【手続補正書】
【提出日】平成28年5月26日(2016.5.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
重合体粒子および機能化された刺激応答性重合体を含む組成物であって;
該重合体粒子が、(i) ブロック共重合体を含み、かつ(ii) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、少なくとも1つの一般的な刺激に応答性である、
該組成物。
【請求項２】
液体をさらに含み、前記重合体粒子および前記機能化された刺激応答性重合体の両方を伴う前記刺激応答性重合体が該液体内で可溶性である、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
液体をさらに含み、かつゲルの形態であり、前記重合体粒子および前記機能化された刺激応答性重合体の両方を伴う前記刺激応答性重合体が該液体内で不溶性である、請求項1記載の組成物。
【請求項４】
請求項1〜3のいずれか一項記載の組成物を含む、細胞培養システム。
【請求項５】
請求項1〜3のいずれか一項記載の組成物を含む、薬物送達システム。
【請求項６】
(i) 重合体粒子および細胞で機能化された刺激応答性重合体を含む液体組成物を提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該細胞で機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で可溶性である、段階;
(ii)該重合体粒子と該細胞で機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で可溶性である状態から該液体中で不溶性である状態への移行を生じるように、該液体組成物を該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、該重合体粒子および該細胞で機能化された刺激応答性重合体の凝集を促進して、細胞塊を形成させる、段階; ならびに
(iii) 該細胞塊の内部でおよび/または表面上で細胞を培養する段階
を含む、細胞を培養する方法。
【請求項７】
(iv)前記重合体粒子と前記細胞で機能化された刺激応答性重合体との前記刺激応答性重合体が、前記液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、培養された細胞を含む前記液体組成物を前記一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、前記細胞塊からの個々の細胞および/またはさらに小さな細胞塊の放出を容易にする、段階
をさらに含む、請求項6記載の方法。
【請求項８】
(v) 段階(iv)においてそのように形成された個々の細胞および/または形成されたさらに小さな細胞塊の少なくともいくつかを、前記液体組成物から取り出す段階
をさらに含む、請求項7記載の方法。
【請求項９】
前記液体が水性液体であり、かつ前記重合体粒子と前記細胞で機能化された刺激応答性重合体との前記刺激応答性重合体が、一般的なLCSTを有する熱応答性重合体である、請求項6〜8のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０】
段階(ii)において加えられる一般的な刺激が、前記液体の温度をLCST超まで上昇させることである、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
37℃がLCSTであるかまたはLCST超である、請求項9または10記載の方法。
【請求項１２】
(i) 液体、細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体、および基材に固定された重合体粒子を含む液体組成物を提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で可溶性である、段階;
(ii)該重合体粒子と該細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で可溶性である状態から該液体中で不溶性である状態への移行を生じるように、該液体組成物を該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、該重合体粒子および該細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体の凝集を促進して、該細胞受容体リガンドを含む表面を有する凝集体構造を形成させる、段階;
(iii) 細胞受容体リガンドと結合するように培養される1種または複数種の細胞を該液体に導入する段階; ならびに
(iv) 該細胞受容体リガンドを含む該表面上で細胞を培養する段階
を含む、細胞を培養する方法。
【請求項１３】
(v)前記重合体粒子と前記細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との前記刺激応答性重合体が、前記液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、培養された前記細胞を含む前記液体組成物を前記一般的な刺激に供する段階であり、該移行が該培養細胞の放出を容易にする、段階
をさらに含む、請求項12記載の方法。
【請求項１４】
(vi) 段階(v)において形成された培養細胞の少なくともいくつかを、前記液体組成物から取り出す段階
をさらに含む、請求項13記載の方法。
【請求項１５】
前記液体が水性液体であり、かつ前記重合体粒子と前記細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との前記刺激応答性重合体が、一般的なLCSTを有する熱応答性重合体である、請求項12〜14のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６】
段階(ii)において加えられる一般的な刺激が、液体組成物の温度をLCST超まで上昇させることである、請求項15記載の方法。
【請求項１７】
請求項13に従属する場合、段階(v)において加えられる一般的な刺激が、液体組成物の温度をLCST未満まで低下させることである、請求項15記載の方法。
【請求項１８】
37℃がLCSTであるかまたはLCST超である、請求項15、16、または17記載の方法。
【請求項１９】
(i) 液体、重合体粒子、および機能化された刺激応答性重合体を含む液体組成物を提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で可溶性である、段階; ならびに
(ii)該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で可溶性である状態から該液体中で不溶性である状態への移行を生じるように、該液体組成物を該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、ゲルの形成を促進する、段階
を含む、機能化された刺激応答性重合体を含むゲルを形成する方法。
【請求項２０】
(i) 重合体粒子、機能化された刺激応答性重合体、および液体を含むゲルを提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で不溶性である、段階; ならびに
(ii)該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、該ゲルを該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、該ゲルを、該重合体粒子および該機能化された刺激応答性重合体を含む液体組成物にして、それによって該ゲルからの該機能化された刺激応答性重合体の放出を促進する、段階
を含む、機能化された刺激応答性重合体をゲルから放出させる方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
[本発明1001]
重合体粒子および機能化された刺激応答性重合体を含む組成物であって;
該重合体粒子が、(i) ブロック共重合体を含み、かつ(ii) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、少なくとも1つの一般的な刺激に応答性である、
該組成物。
[本発明1002]
液体をさらに含み、前記重合体粒子および前記機能化された刺激応答性重合体の両方を伴う前記刺激応答性重合体が該液体内で可溶性である、本発明1001の組成物。
[本発明1003]
液体をさらに含み、かつゲルの形態であり、前記重合体粒子および前記機能化された刺激応答性重合体の両方を伴う前記刺激応答性重合体が該液体内で不溶性である、本発明1001の組成物。
[本発明1004]
本発明1001〜1003のいずれかの組成物を含む、細胞培養システム。
[本発明1005]
本発明1001〜1003のいずれかの組成物を含む、薬物送達システム。
[本発明1006]
(i) 重合体粒子および細胞で機能化された刺激応答性重合体を含む液体組成物を提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該細胞で機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で可溶性である、段階;
(ii)該重合体粒子と該細胞で機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で可溶性である状態から該液体中で不溶性である状態への移行を生じるように、該液体組成物を該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、該重合体粒子および該細胞で機能化された刺激応答性重合体の凝集を促進して、細胞塊を形成させる、段階; ならびに
(iii) 該細胞塊の内部でおよび/または表面上で細胞を培養する段階
を含む、細胞を培養する方法。
[本発明1007]
(iv)前記重合体粒子と前記細胞で機能化された刺激応答性重合体との前記刺激応答性重合体が、前記液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、培養された細胞を含む前記液体組成物を前記一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、前記細胞塊からの個々の細胞および/またはさらに小さな細胞塊の放出を容易にする、段階
をさらに含む、本発明1006の方法。
[本発明1008]
(v) 段階(iv)においてそのように形成された個々の細胞および/または形成されたさらに小さな細胞塊の少なくともいくつかを、前記液体組成物から取り出す段階
をさらに含む、本発明1007の方法。
[本発明1009]
前記液体が水性液体であり、かつ前記重合体粒子と前記細胞で機能化された刺激応答性重合体との前記刺激応答性重合体が、一般的なLCSTを有する熱応答性重合体である、本発明1006〜1008のいずれかの方法。
[本発明1010]
段階(ii)において加えられる一般的な刺激が、前記液体の温度をLCST超まで上昇させることである、本発明1009の方法。
[本発明1011]
37℃がLCSTであるかまたはLCST超である、本発明1009または1010の方法。
[本発明1012]
(i) 液体、細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体、および基材に固定された重合体粒子を含む液体組成物を提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で可溶性である、段階;
(ii)該重合体粒子と該細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で可溶性である状態から該液体中で不溶性である状態への移行を生じるように、該液体組成物を該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、該重合体粒子および該細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体の凝集を促進して、該細胞受容体リガンドを含む表面との凝集体構造を形成させる、段階;
(iii) 細胞受容体リガンドと結合するように培養される1種または複数種の細胞を該液体に導入する段階; ならびに
(iv) 該細胞受容体リガンドを含む該表面上で細胞を培養する段階
を含む、細胞を培養する方法。
[本発明1013]
(v)前記重合体粒子と前記細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との前記刺激応答性重合体が、前記液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、培養された前記細胞を含む前記液体組成物を前記一般的な刺激に供する段階であり、該移行が該培養細胞の放出を容易にする、段階
をさらに含む、本発明1012の方法。
[本発明1014]
(vi) 段階(v)において形成された培養細胞の少なくともいくつかを、前記液体組成物から取り出す段階
をさらに含む、本発明1013の方法。
[本発明1015]
前記液体が水性液体であり、かつ前記重合体粒子と前記細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との前記刺激応答性重合体が、一般的なLCSTを有する熱応答性重合体である、本発明1012〜1014のいずれかの方法。
[本発明1016]
段階(ii)において加えられる一般的な刺激が、液体組成物の温度をLCST超まで上昇させることである、本発明1015の方法。
[本発明1017]
本発明1013に従属する場合、段階(v)において加えられる一般的な刺激が、液体組成物の温度をLCST未満まで低下させることである、本発明1015の方法。
[本発明1018]
37℃がLCSTであるかまたはLCST超である、本発明1015、1016、または1017の方法。
[本発明1019]
(i) 液体、重合体粒子、および機能化された刺激応答性重合体を含む液体組成物を提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で可溶性である、段階; ならびに
(ii)該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で可溶性である状態から該液体中で不溶性である状態への移行を生じるように、該液体組成物を該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、ゲルの形成を促進する、段階
を含む、機能化された刺激応答性重合体を含むゲルを形成する方法。
[本発明1020]
(i) 重合体粒子、機能化された刺激応答性重合体、および液体を含むゲルを提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で不溶性である、段階; ならびに
(ii)該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、該ゲルを該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、該ゲルを、該重合体粒子および該機能化された刺激応答性重合体を含む液体組成物にして、それによって該ゲルからの該機能化された刺激応答性重合体の放出を促進する、段階
を含む、機能化された刺激応答性重合体をゲルから放出させる方法。
本発明のさらなる局面および/または態様は、以下でさらに詳細に記述される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
本発明はさらに、
(i) 重合体粒子、機能化された刺激応答性重合体、および液体を含むゲルを提供する段階であり;
該重合体粒子が、(a) ブロック共重合体を含み、かつ(b) コアシェル構造を有し、該ブロック共重合体が、(a) コア構造の少なくとも一部を形成する非刺激応答性重合体ブロック、および(b) シェル構造の少なくとも一部を形成する刺激応答性重合体ブロックを含み;
該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、(a) 少なくとも1つの一般的な刺激に応答性であり、かつ(b) 該液体中で不溶性である、段階; ならびに
(ii)該重合体粒子と該機能化された刺激応答性重合体との該刺激応答性重合体が、該液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、該ゲルを該一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、該ゲルを、重合体粒子、機能化された刺激応答性重合体、および液体を含む液体組成物にして、それによって該ゲルからの該機能化された刺激応答性重合体の放出を促進する、段階
を含む、機能化された刺激応答性重合体をゲルから放出させる方法を提供する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５９】
この方法は、
(v)重合体粒子と細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、培養された細胞を含む液体組成物を一般的な刺激に供する段階であり、該移行が、該培養細胞の放出を容易にする、段階
をさらに含みうる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６３】
この方法は、
(iv)重合体粒子と細胞受容体リガンドで機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、培養された細胞を含むゲルを一般的な刺激に供する段階であり、該移行が該培養細胞の放出を容易にする、段階
をさらに含みうる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７３】
この方法は、
(iv)重合体粒子と細胞で機能化された刺激応答性重合体との刺激応答性重合体が、液体中で不溶性である状態から該液体中で可溶性である状態への移行を生じるように、培養された細胞を含む液体組成物を一般的な刺激に供する段階であり、ここで該移行が、細胞塊からの個々の細胞および/またはさらに小さな細胞塊の放出を容易にする、段階
をさらに含みうる。