【誤訳訂正書】
【提出日】平成28年11月4日(2016.11.4)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物の調製の改善方法であって、
【化１】
2015535003.tif 000001
（ａ）任意に溶媒中、弱酸と弱塩基との塩、または弱塩基の存在下、式（ＩＩ）のイソバレルアルデヒドと式（ＩＩＩ）のシアノ酢酸アルキルとを反応させて、式（ＩＶ）の２−シアノ−５−メチル−ヘキサ−２−エン酸アルキルエステルを得るステップ、
【化２】
2015535003.tif 000002
（式中、Ｒ1は、直鎖または分岐のＣ1からＣ4アルキルである）
（ｂ）水中もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、式（ＩＶ）の２−シアノ−５−メチル−ヘキサ−２−エン酸アルキルエステルをシアン化物源と反応させて、式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを得るステップ、
【化３】
2015535003.tif 000003
（ｃ）水中もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、シアン化物源の存在下、式（ＩＩ）のイソバレルアルデヒドと式（ＩＩＩ）のシアノ酢酸アルキルとを、単一ステップで反応させることにより、式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを得てもよいステップ、
（ｄ）水中、または有機共溶媒を含む水中、遺伝子修飾したニトリラーゼ酵素により、式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを式（ＶＩ）のラセミ３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩に変換するステップ、
【化４】
2015535003.tif 000004
（式中、Ｒ2は、水素、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、アルキルアンモニウム、及び有機アミンからなる群から選択されるカチオン対イオン）
ｅ）塩基の存在下、式（ＶＩ）のラセミ３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩をアルコール（Ｒ3ＯＨ）および酸性触媒、またはハロゲン化アルキル（Ｒ3Ｘ）と処理することにより、式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートへと変換するステップ、
【化５】
2015535003.tif 000005
（式中、Ｒ3は、直鎖もしくは分岐のＣ1からＣ4アルキル、Ｃ7からＣ10アリール及びアルキルアリールからなる群から選択される）
（ｆ）水もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、酵素によるエナンチオ選択的な加水分解により、式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートから、式（ＶＩＩＩ）の（Ｓ）−アルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートおよび式（Ｘ）の（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩を得るステップ、
【化６】
2015535003.tif 000006
（式中、
Ｒ2は、水素、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、アルキルアンモニウム、及び有機アミンからなる群から選択されるカチオン対イオンであり；及び
Ｒ3は、直鎖もしくは分岐のＣ1からＣ4アルキル、Ｃ7からＣ10アリール及びアルキルアリールからなる群から選択される）
（ｇ）塩基の存在下、式（Ｘ）の不要な（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸もしくはその塩、または実質的に豊富な式（Ｘ）のその（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸塩をラセミ化することにより、式（ＶＩＩ）の化合物を得るステップ、
（ｈ）アルカリ金属塩基またはアルカリ土類金属塩基を用いるエステル基の加水分解、その後の、水もしくは他の有機溶媒、及びそれらの混合物からなる群から選択される溶媒中、水素化触媒での水素化により、式（ＶＩＩＩ）の（Ｓ）−アルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートを式（Ｉ）のプレガバリンに変換するステップ、
を含む、方法。
【請求項２】
ステップ（ａ）における有機弱酸が、安息香酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸、及び酢酸からなる群から選択され、ステップ（ａ）における前記弱塩基が、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンからなる群から選択され、ステップ（ａ）において使用される前記塩が、酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、安息香酸アンモニウム、コハク酸アンモニウム、及び酢酸アルキルアンモニウムからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ステップ（ａ）における前記溶媒が、酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、シクロヘキサン、トルエン、およびそれらの混合物からなる群から選択され、ステップ（ｂ）およびステップ（ｃ）における前記溶媒が、水、エチルアルコール、メチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、シクロヘキサン、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ステップ（ｂ）およびステップ（ｃ）の前記シアン化物源が、シアン化リチウム、シアン化ナトリウム、シアン化カリウム、及びシアン化トリメチルシリルからなる群から選択され、ステップ（ｂ）の前記反応が、４５℃〜１２０℃の間の温度範囲で実施され、及びステップ（ａ）およびステップ（ｃ）の前記反応が、周囲温度から還流温度で実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ステップ（ｄ）における化合物（ＶＩ）を調製するための式（Ｖ）の化合物の投入量が、水または共溶媒と組み合わせた水１リットルあたり３０〜３００ｇから選択され、ステップ（ｄ）において化合物（ＶＩ）を調製するための、前記遺伝子修飾したニトリラーゼ酵素（Ｎｉｔ９Ｎ＿５６＿２）の投入量が、化合物（Ｖ）１ｇあたり４〜２５Ｕから選択され；及び、溶液のｐＨが、７．２±０．８の範囲に保持され、リン酸もしくは酢酸緩衝液から選択される緩衝液により、または酢酸、クエン酸、酒石酸、塩酸、硫酸、リン酸から選択される酸及びアンモニア、モノ、ジおよびトリアルキルアミン、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムからなる群から選択される塩基を添加することにより維持され、ステップ（ｄ）の前記反応が、２５℃〜４０℃の間の温度範囲で実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ステップ（ｅ）におけるアルコール（Ｒ3ＯＨ）が、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、シクロペンタノール、及びシクロヘキサノールからなる群から選択され、ステップ（ｅ）における前記ハロゲン化アルキル（Ｒ3Ｘ）が、ヨウ化メチル、塩化エチル、臭化エチル、ヨウ化エチル、臭化ｎ−プロピル、塩化イソプロピル、及び臭化イソプロピルからなる群から選択され；及び、ステップ（ｅ）における前記酸触媒または試薬が、塩酸、硫酸、塩化チオニル、塩化トリメチルシリル、メタンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ルイス酸、又は強酸性スルホン化樹脂からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチルヘキサノエートの調製中、これをステップ（ｅ）において蒸留することにより精製される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
ステップ（ｆ）における前記酵素によるエナンチオ選択的な加水分解が、カンジダ・アンタルクチカＡ、カンジダ・アンタルクチカＢ１、カンジダ・アンタルクチカＢＹ２、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ、Ｎｏｖｏｚｙｍｅ４３５、リゾムコル・メイヘイ、サーモマイセス・ランギノサ、シュードモナス・ケペシア、Ｒｅｓｉｎａｓｅ  ＨＴ、Ｌｉｐｅｘ  １００Ｌ、枯草菌、リパーゼ３．１０１、リパーゼ３．１０２、リパーゼ３．１０４、リパーゼ３．１０５、リパーゼ３．１０６、リパーゼ３．１０７、リパーゼ３．１０８、リパーゼ３．１０９、リパーゼ３．１１１、リパーゼ３．１１５、リパーゼ３．１１３、リパーゼ３．１１７、リパーゼ３．１３６、ＡＹＳ  Ａｍｉｎｏ、ＡＳ  Ａｍａｎｏ、ＰＳ  ＡｍａｎｏＳＤ、及びＡＫ  Ａｍａｎｏからなる群から選択される、エステラーゼ、リポラーゼ、およびリパーゼのような加水分解酵素を使用することにより実施され、好ましい酵素の投入量が、基質に比べて、＞０．１％〜＜５％ｗ／ｗの範囲にあり；並びに、酵素が、回収されてもよく、及び、ほとんど完全な酵素活性が保たれている間、数回再使用されてもよく、その活性が乏しい場合、酵素の再利用中、初期酵素投入量に対して５％〜５０％ｗ／ｗの範囲で新しい酵素の追加量が追加される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
ステップ（ｆ）における溶媒が、水、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、アセトン、メチルイソブチルケトン、アセトニトリル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、及びジメチルスルホキシドからなる群から選択され、酢酸、クエン酸、ホウ酸、エチレンジアミン四酢酸、塩酸、硫酸、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピリジン、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、及びそれらの適切な組合せ物からなる群から選択される試薬を使用することにより、溶液の初期ｐＨが７．５±０．５の範囲に保持され；及び、              反応の進行中の反応混合物のｐＨを、７〜９の範囲で向上させる、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
ステップ（ｆ）における式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートの実質的に光学的に純粋な（Ｓ）−エステル（ＶＩＩＩ）への変換において、酵素によるステップが、塩化リチウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、及び塩化マグネシウムからなる群から選択される塩の存在下で行われ、または酸と塩基の中和により、インサイチュで生成され；及び前記酵素によるステップ（ｆ）が、２０℃〜４５℃の間の温度範囲で実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
ステップ（ｇ）及び（ｈ）における前記溶媒が、水、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、三級ブチルアルコール、シクロヘキサノール、トルエン、モノクロロベンゼン、ジクロロベンゼン、テトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアミン、ジメチルスルホキシド、スルホラン、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
ステップ（ｇ）において使用される前記塩基が、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピリジン、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、アルカリ金属およびアルカリ土類金属Ｃ1からＣ6アルコキシドからなる群から選択され；及び前記酵素によるステップ（ｇ）が、２５℃〜２００℃の間の温度範囲で１〜６０時間実施され；及びステップ（ｈ）における加水分解のための前記塩基は、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化バリウム、及びＣ1からＣ5四級水酸化アンモニウムからなる群から選択される、アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
ステップ（ｈ）が、構造（ＶＩＩＩ）の化合物をインサイチュで加水分解するステップ、その後の接触水素化を行うステップを含み、加水分解のための塩基強度が、０．１Ｎ〜５Ｎから選択され、前記水素化触媒が、担体を含むまたは含まない、ニッケル、パラジウム、ルテニウム、ロジウム、ならびに化学形態およびグレードからなる群から選択され、触媒反応が、１０℃〜１００℃の間の温度範囲と０．５〜２５ｋｇ／ｃｍ2の範囲の水素圧で実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
式（Ｉ）のプレガバリンの前記調製が、水素化生成物を活性炭処理するステップ、および６．９〜７．３のｐＨ範囲において等電点電気泳動によりプレガバリンを単離するステップ、および水、Ｃ1からＣ5アルコール、またはそれらの混合物から粗製物を結晶化するステップを含み、塩酸、硫酸、酢酸、リン酸、ギ酸、及びトリフルオロ酢酸からなる群から選択される無機酸または有機酸を用いてｐＨを調節し；及び乾燥母液の再結晶により、純粋な式（Ｉ）のプレガバリンを回収するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
式（Ｉ）のプレガバリンの調製が、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、カルボキシベンジル、及びトリチルからなる群から選択されるアミノ保護誘導体として、母液から式（Ｉ）のプレガバリンを代替的に回収するステップ、およびその後に、溶媒中、酸により処理することによりｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基の除去するステップをさらに含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記遺伝子修飾したニトリラーゼ酵素がＮｉｔ９Ｎ＿５６＿２であり、かつ、ステップ（ｆ）が、カンジダ・アンタルクチカＡ、カンジダ・アンタルクチカＢ１、カンジダ・アンタルクチカＢＹ２、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ、Ｎｏｖｏｚｙｍｅ４３５、リパーゼ３．１０１、リパーゼ３．１０２、リパーゼ３．１０４、リパーゼ３．１０５、リパーゼ３．１０６、リパーゼ３．１０７、リパーゼ３．１０８、リパーゼ３．１０９、リパーゼ３．１１１、リパーゼ３．１１５、リパーゼ３．１１３、リパーゼ３．１１７、リパーゼ３．１３６、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される加水分解酵素を使用することにより実施される請求項１に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
したがって、本発明は、
【化１４】
2015535003.tif 000007
（ａ）任意に適切な溶媒中、弱酸と弱塩基との塩、または弱塩基の存在下、式（ＩＩ）のイソバレルアルデヒドと式（ＩＩＩ）のシアノ酢酸アルキルとを反応させて、式（ＩＶ）の２−シアノ−５−メチル−ヘキサ−２−エン酸アルキルエステルを得るステップ、
（ｂ）水中もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、式（ＩＶ）の２−シアノ−５−メチル−ヘキサ−２−エン酸アルキルエステルを適切なシアン化物源と反応させて、式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを得るステップ、
（ｃ）水中もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、適切なシアン化物源の存在下、式（ＩＩ）のイソバレルアルデヒドと式（ＩＩＩ）のシアノ酢酸アルキルとを、単一ステップで反応させることにより、任意に式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを得てもよいステップ、
（ｄ）適切なｐＨおよび温度において、水中、または任意に有機共溶媒を含んでもよい水中、遺伝子修飾したニトリラーゼ酵素（Ｎｉｔ９Ｎ＿５６＿２）により、式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを式（ＶＩ）のラセミ３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩に変換するステップ、
（ｅ）適切な溶媒またはそれらの溶媒の混合物中、塩基の存在下、式（ＶＩ）のラセミ３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩をアルコール（Ｒ3ＯＨ）および酸性触媒、またはハロゲン化アルキル（Ｒ3Ｘ）と処理することにより、式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートへと変換するステップ、
（ｆ）水もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、酵素によるエナンチオ選択的な加水分解により、式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートから、式（ＶＩＩＩ）の（Ｓ）−アルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートおよび式（Ｘ）の（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩を得るステップ、
（ｇ）有機溶媒またはその混合物中、塩基の存在下、式（Ｘ）の不要な（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸もしくはその塩、または実質的に豊富な式（Ｘ）のその（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸塩をラセミ化することにより、任意に式（ＶＩＩ）の化合物を得てもよいステップ、
（ｈ）適切なアルカリ金属塩基またはアルカリ土類金属塩基を用いるエステル基の加水分解、その後の適切な水素化触媒の存在下、水もしくは他の有機溶媒、またはそれらの混合物から選択される溶媒中、任意にワンポットで行ってもよい水素化により、式（ＶＩＩＩ）の（Ｓ）−アルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートを式（Ｉ）のプレガバリンに変換するステップ、
を含む、式（Ｉ）の化合物の調製の改善方法を提供する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１４】
以下のリストは、本発明において使用された、略語の一部である。
Ａｑ        ：水性
Ｂｏｃ      ：三級ブチルオキシカルボニル
ｃｍ2      ：平方センチメートル
ＤＭ        ：脱イオン化
ＤＣＭ      ：ジクロロメタン
ＤＢＵ      ：１，８−ジアザビシクロウンデカ−７−エン
ＤＩＰＡ    ：  ジイソプロピルアミン
ＤＭＡＰ    ：  ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＰＡ      ：ジフェニルアミン
ＤＭＦ      ：ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ    ：ジメチルスルホキシド
ｅｅ        ：鏡像異性体過剰率
ｅｑｖ．    ：当量
ＥｔＯＡｃ  ：酢酸エチル
ｇ          ：グラム
ＧＣ        ：ガスクロマトグラフィー
ｈ          ：時間
ＨＰＬＣ    ：高速液体クロマトグラフィー
ＩＰＡ      ：イソプロピルアルコール
Ｋｇ        ：キログラム
ＫｏｔＢｕ  ：カリウムｔ−ブトキシド
ＫＵ        ：キロ単位
Ｌｉｔ      ：リットル
ＭＤＣ      ：ジクロロメタン
ＭｅＯＨ    ：メチルアルコール
ＭＩＢＫ    ：メチルイソブチルケトン
ｍｌ        ：ミリリットル
ｍｍｏｌ    ：ミリモル
ｍｏｌ      ：モル
ＭＴＢＥ    ：第三ブチルメチルエーテル
ＮＭＲ      ：核磁気共鳴分光法
ＲＢＦ      ：丸底フラスコ
ＲＰＭ      ：毎分回転数
ＴＨＦ      ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ      ：薄層クロマトグラフィー
Ｕ          ：単位
Ｖ          ：体積
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕式（Ｉ）の化合物の調製の改善方法であって、
【化１】
2015535003.tif 000008
（ａ）任意に適切な溶媒中、弱酸と弱塩基との塩、または弱塩基の存在下、式（ＩＩ）のイソバレルアルデヒドと式（ＩＩＩ）のシアノ酢酸アルキルとを反応させて、式（ＩＶ）の２−シアノ−５−メチル−ヘキサ−２−エン酸アルキルエステルを得るステップ、
【化２】
2015535003.tif 000009
（式中、Ｒ1＝Ｃ1からＣ4のような直鎖または分岐低級アルキルなどである）
（ｂ）水中もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、式（ＩＶ）の２−シアノ−５−メチル−ヘキサ−２−エン酸アルキルエステルを適切なシアン化物源と反応させて、式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを得るステップ、
【化３】
2015535003.tif 000010
（ｃ）水中もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、適切なシアン化物源の存在下、式（ＩＩ）のイソバレルアルデヒドと式（ＩＩＩ）のシアノ酢酸アルキルとを、単一ステップで反応させることにより、任意に式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを得てもよいステップ、
（ｄ）適切なｐＨおよび温度において、水中、または任意に有機共溶媒を含んでもよい水中、Ｎｉｔ９Ｎ＿５６＿２のような遺伝子修飾したニトリラーゼ酵素により、式（Ｖ）の２−イソブチルスクシノニトリルを式（ＶＩ）のラセミ３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩に変換するステップ、
【化４】
2015535003.tif 000011
（式中、Ｒ2＝カチオン対イオン、水素、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、アルキルアンモニウム塩、有機アミン塩など）
ｅ）適切な溶媒またはそれらの溶媒の混合物中、塩基の存在下、式（ＶＩ）のラセミ３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩をアルコール（Ｒ3ＯＨ）および酸性触媒、またはハロゲン化アルキル（Ｒ3Ｘ）と処理することにより、式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートへと変換するステップ、
【化５】
2015535003.tif 000012
（式中、Ｒ3＝Ｃ1からＣ4のような直鎖もしくは分岐低級アルキル、またはＣ7からＣ10アリールもしくはアルキルアリールなどである）
（ｆ）水もしくは有機溶媒中、またはそれらの混合物中、酵素によるエナンチオ選択的な加水分解により、式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートから、式（ＶＩＩＩ）の（Ｓ）−アルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートおよび式（Ｘ）の（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸またはその塩を得るステップ、
【化６】
2015535003.tif 000013
（式中、
Ｒ2＝カチオン対イオン、水素、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、アルキルアンモニウム塩、有機アミン塩などであり、
Ｒ3＝Ｃ1からＣ4のような直鎖もしくは分岐低級アルキル、またはＣ7からＣ10アリールもしくはアルキルアリールなどである）
（ｇ）有機溶媒またはその混合物中、塩基の存在下、式（Ｘ）の不要な（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸もしくはその塩、または実質的に豊富な式（Ｘ）のその（Ｒ）−３−シアノ−５−メチル−ヘキサン酸塩をラセミ化することにより、任意に式（ＶＩＩ）の化合物を得てもよいステップ、
（ｈ）適切なアルカリ金属塩基またはアルカリ土類金属塩基を用いるエステル基の加水分解、その後の適切な水素化触媒の存在下、水もしくは他の有機溶媒、またはそれらの混合物から選択される溶媒中、任意にワンポットで行ってもよい水素化により、式（ＶＩＩＩ）の（Ｓ）−アルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートを式（Ｉ）のプレガバリンに変換するステップ、
を含む、方法。
〔２〕ステップ（ａ）において使用される前記有機弱酸が、好ましくは、安息香酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸、酢酸などからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔３〕ステップ（ａ）において使用される前記弱塩基が、好ましくは、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンなどから、より好ましくはジイソプロピルエチルアミン、ピペリジンなどからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔４〕ステップ（ａ）において使用される前記塩が、好ましくは、酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、安息香酸アンモニウム、コハク酸アンモニウム、酢酸アルキルアンモニウムなどから、より好ましくは酢酸アンモニウム、酢酸ナトリウムからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔５〕ステップ（ａ）およびステップ（ｂ）の前記適切なシアン化物源が、好ましくは、シアン化リチウム、シアン化ナトリウム、シアン化カリウム、シアン化トリメチルシリルなどから、より好ましくはシアン化ナトリウムまたはシアン化カリウムからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔６〕ステップ（ａ）における前記適切な有機溶媒が、好ましくは、酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、シクロヘキサン、トルエン、およびそれらの混合物から、より好ましくはシクロヘキサンまたはトルエンからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔６〕ステップ（ｂ）およびステップ（ｃ）における前記有機溶媒が、水、エチルアルコール、メチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、シクロヘキサンなどからなる群から選択され、より好ましくは、溶媒は、メチルアルコール、もしくはエチルアルコール、もしくは水、またはそれらの混合物である、前記〔１〕に記載の方法。
〔７〕ステップ（ｂ）の前記反応が、好ましくは、４５℃〜１２０℃の間、より好ましくは４５℃〜１１０℃の間の温度範囲で実施され、最も好ましくは、メチルアルコールまたはエチルアルコールの還流温度から水の還流温度においてである、前記〔１〕に記載の方法。
〔８〕ステップ（ａ）およびステップ（ｃ）の前記反応が、好ましくは周囲温度から還流温度で、より好ましくは還流温度で実施される、前記〔１〕に記載の方法。
〔９〕ステップ（ｄ）における化合物（ＶＩ）を調製するための式（Ｖ）の化合物の投入量が、好ましくは、水または共溶媒と組み合わせた水１リットルあたり３０〜３００ｇから、より好ましくは、水または共溶媒と組み合わせた水１リットルあたり５０〜２００ｇから、最も好ましくは水または共溶媒と組み合わせた水１リットルあたり６０〜１５０ｇから選択することができる、前記〔１〕に記載の方法。
〔１０〕ステップ（ｄ）において化合物（ＶＩ）を調製するための、前記遺伝子修飾したニトリラーゼ酵素（Ｎｉｔ９Ｎ＿５６＿２）の投入量が、好ましくは、化合物（Ｖ）１ｇあたり４〜２５Ｕから、より好ましくは、化合物（Ｖ）１ｇあたり６〜２０Ｕから選択することができる、前記〔１〕に記載の方法。
〔１１〕ステップ（ｄ）における式（ＶＩ）の化合物の調製中に、溶液のｐＨが７．２±０．８の範囲、最も好ましくは７．０±０．５の範囲に保持され、適切な緩衝液により維持することができ、当分野において周知であり、実現するための最も好ましい方法の１つが、リン酸もしくは酢酸緩衝液を使用するか、または酢酸、クエン酸、酒石酸、塩酸、硫酸、リン酸などから選択される適切な酸を添加することによりｐＨを維持することであり、最も好ましい酸が塩酸、ならびに／またはアンモニア、モノ、ジおよびトリアルキルアミン、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどからなる群から選択される塩基であり、最も好ましい塩基が炭酸水素ナトリウムである、前記〔１〕に記載の方法。
〔１２〕ステップ（ｄ）の前記反応が、好ましくは、２５℃〜４０℃の間、より好ましくは２８℃〜３８℃の間の温度範囲、最も好ましくは３０℃〜３７℃の間の温度範囲で実施される、前記〔１〕に記載の方法。
〔１３〕ステップ（ｅ）における前記アルコール（Ｒ3ＯＨ）が、好ましくは、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、シクロペンタノール、シクロヘキサノールなどからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔１４〕ステップ（ｅ）における前記ハロゲン化アルキル（Ｒ3Ｘ）が、好ましくは、ヨウ化メチル、塩化エチル、臭化エチル、ヨウ化エチル、臭化ｎ−プロピル、塩化イソプロピル、臭化イソプロピルなどからなる基Ｃ1からＣ5ハロゲン化アルキルから選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔１５〕ステップ（ｅ）における前記酸触媒／または試薬が、好ましくは、塩酸、硫酸、塩化チオニル、塩化トリメチルシリル、メタンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ルイス酸、または当分野で周知の強酸性スルホン化樹脂からなる群から、より好ましくは塩酸、硫酸、パラトルエンスルホン酸、塩化トリメチルシリルなどからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔１６〕式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチルヘキサノエートの調製中、これをステップ（ｅ）において蒸留することにより任意に精製してもよい、前記〔１〕に記載の方法。
〔１７〕ステップ（ｆ）における前記酵素によるエナンチオ選択的な加水分解が、カンジダ・アンタルクチカＡ、カンジダ・アンタルクチカＢ１、カンジダ・アンタルクチカＢＹ２、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ、Ｎｏｖｏｚｙｍｅ４３５、リゾムコル・メイヘイ、サーモマイセス・ランギノサ、シュードモナス・ケペシア、Ｒｅｓｉｎａｓｅ  ＨＴ、Ｌｉｐｅｘ  １００Ｌ、枯草菌、リパーゼ３．１０１、リパーゼ３．１０２、リパーゼ３．１０４、リパーゼ３．１０５、リパーゼ３．１０６、リパーゼ３．１０７、リパーゼ３．１０８、リパーゼ３．１０９、リパーゼ３．１１１、リパーゼ３．１１５、リパーゼ３．１１３、リパーゼ３．１１７、リパーゼ３．１３６、ＡＹＳ  Ａｍｉｎｏ、ＡＳ  Ａｍａｎｏ、ＰＳ  ＡｍａｎｏＳＤ、ＡＫ  Ａｍａｎｏなどから、より好ましくは、カンジダ・アンタルクチカＢ１またはカンジダ・アンタルクチカＢＹ２またはＮｏｖｏｚｙｍｅ４３５からなる群から選択される、エステラーゼ、リポラーゼ、およびリパーゼのような加水分解酵素を使用することにより、好ましくは実施される、前記〔１〕に記載の方法。
〔１８〕ステップ（ｆ）における好ましい酵素の投入量が、基質に比べて、＞０．１％〜＜５％ｗ／ｗの範囲にあり、より好ましくはその範囲が、基質に比べて０．５％〜４％ｗ／ｗであり、最も好ましくは、その範囲が、基質と比べて１．０％〜３％ｗ／ｗである、前記〔１〕に記載の方法。
〔１９〕ステップ（ｆ）における好ましい酵素が、回収されて、ほとんど完全な酵素活性が保たれている間、数回再使用することができ、その活性が乏しい場合、酵素の再利用中、追加量の新しい酵素を添加することができ、その追加量は、初期酵素投入量に対して５％〜５０％ｗ／ｗの範囲、より優先的には初期酵素投入量に対して５％〜２５％ｗ／ｗの範囲とすることができる、前記〔１〕に記載の方法。
〔２０〕ステップ（ｆ）における有機溶媒が、水、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、アセトン、メチルイソブチルケトン、アセトニトリル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ジメチルスルホキシドなどからなる群から選択され、より好ましくは、溶媒は、水、１，４−ジオキサン、ジメチルスルホキシド、またはそれらの混合物である、前記〔１〕に記載の方法。
〔２１〕ステップ（ｆ）における式（ＶＩＩＩ）の化合物の調製中に、酢酸、クエン酸、ホウ酸、エチレンジアミン四酢酸、塩酸、硫酸、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピリジン、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、またはそれらの適切な組合せ物からなる群から選択される適切な試薬を使用することにより、好ましくは溶液の初期ｐＨが７．５±０．５の範囲、最も好ましくは７．２±０．２の範囲に保持される、前記〔１〕に記載の方法。
〔２２〕ステップ（ｆ）における、式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートの実質的に光学的に純粋な（Ｓ）−エステル（ＶＩＩＩ）への変換において、反応の進行中の反応混合物のｐＨが、好ましくは、７〜９の範囲でゆっくりと向上させることができ、より好ましくは、最大≧７．５〜≦８．５まで向上させることができる、前記〔１〕に記載の方法。
〔２３〕ステップ（ｆ）における式（ＶＩＩ）のラセミアルキル３−シアノ−５−メチル−ヘキサノエートの実質的に光学的に純粋な（Ｓ）−エステル（ＶＩＩＩ）への変換において、酵素によるステップが、塩化リチウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウムなどからなる群から選択することができる塩の存在下で任意に行ってもよく、または適切な酸と適切な塩基の中和により、インサイチュで生成させることができる、前記〔１〕に記載の方法。
〔２４〕前記酵素によるステップ（ｆ）が、好ましくは、２０℃〜４５℃の間、より好ましくは２２℃〜４０℃の間の温度範囲、最も好ましくは２５℃〜３５℃の間の温度範囲で実施される、前記〔１〕に記載の方法。
〔２５〕ステップ（ｇ）における前記有機溶媒が、好ましくは、水、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、三級ブチルアルコール、シクロヘキサノール、トルエン、モノクロロベンゼン、ジクロロベンゼン、テトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアミン、ジメチルスルホキシド、スルホランなどからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔２６〕ステップ（ｇ）において使用される前記塩基が、好ましくは、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピリジン、ピペリジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、アルカリ金属およびアルカリ土類金属、Ｃ1からＣ6アルコキシドなどからなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔２７〕前記酵素によるステップ（ｇ）が、好ましくは、２５℃〜２００℃の間の温度範囲で１〜６０時間、より好ましくは５０℃〜１８０℃の間の温度範囲で２〜２４時間、実施される、前記〔１〕に記載の方法。
〔２８〕ステップ（ｈ）における加水分解のための前記塩基は、好ましくは、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化バリウム、Ｃ1からＣ5四級水酸化アンモニウムなどから選択される、アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔２９〕ステップ（ｈ）において、式（Ｉ）のプレガバリンの前記調製が、構造（ＶＩＩＩ）の化合物をインサイチュで加水分解するステップ、その後の接触水素化を行うステップを含み、加水分解のための塩基強度が、好ましくは０．１Ｎ〜５Ｎ、より好ましくは０．３〜３Ｎ、最も好ましくは０．５Ｎ〜２Ｎから選択され得る、前記〔１〕に記載の方法。
〔３０〕ステップ（ｈ）における前記有機溶媒が、好ましくは、水、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、三級ブチルアルコール、シクロヘキサノール、トルエン、モノクロロベンゼン、ジクロロベンゼン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、またはそれらの組合せ物からなる群から選択される、前記〔１〕に記載の方法。
〔３１〕前記適切な水素化触媒が、好ましくは、担体を含むまたは含まないニッケル、パラジウム、ルテニウム、ロジウム、ならびにそれらの異なる化学形態およびグレード、新しい触媒もしくは回収触媒、または新しい触媒と回収触媒の混合物でもよいものからなる群から選択され、最も好ましい触媒は、ニッケルおよびパラジウムである、前記〔１〕に記載の方法。
〔３２〕ステップ（ｈ）が、好ましくは、１０℃〜１００℃の間、より好ましくは１５℃〜６０℃の間の温度範囲、最も好ましくは２５℃〜５０℃の間の温度範囲で実施される、前記〔１〕に記載の方法。
〔３３〕ステップ（ｈ）における前記接触水素化が、好ましくは、０．５〜２５ｋｇ／ｃｍ2または等価な単位の範囲の水素圧、２〜１５ｋｇ／ｃｍ2または等価な単位の範囲の好ましい水素圧を用いて実施され、最も好ましい圧力範囲が、３〜１０ｋｇ／ｃｍ2である、前記〔１〕に記載の方法。
〔３４〕式（Ｉ）のプレガバリンの前記調製が、水素化生成物を活性炭処理してもよいステップ、および好ましくは６．９〜７．３のｐＨ範囲、より好ましくはｐＨ７〜７．２において等電点電気泳動によりプレガバリンを単離するステップ、および水、Ｃ1からＣ5アルコール、またはそれらの混合物から粗製物を結晶化するステップを含む、前記〔１〕に記載の方法。
〔３５〕式（Ｉ）のプレガバリンの前記調製が、等電点電気泳動によりプレガバリンを単離するステップであって、ｐＨを塩酸、硫酸、酢酸、リン酸、ギ酸、トリフルオロ酢酸のような任意の無機酸または有機酸を用いて調節することができ、最も好ましい酸が、塩酸または酢酸である、ステップを含む、前記〔１〕に記載の方法。
〔３６〕式（Ｉ）のプレガバリンの調製が、水、Ｃ1からＣ5アルコール、またはそれらの混合物から粗製物を結晶化することによりプレガバリンを精製するステップ、および乾燥母液の再結晶により、さらなる量の純粋な式（Ｉ）のプレガバリンを回収するステップを含む、前記〔１〕に記載の方法。
〔３７〕式（Ｉ）のプレガバリンの調製が、好ましくはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、カルボキシベンジル、トリチルのような当分野で公知のアミノ保護誘導体として、母液から式（Ｉ）のプレガバリンを代替的に回収するステップをさらに含んでおり、最も好ましくは、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルを使用して、その後に、適切な溶媒中、酸により処理することによりｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基の除去を行うことができる、前記〔３６〕に記載の方法。