【手続補正書】
【提出日】平成28年5月30日(2016.5.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５０nM未満のＫｄでＰ２Ｘ７、特にヒトＰ２Ｘ７（配列番号１〜３）、に結合することができる免疫グロブリン単一可変ドメインを少なくとも１つ含む、Ｐ２Ｘ７関連疾患の処置における使用のためのポリペプチドであって、ここで、該Ｐ２Ｘ７、特にヒトＰ２Ｘ７（配列番号１〜３）、への該免疫グロブリン単一可変ドメインの結合が、Ｐ２Ｘ７、特にヒトＰ２Ｘ７（配列番号１〜３）、の活性を阻害し、Ｐ２Ｘ７関連疾患が、好ましくは、ＭＳ、ＩＢＤ、神経因性疼痛、てんかん、脳卒中、糖尿病、高血圧、及び癌からなる群より選択される、ポリペプチド。
【請求項２】
請求項１記載のポリペプチドであって、ここで、少なくとも１つの免疫グロブリン単一可変ドメインが、式１：
ＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４  （１）；
ここで、ＦＲ１〜ＦＲ４が、フレームワーク領域１〜４を指し、免疫グロブリン単一可変ドメインのフレームワーク領域（ＦＲ）であり；そして
−  ここで、ＣＤＲ１は：
−  配列番号３４〜４７、
−  配列番号３４〜４７と少なくとも８０%アミノ酸同一性を有するポリペプチド、及び
−  配列番号３４〜４７と３、２、又は１アミノ酸の違いを有するポリペプチド
からなる群より選ばれ、そして
−  ここで、ＣＤＲ２は：
−  配列番号６２〜７５、
−  配列番号６２〜７５と少なくとも８０%アミノ酸同一性を有するポリペプチド、及び
−  配列番号６２〜７５と３、２、又は１アミノ酸の違いを有するポリペプチド
からなる群より選ばれ、そして
−  ここで、ＣＤＲ３は：
−  配列番号９０〜１０３、
−  配列番号９０〜１０３と少なくとも８０%アミノ酸同一性を有するポリペプチド、及び
−  配列番号９０〜１０３と３、２、又は１アミノ酸の違いを有するポリペプチド
からなる群より選ばれる；
のアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項３】
請求項２記載のポリペプチドであって、少なくとも１つの免疫グロブリン単一可変ドメインが、免疫グロブリン単一可変ドメインの群：
−  ＣＤＲ１は配列番号３４であり、ＣＤＲ２は配列番号６２であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９０である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３５であり、ＣＤＲ２は配列番号６３であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９１である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４０であり、ＣＤＲ２は配列番号６８であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９６である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３６であり、ＣＤＲ２は配列番号６４であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９２である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３７であり、ＣＤＲ２は配列番号６５であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９３である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３８であり、ＣＤＲ２は配列番号６６であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９４である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３９であり、ＣＤＲ２は配列番号６７であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９５である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４１であり、ＣＤＲ２は配列番号６９であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９７である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４２であり、ＣＤＲ２は配列番号７０であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９８である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４３であり、ＣＤＲ２は配列番号７１であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９９である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４４であり、ＣＤＲ２は配列番号７２であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号１００である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４５であり、ＣＤＲ２は配列番号７３であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号１０１である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４６であり、ＣＤＲ２は配列番号７４であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号１０２である；及び
−  ＣＤＲ１は配列番号４７であり、ＣＤＲ２は配列番号７５であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号１０３である；
より選ばれる、ポリペプチド。
【請求項４】
ポリペプチドが、配列番号６〜１９と８０%を上回る配列同一性、好ましくは、配列番号６〜１９と９０%を上回る配列同一性を伴うアミノ酸配列を有する免疫グロブリン単一可変ドメインを含むポリペプチドからなる群より選択される、請求項２又は３記載のポリペプチド。
【請求項５】
Ｐ２Ｘ７に結合することができる少なくとも２つの免疫グロブリン単一可変ドメインを含む、請求項１〜４のいずれか一項記載のポリペプチド。
【請求項６】
請求項５に記載のポリペプチドであって、少なくとも２つの免疫グロブリン単一可変ドメインが式１；
ＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４  （１）；
ここで、ＦＲ１〜ＦＲ４が、フレームワーク領域１〜４を指し、免疫グロブリン単一可変ドメインのフレームワーク領域（ＦＲ）であり；そして
−  ここで、ＣＤＲ１は：
−  配列番号３４〜４７、
−  配列番号３４〜４７と少なくとも８０%アミノ酸同一性を有するポリペプチド、及び
−  配列番号３４〜４７と３、２、又は１アミノ酸の違いを有するポリペプチド
からなる群より選ばれ、そして
−  ここで、ＣＤＲ２は：
−  配列番号６２〜７５、
−  配列番号６２〜７５と少なくとも８０%アミノ酸同一性を有するポリペプチド、及び
−  配列番号６２〜７５と３、２、又は１アミノ酸の違いを有するポリペプチド
からなる群より選ばれ、そして
−  ここで、ＣＤＲ３は：
−  配列番号９０〜１０３、
−  配列番号９０〜１０３と少なくとも８０%アミノ酸同一性を有するポリペプチド、及び
−  配列番号９０〜１０３と３、２、又は１アミノ酸の違いを有するポリペプチド
からなる群より選ばれる；
のアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項７】
請求項６記載のポリペプチドであって、ここで、少なくとも２つの免疫グロブリン単一可変ドメインが、免疫グロブリン単一可変ドメインの群：
−  ＣＤＲ１は配列番号３４であり、ＣＤＲ２は配列番号６２であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９０である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３５であり、ＣＤＲ２は配列番号６３であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９１である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４０であり、ＣＤＲ２は配列番号６８であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９６である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３６であり、ＣＤＲ２は配列番号６４であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９２である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３７であり、ＣＤＲ２は配列番号６５であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９３である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３８であり、ＣＤＲ２は配列番号６６であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９４である；
−  ＣＤＲ１は配列番号３９であり、ＣＤＲ２は配列番号６７であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９５である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４１であり、ＣＤＲ２は配列番号６９であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９７である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４２であり、ＣＤＲ２は配列番号７０であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９８である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４３であり、ＣＤＲ２は配列番号７１であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号９９である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４４であり、ＣＤＲ２は配列番号７２であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号１００である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４５であり、ＣＤＲ２は配列番号７３であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号１０１である；
−  ＣＤＲ１は配列番号４６であり、ＣＤＲ２は配列番号７４であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号１０２である；及び
−  ＣＤＲ１は配列番号４７であり、ＣＤＲ２は配列番号７５であり、及び、ＣＤＲ３は配列番号１０３である；
より選ばれる、ポリペプチド。
【請求項８】
請求項５〜７のいずれか一項記載のポリペプチドであって、ここで、ポリペプチドが、配列番号６〜１９と８０%を上回る配列同一性、好ましくは、配列番号６〜１９と９０%を上回る配列同一性を伴うアミノ酸配列を各々有する少なくとも２つの免疫グロブリン単一可変ドメインを含むポリペプチドからなる群より選択されるポリペプチド。
【請求項９】
Ｐ２Ｘ７に結合することができる少なくとも２つの免疫グロブリン単一可変ドメインを含む、請求項５〜８のいずれか一項記載のポリペプチドであって、ここで、Ｐ２Ｘ７に結合することができる前記の少なくとも２つの免疫グロブリン単一可変ドメインが、同じでありうる又は異なりうるポリペプチド。
【請求項１０】
結合Ａｌｂ８（配列番号１２６）又はＡｌｂ１１（配列番号１２５）などのヒト血清アルブミンに結合している免疫グロブリン単一可変ドメインをさらに含む、請求項１〜９のいずれか一項記載のポリペプチド。
【請求項１１】
ポリペプチドが、配列番号１１８〜１２４と８０%を上回る配列同一性を伴うアミノ酸配列を有するポリペプチドと、配列番号１１８〜１２４と９０%を上回る配列同一性を伴うアミノ酸配列を有するポリペプチドと、配列番号１１８〜１２４のアミノ酸配列を有するポリペプチドとからなる群より選択される、請求項１〜１０のいずれか一項記載のポリペプチド。
【請求項１２】
Ｐ２Ｘ７に対して向けられた少なくとも２つの免疫グロブリン単一可変ドメインを含むポリペプチドであって、ここで
ａ）少なくとも１つの第１免疫グロブリン単一可変ドメインが、Ｐ２Ｘ７の第１抗原決定基、エピトープ、部分、ドメイン、サブユニット、又は立体構造に対して向けられ；及び、ここで、
ｂ）少なくとも１つの第２免疫グロブリン単一可変ドメインが、第１抗原決定基、エピトープ、部分、ドメイン、サブユニット、又は立体構造とはそれぞれ異なる、前記Ｐ２Ｘ７の第２抗原決定基、エピトープ、部分、ドメイン、サブユニット、又は立体構造に対して向けられるポリペプチド。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項記載のポリペプチドであって、ここで、前記免疫グロブリン単一可変ドメインが、ドメイン抗体、ドメイン抗体としての使用のために適しているアミノ酸配列、単一ドメイン抗体、単一ドメイン抗体としての使用のために適しているアミノ酸配列、ｄＡｂ、ｄＡｂとしての使用のために適しているアミノ酸配列、ナノボディ、ＶＨＨ配列、ヒト化ＶＨＨ配列、又はラクダ化ＶＨ配列からなるポリペプチド。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項記載のポリペプチドを産生するための方法であって、前記方法が、以下の工程：
ａ）適した宿主細胞もしくは宿主生物において又は別の適した発現系において、請求項１〜１３のいずれか一項記載のポリペプチドをコードする核酸又はヌクレオチド配列を発現させること；場合により、以下が続く：
ｂ）前記免疫グロブリン単一可変ドメイン又は前記ポリペプチドを単離及び／又は精製すること
を少なくとも含む、方法。
【請求項１５】
少なくとも以下の工程：
ａ）免疫グロブリン単一可変ドメインのセット、コレクション、又はライブラリーを提供すること；及び
ｂ）Ｐ２Ｘ７及び特にヒトＰ２Ｘ７（配列番号１〜３）に結合することができる及び／又はそれについての親和性を有する免疫グロブリン単一可変ドメインについて、免疫グロブリン単一可変ドメインの前記セット、コレクション、又はライブラリーをスクリーニングすること；及び
ｃ）Ｐ２Ｘ７及び特にヒトＰ２Ｘ７（配列番号１〜３）に結合することができる及び／又はそれについての親和性を有するアミノ酸配列を単離すること
を含む、Ｐ２Ｘ７及び特にヒトＰ２Ｘ７（配列番号１〜３）に対して向けられた免疫グロブリン単一可変ドメインをスクリーニングするための方法。
【請求項１６】
５０nM未満のＫｄでＰ２Ｘ７に結合することができる免疫グロブリン単一可変ドメインであって、Ｐ２Ｘ７への免疫グロブリン単一可変ドメインの結合によって、Ｐ２Ｘ７の活性が阻害される、免疫グロブリン単一可変ドメイン。