(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を15重量％以上含有する、乳由来の塩基性タンパク質画分を有効成分とする血圧降下剤。
【請求項２】
乳由来の塩基性タンパク質画分が、乳または乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出して得られる画分である請求項１記載の血圧降下剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の乳由来の塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とする血圧降下剤。
【請求項４】
タンパク質分解酵素が、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン及びパンクレアチンよりなる群から選択される少なくとも１種のタンパク質分解酵素である請求項３記載の血圧降下剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、血圧降下剤及び血圧降下飲食品に関する。本発明の血圧降下剤及び血圧降下飲食品は、これを摂取することにより血圧を下げることができるので、高血圧の予防や治療に有用である。
【０００２】
【従来の技術】
高血圧症には、原因がよくわかっていない本態性高血圧症と、腎、副腎、神経系の疾患に伴う二次性高血圧症とがあるが、近年では、前者が全体の90％を占めている。現在、本態性高血圧の予防と治療には、血圧降下剤がしばしば使われている。しかし、従来の血圧降下剤には、いずれも何らかの副作用を示すという欠点があった。例えば、降圧利尿剤は低カリウム血症や高酸血症、末梢血管拡張性降圧剤は赤血球減少、β-遮断剤は気管支喘息、α-メチルドーパは血中のGOT値やGPT値の上昇及び溶血性貧血など、それぞれ特有の副作用を示す。したがって、これらの血圧降下剤を投与する際には慎重を要し、投与量及び投与期間はおのずから制限されてしまっていた。
【０００３】
このような状況の中で、副作用のない血圧降下剤の開発が強く望まれ、微生物由来の物質を有効成分とした血圧降下剤が注目された。例えば、乳酸菌由来の高分子多糖類を有効成分とするもの（特開昭59-190929号公報）、クロレラ藻体から分離された分子量１万以上の糖タンパク質からなるもの（特開昭60-45603号公報）、ストレプトコッカス属細菌の生菌体または死菌体からなるもの（特開昭61-221124号公報）、乾燥ビール酵母を有効成分とするもの（特開昭63-255234号公報）、乳酸菌の熱水抽出物からなるもの（特開昭63-139129号公報、特開平2-247127号公報）などが挙げられる。しかし、これらの中には、水不溶性であるものが多く、また、風味上の問題があるものも多いため、ほとんど実用化には至っていない。
【０００４】
そこで、日常的な経口投与が可能な食品素材に含まれている物質を有効成分とした血圧降下剤の開発が行われてきた。例えば、カゼインの酵素分解物（食品と開発,vol. 32,37-39(1997)）や魚肉の酵素分解物（健康・栄養食品研究 vol. 1,62-71(1998)、食品と開発 vol. 31,50-52(1996)）などが挙げられる。しかし、これらには、比較的多量の投与を必要とするという問題、苦味や魚臭などという風味上の問題や、飲料にした場合に保存中に沈殿するなどの保存安定性の問題があった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、これらの問題点を鑑み、広く食品素材に含まれている血圧降下作用を示す物質について、鋭意、探索を進めていたところ、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいはその塩基性タンパク質画分をペプシンやパンクレアチンなどのタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分が、経口投与により血圧を降下させることができることを見出した。そして、この塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分を血圧降下剤や血圧降下飲食品の有効成分として利用できることを見出し、本発明を完成するに至った。したがって、本発明は、この血圧降下作用を有する乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分を有効成分とする血圧降下剤を提供することを課題とする。また、本発明は、これらの画分を配合した血圧降下飲食品を提供することを課題とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明の血圧降下剤の特徴は、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいはその塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる塩基性ペプチド画分を有効成分とすることにある。この乳由来の塩基性タンパク質画分は、牛乳、人乳、山羊乳、羊乳など哺乳類の乳から得られるものであり、また、この塩基性ペプチド画分は、乳由来の塩基性タンパク質画分にタンパク質分解酵素を作用させて得ることができるものである。
【０００７】
この乳由来の塩基性タンパク質画分は、後述する試験例１〜４に示したように次の性質を有している。
1) ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)によると分子量 3,000〜80,000の範囲の数種のタンパク質よりなる。
2) 95重量％以上がタンパク質であって、その他少量の脂肪、灰分を含む。
3) タンパク質は主としてラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼよりなる。
4) タンパク質のアミノ酸組成は、リジン、ヒスチジン、アルギニン等の塩基性アミノ酸を15重量％以上含有する。
このような塩基性タンパク質画分は、例えば、脱脂乳や乳清などの乳原料を陽イオン交換樹脂と接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を0.1M〜1.0Mの塩濃度の溶出液で溶出し、この溶出画分を回収し、逆浸透(RO)膜や電気透析(ED)法などにより脱塩及び濃縮し、必要に応じて乾燥することにより得ることができる。
【０００８】
また、乳由来の塩基性タンパク質画分を得る方法としては、乳または乳由来の原料を陽イオン交換体に接触させて塩基性タンパク質を吸着させた後、この陽イオン交換体に吸着した塩基性タンパク質画分を、pH５を越え、イオン強度 0.5を越える溶出液で溶出して得る方法（特開平5-202098号公報）、アルギン酸ゲルを用いて得る方法（特開昭 61-246198号公報）、無機の多孔性粒子を用いて乳清から得る方法（特開平 1-86839号公報）、硫酸化エステル化合物を用いて乳から得る方法（特開昭 63-255300号公報）などが知られており、本発明では、このような方法で得られた塩基性タンパク質画分を用いることができる。
【０００９】
また、乳由来の塩基性ペプチド画分は、塩基性タンパク質画分と同様のアミノ酸組成を有しており、例えば、上記の方法で得られた乳由来の塩基性タンパク質画分にペプシン、トリプシン、キモトリプシンなどのタンパク質分解酵素を作用させ、さらに必要に応じ、パンクレアチンなどのタンパク質分解酵素を作用させることにより、平均分子量 4,000以下のペプチド組成物として得ることができる。
【００１０】
本発明の血圧降下剤を投与するに際しては、有効成分の乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分をそのままの状態で用いることもできるが、常法に従い、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤などに製剤化して用いることもできる。さらには、これらの塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分をそのままあるいは製剤化した後、これを栄養剤や飲食品などに配合して、血圧降下を図ることも可能である。また、カルシウム、マグネシウム、カリウム、食物繊維など従来から血圧降下作用をもつと考えられている成分とともに塩基性タンパク質画分や塩基性ペプチド画分を配合すれば、一層の血圧降下作用が期待できる。なお、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分は、比較的熱に対して安定なので、乳由来の塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分を含む原料を通常行われるような条件で加熱殺菌することも可能である。
【００１１】
本発明の血圧降下剤の投与量は、年齢、治療効果及び病態などにより異なるが、ラットを用いた動物実験の結果によると、血圧降下作用を示すためには塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分を、ラットの体重を1kgに換算して20mg以上投与する必要があることが判った。このことから、外挿法（続医薬品の開発、vol.8,7-18(1993)）にしたがうと、ヒトでの有効投与量は、成人一人当たり一日20mg以上となるので、この必要量を確保できるよう飲食品に配合したり、医薬として投与すれば良い。
次に、実施例及び試験例を示して本発明を詳細に説明する。
【００１２】
【実施例１】
陽イオン交換樹脂のスルホン化キトパール（富士紡績社製）400gを充填したカラム（直径５cm×高さ30cm）を脱イオン水で十分洗浄した後、このカラムに脱脂乳40 l (pH 6.7)を流速25ml/分で通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、 0.98M塩化ナトリウムを含む 0.02M炭酸緩衝液(pH 7.0)で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を逆浸透(RO)膜により脱塩して、濃縮した後、凍結乾燥して粉末状の塩基性タンパク質画分粉末 21gを得た。
【００１３】
【試験例１】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)により測定したところ、分子量は 3,000〜80,000の範囲に分布していた。
【００１４】
【試験例２】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、成分組成を分析した。その結果を表１に示す。この表に示すとおり、この画分のほとんどはタンパク質である。
【表１】
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【００１５】
【試験例３】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分について、6N塩酸で 110℃、24時間加水分解した後、アミノ酸分析装置（L-8500型、日立製作所製） でそのアミノ酸組成を分析した。その結果を表２に示す。この塩基性タンパク質画分には、アミノ酸組成中15重量％以上の塩基性アミノ酸が含まれている。
【表２】
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【００１６】
【実施例２】
陽イオン交換樹脂のＳＰトヨパール（東ソー社製）30kgを充填したカラム（直径 100cm×高さ10cm）を脱イオン水で十分洗浄した後、このカラムに121℃で30秒間加熱殺菌したチーズホエー3t(pH 6.2)を流速10 l/分で通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、0.9M塩化ナトリウムを含む0.1Mクエン酸緩衝液(pH 5.7)で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を電気透析(ED)法により脱塩し、濃縮した後、凍結乾燥して塩基性タンパク質画分粉末183gを得た。
【００１７】
【実施例３】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分粉末 50gを蒸留水10 l に溶解した後、１重量％パンクレアチン（シグマ社製）溶液 50mlを添加し、37℃で２時間反応させた。反応後、80℃で10分間加熱処理して酵素を失活させた後、濃縮し凍結乾燥して塩基性ペプチド画分粉末48.3g を得た。
【００１８】
【試験例４】
実施例１で得られた塩基性タンパク質画分粉末及び実施例３で得られた塩基性ペプチド画分粉末について、先天的に高血圧の遺伝的要素をもつSHRラットを用いた動物実験により血圧降下作用を調べた。20週齢のSHR雄ラットを、生理食塩水投与群（Ａ群）、塩基性タンパク質画分粉末をラット体重1kg換算で20mg投与する群（Ｂ群）、塩基性タンパク質画分粉末をラット体重1kg換算で200mg投与する群（Ｃ群）、塩基性ペプチド画分粉末をラット体重1kg換算で20mg投与する群（Ｄ群）、塩基性ペプチド画分粉末をラット体重1kg換算で200mg投与する群（Ｅ群）の5試験群（ｎ＝８）に分け、それぞれを毎日1回ゾンデで投与して8週間飼育し、4週間後と8週間後に収縮期血圧を測定した。その結果を表3に示す。
【表３】
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【００１９】
これによると、4週間後の収縮期血圧は、対照群であるＡ群に比べ、試験群であるＣ群とＥ群で有意に低い値を示した。さらに、8週間後の収縮期血圧は、Ａ群に比べ、Ｂ群、Ｃ群、Ｄ群及びＥ群で有意に低い値を示した。
このことから、塩基性タンパク質画分及び塩基性ペプチド画分には血圧降下作用があることが明らかとなった。
また、この血圧降下作用は塩基性タンパク質画分または塩基性ペプチド画分をラット体重1kgに換算で最低20mg投与した場合に認められることが明らかとなった。
【００２０】
【実施例４】
表４に示す組成の血圧降下飲料を製造した。製造した飲料の風味は良好で、常温1年間保存によっても風味が劣化することはなく、沈殿等の問題もなかった。
【表４】
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【００２１】
【実施例５】
表５に示す組成のドウを作成し、成形した後、焙焼して血圧降下ビスケットを製造した。
【表５】
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【００２２】
【実施例６】
表６に示す組成の血圧降下錠剤を製造した。
【表６】
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【００２３】
【発明の効果】
本発明の血圧降下剤や血圧降下飲食品は、これを摂取することにより血圧を下げることができるので、高血圧の予防や治療に有用である。