【手続補正書】
【提出日】平成28年1月29日(2016.1.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
二重特異性キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）および治療用制御物質を含む、組成物であって、
該二重特異性ＣＡＲが、
ａ．少なくとも２つの抗原特異的標的指向領域、
ｂ．細胞外スペーサードメイン、
ｃ．膜貫通ドメイン、
ｄ．少なくとも１つの共刺激ドメイン、および
ｅ．細胞内シグナル伝達ドメイン
を含み、
各抗原特異的標的指向領域が抗原特異的単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントを含み、かつ少なくとも２つの抗原特異的標的指向領域が少なくとも２つの異なる抗原に結合する、組成物。
【請求項２】
ａ．（ｉ）少なくとも２つの抗原特異的標的指向領域、
（ｉｉ）細胞外スペーサードメイン、
（ｉｉｉ）膜貫通ドメイン、
（ｉｖ）少なくとも１つの共刺激ドメイン、および
（ｖ）細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む、二重特異性キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であって、各抗原特異的標的指向領域が抗原特異的単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントを含み、かつ少なくとも２つの抗原特異的標的指向領域が異なる抗原に結合する、二重特異性ＣＡＲ；ならびに
ｂ．治療用制御物質
をコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項３】
前記治療用制御物質が、細胞の増殖を調節することまたは細胞の選択を促進することができ、該細胞が、二重特異性ＣＡＲおよび治療用制御物質を発現する、請求項１に記載の組成物および請求項２に記載のポリヌクレオチド。
【請求項４】
前記治療用制御物質が、トランケート型上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲｔ）、チミジンキナーゼ、シトシンデアミナーゼ、ニトロレダクターゼ、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、ヒトカスパーゼ８、ヒトカスパーゼ９、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、リナマラーゼ／リナマリン／グルコースオキシダーゼ、デオキシリボヌクレオシドキナーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）／インドール−３−酢酸（ＩＡＡ）、γグルタミルシステインシンテターゼ、ＣＤ２０／αＣＤ２０、ＣＤ３４／チミジンキナーゼキメラ、ｄｏｘ依存カスパーゼ−２、変異チミジンキナーゼ（ＨＳＶ−ＴＫＳＲ３９）、ＡＰ１９０３／Ｆａｓ系、キメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）、選択マーカー、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか１つまたは複数を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物またはポリヌクレオチド。
【請求項５】
前記治療用制御物質が少なくともＥＧＦＲｔを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物またはポリヌクレオチド。
【請求項６】
前記ＥＧＦＲｔが、ＥＧＦＲ特異的ｓｉＲＮＡ、小分子、抗ＥＧＦＲ抗体もしくはそのフラグメント、またはそれらの組み合わせのうちのいずれか１つまたは複数に結合する、請求項４または５に記載の組成物またはポリヌクレオチド。
【請求項７】
前記選択マーカーが、ジヒドロキシ葉酸受容体（ＤＨＦＲ）、変異ＤＨＦＲ、メチル化−ＤＮＡ−タンパク質−システインメチルトランスフェラーゼ、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼＩＩ（ＩＭＤＨＰ２）、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか１つまたは複数を含む；ならびに／または
前記ＣＣＲが、（ｉ）ＩＬ−７サイトカイン−リンカー−ＩＬ７Ｒα、（ｉｉ）ＩＬ−７サイトカイン−リンカー−ＩＬ−７Ｒαの細胞外ドメイン−ＩＬ−７Ｒαの膜貫通ドメイン−ＩＬ−２Ｒβの細胞質ドメイン、（ｉｉｉ）ＩＬ−７サイトカイン−リンカー−ＩＬ２Ｒβ、および（ｉｖ）それらの組み合わせのうちのいずれか１つまたは複数を含む、
請求項４、５、または６に記載の組成物またはポリヌクレオチド。
【請求項８】
前記二重特異性キメラ抗原受容体および前記治療用制御物質が、切断可能なリンカーを介して連結され、任意で該切断可能なリンカーが、自己切断型の切断可能なリンカーであり、任意で２Ａリンカー、２Ａ様リンカー、またはその機能的等価物のうちのいずれか１つまたは複数である、前記請求項のいずれか一項に記載の組成物またはポリヌクレオチド。
【請求項９】
図４、９、または１１に記載される配列を含む、請求項２〜８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項１０】
請求項２〜９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
【請求項１１】
プラスミドトランスポゾン、レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、泡沫状ウイルスベクター、アデノウイルスベクター、ＲＮＡウイルスベクター、ポックスウイルスベクター、ヘルペスウイルスベクター、またはアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターである、請求項１０に記載のベクター。
【請求項１２】
前記細胞外スペーサードメインが、（ｉ）抗体のＦｃフラグメント、またはその機能的等価物、フラグメント、もしくは誘導体、（ｉｉ）抗体のヒンジ領域、またはその機能的等価物、フラグメント、もしくは誘導体、（ｉｉｉ）抗体のＣＨ２領域、（ｉｖ）抗体のＣＨ３領域、（ｖ）人工スペーサー配列、（ｖｉ）ＩｇＧ４のヒンジ、ＣＨ２、およびＣＨ３領域、（ｖｉｉ）ＩｇＧ４のヒンジ領域、（ｖｉｉｉ）ＩｇＧ４のヒンジおよびＣＨ２領域、（ｉｘ）ＣＤ８αのヒンジ領域、（ｘ）ＩｇＧ１のヒンジ、ＣＨ２、およびＣＨ３領域、（ｘｉ）ＩｇＧ１のヒンジ領域、（ｘｉｉ）ＩｇＧ１のヒンジおよびＣＨ２領域、または（ｘｉｉｉ）それらの組み合わせのうちのいずれか１つまたは複数を含み；
前記膜貫通ドメインが、Ｉ型膜貫通タンパク質の膜貫通領域、人工疎水性配列、Ｔ細胞受容体複合体のζ鎖の膜貫通ドメイン、ＣＤ２８、ＣＤ８α、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか１つまたは複数を含み；
前記少なくとも１つの共刺激ドメインが、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、Ｄａｐ１０、ＣＤ２７、ＣＤ２、ＣＤ５、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１、Ｌｃｋ、ＴＮＦＲ−Ｉ、ＴＮＦＲ−ＩＩ、Ｆａｓ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか１つまたは複数に由来するシグナル伝達ドメインを含み；ならびに／または
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ヒトＣＤ３ζ鎖、ＦｃγＲＩＩＩ、ＦｃεＲＩ、Ｆｃ受容体の細胞質側末端、免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を有する細胞質受容体、およびそれらの組み合わせのうちの１つまたは複数のシグナル伝達ドメインを含む、
前記請求項のいずれか一項に記載の組成物、ポリヌクレオチド、またはベクター。
【請求項１３】
前記細胞外スペーサードメインがＣＤ８αヒンジを含み、前記膜貫通ドメインがＣＤ８α膜貫通ドメインを含み、前記少なくとも１つの共刺激ドメインが４−１ＢＢ共刺激ドメインを含み、および前記細胞内シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ鎖のシグナル伝達ドメインを含むか；
前記細胞外スペーサードメインがＩｇＧ４のヒンジ領域を含み、前記膜貫通ドメインがＣＤ２８膜貫通ドメインを含み、前記共刺激ドメインが４−１ＢＢ共刺激ドメインを含み、および前記細胞内シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ鎖のシグナル伝達ドメインを含むか；または
前記細胞外スペーサードメインがＩｇＧ４のヒンジ領域を含み、前記膜貫通ドメインがＣＤ２８膜貫通ドメインを含み、前記少なくとも１つの共刺激ドメインがＣＤ２８共刺激ドメインを含み、および前記細胞内シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ鎖のシグナル伝達ドメインを含む、
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物、ポリヌクレオチド、またはベクター。
【請求項１４】
前記ＣＡＲが単一のポリペプチド鎖として発現され；および／または
前記少なくとも２つの抗原特異的標的指向領域が、直列に配置され、かつリンカーによって分離されている、
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物、ポリヌクレオチド、またはベクター。
【請求項１５】
前記少なくとも２つの異なる抗原が、癌、炎症性疾患、神経障害、糖尿病、心血管系疾患、感染性疾患、自己免疫性疾患、およびそれらの組み合わせに対して特異的な抗原からなる群から独立して選択される、前記請求項のいずれか一項に記載の組成物、ポリヌクレオチド、またはベクター。
【請求項１６】
前記癌に特異的な抗原が、４−１ＢＢ、５Ｔ４、腺癌抗原、α−フェトプロテイン、ＢＡＦＦ、Ｂ−リンパ腫細胞、Ｃ２４２抗原、ＣＡ−１２５、炭酸脱水酵素９（ＣＡ−ＩＸ）、Ｃ−ＭＥＴ、ＣＣＲ４、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２２、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３３、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ７４、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＮＴＯ８８８、ＣＴＬＡ−４、ＤＲ５、ＥＧＦＲ、ＥｐＣＡＭ、ＣＤ３、ＦＡＰ、フィブロネクチンのエクストラドメイン−Ｂ、葉酸受容体１、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、糖タンパク質７５、ＧＰＮＭＢ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＧＦ、ヒト細胞分散因子（ｓｃａｔｔｅｒ  ｆａｃｔｏｒ）受容体キナーゼ、ＩＧＦ−１受容体、ＩＧＦ−Ｉ、ＩｇＧ１、Ｌ１−ＣＡＭ、ＩＬ−１３、ＩＬ−６、インスリン様成長因子Ｉ受容体、インテグリンα５β１、インテグリンαｖβ３、ＭＯＲＡｂ−００９、ＭＳ４Ａ１、ＭＵＣ１、ムチンＣａｎＡｇ、Ｎ−グリコリルノイラミン酸、ＮＰＣ−１Ｃ、ＰＤＧＦ−Ｒα、ＰＤＬ１９２、ホスファチジルセリン、前立腺癌細胞、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＲＯＲ１、ＳＣＨ  ９００１０５、ＳＤＣ１、ＳＬＡＭＦ７、ＴＡＧ−７２、テネイシンＣ、ＴＧＦβ２、ＴＧＦ−β、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、腫瘍抗原ＣＴＡＡ１６．８８、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ２、ビメンチン、およびそれらの組み合わせから選択され；
前記炎症性疾患に特異的な抗原が、ＡＯＣ３（ＶＡＰ−１）、ＣＡＭ−３００１、ＣＣＬ１１（エオタキシン−１）、ＣＤ１２５、ＣＤ１４７（ベイシジン）、ＣＤ１５４（ＣＤ４０Ｌ）、ＣＤ２、ＣＤ２０、ＣＤ２３（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ２５（ＩＬ−２受容体のα鎖）、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＩｇＥ、ＩｇＥ  Ｆｃ領域、ＩＬ−１、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−６受容体、インテグリンα４、インテグリンα４β７、リャマ（Ｌａｍａ  ｇｌａｍａ）、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ）、ＭＥＤＩ−５２８、ミオスタチン、ＯＸ−４０、ｒｈｕＭＡｂβ７、スクレロスシン（ｓｃｌｅｒｏｓｃｉｎ）、ＳＯＳＴ、ＴＧＦβ１、ＴＮＦ−α、ＶＥＧＦ−Ａ、およびそれらの組み合わせから選択され；
前記神経障害に特異的な抗原が、βアミロイド、ＭＡＢＴ５１０２Ａ、およびそれらの組み合わせから選択され；
前記糖尿病に特異的な抗原が、Ｌ−１β、ＣＤ３、およびそれらの組み合わせから選択され；
前記心血管系疾患に特異的な抗原が、Ｃ５、心筋ミオシン、ＣＤ４１（インテグリンα−ＩＩｂ）、フィブリンＩＩ、β鎖、ＩＴＧＢ２（ＣＤ１８）、スフィンゴシン−１−ホスファート、およびそれらの組み合わせから選択され；ならびに／または
前記感染性疾患に特異的な抗原が、炭疽毒素、ＣＣＲ５、ＣＤ４、クランピング因子Ａ、サイトメガロウイルス、サイトメガロウイルス糖タンパク質Ｂ、内毒素、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、Ｂ型肝炎表面抗原、Ｂ型肝炎ウイルス、ＨＩＶ−１、Ｈｓｐ９０、Ａ型インフルエンザ血球凝集素、リポテイコ酸、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、狂犬病ウイルス糖タンパク質、呼吸器合胞体ウイルス、ＴＮＦ−α、およびそれらの組み合わせから選択される、
請求項１５に記載の組成物、ポリヌクレオチド、またはベクター。
【請求項１７】
前記少なくとも２つの抗原が、Ｂ細胞上で発現され、任意でＢ細胞関連疾患抗原であり、任意でＢ細胞系悪性腫瘍抗原または癌性Ｂ細胞抗原である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物、ポリヌクレオチド、またはベクター。
【請求項１８】
前記少なくとも２つの抗原が、単一の患部細胞上の少なくとも２つの抗原を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の組成物、ポリヌクレオチド、またはベクター。
【請求項１９】
前記少なくとも２つの抗原が、
（ｉ）ＣＤ１９およびＣＤ２０、
（ｉｉ）ＣＤ２０およびＬ１−ＣＡＭ、
（ｉｉｉ）Ｌ１−ＣＡＭおよびＧＤ２、
（ｉｖ）ＥＧＦＲおよびＬ１−ＣＡＭ、
（ｖ）ＣＤ１９およびＣＤ２２、
（ｖｉ）ＥＧＦＲおよびＣ−ＭＥＴ、
（ｖｉｉ）ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２、
（ｖｉｉｉ）Ｃ−ＭＥＴおよびＨＥＲ２、または
（ｉｘ）ＥＧＦＲおよびＲＯＲ１
を含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物、ポリヌクレオチド、またはベクター。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドまたはベクターまたは二重特異性ＣＡＲおよび治療用制御物質の組成物を含む、遺伝子改変細胞。
【請求項２１】
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、胚性幹細胞、多能性幹細胞、またはＴ−リンパ球（Ｔ細胞）であり、任意でナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、またはエフェクターメモリーＴ細胞である、請求項２０に記載の遺伝子改変細胞。
【請求項２２】
ａ．請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物、ポリヌクレオチド、もしくはベクター、または請求項２０もしくは２１に記載の遺伝子改変細胞と、
ｂ．薬学的に許容される担体と
を含む、薬学的組成物。
【請求項２３】
医薬に使用するための請求項２２に記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
請求項２０または２１に記載の遺伝子改変細胞の増殖を阻害するために使用するための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の、前記ＣＡＲ内で共発現されるか、または前記ポリヌクレオチド内に含まれる治療用制御物質と生化学的に相互作用するように適合された組成物であって、任意で、ハーセプチン、メトトレキサート、セツキシマブ、チミジン類似体（例えばガンシクロビル）、（Ｅ）−５−（２−ブロモビニル）−２'−デオキシウリジン（ＢＶＤＵ）、５−フルロシトシン（ｆｌｕｒｏｃｙｔｏｓｉｎｅ）（５−ＦＣ）、５−（アザリジン（ａｚａｒｉｄｉｎ）−１−イル）−２，４−ジニトロベンズアミド（ＣＢ１９５４）、６−チオグアニン、合成二量体化薬（ｄｉｍｅｒｉｚｉｎｇ  ｄｒｕｇ）（例えば、ＡＰ１９０３）、リン酸フルダラビン、リナマリン（ｌｉｎ）、ヌクレオシド類似体（例えば、ＢＶＤＵ、ジフルオロデオキシシチジン（ｄＦｄＣ）、１−β−Ｄ−アラビノフラノシルチミン（アラ−Ｔ））、インドール−３−酢酸（ＩＡＡ）、ｌ−ブチオニン−Ｓ，Ｒ−スルホキシイミン（ＢＳＯ）、リツキシマブ（ＲＴＸ）、ドキシサイクリン、チロシンキナーゼ阻害剤、またはそれらの組み合わせのうちのいずれか１つまたは複数を含む、組成物。
【請求項２５】
以下の工程を含む、二重特異性ＣＡＲを発現する一定量のＴ細胞を生成する方法：
請求項１０または１１に記載のベクターを、１個または複数個のＴ細胞にトランスフェクトする工程、および
少なくとも２つの抗原特異的標的指向領域によって標的とされる抗原を発現する細胞、少なくとも２つの抗原特異的標的指向領域によって標的とされる組換え抗原を発現する細胞、またはキメラ抗原受容体に対する抗体を発現する細胞で、該１個または複数個のＴ細胞を刺激する工程であって、それによって該Ｔ細胞が、一定量のＴ細胞を生成するように増殖する、工程。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
一実施形態において、上述の二重特異性キメラ抗原受容体、二重特異性キメラ抗原受容体および治療用制御物質の組み合わせ、二重特異性キメラ抗原受容体をコードするポリペプチド、二重特異性キメラ抗原受容体を含むベクター、ウイルス、および遺伝子改変細胞、二重特異性キメラ抗原受容体および治療用制御物質の組み合わせを含むベクター、ウイルス、および遺伝子改変細胞、またはそれらの組み合わせと、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物がまた提供される。
[本発明1001]
ａ．少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域、
ｂ．細胞外スペーサードメイン、
ｃ．膜貫通ドメイン、
ｄ．少なくとも1つの共刺激ドメイン、および
ｅ．細胞内シグナル伝達ドメイン
を含み、治療用制御物質と共発現される、二重特異性キメラ抗原受容体であって、
各抗原特異的標的指向領域が、抗原特異的単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントを含み、かつ異なる抗原に結合する、
二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1002]
前記治療用制御物質が、トランケート型上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲｔ）、チミジンキナーゼ、シトシンデアミナーゼ、ニトロレダクターゼ、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、ヒトカスパーゼ8、ヒトカスパーゼ9、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、リナマラーゼ／リナマリン／グルコースオキシダーゼ、デオキシリボヌクレオシドキナーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）／インドール−3−酢酸（ＩＡＡ）、γグルタミルシステインシンテターゼ、ＣＤ20／αＣＤ20、ＣＤ34／チミジンキナーゼキメラ、ｄｏｘ依存カスパーゼ−2、変異チミジンキナーゼ（ＨＳＶ−ＴＫＳＲ39）、ＡＰ1903／Ｆａｓ系、キメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）、選択マーカー、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1003]
前記ＥＧＦＲｔが、ＥＧＦＲ特異的ｓｉＲＮＡ、小分子、抗ＥＧＦＲ抗体もしくはそのフラグメント、またはそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数に結合する、本発明1002の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1004]
前記選択マーカーが、ジヒドロキシ葉酸受容体（ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｆｏｌａｔｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）（ＤＨＦＲ）、変異ＤＨＦＲ、メチル化−ＤＮＡ−タンパク質−システインメチルトランスフェラーゼ、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼＩＩ（ＩＭＤＨＰ2）、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1002の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1005]
前記ＣＣＲが、（ｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ7Ｒα、（ｉｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ−7Ｒαの細胞外ドメイン−ＩＬ−7Ｒαの膜貫通ドメイン−ＩＬ−2Ｒβの細胞質ドメイン、（ｉｉｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ2Ｒβ、および（ｉｖ）それらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1002の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1006]
前記二重特異性キメラ抗原受容体および前記治療用制御物質が、切断可能なリンカーを介して連結されている、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1007]
前記切断可能なリンカーが、自己切断型の切断可能なリンカーである、本発明1006の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1008]
前記切断可能なリンカーが、2Ａリンカー、2Ａ様リンカー、またはその機能的等価物のうちのいずれか1つまたは複数である、本発明1007の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1009]
前記細胞外スペーサードメインが、抗体のＦｃフラグメント、またはその機能的等価物、フラグメント、もしくは誘導体、抗体のヒンジ領域、またはその機能的等価物、フラグメント、もしくは誘導体、抗体のＣＨ2領域、抗体のＣＨ3領域、人工スペーサー配列、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1010]
前記細胞外スペーサードメインが、（ｉ）ＩｇＧ4のヒンジ、ＣＨ2、およびＣＨ3領域、（ｉｉ）ＩｇＧ4のヒンジ領域、（ｉｉｉ）ＩｇＧ4のヒンジおよびＣＨ2領域、（ｉｖ）ＣＤ8αのヒンジ領域、（ｖ）ＩｇＧ1のヒンジ、ＣＨ2、およびＣＨ3領域、（ｖｉ）ＩｇＧ1のヒンジ領域、（ｖｉ）ＩｇＧ1のヒンジおよびＣＨ2領域、または（ｖｉｉ）それらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1009の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1011]
前記膜貫通ドメインが、Ｉ型膜貫通タンパク質の膜貫通領域、人工疎水性配列、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1012]
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体複合体のζ鎖の膜貫通ドメイン、ＣＤ28、ＣＤ8α、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1011の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1013]
前記共刺激ドメインが、ＣＤ28、ＣＤ137（4−1ＢＢ）、ＣＤ134（ＯＸ40）、Ｄａｐ10、ＣＤ27、ＣＤ2、ＣＤ5、ＩＣＡＭ−1、ＬＦＡ−1、Ｌｃｋ、ＴＮＦＲ−Ｉ、ＴＮＦＲ−ＩＩ、Ｆａｓ、ＣＤ30、ＣＤ40、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数に由来するシグナル伝達ドメインを含む、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1014]
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ヒトＣＤ3ζ鎖、ＦｃγＲＩＩＩ、ＦｃεＲＩ、Ｆｃ受容体の細胞質側末端、免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を有する細胞質受容体、およびそれらの組み合わせのうちの1つまたは複数のシグナル伝達ドメインを含む、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1015]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向ドメインのそれぞれが、癌、炎症性疾患、神経障害、糖尿病、心血管系疾患、感染性疾患、自己免疫性疾患、およびそれらの組み合わせに対して特異的な抗原から成る群から独立して選択される抗原を標的とする、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1016]
癌に特異的な前記抗原が、4−1ＢＢ、5Ｔ4、腺癌抗原、α−フェトプロテイン、ＢＡＦＦ、Ｂ−リンパ腫細胞、Ｃ242抗原、ＣＡ−125、炭酸脱水酵素9（ＣＡ−ＩＸ）、Ｃ−ＭＥＴ、ＣＣＲ4、ＣＤ152、ＣＤ19、ＣＤ20、ＣＤ200、ＣＤ22、ＣＤ221、ＣＤ23（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ28、ＣＤ30（ＴＮＦＲＳＦ8）、ＣＤ33、ＣＤ4、ＣＤ40、ＣＤ44ｖ6、ＣＤ51、ＣＤ52、ＣＤ56、ＣＤ74、ＣＤ80、ＣＥＡ、ＣＮＴＯ888、ＣＴＬＡ−4、ＤＲ5、ＥＧＦＲ、ＥｐＣＡＭ、ＣＤ3、ＦＡＰ、フィブロネクチンのエクストラドメイン−Ｂ、葉酸受容体1、ＧＤ2、ＧＤ3ガングリオシド、糖タンパク質75、ＧＰＮＭＢ、ＨＥＲ2／ｎｅｕ、ＨＧＦ、ヒト細胞分散因子（ｓｃａｔｔｅｒ  ｆａｃｔｏｒ）受容体キナーゼ、ＩＧＦ−1受容体、ＩＧＦ−Ｉ、ＩｇＧ1、Ｌ1−ＣＡＭ、ＩＬ−13、ＩＬ−6、インスリン様成長因子Ｉ受容体、インテグリンα5β1、インテグリンαｖβ3、ＭＯＲＡｂ−009、ＭＳ4Ａ1、ＭＵＣ1、ムチンＣａｎＡｇ、Ｎ−グリコリルノイラミン酸、ＮＰＣ−1Ｃ、ＰＤＧＦ−Ｒα、ＰＤＬ192、ホスファチジルセリン、前立腺癌細胞、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＲＯＲ1、ＳＣＨ  900105、ＳＤＣ1、ＳＬＡＭＦ7、ＴＡＧ−72、テネイシンＣ、ＴＧＦβ2、ＴＧＦ−β、ＴＲＡＩＬ−Ｒ1、ＴＲＡＩＬ−Ｒ2、腫瘍抗原ＣＴＡＡ16．88、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦＲ−1、ＶＥＧＦＲ2、ビメンチン、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1015の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1017]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域が、（ｉ）ＣＤ19およびＣＤ20、（ｉｉ）ＣＤ20およびＬ1−ＣＡＭ、（ｉｉｉ）Ｌ1−ＣＡＭおよびＧＤ2、（ｉｖ）ＥＧＦＲおよびＬ1−ＣＡＭ、（ｖ）ＣＤ19およびＣＤ22、（ｖｉ）ＥＧＦＲおよびＣ−ＭＥＴ、（ｖｉｉ）ＥＧＦＲおよびＨＥＲ2、（ｖｉｉｉ）Ｃ−ＭＥＴおよびＨＥＲ2、または（ｉｘ）ＥＧＦＲおよびＲＯＲ1に結合する、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1018]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域が、ＣＤ19およびＣＤ20に結合する、本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1019]
炎症性疾患に特異的な前記抗原が、ＡＯＣ3（ＶＡＰ−1）、ＣＡＭ−3001、ＣＣＬ11（エオタキシン−1）、ＣＤ125、ＣＤ147（ベイシジン）、ＣＤ154（ＣＤ40Ｌ）、ＣＤ2、ＣＤ20、ＣＤ23（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ25（ＩＬ−2受容体のα鎖）、ＣＤ3、ＣＤ4、ＣＤ5、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＩｇＥ、ＩｇＥ  Ｆｃ領域、ＩＬ−1、ＩＬ−12、ＩＬ−23、ＩＬ−13、ＩＬ−17、ＩＬ−17Ａ、ＩＬ−22、ＩＬ−4、ＩＬ−5、ＩＬ−5、ＩＬ−6、ＩＬ−6受容体、インテグリンα4、インテグリンα4β7、リャマ（Ｌａｍａ  ｇｌａｍａ）、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ）、ＭＥＤＩ−528、ミオスタチン、ＯＸ−40、ｒｈｕＭＡｂβ7、スクレロスシン（ｓｃｌｅｒｏｓｃｉｎ）、ＳＯＳＴ、ＴＧＦβ1、ＴＮＦ−α、ＶＥＧＦ−Ａ、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1015の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1020]
神経障害に特異的な前記抗原が、βアミロイド、ＭＡＢＴ5102Ａ、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1015の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1021]
糖尿病に特異的な前記抗原が、Ｌ−1β、ＣＤ3、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1015の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1022]
心血管系疾患に特異的な前記抗原が、Ｃ5、心筋ミオシン、ＣＤ41（インテグリンα−ＩＩｂ）、フィブリンＩＩ、β鎖、ＩＴＧＢ2（ＣＤ18）、スフィンゴシン−1−ホスファート、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1015の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1023]
感染性疾患に特異的な前記抗原が、炭疽毒素、ＣＣＲ5、ＣＤ4、クランピング因子Ａ、サイトメガロウイルス、サイトメガロウイルス糖タンパク質Ｂ、内毒素、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、Ｂ型肝炎表面抗原、Ｂ型肝炎ウイルス、ＨＩＶ−1、Ｈｓｐ90、Ａ型インフルエンザ血球凝集素、リポテイコ酸、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、狂犬病ウイルス糖タンパク質、呼吸器合胞体ウイルス、ＴＮＦ−α、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1015の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1024]
本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体と、治療用制御物質との組み合わせ。
[本発明1025]
前記治療用制御物質が、トランケート型上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲｔ）、チミジンキナーゼ、シトシンデアミナーゼ、ニトロレダクターゼ、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、ヒトカスパーゼ8、ヒトカスパーゼ9、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、リナマラーゼ／リナマリン／グルコースオキシダーゼ、デオキシリボヌクレオシドキナーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）／インドール−3−酢酸（ＩＡＡ）、γグルタミルシステインシンテターゼ、ＣＤ20／αＣＤ20、ＣＤ34／チミジンキナーゼキメラ、ｄｏｘ依存カスパーゼ−2、変異チミジンキナーゼ（ＨＳＶ−ＴＫＳＲ39）、ＡＰ1903／Ｆａｓ系、キメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）、選択マーカー、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1024の組み合わせ。
[本発明1026]
前記ＥＧＦＲｔが、ＥＧＦＲ特異的ｓｉＲＮＡ、小分子、抗ＥＧＦＲ抗体もしくはそのフラグメント、またはそれらの組み合わせのうちのいずれかのうちの1つまたは複数に結合する、本発明1025の組み合わせ。
[本発明1027]
前記選択マーカーが、ジヒドロキシ葉酸受容体（ＤＨＦＲ）、変異ＤＨＦＲ、メチル化−ＤＮＡ−タンパク質−システインメチルトランスフェラーゼ、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼＩＩ（ＩＭＤＨＰ2）、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1025の組み合わせ。
[本発明1028]
前記ＣＣＲが、（ｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ7Ｒα、（ｉｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ−7Ｒαの細胞外ドメイン−ＩＬ−7Ｒαの膜貫通ドメイン−ＩＬ−2Ｒβの細胞質ドメイン、（ｉｉｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ2Ｒβ、および（ｉｖ）それらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1025の組み合わせ。
[本発明1029]
前記二重特異性キメラ抗原受容体および前記治療用制御物質が、切断可能なリンカーを介して連結されている、本発明1024の組み合わせ。
[本発明1030]
前記切断可能なリンカーが、自己切断型の切断可能なリンカーである、本発明1029の組み合わせ。
[本発明1031]
前記切断可能なリンカーが、2Ａリンカー、2Ａ様リンカー、またはその機能的等価物のうちのいずれか1つまたは複数である、本発明1029の組み合わせ。
[本発明1032]
本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体または本発明1024の組み合わせをコードする、ポリヌクレオチド。
[本発明1033]
本発明1032のポリヌクレオチドによってコードされる、ポリペプチド。
[本発明1034]
本発明1032のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
[本発明1035]
本発明1032のポリヌクレオチドを含む、ウイルス。
[本発明1036]
ＲＮＡウイルスである、本発明1035のウイルス。
[本発明1037]
レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レンチウイルス、ポックスウイルス、またはヘルペスウイルスである、本発明1035のウイルス。
[本発明1038]
本発明1032のポリヌクレオチド、本発明1001のキメラ抗原受容体、または本発明1024の組み合わせを含む、遺伝子改変細胞。
[本発明1039]
Ｔ−リンパ球（Ｔ細胞）である、本発明1038の遺伝子改変細胞。
[本発明1040]
ナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、エフェクターメモリーＴ細胞、またはそれらの組み合わせである、本発明1039の遺伝子改変細胞。
[本発明1041]
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、胚性幹細胞、または多能性幹細胞である、本発明1038の遺伝子改変細胞。
[本発明1042]
ａ．本発明1001の二重特異性キメラ抗原受容体、本発明1024の組み合わせ、本発明1032のポリペプチド、本発明1034のベクター、本発明1035のウイルス、本発明1038の遺伝子改変細胞、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数と、
ｂ．薬学的に許容される担体と
を含む、薬学的組成物。
[本発明1043]
本発明1042の薬学的組成物と、
治療用制御物質を発現する細胞の増殖を阻害するための、該治療用制御物質と生化学的に相互作用するように適合された組成物と
の組み合わせ。
[本発明1044]
前記治療用制御物質と生化学的に相互作用するように適合された前記組成物が、ハーセプチン、メトトレキサート、セツキシマブ、チミジン類似体（例えばガンシクロビル）、（Ｅ）−5−（2−ブロモビニル）−2'−デオキシウリジン（ＢＶＤＵ）、5−フルロシトシン（ｆｌｕｒｏｃｙｔｏｓｉｎｅ）（5−ＦＣ）、5−（アザリジン（ａｚａｒｉｄｉｎ）−1−イル）−2，4−ジニトロベンズアミド（ＣＢ1954）、6−チオグアニン、合成二量体化薬（ｄｉｍｅｒｉｚｉｎｇ  ｄｒｕｇ）（例えば、ＡＰ1903）、リン酸フルダラビン、リナマリン（ｌｉｎ）、ヌクレオシド類似体（例えば、ＢＶＤＵ、ジフルオロデオキシシチジン（ｄＦｄＣ）、1−β−Ｄ−アラビノフラノシルチミン（アラ−Ｔ））、インドール−3−酢酸（ＩＡＡ）、ｌ−ブチオニン−Ｓ，Ｒ−スルホキシイミン（ＢＳＯ）、リツキシマブ（ＲＴＸ）、ドキシサイクリン、チロシンキナーゼ阻害剤、またはそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数である、本発明1043の組み合わせ。
[本発明1045]
以下の工程を含む、キメラ抗原受容体を発現する一定量のＴ細胞を生成する方法：
（ｉ）本発明1034のベクターを、1個または複数個のＴ細胞にトランスフェクトする工程、および
（ｉｉ）少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域によって標的とされる抗原を発現する細胞、少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域によって標的とされる組換え抗原を発現する細胞、またはキメラ抗原受容体に対する抗体を発現する細胞で、該1個または複数個のＴ細胞を刺激する工程であって、それによって該Ｔ細胞が、一定量のＴ細胞を生成するように増殖する、工程。
[本発明1046]
疾患の治療を必要とする対象における疾患を治療するための方法であって、
該方法が、
（ｉ）本発明1042の組成物を提供する工程、および
（ｉｉ）治療的有効量の該組成物を、該疾患を治療するように該対象に投与する工程
を含み、
少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域がそれぞれ、抗原を標的とし、かつ少なくとも1つのそのような抗原が、該疾患と関連している、
該方法。
[本発明1047]
ａ．少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域、
ｂ．細胞外スペーサードメイン、
ｃ．膜貫通ドメイン、
ｄ．少なくとも1つの共刺激ドメイン、および
ｅ．細胞内シグナル伝達ドメイン
を含み、トランケート型上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲｔ）と共発現される、二重特異性キメラ抗原受容体であって、
各抗原特異的標的指向領域が、抗原特異的単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントを含み、かつ異なる抗原に結合する、
二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1048]
チミジンキナーゼ、シトシンデアミナーゼ、ニトロレダクターゼ、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、ヒトカスパーゼ8、ヒトカスパーゼ9、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、リナマラーゼ／リナマリン／グルコースオキシダーゼ、デオキシリボヌクレオシドキナーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）／インドール−3−酢酸（ＩＡＡ）、γグルタミルシステインシンテターゼ、ＣＤ20／αＣＤ20、ＣＤ34／チミジンキナーゼキメラ、ｄｏｘ依存カスパーゼ−2、変異チミジンキナーゼ（ＨＳＶ−ＴＫＳＲ39）、ＡＰ1903／Ｆａｓ系、キメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）、選択マーカー、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む治療用制御物質と共発現される、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1049]
前記ＥＧＦＲｔが、ＥＧＦＲ特異的ｓｉＲＮＡ、小分子、抗ＥＧＦＲ抗体もしくはそのフラグメント、またはそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数に結合する、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1050]
前記選択マーカーが、ジヒドロキシ葉酸受容体（ＤＨＦＲ）、変異ＤＨＦＲ、メチル化−ＤＮＡ−タンパク質−システインメチルトランスフェラーゼ、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼＩＩ（ＩＭＤＨＰ2）、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1048の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1051]
前記ＣＣＲが、（ｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ7Ｒα、（ｉｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ−7Ｒαの細胞外ドメイン−ＩＬ−7Ｒαの膜貫通ドメイン−ＩＬ−2Ｒβの細胞質ドメイン、（ｉｉｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ2Ｒβ、および（ｉｖ）それらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1048の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1052]
前記二重特異性キメラ抗原受容体および前記治療用制御物質が、切断可能なリンカーを介して連結されている、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1053]
前記切断可能なリンカーが、自己切断型の切断可能なリンカーである、本発明1052の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1054]
前記切断可能なリンカーが、2Ａリンカー、2Ａ様リンカー、またはその機能的等価物のうちのいずれか1つまたは複数である、本発明1052の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1055]
前記細胞外スペーサードメインが、抗体のＦｃフラグメント、またはその機能的等価物、フラグメント、もしくは誘導体、抗体のヒンジ領域、またはその機能的等価物、フラグメント、もしくは誘導体、抗体のＣＨ2領域、抗体のＣＨ3領域、人工スペーサー配列、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1056]
前記細胞外スペーサードメインが、（ｉ）ＩｇＧ4のヒンジ、ＣＨ2、およびＣＨ3領域、（ｉｉ）ＩｇＧ4のヒンジ領域、（ｉｉｉ）ＩｇＧ4のヒンジおよびＣＨ2領域、（ｉｖ）ＣＤ8αのヒンジ領域、（ｖ）ＩｇＧ1のヒンジ、ＣＨ2、およびＣＨ3領域、（ｖｉ）ＩｇＧ1のヒンジ領域、（ｖｉ）ＩｇＧ1のヒンジおよびＣＨ2領域、ならびに（ｖｉｉ）それらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1055の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1057]
前記膜貫通ドメインが、Ｉ型膜貫通タンパク質の膜貫通領域、人工疎水性配列、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1058]
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体複合体のζ鎖の膜貫通ドメイン、ＣＤ28、ＣＤ8α、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1057の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1059]
前記共刺激ドメインが、ＣＤ28、ＣＤ137（4−1ＢＢ）、ＣＤ134（ＯＸ40）、Ｄａｐ10、ＣＤ27、ＣＤ2、ＣＤ5、ＩＣＡＭ−1、ＬＦＡ−1、Ｌｃｋ、ＴＮＦＲ−Ｉ、ＴＮＦＲ−ＩＩ、Ｆａｓ、ＣＤ30、ＣＤ40、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数に由来するシグナル伝達ドメインを含む、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1060]
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ヒトＣＤ3ζ鎖、ＦｃγＲＩＩＩ、ＦｃεＲＩ、Ｆｃ受容体の細胞質側末端、免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を有する細胞質受容体、およびそれらの組み合わせのうちの1つまたは複数のシグナル伝達ドメインを含む、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1061]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向ドメインのそれぞれが、癌、炎症性疾患、神経障害、糖尿病、心血管系疾患、感染性疾患、自己免疫性疾患、およびそれらの組み合わせに対して特異的な抗原から成る群から独立して選択される抗原を標的とする、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1062]
癌に特異的な前記抗原が、4−1ＢＢ、5Ｔ4、腺癌抗原、α−フェトプロテイン、ＢＡＦＦ、Ｂ−リンパ腫細胞、Ｃ242抗原、ＣＡ−125、炭酸脱水酵素9（ＣＡ−ＩＸ）、Ｃ−ＭＥＴ、ＣＣＲ4、ＣＤ152、ＣＤ19、ＣＤ20、ＣＤ200、ＣＤ22、ＣＤ221、ＣＤ23（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ28、ＣＤ30（ＴＮＦＲＳＦ8）、ＣＤ33、ＣＤ4、ＣＤ40、ＣＤ44ｖ6、ＣＤ51、ＣＤ52、ＣＤ56、ＣＤ74、ＣＤ80、ＣＥＡ、ＣＮＴＯ888、ＣＴＬＡ−4、ＤＲ5、ＥＧＦＲ、ＥｐＣＡＭ、ＣＤ3、ＦＡＰ、フィブロネクチンのエクストラドメイン−Ｂ、葉酸受容体1、ＧＤ2、ＧＤ3ガングリオシド、糖タンパク質75、ＧＰＮＭＢ、ＨＥＲ2／ｎｅｕ、ＨＧＦ、ヒト細胞分散因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ−1受容体、ＩＧＦ−Ｉ、ＩｇＧ1、Ｌ1−ＣＡＭ、ＩＬ−13、ＩＬ−6、インスリン様成長因子Ｉ受容体、インテグリンα5β1、インテグリンαｖβ3、ＭＯＲＡｂ−009、ＭＳ4Ａ1、ＭＵＣ1、ムチンＣａｎＡｇ、Ｎ−グリコリルノイラミン酸、ＮＰＣ−1Ｃ、ＰＤＧＦ−Ｒα、ＰＤＬ192、ホスファチジルセリン、前立腺癌細胞、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＲＯＲ1、ＳＣＨ  900105、ＳＤＣ1、ＳＬＡＭＦ7、ＴＡＧ−72、テネイシンＣ、ＴＧＦβ2、ＴＧＦ−β、ＴＲＡＩＬ−Ｒ1、ＴＲＡＩＬ−Ｒ2、腫瘍抗原ＣＴＡＡ16．88、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦＲ−1、ＶＥＧＦＲ2、ビメンチン、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1061の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1063]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域が、（ｉ）ＣＤ19およびＣＤ20、（ｉｉ）ＣＤ20およびＬ1−ＣＡＭ、（ｉｉｉ）Ｌ1−ＣＡＭおよびＧＤ2、（ｉｖ）ＥＧＦＲおよびＬ1−ＣＡＭ、（ｖ）ＣＤ19およびＣＤ22、（ｖｉ）ＥＧＦＲおよびＣ−ＭＥＴ、（ｖｉｉ）ＥＧＦＲおよびＨＥＲ2、（ｖｉｉｉ）Ｃ−ＭＥＴおよびＨＥＲ2、または（ｉｘ）ＥＧＦＲおよびＲＯＲ1に結合する、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1064]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域が、ＣＤ19およびＣＤ20に結合する、本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1065]
炎症性疾患に特異的な前記抗原が、ＡＯＣ3（ＶＡＰ−1）、ＣＡＭ−3001、ＣＣＬ11（エオタキシン−1）、ＣＤ125、ＣＤ147（ベイシジン）、ＣＤ154（ＣＤ40Ｌ）、ＣＤ2、ＣＤ20、ＣＤ23（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ25（ＩＬ−2受容体のα鎖）、ＣＤ3、ＣＤ4、ＣＤ5、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＩｇＥ、ＩｇＥ  Ｆｃ領域、ＩＬ−1、ＩＬ−12、ＩＬ−23、ＩＬ−13、ＩＬ−17、ＩＬ−17Ａ、ＩＬ−22、ＩＬ−4、ＩＬ−5、ＩＬ−5、ＩＬ−6、ＩＬ−6受容体、インテグリンα4、インテグリンα4β7、リャマ、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ）、ＭＥＤＩ−528、ミオスタチン、ＯＸ−40、ｒｈｕＭＡｂβ7、スクレロスシン、ＳＯＳＴ、ＴＧＦβ1、ＴＮＦ−α、ＶＥＧＦ−Ａ、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1061の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1066]
神経障害に特異的な前記抗原が、βアミロイド、ＭＡＢＴ5102Ａ、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1061の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1067]
糖尿病に特異的な前記抗原が、Ｌ−1β、ＣＤ3、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1061の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1068]
心血管系疾患に特異的な前記抗原が、Ｃ5、心筋ミオシン、ＣＤ41（インテグリンα−ＩＩｂ）、フィブリンＩＩ、β鎖、ＩＴＧＢ2（ＣＤ18）、スフィンゴシン−1−ホスファート、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1061の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1069]
感染性疾患に特異的な前記抗原が、炭疽毒素、ＣＣＲ5、ＣＤ4、クランピング因子Ａ、サイトメガロウイルス、サイトメガロウイルス糖タンパク質Ｂ、内毒素、大腸菌、Ｂ型肝炎表面抗原、Ｂ型肝炎ウイルス、ＨＩＶ−1、Ｈｓｐ90、Ａ型インフルエンザ血球凝集素、リポテイコ酸、緑膿菌、狂犬病ウイルス糖タンパク質、呼吸器合胞体ウイルス、ＴＮＦ−α、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1061の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1070]
本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体と、ＥＧＦＲｔとの組み合わせ。
[本発明1071]
前記ＥＧＦＲｔが、ＥＧＦＲ特異的ｓｉＲＮＡ、小分子、抗ＥＧＦＲ抗体もしくはそのフラグメント、またはそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数に結合する、本発明1070の組み合わせ。
[本発明1072]
前記二重特異性キメラ抗原受容体および前記ＥＧＦＲｔが、切断可能なリンカーを介して連結されている、本発明1070の組み合わせ。
[本発明1073]
前記切断可能なリンカーが、自己切断型の切断可能なリンカーである、本発明1072の組み合わせ。
[本発明1074]
前記切断可能なリンカーが、2Ａリンカー、2Ａ様リンカー、またはその機能的等価物のうちのいずれか1つまたは複数である、本発明1072の組み合わせ。
[本発明1075]
本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体または本発明1070の組み合わせをコードする、ポリヌクレオチド。
[本発明1076]
本発明1075のポリヌクレオチドによってコードされる、ポリペプチド。
[本発明1077]
本発明1075のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
[本発明1078]
本発明1075のポリヌクレオチドを含む、ウイルス。
[本発明1079]
ＲＮＡウイルスである、本発明1078のウイルス。
[本発明1080]
レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レンチウイルス、ポックスウイルス、またはヘルペスウイルスである、本発明1078のウイルス。
[本発明1081]
本発明1075のポリヌクレオチド、本発明1047のキメラ抗原受容体、または本発明1070の組み合わせを含む、遺伝子改変細胞。
[本発明1082]
Ｔ−リンパ球（Ｔ細胞）である、本発明1081の遺伝子改変細胞。
[本発明1083]
ナイーブＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、エフェクターメモリーＴ細胞、またはそれらの組み合わせである、本発明1082の遺伝子改変細胞。
[本発明1084]
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、造血幹細胞（ＨＳＣ）、胚性幹細胞、または多能性幹細胞である、本発明1081の遺伝子改変細胞。
[本発明1085]
ａ．本発明1047の二重特異性キメラ抗原受容体、本発明1070の組み合わせ、本発明1076のポリペプチド、本発明1077のベクター、本発明1078のウイルス、本発明1081の遺伝子改変細胞、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数と、
ｂ．薬学的に許容される担体と
を含む、薬学的組成物。
[本発明1086]
本発明1085の薬学的組成物と、
ＥＧＦＲｔを発現する細胞の増殖を阻害するための、治療用制御物質と生化学的に相互作用するように適合された組成物と
の組み合わせ。
[本発明1087]
前記治療用制御物質と生化学的に相互作用するように適合された前記組成物が、ハーセプチン、メトトレキサート、セツキシマブ、チミジン類似体（例えばガンシクロビル）、（Ｅ）−5−（2−ブロモビニル）−2'−デオキシウリジン（ＢＶＤＵ）、5−フルロシトシン（5−ＦＣ）、5−（アザリジン−1−イル）−2，4−ジニトロベンズアミド（ＣＢ1954）、6−チオグアニン、合成二量体化薬（例えば、ＡＰ1903）、リン酸フルダラビン、リナマリン（ｌｉｎ）、ヌクレオシド類似体（例えば、ＢＶＤＵ、ジフルオロデオキシシチジン（ｄＦｄＣ）、1−β−Ｄ−アラビノフラノシルチミン（アラ−Ｔ））、インドール−3−酢酸（ＩＡＡ）、ｌ−ブチオニン−Ｓ，Ｒ−スルホキシイミン（ＢＳＯ）、リツキシマブ（ＲＴＸ）、ドキシサイクリン、チロシンキナーゼ阻害剤、またはそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数である、本発明1086の組み合わせ。
[本発明1088]
以下の工程を含む、キメラ抗原受容体を発現する一定量のＴ細胞を生成する方法：
（ｉ）本発明1077のベクターを、1個または複数個のＴ細胞にトランスフェクトする工程、および
（ｉｉ）少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域によって標的とされる抗原を発現する細胞、少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域によって標的とされる組換え抗原を発現する細胞、またはキメラ抗原受容体に対する抗体を発現する細胞で、該1個または複数個のＴ細胞を刺激する工程であって、それによって該Ｔ細胞が、一定量のＴ細胞を生成するように増殖する、工程。
[本発明1089]
疾患の治療を必要とする対象における疾患を治療するための方法であって、
該方法が、
（ｉ）本発明1085の組成物を提供する工程、および
（ｉｉ）治療的有効量の該組成物を、該疾患を治療するように該対象に投与する工程
を含み、
少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域がそれぞれ、抗原を標的とし、かつ少なくとも1つのそのような抗原が、該疾患と関連している、
該方法。
[本発明1090]
図4、9、または11に記載される配列を含む、二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1091]
ａ．少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域、
ｂ．ＣＤ8αヒンジ細胞外スペーサードメイン、
ｃ．ＣＤ8α膜貫通ドメイン、
ｄ．4−1ＢＢ共刺激ドメイン、および
ｅ．ＣＤ3ζ細胞内シグナル伝達ドメイン
を含み、トランケート型上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲｔ）と共発現される、二重特異性キメラ抗原受容体であって、
各抗原特異的標的指向領域が、抗原特異的単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメントを含み、かつ異なる抗原に結合し、
二重特異性キメラ抗原受容体およびＥＧＦＲｔが、Ｔ2Ａリンカーを介して連結されている、
二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1092]
チミジンキナーゼ、シトシンデアミナーゼ、ニトロレダクターゼ、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、ヒトカスパーゼ8、ヒトカスパーゼ9、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、リナマラーゼ／リナマリン／グルコースオキシダーゼ、デオキシリボヌクレオシドキナーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）／インドール−3−酢酸（ＩＡＡ）、γグルタミルシステインシンテターゼ、ＣＤ20／αＣＤ20、ＣＤ34／チミジンキナーゼキメラ、ｄｏｘ依存カスパーゼ−2、変異チミジンキナーゼ（ＨＳＶ−ＴＫＳＲ39）、ＡＰ1903／Ｆａｓ系、キメラサイトカイン受容体（ＣＣＲ）、選択マーカー、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む治療用制御物質と共発現される、本発明1091の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1093]
前記ＥＧＦＲｔが、ＥＧＦＲ特異的ｓｉＲＮＡ、小分子、抗ＥＧＦＲ抗体もしくはそのフラグメント、またはそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数に結合する、本発明1091の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1094]
前記選択マーカーが、ジヒドロキシ葉酸受容体（ＤＨＦＲ）、変異ＤＨＦＲ、メチル化−ＤＮＡ−タンパク質−システインメチルトランスフェラーゼ、イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼＩＩ（ＩＭＤＨＰ2）、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1092の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1095]
前記ＣＣＲが、（ｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ7Ｒα、（ｉｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ−7Ｒαの細胞外ドメイン−ＩＬ−7Ｒαの膜貫通ドメイン−ＩＬ−2Ｒβの細胞質ドメイン、（ｉｉｉ）ＩＬ−7サイトカイン−リンカー−ＩＬ2Ｒβ、および（ｉｖ）それらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1092の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1096]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向ドメインのそれぞれが、癌、炎症性疾患、神経障害、糖尿病、心血管系疾患、感染性疾患、自己免疫性疾患、およびそれらの組み合わせに対して特異的な抗原から成る群から独立して選択される抗原を標的とする、本発明1091の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1097]
癌に特異的な前記抗原が、4−1ＢＢ、5Ｔ4、腺癌抗原、α−フェトプロテイン、ＢＡＦＦ、Ｂ−リンパ腫細胞、Ｃ242抗原、ＣＡ−125、炭酸脱水酵素9（ＣＡ−ＩＸ）、Ｃ−ＭＥＴ、ＣＣＲ4、ＣＤ152、ＣＤ19、ＣＤ20、ＣＤ200、ＣＤ22、ＣＤ221、ＣＤ23（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ28、ＣＤ30（ＴＮＦＲＳＦ8）、ＣＤ33、ＣＤ4、ＣＤ40、ＣＤ44ｖ6、ＣＤ51、ＣＤ52、ＣＤ56、ＣＤ74、ＣＤ80、ＣＥＡ、ＣＮＴＯ888、ＣＴＬＡ−4、ＤＲ5、ＥＧＦＲ、ＥｐＣＡＭ、ＣＤ3、ＦＡＰ、フィブロネクチンのエクストラドメイン−Ｂ、葉酸受容体1、ＧＤ2、ＧＤ3ガングリオシド、糖タンパク質75、ＧＰＮＭＢ、ＨＥＲ2／ｎｅｕ、ＨＧＦ、ヒト細胞分散因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ−1受容体、ＩＧＦ−Ｉ、ＩｇＧ1、Ｌ1−ＣＡＭ、ＩＬ−13、ＩＬ−6、インスリン様成長因子Ｉ受容体、インテグリンα5β1、インテグリンαｖβ3、ＭＯＲＡｂ−009、ＭＳ4Ａ1、ＭＵＣ1、ムチンＣａｎＡｇ、Ｎ−グリコリルノイラミン酸、ＮＰＣ−1Ｃ、ＰＤＧＦ−Ｒα、ＰＤＬ192、ホスファチジルセリン、前立腺癌細胞、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＲＯＲ1、ＳＣＨ  900105、ＳＤＣ1、ＳＬＡＭＦ7、ＴＡＧ−72、テネイシンＣ、ＴＧＦβ2、ＴＧＦ−β、ＴＲＡＩＬ−Ｒ1、ＴＲＡＩＬ−Ｒ2、腫瘍抗原ＣＴＡＡ16．88、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦＲ−1、ＶＥＧＦＲ2、ビメンチン、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1096の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1098]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域が、（ｉ）ＣＤ19およびＣＤ20、（ｉｉ）ＣＤ20およびＬ1−ＣＡＭ、（ｉｉｉ）Ｌ1−ＣＡＭおよびＧＤ2、（ｉｖ）ＥＧＦＲおよびＬ1−ＣＡＭ、（ｖ）ＣＤ19およびＣＤ22、（ｖｉ）ＥＧＦＲおよびＣ−ＭＥＴ、（ｖｉｉ）ＥＧＦＲおよびＨＥＲ2、（ｖｉｉｉ）Ｃ−ＭＥＴおよびＨＥＲ2、または（ｉｘ）ＥＧＦＲおよびＲＯＲ1に結合する、本発明1096の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1099]
前記少なくとも2つの抗原特異的標的指向領域が、ＣＤ19およびＣＤ20に結合する、本発明1096の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1100]
炎症性疾患に特異的な前記抗原が、ＡＯＣ3（ＶＡＰ−1）、ＣＡＭ−3001、ＣＣＬ11（エオタキシン−1）、ＣＤ125、ＣＤ147（ベイシジン）、ＣＤ154（ＣＤ40Ｌ）、ＣＤ2、ＣＤ20、ＣＤ23（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ25（ＩＬ−2受容体のα鎖）、ＣＤ3、ＣＤ4、ＣＤ5、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＩｇＥ、ＩｇＥ  Ｆｃ領域、ＩＬ−1、ＩＬ−12、ＩＬ−23、ＩＬ−13、ＩＬ−17、ＩＬ−17Ａ、ＩＬ−22、ＩＬ−4、ＩＬ−5、ＩＬ−5、ＩＬ−6、ＩＬ−6受容体、インテグリンα4、インテグリンα4β7、リャマ、ＬＦＡ−1（ＣＤ11ａ）、ＭＥＤＩ−528、ミオスタチン、ＯＸ−40、ｒｈｕＭＡｂβ7、スクレロスシン、ＳＯＳＴ、ＴＧＦβ1、ＴＮＦ−α、ＶＥＧＦ−Ａ、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1096の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1101]
神経障害に特異的な前記抗原が、βアミロイド、ＭＡＢＴ5102Ａ、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1096の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1102]
糖尿病に特異的な前記抗原が、Ｌ−1β、ＣＤ3、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1096の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1103]
心血管系疾患に特異的な前記抗原が、Ｃ5、心筋ミオシン、ＣＤ41（インテグリンα−ＩＩｂ）、フィブリンＩＩ、β鎖、ＩＴＧＢ2（ＣＤ18）、スフィンゴシン−1−ホスファート、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1096の二重特異性キメラ抗原受容体。
[本発明1104]
感染性疾患に特異的な前記抗原が、炭疽毒素、ＣＣＲ5、ＣＤ4、クランピング因子Ａ、サイトメガロウイルス、サイトメガロウイルス糖タンパク質Ｂ、内毒素、大腸菌、Ｂ型肝炎表面抗原、Ｂ型肝炎ウイルス、ＨＩＶ−1、Ｈｓｐ90、Ａ型インフルエンザ血球凝集素、リポテイコ酸、緑膿菌、狂犬病ウイルス糖タンパク質、呼吸器合胞体ウイルス、ＴＮＦ−α、およびそれらの組み合わせのうちのいずれか1つまたは複数を含む、本発明1096の二重特異性キメラ抗原受容体。