【手続補正書】
【提出日】平成28年2月16日(2016.2.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マウスであって、
（ａ）単一のヒトＶＨ遺伝子セグメント、１つ以上のヒトＤＨ遺伝子セグメントおよび１つ以上のヒトＪＨ遺伝子セグメントを含む再構成されていないヒトゲノム配列であって、該単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントは、ＶＨ１−２、ＶＨ１−６９、ＶＨ２−２６、ＶＨ２−７０、またはそれらの多型変異体である、再構成されていないヒトゲノム配列；および
（ｂ）雄マウスにおいて機能的であるＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列であって、野生型マウスのＡＤＡＭ６遺伝子座とは異なる位置にある、ＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列
をその生殖細胞系に有する、マウス。
【請求項２】
前記単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントが多型ＶＨ遺伝子セグメントである、請求項１に記載のマウス。
【請求項３】
前記ＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列がマウス配列である、請求項１または２に記載のマウス。
【請求項４】
前記ＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列が前記再構成されていないヒトゲノム配列に並置または隣接している、請求項１〜３のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項５】
前記再構成されていないヒトゲノム配列および前記ＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列が内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に存在する、請求項１〜４のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項６】
前記再構成されていないヒトゲノム配列が内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に存在し、前記ＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列が該内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座以外のマウスゲノム内の位置に存在する、請求項１〜４のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項７】
すべてのまたは実質的にすべての内因性ＶＨ遺伝子セグメントの欠失を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項８】
前記単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントがＶＨ１−６９である、請求項１〜７のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項９】
前記単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントがＶＨ１−２である、請求項１〜７のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項１０】
前記再構成されていないヒトゲノム配列が、ヒト、マウスまたはキメラヒト／マウス免疫グロブリン定常領域遺伝子に作動可能に連結されている、請求項１〜９のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項１１】
前記免疫グロブリン定常領域遺伝子がマウス免疫グロブリン定常領域遺伝子である、請求項１０に記載のマウス。
【請求項１２】
前記免疫グロブリン定常領域遺伝子が、ヒトＣＨ１、ヒトヒンジ、ヒトＣＨ２、ヒトＣＨ３およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるヒト配列を含む、請求項１０に記載のマウス。
【請求項１３】
前記マウス免疫グロブリン定常領域遺伝子が内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座にある、請求項１１に記載のマウス。
【請求項１４】
前記再構成されていないヒトゲノム配列が、ヒトＶＨ１−６９遺伝子セグメント、２７のヒトＤＨ遺伝子セグメントおよび６のヒトＪＨ遺伝子セグメントを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項１５】
前記再構成されていないヒトゲノム配列が、ヒトＶＨ１−２遺伝子セグメント、２７のヒトＤＨ遺伝子セグメントおよび６のヒトＪＨ遺伝子セグメントを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項１６】
１つ以上のヒトＶκ遺伝子セグメントおよび１つ以上のヒトＪκ遺伝子セグメントをその生殖細胞系にさらに含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項１７】
前記１つ以上のヒトＶκ遺伝子セグメントおよび１つ以上のヒトＪκ遺伝子セグメントが内因性免疫グロブリン軽鎖遺伝子座に存在する、請求項１６に記載のマウス。
【請求項１８】
前記ＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列が異所位置に存在する、請求項１〜１７のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項１９】
前記ＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列が内因性免疫グロブリン遺伝子座に存在する、請求項１〜１８のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項２０】
前記ＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列がマウスゲノム内の内因性免疫グロブリン遺伝子座以外の位置に存在する、請求項１〜１８のいずれか一項に記載のマウス。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２８９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２８９】
１つの実施形態において、上記可変ドメインは、重鎖可変ドメインである。特定の実施形態において、上記重鎖可変ドメインは、ＶＨ１−２、ＶＨ１−６９、ＶＨ２−２６、ＶＨ２−７０、またはＶＨ３−２３から選択される再構成ヒトＶＨ遺伝子セグメントを含む。特定の実施形態において、上記重鎖可変ドメインは、再構成ヒトＶＨ１−６９遺伝子セグメントを含む。特定の実施形態において、上記重鎖可変ドメインは、再構成ヒトＶＨ１−２遺伝子セグメントを含む。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
マウスであって、
（ａ）単一のヒトＶＨ遺伝子セグメント、１つ以上のＤＨ遺伝子セグメントおよび１つ以上のＪＨ遺伝子セグメントを含むヒトゲノム配列；および
（ｂ）雄マウスにおいて機能的であるＡＤＡＭ６タンパク質をコードする配列であって、野生型マウスのＡＤＡＭ６遺伝子座とは異なる位置にある配列
をその生殖細胞系に有する、マウス。
（項目２）
前記単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントが多型ＶＨ遺伝子セグメントである、項目１に記載のマウス。
（項目３）
前記ＡＤＡＭ６をコードする配列がマウス配列である、項目１に記載のマウス。
（項目４）
前記マウスゲノム配列が前記ヒトゲノム配列に並置または隣接している、項目１に記載のマウス。
（項目５）
前記ヒトゲノム配列および前記マウスゲノム配列が内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に存在する、項目１に記載のマウス。
（項目６）
前記ヒトゲノム配列が内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座に存在し、前記マウスゲノム配列が内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座以外の該マウスゲノム内の位置に存在する、項目１に記載のマウス。
（項目７）
すべてのまたは実質的にすべての内因性ＶＨ遺伝子セグメントの欠失を含む、項目１に記載のマウス。
（項目８）
前記単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントが、ＶＨ１−２、ＶＨ１−６９、ＶＨ２−２６、ＶＨ２−７０、ＶＨ３−２３またはそれらの多型変異体から選択される、項目１に記載のマウス。
（項目９）
前記ヒトＶＨ遺伝子セグメントがＶＨ１−６９である、項目８に記載のマウス。
（項目１０）
前記ヒトＶＨ遺伝子セグメントがＶＨ１−２である、項目８に記載のマウス。
（項目１１）
前記単一のＶＨ遺伝子セグメントが、ヒト、マウスまたはキメラヒト／マウス免疫グロブリン定常領域遺伝子に作動可能に連結されている、項目１に記載のマウス。
（項目１２）
前記免疫グロブリン定常領域遺伝子がマウス定常領域遺伝子である、項目１１に記載のマウス。
（項目１３）
前記免疫グロブリン定常遺伝子が、ヒトＣＨ１、ヒトヒンジ、ヒトＣＨ２、ヒトＣＨ３およびそれらの組み合わせから選択されるヒト配列を含む、項目１１に記載のマウス。
（項目１４）
前記マウス定常遺伝子が内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座にある、項目１２に記載のマウス。
（項目１５）
前記ヒトゲノム配列が、ヒトＶＨ１−６９遺伝子セグメント、２７のヒトＤＨ遺伝子セグメントおよび６のヒトＪＨ遺伝子セグメントを含む、項目１に記載のマウス。
（項目１６）
前記ヒトゲノム配列が、ヒトＶＨ１−２遺伝子セグメント、２７のヒトＤＨ遺伝子セグメントおよび６のヒトＪＨ遺伝子セグメントを含む、項目１に記載のマウス。
（項目１７）
１つ以上のヒトＶκ遺伝子セグメントおよび１つ以上のＪκ遺伝子セグメントをさらに含む、項目１、１５または１６に記載のマウス。
（項目１８）
前記１つ以上のヒトＶκ遺伝子セグメントおよび１つ以上のＪκ遺伝子セグメントが内因性免疫グロブリン軽鎖遺伝子座に存在する、項目１７に記載のマウス。
（項目１９）
少なくとも１つのヒトＤＨ遺伝子セグメントおよび少なくとも１つのヒトＪＨ遺伝子セグメントに作動可能に連結された少なくとも１つのヒトＶＨ遺伝子セグメントを含むマウスであって、異所性マウスＡＤＡＭ６配列を含む、マウス。
（項目２０）
前記核酸配列が異所位置に存在する、項目１９に記載のマウス。
（項目２１）
前記核酸配列が内因性免疫グロブリン遺伝子座に存在する、項目１９に記載のマウス。
（項目２２）
前記核酸配列がマウスゲノム内の内因性免疫グロブリン遺伝子座以外の位置に存在する、項目１９に記載のマウス。
（項目２３）
血清免疫グロブリンを発現するマウスであって、該マウスの該血清免疫グロブリンの８０％超がヒト重鎖可変ドメインおよび同種のヒト軽鎖可変ドメインを含み、該ヒト重鎖可変ドメインが、単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントおよび／またはその多型変異体から本質的になるＶＨ遺伝子セグメントのレパートリーに由来する、マウス。
（項目２４）
マウスであって、内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座において、すべてのまたは実質的にすべての内因性ＶＨ遺伝子セグメントの、単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントおよび／またはその多型変異体による置換をその生殖細胞系に含む、マウス。
（項目２５）
マウスであって、内因性免疫グロブリン軽鎖遺伝子座において、すべてのまたは実質的にすべての内因性軽鎖Ｖ遺伝子セグメントの、１つ以上のヒト軽鎖Ｖ遺伝子セグメントによる置換をさらに含む、項目２４に記載のマウス。
（項目２６）
前記ヒト軽鎖Ｖ遺伝子セグメントに作動可能に連結された１つ以上のヒト軽鎖Ｊ遺伝子セグメントをさらに含む、項目２５に記載のマウス。
（項目２７）
項目１、１９、２３または２４に記載のマウスに由来する、細胞または組織。
（項目２８）
単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントに由来する重鎖を含むヒト抗体集団を作製するための方法であって、以下：
（ａ）項目１に記載のマウスを対象となる抗原で免疫する工程；
（ｂ）該マウスが該対象となる抗原に関して免疫応答を開始するようにする工程；および（ｃ）該抗体が該対象となる抗原に結合する、該非ヒト動物の免疫グロブリン重鎖可変領域配列を同定または単離する工程
を含む、方法。
（項目２９）
前記免疫グロブリン重鎖可変領域配列が、配列番号５と少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または少なくとも９８％同一である、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
前記免疫グロブリン重鎖可変領域配列が配列番号５を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３１）
前記免疫グロブリン重鎖可変領域配列が、配列番号６４と少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または少なくとも９８％同一である、項目２８に記載の方法。
（項目３２）
前記免疫グロブリン重鎖可変領域配列が配列番号６４を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３３）
マウスの免疫グロブリン重鎖遺伝子座を改変するための方法であって、以下：
（ａ）雄マウスにおいて内因性マウスＡＤＡＭ６活性の低減または除去を結果としてもたらす、該マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座の第一の改変を行う工程；および
（ｂ）該マウスに対してＡＤＡＭ６活性を回復させるための該マウスの第二の改変を行う工程
を含む、方法。
（項目３４）
工程（ｂ）の核酸配列が異所位置に存在する、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
前記第一の改変が、１つ以上のヒト免疫グロブリン遺伝子配列の存在を含む、項目３３に記載の方法。
（項目３６）
前記第一の改変が、前記マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座内の１つ以上の配列の、該マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座内の１つ以上のヒト免疫グロブリン遺伝子配列による置換を含む、項目３３に記載の方法。
（項目３７）
前記第一の改変が、１つ以上の内因性ＶＨ遺伝子セグメントの、前記マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座内の単一のヒトＶＨ遺伝子セグメントによる置換を含む、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記第一の改変が、内因性重鎖可変遺伝子配列の、前記マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座内のヒト重鎖可変遺伝子配列による置換を含む、項目３３に記載の方法。
（項目３９）
前記第一および前記第二の改変が同時に行われる、項目３３に記載の方法。
（項目４０）
抗原に対して特異的な抗体を産生させるための方法であって、以下の工程：
（ａ）項目１に記載のマウスを該抗原で免疫する工程；
（ｂ）該抗原に対して特異的な抗体を産生する該マウスから少なくとも１つの細胞を単離する工程；および
（ｃ）工程ｂ）の抗体を産生する少なくとも１つの細胞を培養する工程、および該抗体を得る工程
を含む、方法。
（項目４１）
工程（ｃ）における前記培養する工程が、工程（ｂ）において得た前記少なくとも１つの細胞から産生された少なくとも１つのハイブリドーマ細胞で行われる、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
工程（ｂ）において得られる前記少なくとも１つの細胞が、工程（ａ）からの前記マウスの脾臓、リンパ節または骨髄に由来する、項目４０に記載の方法。
（項目４３）
工程（ａ）の前記抗原での免疫が、タンパク質、ＤＮＡ、ＤＮＡとタンパク質の組み合わせ、または該抗原を発現する細胞で行われる、項目４０に記載の方法。