【手続補正書】
【提出日】平成28年4月4日(2016.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＣＤ２２に結合する単離された抗体または抗体フラグメントであって、ＶＭ１０００、ＶＭ１００１、ＶＭ１００２、ＶＭ１００３、ＶＭ１００４、ＶＭ１００５、ＶＭ１００６、ＶＭ１００７、ＶＭ１００８、ＶＭ１００９、ＶＭ１０１０、ＶＭ１０１１、ＶＭ１０１２、ＶＭ１０１３、ＶＭ１０１４、及びＶＭ１０１５のうちの１若しくはそれ以上の可変領域から誘導された重鎖および軽鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）と、１若しくはそれ以上のヒト抗体から誘導された定常領域とを有する、単離された抗体または抗体フラグメント。
【請求項２】
請求項１記載の単離された抗体または抗体フラグメントにおいて、前記抗体または抗体フラグメントは、配列ＩＤ番号４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、または６４のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列ＩＤ番号１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、または３２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域とを有する、単離された抗体または抗体フラグメント。
【請求項３】
請求項１記載の抗体または抗体フラグメントにおいて、前記抗体または抗体フラグメントは抗ＣＤ２２マウス抗体のヒトＣＤ２２への結合をインビボで競合阻害する、抗体または抗体フラグメント。
【請求項４】
請求項１記載の抗体または抗体フラグメントにおいて、前記抗体または抗体フラグメントは、少なくとも１０−９Ｍ、または少なくとも１０−１１Ｍ、または少なくとも１０−１２Ｍの親和性（Ｋｄ）でＣＤ２２を結合する、抗体または抗体フラグメント。
【請求項５】
請求項１記載の抗体または抗体フラグメントにおいて、前記抗体または抗体フラグメントは、少なくとも１つのＣＤ２２の少なくとも１つの活性を実質的に中和する、抗体または抗体フラグメント。
【請求項６】
請求項１記載の単離された抗体または抗体フラグメントと、担体または希釈剤とを有する、組成物。
【請求項７】
細胞、組織、器官、または動物における免疫状態、障害、または疾患を治療する方法であって、免疫調節有効量の請求項１記載の少なくとも１つの抗体または抗体フラグメントを、前記細胞、組織、器官、または動物と接触させ、または前記細胞、組織、器官、または動物に投与する工程を有する、方法。
【請求項８】
請求項７記載の方法において、前記免疫状態、障害、または疾患は、関節リウマチ／血清反応陰性関節症、骨関節炎、炎症性大腸炎、全身性エリテマトーデス（ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｉｓ）、及び虹彩毛様体炎／ブドウ膜炎（ｕｖｅｔｉｓ）／視神経炎から選択される少なくとも１つである、方法。
【請求項９】
請求項７記載の方法において、前記有効量は前記細胞、組織、器官、または動物の０．０００１〜５０ｍｇ／キログラムである、方法。
【請求項１０】
細胞、組織、器官、または動物における癌性障害または状態を調節する方法であって、薬学的有効量の少なくとも１つの請求項１記載の抗体または抗体フラグメントを、前記細胞、組織、器官、または動物と接触させ、または前記細胞、組織、器官、または動物に投与する工程を有する、方法。
【請求項１１】
請求項１０記載の方法において、前記癌性障害または状態が、白血病、急性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞、Ｔ細胞またはＦＡＢ  ＡＬＬ、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、リンパ腫、ホジキン病、悪性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、および多発性骨髄腫から選択される少なくとも１つである、方法。
【請求項１２】
請求項１０記載の方法において、前記薬学的有効量は前記細胞、組織、器官または動物の０．０１〜１００ｍｇ／キログラムである、方法。
【請求項１３】
請求項１０記載の方法において、前記接触させる工程または前記投与する工程が、静脈内、筋肉内、ボーラス、皮下、呼吸、吸入、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内、及び経皮から選択される少なくとも１つの様式によるものである、方法。
【請求項１４】
請求項１記載の少なくとも１つの抗体または抗体フラグメントを有する医療用デバイスであって、前記デバイスは、静脈内、筋肉内、ボーラス、皮下、呼吸、吸入、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内、及び経皮から選択される少なくとも１つの様式によって、前記少なくとも１つの抗体または抗体フラグメントを接触させ、または投与することに適している、医療用デバイス。
【請求項１５】
請求項１記載の少なくとも１つの抗体または抗体フラグメントと、
滅菌水、及び滅菌緩衝化水から選択される少なくとも１つの担体、並びに
フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、硝酸フェニル水銀、フェノキシエタノール、ホルムアルデヒド、クロロブタノール、塩化マグネシウム、アルキルパラベン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、およびチメロサール、及びこれらの混合物から選択される、水性希釈剤中の少なくとも１つの保存剤
のうちの１つと
を有する製剤。
【請求項１６】
請求項１５記載の製剤において、前記少なくとも１つの抗体または抗体フラグメントの濃度は約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌである、製剤。
【請求項１７】
請求項１５記載の製剤であって、さらに、等張剤または生理学的に許容可能な緩衝液を有する、製剤。
【請求項１８】
第１の容器中における凍結乾燥型の請求項１記載の少なくとも１つの抗体または抗体フラグメントと、
滅菌水、滅菌緩衝化水、またはフェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、硝酸フェニル水銀、フェノキシエタノール、ホルムアルデヒド、クロロブタノール、塩化マグネシウム、アルキルパラベン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、およびチメロサール、及びこれらの混合物から選択される、水性希釈剤中の少なくとも１つの保存剤を有する選択的な第２の容器と
を有する、キット。
【請求項１９】
請求項１８記載のキットであって、さらに、等張剤または生理学的に許容可能な緩衝液を有する、キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
ＣＤ２２の少なくとも２の主要な生物学的機能が存在する：ＣＤ２２は、Ｂ細胞受容体複合体（ＢＣＲ）と相互作用して、細胞内シグナル伝達を刺激してＢ細胞分化と免疫グロブリンの産生と促進でき、そしてまた、ＢＣＲと相互作用して、細胞内シグナル伝達ならびに細胞の増殖および分化を阻害もできる。マウスモノクローナル抗ＣＤ２２抗体の結合は、ＣＤ２２チロシンリン酸化を刺激し、そしてマイトジェンシグナル伝達をネガティブに調節する（Ｃａｒｎａｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  １，２００３  ９；３９８２ｓ）。
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、以下のものがある（国際出願日以降国際段階で引用された文献及び他国に国内移行した際に引用された文献を含む）。
（先行技術文献）
（特許文献）
（特許文献１）  米国特許第５，７８９，５５４号明細書
（特許文献２）  国際公開第０３／０９３３２０号
（非特許文献）
（非特許文献１）  ＡＲＮＤＴ，ＭＩＣＨＡＥＬＡ  Ａ．Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，‘Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｈｉｇｈｌｙ  ｓｔａｂｌｅ，ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚｉｎｇ  ａｎｔｉ−ＣＤ２２  ｓｉｎｇｌｅ−ｃｈａｉｎ  Ｆｖ  ｆｒａｇｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ  ｌｙｍｐｈｏｍａ’，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１０  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００３，Ｖｏｌ．１０７，Ｎｏ．５，ｐｐ．８２２−８２９
（非特許文献２）  ＧｅｎＢａｎｋ  ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  ｎｏ．ＡＡＣ９２９０３．１（１０  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  １９９８）
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８３】
リンパ腫細胞系統における定量的共焦点免疫蛍光顕微鏡法による本発明の抗ＣＤ２２抗体の迅速な内在化の測定。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８６】
抗ＣＤ２２モノクローナル抗体、選択された本発明のクローンＶＭ１０００、ＶＭ１００１、ＶＭ１００２、ＶＭ１００３、ＶＭ１００４、ＶＭ１００５、ＶＭ１００６、ＶＭ１００７、ＶＭ１００８、ＶＭ１００９、ＶＭ１０１０、ＶＭ１０１１、ＶＭ１０１２、ＶＭ１０１３、ＶＭ１０１４、およびＶＭ１０１５で処理後のＣＤ２２ポジティブリンパ腫細胞系統のＣＤ２２チロシンリン酸化の刺激。抗ＣＤ２２抗体は、ＣＤ２２を発現する細胞に結合し、受容体の細胞質領域のチロシンリン酸化を刺激することが以前に示されてきた（Ｃａｒｎａｈａｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  １，２００３  ９；３９８２ｓ）。抗ＣＤ２２抗体のこの生物活性は、リンパ腫細胞の増殖の減少および細胞死の誘導を生じるＢＣＲシグナル伝達複合体のネガティブ調節と関連付けられてきた。従って、選択された抗ＣＤ２２抗体は、受容体を発現する細胞系統への曝露の際にＣＤ２２チロシンリン酸化を刺激するそれらの能力について分析された。Ｄａｕｄｉ細胞は、収穫および抗ＣＤ２２抗体を用いる処理の前に、１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ  １６４０中で培養することによって対数増殖に維持された。次いで、処理された細胞は界面活性剤緩衝液で溶解され、ＣＤ２２は抗ＣＤ２２  ＢＡ００６Ｈを使用して免疫沈殿され、次いで、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロット分析に供された。次いで、得られたブロットは、抗ホスホチロシン抗体（４Ｇ１０）またはウサギポリクローナル抗ＣＤ２２抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ，Ｃａｔａｌｏｇ  ｎｕｍｂｅｒ  ＳＣ−７９３２でプローブされた。図２２ＡおよびＢは、これらの分析の結果を示す。チロシンリン酸化ＣＤ２２タンパク質対総ＣＤ２２の比率は、各抗体処理の下に示される。対照として、Ｄａｕｄｉ細胞が、抗ＩｇＭ抗体で処理され、ＣＤ２２細胞質ドメインをトランスリン酸化する潜在能力を飽和させるための手段として、Ｂ細胞受容体複合体を関与させかつ刺激する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８７】
交差反応性。表面タンパク質ＣＤ２２は、Ｂ細胞系統から誘導されたリンパ腫および白血病細胞上でＢ細胞を発生させる表面上で発現されることが知られている。本発明の抗ＣＤ２２抗体は、マウスおよび齧歯類Ｂ細胞上で発現されるＣＤ２２と交差反応する能力について評価された。結果は、齧歯類型のタンパク質に対する結合は認められないことを示す。本発明の抗ＣＤ２２抗体はまた、霊長類種、カニクイザル  マカクザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に対する交差反応性についても評価された。カニクイザル  マカクザル（供給源Ｐｒｉｍａｔｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）から単離された末梢血リンパ球（ＰＢＭＣ）（ＣＤ２２陽性Ｂ細胞で富化されている）が分析された。本発明の抗ＣＤ２２抗体（本明細書中のデータにおいて「ＶＭ１０１」と称する抗ＣＤ２２抗体）は蛍光分子フィコエリトリン（ＰＥ）で直接標識された。陽性染色を試験するために、各試験条件について約２．５×１０ｅ６  ＰＢＭＣがＰＢＳ中で洗浄され、次いで、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含有するＰＢＳ中に再懸濁された。次いで、細胞は、抗体なし、抗ＣＤ２２  ＰＥ標識抗体（２０ｕｇ／ｍｌ）、またはカニクイザルＣＤ２０と交差反応性を示した抗ヒトＣＤ２０−ＦＩＴＣ結合体化抗体（Ｍｉｌｔｅｎｙｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈ，ｃａｔａｌｏｇ  ｎｕｍｂｅｒ  １３０−０９１−１０８、ストック試薬の１：１０希釈）のいずれかに曝露され、次いで、０Ｃで６０分間インキュベートされた。各試験条件の細胞はＰＢＳ中で洗浄され、次いで、ＰＢＳ中４％ホルムアルデヒドを用いて、室温で１０分間固定された。次いで、細胞は、２％ＦＢＳを含有する０．５ｍｌ  ＰＢＳに再懸濁され、次いで、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）分析によってＣＤ２２およびＣＤ２０表面染色について分析された（図２３Ａ〜２３Ｄ）。抗体で処理されなかった細胞は、ＦＩＴＣまたはＰＥのいずれのチャンネルでも蛍光強度の見かけのシフトを有さなかったのに対して（図２３Ａ）、ＶＭ１０１−ＰＥで染色された細胞はＣＤ２２ポジティブ集団を含んだ（図２３Ｂ）。同様に、抗ＣＤ２０−ＦＩＴで染色された細胞は、ＣＤ２０ポジティブ集団を含んだ（図２３Ｃ）。ＶＭ１０１−ＰＥ抗体とＣＤ２０−ＦＩＴＣ抗体の両方で染色された細胞は、ＰＢＭＣ中の両方の抗原の発現パターンに基づいて予測されるように、二重標識集団を有した（図２３Ｄ）。ＶＭ１０１は、特異的に、カニクイザルＣＤ２２タンパク質を認識する。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８８】
抗ＣＤ２２抗体の相対的発現。本発明の抗ＣＤ２２抗体は、哺乳動物細胞中で発現され、臨床的研究のための材料を産生するための製造プロセスにおける高いレベルの産生と一貫している特性をこれらが有しているか否かを決定した。本発明の抗ＣＤ２２抗体（抗体１、抗体２、および抗体３）の発現は、対照抗体（「対照」）、ヒト化ＣＤ２２抗体と比較された。各ＣＤ２２抗体を発現する得られた細胞は、哺乳動物細胞培養条件において等価な期間の間培養され、馴化培地が、モノクローナル抗体の存在および収率について試験された。結果は、これらの条件の間に高レベルで発現される市販の抗体（トラスツズマブ、ハーセプチンとしても知られる）と比較され、これは比較対照として役立った。表１は、これらの条件下での発現および製造性のためのこの試験の結果を示す。