【手続補正書】
【提出日】平成28年4月15日(2016.4.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
場合により配列番号７６と少なくとも６５％のヌクレオチド配列同一性を有する２３Ｓ  ｒＲＮＡを含み、場合により偏性従属栄養性であり、且つ場合により細胞が単一炭素源としてのショ糖上で成長することができるように外来性ショ糖インベルターゼ遺伝子を含む、油産生微細藻類細胞であって、前記細胞が、活性ＬＰＡＡＴ酵素をコードする外来遺伝子を含み、前記細胞が、トリグリセリドを含む油を産生し、前記油は、ＬＰＡＡＴ活性によって：
（ａ）中鎖脂肪酸を含むトリグリセリドが高濃度化され；又は
（ｂ）飽和−不飽和−飽和型のトリグリセリドが高濃度化される、
細胞。
【請求項２】
前記油のトリグリセリドは、４０、５０、６０、７０、又は８０％又はそれを超えるＣ８：０、Ｃ１０：０、Ｃ１２：０、Ｃ１４：０、又はＣ１６：０脂肪酸を含む、請求項１に記載の細胞。
【請求項３】
前記細胞は、
（ａ）活性脂肪酸アシル−ＡＣＰチオエステラーゼをコードする外来遺伝子であって、場合により、前記油の前記トリグリセリドは、前記外因性ＬＰＡＡＴ及びアシル−ＡＣＰチオエステラーゼが発現する結果として中鎖脂肪酸が７０％より大きい割合だけ高濃度化される、外来遺伝子；
（ｂ）外因性ＫＡＳ  Ｉ又はＫＡＳ  ＩＶ酵素をコードする働き又は内因性ＫＡＳ  Ｉ酵素の活性を低下させる働きをする組換え核酸；及び／又は
（ｃ）ＦＡＭＥ  ＧＣ／ＦＩＤによるときリノール酸及びリノレン酸が合計５面積パーセント以下である油を生成するため、場合により調節可能なプロモーターによって、デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼの発現を低下させる働きをする核酸
をさらに含む、請求項１又は２に記載の細胞。
【請求項４】
前記油は、ＳＯＳ、ＰＯＳ、及び／又はＰＯＰが高濃度化され、場合により、前記油は、少なくとも５０％のＳＯＳ、場合により１０％未満のＳＳＳを含むトリグリセリドを含む、請求項１に記載の細胞。
【請求項５】
（ａ）ステアロイル−ＡＣＰデサチュラーゼ遺伝子、脂肪酸アシル−ＡＣＰチオエステラーゼ遺伝子、又は両方のノックアウト又はノックダウン；及び／又は
（ｂ）β−ケトアシルＣｏＡシンターゼ活性を増加させる働きをする組換え核酸であって、場合により、前記β−ケトシルシンターゼ活性を増加させる働きをする核酸が、β−ケトアシルＣｏＡシンターゼをコードする外来遺伝子を含む、組換え核酸
をさらに含む、請求項４に記載の細胞。
【請求項６】
（ａ）油中のステアリン酸塩とオレイン酸塩との比が３：１±２０％である；
（ｂ）前記油中のＰＯＰ、ＳＯＳ、及びＰＯＳが、合計で少なくとも３０％含まれる；
（ｃ）前記油が少なくとも３０％のＰＯＳを含む；
（ｄ）前記油が、１６％±２０％のＰＯＰ、３８％±２０％のＰＯＳ、及び２３％±２０％のＳＯＳを含む；及び／又は
（ｅ）前記油の前記脂肪酸プロフィールが１〜４％のアラキジン酸を含む、
請求項４又は５に記載の細胞。
【請求項７】
（ａ）前記細胞が、リノール酸及びリノレン酸が合計５面積パーセント以下である油を生成するため、場合により調節可能なプロモーターによって、デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼの発現を低下させる働きをする核酸をさらに含む；
（ｂ）前記油が、６５％超のＳＯＳ、４５％未満の不飽和脂肪酸、５％未満の多価不飽和脂肪酸、１％未満のラウリン酸、及び２％未満のトランス脂肪酸を有する；及び／又は
（ｃ）前記ＬＰＡＡＴが、配列番号７８若しくは配列番号７９のアミノ酸配列又は配列番号７８若しくは配列番号７９と少なくとも９５％の同一性を有する配列を有する、
請求項４〜６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項８】
Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ属の細胞であり、場合によりＰｒｏｔｏｔｈｅｃａ  ｍｏｒｉｆｏｒｍｉｓ種の細胞である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の細胞を提供又は培養する工程と、前記油を抽出
する工程とを含む、油の生成方法であって、前記細胞が場合により従属栄養培養される、
方法。
【請求項１０】
請求項９により生成されるトリグリセリドを含む油であって、場合により、以下：
少なくとも１０％のエルゴステロール；
エルゴステロール及びβ−シトステロールであって、エルゴステロールとβ−シトステ
ロールとの比は２５：１より大きい、エルゴステロール及びβ−シトステロール；
エルゴステロール及びブラシカステロール；
エルゴステロール、ブラシカステロール、及びポリフェラステロール；
の１つ以上を含み、
場合により、β−シトステロール、カンペステロール、及びスチグマステロールの１つ
以上を含まない、油。
【請求項１１】
（ａ）前記油がβ多形結晶を形成し、場合により、前記結晶が２Ｌラメラ構造又は３Ｌラメラ構造を有し、あるいは（ｂ）前記油がβ’多形結晶を形成し、場合により、前記結晶が２Ｌラメラ構造又は３Ｌラメラ構造を有する、請求項１０に記載の油。
【請求項１２】
（ａ）前記トリグリセリドが、ステアリン酸塩とパルミチン酸塩との合計割合が、オレイン酸塩の割合に２．０を乗じたもの±４０％に等しいことを特徴とする脂肪酸プロフィールを有する；
（ｂ）前記油が、６５％超のＳＯＳトリグリセリド、４５％未満の不飽和脂肪酸、５％未満の不飽和脂肪酸類、１％未満のラウリン酸、及び２％未満のトランス脂肪酸を有する；
（ｃ）前記脂肪酸プロフィールにおけるステアリン酸塩とパルミチン酸塩との合計割合がオレイン酸塩の割合の２倍±２０％であり、場合により、前記ｓｎ−２プロフィールが少なくとも４０％のオレイン酸塩を有する；
（ｄ）前記油が、少なくとも４０、５０、６０、７０、８０、又は９０％のＳＯＳである；ならびに／あるいは
（ｅ）前記油が、３０℃〜４０℃の融解温度を有するロールイン用ショートニングであり、場合により、
（ｉ）β’多形結晶を含む；
（ｉｉ）３５℃で１５％未満の固形脂肪含有量を有する；及び／又は
（ｉｉｉ）１５〜２０％のＣ８〜Ｃ１４脂肪酸、４５〜５０％のＣ１６以上の脂肪酸、及び／又は３０〜２５％の不飽和脂肪酸を含む、
請求項１０又は１１に記載の油。
【請求項１３】
請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の油を使用して製造される食品、燃料又は化学
製品。
【請求項１４】
配列番号７７〜７９と少なくとも９０％の同一性を有し、場合により、配列番号７７〜７９と少なくとも９５％の同一性又は少なくとも９８％の同一性を有するタンパク質をコードする核酸を含む構築物、ベクター、染色体又は宿主細胞。
【請求項１５】
配列番号８０〜８５又は遺伝子コードの縮重の理由で等価な配列と少なくとも８０、９０、９５、９６、９７、９８、又は９９％の配列同一性を有する核酸を含む、請求項１４に記載の構築物、ベクター、染色体、又は宿主細胞。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
別の態様において、本発明は、配列番号７７〜７９と少なくとも９０％の同一性を有するタンパク質をコードする核酸を含む構築物、ベクター、染色体又は宿主細胞を提供する。ある場合には、核酸は、配列番号７７〜７９と少なくとも９５％の同一性を有するタンパク質をコードする。ある場合には、核酸は、配列番号７７〜７９と少なくとも９８％の同一性を有するタンパク質をコードする。ある場合には、核酸は、配列番号８０〜８５又は遺伝子コードの縮重の理由で等価な配列と少なくとも８０、９０、９５、９６、９７、９８、又は９９％の配列同一性を有する。
本発明は、例えば、以下の項目も提供する。
（項目１）
場合により配列番号７６と少なくとも６５％のヌクレオチド配列同一性を有する２３Ｓ  ｒＲＮＡを含み、場合により偏性従属栄養性であり、且つ場合により細胞が単一炭素源としてのショ糖上で成長することができるように外来性ショ糖インベルターゼ遺伝子を含む、油産生微細藻類細胞であって、前記細胞が、活性ＬＰＡＡＴ酵素をコードする外来遺伝子を含み、前記細胞が、トリグリセリドを含む油を産生し、前記油は、ＬＰＡＡＴ活性によって：
（ａ）中鎖脂肪酸を含むトリグリセリドが高濃度化され；又は
（ｂ）飽和−不飽和−飽和型のトリグリセリドが高濃度化される、
細胞。
（項目２）
前記油のトリグリセリドは、４０、５０、６０、７０、又は８０％又はそれを超えるＣ８：０、Ｃ１０：０、Ｃ１２：０、Ｃ１４：０、又はＣ１６：０脂肪酸を含む、項目１に記載の細胞。
（項目３）
前記細胞は、活性ＦＡＴＢアシル−ＡＣＰチオエステラーゼをコードする外来遺伝子をさらに含む、項目１又は２に記載の細胞。
（項目４）
前記油の前記トリグリセリドは、前記外因性ＬＰＡＡＴ及びアシル−ＡＣＰチオエステラーゼが発現する結果として中鎖脂肪酸が７０％より大きい割合だけ高濃度化される、項目３に記載の細胞。
（項目５）
前記細胞は、外因性ＫＡＳ  Ｉ又はＫＡＳ  ＩＶ酵素をコードする働き又は内因性ＫＡＳ  Ｉ酵素の活性を低下させる働きをする組換え核酸をさらに含む、項目１〜４のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６）
前記細胞は、ＦＡＭＥ  ＧＣ／ＦＩＤによるときリノール酸及びリノレン酸が合計５面積パーセント以下である油を生成するため、場合により調節可能なプロモーターによって、デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼの発現を低下させる働きをする核酸をさらに含む、項目１〜５のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７）
前記油は、飽和−不飽和−飽和型のトリグリセリドが高濃度化される、項目１に記載の細胞。
（項目８）
前記油は、ＳＯＳ、ＰＯＳ、及び／又はＰＯＰが高濃度化される、項目７に記載の細胞。
（項目９）
前記油は、少なくとも５０％のＳＯＳ、場合により１０％未満のＳＳＳを含むトリグリセリドを含む、項目８に記載の細胞。
（項目１０）
ステアロイル−ＡＣＰデサチュラーゼ遺伝子、ＦａｔＡ遺伝子、又は両方のノックアウト又はノックダウンをさらに含む、項目８又は９に記載の細胞。
（項目１１）
β−ケトアシルＣｏＡシンターゼ活性を増加させる働きをする組換え核酸をさらに含む、項目７〜９のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１２）
前記β−ケトシルシンターゼ活性を増加させる働きをする核酸が、β−ケトアシルＣｏＡシンターゼをコードする外来遺伝子を含む、項目１１に記載の細胞。
（項目１３）
油中のステアリン酸塩とオレイン酸塩との比が３：１±２０％である、項目７〜１２のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１４）
前記油中のＰＯＰ、ＳＯＳ、及びＰＯＳが、合計で少なくとも３０％含まれる、項目７〜１３のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１５）
前記油が少なくとも３０％のＰＯＳを含む、項目７〜１４のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１６）
前記油が、１６％±２０％のＰＯＰ、３８％±２０％のＰＯＳ、及び２３％±２０％のＳＯＳを含む、項目７〜１５のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１７）
前記油の前記脂肪酸プロフィールが１〜４％のアラキジン酸を含む、項目７〜１６のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１８）
前記細胞が、リノール酸及びリノレン酸が合計５面積パーセント以下である油を生成するため、場合により調節可能なプロモーターによって、デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼの発現を低下させる働きをする核酸をさらに含む、項目７〜１７のいずれか一項に記載の細胞。
（項目１９）
前記油が、６５％超のＳＯＳ、４５％未満の不飽和脂肪酸、５％未満の多価不飽和脂肪酸、１％未満のラウリン酸、及び２％未満のトランス脂肪酸を有する、項目７〜１７のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２０）
前記ＬＰＡＡＴが、配列番号７８若しくは配列番号７９のアミノ酸配列又は配列番号７８若しくは配列番号７９と少なくとも９５％の同一性を有する配列を有する、項目１〜１９のいずれか一項に記載の細胞。
（項目２１）
項目１〜２０のいずれか一項に記載の細胞を提供又は培養する工程と、前記油を抽出する工程とを含む、油の生成方法であって、前記細胞が場合により従属栄養培養される、方法。
（項目２２）
項目２１により生成されるトリグリセリドを含む油。
（項目２３）
少なくとも１０％のエルゴステロール；
エルゴステロール及びβ−シトステロールであって、エルゴステロールとβ−シトステロールとの比は２５：１より大きい、エルゴステロール及びβ−シトステロール；
エルゴステロール及びブラシカステロール；
エルゴステロール、ブラシカステロール、及びポリフェラステロール；
の１つ以上を含み、
場合により、β−シトステロール、カンペステロール、及びスチグマステロールの１つ以上を含まない、項目２２に記載の油。
（項目２４）
前記油がβ多形結晶を形成する、項目２２に記載の油。
（項目２５）
前記結晶が２Ｌラメラ構造を有する、項目２４に記載の油。
（項目２６）
前記結晶が３Ｌラメラ構造を有する、項目２４に記載の油。
（項目２７）
前記油がβ’多形結晶を形成する、項目２２に記載の油。
（項目２８）
前記結晶が２Ｌラメラ構造を有する、項目２４に記載の油。
（項目２９）
前記結晶が３Ｌラメラ構造を有する、項目２４に記載の油。
（項目３０）
前記トリグリセリドが、ステアリン酸塩とパルミチン酸塩との合計割合が、オレイン酸塩の割合に２．０を乗じたもの±４０％に等しいことを特徴とする脂肪酸プロフィールを有する、項目２２〜２９のいずれか一項に記載の油。
（項目３１）
前記油が、６５％超のＳＯＳトリグリセリド、４５％未満の不飽和脂肪酸、５％未満の不飽和脂肪酸類、１％未満のラウリン酸、及び２％未満のトランス脂肪酸を有する、項目２２〜３０のいずれか一項に記載の油。
（項目３２）
前記脂肪酸プロフィールにおけるステアリン酸塩とパルミチン酸塩との合計割合がオレイン酸塩の割合の２倍±２０％である、項目２２〜３１のいずれか一項に記載の油。
（項目３３）
前記ｓｎ−２プロフィールが少なくとも４０％のオレイン酸塩を有する、項目３２に記載の油。
（項目３４）
前記油が、少なくとも４０、５０、６０、７０、８０、又は９０％のＳＯＳである、項目２２〜３３のいずれか一項に記載の油。
（項目３５）
前記油が、３０℃〜４０℃の融解温度を有するロールイン用ショートニングである、項目２２〜３３のいずれか一項に記載の油。
（項目３６）
β’多形結晶を含む、項目３５に記載の油。
（項目３７）
３５℃で１５％未満の固形脂肪含有量を有する、項目３５又は３６に記載の油。
（項目３８）
１５〜２０％のＣ８〜Ｃ１４脂肪酸、４５〜５０％のＣ１６以上の脂肪酸、及び／又は３０〜２５％の不飽和脂肪酸を含む、項目３５〜３７のいずれか一項に記載の油。
（項目３９）
項目２２〜３８のいずれか一項に記載の油を使用して製造される食品、燃料又は化学製品。
（項目４０）
天然油又は天然油から生成されるＲＢＤ油であって、３．５％以下の飽和脂肪酸を含み、場合により５０％超のオレイン酸及び／又は１％超のパルミトレイン酸を含む油。
（項目４１）
０．１〜３．５％の飽和脂肪酸を有する、項目４０に記載の油。
（項目４２）
少なくとも９０％のオレイン酸を含む、項目４０又は４１に記載の油。
（項目４３）
少なくとも３％の多価不飽和脂肪酸を含む、項目４２に記載の油。
（項目４４）
場合により配列番号７６と少なくとも６５％のヌクレオチド配列同一性を有する２３Ｓ  ｒＲＮＡを含み、且つ場合により偏性従属栄養性である油産生細胞であって、３．５％以下の飽和脂肪酸を含む油を産生する細胞。
（項目４５）
前記細胞がＰｒｏｔｏｔｈｅｃａ属の細胞である、項目４４に記載の細胞。
（項目４６）
ＦＡＴＡノックアウト又はノックダウンをさらに含む、項目４４に記載の細胞。
（項目４７）
パルミトイル−ＣｏＡからプラミトイル−ＣｏＡに不飽和化する活性を有する酵素をコードする外来遺伝子を含む、項目４４〜４６のいずれか一項に記載の細胞。
（項目４８）
前記外来遺伝子がＰＡＤ遺伝子である、項目４７に記載の細胞。
（項目４９）
前記外来遺伝子が、パルミトイル−ＡＣＰに対するデサチュラーゼ活性を有するＳＡＤ遺伝子である、項目４７に記載の細胞。
（項目５０）
過剰発現したＫＡＳＩＩ酵素をさらに含む、項目４４〜４９のいずれか一項に記載の細胞。
（項目５１）
リノール酸及びリノレン酸が合計５面積パーセント以下である油を生成するため、場合により調節可能なプロモーターによって、デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼの発現を低下させる働きをする核酸をさらに含む、項目４４〜５０のいずれか一項に記載の細胞。
（項目５２）
場合により精製、漂白、及び脱臭された、項目４４〜５１のいずれか一項に記載の細胞によって産生される油であって、
少なくとも１０％のエルゴステロール；
エルゴステロール及びｂ−シトステロールであって、エルゴステロールとｂ−シトステロールとの比は２５：１より大きい、エルゴステロール及びｂ−シトステロール；
エルゴステロール及びブラシカステロール；及び
エルゴステロール、ブラシカステロール、及びポリフェラステロール；
の１つ以上を含み、
場合により、−シトステロール、カンペステロール、及びスチグマステロールの１つ以上を含まない油。
（項目５３）
３．５％以下の飽和脂肪酸を有する油の生成方法であって、項目５〜１２のいずれか一項に記載の細胞を提供又は培養する工程と、前記細胞から前記油を抽出する工程とを含む方法。
（項目５４）
項目５３に記載の方法により生成された油を食品に添合する工程を含む、食品の製造方法であって、最終食品製品が３．５％以下の飽和脂肪を有する、方法。
（項目５５）
場合により配列番号７６と少なくとも６５％のヌクレオチド配列同一性を有する２３Ｓ  ｒＲＮＡを含み、且つ場合により偏性従属栄養性である組換え油産生細胞であって、活性ケトアシル−ＣｏＡシンターゼ酵素をコードする外来遺伝子を含む細胞。
（項目５６）
２０％超のエルカ酸を含む油を産生する、項目５５に記載の細胞。
（項目５７）
６０％超のエルカ酸を含む油を産生する、項目５６に記載の細胞。
（項目５８）
少なくとも４０％の油を含む、項目５５〜５７のいずれか一項に記載の細胞。
（項目５９）
Ｐｒｏｔｏｔｈｅｃａ属の細胞であり、場合によりＰｒｏｔｏｔｈｅｃａ  ｍｏｒｉｆｏｒｍｉｓ種の細胞である、項目５５〜５８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目６０）
少なくとも１０％のエルゴステロール；
エルゴステロール及びβ−シトステロールであって、エルゴステロールとβ−シトステ
ロールとの比は２５：１より大きい、エルゴステロール及びβ−シトステロール；
エルゴステロール及びブラシカステロール；及び
エルゴステロール、ブラシカステロール、及びポリフェラステロール
の１つ以上を含む、項目５５〜５９のいずれか一項に記載の細胞によって産生される油であって、
場合により、β−シトステロール、カンペステロール、及びスチグマステロールの１つ以上を含まない油。
（項目６１）
項目６０に記載の油から製造される化学品。
（項目６２）
項目５５〜５９のいずれか一項に記載の細胞を提供又は培養する工程と、前記細胞から油を抽出する工程とを含む、油の生成方法。
（項目６３）
５％未満のリノール酸を有するトリアシルグリセロールプロフィールの油を産生するように、デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼ遺伝子産物の活性を抑制する働きをする組換え核酸を含む組換え油産生細胞。
（項目６４）
３％未満のリノール酸を有するトリアシルグリセロールプロフィールの油を産生する、項目６３に記載の細胞。
（項目６５）
２％未満のリノール酸を有するトリアシルグリセロールプロフィールの油を産生する、項目６４に記載の細胞。
（項目６６）
前記油を産生するため、リノール酸要求株であるか、又は環境条件によってデルタ１２脂肪酸デサチュラーゼの活性が抑制され得る、項目６３に記載の細胞。
（項目６７）
調節可能なプロモーターが前記デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼ遺伝子に作動可能に連結していることにより、前記デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼを環境条件によって調節可能である、項目６６に記載の細胞。
（項目６８）
前記調節可能なプロモーターが、培地ｐＨ又は窒素濃度の変化により調節可能である、項目６７に記載の細胞。
（項目６９）
外因性ＫＡＳＩＩ、ＬＰＡＡＴ、又はＦＡＴＢ酵素を発現する働きをする組換え核酸をさらに含む、項目６４〜６８のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７０）
ステアロイルＡＣＰデサチュラーゼ酵素の発現をノックアウト又はノックダウンする働きをする組換え核酸をさらに含む、項目６４〜６９のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７１）
内在性ＦａｔＡによりコードされるアシル−ＡＣＰチオエステラーゼの発現をノックアウト又はノックダウンする働きをする組換え核酸をさらに含む、項目６４〜７０のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７２）
前記油が、１１０℃で、ＡＯＣＳ  Ｃｄ  １２ｂ−９２ランシマット試験条件下２０時間までに未だ電気伝導度の変曲点に達しない安定性を有する、項目６４〜７１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７３）
前記油が、１０５０ｐｐｍのトコフェロール及び５００ｐｍのパルミチン酸アスコルビルを前記油に加えたとき、１１０℃で、ＡＯＣＳ  Ｃｄ  １２ｂ−９２ランシマット試験条件下５日間までに未だ電気伝導度の変曲点に達しない安定性を有する、項目６４〜７１のいずれか一項に記載の細胞。
（項目７４）
（ａ）場合により配列番号７６と少なくとも６５％のヌクレオチド配列同一性を有する２３Ｓ  ｒＲＮＡを含み、場合により偏性従属栄養性である組換え油産生細胞を提供する工程であって、前記細胞が、前記細胞によって作られる脂肪酸の量を環境条件の変化に応じて変える働きをする組換え核酸を含む、工程と；
（ｂ）細胞分裂させて細胞数を増加させるための、前記脂肪酸の合成に許容的な第１の環境条件下で前記細胞を培養する工程と；
（ｃ）前記組換え核酸のため、前記脂肪酸の合成が低下し、従って前記細胞により産生される前記油中の当該の脂肪酸の量が低下する第２の環境条件下で前記細胞を培養する工程と；
（ｄ）前記細胞から前記油を抽出する工程と
を含む方法。
（項目７５）
前記細胞が、前記油中のリノール酸の量を低下させるため、デルタ１２脂肪酸デサチュラーゼの活性を低下させる働きをする外来核酸を含む、項目７４に記載の方法。
（項目７６）
前記リノール酸が、前記油中で少なくとも５０、６０、７０、８０、又は９０％欠乏している、項目７４又は７５に記載の方法。
（項目７７）
前記細胞が従属栄養培養される、項目７４〜７６のいずれか一項に記載の方法。
（項目７８）
前記細胞が微細藻類細胞である、項目７４〜７７のいずれか一項に記載の方法。
（項目７９）
前記細胞が、乾燥細胞重量基準で少なくとも４０、５０、６０、７０、８０、又は９０％の油を産生する、項目７４〜７８のいずれか一項に記載の方法。
（項目８０）
前記第１の環境条件が培養培地の第１のｐＨであり、前記第２の環境条件が第２のｐＨである、項目７４〜７９のいずれか一項に記載の方法。
（項目８１）
前記細胞からの抽出時、前記油が、１１０℃で、ＡＯＣＳ  Ｃｄ  １２ｂ−９２ランシマット試験条件下２０時間までに未だ電気伝導度の変曲点に達しない安定性を有する、項目７４〜８０のいずれか一項に記載の方法。
（項目８２）
前記細胞からの抽出時、前記油が、１０５０ｐｐｍのトコフェロール及び５００ｐｍのパルミチン酸アスコルビルを前記油に加えたとき、１１０℃で、ＡＯＣＳ  Ｃｄ  １２ｂ−９２ランシマット試験条件下５日間までに未だ電気伝導度の変曲点に達しない安定性を有する、項目７４〜８１のいずれか一項に記載の方法。
（項目８３）
前記細胞が、ＫＡＳ  ＩＩ酵素をコードする外来遺伝子と、場合によりＦａｔＡ遺伝子のノックアウト又はノックダウンとを含む、項目７４〜８２のいずれか一項に記載の方法。
（項目８４）
前記細胞によって作られる脂肪酸の量を変える働きをする前記組換え核酸が、ＦＡＤ遺伝子を標的化する阻害性ＲＮＡを含み、前記阻害性ＲＮＡの産生が調節可能なプロモーターの制御下にある、項目７４〜８３のいずれか一項に記載の方法。
（項目８５）
前記油が、６０％超のオレイン酸と３％未満の多価不飽和物とを含む脂肪酸プロフィールによって特徴付けられる、項目８３又は８４に記載の方法。
（項目８６）
前記油が、７０％超のオレイン酸と２％未満の多価不飽和物とを含む脂肪酸プロフィールによって特徴付けられる、項目８５に記載の方法。
（項目８７）
前記油が、８０％超のオレイン酸と１％未満の多価不飽和物とを含む脂肪酸プロフィールによって特徴付けられる、項目８６に記載の方法。
（項目８８）
項目７４〜８７のいずれか一項に記載の方法によって生成される油。
（項目８９）
０．０１〜２％のリノール酸と、（ｉ）８０〜９５％のオレイン酸又は（ｉｉ）４０％超のＣ８、Ｃ１０、Ｃ１２、Ｃ１４又はＣ１６脂肪酸とを含む、項目８８に記載の油。
（項目９０）
少なくとも１０％のエルゴステロール；
エルゴステロール及びｂ−シトステロールであって、エルゴステロールとｂ−シトステロールとの比は２５：１より大きい、エルゴステロール及びｂ−シトステロール；
エルゴステロール及びブラシカステロール；及び
エルゴステロール、ブラシカステロール、及びポリフェラステロール
の１つ以上をさらに含む、項目８８又は８９に記載の油。
（項目９１）
項目８８〜９０のいずれか一項に記載の油から生成される製品。
（項目９２）
食品、燃料又は化学品である、項目９１に記載の製品。
（項目９３）
フライ油、潤滑油、洗浄溶剤、界面活性剤、発泡剤又は潤滑剤である、項目９１に記載の製品。
（項目９４）
オレイン酸ダイマーである、項目９１に記載の製品。
（項目９５）
配列番号７７〜７９と少なくとも９０％の同一性を有するタンパク質をコードする核酸を含む構築物、ベクター、染色体又は宿主細胞。
（項目９６）
配列番号７７〜７９と少なくとも９５％の同一性を有するタンパク質をコードする、項目９５に記載の構築物、ベクター、染色体又は宿主細胞。
（項目９７）
配列番号７７〜７９と少なくとも９８％の同一性を有するタンパク質をコードする、項目９５に記載の構築物、ベクター、染色体又は宿主細胞。
（項目９８）
配列番号８０〜８５又は遺伝子コードの縮重の理由で等価な配列と少なくとも８０、９０、９５、９６、９７、９８、又は９９％の配列同一性を有する核酸を含む、項目９５〜９７のいずれか一項に記載の構築物、ベクター、染色体、又は宿主細胞。