(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記構造（Ｓ１）：
【化１】
0003938690.tif 000281
〔式中、Ｒ1、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、ｍ、ｎ、Ａ及びＢは、ａ）〜ｄ）に定義されるとおりである〕を含むことを特徴とする化合物であって、ａ）〜ｄ）：
ａ）式（Ｉ）：
【化２】
0003938690.tif 000282
｛式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｘは、下記式：
【化３】
0003938690.tif 000283
〔式中、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立に、水素又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシであり（ここで、Ｒ3が、アルコキシであるとき、Ｒ2及びＲ4は、両方とも水素である）；
Ｒ9は、水素、１〜３個の炭素を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は非置換フェノキシであり；
Ｒ11は、シクロヘキシル、シクロヘプチル、又は３〜８個の炭素原子を有する分岐アルキルである〕で示され；
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ7は、下記式：
【化４】
0003938690.tif 000284
で示され；
Ｙは、下記式：
【化５】
0003938690.tif 000285
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【化６】
0003938690.tif 000286
で示され、かつＲ8は、水素である｝で示される化合物、
ｂ）式（IA）：
【化７】
0003938690.tif 000287
〔式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立に、水素；１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル；ヒドロキシ；１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ；又はクロロであり（ここで、Ｒ3が、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ又はクロロであるとき、Ｒ2及びＲ4は、両方とも水素である）；
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ7は、下記式：
【化８】
0003938690.tif 000288
で示され；
Ｙは、下記式：
【化９】
0003938690.tif 000289
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【化１０】
0003938690.tif 000290
で示され、かつＲ8は、水素である〕で示される化合物、
ｃ）式（II）：
【化１１】
0003938690.tif 000291
｛式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、４〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；あるいは非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｒ7は、下記式：
【化１２】
0003938690.tif 000292
で示され、
Ｙは、下記式：
【化１３】
0003938690.tif 000293
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【化１４】
0003938690.tif 000294
で示され、かつＲ8は、水素であり；
Ｒ10は、水素、ハロ、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は−ＮＲ12Ｒ13〔ここで、Ｒ12及びＲ13は、それぞれ独立に、１〜３個の炭素を有する直鎖又は分岐アルキルであるか、あるいは一緒になって、−（ＣＨ2）q−（ここでｑは、３、４又は５である）である〕である｝で示される化合物、及び
ｄ）式（III）：
【化１５】
0003938690.tif 000295
（式中、
Ｒ1は、４〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキルであり；
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ8は、水素又はメチルであり；
ｐは、２、３又は４であり、かつＲ14は、下記式：
【化１６】
0003938690.tif 000296
で示されるか、あるいは
ｐは、４であり、かつＲ14は、下記式：
【化１７】
0003938690.tif 000297
で示されるか、あるいは
ｐは、３であり、かつＲ14は、下記式：
【化１８】
0003938690.tif 000298
で示される）で示される化合物
よりなる群から選択される化合物。
【請求項２】
式（Ｉ）：
【化１９】
0003938690.tif 000299
｛式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｘは、下記式：
【化２０】
0003938690.tif 000300
〔式中、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立に、水素又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシであり（ここで、Ｒ3が、アルコキシであるとき、Ｒ2及びＲ4は、両方とも水素である）；
Ｒ9は、水素、１〜３個の炭素を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は非置換フェノキシであり；
Ｒ11は、シクロヘキシル、シクロヘプチル、又は３〜８個の炭素原子を有する分岐アルキルである〕で示され、
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ7は、下記式：
【化２１】
0003938690.tif 000301
で示され、
Ｙは、下記式：
【化２２】
0003938690.tif 000302
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【化２３】
0003938690.tif 000303
で示され、かつＲ8は、水素である｝で示される、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ6が水素であり、そしてＲ8が水素である、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
ｎが１である、請求項２記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ7が、下記式：
【化２４】
0003938690.tif 000304
で示される、請求項２記載の化合物。
【請求項６】
式（IA）：
【化２５】
0003938690.tif 000305
〔式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立に、水素；１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル；ヒドロキシ；１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ；又はクロロであり（ここで、Ｒ3が、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ又はクロロであるとき、Ｒ2及びＲ4は、両方とも水素である）；
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ7は、下記式：
【化２６】
0003938690.tif 000306
で示され；
Ｙは、下記式：
【化２７】
0003938690.tif 000307
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【化２８】
0003938690.tif 000308
で示され、かつＲ8は、水素である〕で示される、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ7が、下記式：
【化２９】
0003938690.tif 000309
で示される、請求項６記載の化合物。
【請求項８】
ｎが０である、請求項７記載の化合物。
【請求項９】
ｎが１である、請求項７記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙが、−ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2−、又は下記式：
【化３０】
0003938690.tif 000310
で示される、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
ｍが１である、請求項１０記載の化合物。
【請求項１２】
ｍが０である、請求項１０記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4が、水素である、請求項１２記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ1が、非置換の直鎖アルキルである、請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ1が、非置換フェニルである、請求項１３記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ3が、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ又はクロロである、請求項１２記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ3が、ヒドロキシ又はアルコキシである、請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ2がアルコキシであり、Ｒ3が水素であり、そしてＲ4が水素である、請求項１２記載の化合物。
【請求項１９】
Ｙが、下記式：
【化３１】
0003938690.tif 000311
で示される、請求項９記載の化合物。
【請求項２０】
ｍが１である、請求項１９記載の化合物。
【請求項２１】
ｍが０である、請求項１９記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4が水素であり、そしてＲ7が、下記式：
【化３２】
0003938690.tif 000312
で示される、請求項６記載の化合物。
【請求項２３】
ｎが１であり、そしてｍが０である、請求項２２記載の化合物。
【請求項２４】
Ｙが、−ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2−、又は下記式：
【化３３】
0003938690.tif 000313
で示される、請求項２３記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ1が、非置換の直鎖アルキルである、請求項２４記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ1が、非置換フェニル；又はフェニル若しくはカルボキシルにより置換されているアルキルである、請求項２４記載の化合物。
【請求項２７】
Ｒ1が、非置換の低級アルキルであり、そしてＹが、下記式：
【化３４】
0003938690.tif 000314
で示される、請求項２３記載の化合物。
【請求項２８】
式（IB）：
【化３５】
0003938690.tif 000315
〔式中、
Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキルであり；
Ｒ7は、下記式：
【化３６】
0003938690.tif 000316
で示され；
Ｒ11は、シクロヘキシル、又は３〜８個の炭素原子を有する分岐アルキルであり；そして
Ｙは、−ＣＨ2−である〕で示される、請求項２記載の化合物。
【請求項２９】
式（IC）：
【化３７】
0003938690.tif 000317
〔式中、
Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキルであり；
Ｒ7は、下記式：
【化３８】
0003938690.tif 000318
で示され；
Ｙは、下記式：
【化３９】
0003938690.tif 000319
で示され；そして
Ｒ9は、水素、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、フルオロ、クロロ、又は非置換フェノキシである〕で示される、請求項２記載の化合物。
【請求項３０】
Ｒ9が水素である、請求項２９記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ9が、１〜３個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキルである、請求項２９記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ9が、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は非置換フェノキシである、請求項２９記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ9がクロロである、請求項２９記載の化合物。
【請求項３４】
式（II）：
【化４０】
0003938690.tif 000320
｛式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、４〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；あるいは非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｒ7は、下記式：
【化４１】
0003938690.tif 000321
で示され、
Ｙは、下記式：
【化４２】
0003938690.tif 000322
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【化４３】
0003938690.tif 000323
で示され、かつＲ8は、水素であり；
Ｒ10は、水素、ハロ、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は−ＮＲ12Ｒ13〔ここで、Ｒ12及びＲ13は、それぞれ独立に、１〜３個の炭素を有する直鎖又は分岐アルキルであるか、あるいは一緒になって、−（ＣＨ2）q−（ここでｑは、３、４又は５である）である〕である｝で示される、請求項１記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒ6及びＲ8が、それぞれ水素であり；Ｒ7が、下記式：
【化４４】
0003938690.tif 000324
で示され、そしてｎが１である、請求項３４記載の化合物。
【請求項３６】
Ｙが−ＣＨ2−であり、そしてｍが０である、請求項３５記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒ10が、水素、又は１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルである、請求項３６記載の化合物。
【請求項３８】
Ｒ10がハロである、請求項３６記載の化合物。
【請求項３９】
Ｒ10が、１〜３個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルコキシである、請求項３６記載の化合物。
【請求項４０】
Ｒ10が、−ＮＲ12Ｒ13であり、そしてＲ12及びＲ13が、両方ともメチルである、請求項３６記載の化合物。
【請求項４１】
Ｙが、下記式：
【化４５】
0003938690.tif 000325
で示され、そしてＲ10がハロである、請求項３５記載の化合物。
【請求項４２】
Ｒ6及びＲ8が、水素であり；Ｒ7が、下記式：
【化４６】
0003938690.tif 000326
で示され、そしてＲ10がハロである、請求項３４記載の化合物。
【請求項４３】
式（III）：
【化４７】
0003938690.tif 000327
〔式中、
Ｒ1は、４〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキルであり；
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ8は、水素又はメチルであり；
ｐは、２、３又は４であり、かつＲ14は、下記式：
【化４８】
0003938690.tif 000328
で示されるか、あるいは
ｐは、４であり、かつＲ14は、下記式：
【化４９】
0003938690.tif 000329
で示されるか、あるいは
ｐは、３であり、かつＲ14は、下記式：
【化５０】
0003938690.tif 000330
で示される〕で示される、請求項１記載の化合物。
【請求項４４】
【表１】
0003938690.tif 000331
よりなる群から選択される、請求項１〜４３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項４５】
請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物の製造方法であって、固体支持体に結合している、請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物を、酸により該固体支持体から開裂することを特徴とする方法。
【請求項４６】
請求項４５記載の方法により製造することができる、請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
肥満症は、先進国にとって重大な健康問題として広く認識されており、米国においては流行の状態にまで達している。５０％を超える米国人口が過体重であると考えられており、＞２５％が臨床的に肥満症として診断され、心疾患、インスリン非依存型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、高血圧症、及びある種の癌に関してかなりのリスクがあると考えられている。この流行は、１年に７００億ドルを超える計画された肥満症治療費用が米国だけでも予想されるため、健康管理システムに著しい負担を与える。肥満症治療の戦略は、食物摂取を減少させること又はエネルギーの消費を高めることを含む。
【０００２】
メラノコルチン−４受容体（ＭＣ４−Ｒ）アゴニスト活性を有するα−メラノサイト刺激ホルモン（αＭＳＨ）の環状ヘプタペプチド類似体は、第３脳室内又は腹腔内に注入すると、マウスにおいて食物摂取の長期の持続性阻害を引き起こした。この作用は、ＭＣ４−Ｒアンタゴニストと同時投与するとき可逆的であった（Fanら, Nature (1997) 385: 165-168）。したがってＭＣ４−Ｒ活性のアゴニストは、肥満症の治療又は予防に有用である。
【０００３】
ファミリーのメンバー間で相同性が３５〜６０％の範囲内にある、配列相同性に基づく５種の既知メラノコルチン受容体が存在する（Coneら, Rec. Prog. Hormone Res. (1996) 51:287-318）が、これらの受容体はその機能が異なる。例えば、ＭＣ１−Ｒは、αＭＳＨ（これは、ＭＣ１−Ｒの強力なアゴニストである）に応答して色素沈着を調節するＧタンパク質結合受容体である（Coneら、同文献）。ＭＣ１−Ｒ受容体のアゴニズムによって、メラノサイトが刺激され、このためユーメラニンが生じて、皮膚の癌のリスクを上昇させる。ＭＣ１−Ｒのアゴニズムはまた、神経学的作用を有することもある。ＭＣ２−Ｒ活性を刺激すると、副腎組織の癌が生じることがある。ＭＣ３−Ｒ及びＭＣ５−Ｒのアゴニズムの作用は未だ知られていない。全てのメラノコルチン受容体は、ペプチドホルモンクラスのメラノサイト刺激ホルモン（ＭＳＨ）に応答する。これらのペプチドは、１３１個のアミノ酸のプロホルモンである、プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）に由来し、これが３つのクラスのホルモンに加工処理される；メラノコルチン（α、β及びγ）、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、及び種々のエンドルフィン（例えば、リポトロピン）（Coneら、同文献）。それらの異なる機能のため、多数のメラノコルチン受容体の活性の同時アゴニズムは、不必要な副作用を引き起こす可能性がある。したがって、ＭＣ４−Ｒのアゴニストは、１つ以上の他のメラノコルチン受容体に対してよりも、ＭＣ４−Ｒに対して選択性が高いことが望まれる。
【０００４】
Haskell-Luevanoら（Peptides (1996) 17(6): 995-1002）は、トリペプチド（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐを含み、カエル（ラナ・ピピエンス（Rana pipiens））皮膚のバイオアッセイにおいてメラノトロピック（melanotropic）（皮膚暗色化）活性を示すペプチドを開示している。Haskell-Luevanoら（同文献）は、以下に記述される式（Ｉ）、（II）又は（III）で示されるどの化合物をも開示していない。
【０００５】
発明の要約
本発明は、下記構造（Ｓ１）：
【０００６】
【化５１】
0003938690.tif 000002
【０００７】
〔式中、Ｒ1、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、ｍ、ｎ、Ａ及びＢは、ａ）〜ｄ）に定義されるとおりである〕を含むことを特徴とする化合物であって、ａ）〜ｄ）：
ａ）式（Ｉ）：
【０００８】
【化５２】
0003938690.tif 000003
【０００９】
｛式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｘは、下記式：
【００１０】
【化５３】
0003938690.tif 000004
【００１１】
〔式中、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立に、水素又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシであり（ここで、Ｒ3が、アルコキシであるとき、Ｒ2及びＲ4は、両方とも水素である）；
Ｒ9は、水素、１〜３個の炭素を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は非置換フェノキシであり；
Ｒ11は、シクロヘキシル、シクロヘプチル、又は３〜８個の炭素原子を有する分岐アルキルである〕で示され；
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ7は、下記式：
【００１２】
【化５４】
0003938690.tif 000005
【００１３】
で示され；
Ｙは、下記式：
【００１４】
【化５５】
0003938690.tif 000006
【００１５】
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【００１６】
【化５６】
0003938690.tif 000007
【００１７】
で示され、かつＲ8は、水素である｝で示される化合物、
ｂ）式（IA）：
【００１８】
【化５７】
0003938690.tif 000008
【００１９】
〔式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立に、水素；１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル；ヒドロキシ；１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ；又はクロロであり（ここで、Ｒ3が、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ又はクロロであるとき、Ｒ2及びＲ4は、両方とも水素である）；
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ7は、下記式：
【００２０】
【化５８】
0003938690.tif 000009
【００２１】
で示され；
Ｙは、下記式：
【００２２】
【化５９】
0003938690.tif 000010
【００２３】
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【００２４】
【化６０】
0003938690.tif 000011
【００２５】
で示され、かつＲ8は、水素である〕で示される化合物、
ｃ）式（II）：
【００２６】
【化６１】
0003938690.tif 000012
【００２７】
｛式中、
ｍは、０又は１であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ1は、４〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；あるいは非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルであり；
Ｒ7は、下記式：
【００２８】
【化６２】
0003938690.tif 000013
【００２９】
で示され、
Ｙは、下記式：
【００３０】
【化６３】
0003938690.tif 000014
【００３１】
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【００３２】
【化６４】
0003938690.tif 000015
【００３３】
で示され、かつＲ8は、水素であり；
Ｒ10は、水素、ハロ、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は−ＮＲ12Ｒ13〔ここで、Ｒ12及びＲ13は、それぞれ独立に、１〜３個の炭素を有する直鎖又は分岐アルキルであるか、あるいは一緒になって、−（ＣＨ2）q−（ここでｑは、３、４又は５である）である〕である｝で示される化合物、及び
ｄ）式（III）：
【００３４】
【化６５】
0003938690.tif 000016
【００３５】
（式中、
Ｒ1は、４〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキルであり；
Ｒ6は、水素又はメチルであり；
Ｒ8は、水素又はメチルであり；
ｐは、２、３又は４であり、かつＲ14は、下記式：
【００３６】
【化６６】
0003938690.tif 000017
【００３７】
で示されるか、あるいは
ｐは、４であり、かつＲ14は、下記式：
【００３８】
【化６７】
0003938690.tif 000018
【００３９】
で示されるか、あるいは
ｐは、３であり、かつＲ14は、下記式：
【００４０】
【化６８】
0003938690.tif 000019
【００４１】
で示される）で示される化合物
よりなる群から選択される化合物に関する。
【００４２】
本発明は、式（Ｉ）：
【００４３】
【化６９】
0003938690.tif 000020
【００４４】
で示される化合物を提供する。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物において、ｍは０又は１であり、ｎは０又は１である。Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルである。
Ｘは、下記式：
【００４６】
【化７０】
0003938690.tif 000021
【００４７】
で示される。Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立に、水素又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシである（ここで、Ｒ3が、アルコキシであるとき、Ｒ2及びＲ4は、両方とも水素である）。Ｒ9は、水素、１〜３個の炭素を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は非置換フェノキシである。Ｒ11は、シクロヘキシル、シクロヘプチル、又は３〜８個の炭素原子を有する分岐アルキルである。Ｒ6は、水素又はメチルである。Ｒ7は、下記式：
【００４８】
【化７１】
0003938690.tif 000022
【００４９】
で示される。Ｙは、下記式：
【００５０】
【化７２】
0003938690.tif 000023
【００５１】
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【００５２】
【化７３】
0003938690.tif 000024
【００５３】
で示され、かつＲ8は、水素である。
【００５４】
本発明は、式（II）：
【００５５】
【化７４】
0003938690.tif 000025
【００５６】
で示される化合物を提供する。
【００５７】
式（II）の化合物において、ｍは０又は１であり、ｎは０又は１である。Ｒ1は、４〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；あるいは非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルである。Ｒ7は、下記式：
【００５８】
【化７５】
0003938690.tif 000026
【００５９】
で示される。Ｙは、下記式：
【００６０】
【化７６】
0003938690.tif 000027
【００６１】
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【００６２】
【化７７】
0003938690.tif 000028
【００６３】
で示され、かつＲ8は、水素である。
【００６４】
Ｒ10は、水素、ハロ、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、又は−ＮＲ12Ｒ13〔ここで、Ｒ12及びＲ13は、それぞれ独立に、１〜３個の炭素を有する直鎖又は分岐アルキルであるか、あるいは一緒になって、−（ＣＨ2）q−（ここでｑは、３、４又は５である）である〕である。
【００６５】
本発明は、式（III）：
【００６６】
【化７８】
0003938690.tif 000029
【００６７】
で示される化合物を提供する。
【００６８】
式（III）の化合物において、Ｒ1は、４〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキルである。Ｒ6は、水素又はメチルである。Ｒ8は、水素又はメチルである。ｐは、２、３又は４であり、かつＲ14は、下記式：
【００６９】
【化７９】
0003938690.tif 000030
【００７０】
で示されるか、あるいは
ｐは、４であり、かつＲ14は、下記式：
【００７１】
【化８０】
0003938690.tif 000031
【００７２】
で示されるか、あるいは
ｐは、３であり、かつＲ14は、下記式：
【００７３】
【化８１】
0003938690.tif 000032
【００７４】
で示される。
【００７５】
式（Ｉ）、（II）及び（III）の化合物、並びにＰｅｎｔａ−Ａｄｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−Ａｐｅ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2は、ＭＣ４−Ｒのアゴニストである。ＭＣ４−Ｒ活性のアゴニストが、ヒト肥満症のマウスモデルにおいて食物摂取の減少を引き起こすことは知られている。したがって式（Ｉ）の化合物は、肥満症の治療又は予防において有用である。
【００７６】
以下に例示される式（Ｉ）、（II）及び（III）の全ての化合物、並びにＰｅｎｔａ−Ａｄｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−Ａｐｅ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2は、生物学的活性の実施例Ａにおいて後述されるインビトロ測定法において、ＭＣ４−Ｒアゴニスト活性及びＭＣ１−Ｒアゴニスト活性に関して試験された。全ての試験化合物は、ＭＣ４−Ｒアゴニスト活性のＥＣ50が５００nM未満であり、そして全部が、ＭＣ１−Ｒアゴニスト活性よりも少なくとも１０倍大きいＭＣ４−Ｒアゴニスト活性を示した。対照的に、化合物Ｂｕ−Ｈｉｓ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2（実施例３０）は、ＭＣ４−Ｒアゴニスト活性よりも大きなＭＣ１−Ｒアゴニスト活性を示した。
【００７７】
発明の詳細な説明
命名法及び略語
ペプチドを定義するために使用した命名法は、Ｎ末端のアミノ基が左側に、そしてＣ末端のカルボキシル基が右側にみられる、当該分野において典型的に使用されるものである。天然アミノ酸とは、タンパク質中に見い出される自然に存在するアミノ酸の１つ、即ち、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、及びＨｉｓを意味する。アミノ酸が異性体型を有するとき、これは、他に明示的に記載がなければ、表されるアミノ酸のＬ型である。
【００７８】
下記の略語又は記号は、アミノ酸、保護基、溶媒、試薬などを表すために使用される。
【００７９】
0003938690.tif 000033
0003938690.tif 000034
0003938690.tif 000035
【００８０】
括弧の中に置換アミノ酸を示したのは、ペプチド配列の類似体を示している。Ｎ末端アミノ基の誘導体化は、ハイフンで分離してＮ末端置換の左側に示される。即ち、例えば、Ａｃ−Ｈｉｓ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2は、アセチル基がＮ末端の水素と置換しているアミノ酸配列を有するペプチドを示す。ハイフン又は括弧に続く接尾辞「−ＯＨ」及び「−ＮＨ2」は、それぞれポリペプチドの遊離酸及びアミド型を意味する。
【００８１】
「アルキル」という用語は、他に記載がなければ、１〜８個の炭素原子を有する飽和炭化水素に関連する。アルキル基は、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル若しくはｎ−ペンチルのように直鎖であっても、又は例えば、ｉ−プロピル若しくはｔ−ブチルのように分岐していてもよい。例えば、「低級アルキル」の中の「低級」という用語は、１〜６個の炭素原子を有する基に関連する。
【００８２】
化合物の詳細な説明
式（Ｉ）の化合物において、一般に、Ｒ6及びＲ8が両方とも水素であり、ｎが１であり、そしてＲ7が、上記の第１又は第２の下部構造のいずれかであることが好ましい。また、以下に示される式（IA）、（IB）又は（IC）の化合物も好ましい。
【００８３】
式（IA）の化合物は、下記式（IA）：
【００８４】
【化８２】
0003938690.tif 000036
【００８５】
として表される。
【００８６】
式（IA）の化合物において、ｍは０又は１であり、ｎは０又は１である。Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキル；フェニル又はカルボキシルにより単置換されている、１〜８個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル；非置換フェニル；あるいはフルオロ、クロロ又は１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルにより単置換されているフェニルである。Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、独立に、水素；１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル；ヒドロキシ；１〜４個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ；又はクロロである（ここで、Ｒ3が、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ又はクロロであるとき、Ｒ2及びＲ4は、両方とも水素である）。Ｒ6は、水素又はメチルである。Ｒ7は、下記式：
【００８７】
【化８３】
0003938690.tif 000037
【００８８】
で示される。Ｙは、下記式：
【００８９】
【化８４】
0003938690.tif 000038
【００９０】
で示され、かつＲ8は、水素又はメチルであるか；あるいは
Ｙは、下記式：
【００９１】
【化８５】
0003938690.tif 000039
【００９２】
で示され、かつＲ8は、水素である。
【００９３】
式（IA）の化合物において、Ｒ7は、トリプトファン側鎖又は１−若しくは２−ナフチル基のいずれかであってよい。Ｒ7がトリプトファン側鎖、即ち、下記式：
【００９４】
【化８６】
0003938690.tif 000040
【００９５】
で示される、式（IA）の化合物において、ｎは０又は１のいずれかであってよい。ｎが０である、このような化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチルＴｒｐ−ＮＨ2を含む。Ｒ7がトリプトファン側鎖であり、そしてｎが１である、式（IA）の化合物において、Ｙは、メチレン、エチレン又はメチル置換メチレン（即ち、下記式：
【００９６】
【化８７】
0003938690.tif 000041
【００９７】
で示されるもの）から選択される直鎖又は分岐アルキル基、あるいは上述のアリール含有残基の１つであってよい。Ｒ7がトリプトファン側鎖であり、そしてｎが１である、式（IA）の化合物において、Ｙは、メチレン、エチレン又はメチル置換メチレンであり、ｍは、０又は１であってよい。ｍが１である、このような化合物の例は、Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−ＮＨ2、及びＢｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−β−Ａｌａ−ＮＨ2を含む。Ｒ7がトリプトファン側鎖であり、ｎが１であり、Ｙがメチレン、エチレン又はメチル置換メチレンであり、そしてｍが０である、式（IA）の化合物において、Ａｐｃ基のフェニル環は、非置換（即ち、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、水素である）であっても置換されていてもよい。Ａｐｃ基のフェニル環が非置換である、このような化合物において、Ｒ1は、例えば、化合物Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｓａｒ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチルＴｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−ＮＨ2、又はＢｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−β−Ａｌａ−ＮＨ2などにあるような非置換直鎖アルキル；あるいは化合物フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−ＮＨ2、又はフェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−ＮＨ2などにあるような非置換フェニルであってよい。Ａｐｃ基のフェニル環が置換されている、このような化合物において、１つの好ましい置換パターンは、Ｒ3が、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ又はクロロであり（更に好ましくは、Ｒ3は、ヒドロキシ又はアルコキシである）、そしてＲ2及びＲ4が、水素であるものである。例は、Ｐｅｎｔａ−４−ＣｌＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−４−ＭｅＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−４−ＨＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−４−ＭｅＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−４−ＥｔＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、及びＰｅｎｔａ−４−ｉＰｒＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。別の好ましい置換パターンは、Ｒ2がアルコキシであり、Ｒ3が水素であり、そしてＲ4が水素であるものであり、例えば、化合物Ｐｅｎｔａ−３−ＭｅＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2中のパターンである。Ｒ7がトリプトファン側鎖であり、かつｎが１であり、そしてＹが下記式：
【００９８】
【化８８】
0003938690.tif 000042
【００９９】
で示される、式（IA）の化合物において、ｍは、０又は１であってよい。ｍが１である、このような化合物の例は、Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2及びＢｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−３−Ａｍｂ−ＮＨ2を含む。ｍが０である、このような化合物の例は、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2、フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−３−Ａｍｂ−ＮＨ2、フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−３−Ａｍｂ−ＮＨ2、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−４−Ａｍｂ−ＮＨ2、及びフェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−４−Ａｍｂ−ＮＨ2を含む。
【０１００】
Ｒ7が２−ナフチルである、即ち、下記式：
【０１０１】
【化８９】
0003938690.tif 000043
【０１０２】
で示される、式（IA）の化合物において、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、水素であることが好ましい。このような化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチル（２）Ｎａｌ−ＮＨ2及びＢｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。Ｒ7が２−ナフチルである、式（IA）の化合物において、ｎが１であり、そしてｍが０であることが好ましい。Ｒ7が２−ナフチルであり、ｎが１であり、かつｍが０であり、そしてＹが、メチレン、エチレン又はメチル置換メチレンである、式（IA）の化合物において、Ｒ1は、例えば非置換の直鎖アルキルであってよい。このような化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ａｃ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチル（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ａｌａ−ＮＨ2、及びＢｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−ベータ−Ａｌａ−ＮＨ2を含む。あるいは、Ｒ1は、例えば、非置換フェニル、又はフェニル若しくはカルボキシルにより置換されているアルキルであってもよい。このような化合物の例は、ベンゾイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、３−カルボキシルプロパノイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、及びフェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。
【０１０３】
Ｒ7が２−ナフチルであり、ｎは１であり、かつｍは０であり、そしてＹは、下記式：
【０１０４】
【化９０】
0003938690.tif 000044
【０１０５】
で示される式（IA）の化合物において、Ｒ1は、非置換の低級アルキルであることが好ましい。このような化合物の例は、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−３−Ａｍｂ−ＮＨ2、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−２−Ａｂａ−ＮＨ2、及びＢｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−４−Ａｍｂ−ＮＨ2を含む。
【０１０６】
式（IB）の化合物は、下記式（IB）：
【０１０７】
【化９１】
0003938690.tif 000045
【０１０８】
として表される。
【０１０９】
式（IB）の化合物において、Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキルである。Ｒ7は、下記式：
【０１１０】
【化９２】
0003938690.tif 000046
【０１１１】
で示される。Ｒ11は、シクロヘキシル、又は３〜８個の炭素原子を有する分岐アルキルである。Ｙは、メチレン、即ち、−ＣＨ2−である。式（IB）の化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−Ａｂｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−Ａｃｈｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。
【０１１２】
式（IC）の化合物は、下記式（IC）：
【０１１３】
【化９３】
0003938690.tif 000047
【０１１４】
として表される。
【０１１５】
式（IC）の化合物において、Ｒ1は、１〜８個の炭素原子を有する非置換の直鎖又は分岐アルキルである。Ｒ7は、下記式：
【０１１６】
【化９４】
0003938690.tif 000048
【０１１７】
で示され；Ｙは、下記式：
【０１１８】
【化９５】
0003938690.tif 000049
【０１１９】
で示され；そしてＲ9は、水素、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキル、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ、フルオロ、クロロ、又は非置換フェノキシである。
【０１２０】
Ｒ9が水素である、式（IC）の化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−Ａｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−Ａｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。Ｒ9が１〜３個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキルである、式（IC）の化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−２−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−２−ｉＰｒＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−３−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−４−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。Ｒ9が、１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルコキシ又は非置換フェノキシである、式（IC）の化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−３−ＭｅＯＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−４−ＰｈＯＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。Ｒ9がクロロである、式（IC）の化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−４−ＣｌＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。
【０１２１】
式（II）の化合物において、一般に、Ｒ6及びＲ8は、水素であることが好ましい。Ｒ7は、例えば、トリプトファン側鎖、即ち、下記式：
【０１２２】
【化９６】
0003938690.tif 000050
【０１２３】
で示されるもの、又は２−ナフチルであってよい。Ｒ7が、トリプトファン側鎖であるとき、一般に、ｎは１であることが好ましい。Ｒ6及びＲ8が水素であり；Ｒ7がトリプトファン側鎖であり、そしてｎが１である、式（II）の化合物には、Ｙが−ＣＨ2−であり、そしてｍが０である、化合物が含まれる。Ｒ10が、水素又は１〜３個の炭素原子を有する直鎖若しくは分岐アルキルである、このような化合物の例は、Ｂｕ−Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−５−Ｍｅ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−５−Ｅｔ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−５−ｉＰｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。Ｒ10がハロである、このような化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−５−Ｂｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−５−Ｂｒ−Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−５−Ｃｌ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。Ｒ10が、１〜３個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルコキシである、このような化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−５−ＭｅＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−５−ＥｔＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−５−ｉＰｒＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。Ｒ10が−ＮＲ12Ｒ13（ここで、Ｒ12及びＲ13は、それぞれメチルである）である、このような化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−５−ＤｍａＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。
【０１２４】
Ｒ6及びＲ8が水素であり；Ｒ7がトリプトファン側鎖であり、そしてｎが１である、式（II）の化合物には、Ｙが、下記式：
【０１２５】
【化９７】
0003938690.tif 000051
【０１２６】
で示され、そしてＲ10がハロである、化合物が含まれる。このような化合物の例は、Ｂｕ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2、Ｂｕ−カルバモイル−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2及びフェニルアセチル−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2を含む。
【０１２７】
Ｒ6及びＲ8が水素であり；Ｒ7が２−ナフチルである、即ち、下記式：
【０１２８】
【化９８】
0003938690.tif 000052
【０１２９】
で示される、式（II）の化合物において、一般に、Ｒ10は、ハロであることが好ましい。このような化合物の例は、Ｐｅｎｔａ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、３−カルボキシルプロパノイル−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、フェニルアセチル−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＢｕ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−２−Ａｂａ−ＮＨ2を含む。
【０１３０】
式（III）の化合物の例は、Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−フェニルホモＡｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2、Ｐｅｎｔａ−Ａｄｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2及びＰｅｎｔａ−Ａｐｅ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2を含む。
【０１３１】
上述の好ましい化合物は、個々に実施例に記述されるものである。
【０１３２】
上述の特に好ましい化合物は、下記よりなる群から選択されるものである：
【０１３３】
【表２】
0003938690.tif 000053
【０１３４】
上述の化合物は、肥満症のようなメラノコルチン−４受容体に関連した疾患の治療及び／又は予防に有用である。したがって本発明は、上述の化合物、並びに薬剤学的に許容しうる担体及び／又は補助剤を含むことを特徴とする、医薬組成物に関する。本発明は更に、治療活性物質として、特に肥満症のようなメラノコルチン−４受容体に関連した疾患の治療及び／又は予防用の治療活性物質としての使用のための、上述の化合物に関する。本発明の別の好ましい実施態様は、肥満症のようなメラノコルチン−４受容体に関連した疾患の治療及び／又は予防のための方法であって、上記の化合物をヒト又は動物に投与することを特徴とする方法である。本発明はまた、肥満症のようなメラノコルチン−４受容体に関連した疾患の治療及び／又は予防のための、上述の化合物の使用に関する。肥満症のようなメラノコルチン−４受容体に関連した疾患の治療及び／又は予防用の医薬品の製造のための、上記の化合物の使用は、本発明の更に別の好ましい実施態様である。このような医薬品は、上述の化合物を含むことを特徴とする。
【０１３５】
化学合成
本発明の化合物は、アミノ酸の間のペプチド結合の形成のための任意の既知の従来法により容易に合成することができる。このような従来法は、例えば、アミノ酸の遊離アルファアミノ基又はカルボキシル基若しくは他の反応性基が保護されているその残基と、別のアミノ酸の遊離第１級カルボキシル基又はそのアミノ基若しくは他の反応性基が保護されているその残基との間の縮合を可能にする任意の液相法を含む。
【０１３６】
これらの化合物の合成は、所望の配列で各アミノ酸を、別のアミノ酸又はその残基に続けて１度に１個づつ付加する方法により、あるいは所望のアミノ酸配列のペプチド断片を最初に従来法により合成し、次に縮合して所望のペプチドを得る方法により行われる。
【０１３７】
本発明の新規な化合物を合成するためのこのような従来法は、例えば、任意の固相ペプチド合成方法を含む。このような方法において、新規な化合物の合成は、固相法の一般原理により、成長ペプチド鎖に１度に１個づつ所望のアミノ酸残基を逐次組み込むことにより行うことができる〔Merrifield, R.B., J. Amer. Chem. Soc. 1963, 85, 2149-2154；Baranyら, The Peptides, Analysis, Synthesis and Biology, Vol. 2, Gross, E.とMeienhofer, J.編, Academic Press 1-284 (1980)〕。
【０１３８】
ペプチドの化学合成に共通するのは、適切な保護基による種々のアミノ酸残基の反応性側鎖基の保護であり、この保護基は、最後に脱離されるまで、その部位で化学反応が起こるのを妨げる。また通常共通なのは、本体がカルボキシル基で反応する間のアミノ酸又は断片のアルファアミノ基の保護であり、次にアルファアミノ保護基を選択的に脱離して、この部位で次の反応が起こるのを可能にする。固相合成法に関して特定の保護基が以下に言及されるが、各アミノ酸は、液相合成において各アミノ酸のために従来から使用される任意の保護基により保護することができることに注意されたい。
【０１３９】
例えば、アルファアミノ基は、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）及び置換ベンジルオキシカルボニル（例えば、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｐ−ビフェニル−イソプロポキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）及びｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル（Ｍｏｚ））のような芳香族ウレタン型保護基；ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、及びアリルオキシカルボニルのような脂肪族ウレタン型保護基から選択される適切な保護基により保護されてもよい。ここで、Ｆｍｏｃが、アルファアミノ保護には最も好ましい。
【０１４０】
グアニジノ基は、ニトロ、ｐ−トルエンスルホニル（Ｔｏｓ）、Ｚ、ペンタメチルクロマンスルホニル（Ｐｍｃ）、アダマンチルオキシカルボニル、及びＢｏｃから選択される適切な保護基により保護されてもよい。Ｐｍｃが、アルギニン（Ａｒｇ）には最も好ましい。
【０１４１】
実施例において、全ての溶媒、イソプロパノール（ｉＰｒＯＨ）、塩化メチレン（ＣＨ2Ｃｌ2）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）は、フィッシャー（Fisher）又はバーディック・アンド・ジャクソン（Burdick and Jackson）から購入し、更に蒸留することなく使用した。トリフルオロ酢酸は、ハロカーボン（Halocarbon）又はフルカ（Fluka）から購入し、更に精製することなく使用した。ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）及びジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）は、フルカ又はアルドリッチ（Aldrich）から購入し、更に精製することなく使用した。ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、硫化ジメチル（ＤＭＳ）及び１，２−エタンジチオール（ＥＤＴ）は、シグマ化学（Sigma Chemical Co.）から購入し、更に精製することなく使用した。保護アミノ酸は、一般にＬ立体配置のものであり、バッケム（Bachem）、アドバンスト・ケムテック（Advanced ChemTech）、又はネオシステム（Neosystem）から市販されているのを入手した。これらの試薬の純度は、使用前に薄層クロマトグラフィー、ＮＭＲ及び融点により確認した。ベンズヒドリルアミン樹脂（ＢＨＡ）は、バッケム又はアドバンスト・ケムテックから入手したスチレン−１％ジビニルベンゼンのコポリマー（１００〜２００又は２００〜４００メッシュ）であった。これらの樹脂の窒素総含量は、一般に０．３〜１．２meq/gであった。
【０１４２】
高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、コンスタメトリック（Constametric）Ｉ及びIIIポンプ、グラディエント・マスター（Gradient Master）溶媒プログラマー及びミキサー、並びにスペクトロモニター（Spectromonitor）III波長可変ＵＶ検出器よりなるＬＤＣ装置で行った。分析ＨＰＬＣは、ヴィダック（Vydac）Ｃ18カラム（０．４×３０cm）を用いて逆相モードで実施した。分取ＨＰＬＣ分離は、ヴィダックカラム（２×２５cm）で実行した。
【０１４３】
ペプチドは、Merrifield〔J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 2149〕により報告された原理と一般法により固相合成法を用いて調製されたが、前に言及したように当該分野において既知の他の同等な化学合成法も使用することができる。固相合成法は、ペプチドのＣ末端から、適切な樹脂に保護されたアルファアミノ酸をカップリングすることにより開始する。このような出発物質は、アルファアミノ保護アミノ酸を、エステル結合によりｐ−ベンジルオキシベンジルアルコール（Wang）樹脂に、又はｐ−〔（Ｒ，Ｓ）−α−〔１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−メトキシホルムアミド〕−２，４−ジメチルオキシベンジル〕−フェノキシ酢酸（Rinkリンカー）のようなＦｍｏｃ−リンカー（Linker）との間のアミド結合によりベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂に結合させることにより、調製することができる。ヒドロキシメチル樹脂の調製は、当該分野において周知である。Ｆｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂支持体は、市販されており、そして合成される所望のペプチドが、Ｃ末端に非置換アミドを有するときに一般に使用される。
【０１４４】
一般に、アミノ酸又はミメティック（mimetics）は、Ｆｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂上に、２〜５当量のアミノ酸及び適切なカップリング試薬と共に、Ｆｍｏｃ保護型のアミノ酸又はミメティックを用いてカップリングされる。カップリング後、樹脂は洗浄され、真空乾燥される。樹脂上へのアミノ酸の装填は、アリコートのＦｍｏｃ−アミノ酸樹脂のアミノ酸分析によって、又はＵＶ分析によるＦｍｏｃ基の測定によって決定される。未反応アミノ基はいずれも、塩化メチレン中で樹脂を無水酢酸及びジイソプロピルエチルアミンと反応させることによりキャップされる。
【０１４５】
樹脂は、アミノ酸を逐次付加するために数回の反復サイクルを経る。アルファアミノＦｍｏｃ保護基は、塩基性条件下で脱離される。ＤＭＦ中のピペリジン、ピペラジン又はモルホリン（２０〜４０％  v/v）をこの目的に使用してもよい。好ましくはＤＭＦ中の４０％ピペリジンが利用される。
【０１４６】
アルファアミノ保護基の脱離後、次の保護されたアミノ酸は、中間体の保護されたペプチド−樹脂を得るために、所望の順序で段階的にカップリングされる。ペプチドの固相合成法においてアミノ酸のカップリングのために使用される活性化試薬は、当該分野において周知である。例えば、このような合成のために適切な試薬は、ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリ（ジメチルアミノ）ホスホニウム（ＢＯＰ）、ヘキサフルオロリン酸ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウム（ＰｙＢｒｏＰ）、ヘキサフルオロリン酸２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム（ＨＢＴＵ）、及びジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）である。ここで好ましいものは、ＨＢＴＵ及びＤＩＣである。BaranyとMerrifieldにより報告されたような、他の活性化剤を利用してもよい〔The Peptides, Vol. 2, J. Meienhofer編, Academic Press, 1979, pp 1-284〕。合成サイクルを最適化するために、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）及び３，４−ジヒドロ−３−ヒドロキシ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアゾール（ＨＯＯＢＴ）のような種々の試薬をカップリング混合物に加えてもよい。ここで好ましいのは、ＨＯＢＴである。
【０１４７】
典型的な合成サイクルのプロトコールは、下記のとおりである：
【０１４８】
【表３】
0003938690.tif 000054
【０１４９】
全ての洗浄及びカップリングのための溶媒は、１０〜２０ml/gの樹脂の容量に及んだ。合成をとおしてのカップリング反応は、カイザー（Kaiser）ニンヒドリン試験によりモニターして、完了の程度を決定した〔Kaiserら, Anal. Biochem. 1970, 34, 595-598〕。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）に関して、そして立体障害を与えられた酸による第２級アミンへのカップリングに関して、緩徐な反応速度が観測された。不完全なカップリング反応物はいずれも、新たに調製された活性化されたアミノ酸と再カップリングさせたか、又は上述のようにペプチド樹脂を無水酢酸で処理することによりキャップした。完全に組立てられたペプチド−樹脂は、数時間真空乾燥した。
【０１５０】
各化合物に関して、以下の手順により、ブロッキング基を脱離してペプチドを樹脂から開裂させた。一般に、ペプチド−樹脂は、室温で１２０分間、樹脂１グラム当たり、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール３００μL、及びトリフルオロ酢酸９．５mLで処理された。樹脂を濾過して、濾液を、冷やしたエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿物を遠心分離して、エーテル層をデカントした。残渣をＥｔ2Ｏの２又は３容量で洗浄して、再遠心分離した。粗生成物を真空乾燥した。
【０１５１】
粗ペプチド調製物の精製
粗ペプチドの精製は、分取ＨＰＬＣにより行った。ペプチドは、ＡｃＯＨ／Ｈ2Ｏ又は０．１％  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏのいずれかの最少量中でカラムに適用した。勾配溶出は、一般に８mL/分の流量で、１０％  Ｂ緩衝液で開始し、９０分間に１０％〜６０％  Ｂで行った（緩衝液Ａ：０．１％  ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％  ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）。ＵＶ検出は２８０nmで行った。画分は、１．０〜２．５分間隔で回収して、分析ＨＰＬＣにより検査した。高純度と判定された画分をプールして凍結乾燥した。
【０１５２】
最終生成物の純度は、上述のとおり逆相カラムでの分析ＨＰＬＣによりチェックした。全ての生成物の純度は、約９５〜９９％と判定された。全ての最終生成物はまた、高速原子衝撃質量分析（ＦＡＢ−ＭＳ）又はエレクトロスプレー質量分析（ＥＳ−ＭＳ）にも付した。全ての生成物から、予想された親Ｍ＋Ｈイオンが許容限界内に得られた。
【０１５３】
上述の手法を利用して、本発明の化合物は、以下の反応スキームにより合成することができる。
【０１５４】
【化９９】
0003938690.tif 000055
0003938690.tif 000056
0003938690.tif 000057
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【０１５５】
本発明の合成ペプチドは、前セクションに論じられた従来の固相ペプチド合成法を用いて調製される。各サイクルは、２つの手順よりなる；樹脂結合鎖中の末端窒素からのＦｍｏｃ保護基の初期開裂と、これに続くＦｍｏｃ保護アミノ酸によるアミン官能基のアシル化である。このサイクルは、一般にプロトコール１に略述される段階的手順により行われる。脱保護は、有機塩基、例えば、ピペラジン、モルホリン又はピペリジン、好ましくはピペリジンを用いて、適切な不活性溶媒、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又はＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）中で成し遂げられる。このカップリング反応は、アミド結合形成のために開発された多くの条件の１つ、例えば、有機塩基（例えば、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ））の存在下で、不活性溶媒（例えば、ＤＭＦ）中で、ヘキサフルオロリン酸Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウム（ＨＢＴＵ）により実施することができる。あるいはこの例では、アミド基は、カルボジイミド、例えば、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）のような活性化剤と一緒に、ＤＭＦのような適切な不活性溶媒中で使用することにより形成することができる。
【０１５６】
スキームＡにおいて、第１サイクルで、構造（１）により表されるＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂は、脱保護され、そして構造（２）のＦｍｏｃ−アミノ酸と縮合して、構造（３）の樹脂結合化合物が得られる。第２サイクルは、Ｆｍｏｃ−アミノ酸（４）を組み込んで、構造（５）の化合物（ｎ＝１）が得られる。ｎ＝０である構造（５）の化合物は、第１サイクルを除外し、構造（４）のＦｍｏｃ−アミノ酸を脱保護されたＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂に直接カップリングすることにより調製される。第３サイクルでは、樹脂結合ペプチドの処理により、Ｒ6が水素を表す、構造（６ａ）の中間体が与えられる。Ｒ6がメチルを表す、構造（６ｂ）の中間体は、スキームＣに示されるように合成される。プロトコール１の工程１〜５に規定されたように構造（５）の化合物を処理することにより調製された、構造（６ａ）の化合物は、アリールスルホニルクロリド、好ましくは２−ニトロベンゼンスルホニルクロリドと反応させる。この反応は、プロトンアクセプター、例えば、ピリジン、トリエチルアミン（ＴＥＡ）又はＤＩＰＥＡ、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下で、適切な不活性溶媒、好ましくはＤＭＦ中で行われる。洗浄した構造（１９）の樹脂結合化合物中の生成したスルホンアミド基のＮ−メチル化は、ミツノブ条件下で成し遂げられる。即ち、構造（１９）のスルホンアミドは、アゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）及びトリフェニルホスフィンの存在下で、溶媒としてメタノールを使用して、メタノールと反応させる。反応が終了後、構造（２０）の樹脂結合Ｎ−メチルスルホンアミドは、洗浄して残留試薬及び副産物を除去する。２−ニトロベンゼンスルホニル残基は、（２０）を２−メルカプトエタノール及び有機強塩基の１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）と、適切な溶媒中で、好ましくはＤＭＦ中で反応させることにより脱離して、構造（６ｂ）の樹脂結合中間体を得る。第３サイクルは、構造（６ａ）及び（６ｂ）の構造のいずれかの化合物をＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（７）とカップリングすることにより完了し、構造（８）の樹脂結合化合物が得られる。２つの追加サイクル（スキームＢ）が、構造（８）のペプチドに対し行われるが、ここでは、アミノ酸のＦｍｏｃ−（Ｄ）−Ｐｈｅ−ＯＨ（９）に続いて、構造（１０）又は（１１）のアミノ酸誘導体の１つが、逐次樹脂結合ペプチド中に組み込まれて、構造（１２）及び（１３）の樹脂結合ポリペプチドが得られる。
【０１５７】
樹脂結合ポリペプチド（１２）からのＦｍｏｃの脱離は、（１２）をＤＭＦ中ピペリジンで処理することにより行われ、プロトコール１の工程１〜５に略述される反応条件を用いて構造（１４）の化合物が得られる。次にこのポリペプチドは、アシル化剤との反応によりＮ−キャップされて、構造（１５）の樹脂結合アミドを形成するか、又はイソシアナートとの反応により、構造（１６）の尿素を形成する（スキームＤ）。このアシル化は、当業者には周知の種々の方法の下で行われる。使用される方法には下記がある：
（ｉ）ＤＭＦのような適切な溶媒中、ＨＢＴＵ、及び有機塩基、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下での、構造（１４）の化合物の、カルボン酸Ｒ1−ＣＯ2Ｈとの反応、及び
（ii）ジクロロメタンのような適切な溶媒中、ピリジン、ＴＥＡ及びＤＩＰＥＡ、好ましくはＤＩＰＥＡのような有機塩基の存在下での、構造（１４）の化合物の、カルボン酸塩化物Ｒ1−ＣＯＣｌとの反応、及び
（iii）ジクロロメタン又はＤＭＦのような適切な溶媒中、有機塩基、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下での、構造（１４）の化合物の、カルボン酸無水物Ｒ1−ＣＯ2ＣＯ−Ｒ1との反応がある。
【０１５８】
構造（１４）の化合物のイソシアナートＲ1−ＮＣＯとの反応は、ジクロロメタン又はＤＭＦのような適切な溶媒中で、有機塩基、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下で行われる。
【０１５９】
アシル化及び尿素形成反応が終了すると、樹脂結合生成物（１５）及び（１６）は洗浄して、残留試薬及び副産物を除去する。
【０１６０】
同じ条件を使用して、構造（１３）の樹脂結合ポリペプチドは、構造（１７）のＮ−アシル化化合物及び構造（１８）の尿素に変換される（スキームＥ）。
【０１６１】
スキームＦにおいて、配列作りは、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（７）の代わりにＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）−ＯＨ（２１）が樹脂結合ポリペプチドに組み込まれることを除いて、スキームＡと同様に行われ、構造（２２）のＮ−キャップされた樹脂結合ポリペプチドが得られる。アリル基は、（２２）を水素化トリブチルスズ、塩化パラジウム及びトリフェニルホスフィンで、不活性溶媒中、例えば、ＤＭＦ中で処理することにより脱離され、構造（２３）の樹脂結合ポリペプチドが得られる。（２３）をＢｏｃ−グアニジンとカップリングさせると、構造（２４）のアシルグアニジン樹脂結合化合物が得られた。この反応は、標準的なアミド形成反応法を用いて、例えば、ＨＢＴＵ及び有機塩基、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下で、ＤＭＦのような適切な溶媒中で行うことができる。
【０１６２】
スキームＧにおいて、配列作りは、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（７）の代わりに、Ｆｍｏｃ−フェニルホモＡｒｇ−ＯＨ（２５）又はＦｍｏｃ−シトルリン（２６）のいずれかが樹脂結合ポリペプチド中に組み込まれることを除いて、スキームＡと同様に行われ、それぞれ構造（２７）及び（２８）のＮ−キャップされた樹脂結合ポリペプチドが得られる。
【０１６３】
スキームＨに示されるように、Ｎ−キャップされたポリペプチド（１５）〜（１８）、（２４）、（２７）及び（２８）中の残りの保護基の開裂、及びこれに伴う固体支持体からのペプチドの開裂は、有機強酸、好ましくはトリフルオロ酢酸を使用し、場合によりジクロロメタンと痕跡量（１％）の水のような不活性溶媒の存在下で行われる。この反応は、便利には１つ以上のカルボカチオンスカベンジャー、例えば、エタンジチオール、硫化ジメチル、トリエチルシラン及びアニソールの存在下で、又は非存在下で行われる。ポリペプチド開裂溶液は、濾過して固体支持体から遊離され、次に適切な溶媒、好ましくはジエチルエーテルで希釈される。こうして生成される構造（２９）〜（３５）の固体ポリペプチドは、分取Ｃ１８カラム上で逆相クロマトグラフィーにより精製される。便利であれば、ラセミ体のＦｍｏｃ−アミノ酸（１１）がポリペプチド中に配列されている場合に、個々の立体異性体は、精製手順の間に分離される。Ｆｍｏｃ−アミノ酸（２）、（４）、（７）、（９）、（２１）、（２５）及び（２６）、並びにポリペプチドをＮ−キャップするために使用されるアシル化剤及びイソシアナートは、市販されている既知化合物である。
【０１６４】
Ｆｍｏｃ−アミノ酸（１０）及び（１１）は、本明細書に記述されるように、有機化学の実施において通常の技能を有するものには周知である方法により調製される。スキームＩには、環状ケトンからのＦｍｏｃ−アミノ酸の調製法が略述されている。式（３６）の４−フェニルシクロヘキサノンは、炭酸アンモニウム及びシアン化カリウムでの処理により、式（３７）のヒダントインに変換される。この反応は、便利には水エタノール混合物中で５０℃〜９０℃、好ましくは８０℃と９０℃の間の温度で行われる。このヒダントインの構造（３８）のアミノ酸への直接加水分解には、還流温度での、強塩基、例えば、６Ｎ水酸化ナトリウム溶液又は水酸化バリウムでの長時間処理が必要である。あるいは、構造（３７）の化合物は、構造（３９）のビス−Ｂｏｃ誘導体に変換することができる。この反応は、二炭酸tert−ブチル〔（Ｂｏｃ）2Ｏ〕を使用して、不活性溶媒、好ましくはテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、有機アミン塩基、好ましくはＴＥＡ及び触媒の４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下で零度〜室温の温度、好ましくは室温で行われる。構造（３９）のビス−Ｂｏｃヒダントインは、構造（３８）のアミノ酸に容易に変換される。この反応は、１Ｎ水酸化ナトリウムを使用して、不活性溶媒、好ましくはジメトキシエタン（ＤＭＥ）中で零度〜５０℃で、好ましくはおよそ室温で成し遂げられる。構造（３８）の化合物におけるＦｍｏｃ基によるアミノ官能基の保護は、種々の反応条件下で行われて、（４０）が得られる。この反応は、便利には、零度〜室温の温度で、好ましくは室温で、ＴＨＦ又はジオキサンの混合物、好ましくはジオキサンと炭酸ナトリウム水溶液中で、９−フルオレニルメトキシクロロホルマート（ＦｍｏｃＣｌ）によりアミノ酸（３８）の溶液を処理することにより実行してもよい。あるいは、Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（ＦｍｏｃＯＳｕ）を、有機第３級アミン塩基、好ましくはＴＥＡを含むアセトニトリル水溶液中のアミノ酸（３８）の溶液に加える。この反応は、零度〜室温で、好ましくは室温で実行される。別の変法では、ＤＭＥは、（３９）の（３８）への変換中に加水分解混合物から留去し、そして反応物を約pH１１に調整する。生じた（３８）のナトリウム塩の溶液は、次にインサイチューでＦｍｏｃＯＳｕ又はＦｍｏｃＣｌによりジオキサン中で零度〜室温の温度で、好ましくは室温で処理される。
【０１６５】
同様に、テトラロン（４１）、Ｎ−アリール−４−ケトピペリジン（４２）、並びにシクロヘキサノン誘導体（４３）及び（４４）は、構造（１１）及び（４５）〜（４７）の対応するＦｍｏｃ−アミノ酸に変換される。
【０１６６】
下部構造（４９）のように、Ｒ3が、直鎖又は分岐の低級アルコキシを表し、そしてＲ2及びＲ4が水素である、構造（４０）の化合物は、構造（４８）の化合物のＯ−アルキル化により調製されてもよい（スキームＪ）。Ｒ16が、非分岐低級アルキル部分を表すとき、アルキル化は、構造Ｒ16Ｘの第１級ハロゲン化アルキルを使用して、アルカリ金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウム又はカリウムの存在下で行われる。ハロゲン化アルキルは、クロロ、ブロモ又はヨード誘導体、好ましくはヨウ化アルキル（Ｘ＝Ｉ）であってよい。この反応は便利には、Ｓｎ２置換反応を促進する不活性溶媒、例えば、アセトン、２−ブタノン又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、好ましくはアセトン中で、室温から溶液の還流温度までの温度で、好ましくは還流温度で行われる。Ｒ16が、分岐低級アルキル基、例えば、２−プロピルを表すとき、アルキル化は、構造Ｒ16Ｘの第２級ハロゲン化アルキルを使用して、アルカリ金属炭酸塩、例えば、炭酸カリウムの存在下で行われる。第２級ハロゲン化アルキルは、好ましくは第２級ヨウ化アルキル、例えば、２−ヨードプロパン（Ｘ＝Ｉ）である。この反応は、便利には不活性溶媒、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中で、室温から溶液の還流温度までの温度で、好ましくは約１００℃で行われる。
【０１６７】
構造（４０）の化合物は、有機化学の実施において通常の技能を有するものには周知である方法により調製することができる。スキームＫに略述されるように、アルキル金属試薬、好ましくはｔ−ブチルリチウムを用いた、構造（５０）のハロゲン化アリール（Ｘ′は、ブロモ又はヨードを表す）の処理によって、金属交換反応が起こり、構造（５１）の対応するアリールリチウムが得られる。この反応は、便利には−７８℃で、ジエチルエーテル又はテトラヒドロフラン、好ましくはテトラヒドロフランのような不活性な無水溶媒中の、構造（５０）の化合物の溶液へのアルキルリチウム溶液の添加によって行われる。構造（５１）のアリールリチウムは次に、インサイチューで適切な不活性溶媒、例えば、テトラヒドロフラン中のシクロヘキサン−１，４−ジオンのモノケタール（５２）の溶液と反応させるが、このとき反応温度は、−６０℃未満、好ましくは約−７８℃に維持して、構造（５３）のカルビノールが得られる。構造（５４）の化合物は、構造（５３）のカルビノールの脱水により得られる。この反応は便利には、不活性溶媒、例えば、ベンゼン又はトルエン、好ましくはベンゼン中で、溶媒の還流温度で、有機強酸触媒、好ましくはｐ−トルエンスルホン酸を使用して行われる。生成した水は、デーン−シュターク装置により反応混合物から除去することにより、反応を完了するまで進行させられる。構造（５５）の化合物は、構造（５４）のオレフィンの水素化により製造される。この反応は、便利には貴金属触媒、例えば、パラジウム担持炭素を使用して、水素雰囲気下で、不活性溶媒、例えば、エタノール又は酢酸エチル中で行われる。この水素化は、通常室温及び４０psiの水素で行われるが、構造（５４）中のアリール環が、水素化分解を受けやすい基を含むならば、例えば、Ｒ2、Ｒ3又はＲ4が、クロロを表すならば、反応圧力は、約５psiに保つ。構造（５５）の化合物はまた、構造（５３）のカルビノールから、ヒドロキシル基の還元的脱離によって直接得られてもよい。この反応において、不活性溶媒、例えば、ジクロロメタン中の構造（５３）（Ｒ2＝Ｒ3＝ＨかつＲ4＝ＯＭｅ）の溶液は、三フッ化ホウ素エーテル錯化合物のようなルイス酸、及び還元剤、例えば、トリエチルシランで、零度〜室温の温度で処理する。構造（５５）の化合物中のケタール保護基の脱離によって、式（４０）のケトンが得られる。この反応は便利には、アセトン又は２−ブタノン、好ましくはアセトン中で、酸触媒、例えば、４Ｎ塩酸又はｐ−トルエンスルホン酸の下で、室温から反応混合物の還流温度で、好ましくは還流温度で行われる。
【０１６８】
構造（４１）の５−置換−β−テトラロンは、一般に既知化合物であるか、あるいは既知でなければ、有機化学の分野において通常の技能を有するものには周知の方法によって調製することができる。この例では、構造（４１）の化合物は、スキームＬ及びＭに略述される２つの方法により調製される。
【０１６９】
スキームＬに示されるように、構造（５６）の２−置換ヒドロケイ皮酸（Ｒ10＝ブロモ、クロロ又は１〜３個の炭素の直鎖若しくは分岐アルキル基）は、構造（５７）の対応するカルボン酸塩化物に変換される。この変換は、幾つかの方法、例えば、場合により触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの存在下で、ベンゼン又はジクロロメタン、好ましくはジクロロメタンのような不活性溶媒中での、塩化オキサリルによるヒドロケイ皮酸の処理によって行うことができる。この反応は便利には、零度〜室温の温度で、好ましくは室温で行われる。あるいは構造（５６）の化合物は、塩化スルフリルのような塩化アシル形成試薬と、不活性溶媒、例えば、ベンゼン又はトルエン、好ましくはトルエン中で、室温から溶液の還流温度の間の温度で、好ましくは還流温度で反応させる。
【０１７０】
構造（５８）のジアゾケトンは、こうして生成した構造（５７）のハロゲン化アシルを、新たに調製した過剰のジアゾメタンのエーテル溶液を用いて、不活性溶媒、例えば、ジクロロメタン中で処理することにより調製される。試薬は、便利には氷浴温度で合わせられ、次に反応は、零度〜室温の温度で、好ましくは室温で進行させる。構造（４１）のテトラロンを与える構造（５８）のジアゾケトンの環化は、酢酸ロジウム（II）ダイマーにより、不活性溶媒、例えば、ジクロロメタン中で促進される。この反応は、通常室温から溶液の還流温度で、好ましくは還流温度で行われる。
【０１７１】
Ｒ10が、直鎖又は分岐低級アルコキシ基又はジアルキルアミノ置換基を表す、構造（４１）の化合物は、スキームＭに示されるように調製される。構造（６０）の化合物（Ｒ15'＝非分岐低級アルキル部分）は、第１級ヨウ化又は臭化アルキル、好ましくはヨウ化物による、アルカリ金属炭酸塩（例えば、炭酸ナトリウム又はカリウム）のような塩基の存在下での、構造（５９）のナフタレンジオールのペル−Ｏ−アルキル化によって調製される。この反応は、不活性溶媒、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中で、室温〜１００℃の温度で、好ましくは３５℃で行われる。構造（６３）の化合物（Ｒ15"は、分岐低級アルキルを表す）は、構造（６１）の２−テトラロンから２工程で調製される。構造（６１）のテトラロンは、パラジウム金属（炭素上に１０％）のような貴金属触媒の存在下で、ｐ−シメンのような適切な高沸点溶媒中で脱水素反応に付され、構造（６２）の芳香族化合物が得られる。次に構造（６２）のナフトールは、第２級ヨウ化アルキルにより、アルカリ金属炭酸塩、好ましくは炭酸セシウムのような塩基の存在下でＯ−アルキル化され、構造（６３）の化合物が与えられる。この反応は便利には、不活性溶媒、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中で、室温〜１００℃の温度で、好ましくは約４０℃で行われる。構造（６５）の化合物は、アルカリ金属炭酸塩、好ましくは炭酸カリウムのような塩基の存在下での、ヨウ化メチルによる５−アミノ−２−ナフトール（６４）のアルキル化によって調製される。この反応は、不活性溶媒、例えば、アセトン又は２−ブタノン、好ましくはアセトン中で、室温と溶液の還流温度の間の温度で、好ましくは還流温度で行われる。
【０１７２】
構造（４１）のテトラロンは、溶解金属条件下での構造（６０）、（６３）及び（６５）の化合物の還元と、これに続く中間体エノールエーテルの酸触媒加水分解により製造される。この変換は便利には、出発物質が消費されるまで、低級アルコール、好ましくはエタノール中の基質の沸騰溶液に、大過剰のナトリウム又はカリウム、好ましくはナトリウムのようなアルカリ金属を少量ずつ添加することにより行われる。構造（４１）のテトラロンは、単離された中間体のエノールエーテルの溶液を強酸触媒、好ましくはｐ−トルエンスルホン酸で処理することにより得られる。この加水分解は便利には、低級アルコール、好ましくはエタノールと水との混合物中で、室温と溶液の還流温度との間の温度で、好ましくは還流温度で行われる。
【０１７３】
構造（６８）の化合物は、それ自体既知の反応により調製することができる。例えばこれらは、構造（６６）の第２級アミンを、構造（６７）の臭化又はヨウ化アリール、好ましくはヨウ化アリールとカップリングすることにより調製することができる（スキームＮ）。このカップリング反応は、貴金属触媒、好ましくはトリ（ジベンジリデンアセトン）−二パラジウムにより、キレート化ホスフィンリガンド、好ましくはトリ−Ｏ−トリルホスフィン、及びナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのような立体障害アルコキシド塩基の存在下で触媒される。この反応は便利には、不活性雰囲気下、ジオキサン又はトルエン、好ましくはジオキサンのような無水溶媒を使用して、６０℃〜還流温度の温度で、好ましくは９０℃で行われる。構造（５６）及び（６６）の化合物は、一般に既知化合物であり、業者から入手できる。構造（４２）の化合物を与える化合物（６７）中のカルボニル保護基の脱離は、有機化学の分野において周知の種々の方法により行うことができる。例えば、この脱保護は、化合物（６８）の溶液をアセトン又は２−ブタノンのような低沸点ケトン中で鉱酸水溶液、例えば、６Ｎ塩酸により処理することによって達成できる。この反応は、室温から混合物の還流温度の温度で、好ましくは還流温度で実行することができる。
【０１７４】
構造（６３）のシクロヘキサノン誘導体は、市販化合物であり、４，４−ジフェニルシクロヘキサノン（６４）は、公表された手順により調製される。
【０１７５】
本発明はまた、上述の化合物の製造方法に関するものであり、この方法は、固体支持体に結合している上述の化合物を、酸により該固体支持体から開裂することを特徴とする。このような製造法は、例えば、スキームＨに上述されており、また当業者には、例えば、本明細書に引用されている文献からも周知である。好ましくは、上述の開裂が実施される際の酸は、トリフルオロ酢酸である。この開裂は、例えば、場合により痕跡量（約１％）の水を含むジクロロメタンのような溶媒中で行うことができる。この開裂は、例えば、エタンジチオール、硫化ジメチル、トリエチルシラン又はアニソールのようなスカベンジャーにより行うことができる。適切な固体支持体は、当業者には、例えば、本明細書に引用される文献から周知であり、また市販もされている。固体支持体に結合している上述の化合物の調製は、例えば、上記スキーム及び実施例に記載されている。保護基、例えば、Ｐｍｃ基は、上述の開裂と同時に、グアニジノ基から脱離することができる。本発明は更に、上述の製造法により製造することができる、上述の化合物に関する。
【０１７６】
上述の化合物は、医薬品として、例えば、経腸、非経口又は局所投与用の製剤の剤形で使用することができる。これらは、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬及び軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤又は懸濁剤の剤形で、例えば経口的に、例えば坐剤の剤形で直腸内に、例えば注射液又は輸液の剤形で非経口的に、あるいは例えば軟膏剤、クリーム剤又は油剤の剤形で局所的に投与することができる。
【０１７７】
製剤の製造は、当業者が精通している方法で、上述の化合物を、場合により他の治療上有用な物質と組合せて、適切な非毒性の不活性な治療上適合性のある固体又は液体担体物質、並びに所望であれば、通常の薬剤補助剤と共にガレヌス製剤投与剤形にすることによって、遂行することができる。
【０１７８】
適切な担体物質は、無機担体物質だけでなく、有機担体物質も含まれる。即ち、例えば、乳糖、トウモロコシデンプン又はその誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩は、錠剤、コーティング錠、糖衣錠及び硬ゼラチンカプセル剤用の担体物質として使用することができる。軟ゼラチンカプセル剤に適した担体物質は、例えば、植物油、ロウ、脂肪並びに半固体及び液体ポリオールである（しかし、活性成分の性質によっては、軟ゼラチンカプセル剤の場合、担体を必要としない）。液剤及びシロップ剤の製造に適した担体物質は、例えば、水、ポリオール、ショ糖、転化糖などである。注射液に適した担体物質は、例えば、水、アルコール、ポリオール、グリセリン及び植物油である。坐剤に適した担体物質は、例えば、天然もしくは硬化油、ロウ、脂肪及び半液体又は液体ポリオールである。局所製剤に適した担体物質は、グリセリド、半合成及び合成グリセリド、硬化油、液体ロウ、流動パラフィン、液体脂肪アルコール、ステロール、ポリエチレングリコール並びにセルロース誘導体である。
【０１７９】
通常の安定剤、保存料、湿潤剤及び乳化剤、粘稠度改善剤、香味改善剤、浸透圧を変える塩類、緩衝剤、可溶化剤、着色料及びマスキング剤並びに酸化防止剤が、製剤補助剤として考慮される。
【０１８０】
上述の化合物の用量は、制御すべき疾患、患者の年齢及び個々の症状、並びに投与の様式に応じて、広い範囲内で変化させることができ、当然ながら各特定症例の個々の要求に適合させられる。成人患者には、約１mg〜約１０００mg、特に約１０mg〜約５００mgの１日用量が考慮される。用量に応じて、１日用量を数回の投与単位で投与するのが便利である。
【０１８１】
本製剤は便利には、約１〜５００mg、好ましくは５〜２００mgの上述の化合物を含む。
【０１８２】
本発明は、下記実施例を参照することにより理解が深まるが、これらの実施例は、本明細書に記載される本発明を説明するものであって、限定するものではない。
【０１８３】
実施例１
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−フェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０１８４】
【化１００】
0003938690.tif 000067
【０１８５】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（１００mL）と水（３３mL）中の４−フェニルシクロヘキサノン（１０．０ｇ、５７．５mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（３３ｇ、３４４mmol、６当量）及びシアン化カリウム（５．６ｇ、８６．２mmol、１．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で２４時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（１４．０ｇ、収率１００％）として得た。1H NMR (DMSO-d6): 8.63 (s, 1H), 7.23-7.36 (m, 4), 7.15 (m, 1), 2.50 (m, 1H), 2.10 (m, 1H), 1.85 (d, 1H)及び1.55-1.80 (m, 6H)
【０１８６】
工程２：
【０１８７】
【化１０１】
0003938690.tif 000068
【０１８８】
ヒダントイン（１０．０ｇ）をＮａＯＨ水溶液（６N、３５０mL）に懸濁し、１３０℃で２〜３日間加熱した。加水分解が完了したとき、反応混合物を濃ＨＣｌにより僅かに酸性（pH約６）に中和した。得られたスラリーを濾過し、水で洗浄し、乾燥させて、１−アミノ−４−フェニルシクロヘキサンカルボン酸（ＡＰＣ）を白色の固体（２５ｇ、収率＞１００％、無機塩により汚染されている）として得て、それを次の工程に直接使用した。少量の粗生成物をＨＰＬＣにより精製した。1H NMR (DMSO-d6): 7.23-7.35 (m,2), 7.10-7.19 (m, 3H), 2.45 (m, 1H), 1.92-2.18 (m, 3H), 1.56-1.78 (m, 4H)及び1.20 (m, 1H); LRMS (エレクトロスプレー) m/e 220 (M+1)+, C13H17NO2計算値, 219
【０１８９】
工程３：
【０１９０】
【化１０２】
0003938690.tif 000069
【０１９１】
最後の工程の粗ＡＰＣ（２５ｇ）をジオキサン（３００mL）と１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（１５０ml）中のＦｍｏｃ−Ｃｌ（１３．２ｇ、１．２５当量）で処理し、一晩激しく撹拌した。反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６NＨＣｌにより僅かに酸性（pH５〜６）に中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させた。溶媒を除去して粗生成物を得て、それを次にフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋なＦｍｏｃ−cis−ＡＰＣ（１８．２ｇ、２工程の合計収率７２％）及びＦｍｏｃ−trans−ＡＰＣ（２．１ｇ、８％）を得た。cisＦｍｏｃ−ＡＰＣの構造をその誘導体の単結晶Ｘ線分析により確認した。Fmoc-cis-APC, 1H NMR (CD3OD), 7.79 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.37 (t, 2), 7.24-7.32 (m, 4), 7.14-7.23 (m, 3), 4.37 (d, 2H), 4.24 (t, 1H), 2.55 (m, 1H), 2.28 (m, 2H), 1.84-1.96 (m, 2H)及び1.64-1.73 (m, 4H)
【０１９２】
実施例２
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０１９３】
【化１０３】
0003938690.tif 000070
【０１９４】
アセトン（１００mL）中の４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサノン（５．０ｇ、２６．３mmol）の溶液をＫ2ＣＯ3（１４．５ｇ、１０５mmol、４当量）及びヨードメタン（４．９mL、１１．２ｇ、７８．６mmol、３当量）で処理した。反応を６５℃で一晩加熱した。溶媒を除去した後、残渣をＨ2Ｏで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、真空下で濃縮して、分光学的に純粋な４−（４−メトキシフェニル）シクロヘキサノン（５．３４ｇ、１００％）を得た。1H NMR (CDCl3) 7.16 (dt, 2H), 6.87 (dt, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.99 (tt, 1H), 2.47-2.53 (m, 4H), 2.20 (m, 2H)及び1.83-1.98 (m, 2H); MS (エレクトロスプレー) m/e, 205 (M+1)+, C13H16O2計算値, 204
【０１９５】
工程２：
【０１９６】
【化１０４】
0003938690.tif 000071
【０１９７】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（５０mL）と水（１５mL）中のケトン（３．８６ｇ、１８．９mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（１４．５ｇ、１５１mmol、８当量）及びシアン化カリウム（２．０ｇ、３０．７mmol、１．６当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で２４時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（３００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（４．７５ｇ、収率９１％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 273 (M-H), C15H18N2O3計算値, 274
【０１９８】
工程３：
【０１９９】
【化１０５】
0003938690.tif 000072
【０２００】
無水ＴＨＦ（４５０mL）中のヒダントイン（１８．７ｇ、６８．２５mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（３７．２ｇ、１７０．５mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（１０．５mL、７．５９ｇ、７５．０mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（４６０mg、３．６５mmol）を連続して加えた。添加の約１５分後、反応は明澄な黄色の溶液になり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（８００mL）に取り、１NＨＣｌ（３×５０mL）、飽和Ｎａ2ＣＯ3水溶液（２×５０mL）及びブライン（２×５０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（２７．６ｇ、８７％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.28 (dt, 2H), 6.88 (dt, 2H), 3.79 (s 3H) 2.14-2.24 (m, 2H), 1.59 (s, 9H)及び1.38 (s 9H); MS (エレクトロスプレー) m/e 538 (M+MeCN+Na)+, C25H34N2O7計算値, 474
【０２０１】
工程４：
【０２０２】
【化１０６】
0003938690.tif 000073
【０２０３】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（１５．０８ｇ、３１．７８mmol）をＤＭＥ（５００mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（２９０mL、２９０mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、僅かに濁った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、１−アミノ−４−（４−メトキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＭｅＯＡＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。この溶液（約３００mL）に、ＤＭＥ（３００mL）、及びＤＭＥ（２００mL）中のＦｍｏｃ−ＯＳｕ（１６．７ｇ、４９．４２mmol）の溶液を加え、反応を室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、３NＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）により精製して、純粋な生成物Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＯＡＰＣを白色の固体（１２．４ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率８３％）として得た。1HNMR (DMSO-d6), 7.88 (d, 2H) 7.76 (d, 2H), 7.40 (t, 2H), 7.30 (t, 2H), 7.11 (d, 2H), 6.85 (d, 2H), 3.71 (s, 3H); MS (エレクトロスプレー) m/e 470 (M-H), C29H29NO5計算値, 471
【０２０４】
実施例３
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−エトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＥｔＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０２０５】
【化１０７】
0003938690.tif 000074
【０２０６】
アセトン（１００mL）中の４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサノン（５．０ｇ、２６．３mmol）の溶液をＫ2ＣＯ3（１４．５ｇ、１０５mmol、４当量）及びヨードメタン（１０．５mL、２０．５ｇ、１３１mmol、５当量）で処理した。反応を６５℃で一晩加熱した。溶媒を除去した後、残渣をＨ2Ｏで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、真空下で濃縮して、分光学的に純粋な４−（４−エトキシフェニル）シクロヘキサノン（５．７４ｇ、１００％）を得た。1H NMR (CDCl3) 7.15 (dt, 2H), 6.86 (dt, 2H), 4.02 (q, 2H), 2.99 (tt, 1H), 2.46-2.54 (m, 4H), 2.16-2.24 (m, 2H), 1.83-2.00 (m, 2H) 及び1.41 (t, 3H); MS (エレクトロスプレー) m/e, 219 (M+1)+, C14H18O2計算値, 218
【０２０７】
工程２：
【０２０８】
【化１０８】
0003938690.tif 000075
【０２０９】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（５０mL）と水（１５mL）中のケトン（４．１５ｇ、１９．０１mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（１４．５ｇ、１５１mmol、８当量）及びシアン化カリウム（２．０５ｇ、３１．４２mmol、１．６当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で１９時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（３００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（５．１７ｇ、収率９４％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 287 (M-H), C16H20N2O3計算値, 288
【０２１０】
工程３：
【０２１１】
【化１０９】
0003938690.tif 000076
【０２１２】
無水ＴＨＦ（１００mL）中のヒダントイン（４．２２ｇ、１４．６５mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（７．９８ｇ、３６．６０mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（２．３mL、１．６３ｇ、１６．１１mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（８９．４mg、０．７３mmol）を連続して加えた。添加の約１５分後、反応は明澄な黄色の溶液になり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り、１NＨＣｌ（３×２０mL）、飽和Ｎａ2ＣＯ3水溶液（２×２０mL）及びブライン（２×２０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（７．０１ｇ、９８％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.27 (dt, 2H), 6.87 (dt, 2H), 4.02 (q, 2H), 1.59 (s, 9H), 1.43 (t, 3H) 及び1.38 (s, 9H); MS (エレクトロスプレー) m/e 999 (2M+Na)+, C26H36N2O7計算値, 488
【０２１３】
工程４：
【０２１４】
【化１１０】
0003938690.tif 000077
【０２１５】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（６．５８ｇ、１３．４６mmol）をＤＭＥ（２００mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（１２１mL、１２１mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、僅かに濁った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、１−アミノ−４−（４−エトキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＥｔＯＡＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。この溶液（約１３０mL）に、ＤＭＥ（１００mL）、及びＤＭＥ（３０mL）中のＦｍｏｃ−ＯＳｕ（６．８３ｇ、２０．２４mmol）の溶液を加え、反応を室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、３NＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（５．５６ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率８５％）を得た。1H NMR (DMSO- d6), 7.88 (d, 2H), 7.74 (d, 2H), 7.40 (td, 2H), 7.30 (td, 2H), 7.11 (d, 2H), 6.84(d, 2H), 3.97 (q, 2H)及び1.29 (t, 3H); MS (エレクトロスプレー) m/e 484 (M-H), C30H31NO5計算値, 485
【０２１６】
実施例４
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＨＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０２１７】
【化１１１】
0003938690.tif 000078
【０２１８】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（３０mL）と水（１０mL）中の４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサノン（２．００ｇ、１０．５２mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（６．１７ｇ、６４．２mmol、６当量）及びシアン化カリウム（１．０７ｇ、１５．８mmol、１．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で一晩加熱した。冷却した反応混合物を氷水（２００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（２．５６ｇ、収率９４％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 261 (M+H)+, C14H16 N2O3計算値, 260
【０２１９】
工程２：
【０２２０】
【化１１２】
0003938690.tif 000079
【０２２１】
ヒダントイン（２．１０ｇ、８．０６mmol）をＮａＯＨ水溶液（６N、１００mL）に懸濁し、１３０℃で２〜３日間加熱した。加水分解が完了したとき、反応混合物を濃ＨＣｌにより僅かに酸性（pH約６）に中和した。得られたスラリーを濾過し、水で洗浄し、乾燥させて、１−アミノ−４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＨＯＡＰＣ）を白色の固体（３．１ｇ、収率＞１００％、無機塩で汚染されている）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 236 (M+H)+, C13H17NO3計算値, 235
【０２２２】
工程３：
【０２２３】
【化１１３】
0003938690.tif 000080
【０２２４】
最後の工程の粗ＡＰＣ（３．１ｇ）をジオキサン（１００mL）と１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（５０ml）中のＦｍｏｃ−Ｃｌ（２．６ｇ、１．２５当量）で処理し、一晩激しく撹拌した。反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６NＨＣｌにより僅かに酸性（pH５〜６）に中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させた。溶媒を除去して粗生成物を得て、それをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋なＦｍｏｃ−４−ＨＯＡＰＣ（２．７６ｇ、２工程の合計収率７５％）を得た。1H NMR (CD3OD), 7.78 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.38 (t, 2H), 7.30 (td, 2H), 7.04 (d, 2H), 6.72 (dt, 2H), 4.38 (d, 2H), 4.25 (t, 1H), 2.46 (m, 1H), 2.24-2.34 (m, 2H)及び1.81-1.92 (m, 6H); MS (エレクトロスプレー) m/e 456 (M-H), C28H27NO5計算値, 457
【０２２５】
実施例５
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−イソプロポキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ｉＰｒＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０２２６】
【化１１４】
0003938690.tif 000081
【０２２７】
ＤＭＦ（９０mL）中の４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサノン（６．０ｇ、３１．６mmol）の溶液をＫ2ＣＯ3（２１ｇ、１５８mmol、５当量）及び２−ヨードプロパン（１５mL、２６．８ｇ、１５８mmol、５当量）で処理した。反応を１００℃で一晩加熱した。溶媒を除去した後、残渣をＨ2Ｏで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、真空下で濃縮して、分光学的に純粋な４−（４−イソプロポキシフェニル）シクロヘキサノン（７．０２ｇ、９５％）を得た。1H NMR (CDCl3): 7.14 (dt, 2H), 6.84 (dt, 2H), 4.3 (septet, 1H), 2.97 (tt, 1H), 2.46-2.52 (m, 4H), 2.16-2.24 (m, 2H), 1.83-1.98 (m, 2H)及び1.33 (d, 6H)
【０２２８】
工程２：
【０２２９】
【化１１５】
0003938690.tif 000082
【０２３０】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（９０mL）と水（３０mL）中のケトン（５．１ｇ、２１．９８mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（１２．６ｇ、１３１mmol、６当量）及びシアン化カリウム（２．１４ｇ、３２．９mmol、１．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で２４時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（６．６０ｇ、収率９９％）として得た。1H NMR (DMSO-d6): 10.60 (s,1H), 8.65 (s, 1H), 7.18 (d, 2H), 6.80 (d, 2H), 4.52 (septet, 1H), 2.43 (m, 1H), 1.85-2.15 (m, 2H), 1.56-1.80 (m, 6H)及び1.22 (d, 6H); MS (エレクトロスプレー) m/e 301 (M-H), C17H22N2O3計算値, 302
【０２３１】
工程３：
【０２３２】
【化１１６】
0003938690.tif 000083
【０２３３】
無水ＴＨＦ（１８０mL）中のヒダントイン（５．８ｇ、１９．２０mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（１０．４６ｇ、４８．０mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（２．９mL、２．１３ｇ、２１．１２mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（１４０mg、１．１５mmol）を連続して加えた。添加の約１５分後、反応は明澄な黄色の溶液になり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（６００mL）に取り、１NＨＣｌ（３×４０mL）、飽和Ｎａ2ＣＯ3水溶液（２×４０mL）及びブライン（２×４０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（９．４ｇ、９８％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.27 (dt, 2H), 6.87 (dt, 2H), 4.02 (q, 2H), 2.98 (t, 1H), 2.26-2.56 (m, 4H), 2.14-2.24 (m, 2H), 1.76-1.86 (m, 2H), 1.59 (s, 9H), 1.43 (t, 3H) 及び1.38 (s, 9H); MS (エレクトロスプレー) m/e 999 (2M+Na)+, C26H36N2O7計算値, 488
【０２３４】
工程４：
【０２３５】
【化１１７】
0003938690.tif 000084
【０２３６】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（４．３４ｇ、８．６４mmol）をＤＭＥ（１００mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（７８mL、７８mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、相当に明澄な混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、１−アミノ−４−（４−イソプロポキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ｉＰｒＯＡＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。この溶液（約９０mL）に、ＤＭＥ（１２０mL）、及びＤＭＥ（２０mL）中のＦｍｏｃ−ＯＳｕ（３．４９ｇ、１０．３４mmol、１．２当量）の溶液を加え、反応を室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、３NＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（３．２３ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率７５％）を得た。1H NMR (DMSO- d6), 7.76 (d, 2H), 7.60 (d, 2H), 7.39 (t, 2H), 7.31 (t, 2H), 7.08 (d, 2H), 6.84 (d, 2H), 4.24 (m, 1H) and 1.34 (d, 6H); MS (エレクトロスプレー) m/e 498 (M-H),C31H33NO5計算値, 499
【０２３７】
実施例６
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−メチルフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０２３８】
【化１１８】
0003938690.tif 000085
【０２３９】
無水ＴＨＦ（１８０mL）中の４−ヨードトルエン（１０．９ｇ、５０．０mmol）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ＢｕＬｉ（１．６M、３１．０mL、５０mmol）の溶液を−７８℃で２０分間かけて加えた。反応を更に２０分間撹拌し、その後、無水ＴＨＦ（１００mL）中の１，４−シクロヘキサンジオンモノエチレンケタール（６．０ｇ、３８．４６mmol）の溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌した後、反応をＮＨ4Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、真空下で濃縮して、分光学的に純粋な生成物を白色の固体（９．３４ｇ、収率９８％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.41 (m, 2H), 7.16 (d, 2H), 3.98 (m, 4H), 2.34 (s, 3H); MS (EI) m/e 248 (M+), C15H20O3計算値, 248
【０２４０】
工程２：
【０２４１】
【化１１９】
0003938690.tif 000086
【０２４２】
Dean-Starkトラップを備えたフラスコ中、無水ベンゼン（２００mL）中のアルコール（９．１０ｇ、３６．６５mmol）の溶液にｐ−トルエンスルホン酸一水和物（６５０mg）を加え、反応を１００℃で３時間加熱した。反応を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（５００mL）で希釈し、Ｎａ2ＣＯ3水溶液（５０mL）、ブライン（３×５０mL）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、分光学的に純粋な生成物（８．３６ｇ、収率１００％）を得て、それを精製しないで次に工程に使用した。MS (EI) m/e 230 (M+), 190(M-OCH2CH2O), C15 H18O2計算値, 230
【０２４３】
工程３：
【０２４４】
【化１２０】
0003938690.tif 000087
【０２４５】
ＥｔＯＡｃ（１８０mL）中のオレフィン（７．４９ｇ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（炭素上５重量％、８００mg）を加え、反応を水素４０psi下、室温で３時間実施した。触媒を濾別し、濾液を濃縮して、分光学的に純粋な生成物を無色の油状物（７．４０ｇ、収率１００％）として得た。MS (EI) m/e 232 (M+), 188(M-OCH2CH2), C15H20O2計算値, 232
【０２４６】
工程４：
【０２４７】
【化１２１】
0003938690.tif 000088
【０２４８】
アセトン（１４０mL）中のケタール（６．９０ｇ）の溶液を４NＨＣｌ（６０mL）で処理し、６５℃で４時間加熱した。溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、４NＨＣｌで中和した。水溶液をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮した。得られた粗生成物を精製しないで次の工程に使用した（５．５７ｇ、定量収率）。MS (EI) m/e 188 (M)+, C13H16O計算値, 188
【０２４９】
工程５：
【０２５０】
【化１２２】
0003938690.tif 000089
【０２５１】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（９０mL）と水（３０mL）中の４−（４−メチルフェニル）シクロヘキサノン（５．３２ｇ、２８．３mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（１６．３ｇ、１６９．８mmol、６当量）及びシアン化カリウム（３．６８ｇ、５６．５mmol、２当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で一晩加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（６．３ｇ、収率８６％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 517 (2M+H), C15H18ClN2O2計算値, 258
【０２５２】
工程６：
【０２５３】
【化１２３】
0003938690.tif 000090
【０２５４】
無水ＴＨＦ（２５０mL）中のヒダントイン（５．８２ｇ、２２．５５mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（１２．３ｇ、５６．４mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（３．５mL、２．５ｇ、２４．７mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（２７５mg、２．２５mmol）を連続して加えた。反応は明澄な黄色の溶液に変わり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（５００mL）に取り、１NＨＣｌ（３×５０mL）、飽和Ｎａ2ＣＯ3水溶液（２×５０mL）及びブライン（２×５０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（１０．０３ｇ、１００％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.26 (d, 2H), 6.87 (d, 2H), 3.00 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 1.59 (s, 9H) 及び1.37 (s, 9H)
【０２５５】
工程７：
【０２５６】
【化１２４】
0003938690.tif 000091
【０２５７】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（６．４０ｇ、１３．９７mmol）をＤＭＥ（２００mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（１２０mL、１２０mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、僅かに濁った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、１−アミノ−４−（４−メチルフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＭｅＡＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。この溶液（約１４０mL）に、ＤＭＥ（２４０mL）、及びＤＭＥ（４０mL）中のＦｍｏｃ−ＯＳｕ（５．１０ｇ、１５．１３mmol、１．１当量）の溶液を加え、反応を室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、３NＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（４．３５ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率６９％）を得た。1H NMR (DMSO- d6): 7.88 (d, 2H), 7.75 (d, 2H), 7.24-7.43 (m, 4H), 7.02-7.14 (m, 4H), 4.25 (m, 3H), 2.24 (s, 3H)
【０２５８】
実施例７
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−クロロフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０２５９】
【化１２５】
0003938690.tif 000092
【０２６０】
無水ＴＨＦ（１８０mL）中の４−クロロフェニルブロミド（７．５ｇ、３９．２mmol）の溶液を−７８℃に冷却し、ヘキサン中のｎ−ＢｕＬｉ（１．６M、２５mL、４０mmol）の溶液を２０分間かけて滴加して処理した。反応を更に３０分間撹拌し、その後、無水ＴＨＦ（１００mL）中の１，４−シクロヘキサンジオンモノエチレンケタール（６．０ｇ、３８．４６mmol）の溶液を滴加した。−７８℃で１時間撹拌した後、反応をＮＨ4Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、真空下で濃縮して、分光学的に純粋な生成物を白色の固体（９．４０ｇ、収率９１％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.45 (m 2H), 7.31 (m, 2H), 3.99 (m, 4H), 2.02-2.20 (m, 4H), 1.75-1.82 (m, 2H), 1.66-1.73 (m, 2H), 1.54 (s, 1H); MS (EI) m/e 268 (M+), 251 (M-OH), 250 (M-H2O), C14H17ClO3計算値, 268
【０２６１】
工程２：
【０２６２】
【化１２６】
0003938690.tif 000093
【０２６３】
Dean-Starkトラップを備えたフラスコ中、無水ベンゼン（１２０mL）中のアルコール（６．７８ｇ、２５．３０mmol）の溶液にｐ−トルエンスルホン酸一水和物（９６０mg）を加え、反応を還流下で３時間加熱した。反応を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（５００mL）で希釈し、Ｎａ2ＣＯ3水溶液（５０mL）、ブライン（３×５０mL）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、分光学的に純粋な生成物（６．３０ｇ、収率１００％）を得て、それを精製しないで次に工程に使用した。MS (EI) m/e 250 (M+), 190(M-OCH2CH2O), C14H15ClO2計算値, 250
【０２６４】
工程３：
【０２６５】
【化１２７】
0003938690.tif 000094
【０２６６】
ＥｔＯＡｃ（１２０mL）中のオレフィン（６．１１ｇ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（炭素上５重量％、６００mg）を加え、反応を水素５psi下、室温で３時間実施した。触媒を濾別し、濾液を濃縮して、分光学的に純粋な生成物を無色の油状物（６．１０ｇ、収率１００％）として得た。MS (EI) m/e 252 (M)+, C14H17ClO2計算値, 252
【０２６７】
工程４：
【０２６８】
【化１２８】
0003938690.tif 000095
【０２６９】
アセトン（２００mL）中のケタール（５．８１ｇ、２３．０６mmol）の溶液をｐ−トルエンスルホン酸一水和物（８７６mg）で処理し、６０℃で一晩加熱した。溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃに取り、Ｎａ2ＣＯ3水溶液、ブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮して、粗生成物を黄色の油状物（５．３８ｇ、収率＞１００％）として得た。フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８０／２０→６０／４０）により精製して、ケトンを明黄色の油状物（４．５４ｇ、収率９５％）として得た。MS (EI) m/e 208 (M)+, C12H13ClO2計算値, 208
【０２７０】
工程５：
【０２７１】
【化１２９】
0003938690.tif 000096
【０２７２】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（９０mL）と水（３０mL）中の４−（４−クロロフェニル）シクロヘキサノン（４．２６ｇ、２０．４８mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（１３．８ｇ、１４４mmol、７当量）及びシアン化カリウム（３．５６ｇ、５４．７７mmol、２．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で一晩加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（５．５８ｇ、収率９８％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 277 (M-H), C14H15ClN2O2計算値, 278
【０２７３】
工程６：
【０２７４】
【化１３０】
0003938690.tif 000097
【０２７５】
無水ＴＨＦ（２５０mL）中のヒダントイン（５．１５ｇ、１８．５mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（１０．１ｇ、４６．３mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（２．８mL、２．０７ｇ、２０．４５mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（２２６mg、１．８５mmol）を連続して加えた。反応は明澄な黄色の溶液に変わり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（５００mL）に取り、１NＨＣｌ（３×５０mL）、飽和Ｎａ2ＣＯ3水溶液（２×５０mL）及びブライン（２×５０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（８．０５ｇ、収率９１％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 542 (M+Ma+MeCN), C24H31ClN2O6計算値, 478
【０２７６】
工程７：
【０２７７】
【化１３１】
0003938690.tif 000098
【０２７８】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（６．４１ｇ、１３．９７mmol）をＤＭＥ（２００mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（１２０mL、１２０mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、僅かに濁った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、１−アミノ−４−（４−クロロフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＣｌＡＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。この溶液（約１８０mL）に、ＤＭＥ（２４０mL）、及びＤＭＥ（３０mL）中のＦｍｏｃ−ＯＳｕ（５．３１ｇ、１５．７４mmol、１．１当量）の溶液を加え、反応を室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、３NＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（５．０４ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率７６％）を得た。1H NMR (DMSO- d6): 7.88 (d, 2H), 7.74 (d, 2H), 7.19-7.42 (m, 4H), 4.20-4.31 (m, 4H), 474 (m, 3H), 475 (s, 3H); MS (エレクトロスプレー) m/e 474 (M-H), C28H26ClNO4計算値, 475
【０２７９】
実施例８
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（３−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０２８０】
【化１３２】
0003938690.tif 000099
【０２８１】
無水ＴＨＦ（１８０mL）中の３−ヨードアニソール（１１．７ｇ、５０．０mmol、１．３当量）の溶液に、ヘキサン中のｎ−ＢｕＬｉ（１．６M、３１．０mL、５０mmol、１．３当量）の溶液を−７８℃で２５分間かけて加えた。反応を更に３０分間撹拌し、その後、無水ＴＨＦ（１００mL）中の１，４−シクロヘキサンジオンモノエチレンケタール（６．０ｇ、３８．４６mmol）の溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌した後、反応をＮＨ4Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、真空下で濃縮して、分光学的に純粋な生成物を白色の固体（９．３４ｇ、収率９８％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.26 (dd, 1H), 7.06-7.11 (m, 2H), 6.79 (dd, 1H), 3.98 (m, 4H), 3.81 (s, 3H)
【０２８２】
工程２：
【０２８３】
【化１３３】
0003938690.tif 000100
【０２８４】
無水ＣＨ2Ｃｌ2（２００mL）中のアルコール（５．６ｇ、２１．２１mmol）の撹拌した溶液に、窒素雰囲気下、塩氷浴温度でトリエチルシラン（１０．２mL、７．４ｇ、６３．６３mmol、３当量）及び三フッ化ホウ素エーテル錯化合物（２１．５mL、２４．１ｇ、１６９．７mmol、８当量）を連続して加えた。次に反応混合物を室温に温め、３時間撹拌し、その後、１０％Ｋ2ＣＯ3水溶液及びＨ2Ｏで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、真空下で濃縮して、脱酸素反応化合物を油状物（４．９１ｇ）として得て、これは、直接使用するのには十分に純粋であった。
【０２８５】
この粗中間体をアセトン（１３０mL）に溶解し、４NＨＣｌ（６０mL）で処理し、６５℃で４時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、４NＮａＯＨで中和した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー（８０／２０→６０／４０）により精製して、ケトン（３．６７ｇ、全体収率８５％）を黄色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3): 7.25 (dt, 1H), 6.75-6.86 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.00 (tt, 1H); MS (EI) m/e 204 (M+), C13H16O2計算値, 204
【０２８６】
工程３：
【０２８７】
【化１３４】
0003938690.tif 000101
【０２８８】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（６０mL）と水（２０mL）中の４−（３−メトキシフェニル）シクロヘキサノン（３．１０ｇ、１５．２０mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（８．７５ｇ、９１．２０mmol、６当量）及びシアン化カリウム（１．９８ｇ、３０．４０mmol、２当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で一晩加熱した。冷却した反応混合物を氷水（３００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（４．０８ｇ、収率９８％）として得た。1H NMR (DMSO-d6): 7.11 (d, 1H), 6.70-6.94 (m, 3H), 3.72 (s, 3H); MS (エレクトロスプレー) m/e 316 (M+MeCN+H), C15H18N2O3計算値, 274
【０２８９】
工程４：
【０２９０】
【化１３５】
0003938690.tif 000102
【０２９１】
無水ＴＨＦ（２５０mL）中のヒダントイン（５．２９ｇ、１９．３０mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（１０．５ｇ、４８．１６mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（３．０mL、２．１７ｇ、２１．５２mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（２３５mg、１．９２mmol）を連続して加えた。反応は明澄な黄色の溶液に変わり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（５００mL）に取り、１NＨＣｌ（３×５０mL）、飽和Ｎａ2ＣＯ3水溶液（２×５０mL）及びブライン（２×５０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８０／２０→６０／４０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（８．７０ｇ、９５％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 538 (M+MeCN+Na), C25H34N2O7計算値, 474
【０２９２】
工程５：
【０２９３】
【化１３６】
0003938690.tif 000103
【０２９４】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（２．３０ｇ、４．８４mmol）をＤＭＥ（８０mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（４４mL、４４mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、僅かに濁った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、１−アミノ−４−（３−メトキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（３−ＭｅＯＡＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。この溶液（約４０mL）にジオキサン（８０mL）及びＦｍｏｃ−Ｃｌ（１．７３ｇ、６．７６mmol、１．４当量）を加え、反応を室温で一晩撹拌した。次に反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、３NＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（１．９８ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率８７％）を得た。1H NMR (DMSO-d6), 7.88 (d, 2H), 7.75 (d, 2H), 7.40 (td, 2H), 7.30 (td, 2H), 7.21 (m, 1H), 6.71-6.80 (m, 3H), 3.72 (s, 3H); MS (エレクトロスプレー) m/e 494 (M+Na), C29H29NO5計算値, 471
【０２９５】
実施例９
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ブロモ２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−Ｂｒ−Ａｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０２９６】
【化１３７】
0003938690.tif 000104
【０２９７】
３−（２−ブロモフェニル）プロパン酸（２−ブロモベンジルブロミドから２工程で調製、２．０ｇ、８．７３mmol）、塩化オキサリル（１．１４ml、１３．１mmol）及び塩化メチレン（２０ml）の混合物を氷浴で冷却し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３４μL、０．４４mmol）を滴加した。混合物を室温で３時間撹拌した。真空下で濃縮して、３−（２−ブロモフェニル）プロパノイルクロリドを得て、それを塩化メチレンに取り、粗原料として次に工程に使用した。
【０２９８】
工程２：
【０２９９】
【化１３８】
0003938690.tif 000105
【０３００】
塩化メチレン中の上記の酸塩化物（粗原料、８．７３mmol）の溶液を、氷浴で冷却したエーテル（４０ml）中のジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン５．７０ｇから生成）の溶液にゆっくりと加えた。次に混合物を室温に温め、一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（１０→２０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１−ジアゾ−４−（２−ブロモフェニル）ブタン−２−オン（１．８８ｇ、２工程で８５％）を得た。1H NMR (CDCl3) δ 7.50 (1H, d, フェニル), 7.24 (2H, m, フェニル), 7.06 (1H, m, フェニル), 5.21 (1H, 広帯域 s, ジアゾ), 3.05 (2H, t, ベンジル), 2.62 (2H, m)
【０３０１】
工程３：
【０３０２】
【化１３９】
0003938690.tif 000106
【０３０３】
塩化メチレン（１２０ml）中の酢酸ロジウム（II)二量体（１５mg、０．０６８mmol）の混合物に、還流下、塩化メチレン（３０ml）中の１−ジアゾ−４−（２−ブロモフェニル）ブタン−２−オン（１．７４ｇ、６．８５mmol）の溶液をゆっくりと加えた。添加が完了した後、混合物を更に２０分間還流した。混合物を室温に冷却し、トリフルオロ酢酸エチル（１．５ml）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。反応を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を再び飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、褐色の油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（１０→１５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−ブロモ−β−テトラロン（１．１８ｇ、収率７７％）を無色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 7.46 (1H, t, フェニル), 7.05-7.09 (2H, m, フェニル), 3.58 (2H, s, ベンジル), 3.22 (2H, t, ベンジル), 2.54 (2H, t)
【０３０４】
工程４：
【０３０５】
【化１４０】
0003938690.tif 000107
【０３０６】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の５−ブロモ−β−テトラロン（１．１８ｇ、５．２４mmol）、シアン化カリウム（５１２mg、７．８６mmol）、炭酸アンモニウム（３．０ｇ、３１．２２mmol）、エタノール（２５ml）及び水（５ml）の混合物を、８０℃の油浴で４日間加熱した。室温に冷却した後、白色のスラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて自然乾燥させて、ヒダントイン（１．３１ｇ、８５％）を得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.71 (1H, 広帯域, NH), 8.28 (1H, 広帯域 s, NH), 7.0-7.5 (3H, m, フェニル); LRMS (エレクトロスプレー): C12H11BrN2O2, 計算値 294; 実測値: 293 (M-H), 295 (M-H)
【０３０７】
工程５：
【０３０８】
【化１４１】
0003938690.tif 000108
【０３０９】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中、水（２５ml）中のヒダントイン（１．２８７ｇ、４．３６mmol）、Ｂａ（ＯＨ）2.Ｈ2Ｏ（４．２０ｇ、２２．２mmol）の混合物を、１２５℃の油浴で４日間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH３に酸性化した。懸濁液を沸騰水浴中で１時間撹拌し、室温に冷却した。白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約２０mlに濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、真空下で一晩乾燥させて、ラセミ体の５−ブロモ−２アミノテトラリン−２−カルボン酸（８９３mg、収率７６％）を得た。LRMS (エレクトロスプレー):  C11H12BrNO2, 計算値 269; 実測値: 270 (M+H), 272 (M+H), 268 (M-H), 270 (M-H)
【０３１０】
工程６：
【０３１１】
【化１４２】
0003938690.tif 000109
【０３１２】
アセトニトリル（３０ml）と水（３０ml）中のラセミ体の５−ブロモ−２アミノテトラリン−２−カルボン酸（８８２mg、３．２７mmol）、トリエチルアミン（０．６０ml、４．３０mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−Ｏｓｕ、１．３２ｇ、３．９１mmol）の混合物を室温で一晩撹拌した。翌日の反応のＴＬＣ分析は、出発材料であるアミノ酸の存在を示した。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（０．２５ｇ）、トリエチルアミン（０．６ml）及びアセトニトリル（５ml）を加え、混合物を室温で更に１日撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを塩化メチレンで２回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（２→５→１０％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−ブロモ−２アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．０９ｇ、収率６８％）を白色の固体として得た。HRMS (FAB): C26H22BrNNaO4 (M+Na) 計算値 514.0630; 実測値: 514.0643
【０３１３】
実施例１０
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−クロロ−２アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＣｌＡｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０３１４】
【化１４３】
0003938690.tif 000110
【０３１５】
３−（２−クロロフェニル）プロパン酸（５．０ｇ、２７．１mmol）、塩化チオニル（１０．９ml、１４９mmol）及びトルエン（７５ml）の混合物を２時間還流した。真空下で濃縮して、３−（２−クロロフェニル）プロパノイルクロリドを得て、それを塩化メチレンに取り、更に精製しないで次に工程に使用した。
【０３１６】
工程２：
【０３１７】
【化１４４】
0003938690.tif 000111
【０３１８】
塩化メチレン中の上記の酸塩化物（粗原料、２７．１mmol）の溶液を、氷浴で冷却したエーテル（１２０ml）中のジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン１７．８ｇから生成）の溶液にゆっくりと加えた。次に混合物を室温に温め、一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮して、１−ジアゾ−４−（２−クロロフェニル）ブタン−２−オン（５．８７ｇ、２工程の収率＞１００％）を鮮黄色の油状物として得た。化合物を更に精製しないで次の工程に使用した。1H NMR (CDCl3) δ 7.05-7.32 (4H, m, フェニル), 5.13 (1H, 広帯域 s, ジアゾ), 3.00 (2H, t, ベンジル), 2.57 (2H, m)
【０３１９】
工程３：
【０３２０】
【化１４５】
0003938690.tif 000112
【０３２１】
塩化メチレン（４００ml）中の酢酸ロジウム（II)二量体（６０mg、０．２７mmol）の混合物に、還流下、塩化メチレン（５０ml）中の粗１−ジアゾ−４−（２−ブロモフェニル）ブタン−２−オン（５．８７ｇ、理論値２７．１mmol）の溶液をゆっくりと加えた。添加が完了した後、混合物を更に２０分間還流した。混合物を室温に冷却し、トリフルオロ酢酸（６．０ml）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。反応を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を再び飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、褐色の油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（１０→１５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−クロロ−β−テトラロン（３．３２ｇ、工程ａ〜ｃの収率６８％）を明褐色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 7.30 (1H, m, フェニル), 7.15 (1H, t, フェニル), 7.05 (1H, d, フェニル), 3.60 (2H, s, ベンジル), 3.22 (2H, t, ベンジル), 2.56 (2H, t)
【０３２２】
工程４：
【０３２３】
【化１４６】
0003938690.tif 000113
【０３２４】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の５−クロロ−β−テトラロン（８８０mg、４．８７mmol）、シアン化カリウム（５００mg、７．６７mmol）、炭酸アンモニウム（２．８５ｇ、２９．７mmol）、エタノール（２４ml）及び水（６ml）の混合物を、８０℃の油浴で６６時間加熱した。室温に冷却した後、スラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて自然乾燥させて、ヒダントイン（０．９２ｇ、７５％）を明るいベージュ色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.70 (1H, 広帯域, NH), 8.25 (1H, 広帯域 s, NH), 7.0-7.3 (3H, m, フェニル); LRMS (エレクトロスプレー): C12H11ClN2O2, 計算値 250; 実測値: 249 (M-H), 251 (M-H)
【０３２５】
工程５：
【０３２６】
【化１４７】
0003938690.tif 000114
【０３２７】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中、水（５０ml、超希薄）中のヒダントイン（８８０mg、３．５１mmol）、Ｂａ（ＯＨ）2.Ｈ2Ｏ（３．４０ｇ、１８．０mmol）の混合物を、１２５℃の油浴で２日間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH３に酸性化した。懸濁液を沸騰水浴中で２時間撹拌し、室温に冷却した。白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約５０mlに濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、真空下で一晩乾燥させて、ラセミ体の５−クロロ−２アミノテトラリン−２−カルボン酸（７８８mg、収率９９％）を得た。LRMS (エレクトロスプレー): C11H12ClNO2, 計算値 225; 実測値: 226 (M+H), 228 (M+H), 224 (M-H), 226 (M-H)
【０３２８】
工程６：
【０３２９】
【化１４８】
0003938690.tif 000115
【０３３０】
アセトニトリル（２０ml）と水（２０ml）中のラセミ体の５−クロロ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（４０２mg、１．７８mmol）、トリエチルアミン（０．３８ml、２．７３mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、９０４mg、２．６８mmol）の混合物を室温で２日間撹拌した。２日後の反応のＴＬＣ分析は、出発材料であるアミノ酸の存在を示した。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（０．１２ｇ）及びトリエチルアミン（０．１ml）を加え、混合物を室温で更に１日撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（３→６→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−クロロ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（５４０mg、収率６８％）を白色の固体として得た。HRMS (EI): C26H22ClNO4 (M) 計算値 447.1237; 実測値: 447.1234
【０３３１】
実施例１１
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−メトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＭｅＯＡｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０３３２】
【化１４９】
0003938690.tif 000116
【０３３３】
アセトニトリル（２５ml）と水（２５ml）中のラセミ体の５−メトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Obrecht, D. et. al. Helv. Chim Acta. 1992, 75, 1666に従って調製）（８０２mg、３．２６mmol）、トリエチルアミン（０．６２ml、４．４５mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、１．４７ｇ、４．３６mmol）の混合物を室温で３０時間撹拌した。反応のＴＬＣ分析は、出発材料であるアミノ酸の存在を示した。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（３７０mg）及びトリエチルアミン（０．６ml）を加え、混合物を室温で更に２４時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（１→３→５→１０％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−メトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．１４ｇ、収率７１％）をオフホワイト（off-white）の固体として得た。HRMS (FAB):  C27H26NO5 (M+H) 計算値 444.1812; 実測値: 444.1814
【０３３４】
実施例１２
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＥｔＯＡｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０３３５】
【化１５０】
0003938690.tif 000117
【０３３６】
１，６−ジヒドロキシナフタレン（５．０２ｇ、３１．３mmol）、無水炭酸カリウム（５２．０ｇ、３７６mmol）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ml）及びヨードエタン（１５ml、１８８mmol）の混合物を３５℃の油浴で２４時間撹拌した。反応混合物を濾過し、固形残渣をエチルエーテルで十分にすすぎ洗いした。濾液と洗液を合わせ、真空下で濃縮して大部分の溶媒を除去した。褐色の残渣を水とエーテルに分配し、層を分離した。エーテル層を水で洗浄した。合わせた水層をエーテルで逆抽出した。エーテル抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、粗褐色の固体（６．７４ｇ、収率９９％）を得た。粗生成物を高温メタノールから再結晶させて、１，６−ジエトキシナフタレン（４．３６ｇ、収率６４％、最初の産出物）を明褐色の固体として得た。1H NMR (CDCl3) δ 8.20 (1H, d, フェニル), 7.06-7.36 (4H, m, フェニル), 6.66 (1H, dd, フェニル), 4.10-4.23 (4H, 2 セットのq, 2 CH2), 1.45-1.56 (6H, 2 セットのt, 2 CH3)
【０３３７】
工程２：
【０３３８】
【化１５１】
0003938690.tif 000118
【０３３９】
無水エタノール（１００ml）中の１，６−ジエトキシナフタレン（４．１５ｇ、１９．２mmol）の還流している溶液に、ナトリウム金属（６．８ｇ、２９６mmol）を６０分間かけて少量ずつ注意深く加えた。混合物を更に９０分間還流した。ＴＬＣは未反応の出発材料の存在を示した。追加のナトリウム金属（１．０ｇ、４３．５mmol）を加え、反応混合物を更に６０分間還流した。反応を室温に冷却し、水でクエンチし、濃塩酸で酸性化した。混合物を真空下で濃縮して、大部分のエタノールを除去した。水性混合物をエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、褐色の固体を得て、それを１：１のエタノール／水（２００ml）に溶解し、次にｐ−トルエンスルホン酸（４００mg）を加えた。混合物を２１０分間還流した。追加のｐ−トルエンスルホン酸（１００mg）を加え、混合物を更に６０分間還流した。室温に冷却した後、大部分のエタノールを減圧下で除去した。水性混合物をエーテルで３回抽出し、合わせた有機層を水、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、褐色の油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（７％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−エトキシ−β−テトラロン（２．４３ｇ、収率６７％）を明黄色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 7.15 (1H, t, フェニル), 6.76 (1H, d, フェニル), 6.72 (1H, d, フェニル), 4.05 (2H, q, CH2), 3.56 (2H, s, ベンジル), 3.10 (2H, t, ベンジル), 2.53 (2H, t), 1.44 (3H, t, CH3)
【０３４０】
工程３：
【０３４１】
【化１５２】
0003938690.tif 000119
【０３４２】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の５−エトキシ−β−テトラロン（２．２３ｇ、１１．７mmol）、シアン化カリウム（１．２０ｇ、１８．４mmol）、炭酸アンモニウム（６．７５ｇ、７０．２mmol）、エタノール（８０ml）及び水（２０ml）の混合物を、８０℃の油浴で３日間加熱した。室温に冷却した後、スラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて自然乾燥させて、ヒダントイン（２．６９ｇ、８８％）をベージュ色の固体として得た。1H NMR (DMSO- d6) δ 10.65 (1H, 広帯域 s, NH), 8.22 (1H, 広帯域 s, NH), 7.06 (1H, t, フェニル), 6.75 (1H, d, フェニル), 6.65 (1H, d, フェニル), 3.98 (2H, q, CH2), 1.32 (3H, t, CH3); LRMS (エレクトロスプレー): C14H16N2O3, 計算値 259; 実測値: 258 (M-H)
【０３４３】
工程４：
【０３４４】
【化１５３】
0003938690.tif 000120
【０３４５】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中、水（２００ml、超希薄）中のヒダントイン（２．５７ｇ、９．８７mmol）、Ｂａ（ＯＨ）2.Ｈ2Ｏ（９．４０ｇ、４９．６mmol）の混合物を、１０５℃の油浴で３９時間加熱した。追加のＢａ（ＯＨ）2.Ｈ2Ｏ（９．４０ｇ、４９．６mmol）を加え、混合物を１２５℃の油浴で更に２１時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH３に酸性化した。懸濁液を沸騰水浴中で１時間撹拌し、室温に冷却した。白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約７５mlに濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、自然乾燥させて、ラセミ体の５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（２．３４ｇ、定量収率）を明るいベージュ色の固体として得た。LRMS (エレクトロスプレー): C13H17NO3, 計算値 235; 実測値: 236 (M+H), 234  (M-H)
【０３４６】
工程５：
【０３４７】
【化１５４】
0003938690.tif 000121
【０３４８】
アセトニトリル（７５ml）と水（７５ml）中のラセミ体の５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（２．２２ｇ、９．４４mmol）、トリエチルアミン（２．００ml、１４．３mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、４．８１ｇ、１４．３mmol）の混合物を室温で２日間撹拌した。反応のＴＬＣ分析は、出発材料であるアミノ酸の存在を示した。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（６４５mg）及びトリエチルアミン（１．０ml）を加え、混合物を室温で更に１日撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（３→５→１０％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（４．６６ｇ、＞定量収率）を白色の固体として得た。HRMS (FAB): C28H28NO5 (M+H) 計算値 458.1967; 実測値: 458.1985
【０３４９】
実施例１３
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ｉＰｒＯＡｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０３５０】
【化１５５】
0003938690.tif 000122
【０３５１】
無水ｐ−シメン（２５０ml）中の６−メトキシ−１−テトラロン（５．０７ｇ、２８．８mmol）、１０％Ｐｄ／Ｃ（３．５３ｇ、３．３２mmol）の混合物をアルゴン下、３８時間加熱還流した。反応混合物を室温に冷却し、セライトで濾過し、残渣をｐ−シメンで十分にすすぎ洗いした。濾液と洗液を合わせ、１N水酸化ナトリウム溶液（２×７０ml）で２回抽出した。合わせた水性抽出物を６N塩酸でpH約３に酸性化し、エーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、粗５−ヒドロキシ−６−メトキシナフタレン（２．３１ｇ、収率４６％）を明褐色の固体として得て、それを更に精製しないで次の工程に使用した。LRMS (エレクトロスプレー): C11H10O2, 計算値 174; 実測値: 173 (M-H)
【０３５２】
工程２：
【０３５３】
【化１５６】
0003938690.tif 000123
【０３５４】
５−ヒドロキシ−６−メトキシナフタレン（２．１０ｇ、１２．１mmol）、炭酸セシウム（１９．７ｇ、６０．５mmol）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２ml）及び２−ブロモプロパン（３．５０ml、３６．９mmol）の混合物を４０℃の油浴で一晩撹拌した。反応混合物を濾過し、固形残渣をエチルエーテルで十分にすすぎ洗いした。濾液と洗液を合わせ、真空下で濃縮して大部分の溶媒を除去した。褐色の残渣を水とエーテルに分配し、層を分離した。エーテル層を水で洗浄した。合わせた水層をエーテルで逆抽出した。エーテル抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、粗原料を得て、それをカラムクロマトグラフィー（２．５→５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１−イソプロポキシ−６−メトキシナフタレン（２．２３ｇ、収率８６％）を明褐色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 8.17 (1H, d, フェニル), 7.05-7.38 (4H, m, フェニル), 6.72 (1H, dd, フェニル), 4.73 (1H, m, iPrのCH), 3.92 (3H, s, OCH3), 1.42 (6H, d, iPrの2 CH3)
【０３５５】
工程３：
【０３５６】
【化１５７】
0003938690.tif 000124
【０３５７】
無水エタノール（５０ml）中の１−イソプロポキシ−６−メトキシナフタレン（２．２３ｇ、１０．３mmol）の還流している溶液に、ナトリウム金属（３．６ｇ、１５７mmol）を４５分間かけて少量ずつ注意深く加えた。混合物を更に１２０分間還流した。反応を室温に冷却し、水でクエンチし、濃塩酸で酸性化した。混合物を真空下で濃縮して、大部分のエタノールを除去した。水性混合物をエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、赤色を帯びた油状物を得て、それを１：１のエタノール／水（９０ml）に溶解し、次にｐ−トルエンスルホン酸（２００mg）を加えた。混合物を６０分間還流した。室温に冷却した後、大部分のエタノールを減圧下で除去した。水性混合物をエーテルで２回抽出し、合わせた有機層を水、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、赤色を帯びた油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（８→１５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−イソプロポキシ−β−テトラロン（１．３７ｇ、収率６５％）を無色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 7.16 (1H, t, フェニル), 6.78 (1H, d, フェニル), 6.71 (1H, d, フェニル), 4.53 (1H, m, iPrのCH ), 3.56 (2H, s, ベンジル), 3.08 (2H, t, ベンジル), 2.50 (2H, t), 1.37 (6H, d, iPrの2 CH3)
【０３５８】
工程４：
【０３５９】
【化１５８】
0003938690.tif 000125
【０３６０】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の５−イソプロポキシ−β−テトラロン（１．３７ｇ、６．７１mmol）、シアン化カリウム（６６０mg、１０．１mmol）、炭酸アンモニウム（３．８７ｇ、４０．３mmol）、エタノール（４４ml）及び水（９ml）の混合物を、８０℃の油浴で４２時間加熱した。室温に冷却した後、スラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて自然乾燥させて、ヒダントイン（１．６４ｇ、８９％）を得た。
【０３６１】
工程５：
【０３６２】
【化１５９】
0003938690.tif 000126
【０３６３】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中、水（２５ml）中のヒダントイン（１．６４ｇ、５．９８mmol）、Ｂａ（ＯＨ）2.Ｈ2Ｏ（５．６６ｇ、２９．９mmol）の混合物を、１００℃の油浴で７０時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH７に中和した。懸濁液を沸騰水浴中で１時間撹拌し、室温に冷却した。１N水酸化ナトリウム溶液で塩基性化し、白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約７５mlに濃縮した。濃塩酸溶液で中和して、白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、自然乾燥させて、ラセミ体の５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（３．４８ｇ、湿潤、無機塩を含有、＞定量収率）を得た。LRMS (エレクトロスプレー): C14H19NO3, 計算値 249; 実測値: 248 (M-H)
【０３６４】
工程６：
【０３６５】
【化１６０】
0003938690.tif 000127
【０３６６】
アセトニトリル（３０ml）と水（３０ml）中のラセミ体の５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（３．４８ｇ、理論値５．９８mmol）、トリエチルアミン（１．１０ml、７．８９mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、２．６２ｇ、７．７７mmol）の混合物を室温で１日撹拌した。反応のＴＬＣ分析は、出発材料であるアミノ酸の存在を示した。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（５００mg）を加え、混合物を室温で更に１日撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを塩化メチレンで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（１→２→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（０．５０ｇ、２工程の収率１８％）を白色の固体として得た。HRMS (FAB): C29H30NO5 (M+H) 計算値 472.2124; 実測値: 472.2117
【０３６７】
実施例１４
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ジメチルアミノ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＤｍａＡｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０３６８】
【化１６１】
0003938690.tif 000128
【０３６９】
５−アミノ−２−ナフトール（２．９７ｇ、１８．６mmol）、炭酸カリウム（３７．０ｇ、２６８mmol）、アセトン（１００ml）及びヨードメタン（１０．０ml、１６１mmol）の混合物を２日間還流した。反応混合物を室温に冷却し、濾過し、固形残渣をエチルエーテル及びアセトンで十分にすすぎ洗いした。濾液と洗液を合わせ、真空下で濃縮して大部分の溶媒を除去した。褐色の残渣を水とエーテルに分配し、層を分離した。エーテル層を水で洗浄した。合わせた水層をエーテルで逆抽出した。エーテル抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、粗１−ジメチルアミノ−６−メトキシナフタレン（３．５４ｇ、収率９４％）を暗褐色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 8.16 (1H, t, フェニル), 7.30-7.50 (2H, m, 芳香族), 7.10-7.20 (2H, m, 芳香族), 6.96 (1H, d, 芳香族), 3.93 (3H, s, OCH3), 2.89 (6H, s, N(CH3)2)
【０３７０】
工程２：
【０３７１】
【化１６２】
0003938690.tif 000129
【０３７２】
無水エタノール（１００ml）中の１−ジメチルアミノ−６−メトキシナフタレン（２．９９ｇ、１４．９mmol）の還流している溶液に、ナトリウム金属（５．７６ｇ、２５１mmol）を４５分間かけて少量ずつ注意深く加えた。混合物を更に４５分間還流した。ＴＬＣは未反応の出発材料の存在を示した。追加のナトリウム金属（７．０９ｇ、３０８mmol）を加え、反応混合物を、ＴＬＣが全ての出発材料が完全に消費されたことを示すまで還流した。反応を室温に冷却し、濃塩酸でpHを約９〜１０に調整した。混合物を真空下で濃縮して、大部分のエタノールを除去した。水性混合物を酢酸エチルで４回抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、暗赤色の油状物を得て、それを１：１のエタノール／水（１５０ml）に溶解し、次にｐ−トルエンスルホン酸（３．０５ｇ）を加えてpHを約２〜３にした。混合物を３時間還流した。室温に冷却した後、大部分のエタノールを減圧下で除去した。混合物のpHを２N水酸化ナトリウム溶液で約９〜１０に調整し、水性混合物を酢酸エチルで４回抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して、暗褐色の油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−ジメチルアミノ−β−テトラロン（８３４mg、収率３０％）を褐色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 7.18 (1H, t, フェニル), 6.96 (1H, d, フェニル), 6.82 (1H, d, フェニル), 3.57 (2H, s, ベンジル), 3.10 (2H, t, ベンジル), 2.70 (6H, s, N(CH3)2), 2.48 (2H, t); LRMS (エレクトロスプレー): C12H15NO, 計算値 189; 実測値: 190 (M+H)
【０３７３】
工程３：
【０３７４】
【化１６３】
0003938690.tif 000130
【０３７５】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の５−ジメチルアミノ−β−テトラロン（０．９７ｇ、５．１３mmol）、シアン化カリウム（５１０mg、７．８２mmol）、炭酸アンモニウム（２．９８ｇ、３１．０mmol）、エタノール（４０ml）及び水（１０ml）の混合物を、８０℃の油浴で２９時間加熱した。室温に冷却した後、暗褐色のスラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて自然乾燥させて、ヒダントイン（８８５mg、６７％）を暗褐色の固体として得た。LRMS (エレクトロスプレー): C14H17N3O2, 計算値 259; 実測値: 260 (M+H), 258  (M-H)
【０３７６】
工程４：
【０３７７】
【化１６４】
0003938690.tif 000131
【０３７８】
ＴＨＦ（２５ml）中のヒダントイン（８３２mg、３．２１mmol）の溶液に、ジ−ｔ−ブチルジカルボナート（２．５１ｇ、１１．５mmol）、トリエチルアミン（０．５０ml、３．５９mmol）及び４−ジメチルアミノピリジン（１７mg、０．１４mmol）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空下で除去し、粗原料をカラムクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）を使用して精製して、ビス−Ｂｏｃヒダントイン（１．０２ｇ、収率６９％）を黄色の泡状物として得た。LRMS (エレクトロスプレー): C24H33N3O6, 計算値 459; 実測値: 919 (2M+H)
【０３７９】
工程５：
【０３８０】
【化１６５】
0003938690.tif 000132
【０３８１】
ジメトキシエタン（１５ml）中のビス−Ｂｏｃヒダントイン（９８８mg、２．１５mmol）の溶液に１N水酸化ナトリウム溶液（２０ml）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分の溶媒を除去し、得られた明褐色の混合物に水を加えた。水性混合物を塩化メチレンで２回、酢酸エチルで２回抽出した。水層を約２０mlに濃縮し、１N塩酸でpH約７に中和してスラリーを得た。スラリーを濾過して、ラセミ体の５−ジメチルアミノ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．３３ｇ、依然として湿潤、＞定量収率）をオフホワイトの固体として得た。LRMS (エレクトロスプレー): C13H18N2O2, 計算値 234; 実測値: 235 (M+H)
【０３８２】
工程６：
【０３８３】
【化１６６】
0003938690.tif 000133
【０３８４】
アセトニトリル（１０ml）と水（１０ml）中の５−ジメチルアミノ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．３３ｇ、理論値２．１５mmol）、トリエチルアミン（０．４０ml、２．８７mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、０．９２ｇ、２．７３mmol）の混合物を室温で１日撹拌した。反応のＴＬＣ分析は、出発材料であるアミノ酸の存在を示した。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（４００mg）及びトリエチルアミン（０．２ml）を加え、混合物を室温で更に１日撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、ほぼ中性の混合物を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗原料を得て、それをカラムクロマトグラフィー（２．５→６→１０→１５→２０％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−ジメチルアミノ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（６０２mg、２工程の収率６１％）をオフホワイトの固体として得た。HRMS (FAB): C28H28N2O4 (M) 計算値 456.2049; 実測値: 456.2056
【０３８５】
実施例１５
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＭｅＡｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０３８６】
【化１６７】
0003938690.tif 000134
【０３８７】
２−メチルヒドロケイ皮酸（３．０ｇ、１８．３mmol）、塩化オキサリル（３．１９ml、３６．６mmol）及び塩化メチレン（３０ml）の混合物を氷浴で冷却し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．１４ml、１．８１mmol）を滴加した。混合物を室温で一晩撹拌した。真空下で濃縮して、３−（２−メチルフェニル）プロパノイルクロリドを得て、それを塩化メチレンに取り、粗原料として次に工程に使用した。
【０３８８】
工程２：
【０３８９】
【化１６８】
0003938690.tif 000135
【０３９０】
塩化メチレン中の上記の酸塩化物（粗原料、１８．３mmol）の溶液を、氷浴で冷却したエーテル（８０ml）中のジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン１１．９ｇから生成）の溶液にゆっくりと加えた。次に混合物を室温に温め、一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（１０→２０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１−ジアゾ−４−（２−メチルフェニル）ブタン−２−オン（２．０８ｇ、２工程で６０％）を鮮黄色の油状物として得た。
【０３９１】
工程３：
【０３９２】
【化１６９】
0003938690.tif 000136
【０３９３】
塩化メチレン（２００ml）中の酢酸ロジウム（II)二量体（２４mg、０．１０９mmol）の混合物に、還流下、塩化メチレン（５０ml）中の１−ジアゾ−４−（２−メチルフェニル）ブタン−２−オン（２．０８ｇ、１１．１mmol）の溶液を１８０分間かけてゆっくりと加えた。添加が完了した後、混合物を更に２０分間還流した。混合物を室温に冷却し、トリフルオロ酢酸（２．４０ml）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。反応を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を再び飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、褐色の粗油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−メチル−β−テトラロン（１．４８ｇ、収率８４％）を明褐色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3) δ 6.90-7.20 (3H, m, フェニル), 3.58 (2H, s, ベンジル), 3.03 (2H, t, ベンジル), 2.55 (2H, t), 2.34 (3H, s, CH3)
【０３９４】
工程４：
【０３９５】
【化１７０】
0003938690.tif 000137
【０３９６】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の５−メチル−β−テトラロン（１．４８ｇ、９．２４mmol）、シアン化カリウム（９０２mg、１３．９mmol）、炭酸アンモニウム（５．３３ｇ、５５．５mmol）、エタノール（４５ml）及び水（９ml）の混合物を、８０℃の油浴で３日間加熱した。室温に冷却した後、スラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて自然乾燥させて、粗ヒダントイン（１．８１ｇ、収率８５％）をベージュ色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.66 (1H, 広帯域 s, NH), 8.22 (1H, 広帯域 s, NH), 6.85-7.05 (3H, m, フェニル), 2.17 (3H, s, CH3)
【０３９７】
工程５：
【０３９８】
【化１７１】
0003938690.tif 000138
【０３９９】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中、水（２８ml）中のヒダントイン（１．８０ｇ、７．８２mmol）、Ｂａ（ＯＨ）2.Ｈ2Ｏ（７．４０ｇ、３９．１mmol）の混合物を、１２５℃の油浴で８８時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH３に酸性化した。懸濁液を沸騰水浴中で１時間撹拌し、室温に冷却した。白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約５０mlに濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、自然乾燥させて、ラセミ体の５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．０５ｇ、収率６５％）をベージュ色の固体として得た。LRMS (エレクトロスプレー): C12H15NO2, 計算値 205; 実測値: 206 (M+H)
【０４００】
工程６：
【０４０１】
【化１７２】
0003938690.tif 000139
【０４０２】
アセトニトリル（３０ml）と水（３０ml）中のラセミ体の５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．０５ｇ、５．１２mmol）、トリエチルアミン（０．９３ml、６．６７mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、２．２４ｇ、６．６４mmol）の混合物を室温で２日間撹拌した。反応のＴＬＣ分析は、出発材料であるアミノ酸の存在を示した。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（５２０mg）を加え、混合物を室温で更に２４時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを塩化メチレンで２回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（２→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．６２ｇ、収率７４％）を明褐色の固体として得た。HRMS (FAB):  C27H26NO4 (M+H) 計算値 428.1862; 実測値: 428.1844
【０４０３】
実施例１６
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−エチル−２アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＥｔＡｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０４０４】
【化１７３】
0003938690.tif 000140
【０４０５】
３−（２−エチルフェニル）プロパン酸（１−エチル−２−ヨードベンゼンから３工程で調製、４．２４ｇ、２３．８mmol）、塩化チオニル（９．５０ml、１３０mmol）及びトルエン（１００ml）の混合物を２時間還流した。真空下で濃縮して、３−（２−エチルフェニル）プロパノイルクロリドを得て、それを塩化メチレンに取り、粗原料として次に工程に使用した。
【０４０６】
工程２：
【０４０７】
【化１７４】
0003938690.tif 000141
【０４０８】
塩化メチレン中の上記の酸塩化物（粗原料、２３．８mmol）の溶液を、氷浴で冷却したエーテル（１００ml）中のジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン１５．６ｇから生成）の溶液にゆっくりと加えた。次に混合物を室温に温め、一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（１０→２０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１−ジアゾ−４−（２−エチルフェニル）ブタン−２−オン（３．４７ｇ、２工程で７２％）を得た。1H NMR (CDCl3) δ 7.1-7.25 (4H, m, フェニル), 5.21 (1H, 広帯域 s, ジアゾ), 2.97 (2H, m, エチルのCH2), 1.20 (3H, t, CH3)
【０４０９】
工程３：
【０４１０】
【化１７５】
0003938690.tif 000142
【０４１１】
塩化メチレン（３００ml）中の酢酸ロジウム（II)二量体（３８mg、０．１７２mmol）の混合物に、還流下、塩化メチレン（５０ml）中の１−ジアゾ−４−（２−エチルフェニル）ブタン−２−オン（３．４７ｇ、１７．２mmol）の溶液を９０分間かけてゆっくりと加えた。添加が完了した後、混合物を更に２０分間還流した。混合物を室温に冷却し、トリフルオロ酢酸（３．７５ml）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。反応を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を再び飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、粗５−エチル−β−テトラロン（３．０９ｇ、＞定量収率）を赤みを帯びた褐色の油状物として得た。化合物を更に精製しないで次の工程に使用した。1H NMR (CDCl3) δ 6.9-7.2 (3H, m, フェニル), 3.58 (2H, s, ベンジル),3.08 (2H, s, ベンジル), 2.70 (2H, q, エチルのCH2), 2.52 (2H, t, ベンジル), 1.20 (3H, t, エチルのCH3)
【０４１２】
工程４：
【０４１３】
【化１７６】
0003938690.tif 000143
【０４１４】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の５−エチル−β−テトラロン（３．０９ｇ、１７．７mmol）、シアン化カリウム（１．７３ｇ、２６．６mmol）、炭酸アンモニウム（１０．２ｇ、１０６mmol）、エタノール（８０ml）及び水（１６ml）の混合物を、８０℃の油浴で４８時間加熱した。室温に冷却した後、白色のスラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて自然乾燥させて、ヒダントイン（３．８５ｇ、２工程の収率９２％）を明るいベージュ色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.67 (1H, 広帯域 s, NH), 8.26 (1H, 広帯域 s, NH), 6.8-7.1 (3H, m, フェニル), 1.13 (3H, t, CH3); LRMS (エレクトロスプレー): C14H16N2O2, 計算値 244; 実測値: 243 (M-H)
【０４１５】
工程５：
【０４１６】
【化１７７】
0003938690.tif 000144
【０４１７】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中、水（２０ml）中のヒダントイン（１．００ｇ、４．０９mmol）、Ｂａ（ＯＨ）2.Ｈ2Ｏ（４．００ｇ、２１．１mmol）の混合物を、１２５℃の油浴で４８時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH３に酸性化した。懸濁液を沸騰水浴中で２時間撹拌し、室温に冷却した。白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約５０mlに濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、真空下で一晩乾燥させて、ラセミ体の５−エチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（７９６mg、収率８９％）を得た。LRMS (エレクトロスプレー): C13H17NO2, 計算値 219; 実測値: 220 (M+H)
【０４１８】
工程６：
【０４１９】
【化１７８】
0003938690.tif 000145
【０４２０】
アセトニトリル（４０ml）と水（４０ml）中のラセミ体の５−エチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（７６５mg、３．４９mmol）、トリエチルアミン（１．０ml、７．１７mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、１．７９ｇ、５．３１mmol）の混合物を室温で２日間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルション抽出物を塩化メチレンで２回、酢酸エチルで２回抽出した。塩化メチレン抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。酢酸エチル抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（２→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−エチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（３３０mg、収率２１％）を白色の固体として得た。HRMS (FAB):C28H28NO4 (M+H) 計算値 442.2018; 実測値: 442.2010
【０４２１】
実施例１７
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ｉＰｒＡｔｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０４２２】
【化１７９】
0003938690.tif 000146
【０４２３】
３−（２−イソプロピルフェニル）プロパン酸（１−イソプロピル−２−ヨードベンゼンから３工程で調製、２．０１ｇ、１０．５mmol）、塩化チオニル（４．３０ml、５９．０mmol）及びトルエン（４０ml）の混合物を２時間還流した。真空下で濃縮して、３−（２−イソプロピルフェニル）プロパノイルクロリドを得て、それを塩化メチレンに取り、粗原料として次に工程に使用した。
【０４２４】
工程２：
【０４２５】
【化１８０】
0003938690.tif 000147
【０４２６】
塩化メチレン中の上記の酸塩化物（粗原料、１０．５mmol）の溶液を、氷浴で冷却したエーテル（５０ml）中のジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン６．９５ｇから生成）の溶液にゆっくりと加えた。次に混合物を室温に温め、一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（２０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１−ジアゾ−４−（２−イソプロピルフェニル）ブタン−２−オン（１．８７ｇ、２工程で８２％）を鮮黄色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3)δ7.10-7.30 (4H, m, フェニル), 5.21 (1H, 広帯域 s,ジアゾ), 3.15 (1H, m, iPrのCH), 3.00 (2H, t, ベンジル), 2.57 (2H, m), 1.24 (6H, d, iPrの2 CH3)
【０４２７】
工程３：
【０４２８】
【化１８１】
0003938690.tif 000148
【０４２９】
塩化メチレン（１６０ml）中の酢酸ロジウム（II)二量体（２０mg、０．０９１mmol）の混合物に、還流下、塩化メチレン（２５ml）中の１−ジアゾ−４−（２−ブロモフェニル）ブタン−２−オン（１．８７ｇ、８．６５mmol）の溶液を６０分間かけてゆっくりと加えた。添加が完了した後、混合物を更に１５分間還流した。混合物を室温に冷却し、トリフルオロ酢酸（１．９０ml）を加え、混合物を室温で４５分間撹拌した。反応を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を再び飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、褐色の粗油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−イソプロピル−β−テトラロン（１．５７ｇ、収率９６％）を明黄色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3)δ6.93-7.22 (3H, m, フェニル), 3.59 (2H, s, ベンジル), 3.24 (1H, m, iPrのCH), 3.12 (2H, t, ベンジル), 2.52 (2H, t), 1.27 (6H, d, iPrの2 CH3)
【０４３０】
工程４：
【０４３１】
【化１８２】
0003938690.tif 000149
【０４３２】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の５−イソプロピル−β−テトラロン（１．５７ｇ、８．３４mmol）、シアン化カリウム（０．８２ｇ、１２．６mmol）、炭酸アンモニウム（４．８１ｇ、５０．１mmol）、エタノール（４０ml）及び水（１０ml）の混合物を、８０℃の油浴で４８時間加熱した。室温に冷却した後、褐色のスラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて自然乾燥させて、粗ヒダントインをベージュ色の固体として得て、それを更に精製しないで次の工程に使用した。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.67 (1H, 広帯域 s, NH), 8.30 (1H, 広帯域 s, NH), 6.85-7.32 (3H, m, フェニル), 1.15 (6H, t, CH3); LRMS (エレクトロススプレー): C15H18N2O2, 計算値 258; 実測値: 539 (2M+Na)
【０４３３】
工程５：
【０４３４】
【化１８３】
0003938690.tif 000150
【０４３５】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中、水（４０ml）中のヒダントイン（粗原料、理論値８．３４mmol）、Ｂａ（ＯＨ）2.Ｈ2Ｏ（７．９０ｇ、４１．７mmol）の混合物を、１２５℃の油浴で３８時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH３に酸性化した。懸濁液を沸騰水浴中で２時間撹拌し、室温に冷却した。白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約５０mlに濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、真空下で一晩乾燥させて、ラセミ体の５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．２３ｇ、２工程の収率６３％）をベージュ色の固体として得た。LRMS (エレクトロスプレー): C14H19NO2, 計算値 233; 実測値: 232 (M-H)
【０４３６】
工程６：
【０４３７】
【化１８４】
0003938690.tif 000151
【０４３８】
アセトニトリル（３０ml）と水（３０ml）中のラセミ体の５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（２５０mg、１．０７mmol）、トリエチルアミン（１．２ml、８．６１mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、２．７０ｇ、８．００mmol）の混合物を室温で２日間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを酢酸エチルで抽出した。有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（２→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミ体のＦｍｏｃ−５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（２０８mg、収率４３％）をオフホワイトの泡状物として得た。HRMS (FAB):  C29H30NO4 (M+H) 計算値 456.2175; 実測値: 456.2184
【０４３９】
実施例１８
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−フェニルピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｐｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０４４０】
【化１８５】
0003938690.tif 000152
【０４４１】
無水ジオキサン（１２０mL）中のヨードベンゼン（６．３７ｇ、３．５mL、３１．２mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（１０．３２ｇ、９．３mL、７２．２mmol、２．３当量）及びナトリウムtert−ブトキシド（８．０ｇ、８３．３mmol、２．７当量）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９１mg、０．１mmol）及びトリ−ｏ−トリルホスフィン（１８０mg、０．５９１mmol）を加えた。反応を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、褐色の油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５〜７５／２５）により精製して、純粋な生成物を僅かに黄色の固体（６．０８ｇ、８９％）として得た。1H NMR (CDCl3), 7.25 (ddt, 2H), 6.95 (dd, 2H), 6.84 (t, 1H), 4.00 (s, 4H), 3.32 (t, 4H) and 1.84 (t, 4H); MS (エレクトロスプレー) m/e 220 (M+H), C13H17NO2計算値, 219
【０４４２】
工程２：
【０４４３】
【化１８６】
0003938690.tif 000153
【０４４４】
アセトン（１００mL）中のケタール（３．２２ｇ、１５．１６mmol）の溶液に、６N塩酸（５０mL）を加え、反応を還流下で一晩加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃに取り、６NＮａＯＨ水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８０／２０→６０／４０）により精製して、生成物を黄色の油状物（２．５８ｇ、９７％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 176 (M+H)+, C11H13NO計算値, 175
【０４４５】
工程３：
【０４４６】
【化１８７】
0003938690.tif 000154
【０４４７】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（７５mL）と水（２５mL）中のケトン（２．５３ｇ、１４．４６mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（１２．９ｇ、１３４．３mmol、９当量）及びシアン化カリウム（２．１１ｇ、３２．５mmol、２当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を真空下で濃縮し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃ（４×）で抽出した。合わせた有機抽出物を水で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、分光学的に純粋なヒダントインを白色の固体（３．３６ｇ、収率９５％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 246 (M+H), C13H15N3O2計算値, 245
【０４４８】
工程４：
【０４４９】
【化１８８】
0003938690.tif 000155
【０４５０】
ヒダントイン（３．３６ｇ）をＮａＯＨ水溶液（６N、１００mL）に懸濁し、１３０℃で２〜３日間加熱した。加水分解が完了した（ＨＰＬＣ）とき、反応混合物を濃ＨＣｌにより僅かに酸性（pH約６）に中和した。得られたスラリーを濾過し、水で洗浄し、乾燥させて、４−アミノ−１−フェニルピペリジン−４−カルボン酸（ＡＰＰＣ）を白色の固体（５．２６ｇ、収率＞１００％、湿潤、無機塩により汚染されている）として得て、それはＨＰＬＣによると単一ピークを示し、それを次の工程に直接使用した。MS (エレクトロスプレー) m/e 221 (M+H), C12H16N2O2計算値, 220
【０４５１】
工程５：
【０４５２】
【化１８９】
0003938690.tif 000156
【０４５３】
最後の工程の粗アミノ酸ＡＰＰＣをジオキサン（８０mL）及び１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（４０mL）に懸濁し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（５．３ｇ、２０．５７mmol、１．５当量）で処理し、一晩激しく撹拌した。次に反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６NＨＣｌにより僅かに酸性（pH６）に中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させた。溶媒を除去して粗生成物を得て、それをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋なＡＰＰＣ（４．９１ｇ、２工程の合計収率８１％）を得た。1H NMR (DMSO-d6), 7.88 (d, 2H), 7.74 (d, 2H), 7.19-7.42 (m, 8H), 4.20-4.31 (m, 3H); HRMS m/z 465.1788, C27H26N2O4Na計算値, 465.1791
【０４５４】
実施例１９
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０４５５】
【化１９０】
0003938690.tif 000157
【０４５６】
無水ジオキサン（４０mL）中の４−ヨードトルエン（２．１２ｇ、９．７mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（２．８mL、３．１２ｇ、２１．８２mmol、２．２当量）及びナトリウムtert−ブトキシド（２．６ｇ、２７．０８mmol、２．８当量）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４４．４mg、０．０４８５mmol）及びトリ−ｏ−トリルホスフィン（５９．０mg、０．１９４mmol）を加えた。反応を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、褐色の油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５〜７５／２５）により精製して、純粋な生成物を僅かに黄色の固体（１．９３７ｇ、８５％）として得た。1H NMR (CDCl3), 7.06 (d, 2H), 6.87 (d, 2H), 3.99 (s, 4H), 3.26 (t, 4H), 2.26 (s, 3H)及び1.85 (t, 4H)
【０４５７】
工程２：
【０４５８】
【化１９１】
0003938690.tif 000158
【０４５９】
アセトン（５０mL）中のケタール（１．５８ｇ、６．７９mmol）の溶液に、６N塩酸（２５mL）を加え、反応を還流下で一晩加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃに取り、６NＮａＯＨ水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、生成物を黄色の油状物（１．２７ｇ、９８％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 190 (M+H), C12H15NO計算値, 189
【０４６０】
工程３：
【０４６１】
【化１９２】
0003938690.tif 000159
【０４６２】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（６０mL）と水（２０mL）中のケトン（１．１７ｇ、６．１８mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（４．７４ｇ、４９．４４mmol、８当量）及びシアン化カリウム（１．０１ｇ、１５．５４mmol、２．５当量）を加えた。混合物を９０℃で２２時間加熱した。冷却した反応混合物を真空下で濃縮し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃ（４×）で抽出した。合わせた有機抽出物を水で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、分光学的に純粋なヒダントインを白色の固体（１．５５４ｇ、収率９７％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 260 (M+H)+, C14H17N3O2計算値, 259
【０４６３】
工程４：
【０４６４】
【化１９３】
0003938690.tif 000160
【０４６５】
ヒダントイン（１．５０２ｇ）をＮａＯＨ水溶液（６N、４０mL）に懸濁し、１３０℃で４日間加熱した。加水分解が完了した（ＨＰＬＣ）とき、反応混合物を濃ＨＣｌにより僅かに酸性（pH約６）に中和した。得られたスラリーを濾過し、水で洗浄し、乾燥させて、４−アミノ−１−（４−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＭｅＡＰＰＣ）を白色の固体（２．１０ｇ、収率＞１００％、湿潤、無機塩により汚染されている）として得て、それはＨＰＬＣによると単一ピークを示し、それを次の工程に直接使用した。MS (エレクトロスプレー) m/e 235 (M+H), C13H18N2O2計算値, 234
【０４６６】
工程５：
【０４６７】
【化１９４】
0003938690.tif 000161
【０４６８】
最後の工程の粗アミノ酸４−ＭｅＡＰＰＣをジオキサン（８０mL）及び１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（４０mL）に懸濁し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（２．２ｇ、８．５９mmol、１．５当量）で処理し、一晩激しく撹拌した。次に反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６NＨＣｌにより僅かに酸性（pH６）に中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させた。溶媒を除去して粗生成物を得て、それをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋なＦｍｏｃ−４−ＭｅＡＰＰＣ（２．１６ｇ、２工程の合計収率８２％）を得た。1H NMR (DMSO-d6): 7.88 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.39 (t, 2H), 7.30 (td, 2H), 6.99 (d, 2H), 6.82 (d, 2H), 2.18 (s, 3H);  MS (エレクトロスプレー) m/e 457 (M+H), C28H28N2O4計算値, 456
【０４６９】
実施例２０
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（４−クロロフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０４７０】
【化１９５】
0003938690.tif 000162
【０４７１】
無水ジオキサン（４０mL）中の１−クロロ−４−ヨードベンゼン（２．３８ｇ、１０．０mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（３．１mL、３．４４ｇ、２４．０mmol、２．４当量）及びナトリウムtert−ブトキシド（２．６８ｇ、２８．０mmol、２．８当量）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４５．５mg、０．０４９７mmol）及びトリ−ｏ−トリルホスフィン（６１mg、０．２０mmol）を加えた。反応を９０℃で９時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、褐色の油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５〜７５／２５）により精製して、純粋な生成物を僅かに黄色の固体（２．１７ｇ、８６％）として得た。1H NMR (CDCl3), 7.18 (dt, 2H), 6.85 (dt, 2H), 3.98 (s, 4H), 3.28 (t, 4H)及び1.82 (t, 4H)
【０４７２】
工程２：
【０４７３】
【化１９６】
0003938690.tif 000163
【０４７４】
アセトン（７５mL）中のケタール（２．１２３ｇ、８．３９mmol）の溶液に、６N塩酸（３０mL）を加え、反応を還流下で一晩加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃに取り、６NＮａＯＨ水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７０／３０）により精製して、生成物を黄色の固体（１．５１５ｇ、８６％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 210 (M+H), C11H12ClNO計算値, 209
【０４７５】
工程３：
【０４７６】
【化１９７】
0003938690.tif 000164
【０４７７】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（７５mL）と水（２５mL）中のケトン（１．４６５ｇ、６．９８６mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（５．３６ｇ、５５．８８mmol、８当量）及びシアン化カリウム（１．１３５ｇ、１７．４６mmol、２．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を真空下で濃縮し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃ（４×）で抽出した。合わせた有機抽出物を水で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、分光学的に純粋なヒダントインを白色の固体（１．８１７ｇ、収率９３％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 280 (M+H), C13H14ClN3O2計算値, 279
【０４７８】
工程４：
【０４７９】
【化１９８】
0003938690.tif 000165
【０４８０】
ヒダントイン（１．７６８ｇ）をＮａＯＨ水溶液（６N、５０mL）に懸濁し、１３０℃で４日間加熱した。加水分解が完了した（ＨＰＬＣ）とき、反応混合物を濃ＨＣｌにより僅かに酸性（pH約６）に中和した。得られたスラリーを濾過し、水で洗浄し、乾燥させて、４−アミノ−１−（４−クロロフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＣｌＡＰＰＣ）を白色の固体（２．０５ｇ、収率＞１００％、湿潤、無機塩により汚染されている）として得て、それはＨＰＬＣによると単一ピークを示し、それを次の工程に直接使用した。MS (エレクトロスプレー) m/e 253 (M-H), C12H15ClN2O2計算値, 254
【０４８１】
工程５：
【０４８２】
【化１９９】
0003938690.tif 000166
【０４８３】
最後の工程の粗アミノ酸４−ＣｌＡＰＰＣをジオキサン（１００mL）及び１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（５０mL）に懸濁し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（２．０ｇ、７．７５mmol、１．２当量）で処理し、一晩激しく撹拌した。次に反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６NＨＣｌにより僅かに酸性（pH６）に中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させた。溶媒を除去して粗生成物を得て、それをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋なＦｍｏｃ−４−ＣｌＡＰＰＣ（１．１８ｇ、２工程の合計収率８１％）を得た。1H NMR (DMSO-d6): 7.87 (d, 2H), 7.71 (d, 2H), 7.39 (td, 2H), 7.30 (td, 2H), 7.20 (d, 2H), 6.92 (d, 2H), 3.44 (d, 2H), 2.93 (t, 2H);  MS (エレクトロスプレー) m/e 477 (M+H), C27H25N2O4計算値, 476
【０４８４】
実施例２１
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（４−フェノキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＰｈＯＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０４８５】
【化２００】
0003938690.tif 000167
【０４８６】
無水ジオキサン（４０mL）中の１−ヨード−４−フェノキシベンゼン（３．１５ｇ、１０．６mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（３．３mL、３．６６ｇ、２５．６mmol、２．４当量）及びナトリウムtert−ブトキシド（２．８５ｇ、２９．７mmol、２．８当量）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４８．５mg、０．０５３mmol）及びトリ−ｏ−トリルホスフィン（６４mg、０．４mmol）を加えた。反応を９０℃で９時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、褐色の油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５〜８０／２０）により精製して、純粋な生成物を僅かに黄色の固体（２．８０５ｇ、８５％）として得た。1H NMR (CDCl3), 7.26-7.32 (m, 2H), 7.03 (t, 1H), 6.92-6.97 (m, 6H), 4.00 (s, 4H), 3.26 (t, 4H), 1.86 (t, 4H)
【０４８７】
工程２：
【０４８８】
【化２０１】
0003938690.tif 000168
【０４８９】
アセトン（９０mL）中のケタール（２．７５５ｇ、８．８６mmol）の溶液に、６N塩酸（４５mL）を加え、反応を還流下で一晩加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、６NＮａＯＨ水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、粗生成物を得て、それをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０〜７０／３０）により精製して、生成物を黄色の油状物（２．２１ｇ、９３％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 268 (M+H), C17H17ClNO2計算値, 267
【０４９０】
工程３：
【０４９１】
【化２０２】
0003938690.tif 000169
【０４９２】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（８０mL）と水（２５mL）中のケトン（２．０１ｇ、７．５２mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（５．７８ｇ、６０．０mmol、８当量）及びシアン化カリウム（１．２２ｇ、１８．８０mmol、２．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を真空下で濃縮し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃ（４×）で抽出した。合わせた有機抽出物を水で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、分光学的に純粋なヒダントインを白色の固体（２．３４ｇ、収率９５％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 338 (M+H), C19H19N3O3計算値, 337
【０４９３】
工程４：
【０４９４】
【化２０３】
0003938690.tif 000170
【０４９５】
ヒダントイン（２．２８ｇ、６．７６mmol）をＮａＯＨ水溶液（６N、６０mL）に懸濁し、１３０℃で４日間加熱した。加水分解が完了した（ＨＰＬＣ）とき、反応混合物を濃ＨＣｌにより僅かに酸性（pH約６）に中和した。得られたスラリーを濾過し、水で洗浄し、乾燥させて、４−アミノ−１−（４−フェノキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＰｈＯＡＰＰＣ）を白色の固体（２．５３ｇ、収率＞１００％、湿潤、無機塩により汚染されている）として得て、それはＨＰＬＣによると単一ピークを示し、それを次の工程に直接使用した。MS (エレクトロスプレー) m/e 313 (M+H), C18H20N2O3計算値, 312
【０４９６】
工程５：
【０４９７】
【化２０４】
0003938690.tif 000171
【０４９８】
最後の工程の粗４−ＰｈＯＡＰＰＣをジオキサン（５０Ｌ）と１０％Ｎａ2ＣＯ3水溶液（５０ml）中のＦｍｏｃ−Ｃｌ（２．６ｇ、１．２５当量）で処理し、一晩激しく撹拌した。反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６NＨＣｌにより僅かに酸性（pH６）に中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させた。溶媒を除去して粗生成物を得て、それをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋な４−ＰｈＯＡＰＰＣ（２．１８ｇ、２工程の合計収率６０％）を得た。1H NMR (DMSO-d6): 7.87 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.38 (t, 2H), 7.30 (td, 4H), 7.02 (dt, 1H), 6.86-6.96 (m, 6H), 3.35 (m, 2H), 2.94 (t, 2H); MS (エレクトロスプレー) m/e 535 (M+H), C33H30N2O5計算値, 534
【０４９９】
実施例２２
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（２−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−２−ＭｅＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０５００】
【化２０５】
0003938690.tif 000172
【０５０１】
無水ジオキサン（８０mL）中の２−ヨードトルエン（４．３６ｇ、２．５mL、２０．０mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（６．８８ｇ、６．２mL、４８．１mmol、２．４当量）及びナトリウムtert−ブトキシド（５．３ｇ、５５．２mmol、２．８当量）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９１mg、０．１mmol）及びトリ−ｏ−トリルホスフィン（１２２mg、０．４mmol）を加えた。反応を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、褐色の油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５〜７５／２５）により精製して、純粋な生成物を僅かに黄色の固体（２．６６ｇ、５７％）として得た。1H NMR (CDCl3), 7.12-7.18 (m, 2H), 6.94-7.06 (m, 2H), 4.01 (s, 4H), 2.98 (t, 4H)及び1.88 (t, 4H)
【０５０２】
工程２：
【０５０３】
【化２０６】
0003938690.tif 000173
【０５０４】
アセトン（７０mL）中のケタール（２．６６ｇ、１１．４mmol）の溶液に、６N塩酸（３５mL）を加え、反応を８５℃で一晩加熱した。得られた反応を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ（6N）水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０〜７０／３０）により精製して、生成物を黄色の油状物（２．０４ｇ、９５％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 190 (M+H), C12H15NO計算値, 189
【０５０５】
工程３：
【０５０６】
【化２０７】
0003938690.tif 000174
【０５０７】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（６０mL）と水（２０mL）中のケトン（１．５４ｇ、８．１５mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（４．６９ｇ、４８．９mmol、６当量）及びシアン化カリウム（８００ｇ、１２．２mmol、１．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（３００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（２．０１ｇ、収率９５％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 260 (M+H), C14H17N3O2計算値, 259
【０５０８】
工程４：
【０５０９】
【化２０８】
0003938690.tif 000175
【０５１０】
無水ＴＨＦ（２５mL）中のヒダントイン（１．０７ｇ、４．１３mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（２．２５ｇ、１０．３２mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（０．６３mL、４６０mg、４．５４mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（３６mg、０．２９mmol）を連続して加えた。添加の約１５分後、反応は明澄な黄色の溶液になり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り、１NＨＣｌ（３×３０mL）、飽和Ｎａ2ＣＯ3水溶液（２×３０mL）及びブライン（２×３０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（１．７１ｇ、９０％）として得た。MS (エレクトロスプレー) m/e 460 (M+H), C24H33N3O6計算値, 459
【０５１１】
工程５：
【０５１２】
【化２０９】
0003938690.tif 000176
【０５１３】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（１．７１ｇ、３．７２mmol）をＤＭＥ（２３mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（３３mL、３３mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、相当に明澄な混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、４−アミノ−１−（２−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（２−ＭｅＡＰＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。次にこの溶液（３０mL）を１，４−ジオキサン（３０mL）で希釈し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（１．２８ｇ、４．９６mmol、１．３当量）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してジオキサンを除去し、1NＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（１．０９ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率６４％）を得た。1H NMR (DMSO-d6): 7.87 (d, 2H), 7.74 (d, 2H), 7.40 (td, 2H), 7.31 (td, 2H), 7.12 (m, 2H), 6.97 (d, 1H), 6.92 (td, 1H), 2.72-2.88 (m, 4H) and 2.22 (s, 3H); MS (エレクトロスプレー) m/e 457 (M+H), C28H28N2O4計算値, 456
【０５１４】
実施例２３
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（２−イソプロピルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−２−ｉＰｒＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０５１５】
【化２１０】
0003938690.tif 000177
【０５１６】
無水ジオキサン（１６０mL）中の１−ヨード−２−イソプロピルベンゼン（１０．０ｇ、４０．７mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（１２．０mL、１３．３ｇ、９３．０mmol、２．３当量）及びナトリウムtert−ブトキシド（１０．０ｇ、１０４．２mmol、２．６当量）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１８０mg、０．１９７mmol）及びトリ−ｏ−トリルホスフィン（２４４mg、０．８０mmol）を加え、反応を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去し、水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、褐色の油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７５／２５）により精製して、純粋な生成物を僅かに黄色の固体（３．６１ｇ、収率３５％）として得た。MS m/z 262 (M+H), C16H23NO2計算値, 261
【０５１７】
工程２：
【０５１８】
【化２１１】
0003938690.tif 000178
【０５１９】
アセトン（９０mL）中のケタール（３．２４ｇ、１２．４mmol）の溶液に、６N塩酸（４５mL）を加え、反応を還流下で一晩加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ（６N）水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、生成物を黄色の油状物（２．４２ｇ、８９％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.27 (m, 1H), 7.04-7.19 (m, 3H), 3.58 (m, 1H), 3.20 (t, 4H), 2.60 (t, 4H)及び1.25 (d, 6H); MS m/z 218 (M+H), C14H19NO計算値, 217
【０５２０】
工程３：
【０５２１】
【化２１２】
0003938690.tif 000179
【０５２２】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（９０mL）と水（２０mL）中のケトン（２．３０ｇ、１０．６mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（８．１ｇ、８４．３mmol、８当量）及びシアン化カリウム（１．７２ｇ、２６．５mmol、２．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（２．７８ｇ、収率９１％）として得た。MS m/z 288 (M+H),C16H21N3O2計算値, 287
【０５２３】
工程４：
【０５２４】
【化２１３】
0003938690.tif 000180
【０５２５】
無水ＴＨＦ（１００mL）中のヒダントイン（２．７４ｇ、９．５４mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（５．２ｇ、２４．２４mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（１．５mL、１．０７ｇ、１０．５mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（４６mg、０．２９mmol）を連続して加えた。添加の約１５分後、反応は明澄な黄色の溶液になり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り、ブライン（３×３０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（４．３９ｇ、収率９４％）として得た。MS m/z 488 (M+H), C26H37N3O6計算値, 487
【０５２６】
工程５：
【０５２７】
【化２１４】
0003938690.tif 000181
【０５２８】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（２．３４ｇ、４．８mmol）をＤＭＥ（３０mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（４５mL、４５mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、相当に明澄な混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、４−アミノ−１−（２−イソプロピルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（２−ｉＰｒＡＰＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。次にこの溶液（約４５mL）を１，４−ジオキサン（４５mL）で希釈し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（１．７８ｇ、６．８９mmol、１．５当量）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してジオキサンを除去し、1NＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（１．４６ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率６３％）を得た。HRMS m/z 507.2263, C30H32N2O4Na計算値, 507.2260
【０５２９】
実施例２４
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（３−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−２−ＭｅＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０５３０】
【化２１５】
0003938690.tif 000182
【０５３１】
無水ジオキサン（８０mL）中の３−ヨードトルエン（４．３６ｇ、２．６mL、２０．０mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（６．８８ｇ、６．２mL、４８．１mmol、２．４当量）及びナトリウムtert−ブトキシド（５．３ｇ、５５．２mmol、２．８当量）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９１mg、０．１mmol）及びトリ−ｏ−トリルホスフィン（１２２mg、０．４mmol）を加えた。反応を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、褐色の油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５〜７５／２５）により精製して、純粋な生成物を僅かに黄色の固体（３．２１ｇ、６９％）として得た。
【０５３２】
工程２：
【０５３３】
【化２１６】
0003938690.tif 000183
【０５３４】
アセトン（２０mL）中のケタール（１．２５ｇ、５．３６mmol）の溶液に、６N塩酸（１０mL）を加え、反応を還流下で一晩加熱した。得られた反応を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ（６N）水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０〜７０／３０）により精製して、生成物を黄色の油状物（８４３mg、収率８３％）として得た。MS m/z 190 (M+H), C12H15NO計算値, 189
【０５３５】
工程３：
【０５３６】
【化２１７】
0003938690.tif 000184
【０５３７】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（４５mL）と水（１５mL）中のケトン（７６３ｇ、４．０３mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（３．０９ｇ、３２．２１mmol、８当量）及びシアン化カリウム（６７５mg、１０．３８mmol、２．５当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（２００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（９３０mg、収率８９％）として得た。MS m/z 260 (M+H), C14H17N3O2計算値, 259
【０５３８】
工程４：
【０５３９】
【化２１８】
0003938690.tif 000185
【０５４０】
無水ＴＨＦ（２２mL）中のヒダントイン（７８０mg、３．０１２mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（１．６４ｇ、７．５２mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（０．４２mL、３０５mg、３．０１mmol、１．０当量）及びＤＭＡＰ（２０mg、０．１６４mmol）を連続して加えた。添加の約５分後、反応は明澄な黄色の溶液になり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り、ブライン（３×３０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（１．３７ｇ、定量収率）として得た。HRMS m/z 482.2261 (M+Na), C24H33N3O6Na計算値, 482.2267
【０５４１】
工程５：
【０５４２】
【化２１９】
0003938690.tif 000186
【０５４３】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（１．２９ｇ、２．８１８mmol）をＤＭＥ（２０mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（２５mL、２５mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、相当に明澄な混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、４−アミノ−１−（３−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（３−ＭｅＡＰＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。次にこの溶液（３０mL）を１，４−ジオキサン（３０mL）で希釈し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（１．４６mg、５．６５mmol、２．０当量）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してジオキサンを除去し、1NＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（１．００２ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率７８％）を得た。HRMS m/z 479.1940 (M+Na), C28H28N2O4Na計算値, 479.1947
【０５４４】
実施例２５
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（３−メトキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０５４５】
【化２２０】
0003938690.tif 000187
【０５４６】
無水ジオキサン（８０mL）中の３−ヨードアニソール（４．６８ｇ、２．４mL、２０．０mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（６．２mL、６．８８ｇ、４８．１mmol、２．４当量）及びナトリウムtert−ブトキシド（５．３ｇ、５５．２mmol、２．８当量）の溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９１mg、０．１mmol）及びトリ−ｏ−トリルホスフィン（１２２mg、０．４mmol）を加え、反応を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮して、褐色の油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５〜７５／２５）により精製して、純粋な生成物を僅かに黄色の固体（３．１０ｇ、収率６２％）として得た。MS m/z (M+H), 250 (M+H), C14H19NO3計算値, 249
【０５４７】
工程２：
【０５４８】
【化２２１】
0003938690.tif 000188
【０５４９】
アセトン（９０mL）中のケタール（３．１０ｇ、１２．４５mmol）の溶液に、６N塩酸（４５mL）を加え、反応を還流下で一晩加熱した。得られた反応を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ（６N）水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０〜７０／３０）により精製して、生成物を黄色の油状物（２．５３ｇ、収率９９％）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.20 (m, 1H), 6.58 (d, 1H), 6.39-6.56 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.59 (m, 4H)及び2.58 (m, 4H)
【０５５０】
工程３：
【０５５１】
【化２２２】
0003938690.tif 000189
【０５５２】
耐圧ガラス瓶中、エタノール（６０mL）と水（２０mL）中のケトン（１．８１ｇ、８．８２mmol）の溶液に、炭酸アンモニウム（６．７７ｇ、７０．５２mmol、８当量）及びシアン化カリウム（１．１４ｇ、１７．６mmol、２．０当量）を加えた。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（２００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿物を吸引濾過し、水で十分に洗浄し、乾燥させて、ヒダントインを白色の固体（２．２３ｇ、収率９２％）として得た。MS m/z 276 (M+H), C14H17N3O3計算値, 275
【０５５３】
工程４：
【０５５４】
【化２２３】
0003938690.tif 000190
【０５５５】
無水ＴＨＦ（５０mL）中のヒダントイン（１．１０ｇ、４．００mmol）の懸濁液に、二炭酸ジ−tert−ブチル（２．１８ｇ、１０．０mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（０．６２mL、４４５mg、４．４mmol、１．１当量）及びＤＭＡＰ（２０mg、０．１６４mmol）を連続して加えた。添加の約１５分後、反応は明澄な黄色の溶液になり、それを室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して固体を得て、それを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り、ブライン（３×３０mL）で洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。明黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純粋なビス−Ｂｏｃヒダントインを白色の固体（１．９０ｇ、定量収率）として得た。1H NMR (CDCl3): 7.16 (t, 1H), 6.57 (d, 1H), 6.24 (s, 1H), 6. 19 (d, 1H), 3.77 (s, 3H), 1.58 (s, 9H), 1.42 (s, 9H); MS m/z 476 (M+H), C24H33N3O7計算値, 475
【０５５６】
工程５：
【０５５７】
【化２２４】
0003938690.tif 000191
【０５５８】
ビス−Ｂｏｃヒダントイン（１．０６ｇ、２．２３mmol）をＤＭＥ（２０mL）に溶解して、明澄な溶液を得た。この溶液に１NＮａＯＨ（２０mL、２０mmol）を加え、反応を室温で一晩撹拌して、相当に明澄な混合物を得た。ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。反応混合物を減圧下で濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ2Ｏで抽出した。精製をしないで、４−アミノ−１−（３−メトキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（３−ＭｅＯＡＰＰＣ）を含有する得られた水層を、６NＨＣｌで処理してpHを１１〜１２に調整した。次にこの溶液（３５mL）を１，４−ジオキサン（３５mL）で希釈し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（７５５mg、２．９３mmol、１．３当量）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してジオキサンを除去し、1NＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ）により精製して、純粋な生成物を白色の固体（６６８mg、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率６３％）を得た。1H NMR (CDCl3): 7.83 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.41 (td, 2H), 7.34 (dt, 2H), 7.16 (t, 1H), 6.52 (d, 1H), 6.42 (s, 1H), 6.36 (d, 1H), 4.25 (m, 3H), 3.68 (s, 3H), 3.23-3.40 (m, 2H), 2.96 (t, 2H)及び1.86-2.18 (m, 4H); HRMS m/z 495.1901 (M+Na), C28H28N2O5Na計算値, 495.1896
【０５５９】
実施例２６
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｃｈｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０５６０】
【化２２５】
0003938690.tif 000192
【０５６１】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の４−シクロヘキシルシクロヘキサノン（３．００ｇ、１６．６mmol）、シアン化カリウム（１．６３ｇ、２５．０mmol）、炭酸アンモニウム（９．５９ｇ、９９．８mmol）、エタノール（７５ml）及び水（１５ml）の混合物を、８０℃の油浴で１５時間加熱した。室温に冷却した後、白色のスラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、自然乾燥させて、ヒダントイン（６．１０ｇ、依然として湿潤、収率＞１００％）を白色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.52 (1H, 広帯域, NH), 8.43 (1H, 広帯域 s, NH), 0.80-1.80 (20H, m); LRMS (APCI): C14H22N2O2, 計算値 250; 実測値: 249 (M-H), 251 (M+H)
【０５６２】
工程２：
【０５６３】
【化２２６】
0003938690.tif 000193
【０５６４】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中のヒダントイン（１．３９ｇ、５．５５mmol）及び６N水酸化ナトリウム溶液（５０ml）の混合物を１３０℃の油浴で２日間加熱した。反応混合物を氷浴で冷却し、濃塩酸を使用して約pH７に中和した。白色のスラリーを濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いして、粗１−アミノ−４−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸（４８．３ｇ、湿潤、無機塩を含有、収率＞１００％）を得た。LRMS (エレクトロスプレー): C13H23NO2, 計算値 225; 実測値: 226 (M+H)
【０５６５】
工程３：
【０５６６】
【化２２７】
0003938690.tif 000194
【０５６７】
アセトニトリル（７５ml）と水（７５ml）中の粗1−アミノ−４−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸（４８．３ｇ、理論値５．５５mmol）、トリエチルアミン（１．０ml、７．１７mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、２．４３ｇ、７．２０mmol）の混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを塩化メチレンで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（1→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−trans−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸（２５０mg、２工程の収率１０％）を得た。HRMS (FAB): C28H34NO4 (M+H) 計算値 448.2488; 実測値: 448.2497
【０５６８】
実施例２７
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４，４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｄｐｃ−ＯＨ）の調製
【０５６９】
工程１：
【０５７０】
【化２２８】
0003938690.tif 000195
【０５７１】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の４，４−ジフェニルシクロヘキサノン（Freeman, P.K. et. al. J. Org. Chem. 1989, 54, 782-789の手順に従って４，４−ジフェニルシクロヘキセノンの水素化により調製）（１．５５ｇ、６．１９mmol）、シアン化カリウム（０．６５ｇ、９．９７mmol）、炭酸アンモニウム（３．６０ｇ、３７．５mmol）、エタノール（４８ml）及び水（１２ml）の混合物を８０℃の油浴で２４時間加熱した。室温に冷却した後、白色のスラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、自然乾燥させて、ヒダントイン（１．８９ｇ、収率９５％）を白色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.57 (1H, 広帯域, NH), 8.59 (1H, 広帯域 s, NH), 7.00-7.50 (10H, m, フェニル); LRMS (エレクトロスプレー): C20H20N2O2, 計算値 320; 実測値: 319 (M-H)
【０５７２】
工程２：
【０５７３】
【化２２９】
0003938690.tif 000196
【０５７４】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中のヒダントイン（１．８８ｇ、５．８７mmol）、水酸化バリウム一水和物（５．６０ｇ、２９．６mmol）及び水（１００ml、超希薄）の混合物を、１０５℃の油浴で２日間加熱した。更なる水酸化バリウム一水和物（５．６０ｇ、２９．６mmol）を加え、混合物を１０５℃の油浴で更に２４時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH３に酸性化した。懸濁液を沸騰水浴中で２時間撹拌し、室温に冷却した。白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約３０mlに濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、真空下で一晩乾燥させて、粗１−アミノ−４，４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（０．５２ｇ、収率３０％）を白色の固体として得た。LRMS (エレクトロスプレー): C19H21NO2, 計算値 295; 実測値: 294 (M-H), 296 (M+H)
【０５７５】
工程３：
【０５７６】
【化２３０】
0003938690.tif 000197
【０５７７】
アセトニトリル（２５ml）と水（２５ml）中の粗１−アミノ−４，４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（５１０mg、１．７３mmol）、トリエチルアミン（０．３７ml、２．６５mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、８８０mg、２．６１mmol）の混合物を室温で一晩撹拌した。反応のＴＬＣ分析は、出発材料であるアミノ酸の存在を示した。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（２００mg）及びアセトニトリル（５ml）を加え、混合物を室温で更に２４時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のアセトニトリルを除去し、１０％クエン酸水溶液でpH約３に酸性化し、白色のエマルションを酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、それをカラムクロマトグラフィー（１→４→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４，４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（３５０mg、収率３９％）を白色の固体として得た。HRMS (FAB): C34H32NO4 (M+H) 計算値 518.2331; 実測値: 518.231
【０５７８】
実施例２８
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−trans−ｔ−ブチルシクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｂｃ−ＯＨ）の調製
工程１：
【０５７９】
【化２３１】
0003938690.tif 000198
【０５８０】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中の４−ｔ−ブチルシクロヘキサノン（２．００ｇ、１３．０mmol）、シアン化カリウム（１．２７ｇ、１９．５mmol）、炭酸アンモニウム（７．４８ｇ、７７．８mmol）、エタノール（６０ml）及び水（１２ml）の混合物を、８０℃の油浴で１５時間加熱した。室温に冷却した後、白色のスラリーを氷水に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過して、ヒダントイン（２．７８ｇ、収率９６％）を白色の固体として得て、それを粗原料として次の工程に使用した。1H NMR (DMSO-d6) δ 10.52 (1H, 広帯域, NH), 8.50 (1H, 広帯域 s, NH), 0.81 (9H, s, t-Bu)
【０５８１】
工程２：
【０５８２】
【化２３２】
0003938690.tif 000199
【０５８３】
密閉した厚肉耐圧フラスコ中のヒダントイン（２．７８ｇ、１２．４mmol）、水酸化バリウム一水和物（１１．７４ｇ、６２．０mmol）及び水（５０ml）の混合物を、１２０℃の油浴で２日間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、激しく撹拌しながら、４N硫酸を使用して約pH３に酸性化した。懸濁液を沸騰水浴中で１時間撹拌し、室温に冷却した。白色の懸濁液を濾過し、沈殿物を水ですすぎ洗いした。合わせた濾液と洗液を真空下で約３０mlに濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して白色の沈殿物を得て、それを濾過し、水で洗浄し、真空下で一晩乾燥させて、１−アミノ−４−trans−ｔ−ブチルシクロヘキサン−１−カルボン酸（２．１０ｇ、収率８５％）を白色の固体として得た。
【０５８４】
工程３：
【０５８５】
【化２３３】
0003938690.tif 000200
【０５８６】
ジオキサン（１５０ml）と１０％炭酸ナトリウム溶液（１２０ml）中の粗１−アミノ−４−trans−ｔ−ブチルシクロヘキシル−１−カルボン酸（２．１０ｇ、１０．５４mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカルボナート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、６．３３ｇ、７．２０mmol）の混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して大部分のジオキサンを除去し、３NＨＣｌでpH約３に酸性化し、白色のエマルションを塩化メチレンで２回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。濾過し、濃縮して粗原料を得て、それをカラムクロマトグラフィー（１→４→５％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−trans−ｔ−ブチルシクロヘキサン−１−カルボン酸（１．４２ｇ、収率３２％）を得た。HRMS (FAB): C26H32NO4 (M+H) 計算値 422.2331; 実測値: 422.23
【０５８７】
実施例２９
Ｆｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂の調製
ベンズヒドリルアミンコポリスチレン−１％ジビニルベンゼン架橋樹脂（１０．０ｇ、９．３当量、１００〜２００ASTMメッシュ、Advanced ChemTech）をＣＨ2Ｃｌ2  １００mL中で膨張させ、濾過し、それぞれ１００mlのＣＨ2Ｃｌ2、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2（２回）、ＣＨ2Ｃｌ2（２回）で連続して洗浄した。樹脂を、２５％ＤＭＦ／ＣＨ2Ｃｌ2  １００mL中のｐ−〔（Ｒ，Ｓ）−α−〔１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシホルムアミド〕−２，４−ジメトキシベンジル〕フェノキシ酢酸（Ｆｍｏｃ−リンカー）（７．０１ｇ、１３．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．１６ｇ、１６．０mmol）及びジイソプロピルカルボジイミド（２．０４ml、１３．０mmol）により室温で２４時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ１００mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール（２回）、ＤＭＦ及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。カイザーニンヒドリン分析は陰性であった。樹脂を真空下で乾燥させて、Ｆｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂１６．１２ｇを得た。この樹脂の一部分（３．５mg）をＦｍｏｃ脱保護に付し、定量ＵＶ分析は、０．５６mmol/gのローディングを示した。
【０５８８】
実施例３０
Ｂｕ−Ｈｉｓ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2の調製
【０５８９】
【化２３４】
0003938690.tif 000201
【０５９０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）（３００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、Ｂｕ−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０５９１】
Ｂｕ−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３０mgを得た。
【０５９２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５２mg（３４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C38H50N12O6, 計算値： 770, 実測値： m/z (771 M+H)
【０５９３】
実施例３１
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０５９４】
【化２３５】
0003938690.tif 000202
【０５９５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０５９６】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４５mgを得た。
【０５９７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６１mg（３６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H60N10O6, 計算値： 849, 実測値： m/z (850 M+H)
【０５９８】
実施例３２
フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０５９９】
【化２３６】
0003938690.tif 000203
【０６００】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸（８２mg、０．６mmol）とＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）で処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０６０１】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５５mgを得た。
【０６０２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C49H58N10O6, 計算値： 883, 実測値： m/z (884 M+H)
【０６０３】
実施例３３
Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６０４】
【化２３７】
0003938690.tif 000204
【０６０５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）をそれぞれ用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ中のｎ−ブチルイソシアナート（５当量）で１２時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチルウレア−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５５０mgを得た。
【０６０６】
ブチルウレア−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３５mgを得た。
【０６０７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H61N11O6, 計算値： 864, 実測値： m/z (865 M+H)
【０６０８】
実施例３４
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ2の調製
【０６０９】
【化２３８】
0003938690.tif 000205
【０６１０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、４カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−テトラペプチド樹脂６００mgを得た。
【０６１１】
ペンチル−テトラペプチド樹脂をジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１１０mgを得た。
【０６１２】
この物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の粉末４０mg（２５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C44H57N9O5, 計算値： 792, 実測値： m/z (793 M+H)
【０６１３】
実施例３５
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６１４】
【化２３９】
0003938690.tif 000206
【０６１５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−２−Ｎａｌ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０６１６】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４５mgを得た。
【０６１７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６１mg（３６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C48H61N9O6, 計算値： 860, 実測値： m/z (861 M+H)
【０６１８】
実施例３６
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６１９】
【化２４０】
0003938690.tif 000207
【０６２０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酢酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０６２１】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４４mgを得た。
【０６２２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C47H59N9O6, 計算値： 846, 実測値： m/z (847 M+H)
【０６２３】
実施例３７
Ａｃ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６２４】
【化２４１】
0003938690.tif 000208
【０６２５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酢酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、Ａｃ−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０６２６】
Ａｃ−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５０mgを得た。
【０６２７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６２mg（３８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C45H55N9O6, 計算値： 818, 実測値： m/z (819 M+H)
【０６２８】
実施例３８
Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６２９】
【化２４２】
0003938690.tif 000209
【０６３０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ中のｎ−ブチルイソシアナート（５当量）で１２時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５５０mgを得た。
【０６３１】
ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３５mgを得た。
【０６３２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３．１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C48H62N10O6, 計算値： 875, 実測値： m/z (876 M+H)
【０６３３】
実施例３９
ベンゾイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６３４】
【化２４３】
0003938690.tif 000210
【０６３５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ中の無水安息香酸で１２時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ベンゾイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５７０mgを得た。
【０６３６】
ベンゾイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３０mgを得た。
【０６３７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５０mg（２８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C50H57N9O6, 計算値： 880, 実測値： m/z (881 M+H)
【０６３８】
実施例４０
３−カルボキシルプロパノイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６３９】
【化２４４】
0003938690.tif 000211
【０６４０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のコハク酸（７１mg、０．６mmol）とＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）で処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、３−カルボキシプロパノイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５５０mgを得た。
【０６４１】
３−カルボキシプロパノイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３６mgを得た。
【０６４２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５２mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C47H57N9O8, 計算値： 876, 実測値： m/z (877 M+H)
【０６４３】
実施例４１
フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６４４】
【化２４５】
0003938690.tif 000212
【０６４５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸（８２mg、０．６mmol）とＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）で処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０６４６】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３２mgを得た。
【０６４７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４９mg（２９％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C51H59N9O6, 計算値： 894, 実測値： m/z (895 M+H)
【０６４８】
実施例４２
Ｐｅｎｔａ−４−ＣｌＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６４９】
【化２４６】
0003938690.tif 000213
【０６５０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチルＰｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０６５１】
ペンチルＰｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４１mgを得た。
【０６５２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４５mg（２６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C46H59N10O6Cl, 計算値： 883, 実測値： m/z (884 M+H)
【０６５３】
実施例４３
Ｐｅｎｔａ−４−ＨＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６５４】
【化２４７】
0003938690.tif 000214
【０６５５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＨＯＡｐｃ（２８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０６５６】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５０mgを得た。
【０６５７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H60N10O7, 計算値： 865, 実測値： m/z (866 M+H)
【０６５８】
実施例４４
Ｐｅｎｔａ−４−ＭｅＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６５９】
【化２４８】
0003938690.tif 000215
【０６６０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＯＡｐｃ（３００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０６６１】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５２mgを得た。
【０６６２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５９mg（３３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C47H62N10O7, 計算値： 879, 実測値：880 m/z (M+H)
【０６６３】
実施例４５
Ｐｅｎｔａ−３−ＭｅＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６６４】
【化２４９】
0003938690.tif 000216
【０６６５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡｐｃ（３００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０６６６】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５２mgを得た。
【０６６７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５９mg（３３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C47H62N10O7, 計算値： 879, 実測値：880 m/z (M+H)
【０６６８】
実施例４６
Ｐｅｎｔａ−４−ＥｔＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６６９】
【化２５０】
0003938690.tif 000217
【０６７０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＥｔＯＡｐｃ（３２０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１５mgを得た。
【０６７１】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１６０mgを得た。
【０６７２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６３mg（３５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C48H64N10O7, 計算値： 893, 実測値：894 m/z (M+H)
【０６７３】
実施例４７
Ｐｅｎｔａ−４−ｉＰｒＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６７４】
【化２５１】
0003938690.tif 000218
【０６７５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ｉＰｒＯＡｐｃ（２８５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０６７６】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０６７７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４５mg（２６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C49H66N10O7, 計算値： 907, 実測値： m/z (908 M+H)
【０６７８】
実施例４８
Ｐｅｎｔａ−４−ＭｅＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６７９】
【化２５２】
0003938690.tif 000219
【０６８０】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡｐｃ（２８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５９０mgを得た。
【０６８１】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３９mgを得た。
【０６８２】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５１mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C47H62N10O6, 計算値： 863, 実測値： m/z (864 M+H)
【０６８３】
実施例４９
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｓａｒ−ＮＨ2
【０６８４】
【化２５３】
0003938690.tif 000220
【０６８５】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｓａｒ（１８７mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０６８６】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１７５mgを得た。
【０６８７】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６９mg（４０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C47H62N10O6, 計算値： 863, 実測値：864 m/z (M+H)
【０６８８】
実施例５０
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチル（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６８９】
【化２５４】
0003938690.tif 000221
【０６９０】
実施例２９の手順を使用して合成したＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７００mg、０．３８５mmol）を、プロトコール１で示したようにＤＩＣ／ＨＯＢＴカップリング条件を使用する固相合成に付し、洗浄を実施した。ＤＩＣ（５当量）、ＨＯＢＴ（２．５当量）をカップリング剤として、そしてＦｍｏｃ−アミノ酸（２．５当量）を使用して全てのアミノ酸カップリングを実施した。それぞれのペプチドカップリングの後、樹脂をプロトコール１に示した洗浄工程１〜６に付した。それぞれ１回のＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（２８６mg、０．９６mmol）、続くＦｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（４２１mg、０．９６mmol）による２カップリングサイクルを実施した。２−Ｎａｌ残渣からＦｍｏｃを除去した後、ＤＭＦ中の２−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（５当量、４２６mg、１．９３mmol）とＤＩＰＥＡ（５当量）を塩基として使用して、得られたアミンをその２−ニトロベンゼンスルホニル誘導体に変換した。ＤＭＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。得られたスルホンアミドを、ＴＨＦ中のトリフェニルホスフィン（５当量、５０５mg、１．９３mmol）、Ｎ，Ｎ−ジエチルアゾジカルボキシラート（５当量、３０３μl、１．９３mmol）及びメタノール（１０当量、１５６μl、３．８５mmol）を使用するメチル化に付した。ＴＨＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ2Ｃｌ2（５×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。次にＤＭＦ中の１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデク−７−エン（３当量、１７３μl、１．１６mmol）、２−メルカプトエタノール（５当量、１３５μl、１．９３mmol）を使用して２−ニトロベンゼンスルホニル基を除去した。ＤＭＦ（３×３０ml）、イソプロパノール（３×３０ml）、続いてエチルエーテル（３×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。得られたＮ−Ｍｅ−（２）Ｎａｌ残渣を、１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（６３８mg、０．９６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（３７３mg、０．９６mmol）及びＦｍｏｃ−Ａｐｃ（１７０mg、０．９６mmol）を用いた、３カップリングサイクルに付した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ  １５ml中の無水吉草酸３００μl、ピリジン２４５μlで５時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ３０mlのＤＭＦ（３回）、イソプロパノール、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）及びエチルエーテル（３回）により連続して洗浄した。得られたペンチルペプチド樹脂を真空下で乾燥させ、１％水を含むＣＨ2Ｃｌ2中の６０％トリフルオロ酢酸７ml、及びトリエチルシラン（１０当量、３．８５mmol）６１５mlで１６０分間処理した。樹脂を濾別し、ＣＨ2Ｃｌ2約５〜７mlで洗浄し、濾液をSavant高速真空ポンプ（speed vacuum pump）で濃縮して、粗生成物を得た。
【０６９１】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末３０mg（約１０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C49H63N9O6, 計算値： 873, 実測値： m/z (874 M+H)
【０６９２】
実施例５１
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチル（２）Ｎａｌ−ＮＨ2
【０６９３】
【化２５５】
0003938690.tif 000222
【０６９４】
実施例２９の手順を使用して合成したＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７００mg、０．３８５mmol）を、プロトコール１で示したようにＤＩＣ／ＨＯＢＴカップリング条件を使用する固相合成に付し、洗浄を実施した。ＤＩＣ（５当量）、ＨＯＢＴ（２．５当量）をカップリング剤として、そしてＦｍｏｃ−アミノ酸（２．５当量）を使用して全てのアミノ酸カップリングを実施した。それぞれのペプチドカップリングの後、樹脂をプロトコール１に示した洗浄工程１〜６に付した。１カップリングサイクルをＦｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（４２１mg、０．９６mmol）で実施した。（２）Ｎａｌ残渣からＦｍｏｃを除去した後、ＤＭＦ中の２−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（５当量、４２６mg、１．９３mmol）とＤＩＰＥＡ（５当量）を塩基として使用して、得られたアミンをその２−ニトロベンゼンスルホニル誘導体に変換した。ＤＭＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。得られたスルホンアミドを、ＴＨＦ中のトリフェニルホスフィン（５当量、５０５mg、１．９３mmol）、Ｎ，Ｎ−ジエチルアゾジカルボキシラート（５当量、３０３μl、１．９３mmol）及びメタノール（１０当量、１５６μl、３．８５mmol）を使用してメチル化に付した。ＴＨＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ2Ｃｌ2（５×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。次にＤＭＦ中の１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデク−７−エン（３当量、１７３μl、１．１６mmol）、２−メルカプトエタノール（５当量、１３５μl、１．９３mmol）を使用して２−ニトロベンゼンスルホニル基を除去した。ＤＭＦ（３×３０ml）、イソプロパノール（３×３０ml）、続いてエチルエーテル（３×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。得られたＮ−Ｍｅ−（２）Ｎａｌ残渣を、１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（６３８mg、０．９６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（３７３mg、０．９６mmol）及びＦｍｏｃ−Ａｐｃ（１７０mg、０．９６mmol）を用いた、３カップリングサイクルに付した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ  １５ml中の無水吉草酸３００μl、ピリジン２４５μlで５時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ３０mlのＤＭＦ（３回）、イソプロパノール、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）及びエチルエーテル（３回）により連続して洗浄した。得られたペンチルペプチド樹脂を真空下で乾燥させ、１％水を含むＣＨ2Ｃｌ2中の６０％トリフルオロ酢酸７ml、及びトリエチルシラン（１０当量、３．８５mmol）６１５mlで１６０分間処理した。樹脂を濾別し、ＣＨ2Ｃｌ2約５〜７mlで洗浄し、濾液をSavant高速真空ポンプで濃縮して、粗生成物を得た。
【０６９５】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４３mg（約１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C47H60N8O5, 計算値： 817, 実測値： m/z (818 M+H)
【０６９６】
実施例５２
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチルＴｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０６９７】
【化２５６】
0003938690.tif 000223
【０６９８】
実施例２９の手順を使用して合成したＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７００mg、０．３８５mmol）を、プロトコール１で示したようにＤＩＣ／ＨＯＢＴカップリング条件を使用する固相合成に付し、洗浄を実施した。ＤＩＣ（５当量）、ＨＯＢＴ（２．５当量）をカップリング剤として、そしてＦｍｏｃ−アミノ酸（２．５当量）を使用して全てのアミノ酸カップリングを実施した。それぞれのペプチドカップリングの後、樹脂をプロトコール１に示した洗浄工程１〜６に付した。それぞれ１回のＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（２８６mg、０．９６mmol）、続くＦｍｏｃ−Ｔｒｐ（４６１mg、０．９６mmol）による２カップリングサイクルを実施した。Ｔｒｐ残渣からＦｍｏｃを除去した後、ＤＭＦ中の２−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（５当量、４２６mg、１．９３mmol）とＤＩＰＥＡ（５当量）を塩基として使用して、得られたアミンをその２−ニトロベンゼンスルホニル誘導体に変換した。ＤＭＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。得られたスルホンアミドを、ＴＨＦ中のトリフェニルホスフィン（５当量、５０５mg、１．９３mmol）、Ｎ，Ｎ−ジエチルアゾジカルボキシラート（５当量、３０３μl、１．９３mmol）及びメタノール（１０当量、１５６μl、３．８５mmol）を使用してメチル化に付した。ＴＨＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ2Ｃｌ2（５×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。次にＤＭＦ中の１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデク−７−エン（３当量、１７３μl、１．１６mmol）、２−メルカプトエタノール（５当量、１３５μl、１．９３mmol）を使用して２−ニトロベンゼンスルホニル基を除去した。ＤＭＦ（３×３０ml）、イソプロパノール（３×３０ml）、続いてエチルエーテル（３×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。得られたＮ−ＭｅＴｒｐ残渣を、１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（６３８mg、０．９６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（３７３mg、０．９６mmol）及びＦｍｏｃ−Ａｐｃ（１７０mg、０．９６mmol）を用いた、３カップリングサイクルに付した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ  １５ml中の無水吉草酸３００μl、ピリジン２４５μlで５時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ３０mlのＤＭＦ（３回）、イソプロパノール、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）及びエチルエーテル（３回）により連続して洗浄した。得られたペンチルペプチド樹脂を真空下で乾燥させ、１％水を含むＣＨ2Ｃｌ2中の６０％トリフルオロ酢酸７ml、及びトリエチルシラン（１０当量、３．８５mmol）６１５mlで処理した。樹脂を濾別し、ＣＨ2Ｃｌ2約５〜７mlで洗浄し、濾液をSavant高速真空ポンプで濃縮して、粗生成物を得た。
【０６９９】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末３０mg（約１０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C47H62N10O6, 計算値： 863, 実測値： m/z (864 M+H)
【０７００】
実施例５３
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチルＴｒｐ−ＮＨ2
【０７０１】
【化２５７】
0003938690.tif 000224
【０７０２】
実施例２９の手順を使用して合成したＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７００mg、０．３８５mmol）を、プロトコール１で示したようにＤＩＣ／ＨＯＢＴカップリング条件を使用する固相合成に付し、洗浄を実施した。ＤＩＣ（５当量）、ＨＯＢＴ（２．５当量）をカップリング剤として、そしてＦｍｏｃ−アミノ酸（２．５当量）を使用して全てのアミノ酸カップリングを実施した。それぞれのペプチドカップリングの後、樹脂をプロトコール１に示した洗浄工程１〜６に付した。１カップリングサイクルをＦｍｏｃ−Ｔｒｐ（４６１mg、０．９６mmol）で実施した。Ｔｒｐ残渣からＦｍｏｃを除去した後、ＤＭＦ中の２−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（５当量、４２６mg、１．９３mmol）とＤＩＰＥＡ（５当量）を塩基として使用して、得られたアミンをその２−ニトロベンゼンスルホニル誘導体に変換した。ＤＭＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ2Ｃｌ2（３×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。得られたスルホンアミドを、ＴＨＦ中のトリフェニルホスフィン（５当量、５０５mg、１．９３mmol）、Ｎ，Ｎ−ジエチルアゾジカルボキシラート（５当量、３０３μl、１．９３mmol）及びメタノール（１０当量、１５６μl、３．８５mmol）を使用してメチル化に付した。ＴＨＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ2Ｃｌ2（５×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。次にＤＭＦ中の１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデク−７−エン（３当量、１７３μl、１．１６mmol）、２−メルカプトエタノール（５当量、１３５μl、１．９３mmol）を使用して２−ニトロベンゼンスルホニル基を除去した。ＤＭＦ（３×３０ml）、イソプロパノール（３×３０ml）、続いてエチルエーテル（３×３０ml）を使用して洗浄を実施し、樹脂を真空下で乾燥させた。得られたＮ−ＭｅＴｒｐ残渣を、１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（６３８mg、０．９６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（３７３mg、０．９６mmol）及びＦｍｏｃ−Ａｐｃ（１７０mg、０．９６mmol）を用いた、３カップリングサイクルに付した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ  １５ml中の無水吉草酸３００μl、ピリジン２４５μlで５時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ３０mlのＤＭＦ（３回）、イソプロパノール、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）及びエチルエーテル（３回）により連続して洗浄した。得られたペンチルペプチド樹脂を真空下で乾燥させ、１％水を含むＣＨ2Ｃｌ2中の６０％トリフルオロ酢酸７ml、及びトリエチルシラン（１０当量、３．８５mmol）６１５mlで１６０分間処理した。樹脂を濾別し、ＣＨ2Ｃｌ2約５〜７mlで洗浄し、濾液をSavant高速真空ポンプで濃縮して、粗生成物を得た。
【０７０３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４３mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー： C45H59N9O5, 計算値： 806, 実測値： m/z (807 M+H)
【０７０４】
実施例５４
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−ＮＨ2
【０７０５】
【化２５８】
0003938690.tif 000225
【０７０６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ａｌａ（１８７mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０７０７】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４５mgを得た。
【０７０８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６１mg（３６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H60N10O6, 計算値： 849, 実測値： m/z (850 M+H)
【０７０９】
実施例５５
Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−ＮＨ2
【０７１０】
【化２５９】
0003938690.tif 000226
【０７１１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ａｌａ（１８７mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中のｎ−ブチルイソシアナート（５当量）で３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、Ｂｕ−カルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０７１２】
Ｂｕ−カルバモイルペンタペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４３mgを得た。
【０７１３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６５mg（３７％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C47H63N11O6, 計算値： 878, 実測値： m/z (879 M+H)
【０７１４】
実施例５６
フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−ＮＨ2
【０７１５】
【化２６０】
0003938690.tif 000227
【０７１６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ａｌａ（１８７mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸（８２mg、０．６mmol）とＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）で処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０７１７】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３８mgを得た。
【０７１８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５３mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C50H60N10O6, 計算値： 897, 実測値： m/z (898 M+H)
【０７１９】
実施例５７
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−β−Ａｌａ−ＮＨ2
【０７２０】
【化２６１】
0003938690.tif 000228
【０７２１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−β−Ａｌａ（１８６mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ中の無水酪酸で１２時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５５０mgを得た。
【０７２２】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３５mgを得た。
【０７２３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H60N10O6, 計算値： 848, 実測値： m/z (850 M+H)
【０７２４】
実施例５８
Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−β−Ａｌａ−ＮＨ2
【０７２５】
【化２６２】
0003938690.tif 000229
【０７２６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＥＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−β−Ａｌａ（１８６mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ中のｎ−ブチルイソシアナート（５当量）で１２時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５５０mgを得た。
【０７２７】
ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３５mgを得た。
【０７２８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C47H63N11O6 計算値： 878, 実測値： m/z (879 M+H)
【０７２９】
実施例５９
フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−β−Ａｌａ−ＮＨ2
【０７３０】
【化２６３】
0003938690.tif 000230
【０７３１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−β−Ａｌａ（１８６mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸（８２mg、０．６mmol）とＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）で処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５５０mgを得た。
【０７３２】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１２９mgを得た。
【０７３３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４９mg（２７％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C50H60N10O6, 計算値： 897, 実測値： m/z (898 M+H)
【０７３４】
実施例６０
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2
【０７３５】
【化２６４】
0003938690.tif 000231
【０７３６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−２−Ａｂａ（２１５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０７３７】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０７３８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４７mg（２６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C50H60N10O6, 計算値： 897, 実測値： m/z (898 M+H)
【０７３９】
実施例６１
Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2
【０７４０】
【化２６５】
0003938690.tif 000232
【０７４１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−２−Ａｂａ（２１５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中のｎ−ブチルイソシアナート（５当量）で３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０７４２】
ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５２mgを得た。
【０７４３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C51H63N11O6, 計算値： 926, 実測値： m/z (927 M+H)
【０７４４】
実施例６２
フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2
【０７４５】
【化２６６】
0003938690.tif 000233
【０７４６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−２−Ａｂａ（２１５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（９２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸（８２mg、０．６mmol）とＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）で処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１５mgを得た。
【０７４７】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４２mgを得た。
【０７４８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５３mg（２９％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C54H60N10O6, 計算値： 945, 実測値： m/z (955 M+H)
【０７４９】
実施例６３
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−３−Ａｍｂ−ＮＨ2
【０７５０】
【化２６７】
0003938690.tif 000234
【０７５１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−３−Ａｍｂ（２３０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（226 mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５９０mgを得た。
【０７５２】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０７５３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５０mg（２７％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C51H62N10O6, 計算値： 911, 実測値： m/z (912 M+H)
【０７５４】
実施例６４
Ｂｕ−カルバモイル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−３−Ａｍｂ−ＮＨ2
【０７５５】
【化２６８】
0003938690.tif 000235
【０７５６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−３−Ａｍｂ（２３０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中のｎ−ブチルイソシアナート（５当量）で３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０７５７】
ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４３mgを得た。
【０７５８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５３mg（２８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C52H65N11O6, 計算値： 940, 実測値： m/z (941 M+H)
【０７５９】
実施例６５
フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−３−Ａｍｂ−ＮＨ2
【０７６０】
【化２６９】
0003938690.tif 000236
【０７６１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−３−Ａｍｂ（２３０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸（８２mg、０．６mmol）とＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）で処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０７６２】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３５mgを得た。
【０７６３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４９mg（２６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C55H62N10O6, 計算値： 959, 実測値： m/z (960 M+H)
【０７６４】
実施例６６
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−４−Ａｍｂ−ＮＨ2
【０７６５】
【化２７０】
0003938690.tif 000237
【０７６６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−４−Ａｍｂ（２３０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１５mgを得た。
【０７６７】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５３mgを得た。
【０７６８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C51H62N10O6, 計算値： 911, 実測値： m/z (912 M+H)
【０７６９】
実施例６７
フェニルアセチル−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−４−Ａｍｂ−ＮＨ2
【０７７０】
【化２７１】
0003938690.tif 000238
【０７７１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−４−Ａｍｂ（２３０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸（８２mg、０．６mmol）とＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）で処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８５mgを得た。
【０７７２】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４２mgを得た。
【０７７３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４７mg（２６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C55H62N10O6, 計算値： 959, 実測値： m/z (960 M+H)
【０７７４】
実施例６８
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ａｌａ−ＮＨ2
【０７７５】
【化２７２】
0003938690.tif 000239
【０７７６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ａｌａ（１８７mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０７７７】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４９mgを得た。
【０７７８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５７mg（３３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C48H61N9O6, 計算値： 860, 実測値： m/z (861 M+H)
【０７７９】
実施例６９
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−ｂｅｔａ−Ａｌａ−ＮＨ2
【０７８０】
【化２７３】
0003938690.tif 000240
【０７８１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−ｂｅｔａ−Ａｌａ（１８７mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の酪酸無水物１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６０５mgを得た。
【０７８２】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４２mgを得た。
【０７８３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５４mg（３２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C48H61N9O6, 計算値： 860, 実測値： m/z (861 M+H)
【０７８４】
実施例７０
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−３−Ａｍｂ−ＮＨ2
【０７８５】
【化２７４】
0003938690.tif 000241
【０７８６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−３−Ａｍｂ（２３０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５５０mgを得た。
【０７８７】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１２５mgを得た。
【０７８８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４４mg（２７％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C53H63N9O6, 計算値： 922, 実測値： m/z (923 M+H)
【０７８９】
実施例７１
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−２−Ａｂａ−ＮＨ2
【０７９０】
【化２７５】
0003938690.tif 000242
【０７９１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−２−Ａｂａ（２１５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５１０mgを得た。
【０７９２】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１１４mgを得た。
【０７９３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末３６mg（２０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C52H61N9O6, 計算値： 908, 実測値： m/z (909 M+H)
【０７９４】
実施例７２
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−４−Ａｍｂ−ＮＨ2
【０７９５】
【化２７６】
0003938690.tif 000243
【０７９６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−４−Ａｍｂ（２３０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０７９７】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３９mgを得た。
【０７９８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５６mg（３１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C53H63N9O6, 計算値： 922, 実測値： m/z (923 M+H)
【０７９９】
実施例７３
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−アシルグアニジン−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８００】
【化２７７】
0003938690.tif 000244
【０８０１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（アリル）（２５０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂を得た。
【０８０２】
アリル保護基をＤＭＦ中、アルゴン下でＰｄＣｌ2／トリフェニルホスフィン／水素化トリブチルスズを使用して除去した。Ｂｏｃ−グアニジンＨＣｌ（１００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を使用してグアニジン化を達成した。
【０８０３】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０８０４】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末３０mg（１５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H58N10O7, 計算値： 977, 実測値： m/z (978 M+H)
【０８０５】
実施例７４
Ｂｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−フェニルホモＡｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８０６】
【化２７８】
0003938690.tif 000245
【０８０７】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−フェニルホモＡｒｇ（２９５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、それぞれ２０mlの６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５７０mgを得た。
【０８０８】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０８０９】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５４mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C52H64N10O6, 計算値： 925, 実測値： m/z (926 M+H)
【０８１０】
実施例７５
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８１１】
【化２７９】
0003938690.tif 000246
【０８１２】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｉｔ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５９０mgを得た。
【０８１３】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５２mgを得た。
【０８１４】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６５mg（３８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H56N9O7, 計算値： 850, 実測値： m/z (851 M+H)
【０８１５】
実施例７６
Ｐｅｎｔａ−Ａｄｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８１６】
【化２８０】
0003938690.tif 000247
【０８１７】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｄｐｃ（３２０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０８１８】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４２mgを得た。
【０８１９】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４７mg（２６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C52H64N10O6, 計算値： 925, 実測値： m/z (926 M+H)
実施例７７
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｅ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2（ピーク１）
【０８２０】
【化２８１】
0003938690.tif 000248
【０８２１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｅ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０８２２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０８２３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、最初の主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末２５mg（１５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H58N10O6, 計算値： 847, 実測値： m/z (948 M+H)
【０８２４】
実施例７８
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｅ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2（ピーク２）
【０８２５】
【化２８２】
0003938690.tif 000249
【０８２６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｅ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０８２７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０８２８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、２番目の主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末２２mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H58N10O6, 計算値： 847, 実測値： m/z (948 M+H)
【０８２９】
実施例７９
Ｐｅｎｔａ−Ａｂｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８３０】
【化２８３】
0003938690.tif 000250
【０８３１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｂｃ（２７０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０８３２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５５mgを得た。
【０８３３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６１mg（３６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C44H64N10O6, 計算値： 829, 実測値： m/z (830 M+H)
【０８３４】
実施例８０
Ｐｅｎｔａ−Ａｃｈｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８３５】
【化２８４】
0003938690.tif 000251
【０８３６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｃｈｃ（２７８mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０８３７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４５mgを得た。
【０８３８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６５mg（３８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H66N10O6, 計算値： 855, 実測値： m/z (856 M+H)
【０８３９】
実施例８１
Ｂｕ−Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2の調製
【０８４０】
【化２８５】
0003938690.tif 000252
【０８４１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（２５２mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、Ｂｕ−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５５０mgを得た。
【０８４２】
Ｂｕ−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１１０mgを得た。
【０８４３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、２番目の主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４２mg（２６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C43H54N10O6, 計算値： 807, 実測値： m/z (808 M+H)
【０８４４】
実施例８２
Ｐｅｎｔａ−５−Ｂｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８４５】
【化２８６】
0003938690.tif 000253
【０８４６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｂｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０８４７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３５mgを得た。
【０８４８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４５mg（２５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C44H55N10O6Br, 計算値： 900, 実測値： m/z (901 M+H)
【０８４９】
実施例８３
Ｐｅｎｔａ−５−Ｂｒ−Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2（ピーク１）
【０８５０】
【化２８７】
0003938690.tif 000254
【０８５１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５９０mgを得た。
【０８５２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１３０mgを得た。
【０８５３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、最初の主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４０mg（２２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C44H55N10O6Br, 計算値： 900, 実測値： m/z (901 M+H)
【０８５４】
実施例８４
Ｐｅｎｔａ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2（ピーク２）
【０８５５】
【化２８８】
0003938690.tif 000255
【０８５６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０８５７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４５mgを得た。
【０８５８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、２番目の主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C44H55N10O6Br, 計算値： 900, 実測値： m/z (901 M+H)
【０８５９】
実施例８５
Ｐｅｎｔａ−５−Ｃｌ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８６０】
【化２８９】
0003938690.tif 000256
【０８６１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ＣｌＡｔｃ（２９０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０８６２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５０mgを得た。
【０８６３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４８mg（２８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C44H55N10O6Cl, 計算値： 855, 実測値： m/z (856 M+H)
【０８６４】
実施例８６
Ｐｅｎｔａ−５−ＭｅＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８６５】
【化２９０】
0003938690.tif 000257
【０８６６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ＭｅＯ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（３００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０８６７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５５mgを得た。
【０８６８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４６mg（２７％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C45H58N10O7, 計算値： 851, 実測値： m/z (852 M+H)
【０８６９】
実施例８７
Ｐｅｎｔａ−５−ＥｔＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８７０】
【化２９１】
0003938690.tif 000258
【０８７１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ＥｔＯ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５９４mgを得た。
【０８７２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４５mgを得た。
【０８７３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４１mg（２４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H60N10O7, 計算値： 865, 実測値： m/z (866 M+H)
【０８７４】
実施例８８
Ｐｅｎｔａ−５−ｉＰｒＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８７５】
【化２９２】
0003938690.tif 000259
【０８７６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ｉＰｒＯ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０８７７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４２mgを得た。
【０８７８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４３mg（２５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C47H62N10O7, 計算値： 879, 実測値： m/z (880 M+H)
【０８７９】
実施例８９
Ｐｅｎｔａ−５−Ｍｅ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８８０】
【化２９３】
0003938690.tif 000260
【０８８１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｍｅ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（２９０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０８８２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４３mgを得た。
【０８８３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４０mg（２４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C45H58N10O6, 計算値： 835, 実測値： m/z (836 M+H)
【０８８４】
実施例９０
Ｐｅｎｔａ−５−Ｅｔ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８８５】
【化２９４】
0003938690.tif 000261
【０８８６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｅｔ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（２８５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０８８７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５４mgを得た。
【０８８８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５３mg（３１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H60N10O6, 計算値： 849, 実測値： m/z (850 M+H)
【０８８９】
実施例９１
Ｐｅｎｔａ−５−ｉＰｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０８９０】
【化２９５】
0003938690.tif 000262
【０８９１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ｉＰｒ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（３００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０８９２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４９mgを得た。
【０８９３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４７mg（２７％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C47H62N10O6, 計算値： 863, 実測値： m/z (864 M+H)
【０８９４】
実施例９２
Ｐｅｎｔａ−５−ＤｍａＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2（ピーク１）
【０８９５】
【化２９６】
0003938690.tif 000263
【０８９６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｄｍａ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（３００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０８９７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４９mgを得た。
【０８９８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、最初の主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末２２mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H61N11O6, 計算値： 864, 実測値： m/z (865 M+H)
【０８９９】
実施例９３
Ｐｅｎｔａ−５−ＤｍａＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2（ピーク２）
【０９００】
【化２９７】
0003938690.tif 000264
【０９０１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｄｍａ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（３００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０９０２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４９mgを得た。
【０９０３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、２番目の主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末２７mg（１６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H61N11O6, 計算値： 864, 実測値： m/z (865 M+H)
【０９０４】
実施例９４
Ｂｕ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2
【０９０５】
【化２９８】
0003938690.tif 000265
【０９０６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−２−Ａｂａ（２１５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０９０７】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４１mgを得た。
【０９０８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末３５mg（１９％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C48H55N10O6Br, 計算値： 948, 実測値： m/z (949 M+H)
【０９０９】
実施例９５
Ｂｕ−カルバモイル−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2
【０９１０】
【化２９９】
0003938690.tif 000266
【０９１１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−２−Ａｂａ（２１５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中のｎ−ブチルイソシアナート（５当量）で１２時間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０９１２】
ブチルカルバモイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５３mgを得た。
【０９１３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４１mg（２１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C49H58N11O6Br, 計算値： 977, 実測値： m/z (978 M+H)
【０９１４】
実施例９６
フェニルアセチル−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−２−Ａｂａ−ＮＨ2
【０９１５】
【化３００】
0003938690.tif 000267
【０９１６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−２−Ａｂａ（２１５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸、ＨＢＴＵで処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０９１７】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４８mgを得た。
【０９１８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末３８mg（１９％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C52H55N10O6Br, 計算値： 996, 実測値： m/z (997 M+H)
【０９１９】
実施例９７
Ｐｅｎｔａ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９２０】
【化３０１】
0003938690.tif 000268
【０９２１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０９２２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１６２mgを得た。
【０９２３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６０mg（３３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H56N9O6Br, 計算値： 911, 実測値： m/z (912 M+H)
【０９２４】
実施例９８
３−カルボキシプロパノイル−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９２５】
【化３０２】
0003938690.tif 000269
【０９２６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のコハク酸、ＨＢＴＵで処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、３−カルボキシプロパノイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０９２７】
３−カルボキシプロパノイル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５８mgを得た。
【０９２８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C45H52N9O8Br, 計算値： 927, 実測値： m/z (928 M+H)
【０９２９】
実施例９９
フェニルアセチル−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９３０】
【化３０３】
0003938690.tif 000270
【０９３１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、ＤＭＦ中のフェニル酢酸、ＨＢＴＵで処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０９３２】
フェニルアセチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１６１mgを得た。
【０９３３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５８mg（３０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C49H54N9O6Br, 計算値： 945, 実測値： m/z (946 M+H)
【０９３４】
実施例１００
Ｂｕ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−２−Ａｂａ−ＮＨ2
【０９３５】
【化３０４】
0003938690.tif 000271
【０９３６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−２−Ａｂａ（２１５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ＢｒＡｔｃ（３１０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水酪酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５９０mgを得た。
【０９３７】
ブチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０９３８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末３０mg（１６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C50H56N9O6Br, 計算値： 959, 実測値： m/z (960 M+H)
【０９３９】
実施例１０１
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９４０】
【化３０５】
0003938690.tif 000272
【０９４１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６２０mgを得た。
【０９４２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５３mgを得た。
【０９４３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末６５mg（３８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C45H59N11O6, 計算値： 850, 実測値： m/z (851 M+H)
【０９４４】
実施例１０２
Ｐｅｎｔａ−Ａｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９４５】
【化３０６】
0003938690.tif 000273
【０９４６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（２）Ｎａｌ（２６５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｐｃ（２７５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０９４７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４５mgを得た。
【０９４８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C47H60N10O6, 計算値： 861, 実測値： m/z (862 M+H)
【０９４９】
実施例１０３
Ｐｅｎｔａ−２−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９５０】
【化３０７】
0003938690.tif 000274
【０９５１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−２−ＭｅＡｐｐｃ（２８５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０９５２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４５mgを得た。
【０９５３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５９mg（３５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H61N11O6, 計算値： 864, 実測値： m/z (865 M+H)
【０９５４】
実施例１０４
Ｐｅｎｔａ−２−ｉＰｒＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９５５】
【化３０８】
0003938690.tif 000275
【０９５６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−２−ｉＰｒＡｐｐｃ（２９５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０９５７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４７mgを得た。
【０９５８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４９mg（２７％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C48H65N11O6, 計算値： 892, 実測値： m/z (893 M+H)
【０９５９】
実施例１０５
Ｐｅｎｔａ−３−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９６０】
【化３０９】
0003938690.tif 000276
【０９６１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＡｐｐｃ（２８５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５９５mgを得た。
【０９６２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０９６３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５５mg（３２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H61N11O6, 計算値： 864, 実測値： m/z (865 M+H)
【０９６４】
実施例１０６
Ｐｅｎｔａ−３−ＭｅＯＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９６５】
【化３１０】
0003938690.tif 000277
【０９６６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡｐｐｃ（２９０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０９６７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５４mgを得た。
【０９６８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５０mg（２９％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H61N11O7, 計算値： 880, 実測値： m/z (881 M+H)
【０９６９】
実施例１０７
Ｐｅｎｔａ−４−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９７０】
【化３１１】
0003938690.tif 000278
【０９７１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡｐｐｃ（２８５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６００mgを得た。
【０９７２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１５０mgを得た。
【０９７３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末５７mg（３３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C46H61N11O6, 計算値： 864, 実測値： m/z (865 M+H)
【０９７４】
実施例１０８
Ｐｅｎｔａ−４−ＣｌＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９７５】
【化３１２】
0003938690.tif 000279
【０９７６】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡｐｐｃ（２９０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂５８０mgを得た。
【０９７７】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４０mgを得た。
【０９７８】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４９mg（２８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C45H58N11O6Cl, 計算値： 884, 実測値： m/z (885 M+H)
【０９７９】
実施例１０９
Ｐｅｎｔａ−４−ＰｈＯＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ2
【０９８０】
【化３１３】
0003938690.tif 000280
【０９８１】
実施例２９のＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（３６０mg、０．２mmol）を前記のプロトコール１を使用する固相合成に付した。ＤＭＦ中のＨＢＴＵをカップリング剤として、ＤＩＰＥＡ（３当量）を塩基として使用して、全てのカップリングを実施した。１サイクルがそれぞれＦｍｏｃ−Ｇｌｙ（１８０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（２６０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（４００mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（２４０mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＰｈＯＡｐｐｃ（３２５mg、０．６mmol）及びＨＢＴＵ（２２６mg、０．６mmol）を用いた、５カップリングサイクルを実施した。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に通し、ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で洗浄し、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ2Ｃｌ2中の無水吉草酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、それぞれ２０mlのＣＨ2Ｃｌ2（２回）、イソプロパノール及びＣＨ2Ｃｌ2（３回）により連続して洗浄した。樹脂を真空下で乾燥させて、ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂６１０mgを得た。
【０９８２】
ペンチル−Ｐｅｎｔａペプチド樹脂をエタンジチオール４０μL、ジメチルスルフィド４０μL、アニソール１２０μL及びトリフルオロ酢酸４mLにより室温で１８０分間処理した。樹脂を濾別し、ＴＦＡ約２mlで洗浄し、濾液を冷エチルエーテル中に沈殿させた。沈殿物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。残渣を２又は３容量のＥｔ2Ｏで洗浄し、再び遠心分離し、粗生成物を真空下で乾燥させて、オフホワイトの固体１４３mgを得た。
【０９８３】
この粗物質を、ヴィダックＣ18カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣにより、直線勾配１０〜６０％Ｂ（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ2Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ3ＣＮ）で６０分間、流速８ml/min、検出２８０nmにより溶離して精製した。回収した画分を分析ＨＰＬＣで分析して、主要なピークをカットし、プールし、凍結乾燥して、白色の無定形粉末４１mg（２２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：C51H63N11O7, 計算値： 942, 実測値： m/z (943 M+H)
【０９８４】
生物学的活性例：
例Ａ：アゴニストアッセイ
方法
概要：２９３細胞（ATCC CRL-1573）に、ＭＣ−４レセプターＤＮＡ又はＭＣ−１レセプターＤＮＡのいずれかを含むＤＮＡ構築物をトランスフェクトし、９６ウエルプレートで培養した。ＭＣ−４及びＭＣ−１をコードするＤＮＡ及び対応するタンパク質配列は当該技術において既知であり、例えば、Cone, et al., Rec. Prog. Hormone Res. (1996) 51: 287-318に記載されている。細胞を１００nMＮＤＰ−αＮＳＨ又はスクリーニング化合物のいずれかにより刺激した。環状ＡＭＰを細胞から抽出し、濃度をBiotrak-cAMP SPAアッセイにより測定した。ｃＡＭＰを増加させる化合物として、アゴニストを同定した。
【０９８５】
細胞培養：２９３ＭＣ４細胞（上記と同様にして得た）を、７５cm2フラスコ中の１０％ＦＳＣと５００μg/mlＧ４１８が補充されたＤ−ＭＥＭで培養した。細胞をトリプシン処理し、９６ウエル平底組織培養処理プレートに１：３で分配した。細胞を集密状態で刺激した（２〜４日目）
【０９８６】
ｃＡＭＰ反応：１００％ＤＭＳＯ中で連続的に希釈された化合物を、１０％ＦＢＳと０．１mMＩＢＭＸを含むＤ−ＭＥＭ中、１：２００（希釈化合物２．５μl＋媒体５００μl）で更に希釈した。非刺激細胞には、ＤＭＳＯ  ２．５μlを媒体５００μlに加えた。α−ＭＳＨ刺激細胞には、１００％ＤＭＳＯ中の２０μMＮＤＰ−αＭＳＨ  ２．５μlを媒体５００μlに加えた（最終濃度１００nM）。全てのウエルにおけるＤＭＳＯの最終濃度は０．５％であった。
注：各サンプルを別個のプレートで二重に実験した。
【０９８７】
集密した９６ウエル培養プレートから培地を除去し、適切なウエル中に上記の希釈物２００μlと代えた。プレートを室温で１時間インキュベートした。培地を除去し、プレートをＰＢＳの２００μl／ウエルで１回洗浄した。７０％エタノール（冷蔵庫に保存）６０μlを加えてｃＡＭＰを抽出した。３０分間抽出した後、エタノール抽出物１０μlをｃＡＭＰアッセイプレートに移すか、又はサンプルをｃＡＭＰアッセイを実施するまで−２０℃で保存した。
【０９８８】
ｃＡＭＰアッセイ：抽出サンプルとキットに含まれる全ての試薬を室温にした。９６ウエルOptiPlateに、エタノール抽出物１０μl、アッセイ用緩衝液４０μl、〔１２５Ｉ〕ｃＡＭＰ  ５０μl、抗血清５０μl及びＳＰＡビーズ５０μlを加えた。添加後の総ウエル容量は、２００μlであった。プレートを密封し、室温で１５〜２０時間インキュベートした。〔１２５Ｉ〕ｃＡＭＰのＳＰＡビーズへの結合を、各プレートを２分間Packard TopCount（登録商標）でカウントすることにより測定した。
注：各プレートは、非刺激細胞用の対照サンプル及び刺激細胞用のＮＤＰ−αＭＳＨを含有した。
【０９８９】
例Ａ
下記の成分を含有する錠剤は常法により製造できる。
成分                              錠剤１個当たり
式Ｉの化合物                    １０．０〜１００．０mg
乳糖                          １２５．０mg
トウモロコシデンプン            ７５．０mg
タルク                            ４．０mg
ステアリン酸マグネシウム          １．０mg
【０９９０】
例Ｂ
下記の成分を含有するカプセル剤は常法により製造できる。
成分                            カプセル剤１個当たり
式Ｉの化合物                    ２５．０mg
乳糖                          １５０．０mg
トウモロコシデンプン            ２０．０mg
タルク                            ５．０mg
【０９９１】
例Ｃ
注射用溶剤は下記の組成を有することができる。
式Ｉの化合物                      ３．０mg
ゼラチン                      １５０．０mg
フェノール                        ４．７mg
注射溶剤用水                      １．０mlになる量