【手続補正書】
【提出日】平成28年2月10日(2016.2.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的細胞に特異的な非毒素関連受容体結合リガンドと融合した受容体破壊孔形成性AB毒素単位を含む融合タンパク質、および
標的細胞のサイトゾルへの治療用タンパク質の送達のための、孔形成性毒素単位と会合することができる相補的な毒素単位
を含む、標的細胞への活性分子の送達のための改変型バイナリー毒素システム。
【請求項２】
受容体破壊孔形成性単位が炭疽毒素防御抗原（PA）である、請求項1記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項３】
PAがPAN682AD683Aである、請求項2記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項４】
非毒素関連特異的標的受容体結合リガンドが、上皮増殖因子1または上皮増殖因子2である、請求項1〜3のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項５】
相補的な毒素単位が炭疽毒素致死因子（LF）である、請求項1〜4のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項６】
相補的な毒素単位が炭疽毒素致死因子のアミノ末端部分（LFN）である、請求項1〜5のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項７】
治療用タンパク質が、ジフテリア毒素（DTA）、リシン、志賀毒素、またはシュードモナス外毒素Aの触媒ドメインである、請求項1〜6のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項８】
AB毒素が、ボツリヌス（botulinum）神経毒、炭疸毒素、ジフテリア毒素、リシン、志賀毒素、志賀様毒素、外毒素A、またはコレラ毒素である、請求項1〜7のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項９】
バイナリー毒素が、ウェルシュ菌（Clostridium perfringens）毒素α、β、ε、もしくはι；ボツリヌス菌（Clostridium botulinum）C2毒素；またはクロストリジウム・スピロフォルム（Clostridium spiroforme）ι様毒素である、請求項8記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項１０】
受容体結合リガンドが、上皮増殖因子受容体HERl、HER2、HER3、もしくはHER4；血管内皮増殖因子受容体VEGFR-1、VEGFR-2、もしくはVEGFR-3；インスリン様増殖因子1受容体；繊維芽細胞増殖因子受容体；トロンボスポンジン1受容体；エストロゲン受容体；ウロキナーゼ受容体；プロゲステロン受容体；テストステロン受容体；癌胎児性抗原；前立腺特異抗原；ファルネソイドX受容体；トランスフォーミング増殖因子受容体；トランスフェリン受容体；肝細胞増殖因子受容体；または血管作動性腸管ポリペプチド受容体1および2から選択される受容体と結合する、請求項1〜9のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項１１】
受容体結合リガンドが、抗体またはアフィボディから選択される、請求項1〜10のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項１２】
アフィボディがHER2アフィボディである、請求項11記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項１３】
HER2アフィボディがZHER2である、請求項12記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項１４】
治療用タンパク質が、志賀毒素、志賀様毒素1および2、リシン、リシン毒素A鎖、アブリン、ゲロニン、ヨウシュヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質、サポリン、トリコサンチン、ペプシン（pepcin）、トウモロコシRIP、αサルシン、ウェルシュ菌ε毒素、ボツリヌス（Botulinum）神経毒、ブドウ球菌（Staphylococcus）エンテロトキシン、クロストリジウム・ディフィシル（Clostridium difficile）毒素、百日咳毒素、またはシュードモナス外毒素の細胞毒性ドメインである、請求項1〜13のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システム。
【請求項１５】
請求項1〜14のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システムを含む、真核細胞へ生理活性分子を送達するためのキット。
【請求項１６】
請求項1〜14のいずれか一項記載の改変型バイナリー毒素システムを、癌を有すると診断された対象へ投与する工程を含む、癌を処置する方法。
【請求項１７】
改変型バイナリー毒素システムが、受容体転向型（receptor-redirected）炭疽防御抗原を含む、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
癌がHER2陽性癌であり、炭疽防御抗原がHER2結合リガンドと融合している、請求項16〜17のいずれか一項記載の方法。
【請求項１９】
HER2結合リガンドが、抗体またはアフィボディである、請求項18記載の方法。
【請求項２０】
癌の処置のための、請求項1〜14のいずれか一項記載のバイナリー毒素システムの使用。
【請求項２１】
癌の処置のための受容体転向型炭疽防御抗原の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８６】
本発明のいくつかの態様は、以下の項目にリストされる:
１.  標的細胞に特異的な非毒素関連受容体結合リガンドと融合した受容体破壊孔形成性のバイナリー毒素またはAB毒素単位を含む融合タンパク質、および
標的細胞のサイトゾルへの治療用タンパク質の送達のための、孔形成性毒素単位と会合することができる相補的な毒素単位
を含む、標的細胞への活性分子の送達のための改変型バイナリー毒素システム。
２.  受容体破壊孔形成性単位が炭疽毒素防御抗原（PA）である、項目1に記載の改変型バイナリー毒素システム。
３.  PAがPAN682AD683Aである、項目2記載の改変型バイナリー毒素システム。
４.  非毒素関連特異的標的受容体結合リガンドが、上皮増殖因子1または上皮増殖因子2であるか、あるいは非毒素関連特異的受容体結合リガンドが、上皮増殖因子受容体1（EGFR）または上皮増殖因子受容体2（HER2）を標的とする、項目1〜3のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システム。
５.  相補的な毒素単位が炭疽毒素致死因子（LFまたはEF）である、項目1〜4のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システム。
６.  相補的な毒素単位が炭疽毒素致死因子のアミノ末端部分（LFNまたはEFN）である、項目1〜5のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システム。
７.  治療用タンパク質が、ジフテリア毒素（DTA）、リシン、志賀毒素、またはシュードモナス外毒素Aの触媒ドメインである、項目1〜6のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システム。
８.  AB毒素が、ボツリヌス神経毒、炭疸毒素、ジフテリア毒素、リシン、志賀毒素、志賀様毒素、外毒素A、またはコレラ毒素である、項目1〜7のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システム。
９.  バイナリー毒素が、ウェルシュ菌毒素α、β、ε、もしくはι；ボツリヌス菌C2毒素；またはクロストリジウム・スピロフォルムι様毒素である、項目8に記載の改変型バイナリー毒素システム。
１０.  受容体結合リガンドが、上皮増殖因子受容体HERl、HER2、HER3、もしくはHER4；血管内皮増殖因子受容体VEGFR-1、VEGFR-2、もしくはVEGFR-3；インスリン様増殖因子1受容体；繊維芽細胞増殖因子受容体；トロンボスポンジン1受容体；エストロゲン受容体；ウロキナーゼ受容体；プロゲステロン受容体；テストステロン受容体；癌胎児性抗原；前立腺特異抗原；ファルネソイドX受容体；トランスフォーミング増殖因子受容体；トランスフェリン受容体；肝細胞増殖因子受容体；または血管作動性腸管ポリペプチド受容体1および2から選択される受容体と結合する、項目1〜9のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システム。
１１.  受容体結合リガンドが、抗体またはアフィボディから選択される、項目1〜10のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システム。
１２.  アフィボディがHER2アフィボディである、項目11に記載の改変型バイナリー毒素システム。
１３.  HER2アフィボディがZHER2である、項目12に記載の改変型バイナリー毒素システム。
１４.  治療用タンパク質が、志賀毒素、志賀様毒素1および2、リシン、リシン毒素A鎖、アブリン、ゲロニン、ヨウシュヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質、サポリン、トリコサンチン、ペプシン（pepcin）、トウモロコシRIP、αサルシン、ウェルシュ菌ε毒素、ボツリヌス神経毒、ブドウ球菌エンテロトキシン、クロストリジウム・ディフィシル毒素、百日咳毒素、またはシュードモナス外毒素の細胞毒性ドメインである、項目1〜13のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システム。
１５.  項目1〜14のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システムを含む、真核細胞へ生理活性分子を送達するためのキット。
１６.  項目1〜14のいずれかに記載の改変型バイナリー毒素システムを、癌を有すると診断された対象へ投与する工程を含む、癌を処置する方法。
１７.  改変型バイナリー毒素システムが、受容体転向型炭疽防御抗原を含む、項目16に記載の方法。
１８.  癌がHER2陽性癌であり、炭疽防御抗原がHER2結合リガンドと融合している、項目16〜17のいずれかに記載の方法。
１９.  HER2結合リガンドが、抗体またはアフィボディである、項目18記載の方法。
２０.  癌の処置のための、項目1〜14のいずれかに記載のバイナリー毒素システムの使用。
２１.  癌の処置のための受容体転向型炭疽防御抗原の使用。
２２.  項目1〜14のいずれかに記載の毒素システムと薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。