(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリアクリル酸ナトリウム、ポリアクリル酸架橋体、ポリアクリル酸ナトリウム架橋体、ポリアクリル酸カルシウム架橋体、ポリメタクリル酸架橋体、ポリメタクリル酸ナトリウム架橋体及びポリメタクリル酸カルシウム架橋体からなる群から選ばれた少なくとも一種のアクリル系吸水性樹脂を有効成分として含有することを特徴とする、腎疾患患者における血中グアニジノ化合物濃度の上昇を抑制するための医薬組成物。
【請求項２】
ポリアクリル酸ナトリウム、ポリアクリル酸架橋体、ポリアクリル酸ナトリウム架橋体、ポリアクリル酸カルシウム架橋体、ポリメタクリル酸架橋体、ポリメタクリル酸ナトリウム架橋体及びポリメタクリル酸カルシウム架橋体からなる群から選ばれた少なくとも一種のアクリル系吸水性樹脂を有効成分として含有することを特徴とする、腎疾患患者における血中グアニジノ化合物濃度の上昇を抑制し、且つ水分を体外に排出するための医薬組成物。
【請求項３】
ポリアクリル酸ナトリウム、ポリアクリル酸架橋体、ポリアクリル酸ナトリウム架橋体、ポリアクリル酸カルシウム架橋体、ポリメタクリル酸架橋体、ポリメタクリル酸ナトリウム架橋体及びポリメタクリル酸カルシウム架橋体からなる群から選ばれた少なくとも一種のアクリル系吸水性樹脂を有効成分として含有することを特徴とする、腎疾患患者における血中グアニジノ化合物濃度の上昇を抑制し、且つ水分及びカリウムイオンを体外に排出するための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はグアニジノ化合物低下剤、より詳しくは、血液透析を受けている急性及び慢性腎不全患者や、血液透析を受けるまでには至っていないが、腎機能低下により水分摂取の制限を受けている患者に経口投与して、該患者の体内に蓄積されたグアニジノ化合物を低下させ、同体内に蓄積される水分と共に、血液透析によることなく体外に排出し且つ体内に蓄積されるカリウムイオンも除去可能な新しい作用を有するグアニジノ化合物低下剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ポリアクリル酸ソーダ等のアクリル系吸水性樹脂は、従来より、生理用品、おむつ、使い捨て雑巾等の衛生用品を始めとして、食品添加物、農園芸用品等として用いられてきており、文献的にも消化性潰瘍治療剤（独国特許第２４１２０９０号）、止血及び創傷保護剤（特開昭６２−７０３１８号）、酒酔い防止剤（特開平１−１５３６４３号）等として利用できることが知られている。
【０００３】
一方、腎機能が低下し、窒素、代謝老廃物、水分等の尿中に排泄されるべき物質が生体内に蓄積される、急性及び慢性の腎不全患者の治療、処置法としては、腎移植やＣＡＰＤ（携行式腹膜透析）等も知られてはいるが、腎移植では腎提供者が少な過ぎ、ＣＡＰＤでは腹膜炎を併発しやすい欠点があることから、主として、血液透析に頼っているのが現状である。
【０００４】
我国の腎疾患患者数は、５０〜６０万人といわれ、日本透析医学統計調査委員会は、１９９４年末現在の我国の慢性透析患者数が、１４３７０９人であり、前年よりも９４１１人増加したと報告している。
【０００５】
之等の透析患者及び血液透析を受けるまでには至っていないが、腎機能低下により透析患者と同様の水分摂取の制限を受けている保存期の患者は、腎機能低下による水分等の体外排出が不能乃至困難であること及び透析患者の狭心症は透析中に出現しやすく、透析直前の体液量が最も増加した時にも発作が誘発されやすいといわれていること等から、摂取水分量を厳しく制限されている。その１日の許容水分摂取量は、ほぼ１リットル以内とされており、透析患者では次の血液透析までの間に摂取できる許容水分量は、体重の４〜５％程度までに抑えられている現状にある。しかして、この許容水分摂取量は、健常人が通常摂取する水分量の約半分程度に相当する。この長期間に亘る厳しい水分管理は、透析患者に多大の精神的及び肉体的苦痛を与えるものであり、これが血液透析の最も重大な弊害のひとつとして挙げられる。
【０００６】
また、上記透析患者の血液透析時間は、例えば２リットルの水分と代謝老廃物等を除去する場合で約３時間を要し、それ以上の水分除去には更に長時間を要する。患者は、かかる血液透析を週に２〜３回程度繰り返す必要があるため、時間的にも社会復帰が困難な現状にある。
【０００７】
このように、現在、腎不全患者に適用されている血液透析は、該患者の生命維持に必須のものではあるが、多大の精神的苦痛等を伴うに加えて、長期の処置時間を要するものであり、それらを軽減できる新しい技術の開発が待ち望まれている。
【０００８】
更に、透析患者等の腎不全患者においては、尿毒症の原因物質の一つとされている、例えばメチルグアニジン、グアニジノプロピオン酸、グアニジノ酪酸等のグアニジノ化合物が体内に蓄積されるという重大な弊害がある。また、メチルグアニジンには細胞毒性があり、グアニジノプロピオン酸には溶血作用があり、グアニジノ酪酸には中枢神経障害作用があり、之等それぞれの体内蓄積によれば、各種疾患の罹病のおそれがある。
【０００９】
このうち、メチルグアニジンは血液透析により血中の濃度低下を図ることが可能であるが、臓器内濃度は血液透析でも容易に低下しない。また、グアニジノプロピオン酸及びグアニジノ酪酸は血液透析でもその血中及び臓器内濃度を殆ど低下させることはできない。
【００１０】
このように、血液透析は、水分除去以外に、代謝老廃物、毒性物質等の除去を目的として行なわれるものではあるが、体内に蓄積する毒性物質等の種類によっては之等を充分に除去できるものではなく、これに代わるか又はこれを補い得る技術の開発もまた望まれている。
【００１１】
加えて、一般に血液透析患者にあっては、発熱、感染、摂食不良等が起こると、細胞質や自己蛋白の崩壊により、細胞外にカリウムイオンが移行し、経口によるカリウムの摂取を行なわずとも、容易に高カリウム血症が惹起され、四肢知覚障害、嘔吐、下痢、乏尿、筋脱力感、弛緩性筋麻痺、代謝性アシドーシス、呼吸筋麻痺、呼吸困難、不整脈等の症候を出現させる場合のあることが知られている。従って、従来、かかる透析患者には、カリウム吸着剤の投与がよく行なわれているが、公知のカリウム吸着剤は副作用として便秘を伴う欠点があり、その改善も求められている。
【００１２】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的は、血液透析患者等が摂取した水分、体内に蓄積されるグアニジノ化合物及びカリウムイオンを、血液透析によらずとも、体外に排出できる新しい技術、殊に、かかる体外排出を可能とする経口投与剤を提供する点にある。
【００１３】
本発明者らは、上記目的より鋭意研究の結果、従来より、衛生用品等に用いられているある種の吸水性樹脂が、これを患者に経口摂取させるときには、体内に蓄積されたグアニジノ化合物を低下させ、且つ水分と同時にカリウムイオンをも吸着して、体外に排出させ得る作用を発揮し、上記作用を発揮する投与量での経口投与は安全性に優れていることを見出し、ここに本発明を完成するに至った。
【００１４】
【課題を解決するための手段】
本発明によれば、アクリル系吸水性樹脂を有効成分として含有することを特徴とするグアニジノ化合物低下剤、特にグアニジノ化合物低下剤及び水分吸着剤並びにグアニジノ化合物低下剤、水分及びカリウムイオン吸着剤が提供される。
【００１５】
【発明の実施の形態】
本発明低下及び吸着剤において有効成分とする上記アクリル系吸水性樹脂に含まれる好ましい一つの例としては、一般式
ＣＨ2＝ＣＲ1ＣＯＯＲ2
〔式中Ｒ1は水素原子又はメチル基、Ｒ2は水素原子又は金属原子を示す。〕
で表されるアクリル系モノマーを必須構成単位として含む重合体及び該重合体の架橋体から選ばれるものを例示することができる。
【００１６】
ここで金属塩を形成する金属としては、ナトリウム、カリウム、リチウム等のアルカリ金属、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属を例示できる。
【００１７】
上記好ましいアクリル系吸水性樹脂には、アクリル酸系重合体、アクリル酸金属塩系重合体、メタクリル酸系重合体及びメタクリル酸金属塩系重合体が包含され、之等各重合体は、その架橋型であってもよい。之等の内では、ポリアクリル酸もしくはポリアクリル酸アルカリ金属塩の架橋物が好適であり、更に該架橋物の一部がカルシウム塩の形態を有しているものが最適である。
【００１８】
また、上記架橋物には、何等の架橋剤を用いることなく得られた自己架橋体及び通常汎用される各種の架橋剤を用いて常法に従い架橋された架橋体が含まれる。
【００１９】
上記架橋剤としては、多価アリル類、多価ビニル類、多価エポキシ類、ハロエポキシ類、多価アルコール類、多価アミン類、ヒドロキシビニル類等の各種のものを利用することができる。代表的な架橋剤としては次のものを例示できる。
【００２０】
多価アリル類：Ｎ，Ｎ−ジアリルアクリルアミド及びＮ，Ｎ−ジアリルメタクリルアミド（之等を「Ｎ，Ｎ−ジアリル（メタ）アクリルアミド」と表記する、以下同じ）、ジアリルアミン、ジアリルメタクリルアミン、ジアリルフタレート、ジアリルマレート等の多価アリル系化合物。
【００２１】
多価ビニル類：ジビニルベンゼン、Ｎ，Ｎ′−メチレンビス（メタ）アクリルアミド、エチレングリコールジ（メタ）アクリレート及びポリエチレングリコールジ（メタ）アクリレート（之等を「（ポリ）エチレングリコールジ（メタ）アクリレート」と表記する、以下同じ）、（ポリ）プロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、トリメタロールプロパントリアクリレート等の多価ビニル系化合物。
【００２２】
多価エポキシ類：（ポリ）エチレングリコールジグリシジルエーテル、（ポリ）プロピレングリコールジグリシジルエーテル、グリセリン−１，３−ジグリシジルエーテル、トリメチロールプロパントリグリシジルエーテル、（ポリ）グリセリンポリグリシジルエーテル等のポリエポキシ化合物。
【００２３】
ハロエポキシ類：エピクロルヒドリン、α−メチルクロルヒドリン等。
【００２４】
多価アルコール類：（ポリ）グリセリン、（ポリ）エチレングリコール、トリメチロールプロパン、ペンタエリスリトール等。
【００２５】
多価アミン類：エチレンジアミン等。
【００２６】
更に、上記アクリル酸系重合体、アクリル酸金属塩系重合体、メタクリル酸系重合体及びメタクリル酸金属塩系重合体には、アクリル酸及びメタクリル酸のそれぞれのホモポリマー以外に、之等のコポリマーや、之等各モノマーとそれらと共重合可能な他のモノマーやグラフト重合可能なポリマーとのコポリマーも包含され、かかるコポリマーは、ランダム重合体であっても、ブロック重合体、グラフト重合体であってもよい。
【００２７】
ここで、（メタ）アクリル酸と共重合可能な他のモノマーとしては、例えばヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、（メトキシ）ポリエチレングリコール（メタ）アクリレート、グリセリン（メタ）アクリレート、グリコシルエチル（メタ）アクリレート等のアルキル（メタ）アクリレート類；Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、アクリルアミド等のアクリルアミド系化合物；マレイン酸及びその金属塩、イタコン酸及びその金属塩等のカルボン酸系化合物；２−アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸及びその金属塩、ビニルスルホン酸及びその金属塩、スチレンスルホン酸及びその金属塩等のスルホン酸系化合物；その他Ｎ−ビニルピロリドン等を例示できる。
【００２８】
また、（メタ）アクリル酸とグラフト重合可能なポリマーとしては、例えば澱粉、カラギーナン、アガロース、カルボキシメチルセルロース等の親水性多糖類等を例示できる。
【００２９】
上記各種の吸水性樹脂は、一部市販されており、また通常の方法により製造することができる。一般的な製造方法としては、例えばモノマー水溶液中でモノマーを重合させる方法（水溶液重合）、非水系有機溶剤中でモノマー水溶液の懸濁液をつくり、これを重合させる方法（逆相懸濁重合）、ポリマー水溶液を架橋剤を用いて架橋する方法（ポリマー架橋方法）等が知られており、本発明に利用する吸水性樹脂は、かかるいずれの方法によるものであってもよい。
【００３０】
特に、本発明有効成分として好適なものの一つである自己架橋型アクリル酸アルカリ金属塩系重合体は、水溶性ラジカル重合開始剤を用いて、アクリル酸アルカリ金属塩の高濃度水溶液を有機溶剤に懸濁、分散させて重合（逆相懸濁重合）させることにより製造される（例えば特公昭５４−３０７１０号公報参照）のが好適である。
【００３１】
また、本発明有効成分として特に好適なものの一つであるアルカリ金属原子の一部をカルシウムに置換した、自己架橋型アクリル酸金属塩系重合体は、例えばアクリル酸アルカリ金属塩とアクリル酸カルシウム塩の高濃度水溶液を有機溶剤に懸濁、分散させて重合させることにより、或いはより好ましくは、前記方法に従い得られる自己架橋型アクリル酸アルカリ金属塩の水膨潤ポリマーに塩化カルシウム水溶液を徐々に加えて、対イオン交換を行なうことにより、製造することができる。
【００３２】
かくして、本発明グアニジノ化合物低下剤の有効成分として利用できるアクリル系吸水性樹脂を製造できる。
【００３３】
本発明に特に好適な上記アクリル系樹脂としては、例えば生理食塩水吸水能（１ｇ当たりの生理食塩水の吸水量（ｍｌ））が、５〜１００程度、より好ましくは１５〜７０程度のものを例示できる。
【００３４】
本発明グアニジノ化合物低下剤は、上記の如くして得られるアクリル系吸水性樹脂を、入手される通常の形態、例えば粉末状、パウダー状、微粉末状、ビーズ状、フレーク状、ゲル状等の形態で、グアニジノ化合物の低下、水分、カリウムイオンの吸着除去を必要とする患者に経口投与することができ、また通常の経口投与剤と同様に、汎用される賦形剤等の医薬担体を用いて、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の適宜の形態に賦形して用いることもできる。
【００３５】
その投与量は、これを投与される血液透析患者及び保存期の患者の摂取した水分量に応じて任意に決定でき、特に制限されるものではない。例えば、７００ｍｌの水分を摂取した患者に本発明低下剤を適用する場合には、１日に有効成分量約５〜２０ｇ程度の範囲とするのがよく、この経口投与によって、上記摂取水分の約半量を吸着保持して体外に排泄でき、同時に体内に蓄積されるグアニジノ化合物を低下させ且つカリウムイオンをも吸着保持して体外に排出させることができる。
【００３６】
勿論、上記有効成分は、それ自体従来より消化性潰瘍治療剤や止血剤等として提案されているように、これを生体に適用しても毒性の実質的にない安全性を有するものであり、また、本発明に従う経口投与によっても、実質的に体内に吸収されることはなく、従ってその適用による安全性は保証されている。
【００３７】
かくして、本発明グアニジノ化合物低下剤の利用によれば、上記血液透析患者等の水分管理を容易なものとし、また血液透析時間を短縮させることができ、之等に伴われる患者の肉体的及び精神的苦痛を非常に軽減することができる。
【００３８】
【実施例】
以下、本発明を更に詳しく説明するため、本発明において有効成分として利用する吸水性樹脂の製造法を製造例として挙げ、次いで本発明グアニジノ化合物低下剤の処方例及びこれを用いた試験例を挙げる。
【００３９】
【製造例１】
ポリアクリル酸ナトリウム架橋体の製造
撹拌機、還流冷却器、滴下濾斗、窒素ガス導入管を付した５０００ｍｌの４つ口フラスコに、シクロヘキサン１６００ｍｌとソルビタンモノステアレート１６．３２ｇを仕込み、窒素ガスを吹き込んで溶存酸素を追い出しつつ、７５℃まで昇温した。
【００４０】
別のフラスコに、８０％アクリル酸５１０ｇを外部より冷却しつつ加え、３０％ＮａＯＨ水溶液５４４ｇを加えて中和し、次いで、過硫酸カリウム１．６２ｇを溶解した後、窒素ガスを吹き込んで水溶液に溶存する酸素を除去した。
【００４１】
フラスコ内容物を、上記４つ口フラスコに１時間を要して滴下し、重合反応を行なわせた。シクロヘキサンを減圧下に留去し、残った膨潤ポリマーを８０〜１００℃で減圧下に乾燥した。シクロヘキサン３００ｍｌを用いて回収した架橋ポリマーを２回洗浄して、ソルビタンモノステアレートを除去した。
【００４２】
かくして得られた架橋ポリマー１ｇ当たりの生理食塩水吸水能は、５３（ｇ）であった。以下、このポリマーを「ポリマーＡ」とする。
【００４３】
同様にして、架橋ポリマー１ｇ当たりの生理食塩水吸収能４８（ｇ）のポリマー（ポリマーＢ）及び同５８（ｇ）のポリマー（ポリマーＣ）を得た。
【００４４】
【製造例２】
ポリアクリル酸架橋体の製造
製造例１で得られたポリアクリル酸ナトリウム５０ｇを、塩酸７７．５ｇの水溶液１５リットル中に撹拌しながら加えた後、２日間放置して、ナトリウムイオンを水素イオンに置換させた。得られたポリマーを濾過して回収し、イオン交換水で洗浄後、３リットルのイオン交換水に加えてスラリー状とし、このスラリーから水と塩酸を蒸発留去して、乾燥したポリマーを得た。これを「ポリマーＤ」とする。
【００４５】
得られたポリマー中のＮａ含量は、５３０ｐｐｍであり、ポリマー中のアクリル酸ナトリウムは、９９％以上がアクリル酸に変換された。
【００４６】
このものの生理食塩水吸水能は１（ｇ）であった。
【００４７】
【製造例３】
ポリアクリル酸カルシウム架橋体の製造
製造例１で得られたポリアクリル酸ナトリウム１００ｇを、５リットルのイオン交換水中に投入して吸水させ、これに撹拌しながら０．２Ｍの塩化カルシウム水溶液２．４リットルを滴下して、所望のポリマーを得た。これを「ポリマーＥ」とする。
【００４８】
該ポリマーＥは、原料ポリマー中のアクリル酸ナトリウム９０％以上がアクリル酸カルシウムに変換されたものであり、このものの生理食塩水吸水能は１８．５（ｇ）であった。
【００４９】
【製造例４】
ポリメタクリル酸ナトリウム架橋体の製造
製造例１において、８０％アクリル酸の代わりに７０％メタクリル酸７１４ｇを用い、これを冷却しつつ、３０％ＮａＯＨ５４４ｇ水溶液中で中和し、次いで、メチレンビスアクリルアミド（架橋剤）０．０４ｇと過硫酸カリウム１．６３ｇとを溶解した後、窒素ガスを吹き込み、水溶液内に溶存する酸素を除去する以外は、同一操作を行なって、所望のポリマーを得た。これを「ポリマーＦ」とする。
【００５０】
このものの生理食塩水吸水能は４７（ｇ）であった。
【００５１】
【製造例５】
ポリメタクリル酸架橋体の製造
製造例２において、ポリアクリル酸ナトリウム架橋体の代わりに製造例４で得られたポリメタクリル酸ナトリウム架橋体５５ｇを用いる以外は、同様にして、所望のポリマーを得た。これを「ポリマーＧ」とする。
【００５２】
このものの生理食塩水吸水能は３１（ｇ）であった。
【００５３】
【製造例６】
ポリメタクリル酸カルシウム架橋体の製造
製造例３において、ポリアクリル酸ナトリウム架橋体の代わりに製造例４で得られたポリメタクリル酸ナトリウム架橋体１１０ｇを用いる以外は、同様にして、所望のポリマーを得た。これを「ポリマーＨ」とする。
【００５４】
このものの生理食塩水吸水能は２０（ｇ）であった。
【００５５】
【製造例７】
ポリアクリル酸ナトリウム＋カルシウム架橋体（Ｎａ／Ｃａ＝３／１）の製造
製造例１において、３０％ＮａＯＨ水溶液５４４ｇを用いて中和する代わりに、３０％ＮａＯＨ水溶液４０８ｇを用いて中和し、またＣａ（ＯＨ）2１２６ｇとイオン交換水１５０ｇからなる懸濁液による中和を行なう以外は、同様にして、所望のポリマーを得た。これを「ポリマーＩ」とする。
【００５６】
このもののカルシウム置換度は２５％であり、生理食塩水吸水能は４３（ｇ）であった。
【００５７】
【処方例１】
カプセル剤の製造
有効成分として製造例１で得たポリアクリル酸ナトリウムの自己架橋体（中和度：７２％、吸水能：５３、ポリマーＡ）を、所望の寸法を有する経口投与用ゼラチンカプセルに充填して、１カプセル当たりその２５０ｍｇ含有する硬質ゼラチンカプセル１０００個を調製した。
【００５８】
【処方例２】
カプセル剤の製造
有効成分としてポリマーＡ及び製造例３で得たポリアクリル酸カルシウムの自己架橋体（中和度：７０％、吸水能：１８．５、ポリマーＢ）を均一に混合して、所望の寸法を有する経口投与用ゼラチンカプセルに充填して、１カプセル当たりポリマーＡの１５０ｍｇ及びポリマーＢの１５０ｍｇをそれぞれ含有する硬質ゼラチンカプセル１０００個を調製した。
【００５９】
【薬理試験例１】
７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本チャールスリバー社産）を１群６−８匹に分け、１日目の午前中に全ラットにつき腎臓全摘出手術を行なった。即ち、ネンブタール麻酔下でラットの両背側面を除毛し、肋骨端で腹壁を背腹切開した。脂肪組織に包まれた腎臓を引き出し、腎動脈、腎静脈尿管を結紮した後、腎臓を切除し、腹壁と皮膚の切開部を縫合した。
【００６０】
供試薬剤としてのポリマーＡを市販のシソ油に懸濁させ、３００ｍｇ／ｍｌの投与液を作成した。一回の投与量は１ｍｌとした。投与は１日目の午後８時、２日目の午前８時、午後２時、午後８時及び３日目の午前８時の合計５回、それぞれ水１０ｍｌ、次いで上記供試薬剤の懸濁液１ｍｌを胃ゾンテを用いて経口的に実施した。最終投与後、各ラット屠殺し、採血後、解剖した（実験群）。
【００６１】
また水１０ｍｌを摂取させ、次いで上記供試薬剤の懸濁液に代えて供試薬剤を含まないシソ油のみ１ｍｌを同様にして投与した上記腎臓摘出ラットからなる対照群を作成した。
【００６２】
更に、正常ラット（腎臓摘出手術を行なっていないラット）に水を自由摂取させ、次いで上記供試薬剤の懸濁液に代えて供試薬剤を含まないシソ油のみ１ｍｌを同様にして投与した参考群を設けた。
【００６３】
尚、実験期間中、各群のラットには自由摂餌させたが、摂水量は上記経口投与による負荷量のみとした。
【００６４】
上記実験において、各群のラットの実験前（懸濁液投与前）体重及び実験終了後（３日目の午後２時における最終投与後解剖前）体重をそれぞれ測定した。また、体中水分率を以下の方法により測定した。
【００６５】
即ち、実験終了後、各ラットを屠殺し、採血後、内臓、脂肪及び消化管を切除し、ラット重量（大部分は骨と筋肉と皮膚から構成される、以下「乾燥前重量」という）を測定し、その後１週間７０℃で乾燥し、その重量（以下「乾燥後重量」という）を測定し、上記乾燥前重量より乾燥後重量を差し引いた値を体内に蓄積された水分量として、これを乾燥前重量で除した値を体中水分率として求めた。
【００６６】
更に、採血した血液（血清）について、イオン電極法により血清ナトリウム、カリウム及びクロールイオン濃度を測定した。
【００６７】
各測定値は、分散分析後、Dunnett-Two Tail法により統計処理し、検定した。
【００６８】
得られた結果（平均±Ｓ．Ｅ．）を、下記図１（体重変動）、図２（体中水分率）及び表１（血清ナトリウム、カリウム及びクロールイオン濃度）に示す。
【００６９】
各図において、（１）は対照群（ｎ＝８）を、（２）は供試薬剤の３００ｍｇ／回投与実験群（ｎ＝７）を、（３）は参考群（ｎ＝６）をそれぞれ示し、また図中、黒星印は上記統計処理による対照群（１）に対するｐ＜０．０１を示す。
【００７０】
【表１】
0003885130.tif 000002
【００７１】
上記結果より次のことが明らかである。
【００７２】
即ち、図１より、対照群（１）では平均約３０ｇの体重増加が認められたが、本発明の供試薬剤３００ｍｇ／回投与実験群（２）の体重増加は平均約１０ｇであり、これは参考群（３）と略々同等であることが判る。
【００７３】
図２によれば、対照群（１）の体中水分率は平均０．７０９であるのに対して、供試薬剤３００ｍｇ／回投与実験群（２）のそれは平均０．６９１であり、これは対照群に比して有意（ｐ＜０．０１）に体中水分の蓄積を抑制したことが明らかである。
【００７４】
また、表１によれば、腎臓摘出によって、血清カリウム濃度は正常ラットに比して有意に高値を示す一方、血清ナトリウム及びクロール濃度は有意に低値を示すことが判る（参考群（３）と対照群（１）との対比）。
【００７５】
しかるに、本発明に係わる供試薬剤３００ｍｇ／回投与実験群（２）では、上記対照群（１）に見られる血清カリウム濃度の著名な上昇及び血清ナトリウム濃度の低下を、顕著に抑制できることが明らかである。
【００７６】
【薬理試験例２】
８週齢のウイスター（Wister）系雄性ラット（日本チャールスリバー社産）を１群８匹（各ラットの体重により群分けした）用い、１日目の午後に全ラットにつき腎臓全摘出手術を行なった。即ち、ネンブタール麻酔下でラットの両背側面を除毛し、肋骨端で腹壁を背腹切開した。脂肪組織に包まれた腎臓を引き出し、腎動脈、腎静脈尿管を結紮した後、腎臓を切除し、腹壁と皮膚の切開部を縫合した。
【００７７】
供試薬剤として、ポリアクリル酸ナトリウム（食品添加物グレード、ワコー社製、以下「ポリマーＪ」とする）、ポリマーＢ、Ｃ、Ｄ及びＥのそれぞれを、市販のシソ油に懸濁させ、２５０ｍｇ／ｍｌ及び１００ｍｇ／ｍｌの投与液を作成した。一回の投与量は１ｍｌとした。投与は１日目の午後９時、２日目の午前９時及び午後９時の合計３回、それぞれ水１５ｍｌ、次いで上記供試薬剤の懸濁液１ｍｌを胃ゾンテを用いて経口的に実施した。最終投与後、各ラット屠殺し、採血後、解剖した（実験群）。
【００７８】
また上記供試薬剤の懸濁液に代えて供試薬剤を含まないシソ油のみ１ｍｌと水１５ｍｌとを、同様にして投与した上記腎臓摘出ラットからなる対照群を作成した。
【００７９】
尚、参考群として、上記腎臓摘出手術に代えて、腹壁を切開後、腎臓摘出を行なうことなく切開部を縫合したラットについて、上記と同様に吸水制限を行なった群（参考Ｉ群）及び水を自由摂取させた群（参考II群）を設けた。
【００８０】
実験期間中、各群のラットには自由摂餌させたが、摂水量は上記経口投与による負荷量のみとした。
【００８１】
上記実験において、各群のラットの実験前（懸濁液投与前）体重及び実験終了後（３日目の午前９時における解剖前）体重をそれぞれ測定した。また、体中水分率を以下の方法により測定した。
【００８２】
即ち、実験終了後、各ラットを屠殺し、採血後、内臓、脂肪及び消化管を切除し、ラット重量（大部分は骨と筋肉と皮膚から構成される、以下「乾燥前重量」という）を測定し、その後１週間７０℃で乾燥し、その重量（以下「乾燥後重量」という）を測定し、上記乾燥前重量より乾燥後重量を差し引いた値を体内に蓄積された水分量として、これを乾燥前重量で除した値を体中水分率として求めた。
【００８３】
更に、採血した血液（血清）について、イオン電極法により血清ナトリウム、カリウム、クロール及びマグネシウムイオン濃度を測定した。
【００８４】
血漿については、強酸性陽イオン交換樹脂で分離したグアニジノ化合物をアルカリ性下でニンヒドリンと反応させ、得られた蛍光強度を測定することにより、各グアニジノ化合物を定量した〔Hiraga,Y. et al., J. Chematography, 226, 43-51 (1981) : 佐々木ら、日本臨床、４７、１９８９増刊号、397-401 (1989)〕。
【００８５】
各測定値は、分散分析後、Dunnett-Two Tail法により統計処理し、検定した。
【００８６】
得られた結果（平均±Ｓ．Ｄ．）を、図３（体重変化量）、図４（体中水分率）、表２（血清カリウム及びマグネシウムイオン濃度）及び図５（血中グアニジノ化合物濃度）に示す。
【００８７】
各図及び表において、（１）は参考Ｉ群を、（２）は参考II群を、（３）は対照群を、（４）はポリマーＪ投与実験群を、（５）はポリマーＢ投与実験群を、（６）はポリマーＣ投与実験群を、（７）はポリマーＥ投与実験群を、（８）はポリマーＤ投与実験群をそれぞれ示す。
【００８８】
また、図３及び図５の各実験群における白抜き棒グラフは、供試薬剤１００ｍｇ／ｍｌ投与の場合を、黒塗り棒グラフは、供試薬剤２５０ｍｇ／ｍｌ投与の場合を示し、図４の結果は、供試薬剤２５０ｍｇ／ｍｌ投与の結果である。
【００８９】
星印は統計処理による対照群（３）に対するｐ＜０．０５を示す。
【００９０】
【表２】
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【００９１】
上記結果より次のことが明らかである。
【００９２】
即ち、図３より、対照群（３）では平均約２５ｇの体重増加が認められたのに対して、本発明供試薬剤２５０ｍｇ投与の実験群（４）、（５）及び（６）における体重増加は、１０〜１５ｇ程度であり、対照群（３）と比較して統計学的に有意（ｐ＜０．０５）な差が認められた。
【００９３】
図４によれば、対照群（３）の体中水分率は、平均０．７１０であったのに対して、本発明供試薬剤２５０ｍｇ投与実験群（４）、（５）、（６）及び（８）では、対照群（３）に比して有意（ｐ＜０．０５）に体中水分の蓄積を抑制したことが明らかである。尚、ポリマーＥ投与の実験群（７）については、統計学的有意差は認められないものの、体中水分の蓄積は抑制される傾向のあることが明らかである。
【００９４】
表２によれば、腎臓摘出によって、血清カリウムイオン濃度は、正常ラット（参考群）に比して高値を示すことが確認された（対照群参照）。これに対して、本発明供試薬剤２５０ｍｇ／ｍｌ投与の実験群（４）、（５）及び（６）では、上記対照群に認められるような血清カリウムイオンの著明な上昇は認められず、有意（ｐ＜０．０５）に低値を示すこと、即ち、カリウムイオン濃度の上昇を顕著に抑制できることが判る。
【００９５】
更に、図５によれば、参考Ｉ群及び参考II群における血中グアニジノ化合物（グアニジノ酪酸（ＧＢＡ）、グアニジノプロピオン酸（ＧＰＡ）及びメチルグアニジン（ＭＧ））濃度は、いずれも検出限界値以下であるのに対して、腎臓全摘出によれば、之等のグアニジノ化合物濃度が顕著に上昇し、血中に貯留してくる（対照群（３）参照）。
【００９６】
本発明に係わる供試薬剤の２５０ｍｇ投与実験群（４）、（５）、（６）、（７）及び（８）では、上記対照群（３）に見られる血中グアニジノ化合物濃度の著明な上昇（血中への貯留）を、抑制できることが明らかとなった。
【図面の簡単な説明】
【図１】薬理試験例１に従い測定された供試動物の体重変化量を示すグラフである。
【図２】薬理試験例１に従い測定された供試動物の体中水分率を示すグラフである。
【図３】薬理試験例２に従い測定された供試動物の体重変化量を示すグラフである。
【図４】薬理試験例２に従い測定された供試動物の体中水分率を示すグラフである。
【図５】薬理試験例２に従い測定された供試動物の血中グアニジノ化合物濃度を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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