(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンゴスチン(Garcinia mangostana L.)の果皮の極性溶媒で抽出した抽出物からなる抗アレルギー剤。
【請求項２】
極性溶媒抽出物がメタノール抽出物またはエタノール抽出物であることを特徴とする請求項１記載の抗アレルギー剤。
【請求項３】
式：
【化１】
0003968405.tif 000004
で表されるＲがＣＨ３であるα−マンゴスチンおよび／またはＲがＨであるγ−マンゴスチンを有効成分として含有することを特徴とする抗アレルギー剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、マンゴスチン由来の抗アレルギー剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
アレルギーや炎症は、その発症メカニズムとして化学伝達物質であるヒスタミンやセロトニンなどが各々の受容体に結合し、例えば血管では透過性の亢進、気管および気管支等の平滑筋では収縮、皮膚では発赤、浮腫等を引き起こすといわれている。従って、これらの症状を抑制するために、ヒスタミンやセロトニン等化学物質の受容体への結合を阻害することによりその作用発現を抑制することができ、既に医薬品として化学伝達物質の受容体拮抗薬が開発されている。しかし、副作用がなく、手軽に利用できる形のものは少ない。従来、この効果を有する天然物からの抽出物に求める研究が行われていたが、その薬理作用および有効成分についてはあまり知られていない。
【０００３】
マンゴスチンの果皮については、原産国のタイでは民間薬として、下痢止めや炎症の治療に用いられてきた。マンゴスチンについては、特開平4-244004号公報（化粧料）では果皮の水溶性溶媒抽出物が抗炎症作用を有するとしているが、その作用メカニズムや有効成分については明らかにされていない。その他食品保存剤（特開平7-147951号公報）、テストステロン  ５α−レダクターゼ阻害剤（特開平5-17365 号公報）、抗菌剤（特開平7-250658号公報）が特許出願されているが、抗アレルギーに関するものは知られていない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明の目的は、マンゴスチン(Garcinia mangostana L.)の果皮の極性溶媒抽出物、α−マンゴスチンおよび／またはγ−マンゴスチンを有効成分とする抗アレルギー剤を提供することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、低毒性で有用な抗アレルギー剤を得る目的で、マンゴスチンの果皮から極性溶媒を用いて抽出し、さらに抽出物に含まれる数種の成分を単離し、抽出物および成分の各々に関して抗アレルギー剤としての効果を試験した結果、該抽出物、および次式：
【化２】
0003968405.tif 000002
で表されるＲがＣＨ3 であるα−マンゴスチンおよび／またはＲがＨであるγ−マンゴスチンが優れた抗アレルギー作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
【０００６】
即ち、本発明は、マンゴスチン(Garcinia mangostana L.)の果皮の極性溶媒抽出物および、該抽出物から単離されるα−マンゴスチンおよび／またはγ−マンゴスチンを有効成分として含有することを特徴とする抗アレルギー剤に関する。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明によれば、有効なマンゴスチンの果皮の極性溶媒抽出物は、下記する方法で抽出することができる。
【０００８】
マンゴスチンの果皮は、マンゴスチン果実（生または乾燥品）から得られるものを使用することができる。マンゴスチンの果皮はそのまま使用できるが、その抽出効率が高くなるという理由から、破砕または粉末とした後に抽出するのが好適である。また、抽出の前にマンゴスチン果皮を非極性溶媒で脱脂することもできる。
【０００９】
抽出は、極性溶媒であるメタノール，エタノール，ｎ−プロパノール，イソプロパノール，ｎ−ブタノール，アセトン，酢酸エチルおよび水からなる群から選択される極性溶媒の少なくとも１種の溶媒を適用して実施する。２種類以上の溶媒を組み合わせて実施することもできる。抽出温度は特に規定はしないが、抽出効率の点で、室温から溶媒の沸点温度の範囲が好適である。抽出時間は、溶媒の種類、果皮の状態（生または乾燥品、粉砕物または粉末等）および抽出温度により変化するが、０．５〜２４時間の範囲が好適である。
【００１０】
本発明によれば、α−マンゴスチンおよびγ−マンゴスチンは、マンゴスチン果皮の極性溶媒抽出物から製造することができる。マンゴスチンの果皮の極性溶媒抽出物、α−マンゴスチンおよびγ−マンゴスチンを単独、あるいは他の医薬または任意の製剤用担体乃至希釈剤と混合した任意の剤形にして医薬として利用でき、またその有効成分を各種の食品に配合して抗アレルギー食品を製造することができる。例えば、経口投与剤として錠剤、顆粒剤、細粒剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、経口用液体製剤等を例示できる。
【００１１】
本発明の抗アレルギー剤は、清涼飲料、菓子、冷菓、乳製品、酒類および肉類等の食品に添加することができる。
【００１２】
抗アレルギー剤としての抽出物、α−マンゴスチンおよび／またはγ−マンゴスチンの投与量は投与方法および必要な治療によって変化するので一概には規定できないが、抽出物は動物１ｋｇ当たり５〜５０００ｍｇ、ヒトに対しては１日当たり全投与量５０ｍｇ〜５０ｇ、好ましくは５０ｍｇ〜１０ｇであり、α−マンゴスチンおよびγ−マンゴスチンは動物体重１ｋｇ当たり０．２〜２００ｍｇ、ヒトに対しては１日当たり全投与量２〜２０００ｍｇ、好ましくは１０〜１０００ｍｇである。本発明の抗アレルギー剤を投与するにあたり、各々の投与量の最小値未満では十分な効果が望めず、最大値を超えて投与しても効果の増強が無く効率が悪い。本発明の抗アレルギー食品の有効成分としての抽出物、α−マンゴスチンおよび／またはγ−マンゴスチンは、食品としての１日通常摂取量で上記の有効量を満たすよう配合量を規定することができる。
【００１３】
一般的に医薬品をヒトに投与するにはその安全性が問われるが、マンゴスチン果皮の水溶性（または親水性）有機溶媒抽出物において種々の安全性試験が実施されている。例えば、マウスを用いて経口投与による急性毒性試験が行われ、前記抽出物を１０ｇ／ｋｇを投与しても死亡例が認められず（特開平5-17365 号公報、第４５９〜４６０頁、段落番号［００１５］）、またマンゴスチン果皮抽出物の皮膚塗布によるヒトに対する刺激性試験も行われており、皮膚には紅斑等の反応が全く認められていない（特開平4-244004号公報、第２７頁、段落番号［００４７］）等、マンゴスチン果皮抽出物は哺乳動物およびヒトに対する投与においてその安全性は既に証明されている。従って、本発明の抗アレルギー剤をヒトが摂取する場合においても、安全性について問題はない。
【００１４】
【実施例】
以下に本発明を例を挙げてさらに詳細に説明するが、本発明の範囲は以下の例のみに限定されるものではない。
【００１５】
まず、マンゴスチンの果皮から抗アレルギー作用を有する抽出物の抽出、ならびにα−マンゴスチンおよびγ−マンゴスチンを製造した例を示す。次に抗アレルギー効果を試験する実験方法およびその結果、本発明の抗アレルギー剤および本発明の抗アレルギー剤を含有する食品の作製例、さらにヒトに対する本発明の抗アレルギー剤の効果試験およびその結果を示す。
【００１６】
抽出例１
マンゴスチンの未乾燥果皮１ｋｇを１０ｌのメタノールに浸漬し、２４時間室温下抽出した。これを濾過し、その後濾液をエバポレーターで減圧乾燥し、８０ｇの抽出物１を得た。
【００１７】
抽出例２
マンゴスチンの乾燥果皮１ｋｇを粉砕し、５ｌのエタノール中で５時間、６０℃で攪拌抽出した。これを濾過し、その後濾液をエバポレーターで減圧乾燥し、１０８ｇの抽出物２を得た。
【００１８】
α−マンゴスチンおよびγ−マンゴスチンの製造例
８０ｇの抽出物１を３５０ｍｌの酢酸エチルに溶解後、２０ｍｌの水を用いて２回洗浄した。酢酸エチル画分をエバポレーターを用いて溶媒を留去させ、２０ｇの乾燥物を得た。この乾燥物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（８００ｇ）を用いて精製した。溶出は、ヘキサン−酢酸エチルの系により、徐々に酢酸エチルの構成比を増加させるグラジエント溶出法により実施した。溶出物を薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）分析により、３つの画分に分けた。薄層クロマトグラフィーの展開溶媒はヘキサン−酢酸エチル（５０：５０もしくは３０：７０）を用いて実施し、検出にはアニスアルデヒドを用いた。最初の画分（５ｇ）をヘキサンで調製したシリカゲルカラムクロマトグラフィーにのせ、溶出はヘキサン−酢酸エチル（５０：５０→３０：７０→１０：９０）用いて実施し、黄色針状結晶のα−マンゴスチン（Ｃ24Ｈ26Ｏ6 ，ｍｐ  １８０〜１８１℃）を２ｇ得た。２つめの画分（２ｇ）も同様に再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００ｇ）により精製した。溶出は、ヘキサン−酢酸エチル（５０：５０→３０：７０）、続いて酢酸エチルのみ、さらに酢酸エチル−メタノール（５０：５０）で実施した。これにより黄色非結晶状のγ−マンゴスチン（Ｃ23Ｈ24Ｏ6 ，ｍｐ  ２０６〜２１０℃）を５００ｍｇ得た。これらは既知物質であり、既に報告の１Ｈ−ＮＭＲ，13Ｃ−ＮＭＲ，ＭＳ，ＵＶスペクトルデータと比較して、得られた精製物が各々α−マンゴスチン、γ−マンゴスチンであることを確認した。
【００１９】
実験例１および２
抗ヒスタミン薬の実験法として知られているマグヌス法（「医薬品の開発」、第９巻「医薬品の探索III 」、第10.1章「抗ヒスタミン薬」、廣川書店、東京、第１７頁、平成２年２月２６日発行）に従い、雄アルビノラビットの大動脈の螺旋状切片を（２×１５ｍｍ）を得て、これをマグヌス槽の３７℃のクレブス  リンガー液（ｐＨ７．４）中に１Ｇの重力下につるし、９５％酸素−５％二酸化炭素を通気した。マグヌス槽中に血管を収縮させる収縮剤を添加すると、大動脈切片は収縮するが、その収縮応力をトランスデューサにより測定した。収縮剤としてアレルギー反応化学伝達物質である、ヒスタミン（図１）を０．３〜５００μＭの範囲の濃度で、およびセロトニン（図２）を０．１〜５００μＭの範囲の濃度で用いた。収縮剤と共に本発明の抽出物１および２（５または１０μｇ／ｍｌ）、α−マンゴスチン（５μＭ）またはγ−マンゴスチン（５μＭ）を添加し、大動脈切片の収縮を測定し、アレルギー反応による血管の収縮に対する本発明の抗アレルギー剤の抗アレルギー効果を試験し、その結果を図１（ヒスタミン）および図２（セロトニン）で示した。
【００２０】
ヒスタミン０．４ｍＭもしくはセロトニン０．５ｍＭの存在下における前記大動脈切片の収縮応力を１００％とし、抗アレルギー剤無添加での実験をコントロールとした。
【００２１】
これらの実験では、各々の収縮剤の濃度において収縮率がコントロールより低い場合、本発明の抗アレルギー剤によってアレルギー反応が阻害されたことを意味し、その効果が大きい程、算出される収縮率は小さくなる。
【００２２】
実験例１（図１参照）
γ−マンゴスチンの添加により収縮率の低下は観察されないが、α−マンゴスチン、抽出物１および２の添加により収縮率の低下が観察された。また、α−マンゴスチン、抽出物１および２を添加した場合、コントロールと同程度の血管収縮を誘発するには、非常に高濃度のヒスタミンが必要であることが明らかになった。従って、γ−マンゴスチンはヒスタミンに起因するアレルギー反応を阻害しないが、α−マンゴスチン、抽出物１および２はヒスタミンに起因するアレルギー反応を阻害した。
【００２３】
実験例２（図２参照）
α−マンゴスチンの添加により収縮率は低下しないが、抽出物１および２の添加によりわずかに収縮率が低下し、γ−マンゴスチンの添加により収縮率が大幅に低下した。また、γ−マンゴスチンを添加した場合、コントロールと同程度の血管収縮を誘発するには、非常に高濃度のセロトニンが必要であることが明らかになった。従って、α−マンゴスチンはセロトニンに起因するアレルギー反応を阻害しないが、抽出物１および２はセロトニンに起因するアレルギー反応をわずかに阻害し、γ−マンゴスチンはセロトニンに起因するアレルギー反応を阻害した。
【００２４】
これらの結果は、α−マンゴスチンはヒスタミンに対し拮抗作用による阻害効果を有し、γ−マンゴスチンはセロトニンに対し拮抗作用による阻害効果を有していることを示し、本発明の抗アレルギー剤はヒスタミンおよび／またはセロトニンに起因するアレルギー反応に対し抗アレルギー効果を有することを示唆している。
【００２５】
［実施例１］
以下に示す処方にて散剤を調製した。
乳糖                                ２５部
馬鈴薯デンプン                      １０部
抽出物１                            ５部
【００２６】
［実施例２］
以下に示す処方にて錠剤を調製した。
Ｄ−マンニトール                    １０部
乳糖                                １０部
結晶セルロース                      ２部
ヒドロキシプロピルセルロース        １部
α−マンゴスチン                    ０．５部
【００２７】
［実施例３］
以下に示す処方にてキャンディを作製した。
グラニュー糖                        ４５部
水飴（Ｄ．Ｅ．４２）                ５０部
水                                  ２０部
γ−マンゴスチン                    ０．５部
香料（ペパーミントオイル）          ０．３部
【００２８】
［実施例４］
以下に示す処方にて慣用的に用いられる情報に従ってチョコレートを作製した。
カカオビター                        ２０部
カカオバター                        １７部
砂糖                                ４３部
全脂粉乳                            ２０部
抽出物２                            １部
香料（バニラフレーバー）            ０．２部
【００２９】
［実施例５］
以下に示す処方にて慣用的に用いられる情報に従ってチューインガムを作製した。
ガムベース                          ２０部
砂糖                                ５６部
水飴                                １３部
ブドウ糖                            １０部
軟化剤（グリセリン）                １部
α−マンゴスチン                    ０．５部
香料（ペパーミントオイル）          １部
【００３０】
［試験例１］
ヒトに対する効果試験
花粉症の症状を有する２０名を対象に、本発明の抗アレルギー剤のヒトに対する抗アレルギー効果の試験を実施した。
【００３１】
実施例２に従い、抽出物２（７５ｍｇ）、α−マンゴスチン（２５ｍｇ）またはγ−マンゴスチン（２５ｍｇ）を含有する錠剤を調製し、下記する１日当たりの摂取量になるように、朝晩各２錠ずつ計４錠／日を経口摂取した。
【００３２】
本発明の抗アレルギー剤の１日当たりの摂取量    
抽出物２                        ３００ｍｇ／日
α−マンゴスチン                １００ｍｇ／日
γ−マンゴスチン                １００ｍｇ／日
【００３３】
抗アレルギー剤を含有する錠剤の摂取期間は４週間とし、その後各自アンケートにより著効、有効、やや有効、不変、悪化の５段階で自己評価した。評価対象は、くしゃみ発作、鼻汁、鼻閉とし、これらの結果を表１に示す。
【００３４】
【表１】
0003968405.tif 000003
【００３５】
本発明の抗アレルギー剤を含有する錠剤を摂取することにより、くしゃみの発作は３０〜４０％、鼻汁は３０〜４０％、鼻閉は１０〜１５％の症状の改善が認められた。
【００３６】
これらの結果から、３種の本発明の抗アレルギー剤（抽出物２、α−マンゴスチンおよびγ−マンゴスチン）は、アレルギーの症状であるくしゃみ発作、鼻汁および鼻閉に対し、これらの症状を改善する効果を有することが確認された。
【００３７】
実験例および試験例の結果から、本発明の抗アレルギー剤は、哺乳動物の花粉症、枯草熱、アレルギー性鼻炎、喘息、アトピー性皮膚炎または結膜炎等のアレルギーの治療に有用な抗アレルギー剤として特徴づけられる。
【００３８】
【発明の効果】
本発明により、天然物からの抽出物であり、安全性が高くかつ優れた抗アレルギー効果を有するマンゴスチン(Garcinia mangostana L.)果皮の極性溶媒抽出物およびα−マンゴスチンおよび／またはγ−マンゴスチンを有効成分とする抗アレルギー剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【図１】化学伝達物質ヒスタミンに起因するアレルギー反応に対する本発明の抽出物１、抽出物２、α−マンゴスチンおよびγ−マンゴスチンの抗アレルギー効果を示すグラフである。
【図２】化学伝達物質セロトニンに起因するアレルギー反応に対する本発明の抽出物１、抽出物２、α−マンゴスチンおよびγ−マンゴスチンの抗アレルギー効果を示すグラフである。
【図１】
0003968405.tif 000005
【図２】
0003968405.tif 000006