【手続補正書】
【提出日】平成28年3月11日(2016.3.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
粒子状脂質組成物を形成する複数の脂質を含む水不溶性脂質化グリコサミノグリカン粒子と、前記粒子内に封入された核酸とを含む組成物であって、前記核酸と脂質の重量比が１：１未満である組成物。
【請求項２】
前記複数の脂質が、カチオン性脂質、および一級アミノ基を有する脂質を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記カチオン性脂質が、モノカチオン性脂質Ｎ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＯＴＡＰ）、ＢＣＡＴ（Ｏ−（２Ｒ−１  ２−ジ−Ｏ−（１’Ｚ，９’Ｚ−オクタデカジエニル）−グリセロール）−３−Ｎ−（ビス−２−アミノエチル）−カルバメート）、ＢＧＳＣ（ビス−グアニジニウム−スペルミジン−コレステロール）、ＢＧＴＣ（ビス−グアニジニウム−トレン−コレステロール）、ＣＤＡＮ（Ｎ’−コレステリルオキシカルボニル−３，７−ジアザノナン−１，９−ジアミン）、ＣＨＤＴＡＥＡ（コレステリルヘミジチオジグリコリルトリス（アミノ（エチル）アミン）、ＤＣＡＴ（Ｏ−（１，２−ジ−Ｏ−（９’Ｚ−オクタデセニル）−グリセロール）−３−Ｎ−（ビス−２−アミノエチル）−カルバメート）、ＤＣ−Ｃｈｏｌ（３β−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアニリン（エチル）カルバモイルコレステロール）、ＤＬＫＤ（Ｏ，Ｏ’−ジラウリルＮ−リジルアスパルテート）、ＤＭＫＤ（Ｏ，Ｏ’−ジミリスチルＮ−リジルアスパルテート）、ＤＯＧ（ジオレイルグリセロール）、ＤＯＧＳ（ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン）、ＤＯＧＳＤＳＯ（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−スクシニル−２−ヒドロキシエチルジスルフィドオルニチン）、ＤＯＰＣ（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＯＳＮ（ジオレイルスクシニルエチルチオネオマイシン）、ＤＯＳＰ（ジオレイルスクシニルパロモマイシン）、ＤＯＳＴ（ジオレイルスクシニルトブラマイシン）、ＤＯＴＡＰ（１，２−ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウムプロパン）、ＤＯＴＭＡ（Ｎ’［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド）、ＤＰＰＥＳ（ジ−パルミトイルホスファチジルエタノールアミドスペルミン）、ＤＤＡＢおよびＤＯＤＡＰから選択されるか、または
前記一級アミノ基を有する脂質が、１，２−ジラウロイル−Ｌ−ホスファチジル−エタノールアミン（ＤＬＰＥ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２−ジフィタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＰｈＰＥ）、１，３−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−２−ホスホエタノールアミン（１，３−ＤＰＰＥ）、１−パルミトイル−３−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−２−ホスホエタノールアミン（１，３−ＰＯＰＥ）、ビオチン−ホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）およびジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）から選択される、
請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記複数の脂質が、膜安定化脂質をさらに含み、
好ましくは、前記膜安定化脂質が、コレステロール、リン脂質、セファリン、スフィンゴ脂質およびグリセロ糖脂質から選択される、
請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記グリコサミノグリカンが、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、ヘパリン、ヘパラン硫酸、これらの塩および混合物から選択され、
好ましくは、前記ヒアルロン酸が、高分子量ヒアルロン酸を含む、
請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記粒子状脂質組成物が、１０〜２００ｎｍの粒径を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記複数の脂質と前記核酸との間の重量比が、１０：１であるか、
または
前記核酸が、ＤＮＡ、ＲＮＡ、これらの修飾型、およびこれらの組み合わせを含み、好ましくは、前記ＲＮＡが、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡおよびこれらの組み合わせから選択される、
請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
標的化部分をさらに含むか、
または
前記粒子が、前記核酸を標的部位に送達するよう適合されるか、
または
前記標的部位が、細胞、組織、器官および微生物から選択される、
請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
モノカチオン性脂質Ｎ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＯＴＡＰ）を含むカチオン性脂質と；１，２−ジラウロイル−Ｌ−ホスファチジル−エタノールアミン（ＤＬＰＥ）を含む一級アミノ基を有する脂質と；コレステロールを含む膜安定化脂質とを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
凍結乾燥粒子の形態の請求項１から９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
経口、非経口および局所から選択される経路を介する投与に適した剤形の請求項１から１０のいずれか一項に記載の粒子を含む医薬組成物。
【請求項１２】
がんの治療における使用のための、請求項１から１０のいずれか一項に記載の組成物、または請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
核酸を封入した脂質化グリコサミノグリカン組成物を調製する方法であって、
ａ）
ｉ）１種または複数の脂質を有機溶媒に所望の比で混合し、均質な脂質混合物を形成するステップと、
ｉｉ）前記脂質混合物を水性緩衝液に懸濁し、加熱脂質押出機中での前記脂質懸濁液の順次濾過により所望の粒径を得るステップと
を含む粒子状脂質組成物を形成するステップと、
ｂ）
ｉ）グリコサミノグリカンを酸性緩衝液に溶解し、架橋剤を添加して活性化グリコサミノグリカンを形成するステップ
を含むグリコサミノグリカンを活性化するステップと、
ｃ）
ｉ）ステップａ）の前記脂質組成物を前記核酸とインキュベートするステップと、
ｉｉ）ステップｂ）の前記活性化グリコサミノグリカンを前記混合物に添加するステップと
により前記脂質化グリコサミノグリカン組成物を形成するステップと
を含む方法。
【請求項１４】
前記脂質粒子が、約１０〜２００ｎｍの粒径を有するか、
または
前記有機溶媒を前記脂質混合物から蒸発させて脂質膜を形成するか、
または
記脂質粒子を凍結乾燥するステップをさらに含むか、
または
前記核酸と前記脂質粒子の重量比が、１：１未満であるか、
または
前記グリコサミノグリカンが、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、ヘパリン、ヘパラン硫酸、これらの塩および混合物から選択され、好ましくは前記ヒアルロン酸が、高分子量ヒアルロン酸を含むか、
または
前記核酸が、ＤＮＡ、ＲＮＡ、これらの修飾型、およびこれらの組み合わせを含み、好ましくは、前記ＲＮＡが、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡおよびこれらの組み合わせから選択される、
請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記脂質が、カチオン性脂質、および一級アミノ基を有する脂質を含むか、
または
前記カチオン性脂質が、モノカチオン性脂質Ｎ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＯＴＡＰ）、ＢＣＡＴ（Ｏ−（２Ｒ−１  ２−ジ−Ｏ−（１’Ｚ，９’Ｚ−オクタデカジエニル）−グリセロール）−３−Ｎ−（ビス−２−アミノエチル）−カルバメート）、ＢＧＳＣ（ビス−グアニジニウム−スペルミジン−コレステロール）、ＢＧＴＣ（ビス−グアニジニウム−トレン−コレステロール）、ＣＤＡＮ（Ｎ’−コレステリルオキシカルボニル−３，７−ジアザノナン−１，９−ジアミン）、ＣＨＤＴＡＥＡ（コレステリルヘミジチオジグリコリルトリス（アミノ（エチル）アミン）、ＤＣＡＴ（Ｏ−（１，２−ジ−Ｏ−（９’Ｚ−オクタデセニル）−グリセロール）−３−Ｎ−（ビス−２−アミノエチル）−カルバメート）、ＤＣ−Ｃｈｏｌ（３β−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアニリン（エチル）カルバモイルコレステロール）、ＤＬＫＤ（Ｏ，Ｏ’−ジラウリルＮ−リジルアスパルテート）、ＤＭＫＤ（Ｏ，Ｏ’−ジミリスチルＮ−リジルアスパルテート）、ＤＯＧ（ジオレイルグリセロール）、ＤＯＧＳ（ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン）、ＤＯＧＳＤＳＯ（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−スクシニル−２−ヒドロキシエチルジスルフィドオルニチン）、ＤＯＰＣ（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＯＳＮ（ジオレイルスクシニルエチルチオネオマイシン）、ＤＯＳＰ（ジオレイルスクシニルパロモマイシン）、ＤＯＳＴ（ジオレイルスクシニルトブラマイシン）、ＤＯＴＡＰ（１，２−ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウムプロパン）、ＤＯＴＭＡ（Ｎ’［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド）、ＤＰＰＥＳ（ジ−パルミトイルホスファチジルエタノールアミドスペルミン）、ＤＤＡＢおよびＤＯＤＡＰから選択されるか、
または
前記一級アミノ基を有する脂質が、１，２−ジラウロイル−Ｌ−ホスファチジル−エタノールアミン（ＤＬＰＥ）、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２−ジフィタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＰｈＰＥ）、１，３−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−２−ホスホエタノールアミン（１，３−ＤＰＰＥ）、１−パルミトイル−３−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−２−ホスホエタノールアミン（１，３−ＰＯＰＥ）、ビオチン−ホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）から選択されるか、
または
前記脂質が、膜安定化脂質をさらに含むか、
または
前記膜安定化脂質が、コレステロール、リン脂質、セファリン、スフィンゴ脂質およびグリセロ糖脂質から選択される、
請求項１３に記載の方法。