(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
三七人参より単離される下記の構造式：
【化１】
0003998282.tif 000006
〔式中、Ｒ1は−Ｇｌｕ6−1Ｇｌｕ；Ｒ2は−Ｇｌｕ2−1Ｇｌｕ；Ｒ3は下記式：
【化２】
0003998282.tif 000007
で示される基を表す。Ｇｌｕはβ−Ｄ−グルコピラノシルを意味し、それらの肩に付された数字はそれらの結合位置を示す〕
で示される化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は三七人参由来の新規サポニン配糖体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
三七人参は、ウコギ科（Araliaceae）のサンシチニンジン ［Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen （= P. sanchi Hoo,  P. pseudo-ginseng Wall. var. notoginseng（Burk.）Hoo et Tseng）］ の根を乾燥したものであり、現在市場では「三七」「人参三七」「参三七」「田三七」「田七」「田七人参」などと称し、また別名を「山漆」「金不換」という。
本植物は中国雲南省東南部から広西省西南部の極限された地域に分布するもので、既に清代頃から同地域で栽培化されており、１６世紀末頃から中国南部地方で民間的に金瘡、打撲、挫傷などの血症に対し、止血、消炎、鎮痛などの薬として用いられている。
【０００３】
現代においてもこれら止血、消炎（消腫）、鎮痛作用を主体に、内服、外用を問わず、臨床的に優秀な効果が認められている。漢方でいう止血の概念は非常に広範なものであり、補血作用やお血（ふる血）を化して水にすることにより痛みを止めるなどの作用も包含している。
すなわち、打身、ねんざ、腫痛出血、吐血、鼻血、婦人の崩漏、産後のお阻腹痛など諸出血症状に応用する。その他、近年では強心作用が見出され、冠状動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、高血圧、コレステロール過多症等にも応用されるようになってきている。また現代中国では、慢性肝炎、急性肝炎等の肝疾患にも用いられており、今後、抗炎症剤としての使用も期待される。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
三七人参の成分としては、サポニン配糖体であるジンセノサイド（ginsenoside）Rb1, Rg1, Rg2, Ra, Rb2, Rd, Re, Roの他、パナキシノール（panaxynol）、β−シロステロール（β−sitosterol）が知られているが、これらの成分はすべて人参（オタネニンジン＝Panax ginseng C.A.Meyer）と共通するものであって、三七人参特有の成分については精査されておらず、三七人参の薬理作用を説明するには不十分であるといえる。
そこで本発明者らは、三七人参の活性本体であると推測される三七人参特有の成分について精査し、新規化合物３種を単離し、構造決定するに至った。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明は次の式で表される三七人参由来のサポニン配糖体を提供するものである。
【化３】
0003998282.tif 000002
〔式中、Ｒ1は−Ｇｌｕ6−1Ｇｌｕ；Ｒ2は−Ｇｌｕ2−1Ｇｌｕ；Ｒ3は下記式：
【化４】
0003998282.tif 000003
で示される基を表す。Ｇｌｕはβ−Ｄ−グルコピラノシルを意味し、それらの肩に付された数字はそれらの結合位置を示す〕
【０００６】
【発明の実施の形態】
本発明の新規なサポニン配糖体は、三七人参より下記の抽出操作によって抽出、単離される。
三七人参をメタノールで熱時抽出し、そのメタノール抽出エキスを酢酸エチルと水で液−液分配し、水相移行部にｎ−ブタノールを加えて再度液−液分配し、そのブタノール相について順相シリカゲルカラムクロマトグラフィ［クロロホルム：メタノール：水（５０：１０：１→７：３：０.５→５：５：１）で順次溶出］に付し、薄層クロマトグラフィで確認しながら、順に５つの画分に分け、その第４画分を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィ（６０％、７０％、１００％メタノールにて順次溶出）に付し、その６０％メタノール溶出部をさらに逆相高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）［溶出液：メタノール−水（６５：３５、ｖ／ｖ）、流速：１０.０ｍｌ／分］で分離精製することにより目的とするサポニン配糖体３種（それぞれサンシチサポニンＡ、サンシチサポニンＢ、およびサンシチサポニンＣと命名した）を得る。
【０００７】
上記で得られるサポニン配糖体は表１に示す化学構造を有する。
【表１】
0003998282.tif 000004
【０００８】
本発明のサポニン配糖体は、これまで三七人参が用いられていた種々の疾患の治療に有用であると考えられ、とくに肝疾患の治療に有用である。
【０００９】
【実施例】
つぎに実施例および試験例を挙げて本発明のサポニン配糖体の製法および薬理作用の一例を示す。
実施例１〜３
（１）雲南省生三七（１２ｋｇ）を粉末にし、メタノール（１８リットル）で４回熱時抽出した。メタノール抽出液を合わせて減圧下溶媒を留去し、メタノール抽出エキス（１０５０ｇ、生薬からの収率８.８％）を得た。このメタノール抽出エキス（５１０ｇ）を酢酸エチル−水（１：１）で分配し、酢酸エチル移行部（４３.７ｇ、０.７５％）と水移行部を得、この水移行部にｎ−ブタノールを加えてさらに液−液分配抽出してｎ−ブタノール移行部エキス（４３０ｇ、７.４％）および水移行部エキス（３７.９ｇ、０.６５％）を得た。
ｎ−ブタノール移行部エキス（１００ｇ）を順相カラムクロマトグラフィ［３ｋｇ、クロロホルム：メタノール：水（５０：１０：１→７：３：０.５→５：５：１）で順次溶出］に付しＴＬＣで確認しながら順に、画分１（１４.８ｇ、０.９１％）、画分２（２.３ｇ、０.１４％）、画分３（４.０ｇ、０.２５％）、画分４（２７.８ｇ、１.７２％）、画分５（９.４ｇ、０.５８％）を得た。
【００１０】
上記画分４を逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィ（１ｋｇ、６０％、７０％、１００％メタノールで順次溶出）に付し、その６０％メタノール溶出部（１.１ｇ）をさらに逆相ＨＰＬＣ［カラム：ＹＭＣ−Pack R & D ODS-5(250 × 20 mm i. d）、溶出液；メタノール−水（６５：３５、ｖ／ｖ）、流速；１０.０ｍｌ／分］で分離精製することによりサンシチサポニンＡ（８５.３ｍｇ、０.００６％）、サンシチサポニンＢ（５５.８ｍｇ、０.００４％）、およびサンシチサポニンＣ（７３.３ｍｇ、０.００５％）を得た。これらの物質は下記の物性を示す。
【００１１】
サンシチサポニンＡの物性
分子式：C54H92O24
融点：１９７〜２００℃
比旋光度(C=0.003, MeOH)：[α]24D=+18.9°
マススペクトル(FAB-MS)m/z：1169(M+2Na-H)+, 1147(M+Na)+, 1129(M+Na-H2O)+(100%)
マススペクトル(HR-FAB-MS)m/z：C54H92O24Na, 計算値：1147.5876；実測値：1147.5895
赤外線吸収スペクトル(IR, ν max cm-1, KBr)：3432, 1632, 1072
13C NMR (125 Mz、ピリジン-d5、δ ppm）：142.3(d), 122.7(d), 106.0(d), 105.1(d), 104.8(d), 98.1(d), 89.0(d), 83.3(s), 83.3(d), 78.7(d), 78.3(d)x4, 78.1(d), 77.9(d),77.1(d)x2, 75.2(d), 75.0(d), 71.7(d), 71.6(d)x3, 70.5(d), 70.0(s), 70.0(t), 62.8(t)x3, 56.4(d), 52.1(d), 51.4(s), 50.1(d), 49.6(d), 40.1(d), 39.7(t), 39.7(s), 39.2(t), 36.9(s), 35.1(t), 30.8(t), 30.7(q), 30.6(s), 30.6(t), 28.1(q), 26.8(t)x2, 23.3(q), 18.4(t), 17.2(q), 16.6(q), 16.3(q), 16.0(q)
1H NMR (500 Mz, ピリジン-d5, δ ppm)：0.85(3H, s), 0.89(3H, s), 1.03(3H, s), 1.11(3H, s), 1.29(3H, s), 1.55(6H, s), 1.61(3H, s), 4.92(1H, d, J=7.6), 5.10(1H, d,J=7.6), 5.18(1H, d, J=7.6), 5.37(1H, d, J=7.3), 6.08(1H, d, J=15.6), 6.19(1H, m)
【００１２】
サンシチサポニンＢの物性
分子式：C54H90O24
融点：２０１〜２０４℃
比旋光度(C=0.003, MeOH)：[α]23D=+17.8°
マススペクトル(FAB-MS)m/z：1145(M+Na)+(100%)
マススペクトル(HR-FAB-MS)m/z:C54H90O24Na, 計算値：1145.5720；実測値：1145.5717
赤外線吸収スペクトル(IR, ν max cm-1, KBr)：3410, 1638, 1078
13C NMR (125 Mz, ピリジン-d5, δ ppm)：202.2(s), 144.4(s), 125.6(t), 106.0(d), 105.6(d), 105.1(d), 98.0(d), 89.0(d), 83.5(d), 83.2(s), 79.4(d), 78.5(d)x2, 78.4(d), 78.3(d), 78.1(d), 78.0(d), 77.1(d), 76.7(d), 75.2(d), 74.8(d), 71.8(d), 71.7(d)x2, 71.3(d), 70.3(t), 70.2(d), 62.9(t), 62.8(t), 62.7(t), 56.4(d), 52.1(d), 51.5(s), 50.2(d), 49.5(d), 40.0(s), 39.7(s), 39.2(t), 36.9(s), 35.1(t), 32.8(t), 30.8(t), 30.7(t), 29.8(t), 28.1(q), 26.8(t), 26.7(t), 21.9(q), 18.4(t), 17.8(q), 17.4(q), 16.6(q), 16.3(q), 16.0(q)
1H NMR (500 Mz, ピリジン-d5, δ ppm)：0.82(3H, s), 0.92(3H, s), 0.97(3H, s), 1.11(3H, s), 1.28(3H, s), 1.59(3H, s), 1.83(3H, s), 4.93(1H, d, J=7.6), 5.03(1H, d,J=7.2), 5.11(1H, d, J=7.3), 5.38(1H, d, J=7.6)
【００１３】
サンシチサポニンＣの物性
分子式：C54H92O25
融点：１９９〜２０２℃
比旋光度(C=0.003, MeOH)：[α]22D=+14.4°
マススペクトル(FAB-MS)m/z：1185(M+2Na-H)+, 1163(M+Na)+, 1145(M+Na-H2O)+(100%)
マススペクトル(HR-FAB-MS)m/z:C54H92O25Na, 計算値：1163.5826；実測値：1163.5873
赤外線吸収スペクトル(IR, ν max cm-1, KBr)：3410, 1638, 1078
13C NMR (125 Mz, ピリジン-d5, δ ppm)：146.0(d), 113.5(d), 106.0(d), 105.2(d), 105.1(d), 98.1(d), 90.0(d), 89.0(s), 83.4(s), 83.3(d), 79.1(d), 78.4(d), 78.3(d)x3, 78.2(d), 78.1(d), 77.1(d), 77.0(d), 75.2(d), 74.8(d), 71.8(d), 71.7(d), 71.6(d), 71.5(d), 70.2(d), 70.0(t), 62.9(t), 62.8(t), 62.7(t), 56.4(d), 51.7(d), 51.4(s), 50.2(d), 49.4(d), 40.0(s), 39.7(s), 39.2(t), 36.9(s), 35.1(t), 32.6(t), 30.9(t), 30.8(t), 28.1(q), 26.8(t), 26.7(t), 26.3(t), 22.6(q), 18.5(t), 17.6(q), 17.4(q), 16.6(q), 16.3(q), 16.0(q)
1H NMR (500 Mz, ピリジン-d5, δ ppm)：0.83(3H, s), 0.94(3H, s), 0.99(3H, s), 1.10(3H, s), 1.28(3H, s), 1.64(3H, s), 1.95(3H, s), 4.79(dd-like), 4.91(1H, d, J=7.3), 5.09(1H, d,-like), 5.10(1H, d-like), 5.36(1H, d, J=7.6)
【００１４】
薬理試験
コンカナバリンＡ誘発肝障害モデル試験
（１）試験方法：
雌性BALB/cマウス（８週令、１群５または６匹）にコンカナバリンＡを１０ｍｇ／ｋｇの用量で尾静脈より投与した。２０時間後に採血し、血清トランスアミラーゼ（ＧＯＴおよびＧＰＴ）を市販キットを用いて測定した。被験薬物はコンカナバリンＡ投与の２時間前に腹腔内投与（i.p.）した。対照群には何らの薬物も投与しなかった。
（２）被験薬物：
前記実施例において得られた、三七人参のメタノール抽出エキスを酢酸エチルと水で液−液分配し、更に水移行部をｎ−ブタノールで液−液分配し、ｎ−ブタノール移行部について、ｎ−ブタノールを留去したエキス部分（サンシチサポニンＡ、ＢおよびＣを含有）を被験薬物とした。
【００１５】
（３）実験結果：
上記実験結果を表２に示す。
【表２】
0003998282.tif 000005
上記の実験結果より明らかなように、本発明の新規サポニン配糖体を含有する三七人参抽出エキスはコンカナバリンＡ誘発肝障害モデル試験において優れた薬効を示した。