【手続補正書】
【提出日】平成28年8月9日(2016.8.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域内のエピトープに特異的に結合し、エピトープが、Ｔａｕポリペプチドのアミノ酸１５−２４内にある、単離されたヒト化モノクローナル抗体、またはそのフラグメント。
【請求項２】
エピトープ内のアミノ酸のリン酸化に関係なく該エピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の単離されたヒト化モノクローナル抗体、またはそのフラグメント。
【請求項３】
エピトープがリン酸化アミノ酸を含まない、請求項１に記載の単離されたヒト化モノクローナル抗体、またはそのフラグメント。
【請求項４】
エピトープがニトロ化アミノ酸を含まない、請求項１に記載の単離されたヒト化モノクローナル抗体、またはそのフラグメント。
【請求項５】
エピトープがリン酸化アミノ酸、ニトロ化アミノ酸、またはリン酸化アミノ酸とニトロ化アミノ酸の両方を含む、請求項１に記載の単離されたヒト化モノクローナル抗体、またはそのフラグメント。
【請求項６】
Ｔａｕに特異的に結合する抗体であって、
ａ）（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、
（ｉｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ３、および
（ｉｖ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域
を含む軽鎖領域、ならびに
ｂ）（ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、
（ｉｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３、および
（ｉｖ）ヒト化重鎖フレームワーク領域
を含む重鎖領域、を含む抗体。
【請求項７】
Ｔａｕに特異的に結合する抗体であって、
ａ）（ｉ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、
（ｉｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ３、および
（ｉｖ）ヒト化軽鎖フレームワーク領域
を含む軽鎖領域、ならびに
ｂ）（ｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、
（ｉｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、
（ｉｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３、および
（ｉｖ）ヒト化重鎖フレームワーク領域
を含む重鎖領域、を含む抗体。
【請求項８】
Ｔａｕに特異的に結合する抗体であって、
ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２；および配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２；
ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体１；および配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体１；
ｃ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体１；および配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２；
ｄ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体１；および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体３；
ｅ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体１；および配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体４；
ｆ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２；および配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体１；
ｇ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２；および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体３；
ｈ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２；および配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体４；
ｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体３；および配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体１；
ｊ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体３；および配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２；
ｋ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体３；および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体３；
１）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体３；および配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体４；
ｍ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体４；および配列番号４０のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体１；
ｎ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体４；および配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２；
ｏ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体４；および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体３；または
ｐ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体４；および配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体４
を含む抗体。
【請求項９】
Ｔａｕに特異的に結合する抗体であって、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ変異体２；および配列番号４１のアミノ酸配列を含むＶｋ変異体２を含む抗体。
【請求項１０】
重鎖領域が、アイソタイプ ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のものである、請求項６から９のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１１】
抗体が、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、またはＦａｂ’である、請求項６から１０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１２】
抗体が、共有結合した非ペプチド性合成ポリマーを含む、請求項６から１１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３】
合成ポリマーがポリ（エチレングリコール）ポリマーである、請求項１２に記載の単離された抗体。
【請求項１４】
抗体が、血液脳関門の通過を促進する担体分子、ペプチドまたはタンパク質に直接またはリンカーを介して結合されている、請求項６から１３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１５】
ヒト化軽鎖フレームワーク領域が、表３に記載のアミノ酸置換の１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個を含む、請求項６または７に記載の単離された抗体。
【請求項１６】
ヒト化重鎖フレームワーク領域が、表２に記載のアミノ酸置換の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２個を含む、請求項６または７に記載の単離された抗体。
【請求項１７】
ＴａｕポリペプチドのＮ末端領域内のエピトープへの結合を請求項８に記載の抗体と競合する、単離された抗体。
【請求項１８】
以下の１つまたはそれ以上の特性を有する、請求項１から１７のいずれか一項に記載の単離された抗体、またはそのフラグメント：
（ａ）１０−７Ｍ、１０−８Ｍまたは１０−９Ｍの解離定数（ＫＤ）で、完全長組み換えｔａｕ（ｒＴａｕ３８３）に結合する；
（ｂ）ｅＴａｕ仲介性ニューロン過活動を低減させる；
（ｃ）低い免疫原性を有する；
（ｄ）インビボにおけるリン酸化Ｔａｕレベルを低下させる；
（ｅ）間質液（ＩＳＦ）および脳脊髄液（ＣＳＦ）中の遊離ｔａｕレベルを低減させる；
（ｆ）運動障害を軽減させる；および／または
（ｇ）ヒト大脳皮質由来の初代神経細胞により分泌されるＡβ４０および／またはＡβ４２の量を低減させ、および／または神経細胞および／または細胞外液中のＡβ４０および／またはＡβ４２の量を低減する。
【請求項１９】
ａ）請求項１から１８のいずれか一項に記載の抗体、および
ｂ）薬学的に許容される賦形剤
を含む、医薬製剤。
【請求項２０】
抗体がリポソームに封入されている、請求項１９に記載の医薬製剤。
【請求項２１】
抗体が、血液脳関門の通過を促進する薬物と共に製剤されている、請求項１９または２０に記載の医薬製剤。
【請求項２２】
抗体が、血液脳関門の通過を促進する担体分子、ペプチドまたはタンパク質に直接またはリンカーを介して結合されている、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２３】
抗体が、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、またはＦａｂ’である、請求項１９から２２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２４】
ヌクレオチド配列が、真核細胞において活性な転写調節要素に操作可能に連結されている、請求項１から１８のいずれか一項に記載の抗体をコード化するヌクレオチド配列を含む組換え発現ベクター。
【請求項２５】
請求項２４に記載の組換え発現ベクターで遺伝子組み換えされたインビトロの宿主細胞。
【請求項２６】
タウオパチーの処置における使用のための、請求項１から１８のいずれか一項に記載の抗体、または請求項１９から２３のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２７】
タウオパチーの処置用医薬の製造における使用のための、請求項１から１８のいずれか一項に記載の抗体、または請求項１９から２３のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２８】
該抗体または医薬製剤の投与が、
ａ）脳組織における細胞外遊離ｔａｕの量；
ｂ）間質液（ＩＳＦ）における細胞外遊離ｔａｕの量；
ｃ）脳脊髄液（ＣＳＦ）における細胞外遊離ｔａｕの量；
ｄ）ニューロンから他のニューロンへのｔａｕの拡散；
ｅ）ニューロン内のｔａｕ凝集の量；
ｆ）ミクログリアおよび／またはアストロサイトの活性化の低減；
ｇ）リン酸化または過剰リン酸化ｔａｕの量；
ｈ）ＩＳＦまたはＣＳＦにおける、全量ｔａｕまたは遊離ｔａｕの量；
ｉ）細胞内のｔａｕのＮ末端フラグメントの量；
ｊ）ニューロン過活動；
ｋ）ＣＳＦにおける、Ａβ４０および／またはＡβ４２の量；
ｌ）Ａβプラーク面積率；
ｍ）ニューロンからのＡβ４０および／またはＡβ４２の分泌；
ｎ）アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）プロモーター活性；
ｏ）ＡＰＰ ｍＲＮＡおよび／またはタンパク質レベル；
ｐ）β−セクレターゼおよび／またはγ−セクレターゼの活性；
ｑ）Ａβ仲介シグナル伝達経路の活性化状態；
ｒ）細胞内全量ｔａｕまたは遊離ｔａｕの量；
ｓ）ＩＳＦまたはＣＳＦにおける、抗ｔａｕ抗体−結合ｔａｕの量；および
ｔ）細胞内抗Ｔａｕ抗体−結合ｔａｕの量、
のうち、１つまたはそれ以上の変化をもたらす、請求項２６または２７に記載の抗体または医薬製剤。
【請求項２９】
該抗体または医薬製剤の投与が、
ａ）個体の認知機能の改善；
ｂ）個体の認知機能の低下率の低下；
ｃ）個体の運動機能の改善；および、
ｄ）個体の運動機能の低下率の低下
の１つまたはそれ以上をもたらす、請求項２６または２７に記載の抗体または医薬製剤。
【請求項３０】
個体におけるタウオパチーの進行をモニターする方法であって、
ａ）第一の時点で個体から得られた生物学的サンプルにおけるＴａｕポリペプチドの第一レベルを決定し、
ｂ）第二の時点で個体から得られた生物学的サンプルにおけるＴａｕポリペプチドの第二レベルを決定し、そして
ｃ）Ｔａｕの第一レベルとＴａｕの第二レベルを比較すること、ここで、該決定は、ｉ）該生物学的サンプルを請求項１から１８のいずれか一項に記載の抗体と接触させ、ｉｉ）該サンプル中に存在するＴａｕポリペプチドへの抗体の結合を定量することを含む
を含む、方法。
【請求項３１】
抗ｅＴａｕ抗体を用いる処置を施されている対象から得られた脳脊髄液（ＣＳＦ）または間質液（ＩＳＦ）のサンプルにおける、抗ｅＴａｕ抗体に結合しない細胞外Ｔａｕ（ｅＴａｕ）の量を決定する方法であって、
ａ）固定化抗体を対象から得られたＣＳＦまたはＩＳＦのサンプルと接触させ、ここで、該固定化抗体は、ｅＴａｕへの結合に対して、対象に投与された抗ｅＴａｕ抗体と競合し、該接触は、固定化抗体への非結合型ｅＴａｕの結合に好適な条件下で行われる、そして
ｂ）固定化抗体に結合したｅＴａｕの量を決定すること、ここで、固定化抗体に結合するｅＴａｕの量は、サンプル中の抗Ｔａｕ抗体に結合しないｅＴａｕの量の指標である
を含む、方法。
【請求項３２】
タウオパチーが進行性核上性麻痺である、請求項２６または２７に記載の抗体または医薬製剤。