【手続補正書】
【提出日】平成27年12月1日(2015.12.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体においてハッチンソン−ギルフォード早老症候群を処置するのに使用するための、アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む組成物であって、前記組成物は、ハッチンソン−ギルフォード早老症候群の処置を必要とする被験体に投与されることを特徴とし、前記オリゴヌクレオチドは、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡの異常なスプライシングをモジュレートし、前記オリゴヌクレオチドは、モルホリノサブユニット、および１つのサブユニットのモルホリノ窒素と隣接するサブユニットの５’環外炭素とを接合するリン含有サブユニット間連結から構成され、かつ以下：
（ｉ）実質的に荷電していない、ヌクレアーゼ耐性骨格を有し、
（ｉｉ）哺乳動物宿主細胞による取込みが可能であり、
（ｉｉｉ）約１２〜４０のヌクレオチド塩基を含有し、かつ
（ｉｖ）ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１０、イントロン１０、エキソン１１、またはこれらの組合せに対して相補的である少なくとも約１２の連続的なサブユニットの標的化配列を有する、組成物。
【請求項２】
（ｉ）前記標的化配列が、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位の上流の塩基に対して相補的である；
（ｉｉ）前記標的化配列が、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位の下流の塩基に対して相補的である；
（ｉｉｉ）前記標的化配列が、前記ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位と重複しない；または
（ｉｖ）前記早老症候群が、前記ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位内の１８２４Ｃ＞Ｔ変異と関連し、前記標的化配列が、前記１８２４Ｃ＞Ｔ変異と重複しない、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記標的化配列の最も３’側の塩基が、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位の約１〜３０塩基下流または約１０〜４０塩基上流であるＬＭＮＡエキソン１１中の塩基に対して相補的である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記標的化配列の最も３’側の塩基が、（ｉ）ＬＭＮＡエキソン１１の約１〜６０塩基上流であるＬＭＮＡイントロン１０中の塩基に対して相補的である；または（ｉｉ）ＬＭＮＡイントロン１０の約１〜３０塩基上流であるＬＭＮＡエキソン１０中の塩基に対して相補的である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記標的化配列が、ＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１０および１１のスプライスドナー（ＳＤ）部位またはスプライスアクセプター（ＳＡ）部位のスプライスジャンクションと重複する領域に対して相補的であり、かつプロセシングを受ける前の前記ｍＲＮＡのエキソン領域の一部およびイントロン領域の一部に対して相補的である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記標的化配列が、配列番号３〜３４のいずれか１つを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記オリゴヌクレオチドが、ホスホロジアミデートモルホリノオリゴヌクレオチド（ＰＭＯ）、１つもしくは複数のピペラジン含有サブユニット間連結を含むＰＭＯまたは１つもしくは複数の４−アミノピペリジニル含有サブユニット間連結を含むＰＭＯである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記オリゴヌクレオチドが、約１０％〜５０％のサブユニット間カチオン性連結を含有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記オリゴヌクレオチド中の前記モルホリノサブユニットが、下記の構造：
【化４３】
2015501817.tif 000001
に従ってリン含有サブユニット間連結によって接合しており、
式中、Ｚは、ＳまたはＯであり、
Ｘ＝ＮＲ１Ｒ２またはＯＲ６であり、
Ｙ１＝ＯまたはＮＲ７であり、
Ｐｊはプリンまたはピリミジン塩基対合部分であり、そして
それぞれの前記連結は、以下：
（ａ）荷電していない連結（ａ）であって、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、およびＲ７のそれぞれは、水素および低級アルキルから独立に選択される、荷電していない連結（ａ）；
（ｂ１）カチオン性連結（ｂ１）であって、ここで、Ｘ＝ＮＲ１Ｒ２であり、Ｙ１＝Ｏであり、ＮＲ１Ｒ２は、Ｒ１Ｒ２＝−ＣＨＲＣＨＲＮ（Ｒ３）（Ｒ４）ＣＨＲＣＨＲ−であるように、任意選択で置換されているピペラジノ基を表し、
各Ｒ４は、Ｈ、ＣＨ３であるかまたは存在せず、かつ
Ｒ３は、Ｈ、低級アルキル、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、Ｚ−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、および［Ｃ（Ｏ）ＣＨＲ’ＮＨ］ｍＨから選択され、ここで、Ｚは、カルボニル（Ｃ（Ｏ））または直接結合であり、Ｌは、アルキル、アルコキシ、およびアルキルアミノから選択される結合を有する長さが１８原子までの任意選択のリンカーであり、Ｒ’は、天然アミノ酸またはその１もしくは２炭素ホモログの側鎖であり、かつｍは、１〜６である、カチオン性連結（ｂ１）；
（ｂ２）カチオン性連結（ｂ２）であって、ここで、Ｘ＝ＮＲ１Ｒ２であり、Ｙ１＝Ｏであり、Ｒ１＝ＨまたはＣＨ３であり、かつＲ２＝ＬＮＲ３Ｒ４Ｒ５であり、ここで、Ｌ、Ｒ３、およびＲ４は、上記のように定義され、かつＲ５は、Ｈ、低級アルキル、または低級（アルコキシ）アルキルである、カチオン性連結（ｂ２）；ならびに
（ｂ３）カチオン性連結（ｂ３）であって、ここで、Ｙ１＝ＮＲ７であり、Ｘ＝ＯＲ６であり、かつＲ７＝ＬＮＲ３Ｒ４Ｒ５であり、ここで、Ｌ、Ｒ３、およびＲ４およびＲ５は、上記のように定義され、かつＲ６は、Ｈまたは低級アルキルである、カチオン性連結（ｂ３）；
から選択され、
少なくとも１つの前記連結は、カチオン性連結（ｂ１）、カチオン性連結（ｂ２）、およびカチオン性連結（ｂ３）から選択される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
（ｉ）タイプ（ａ）の連結におけるＲ１およびＲ２のそれぞれが、メチルである；
（ｉｉ）少なくとも１つの連結が、タイプ（ｂ１）のものであり、各Ｒが、Ｈであり、Ｒ４が、Ｈ、ＣＨ３、または電子対であり、かつＲ３が、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、およびＣ（Ｏ）−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２から選択される；
（ｉｉｉ）少なくとも１つの連結が、タイプ（ｂ１）のものであり、各Ｒが、Ｈであり、Ｒ４が、電子対であり、かつＲ３が、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２およびＣ（Ｏ）−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２から選択される；
（ｉｖ）少なくとも１つの連結が、タイプ（ｂ１）のものであり、各Ｒが、Ｈであり、Ｒ４が、電子対であり、かつＲ３が、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２およびＣ（Ｏ）−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２から選択され、そして任意選択で、Ｒ３が、Ｃ（Ｏ）−Ｌ−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２であり、Ｌが、構造−（ＣＨ２）ｎ−を有する炭化水素であり、ｎが、１〜１２である；または
（ｖ）少なくとも１つの連結が、タイプ（ｂ１）のものであり、各Ｒが、Ｈであり、かつＲ３およびＲ４のそれぞれが独立に、ＨまたはＣＨ３である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞透過性ペプチドに共有結合的に付着している、請求項１から１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記細胞透過性ペプチドが、アルギニンに富んだペプチドである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記アルギニンに富んだペプチドが、１つまたは２つのアミノ酸リンカーを介してそのＣ末端において前記オリゴヌクレオチドの５’端または３’端に付着している、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
被験体においてハッチンソン−ギルフォード早老症候群を処置するのに使用するための、アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物であって、前記医薬組成物は、ハッチンソン−ギルフォード早老症候群の処置を必要とする被験体に投与されることを特徴とし、前記オリゴヌクレオチドは、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡの異常なスプライシングをモジュレートし、前記オリゴヌクレオチドは、骨格を含み、前記骨格は、サブユニット間連結によって接合されているモルホリノ環構造の配列を含み、前記サブユニット間連結は、１つのモルホリノ環構造の３’端と隣接するモルホリノ環構造の５’端とを接合し、各モルホリノ環構造は、前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１〜３４のいずれか１つにおいて記載した配列の少なくとも１２塩基に対して相補的であるか、または配列番号３〜３４の任意の１つもしくは複数を含む標的化配列を含む標的核酸に配列特異的様式で結合することができるように、塩基対合部分に結合しており、前記サブユニット間連結は、以下の一般構造（Ｉ）：
【化４４】
2015501817.tif 000002
またはその塩もしくは異性体を有し、前記サブユニット間連結（Ｉ）のそれぞれは、独立に、連結（Ａ）または連結（Ｂ）であり、
ここで連結（Ａ）について：
Ｗは、それぞれの出現において独立に、ＳまたはＯであり、
Ｘは、それぞれの出現において独立に、−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＮＲ１Ｒ２、−ＯＲ３または、
【化４５】
2015501817.tif 000003
であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ２であり、
Ｒ１は、それぞれの出現において独立に、水素またはメチルであり、
Ｒ２は、それぞれの出現において独立に、水素または−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
Ｒ３は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ４は、それぞれの出現において独立に、水素、メチル、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−Ｚ−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２または−［Ｃ（Ｏ）ＣＨＲ’ＮＨ］ｍＨであり、ここで、Ｚは、カルボニル（Ｃ（Ｏ））または直接結合であり、Ｒ’は、天然アミノ酸またはその１もしくは２炭素ホモログの側鎖であり、かつｍは、１〜６であり、
Ｒ５は、それぞれの出現において独立に、水素、メチルまたは電子対であり、
Ｒ６は、それぞれの出現において独立に、水素またはメチルであり、
Ｒ７は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシアルキルであり、
Ｌは、アルキル、アルコキシまたはアルキルアミノ基、またはこれらの組合せを含む長さが１８原子までの任意選択のリンカーであり、そして
連結（Ｂ）について：
Ｗは、それぞれの出現において独立に、ＳまたはＯであり、
Ｘは、それぞれの出現において独立に、−ＮＲ８Ｒ９または−ＯＲ３であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ１０であり、あるいは
ＷおよびＹは、それぞれＯであり、
Ｒ８は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルキルであり、
Ｒ９は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アラルキルまたはアリールであり、
Ｒ１０は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルまたは−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
ここで、Ｒ８およびＲ９は接合して、５〜１８員の単環式または二環式複素環を形成し得るか、あるいはＲ８、Ｒ９またはＲ３はＲ１０と接合して、５〜７員の複素環を形成し得、そしてＸが４−ピペラジノであるとき、Ｘは、下記の構造（ＩＩＩ）：
【化４６】
2015501817.tif 000004
を有し、式中、
Ｒ１１は、それぞれの出現において独立に、Ｃ２〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルカルボニル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルであり、かつ
Ｒは、それぞれの出現において独立に、電子対、水素またはＣ１〜Ｃ１２アルキルであり、かつ
Ｒ１２は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、−ＮＨ２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＮＲ１３Ｒ１４Ｒ１５、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルカルボニル、オキソ、−ＣＮ、トリフルオロメチル、アミジル、アミジニル、アミジニルアルキル、アミジニルアルキルカルボニルグアニジニル、グアニジニルアルキル、グアニジニルアルキルカルボニル、コレート、デオキシコレート、アリール、ヘテロアリール、複素環、−ＳＲ１３またはＣ１〜Ｃ１２アルコキシであり、ここで、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、それぞれの出現において独立に、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルであり、そして
前記サブユニット間連結の少なくとも１つは、連結（Ｂ）であるか、または各連結（Ｂ）が、それぞれの出現において同じ構造を有し；そして任意選択で、前記サブユニット間連結の少なくとも５％、または１０％〜５０％が、連結（Ｂ）である、医薬組成物。
【請求項１５】
前記標的化配列が、配列番号３〜７、１１または１４〜１６のいずれか１つを含む、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
被験体においてハッチンソン−ギルフォード早老症候群を処置するのに使用するための、アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物であって、前記組成物は、ハッチンソン−ギルフォード早老症候群の処置を必要とする被験体に投与されることを特徴とし、前記オリゴヌクレオチドは、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡの異常なスプライシングをモジュレートし、前記オリゴヌクレオチドは、
式：
【化４７】
2015501817.tif 000005
の化合物またはその薬学的に許容される塩であって、式中：
Ｒは、Ｈまたは−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３であり、
各Ｐｊは、プリンまたはピリミジン塩基対合部分であり、一緒になって標的化配列を形成し、前記標的化配列は、
ａ）配列番号３（ＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴＴＧＴＣＧＧＣＡＧ）、ここでＸは２３である、
ｂ）配列番号４（ＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴＴＧＴＣ）、ここでＸは２３である、
ｃ）配列番号５（ＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴ）、ここでＸは２３である、
ｄ）配列番号６（ＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧ）、ここでＸは２３である、
ｅ）配列番号７（ＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡ）、ここでＸは２３である、
ｆ）配列番号８（ＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣ）、ここでＸは２３である、
ｇ）配列番号１０（ＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣ）、ここでＸは２３である、
ｈ）配列番号１１（ＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧ）、ここでＸは２３である、
ｉ）配列番号１２（ＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣ）、ここでＸは２３である、
ｊ）配列番号１３（ＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣ）、ここでＸは２３である、
ｋ）配列番号１４（ＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣ）、ここでＸは２３である、
ｌ）配列番号１５（ＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧ）、ここでＸは２３である、
ｍ）配列番号１６（ＡＣＴＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧ）、ここでＸは２３である、
ｎ）配列番号１７（ＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＡＴＧＧＡＧＣＡＧＧＴＣＡＴ）、ここでＸは２３である、
ｏ）配列番号１８（ＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＡＴＧＧＡＧＣＡＧＧ）、ここでＸは２３である、
ｐ）配列番号２０（ＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴ）、ここでＸは２３である、
ｑ）配列番号２１（ＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴ）、ここでＸは２３である、
ｒ）配列番号２２（ＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴ）、ここでＸは２３である、
ｓ）配列番号２３（ＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣ）、ここでＸは２３である、
ｔ）配列番号２４（ＧＣＴＣＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣ）、ここでＸは２３である、
ｕ）配列番号２５（ＣＧＡＧＴＣＴＧＧＧＡＣＴＧＡＣＣＡＣＴＣＡＧＧＣ）、ここでＸは２３である、
ｖ）配列番号２６（ＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧＧＣＧＡＧＴＣＴＧ）、ここでＸは２３である、
ｗ）配列番号２７（ＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧＧＣＧＡ）、ここでＸは２３である、
ｘ）配列番号２８（ＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧ）、ここでＸは２３である、
ｙ）配列番号２９（ＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧ）、ここでＸは２３である、
ｚ）配列番号３０（ＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡ）、ここでＸは２３である、
ａａ）配列番号３１（ＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡ）、ここでＸは２３である、
ｂｂ）配列番号３２（ＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧ）、ここでＸは２３である、
ｃｃ）配列番号３３（ＡＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡ）、ここでＸは２３である、および
ｄｄ）配列番号３４（ＣＣＣＣＣＧＡＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣ）、ここでＸは２３である、
から選択される、医薬組成物。
【請求項１７】
前記標的化配列が配列番号３（ＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴＴＧＴＣＧＧＣＡＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記標的化配列が配列番号４（ＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴＴＧＴＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記標的化配列が配列番号５（ＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記標的化配列が配列番号６（ＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記標的化配列が配列番号７（ＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記標的化配列が配列番号８（ＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記標的化配列が配列番号１０（ＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記標的化配列が配列番号１１（ＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記標的化配列が配列番号１２（ＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記標的化配列が配列番号１３（ＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記標的化配列が配列番号１４（ＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記標的化配列が配列番号１５（ＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記標的化配列が配列番号１６（ＡＣＴＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記標的化配列が配列番号１７（ＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＡＴＧＧＡＧＣＡＧＧＴＣＡＴ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記標的化配列が配列番号１８（ＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＡＴＧＧＡＧＣＡＧＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記標的化配列が配列番号２０（ＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記標的化配列が配列番号２１（ＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記標的化配列が配列番号２２（ＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記標的化配列が配列番号２３（ＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記標的化配列が配列番号２４（ＧＣＴＣＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記標的化配列が配列番号２５（ＣＧＡＧＴＣＴＧＧＧＡＣＴＧＡＣＣＡＣＴＣＡＧＧＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
前記標的化配列が配列番号２６（ＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧＧＣＧＡＧＴＣＴＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記標的化配列が配列番号２７（ＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧＧＣＧＡ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記標的化配列が配列番号２８（ＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記標的化配列が配列番号２９（ＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
前記標的化配列が配列番号３０（ＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記標的化配列が配列番号３１（ＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記標的化配列が配列番号３２（ＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記標的化配列が配列番号３３（ＡＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記標的化配列が配列番号３４（ＣＣＣＣＣＧＡＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣ）であり、Ｘが２３であり、ＲがＨである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記標的化配列が配列番号３（ＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴＴＧＴＣＧＧＣＡＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記標的化配列が配列番号４（ＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴＴＧＴＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記標的化配列が配列番号５（ＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＣＴ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記標的化配列が配列番号６（ＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＧＡＴＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
前記標的化配列が配列番号７（ＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
前記標的化配列が配列番号８（ＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣＴＧＡＧＣＣＧＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前記標的化配列が配列番号１０（ＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧＣＴＣＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
前記標的化配列が配列番号１１（ＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
前記標的化配列が配列番号１２（ＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣＣＡＣＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
前記標的化配列が配列番号１３（ＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣＡＣＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
前記標的化配列が配列番号１４（ＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧＧＴＣＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
前記標的化配列が配列番号１５（ＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧＡＴＧＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
前記標的化配列が配列番号１６（ＡＣＴＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
前記標的化配列が配列番号１７（ＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＡＴＧＧＡＧＣＡＧＧＴＣＡＴ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
前記標的化配列が配列番号１８（ＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＡＴＧＧＡＧＣＡＧＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６２】
前記標的化配列が配列番号２０（ＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴＧＧＴ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
前記標的化配列が配列番号２１（ＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴＧＧＴ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
前記標的化配列が配列番号２２（ＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣＧＴ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６５】
前記標的化配列が配列番号２３（ＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣＴＣＡＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６６】
前記標的化配列が配列番号２４（ＧＣＴＣＧＧＣＣＴＣＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＡＣＣＡＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６７】
前記標的化配列が配列番号２５（ＣＧＡＧＴＣＴＧＧＧＡＣＴＧＡＣＣＡＣＴＣＡＧＧＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６８】
前記標的化配列が配列番号２６（ＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧＧＣＧＡＧＴＣＴＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項６９】
前記標的化配列が配列番号２７（ＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧＧＣＧＡ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項７０】
前記標的化配列が配列番号２８（ＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧＧＡＣＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項７１】
前記標的化配列が配列番号２９（ＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡＧＧＣＧＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項７２】
前記標的化配列が配列番号３０（ＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡＧＧＣＴＣＡ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項７３】
前記標的化配列が配列番号３１（ＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧＧＧＡＧＡＣＡＡ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項７４】
前記標的化配列が配列番号３２（ＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡＡＧ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項７５】
前記標的化配列が配列番号３３（ＡＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項７６】
前記標的化配列が配列番号３４（ＣＣＣＣＣＧＡＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣＣ）であり、Ｘが２３であり、Ｒが−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ２であり、
Ｒ１は、それぞれの出現において独立に、水素またはメチルであり、
Ｒ２は、それぞれの出現において独立に、水素または−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
Ｒ３は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ４は、それぞれの出現において独立に、水素、メチル、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−Ｚ−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２または−［Ｃ（Ｏ）ＣＨＲ’ＮＨ］ｍＨであり、Ｚは、カルボニル（Ｃ（Ｏ））または直接結合であり、Ｒ’は、天然アミノ酸またはその１もしくは２炭素ホモログの側鎖であり、ｍは、１〜６であり、
Ｒ５は、それぞれの出現において独立に、水素、メチルまたは電子対であり、
Ｒ６は、それぞれの出現において独立に、水素またはメチルであり、
Ｒ７は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシアルキルであり、
Ｌは、アルキル、アルコキシまたはアルキルアミノ基、またはこれらの組合せを含む長さが１８原子までの任意選択のリンカーであり、
連結（Ｂ）について：
Ｗは、それぞれの出現において独立に、ＳまたはＯであり、
Ｘは、それぞれの出現において独立に、−ＮＲ８Ｒ９または−ＯＲ３であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ１０であり、
Ｒ８は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルキルであり、
Ｒ９は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アラルキルまたはアリールであり、
Ｒ１０は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルまたは−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
Ｒ８およびＲ９は接合して、５〜１８員の単環式または二環式複素環を形成し得るか、あるいはＲ８、Ｒ９またはＲ３はＲ１０と接合して、５〜７員の複素環を形成し得、Ｘが４−ピペラジノであるとき、Ｘは、下記の構造（ＩＩＩ）：
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ２であり、
Ｒ１は、それぞれの出現において独立に、水素またはメチルであり、
Ｒ２は、それぞれの出現において独立に、水素または−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
Ｒ３は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ４は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−Ｚ−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２または−［Ｃ（Ｏ）ＣＨＲ’ＮＨ］ｍＨであり、Ｚは、カルボニル（Ｃ（Ｏ））または直接結合であり、Ｒ’は、天然アミノ酸またはその１もしくは２炭素ホモログの側鎖であり、ｍは、１〜６であり、
Ｒ５は、それぞれの出現において独立に、水素、メチルまたは電子対であり、
Ｒ６は、それぞれの出現において独立に、水素またはメチルであり、
Ｒ７は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシアルキルであり、
Ｌは、アルキル、アルコキシまたはアルキルアミノ基、またはこれらの組合せを含む長さが１８原子までの任意選択のリンカーであり、
連結（Ｂ）について：
Ｗは、それぞれの出現において独立に、ＳまたはＯであり、
Ｘは、それぞれの出現において独立に、−ＮＲ８Ｒ９または−ＯＲ３であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ１０であり、
Ｒ８は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルキルであり、
Ｒ９は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アラルキルまたはアリールであり、
Ｒ１０は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルまたは−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
Ｒ８およびＲ９は接合して、５〜１８員の単環式または二環式複素環を形成し得るか、あるいはＲ８、Ｒ９またはＲ３はＲ１０と接合して、５〜７員の複素環を形成し得、Ｘが４−ピペラジノであるとき、Ｘは、下記の構造（ＩＩＩ）：
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
本発明のこのような態様および他の態様は、下記の詳細な説明を参照することによって明らかである。このために、様々な参照文献を、本明細書において記載するが、これらはより詳細に、特定の背景的情報、手順、化合物および／または組成物を記載しており、それぞれは参照によりその全体が本明細書に組み込まれている。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
早老性疾患または関連する状態の処置を必要とする被験体において早老性疾患または関連する状態を処置するための方法であって、前記被験体にアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与することを含み、前記オリゴヌクレオチドは、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡの異常なスプライシングをモジュレートし、前記オリゴヌクレオチドは、モルホリノサブユニット、および１つのサブユニットのモルホリノ窒素と隣接するサブユニットの５’環外炭素とを接合するリン含有サブユニット間連結から構成され、かつ以下：
（ｉ）実質的に荷電していない、ヌクレアーゼ耐性骨格を有し、
（ｉｉ）哺乳動物宿主細胞による取込みが可能であり、
（ｉｉｉ）約１２〜４０のヌクレオチド塩基を含有し、かつ
（ｉｖ）ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１０、イントロン１０、エキソン１１、またはこれらの組合せに対して相補的である少なくとも約１２の連続的なサブユニットの標的化配列を有する、方法。
（項目２）
前記標的化配列が、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位の上流の塩基に対して相補的である、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記標的化配列が、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位の下流の塩基に対して相補的である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記標的化配列が、前記ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位と重複しない、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記早老性疾患が、前記ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位内の１８２４Ｃ＞Ｔ変異と関連し、前記標的化配列が、前記１８２４Ｃ＞Ｔ変異と重複しない、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記標的化配列の最も３’側の塩基が、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位の約１〜３０塩基下流であるＬＭＮＡエキソン１１中の塩基に対して相補的である、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記標的化配列の最も３’側の塩基が、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１１潜在的スプライス部位の約１０〜４０塩基上流であるＬＭＮＡエキソン１１中の塩基に対して相補的である、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記標的化配列の最も３’側の塩基が、ＬＭＮＡエキソン１１の約１〜６０塩基上流であるＬＭＮＡイントロン１０中の塩基に対して相補的である、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記標的化配列の最も３’側の塩基が、ＬＭＮＡイントロン１０の約１〜３０塩基上流であるＬＭＮＡエキソン１０中の塩基に対して相補的である、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記標的化配列が、ＬＭＮＡプレｍＲＮＡのエキソン１０および１１のスプライスドナー（ＳＤ）部位またはスプライスアクセプター（ＳＡ）部位のスプライスジャンクションと重複する領域に対して相補的であり、かつプロセシングを受ける前の前記ｍＲＮＡのエキソン領域の一部およびイントロン領域の一部に対して相補的である、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記標的化配列が、配列番号３〜３４のいずれか１つを含む、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記標的化配列が、配列番号３〜７または１４〜１６のいずれか１つを含む、項目１に記載の方法。
（項目１３）
前記標的化配列が、配列番号４から本質的になる、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記標的化配列が、配列番号１１から本質的になる、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記オリゴヌクレオチドが、ホスホロジアミデートモルホリノオリゴヌクレオチド（ＰＭＯ）、１つもしくは複数のピペラジン含有サブユニット間連結を含むＰＭＯ（ＰＭＯプラス）またはＰＭＯ−Ｘオリゴヌクレオチドである、項目１に記載の方法。
（項目１６）
前記オリゴヌクレオチドが、約１０％〜５０％のサブユニット間カチオン性連結を含有する、項目１に記載の方法。
（項目１７）
前記オリゴヌクレオチド中の前記モルホリノサブユニットが、下記の構造：
【化４３】
2015501817.tif 000006
に従ってホスホロジアミデート連結によって接合しており、
式中、Ｚは、ＳまたはＯであり、
Ｘ＝ＮＲ１Ｒ２またはＯＲ６であり、
Ｙ＝ＯまたはＮＲ７であり、そして
それぞれの前記連結は、以下：
（ａ）荷電していない連結（ａ）であって、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６、およびＲ７のそれぞれは、水素および低級アルキルから独立に選択される、荷電していない連結（ａ）；
（ｂ１）カチオン性連結（ｂ１）であって、ここで、Ｘ＝ＮＲ１Ｒ２であり、Ｙ＝Ｏであり、ＮＲ１Ｒ２は、Ｒ１Ｒ２＝−ＣＨＲＣＨＲＮ（Ｒ３）（Ｒ４）ＣＨＲＣＨＲ−であるように、任意選択で置換されているピペラジノ基を表し、
各Ｒ４は、Ｈ、ＣＨ３であるかまたは存在せず、かつ
Ｒ３は、Ｈ、低級アルキル、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、Ｚ−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、および［Ｃ（Ｏ）ＣＨＲ’ＮＨ］ｍＨから選択され、ここで、Ｚは、カルボニル（Ｃ（Ｏ））または直接結合であり、Ｌは、アルキル、アルコキシ、およびアルキルアミノから選択される結合を有する長さが１８原子までの任意選択のリンカーであり、Ｒ’は、天然アミノ酸またはその１もしくは２炭素ホモログの側鎖であり、かつｍは、１〜６である、カチオン性連結（ｂ１）；
（ｂ２）カチオン性連結（ｂ２）であって、ここで、Ｘ＝ＮＲ１Ｒ２であり、Ｙ＝Ｏであり、Ｒ１＝ＨまたはＣＨ３であり、かつＲ２＝ＬＮＲ３Ｒ４Ｒ５であり、ここで、Ｌ、Ｒ３、およびＲ４は、上記のように定義され、かつＲ５は、Ｈ、低級アルキル、または低級（アルコキシ）アルキルである、カチオン性連結（ｂ２）；ならびに
（ｂ３）カチオン性連結（ｂ３）であって、ここで、Ｙ＝ＮＲ７であり、Ｘ＝ＯＲ６であり、かつＲ７＝ＬＮＲ３Ｒ４Ｒ５であり、ここで、Ｌ、Ｒ３、およびＲ４およびＲ５は、上記のように定義され、かつＲ６は、Ｈまたは低級アルキルである、カチオン性連結（ｂ３）；
から選択され、
少なくとも１つの前記連結は、カチオン性連結（ｂ１）、カチオン性連結（ｂ２）、およびカチオン性連結（ｂ３）から選択される、項目１に記載の方法。
（項目１８）
タイプ（ａ）の連結におけるＲ１およびＲ２のそれぞれが、メチルである、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
少なくとも１つの連結が、タイプ（ｂ１）のものであり、各Ｒが、Ｈであり、Ｒ４が、Ｈ、ＣＨ３、または電子対であり、かつＲ３が、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、およびＣ（Ｏ）−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２から選択される、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
少なくとも１つの連結が、タイプ（ｂ１）のものであり、各Ｒが、Ｈであり、Ｒ４が、電子対であり、かつＲ３が、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２およびＣ（Ｏ）−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２から選択される、項目１７に記載の方法。
（項目２１）
少なくとも１つの連結が、タイプ（ｂ１）のものであり、各Ｒが、Ｈであり、Ｒ４が、電子対であり、かつＲ３が、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２およびＣ（Ｏ）−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２から選択される、項目１７に記載の方法。
（項目２２）
Ｒ３が、Ｃ（Ｏ）−Ｌ−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２であり、Ｌが、構造−（ＣＨ２）ｎ−を有する炭化水素であり、ｎが、１〜１２である、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
少なくとも１つの連結が、タイプ（ｂ１）のものであり、各Ｒが、Ｈであり、かつＲ３およびＲ４のそれぞれが独立に、ＨまたはＣＨ３である、項目１７に記載の方法。
（項目２４）
前記アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞透過性ペプチドに共有結合的に付着している、項目１から２３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記細胞透過性ペプチドが、アルギニンに富んだペプチドである、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記アルギニンに富んだペプチドが、１つまたは２つのアミノ酸リンカーを介してそのＣ末端において前記オリゴヌクレオチドの５’端に付着している、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記ペプチドが、１つまたは２つのアミノ酸リンカーを介してそのＣ末端において前記オリゴヌクレオチドの３’端に付着している、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
前記早老性疾患または前記関連する状態が、早老性ラミノパシー、年齢に関連する状態、心血管疾患、ＨＧＰＳまたはアテローム性動脈硬化症から選択される、項目１に記載の方法。
（項目２９）
早老性ラミノパシーの処置を必要とする被験体において早老性ラミノパシーを処置するための方法であって、前記方法は、前記被験体にアンチセンスオリゴヌクレオチド、またはこれを含む医薬組成物を投与することを含み、前記オリゴヌクレオチドは、ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡの異常なスプライシングをモジュレートし、前記オリゴヌクレオチドは、骨格を含み、前記骨格は、サブユニット間連結によって接合されているモルホリノ環構造の配列を含み、前記サブユニット間連結は、１つのモルホリノ環構造の３’端と隣接するモルホリノ環構造の５’端とを接合し、各モルホリノ環構造は、前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１〜３４のいずれか１つにおいて記載した配列の少なくとも１２塩基に対して相補的であるか、または配列番号３〜３４の任意の１つもしくは複数を含む標的化配列を含む標的核酸に配列特異的様式で結合することができるように、塩基対合部分に結合しており、前記サブユニット間連結は、以下の一般構造（Ｉ）：
【化４４】
2015501817.tif 000007
またはその塩もしくは異性体を有し、前記サブユニット間連結（Ｉ）のそれぞれは、独立に、連結（Ａ）または連結（Ｂ）であり、
ここで連結（Ａ）について：
Ｗは、それぞれの出現において独立に、ＳまたはＯであり、
Ｘは、それぞれの出現において独立に、−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＮＲ１Ｒ２、−ＯＲ３または、
【化４５】
2015501817.tif 000008
であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ２であり、
Ｒ１は、それぞれの出現において独立に、水素またはメチルであり、
Ｒ２は、それぞれの出現において独立に、水素または−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
Ｒ３は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ４は、それぞれの出現において独立に、水素、メチル、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−Ｚ−Ｌ−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２または−［Ｃ（Ｏ）ＣＨＲ’ＮＨ］ｍＨであり、ここで、Ｚは、カルボニル（Ｃ（Ｏ））または直接結合であり、Ｒ’は、天然アミノ酸またはその１もしくは２炭素ホモログの側鎖であり、かつｍは、１〜６であり、
Ｒ５は、それぞれの出現において独立に、水素、メチルまたは電子対であり、
Ｒ６は、それぞれの出現において独立に、水素またはメチルであり、
Ｒ７は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ１〜Ｃ６アルコキシアルキルであり、
Ｌは、アルキル、アルコキシまたはアルキルアミノ基、またはこれらの組合せを含む長さが１８原子までの任意選択のリンカーであり、そして
連結（Ｂ）について：
Ｗは、それぞれの出現において独立に、ＳまたはＯであり、
Ｘは、それぞれの出現において独立に、−ＮＲ８Ｒ９または−ＯＲ３であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ１０であり、
Ｒ８は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルキルであり、
Ｒ９は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アラルキルまたはアリールであり、
Ｒ１０は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルまたは−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
ここで、Ｒ８およびＲ９は接合して、５〜１８員の単環式または二環式複素環を形成し得るか、あるいはＲ８、Ｒ９またはＲ３はＲ１０と接合して、５〜７員の複素環を形成し得、そしてＸが４−ピペラジノであるとき、Ｘは、下記の構造（ＩＩＩ）：
【化４６】
2015501817.tif 000009
を有し、式中、
Ｒ１１は、それぞれの出現において独立に、Ｃ２〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルカルボニル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルであり、かつ
Ｒは、それぞれの出現において独立に、電子対、水素またはＣ１〜Ｃ１２アルキルであり、かつ
Ｒ１２は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、−ＮＨ２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＮＲ１３Ｒ１４Ｒ１５、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルカルボニル、オキソ、−ＣＮ、トリフルオロメチル、アミジル、アミジニル、アミジニルアルキル、アミジニルアルキルカルボニルグアニジニル、グアニジニルアルキル、グアニジニルアルキルカルボニル、コレート、デオキシコレート、アリール、ヘテロアリール、複素環、−ＳＲ１３またはＣ１〜Ｃ１２アルコキシであり、ここで、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、それぞれの出現において独立に、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルであり、そして
前記サブユニット間連結の少なくとも１つは、連結（Ｂ）である、方法。
（項目３０）
前記サブユニット間連結の少なくとも５％が、連結（Ｂ）である、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記サブユニット間連結の１０％〜５０％が、連結（Ｂ）である、項目２９に記載の方法。
（項目３２）
各連結（Ｂ）が、それぞれの出現において同じ構造を有する、項目２９に記載の方法。
（項目３３）
各Ｙおよび各Ｗが、Ｏである、項目２９に記載の方法。
（項目３４）
前記標的化配列が、配列番号３〜７または１４〜１６のいずれか１つを含む、項目２９に記載の方法。
（項目３５）
前記標的化配列が、配列番号４から本質的になる、項目２９に記載の方法。
（項目３６）
前記標的化配列が、配列番号１１から本質的になる、項目２９に記載の方法。
（項目３７）
前記早老性疾患または前記関連する状態が、早老性ラミノパシー、年齢に関連する状態、心血管疾患、ＨＧＰＳまたはアテローム性動脈硬化症から選択される、項目２９に記載の方法。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６０】
ヒトＬＭＮＡプレｍＲＮＡを標的とするための本発明の方法において使用するための例示的なアンチセンス配列を、下記の表２において示す。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、これらの標的化配列の全てまたは一部を含み得る。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２０】
またはその塩もしくは異性体を有し、式中、
Ｗは、それぞれの出現において独立に、ＳまたはＯであり、
Ｘは、それぞれの出現において独立に、−ＮＲ８Ｒ９または−ＯＲ３であり、
Ｙは、それぞれの出現において独立に、Ｏまたは−ＮＲ１０であり、
Ｒ３は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ８は、それぞれの出現において独立に、水素またはＣ２〜Ｃ１２アルキルであり、
Ｒ９は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ１２アラルキルまたはアリールであり、
Ｒ１０は、それぞれの出現において独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ１２アルキルまたは−ＬＮＲ４Ｒ５Ｒ７であり、
Ｒ８およびＲ９は接合して、５〜１８員の単環式または二環式複素環を形成し得るか、あるいはＲ８、Ｒ９またはＲ３はＲ１０と接合して、５〜７員の複素環を形成し得、Ｘが４−ピペラジノであるとき、Ｘは、下記の構造（ＩＩＩ）：