(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式：
CH3SO2N(Y)N(CONHR)SO2CH3
（式中、Ｙは−CH3または−CH2CH2Clであり、Ｒは−Ｃ1〜Ｃ7アルキル、シクロヘキシル、メチルシクロヘキシル、−CH2CH＝CH2、−CH2CH2Cl、−CH2CH2Cl、−CH2COOC2H5、−CH（CH3）COOC2H5または−CH（CH2C6H5）COOC2H5である。）で表される化合物。
【請求項２】
Ｙが−CH2CH2Clであり、Ｒが−CH2CH2Cl、−CH2CH＝CH2または−CH3である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒが−CH2CH2Clまたは−CH3である請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒが−CH2CH2Clである請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
上記C1〜C7アルキルがメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシルおよびイソヘキシルからなる群から選ばれる請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
次の式
CH3SO2N(Y)N(CONHR)SO2CH3
（式中、Ｙは−CH3または−CH2CH2Clであり、Ｒは−Ｃ1〜Ｃ7アルキル、シクロヘキシル、メチルシクロヘキシル、−CH2CH＝CH2、−CH2CH2Cl、−CH2CH2CH2Cl、−CH2COOC2H5、−CH(CH3)COOC2H5または−CH(CH2C6H5)COOC2H5である。）で表される化合物の治療有効量からなる、哺乳動物の悪性腫瘍治療用製薬組成物。
【請求項７】
さらに、製薬的に許容できる賦形剤、添加剤または担体を含有する請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
Ｙが−CH2CH2Clであり、Ｒが−CH2CH2Cl、−CH2CH＝CH2または−CH3である請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
Ｒが−CH2CH2Clまたは−CH3である請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
Ｒが−CH2CH2Clである請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
上記C1〜C7アルキルがメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシルおよびイソヘキシルからなる群から選ばれる請求項６に記載の組成物。
【請求項１２】
静脈内投与剤形である請求項７に記載の組成物。
【請求項１３】
筋肉内投与剤形である請求項７に記載の組成物。
【請求項１４】
経口投与剤形である請求項７に記載の組成物。
【請求項１５】
次の式
CH3SO2N(Y)N(CONHR)SO2CH3
（式中、Ｙは−CH3または−CH2CH2Clであり、Ｒは−Ｃ1〜Ｃ7アルキル、シクロヘキシル、メチルシクロヘキシル、−CH2CH＝CH2、−CH2CH2Cl、−CH2CH2CH2Cl、−CH2COOC2H5、−CH(CH3)COOC2H5または−CH(CH2C6H5)COOC2Hである。）で表される化合物の治療有効量を投与することからなる哺乳動物の悪性腫瘍治療のための製薬組成物。
【請求項１６】
Ｙが−CH2CH2Clである請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
上記C1〜C7アルキルがメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシルおよびイソヘキシルからなる群から選ばれる請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
Ｙが−CH2CH2Clであり、Ｒが−CH2CH2Cl、−CH2CH＝CH2または−CH3である請求項１５に記載の組成物。
【請求項１９】
Ｒが−CH2CH2Clまたは−CH3である請求項１８に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は哺乳動物において抗腫瘍活性を示す２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）ヒドラジン類に関する。本発明の他の態様は、特に固形腫瘍を含む新形成の治療方法である。
この研究は国立予防衛生研究所(National Institute of Health)の助成金を得て行われたものである。従って、合衆国政府は本発明の権利の一部を所有する。
背景技術
強力な抗腫瘍活性を示す化合物の研究は、１，３−ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレア（ＢＣＮＵ）などのニトロソウレア化合物と関連薬剤に注目して行われて来た。これまで数種のＮ−（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソウレア類（ＣＮＵ）の化合物が臨床評価されて、脳腫瘍、結腸癌やリンパ腫に対して顕著な抗腫瘍活性を持つことが立証されている（DeVita et al.,Cancer Res.1965,25,1876-1881;Nissen,et al.,Cancer 1979,43,31-40参照）。BCNUや１−（２−クロロエチル）−３−シクロヘキシル−１−ニトロソウレア（CCNU）など臨床に使用されているCNUの分解生成物が特性付けられた結果、クロロエチル化性、カルバモイル化性やヒドロキシエチル化性の化合物を含む数種の反応生成物が同定された（例えば、Montgomery,et al.,J.Med.Chem.1967,10,668-674;Montgomery,et al.,J.Med.Chem.1975,18,568-571;Weinkam and Lin,J.Med.Chem.1979,22,1193-1198;およびBrundrett,R.B.,J.Med.Chem.1980,23,1245-1247参照）。
CNUの抗腫瘍性は、DNAがクロロエチル化され、その後で架橋されて発生するのであると提案されている（Kohn,K.W.in Recent Results in Cancer Research(Carter,S.K.,Sakurai,Y.Umezawa,H.編集）,vol.76,p.141,Springer,Berlin(1981))。カルバモイル化活性を持たない多くのクロロエチル化薬剤が優れた抗腫瘍活性を示すことが観察されて、この考え方が支持されている。（例えば、Shealy,et al.,がJ.Med.Chem.1984,27,664-670で論じているクロメソン（clomesone））。さらに、CNUのクロロ基をヒドロキシル基で置換したところ、抗腫瘍活性が大幅に低下した（Gibson,et al.がCancer Res.1986,46,553-557において引用しているMontgomery,J.A.の私信）。また、DNAをヒドロキシエチル化すると発癌性および／または突然変異誘発性を持つ結果となることを示す確実な証拠がある（Pelfrene,et al.,J.Natl.Cancer Inst.1976,56,445-446;およびSwenson,et.al.,J.Natl.Cancer Inst.1979,63,1469-1473）。
ヒドロキシエチル化はCNUの抗腫瘍活性に良い影響を与えないと考えられる一方、カルバモイル化種（即ち、イソシアネート）が果たす役割についても若干の点で分かっていない。CNUから発生するイソシアネートはタンパク質のチオールやアミンの官能性と反応してDNAポリメラーゼを阻害し（Baril,et al.Cancer Res.1975,35,1-5）、DNAストランドの修復（Kann,et al.,Cancer Res.1974,34,398-402）やRNAの合成とプロセッシング（Kann,et al.,Cancer Res.1974,34,1982-1988）が妨げられる。その上、BCNUはグルタチオン還元酵素、リボヌクレオチド還元酵素、およびチオレドキシン還元酵素を阻害することが証明されている（Schallreuter,et al.,Biochem.Biophys.Acta1990,1054,14-20）。この同じ特性の一部がCNUsの有毒な副作用の一因となっていると信じているものは多いけれども（Colvin,et al.,Biochem. Pharmacol.1976,25,695-699;Wheeler,et al.,Cancer Res.1974,34,194-200;およびPanasci,et al.,Cancer Res.1977,37,2615-2618）、GibsonおよびHickmanがマウスのTLX腫瘍に対するBCNUの効果を検討して推論しているように、細胞内で放出されるイソシアネート類が、特定タイプの腫瘍の一部に対するCNUsの生物活性を弱める役割を果たしていることも大きな可能性がある。ダウ化学会社（Dow Chemical Company）が研究開発した腫瘍剤であるカラセマイド（Caracemide）（Newman and Farquhar,Invest.New Drugs 1987,5,267-271およびSlatter,et al.,Chem.Res.Toxicol.1993,6,335-340）はメチル・イソシアネートが潜伏している形（alatent form）で作用すると考えられている。この薬剤はこれまでに、無胸腺症マウスの副腎（subrenal capsules）に異種移植した哺乳動物のＭＸ−１腫瘍とヒトのＣＸ−１結腸腫瘍を始めとする多くの国立癌研究所腫瘍モデルに活性があることが証明されている。（Division of Cancer Treatment,National Cancer Instituteの臨床冊子「カラセマイド  ＮＳＣ  ２５３２７２」）。
CNUから発生するヒドロキシエチル化種、２−ヒドロキシエチルジアゾヒドロキシドは、４，５−ジヒドロ−１，２，３−オキサジアゾールから形成されると考えられている。また、この４，５−ジヒドロ−１，２，３−オキサジアゾールはＮ−ニトロソ基の内部環形成反応による結果であると仮定されている（Brundrett,R.B.,J.Med.Chem.1980,23,1245-1247）。Ｎ−ニトロソ基は酵素によるCNUsの不活性化にも関与している。例えば、BCNUを肝臓ミクロソーム酵素で、NADPH依存性の反応により脱ニトロソ化すると、不活性化して１，３−ビス（２−クロロエチル）ウレアが形成される（Hill,et al.,Cancer Res.1975,35,296-301およびLin and Weinkam,J.Med.Chem.1981,24,761-763）。脱ニトロソ化反応はCCNUの場合、NADPH:シトクロムＰ４５０還元酵素によって触媒される（Potter and Reed,Arch.Biochem.Biophys.1982,216,158-169およびPotter and Reed,J.Biol.Chem.1983,258,6906-6911）。BCNUはまた、ラット（Smith,et al.,Cancer Res.,1989,49,2621-2625）およびヒト（Berhane,et al.,Cancer Res.,1993,53,4257-4261）のグルタチオン・Ｓ−トランスフェラーゼ・ミュー・アイソザイム類（glutathione S-transferase mu isoenzymes）によって触媒されて、グルタチオン依存性の脱ニトロソ化をすることが証明されている。
腫瘍細胞が触媒する脱ニトロソ化が、おそらくはCNU類に対する耐性発生のメカニズムであると考えられるので、本発明者らは、(a)クロロエチル化性またはクロロメチル化性の化合物を発生させることができ、(b)カルバモイル化性の化合物を生成することができ、(c)ヒドロキシエチル化活性がなく、(d)しかも代謝性不活性化に極めて弱い構造的特徴がない一連の化合物を合成することを目的とした。
本発明者らは、次の理由から、２−アミノカルボ−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）ヒドラジン類（Ｉ）が上記の条件を満足させると確信した。すなわち、
(a)塩基で触媒して化合物（Ｉ）を除くと、下記のクロロエチル化性またはクロロメチル化性化合物とカルバモイル化薬剤が形成される。
0003869007.tif 000002
(b)化合物IIから、少なくとも３クラスの強い抗腫瘍活性を持つプロドラッグ、即ち１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロメチル）ヒドラジン、１−（２−クロロエチル）−１，２，２−トリス（メチルスルホニル）ヒドラジン（Shyam,et al.,J.Med.Chem.,1990,33,2259-2264）および１−アシル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−２−（２−クロロエチル）ヒドラジン（Shyam,et al.,J.Med.Chem.,1993,36,3496-3502）が同定された。
(c)Ｎ−ニトロソ部分がないことにより、４，５−ジヒドロ−１，２，３−オキサアゾール中間体の形成を妨げうる。これによって２−ヒドロキシエチル化剤の形成を防止できるかも知れない。また、Ｎ−ニトロソ基がないと、化合物の代謝性不活性化の傾向を低下させうる。
発明の目的
本発明の目的は、動物およびヒトの固形腫瘍を始めとする多くの癌疾患の治療に有効な、効果的な抗腫瘍剤を提供することにある。
本発明の他の目的は、カルバモイル化性またはクロロエチル化性の化学物質を発生することが出来る抗腫瘍剤を提供することにある。
本発明のさらに他の目的は、関連構造を持つ化合物よりも、代謝により不活性化される傾向が少ない効果的な抗腫瘍剤を提供することにある。
本発明のさらに他の目的は、これらの新規の抗腫瘍剤を使用することよりなる製薬組成物を提供することにある。
本発明のさらに他の目的は、動物およびヒトの固形腫瘍を始めとする新形成の治療方法を提供することにある。
本発明のこれらの目的および／または他の目的は、下記の本発明の説明によって容易に理解することができる。
発明の要旨
本発明は、次の式：
CH3SO2N(Y)N(CONHR)SO2CH3
で表される２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）ヒドラジン化合物類に関する。式中、Ｙは−CH3または−CH2CH2Clであり、ＲはＣ1〜Ｃ7のアルキル、シクロヘキシル、メチルシクロヘキシル、−CH2CH=CH2、−CH2CH2Cl、−CH2CH2CH2Cl、−CH2COOC2H5、−CH(CH3)COOC2H5，または−CH(CH2C6H5)COOC2H5である。
本発明の最良の化合物においては、Ｙは−CH2CH2Clであり、Ｒは−CH2CH2Cl、−CH2CH=CH2または−CH3である。Ｒは最も好ましくは−CH2CH2ClまたはCH3である。Ｃ1〜Ｃ7アルキル置換基は好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシルおよび置換ヘキシルからなる群から選ばれる。本発明の化合物は、既に開示されている化学合成法を含み、当業者たちが容易に知ることができる合成方法によって製造される。
本発明はさらに、上記の２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）ヒドラジン化合物の抗腫瘍有効量よりなる製薬組成物に関する。これらの製薬組成物は好ましくは、製薬的に許容できる添加剤、担体または賦形剤を含有する。
本発明はさらに、癌患者に２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）ヒドラジン化合物の抗腫瘍有効量を投与することよりなる哺乳動物の新形成の治療方法に関する。本発明の最良の態様は、一以上のこれら薬剤の抗腫瘍有効量を患者投与することからなる固形悪性腫瘍の治療方法である。諸種の癌疾患状態の中、特に白血病、肺癌、黒色腫や小網細胞肉腫を、本発明の化合物を用いて治療することができる。
発明の詳細な説明
本明細書を通して、「新形成(neoplasia)」とは癌性または悪性の新生物、即ち細胞の繁殖によって増殖し、しばしば正常組織よりも増殖速度が速く、新しい増殖が始まる原因であった刺激が終わった後も増殖を続ける、異常な組織の形成と増殖を招来する病理過程を指す。悪性新生物は、正常組織との構造の構成や機能の連携の一部または全部を欠いていて、ほとんどの場合隣接部位に侵入し、数カ所の部位に転位し、除去しようと試みても再発し、適切な治療を欠く場合、患者を死に至らしめる。本明細書では新形成なる語は、癌と関連するあらゆる疾患状態の説明に使用し、悪性の血行性腫瘍、腹水性腫瘍および固形腫瘍に関連する病理過程を包含するものとする。
本明細書を通して「抗腫瘍有効量」なる語は、癌性腫瘍患者の治療に本化合物類を使用することにより、新生物がさらに増殖するのを防止し、増殖をコントロールして、好ましくは腫瘍を緩解させることができる用量を指す。
本明細書を通して「治療有効量」なる語は、癌に罹患している、特にヒトの患者を始めとする哺乳動物患者に投与して、血行性腫瘍、腹水腫瘍性や固形腫瘍の増殖や拡散を減退または阻害する本発明の化合物の用量を指す。好ましくは、本発明の化合物により悪性の血行性腫瘍、腹水性腫瘍および固形腫瘍を緩解させる。固形腫瘍の場合、本発明の化合物により腫瘍組織がさらに増殖するのを阻害し、現存する腫瘍が縮化する。
本発明は、次の式：
CH3SO2N(Y)N(CONHR)SO2CH3
で表される２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）ヒドラジン化合物類に関する。式中、Ｙは−CH3または−CH2CH2Clであり、ＲはＣ1〜Ｃ7アルキル、シクロヘキシル、メチルシクロヘキシル、−CH2CH=CH2，−CH2CH2Cl、−CH2CH2CH2Cl、−CH2COOC2H5、−CH(CH3)COOC2H5，または−CH(CH2C6H5)COOC2H5である。
本発明の最良の化合物においては、Ｙは−CH2CH2Clであり、Ｒは、−CH2CH2Cl、−CH2CH=CH2、または−CH3である。Ｒは最も好ましくは−CH2CH2ClまたはCH3である。ＲがＣ1〜Ｃ7アルキルである場合、Ｒはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシルまたは置換ヘキシルからなる群から選ばれる。
これらの化合物は２−アミノカルボニル基を含有しており、例えば、多くの固形腫瘍を始めとする、広範囲の新生物疾患状態に強力な活性を示す。インビボのスクリーニング・テストでは、広範囲の新生物疾患状態に対して広範囲な活性を示した。ＲがCH2CH2Clである一例では、この化合物は意外にも市販のアルキル化抗腫瘍剤もうちでも最も効果があるマイトマイシンＣやシクロホスファミドよりも優れた抗腫瘍活性を示したことは予想をせざるところであった。
これらの本化合物は、クロロエチル化、メチル化および／またはカルバモイル化のメカニズムにより活性を示すようになると考えられているプロドラッグ剤形の中間体である。
本発明の化合物は主として、固形腫瘍に対する活性を含め、主として抗腫瘍活性があるが故に有用である。さらに、これらの組成物は、治療薬としてあるいは他の目的に有用である、他の有用な抗腫瘍剤の化学合成の際の中間体として使用することもできる。
本発明の化合物は、当業者によく知られている方法を用いて合成できる。下記で示すように、トリエチルアミン存在下、乾燥アセトニトリル中で、１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−メチルヒドラジンまたは１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）ヒドラジンを、適当なイソシアネート（Ｒが指示通りの構造であるか、または関連アルキル構造であるもの）と反応させて、２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）ヒドラジン類（Ｉ、Ｙは−CH3または−CH2CH2Clである）を合成する。この反応系で使用する適当なイソシアネート誘導体は、当業者にもよく知られている、標準的な化学方法を用いて合成する。
0003869007.tif 000003
合成後、一般に残滓を粉砕して、希釈した酸で洗い、乾燥の上、再び粉砕し、適当な溶媒、例えばエタノールまたはエタノール／石油エーテルで再結晶する。通常の技術を持つ当業者は、容易にここに開示した化学合成方法を変更して、これら本化合物の異なる合成経路を作ることが出来る。
本発明はさらに、上記の２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）−ヒドラジン化合物の治療有効量からなる製薬組成物類に関する。一以上のこれら化合物の治療有効量とは、悪性腫瘍などの癌患者の治療に使用できる用量を言う。これらの製薬組成物には、好ましくは製薬的に許容できる添加剤、担体または賦形剤が含有される。
本発明の悪性固形腫瘍治療用製薬組成物において、これらの組成物は一以上の上記２−アミノカルバモイル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（置換）ヒドラジン化合物類の、治療しようとする腫瘍の増殖を有効に阻止し、ある場合には治療しようとする腫瘍を実際に縮化できる用量からなる。
当業者は、悪性腫瘍の治療に使用するこれら本発明の化合物の治療有効量は、治療する患者（動物またはヒト）、並びに治療しようとする疾患の状況や条件、重篤度、実施しようとする治療計画、所望の結果（外科手段または放射線を併用しての腫瘍の緩解、縮化）、化合物を輸送するための投与のタイプ、使用する化合物の薬学的な動態によって変わってくることを認識している。
本発明の製薬態様においては、一以上の本発明の化合物に、好ましくは製薬的に許容できる添加剤、担体または賦形剤を配合して製剤にする。一般に製薬組成物は、非経口的に投与できる剤形（好ましくは、静注）で投与することが好ましいが、筋肉内、経皮、経頬、皮下、座薬、経口またはその他の経路で投与する剤形も考慮に入れるべきである。勿論、当業者の一は、本発明の組成物を不安定にしたり、あるいは治療活性を弱化させることなく、本明細書が教示する剤形を変えて、特定の投与経路に適する剤形を数多く作ることができる。
例えば、本発明の化合物の水その他の賦形剤に対する溶解性を高める場合には、例えば、当業者の通常技術の範囲内である、小幅な変性（塩を処方する、エステル化するなど）を加えさえすれば達成することができる。さらに、特定化合物の投与経路や投与の仕方（dosage regimen）を変えて、治療する患者に最大の有益な効果を与えることができるように、薬物動態を管理することも、通常技術の範囲内である。本発明では、持続性剤形および／または徐放性剤形の製薬組成物も考慮に入れている。
これらの本発明の化合物はプロドラッグ剤形の反応性中間体である。ある投与態様（dosage form）おいて、主成分の特定投与経路を利用するために、本化合物をその他の形態のプロドラッグに変更することができる。当業者は、本化合物を他のプロドラッグ形態に変えて、患者の標的部位に対する主成分の輸送を促進することが容易にできることを認識するであろう。当業者はさらに、可能な場合、プロドラッグ形態の有利な薬物動態パラメーターを利用して、抗腫瘍効果が最大となるように、患者の標的部位にこれらの本化合物を輸送することができる。
治療に有効な剤形における本発明の化合物の含量は、悪性腫瘍の治療に有効な用量でなければならない。一般に、投与剤（dosage form）中に含有される  本発明の化合物の治療有効量は、通常、治療される患者の体重換算で約０．０５ｍｇ／ｋｇ未満から約５００ｍｇ／ｋｇまでの範囲であるが、用いられている化合物、治療している腫瘍のタイプ、治療部位に局在化できる主成分の能力、投与経路、および患者の体内における化合物の薬物動態によってはこの範囲を大幅に超えることが出来る。固形腫瘍を治療する場合では、化合物投与量は好ましくは一回当たり約０．０５ｍｇ／ｋｇから約２５０ｍｇ／ｋｇの範囲である。この投与量範囲から、主成分の有効血中濃度が患者の血液１ｍｌ当たり約０．０１〜約５００マイクログラムとなる。治療期間は治療する病態如何で、一日以上、または数ヶ月間、または相当の長期間（複数年）となる。
主成分の投与形式は、連続投与（静脈内点滴注入）から筋肉内投与、一日当たり数回の経口投与（例えば、一日４回）、非経口与に亘り、さらには投与経路の中特に、静脈内と筋肉内、経口、局所、皮下、経皮（この場合、浸透促進剤を含有していても良い）、経頬、および座薬などによる投与を含む。
本発明の製薬組成物は、一以上の本発明化合物の治療有効量を、好ましくは従来からの製薬製剤方法により製薬的に許容できる担体とよく混合して、一回服用量づつの製剤に製造する。担体は、例えば、経口あるいは非経口いずれのか投与用として、広範囲の剤形のものが利用できる。
非経口製剤の場合、無菌水または塩化ナトリウム水溶液を担体として用い、エタノールなどの拡散助剤や、特にDMSOを始めとする製薬的に許容できる溶媒などを併用する。用いる溶液が無菌状態で使用したり、維持するため、組成物と担体もまた殺菌しなければならないことは言うまでもない。注射用懸濁液も適当な液体担体と懸濁剤などを用いて製造することができる。
経口剤形の製薬組成物を製造する場合は、一以上の通常製薬媒体を使用することができる。したがって、懸濁液、エリキシルや、溶液などの経口用液体製剤では、水、グリコール、油、アルコール、香料、防腐剤、着色剤などを含む適当な担体類や添加剤類を使用することができる。粉末、錠剤、カプセルなどの経口用固体製剤および座薬などの固体製剤では、澱粉や、デキストロース、マンニトール、ラクトース、関連担体などの砂糖担体、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、バインダー、崩壊剤などを始めとする適切な担体や添加剤を使用することができる。所望の場合には、錠剤やカプセルを標準技術により腸溶糖衣剤または徐放糖衣剤にすることができる。
本発明の化合物や組成物は、ヒトを含む哺乳動物の癌の治療に使用される。一般に悪性腫瘍治療の場合には、非経口的、好ましくは静脈内投与剤形で、約２５マイクログラム〜約５００ｍｇ以上を一日１回〜４回投与する。本化合物は非経口的に投与することが好ましいが、他の方法、例えば経口投与、または局所投与または座薬による投与でも良い。
本発明の化合物類は単独投与しても良いし、特に本発明の他の化合物を始めとする他の薬剤と併用投与しても良い。さらに、本発明では一以上の本発明の化合物と、特に、抗代謝物、エポトシド（epotoside）、ドキソルビシン、タキソール（taxol）、ビンクリスチン、シクロホスファミド、または、マイトマイシンＣなどの他の抗腫瘍剤との併用化学療法を考慮している。
理論によって確定はしていないが、本発明の化合物は悪性腫瘍治療の場合、ヒドロキシエチル化活性を呈することなく、主としてクロロエチル化剤とカルバモイル化剤とが合剤である如く機能して治療効果を誘発していると信じられている。
本発明を、純粋な例示としての次の例により説明する。当業者は、これらの例が如何なる意味においても限定的なものではないこと、例にある細かい事項を変更しても本発明の精神と範囲からは逸脱することはできないことを理解している。
例
実験の部
合成：融点はThomas-Hoover融点装置の毛細管で測定したが、修正は行っていない。1Ｈ ＮＭＲスペクトルはテトラメチル・シランを内部標準とするVarian EM-390分光光度計により記録した。元素分析はBaron Consulting Co.,Orange,CTに委嘱したが、データは２−アミノカルバモイル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）ヒドラジン類の理論値の±０．４％であった。
例１
１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）−２−（２−クロロエチル）アミノカルバモイルヒドラジン（III）の合成
１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）ヒドラジン（Shyam,et al.,J.Med.Chem.,1990,33,2259-2264）（２．５ｇ、０．０１０ｍｏｌ）と２−クロロエチル・イソシアネート（１．２ｇ、０．０１１ｍｏｌ）とを乾燥アセトニトリル（１００ｍＬ）に溶解した溶液を攪拌しながら、室温でトリエチルアミン（１．１ｇ、０．０１１ｍｏｌ）を添加した。さらに１０分後、反応混合物を真空中で蒸発乾燥した。残滓を石油エーテル１５ｍＬづつで２回粉砕し、粉砕の度に石油エーテル層を棄てた。その後残滓を酢酸エーチル（１５０ｍＬ）により取り出し、希釈塩酸（3×１５ｍＬ）で洗った。酢酸エチル層を無水硫酸マグネシウム上で乾燥して濾過した。溶媒を蒸発して、半固体の残滓を得、さらにこの残滓を無水エタノールとともに粉砕して白色の固体を得た。これをエタノールで再結晶して首題の化合物１．５ｇ（４２．２％）を得た：ｍｐ  ９６−９７．５℃；1Ｈ ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）σ７．０（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、３．７−４．２（ｍ、４Ｈ、SO2NCH2CH2Cl）、３．５−３．７（ｍ、４Ｈ、CONHCH2CH2Cl）、３．５および３．３（２ｓ、６Ｈ、２CH3）。分析（C7H15C12N3O5S2）C、H、N。
例２〜７
２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）ヒドラジン類の合成
例１で説明した化合物（III）と同様な方法を用いて次の化合物類を製造した。
例１の方法により１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）−２−メチルアミノカルボニルヒドラジン（IV）を合成した。化合物IVをエタノールで再結晶した：収率４２．４％；ｍｐ １４６−１４７．５℃；1Ｈ ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）σ６．７（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、３．７−４．２（ｍ、４Ｈ、CH2CH2Cl），３．５および３．３（２ｓ、６Ｈ、２ CH3）、２．９（ｄ、３Ｈ、NCH3）。分析（C6H14ClN3O5S2）C、H、N。
例１の方法により２−アリルアミノカルボニル１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）ヒドラジン（Ｖ）を合成した。化合物Ｖをエタノールで再結晶した：収率４２．２％；ｍｐ １０５−１０６℃；1Ｈ ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）σ６．９（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、５．６−６．１（ｍ、１Ｈ、CH＝C），５．４、５．２および５．１（３ｄ、２Ｈ、C＝CH2）、３．７−４．２（ｍ、６Ｈ、NHCH2およびCH2CH2Cl）、３．５および３．３（２ｓ、６Ｈ、２CH3）。分析（C8H16ClN3O5S2）C、H、N。
例１の方法により１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）−２−（３−クロロプロピル）アミノカルボニルヒドラジン（VI）を合成した。化合物VIはエタノールで再結晶した：収率３５．２％；ｍｐ８５−８６℃；1Ｈ ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）σ６．８（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、３．７−４．２（ｍ、４Ｈ、SO2NCH2CH2Cl），３．４−３．８（ｍ、６Ｈ、CH2CH2Cl）、３．５および３．３（２ｓ、６Ｈ、２CH3）。分析（C8H17Cl2N3O5S2）C、H、N。
例１の方法により１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）−２−（エトキシカルボニルメチル）アミノカルボニルヒドラジン（VII）を合成した。化合物VIIをエタノールで再結晶した：収率４２．２％；ｍｐ １２１−１２２℃；1Ｈ ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）σ７．１（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、３．７−４．４（ｍ、８Ｈ、OCH2、NHCH2およびCH2CH2Cl）、３．５および３．３（２ｓ、６Ｈ、２CH3）、１．２（ｔ、３Ｈ、CCH3）。分析（C9H18ClN3O7S2）C、H、N。
例１の方法により１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）−２−（１−エトキシカルボニルエチル）アミノカルボニルヒドラジン（VIII）を合成した。化合物VIIIをエタノールで再結晶した：収率２８．０％；ｍｐ １１１−１１２℃；1Ｈ ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）σ６．９（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）、３．７−４．６（ｍ、７Ｈ、OCH2、NHCHおよびCH2CH2Cl），３．５および３．３（２ｓ、６Ｈ、２CH3）、１．４（ｄ、３Ｈ、CHCH3）、１．２（ｔ、３Ｈ、CH2CH3）。分析（C10H20ClN3O7S2）C、H、N。
例１の方法により１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）−２−（１−エトキシカルボニル−２−フェニルエチル）アミノカルボニルヒドラジン（IX）を合成した。化合物IXをエタノール・石油エーテルで再結晶した：収率１２．８％；ｍｐ １０６−１０７℃；1Ｈ ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）σ７．１−７．３（ｍ、５Ｈ、C6H5）、６．８（ｂｒ、１Ｈ、ＮＨ）４．６（ｍ、１Ｈ、ＮＨＣＨ）、３．６−４．３（ｍ、６Ｈ、OCH2およびCH2CH2Cl），３．５（ｓ、３Ｈ、CH3SO2）、３．０−３．３（ｓ、ｍ、５Ｈ、CH2C6H5，CH3SO2）、１．２（ｔ、３Ｈ、CH2CH3）。分析（C16H24ClN3O7S2）C、H、N。
同じアミノカルボニル置換基を含有する２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−メチルヒドラジン化合物類を、同様にして上記で説明した合成プロトコルに従って製造した。
例８
抗腫瘍活性
数種の細胞系、即ちＬ１２１０白血病，Ｂ１６Ｆ１０黒色腫、Ｍ５０７６小網細胞肉腫、Ｍ１０９肺癌、およびＬＸ−１肺癌に対する抗腫瘍活性を試験した。
Ｌ１２１０白血病試験
Ｌ１２１０白血病細胞は、米国立癌研究所(National Cancer Institute)の癌治療腫瘍保管部門であるFrederick癌研究施設から恵贈され、組織の連続継体培養によって維持した。８週間おきに、この腫瘍細胞を８〜１０週齢のドナーＣＤ2Ｆ1マウス５匹に腹腔内注射して、７日間増殖させた。腹腔内の液を採取して、懸濁液を１６００ｇで５分間遠心分離した。上澄み液をデカントし、予めウシ胎児血清１０％とＬ−グルタチオン１％を含有させてあるＲＰＭＩ  1640培地１０ｍＬ中に１０5細胞／ｍＬを接種して、再度培養中に維持した。抗腫瘍活性の検定では、受容マウス一匹につきＬ１２１０白血病細胞１０5を含有する細胞懸濁液０．１ｍＬづつを腹腔内注射した。腫瘍移植後２４時間から始まる連続６日間、一日一回の頻度で広範囲の用量で実験化合物を投与した。剤形はすべて、ジメチルスルホキシド（DMSO）１００％に溶解した溶液、投与経路は腹腔内注射、一回投与量は０．０２５ｍＬ以下であった。実験の度に、マウスを同じ様な体重を持つ５匹宛の群に分け、実験期間を通し給餌はPurina Laboratory Chowペレットを与え、水は随意に飲ませた。実験の度に、腫瘍を持つ動物に類似用量の賦形剤のみを与えてコントロールとした。実験期間中のマウスの体重を計測し、治療開始から終了までの間の体重変化の％を薬剤毒性のインジケーターとして利用した。これらの実験化合物に対する新生物の感受性は、化合物治療によって達成された延命効果によって判定した。
Ｌ１２１０の実験結果
第一回実験においてマウスの腹腔内（ip）にＬ１２１０白血病細胞を移植し、これらマウスの生存時間に対する効果を測定することにより、化合物III〜IXの腫瘍阻害特性を判定した。実験結果は要約して下記表１に示している。
化合物VIを除き、合成した薬剤すべては、腹腔内注射した一種以上の投与量により、Ｌ１２１０白血病マウスの「完治」率１００％を（腫瘍移植後６０日で腫瘍が消失するとの定義により）達成した。化合物VIは一日当たり投与量１５ｍｇ／ｋｇ以上を連続６日間続けて評価されなかったことだけが原因となって、上記の効果を挙げることが出来なかったと思われる。しかしながら、最も高い投与量による実験では、化合物VIは腫瘍マウスに対して部分的な治癒率を示していた。化合物IIIおよびIVの治療力はアミノ酸エステル誘導体、即ち化合物VII,VIIIおよびIXよりも遙かに高いと思われた。この中、メチル・ウレア誘導体(IV)は、腫瘍マウスに連続６日間５ｍｇ／ｋｇを投与して完治率４０％を示し、体重の減少は起こらなかった。この薬剤はさらに、１０および１５ｍｇ／ｋｇ×６でＬ１２１０白血病マウスの完治率は１００％であったが、６％未満の体重減少があった。構造的にBCNUの類縁化合物と見なすことができる、２−クロロエチル・ウレア誘導体(III)は１０〜２０ｍｇ／ｋｇ×６で白血病マウスの完治率が８０〜１００％であったが、最も高い投与量２０ｍｇ／ｋｇによる実験では体重減少が１０．４％と若干の毒性があるように見受けられた。アリル・ウレア誘導体（Ｖ）も同じ腫瘍に対して高い効果を示し、連続６日間一日当たり１５ｍｇ／ｋｇを投与して１００％のマウスを完治した。アミノ酸エステル誘導体（VII〜IX）は、一般に化合物III〜Ｖよりも遙かに力が弱く、至適治癒率を挙げるためには２５〜１００ｍｇ／ｋｇ範囲の一日当たり投与量を必要とし、しかも治療初期から高い投与量を与える度にマウスが死亡した。
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Ｂ１６Ｆ１０黒色腫、Ｍ５０７６小網細胞肉腫、Ｍ１０９肺癌およびＬＸ−１肺癌の実験
Ｂ１６Ｆ１０黒色腫細胞はインビトロで、最小必須培地にウシ胎児血清１０％と１％Ｌ−グルタミン溶液２００ｍＭを添加してあるハンクス液を入れて、単層培養により増殖した。培養物を新たにトリプシン化して、Ｂ１６Ｆ１０細胞を１０6／ｍＬを含有する細胞懸濁液を作り、１２〜１４週齢のＣ５７ＢＬ／６雌マウスの右側腹部に一匹につき懸濁液０．１ｍＬを皮内注射して固形腫瘍を作った。１０〜１２日後、約１００ｍｍ3の腫瘍を持つマウスを、化合物IIIまたはIVをＤＭＳＯ１００％に溶解した溶液の腹腔内注射で連続６日間治療し、腫瘍の体積を１０００ｍｍ3となるまで一日おきに測定した。
Ｍ５０７６小網細胞肉腫は二週間おきに、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに腫瘍フラグメントを皮下移植することにより継体し、Ｍ１０９肺癌は同様にしてＢＡＬＢ／ｃマウスにより継体した。ヒトＬＸ−１は肺癌は、２〜３週間毎にＢＡＬＢ／ｃ系バックグラウンド無胸腺症（nu／nu）マウスの皮下に継体した。これらの腫瘍系で使用するときには、化合物IIIを次のように溶解した。すなわち、（ａ）１００％DMSOに溶解して、溶液の用量を１０マイクロリットルに一定して静注した。または、（ｂ）ＤＭＳＯの最終濃度が１０％となるように食塩水で希釈したDMSO溶液中に溶解して、０．１ミリリットル／体重１ｇの用量を静注した。このように処方を変えることによって、異なる腫瘍系に対する至適投与量が異なるという結果を得た。マイトマイシンＣとシクロホスファミドは、食塩水に溶解して投与した。ＢＣＮＵとＭｅＣＣＮＵとは、エタノールに溶解して、投与する前に水で１：９（ｖ／ｖ）に希釈した。
Ｂ１６Ｆ１０黒色腫の実験では一群当たりマウス５匹、およびＭ５０７６肉腫、Ｍ１０９癌とＬＸ−１癌の実験では一群当たりマウス８匹を使用した。評価の度に化合物一種につき少なくとも２種の投与量を用い、薬物治療の開始期間はＭ５０７６肉腫およびＭ１０９癌の場合は腫瘍移植後２４時間とした。ＬＸ−１実験の場合は、腫瘍移植後６日において腫瘍マウスを選別し、治療群とコントロール群とに分け、腫瘍の重量が５０〜１００ｍｇの範囲にあり、腫瘍重量の中間値が各群とも類似するようにした。治療結果は次の基準で表すものとする：（ａ）治療群対コントロール群（即ち、％Ｔ／Ｃ値）生存時間の相対中間値（ＭＳＴ）および長時間生存マウスで表される延命効果、および（ｂ）、治療したマウス（Ｔ）と治療しなかったコントロール・マウス（Ｃ）の腫瘍サイズが、ＬＸ−１癌の場合は０．５ｇに、またはネズミ新生物（murine neoplasms）の場合は１ｇになるまでの相対中間時間を計算して、第一腫瘍増殖阻害（primary tumor growth inhibition）を測定する。腫瘍の重量は１ｍｍ3＝１ｍｇの割合で腫瘍の大きさに変換することができる。延命活性の基準は、Ｔ／Ｃが≧１２５％である。腫瘍阻害活性の基準は、対数で１の細胞殺傷（one log10cell kill;LCK）に一致する腫瘍増殖の遅延であった。この程度の効力を達成するに必要な絶対Ｔ−Ｃ値は、すべての実験において実験毎に異なっていたし、コントロール・マウスの腫瘍体積倍増時間に依存していた。腹腔内移植のＭ１０９実験において治療マウスが日１０以前に死亡した場合、またＬＸ−１癌の実験に置いて腫瘍が０．５ｇになる前にマウスが死亡した場合、皮下移植した他のすべて腫瘍モデルの実験において腫瘍が１ｇとなる前に死亡した場合、すべて死因は薬品の毒性によるものと見なした。薬品の毒性を原因とする死亡が一例以上発生した群は、抗腫瘍効果の評価には算入しなかった。データの統計評価は、Gehanの一般化Wilcoxan testを用いて行った（Gehan,Biometrika,1965,52,203-233）。
Ｂ１６Ｆ１０黒色腫、Ｍ５０７６小網細胞肉腫、Ｍ１０９肺癌およびＬＸ−１肺癌の実験結果
上記で説明したように、Ｌ１２１０系で実験した中で最も活性が高く、最も強力な化合物の一つである化合物IIIは、数種の他の移植腫瘍（下記の表２）に対しても評価を行った。腹腔内移植のＭ１０９肺癌モデルにおいて、実験した最も高い投与量、即ち５０ｍｇ／ｋｇを４日間隔で３回腹腔内投与したところ、この化合物は２６７の％Ｔ／Ｃを示した。同じ系を用いた他の実験では、アセチル誘導体（Ｘ）は実験した最も高い投与量（注射一回当たり６０ｍｇ／ｋｇ）を同一の投与方法で腹腔内投与したところ、％Ｔ／Ｃは匹敵する値である２３１を示した（Shyam,et al.,J.Med.Chem.1993,36,3496-3502）。
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化合物IIIは、皮下（ｓｃ）移植のＭ１０９肺癌に対しても評価を行った。このモデルを用いた第一回実験では、食塩水で希釈した１０％DMSO溶液に溶解したものを、注射一回当たり化合物IIIとして５０ｍｇ／ｋｇを４日おきに、合計３回静注により投与した。この時達成された最大％Ｔ／Ｃ（１１５）は有効（active）な結果であるとは考えられなかったが、これらの条件下で有意な腫瘍増殖の遅延（Ｔ−Ｃ）８．３日が観察された。対照薬品として用いられたマイトマイシンＣは１０３の最大％Ｔ／Ｃ値と１０日の腫瘍増殖の遅延（データ図示省略）とを示した。化合物IIIの第二回評価では、投与方法を若干変え、投与量も変えて４種、賦形剤は２種、即ち食塩水で希釈した１０％DMSO溶液と１００％DMSO溶液に、化合物IIIを２４，３２，４８および６４ｍｇ／ｋｇを配合したものを３日おきに、合計４回注射した。賦形剤として食塩水で希釈した１０％DMSO溶液を用いて投与した場合、注射一回当たり化合物IIIを各々２４および３２ｍｇ／ｋｇで、最大％Ｔ／Ｃ１４３と最大腫瘍増殖遅延９．３日を示した。しかしながら、評価した投与量の中二番目に高い注射一回当たり４８ｍｇ／ｋｇは極めて致死性が高かった。評価した投与量で最も高い注射一回当たり６４ｍｇ／ｋｇは、賦形剤として１００％DMSO溶液を使用しために可能となったものであるが、治療に関連する死亡例を起こすことなく、最大％Ｔ／Ｃ１４５および腫瘍増殖遅延１７．８日を示した。この後者の抗腫瘍効果は、賦形剤として食塩水で希釈した１０％DMSO溶液を用いて化合物IIIを投与して達成した最良のＴ−Ｃ値よりも統計的に優れていた（ｐ＜０．０１）。この第二回実験ではシクロホスファミドとマイトマイシンＣを対照薬剤として使用した。前者の薬剤は最大％Ｔ／Ｃ１４３および腫瘍増殖遅延８．８日、マイトマイシンＣは最大％Ｔ／Ｃ１３４およびＴ−Ｃ値９．３日を示した（データは示さない）。先に報告されているように、化合物Ｘはこの腫瘍に対して最大％T／Ｃ１３６および最大Ｔ−Ｃ値１４．５日を示した（Shyam,et al.,J.Med.Chem.,1993,36,3496）。
皮下に移植したＭ５０７６小網細胞肉腫に対しても、化合物IIIの評価を行った。賦形剤として１００％DMSO溶液を用いて注射一回当たり化合物III４８ｍｇ／ｋｇ程度を一日おき５日間投与したところ、統計８匹のうち６匹を完治したので、この群については腫瘍のサイズが１グラムとなる中間時間（Ｔ−Ｃ値）を求めなかった。１００％DMSO溶液のみ与えられたマウスの腫瘍増殖は、治療をされていないコントロール・マウスのそれと区別が付かない程度であった。１−（２−クロロエチル）−３−（４−メチルシクロヘキシル）−１−ニトロソウレア（MeCCNU）とBCNUとは、比較のためこの実験に加えた。前者は注射一回当たり１６ｍｇ／ｋｇを４日間おきに、合計３回静注することにより、最大％Ｔ／Ｃ１２８および腫瘍増殖遅延３３．５日を示した。一方、上記と同一の治療計画によりBCNUを静注したところ、％Ｔ／Ｃは１５７を超え、８匹の中２匹が完治し、Ｔ−Ｃは６２日を越えた（データは示さない）。カルバモイル化活性がないクロロエチル化剤である化合物Ｘは，この腫瘍に対する活性が、化合物IIIやBUNUよりも遙かに弱い、したがって、恐らくはイソシアネート中間体の発生が、クロロエチル化剤のＭ５０７６肉腫に対する抗腫瘍活性に寄与することが考えられる。
無胸腺症マウスの皮下に異種移植したヒト肺腫瘍、ＬＸ−１、を用いて、化合物IIIの抗腫瘍力を実験した。腫瘍の重量中間値が約１００ｍｇとなった、移植後６日目に治療を開始した。注射一回当たり化合物III４０ｍｇ／ｋｇを１００％DMSO溶液に溶解した注射液を、一日おきに計５回静注するのが至適投与量であった。この療法では標的サイズ０．５ｇとなるまでの腫瘍増殖に対して遅延中間値１４．５日を示した。この活性水準、１．６ＬＣＫ、は、同一の実験でBCNUが達成した中間値よりも望ましい結果である。この時のBCNUは注射一回当たり２０ｍｇ／ｋｇを、４日間おきに計３回静注する至適投与量で、Ｔ−Ｃ１１．８日（１．３ＬＣＫ）を示した。
さらに、化合物IIIとIVの両方を、１００％DMSOに溶解した溶液で、マウスの内皮（id）に移植したＢ１６Ｆ１０に対する評価を行った。第一回実験では、移植後１０日から化合物IVを一日当たり投与量２０ｍｇ／ｋｇを、一日一回、連続６日間続けた結果、Ｔ−Ｃは１５．５日であった。同一の実験において、同じ治療計画により化合物IIIを用いた場合は、増殖遅延は１１日であった。第二回実験では、化合物IVの一日当たり投与量を３０ｍｇ／ｋｇに増量したところ、増殖遅延値が大幅に上昇して２５．５日となったが、化合物IIIは一日投与量を同様に３０ｍｇ／ｋｇに増量しても活性が低く、Ｔ−Ｃ値は１３．５日であった。つまり、このクラスの薬剤のＢ１６Ｆ１０黒色腫に対する抗腫瘍効果は、アミノカルバモイル成分如何で、高くなったり低くなったりするのである。
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まとめ
要約すると、２−アミノカルボニル−１，２−ビス（メチルスルホニル）−１−（２−クロロエチル）ヒドラジン類は、マウスのＬ１２１０白血病に対して活性が高い。このクラスの代表的な薬剤である化合物IIIは、より条件が厳しい遠位部位の腫瘍モデルに対して著しい活性を持っており、この検定試験において比較のために用いた臨床的に最も活性があるアルキル化剤のいくつかよりも優れているか、または同等であることが見出されたのは、全く意外であり、予想を超えるものであった。さらにまた、Ｂ１６Ｆ１０黒色腫に対して化合物IIIとIVとを比較したところ、アミノカルボニル基が、達成可能な抗腫瘍活性の度合いに影響することが立証された。
当業者は、上記の説明と実施例は本発明を如何に実施するかを示しているものであって、如何なる意味においても限定するものではないことを理解している。また、本明細書で提示している詳細事項を変更しても、次の特許請求で範囲を定めている本発明の精神と範囲から逸脱することはできない。