【手続補正書】
【提出日】平成27年11月13日(2015.11.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の（ｉ）又は（ｉｉ）：
（ｉ）配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６、配列番号７７、配列番号７８、配列番号７９、配列番号８０、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、配列番号８４、配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１１２、配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号１１７、配列番号１１８又は配列番号１１９から選択されるアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６、配列番号７７、配列番号７８、配列番号７９、配列番号８０、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、配列番号８４、配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１１２、配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号１１７、配列番号１１８又は配列番号１１９のアミノ酸配列中、１〜ψ個のアミノ酸残基が置換、欠失、挿入及び／又は付加されているアミノ酸配列
から選択されるアミノ酸配列を有するヒダントイナーゼであって、
ここでψ＝７５であり、かつ更にヒダントイナーゼの触媒活性は、配列番号１のアミノ酸配列を有するヒダントイナーゼの触媒活性よりも少なくともζ倍だけ高く、かつ
ζ＝１．２である、前記ヒダントイナーゼ。
【請求項２】
ψは、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１から選択される、請求項１に記載のヒダントイナーゼ。
【請求項３】
ζは１．５、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５又は３０から選択される、請求項１に記載のヒダントイナーゼ。
【請求項４】
ヒダントイナーゼは、以下の基質ヒダントイン、５−メチルヒダントイン、５−ベンジルヒダントイン、５−（４−ヒドロキシベンジル）ヒダントイン、５−インドリルメチルヒダントイン、５−（３，４−ジヒドロキシベンジル）ヒダントイン、５−メチルチオエチルヒダントイン、５−イソプロピルヒダントイン、５−イソブチルヒダントイン、５−ｓｅｃ−ブチルヒダントイン、５−（４−アミノブチル）ヒダントイン、５−ヒドロキシメチルヒダントイン、又は非天然アミノ酸に相応する５−置換ヒダントイン化合物、それぞれその誘導体のうち少なくとも１つを各々のカルバモイルアミノ酸に変換し、ここで前記基質の変換に関するヒダントイナーゼの触媒活性は、Ｄ−５−インドリルメチルヒダントインの変換に関して、配列番号１のアミノ酸配列を有するヒダントイナーゼの触媒活性と少なくとも同じ高さである、請求項１から３までのいずれか１項に記載のヒダントイナーゼ。
【請求項５】
Ｄ−ヒダントインのエナンチオ選択性は、配列番号１のアミノ酸配列を有するヒダントイナーゼのエナンチオ選択性よりも少なくとも１．２倍、１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、５０倍、１００倍、又は１５０倍高い、請求項１から４までのいずれか１項に記載のヒダントイナーゼ。
【請求項６】
請求項１から５までのいずれか１項に記載のヒダントイナーゼのいずれかをコードするポリヌクレオチド。
【請求項７】
１×塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）及び０．１％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）の溶液中６５℃で洗浄し、請求項６に定義するようなヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドの全長相補鎖にすることから成るストリンジェントな条件下にハイブリダイズする単離又は組換えポリヌクレオチドであって、
ヒダントイナーゼの触媒活性は、配列番号１のアミノ酸配列を有するヒダントイナーゼの触媒活性よりも少なくともζ倍だけ高く、かつ
ζ＝１．２である、前記ポリヌクレオチド。
【請求項８】
請求項６又は７に記載のポリヌクレオチドを有するベクター。
【請求項９】
請求項６若しくは７に記載のポリヌクレオチド、又は請求項８に記載のベクターを有する単離された若しくは形質転換された宿主細胞。
【請求項１０】
以下の：
ヒダントイナーゼ；ヒダントイナーゼとヒダントインラセマーゼ；ヒダントイナーゼとカルバモイラーゼ；又はヒダントイナーゼとヒダントインラセマーゼとカルバモイラーゼ
から選択される酵素活性を少なくとも発現する、請求項９に記載の宿主細胞。
【請求項１１】
以下の工程（ａ）〜（ｃ）：
（ａ）請求項１から５までのいずれか１項に記載のヒダントイナーゼのヒダントイナーゼ活性、及びカルバモイラーゼ活性、及び少なくとも１つの５−置換ヒダントインを反応培地に用意し、任意で前記反応培地にヒダントインラセマーゼ活性を用意する工程、
（ｂ）５−置換ヒダントインを工程（ａ）で用意された酵素活性により各々のアミノ酸に変換するために反応培地をインキュベートする工程、及び
（ｃ）各々の５−置換ヒダントインの酵素的変換から得られたアミノ酸を反応培地から回収する工程
を含むアミノ酸を製造する方法。
【請求項１２】
前記５−置換ヒダントインは、Ｄ，Ｌ−５−置換ヒダントイン、Ｄ，Ｌ−５−インドリルメチルヒダントイン（＝Ｄ，Ｌ−トリプトファンヒダントイン）、Ｄ−５−置換ヒダントイン、Ｄ−５−インドリルメチルヒダントン（＝Ｄ−トリプトファンヒダントイン）から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
反応培地に用意される前記５−置換ヒダントインは、Ｌ−５−置換ヒダントイン又はＤ，Ｌ−５−置換ヒダントインであり、かつ更にヒダントインラセマーゼ活性は、Ｌ−５−置換ヒダントイン又はＤ，Ｌ−５−置換ヒダントインをＤ−５−置換ヒダントインに変換するために工程（ａ）で反応培地に用意される、請求項１１又は１２に記載の方法。
【請求項１４】
製造すべきアミノ酸は、Ｄ−トリプトファンであり、かつ５−置換ヒダントインは、
Ｄ−５−インドリルメチルヒダントイン、Ｌ−５−インドリルメチルヒダントイン又はＤ，Ｌ−５−インドリルメチルヒダントインから選択される、請求項１１から１３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
反応培地は、部分的に又は全体的に細胞培養培地から成る培地であり、かつヒダントイナーゼ活性は請求項９又は１０に記載の宿主細胞により用意され、かつ宿主細胞は前記反応培地中で培養される、請求項１３又は１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
反応培地は部分的に又は全体的に細胞培養培地から成る培地であり、かつカルバモイラーゼ活性は、請求項９若しくは１０に記載の宿主細胞又は第二の宿主細胞により用意され、かつ前記宿主細胞は前記反応培地中で培養される、請求項１１から１５までのいずれか１項に記載の方法。