(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルコール溶媒中でフマギリンジシクロへキシルアミン塩を有機酸と反応させることを特徴とする、その塩からの遊離による、フマギリン調製プロセス。
【請求項２】
ｐＫａ値が４．７〜４．９である、有機酸、アルカンカルボン酸を使用することを特徴とする、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
アルカンカルボン酸として酢酸またはプロピオン酸を使用することを特徴とする、請求項２に記載のプロセス。
【請求項４】
アルコール溶媒として、メタノール、エタノールまたはプロパノールを使用することを特徴とする、請求項１に記載のプロセス。
【請求項５】
有機酸を過剰に使用することを特徴とする、請求項１に記載のプロセス。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔａの発酵生成物である、式（Ｉ）のフマギリンは、強力な殺小胞子虫剤である。その安定なジシクロヘキシルアミン塩で、ミツバチや魚の小胞子虫症の予防として動物治療薬として用いられている（Ｆｕｍｉｄｉｌ、Ｆｕｍａｄｉｌ  Ｂ、Ａｍｅｂｉｃｉｌｌｉｎなど）。
【０００２】
【化１】
0003923798.tif 000002
【０００３】
フマギリンは最近、微胞子虫類および／またはクリプトスポリジウムによって引き起こされるヒトの腸感染症の治療に有用であることがわかった（ＷＯ  ９６／３００１０）。これらの感染症は、免疫不全患者には致命的な疾病である。
【０００４】
デカテトラエンジオール酸およびフマギロールのモノエステルであるフマギリンは、非常に感受性の高い物質である。その反応基（ヒドロキシル化および開環が可能な２個のエポキシド；二量体化、重合、エポキシ化、ヒドロキシル化が可能な共役ポリエン鎖；加水分解可能なエステル基）に帰因して、フマギリンは熱、空気、光、酸、塩基に非常に感受性が高い。−８０℃で安定であると見なされる。
【０００５】
フマギリンは、シクロヘキシルアミンまたはジクシクロヘキシルアミンなどの（後者は動物治療薬として用いられる）、大きいシクロアルキル置換基を含むアミンを有することにより安定な塩となる。しかしこれらのアミンは、親油特性によって組織に蓄積し得るため、塩状態の成分としてはヒト医薬品として製造承認されていない。加えて、動物治療薬として用いられるフマギリンジシクロヘキシルアミン塩の純度は、わずか８５％である（このことはフマギリン含有量がわずか６１％であることを意味する）。
【０００６】
ヒトの治療に適切な薬剤物質として適切なフマギリンを得るために、我々は、市販のジシクロヘキシルアミン塩から、スケールアップにも適した方法によって、単一形のフマギリンを調製することを目的とした。−遊離後の−再結晶化によるフマギリンの生成は少量で可能であるが、物質の感熱性によって、大量の場合は適当ではない。したがって、我々の研究において、遊離プロセスから直接、さらなる精製を行わずに、単一状態のフマギリンを得ることは不可欠であった。
【０００７】
単一のフマギリンのその塩からの調製についての文献はない。
【０００８】
有機酸をその塩から得るための一般的な方法は、無機または有機酸によって水性溶媒にて酸を遊離することである。フマギリンは酸に感受性が高いため、より緩やかな有機酸、すなわちｐＫａ４．７〜４．９のアルカンカルボン酸を過剰量を用いた。
【０００９】
我々は、過剰量の酢酸（ｐＫａ  ４．７６）を用いて、フマギリンをそのジシクロヘキシルアミン塩から遊離させた。水性反応混合物の温度は０〜（＋５）℃に注意深く維持した。しかし、沈殿したフマギリンは十分な純度ではなかった。したがってジクロロメタンを用いて抽出し、ジクロロメタン相を水で洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮し、さらにメタノールを加えた濃縮溶液からフマギリンを沈殿させた。それゆえ得られた生成物は単一であったが、残留ジクロロメタンを大量に含んでいた。プロセス全体は長く、スケールアップには適していなかった。収率は４５〜６０％の間で変化し、収率と生成物の品質はあまり再現性がなかった。
【００１０】
上述の方法の欠点を回避するため、有機溶媒中でアルカン酸による遊離を行った。トルエン中での遊離は成功したが、酸の作用による塩の溶解の直後に、フマギリンが沈殿し、濾過が重要であるかもしれないが、濾過を行うことができない。生成物は要求した程の純度ではなく、残留物のトルエン含有量は高かった。
次に、濾過をプロセス中で実施するため、溶媒中で又はクリテリウム（criterium）を様々な比率で混合した溶媒混合物中で遊離を実施した。我々はトルエン、アルコール、ジクロロメタン、アセトニトリル、ジオキサン、アセトン、酢酸エチル、それらの二つの混合物などの溶媒を試した。収率は中程度から良好であった。生成物の残留物溶媒含有量も調査した。我々の発明の主題は、上記に従って、アルコール溶媒中でフマギリンジシクロヘキシルアミン塩を有機酸に反応させることを特徴とする、フマギリンをその塩から遊離することによる調製プロセスである。
【００１１】
有機酸として、ｐＫａ値４．７〜４．９のアルカン酸、好ましくは酢酸、プロピオン酸、アルコール溶媒としてメタノール、エタノールまたはプロパノールを用いることができる。有機酸は過剰量使用することが好ましい。
【００１２】
我々のプロセスの結果として、アルコール溶媒中の遊離によって、驚くほど好ましい結果が得られることがわかった。塩溶液を濾過し、透明溶液から酸を遊離させた。収率は良好であり、生成物は単一であった。アルコールの場合には残留溶媒含有量は重大ではないが、生成物が残留溶媒をほとんど含まないことが好ましい。プロセス自体は穏やかで、迅速であり、再現性が良好であった。
【００１３】
最も驚くべき結果は、本アルコール方法によって得られたフマギリンサンプル−おそらくその純度と残留溶媒含有量が低いことによって−他の方法によって得られたサンプルよりもかなり安定であることがわかった。
【００１４】
我々は、各種方法で得た選択されたサンプルの、４０℃、周囲湿度における２週間の安定性試験を実施した。サンプルのフマギリン含有量は、ストレス付与の前後でＨＰＬＣによって測定した。一部の実験結果を以下の表に示す。
【００１５】
遊離のために、３つの同等の酢酸をすべての実験例で用いた。
【００１６】
【表１】
0003923798.tif 000003
【００１７】
このようにして、我々は高収率、純粋な状態のフマギリンを得る方法を発見した；さらに、この方法で得られた生成物は、他の調製方法で得られた生成物よりもかなり安定であることがわかった。そのような感受性の高い薬剤物質の場合は、より高い安定性は著しい利点である。
【００１８】
プロセス自体は単純、迅速であり、再現性が良好であり、環境に優しく、スケールアップにも適している。
【００１９】
本発明のさらなる詳細は、以下の実施例に例示し、請求項はこれらの実施例に制限されることはない。
【００２０】
実施例
実施例１
３当量酢酸による、メタノール溶媒中におけるフマギリンのそのジシクロヘキシルアミン（ＤＣＨ）塩からの遊離
３．２ｇ（５ｍｍｏｌ）のフマギリンＤＨＣ塩を１６ｍｌのメタノールに室温で溶解した。不溶性物質は濾過により除去した。透明な濾液に、室温で撹拌しながら０．９０ｇ（１５ｍｍｏｌ）の９９〜１００％酢酸を加えた。数分の撹拌後、白色の微細結晶物質が沈殿し始め、５〜１０分以内に濃厚な懸濁液が得られ、これを冷蔵庫で一晩冷却した。次に結晶を濾過して、冷メタノール（３×４ｍｌ）で洗浄し、室温にて真空乾燥機中で乾燥させた（約７時間）。
0003923798.tif 000004
【００２１】
【化２】
0003923798.tif 000005
【００２２】
実施例２  ４当量酢酸による、メタノール溶媒中におけるフマギリンのそのジシクロヘキシルアミン（ＤＣＨ）塩からの遊離  ３．２ｇ（５ｍｍｏｌ）のフマギリンＤＨＣ塩を１６ｍｌのメタノールに室温で溶解した。不溶性物質は濾過により除去した。透明な濾液に、室温で撹拌しながら１．２０ｇ（２０ｍｍｏｌ）の９９〜１００％酢酸を加えた。数分の撹拌後、白色の微細結晶物質が沈殿し始め、濃厚な懸濁液が得られ、これを実施例１で述べたように処理した。
0003923798.tif 000006
【００２３】
実施例３
２当量酢酸による、メタノール溶媒中におけるフマギリンのそのジシクロヘキシルアミン（ＤＣＨ）塩からの遊離
３．２ｇ（５ｍｍｏｌ）のフマギリンＤＨＣ塩を１６ｍｌのメタノールに室温で溶解した。不溶性物質は濾過により除去した。透明な濾液に、室温で撹拌しながら０．６０ｇ（１０ｍｍｏｌ）の９９−１００％酢酸を加えた。数分の撹拌後、白色の微細結晶物質が沈殿し始め、濃厚な懸濁液が得られ、これを冷蔵庫で一晩冷却した。次に結晶を濾過して、冷メタノール（３×４ｍｌ）で洗浄し、室温にて真空乾燥機中で乾燥させた（約１０時間）。
0003923798.tif 000007
【００２４】
実施例４
３当量プロピオン酸による、メタノール溶媒中におけるフマギリンのそのジシクロヘキシルアミン（ＤＣＨ）塩からの遊離
３．２ｇ（５ｍｍｏｌ）のフマギリンＤＨＣ塩を１６ｍｌのメタノールに室温で溶解した。不溶性物質は濾過により除去した。透明な濾液に、室温で撹拌しながら１．１１ｇ（１５ｍｍｏｌ）の９９％プロピオン酸を加えた。数分の撹拌後、白色の微細結晶物質が沈殿し始め、濃厚な懸濁液が得られ、これを冷蔵庫で一晩冷却した。次に結晶を濾過して、冷メタノール（３×４ｍｌ）で洗浄し、室温にて真空乾燥機中で乾燥させた（約９時間）。
0003923798.tif 000008