(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
所定の磁化方向に磁化した再生層及び中間層を有する光磁気ディスクに、検体との間で抗原抗体反応を行わせることにより、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向を有する標識体としての磁性粒子を固定する工程と、前記光磁気ディスクの再生層側からレーザ光を照射し、磁性粒子に対応する再生層及び中間層の部分の磁化方向を磁性粒子の磁化方向に反転させる工程と、前記再生層側から磁性粒子に対応する部分にレーザ光を照射するとともに、反射光の偏光角度に基づき磁性粒子に対応する部分に記録されたデータを読み取ることを特徴とする磁気免疫測定方法。
【請求項２】
請求項１に記載の磁気免疫測定方法において、前記磁性粒子を固定する工程は、支持体上に抗体又は抗原を固相化する工程と、前記支持体上で固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、標識体としての磁性粒子と前記検体中に存在する抗原又は抗体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、前記支持体上に捕捉された磁性粒子を光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化する工程と、前記光磁気ディスクの中間層側に前記支持体を固定する工程とを含むことを特徴とする磁気免疫測定方法。
【請求項３】
請求項１に記載の磁気免疫測定方法において、前記磁性粒子を固定する工程は、前記光磁気ディスクの中間層側に形成したフォトレジスト膜に固相領域を形成する工程と、前記固相領域に抗体又は抗原を固相化する工程と、前記固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、標識体としての磁性粒子と前記検体中に存在する抗原又は抗体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、前記固相領域にて捕捉された磁性粒子を光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化する工程とを含むことを特徴とする磁気免疫測定方法。
【請求項４】
所定の磁化方向に磁化した再生層及び中間層を有する光磁気ディスクに、検体との間で抗原抗体反応を行わせることにより、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向を有する標識体としての磁性粒子を固定する工程と、前記光磁気ディスクの再生層側からレーザ光を照射し、磁性粒子に対応する再生層及び中間層の部分の磁化方向を磁性粒子の磁化方向に反転させる工程と、前記中間層側で磁気ヘッドを介して磁性粒子に対応する部分に記録されたデータを読み取ることを特徴とする磁気免疫測定方法。
【請求項５】
請求項４に記載の磁気免疫測定方法において、前記磁性粒子を固定する工程は、支持体上に抗体又は抗原を固相化する工程と、前記支持体上で固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、標識体としての磁性粒子と前記検体中に存在する抗原又は抗体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、前記支持体上に捕捉された磁性粒子を光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化する工程と、前記光磁気ディスクの中間層側に前記支持体を固定する工程とを含むことを特徴とする磁気免疫測定方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗原抗体反応を利用した磁気免疫測定方法に関し、特に、抗原抗体反応により標識体としての磁性粒子を光磁気ディスク上に固定するとともに、光磁気ディスクにて磁性粒子に対応する部分に記録されているデータを読み取り、その読み取ったデジタルデータに基づき検体中の抗原又は抗体を精度良く且つ簡単に検出することが可能であり、また、検体中の抗原又は抗体の量をデジタルデータで定量的に取り扱うことが可能な磁気免疫測定方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、エイズ、成人Ｔ細胞白血病等の疾病、各種ガンの早期検査方法として、抗原抗体反応を利用した各種の免疫測定方法が提案されている。これらの免疫測定方法の内、標識体として磁性超微粒子を使用した免疫測定方法には、例えば、特開昭６３−１０８２６４号公報に記載された測定方法がある。
【０００３】
ここに、特開昭６３−１０８２６４号公報には、固相化された抗原または抗体が所与の領域に固定された支持体からなる検査試薬を用意し、その検査試薬の所与の領域に検体を滴下して検体との間で抗原抗体反応させる第１の工程と、磁性超粒子標識体を検査試薬の所与の領域に付与して第１の工程により固相化された抗原または抗体と結合して検体中の抗体または抗原との間で抗原抗体反応させる第２工程と、検査試薬の所与の領域から未反応の磁性超微粒子標識体を磁気的に除去する第３の工程と、反応した磁性超微粒子標識体を試薬上に定着させる第４の工程と、検査試薬の所与の領域内の磁性超微粒子標識体の磁化を磁気検出器により測定する第５の工程とを含む磁気免疫測定方法が記載されている。
【０００４】
かかる磁気免疫測定方法によれば、酵素イムノアッセイ（ＥＩＡ）と同等以上の検出感度を有し、検査の自動化が容易でかつ簡便に行うことができるものである。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、前記特開昭６３−１０８２６４号公報に記載された磁気免疫測定方法では、磁気検出器により磁性超微粒子標識体の磁化を検出すると所定の出力波形が得られるが、その出力波形は、検査試薬の所与領域内に存在する磁性超微粒子標識体全体の磁化量に対応して得られる波形である。
【０００６】
換言すれば、磁気検出器により得られた出力波形からは、抗原抗体反応により検査試薬の所与領域内にどの程度の個数の磁気超微粒子標識体がトラップされたかについては、判断することができない。従って、出力波形に基づき検査対象となる検体が陽性であることは判断できたとしても、検査試薬の所与領域にトラップされた磁気超微粒子の個数までは判断できないことから、デジタル的に検体中の抗原又は抗体を精度良く且つ簡単に検出することは不可能であり、また、検出波形に基づき検体中の抗原又は抗体の量をデジタルデータで定量的に取り扱うことは不可能なものである。
【０００７】
本発明は前記従来技術の問題点を解消するためになされたものであり、抗原抗体反応により標識体としての磁性粒子を光磁気ディスク上に固定するとともに、光磁気ディスクにて磁性粒子に対応する部分に記録されているデータを読み取り、その読み取ったデジタルデータに基づき検体中の抗原又は抗体を精度良く且つ簡単に検出することが可能であり、また、検体中の抗原又は抗体の量をデジタルデータで定量的に取り扱うことが可能な磁気免疫測定方法を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成するため請求項１に係る磁気免疫測定方法は、所定の磁化方向に磁化した再生層及び中間層を有する光磁気ディスクに、検体との間で抗原抗体反応を行わせることにより、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向を有する標識体としての磁性粒子を固定する工程と、前記光磁気ディスクの再生層側からレーザ光を照射し、磁性粒子に対応する再生層及び中間層の部分の磁化方向を磁性粒子の磁化方向に反転させる工程と、前記再生層側から磁性粒子に対応する部分にレーザ光を照射するとともに、反射光の偏光角度に基づき磁性粒子に対応する部分に記録されたデータを読み取ることを特徴とする。
【０００９】
請求項１の磁気免疫測定方法では、所定の磁化方向に磁化した再生層及び中間層を有する光磁気ディスクに、検体との間で抗原抗体反応を行わせることにより、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向を有する標識体としての磁性粒子を固定した後、光磁気ディスクの再生層側からレーザ光を照射して磁性粒子に対応する再生層及び中間層の部分の磁化方向を磁性粒子の磁化方向に反転させる。そして、再生層側からレーザ光を照射し、その反射光の偏向角度に基づいて磁性粒子に対応する部分に記録されたデータが読み取られる。
【００１０】
このように請求項１の磁気免疫測定方法では、光磁気ディスクの記録・測定原理を免疫測定方法に利用することにより、光磁気ディスクにおいて磁性粒子に対応する部分に記録されたデータをデジタルデータとして読み取ることができる。かかるデジタルデータに基づけば、検体中の抗原又は抗体を精度良く且つ簡単に検出することが可能となる。また、検体中の抗原又は抗体の量をデジタルデータで定量的に取り扱うことが可能となる。
【００１１】
このとき、磁性粒子のサイズを光磁気ディスクにおける１ビット記録単位のサイズよりも大きくしておけば、１個の磁性粒子を複数ビットのデータで表すことができ、これより磁性粒子の検出精度を格段に向上することが可能となる。
【００１２】
ここに、前記磁性粒子を固定する工程は、請求項２に記載されているように、支持体上に抗体又は抗原を固相化する工程と、前記支持体上で固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、標識体としての磁性粒子と前記検体中に存在する抗原又は抗体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、前記支持体上に捕捉された磁性粒子を光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化する工程と、前記光磁気ディスクの中間層側に前記支持体を固定する工程とを含んでいてもよい。
【００１３】
かかる場合には、支持体上に抗体又は抗原を固相化した後、その固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせるとともに、検体中に存在する抗原又は抗体と標識体となる磁性粒子との間で抗原抗体反応を行わせる。これにより、検体中に抗原又は抗体が存在する場合には、支持体上に磁性粒子が捕捉される。このように捕捉された磁性粒子は、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化される。更に、光磁気ディスクの中間層側に前記支持体を固定した後、光磁気ディスクの再生層側からレーザ光を照射して磁性粒子に対応する再生層及び中間層の部分の磁化方向を磁性粒子の磁化方向に反転させる。そして、再生層側からレーザ光を照射し、その反射光の偏向角度に基づいて磁性粒子に対応する部分に記録されたデータが読み取られる。
【００１４】
また、請求項３に記載されているように、前記磁性粒子を固定する工程は、前記磁性粒子を固定する工程は、前記光磁気ディスクの中間層側に形成したフォトレジスト膜に固相領域を形成する工程と、前記固相領域に抗体又は抗原を固相化する工程と、前記固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、標識体としての磁性粒子と前記検体中に存在する抗原又は抗体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、前記固相領域にて捕捉された磁性粒子を光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化する工程とを含んでいてもよい。
【００１５】
かかる場合には、光磁気ディスクの中間層側に形成したフォトレジスト膜に固相領域を形成した後、固相領域には抗体又は抗原が固相化される。このように固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせるとともに、検体中に存在する抗原又は抗体と標識体となる磁性粒子との間で抗原抗体反応を行わせる。これにより、検体中に抗原又は抗体が存在する場合には、支持体上に磁性粒子が捕捉される。このように捕捉された磁性粒子は、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化される。更に、光磁気ディスクの中間層側に前記支持体を固定した後、光磁気ディスクの再生層側からレーザ光を照射して磁性粒子に対応する再生層及び中間層の部分の磁化方向を磁性粒子の磁化方向に反転させる。そして、再生層側からレーザ光を照射し、その反射光の偏向角度に基づいて磁性粒子に対応する部分に記録されたデータが読み取られる。
【００１６】
また、請求項４に係る磁気免疫測定方法は、所定の磁化方向に磁化した再生層及び中間層を有する光磁気ディスクに、検体との間で抗原抗体反応を行わせることにより、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向を有する標識体としての磁性粒子を固定する工程と、前記光磁気ディスクの再生層側からレーザ光を照射し、磁性粒子に対応する再生層及び中間層の部分の磁化方向を磁性粒子の磁化方向に反転させる工程と、前記中間層側で磁気ヘッドを介して磁性粒子に対応する部分に記録されたデータを読み取ることを特徴とする。
【００１７】
請求項４の磁気免疫測定方法では、所定の磁化方向に磁化した再生層及び中間層を有する光磁気ディスクに、検体との間で抗原抗体反応を行わせることにより、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向を有する標識体としての磁性粒子を固定した後、光磁気ディスクの再生層側からレーザ光を照射して磁性粒子に対応する再生層及び中間層の部分の磁化方向を磁性粒子の磁化方向に反転させる。そして、中間層側で磁気ヘッドを介して磁性粒子に対応する部分に記録されたデータが読み取られる。
【００１８】
このように請求項４の磁気免疫測定方法では、光磁気ディスクの記録原理を免疫測定方法に利用するとともに、磁気ヘッドを介して光磁気ディスクに記録されたデータを読み取ることにより、光磁気ディスクにおいて磁性粒子に対応する部分に記録されたデータをデジタルデータとして読み取ることができる。かかるデジタルデータに基づけば、検体中の抗原又は抗体を精度良く且つ簡単に検出することが可能となる。また、検体中の抗原又は抗体の量をデジタルデータで定量的に取り扱うことが可能となる。
【００１９】
このとき、磁性粒子のサイズを光磁気ディスクにおける１ビット記録単位のサイズよりも大きくしておけば、１個の磁性粒子を複数ビットのデータで表すことができ、これより磁性粒子の検出精度を格段に向上することが可能となる。
【００２０】
ここに、前記磁性粒子を固定する工程は、請求項５に記載されているように、支持体上に抗体又は抗原を固相化する工程と、前記支持体上で固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、標識体としての磁性粒子と前記検体中に存在する抗原又は抗体との間で抗原抗体反応を行わせる工程と、前記支持体上に捕捉された磁性粒子を光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化する工程と、前記光磁気ディスクの中間層側に前記支持体を固定する工程とを含んでいてもよい。
【００２１】
かかる場合には、支持体上に抗体又は抗原を固相化した後、その固相化された抗体又は抗原と検体との間で抗原抗体反応を行わせるとともに、検体中に存在する抗原又は抗体と標識体となる磁性粒子との間で抗原抗体反応を行わせる。これにより、検体中に抗原又は抗体が存在する場合には、支持体上に磁性粒子が捕捉される。このように捕捉された磁性粒子は、光磁気ディスクの磁化方向とは反対の磁化方向に磁化される。更に、光磁気ディスクの中間層側に前記支持体を固定した後、中間層側で磁気ヘッドを介して磁性粒子に対応する部分に記録されたデータが読み取られる。
【００２２】
尚、請求項２の磁気免疫測定方法に使用される磁気免疫測定媒体としては、支持体上に抗体又は抗原を固相化した磁気免疫測定用媒体が適用でき、請求項３の磁気免疫測定方法に使用される磁気免疫測定用媒体としては、光磁気ディスクの中間層側に形成したフォトレジスト膜に固相領域を形成するとともに、固相領域に抗体又は抗原を固相化した磁気免疫測定用媒体が適用でき、更に、請求項５の磁気免疫測定方法に使用される磁気免疫測定用媒体としては、支持体上に抗体又は抗原を固相化した磁気免疫測定用媒体が適用することができる。
【００２３】
【発明の実施の形態】
以下、本発明に係る実施形態について説明する。先ず、本発明の第１実施形態に係る磁気免疫測定方法の基本的概念について図１乃至図５に基づいて説明する。ここに、図１は抗原抗体反応により支持体上に磁性粒子が捕捉された状態を模式的に示す説明図、図２は光磁気ディスクの一部を拡大して模式的に示す説明図、図３は磁性粒子が捕捉された支持体を光磁気ディスクに固定する状態を模式的に示す説明図、図４は光磁気ディスクにおいて磁性粒子に対応する部分の磁化方向を反転している状態を模式的に示す説明図、図５はレーザ光を照射することにより、又は、磁気ヘッドにより、光磁気ディスクに記録されたデータを読み取る状態を模式的に示す説明図である。
【００２４】
図１において、支持体１上に形成された複数領域２には、抗体３が固相化されている。かかる支持体１上の抗体３と検体との間で抗原抗体反応を行わせる。このとき、検体中に抗原４が存在していれば、かかる抗原４は抗体３と結合する。この後、磁性粒子５に付着されたカップリング剤６に結合した２次抗体７と検体中の抗原４との間で抗原抗体反応が行われる。これにより、検体中に存在する抗原４は、支持体１上の抗体３と磁性粒子５側の２次抗体７とによりサンドイッチ構造で捕捉される。この後、磁石等を使用して支持体１に捕捉された磁性粒子５は所定磁化方向（後述する矢印Ｂ方向）に磁化される。
【００２５】
前記のように、磁性粒子５が捕捉された支持体１は、光磁気ディスク８に固定される。ここで、光磁気ディスク８について図２に基づき説明する。光磁気ディスク８は、公知のように、その一面側から再生層、中間層及び記録層の３層構造を有しているが、本実施形態で使用される光磁気ディスク８は、再生層及び中間層からなる２層構造のディスクが使用される。尚、後述するように、磁性粒子５が中間層側に密着するように支持体１を光磁気ディスク８に固定した状態で、磁性粒子５は記録層としての作用を行う。再生層及び中間層は、例えば、レーザ光により１５０℃程度に暖められると、その磁化方向が変化し易くなる特質を有している。かかる光磁気ディスク８の基本的な構造、特性については公知であるのでここでは詳細な説明を省略する。
【００２６】
図２においては、光磁気ディスク８における微小エリア９が拡大して模式的に示されており、この微小エリア９において、多数の１ビット記録単位１０が存在している。また、光磁気ディスク８は、初期において図２に示すように、再生層側から中間層に向かう方向（矢印Ａ方向）に磁化されている。
【００２７】
前記のように調整された支持体１は、磁性粒子５の捕捉面が光磁気ディスク８の中間層と密着するように、光磁気ディスク８に固定される。この状態が図３に示されている。ここに、図３では、理解を容易にするため支持体１と光ディスク８の中間層側の面とは離間されているように記載されているが、実際には支持体１はその磁性粒子５が中間層に密着するように、光磁気ディスク８に隙間なく密着されている。この状態で、支持体１に捕捉されている磁性粒子５は、一般光磁気ディスク８における記録層としての作用を行う。
【００２８】
続いて、前記のように支持体１が中間層側に固定された光磁気ディスク８を光磁気システムにセットし、レーザ照射装置１１を介してレーザ光Ｌを再生層側から各１ビット記録単位１０につき連続してレーザスキャニングを行う。このように各１ビット記録単位１０にレーザ光Ｌを照射すると、各１ビット記録単位１０の領域に対応する再生層及び中間層は、１５０℃程度に暖められるのでその磁化方向が変化し易くなる。
【００２９】
このとき、磁性粒子５が密着された領域に対応する複数の各１ビット記録単位１０において、その再生層及び中間層の磁化方向が変化し易くなり、かかる状態で磁性粒子５は記録層として作用することから、磁性粒子５の磁化方向が中間層及び再生層に転写される。これにより、中間層及び再生層の磁化方向は、当初Ａ方向であったものが、図４に示すように、Ａ方向とは反対のＢ方向に反転される。このような中間層及び再生層の磁化方向の反転は、磁性粒子５に対応する部分のみで行われる。
【００３０】
尚、磁性粒子５が密着されていない中間層及び再生層では、レーザ光Ｌを介して一旦磁化方向が変化し易くなるものの、記録層に相当する磁性粒子５が存在しないことから、その磁化方向の反転は行われない。
【００３１】
前記したように磁性粒子５が密着された領域に対応する中間層及び再生層の磁性方向の反転操作が行われた後、光磁気システムにおいて、光磁気ディスク８の中間層、再生層に記録されたデータが読み取られる。ここでは、先ず、レーザ照射装置１１から光磁気ディスク８に向かってレーザ光Ｌを照射し、各１ビット記録単位１０から反射されるレーザ光の偏光角度を光学系を介して検出することにより、各１ビット記録単位１０に記録されているデータの読み取りを行う場合について説明する。
【００３２】
光磁気ディスク８における各１ビット記録単位１０に記録されているデータを読み取るには、図５に示すように、レーザ照射装置１１からレーザ光Ｌを光磁気ディスク８の各１ビット単位毎に照射する。そして、各１ビット記録単位１０から反射するレーザ光Ｌを光学系で検出するとともに、その反射光の偏光角度を検出する。かかる偏光角度と１ビット記録単位１０における磁化方向との間には、公知のように相関関係が存在することから、偏光角度を調べることにより各１ビット記録単位１０に記録されているデータが、「１」であるか、又は、「０」であるかを検出することができる。
【００３３】
例えば、前記した例において、磁性粒子５には対応せず磁化方向の反転が行われなかった１ビット記録単位１０では、矢印Ａ方向に磁化されているが、かかる場合をデータ「０」であるとすると、磁性粒子５に対応して磁化方向の反転が行われることにより矢印Ｂ方向の磁化方向を有する１ビット記録単位１０に記録されたデータは、「１」となる。具体的には、図５において、白丸（○）で表示された１ビット記録単位１０におけるデータは「０」となり、また、黒丸（●）で表示された１ビット記録単位１０におけるデータは「１」となる。また、図５に示されているように、磁性粒子５に対応する領域に存在する複数の１ビット記録単位１０は、磁性粒子５の形状に略対応してデータ「１」の領域を形成する。
【００３４】
従って、１個の磁性粒子５がカバーする１ビット記録単位１０の個数は、支持体１における磁性粒子５の捕捉状態で多少ばらつきが発生するものの、略一定個数になることから、光磁気システムにより光磁気ディスク８における全ての１ビット記録単位１０に記録されているデータの読み取りを行うとともに、データ「１」の１ビット記録単位１０の個数をカウントすることにより、磁性粒子５の個数を精度良く且つ簡単に検出することができる。これより、検体中に含有されている抗原４の量を、磁性粒子５の個数でデジタル的に表すことができるとともに、このように得られたデジタルデータに基づき検体の陽性・陰性の判断を簡単且つ確実に行うことができる。また、支持体１において抗体３が固相化される領域２の個数（予め分かっている）と前記のように検出された磁性粒子５の個数との比率を算出することにより、検体中の抗原４の量をデジタルデータに基づき定量的に取り扱うことが可能となり、検体の陽性・陰性の判断をより精細に行うことができる。
【００３５】
続いて、磁気ヘッドＨを介して各１ビット記録単位１０に記録されているデータの読み取りを行う場合について説明する。前記の場合と同様に、磁性粒子５が密着された領域に対応する中間層及び再生層の磁性方向の反転操作が行われた後、光磁気ディスク８が光磁気システムから取り出されるとともに、支持体１が光磁気ディスク８から除去される。かかる光磁気ディスク８は、再度光磁気システムにセットされる。
【００３６】
光磁気ディスク８における各１ビット記録単位１０に記録されているデータを磁気ヘッドＨを介して読み取るには、図５に示すように、光磁気ディスク８の中間層側（支持体１が固定されていた側で、図５中下側）に磁気ヘッドＨを接触させて各１ビット記録単位１０に記録されているデータを読み取る。
【００３７】
ここに、前記の場合と同様に、磁性粒子５には対応せず磁化方向の反転が行われなかった１ビット記録単位１０では、矢印Ａ方向に磁化されているが、かかる場合をデータ「０」であるとすると、磁性粒子５に対応して磁化方向の反転が行われることにより矢印Ｂ方向の磁化方向を有する１ビット記録単位１０に記録されたデータは、「１」となる。具体的には、図５において、白丸（○）で表示された１ビット記録単位１０におけるデータは「０」となり、また、黒丸（●）で表示された１ビット記録単位１０におけるデータは「１」となる。また、図５に示されているように、磁性粒子５に対応する領域に存在する複数の１ビット記録単位１０は、磁性粒子５の形状に略対応してデータ「１」の領域を形成する。
【００３８】
従って、１個の磁性粒子５がカバーする１ビット記録単位１０の個数は、支持体１における磁性粒子５の捕捉状態で多少ばらつきが発生するものの、略一定個数になることから、光磁気システムにより光磁気ディスク８における全ての１ビット記録単位１０に記録されているデータの読み取りを行うとともに、データ「１」の１ビット記録単位１０の個数をカウントすることにより、磁性粒子５の個数を精度良く且つ簡単に検出することができる。これより、検体中に含有されている抗原４の量を、磁性粒子５の個数でデジタル的に表すことができるとともに、このように得られたデジタルデータに基づき検体の陽性・陰性の判断を簡単且つ確実に行うことができる。また、支持体１において抗体３が固相化される領域２の個数（予め分かっている）と前記のように検出された磁性粒子５の個数との比率を算出することにより、検体中の抗原４の量をデジタルデータに基づき定量的に取り扱うことが可能となり、検体の陽性・陰性の判断をより精細に行うことができる。
【００３９】
（実施例）
次に、前記第１実施形態に係る磁気免疫測定方法の基本的概念を具体的に実施した実施例について説明する。
［抗体の固相化テープの作成］
ポリイミド耐熱磁気記録用テープに対し平行平板電極型プラズマバッチ処理装置にてプラズマ処理を行い、ポリイミドのイミド環の開裂を引き起こした。開裂部位にアンモニアガスを導入しアミノ基の形成を行った。形成されたアミノ基に対してGMBSカップリング試薬(ピアース社製)を反応させGMBSをテープ上に固定した。電子線照射にGMBSが反応した区域を限定したテープを調整した。Fab`化抗HIV-1p24Mab A  (SH基が一つ露出する)を基板上のGMBS基と反応させ、抗HIV-1p24Mab A  抗体をテープ上に固定（固相化）した。
［磁性粒子の調整］
BaFe磁性粒子（平均粒子系３μｍ  戸田工業）をまず消磁し粒子の凝集をおさえ、イソプロパノ−ル超音波処理にて脱脂洗浄を行った。十分に洗浄し塵の良く除去されたBaFe磁性粒子をサンプルテーブルにのせ下部より振動を与えテーブル上で一層に均一に粒子を分布させた。均一に分布した状態でスパッタリング法にてSiO2の被膜（厚さ１nm以下）をBaFe磁性粒子の表面に形成した。サンプルテーブル上にて１％アミノシランカップリング剤（γ-アミノプロピルトリエキシシランKBE903  信越化学社製）溶液を噴霧し15分放置後、3mMTris-HCl  pH10溶液で洗浄し110度１5分間過熱処理した。共有結合のできたアミノシランカップリング剤に対してGMBS（SH基、アミノ基リンカー  ピアース社製）を反応させた。その後シリコナイズ処理（非特異物理吸着阻害）を行った。固定されたGMBS−アミノシランカップリング剤に対して  還元処理後ペプチド合成機より取り出した-ＳHHHHHHHHHH(システイン ヒスチジン（１０）ヒスチジンタグ)を反応させ磁性粒子上にヒスチジンタグを形成した。過剰な-ＳHHHHHHHHHH(システイン ヒスチジン（１０）スチジンタグ)は  磁性体を磁石で回収する際に除去した。HHHHHHHHHH(ヒスチジン（１０）)ＳHHHHHHHHHH(システイン ヒスチジン（１０）)はペプチド合成機(パーキンエルマー社製)により合成した。
［光磁気ディスクの作製］
市販の3.5インチMO（光磁気）ディスクにおいてレーザー照射面の反対に位置する記録用磁気層を形成させないディスクを特別に作成した。垂直磁性体の再生層の下部にはスパッタリングによりチタンをコート（５nm以下）し再生層の磁性体酸化防止を行った。
［抗原の調整］
HIV-1持続感染MOLT4細胞培養液を濃縮し、6１℃３０分熱処理を行ってウイルスの非動化をおこなった。アルカリ法にてウイルスゲノムを回収しＤＮＡ合成装置（モデル３９２、パーキンエルマー社製）を用いて作製した20ｍｅｒのプライマーを2個使用し、ＰＣＲ法によりp24タンパク質構造遺伝子領域の増幅を行った。５'末にＮｄｅＩ部位を、３'末に制限酵素ＥｃｏＲＩ ストップコドンを、付加したこの断片をｐＧＥＭＥＸ−１（プロメガ社製）とｐＧＥＸ−２Ｔ（ファルマシアバイオテック社製）より作製した４．６ＫｂのｐＷ６ＡベクターのＮｄｅＩ、ＥｃｏＲＩ部位に組込み、HIV-1p24を発現するベクターとしてｐＷp24Ａを作製した。ｐＷp24ＡはＮｄｅＩ及びＥｃｏＲＩ部位に、HIV-1p24由来の230アミノ酸個の遺伝子を含んでいる。挿入断片はＤＮＡシーケンスキット（シーケナーゼキットVer.2.0 、アマーシャム ユナイテッドステイツバイオケミカル社製）によりＤＮＡ配列を確認した。
【００４０】
ｐＷp24Ａを宿主大腸菌に導入後、ＬＢ培地３７℃の条件下で培養した。培養液の大腸菌濃度を予備培養にて波長６００ｎｍで吸光度約１．０の濁度とした後、１ｍＭ ＩＰＴＧを添加し発現誘導を行った。4時間培養後、遠心を行い大腸菌を回収した。回収した大腸菌に５０ｍＭトリス−塩酸緩衝液ｐＨ８．０（以下本明細書中ではトリス緩衝液と記載する）を２００ｍｌ加え、氷冷下で超音波破砕処理を行った。発現したp24蛋白質は、遠心後可溶性成分として上清に回収された。
この上清を、トリス緩衝液で平衡化したＱＦＦ陰イオン交換カラム（ファルマシアバイオテック社製）でイオン交換精製した。塩化ナトリウムを含むカラム平衡緩衝液で溶出したところ、約０．３Ｍ塩化ナトリウム濃度溶出画分にp24を回収した。次いでこのp24画分を、濃縮後４Ｍ尿素  トリス緩衝液で平衡化されたスーパーデックス２００(ファルマシアバイオテック社製)にかけ  ゲルろ過精製を行った。
【００４１】
HBs陽性のHBV患者血清を濃縮後  アルカリ法を用いてウイルスゲノム遺伝子を回収した。HBVcore構造遺伝子中１−１４９番目アミノ酸配列に対する遺伝子領域を  既知のHBVゲノムＤＮＡ配列をもとに３０ｍｅｒのプライマーを2個ＤＮＡ合成装置（パーキンエルマー社製）を用いて作製した。作製したプライマーを使用し、９４℃−１分、５５℃−１分、７２℃−１分、３０サイクルの条件下、ＰＣＲ法により、HBVcore構造遺伝子領域における1-149番目タンパク質領域の増幅を行った。５'末にＮｄｅＩ部位を、３'末に制限酵素ＥｃｏＲＩ  ストップコドンを付加したこの断片をｐＧＥＭＥＸ−１（プロメガ社製）とｐＧＥＸ−２Ｔ（ファルマシアバイオテック社製）より作製した４．６ＫｂのｐＷ６ＡベクターのＮｄｅＩ、ＥｃｏＲＩ部位に組込み、HBVcore1-149を発現するベクターとしてｐＷHBc 1-149を作製した。ｐＷHBc 1-149はＮｄｅＩ及びＥｃｏＲＩ部位に、HBVcore構造遺伝子由来の１４９アミノ酸発現領域を含んでいる。挿入断片はＤＮＡシーケンスキット（シーケナーゼキットVer.2.0 、アマーシャム ユナイテッドステイツ バイオケミカル社製）によりＤＮＡ配列を確認した。
【００４２】
ｐＷHBV core1-149を宿主大腸菌に導入後、ＬＢ培地３７℃の条件下で培養した。培養液の大腸菌濃度を予備培養にて波長６００ｎｍで吸光度約１．０の濁度とした後、１ｍＭ ＩＰＴＧを添加し発現誘導を行った。３時間培養後、遠心を行い大腸菌を回収した。回収した大腸菌に５０ｍＭトリス−塩酸緩衝液ｐＨ８．０（以下本明細書中ではトリス緩衝液と記載する）を２００ｍｌ加え、氷冷下で超音波破砕処理を行った。この上清を、トリス緩衝液で平衡化したＱＦＦ陰イオン交換カラム（ファルマシアバイオテック社製）でイオン交換精製した。塩化ナトリウムを含むカラム平衡緩衝液で溶出したところ、約０．３Ｍ塩化ナトリウム濃度溶出画分にHBV core1-149を回収した。次いでこのＱ溶出画分を、セラミックアパタイトカラムにかけ吸着させ  ３０ｍＭのリン酸緩衝液にて溶出させた。セラミックアパタイトカラム吸着画分を濃縮後４Ｍ尿素  ０．５Ｍ塩化ナトリウム  トリス緩衝液で平衡化されたスーパーデックス２００(ファルマシアバイオテック社製)にかけ  ゲルろ過精製を行った。精製したHIV-1p24  HBV core1-149は各々マウスに免疫し  サンドイッチアッセイに使用可能なモノクロナール抗体を確立した。抗HIV-1p24モノクローナル抗体 A  産生細胞（）抗HIV-1p24モノクローナル抗体 Ｂ産生細胞（）を各々マウスの腹空内に移植し  腹水中へ高濃度の抗HIV-1p24モノクローナル抗体 A  、Ｂ各々をを産生させた。腹水を回収し  遠心分離  フィルターを通した後  結合緩衝液で希釈後プロテインＡアガロースカラムにて抗体精製を行った。（バイオラド社製）精製した各々の抗体は（酵素免疫測定法(第三版)石川栄治  著）J.Immunoassay,4:209-327,1983  Isikawa,E etalにのっとり酸性条件下  ペプシンにて抗体を消化しゲルろ過にて消化物の分離精製を行った。分画した各々のF(ab`)2画分を２メルカプトエタノールにて
還元処理後  脱塩カラム処理を行って還元剤とFab`画分を分離した。
【００４３】
一つのSH基の存在するFab`化抗HIV-1p24モノクローナル抗体 Ｂ  に対しGMBS−イミノジ酢酸を反応させ  イミノジ酢酸を導入した。脱塩カラムにて過剰のGMBS-イミノジ酢酸を除去し  イミノジ酢酸ラベル化Fab`化抗HIV-1p24モノクローナル抗体 Ｂを得た。抗HBV core1-149モノクロナール抗体Ｃ産生細胞（）抗HBV core1-149モノクロナール抗体Ｄ産生細胞（）を各々マウスの腹空内に移植し  腹水中へ高濃度の抗HBV core1-149モノクロナール抗体Ｃ  抗HBV core1-149モノクロナール抗体Ｄを産生させた。腹水を回収し、遠心分離、フィルターを通した後  結合緩衝液で希釈後プロテインＡアガロースカラムにて各々の抗体精製を行った。（バイオラド社製）精製した各々の抗体は（酵素免疫測定法(第三版)石川栄治  著）J.Immunoassay,4:209-327,1983  Isikawa,E etalにのっとり酸性条件下  ペプシンにて抗体を消化しゲルろ過にて消化物と分離精製を行った。分画した各々のF(ab`)2画分を２メルカプトエタノールにて還元処理後  脱塩カラム処理を行って還元剤とFab`画分を分離した。一つのSH基の存在するFab`化抗HBV core1-149モノクローナル抗体 Ｄ  に対しGMBS−イミノジ酢酸を反応させ  イミノジ酢酸を導入した。脱塩カラムにて過剰のGMBS-イミノジ酢酸を除去し  イミノジ酢酸ラベル化Fab`化抗HBV core1-149モノクローナル抗体Ｄを得た。
［テープ上での抗体と抗原との反応］
精製HBV core1-149、HIV-1p24抗原を生理食塩濃度リン酸緩衝（PBS）で希釈し、fmol/mlからの希釈系列を作製した。抗HIV-1p24Mab A  Fab`化抗体を固定3.0X8.0mm画分と抗HBc1-149Mab C  Fab`化抗体を固定3.0X8.0mm画分したテープ上にPBSで１fg/mlに希釈したリコンビナントHIV-1p24抗原を10μl各々添加し、室温(約２５℃)で、１０分静置した。20μlのPBS Tween洗浄液にて１回洗浄し洗浄液を除去した後、１mg/ml濃度  イミノジ酢酸ラベル化抗HIV-1p24Mab B二次抗体を各々の画分に５μl添加し室温(約２５℃)で、10分静置した。
【００４４】
１回洗浄（PBS Tween20ｍＭイミダゾ−ル）後、一様に分散したヒスチジンラベル化消磁磁性粒子液2％w/vを  10μl添加。１回下部より磁石を近接させた後振動させながら10分放置した。
［テープ上の磁性粒子の初期化］
テープの上部より磁石を近接させて過磁性粒子を除去した。テープの下部より記録用磁気ヘッドでテープに固定されている消磁された磁性粒子をMOの初期化磁極と反対になるよう磁化させた。
［磁下方向の反転処理］
作製した記録層の無い初期化された光磁気ディスクの下部（レーザー照射の反対側）に磁化させた磁性粒子の固定したテープを磁性粒子がディスクに直接接するように固定し、上部より集光させたレーザー光線約20mWの強度で照射し連続的にディスクの一部を高温とした。（スポットとなる部位が150℃以上200℃未満であり垂直磁性体が磁極の反転を生ずる条件で行った）。
［レーザ照射による光磁気ディスクのデータの読み取り（測定法１）］
上部より読み取りレーザー約1.5mwの強度でレーザーを照射し偏光（反転した磁極のため）を測定することでテープ上にあった磁性粒子の場所と数を特定した。
［磁気ヘッドによる光磁気ディスクのデータの読み取り（測定法２）］
磁性粒子の固定されたテープを除去し下部ディスク表面を十分にクリーニングテープでふき取り磨きGMR磁気ヘッドによって磁界を測定した。
［測定結果］
前記した測定法１及び測定法２により測定した結果を図６及び図７に示す。図６に示すように、レーザによる偏光角度を測定した場合（測定法１）と磁気ヘッドで磁界を測定した場合（測定法２）とで大きな差は生じず、磁性粒子のあった場所と数を測定できた。
【００４５】
具体的に、図６に示す測定法１の測定結果において、MOにおける上から１番目のトラックでは、いずれの１ビット記録単位も磁性粒子により遮蔽されはおらず、従って、各１ビット記録単位については磁性粒子の磁力によりデータ反転は行われないことから、各１ビット単位における記録データは、「０」のままである。
【００４６】
上から２番目のトラックでは、左から３番目の１ビット記録単位の５０％程度、４番目の１ビット記録単位の略全体、５番目の１ビット記録単位の６０％程度が、それぞれ磁性粒子により遮蔽されている。このとき、３番目の１ビット記録単位は、磁性粒子の磁力により「１」にはデータ反転されずエラーとなり、４番目の１ビット記録単位は「１」にデータ反転され、５番目の１ビット記録単位は磁性粒子の磁力により「１」にデータ反転されずエラーとなる。
【００４７】
また、上から３番目のトラックにおいては、左から２番目の１ビット記録単位乃至５番目の１ビット記録単位のいずれも、磁性粒子により遮蔽されており、従って、各１ビット記録単位では磁性粒子の磁力により「１」にデータ反転が行われる。
【００４８】
更に、上から４番目のトラックでは、左から３番目の１ビット記録単位の１０％程度、４番目の１ビット記録単位の５０％程度、５番目の１ビット記録単位の数パーセント程度が、それぞれ磁性粒子により遮蔽されている。従って、３番目乃至５番目の各１ビット記録単位は、磁性粒子の磁力により「１」にデータ反転されることはなく、全てエラーとなる。
【００４９】
前記したところにより、磁性粒子を介して遮蔽されたことによりデータ反転及びエラーが発生した１ビット記録単位は、合計８個であることが分かる。
【００５０】
また、図６に示す測定法２の測定結果においては、前記の場合と同様にして、上から１番目乃至３番目のトラックは、磁性粒子により全く遮蔽されていないことからデータ反転は発生せず、データは「０」のままである。
【００５１】
上から４番目のトラックにおいては、左から３番目の１ビット記録単位の７０％程度が磁性粒子により遮蔽されており、その遮蔽程度に応じて磁性粒子の磁力により「１」にデータ反転されることから、これに対応して測定された磁性データが得られている。
【００５２】
上から５番目のトラックにおいては、左から３番目乃至５番目の１ビット記録単位の略全体が磁性粒子により遮蔽されていることから、各１ビット記録単位は全て「１」にデータ反転され、これに対応して測定された磁性データが得られている。
【００５３】
上から６番目及び８番目のトラックでは、左から２番目乃至５番目の１ビット記録単位の略全体が磁性粒子により遮蔽されており、従って、各１ビット記録単位は全て「１」にデータ反転され、これに対応して測定された磁性データが得られている。
【００５４】
上から９番目のトラックでは、左から４番目の１ビット記録単位の４０％程度が磁性粒子により遮蔽されており、その遮蔽程度に応じて磁性粒子の磁力により「１」にデータ反転されることから、これに対応して測定された磁性データが得られている。
【００５５】
前記したところにより、磁性粒子を介して遮蔽されたことによりデータ反転が発生した１ビット記録単位は、合計１７個であることが分かる。
【００５６】
尚、測定レンジは、テープの表面に固定できた抗体の数により決定され  高濃度のサンプルにおいては、図７に示すように直線性が得られない結果となった。
【００５７】
続いて、本発明の第２実施形態に係る磁気免疫測定方法の基本的概念について図８乃至図１０に基づいて説明する。ここに、図８は光磁気ディスクの中間層側に形成されたフォトレジスト膜にレーザ光を選択的に照射して抗体固相化領域を形成している状態を模式的に示す説明図、図９は抗体固相化領域に抗体を固相化した状態を模式的に示す説明図、図１０はレーザ光を照射することにより光磁気ディスクに記録されたデータを読み取る状態を模式的に示す説明図である。
【００５８】
尚、前記第１実施形態に係る磁気免疫測定方法では、支持体１上の各領域２に固相化された抗体３と検体との間で抗原抗体反応を行わせて検体中の抗原４をトラップした後、かかる抗原４と磁性粒子５を有する２次抗体７との間で抗原抗体反応を行わせて磁性粒子をトラップした支持体１を光磁気ディスク８に固定するように構成されていたが、第２実施形態に係る磁気免疫測定方法では、支持体１を使用することなく光磁気ディスク上に抗体を固相化した領域を直接形成する点で、第１実施形態とは異なる。第２実施形態の残余の構成については、基本的に第１実施形態の場合と同様であるので、以下の説明においては第１実施形態における要素等と同一の要素等については同一の符号を付して説明する。
【００５９】
図８において、光磁気ディスク８（再生層と中間層の２層構造を有する）の中間層側（図８中上側）には、フォトレジスト膜２０が形成されており、かかるフォトレジスト膜２０には、抗体３を固相化するための複数の領域２が形成されている。ここで、フォトレジスト膜２０に各領域２を形成するには、フォトレジスト膜２０を光磁気ディスク８の中間層側に形成した後、光磁気ディスク８の再生層側（図８中か側）からレーザ照射装置１１を介してレーザ光Ｌを、各領域２部分以外の部分に照射する。これにより、レーザ光Ｌが照射されたフォトレジスト膜２０の部分は光硬化する一方、レーザ光Ｌが照射されない各領域２部分は未硬化の状態を保持する。この後、未硬化状態のフォトレジスト膜２０を除去することにより、各領域２を形成することができる。
【００６０】
尚、光磁気ディスク８は、初期において再生層側から中間層に向かう方向（矢印Ａ方向）に磁化されている。
【００６１】
前記のようにフォトレジスト膜２０に形成された複数領域２には、抗体３が固相化されている。かかる各領域２に固相化された抗体３と検体との間で抗原抗体反応を行わせる。このとき、検体中に抗原４が存在していれば、かかる抗原４は抗体３と結合する。この後、磁性粒子５に付着されたカップリング剤６に結合した２次抗体７と検体中の抗原４との間で抗原抗体反応が行われる。これにより、検体中に存在する抗原４は、各領域２における抗体３と磁性粒子５側の２次抗体７とによりサンドイッチ構造で捕捉される。この後、磁石等を使用して各領域２に捕捉された磁性粒子５は所定磁化方向（後述する矢印Ｂ方向）に磁化される。ここに、前記のように各領域２に捕捉されている磁性粒子５は、一般光磁気ディスク８における記録層としての作用を行う。
【００６２】
続いて、前記のようにフォトレジスト膜２０の複数領域２に磁性粒子５が捕捉された光磁気ディスク８を光磁気システムにセットし、図１０に示すようにレーザ照射装置１１を介してレーザ光Ｌを再生層側から各１ビット記録単位１０につき連続してレーザスキャニングを行う。このように各１ビット記録単位１０にレーザ光Ｌを照射すると、各１ビット記録単位１０の領域に対応する再生層及び中間層は、１５０℃程度に暖められるのでその磁化方向が変化し易くなる。
【００６３】
このとき、磁性粒子５により遮蔽される領域に対応する複数の各１ビット記録単位１０において、その再生層及び中間層の磁化方向が変化し易くなり、かかる状態で磁性粒子５は記録層として作用することから、磁性粒子５の磁化方向が中間層及び再生層に転写される。これにより、中間層及び再生層の磁化方向は、当初Ａ方向であったものが、図１０に示すように、Ａ方向とは反対のＢ方向に反転される。このような中間層及び再生層の磁化方向の反転は、磁性粒子５に対応する部分のみで行われる。
【００６４】
尚、磁性粒子５により遮蔽されていない中間層及び再生層では、レーザ光Ｌを介して一旦磁化方向が変化し易くなるものの、記録層に相当する磁性粒子５が存在しないことから、その磁化方向の反転は行われない。
【００６５】
前記したように磁性粒子５の遮蔽領域に対応する中間層及び再生層の磁性方向の反転操作が行われた後、光磁気システムにおいて、光磁気ディスク８の中間層、再生層に記録されたデータが読み取られる。
【００６６】
光磁気ディスク８における各１ビット記録単位１０に記録されているデータを読み取るには、図１０に示すように、レーザ照射装置１１からレーザ光Ｌを光磁気ディスク８の各１ビット単位毎に照射する。そして、各１ビット記録単位１０から反射するレーザ光Ｌを光学系で検出するとともに、その反射光の偏光角度を検出する。かかる偏光角度と１ビット記録単位１０における磁化方向との間には、公知のように相関関係が存在することから、偏光角度を調べることにより各１ビット記録単位１０に記録されているデータが、「１」であるか、又は、「０」であるかを検出することができる。
【００６７】
例えば、磁性粒子５には対応せず磁化方向の反転が行われなかった１ビット記録単位１０では、矢印Ａ方向に磁化されているが、かかる場合をデータ「０」であるとすると、磁性粒子５に対応して磁化方向の反転が行われることにより矢印Ｂ方向の磁化方向を有する１ビット記録単位１０に記録されたデータは、「１」となる。
【００６８】
従って、１個の磁性粒子５がカバーする１ビット記録単位１０の個数は、各領域２における磁性粒子５の捕捉状態で多少ばらつきが発生するものの、略一定個数になることから、光磁気システムにより光磁気ディスク８における全ての１ビット記録単位１０に記録されているデータの読み取りを行うとともに、データ「１」の１ビット記録単位１０の個数をカウントすることにより、磁性粒子５の個数を精度良く且つ簡単に検出することができる。これより、検体中に含有されている抗原４の量を、磁性粒子５の個数でデジタル的に表すことができるとともに、このように得られたデジタルデータに基づき検体の陽性・陰性の判断を簡単且つ確実に行うことができる。また、支持体１において抗体３が固相化される領域２の個数（予め分かっている）と前記のように検出された磁性粒子５の個数との比率を算出することにより、検体中の抗原４の量をデジタルデータに基づき定量的に取り扱うことが可能となり、検体の陽性・陰性の判断をより精細に行うことができる。
（実施例）
次に、前記第２実施形態に係る磁気免疫測定方法の基本的概念を具体的に実施した実施例について説明する。
［光磁気ディスクの作製］
市販の3.5インチMO（光磁気）ディスクにおいてレーザー照射面の反対に位置する記録用磁気層を形成させないディスクを特別に作成した。垂直磁性体の再生層の下部にはスパッタリングによりチタンをコート（５nm以下）し再生層の磁性体酸化防止を行った。
［光磁気ディスクへの抗体固相領域の形成］
光磁気ディスクの再生層側に、均一な膜圧でフォトレジスト膜を形成した後、光磁気装置にセットし、複数の抗体固相領域となる領域以外の部分にレーザ光を照射して、各抗体固相化領域以外の部分を光硬化させた。この光磁気ディスクを光磁気装置から取り出し、各抗体固相化領域となる領域に存在する未硬化状態のフォトレジスト膜を除去した。
［抗体固相化領域への抗体の固相化］
光磁気ディスクの再生層側に形成された抗体固相化領域に対して、シランカップリング剤を反応させ、エポキシ官能基を露出させた。更に、エポキシ官能基に対して抗ＨＢｅ抗体Ａを反応させ、固相化領域に抗体を固相化した。
［固相化抗体と検体中の抗原との反応］
ＨＢｅ抗原を含有する検体と各領域に固相化された抗ＨＢｅ抗体Ａとの間で抗原抗体反応を行わせ、各領域にＨＢｅ抗原を固定した。
［磁性粒子のトラップ］
ＨＢｅ抗原を固定した光磁気ディスク上の各領域に、ヒスチジンクラスターを導入した抗ＨＢｅ抗体ＢのＦａｂ’を反応させた後、イミノジ酢酸を粒子表面に導入した消磁化磁性粒子を反応させ、各領域に磁性粒子をトラップした。
［磁性粒子の初期化］
光磁気ディスクの上部より磁石を近接させて過磁性粒子を除去した後、磁性粒子を光磁気ディスクの磁化方向と反対の方向に磁化させた。
［磁下方向の反転処理］
光磁気ディスクの再生層側から集光させたレーザー光線約20mWの強度で照射し連続的にディスクの一部を高温とした。（スポットとなる部位が150℃以上200℃未満であり垂直磁性体が磁極の反転を生ずる条件で行った）。
［レーザ照射による光磁気ディスクのデータの読み取り］
再生層側より読み取りレーザー約1.5mwの強度でレーザーを照射し偏光（反転した磁極のため）を測定することでテープ上にあった磁性粒子の場所と数を特定した。
［測定結果］
前記のように測定を行って得られた測定結果は、前記図６にて説明した場合と同様の結果となり、磁性粒子のあった場所と数を測定できた。
【００６９】
【発明の効果】
以上説明した通り本発明に係る磁気免役測定方法では、抗原抗体反応により標識体としての磁性粒子を光磁気ディスク上に固定するとともに、光磁気ディスクにて磁性粒子に対応する部分に記録されているデータを読み取り、その読み取ったデジタルデータに基づき検体中の抗原又は抗体を精度良く且つ簡単に検出することが可能であり、また、検体中の抗原又は抗体の量をデジタルデータで定量的に取り扱うことが可能な磁気免疫測定方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】抗原抗体反応により支持体上に磁性粒子が捕捉された状態を模式的に示す説明図である。
【図２】光磁気ディスクの一部を拡大して模式的に示す説明図である。
【図３】磁性粒子が捕捉された支持体を光磁気ディスクに固定する状態を模式的に示す説明図である。
【図４】光磁気ディスクにおいて磁性粒子に対応する部分の磁化方向を反転している状態を模式的に示す説明図である。
【図５】レーザ光を照射することにより、又は、磁気ヘッドにより、光磁気ディスクに記録されたデータを読み取る状態を模式的に示す説明図である。
【図６】実施例における測定法１と測定法２により測定した測定結果を示すグラフである。
【図７】サンプル濃度と検量線との関係を示すグラフである。
【図８】光磁気ディスクの中間層側に形成されたフォトレジスト膜にレーザ光を選択的に照射して抗体固相化領域を形成している状態を模式的に示す説明図である。
【図９】抗体固相化領域に抗体を固相化した状態を模式的に示す説明図である。
【図１０】レーザ光を照射することにより光磁気ディスクに記録されたデータを読み取る状態を模式的に示す説明図である。
【符号の説明】
１・・・支持体
２・・・抗体の固相領域
３・・・抗体
４・・・検体中の抗原
５・・・磁性粒子
６・・・カップリング剤
７・・・２次抗体
８・・・光磁気ディスク
９・・・微小エリア
１０・・・１ビット記録単位
１１・・・レーザ照射装置
Ｌ・・・レーザ光
Ａ、Ｂ・・・磁化方向
【図１】
0003928425.tif 000002
【図２】
0003928425.tif 000003
【図３】
0003928425.tif 000004
【図４】
0003928425.tif 000005
【図５】
0003928425.tif 000006
【図６】
0003928425.tif 000007
【図７】
0003928425.tif 000008
【図８】
0003928425.tif 000009
【図９】
0003928425.tif 000010
【図１０】
0003928425.tif 000011