【手続補正書】
【提出日】平成27年11月24日(2015.11.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
状態に罹患した対象を治療するための医薬組成物であって、状態は消化管にアルファ４ベータ７を発現する細胞の不適当な輸送と関連し：
（ａ）７から２１日間毎に５から１４ｍｇ；
（ｂ）１４から５６日間毎に１５から５４ｍｇ；
（ｃ）４３から１２６日間毎に５５から１４９ｍｇ；
（ｄ）１１２から１４７日間毎に１５０から２９９ｍｇ；および
（ｅ）１２６から２２４日間毎に３００から１０００ｍｇ
からなる群から選択される量および間隔で投与されるアルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗体を含む、前記医薬組成物。
【請求項２】
前記量および間隔が：
（ａ）１１から１７日間毎に５から１０ｍｇ；
（ｂ）３０から５０日間毎に１５から３０ｍｇ；
（ｃ）７５から９５日間毎に５５から８５ｍｇ；
（ｄ）１２０から１３２日間毎に１６０から２６０ｍｇ；および
（ｅ）１６５から１８５日間毎に３００から７００ｍｇ
からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記量および間隔が：
（ａ）２週間毎に７ｍｇ；
（ｂ）６週間毎に２１ｍｇ；
（ｃ）１２週間毎に７０ｍｇ；
（ｄ）１８週間毎に２１０ｍｇ；および
（ｅ）６ヶ月毎に４２０ｍｇ
からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
状態に罹患した対象を治療するための医薬組成物であって、状態は消化管にアルファ４ベータ７を発現する細胞の不適当な輸送と関連し、少なくとも約７５％の受容体占有の達成および／または維持に十分な量および間隔で投与されるアルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗体を含む、前記医薬組成物。
【請求項５】
達成された前記受容体占有が少なくとも約８０％である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
達成された前記受容体占有が少なくとも約８５％である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
達成された前記受容体占有が少なくとも約９０％である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項８】
達成された前記受容体占有が少なくとも約９５％である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項９】
達成された前記受容体占有が少なくとも約９９％である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
状態に罹患した対象を治療するための医薬組成物であって、状態は消化管にアルファ４ベータ７を発現する細胞の不適当な輸送と関連し、血清の体積あたり１０ｎｇ／ｍｌから１０００ｎｇ／ｍｌの間のヘテロ二量体特異抗体の量を達成および／または維持するために十分な量および間隔で投与される、アルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗体を含む、前記医薬組成物。
【請求項１１】
血清の体積あたりのヘテロ二量体特異抗体の前記量が少なくとも１０ｎｇ／ｍｌである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
血清の体積あたりのヘテロ二量体特異抗体の前記量が：少なくとも２５ｎｇ／ｍｌ；少なくとも５０ｎｇ／ｍｌ；少なくとも６０ｎｇ／ｍｌ；少なくとも７０ｎｇ／ｍｌ；少なくとも７５ｎｇ／ｍｌ；および少なくとも８０ｎｇ／ｍｌからなる群から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
血清の体積あたりのヘテロ二量体特異抗体の前記量が８５ｎｇ／ｍｌから１００ｎｇ／ｍｌの間である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
血清の体積あたりのヘテロ二量体特異抗体の前記量が７０ｎｇ／ｍｌから１５０ｎｇ／ｍｌの間である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
血清の体積あたりのヘテロ二量体特異抗体の前記量が５０ｎｇ／ｍｌから２５０ｎｇ／ｍｌの間である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
血清の体積あたりのヘテロ二量体特異抗体の前記量が４０ｎｇ／ｍｌから５００ｎｇ／ｍｌの間である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
血清の体積あたりのヘテロ二量体特異抗体の前記量が２５ｎｇ／ｍｌから７５０ｎｇ／ｍｌの間である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
血清の体積あたりのヘテロ二量体特異抗体の前記量が１０ｎｇ／ｍｌから１，０００ｎｇ／ｍｌの間である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記アルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗体が１８Ａ１１である、請求項１から１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
１８Ａ１１が単離され、アルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗原結合タンパク質が配列番号５からＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号２からＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
１８Ａ１１が単離され、アルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗原結合タンパク質が、前記重鎖可変領域が配列番号５と少なくとも９０％同一であり、前記軽鎖可変領域がＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３から配列番号２と少なくとも９０％同一である、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
１８Ａ１１が軽鎖定常領域（配列番号７）および重鎖定常領域（配列番号８）をさらに含む、請求項２０または２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
１８Ａ１１が１８Ａ１１可変領域における１から１０個のアミノ酸の置換、挿入または欠失により配列番号２および５のアミノ酸配列とアミノ酸配列の点で異なる、請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
１８Ａ１１が１８Ａ１１定常領域の１８Ａ１１における１から１０個のアミノ酸の置換、挿入または欠失により配列番号７および８のアミノ酸配列とアミノ酸配列が異なる、請求項２２または２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記１８Ａ１１がいくつかの、ほとんどのまたは実質的に全てのＮ末端アミノ酸のピログルタミン酸への変換；ならびに１つ、２つ、３つ、４つまたは５つのＮ末端および／またはＣ末端アミノ酸の除去（翻訳後または組換え技術によってのいずれか）からなる群から選択される、１つ以上の修飾を含む、請求項２０から２４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
アルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗体で治療されているヒト対象におけるアルファ４ベータ７受容体占有を評価する方法であって：
ａ）前記対象に対して６本１組の試薬管を用意し、前記管には１から６の番号を付けられており、各管がアルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗体（管２；「スパイク」（ｓｐｉｋｅｄ）と称する）またはプラセボ対照（管１、３、４、５および６）を含み、そしてアルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗体で治療された対象から全血試料を得、
ｂ）前記全血試料の一部を前記６本の管それぞれの中に入れて試料混合物を形成し、前記得られた試料混合物をインキュベートし；
ｃ）１：１の割合の抗体カクテルとフィコエリスリン試薬を、前記試料混合物に加え、実質的に示したようなスキームにおいて、抗体カクテル／試料混合物を形成し：
−管１に、抗ＣＤ８＋ＣＤ１０３；ＦＩＴＣ、抗アルファ４ベータ７競合抗体：フィコエリスリン、抗ＣＤ４５：ＰｅｒＣＰ、抗ＣＣＲ７：ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）６４７、抗ＣＤ４５  ＲＡ：ＡＰＣ−Ｈ７、および抗ＣＤ３：Ｖ４５０を加え；
−管２に、抗ＣＤ８＋ＣＤ１０３：ＦＩＴＣ、抗アルファ４ベータ７競合抗体：フィコエリスリン、抗ＣＤ４５：ＰｅｒＣＰ、抗ＣＣＲ７：ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）６４７、抗ＣＤ４５  ＲＡ：ＡＰＣ−Ｈ７、および抗ＣＤ３：Ｖ４５０を加え；
−管３に、抗ＣＤ＋ＣＤ１０３：ＦＩＴＣ、非競合抗β７抗体：フィコエリスリン、抗ＣＤ４５：ＰｅｒＣＰ、抗ＣＣＲ７：ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）６４７、抗ＣＤ４５  ＲＡ：ＡＰＣ−Ｈ７、および抗ＣＤ３：Ｖ４５０を加え；
−管４に、抗ＣＤ７＋ＣＤ１０３：ＦＩＴＣ、非競合抗β７抗体：フィコエリスリン、抗ＣＤ４５：ＰｅｒＣＰ、抗ＣＤ４５  ＲＡ：ＡＰＣ−Ｈ７、および抗ＣＤ３：Ｖ４５０を加え；
−管５に、抗ＣＬＡ：ＦＩＴＣ、非競合抗β７抗体：フィコエリスリン、抗ＣＤ４５：ＰｅｒＣＰ、抗ＣＤ４：ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）６４７、抗ＣＤ４５  ＲＡ：ＡＰＣ−Ｈ７、および抗ＣＤ３：Ｖ４５０を加え；
−管６に、抗ＣＤ１９：ＦＩＴＣ、抗ＣＤ４：フィコエリスリン、抗ＣＤ４５：ＰｅｒＣＰ、抗ＣＤ１６＋ＣＤ５６：ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）６４７、抗ＣＤ８  ＲＡ：ＡＰＣ−Ｈ７、および抗ＣＤ３：Ｖ４５０を加え；
ｄ）前記抗体カクテル／試料混合物をインキュベートし、
ｅ）前記抗体カクテル／試料混合物を処理してあらゆる赤血球を溶解して残りの細胞の混合物を形成し；
ｆ）残りの細胞の前記混合物を洗浄し、蛍光活性化セルソーターを用いてそれらを解析して、前記残りの細胞に存在する、前記アルファ４ベータ７ヘテロ二量体特異抗体により占有されたアルファ４ベータ７受容体の割合を決定することを含む、方法。
【請求項２７】
前記試料混合物が室温で約３０分間インキュベートされ、前記抗体カクテル／試料が室温で約２０分間インキュベートされる、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
各管に加えられる、前記全血試料の一部が１００マイクロリットルであり、前記抗体カクテルの体積が２０マイクロリットルであり、前記抗体：フィコレリスリン試薬の体積が６０マイクロリットルである、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項２９】
各集団に対して集められた前記ＣＤ４ナイーブＴ細胞のイベントの数を前記リンパ球イベントによって除算し、その後マイクロリットルあたりのリンパ球の血液学的結果によって乗算し、ナイーブＣＤ４  Ｔ細胞をＣＣＲ７＋ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＤ３＋ＣＤ８−ＣＤ１０３−ＣＤ４５＋リンパ球として規定する、請求項２６から２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
スパイクおよび非スパイク状態に対する蛍光強度中央値が蛍光ビーズ検量線を用いて細胞あたりの結合分子（ＭＢＰＣ）に変換され、受容体占有を算出するために利用される、請求項２６から２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記対象が使用可能な２つの投与前試料があり、目標飽和度は以下の式：
【数１】
2015505822.tif 000001
を用いて算出される、請求項２６から３０のいずれか１項に記載の方法。