(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
内服又は外用にて使用されるシクロスポリンを含む製薬組成物であって、
前記組成物は０．１〜２０重量％のシクロスポリン（Ｉ）とビヒクルとを含み、同ビヒクルは、
（ｉ）以下に示す一般式ＩＩａである少なくとも一つの１〜６０重量％のポリエーテル（ＩＩ）と、
R-O-(CH2CH2O-)nH                    （ＩＩａ）
（ここで、ｎは２から２０までの整数であり、Ｒは、Ｈ又はＣ1〜Ｃ3のアルキルである、）
（ｉｉ）以下に示す一般式ＩＩｂの化合物と、
0004005134.tif 000017
（ここで、ＲはＣ1〜Ｃ3のアルキルである、）
のうちの少なくとも一方を含み、かつ、
（ｉｉｉ）一つ又はそれ以上のＣ8〜Ｃ22脂肪酸のグリセリルモノエステル（ＩＩＩ）とＣ8〜Ｃ22脂肪酸のヘキサグリセリル乃至ペンタデカグリセリルのモノエステルから選択される一つ又はそれ以上のポリグリセリルエステル（ＩＶ）とを含む１〜６０重量％の混合物であって、その組成比、（ＩＩＩ）／（ＩＶ）が１：２〜１：６である混合物を含むことを特徴とする製薬組成物。
【請求項２】
シクロスポリン（Ｉ）は、シクロスポリン、［NVa］2−シクロスポリン、［MeIle］4−シクロスポリン及び［3'−O−acylMeBmt］1−シクロスポリンから選択されることを特徴とする請求項１に記載の製薬組成物。
【請求項３】
式ＩＩａの化合物は、エトキシジグリコール又はポリエチレングリコール３００〜６００より選択されることを特徴とする請求項１又は２に記載の製薬組成物。
【請求項４】
式ＩＩｂの化合物は、ジメチルイソソルビド、ジメチルイソイジド及びジメチルイソマニドから選択されることを特徴とする請求項１乃至３のいずれか１項に記載の製薬組成物。
【請求項５】
化合物ＩＩＩは、モノオクタン酸グリセリル、モノデカン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル及びモノリノール酸グリセリルから選択されることを特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項に記載の製薬組成物。
【請求項６】
化合物ＩＶは、モノオレイン酸ヘキサグリセリル、モノステアリン酸オクタグリセリル、モノオレイン酸オクタグリセリル、モノラウリン酸デカグリセリル、モノミリスチン酸デカグリセリル、モノステアリン酸デカグリセリル及びモノオレイン酸デカグリセリルから選択されることを特徴とする請求項１乃至５のいずれか１項に記載の製薬組成物。
【請求項７】
抗酸化剤、保存剤、安定化剤、着香剤、増粘剤及び希釈剤から選択される一つ又はそれ以上のアジュバンド（Ｖ）を更に含む請求項１乃至６のいずれか１項に記載の製薬組成物。
【請求項８】
前記ビヒクルは、アミノ酸又はタンパク質水解物とＣ8〜Ｃ22脂肪酸とのＮ−アシル化によって得られる一つ又はそれ以上のリポアミノ酸（ＶＩ）を含み、前記化合物の重量比（Ｉ）／（ＶＩ）は１：１〜１：３である請求項１乃至７のいずれか１項に記載の外用に使用される製薬組成物。
【請求項９】
リポアミノ酸（ＶＩ）は、カプリロイルグリシン、ジカプリロイルシスチン、ジパルミトイルヒドロキシプロリン、リジンラウロイルメチオネート及びジオクチルドデシルラウロイルグルタメートから選択されることを特徴とする請求項８に記載の製薬組成物。
【発明の詳細な説明】
本発明は、活性成分としてシクロスポリンを含む製薬処方物に関する。本発明は、体内にて使用される処方物に関し、更に局所用処方物にも関する。
シクロスポリンは、免疫抑制作用を有する環状ウンデカペプチドであり、臓器移植において特に使用されている。シクロスポリンは更に、自己免疫疾患並びに関節炎及びリウマチ病のような炎症状態の治療にも使用される。更なる適用には、抗寄生虫薬及び抗ガン剤としての適用が含まれる。免疫抑制作用のないある種のシクロスポリンでは、ＨＩＶ−１ウィルスの複製に対する阻害効果を示すことが明らかになっており、これらの化合物は、ＡＩＤＳ及びＡＩＤＳ関連疾患の治療及び予防に使用され得る。
種々のシクロスポリンが同定されている。シクロスポリンは非常に疎水性であり、従って、適切なバイオアベイラビリティを提供する剤形に処方化することが非常に困難である。シクロスポリンの水に対する溶解度は、通常、２５ｍｇ／ｌを超えることはない。シクロスポリンの高い脂溶性は、ｎ−オクタノール／水系における分配係数Ｐの値によっても示される。シクロスポリンに関して、ｌｏｇＰ＝２．０８〜２．９９という値が報告されている。
親水相、疎水相及び界面活性成分の存在によって特徴づけられる分散系は、シクロスポリン処方物における許容可能なバイオアベイラビリティを提供するために使用されている。経口投与可能な市販の組成物としては、サンディミュン、サンディミュン−ネオラール（Sandimmun-Neoral）、コンスプレン（Consupren）、インプランタ（Implanta）及びイムスポリン（Imusporin）（いずれも商標名）が挙げられる。これらの処方物は、英国特許出願公開第２０１５３３９号、英国特許出願公開第２２２２７７０号、英国特許出願公開第２２７０８４２号及び英国特許出願公開第２２７８７８０号に開示されている。親水相を除去して、代わりに、プロピレングリコール、グリセロール又はソルビトール等のポリオール類と脂肪酸との部分的なエステルを加えた変形例が英国特許出願公開第２２２８１９８号に開示されている。
ドイツ連邦共和国出願公開第４３２２８２６号は、親油性成分としてトリアシルグリセロールの存在下において、ＨＬＢが１０より大きい非イオン系界面活性剤に対する協働界面活性剤（co-tenside）として脂肪酸のポリグリセリルエステルを含む組成物からなる、水に難溶性である薬物に対する担体系を開示している。協働界面活性剤としてジメチルイソソルビドを使用することは英国特許出願公開第６５０７２１号に記載されている。
脂肪族カルボン酸とモノ及びジ−エタノールアミド類との反応生成物として調製されたＮ−アシルサルコシン及びその塩と脂肪酸アミド類との組み合わせを経皮吸収促進剤として含む、炎症性皮膚疾患の外用治療に用いる組成物が日本国特許出願公開第０７０２５７８４号に開示されている。
脂質成分を変更して処方物からエトキシレート（ethoxylated）界面活性剤を除くことによって、従来の組成物にまさるシクロスポリン処方物を調製することが可能であるという優れた知見が得られた。オリーブ油又はコーン油に対するシクロスポリンの溶解度は５０ｍｇ／ｍｌを超えないが、グリセリルモノエステル中におけるシクロスポリンの溶解度は、約一桁も高いことが発明者らによって明らかにされた。
本発明に従って、内用、又は外用に使用されるシクロスポリンを含む製薬組成物は、０．１〜２０重量％のシクロスポリン（Ｉ）とビヒクル（vehicle）とを含み、同ビヒクルは、
（ｉ）以下の一般式ＩＩａにて示される１〜６０重量％の少なくとも一つのポリエーテル（ＩＩ）と、
R−O−(CH2CH2O−)nH          （ＩＩａ）
（ここで、ｎは、２〜２０の整数であり、ＲはＨ又はＣ1〜Ｃ3のアルキルである、）
（ｉｉ）以下の一般式ＩＩｂにて示される化合物と、
0004005134.tif 000002
（ここで、Ｒは、Ｃ1〜Ｃ3のアルキルである、）
のうちの少なくとも一方を含み、かつ、
（ｉｉｉ）一つ又はそれ以上のＣ8〜Ｃ22脂肪酸のグリセリルモノエステル（ＩＩＩ）とＣ8〜Ｃ22脂肪酸のヘキサグリセリル乃至ペンタデカグリセリルのモノエステルから選択される一つ又はそれ以上のポリグリセリルエステル（ＩＶ）とを含む１〜６０重量％の混合物であって、その組成比、（ＩＩＩ）／（ＩＶ）が１：２〜１：６である混合物を含むことによって特徴づけられる。
脂肪酸とグリセロールのモノエステルによって形成される極性脂質と、脂肪酸と、例えば、ヘキサグリセロールからペンタデカグリセロールまでのポリグリセロールとのモノエステルによって形成される擬脂質（pseudolipids）との混合物はシクロスポリンの処方化に特に適していることが発明者らによって明らかにされた。
使用され得るシクロスポリン類としては、一つ又はそれ以上の、シクロスポリン、［NVa］2−シクロスポリン、［MeIle］4−シクロスポリン、［3'−O−acylMeBmt］1−シクロスポリンを含む。
ポリエーテルＩＩａは、好ましくは、エトキシジグリコール又は、ポリエチレングリコール３００〜６００より選択される。
式ＩＩｂの化合物は、好ましくは、ジメチルイソイジド（dimethyl isoidide）、ジメチルイソマニド（dimethyl isomannide）から選択され、より好ましくは、ジメチルイソソルビドから選択される。
化合物ＩＩＩは、モノオクタン酸グリセリル、モノデカン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル及びモノリノール酸グリセリルから選択される。
化合物ＩＶは、好ましくは、一つ又はそれ以上の、モノオレイン酸ヘキサグリセリル、モノステアリン酸オクタグリセリル、モノオレイン酸オクタグリセリル、モノラウリン酸デカグリセリル、モノミリスチン酸デカグリセリル、モノステアリン酸デカグリセリル及びモノオレイン酸デカグリセリルであるポリグリセリルモノエステルから選択される。
組成物は、例えば、抗酸化剤、保存剤、安定化剤、着香剤、増粘剤及び希釈剤等の一つ又はそれ以上のアジュバンド（Ｖ）を含み得る。
本発明に従い、外用に使用される組成物は、アミノ酸又はタンパク質水解物とＣ8〜Ｃ22脂肪酸とのアシル化によって得られるリポアミノ酸（ＶＩ）を含み得る。化合物（Ｉ）／（ＶＩ）の重量比は好ましくは１：１〜１：３である。
リポアミノ酸（ＶＩ）は、好ましくは、カプリロイルグリシン、ジカプリロイルシスチン、ジパルミトイルヒドロキシプロリン、リジンラウロイルメチオネート及びジオクチルドデシルラウロイルグルタメートから選択される。
ポリエーテル類からなる溶媒は、処方物の物理的特性を変更するため、特に、消化器官の水性媒体との直接接触、又は、投与前において濃縮物を希釈する場合において使用される。本発明に従う組成物の薬物動態学特性は、再現性の高い吸収と良好なバイオアベイラビリティとを示す。
本発明に従う好ましい組成物は、モノアシルグリセロールから構成される脂質をビヒクルとして含み、ここで、アシル残基はＣ8〜Ｃ22であり、６〜１５のグリセロール単位を備えたモノアシルグリセロールである。例えば、Ｃ8〜Ｃ10脂肪酸のような短い側鎖の比率は消化器官の粘性細胞を経て血流へと活性組成物が移動するのを促進するが、Ｃ12〜Ｃ22脂肪酸モノグリセリドを使用することが好ましい。有効的に、本発明の組成物中にて使用されるモノアシルグリセロールは、少なくとも９５％のモノエステル量を含む。適切な製品としては、例えば、以下の特性を有する市販のモノオレイン酸グリセリル（グリンドステッド（Grindsted）社より製造されるＧＭＯ）が挙げられる。
0004005134.tif 000003
９０％モノエステルの最少含量を含む商標名Myverol▲Ｒ▼１８−９９（モノオレイン酸グリセリル）又はMyverol▲Ｒ▼１８−９２（モノリノレン酸グリセリル（glyceryl monolinoleate））にてイーストマン（Eastman）社で製造されている同様の製品も使用される。
極性脂質成分として適する更なる製品は、以下の一般式にて示すポリグリセロールのモノエステルである；
HOCH2-CHOH-CH2-(-O-CH2-CHOH-CH2）x-O-CH2-CHOH-CH2OH
（ここでｘは、３〜１２である。）
ポリグリセロールは以下の性質によって特徴づけられる。
0004005134.tif 000004
ポリグリセロールと脂肪酸とのエステルは、一般的には、ポリグリセロールと対応する飽和若しくは不飽和脂肪酸との部分的なエステル化又は植物油とポリグリセロールとのエステル交換反応によって調製される。ポリグリセロールの個々のモノエステルの各々は、そのけん化値によって特徴づけられるのに対し、重合化度は、ヒドロキシル価によって最適に示される。本発明の組成物に特に適したポリグリセロールのモノエステルを以下に示す。
0004005134.tif 000005
これらのポリグリセロールモノエステルは、日光ケミカルズ株式会社（Nikko Chemicals Co Ltd）より市販されている商標名NIKKOL▲Ｒ▼及びダーキー・フーズ社（Durkee Foods）より市販されている商標名SANTONE▲Ｒ▼である。
本発明の組成物に有用なポリグリセロールモノエステルの全体の群は、以下の純度試験によって特徴づけられる。
0004005134.tif 000006
好ましい組成物は、例えば、ソルビトール、マンニトール、イジトール等の六炭糖性アルコールの無水誘導体のアルコキシル化によって得られる環状エステルを含み得る。ソルビトール又は他の六炭糖性アルコールの脱水素化が濃硫酸の触媒反応下に起こり、以下の化合物が得られる。
0004005134.tif 000007
引き続き、例えば塩化メチルと反応させることにより、２，５−ジ−Ｏ−メチル誘導体が得られ、同誘導体は、シクロスポリン処方物の溶媒として有用である。特に好適な製品は、アイ・シー・アイ（ＩＣＩ）社より商標名ARLASOLVE▲Ｒ▼にて製造されている２，５−ジメチルイソソルビドである。
２，５−ジメチルイソソルビド中におけるシクロスポリンの溶解度の研究から、シクロスポリンの溶解度は、水分含量に依存して変則的な挙動をとり、モル比率Ｎ＝０．５において最大値となるという優れた知見が得られた。シクロスポリンの溶解度はジメチルイソソルビドの濃度の増加とともに僅かに減少し、無水製品においては２０℃においてわずか３２４ｍｇ・ｇ-1しか溶解しない（表１を参照）。
0004005134.tif 000008
シクロスポリンは、２，５−ジメチルイソソルビドとともに溶媒和形を形成し、同溶媒和形は、以下に示す格子定数を備える単斜晶の空間群Ｐ２1に結晶化する：ａ＝１５．５２１（２）Å，ｂ＝２０．８３３（３）Å，ｃ＝１２．２２３（３）Å，β＝１００．２１°（１），Ｚ＝２（Husak M, Kratochvil B, Jegorov A, Matha V, Stuchlik M, Andrysek Tによる「新規なシクロスポリンＡ溶媒和形の構造」，Zeitschrift fur Kristallographie,２１１刊，３１３−３１８頁，１９９６年）。
ジメチルイソソルビド−水・二成分系におけるシクロスポリンの溶解度の改良は、ゼラチン層からカプセル内容物中への水の移動が起こるゼラチン軟カプセルの処方化において非常に有利である。
本発明の組成物に特に好適な一般式ＩＩの群からなるポリエーテルは、商標名TRANSCUTOL▲Ｒ▼として製薬の分野にて公知であるエトキシジグリコールであり、フランスの会社てあるガットフォッセ社（Gattefosse）より市販されている。
エトキシジグリコール単独中におけるシクロスポリンの溶解度は、２０℃において５７８．５ｍｇ・ｇ-1であり、少量の水ではほとんど影響を受けない。シクロスポリンは、エトキシジグリコールと水との二成分混合物において、Ｎ＝０．５のモル分率に対応するエトキシジグリコールの濃度にて、２０℃で２１６ｍｇ・ｇ-1溶解している。
本発明に従う使用に好適なエトキシジグリコールは以下に示す物理的及び化学的特性を備える。
0004005134.tif 000009
一般式ＩＩａのポリエーテル類からなる製品も本発明の組成物に対して好適であり、同製品は、平均分子量が２００から６００である液体から半固体のポリエチレングリコールである。これらのポリエーテル類はシクロスポリンと過飽和溶液を形成する傾向にあり、同過飽和溶液から非溶媒和の斜方晶系に結晶化される。これらのポリエチレングリコール溶液は、表２に示すように少量のプロピレングリコールを加えることにより安定化される。
0004005134.tif 000010
0004005134.tif 000011
皮膚及び粘膜に対し外用にて適用される本発明の組成物に関しては、上記ビヒクルにリポアミノ酸が補足される。これらはバイオベクタとして機能し、皮膚への透過を可能にするとともに表皮の上層にアミノ酸を固定する。その両親媒性の構造により、リポアミノ酸は細胞間組織内に組み込まれ、角質細胞の付着特性に重要な役割を果たし、皮膚の水分調整及びバリア機能の働きに貢献する。皮膚との生物学的親和性によって、リポアミノ酸は、溶解したシクロスポリンを含むビヒクルの作用部位への浸透速度を調節し得る。リポアミノ酸のカルボキシル基は皮膚における所望のｐＨ反応の調節剤であり、免疫調節薬の治療効果に貢献する。
特に好適なリポアミノ酸は、例えば、ジオクチルドデシルラウロイルグルタメート、Amiter LGOD（味の素（Ajinomoto）株式会社の商標名）等のグリセロールモノエステルと相溶する擬脂質成分として機能するＮ−アシルグルタミン酸及び高級脂肪アルコールの非イオン性誘導体である。
本発明の局所用組成物に適する他のリポアミノ酸としては、例えば、カプリロイルグリシン、ジカプリロイルシスチン（dicapryloyl cystine）、ジパルミトイルヒドロキシプロリン、リジンラウロイルメチオネート、又はコラーゲン、ミルク若しくは小麦タンパク等のタンパク質水解物から調製されるアミノ酸のＮ−アシル誘導体である。これらの製品は、例えば、フランスの会社であるセピック（Seppic）社により商標名LIPACID▲Ｒ▼にて市販されている。
本発明は、以下に示す実施例によって更に記載されるが、これらの実施例のみに限定されるものではない。
例１：ゼラチン軟カプセル
以下の成分を使用した。
（Ｉ）        シクロスポリン                          １０．００ｇ
（ＩＩｂ）    ジメチルイソソルビド                    ３０．００ｇ
（ＩＩＩ）    モノオレイン酸グリセリル                １５．００ｇ
（ＩＶ）      モノオレイン酸デカグリセリール          ４４．４０ｇ
（Ｖ）        リノレン酸トコフェロール                  ０．６０ｇ
成分（ＩＩＩ）、（ＩＶ）及び（ＩＩｂ）を５０℃にて混合した。得られた混合物に、（Ｉ）及び抗酸化剤（Ｖ）を加え、不活性ガスブランケッティング（blanket）下にて溶解するまで攪拌した。得られた生成物を濾過し、ゼラチン軟カプセルへ充填した。
例２：経口用溶液
以下の成分を使用した。
（Ｉ）        シクロスポリン                          １０．００ｇ
（ＩＩａ）    ポリエチレングリコール４００            ４０．００ｇ
（ＩＩＩ）    モノオレイン酸グリセリル                １０．００ｇ
（ＩＶ）      モノオレイン酸デカグリセリル            ３０．００ｇ
（Ｖ）        プロピレングリコール                      ９．４０ｇ
（Ｖ）        ネオヘスペリジンジヒドロカルコン          ０．２０ｇ
（neohesperidine dihydrochalcone）
（Ｖ）        Ｒ，Ｒ，Ｒ−α−トコフェロール            ０．４０ｇ
成分（ＩＩＩ）、（ＩＶ）及び（ＩＩａ）を５０℃にて混合した。得られた混合物に、（Ｉ）及びアジュバンド混合物（Ｖ）を加えた。得られた混合物を不活性ガスブランケッティング下にて溶解するまで攪拌した。得られた生成物を濾過し、ガラス製バイアルへ充填した。
参考例３：外用軟膏
以下の成分よりなる軟膏を調製した。
（Ｉ）        シクロスポリン                                ３．００ｇ
（ＩＩａ）    エトキシジグリコール                        １２．００ｇ
（ＩＩＩ）    モノリノール酸グリセリル                    ６２．００ｇ
（ＩＶ）      モノラウリン酸デカグリセリル                １６．００ｇ
（ＶＩ）      ジ−オクチルドデシルラウロイルグルタメート    ５．００ｇ
（ＶＩ）      カプロイルグリシン                            ２．００ｇ
物質（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）を５０℃にて融解し、共に混合した。物質（Ｉ）を（ＩＩ）中に別に溶解し、得られた溶液を溶融物とともにホモジナイズし、外用として適用可能な適切な容器に充填した。
軟膏はプラセボとの比較試験を行った。試験には、アルビノ種モルモットを使用した。５％ジニトロフルオロベンゼン（ＤＮＦＢ）５０μｌにて動物の両耳の付け根を感作し、アセトン／オリーブ油１：１混合物中に溶解した２％ＤＮＦＢによって繰り返し行った。６日後、動物の両耳の毛を刈り、脱毛した。翌日、アセトン／オリーブ油１：１混合物中に溶解した０．５％ジニトロフルオロベンゼン２０μｌを両耳に塗布した。塗布後直ちに、参考例３の組成物２５０ｍｇをモルモットの右耳に塗布し、参考例３の組成物のプラセボをモルモットの左耳に塗布した。組成物を試験するに当たり、２つの対照群の動物を使用した。
負の対照：０．５％ジニトルフルオロベンゼン２０μｌを両耳に適用した動物。
正の対照：動物は試験組成物で処理されていない。
組成物を適用後、２４時間及び３２時間における紅斑を評価した。
紅斑を評価するための基準：
４−暗赤色の突起状しみ（stain）
３−赤色のしみ
２−バラ色のしみ
１−小さな斑点（spot）
０−変化なし
紅斑の評価：
0004005134.tif 000012
浮腫の評価は、適用前日の皮膚の厚み［ｍｍ］の値と適用後８，２４，３２及び４８時間における皮膚の厚みの値を読みとることにより得られた。
0004005134.tif 000013
例４：ゼラチン硬カプセル
以下の成分を使用した。
（Ｉ）      ［Nva］2−シクロスポリン                １５．００ｇ
（ＩＩｂ）  ９５％ジメチルイソソルビド              ３５．００ｇ
（ＩＩＩ）  モノカプリン酸グリセリル                  ５．００ｇ
（ＩＩＩ）  モノリノール酸グリセリル                １２．００ｇ
（ＩＶ）    モノステアリン酸オクタグリセリル        ３２．６０ｇ
（Ｖ）      Ｒ，Ｒ，Ｒ−α−トコフェロール            ０．４０ｇ
物質（ＩＶ）及び（ＩＩＩ）を５０℃にて融解し、共に混合し、抗酸化剤（Ｖ）を加えた。得られた混合物に、（Ｉ）及び（ＩＩｂ）の溶液を加え、ホモジナイズし、濾過後の生成物を５０℃にてゼラチン硬カプセルへ充填した。
例５
以下の成分を使用した。
（Ｉ）      シクロスポリン                          １０．０ｇ
（ＩＩ）    ９５％２，５−ジメチルイソソルビド      ３０．０ｇ
（ＩＩＩ）  モノオレイン酸グリセリル                ２０．０ｇ
（ＩＶ）    モノオレイン酸ヘキサグリセリル          ４０．０ｇ
組成物はデンプンカプセルCAPILLに充填され、各カプセル中に５０ｍｇのシクロスポリンを含んでいる。
組成物の薬物動態学評価及び市販品との比較は、１０頭のビーグル犬を用いた二相交叉試験において１００ｍｇのシクロスポリンを単回投与後に実施した。月齢１２〜３６ヶ月及び体重９〜１３ｋｇの雄犬に、適宜摂水させながら、１日３００ｇの標準的なペレット状の餌を与えた。
組成物は、１８時間絶食後に投与した。更なる餌は１０時間の間隔をあけた後に動物に与えられた。０、０．５、１、２、３、５及び８時間後に前腕（前足）の静脈より血液が採取された。血液試料は、液体クロマトグラフィーにてシクロスポリンの含量を分析するまで、−２０℃にて凍結保存された。薬物動態学パラメータはプログラムＫＩＮＦＩＴを用いた１−コンパートメント分析により算出された。結果を以下に示す。
0004005134.tif 000014
略語の説明：
ＡＵＣ        曲線下面積
Ｔ1/2E1       消失半減期
Ｔｍａｘ      最大濃度に達する時間
Ｃｍａｘ      最大濃度
ＳＤ          標準偏差
φ            平均濃度
例６：経口用溶液
以下の成分を使用した。
（Ｉ）      シクロスポリン                        １０．００ｇ
（ＩＩａ）  ポリエチレングリコール４００          １９．７０ｇ
（ＩＩＩ）  モノオレイン酸グリセリル              １６．１０ｇ
（ＩＶ）    モノラウリン酸デカグリセリル          ４３．９０ｇ
（Ｖ）      プロピレングリコール                  １０．００ｇ
（Ｖ）      ヘスペリジンジヒドロカルコン            ０．３０ｇ
成分（ＩＩＩ）、（ＩＶ）及び（ＩＩａ）を５０℃にて混合した。シクロスポリン（Ｉ）及び両添加物（Ｖ）を加え、不活性ガスブランケッティング下において、混合物を（ＩＩ）溶解するまで攪拌した。得られた混合物を濾過し、ガラス製の密封可能なバイアルへ充填した。
市販の組成物であるCONSUPREN溶液と比較した例６の組成物の薬物動態学評価を１０頭のビーグル犬にて実施した。体重１３〜１６．５ｋｇ、２歳の雄犬に標準的な餌を与え、摂水は自由に行えるもとのした。試験組成物及び比較用組成物の両方の単回投与を１８時間絶食させた後に行った。投与後１２時間における血液採取を行った後にはじめて更なる餌を動物に与えた。０、１、２、３、５、８、１２及び２４時間後に前腕の静脈より血液が採取された。血液試料は、イムノテク（IMMUNOTECH）社によるＲＩＡキットを用いてシクロスポリン及びその代謝物の分析を行うまで、−２０℃にて保存された。
0004005134.tif 000015
0004005134.tif 000016