【手続補正書】
【提出日】平成28年7月11日(2016.7.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
出発細胞、若しくは哺乳類由来出発細胞、若しくはヒト由来出発細胞、若しくは多分化能性幹細胞、多能な幹細胞および最終分化細胞を含むグループから選ばれる出発細胞、若しくは多分化能性幹細胞であって刺激された状態である出発細胞、若しくは多能な幹細胞であって造血性細胞、骨髄細胞あるいはニューロンの細胞である出発細胞、若しくは最終分化細胞であって、繊維芽細胞、皮膚芽細胞、血球あるいはニューロン細胞である出発細胞をより少ない成熟状態に戻ることを誘導する若しく誘導を生体外で実行することを含む、出発細胞から、より少ない成熟細胞の生成の方法であって、以下から選ばれる生物学的物質若しくは化学物質と出発細胞との接触を含む方法；
(i-1) 細胞において、MUC1あるいはNMEタンパク質の量を増加させる物質;
(i-2) 細胞において、MUC1あるいはNMEタンパク質の量を増加させる物質であってMUC1またはNMEの量を増加させる生物学的種が、MUC1、MUC1*、NME1あるいはNME7をコードする核酸あるいはそれのバリアントである。
(ii) 細胞において、MUC1あるいはNMEタンパク質の発現を増加させる物質;
あるいは、
(iii) MUC1あるいはNMEタンパク質の活性を増加させる物質。
【請求項２】
以下から選ばれる接触である、請求項１に記載の方法；
（１−１）直接又は間接的に、MUC1あるいはNMEタンパク質の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含む。
（１−２）直接又は間接的に、MUC1あるいはNMEタンパク質の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含み、核酸が、MUC1をコードする。
（１−３）直接又は間接的に、MUC1あるいはNMEタンパク質の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含み、核酸が、MUC1*をコードする。
（１−４）直接又は間接的に、MUC1あるいはNMEタンパク質の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含み、核酸が、核酸が、MUC1*のリガンドをコードする。
（１−５）直接又は間接的に、MUC1あるいはNMEタンパク質の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含み、核酸が、核酸が、MUC1*のリガンドをコードし、リガンドが、MUC1*抗体あるいはNMEタンパク質である。
（２）直接又は間接的に、MUC1あるいはNMEタンパク質の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含み、NMEタンパク質が、NME7あるいはNME7バリアントである。
（３）直接又は間接的に、MUC1あるいはNMEタンパク質の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含み、NMEタンパク質が、NME1あるいはNME1バリアントである。
（４）直接又は間接的に、MUC1あるいはNMEタンパク質の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含み、MUC1が、MUC1*である。
（５）直接又は間接的に、MUC1開裂酵素の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含む。
（６）直接又は間接的に、MUC1開裂酵素の、量、発現又は活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることを含み、開裂酵素が、MMP-16、MMP-14あるいはADAM-17である。
（７）接触させる生物学的物質の生物学的種が、ペプチドかタンパク質である。
（８）接触させる生物学的物質の生物学的種が、ペプチドかタンパク質であって、該ペプチド又は該タンパク質が、NMEタンパク質又はそのバリアントである。
（９）接触させる生物学的物質の生物学的種が、ペプチドかタンパク質であって、該ペプチド又は該タンパク質が、NMEタンパク質であって、NMEタンパク質が、NME7である。
（１０）接触させる生物学的物質の生物学的種が、ペプチドかタンパク質であって、該ペプチド又は該タンパク質が、NMEタンパク質であって、NMEタンパク質が、NME１である。
（１１）接触させる生物学的物質の生物学的種が、ペプチドかタンパク質であって、該ペプチド又は該タンパク質が、MUC1あるいはMUC1の一部である。
（１２）接触させる生物学的物質の生物学的種が、ペプチドかタンパク質であって、該ペプチド又は該タンパク質が、細胞に入る能力を増強するモエティーあるいは配列で修飾される。
（１３）接触させる化学物質の化学的種が、直接又は間接的に、NME7、NME1、MUC1、MUC1*、MMP16、MMP14またはADAM17の、量、発現又は活性における増加を、起こす。
【請求項３】
生物学的物質若しくは化学物質と出発細胞との接触を含み、直接若しくは間接的に、Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc、Lin28、あるいはNanogの、量、発現若しくは活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることをさらに含む、
又は
生物学的物質若しくは化学物質と出発細胞との接触を含み、直接若しくは間接的に、Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc、Lin28、あるいはNanogの、量、発現若しくは活性における増加を起こす化学種と出発細胞を接触することをさらに含む、
又は
生物学的物質若しくは化学物質と出発細胞との接触を含み、直接若しくは間接的に、Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc、Lin28、あるいはNanogの、量、発現若しくは活性における増加を起こすペプチドかタンパク質と出発細胞を接触することをさらに含む、
又は
接触させる生物学的物質の生物学的種が、ペプチドかタンパク質であって、該ペプチド又は該タンパク質が、NMEタンパク質又はそのバリアントであって、直接若しくは間接的に、Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc、Lin28、あるいはNanogの、量、発現若しくは活性における増加を起こすペプチド又は蛋白質と出発細胞を接触することをさらに含む、
又は
接触させる生物学的物質の生物学的種が、ペプチドかタンパク質であって、該ペプチド又は該タンパク質が、NMEタンパク質又はそのバリアントであって、直接若しくは間接的に、Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc、Lin28またはNanogの、量、発現若しくは活性における増加を起こす核酸で出発細胞をトランスフェクトすることをさらに含む、
請求項１に記載の方法。
【請求項４】
より少ない成熟状態が、OCT4、SOX2、KLF4、KLF2、NANOG、LIN28、MUC1、NME1あるいはNME7の少なくとも1つの発現の増加によって特徴づけられる、又はより少ない成熟状態が、OCT4、SOX2、KLF4、KLF2、NANOG、LIN28、MUC1、NME1あるいはNME7の少なくとも1つの発現の増加によって特徴づけられ、多分化能の状態で特徴づけられる請求項１〜３のいずれか１に記載の方法。
【請求項５】
生物学的物質がタンパク質であり、タンパク質が以下から選択される請求項１に記載の方法；
（１）MUC1*リガンドである、
（２）タンパク質が、MUC1*リガンドであり、該リガンドが、MUC1*を二量化させる、
（３）タンパク質が、MUC1*リガンドであり、該リガンドが、NMEファミリーである、
（４）タンパク質が、MUC1*リガンドであり、該リガンドが、NMEファミリーであり、該NMEファミリーが、NME1、NME6あるいはNME7である、
（５）タンパク質が、MUC1*リガンドであり、該リガンドが、NMEファミリーであり、該NMEファミリーが、NME1、NME6あるいはNME7であり、該NME1と該NME6が、二量体の形式であり、該NME7が、モノマーの形式である。
（６）MUC1*のPSMGFR配列を認識する抗体である。
【請求項６】
化学物質が、化学的種であり、該化学的種が、以下から選ばれる請求項１に記載の方法；
（１）低分子物質である。
（２）低分子物質であって、該低分子物質が、MUC1の転写、MUC1開裂酵素の転写あるいはNMEファミリーメンバーの転写を増強する。
（３）低分子物質であって、該低分子物質が、MUC1の転写、MUC1開裂酵素の転写あるいはNMEファミリーメンバーの転写を増強すし、該開裂酵素が、MMP-16、MMP-14あるいはADAM-17である。
（４）低分子物質であって、該低分子物質が、MUC1の開裂を増強する。
（５）低分子物質であって、該低分子物質が、MUC1の開裂を増強し、ホルボールエステルである。
【請求項７】
出発細胞を、以下から選ばれる一と接触させることをさらに含む請求項１に記載の方法；
（１）多分化能を導く遺伝子産物の発現を増加させる分子。
（２）多分化能を導く遺伝子産物の発現を増加させる分子であって、該分子は、OCT4、SOX2、NANOG、KLF4あるいはLIN28の発現を増加する。
（３）多分化能を導く遺伝子産物の発現を増加させる分子であって、該分子は、OCT4およびSOX2の発現を増加させる。
【請求項８】
細胞が、哺乳類由来若しくはヒト由来である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
以下のいずれかの工程を含む、出発細胞、若しくは哺乳類由来出発細胞、若しくはヒト由来出発細胞、若しくは多分化能性幹細胞、多能な幹細胞および最終分化細胞を含むグループから選ばれる出発細胞、若しくは多分化能性幹細胞であって刺激された状態である出発細胞、若しくは多能な幹細胞であって造血性細胞、骨髄細胞あるいはニューロンの細胞である出発細胞、若しくは最終分化細胞であって、繊維芽細胞、皮膚芽細胞、血球あるいはニューロン細胞である出発細胞をより少ない成熟細胞への戻りを誘導する若しく誘導を生体外で実行することを含む出発細胞からより少ない成熟細胞の生成方法；
（１）出発細胞を、細胞においてMUC1またはNMEの量を増加させる生物学的又は化学的物質と、接触させること、そして、さらに、出発細胞を、OCT4、SOX2、NANOG、KLF4またはLIN28の1つ以上の量を増加させる生物学的又は化学的種と接触させること。
（２）出発細胞を、細胞においてMUC1またはNMEの量を増加させる生物学的又は化学的物質と、接触させること、そして、さらに、出発細胞を、OCT4、SOX2、NANOG、KLF4またはLIN28の1つ以上の量を増加させる生物学的又は化学的種と接触させることであって、MUC1またはNMEの量を増加させる生物学的種が、MUC1、MUC1*、NME1あるいはNME7をコードする核酸あるいはそれのバリアントである。
（３）出発細胞を、細胞においてMUC1またはNMEの量を増加させる生物学的又は化学的物質と、接触させること、そして、さらに、出発細胞を、OCT4、SOX2、NANOG、KLF4またはLIN28の1つ以上の量を増加させる生物学的又は化学的種と接触させることであって、出発細胞が、哺乳類である。
【請求項１０】
生成された細胞が、その後分化される、若しくは生体外で分化される、若しくは生体内で分化される請求項１〜９のいずれか１に記載の方法。
【請求項１１】
生成された細胞を分化することを含み、それの必要のある患者へ当該分化された細胞を投与する、又はそれの必要のある患者への生成された細胞若しくは患者由来の生成された細胞若しくはドナー由来の生成された細胞を投与する、又は請求項１〜９の方法によって生成された細胞若しくは当該生成された細胞の分化された細胞からなる医薬。
【請求項１２】
以下を含む幹細胞を分化する方法;
(i)請求項１〜９のいずれか１に記載の方法を実行することを含む、出発細胞を、より少ない成熟状態へ戻すこと又はより少ない成熟状態に維持することを誘導すること、及び
(ii)より少ない成熟状態を、分化をさせること。
【請求項１３】
細胞が、外胚葉、中胚葉、又は内胚葉細胞へ分化される請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜９のいずれか１に記載の方法によって作られた誘導多分化能細胞の、対象への注入方法。
【請求項１５】
以下から選ばれる剤の有効量をそれの必要のある人に投与又は注入、移植あるいは局所適用によって投与することを含む傷のサイトで、幹細胞の誘導又は維持によって処置される、疾病または傷の治療剤；
多分化能誘発剤、MUC1*活性剤又はNME。
【請求項１６】
ある細胞をNMEと接触させることを含む以下の目的での利用；
退化した幹細胞を救う方法、又は細胞の多分化能の誘導の効率を増加させる方法、又は細胞若しくは幹細胞においてMUC1又はMUC1*の発現を増加させる方法、又は出発細胞を、bFGFがない状態で、NMEと接触させることを含む、誘導多分化能性幹細胞を生成する方法。