【手続補正書】
【提出日】平成28年4月4日(2016.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイコプラズマ・ハイオニューモニエ（Ｍ．ｈｙｏ）の全細胞調製物の可溶性部分およびブタサーコウイルス２型（ＰＣＶ２）抗原が含まれる多価免疫原性組成物であって、該Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が、Ｍ．ｈｙｏ特異的可溶性タンパク質抗原を含み、そして、不溶性細胞物質から分離されており、そして、ＩｇＧ、及び、抗原／免疫グロブリンの免疫複合体の両方を実質的に含まない、前記組成物。
【請求項２】
Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が免疫原性組成物に添加される前にプロテインＡまたはプロテインＧで処理されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が免疫原性組成物に添加される前にプロテインＡで処理されている、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
ＰＣＶ２抗原がキメラ１型−２型サーコウイルスの形態であり、前記のキメラウイルスがブタサーコウイルス２型のＯＲＦ２タンパク質を発現する不活化組み換えブタサーコウイルス１型を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
ＰＣＶ２抗原が組み替えＯＲＦ２タンパク質の形態である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
組み換えＯＲＦ２タンパク質がバキュロウイルスベクターから発現される、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
組成物がさらに、ブタにおいて疾患を引き起こし得る微生物に対して防御的である、少なくとも１種類の追加の抗原を含み、該微生物がブタ生殖および呼吸症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）、ブタパルボウイルス（ＰＰＶ）、ヘモフィルス・パラスイス、パスツレラ・マルトシダ、ストレプトコッカス・スイス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｍ  ｓｕｉｓ）、ストレプトコッカス・ヒカス、アクチノバチルス・プルロニューモニエ、ボルデテラ・ブロンキセプティカ、サルモネラ・コレラエスイス、サルモネラ・エンテリティディス、エリジペロスリックス・ルジオパシエ、マイコプラズマ・ハイオリニス（Ｍｙｃｏｐｌａｍａ  ｈｙｏｒｈｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ヒオシノヴィエ、レプトスピラ属の細菌、ローソニア・イントラセルラリス、ブタインフルエンザウイルス（ＳＩＶ）、大腸菌抗原、ブラキスピラ・ヒオディセンテリア、ブタ呼吸器コロナウイルス、ブタ流行性下痢（ＰＥＤ）ウイルス、ロタウイルス、トルクテノウイルス（ＴＴＶ）、ブタサイトメガロウイルス、ブタエンテロウイルス、脳心筋炎ウイルス、オーエスキー病（Ａｕｊｅｓｋｙ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ）、ブタコレラ（ＣＳＦ）を引き起こす病原体、およびブタ伝染性胃腸炎を引き起こす病原体、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
組成物がさらにアジュバントを含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
アジュバントが水中油型アジュバント、ポリマーおよび水のアジュバント、油中水型アジュバント、水酸化アルミニウムアジュバント、ビタミンＥアジュバントおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
１回量投与として投与された場合に、Ｍ．ｈｙｏおよびＰＣＶ２の両方に対する防御免疫応答を引き出し、そして、１回量投与として投与された場合に、存在する場合に、ブタにおいて疾患を引き起こし得る少なくとも１種類の追加の微生物に対する防御免疫応答も引き出すための組成物の製造における、請求項１〜９のいずれか１項の組成物の使用。
【請求項１１】
ブタをマイコプラズマ・ハイオニューモニエ（Ｍ．ｈｙｏ）およびＰＣＶ２に対して免疫化するための組成物の製造における、請求項１〜９のいずれか１項の組成物の使用。
【請求項１２】
組成物を１回量で投与する、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
組成物がＭ．ｈｙｏおよびＰＣＶ２の少なくとも一方に対する母系由来抗体、あるいは、Ｍ．ｈｙｏおよびＰＣＶ２の両方に対する母系由来抗体を有するブタに投与される、請求項１１又は１２に記載の使用。
【請求項１４】
組成物が３週齢以上のブタに投与される、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１５】
請求項１〜９のいずれか１項の免疫原性組成物を含むワクチン組成物であって、当該組成物はさらに、薬学的に許容可能なキャリアーを含む、前記組成物。
【請求項１６】
家畜地方病性肺炎、離乳後多臓器発育不良症候群（ＰＭＷＳ）及び豚サーコウイルス関連疾患（ＰＣＶＡＤ）に対するブタの防御における使用のための、請求項１５に記載のワクチン組成物。
【請求項１７】
ＰＣＶ２抗原およびマイコプラズマ・ハイオニューモニエ（Ｍ．ｈｙｏ）全細胞調製物の可溶性部分の両方が含まれる免疫原性組成物若しくはワクチン組成物を含むボトルを含むキットであって、
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の通り、該Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が、Ｍ．ｈｙｏ特異的可溶性タンパク質抗原を含み、そして、不溶性細胞物質から分離されており、そして、ＩｇＧ、及び、抗原／免疫グロブリンの免疫複合体の両方を実質的に含まない、そして、所望により、さらに組成物を投与するための情報を含有する取扱い説明書が含まれる、
前記キット。
【請求項１８】
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の免疫原性組成物若しくはワクチン組成物を調製するための方法であって、該方法が以下の工程：
ｉ）Ｍ．ｈｙｏを適切な培地中で１８〜１４４時間の範囲の期間にわたって培養し；
ｉｉ）続いて該Ｍ．ｈｙｏ培養物を不活化し；
ｉｉｉ）該不活化された培養液を回収し、ここで該不活化された培養液は可溶性液体画分および不溶性細胞性物質の両方を含むＭ．ｈｙｏ全細胞調製物を含み、ここで、該可溶性液体画分がＭ．ｈｙｏ特異的可溶性タンパク質抗原を含む；
ｉｖ）該可溶性液体画分を該不溶性細胞性物質から分離し；
ｖ）ＩｇＧおよび抗原／免疫グロブリン免疫複合体の両方を該分離された可溶性液体画分から実質的に除去して該Ｍ．ｈｙｏ全細胞調製物の可溶性部分を形成し；そして
ｖｉ）続いて該Ｍ．ｈｙｏ全細胞調製物の可溶性部分をＰＣＶ２抗原と組み合わせる；
を含む、前記方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
加えて、本発明は免疫原性組成物を調製するための方法を提供する。この方法には以下の工程が含まれる：ｉ）Ｍ．ｈｙｏを適切な培地中で１８〜１４４時間の範囲の期間にわたって培養し；ｉｉ）続いてそのＭ．ｈｙｏ培養物を不活化し；ｉｉｉ）その不活化された培養液を回収し、ここでその不活化された培養液は可溶性液体画分および不溶性細胞性物質の両方を含むＭ．ｈｙｏ全細胞調製物を含み；ｉｖ）その可溶性液体画分を不溶性細胞性物質から分離し；ｖ）ＩｇＧおよび抗原／免疫グロブリン免疫複合体の両方をその分離された可溶性液体画分から実質的に除去してＭ．ｈｙｏ全細胞調製物の可溶性部分を形成し；そしてｖｉ）続いてそのＭ．ｈｙｏ全細胞調製物の可溶性部分をＰＣＶ２抗原と組み合わせる。
非限定的に、本発明は以下の態様を含む。
［態様１］  マイコプラズマ・ハイオニューモニエ（Ｍ．ｈｙｏ）の全細胞調製物の可溶性部分およびブタサーコウイルス２型（ＰＣＶ２）抗原が含まれる多価免疫原性組成物であって、該Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が（ｉ）ＩｇＧおよび（ｉｉ）免疫グロブリンに結合した抗原からなる免疫複合体の両方を実質的に含まない、前記組成物。
［態様２］  Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が免疫原性組成物に添加される前にプロテインＡまたはプロテインＧで処理されている、態様１に記載の組成物。
［態様３］  組成物が使用準備済の液体組成物の形態である、態様１または態様２に記載の組成物。
［態様４］  Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が少なくとも１種類のＭ．ｈｙｏタンパク質抗原を含む、態様１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
［態様５］  Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が２種類以上のＭ．ｈｙｏタンパク質抗原を含む、態様４に記載の組成物。
［態様６］  組成物がブタにおいてＭ．ｈｙｏおよびＰＣＶ２に対する防御免疫応答を引き出す、態様１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
［態様７］  ＰＣＶ２抗原がキメラ１型−２型サーコウイルスの形態であり、前記のキメラウイルスがブタサーコウイルス２型のＯＲＦ２タンパク質を発現する不活化組み換えブタサーコウイルス１型を含む、態様１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
［態様８］  ＰＣＶ２抗原が組み替えＯＲＦ２タンパク質の形態である、態様１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
［態様９］  組み換えＯＲＦ２タンパク質がバキュロウイルスベクターから発現される、態様８に記載の組成物。
［態様１０］  さらに少なくとも１種類の追加の抗原を含む、態様４に記載の組成物。
［態様１１］  少なくとも１種類の追加の抗原がブタにおいて疾患を引き起こし得る微生物に対して防御的である、態様１０に記載の組成物。
［態様１２］  微生物が細菌、ウイルス、または原生動物を含む、態様１１に記載の組成物。
［態様１３］  微生物がブタ生殖および呼吸症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）、ブタパルボウイルス（ＰＰＶ）、ヘモフィルス・パラスイス、パスツレラ・マルトシダ、ストレプトコッカス・スイス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｍ  ｓｕｉｓ）、ストレプトコッカス・ヒカス、アクチノバチルス・プルロニューモニエ、ボルデテラ・ブロンキセプティカ、サルモネラ・コレラエスイス、サルモネラ・エンテリティディス、エリジペロスリックス・ルジオパシエ、マイコプラズマ・ハイオリニス（Ｍｙｃｏｐｌａｍａ  ｈｙｏｒｈｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ヒオシノヴィエ、レプトスピラ属の細菌、ローソニア・イントラセルラリス、ブタインフルエンザウイルス（ＳＩＶ）、大腸菌抗原、ブラキスピラ・ヒオディセンテリア、ブタ呼吸器コロナウイルス、ブタ流行性下痢（ＰＥＤ）ウイルス、ロタウイルス、トルクテノウイルス（ＴＴＶ）、ブタサイトメガロウイルス、ブタエンテロウイルス、脳心筋炎ウイルス、オーエスキー病（Ａｕｊｅｓｋｙ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ）、ブタコレラ（ＣＳＦ）を引き起こす病原体、およびブタ伝染性胃腸炎を引き起こす病原体、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される、態様１２に記載の組成物。
［態様１４］  組成物がさらにアジュバントを含む、態様１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
［態様１５］  アジュバントが水中油型アジュバント、ポリマーおよび水のアジュバント、油中水型アジュバント、水酸化アルミニウムアジュバント、ビタミンＥアジュバントおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、態様１４に記載の組成物。
［態様１６］  組成物がさらに薬学的に許容可能なキャリヤーを含む、態様１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。
［態様１７］  組成物が１回量投与として投与された際にＭ．ｈｙｏおよびＰＣＶ２の両方に対する防御免疫応答を引き出す、態様１〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
［態様１８］  組成物が１回量投与として投与された際にＭ．ｈｙｏ、ＰＣＶ２およびブタに感染することが知られている少なくとも１種類の追加の微生物に対する防御免疫応答を引き出す、態様１１に記載の組成物。
［態様１９］  態様１に記載の組成物をブタに投与することを含む、ブタをマイコプラズマ・ハイオニューモニエ（Ｍ．ｈｙｏ）およびＰＣＶ２に対して免疫化する方法。
［態様２０］  組成物を筋内、皮内、経皮、または皮下投与する、態様１９に記載の方法。
［態様２１］  組成物を１回量で投与する、態様１９または態様２０に記載の方法。
［態様２２］  Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が少なくとも１種類のＭ．ｈｙｏタンパク質抗原を含む、態様１９〜２１のいずれか１項に記載の方法。
［態様２３］  組成物がブタに感染することが知られている微生物に対して防御的である少なくとも１種類の追加の抗原と合わせて投与される、態様２２に記載の方法。
［態様２４］  微生物がブタ生殖および呼吸症候群ウイルス（ＰＲＲＳＶ）、ブタパルボウイルス（ＰＰＶ）、ヘモフィルス・パラスイス、パスツレラ・マルトシダ、ストレプトコッカス・スイス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｍ  ｓｕｉｓ）、ストレプトコッカス・ヒカス、アクチノバチルス・プルロニューモニエ、ボルデテラ・ブロンキセプティカ、サルモネラ・コレラエスイス、サルモネラ・エンテリティディス、エリジペロスリックス・ルジオパシエ、マイコプラズマ・ハイオリニス（Ｍｙｃｏｐｌａｍａ  ｈｙｏｒｈｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ヒオシノヴィエ、レプトスピラ属の細菌、ローソニア・イントラセルラリス、ブタインフルエンザウイルス（ＳＩＶ）、大腸菌抗原、ブラキスピラ・ヒオディセンテリア、ブタ呼吸器コロナウイルス、ブタ流行性下痢（ＰＥＤ）ウイルス、ロタウイルス、トルクテノウイルス（ＴＴＶ）、ブタサイトメガロウイルス、ブタエンテロウイルス、脳心筋炎ウイルス、オーエスキー病（Ａｕｊｅｓｋｙ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ）、ブタコレラ（ＣＳＦ）を引き起こす病原体、およびブタ伝染性胃腸炎を引き起こす病原体、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される、態様２３に記載の方法。
［態様２５］  組成物がＭ．ｈｙｏおよびＰＣＶ２の少なくとも一方に対する母系由来抗体を有するブタに投与される、態様１９〜２４のいずれか１項に記載の方法。
［態様２６］  組成物がＭ．ｈｙｏおよびＰＣＶ２の両方に対する母系由来抗体を有するブタに投与される、態様２５に記載の方法。
［態様２７］  組成物が３週齢以上のブタに投与される、態様１９〜２６のいずれか１項に記載の方法。
［態様２８］  ＰＣＶ２抗原およびマイコプラズマ・ハイオニューモニエ（Ｍ．ｈｙｏ）全細胞調製物の可溶性部分の両方が含まれる免疫原性組成物を含むボトルを含むキットであって、該Ｍ．ｈｙｏ調製物の可溶性部分が（ｉ）ＩｇＧおよび（ｉｉ）抗原／免疫グロブリン免疫複合体の両方を実質的に含まない、前記キット。
［態様２９］  さらに免疫原性組成物を投与するための情報を含有する取扱い説明書が含まれる、態様２８に記載のキット。
［態様３０］  ボトル中の免疫原性組成物が使用準備済の液体組成物として提供される、態様２８または態様２９に記載のキット。
［態様３１］  免疫原性組成物を調製するための方法であって、該方法が以下の工程：
ｉ）Ｍ．ｈｙｏを適切な培地中で１８〜１４４時間の範囲の期間にわたって培養し；
ｉｉ）続いて該Ｍ．ｈｙｏ培養物を不活化し；
ｉｉｉ）該不活化された培養液を回収し、ここで該不活化された培養液は可溶性液体画分および不溶性細胞性物質の両方を含むＭ．ｈｙｏ全細胞調製物を含み；
ｉｖ）該可溶性液体画分を該不溶性細胞性物質から分離し；
ｖ）ＩｇＧおよび抗原／免疫グロブリン免疫複合体の両方を該分離された可溶性液体画分から実質的に除去して該Ｍ．ｈｙｏ全細胞調製物の可溶性部分を形成し；そして
ｖｉ）続いて該Ｍ．ｈｙｏ全細胞調製物の可溶性部分をＰＣＶ２抗原と組み合わせる；
を含む、前記方法。