(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
インゲン植物の乾燥した豆（種子）を水洗し、水で膨潤し、食塩水に入れて微粉砕し、こうして得られた豆の粉砕微粒子を含むホモジナイズ液から上清画分を遠心分離し、その上清画分を水に対する透析にかけて上清画分からアミノ酸、低分子量のペプチド、塩類を除去し、透析後の上清画分を硫安沈殿による分画法にかけることにより90％飽和の硫安濃度で初めて沈殿する水溶性タンパク質を採取し、該タンパク質を水に対する透析法、限外濾過法およびゲル濾過法の組合わせにより精製することから成ることを特徴とする、タンパク質の構成アミノ酸としてアスパラギン酸、トレオニン、セリン、グルタミン酸、プロリン、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニルアラニン、リジン、ヒスチジンおよびアルギニンを含有し且つ炭素 44.84％、水素6.69％、窒素9.96％および酸素 38.51％の元素分析値を示し、またSDS-アクリルアミドゲルスラブ電気泳動法で平均48,000の分子量を有する単一バンドを示す水溶性タンパク質からなる、リンパ球および好中球の増殖活性とリンパ球の賦活活性ならびに血小板増加作用を有する水溶性タンパク質物質の製法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法で製造された水溶性タンパク質物質を有効成分として含有することを特徴とする、リンパ球および好中球の増殖およびリンパ球賦活剤。
【請求項３】
請求項１に記載の方法で製造された水溶性タンパク質を有効成分として含有することを特徴とする、血小板増加剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はインゲン植物の豆（種子）から抽出、分離および精製された水溶性タンパク質からなるリンパ球および好中球の増殖活性とリンパ球の賦活活性ならびに血小板増加作用を有するタンパク質物質の製法に関する。
【０００２】
さらに本発明は前記のタンパク質物質を有効成分とするリンパ球および好中球の増殖およびリンパ球賦活剤、ならびに血小板増加剤にも関する。
【０００３】
【従来の技術】
癌の治療法として化学療法剤と放射線による治療法が一般的であるがこれらの治療法は副作用が強く、特に骨髄系に対する副作用が顕著であり、白血球、ことにリンパ球の減少を伴うので正常な免疫機能を著しく阻害する。特に、細胞性免疫の低下によって、癌細胞に対する攻撃が阻害されるのみでなく、一般の菌感染症に対する抵抗性が著しく低下する。一方、エイズ（ＨＩＶ感染による後天性免疫不全症候群）の場合には、エイズウイルスの感染により、ヘルパ−Ｔ細胞と呼ばれるリンパ球が著しく減少することが後天性免疫不全症の原因とされる。またリンパ球が先天的に少ない人の場合には各種の感染症に罹りやすい。
【０００４】
このように化学療法剤や放射線による治療を受けた患者で顕著に減少したリンパ球を増数および回復させることが急務である。またＨＩＶ感染により減少したヘルパ−Ｔ細胞を増数および回復させることによりエイズ発症を防ぐことができるから、エイズ患者を死に至らしめることを抑制できる。化学療法、放射線療法の結果、白血球、ことにリンパ球の減少している患者、またエイズウイルスの感染によりヘルパーＴ細胞が著しく減少している患者、血友病患者、肝炎ウイルス等のウイルス疾患の患者、リンパ球が先天的に少ない人および一般の菌感染症に対する抵抗力が低下している患者および老人、ならびにリンパ球の減少する疾患にかかった患者、例えば、免疫不全症、各種ウイルス感染症、リンパ組織の悪性腫瘍、細網症、担癌、腎不全等の患者ではリンパ球の増殖および賦活を必要とする。
【０００５】
また、インターロイキン−２（ＩＬ−２）の減少する場合として免疫不全症、自己免疫疾患、担癌患者、骨髄移植患者およびエイズ患者等もリンパ球の増殖、賦活を必要とする患者である。
【０００６】
一般には、豆類に含まれるタンパク質としてレクチンが知られるが、レクチンは他の植物種子でもその存在が明らかにされている。レクチンは赤血球を凝集させる性質とリンパ球を幼若化する作用を有することが認められ、リンパ球幼若化試験でマイトゲンとして用いるＰＨＡ（フィトヘマグルチニン）の名称ですでに使用されている。レクチンは実際には、数種類のタンパク質からなり、赤血球の凝集作用が著しく、注射すると発熱するなどの危険を伴うから人間に投与する医薬品としては利用できない。また、タチナタ豆から抽出されたタンパク質としてのコンカナバリンＡもリンパ球幼若化作用を有することが知られている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
上記の患者の治療のために、白血球、特にリンパ球の増殖活性、賦活活性および（または）血小板増加作用を有する新規な医薬を提供することは現在一つの課題となっている。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、リンパ球の増殖活性と賦活活性を有する新規な物質を探索する目的で、種々な植物種子から生理活性を有するタンパク質を分離して有用なタンパク質を収得する研究を鋭意行った。その研究の一成果として、本発明者らは、インゲン植物の豆（種子）であってインゲンの一品種の「大正金時」の名の豆から平均48,000の分子量を有する新規なタンパク質を分離および精製して収得することに成功した。
【０００９】
またこの新規タンパク質の物理化学的な性質を研究し、さらに該タンパク質の生理活性を研究することにより、このタンパク質が後記の物理化学的性質を有すること、また白血球、特にリンパ球の増殖活性と賦活活性、ならびに血小板増加作用および好中球増加作用を有することを発見した。また、インゲン植物の他の品種の豆からも、同じタンパク質が収得できると期待できる。
【００１１】
第１の本発明（補正後の請求項１に係る）においては、インゲン植物の乾燥した豆（種子）を水洗し、水で膨潤し、食塩水に入れて微粉砕し、こうして得られた豆の粉砕微粒子を含むホモジナイズ液から上清画分を遠心分離し、その上清画分を水に対する透析にかけて上清画分からアミノ酸、低分子量のペプチド、塩類を除去し、透析後の上清画分を硫安沈殿による分画法にかけることにより90％飽和の硫安濃度で初めて沈殿する水溶性タンパク質を採取し、該タンパク質を水に対する透析法、限外濾過法およびゲル濾過法の組合わせにより精製することから成ることを特徴とする、タンパク質の構成アミノ酸としてアスパラギン酸、トレオニン、セリン、グルタミン酸、プロリン、グリシン、アラニン、バリン、メチオニン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニルアラニン、リジン、ヒスチジンおよびアルギニンを含有し且つ炭素 44.84％、水素6.69％、窒素9.96％および酸素 38.51％の元素分析値を示し、またSDS-アクリルアミドゲルスラブ電気泳動法で平均48,000の分子量を有する単一バンドを示す水溶性タンパク質からなる、リンパ球および好中球の増殖活性とリンパ球の賦活活性ならびに血小板増加作用を有する水溶性タンパク質物質の製法が提供される。
【００１２】
本発明により得られた新規なタンパク質は、本明細書ではＰＬＳ−１Ａ物質と仮称する。本発明によるタンパク質、ＰＬＳ−１Ａ物質はインゲン植物の「大正金時」豆のみならず、通称、白インゲン豆からも抽出、分離できる。
【００１３】
本発明によるタンパク質、ＰＬＳ−１Ａ物質は、分子量が比較的小さく、単一成分よりなるもので、赤血球の凝集作用が低いこと、静脈内投与した場合にほとんど発熱などの副作用がなく比較的短時間でリンパ球を増加することができる。従って、前述の各種病気や副作用による白血球、特にリンパ球の減少症の治療および予防に有効であると認められる。一方、好中球および血小板の増加にも効果的であることが判明し、血友病の予防・治療にも有効であることが判明した。
【００１４】
本発明による新規タンパク質、ＰＬＳ−１Ａ物質は下記の物理化学的性状を有する。
【００１５】
１）分子量（ＳＤＳ−アクリルアミドゲルスラブ電気泳動による測定）
使用したゲルは12.5％のＳＤＳ−アクリルアミドゲルであり、分子量マーカーとして使用した標準物質はオリエンタル酵母株式会社製のチトクロームＣとして市販される５種類の有色タンパク質で、それぞれの分子量がモノマー：12,400、ダイマー：24,800、トリマー：37,200、テトラマー：49,600、ヘキサマー：
74,400であるものである。標準物質と同一条件で本発明のＰＬＳ−１Ａ物質を電気泳動した結果、分子量が47,000から49,000で単一バンドを示し平均48,000の分子量を有する単一物質であることが確認された。
【００１６】
２）元素組成
元素分析の結果、ＰＬＳ−１Ａ物質の元素組成は酸素 38.51％、炭素 44.84％、水素6.69％、窒素9.96％であった。
【００１７】
３）アミノ酸組成
アミノ酸アナライザーで分析した結果、ＰＬＳ−１Ａ物質は下記のアミノ酸成分を下記の含量で含有して構成されるものと認められた。
【００１８】
アミノ酸成分     含量（％）
アスパラギン酸            15.3
トレオニン                 5.6
セリン                     6.1
グルタミン酸              14.6
プロリン                   3.2
グリシン                   4.4
アラニン                   4.9
バリン                     6.4
メチオニン                 0.6
イソロイシン               4.9
ロイシン                   8.7
チロシン                   1.2
フェニルアラニン           7.1
リジン                     7.9
ヒスチジン                 4.2
アルギニン                 5.4
４）赤外部吸収スペクトル：ＰＬＳ−１Ａ物質の赤外部吸収スペクトルを測定した吸収曲線を添付図面の第１図に示す。
【００１９】
本発明によるタンパク質、ＰＬＳ−１Ａ物質は下記の具体的な工程から成る方法、すなわち乾燥した大正金時インゲン豆を水洗し、水中で膨潤させ、食塩水中に入れてブレンダーまたはミキサーで微粉砕し、こうして得られた豆の微粉砕粒子を含むホモジナイズ液を遠心分離により固体残渣と上清画分に分離し、この上清画分を分取し、透析膜の袋に入れて水に対して１日〜３日間透析し、これによりアミノ酸、低分子量ペプチドおよび塩類を除去し、さらに遠心分離器にかけて析出固体を除去し、得られた上清画分を分取し、この上清画分を順次に75％飽和、90％飽和および90％飽和の濃度の硫安により沈殿分画し、ここで最後の90％飽和の濃度の硫安により最終的に沈殿された分画のタンパク質を遠心分離により採取し、このタンパク質沈殿を水に再溶解し、得られた水溶液を水に対する透析にかけて硫安成分を除去し、脱硫安された被透析液をセファデックスＧ−25カラムにチャージし且つ生理食塩水で溶出するゲル濾過法にかけ、溶出液を画分に分けて集め、タンパク質濃度の低い溶出液画分を捨て、タンパク質濃度の高い溶出液画分を分子量10,000の限外濾過膜（すなわち分子量10,000以下の物質を通過させ得る濾過膜）で限外濾過し、これによってタンパク質を濃縮すると共に脱塩し、さらに、こうして得られたタンパク質の濃縮水溶液から凍結乾燥法または減圧下の水分蒸留法により目的のタンパク質を白色結晶またはそれの濃厚水溶液として採取することから成る方法により得られたものであるのが好ましい。
【００２０】
さらに、第２の本発明（補正後の請求項２に係る）によると、第１の本発明による方法で製造された水溶性タンパク質物質を有効成分として含有することを特徴とするリンパ球および好中球の増殖およびリンパ球賦活剤が提供される。
【００２１】
また、第３の本発明（補正後の請求項３に係る）によると、第１の本発明による方法で製造された水溶性タンパク質物質を有効成分として含有することを特徴とする血小板増加剤が提供される。
【００２２】
第３の本発明および第４の本発明による薬剤は、有効成分を常用の液体状担体または固体状担体と混和した組成物の形であることができる。液体状担体として生理食塩水または５％ブドウ糖水溶液を用いて静脈注射剤として製剤することが好ましい。
【００２３】
【発明の実施の形態】
次に、第１の本発明による水溶性タンパク質物質の製造を実施例１について具体的に説明する。
【００２４】
実施例１
乾燥した大正金時（豆） 100ｇを水に浸して膨潤させ、それに10％食塩水
800mlを加えてホモジナイズした。得られたホモジナイズ液を10,000 x Gで30分間遠心分離して上清画分 850mlを得た。これを透析膜で蒸留水20リットルに対して３日間透析し、その間３回水を取り替える。透析後に被透析液を10,000 x Gで30分間遠心分離して上清画分1,150 mlが得られた。
【００２５】
この上清画分に 100mlあたりに硫酸アンモニウム57.0ｇづつ加え合計655.5gを加えて75％飽和の硫安濃度とし、さらに一昼夜静かに攪拌しながら冷蔵庫内で処理した。このように処理した液を10,000 x Gで30分間遠心分離して上清画分
1,020 mlを得た。この上清画分に対して、さらに 100mlあたりに硫酸アンモニウム 8.1ｇつづ加え合計 82.62ｇを加えて90％飽和の硫安濃度とし、さらに一昼夜静かに攪拌しながら冷蔵庫内で処理した。このように処理された液を10,000 x Gで30分間遠心分離し、得られた沈殿物を蒸留水 300mlに溶解した。この沈殿溶解液の 100mlあたりに硫酸アンモニウム68.4ｇを加えて90％飽和の硫安濃度とし、さらに一昼夜静かに攪拌しながら冷蔵庫内で処理した。
【００２６】
この液を10,000 x Gで30分間遠心分離して沈殿物を得て、次いでこの沈殿物を蒸留水 300mlに溶解してその溶解液を透析膜で蒸留水20リットルに対して３日間透析した。その間３回水を取り替えた。この透析を完了したタンパク質水溶液を分子量10,000の限外濾過膜で濃縮し 100mlの濃縮液を得た。
【００２７】
直径 2.8cm、長さ80cmのガラス製カラムに、セファデックスＧ−25のゲルの約 370mlを充填した。このカラムに前記の濃縮液10mlをチャージして、生理食塩水を溶出液としてカラムクロマトグラフィーを実施した。溶出液は１本の試験管に10mlづつ分画した。各試験管内の画分のタンパク質濃度を波長 280ｍμの紫外線吸収で測定した結果、タンパク質を含む画分が入った試験管が15本得られたが、濃度の低い両サイド３本づつを捨て９本のタンパク質溶液の合計90mlを集めた。同じ作業を３回実施して、合計 270mlの分画液を集め、さらに分子量10,000の限外濾過膜で濃縮し30mlにした。得られた濃縮液を凍結乾燥すると、 150mgの白色のタンパク質の結晶が本発明の水溶性タンパク質ＰＬＳ−１Ａ物質として得られた。これの収量は、原料の大正金時豆 100ｇから約 0.5％の収率（ 500mg）で得られたことになる。
【００２８】
本結晶性タンパク質物質を水に溶解した場合に、水溶液中の有効成分（タンパク質）の濃度は波長 280ｍμの紫外線の吸光度で測定するか、またはビュレット法あるいはその他の方法で測定できる。
【００２９】
前記の実施例１で得られた本発明のタンパク質、ＰＬＳ−１Ａ物質は、前記した物理化学的性状をもち、これの 0.3mgを水 1.0mlにとかした水溶液で波長 280ｍμの紫外線の吸収を測定すると、 1.0の吸光度の値を与える。 1.0mlの水にとかしたＰＬＳ−１Ａ物質の水溶液について波長 280ｍμの紫外線で測定して 1.0の吸光度を示す場合、その水溶液中に含まれるＰＬＳ−１Ａ物質の量（力価）を1000単位（結晶性ＰＬＳ−１Ａ物質の0.3 mgに相当）とみなして定量するのが便利である。
【００３０】
本タンパク質物質を患者に投与する際は、生理食塩水または５％ブドウ糖水溶液で溶解して静脈注射液に製剤して使用できる。
【００３１】
次に実施例１で得られた本発明のＰＬＳ−１Ａ物質の有するリンパ球および好中球の増殖能、リンパ球のインターロイキン−２（ＩＬ−２）産生能の賦活活性およびエフェクターＴ細胞（ナチュラルキラー細胞）賦活活性を試験管内で測定する下記の試験例１〜３により例証する。
【００３２】
試験例１
本例は本発明のＰＬＳ−１Ａ物質のリンパ球増殖活性を例示するものである。一般に、成熟したリンパ球それ自体は増殖能を失っているが、幼若化（blastoid transformation)されると増殖能を回復できる。マイトゲンによって幼若化を引起こされたリンパ球の幼若化細胞は、その細胞核内におけるデオキシリボ核酸の合成が活発になる。その際ラジオアイソトープでラベルされた核酸前駆物質（3Ｈ−サイミジン）をリンパ球の幼若化細胞の培養液中に添加すると、核酸合 成の亢進している細胞内へサイミジンが取込まれる。その取込まれた3Ｈ−サイ ミジンの量の大小によって、リンパ球の幼若化と幼若化細胞の増殖の程度を評価できる〔Bernhard,M.I.ら：「J. Immunol.」,124巻、964頁（1980）参照〕。   人リンパ球を分離、洗浄した後、リンパ球を調整（5x105個／ml）し、分注・ 培養した。培養液に本発明のＰＬＳ−１Ａ物質の 0.3mg／mlを含む水溶液の20μｌを添加した。培養64時間後に3Ｈ−サイミジン（3Ｈ−TDR）を添加して８ 時間培養した後、細胞の3Ｈ−サイミジンの取込みを測定した結果、本物質を添 加しない対照の細胞では 100〜700 cpmの量の3Ｈ−サイミジンを取込んだのに対して、本物質を添加された細胞では30,000〜80,000 cpmの量の3Ｈ−サイミジン を取込んだことが認められた。
【００３３】
上記の3Ｈ−サイミジンの取込み試験の結果から、本発明のＰＬＳ−１Ａ物質 は人リンパ球の幼若化作用と増殖作用を有することが明らかである。
【００３４】
試験例２
本例は、本発明のＰＬＳ−１Ａ物質がＩＬ−２を産生するヒトＴ−細胞の機能を賦活する活性を有することを例証するものである。一般に、血液中のＩＬ−２を定量することによって、試験管内で細胞性免疫能を検知し、またＩＬ−２産生についてのＴ−細胞の機能を、量的に検討し得る〔Brunner,K.T.ら：「In vitro method in cell-mediated and tumor immunity」ed.(Bloom,B.R.およびDavid, J.R.) p.423-428, Academic press, New York,(1976)参照〕。
【００３５】
125Ｉで標識されたリコンビナントＩＬ−２と、その抗体（ウサギ）に、サン プルあるいは非標識リコンビナントＩＬ−２（スタンダード）を加えるラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ；２抗体法）によって、サンプル中のＩＬ−２量を測定できる。
【００３６】
試験管内でヒト全血８mlに対して本発明のＰＬＳ−１Ａ物質の0.15mgを添加した結果、ＩＬ−２の量は、正常値４〜25ユニット／mlから、50〜100ユニット／ mlに上昇した。
【００３７】
試験例３
本例は本発明のＰＬＳ−１Ａ物質がエフエクター細胞（ナチュラルキラー細胞；ＮＫ細胞と略記される）のＮＫ細胞活性を賦活する作用を有することを例証するものである。一般に、ＮＫ細胞活性は即時的に働き得る生体防御免疫監視機構として注目されており、免疫感作が明らかにない正常な個体のリンパ球が標的細胞に対して細胞障害活性を示すことを指す〔Gillis,S.ら：「J. Immunol.」120 巻、2027頁、(1978）参照〕。
【００３８】
51Ｃｒによって標識された標的細胞（株化された培養細胞Ｋ−562）にエフェ クター細胞（ＮＫ細胞）を加えて試験管内で培養し、標的細胞障害により遊離した51Ｃｒを測定することによってＮＫ細胞活性値を算定できる。
【００３９】
ＮＫ細胞活性の測定に際しては、試験管内でヒト全血８mlにたいして本発明のＰＬＳ−１Ａ物質の0.15mgを添加して培養した結果、標的細胞（Ｋ−562）の死 亡率が正常値18〜40％から、35〜60％に上昇した。
【００４０】
さらに、本発明のＰＬＳ−１Ａ物質の生理的活性を評価する動物実験および患者治療試験を下記の試験例４〜８により示す。
【００４１】
試験例４
ＩＣＲ系マウス（雌性、一群５匹）に白血球減少作用を有するシクロホスファミド（エンドキサン）を 200mg／kgの投与量で腹腔内に投与し、対照群はそのまま飼育した。処置群にはＰＬＳ−１Ａ物質（0.3 mg／mlを 0.1ml）を腹腔内に０日および４日目に合計２回投与し、その後は投与を中止した。０，２，４，７，９，11日目に尾静脈から血液を採取して、血中の白血球（好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、単球のすべて）の数を算定した。
【００４２】
血液１mm3あたりの算定した白血球の数（平均値）をシクロホスファミドの投 与前の白血球数の正常値に対する百分率(％)として換算して次の表１に示す。
【００４３】
0003955654.tif 000002
【００４４】
表１の結果を添付図面の図２にグラフとして示す。対照群は実線で、またＰＬＳ−１Ａ物質処置群は点線で示し、ＰＬＳ−１Ａ物質の投与日を矢印で表わす。図２から明らかなように、対照群は実験前の正常レベルまで回復するのに約11日を必要とした。それに対してＰＬＳ−１Ａ物質を投与した処置群では、４日以降に急速に白血球数を回復し、約７日で実験前の正常レベルに回復した。
【００４５】
これにより、本発明のＰＬＳ−１Ａ物質は、減少した白血球数を正常値に急速に回復させる作用を有することが明らかである。
【００４６】
試験例５
ＩＣＲ系マウス（雌性、一群５匹）に白血球を減少させる作用を有するＸ線を450ラドの線量で照射した。Ｘ線照射を受けたマウスを対照群と、本発明のＰＬ Ｓ−１Ａ物質の投与を受ける処置群とに分けた。対照群はそのまま飼育した。処置群には０日から週２回の予定でＰＬＳ−１Ａ物質(0.3 mg／mlを 0.1ml)を腹腔内に０，４，７，９，11日目に合計４回投与したが、その後は投与を中止した。０，２，４，７，11，14，18日目にそれぞれ尾静脈から血液を採取し、血中の白血球（好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、単球のすべて）の数を算定した。血液１mm3あたりの算定した白血球の数（平均値）をＸ線照射前の正常値に対 する百分率（％）として換算して次の表２に示す。
【００４７】
0003955654.tif 000003
【００４８】
表２の結果を添付図面の図３にグラフとして示す。対照群は実線で、またＰＬＳ−１Ａ物質処置群は点線で示し、ＰＬＳ−１Ａ物質の投与日を矢印で表わす。図３から明らかなように、ＰＬＳ−１Ａ物質を投与した処置群では、白血球数は７日以降に急速に回復し、約２週間で実験前の正常レベルに回復した。それに対して対照群は実験前の正常レベルまで回復するのに時間がかかり18日目で約50％しか回復しなかった。ここで実験は中止したが、その後の正常値への回復日数を推定すると33日を必要とすることが判明した。
【００４９】
試験例６
本発明のＰＬＳ−１Ａ物質の投与で治療された患者は、第９因子欠如の血友病患者でコーナイン（第９因子の補充用の血液製剤の商品名）の投与によりＨＩＶ（エイズウイルス）に感染した者である。この患者に対して、約１週間に１回の割合で0.3mgのＰＬＳ−１Ａ物質を計４回静脈注射した。
【００５０】
その間、患者から採血して血液の一般検査、白血球分画検査ならびにＣＤ4 陽性細胞（ヘルパ−Ｔ−細胞）およびＣＤ8 陽性細胞（サプレッサ−Ｔ−細胞）の計数検査を行なった。これらの試験の結果として得られた白血球数(個／mm3）、血小板数（個／mm3）、リンパ球百分率（％，白血球の全数に対するリンパ球数 の百分率）を次の表３に要約して示す。
【００５１】
0003955654.tif 000004
【００５２】
試験例７
肝臓癌の担癌患者を免疫抗癌剤「ＡＴＳ−６５１Ｆ」（牛胎児胸腺のグルタルアルデヒド処理物で特公平-6-39385号公報に記載される抗癌剤）の投与により治療して癌は完治したが、この患者の血液の白血球数および血小板数が減少していた。この患者に約１週間に１回あたり本発明のＰＬＳ−１Ａ物質の 0.3mgを合計６回静脈注射した。
【００５３】
この間、患者から採血して血液を試験例６と同様に検査した。得られた結果を次の表４に要約して示す。
【００５４】
0003955654.tif 000005
【００５５】
試験例８
白血球および血小板が減少している患者に対して、１週間に１回あたり本発明のＰＬＳ−１Ａ物質の 0.3mgを静脈注射した。患者から採血して試験例６と同様に検査した。得られた結果を表５に要約して示す。
【００５６】
0003955654.tif 000006
【００５７】
表５に示された結果を考察すると、ＰＬＳ−１Ａ物質の投与後の血液の主な細胞数の変化に関して、赤血球数の増減は認められないが、白血球の全数、好中球、リンパ球および血小板の各々の数の顕著な増加が認められ、合計３回のＰＬＳ−１Ａ物質の投与で何れも正常域に復帰したので投与を中止した。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施例１で得られた水溶性タンパク質、ＰＬＳ−１Ａ物質の赤外吸収スペクトル図である。
【図２】本発明の試験例４の表１の結果を表示するグラフである。
【図３】本発明の試験例５の表２の結果を表示するグラフである。
【図１】
0003955654.tif 000007
【図２】
0003955654.tif 000008
【図３】
0003955654.tif 000009