(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記成分ａ）とｂ）の反応生成物からなるアルキル化架橋ポリマーであって、
ａ）下記式から成る群から選ばれた反復単位を有する、
0003931217.tif 000004
１つ以上の架橋ポリマーまたはその塩またはその共重合体、ここで、ｎは正の整数であり、各Ｒはそれぞれ独立にＨまたはＣ1−Ｃ8アルキル基である、および
ｂ）式ＲＸを有し、ここで、ＲはＣ1−Ｃ20アルキルアンモニウム基であり、Ｘは１つ以上の求電子脱離基である、少なくとも１つのアルキル化剤、
該反応生成物が、
（ｉ）該反復単位中の窒素原子のうちの少なくとも一部は該アルキル化剤と反応していないこと、および
（ｉｉ）該アルキル化剤と反応する該反復単位中の窒素原子の１０モル％未満のものが四級アンモニウム単位を形成すること、
で特徴づけられる、アルキル化架橋ポリマー。
【請求項２】
下記成分ａ）とｂ）の反応生成物からなるアルキル化架橋ポリマーであって、
ａ）下記式を有する反復単位を有する、
0003931217.tif 000005
１つ以上の架橋ポリマーまたはその塩またはその共重合体、ここで、ｎは正の整数であり、各Ｒはそれぞれ独立にＨまたはＣ1−Ｃ8アルキル基であり、および
ｂ）式ＲＸを有し、ここで、ＲはＣ1−Ｃ20アルキルアンモニウム基であり、Ｘは１つ以上の求電子脱離基である、少なくとも１つのアルキル化剤、
該反応生成物が、
（ｉ）該反復単位中の窒素原子のうちの少なくとも一部は該アルキル化剤と反応していないこと、および
（ｉｉ）該アルキル化剤と反応する該反復単位中の窒素原子の１０モル％未満のものが四級アンモニウム単位を形成すること、
で特徴づけられる、アルキル化架橋ポリマー。
【請求項３】
該ポリマーが多官能架橋剤によって架橋され、該剤の存在量がモノマーと架橋剤の合計重量の１〜２５重量％である請求項１または２記載のポリマー。
【請求項４】
該架橋剤の存在量がモノマーと架橋剤の合計重量の２．５〜２０重量％である請求項３記載のポリマー。
【請求項５】
該架橋剤がエピクロロヒドリンからなる請求項３または４記載のポリマー。
【請求項６】
成分ａ）における反復単位のＲがＨである請求項１〜５いずれか記載のポリマー。
【請求項７】
式Ｒ’Ｘ（ここで、Ｒ’はＣ1−Ｃ20アルキル基、Ｃ1−Ｃ20ヒドロキシアルキル基、Ｃ1−Ｃ20アルキルアンモニウム基、またはＣ1−Ｃ20アルキルアミド基であり、Ｘは１つ以上の求電子脱離基を表す）を有する第二のアルキル化剤と反応したものである、請求項１〜６いずれか記載のポリマー。
【請求項８】
Ｒ’Ｘ及びＲＸにおけるＸが、独立して、ハロゲン化物、エポキシ、トシレート、またはメシレート基である請求項７記載のポリマー。
【請求項９】
Ｒ’はＣ1−Ｃ20アルキル基である、請求項７記載のポリマー。
【請求項１０】
該アルキル化剤Ｒ’Ｘのうち１つがアルキルハライドであり、他方の該アルキル化剤ＲＸがアルキルハライドアンモニウム塩である請求項９記載のポリマー。
【請求項１１】
該アルキルハライドがＣ4−Ｃ20アルキルハライドであり、該アルキルハライドアンモニウム塩がＣ4−Ｃ18アルキルハライドアンモニウム塩である請求項１０記載のポリマー。
【請求項１２】
該アルキルハライドがＣ10アルキルハライドであり、該アルキルハライドアンモニウム塩がＣ6アルキルハライドアンモニウム塩である請求項１１記載のポリマー。
【請求項１３】
Ｃ1−Ｃ20ジハロアルカンである、第二のアルキル化剤と反応したものである、請求項１〜６いずれか記載のポリマー。
【請求項１４】
治療上有効量の請求項１〜１３いずれかに記載のポリマーを含んでなる医薬組成物。
【請求項１５】
請求項１〜１３いずれかに記載のポリマーを含んでなる、患者からの胆汁酸塩除去剤。
【請求項１６】
該組成物が、患者から胆汁酸塩を除去するために投与されるものである、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１７】
治療に使用する医薬の製造のための請求項１〜１３いずれかに記載のポリマーの使用。
【請求項１８】
該治療が、患者から胆汁酸塩を除去することである、請求項１７記載の使用。
【発明の詳細な説明】
発明の背景
本発明は患者から胆汁酸塩を除去する方法に関する。
胆汁酸の塩は、界面活性剤として食物脂肪を可溶化させて、結果としてその消化を助ける働きをする。胆汁酸は胆汁酸塩の前駆体であり、コレステロールに由来するものである。消化後の胆汁酸は空腸に受動的に吸収され得るが、コンジュゲート化（conjugated）一次胆汁酸の場合は能動輸送によって回腸に再吸収され得る。能動輸送によって再吸収されない胆汁酸は遠位回腸および大腸の中で細菌の作用によって脱コンジュゲート化され脱水酸化される。
腸からの胆汁酸の再吸収によって、血流中にリポタンパクコレステロールが維持される。逆に、胆汁酸の再吸収を減らすことによって血中コレステロール値を下げることができる。
再吸収される胆汁酸の量を減らす１つの方法は、胆汁酸を隔離（sequester）させるがそれ自体は吸収されない化合物の経口投与である。その結果、隔離された胆汁酸は細菌作用によって分解するか、排泄される。
ところが、多くの胆汁酸隔離剤（sequestrants）は、コンジュゲート化コール酸やケノデオキシコール酸などのコンジュゲート化一次胆汁酸よりも、比較的疎水性の胆汁酸とより結合しやすい。さらに、回腸内での能動輸送は、隔離されたコンジュゲート化一次胆汁酸の実質的な部分の脱着を引き起こし、再吸収のための遊離胆汁酸プールに入れてしまう。また、安全に摂取できる隔離剤の量は限られている。その結果、隔離剤の血中コレステロール値低下効果も制限されてしまう。
患者の体内で胆汁酸塩（たとえばコール酸塩、グリココール酸塩、グリコケノコール酸塩、タウロコール酸塩、およびデオキシコール酸塩）を隔離、除去する方法を用いて、その患者のコレステロール値を低下させることができる。胆汁酸塩の生物学的前駆体はコレステロールであるため、胆汁酸塩を生成するコレステロール代謝には、同時にその患者の体内のコレステロール値の低下が伴う。
ポリスチレン／ジビニルベンゼンアンモニウムイオン交換樹脂であるコレスチルアミンを摂取すると、消化管を介して胆汁酸塩が除去されるが、この樹脂は食味が悪く、ザラザラしており、便秘を引き起こしやすい。したがって、これらの欠点を回避し（完全に、または部分的に）および／または改善された胆汁酸塩隔離性を有する樹脂が求められている。
発明の概要
本発明は、新規イオン交換樹脂が従来より向上した胆汁酸塩隔離性を有するとともにザラザラした舌ざわりがほとんどまたはまったくないことで、組成物の食味を改善するという発見に係るものである。
該樹脂は、１つ以上の疎水性置換基を有するものであり、さらに１つ以上の四級アンモニウム含有置換基を有することを特徴とする架橋ポリアミンから成る。
一般に、本発明は、樹脂および、下記成分（ａ）と（ｂ）の反応生成物の治療上有効量を患者に投与することを含む、患者から胆汁酸塩を除去するための樹脂の用途を特徴とする。
（ａ）必須として下記のものから成る群から選ばれた反復単位（repeat unit）、
0003931217.tif 000002
並びにそれらの塩および共重合体を含むことを特徴とする１つ以上の架橋ポリマー、ここで、ｎは整数であり、各Ｒはそれぞれ独立にＨまたは置換もしくは未置換のアルキル基（たとえばＣ1−Ｃ8アルキル）である、および
（ｂ）少なくとも１つのアルキル化剤。反応生成物は、（ｉ）反復単位中の窒素原子のうちの少なくとも一部はアルキル化剤と反応していないこと、（ｉｉ）アルキル化剤と反応する反復単位中の窒素原子の１０モル％未満のものが四級アンモニウム単位を形成すること、および（ｉｉｉ）反応生成物はいったん摂取されると無毒で安定であることが好ましいことを特徴とするものである。
適当な置換基としては、たとえば四級アンモニウム、アミン、アルキルアミン、ジアルキルアミン、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロゲン、カルボキサミド、スルホンアミド、およびカルボン酸エステルなどが挙げられる。
好ましい態様においては、反応生成物を構成する化合物（ａ）のポリアミンを多官能架橋剤によって架橋させるが、該剤の存在量はモノマーと架橋剤の合計重量の約０．５〜２５重量％（より好ましくは約２．５〜２０重量％、最も好ましくは１〜１０重量％）である。好ましい架橋剤としては、入手が容易で低価格であることからエピクロロヒドリンが挙げられる。エピクロロヒドリンは、分子量が低いことと親水性を示すことからポリアミンの水分膨潤性とゲル特性を向上させるという利点もある。
本発明はまた、上記反応生成物を成分とする組成物を特徴とする。
本発明は、患者から胆汁酸塩を除去する（結果としてその患者のコレステロール値を低下させる）ための有効な治療法を提供する。該組成物は、治療上有効量で摂取されたときに無毒で安定である。
本発明の上記以外の特徴および利点については、好ましい態様に関する以下の説明および請求の範囲から明らかになる。
発明の詳細な説明
組成物
好ましい反応生成物としては、上記「発明の概要」に記載した式を有する１つ以上の架橋ポリマーと１つ以上のアルキル化剤との生成物などが挙げられる。該ポリマーは架橋される。架橋度はポリマーを完全に不溶化させる程度のものであるため、アルキル化反応生成物の作用は消化管のみに限定される。したがって、本発明の組成物は作用が全身に及ぶことはなく、患者への副作用が少なくなる。
「無毒」という用語は、治療上有効量で摂取したときに、反応生成物も、イオン交換によって体内に放出されるあらゆるイオンも、有害でないことをいう。ポリマーの架橋により、ポリマーは実質的に吸収に対して抵抗性を有する。ポリマーは塩として投与されるときは、後述でさらに詳細に説明するように、患者への有害な作用を最小にするためにカチオン対イオンを選択するのが好ましい。
「安定」という用語は、治療上有効量で摂取したときに、反応生成物が生体内で溶解せず、あるいは分解して有害性を示すおそれのある副生成物を形成することなく、体外へ物質を輸送することができるように実質的に無傷の状態を保つことをいう。
「塩」という用語は、反復単位中の窒素基がプロトン化されて陰電荷対イオンと関連する陽電荷窒素原子を生成することをいう。
「アルキル化剤」という用語は、架橋ポリマーと反応させたときにアルキル基またはその誘導体（たとえばアラルキル、ヒドロキシアルキル、アルキルアンモニウム塩、アルキルアミド、またはそれらを組み合わせたものなどの置換アルキル）をポリマーの１つ以上の窒素原子に共有結合させる反応体をいう。
好ましいポリマーの１つの例としては、下記式を有する反復単位、
0003931217.tif 000003
またはその塩もしくは共重合体を含むことを特徴とするものである。ここで、ｘはゼロまたは約１〜４の整数である。
好ましいポリマーの第２の例としては下記式を有する反復単位、
（NH-CH2CH2）n      （６）
またはその塩もしくは共重合体を含むことを特徴とするものである。
好ましいポリマーの第３の例としては、下記式を有する反復単位、
（NH-CH2CH2-NH-CH2CH2-NH-CH2CHOH-CH2）n      （7）
またはその塩もしくは共重合体を含むことを特徴とするものである。
ポリマーは、アルキル化に先立ち架橋されることが好ましい。適当な架橋剤の例としては、塩化アクリロイル、エピクロロヒドリン、ブタンジオールジグリシジルエーテル、エタンジオールジグリシジルエーテル、およびコハク酸ジメチルなどが挙げられる。架橋剤の量は通常、架橋剤とモノマーの合計重量の０．５〜２５重量％であり、２．５〜２０％または１〜１０％が好ましい。
アミンポリマーと反応させる架橋剤の量は通常、アミンの約０．５〜２０％で十分である。好ましい態様においては、約０．５〜６％のアミン基が架橋剤と反応する。
ポリマーの架橋は、約２５℃で約１８時間にわたり苛性水溶液中で適当な架橋剤とポリマーを反応させて、それによってゲルを形成させることによって行なうことができる。次いで、ゲルを水と合わせて混合し、粒状固体を形成させる。次いで、この粒状固体を水洗し、たとえば約５０℃の温度で約１８時間といった適当な条件下で乾燥させる。
アルキル化は、ポリマーの窒素原子とアルキル化剤（たとえばアミド基やアンモニウム基などの形でさらに別の窒素原子を含んでいてよい）の反応である。また、単数または複数のアルキル化剤と反応する窒素原子は複数回のアルキル化に耐えて、アルキル化終了時に１０モル％未満の窒素原子が四級アンモニウムイオンを形成する。
好ましいアルキル化剤は式ＲＸを有するものであるが、ここで、ＲはＣ1−Ｃ20アルキル基（好ましくはＣ4−Ｃ20）、Ｃ1−Ｃ20ヒドロキシアルキル基（好ましくはＣ4−Ｃ20ヒドロキシアルキル基）、Ｃ7−Ｃ20アラルキル基、Ｃ1−Ｃ20アルキルアンモニウム基（好ましくはＣ4−Ｃ20アルキルアンモニウム基）、またはＣ1−Ｃ20アルキルアミド基（好ましくはＣ4−Ｃ20アルキルアミド基）であり、Ｘとしては１つ以上の求電子脱離基が例示される。「求電子脱離基」という用語は、アルキル化反応進行中に架橋ポリマー中の窒素原子によって置換される基をいう。好ましい脱離基の例としては、ハロゲン化物、エポキシ、トシレート、およびメシレート基などが挙げられる。たとえばエポキシ基の場合、アルキル反応によって３員エポキシ環の開裂が起きる。
好ましいアルキル化剤の例としては、Ｃ1−Ｃ20アルキルハライド（たとえばｎ−ブチルハライド、ｎ−ヘキシルハライド、ｎ−オクチルハライド、ｎ−デシルハライド、ｎ−ドデシルハライド、ｎ−テトラデシルハライド、ｎ−オクタデシルハライド、およびそれらを組み合わせたもの）；Ｃ1−Ｃ20ジハロアルカン（たとえば１，１０−ジハロデカン）；Ｃ1−Ｃ20ヒドロキシアルキルハライド（たとえば１１−ハロ−１−ウンデカノール）；Ｃ1−Ｃ20アラルキルハライド（たとえばベンジルハライド）；Ｃ1−Ｃ20アルキルハライドアンモニウム塩（たとえば（４−ハロブチル）トリメチルアンモニウム塩、（６−ハロヘキシル）トリメチルアンモニウム塩、（８−ハロオクチル）トリメチルアンモニウム塩、（１０−ハロデシル）トリメチルアンモニウム塩、（１２−ハロドデシル）トリメチルアンモニウム塩、およびそれらを組み合わせたもの）；Ｃ1−Ｃ20アルキルエポキシアンモニウム塩（たとえば（グリシジルプロピル）トリメチルアンモニウム塩）；およびＣ1−Ｃ20エポキシアルキルアミド（たとえばＮ−（２，３−エポキシプロパン）ブチルアミド、Ｎ−（２，３−エポキシプロパン）ヘキサンアミド、およびそれらを組み合わせたもの）などが挙げられる。
ポリマーは、ポリマーと同時にまたは続いて添加される少なくとも２つのアルキル化剤と反応させることがとくに好ましい。１つの好ましい例においては、アルキル化剤のうちの１つは式ＲＸを有するものである。ここで、ＲはＣ1−Ｃ20アルキル基であり、Ｘとしては１つ以上の求電子脱離基（たとえばアルキルハライド）が例示される。また、他方のアルキル化剤は式Ｒ’Ｘを有するものである。ここで、Ｒ’はＣ1−Ｃ20アルキルアンモニウム基であり、Ｘとしては１つ以上の求電子脱離基（たとえばアルキルハライドアンモニウム塩）が例示される。
もう１つの好ましい例においては、アルキル化剤のうちの１つは式ＲＸを有するものである。ここで、ＲはＣ1−Ｃ20アルキル基であり、Ｘとしては１つ以上の求電子脱離基（たとえばアルキルハライド）が例示される。また、他方のアルキル化剤は式Ｒ’Ｘを有するものである。ここで、Ｒ’はＣ1−Ｃ20ヒドロキシアルキル基であり、Ｘとしては１つ以上の求電子脱離基（たとえばヒドロキシアルキルハライド）が例示される。
さらに別の好ましい例においては、アルキル化剤のうちの１つはＣ1−Ｃ20ジハロアルカンであり、他方のアルキル化剤はＣ1−Ｃ20アルキルアンモニウム塩である。
反応生成物は固定陽電荷を有していてもよいし、生理的ｐＨで摂取されると荷電する能力を有するものであってもよい。後者の場合、荷電イオンが摂取されると、胆汁酸塩と交換できる陰電荷対イオンを捕捉するが、固定陽電荷を有する反応生成物の場合は、反応生成物は１つ以上の交換可能対イオンを付与されてもよい。適当な対イオンの例としては、Ｃｌ-、Ｂｒ-、ＣＨ3ＯＳＯ3-、ＨＳＯ4-、ＳＯ42-、ＨＣＯ3-、ＣＯ3-、酢酸塩、乳酸塩、コハク酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、アスコルビン酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、葉酸塩、アミノ酸誘導体、ヌクレオチド、脂質、またはリン脂質などが挙げられる。対イオンは互いに同じものであってもよいし、異なるものであってもよい。たとえば、反応生成物は、いずれも除去途中の胆汁酸塩と交換される２種類の対イオンを含んでいてよい。それぞれが固定電荷に関連する異なる対イオンを有する複数の反応生成物を投与してもよい。
アルキル化剤は、たとえば約０．０５：１〜４：１のモル比で架橋ポリマーに添加することができるが、アルキル化剤は疎水性領域と親水性領域を提供するものを選択できることが好ましい。
アミンポリマーは通常、有機溶媒中でアルキル化剤とポリマーを結合させることによってアルキル化される。アミンポリマーと結合される第１のアルキル化剤の量は一般に、第１のアルキル化剤と、反応に利用できるアミンポリマーのアミン基の約５〜７５％との反応を引き起こすのに十分な量である。アミンポリマーおよび溶液と結合される第２のアルキル化剤の量は一般に、第２のアルキル化剤と、反応に利用できるアミンポリマーのアミン基の約５〜７５％との反応を引き起こすのに十分な量である。適当な有機溶媒の例としては、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、ＤＭＦ、およびＤＭＳＯなどが挙げられる。好ましい有機溶媒としてはメタノールが挙げられる。
１つの態様においては、反応混合物を攪拌しながら約４０分にわたり約６５℃まで加熱する。通常、反応進行中に水酸化ナトリウム水溶液を連続的に添加する。６５℃における反応時間は約１８時間で、続いて４時間かけて約２５℃の室温まで徐々に冷却することが好ましい。次いで、生じた反応生成物を濾過し、メタノールに再懸濁し、再度濾過し、次いで、２モルの塩化ナトリウムなどの適当な水溶液で洗浄し、さらに脱イオン水で洗浄する。次いで、生じた固体生成物を風乾オーブン中約６０℃の温度といった適当な条件下で乾燥させる。続いて、乾燥固体を処理する。固体は粉砕して８０メッシュふるいに通すことが好ましい。
本発明のとくに好ましい態様においては、アミンポリマーは架橋ポリ（アリルアミン）であって、ここで第１の置換基は疎水性デシル部分を含み、第２のアミン置換基はヘキシルトリメチルアンモニウムを含むものである。さらに、とくに好ましい架橋ポリ（アリルアミン）は、エピクロロヒドリンとの反応に利用できるアミンの約２〜６％の範囲で存在するエピクロロヒドリンによって架橋される。
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。
実施例
Ａ．ポリマーの調製
１．ポリ（ビニルアミン）の調製
第１の工程として、エチリデンビスアセトアミドの調製を行なった。アセトアミド（１１８ｇ）、アセトアルデヒド（４４．０６ｇ）、酢酸銅（０．２ｇ）、および水（３００ｍＬ）を冷却器、温度計、および機械的攪拌子を備えた１リットルの三つ口フラスコに入れた。濃ＨＣｌ（３４ｍＬ）を加え、混合物を攪拌しながら４５〜５０℃まで２４時間加熱した。次いで、水を真空中で除去すると厚いスラッジが残り、これを５℃まで冷却して結晶を形成させた。アセトン（２００ｍＬ）を加え、数分間攪拌した後、固体を濾取して捨てた。アセトンを０℃まで冷却し、固体を濾取した。この固体を５００ｍＬのアセトンでリンスし、１８時間風乾して、３１．５ｇのエチリデンビスアセトアミドを得た。
次の工程では、エチリデンビスアセトアミドからビニルアセトアミドを調製した。温度計、機械的攪拌子、およびビグロウカラム（Vigroux column）の頂上につないだ分留頭を備えた５００ｍＬの三つ口フラスコに、エチリデンビスアセトアミド（３１．０５ｇ）、炭酸カルシウム（２ｇ）、およびシーライト（celite）５４１（２ｇ）を入れた。ポットを１８０〜２２５℃まで加熱することによって、混合物を２４ｍｍＨｇで真空蒸留した。単一のフラクションだけが採取され（１０．８ｇ）、このものは生成物に加えて大量のアセトアミドを含んでいた（ＮＭＲで測定）。この固体生成物をイソプロパノール（３０ｍＬ）に溶解させて、重合に使用する粗製ビニルアセトアミド溶液を得た。
粗製ビニルアセトアミド溶液（１５ｍＬ）、ジビニルベンゼン（１ｇ、工業用、純度５５％、混合異性体）、およびＡＩＢＮ（０．３ｇ）を混合し、窒素雰囲気下で９０分間加熱還流すると、固体沈殿物が生じた。溶液を冷却し、イソプロパノール（５０ｍＬ）を加えて、遠心分離によって固体を集めた。固体をイソプロパノールで２回、水で１回リンスし、真空オーブン中で乾燥させて、０．８ｇのポリ（ビニルアセトアミド）を得た。このものを下記のようにして用いて、ポリ（ビニルアミン）を調製した。
ポリ（ビニルアセトアミド）（０．７９ｇ）を、水（２５ｍＬ）と濃ＨＣｌ（２５ｍＬ）を含む１００ｍＬの一口フラスコに入れた。混合物を５日間還流させた後、固体を濾取し、水で１回、イソプロパノールで２回リンスし、真空オーブン中で乾燥させて、０．７７ｇの生成物を得た。赤外分光法により、大量のアミド（１６５６ｃｍ-1）が残留していること、およびそれほど多くないアミン（１６０６ｃｍ-1）が生成したことが確認された。この反応の生成物（約０．８４ｇ）をＮａＯｈ（４６ｇ）と水（４６ｇ）に懸濁し、沸騰するまで加熱した（約１４０℃）。発泡があるので温度を下げ、約１００℃で２時間維持した。水（１００ｍＬ）を加え、固体を濾過により集めた。水で１回リンスした後、固体を水（５００ｍＬ）に懸濁し、酢酸でｐＨ５に調整した。固体を再び濾取し、水でリンスした後、イソプロパノールでリンスし、真空オーブン中で乾燥させて、０．５１ｇの生成物を得た。赤外分光法により、大量のアミンが生成していたことが確認された。
２．ポリ（エチレンイミン）の調製
ポリ（エチレンイミン）（１２０ｇの５０％水溶液；Scientific Polymer Products）を水（２５０ｍＬ）に溶解させた。エピクロロヒドリン（２２．１ｍＬ）を滴下して加えた。その溶液を４時間６０℃まで加温した後ゲル化した。そのゲルを取り出し、水（１．５Ｌ）と混合して、固体を濾取し、水（３Ｌ）で３回、イソプロパノール（３Ｌ）で２回リンスし、生成したゲルを真空オーブン中で乾燥させて８１．２ｇの表題のポリマーを得た。
３．ポリ（アリルアミン）ヒドロクロリドの調製
（１）窒素ガス差込み口を上部に持つ冷却器と（２）温度計と（３）機械的攪拌子を備えた２Ｌの水ジャケット付反応釜に濃塩酸（３６０ｍＬ）を加えた。反応釜のジャケットに水を循環させる（水の温度＝０℃）ことによりこの酸を５℃まで冷却した。反応温度を５〜１０℃で維持し攪拌しながらアリルアミン（３２８．５ｍＬ，２５０ｇ）を滴下して加えた。添加完了後、混合物を取り出し、３Ｌの一口フラスコに入れ、、２０６ｇの液体を６０℃でロータリー真空蒸発によって除去した。次いで、水（２０ｍＬ）を加え、液体を反応釜に戻した。次いで、１１ｍＬの水に懸濁したアゾビス（アミジノプロパン）ジヒドロクロリド（０．５ｇ）を加えた。得られた反応混合物を窒素雰囲気下で攪拌しながら５０℃まで２４時間加熱した。次いで、１１ｍＬの水に懸濁したアゾビス（アミジノプロパン）ジヒドロクロリド（５ｍＬ）をさらに加えた後、加熱と攪拌をさらに４４時間続けた。
この反応終了後、反応混合物に蒸留水（１００ｍＬ）を加え、攪拌しながら液体混合物を放置冷却した。次いで、混合物を取り出し、２Ｌに分液ロートに入れた後、攪拌中のメタノール溶液（４Ｌ）に滴下して加え、固体を生成させた。固体を濾過で分取し、メタノール（４Ｌ）に再懸濁し、１時間攪拌し、濾過により集めた。次いで、このメタノールリンスをもう１回繰り返し、固体を真空オーブン中で乾燥して、２１５．１ｇのポリ（アリルアミン）ヒドロクロリドを顆粒状の白色固体として得た。
４．エピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）ヒドロクロリドの調製
５ガロンのバケツに実施例３の方法で調製したポリ（アリルアミン）ヒドロクロリド（１ｋｇ）と水（４Ｌ）を加えた。混合物を攪拌してヒドロクロリドを溶解させ、固体のＮａＯＨ（２８４ｇ）を加えてｐＨを調整した。得られた溶液を室温まで冷却した後、エピクロロヒドリン架橋剤（５０ｍＬ）を攪拌しながら１度にすべて加えた。得られた混合物をゲル状になるまでゆっくり攪拌した（約３５分）。架橋反応を室温でさらに１８時間進行させた後、ポリマーゲルを取り出し、分別して総量１０Ｌの水とともにブレンダーに入れた。分別物それぞれを約３分間ゆっくり混合して粗粒子を形成させ、次いで１時間攪拌して濾過により集めた。固体を水（１０Ｌ、１５Ｌ、２０Ｌ）に懸濁させ、各懸濁液を１時間攪拌し、そのたびに濾過により集めることによって、固体を３回リンスした。次いで、得られた固体をイソプロパノール（１７Ｌ）に懸濁し、混合物を１時間攪拌し、次いで濾過により集めることにより、１度リンスした後、固体を５０℃で１８時間真空オーブン中で乾燥させて、６７７ｇの架橋ポリマーを顆粒状のもろい白色固体として得た。
５．ブタンジオールジグリシジルエーテルで架橋されたポリ（アリルアミン）ヒドロクロリドの調製
５ガロンのプラスチックのバケツに、実施例３の方法で調製したポリ（アリルアミン）ヒドロクロリド（５００ｇ）と水（２Ｌ）を加えた。混合物を攪拌してヒドロクロリドを溶解させ、固体のＮａＯＨ（１３４．６ｇ）を加えてｐＨを１０に調整した。得られた溶液をバケツ中で室温まで冷却した後、１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル架橋剤（６５ｍＬ）を攪拌しながら１度にすべて加えた。得られた混合物をゲル状になるまでゆっくり攪拌した（約６分）。架橋反応を室温でさらに１８時間進行させた後、ポリマーゲルを取り出し、７５℃の真空オーブン中で２４時間乾燥させた。次いで、乾燥固体を粉状にし、−３０メッシュのふるいにかけた後６ガロンの水に懸濁し、１時間攪拌した。次いで、固体を濾取し、リンス工程をさらに２回繰り返した。次いで、得られた固体を４８時間風乾し、続いて５０℃の真空オーブン中で２４時間乾燥させて、約４１５ｇの架橋ポリマーを白色固体として得た。
６．エタンジオールジグリシジルエーテルで架橋されたポリ（アリルアミン）ヒドロクロリドの調製
１００ｍＬのビーカーに、実施例３の方法で調製したポリ（アリルアミン）ヒドロクロリド（１０ｇ）と水（４０ｍＬ）を加えた。混合物を攪拌してヒドロクロリドを溶解させ、固体のＮａＯＨを加えてｐＨを１０に調整した。得られた溶液をビーカー中、室温まで冷却した後、１，２−エタンジオールジグリシジルエーテル架橋剤（２．０ｍＬ）を攪拌しながら１度にすべて加えた。得られた混合物をゲル状になるまでゆっくり攪拌した（約４分）。架橋反応を室温でさらに１８時間進行させた後、ポリマーゲルを取り出し、５００ｍＬのメタノールと混合した。次いで、固体を濾取し、水（５００ｍＬ）に懸濁した。１時間攪拌した後、固体を濾取し、リンス工程を繰り返した。得られた固体をイソプロパノール（４００ｍＬ）で２回リンスし、５０℃の真空オーブン中で２４時間乾燥させて８．７ｇの架橋ポリマーを白色固体として得た。
７．ジメチルスクシネートで架橋されたポリ（アリルアミン）ヒドロクロリドの調製
５００ｍＬの丸底フラスコに実施例３の方法で調製したポリ（アリルアミン）ヒドロクロリド（１０ｇ）、メタノール（１００ｍＬ）、およびトリエチルアミン（１０ｍＬ）を加えた。混合物を攪拌し、ジメチルスクシネート架橋剤（ｌｍＬ）を加えた。溶液を加熱還流し、３０分後攪拌を止めた。１８時間後、溶液を室温まで冷却し、固体を濾取し、４００ｍＬのイソプロパノールと混合した。次いで、固体を濾取し、水（１Ｌ）に懸濁した。１時間攪拌後、固体を濾取し、リンス工程をさらに２回繰り返した。次いで、その固体をイソプロパノール（８００ｍＬ）で１回リンスし、５０℃の真空オーブン中で２４時間乾燥させて５．９ｇの架橋ポリマーを白色固体として得た。
８．アクリロイルクロリドで架橋されたポリ（エチレンイミン）の調製
機械的攪拌子、温度計、および追加ロートを備えた５Ｌの三つ口フラスコ内に、ポリ（エチレンイミン）（５１０ｇの５０％水溶液、乾燥ポリマーの２５５ｇと等量）とイソプロパノール（２．５Ｌ）を加えた。アクリロイルクロリド架橋剤（５０ｇ）を３５分間かけて追加ロートを通して滴下して加え、温度は２９℃以下に保った。それから、この溶液を攪拌しながら６０℃まで１８時間加熱した後、溶液を冷却し、すぐに固体を濾取した。次いで、その固体を水（２ガロン）に懸濁し、１時間攪拌し、濾過して固体を回収することにより、３回リンスした。次に、固体をメタノール（２ガロン）に懸濁し、３０分間攪拌し、濾過して固体を回収することにより、１回リンスした。最後に、その固体を実施例７で記述したようにイソプロパノールでリンスし、５０℃の真空オーブン中で１８時間乾燥させて２０６ｇの架橋ポリマーを薄オレンジ色の粉状固体として得た。
９．１−ヨードオクタンアルキル化剤によるブタンジオールジグリシジルエーテルで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
実施例５の方法で調製したブタンジオールジグリシジルエーテルで架橋されたポリ（アリルアミン）（５ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に懸濁し、水酸化ナトリウム（０．２ｇ）を加えた。１５分間攪拌した後、１−ヨードオクタン（１．９２ｍＬ）を加え、混合物を６０℃で２０時間攪拌した。次いで、混合物を冷却し、固体を濾取した。次に、固体をイソプロパノール（５００ｍＬ）で懸濁させることにより洗浄した後１時間攪拌し、次いで濾過により集めた。次いで、塩化ナトリウム水溶液（５００ｍＬの１Ｍ溶液）で２回、水（５００ｍＬ）で２回、イソプロパノール（５００ｍＬ）で１回の洗浄操作を繰り返した後、５０℃の真空オーブン中で２４時間乾燥させて、４．６５ｇのアルキル化物を得た。
２．８８ｍＬの１−ヨードオクタンを用いて同じ手順を繰り返し、４．６８ｇのアルキル化物を得た。
１０．１−ヨードオクタンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
３．８４ｍＬの１−ヨードドデカンを用いた以外は実施例９に説明した手順に従い、実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（５ｇ）をアルキル化した。この操作で５．９４ｇのアルキル化物を得た。
１１．１−ヨードオクタデカンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（１０ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に懸濁し、水酸化ナトリウム（０．２ｇ）を加えた。１５分間攪拌した後、１−ヨードオクタデカン（８．１ｇ）を加え、混合物を６０℃で２０時間攪拌した。次いで、混合物を冷却し、固体を濾取した。次に、固体をイソプロパノール（５００ｍＬ）で懸濁させることにより洗浄した後１時間攪拌し、次いで濾過により集めた。次いで、塩化ナトリウム水溶液（５００ｍＬのｌＭ溶液）で２回、水（５００ｍＬ）で２回、イソプロパノール（５００ｍＬ）で１回の洗浄操作を繰り返した後、５０℃の真空オーブン中で２４時間乾燥させて、９．６ｇのアルキル化物を得た。
１２．１−ヨードドデカンアルキル化剤によるブタンジオールジグリシジルエーテルで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
２．４７ｍＬの１−ヨードドデカンを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、実施例５の方法で調製したブタンジオールジグリシジルエーテルで架橋されたポリ（アリルアミン）（５ｇ）をアルキル化した。この操作で４．７ｇのアルキル化物を得た。
１３．ベンジルブロミドアルキル化剤によるブタンジオールジグリシジルエーテルで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
２．４２ｍＬのベンジルブロミドを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、実施例５の方法で調製したブタンジオールジグリシジルエーテルで架橋されたポリ（アリルアミン）（５ｇ）をアルキル化した。この操作で６．４ｇのアルキル化物を得た。
１４．ベンジルブロミドアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
１．２１ｍＬのベンジルブロミドを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（５ｇ）をアルキル化した。この操作で６．６ｇのアルキル化物を得た。
１５．１−ヨードデカンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
７．１５ｇの１−ヨードデカンと２．１ｇのＮａＯＨを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（２０ｇ）をアルキル化した。この操作で２０．６７ｇのアルキル化物を得た。
１６．１−ヨードブタンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
２２．０３ｇの１−ヨードブタンと８．０ｇのＮａＯＨを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（２０ｇ）をアルキル化した。この操作で２４．０ｇのアルキル化物を得た。
２９．４４ｇおよび１４．７２ｇの１−ヨードブタンを用いて同じ手順を繰り返し、それぞれ１７．０ｇと２１．０ｇのアルキル化物を得た。
１７．１−ヨードテトラデカンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
２．１ｍＬの１−ヨードテトラデカンを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（５ｇ）をアルキル化した。この操作で５．２ｇのアルキル化物を得た。
６．４ｍＬの１−ヨードテトラデカンを用いて同じ手順を繰り返し、７．１５ｇのアルキル化物を得た。
１８．１−ヨードオクタンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
１．９２ｍＬの１−ヨードオクタンを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、実施例８の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（５ｇ）をアルキル化した。この操作で５．０ｇのアルキル化物を得た。
１９．１−ヨードオクタンアルキル化剤によるジエチレントリアミンとエピクロロヒドリンの共重合体のアルキル化
１．９２ｍＬの１−ヨードオクタンを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、ジエチレントリアミンとエピクロロヒドリンの共重合体（１０ｇ）をアルキル化した。この操作で５．３ｇのアルキル化物を得た。
２０．１−ヨードドデカンおよび塩化グリシジルプロピルトリメチルアンモニウムアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
２３．６６ｇの１−ヨードドデカン、６．４ｇの水酸化ナトリウム、および５００ｍＬのメタノールを用いた以外は実施例１１に説明した手順に従い、実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（２０ｇ）をアルキル化した。次いで、メタノール（１Ｌ）中で２４ｇのアルキル化物を５０ｇの９０％塩化グリシジルプロピルトリメチルアンモニウムと反応させた。混合物を２４時間攪拌還流した後、室温まで冷却し、水で連続的に洗った（２．５Ｌづつ用いて３回）。真空乾燥させたところ、２２．４ｇのジアルキル化物が得られた。
１−ヨードドデカンに代えて１−ヨードデカンと１−ヨードオクタデカンをそれぞれ用いる処理を行なった後で、塩化グリシジルプロピルトリメチルアンモニウムとアルキル化させることによって同様の方法によりジアルキル化物を調製した。
２１．塩化グリシジルプロピルトリメチルアンモニウムアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（５ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）中で１１．６３ｇの９０％塩化グリシジルプロピルトリメチルアンモニウムと反応させた。混合物を６０℃で２０時間攪拌した後、室温まで冷却し、水（４００ｍＬづつ用いて３回）およびイソプロパノール（４００ｍＬ用いて１回）で連続的に洗った。真空乾燥させたところ、６．９３ｇのアルキル化物が得られた。
５０％、２００％、および３００％モル等量の９０％の塩化グリシジルプロピルトリメチルアンモニウムを用いて同様の方法によりアルキル化物を調製した。
２２．臭化（１０−ブロモデシル）トリメチルアンモニウムアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
第１工程として、以下のようにして臭化（１０−ブロモデシル）トリメチルアンモニウムを調製する。
１，１０−ジブロモデカン（２００ｇ）を、冷却管（−５℃）を備えた５リットルの三つ口丸底フラスコに入れたメタノール（３Ｌ）に溶解させた。この混合物にトリメチルアミン水溶液（１７６ｍＬの２４％（ｗ／ｗ）水溶液）を加えた。混合物を室温で４時間攪拌した後、さらに１８時間加熱還流した。加熱終了時に、フラスコを５０℃まで冷却し、溶媒を真空下で除去すると固体塊が残った。アセトン（３００ｍＬ）を加え、混合物を４０℃で１時間攪拌した。固体を濾取し、追加したアセトン（１Ｌ）に再懸濁し、９０分間攪拌した。
攪拌終了時に、固体を濾過し捨て、アセトンのフラクションを合わせ真空下で蒸発乾固させた。ヘキサン（約１．５Ｌ）を加え、次いで、混合物を１時間攪拌した後、固体を濾取し、次いで濾過ロート上で新しいヘキサンでリンスした。次いで、得られた固体を４０℃でイソプロパノール（７５ｍＬ）に溶解させた。酢酸エチル（１５００ｍＬ）を加え、温度を約５０℃まで上げてすべての固体物質を完全に溶解させた。次いで、フラスコをタオルで包み、２４時間冷凍庫に入れておいたところ、固体結晶が生成した。結晶を濾取し、冷酢酸エチルでリンスし、７５℃の真空オーブン中で乾燥させて、１００．９ｇの臭化（１０−ブロモデシル）トリメチルアンモニウムを白色結晶として得た。
実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（１０ｇ）をメタノール（３００ｍＬ）に懸濁した。水酸化ナトリウム（３．３ｇ）を加え、溶解するまで混合物を攪拌した。臭化（１０−ブロモデシル）トリメチルアンモニウム（２０．７ｇ）を加え、混合物を２０時間攪拌還流した。次いで、混合物を室温まで冷却し、メタノール（１Ｌづつ用いて２回）、塩化ナトリウム（１Ｍ溶液を１Ｌづつ用いて２回）、水（１Ｌづつ用いて３回）、およびイソプロパノール（１Ｌ用いて１回）で連続的に洗った。真空乾燥させたところ、１４．３ｇのアルキル化物が得られた。
２３．臭化（１０−ブロモデシル）トリメチルアンモニウムおよび１，１０−ジブロモデカンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
１，１０−ジブロモデカン（２００ｇ）を、冷却管（−５℃）を備えた５リットルの丸底フラスコに入れたメタノール（３Ｌ）に溶解させた。この混合物にトリメチルアミン水溶液（２２０ｍＬの２４％（ｗ／ｗ）水溶液）を加えた。混合物を室温で４時間攪拌した後、さらに２４時間加熱還流した。次いで、フラスコを室温に冷却すると、３３５０ｍＬの透明な液体が得られた。
実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（３０ｇ）を透明な液体（２Ｌ）に懸濁し、１０分間攪拌した。次いで、水酸化ナトリウム（２０ｇ）を加え、溶解するまで混合物を攪拌した。次に、混合物を２４時間攪拌還流し、室温まで冷却し、固体を濾取した。次に、固体をメタノール（１０Ｌ用いて１回）、塩化ナトリウム（ｌＭ溶液を１０Ｌづつ用いて２回）、水（１０Ｌづつ用いて３回）、およびイソプロパノール（５Ｌ用いて１回）で連続的に洗った。真空乾燥させたところ、３５．３ｇのジアルキル化物が得られた。
２４．臭化（１０−ブロモデシル）トリメチルアンモニウムおよび１−ブロモデカンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（１０ｇ）をメタノール（３００ｍＬ）に懸濁した。水酸化ナトリウム（４．９９ｇ）を加え、溶解するまで混合物を攪拌した。実施例２２の方法で調製した臭化（１０−ブロモデシル）トリメチルアンモニウム（２０．７ｇ）および１−ブロモデカンを加え、混合物を２０時間攪拌還流した。次いで、混合物を室温まで冷却し、メタノール（ｌＬづつ用いて２回）、塩化ナトリウム（１Ｍ溶液を１Ｌづつ用いて２回）、水（１Ｌづつ用いて３回）、およびイソプロパノール（１Ｌ用いて１回）で連続的に洗った。真空乾燥させたところ、１０．８ｇのジアルキル化物が得られた。
また、次に示すように異なる量の１−ブロモデカンを用いて同様の方法でジアルキル化物を得た。：（ａ）３．１９ｇの１−ブロモデカンと４．１４ｇの水酸化ナトリウムを用いて１１．８ｇのジアルキル化物を得た。；（ｂ）３８．４ｇの１−ブロモデカンと６．９６ｇの水酸化ナトリウムを用いて１９．１ｇのジアルキル化物を得た。
また、次に示すアルキル化剤の組み合わせを用いて同様の方法により、ジアルキル化物を得た。：１−ブロモデカンと臭化（４−ブロモブチル）トリメチルアンモニウム；１−ブロモデカンと臭化（６−ブロモヘキシル）トリメチルアンモニウム；１−ブロモデカンと臭化（８−ブロモオクチル）トリメチルアンモニウム；１−ブロモデカンと臭化（２−ブロモエチル）トリメチルアンモニウム；１−ブロモデカンと臭化（３−ブロモプロピル）トリメチルアンモニウム；１−ブロモヘキサンと臭化（６−ブロモヘキシル）トリメチルアンモニウム；１−ブロモドデカンと臭化（１２−ブロモドデシル）トリメチルアンモニウム；１−ブロモオクタンと臭化（６−ブロモヘキシル）トリメチルアンモニウム．
２５．１１−ブロモ−１−ウンデカノールアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（５．３５ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に懸濁した。水酸化ナトリウム（１．１０ｇ）を加え、溶解するまで混合物を攪拌した。１１−ブロモ−１−ウンデカノール（５．０ｇ）を加え、混合物を２０時間攪拌還流した後、混合物を室温まで冷却し、メタノール（３Ｌ用いて１回）、塩化ナトリウム（ｌＭ溶液を用いて５００ｍＬづつ２回）、および水（１Ｌづつ用いて３回）で連続的に洗った。真空乾燥させたところ、６．４７ｇのアルキル化物が得られた。
また、１．０５ｇの水酸化ナトリウムと１０ｇの１１−ブロモ−１−ウンデカノールを用いて、この反応を行ったところ、８．８６ｇのアルキル化物が得られた。
２６．Ｎ−（２，３−エポキシプロパン）ブチルアミドアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
第１工程として、以下のようにしてＮ−アリルブチルアミドを調製する。
塩化ブチロイル（１９４．７ｇ、１．８３モル）を１Ｌのテトラヒドロフランに溶解させたものを、温度計、攪拌バー、滴下ロートを備えた三つ口丸底フラスコに加えた。次いで、フラスコの内容物を攪拌しながら氷浴中で１５℃まで冷却した。次いで、攪拌を続けながら、アリルアミン（２０８．７ｇ、３．６５モル）を５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させたものを滴下ロートを通して徐々に加えた。添加中は、温度を１５℃に保った。添加終了後、さらに１５分間攪拌を続けた後、固体の塩化アリルアミン沈殿物を濾過した。濾液を真空下で濃縮して、２３６．４ｇのＮ−アリルブチルアミドを無色粘稠液体として得た。
Ｎ−アリルブチルアミド（１２．７ｇ、０．１モル）を、攪拌バーと空気冷却器を備えた１リットルの丸底フラスコに取った。塩化メチレン（２００ｍＬ）をフラスコに加えた後、３−クロロペルオキシ安息香酸（濃度５０〜６０％、２００ｇ）を５回に分けて３０分かけて加え、反応を進行させた。１６時間後、ＴＬＣ分析（ジクロロメタンの５％メタノール溶液を使用）を行なったところ、生成物が完全に生成したことが確認された。次いで、反応混合物を冷却し、濾過して、固体安息香酸沈殿物を除去した。濾液を飽和硫酸ナトリウム溶液で洗った後（１００ｍＬづつ用いて２回）、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗った（１００ｍＬづつ用いて２回）。次いで、ジクロロメタン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、１０．０ｇのＮ−（２，３−エポキシプロパン）ブチルアミドを淡黄色粘稠液体として得た。
実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（１０ｇ、−８０メッシュふるい分け済み）とメタノール（２５０ｍＬ）を１リットルの丸底フラスコに加えた後、Ｎ−（２，３−エポキシプロパン）ブチルアミド（０．９７ｇ、０．００６７モル、５モル％）、さらに水酸化ナトリウムペレット（０．５５ｇ、０．０１３７５モル）を加えた。混合物を室温で一晩攪拌した。１６時間後、反応混合物を濾過し、固体をメタノール（３００ｍＬづつ用いて３回）、水（３００ｍＬづつ用いて２回）、およびイソプロパノール（３００ｍＬづつ用いて３回）で連続的に洗った。５４℃で一晩真空乾燥させたところ、９．０ｇのアルキル化物が淡黄色粉末として得られた。
（ａ）１０モル％の場合、１．９３ｇ（０．０１３モル）のＮ−（２，３−エポキシプロパン）ブチルアミドと１．１ｇ（０．０２７５モル）の水酸化ナトリウムペレットを用いて８．３ｇのアルキル化物を得たこと、（ｂ）２０モル％の場合、３．８６ｇ（０．０２６モル）のＮ−（２，３−エポキシプロパン）ブチルアミドと２．１ｇ（０．０５３モル）の水酸化ナトリウムペレットを用いて８．２ｇのアルキル化物を得たこと、および（ｃ）３０モル％の場合、５．７２ｇ（０．０４モル）のＮ−（２，３−エポキシプロパン）ブチルアミドと２．１ｇ（０．０５３モル）の水酸化ナトリウムペレットを用いて８．３２ｇのアルキル化物を得たこと以外は同様の手順で、１０モル％、２０モル％、および３０モル％のＮ−（２，３−エポキシプロパン）ブチルアミドによるアルキル化物を調製した。
２７．Ｎ−（２，３−エポキシプロパン）ヘキサンアミドアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
第１工程として、以下のようにしてＮ−アリルヘキサンアミドを調製する。
塩化ヘキサノイル（３３ｇ、０．２５モル）を２５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させたものを、温度計、攪拌バー、滴下ロートを備えた三つ口丸底フラスコに加えた。次いで、フラスコの内容物を攪拌しながら氷浴中で１５℃まで冷却した。次いで、攪拌を続けながら、アリルアミン（２８．６ｇ、０．５モル）を２００ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させたものを滴下ロートを通して徐々に加えた。添加中は、温度を１５℃に保った。添加終了後、さらに１５分間攪拌を続けた後、固体の塩化アリルアミン沈殿物を濾過した。濾液を真空下で濃縮して、３７ｇのＮ−アリルヘキサンアミドを無色粘稠液体として得た。
Ｎ−アリルヘキサンアミド（１６ｇ、０．１モル）を、攪拌バーと空気冷却器を備えた１リットルの丸底フラスコに取った。塩化メチレン（２００ｍＬ）をフラスコに加えた後、３−クロロペルオキシ安息香酸（濃度５０〜６０％、２００ｇ）を５回に分けて３０分かけて加え、反応を進行させた。１６時間後、ＴＬＣ分析（ジクロロメタンの５％メタノール溶液を使用）を行なったところ、生成物が完全に生成したことが確認された。次いで、反応混合物を冷却し、濾過して、固体安息香酸（enzoic acid）沈殿物を除去した。濾液を飽和硫酸ナトリウム溶液で洗った後（１００ｍＬづつ用いて２回）、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗った（１００ｍＬづつ用いて２回）。次いで、ジクロロメタン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、１４．２ｇのＮ−（２，３−エポキシプロパン）ヘキサンアミドを淡黄色粘稠液体として得た。
実施例４の方法で調製したエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）（１０ｇ、−８０メッシュふるい分け済み）とメタノール（２５０ｍＬ）を１リットルの丸底フラスコに加えた後、Ｎ−（２，３−エポキシプロパン）ヘキサンアミド（４．４６ｇ、０．０２６モル、２０モル％）、さらに水酸化ナトリウムペレット（２．１ｇ、０．０５３モル）を加えた。混合物を室温で一晩攪拌した。１６時間後、反応混合物を濾過し、固体をメタノール（３００ｍＬづつ用いて３回）、水（３００ｍＬづつ用いて２回）、およびイソプロパノール（３００ｍＬづつ用いて３回）で連続的に洗った。５４℃で一晩真空乾燥させたところ、９．５９ｇのアルキル化物が淡黄色粉末として得られた。
６．８４ｇ（０．０４モル）のＮ−（２，３−エポキシプロパン）ヘキサンアミドを用いて９．８３ｇのアルキル化物を得た以外は同様の方法で、３０モル％のＮ−（２，３−エポキシプロパン）ヘキサンアミドによるアルキル化物を調製した。
２８．臭化（６−ブロモヘキシル）トリメチルアンモニウムおよび１−ブロモデカンアルキル化剤によるエピクロロヒドリンで架橋されたポリ（アリルアミン）のアルキル化
機械的攪拌子、温度計、および冷却器を備えた１２リットルの丸底フラスコにメタノール（５Ｌ）と水酸化ナトリウム（１３３．７ｇ）を加える。固体が溶解するまで混合物を攪拌し、架橋されたポリ（アリルアミン）（２９７ｇ、−８０メッシュサイズまで粉砕したもの）を追加のメタノール（３Ｌ）とともに加える。臭化（６−ブロモヘキシル）トリメチルアンモニウム（５２２．１ｇ）と１−ブロモデカン（３１１．７ｇ）を加え、混合物を攪拌しながら６５℃まで加熱する。６５℃で１８時間経過後、混合物を室温まで放置冷却する。固体を濾取し、懸濁によりリンスし、３０分間攪拌し、メタノール，１２Ｌ；メタノール，１２Ｌ；２ＭのＮａＣ１水溶液，２２Ｌ；２ＭのＮａＣ１水溶液，２２Ｌ；脱イオン水，２２Ｌ；脱イオン水，２２Ｌ；脱イオン水，２２Ｌおよびイソプロパノール，２２Ｌから固体を濾取する。固体を真空オーブン中５０℃で乾燥させて、５０５．１ｇの灰色がかった白色の固体を得る。次いで、固体を、８０メッシュふるいを通過する粒度まで粉砕する。
ポリマーの試験
人工腸液の調製
炭酸ナトリウム（１．２７ｇ）と塩化ナトリウム（１．８７ｇ）を４００ｍＬの蒸留水に溶解させた。この溶液に、グリココール酸（１．９５ｇ、４．０ミリモル）またはグリコケノデオキシコール酸（１．８９ｇ、４．０ミリモル）のいずれかを加えて、１０ｍＭ溶液を調製した。溶液のｐＨを酢酸で６．８に調整した。これらの溶液を用いて様々なポリマーの試験を行なった。
ポリマーは次のようにして試験した。
１４ｍＬの遠心管に、ポリマー１０ｍｇと、適量の１０ｍＭ原液（あらかじめ上記のようにして調製したもの）と胆汁酸塩を含まない緩衝液から調製した０．１〜１０ｍＭの濃度範囲の胆汁酸塩溶液１０ｍＬを加えた。混合物を、３７℃に保った水浴中で３時間攪拌した。次いで、混合物を濾過した。３ａ−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼを用いる酵素分析評価により以下に説明するようにして、濾液の３−ヒドロキシステロイド含有総量を分析した。
胆汁酸塩含有総量の酵素分析評価
４つの原液を調製した。
溶液１−０．１３３Ｍのトリスと０．６６６ｍＭのＥＤＴＡを含むｐＨ９．５のトリス−ＨＣ１緩衝液
溶液２−１Ｍのヒドラジン水和物を含むｐＨ９．５のヒドラジン水和物溶液
溶液３−７ｍＭのＮＡＤ＋を含むｐＨ７．０のＮＡＤ溶液
溶液４−トリス−ＨＣ１緩衝液（０．０３Ｍトリス、１ｍＭのＥＤＴＡ）１ｍＬあたり２単位を含むｐＨ７．２のＨＳＤ溶液
３ｍＬのキュベットに、１．５ｍＬの溶液１、１．０ｍＬの溶液２、０．３ｍＬの溶液３、０．１ｍＬの溶液４、および上記ポリマー試験で得た０．１ｍＬの上清／濾液を加えた。溶液をＵＶ−ＶＩＳ分光光度計に入れ、３５０ｎｍにおけるＮＡＤＨの吸光度（Ｏ．Ｄ．）を測定した。上記のようにして調製した人工腸液の希釈物から作成した校正曲線から胆汁酸塩濃度を求めた。
上記ポリマーすべてを上記のようにして試験したところ、いずれも人工腸液からの胆汁酸塩の除去に有効であった。
用途
本発明によるポリマーは約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０ｇ／ｋｇ／日の用量で患者に経口投与することができる。具体的な用量は患者ごとに異なる（たとえば、患者の体重および求められる胆汁酸塩除去程度）。ポリマーは、水和状態あるいは脱水状態のいずれかで投与することができ、患者が摂取しやすいように着香してもよいし、食品や飲料に添加してもよい。他の胆汁酸隔離剤、高コレステロール血症、アテローム性動脈硬化症、その他の関連適応症の治療薬、または人工着色料などの不活性成分を添加してもよい。
適当な投与形態の例としては、丸薬、錠剤、カプセル剤、および粉剤（たとえば食品ふりかけ用）などが挙げられる。丸薬、錠剤、カプセル剤、または粉剤は、組成物を分解させないで（undisintegrated）患者の小腸へ輸送するのに十分な時間にわたり患者の胃の胃酸から組成物を保護しうる物質で被覆することができる。ポリマーは単独で投与してもよいし、たとえば炭酸マグネシウム、乳糖、またはポリマーがミセルを形成することができるリン脂質などの薬学的に許容される担体物質と組み合わせて投与してもよい。
均等物
当該分野に熟練せる者であれば、本明細書に具体的に説明されている発明の具体的態様と同等の多くの物を通常の実験手法のみによって認識または確認することができるであろう。このようなすべての他の均等物も下記請求の範囲に含まれるものとする。