【手続補正書】
【提出日】平成28年6月3日(2016.6.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造式のいずれか１つによって表される結合体であって、
2015520184.tif 000001
、
2015520184.tif 000002
または
2015520184.tif 000003
式中、
Ｒ２は、ＨまたはＳＯ３Ｈである、結合体。
【請求項２】
請求項１に記載の結合体であって、
ＰＥＧは、ＰＥＧ３０であることを特徴とする結合体。
【請求項３】
請求項１に記載の結合体であって、
Ｒ２は、２位にあることを特徴とする結合体。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の結合体と、
薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【請求項５】
医薬を製造するための、請求項１〜３のいずれか１項に記載の結合体または請求項４に記載の医薬組成物の使用。
【請求項６】
肥満を治療するための医薬を製造するための、請求項１〜３のいずれか１項に記載の結合体または請求項４に記載の医薬組成物の使用。
【請求項７】
以下の構造式によって表される結合体の製造方法であって、
2015520184.tif 000004
前記オキシントモジュリン（ＯＸＭ、配列番号１のもの）は、前記オキシントモジュリンの末端アミノ基を介してリンクされ、Ｒ２は、ＨまたはＳＯ３Ｈであり、それぞれはＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｎ末端）及びＰＥＧ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｎ末端）を表し、
前記方法は、
下記のＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳまたはＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳ、即ち
2015520184.tif 000005
または
2015520184.tif 000006
と、
樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンであって、前記樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンのＬｙｓ１２及びＬｙｓ３０のアミノ側鎖は、各々保護基で保護されている、該樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンと反応させて、樹脂結合ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｎ末端）または樹脂結合ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｎ末端）を得る反応ステップを含み、
前記方法は更に、前記反応ステップの後に、
（ａ）前記樹脂結合ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｎ末端）または前記樹脂結合ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｎ末端）とスルフヒドリルＰＥＧポリマー（ＰＥＧ−ＳＨ）とを反応させ、その後に前記保護基及び前記樹脂の除去を行うか、または
（ｂ）前記保護基及び前記樹脂の除去を行ってＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｎ末端）またはＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｎ末端）を得て、その後前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｎ末端）または前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｎ末端）とスルフヒドリルＰＥＧポリマー（ＰＥＧ−ＳＨ）とを反応させて、
ＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｎ末端）またはＰＥＧ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｎ末端）を得るステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法であって、
前記ＰＥＧは、ＰＥＧ３０であることを特徴とする方法。
【請求項９】
請求項７に記載の方法であって、
Ｒ２またはＳＯ３Ｈ、２位にあることを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項７に記載の方法であって、
前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｎ末端）及び前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｎ末端）の前記Ｌｙｓ１２及びＬｙｓ３０のアミノ側鎖の前記保護基は除去されて、ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｎ末端）及びＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｎ末端）がそれぞれ得られ、前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｎ末端）及び前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｎ末端）は更に精製されることを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項７に記載の方法であって、
前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｎ末端）及び前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｎ末端）の前記Ｌｙｓ１２及びＬｙｓ３０のアミノ側鎖の前記保護基は、ｉｖＤｄｅ（１−［（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリジン）エチル］）であることを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項７に記載の方法であって、
前記保護基は、塩基性条件下で除去されることを特徴とする方法。
【請求項１３】
以下の構造式によって表される結合体の製造方法であって、
2015520184.tif 000007
前記オキシントモジュリン（ＯＸＭ、配列番号１のもの）は、前記オキシントモジュリンのＬｙｓ１２のアミノ側鎖を介してリンクされ、Ｒ２は、ＨまたはＳＯ３Ｈであり、それぞれはＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）及びＰＥＧ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）を表し、
前記方法は、
下記のＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳまたはＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳ、即ち
2015520184.tif 000008
または
2015520184.tif 000009
と、
樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンであって、前記樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンのＬｙｓ３０のアミノ側鎖及びＨｉｓ１のアミノ末端は、各々保護基で保護されている、該樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンと反応させて、樹脂結合ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）または樹脂結合ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）を得る反応ステップを含み、
前記方法は更に、前記反応ステップの後に、
（ａ）前記樹脂結合ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）または前記樹脂結合ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）とスルフヒドリルＰＥＧポリマー（ＰＥＧ−ＳＨ）とを反応させ、その後に前記保護基及び前記樹脂の除去を行うか、または
（ｂ）前記保護基及び前記樹脂の除去を行ってＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）またはＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）を得て、その後前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）または前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）とスルフヒドリルＰＥＧポリマー（ＰＥＧ−ＳＨ）とを反応させて、
ＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）またはＰＥＧ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）を得るステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１３に記載の方法であって、
前記ＰＥＧは、ＰＥＧ３０であることを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１３に記載の方法であって、
Ｒ２またはＳＯ３Ｈ、２位にあることを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１３に記載の方法であって、
前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）及び前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）の前記Ｌｙｓ３０のアミノ側鎖及びＨｉｓ１のアミノ末端の前記保護基は除去されて、ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）及びＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）がそれぞれ得られ、前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）及び前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ１２）は更に精製されることを特徴とする方法。
【請求項１７】
以下の構造式によって表される結合体の製造方法であって、
2015520184.tif 000010
前記オキシントモジュリン（ＯＸＭ、配列番号１のもの）は、前記オキシントモジュリンのＬｙｓ３０のアミノ側鎖を介してリンクされ、Ｒ２は、ＨまたはＳＯ３Ｈであり、それぞれはＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）及びＰＥＧ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）を表し、
前記方法は、
下記のＭＡＬ−ＦＭＳ−ＮＨＳまたはＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＮＨＳ、即ち
2015520184.tif 000011
または
2015520184.tif 000012
と、
樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンであって、前記樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンのＬｙｓ１２のアミノ側鎖及びＨｉｓ１のアミノ末端は、各々保護基で保護されている、該樹脂結合した配列番号１のオキシントモジュリンと反応させて、樹脂結合ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）または樹脂結合ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）を得る反応ステップを含み、
前記方法は更に、前記反応ステップの後に、
（ａ）前記樹脂結合ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）または前記樹脂結合ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）とスルフヒドリルＰＥＧポリマー（ＰＥＧ−ＳＨ）とを反応させ、その後に前記保護基及び前記樹脂の除去を行うか、または
（ｂ）前記保護基及び前記樹脂の除去を行ってＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）またはＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）を得て、その後前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）または前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）とスルフヒドリルＰＥＧポリマー（ＰＥＧ−ＳＨ）とを反応させて、
ＰＥＧ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）またはＰＥＧ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）を得るステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１７に記載の方法であって、
前記ＰＥＧは、ＰＥＧ３０であることを特徴とする方法。
【請求項１９】
請求項１７に記載の方法であって、
Ｒ２またはＳＯ３Ｈ、２位にあることを特徴とする方法。
【請求項２０】
請求項１７に記載の方法であって、
前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）及び前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−保護ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）の前記Ｌｙｓ１２のアミノ側鎖及びＨｉｓ１のアミノ末端の前記保護基は除去されて、ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）及びＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）がそれぞれ得られ、前記ＭＡＬ−Ｆｍｏｃ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）及び前記ＭＡＬ−ＦＭＳ−ＯＸＭ（Ｌｙｓ３０）は更に精製されることを特徴とする方法。
【請求項２１】
生物学的半減期の長いオキシントモジュリンを含む組成物の製造方法であって、
請求項７〜２０のいずれか１項に記載の方法によってオキシントモジュリン結合体を製造するステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項２２】
必要な投与頻度が小さいオキシントモジュリンを含む組成物の製造方法であって、
請求項７〜２０のいずれか１項に記載の方法によってオキシントモジュリン結合体を製造するステップを含むことを特徴とする方法。