(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘパリン断片のフラグミンと、脂肪酸８：０カプリレートおよび１０：０カプラートの混合物から構成されているアシル基を有するモノグリセリドからなる吸収増強剤とを含有する経口及び直腸投与製剤用の医薬組成物。
【請求項２】
ヘパリン断片のフラグミンの粉末、水溶液、または懸濁液を脂肪酸８：０カプリレートおよび１０：０カプラートの混合物から構成されているアシル基を有するモノグリセリドと混合させたことを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【技術分野】
本発明は単一の吸収増強剤として少なくとも１つの脂肪酸の１つまたはそれ以上のグリセロールエステルと組み合わせたヘパリン、ヘパリン断片またはそれらの誘導体を含有する医薬組成物に関するものである。該医薬組成物は経口投与、粘膜を通しての投与または経皮的投与に有用である。その医薬組成物は必要なとき、経口、口内、直腸、舌下、鼻内、皮下の投与または経皮的な投与についての適用に適する希釈剤および／または担体のごとき、さらに他の生理学的に許容し得る添加物を含有することができる。本発明による医薬組成物は追加の増強剤または促進剤を使用することなしに優れた吸収性および生体有効性を有する。
【０００２】
【発明の背景】
ヘパリンは豚の腸の粘膜または牛の肺から生じる抗凝血剤として広く使用されている硫酸塩含有多糖類である。ヘパリンは血栓症の治療および予防のために数十年使用されている。近年において非常に有効でかつ特別な活性を有するヘパリン誘導体およびヘパリン断片の幾つかの新型生成物が開発されかつ市場で販売されている。このようなヘパリンの低分子断片は例えばヨーロツパ特許出願第ＥＰ−Ａ−００１４１８４号明細書に開示されている。フラグミン「“Ｆｒａｇｍｉｎ”（登録商標）」として知られる製品がスウェーデン国，ストツクホルムに所在のフアーマシア  アクチボラーグによって市場で販売されている。
【０００３】
例えば経口投与または直腸投与の際に、それらの不十分な吸収性によりすべてのヘパリンおよびそれらの断片を注入するのにその投与に代えて別の投与経路を見つけるのにかなりの問題があつた。従って、ヘパリンまたはヘパリン断片により長期間の治療を受ける患者の便宜を増大するために安全かつ有効な別の注入方法が要求されている。
【０００４】
体膜を通してヘパリンまたはその低分子量誘導体の浸透を高めるための薬学的手段について幾つかの文献がある。各種の直腸または小腸投与組成物が米国特許第４，１５６，７１９号明細書、ドイツ特許出願第３３３１００９号明細書およびヨーロツパ特許出願第００３７９４３号明細書に記載されている。これらの文献において、生体吸収性は各種の表面活性剤、またはサリチル酸およびグルタミン酸のようなカルボキシル酸によつて高められている。ヘパリンの経口、口内および舌下投与のためのスルホンおよび脂肪アルコールを含有する組成物が米国特許第３，５１０，５６１号明細書に記載されている。国際特許出願公開第ＷＯ８８／１０１１７号公報に記載のものは単糖類および金属カチオンの塩を含有する経口ヘパリン組成物に関する。ヨーロツパ特許出願第０１３０５５５号明細書は口および鼻において改善された浸透性を有するヘパリンおよび非イオンテンサイドを含有する薬剤を開示している。
【０００５】
しかしながら、これらの文献に開示された組成物はヘパリンまたはヘパリン断片の非経口投与に代わる生成物を導かなかった。
【０００６】
本発明の目的は、経口でまたは粘膜を通してまたは皮膚を通して投与させるとき、皮下注射または筋肉内注射から得られる血漿レベルと匹敵し得るほど臨床的に適切な血漿レベルを発生させるのに十分高い生体有効性を有する治療的に有効な量のヘパリン、ヘパリン断片またはそれらの誘導体を含有する新規な組成物を提供することにある。
【０００７】
本発明によればかかる組成物は薬剤組成物において脂肪酸の１つまたはそれ以上のグリセロールエステルと組み合わせてヘパリンを使用することにより生成することができる。
【０００８】
中間鎖グリセリドは直腸組成物および局所組成物の双方における吸収増強剤として従来より使用されていたが、該中間鎖グリセリドはカルシトニンおよびインシユリンのごとき小さい分子および一定のポリペプチドが身体組織に使用されるときのみ上首尾であり、そして多くの用途において表面活性剤のごとき、追加の増強賦形剤とともに使用されていた。
【０００９】
現在、吸収増強成分として脂肪酸のグリセリドを有する非常に治療的に有用な親水性の多糖類（ヘパリンおよびそれらの断片のごとき）における良好な生体吸収性に関して成功した組成物は存在しない。
【００１０】
本発明は一般に治療的に有効な量のヘパリンおよび／またはヘパリン断片および／またはその誘導体と１つまたは複数の脂肪酸の少なくとも１つのグリセロールエステルとからなる組成物と、その組成物の製造方法と、医薬製剤の製造のための組成物の使用と、体膜を通してのヘパリンの吸収を高めるための１つまたは複数の脂肪酸のグリセロールエステルの使用とに関するものである。
【００１１】
本発明によれば、表現「ヘパリン」は天然の、生合成のまたは遺伝子工学的に処理された源からのヘパリンの断片または等級、ならびにその誘導体、例えばヘパリンエステルを示す。ヘパリンの断片はヘパリンの低分子量断片または化学的に変性された、生合成の、半合成のまたは合成ヘパリン状オリゴ糖を含むヘパリン活性を有するそれらの誘導体を示す。適切には、低分子量ヘパリン断片および／またはそれらの誘導体は約１０００から１００００ダルトンの範囲の分子質量を有する。
【００１２】
本発明による好適なヘパリン断片は上述したヨーロツパ特許出願第００１４１８４号明細書に開示されているフラグミン「“Ｆｒａｇｍｉｎ”（登録商標）」である。フラグミン（登録商標）は組成物の他の成分に添加または混合させたとき溶液または懸濁液の形状にすることができる。それはまた粉末として混合させることもでき、または溶液においてグリセリドからなる本質的に水分なしの脂質マトリクスと混合され得る。フラグミン（登録商標）は水に非常に溶け易く、かかる水性組成物は優れた安定性を有すると考えられている。フラグミン（登録商標）の溶解性および安定性は適切な投与形態に対する組成物の適応を容易にする。
【００１３】
本発明による脂肪酸のグリセロールエステルは少なくとも１つの脂肪酸のモノ−、ジ−またはトリグリセリドまたはそのいずれかの混合物である。脂肪酸残留物はジおよびトリグリセリド分子上で同一にさせるかまたは異ならせることができる。モノ−、ジ−およびトリグリセリドの混合された個体群に関して、アシル基または脂肪酸残留物は分子の各カテゴリーにおいて同一にさせるかまたは異ならせることができる。適切には、アシル基は６〜１８間の炭素原子の鎖長さにより、慎重に特定されている。本発明による組成物においてかかるモノ−、ジ−またはトリグリセリドの相対的な組成の選択は実際の投与経路に依存する。そのうえ、かかるモノ−、ジ−またはトリグリセリドの相対的な組成の選択は、グリセリドが鎖長さ、極性、不飽和の程度および融点および粘度のごとき他の物理的特性において異なり得るので、ヘパリンの吸収率および／または解放率を制御するための手段として使用され得る。ヘパリンまたはそれらの断片の吸収率および／または解放率を制御するための他の適切な方法は６〜１８の炭素原子の間でアシル基の鎖長さを変化させることにある。
【００１４】
ヘパリンおよび脂肪酸のグリセリドエステルを含有する組成物の特性はかくして極性、鎖長さ、成分の相対的な量およびグリセリドのアシル基中の不飽和結合の数により影響される。
【００１５】
当業者は脂質成分を変化させることにより、例えば脂質出発材料の選択を変化させることにより、治療的に有効な量のヘパリンの好都合な供給系に組成物を適合させるための適切な成分を容易に見出し、それにより異なる粘度および吸収増強能力を有する組成物を得る。
【００１６】
本発明による好適な組成物は６〜１８の炭素原子の範囲内の特定のアシル基を有するモノグリセリドを含有する。適切なモノグリセリドは本質的に８：０カプリレートおよび１０：０カプラートの混合物からなる。かかる組成物はそれらが適切な賦形剤を添加することにより各々所望の投与経路に適合する種々の製剤に容易に適合させられ得るために非常に順応し得る。
【００１７】
トリグリセリドを含有するヘパリン組成物での試験は同様に改善された吸収性を示す。トリグリセリドの使用は通常トリグリセリドがモノ−およびジグリセリド双方より安価であるので有利である。しかしながら、同時に毒性作用を回避しながら高められた吸収性を得るのに要求される濃度はモノ−および／またはジグリセリドによるものよりトリグリセリドによるもののほうが高い。
【００１８】
本発明による組成物の製造は意図された投与経路に関連して選ばれる種々の方法において行われ得る。例えば、フラグミン（登録商標）が１つの脂質成分または複数の脂質成分により同種の組成物に混合され得るとき、フラグミン（登録商標）は脂質中に分散される粉末として、脂質と混合されるべき過剰な量の水を有する溶液としてまたは脂質との混合後本質的に水分の無いマトリクス組成物として存在し得る。フラグミン（登録商標）の順応性および安定性は溶液、懸濁液、または特別な投与形態のためおよび例えば粘度および吸収増強特性に関してグリセリド成分の特別な品質のために要求される半固体マトリックス、粘性マトリックス、または固体マトリックスのごとき所望の組成物に対し容易な適合を可能にする。
【００１９】
製剤は泡、浣腸液、カプセルおよび座薬の形状において直腸使用にまたは経口、口内、舌下、鼻内、経皮および皮下投与用にまたは一般に粘膜を通しての投与用にとくに製造される種々の製剤に適合させ得る。ヘパリン、それらの断片または誘導体と脂肪酸のグリセロールエステルとを含有する本発明の組成物はまた例えば皮下投与用の制御された解放を得るためまたは経口投与形態に封入バリヤ膜を使用することにより制御された経口解放のためのデポー製剤の製造に適する。本発明による他の適切な製剤は本発明の組成物が多孔性重合マトリクスに加えられるかまたは粘膜癒着特性を任意に有する被覆体内に封入される頬投与形態である。上述した製剤は血栓塞栓症、梗塞形成前アンギナ、冠状心臓疾患、炎症性疾患、血栓静脈炎、自己免疫疾患、動脈硬化症のごときヘパリン治療と一般に関連付けられる広範な病理学的過程を治療および／または防止するのに有用であり、又メタ−スサシスまたは血管形成関連疾患の治療に有用である。ヘパリンまたはそれらの断片と連係する治療用の上述した投与経路の組成物の適切な添加剤または賦形剤を見出すことについてのそれぞれの適合は当業者には自明である。
【００２０】
上述した投与形態におけるヘパリンまたはヘパリン断片の合計投与量はしたがつて非常に高く、生体有効性により制限されるだけでなく、治療的にまたは臨床的に投与に適しかつ良好に許容されることにより制限される。
【００２１】
フラグミン（登録商標）の臨床的な投与量の例は重い静脈血栓症に関して１２０ＩＵ／ｋｇ体重、１日２回そして血栓症予防に関して２５００／日（危険の低い患者に関して）５０００ＩＵ／日（危険の高い患者に関して）である。例えば、脂肪酸のグリセロールエステルを含有する脂質に対するフラグミン（登録商標）の相対的な量は好ましくは１〜２００％（ｗ／ｗ）の範囲内にすることができる。しかしながら、それより高い量のフラグミン（登録商標）または脂質は臨床的に適切であるならば、本発明の範囲内で考え得る。
【００２２】
脂質の量が組成物中において非常に低い場合に、吸収作用は減少され、それは投与後に同一の血漿レベルを得るためにフラグミンの量を増加することにより補われ得る。２００％（ｗ／ｗ）までの相対的な量においてリピドへのフラグミン（登録商標）の取得を可能にするこの広い濃度範囲は、種々の型の患者に供給されるような適切な投与形態用の組成物に容易に適合され得る成分の順応性を示す。
【００２３】
以下の例はフラグミン（登録商標）および特定のモノグリセリドを含有する本発明による組成物の生体有効性および吸収性を示す。組成物は生体のウサギの直腸および十二指腸に投与させた。例は、本発明による特別な実施例を示すためのみで、本発明の範囲を制限するものではない。
【００２４】
例１は以下の例において使用した所定のモノグリセリドの成分を示す。
【００２５】
例２は例１によるフラグミン（登録商標）とモノグリセリド組成物についての十二指腸および直腸吸収をそれぞれ示す。
【００２６】
例３はモノグリセリドなしで十二指腸または直腸に使用されたフラグミン（登録商標）の生体有効性を示す比較例である。
【００２７】
結果はこの用途におけるフラグミン（登録商標）が例えば皮下注射に少なくとも匹敵し得る血漿レベルを生じる吸収性を有することを明白に示す。意外であることは、表面活性剤または他の成分を含む他の浸透増強剤または増強剤は好都合な生体有効性および吸収性を達成するのに必要でないということである。そのうえ、意外であることは、モノグリセリドが低い濃度においてさえも非常に有効であり、その低い濃度の有効性は新たな投与形態および／または投与経路かつ含有される成分と細胞構成成分との間の特別な共同性の相互依存作用の独特な機会を示す。
例１
以下の例に使用されたモノグリセリドはスウェーデン国に所在のカールシヤーマズ・リピド・テクニク・アクチボラーグ社（Ｋａｒｌｓｈａｍｎｓ  Ｌｉｐｉｄ  Ｔｅｋｎｉｋ  ＡＢ，Ｓｗｅｄｅｎ）により供給された非常に純化された断片であり、以下の成分を有していた。
８：０カプリレート                    ７８．４
１０：０カプラート                    ２１．２
１２：０ラウラート                      ０．２
微量（マイナーズ）                      ０．２
合計                                １００
例２
動物病態モデル
雄のニュージーランド産白ウサギ、重量２．５ｋｇ〜３．５ｋｇがすべての実験に使用された。１２時間の断食後、各動物にはハイプノーム０．１ｍｌ／ｋｇ（ジヤンセン・フアーマシユーテイカルズ、ベルギー）の筋肉内注射およびアトロピン０．５ｍｌ／ｋｇ（フアーマシア，スエーデン）の皮下注射により鎮痛剤を投与した。ウサギはメブマル２０ｍｇ／ｍｌで麻酔がかけられた。麻酔はその後必要とされるとき維持された。その動物は刈り込まれかつ医療腹膜切開が行われた。試験化合物が次いで十二指腸に直接注入されそしてその後に腹膜腔が閉じられた。投与量は試験化合物の投与の前後に注射器を計量することによりチエックされた。
【００２８】
１．５ｍｌの血液サンプルが耳動脈中に位置決めされたカテーテルから０．０，０．２５，０．５，１．０，２．０，２．５，３．０，３．５，４．０，５．０，６．０，７．０，８．０，９．０および１０．０時間後に収集された。サンプルは０．０４Ｍの最終濃度までクエン酸ナトリウムにより混合された。サンプル管はそれらが遠心分離法（５分間、３５００ｒｐｍ）を受けるまで氷上に保持された。血漿中の抗−ＦＸａ活性がウシ属のＦＸａ（フアーマシア）および発色性基質Ｓ−２２２２を使用する初期割合評価分析により測定された。
【００２９】
この動物病態モデルは以下の実験において十二指腸および直腸に加えられたフラグミン（登録商標）およびモノグリセリドにより利用された。
フラグミン（登録商標）およびグリセリドの十二指腸内吸収
十二指腸内投与後のフラグミン（商標登録）の生体有効性は抗ＦＸａ活性曲線すなわち十二指腸投与（ＡＵＣｉｄ）および皮下投与（ＡＵＣｓｃ）に従った活性一時間曲線に基づく区域（ＡＵＣ）の一部として表され、抗ＦＸａ活性は２ｍｇ／ｋｇの投与でフラグミンの皮下注射を収容する６匹のウサギにおいて５．１４±０．３４任意単位になるように決定された。例１によるモノグリセリドと混合されたフラグミン（登録商標）の十二指腸内吸収が５匹のウサギにおいて試験された。フラグミン（商標登録）粉末は５０ｍｇ／ｍｌ（５．０％）の最終濃度まで生理塩水中で溶解された。このフラグミン（登録商標）溶液の重量当たり４部が実験前におよそ１５時間、モノグリセリドの１部（重量）と混合された。すべてのウサギは以下の投与量、すなわち、フラグミン２５ｍｇ／ｋｇ、モノグリセリド０．１２５ｇ／ｋｇおよび塩水０．５ｍｌ／ｋｇを収容した。この実験においてすべてのウサギが血漿中に検出し得るレベルの抗−ＦＸａ活性を有した。最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）は０．５〜３．０時間内に達成されかつ３．３０ＩＵ／ｍｌないし４．７０ＩＵ／ｍｌの間の範囲であつた。平均吸収は皮下注射の２５．０±９．０％であつた。
フラグミン（登録商標）およびグリセリドの直腸吸収
本質的に８：０カプリレートおよび１０：０カプラートから構成される例１による高純度のモノグリセリドと混合されたフラグミン（登録商標）の直腸吸収が５匹のウサギにおいて試験された。フアーマシア  アクチボラークにより製造されたフラグミン（登録商標）が１０ｍｇ／ｍｌの最終濃度まで生理塩水中で溶解された。この溶液は分散が同質になるまで強力攪拌によりモノグリセリド（最終濃度２５０ｍｇ／ｍｌ）と混合された。フラグミン（登録商標）／モノグリセリド組成物はウサギの体重に依存して０．５〜０．６ｍｌの量で直腸に直接注入された。これはフラグミン（登録商標）およびモノグリセリドのそれぞれの２ｍｇ／ｋｇおよび５０ｍｇ／ｋｇの投与量に対応する。
【００３０】
すべてのウサギが血漿中に高いレベルの抗−ＦＸａ活性を示した。Ｃｍａｘは１．５〜２時間以内に達成されかつ１．８５ＩＵ／ｍｌ〜２．５６ＩＵ／ｍｌの間の範囲であつた。曲線に基づく区域（ＡＵＣ）は皮下注射後のＡＵＣより高い１．３倍である６．５６±１．５４であつた。
【００３１】
これはフラグミン（登録商標）の直腸吸収が皮下注射による投与後の生体有効性と同じかまたはそれより僅かに高いことを示す。
例３
グリセリドの不存在におけるフラグミン（登録商標）の生体有効性
例１〜２のモノグリセリドの不存在における十二指腸内投与後のフラグミン（登録商標）の生体有効性が４匹のウサギにおいて試験された。ウサギの中の２匹が幽門レベルで十二指腸内に置かれたゼラチンカプセル中に包含させた粉末としてフラグミン（登録商標）２５ｍｇ／ｋｇを収容した。残りの２匹のウサギは十二指腸に直接注入された（合計投与量２５ｍｇ／ｋｇ）生理塩水中に溶解されたフラグミン（登録商標）を収容した。抗ＦＸａ活性は８〜１０時間の観察期間にわたってこれらの動物のいずれにも検出され得なかった。
【００３２】
直腸投与後のフラグミン（登録商標）の生体有効性が３匹のウサギにおいて試験された。フラグミン（登録商標）は生理塩水中に溶解されかつ１０ｍｇ／ｋｇの投与量で直腸に直接注入された。これらのウサギの中の２匹は血漿中に抗ＦＸａ活性は検出し得なかつたが１匹は１％以下の生体有効性に対応する４５分間で０．２１Ｕ／ｍｌの活性を示した。
【００３３】
結論はモノグリセリドの不存在におけるフラグミン（登録商標）の生体有効性が十二指腸内または直腸投与後１％以下であるということである。