【手続補正書】
【提出日】平成28年5月20日(2016.5.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の代謝物質の検出方法であって、
代謝物質を含む試料と、下記式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物とを接触させ、
【化１】
2015524058.tif 000001
前記代謝物質と、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の前記化合物とを反応させて付加物を形成することと、前記付加物を検出することを含み、
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ保護基、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素であり、
Ｒ５とＲ６は、独立して−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＢ）２、及び下記式（ｉ）の基から選択され、
【化２】
2015524058.tif 000002
ただし、Ｒ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基であり、
各ＲＢは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＢ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ保護基、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである、前記検出方法。
【請求項２】
試料中の代謝物質の検出方法であって、
試験化合物、酵素系を下記式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物とを接触させ、
【化３】
2015524058.tif 000003
前記試験化合物は、前記酵素系により代謝され、代謝物質となり、前記代謝物質を、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物と反応させ、付加物を形成し、
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ保護基、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素であり、
Ｒ５とＲ６は、独立して−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＢ）２、及び下記式（ｉ）の基から選択され、
【化４】
2015524058.tif 000004
ただし、Ｒ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基であり、
各ＲＢは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＢ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ保護基、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである、前記検出方法。
【請求項３】
化合物は、下記式（Ｉ−ｃ）で示される化合物であり、
【化５】
2015524058.tif 000005
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ保護基、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素、又は硫黄保護基であり、
Ｘ−は、対アニオンである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
化合物は、下記式からなる群：
【化６】
2015524058.tif 000006
から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記試料は、酵素系をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記酵素系は、Ｐ４５０ミクロソーム酵素系である、請求項２又は５に記載の方法。
【請求項７】
Ｐ４５０ミクロソーム酵素系は、ミクロソーム、Ｓ９画分、及びＰ４５０酵素から成る群から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
代謝物質は、試験化合物を試料に加えることにより生成される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記付加物の形成は、ＮＡＤＰＨ生成系、又は、ＮＡＤＰＨを添加することにより開始される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記付加物は、質量分析計、または質量分析計に接続した液体クロマトグラフィにより検出される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記質量分析計は、タンデム質量分析計と接続したエレクトロスプレーイオン化質量分析による質量分析計(ESI-MS/MS)である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記液体クロマトグラフィは、高速液体クロマトグラフィ(HPLC)である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
下記式（Ｉ）で示される化合物：
【化７】
2015524058.tif 000007
式中、
Ｒ１は水素であり、Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、又は、
−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲＡであり、ＲＡは、下記式で示される基であり、
【化８】
2015524058.tif 000008
式中、ｐは、０、１又は、２であり、ｍは、１、２、３、４、又は、５であり、Ｒ７はハロゲンであり、
Ｒ３は、水素、又は硫黄保護基であり、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ保護基、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである。
【請求項１４】
下記式（II）で示される化合物：
【化９】
2015524058.tif 000009
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ保護基、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素又は、硫黄保護基であり、
Ｒ５とＲ６は、独立して−ＯＲＢ、−Ｎ（ＲＢ）２、及び下記式（ｉ）の基から選択され、
【化１０】
2015524058.tif 000010
ただし、Ｒ５とＲ６の少なくともいずれか一方が、式（ｉ）の基であり、
各ＲＢは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＢ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各Ｒ４は、それぞれ独立して置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、若しくはアミノ保護基、又は、２つのＲ４基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
ｎは、１、２、３、４、５又は６であり、
Ｘ−は、対アニオンである。
【請求項１５】
Ｒ１は水素であり、
（ａ）Ｒ２は水素、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２又はアミノ保護基であるか；又は、
（ｂ）Ｒ２は水素であるか；又は、
（ｃ）Ｒ２は−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３であるか；又は、
（ｄ）Ｒ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ又は−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲＡであり、ＲＡは、下記式で示される基であり、
【化１１】
2015524058.tif 000011
式中、ｐは、０、１又は、２であり、ｍは、１、２、３、４、又は、５であり、Ｒ７はハロゲンである；
請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ７はブロモ又はフルオロである、請求項１３または１５に記載の化合物。
【請求項１７】
ｍは１であり、Ｒ７はブロモである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
ｍは５であり、Ｒ７はフルオロである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１９】
ＲＢは、下記式の基であり、
【化１２】
2015524058.tif 000012
ｐは、０、１、又は、２であり、ｍは、１、２、３、４、又は、５であり、Ｒ７は、ハロゲンである、請求項１４に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ７はブロモ又はフルオロである、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
ｍは１であり、Ｒ７はブロモである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
ｍは５であり、Ｒ７はフルオロである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ３は水素である、請求項１３又は１４に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ４は、それぞれ独立して、置換または非置換のアルキルである、請求項１３又は１４に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ４は、それぞれ独立して、置換または非置換のＣ１−６アルキルである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ４は、それぞれ-ＣＨ３である、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
ｎは２である、請求項１３又は１４に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｘ−は、クロリド対アニオンである、請求項１３又は１４に記載の化合物。
【請求項２９】
下記式
【化１３】
2015524058.tif 000013
又は
【化１４】
2015524058.tif 000014
で示される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項３０】
下記式（Ｉ−ｃ）で示される化合物：
【化１５】
2015524058.tif 000015
式中、
各Ｒ１とＲ２は、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）２、若しくはアミノ保護基、又は、Ｒ１とＲ２が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
各ＲＡは、それぞれ独立して水素、置換若しくは非置換のアルキル、置換若しくは非置換のアルケニル、置換若しくは非置換のアルキニル、置換若しくは非置換のカルボシクリル、置換若しくは非置換のヘテロシクリル、置換若しくは非置換のアリール、置換若しくは非置換のヘテロアリール、酸素原子と結合した場合に酸素保護基、若しくは窒素原子と結合した場合に窒素保護基、又は、２つのＲＡ基が結合して置換若しくは非置換の複素環を形成し、
Ｒ３は、水素、又は硫黄保護基であり、
Ｘ−は、対アニオンである。
【請求項３１】
下記式からなる群：
【化１６】
2015524058.tif 000016
から選択される、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
下記式からなる群：
【化１７】
2015524058.tif 000017
【化１８】
2015524058.tif 000018
【化１９】
2015524058.tif 000019
【化２０】
2015524058.tif 000020
【化２１】
2015524058.tif 000021
【化２２】
2015524058.tif 000022
および
【化２３】
2015524058.tif 000023
から選択される、請求項１４に記載の化合物。
【請求項３３】
下記式からなる群：
【化２４−１】
2015524058.tif 000024
【化２４−２】
2015524058.tif 000025
【化２４−３】
2015524058.tif 000026
から選択される、請求項１４に記載の化合物。