(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液と化学物質を含む溶液を混合するための容器（５）と、連結手段（２）と分離手段（３）とから構成され、
前記容器（５）は上部にキャップ（７）と下部に封止部材（７Ａ）を装着し、
前記連結手段（２）は、針（２Ａ）と外筒（２Ｂ）より構成され、
前記分離手段（３）は、分離体（３Ｍ）を血液成分の入口と出口を有するハウジング（３Ｈ）内に配置することにより構成され、
前記針（２Ａ）は、前記封止部材（７Ａ）を貫通して前記容器（５）内と連通し、前記外筒（２Ｂ）は容器（５）下部外周に装着され、
自然落差にて前記容器（５）の混合溶液中の血漿成分のみが、前記分離手段（３）の分離体（３Ｍ）を透過して、前記分離手段（３）の血液成分の出口より、血漿採集容器（９）に分離採集することができる、ことを特徴とする血液成分分離装置（１）。
【請求項２】
血液と化学物質を含む溶液を混合するための容器（１５）と連結手段（１２）と分離手段（１３）と血液成分の収納手段（１４）から構成され、
前記容器（１５）は上部にキャップ（１７）と下部に封止部材（１７Ａ）を装着し、
前記連結手段（１２）は、針（１２Ａ）と外筒（１２Ｂ）より構成され、
前記分離手段（１３）は、分離体（１３Ｍ）を血液成分の入口と出口を有するハウジング（１３Ｈ）内に配置することにより構成され、
前記血液成分の収納手段（１４）は、当該収納手段（１４）内を上下に可動できる駆動手段（１６）を装着し、当該収納手段（１４）は前記分離手段（１３）の下部に装着し、
前記針（１２Ａ）は、前記封止部材（１７Ａ）を貫通して前記容器（１５）内と連通し、前記外筒（１２Ｂ）は容器（１５）下部外周に装着され、
前記駆動手段（１６）を下方に引いて、前記収納手段（１４）内を陰圧にし、前記容器（１５）の混合溶液中の血漿成分のみが、前記分離手段（１３）の分離体（１３Ｍ）を透過して、前記分離手段（１３）の血液成分の出口より、前記収納手段（１４）内に分離採集することができる、ことを特徴とする血液成分分離装置（１１）。
【請求項３】
血液と化学物質を含む溶液を混合するための容器（２５、３５、４５、５５Ａ、５５Ｂ、８５）と分離手段（２３、３３、４３、５３、８３）とから構成され、
前記分離手段（２３、３３、４３、５３、８３）は、分離体（２３Ｍ、３３Ｍ、４３Ｍ、５３Ｍ、８３Ｍ）を血液成分の入口と出口を有するハウジング（２３Ｈ、３３Ｈ、４３Ｈ、５３Ｈ、８３Ｈ）内に配置することにより構成され、
前記容器（２５、３５、４５、５５Ａ、８５）は、内部に上下に可動し混合液を加圧する駆動手段（２６、３８、４８、５８、８６）を配置し、
前記駆動手段（２６、３８、４８、５８、８６）を下方に押して、前記容器（２５、３５、４５、５５Ａ、８５）内の混合液を加圧し、当該混合溶液中の血漿成分のみが、前記分離体（２３Ｍ、３３Ｍ、４３Ｍ、５３Ｍ、８３Ｍ）を透過して、前記分離手段（２３、３３、４３、５３、８３）の血液成分の出口より、血漿採集容器（２９、３９、４９、５９、８４）に分離採集することができる、ことを特徴とする血液成分分離装置（２１、３１、４１、５１、８１）。
【請求項４】
前記容器（４５）の下部に三方活栓（４４）と血液注入口（４２）を装着したことを特徴とする請求項３に記載の血液成分分離装置（４１）。
【請求項５】
前記分離手段（８３）に前記容器（８５）との連結手段（８２）と、前記血漿採集容器（８４）との連結手段（８９）装着したことを特徴とする請求項３記載の血液成分分離装置（８１）。
【請求項６】
血液と化学物質を含む溶液を混合するための容器（６５、７５）と分離手段（６３、７３）とから構成され、
前記分離手段（６３、７３）は、分離体（６３Ｍ、７３Ｍ）を血液成分の入口と出口を有するハウジング（６３Ｈ、７３Ｈ）内に配置することにより構成され、
前記容器（６５、７５）は、蛇腹構造でそれ自体が混合液を加圧する駆動部として機能し、下部にキャップ（６４、７４Ａ）を装着し、
前記容器（６５、７５）の上部を押して、前記容器（６５、７５）内の混合液を加圧し、当該混合溶液中の血漿成分のみが、前記分離体（６３Ｍ、７３Ｍ）を透過して、前記分離手段（６３、７３）の血液成分の出口より、血漿採集容器（６９、７９）に分離採集することができる、ことを特徴とする血液成分分離装置（６１、７１）。
【請求項７】
前記血漿採集容器（７９）の支持容器（７４）を有し、当該支持容器（７４）は、外周に円筒状の支持部（７６Ｂ）を装着し、底部に血漿採集容器（７９）を装着するための小円筒（７４Ｄ）を突設し、
前記分離手段（７３）は、外周に円筒状の支持部（７６Ａ）を装着し、
当該分離手段（７３）の円筒状の支持部（７６Ａ）と前記収納容器（７４）の円筒状の支持部（７６Ｂ）は相互に、連結可能であることを特徴とする請求項６に記載の血液成分分離装置（７１）。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は血液成分分離方法および血液成分分離装置に関する。詳しくは血液成分の分離方法として、血球成分を化学物質により修飾または固定し、血球成分と血漿を分離するための簡易な分離方法及び分離装置に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
従来、血液検査に用いられる為に、血液成分を血球成分と血漿成分又は血餅と血清に分離する方法は、遠心装置を使用した方法が主として用いられている。この方法は遠心装置が必要不可欠であり、1〜10mL程度の血液が必要であることから、遠心装置を常設している施設で医師，看護婦又は検査技師などの有資格者が採血を行う必要があった。また、採血のみならず、遠心分離した血液から血漿を血球の混入がないように注意深く取り出す必要があり、操作も煩雑である。
近年、血液分析機器の性能の向上に伴い、少量の血液試料での分析が可能になったことで、不織布を多層にしたフィルターを用い、血液成分より血漿成分を分離する手法が開発された（特開平11-295302）が、この方法でも、3mL以上の血液量が必要で、また得られる血漿量は少量であり、注射器などを用いた採血に頼らざるを得ない。
また注射器などを用いた採血ではなく、ランセットを用いて指等に針等を刺して得られる少量の血液を分離する方法として、血液をガラス繊維等の膜上に垂らし、ペーパークロマトグラフの原理で血球成分と血漿或いは血清を分離する方法もあるが、血液成分を自然乾燥させた後に、界面活性剤等で目的成分を抽出する工程が必要であるなど、幾つもの煩雑な操作が必要となる上、その処理により検査に影響を与える項目については実施することができない。
またその他に、中空糸や平膜を用いた血液成分からの血漿成分の分離方法もあるが、中空糸を用いる方法では微量の血液から血漿成分を分離することは困難であるし、また平膜では血液成分分離時に血球成分、特に赤血球の溶血が見られ、検査項目への影響は避けられない。
本発明者らは上述の問題点を解決すべく鋭利検討を重ねた結果、血液中の血球成分を修飾することによって微量の血液から血球成分が崩壊することなしに血漿或いは血清を得ることが可能となる次のような発明に達した。
【０００３】
【課題を解決するための手段】
［１］本発明は、血液と化学物質を含む溶液を混合するための容器（５）と、連結手段（２）と分離手段（３）とから構成され、
前記容器（５）は上部にキャップ（７）と下部に封止部材（７Ａ）を装着し、
前記連結手段（２）は、針（２Ａ）と外筒（２Ｂ）より構成され、
前記分離手段（３）は、分離体（３Ｍ）を血液成分の入口と出口を有するハウジング（３Ｈ）内に配置することにより構成され、
前記針（２Ａ）は、前記封止部材（７Ａ）を貫通して前記容器（５）内と連通し、前記外筒（２Ｂ）は容器（５）下部外周に装着され、
自然落差にて前記容器（５）の混合溶液中の血漿成分のみが、前記分離手段（３）の分離体（３Ｍ）を透過して、前記分離手段（３）の血液成分の出口より、血漿採集容器（９）に分離採集することができる血液成分分離装置（１）を提供する。
［２］本発明は、血液と化学物質を含む溶液を混合するための容器（１５）と連結手段（１２）と分離手段（１３）と血液成分の収納手段（１４）から構成され、
前記容器（１５）は上部にキャップ（１７）と下部に封止部材（１７Ａ）を装着し、
前記連結手段（１２）は、針（１２Ａ）と外筒（１２Ｂ）より構成され、
前記分離手段（１３）は、分離体（１３Ｍ）を血液成分の入口と出口を有するハウジング（１３Ｈ）内に配置することにより構成され、
前記血液成分の収納手段（１４）は、当該収納手段（１４）内を上下に可動できる駆動手段（１６）を装着し、当該収納手段（１４）は前記分離手段（１３）の下部に装着し、
前記針（１２Ａ）は、前記封止部材（１７Ａ）を貫通して前記容器（１５）内と連通し、前記外筒（１２Ｂ）は容器（１５）下部外周に装着され、
前記駆動手段（１６）を下方に引いて、前記収納手段（１４）内を陰圧にし、前記容器（１５）の混合溶液中の血漿成分のみが、前記分離手段（１３）の分離体（１３Ｍ）を透過して、前記分離手段（１３）の血液成分の出口より、前記収納手段（１４）内に分離採集することができる血液成分分離装置（１１）を提供する。
［３］本発明は、血液と化学物質を含む溶液を混合するための容器（２５、３５、４５、５５Ａ、５５Ｂ、８５）と分離手段（２３、３３、４３、５３、８３）とから構成され、
前記分離手段（２３、３３、４３、５３、８３）は、分離体（２３Ｍ、３３Ｍ、４３Ｍ、５３Ｍ、８３Ｍ）を血液成分の入口と出口を有するハウジング（２３Ｈ、３３Ｈ、４３Ｈ、５３Ｈ、８３Ｈ）内に配置することにより構成され、
前記容器（２５、３５、４５、５５Ａ、８５）は、内部に上下に可動し混合液を加圧する駆動手段（２６、３８、４８、５８、８６）を配置し、
前記駆動手段（２６、３８、４８、５８、８６）を下方に押して、前記容器（２５、３５、４５、５５Ａ、８５）内の混合液を加圧し、当該混合溶液中の血漿成分のみが、前記分離体（２３Ｍ、３３Ｍ、４３Ｍ、５３Ｍ、８３Ｍ）を透過して、前記分離手段（２３、３３、４３、５３、８３）の血液成分の出口より、血漿採集容器（２９、３９、４９、５９、８４）に分離採集することができる血液成分分離装置（２１、３１、４１、５１、８１）を提供する。
［４］本発明は、前記容器（４５）の下部に三方活栓（４４）と血液注入口（４２）を装着した［３］に記載の血液成分分離装置（４１）を提供する。
［５］本発明は、前記分離手段（８３）に前記容器（８５）との連結手段（８２）と、前記血漿採集容器（８４）との連結手段（８９）装着した［３］記載の血液成分分離装置（８１）を提供する。
［６］本発明は、血液と化学物質を含む溶液を混合するための容器（６５、７５）と分離手段（６３、７３）とから構成され、
前記分離手段（６３、７３）は、分離体（６３Ｍ、７３Ｍ）を血液成分の入口と出口を有するハウジング（６３Ｈ、７３Ｈ）内に配置することにより構成され、
前記容器（６５、７５）は、蛇腹構造でそれ自体が混合液を加圧する駆動部として機能し、下部にキャップ（６４、７４Ａ）を装着し、
前記容器（６５、７５）の上部を押して、前記容器（６５、７５）内の混合液を加圧し、当該混合溶液中の血漿成分のみが、前記分離体（６３Ｍ、７３Ｍ）を透過して、前記分離手段（６３、７３）の血液成分の出口より、血漿採集容器（６９、７９）に分離採集することができる血液成分分離装置（６１、７１）を提供する。
［７］本発明は、前記血漿採集容器（７９）の支持容器（７４）を有し、当該支持容器（７４）は、外周に円筒状の支持部（７６Ｂ）を装着し、底部に血漿採集容器（７９）を装着するための小円筒（７４Ｄ）を突設し、
前記分離手段（７３）は、外周に円筒状の支持部（７６Ａ）を装着し、
当該分離手段（７３）の円筒状の支持部（７６Ａ）と前記収納容器（７４）の円筒状の支持部（７６Ｂ）は相互に、連結可能である［６］に記載の血液成分分離装置（７１）を提供する。
【０００４】
【発明の実施の形態】
本発明を使用して実施する血液成分分離方法は、少なくとも（１）血液成分と化学物質を含む溶液とを接触させるステップ、（２）血液成分を分離するステップを含む。
本発明で前記血液成分とは、主に赤血球、白血球及び血小板を含む血球成分と残余の血漿成分である。
前記（１）血液成分と化学物質を含む溶液と接触するステップにおいて、主に前記血球成分が化学物質により、修飾若しくは固定される。
前記血球成分は、少なくとも１つ以上の化学物質により修飾若しくは固定することができれば良い。
また前記（１）化学物質により修飾若しくは固定されるステップにおいて、化学物質により修飾若しくは固定された血液成分は物理的力が加わった場合でも、未修飾若しくは未固定の血球成分に比べその形態を保持することが可能である。
【０００５】
前記血球成分は、化学物質を含む溶液と混合され、少なくとも数分以上放置することにより修飾若しくは固定される。
前記血球成分を修飾または固定する化学物質とは、例えばアルデヒド基、ケトン基、カルボニル基、ヒドロキシル基、アミノ基、スルホン基、ニトロ基等の中から選択される少なくとも一つ以上の官能基を有する化学物質、または例えばエステル結合を有する化学物質である。
前記化学物質とは、例えばパラホルムアルデヒド、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、アクロレイン、メタノール、エタノール、プロパノール、ポリエチレングリコール、タンニン酸等である。
【０００６】
前記化学物質は生理食塩液または緩衝溶液等の水性溶液に溶解され、同化学物質の濃度は0.1〜100%に調整される。前記（２）血液成分を分離するステップにおいて、分離手段を用いて血液成分より目的とする血液成分を分離することができる。前記分離手段を用いて分離されるのは、主に血漿成分である。
本発明で前記分離手段とは、血液成分より血球成分を分離することが可能な構造をもつ分離体を含む。分離体は、例えば中空糸膜もしくは単一層ないし多層からなる平膜もしくはろ紙もしくは管状膜もしくはスポンジ質の樹脂発泡体等が使用される。これらは例えば、炭素質もしくはシリカ炭素質もしくは金属化合物質もしくはガラス質のいずれかにより構成される無機質体または、ポリマー系もしくは繊維質もしくは紙質のいずれかもしくはこれらの2種類以上の組み合わせから構成される有機質体から構成される。
また前記分離体として前記無機質体もしくは前記有機質体から構成される粒状の樹脂を積層したカラムまたはこれらと実質的に同様の構造ないし作用効果を有するもの（本発明ではこれらも含めてカラムという）を使用することができる。
【０００７】
前記分離体の材質は、例えばセルロースアセテート、ニトロセルロース、酢酸セルロース、再生セルロース、ポリビニリデンジフロライド、ポリテトラフロロエチレン、ポリカーボネート、ポリエーテルスルホン、ポリ塩化ビニリデン、ポリプロピレン、ポリエチレン、ナイロン、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリ塩化ビニル、ポリアミド、ポリイミド、アクリル共重合体、ポリウレタン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリル酸メチル、エチレン・ビニルアルコール共重合体、ポリオレフィン、ポリスチレン、銀メンブレン、グラスファイバー、ガラスウール、石英繊維、アルミナ、ガラス等である。
前記血球成分は化学物質により修飾または固定した後、加圧、引圧若しくは自然落差で、血漿成分と分離することができる。
【０００８】
前記化学物質を含む水性溶液には、必要に応じ抗血液凝固剤、安定化剤、浸透圧調整剤、防腐剤、抗生物質、リン酸緩衝液、Good緩衝液等の緩衝剤の中から選択される少なくとも一つ以上の物質ないし緩衝液を含む。
【０００９】
本発明の血液成分分離装置は少なくとも血液と化学物質を接触させる手段Ｉと、血液を化学物質により修飾または固定する手段IIを有する。
前記血液と化学物質を接触させる手段Ｉとして、少なくとも（１）血液成分と化学物質を含む溶液とを混合するための手段を有し、前記血液を化学物質により修飾または固定する手段IIとして、少なくとも前記（１）血液成分と化学物質を含む溶液とを混合するための手段中に、血液成分を修飾または固定する化学物質と同化学物質を含む水溶液を収納している。
本発明の血液成分分離装置は、少なくとも（１）血液成分と化学物質を含む水性溶液とを混合するための手段、（２）血液成分から血液成分を分離するための分離手段を有し、前記手段（１）、（２）にさらに（３）血液成分と化学物質を含む水性溶液を混合するための手段と前記分離手段とを接続する連結手段、（４）分離される血液成分の収納手段、（５）加圧または引圧を生じさせる駆動手段のいずれか一つ以上の手段を付加して構成することができる。
本発明で前記（１）血液成分と化学物質を含む水性溶液とを混合するための手段とは例えば、ポリプロピレンやポリエチレン等の高分子材料或いはガラス等の無機材料で成型された密閉性を有する容器５、１５、２５、３５、４５、５５Ａ、６５、７５、８５等であり、その形状は本発明の目的を達成することができるものであれば何でも採用することができる。但し、前記容器のうち5（例えば後述する図１参照）は容器上部及び下部が通気された時に、自然落差にて容器内溶液が下部方向の外部へ流出することが可能なものであり、また前記容器のうち３５、５５Ａ、６５、７５、８５（例えば後述する図４、図６、図７、図８、図９参照）は、その下部に分離体３３、５３、６３、７３、８３が接続可能なものである。
前記（２）血液成分から血液成分を分離するための分離手段３、１３、２３、３３、４３、５３、６３、７３、８３とは前記段落番号［０００６］に記載の分離手段そのもの（例えば平膜或いはろ紙や中空糸やスポンジ質の樹脂発泡体等）、または同分離を血液の出口と入口を有するハウジング内に配置したものであり（例えば後述する図１から図７参照）、分離手段そのもの及びハウジングの形状は、本発明の目的を達成することができるものであれば何でも採用することができる。
また前記（３）血液成分と化学物質を含む水性溶液を混合するための手段と前記分離手段３、１３、８３とを接続する連結手段２、１２、８２（例えば後述する図１、図２、図９参照）とは、封止部材７Ａ、１７Ａ、８７Ａを穿刺し、内容液等を通液する機能を持ち容易に脱着不可能な針２Ａ、１２Ａ、８２Ａ等であり、これらの形状は、本発明の目的を達成することができるものであれば何でも採用することができる。
前記（４）分離される血液成分の収納手段９、１４、２９、３９、４９、５９、６９、７９、８９（例えば後述する図１から図９参照）とは血液成分に影響を与えない材質で分離される血漿を受けることができる容器等で、また容器８４内は引圧状態で、分離手段８３内で分離された血漿を吸引する機能を有するものである。例えば、ポリプロピレンやポリエチレン等の高分子材料或いはガラス等の無機材料で成型された密閉性を有する容器等であり、これらの形状は、本発明の目的を達成することができるものであれば何でも採用することができる。
前記（５）加圧または引圧を生じさせる駆動手段１６、２６、３８、４８、５８、６５、７５、８６（例えば後述する図２から図９参照）とは、例えばシリンジのピストン１６、３８、４８、５８、８６筒体２６或いは蛇腹構造である容器６５、７５等であり、これらの上部を押すことで、容易に容器２５、３５、４５、５５Ａ、６５、７５、８５内の液体を加圧することができる機能を有し、または容器１４内を陰圧にし容器１５内の溶液を吸引する機能を有するものであり、本発明の目的を達成することができるものであれば何でも採用することができる。
【００１０】
また前記血液成分分離装置は、血液成分を化学物質により修飾若しくは固定した後、駆動手段１６、２６、３８、４８、５８、６５、７５、８６を操作し加圧若しくは引圧にて分離を行うことができる。前記分離される血液成分の収納手段は血漿分離後、他の手段と取り外しが可能である。
【００１１】
図１から図９は本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図であり、以下これらに基づいて説明する。図１から図９の血液成分分離装置はあくまでも例示であり、同様の作用効果を奏する血液成分分離装置は、全て本発明に含まれる。
図１の血液成分分離装置１は、血液と化学物質を含む溶液Ｓを混合する容器５と連結手段２と分離手段３とから構成されており、加圧や陰圧といった物理的力を用いずに容器５上部及び下部が通気することで、内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。容器５の上部及び下部には容器5の密着性を維持するため、ポリプロピレンやポリエチレン等の高分子材料或いはガラスのような無機材料で成型された栓体またはシート等の封止部材７Ａやキャップ７等が装着されている。連結手段２は合成樹脂製の針２Ａと蛇腹状の外筒２Ｂより構成され、これらの下部に分離手段３が装着される。分離手段３は例えば平膜３Ｍ（或いはろ紙や中空糸等）を血液の入口と出口を有するハウジング３Ｈ内に配置したものである。
図１の血液成分分離装置１は、例えば次の順序で血液成分分離を分離することができる。
（１）化学物質溶解液の入った容器５上部のキャップ７を外し、血液を同容器５に添加する。
（２）容器５の上部に再びキャップ７を装着し、同容器５を転倒して血液と化学物質溶解液を混和して放置する。
（３）放置後、連結手段２を容器５下部の封止部材７Ａに穿刺して装着する。針２Ａは封止部材７Ａを貫通して容器５内と連通し、蛇腹状の外筒２Ｂは容器５下部外周に装着される。
（４）容器５上部のキャップ７を開け、自然落差にて前記容器５の内容液（血液と化学物質溶解液）中の血漿成分のみを分離手段３を透過させ、容器９に分離採集する。
【００１２】
図２の血液成分分離装置１１は、陰圧力を用い、容器１５内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。図１の血液成分分離装置１と比較して、新たに分離手段１３の下部に引圧による血液成分の収納手段（分離後の血漿を回収する容器）１４を装着したものである。分離手段１３は例えば平膜１３Ｍ（或いはろ紙や中空糸等）を血液の入口と出口を有するハウジング１３Ｈ内に配置したものである。
容器１４内には同容器１４内を上下に可動できる駆動手段１６が装着されている。図２の血液成分分離装置１は、例えば次の順序で血液成分分離を分離することができる。
（１）化学物質溶解液の入った容器１５の上部のキャップ１７を外し、血液を同容器１５に添加する。
（２）容器１５の上部に再びキャップ１７を装着し、同容器１５を転倒して血液と化学物質溶解液を混和して放置する。
（３）放置後、連結部１２を容器１５下部の封止部材１７Ａに穿刺して装着する。針１２Ａは封止部材１７Ａを貫通して容器１５内と連結し、蛇腹状の外筒１２Ｂは容器１５下部外周に装着される。
（４）キャップ１７を開けるか又は容器１５に通気孔を設ける等して駆動手段１６を下方に引いて、同容器１４内を陰圧状態にして、分離手段１３を通して容器１５中の血漿成分のみを分離手段１３を透過させ、容器１４中に分離採集する。
図３の血液成分分離装置２１は、加圧力を用い、容器２５内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。
図２の血液成分分離装置１１と比較して、血液と化学物質を含む溶液を混合する容器２５の内部に上下に可動し内容液を加圧する筒状の駆動手段２６を装着し、同容器２５の下部には分離手段２３とこれにキャップ２７を装着したものである。分離手段２３は例えば平膜２３Ｍ（或いはろ紙や中空糸等）を血液の入口と出口を有するハウジング２３Ｈ内に配置したものである。
図３の血液成分分離装置２１は、例えば次の順序で血液成分分離を分離することができる。
（１）化学物質溶解液の入った容器２５から駆動手段２６を外し、血液を同容器２５に添加する。
（２）前記駆動手段２６を再び容器２５に装着し、同容器を転倒して血液と化学物質溶解液を混和して放置する。
（３）放置後、容器２５下部のキャップ２７を外し、駆動手段２６を下方に押して容器２５の内容液を加圧し、容器２５中の血漿成分のみを分離手段２３を透過させ、容器２９に分離採集する。
【００１３】
図４の血液成分分離装置３１は、加圧力を用い、容器３５内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。
図３の血液成分分離装置２１と比較して血液と化学物質を含む溶液を混合する容器３５に血液を添加し、分離時は駆動手段３８を装着し、同容器３５の下部にキャップ３７を装着し、該キャップ３７を取り外した後に分離手段３３を装着するようにしたものである。分離手段３３は例えば平膜３３Ｍ（或いはろ紙や中空糸等）を血液の入口と出口を有するハウジング３３Ｈ内に配置したものである。
図４の血液成分分離装置３１は、例えば次の順序で血液成分分離を分離することができる。
（１）化学物質溶解液の入った容器３５のキャップ３７を外し、血液を同容器３５に添加する。
（２）キャップ３７を再び容器３５に装着し、同容器３５を転倒して血液と化学物質溶解液を混和して放置する。
（３）放置後、キャップ３７をはずし、容器３５下部に分離手段３３を装着する。
（４）駆動手段３８を下方に押して容器３5の内容液を加圧し、容器３５中の血漿成分のみを分離手段２３を透過させ、容器３９に分離採集する。
【００１４】
図５の血液成分分離装置４１は、加圧力を用い、容器４５内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。
図４の血液成分分離装置３１と比較して、血液と化学物質を含む溶液を混合する容器４５の下部に三方活栓４４と血液注入口４２を装着し、これらの下部に分離手段４３を装着したものである。分離手段４３は例えば平膜４３Ｍ（或いはろ紙や中空糸等）を血液の入口と出口を有するハウジング４３Ｈ内に配置したものである。
図５の血液成分分離装置４１は、例えば次の順序で血液成分を分離することができる。
（１）血液注入口４２側が通液する方向に三方活栓４４を動かす。
（２）駆動手段４８を引いて、血液注入口４２より、血液を化学物質溶解液の入った容器４５内に注入する。
（３）容器４５が密閉される方向に三方活栓４４を再び動かす。
（４）密閉された容器４５を転倒して血液と化学物質溶解液を混和して放置する。
（５）放置後、分離手段４３が通液する方向に三方活栓を動かす。
（６）駆動手段４８を下方に押して容器４５の内容液を加圧し、容器４５中の血漿成分のみを分離手段４３を透過させ、容器４９に分離採集する。
図６の血液成分分離装置５１は、加圧力を用い、容器５５内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。
図４の血液成分分離装置３１と比較して、血液と化学物質を含みかつ血液と化学物質を混合する容器を、血液と化学物質を混合する容器５５Ａと化学物質を含む容器５５Ｂの二つに分別し、容器５５Ａ上部に内容液を加圧する駆動手段５８と容器５５Ａの下部に分離手段５３を装着するようにしたものである。分離手段５３は例えば平膜５３Ｍ（或いはろ紙や中空糸等）を血液の入口と出口を有するハウジング５３Ｈ内に配置したものである。
図６の血液成分分離装置５１は、例えば次の順序で血液成分を分離することができる。
（１）化学物質溶解液の入った容器５５Ｂに血液を添加する。
（２）容器５５Ａを容器５５Ｂに装着する。
（３）駆動手段５８を上方に引いて、容器５５Ｂ中の全内容液を容器５５Ａ中に移す。
（４）容器５５Ｂと容器５５Ａを分離し、容器５５Ａ下部をキャップ５６で密閉し転倒して血液と化学物質溶解液を混和して放置する。
（５）放置後、キャップ５６を取り外して分離手段５３を容器５５Ａの下部に装着する。
（６）駆動手段５８を下方に押して、容器５５Ａの内容液を加圧し、容器５５Ａ中の血漿成分のみを分離手段５３を透過させ、容器５９に分離採集する。
図７の血液成分分離装置６１は、加圧力を用い、容器６５内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。
図４の血液成分分離装置３１と比較して、血液と化学物質を混合する容器６５が蛇腹構造でそれ自体が内溶液を加圧する駆動部となるようにし、容器６５の口部先端に分離手段６３が装着されるようにしたものである。
分離手段６３は例えば平膜６３Ｍ（或いはろ紙や中空糸等）を血液の入口と出口を有するハウジング６３Ｈ内に配置したものである。
図７の血液成分分離装置６１は、例えば次の順序で血液成分を分離することができる。
（１）キャップ６４を外し化学物質の入った容器６５に血液を添加する。
（２）キャップ６４を再び容器６５に装着し、血液と化学物質溶解液をよく混和して放置する。
（３）放置後、キャップ６４を外して分離手段６３を装着する。
（４）容器６５の上部を押して容器６５中の血漿成分のみを分離手段６３を透過させ、容器６９に分離採取する。
【００１５】
図８の血液成分分離装置７１は、加圧力を用い、容器７５内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。
図７の血漿成分分離装置６１と比較して、分離手段７３と分離される血漿を採取する容器７９を支持する支持容器７４を含む。支持容器７４の外周には円筒状の支持部７６Ａが装着されている。また分離手段７３の外周にも円筒状の支持部７６Ａが装着されている。
またそれぞれの支持部７６Ａ、７６Ｂ同士は相互に連結可能な構造を有し、分離装置７１自体を安定した状態に保つことができるようにしたものである。
例えば図８に例示するように、容器７９を底部を有する支持容器７４内に配置する（底部に小円筒７４Ｄを突設し、該小円筒７４Ｄ内に容器７９を装着する）。前記支持部７６Ａを構成する円筒（支持部７６Ａ円筒）を、前記支持部７６Ｂを構成する円筒（支持部７６Ｂ円筒）よりも小径に形成し、若しくは、支持部７６Ｂの支持部７６Ａとの連結部を支持部７６Ａよりも小径に形成し、支持部７６Ａ円筒の外周を支持部７６Ｂ円筒の内周に装着（連結ともいう）、離脱が可能な形態とする。また支持部７６Ａ円筒の外周と支持部７６Ｂ円筒の内周に、相互に対応するネジ突起とネジ溝または支持部７６Ａ円筒と支持部７６Ｂ円筒が相互に直線状にスライド可能な線状突起と線状溝等を形成して、相互の装着（連結）と離脱を速やかにできるようにすることができる。前記「支持部７６Ｂの支持部７６Ａとの連結部を支持部７６Ａよりも小径に形成する」とは、支持部７６Ａ円筒と支持部７６Ｂ円筒の外径を同じにし、前記「ネジ突起」または「線状突起」等を形成した支持部７６Ｂ円筒の連結部を小径にすることを意味する。
また、容器７５の口部、分離手段７３の血液の出口及び容器７９の開口部（天面または血液の入口ともいう）にそれぞれ、キャップ７４Ａ、７４Ｂ、７４Ｃが装着されている。
分離手段７３は、例えば平膜７３Ｍ（或いはろ紙や中空糸等）を血液の入口と出口を有するハウジング７３Ｈ内に配置したものである。
図８の血液成分分離装置７１は、例えば次の順序で血液成分を分離することができる。
（１）化学物質溶解液の入った容器７５のキャップ７４Ａを外し、血液を同容器７５に添加する。
（２）キャップ７４Ａを再び容器７５に装着し、同容器７５を転倒混和して放置する。
（３）分離手段７３のキャップ７４Ｂと分離される血漿を採取する容器７９のキャップ７４Ｃを外し、それぞれの支持体７６Ａと７６Ｂを連結する。
（４）放置した容器７５のキャップ７４Ａを外し、同容器７５の口部と分離手段７３の血液の入り口とを連結する。
（５）容器７５の上部を押して容器７５内の溶液を分離手段７３に透過させ、分離される血漿を容器７９に採取する。
（６）支持部７６Ａを支持部７６Ｂから取り外し、キャップ７４Ｂを分離手段７３に、キャップ７４Ｃを容器７９に装着する。
図９の血液成分分離装置８１は、加圧力を用い、容器８５内溶液中の血液成分のうち血漿成分を含む溶液を分離することが可能な装置である。
図４の血液成分分離装置３１と比較して、血液と化学物質を含む溶液とを混合する容器８５の口部および分離される血漿を採取する容器８４の口部がゴム栓等の封止部材８７Ａ、８７Ｄによって密閉されているものである。
また本実施例の分離手段８３は、図１から図８に例示した分離手段３、１３、２３、３３、４３、５３、６３、７３のハウジング３Ｈ、１３Ｈ、２３Ｈ、３３Ｈ、４３Ｈ、５３Ｈ、６３Ｈ、７３Ｈ内に配置した平膜やろ紙等に代えて、中空糸膜８３Ｍを血液の入口と分離された血漿を排出する為の出口を有するハウジング８３Ｈ内に配置した実施例である。
図９の例示に従って詳細に説明すると、ハウジング８３Ｈの上部には血液の入口（連結手段８２、さらに詳述すれば液体通路を有し液体を中空糸膜８３Ｍの内側に導入する針８２Ａ、同針８２Ａには蛇腹状の外筒８２Ｂが装着されている）、右側部には中空糸膜８３Ｍでろ過された血漿を排出する為の出口（連結手段８９、さらに詳述すれば中空糸膜８３Ｍでろ過された血漿（液体）通路を有し血漿（液体）を容器８４内に導入する針８９Ａ、同針８９Ａには先端が密閉された外筒８９Ｂが装着されている）がそれぞれ装着されている。また左側部と下部には、それぞれ分離手段８３に通液する容器８５の内溶液或いは分離手段８３外に排出される血漿（液体）を透過しない材質・構造を有する通気部８８Ａと８８Ｂが装着されている。さらに同通気部８８Ａ、８８Ｂにはそれぞれ、シート状等の封止部材８７Ｂ、８７Ｃが装着され、ハウジング８３Ｈ内を外気と通気するまでは同通気部８８Ａと８８Ｂは封止部材８７Ｂ、８７Ｃによって密閉された状態である。
以上説明したように、図１から図８に例示した血液成分分離装置１、１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１において、各分離手段３、１３、２３、３３、４３、５３、６３、７３のハウジング３Ｈ、１３Ｈ、２３Ｈ、３３Ｈ、４３Ｈ、５３Ｈ、６３Ｈ、７３Ｈ（内部には平膜やろ紙等が配置される）に代えて、本
実施例のハウジング８３Ｈ（中空糸膜８３Ｍが配置される形態）を使用することも可能である。
逆に、本実施例の血液成分分離装置８１において、分離手段８３のハウジング８３Ｈ（中空糸膜８３Ｍが配置される形態）に代えて、図１から図８に例示した血液成分分離装置１、１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１の前記ハウジング３Ｈ、１３Ｈ、２３Ｈ、３３Ｈ、４３Ｈ、５３Ｈ、６３Ｈ、７３Ｈ（内部には平膜やろ紙等が配置される）を使用することも可能である。
図９の血液成分分離装置８１は、例えば次の順序で血液成分を分離することができる。
（１）駆動部８６を上部に引き抜き、血液と化学物質を含む溶液とを混合する容器８５内に血液を添加する。
（２）再び駆動部８６を容器８５に装着し、同容器８５を転倒混和し、放置する。
（３）分離手段８３の封止部材８７Ｃを外し、中空糸膜８３Ｍ内部を外気と通気する。同分離手段８３の連結手段８２（針８２Ａ）を容器８５の封止部材８７Ａに穿刺して装着し、同容器８５内の溶液が同分離手段８３に通液可能な状態にする。
（４）容器８５上部の駆動手段８６を押し、同容器８５内の溶液を加圧し、分離手段８２に全量通液する。
（５）中空糸膜８３Ｍによって、血漿成分のみがろ過され、中空糸膜８３Ｍ外に漏洩する。
（６）封止部材８７Ｃを分離手段８３に再び装着し、同分離手段８３の封止部材８７Ｂを外す。
（７）分離手段８３の連結部８９（針８９Ａ）を分離される血漿成分を採取する容器８４に穿刺して装着する。
（８）容器８４内は陰圧のため、分離手段８３内で分離膜８３Ｍを通して分離された血漿が、連結部８９（針８９Ａ）を通して、全て容器８４内に採取される。
（９）分離される血漿採取後、容器８４から分離手段８２を取り外す。
【００１６】
【実施例】
実施例１
本実施例は血球成分を修飾または固定する化学物質の種々の濃度によって血球成分の固定を行い、血漿成分の分離の可不可を検討したものである。
本実施例では、以下の材料を使用した。
人血液を用い、分離手段として多孔質体ポリマーの平膜(親水化処理ポリプロピレン、親水性ポリビニリデンジフロライド、ニトロセルロース、親水性ポリカーボネイト、親水性ポリテトラフロロエチレン)：直径13〜25mm、孔径0.65〜5.0μm、またはガラス繊維製のろ紙：直径13mm、保留粒子径0.4〜0.6μm、血球成分を修飾または固定する化学物質として、25%グルタルアルデヒド溶液、パラホルムアルデヒド、ホルムアルデヒド、タンニン酸、オスミウム酸、メタノール、また必要に応じて使用する前記化学物質の溶解液として生理的リン酸緩衝食塩水（PBS）、駆動手段及び血液と化学物質を含む溶液を混合する容器としてシリンジ（2.5mL）、分離体として前記平膜付きハウジング（ミリポア社製）を使用した。
具体的な血液成分の分離方法は以下の通りである。
１．25%グルタルアルデヒド溶液，パラホルムアルデヒド、ホルムアルデヒド、タンニン酸、オスミウム酸をそれぞれPBSに溶解し、0.25〜5%範囲の溶液を調整した。メタノールはそのまま原液を使用した。（以下これら全てを総称し化学物質含有溶液とする）
２．分離手段（平膜またはろ紙）をハウジングに組み込んだ。
３．人血液成分400μLと化学物質含有溶液1600μLを混合し、5分間放置した。
４．シリンジで混合液を1mL吸引し、シリンジの先端部に平膜付きハウジングを接続した。
５．シリンジを加圧し、血漿と血球成分に分離した。
結果を表１に示す。
全ての化学物質含有溶液にて、血球成分を修飾または固定化した場合、溶血も無く血漿の分離が可能であった。
【００１７】
試験に使用した多孔質分離体の詳細は次の通りである。
１．親水化処理ポリプロピレン(PP)製フィルター：直径13mm、孔径1.2、2.5μm
２．親水性ポリビニリデンジフロライドフィルター（PVDF）：直径13、25mm、孔径0.65、5.0μm
３．ニトロセルロースフィルター：直径13、25mm，孔径1.2、0.8、3.0μm
４．親水性ポリテトラフロロエチレン(PTFE)フィルター：直径13mm、孔径1.2μm
５．親水性ポリカーボネイト(PC)フィルター：直径13mm、孔径1.0μm
６．ガラス繊維製のろ紙：直径13mm、保留粒子径0.4、0.6μm
【表１】
0003942912.tif 000002
【００１８】
実施例２
本実施例は血球成分を修飾または固定する化学物質としてグルタルアルデヒド及びホルムアルデヒドを用い、固定化時間を変え、血球成分の固定を行い、血漿の分離の可不可を検討した。
本実施例では、以下の材料を使用した。
人血液を用い、分離手段を構成する高分子膜としてポリビニリデンジフロライド製の平膜：直径13mm，孔径0.65μm、血球成分を修飾または固定する化学物質として、25%グルタルアルデヒド溶液、ホルムアルデヒド溶液、化学物質の溶解液として生理的リン酸緩衝食塩水（PBS）、リン酸ナトリウム緩衝液、駆動手段及び血液と化学物質を含む溶液を混合する容器としてシリンジ（2.5mL）、分離体として前記平膜付きハウジング（ミリポア社製）を使用した。具体的な血液成分の分離方法は以下の通りである。
１．グルタルアルデヒドをPBSに溶解し、0.25%グルタルアルデヒド・PBS溶液を調整した。
２．ホルムアルデヒドをリン酸緩衝液に溶解し、2%ホルムアルデヒド・リン酸緩衝液を調整した。
３．分離手段（平膜）をハウジングに組み込んだ。
４．血液成分400μLと0.25%グルタルアルデヒド・PBS溶液1600μLとを混合し、0〜40分間放置した。
５．血液成分400μLと2%ホルムアルデヒド・リン酸緩衝液1600μLとを混合し、0〜40分間放置した。
６．シリンジで混合液を1mL吸引し、シリンジの先端部にフィルターハウジングを接続した。
７．シリンジを加圧し、血漿と血球成分に分離した。
結果を表２に示す
【００１９】
【表２】
0003942912.tif 000003
表２から分かるように、血液成分を化学物質にて固定処理してから２分間以上放置することで、赤血球の溶血なしに血液成分から血漿成分が分離できることが分かった。しかし、固定処理直後は赤血球の溶血がみられ血漿成分を分離することは困難であった。
【００２０】
実施例３
本実施例は血球成分を修飾または固定する化学物質としてグルタルアルデヒド及びホルムアルデヒドを用いて血球成分の固定を行い、分離された血漿成分（GOT，GPT，TP，TCHO，TGL，Glu)の分析を行った。
本実施例では、以下の材料を使用した。
血液成分として人の血液成分、分離手段として多孔質体ポリマーの平膜(親水化処理ポリプロピレン、親水性ポリビニリデンジフロライド、ニトロセルロース、親水性ポリカーボネイト、親水性ポリテトラフロロエチレン)：直径13〜25mm、孔径0.65〜1.2μm、血球成分を修飾または固定する化学物質として、25%グルタルアルデヒド溶液、ホルムアルデヒド溶液、化学物質の溶解液として生理的リン酸緩衝食塩水（PBS）、リン酸ナトリウム緩衝液、駆動手段及び血液と化学物質を含む溶液を混合する容器としてシリンジ（2.5mL）、を使用した。また血漿成分の測定装置として、日本電子社製自動分析装置BM-2000Cを使用した。具体的な血液成分の分離方法は以下の通りである。
１．グルタルアルデヒドをPBSに溶解し、0.25%グルタルアルデヒド・PBS溶液を調整した。
２．ホルムアルデヒドをリン酸緩衝液に溶解し、2%ホルムアルデヒド・リン酸緩衝液を調整した。
３．分離手段（平膜）をハウジングに組み込んだ。
４．血液成分400μLと0.25%グルタルアルデヒド・PBS溶液1600μLとを混合し、0〜40分間放置した。
５．血液成分400μLと2%ホルムアルデヒド・リン酸緩衝液1600μLとを混合し、0〜40分間放置した。
６．シリンジで混合液を2mL吸引し、シリンジの先端部にフィルターハウジングを接続した。
７．シリンジを加圧し、血漿と血球成分に分離した。
８．分離した血漿の５成分につき自動分析装置BM-2000Cにて測定した。
９．化学物質で処理していない血液から血清を分離したものを測定対照として用い、この血清の測定値に対する一致率を求めた。
結果を表３及び表４に示す。
【００２１】
試験に使用した多孔質分離体の詳細は次の通りである。
フィルターＡ：親水性ポリビニリデンジフロライドフィルター（PVDF）：孔径0.65μm
フィルターＢ：ニトロセルロースフィルター：孔径0.8μm
フィルターＣ：親水性ポリテトラフロロエチレン(PTFE)フィルター：孔径1.2μm
フィルターＤ：親水性ポリカーボネイト(PC)フィルター：孔径1.0μm
【表３】
0003942912.tif 000004
【表４】
0003942912.tif 000005
表３より、0.25%グルタルアルデヒドで固定処理した血液から分離された血漿と血清との測定値一致率は、全ての測定項目において70%以上を示した。一方、表４より2%ホルムアルデヒドで固定処理した血液から分離された血漿では、GOTやGTP測定値が血清測定値の数倍以上を示し、Gluの測定値は血清測定値に対して60%程度の一致率であったが、その他の項目は全て97%以上の一致率を示した。血液をホルムアルデヒドで処理した場合GOT，GTP及びGlu測定系に何らかの影響がでていることが考えられるが、これらの測定項目はグルタルアルデヒドで処理した血漿では血清との一致率が70%以上を示している。従って、血液を処理するときの固定剤を選別使用することにより、分離された血漿成分の測定は十分可能である。
【００２２】
【発明の作用効果】
本発明の方法を用いることにより、遠心装置が無い場合でも血漿の分離が可能となり、また少量の血液からでも血漿を分離することが可能となる。
従来、血液成分を濾過する際に、血球成分を化学物質により修飾または固定する操作を行わない場合、溶血や十分な血漿量の分離が得られないと課題があったが、本発明では、血球成分を化学物質により修飾または固定する操作を行うことにより、血液成分の濾過中に細胞（血球成分）が変形せず、平膜等の薄い膜や中空糸等の分離手段により血漿成分の分離を行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【図２】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【図３】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【図４】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【図５】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【図６】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【図７】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【図８】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【図９】本発明の血液成分分離装置の一例を示す概略図
【符号の説明】
１、１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１  血液成分分離装置
２、１２、８２、８９  連結手段
２Ａ、１２Ａ、８２Ａ、８９Ａ  針
２Ｂ、１２Ｂ、８２Ｂ、８９Ｂ  外筒
３、１３、２３、３３、４３、５３、６３、７３、８３  分離手段
３Ｈ、１３Ｈ、２３Ｈ、３３Ｈ、４３Ｈ、５３Ｈ、６３Ｈ、７３Ｈ、８３Ｈ  ハウジング
３Ｍ、１３Ｍ、２３Ｍ、３３Ｍ、４３Ｍ、５３Ｍ、６３Ｍ、７３Ｍ、８３Ｍ  分離体（平膜、或いはろ紙或いは中空糸等）
１４、８４  陰圧にて分離後の血漿を採集する血漿採集容器（収納手段）
９、２８、３９、４９、５９、６９、７９  分離後の血漿を採集する血漿採集容器（収納手段）
５、１５、２５、３５、４５、５５、５５Ａ、５５Ｂ、６５、７５、８５  血液と化学物質を含む溶液を混合する手段（容器）
１６、２６、３８、４８、５８、６５、７５、８６  駆動手段
７、１７、２７、３７、５６、６４、７４Ａ、７４Ｂ、７４Ｃ  キャップ
７Ａ、１７Ａ、８７Ａ、８７Ｂ、８７Ｃ、８７Ｄ  封止部材
４２  血液注入口
４４  三方活栓
７４  （血漿採集容器の）支持容器
７６Ａ、７６Ｂ  支持部
７４Ｄ  （支持容器の）小円筒
８８Ａ、８８Ｂ  通気部
Ｓ  血液と化学物質を含む溶液
【図１】
0003942912.tif 000006
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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