【手続補正書】
【提出日】平成28年2月12日(2016.2.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：（Ａ１）−ａ１−（Ａ２）−ａ２−［Ｂ］を含む第１のポリペプチドと、式ＩＩ：ａ３−（Ａ３）−（Ｃ１）を含む第２のポリペプチドと、を含む、組換えＦＶＩＩＩタンパク質であって、
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、融合されるか、またはヘテロ二量体として存在し、
式中、ａ）Ａ１は、ＦＶＩＩＩのＡ１ドメインであり、ｂ）Ａ２は、ＦＶＩＩＩのＡ２ドメインであり、ｃ）［Ｂ］は、ＦＶＩＩＩのＢドメイン、その断片であるか、または欠失されており、ｄ）Ａ３は、ＦＶＩＩＩのＡ３ドメインであり、ｅ）Ｃ１は、ＦＶＩＩＩのＣ１ドメインであり、ｆ）ａ１、ａ２、およびａ３は、酸性スペーサー領域であり、
前記Ａ１ドメインは、許容ループ−１（Ａ１−１）領域および許容ループ−２（Ａ１−２）領域を含み、
前記Ａ２ドメインは、許容ループ−１（Ａ２−１）領域および許容ループ−２（Ａ２−２）領域を含み、
前記Ａ３ドメインは、許容ループ−１（Ａ３−１）領域および許容ループ−２（Ａ３−２）領域を含み、
前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、Ａ３−２、またはａ３のうちの少なくとも１つは、異種性部分を含み、
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性を示す、組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２】
式Ｉ：（Ａ１）−ａ１−（Ａ２）−ａ２−［Ｂ］を含む第１のポリペプチドと、式ＩＩ：ａ３−（Ａ３）−（Ｃ１）を含む第２のポリペプチドと、を含む、組換えＦＶＩＩＩタンパク質であって、
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、融合されるか、またはヘテロ二量体として存在し、
式中、ａ）Ａ１は、ＦＶＩＩＩのＡ１ドメインであり、ｂ）Ａ２は、ＦＶＩＩＩのＡ２ドメインであり、ｃ）［Ｂ］は、ＦＶＩＩＩのＢドメイン、その断片であるか、または欠失されているか、もしくは任意に不在であり、ｄ）Ａ３は、ＦＶＩＩＩのＡ３ドメインであり、ｅ）Ｃ１は、ＦＶＩＩＩのＣ１ドメインであり、ｆ）ａ１、ａ２、およびａ３は、酸性スペーサー領域であり、
異種性部分が、ａ３に挿入され、
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性を示す、組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項３】
前記異種性部分は、ＸＴＥＮでない、請求項１または２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項４】
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、前記式（Ａ１）−ａ１−（Ａ２）−ａ２−［Ｂ］−［ａ３］−（Ａ３）−（Ｃ１）を含む１本のポリペプチド鎖を形成する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項５】
前記第２のポリペプチドは、前記式［ａ３］−（Ａ３）−（Ｃ１）−（Ｃ２）を含み、（Ｃ２）は、ＦＶＩＩＩのＣ２ドメインである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項６】
前記許容ループは、表面が露出した柔軟なループ構造内に含有され、ＤＳＳＰデータベースの受入番号２Ｒ７Ｅとして保管される成熟第ＶＩＩＩ因子の二次構造に従って、Ａ１−１は、βストランド１とβストランド２との間に位置し、Ａ１−２は、βストランド１１とβストランド１２との間に位置し、Ａ２−１は、βストランド２２とβストランド２３との間に位置し、Ａ２−２は、βストランド３２とβストランド３３との間に位置し、Ａ３−１は、βストランド３８とβストランド３９との間に位置し、Ａ３−２は、βストランド４５とβストランド４６との間に位置する、請求項１または３〜５のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項７】
Ａ１−１を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１５〜アミノ酸約４５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項８】
Ａ１−１は、配列番号１のアミノ酸約１８〜アミノ酸約４１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項７に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項９】
Ａ１−２を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約２０１〜アミノ酸約２３２の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項８に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１０】
Ａ１−２は、配列番号１のアミノ酸約２１８〜アミノ酸約２２９の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項９に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１１】
Ａ２−１を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約３９５〜アミノ酸約４２１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１２】
Ａ２−１は、配列番号１のアミノ酸約３９７〜アミノ酸約４１８の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項１１に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１３】
Ａ２−２を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約５７７〜アミノ酸約６３５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１４】
Ａ２−２は、配列番号１のアミノ酸約５９５〜アミノ酸約６０７の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項１３に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１５】
Ａ３−１を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１７０５〜アミノ酸約１７３２の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１６】
Ａ３−１は、配列番号１のアミノ酸約１７１１〜アミノ酸約１７２５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項１５に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１７】
Ａ３−２を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１８８４〜アミノ酸約１９１７の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１８】
Ａ３−２は、配列番号１のアミノ酸約１８９９〜アミノ酸約１９１１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、請求項１７に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項１９】
異種性部分が、前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、Ａ３−２、またはａ３のうちの少なくとも２つに挿入される、請求項１または３〜１８いずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２０】
前記異種性部分が、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸１８８、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸３３３、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４４２、配列番号１の４９０、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７９６、配列番号１のアミノ酸１８０２、配列番号１のアミノ酸１９００、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、請求項１または３〜１９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２１】
前記異種性部分が、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２１、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３３６、配列番号１のアミノ酸３３９、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸４１６、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１の１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、請求項１または３〜１９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２２】
さらなる異種性部分がａ３に挿入される、請求項１または３〜２１のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２３】
さらなる異種性部分が、配列番号１のアミノ酸１６５６に対応するアミノ酸の直ぐ下流のａ３に挿入される、請求項２２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２４】
少なくとも２つの異種性部分を含む、請求項１または３〜２３のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２５】
少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、または少なくとも６つの異種性部分を含む、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２６】
前記Ａ１ドメインは、許容ループ−１（Ａ１−１）領域および許容ループ−２（Ａ１−２）領域を含み、
前記Ａ２ドメインは、許容ループ−１（Ａ２−１）領域および許容ループ−２（Ａ２−２）領域を含み、
前記Ａ３ドメインは、許容ループ−１（Ａ３−１）領域および許容ループ−２（Ａ３−２）領域を含み、
さらなる異種性部分が、前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの少なくとも１つに挿入される、請求項２〜５のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２７】
さらなる異種性部分が、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸１８８、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸３３３、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４４２、配列番号１のアミノ酸４９０、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７９６、配列番号１のアミノ酸１８０２、配列番号１のアミノ酸１９００、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、請求項２〜５または２６のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２８】
異種性部分が、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２１、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３３６、配列番号１のアミノ酸３３９、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸４１６、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１のアミノ酸１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、請求項２〜５または２６のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項２９】
少なくとも１つの異種性部分が、前記ＦＶＩＩＩ配列に挿入される１つ以上のアミノ酸の配列を含む、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項３０】
少なくとも１つの異種性部分が、前記タンパク質のインビボ半減期を増加させる要素を含む、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項３１】
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の前記インビボ半減期を増加させる前記要素は、アルブミン、アルブミン結合ポリペプチド、Ｆｃ、ＰＡＳ、ヒト絨毛性ゴナドトロピンのβサブユニットのＣ末端ペプチド（ＣＴＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、アルブミン結合小分子、またはそれらの組み合わせを含む、請求項３０に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項３２】
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の前記インビボ半減期を増加させる前記要素は、クリアランス受容体、またはその断片を含み、前記クリアランス受容体は、ＦＶＩＩＩクリアランス受容体への前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の結合を遮断し、前記クリアランス受容体は、低比重リポタンパク質受容体関連タンパク質１（ＬＲＰ１）またはそのＦＶＩＩＩ結合断片である、請求項３０に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項３３】
少なくとも１つの異種性部分は、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の可視化または位置特定をインビトロ、インビボ、エクスビボ、またはそれらの任意の組み合わせで可能にするペプチドまたはポリペプチドを含む、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項３４】
少なくとも１つの異種性部分は、前記タンパク質の安定性を増加させる要素を含む、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項３５】
前記組換えタンパク質は、天然ＦＶＩＩＩの少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％の前記凝血促進活性を有する、請求項１〜３４のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
【請求項３６】
請求項１〜３５のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質をコードする配列を含む、単離された核酸。
【請求項３７】
請求項３６に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項３８】
前記ベクターは、プラスミド、ファージミド、ウイルス、またはそれらの誘導体である、請求項３７に記載の発現ベクター。
【請求項３９】
前記ウイルスベクターは、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ関連ウイルスベクター、ＳＶ４０型ウイルスベクター、ポリオーマウイルスベクター、エプスタイン・バールウイルスベクター、パピローマウイルスベクター、ヘルペスウイルスベクター、ワクシニアウイルスベクター、およびポリオウイルスベクターから選択される、請求項３８に記載の発現ベクター。
【請求項４０】
前記レトロウイルスベクターは、モロニーマウス白血病ウイルスベクター、ハーベイマウス肉腫ウイルスベクター、マウス乳腺腫瘍ウイルスベクター、およびラウス肉腫ウイルスベクターから選択される、請求項３９に記載の発現ベクター。
【請求項４１】
前記単離された核酸は、プロモーターまたは制御配列に作動可能に連結している、請求項３７〜４０のいずれか１項に記載の発現ベクター。
【請求項４２】
請求項３６に記載の単離された核酸または請求項３７〜４１のいずれか１項に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項４３】
組換えＦＶＩＩＩタンパク質を産生する方法であって、請求項４２に記載の宿主細胞を、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質が発現される条件下で培養することを含む、方法。
【請求項４４】
請求項１〜３５のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質、請求項３６に記載の単離された核酸、請求項３７〜４１のいずれか１項に記載の発現ベクター、または請求項４２に記載の宿主細胞と、薬学的に許容される賦形剤と、を含む、薬学的組成物。
【請求項４５】
必要性のある患者において凝血疾患または病態を予防する、治療する、寛解させる、または管理するための、請求項４４に記載の薬学的組成物。
【請求項４６】
患者において凝血疾患または病態を診断するまたは画像診断するための、請求項４４に記載の薬学的組成物。
【請求項４７】
請求項１〜３５のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質を作製する方法であって、異種性部分を、特定された許容箇所に挿入することを含み、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性を示す、方法。
【請求項４８】
組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現を増加させる方法であって、少なくとも１つの異種性部分を、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質のａ３酸性スペーサー領域に挿入することを含み、前記ａ３領域への少なくとも１つの異種性部分の前記挿入は、前記ａ３領域に挿入される前記少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす、方法。
【請求項４９】
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、相互に融合され、それによって１本鎖ポリペプチドを形成する、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質、請求項３６に記載の単離された核酸、請求項３７〜４１のいずれか１項に記載の発現ベクター、請求項４２に記載の宿主細胞、または請求項４３〜４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
残基１６４５、残基１６４８、または残基１６４５および１６４８の両方における前記アミノ酸残基は、アルギニンでない、請求項４９に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質、核酸、ベクター、宿主細胞、または方法。
【請求項５１】
前記凝血疾患または病態は、血友病である、請求項４５または４６に記載の薬学的組成物の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
本開示はまた、少なくとも１つの異種性部分を、組換えＦＶＩＩＩタンパク質のａ３酸性スペーサー領域に挿入することを含む、組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現を増加させる方法も提供し、このａ３領域への少なくとも１つの異種性部分の挿入は、ａ３領域に挿入された少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす。いくつかの態様において、組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、許容ループ、例えば、Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの１つに挿入された、１つのさらなる異種性部分をさらに含み、このａ３領域への少なくとも１つの異種性部分の挿入は、ａ３領域に挿入された少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす。他の態様において、組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、許容ループ、例えば、Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの１つ以上に挿入された、２つのさらなる異種性部分をさらに含み、このａ３領域への少なくとも１つの異種性部分の挿入は、ａ３領域に挿入された少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす。いくつかの態様において、組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、１つ以上の許容ループ、例えば、Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２に挿入された、３つのさらなる異種性部分をさらに含み、このａ３領域への少なくとも１つのさらなる異種性部分の挿入は、ａ３領域に挿入された少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす。いくつかの態様において、組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、１つ以上の許容ループ、例えば、Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２に挿入された、４つのさらなる異種性部分をさらに含み、このａ３領域への少なくとも１つのさらなる異種性部分の挿入は、ａ３領域に挿入された少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす。いくつかの態様において、組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、１つ以上の許容ループ、例えば、Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２に挿入された、５つのさらなる異種性部分をさらに含み、このａ３領域への少なくとも１つのさらなる異種性部分の挿入は、ａ３領域に挿入された少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす。いくつかの態様において、組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、１つ以上の許容ループ、例えば、Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２に挿入された、６つのさらなる異種性部分をさらに含み、このａ３領域への少なくとも１つのさらなる異種性部分の挿入は、ａ３領域に挿入された少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
式Ｉ：（Ａ１）−ａ１−（Ａ２）−ａ２−［Ｂ］を含む第１のポリペプチドと、式ＩＩ：ａ３−（Ａ３）−（Ｃ１）を含む第２のポリペプチドと、を含む、組換えＦＶＩＩＩタンパク質であって、
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、融合されるか、またはヘテロ二量体として存在し、
式中、ａ）Ａ１は、ＦＶＩＩＩのＡ１ドメインであり、ｂ）Ａ２は、ＦＶＩＩＩのＡ２ドメインであり、ｃ）［Ｂ］は、ＦＶＩＩＩのＢドメイン、その断片であるか、または欠失されており、ｄ）Ａ３は、ＦＶＩＩＩのＡ３ドメインであり、ｅ）Ｃ１は、ＦＶＩＩＩのＣ１ドメインであり、ｆ）ａ１、ａ２、およびａ３は、酸性スペーサー領域であり、
前記Ａ１ドメインは、許容ループ−１（Ａ１−１）領域および許容ループ−２（Ａ１−２）領域を含み、
前記Ａ２ドメインは、許容ループ−１（Ａ２−１）領域および許容ループ−２（Ａ２−２）領域を含み、
前記Ａ３ドメインは、許容ループ−１（Ａ３−１）領域および許容ループ−２（Ａ３−２）領域を含み、
異種性部分が、前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの少なくとも１つに挿入され、
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性を示す、組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２）
式Ｉ：（Ａ１）−ａ１−（Ａ２）−ａ２−［Ｂ］を含む第１のポリペプチドと、式ＩＩ：ａ３−（Ａ３）−（Ｃ１）を含む第２のポリペプチドと、を含む、組換えＦＶＩＩＩタンパク質であって、
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、融合されるか、またはヘテロ二量体として存在し、
式中、ａ）Ａ１は、ＦＶＩＩＩのＡ１ドメインであり、ｂ）Ａ２は、ＦＶＩＩＩのＡ２ドメインであり、ｃ）［Ｂ］は、ＦＶＩＩＩのＢドメイン、その断片であるか、または欠失されているか、もしくは任意に不在であり、ｄ）Ａ３は、ＦＶＩＩＩのＡ３ドメインであり、ｅ）Ｃ１は、ＦＶＩＩＩのＣ１ドメインであり、ｆ）ａ１、ａ２、およびａ３は、酸性スペーサー領域であり、
異種性部分が、ａ３に挿入され、
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性を示す、組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３）
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、前記式（Ａ１）−ａ１−（Ａ２）−ａ２−［Ｂ］−［ａ３］−（Ａ３）−（Ｃ１）を含む１本のポリペプチド鎖を形成する、項目１または項目２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目４）
前記第２のポリペプチドは、前記式［ａ３］−（Ａ３）−（Ｃ１）−（Ｃ２）を含み、（Ｃ２）は、ＦＶＩＩＩのＣ２ドメインである、項目１〜３のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目５）
前記許容ループは、表面が露出した柔軟なループ構造内に含有され、ＤＳＳＰデータベースの受入番号２Ｒ７Ｅとして保管される成熟第ＶＩＩＩ因子の二次構造に従って、Ａ１−１は、βストランド１とβストランド２との間に位置し、Ａ１−２は、βストランド１１とβストランド１２との間に位置し、Ａ２−１は、βストランド２２とβストランド２３との間に位置し、Ａ２−２は、βストランド３２とβストランド３３との間に位置し、
Ａ３−１は、βストランド３８とβストランド３９との間に位置し、Ａ３−２は、βストランド４５とβストランド４６との間に位置する、項目１、３、または４のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目６）
Ａ１−１を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１５〜アミノ酸約４５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目７）
Ａ１−１は、配列番号１のアミノ酸約１８〜アミノ酸約４１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８）
Ａ１−２を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約２０１〜アミノ酸約２３２の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９）
Ａ１−２は、配列番号１のアミノ酸約２１８〜アミノ酸約２２９の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目８に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１０）
Ａ２−１を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約３９５〜アミノ酸約４２１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１１）
Ａ２−１は、配列番号１のアミノ酸約３９７〜アミノ酸約４１８の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目１０に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１２）
Ａ２−２を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約５７７〜アミノ酸約６３５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１３）
Ａ２−２は、配列番号１のアミノ酸約５９５〜アミノ酸約６０７天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目１２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１４）
Ａ３−１を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１７０５〜アミノ酸約１７３２の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１５）
Ａ３−１は、配列番号１のアミノ酸約１７１１〜アミノ酸約１７２５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目１４に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１６）
Ａ３−２を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１８８４〜アミノ酸約１９１７の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１７）
Ａ３−２は、配列番号１のアミノ酸約１８９９〜アミノ酸約１９１１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目１６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１８）
異種性部分が、前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの少なくとも２つに挿入される、項目１または３〜１７のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１９）
異種性部分が、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１のアミノ酸１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９００、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、項目１または３〜１８のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２０）
さらなる異種性部分が、ａ３に挿入される、項目１または３〜１９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２１）
前記さらなる異種性部分が、配列番号１のアミノ酸１６５６に対応するアミノ酸の直ぐ下流のａ３に挿入される、項目２０に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２２）
２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、または９つのさらなる異種性部分をさらに含む、項目１または３〜２１のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２３）
前記Ａ１ドメインは、許容ループ−１（Ａ１−１）領域および許容ループ−２（Ａ１−２）領域を含み、
前記Ａ２ドメインは、許容ループ−１（Ａ２−１）領域および許容ループ−２（Ａ２−２）領域を含み、
前記Ａ３ドメインは、許容ループ−１（Ａ３−１）領域および許容ループ−２（Ａ３−２）領域を含み、
さらなる異種性部分が、前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの少なくとも１つに挿入される、項目２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２４）
さらなる異種性部分が、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１のアミノ酸１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９００、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、項目２または項目２３に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２５）
少なくとも１つの異種性部分が、前記ＦＶＩＩＩ配列に挿入される１つ以上のアミノ酸の配列を含む、項目１〜２４のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２６）
少なくとも１つの異種性部分が、前記タンパク質のインビボ半減期を増加させる要素を含む、項目１〜２５のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２７）
記組換えＦＶＩＩＩタンパク質のインビボ半減期を増加させる前記要素は、アルブミン、アルブミン結合ポリペプチド、Ｆｃ、ＰＡＳ、ヒト絨毛性ゴナドトロピンのβサブユニットのＣ末端ペプチド（ＣＴＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、アルブミン結合小分子、またはそれらの組み合わせを含む、項目２６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２８）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質のインビボ半減期を増加させる前記要素は、クリアランス受容体、またはその断片を含み、前記クリアランス受容体は、ＦＶＩＩＩクリアランス受容体への前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の結合を遮断する、項目２６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目２９）
前記クリアランス受容体は、低比重リポタンパク質受容体関連タンパク質１（ＬＲＰ１）またはそのＦＶＩＩＩ結合断片である、項目２８に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３０）
少なくとも１つの異種性部分が、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の可視化または位置特定を可能にするペプチドまたはポリペプチドを含む、項目１〜２９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３１）
可視化または位置特定は、インビトロ、インビボ、エクスビボ、またはそれらの任意の組み合わせで可能にされる、項目３０に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３２）
視化または位置特定を可能にする前記ペプチドまたはポリペプチドは、ビオチンアクセプターペプチド、リポ酸アクセプターペプチド、蛍光タンパク質、二ヒ素色素のライゲーションのためまたは準安定テクネチウム複合体化のためのシステイン含有ペプチド、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）ベースの近接アッセイのためのユウロピウムクラスレート複合体化のためのペプチド、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、項目３０または項目３１に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３３）
前記蛍光タンパク質は、ＧＦＰ、ＲＦＰ、ＹＦＰ、ＥＧＦＰ、またはＥＹＦＰである、項目３２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３４）
前記二ヒ素色素は、４’，５’−ビス（１，３，２−ジチオアルソラン（ｄｉｔｈｉｏａｒｓｏｌａｎ）−２−イル）フルオレセイン（ＦｌＡｓＨ）である、項目３２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３５）
前記ビオチンアクセプターペプチドは、アビジンベースおよびストレプトアビジンベースの試薬の複合体化を容易にする、項目３２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３６）
前記リポ酸アクセプターペプチドは、結合されたリポ酸へのチオール反応性プローブの複合体化または蛍光リポ酸類似体の直接のライゲーションを容易にする、項目３２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３７）
少なくとも１つの異種性部分が、前記タンパク質の安定性を増加させる要素を含む、項目１〜３６のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３８）
前記組換えタンパク質は、天然ＦＶＩＩＩの少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％の前記凝血促進活性を有する、項目１〜３７のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目３９）
凝血促進活性は、発色基質アッセイ、一段式凝血アッセイ、または両方によって測定される、項目１〜３８のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目４０）
項目１〜３９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質をコードする配列を含む、単離された核酸。
（項目４１）
項目４０に記載の核酸を含む、発現ベクター。
（項目４２）
項目４０に記載の単離された核酸または項目３９に記載のベクターを含む、宿主細胞。
（項目４３）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、インビボで発現される、項目４２に記載の宿主細胞。
（項目４４）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、インビトロで発現される、項目４２に記載の宿主細胞。
（項目４５）
組換えＦＶＩＩＩタンパク質を産生する方法であって、項目４２に記載の宿主細胞を、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質が発現される条件下で培養することを含む、方法。
（項目４６）
項目１〜３９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質、項目４０に記載の単離された核酸、項目４１に記載の発現ベクター、または項目４２〜４４のいずれか１項に記載の宿主細胞と、薬学的に許容される賦形剤と、を含む、組成物。
（項目４７）
有効量の項目４６に記載の組成物を投与することによって、必要性のある患者において凝血疾患または病態を予防する、治療する、寛解させる、または管理する方法。
（項目４８）
項目４６に記載の組成物を用いて、患者において凝血疾患または病態を診断するまたは画像診断するための方法。
（項目４９）
組換えＦＶＩＩＩタンパク質を作製する方法であって、異種性部分を、特定された許容箇所に挿入することを含み、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性を示す、方法。
（項目５０）
前記特定された許容箇所は、許容ループである、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
前記許容ループ領域は、前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、およびＡ３−２からなる群から選択される、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
異種性部分が、前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの少なくとも２つに挿入される、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
前記異種性部分は、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１のアミノ酸１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９００、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、項目４９または５２のいずれか１項に記載の方法。
（項目５４）
異種性部分が、配列番号１のアミノ酸１８８、配列番号１のアミノ酸２２１、配列番号１のアミノ酸３３３、配列番号１のアミノ酸３３６、配列番号１のアミノ酸３３９、配列番号１のアミノ酸４１６、配列番号１のアミノ酸４４２、配列番号１のアミノ酸４９０、配列番号１のアミノ酸７１３、配列番号１のアミノ酸１７９６、配列番号１のアミノ酸１８０２、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、項目４９に記載の方法。
（項目５５）
さらなる異種性部分が、ａ３に挿入される、項目４９〜５４のいずれか１項に記載の方法。
（項目５６）
前記さらなる異種性部分は、配列番号１のアミノ酸１６５６に対応するアミノ酸の直ぐ下流のａ３に挿入される、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
少なくとも１つの異種性部分が、前記ＦＶＩＩＩ配列を含む１つ以上のアミノ酸の配列に挿入される、項目４９〜５６のいずれか１項に記載の方法。
（項目５８）
少なくとも１つの異種性部分が、前記タンパク質のインビボ半減期を増加させる、項目４９〜５６のいずれか１項に記載の方法。
（項目５９）
少なくとも１つの異種性部分が、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の可視化または位置特定を可能にするペプチドまたはポリペプチドを含む、項目４９〜５６のいずれか１項に記載の方法。
（項目６０）
組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現を増加させる方法であって、少なくとも１つの異種性部分を、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質のａ３酸性スペーサー領域に挿入することを含み、前記ａ３領域への少なくとも１つの異種性部分の前記挿入は、前記ａ３領域に挿入される前記少なくとも１つの異種性部分を含まない対応する前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の発現と比較して、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質の増加した発現をもたらす、方法。
（項目６１）
前記異種性部分は、配列番号１のアミノ酸１６５６に対応するアミノ酸の直ぐ下流のａ３に挿入される、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、許容ループ領域に挿入された少なくとも１つのさらなる異種性部分を含む、項目６０に記載の方法。
（項目６３）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、許容ループ領域に挿入された２つのさらなる異種性部分を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６４）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、許容ループ領域に挿入された３つのさらなる異種性部分を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６５）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、許容ループ領域に挿入された４つのさらなる異種性部分を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６６）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、許容ループ領域に挿入された５つのさらなる異種性部分を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６７）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、許容ループ領域に挿入された６つのさらなる異種性部分を含む、項目６２に記載の方法。
（項目６８）
前記許容ループ領域は、前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、およびＡ３−２からなる群から選択される、項目６２〜６７のいずれか１項に記載の方法。
（項目６９）
前記異種性部分は、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１のアミノ酸１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９００、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応するアミノ酸の直ぐ下流に挿入される、項目６２〜６７のいずれか１項に記載の方法。
（項目７０）
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、相互に融合され、それによって１本鎖ポリペプチドを形成する、項目１〜３８のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質、項目４０に記載の核酸、項目４１に記載のベクター、項目の４２〜４４いずれか１項に記載の宿主細胞、または項目４５〜６９のいずれか１項に記載の方法。
（項目７１）
前記本鎖ポリペプチドは、成熟完全長ＦＶＩＩＩ配列に対応する残基１６４５、残基１６４８、または残基１６４５および１６４８の両方において１つ以上の置換、欠失、または突然変異を含有する、項目７０に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質、核酸、ベクター、宿主細胞、または方法。
（項目７２）
残基１６４５、残基１６４８、または残基１６４５および１６４８の両方における前記アミノ酸残基は、アルギニンでない、項目７１に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質、核酸、ベクター、宿主細胞、または方法。
（項目７３）
前記１本鎖ポリペプチドは、プロセシングされていない、項目７０に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質、核酸、ベクター、宿主細胞、または方法。
（項目７４）
前記ＦＶＩＩＩタンパク質の凝血促進活性を排除するまたは低減することなくＦＶＩＩＩタンパク質の半減期を増加させる方法であって、異種性部分を、特定された許容箇所に挿入することを含み、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性および前記異種性部分を含まない前記ＦＶＩＩＩタンパク質と比較して増加した半減期を示す、方法。
（項目７５）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性および前記異種性部分を含まない前記ＦＶＩＩＩタンパク質と比較して増加した半減期を有する、項目４９〜６９のいずれか１項に記載の方法。
（項目７６）
式Ｉ：（Ａ１）−ａ１−（Ａ２）−ａ２−［Ｂ］を含む第１のポリペプチドと、式ＩＩ：ａ３−（Ａ３）−（Ｃ１）を含む第２のポリペプチドと、を含む、組換えＦＶＩＩＩタンパク質であって、
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、融合されるか、またはヘテロ二量体として存在し、
式中、ａ）Ａ１は、ＦＶＩＩＩのＡ１ドメインであり、ｂ）Ａ２は、ＦＶＩＩＩのＡ２ドメインであり、ｃ）［Ｂ］は、ＦＶＩＩＩのＢドメイン、その断片であるか、または欠失されており、ｄ）Ａ３は、ＦＶＩＩＩのＡ３ドメインであり、ｅ）Ｃ１は、ＦＶＩＩＩのＣ１ドメインであり、ｆ）ａ１、ａ２、およびａ３は、酸性スペーサー領域であり、
前記Ａ１ドメインは、許容ループ−１（Ａ１−１）領域および許容ループ−２（Ａ１−２）領域を含み、
前記Ａ２ドメインは、許容ループ−１（Ａ２−１）領域および許容ループ−２（Ａ２−２）領域を含み、
前記Ａ３ドメインは、許容ループ−１（Ａ３−１）領域および許容ループ−２（Ａ３−２）領域を含み、
前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、Ａ３−２、またはａ３のうちの少なくとも１つは、異種性部分を含み、
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性を示す、組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目７７）
前記許容ループは、表面が露出した柔軟なループ構造内に含有され、ＤＳＳＰデータベースの受入番号２Ｒ７Ｅとして保管される成熟第ＶＩＩＩ因子の二次構造に従って、Ａ１−１は、βストランド１とβストランド２との間に位置し、Ａ１−２は、βストランド１１とβストランド１２との間に位置し、Ａ２−１は、βストランド２２とβストランド２３との間に位置し、Ａ２−２は、βストランド３２とβストランド３３との間に位置し、Ａ３−１は、βストランド３８とβストランド３９との間に位置し、Ａ３−２は、βストランド４５とβストランド４６との間に位置する、項目１、３、４、または７６のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目７８）
Ａ１−１を含む、前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１５〜アミノ酸約４５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５または７７に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目７９）
Ａ１−１は、配列番号１のアミノ酸約１８〜アミノ酸約４１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目７８に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８０）
Ａ１−２を含む前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約２０１〜アミノ酸約２３２の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５〜８および７７〜７９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８１）
Ａ１−２は、配列番号１のアミノ酸約２１８〜アミノ酸約２２９の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目８０に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８２）
Ａ２−１を含む前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約３９５〜アミノ酸約４２１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５〜９および７７〜８１のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８３）
Ａ２−１は、配列番号１のアミノ酸約３９７〜アミノ酸約４１８の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目８２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８４）
Ａ２−２を含む前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約５７７〜アミノ酸約６３５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５〜１１および７７〜８３のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８５）
Ａ２−２は、配列番号１のアミノ酸約５９５〜アミノ酸約６０７天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目８４に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８６）
Ａ３−１を含む前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１７０５〜アミノ酸約１７３２の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５〜１３および７７〜８５のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８７）
Ａ３−１は、配列番号１のアミノ酸約１７１１〜アミノ酸約１７２５の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目８６に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８８）
Ａ３−２を含む前記表面が露出した柔軟なループ構造は、配列番号１のアミノ酸約１８８４〜アミノ酸約１９１７の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目５〜１５および７７〜８７のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目８９）
Ａ３−２は、配列番号１のアミノ酸約１８９９〜アミノ酸約１９１１の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目８８に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９０）
前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、Ａ３−２、またはａ３のうちの少なくとも２つの各々は、異種性部分を含む、項目１〜１７および７６〜８９のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９１）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１のアミノ酸１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９００、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応する挿入部位において異種性部分を含む、項目１、３〜１８、または７６〜９０のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９２）
ａ３は、さらなる異種性部分を含む、項目１、３〜１９、または７６〜９１のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９３）
ａ３は、配列番号１のアミノ酸１６５６に対応する挿入部位において前記さらなる異種性部分を含む、項目９２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９４）
前記Ａ１ドメインは、許容ループ−１（Ａ１−１）領域および許容ループ−２（Ａ１−２）領域を含み、
前記Ａ２ドメインは、許容ループ−１（Ａ２−１）領域および許容ループ−２（Ａ２−２）領域を含み、
前記Ａ３ドメインは、許容ループ−１（Ａ３−１）領域および許容ループ−２（Ａ３−２）領域を含み、
前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの少なくとも１つは、さらなる異種性部分を含む、項目２に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９５）
Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２は、項目５〜１７のいずれか１項に記載されるように定義される、項目９４に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９６）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１のアミノ酸１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９００、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応する挿入部位においてさらなる異種性部分を含む、項目２、２３、９３、または９４に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９７）
前記異種性部分のうちの少なくとも１つは、前記タンパク質の半減期を増加させる、項目１〜２５または７６〜９６のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９８）
前記異種性部分のうちの少なくとも１つは、前記タンパク質の安定性を増加させる、項目１〜３６または７６〜９７のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目９９）
ａ３は、配列番号１のアミノ酸約１６４９〜アミノ酸約１６８９の天然成熟ヒトＦＶＩＩＩにおける領域に対応する、項目２〜４、２０、２１、２３、２４〜３９、７０〜７３、または７６〜９８のいずれか１項に記載の組換えＦＶＩＩＩタンパク質。
（項目１００）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、インビトロまたはインビボで発現される、項目４５に記載の方法。
（項目１０１）
前記凝血疾患または病態は、血友病である、項目４７または４８に記載の方法。
（項目１０２）
Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２は、項目５〜１７のいずれか１項に記載されるように定義される、項目５１に記載の方法。
（項目１０３）
前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、またはＡ３−２のうちの少なくとも２つの各々は、異種性部分を含む、項目５０、１０１、または１０２に記載の方法。
（項目１０４）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、配列番号１のアミノ酸１８、配列番号１のアミノ酸２２、配列番号１のアミノ酸２６、配列番号１のアミノ酸４０、配列番号１のアミノ酸２１６、配列番号１のアミノ酸２２０、配列番号１のアミノ酸２２４、配列番号１のアミノ酸３９９、配列番号１のアミノ酸４０３、配列番号１のアミノ酸４０９、配列番号１のアミノ酸５９９、配列番号１のアミノ酸６０３、配列番号１のアミノ酸１７１１、配列番号１のアミノ酸１７２０、配列番号１のアミノ酸１７２５、配列番号１のアミノ酸１９００、配列番号１のアミノ酸１９０５、配列番号１のアミノ酸１９１０、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応する挿入部位において前記異種性部分を含む、項目４９〜５２、１０２、または１０３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０５）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、配列番号１のアミノ酸１８８、配列番号１のアミノ酸２２１、配列番号１のアミノ酸３３３、配列番号１のアミノ酸３３６、配列番号１のアミノ酸３３９、配列番号１のアミノ酸４１６、配列番号１のアミノ酸４４２、配列番号１のアミノ酸４９０、配列番号１のアミノ酸７１３、配列番号１のアミノ酸１７９６、配列番号１のアミノ酸１８０２、およびそれらの任意の組み合わせから選択される、成熟天然ヒトＦＶＩＩＩにおけるアミノ酸に対応する挿入部位において前記異種性部分を含む、項目４９〜５２、１０２、または１０３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０６）
ａ３は、さらなる異種性部分を含む、項目４９〜５４または１０２〜１０５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０７）
ａ３は、配列番号１のアミノ酸１６５６に対応する挿入部位において前記さらなる異種性部分を含む、項目５５または１０６に記載の方法。
（項目１０８）
組換えＦＶＩＩＩタンパク質を構築する方法であって、前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を設計することを含み、
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、式Ｉ：（Ａ１）−ａ１−（Ａ２）−ａ２−［Ｂ］を含む第１のポリペプチドと、式ＩＩ：ａ３−（Ａ３）−（Ｃ１）を含む第２のポリペプチドと、を含み、
前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドは、融合されるか、またはヘテロ二量体として存在し、
式中、ａ）Ａ１は、ＦＶＩＩＩのＡ１ドメインであり、ｂ）Ａ２は、ＦＶＩＩＩのＡ２ドメインであり、ｃ）［Ｂ］は、ＦＶＩＩＩのＢドメイン、その断片であるか、または欠失されており、ｄ）Ａ３は、ＦＶＩＩＩのＡ３ドメインであり、ｅ）Ｃ１は、ＦＶＩＩＩのＣ１ドメインであり、ｆ）ａ１、ａ２、およびａ３は、酸性スペーサー領域であり、
前記Ａ１ドメインは、許容ループ−１（Ａ１−１）領域および許容ループ−２（Ａ１−２）領域を含み、
前記Ａ２ドメインは、許容ループ−１（Ａ２−１）領域および許容ループ−２（Ａ２−２）領域を含み、
前記Ａ３ドメインは、許容ループ−１（Ａ３−１）領域および許容ループ−２（Ａ３−２）領域を含み、
前記領域Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、Ａ３−２、またはａ３のうちの少なくとも１つは、異種性部分を含み、
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、凝血促進活性を示す、方法。
（項目１０９）
前記組換えＦＶＩＩＩタンパク質は、項目３〜３９、７０〜７３、または７７〜９８のいずれか１項に記載されるように定義される、項目１０８に記載の方法。
（項目１１０）
Ａ１−１、Ａ１−２、Ａ２−１、Ａ２−２、Ａ３−１、Ａ３−２、またはａ３は、項目５〜１７または２１のいずれか１項に記載されるように定義される、項目１０８に記載の方法。