【手続補正書】
【提出日】平成28年11月4日(2016.11.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
親酵素サーモリシンに対するアミノ酸の改変を含むサーモリシン酵素変異体又はその活性断片であって、前記改変は生産的位置であり、前記生産的位置で試験された前記改変が、次の評価基準［すなわち、
前記親酵素サーモリシンに対して、発現、洗剤安定性、熱安定性、ＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄活性、又はＡｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性のパラメータのうち少なくとも３種に関する最小性能指数（ＰＩ）が１以上である、位置］を満たしており、
前記生産的位置が（ｉ）２７８位、２８３位、１８０位、２４４位、４８位及び６３位、又は（ｉｉ）Ｔ２７８Ｒ、Ｑ２８３Ｅ、Ａ１８０Ｅ、Ｉ２４４Ｔ、Ｔ４８Ｅ及びＦ６３Ｃからなる群から選択され、サーモリシン変異体のアミノ酸の位置は、配列番号３で示されるサーモリシンのアミノ酸配列と対応させて番号付けされている、サーモリシン酵素変異体又はその活性断片。
【請求項２】
親酵素サーモリシンに対するアミノ酸の改変を含むサーモリシン酵素変異体又はその活性断片であって、前記改変は生産的位置で生じ、前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも１つの改変が、次の評価基準［すなわち、
前記親酵素サーモリシンに対して、発現、洗剤安定性、熱安定性、ＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄活性、又はＡｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性のパラメータの少なくとも全てに関する最小性能指数（ＰＩ）が０．５以上であるが、前記パラメータのうち一つ以下が０．８未満である、位置］を満たしており、
前記生産的位置が、（ｉ）０１９位、０２５位、０２６位、０６５位、０９１位、０９６位、０９７位、１０１位、１０９位、１１８位、１３１位、１４０位、１５８位、１５９位、１７５位、１８０位、１９６位、２１９位、２２５位、２３２位、２４４位、２４６位、２６１位、２７７位、２９３位、３００位、３０１位、３０１位、３０３位、３０５位、及び３１１位、又は（ｉｉ）Ｎ０１９Ｄ、Ｓ０２５Ａ、Ｔ０２６Ｒ、Ｓ０６５Ａ、Ｌ０９１Ｍ、Ｎ０９６Ｑ、Ｎ０９６Ｒ、Ｎ０９６Ｙ、Ｎ０９７Ｋ、Ｒ１０１Ｍ、Ｇ１０９Ａ、Ｓ１１８Ａ、Ｉ１３１Ｌ、Ｖ１４０Ｄ、Ｑ１５８Ａ、Ｎ１５９Ｅ、Ｎ１５９Ｋ、Ｌ１７５Ｖ、Ａ１８０Ｒ、Ｇ１９６Ｔ、Ｇ１９６Ｙ、Ｋ２１９Ｓ、Ｑ２２５Ｅ、Ｉ２３２Ｒ、Ｉ２４４Ｌ、Ｑ２４６Ｄ、Ｄ２６１Ｎ、Ｐ２７７Ｇ、Ｔ２９３Ｙ、Ｓ３００Ｇ、Ｑ３０１Ｆ、Ｑ３０１Ｍ、Ｖ３０３Ｒ、Ｓ３０５Ａ、及びＤ３１１Ａからなる群から選択され、サーモリシン変異体のアミノ酸の位置は、配列番号３で示されるサーモリシンのアミノ酸配列と対応させて番号付けされている、サーモリシン酵素変異体又はその活性断片。
【請求項３】
親酵素サーモリシンに対するアミノ酸の改変を含むサーモリシン酵素変異体又はその活性断片であって、前記改変はサーモリシン酵素変異体の生産的位置で生じ、
（ｉ）２位、２６位、４７位、４９位、５３位、６５位、８７位、９１位、９６位、１０８位、１１８位、１２８位、１５４位、１７９位、１９６位、１９７位、１９８位、１９９位、２０９位、２１１位、２１７位、２１９位、２２５位、２３２位、２５６位、２５７位、２５９位、２６１位、２６５位、２６７位、２７２位、２７６位、２７７位、２８６位、２８９位、２９０位、２９３位、２９５位、２９８位、２９９位、３００位、３０１位、３０３位、３０５位、３０８位、３１１位、及び３１６位、又は２位、２６位、４７位、５３位、８７位、９１位、９６位、１０８位、１１８位、１５４位、１７９位、１９７位、１９８位、１９９位、２０９位、２１１位、２１７位、２１９位、２２５位、２３２位、２５６位、２５７位、２５９位、２６１位、２６５位、２６７位、２７２位、２７６位、２７７位、２８６位、２８９位、２９０位、２９３位、２９５位、２９８位、２９９位、３００位、３０１位、３０３位、３０５位、３０８位、３１１位、及び３１６位、又は２位、８７位、９６位、１９８位、２７７位、２９３位、２９５位、２９８位及び３０１位からなる群から選択される前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも７５％は、
（ｉｉ）１位、４位、１７位、２５位、４０位、４５位、５６位、５８位、６１位、７４位、８６位、９７位、１０１位、１０９位、１４９位、１５０位、１５８位、１５９位、１７２位、１８１位、２１４位、２１６位、２１８位、２２１位、２２２位、２２４位、２５０位、２５３位、２５４位、２５８位、２６３位、２６４位、２６６位、２６８位、２７１位、２７３位、２７５位、２７８位、２７９位、２８０位、２８２位、２８３位、２８７位、２８８位、２９１位、２９７位、３０２位、３０４位、３０７位、及び３１２位からなる群から選択される前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも４０％でかつ７５％未満は、
（ｉｉｉ）５位、９位、１１位、１９位、２７位、３１位、３３位、３７位、４６位、６４位、７３位、７６位、７９位、８０位、８５位、８９位、９５位、９８位、９９位、１０７位、１２７位、１２９位、１３１位、１３７位、１４１位、１４５位、１４８位、１５１位、１５２位、１５５位、１５６位、１６０位、１６１位、１６４位、１６８位、１７１位、１７６位、１８０位、１８２位、１８７位、１８８位、２０５位、２０６位、２０７位、２１０位、２１２位、２１３位、２２０位、２２７位、２３４位、２３５位、２３６位、２３７位、２４２位、２４４位、２４６位、２４８位、２４９位、２５２位、２５５位、２７０位、２７４位、２８４位、２９４位、２９６位、３０６位、３０９位、３１０位、３１３位、３１４位、及び３１５位からなる群から選択される前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも１５％でかつ４０％未満は、又は
（ｉｖ）３位、６位、７位、２０位、２３位、２４位、４４位、４８位、５０位、５７位、６３位、７２位、７５位、８１位、９２位、９３位、９４位、１００位、１０２位、１０３位、１０４位、１１０位、１１７位、１２０位、１３４位、１３５位、１３６位、１４０位、１４４位、１５３位、１７３位、１７４位、１７５位、１７８位、１８３位、１８５位、１８９位、１９３位、２０１位、２２３位、２３０位、２３８位、２３９位、２４１位、２４７位、２５１位、２６０位、２６２位、２６９位、及び２８５位からなる群から選択される前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも１つの改変でかつ１５％未満は、
次の評価基準［すなわち、
ａ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．９以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．０以上である、位置、
ｂ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．８以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．２以上である、位置、及び
ｃ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．５以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．５以上である、位置］から選択される少なくとも１つを満たしており、
サーモリシン変異体のアミノ酸の位置は、配列番号３で示されるサーモリシンのアミノ酸配列と対応させて番号付けされている、サーモリシン酵素変異体又はその活性断片。
【請求項４】
前記親酵素サーモリシンに対するアミノ酸の改変を更に含むサーモリシン酵素変異体又はその活性断片であって、前記改変はサーモリシン酵素変異体の生産的位置で生じ、前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも４０％でかつ７５％未満は、次の評価基準［すなわち、
ａ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．９以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．０以上である、位置、
ｂ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．８以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．２以上である、位置、及び
ｃ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．５以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．５以上である、位置］から選択される少なくとも１つを満たしており、
前記生産的位置が、１位、４位、１７位、２５位、４０位、４５位、６１位、７４位、８６位、９７位、１０１位、１０９位、１４９位、１５０位、１５８位、１５９位、１７２位、１８１位、２１４位、２１６位、２１８位、２２１位、２２２位、２２４位、２５０位、２５３位、２５４位、２５８位、２６３位、２６４位、２６６位、２６８位、２７１位、２７５位、２７９位、２８２位、２８７位、２８８位、２９１位、２９７位、３０２位、３０４位、３０７位、及び３１２位からなる群から選択され、サーモリシン変異体のアミノ酸の位置は、配列番号３で示されるサーモリシンのアミノ酸配列と対応させて番号付けされている、請求項１に記載のサーモリシン酵素変異体又はその活性断片。
【請求項５】
前記親酵素サーモリシンに対するアミノ酸の改変を更に含むサーモリシン酵素変異体又はその活性断片であって、前記改変はサーモリシン酵素変異体の生産的位置で生じ、前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも１５％でかつ４０％未満は、次の評価基準［すなわち、
ａ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．９以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．０以上である、位置、
ｂ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．８以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．２以上である、位置、及び
ｃ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．５以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．５以上である、位置］から選択される少なくとも１つを満たしており、
前記生産的位置が、５位、９位、１１位、２７位、３１位、３３位、３７位、４６位、６４位、７３位、７６位、７９位、８０位、８５位、８９位、９５位、９８位、９９位、１０７位、１２７位、１２９位、１３７位、１４１位、１４５位、１４８位、１５２位、１５５位、１６０位、１６１位、１６４位、１６８位、１７１位、１７６位、１８２位、１８７位、１８８位、２０５位、２０６位、２０７位、２１０位、２１２位、２１３位、２２０位、２２７位、２３４位、２３５位、２３６位、２３７位、２４２位、２４８位、２４９位、２５２位、２５５位、２７０位、２７４位、２８４位、２９４位、２９６位、３０６位、３０９位、３１０位、３１３位、３１４位、及び３１５位からなる群から選択され、サーモリシン変異体のアミノ酸の位置は、配列番号３で示されるサーモリシンのアミノ酸配列と対応させて番号付けされている、請求項２に記載のサーモリシン酵素変異体又はその活性断片。
【請求項６】
親酵素サーモリシンに対するアミノ酸改変を更に含むサーモリシン酵素変異体又はその活性断片であって、前記改変が、サーモリシン酵素変異体の生産的位置で生じ、前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも１つの改変でかつ１５％未満は、次の評価基準［すなわち、
ａ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．９以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．０以上である、位置、
ｂ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．８以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．２以上である、位置、及び
ｃ）前記親酵素サーモリシンに対して、ｐＨ６又はｐＨ８でのＰＡＳ−３８微小布見本の洗浄、Ａｂｚ−ＡＧＬＡ−Ｎｂａに対する活性、洗剤安定性及び熱安定性に関する最小性能指数（ＰＩ）が０．５以上であり、更に、これら試験のうちいずれか一つに関するＰＩが１．５以上である、位置］から選択される少なくとも１つを満たしており、
前記生産的位置が、３位、７位、２０位、２３位、２４位、４４位、４８位、５０位、５７位、７２位、８１位、９２位、９３位、９４位、１００位、１０２位、１０３位、１０４位、１１０位、１１７位、１２０位、１３４位、１３５位、１３６位、１４０位、１４４位、１５３位、１７３位、１７４位、１７５位、１７８位、１８３位、１８５位、１８９位、１９３位、２０１位、２２３位、２３０位、２３８位、２３９位、２４１位、２４７位、２５１位、２６０位、２６２位、２６９位、及び２８５位からなる群から選択され、サーモリシン変異体のアミノ酸の位置は、配列番号３で示されるサーモリシンのアミノ酸配列と対応させて番号付けされている、請求項３に記載のサーモリシン酵素変異体又はその活性断片。
【請求項７】
請求項３に記載のサーモリシン酵素変異体又はその活性断片であって、
（ｉ）２位、２６位、４７位、４９位、５３位、６５位、８７位、９１位、９６位、１０８位、１１８位、１２８位、１５４位、１７９位、１９６位、１９７位、１９８位、１９９位、２０９位、２１１位、２１７位、２１９位、２２５位、２３２位、２５６位、２５７位、２５９位、２６１位、２６５位、２６７位、２７２位、２７６位、２７７位、２８６位、２８９位、２９０位、２９３位、２９５位、２９８位、２９９位、３００位、３０１位、３０３位、３０５位、３０８位、３１１位、及び３１６位、又は２位、２６位、４７位、５３位、８７位、９１位、９６位、１０８位、１１８位、１５４位、１７９位、１９７位、１９８位、１９９位、２０９位、２１１位、２１７位、２１９位、２２５位、２３２位、２５６位、２５７位、２５９位、２６１位、２６５位、２６７位、２７２位、２７６位、２７７位、２８６位、２８９位、２９０位、２９３位、２９５位、２９８位、２９９位、３００位、３０１位、３０３位、３０５位、３０８位、３１１位、及び３１６位、又は２位、８７位、９６位、１９８位、２７７位、２９３位、２９５位、２９８位及び３０１位からなる群から選択される前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも７５％が、ａ）、ｂ）及びｃ）の評価基準から選択される少なくとも１つを満たしている場合は、
前記改変が、２位（Ｔ，Ｆ，Ｌ，Ｐ，Ｓ，Ｖ，Ｗ，Ｙ，Ｑ，Ａ，Ｃ，Ｉ，Ｋ，Ｍ）、２６位（Ｔ，Ｋ，Ｌ，Ｒ，Ｖ，Ｙ，Ｗ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｍ，Ｃ，Ｄ）、４７位（Ｒ，Ａ，Ｃ，Ｈ，Ｋ，Ｎ，Ｄ，Ｅ，Ｇ，Ｌ，Ｍ，Ｑ，Ｔ）、４９位（Ｔ，Ａ，Ｆ，Ｈ，Ｖ，Ｅ，Ｙ）、５３位（Ｓ，Ｆ，Ｈ，Ｉ，Ｍ，Ｑ，Ｔ，Ｗ，Ｋ，Ｒ，Ａ，Ｎ，Ｖ，Ｃ，Ｌ）、６５位（Ｓ，Ｉ，Ｍ，Ｑ，Ｌ，Ａ）、８７位（Ｖ，Ｄ，Ｅ，Ｇ，Ｉ，Ｓ，Ｐ，Ｒ，Ｔ，Ｃ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｎ，Ｑ，Ｗ，Ｙ）、９１位（Ｌ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｋ，Ｍ，Ｐ，Ｑ，Ｓ，Ａ，Ｎ，Ｒ，Ｗ，Ｙ）、９６位（Ｎ，Ｃ，Ｄ，Ｉ，Ｖ，Ｆ，Ｔ，Ｇ，Ｈ，Ｑ，Ｒ，Ｓ，Ｗ，Ｋ，Ｌ，Ｙ）、１０８位（Ｑ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｈ，Ａ，Ｄ，Ｉ，Ｋ，Ｎ，Ｌ，Ｍ）、１１８位（Ｓ，Ｃ，Ｇ，Ｅ，Ａ，Ｄ，Ｍ，Ｑ，Ｒ，Ｔ，Ｖ）、１２８位（Ｑ，Ｄ，Ｅ，Ｒ，Ｓ，Ｋ，Ａ）、１５４位（Ｇ，Ｌ，Ｑ，Ｓ，Ｔ，Ｄ，Ｉ，Ｗ，Ｃ，Ｎ，Ａ，Ｈ，Ｋ，Ｍ，Ｙ）、１７９位（Ｙ，Ａ，Ｄ，Ｈ，Ｍ，Ｎ，Ｑ，Ｓ，Ｔ，Ｗ，Ｆ）、１９６位（Ｇ，Ｅ，Ｔ，Ｋ，Ｖ，Ｌ，Ｙ，Ａ，Ｗ）、１９７位（Ｉ，Ｄ，Ｋ，Ｌ，Ｔ，Ｖ，Ｗ，Ｙ，Ａ，Ｈ，Ｎ，Ｅ，Ｑ，Ｒ，Ｆ，Ｃ）、１９８位（Ｓ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｐ，Ｑ，Ｔ，Ｖ，Ｍ，Ｎ，Ｒ，Ｗ，Ａ，Ｋ）、１９９位（Ｇ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｈ，Ｑ，Ｓ，Ｔ，Ｗ，Ｌ，Ａ，Ｙ）、２０９位（Ａ，Ｄ，Ｅ，Ｌ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｇ，Ｉ，Ｋ，Ｐ，Ｒ，Ｙ，Ｃ，Ｍ）、２１１位（Ｙ，Ａ，Ｃ，Ｄ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｌ，Ｎ，Ｑ，Ｓ，Ｔ，Ｅ，Ｒ）、２１７位（Ｙ，Ｑ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｗ，Ｇ，Ａ，Ｆ，Ｍ，Ｎ，Ｃ，Ｌ）、２１９位（Ｋ，Ｄ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｍ，Ｎ，Ｑ，Ｔ，Ａ，Ｅ，Ｒ，Ｓ）、２２５位（Ｑ，Ｄ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｐ，Ｖ，Ｗ，Ａ，Ｍ，Ｒ，Ｃ，Ｅ，Ｋ，Ｌ，Ｓ）、２３２位（Ｉ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｋ，Ｍ，Ｎ，Ｑ，Ｗ，Ｇ，Ｌ，Ｒ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｙ）、２５６位（Ｖ，Ｌ，Ｔ，Ｋ，Ａ，Ｄ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｒ，Ｓ，Ｎ）、２５７位（Ｇ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｌ，Ｎ，Ｐ，Ｑ，Ｓ，Ｔ，Ｙ，Ｋ，Ｒ）、２５９位（Ｇ，Ａ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｈ，Ｌ，Ｍ，Ｗ，Ｋ，Ｒ，Ｎ，Ｓ，Ｔ）、２６１位（Ｄ，Ａ，Ｎ，Ｐ，Ｖ，Ｗ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｓ）、２６５位（Ｋ，Ａ，Ｃ，Ｄ，Ｍ，Ｐ，Ｑ，Ｓ，Ｇ，Ｉ，Ｌ，Ｒ，Ｎ）、２６７位（Ｆ，Ｅ，Ｇ，Ｎ，Ｓ，Ｖ，Ｗ，Ａ，Ｃ，Ｈ，Ｉ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｔ，Ｙ）、２７２位（Ｔ，Ｅ，Ｌ，Ｖ，Ｗ，Ｐ，Ｙ，Ｃ，Ｆ，Ｎ，Ｑ，Ａ，Ｋ）、２７６位（Ｔ，Ｃ，Ｆ，Ｉ，Ｐ，Ｑ，Ｗ，Ｈ，Ａ，Ｌ，Ｖ，Ｙ）、２７７位（Ｐ，Ｑ，Ｓ，Ｔ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｎ，Ｒ，Ｖ，Ｗ，Ａ，Ｄ，Ｙ）、２８６位（Ａ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｓ，Ｐ，Ｃ，Ｑ，Ｒ，Ｔ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｎ，Ｙ）、２８９位（Ｖ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｉ，Ｎ，Ｓ，Ｗ，Ｒ，Ｔ，Ｌ，Ｍ，Ｙ，Ａ）、２９０位（Ｑ，Ｃ，Ｄ，Ｆ，Ｇ，Ｌ，Ｗ，Ｙ，Ｒ，Ｔ，Ｖ，Ａ，Ｈ，Ｎ）、２９３位（Ｔ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｑ，Ｓ，Ｎ，Ｖ，Ｗ，Ａ，Ｉ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｙ）、２９５位（Ｌ，Ｃ，Ｉ，Ｎ，Ｔ，Ｖ，Ｆ，Ｇ，Ａ，Ｋ，Ｍ，Ｗ）、２９８位（Ｓ，Ｃ，Ｔ，Ｗ，Ｙ，Ｅ，Ｎ，Ｐ，Ａ，Ｇ，Ｋ，Ｍ，Ｒ）、２９９位（Ｔ，Ｃ，Ｆ，Ｌ，Ｍ，Ｒ，Ｗ，Ｐ，Ｄ，Ｑ，Ｎ，Ａ，Ｋ）、３００位（Ｓ，Ｃ，Ｋ，Ｍ，Ｒ，Ｙ，Ｉ，Ｌ，Ｈ，Ｐ，Ｖ，Ｗ，Ａ，Ｇ，Ｔ，Ｄ，Ｎ）、３０１位（Ｑ，Ｅ，Ｈ，Ｐ，Ｒ，Ｌ，Ｃ，Ｆ，Ｇ，Ｗ，Ｍ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｋ）、３０３位（Ｖ，Ｃ，Ｈ，Ｇ，Ｋ，Ｌ，Ｒ，Ｗ，Ａ，Ｐ，Ｙ）、３０５（Ｓ，Ｇ，Ｉ，Ｌ，Ｎ，Ｗ，Ｙ，Ｑ，Ｈ，Ｔ，Ｖ，Ａ，Ｋ，Ｍ）、３０８位（Ｑ，Ｃ，Ｄ，Ｆ，Ｇ，Ｉ，Ｍ，Ｒ，Ｖ，Ｗ，Ｙ，Ａ，Ｌ）、３１１位（Ｄ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｉ，Ｑ，Ｓ，Ｔ，Ａ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｖ，Ｗ，Ｙ）、及び３１６位（Ｋ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｌ，Ｎ，Ｐ，Ｑ，Ｒ，Ｓ，Ｖ，Ｗ，Ｙ，Ａ，Ｍ）からなる群から選択され、
（ｉｉ）１位、４位、１７位、２５位、４０位、４５位、５６位、５８位、６１位、７４位、８６位、９７位、１０１位、１０９位、１４９位、１５０位、１５８位、１５９位、１７２位、１８１位、２１４位、２１６位、２１８位、２２１位、２２２位、２２４位、２５０位、２５３位、２５４位、２５８位、２６３位、２６４位、２６６位、２６８位、２７１位、２７３位、２７５位、２７８位、２７９位、２８０位、２８２位、２８３位、２８７位、２８８位、２９１位、２９７位、３０２位、３０４位、３０７位、及び３１２位からなる群から選択される前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも４０％でかつ７５％未満が、ａ）、ｂ）及びｃ）の評価基準から選択される少なくとも１つを満たしている場合は、前記改変が、１位（Ｉ，Ｋ，Ｍ，Ｖ，Ａ，Ｈ，Ｗ，Ｙ，Ｃ，Ｌ）、４位（Ｔ，Ｅ，Ａ，Ｎ，Ｒ，Ｖ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｙ）、１７位（Ｑ，Ｉ，Ｗ，Ｙ，Ｃ，Ｒ，Ｖ，Ｔ，Ｌ）、２５位（Ｓ，Ｄ，Ｆ，Ａ，Ｃ，Ｋ，Ｍ，Ｒ）、４０位（Ｆ，Ｅ，Ｇ，Ｍ，Ｑ，Ｓ，Ｙ，Ｗ，Ａ，Ｋ，Ｌ）、４５位（Ｋ，Ｅ，Ｌ，Ｓ，Ｆ，Ｈ，Ｑ，Ｙ，Ａ，Ｇ，Ｍ）、５６位（Ａ，Ｋ，Ｑ，Ｖ，Ｗ，Ｈ，Ｉ，Ｍ）、５８位（Ａ，Ｎ，Ｙ，Ｖ，Ｌ）、６１位（Ｑ，Ｍ，Ｒ，Ｗ，Ｆ，Ｖ，Ｃ，Ｉ，Ｌ）、７４位（Ｈ，Ｅ，Ｌ，Ｖ，Ｃ，Ｆ，Ｍ，Ｎ，Ｑ，Ｗ）、８６（Ｎ，Ｌ，Ｓ，Ｙ，Ａ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｋ，Ｄ）、９７位（Ｎ，Ｋ，Ｃ，Ｒ，Ｓ，Ｙ，Ｅ，Ｍ）、１０１位（Ｒ，Ｔ，Ｃ，Ｌ，Ｓ，Ｈ）、１０９位（Ｇ，Ａ，Ｌ，Ｓ，Ｅ，Ｍ，Ｒ，Ｗ）、１４９位（Ｔ，Ｍ，Ｖ，Ａ，Ｌ，Ｄ，Ｓ，Ｎ）、１５０位（Ｄ，Ａ，Ｆ，Ｋ，Ｎ，Ｑ，Ｔ，Ｖ，Ｓ）、１５８位（Ｑ，Ａ，Ｋ，Ｍ，Ｎ，Ｌ，Ｒ，Ｙ，Ｓ）、１５９位（Ｎ，Ｒ，Ｗ，Ａ，Ｃ，Ｇ，Ｍ，Ｔ，Ｓ，Ｙ）、１７２位（Ｆ，Ｇ，Ｌ，Ｍ，Ｑ，Ｓ，Ｖ，Ｗ，Ｙ，Ｄ，Ｈ）、１８１位（Ｎ，Ｌ，Ａ，Ｇ，Ｋ，Ｍ，Ｔ，Ｓ）、２１４位（Ｐ，Ｃ，Ｇ，Ｋ，Ｓ，Ｎ，Ａ，Ｒ）、２１６位（Ｈ，Ｃ，Ｅ，Ｓ，Ｔ，Ｒ，Ａ）、２１８位（Ｓ，Ｋ，Ｌ，Ｙ，Ｆ，Ｇ，Ｔ，Ｖ）、２２１位（Ｙ，Ｋ，Ｎ，Ｑ，Ｒ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ａ，Ｆ，Ｇ，Ｍ）、２２２位（Ｔ，Ｃ，Ｄ，Ｌ，Ｙ，Ｉ，Ｖ，Ａ，Ｍ，Ｋ）、２２４位（Ｔ，Ｋ，Ｍ，Ｆ，Ｌ，Ｐ，Ｑ，Ｖ，Ｙ，Ｅ，Ｈ）、２５０位（Ｈ，Ａ，Ｃ，Ｋ，Ｍ，Ｎ，Ｐ，Ｑ，Ｒ，Ｖ，Ｙ）、２５３位（Ｖ，Ｎ，Ｔ，Ｉ，Ｒ，Ｙ，Ｍ，Ｑ）、２５４位（Ｓ，Ａ，Ｍ，Ｒ，Ｙ，Ｋ，Ｌ，Ｎ，Ｖ，Ｗ）、２５８位（Ｉ，Ｅ，Ｌ，Ｍ，Ｎ，Ｒ，Ｓ，Ａ，Ｃ，Ｋ，Ｑ，Ｖ）、２６３位（Ｌ，Ｃ，Ｉ，Ｑ，Ｔ，Ｈ，Ｋ，Ｎ，Ｖ，Ａ，Ｍ）、２６４位（Ｇ，Ｃ，Ｒ，Ａ，Ｎ，Ｐ，Ｑ，Ｓ，Ｔ）、２６６位（Ｉ，Ａ，Ｆ，Ｌ，Ｓ，Ｃ，Ｍ，Ｔ，Ｖ）、２６８位（Ｙ，Ｍ，Ｑ，Ｖ，Ａ，Ｓ，Ｋ）、２７１位（Ｌ，Ａ，Ｄ，Ｆ，Ｉ，Ｎ，Ｙ，Ｈ）、２７３位（Ｑ，Ａ，Ｈ，Ｙ，Ｃ，Ｓ，Ｗ，Ｅ，Ｇ，Ｎ）、２７５位（Ｌ，Ｉ，Ｍ，Ｖ，Ｃ，Ｑ，Ｓ，Ｔ）、２７８位（Ｔ，Ｇ，Ｋ，Ｒ，Ｙ，Ｃ，Ｈ，Ｍ，Ｎ，Ｑ，Ｓ）、２７９位（Ｓ，Ａ，Ｄ，Ｉ，Ｌ，Ｍ，Ｎ，Ｑ，Ｔ，Ｇ）、２８０位（Ｎ，Ａ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｇ，Ｑ，Ｈ，Ｔ）、２８２位（Ｓ，Ｋ，Ｎ，Ｒ，Ａ，Ｈ，Ｌ，Ｍ，Ｔ）、２８３位（Ｑ，Ｋ，Ｌ，Ｐ，Ｒ，Ｗ，Ｙ，Ｓ）、２８７位（Ａ，Ｉ，Ｌ，Ｎ，Ｖ，Ｙ，Ｋ，Ｒ，Ｔ，Ｄ，Ｃ）、２８８位（Ａ，Ｃ，Ｉ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｙ，Ｎ，Ｌ，Ｍ）、２９１位（Ｓ，Ｅ，Ｉ，Ｌ，Ｍ，Ｎ，Ｖ，Ａ，Ｔ）、２９７位（Ｇ，Ａ，Ｍ，Ｒ，Ｙ，Ｃ，Ｆ，Ｋ，Ｔ，Ｄ，Ｎ）、３０２位（Ｅ，Ｋ，Ｌ，Ｇ，Ｔ，Ｖ，Ｄ，Ｑ，Ａ）、３０４位（Ａ，Ｃ，Ｄ，Ｌ，Ｎ，Ｒ，Ｓ，Ｔ，Ｗ，Ｅ，Ｋ，Ｙ）、３０７位（Ｋ，Ａ，Ｃ，Ｇ，Ｉ，Ｍ，Ｎ，Ｑ，Ｒ，Ｗ，Ｙ，Ｈ）、及び３１２位（Ａ，Ｇ，Ｍ，Ｖ，Ｌ，Ｎ，Ｒ，Ｔ，Ｃ）からなる群から選択され、
（ｉｉｉ）５位、９位、１１位、１９位、２７位、３１位、３３位、３７位、４６位、６４位、７３位、７６位、７９位、８０位、８５位、８９位、９５位、９８位、９９位、１０７位、１２７位、１２９位、１３１位、１３７位、１４１位、１４５位、１４８位、１５１位、１５２位、１５５位、１５６位、１６０位、１６１位、１６４位、１６８位、１７１位、１７６位、１８０位、１８２位、１８７位、１８８位、２０５位、２０６位、２０７位、２１０位、２１２位、２１３位、２２０位、２２７位、２３４位、２３５位、２３６位、２３７位、２４２位、２４４位、２４６位、２４８位、２４９位、２５２位、２５５位、２７０位、２７４位、２８４位、２９４位、２９６位、３０６位、３０９位、３１０位、３１３位、３１４位、及び３１５位からなる群から選択される前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも１５％でかつ４０％未満が、ａ）、ｂ）及びｃ）の評価基準から選択される少なくとも１つを満たしている場合は、前記改変が、５位（Ｓ，Ｄ，Ｎ，Ｐ，Ｈ，Ｌ）、９位（Ｖ，Ｌ，Ｔ，Ｉ）、１１位（Ｒ，Ｉ，Ｙ，Ｋ）、１９位（Ｎ，Ｌ，Ｙ，Ｋ，Ｓ）、２７位（Ｙ，Ｗ，Ａ，Ｍ，Ｖ，Ｃ，Ｌ）、３１位（Ｑ，Ａ，Ｋ，Ｖ，Ｉ，Ｃ，Ｙ）、３３位（Ｎ，Ｓ，Ｔ，Ｋ，Ａ，Ｃ，Ｌ，Ｍ）、３７位（Ｎ，Ｄ，Ｑ，Ｒ，Ｌ，Ｋ）、４６位（Ｙ，Ｌ，Ｈ，Ｎ，Ｃ）、６４位（Ａ，Ｈ，Ｑ，Ｔ，Ｄ，Ｅ）、７３位（Ａ，Ｉ，Ｆ，Ｌ，Ｍ，Ｗ）、７６位（Ｙ，Ｈ，Ｌ，Ｍ，Ｑ，Ｔ）、７９位（Ｖ，Ｌ，Ｑ，Ｔ，Ａ，Ｎ，Ｓ）、８０位（Ｔ，Ｉ，Ｄ，Ａ，Ｌ，Ｎ）、８５位（Ｋ，Ｅ，Ａ，Ｌ，Ｎ，Ｒ，Ｓ）、８９位（Ｎ，Ｌ，Ｍ，Ｈ）、９５（Ｇ，Ａ，Ｄ，Ｈ，Ｍ，Ｎ，Ｓ）、９８位（Ａ，Ｃ，Ｅ，Ｈ，Ｒ，Ｙ，Ｋ，Ｖ）、９９位（Ａ，Ｅ，Ｋ，Ｐ，Ｒ，Ｓ）、１０７位（Ｓ，Ｄ，Ｋ，Ｙ，Ａ，Ｇ）、１２７位（Ｇ，Ｃ，Ｄ，Ｅ）、１２９位（Ｔ，Ｉ，Ｒ，Ｅ，Ｙ，Ｌ，Ｍ）、１３１位（Ｉ，Ｙ，Ｗ，Ｌ）、１３７位（Ｉ，Ｐ，Ａ，Ｅ，Ｔ，Ｖ，Ｌ）、１４１位（Ａ，Ｓ，Ｃ，Ｇ）、１４５位（Ｔ，Ａ，Ｃ，Ｅ，Ｇ，Ｍ，Ｎ，Ｑ）、１４８位（Ｖ，Ｌ，Ｎ，Ｙ，Ｍ，Ａ，Ｑ）、１５１位（Ｙ，Ｇ）、１５２位（Ｔ，Ｓ，Ｌ，Ｍ，Ｇ）、１５５位（Ｌ，Ｃ，Ｉ，Ｍ）、１５６位（Ｉ，Ｌ，Ｑ）、１６０位（Ｅ，Ｌ，Ｙ，Ｑ）、１６１位（Ｓ，Ａ，Ｎ，Ｐ，Ｔ）、１６４位（Ｉ，Ｌ，Ｎ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｃ，Ａ）、１６８位（Ｉ，Ａ，Ｍ，Ｔ，Ｌ）、１７１位（Ｉ，Ｃ，Ｅ，Ｆ，Ｌ，Ｓ，Ｇ）、１７６位（Ｖ，Ｌ，Ｎ，Ｃ）、１８０位（Ａ，Ｅ，Ｇ，Ｋ，Ｔ，Ｓ）、１８２位（Ｋ，Ｌ，Ａ，Ｗ）、１８７位（Ｅ，Ｌ，Ｄ）、１８８位（Ｉ，Ｌ，Ｖ）、２０５位（Ｍ，Ｌ，Ａ，Ｖ，Ｑ）、２０６位（Ｓ，Ａ，Ｃ，Ｋ，Ｌ，Ｍ，Ｒ）、２０７位（Ｄ，Ａ，Ｈ，Ｎ）、２１０位（Ｋ，Ｉ，Ｌ，Ｖ）、２１２位（Ｇ，Ｙ，Ａ，Ｄ，Ｑ）、２１３位（Ｄ，Ｎ，Ｓ，Ｌ，Ａ，Ｇ，Ｗ）、２２０位（Ｒ，Ｋ，Ｖ，Ａ）、２２７位（Ｎ，Ｄ，Ｌ，Ｙ，Ａ）、２３４位（Ｓ，Ｄ，Ｎ，Ａ，Ｃ）、２３５位（Ｇ，Ｍ，Ｃ，Ｑ，Ｓ，Ａ）、２３６位（Ｉ，Ｍ，Ａ，Ｃ）、２３７位（Ｉ，Ｎ，Ｆ，Ｍ）、２４２位（Ｙ，Ｃ，Ｆ，Ｎ，Ｖ）、２４４位（Ｉ，Ｔ，Ｖ，Ｆ，Ａ，Ｍ，Ｌ）、２４６位（Ｑ，Ｅ，Ｎ，Ｔ，Ｌ，Ｃ，Ｄ）、２４８位（Ｇ，Ａ，Ｅ，Ｓ）、２４９位（Ｔ，Ｋ，Ｍ，Ｎ，Ｌ，Ｙ，Ｐ）、２５２位（Ｇ，Ｋ，Ｙ，Ａ，Ｓ，Ｔ，Ｗ）、２５５位（Ｖ，Ｌ，Ｐ，Ａ，Ｙ，Ｍ，Ｎ）、２７０位（Ａ，Ｃ，Ｆ，Ｉ，Ｌ，Ｓ，Ｇ）、２７４位（Ｙ，Ｆ，Ｈ，Ａ，Ｃ，Ｑ，Ｔ，Ｍ）、２８４位（Ｌ，Ｖ，Ｗ，Ａ，Ｍ，Ｙ）、２９４位（Ｄ，Ａ，Ｖ，Ｑ，Ｎ）、２９６位（Ｙ，Ｎ，Ｌ，Ｒ，Ｈ，Ｗ，Ｍ）、３０６位（Ｖ，Ａ，Ｓ，Ｆ，Ｉ，Ｌ，Ｔ）、３０９位（Ａ，Ｇ，Ｓ，Ｔ，Ｖ，Ｃ）、３１０位（Ｆ，Ａ，Ｃ，Ｗ，Ｍ）、３１３位（Ｖ，Ｔ，Ａ，Ｇ，Ｌ，Ｉ，Ｃ）、３１４位（Ｇ，Ａ，Ｅ，Ｈ，Ｍ，Ｓ，Ｗ，Ｑ）、及び３１５位（Ｖ，Ａ，Ｃ，Ｉ，Ｍ，Ｌ，Ｔ）からなる群から選択され、又は
（ｉｖ）３位、６位、７位、２０位、２３位、２４位、４４位、４８位、５０位、５７位、６３位、７２位、７５位、８１位、９２位、９３位、９４位、１００位、１０２位、１０３位、１０４位、１１０位、１１７位、１２０位、１３４位、１３５位、１３６位、１４０位、１４４位、１５３位、１７３位、１７４位、１７５位、１７８位、１８３位、１８５位、１８９位、１９３位、２０１位、２２３位、２３０位、２３８位、２３９位、２４１位、２４７位、２５１位、２６０位、２６２位、２６９位、及び２８５位からなる群から選択される前記生産的位置で試験された前記改変のうち少なくとも１つの改変でかつ１５％未満が、ａ）、ｂ）及びｃ）の評価基準から選択される少なくとも１つを満たしている場合は、前記改変が、３位（Ｇ，Ｙ）、６位（Ｔ，Ｃ，Ｖ）、７位（Ｖ，Ｌ，Ｉ）、２０位（Ｉ，Ｌ，Ｖ）、２３位（Ｔ，Ｆ，Ｗ）、２４位（Ｙ，Ｗ）、４４位（Ａ，Ｃ）、４８位（Ｔ，Ｅ，Ｄ）、５０位（Ｌ，Ｐ）、５７位（Ｄ，Ｋ）、６３位（Ｆ，Ｙ，Ｃ）、７２位（Ｄ，Ｆ，Ｗ）、７５位（Ｙ，Ａ）、８１位（Ｙ，Ｆ）、９２位（Ｓ，Ｌ）、９３位（Ｙ，Ｔ，Ｃ）、９４位（Ｄ，Ｔ）、１００位（Ｉ，Ｌ，Ｖ）、１０２位（Ｓ，Ｇ，Ｎ）、１０３位（Ｓ，Ｔ）、１０４位（Ｖ，Ａ）、１１０位（Ｙ，Ｌ）、１１７位（Ｇ，Ｈ）、１２０位（Ｍ，Ｌ）、１３４位（Ｓ，Ａ，Ｐ）、１３５位（Ｇ，Ａ）、１３６位（Ｇ，Ａ，Ｓ）、１４０位（Ｖ，Ｄ）、１４４位（Ｌ，Ｔ）、１５３位（Ａ，Ｔ）、１７３位（Ｇ，Ａ，Ｃ）、１７４位（Ｔ，Ｃ，Ａ）、１７５位（Ｌ，Ｈ，Ｓ）、１７８位（Ｆ，Ｈ，Ｙ）、１８３位（Ｎ，Ｓ）、１８５位（Ｄ，Ｅ）、１８９位（Ｇ，Ａ）、１９３位（Ｙ，Ｆ）、２０１位（Ｓ，Ｃ，Ａ）、２２３位（Ｇ，Ｄ，Ｋ）、２３０位（Ｖ，Ａ）、２３８位（Ｎ，Ｌ，Ｍ）、２３９位（Ｋ，Ａ）、２４１位（Ａ，Ｌ，Ｓ）、２４７位（Ｇ，Ａ，Ｓ）、２５１位（Ｙ，Ｍ）、２６０位（Ｒ，Ａ，Ｎ）、２６２位（Ｋ，Ａ）、２６９位（Ｒ，Ｖ，Ｋ）、及び２８５位（Ｒ，Ｋ，Ｙ）からなる群から選択され、
サーモリシン変異体のアミノ酸の位置は、配列番号３で示されるサーモリシンのアミノ酸配列と対応させて番号付けされている、請求項３に記載のサーモリシン酵素変異体又はその活性断片。
【請求項８】
前記変異体が、配列番号３に記載のサーモリシンと少なくとも５０％の同一性を有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載のサーモリシン酵素変異体又はその活性断片。
【請求項９】
前記サーモリシン酵素変異体が、バチルス属、ゲオバチルス種、アリシクロバチルス属、乳酸桿菌、エクシグオバクテリウム属、ブレビバチルス属、パエニバチルス属、ヘルペトシフォン属、オセアノバチルス属、シュワネラ属、クロストリジウム属、ブドウ球菌属、フラボバクテリウム属、スチグマテラ属、ミクソコッカス属、ビブリオ属、メタノサルシナ属、クリセオバクテリウム属、ストレプトマイセス属、クリベラ属、ジャニバクター属、ノカルジオイデス属、ザントモナス属（Xanthamonas）、ミクロモノスポラ属、バークホルデリア属、デハロコッコイデス属、クロセイバクター、コルジア属、マイクロシーラ属、サーモアクチノミセス属、クロロフレクサス属、リステリア属、プレシオシスチス属、ハリスコメノバクター属、サイトファーガ属、ハヘラ属、アルスロバクター属、ブラキバクテリウム属、クラビバクター属、ミクロバクテリウム属、イントラスポランギウム属、フランキア属、メイオテルムス属、シュードモナス属、トウゴマ属、カテヌリスポラ属、アナベナ属、ノストック属、ハロモナス属、クロモハロバクター属、ボルデテラ属、バリオボラックス属、ディケヤー属、ペクトバクテリウム属、シトロバクター属、エンテロバクター属、サルモネラ属、エルウィニア属、パントエア属、ラーネラ属、セラチア属、ゲオデルマトフィルス属、ゲンマタ属、ゼノラブダス属、フォトラブダス属、アスペルギルス属、ネオサルトリア属、ピレノフォラ属、サッカロポリスポラ属、ネクトリア属、ジベレラ属、メタリジウム属、ワドリア属、シアノセイス属、セルロファーガ属、プロビデンシア属、ブラディリゾビウム属、アグロバクテリウム属、ムシラジニバクター（Mucilaginibacter）、セラチア属、ソランジウム属、ストレプトスポランジウム属、レニバクテリウム属、アエロモナス属、レイネケア属、クロモバクテリウム属、モリテラ属、ハリアンギウム属、カンギエラ属、マリノモナス属、ビブリオナレス属、リストネラ属、サリニビブリオ属、フォトバクテリウム属、アルテロモナダーレス属、レジオネラ属、テレディニバクター属、レイネケア属、ヒドロゲニビルガ属、及びシュードアルテロモナス属からなる群から選択される一つの属に由来するものである、請求項１〜８のいずれか一項に記載のサーモリシン酵素変異体。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載のサーモリシン酵素変異体を少なくとも１種含む、クリーニング組成物。
【請求項１１】
前記クリーニング組成物が洗剤組成物である、請求項１０に記載のクリーニング組成物。
【請求項１２】
前記クリーニング組成物が、洗濯洗剤組成物、食器用洗剤組成物、又は硬質表面用クリーニング組成物である、請求項１０又は１１に記載のクリーニング組成物。
【請求項１３】
少なくとも１種の漂白剤、又はアシルトランスフェラーゼ、αアミラーゼ、βアミラーゼ、αガラクトシダーゼ、アラビノシダーゼ、アリールエステラーゼ、βガラクトシダーゼ、カラギナーゼ、カタラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、セルラーゼ、コンドロイチナーゼ、クチナーゼ、エンド−β−１、４−グルカナーゼ、エンド−β−マンナナーゼ、エステラーゼ、エクソマンナナーゼ、ガラクタナーゼ、グルコアミラーゼ、ヘミセルラーゼ、ヒアルロニダーゼ、ケラチナーゼ、ラッカーゼ、ラクターゼ、リグニナーゼ、リパーゼ、リポキシゲナーゼ、マンナナーゼ、オキシダーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ペクチンアセチルエステラーゼ、ペクチナーゼ、ペントサナーゼ、ペルオキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、ホスファターゼ、ホスホリパーゼ、フィターゼ、ポリガラクツロナーゼ、プロテアーゼ、プルラナーゼ、レダクターゼ、ラムノガラクツロナーゼ、βグルカナーゼ、タンナーゼ、トランスグルタミナーゼ、アセチルキシランエステラーゼ、キシラナーゼ、キシログルカナーゼ、およびキシロシダーゼ、追加のメタロプロテアーゼ酵素、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１種の追加の酵素を更に含む、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載のクリーニング組成物。
【請求項１４】
表面又は物品を、請求項１〜９のいずれか一項に記載のサーモリシン酵素変異体を少なくとも１種含むクリーニング組成物と接触させる工程を含む、クリーニング方法。