【手続補正書】
【提出日】平成28年6月30日(2016.6.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２９】
実施形態及び実施例は、単なる説明であり、特許請求の範囲を限定することを意図しない。
本発明の実施形態として、例えば以下を挙げることができる。
(1)  リグノセルロース系バイオマスを処理する方法であって、
ソフトリグノセルロース系バイオマス原料を準備するステップと、
前処理されたバイオマスが10%以上のキシラン価を有することを特徴とするように、原料を、1段階加圧熱水前処理において、3.5から9.0の範囲内のpHで、少なくとも35%の乾燥物質含量で、160℃から200℃の間の温度で、60分未満の滞留時間で前処理するステップと、
前処理されたバイオマスを、固体画分及び液体画分に分離するステップと、
エンドグルカナーゼ活性、エキソグルカナーゼ活性、β-グルコシダーゼ活性、エンドキシラナーゼ活性、キシロシダーゼ活性、及びアセチルキシランエステラーゼ活性を含む酵素混合物により触媒される酵素加水分解を利用して、補助水分を添加して又は添加せずに、15%以上の乾燥物質含量で、24時間から150時間の間の時間で、固体画分を加水分解するステップと、
その後、少なくとも50%のグルコース変換率が達成された後に、分離した液体画分及び加水分解した固体画分を混合し、後加水分解を少なくとも6時間行うステップであって、液体画分中のキシロオリゴマーが、加水分解した固体画分中に残留する酵素活性の作用により、キシロースモノマーに分解されるステップと
を含む方法。
(2)    1段階加圧熱水前処理が、前処理中にヘミセルロース加水分解により遊離した酢酸がヘミセルロース加水分解をさらに触媒する、1段階加圧自己加水分解前処理として行われる、(1)に記載の方法。
(3)  前処理ステップ中に原料に硫酸が添加されない、(1)又は(2)に記載の方法。
(4)  原料が、麦わら、トウモロコシ茎葉、サトウキビバガス、スイートソルガムバガス、又は空果房である、(1)に記載の方法。
(5)  原料が、加圧前処理の前に洗浄及び/又は浸出される、(1)に記載の方法。
(6)  原料が、加圧前処理の前に、前処理の後続のステップから得られる酢酸含有液体中に浸漬される、(1)に記載の方法。
(7)  原料の繊維構造が前処理中に維持される、(1)に記載の方法。
(8)  加圧前処理が、10バール以下の圧力で行われる、(1)に記載の方法。
(9)  原料が、液体遠心分離システムを使用して、加圧前処理反応器から除去される、(1)に記載の方法。
(10)  原料が、スルース型システムを使用して、加圧前処理反応器から除去される、(1)に記載の方法。
(11)  バイオマスが12%以上のキシラン価を有することを特徴とするような過酷度まで原料を前処理する、(1)に記載の方法。
(12)  固体画分が、40%以上の乾燥物質含量を有する、(1)に記載の方法。
(13)  後加水分解後のキシロースモノマー収率が、理論的最大収率の少なくとも60%である、(1)に記載の方法。
(14)  加水分解後のグルコースモノマー収率が、理論的最大収率の少なくとも60%である、(1)に記載の方法。
(15)  酵素加水分解が、製造者が提案する範囲内の酵素用量レベルで使用される、リグノセルロース系バイオマス変換に最適化された市販のセルラーゼ調製物を使用して行われる、(1)に記載の方法。
(16)  酵素加水分解が、少なくとも96時間行われる、(1)に記載の方法。
(17)  酵素加水分解が、15%から23%の間の乾燥物質含量で行われる、(1)に記載の方法。
(18)  酵素加水分解が、20%以上の乾燥物質含量で行われる、(1)に記載の方法。
(19)  酵素加水分解が、エキソセルラーゼ活性(EC3.2.1.91)、エンドセルラーゼ活性(EC3.2.1.4)、β-グルコシダーゼ活性(EC3.2.1.21)、β-1,4-エンドキシラナーゼ活性(EC3.2.1.8)、及びアセチルキシランエステラーゼ活性(EC3.1.1.72)を含む酵素混合物を使用して行われ、酵素混合物は、1FPUのセルラーゼ活性ごとに、少なくとも30CMC Uのエンドグルカナーゼ活性があり、及び少なくとも28pNPG Uのβ-グルコシダーゼ活性があり、及び少なくとも50ABX Uのエンドキシラナーゼ活性がある、酵素活性の相対的比率を有することをさらに特徴とする、(1)に記載の方法。
(20)  酵素混合物が、β-1,3-キシロシダーゼ活性(EC3.2.1.72)、β-1,4-キシロシダーゼ活性(EC3.2.1.37)、並びにα-1,3-アラビノフラノシダーゼ活性及び/又はα-1,5-アラビノフラノシダーゼ活性(EC3.2.1.23)をさらに含む、(19)に記載の方法。
(21)  液体画分の後加水分解後に回収された、合わせられたC5/C6加水分解物が、1種以上の改変酵母株を使用してエタノールに直接発酵されることをさらに特徴とする、(1)に記載の方法。
(22)  固体画分が、溶解固体の50%超が除去された不溶性固体を含む、(1)に記載の方法。
(23)  液体画分中に存在するキシロオリゴマーの少なくとも85%が、後加水分解中にキシロースモノマーに加水分解される、(1)に記載の方法。
(24)  リグノセルロース系バイオマス変換に最適化された市販のセルラーゼ調製物が、1種以上の追加的酵素活性で補完されている、(15)に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リグノセルロース系バイオマスを処理する方法であって、
ソフトリグノセルロース系バイオマス原料を準備するステップと、
前処理されたバイオマスが10%以上のキシラン価を有することを特徴とするように、原料を、1段階加圧熱水前処理において、3.5から9.0の範囲内のpHで、少なくとも35%の乾燥物質含量で、160℃から200℃の間の温度で、60分未満の滞留時間で前処理するステップと、
前処理されたバイオマスを、固体画分及び液体画分に分離するステップと、
エンドグルカナーゼ活性、エキソグルカナーゼ活性、β-グルコシダーゼ活性、エンドキシラナーゼ活性、キシロシダーゼ活性、及びアセチルキシランエステラーゼ活性を含む酵素混合物により触媒される酵素加水分解を利用して、補助水分を添加して又は添加せずに、15%以上の乾燥物質含量で、24時間から150時間の間の時間で、固体画分を加水分解するステップと、
その後、少なくとも50%のセルロースのグルコースへの変換率が達成された後に、分離した液体画分及び加水分解した固体画分を混合し、さらに後加水分解を少なくとも6時間行うステップであって、液体画分中のキシロオリゴマーが、加水分解した固体画分中に残留する酵素活性の作用により、キシロースモノマーに分解されるステップと
を含む方法。
【請求項２】
1段階加圧熱水前処理が、前処理中にヘミセルロース加水分解により遊離した酢酸がヘミセルロース加水分解をさらに触媒する、1段階加圧自己加水分解前処理として行われる、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
前処理ステップ中に原料に硫酸が添加されない、請求項1又は2に記載の方法。
【請求項４】
原料が、麦わら、トウモロコシ茎葉、サトウキビバガス、スイートソルガムバガス、又は空果房である、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
原料が、加圧前処理の前に洗浄及び/又は浸出される、請求項1に記載の方法。
【請求項６】
原料が、加圧前処理の前に、前処理の後続のステップから得られる酢酸含有液体中に浸漬される、請求項1に記載の方法。
【請求項７】
原料の繊維構造が前処理中に維持される、請求項1に記載の方法。
【請求項８】
加圧前処理が、10バール以下の圧力で行われる、請求項1に記載の方法。
【請求項９】
原料が、液体遠心分離システムを使用して、加圧前処理反応器から除去される、請求項1に記載の方法。
【請求項１０】
原料が、スルース型システムを使用して、加圧前処理反応器から除去される、請求項1に記載の方法。
【請求項１１】
バイオマスが12%以上のキシラン価を有することを特徴とするような過酷度まで原料を前処理する、請求項1に記載の方法。
【請求項１２】
固体画分が、40%以上の乾燥物質含量を有する、請求項1に記載の方法。
【請求項１３】
後加水分解後のキシロースモノマー収率が、理論的最大収率の少なくとも60%である、請求項1に記載の方法。
【請求項１４】
加水分解後のグルコースモノマー収率が、理論的最大収率の少なくとも60%である、請求項1に記載の方法。
【請求項１５】
酵素加水分解が、製造者が提案する範囲内の酵素用量レベルで使用される、リグノセルロース系バイオマス変換に最適化された市販のセルラーゼ調製物を使用して行われる、請求項1に記載の方法。
【請求項１６】
酵素加水分解が、少なくとも96時間行われる、請求項1に記載の方法。
【請求項１７】
酵素加水分解が、15%から23%の間の乾燥物質含量で行われる、請求項1に記載の方法。
【請求項１８】
酵素加水分解が、20%以上の乾燥物質含量で行われる、請求項1に記載の方法。
【請求項１９】
酵素加水分解が、エキソセルラーゼ活性(EC3.2.1.91)、エンドセルラーゼ活性(EC3.2.1.4)、β-グルコシダーゼ活性(EC3.2.1.21)、β-1,4-エンドキシラナーゼ活性(EC3.2.1.8)、及びアセチルキシランエステラーゼ活性(EC3.1.1.72)を含む酵素混合物を使用して行われ、酵素混合物は、1FPUのセルラーゼ活性ごとに、少なくとも30CMC Uのエンドグルカナーゼ活性があり、及び少なくとも28pNPG Uのβ-グルコシダーゼ活性があり、及び少なくとも50ABX Uのエンドキシラナーゼ活性がある、酵素活性の相対的比率を有することをさらに特徴とする、請求項1に記載の方法。
【請求項２０】
酵素混合物が、β-1,3-キシロシダーゼ活性(EC3.2.1.72)、β-1,4-キシロシダーゼ活性(EC3.2.1.37)、並びにα-1,3-アラビノフラノシダーゼ活性及び/又はα-1,5-アラビノフラノシダーゼ活性(EC3.2.1.23)をさらに含む、請求項19に記載の方法。
【請求項２１】
液体画分の後加水分解後に回収された、合わせられたC5/C6加水分解物が、1種以上の改変酵母株を使用してエタノールに直接発酵されることをさらに特徴とする、請求項1に記載の方法。
【請求項２２】
固体画分が、溶解固体の50%超が除去された不溶性固体を含む、請求項1に記載の方法。
【請求項２３】
液体画分中に存在するキシロオリゴマーの少なくとも85%が、後加水分解中にキシロースモノマーに加水分解される、請求項1に記載の方法。
【請求項２４】
リグノセルロース系バイオマス変換に最適化された市販のセルラーゼ調製物が、1種以上の追加的酵素活性で補完されている、請求項15に記載の方法。