(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式のペプチド：
［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29，Ａｈｃ31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,25，Ａｈｃ23，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,25,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ａｈｃ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ａｈｃ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,31，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｃｈａ22，Ａｈｃ23，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24,27，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ａｈｃ18,24,27，Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ25,26，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｈｃ24，Ｌｙｓ25,26，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ａｈｃ22,24，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ａｈｃ22,24，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
またはこれらの製薬上許容できる塩。
【請求項２】
下記式のペプチド：
［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29，Ｎｌｅ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26,30Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；
［Ｌｅｕ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；
またはこれらの製薬上許容できる塩。
【発明の詳細な説明】
関連出願に関する引用
本出願は、現在継続中の、１９９７年１月７日付で提出の米国特許出願第０８／７７９，７６８号のカウンターパート（counterpart）である。
発明の背景
副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）は、副甲状腺によって産生されるポリペプチドである。このホルモンの成熟循環形態は、８４アミノ酸残基から構成される。ＰＴＨの生物学的な作用は、Ｎ−末端のペプチド断片（例えば、１から３４番目のアミノ酸残基）によって再現されうる。副甲状腺ホルモン関連タンパク質（ＰＴＨｒＰ）は、ＰＴＨとＮ−末端相同性のある１３９〜１７３アミノ酸タンパク質である。ＰＴＨｒＰは、共通のＰＴＨ／ＰＴＨｒＰレセプターへの結合などの多くのＰＴＨの生物学的な作用を共有する。トレギアーら、エンドクリノル、９３：１３４９（１９８３年）［Tregear,et al.,Endocrinol.,93:1349（1983）］。ヒト、ウシ、ラット、ニワトリ等の、多くの様々な源由来のＰＴＨペプチドの特性が明らかになった。ニッセンソンら、レセプター、３：１９３（１９９３年）［Nissenson,et al.,Receptor,3:193（1993）］。
ＰＴＨは、骨の量及び質を改善することが示された。デンプスターら、エンドクリン  レブ、１４：６９０（１９９３年）［Dempster,et al.,Endocrine Rev.,14:690（1993）］；およびリッグス、アメル  ジェー  メド、９１（補遺５Ｂ）：３７Ｓ（１９９１年）［Riggs,Amer.J.Med.,91(Suppl.5B):37S（1991）］。間欠的に投与されるＰＴＨの同化作用が、同時抗吸収療法（concurrent antiresorptive therapy）を伴うまたは伴わないにかかわらず骨粗鬆症の男性及び女性で観察された。スロビックら、ジェー  ボーン  ミナー  レス、１：３７７（１９８６年）［Slovik,et al.,J.Bone Miner.Res.,1:377（1986）］；リーブら、ビーアール  メド  ジェー、３０１：３１４（１９９０年）［Reeve,et al.,Br.Med.J.,301:314（1990）］；およびヘシュ  アール−ディーら、カルシフ  ティッシュー  イントル、４４：１７６（１９８９年）［Hesch,R-D.,et al.,Calcif.Tissue Int'l,44:176（1989）］。
発明の要約
一概念によると、本発明は、下記式のペプチドを特徴とするものである：
0003963482.tif 000002
ただし、
Ａ1はＳｅｒ、Ａｌａ、またはＤａｐであり；
Ａ3はＳｅｒ，Ｔｈｒ、またはＡｉｂであり；
Ａ5はＬｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉｌｅ、Ｃｈａ、β−Ｎａｌ、Ｔｒｐ、Ｐａｌ、Ａｃｃ、Ｐｈｅまたはｐ−Ｘ−Ｐｈｅであり、この際、ＸはＯＨ、ハロゲン、またはＣＨ3であり；
Ａ7はＬｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉｌｅ、Ｃｈａ、β−Ｎａｌ、Ｔｒｐ、Ｐａｌ、Ａｃｃ、Ｐｈｅ、またはｐ−Ｘ−Ｐｈｅであり、この際、ＸはＯＨ、ハロゲン、またはＣＨ3であり；
Ａ8はＭｅｔ、Ｎｖａ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｃｈａ、Ａｃｃ、またはＮｌｅであり；
Ａ11はＬｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉｌｅ、Ｃｈａ、β−Ｎａｌ、Ｔｒｐ、Ｐａｌ、Ａｃｃ、Ｐｈｅまたはｐ−Ｘ−Ｐｈｅであり、この際、ＸはＯＨ、ハロゲン、またはＣＨ3であり；
Ａ12はＧｌｙ、Ａｃｃ、またはＡｉｂであり；
Ａ15はＬｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉｌｅ、Ｃｈａ、β−Ｎａｌ、Ｔｒｐ、Ｐａｌ、Ａｃｃ、ＰｈｅまたはＰ−Ｘ−Ｐｈｅであり、この際、ＸはＯＨ、ハロゲン、またはＣＨ3であり；
Ａ16はＳｅｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、またはＡｉｂであり；
Ａ17はＳｅｒ、Ｔｈｒ、またはＡｉｂであり；
Ａ18はＭｅｔ、Ｎｖａ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｎｌｅ、Ａｃｃ、Ｃｈａ、またはＡｉｂであり；
Ａ19はＧｌｕまたはＡｉｂであり；
Ａ21はＶａｌ、Ａｃｃ、Ｃｈａ、またはＭｅｔであり；
Ａ22はＡｃｃまたはＧｌｕであり；
Ａ23はＴｒｐ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ24はＬｅｕ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ27はＬｙｓ、Ａｉｂ、Ｌｅｕ、ｈＡｒｇ、Ｇｌｎ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ28はＬｅｕ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ29はＧｌｕ、Ａｃｃ、またはＡｉｂであり；
Ａ30はＡｓｐまたはＬｙｓであり；
Ａ31はＶａｌ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ａｃｃ、若しくはＣｈａである、または欠損しており；
Ａ32はＨｉｓである、または欠損しており；
Ａ33はＡｓｎである、または欠損しており；
Ａ34はＰｈｅ、Ｔｙｒ、Ａｍｐ、若しくはＡｉｂである、または欠損しており；
Ｒ1およびＲ2は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ1-12アルキル、Ｃ2-12アルケニル、Ｃ7-20フェニルアルキル、Ｃ11-20ナフチルアルキル、Ｃ1-12ヒドロキシアルキル、Ｃ2-12ヒドロキシアルケニル、Ｃ7-20ヒドロキシフェニルアルキル、若しくはＣ11-20ヒドロキシナフチルアルキルであり；またはＲ1およびＲ2の一方及び一方のみがＣＯＥ1であり、この際、Ｅ1はＣ1-12アルキル、Ｃ2-12アルケニル、Ｃ7-20フェニルアルキル、Ｃ11-20ナフチルアルキル、Ｃ1-12ヒドロキシアルキル、Ｃ2-12ヒドロキシアルケニル、Ｃ7-20ヒドロキシフェニルアルキル、若しくはＣ11-20ヒドロキシナフチルアルキルであり；および
Ｒ3はＯＨ、ＮＨ2、Ｃ1-12アルコキシ、またはＮＨ−Ｙ−ＣＨ2−Ｚであり、この際、ＹはＣ1-12炭化水素部分であり、ＺはＨ、ＯＨ、ＣＯ2Ｈ、またはＣＯＮＨ2であり；
Ａ5、Ａ7、Ａ8、Ａ11、Ａ12、Ａ15、Ａ18、Ａ21、Ａ22、Ａ23、Ａ24、Ａ27、Ａ28、Ａ29、及びＡ31の少なくとも一がＡｃｃである；またはこれらの製薬上許容できる塩。
上記式で包含される本発明のペプチドの例は下記のとおりである：［Ａｈｃ7,11］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ7,11，Ｎｌｅ8,18，Ｔｙｒ34］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ11］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ7,11,15］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ7］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ23］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ｎｌｅ8,18，Ａｈｃ27］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ28］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ31］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24,28,31］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24,28,31，Ｌｙｓ30］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ28,31］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ15］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24,27，Ａｉｂ29，Ｌｙｓ30］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24,27，Ａｉｂ29，Ｌｙｓ30，Ｌｅｕ31］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ5］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ12］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ27］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24,27］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24,27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ18］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ8］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ18,27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ18,24,27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ］22ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；若しくは［Ａｈｃ22，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｌｅｕ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ24，Ｌｅｕ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；またはこれらの製薬上許容できる塩。
他の概念によると、本発明は、下記式のペプチドを特徴とするものである：
0003963482.tif 000003
ただし、
Ａ1はＡｌａ、Ｓｅｒ、またはＤａｐであり；
Ａ3はＳｅｒまたはＡｉｂであり；
Ａ5はＨｉｓ、Ｉｌｅ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ7はＬｅｕ、Ｃｈａ、Ｎｌｅ、β−Ｎａｌ、Ｔｒｐ、Ｐａｌ、Ａｃｃ、Ｐｈｅ、またはｐ−Ｘ−Ｐｈｅであり、この際、ＸはＯＨ、ハロゲン、またはＣＨ3であり；
Ａ8はＬｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ10はＡｓｐまたはＡｓｎであり；
Ａ11はＬｙｓ、Ｌｅｕ、Ｃｈａ、Ａｃｃ、Ｐｈｅ、またはβ−Ｎａｌであり；
Ａ12はＧｌｙ、Ａｃｃ、またはＡｉｂであり；
Ａ14はＳｅｒまたはＨｉｓであり；
Ａ15はＩｌｅ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ16はＧｌｎまたはＡｉｂであり；
Ａ17はＡｓｐまたはＡｉｂであり；
Ａ18はＬｅｕ、Ａｉｂ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ19はＡｒｇまたはＡｉｂであり；
Ａ22はＰｈｅ、Ｇｌｕ、Ａｉｂ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ23はＰｈｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ24はＬｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ25はＨｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｉｂ、Ａｃｃ、またはＧｌｕであり；
Ａ26はＨｉｓ、Ａｉｂ、Ａｃｃ、またはＬｙｓであり；
Ａ27はＬｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ28はＩｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｃｃ、またはＣｈａであり；
Ａ29はＡｌａ、Ｇｌｕ、Ａｃｃ、またはＡｉｂであり；
Ａ30はＧｌｕ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｃｈａ、Ａｉｂ、Ａｃｃ、またはＬｙｓであり；
Ａ31はＩｌｅ、Ｌｅｕ、Ｃｈａ、Ｌｙｓ若しくはＡｃｃである、または欠損しており；
Ａ32はＨｉｓであるまたは欠損しており；
Ａ33はＴｈｒであるまたは欠損しており；
Ａ34はＡｌａであるまたは欠損しており；
Ｒ1およびＲ2は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ1-12アルカニル、Ｃ7-20ェニルアルキル、Ｃ11-20ナフチルアルキル、Ｃ1-12ヒドロキシアルキル、Ｃ2-12ヒドロキシアルケニル、Ｃ7-20ヒドロキシフェニルアルキル、若しくはＣ11-20ヒドロキシナフチルアルキルであり；またはＲ1およびＲ2の一方及び一方のみがＣＯＥ1であり、この際、Ｅ1はＣ1-12アルキル、Ｃ2-12アルキル、Ｃ2-12アルケニル、Ｃ7-20フェニルアルキル、Ｃ11-20ナフチルアルキル、Ｃ1-12ヒドロキシアルキル、Ｃ2-12ヒドロキシアルケニル、Ｃ7-20ヒドロキシフェニルアルキル、若しくはＣ11-20ヒドロキシナフチルアルキルであり；および
Ｒ3はＯＨ、ＮＨ2、Ｃ1-12アルコキシ、またはＮＨ−Ｙ−ＣＨ2−Ｚであり、この際、ＹはＣ1-12炭化水素部分であり、ＺはＨ、ＯＨ、ＣＯ2Ｈ、またはＣＯＮＨ2であり；
Ａ5、Ａ7、Ａ8、Ａ11、Ａ12、Ａ15、Ａ18、Ａ22、Ａ23、Ａ24、Ａ25、Ａ26、Ａ27、Ａ28、Ａ29、Ａ30、またはＡ31の少なくとも一がＡｃｃである；またはこれらの製薬上許容できる塩。
上記式で包含される本発明のペプチドの例は下記のとおりである：
［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29，Ａｈｃ31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ａｈｃ23，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ａｈｃ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27］ｈＰＴＨrＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,31，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ａｈｃ23，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22,24,27，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24,27，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ,23,28,31，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ18,24,27，Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ25,26，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｈｃ24，Ｌｙｃ25,26，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29，Ｎｅｌ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｓｅｒ1，Ｉｌｅ5，Ｃｈａ7,11，Ｍｅｔ8，Ａｓｈ10，Ｈｉｓ14，Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｓｅｒ1，Ｉｌｅ5，Ｍｅｔ8，Ａｓｎ10，Ｌｅｕ11,23,28,31，Ｈｉｓ14，Ｃｈａ15，Ｇｌｕ22,25，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ａｈｃ23，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ａｈｃ23，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24,27，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22,24,27，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22,27，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26,30，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｈｃ24,27，Ｌｙｓ25,26，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ25,26，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ25,26，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ25,26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ25,26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｈｃ24，Ｌｙｓ25,26，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29，Ａｈｃ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｉｂ22,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ａｈｃ23，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26,30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,31，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ28］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26，Ａｈｃ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,29，Ａｈｃ23，Ａｉｂ25，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ25，Ｌｙｓ26,30，Ｇｌｕ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ａｉｂ25，Ｌｙｓ26,30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,29，Ｌｅｕ23,31，Ａｉｂ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ28］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,29，Ｌｅｕ23,28，Ａｉｂ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ25，Ｌｙｓ26，Ａｈｃ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ａｈｃ27，Ａｉｂ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｌｅｕ23,28，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26,30,31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25,29，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ26,31，Ａｈｃ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25,29，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ26,30,31，Ａｈｃ27］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｃｈａ23，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ25,26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ25,26，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｒｇ25，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22,24，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22,24，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ25,26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22,24，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22,24，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｈｃ22,24，Ｌｅｕ23,28，Ａｒｇ25，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ｌｙｓ25,26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｈｃ24，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ａｒｇ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ａｒｇ25，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｈｃ24，Ａｒｇ25，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ａｈｃ23，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ａｈｃ23，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26，Ｌｅｕ28］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ａｈｃ23,31，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26，Ｌｅｕ28］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26，Ａｈｃ31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28，Ａｈｃ24,31，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；若しくは［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｈｃ24,31，Ｌｙｓ25,26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｈｃ24，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；またはこれらの製薬上許容できる塩。
本発明はまた、下記式のペプチドを特徴とするものである：［Ｃｈａ22,23，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22,23，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29，Ｎｌｅ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,30,31，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25,29，Ｌｅｕ23,28,30,31，Ｌｙｓ26］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25,29，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ｎｌｅ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｓｅｒ1，Ｉｌｅ5，Ｍｅｔ8，Ａｓｎ10，Ｌｅｕ11,23,28,31，Ｈｉｓ14，Ｃｈａ15，Ｇｌｕ22,25，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29，Ｎｌｅ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22,23，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31,Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25,29，Ｌｙｓ26，Ｎｌｅ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ7,11,15］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｃｈａ7,8,15］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｃｈａ23，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26，Ｌｅｕ28］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22，Ｌｅｕ23,28，Ａｉｂ25,29，Ｌｙｓ26］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29，Ｎｌｅ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29，Ｌｅｕ31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29,30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ｌｙｓ26，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28,31，Ａｉｂ26,29，Ｌｙｓ30］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28,31，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；［Ｇｌｕ22,25，Ｃｈａ23，Ｌｙｓ26,30，Ｌｅｕ28，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2；若しくは［Ｌｅｕ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2；またはこれらの製薬上許容できる塩。
Ｎ−末端アミノ酸以外の、本明細書に記載されるアミノ酸のすべての略称（例えば、ＡｌａまたはＡ1）は、−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ）−ＣＯ−の構造式を表わ、この際、Ｒはアミノ酸の側鎖（例えば、ＡｌａではＣＨ3）である。Ｎ−末端アミノ酸に関しては、略称は、＝Ｎ−ＣＨ（Ｒ）−ＣＯ−の構造式を表わし、この際、Ｒはアミノ酸の側鎖である。β−Ｎａｌ、Ｎｌｅ、Ｄａｐ、Ｃｈａ、Ｎｖａ、Ａｍｐ、Ｐａｌ、Ａｈｃ、及びＡｉｂは、以下のα−アミノ酸の略称である：それぞれ、β−（２−ナフチル）アラニン、ノルロイシン、α，β−ジアミノプロピオン酸、シクロヘキシルアラニン、ノルバリン、４−アミノ−フェニルアラニン、β−（３−ピリジニル）アラニン、１−アミノ−１−シクロ−ヘキサンカルボン酸（1-amino-1-cyclo-hexanecarboxylic acid)及びα−アミノイソ酪酸。Ａｃｃによって意味されるところのものは、１−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸（1-amino-1-cyclopropanecarboxylic acid）；１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（1-amino-1-cyclobutanecarboxylic acid）；１−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸（1-amino-1-cyclopentanecarboxylic acid）；１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（1-amino-1-cyclohexanecarboxylic acid）；１−アミノ−１−シクロヘプタンカルボン酸（1-amino-1-cycloheptanecarboxylic acid）；１−アミノ−１−シクロオクタンカルボン酸（1-amino-1-cyclooctanecarboxylic acid）；及び１−アミノ−１−シクロノナンカルボン酸（1-amino-1-cyclononanecarboxylic acid）の群から選ばれるアミノ酸である。上記式において、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシフェニル−アルキル、及びヒドロキシナフチルアルキルは、１〜４個のヒドロキシル置換基（hydroxy substituent）を有していてもよい。また、ＣＯＥ1は、−Ｃ＝Ｏ・Ｅ1を表わす。−Ｃ＝Ｏ・Ｅ1の例としては、以下に制限されないが、アセチル及びフェニルプロピオニルが挙げられる。
また、本発明のペプチドは、他の式、例えば、［Ａｈｃ7,11］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2によっても示され、この際、天然の配列から置換されるアミノ酸は角括弧の２番目のセットの間に置かれる（例えば、ｈＰＴＨにおいてＬｅｕ7からＡｈｃ7へ及びＬｅｕ11からＡｈｃ11へ）。ｈＰＴＨの略称はヒトのＰＴＨを、ｈＰＴＨｒＰはヒトのＰＴＨｒＰを、ｒＰＴＨはラットのＰＴＨを、およびｂＰＴＨはウシのＰＴＨを表わす。括弧内の番号は、ペプチド中に存在するアミノ酸の番号を意味する（例えば、ｈＰＴＨ（１−３４）は、ヒトのＰＴＨに関するペプチド配列の１〜３４番目のアミノ酸である）。ｈＰＴＨ（１−３４）、ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）、ｂＰＴＨ（１−３４）、及びｒＰＴＨ（１−３４）に関する配列は、ニッセンソンら、レセプター、３：１９３（１９９３年）［Nissenson,et al.,Receptor,3:193（1993）］に列挙される。ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2における「ＮＨ2」ということばは、ペプチドのＣ−末端がアミド化されることを示す。他方、ＰＴＨ（１−３４）は、遊離酸のＣ−末端を有する。
本発明の各ペプチドは、被検者（即ち、ヒト患者等の哺乳動物）の骨の成長を刺激することができる。したがって、本発明のペプチドは、単独であるいはビスホスホネートやカルシトニン等の抗吸収療法（antires orptive therapy）と同時に投与される際に、骨粗鬆症や骨折の治療に有用である。
本発明のペプチドは、製薬上許容できる塩の形態で提供されてもよい。このような塩の例としては、以下に限られないが、有機酸（例えば、酢酸、乳酸、マレイン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、コハク酸、安息香酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、またはパモイックアシッド（pamoic acid））、無機酸（例えば、塩酸、硫酸、またはリン酸）、および高分子酸（polymeric acid）（例えば、タンニン酸、カルボキシメチルセルロース、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、またはポリ乳酸−グリコール酸の共重合体）で形成されるものが挙げられる。
治療上有効な量の本発明のペプチドおよび製薬上許容できる担体物質（例えば、炭酸マグネシウム、ラクトース、または治療化合物がそれと共にミセルを形成できるリン脂質）から、被検者への（例えば、経口による、静脈内への、経皮的な、肺への、経膣的な、皮下への、経鼻的な、イオン導入による、または気管内による）投与用の治療用組成物（例えば、ピル、錠剤、カプセル、または液体）を形成しうる。経口投与を意図するピル、錠剤、またはカプセルは、活性組成物を小腸中を未消化な状態で通過させるのに十分な時間、胃内で胃酸または腸の酵素から保護するための物質で被覆してもよい。治療用組成物はまた、皮下または筋肉内投与を目的とする生分解性のまたは非生分解性の徐放性配合物の形態であってもよい。例えば、米国特許第３，７７３，９１９号及び４，７６７，６２８号ならびにＰＣＴ出願番号ＷＯ  ９４／１５５８７号を参照。持続的な投与はまた、埋込型または外部型ポンプ（例えば、インフューサイド（登録商標）ポンプ（INFUSAIDTM pump））を用いることにより達成されてもよい。投与は、例えば、一日に一回注射等の間欠的に、あるいは、例えば、徐放性配合物等の低投与量で連続的に行われてもよい。
上記したような病気または疾患を処置するための本発明のペプチドの投与量は、投与様式、被検者の年齢や体重、及び処置される被検者の状態によって変化し、最終的には、主治医や獣医によって決定されるであろう。
例えば、骨粗鬆症や骨折等の骨の成長不全などに関連する病気または疾患を処置するのに使用される上記一般式で包含されるペプチドもまた、本発明の概念に含まれる。
本発明の他の態様及び利点は詳細な説明から及び請求の範囲から明らかであろう。
発明の詳細な説明
本明細書の記載に基づいて、本発明は最大限利用できる。下記の特定の実施例は単に説明するためのものであり、残りの開示を何等制限するものではないと解される。さらに、本明細書中のすべての公報は参考のために取り入れられる。
構造
ＰＴＨ（１−３４）及びＰＴＨｒＰ（１−３４）は２個の両親媒性の（amphopilic）アルファらせんドメインを有することが既に報告された。例えば、バーデンら、バイオケム、３２：７１２６（１９９２年）［Barden,et al.,Biochem.,32:7126（1992）］を参照。第一のα−ヘリックスは４から１３番目のアミノ酸残基間に形成されるが、第二のα−ヘリックスは２１から２９番目のアミノ酸残基間に形成される。本発明のペプチドによっては、例えば、第一のα−ヘリックス内のＡｈｃ7及びＡｈｃ11または第二のα−ヘリックス内のＡｈｃ27及びＡｈｃ28のように、ＰＴＨ（１−３４）及びＰＴＨｒＰ（１−３４）の上記２領域内にあるいは２領域付近にある一以上の残基がＡｃｃに置換されるものもある。
合成
本発明のペプチドは、標準的な固相合成によって調製できる。例えば、スチュワート  ジェーエムら、ソリッド  フェーズ  シンテシス（ピアース  ケミカル  シーオー、第二版、１９８４年）［Stewart,J.M.,et al.,Solid Phase Synthesis（Pierce Chemical Co.,2d ed.1984）］を参照。［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29，Ａｈｃ31］ｈＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2の調製方法を以下に説明する。本発明の他のペプチドは、当該分野における通常の知識を有するものによって同様の方法により調製できる。
１−［Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−アミノ］−１−シクロヘキサン−カルボン酸（Ｂｏｃ−Ａｈｃ−ＯＨ）［1-［N-tert-butoxycarbonyl-amino］-1-cyclohexane-carboxylic acid(Boc-Ahc-OH）］を以下のようにして合成した：
１９．１ｇ（０．１３３モル）の１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸（アクロスオルガニックス，フィッシャーサイエンティフィック（Acros Organics,Fisher Scientific）、ピッツバーグ，ピーエー（Pittsburgh,PA））を２００ｍｌのジオキサン及び１００ｍｌの水に溶解した。これに、６７ｍｇの２Ｎ  ＮａＯＨを添加した。この溶液を氷−水浴中で冷却した。３２．０ｇ（０．１４７モル）のジ−ｔ−ブチル−ジカルボネート（di-tert-butyl-dicarbonate）をこの溶液に加えた。この反応混合物を室温で一晩攪拌した。次に、ジオキサンを減圧下で除去した。２００ｍｌの酢酸エチルを残りの水溶液に添加した。この混合液を氷−水浴中で冷却した。水層のｐＨを４Ｎ  ＨＣｌを添加することによって約３に調節した。有機層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した（１×１００ｍｌ）。２つの有機層を合わせて、水で洗浄し（２×１５０ｍｌ）、無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、さらに減圧下で乾固するまで濃縮した。残渣を酢酸エチル／ヘキサンで再結晶化した。９．２ｇの純粋な産物が得られた。２９％の収率。他の保護Ａｃｃアミノ酸は、当該分野における通常の知識を有するものによって類似の方法によって調製できる。
上記ペプチドは、Ｂｏｃ−化学固相ペプチド合成が加速されるように改変されたアプライド  バイオシステムズ（Applied Biosystems）（フォスター  シティー、シーエー（（Foster City,CA））モデル４３０Ａペプチド合成器で合成された。シュノイズら、イント  ジェー  ペプチド  プロテイン  レス、９０：１８０（１９９２年）［Schnoize,et al.,Int.J.Peptide Protein Res.,90:180（1992）］を参照。０．９３ミリモル／ｇに変更された４−メチルベンズヒドリルアミン（ＭＢＨＡ）樹脂（ペニンシュラ（Peninsula）、ベルモント（Belmont）、シーエー（CA））を使用した。Ｂｏｃアミノ酸（バケム（Bachem）、シーエー（CA）、トランス（Torrance）、シーエー（CA）；ノバ  バイオケム（Nova Biochem.）、ラジョーラ（LaJolla）、シーエー（CA））を、以下のように側鎖を保護して使用した：Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｃＨｅｘ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ＤＮＰ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（２ＣｌＺ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ａｈｃ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ；及びＢｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ。合成は０．１４ミリモルのスケールで行った。Ｂｏｃ基を、１００％ＴＦＡで１分間、２回処理することにより除去した。Ｂｏｃアミノ酸（２．５ミリモル）は、４ｍｌのＤＭＦにおけるＨＢＴＵ（２．０ミリモル）及びＤＩＥＡ（１．０ｍｌ）で予め活性化し、ペプチド−樹脂  ＴＦＡ塩を予め中和せずにカップリングした。カップリング時間は、Ｂｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ、及びその次の残基、Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、及びＢｏｃ−Ａｈｃ−ＯＨ、及びその次の残基、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（２Ｃｌｚ）−ＯＨ以外は、５分であり、この際これらの４残基に関するカップリング時間は２時間であった。
ペプチド鎖のアッセンブリー（assembly）が終了したら、樹脂をＤＭＦにおける２０％メルカプトエタノール／１０％ＤＩＥＡの溶液で３０分間、２回処理して、Ｈｉｓ側鎖上のＤＮＰ基を除去した。次に、Ｎ−末端のＢｏｃ基を、１００％ＴＦＡで２分間、２回処理することにより除去した。部分的に脱保護されたペプチド−樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで洗浄し、減圧下で乾燥した。最終的な切断は、０℃で７５分間、１ｍｌのアニソール及びジチオトレイトール（２４ｍｇ）を含む１０ｍｌのＨＦ中でペプチド−樹脂を撹拌することによって行った。ＨＦを窒素を流すことにより除去した。残基をエーテルで洗浄し（６×１０ｍｌ）、４Ｎ  ＨＯＡｃで抽出した（６×１０ｍｌ）。
水性抽出物中のペプチド混合物を、逆相ＶｙｄａｃTM  Ｃ18カラム（ネスト  グループ（Nest Group）、サウスボラウ（Southborough）、エムエー（MA））を用いた逆相分離用高圧液体クロマトグラフィー（reversed-phase preparative high pressure liquid chromatography）（ＨＰＬＣ）で精製した。カラムを、１０ｍｌ／分の流速で直線的な濃度勾配（１３０分かけて１０％から４５％の溶液Ｂ）（溶液Ａ＝０．１％ＴＦＡ水溶液；溶液Ｂ＝０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル）で溶出した。画分を集め、分析用ＨＰＬＣで調べた。精製産物を含む画分を合わせ、乾固するまで凍結乾燥した。８５ｍｇの白色固体が得られた。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析を基準にして、＞９９％であった。エレクトロ−スプレーマススペクトロメーター分析（electro-spray mass spectrometer analysis）による分子量は３９７２．４であった（これは３９７２．７の算出した分子量と一致した）。
［Ｃｈａ22，Ｌｅｕ23,28,31，Ｇｌｕ25，Ｌｙｓ26,30，Ａｈｃ27，Ａｉｂ29］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2の合成及び精製を、［Ｇｌｕ22,25，Ｌｅｕ23,28，Ｌｙｓ26,30，Ａｉｂ29，Ａｈｃ31］ｈＰＴＨｒＰ（１−３４）ＮＨ2の上記合成法と同様にして行った。保護アミノ酸Ｂｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨをバケム（Bachem）、シーエー（CA）から購入した。最終産物の純度は＞９９％であり、エレクトロン−スプレーマススペクトロメーター（electron-spray mass spectrometer）による分子量は３９９７．２であった（算出した分子量は３９９６．８である）。
上記で使用された略称の正式名称は下記のとおりである：Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル、ＨＦはフッ化水素、Ｆｍはホルミル、Ｘａｎはキサンチル、Ｂｚｌはベンジル、Ｔｏｓはトシル、ＤＮＰは２，４−ジニトロフェニル、ＤＭＦはジメチルホルムアミド、ＤＣＭはジクロロメタン、ＨＢＴＵは２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート［2-（1H-Benzotriazol-1-yl）-1,1,3,3-tetramethyl uronium hexafluorophosphate］、ＤＩＥＡはジイソプロピルエチルアミン、ＨＯＡｃは酢酸、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸、２ＣｌＺは２−クロロベンジルオキシカルボニル及びＯｃＨｘｌはＯ−シクロヘキシルを表わす。
上記一般式の置換基Ｒ1及びＲ2は、当該分野において既知の標準的な方法によってＮ−末端アミノ酸の遊離アミンに結合させてもよい。例えば、Ｃ1-12アルキル等のアルキル基を、還元的アルキル化を用いて結合させる。また、例えば、Ｃ1-12ヒドロキシアルキル等のヒドロキシアルキル基を、遊離ヒドロキシル基をｔ−ブチルエステルで保護する還元的アルキル化を用いて結合してもよい。例えば、ＣＯＥ1等のアシル基を、完全樹脂を塩化メチレンにおいて３モル当量の遊離酸及びジイソプロピルカルボジイミド双方と１時間混合し、得られた樹脂に上記洗浄プログラムの段階（ａ）〜（ｆ）を循環することによりＥ1ＣＯＯＨ等の遊離酸をＮ−末端アミノ酸の遊離アミンにカップリングさせることによって結合させてもよい。ｐ−ヒドロキシフェニルプロピオン酸等の、遊離酸が遊離ヒドロキシル基を含む際には、カップリングはさらに３モル当量のＨＯＢＴを用いて行われなければならない。
本発明の他のペプチドは、当該分野における通常の知識を有するものによって同様の方法で調製できる。
機能分析
Ａ．ＰＴＨレセプターへの結合
本発明のペプチドについて、ＳａＯＳ−２（ヒトの骨肉腫細胞）上に存在するＰＴＨレセプターへの結合能を試験した。ＳａＯＳ−２細胞（アメリカン  タイプ  カルチャー  コレクション（American Type Culture Collection）、ロックヴィレ（Rockville）、エムディー（MD）；ＡＴＣＣ  ＃ＨＴＢ  ８５）を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）及び２ｍＭ  グルタミンを添加したＲＰＭＩ  １６４０培地（シグマ（Sigma）、セントルイス（St.Louis）、エムオー（MO））中で、３７℃で、空気における５％ＣＯ2の湿潤化雰囲気中で維持した。培地は３または４日毎に交換し、細胞をトリプシン処理によって毎週継代培養した。
ＳａＯＳ−２細胞を、コンフルエンス（confluence）になるまで４日間維持した。培地は、５％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ  １６４０培地に交換し、１０-11Ｍ〜１０-4Ｍの様々な濃度の本発明の競合ペプチドの存在下で、１０×１０4ｃｐｍのモノ−125Ｉ−［Ｎｌｅ8,18，Ｔｙｒ34（３−125Ｉ）］ｂＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2と共に室温で２時間インキュベートした。細胞を氷冷したＰＢＳで４回洗浄し、０．１Ｍ  ＮａＯＨで溶解し、細胞に結合した放射能をシンチレーションカウンターで計測した。モノ−125Ｉ−［Ｎｌｅ8,18，Ｔｙｒ34（３−125Ｉ）］ｂＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2の合成は、ゴールドマン  エムイーら、エンドクリノル、１２３：１４６８（１９８８年）［Goldman,M.E.,et al.,Endocrinol.,123:1468（1988）］に記載されるのと同様にして行った。
結合アッセイを様々な本発明のペプチドについて行い、各ペプチドについて、Ｋｄ値（モノ−125Ｉ−［Ｎｌｅ8,18，Ｔｙｒ34（３−125Ｉ）］ｂＰＴＨ（１−３４）ＮＨ2の結合の最大阻害の半分値（half maximal inhibition））を算出した。
表１に示されるように、すべての試験ペプチドは、ＳａＯＳ−２細胞上のＰＴＨレセプターに対して高い結合親和性を有していた。
Ｂ．アデニル酸シクラーゼ活性の刺激
本発明のペプチドのＳａＯＳ−２細胞の生物学的な応答の誘導能を測定した。より詳しくは、従来、ロダンら、ジェー  クリン  インベスト、７２：１５１１（１９８３年）［Rodan,et al.,J.Clin.Invest.72:1511（1983）］およびゴールドマンら、エンドクリノル、１２３：１４６８（１９８８年）［Goldman,et al.,Endocrinol.,123:1468（1988）］に記載されるのと同様にして、ｃＡＭＰ（アデノシン３’５’−一リン酸）の合成レベルを測定することによって、アデニル酸シクラーゼ活性の刺激を測定した。２４穴のプレートの密集ＳＡＯＳ−２細胞を、３７℃で２時間新鮮な培地中で０．５μＣｉ［3Ｈ］アデニン（２６．９Ｃｉ／ミリモル、ニューイングランド  ヌクレアー（New England Nuclear）、ボストン（Boston）、エムエー（MA））と共にインキュベートし、ハンクス液（ギブコ（Gibco）、ガイザーブルグ（Gaithersburg）、エムディー（MD））で２回洗浄した。この細胞を、新鮮な培地における１ｍＭ  ＩＢＭＸ［イソブチルメチル−キサンチン（isobutylmethyl-xanthine）、シグマ（Sigma)、セントルイス（St.Louis）、エムオー（MO）］で、１５分間、処理し、本発明のペプチドを培地に添加して、５分間インキュベートした。反応を、１．２Ｍ  トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）（シグマ（Sigma)、セントルイス（St.Louis）、エムオー（MO））を添加することにより終了させた後、サンプルを４Ｎ  ＫＯＨで中和した。ｃＡＭＰを２カラムクロマトグラフィー法（two-column chromatographic method）（サーモンら、１９７４年、アナル  バイオケム、５８、５４１（Salmon,et al.,1974,Anal.Biochem.58,541））によって単離した。放射能をシンチレーションカウンター（液体シンチレーションカウンター  ２２００ＣＡ、パッカード、ダウナーズ、グローブ、アイエル（Liquid Scintillation Counter 2200CA,PACKARD,Downers Grove,IL））で計測した。
試験ペプチドに関する代表的なＥＣ50アデニル酸シクラーゼの最大刺激の半分値（half maximal stimulation of adenylate cyclase））を算出し、表１に示す。すべての試験ペプチドは、骨芽細胞の増殖（例えば、骨の成長）の近位のシグナルとして示唆される生物学的な経路である、アデニル酸シクラーゼ活性の潜在的な刺激剤であることが分かった。
0003963482.tif 000004
他の実施態様
本発明を詳細な説明と関連して説明したものの、前記記載は本発明を詳細に説明するものであり本発明の概念を制限するものではなく、本発明の概念は添付の請求の範囲の概念によって定義されると解されるべきである。他の概念、利点、及び変更は請求の範囲に含まれる。