【手続補正書】
【提出日】平成28年2月12日(2016.2.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）第１のＶＨ（ＶＨ１）ドメイン成分及び第２のＶＨ（ＶＨ２）ドメイン成分、
（ｂ）ヘテロ二量体化（ＨＤ）テザー成分、及び
（ｃ）一又は複数の重鎖定常ドメイン成分
を含み、
前記一又は複数の重鎖定常ドメインが、第１のＣＨ２（ＣＨ２１）ドメイン、第１のＣＨ３（ＣＨ３１）ドメイン、第２のＣＨ２（ＣＨ２２）ドメイン、及び第２のＣＨ３（ＣＨ３２）ドメインから選択され、
前記成分が、Ｎ末端からＣ末端の方向に、ＶＨ１−任意選択のＣＨ２１−任意選択のＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＨ２−任意選択のＣＨ２２−任意選択のＣＨ３２の通りに、互いに相対的に配置される、
単一ポリペプチドを含む単鎖抗体。
【請求項２】
前記ポリペプチドが、
（ａ）前記ＶＨ１とＣＨ２１ドメインの間に配置された第１のヒンジ（ヒンジ１）ドメイン、
（ｂ）前記ＶＨ２とＣＨ２２ドメインの間に配置された第２のヒンジ（ヒンジ２）ドメイン、又は
（ｃ）第１のヒンジ（ヒンジ１）ドメイン及び第２のヒンジ（ヒンジ２）ドメインの両方
を更に含み、
前記ドメインが、Ｎ末端からＣ末端の方向に、ＶＨ１−任意選択のヒンジ１−任意選択のＣＨ２１−任意選択のＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＨ２−任意選択のヒンジ２−任意選択のＣＨ２２−任意選択のＣＨ３２の通り、互いに相対的に配置される、請求項１に記載の単鎖抗体。
【請求項３】
前記ポリペプチドが、第１のＣＨ１（ＣＨ１１）ドメイン又は第２のＣＨ１（ＣＨ１２）ドメインあるいは両方を含み、
前記ポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端の方向に、ＶＨ１−任意選択のＣＨ１１−任意選択のヒンジ１−任意選択のＣＨ２１−任意選択のＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＨ２−任意選択のＣＨ１２−任意選択のヒンジ２−任意選択のＣＨ２２−任意選択のＣＨ３２の通り、互いに相対的に配置されたドメインを含む、請求項１又は２に記載の単鎖抗体。
【請求項４】
前記ポリペプチドが、第１のＶＬ（ＶＬ１）ドメイン又は第２のＶＬ（ＶＬ２）ドメイン又は両方を更に含み、前記ポリペプチドがＶＬ１ドメイン及びＶＬ２ドメインを含み、前記ＶＬ１ドメインが第１のテザー（ＣＬＨテザー１）により前記ＶＨ１ドメインに連結され、前記ＶＬ２ドメインが第２のテザー（ＣＬＨテザー２）により前記ＶＨ２ドメインに連結され、前記ドメインが、Ｎ末端からＣ末端の方向に、ＶＬ１−ＣＬＨテザー１−ＶＨ１−任意選択のＣＨ１１−任意選択のヒンジ１−ＣＨ２１−ＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＬ２−ＣＬＨテザー２−ＶＨ２−任意選択のＣＨ１２−任意選択のヒンジ２−ＣＨ２２−ＣＨ３２の通り、互いに相対的に配置される、請求項１から３の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項５】
前記ポリペプチドが、第１のＣＬ（ＣＬ１）ドメイン又は第２のＣＬ（ＣＬ２）ドメイン又は両方を含み、前記ポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端の方向に、ＶＬ１−任意選択のＣＬ１−ＣＬＨテザー１−ＶＨ１−任意選択のＣＨ１１−任意選択のヒンジ１−任意選択のＣＨ２１−任意選択のＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＬ２−任意選択のＣＬ２−ＣＬＨテザー２−ＶＨ２−任意選択のＣＨ１２−任意選択のヒンジ２−任意選択のＣＨ２２−任意選択のＣＨ３２の通り、互いに相対的に配置されるＣＬ１ドメイン又はＣＬ２ドメインを含む、請求項１から４の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項６】
Ｎ末端からＣ末端の方向に互いに相対的に配置された以下のドメイン、すなわち、ＶＬ１−ＣＬ１−ＣＬＨテザー１−ＶＨ１−ＣＨ１１−ヒンジ１−ＣＨ２１−ＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＬ２−ＣＬ２−ＣＬＨテザー２−ＶＨ２−ＣＨ１２−ヒンジ２−ＣＨ２２−ＣＨ３２を含む単一ポリペプチドを含む単鎖抗体。
【請求項７】
前記ＨＤテザーが１５〜１００アミノ酸長である、請求項１から６の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項８】
前記ＨＤテザー及び／又はＣＬＨテザーが、グリシン（Ｇ）及びセリン（Ｓ）残基を含む、請求項１から７の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項９】
前記ＨＤテザー及び／又はＣＬＨテザーが８から９個のＧＧＳリピート（配列番号１９）を含む、請求項１から８の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項１０】
前記ＨＤテザー及び／又はＣＬＨテザーが、エンドペプチダーゼにより切断可能なアミノ酸配列を含み、エンドペプチダーゼが、フューリン、ウロキナーゼ、トロンビン、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰａ）、ゲネナーゼ、Ｌｙｓ−Ｃ、Ａｒｇ−Ｃ、Ａｓｐ−Ｎ、Ｇｌｕ−Ｃ、第Ｘａ因子、タバコエッチウイルスプロテアーゼ（ＴＥＶ）、エンテロキナーゼ、ヒトライノウイルスＣ３プロテアーゼ（ＨＲＶ  Ｃ３）、及びキニノゲナーゼからなる群から選択される、請求項１から８の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項１１】
精製後、前記アミノ酸配列は前記エンドペプチダーゼの添加により切断される、請求項１０に記載の単鎖抗体。
【請求項１２】
前記ＨＤテザー及び／又はＣＬＨテザーが、前記ＨＤ又はＣＬＨテザーのＮ末端及びＣ末端に位置する２つのエンドペプチダーゼ切断部位を含み、前記エンドペプチダーゼ切断部位の１つがフューリン切断部位である、請求項１１に記載の単鎖抗体。
【請求項１３】
フューリンにより切断可能なアミノ酸配列が、アミノ酸配列ＲＫＲＫＲＲ（配列番号９）又はＲＨＲＱＰＲ（配列番号１０）を含む、請求項１２に記載の単鎖抗体。
【請求項１４】
前記ＣＬＨテザー１及び前記ＣＬＨテザー２がそれぞれ１０〜８０アミノ酸長である、請求項４から１３の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項１５】
前記ＣＬＨテザー１及び／又は前記ＣＬＨテザー２が、前記ＣＬＨテザー１又は前記ＣＬＨテザー２のＮ末端及びＣ末端に位置する２つのエンドペプチダーゼ切断部位を含み、前記エンドペプチダーゼ切断部位が両方ともフューリン切断部位である、請求項４から１４の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項１６】
前記第１のヒンジドメイン又は前記第２のヒンジドメインが、ヒトＩｇＧ１のＧｌｕ２１６からＰｒｏ２３０を含む、請求項２から１５の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項１７】
前記第１のヒンジドメイン又は前記第２のヒンジドメインが、Ｌｙｓ−Ｃエンドペプチダーゼ切断部位を含む、請求項１６に記載の単鎖抗体。
【請求項１８】
前記Ｌｙｓ−Ｃエンドペプチダーゼ切断部位が不活性化変異を含み、前記不活性化変異がＫ２２２Ａ置換（ＥＵナンバリングシステム）である、請求項１７に記載の単鎖抗体。
【請求項１９】
前記単鎖抗体が、少なくとも一つのＦｃ成分における機能性部分にコンジュゲートされた定常領域を含む、請求項１から１８の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項２０】
前記単鎖抗体が、一又は複数の前記ＨＤ又はＣＬＨテザーの切断後にエキソペプチダーゼに対する一又は複数の切断部位を含み、エキソペプチダーゼが、カルボキシペプチダーゼＡ、カルボキシペプチダーゼＢ、血漿カルボキシペプチダーゼＢ、カルボキシペプチダーゼＤ、カルボキシペプチダーゼＥ、カルボキシペプチダーゼＭ、カルボキシペプチダーゼＮ、及びカルボキシペプチダーゼＺからなる群から選択される、請求項１から１９の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項２１】
前記ポリペプチドが、
（ａ）前記ＣＨ１１ドメイン又は前記ＣＨ１２ドメイン又は両方に突起又はキャビティと、
（ｂ）前記ＣＬ１ドメイン又は前記ＣＬ２ドメイン又は両方に突起又はキャビティと
を更に含み、
（ｃ）前記ＣＨ１１ドメイン中の前記突起もしくはキャビティが、それぞれ前記ＣＬ１ドメイン中の前記キャビティもしくは突起に配置可能であり、
（ｄ）前記ＣＨ１２ドメイン中の前記突起もしくはキャビティが、それぞれ前記ＣＬ２ドメイン中の前記キャビティもしくは突起に配置可能であり、又は
（ｅ）（ｃ）及び（ｄ）の両方であり、  前記ＣＨ１１及びＣＬ１ドメイン、前記ＣＨ１２及びＣＬ２ドメイン、又は全ての４つの前記ドメインが、前記突起とキャビティの間の界面で会合する、請求項５から２０の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項２２】
前記ＣＨ２１又はＣＨ２２ドメインの一又は複数が、抗体エフェクター機能に影響を与えるＣＨ２ドメイン変異を含む、請求項１から２１の何れか一項に記載の単鎖抗体。
【請求項２３】
抗体エフェクター機能に影響を与える前記ＣＨ２ドメイン変異がＮ２９７変異である、請求項２２に記載の単鎖抗体。
【請求項２４】
請求項１から２３の何れか一項に記載の単鎖抗体をコードするポリヌクレオチド。
【請求項２５】
請求項２４に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項２６】
請求項２５に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項２７】
前記宿主細胞が哺乳動物細胞又は原核生物細胞である、請求項２６に記載の宿主細胞。
【請求項２８】
哺乳動物細胞がＣＨＯ細胞であるか、又は原核生物細胞が大腸菌細胞である、請求項２７に記載の宿主細胞。
【請求項２９】
請求項１から２３の何れか一項に記載の単鎖抗体を作製する方法であって、請求項１から２３の何れか一項に記載の単鎖抗体を発現することが可能なポリヌクレオチドを含むベクターを含む宿主細胞を、培養培地で単鎖抗体の発現に適した条件下で培養することを含む方法。
【請求項３０】
（ａ）各々がＶＬドメイン及びＣＬドメインを含む第１及び第２の同一ポリペプチド成分、並びに
（ｂ）（ｉ）第１のＶＨ（ＶＨ１）及び第２のＶＨ（ＶＨ２）ドメイン、
（ｉｉ）ＨＤテザー、
（ｉｉｉ）第１のヒンジ（ヒンジ１）ドメイン又は第２のヒンジ（ヒンジ２）ドメイン又は両方、及び
（ｉｖ）一又は複数の重鎖定常ドメイン
を含む第３のポリペプチド成分
を含み、
前記一又は複数の重鎖定常ドメインが、第１のＣＨ１（ＣＨ１１）ドメイン、第１のＣＨ２（ＣＨ２１）ドメイン、第１のＣＨ３（ＣＨ３１）ドメイン、第２のＣＨ１（ＣＨ１２）ドメイン、第２のＣＨ２（ＣＨ２２）ドメイン、及び第２のＣＨ３（ＣＨ３２）ドメインから選択され、
前記第３のポリペプチドの前記成分が、Ｎ末端からＣ末端の方向に、ＶＨ１−任意選択のＣＨ１１−任意選択のヒンジ１−任意選択のＣＨ２１−任意選択のＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＨ２−任意選択のＣＨ１２−任意選択のヒンジ２−任意選択のＣＨ２２−任意選択のＣＨ３２の通り、互いに相対的に配置される、抗体。
【請求項３１】
請求項３０の抗体をコードするポリヌクレオチド。
【請求項３２】
請求項３１のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項３３】
請求項３２のベクターを含む宿主細胞。
【請求項３４】
請求項３０に記載の抗体を作製する方法であって、請求項３０の抗体を発現することが可能なポリヌクレオチドを含むベクターを含む宿主細胞を、培養培地で抗体の発現に適した条件下で培養することを含む方法。
【請求項３５】
（ａ）第１のＶＬ（ＶＬ１）ドメイン及び第１のＣＬ（ＣＬ１）ドメインを含む第１のポリペプチド成分、及び
（ｂ）（ｉ）第１のＶＨ（ＶＨ１）及び第２のＶＨ（ＶＨ２）ドメイン、
（ｉｉ）ＨＤテザー、
（ｉｉｉ）第２のＶＬ（ＶＬ２）及び第２のＣＬ（ＣＬ２）ドメイン、
（ｉｖ）ＣＬＨテザー、
（ｖ）第１のヒンジ（ヒンジ１）ドメイン又は第２のヒンジ（ヒンジ２）ドメイン又は両方、及び
（ｖｉ）一又は複数の重鎖定常ドメイン
を含む第２のポリペプチド成分
を含み、
前記一又は複数の重鎖定常ドメインが、第１のＣＨ１（ＣＨ１１）ドメイン、第１のＣＨ２（ＣＨ２１）ドメイン、第１のＣＨ３（ＣＨ３１）ドメイン、第２のＣＨ１（ＣＨ１２）ドメイン、第２のＣＨ２（ＣＨ２２）ドメイン、及び第２のＣＨ３（ＣＨ３２）ドメインから選択され、
前記第２のポリペプチドの前記成分が、Ｎ末端からＣ末端の方向に、ＶＨ１−任意選択のＣＨ１１−任意選択のヒンジ１−任意選択のＣＨ２１−任意選択のＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＬ２−ＣＬ２−ＣＬＨテザー−ＶＨ２−任意選択のＣＨ１２−任意選択のヒンジ２−任意選択のＣＨ２２−任意選択のＣＨ３２の通り、互いに相対的に配置される、抗体。
【請求項３６】
請求項３５の抗体をコードするポリヌクレオチド。
【請求項３７】
請求項３６のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項３８】
請求項３６のベクターを含む宿主細胞。
【請求項３９】
請求項３５に記載の抗体を作製する方法であって、請求項３５の抗体を発現することが可能なポリヌクレオチドを含むベクターを含む宿主細胞を、培養培地で抗体の発現に適した条件下で培養することを含む方法。
【請求項４０】
（ａ）（ｉ）第１のＶＬ（ＶＬ１）ドメイン及び第１のＣＬ（ＣＬ１）ドメイン、
（ｉｉ）ＣＬＨテザー、
（ｉｉｉ）第１のＶＨ（ＶＨ１）及び第２のＶＨ（ＶＨ２）ドメイン、
（ｉｖ）ＨＤテザー、
（ｖ）第１のヒンジ（ヒンジ１）ドメイン又は第２のヒンジ（ヒンジ２）ドメイン又は両方、及び
（ｖｉ）一又は複数の重鎖定常ドメイン
を含む第１のポリペプチド成分と、
（ｂ）第２のＶＬ（ＶＬ２）ドメイン及び第２のＣＬ（ＣＬ２）ドメインを含む第２のポリペプチド成分
を含み、
前記第１のポリペプチドの前記一又は複数の重鎖定常ドメインが、第１のＣＨ１（ＣＨ１１）ドメイン、第１のＣＨ２（ＣＨ２１）ドメイン、第１のＣＨ３（ＣＨ３１）ドメイン、第２のＣＨ１（ＣＨ１２）ドメイン、第２のＣＨ２（ＣＨ２２）ドメイン、及び第２のＣＨ３（ＣＨ３２）ドメインから選択され、
前記第１のポリペプチドの前記成分が、Ｎ末端からＣ末端の方向に、ＶＬ１−ＣＬ１−ＣＬＨテザー−ＶＨ１−任意選択のＣＨ１１−任意選択のヒンジ１−任意選択のＣＨ２１−任意選択のＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＨ２−任意選択のＣＨ１２−任意選択のヒンジ２−任意選択のＣＨ２２−任意選択のＣＨ３２の通り、互いに相対的に配置される、抗体。
【請求項４１】
請求項４０に記載の抗体をコードするポリヌクレオチド。
【請求項４２】
請求項４１に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項４３】
請求項４２に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項４４】
請求項４０に記載の抗体を作製する方法であって、請求項４０の抗体を発現することが可能なポリヌクレオチドを含むベクターを含む宿主細胞を、培養培地で抗体の発現に適した条件下で培養することを含む方法。
【請求項４５】
（ａ）アドヘシン成分、
（ｂ）第１のＣＨ２（ＣＨ２１）ドメイン成分又は第１のＣＨ３（ＣＨ３１）ドメイン成分又は両方、
（ｃ）ＨＤテザー成分、
（ｄ）ＶＨドメイン成分、及び
（ｅ）ＣＨ１ドメイン、第２のＣＨ２（ＣＨ２２）ドメイン、又は第２のＣＨ３（ＣＨ３２）ドメインから選択される一又は複数の重鎖定常ドメイン成分
を含み、
ヘテロ多量体の前記成分が、Ｎ末端からＣ末端の方向に、アドヘシン−任意選択のＣＨ２１−任意選択のＣＨ３１−ＨＤテザー−ＶＨ−任意選択のＣＨ１−任意選択のＣＨ２２−任意選択のＣＨ３２の通り、互いに相対的に配置される、ヘテロ多量体。
【請求項４６】
請求項４５に記載のヘテロ多量体をコードするポリヌクレオチド。
【請求項４７】
請求項４６に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項４８】
請求項４７に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項４９】
請求項４５に記載のヘテロ多量体を作製する方法であって、請求項４５に記載のヘテロ多量体を発現することが可能なポリヌクレオチドを含むベクターを含む宿主細胞を、培養培地でヘテロ多量体の発現に適した条件下で培養することを含む方法。