(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
a）式（Ｉ）：
0003983803.tif 000021
（式中、Ｒ1は水素、ハロゲン、適切に保護された水酸基を表わし、Ｒ3はアミノ保護基を表わす）で示されるＮが保護されたダウノルビシンまたはその誘導体を、トリフルオロメタンスルホン酸またはその反応性誘導体と反応させて、式（II）：
0003983803.tif 000022
（式中、Ｒ1およびＲ3は前記と同じ）で示される化合物をえること、
b）９位の水酸基を保護し、任意に６および１１位の水酸基を保護して式（III）：
0003983803.tif 000023
（式中、Ｔは保護基を表わし、Ｒ1は前記と同じ）で示される中間体をえること、
c）工程ｂ）でえられた化合物を、式：ＲＣＯＯＨ（式中、Ｒは脂肪族残基、任意にヘテロ原子により置換されたか中断された脂肪族残基、または任意に置換された芳香族残基を表わす）で示されるカルボン酸と第二級または第三級アミンとの塩で処理して、式（IV）：
0003983803.tif 000024
（式中、Ｒ、Ｒ1、Ｒ3およびＴは前記と同じ）で示されるエステルをえること、
d）９位の水酸基を脱保護して式（Ｖ）：
0003983803.tif 000025
（式中、Ｒ、Ｒ1およびＲ3は前記と同じ）で示される中間体をえること、
e）前記エステルを加水分解して式（VI）：
0003983803.tif 000026
（式中、Ｒ1およびＲ3は前記と同じ）で示されるＮが保護されたエピダウノルビシンまたはその誘導体をえること、
f）アミノ保護基を除去すること、および
要すれば、g）式（Ａ）：
0003983803.tif 000027
（式中、Ｒ1はＯＨまたはＯＣＯＲ2を表わし、Ｒ2は炭素数１〜４のアルキル基を表わす）で示されるエピルビシンまたはそのエステルへ変換することからなる、式（Ａ）：
0003983803.tif 000028
（式中、Ｒ1は水素、ＯＨまたはＯＣＯＲ2を表わし、Ｒ2は前記と同じ）で示される化合物の製造法。
【請求項２】
該カルボン酸塩がトリエチルアミン塩である請求の範囲第１項記載の製造法。
【請求項３】
該酸がギ酸、酢酸、イソ酪酸、トリメチルシリル酢酸、ｐ−ニトロ安息香酸からなる群より選ばれる請求の範囲第１項または第２項記載の製造法。
【請求項４】
工程ｃ）が０〜５０℃の温度で行なわれる請求の範囲第１項、第２項または第３項記載の製造法。
【請求項５】
６、９および１１位の水酸基がトリアルキルシリル基で保護される請求の範囲第１項、第２項、第３項または第４項記載の製造法。
【請求項６】
Ｒ3がトリフルオロアセチルである請求の範囲第１項、第２項、第３項、第４項または第５項記載の製造法。
【請求項７】
a）ドキソルビシンを９および１４位の水酸基のための適切な保護剤と反応させ、ついで３′位のアミンを保護して、式（VII）：
0003983803.tif 000029
（式中、Ｍ1は炭素数１〜４のアルコキシ基を表わし、Ｍ2は水素または炭素数１〜４のアルキル基を表わす）で示される化合物をえること、
b）前記中間体（VII）をトリフルオロメタンスルホン酸またはその反応性誘導体と反応させて、式（VIII）：
0003983803.tif 000030
（式中、Ｍ1、Ｍ2およびＲ3は前記と同じ）で示される化合物をえること、
c）６および１１位の水酸基を保護して式（IX）：
0003983803.tif 000031
（式中、Ｔは保護基を表わし、Ｍ1、Ｍ2およびＭ3は前記と同じ）で示される中間体をえること、
d）工程ｃ）でえられた化合物を、式：ＲＣＯＯＨ（式中、Ｒは任意にヘテロ原子により置換されたか中断された脂肪族残基、任意に置換された芳香族残基を表わす）で示されるカルボン酸と第二級または第三級アミンとの塩で処理して、式（Ｘ）：
0003983803.tif 000032
（式中、Ｒ、Ｒ3、Ｍ1およびＭ2は前記と同じ）で示されるエステルをえること、
e）前記エステルを加水分解し、ついで９および１４位の水酸基ならびにアミノ基の保護基を除去すること
からなる、式：
0003983803.tif 000033
で示されるエピルビシンの製造法。
【請求項８】
該カルボン酸塩がトリエチルアミン塩である請求の範囲第７項記載の製造法。
【請求項９】
該酸がギ酸、酢酸、イソ酪酸、トリメチルシリル酢酸、ｐ−ニトロ安息香酸からなる群より選ばれる請求の範囲第７項または第８項記載の製造法。
【請求項１０】
工程ｄ）が０〜５０℃の温度で行なわれる請求の範囲第７項、第８項または第９項記載の製造法。
【請求項１１】
Ｒ3がトリフルオロアセチルである請求の範囲第７項、第８項、第９項または第１０項記載の製造法。
【発明の詳細な説明】
本発明はアンスラサイクリン系抗生物質の製造法に関する。
技術分野
エピルビシン（エピドキソルビシン）およびエピダウノマイシンは、抗腫瘍活性を有するアンスラサイクリンクラスに属する抗生物質である。
これらの化合物は、分子のグリコシド部分のＣ−４′位の水酸基の立体配置において、抗腫瘍性ドキソルビシンおよびダウノルビシンとは異なる。これらの立体配置はそれぞれ、ドキソルビシンおよびダウノルビシンではアキシアルであり、エピルビシンおよびエピダウノルビシンではエクアトリアルである。
ドキソルビシンは抗悪性腫瘍の治療において長いあいだ用いられている。総説については、Arcamone編，“Doxorubicin”, Acad. Press，ニューヨーク  1981を参照されたい。ドキソルビシンの深刻な副作用としては、しばしば不可逆性である心筋症を発症することがあげられる。
エピルビシンはその類似体と比較して同等の抗腫瘍活性を有しながらも副作用はその類似体のものよりも低いという有利な薬理学的特性を有することが見出された（R. B. Weissら，Cancer Chemother. Pharmacol. 18, 185-97(1986)）。
エピルビシンの最初の合成は、式（Ｂ）：
0003983803.tif 000002
で示されるダウノルビシンのアグリコンとトリフルオロアセトアミドのように保護されたアコサミン（acosamine）の１−クロロ−誘導体（Arcamone, F. ら，J. Med. Chem., 18, 7, 703-707,(1975)）との縮合、それに続く脱保護、および文献周知の方法を用いる側鎖への働きかけ（working up）を含む。前記方法は、すでにダウノルビシンをドキソルビシンに変換するために用いられている（E. M. Acton, J. Med. Chem., 17, 65(1974); DE 1917874）。
塩化トリフルオロアセチルアコサミニルのＮ，Ｏ誘導体は、かなり複雑で高価な多数の方法を用いる様々な天然の糖の合成変換によりえられた。
イタリア国特許第１，１６３，００１号公報および、そののちのG. Bonadonnaの“Advances in Anthracycline Chemotherapy Epirubicin”, Masson編，ミラノ、イタリア国、１９８４には、Ｎ−トリフルオロアセチルダウノルビシンのグリコシド全体について行なわれる合成方法が開示されている。この方法はＣ−４′位の水酸基をケト基に酸化し、つぎにホウ水素化ナトリウムを用いてそのケト基を水酸基に立体選択的に還元することからなる。前記酸化反応はきわめて低温（−70℃）で行なわなければならない。前記ケト誘導体は非常に分解しやすく不安定である。さらに、ホウ水素化ナトリウムを用いる還元は、アグリコンのカルボニル基の競争還元を最小化するために低温で行なわなければならない。前記特許から推論しうる最大の異性化収率は、記載はないが、約４８％である。
Ｃ−４′位のエピマー化のための別の方法は、B. Barbieriら，Cancer Research, 47,4001（1987）に記載されている。この方法は４′−ハロゲン−ダウノルビシンをえ、つぎにエクアトリアル配置からアキシアル配置へのエピマー化、すなわち本発明において所望されることとは反対の方向におけるエピマー化を達成する。前記エピマー化反応はハロゲン化テトラブチルアンモニウムを用いるトリフルオロメタンスルホン酸基（triflate group）（エクアトリアル）の求核置換反応により行なわれる。
発明の開示
そこで、より簡便に制御しうる、とくには反応温度に関する、反応条件下で、より簡便な精製操作を用いて、アンスラサイクリン系抗生物質分子全体について、ダウノサミン残基の４′位の水酸基の異性化のための新規な方法を見出した。
この方法にしたがえば、アミノ基が適切に保護されているダウノサミン残基のアキシアル配置からエクアトリアル配置への４′位の水酸基のエピマー化が、強い離脱基を導入し、ついで４′位の炭素原子の立体配置の反転をともなって、導入された離脱基をカルボン酸残基（carboxylate group）で置換し、さらに引き続いてカルボン酸塩を加水分解し、水酸基を再びえて、アミノ保護基を除去することによりえられる。
エピマー化反応の研究中に、所望のエピマーの収率は、トリフラート脱離基（triflate leaving group）の置換反応と競争して形成される副生物のためにあまり高くないことが見出された。
驚くべきことに、前記アグリコン部分の水酸基の保護、とくには９位の水酸基の保護により、副生物を競争的に形成することなく所望のエピマーをえることが可能となった。
本発明にしたがう方法の目的のためには、前記アグリコン部分の９位の水酸基を保護することが必須である。６位と１１位の水酸基も保護すると収率を上げることができる。
したがって、本発明の目的とするものは、式（Ａ）：
0003983803.tif 000003
（式中、Ｒ1は水素、ＯＨまたはＯＣＯＲ2を表わし、Ｒ2は炭素数１〜４のアルキル基を表わす）で示されるアンスラサイクリンクラスの抗生物質の製造法であり、前記製造法は前記抗生物質分子のアグリコン部分の水酸基を保護して、４′位のトリフルオロメタンスルホン酸残基のカルボン酸残基を用いた求核置換反応によって４′位の水酸基をエピマー化することからなる。
発明の詳細な説明
本発明の第一の実施態様にしたがえば、製造法は
a）式（Ｉ）：
0003983803.tif 000004
（式中、Ｒ1は水素、ハロゲン、適切に保護された水酸基を表わし、Ｒ3はアミノ保護基を表わす）で示されるＮが保護されたダウノルビシンまたはその誘導体を、トリフルオロメタンスルホン酸（triflic acid）またはその反応性誘導体と反応させて、式（II）：
0003983803.tif 000005
（式中、Ｒ1およびＲ3は前記と同じ）で示される化合物をえること、
b）９位の水酸基を保護し、任意に６および１１位の水酸基を保護して式（III）：
0003983803.tif 000006
（式中、Ｔは保護基を表わし、Ｒ1およびＲ3は前記と同じ）で示される中間体をえること、
c）工程ｂ）でえられた化合物を、式：ＲＣＯＯＨ（式中、Ｒは脂肪族残基、任意にヘテロ原子により置換されたか中断された脂肪族残基、または任意に置換された芳香族残基を表わす）で示されるカルボン酸と第二級または第三級アミンとの塩で処理して、式（IV）：
0003983803.tif 000007
（式中、Ｒ、Ｒ1、Ｒ3およびＴは前記と同じ）で示されるエステルをえること、
d）９位の水酸基を脱保護して式（Ｖ）：
0003983803.tif 000008
（式中、Ｒ、Ｒ1およびＲ3は前記と同じ）で示される中間体をえること、
e）前記エステルを加水分解して式（VI）：
0003983803.tif 000009
（式中、Ｒ1およびＲ3は前記と同じ）で示されるＮが保護されたエピダウノルビシンまたはその誘導体をえること、
f）アミノ保護基を除去すること、および
要すれば、g）式（Ａ）：
0003983803.tif 000010
（式中、Ｒ1はＯＨまたはＯＣＯＲ2を表わし、Ｒ2は炭素数１〜４のアルキル基を表わす）で示されるエピルビシンまたはそのエステルへ変換することからなる。
出発化合物は好ましくはダウノルビシントリフルオロアセトアミド（daunorubicin trifluoroacetamide）、またはその誘導体であり、それらは当該技術分野において既知であり、いずれにせよダウノルビシンおよびトリフルオロ酢酸無水物から出発する既知の方法（たとえば、J. Med. Chem., 18, 7, 703-707,(1975)）にしたがって製造しうる。
ほかのアミノ保護基、たとえばカルバミン酸フルオレニルメトキシ（Fmoc）などのカルバミン酸エステル（carbamate esters）も同様に用いることができる。
離脱基としては、トリフラート（トリフルオロメチルスルホン酸の）イオンがここでは用いられ、これは市販されており、対応する無水物の形態で用いることができる。前記反応は、たとえばジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ベンゼンなどの極性の小さい非プロトン性の溶媒のような、反応物および最終生成物に影響を及ぼさない適切な溶媒中で行なう。
前記反応はそれを完了するのに充分な時間、低温（約０℃）で行なう。
結果としてえられた式（II）の中間体化合物はそれを回収することなく、つぎの工程に直接用いることができる。そののち、同じ反応容器内で、そのアグリコン部分の９位の、所望であれば、さらに６および１１位の水酸基のための保護基を提供する適切な試薬を加える。この中間体（III）もさらに引き続く工程に直接用いることができる。この反応における適切な保護基は当業者に知られている。トリメチルシリル基が市販価格が安いため好ましいが、ほかのシリル誘導基（silyl derivating group）も同等に有効である。
そののちの工程において、カルボン酸塩は第二級または第三級アミンとの塩の形態で加える。その反応はアンモニウム第四級塩（ammonium quaternary salts）を用いると不充分にしか進行しないことが見出された。
カルボン酸塩の具体例としては、ギ酸塩、酢酸塩、イソ酪酸塩、トリメチルシリル酢酸塩、ｐ−ニトロ安息香酸塩、トリフルオロ酢酸塩などのハロ酢酸塩があげられる。前記脂肪族残基もしくは芳香族残基のいずれの置換基も、ＲＣＯＯＨである酸の脂肪族鎖におけるいずれのヘテロ原子も求核置換反応で干渉されるべきではない。好ましいアミンはトリエチルアミンである。前記反応は０〜５０℃の範囲の温度で、好ましくは室温で、それを完了するのに充分な時間行なう。最後に、式（IV）の生成物を通常の操作にしたがって回収し、つぎに通常の操作で適切に処理して９位の水酸基を脱保護し、これにより式（Ｖ）の化合物をえる。
エステルの加水分解は、当業者に周知のアルカリ条件下で行ない、たとえばメタノールなどの極性溶媒に化合物（Ｖ）を溶解し、たとえば水酸化ナトリウムなどのアルカリまたはアルカリ土類金属の水酸化物で化合物（Ｖ）を処理する。Ｎが保護されたエピダウノルビシン（VI）をこれによりえ、窒素の保護基を加水分解したのち、エピダウノルビシン（Ａ；Ｒ1＝Ｈ）をえ、所望であれば、当該技術分野において知られている方法（たとえば、A. Suaratoら，Carbohydrate Res., 98, c1-c3(1981)）でエピルビシンまたはそのエステル（Ａ；Ｒ1＝ＯＨまたはＣＣＯＲ2）に変換する。
本発明の別の実施態様にしたがえば、エピルビシンを式（Ｃ）：
0003983803.tif 000011
で示されるドキソルビシンから出発して製造する。前記方法は
a）ドキソルビシンを９および１４位の水酸基のための適切な保護剤と反応させ、ついで３′位のアミンを保護して、式（VII）：
0003983803.tif 000012
（式中、Ｍ1は炭素数１〜４のアルコキシ基を表わし、Ｍ2は水素または炭素数１〜４のアルキル基を表わす）で示される化合物をえること、
b）前記中間体（VII）をトリフルオロメタンスルホン酸またはその反応性誘導体と反応させて、式（VIII）：
0003983803.tif 000013
（式中、Ｍ1、Ｍ2およびＲ3は前記と同じ）で示される化合物をえること、
c）６および１１位の水酸基を保護して式（IX）：
0003983803.tif 000014
（式中、Ｔは保護基を表わし、Ｍ1、Ｍ2およびＭ3は前記と同じ）で示される中間体をえること、
d）工程ｃ）でえられた化合物を、式：ＲＣＯＯＨ（式中、Ｒは任意にヘテロ原子により置換されたか中断された脂肪族残基、任意に置換された芳香族残基を表わす）で示されるカルボン酸と第二級または第三級アミンとの塩で処理して、式（Ｘ）：
0003983803.tif 000015
（式中、Ｒ、Ｒ3、Ｍ1およびＭ2は前記と同じ）で示されるエステルをえること、
e）前記エステルを加水分解し、ついで９および１４位の水酸基ならびにアミノ基の保護基を除去すること
からなる。
前記出発化合物は常套的に製造する。好ましい具体例は、オルトギ酸トリエチル（Ｍ1＝Ｃ2Ｈ5Ｏ、Ｍ2＝Ｈ）を用いるドキソルビシンの反応である（Arcamone，前出の文献，p.21参照）。それに続く工程は本発明の第一の実施形態に記載したように行なう。とくに、工程ｄ）は０〜５０℃の範囲の温度で、好ましくは室温で行なう。保護基は周知の方法にしたがい除去する。
以下の実施例により本発明をさらに説明する。
実施例１
０℃に冷却した、ジクロロメタン（500ml）およびピリジン（2.5ml）と化合物Ｉ（5g）との混合物を、徐々にトリフルオロメタンスルホン酸無水物（2.5ml）のジクロロメタン（125ml）溶液とともに加える。えられた混合物を約１時間反応させ、トリフラート（化合物II）を形成させる。
Ｎ，Ｏ−ビス−トリメチルシリルアセトアミド（10ml）を加え、室温まで昇温し、４時間撹拌する。トリスシリラート（tris silylate）（化合物III、Ｔ＝トリメチルシリル）をイソ酪酸トリエチルアミンのジクロロメタン（500ml）０．１モル溶液とともに加え、室温でさらに１５時間撹拌する。反応混合物を５００ｍｌの０．２５Ｎ塩酸で洗浄し、つぎに重炭酸ナトリウムの２％溶液で洗浄し、最後に５００ｍｌの水で二回洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、蒸発乾固する。
５ｇの化合物ＩＶｃをえる（Ｒ＝（ＣＨ3）2ＣＨ、Ｔ＝Ｓｉ（ＣＨ3）3、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
0003983803.tif 000016
実施例２
酢酸トリエチルアミンを用いたほかは実施例１に記載の操作にしたがい、５ｇの化合物ＩＶａをえる（Ｒ＝ＣＨ3、Ｔ＝Ｓｉ（ＣＨ3）3、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例３
ギ酸ジエチルアミンを用いたほかは実施例１に記載の操作にしたがい、５．１ｇの化合物ＩＶｄをえる（Ｒ＝Ｈ、Ｔ＝Ｓｉ（ＣＨ3）3、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例４
ｐ−ニトロ安息香酸トリエチルアミンを用いたほかは実施例１に記載の操作にしたがい、４．９ｇの化合物ＩＶｅをえる（Ｒ＝ｐ−Ｏ2ＮＣ6Ｈ4、Ｔ＝Ｓｉ（ＣＨ3）3、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例５
酢酸トリメチルシリルトリエチルアミン（triethylamine trimethylsilyl acetate）を用いたほかは実施例１に記載の操作にしたがい、５．１ｇの化合物ＩＶｂをえる（Ｒ＝（ＣＨ3）3ＳｉＣＨ2、Ｔ＝Ｓｉ（ＣＨ3）3、Ｒ3＝ＣＦ3Ｃ〇）。
実施例６
化合物ＩＶｃ（5g）のジクロロメタン（1000ml）溶液をフッ化カリウムの４８％水溶液（20ml）および１ｇの酢酸トリエチルアミンとともに加える。えられた混合物を室温で２日間撹拌し、つぎに相を分離する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥したのち、蒸発乾固する。
残渣をカラム（シリカゲル：溶離液  ジクロロメタン−アセトン  ９５：５）に通し精製して４．５ｇの化合物Ｖｃ（Ｒ＝（ＣＨ3）2ＣＨ）をえる。
0003983803.tif 000017
実施例７
ＩＶａ（5g）から出発し、実施例６と同様の操作で、４．２ｇの化合物Ｖａをえる（Ｒ＝ＣＨ3、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例８
ＩＶｄ（5.1g）から出発し、実施例６と同様の操作で、４．４ｇの化合物Ｖｄをえる（Ｒ＝Ｈ、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例９
ＩＶｅ（4.9g）から出発し、実施例６と同様の操作で、４．３ｇの化合物Ｖｅをえる（Ｒ＝ｐ−Ｏ2ＮＣ6Ｈ4、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例１０
ＩＶｂ（5.1g）から出発し、実施例６と同様の操作で、３．９ｇの化合物Ｖａをえる（Ｒ＝ＣＨ3、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例１１
化合物Ｖｃ（4.5g）のメタノール（270ml）溶液を０．３ｍｌの１０％水酸化ナトリウム溶液で２時間処理する。えられた混合物を０．１ｍｌの酢酸で中和し、蒸発乾固する。残渣を２０ｍｌのジクロロメタンおよび０．５ｍｌの水に溶解する。
えられた溶液を１０時間結晶化させ、３ｇの化合物ＶＩ（Ｒ1＝Ｈ、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）をえる。
0003983803.tif 000018
実施例１２
Ｖａ（4.2g）から出発し、実施例１１の記載と同様の操作で、３．５ｇの化合物ＶＩをえる（Ｒ1＝Ｈ、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例１３
Ｖｄ（4.4g）から出発し、実施例１１の記載と同様の操作で、３．９ｇの化合物ＶＩをえる（Ｒ1＝Ｈ、Ｒ3＝ＣＨ3ＣＯ）。
実施例１４
Ｖｅ（4.3g）から出発し、実施例１１の記載と同様の操作で、２．９ｇの化合物ＶＩをえる（Ｒ1＝Ｈ、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
実施例１５
ジメチルホルムアミド（32ml）とドキソルビシン塩酸塩（1.6g）との混合物を、オルトギ酸トリエチル（8ml）およびトリフルオロ酢酸（0.8ml）とともに加える。結果としてえられた溶液を室温で３時間撹拌し、つぎにジクロロメタン（60ml）で希釈し、Ｎ−メチル−モルホリン（2.5ml）とともに加える。０℃に冷却したのち、トリフルオロ酢酸無水物（0.8ml）のジクロロメタン（6ml）溶液を加える。えられた混合物を３時間、０℃で反応させ、つぎに３ｇの重炭酸ナトリウムおよび３０ｍｌのメタノールを加える。約２０分後、反応混合物を５０ｍｌの水、５０ｍｌの０．２５Ｎ塩酸および５０ｍｌの水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発乾固する。
残渣（化合物VII、Ｍ1＝Ｃ2Ｈ5Ｏ、Ｍ2＝Ｈ）を１００ｍｌのジクロロメタンおよび５ｍｌのピリジンに溶解し、０℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（0.5ml）のジクロロメタン（20ml）溶液を滴下により加える。えられた混合物を０℃で約１時間反応させ、トリフラート（化合物VIII、Ｍ1＝Ｃ2Ｈ5Ｏ、Ｍ1＝Ｈ、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）をえる。
２ｍｌのビス−トリメチルシリルアセトアミドを加え、室温で４時間温め、ビスシリラート（bis silylate）（化合物ＩＸ、Ｍ1＝Ｃ2Ｈ5Ｏ、Ｍ1＝Ｈ、Ｔ＝Ｓｉ（ＣＨ3）3、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）をえ、つぎにギ酸トリエチルアミンのジクロロメタン（100ml）の１Ｍ溶液を加える。えられた混合物を１５時間反応させ、化合物（Ｘ）（Ｒ＝Ｈ、Ｍ1＝Ｃ2Ｈ5Ｏ、Ｍ2＝Ｈ）をえる。
１０ｍｌの４８％フッ化カリウム溶液および２０ｍｌのメタノールを加え、２日間撹拌する。有機相を１００ｍｌの０．５Ｎ塩酸で洗浄し、つぎに１００ｍｌの３％重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、最後に１００ｍｌの水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発乾固する。残渣を２５０ｍｌの０．１ＭＮａＯＨ水溶液を用いて５℃で３時間処理し、つぎに生成物を２５０ｍｌのＣＨＣｌ3で４回抽出し、あわせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、蒸発乾固する。
残渣を１００ｍｌのメタノールに溶解し、塩酸でｐＨ２に調整する。
オルトエステルの加水分解は約３０分間で完了する。
えられた混合物を減圧下、室温で蒸発乾固し、残渣をジイソプロピルエーテルを加えて粉末化し、０．５ｇの粗エピルビシン塩酸塩をえる。
精製はイタリア国特許第１，２３７，２０２号公報にしたがって行ない、純粋なエピルビシン塩酸塩をえる。
0003983803.tif 000019
実施例１６
０℃に冷却した、ジクロロメタン（500ml）およびピリジン（2.5ml）と化合物Ｉ（Ｒ1＝Ｈ）（５ｇ）との混合物を、徐々にトリフルオロメタンスルホン酸無水物（2.5ml）のジクロロメタン（125ml）溶液とともに加える。えられた混合物を約１時間反応させ、トリフラート（化合物II、Ｒ1＝Ｈ）をえ、つぎにピリジン（6ml）およびトリフルオロメタンスルホン酸トリエチルシリル（15ml）を加え、室温まで温め、４時間撹拌する。
トリスシリラート（化合物III、Ｒ1＝Ｈ、Ｔ＝（Ｃ2Ｈ5）3Ｓｉ）をギ酸トリエチルアミンのジクロロメタン（500ml）の０．１Ｍ溶液とともに加え、室温でさらに１５時間撹拌する。
反応混合物を５００ｍｌの０．２５Ｎ塩酸で洗浄し、つぎに２％重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、最後に５００ｍｌの水で２回洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、蒸発乾固する。
５．２ｇの化合物ＩＶｆをえる（Ｒ1＝Ｈ、Ｒ＝Ｈ、Ｒ＝Ｓｉ（ＣＨ2ＣＨ3）3、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ、Ｒ3＝ＣＦ3ＣＯ）。
0003983803.tif 000020
実施例１７
ＩＶｆ（5.2g）から出発し、実施例６と同様の操作で、４．２ｇの化合物Ｖｄをえる。
実施例１８
米国特許第４，０３３，５６６号公報に記載されたようにしてえられた１４５ｍｇの１４５ｍｇの１４−吉草酸−ｎ−トリフルオロアセチルアドリアマイシン（n-trifluoroacetyladriamycin 14-valerate）（0.2mM）（ＡＤ３２）を、１０ｍｌの無水ＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、えられた混合物を５℃に冷却し、４８μｌのピリジンおよび４９μｌのトリフロオロメタンスルホン酸無水物0.3mM）を加える。２時間冷却し、反応が完了したら、４９μｌ（0.2mM）のビス−トリメチルシリルアセトアミドを加え、室温まで昇温し、４時間撹拌する。シリル化した生成物を４５０μｌ（3.3mM）のトリエチルアミンおよび１２４μｌのギ酸（3.3mM）とともに加える。えられた混合物を室温でさらに１５時間撹拌し、つぎに２ｍｌのメタノールおよび２ｍｌの４８％フッ化カリウム水溶液を加える。２日後、相を分離し、有機相を１０ｍｌの水で抽出する。有機相を蒸発させ、純粋なジクロロメタンから残渣を結晶化する。結晶化したエピアドリアマイシン−１４−吉草酸−３−トリフルオロアセトアミド（epiadriamycine 14-valerate-3-trifluoroacetamide）は融点２３０℃をもち、その構造に一致するＮＭＲ（ＤＭＳＯ）およびＭＳを有する。
回収した生成物は出発化合物ＡＤ３２よりわずかに低いＲｆを有する。
０．０５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を用いる、１０分間、５℃での生成物の加水分解により、クロマトグラフィーで分離し、すでに記載したものと同じであることがわかる、エピルビシンの部分的なフォーメーションが生じる。
実施例１９
４０ｍｌの無水ジクロロメタン中の１ｇのダウノルビシン塩酸塩を室温で、０．４ｍｌのＮ−メチルモルホリンおよび０．６ｇの塩化ＦＭＯＣと反応させる。１時間後、３ｍｌのメタノールを加え、室温で１２時間放置する。反応混合物を洗浄し、２０ｍｌの０．２ＭＨＣｌで抽出し、つぎに２０ｍｌの水で抽出し、そののち硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発してジイソプロピルエーテルから残渣を結晶化する。融点１７４〜１７５℃を有する０．５ｇの第一晶（first crop）をえる。
実施例１８では１５０ｍｇを反応させたが、最後の加水分解は、０．０５Ｍ水酸化ナトリウムのかわりに、１ｍｌのジメチルホルムアミドおよび０．１５ｍｌのジエチルアミンを用いて、約１時間、−１０℃で行なう。反応混合物を２０ｍｌのエチルエーテル中で沈殿させ、えられたガムをろ過し、水に懸濁する。０．１Ｍ塩酸を充分に加えて残渣を溶解し、ｐＨを３．７に調整する。すでに文献に記載されたものと同じである純粋なエピダウノルビシンをえるイタリア国特許第１，２３７，２０２号公報の記載を模倣して、溶液をＲＰ１８で精製する。