【手続補正書】
【提出日】平成28年11月11日(2016.11.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
hsa-miR-204またはその相同体を含む、癌細胞の増殖を低下させるための組成物であって、hsa-miR-204またはその相同体の発現が低下している癌細胞を有するまたは有することが疑われる対象に投与されるように用いられることを特徴とする、組成物。
【請求項２】
癌細胞が、脳由来神経栄養因子（BDNF）またはエズリンを過剰発現する、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
癌細胞が、乳癌細胞、卵巣癌細胞、または小児腎腫瘍細胞である、請求項1〜2のいずれか一項記載の組成物。
【請求項４】
乳癌細胞がトリプルネガティブ乳癌（TNBC）細胞である、請求項3記載の組成物。
【請求項５】
癌細胞の増殖が転移性である、請求項1〜4のいずれか一項記載の組成物。
【請求項６】
癌細胞におけるhsa-miR-204またはその相同体のレベルが決定される、請求項1〜5のいずれか一項記載の組成物。
【請求項７】
hsa-miR-204またはその相同体のレベルが、定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）またはアレイハイブリダイゼーションを用いて決定される、請求項6記載の組成物。
【請求項８】
対象から得た血液試料中のhsa-miR-204またはその相同体のレベルが決定される、請求項6または7のいずれか一項記載の組成物。
【請求項９】
血液試料中のhsa-miR-204またはその相同体のレベルが、対照と比較して低下している、請求項8記載の組成物。
【請求項１０】
全身投与のために製剤化される、請求項1〜9のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１１】
静脈内注射により投与される、請求項1〜10のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１２】
脂質ベースの送達媒体またはナノ粒子ベースの送達媒体をさらに含む、請求項11記載の組成物。
【請求項１３】
第二の活性物質を含む組成物と併用される、請求項1〜12のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１４】
第二の活性物質が、細胞傷害性化学療法剤、ナノバイオコンジュゲート、またはhsa-miR-204もしくはその相同体以外のmiRNAを含む、請求項13記載の組成物。
【請求項１５】
細胞傷害性化学療法剤がタキサンである、請求項14記載の組成物。
【請求項１６】
タキサンがパクリタキセルである、請求項15記載の組成物。
【請求項１７】
第二の活性物質を含む組成物と同時に投与されるように用いられることを特徴とする、請求項13〜16のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１８】
第二の活性物質を含む組成物が投与される前または後に投与されるように用いられることを特徴とする、請求項13〜16のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１９】
第二の活性物質を含む組成物との投与の時間間隔が1から30日である、請求項18記載の組成物。
【請求項２０】
第二の活性物質を含む組成物が投与された後に投与されるように用いられることを特徴とする、請求項18または19のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２１】
癌細胞が第二の活性物質に対して耐性となっている、請求項13〜20のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２２】
第二の活性物質がパクリタキセルである、請求項21記載の組成物。
【請求項２３】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２４】
無菌性、発熱物質、および微粒子、または他の混入物に関する薬局方の要件を満たしている調製物である、請求項23記載の組成物。
【請求項２５】
調製物が全身投与のために製剤化されている、請求項23または24のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２６】
対象が哺乳動物である、請求項1〜25のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２７】
対象がヒトである、請求項1〜26のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２８】
対象の細胞におけるhsa-miR-204またはその相同体のレベルを決定する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための治療から効果が得られる可能性がある対象を同定するための方法。
【請求項２９】
対象の細胞におけるhsa-miR-204またはその相同体のレベルが、qRT-PCRまたはアレイハイブリダイゼーションを用いて決定される、請求項28記載の方法。
【請求項３０】
対象から得た血液試料中のhsa-miR-204またはその相同体のレベルが決定される、請求項29記載の方法。
【請求項３１】
血液試料中のhsa-miR-204またはその相同体のレベルが、対照と比較して低下している、請求項30記載の方法。
【請求項３２】
阻害されると、治療活性物質の亜致死濃度で培養した癌細胞株の細胞の生存率を増加させる有望な増感剤miRNAをスクリーニングするための方法であって、
候補増感剤miRNAの阻害物質と共に治療活性物質の亜致死濃度を含むmiRNA阻害物質含有培養物中で癌細胞株の細胞を培養する段階；
治療活性物質の亜致死濃度を含むが候補増感剤miRNAの阻害物質が添加されていないmiRNA阻害物質欠如培養物中で癌細胞株の細胞を培養する段階；ならびに
一定期間後に、miRNA阻害物質含有細胞集団と、miRNA阻害物質欠如細胞集団の生存率を決定する段階であって、miRNA阻害物質含有細胞集団の生存率が、miRNA阻害物質欠如細胞集団の生存率より有意に高ければ、候補増感剤miRNAが有望な増感剤miRNAとして同定される、段階
を含む、方法。
【請求項３３】
有望な増感剤miRNAが、hsa-miR-204、hsa-miR-185、hsa-miR-211、hsa-miR-367-5p、またはhsa-miR-133A、またはそれらの相同体である、請求項32記載の方法。
【請求項３４】
有望な増感剤mRNAがhsa-miR-204またはその相同体である、請求項33記載の方法。
【請求項３５】
治療活性物質の亜致死濃度が、癌細胞株の細胞の80％が72時間培養後になおも生存可能である濃度である、請求項32〜34のいずれか一項記載の方法。
【請求項３６】
治療活性物質がパクリタキセルである、請求項32〜35のいずれか一項記載の方法。
【請求項３７】
パクリタキセルの亜致死濃度が2〜8 nMである、請求項35記載の方法。
【請求項３８】
癌細胞株の細胞がTNBC細胞である、請求項32〜37のいずれか一項記載の方法。
【請求項３９】
阻害されると、治療活性物質の亜致死濃度中で培養した癌細胞株の細胞の生存率を低下させる有望な減感剤miRNAをスクリーニングするための方法であって、
候補減感剤miRNAの阻害物質と共に治療活性物質の亜致死濃度を含むmiRNA阻害物質含有培養物中で癌細胞株の細胞を培養する段階；
治療活性物質の亜致死濃度を含むが候補減感剤miRNAの阻害物質が添加されていないmiRNA阻害物質欠如培養物中で癌細胞株の細胞を培養する段階；および
一定期間後にmiRNA阻害物質含有細胞集団とmiRNA阻害物質欠如細胞集団の生存率を決定する段階であって、miRNA阻害物質含有細胞集団の生存率が、miRNA阻害物質欠如細胞集団の生存率より有意に低ければ、候補減感剤miRNAが有望な減感剤miRNAとして同定される、段階
を含む、方法。
【請求項４０】
有望な減感剤miRNAが、hsa-miR-129-3p、hsa-miR-296-5p、hsa-miR-216a、hsa-miR-1237、hsa-miR-1915*、hsa-miR-320d、またはそれらの相同体である、請求項39記載の方法。
【請求項４１】
治療活性物質の亜致死濃度が、癌細胞株の細胞の80％が72時間培養後になおも生存可能である濃度である、請求項39または40のいずれか一項記載の方法。
【請求項４２】
治療活性物質がパクリタキセルである、請求項39〜41のいずれか一項記載の方法。
【請求項４３】
パクリタキセルの亜致死濃度が2〜8 nMである、請求項42記載の方法。
【請求項４４】
癌細胞株の細胞がTNBC細胞である、請求項39〜43のいずれか一項記載の方法。
【請求項４５】
増感剤miRNAまたはその相同体を含む、癌細胞の増殖を低下させるための組成物であって、増感剤miRNAの発現が有意に低下している癌細胞を有するまたは有することが疑われる対象に投与されるように用いられることを特徴とする、組成物。
【請求項４６】
減感剤miRNAまたはその相同体の阻害物質を含む、癌細胞の増殖を低下させるための組成物であって、減感剤miRNAの発現が有意に増加している癌細胞を有するまたは有することが疑われる対象に投与されるように用いられることを特徴とする、組成物。
【請求項４７】
対象の細胞における増感剤miRNAまたはその相同体のレベルを決定する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための治療から効果が得られる可能性がある対象を同定するための方法。
【請求項４８】
増感剤miRNAが、hsa-miR-204、hsa-miR-185、hsa-miR-211、hsa-miR-367-5p、またはhsa-miR-133A、またはそれらの相同体である、請求項47記載の方法。
【請求項４９】
対象の細胞における減感剤miRNAまたはその相同体のレベルを決定する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための治療から効果が得られる可能性がある対象を同定するための方法。
【請求項５０】
有望な減感剤miRNAが、hsa-miR-129-3p、hsa-miR-296-5p、hsa-miR-216a、hsa-miR-1237、hsa-miR-1915*、hsa-miR-320d、またはそれらの相同体である、請求項49記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
[本発明1001]
hsa-miR-204またはその相同体の発現が低下している癌細胞を有するまたは有することが疑われる対象に、hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物の有効量を投与する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための方法。
[本発明1002]
癌細胞が、脳由来神経栄養因子（BDNF）またはエズリンを過剰発現する、本発明1001の方法。
[本発明1003]
癌細胞が、乳癌細胞、卵巣癌細胞、または小児腎腫瘍細胞である、本発明1001〜1002のいずれかの方法。
[本発明1004]
乳癌細胞がトリプルネガティブ乳癌（TNBC）細胞である、本発明1003の方法。
[本発明1005]
癌細胞の増殖が転移性である、本発明1001〜1004のいずれかの方法。
[本発明1006]
癌細胞におけるhsa-miR-204またはその相同体のレベルを決定する段階をさらに含む、本発明1001〜1005のいずれかの方法。
[本発明1007]
hsa-miR-204またはその相同体のレベルが、定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）またはアレイハイブリダイゼーションを用いて決定される、本発明1006の方法。
[本発明1008]
対象から得た血液試料中のhsa-miR-204またはその相同体のレベルが決定される、本発明1006または1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
血液試料中のhsa-miR-204またはその相同体のレベルが、対照と比較して低下している、本発明1008の方法。
[本発明1010]
hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物が全身投与のために製剤化される、本発明1001〜1009のいずれかの方法。
[本発明1011]
hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物が、静脈内注射により投与される、本発明1001〜1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物が、脂質ベースの送達媒体またはナノ粒子ベースの送達媒体をさらに含む、本発明1011の方法。
[本発明1013]
対象が、第二の活性物質を含む組成物をさらに投与される、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
第二の活性物質が、細胞傷害性化学療法剤、ナノバイオコンジュゲート、またはhsa-miR-204もしくはその相同体以外のmiRNAを含む、本発明1013の方法。
[本発明1015]
細胞傷害性化学療法剤がタキサンである、本発明1014の方法。
[本発明1016]
タキサンがパクリタキセルである、本発明1015の方法。
[本発明1017]
hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物が、第二の活性物質を含む組成物と同時に投与される、本発明1013〜1016のいずれかの方法。
[本発明1018]
hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物が、第二の活性物質を含む組成物が投与される前または後に投与される、本発明1013〜1016のいずれかの方法。
[本発明1019]
hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物と第二の活性物質を含む組成物との投与の時間間隔が1から30日である、本発明1018の方法。
[本発明1020]
第二の活性物質を含む組成物が、hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物の前に投与される、本発明1018または1019のいずれかの方法。
[本発明1021]
癌細胞が第二の活性物質に対して耐性となっている、本発明1013〜1020のいずれかの方法。
[本発明1022]
第二の活性物質がパクリタキセルである、本発明1021の方法。
[本発明1023]
hsa-miR-204またはその相同体を含む組成物が薬学的に許容される担体を含む、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1024]
調製物が、無菌性、発熱物質、および微粒子、または他の混入物に関する薬局方の要件を満たしている、本発明1023の方法。
[本発明1025]
調製物が全身投与のために製剤化されている、本発明1023または1024のいずれかの方法。
[本発明1026]
対象が哺乳動物である、本発明1001〜1025のいずれかの方法。
[本発明1027]
対象がヒトである、本発明1001〜1026のいずれかの方法。
[本発明1028]
対象の細胞におけるhsa-miR-204またはその相同体のレベルを決定する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための治療から効果が得られる可能性がある対象を同定するための方法。
[本発明1029]
対象の細胞におけるhsa-miR-204またはその相同体のレベルが、qRT-PCRまたはアレイハイブリダイゼーションを用いて決定される、本発明1028の方法。
[本発明1030]
対象から得た血液試料中のhsa-miR-204またはその相同体のレベルが決定される、本発明1029の方法。
[本発明1031]
血液試料中のhsa-miR-204またはその相同体のレベルが、対照と比較して低下している、本発明1030の方法。
[本発明1032]
阻害されると、治療活性物質の亜致死濃度で培養した癌細胞株の細胞の生存率を増加させる有望な増感剤miRNAをスクリーニングするための方法であって、
候補増感剤miRNAの阻害物質と共に治療活性物質の亜致死濃度を含むmiRNA阻害物質含有培養物中で癌細胞株の細胞を培養する段階；
治療活性物質の亜致死濃度を含むが候補増感剤miRNAの阻害物質が添加されていないmiRNA阻害物質欠如培養物中で癌細胞株の細胞を培養する段階；ならびに
一定期間後に、miRNA阻害物質含有細胞集団と、miRNA阻害物質欠如細胞集団の生存率を決定する段階であって、miRNA阻害物質含有細胞集団の生存率が、miRNA阻害物質欠如細胞集団の生存率より有意に高ければ、候補増感剤miRNAが有望な増感剤miRNAとして同定される、段階
を含む、方法。
[本発明1033]
有望な増感剤miRNAが、hsa-miR-204、hsa-miR-185、hsa-miR-211、hsa-miR-367-5p、またはhsa-miR-133A、またはそれらの相同体である、本発明1032の方法。
[本発明1034]
有望な増感剤mRNAがhsa-miR-204またはその相同体である、本発明1033の方法。
[本発明1035]
治療活性物質の亜致死濃度が、癌細胞株の細胞の80％が72時間培養後になおも生存可能である濃度である、本発明1032〜1034のいずれかの方法。
[本発明1036]
治療活性物質がパクリタキセルである、本発明1032〜1035のいずれかの方法。
[本発明1037]
パクリタキセルの亜致死濃度が2〜8 nMである、本発明1035の方法。
[本発明1038]
癌細胞株の細胞がTNBC細胞である、本発明1032〜1037のいずれかの方法。
[本発明1039]
阻害されると、治療活性物質の亜致死濃度中で培養した癌細胞株の細胞の生存率を低下させる有望な減感剤miRNAをスクリーニングするための方法であって、
候補減感剤miRNAの阻害物質と共に治療活性物質の亜致死濃度を含むmiRNA阻害物質含有培養物中で癌細胞株の細胞を培養する段階；
治療活性物質の亜致死濃度を含むが候補減感剤miRNAの阻害物質が添加されていないmiRNA阻害物質欠如培養物中で癌細胞株の細胞を培養する段階；および
一定期間後にmiRNA阻害物質含有細胞集団とmiRNA阻害物質欠如細胞集団の生存率を決定する段階であって、miRNA阻害物質含有細胞集団の生存率が、miRNA阻害物質欠如細胞集団の生存率より有意に低ければ、候補減感剤miRNAが有望な減感剤miRNAとして同定される、段階
を含む、方法。
[本発明1040]
有望な減感剤miRNAが、hsa-miR-129-3p、hsa-miR-296-5p、hsa-miR-216a、hsa-miR-1237、hsa-miR-1915*、hsa-miR-320d、またはそれらの相同体である、本発明1039の方法。
[本発明1041]
治療活性物質の亜致死濃度が、癌細胞株の細胞の80％が72時間培養後になおも生存可能である濃度である、本発明1039または1040のいずれかの方法。
[本発明1042]
治療活性物質がパクリタキセルである、本発明1039〜1041のいずれかの方法。
[本発明1043]
パクリタキセルの亜致死濃度が2〜8 nMである、本発明1042の方法。
[本発明1044]
癌細胞株の細胞がTNBC細胞である、本発明1039〜1043のいずれかの方法。
[本発明1045]
増感剤miRNAの発現が有意に低下している癌細胞を有するまたは有することが疑われる対象に、増感剤miRNAまたはその相同体を含む組成物の有効量を投与する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための方法。
[本発明1046]
減感剤miRNAの発現が有意に増加している癌細胞を有するまたは有することが疑われる対象に、減感剤miRNAまたはその相同体の阻害物質を含む組成物の有効量を投与する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための方法。
[本発明1047]
対象の細胞における増感剤miRNAまたはその相同体のレベルを決定する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための治療から効果が得られる可能性がある対象を同定するための方法。
[本発明1048]
増感剤miRNAが、hsa-miR-204、hsa-miR-185、hsa-miR-211、hsa-miR-367-5p、またはhsa-miR-133A、またはそれらの相同体である、本発明1047の方法。
[本発明1049]
対象の細胞における減感剤miRNAまたはその相同体のレベルを決定する段階を含む、癌細胞の増殖を低下させるための治療から効果が得られる可能性がある対象を同定するための方法。
[本発明1050]
有望な減感剤miRNAが、hsa-miR-129-3p、hsa-miR-296-5p、hsa-miR-216a、hsa-miR-1237、hsa-miR-1915*、hsa-miR-320d、またはそれらの相同体である、本発明1049の方法。
本発明の他の目的、特色、および利点は、以下の詳細な説明から明らかとなるであろう。しかし、この詳細な説明から当業者には、本発明の精神および範囲に含まれる様々な変更および改変が明らかとなることから、詳細な説明および具体例は、本発明の具体的な態様を示しているが、単なる例証のために提供されると理解すべきである。