【手続補正書】
【提出日】平成27年11月26日(2015.11.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｔ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量、但し前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞は、対象の体重１キログラムあたり５×１０５個未満のＣＤ３＋Ｔ細胞を含み、かつ、前記用量は、前記対象の体重１キログラムあたり少なくとも約５×１０６個のＣＤ３４＋細胞を含み、前記用量は、非同系の細胞移植片または組織移植片を必要としているヒト対象を処置するために、治療効果的な量のシクロホスファミドを含み、前記治療効果的な量は体重１キログラムあたり２５ｍｇ〜２００ｍｇを含み、かつ、前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞は、以下の（Ｉ）、（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の方法からなる群から選択される方法によって前記未成熟造血細胞から前記Ｔ細胞を分離することによって得られる：
（Ｉ）以下の（ｉ）〜（ｉｖ）を含む方法：
（ｉ）表面マーカーに特異的に結合する抗体であって、磁気応答性作用因により標識される抗体を、前記未成熟造血細胞に加えること；
（ｉｉ）前記磁気応答性作用因により標識される前記抗体に特異的に結合する前記未成熟造血細胞を磁場によりマトリックスにおいて固定化すること；
（ｉｉｉ）前記マトリックスを洗浄して、結合していない細胞を除くこと；および
（ｉｖ）前記磁場を除いて、結合した細胞を前記マトリックスから溶出すること、
（ＩＩ）前記Ｔ細胞によって分泌される産物に基づく方法、および
（ＩＩＩ）４−１ＢＢ、ＦｏｘＰ３、ＣＤ１５４、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、潜在型ＴＧＦ−ｂｅｔａ（ＬＡＰ）、ＧＡＲＰ（ＬＲＲＣ３２）およびＣＤ１２１ａ／ｂからなる群から選択されるＴ細胞の少なくとも１つの表面マーカーの発現に基づく方法。
【請求項２】
前記対象が、前処置された対象であり、
所望により、
（Ｉ）前記前処置された対象の前処置が、強度軽減移植前処置プロトコルのもとであり、
所望により、前記強度軽減移植前処置プロトコルは骨髄非破壊的前処置プロトコルを含み、
所望により、前記骨髄非破壊的前処置プロトコルは、全身照射（ＴＢＩ）、全身リンパ節照射（ＴＬＩ）、化学療法剤および／または抗体免疫療法の少なくとも１つを含み、
所望により、
（ｉ）前記ＴＢＩは、１Ｇｙ〜７．５Ｇｙ、および、１Ｇｙ〜３．５Ｇｙからなる群から選択される範囲に含まれる単回照射線量または分割照射線量を含むか、もしくは
（ｉｉ）前記化学療法剤は、ブスルファン、フルダラビン、メルファランおよびチオテパの少なくとも１つを含むか、もしくは
（ｉｉｉ）前記抗体は、抗ＣＤ５２抗体、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）抗体および抗ＣＤ３（ＯＫＴ３）抗体の少なくとも１つを含むか、または
（ＩＩ）前記前処置された対象の前処置が、インビボＴ細胞減量であり、所望により、前記インビボＴ細胞減量が、抗体によって行なわれる、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項３】
前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞の用量は前記対象の体重１キログラムあたり５〜４０×１０６個のＣＤ３４＋細胞を含む、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項４】
（ｉ）前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞は前記対象の体重１キログラムあたり１×１０６個未満のＣＤ８＋ＴＣＲα／β−細胞を含むか、または
（ｉｉ）前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞はＭＡＣＳ（商標）によって得られる、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項５】
前記表面マーカーがＴ細胞表面マーカーであるとき、前記結合していない細胞がＴ細胞枯渇未成熟造血細胞を含むかまたは前記表面マーカーが未成熟造血細胞表面マーカーであるとき、前記結合した細胞がＴ細胞枯渇未成熟造血細胞を含む、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項６】
（ｉ）前記マトリックスは強磁性マトリックスであるかまたは前記マトリックスは磁気感受性材料もしくは強磁性材料の球体を含み、または
（ｉｉ）前記磁気応答性作用因は超常磁性粒子を含み、所望により、前記超常磁性粒子は、抗免疫グロブリン、アビジンおよび／または抗ハプテン特異的マイクロビーズとの組合せで前記抗体にコンジュゲートされる、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項７】
前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞が非同系のドナーから得られる、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項８】
前記シクロホスファミドの濃度が体重１キログラムあたり約１００ｍｇ〜２００ｍｇ、または、約１００ｍｇである、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項９】
前記シクロホスファミドが単回服用または２回服用で処方され、所望により、前記２回服用のそれぞれが体重１キログラムあたり約５０ｍｇの濃度を含む、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項１０】
（ｉ）前記対象は悪性疾患を有し、所望により、前記悪性疾患は造血系のガンであるか、または
（ｉｉ）前記対象は非悪性疾患を有し、所望により、前記非悪性疾患は、遺伝性の疾患または障害、造血異常、自己免疫疾患、あるいは、代謝障害である、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項１１】
（ｉ）前記細胞移植片または組織移植片が、未成熟造血細胞、肝臓、膵臓、脾臓、腎臓、心臓、肺、皮膚、腸およびリンパ系／造血系の組織または臓器からなる群から選択されるか、または
（ｉｉ）前記細胞移植片または組織移植片が、いくつかの臓器の同時移植を含む、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項１２】
前記細胞移植片または組織移植片および前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞が、同じドナーから得られる、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項１３】
前記対象が、未成熟造血細胞移植を必要としている前処置された対象であり、
所望により、前記前処置された対象の前処置が、強度軽減移植前処置プロトコルのもとであり、
所望により、前記強度軽減移植前処置プロトコルは、全身照射（ＴＢＩ）および化学療法剤を含む、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項１４】
前記非同系の細胞移植片または組織移植片を必要としている前記対象においてドナー特異的寛容性を誘導するためのものである、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項１５】
（ｉ）前記分離することが、抗体を使用して行われ、所望により、前記抗体は、蛍光色素、ハプテンもしくは磁性粒子にカップリングされるか、または
（ｉｉ）前記分離することが、フローサイトメトリーもしくは磁気細胞選別を使用して行われ、所望により、前記磁気細胞選別はＭＡＣＳ（商標）を含むか、または
（ｉｉｉ）前記Ｔ細胞を前記未成熟造血細胞から分離することが、高勾配磁気分離（ＨＧＭＳ）もしくは分離カラムを使用して行われるか、または
（ｉｖ）前記Ｔ細胞を前記Ｔ細胞によって分泌される産物に基づいて前記未成熟造血細胞から分離することは、分泌産物により標識されるＴ細胞を分離することを含み、ただし、前記Ｔ細胞は、前記Ｔ細胞によって分泌される産物と特異的に結合する捕捉成分にカップリングされており、かつ、前記Ｔ細胞は、前記産物が分泌され、前記捕捉成分に結合し、それにより、前記分泌産物により標識されるＴ細胞を生じさせる条件のもとで培養されており、また、前記Ｔ細胞は前記方法によって溶解されず、かつ、前記分泌産物は標識成分により標識されるか、または
（ｖ）方法が、Ｂ細胞を、Ｂ細胞表面マーカーに特異的に結合する抗体の使用によって前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞から分離することをさらに含むか、または
（ｖｉ）方法が、Ｂ細胞を前記Ｂ細胞によって分泌される産物に基づいて前記Ｔ細胞枯渇未成熟造血細胞から分離することをさらに含み、前記分離することは、分泌産物により標識されるＢ細胞を分離することを含み、ただし、前記Ｂ細胞は、前記Ｂ細胞によって分泌される産物と特異的に結合する捕捉成分にカップリングされており、かつ、前記Ｂ細胞は、前記産物が分泌され、前記捕捉成分に結合し、それにより、前記分泌産物により標識されるＢ細胞を生じさせる条件のもとで培養されており、また、前記Ｂ細胞は前記方法によって溶解されず、かつ、前記分泌産物は標識成分により標識される、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。
【請求項１６】
（ｉ）前記分泌産物は、サイトカイン、抗体またはホルモンであるか、または
（ｉｉ）前記分泌産物は、ＩＦＮ−γ、ＩＬ１、ＩＬ２、ＩＬ４、ＩＬ１０、ＩＬ１２、ＴＧＦ−β、ＴＮＦ、ＧＭ−ＣＳＦおよびＳＣＦからなる群から選択されるか、または
（ｉｉｉ）前記捕捉成分は固定用成分を介して前記Ｔ細胞またはＢ細胞にカップリングされるかもしくは前記捕捉成分は抗体またはその抗原結合フラグメントであるか、または
（ｉｖ）前記標識成分は、前記分泌産物について特異的な抗体であるかまたは前記標識成分は蛍光着色されるか、もしくは磁化可能であるか、もしくは磁性粒子を含む、請求項１に記載のＴ細胞を枯渇させた未成熟な造血細胞の用量。