(I)のモル数を表す)
【００４３】
一般に、R2が水素原子の場合にはこの鏡像体過剰率S：Rはゼロであり、段階（B）のミカエル付加で二つの鏡像異性体RとSが形成されるチャンスは同じである。従って、例えばR2＝Hである化合物（V）から得られる式（II）のラセカドトリル（racecadotril）を本発明方法で合成するとラセミ混合物が得られる。
【００４４】
これに対して、R2が水素原子でない場合には、化合物（V）のキラリティーによってミカエル反応のための対掌体選択性が生じる。従って、反応中間体としてキラルな（V）形を用い、少なくとも半分以上をS形にするか、少なくとも半分以上をR形にすると、段階（B）で得られる化合物(I)の鏡像体過剰率Ｓ:Ｓはゼロ以外になる。
従って、例えば（Ｓ）形のアミノエステル（VIII）をアクリル酸（VI）にカップリングして得られる、基R2に結合した不斉炭素がS形である、光学的に純粋なアクリルアミド誘導体を用いた場合には上記定義の鏡像体過剰率S：R（ジアステレオマ過剰率（S,S）：（R,S）に対応）は一般に10%以上になり、場合によっては25%以上、さらには30%を超えることもある。
【００４５】
キラルな化合物（V）を用いた場合に反応の立体選択性をさらに改善するために段階（B）のミカエル反応でキラリティインデュ−サ（inducteur de chiralite）を用いることができる。このインデュ−サとしては例えばキニ−ネ、キニジン、シンコニンまたはシンコニジンあるいはこれらの化合物の誘導体、例えばo−アセチルキニ−ネ、アルカロイドが挙げられる。その量は化合物（V）に対して0.01〜1当量にするのが好ましい。一般に、この種の化合物が絶対に存在する必要はなく、15%以上の鏡像体過剰率が得られる。
さらに、R2がキラル炭素にキラル性を与える低級アルキル基である場合には、本発明方法は段階（B）後に、段階（B）で得られたジアステレオ異性体を分離する段階（C）を有することができる。
【００４６】
すなわち、（S）形の化合物（V）を優先的に用いた場合には、段階（B）後に得られる（S,S）および（R,S）の形のジアステレオ異性体を分離する段階を有する。この段階は一般に（S,S）化合物の選択的結晶化で行うことができ、この操作は溶媒中または溶媒混合物中で行うことができる。溶媒はイソプロパノ−ル、n−プロパノ−ル、エタノ−ル、メタノ−ル、ジイソプロピルエ−テル、トルエン、ジクロロメタン、クロロホルム、1,4−ジオキサン、酢酸ブチル、酢酸エチル、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、酢酸プロピル、テトラヒドロフラン、1,4−ジオキサン、シクロヘキサン、アセトン、1−ブタノ−ル、2−ブタノ−ル、シクロヘキサンおよび1,2−ジメトキシエタンの中から選択することができる。
本発明方法の上記以外の特徴および利点は単なる例として示す以下の実施例からより良く理解できよう。
【００４７】
【実施例】
実施例1
式（II）のラセカドトリル（racecadotril）（N−(RS)−[2−アセチルチオメチル−l−オキソ−3−フェニル−プロピル]−ベンジルグリシネイト）の製造
段階(A)：
N−[1−オキソ−2−ベンジル−プロペニル]−ベンジルグリシネイトの製造
段階（A1）：
2−ベンジルプロペノイルクロリドの合成
500mlの円錐フラスコ中に下記を導入する：
１）  ベンジルアクリル酸、71.49g（441.29mmol）
２）  トルエン、179ml
得られた混合物を110℃に加熱し、約35mlのトルエンを蒸留して共沸騰蒸留の随伴でベンジルアクリル酸を乾燥する。
次いで、温度を70℃に安定させ、5時間かけて64.06g（538.32mmol）の塩化チオニルSOCl2を加える。添加期間全体にわたって温度を70℃に維持する。添加後、反応液を70℃に3時間維持する。その後、温度を室温（25℃）まで下げ、回転真空乾燥機でトルエンを蒸発させて反応媒体を濃縮する。
82.8gの黄色−オレンジ色のオイルが得られる。このオイルを水を用いて真空蒸留（15mmHg）し、オイルバスで145〜150℃の温度に加熱する。72.71gの無色なオイルが得られる。
沸点：115℃
【００４８】
（A1）段階の収率：91%
段階（A2）：
パラ−トルエンスルホネ−トベンジルグリシネイトとのカップリング
250mlの円錐フラスコ中に下記を導入した：
１）パラ−トルエンのスルホネ−トベンジルグリシネイト、45.18g（134.06mmol）、
２）トルエン、110ml。
懸濁液を撹拌し、アイスバスに浸けてO℃に冷却する。O℃の温度を維持しながら30分かけて27.08g（268.11ミリモル）のリエチルアミンを加える。反応媒体が透明になったときに、温度を０℃に30分間維持する。
上記段階（A1）で得た無色のオイル状酸クロリドの22g（121.88ミリモル）を撹拌しながら（1時間かけて）加える。その際、発熱反応であるので円錐フラスコを0℃のアイスバスに常に維持する。反応を0℃で1時間、撹拌下に行い、その後、温度を25℃へ上げる。
【００４９】
反応媒体中に45mlの蒸留水を加え、５Ｎ−塩酸を加える酸処理によってpHを4にする。混合物を５分間攪拌し、得られた２つの相を分液漏斗に入れる。有機相を分離した後、下記で洗浄する：
1)  90mlの水
2)  45mlの重炭酸ナトリウム水溶液（１リットル当たり44g）
3)  45mlの水
次いで、有機相を真空回転乾燥機で濃縮して、溶媒を除去する。得られた濃縮混合物を110mlのイソプロピルエ−テルとイソプロピルアルコ−ルとの75/25（体積）混合物中に溶解する。得られた溶液を撹拌し、冷却する。結晶化は8℃から始まり、それから急速に現れる。5℃で30分間攪拌する。
生成物を濾過し、乾燥し、5℃の20mlのイソプロピルエ−テルで洗浄すると、30.51gの湿った固形物が得られる。これを一定質量になるまで真空乾燥（20mmHg）する。30.0gの白い固形物を得る。
融点= 52〜53℃
TLC：50/50エチルエ−テル/石油エ−テル溶出液
単一スポット：Rf＝0.5
段階（A2）の収率＝79%
【００５０】
段階（B）：
チオ酢酸のミカエル付加
磁気攪拌機を備えてた250ml円錐フラスコ中に段階（A2）で得られた白い固形物の30g（97.08mmol）を導入する。25℃で攪拌し、8.85g（116.44mmol）のチオ酢酸を30分かけて徐々に加える。次いで、反応媒体の温度を80℃に上げ、この温度を3時間維持する。その後、温度を40℃に下げ、19mlのイソプロピルアルコ−ルを加える。
次いで、混合物を回転真空乾燥機で蒸発乾燥する。得られた油状の残留物を150mlのイソプロピルアルコ−ルに溶解し、40℃にする。撹拌し、ゆっくり冷却する。最初の結晶は27℃で見られる。27℃に45分間維持した後、10℃まで冷却する。
得られた結晶性固形物を孔率No.2の焼結濾材で濾過し、乾燥し、50mlのイソプロピルエ−テルとイソプロピルアルコ−ルの3/2（体積）混合物で5℃で洗浄する。白い固形物が得られる。それを45℃で真空乾燥（15mmHg）する。
得られた重量： 28.22 g
融点＝79〜80℃（顕微鏡）
TLC：50/50エチルエ−テル/石油エ−テル溶出液
単一スポット：Rf＝0.45
段階（B）の収率＝75%
ラセカドトリル（racecadotril）合成プロセスの全収率：53.9%
【００５１】
実施例2
式（III）のファシドトリル（fasidotril）（N−(S)−2−アセチルチオメチル−l−オキソ−3−(3，4−メチレンジオキシフェニル）プロピル]−(Ｓ)−ベンジルアラニネ−トの製造
段階(A)：
N−[1−オキソ−2−(3，4−メチレンジオキシベンジル）プロペニル]−（S）−ベンジルアラニネ−トの製造
【００５２】
段階（A１）：
2−(3，4−メチレンジオキシベンジル）プロペノイルクロリドの合成：
250ml三つ口フラスコに下記を導入した：
１）  50g（242.71ミリモル）のピペロニルアクリル酸、
２）  50mlのトルエン
５分かけて34.66g（291.26ミリモル）の塩化チオニルを加える。得られた懸濁液を30分間オイルバスを用いて還流する。次いで、反応媒体を室温（25℃）に冷却し、ウォ−タ−バス中で回転乾燥機で45℃で濃縮する。赤色−オレンジ色の粗オイルを得る。
質量＝56.95g
【００５３】
段階（A2）
ベンジルアラニネ−トのメタンスルホナ−トとのカップリング
1リットルの三つ口フラスコに下記を導入する：
１）  150mlのトルエン、
２）  66.75g（242.72mmol）のメタンスルホナ−トベンジルアラニネ−ト
得られた懸濁液を撹拌し、5℃に冷却する。次いで、15分かけて51.48g（509.70mmol）のトリエチルアミンを加える。10分間、0〜＋5℃の温度で撹拌する。次いで、反応媒体に50mlのトルエンに溶解した段階（A1）で得られたオイルの56.95gを加える。添加中はl5℃を越えないようにする。
高い発熱反応であるので、添加は三つ口フラスコを塩を加えたアイスバス中に維持して−5℃で40分かけて行う。
その後、反応媒体を約20分かけて室温（25℃）まで上昇させる。次に、150mlの水を加え、混合物を５分間撹拌する。得られる二相を分液漏斗に入れ、水相を除去する。次いで、トルエン相を下記で洗浄する：
１）  100mlの１N−HCl
２）  150mlの水
【００５４】
有機相を50℃のウォーターバス中で回転乾燥機で濃縮する。87.16gのオイル状残留物を得る。それ27mlのイソプロパノ−ルに溶解する。100mlのイソプロピルエ−テルを加える。得られた溶液をビーカに移し、10℃に冷却し、撹拌する。
反応媒体に5mgのN−[l−オキソ（2−（3,4−メチレンジオキシベンジル）プロペニル]−（S）ベンジルアラニネート結晶を種として加える。媒体を5℃に冷却し、30分間撹拌する。形成された結晶状固形物を孔率がNo.2の焼結濾材を用いて濾過する。析出物を100mlのイソプロピルエ−テルに5℃で溶かし、濾過し、5℃で25mlのイソプロピルエーテルで洗浄し、一定質量になるまで真空乾燥する。
63.93 g白色−クリ−ム色の固形物を得る。
融点：51〜52℃（顕微鏡）
TLC：50/50エチルエ−テル/石油エ−テル溶出液
顕色剤：リンモリブデン酸、Rf＝0.38
旋光能：[α1]＝−l6.7°（25℃、メタノ−ル中c＝=2.04）
段階(A)の収率：71%
【００５５】
段階（B）：
チオ酢酸のミカエル付加
磁気攪拌機を備えた250mlの三つ口フラスコに上記段階で得られた固形物の30g（81.74mmol）を導入する。撹拌しながら25℃で５分かけて7.76g（102.10mmol）のチオ酢酸を徐々に導入する。次いで、反応媒体を80℃に2〜3時間加熱する。反応の終点をモニタ−するために、得られる油性媒体を1H−NMRおよびHPLCで分析する。反応媒体のジアステレオ異性体過剰量（S,S）：（R,S）を測定する。この値は25%である。
【００５６】
段階（Cl）：
第１回再結晶
段階（B）で得られた反応媒体に300mlのイソプロパノ−ルを加え、得られた溶液を30℃に冷却する。反応媒体中に50mgのファシドトリル（fasidotril）（S,S）結晶の種を加え、30℃の温度に2時間維持する。得られた固形物を濾過、15mlのイソプロパノ−ルで洗浄し、25℃で真空乾燥（20mmHg）する。
13.88 gの白い固形物が得られる。
融点：97〜l00℃
TLC：溶出液：60/40エチルエ−テル/石油エ−テル、Rf＝0.44、単一スポット、
顕色剤：254ナノメ−トルのＵＶおよびリンモリブデン酸。
1H−NMR：ジアステレオ異性体過剰率（S,S）：（S,R）が約90%であることを示す。
段階（B）と（Cl）の全収率：38%
【００５７】
段階（C2）：
第２回再結晶
250mlの三つ口丸底フラスコに上記で得られた白固形物の13.88gと、207mlのイソプロパノ−ルとを導入する。固形物が完全に溶けるまで混合物を撹拌し、70℃の温度に加熱する。得られた溶液を50℃に冷却し、ファシドトリル（fasidotril）（S,S）結晶を入れて、（S,S）化合物を選択結晶化させる。
反応媒体を2時間かけて35℃まで冷却し、35℃の温度に１時間30分維持する。得られた結晶状固形物を孔率がNo.2の焼結濾材を用いて濾過し、15mlのイソプロパノ−ルで洗浄する。25℃で真空乾燥（20mmHg）した後、11.16gの固形物を得る。
融点：109℃（顕微鏡）
ジアステレオマ−異性体の過剰率（S,S）：（R,S）：少なくとも98%
TLC：溶出液：60/40エチルエ−テル/鉱油エ−テル、
顕色剤：254ナノメ−トルのUVおよびリンモリブデン酸
Rf＝0.42.
旋光能：[α]D＝−5l.8°（20℃、メタノ−ル中c ＝1.03）
段階（C）の収率：80%
ファシドトリル（fasidotril）合成の全収率：30%