【手続補正書】
【提出日】平成28年7月29日(2016.7.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号３４に記載されるアミノ酸配列を含む昆虫阻害ポリペプチドであって、前記昆虫阻害ポリペプチドは半翅目昆虫種に対する阻害活性を呈する、昆虫阻害ポリペプチド。
【請求項２】
前記半翅目昆虫種は、リグス（Ｌｙｇｕｓ）種、エムポアスカ（Ｅｍｐｏａｓｃａ）種、およびアムラスカ（Ａｍｒａｓｃａ）種から成る群から選択される、請求項１に記載の昆虫阻害ポリペプチド。
【請求項３】
前記半翅目昆虫種は、リグス・ヘスペルス（Ｌｙｇｕｓ  ｈｅｓｐｅｒｕｓ）、リグス・リネオラリス（Ｌｙｇｕｓ  ｌｉｎｅｏｌａｒｉｓ）、アムラスカ・デバスタンス（Ａｍｒａｓｃａ  ｄｅｖａｓｔａｎｓ）、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される、請求項２に記載の昆虫阻害ポリペプチド。
【請求項４】
配列番号２０１に記載される配列と９９％同一性であるヌクレオチド配列を含む、請求項１から３のいずれかに記載の昆虫阻害ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【請求項５】
前記ポリヌクレオチドは、配列番号２０１に記載される配列と１００％同一性である、請求項４に記載のポリヌクレオチド。
【請求項６】
アグロバクテリウム、リゾビウム、バチルス、エシェリキア、シュードモナス、およびサルモネラから成る群から選択される細菌宿主細胞、または植物宿主細胞である、請求項４または５に記載のポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
【請求項７】
前記細菌宿主細胞は、バチルス・チューリンゲンシスまたは大腸菌である、請求項６に記載の宿主細胞。
【請求項８】
配列番号３４に記載されるアミノ酸配列を含む昆虫阻害ポリペプチドをコードする配列番号２０１に記載される配列と９９％同一性であるポリヌクレオチドを含む、トランスジェニック植物またはその部分。
【請求項９】
前記ポリヌクレオチドは、配列番号２０１に記載されるヌクレオチド配列を含む、請求項８に記載のトランスジェニック植物またはその部分。
【請求項１０】
前記トランスジェニック植物は、アルファルファ、アーモンド、バナナ、オオムギ、マメ、ビート、ブロッコリ、キャベツ、アブラナ属、ナス（ｂｒｉｎｊａｌ）、ニンジン、キャッサバ、ヒマ、カリフラワー、セロリ、ヒヨコマメ、ハクサイ、セロリ、柑橘類、ココナツ、コーヒー、トウモロコシ、クローバ、綿、ウリ、キュウリ、ダグラスファー、ナス（ｅｇｇｐｌａｎｔ）、ユーカリ、亜麻、ニンニク、ブドウ、グアー、ホップ、リーキ、マメ類、レタス、テーダマツ、キビ、メロン、ネクタリン、ナッツ、オートムギ、オクラ、オリーブ、タマネギ、観賞植物、ヤシ、牧草、パパイヤ、エンドウ、モモ、ピーナッツ、コショウ、キマメ、マツ、ジャガイモ、ポプラ、カボチャ、ラジアータマツ、ダイコン、ナタネ、コメ、台木、ライムギ、ベニバナ、低木、ソルガム、サザンパイン、大豆、ホウレンソウ、スクオッシュ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、ヒマワリ、スイートコーン、モミジバフウ、サツマイモ、スイッチグラス、茶、タバコ、トマト、ライコムギ、芝草、スイカ、およびコムギから成る群から選択される、請求項８に記載のトランスジェニック植物またはその部分。
【請求項１１】
前記トランスジェニック植物またはその部分は綿植物である、請求項１０に記載のトランスジェニック植物またはその部分。
【請求項１２】
前記部分は、花粉、胚珠、種子、実、葉、花、茎、根、および細胞から成る群から選択される、請求項８に記載のトランスジェニック植物またはその部分。
【請求項１３】
請求項１に記載の昆虫阻害ポリペプチドまたは前記昆虫阻害ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、昆虫阻害組成物。
【請求項１４】
前記昆虫阻害ポリペプチドとは異なり、鱗翅目、鞘翅目、異翅目、または同翅目の１つ以上の有害生物種に対する活性を呈する少なくとも１つの昆虫阻害剤をさらに含む請求項１３に記載の昆虫阻害組成物であって、前記少なくとも１つの昆虫阻害剤は、昆虫阻害タンパク質、昆虫阻害ｄｓＲＮＡ分子、および昆虫阻害化学物質から成る群から選択される、昆虫阻害組成物。
【請求項１５】
半翅目の有害生物を制御する方法であって、前記半翅目の有害生物に阻害量の請求項１から３のいずれかに記載の昆虫阻害ポリペプチドを与えることを含む、方法。
【請求項１６】
前記与えることは、綿植物において前記昆虫阻害ポリペプチドを発現させることによる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
半翅目の有害生物を制御する方法であって、前記半翅目の有害生物を請求項８に記載のトランスジェニック植物またはその部分に曝露することを含み、前記トランスジェニック植物またはその部分は、半翅目阻害量の前記昆虫阻害ポリペプチドを発現する、方法。
【請求項１８】
請求項８に記載のトランスジェニック植物またはその部分から得られる商品産物であって、前記商品産物は、植物バイオマス、油、食物、動物飼料、粉、フレーク、ふすま、リント、および外皮から成る群から選択され、検出可能な量の前記昆虫阻害ポリペプチドを含む、商品産物。
【請求項１９】
植物を半翅目の有害生物の侵入に対して抵抗性にする方法であって、操作された半翅目の毒素タンパク質（ｅＨＴＰ）をコードする配列番号２０１に記載されるヌクレオチド配列を含む組み換えポリヌクレオチドを植物細胞に導入するステップと、前記植物細胞から、昆虫阻害量のｅＨＴＰを発現するトランスジェニック植物を再生するステップと、半翅目の有害生物の侵入抵抗を前記トランスジェニック植物の特性として実証するステップと、を含み、
前記植物は、任意に、
ａ．双子葉植物および単子葉植物から成る群から選択されるか、
ｂ．アルファルファ、アーモンド、バナナ、オオムギ、マメ、ビート、ブロッコリ、キャベツ、アブラナ属、ナス（ｂｒｉｎｊａｌ）、ニンジン、キャッサバ、ヒマ、カリフラワー、セロリ、ヒヨコマメ、ハクサイ、セロリ、柑橘類、ココナツ、コーヒー、トウモロコシ、クローバ、綿、ウリ、キュウリ、ダグラスファー、ナス（ｅｇｇｐｌａｎｔ）、ユーカリ、亜麻、ニンニク、ブドウ、グアー、ホップ、リーキ、マメ類、レタス、テーダマツ、キビ、メロン、ネクタリン、ナッツ、オートムギ、オクラ、オリーブ、タマネギ、観賞植物、ヤシ、牧草、パパイヤ、エンドウ、モモ、ピーナッツ、コショウ、キマメ、マツ、ジャガイモ、ポプラ、カボチャ、ラジアータマツ、ダイコン、ナタネ、コメ、台木、ライムギ、ベニバナ、低木、ソルガム、サザンパイン、大豆、ホウレンソウ、スクオッシュ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、ヒマワリ、スイートコーン、モミジバフウ、サツマイモ、スイッチグラス、茶、タバコ、トマト、ライコムギ、芝草、スイカ、およびコムギから成る群から選択されるか、または
ｃ．前記ｅＨＴＰとは異なる昆虫阻害タンパク質、昆虫阻害ｄｓＲＮＡ分子、および昆虫阻害化学物質から成る群から選択される補助的薬剤を含み、
前記ｅＨＴＰとは異なる前記昆虫阻害タンパク質は、Ｃｒｙ１毒素、Ｃｒｙ２毒素、Ｃｒｙ５毒素、Ｃｒｙ７毒素、Ｃｒｙ９毒素、およびＶＩＰ３毒素から成る群から選択され、
前記昆虫阻害化学物質は、ピレトリンおよび合成ピレスロイド；オキサジアジン（ｏｘａｄｉｚｉｎｅ）誘導体；クロロニコチニル；ニトログアニジン誘導体；トリアゾール；有機リン酸；ピロール；ピラゾール；フェニルピラゾール；ジアシルヒドラジン；生物学的／発酵産物；およびカルバメートから成る群から選択される、方法。
【請求項２０】
請求項１９に記載の方法であって、前記半翅目昆虫有害生物は、植物虫（カスミカメムシ科を含む）、セミ科からのセミ、ヨコバイ（例えば、エンポアスシニ（Ｅｍｐｏａｓｃｉｎｉ）族を含むオオヨコバイ科からのエムポアスカ（Ｅｍｐｏａｓｃａ）種、アムラスカ（Ａｍｒａｓｃａ）種、例えば、アムラスカ・ビグッチュラ（Ａｍｒａｓｃａ  ｂｉｇｕｔｔｕｌａ）、アムラスカ・デバスタンス、アウストロアスカ・ヴィリジグリセア（Ａｕｓｔｒｏａｓｃａ  ｖｉｒｉｄｉｇｒｉｓｅａ）、アシンメトラスカ・デセデンス（Ａｓｙｍｍｅｔｒａｓｃａ  ｄｅｃｅｄｅｎｓ）、エムポアスカ・デシピエンス（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｄｅｃｉｐｉｅｎｓ）、エムポアスカ・ディスティングエンダ（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｄｉｓｔｉｎｇｕｅｎｄａ）、エムポアスカ・ドリチ（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｄｏｌｉｃｈｉ）、エムポアスカ・ファバエ（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｆａｂａｅ）、エムポアスカ・ケリ（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｋｅｒｒｉ）、エムポアスカ・クラエメリ（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｋｒａｅｍｅｒｉ）、エムポアスカ・オヌキイ（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｏｎｕｋｉｉ）、エムポアスカ・サカイイ（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｓａｋａｉｉ）、エムポアスカ・スミチ（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｓｍｉｔｈｉ）、エムポアスカ・ビティス（Ｅｍｐｏａｓｃａ  ｖｉｔｉｓ）、ヤコビアスカ・リビカ（Ｊａｃｏｂｉａｓｃａ  ｌｙｂｉｃａ）、ソナサスカ・ソラナ（Ｓｏｎａｓａｓｃａ  Ｓｏｌａｎａ）、エリスロニューリニ（Ｅｒｙｔｈｒｏｎｅｕｒｉｎｉ）族、例えば、エムポアスカナラ・ナグプレンシス（Ｅｍｐｏａｓｃａｎａｒａ  ｎａｇｐｕｒｅｎｓｉｓ）、タイアアサメンシス（Ｔｈａｉａａｓｓａｍｅｎｓｉｓ）、ジグニディア・クユミ（Ｚｙｇｎｉｄｉａ  ｑｕｙｕｍｉ）、ニルバニアエ（Ｎｉｒｖａｎｉａｅ）族、ソフォニア・ルフォファスシア（Ｓｏｐｈｏｎｉａ  ｒｕｆｏｆａｓｃｉａ）、ウンカ科、例えば、ニラパルヴァータ・ルーゲンス（Ｎｉｌａｐｏａｒｖａｔａ  ｌｕｇｅｎｓ）、ソガテラ・フルシフェラ（Ｓｏｇａｔｅｌｌａ  ｆｕｒｃｉｆｅｒａ）、サッポロトビウンカ（Ｕｎｋａｎｏｄｅｓ  ｓａｐｐｏｒｏｎｕｓ）、およびアシブトウンカ科、例えば、ゾフィウマ・ロブラタ（Ｚｏｐｈｉｕｍａ  ｌｏｂｕｌａｔａ））、ウンカ（ビワハゴロモ上科およびウンカ科から）、ツノゼミ（ツノゼミ科から）、キジラミ（キジラミ科から）、コナジラミ（コナジラミ科から）、アブラムシ（アブラムシ科から）、ネアブラムシ（ネアブラムシ科から）、コナカイガラムシ（コナカイガラムシ科から）、カイガラムシ（カタカイガラムシ科、マルカイガラムシ科、およびワタフキカイガラムシ科から）、グンバイムシ（グンバイムシ科から）、カメムシ（カメムシ科から）、ナガカメムシ（例えば、ブリッサス（Ｂｌｉｓｓｕｓ）種、およびナガカメムシ科からの他の種子虫）、アワフキムシ（アワフキムシ科から）、ヘリカメムシ（ヘリカメムシ科から）、ツツガムシおよびアカホシカメムシ（ホシカメムシ科から）、アクロステルヌム・ヒラレ（Ａｃｒｏｓｔｅｒｎｕｍ  ｈｉｌａｒｅ）（アオカメムシ）、アナサ・トリスティス（Ａｎａｓａ  ｔｒｉｓｔｉｓ）（ヘリカメムシ）、ブリッサス・ロイコプテルス・ロイコプテルス（Ｂｌｉｓｓｕｓ  ｌｅｕｃｏｐｔｅｒｕｓ  ｌｅｕｃｏｐｔｅｒｕｓ）（ヒメコバネナガカメムシ）、コリスカ・ゴシピイ（Ｃｏｒｙｔｈｕｃａ  ｇｏｓｓｙｐｉｉ）（コットンレースバグ（ｃｏｔｔｏｎ  ｌａｃｅ  ｂｕｇ））、シルトペルティス・モデスタ（Ｃｙｒｔｏｐｅｌｔｉｓ  ｍｏｄｅｓｔａ）（トマトバグ（ｔｏｍａｔｏ  ｂｕｇ）、ディスデルクス・スツレルス（Ｄｙｓｄｅｒｃｕｓ  ｓｕｔｕｒｅｌｌｕｓ）（アカホシカメムシ）、ユースキスツス・セルバス（Ｅｕｓｃｈｉｓｔｕｓ  ｓｅｒｖｕｓ）（ブラウンスティンクバグ（ｂｒｏｗｎ  ｓｔｉｎｋ  ｂｕｇ））、ユースキスツス・バリオラリウス（Ｅｕｓｃｈｉｓｔｕｓ  ｖａｒｉｏｌａｒｉｕｓ）（ワンスポッテッドスティンクバグ（ｏｎｅ−ｓｐｏｔｔｅｄ  ｓｔｉｎｋ  ｂｕｇ））、グラプトステツス（Ｇｒａｐｔｏｓｔｅｔｈｕｓ）種（種子虫の複合）、レプトグロッスス・コルクルス（Ｌｅｐｔｏｇｌｏｓｓｕｓ  ｃｏｒｃｕｌｕｓ（リーフ・フッテッドパインシードバグ（ｌｅａｆ−ｆｏｏｔｅｄ  ｐｉｎｅ  ｓｅｅｄ  ｂｕｇ））、リグス・リネオラリス（ミドリメクラガメ）、リグス・ヘスペルス（ウエスタンターニッシュプラントバグ（ｗｅｓｔｅｒｎ  ｔａｒｎｉｓｈ  ｐｌａｎｔ  ｂｕｇ））、ネザラ・ビリヅラ（Ｎｅｚａｒａ  ｖｉｒｉｄｕｌａ）（ミナミアオカメムシ）、オエバルス・プグナクス（Ｏｅｂａｌｕｓ  ｐｕｇｎａｘ）（イネカメムシ）、オンコペルツス・ファスシアツス（Ｏｎｃｏｐｅｌｔｕｓ  ｆａｓｃｉａｔｕｓ）（ラージミルクウィードバグ（ｌａｒｇｅ  ｍｉｌｋｗｅｅｄ  ｂｕｇ））、およびシューダトモスセリス・セリアツス（Ｐｓｅｕｄａｔｏｍｏｓｃｅｌｉｓ  ｓｅｒｉａｔｕｓ）（ワタノミハムシ）から成る群から選択される、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
検出可能な量のｅＨＴＰをコードする組み換えポリヌクレオチド、またはその任意の特徴的な半翅目制御部分を含有する、加工された植物産物もまた、提供される。かかる加工された産物としては、植物バイオマス、油、食物、動物飼料、粉、フレーク、ふすま、リント、外皮、および加工された種子が挙げられるが、これらに限定されない。加工された産物は、再生不可能であってもよい。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
種子または果実もしくは野菜以外の植物産物は、商取引を経る、およびトランスジェニック植物もしくはトランスジェニック植物部分に由来する、商品または他の産物として意図され、該商品または他の産物は、本発明のｅＨＴＰに対応する、および商品または他の産物が得られた、植物または植物組織もしくは部分において産生または維持される、ヌクレオチドセグメント、ＲＮＡ、もしくはタンパク質を検出することによって、商取引を通じて追跡することができる。商取引のかかる商品または他の産物としては、植物部分、バイオマス、油、食物、糖、動物飼料、粉、フレーク、ふすま、リント、加工された種子、および種子が挙げられるが、これらに限定されない。植物部分としては、植物種子、実、葉、花、茎、花粉、または根が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施形態において、植物部分は、当該種子、実、葉、花、茎、花粉、または根の再生不可能な部分である。ｅＨＴＰを含有する綿および亜麻植物実、およびこれらの再生不可能な部分もまた、提供される。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
検出可能な量のｅＨＴＰをコードする組み換えポリヌクレオチド、ｅＨＴＰ、もしくはその昆虫阻害断片、またはその任意の特徴的な部分を含有する、加工された植物産物が提供される。加工された産物は、植物バイオマス、油、食物、動物飼料、粉、フレーク、ふすま、リント、外皮、および加工された種子から成る群から選択される。