【手続補正書】
【提出日】平成28年7月4日(2016.7.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
卵内の鳥類胚の性別、発生段階および／または生存能の非破壊的決定のための方法であって、
（ａ）卵の培養から孵化までの間の卵内の糖および／またはアミノ酸、その前躯体および代謝物から選択される第１の発生マーカー化合物を少なくとも検出し；
（ｂ）少なくとも前記第１の検出された発生マーカー化合物の量を測定し、および
（ｃ）雄および雌、前記胚の発生段階、ならびに／または、生きている胚および死亡した胚もしくは発達していない胚について確立したベースラインと前記量とを比較して、前記胚が生存能力があるかどうかを、雄および／もしくは雌を、ならびに／または前記胚の発生段階を決定すること
を有する、方法。
【請求項２】
少なくとも前記第１の発生マーカー化合物が、卵の胚液中で検出される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記胚液が、尿膜腔液である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
少なくとも第２のマーカーが工程（ａ）で検出され、少なくとも前記第１および前記第２のマーカーが分析され、発生マーカー比を確立するためにベースライン、および互いと比較される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記発生マーカーが、グルコース、コリンおよび／またはバリンから選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記鳥類の種が、ガッルス・ガッルス・ドメスティクス（Ｇａｌｌｕｓ  ｇａｌｌｕｓ  ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ）であり、この際第１またはさらなる発生マーカーが、雌胚に関して３０μＭ／ｍｌ〜７０μＭ／ｍｌの範囲内、雄胚に関して１μＭ／ｍｌ〜３０μＭ／ｍｌの範囲内の絶対量のグルコースである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
第１のまたはさらなる発生マーカーが、雌胚に関して１１０μＭ／ｍｌ〜１３０μＭ／ｍｌの範囲内、雄胚に関して９０μＭ／ｍｌから１１０μＭ／ｍｌ未満の絶対量のコリンである、請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
第１またはさらなる発生マーカーが、雌胚に関して１１０μＭ／ｍｌ〜１３０μＭ／ｍｌの範囲内、雄胚に関して９０μＭ／ｍｌから１１０μＭ／ｍｌ未満の絶対量のバリンである、請求項５〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
少なくとも第１および第２の発生マーカーが検出および分析され、この際前記絶対量および少なくとも第１のマーカーの第２のマーカーに対する比を用いて性別および／または生存能が決定される、請求項５〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記胚液を侵襲的にまたは非侵襲的に分析する工程を有する、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記分析が、核共鳴法を含む磁気共鳴画像形成法によって；赤外もしくはラマン分光法を含むスペクトル共鳴法によって；ならびに／または、適当な検出器が連結されたＧＣもしくはＨＰＬＣ、蛍光分光法および／もしくは酵素結合免疫吸着測定法のような分析法によって実施される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
卵内の胚が、生存能力のある雄であるか、または生存能力のある雌であるかを決定し、および、多数の生存能力のある雄卵を多数の生存能力のある雌卵から分離して、大部分が雄または大部分が雌の選別卵を形成することをさらに有する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記生存能力のある雌または雄の選別卵を培養および孵化処理し、大部分が雌または雄のヒヨコ集団を作ることをさらに有する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記胚の発生段階および孵化が起こるであろう時間を決定し、ならびに卵を同様のまたは等しい発生段階の多数の卵に分離することをさらに有する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記胚の生存能を決定し、および卵を多数の生存能力のある卵と生存能力のない卵に分離することをさらに有する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記生存能力のある選別卵に、予測される孵化日に沿って培養および孵化処理し、大部分が同じ発生段階のヒヨコ集団を形成することをさらに有する、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
生存胚を含有するもの、雄もしくは雌、および／または特定の発生段階として識別された各々の卵にウイルスまたはウイルス様物質を注入することをさらに有する、請求項１２または１５に記載の方法。
【請求項１８】
得られたワクチンを培養した卵から単離することをさらに有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１３または１６に記載の方法によって得られるヒヨコまたはヒヨコ集団。
【請求項２０】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の卵内の鳥類胚の発生段階の決定のための方法であって、
（ａ）卵内のアミノ酸、その前駆体および代謝物から選択される少なくとも第１の発生マーカー化合物を検出し；
（ｂ）少なくとも前記第１の検出した発生マーカー化合物の量を測定し、および
（ｃ）産卵から孵化までの発生段階について確立したベースラインと前記量を比較して、前記胚の発生段階および孵化が起こるであろう時間を決定すること
を有する、方法。
【請求項２１】
少なくとも第２のマーカーが、工程（ａ）で検出され、この際少なくとも前記第１および第２のマーカーが分析され、発生マーカー比を確立するために前記ベースライン、および互いと比較される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記鳥類の種が、ガッルス・ガッルス・ドメスティクス（Ｇａｌｌｕｓ  ｇａｌｌｕｓ  ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ）であり、この際前記発生マーカーが、トリメチルグリシン；アスパラギン酸塩および／もしくはアスパラギン；グルタミン酸塩および／もしくはグルタミン、ならびに／またはプロリンから選択される、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
少なくとも第１および第２の発生マーカーが検出および分析され、この際前記絶対量および少なくとも前記第１のマーカーの第２のマーカーに対する比が、前記発生段階を決定するために用いられる、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記胚液を侵襲的にまたは非侵襲的に分析する工程を有する、請求項２０〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記分析が、核共鳴法を含む磁気共鳴画像形成法；赤外もしくはラマン分光法を含むスペクトル共鳴法、ならびに／または適当な検出器が連結されたＧＣもしくはＨＰＬＣ、蛍光分光法および／もしくは酵素結合免疫吸着測定法のような分析法によって実施される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
実質的に同じ発生段階の卵を選択することをさらに有する、請求項２０〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記選別卵を発生段階に沿って培養および孵化処理し、実質的に同じ年齢のヒヨコ集団を形成することをさらに有する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
卵内の胚が生存能力があるかどうかを決定し、孵化および／またはワクチン注入工程の前に生存能力のない卵を分離することをさらに有する、請求項２０〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
胚が雄または雌であるかを決定し、多数の雄卵を多数の雌卵から分離して、大部分が雄または大部分が雌の選別卵を形成することをさらに有する、請求項２０〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記胚の発生段階に沿って、生存胚を含有するものおよび雄または雌として識別された各々の卵にウイルスまたはウイルス様物質を注入することをさらに有する、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
得られたワクチンを培養した卵から単離することをさらに有する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
請求項２０〜３１のいずれか一項に記載の方法によって得られるヒヨコまたはヒヨコ集団。
【請求項３３】
請求項１２〜１５、または２５のいずれか一項に記載の方法から得られる多数の卵。
【請求項３４】
動物および／もしくはヒト食料製造のための、化粧品化合物、医薬化合物および／もしくは栄養化合物の製造および／もしくは単離のための、発酵によるメタン生成のための、ならびに／または高品質の肥料生産のための、前記方法から得られる多数の卵の使用。