(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
電気絶縁性基板、前記基板上に設けられた少なくとも作用極と対極を有する電極系、および前記電極系に接してまたはその近傍に形成され、少なくともピロロキノリンキノンを補酵素としたグルコースデヒドロゲナーゼを含む反応層を具備するグルコースセンサであって、前記反応層が、グルコン酸およびその塩からなる群より選択される少なくとも１種の添加剤を含むグルコースセンサ。
【請求項２】
前記反応層が、さらに、フタル酸、フタル酸の塩、マレイン酸、マレイン酸の塩、コハク酸、およびコハク酸の塩からなる群より選択される少なくとも１種の添加剤を含む請求項１に記載のグルコースセンサ。
【請求項３】
前記反応層が、さらにカルシウムイオンを含む請求項１または２記載のグルコースセンサ。
【請求項４】
前記グルコン酸の塩が、グルコン酸カリウム、グルコン酸ナトリウム、グルコン酸カルシウム、グルコン酸コバルト、またはグルコン酸銅である請求項１〜３のいずれかに記載のグルコースセンサ。
【請求項５】
前記反応層が、さらに電子メディエータを含む請求項１〜４のいずれかに記載のグルコースセンサ。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
技術分野
本発明は、試料中の特定成分を迅速かつ簡便に高精度で定量することができるグルコースセンサに関する。さらに具体的には、本発明は、ピロロキノリンキノンを補酵素としたグルコースデヒドロゲナーゼを用いたグルコースセンサに関する。
【０００２】
背景技術
従来から、試料液の希釈や攪拌などを行うことなく試料液中の特定成分を簡易に定量する方式として、様々なバイオセンサが提案されている。バイオセンサの一例として、例えば次のようなセンサが知られている（特開平２−０６２９５２号公報）。
【０００３】
このバイオセンサは、絶縁性基板上にスクリーン印刷などの方法で作用極、対極および参照極からなる電極系を形成し、この電極系上に接して親水性高分子と酸化還元酵素と電子受容体とを含む酵素反応層を形成することによって作製される。
【０００４】
このバイオセンサの酵素反応層上に基質を含む試料液を滴下すると、酵素反応層が溶解して酵素と基質が反応し、これにともなって電子受容体が還元される。その後、還元された電子受容体を電気化学的に酸化し、このとき得られる酸化電流値から試料液中の基質濃度を求めることができる。
【０００５】
上記のようなバイオセンサによれば、原理的には、測定対象物質を基質とする酵素を選択することによって、様々な物質の測定が可能である。
例えば、酵素にグルコースオキシダーゼを選択すると、試料液中のグルコース濃度を測定するグルコースセンサを作製することができる。
【０００６】
上記のような構成のバイオセンサでは、通常、酵素は、乾燥状態でセンサ内に保持されている。酵素は、蛋白質を主成分とするため、空気中などの水分に長期間接すると、変性してしまう危険性がある。また、極端な場合、酵素が失活してしまう危険性がある。
【０００７】
そのため、センサを長期間保存すると、酵素の活性が低下して、基質と反応する酵素量が不足してしまい、得られる応答電流値が基質の濃度に比例しなくなる場合がある。
【０００８】
したがって、保存安定性に優れたバイオセンサを得るためには、酵素の近傍に、酵素の活性が長期間保持されるような環境を整えることが重要である。さらに、酵素反応時に電子や基質の移動が円滑に行われるようにし、センサの応答性を高めることも必要である。
【０００９】
一方、高性能なグルコースセンサを作製するため、酵素として、ピロロキノリンキノンを補酵素としたグルコースデヒドロゲナーゼ（以下、「ＰＱＱ−ＧＤＨ」という。）が用いられている。ＰＱＱ−ＧＤＨを用いるグルコースセンサは、ＰＱＱ−ＧＤＨそのものの触媒反応に酸素が関与しないため、酵素反応が血中などの溶存酸素の影響を全く受けないという特性を有する。そのため、このグルコースセンサによって得られる測定値は、試料液中の酸素分圧によってばらつくことがない。すなわち、高性能なセンサを得ることができる。
【００１０】
しかし、グルコースセンサの酵素としてＰＱＱ−ＧＤＨを用いた場合、保存することによって応答値が低下するという問題点があることが明らかになった。このことは、グルコースセンサの保存期間が長くなると、応答値が低下するということを意味する。センサ製造後、常に一定時間後にセンサを使用することは不可能である。従って、保存することによって応答値が低下するセンサでは、グルコース濃度を正確に定量することができない。
【００１１】
本発明は、このような問題点に鑑み、保存安定性に優れ、かつ初期における応答性が向上した高性能なグルコースセンサを提供することを目的とする。
【００１２】
発明の開示
本発明によるグルコースセンサは、電気絶縁性基板、前記基板上に設けられた少なくとも作用極と対極を有する電極系、および前記電極系に接してまたはその近傍に形成され、少なくとも、ピロロキノリンキノンを補酵素としたグルコースデヒドロゲナーゼを含む反応層を具備するグルコースセンサにおいて、前記反応層が、グルコン酸、およびグルコン酸の塩からなる群より選択される少なくとも１種の添加剤を含むことを特徴とする。
【００１３】
前記反応層は、さらに、フタル酸、フタル酸の塩、マレイン酸、マレイン酸の塩、コハク酸、およびコハク酸の塩からなる群より選択される少なくとも１種の添加剤を含むことが好ましい。
前記反応層は、さらにカルシウムイオンを含むことが好ましい。
【００１４】
前記グルコン酸の塩は、グルコン酸カリウム、グルコン酸ナトリウム、グルコン酸カルシウム、グルコン酸コバルト、またはグルコン酸銅であることが好ましい。
前記反応層は、さらに電子メディエータを含むことが好ましい。
【００１５】
発明を実施するための最良の形態
上記のように、本発明のグルコースセンサは、酵素としてＰＱＱ−ＧＤＨを含む反応層に、グルコン酸および／またはその塩を添加したものである。
【００１６】
本発明者らは、ＰＱＱ−ＧＤＨを含む反応層に、グルコン酸および／またはその塩を添加すると、センサの保存安定性を著しく向上できることを見いだした。グルコン酸および／またはその塩が、温度、湿度、電荷の状態などの環境の変化からＰＱＱ−ＧＤＨを保護し、これによって保存安定性が向上するものと思われる。このような効果を高めるには、グルコン酸および／またはその塩とＰＱＱ−ＧＤＨの混合溶液を反応層形成部位に滴下し、乾燥する方法により反応層を形成するのが好ましい。この方法により反応層を形成すると、酵素がグルコン酸によって分子レベルで取り囲まれるため、温度、湿度、電荷の状態などの環境の変化からＰＱＱ−ＧＤＨを有効に保護することができる。その結果、酵素の活性を長期間安定させることができるのである。
【００１７】
さらに本発明者らは、ＰＱＱ−ＧＤＨを含む反応層に、グルコン酸および／またはその塩を添加すると、センサの保存前における応答性、すなわち初期特性が向上することを見出した。グルコン酸またはその塩は水に溶けやすいので、反応層に含ませておくと、試料液を反応層に添加した際、反応層は直ちに試料液に溶解し、酵素反応と電極反応を円滑に進めることができて都合がよい。
【００１８】
これらの効果が期待できる添加剤は、グルコン酸の他、グルコン酸カリウム、グルコン酸ナトリウム、グルコン酸カルシウム、グルコン酸コバルト、グルコン酸銅などがあげられる。特に、グルコン酸カリウムを用いると、保存安定性および応答特性に優れ、ブランク値の非常に小さいグルコースセンサを得ることができる。ここで、ブランク値とは、基質であるグルコースを全く含まない試料液、例えば水を用いた場合のセンサ応答値である。
【００１９】
フタル酸、マレイン酸、コハク酸、およびそれらの塩は、それ単独では、グルコン酸およびその塩には及ばないが、ＰＱＱ−ＧＤＨを保護する効果を有しているから、グルコン酸またはその塩とともに添加すると、相乗的な効果として、センサの保存安定性をより向上することができる。さらに、フタル酸、マレイン酸、コハク酸、およびそれらの塩は水に溶解しやすいので、反応層に含ませておくと、試料液を反応層に添加した際、反応層が直ちに試料液に溶解し、酵素反応と電極反応を円滑に進めることができ、初期特性が向上する。
【００２０】
フタル酸、マレイン酸、コハク酸、およびそれらの塩は、すべて緩衝剤として使用することのできる化合物であり、必要に応じて塩酸、酢酸などの酸やＮａＯＨ、ＫＯＨなどのアルカリにより所定のｐＨに調製して反応層形成試薬に添加すればよい。好適なｐＨは、５．０〜８．５である。もちろん、ほかの緩衝液にこれらの添加剤を配合したものを用いてもよい。
【００２１】
グルコン酸、フタル酸、マレイン酸、コハク酸、およびそれらの塩は、吸湿しやすい化合物であるので、前もって酵素に添加するより、グルコースセンサ作製の際に初めて酵素と接触するように、グルコースセンサ作製時に添加すべきである。これらの添加剤を含むグルコースセンサは、密封した状態で保存することが好ましい。グルコースセンサを保存する際には、シリカゲル等の吸湿剤を入れた密封容器に保存するのがよい。
【００２２】
試料液として血液０．５〜５μｌを測定対象とする使い捨てタイプのセンサでは、酵素量０．２〜２０Ｕ／センサに対して、上記グルコン酸またはその塩の添加量は、１．５〜１５０μｇ／センサの範囲であればよく、保存安定性とブランク値の低減化という観点から、１５〜５０μｇ／センサであるのが好ましい。一方、フタル酸、マレイン酸、コハク酸、およびそれらの塩の添加量は、前記センサに対して、０．０２５〜２５μｇ／センサであるのが好ましく、望ましくは０．１〜３μｇ／センサであるのが好ましい。なお、Ｕはユニット（ｕｎｉｔ）を表す。
【００２３】
他の好ましい添加剤として、カルシウムイオンを与える塩化カルシウムなどがある。一般に、カルシウムイオンは、ＰＱＱ−ＧＤＨが二量体を形成する際に必要となる。従って、反応層形成試薬に、塩化カルシウムなどによりカルシウムイオンを導入すると、センサの作製中または作製後において、ＰＱＱ−ＧＤＨが二量体へ解離するのを防ぎ、その活性保持に役立つ。塩化カルシウムの添加量は、上記のセンサに対して、５〜７０ｎｇ（ナノグラム）／センサであるのが好ましい。
【００２４】
本発明のバイオセンサの反応層には、酵素反応に伴って還元される電子メディエータを含有させるのが好ましい。この電子メディエータには、フェリシアン化カリウム、ｐ−ベンゾキノンおよびその誘導体、フェナジンメトサルフェート、メチレンブルー、フェロセンおよびその誘導体などを用いることができる。
【００２５】
本発明のバイオセンサの反応層には、親水性高分子を含有させてもよい。反応層中に親水性高分子を添加することにより、電極系表面または基板表面からの反応層の剥離を防ぐことができる。さらに、親水性高分子は、反応層表面の割れを防ぐ効果も有しており、バイオセンサの信頼性を高めるのに効果的である。
【００２６】
このような親水性高分子としては、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、エチルヒドロキシエチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリリジンなどのポリアミノ酸、ポリスチレンスルホン酸、ゼラチンおよびその誘導体、アクリル酸およびその塩の重合体、メタクリル酸およびその塩の重合体、スターチおよびその誘導体、無水マレイン酸およびその塩の重合体、アガロースゲルおよびその誘導体が好適に用いられる。
【００２７】
バイオセンサ内における反応層は、電気絶縁性基板上に形成された電極系上のほか、本発明の効果を損なわない限り、種々の位置に配置することができる。例えば、前記基板の電極系上以外の場所にも配置することができる。また、バイオセンサは、カバー部材を含むことが好ましい。このカバー部材は、前記基板に組み合わされて基板との間に前記電極系に試料液を供給する試料液供給路を形成する。このカバー部材の試料液供給路に露出する面に、前記反応層を配置することもできる。
【００２８】
酵素反応に伴い還元された電子メディエータを酸化する電流の測定方法としては、作用極と対極のみの二電極方式と、参照極を加えた三電極方式があり、三電極方式の方がより正確な測定が可能である。
【００２９】
ここで、本発明のバイオセンサの反応層には、前記添加剤に加えて、本発明の効果を損なわない範囲で他の安定化剤を添加してもよい。そのような安定化剤としては、例えば金属塩、蛋白質、アミノ酸、糖、有機酸、界面活性剤などをあげることができる。
【００３０】
金属塩としては、例えば、ストロンチウム、マンガンなどのハロゲン化物のほか、これらの硫酸塩、硝酸塩などでもよい。蛋白質としては、酵素活性に影響を与えないものであるのが好ましく、例えばウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、卵アルブミン、ゼラチンなどをあげることができる。
【００３１】
アミノ酸としては、例えばリジン、ヒスチジン、グルタミン酸などの一般的なもののほか、グリシルグリシン、ポリリジンなども用いることができる。なかでも、水溶性の高いものが好ましい。
【００３２】
糖としては、単糖、二糖、オリゴ糖および多糖など、種類を問わずに用いることができる。また、これらの誘導体も用いることができる。具体的には、例えばグルコース、フルクトース、ガラクトース、マンノース、キシロース、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、マルトトリオース、マルトシルサイクロデキストリン、α−サイクロデキストリン、β−サイクロデキストリン、γ−サイクロデキストリン、デキストリン、アミロース、グリコーゲン、デンプン、イヌリン、グルコサミン、イノシトール、マンニトール、ソルビトール、リビトールおよびデオキシグルコースなどをあげることができる。
【００３３】
有機酸としては、例えばα−ケトグルタル酸、リンゴ酸、フマール酸、コール酸およびデオキシコール酸などがあげられる。
界面活性剤としては、非イオン性のものが好ましい。
【００３４】
その他、ホウ酸、ホウ砂、塩化カリウム、塩化ナトリウム、硫酸アンモニウム、グリセロール、フィコール、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＴ、ＤＴＥ、ＧＳＨ、２−メルカプトエタノールなどを添加してもよい。
これらの安定化剤の添加量は、ＰＱＱ−ＧＤＨの１００重量部に対して、０．０１〜１００重量部であることが好ましい。
【００３５】
補酵素であるピロロキノリンキノン（ＰＱＱ）が、ＰＱＱ−ＧＤＨから外れることを阻止するため、反応層中に、ＰＱＱを添加してもよい。ＰＱＱの添加量は、０．０４〜２０ｎｇ／センサであるのが望ましい。
本発明で用いる酵素ＰＱＱ−ＧＤＨは、いずれの起源のものも用いることができる。
【００３６】
上述の添加剤を含み、さらに要すれば前記安定化剤を含む本発明のＰＱＱ−ＧＤＨを用いたグルコースセンサは、安価に、しかも酵素の基本性能に悪影響を与えることなくその性能を保持することができる。
【００３７】
【実施例】
以下に、実施例を用いて本発明を説明するが、本発明はこれらのみに限定されるものではない。
図１は、本発明の一実施例におけるバイオセンサの反応層を取り除いた分解斜視図である。ポリエチレンテレフタレートからなる電気絶縁性基板１上に、スクリーン印刷により銀ペーストを印刷し、リード２および３を形成している。ついで、樹脂バインダーを含む導電性カーボンペーストを基板１上に印刷して作用極４を形成している。この作用極４は、リード２と接触している。さらに、この基板１上に、絶縁性ペーストを印刷して絶縁層６を形成している。絶縁層６は、作用極４の外周部を覆っており、これにより作用極４の露出部分の面積を一定に保っている。そして、樹脂バインダーを含む導電性カーボンペーストをリード３と接触するように基板１上に印刷してリング状の対極５を形成している。
【００３８】
上記の絶縁性基板１に、後述のように反応層を形成した後、スリット１０を有するスペーサ８および空気孔１１を備えたカバー９を図１の一点鎖線で示すような位置関係をもって接着することにより、バイオセンサが作製される。スペーサ８のスリット１０の部分に試料液供給路が形成される。センサの端部におけるスリット１０の開放端部は、試料液供給路への試料供給口となる。
【００３９】
図２は、本発明によるバイオセンサの縦断面図である。電極系を形成した基板１上に、酵素および電子メディエータを含む反応層７が形成されている。反応層７は、電極系上に形成されるのが好ましいが、電極系の近傍、例えば試料液供給路に露出するように、カバー側に形成されていてもよい。反応層７は、図示の例では、親水性高分子層７ａと、その上に形成されたＰＱＱ−ＧＤＨと添加剤を含む層７ｂからなる。
【００４０】
比較例１
図１の基板１の電極系上に、親水性高分子であるカルボキシメチルセルロースのナトリウム塩（以下、「ＣＭＣ」と略す。）の０．５ｗｔ％水溶液を５μｌ滴下し、５０℃の温風乾燥器中で１０分間乾燥させ、ＣＭＣ層７ａを形成した。続いて、１０００Ｕ／ｍｌのＰＱＱ−ＧＤＨ、および５０ｍＭのフェリシアン化カリウムを含む混合水溶液をＣＭＣ層７上に５μｌ滴下し、乾燥して、層７ｂを形成した。このようにしてグルコースセンサを作製した。
【００４１】
つぎに、試料液として、グルコース濃度が３０〜６２０ｍｇ／ｄｌとなるように調製した血液を用意した。そして、この試料液を反応層７上に滴下した。グルコースを含む試料液が反応層に供給されると、試料内のグルコースはＰＱＱ−ＧＤＨにより酸化される。そして、これと同時に反応層中のフェリシアン化カリウムがフェロシアン化カリウムに還元される。ここで、試料液を滴下してから３０秒後に、対極５を基準にして作用極４に＋０．５Ｖの電圧を印加して、フェロシアン化カリウムを酸化した。そして、５秒後に対極と作用極の間を流れる電流値を測定した。
【００４２】
種々のグルコース濃度に調製された血液に対して電流値を測定し、横軸にグルコース濃度、縦軸に電流値をプロットしてセンサの応答特性図を作成した。その結果を図３に実線で示す。
【００４３】
同様にして作製したバイオセンサを、吸湿剤であるシリカゲルの入った密封容器に入れ、４０℃において１週間保存した後、このバイオセンサの応答特性図を作成した。その結果を図３に点線で示す。
【００４４】
図３より、グルコース濃度と応答電流値との間には一定の相関性があることがわかる。しかし、作製直後、すなわち保存前のセンサに比較して、４０℃で１週間保存後のセンサの応答性が低下していることがわかる。
【００４５】
実施例１
比較例１と同様にしてＣＭＣ層７ａを形成した後、１０００Ｕ／ｍｌのＰＱＱ−ＧＤＨ、５０ｍＭのフェリシアン化カリウムおよび４０ｍＭのグルコン酸カリウムを含む混合水溶液を、ＣＭＣ層７ａ上に５μｌ滴下後乾燥して、層７ｂを形成した。このようにしてグルコースセンサを作製した。
【００４６】
比較例１と同様にして、作製直後のセンサおよびシリカゲルの入った密封容器内で４０℃で１週間保存した後のセンサについて応答特性図を作成した。その結果を図４に示す。図４より、グルコース濃度と応答電流値との間には一定の相関性があることがわかる。本実施例のセンサは、比較例１と比較すると、４０℃で１週間保存後の応答のうち、特に４００ｍｇ／ｄｌ以上の領域における応答電流値の低下が小さくなっていることがわかる。これにより、グルコン酸カリウムを添加することで、グルコースセンサの保存特性が大幅に改善されることがわかる。
【００４７】
グルコン酸カリウムを含まない比較例１のセンサと、グルコン酸カリウムを含む本実施例のセンサの保存前の応答特性の比較を図５に示す。図５を見ると、グルコン酸カリウムを含むグルコースセンサは、グルコン酸カリウムを含まないグルコースセンサより、６００ｍｇ／ｄｌ付近の応答値が高い。これにより、グルコン酸カリウムを添加することで、高濃度域におけるグルコースセンサの応答性を改善できることがわかる。
【００４８】
実施例２
比較例１と同様にしてＣＭＣ層７ａを形成した後、１０００Ｕ／ｍｌのＰＱＱ−ＧＤＨ、５０ｍＭのフェリシアン化カリウム、４０ｍＭのグルコン酸カリウムおよび０．５ｍＭのフタル酸水素カリウムを含む混合水溶液を、ＣＭＣ層７ａ上に５μｌ滴下し乾燥して、層７ｂを形成した。このようにしてグルコースセンサを作製した。
【００４９】
比較例１と同様にして、作製直後のセンサおよびシリカゲルの入った密封容器内で４０℃で１週間保存した後のセンサについて応答特性図を作成した。その結果を図６に示す。図６より、作製直後のセンサと４０℃で１週間保存後のセンサの応答特性にはほとんど差はなく、比較例１と比較すると、本実施例のセンサの保存特性が大幅に改善されていることがわかる。
【００５０】
グルコン酸カリウムを含まない比較例１のセンサと、グルコン酸カリウムおよびフタル酸水素カリウムを含む本実施例のセンサの保存前の応答特性の比較を図７に示す。図７を見ると、グルコン酸カリウムおよびフタル酸水素カリウムを含むグルコースセンサは、比較例１のセンサに比べて、６００ｍｇ／ｄｌ付近の応答値が高い。これにより、グルコン酸カリウムおよびフタル酸水素カリウムを添加することで、高濃度域におけるグルコースセンサの応答性を改善できることがわかる。
【００５１】
実施例３
比較例１と同様にしてＣＭＣ層７ａを形成した後、１０００Ｕ／ｍｌのＰＱＱ−ＧＤＨ、５０ｍＭのフェリシアン化カリウム、４０ｍＭのグルコン酸カリウムおよび０．５ｍＭのマレイン酸を含む混合水溶液を、ＣＭＣ層７ａ上に５μｌ滴下し乾燥して、層７ｂを形成した。このようにしてグルコースセンサを作製した。
【００５２】
比較例１と同様にして、作製直後のセンサおよびシリカゲルの入った密封容器内で４０℃で１週間保存した後のセンサについて応答特性図を作成した。その結果を図８に示す。図８より、作製直後のセンサと４０℃で１週間保存後のセンサの応答特性にはほとんど差はなく、比較例１と比較すると、本実施例のセンサの保存特性が改善されていることがわかる。
【００５３】
グルコン酸カリウムを含まない比較例１のセンサと、グルコン酸カリウムおよびマレイン酸を含む本実施例のセンサの保存前の応答特性の比較を図９に示す。図９を見ると、グルコン酸カリウムおよびマレイン酸を含むグルコースセンサは、６００ｍｇ／ｄｌ付近の応答値が高い。これにより、グルコン酸カリウムおよびマレイン酸を添加することで、高濃度域におけるグルコースセンサの応答性を改善できることがわかる。
【００５４】
実施例４
比較例１と同様にしてＣＭＣ層７ａを形成した後、１０００Ｕ／ｍｌのＰＱＱ−ＧＤＨ、５０ｍＭのフェリシアン化カリウム、４０ｍＭのグルコン酸カリウムおよび０．５ｍＭのこはく酸を含む混合水溶液を、ＣＭＣ層７ａ上に５μｌ滴下し乾燥して、層７ｂを形成した。このようにしてグルコースセンサを作製した。
【００５５】
比較例１と同様にして、作製直後のセンサおよびシリカゲルの入った密封容器内で４０℃で１週間保存した後のセンサについて応答特性図を作成した。その結果を図１０に示す。図１０より、作製直後のセンサと４０℃で１週間保存後のセンサの応答特性にはほとんど差はなく、比較例１と比較すると、本実施例のセンサの保存特性が改善されていることがわかる。
【００５６】
比較例１のセンサと、グルコン酸カリウムおよびこはく酸を含む本実施例のセンサの保存前の応答特性の比較を図１１に示す。図１１を見ると、グルコン酸カリウムおよびこはく酸を含むグルコースセンサは、６００ｍｇ／ｄｌ付近おける応答値が高い。これにより、グルコン酸カリウムおよびこはく酸を添加することで、高濃度域におけるグルコースセンサの応答性を改善できることがわかる。
【００５７】
実施例５
比較例１と同様にしてＣＭＣ層７ａを形成した後、１０００Ｕ／ｍｌのＰＱＱ−ＧＤＨ、５０ｍＭのフェリシアン化カリウム、４０ｍＭのグルコン酸カリウム、０．５ｍＭのフタル酸水素カリウムおよび７５μＭの塩化カルシウムを含む混合水溶液を、ＣＭＣ層７ａ上に５μｌ滴下し乾燥して、層７ｂを形成した。このようにしてグルコースセンサを作製した。
【００５８】
比較例１と同様にして、作製直後のセンサおよびシリカゲルの入った密封容器内で４０℃で１週間保存した後のセンサについて応答特性図を作成した。その結果を図１２に示す。図１２より、作製直後のセンサと４５℃で１週間保存後のセンサの応答特性にはほとんど差はなく、４５℃で１週間という高温保存条件において、本実施例のセンサの保存特性が優れていることがわかる。
【００５９】
産業上の利用の可能性
以上のように本発明によれば、保存安定性に優れ、かつ応答性が向上した、高性能なグルコースセンサを得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  本発明の一実施例におけるグルコースセンサの反応層を除いた斜視図である。
【図２】  図１に示すグルコースセンサの要部の縦断面図である。
【図３】  比較例１のグルコースセンサの応答特性図である。
【図４】  本発明の実施例１のグルコースセンサの応答特性図である。
【図５】  実施例１のグルコースセンサおよび比較例１のグルコースセンサの保存前の応答特性図である。
【図６】  本発明の実施例２のグルコースセンサの応答特性図である。
【図７】  実施例２のグルコースセンサおよび比較例１のグルコースセンサの保存前の応答特性図である。
【図８】  本発明の実施例３のグルコースセンサの応答特性図である。
【図９】  実施例３のグルコースセンサおよび比較例１のグルコースセンサの保存前の応答特性図である。
【図１０】  本発明の実施例４のグルコーセンサの応答特性図である。
【図１１】  実施例４のグルコースセンサおよび比較例１のグルコースセンサの保存前の応答特性図である。
【図１２】  本発明の実施例５のグルコースセンサの応答特性図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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