【手続補正書】
【提出日】平成28年5月10日(2016.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌に関して対象をスクリーニングするためのデータを収集する方法であって、対象由来の生物学的試料中で循環癌関連マクロファージ様細胞（ＣＡＭＬ）を検出するステップを含み、
前記生物学的試料が、末梢血、血液及びリンパ節からなる群から選択される１つ又は複数であり、ＣＡＭＬが２０ミクロン〜３００ミクロンのサイズである、方法。
【請求項２】
ＣＡＭＬが前記生物学的試料中で検出される場合、前記対象が、癌腫又は固形腫瘍を潜在的に有すると特定される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＣＡＭＬが前記生物学的試料中で検出される場合、前記対象が、癌腫又は固形腫瘍を有すると特定される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記生物学的試料中で循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）を検出するステップをさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
対象において癌を診断するためのデータを収集する方法であって、対象由来の生物学的試料中でＣＡＭＬを検出するステップを含み、ＣＡＭＬが前記生物学的試料中で検出される場合、前記対象が癌であると診断され、
前記生物学的試料が、末梢血、血液及びリンパ節からなる群から選択される１つ又は複数であり、ＣＡＭＬが２０ミクロン〜３００ミクロンのサイズである、方法。
【請求項６】
前記生物学的試料中でＣＴＣを検出するステップをさらに含み、ＣＡＭＬ及びＣＴＣが前記生物学的試料中で検出される場合、前記対象が癌であると診断される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
対象において癌の再発を検出するためのデータを収集する方法であって、癌に関してすでに治療した対象由来の生物学的試料中でＣＡＭＬを検出するステップを含み、ＣＡＭＬが前記生物学的試料中で検出される場合、癌の再発が検出され、
前記生物学的試料が、末梢血、血液及びリンパ節からなる群から選択される１つ又は複数であり、ＣＡＭＬが２０ミクロン〜３００ミクロンのサイズである、方法。
【請求項８】
前記生物学的試料中でＣＴＣを検出するステップをさらに含み、ＣＡＭＬ及びＣＴＣが前記生物学的試料中で検出される場合、癌の再発が検出される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
対象において癌の診断を確認するためのデータを収集する方法であって、癌であると診断された対象由来の生物学的試料中でＣＡＭＬを検出するステップを含み、ＣＡＭＬが前記生物学的試料中で検出される場合、癌の診断が前記対象において確認され、
前記生物学的試料が、末梢血、血液及びリンパ節からなる群から選択される１つ又は複数であり、ＣＡＭＬが２０ミクロン〜３００ミクロンのサイズである、方法。
【請求項１０】
前記生物学的試料中でＣＴＣを検出するステップをさらに含み、ＣＡＭＬ及びＣＴＣが前記生物学的試料中で検出される場合、癌の診断が前記対象において確認される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
初期の癌診断が、マンモグラフィー、ＰＳＡ試験又はＣＡ１２５の存在を使用するスクリーニングによるものであった、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記対象が、癌を有する疑いがある、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ＣＡＭＬが、サイズ排除方法、赤血球溶解、ＦＩＣＯＬＬ、マイクロ流体チップ、及びフローサイトメトリー、又はそれらの組合せからなる群から選択される１つ又は複数の手段を使用して検出される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記サイズ排除方法が、７〜８ミクロンの孔サイズを有するマイクロフィルターの使用を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記マイクロフィルターが、精密孔配置及び均一な孔分布を有する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＣＡＭＬ及びＣＴＣが、７〜８ミクロンの孔サイズを有するマイクロフィルターを使用して同時に検出される、請求項４、６、８又は１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記マイクロフィルターが、精密孔配置及び均一な孔分布を有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ＣＡＭＬが、物理的サイズベースの選別、流体力学的サイズベースの選別、グループ分け、捕捉、免疫捕獲、大細胞の濃縮、又はサイズに基づく小細胞の排除に基づいて、マイクロ流体チップを使用して検出される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
ＣＡＭＬが、低圧精密濾過アッセイを使用して検出される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記癌が固形腫瘍である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記癌が、ステージＩ、ステージＩＩ、ステージＩＩＩ又はステージＩＶの癌である、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記癌が上皮細胞癌である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、肺癌、膵臓癌又は大腸癌である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
癌治療の効力をモニタリングするためのデータを収集する方法であって、（ａ）癌治療前に、対象由来の生物学的試料中でＣＡＭＬの数を決定するステップと、（ｂ）（ａ）で決定したＣＡＭＬの前記数を、治療後の１つ又は複数の時点で同じ対象由来の類似する生物学的試料から決定したＣＡＭＬの数と比較するステップとを含み、前記生物学的試料が、末梢血、血液及びリンパ節からなる群から選択される１つ又は複数であり、ＣＡＭＬが２０ミクロン〜３００ミクロンのサイズである、方法。
【請求項２５】
ＣＡＭＬの前記数における変化が、治療効力の指標である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記変化が増加である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記変化が減少である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記癌治療が、化学療法又は放射線療法である、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
（ｃ）（ａ）の前記生物学的試料中でＣＴＣの数を決定するステップと、（ｄ）（ｃ）で決定したＣＴＣの前記数を（ｂ）の前記生物学的試料から決定したＣＴＣの数と比較するステップとをさらに含む、請求項２４〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
ＣＡＭＬの前記数が、サイズ排除方法、赤血球溶解、ＦＩＣＯＬＬ、マイクロ流体チップ、及びフローサイトメトリー、又はそれらの組合せからなる群から選択される１つ又は複数の手段を使用して決定される、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記サイズ排除方法が、７〜８ミクロンの孔サイズを有するマイクロフィルターの使用を含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記マイクロフィルターが、精密孔配置及び均一な孔分布を有する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ＣＡＭＬ及びＣＴＣの前記数が、７〜８ミクロンの孔サイズを有するマイクロフィルターを使用して同時に決定される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３４】
前記マイクロフィルターが、精密孔配置及び均一な孔分布を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
ＣＡＭＬの前記数が、物理的サイズベースの選別、流体力学的サイズベースの選別、グループ分け、捕捉、免疫捕獲、大細胞の濃縮、又はサイズに基づく小細胞の排除に基づいて、マイクロ流体チップを使用して決定される、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
ＣＡＭＬの前記数が、低圧精密濾過アッセイを使用して決定される、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記癌が固形腫瘍である、請求項２４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記癌が、ステージＩ、ステージＩＩ、ステージＩＩＩ又はステージＩＶの癌である、請求項２４〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記癌が上皮細胞癌である、請求項２４〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記癌が、乳癌、前立腺癌、肺癌、膵臓癌又は大腸癌である、請求項２４〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
以下の特徴：
（ａ）１４〜６４μｍのサイズを有する大異型核、
（ｂ）拡散し、又は空胞及び／若しくは摂取材料に付随するサイトケラチン８、１８及び１９のうちの１つ又は複数の発現、
（ｃ）２０ミクロン〜３００ミクロンの範囲の細胞サイズ、
（ｄ）紡錘形、オタマジャクシ形、円形、楕円形及び無定形からなる群から選択される形態学的形状、及び
（ｅ）ＣＤ４５陽性表現型
を有する単離循環癌関連マクロファージ様細胞（ＣＡＭＬ）。
【請求項４２】
以下のさらなる特徴：
（ｆ）ほぼ均一な分布を有する拡散性ＥｐＣＡＭの発現、
（ｇ）原発性腫瘍の１つ又は複数のマーカーの発現、
（ｈ）単球ＣＤ１１Ｃ及びＣＤ１４マーカーの発現、及び
（ｉ）内皮ＣＤ１４６、ＣＤ２０２ｂ及びＣＤ３１マーカーの発現
のうちの１つ又は複数を有する、請求項４１に記載の単離循環癌関連マクロファージ様細胞。
【請求項４３】
前記さらなる特徴のそれぞれを有する、請求項４２に記載の単離循環癌関連マクロファージ様細胞。
【請求項４４】
以下の特徴：
（ａ）癌様核、
（ｂ）線維状パターンを有するサイトケラチン８、１８及び１９のうちの１つ又は複数の発現、及び
（ｃ）ＣＤ４５陰性表現型
のうちの１つ又は複数を有する病理学的に規定可能な単離循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）。
【請求項４５】
以下の特徴：
（ａ）癌様核、
（ｂ）スポットの形態で断片化されているサイトケラチン８、１８及び１９のうちの１つ又は複数の発現、及び
（ｃ）ＣＤ４５陰性表現型
のうちの１つ又は複数を有する単離アポトーシス循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）。