(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎症状において、上腕内側部から採取された前記乳幼児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、アトピー性皮膚炎の程度の鑑別法。
【請求項２】
角質細胞の大きさが角質細胞面積であることを特徴とする、請求項１に記載のアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法。
【請求項３】
角質細胞が大きいほどアトピー性皮膚炎は軽度である、及び／又は、角質細胞が小さいほどアトピー性皮膚炎は重篤であると鑑別することを特徴とする、請求項１又は２に記載のアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法。
【請求項４】
乳児に於けるアトピー性皮膚炎症状において、上腕内側部から採取された前記乳児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載のアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法。
【請求項５】
乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎の治療において、上腕内側部から採取された前記乳幼児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、治療効果のモニタリング方法。
【請求項６】
角質細胞の大きさが角質細胞面積であることを特徴とする、請求項５に記載のモニタリング方法。
【請求項７】
角質細胞が大きくなるほどアトピー性皮膚炎は良好に治癒していると判断する、及び／又は、角質細胞が小さくなるほどアトピー性皮膚炎は重篤に推移していると判断することを特徴とする、請求項５又は６に記載のモニタリング方法。
【請求項８】
乳児に於けるアトピー性皮膚炎の治療において、上腕内側部から採取された前記乳児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、請求項５〜７のいずれか１項に記載のモニタリング方法。
【請求項９】
乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎の薬剤治療において、上腕内側部から採取された前記乳幼児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、使用薬剤の適性度の鑑別法。
【請求項１０】
角質細胞の大きさが角質細胞面積であることを特徴とする、請求項９に記載の使用薬剤の適性度の鑑別法。
【請求項１１】
角質細胞が大きいほどアトピー性皮膚炎は軽度である、及び／又は、角質細胞が小さいほどアトピー性皮膚炎は重篤であると鑑別することを特徴とする、請求項９又は１０に記載の使用薬剤の適性度の鑑別法。
【請求項１２】
乳児に於けるアトピー性皮膚炎の薬剤治療において、上腕内側部から採取された前記乳児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の使用薬剤の適性度の鑑別法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法、その治癒経過のモニタリング方法、使用薬剤の適性度の鑑別法及びその為のキットに関する。
【０００２】
【従来の技術】
アトピー性皮膚炎と呼ばれている１群の皮膚炎は、近年においてその患者数を著しくのばし、年齢を問わず人口の数％〜数十％に上るとも言われている。その原因についてはアレルギーが起因しているとか、ストレスの要因が大きい等のように種々の説が提出されているが、実のところは明確になっていないのが現状である。言い換えれば、原因不明な掻痒を伴う皮膚炎を現象的にアトピー性皮膚炎と名付けているに過ぎず、その実態には多くの種類の皮膚炎が存在しているとも言われている。成人に於けるアトピー性皮膚炎では、主としてインドメタシン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ケトチフェン等のノンステロイド抗炎症剤を投与したり、デキサメタゾン、プレドニゾロンなどの抗炎症ステロイドを投与したり、或いは尿素、グリセリンなどの保湿因子の高い皮膚外用剤を投与して、その予後を判別しつつ、薬剤の種類を変えて治療する手段が取られている。これは、成人においては掻痒の程度が言葉によって比較的的確に表現できるため、薬の効果のフィードバックが速やかに行えるからである。それに反して、乳幼児のアトピー性皮膚炎においては、言語的表現能力が無いが故に、ひっかき傷などの状況を見て薬効の判断を行わなければならず、症状に適した薬剤の選択がしにくい状況があった。又、乳幼児は所謂母体からの移行抗体に免疫を依存している時期であり、アトピー性皮膚炎のメカニズムとしてもアレルギーなどを原因とするものはそう多くはないように思われ、成人のアトピー性皮膚炎とは大きく異なることが推測される。この様な推測は多くの小児科医が経験的に持っている実感と一致している。言い換えれば、乳幼児のアトピー性皮膚炎においては、成人アトピー性皮膚炎の治療指針はあまり参考にはならず、しかも、その程度、或いは治療推移のモニタリングも鑑別しにくいことが適切な薬剤選択を阻害し、治療に於ける大きな問題となっている。
【０００３】
一方、成人アトピー性皮膚炎において、その程度や治癒過程のモニタリングが、角質細胞の大きさをもとに行えることは既に知られている。この様な角質細胞としては、疾患の部位の角質細胞を使用することが必要であり、これは、炎症によって生じるターンオーバーの昂進状況の代替値として角質細胞の大きさが捉えられているからである。又、基本的なアトピー性皮膚炎を起こしやすいか否かの体質的な鑑別は、患部ではなく、上腕内側部などの外部変化を受けにくい場所の角質細胞の大きさを指標に鑑別できることも知られている。しかしながら、かかる上腕内側部などの外部変化を受けにくい場所の角質細胞の大きさを指標に、アトピー性皮膚炎の治癒過程をモニタリングすることは相関性が低く困難であった。この為、相関性の高い頬部などの角質細胞の大きさを指標として用いていた。
【０００４】
従って、乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎において、採取した前記乳幼児の角質細胞の大きさを指標とし、アトピー性皮膚炎の程度、治癒過程のモニタリング、使用薬剤の適切性などを判断することはおこなわれていなかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、この様な状況下為されたものであり、乳幼児のアトピー性皮膚炎において、その程度、治療推移のモニタリング、適切な薬剤を鑑別する手段を提供することを課題とする。
【０００６】
【課題の解決手段】
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、乳幼児のアトピー性皮膚炎において、その程度、治療推移のモニタリング、適切な薬剤を鑑別する手段を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、乳幼児の角質細胞を採取し、この角質細胞の大きさを計測し、それを指標とすることにより、その様な技術が可能であることを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は、以下に示す技術に関するものである。尚、本発明に言う、乳幼児とは、授乳状態にある乳児から幼児の総称を意味し、おおむね５歳までの幼児をさす。
（１）乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎症状において、採取した前記乳幼児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、アトピー性皮膚炎の程度の鑑別法。
（２）角質細胞の大きさが角質細胞面積であることを特徴とする、（１）に記載のアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法。
（３）角質細胞の採取部位が上腕内側部であることを特徴とする、（１）又は（２）に記載のアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法。
（４）角質細胞が大きいほどアトピー性皮膚炎は軽度である、及び／又は、角質細胞が小さいほどアトピー性皮膚炎は重篤であると鑑別することを特徴とする、（１）〜（３）何れか１項に記載のアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法。
（５）乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎の治療において、採取した前記乳幼児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、治療効果のモニタリング方法。
（６）角質細胞の大きさが角質細部面積であることを特徴とする、（５）に記載のモニタリング方法。
（７）角質細胞の採取部位が上腕内側部であることを特徴とする、（５）又は（６）に記載のモニタリング方法。
（８）角質細胞が大きくなるほどアトピー性皮膚炎は良好に治癒していると判断する、及び／又は、角質細胞が小さくなるほどアトピー性皮膚炎は重篤に推移していると判断することを特徴とする、（５）〜（７）何れか１項に記載のモニタリング方法。
（９）乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎の薬剤治療において、採取した前記乳幼児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする、使用薬剤の適性度の鑑別法。
（１０）角質細胞の大きさが角質細胞面積であることを特徴とする、（９）に記載の使用薬剤の適性度の鑑別法。
（１１）角質細胞の採取部位が上腕内側部であることを特徴とする、（９）又は（１０）に記載の使用薬剤の適性度の鑑別法。
（１２）角質細胞が大きいほどアトピー性皮膚炎は軽度である、及び／又は、角質細胞が小さいほどアトピー性皮膚炎は重篤であると鑑別することを特徴とする、（９）〜（１１）何れか１項に記載の使用薬剤の適性度の鑑別法。
（１３）次に示す構成部品を必須構成要素として有する、乳幼児のアトピー性皮膚炎の鑑別又はモニタリングのためのキット。
（構成部品１）角質細胞採取用の粘着テープ
（構成部品２）角質細胞の染色剤
（構成部品３）角質細胞の大きさの計測装置
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明の乳幼児に於けるアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法は、採取した前記乳幼児の角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする。大きさとしては、面積、体積、角質細胞の周辺の長さの平均値の何れもが使用できるが、計測の簡便性から面積をも用いるのが特に好ましい。この様な角質細胞の大きさの測定方法は既に多くの技術が知られておりそれらを利用或いは応用することができる。具体的な方法については、特開２００２−１７６８８号、特開２００１−１０８６７４号、特開２００１−１３１３８号、特開２０００−１１６６２３号、特開平１１−３０４７９８号、特開平１１−２９９７９２号、特開平７−２０９２９２号等の記載を参考にすることができる。この様な測定を行うためには、顔や上腕内側部などの体部の何れかの部位から角質細胞を採取し、角質細胞を作成することが好ましい。即ち、顔の頬、額、上腕内側部、大腿部などの部位より粘着テープや粘着剤を塗工したディスクなどの粘着支持体を用いて、これらを押しつけ、しかる後に剥離し、ストリッピングにより角質細胞を採取したものが好適に例示できる。粘着支持体としては、均一性の点でディスクに粘着剤を塗工した形態が更に好ましく例示できる。又、押しつける作業も２、３回行い、ムラをなくすことが好ましい。この場合、本発明においては、乳幼児を対象にするため、この際、更にもう一度粘着支持体を用いて角質細胞を転写し、角質細胞の表面側の面を上面にし、この面を観察することもできる。この様な転写を行うことは、角質細胞を均一な一層にすることができるので、角質細胞の形状の理解にとっては好ましい。かかる角質細胞の採取部位としては、本発明においては上腕内側部が特に好ましい。これはこの部位に於ける角質細胞の方が頬部などの濾紙粒に於ける角質細胞よりも、よりアトピー性皮膚炎の状況に相関しているためである。このことからも乳幼児のアトピー性皮膚炎の素因が成人のそれとは異なる可能性があることを示唆している。かくして得られた角質細胞は、形状が明らかになるように染色することが好ましい。染色法としては、細胞質が染色されるものであれば特段の限定はないが、ブリリアントグリーンとゲンチアナバイオレットによる二重染色が好ましい、乳幼児の角質細胞は染色されにくいため、かかる染色液は、成人に比べて濃いめに、浸漬時間は長くすることが好ましい。染色剤の濃度としては、ブリリアントグリーンが０．４〜２重量％が好ましく、０．４〜１重量％が更に好ましい。ゲンチアナバイオレットは３重量％までがこのましく、０．９〜２重量％が更に好ましい。浸漬時間は、温度２０〜４０℃で、１０〜４０分が好ましく、１５〜３０分が特に好ましい。かくして得られた染色された標本は、顕微鏡やビデオマイクロスコープなどを通して画像として取り込んで「フォトショップ」（登録商標）などの市販の画像処理ソフトを用いて、画像処理し面積を計測することが好ましい。この様な測定は以下に示す構成要素を最低限含むキットによって作成された標本を用いることによってなし得る。即ち、（構成部品１）角質細胞採取用の粘着テープ（構成部品２）角質細胞の染色剤及び（構成部品３）角質細胞の大きさの計測装置の３つであり、これ以外に所望により、転写用の粘着体や染色槽、バルサムなどの封入剤などを加えることもできる。これが本発明のキットである。
【０００８】
本発明の乳幼児のアトピー性皮膚炎の程度の鑑別法は前記角質細胞の大きさを指標とすることを特徴とする。この時、大きさとアトピー性皮膚炎の程度との関係は、角質細胞が大きいほどアトピー性皮膚炎は軽度であり、角質細胞が小さいほどアトピー性皮膚炎は重篤であることが目安となる。かかる角質細胞大きさの標準値（正常値）は部位により異なるが、平均値を取ってみると、頬部では７００μｍ２前後であり、上腕内側部では８００μｍ２前後である。
【０００９】
前記の原理を利用すると、個人個人の角質細胞の大きさをトレースをすることにより、アトピー性皮膚炎の重篤度或いは軽快度がモニタリングすることができる。乳幼児に於いては病態についての意思伝達ができないため、治療、投薬によって掻痒などの感覚的変化の有無が把握しにくく、処置や投与した薬剤の有効性を確かめることはこれまでは不可能であったが、本発明のモニタリング方法によって、この様な有効性の把握が可能となっている。
【００１０】
前記のモニタリングが投薬された薬剤に関するものが、本発明の使用薬剤の適性の鑑別法となる。
【００１１】
【実施例】
以下に実施例を挙げて、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明がこれら実施例にのみ限定されないことは言うまでもない。
【００１２】
＜実施例１＞
健常な０歳児（９ヶ月以下）５５名と医師によってアトピー性皮膚炎と判断された０歳児（９ヶ月以下）１２名について、頬部及び上腕内側部より角質細胞を採取し、０．５％ブリリアントグリーン水溶液に４０℃１５分、１％ゲンチアナバイオレット水溶液に４０℃１５分浸漬し、顕微鏡を介してデジタル画像を取り込み、「フォトショップ」で輝度調整を行い、角質細胞を明確にし、これより面積を測定した。結果を図１に示す。これより、上腕内側部の角質細部面積に於いて、アトピー患者が健常人に比べて有意に小さくなっていることがわかる。尚、角質細胞の標本は粘着剤を塗工したディスク（直径２ｃｍ）を部位に２回押しつけ、剥離した後、粘着テープに転写し採取したものを染色して用いた。
【００１３】
＜実施例２＞
生後６ヶ月のアトピー性皮膚炎の患者に、「ヒルドイド」による治療を試みた。同時に、頬部、上腕内側部から治療前、治療開始１１日、８１日に実施例１と同様に角質細胞を採取し、標本を作製し、角質細胞の面積を測定した。同時に、症状についてスコア０（全くなし）からスコア４（非常に著しい、重篤）までのランクで、紅斑、丘疹、乾燥・落屑、掻破痕、その他の症状を医師が判別した。結果を図２に示す。これより、本発明のモニタリング方法によって、アトピー性皮膚炎の治癒経過が適切にモニタリングできることがわかる。
【００１４】
＜実施例３＞
生後５ヶ月のアトピー性皮膚炎患者を「ヒルドイド」の投与で１４日間治療したが、上腕内側部の角質細胞面積は、治療前７２４μｍ２であり、治療開始１４日で７１９μｍ２であり、効果が出ていないと判断し、薬剤をプレドニゾロン軟膏に変えたところ、投与１４日で７６１μｍ２となり有効性が確かめられた。これより本発明の薬剤の適性の鑑別法により適切な薬剤が選択できることがわかる。
【００１５】
【発明の効果】
乳幼児のアトピー性皮膚炎において、その程度、治療推移のモニタリング、適切な薬剤を鑑別する手段を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】  実施例１の結果を示す図である。
【図２】  実施例２の結果を示す図である。
【図１】
0003893319.tif 000002
【図２】
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