【手続補正書】
【提出日】平成28年7月22日(2016.7.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫グロブリン構築物であって、
免疫グロブリン重鎖由来の可変領域ポリペプチド（ＶＨ）、
免疫グロブリン軽鎖由来の可変領域ポリペプチド（ＶＬ）、
免疫グロブリン軽鎖由来の定常領域ポリペプチド（ＣＬ）、
免疫グロブリン重鎖由来の定常領域ポチペプチド（ＣＨ１）、および
を含む単鎖Ｆａｂ領域（ｓｃＦａｂ）を含み、
前記ＶＨと前記ＣＬとが、リンカーポリペプチドにより結合され、前記リンカーポリペプチドが、らせん構造を形成する性向を示す、
免疫グロブリン構築物。
【請求項２】
前記単鎖Ｆａｂ領域が、ＶＬ−ＣＬ−Ｌ８−ＶＨ−ＣＨ１を含む配列を有し、Ｌ８が、前記リンカーポリペプチドである、請求項１記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項３】
前記リンカーポリペプチドが、αへリックス、ポリプロリンＩへリックス、ポリプロリンＩＩへリックス、および３１０へリックスの少なくとも１つを形成する、請求項１または２記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項４】
前記リンカーが、約１〜約２０巻きのらせんを形成する、請求項３記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項５】
前記リンカーポリペプチドが、らせんを安定化させる相互作用を形成する少なくとも一対のアミノ酸を含む、請求項１〜４のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項６】
前記らせんを安定化させる相互作用が、電荷間相互作用、カチオン−π相互作用、疎水性相互作用、およびサイズコンプリメンタリィ相互作用（ｓｉｚｅ  ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔａｒｙ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ）の内の少なくとも１つである、請求項５記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項７】
前記リンカーポリペプチドが、アミノ酸Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｇｌｕ（Ｅ）、Ｇｌｎ（Ｑ）、Ａｓｐ（Ｄ）、Ａｓｎ（Ｎ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｌｙｓ（Ｋ）、Ｈｉｓ（Ｈ）、Ｖａｌ（Ｖ）、またはＩｌｅ（Ｉ）を含むアミノ酸配列を含む、請求項１〜６のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項８】
前記リンカーが、少なくとも１つの（Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ）ｎモチーフを含むアミノ酸配列を有し、式中、ｎが１〜１０の整数である、、請求項７記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項９】
免疫グロブリン構築物であって、
免疫グロブリン重鎖由来の可変領域ポリペプチド（ＶＨ）、
免疫グロブリン軽鎖由来の可変領域ポリペプチド（ＶＬ）、
免疫グロブリン軽鎖由来の定常領域ポリペプチド（ＣＬ）、
免疫グロブリン重鎖由来の定常領域ポチペプチド（ＣＨ１）、および
を含む単鎖Ｆａｂ領域（ｓｃＦａｂ）を含み、
前記ＶＨと前記ＶＬとが、第１のリンカーにより結合され、単鎖Ｆｖ構築物（ｓｃＦｖ）を形成し、
前記ＣＬと前記ＣＨ１が、第２のリンカーにより結合される、
免疫グロブリン構築物。
【請求項１０】
前記単鎖Ｆａｂ領域が、ＶＨ−Ｌ１−ＶＬ−ＣＬ−Ｌ２−ＣＨ１を含む配列を有し、Ｌ１およびＬ２が第１のリンカーおよび第２のリンカーである、請求項９記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１１】
前記単鎖Ｆａｂ領域が、ＶＨ−Ｌ１−ＶＬ−Ｌ３−ＣＬ−Ｌ２−ＣＨ１を含む配列を有し、Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３が、リンカーであるか、または、前記単鎖Ｆａｂ領域が、ＶＬ−Ｌ４−ＶＨ−ＣＨ１−Ｌ５−ＣＬを含む配列を有し、Ｌ４およびＬ５がリンカーである、請求項９または１０記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１２】
前記リンカーが、アミノ酸Ｇｌｙ（Ｇ）およびＳｅｒ（Ｓ）を含むアミノ酸配列を含む、請求項９〜１１のいずれか１項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１３】
前記リンカーは、式（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ）ｎのアミノ酸配列を含み、式中、ｎが４〜１０の整数である、請求項１２記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１４】
第１のリンカーおよび第２のリンカーが、それぞれ少なくとも約１５アミノ酸長である、請求項９〜１２のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１５】
第１のリンカーおよび第２のリンカーが、それぞれ３２アミノ酸長以下である、請求項９〜１２のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１６】
第１のリンカーおよび第２のリンカーが、それぞれ１６〜４０アミノ酸長である、請求項９〜１５のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１７】
第２のリンカーが、第１のリンカーのアミノ酸配列の長さに等しいかそれを上回るアミノ酸配列を含む、請求項９〜１６のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１８】
第１のリンカーが、１５〜２０アミノ酸長である、請求項１７記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項１９】
第２のリンカーが、２０〜２８アミノ酸長である、請求項１８記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項２０】
第１および／または第２のリンカーのアミノ酸配列が、少なくとも１つのＰｒｏ（Ｐ）残基をさらに含む、請求項９〜１９のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項２１】
第１のリンカーおよび／または第２のリンカーが、αへリックス、ポリプロリンＩへリックス、ポリプロリンＩＩへリックス、および３１０へリックスの少なくとも１つを形成する、請求項２０記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項２２】
第１のリンカーおよび／または第２のリンカーが以下より選択される、請求項９〜１１のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物：
ＧＳ−１５リンカー（ＧＧＧＧＳ）３（配列番号４４）、ＧＳ−２０リンカー（ＧＧＧＧＳ）４（配列番号４５）、ＧＳ−２４リンカー（ＧＧＧＧＳ）４ＧＧＧＧ（配列番号４６）、ＧＳ−２８リンカー（ＧＧＧＧＳ）５ＧＧＧ（配列番号４７）、ＧＳ−３０リンカー（ＧＧＧＧＳ）６（配列番号４０）、ＧＳＴ−１８リンカーＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧ（配列番号４８）、ＧＳＴ−２０リンカーＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧＳＧ（配列番号４９）、ＧＳＴ−２６リンカーＧＳＴＳＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧＧＳＴＳ（配列番号５０）、ＧＳＥ−３０リンカー（ＳＧＧＧ）２（ＳＥＧＧＧ）４ＳＧ（配列番号４２）、およびＧＳＥ−３４リンカー（ＳＧＧＧ）２（ＳＥＧＧＧ）４ＳＧＧＧＳＧ（配列番号４３）。
【請求項２３】
第１のリンカーが以下より選択される、請求項９〜１１のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物：
ＧＳ−１５リンカー（ＧＧＧＧＳ）３（配列番号４４）、ＧＳ−２０リンカー（ＧＧＧＧＳ）４（配列番号４５）、ＧＳＴ−１８リンカーＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧ（配列番号４８）、およびＧＳＴ−２０リンカーＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧＳＧ（配列番号４９）。
【請求項２４】
第２のリンカーが以下より選択される、請求項９〜１１のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物：
ＧＳ−２０リンカー（ＧＧＧＧＳ）４（配列番号４５）、ＧＳ−２４リンカー（ＧＧＧＧＳ）４ＧＧＧＧ（配列番号４６）、ＧＳ−２８リンカー（ＧＧＧＧＳ）５ＧＧＧ（配列番号４７）、ＧＳ−３０リンカー（ＧＧＧＧＳ）６（配列番号４０）、ＧＳＴ−１８リンカーＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧ（配列番号４８）、ＧＳＴ−２０リンカーＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧＳＧ（配列番号４９）、ＧＳＴ−２６リンカーＧＳＴＳＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧＧＳＴＳ（配列番号５０）、ＧＳＥ−３０リンカー（ＳＧＧＧ）２（ＳＥＧＧＧ）４ＳＧ（配列番号４２）、およびＧＳＥ−３４リンカー（ＳＧＧＧ）２（ＳＥＧＧＧ）４ＳＧＧＧＳＧ（配列番号４３）。
【請求項２５】
ＣＨ３ドメインおよび任意でＣＨ２ドメインをさらに含む、請求項１〜２４のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項２６】
前記ＣＨ３ドメインが、ヘテロダイマーＦｃの形成を促進する少なくとも１つのアミノ酸変異を含む変異型ＣＨ３ドメインである、請求項２５記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項２７】
前記変異型ＣＨ３ドメインが、約７３℃以上の融解温度（Ｔｍ）を有し、かつ／または、前記ヘテロダイマーＦｃが、少なくとも約７０％の純度で形成される、請求項２６記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項２８】
前記ヘテロダイマーＦｃ領域がグリコシル化されるかまたはアグリコシル化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）される、請求項２６または２７記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項２９】
抗原結合ポリペプチド構築物をさらに含む、請求項２５〜２８のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項３０】
抗原結合ポリペプチド構築物が、ｓｃＦｖまたは、請求項１〜２４のいずれか一項記載のｓｃＦａｂ領域である、請求項２９記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項３１】
前記免疫グロブリン構築物が、多重特異性または二重特異性である、請求項１〜３０のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項３２】
前記構築物が、抗原を発現する少なくとも１つの細胞と結合でき、前記細胞が、白血球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、内皮下細胞、乳房、胃、子宮、神経、筋肉、分泌細胞および生殖細胞などの免疫細胞を含む一覧から選択される、請求項１〜３０のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項３３】
免疫グロブリン構築物であって、
請求項１〜２４のいずれか一項記載の前記第１のｓｃＦａｂ領域と、第１のＣＨ３領域を含む第１の重鎖ポリペプチドとを含む第１のポリペプチド構築物と、
第２のＣＨ３領域を含む第２の重鎖ポリペプチドを含む、第２のポリペプチド構築物とを含み、
前記第１の重鎖ポリペプチドおよび前記第２の重鎖ポリペプチドの少なくとも１つが、ヘテロダイマーの形成を促進する変異型ＣＨ３領域を任意に含む、
免疫グロブリン構築物。
【請求項３４】
前記第１のポリペプチド構築物および前記第２のポリペプチド構築物が、抗原結合ポリペプチド構築物をさらに含む、請求項３３記載の免疫グロブリン構築物。
【請求項３５】
免疫グロブリン構築物であって、
第１の定常ドメインポリペプチドにリンカーにより結合される第１の単鎖Ｆｖポリペプチドを含む、第１の単量体ポリぺプチドと、
前記第１のＦｖポリペプチドと異なり、前記第１の定常ドメインポリペプチドと異なる第２の定常ドメインポリペプチドにリンカーにより結合される第２の単鎖Ｆｖポリペプチドを含む、第２の単量体ポチペプチドと
を含み、
前記定常ドメインポリペプチドのそれぞれが、ＣＬ領域、ＣＨ１領域、およびＣＨ３領域、またはそのフラグメント、変異体、もしくは誘導体の少なくとも１つを含み、
前記ＣＬ領域と前記ＣＨ１領域とが、リンカーにより結合され、前記第１の定常ドメインポリペプチドと前記第２の定常ドメインポリペプチドとが、Ｆｃ領域を形成する、免疫グロブリン構築物。
【請求項３６】
免疫グロブリン構築物であって、
第１の定常ドメインポリペプチドに融合した第１のｓｃＦａｂポリペプチドを含む第１の単量体ポチペプチドと、
前記第１のＦａｂポリペプチドと異なり、第２の定常ドメインポリペプチドに融合した第２のｓｃＦａｂポリペプチドを含む、第２の単量体ポチペプチドと
を含み、
前記第１のｓｃＦａｂポリペプチドおよび前記第２のｓｃＦａｂポリペプチドの少なくとも１つが、らせん構造を形成する性向を備えたリンカーポリペプチドを含み、
前記第１の定常ドメインポリペプチドおよび前記第２の定常ドメインポリペプチドが、天然のホモダイマーＦｃと比較可能な安定性を有する前記ヘテロダイマーの形成を促進する、少なくとも１つのアミノ酸変異を含む変異型免疫グロブリンＣＨ３領域を含む、ヘテロダイマーＦｃ領域を形成する、
免疫グロブリン構築物。
【請求項３７】
請求項１〜３６のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３８】
請求項１〜３６のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物をコードする１つまたは複数の核酸。
【請求項３９】
請求項３８記載の１つまたは複数の核酸を含む１つまたは複数のベクター。
【請求項４０】
請求項３９記載の１つまたは複数のベクターを含む宿主細胞。
【請求項４１】
哺乳動物細胞中で、請求項１〜３６のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物を含む発現生成物を生成する方法であって、前記方法は、
前記免疫グロブリン構築物をコードする少なくとも１つの核酸配列で少なくとも１つの哺乳動物細胞をトランスフェクトすることと、
前記トランスフェクトされた哺乳動物細胞を培養して、前記免疫グロブリン構築物を含む前記発現生成物を産生すること、
を含む、方法。
【請求項４２】
前記哺乳動物細胞が、ＶＥＲＯ、ＨｅＬａ、ＨＥＫ、ＮＳ０、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）、Ｗ１３８、ＢＨＫ、ＣＯＳ−７、Ｃａｃｏ−２およびＭＤＣＫ細胞、ならびにそのサブクラスおよび変異体からなる群から選択される、請求項４１記載の方法。
【請求項４３】
有効量の請求項１〜３６のいずれか一項記載の免疫グロブリン構築物を含む、癌、自己免疫症状、または炎症性症状を処置するための治療薬。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
本明細書で、本明細書に定義される免疫グロブリン構築物を含むキット、ならびにその使用説明書が提供される。
[本発明1001]
免疫グロブリン構築物であって、
免疫グロブリン重鎖由来の可変領域ポリペプチド（ＶＨ）と、
免疫グロブリン軽鎖由来の可変領域ポリペプチド（ＶＬ）と、
免疫グロブリン軽鎖由来の定常領域ポリペプチド（ＣＬ）と、
免疫グロブリン重鎖由来の定常領域ポチペプチド（ＣＨ１）と
を含む単鎖Ｆａｂ領域（ｓｃＦａｂ）を含み、
前記ＶＨと前記ＶＬとが、第１のリンカーにより結合され、単鎖Ｆｖ構築物（ｓｃＦｖ）を形成する、
免疫グロブリン構築物。
[本発明1002]
前記ＣＬと前記ＣＨ１が、第２のリンカーにより結合される、本発明1001の免疫グロブリン構築物。
[本発明1003]
前記単鎖Ｆａｂ領域が、ＶＨ−Ｌ１−ＶＬ−ＣＬ−Ｌ２−ＣＨ１を含む配列を有し、Ｌ１およびＬ２が第１のリンカーおよび第２のリンカーである、本発明1001または1002の免疫グロブリン構築物。
[本発明1004]
前記単鎖Ｆａｂ領域が、ＶＨ−Ｌ１−ＶＬ−Ｌ３−ＣＬ−Ｌ２−ＣＨ１を含む配列を有し、Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３が、リンカーである、本発明1001または1002の免疫グロブリン構築物。
[本発明1005]
前記単鎖Ｆａｂ領域が、ＶＬ−Ｌ４−ＶＨ−ＣＨ１−Ｌ５−ＣＬを含む配列を有し、Ｌ４およびＬ５がリンカーである、本発明1001または1002の免疫グロブリン構築物。
[本発明1006]
各リンカーが、約１〜約１００のアミノ酸を含むポリペプチドである、本発明1001〜1005のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1007]
前記リンカーが、Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、およびＧｌｕ（Ｅ）から選択されるアミノ酸を含むアミノ酸配列を含む、本発明1006の免疫グロブリン構築物。
[本発明1008]
前記リンカーは、式（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ）ｎのポリペプチドから構成され、式中、ｎが４〜１０の整数である、本発明1007の免疫グロブリン構築物。
[本発明1009]
免疫グロブリン構築物であって、
免疫グロブリン重鎖由来の可変領域ポリペプチド（ＶＨ）と、
免疫グロブリン軽鎖由来の可変領域ポリペプチド（ＶＬ）と、
免疫グロブリン軽鎖由来の定常領域ポリペプチド（ＣＬ）と、
免疫グロブリン重鎖由来の定常領域ポチペプチド（ＣＨ１）と
を含み、
前記ＶＨと前記ＣＬとが、リンカーポリペプチドにより結合され、前記リンカーポリペプチドが、らせん構造を形成する性向を示す、
免疫グロブリン構築物。
[本発明1010]
前記単鎖Ｆａｂポリペプチドが、ＶＬ−ＣＬ−Ｌ８−ＶＨ−ＣＨ１を含む配列を有し、Ｌ８が、らせん構造を形成する性向を有するポリペプチドである、本発明1009の免疫グロブリン構築物。
[本発明1011]
前記リンカーポリペプチドが、αへリックス、ポリプロリンＩへリックス、ポリプロリンＩＩへリックス、および３１０へリックスの少なくとも１つを形成する、本発明1009または1010の免疫グロブリン構築物。
[本発明1012]
前記リンカーが、約１〜約２０巻きのらせんを形成する、本発明1011の免疫グロブリン構築物。
[本発明1013]
前記リンカーが、らせんを安定化させる相互作用を形成する少なくとも一対のアミノ酸を含む、本発明1009〜1012のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1014]
前記らせんを安定化させる相互作用が、電荷間相互作用、カチオン−π相互作用、疎水性相互作用、およびサイズコンプリメンタリィ相互作用（ｓｉｚｅ  ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔａｒｙ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ）の内の少なくとも１つである、本発明1013の免疫グロブリン構築物。
[本発明1015]
前記リンカーポリペプチドが、Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｇｌｕ（Ｅ）、Ｇｌｎ（Ｑ）、Ａｓｐ（Ｄ）、Ａｓｎ（Ｎ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｌｙｓ（Ｋ）、Ｈｉｓ（Ｈ）、Ｖａｌ（Ｖ）、およびＩｌｅ（Ｉ）から選択されるアミノ酸を含む、本発明1009〜1014のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1016]
前記リンカーが、少なくとも１つの（Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ）ｎモチーフを含むアミノ酸配列を有し、式中、ｎが１〜１０の整数である、本発明1015の免疫グロブリン構築物。
[本発明1017]
免疫グロブリン構築物であって、
本発明1001〜1016のいずれかの第１のｓｃＦａｂと、第１のＣＨ３領域を含む第１の重鎖ポリペプチドとを含む第１のポリペプチド構築物と、
第２のＣＨ３領域を含む第２の重鎖ポリペプチドを含む、第２のポリペプチド構築物とを含み、
前記第１の重鎖ポリペプチドおよび前記第２の重鎖ポリペプチドの少なくとも１つが、ヘテロダイマーの形成を促進する変異型ＣＨ３領域を任意に含む、
免疫グロブリン構築物。
[本発明1018]
前記第１のポリペプチド構築物および前記第２のポリペプチド構築物が、抗原結合ポリペプチド構築物をさらに含む、本発明1017の免疫グロブリン構築物。
[本発明1019]
前記抗原結合ポリペプチド構築物が、ｓｃＦｖまたはｓｃＦａｂの少なくとも１つである、本発明1018の免疫グロブリン構築物。
[本発明1020]
前記ｓｃＦａｂが、本発明1001〜1016のいずれかのｓｃＦａｂである、本発明1019の免疫グロブリン構築物。
[本発明1021]
前記第１の重鎖ポリペプチドおよび前記第２の重鎖ポリペプチドが、ヘテロダイマーＦｃを形成する、本発明1016〜1020のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1022]
前記ヘテロダイマーＦｃが、少なくとも１つのアミノ酸変異を含む変異型免疫グロブリンのＣＨ３ドメインを含む、本発明1021の免疫グロブリン構築物。
[本発明1023]
前記少なくとも１つのアミノ酸変異が、天然のホモダイマーＦｃと比較可能な安定性を有する前記ヘテロダイマーＦｃの形成を促進する、本発明1022の免疫グロブリン構築物。
[本発明1024]
前記変異型ＣＨ３ドメインが、約７３℃以上の融解温度（Ｔｍ）を有する、本発明1022または1023の免疫グロブリン構築物。
[本発明1025]
前記ヘテロダイマーＦｃが、少なくとも約７０％の純度で形成される、本発明1022または1023の免疫グロブリン構築物。
[本発明1026]
前記ヘテロダイマーＦｃが、少なくとも約７０％の純度で形成され、前記Ｔｍが少なくとも約７３℃である、本発明1022〜1025のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1027]
前記ヘテロダイマーＦｃが、少なくとも約７５％の純度で形成され、前記Ｔｍが約７５℃である、本発明1022〜1025のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1028]
前記第１の重鎖ポリペプチドおよび前記第２の重鎖ポリペプチドの少なくとも１つが、前記Ｆｃガンマ受容体の少なくとも１つへの選択的結合を促進するためのアミノ酸変異を含む変異型ＣＨ２ドメインをさらに含む、本発明1017〜1027のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1029]
前記第１の重鎖ポリペプチドおよび前記第２の重鎖ポリペプチドの少なくとも１つが、前記Ｆｃガンマ受容体の少なくとも１つへの機能的に有効な結合を防止するアミノ酸修飾を含む変異型ＣＨ２ドメインまたはヒンジを含む、本発明1017〜1028のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1030]
前記Ｆｃ領域がグリコシル化される、本発明1017〜1029のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1031]
前記Ｆｃ領域がアグリコシル化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）される、本発明1017〜1030のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1032]
前記免疫グロブリン構築物が、多重特異性免疫グロブリン構築物である、本発明1017〜1031のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1033]
前記免疫グロブリン構築物が、二重特異性である、本発明1032の免疫グロブリン構築物。
[本発明1034]
免疫グロブリン構築物であって、
第１の定常ドメインポリペプチドにリンカーにより結合される第１の単鎖Ｆｖポリペプチドを含む、第１の単量体ポリぺプチドと、
前記第１のＦｖポリペプチドと異なり、前記第１の定常ドメインポリペプチドと異なる第２の定常ドメインポリペプチドにリンカーにより結合される第２の単鎖Ｆｖポリペプチドを含む、第２の単量体ポチペプチドと
を含み、
前記定常ドメインポリペプチドのそれぞれが、ＣＬ領域、ＣＨ１領域、およびＣＨ３領域、またはそのフラグメント、変異体、もしくは誘導体の少なくとも１つを含み、
前記ＣＬ領域と前記ＣＨ１領域とが、リンカーにより結合され、前記第１の定常ドメインポリペプチドと前記第２の定常ドメインポリペプチドとが、Ｆｃ領域を形成する、免疫グロブリン構築物。
[本発明1035]
前記構築物が、ＣＨ２ドメインを一切含まない、本発明1034の免疫グロブリン構築物。
[本発明1036]
免疫グロブリン構築物であって、
第１の定常ドメインポリペプチドと融合する第１のｓｃＦａｂポリペプチドを含む第１の単量体ポチペプチドと、
前記第１のＦａｂポリペプチドと異なり、第２の定常ドメインポリペプチドと融合する第２のｓｃＦａｂポリペプチドを含む、第２の単量体ポチペプチドと
を含み、
前記第１のｓｃＦａｂポリペプチドおよび前記第２のｓｃＦａｂポリペプチドの少なくとも１つが、らせん構造を形成する性向を備えたリンカーポリペプチドを含み、
前記第１の定常ドメインポリペプチドおよび前記第２の定常ドメインポリペプチドが、天然のホモダイマーＦｃと比較可能な安定性を有する前記ヘテロダイマーの形成を促進する、少なくとも１つのアミノ酸変異を含む変異型免疫グロブリンＣＨ３領域を含む、ヘテロダイマーＦｃ領域を形成する、
免疫グロブリン構築物。
[本発明1037]
前記構築物が、抗原を発現する少なくとも１つの細胞と結合でき、前記細胞が、白血球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、内皮下細胞、乳房、胃、子宮、神経、筋肉、分泌細胞および生殖細胞などの免疫細胞を含む一覧から選択される、本発明1017〜1036のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1038]
前記構築物が、抗原を発現する少なくとも１つの細胞と結合でき、前記細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞を含む一覧から選択される、本発明1017〜1036のいずれかの免疫グロブリン構築物。
[本発明1039]
前記Ｔ細胞がヒト細胞である、本発明1038の免疫グロブリン構築物。
[本発明1040]
前記Ｔ細胞が非ヒト哺乳動物細胞である、本発明1038の免疫グロブリン構築物。
[本発明1041]
前記少なくとも１つの細胞が疾患と関連する、本発明1038の単離型免疫グロブリン構築物。
[本発明1042]
前記疾患が、骨髄腫、芽腫、乳頭腫、腺腫、癌腫、肉腫、白血病、リンパ腫および神経膠腫から選択される癌である、本発明1041の免疫グロブリン構築物。
[本発明1043]
前記癌が、扁平上皮癌、腺癌、移行上皮癌、骨肉腫および柔組織肉腫の少なくとも１つである、本発明1042の免疫グロブリン構築物。
[本発明1044]
前記少なくとも１つの細胞が、自己免疫応答性細胞である、本発明1038の免疫グロブリン構築物。
[本発明1045]
前記免疫グロブリン構築物をコードする少なくとも１つの核酸配列を含む、本発明1001〜1044のいずれかの免疫グロブリン構築物を発現する少なくとも１つのベクターを含む、組成物。
[本発明1046]
安定した哺乳動物細胞中で、本発明1001〜1044のいずれかの免疫グロブリン構築物を含む発現生成物を生成する方法であって、前記方法は、
安定した哺乳動物細胞を産生するために前記免疫グロブリン構築物をコードする少なくとも１つのＤＮＡ配列で少なくとも１つの哺乳動物細胞をトランスフェクトすることと、
前記免疫グロブリン構築物を含む前記発現生成物を産生する前記安定した哺乳動物細胞を培養することと
を含む、方法。
[本発明1047]
前記哺乳動物細胞が、ＶＥＲＯ、ＨｅＬａ、ＨＥＫ、ＮＳ０、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）、Ｗ１３８、ＢＨＫ、ＣＯＳ−７、Ｃａｃｏ−２およびＭＤＣＫ細胞、ならびにそのサブクラスおよび変異体からなる群から選択される、本発明1046の方法。
[本発明1048]
本発明1001〜1044のいずれかに定義される単離型免疫グロブリン構築物、および適切な賦形剤を含む、薬学的組成物。
[本発明1049]
本発明1048の薬学的組成物の製造方法であって、
本発明1001〜1044のいずれかで定義されるような免疫グロブリン構築物の発現を可能にする条件下で宿主細胞を培養することと、
前記培養物から産生した免疫グロブリン構築物を回収することと、
薬学的組成物を生成することと
を包含する工程。
[本発明1050]
それを必要とする哺乳動物における癌の処置方法であって、有効量の本発明1048の薬学的組成物を含む組成物を哺乳動物に投与することを包含する方法。
[本発明1051]
前記癌が固形腫瘍である、本発明1048の方法。
[本発明1052]
前記固形腫瘍が肉腫、癌腫およびリンパ腫のうちの１つ以上である、本発明1051の方法。
[本発明1053]
前記癌が、Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、および白血病のうちの１つ以上である本発明1050の方法。
[本発明1054]
それを必要とする哺乳動物における自己免疫症状の処置方法であって、有効量の本発明1048で提供される薬学的組成物を含む組成物を前記哺乳動物に投与することを包含する方法。
[本発明1055]
前記自己免疫症状が、多発性硬化症、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、乾癬性関節炎、乾癬、血管炎、ブドウ膜炎、クローン病、および１型糖尿病のうちの１つ以上である、本発明1054の方法。
[本発明1056]
それを必要とする哺乳動物における炎症性症状の処置方法であって、本発明1048で提供される薬学的組成物を含む組成物を前記哺乳動物に投与することを包含する方法。
[本発明1057]
本発明1001〜1044のいずれかで定義されるような免疫グロブリン構築物を含むキット、ならびにその使用説明書。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2015531751000001.app