(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
コナゲニン又は薬学的に許容されるその塩を有効成分とする潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤。
【請求項２】
コナゲニン又は薬学的に許容されるその塩及び薬学的に許容される担体を含有する潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤組成物。
【請求項３】
潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤を製造するためのコナゲニン又は薬学的に許容されるその塩の使用。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療に有効な医薬品に関する。
背景技術
潰瘍性大腸炎及びクローン病は厚生省の特定難治性疾患に指定されており、その治療法としては、潰瘍性大腸炎に関してはサラゾスルファピリジンとプレドニゾロンを症状に応じて投薬量を増減して投与すること（厚生省特定疾患・難治性炎症性腸管障害調査研究班昭和６３年度事業集、３８頁）、クローン病に関してはその活動期の小腸型疾患では副腎皮質ホルモン、大腸型疾患ではサラゾスルファピリジンの大量を投与し、その緩解期にはサラゾスルファピリジンの常用量を投与すること（厚生省特定疾患・難治性炎症性腸管障害調査研究班平成２年度事業集、３４頁）とされている。しかしサラゾスルファピリジンには副作用の頻度が高く、そのために連用出来ない患者（不耐性患者）の問題がある他、プレドニゾロンにもステロイドであるが故の副作用により、連用が困難となる問題がある。
この副作用を軽減すべく開発されたのがメサラジンであるが、副作用発現率の若干の低下につながったものの完全に消失したわけでない。また臨床効果には大差がなく、問題を十分に解決したとは言い難い。ちなみに、メサラジンのサラゾスルファピリジンを対照薬とした二重盲検比較試験（薬理と治療〔Japanese Pharmacology & Therapeutics〕、１９９４年、２２巻別冊、Ｓ２５５５−Ｓ２５８３頁）の結果は、全般改善度はメサラジンで６８．８％、サラゾスルファピリジンで６３．５％、副作用発現率がメサラジンで１１．５％、サラゾスルファピリジンで２８．１％であった。
炎症性腸疾患の原因についてはこれまで不明な点が多かった。しかしながら、患者の患部組織のサイトカイン分析や免疫担当細胞によるサイトカイン産生に関する研究により、ＩＬ−１α、ＴＮＦ−α、ＩＬ−６及びＩＬ−８等の炎症性サイトカインが病態の形成や進行に強く関与していることが示唆されており（Gastroenterology、１９９２年、１０６巻、５３３−５３９頁、Lancet、１９９２年、２４３４−２３４０頁）、炎症性腸疾患が免疫担当細胞から異常に高値に産生される炎症性サイトカインにより惹起される組織障害と見なされるに至っている。そして近年、新しい試みとして、ＴＮＦ−αキメラ抗体投与（Gastroenterology、１９９５年、１０９巻、１２９−１３５頁）やＩＬ−１０の注腸投与（Gastroenterology、１９９５年、１０８巻、１４３４−１４４４頁）による抗サイトカイン療法が試みられる様になったが、この療法は治療が簡便でなく、またコストが高いという問題があった。
従って本発明の目的は、サラゾスルファピリジンやステロイド剤の治療に伴う副作用の問題が克服され、またＴＮＦ−αキメラ抗体療法やＩＬ−１０の注腸療法の際の治療上の利便性の問題や治療コストの問題が解決され、かつ高い治療効果を有する潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤を提供することにある。
発明の開示
斯かる実情に鑑み、本発明者らは、ラットを用いたｉ）酢酸誘発モデル、ii）トリニトロベンゼンスルホン酸誘発モデル及びiii）デキストラン硫酸誘発モデル（Scand J Gastroenterol、１９９２年、２７巻、５２９−５３７頁）等の炎症性腸疾患モデル等により種々の薬物について研究したところ、コナゲニンが潰瘍性大腸炎及びクローン病の予防・治療剤として有用であることを見出し本発明を完成した。
すなわち本発明は、コナゲニン又は薬学的に許容されるその塩を有効成分とする潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤に係わるものである。
また、本発明はコナゲニン又は薬学的に許容されるその塩及び薬学的に許容される担体を含有する潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤組成物に係わるものである。
更に、本発明は潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤を製造するためのコナゲニン又は薬学的に許容されるその塩の使用に係わるものである。
発明を実施するための最良の形態
コナゲニンは次の構造式で示される化合物であり、その化学名は（２Ｓ）Ｎ−〔（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）２，４−ジヒドロキシ−３−メチル−ペンタノイル〕−２−メチルセリンである。
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コナゲニンは公知化合物であり、物質と製法に関しては本発明者らによる特開平２−３０６９５３号公報に、また血小板・白血球減少症の治療の用途に関しては特開平５−２２９９３９号公報に、がん化学療法剤及び／又は放射線治療に伴う副作用の軽減剤としての用途に関しては特開平６−６５０７２号公報に、下痢の予防と治療に関する用途に関しては特開平８−１６５２３６号公報に記載があるが、潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病に対する作用については全く知られていない。
コナゲニンの塩としては、薬学的に許容される塩であれば特に限定はなく、例えばそのカルボキシル基における金属塩、特にナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩、あるいはアンモニウム塩等が挙げられる。
コナゲニンはストレプトミセス属に属するコナゲニン生産菌の培養物から採取でき、例えば前記特開平２−３０６９５３号公報に記載の製造法にて得ることができる。
コナゲニンは毒性が低く、例えばラット急性毒性試験において、経口、皮下、腹腔内、静脈内いずれの投与経路でもコナゲニンのＬＤ50値は５００mg／kg以上であった。
本発明の潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤は、コナゲニン又はその薬学的に許容される塩を常用の製剤用担体と適量配合して医薬組成物として製剤化できる。ここで担体としては、通常の薬学的に許容される各種のもの、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤、界面活性剤等を使用することができる。また、本発明の予防及び治療剤の剤型は特に限定されず、目的に応じて適宜決定すればよいが、具体的には、錠剤、被覆錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の経口剤及び注射剤、坐剤、軟膏剤、硬膏剤、貼付剤、エアゾール剤等の非経口剤が例示され、これらは、常法により製造することができる。
錠剤を調製するには、担体として例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤；単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、シェラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤；白糖、ステアリン酸、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤；グリセリン、デンプン等の保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等を使用し、常法により打錠等を行えばよい。更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠、二重錠、多層錠等とすることができる。
丸剤は、担体として例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン等の結合剤、ラミナラン、カンテン等の崩壊剤等を用い、常法により調製することができる。
カプセル剤は常法に従い本発明化合物を上記で例示した各種の担体と混合して硬化ゼラチンカプセル、軟質カプセル等に充填して調製される。
また、本発明の有効成分に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等の担体を加えて常法により内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等の経口用液体製剤を製造することもできる。この場合矯味剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が使用でき、緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が使用できる。
注射剤を調製する場合、液剤、乳剤及び懸濁剤は殺菌することが必要であり、且つ血液と等張であるのが好ましく、調製には、希釈剤として例えば水、エチルアルコール、マクロゴールプロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を使用することができる。なお、この場合等張性の溶液を調製するに十分な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを医薬製剤中に含有せしめてもよく、また、pH調整剤、緩衝剤、安定化剤、局所麻酔剤等を添加してもよい。ここで、pH調整剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム等が、安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。
坐剤は、本発明の有効成分に基剤、更に必要に応じて界面活性剤等を加えた後、常法により製造することができる。基剤としては、例えばラノリン、カカオ油、脂肪酸トリグリセライド、ウィテップゾール（ダイナマイトノーベルズ社製）等の油性基剤や、マクロゴール等の水溶性基剤を用いることができる。
軟膏剤は、本発明化合物に、通常使用される基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等の担体を必要に応じて配合し、常法により混合し、製剤化すればよい。基剤としては流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィン等が挙げられる。保存剤としてはパラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル等が挙げられる。
貼付剤を製造する場合には、通常の支持体に前記軟膏、ペースト、クリーム、ゲル等を常法により塗布すればよい。支持体としては綿、スフ、化学繊維からなる織布、不織布や軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルムあるいは発泡体シートが適当である。
更に上記各製剤には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他の医薬品を含有せしめてもよい。
本発明の医薬製剤中に含有するコナゲニン又はその塩の量としては、特に限定されず広範囲に選択されるが、通常医薬製剤中０．２〜９０重量％とすることが好ましい。
上記医薬製剤の投与方法は特に制限はなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条件、疾患の程度等に応じて適宜決定すればよい。例えば錠剤、丸剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤は経口投与される。注射剤は単独であるいはブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与される。坐剤は直腸内投与される。軟膏剤は皮膚、口腔内粘膜等に塗布される。
また、コナゲニンの投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別、その他の条件等に応じて適宜選択されるが、通常成人１日あたり、非経口投与の場合、コナゲニンとして約０．１mg〜５ｇ、経口投与の場合０．５mg〜５ｇとすることが好ましく、これを１日１回又は２〜４回程度に分けて投与することが好ましい。
実施例
次に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明する。
試験例１  ラットの酢酸誘発潰瘍モデルに対する効果
６週令ドンリュー：ＣＲＪ系雄性ラット（１群９匹）を２４時間絶食した後、エーテル麻酔下で開腹し、結腸を結紮後、２５Ｇの注射針を装着したシリンジで１０％酢酸水溶液２mlを消化管腔内に注入した後、３mlの空気を更に注入して酢酸溶液を排出した後、術創を縫合・閉鎖して病態モデルを作成した。コナゲニンを５０mg／kgでモデル作成２４時間前、処置直後に静脈内投与し、２４時間後に屠殺し、結腸及び直腸を摘出した。これらの臓器の肛門直上より１０cmを切開して内容物を除去後、重量を測定すると共に肉眼的に粘膜障害の程度を肉眼で観察した。組織の障害度の評価としては、軽度、中等度、重度を用いた。表１にその結果を示す。
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表１から対照群（生食投与群）に比較してコナゲニン投与群で酢酸投与により発生した炎症性潰瘍に対する高い抑制効果を示していることが判る。
試験例２  トリニトロベンゼンスルホン酸で誘発した潰瘍モデルに対する効果
６週令ウィスター系雄性ラット（１群７匹）を４８時間絶食した後、ペントバルビタール麻酔下で、肛門よりカテーテルを８cm挿入し、２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸を５０％エタノールに８０mg／mlで溶解したものの０．２５mlを注入した後、肛門を約１０分押さえ、その後放置し、病態モデルを作成した。
コナゲニンを５０mg／kg静脈内投与した。対照薬としてサラゾスルファピリジン３００mg／kgを経口投与した。これら被験薬の投薬は２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸投与の前日から投与後４日目にかけて連日行い、５日目に屠殺し、直腸（８cm）の湿重量変化と、病理学的所見に基づく判定を行った。
組織の障害度の評価としては、著変なし、軽度、中等度、重度を用いた。結果を表２及び表３に示す。
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炎症変化の大きさと相関する大腸湿重量変化（表２）に関しては、対照群（生理食塩水投与群）は１０％増加したのに対し、対照薬として用いたサラゾスルファピリジン群では４％増加した。コナゲニン投与群では増加が全く認められなかった。
病理的所見（表３）に関しては、潰瘍の深達度が生理食塩水群と、サラゾスルファピリジン群で粘膜固有層と粘膜下組織に関する病理所見判定で中等度であったのに対し、コナゲニン投与群では軽度であった。即ちコナゲニンの著効が認められた。病変の段階についても生理食塩水群、サラゾスルファピリジン群では亜急性段階に達したものが４匹だったのに対し、コナゲニン投与群では２匹に止まった。炎症性変化に関してもコナゲニン投与群では全く同様の良好な成績が得られた。
以上の結果より、コナゲニンは対照薬のサラゾスルファピリジンと較べて著しい治療効果があることが判明した。
試験例３  単回投与毒性試験
コナゲニン５００mg／kgをマウス及びラットに静脈、腹腔内、皮下、経口的に単回投与を行い、毒性を調べた。結果を表４に示す。
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投薬したマウス、ラットの何れにも死亡は認められず、また一般症状の異常所見も認められなかった。以上よりコナゲニンは単回投与において安全な薬剤であることが確認された。
試験例４  反復投与毒性試験
６週令ウィスター系雄性ラット（１群３匹）の腹腔内にコナゲニン１００mg／kgを３ケ月間反復投与し、生理食塩水投与群を対照として毒性を評価した。一般症状、尿検査、血液検査、血液生化学検査、剖検、臓器重量、病理検査について試験した。結果を表５に示す。
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調査した全ての項目の一般症状、尿検査、血液検査、血液生化学検査、剖検、臓器重量、病理検査に関して、コナゲニン投与群では、対照の生理食塩水投与群と比較して、有意な変化を全く認めなかった。即ちコナゲニンは長期連続投与においても極めて高い安全性を示すことが確認された。
また、サラゾスルファピリジンと比較して安全性面で優れているとされるメサラジンが、ラットの１３週連続投与毒性試験の結果、薬効用量に近い用量の２００、４００mg／kgで死亡例、瀕死例等を認めている（応用薬理〔Oyo Yakuri／Pharmacometrics〕、１９９４年、４８巻、２７７−２７８頁）のに対し、コナゲニンでは薬効用量の１００mg／kgではラットの３ケ月反復投与毒性試験において毒性発現が全く認められなかった。すなわち、コナゲニンは既存の薬剤と比べてはるかに高い安全性を有することが判った。
実施例１  錠剤
コナゲニン                                  ３００mg
デンプン                                    １１２mg
ステアリン酸マグネシウム                      １８mg
乳糖                                          ４５mg
１錠当たり                                  ４７５mg
上記配合割合で、常法に従い錠剤を調製した。
実施例２  注射剤
コナゲニン                                    ５０mg
注射用蒸留水                                    適量
１バイアル（用時溶解）中                        ５ml
上記配合割合で、常法に従い注射剤を調製した。
実施例３  坐剤
コナゲニン                                  ３００mg
ウィテップゾールＷ−３５                  １４００mg
（登録商標、ダイナマイトノーベル社製）              
１個当たり                                １７００mg
上記配合割合で、常法に従い坐剤を調製した。
産業上の利用可能性
本発明の潰瘍性大腸炎及び／又はクローン病の予防及び治療剤は、従来品に比べ高い治療効果を有し、更に副作用が少なく、極めて安全性が高い。