【手続補正書】
【提出日】平成28年6月15日(2016.6.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
操作した、生きている、三次元の結合組織構成物であって、前記構成物は、
生きている、三次元の結合組織構成物を提供するために互いに凝集した、結合組織細胞を含み；ここで、前記構成物は、使用時に予め形成されたスキャフォールドがほぼない、ことを特徴とする、操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項２】
前記構成物が、神経支配されていないことを特徴とする、請求項１に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項３】
結合組織細胞が、インビトロで多能性細胞に由来する結合組織細胞を含むことを特徴とする、請求項１または２に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項４】
（ａ）多能性細胞が、組織特異的な前駆体、間葉系幹／間質細胞、人工多能性幹細胞、および胚性幹細胞の１つ以上を含む；
（ｂ）多能性細胞が、哺乳動物の脂肪組織に由来する；
（ｃ）多能性細胞が、哺乳動物の骨髄に由来する；
（ｄ）多能性細胞が、非脂肪の、非骨髄組織源に由来する；
（ｅ）多能性細胞が、前記構成物の成形前に、１つ以上の分化シグナルにさらされた；
（ｆ）多能性細胞が、前記構成物の成形中に、１つ以上の分化シグナルにさらされた；または
（ｇ）多能性細胞が、前記構成物の成形後に、１つ以上の分化シグナルにさらされた、ことを特徴とする、請求項３に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項５】
前記構成物が、バイオプリントされたことを特徴とする、請求項１乃至４のいずれか１項に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項６】
押出化合物をさらに含み、該押出化合物が、バイオプリンティングに対する細胞の適合性を改善することを特徴とする、請求項５に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項７】
結合組織が、骨、軟骨、腱、および靭帯から成る群から選択されることを特徴とする、請求項１乃至６のいずれか１項に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項８】
以下の細胞タイプ：血管細胞、内皮細胞、上皮細胞、線維芽細胞、周細胞、幹／前駆細胞、免疫細胞、の１つ以上をさらに含むことを特徴とする、請求項１乃至７のいずれか１項に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項９】
細胞外マトリックスをさらに含むことを特徴とする、請求項８に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項１０】
実質的に、
（ａ）シート、パッチ、環、チューブ、立方体、多面体、または球体；または
（ｂ）インビボでの天然のヒト結合組織の形状または構造を模倣する形状、
の形態であることを特徴とする、請求項１乃至９のいずれか１項に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項１１】
損傷、疾患、または変性の部位での被験体における移植のための、請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項１２】
別々の補填体の１つ以上をさらに含み、各補填体が、生体適合材料を含み、ここで１つ以上の補填体は、凝集した細胞において間隙または空間を作り出すことを特徴とする、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項１３】
各補填体が、実質的に、細胞の移動および内方成長に抵抗することを特徴とする、請求項１２に記載の操作した、生きている、三次元の結合組織構成物。
【請求項１４】
操作した、生きている、三次元の結合組織構成物のアレイであって、
各構成物は、生きている、三次元の結合組織構成物を提供するために、多能性細胞を１つ以上の分化シグナルにさらす工程、を含むプロセスによって成形され；ここで各結合組織構成物は、使用時に予め形成されたスキャフォールドがほぼなく、培養中に維持されることを特徴とする、アレイ。
【請求項１５】
（ａ）各構成物が、神経支配されていない；
（ｂ）多能性細胞が、組織特異的な前駆体、間葉系幹／間質細胞、人工多能性幹細胞、および胚性幹細胞の１つ以上を含む；
（ｃ）多能性細胞が、哺乳動物の脂肪組織に由来する；
（ｄ）多能性細胞が、哺乳動物の骨髄に由来する；
（ｅ）多能性細胞が、非脂肪の、非骨髄組織源に由来する；
（ｆ）多能性細胞が、前記構成物の成形前に、１つ以上の分化シグナルにさらされた；
（ｇ）多能性細胞が、前記構成物の成形中に、１つ以上の分化シグナルにさらされた；
（ｈ）多能性細胞が、前記構成物の成形後に、１つ以上の分化シグナルにさらされた；
（ｉ）各構成物が、バイオプリントされた；
（ｊ）結合組織が、骨、軟骨、腱、および靭帯から成る群から選択される；または
（ｋ）１つ以上の結合組織構成物が、以下の細胞タイプ：内皮細胞、上皮細胞、線維芽細胞、幹／前駆細胞、周細胞、衛星細胞、または血管細胞、の１つ以上をさらに含む、
ことを特徴とする、請求項１４に記載のアレイ。
【請求項１６】
１つ以上の結合組織構成物が、細胞外マトリックスをさらに含むことを特徴とする、請求項１４または１５に記載のアレイ。
【請求項１７】
１つ以上の結合組織構成物が、複組織構成物であり、該複組織構成物が、
（ａ）１つ以上の結合組織；
（ｂ）結合組織および非結合組織；または 
（ｃ）骨組織および非結合組織，を含むことを特徴とする、請求項１４乃至１６のいずれか１項に記載のアレイ。
【請求項１８】
インビトロでのアッセイに使用するための、請求項１４乃至１７のいずれか１項に記載のアレイ。
【請求項１９】
創薬、薬物検査、毒性学的検査、疾患モデル、三次元の生物学研究、および細胞スクリーニング、の１つ以上における使用のための、請求項１８に記載のアレイ。
【請求項２０】
１つ以上の分化シグナルが、機械的シグナル、生体力学的シグナル、可溶性シグナル、または物理的シグナル、あるいはそれらの組み合わせを含むことを特徴とする、請求項１４乃至１９のいずれか１項に記載のアレイ。
【請求項２１】
１つ以上の結合組織構成物が、１つ以上の別々の補填体をさらに含み、各補填体が、生体適合材料を含み、ここで１つ以上の補填体は、凝集した細胞において間隙または空間を作り出すことを特徴とする、請求項１４乃至２０のいずれか１項に記載のアレイ。
【請求項２２】
各補填体が、実質的に、細胞の移動および内方成長に抵抗することを特徴とする、請求項２１に記載のアレイ。
【請求項２３】
生きている、三次元の結合組織構成物を成形するための方法であって、該方法は、
支持体上に堆積され、１つ以上の分化シグナルにさらされた多能性細胞を含む、バイオインクをインキュベートする工程であって、それによって、バイオインクが、凝集することができ、生きている、三次元の結合組織構成物を形成することができる工程を含み、ここで、前記インキュベートする工程は、約１時間から約３０日間の期間を有することを特徴とする、方法。
【請求項２４】
（ａ）多能性細胞が、間葉系幹／間質細胞、人工多能性幹細胞、および胚性幹細胞の１つ以上を含む；
（ｂ）多能性細胞が、哺乳動物の脂肪組織に由来する；
（ｃ）多能性細胞が、哺乳動物の骨髄に由来する；
（ｄ）多能性細胞が、非脂肪の、非骨髄組織源に由来する；
（ｅ）結合組織細胞が、バイオインクを支持体上に堆積させる約１−２１日前とバイオインクを支持体上に堆積させた約１−２１日後との間の１つ以上の時間間隔で、１つ以上の分化シグナルにさらされる；
（ｆ）バイオインクが、バイオプリンティングによって堆積される；
（ｇ）前記構成物が、バイオプリンティング使用時に、任意の予め形成されたスキャフォールドがほぼない；
（ｈ）前記構成物が、神経支配されていない；
（ｉ）結合組織が、骨、軟骨、腱、および靭帯から成る群から選択される；
（ｊ）バイオインクが、以下の細胞タイプ：血管細胞、内皮細胞、上皮細胞、線維芽細胞、周細胞、幹／前駆細胞、免疫細胞、の１つ以上をさらに含む；
（ｋ）バイオインクが、押出化合物をさらに含む；または
（ｌ）１つ以上の分化シグナルが、機械的シグナル、生体力学的シグナル、可溶性シグナル、または物理的シグナル、あるいはそれらの組み合わせを含む、
ことを特徴とする、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
バイオインクが、細胞外マトリックスをさらに含むことを特徴とする、請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項２６】
１つ以上の別々の補填体を堆積させる工程をさらに含み、各補填体が、生体適合性材料を含み、ここで１つ以上の補填体は、凝集した細胞において間隙または空間を作り出すことを特徴とする、請求項２３乃至２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
各補填体が、実質的に、細胞の移動および内方成長に抵抗することを特徴とする、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
複数の、生きている、三次元の結合組織構成物を、生体適合性の表面上に又はその中に空間的に閉じ込めることによって、複数の、生きている、三次元の結合組織構成物をアレイへと構築する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項２３乃至２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記構成物が、損傷、疾患、または変性の部位での被験体における移植に適していることを特徴とする、請求項２３乃至２８のいずれか１項に記載の方法。