【手続補正書】
【提出日】平成28年7月13日(2016.7.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験者の血液サンプルの凝固時間を測定するための方法であって：
（ａ）  被験者の血液サンプルの凝固反応を開始すること；
（ｂ）  前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得すること；および
（ｃ）  前記血液サンプルの凝固時間を測定するために前記一組の画像を分析することを含み、
前記血液サンプルの容積が約１μｌ以下である、方法。
【請求項２】
被験者の血液サンプルの凝固時間を測定するための方法であって：
（ａ）  前記血液サンプルの凝固反応を開始すること；
（ｂ）  前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得すること；および
（ｃ）  前記血液サンプルの凝固時間を測定するために前記一組の画像を分析することを含む方法であって、
ステップ（ａ）〜（ｃ）を遂行するための時間の量が約１時間以下である方法。
【請求項３】
ステップ（ａ）〜（ｄ）を遂行するための時間の量が約３０分以下である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記一組の画像の個々の画像が、ピクセル化されおよび少なくとも１０，０００ピクセルを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
希釈後の前記血液サンプルの凝固時間が約１分〜約１０分であることができるように、前記血液サンプルを希釈することを更に含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
フィブリノーゲンを凝固反応に加えることを更に含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記開始することのステップが、凝固開始剤を前記血液サンプルに加えることを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項８】
前記血液が血漿サンプルである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項９】
前記血液サンプルが非血管的経路から得られる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１０】
前記画像が、凝固反応の光散乱画像である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１１】
前記凝固時が、前記散乱された光の強度の遷移に基づいて測定される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
一組の画像を取得する前に、複数のビーズを前記血液サンプルに加えることを更に含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１３】
前記複数のビーズが、少なくとも２つの異なるサイズのビーズを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記複数のビーズが、約１μｍ〜５μｍの間の任意のサイズから選ばれる少なくとも２つの異なるサイズのビーズを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記複数のビーズが、約５μｍ〜５０μｍの間の任意のサイズから選ばれる少なくとも２つの異なるサイズのビーズを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記複数のビーズが、ラテックス、ポリスチレン、アクリル、またはガラスの１つ以上のを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
前記一組の画像を分析するステップが、前記ビーズが実質的に静止する時点の位置を決定することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
前記一組の画像を分析するステップが、前記ビーズの可動性の遷移が生じる時点の位置を決めることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記ビーズの可動性の遷移が、前記凝固反応における、前記ビーズの沈降の減速により証明される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記一組の画像を分析するステップが、前記ビーズの動きを測定するために、前記一組の画像の２つの画像を、比較することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項２１】
前記２つの画像が、実質的に同一である場合に、前記ビーズが、実質的に静止している、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ビーズが標識される、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項２３】
前記ビーズが蛍光性の標識により標識される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
被験者の血液サンプルの複数の凝固パラメーターを測定するための方法であって：
前記複数の凝固パラメーターを測定するために、前記サンプルを用いて複数の検定を遂行することを含み、
前記血液サンプルは約１ｍｌ以下であり、前記複数の検定の個々の検定で約２μｌ未満のサンプルが用いられる、方法。
【請求項２５】
少なくとも１つの前記凝固パラメーターが以下の検定から構成される群から選ばれる請求項２４に記載の方法：活性化部分トロンボプラスチン時間（ａＰＴＴ）、プロトロンビン時間（ＰＴ）、国際標準比（ＩＮＲ）、フィブリノーゲン、出血時間、凝固因子、抗リン脂質抗体、Ｄ−ダイマー、希釈ラッセル蛇毒時間法（ｄｉｌｕｔｅ  Ｒｕｓｓｅｌｌ’ｓ
ｖｉｐｅｒ  ｖｅｎｏｍ  ｔｉｍｅ）（ｄＲＶＶＴ）、血小板機能、トロンボエラストグラフィー（ｔｈｒｏｍｂｏｅｌａｓｔｏｇｒａｐｈｙ）（ＴＥＧまたはＳｏｎｏｃｌｏｔ）、および真性グロブリン溶解時間（ｅｕｇｌｏｂｕｌｉｎｌｙｓｉｓｔｉｍｅ）（ＥＬＴ）。
【請求項２６】
前記複数の検定のそれぞれの反応容積が、約６０μｌ以下である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
ステップ（ａ）〜（ｃ）を遂行する時間の量が約１時間以下である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
ステップ（ａ）〜（ｃ）を遂行する時間の量が約３０分以下である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
前記ステップ（ｃ）が：
（ｉ）  少なくとも１つの前記複数の検定の２つ以上の画像の一組を得ること；および
（ｉｉ）  前記凝固時間を測定するために前記一組の画像を分析することを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項３０】
前記一組の画像の個々の画像が、ピクセル化されおよび少なくとも１０，０００ピクセルを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記血液サンプルが赤血球（ＲＢＣ）を含み、および前記一組の画像を分析するステップが、前記ＲＢＣが実質的に静止する時点の位置を決めることを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項３２】
前記血液サンプルが赤血球（ＲＢＣ）を含み、および前記一組の画像を分析するステップが、前記ＲＢＣの可動性の遷移が生じる時点の位置を決めることを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＲＢＣの可動性の遷移が、前記凝固反応におけるＲＢＣの沈降の減速により証明される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記血液サンプルがＲＢＣを含み、および前記一組の画像を分析するステップが、前記ＲＢＣの動きを測定するために、前記一組の画像の２つの画像を比較することを含む、請求項１または２に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
本明細書において言及される、全ての刊行物、特許及び特許出願は、個々の刊行物、特許及び特許出願のそれぞれが、参照により組み込まれるために、あたかも明確に、及び個々に参照により示されるのと同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。組み込まれた刊行物は、米国特許出願公開第２０１０／００８１１４４Ａ１号；米国特許第７，８８８，１２５号；米国特許出願公開第２０１１／００９３２４９Ａ１号；米国特許出願公開第２００９／０３１８７７５Ａ１号；米国特許第７，２９１，４９７号；米国特許第８，０１２，７４４号；米国特許出願公開第２００６／０２６４７８３Ａ１号；米国特許出願公開第２００７／０２２４０８４Ａ１号；および米国特許出願第１３／２４４，９４７号を含む。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
被験者の血液サンプルの凝固時間を測定するための方法であって：
（ａ）  被験者の血液サンプルの凝固反応を開始すること；
（ｂ）  前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得すること；および
（ｃ）  前記血液サンプルの凝固時間を測定するために前記一組の画像を分析することを含む方法。
（項目２）
被験者の血液サンプルの凝固時間を測定するための方法であって：
（ａ）  １ｍｌ以下の血液サンプルを被験者から得ること；
（ｂ）  前記血液サンプルの凝固反応を開始すること；
（ｃ）  前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得すること；および
（ｄ）  前記血液サンプルの凝固時間を測定するために前記一組の画像を分析することを含む方法であって、ステップ（ａ）〜（ｄ）を遂行するための時間の量が約１時間以下である方法。
（項目３）
ステップ（ａ）〜（ｄ）を遂行するための時間の量が約３０分以下である、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記血液サンプルの容積が約１μｌ以下である、項目１または２に記載の方法。
（項目５）
前記一組の画像の個々の画像が、ピクセル化されおよび少なくとも１０，０００ピクセルを含む、項目１または２に記載の方法。
（項目６）
希釈後の前記血液サンプルの凝固時間が約１分〜約１０分であることができるように、前記血液サンプルを希釈することを更に含む、項目１または２に記載の方法。
（項目７）
フィブリノーゲンを凝固反応に加えることを更に含む、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記開始することのステップが、凝固開始剤を前記血液サンプルに加えることを含む、項目１または２に記載の方法。
（項目９）
前記血液が血漿サンプルである、項目１または２に記載の方法。
（項目１０）
前記血液サンプルが非血管的経路から得られる、項目１または２に記載の方法。
（項目１１）
前記画像が、凝固反応の光散乱画像である、項目１または２に記載の方法。
（項目１２）
前記凝固時が、前記散乱された光の強度の遷移に基づいて測定される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
一組の画像を取得する前に、複数のビーズを前記血液サンプルに加えることを更に含む、項目１または２に記載の方法。
（項目１４）
前記複数のビーズが、少なくとも２つの異なるサイズのビーズを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記複数のビーズが、約１μｍ〜５μｍの間の任意のサイズから選ばれる少なくとも２つの異なるサイズのビーズを含む、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記複数のビーズが、約５μｍ〜５０μｍの間の任意のサイズから選ばれる少なくとも２つの異なるサイズのビーズを含む、項目１４に記載の方法。
（項目１７）
前記複数のビーズが、ラテックス、ポリスチレン、アクリル、またはガラスの１つ以上のを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１８）
前記一組の画像を分析するステップが、前記ビーズが実質的に静止する時点の位置を決定することを含む、項目１３に記載の方法。
（項目１９）
前記一組の画像を分析するステップが、前記ビーズの可動性の遷移が生じる時点の位置を決めることを含む、項目１３に記載の方法。
（項目２０）
前記ビーズの可動性の遷移が、前記凝固反応における、前記ビーズの沈降の減速により証明される、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記一組の画像を分析するステップが、前記ビーズの動きを測定するために、前記一組の画像の２つの画像を、比較することを含む、項目１３に記載の方法。
（項目２２）
前記２つの画像が、実質的に同一である場合に、前記ビーズが、実質的に静止している、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記ビーズが標識される、項目１５または１６に記載の方法。
（項目２４）
前記ビーズが蛍光性の標識により標識される、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
被験者の血液サンプルの複数の凝固パラメーターを測定するための方法であって：
（ａ）  被験者の血液サンプルを取得することであって、前記血液サンプルはまたは約１ｍｌ以下であり；および
（ｂ）  前記複数の凝固パラメーターを測定するために、前記サンプルを用いて複数の検定を遂行することを含む方法。
（項目２６）
少なくとも１つの前記凝固パラメーターが以下の検定から構成される群から選ばれる項目２５に記載の方法：活性化部分トロンボプラスチン時間（ａＰＴＴ）、プロトロンビン時間（ＰＴ）、国際標準比（ＩＮＲ）、フィブリノーゲン、出血時間、凝固因子、抗リン脂質抗体、Ｄ−ダイマー、希釈ラッセル蛇毒時間法（ｄｉｌｕｔｅ  Ｒｕｓｓｅｌｌ’ｓ
ｖｉｐｅｒ  ｖｅｎｏｍ  ｔｉｍｅ）（ｄＲＶＶＴ）、血小板機能、トロンボエラストグラフィー（ｔｈｒｏｍｂｏｅｌａｓｔｏｇｒａｐｈｙ）（ＴＥＧまたはＳｏｎｏｃｌｏｔ）、および真性グロブリン溶解時間（ｅｕｇｌｏｂｕｌｉｎｌｙｓｉｓｔｉｍｅ）（ＥＬＴ）。
（項目２７）
前記複数の検定の個々の検定で約２μｌ未満のサンプルが用いられる、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
前記複数の検定のそれぞれの反応容積が、約６０μｌ以下である、項目２５に記載の方法。
（項目２９）
ステップ（ａ）〜（ｃ）を遂行する時間の量が約１時間以下である、項目２５に記載の方法。
（項目３０）
ステップ（ａ）〜（ｃ）を遂行する時間の量が約３０分以下である、項目２５に記載の方法。
（項目３１）
前記ステップ（ｃ）が：
（ｉ）  少なくとも１つの前記複数の検定の２つ以上の画像の一組を得ること；および
（ｉｉ）  前記凝固時間を測定するために前記一組の画像を分析することを含む、項目２５に記載の方法。
（項目３２）
前記一組の画像の個々の画像が、ピクセル化されおよび少なくとも１０，０００ピクセルを含む、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
被験者の血液サンプルの凝固時間を測定する機器であって：
（ａ）  凝固開始剤を、被験者からの前記血液サンプルに凝血塊の形成に適切な条件下で加え、それにより凝固反応を開始するために構成された構成要素；
（ｂ）  前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得するために構成された構成要素；および
（ｃ）  前記血液サンプルの凝固時間を測定するために、前記一組の画像を分析する構成要素を含む機器。
（項目３４）
被験者の血液サンプルの凝固時間を測定するシステムであって：
（ａ）  凝固開始剤を、被験者からの前記血液サンプルに凝血塊の形成に適切な条件下で加え、それにより凝固反応を開始するために構成された機器；
（ｂ）  前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得するために構成されたカメラ；および
（ｃ）  前記血液サンプルの凝固時間を測定するために、前記一組の画像を分析するコンピュータを含むシステム。
（項目３５）
前記血液サンプルが赤血球（ＲＢＣ）を含み、および前記一組の画像を分析するステップが、前記ＲＢＣが実質的に静止する時点の位置を決めることを含む、項目１または２に記載の方法。
（項目３６）
前記血液サンプルが赤血球（ＲＢＣ）を含み、および前記一組の画像を分析するステップが、前記ＲＢＣの可動性の遷移が生じる時点の位置を決めることを含む、項目１または２に記載の方法。
（項目３７）
前記ＲＢＣの可動性の遷移が、前記凝固反応におけるＲＢＣの沈降の減速により証明される、項目３５に記載の方法。
（項目３８）
前記血液サンプルがＲＢＣを含み、および前記一組の画像を分析するステップが、前記ＲＢＣの動きを測定するために、前記一組の画像の２つの画像を比較することを含む、項目１または２に記載の方法。
（項目３９）
前記２つの画像が実質的に同じ場合に、前記ＲＢＣは実質的に静止している、項目３４に記載の方法。
（項目４０）
前記ＲＢＣが標識されている、項目３４または３５に記載の方法。
（項目４１）
前記ＲＢＣが、蛍光性の標識で標識される、項目３９に記載の方法。
（項目４２）
前記方法が、血漿サンプルを前記血液サンプルから調製すること、および前記複数の凝固パラメーターを測定するために、前記血漿サンプルを、複数の検定に用いることを更に含む、項目２５に記載の方法。
（項目４３）
前記凝固反応の、２つ以上の画像の一組を取得するために構成された、前記構成要素、および前記血液サンプルの凝固時間を測定するために、前記一組の画像を分析する構成要素が、前記機器内の同じ装置の部分である、項目３２に記載の機器。
（項目４４）
前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得するために構成されたカメラ、および前記血液サンプルの凝固時間を測定するために、前記一組の画像を分析するコンピュータが、システム内の同じ装置の部分である、項目３３に記載の機器。
（項目４５）
前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得するために構成されたカメラ、および前記血液サンプルの凝固時間を測定するために、前記一組の画像を分析するコンピュータが、システム内の同じ装置の部分ではない、項目３３に記載の機器。
（項目４６）
前記血液サンプルの凝固時間を測定するために、前記一組の画像を分析するコンピュータが、前記凝固反応の２つ以上の画像の一組を取得するために構成されたカメラとは遠隔に配置される、項目４４に記載のシステム。
（項目４７）
前記血液サンプルが２０μｌ以下である、項目２に記載の方法。
（項目４８）
前記血液サンプルが約２０μｌ以下である、項目２５に記載の方法。
（項目４９）
前記一組の２つ以上の画像がビデオ画像を含む、項目１〜４２のいずれかに記載の方法。
（項目５０）
被験者の血液サンプルの複数の凝固時間を測定するための方法であって：
（ａ）  被験者の血液サンプルの凝固反応を開始すること；
（ｂ）  前記凝固反応のビデオを取得すること；および
（ｃ）  前記血液サンプルの凝固時間を測定するために前記ビデオを分析することを含む方法。
（項目５１）
前記方法がポイント・オブ・サービスの場所で遂行される、項目１〜４２のいずれかに記載の方法。
（項目５２）
少なくとも機器またはシステムの一部分がポイント・オブ・サービスの場所に配置される、項目４３〜４６のいずれかに記載の方法。
（項目５３）
前記機器またはシステムが、クラウドコンピューティング・インフラストラクチャーを介して動的に制御され得る、項目４３〜４６または５２のいずれかに記載の方法。
（項目５４）
凝固について、混合物を検定するための方法であって：
Ａ）オリジナルの生物学的サンプルの一定量を含む混合物における凝固反応を開始することであって、この混合物は：ｉ）２００マイクロリットルと同程度の全体の容積を有し、ｉｉ）２０マイクロリットルと同程度のオリジナルの生物学的サンプルを含み、およびｉｉｉ）容積により８０％と同程度のオリジナルの生物学的サンプルを有し；
Ｂ）混合物を照射することおよびこの混合物からの光学的信号を検出すること；および
Ｃ）この混合物からの光学的信号の分析に基づいて、この混合物を分析することを含む方法。
（項目５５）
前記混合物からの光学的信号を検出するステップが前記混合物の画像を取得することを含む、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
目的の領域（ＲＯＩ）の画像を特定するために前記画像を分析することを更に含み、画像の目的の領域が、混合物の画像化された情報を含む、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記ＲＯＩにおける、平均光学的信号強度を決定するために、前記画像のＲＯＩを分析することを更に含む、項目５５に記載の方法。
（項目５８）
少なくとも混合物の第一の画像および第二の画像を経時的に取得することを更に含み、前記混合物の凝固時間が、第一の画像のＲＯＩにおける光学的信号強度、および第二の画像のＲＯＩにおける光学的信号強度における差を、決定することを含む分析に基づいて、決定される、項目５５に記載の方法。
（項目５９）
混合物の画像がＣＣＤまたはＣＭＯＳセンサーにより取得される、項目５５〜５８のいずれかに記載の方法。
（項目６０）
混合物の画像を取得するステップが、この混合物のビデオを取得することを含む、項目５５〜５９のいずれかに記載の方法。
（項目６１）
前記混合物からの光学的信号を検出するステップが、前記混合物を通過して透過された光学的信号を検出することを含む、項目５４に記載の方法。
（項目６２）
前記混合物を通過して透過された光学的信号が、経時的に検出される、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
前記混合物を通過して透過された光学的信号の強度が、前記混合物を通過して透過された光学的信号のベースラインと比較して、選択された量だけ低下される時間を決定することを含む分析に基づき、前記混合物の凝固時間を特定することを更に含む、項目６２に記載の方法。
（項目６４）
前記混合物を通過して透過された光学的信号の強度が、前記混合物を通過して透過された光学的信号のベースラインと比較して、２０％以上低下される時間を決定することを含む分析に基づき、前記混合物の凝固時間を特定することを更に含む、項目６２に記載の方法。
（項目６５）
前記混合物からの光学的信号を検出するステップが、前記混合物により散乱された光学的信号を検出することを含む、項目５４に記載の方法。
（項目６６）
前記混合物により散乱された光学的信号が、経時的に検出される、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
前記混合物により散乱された光学的信号の強度が、前記混合物により散乱された光学的信号のベースライン強度に比較して、選択された量だけ増大される時間を決定することを含む分析に基づいて、前記混合物の凝固時間を特定することを更に含む、項目６６に記載の方法。
（項目６８）
前記混合物により散乱された光学的信号の強度が、前記混合物により散乱された光学的信号のベースライン強度に比較して、２０％以上増大される時間を決定することを含む分析に基づいて、前記混合物の凝固時間を特定することを更に含む、項目６６に記載の方法。
（項目６９）
前記混合物を通過して透過された、または前記混合物により散乱された光学的信号が、ＣＣＤセンサー、ＣＭＯＳセンサー、光ダイオード、または光電子増倍管（ＰＭＴ）により検出される、項目６１〜６８に記載の方法。
（項目７０）
前記混合物が外因性のフィブリノーゲンを含む、項目５４〜６９に記載の方法。
（項目７１）
前記混合物中の前記外因性のフィブリノーゲンの濃度が、少なくとも１ｍｇ／ｍｌである、項目７０に記載の方法。
（項目７２）
前記混合物中の前記外因性のフィブリノーゲンの濃度が、０．５〜２０ｍｇ／ｍｌである、項目７０に記載の方法。
（項目７３）
前記オリジナルの生物学的サンプルが全血である、項目５４〜７２に記載の方法。
（項目７４）
前記オリジナルの生物学的サンプルが血漿である、項目５４〜７３に記載の方法。
（項目７５）
前記混合物が、５０マイクロリットルと同等の全体の容積を有する、項目５４〜７４に記載の方法。
（項目７６）
前記混合物が、５マイクロリットルと同程度の前記オリジナルの生物学的サンプルを含む、項目５４〜７５に記載の方法。
（項目７７）
前記混合物が、容積により５０％と同程度のオリジナルの生物学的サンプルを含む、項目５４〜７６に記載の方法。
（項目７８）
前記混合物が、白色光源により照射される、項目５４〜７７に記載の方法。
（項目７９）
前記混合物が、１つ以上の選択された波長の光により照射される、項目５４〜７７に記載の方法。
（項目８０）
前記混合物が、光放出ダイオード（ＬＥＤ）からの光により照射される、項目５４〜７７に記載の方法。