(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）
【化１】
0003876079.tif 000018
で表される１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロールをリパーゼ存在下でアシル化反応に付し、下記式（II）
【化２】
0003876079.tif 000019
［式中、Ｒ1は炭素数２から１０のアシル基を表す。］
で表される化合物を得、これとクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリドおよびカルボン酸塩を反応させ、次いで、必要に応じ、保護または脱保護を行うことを特徴とする、下記式（III）
【化３】
0003876079.tif 000020
［式中、Ｒ1、Ｒ2、およびＲ3は、それぞれ同一もしくは異なり、水素原子または炭素数２から１０のアシル基を表す。］
で表される１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の製造法。
【請求項２】
上記式（II）において、Ｒ1がアセチル基である請求項１記載の１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の製造法。
【請求項３】
リパーゼがシュードモナス属由来のものである請求項１または請求項２に記載の１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の製造法。
【請求項４】
カルボン酸塩が安息香酸カリウムである請求項１から請求項３のいずれかに記載の１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の製造法。
【請求項５】
クロロメチレンジメチルアンモニウムクロリドを反応系内で調製することを特徴とする、請求項１から請求項４のいずれかに記載の１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は医薬品として有用なビタミンＤ3誘導体の合成中間体に関する。さらに詳細には、カルシウム代謝または細胞分化機能に異常をきたした疾患の治療薬として有用な１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシビタミンＤ3の重要な合成中間体である１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の製造方法の一つとして、特公昭５３−２３８２８号、特公昭５３−２４０７３号、特公昭５５−１２９２０号、特開平５−０４３５９１号各公報に記載の方法の組合せが挙げられる。この方法はすなわち、以下のように２４−ヒドロキシコレステロールを出発原料とし、１α，２４−ジヒドロキシコレステロールを合成した後、その２４位の異性体を分離するというものである。
【０００３】
【化４】
0003876079.tif 000002
【０００４】
この方法においては、２４位の水酸基の立体配置が望ましくないものであるＳ配置である化合物が副成する。したがって、この方法を実用的に優れた製造法とするには、この副成する２４位がＳ配置である化合物の２４位の立体配置を簡便に反転し、Ｒ配置とする技術が必要である。２４（Ｓ）−ヒドロキシコレステロールおよび１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロールの２４位の水酸基の立体反転法は、特開昭５３−８２７６６号、特公昭６２−９１１８号、特公平７−３９４３４号各公報に記載されている。代表的な例として、特公平７−３９４３４号公報記載の方法を挙げると、１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロールの３位の水酸基を保護し、２４位をメシル化した後、有機カルボン酸塩による立体反転、加水分解等をおこなうことにより、１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロールを得るというものである。
【０００５】
【化５】
0003876079.tif 000003
【０００６】
この１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロールを出発原料とする２４位の立体反転法では３位の水酸基の反応性が他の水酸基に比べて高いため、２４位の立体反転を行う前に３位の水酸基を選択的に保護する必要がある。しかし、特公平７−３９４３４号公報記載の化学的な方法では、その３位の保護の収率は高々６４％であり、必ずしも十分とはいえない。また、立体反転は水酸基の活性化と反転反応を同時に実施できず、２４位の水酸基をあらかじめスルホン酸エステルに誘導したのち実施する必要があり、工程数が増加してしまうという問題点があった。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
上記従来技術の状況のもとに、本発明の目的は入手容易な１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロールを出発原料とする１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の実用的な製造法を提供することである。具体的には、より簡便に２４位の立体配置を反転させる方法を提供することである。その方法は最も実用的に優れた１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロールの製造法の一つになり得る。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、上記課題を踏まえて１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロールの３位の選択的アシル化および得られた３位アシル化体の２４位の水酸基を一気に反転させる方法について鋭意研究した結果、本発明に到達したものである。
【０００９】
すなわち、本発明は下記式（Ｉ）
【００１０】
【化６】
0003876079.tif 000004
【００１１】
で表される１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロールをリパーゼ存在下でアシル化反応に付し、下記式（II）
【００１２】
【化７】
0003876079.tif 000005
【００１３】
［式中、Ｒ1は炭素数２から１０のアシル基を表す。この炭素数にはカルボニル炭素を含む。以下同じ。］
で表される化合物を得、これとクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリドおよびカルボン酸塩を反応させ、次いで必要に応じ、保護または脱保護を行うことを特徴とする下記式（III）
【００１４】
【化８】
0003876079.tif 000006
【００１５】
［式中、Ｒ1、Ｒ2、およびＲ3はそれぞれ同一もしくは異なり、水素原子、炭素数２から１０のアシル基を表す。］
で表される１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類の製造法である。
【００１６】
【発明の実施の形態】
本発明の製造法において、前記式（Ｉ）で表される化合物の３位の選択的アシル化は、リパーゼを用いることで達成できる。用いられるリパーゼは、ほぼシュードモナス属由来のリパーゼに限られ、他のリパーゼではほとんど反応自体が進行しない。シュードモナス属由来のリパーゼとしては、東洋紡製のＬＩＰ−３００およびベーリンガーマンハイム製のキラザイムＬ−６、天野製薬製のリパーゼＰＳが挙げられ、いずれも高選択的に３位のアシル化を触媒する。
【００１７】
前記式（Ｉ）で表される化合物のアシル化に用いられるアシル化剤としては、脂肪族あるいは芳香族カルボン酸のビニルエステル、イソプロペニルエステル、酸無水物、トリフルオロエチルエステル等が用いられる。具体的には酢酸、クロロ酢酸、プロピオン酸、安息香酸、ｐ−ニトロ安息香酸のビニルエステル、イソプロペニルエステル、酸無水物、トリフルオロエチルエステルが挙げられる。その中でも特に入手の容易さ、選択性の高さより、酢酸ビニルやクロロ酢酸ビニルが好ましい。
【００１８】
前記式（Ｉ）で表される化合物のアシル化に用いられる溶媒は、炭化水素系、ハロゲン系、エーテル系の有機溶媒等が挙げられる。なかでもエーテル系の溶媒が好ましく、例としてｔ−ブチルメチルエーテル、ＴＨＦ、ジイソプロピルエーテルが挙げられ、特にその溶解力を考慮してｔ−ブチルメチルエーテルが最適である。
【００１９】
前記式（Ｉ）で表される化合物のアシル化の反応温度は、０℃から溶媒の沸点までの範囲でリパーゼの安定性により選択されるが、通常は室温で実施する。この反応温度は反応時間に影響するが、室温で実施した場合、ほぼ数時間〜数日で反応は完結する。
【００２０】
前記式（II）で表される化合物の２４位の水酸基の反転は、クロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（ビールスマイヤー試薬）存在下、カルボン酸塩と反応させることにより実施できる。この試薬の組合せはJ. Chem. Soc. Chem. Commun., 1403 (1995)に記載されてはいるが、前記式（II）の化合物のような水酸基を２個有する化合物（１位と２４位）の一方の水酸基の選択的反応例はなかった。実際に反応を行った結果、２４位が優先的に反応することおよび１位の反転反応は起こらないことを見出した。すなわち、１位がメチレンジメチルアンモニウムクロリド化された場合は後処理することにより、１位の水酸基がホルミル基で保護された化合物が得られるわけである。
【００２１】
前記式（II）で表される化合物の２４位の水酸基の反転に用いられるクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（ビールスマイヤー試薬）は購入可能であるが、Chem. Soc. Chem. Commun., 1403 (1995)に記載されているように、ＤＭＦと塩化オキサリルより容易に合成できる。また、反応系内でＤＭＦと塩化オキサリルを反応させ調製することも可能である。これは従来知られていなかった事実であり、本発明の特徴の一つとして挙げることができる。このクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（ビールスマイヤー試薬）は前記式（II）で表される化合物を残存させないために、前記式（II）で表される化合物に対して１モル倍〜５モル倍の範囲で用いられるが、好ましくは１．５モル倍〜２．５モル倍の範囲で用いられる。
【００２２】
本反応で用いる反応溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル系溶媒、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル等の水溶性の溶媒、トルエン、ヘキサン等の炭化水素系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲン系溶媒、あるいはその混合溶媒を用いることができる。好ましい溶媒としてはＴＨＦおよびトルエンを挙げることができる。かかる溶媒の使用量としては、通常ｍｍｏｌで表される反応スケールに換算して、１ｍｌ〜１００ｍｌ用いられるが、好ましくは２ｍｌ〜２０ｍｌの範囲で用いられる。
【００２３】
反応温度としては室温から溶媒の沸点までの範囲が使用されるが、好ましくは５０℃から８０℃の温度が選択される。この反応温度は反応時間に影響する。通常、１時間から数日程度である。
【００２４】
本反応で用いられるカルボン酸の塩のカルボン酸としては、酢酸、クロロ酢酸、プロピオン酸、安息香酸が挙げられ、塩としてはカリウム塩、ナトリウム塩、リチウム塩、セシウム塩等が挙げられる。特に好ましいカルボン酸塩として安息香酸カリウム、安息香酸ナトリウムが挙げられる。このカルボン酸塩は２４位の水酸基の反転の試剤であると共にクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（ビールスマイヤー試薬）と前記式（II）で表される化合物が反応した際に生じる塩化水素を捕捉する目的があるため、前記式（II）で表される化合物に対して３モル倍〜３０モル倍の範囲で用いられ、好ましくは５モル倍〜１５モル倍の範囲で用いられる。
【００２５】
かくして、得られた前記式（III）で表される化合物は、３、２４位あるいは１、３、２４位が保護されている。したがって、１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロールを得ることが目的ならば、脱保護する必要があり、それは通常の加水分解等の方法により達成できる。また、前記式（III）で表される化合物は、特公昭６２−５１２６５号公報に記載の方法に従って、１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシビタミンＤ3へ誘導可能である。この場合は、３、２４位が保護されている前記式（III）で表される化合物の場合は、１位の水酸基を通常の方法で保護した後、１、３、２４位が保護された化合物の場合はそのまま以降の工程に付すことができる。以上のように、必要に応じ、脱保護、保護をすることで所望の１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール誘導体が得られる。
【００２６】
【化９】
0003876079.tif 000007
【００２７】
また、本製造法を用いることにより、前記式（Ｉ）で表される化合物より途中精製を行うことなく、１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロールを合成することができる。このように、本製造法は非常に簡便な方法といえる。
【００２８】
【実施例】
［実施例１］
【００２９】
【化１０】
0003876079.tif 000008
【００３０】
１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（１）（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のｔＢｕＯＭｅ溶液（５ｍｌ）に酢酸ビニル（０．２３ｍｌ、２．５０ｍｍｏｌ）およびＬＩＰ−３００（５０ｍｇ）を加え、室温で４時間攪拌した。リパーゼを濾去した後、溶媒を留去することで粗生成物を得た。シリカゲル（２０ｇ）を用い、ヘキサン：酢酸エチル（１０：１→３：１）でカラム精製することで、３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）（２１５ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ、９９％）を得た。
【００３１】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、ｐｐｍ）  δ；
０．６８（３Ｈ，ｓ）  ０．８０−１．００（６Ｈ，ｍ）  １．０５（３Ｈ，ｓ）  １．００−２．５０（２１Ｈ，ｍ）  ２．０３（３Ｈ，ｓ）  ３．２５−３．４５（２Ｈ，ｍ）  ３．８５（１Ｈ，ｂｒ）  ４．９５−５．１５（１Ｈ，ｍ）  ５．５５−５．６５（１Ｈ，ｍ）
【００３２】
［実施例２］
【００３３】
【化１１】
0003876079.tif 000009
【００３４】
１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（１）（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のｔＢｕＯＭｅ−ＴＨＦ溶液（４ｍｌ−１ｍｌ）に酢酸ビニル（０．２３ｍｌ、２．５０ｍｍｏｌ）およびキラザイムＬ−６（５０ｍｇ）を加え、室温で２４時間攪拌した。リパーゼを濾去した後、溶媒を留去することで粗生成物を得た。シリカゲル（２０ｇ）を用い、ヘキサン：酢酸エチル（１０：１→３：１）でカラム精製することで、３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）（１８７ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、８６％）を得た。このもののＮＭＲは実施例１で得たもののそれと一致した。
【００３５】
［実施例３］
【００３６】
【化１２】
0003876079.tif 000010
【００３７】
１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（１）（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のｔＢｕＯＭｅ−ＴＨＦ溶液（３ｍｌ−２ｍｌ）にクロロ酢酸ビニル（０．５ｍｌ、４．９３ｍｍｏｌ）、およびリパーゼＰＳ−Ｄ（５０ｍｇ）を加え、室温で２４時間攪拌した。リパーゼを濾去した後、溶媒を留去することで粗生成物を得た。シリカゲル（２０ｇ）を用い、ヘキサン：酢酸エチル（１０：１→３：１）でカラム精製することで、３−クロロアセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（３）（１９７ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ、８４％）を得た。
【００３８】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、ｐｐｍ）  δ；
０．６８（３Ｈ，ｓ）  ０．８０−１．００（６Ｈ，ｍ）  １．０５（３Ｈ，ｓ）  １．００−２．５０（２１Ｈ，ｍ）  ３．２５−３．３５（２Ｈ，ｍ）  ３．８９（１Ｈ，ｂｒ）  ４．０２（２Ｈ，ｓ）  ５．０５−５．２０（１Ｈ，ｍ）  ５．５５−５．６５（１Ｈ，ｍ）
【００３９】
［実施例４］
【００４０】
【化１３】
0003876079.tif 000011
【００４１】
３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）（２３０ｍｇ、０．５０  ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３ｍｌ）にクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（１３８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、安息香酸カリウム（４８０ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で３時間攪拌した。放冷後、水および酢酸エチル（各２５ｍｌ）でわり、水層を分離した。有機層は飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水（各２５ｍｌ）で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過、濃縮した。粗生成物をＹＭＣ−ＳＩＬ（２ｃｍ×２５ｃｍ）を用いてＨＰＬＣ分取（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１、流量：２０ｍｌ／分、検出：２５４ｎｍ）し、３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ヒドロキシコレステロール（４）（１０６ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ、３８％）および３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ホルミルオキシコレステロール（５）（１１５ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ、３９％）を得た。
【００４２】
（４）の1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、ｐｐｍ）  δ；
０．６５（３Ｈ，ｓ）  ０．８０−１．００（６Ｈ，ｍ）  １．０３（３Ｈ，ｓ）  １．００−２．５０（２１Ｈ，ｍ）  ２．０１（３Ｈ，ｓ）  ３．８５（１Ｈ，ｂｒ）  ４．９０−５．１０（２Ｈ，ｍ）  ５．５５−５．６５（１Ｈ，ｍ）  ７．４０−７．６０（２Ｈ，ｍ）  ８．００−８．１０（１Ｈ，ｍ）
（５）の1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、ｐｐｍ）  δ；
０．６３（３Ｈ，ｓ）  ０．８０−１．００（６Ｈ，ｍ）  １．０８（３Ｈ，ｓ）  １．００−２．５０（２１Ｈ，ｍ）  ２．０２（３Ｈ，ｓ）  ４．８５−５．０５（２Ｈ，ｍ）  ５．２０（１Ｈ，  ｂｒ）  ５．５５−５．６５（１Ｈ，ｍ）  ７．４０−７．６０（２Ｈ，ｍ）  ８．００−８．１０（２Ｈ，ｍ）
【００４３】
［実施例５］
【００４４】
【化１４】
0003876079.tif 000012
【００４５】
３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）（２３０ｍｇ、０．５０  ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３ｍｌ）にクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（１３８ｍｇ、  １．００ｍｍｏｌ）、安息香酸ナトリウム（４３２ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で３時間攪拌した。放冷後、水および酢酸エチル（各２５ｍｌ）でわり、水層を分離した。有機層は飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水（各２５ｍｌ）で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過、濃縮した。粗生成物をＹＭＣ−ＳＩＬ（２ｃｍ×２５ｃｍ）を用いてＨＰＬＣ分取（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１、流量：２０ｍｌ／分、検出：２５４ｎｍ）し、３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ヒドロキシコレステロール（４）（１２１ｍｇ、  ０．２１ｍｍｏｌ、４３％）および３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ホルミルオキシコレステロール（５）（６７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、２３％）を得た。これらのＮＭＲは実施例４で得られたもののそれらと一致した。
【００４６】
［実施例６］
【００４７】
【化１５】
0003876079.tif 000013
【００４８】
３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）（２３０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３ｍｌ）にクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（１３８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（２６８ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で３時間攪拌した。放冷後、水および酢酸エチル（各２５ｍｌ）でわり、水層を分離した。有機層は飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水（各２５ｍｌ）で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過、濃縮した。粗生成物をＹＭＣ−ＳＩＬ（２ｃｍ×２５ｃｍ）を用いてＨＰＬＣ分取（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１、流量：２０ｍｌ／分、検出：２５４ｎｍ）し、３，２４（Ｒ）−ジアセトキシ−１α−ヒドロキコレスト−５−エン（６）（５３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、２３％）および３，２４（Ｒ）−ジアセトキシ−１α−ホルミルオキシコレスト−５−エン（７）（３３ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ、１２％）を得た。
【００４９】
（６）の1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、ｐｐｍ）  δ；
０．６７（３Ｈ，ｓ）  ０．８５−０．９５（６Ｈ，ｍ）  １．０４（３Ｈ，ｓ）  １．００−２．５０（２１Ｈ，ｍ）  ２．０３（３Ｈ，ｓ）  ２．０５（３Ｈ，ｓ）  ３．８５（１Ｈ，ｂｒ）  ４．６５−４．７５（１Ｈ，ｍ）  ４．９０−５．１５（１Ｈ，ｍ）  ５．５５−５．６５（１Ｈ，ｍ）
（７）の1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、ｐｐｍ）  δ；
０．６７（３Ｈ，ｓ）  ０．８５−０．９５（６Ｈ，ｍ）  １．０８（３Ｈ，ｓ）  １．００−２．５０（２１Ｈ，ｍ）  ２．０３（３Ｈ，ｓ）  ２．０５（３Ｈ，ｓ）  ４．６５−４．７５（１Ｈ，ｍ）  ４．８５−５．０５（１Ｈ，ｍ）５．２０（１Ｈ，ｂｒ）  ５．５０−５．６０（１Ｈ，ｍ）  ８．０８（１Ｈ，ｓ）
【００５０】
［実施例７］
【００５１】
【化１６】
0003876079.tif 000014
【００５２】
ＤＭＦ（０．０８５ｍｌ、１．１０ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（２ｍｌ）に塩化オキサル（０．０９ｍｌ、１．００ｍｍｏｌ）を室温で滴下し、１０分間攪拌した。３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）（２３０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２ｍｌ）、安息香酸カリウム（４８０ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で６時間攪拌した。放冷後、水および酢酸エチル（各２５ｍｌ）でわり、水層を分離した。有機層は飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水（各２５ｍｌ）で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過、濃縮した。粗生成物をＹＭＣ−ＳＩＬ（２ｃｍ×２５ｃｍ）を用いてＨＰＬＣ分取（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１、流量：２０ｍｌ／分、検出：２５４ｎｍ）し、３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ヒドロキシコレステロール（４）（１２０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、４２％）および３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ホルミルオキシコレステロール（５）（６９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、２３％）を得た。これらのＮＭＲは実施例４で得られたもののそれらと一致した。
【００５３】
［実施例８］
【００５４】
【化１７】
0003876079.tif 000015
【００５５】
３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）（２３０ｍｇ、０．５０  ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（３ｍｌ）にクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（１３８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、安息香酸ナトリウム（４３２ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で３時間攪拌した。放冷後、水および酢酸エチル（各２５ｍｌ）でわり、水層を分離した。有機層は飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水（各２５ｍｌ）で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過、濃縮した。粗生成物をＹＭＣ−ＳＩＬ（２ｃｍ×２５ｃｍ）を用いてＨＰＬＣ分取（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１、流量：２０ｍｌ／分、検出：２５４ｎｍ）し、３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ヒドロキシコレステロール（４）（６５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、２３％）および３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ホルミルオキシコレステロール（５）（８５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、２８％）を得た。これらのＮＭＲは実施例４で得られたもののそれらと一致した。
【００５６】
［実施例９］
【００５７】
【化１８】
0003876079.tif 000016
【００５８】
３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）（２３０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３ｍｌ）にクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（２１０ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）、安息香酸カリウム（７００ｍｇ、４．３８ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で５時間攪拌した。放冷後、水および酢酸エチル（各２５ｍｌ）でわり、水層を分離した。有機層は飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水（各２５ｍｌ）で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過、濃縮した。粗生成物をＹＭＣ−ＳＩＬ（２ｃｍ×２５ｃｍ）を用いてＨＰＬＣ分取（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１、流量：２０ｍｌ／分、検出：２５４ｎｍ）し、３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ヒドロキシコレステロール（４）（３３ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ、１２％）および３−アセチル−２４（Ｒ）−ベンゾイルオキシ−１α−ホルミルオキシコレステロール（５）（１９０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ、６４％）を得た。これらのＮＭＲは実施例４で得られたもののそれらと一致した。
【００５９】
［実施例１０］
【００６０】
【化１９】
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【００６１】
１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（１）（２３０ｍｇ、純度９０％、０．５０ｍｍｏｌ）のｔＢｕＯＭｅ溶液（５ｍｌ）に酢酸ビニル（０．５ｍｌ、５．４１ｍｍｏｌ）とＬＩＰ−３００（５０ｍｇ）を加え、室温で３時間攪拌した。濾過後、濃縮し、３−アセチル−１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（２）を得た。このＴＨＦ溶液（３ｍｌ）にクロロメチレンジメチルアンモニウムクロリド（１３８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）、安息香酸カリウム（４８０  ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で３時間攪拌した。放冷後、濾過、濃縮し、得られた粗体にＴＨＦ（２ｍｌ）、メタノール（１ｍｌ）、水（０．５ｍｌ）を加えたのち、４Ｍ  ＫＯＨのメタノール溶液（１ｍｌ）を加え、８０℃で１時間攪拌した。水（２５ｍｌ）および酢酸エチル（２５ｍｌ）でわり、水層を分離した。有機層は飽和食塩水（２５ｍｌ）で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラム（２０ｇ；トルエン：酢酸エチル＝１０／１→３／１）で精製し、１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール（８）（１４５ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ、６９％）を得た。このもののＮＭＲは１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロール（１）とほぼ同一であったが、ＨＰＬＣ分析（ＹＭＳ−ＯＤＳ（ＡＭ３０３）、アセトニトリル／水＝７／３、１．０ｍｌ／分、２１０ｎｍ、３５℃）で標品と合わせることにより１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール（８）と同定した。
【００６２】
【発明の効果】
本発明によれば、効率的に１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロール類を得ることができる。例えば、特公平７−３９４３４号公報記載の方法では１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシコレステロールより４工程で５０％の収率で得られた１α，２４（Ｒ）−ジヒドロキシコレステロールが、本法を用いれば３工程、６９％の収率で得られるわけである。また、従来、途中の工程における精製操作が必須であったが、本法を用いれば、途中の工程での精製を省略することができ、一般に精製は反応と同程度の工数を要すると考えれられることを踏まえると、極めて実際的な製造法といえる。