(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
セリシン又は／及びその加水分解物からなることを特徴とするミネラル吸収促進剤。
【請求項２】
セリシンが繭又は生糸から抽出した天然セリシンである請求項１記載のミネラル吸収促進剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はミネラル吸収促剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
人の消化酵素で消化されない成分である食物繊維は、食生活の欧米化に伴い摂取量が年々減少している。しかしその一方で、その低カロリー性、血糖値の改善、便秘解消などの効果が見直されてきている。さらに近年の美容、健康への関心の高まりにより、実に様々な食物繊維を含んだ食品・飲料が提案、市販されている。
【０００３】
例えば特開平７−３１３１２０号公報には、低分子化したコンニャクマンナンからなる食物繊維を含む飲料が提案されている。
その他にも特開平５−１９９８４９号公報にはキノコ類から得られたもの、特開平６−１６９７２４号公報には低分子ペクチン、特開平２−３０３４６８号公報にはアルギン酸類など、実に多数の食物繊維が提案されている。
【０００４】
現在飲食品用として使用されている多くは水溶性の食物繊維である。この種の食物繊維はゲル化しやすい性質を持ち、粘性が高いため、飲食物に添加するには低粘度化してやらねばならず、製造法が複雑になってしまう。また、摂取した場合には腹部に多量のガスが発生するなどの問題がある。
【０００５】
また、食物繊維は余分な糖やコレステロールなどを吸着し体外に排出するため、体に必要なビタミン、ミネラルまでも排出してしまうおそれがある。特に、カルシウムは日本人の摂取量が不足していると言われており、近年ミネラルの十分な摂取は関係する疾患のリスク回避の意味から極めて重要である。しかし、容易に特定のミネラルばかりを大量に摂取することは効率的な補給方法といえないばかりか、他のミネラルの吸収が阻害されるなど新たな栄養的問題を引き起こす危険性もある。従って、栄養のバランスのよく考慮された食事を通じて摂取された点からのミネラル吸収促進作用は重要な問題となる。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は上記課題を解決し、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛などのミネラルの吸収促進作用を有する新規なミネラル吸収促進剤を提供することを目的とするものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者等はセリシン及びその加水分解物がミネラルの吸収を促進するという特有の効果をもち、それ自身の経口摂取により、又はそれを飲食品に添加して摂取することにより、優れたミネラル吸収促進効果を得ることができることを見出し、本発明に到達した。
【０００８】
即ち、本発明はセリシン及び／又はその加水分解物からなるミネラル吸収促進剤である。
【０００９】
本発明で用いるセリシンとしては通常、繭又は生糸由来のセリシンが好ましく用いられる。非加水分解物としてのセリシンは、繭又は生糸から一般的に行われる抽出方法で得ることができる。例えば以下のようにして純度９０％以上の高精製度単一タンパク質の状態で抽出できる。
【００１０】
即ち、繭又は生糸に含有されるセリシンを水によって抽出し、例えば次の（１）、（２）のいずれかの方法で回収する。
（１）メタノール、エタノール、ジオキサン等の水溶性有機溶媒を混合してセリシンを析出させた後、これを濾別乾燥して、セリシン粉体として得る。
（２）特開平４−２０２４３５号公報に提案されているように、限外濾過膜もしくは逆浸透膜に付した後、乾燥することによりセリシン粉体を得る。
【００１１】
またセリシンの加水分解物は、繭又は生糸から一般的に行われる抽出方法で得ることができる。
即ち、繭又は生糸に含有されるセリシンを、電気分解した水や、酸、アルカリもしくは酵素などによって部分加水分解して抽出してから、例えば同様に上記（１）、（２）のいずれかの方法で回収する。
【００１４】
セリシンはミネラルとの結合能を有しており、ミネラル吸収を促進することがわかった。胃などで消化されにくいセリシンは、ミネラルと結合したまま腸内に到達し、そこでミネラルが吸収されるのを助ける働きをするのではないかと考えられる。本発明に用いられるミネラルとしては、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、マンガン、銅、クロム、セレン、モリブデン、コバルト、ニッケル、砒素、沃素、ホウ素、臭素、フッ素、鉛、リチウム、珪素、バナジウム、カドミウムなどの生体に必要な元素であれば特に限定されるものではない。
【００１５】
このセリシンは天然物由来であるため人体への安全性が高く、一般食品、一般飲料、さらには健康食品、特定保険用食品などの特別用途食品、その他経口摂取する適宜のもの（これらを本発明では飲食品と総称する）に添加して用いることができ、日常の食生活において無理なく摂取可能である。さらに水に可溶であるため、飲食品に添加しやすく様々な形状とすることができる。また、予め必要な前記に例示したようなミネラルの１種又は２種以上をバランスよく配合することによって、より効率的にミネラルを摂取することもできる。
【００１６】
薬剤状で用いる場合もその形状は特に制限はなく、例えば粉末状、溶液状、ゲル状、スティック状、顆粒状、カプセル状、錠剤で用いうる。
摂取量も無毒性故特に制限はなく、通常１日の摂取量は１〜３０ｇ程度である。
【００１７】
【実施例】
次に実施例により本発明を例証する。
尚、試験例１〜試験例４及び図１〜図４は本発明外の参考例を示す。
〔製造例１〕  セリシン粉体の製造
繭１ｋｇを水５０Ｌ（リットル）中で９５℃にて２時間処理し、セリシンを抽出した。得られた抽出液を平均孔径０．２μｍのフィルターで濾過し、凝集物を除去した後、濾液を逆浸透膜により脱塩し、濃度０．２％の無色透明のセリシン水溶液を得た。この水溶液をエバポレーターを用いてセリシン濃度約２％にまで濃縮した後、凍結乾燥を行って、純度９５％以上、平均分子量１００，０００のセリシン粉体（以下セリシンＨ）１００ｇを得た。
【００１８】
〔製造例２〕  セリシン加水分解物粉体の製造
繭１ｋｇを０．２％炭酸ナトリウム水（ｐＨ１１〜１２）５０Ｌ中で９５℃にて２時間処理し、セリシン加水分解物を抽出した。得られた抽出液を平均孔径０．２μｍのフィルターで濾過し、凝集物を除去した後、濾液を逆浸透膜により脱塩し、濃度０．２％の無色透明のセリシン加水分解物抽出液を得た。この抽出液をエバポレーターを用いてセリシン濃度約２％にまで濃縮した後、凍結乾燥を行って、純度９０％以上、平均分子量２０，０００のセリシン加水分解物粉体（以下セリシンＬ）１００ｇを得た。
【００１９】
〔試験例１〕消化性試験
消化試験の試料としてセリシンＬまたはカゼインを用い、各試料濃度が０．５％（ｐＨ２．０）溶液になるように塩酸を用いて調製し、蒸留水で１００ｍｌに合わせた。胃の消化酵素であるペプシン（シグマ社）５ｍｇ試料溶液に加え、３７℃で２４時間インキュベートし、適時にサンプリングを行った。インキュベート終了後、試料溶液１００ｍｌを０．１％（ｐＨ８．５）になるよう炭酸水素ナトリウムを用いて調製した。その後、十二指腸の消化酵素であるパンクレアチン（シグマ社）を２ｍｇ加え３７℃で２４時間インキュベートを行った。
ペプチドの濃度測定はＴＮＢＳ（２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸）法を用いて行った。サンプリングは全て０．５ｍｌを採取し、３０％ＴＣＡ（トリクロロ酢酸）を０．１ｍｌ加え、遠心分離後、上清１００μｌに７％炭酸水素ナトリウムを３ｍｌ、０．１％ＴＮＢＳを２ｍｌ加えて、３７℃で２時間加温し、４２０ｎｍの吸光度を測定した。
結果を図１、図２に示した。本試験では体内での消化酵素であるペプシンやパンクレアチンに対する影響を試験管内で確認した。ＴＮＢＳ法はタンパク質のアミノ末端と反応し、消化酵素で分解され易いほど、ペプチドが多く存在するためＴＮＢＳ試薬との反応性が高まる。つまり値が高いほど消化酵素に対して分解されやすいことになる。カゼインに比べてセリシンはペプシン、パンクレアチンのいずれの消化酵素でも難消化性であることが確認された。
【００２０】
〔試験例２〕消化管輸送能試験
実験動物として、５週令の雄ＩＣＲ系マウスを用いた。１群当たり１０匹とし室温を２４±１℃に保ち、１２時間ごとの明暗交替（８：００〜２０：００は明、２０：００〜翌８：００は暗）の環境下で飼育を行った。予備飼育として１週間、市販の固形試料（ＭＦ、オリエンタル酵母（株））を与えた。試験日前日、終夜絶食させた後、１時間摂食させ摂食量がほぼ一定の動物を選別し、１群８匹として実験に用いた。消化管輸送能のマーカーとしてＢＴＢ（投与量：０．３％溶液を１匹当たり０．３５ｍｌ）を経口投与し、同時にセリシンＬ（投与量：２ｇ／体重ｋｇ）またはコントロール（カゼイン、投与量：２ｇ／体重ｋｇ）を経口投与した。投与後２５時間まで経時的に糞を採取した。この間、６時間及び２３時間後に各１時間ずつ摂食させた。糞のＢＴＢ排泄量を測定した後、糞を２４時間減圧乾燥し糞乾燥重量を測定した。なお有意差の判定にはＳｔｕｄｅｎｔのｔ−検定を用いた。
【００２１】
その結果、セリシン群は糞重量がコントロール群に比べて有意に増加していた（図３）。糞の性状はコントルール群に比べてやや大きく、柔らかめであったが、水様便、粘液便などの下痢症状は見られなかった。
またコントロール群で摂食後、２〜４時間で糞中にＢＴＢが見出され始め、６時間までにＢＴＢ総投与量の３３．５％、８時間までに５３．５％、２５時間までに８８．３％が排泄された。一方セリシン群では摂食後４〜８時間のＢＴＢ排泄率がコントルール群に比べて有意に高く、セリシンは消化管輸送速度を高める効果を確認した（図４）。
【００２２】
〔試験例３〕便秘改善効果試験
実験動物として３週令の雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系ラット（日本ＬＳＣ（株））を用い、１群１３匹とした。１匹ずつ金属ケージに入れ、室温を２４±１℃に保ち、１２時間ごとの明暗交替の環境下で飼育を行った。予備飼育として２週間、市販の固形試料（ＭＦ、オリエンタル酵母（株））を与えた後、セリシン群、コントロール群の２群に分け、実験食（表１）で７日間飼育を行った。なお１群は１４匹とし、食事時間は全て１４：００〜１７：００に限定した。実験食開始から７日目の１７：００に、各群を平均体重が等しくなるように２つのグループに分け、それぞれアトロピン塩酸塩（０．５ｍｇ／体重ｋｇ）または生理食塩水を腹腔内注射により投与した。注射後６時間（１７：００〜２３：００）の糞を採取し、減圧乾燥後、乾燥重量とした。なお有意差の判定にはＤｕｎｃａｎの多重比較検定を用いた。
ヒトの便秘の多くは機能性便秘である。これは腸管平滑筋が副交換神経からアセチルコリンの遊離が減少することで、消化管運動や肛門機能を抑制した結果生じる便秘である。実験に用いたアトロピンはナス科のベラドンナから得られるアルカロイドに由来し、副交感神経遮断薬として用いられる為、アセチルコリン及びアセチルコリン様薬物の可逆的拮抗物質として機能性便秘を誘導する。
表２の結果より、セリシンはアトロピン投与によって低下した消化管機能の改善が認められたことから、セリシンの便秘改善効果を確認した。
【００２３】
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【００２４】
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【００２５】
〔試験例４〕脂肪蓄積抑制効果試験
実験動物として５週令の雄ＩＣＲ系マウス（日本ＬＳＣ（株））を用いた。１群１２匹とし、表３に示す飼料及び水を自由摂取させ、室温を２４±１℃に保ち、１２時間ごとの明暗交替の環境下で８週間飼育を行った。試験終了後マウスを屠殺、解剖し、体重および腎付着脂肪重量を測定した。脂肪は体重当たりの腎付着脂肪重量割合を算出し、これを腎付着脂肪率とした。さらに血液から常法により血清を得て、トリグリセライド測定キット（トリグリセライド  Ｇ−テストワコー  和光純薬工業（株））を用いて血清中のトリグリセライド濃度を測定した。なお有意差の判定にはＤｕｎｃａｎの多重比較検定を用いた。
結果を表４に示した。各群の食事摂取量には有意差が見られなかったが、コントロール群に比べてセリシン群はセリシンの添加量に伴って、体重の抑制が確認された。さらにセリシン群では腎付着脂肪率も抑制し、血清中のトリグリセライド濃度も低下したことから、セリシンは脂肪の蓄積を抑制していることが確認された。
【００２６】
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【００２７】
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【００２８】
〔試験例５〕ミネラル吸収促進効果試験
実験動物として８週令の雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系ラット（日本ＬＳＣ（株））を用いた。１群８匹とし、表５に示す飼料及び水を自由摂取させ、室温を２４±１℃に保ち、１２時間ごとの明暗交替の環境下で飼育を行った。飼育開始から１０日後に各ラットを代謝ゲージに入れ、３日間の摂食量と糞排泄量を測定した。さらに糞中に排泄されたミネラル量を原子吸光光度計（Ｚ−８０００日立（株））を用いて測定し、糞中のミネラル含有率を求めた。なお見かけの吸収率は以下の式で求めた。
ミネラル吸収率（％）＝［（ミネラル摂取量−糞中ミネラル量）／ミネラル摂取量］×１００
その結果を表６に示す。セリシン添加によりミネラルのみかけの吸収率を有意に促進したことから、セリシンのミネラル吸収促進作用を確認した。
【００２９】
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【００３０】
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【００３１】
【発明の効果】
セリシンの難消化性であり、胃や腸の働きを活性化させ、胃や腸内で余分な水分やコレステロール、有害物質、中性脂肪などを吸収しにくくし、ダイエットや便秘解消に大いに役立つ。腸内でのまたカルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、などのミネラル吸収促進剤としても有用である。
また天然物由来のタンパク質としての特性を持ち、生体内では高い安全性を有するので、たとえ大量に摂取したとしても無害である。さらに本発明品は無味、無臭であるため食品に添加した場合、官能特性に影響を与えない。従って、日常の食生活において無理なく摂取可能であり、その効果はいっそう顕著なものとなりうる。
【００３２】
更に、本発明の有効成分であるセリシンは繭又は生糸の溶媒抽出物から、容易にしかも単一のタンパク質としては高い純度で抽出できるため、安価に得られ、しかも水溶液の色が無色透明であるので、消色する必要が無く、複雑な処理工程を必要としないという大きな利点がある。
【図面の簡単な説明】
【図１】消化試験（対ペプシン）の結果を示すグラフ。
【図２】消化試験（対パンクレアチン）の結果を示すグラフ。
【図３】消化管輸送能を糞量で測定した結果を示すグラフ。
【図４】消化管輸送能をＢＴＢ排泄率で測定した結果を示すグラフ。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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