(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
レインアントロン−８−グルコシドを酸素又は酸素源により酸化してセンノシドＡ及びＢとするセンノシドＡ及びＢの製造方法にして、触媒として活性炭を用いてレインアントロン−８−グルコシドの酸化を行うことを特徴とする方法。
【請求項２】
得られるセンノシドＡ及びＢの全てまたは一部を、カルシウムイオン含有水溶液からメタノール沈澱によってカルシウム塩に転化する工程を続いて実施することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
水溶液中において、アルカリｐＨ条件下において酸化を行うことを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
該アルカリｐＨ条件がｐＨ値８〜８．５の条件であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
酸素含有気体を酸化に用いることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
該酸素含有気体が空気であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
レインアントロン−８−グルコシドが、センナあるいはセンナの部分から抽出して得られるセンノシド混合物を環元することにより得られたものであることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
上記の環元を、亜ジチオン酸のアルカリ金属塩を用いて水溶液中で行うことを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
該亜ジチオン酸のアルカリ金属塩が亜ジチオン酸ナトリウムであることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
上記の抽出操作を、水−メタノール混合液を用いて行い、抽出後メタノールを蒸発させた後、アルコールで水相を洗浄することを特徴とする請求項７〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
該アルコールが２−ブタノールであることを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
酸化後、反応混合物をｐＨ値１．５〜２．０まで酸性化して結晶化することによりセンノシドＡ及びＢを取得することを特徴とする請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
センノシドＡ及びＢを、水酸化カルシウムを加えることにより水溶液に溶解し、次いでメタノールを加えて該センノシドＡ及びＢをそれらのカルシウム塩として沈澱させることにより、センノシドＡ及びＢをカルシウム塩に転化することを特徴とする請求項２〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
上記の沈澱のために、該水溶液のｐＨ値を６．７〜６．９に調整することを特徴とする請求項１３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明の目的は、レインアントロン−８−グルコシド（ｒｈｅｉｎａｎｔｈｒｏｎｅ−８−ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）を酸素又は酸素源により酸化してセンノシドＡ及びＢを形成することを包含する、センノシドＡ及びＢ（ｓｅｎｎｏｓｉｄｅｓ  Ａ  ａｎｄ  Ｂ）の製造方法を提供することにある。
【０００２】
センノシドは、緩下作用を有する物質であり、例えばカシア・アングスチフォリア（Ｃａｓｓｉａ  ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ）やカシア・アクチフォリア（Ｃａｓｓｉａ  ａｃｕｔｉｆｏｌｉａ）などのセンナ（ｓｅｎｎａ）の中に存在する。センノシドは、センナの部分、例えばその葉やさやなど、から、粗混合物の形で抽出することにより単離することができる。センノシドの中でも最も重要なのは化１で表されるセンノシドＡ及びＢである。
【０００３】
【化１】
0003878680.tif 000002
【０００４】
センノシドＡ及びＢは、互いに立体異性体であり、１０及び１０’の位置に関して互いに配置が異なっている。センノシドＡ及びＢの還元物には、例えば、化２で表されるレインアントロン−８−グルコシド、及びレイン−８−グルコシドがある［エイ．ストール（Ａ．  Ｓｔｏｌｌｅ）ら、Ｆｏｒｔｓｃｈｒｉｔｔｅｄｅｒ  Ｃｈｅｍｉｅ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｒ  Ｎａｔｕｒｓｔｏｆｆｅ，
ｂａｎｄ  ５９９，  １９５０，  ｐ．２４８−２６９９ を参照］。
【０００５】
【化２】
0003878680.tif 000003
【０００６】
粗センノシド混合物は、所望のセンノシドの他に、センニジン（ｓｅｎｎｉｄｉｎ）［アグリコン（ａｇｌｙｃｏｎｅ）に相当する］などの副産物や、センノシドの分解産物などを含んでおり、該副産物は、望ましくない副作用を生じることがある。粗センノシド混合物中のセンノシド系化合物の総量は、約６８％であり、残りは植物由来の他の物質である。
【０００７】
【従来の技術】
センナからセンノシドを取得する方法及びその改変法は、特許や文献から幾つか知られている。例えば、センノシドを取得するための様々な抽出方法や抽出−結晶化方法が知られている（フィンランド国特許第７５９９２号明細書及び本願明細書中に記載の文献を参照）。
【０００８】
また、室温で水−メタノール混合液を用いてセンナのさやと葉からセンノシドを抽出した後、メタノールを蒸発させて粗センノシド混合物を調製することも知られている（例えばＷＯ９３／００３５０を参照）。更に、所望であれば、得られる濃縮物を、例えば２−ブタノールのようなアルコールで洗浄した後還元して、レインアントロン−８−グルコシドを得る。還元剤としては、塩化スズ（II）、二酸化硫黄、水素化ホウ素アルカリ金属、及び、特に亜ジチオン酸のアルカリ金属塩などの多様な還元試薬が提案されている。
【０００９】
センノシドを取得する方法としては、レインアントロン−８−グルコシドを酸化して、対応するセンノシド化合物を形成することが知られている。適当な酸化剤としては、一般に過酸化水素や二酸化マンガンの他に、空気中の酸素などの酸素も提案されている。又、触媒を加えて酸化を容易にすることも提案されており、その触媒としては、パラジウム黒や鉄（III）塩が提案されている。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は前記の公知の方法の改良法を提供することにあり、これによって、従来の方法に較べ更に純度の高いセンノシドＡ及びＢをより高収率で製造することができる。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明の目的は、触媒として活性炭を用いてレインアントロン−８−グルコシドの酸化を行い、そして、更に場合により、得られるセンノシドＡ及びＢを、カルシウムイオン含有水溶液からメタノール沈澱によりカルシウム塩に転化することにより達成される。
【００１２】
本発明の好ましい態様によると、センナのさやや葉などを適切な出発材料として用い、これを室温で、好ましくは２０oＣ〜３０oＣで４５〜７０％のメタノール水溶液で、例えば５０％のメタノール水溶液で抽出して粗センノシド混合物を得る。出発材料に対する抽出用溶媒の具体的な割合は、約１：１〜約２：１である。次いで、メタノールを好ましくは真空下４０oＣ未満で蒸発させると、センノシド混合物を含む水相が残る。本発明の好ましい態様によると、該水相をアルコール、特に２−ブタノールなどの、水中に部分的にのみ溶解する溶媒で洗浄する。洗浄後放置し相分離を行ない、出発材料中のセンノシド混合物の副産物の大部分を含む有機層を蒸留法などで精製後、再利用することができる。洗浄後得られる水相は所望のセンノシドを含んでいる。
【００１３】
センノシドは、還元前にｐＨ値がセンノシドのｐＫａ値以下、即ちｐＨ値が約４より下になるまで、強硫酸などの酸を加えることによって単離することができる。
【００１４】
その後センノシド混合物を水溶液中で還元する。還元には、例えば亜ジチオン酸のアルカリ金属塩、特に亜ジチオン酸ナトリウムを用いる。還元時のｐＨ値は、アルカリ金属の水酸化物、特に水酸化ナトリウムにより、７〜１０、好ましくは８．３に調整する。用いる還元剤の量は、溶液中に含まれるセンノシドの量の約０．５〜約２倍である。還元の際の温度は、１５〜３０oＣに保つのが好ましい。還元は、通常約２〜約４時間行う。
【００１５】
還元後、硫酸などの酸をｐＨ値４〜５、好ましくは４．７になるまで添加することによりレインアントロン−８−グルコシドを沈澱させ、そのｐＨにおいて種晶（ｓｅｅｄ  ｃｒｙｓｔａｌｓ）を加えた後、ｐＨ値２〜３、好ましくは２．９になるまで徐々に酸を加える。この混合物を１０oＣに冷却し、１〜３時間放置し結晶を析出させる。沈澱物は、例えば遠心分離法などによって、窒素雰囲気下で濾別する。長時間保存するために、必要であれば、沈澱物を加熱炉で乾燥してもよい。
【００１６】
その後、得られるレインアントロン−８−グルコシドを、次のようにして酸化処理にかける。即ち、まず、例えばその１０倍量の水−アルコール混合液、好ましくは８０％のイソプロパノール水溶液を用いて、０〜１５oＣ、好ましくは５〜１０oＣにおいてスラリーにして、更にアルカリ金属の水酸化物やアルキルアミド、好ましくはトリエチルアミドやジエチルアミドなどの適当な塩基を加えてｐＨ値を７〜９に調整してから酸化する。塩基を添加する間は、ｐＨ値が８．５を超えると、酸化中のセンノシドから糖分子が分離し、ｐＨ値が０．５〜１上がる恐れがあるので好ましくない。本発明によれば、次に活性炭、好ましくはＯＨ-活性炭を、レインアントロン−８−グルコシドに対して０．０５〜０．２０倍量、好ましくは０．１倍量添加する。本発明によれば、活性炭は表面活性触媒として働き、活性炭の表面に吸着した酸素が、空気や酸素の単なる気泡よりも更に選択的且つ効果的にレインアントロン−８−グルコシドを酸化し、センノシドＡ及びＢとする作用を有する。同時に、活性炭は反応中に形成され得るレイン−８−グルコシドやレインなどの望ましくない過酸化物を吸着する。活性炭を加えた後、酸素又は酸素源を、上記温度で、例えば焼結体フィルターから気泡を発生させて、混合物に送りこむ。
【００１７】
本発明によると、触媒として、パラジウム黒や水中に溶解している酸素などのように以前から提案されている触媒の代りに、特に活性炭を用いることによって、純度の高い製品を高収率で得ることができる。この効果的な触媒を用いる利点は、最終産物中のセンノシド含量について特に反映されており、レインアントロン−８−グルコシドを水酸化カルシウムを含む水に溶解し、活性炭なしで反応混合物に気泡を送って酸化を行う方法で得られる生成物に比べて、センノシド含量が３０％以上も高い生成物が得られる。
【００１８】
上記の酸化反応の進行はＨＰＬＣを用いて調べることができ、出発物質の濃度を監視することによって正確な反応終結点を容易に測定することができる。得られる混合物は濾過し、濾液を適当な酸でｐＨ値１〜４、好ましくは約２に調整する。これを室温で放置するとセンノシドＡ及びＢが酸の形で沈澱する。得られる沈澱物を例えばイソプロパノールで洗浄し、真空室などで乾燥するが、分解を避けるために乾燥温度は最高４０oＣまでとする。
【００１９】
本発明の方法によれば、得られた酸型センノシドＡ及びＢを、より胃腸へ吸収されやすいカルシウム塩に転化することができる。このためには、センノシドＡ及びＢを、好ましくは水酸化カルシウムを加えてｐＨ値を上げることにより、水溶液に溶解する。水酸化カルシウムは、ｐＨ値が８．０±０．５になるまで加えるが、ｐＨが約５の時に既にセンノシドの溶解は始まる。或いは、水酸化ナトリウムを上記のｐＨ値になるまで加えながら、酸型センノシドＡ及びＢの全モルに対して塩化カルシウムを約１．１〜約２モル過剰量加えても良い。次いで、希塩酸等の希酸を加え、約１時間かけて、ｐＨを約６．７〜約６．９に調整する。より高いｐＨの最終生成物を得たい場合は、ｐＨを６．７〜８．５に調整することもできる。ｐＨは、水溶液中のセンノシドが酸として沈澱し始めるのを避けるため、６．７を下回らないようにする。
【００２０】
上記のカルシウム塩を沈澱させるために、メタノールを、まず水溶液の形で、好ましくは５０〜９０％の水溶液として、例えば９０％メタノール水溶液を、１５分から２時間かけて、好ましくは３０分の間に上記の混合液に加え、次いで純粋なメタノールを１〜４時間、好ましくは約２時間かけて加え、混合液を撹拌し、濾別する。センノシドの分解を防ぐため、得られた沈澱物を４０oＣを越えない温度で乾燥する。
【００２１】
【実施例】
以下の実施例で本発明を詳述するが、本発明はこれらの例によってなんら限定されるものではない。
【００２２】
【実施例１】
Ａ．抽出、蒸発及び洗浄
センナのさや１６ｋｇを、メタノール１０リットル及び水道水１０リットルの混合液中に３日間温浸する。抽出をより効果的に達成するため、溶液をポンプで循環する。温度は２０〜３０oＣに維持する。一定時間後、溶液を排出し、さやを５０％メタノール水溶液４リットルで洗浄する。得られたメタノール−水混合液を４０oＣ、真空下で蒸留する。蒸留残留物の密度が１．２５ｋｇ／ｌになった時、蒸留を停止し、蒸留残留物をｎ−ブタノール８リットルで抽出する。抽出は、適当な反応器内で、ブタノール溶液を１．５時間撹拌することにより行なう。撹拌を停止し、溶液を１晩放置して相分離させる。分離後、水相を環元器に入れる。
【００２３】
Ｂ．還元
２５oＣの還元器内の、上記で得られた粗センノシド水溶液に、ｐＨが８．３になるまで５０％水酸化ナトリウム水溶液を添加する。１２０〜１５０ｇのアルカリ液が消費される。更に、該溶液に亜ジチオン酸ナトリウム５００ｇを添加し、得られる混合液を２時間撹拌する。次に水３リットルを加えた後、硫酸を添加してｐＨを４．７に調整する。更にレインアントロン−８−グルコシドの結晶１ｇを加え、硫酸を添加してｐＨを、２．９に調整する。その後、混合液を１０oＣに冷却し、２時間放置する。結晶化したレインアントロン−８−グルコシドをフィルターで濾別し、温水１５００ｍｌで洗浄する。沈澱物を真空下でフィルターを通して窒素吸引することにより乾燥する。これにより約２０％の水分を含有する、レインアントロン−８−グルコシド約５６０ｇを得る。
【００２４】
Ｃ．レインアントロン−８−グルコシドの酸化
１５〜２０％の水分を含有するレインアントロン−８−グルコシド５６０ｇを、８０容量％イソプロパノール６０００ｍｌ中に、５〜１０oＣで懸濁させてスラリーとする。ｐＨ約８になるまでトリエチルアミンを添加することにより、該レインアントロン−８−グルコシドを溶解する。その際、ｐＨは８．５を超えないようにする。約２００ｍｌのトリエチルアミンを消費する。その後、ＯＨ-活性炭５０ｇを加え、焼結体フィルターにより約３リットル／分の速度で気泡を発生させて、混合液中に圧縮空気を通す。反応液の温度は５〜１０oＣに維持しながら、約２．５時間、気泡を流通させる。
【００２５】
反応終了後、混合液を厚紙フィルターで濾過し、濾液に濃塩酸（約２００ｍｌ）を加えてｐＨを１．５〜２．０に調整する。得られる混合液を室温で１晩撹拌して結晶を析出させる。得られた沈澱物を厚紙フィルターで濾別し、イソプロパノール５００ｍｌで洗浄し、その後約４０oＣ以下の温度の真空チャンバー内で乾燥する。収率は約３１０ｇ（レインアントロン−８−グルコシドに対して約６２．２％）である。
【００２６】
Ｄ．カルシウム塩の製造
得られる酸型センノシドＡ及びＢ３００ｇを水１８００ｍｌ中に懸濁させてスラリーとし、更に水酸化カルシウム−水スラリー［Ｃａ（ＯＨ）2３０ｇ＋水１５０ｍｌ］を加えて溶解する。該アルカリスラリーの添加は混合液のｐＨが８±０．５になるまで続け、スラリー約１１０ｍｌを消費する。これにより酸型センノシドＡ及びＢが溶解する。その後１時間かけて、弱塩酸（４０ｍｌ；希釈率１：１０）を加えてｐＨを６．７に調整し、かつｐＨが６．７から６．９の範囲内に維持されているか確認する。３０分以内に９０％メタノール水溶液１０００ｍｌを加え、その後約２時間かけて純粋な（１００％）メタノール４４００ｍｌを加える。更に１時間、混合液を撹拌し、厚紙フィルターで濾別する。沈澱物を少量のメタノールで洗浄する。
【００２７】
沈澱物を最高４０oＣまでの温度で１晩乾燥し、重量を測定する。センノシドＡ及びＢのカルシウム塩の収率は、センノシド成分が約８２％である酸型センノシドＡ及びＢから計算すると、空気乾燥の場合は約３１７ｇ（１００％）、真空乾燥の場合は約２８５ｇ（約９１％）である。
【００２８】
【発明の効果】
本発明の方法により、従来の製造方法に較べ高純度のセンノシドＡ及びＢを更に高収率で得ることができる。