【手続補正書】
【提出日】平成28年3月2日(2016.3.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナノ粒子を製造する方法であって、
(a)溶液中にポリマーを可溶化するステップと、
(b)カルボン酸側基又はアルキルアミノアルキルエステル側基を含む重合可能なモノマーを供給するステップと、
(c)モノマーをグラフト重合して可溶化したポリマー上にポリマー鎖を形成するステップと、
(d)形成している鎖と反応する官能基を有するエトキシ化分子を供給するステップと、を含み、
ステップ(c)がエトキシ化分子の存在下で行われ、エトキシ化分子をポリマー鎖に共有結合させる、方法。
【請求項２】
溶液が、ヒドロキシル溶媒を含む請求項1に記載の方法。
【請求項３】
工程(a)のポリマーが、デンプンを含む請求項1に記載の方法。
【請求項４】
エトキシ化分子が、R(C9-C31)-C(O)O-基を有するポリエトキシ化ソルビタンであり、ソルビタンが、重合ステップの間にR(C9-C31)-C(O)O-基のC-C共有結合を介して第二のポリマーに結合される請求項1に記載の方法。
【請求項５】
生物学的薬剤の送達のためのナノ粒子を製造する方法であって、請求項4に記載の方法を含み、薬剤が、ステップ(a)のポリマーに共有結合している方法。
【請求項６】
生物学的薬剤の送達のためのナノ粒子を製造する方法であって、薬剤及び請求項4に記載の方法によって得られたナノ粒子を液体媒体中で分散させて薬剤をナノ粒子中に取り込むステップを含む方法。
【請求項７】
第一のポリマー、
第一のポリマーにグラフトした第二のポリマー、及び
第二のポリマーに共有結合したポリエトキシ化部分
を含むナノ粒子。
【請求項８】
第二のポリマーが、第二のポリマーの主鎖の2つの炭素当たり約1個のカルボキシル基を有する重合したビニル基を含む請求項7に記載のナノ粒子。
【請求項９】
第二のポリマーが、ポリ(メタクリル酸)である請求項8に記載のナノ粒子。
【請求項１０】
ポリエトキシ化部分が、R(C9-C31)-C(O)O-基を有するソルビタンであり、ソルビタンが、R-基のC-C共有結合を介して第二のポリマーに結合している請求項7に記載のナノ粒子。
【請求項１１】
第一のポリマーが、デンプンを含む請求項10に記載のナノ粒子。
【請求項１２】
第二のポリマーが、架橋されている請求項11に記載のナノ粒子。
【請求項１３】
請求項12に記載の複数のナノ粒子を含む組成物であって、薬学的に活性な薬剤をさらに含む組成物。
【請求項１４】
請求項12に記載の複数のナノ粒子を含む組成物であって、さらにシグナル分子、生物学的薬剤、又は薬学的に活性な薬剤を含む組成物。
【請求項１５】
薬学的に活性な薬剤をさらに含む請求項14に記載の組成物。
【請求項１６】
多糖を含む第一のポリマー、
第一のポリマーにグラフトしたポリ(メタクリル酸)を含む第二の架橋したポリマー、及び
(C9-C31)R-C(O)O-基を含み、第二のポリマーの炭素主鎖とR基との間のC-C結合によって第二のポリマーに共有結合しているポリソルベート
を含むナノ粒子。
【請求項１７】
ポリソルベートが、基-O(CH2CH2O)w-C(O)(C17)R、HO(CH2CH2O)x-、HO(CH2CH2O)y-、HO(CH2CH2O)z-を含み、但し、w+x+y+z=20である請求項16に記載のナノ粒子。
【請求項１８】
第一のポリマーがデンプンを含む請求項17に記載のナノ粒子。
【請求項１９】
ポリ(メタクリル酸)のメタクリレートモノマー単位に対する多糖のモノマー単位のモル比が、0.2と8.0の間である請求項18に記載のナノ粒子。
【請求項２０】
ポリソルベート及びポリ(メタクリル酸)のメタクリレートモノマー単位のモル比が、0.002と0.03の間である請求項19に記載のナノ粒子。
【請求項２１】
ナノ粒子を製造する方法であって、
(a)溶液中でポリマーを可溶化するステップ、
(b)アルキルアミノアルキルエステル側基を含む重合可能なモノマーを供給するステップ、
(c)架橋剤を供給するステップ、及び
(d)モノマーをグラフト重合して可溶化したポリマー上にポリマー鎖を形成して、ナノ粒子を形成するステップ
を含む方法。
【請求項２２】
工程(a)のポリマーが、デンプンを含む請求項21に記載の方法。
【請求項２３】
モノマーが、ジエチルアミノエチルメタクリル酸である請求項22に記載の方法。
【請求項２４】
多糖を含む第一のポリマー、及び
第一のポリマーにグラフトした、メタクリル酸のアルキルアミノアルキルエステル、又はビニル基及び1個のカルボキシル基を含むモノマーを含む第二の架橋ポリマーであって、架橋している第二のポリマー
を含むナノ粒子。
【請求項２５】
第二のポリマーが、重合したジエチルアミノエチルメタクリル酸である請求項24に記載のナノ粒子。
【請求項２６】
第二のポリマーが、重合したメタクリル酸を含む請求項24に記載のナノ粒子。
【請求項２７】
モノマーが、メタクリル酸である請求項22に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２２】
当然のことながら、端点による数値域の列挙は、その範囲内に組み込まれた全てのものを含む。また、異なる列挙された範囲内に端点を有する列挙された範囲は、そのような列挙された範囲の端点を有する任意のその他の範囲の開示である。例えば、範囲20から350及び10から300の列挙は、範囲20から300及び10から350の開示である。
（付記）
（付記１）
ナノ粒子を製造する方法であって、
(a)溶液中にポリマーを可溶化するステップと、
(b)カルボン酸側基を含む重合可能なモノマーを供給するステップと、
(c)モノマーをグラフト重合して可溶化したポリマー上にポリマー鎖を形成するステップと、
(d)形成している鎖と反応する官能基を有するエトキシ化分子を供給するステップと、を含み、
ステップ(c)がエトキシ化分子の存在下で行われ、エトキシ化分子をポリマー鎖に共有結合させる、方法。
（付記２）
溶液が、ヒドロキシル溶媒を含む請求項1に記載の方法。
（付記３）
ヒドロキシル溶媒が水を含む請求項2に記載の方法。
（付記４）
ポリマーが、ポリマーの構成単位当たり0.05と3の間の置換度を有するポリヒドロキシルポリマーであり、モノマーがアルケニル基を含み、グラフト重合ステップが架橋剤の存在下で行われる付記1、2又は3に記載の方法。
（付記５）
ポリヒドロキシルポリマーが、0.5と3の間の置換度を有する付記4に記載の方法。
（付記６）
ポリヒドロキシルポリマーが、2と3の間の置換度を有する付記4に記載の方法。
（付記７）
ポリヒドロキシルポリマーが、0.5と3の間の置換度を有する多糖を含む付記4に記載の方法。
（付記８）
ポリヒドロキシルポリマーが、グルコースを含む付記7に記載の方法。
（付記９）
多糖が、デンプンを含む付記7に記載の方法。
（付記１０）
ステップ(c)のモノマーが、架橋剤の量の1倍と20倍(モル/モル)の間の量で存在する付記4、5又は6に記載の方法。
（付記１１）
ステップ(c)のモノマーが、架橋剤の量の3倍と6倍の間の量で存在する付記10に記載の方法。
（付記１２）
重合ステップが、フリーラジカル開始剤の存在下で行われるフリーラジカルグラフト重合である付記4から11のいずれかに記載の方法。
（付記１３）
開始剤が、遷移金属を実質的に含まない付記4から12のいずれかに記載の方法。
（付記１４）
開始剤が、過硫酸塩又はその機能的同等物である付記4から12のいずれかに記載の方法。
（付記１５）
エトキシ化分子のエトキシ基が、遊離のヒドロキシル基で終端している付記1から14のいずれかに記載の方法。
（付記１６）
エトキシ化分子が、化学反応して界面活性剤分子をポリマー鎖に共有結合させるアルケニル基を含む付記1から15のいずれかに記載の方法。
（付記１７）
エトキシ化分子が、R(C9-C31)-C(O)O-基を有するポリエトキシ化ソルビタンであり、ソルビタンが、重合ステップの間にR(C9-C31)-C(O)O-基のC-C共有結合を介して第二のポリマーに結合される付記16に記載の方法。
（付記１８）
ソルビタンが、オキシエチレン単位の総数が少なくとも10であるポリソルベートである付記17に記載の方法。
（付記１９）
オキシエチレン単位の総数が、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30又は32である付記15に記載の方法。
（付記２０）
前記R(C9-C31)-C(O)O-基が、重合ステップにおいて反応してC-C共有結合を形成する少なくとも1つのC-C不飽和を含む、付記17、18又は19に記載の方法。
（付記２１）
ポリエトキシ化分子が、ポリソルベート80である付記20に記載の方法。
（付記２２）
ステップ(C)のポリマーの量及びモノマーの量が、ポリマーのモノマー単位に対するポリマー鎖中のモノマー単位のモル比が0.1と10の間であるナノ粒子を製造するように選択される付記1から21のいずれかに記載の方法。
（付記２３）
ステップ(C)のポリマーの量及びモノマーの量が、ポリマーのモノマー単位に対するポリマー鎖中のモノマー単位のモル比が0.3と7.0の間であるナノ粒子を製造するように選択される付記22に記載の方法。
（付記２４）
ステップ(C)のポリマーの量及びモノマーの量が、ポリマーのモノマー単位に対するポリマー鎖中のモノマー単位のモル比が1と5.0の間であるナノ粒子を製造するように選択される付記22に記載の方法。
（付記２５）
ステップ(c)におけるエトキシ化分子の量及びモノマー量が、モノマー単位に対するエトキシ化分子のモル比が0.0005と1の間であるナノ粒子を製造するように選択される付記1から24のいずれかに記載の方法。
（付記２６）
ステップ(c)におけるエトキシ化分子の量及びモノマー量が、モノマー単位に対するエトキシ化分子のモル比が0.003と0.01の間であるナノ粒子を製造するように選択される付記25に記載の方法。
（付記２７）
重合ステップが、界面活性剤の存在下で行われる付記1から26のいずれかに記載の方法。
（付記２８）
界面活性剤が、アニオン界面活性剤である付記27に記載の方法。
（付記２９）
生物学的薬剤の送達のためのナノ粒子を製造する方法であって、付記1から28のいずれかに記載の方法を含み、薬剤が、ステップ(a)のポリマーに共有結合している方法。
（付記３０）
ポリマーが、ポリヒドロキシル化ポリマーであり、薬剤が、そのヒドロキシル水素原子の置換によってポリマーに共有結合している付記29に記載の方法。
（付記３１）
薬剤が、金属を錯体化することができる有機部分を含む付記29に記載の方法。
（付記３２）
金属-有機部分錯体を形成するステップをさらに含む付記31に記載の方法。
（付記３３）
金属が、核磁気共鳴映像法において信号を提供するように選択される付記31又は32に記載の方法。
（付記３４）
金属が、Gd+3である付記33に記載の方法。
（付記３５）
ステップ(c)のモノマーの量が十分に高く、製造されるナノ粒子の水溶液の、pH7.4及び10mMのイオン強度で測定される、ゼータ電位の絶対値が、少なくとも15mVである付記1から34のいずれかに記載の方法。
（付記３６）
生物学的薬剤の送達のためのナノ粒子を製造する方法であって、薬剤及び付記1から35のいずれかに記載の方法によって得られたナノ粒子を液体媒体中で分散させて薬剤をナノ粒子中に取り込むステップを含む方法。
（付記３７）
生物学的薬剤の送達のためのナノ粒子を製造する方法であって、付記1から35のいずれかに記載の方法によって製造されたナノ粒子に、薬剤をナノ粒子のポリマー鎖の前記カルボン酸基に、共有結合させることを含む方法。
（付記３８）
キャリアナノ粒子を製造する方法であって、
(i)水溶液中にポリマーを可溶化するステップと、
(ii)カルボン酸側基を含む重合可能なモノマーを供給するステップと、
(iii)モノマーをグラフト重合して可溶化したポリマー上にポリマー鎖を形成するステップと、
(iv)形成している鎖と反応する官能基を有するポリエトキシ化分子を供給するステップと、
を含み、
重合ステップ(ii)がポリエトキシ化分子の存在下で行われ、ポリエトキシ化分子を形成している鎖に共有結合させ、重合生成物がナノ粒子の外側にポリエトキシ化部分を有するナノ粒子を形成する方法。
（付記３９）
第一のポリマー、
第一のポリマーにグラフトした第二のポリマー、及び
第二のポリマーに共有結合したポリエトキシ化部分
を含むナノ粒子。
（付記４０）
第二のポリマーが、第二のポリマーの主鎖の2つの炭素当たり約1個のカルボキシル基を有する重合したビニル基を含む付記39に記載のナノ粒子。
（付記４１）
第二のポリマーが、ポリアルケニルポリマーである付記39に記載のナノ粒子。
（付記４２）
ポリアルケニルポリマーが、ポリアクリル酸である付記41に記載のナノ粒子。
（付記４３）
ポリアクリル酸が、ポリ(メタクリル酸)である付記42に記載のナノ粒子。
（付記４４）
ポリエトキシ化部分が、R(C9-C31)-C(O)O-基を有するソルビタンであり、ソルビタンが、R-基のC-C共有結合を介して第二のポリマーに結合している付記39から43のいずれかに記載のナノ粒子。
（付記４５）
第一のポリマーが、ポリヒドロキシルポリマーを含む付記39から44のいずれかに記載のナノ粒子。
（付記４６）
ポリヒドロキシルポリマーが、0.05と3の間の置換度を有する多糖を含む付記45に記載のナノ粒子。
（付記４７）
多糖が、デンプンを含む付記46に記載のナノ粒子。
（付記４８）
第二のポリマーが、架橋されている付記47に記載のナノ粒子。
（付記４９）
付記39から48のいずれかに記載の複数のナノ粒子を含む組成物であって、薬学的に活性な薬剤をさらに含む組成物。
（付記５０）
薬剤が、ナノ粒子に吸着されている付記49に記載の組成物。
（付記５１）
付記39から48のいずれかに記載の複数のナノ粒子を含む組成物であって、さらにシグナル分子を含む組成物。
（付記５２）
シグナル分子が、有機部分によりキレート化された金属であり、部分がナノ粒子に共有結合されている付記51に記載の組成物。
（付記５３）
有機部分が、第一のポリマーに共有結合されている付記52に記載の組成物。
（付記５４）
シグナル分子が、ナノ粒子に共有結合されており、好ましくはカルボン酸側基に共有結合している付記51に記載の組成物。
（付記５５）
シグナル分子が、フルオロフォアである付記51又は54の組成物。
（付記５６）
薬学的に活性な薬剤をさらに含む付記51から54のいずれかに記載の組成物。
（付記５７）
多糖を含む第一のポリマー、
第一のポリマーにグラフトしたポリ(メタクリル酸)を含む第二の架橋したポリマー、及び
(C9-C31)R-C(O)O-基を含み、第二のポリマーの炭素主鎖とR基との間のC-C結合によって第二のポリマーに共有結合しているポリソルベート
を含むナノ粒子。
（付記５８）
(C9-C31)R-C(O)O-基が、Rが直鎖のアルキルである-(C17)R-C(O)O-である付記57に記載のナノ粒子。
（付記５９）
ポリソルベートが、基-O(CH2CH2O)w-C(O)(C17)R、HO(CH2CH2O)x-、-HO(CH2CH2O)y-、-HO(CH2CH2O)z-を含み、但し、w+x+y+z=20である付記58に記載のナノ粒子。
（付記６０）
多糖の分子量が、2,600Daと4,500Daの間である付記57、58又は59に記載のナノ粒子。
（付記６１）
第一のポリマーがデンプンを含む付記57、58又は59に記載のナノ粒子。
（付記６２）
ポリ(メタクリル酸)のメタクリレートモノマー単位に対する多糖のモノマー単位のモル比が、0.2と8.0の間である付記57から61のいずれかに記載のナノ粒子。
（付記６３）
ポリソルベート及びポリ(メタクリル酸)のメタクリレートモノマー単位のモル比が、0.002と0.03の間である付記57から62のいずれかに記載のナノ粒子。
（付記６４）
ナノ粒子を製造する方法であって、
(a)溶液中でポリマーを可溶化するステップ、
(b)アルキルアミノアルキルエステル側基を含む重合可能なモノマーを供給するステップ、
(c)架橋剤を供給するステップ、及び
(d)モノマーをグラフト重合して可溶化したポリマー上にポリマー鎖を形成して、ナノ粒子を形成するステップ
を含む方法。
（付記６５）
ポリマーが、ポリマーの構成単位当たり0.05と3の間の置換度を有するポリヒドロキシルポリマーであり、モノマーが、アルケニル基を含み、グラフト重合ステップが、架橋剤の存在下で行われる付記64に記載の方法。
（付記６６）
ポリヒドロキシルポリマーが、ポリマーの構成単位当たり1と3の間の置換度を有する付記65に記載の方法。
（付記６７）
ポリヒドロキシルポリマーが、0.5と3の間の置換度を有する多糖を含む付記65に記載の方法。
（付記６８）
ポリヒドロキシルポリマーが、グルコースを含む付記67に記載の方法。
（付記６９）
多糖が、デンプンを含む付記67に記載の方法。
（付記７０）
溶液が、ヒドロキシル溶媒を含む付記64から69のいずれかに記載の方法。
（付記７１）
ヒドロキシル溶媒が、水及び/又はアルコールを含む付記70に記載の方法。
（付記７２）
ヒドロキシル溶媒が、水及びエタノールを含む付記71に記載の方法。
（付記７３）
重合可能なモノマーが、メタクリル酸のアルキルアミノアルキルエステルである付記64から72のいずれかに記載の方法。
（付記７４）
モノマーが、ジエチルアミノエチルメタクリル酸である付記73に記載の方法。
（付記７５）
重合ステップが、フリーラジカル開始剤の存在下で行われるフリーラジカルグラフト重合である付記64から74のいずれかに記載の方法。
（付記７６）
開始剤が、遷移金属を実質的に含まない付記75に記載の方法。
（付記７７）
開始剤が、過硫酸塩又はその機能的同等物である付記75又は76に記載の方法。
（付記７８）
架橋剤が、エチレングリコールジメタクリレートである付記64から77のいずれかに記載の方法。
（付記７９）
ステップ(d)のモノマーが、架橋剤の量の1倍と200倍の間の量(モル/モル)で存在する付記64から78のいずれかに記載の方法。
（付記８０）
ステップ(d)のモノマーが、架橋剤の量の3倍と50倍の間の量(モル/モル)で存在する付記79に記載の方法。
（付記８１）
ステップ(c)のポリマーの量及びモノマーの量が、ポリマーのモノマー単位に対するポリマー鎖中のモノマー単位のモル比が0.05と20の間であるナノ粒子を製造するように選択される付記64から80のいずれかに記載の方法。
（付記８２）
ステップ(c)のポリマーの量及びモノマーの量が、ポリマーのモノマー単位に対するポリマー鎖中のモノマー単位のモル比が2と4の間であるナノ粒子を製造するように選択される付記81に記載の方法。
（付記８３）
ポリソルベートが、ステップ(d)において存在する付記64から82のいずれかに記載の方法。
（付記８４）
ポリソルベートのR基が、不飽和を含むヒドロカルビル基である付記83に記載の方法。
（付記８５）
ポリソルベートが、ポリソルベート80である付記84に記載の方法。
（付記８６）
重合可能なモノマーが、ポリソルベートの量の5倍と50倍の間の量(モル/モル)で存在する付記83、84又は85に記載の方法。
（付記８７）
重合可能なモノマーが、ポリソルベートの量の20倍と30倍の間の量(モル/モル)で存在する付記86に記載の方法。
（付記８８）
非イオン性安定剤がステップ(d)において存在する付記64から87のいずれかに記載の方法。
（付記８９）
安定剤が、ポリビニルピロリドンである付記88に記載の方法。
（付記９０）
生物学的薬剤の送達のためのナノ粒子を製造する方法であって、付記64から89のいずれかに記載の方法を含み、薬剤がステップ(a)のポリマーに共有結合している方法。
（付記９１）
薬剤が、金属を錯体化することができる有機部分を含む付記90に記載の方法。
（付記９２）
金属-有機部分錯体を形成するステップをさらに含む付記91に記載の方法。
（付記９３）
有機部分が、DTPAである付記92に記載の方法。
（付記９４）
金属が、核磁気共鳴映像法において信号を提供するように選択される付記92又は93に記載の方法。
（付記９５）
金属が、Gd+3である付記94に記載の方法。
（付記９６）
生物学的薬剤の送達のためのナノ粒子を製造する方法であって、薬剤及び付記64から95のいずれかに記載の方法によって得られたナノ粒子を液体媒体中で分散させて薬剤をナノ粒子中に取り込むステップを含む方法。
（付記９７）
多糖を含む第一のポリマー、及び
第一のポリマーにグラフトしたメタクリル酸のアルキルアミノアルキルエステルを含む第二の架橋ポリマーであって、架橋している第二のポリマー
を含むナノ粒子。
（付記９８）
第二のポリマーが、重合したジエチルアミノエチルメタクリル酸である付記97に記載のナノ粒子。
（付記９９）
第二のポリマーが、第二のポリマーの主鎖の2つの炭素当たり約1個のカルボキシル基を有する重合したビニル基を含む付記97に記載のナノ粒子。
（付記１００）
多糖が、デンプンである付記97、98又は99に記載のナノ粒子。
（付記１０１）
付記97から100のいずれかに記載のナノ粒子の溶液を含む組成物であって、ナノ粒子が、それらの周囲の溶液のpHを約4から約7.4まで変化させたとき、500倍と1500倍の間で増加した体積変化を示す組成物。
（付記１０２）
ナノ粒子が、それらの周囲の溶液のpHを約4から約7.4まで変化させたとき、700倍と1100倍の間で増加した体積変化を示す付記101に記載の組成物。
（付記１０３）
付記97から100のいずれかに記載の複数のナノ粒子を含む組成物であって、シグナル分子をさらに含む組成物。
（付記１０４）
シグナル分子をさらに含む付記101又は102に記載の組成物。
（付記１０５）
シグナル分子が、有機部分によりキレート化された金属であり、部分がナノ粒子に共有結合されている付記103又は104に記載の組成物。
（付記１０６）
有機部分が、第一のポリマーに共有結合している付記105に記載の組成物。
（付記１０７）
金属が、核磁気共鳴映像法において信号を提供するように選択され、多糖のモノマー単位に対するメタクリル酸のアルキルアミノアルキルエステルのモル比が0.5と5の間である付記106に記載の組成物。
（付記１０８）
多糖のモノマー単位に対するメタクリル酸のアルキルアミノアルキルエステルのモル比が0.5と2の間である付記107に記載の組成物。
（付記１０９）
付記97から100のいずれかに記載の複数のナノ粒子を含む組成物であって、薬学的に活性な薬剤をさらに含む組成物。
（付記１１０）
薬剤が、ナノ粒子に吸着されている付記109に記載の組成物。