【誤訳訂正書】
【提出日】平成28年10月12日(2016.10.12)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
受入番号ＬＭＢＰ  ８０６２ＣＢのハイブリドーマ細胞、ＬＭＢＰ  ８０６３ＣＢのハイブリドーマ細胞、およびＬＭＢＰ  ８０６４ＣＢのハイブリドーマ細胞のうちのいずれかによって産生される、モノクローナル抗体。
【請求項２】
Ａβ−ペプチド断片Ａβ１−３７、Ａβ３−３７、Ａβ３ｐ−３７、Ａβ１１−３７、およびＡβ１１ｐ−３７からなる群から選択されるペプチドを認識する、請求項１に記載のモノクローナル抗体。
【請求項３】
検出可能に標識される、請求項１または２に記載の抗体。
【請求項４】
前記検出可能な標識が、放射性標識、酵素標識、ルミネセンス標識、または蛍光標識である、請求項３に記載の抗体。
【請求項５】
担体上に固定化される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６】
サンプルを請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体に接触させて、前記抗体と前記Ａβｘ−３７ペプチドとの間に免疫複合体が形成されかどうかを測定するステップを含んでなる、サンプル中のＡβｘ−３７ペプチドを測定または検出するための免疫測定法。
【請求項７】
前記サンプルが、哺乳類からの組織サンプルおよび体液サンプルからなる群から選択される、請求項６に記載のＡβｘ−３７ペプチドの存在を測定または検出する方法。
【請求項８】
Ａβ３８、Ａβ４０またはＡβ４２ペプチドを認識し、Ａβｘ−３７ペプチドとの交差反応性を示さない追加的な第２の抗体が使用される、請求項６または７に記載の方法。
【請求項９】
治療を受ける患者の生物学的サンプル中のＡβｘ−３７ペプチド量およびＡβ４２ペプチド量を一定時間毎に測定するステップであって、前記Ａβｘ−３７ペプチド量を測定するステップが請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体を使用して実施されるステップと、
前記Ａβｘ−３７ペプチド量および前記Ａβ４２ペプチド量の相対変化を経時的に測定するステップとを含んでなる、アルツハイマー病の治療をモニタリングする方法。
【請求項１０】
Ａβ３８、Ａβ４０またはＡβ４２ペプチドを認識し、Ａβｘ−３７ペプチドとの交差反応性を示さない追加的な第２の抗体が使用される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体と、前記抗体のための担体とを含んでなる、アルツハイマー病の診断、進行モニタリングまたは治療モニタリングのための免疫測定法キット。
【請求項１２】
Ａβ３８、Ａβ４０またはＡβ４２ペプチドを認識し、Ａβｘ−３７ペプチドとの交差反応性を示さない追加的な第２の抗体が使用される、請求項１１に記載のキット。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００８】
ＡＤおよびその他のＡβ−関連疾患の根本的な機構の理解における進歩にもかかわらず、疾患を診断して治療するための方法および組成物を開発する必要性がなおもある。したがってアミロイド前駆体タンパク質の細胞プロセッシングをモニターする能力は、アルツハイマー病の診断、予後診断、および治療管理において、顕著な価値を有するであろう。特に、血清、脳脊髄液（ＣＳＦ）などの容易に得られる患者サンプル中で、検出可能な診断マーカーをスクリーニングして評価するための、低侵襲性で再現可能な手順を同定することが望ましいであろう。前出のＴ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２１５（１９９６）；１７３−１７６に記載されるようなポリクローナル抗体は、生物学的サンプル中の異なるＡβ−ペプチドを検出するのに有用であるが、各バッチのポリクローナル抗体が異なる事実を踏まえると、これらの抗体は、容易に得られる患者サンプル中で、検出可能な診断マーカーをスクリーニングして評価する、再現可能な手順を実施するツールを提供しない。これに加えて、ポリクローナル抗体の使用では、典型的に非特異的結合がより高く、典型的にウエスタンブロット法の正確度が低下する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１１】
本発明は、γ−セクレターゼによって媒介されるＡＰＰタンパク質の切断後に得られる、より短いＡβペプチド、すなわちＡβ１−３７、Ａβ３−３７、Ａβ３ｐ−３７、Ａβ１１−３７、およびＡβ１１ｐ−３７、および以下Ａβｘ−３７ペプチドとも称されるＡＰＰの３７番目のアミノ酸で終結するその他の類似断片である、Ａβ−ペプチド断片を特異的に認識するモノクローナル抗体を提供する。これは、モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞、ならびに抗体およびハイブリドーマ細胞を製造する方法；および本発明の抗体を使用する競合法またはサンドイッチ法によるＡβｘ−３７ペプチドのための免疫測定法；および生物学的サンプルなどのサンプル中のＡβｘ−３７ペプチドレベルを測定する方法をさらに提供する。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４２】
最高血清力価を示すマウスを融合のために選択した一方で、第２のマウスの脾臓を単離して液体窒素中で冷凍した。融合または脾臓抽出の４日前に、生理食塩水中のｍｃＫＬＨと共役する１００μｇのＨ２Ｎ−ＣＡＩＩＧＬ  ＭＶＧ−ＣＯＯＨで、全てのマウスに腹腔内追加免疫した。Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，６，２９２−２９５（１９７６））の変法によって、マウス脾臓細胞をＳＰ２／０細胞と融合した。３０×９６ウェルプレート内にハイブリドーマを接種して、０．５μｇ／ウェルの非共役ペプチドＡβ１−３７上の直接ＥＬＩＳＡ（ＡｎａＳｐｅｃ，Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＵＳＡ）で、１０日後にスクリーニングした。０．５μｇ／ｍｌの被覆Ａβ１−３７、Ａβ１−３８、およびＡβ１−３９ペプチド（ＡｎａＳｐｅｃ，Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＵＳＡ）上で、陽性細胞を交差反応性について試験して、即座にサブクローニングした。陽性クローンを液体窒素中で冷凍した。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４４】
抗体選択のための直接ＥＬＩＳＡ
抗Ａβｘ−３７抗体の検出のために使用されたスクリーニングＥＬＩＳＡは、５０μｌ／ウェルの被覆緩衝液（１０ｍＭトリス、１０ｍＭのＮａＣｌ、および１０ｍＭのＮａＮ３、ｐＨ８．５）中で、ＮＵＮＣ  Ｍａｘｉｓｏｒｐ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）平底高結合型９６ウェルマイクロタイタープレート内に４℃で一晩被覆させた、０．５μｇ／ｍｌ遊離ヒトＡβ１−３７ペプチドによる、直接ＥＬＩＳＡであった。翌日、プレートを７５μｌ／ウェルのＰＢＳ中０．１％カゼインによって、室温で６０分間被覆して、非特異的結合を低下させた。次に５０μｌのハイブリドーマ上清を添加して、３７℃で１時間インキュベートした。洗浄後、５０μｌ／ウェルの西洋ワサビペルオキシダーゼ共役ヒツジ抗マウスＩｇＧによって、３７℃、１時間で結合モノクローナル抗体を検出した（Ａｍｅｒｓｈａｍ−Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）。双方の試薬を０．１％カゼイン／ＰＢＳ中で希釈した。プレートを洗浄して、５０μｌの１００ｍＭクエン酸および１００ｍＭリン酸水素二ナトリウム中の０．４２ｍＭの３，５，３’，５’−テトラメチル−ベンジジンおよび０．００３％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）のＨ２Ｏ２溶液（ｐＨ４．３）を基質として添加した。プレート振盪機上で反応を室温で最大１５分間進行させ、その後、５０μｌ／ウェルの２ＮＨ２ＳＯ４で発色を停止させて、４５０ｎｍのマイクロタイタープレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏｍａｘ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）上でプレートを読み取った。選択されたモノクローナル抗体と全長ヒト遊離Ａβ１−３８およびＡβ１−３９ペプチドとの交差反応性を、スクリーニングアッセイと同一の直接ＥＬＩＳＡで試験した。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５６】
図２および３で提示されるデータは、ＧＳＭ処置をモニターするための薬力学マーカーとして、Ａβ１−３７ペプチド定量化を使用し得ることを示す。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６１】
【表３】
2014520825.tif 000001
上記の開示によって提供される本願発明の具体例として、以下の発明が挙げられる。
[１]  Ａβｘ−３７ペプチドを特異的に認識する、モノクローナル抗体。
[２]  前記Ａβｘ−３７ペプチドが、Ａβ−ペプチド断片Ａβ１−３７、Ａβ３−３７、Ａβ３ｐ−３７、Ａβ１１−３７、およびＡβ１１ｐ−３７からなる群から選択される、[１]に記載のモノクローナル抗体。
[３]  検出可能に標識される、[１]または[２]に記載の抗体。
[４]  前記検出可能な標識が、放射性標識、酵素標識、ルミネセンス標識、または蛍光標識である、[３]に記載の抗体。
[５]  担体上に固定化される、[１]〜[４]のいずれか一項に記載の抗体。
[６]  ２０１１年２月１日にそれぞれ受入番号ＬＭＢＰ  ８０６２ＣＢおよびＬＭＢＰ  ８０６３ＣＢの下にＢｅｌｇｉａｎ  ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｄ  ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓに寄託された、ハイブリドーマ細胞ＪＲＤ／Ａｂ３７／３  ｓｃｌ１またはＪＲＤ／Ａｂ３７／４  ｓｃｌ１のいずれか、または２０１１年３月３０日に受入番号ＬＭＢＰ  ８０６４ＣＢの下にＢｅｌｇｉａｎ  Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｄ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓに寄託されたハイブリドーマＪＲＤ／Ａｂ３７／１０  ｓｃｌ１による、[１]から[５]のいずれか一項に記載のモノクローナル抗体。
[７]  前記サンプルを[１]〜[６]のいずれか一項に記載の抗体に接触させて、前記抗体と前記Ａβｘ−３７ペプチドとの間に免疫複合体が形成されかどうかを測定するステップを含んでなる、サンプル中のＡβｘ−３７ペプチドを測定または検出するための免疫測定法。
[８]  前記サンプルが、哺乳類からの組織サンプルおよび体液サンプルからなる群から選択される、[７]に記載のＡβｘ−３７ペプチドの存在を測定または検出する方法。
[９]  β−アミロイド関連疾患を診断するための[１]〜[６]のいずれか一項に記載の抗体の使用。
[１０]  治療を受ける患者の生物学的サンプル中のＡβｘ−３７ペプチド量およびＡβ４２ペプチド量を一定時間毎に測定するステップと、
前記Ａβｘ−３７ペプチド量および前記Ａβ４２ペプチド量の相対変化を経時的に測定するステップとを含んでなる、β−アミロイド関連疾患の治療をモニタリングする方法。
[１１]  前記Ａβｘ−３７ペプチド量を測定するステップが、[１]〜[６]のいずれか一項に記載の抗体を使用して実施される、[１０]に記載の方法。
[１２]  [１]〜[６]のいずれか一項に記載の抗体と、前記抗体のための担体手段とを含んでなる、β−アミロイド関連疾患の診断、進行モニタリングまたは治療モニタリングのための免疫測定法キット。