【手続補正書】
【提出日】平成27年12月10日(2015.12.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＦｃＲｎに対する結合親和性が増加した免疫グロブリンＦｃ変異体であって、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、３０７Ｓ、３０８Ｆ、３８０Ｓ、３８０Ａ、４２８Ｌ、４２９Ｋ、４３０Ｓ、４３３Ｋ及び４３４Ｓ（上記ナンバリングはＥＵインデックスによる）からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸修飾を含むことを特徴とする、免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項２】
前記アミノ酸修飾が、４２８Ｌ／４３４Ｓ、４３３Ｋ／４３４Ｓ、４２９Ｋ／４３３Ｋ、４２８Ｌ／４３３Ｋ、３０８Ｆ／３８０Ａ、３０７Ｓ／３８０Ｓ及び３８０Ｓ／４３４Ｓからなる群から選択される、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項３】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、４２８位のメチオニンがロイシンに置換され、４３４位のアスパラギンがセリンに置換されたアミノ酸修飾を含む、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項４】
前記前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、配列番号７４で表されるアミノ酸配列を有する、請求項３に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項５】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、４３３位のヒスチジンがリジンに置換され、４３４位のアスパラギンがセリンに置換されたアミノ酸修飾を含む、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項６】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、配列番号８０で表されるアミノ酸配列を有する、請求項５に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項７】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、４２９位のヒスチジンがリジンに置換され、４３３位のヒスチジンがリジンに置換されたアミノ酸修飾を含む、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項８】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、配列番号９１で表されるアミノ酸配列を有する、請求項７に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項９】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、４２８位のメチオニンがロイシンに置換され、４３３位のヒスチジンがリジンに置換されたアミノ酸修飾を含む、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１０】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、配列番号９２で表されるアミノ酸配列を有する、請求項９に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１１】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、３０８位のバリンがフェニルアラニンに置換され、３８０位のグルタミン酸がアラニンに置換されたアミノ酸修飾を含む、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１２】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、配列番号１００で表されるアミノ酸配列を有する、請求項１１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１３】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、３０７位のスレオニンがセリンに置換され、３８０位のグルタミン酸がセリンに置換されたアミノ酸修飾を含む、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１４】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を有する、請求項１３に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１５】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、３８０位のグルタミン酸がセリンに置換され、４３４位のアスパラギンがセリンに置換されたアミノ酸修飾を含む、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１６】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を有する、請求項１５に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１７】
前記天然免疫グロブリンＦｃフラグメントが、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４のＦｃフラグメントからなる群から選択される、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１８】
前記天然免疫グロブリンＦｃフラグメントが、ＩｇＧ４ Ｆｃフラグメントである、請求項１７に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項１９】
前記天然免疫グロブリンＦｃフラグメントが、ヒト非グリコシル化ＩｇＧ４ Ｆｃフラグメントである、請求項１８に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項２０】
前記天然免疫グロブリンＦｃフラグメントが、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項２１】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、免疫グロブリンの可変領域と軽鎖を含まない、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項２２】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、動物細胞又は大腸菌で生産される、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項２３】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、大腸菌で生産される、請求項２２に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項２４】
前記免疫グロブリンＦｃ変異体が、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントに比べて、ｐＨ７．４では低いＦｃＲｎ結合親和性を示すが、ｐＨ６．０では高いＦｃＲｎ結合親和性を示す、請求項１に記載の免疫グロブリンＦｃ変異体。
【請求項２５】
生体内半減期が延長されたタンパク質結合体であって、生理活性ポリペプチドが、非ペプチド性重合体を介して請求項１〜２４のいずれかに記載の免疫グロブリンＦｃ変異体に共有的に連結されることを特徴とする、タンパク質結合体。
【請求項２６】
前記非ペプチド性重合体が、ポリ（エチレングリコール）モノポリマー、ポリ（プロピレングリコール）モノポリマー、エチレングリコール−プロピレングリコール共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール、ポリビニルアルコール、ポリサッカライド、デキストラン、ポリビニルエチルエーテル、生分解性高分子、脂質重合体、キチン、ヒアルロン酸及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２５に記載のタンパク質結合体。
【請求項２７】
前記非ペプチド性重合体が、ポリ（エチレングリコール）である、請求項２６に記載のタンパク質結合体。
【請求項２８】
前記生理活性ポリペプチドが、ヒト成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、成長ホルモン放出ペプチド、インターフェロン、コロニー刺激因子、インターロイキン、可溶性インターロイキン受容体、可溶性ＴＮＦ受容体、グルコセレブロシダーゼ、マクロファージ活性化因子、マクロファージペプチド、Ｂ細胞因子、Ｔ細胞因子、タンパク質Ａ、アレルギー抑制因子、細胞壊死糖タンパク質、免疫毒素、リンホトキシン、腫瘍壊死因子、腫瘍抑制因子、転移成長因子、α１アンチトリプシン、アルブミン、アポリポタンパク質Ｅ、エリスロポエチン、高グリコシル化エリスロポエチン、血液凝固第VII因子、血液凝固第VIII因子、血液凝固第IX因子、プラスミノーゲン活性化因子、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、タンパク質Ｃ、Ｃ反応性タンパク質、レニンインヒビター、コラゲナーゼインヒビター、スーパーオキシドジスムターゼ、レプチン、血小板由来成長因子、表皮細胞成長因子、骨成長因子、骨促進タンパク質、カルシトニン、インスリン、インスリン変異体、グルカゴン、グルカゴン様ペプチド−１、アトリオペプチン、軟骨誘導因子、結合組織活性化因子、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、神経成長因子、副甲状腺ホルモン、リラキシン、セクレチン、ソマトメジン、インスリン様成長因子、副腎皮質ホルモン、コレシストキニン、膵臓ポリペプチド、ガストリン放出ペプチド、コルチコトロピン放出因子、甲状腺刺激ホルモン、受容体、受容体拮抗物質、細胞表面抗原、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体フラグメント、及びウイルス由来ワクチン抗原からなる群から選択される、請求項２５に記載のタンパク質結合体。
【請求項２９】
生理活性ポリペプチドの生体内半減期を延長させる方法であって、請求項１〜２４のいずれかに記載の免疫グロブリンＦｃ変異体を、非ペプチド性重合体を介して生理活性ポリペプチドに共有的に連結させる工程を含むことを特徴とする、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
本発明の具体的な一実施態様では、天然免疫グロブリンＦｃフラグメントの定常領域において、４２８位のメチオニンがロイシンに置換され、４３４位のアスパラギンがセリンに置換された免疫グロブリンＦｃ変異体を提供する。４２８Ｌ／４３４Ｓのアミノ酸修飾を含む免疫グロブリンＦｃ変異体は配列番号７４で表されるアミノ酸配列を有し、これは配列番号１１３で表される塩基配列を有するヌクレオチドによりコードされる。本発明においては、上記免疫グロブリンＦｃ変異体をＨＭＣ００２と命名する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
【表４】
2015507628.tif 000001
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2015507628000001.app