【手続補正書】
【提出日】平成28年9月6日(2016.9.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５００ｎＭ以下のＫＤでミオスタチンと結合するフィブロネクチンタイプＩＩＩ第１０ドメイン（１０Ｆｎ３）を含むポリペプチドであって、
１０Ｆｎ３ドメインのＢＣ、ＤＥおよびＦＧループは、
（ａ）それぞれ配列番号７、３９および４６のアミノ酸配列；
（ｂ）それぞれ配列番号８、４０および４７のアミノ酸配列；
（ｃ）それぞれ配列番号１２、４２および５１のアミノ酸配列；
（ｄ）それぞれ配列番号１７、３９および５６のアミノ酸配列；
（ｅ）それぞれ配列番号１８、３９および５７のアミノ酸配列；
（ｆ）それぞれ配列番号１７、３９および６２のアミノ酸配列；
（ｇ）それぞれ配列番号３２、４４および７３のアミノ酸配列；
（ｈ）それぞれ配列番号３３、４５および７４のアミノ酸配列；
（ｉ）それぞれ配列番号３４、３９および７５のアミノ酸配列：
（ｊ）それぞれ配列番号３５、３９および７５のアミノ酸配列；
（ｋ）それぞれ配列番号３８、３９および７９のアミノ酸配列；または
（ｌ）（ａ）〜（ｋ）のＢＣ、ＤＥおよびＦＧループのアミノ酸配列と比べて１、２または３アミノ酸置換
を含む、ポリペプチド。
【請求項２】
１０Ｆｎ３ドメインのＢＣ、ＤＥおよびＦＧループの少なくとも１のループが、（ａ）〜（ｋ）のそれぞれのＢＣ、ＤＥおよびＦＧループと比べて１アミノ酸置換を有する、請求項１記載のポリペプチド。
【請求項３】
１０Ｆｎ３のＢＣ、ＤＥおよびＦＧループの１のループが、（ａ）〜（ｋ）のそれぞれのＢＣ、ＢＣ、ＤＥおよびＦＧループと比べて１アミノ酸置換を有する、請求項１記載のポリペプチド。
【請求項４】
ＢＣループが配列番号３４のアミノ酸配列を含み、ＤＥループが配列番号３９を含み、ＦＧループが配列番号７５を含み、所望により、少なくとも１のＢＣ、ＤＥまたはＦＧループが１、２または３アミノ酸置換を有する、先の請求項のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項５】
ＢＣループが配列番号３４のアミノ酸配列を含み、ＤＥループが配列番号３９を含み、ＦＧループが配列番号７５を含み、所望により、ＢＣ、ＤＥまたはＦＧループが１アミノ酸置換を有する、先の請求項のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項６】
（ｉ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置３でのセリンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｉｉ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置４でのロイシンが、ＭおよびＶからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｉｉｉ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置５でのプロリンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｖｉ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置６でのヒスチジンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｖｉｉ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置７でのグルタミンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｖｉｉｉ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置８でのグリシンが、アミノ酸Ｓで置換されている；
（ｉｘ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置９でのリジンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｘ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置１０でのアラニンが、Ｃ、Ｇ、Ｌ、Ｍ、ＳおよびＴからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；または
（ｘｉ）ＢＣループ（配列番号３４）の位置１１でのアスパラギンが、Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｈ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、ＳおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている
請求項４または５記載のポリペプチド。
【請求項７】
ＤＥループ（配列番号３９）の位置５でのバリンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、ＳおよびＴからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている、請求項４〜６のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項８】
（ｉ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置２でのバリンが、Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｑ、Ｔ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｉｉ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置３でのトレオニンが、Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｉｉｉ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置４でのアスパラギン酸が、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｉｖ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置５でのトレオニンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｖ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置６でのグリシンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｖｉ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置７でのチロシンが、Ａ、Ｃ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、ＶおよびＷからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｖｉｉ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置８でのロイシンが、Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｖｉｉｉ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置９でのリジンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、ＷおよびＹからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；
（ｉｘ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置１０でのチロシンが、ＦおよびＷからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている；または
（ｘ）ＦＧループ（配列番号７５）の位置１１でのチロシンが、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＶおよびＷからなる群から選ばれるアミノ酸で置換されている
請求項４〜７のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項９】
ＢＣループが配列番号３４のアミノ酸配列を含み、ＤＥループが配列番号３９を含み、ＦＧループが配列番号７５を含む、先の請求項のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１０】
配列番号３３１、２７３、２８１または１１８で示される非ＢＣ、ＤＥおよびＦＧループ領域と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、９９％または１００％同一なアミノ酸配列を含む、先の請求項のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１１】
配列番号３３１、２７３、８０〜１２３、２２８〜２３９、２５２〜２７２または２８１のいずれかと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、９９％または１００％同一なアミノ酸配列を含む、先の請求項のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１２】
配列番号３３１のアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項１３】
配列番号２７３のアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項１４】
配列番号３のアミノ酸５６〜６６内の領域と結合する、先の請求項のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１５】
配列番号３のアミノ酸８５〜１０１および５６〜６６内の領域と結合する、請求項１４記載のポリペプチド。
【請求項１６】
ミオスタチンとの結合についてＡｃｔＲＩＩＢと競合しない、および／または、ミオスタチンとの結合についてＡＬＫ４および／またはＡＬＫ５と競合する、先の請求項のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１７】
ＢＣ、ＤＥおよびＦＧループが、
（ａ）それぞれ配列番号７、３９および４６のアミノ酸配列；
（ｂ）それぞれ配列番号８、４０および４７のアミノ酸配列；
（ｃ）それぞれ配列番号１２、４２および５１のアミノ酸配列；
（ｄ）それぞれ配列番号１７、３９および５６のアミノ酸配列；
（ｅ）それぞれ配列番号１８、３９および５７のアミノ酸配列；
（ｆ）それぞれ配列番号１７、３９および６２のアミノ酸配列；
（ｇ）それぞれ配列番号３２、４４および７３のアミノ酸配列；
（ｈ）それぞれ配列番号３３、４５および７４のアミノ酸配列；
（ｉ）それぞれ配列番号３４、３９および７５のアミノ酸配列：
（ｊ）それぞれ配列番号３５、３９および７５のアミノ酸配列；または
（ｋ）それぞれ配列番号３８、３９および７９のアミノ酸配列
を含む、請求項１記載のポリペプチド。
【請求項１８】
さらに、ポリエチレングリコール、シアル酸、Ｆｃ、Ｆｃ断片、トランスフェリン、血清アルブミン、血清アルブミン結合タンパク質および血清免疫グロブリン結合タンパク質からなる群から選ばれる１またはそれ以上の薬物動態学的（ＰＫ）部分を含む、先の請求項のいずれかに記載のポリペプチド。
【請求項１９】
先の請求項のいずれかに記載のポリペプチドおよび担体を含む、医薬組成物。
【請求項２０】
請求項１〜１８のいずれかに記載のポリペプチドをコードする単離された核酸分子。
【請求項２１】
請求項２０記載の単離された核酸分子を含む宿主細胞。
【請求項２２】
ミオスタチン関連疾患または障害を処置するのに適した医薬の製造のための、請求項１〜１９のいずれかに記載のポリペプチドまたは組成物の使用。
【請求項２３】
医薬が以下の生物学的効果の少なくとも１つによってミオスタチン関連疾患または障害を処置するのに適している、請求項２２記載の使用：
（ａ）筋肉量の増加；
（ｂ）筋肉細胞の数の増加；
（ｃ）筋肉細胞の大きさの増加；および
（ｄ）筋肉強度の増加。
【請求項２４】
医薬が以下の生物学的効果の少なくとも１つによってミオスタチン関連疾患または障害を処置するのに適している、請求項２２記載の使用：
（ａ）インスリン感受性の増加；
（ｂ）対象における細胞によるグルコース取り込みの増加；
（ｃ）血液グルコースレベルの低下；および
（ｄ）体脂肪の減少。
【請求項２５】
試料と請求項１〜１８のいずれかに記載のポリペプチドを接触させ、該ポリペプチドとミオスタチンとの結合を検出または測定することを含む、試料中のミオスタチンを検出または測定する方法。
【請求項２６】
筋肉量の増加に適している医薬の製造のための、請求項１〜１８のいずれかに記載のポリペプチドまたは組成物の使用。
【請求項２７】
ミオスタチン関連疾患または障害が運動ニューロン疾患、神経筋障害または神経学的障害である、請求項２２に記載の使用。
【請求項２８】
ミオスタチン関連疾患または障害がDuchenne筋ジストロフィーである、請求項２２に記載の使用。