【手続補正書】
【提出日】平成28年10月4日(2016.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１と少なくとも８５％同一なグランザイムＢ（ＧｒＢ）コード配列を含む組換えポリペプチドであって、前記ＧｒＢコード配列が、Ｃｙｓに対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失および以下の特徴：
（ａ）Ａｓｐ３７に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｂ）Ａｓｎ５１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｃ）Ａｓｎ８４に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｄ）Ａｒｇ９６に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｅ）Ａｒｇ１００に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｆ）Ａｒｇ１０２に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｇ）Ａｓｐ１５０に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｈ）Ａｒｇ２０１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｉ）Ｌｙｓ２２１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｊ）Ｌｙｓ２２２に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｋ）Ｌｙｓ２２５に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；または
（ｌ）Ａｒｇ２２６に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失
の１つまたは複数を含む、組換えポリペプチド。
【請求項２】
Ｃｙｓを含む追加的なアミノ酸配列をさらに含み、前記アミノ酸配列が前記ＧｒＢコード配列に対してＣ末端側に位置する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記追加的なアミノ酸が、前記ＧｒＢコード配列に対してＣ末端側に位置する配列ＳＳＣＳＧＳＡ（配列番号１２）を含む、請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記ＧｒＢコード配列が、前記特徴のうちの２つ、３つ、４つまたは５つを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
Ａｓｐ３７またはＡｓｐ１５０に対応する位置におけるアミノ酸置換または欠失を含む、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項６】
Ａｓｎ５１またはＡｓｎ８４に対応する位置におけるアミノ酸置換または欠失を含む、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項７】
Ａｒｇ９６、Ａｒｇ１００、Ａｒｇ１０２、Ａｒｇ２０１またはＡｒｇ２２６に対応する位置におけるアミノ酸置換または欠失を含む、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項８】
Ｌｙｓ２２１、Ｌｙｓ２２２またはＬｙｓ２２５に対応する位置におけるアミノ酸置換または欠失を含む、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項９】
Ｃｙｓ２１０に対応する位置におけるＡｌａ置換を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
細胞結合性部分と結合体化または融合している、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
前記細胞結合性部分とチオエステル連結によって結合体化している、請求項１０に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
前記ＧｒＢコード配列に対してＣ末端側に位置する細胞結合性部分を含む追加的なアミノ酸配列と融合している、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
前記細胞結合性部分がＶＥＧＦ、ＢＬｙＳ、抗体または前述のいずれかの細胞結合性部分である、請求項１０に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
前記抗体が、モノクローナル、キメラ抗体、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単一ドメイン抗体、Ｆｖ、または単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
前記抗体がヒト抗体、ヒト化抗体または脱免疫化抗体である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
前記抗体が、１５Ａ８抗体、ＺＭＥ−０１８抗体、ＳｃＦｖＭＥＬ抗体、セツキシマブ抗体またはトラスツズマブ抗体である、請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
前記細胞結合性部分ががん細胞において発現されるタンパク質、炭水化物または脂質に結合する、請求項１０に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
前記細胞結合性部分が、ＧＰ２４０、５Ｔ４、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＣＤ−３３、ＣＤ−３８、ｆｌｔ１、Ｆｌｋ−１、ＣＥＡ、ＦＧＦＲ３、ＩＧＦＢＰ２またはＩＧＦ−１Ｒに結合する、請求項１０に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
前記ポリペプチドまたは前記細胞結合性部分が画像化剤とさらに結合体化している、請求項１０に記載のポリペプチド。
【請求項２０】
請求項１に記載のＧｒＢポリペプチドを薬学的に許容される担体中に含む組成物。
【請求項２１】
前記ＧｒＢコード配列が、配列番号１と少なくとも９０％同一である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項２２】
前記ＧｒＢコード配列が、配列番号１と少なくとも９５％同一である、請求項２１に記載のポリペプチド。
【請求項２３】
前記ＧｒＢコード配列が、Ｌｙｓ２７および／またはＡｒｇ２８に対応する位置におけるアミノ酸置換または欠失をさらに含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項２４】
前記ＧｒＢコード配列が、アミノ酸置換Ｋ２７Ｅおよび／またはＲ２８Ａを含む、請求項２３に記載のポリペプチド。
【請求項２５】
Ｎ末端にＩＩＧＧ、ＩＶＧＧまたはＩＬＧＧを有する短縮型セリンプロテアーゼと融合した、選択されたプロテアーゼによる切断を受けやすい切断部位を含む組換えポリペプチドであって、前記選択されたプロテアーゼによる前記ポリペプチドの切断の際に、Ｎ末端にイソロイシンを有する前記短縮型セリンプロテアーゼが前記ポリペプチドから放出される、組換えポリペプチド。
【請求項２６】
前記プロテアーゼ切断部位がカスパーゼ切断配列である、請求項２５に記載のポリペプチド。
【請求項２７】
前記プロテアーゼ切断配列がカスパーゼ−３切断配列である、請求項２６に記載のポリペプチド。
【請求項２８】
前記切断部位に対してＮ末端側に位置する細胞結合性部分をさらに含む、請求項２５に記載のポリペプチド。
【請求項２９】
前記細胞結合性部分が、ＨＥＲ２に結合する、請求項２８に記載のポリペプチド。
【請求項３０】
前記細胞結合性部分が、ＶＥＧＦ、ＢＬｙＳ、抗体または前述のいずれかの細胞結合性部分である、請求項２８に記載のポリペプチド。
【請求項３１】
前記細胞結合性部分が抗体重鎖または抗体軽鎖である、請求項３０に記載のポリペプチド。
【請求項３２】
前記抗体重鎖または前記抗体軽鎖がヒトＩｇＧ抗体重鎖またはヒトＩｇＧ抗体軽鎖である、請求項３１に記載のポリペプチド。
【請求項３３】
前記セリンプロテアーゼがグランザイムである、請求項２５に記載のポリペプチド。
【請求項３４】
前記グランザイムが、配列番号１と少なくとも８０％同一のグランザイムＢ（ＧｒＢ）である、請求項３３に記載のポリペプチド。
【請求項３５】
前記選択されたプロテアーゼにより切断された際に生じる前記ＧｒＢポリペプチドがアミノ末端に配列ＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２７）を含む、請求項３４に記載のポリペプチド。
【請求項３６】
配列ＹＶＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２６）；ＲＶＲＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２９）；ＲＶＲＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３０）；（Ｉ／Ａ）（Ｅ／Ｄ）ＧＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３１）；ＹＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３２）；ＷＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３３）；ＤＶＡＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３４）；ＤＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３５）；ＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３６）；ＤＭＱＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３７）；ＬＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３８）；ＬＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３９）；ＶＥＩＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４０）；ＶＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４１）；ＩＥＴＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４２）；ＬＥＴＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４３）またはＩＥＡＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４４）を含む、請求項３５に記載のポリペプチド。
【請求項３７】
配列ＹＶＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２６）を含む、請求項３６に記載のポリペプチド。
【請求項３８】
細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）をさらに含む、請求項２５に記載のポリペプチド。
【請求項３９】
前記短縮型セリンプロテアーゼが、グランザイムＢ、グランザイムＡ、グランザイムＨ、グランザイムＫ、グランザイムＭ、カテプシンＧ、キマーゼ、ミエロブラスチン、カリクレイン−１４、補体因子Ｄ、ＰＲＳＳ３タンパク質、トリプシン−１、セリンプロテアーゼ５７およびＰＲＳＳＬ１からなる群から選択される、請求項２５に記載のポリペプチド。
【請求項４０】
前記短縮型セリンプロテーゼが、Ｎ末端に配列ＩＩＧＧを有する、請求項２５に記載のポリペプチド。
【請求項４１】
前記プロテアーゼ切断部位が、哺乳動物の細胞内プロテアーゼによって切断を受けやすい切断部位である、請求項２５に記載のポリペプチド。
【請求項４２】
請求項２５に記載のポリペプチドを薬学的に許容される担体中に含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
Ｎ末端にＩＩＧＧ、ＩＶＧＧまたはＩＬＧＧを有する短縮型セリンプロテアーゼと融合した、選択されたプロテアーゼによる切断を受けやすい切断部位を含む組換えポリペプチドであって、前記選択されたプロテアーゼによる前記ポリペプチドの切断の際に、Ｎ末端にイソロイシンを有する前記短縮型セリンプロテアーゼが前記ポリペプチドから放出される、組換えポリペプチド。
（項目２）
前記プロテアーゼ切断部位がカスパーゼ切断配列、フューリン切断配列、グランザイムＢ切断配列または第Ｘａ因子切断配列である、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３）
前記プロテアーゼ切断配列がカスパーゼ−３切断配列である、項目２に記載のポリペプチド。
（項目４）
前記切断部位に対してＮ末端側に位置する細胞結合性部分をさらに含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目５）
前記細胞結合性部分が、ＧＰ２４０、５Ｔ４、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＣＤ−３３、ＣＤ−３８、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＣＥＡ、ＦＧＦＲ３、ＩＧＦＢＰ２、Ｆｎ１４またはＩＧＦ−１Ｒに結合する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目６）
前記細胞結合性部分が、ＶＥＧＦ、ＢＬｙＳ、抗体または前述のいずれかの細胞結合性部分である、項目４に記載のポリペプチド。
（項目７）
前記細胞結合性部分が抗体重鎖または抗体軽鎖である、項目６に記載のポリペプチド。
（項目８）
前記抗体重鎖または前記抗体軽鎖がヒトＩｇＧ抗体重鎖またはヒトＩｇＧ抗体軽鎖である、項目７に記載のポリペプチド。
（項目９）
前記セリンプロテアーゼがグランザイムである、項目１に記載のポリペプチド。
（項目１０）
前記グランザイムが、配列番号１と少なくとも８０％同一のグランザイムＢ（ＧｒＢ）である、項目９に記載のポリペプチド。
（項目１１）
前記選択されたプロテアーゼにより切断された際に生じる前記ＧｒＢポリペプチドがアミノ末端に配列ＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２７）を含む、項目１０に記載のポリペプチド。
（項目１２）
配列ＹＶＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２６）；ＲＶＲＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２９）；ＲＶＲＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３０）；（Ｉ／Ａ）（Ｅ／Ｄ）ＧＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３１）；ＹＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３２）；ＷＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３３）；ＤＶＡＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３４）；ＤＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３５）；ＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３６）；ＤＭＱＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３７）；ＬＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３８）；ＬＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３９）；ＶＥＩＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４０）；ＶＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４１）；ＩＥＴＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４２）；ＬＥＴＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４３）またはＩＥＡＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４４）を含む、項目１１に記載のポリペプチド。
（項目１３）
配列ＹＶＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２６）を含む、項目１２に記載のポリペプチド。
（項目１４）
細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）をさらに含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目１５）
前記ＧｒＢコード配列が、以下の特徴：
（ａ）Ａｓｐ３７に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｂ）Ａｓｎ５１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｃ）Ａｓｎ８４に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｄ）Ａｒｇ９６に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｅ）Ａｒｇ１００に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｆ）Ａｒｇ１０２に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｇ）Ａｓｐ１５０に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｈ）Ａｒｇ２０１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｉ）Ｃｙｓ２１０に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｊ）Ｌｙｓ２２１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｋ）Ｌｙｓ２２２に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｌ）Ｌｙｓ２２５に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；または
（ｍ）Ａｒｇ２２６に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失
の１つまたは複数を含む、項目１０に記載のポリペプチド。
（項目１６）
前記ＧｒＢコード配列が、Ｌｙｓ２７およびＡｒｇ２８に対応する位置におけるアミノ酸置換を含む、項目１０に記載のポリペプチド。
（項目１７）
Ｌｙｓ２７およびＡｒｇ２８に対応する位置における前記アミノ酸置換がＫ２７ＥまたはＫ２７ＬおよびＲ２８Ａである、項目１６に記載のポリペプチド。
（項目１８）
前記ＧｒＢコード配列が、８２ＰＫＮ８４に対応する位置において置換された配列ＰＶＰＮを含む、項目１０に記載のポリペプチド。
（項目１９）
ヒト抗体重鎖およびヒト抗体軽鎖を含む抗体標的化部分であって、前記抗体軽鎖、前記抗体重鎖またはその両方が、前記抗体軽鎖および／または前記抗体重鎖に対してＣ末端側に位置する短縮型セリンプロテアーゼを含む、抗体標的化部分。
（項目２０）
前記短縮型セリンプロテアーゼが、項目１０から１８までのいずれか一項に記載のＧｒＢポリペプチドである、項目１９に記載の抗体標的化剤。
（項目２１）
前記抗体がヒトＩｇＧである、項目１９に記載の抗体標的化剤。
（項目２２）
前記抗体がヒトＩｇＧ１である、項目２１に記載の抗体標的化剤。
（項目２３）
血清安定性のあるＧｒＢポリペプチドを提供する方法であって、項目１０から１８までのいずれか一項に記載の組換えポリペプチドを得るステップを含む、方法。
（項目２４）
配列番号１と少なくとも８０％同一なグランザイムＢ（ＧｒＢ）コード配列を含む組換えポリペプチドであって、前記ＧｒＢコード配列が、以下の特徴：
（ａ）Ａｓｐ３７に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｂ）Ａｓｎ５１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｃ）Ａｓｎ８４に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｄ）Ａｒｇ９６に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｅ）Ａｒｇ１００に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｆ）Ａｒｇ１０２に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｇ）Ａｓｐ１５０に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｈ）Ａｒｇ２０１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｉ）Ｃｙｓ２１０に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｊ）Ｌｙｓ２２１に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｋ）Ｌｙｓ２２２に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；
（ｌ）Ｌｙｓ２２５に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失；または
（ｍ）Ａｒｇ２２６に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失
の１つまたは複数を含む、組換えポリペプチド。
（項目２５）
Ｃｙｓを含むアミノ酸配列をさらに含み、前記アミノ酸配列が前記ＧｒＢコード配列に対してＣ末端側に位置する、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目２６）
前記ＧｒＢコード配列に対してＣ末端側に位置する配列ＳＳＣＳＧＳＡ（配列番号１２）をさらに含む、項目２５に記載のポリペプチド。
（項目２７）
前記ＧｒＢコード配列が、前記特徴のうちの２つ、３つ、４つまたは５つを含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目２８）
Ａｓｐ３７に対応する位置に極性側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目２９）
Ａｓｐ３７に対応する位置におけるＡｓｎ置換を含む、項目２８に記載のポリペプチド。
（項目３０）
Ａｓｐ１５０に対応する位置に極性側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３１）
Ａｓｐ１５０に対応する位置におけるＡｓｎ置換を含む、項目３０に記載のポリペプチド。
（項目３２）
Ａｓｎ５１に対応する位置におけるＡｌａまたはＳｅｒ置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３３）
Ａｓｎ８４に対応する位置におけるＡｌａまたはＳｅｒ置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３４）
Ｃｙｓ２１０に対応する位置におけるＡｌａ置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３５）
Ａｒｇ９６に対応する位置に極性または正に荷電した側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３６）
Ａｒｇ１００に対応する位置に極性または正に荷電した側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３７）
Ａｒｇ１０２に対応する位置に極性または正に荷電した側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３８）
Ａｒｇ２０１に対応する位置に極性または正に荷電した側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目３９）
Ｌｙｓ２２１に対応する位置に極性または正に荷電した側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目４０）
Ｌｙｓ２２２に対応する位置に極性または正に荷電した側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目４１）
Ｌｙｓ２２５に対応する位置に極性または正に荷電した側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目４２）
Ａｒｇ２２６に対応する位置に極性または正に荷電した側鎖を有する残基のアミノ酸置換を含む、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目４３）
細胞結合性部分と結合体化または融合している、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目４４）
前記細胞結合性部分とチオエステル連結によって結合体化している、項目４３に記載のポリペプチド。
（項目４５）
前記ＧｒＢコード配列に対してＣ末端側に位置する細胞結合性部分と融合している、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目４６）
前記細胞結合性部分がＶＥＧＦ、ＢＬｙＳ、抗体または前述のいずれかの細胞結合性部分である、項目４３に記載のポリペプチド。
（項目４７）
前記抗体が、モノクローナル、キメラ抗体、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単一ドメイン抗体、Ｆｖ、または単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体である、項目４６に記載のポリペプチド。
（項目４８）
前記抗体がヒト抗体、ヒト化抗体または脱免疫化抗体である、項目４６に記載のポリペプチド。
（項目４９）
前記抗体が、１５Ａ８抗体、ＺＭＥ−０１８抗体、ＳｃＦｖＭＥＬ抗体、セツキシマブ抗体またはトラスツズマブ抗体である、項目４６に記載のポリペプチド。
（項目５０）
前記細胞結合性部分ががん細胞において発現されるタンパク質、炭水化物または脂質に結合する、項目４３に記載のポリペプチド。
（項目５１）
前記細胞結合性部分が、ＧＰ２４０、５Ｔ４、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＣＤ−３３、ＣＤ−３８、ｆｌｔ１、Ｆｌｋ−１、ＣＥＡ、ＦＧＦＲ３、ＩＧＦＢＰ２またはＩＧＦ−１Ｒに結合する、項目４３に記載のポリペプチド。
（項目５２）
前記ポリペプチドまたは前記細胞結合性部分が画像化剤とさらに結合体化している、項目４３に記載のポリペプチド。
（項目５３）
（ａ）配列番号１と少なくとも８０％同一な組換えグランザイムＢ（ＧｒＢ）ポリペプチド、
（ｂ）細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）、および
（ｃ）細胞標的化ポリペプチド
を含む組換えポリペプチドであって、前記ＣＰＰが前記ＧｒＢポリペプチドと前記細胞標的化ポリペプチドの間に位置するか、または前記ＣＰＰが前記細胞標的化ポリペプチドに対してＣ末端側に位置する、組換えポリペプチド。
（項目５４）
前記ＣＰＰがＴ１、Ｔ２、ＩＮＦ７または２６である、項目５３に記載の組換えポリペプチド。
（項目５５）
前記細胞標的化ポリペプチドがＺＭＥまたは４Ｄ５である、項目５３に記載の組換えポリペプチド
（項目５６）
Ｎ末端からＣ末端までに、前記ＧｒＢポリペプチド、第１のリンカー、Ｔ１またはＩＮＦ７  ＣＰＰ、第２のリンカーおよびＺＭＥ抗体を含む、項目５３に記載の組換えポリペプチド。
（項目５７）
Ｎ末端からＣ末端までに、前記ＧｒＢポリペプチド、第１のリンカー、４Ｄ５抗体、第２のリンカーおよび２６  ＣＰＰを含む、項目５３に記載の組換えポリペプチド。
（項目５８）
（ａ）細胞標的化ｓｃＦｖ抗体ドメイン、
（ｂ）抗体重鎖定常（Ｆｃ）ドメイン、および
（ｃ）短縮型セリンプロテアーゼ
を含む細胞標的化構築物。
（項目５９）
前記ポリペプチドが、ＮからＣ末端までに、（ｃ）短縮型セリンプロテアーゼ、（ｂ）Ｆｃドメイン、および（ａ）ｓｃＦｖドメインを含む、項目５８に記載の細胞標的化構築物。
（項目６０）
前記ポリペプチドが、ＮからＣ末端までに、（ａ）ｓｃＦｖドメイン、（ｂ）Ｆｃドメイン、（ｄ）プロテアーゼ切断部位を含むペプチドおよび（ｃ）短縮型セリンプロテアーゼを含む、項目５８に記載の細胞標的化構築物。
（項目６１）
前記短縮型セリンプロテアーゼが配列番号１と少なくとも８０％同一なグランザイムＢ（ＧｒＢ）ポリペプチドである、項目５８に記載の細胞標的化構築物。
（項目６２）
前記プロテアーゼにより切断された際に生じる前記ＧｒＢポリペプチドが、アミノ末端に配列ＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２７）を含む、項目６１に記載の細胞標的化構築物。
（項目６３）
前記プロテアーゼ切断部位がカスパーゼ切断配列、フューリン切断配列、グランザイムＢ切断配列または第Ｘａ因子切断配列である、項目６０に記載の細胞標的化構築物。
（項目６４）
前記ポリペプチドが、配列ＹＶＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２６）；ＲＶＲＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２９）；ＲＶＲＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３０）；（Ｉ／Ａ）（Ｅ／Ｄ）ＧＲＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３１）；ＹＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３２）；ＷＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３３）；ＤＶＡＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３４）；ＤＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３５）；ＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３６）；ＤＭＱＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３７）；ＬＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３８）；ＬＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号３９）；ＶＥＩＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４０）；ＶＥＨＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４１）；ＩＥＴＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４２）；ＬＥＴＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４３）またはＩＥＡＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号４４）を含む、項目６１に記載の細胞標的化構築物。
（項目６５）
前記プロテアーゼ切断部位がカスパーゼ−３切断配列である、項目６０に記載の細胞標的化構築物。
（項目６６）
前記ポリペプチドが配列ＹＶＤＥＶＤＩＩＧＧＨＥＡＫ（配列番号２６）を含む、項目６１に記載の細胞標的化構築物。
（項目６７）
前記ＦｃドメインがヒトＩｇＧ  Ｆｃドメインである、項目５８に記載の細胞標的化構築物。
（項目６８）
前記ＦｃドメインがヒトＩｇＧ１  Ｆｃドメインである、項目６７に記載の細胞標的化構築物。
（項目６９）
前記ｓｃＦｖドメインが、ＧＰ２４０、５Ｔ４、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＣＤ−３３、ＣＤ−３８、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＣＥＡ、ＦＧＦＲ３、ＩＧＦＢＰ２、Ｆｎ１４またはＩＧＦ−１Ｒに結合する、項目６９に記載の細胞標的化構築物。
（項目７０）
前記ｓｃＦｖドメインがＦｎ１４に結合する、項目６９に記載の細胞標的化構築物。
（項目７１）
前記ポリペプチドが、配列番号４５と少なくとも９０％同一な配列を含む、項目７０に記載の細胞標的化構築物。
（項目７２）
組換えＧｒＢが、項目２４に記載の配列を含む、項目６１に記載の細胞標的化構築物。
（項目７３）
前記ＧｒＢコード配列が、Ｌｙｓ２７およびＡｒｇ２８に対応する位置におけるアミノ酸置換を含む、項目６１に記載の細胞標的化構築物。
（項目７４）
Ｌｙｓ２７およびＡｒｇ２８に対応する位置における前記アミノ酸置換がＫ２７ＥまたはＫ２７ＬおよびＲ２８Ａである、項目７３に記載の細胞標的化構築物。
（項目７５）
前記ＧｒＢコード配列が、８２ＰＫＮ８４に対応する位置において置換された配列ＰＶＰＮを含む、項目５８に記載の細胞標的化構築物。
（項目７６）
項目１から５７までのいずれか一項に記載のポリペプチドまたは項目５８から７５までのいずれか一項に記載の細胞標的化構築物を薬学的に許容される担体中に含む組成物。
（項目７７）
項目１から５７までのいずれか一項に記載のポリペプチドまたは項目５８から７５までのいずれか一項に記載の細胞標的化構築物をコードする核酸配列を含むポリヌクレオチド分子。
（項目７８）
項目７７に記載のポリヌクレオチド配列を含む宿主細胞。
（項目７９）
項目１から５７までのいずれか一項に記載のポリペプチドまたは項目５８から７５までのいずれか一項に記載の細胞標的化構築物を発現する、項目７８に記載の宿主細胞。
（項目８０）
哺乳動物細胞、酵母細胞、細菌細胞、繊毛虫細胞または昆虫細胞である、項目７８に記載の宿主細胞。
（項目８１）
ポリペプチドを製造する方法であって、
（ａ）項目７７に記載のポリヌクレオチド分子を、コードされるポリペプチドを産生する条件下で細胞において発現させるステップ、および
（ｂ）前記ポリペプチドを前記細胞から精製するステップ
を含む方法。
（項目８２）
細胞増殖性疾患を有する被験体を処置するための、項目１から５７までのいずれか一項に記載のポリペプチドまたは項目５８から７５までのいずれか一項に記載の細胞標的化構築物の使用であって、前記ポリペプチドが細胞標的化部分と結合体化している、使用。
（項目８３）
前記細胞増殖性疾患が自己免疫疾患である、項目８２に記載の使用。
（項目８４）
前記細胞増殖性疾患ががんまたは前がん状態である、項目８２に記載の使用。
（項目８５）
前記がんが、肺がん、乳がん、脳がん、前立腺がん、脾臓がん、膵臓がん、子宮頸部がん、卵巣がん、頭頸部がん、食道がん、肝臓がん、皮膚がん、腎臓がん、白血病、骨がん、精巣がん、結腸がん、または膀胱がんである、項目８４に記載の使用。
（項目８６）
少なくとも第２の抗がん療法を前記被験体に施すことをさらに含む、項目８４に記載の使用。
（項目８７）
前記第２の抗がん療法が、外科的療法、化学療法、放射線治療、遺伝子療法または免疫療法である、項目８６に記載の使用。
（項目８８）
細胞増殖性疾患を処置するための医薬の製造において使用するための、項目１から５７までのいずれか一項に記載のポリペプチドまたは項目５８から７５までのいずれか一項に記載の細胞標的化構築物。
（項目８９）
細菌またはウイルス感染症を処置するための、項目１から５７までのいずれか一項に記載のポリペプチドまたは項目５８から７５までのいずれか一項に記載の細胞標的化構築物の使用であって、前記ポリペプチドが細胞標的化部分と結合体化している、使用。
（項目９０）
項目１から５７までのいずれかに記載のポリペプチドまたは項目５８から７５までのいずれか一項に記載の細胞標的化構築物を含む、被験体の処置において使用するための組成物。
（項目９１）
前記ポリペプチドが細胞結合性部分と結合体化している、項目９０に記載の組成物。
（項目９２）
（ａ）組換えグランザイムＢ（ＧｒＢ）コード配列、
（ｂ）標的化ポリペプチド、および
（ｃ）配列番号２２の配列を有する細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）
を含む標的化剤。
（項目９３）
前記標的化ポリペプチドが、Ｈｅｒ２／ｎｅｕに結合する、項目９２に記載の標的化剤。
（項目９４）
前記標的化ポリペプチドがｓｃＦｖ  ４Ｄ５である、項目９３に記載の標的化剤。
（項目９５）
Ｎ末端からＣ末端までに、（ａ）組換えＧｒＢコード配列、（ｉ）第１のリンカーペプチド、（ｂ）標的化ポリペプチド、（ｉｉ）第２のリンカーペプチド、および（ｃ）配列番号２２の配列を有する細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）を含む、項目９２に記載の標的化剤。
（項目９６）
前記第１のリンカーペプチドまたは前記第２のリンカーペプチドが、配列番号１３の配列を含む、項目９５に記載の標的化剤。
（項目９７）
前記組換えＧｒＢが、項目２４に記載の配列を含む、項目９２に記載の標的化剤。
（項目９８）
配列番号２４と少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含む、項目９２に記載の標的化剤。
（項目９９）
配列番号２４のアミノ酸配列を含む、項目９８に記載の標的化剤。
（項目１００）
ラパチニブ耐性がんまたはトラスツズマブ耐性がんを有する被験体を処置するための、Ｈｅｒ２／ｎｅｕを標的とするグランザイム治療薬の使用。
（項目１０１）
前記被験体が乳がんを有する、項目１００に記載の使用。
（項目１０２）
前記被験体が、ラパチニブまたはトラスツズマブで以前に処置されている、項目１００に記載の使用。
（項目１０３）
前記被験体がラパチニブ耐性がんを有する、項目１００に記載の使用。
（項目１０４）
前記被験体がトラスツズマブ耐性がんを有する、項目１００に記載の使用。
（項目１０５）
前記Ｈｅｒ２／ｎｅｕを標的とするグランザイム治療薬が、細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）を含む、項目１００に記載の使用。
（項目１０６）
前記Ｈｅｒ２／ｎｅｕを標的とするグランザイム治療薬が、項目９２から９９までのいずれか一項に記載の標的化剤である、項目１００に記載の使用。
（項目１０７）
ラパチニブ耐性がんまたはトラスツズマブ耐性がんを有する被験体を処置するための医薬の作製において使用するための、Ｈｅｒ２／ｎｅｕを標的とするグランザイム治療薬。
本発明のある特定の実施形態は、短縮型セリンプロテアーゼポリペプチドおよびそのようなセリンプロテアーゼを含む融合タンパク質に関する。本明細書で使用される場合、短縮型セリンプロテアーゼポリペプチドとは、ＩＩＧＧ配列、ＩＶＧＧ配列またはＩＬＧＧ配列に対してＮ末端側に位置するリーダー配列が除去されるまたは異種配列で置き換えられるように短縮された、操作されたセリンプロテアーゼを指す。そのような短縮型セリンプロテアーゼポリペプチドの例は図１に示されている。いくつかの態様では、短縮型セリンプロテアーゼポリペプチドを細胞標的化部分と結合体化または融合して、細胞を標的とする細胞傷害性構築物をもたらす。そのような構築物は、例えば、がんなどの細胞増殖性疾患の処置において使用することができる。