【手続補正書】
【提出日】平成27年12月28日(2015.12.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
モグロシド化合物を生産するために、モグロールをグリコシル化することができるウリジン−５’−ジホスホ（ＵＤＰ）依存性グルコシルトランスフェラーゼ（ＵＧＴ）ポリペプチドとともに、モグロールをインキュベートすることを含む、モグロシド化合物を生産する方法。
【請求項２】
モグロシド化合物が、モグロシドＩａ、モグロシドＩｂまたはＣ２５−Ｈでグリコシル化されたモグロシド化合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＵＧＴポリペプチドが組み換えＵＧＴポリペプチドまたは化学合成により生産されるＵＧＴポリペプチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
組み換えＵＧＴポリペプチドが、組み換え宿主を用いて生産される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
モグロシド化合物を生産するために、モグロールをグリコシル化することができるＵＧＴポリペプチドを発現する組み換え宿主から調製された細胞溶解物に、モグロールを接触させることを含む、モグロシド化合物を生産する方法。
【請求項６】
モグロシド化合物が、モグロシドＩａ、モグロシドＩｂまたはＣ２５−Ｈでグリコシル化されたモグロシド化合物である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
宿主が、微生物であり、微生物が、植物細胞、哺乳動物細胞、昆虫細胞、細菌細胞である、請求項４または５に記載の方法。
【請求項８】
ＵＧＴポリペプチドが、ＵＧＴ７３Ｃ３（配列番号：１）、ＵＧＴ７３Ｃ５（配列番号：２）、ＵＧＴ７３Ｃ６（配列番号：３）、ＵＧＴ７３Ｅ１（配列番号：４）またはＵＧＴ８５Ｃ２（配列番号：５）である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ＵＧＴポリペプチドが、ＵＧＴポリペプチドのカルボキシル末端またはアミノ末端のいずれかに位置付けられるタグを含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
タグが、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、グルタチオンＳトランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、ＨＩＳタグ、Ｆｌａｇタグ、葉緑体輸送ペプチド、ミトコンドリア輸送ペプチド、アミロプラストペプチド、シグナルペプチドまたは分泌タグである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ＵＧＴポリペプチドが、Arabidopsis thalianaＵＧＴ７３Ｃ３（配列番号：１）、ＵＧＴ７３Ｃ５（配列番号：２）またはＵＧＴ７３Ｃ６（配列番号：３）またはStevia rebaudianaＵＧＴ７３Ｅ１（配列番号：４）またはＵＧＴ８５Ｃ２（配列番号：５）またはそれらの機能相同体である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
ＵＧＴポリペプチドが、ＵＧＴ７３Ｃ３（配列番号：１）、ＵＧＴ７３Ｃ６（配列番号：３）またはＵＧＴ８５Ｃ２（配列番号：５）であり、モグロシド化合物が、モグロシドＩｂである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ＵＧＴポリペプチドが、ＵＧＴ７３Ｃ５（配列番号：２）であり、モグロシド化合物が、モグロシドＩａおよび／またはモグロシドＩｂである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ＵＧＴポリペプチドが、ＵＧＴ７３Ｅ１（配列番号：４）であり、モグロシド化合物が、Ｃ２５−ＯＨでグリコシル化される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
モグロールが、モグロシドＶからモグロールの酵素的に合成される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
モグロシドＶが、モンク果実抽出物から精製される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ＵＧＴ７３Ｃ３（配列番号：１）、ＵＧＴ７３Ｃ５（配列番号：２）、ＵＧＴ７３Ｃ６（配列番号：３）、ＵＧＴ７３Ｅ１（配列番号：４）またはＵＧＴ８５Ｃ２（配列番号：５）ポリペプチドをコードする単離された核酸。
【請求項１８】
核酸が、ハイブリッド核酸または融合核酸の一部である人工的な核酸である、請求項１７に記載の単離された核酸。
【請求項１９】
Aspergillus niger由来のペクチナーゼとモグロシドＶを接触させることを含む、モグロシド化合物を生産する方法。
【請求項２０】
モグロシド化合物が、モグロシドＩａまたはモグロシドＩｂである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
モグロールが、モグロシドＶから酵素的に合成される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
モグロシドＶが、モンク果実抽出物から精製される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
１または２以上のモグロシド化合物を生産するために、モグロールをグリコシル化することができる、１または２以上のウリジン−５’−ジホスホ（ＵＤＰ）依存性グルコシルトランスフェラーゼ（ＵＧＴ）ポリペプチドとともに、モグロールをインキュベートすることを含む、１または２以上のモグロシド化合物を生産する方法。
【請求項２４】
１または２以上のモグロシド化合物を生産するために、モグロールをグリコシル化することができる１または２以上のＵＧＴポリペプチドを発現する組み換え宿主から調製された細胞溶解物とともに、モグロールを接触させることを含む、１または２以上のモグロシド化合物を生産する方法。
【請求項２５】
１または２以上のモグロシド化合物を生産するために、モグロールをグリコシル化することができるウリジン−５’−ジホスホ（ＵＤＰ）依存性グルコシルトランスフェラーゼ（ＵＧＴ）ポリペプチドとともに、モグロールをインキュベートすることを含む、１または２以上のモグロシド化合物を生産する方法。
【請求項２６】
１または２以上のモグロシド化合物を生産するために、モグロールをグリコシル化することができＵＧＴポリペプチドを発現する組み換え宿主から調製された細胞溶解物とともに、モグロールを接触させることを含む、１または２以上のモグロシド化合物を生産する方法。
【請求項２７】
（ａ）中間体化合物を生産するために、モグロールをグリコシル化することができる１または２以上のウリジン−５’−ジホスホ（ＵＤＰ）依存性グルコシルトランスフェラーゼ（ＵＧＴ）ポリペプチドとともに、モグロールをインキュベートすること
（ｂ）１または２以上のモグロシド化合物を生産するために、中間体化合物をグリコシル化することができる１または２以上のＵＧＴポリペプチドとともに、中間体化合物をインキュベートすること
（ｃ）ステップ（ｂ）で生産された１または２以上のモグロシド化合物を回収すること
を含む、１または２以上のモグロシド化合物を生産する方法。
【請求項２８】
（ａ）中間体化合物を生産するために、モグロールをグリコシル化することができる１または２以上のＵＧＴポリペプチドを発現する組み換え宿主から調製された細胞溶解物とともに、モグロールを接触させること
（ｂ）１または２以上のモグロシド化合物を生産するために、中間体化合物をグリコシル化することができる１または２以上のＵＧＴポリペプチドとともに、中間体化合物をインキュベートすること
（ｃ）ステップ（ｂ）で生産された１または２以上のモグロシド化合物を回収すること
を含む、１または２以上のモグロシド化合物を生産する方法。
【請求項２９】
モグロシド化合物が、モグロシドＩａ、モグロシドＩｂまたはＣ２５−Ｈでグリコシル化されたモグロシド化合物である、請求項２３〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
ＵＧＴポリペプチドが組み換えＵＧＴポリペプチドまたは化学合成により生産されるＵＧＴポリペプチドである、請求項２３、２５または２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
組み換え宿主を使用して、組み換えＵＧＴポリペプチドが生産される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
宿主が、微生物であり、微生物が、植物細胞、哺乳動物細胞、昆虫細胞、細菌細胞である、請求項２４、２６、２８または３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
ＵＧＴポリペプチドが、ＵＧＴ７３Ｃ３（配列番号：１）、ＵＧＴ７３Ｃ５（配列番号：２）、ＵＧＴ７３Ｃ６（配列番号：３）、ＵＧＴ７３Ｅ１（配列番号：４）またはＵＧＴ８５Ｃ２（配列番号：５）である、請求項２３〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
ＵＧＴポリペプチドが、Arabidopsis thalianaもしくはStevia rebaudianaのＵＧＴまたはその機能的相同体である、請求項２３〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
ＵＧＴポリペプチドが、ＵＧＴポリペプチドのカルボキシル末端またはアミノ末端のいずれかに位置付けられるタグを含む、請求項２３〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
タグが、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、グルタチオンＳトランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、ＨＩＳタグ、Ｆｌａｇタグ、葉緑体輸送ペプチド、ミトコンドリア輸送ペプチド、アミロプラストペプチド、シグナルペプチドまたは分泌タグである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
モグロシドが、モグロシドＶからモグロールの酵素的に合成される、請求項２３〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
モグロシドＶが、モンク果実抽出物から精製される、請求項３７に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図３−１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図３−１】
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【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図３−２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図３−２】
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