【手続補正書】
【提出日】平成28年7月13日(2016.7.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
担体タンパク質と複合化された糖を含む複合糖質の作製方法であって、
ａ）糖を安定なニトロキシルラジカル化合物および酸化体と反応させて、活性化した糖を生成するステップと、
ｂ）前記活性化した糖を、１つまたは複数のアミン基を含む担体タンパク質と反応させるステップと
を含む方法。
【請求項２】
前記安定なニトロキシルラジカル化合物が、酸化体の存在下で、第二級ヒドロキシル基に影響を及ぼさずに第一級アルコールを選択的に酸化してアルデヒド基を生じる能力を有するピペリジン−Ｎ−オキシまたはピロリジン−Ｎ−オキシ化合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記安定なニトロキシルラジカル化合物が、酸化体の存在下で、カルボキシル基へ過酸化することなく第一級アルコールを選択的に酸化してアルデヒド基を生じる能力を有するピペリジン−Ｎ−オキシまたはピロリジン−Ｎ−オキシ化合物である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記安定なニトロキシルラジカル化合物が、酸化体の存在下で、第二級ヒドロキシル基に影響を及ぼさずに第一級アルコールを選択的に酸化してアルデヒド基を生じる能力を有する、ＴＥＭＰＯまたはＰＲＯＸＹＬ（２，２，５，５−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシ）部分を有する分子である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記安定なニトロキシルラジカル化合物が、酸化体の存在下で、カルボキシル基へ過酸化することなく第一級アルコールを選択的に酸化してアルデヒド基を生じる能力を有する、ＴＥＭＰＯまたはＰＲＯＸＹＬ（２，２，５，５−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシ）部分を有する分子である、請求項１または４に記載の方法。
【請求項６】
前記ニトロキシルラジカル化合物が、ＴＥＭＰＯ、２，２，６，６−テトラメチル−４−（メチルスルホニルオキシ）−１−ピペリジノオキシ、４−ホスホノオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ、４−メトキシ−ＴＥＭＰＯ、４−イソチオシアナト−ＴＥＭＰＯ、４−（２−ヨードアセトアミド）−ＴＥＭＰＯフリーラジカル、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、４−シアノ−ＴＥＭＰＯ、４−カルボキシ−ＴＥＭＰＯ、４−（２−ブロモアセトアミド）−ＴＥＭＰＯ、４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、４−アセトアミド−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン１−オキシルからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ニトロキシルラジカル化合物が、３β−ＤＯＸＹＬ−５α−コレスタン、５−ＤＯＸＹＬ−ステアリン酸、１６−ＤＯＸＹＬ−ステアリン酸、５−ＤＯＸＹＬ−ステアリン酸メチル、３−（アミノメチル）−ＰＲＯＸＹＬ、３−カルバモイル−ＰＲＯＸＹＬ、３−カルバモイル−２，２，５，５−テトラメチル−３−ピロリン−１−オキシル、３−カルボキシ−ＰＲＯＸＹＬ、３−シアノ−ＰＲＯＸＹＬからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記ニトロキシルラジカル化合物が、ＴＥＭＰＯまたはその誘導体である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記酸化体が、
−  ニトロキシルラジカル化合物の存在下で第一級アルコールを選択的に酸化してアルデヒド基を生じる能力を有する、Ｎ−ハロ部分を有する分子であるか、
−  Ｎ−クロロスクシンイミド、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−ヨードスクシンイミド、ジクロロイソシアヌル酸、１，３，５−トリクロロ−１，３，５−トリアジナン−２，４，６−トリオン、ジブロモイソシアヌル酸、１，３，５−トリブロモ−１，３，５−トリアジナン−２，４，６−トリオン、ジヨードイソシアヌル酸、および１，３，５−トリヨード−１，３，５−トリアジナン−２，４，６−トリオンからなる群から選択されるか、又は、
−  Ｎ−クロロスクシンイミドである、
請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記反応ステップａ）を、
−  水性溶媒中で実施するか、
−  非プロトン性溶媒中で実施するか、又は、
−  ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）溶媒中で実施する、
請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記糖を０．１〜１０モル当量の酸化体、好ましくは０．５〜１．５モル当量の酸化体と反応させる、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
−  前記安定なニトロキシルラジカル化合物が、触媒量で存在するか、又は
−  前記糖を、約０．３モル当量未満の安定なニトロキシルラジカル化合物と反応させる、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
担体タンパク質と複合化された糖を含む複合糖質の作製方法であって、
ａ）水性溶媒中で、糖を２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ（ＴＥＭＰＯ）およびＮ−クロロスクシンイミド（ＮＣＳ）と反応させて、活性化した糖を生成するステップと、
ｂ）前記活性化した糖を、１つまたは複数のアミン基を含む担体タンパク質と反応させるステップと
を含む方法。
【請求項１４】
前記活性化した糖の酸化度が３〜４０、好ましくは６〜１４の範囲である、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記糖が細菌莢膜多糖である、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記莢膜多糖が
−  肺炎連鎖球菌（Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）由来、好ましくはＰｎ−血清型３、Ｐｎ−血清型１０Ａ、Ｐｎ−血清型１２Ｆ、およびＰｎ−血清型３３Ｆ莢膜多糖から選択される、であるか、
−  髄膜炎菌（Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）由来、好ましくは髄膜炎菌（Ｍｎ）−血清型Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹ莢膜多糖から選択される、である、
請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記担体タンパク質が、破傷風、ジフテリア、百日咳、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、ブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、または連鎖球菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）の毒素である、請求項１から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項１から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
ステップａ）の前に、
−  前記糖を、サイズ調整する、好ましくは加水分解もしくは機械的にサイズ調整する、最も好ましくは加水分解しもしくは加圧均質化によって機械的にサイズ調整して５０ｋＤａ〜５００ｋＤａの分子量を実現するか、又は、
−  前記糖を、１００〜４００ｋＤａの範囲の分子量に加水分解する、好ましくは１５０〜３５０ｋＤａの範囲の分子量に加水分解する、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法によって製造されるか又は取得されうる複合糖質。
【請求項２１】
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項２０に記載の複合糖質。
【請求項２２】
糖：担体タンパク質比（ｗ／ｗ）が、０．２〜４の間である、請求項２０から２１のいずれか一項に記載の複合糖質。
【請求項２３】
前記担体タンパク質と前記多糖の間の共有結合連結が、前記多糖の１００個の糖繰返し単位毎に少なくとも１つ存在する、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の複合糖質。
【請求項２４】
請求項２０から２３のいずれか一項に記載の複合糖質と、薬学的に許容できる賦形剤、担体、または希釈剤とを含む免疫原性組成物。
【請求項２５】
担体タンパク質と複合化されたＰｎ−血清型１２Ｆを含む免疫原性組成物であって、前記組成物中の遊離Ｐｎ−血清型１２Ｆ多糖の量が、調製されてから１２０日後に３５％未満である、免疫原性組成物。
【請求項２６】
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項２５に記載の免疫原性組成物。
【請求項２７】
Ｐｎ−血清型１、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１１Ａ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、および２３Ｆ莢膜多糖から選択される莢膜多糖の複合糖質をさらに含む、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項２８】
医薬として使用するための、請求項２４から２７のいずれか一項に記載の免疫原性組成物、又は請求項２０から２３のいずれか一項に記載の複合糖質。
【請求項２９】
ワクチンとして使用するための、請求項２４から２７のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。