【手続補正書】
【提出日】平成28年4月1日(2016.4.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第1ナノ粒子の集団と第2ナノ粒子の集団とを含む、pH応答性システムであって、
第1ナノ粒子が、(i)第1蛍光色素を含む第1ブロックコポリマーを含み、さらに、第1ナノ粒子が、第1pH転移点および第1発光スペクトルを有し；かつ
第2ナノ粒子が、(i)第2蛍光色素を含む第2ブロックコポリマーを含み、さらに、第2ナノ粒子が、第1ナノ粒子の第1pH転移点と異なる第2pH転移点および第1ナノ粒子の第1発光スペクトルと異なる第2発光スペクトルを有し、
第1ナノ粒子の集団および第2ナノ粒子の集団が各々独立して、
a)式
2015518145.tif 000001
に記載の親水性ポリマーセグメント；
b)式A1に記載の疎水性ポリマーセグメント；および
c)式A2に記載のポリマーセグメント
を含むコポリマー、またはその薬学的に許容される塩；ならびにその立体異性体、同位体変種および互変異性体であり；
各A1およびA2は、独立して、
2015518145.tif 000002
より選択され、
各R1aは、独立して、H、置換もしくは非置換アルキル、または
2015518145.tif 000003
であり；
各R2a、R2b、R3a、R3b、R4a、R4b、R4c、R4d、およびR5は、独立して、Hまたは置換もしくは非置換アルキルであり；
各R6aおよびR6bは、独立して、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであるか；またはR6aおよびR6bは、それらが結合しているN原子と一緒になってヘテロ環を形成し；
R7は、ローダミン、BODIPY、クマリン、およびシアニンからなる群より選択される色素を含む部分であり；
下付き文字nは10〜200の整数であり；
かつ該コポリマーがランダムコポリマーである、
pH応答性システム。
【請求項２】
第3ナノ粒子の集団をさらに含むpH応答性システムであって、第3ナノ粒子が、(i)第3蛍光色素を含む第3ブロックコポリマーを含み、さらに、第3ナノ粒子が、第1および第2ナノ粒子のpH転移点と異なる第3pH転移点ならびに第1および第2ナノ粒子の発光スペクトルと異なる第3発光スペクトルを有し、
第3ナノ粒子の集団が、
a)式
2015518145.tif 000004
に記載の親水性ポリマーセグメント；
b)式A1に記載の疎水性ポリマーセグメント；および
c)式A2に記載のポリマーセグメント
を含むコポリマー、またはその薬学的に許容される塩；ならびにその立体異性体、同位体変種および互変異性体であり；
各A1およびA2は、独立して、
2015518145.tif 000005
より選択され、
各R1aは、独立して、H、置換もしくは非置換アルキル、または
2015518145.tif 000006
であり；
各R2a、R2b、R3a、R3b、R4a、R4b、R4c、R4d、およびR5は、独立して、Hまたは置換もしくは非置換アルキルであり；
各R6aおよびR6bは、独立して、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであるか；またはR6aおよびR6bは、それらが結合しているN原子と一緒になってヘテロ環を形成し；
R7は、ローダミン、BODIPY、クマリン、およびシアニンからなる群より選択される色素を含む部分であり；
下付き文字nは10〜200の整数であり；
かつ該コポリマーがランダムコポリマーである、
請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項３】
A1が式
2015518145.tif 000007
を有する、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項４】
R7が、シアニンからなる群より選択される色素を含む部分である、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項５】
A2が式
2015518145.tif 000008
を有する、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項６】
第1ナノ粒子および／または第2ナノ粒子のブロックコポリマーが、異なる疎水性を有する少なくとも2種のモノマーを含む、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項７】
第1および／または第2ナノ粒子のブロックコポリマーが、異なる疎水性を有する異なるモル分率の少なくとも2種のモノマーを含む、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項８】
第1および第2蛍光色素がpH非感受性蛍光色素である、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項９】
第1および第2蛍光色素がΔλ＜40 nmのストークスシフトを有する、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項１０】
第1および第2ナノ粒子のpH転移点がpH 5.0〜pH 8.0である、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項１１】
第1および第2ナノ粒子の発光スペクトルが500〜820 nmである、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項１２】
第1および第2ナノ粒子のpH応答（ΔpH10-90%）が1 pH単位未満である、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項１３】
第1および／または第2ナノ粒子が標的指向部分をさらに含む、請求項1に記載のpH応答性システム。
【請求項１４】
標的指向部分が細胞表面受容体に結合する、請求項13に記載のpH応答性システム。
【請求項１５】
第1ナノ粒子の集団と第2ナノ粒子の集団とを含む組成物であって、各ナノ粒子集団がpH転移点および発光スペクトルを有し、第1ナノ粒子の集団と第2ナノ粒子の集団とでは、pH転移点および発光スペクトルが異なり、
第1ナノ粒子の集団および第2ナノ粒子の集団が各々独立して、
a)式
2015518145.tif 000009
に記載の親水性ポリマーセグメント；
b)式A1に記載の疎水性ポリマーセグメント；および
c)式A2に記載のポリマーセグメント
を含むコポリマー、またはその薬学的に許容される塩；ならびにその立体異性体、同位体変種および互変異性体であり；
各A1およびA2は、独立して、
2015518145.tif 000010
より選択され、
各R1aは、独立して、H、置換もしくは非置換アルキル、または
2015518145.tif 000011
であり；
各R2a、R2b、R3a、R3b、R4a、R4b、R4c、R4d、およびR5は、独立して、Hまたは置換もしくは非置換アルキルであり；
各R6aおよびR6bは、独立して、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであるか；またはR6aおよびR6bは、それらが結合しているN原子と一緒になってヘテロ環を形成し；
R7は、ローダミン、BODIPY、クマリン、およびシアニンからなる群より選択される色素を含む部分であり；
下付き文字nは10〜200の整数であり；
かつ該コポリマーがランダムコポリマーである、
組成物。
【請求項１６】
第3ナノ粒子の集団を含む組成物であって、
第3ナノ粒子の集団が、
a)式
2015518145.tif 000012
に記載の親水性ポリマーセグメント；
b)式A1に記載の疎水性ポリマーセグメント；および
c)式A2に記載のポリマーセグメント
を含むコポリマー、またはその薬学的に許容される塩；ならびにその立体異性体、同位体変種および互変異性体であり；
各A1およびA2は、独立して、
2015518145.tif 000013
より選択され、
各R1aは、独立して、H、置換もしくは非置換アルキル、または
2015518145.tif 000014
であり；
各R2a、R2b、R3a、R3b、R4a、R4b、R4c、R4d、およびR5は、独立して、Hまたは置換もしくは非置換アルキルであり；
各R6aおよびR6bは、独立して、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであるか；またはR6aおよびR6bは、それらが結合しているN原子と一緒になってヘテロ環を形成し；
R7は、ローダミン、BODIPY、クマリン、およびシアニンからなる群より選択される色素を含む部分であり；
下付き文字nは10〜200の整数であり；
かつ該コポリマーがランダムコポリマーである、
請求項15に記載の組成物。
【請求項１７】
A1が式
2015518145.tif 000015
を有する、請求項15に記載の組成物。
【請求項１８】
R7が、シアニンからなる群より選択される色素を含む部分である、請求項15に記載の組成物。
【請求項１９】
A2が式
2015518145.tif 000016
を有する、請求項15に記載の組成物。
【請求項２０】
第1ナノ粒子の集団および／または第2ナノ粒子の集団が、異なる疎水性を有する異なるモル分率の少なくとも2種のモノマーを含むブロックコポリマーを含む、請求項15に記載の組成物。
【請求項２１】
第1ナノ粒子の集団および／または第2ナノ粒子の集団がマレイミド含有コポリマーを約10%含有する、請求項15に記載の組成物。
【請求項２２】
第1ナノ粒子の集団および／または第2ナノ粒子の集団が、Δλ＜40 nmのストークスシフトを有するpH非感受性蛍光色素を含む、請求項15に記載の組成物。
【請求項２３】
第1ナノ粒子の集団および第2ナノ粒子の集団のpH転移点がpH 5.0〜pH 8.0である、請求項15に記載の組成物。
【請求項２４】
第1ナノ粒子の集団および／または第2ナノ粒子集団の発光スペクトルが500〜820 nmである、請求項15に記載の組成物。
【請求項２５】
第1ナノ粒子の集団および／または第2ナノ粒子の集団が標的指向部分をさらに含む、請求項15に記載の組成物。
【請求項２６】
第1ミセル集団と第2ミセル集団とを含む組成物であって、各ミセル集団がブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が、第2ミセル集団のpH転移点および発光スペクトルと異なるpH転移点および発光スペクトルを有し、
第1ミセル集団および第2ミセル集団が各々独立して、
a)式
2015518145.tif 000017
に記載の親水性ポリマーセグメント；
b)式A1に記載の疎水性ポリマーセグメント；および
c)式A2に記載のポリマーセグメント
を含むコポリマー、またはその薬学的に許容される塩；ならびにその立体異性体、同位体変種および互変異性体であり；
各A1およびA2は、独立して、
2015518145.tif 000018
より選択され、
各R1aは、独立して、H、置換もしくは非置換アルキル、または
2015518145.tif 000019
であり；
各R2a、R2b、R3a、R3b、R4a、R4b、R4c、R4d、およびR5は、独立して、Hまたは置換もしくは非置換アルキルであり；
各R6aおよびR6bは、独立して、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであるか；またはR6aおよびR6bは、それらが結合しているN原子と一緒になってヘテロ環を形成し；
R7は、ローダミン、BODIPY、クマリン、およびシアニンからなる群より選択される色素を含む部分であり；
下付き文字nは10〜200の整数であり；
かつ該コポリマーがランダムコポリマーである、
組成物。
【請求項２７】
第3ミセル集団をさらに含む組成物であって、
第3ミセル集団が、
a)式
2015518145.tif 000020
に記載の親水性ポリマーセグメント；
b)式A1に記載の疎水性ポリマーセグメント；および
c)式A2に記載のポリマーセグメント
を含むコポリマー、またはその薬学的に許容される塩；ならびにその立体異性体、同位体変種および互変異性体であり；
各A1およびA2は、独立して、
2015518145.tif 000021
より選択され、
各R1aは、独立して、H、置換もしくは非置換アルキル、または
2015518145.tif 000022
であり；
各R2a、R2b、R3a、R3b、R4a、R4b、R4c、R4d、およびR5は、独立して、Hまたは置換もしくは非置換アルキルであり；
各R6aおよびR6bは、独立して、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであるか；またはR6aおよびR6bは、それらが結合しているN原子と一緒になってヘテロ環を形成し；
R7は、ローダミン、BODIPY、クマリン、およびシアニンからなる群より選択される色素を含む部分であり；
下付き文字nは10〜200の整数であり；
かつ該コポリマーがランダムコポリマーである、
請求項26に記載の組成物。
【請求項２８】
以下の工程を含む、腫瘍を画像化する方法：
(a)腫瘍と、請求項26に記載の組成物とを接触させる工程であって、各ミセル集団がブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が約pH 6.5〜7.4のpH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、第2ミセル集団が約pH 5.9〜6.4のpH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有する、工程；ならびに
(b)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルを腫瘍中において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセル集団がそのpH転移点に達したことと該ミセル集団が解離したこととを示す、工程。
【請求項２９】
腫瘍が、血管新生腫瘍血管系であるか、または原発腫瘍の所属領域内のリンパ節へと転移した腫瘍である、請求項28に記載の方法。
【請求項３０】
以下の工程を含む、循環腫瘍細胞を画像化する方法：
(a)循環腫瘍細胞と、請求項26または27に記載の組成物を含む組成物とを接触させる工程であって、各ミセル集団が、ブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、かつ約pH 5.9〜6.4のpH転移点を有する、工程；ならびに
(b)循環腫瘍細胞の蛍光シグナルを検出する工程であって、蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセル集団がそのpH転移点に達したことと該ミセル集団が解離したこととを示す、工程。
【請求項３１】
循環腫瘍細胞が、リンパ管中または血流中に存在する、請求項30に記載の方法。
【請求項３２】
以下の工程を含む、腫瘍のセンチネルリンパ節を画像化する方法：
(a)腫瘍と、請求項26に記載の組成物とを接触させる工程であって、各ミセル集団がブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が約pH 6.5〜7.4のpH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、第2ミセル集団が約pH 5.9〜6.4のpH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有する、工程；ならびに
(b)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルを腫瘍中において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセル集団がそのpH転移点に達したことと該ミセル集団が解離したこととを示す、工程
(c)蛍光シグナルを含むミセル集団の解離部分を、腫瘍を排出するリンパ管系へ入り込ませて、かつリンパ管系に沿ったリンパ節へとリンパ管系を通って移動させる工程
(d)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルを、リンパ管系中およびリンパ管系に沿ったリンパ節中において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセル集団が原発腫瘍中においてそのpH転移点に達しかつ該ミセル集団が解離しかつリンパ管系およびリンパ管系に沿ったリンパ節へと移動したことを示す、工程。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６３】
[本発明1001]
第1ナノ粒子の集団と第2ナノ粒子の集団とを含む、pH応答性システムであって、
第1ナノ粒子が、(i)親水性ポリマーセグメントと疎水性ポリマーセグメントとを含む第1ブロックコポリマーおよび(ii)第1蛍光色素を含み、さらに、第1ナノ粒子が、第1pH転移点および第1発光スペクトルを有し；かつ
第2ナノ粒子が、(i)親水性ポリマーセグメントと疎水性ポリマーセグメントとを含む第2ブロックコポリマーおよび(ii)第2蛍光色素を含み、さらに、第2ナノ粒子が、第1ナノ粒子の第1pH転移点と異なる第2pH転移点および第1ナノ粒子の第1発光スペクトルと異なる第2発光スペクトルを有する、
pH応答性システム。
[本発明1002]
少なくとも第3ナノ粒子の集団をさらに含むpH応答性システムであって、第3ナノ粒子が、(i)親水性ポリマーセグメントと疎水性ポリマーセグメントとを含む第3ブロックコポリマーおよび(ii)第3蛍光色素を含み、さらに、第3ナノ粒子が、第1および第2ナノ粒子のpH転移点と異なる第3pH転移点ならびに第1および第2ナノ粒子の発光スペクトルと異なる第3発光スペクトルを有する、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1003]
少なくとも第4ナノ粒子の集団をさらに含むpH応答性システムであって、第4ナノ粒子が、(i)親水性ポリマーセグメントと疎水性ポリマーセグメントとを含む第4ブロックコポリマーおよび(ii)第4蛍光色素を含み、さらに、第4ナノ粒子が、第1、第2、および第3ナノ粒子のpH転移点と異なる第4pH転移点ならびに第1、第2、および第3ナノ粒子の発光スペクトルと異なる第4発光スペクトルを有する、本発明1002のpH応答性システム。
[本発明1004]
親水性ポリマーセグメントが、ポリ(エチレンオキシド)（PEO）、ポリ(メタクリレートホスファチジルコリン)（MPC）、およびポリビニルピロリドン（PVP）からなる群より選択される、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1005]
疎水性ポリマーセグメントが、ポリ(2-(ジイソプロピルアミノ)エチルメタクリレート)（PDPA）、ポリ(2-(ジブチルアミノ)エチルメタクリレート)（PDBA）、ポリ(2-(ヘキサメチレンイミノ)エチルメタクリレート)（PC7A）、およびポリ(2-(ペンタメチレンイミノ)エチルメタクリレート)（PC6A）からなる群より選択される、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1006]
第1および第2ナノ粒子が、PEO114-b-P(DPA75-co-AMA6)、MAL-PEO114-b-PDPA88、PEO114-b-P(C7A65-co-AMA6)、PEO114-b-P(DPA74-co-AMA1)、PEO114-b-P(DPA77-co-AMA3)、PEO114-b-P(DPA80-co-AMA6)、PEO114-b-P(DBA65-co-AMA3)、PEO114-b-P(C7A65-co-AMA3)、およびPEO114-b-P(C6A81-co-AMA3)からなる群より選択される前駆体コポリマーから合成される、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1007]
第1または第2ナノ粒子の少なくとも一方のブロックコポリマーが、異なる疎水性を有する少なくとも2種のモノマーを含む、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1008]
第1および第2ナノ粒子のブロックコポリマーが、異なる疎水性を有する異なるモル分率の少なくとも2種のモノマーを含む、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1009]
第1および第2蛍光色素がpH非感受性蛍光色素である、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1010]
第1および第2蛍光色素がΔλ＜40 nmのストークスシフトを有する、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1011]
第1および第2蛍光色素が、ローダミン、BODIPY、クマリン、およびシアニン色素からなる群より選択される、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1012]
第1および第2ナノ粒子が、PDBA-BDY、PDPA-TMR、PDPA-C55、PC7A-C55、PC6A-C75、およびPDPA-CMNからなる群より選択される、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1013]
第1、第2、第3、および第4ナノ粒子が、PDBA-BDY、PDPA-TMR、PC7A-C55、およびPC6A-C75である、本発明1003のpH応答性システム。
[本発明1014]
第1および第2ナノ粒子のpH転移点がpH 5.0〜pH 8.0である、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1015]
第1および第2ナノ粒子のpH転移点がpH 5.7〜pH 6.9である、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1016]
第1および第2ナノ粒子のpH転移点が、pH 5.2、6.4、6.9、および7.2からなる群より選択される、本発明1014のpH応答性システム。
[本発明1017]
第1および第2ナノ粒子のpH転移点が、pH 6.42、6.18、5.94、および5.7からなる群より選択される、本発明1014のpH応答性システム。
[本発明1018]
第1ナノ粒子の集団が約pH 6.21のpH転移点を有し、かつ第2ナノ粒子の集団が約pH 6.9のpH転移点を有する、本発明1014のpH応答性システム。
[本発明1019]
第1および第2ナノ粒子の発光スペクトルが500〜820 nmである、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1020]
第1および第2ナノ粒子のpH応答（ΔpH10-90%）が1 pH単位未満である、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1021]
第1および第2ナノ粒子のpH応答（ΔpH10-90%）が0.25 pH単位未満である、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1022]
第1および第2ナノ粒子の少なくとも一方が標的指向部分をさらに含む、本発明1001のpH応答性システム。
[本発明1023]
標的指向部分が抗体または抗体断片である、本発明1022のpH応答性システム。
[本発明1024]
抗体がセツキシマブである、本発明1023のpH応答性システム。
[本発明1025]
抗体断片がセツキシマブのFab'断片である、本発明1023のpH応答性システム。
[本発明1026]
標的指向部分が細胞表面受容体に結合する、本発明1022のpH応答性システム。
[本発明1027]
標的指向部分がシグナルペプチドである、本発明1022のpH応答性システム。
[本発明1028]
シグナルペプチドが環状アルギニン-グリシン-アスパラギン酸ペプチド（cRGD）ペプチドである、本発明1027のpH応答性システム。
[本発明1029]
シグナルペプチドが、ナノ粒子を核、ミトコンドリア、小胞体、葉緑体、アポプラスト、またはペルオキシソームへと方向付ける、本発明1027のpH応答性システム。
[本発明1030]
標的指向部分が小分子である、本発明1022のpH応答性システム。
[本発明1031]
小分子が葉酸である、本発明1030のpH応答性システム。
[本発明1032]
ブロックコポリマーと蛍光色素とを有する単一のナノ粒子を含むpH応答性システムであって、さらに、該ナノ粒子の集団がpH転移点および発光スペクトルを示す、pH応答性システム。
[本発明1033]
標的指向部分をさらに含む、本発明1032のpH応答性システム。
[本発明1034]
少なくとも2つまたは3つのナノ粒子集団のシリーズを含む組成物であって、各ナノ粒子集団がpH転移点および発光スペクトルを有し、該シリーズ中の各ナノ粒子集団のpH転移点および発光スペクトルが、該シリーズ中の他のナノ粒子集団のpH転移点および発光スペクトルと異なる、組成物。
[本発明1035]
少なくとも2つまたは3つのナノ粒子集団が、
a)式
2015518145.tif 000023
に記載のポリマー；
b)式A1に記載のモノマー；および
c)式A2に記載のモノマー
を含むコポリマー、またはその薬学的に許容される塩；ならびにその立体異性体、同位体変種および互変異性体から合成され；
各A1およびA2は、独立して、
2015518145.tif 000024
より選択され、
各R1aは、独立して、H、置換もしくは非置換アルキル、または
2015518145.tif 000025
であり；
各R2a、R2b、R3a、R3b、R4a、R4b、R4c、R4d、およびR5は、独立して、Hまたは置換もしくは非置換アルキルであり；
各R6aおよびR6bは、独立して、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであるか；またはR6aおよびR6bは、それらが結合しているN原子と一緒になってヘテロ環を形成し；
R7は色素を含む部分であり；
下付き文字nは10〜200の整数であり；
かつ該コポリマーがランダムコポリマーである、
本発明1034の組成物。
[本発明1036]
A1が式
2015518145.tif 000026
を有する、本発明1035の組成物。
[本発明1037]
A2が式
2015518145.tif 000027
を有する、本発明1035の組成物。
[本発明1038]
少なくとも2つまたは3つのナノ粒子集団が、PEO114-b-P(DPA75-co-AMA6)、MAL-PEO114-b-PDPA88、PEO114-b-P(C7A65-co-AMA6)、PEO114-b-P(DPA74-co-AMA1)、PEO114-b-P(DPA77-co-AMA3)、PEO114-b-P(DPA80-co-AMA6)、PEO114-b-P(DBA65-co-AMA3)、PEO114-b-P(C7A65-co-AMA3)、およびPEO114-b-P(C6A81-co-AMA3)からなる群より選択される前駆体コポリマーから合成される、本発明1034の組成物。
[本発明1039]
少なくとも2つまたは3つのナノ粒子集団が、異なる疎水性を有する異なるモル分率の少なくとも2種のモノマーを含むブロックコポリマーを含む、本発明1034の組成物。
[本発明1040]
ナノ粒子集団がマレイミド含有コポリマーを約10%含有する、本発明1034の組成物。
[本発明1041]
少なくとも2つまたは3つのナノ粒子集団が、Δλ＜40 nmのストークスシフトを有するpH非感受性蛍光色素を含む、本発明1034の組成物。
[本発明1042]
少なくとも2つまたは3つのナノ粒子集団が、PDBA-BDY、PDPA-TMR、PDPA-C55、PC7A-C55、PC6A-C75、またはPDPA-CMNを含む、本発明1034の組成物。
[本発明1043]
PDBA-BDYナノ粒子集団、PDPA-TMRナノ粒子集団、およびPC7A-C55ナノ粒子集団を含む、本発明1034の組成物。
[本発明1044]
前記シリーズのpH転移点がpH 5.0〜pH 8.0である、本発明1034の組成物。
[本発明1045]
前記シリーズのpH転移点がpH 5.7〜pH 6.9である、本発明1034の組成物。
[本発明1046]
第1ナノ粒子集団が約pH 5.2のpH転移点を有し、第2ナノ粒子集団が約pH 6.4のpH転移点を有し、かつ第3ナノ粒子集団が約pH 6.9のpH転移点を有する、本発明1034の組成物。
[本発明1047]
第1ナノ粒子集団が約pH 5.7のpH転移点を有し、第2ナノ粒子集団が約pH 5.94のpH転移点を有し、第3ナノ粒子集団が約pH 6.18のpH転移点を有し、かつ第4ナノ粒子集団が約6.42のpH転移点を有する、本発明1034の組成物。
[本発明1048]
第1ナノ粒子集団が約pH 6.21のpH転移点を有し、かつ第2ナノ粒子集団が約pH 6.9のpH転移点を有する、本発明1034の組成物。
[本発明1049]
前記シリーズの発光スペクトルが500〜820 nmである、本発明1034の組成物。
[本発明1050]
前記シリーズのpH応答（ΔpH10-90%）が1 pH単位未満である、本発明1034の組成物。
[本発明1051]
前記シリーズのpH応答（ΔpH10-90%）が0.25 pH単位未満である、本発明1034の組成物。
[本発明1052]
ナノ粒子のうちの少なくとも1種が標的指向部分をさらに含む、本発明1034の組成物。
[本発明1053]
標的指向部分が抗体または抗体断片である、本発明1052の組成物。
[本発明1054]
抗体がセツキシマブである、本発明1053の組成物。
[本発明1055]
抗体断片がセツキシマブのFab'断片である、本発明1053の組成物。
[本発明1056]
標的指向部分が細胞表面受容体に結合する、本発明1052の組成物。
[本発明1057]
標的指向部分がシグナルペプチドである、本発明1052の組成物。
[本発明1058]
シグナルペプチドがcRGDペプチドである、本発明1057の組成物。
[本発明1059]
シグナルペプチドが、ナノ粒子を核、ミトコンドリア、小胞体、葉緑体、アポプラスト、またはペルオキシソームへと方向付ける、本発明1057の組成物。
[本発明1060]
標的指向部分が小分子である、本発明1052の組成物。
[本発明1061]
小分子が葉酸である、本発明1060の組成物。
[本発明1062]
コポリマーと蛍光色素とを有する単一のナノ粒子をさらに含む組成物であって、さらに、該ナノ粒子の集団がpH転移点および発光スペクトルを示す、組成物。
[本発明1063]
標的指向部分をさらに含む、本発明1062の組成物。
[本発明1064]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団を含む組成物であって、各ミセルがブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、各ミセル集団が、他のミセル集団のpH転移点および発光スペクトルと異なるpH転移点および発光スペクトルを有する、組成物。
[本発明1065]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団が、
a)式
2015518145.tif 000028
に記載のポリマー；
b)式A1に記載のモノマー；および
c)式A2に記載のモノマー
を含むコポリマー、またはその薬学的に許容される塩；ならびにその立体異性体、同位体変種および互変異性体から合成され；
各A1およびA2は、独立して、
2015518145.tif 000029
より選択され、
各R1aは、独立して、H、置換もしくは非置換アルキル、または
2015518145.tif 000030
であり；
各R2a、R2b、R3a、R3b、R4a、R4b、R4c、R4d、およびR5は、独立して、Hまたは置換もしくは非置換アルキルであり；
各R6aおよびR6bは、独立して、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換アリール、または置換もしくは非置換ヘテロアリールであるか；またはR6aおよびR6bは、それらが結合しているN原子と一緒になってヘテロ環を形成し；
R7は色素を含む部分であり；
下付き文字nは10〜200の整数であり；
かつ該コポリマーがランダムコポリマーである、
本発明1064の組成物。
[本発明1066]
A1が式
2015518145.tif 000031
を有する、本発明1065の組成物。
[本発明1067]
A2が式
2015518145.tif 000032
を有する、本発明1065の組成物。
[本発明1068]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団が、PEO114-b-P(DPA75-co-AMA6)、MAL-PEO114-b-PDPA88、PEO114-b-P(C7A65-co-AMA6)、PEO114-b-P(DPA74-co-AMA1)、PEO114-b-P(DPA77-co-AMA3)、PEO114-b-P(DPA80-co-AMA6)、PEO114-b-P(DBA65-co-AMA3)、PEO114-b-P(C7A65-co-AMA3)、およびPEO114-b-P(C6A81-co-AMA3)からなる群より選択される前駆体コポリマーから合成される、本発明1064の組成物。
[本発明1069]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団のうちの少なくとも1集団のブロックコポリマーが、異なる疎水性を有する少なくとも2種のモノマーを含む、本発明1064の組成物。
[本発明1070]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団のブロックコポリマーが、異なる疎水性を有する異なるモル分率の少なくとも2種のモノマーを含む、本発明1064の組成物。
[本発明1071]
ナノ粒子集団がマレイミド含有コポリマーを約10%含有する、本発明1064の組成物。
[本発明1072]
蛍光色素が、Δλ＜40 nmのストークスシフトを有するpH非感受性蛍光色素である、本発明1064の組成物。
[本発明1073]
蛍光色素がΔλ＜40 nmのストークスシフトを有する、本発明1064の組成物。
[本発明1074]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団が、PDBA-BDY、PDPA-TMR、PDPA-C55、PC7A-C55、PC6A-C75、またはPDPA-CMNを含む、本発明1064の組成物。
[本発明1075]
PDBA-BDYミセル集団、PDPA-TMRミセル集団、およびPC7A-C55ミセル集団を含む、本発明1064の組成物。
[本発明1076]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団のpH転移点がpH 5.0〜pH 8.0である、本発明1064の組成物。
[本発明1077]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団のpH転移点がpH 5.7〜pH 6.9である、本発明1064の組成物。
[本発明1078]
第1ミセル集団が約pH 5.2のpH転移点を有し、第2ミセル集団が約pH 6.4のpH転移点を有し、かつ第3ミセル集団が約pH 6.9のpH転移点を有する、本発明1064の組成物。
[本発明1079]
第1ミセル集団が約pH 5.7のpH転移点を有し、第2ミセル集団が約pH 5.94のpH転移点を有し、第3ミセル集団が約pH 6.18のpH転移点を有し、かつ第4ミセル集団が約pH 6.42のpH転移点を有する、本発明1064の組成物。
[本発明1080]
第1ミセル集団が約pH 6.21のpH転移点を有し、かつ第2ミセル集団が約pH 6.9のpH転移点を有する、本発明1064の組成物。
[本発明1081]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団の発光スペクトルが500〜820 nmである、本発明1064の組成物。
[本発明1082]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団のpH応答（ΔpH10-90%）が1 pH単位未満である、本発明1064の組成物。
[本発明1083]
少なくとも2つまたは3つのミセル集団のpH応答（ΔpH10-90%）が0.25 pH単位未満である、本発明1064の組成物。
[本発明1084]
ミセル集団のうちの少なくとも1集団のミセルが標的指向部分をさらに含む、本発明1064の組成物。
[本発明1085]
標的指向部分が抗体または抗体断片である、本発明1084の組成物。
[本発明1086]
抗体がセツキシマブである、本発明1085の組成物。
[本発明1087]
抗体断片がセツキシマブのFab'断片である、本発明1085の組成物。
[本発明1088]
標的指向部分が細胞表面受容体に結合する、本発明1084の組成物。
[本発明1089]
標的指向部分がシグナルペプチドである、本発明1084の組成物。
[本発明1090]
シグナルペプチドがcRGDペプチドである、本発明1089の組成物。
[本発明1091]
シグナルペプチドが、ナノ粒子を核、ミトコンドリア、小胞体、葉緑体、アポプラスト、またはペルオキシソームへと方向付ける、本発明1089の組成物。
[本発明1092]
標的指向部分が小分子である、本発明1084の組成物。
[本発明1093]
小分子が葉酸である、本発明1092の組成物。
[本発明1094]
ハイブリッドミセル集団をさらに含む組成物であって、該ミセルが2種以上のブロックコポリマーおよび2種以上の蛍光色素を含み、さらに、該ミセル集団が、2つ以上のpH転移点と、各pH転移点につき異なる発光スペクトルとを示す、本発明1064の組成物。
[本発明1095]
コポリマーと蛍光色素とを有する単一のミセルを含む組成物であって、さらに、該ミセルの集団がpH転移点および発光スペクトルを有する、組成物。
[本発明1096]
標的指向部分をさらに含む、本発明1095の組成物。
[本発明1097]
以下の工程を含む、細胞内pHをモニターする方法：
(a)細胞と、本発明1064〜1094のいずれかの組成物とを接触させる工程；および
(b)細胞中の1種または複数種の蛍光シグナルを検出する工程であって、蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程。
[本発明1098]
細胞中の蛍光シグナルの分布を測定する工程をさらに含む、本発明1097の方法。
[本発明1099]
蛍光シグナルの分布が経時的に測定される、本発明1098の方法。
[本発明1100]
蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1099の方法。
[本発明1101]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1097の方法。
[本発明1102]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1097の方法。
[本発明1103]
蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1097の方法。
[本発明1104]
細胞が、癌細胞であるか、リソソーム蓄積に欠陥のある細胞であるか、または欠陥のある神経細胞である、本発明1097の方法。
[本発明1105]
(a)細胞と、関心対象の化合物とを接触させる工程；
(b)細胞中の1種または複数種の蛍光シグナルを検出する工程；および
(c)細胞と関心対象の化合物との接触に続いて細胞中の1種または複数種の蛍光シグナルに変化が生じたかどうかを判定する工程
をさらに含む、本発明1097の方法。
[本発明1106]
関心対象の化合物が薬物である、本発明1105の方法。
[本発明1107]
関心対象の化合物が、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、または小分子である、本発明1105の方法。
[本発明1108]
以下の工程を含む、小胞輸送をモニターする方法：
(a)細胞と、少なくとも第1、第2、および第3ミセル集団を含む組成物とを、細胞がエンドサイトーシスによって組成物を取り込む条件下で接触させる工程であって、各ミセルがブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が、約pH 6.3〜7.4のpH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、第2ミセル集団が、約pH 5.9〜6.2のpH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有し、かつ第3ミセル集団が、約pH 5.0〜5.8のpH転移点および第3蛍光発光スペクトルを有する、工程；
(b)第1、第2、および第3蛍光発光スペクトルに対応する第1、第2、および第3蛍光シグナルを細胞中において検出する工程であって、第1、第2、および第3蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程；ならびに
(c)第1蛍光シグナルが検出された場合、小胞は初期エンドソームであると判定し、第2蛍光シグナルが検出された場合、小胞は後期エンドソーム／リソソームであると判定し、かつ第3蛍光シグナルが検出された場合、小胞はリソソームであると判定する工程。
[本発明1109]
細胞中の第1、第2、および第3蛍光シグナルの分布を測定する工程をさらに含む、本発明1108の方法。
[本発明1110]
第1、第2、および第3蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1108の方法。
[本発明1111]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1108の方法。
[本発明1112]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1108の方法。
[本発明1113]
第1、第2、および第3蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1108の方法。
[本発明1114]
以下の工程を含む、細胞受容体サイクリングをモニターする方法：
(a)細胞と、少なくとも第1および第2ミセル集団を含む組成物とを接触させる工程であって、各ミセルが、ブロックコポリマー、蛍光色素、および受容体結合部分を含み、さらに、第1ミセル集団が第1pH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、かつ第2ミセル集団が、第1pH転移点および第1発光スペクトルと異なる第2pH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有する、工程；
(b)少なくとも第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する少なくとも第1および第2蛍光シグナルを細胞中またはその表面上において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程；ならびに
(c)細胞中または細胞表面上の少なくとも第1および第2蛍光シグナルの分布を測定する工程。
[本発明1115]
組成物が、第1および第2pH転移点ならびに第1および第2発光スペクトルと異なる第3pH転移点および第3蛍光発光スペクトルを有する少なくとも第3ミセル集団を含む、本発明1114の方法。
[本発明1116]
少なくとも第1および第2蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1114の方法。
[本発明1117]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1114の方法。
[本発明1118]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1114の方法。
[本発明1119]
少なくとも第1および第2蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1114の方法。
[本発明1120]
以下の工程を含む、エンドソームpHをモニターする方法：
(a)エンドソームと、少なくとも第1および第2ミセル集団を含む組成物とを、エンドソームが組成物を取り込む条件下で接触させる工程であって、各ミセルがブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が約pH 5.7〜6.3のpH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、第2ミセル集団が約pH 5.7〜6.3のpH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有し、第1ミセル集団と第2ミセル集団は、異なるpH転移点および異なる蛍光発光スペクトルを有する、工程；
(b)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルの少なくとも一方をエンドソーム中において検出する工程であって、第1および／または第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程；ならびに
(c)エンドソームのpHまたはpH範囲を決定する工程。
[本発明1121]
第1および第2蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1120の方法。
[本発明1122]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1120の方法。
[本発明1123]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1120の方法。
[本発明1124]
第1および第2蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1120の方法。
[本発明1125]
エンドソームと、少なくとも第3および第4ミセル集団とを接触させる工程をさらに含む、本発明1120の方法。
[本発明1126]
第1ミセル集団が約pH 5.7のpH転移点を有し、第2ミセル集団が約pH 5.94のpH転移点を有し、第3ミセル集団が約pH 6.18のpH転移点を有し、かつ第4ミセル集団が約pH 6.42のpH転移点を有する、本発明1125の方法。
[本発明1127]
以下の工程を含む、細胞外pHを測定する方法：
(a)細胞の集合体またはそれらの細胞外環境と、本発明1064〜1087.01のいずれかのpH応答性システムまたは組成物とを接触させる工程；および
(b)細胞の集合体中の蛍光シグナルを検出する工程であって、蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程。
[本発明1128]
細胞の集合体またはそれらの細胞外環境中の蛍光シグナルの分布を測定する工程をさらに含む、本発明1127の方法。
[本発明1129]
蛍光シグナルの分布が経時的に測定される、本発明1128の方法。
[本発明1130]
蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1129の方法。
[本発明1131]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1127の方法。
[本発明1132]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1127の方法。
[本発明1133]
蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1127の方法。
[本発明1134]
細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境が、癌細胞もしくは癌細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、リソソーム蓄積に欠陥のある細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、欠陥のある神経細胞もしくは神経細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、炎症と関連する細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、感染と関連する細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、創傷治癒と関連する細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、低酸素と関連する細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、放射線損傷と関連する細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、外傷と関連する細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境、または低酸素血と関連する細胞もしくは細胞の集合体またはそれらの細胞外環境である、本発明1127の方法。
[本発明1135]
(a)1個もしくは複数個の細胞またはそれらの細胞外環境と、関心対象の化合物とを接触させる工程；
(b)細胞中または細胞周囲の1種または複数種の蛍光シグナルを検出する工程；ならびに
(c)細胞と関心対象の化合物との接触に続いて細胞中または細胞周囲の1種または複数種の蛍光シグナルに変化が生じたかどうかを判定する工程
をさらに含む、本発明1127の方法。
[本発明1136]
関心対象の化合物が薬物である、本発明1135の方法。
[本発明1137]
関心対象の化合物が、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、または小分子である、本発明1135の方法。
[本発明1138]
以下の工程を含む、血管新生腫瘍血管系を画像化する方法：
(a)腫瘍血管系と、本発明1064〜1094のいずれかの少なくとも2つのミセル集団を含む組成物とを接触させる工程であって、各ミセルがブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が約pH 6.5〜7.4のpH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、第2ミセル集団が約pH 5.9〜6.4のpH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有する、工程；ならびに
(b)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルを腫瘍血管系中において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程。
[本発明1139]
腫瘍血管系中の第1および第2蛍光シグナルの分布を測定する工程をさらに含む、本発明1138の方法。
[本発明1140]
標的指向部分を有するミセルをさらに含む、本発明1138の方法。
[本発明1141]
標的指向部分がcRGDペプチドである、本発明1140の方法。
[本発明1142]
第1および第2蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1138の方法。
[本発明1143]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1138の方法。
[本発明1144]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1138の方法。
[本発明1145]
第1および第2蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1138の方法。
[本発明1146]
以下の工程を含む、循環腫瘍細胞を画像化する方法：
(a)リンパ管中または血流中の循環腫瘍細胞と、本発明1064〜1094のいずれかのpH応答性システムを含む組成物とを接触させる工程であって、ミセルが、ブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、かつ約pH 5.9〜6.4のpH転移点を有する、工程；ならびに
(b)循環腫瘍細胞の蛍光シグナルを検出する工程であって、蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程。
[本発明1147]
リンパ系中または血流中の循環腫瘍細胞の第1および第2蛍光シグナルの分布を測定する工程をさらに含む、本発明1146の方法。
[本発明1148]
標的指向部分を有するミセルをさらに含む、本発明1146の方法。
[本発明1149]
標的指向部分が抗体断片である、本発明1148の方法。
[本発明1150]
抗体断片がセツキシマブの断片である、本発明1149の方法。
[本発明1151]
第1および第2蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1146の方法。
[本発明1152]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1146の方法。
[本発明1153]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1146の方法。
[本発明1154]
第1および第2蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1146の方法。
[本発明1155]
以下の工程を含む、腫瘍を画像化する方法：
(a)腫瘍と、本発明1064〜1094のいずれかの少なくとも2つのミセル集団を含む組成物とを接触させる工程であって、各ミセルがブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が約pH 6.5〜7.4のpH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、第2ミセル集団が約pH 5.9〜6.4のpH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有する、工程；ならびに
(b)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルを腫瘍中において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程。
[本発明1156]
腫瘍中の第1および第2蛍光シグナルの分布を測定する工程をさらに含む、本発明1155の方法。
[本発明1157]
標的指向部分を有するミセルをさらに含む、本発明1155の方法。
[本発明1158]
標的指向部分が抗体断片である、本発明1157の方法。
[本発明1159]
抗体断片がセツキシマブのものである、本発明1158の方法。
[本発明1160]
標的指向部分が小分子である、本発明1157の方法。
[本発明1161]
小分子が葉酸である、本発明1160の方法。
[本発明1162]
第1および第2蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1155の方法。
[本発明1163]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1155の方法。
[本発明1164]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1155の方法。
[本発明1165]
第1および第2蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1155の方法。
[本発明1166]
以下の工程を含む、原発腫瘍の所属領域内のリンパ節へと転移した腫瘍を画像化する方法：
(a)腫瘍と、本発明1064〜1094のいずれかの少なくとも2つのミセル集団を含む組成物とを接触させる工程であって、各ミセルがブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が約pH 6.5〜7.4のpH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、第2ミセル集団が約pH 5.9〜6.4のpH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有する、工程；ならびに
(b)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルを腫瘍中において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程。
[本発明1167]
腫瘍中の第1および第2蛍光シグナルの分布を測定する工程をさらに含む、本発明1166の方法。
[本発明1168]
標的指向部分を有するミセルをさらに含む、本発明1166の方法。
[本発明1169]
標的指向部分が抗体断片である、本発明1168の方法。
[本発明1170]
抗体断片がセツキシマブのものである、本発明1169の方法。
[本発明1171]
標的指向部分が小分子である、本発明1168の方法。
[本発明1172]
小分子が葉酸である、本発明1171の方法。
[本発明1173]
第1および第2蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1166の方法。
[本発明1174]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1166の方法。
[本発明1175]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1166の方法。
[本発明1176]
第1および第2蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1166の方法。
[本発明1177]
以下の工程を含む、腫瘍のセンチネルリンパ節を画像化する方法：
(a)腫瘍と、本発明1064〜1094のいずれかの少なくとも2つのミセル集団を含む組成物とを接触させる工程であって、各ミセルがブロックコポリマーおよび蛍光色素を含み、さらに、第1ミセル集団が約pH 6.5〜7.4のpH転移点および第1蛍光発光スペクトルを有し、第2ミセル集団が約pH 5.9〜6.4のpH転移点および第2蛍光発光スペクトルを有する、工程；ならびに
(b)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルを腫瘍中において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルがそのpH転移点に達しかつ解離したことを示す、工程
(c)蛍光シグナルを含むミセルの解離部分を、腫瘍を排出するリンパ管系へ入り込ませて、かつリンパ管系に沿ったリンパ節へとリンパ管系を通って移動させる工程
(d)第1および第2蛍光発光スペクトルに対応する第1および第2蛍光シグナルを、リンパ管系中およびリンパ管系に沿ったリンパ節中において検出する工程であって、第1および第2蛍光シグナルの検出が、対応する蛍光色素を含むミセルが原発腫瘍中においてそのpH転移点に達しかつ解離しかつリンパ管系およびリンパ管系に沿ったリンパ節へと移動したことを示す、工程。
[本発明1178]
腫瘍中の第1および第2蛍光シグナルの分布を測定する工程をさらに含む、本発明1177の方法。
[本発明1179]
標的指向部分を有するミセルをさらに含む、本発明1177の方法。
[本発明1180]
標的指向部分が抗体断片である、本発明1179の方法。
[本発明1181]
抗体断片がセツキシマブのものである、本発明1180の方法。
[本発明1182]
標的指向部分が小分子である、本発明1179の方法。
[本発明1183]
小分子が葉酸である、本発明1182の方法。
[本発明1184]
第1および第2蛍光シグナルの分布が、少なくとも1時間から最大で12時間までの時間にわたって測定される、本発明1177の方法。
[本発明1185]
検出する工程が少なくとも2回繰り返される、本発明1177の方法。
[本発明1186]
検出する工程が少なくとも5回繰り返される、本発明1177の方法。
[本発明1187]
第1および第2蛍光シグナルが500〜820 nmの発光波長を有する、本発明1177の方法。
本発明の他の目的、特徴および利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。しかし、詳細な説明および具体例は、本発明の具体的な態様を示しているが、例示のためのみに与えられることが理解されるべきであり、何故ならば、本発明の精神および範囲内の様々な変更および修飾がこの詳細な説明から当業者に明らかになるためである。