(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体関連物質を分離精製・抽出するための粒子状担体であって、
該粒子状担体は、
ダイヤモンド及び非ダイヤモンド炭素であるか、又は非ダイヤモンド炭素であり、
該粒子状担体の表面は、末端に、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、シアノ基、ニトロ基、チオール基、アミノ基、エポキシ基、又は活性エステル基からなる極性基を配するように化学修飾され、
さらにその表面に、核酸及び／又は蛋白質を担持させたものである粒子状担体。
【請求項２】
生体関連物質を分離精製・抽出するための粒子状担体であって、
該粒子状担体は、
ダイヤモンド、非晶質炭素、無定形炭素、グラファイト、ダイヤモンドライクカーボンからなる群のうち１又は複数の組合せである炭素材料、
及び／又は、
炭化珪素、炭化タングステン、炭化チタンからなる群のうち１又は複数の組合せである炭化物からなり、
かつ、
前記炭素材料及び／又は炭化物が、セラミックス粒子または磁性粒子表面にコーティングされたものであり、
該炭素材料及び／又は該炭化物の表面は、末端に、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、シアノ基、ニトロ基、チオール基、アミノ基、エポキシ基、又は活性エステル基からなる極性基を配するように化学修飾され、
さらにその表面に、核酸及び／又は蛋白質を担持させたものである粒子状担体。
【請求項３】
前記セラミックス粒子がシリカ、アルミナ及び／又は炭化珪素からなる群のうち１または複数の組み合わせである請求項２記載の粒子状担体。
【請求項４】
前記炭素材料及び／又は前記炭化物のコーティングの厚みが１ｎｍ以上であることを特徴とする請求項２又は３記載の粒子状担体。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の粒子状担体の製造方法であって、前記炭素材料及び／又は前記炭化物の表面を、末端に、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、シアノ基、ニトロ基、チオール基、アミノ基、エポキシ基、又は活性エステル基からなる極性基を配するように化学修飾する工程を含むことを特徴とする粒子状担体の製造方法。
【請求項６】
前記末端に極性基を配するように化学修飾する工程が、炭素材料及び／又は炭化物の表面の水素化処理、塩素化処理、アミノ化処理およびカルボキシル化処理からなる工程である請求項５記載の製造方法。
【請求項７】
前記末端に極性基を配するように化学修飾する工程が、炭素材料及び／又は炭化物の表面の水素化処理、塩素ガス中で紫外線照射することによる該表面の塩素化処理、アンモニアガス中で紫外線照射することによるアミノ化処理、非水溶媒中でカルボン酸クロライドと反応させるカルボキシル化処理、および、中和処理からなる工程である請求項６記載の製造方法。
【請求項８】
前記末端に極性基を配するように化学修飾する工程を、真空容器、該真空容器に取り外し自在に取り付けられてなるガラスフィルター、該真空容器の外側の石英ガラス板、該石英ガラス板の外側の高圧水銀灯、塩素、アルゴンガスおよびアンモニアを流すための管、真空に引くための管、および管の流入量を制御するためのバルブを備えた流動槽式の光反応装置により行う請求項５〜７のいずれかに記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ＤＮＡ、ＲＮＡ等の核酸、蛋白質、糖類、疎水性を有する低分子の有機化合物など生体関連物質の分離精製・抽出に好適な粒子状担体及びその製造方法に関するものである。
なお、本発明において生体関連物質とは、ＤＮＡ、ＲＮＡ等の核酸、蛋白質、糖類、疎水性を有する低分子の有機化合物などの生体構成成分を指す。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、吸着剤や吸着剤を担持するための粒子状固相担体としては、シリカ粒子等が良く知られているが、これらを用いる場合、生体関連物質の担体表面への固定化密度が低いために、生体関連物質の回収効率が低く、回収のためには長時間を要し、簡便な方法ではなかった。
【０００３】
例えば、特開平１１−３１３６７０号公報に記載されているように、磁性体を含むシリカ粒子表面にポリアクリルアミドを含有させた担体に核酸を吸着分離する方法や、非多孔性有機高分子粒子の表面にアミド結合によりオリゴヌクレオチドを固定化した担体に、特定の塩基配列を含む核酸とハイブリッドを形成させて分離する方法が用いられていた。
しかしながら、これらの方法では非特異吸着が起こったり、あるいは担体表面への吸着量が少なく、生体関連物質の回収効率をより高めることが望まれていた。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、上記に記載の従来の課題等を解決する。すなわち、目的物質の吸着の特異性が高く、かつ高密度に吸着でき、回収効率を格段に高めた粒子状担体、およびその製造方法を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
そこで、本発明者らは上記目的を活性すべく鋭意検討した結果、炭素材料および／または炭化物からなる粒子表面、あるいは炭素材料および／または炭化物がセラミックス粒子または磁性粒子表面にコーティングされた粒子表面に生体関連物質を特異的にかつ高密度に固定化でき、回収効率を格段に高められることを見出した。
また、かかる粒子状担体を製造するに当り、粒子表面に化学修飾を行うことにより、さらに固定化量を高められることを見出した。
本発明はかかる知見に基づくものである。
【０００６】
すなわち、請求項１の粒子状担体は、生体関連物質を分離精製・抽出するための粒子状担体であって、該粒子状担体は、ダイヤモンド及び非ダイヤモンド炭素であるか、又は非ダイヤモンド炭素であり、該粒子状担体の表面は、末端に、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、シアノ基、ニトロ基、チオール基、アミノ基、エポキシ基、又は活性エステル基からなる極性基を配するように化学修飾され、さらにその表面に、核酸及び／又は蛋白質を担持させたものであることを特徴とする。
請求項２の粒子状担体は、生体関連物質を分離精製・抽出するための粒子状担体であって、該粒子状担体は、ダイヤモンド、非晶質炭素、無定形炭素、グラファイト、ダイヤモンドライクカーボンからなる群のうち１又は複数の組合せである炭素材料、及び／又は、炭化珪素、炭化タングステン、炭化チタンからなる群のうち１又は複数の組合せである炭化物からなり、かつ、前記炭素材料及び／又は炭化物が、セラミックス粒子または磁性粒子表面にコーティングされたものであり、該炭素材料及び／又は該炭化物の表面は、末端に、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、シアノ基、ニトロ基、チオール基、アミノ基、エポキシ基、又は活性エステル基からなる極性基を配するように化学修飾され、さらにその表面に、核酸及び／又は蛋白質を担持させたものであることを特徴とする。
請求項３の粒子状担体は、請求項２において、前記セラミックス粒子がシリカ、アルミナ及び／又は炭化珪素からなる群のうち１または複数の組み合わせであることを特徴とする。
請求項４の粒子状担体は、請求項２又は３において、前記炭素材料及び／又は前記炭化物のコーティングの厚みが１ｎｍ以上であることを特徴とする。
【０００７】
請求項５の粒子状担体の製造方法は、請求項１〜４のいずれかに記載の粒子状担体の製造方法であって、前記炭素材料及び／又は前記炭化物の表面を、末端に、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、シアノ基、ニトロ基、チオール基、アミノ基、エポキシ基、又は活性エステル基からなる極性基を配するように化学修飾する工程を含むことを特徴とする。
請求項６の製造方法は、請求項５において、前記末端に極性基を配するように化学修飾する工程が、炭素材料及び／又は炭化物の表面の水素化処理、塩素化処理、アミノ化処理およびカルボキシル化処理からなる工程であることを特徴とする。
請求項７の製造方法は、請求項６において、前記末端に極性基を配するように化学修飾する工程が、炭素材料及び／又は炭化物の表面の水素化処理、塩素ガス中で紫外線照射することによる該表面の塩素化処理、アンモニアガス中で紫外線照射することによるアミノ化処理、非水溶媒中でカルボン酸クロライドと反応させるカルボキシル化処理、および、中和処理からなる工程であることを特徴とする。
請求項８の製造方法は、請求項５〜７のいずれかにおいて、前記末端に極性基を配するように化学修飾する工程を、真空容器、該真空容器に取り外し自在に取り付けられてなるガラスフィルター、該真空容器の外側の石英ガラス板、該石英ガラス板の外側の高圧水銀灯、塩素、アルゴンガスおよびアンモニアを流すための管、真空に引くための管、および管の流入量を制御するためのバルブを備えた流動槽式の光反応装置により行うことを特徴とする。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明について以下詳細に説明する。
【０００９】
本発明の粒子状担体の構成要素は、炭素材料及び／又は炭化物からなる。
【００１０】
炭素材料とは、炭素原子が共有結合等により金属等と結合したもので、ダイヤモンド、非晶質炭素、無定形炭素およびグラファイトからなる群のうち１または複数の組み合わせを挙げることができる。
【００１１】
これらのうち、固定化密度が格段に高いダイヤモンドが好ましい。ダイヤモンドとしては、ダイヤモンド及び／又は非ダイヤモンド炭素を挙げることができる。
【００１２】
ダイヤモンドとしては、合成ダイヤモンド、高圧形成ダイヤモンド、或いは天然のダイヤモンド等のいずれも使用できる。また、それらの構造が単結晶体或いは多結晶体のいずれでも差し支えない。生産性の観点よりマイクロ波プラズマＣＶＤ法などの気相合成法を用いて製造されたダイヤモンドを用いることが好ましい。
非ダイヤモンド炭素としては、グラファイト、非晶質カーボン、或いはダイヤモンドライクカーボン等のいずれも使用できる。
【００１３】
炭化物とは、炭素とそれより陽性の元素との化合物をいい、例えば、炭化珪素、炭化タングステン及び／又は炭化チタンからなる群のうち１または複数の組み合わせを挙げることができる。
【００１４】
本発明の粒子状担体は、前記炭素材料あるいは炭化物が、セラミックス粒子または磁性粒子表面にコーティングされたものとすることができる。
【００１５】
セラミックス粒子とは、セラミックスを材料とする粒子をいい、アルミナ、炭化珪素等からなる粒子などを挙げることができる。
【００１６】
磁性粒子とは、磁性を有する材料からなる粒子のことをいい、特に、磁場を与えると強い磁性を発揮し、磁場がなくなるとその磁性をなくする性質、すなわち、いわゆる超常磁性を示すものが好ましく用いられる。
例えば、スピネル型又はブランバイト型のフェライトや、鉄、ニッケル、コバルト等を主成分とした合金などが挙げられる。
【００１７】
この場合、コーティングの厚みは、１ｎｍ以上とすること、好ましくは１ｎｍ〜１０００ｎｍとする。１ｎｍ未満だと実質上コーティングの効果が得られない。一方、１０００ｎｍを超えると、実質コーティング層の極表面を利用するため、労力及び費用の点で無駄となる。
【００１８】
炭素材料及び／又は炭化物のコーティングは公知の方法で行うことができる。
例えば、マイクロ波プラズマＣＶＤ法、ＥＣＲＣＶＤ法、ＩＰＣ法、直流スパッタリング法、ＥＣＲスパッタリング法、イオンプレーティング法、アークイオンプレーティング法、ＥＢ蒸着法、抵抗加熱蒸着法、スラリーコーティング法などが挙げられる。
【００１９】
また、粒子状担体の平均粒径の範囲としては、１〜５，０００μｍが好ましい。上記範囲外では、分離精製・抽出の際の分離密度、分離速度といった反応効率が悪く、強度の維持の点から好ましくない。
【００２０】
本発明の粒子状担体表面は意図的に粗面化されていることが望ましい。このような粗面化表面は基体の表面積が増えて多量のＤＮＡ等を固定させることに好都合であるからである。
【００２１】
本発明の粒子状担体は、生体関連物質を基体の表面に固定しやすくする点から、炭素材料及び／又は炭化物の表面が末端に極性基を配するように化学修飾されていることが好ましい。
極性基としては、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、シアノ基、ニトロ基、チオール基、アミノ基、エポキシ基、活性エステル基などがあげられる。
【００２２】
極性基は、炭素数０〜１２、好ましくは０〜６の炭化水素基を介して炭素材料及び／又は炭化物の表面に固定化したものとすることができる。
例えば、極性基がカルボキシル基の場合には、蟻酸、酢酸、プロピオン酸などのモノカルボン酸；シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸などのジカルボン酸；トリメリット酸等の多価カルボン酸等、好ましくはシュウ酸、コハク酸が炭素材料及び／または炭化物の表面に結合していることになる。
このような化学修飾は、炭素材料及び／又は炭化物の表面にペプチド結合、エステル結合等により固定させることができる。
【００２３】
本発明の粒子状担体は、炭素材料及び／又は炭化物表面に核酸及び／または蛋白質を担持させることもできる。例えば、炭素材料及び／又は炭化物の表面を、上記の方法で化学修飾した後、目的の生体関連物質と結合するＤＮＡ、ＲＮＡ等の核酸及び／または蛋白質を担持させておくことができる。
【００２４】
担持させる核酸は、分離精製等したい生体関連物質によってＤＮＡ、ＲＮＡ、ポリヌクレオチド等適宜選択が可能である。また、由来も特に制限されず、高等動物、高等植物、カビ類、バクテリア、ウイルス等に由来する天然のもののほか、人為的に改変を加えたもの、合成ポリヌクレオチドを用いることもできる。鎖長は特に限定されないが、操作の簡便さからいって４〜５０キロ塩基であることが好ましい。
【００２５】
核酸は１本鎖のみならず２本鎖であっても担持させることができる。
２本鎖の場合には、簡便かつ強固に担持させる点から、少なくとも一方の末端が接着末端であることが望ましい。
【００２６】
炭素材料等の表面が化学修飾されている場合には、化学修飾の活性エステル基とアミド結合により強固に固定できる点から、少なくとも一方の末端に第１級アミンを有するヌクレオチドを２以上有することが好ましい。
第１級アミンを有するヌクレオチドの代表的なものとしてアデニン（Ａ）、シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）があるが、中でもアデニン（Ａ）またはグアニン（Ｇ）が好ましい。
【００２７】
末端に第１級アミンを有するヌクレオチドを２以上有する２本鎖のＤＮＡの担持させる方法について例を挙げる。
第１に、ｍＲＮＡからの逆転写反応において、５'末端に第１級アミンを有するヌクレオチドを２以上有するプライマーを用いて相補ＤＮＡを得る方法が挙げられる。
プライマーは、５'末端に第１級アミンを有するヌクレオチド、好ましくはアデニン（Ａ）および／またはグアニン（Ｇ）を２以上有するものを使用できる。
【００２８】
第２の方法としては、５'末端に第１級アミンを有するヌクレオチドを２以上有するプライマーを用いて（特定の鋳型ＤＮＡを）ＰＣＲにより増幅する方法が挙げられる。
プライマーは、末端に第１級アミンを有するヌクレオチド、好ましくはアデニン（Ａ）および／またはグアニン（Ｇ）を２以上有するものを１組容易する。
【００２９】
第３の方法としては、固定したいＤＮＡに対し、第１級アミンを有するヌクレオチドが２以上続く部位に特異的切断活性を有するＥｃｏＲＩ等の制限酵素を作用させることにより、製造する方法が挙げられる。
【００３０】
第４の方法としては、平滑末端のポリヌクレオチドに、末端に第１級アミンを有するヌクレオチドを、直接付加する方法が挙げられる。
【００３１】
また、担持させる蛋白質も、分離精製等したい生体関連物質によって適宜選択が可能である。例えば、生体関連物質が酵素の場合はその基質、抗体の場合はその抗原またはハプテンを選択することができる。
【００３２】
このような本発明の粒子状担体は、炭素材料及び／又は炭化物の表面を、末端に極性基を配するように化学修飾する工程を含む方法により製造することができる。
【００３３】
炭素材料及び／又は炭化物の表面を、末端に極性基を配するように化学修飾する方法としては、炭素材料等の表面を酸素プラズマで酸化し、次いで水蒸気処理する方法；炭素材料等の表面を水素化処理し、次いで塩素ガス中で紫外線照射して炭素材料等の表面を塩素化した後、アルカリ溶液中で加水分解してヒドロキシル化する方法；炭素材料等の表面を酸素プラズマで酸化し、次いで塩素化した後アルカリ溶液中で加水分解してヒドロキシル化する方法；炭素材料等の表面を水素化処理し、次いで塩素ガス中で紫外線照射して炭素材料等の表面を塩素化した後、非水溶媒中でカルボン酸ソーダと反応さる方法等が挙げられる。
【００３４】
また、炭素材料等の表面に水酸基がある場合には、シランカップリング剤、チタンカップリング剤、アルミカップリング剤などをその上に処理すると、化学修飾がより強固なものとなる。
【００３５】
極性基がカルボキシル基の場合、化学修飾のための最も好ましい方法としては、炭素材料及び／又は炭化物の表面の水素化処理、塩素化処理、アミノ化処理およびカルボキシル化処理を行うことが望ましい。詳しくは、炭素材料等の表面を水素化処理し、次いで塩素ガス中で紫外線照射して炭素材料等の表面を塩素化し、次いでアンモニアガス中で紫外線照射してアミノ化した後、非水溶媒中でカルボン酸クロライドと反応させ、次いで弱アルカリ溶液中で中和させる方法が望ましい。
【００３６】
このような化学修飾は、末端に極性基を配するように化学修飾する工程を、真空容器、該真空容器に取り外し自在に取り付けられてなるガラスフィルター、該真空容器の外側の石英ガラス板、該石英ガラス板の外側の高圧水銀灯、塩素、アルゴンガスおよびアンモニアを流すための管、真空に引くための管、および管の流入量を制御するためのバルブを備えた流動槽式の光反応装置により簡便に行うことができる。流動槽式の光反応装置の一例を図１に示す。図１の装置は、ガラスフィルター１を内蔵した真空容器２を備えている。ガラスフィルターは化学修飾をしたい炭素材料及び／又は炭化物を入れる部分であり、真空容器２から取り外し自在に取り付けられている。真空容器２の外側には、石英ガラス板３を介して高圧水銀灯４が設けられ、真空容器内に紫外線を照射できるように設計されている。真空容器２には塩素、アルゴンガス（Ａｒ）及びアンモニアを流すための管５、及び、真空に引くための管６が設けられ、これらの管は、３方バルブＶ１、バルブＶ２、バルブＶ３および３方バルブＶ４により制御されている。
【００３７】
図１の光反応装置を用いると、炭素材料及び／又は炭化物をガラスフィルター１に入れたままで、真空容器２から炭素材料及び／又は炭化物を取り出すことなく水素化、塩素化、及びアミノ化を行うことができる上に、その後ガラスフィルター１ごと取り出してカルボキシル化も簡便に行うことができる。
【００３８】
本発明の粒子状担体は、生体関連物質を分離精製・抽出するために用いることができる。
すなわち、反応溶液中のＤＮＡ、ＲＮＡ、蛋白質、糖類、疎水性を有する低分子の有機化合物などの生体関連物質を粒子状担体に吸着させて該溶液から分離精製することができ、さらに、ＤＮＡ等が吸着した粒子状担体からＤＮＡ等を溶出させて目的物質を得ることができる。
また、分離精製や抽出のほかに、生体関連物質の分析等の各種測定法やアフィニティークロマトグラフィー等による生体関連物質の分離手段などのための担体として用いることもできる。
【００３９】
本発明の粒子状担体を、生体関連物質を分離精製・抽出するために使用する方法の一例を挙げると、本発明の粒子状担体を用い、これと生体関連物質が含まれる試料とを混合し、試料中の核酸を粒子状担体に吸着させた後、ＮａＯＨ水溶液或いは熱水等により粒子状担体から抽出することができる。
【００４０】
【実施例】
実施例１（ダイヤモンド粒子状担体）
図１に示す流動槽式の光反応装置を用い、以下の手順で粒子状担体を製造した。
【００４１】
（１）ダイヤモンド粒子表面の水素化
ダイヤモンド粒子（粒径３０μｍ、大阪ダイヤモンド（株）製）を水素雰囲気下、９００℃×３時間処理して水素化した。
【００４２】
（２）ダイヤモンド粒子表面の塩素化およびアミノ化
図１の装置の真空容器を開け、ガラスフィルターを取り出し、（２）で水素化したダイヤモンド粒子を入れた。ガラスフィルターを真空容器にセットし、蓋をした。
３方バルブＶ１を、流路Ｂとなるように調節し、バルブＶ２を開けた。さらに、バルブＶ３を開け、３方バルブＶ４を流路Ｃとなるように調節し、真空容器内を真空に引いた。
【００４３】
バルブＶ３を閉とし、３方バルブＶ１を流路Ａとして真空容器内にＡｒを流し、該容器内を１．１ａｔｍとした。その後Ａｒを止め、バルブＶ３を開けて真空引きした。
この真空容器内にＡｒを流す操作を計３回繰り返した。
【００４４】
バルブＶ３を閉とし、３方バルブＶ４を流路Ｄとして塩素を流し、真空容器内を１．１ａｔｍとした。塩素を止め、バルブＶ３を開けた。塩素を再び開け、ダイヤモンド粒子を塩素ガスで流動させながら、高圧水銀灯を５分間照射した。
塩素を止め、３方バルブＶ４を流路Ｃとし、真空引きする。
前記した真空容器内にＡｒを流す操作を計３回繰り返す。
【００４５】
バルブＶ３を閉とし、３方バルブＶ４を流路Ｄとなるように調節した。アンモニアを流し、真空容器内を１．１ａｔｍとした。アンモニアを止め、バルブＶ３を開けた。アンモニアを開け、ダイヤモンド粒子を流動させながら、高圧水銀灯を３０分間照射した。アンモニアを止め、３方バルブＶ４を流路Ｃとし、真空引きする。バルブＶ３を閉とし、Ａｒを開けて真空容器の蓋を開けて、ガラスフィルターと共に試料を取り出した。
【００４６】
（３）ダイヤモンド粒子表面のカルボキシル化
図１の装置のガラスフィルターをコック付き吸引ビンに取り付け、１０ｖｏｌ％コハク酸クロリド１，４ジオキサン溶液を充填し１５分間浸漬した。その後コックを開き、コハク酸クロリドを吸引した。その後、１，４−ジオキサンで３回洗浄し、１０ｗｔ％炭酸カリウム水溶液で３回洗浄後、更に３回水洗し、乾燥した。
【００４７】
（４）生体関連物質分離性能の評価
得られる粒子状担体の生体関連物質の分離・精製ならびに抽出性能について、図２の固定化量評価装置で評価を行った。図２の固定化装置は、評価したい粒子状担体を入れるセル１１、溶液を循環させるためのポンプ１２、管１３、溶液用の容器１４からなる。
【００４８】
１）活性化
固定化量評価装置のセル１１に１ｍＬの−ＣＯＯＨ化ダイヤモンド粒子を充填し、次の組成からなる溶液をポンプ１２でセル１１中に圧入し、３０分間室温放置して、活性化した。
【００４９】
・溶液
Ｎ−hydroxysuccinimide                            ２０ｍＭ
1-[(dimethylamino) propyl] 3-ethylcarbodiimide    ０．１Ｍ
リン酸バッファー(ｐＨ６)                          ０．１Ｍ
【００５０】
２）オリゴヌクレオチドの固定化
オリゴヌクレオチド（配列表の配列番号１参照）の１０ｎｍ／ｍＬの滅菌水溶液を、ポンプでセル中に圧入し、２時間室温放置してオリゴヌクレオチドを固定化した。
【００５１】
３）相補的オリゴヌクレオチドのハイブリダイズ
Ｃ末端をＣｙ３（アマシャムファルマシアバイオテク社製）で修飾したオリゴヌクレオチド（配列表の配列番号２参照）１０ｎｍ／ｍＬの滅菌水溶液を、セル内にポンプで６０分間循環させた。その後、滅菌水で３回洗浄した。
【００５２】
３）相補的オリゴヌクレオチドのデハイブリダイズと定量
６０℃の０．３Ｍ  ＮａＯＨ水溶液を、セル内に循環させて、相補的オリゴヌクレオチドをデハイブリダイズした。
Ｃｙ３の蛍光強度（５７０ｎｍ）を測定し、濃度に換算し、ダイヤモンド粒子１ｍＬあたりの固定化量を求めた。
その結果、粒子状担体への固定化量は、５×１０4ｐｍｏｌ／ｍＬであった
【００５３】
実施例２（ＤＬＣ粒子状担体の製造）
ダイヤモンド粒子の代わりに、ダイヤモンドライクカーボン（ＤＬＣ）粒子を用いたほかは、実施例１と同様にして粒子状担体を製造し、同様に粒子状担体への固定化量を評価した。
その結果、粒子状担体への固定化量は、５×１０3ｐｍｏｌ／ｍＬであった。
【００５４】
実施例３（グラファイト粒子状担体の製造）
ダイヤモンド粒子の代わりに、グラファイト粒子を用いたほかは、実施例１と同様にして粒子状担体を製造し、同様に粒子状担体への固定化量を評価した。
その結果、粒子状担体への固定化量は、１×１０3ｐｍｏｌ／ｍＬであった。
【００５５】
実施例４（炭化物粒子状担体の製造）
ダイヤモンド粒子の代わりに、炭化物粒子を用いたほかは、実施例１と同様にして粒子状担体を製造し、同様に粒子状担体への固定化量を評価した。
その結果、粒子状担体への固定化量は、１×１０3ｐｍｏｌ／ｍＬであった。
【００５６】
比較例（市販品）
ダイヤモンド粒子の代わりに、セルロース担体にアビジンを結合させた市販の粒子状担体（アマシャムファルマシアバイオテク社製「アビジンセパロース」）を用いて、実施例１と同様にして粒子状担体と同様に粒子状担体への固定化量を評価した。
その結果、粒子状担体への固定化量は、５×１０2ｐｍｏｌ／ｍＬであった。
以上の結果から、本発明の粒子状担体は、市販品と比較して生体関連物質の固定密度が高いことが判明した。
【００５７】
【発明の効果】
本発明の粒子状担体は、生体関連物質の固定化密度が高く、また、非特異吸着がが少ない。したがって、本発明の粒子状担体は、生体関連物質の分離精製・抽出用の担体として有用である。
また、このような本発明の粒子状担体は、本発明の製造方法によれば簡便に製造することができる。
したがって、本発明の粒子状担体を用いれば、生体関連物質を高い回収効率で、短時間で回収できることが期待されるので、医療分野での疾病診断、生化学、分子生物学分野での研究等の各分野で有用である。
【配列表】
0004001710.tif 000002
【図面の簡単な説明】
【図１】  流動槽式の光反応装置の断面図である。
【図２】  ダイヤモンド粒子表面への固定化量の評価装置の模式図である。
【符号の説明】
１  ガラスフィルター
２  真空容器
３  石英ガラス
４  高圧水銀灯
５、６  管
１１  セル
１２  ポンプ
１３  管
１４  溶液用容器
Ｖ１〜Ｖ４  バルブ
Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ  流路
【図１】
0004001710.tif 000003
【図２】
0004001710.tif 000004