(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）
【化１】
0003965442.tif 000024
〔式中、Ｒ1はフェニル基又はピリジル基を示し、Ｒ2はＣ1-8アルキル基を示し、Ｒ3は水素原子を示し、Ｒ4はベンジル基を示す〕
で表わされる置換ピペリジン誘導体又はその塩。
【請求項２】
Ｒ2がＣ1-8の分岐鎖又は環状アルキル基である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
請求項１又は２記載の化合物を有効成分とする医薬。
【請求項４】
排尿障害予防及び治療剤である請求項３記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は新規な置換ピペリジン誘導体及びその塩に関し、詳細には抗コリン作用及びカルシウム拮抗作用を有し、神経性頻尿、神経因性膀胱、夜尿症、不安定膀胱、慢性膀胱炎等の疾患における頻尿症、尿失禁などの排尿障害の予防、治療用の医薬として有用な置換ピペリジン誘導体及びその塩に関する。
【０００２】
【従来の技術】
神経性頻尿、神経因性膀胱、夜尿症、不安定膀胱、慢性膀胱炎による頻尿症、尿失禁の排尿障害を予防、治療するためには、反射性膀胱収縮を抑制する薬物が有用である。
従来、反射性膀胱収縮を抑制する薬物としては、塩酸オキシブチニン、塩酸プロピベリン、バミカミド及び特開平２−２６２５４８号、特開平６−９２９２１号、特開平６−１３５９５８号、ＷＯ９３／１６０４８号記載の化合物が報告されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、従来の化合物は反射性膀胱収縮を抑制する効果が不十分であった。
従って本発明の目的は、反射性膀胱収縮を有効に抑制し、排尿障害の予防及び治療用の医薬として有用な化合物を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
斯かる実情に鑑み本発明者らは鋭意研究を行った結果、下記一般式（１）で表わされる新規な置換ピペリジン誘導体を合成し、このものが抗コリン作用及びカルシウム拮抗作用を有し反射性膀胱収縮を有効に抑制することから排尿障害予防及び治療剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。
【０００５】
すなわち本発明は、次の一般式（１）
【０００６】
【化２】
0003965442.tif 000002
【０００７】
〔式中、Ｒ1はフェニル基又はピリジル基を示し、Ｒ2はＣ1-8アルキル基を示し、Ｒ3は水素原子を示し、Ｒ4はベンジル基を示す〕
で表わされる置換ピペリジン誘導体又はその塩を提供するものである。
【０００８】
また、本発明は上記置換ピペリジン誘導体又はその塩を有効成分とする医薬を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明の置換ピペリジン誘導体は、前記一般式（１）で示されるものであるが、式中、Ｒ1 で示されるアリール基としては、フェニル基、ナフチル基等が挙げられ、ヘテロアリール基としてはチエニル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラジル基等が挙げられる。またＲ1 で示されるアリール基又はヘテロアリール基に置換し得る基としては、ハロゲン原子、アルキル基、ハロゲノアルキル基、アルコキシル基、アミノ基、ベンジルオキシ基、シアノ基、ベンゾイル基、アルカノイル基、カルバモイル基、カルボキシル基、アルカノイルオキシ基、ニトロ基、スルホンアミド基等が挙げられるが、このうちハロゲン原子、ハロゲノＣ1-6アルキル基（ここで「Ｃ1-6」とは炭素数が１〜６であることを示す。以下炭素数が異なる場合も同様とする。）、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシル基、アミノ基、ベンジルオキシ基、シアノ基、ベンゾイル基、Ｃ1-6アルカノイル基、カルバモイル基、カルボキシル基、Ｃ1-6アルカノイルオキシ基、ニトロ基及びスルホンアミド基から選ばれた１〜３個の基が好ましい。更に、当該置換基としてはハロゲン原子、ハロゲノＣ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルキル基、Ｃ1-6アルコキシル基及びアミノ基から選ばれた１〜３個の基がより好ましく、このうちハロゲン原子、Ｃ1-6アルキル基、ハロゲノＣ1-6アルキル基及びＣ1-6アルコキシル基から選ばれた１〜３個の基が更に好ましく、ハロゲン原子、メチル基、トリフルオロメチル基及びメトキシル基から選ばれた１〜３個の基が特に好ましい。
【００１０】
Ｒ1 としては上記の置換基を有していてもよいアリール基及びヘテロアリール基がより好ましく、上記の置換基を有していてもよいフェニル基、チエニル基及びピリジル基が特に好ましい。
【００１１】
Ｒ2 で示されるアルキル基としてはＣ1-8の直鎖、分岐鎖、環状及び環状−直鎖のアルキル基が挙げられる（ここで環状−直鎖アルキルとは環状アルキル基を置換基として有している直鎖アルキル基をいう。以下同じ。）ここでＣ1-8の直鎖アルキル基としてはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基が挙げられる。分岐鎖アルキル基としてはイソプロピル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、３−ペンチル基、２−エチルヘキシル基等が挙げられる。環状アルキル基としてはシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基が挙げられる。また、環状−直鎖アルキル基としては、シクロプロピルメチル基、シクロヘキシルメチル基等が挙げられる。このうち分岐鎖又は環状アルキル基が特に好ましい。
【００１２】
Ｒ2 で示されるアルケニル基としては炭素数２〜６のアルケニル基が挙げられる。具体的にはビニル基、アリル基等が挙げられるが、ビニル基が特に好ましい。
【００１３】
Ｒ2 で示されるアラルキル基としては、フェニルＣ1-6アルキル基、ナフチルＣ1-6アルキル基等が挙げられ、このうちフェニルＣ1-6アルキル基がより好ましく、ベンジル基が特に好ましい。
【００１４】
Ｒ3 で示されるアルキル基としては炭素数１〜６のもの、具体的にはメチル基、エチル基、直鎖又は分岐鎖のプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル基等が挙げられるが、このうちメチル基が特に好ましい。またＲ3 としては水素原子又はメチル基が特に好ましい。
【００１５】
Ｒ4 で示されるアルキル基としては、炭素数１〜６のものが好ましく、例えばメチル基、エチル基、直鎖又は分岐鎖のプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル基等が挙げられる。また、アリール基としては、フェニル基、ナフチル基等が挙げられる。ヘテロアリール基としては、チエニル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラジル基等が挙げられる。アラルキル基としては、フェニルＣ1-6アルキル基が挙げられ、具体的にはベンジル基、フェネチル基、フェニルプロピル基等が挙げられる。ヘテロアラルキル基としては、ヘテロアリールＣ1-6アルキル基が挙げられ、具体的には、ピリジルメチル基、ピリミジルメチル基、ピラジルメチル基、ピリジルエチル基、ピリミジルエチル基、ピラジルエチル基等が挙げられる。アルアルケニル基としては、フェニルＣ2-6アルケニル基が挙げられ、具体的にはスチリル基、シンナミル基等が挙げられる。
【００１６】
また、上記Ｒ4 で示されるアリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、アルアルケニル基及びヘテロアラルキル基に置換していてもよい基としては、Ｃ1-6アルコキシル基、ハロゲン原子、シアノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、Ｃ1-6アルキルアミノ基及びＣ1-6アルコキシカルボニル基から選ばれた１〜３個の基が挙げられる。ここでＣ1-6アルコキシル基としてはメトキシル基、エトキシル基、イソプロポキシル基等が挙げられるが、メトキシル基が特に好ましい。更に、Ｃ1-6アルコキシカルボニル基としてはメトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基等が挙げられるが、メトキシカルボニル基が特に好ましい。
【００１７】
Ｒ4 としては、水素原子、Ｃ1-6アルキル基、フェニル基、フェニルＣ1-6アルキル基、フェニルＣ2-6アルケニル基又はピリジルＣ1-6アルキル基（ここでフェニルアルキル、フェニルアルケニル又はピリジルアルキル基には、Ｃ1-6アルコキシル基、ハロゲン原子、シアノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、アミノ基、Ｃ1-6アルキルアミノ基及びＣ1-6アルコキシカルボニル基から選ばれた１〜３個の基が置換していてもよい）が特に好ましい。
【００１８】
本発明の置換ピペリジン誘導体（１）の塩としては、医薬として許容される塩であれば特に限定されず、例えばギ酸塩、酢酸塩、トリフロロ酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等の有機酸塩；塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩が挙げられる。また、置換ピペリジン誘導体（１）は不斉炭素を有するため立体異性体が存在するが、これらすべての異性体が本発明に包含される。更に、置換ピペリジン誘導体（１）は、水和物に代表される溶媒和物として存在していてもよい。
【００１９】
本発明の置換ピペリジン誘導体（１）は、例えば下記製造法１〜５に従い製造することができる。
【００２０】
製造法１：
【００２１】
【化３】
0003965442.tif 000003
【００２２】
〔式中、Ｒ1 〜Ｒ4 は前記と同じものを示し、Ｒ5 は低級アルキル基を示し、Ｍはアルカリ金属又はＭｇＸ（ここでＸはハロゲン原子を示す）を示す〕
【００２３】
製造法１によればα−ケトエステル（２）に化合物（３）あるいは、化合物（３−１）を縮合させ（第１工程）、次いで化合物（５）を反応させる（第２工程）ことにより本発明化合物（１）が得られる。また、化合物（４）は、化合物（４−１）とＲ3Ｘを反応させる（第３工程）ことによっても得られる。
【００２４】
第１工程に用いられるα−ケトエステル（２）は、例えば、Ｊ．Ｏ．Ｃ．４６，２１３（１９８１），Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，１１，９４３（１９８１）等の方法で製造することができる。また、化合物（３）は、例えば、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ４，１７４（１９４８）等の方法で製造することができる。
【００２５】
第１工程の反応は、溶媒の存在下あるいは非存在下で行われる。使用される溶媒は反応に影響を与えなければ特に限定はなく、例えばベンゼン、トルエン、キシレンのような炭化水素類；テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエーテル類；ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−α−ピロリドンのようなアミド類；エタノール、ブタノール、メトキシエタノール、エトキシエタノールのようなアルコール類；ジメチルスルホキシドのようなスルホキシド類が挙げられる。反応は室温〜加熱還流下で行われ、反応時間は０．５〜８時間である。最も好適には無溶媒中化合物（２）に対し２倍モルの化合物（３）を用い、油浴上１００〜１２０℃で１〜３時間で行う。
【００２６】
第２工程に用いられる化合物（５）はＲ2 Ｘ（Ｘは前記と同じ意味）より公知の方法により製造できる。第２工程の反応は通常、溶媒の存在下行われ、使用される溶媒としては反応に影響を与えなければ特に限定はなく、例えば、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ｎ−ヘキサンなどが挙げられる。
第３工程の反応は、通常、適当な塩基及び溶媒の存在下行われ、使用される塩基としては、水素化ナトリウム、カリウムｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等が挙げられ、使用される溶媒としては、反応に影響を与えなければ特に限定はなく、例えばエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンなどのエーテル類；ジオキサン−水などの混合溶媒、メタノール、エタノールなどのアルコール類；ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−α−ピロリドンなどのアミド類；ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類が挙げられる。反応温度も特に限定されず、室温〜加熱還流下で行えばよい。
【００２７】
製造法２：
【００２８】
【化４】
0003965442.tif 000004
【００２９】
〔式中、Ｒ1 〜Ｒ4 は前記と同じものを示し、Ｙはハロゲン原子又はスルホニルオキシ基を示す〕
【００３０】
製造法２によれば、化合物（１−１）を接触水素添加して化合物（１−２）を得、次いでこれに化合物（６）を反応させることにより本発明化合物（１）が得られる。
【００３１】
化合物（１−１）の接触水素添加に用いられる触媒の適当な例として、例えばパラジウム−炭素、パラジウム−黒、水酸化パラジウムなどのパラジウム触媒、酸化白金、白金黒などの白金触媒、ラネーニッケルなどのニッケル触媒を挙げることができる。反応は通常、溶媒の存在下行われ、溶媒としては反応に影響を与えなければ特に限定はなく、例えばメタノール、エタノール、ジオキサン、ジメチルホルムアミドなどが用いられる。また、反応温度は特に限定されず、通常、室温又は加温下行えばよい。
【００３２】
化合物（６）における基Ｙの適当な例として、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、メシルオキシ基、トシルオキシ基などが挙げられる。
【００３３】
化合物（１−２）と化合物（６）との反応は、通常、適当な塩基と溶媒の存在下行われ、使用される塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどの無機塩基、トリエチルアミン、ピリジンなどの有機塩基が挙げられ、使用される溶媒としては反応に影響を与えなければ特に限定はなく、例えばエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンなどのエーテル類、ジオキサン−水などの混合溶媒、ジクロルメタン、クロロホルムなどの塩素系炭化水素、メタノール、エタノールなどのアルコール類、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−α−ピロリドンのようなアミド類が挙げられる。反応温度も特に限定されず、室温〜加熱還流下で行えばよい。
【００３４】
製造法３：
【００３５】
【化５】
0003965442.tif 000005
【００３６】
〔式中、Ｒ1 〜Ｒ3 は前記と同じものを示す〕
【００３７】
製造法３によれば、化合物（１−２）を還元的メチル化することにより本発明化合物（１−３）が得られる。
【００３８】
還元的メチル化反応は、具体的には、ホルマリン及びギ酸を反応させて行う。反応は溶媒の存在下あるいは非存在下で行われ、また使用される溶媒は反応に影響を与えなければ特に限定はなく、例えばアセトニトリル、テトラヒドロフラン等が挙げられる。反応温度は室温〜加熱還流下で行われ、反応時間は１〜３時間が好適である。
【００３９】
製造法４：
【００４０】
【化６】
0003965442.tif 000006
【００４１】
〔式中、Ｒ1 〜Ｒ5 及びＭは前記と同じものを示し、Ｐは水酸基の保護基を示す〕
【００４２】
製造法４によれば、α−ケトエステル（２）に化合物（５）を反応させてα−ヒドロキシエステル（７）とし、そのヒドロキシ基を保護した後、化合物（３）を反応させ、次いでヒドロキシ保護基を脱離させることにより本発明化合物（１）が得られる。
【００４３】
α−ケトエステル（２）と化合物（５）の反応は、前記製造法１における第２工程と同様にして行われる。また化合物（７）のヒドロキシ基の保護手段としては、例えばＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ
Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓに記載の手段が挙げられる。また、得られた化合物（８）と化合物（３）との反応は、前記製造法１における第１工程と同様にして行われる。更に、化合物（９）からのヒドロキシ保護基の脱離反応は、例えばＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓの記載に従って行うことができる。
【００４４】
製造法５：
【００４５】
【化７】
0003965442.tif 000007
【００４６】
製造法５によれば、α−ヒドロキシカルボン酸（１０）と化合物（３）を適当な縮合剤の存在下反応させることにより本発明化合物（１）が得られる。
化合物（１０）は例えば製造法４で得られる化合物（７）を公知の方法で加水分解することにより製造できる。
製造法５で用いられる適当な縮合剤としては、例えばカルボニルジイミダゾール、１−ヒドロキシ−２（１Ｈ）−ピリドン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、ジフェニルホスホリルアジド、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド・ハイドロクロリドなどが挙げられ、縮合剤の種類によっては適当な塩基、例えばトリエチルアミン、ピリジン等の有機塩基の存在下で反応を行う。使用される溶媒としては、反応に影響を与えなければ特に限定はなく、例えばジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、クロロホルム、ジクロルメタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどが挙げられる。
【００４７】
上記反応における目的化合物の単離・精製は、常法、例えば洗浄、抽出、再結晶、クロマトグラフィー等により行うことができる。また、塩への変換も常法に従って行うことができる。
【００４８】
本発明化合物（１）は、優れた抗コリン作用及びカルシウム拮抗作用を有し、反射性膀胱収縮を抑制するため、神経性頻尿、神経因性膀胱、夜尿症、不安定膀胱、慢性膀胱炎等の疾患における頻尿症、尿失禁等の排尿障害予防、治療剤として有用である。
【００４９】
本発明化合物をこのような医薬として用いる場合は、当該技術分野で公知の固体又は液体の担体と混合し、非経口投与、経口投与又は外部投与に適した医薬組成物（医薬製剤）とすればよい。医薬製剤としては、例えば注射剤、吸入剤、シロップ剤もしくは乳剤等の液剤、例えば錠剤、カプセル剤若しくは粒剤等の固形剤又は例えば軟膏、坐剤等の外用剤等が挙げられる。また、これらの製剤には必要に応じて助剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、吸収促進剤又は界面活性剤等の通常使用される添加剤が含まれていてもよい。添加剤としては注射用蒸留水、リンゲル液、グルコース、ショ糖シロップ、ゼラチン、食用油、カカオ脂、ステアリン酸マグネシウム又はタルク等が挙げられる。
【００５０】
本発明化合物を、排尿障害予防及び治療剤として使用する場合の投与量は、投与方法、患者の年齢、体重、容態によって異なるが、成人患者に対して経口投与の場合１日あたり０．１〜１０００mgとすることが好ましい。
【００５１】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、もとより本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではない。なお実施例に示す化合物番号は表１〜表１４に示すものである。
【００５２】
実施例１
シクロペンチルブロミド１５．０ｇ、マグネシウム２．１ｇより調製したグリニヤ試薬のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）溶液をＮ−（１−ベンジル−４−ピペリジニル）フェニルグリオキシル酸アミド８．７ｇのＴＨＦ溶液１００ml中にゆっくり滴下した。滴下後、室温で１時間攪拌し、更に２時間加熱還流した。放冷後、反応混合物に水１５０ml、続いて２５％硫酸水溶液１５０mlを滴下し、酢酸エチルで抽出後、有機層を水洗、無水硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を減圧留去した。残渣はシリカゲルカラムにて精製を行い、アセトン：エーテルより再結晶して無色結晶の化合物番号４の化合物３．７４ｇ（収率３５．３％）を得た。
【００５３】
実施例２
化合物番号４の化合物５００mgをエタノール６０mlに懸濁させ、水酸化パラジウム２００mgを加え、室温下で１２時間水素添加を行った。その後、触媒を濾取後、濾液を減圧留去し、化合物番号１６の化合物を定量的に得た。
【００５４】
実施例３
実施例２で得られた化合物番号１６の化合物３８０mgにアセトニトリル７ml、３７％ホルマリン７ml、ギ酸６００mgを加え、１時間加熱還流した。冷後、反応混合物に、水酸化ナトリウム水溶液を加えて塩基性とし、クロロホルムで抽出後、水洗し無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去した。残渣をエーテルより再結晶を行い、無色結晶の化合物番号６の化合物３８０mg（収率９５．６％）を得た。
【００５５】
実施例４
実施例２で得られた化合物番号１６の化合物３８０mgにジオキサン７ml、水７ml、炭酸カリウム４００mgを加えて攪拌しながらフェネチルブロミド５９０mgを滴下し、室温で１２時間攪拌した。その後、反応混合物に水２０mlを加えクロロホルムで抽出し、有機層を水洗し無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去した。残渣はシリカゲルカラムにて精製を行い、得られた粗結晶をエーテルより再結晶して無色結晶の化合物番号８の化合物２６０mg（収率４６．４％）を得た。
上記実施例で得られた化合物及びこれらの実施例と同様にして得られた化合物のデータを次の表１〜表１４に示す。
【００５６】
【表１】
0003965442.tif 000008
【００５７】
【表２】
0003965442.tif 000009
【００５８】
【表３】
0003965442.tif 000010
【００５９】
【表４】
0003965442.tif 000011
【００６０】
【表５】
0003965442.tif 000012
【００６１】
【表６】
0003965442.tif 000013
【００６２】
【表７】
0003965442.tif 000014
【００６３】
【表８】
0003965442.tif 000015
【００６４】
【表９】
0003965442.tif 000016
【００６５】
【表１０】
0003965442.tif 000017
【００６６】
【表１１】
0003965442.tif 000018
【００６７】
【表１２】
0003965442.tif 000019
【００６８】
【表１３】
0003965442.tif 000020
【００６９】
【表１４】
0003965442.tif 000021
【００７０】
注：表中、Meはメチル基、Etはエチル基を示す。
【００７１】
参考例１
フェニルグリオキシル酸エチル４．２８ｇに４−アミノ−１−ベンジルピペリジン９．１２ｇを加え、油浴上１２０℃で３時間加熱攪拌した。その後、生成したエタノールを減圧留去し残渣をシリカゲルカラムにて精製し、Ｎ−（１−ベンジル−４−ピペリジニル）フェニルグリオキシル酸アミド６．３ｇ（収率８１．４％）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，δ）：
１．２５〜２．３８（６Ｈ，ｍ），２．６３〜３．０２（２Ｈ，ｍ），
３．５２（２Ｈ，ｓ），３．８６（１Ｈ，ｂｒ），
６．９８（１Ｈ，ｂｒ），７．２２〜７．８３（８Ｈ，ｍ），
８．２３〜８．５０（２Ｈ，ｍ）．
【００７２】
試験例１
ラット摘出膀胱標本に対する抗コリン作用
１）試験方法
体重２２０〜４５０ｇの雄性Ｓ．Ｄ．ラットを放血致死させて膀胱を摘出し、三角部以下を除去した縦割標本を作成した（幅３〜５mm，長さ１０〜１５mm）。標本は０．５ｇの負荷をかけ、混合ガス（９５％Ｏ2，５％ＣＯ2）を通気したＴｙｒｏｄｅ液（３２℃）を満たしたマグヌス浴槽内に懸垂した。標本の反応は張力トランスデューサーを介して等尺性を記録した。標本の安定が得られた後、アセチルコリン（１０-5Ｍ）収縮に対する作用を検討した。尚、被検薬は５分間前処置をし、その作用を検討した。
試験結果を５０％収縮抑制濃度（ＩＣ50：Ｍ）として表１５に示す。
【００７３】
【表１５】
0003965442.tif 000022
【００７４】
試験例２
ラット摘出膀胱標本に対するカルシウム拮抗作用
１）試験方法
試験例１の試験方法により作成した標本に１mMのＥＤＴＡを添加してカルシウムイオンを除去した後、１０-3Ｍ塩化カルシウムを適用した。塩化カルシウムによる収縮が安定した後、被検薬を累積的に適用した。初回被検薬適用時の収縮を１００％とし、被検薬の各濃度を適用した時の抑制率から被検薬を適用しない標本の自然弛緩率を差し引いたものを収縮抑制率とした。
試験結果を３０％収縮抑制濃度（ＩＣ30：Ｍ）として表１６に示す。
【００７５】
【表１６】
0003965442.tif 000023
【００７６】
【発明の効果】
本発明化合物（１）は、優れた抗コリン作用及びカルシウム拮抗作用を有し、反射性膀胱収縮を抑制するため神経性頻尿、神経因性膀胱、夜尿症、不安定膀胱、慢性膀胱炎等の疾患における頻尿症、尿失禁等の排尿障害予防、治療剤として有用である。