(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記工程により得ることができる多孔質ポリマーからなる吸着剤：
ａ）本質的にポリアミドよりなる多孔質ベースポリマーを用意する工程；
ｂ）該ポリマー中に、重合性二重結合とオキシラン環の両方を含む化合物と該ポリアミドと反応することによって該ベースポリマー中に重合可能な二重結合を導入する工程；
ｃ）工程ｂ）で変性されたポリアミド上に、重合性二重結合及びエポキシ基、または分析物の分離に重要である基である分離作動体を含むモノマーを重合し、該モノマーの重合鎖によって変性された多孔質ベースポリマーを得る工程。
ｄ）必要により、さらに前記ｃ）工程で導入されたエポキシ基と分析物の分離に重要である基を有する化合物とを反応させて、分離作動体を導入する工程。
【請求項２】
請求項１の多孔質ポリマーからなる吸着剤において、重合性二重結合とオキシラン基の両方を含む化合物が式Ｉの化合物である多孔質ポリマーからなる吸着剤。
0003974653.tif 000008
式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が互いに独立してＨまたはＣＨ3であり、Ｒ4はＨ，１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基または６ないし１２個の炭素原子を持つアリール基であり、ｎは１ないし５の整数である。
【請求項３】
工程ｃ）のモノマーがアクリル酸である請求項１記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
【請求項４】
工程ｃ）で導入されるモノマー単位が式IIIのモノマー単位である請求項１記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
0003974653.tif 000009
式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が互いに独立してＨまたはＣＨ3であり、Ｒ5はＨまたは−ＣＯＯＨ、−ＳＯ3ＨまたはＮＲ7Ｒ8で置換された１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基、または−ＣＯＯＨ、−ＳＯ3ＨまたはＮＲ7Ｒ8で置換された６ないし１２個の炭素原子を持つアリール基であり、Ｒ6は−ＣＯＯＨ、−ＳＯ3ＨまたはＮＲ7Ｒ8で置換された１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基、または−ＣＯＯＨ、−ＳＯ3ＨまたはＮＲ7Ｒ8で置換された６ないし１２個の炭素原子を持つアリール基であり、式中Ｒ5，Ｒ6はどちらの基も酸性またはアルカリ性であるかどちらか一つが中性であるように選ばれ、Ｒ7とＲ8は互いに独立してＨまたは１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基である。
【請求項５】
工程ｃ）で導入されるモノマー単位が式ＩＩのモノマー単位である請求項１記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
0003974653.tif 000010
式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が互いに独立してＨまたはＣＨ3であり、Ｒ4はＨ，１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基または６ないし１２個の炭素原子を持つアリール基であり、ｎは１ないし５の整数である。
【請求項６】
請求項５記載の吸着剤中のモノマー単位である式ＩＩのエポキシ基を、工程ｄ）において式ＩＶに変化させた請求項１記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
0003974653.tif 000011
式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が互いに独立してＨまたはＣＨ3であり、Ｒ4はＨ，１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基または６ないし１２個の炭素原子を持つアリール基であり、ｎは１ないし５の整数であり、一つの基Ｘは−ＯＨ基であり、他のＸ基は−ＰＯ4Ｈ2、−ＮＲ7Ｒ8
及びＮ+Ｒ7Ｒ8Ｒ9よりなる群から選ばれるイオン基であり、Ｒ7、Ｒ8は互いに独立してＨまた１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基、Ｒ9は１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基である。但しＸ＝Ｎ+Ｒ7Ｒ8Ｒ9の場合はＲ7とＲ8はＨではない。
【請求項７】
請求項５記載の吸着剤中のモノマー単位である式ＩＩのエポキシ基を、工程ｄ）において式ＩＶに変化させた請求項１記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
0003974653.tif 000012
式中、一つのＸ基がＯＨであり、他のＸ基は−ＯＲ10または−ＮＨＲ10であり、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が互いに独立してＨまたはＣＨ3であり、Ｒ4はＨ，１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基または６ないし１２個の炭素原子を持つアリール基であり、ｎは１ないし５の整数であり、Ｒ10はＣ1−Ｃ20アルキル、Ｃ6−Ｃ25アリール、Ｃ7−Ｃ25アルキルアリールまたはＣ7−Ｃ25アリールアルキルであり、また式中これらの基をニトリルまたはＣ1−Ｃ5アルコキシ基で変性することもできる。また式中、さらに、一つまたはそれ以上の隣り合っていないＣＨ2基をＮＨまたはＯで置換することもでき、あるいは他の一つまたはそれ以上のＣＨ基をＮで置換することもできる。
【請求項８】
請求項５記載の吸着剤中のモノマー単位である式ＩＩのエポキシ基を、工程ｄ）において式ＩＶに変化させた請求項１記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
0003974653.tif 000013
式中、一つのＸ基は−ＯＨであり、もう一つのＸ基が金属キレートアフィニティ基であり、式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が互いに独立してＨまたはＣＨ3であり、Ｒ4はＨ，１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基または６ないし１２個の炭素原子を持つアリール基であり、ｎは１ないし５の整数である。
【請求項９】
請求項８記載の式においてＸである金属キレートアフィニティ基が−Ｎ（ＣＨ2ＣＯＯＨ）2である請求項８記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
【請求項１０】
請求項５記載の吸着剤中のモノマー単位である式ＩＩのエポキシ基を、工程ｄ）において式ＩＶに変化させた請求項１記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
0003974653.tif 000014
式中、一つのＸ基は−ＯＨであり、もう一つのＸ基が親硫黄基であり、式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3が互いに独立してＨまたはＣＨ3であり、Ｒ4はＨ，１ないし５個の炭素原子を持つアルキル基または６ないし１２個の炭素原子を持つアリール基であり、ｎは１ないし５の整数である。
【請求項１１】
請求項１０記載の式においてＸである親硫黄基が−Ｓ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＳＯ2−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＨである請求項１０記載の多孔質ポリマーからなる吸着剤。
【発明の詳細な説明】
本発明はポリアミドの重合性変性体、この変性されたポリアミドに対するグラフト重合の方法、最後にこれらの方法によってつくられるグラフト重合体と成形品に関する。
グラフト反応によって重合体の表面や重合体からつくられる成形品の表面を変性することは可能であり、そのため基材重合体だけでは達成されない性質をうることが可能になる。
グラフト反応を行う種々の方法が知られている。これらの方法は、その長所や短所と共に、例えばＷＯ  ９１／０３  ５０６において詳細に論じられている。例えばグラフトは高エネルギー放射線による励起を用いて行うことができるが、これに伴って望ましくない副反応が起る：すなわち重合体の機械的強度を損なう重合体鎖の崩壊や材料の脆化をまねく架橋反応である。グラフト重合の他の方法では強い酸性媒体の使用が必要であるが、この方法の間にポリアミドは部分的に加水分解をうける。グラフト重合の他の方法は遊離基開始剤がグラフトされるべき基材重合体の存在下に単量体の単独重合を誘発する連鎖移動反応に基いている。グラフトの位置は望み通りには制御されない。
ＷＯ  ９１／０３  ５０６には、遊離基反応が還元剤の存在下に四塩化炭素で処理することによって始まる、ポリアミド膜にグラフトする方法が開示されている。この方法では遊離基鎖はハロアミドから出発する未知の反応機構によって生じる。文献からハロアミドは非常に反応性が高いことが知られている。このため変性された膜を使用すると蛋白質の共有結合のような望ましくない反応が起る。更に、還元剤の使用はポリアミドの機械的性質を損なう。
本発明の目的はポリアミドの目標とする変性を行う方法を提供することである。これらの変性されたポリマーは次に周知の方法でさらに反応させることができる。これらの方法を、例えば、中空繊維膜にさえ適用できる充分な程度に、得られる変性されたポリアミドはその機械的性質を保持しなければならない。
本発明はポリアミドを重合性二重結合とまたオキシラン環を共に含む化合物と反応させることによって得られる、重合性二重結合で変性されたポリアミドに関する。重合性二重結合とまたオキシラン環を共に含む化合物として式Ｉの化合物が好ましい。
0003974653.tif 000002
式中：
Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は互に独立してＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ4はＨ、１ないし５個の炭素原子をもつアルキル、または６ないし１２個の炭素原子をもつアリールであり、
ｎは１ないし５の整数である。
本発明はまた、基材ポリマーとして、重合性二重結合をもつ本発明によって変性されたポリアミドに、単量体を重合させて得られるグラフト重合体に関する。
式II、III、IVまたはＶの単量体単位を含むグラフト重合体が特に好ましい：
0003974653.tif 000003
式中：
Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は互に独立してＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ4はＨ、１ないし５個の炭素原子をもつアルキル、または６ないし１２個の炭素原子をもつアリールであり、
ｎは１ないし５の整数である。
0003974653.tif 000004
式中
Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は互に独立してＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ5はＨ、または−ＣＯＯＨで、−ＳＯ3Ｈでまたは−ＮＲ7Ｒ8で置換された１ないし５個の炭素原子をもつアルキル、または−ＣＯＯＨで、−ＳＯ3Ｈまたは−ＮＲ7Ｒ8で置換された６なし１２個の炭素原子を持つアリールであり、
Ｒ6は−ＣＯＯＨで、−ＳＯ3Ｈでまたは−ＮＲ7Ｒ8で置換された１なし５個の炭素原子を持つアルキル、または−ＣＯＯＨで、−ＳＯ3Ｈまたは−ＮＲ7Ｒ8で置換された６なし１２の炭素原子をもつアリールであり、
式中
Ｒ5とＲ6はどちらの基も酸性または塩基性であるかあるいはどちらか一つが中性であるように選ばれ
Ｒ7とＲ8は互に独立してＨまたは１ないし５個の炭素原子をもつアルキルである。
0003974653.tif 000005
式中：
Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は互に独立してＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ4はＨ、１ないし５個の炭素原子をもつアルキル、または６ないし１２個の炭素原子をもつアリールであり、
ｎは１ないし５の整数であり、
一つのＸ基は分離効果体（分離エフェクター）で他のＸ基はＯＨである。
分離効果体は特に下記のうちの一つである：
ａ）−ＰＯ4Ｈ2，−ＮＲ7Ｒ8およびＮ+Ｒ7Ｒ8Ｒ9よりなる群から選ばれるイオン基、
式中
Ｒ7とＲ8は互に独立してＨまたは１ないし５個の炭素原子をもつアルキルであり、Ｒ9は１ないし５個の炭素原子をもつアルキル、
但しＸ＝−Ｎ+Ｒ7Ｒ8Ｒ9の場合はＲ7とＲ8は水素ではない。
ｂ）疎水性部分基−ＯＲ10または−ＮＨＲ10、式中Ｒ10はＣ1−Ｃ20アルキル、Ｃ6−Ｃ25アリール、Ｃ7−Ｃ25アルキルアリールまたはＣ7−Ｃ25アリールアルキルであり、また式中これらの基をニトリルまたはＣ1−Ｃ5アルコキシで変性することもでき、また式中、さらに、一つまたはそれ以上の隣り合っていないＣＨ2基をＮＨまたはＯで置換することもできあるいはほかに一つまたはそれ以上のＣＨ基をＮで置換することもできる；
ｃ）金属キレート部分基；
ｄ）親硫黄基（親チオ基）。
親硫黄基は、例えば、ＥＰ  Ｏ  １６５  ９１２に開示されている。
0003974653.tif 000006
式中；
Ｒ1、Ｒ2とＲ3は互に独立してＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ4はＨ、１ないし５個の炭素原子をもつアルキル、または６ないし１２個の炭素原子をもつアリールであり、
ｎは１ないし５の整数であり、
一つのＹ基は式VIの基で他のＹ基はＯＨであり、
0003974653.tif 000007
Ｒ7とＲ8は互に独立してＨまたは１ないし５個の炭素原子をもつアルキルである。
特に式IIまたはＶの単量体単位を有するグラフト重合体はアフィニティ保持体をつくるためにまたは酵素を固定化するために用いることができる。
従って本発明はまた本発明のグラフト重合体からつくることができるアフィニティ保持体および固定化酵素に関する。
ポリアミドからつくられる多孔質または非多孔質の成形品は周知である：例として膜、スポンジ、管および中空繊維膜があげられる。従って本発明はまた本質的に本発明のグラフト重合体よりなりかつさらにアフィニティ配位子または固定化酵素を含むこの型式の成形品に関する。
本発明によれば、第一反応工程において、不飽和基がポリアミドに導入される。好適なポリアミドは当業者には周知であり、また市場で求められる。例として、ナイロンR６６のような、ナイロンRの商品名で知られる重合体がある。この形式のポリアミドよりなる多孔質および非多孔質の成形品は同様に周知でありまた市販されている；例として球（ビード）型成形品、膜、管、中空繊維膜やスポンジがあげられる。
変性されるＦポリアミドは不飽和Ｃ＝Ｃ部分基とオキシラン環を共に含む化合物と反応する。この反応はハロ炭化水素や還元剤を添加せずに優れた方法で行うことができることが分った。反応は水性有機溶液中でｐＨ＞５で行われる。特に好ましい有機溶媒はジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）およびジオキサンである。ここで有機溶媒の割合は一般に重量で３０％以上である。反応を純粋な有機溶媒中で行うことも可能である。もし反応がｐＨ＞１０で行われるならば、純粋に水性の相中で行うことも可能である。１００ｃｍ2の変性される表面に対して、反応は一般に１ないし２０ｇの、例えばメタクリル酸グリシジルのような、不飽和Ｃ＝Ｃ部分基とまたオキシラン環を共に含む化合物を５０ないし５００ｍｌの溶媒に溶かして使用する。反応は一般に３０℃ないし６０℃で行われ、また一般に３０分ないし数時間を要する。水よりなる媒体中では、ｐＨを調整するために緩衝液が加えられる：緩衝液の濃度は一般に１０ｍＭないし２Ｍである。好適な緩衝液は当業者には周知である：例として硼酸塩や炭酸塩緩衝液があげられる。純粋に水性の溶液中での反応はまた水酸化アルカリ金属の稀薄溶液（例えば０．１ないし２Ｍの水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム溶液）中でも行うことができる。ハロ炭化水素または還元剤の添加は必要でなく本発明ではその意図はない。
不飽和Ｃ＝Ｃ部分基とまたオキシラン環を共に含む化合物は当業者には周知である：例として特にメタクリル酸グリシジル、アクリル酸グリシジル、ビニルグリシジルエーテルおよびビニルグリシジルウレタンがあげられる。メタクリル酸グリシジルを用いることが好ましい。
ポリアミドを不飽和Ｃ＝Ｃ部分基とまたオキシラン環を共に含む化合物と反応させることによって、不飽和Ｃ＝Ｃ部分基は非常にゆるやかにポリアミド中に導入される。さらに一般に知られる方法で単量体をこれらの部分基に重合させることができる。これら単量体の選択は変性された膜の意途する用途による：
ａ）ＤＥ  ３８  １１  ０４２は、なかでも、イオン交換体をつくるのに適した単量体を開示している：例としてアクリル酸、Ｎ−（スルホエチル）−アクリルアミド、２−アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノエチルアクリルアミド、およびトリメチルアンモニウムメチルアクリルアミドがある。
この刊行物にあげられた他の単量体はアフィニティ配位子または酵素を結合させることができるか、または逆相クロマトグラフィーに適している；例としてアクリル酸、アクリルアミド、アリルアミンおよびアクリロニトリルがあげられる。
ｂ）ＤＥ  ４３  １０  ９６４はオキシラン環、アズラクトン環、またはアズラクトン環に転化可能な部分基を含む単量体を開示している。このタイプの単量体よりなる重合体はアフィニティ配位子または酵素を結合させるのに特に効果的である。アフィニティ配位子は、例えば、ＤＥ  ４３  １０  ９６４に開示されている。
さらにまた、このタイプの重合体中のエポキシド基は有利にも更に反応してイオン交換体、親硫黄性吸着剤、または金属キレートクロマトグラフィまたは疎水性クロマトグラフィ用の吸着剤をつくることができる。このような反応において、燐酸、ジエチルアミン、トリエチルアミン、亜硫酸、あるいは他にイミノ二醋酸のような錯体生成化合物がオキシラン環に付加される。
親硫黄性吸着剤と金属キレートクロマトグラフィ用の吸着剤の調製はＤＥ  ４３  １０  ９６４に開示されている。
ＤＥ  ４３  ３３  ６７４とＤＥ  ４３  ３３  ８２１にはイオン交換体をつくるのに適用できるこのタイプの反応が開示されている。
ＤＥ  ４３  ２３  ９１３には疎水性相互作用クロマトグラフィ用の吸着剤が記載されている。
本発明によれば上記の方法によってクロマトグラフィ保持体の中に導入されかつ分析物（アナライト）の分離に重要な基はまとめて分離作動体と呼ばれる。
種々の吸着剤の調製とそれらの使用について詳細は上記の刊行物に見ることができる；これら刊行物中の関係のある開示は参考として本出願に収録されている。
本発明によれば分析物を分離させる種々の部分基は分離作動体の名のもとにまとめられる。その例は上記の刊行物に見ることができる。
さらなる単量体を本発明によって変性されたポリアミドに重合させる反応は、反応溶液の再循環ポンピングまたは通過ポンピングによって、攪拌しながら行うことができる。再循環ポンピングの場合は反応溶液はポリアミド膜を通過した後循環され再びポンプで送られるが、一方通過ポンピングでは反応溶液はポリアミド膜を通過した後に廃棄される。後者の型の方法が好ましい。
分離作動体を含む、本発明に従って変性され、グラフトされた膜は、例えば、同様な分離作動体を有する粒状の吸着剤の場合に通常用いられる方法に似た方法で物質の分離に用いることができる。吸着剤上の滞留時間は短いので、この方法を行っている間に特に生物学的活性が減少するという危険は少い。この型式を応用した例は粗抽出物から天然または組換え酵素を単離することである。かくして、例えば、メガテリウム菌からグルコースデヒドロゲナーゼの単離またはトリティラチウムアルブムからプロティナーゼＫの単離には第三アミノ基（例えばＤＥＡＥ）または第四アンモニウム基（例えばＴＭＡＥ）をもつ吸着剤上のクロマトグラフィー工程が含まれる。免疫グロブリンの等電点に基く、例えばＩｇＧまたはＩｇＭのような、多クローン性または単クローン性の免疫グロブリンの単離には、陰イオンまたは陽イオン交換体（例えばＴＭＡＥまたはＳＯ3-基を有するもの）が用いられるが、特に親硫黄性または疎水性支持体もまた用いられる。生物学的活性の保持は凝固因子あるいは血漿（プラズマ）または血清の他の活性成分の単離において決定的に重要である。かくしてプロトロンビン錯体やα1−抗トリプシンの単離において、クロマトグラフィーはＤＥＡＥ保持体上で行われる。IX因子の濃縮には、クロマトグラフィーは通常アミノ基を有する保持体上で行われる。VIII因子の単離において、クロマトグラフィー工程は通常第三級アミノ基（例ＤＥＡＥ）または第四級アンモニウム基（例ＴＭＡＥ）を有する吸着剤上またはほかに疎水性分離材上で行われる。
生物学的活性の保持が特に重要である物質の分離の他の例は文献から当業者には知られている。このような事例のすべてにおいて、特別な分離作動体を有する粒状クロマトグラフィー保持体は同一または類似の分離作動体を含む本発明の膜によっておきかえることができる。このタイプの分離作動体を含む膜の例は既に述べてきたし、特に、下記の実施例において示される。
下記の実施例は本発明の実体をより詳細に述べることを意図するものであって本発明の実体を限定するものではない。
更に詳細に述べなくても当業者は上の記述を最大限に利用することができると思われる。従って好ましい実施態様は単にいかなる事情があってもとにかく限定的でない記述的開示として理解されたい。
上記および下記の全部の出願、特許および刊行物の、および１９９５年１月２０日に提出された類似の出願ＤＥ  １  ９５  ０１  ７２６．９の完全な開示は参考として本出願に収録されている。
実施例
以下室温は１５ないし３０℃の温度を意味すると解される。
実施例１：水溶液中でポリアミドにＣ＝Ｃ結合の導入（変法Ａ）
合成を行うために、ナイロンのポリアミド繊維束（繊維数６４の繊維束、長さ３２ｃｍ，内径約２００μｍ、外径約２ｍｍ，平均孔径１−２μｍ、表面積９７ｃｍ2）を３０ｃｍに短くし、３００−１０ｍｍのスーパーフォーマンスR（Ｅ．メルク）クロマトグラフィカラムに充填する。イナートポンプをこのカラムに接続する。装置を先づ水で洗い流す。反応のために、２０ｇのメタクリル酸グリシジルを２００ｍｌの１ＭＮａＯＨに溶解し４０℃で高速（５ｍｌ／分）でポンプを用いて２時間循環させる。次に変性された膜を水で洗滌する。
実施例２：ポリアミドにＣ＝Ｃ結合の導入（水性有機溶液：変法Ｂ）
１０ｇのメタクリル酸グリシジルを２００ｍｌの水性ジメチルホルムアミド（５０容量％）に溶解しポンプを用いて実施例１に記載の装置の中を循環させる（６０℃で２時間）。次に変性された中空繊維膜を水で洗滌する。
実施例３：ポリアミドにＣ＝Ｃ結合の導入（水性有機溶液：変法Ｃ）
１０ｇのメタクリル酸グリシジルを２００ｍｌの水性ジメチルスルホキシド（５０容量％）に溶解しポンプを用いて実施例１に記載の装置の中を循環させる（６０℃で２時間）。次に変性された中空繊維膜を水で洗滌する。
実施例４：ポリアミドにＣ＝Ｃ結合の導入（水性有機溶液：変法Ｄ）
１０ｇのメタクリル酸グリシジルを２００ｍｌの水性ジメチルホルムアミド（０．５Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ１０）中で５０容量％）に溶解しポンプを用いて実施例１に記載の装置の中を循環させる（６０℃で２時間）。次に変性された中空繊維膜を水で洗滌する。
実施例５：ポリアミドにＣ＝Ｃ結合の導入（水性有機溶液：変法Ｅ）
１０ｇのメタクリル酸グリシジルを２００ｍｌの水性ジメチルスルホキシド（０．５Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ１０）中で５０容量％）に溶解しポンプを用いて実施例１に記載の装置の中を循環させる（６０℃で２時間）。次に変性された中空繊維膜を水で洗滌する。
実施例６：ポリアミドにＣ＝Ｃ結合の導入（水性有機溶液：変法Ｆ）
１０ｇのメタクリル酸グリシジルを４０ｍｌのジオキサンと１６０ｍｌの水の混合物に溶解し、次に１７．５ｇのＮａＯＨ溶液（３２重量％）を加える。次にこの溶液をポンプを用いて実施例１に記載の装置の中を循環させる（流速３ｍｌ／分；５０℃で１時間）。次に変性された中空繊維膜を１００ｍｌの水、２００ｍｌのアセトンおよび１００ｍｌのトルエンで洗滌する。
実施例７：平板ポリアミド膜にＣ＝Ｃ結合の導入
三層の平板ポリアミド膜（各々厚さ３ｍｍ；径１２ｃｍ，孔の幅０．２μｍ）を市販の膜ホルダーで締付け、実施例６に準じてメタクリル酸グリシジルと反応させる。次に変性された膜を水で洗滌する。
実施例８：メタクリル酸グリシジルとのグラフト重合
実施例１におけるように変性された中空繊維膜を、同例に記載された装置中で、最初はアセトン、次にトルエン（各々２００ｍｌ）で洗滌する。次に２００ｍｌトルエン中の２０ｇのメタクリル酸グリシジルと１ｇのアゾイソブチロニトリル（重合開始剤）の溶液を８０℃で１時間ポンプによって循環させる。変性中空繊維膜を次にトルエンとアセトンで洗滌する。
実施例９：メタクリル酸グリシジルとのグラフト重合
２００ｍｌのトルエン中の１５ｇのメタクリル酸グリシジルと１ｇのアゾイソブチロニトリル（重合開始剤）の溶液を１００℃で１時間ポンプを用いて、実施例１に記載の装置中で、実施例６におけるように変性され洗滌された中空繊維膜を通して循環させる（７ｍｌ／分）。次に変性中空繊維膜をトルエンとアセトンで洗滌する。
実施例１０：アクリル酸とのグラフト重合
実施例１におけるように変性された中空繊維膜を、同例に記載の装置の中で、最初にアセトンで、次にトルエンで洗浄する（各々２００ｍｌ）。次に２００ｍｌのトルエン中の１０ｇのアクリル酸と１ｇのアゾイソブチロニトリルの溶液をポンプを用いて８０℃で１時間循環させた。次に変性中空繊維膜をトルエン、アセトンおよび水および１ＭＮａＯＨで洗浄する。
実施例１１：メタクリル酸グリシジルの通過流を用いるグラフト重合
実施例６におけるように変性された中空繊維膜を、同例に記載の装置の中で、最初にアセトンで、次にトルエンで洗滌する（各々２００ｍｌ）。２００ｍｌのトルエン中の２０ｇのメタクリル酸グリシジルと１ｇのアゾイソブチロニトリル（重合開始剤）の溶液を準備する。９０℃で１０ｃｍ／分の速度でこの溶液の線状流をポンプを用いて装置の中を通す；この方法は約２０分を要する。次に変性中空繊維膜をトルエンとアセトンで洗滌する。
実施例１２：メタクリル酸グリシジルとのバッチグラフト重合
１０ｇのポリアミド粉末（平均粒径２００μｍ，平均孔径３μｍ）を実施例１に準ずる方法で変性する。次に三口フラスコ中でこの変性されたポリアミド粉末を２００ｍｌのトルエン中の２０ｇのメタクリル酸グリシジルと１０ｇのアゾイソブチロニトリル（重合開始剤）の反応溶液中で攪拌しながら８５℃で３時間反応させ、次に反応生成物をトルエンとアセトンで洗滌する。
実施例１３：メタクリル酸グリシジルの通過流を用いて変性された平板膜へのグラフト重合
実施例７におけるように変性された平板ポリアミド膜を実施例１０に準ずる方法で２リットルのトルエン中の２００ｇメタクリル酸グリシジルと１０ｇのアゾイソブチロニトリル（重合開始剤）の反応溶液の通過流と９５℃で反応させる。次にこの変性膜をトルエンとアセトンで洗滌する。
実施例１４：メタクリル酸グリシジルを用いる変性された平板膜へのバッチグラフト重合
実施例７におけるように変性された平板ポリアミド膜を線枠（ワイヤフレーム）上に巻き、２リットルのトルエン中の２００ｇのメタクリル酸グリシジルと１０ｇのアゾイソブチロニトリル（重合開始剤）の反応溶液中で攪拌しながら８５℃で反応させる（１時間）。次にこの変性膜をトルエンとアセトンで洗滌する。
実施例１５：エポキシ基の濃度の測定
実施例８，１１，１２，１３および１４におけるように変性された膜中のエポキシ基の密度を非水媒体中で過塩素酸滴定によって測定する（M.Pribl；Fresenius Z. Anal.Chem. 303, 113-116；1980）。このために、各実施例もように変性された中空繊維膜を小片に切断し約１ｇの膜片を滴定する。
次の値（ｍｍｏｌエポキシ基／ｌｇの膜）が得られた。
実施例：    ８      １１      １２      １３      １４
mmol/g：１．０    １．５    ０．３    ０．５    ０．１３
実施例１６：弱塩基牲イオン交換体をうるための膜の変性
実施例６におけるように変性された膜を実施例１に記載の装置の中で先ず水で洗滌する。次に２００ｍｌのジエチルアミン水溶液（５０容量％）をポンプを用いて室温で６時間装置中を通す。この結果生じたイオン交換膜を最後に０．５Ｍ燐酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）で溶出液が中性になるまで洗滌する。
実施例１７：アズラクトン基で活性化された保持体をうるための膜の変性
実施例６におけるように変性され実施例９におけるようにメタクリル酸エポキシプロピルでグラフトされた膜を実施例１に記載の装置中で先ず水で洗滌する。２００ｍｌの水中１２．４ｇの炭酸ナトリウム−水塩の溶液を濃ＨＣｌを用いてｐＨ１１に調整し、３０ｇの二硫化ナトリウム水和物を溶液中に溶解する。この溶液を４０℃に加熱し、ポンプを用いて４０℃に保たれたカラムの中を７ｍｌ／分の流速で１時間通した。次にカラムを１００ｍｌの水と２００ｍｌのアセトンで洗滌し、真空乾燥器中で５０℃で夜通し乾燥する。
４０ｇのビニルジメチルアズラクトンを２００ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解し、３．３ｇの１，８−ジアザビシクロ（５，４，０）ウンデセン−７−エンを加えた。この溶液をポンプを用いて７ｍｌ／分の流速で室温で８時間装置の中を通す。次にポンプ循環なしに反応を夜通しつづける。カラムを１００ｍｌのジメチルホルムアミドで洗滌し８０℃で２時間醋酸エチルで抽出する。
実施例１８：（疎水性相互作用クロマトグラフィー用の）フェノールエーテル基をもつ保持体を得るための膜の変性
実施例６におけるように変性され実施例９におけるようにメタクリル酸エポキシプロピルでグラフトされた膜を実施例１に記載の装置中で先ず水で洗滌する。１０ｇのフェノールを２４ｇの水酸化ナトリウム溶液（３２重量％）と共に２００ｍｌの水に溶解しポンプを用いて９０℃で５ｍｌ／分の流速で６時間装置の中を通した。ポンプ循環なしに反応を室温で夜通しつづける。次に水、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液、水、ｐＨ７の０．１Ｍ燐酸塩緩衝液、水およびアセトンを用いて洗滌を行う。次に膜を真空乾燥器中で室温で夜通し乾燥する。
実施例１９：親硫黄性アフィニティ保持体をうるための膜の変性
実施例６におけるように変性され、実施例９におけるようにメタクリル酸エポキシプロピルでグラフトされた膜を実施例１に記載の装置中で先ず水で洗滌する。７．７５ｇの炭酸ナトリウム−水塩を１２５ｍｌの水に溶かし、次に１８．７５ｇの硫化水素ナトリウム水和物を加える。この溶液を４０℃に加熱しポンプを用いて３ｍｌ／分の流速で１時間装置中を通す。次に１００ｍｌの水を用いて洗滌を行う。
７．７５ｇの炭酸ナトリウム−水塩を１２５ｍｌの水に溶解し、５ｍｌのジビニルスルホンを加える。この溶液を４０℃に加熱しポンプを用いて３ｍｌ／分の流速で１時間装置中を通す。次に１００ｍｌの水を用いて洗滌を行う。
７．７５ｇの炭酸ナトリウム−水塩を１２５ｍｌの水に溶解し、２０ｍｌのメルカプトエタノールを加える。この溶液を４０℃に加熱しポンプを用いて２．５ｍｌ／分の流速で１時間装置中を通す。次に各々１００ｍｌの水、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液、水、１ＭＨＣｌ、水、０．１Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７）および水を用いて洗滌を行う。最後の洗滌は２００ｍｌの水性エタノール（２０重量％）を用いて行われる。
実施例２０：強塩基性陰イオン交換体をうるための膜の変性
実施例６におけるように変性され、実施例９におけるようにメタクリル酸エポキシプロピルでグラフトされた膜を実施例１に記載の装置中で先ず水で洗滌する。１００ｍｌの水性トリメチルアミン溶液（４５重量％；カタログ番号８２１１７７；メルク，ダルムシュタット）を１００ｍｌの水で稀釈しポンプを用いて５ｍｌ／分の割合で室温で３時間装置の中を通す；次にポンプ循環なしに反応を夜通しつづける。この膜を水、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液、水、０．１Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７）、水およびアセトンで洗滌し、真空乾燥器中で室温で夜通し乾燥する。
実施例２１：アミノ基を有する保持体を得るための膜の変性
実施例６におけるように変性され、実施例９におけるようにメタクリル酸エポキシプロピルでグラフトされた膜を実施例１に記載の装置中で先ず水で洗滌する。アンモニア水溶液（約１００ｍｌ；３２重量％）を３０℃に暖められた装置に入れる。装置が完全に満たされているように、アンモニア溶液を３時間にわたって加える。次に装置の出口を閉め反応を室温で夜通しつづける。膜を水、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液、アセトンで洗浄し、真空乾燥器中で室温で夜通しつづける。膜を水、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液、水、０．１Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７）、水およびアセトンで洗滌し、真空乾燥器中で室温で夜通し乾燥する。
実施例２２：陽イオン交換体を得るための膜の変性
実施例６におけるように変性され、実施例９におけるようにメタクリル酸エポキシプロピルでグラフトされた膜を実施例１に記載の装置中で先ず水で洗滌する。１０ｇの燐酸二水素ナトリウム、４０ｇの亜硫酸ナトリウムおよび１０ｇの硫酸水素テトラブチルアンモニウムを２００ｍｌの水に溶解し、ｐＨ８に調整する。この溶液を９５℃に加熱しポンプを用いて７ｍｌ／分の割合で２．５時間装置の中を通す。この膜を水、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液、水、０．１Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７）、水およびアセトンで洗滌し、真空乾燥器中で室温で夜通し乾燥する。
実施例２３：金属キレートアフィニティクロマトグラフィー用の保持体をうるための膜の変型
実施例６におけるように変性され、実施例９におけるようにメタクリル酸エポキシプロピルでグラフトされた膜を実施例１に記載の装置中で先ず水で洗滌する。２６ｇのイミノ二醋酸を２００ｍｌの水に溶解し水酸化ナトリウム溶液を用いてｐＨ１１に調整する。この溶液を６０℃に加熱しポンプを用いて５ｍｌ／分の割合で３時間装置の中を通す；次にポンプ循環なしに反応を室温で夜通しつづける。膜を水、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液、水、０．１Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７）、水およびアセトンで洗滌し、真空乾燥器中で室温で夜通し乾燥する。
実施例２４：蛋白質結合能力の測定
実施例１６におけるように変性され、小片に切断された膜の０．５ｇをウシ血清アルブミンの溶液（２０ｍＭトリス（ｐＨ８．２）中５ｍｇ／ｍｌ）１０ｍｌ中で３時間振盪する。膜片を吸引濾過し、残りは廃棄する。結合した蛋白質を２０ｍｌの２０ｍＭトリス＋１Ｍ塩化ナトリウムの緩衝液（ｐＨ８）で処理して脱離させる。含量は光度計を用いて２８０ｍｍで測定する。
蛋白質結合能力は４４ｍｇの蛋白質／ｇの膜と判明する。