【手続補正書】
【提出日】平成28年4月25日(2016.4.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
油含有物がグリセロールにエステル化された脂肪酸から成るトリアシルグリセロール（ＴＡＧ）を含む、および／または油含有物がグリセロールにエステル化された脂肪酸から成るトリアシルグリセロール（ＴＡＧ）を含む種子を生成する植物を生成することができ、
ｉ）前記脂肪酸がパルミチン酸およびオレイン酸を含み、
ｉｉ）前記種子の油含有物の少なくとも９５重量％がＴＡＧであり、
ｉｉｉ）前記種子の油含有物の全脂肪酸の９０重量％〜９５重量％がオレイン酸であり、
ｉｖ）前記種子の油含有物の全脂肪酸の３．１重量％未満がパルミチン酸であり、
ｖ）前記種子の油含有物が０．０３７未満のオレイン酸不飽和率（ＯＤＰ）および／または０．０６３未満のパルミチン酸−リノール酸−オレイン酸（ＰＬＯ）値を有する、ベニバナ種子。
【請求項２】
前記種子の油含有物が、以下の特徴のうちの１つ以上を有する、
ａ）前記種子の油含有物の全脂肪酸の９０重量％〜９４重量％、９１重量％〜９４重量％、または９１重量％〜９２重量％が、オレイン酸である、
ｂ）前記種子の油含有物の全脂肪酸の３重量％未満、２．７５重量％未満、または２．５重量％未満が、パルミチン酸である、
ｃ）前記種子の油含有物の全脂肪酸の０．１重量％〜３重量％、または２重量％〜３重量％が、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）である、
ｄ）前記種子の油含有物の全脂肪酸の１重量％未満または０.５重量％未満が、リノール酸（ＬＡ）である、
ｅ）前記油含有物の全脂肪酸含有量の９０重量％〜９６重量％、または９２重量％〜９６重量％が、一価不飽和脂肪酸である、
ｆ）前記油含有物が、０．０２未満、０．０１５未満、０．００５〜０．０５、または０．００５〜０．０２のオレイン酸一価不飽和率（ＯＭＰ）を有する、
ｇ）前記種子の油含有物のＯＤＰが、０．０３３〜０．０１、０．０３３〜０．０１６、または０．０２３〜０．０３３である、および
ｈ）前記種子の油含有物のＰＬＯ値が、０．０２０〜０．０６３、０．０２０〜０．０５５、０．０２０〜０.０５０、または０．０５０〜０．０５５である、
請求項１に記載のベニバナ種子。
【請求項３】
前記種子の油含有物が、以下の特徴のうちの１つ以上をさらに特徴とする脂質である、
（ａ）α−リノレン酸が前記脂質の脂肪酸中で検出不能である、
（ｂ）前記脂質のＴＡＧ含量の５５％〜８０％、６０％〜８０％、７０％〜８０％、または少なくとも６０％もしくは少なくとも７０％が、トリオレインである、
請求項１または２に記載のベニバナ種子。
【請求項４】
ａ）第１の外因性ポリヌクレオチドを欠失している対応するベニバナ種子と比較して、発育中のベニバナ種子においてΔ１２デサチュラーゼ（ＦＡＤ２）遺伝子の発現を減少させることができる第１のサイレンシングＲＮＡをコードする第１の外因性ポリヌクレオチドであって、前記第１の外因性ポリヌクレオチドが、前記発育中のベニバナ種子において前記ポリヌクレオチドの発現を誘導するプロモーターに作動可能に連結されるもの、
ｂ）第２の外因性ポリヌクレオチドを欠失している対応するベニバナ種子と比較して、発育中のベニバナ種子においてパルミトイル−ＡＣＰチオエステラーゼ（ＦＡＴＢ）遺伝子の発現を減少させることができる第２のサイレンシングＲＮＡをコードする第２の外因性ポリヌクレオチドであって、前記第２の外因性ポリヌクレオチドが、前記発育中のベニバナ種子において前記ポリヌクレオチドの発現を誘導するプロモーターに作動可能に連結されるもの、および
ｃ）場合により、第３の外因性ポリヌクレオチドを欠失している対応するベニバナ種子と比較して、発育中のベニバナ種子において色素体ω６脂肪酸デサチュラーゼ（ＦＡＤ６）遺伝子の発現を減少させることができる第３の外因性ポリヌクレオチドであって、前記第３の外因性ポリヌクレオチドが、前記発育中のベニバナ種子において前記ポリヌクレオチドの発現を誘導するプロモーターに作動可能に連結されるもの、
を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のベニバナ種子。
【請求項５】
以下の特徴
ａ）前記第１のサイレンシングＲＮＡが、発育中のベニバナ種子においてＦＡＤ２をコードする１つを超える外因性遺伝子の発現を減少させる、および／または前記第２のサイレンシングＲＮＡが、発育中のベニバナ種子においてＦＡＴＢをコードする１つを超える外因性遺伝子の発現を減少させる、
ｂ）前記第１の外因性ポリヌクレオチド、ならびに前記第２の外因性ポリヌクレオチドおよび前記第３の外因性ポリヌクレオチドのいずれかまたはその両方が、単一のＤＮＡ分子に、任意に、前記第１、前記第２、および／または前記第３の外因性ポリヌクレオチド間の連結するＤＮＡ配列と共に共有結合する、
ｃ）前記第１の外因性ポリヌクレオチド、ならびに前記第２の外因性ポリヌクレオチドおよび前記第３の外因性ポリヌクレオチドのいずれかまたはその両方が、単一のプロモーターの制御下にあり、そのため、前記第１の外因性ポリヌクレオチドおよび前記第２の外因性ポリヌクレオチドおよび／または前記第３の外因性ポリヌクレオチドが前記発育中のベニバナ種子において転写される場合、第１のサイレンシングＲＮＡおよび第２のサイレンシングＲＮＡおよび／または第３のサイレンシングＲＮＡが単一のＲＮＡ転写物の一部として共有結合する、
ｄ）前記種子がベニバナ種子のゲノムに組み込まれた単一のトランスファーＤＮＡを含み、前記単一のトランスファーＤＮＡが、前記第１の外因性ポリヌクレオチド、ならびに前記第２の外因性ポリヌクレオチドおよび前記第３の外因性ポリヌクレオチドのいずれかまたはその両方を含む、
ｅ）前記種子がｄ）のトランスファーＤＮＡに対してホモ接合である、
ｆ）前記第１のサイレンシングＲＮＡ、前記第２のサイレンシングＲＮＡ、および前記第３のサイレンシングＲＮＡがそれぞれ独立して、アンチセンスポリヌクレオチド、センスポリヌクレオチド、触媒ポリヌクレオチド、マイクロＲＮＡ、および二本鎖ＲＮＡから成る群から選択される、
ｇ）  前記プロモーターのうちのいずれか１つ以上、好ましくはすべてが、種子特異的であり、好ましくは、発育中のベニバナ種子の胚内において選択的に発現される、
ｈ）前記種子が１つ以上のＦＡＤ２遺伝子において、１つ以上の突然変異体を含み、前記突然変異体が、前記突然変異体を欠失している対応するベニバナ種子と比較して、発育中のベニバナ種子において前記１つ以上のＦＡＤ２遺伝子の活性を減少させ、前記突然変異が、欠失、挿入、逆位、フレームシフト、早期翻訳終止コドン、または１つ以上の非保存アミノ酸置換、ＦＡＤ２遺伝子またはＣｔＦＡＤ２−１遺伝子のヌル突然変異体である、
ｉ）ＦＡＤ２タンパク質が、前記種子において検出不能である、ならびに
ｊ）前記第１のサイレンシングＲＮＡがＣｔＦＡＤ２−１およびＣｔＦＡＤ２−２遺伝子の両方の発現を減少させる、
を１つ以上をさらに含む、請求項４に記載のベニバナ種子。
【請求項６】
１）前記ＦＡＤ２遺伝子が、ＣｔＦＡＤ２−１遺伝子、ＣｔＦＡＤ２−２遺伝子、およびＣｔＦＡＤ２−１０遺伝子のうちの１つ以上である、
２）前記ＦＡＴＢ遺伝子が、ＣｔＦＡＴＢ−３遺伝子である、ならびに／または
３）前記ＦＡＤ６遺伝子が、ＣｔＦＡＤ６遺伝子である、
請求項４または５に記載のベニバナ種子。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の種子を生成することが可能である、ベニバナ植物。
【請求項８】
ｉ）請求項１〜６のいずれか一項に記載のベニバナ種子を得ること、および
ｉｉ）前記ベニバナ種子から油を抽出し、それによって油を生成すること、
を含む、油を生成するための方法。
【請求項９】
前記ベニバナ種子から抽出された油を精製するステップをさらに含み、前記精製するステップは、前記抽出された油を脱ガム、脱臭、脱色、乾燥、および／または分留すること、ならびに／あるいは前記抽出された油からの少なくとも一部の、好ましくは実質的にはすべてのワックスおよび／もしくはワックスエステルを除去すること、から成る群のうちの１つ以上またはすべてを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
グリセロールにエステル化された脂肪酸から成るトリアシルグリセロール（ＴＡＧ）を含み、
ｉ）前記脂肪酸がパルミチン酸およびオレイン酸を含み、
ｉｉ）脂質の少なくとも９５重量％がＴＡＧであり、
ｉｉｉ）脂質の全脂肪酸含量の９０重量％〜９５重量％がオレイン酸であり、
ｉｖ）脂質の全脂肪酸含量の３．１重量％未満がパルミチン酸であり、
ｖ）脂質が０．０３７未満のオレイン酸不飽和率（ＯＤＰ）および／または０．０６３未満のパルミチン酸−リノール酸−オレイン酸の値（ＰＬＯ）を有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載のベニバナ種子から抽出される脂質。
【請求項１１】
以下の特徴
ａ）前記脂質の全脂肪酸含量の９０重量％〜９４重量％、９１重量％〜９４重量％、または９１重量％〜９２重量％がオレイン酸である、
ｂ）前記脂質の全脂肪酸含量の３重量％未満、２．７５重量％未満、または２．５重量％未満がパルミチン酸である、
ｃ）前記脂質の全脂肪酸含量の０．１重量％〜３重量％、または２重量％〜３重量％が多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）である、
ｄ）前記脂質の全脂肪酸含量の３重量％未満、２．５重量％未満、または２．２５重量％未満がリノール酸である、
ｅ）前記脂質の全脂肪酸含量の１重量％未満、または０．５重量％未満がα−リノレン酸（ＡＬＡ）である、
ｆ）前記脂質の全脂肪酸含量の０．５重量％〜１重量％が１８：１Δ１１である、
ｇ）前記脂質の脂肪酸含量のＯＤＰが、０．０１〜０．０３３、０．０１６〜０．０３３、または０．０２３〜０．０３３である、
ｈ）前記脂質の脂肪酸含量のＰＬＯ値が、０．０２０〜０．０６３、０．０２０〜０．０５５、０．０２０〜０．０５０、または０．０５０〜０．０５５である、
ｉ）前記脂質の全脂肪酸含量の９０重量％〜９６重量％、または９２重量％〜９６重量％が、一価不飽和脂肪酸である、
ｊ）前記脂質が、０．０２未満、０．０１５未満、または０．００５〜０．０２のオレイン酸一価不飽和率（ＯＭＰ）を有する、
ｋ）前記脂質が、精製油の形態である、
ｌ）前記脂質が水素化されていない、ならびに
ｍ）少なくとも１リットルの体積および／もしくは少なくとも１ｋｇの重量を有する、ならびに／または野外生育植物から得られた種子から抽出された、
のうちの１つ以上またはすべてを有する、請求項１０に記載の脂質。
【請求項１２】
１つ以上のステロールをさらに含み、
油の形態であり、５ｍｇ未満のステロール／ｇ（油）、または１．５ｍｇのステロール／ｇ（油）〜５ｍｇのステロール／ｇ（油）を含み、
ａ）全ステロール含量の２．３％〜４．５％がエルゴスト−７−エン−３β−オールであり、
ｂ）全ステロール含量の１．５％〜３％がトリテルペノイドアルコールである、
請求項１０または１１に記載の脂質。
【請求項１３】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のベニバナ種子から抽出された種子粉末。
【請求項１４】
請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の脂質である第１の成分と、第２の成分とを含み、好ましくは、前記脂質を前記第２の成分と混合することによって生成され、前記第２の成分が非脂質物質、例えば、酵素、非タンパク質触媒もしくは化学物質、または食餌の１つ以上の成分である、組成物。
【請求項１５】
ｉ）請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の脂質、請求項１４に記載の組成物、または請求項１〜６のいずれか一項に記載のベニバナ種子を得るステップと、
ｉｉ）ステップｉ）の、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の脂質、請求項１４に記載の組成物、または請求項１〜６のいずれか一項に記載のベニバナ種子を任意に物理的に処理するステップと、
ｉｉ）請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の脂質、請求項１４に記載の組成物のうちの脂質、請求項１〜６のいずれか一項に記載のベニバナ種子またはステップｉｉ）の物理的に処理された生成物の少なくとも一部を、熱、化学、もしくは酵素的方法、またはそれらの任意の組み合わせを脂質に適用することによって、工業生成物に変換するステップと、
ｉｉｉ）前記工業生成物を回収し、
それによって工業生成物を生成する、工業生成物を生成するための方法。
【請求項１６】
ｉ）請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の脂質、または請求項１４に記載の組成物のうちの脂質、請求項１〜６のいずれか一項に記載のベニバナ種子を、アルコールと任意に触媒の存在下で反応させて、アルキルエステルを生成するステップ、および
ｉｉ）任意に、前記アルキルエステルを石油燃料と混合するステップ、
を含む、燃料を生成する方法。