【誤訳訂正書】
【提出日】平成28年1月20日(2016.1.20)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１１】
フィードバック制御を採用しない哺乳類細胞培養物に連続的に供給する方法が提供される。一実施形態では、本方法は、（ａ）哺乳類細胞および培地を含む哺乳類細胞培養物を含む槽を提供することと、（ｂ）栄養素の消費速度（Ｋ１）、成長速度（Ｋ２１）、および細胞培養物の成長速度（Ｋ２２）の好ましい値を決定することと、（ｃ）細胞培養物に連続供給流を付与するように適合される装置であって、流速Ｆで培養物に連続的に供給するように適合されるコントローラモジュールを備える、装置を提供することであって、Ｆが、Ｋ１ｅｘｐ（Ｋ２１ｔ２＋Ｋ２２ｔ）として定義され、ｔが、供給流がバイオリアクターに添加される時間から供給流が停止される時間までの持続時間であり、Ｋ１、Ｋ２１、およびＫ２２が、（ｂ）で決定された値である、装置を提供することと、（ｄ）細胞培養物の連続供給を開始するために、コントローラモジュールを起動させることと、を含む。一実地形態では、Ｋ１、Ｋ２１、およびＫ２２は、実験によって決定される。別の実施形態では、Ｋ１、Ｋ２１、およびＫ２２はモデル化される。さらなる実施形態では、コントローラモジュールはコンピュータを備える。さらに別の実施形態では、供給流は、複数の栄養素を含む。さらなる実施形態では、細胞培養物の浸透圧は、方法を通して一定のままである。別の実施形態では、培養物に供給される栄養素はグルコースである。他の実施形態では、哺乳類細胞培養物はＣＨＯ細胞培養物である。さらなる実施形態では、コントローラモジュールは、細胞培養物中の予め選択された乳酸塩レベルに応答して起動され、一方で、別の実施形態では、コントローラモジュールは、細胞培養物中の予め選択されたグルコースレベルに応答して起動される。また別の実施形態では、コントローラモジュールは、アスパラギンまたはグルタミン等のアミノ酸の予め選択されたレベルに応答して起動される。またさらなる実施形態では、供給流は、二つ以上の栄養素を含む。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５９】
いくつかの場合では、理論的に計算されたＫ値は、満足のいくように予測され、供給関数に直接組み込むことができる。他の場合では、計算値を最適化するために、一つ以上の試験培養物、およびそれから導かれた成長時間、培地成分、栄養素要件、供給開始時間等に関する実験から得られたデータを使用して、理論的に計算されたＫ値を改良することが望ましい場合がある。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８１】
一実施形態では、実験による方法は、Ｋ１、Ｋ２１、およびＫ２２値を計算するために採用され得る。理論的ではなく、実験によって初期のＫ１、Ｋ２１、およびＫ２２値を得る利点は、経験的アプローチが、本方法が採用されるとき、強化された性能およびタンパク質生成をもたらす、より正確な値を生成することができる点である。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８６】
供給関数を導くまた別の例では、比成長速度をモデル化するために線形またはＳ字状方程式形態を使用するのではなく、成長プロファイルに一致する実験による供給関数を生成するために、代わりに細胞成長曲線がモデル化され得る。そのような供給関数は、適合度により、二次以上の多項式であろう。よって、供給関数は、比成長速度をモデル化するために、線形またはＳ字状関数を使用して最適化されるか、または完全に新しい供給関数が、成長または栄養素曲線に対する多項適合に基づき導かれ得、どの関数を使用するかの選択は、展開用途の方程式の単純さ、供給プロファイルを操作するための強化された自由度の必要性、または実際の細胞成長または栄養消費プロファイルに直接適合する改善された正確さを含む、任意の数の因子を考慮することに基づき得る。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８９】
初期Ｋ値は、次に、全供給混合物に関して最適化される。供給物は、様々な濃度で複数の基質を含むため、最適な性能を達成するために、実験による検証が好ましい。複数の基質に関して供給関数を最適化することに加えて、成長培地は、連続供給速度に最適に適合する栄養素濃度を調節するように開発され得る。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１００
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１００】
Ｋ１、Ｋ２１、およびＫ２２を決定する理論的アプローチは、最初はその容易さおよび単純さが好まれたが、最終的には、より正確なＫ値を提供する実験によるアプローチを探求することが決定された。実験によるアプローチを使用することにより、Ｋ値は、ボーラス供給の実行から生成された実際のグルコース消費容量データに一致するよう供給関数Ｆを適合することにより決定された。図１は、供給関数容量方程式がどのように実験から得られたグルコース容量消費データ曲線に密接に適合するかの一例をグラフにより図示する。このデータ一式に関して、適合度は、Ｋ１＝０．０４、Ｋ２１＝−０．０００１５、およびＫ２２＝０．０３４８のＫ値を生成した。よって、このＫ値一式は、試験の一条件として使用された。同様に、異なるＫ値一式も、供給関数容量方程式を他のボーラス供給実行のグルコースデータに適合することによって生成された。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０１】
グルコース消費容量曲線に最も適合するいくつかのＫ値一式は、評価のために選択された。図２は、細胞系１に関して試験された三つの連続グルコース供給関数を示す。それぞれの供給関数のＫ値は、説明文に記載される。供給関数のそれぞれは、異なる流速プロファイルを生成し、異なる総グルコース容量が添加される。これらは、どれが生成を通して範囲内に一貫してグルコース濃度を最良に維持するかを見るために、実験によって検証された。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０３】
図４は、細胞株２に適用される連続供給モデルの結果を示す。図４ａのデータは、連続グルコース供給が一貫して所定のグルコース濃度の既定範囲内の残留グルコース濃度を良好に維持することができることを示す。塗りつぶされた丸（●）によって表される実行は、二重連続グルコース（Ｋ１＝０．０５０４、Ｋ２１＝−０．０００１５、Ｋ２２＝０．０３３１）および供給（Ｋ１＝０．９６６７８、Ｋ２１＝−０．０００１５、Ｋ２２＝０．０２８８）の実行である。この実行のグルコース濃度範囲は２〜４ｇ／Ｌに維持された。白の丸（○）で表されるボーラスグルコースは、毎日６ｇ／Ｌまでの手動供給の結果として、予測され、典型的に観察された振動パターンを示した。他の連続グルコース実行は、経時的により高いグルコースを蓄積するか、または低いグルコースで終了した。図４ａに示される結果は、生成を通して望ましい一定のグルコースレベルを達成するために、供給関数が実験によって最適化され得ることを示す。要約すると、連続グルコース供給は自動化方式で設定範囲内に培養物中のグルコース濃度を維持し、一方、ボーラスグルコースは振動挙動を引き起こし、望ましい安定した一定のプロファイルではなかったことが観察された。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０７】
図５は、細胞系２に適用される連続供給方法の結果を示す。試験された連続グルコースの二つの変動は、（Ｋ１＝０．１０５、Ｋ２１＝−０．００００５１、Ｋ２２＝０．０１５５）および（Ｋ１＝０．０６９、Ｋ２１＝−０．００００４８、Ｋ２２＝０．０１８）であった。（Ｋ１＝０．１０５、Ｋ２１＝−０．００００５１、Ｋ２２＝０．０１５５）は、全ての二重連続グルコースおよび供給実行に使用された。図５ａは、実験による展開により、３〜６ｇ／Ｌの特定の範囲内にグルコース濃度を一貫して維持することが可能であることを示す。この範囲を達成する実行は、連続供給（ｋ１＝２．３８２１、ｋ２１＝−０．００００６、ｋ２２＝０．００９２）を伴う、連続グルコース（Ｋ１＝０．１０５、Ｋ２１＝−０．００００５１、Ｋ２２＝０．０１５５）を使用する塗りつぶされた四角形（■）である。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フィードバック制御を採用しないで、哺乳類細胞培養物に連続的に供給する方法であって、
（ａ）哺乳類細胞および培地を含む哺乳類細胞培養物を含む槽を提供すること、
（ｂ）栄養素の消費速度（Ｋ１）、前記細胞培養物の成長速度（Ｋ２１）および成長速度（Ｋ２２）の好ましい値を決定すること、
（ｃ）前記細胞培養物に連続供給流を付与するように適合される装置であって、流速Ｆで前記培養物に連続的に供給するように適合されるコントローラモジュールを備える装置を提供すること、ここで、
Ｆは、Ｋ１ｅｘｐ（Ｋ２１ｔ２＋Ｋ２２ｔ）として定義され、
ｔは、前記供給流がバイオリアクターに添加される時間から前記供給流が停止される時間までの持続時間であり、
Ｋ１、Ｋ２１、およびＫ２２は、（ｂ）で決定された値である、および
（ｄ）前記細胞培養物の連続供給を開始するために、前記コントローラモジュールを起動させること、
を含む、方法。
【請求項２】
Ｋ１、Ｋ２１、およびＫ２２が、実験によって決定される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｋ１、Ｋ２１、およびＫ２２が、モデル化される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
コントローラモジュールが、コンピュータを備える、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
供給流が、複数の栄養素を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
請求項１に記載の方法であって、細胞培養物の浸透圧が、前記方法を通して一定のままである、方法。
【請求項７】
栄養素が、グルコースである、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
哺乳類細胞培養物が、ＣＨＯ細胞培養物である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
コントローラモジュールが、予め選択された細胞培養物中の乳酸レベルに応答して起動される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
コントローラモジュールが、予め選択された細胞培養物中のグルコースレベルに応答して起動される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
コントローラモジュールが、予め選択されたアミノ酸のレベルに応答して起動される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
アミノ酸が、アスパラギンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
アミノ酸が、グルタミンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
供給流が、二つ以上の栄養素を含む、請求項１に記載の方法。