【手続補正書】
【提出日】平成27年11月12日(2015.11.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリアニオン性カルボマーポリマーに複合体化させたＥｎｖポリペプチドを含む、注射可能な免疫原性組成物。
【請求項２】
ポリアニオン性カルボマーポリマーに複合体化させたＥｎｖポリペプチドを含む、免疫原性組成物であって、前記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約０．５％（ｗ／ｖ）の間である、免疫原性組成物。
【請求項３】
前記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約０．５％（ｗ／ｖ）の間である、請求項１に記載の免疫原性組成物。
【請求項４】
前記ポリアニオン性ポリマーが、ＣＡＲＢＯＰＯＬ  ９７１Ｐ  ＮＦ（商標）、ＣＡＲＢＯＰＯＬ  ９７４Ｐ  ＮＦ（商標）、またはこれらの組合せを含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項５】
前記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１６０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１６０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項６】
前記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１４０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１４０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項７】
前記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１２０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１２０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項８】
前記Ｅｎｖポリペプチドが、ＨＩＶ  Ｅｎｖポリペプチドであり、そして前記組成物は、前記Ｅｎｖポリペプチドと異なるＨＩＶ亜型から選択される第２のＨＩＶ  Ｅｎｖポリペプチドをさらに含み、ここで前記Ｅｎｖポリペプチドおよび前記第２のＥｎｖポリペプチドが、ＨＩＶ亜型Ｂ株およびＨＩＶ亜型Ｃ株に由来するかまたはこの逆である、請求項１から７のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項９】
水中油エマルジョンであるアジュバントをさらに含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれか一項に記載の免疫原性組成物を生成させる方法であって、
（ａ）前記ポリアニオン性カルボマーポリマーを前記Ｅｎｖポリペプチドと、ｐＨが溶液中の前記ＥｎｖポリペプチドのｐＩを下回る条件下で接触させるステップと、
（ｂ）前記ポリアニオン性カルボマーポリマーを前記Ｅｎｖポリペプチドと共にインキュベートして、前記Ｅｎｖポリペプチドに、前記ポリアニオン性カルボマーポリマーとの複合体を形成させるステップと
を含む、方法。
【請求項１１】
前記ｐＨが、３〜５の間である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ｐＨが、３〜４の間である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
接触させるステップ（ａ）の後における前記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約０．５％（ｗ／ｖ）の間である、請求項１０から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
被験体において免疫反応を発生させる方法で使用するための、請求項１から９のいずれか一項に記載の免疫原性組成物、または請求項１０から１３のいずれか一項に記載の方法により作製される免疫原性組成物。
【請求項１５】
被験体において免疫反応を発生させる方法で使用するための、ポリアニオン性カルボマーポリマーに複合体化させたＥｎｖポリペプチドを含む、免疫原性組成物であって、前記免疫原性組成物は、筋内投与、粘膜内投与、鼻腔内投与、皮下投与、皮内投与、経皮投与、経口投与、または静脈内投与される、免疫原性組成物。
【請求項１６】
前記被験体が、ヒトである、請求項１４または１５に記載の免疫原性組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
本開示の別の態様は、Ｅｎｖポリペプチドを発現させるための遺伝子送達ベクターが、Ｅｎｖポリペプチドの発現を可能とする条件下において、その細胞に既にトランスフェクトされ、これにより、Ｅｎｖポリペプチドに対する免疫反応を発生させている被験体において、増強された免疫反応を発生させる方法であって、前記被験体に、前出の組成物態様に記載の免疫原性組成物を投与し、これにより、Ｅｎｖポリペプチドに対する免疫反応を増強するステップを含む方法を包含する。一実施形態では、免疫原性組成物が、筋内投与、粘膜内投与、鼻腔内投与、皮下投与、皮内投与、経皮投与、膣内投与、直腸内投与、経口投与、または静脈内投与される。前出の実施形態と組み合わせうる特定の実施形態では、被験体が、哺乳動物である。好ましくは、哺乳動物が、ヒトである。前出の実施形態と組み合わせうる特定の実施形態では、免疫反応が、体液性免疫反応を含む。前出の実施形態と組み合わせうる特定の実施形態では、免疫反応が、細胞性免疫反応を含む。
例えば、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
ポリアニオン性カルボマーポリマーとの複合体でのＥｎｖポリペプチドを含む免疫原性組成物。
（項目２）
低粘性のポリアニオン性カルボマーポリマーと共にＥｎｖポリペプチドを含む免疫原性組成物。
（項目３）
上記ポリアニオン性カルボマーポリマーがベンゼンを含まない、項目１または項目２に記載の免疫原性組成物。
（項目４）
上記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約２．０％（ｗ／ｖ）の間である、項目１から３のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目５）
上記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約０．５％（ｗ／ｖ）の間である、項目１から３のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目６）
上記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約０．２％（ｗ／ｖ）の間である、項目１から３のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目７）
上記ポリアニオン性ポリマーが、ＣＡＲＢＯＰＯＬ  ９７１Ｐ  ＮＦ（商標）、ＣＡＲＢＯＰＯＬ  ９７４Ｐ  ＮＦ（商標）、またはこれらの組合せを含む、項目１および３から６のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目８）
上記ポリアニオン性ポリマーが、ＣＡＲＢＯＰＯＬ  ９７１Ｐ  ＮＦ（商標）を含む、項目１から６のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目９）
上記Ｅｎｖポリペプチドが三量体である、項目１から８のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目１０）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、１種または複数の変異を含む、項目１から９のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目１１）
上記１種または複数の変異が、切断部位における、ｇｐ１４０ポリペプチドの、ｇｐ１２０ポリペプチドおよびｇｐ４１ポリペプチドへの切断を防止する変異、グリコシル化部位における変異、Ｖ１領域の欠失、Ｖ２領域の欠失、ならびに前出の組合せから選択される、項目１０に記載の免疫原性組成物。
（項目１２）
上記１種または複数の変異が、切断部位における、ｇｐ１４０ポリペプチドの、ｇｐ１２０ポリペプチドおよびｇｐ４１ポリペプチドへの切断を防止する変異、ならびにＶ２領域の欠失を含む、項目１１に記載の免疫原性組成物。
（項目１３）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１６０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１６０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、項目１から１２のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目１４）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１４０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１４０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、項目１から１２のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目１５）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１２０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１２０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、項目１から１２のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目１６）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、配列番号２２または２３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、項目１から８のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目１７）
上記Ｅｎｖポリペプチドと異なるＨＩＶ亜型から選択される第２のＥｎｖポリペプチドをさらに含む、項目１から１６のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目１８）
上記Ｅｎｖポリペプチドと同じＨＩＶ亜型の異なる株から選択される第２のＥｎｖポリペプチドをさらに含む、項目１から１６のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目１９）
上記第２のＥｎｖポリペプチドおよび上記Ｅｎｖポリペプチドが、上記ポリアニオン性カルボマーポリマーとの混合複合体中にある、項目１７または項目１８に記載の免疫原性組成物。
（項目２０）
上記第２のＥｎｖポリペプチドが、第２のポリアニオン性カルボマーポリマーとの別個の複合体中にある、項目１７または項目１８に記載の免疫原性組成物。
（項目２１）
上記ポリアニオン性カルボマーポリマーと上記第２のポリアニオン性カルボマーポリマーとが、同じ種類のポリマーである、項目２０に記載の免疫原性組成物。
（項目２２）
上記Ｅｎｖポリペプチドおよび上記第２のＥｎｖポリペプチドが、ＨＩＶ亜型Ｂ株およびＨＩＶ亜型Ｃ株に由来するかまたはこの逆である、項目１７から２１のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目２３）
１種または複数のさらなるＨＩＶポリペプチドをさらに含む、項目１から２２のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目２４）
上記１種または複数のさらなるＨＩＶポリペプチドが、Ｇａｇポリペプチド、Ｎｅｆポリペプチド、Ｐｒｏｔポリペプチド、Ｔａｔポリペプチド、Ｒｅｖポリペプチド、Ｖｉｆポリペプチド、Ｖｐｒポリペプチド、およびＶｐｕポリペプチドを含む群から選択される、項目２３に記載の免疫原性組成物。
（項目２５）
上記１種または複数のさらなるＨＩＶポリペプチドが、上記さらなるＨＩＶポリペプチドの、免疫反応を発生させる能力に悪影響を及ぼさずに、上記ポリペプチドの活性を低減または消失させる変異を含む、項目２３または項目２４に記載の免疫原性組成物。
（項目２６）
アジュバントをさらに含む、項目１から２５のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
（項目２７）
上記アジュバントが、水中油エマルジョンである、項目２６に記載の免疫原性組成物。
（項目２８）
上記水中油エマルジョンが、スクアレンを含むサブミクロン処方物である、項目２７に記載の免疫原性組成物。
（項目２９）
項目１および３から２８のいずれか一項に記載の免疫原性組成物を生成させる方法であって、
（ａ）上記ポリアニオン性カルボマーポリマーを上記Ｅｎｖポリペプチドと、ｐＨが溶液中の上記ＥｎｖポリペプチドのｐＩを下回る条件下で接触させるステップと、
（ｂ）上記ポリアニオン性カルボマーポリマーを上記Ｅｎｖポリペプチドと共にインキュベートして、上記Ｅｎｖポリペプチドに、上記ポリアニオン性カルボマーポリマーとの複合体を形成させるステップと
を含む、方法。
（項目３０）
上記ｐＨが、３〜６の間である、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
上記ｐＨが、３〜５の間である、項目２９に記載の方法。
（項目３２）
上記ｐＨが、３〜４の間である、項目２９に記載の方法。
（項目３３）
接触させるステップ（ａ）の後における上記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約２．０％（ｗ／ｖ）の間である、項目２９から３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
接触させるステップ（ａ）の後における上記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約０．５％（ｗ／ｖ）の間である、項目２９から３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
接触させるステップ（ａ）の後における上記ポリアニオン性カルボマーポリマーの濃度が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約０．２％（ｗ／ｖ）の間である、項目２９から３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３６）
上記ポリアニオン性カルボマーポリマーがベンゼンを含まない、項目２９から３５のいずれか一項に記載の方法。
（項目３７）
上記ポリアニオン性ポリマーが、ＣＡＲＢＯＰＯＬ  ９７１Ｐ  ＮＦ（商標）、ＣＡＲＢＯＰＯＬ  ９７４Ｐ  ＮＦ（商標）、またはこれらの組合せを含む、項目２９から３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目３８）
上記ポリアニオン性ポリマーが、ＣＡＲＢＯＰＯＬ  ９７１Ｐ  ＮＦ（商標）を含む、項目２９から３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目３９）
上記Ｅｎｖポリペプチドが三量体である、項目２９から３８のいずれか一項に記載の方法。
（項目４０）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、１種または複数の変異を含む、項目２９から３９のいずれか一項に記載の方法。
（項目４１）
上記１種または複数の変異が、切断部位における、ｇｐ１４０ポリペプチドの、ｇｐ１２０ポリペプチドおよびｇｐ４１ポリペプチドへの切断を防止する変異、グリコシル化部位における変異、Ｖ１領域の欠失、Ｖ２領域の欠失、ならびに前出の組合せから選択される、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
上記１種または複数の変異が、切断部位における、ｇｐ１４０ポリペプチドの、ｇｐ１２０ポリペプチドおよびｇｐ４１ポリペプチドへの切断を防止する変異、ならびにＶ２領域の欠失を含む、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１６０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１６０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、項目２９から４２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４４）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１４０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１４０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、項目２９から４２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４５）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、ｇｐ１２０  Ｅｎｖポリペプチドまたはｇｐ１２０  Ｅｎｖポリペプチドに由来するポリペプチドを含む、項目２９から４２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
上記Ｅｎｖポリペプチドが、配列番号２２または２３に対する少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、項目２９に記載の方法。
（項目４７）
上記Ｅｎｖポリペプチドと異なるＨＩＶ亜型から選択される第２のＥｎｖポリペプチドを上記溶液に添加するステップをさらに含む、項目２９から４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
上記第２のＥｎｖポリペプチドを、上記Ｅｎｖポリペプチドを伴う上記ポリアニオン性カルボマーポリマーと共にインキュベートして、上記Ｅｎｖポリペプチドと上記第２のＥｎｖポリペプチドとが、上記ポリアニオン性カルボマーポリマーとの複合体を同時に形成することを可能とする、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
上記第２のＥｎｖポリペプチドが、第２のポリアニオン性カルボマーポリマーとの別個の複合体中にある、項目４７に記載の方法。
（項目５０）
上記ポリアニオン性カルボマーポリマーと上記第２のポリアニオン性カルボマーポリマーとが、同じ種類のポリマーである、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
上記Ｅｎｖポリペプチドおよび上記第２のＥｎｖポリペプチドが、ＨＩＶ亜型Ｂ株およびＨＩＶ亜型Ｃ株に由来するかまたはこの逆である、項目４７から５０のいずれか一項に記載の方法。
（項目５２）
１種または複数のさらなるＨＩＶポリペプチドを添加するステップをさらに含む、項目２９から５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
上記１種または複数のさらなるＨＩＶポリペプチドが、Ｇａｇポリペプチド、Ｎｅｆポリペプチド、Ｐｒｏｔポリペプチド、Ｔａｔポリペプチド、Ｒｅｖポリペプチド、Ｖｉｆポリペプチド、Ｖｐｒポリペプチド、およびＶｐｕポリペプチドを含む群から選択される、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
上記１種または複数のさらなるＨＩＶポリペプチドが、上記さらなるＨＩＶポリペプチドの、免疫反応を発生させる能力に悪影響を及ぼさずに、上記ポリペプチドの活性を低減または消失させる変異を含む、項目５２または項目５３に記載の方法。
（項目５５）
アジュバントを上記溶液に添加するステップをさらに含む、項目２９から５４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
上記アジュバントが、水中油エマルジョンである、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
上記水中油エマルジョンが、スクアレンを含むサブミクロン処方物である、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
被験体において免疫反応を発生させる方法であって、上記被験体に、項目１から２８のいずれか一項に記載の免疫原性組成物、または項目２９から５７のいずれか一項に記載の方法により作製される免疫原性組成物を投与し、これにより、上記Ｅｎｖポリペプチドに対する上記免疫反応を発生させるステップを含む、方法。
（項目５９）
上記免疫原性組成物が、筋内投与、粘膜内投与、鼻腔内投与、皮下投与、皮内投与、経皮投与、膣内投与、直腸内投与、経口投与、または静脈内投与される、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
上記被験体が、哺乳動物である、項目５８または項目５９に記載の方法。
（項目６１）
上記哺乳動物が、ヒトである、項目５８から６０のいずれか一項に記載の方法。
（項目６２）
上記免疫反応が、体液性免疫反応を含む、項目５８から６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目６３）
上記免疫反応が、細胞性免疫反応を含む、項目５８から６２のいずれか一項に記載の方法。
（項目６４）
被験体において増強された免疫反応を発生させる方法であって、
（ａ）上記被験体の細胞に、Ｅｎｖポリペプチドの発現を可能とする条件下において、上記Ｅｎｖポリペプチドを発現させるための遺伝子送達ベクターをトランスフェクトし、これにより、上記Ｅｎｖポリペプチドに対する免疫反応を発生させるステップと、
（ｂ）上記被験体に、項目１から２８のいずれか一項に記載の免疫原性組成物、または項目２９から５７のいずれか一項に記載の方法により作製される免疫原性組成物を投与し、これにより、上記Ｅｎｖポリペプチドに対する上記免疫反応を増強するステップとを含む、方法。
（項目６５）
被験体において増強された免疫反応を発生させる方法であって、上記被験体は、Ｅｎｖポリペプチドを発現させるための遺伝子送達ベクターが、上記Ｅｎｖポリペプチドの発現を可能とする条件下において、上記被験体の細胞に既にトランスフェクトされ、これにより、上記Ｅｎｖポリペプチドに対する免疫反応を発生させており、上記方法は、上記被験体に、項目１から２８のいずれか一項に記載の免疫原性組成物、または項目２９から５７のいずれか一項に記載の方法により作製される免疫原性組成物を投与し、これにより、上記Ｅｎｖポリペプチドに対する上記免疫反応を増強するステップを含む、方法。
（項目６６）
上記免疫原性組成物が、筋内投与、粘膜内投与、鼻腔内投与、皮下投与、皮内投与、経皮投与、膣内投与、直腸内投与、経口投与、または静脈内投与される、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
上記被験体が、哺乳動物である、項目６５または項目６６に記載の方法。
（項目６８）
上記哺乳動物が、ヒトである、項目６５から６７のいずれか一項に記載の方法。
（項目６９）
上記免疫反応が、体液性免疫反応を含む、項目６５から６８のいずれか一項に記載の方法。
（項目７０）
上記免疫反応が、細胞性免疫反応を含む、項目６５から６９のいずれか一項に記載の方法。