【手続補正書】
【提出日】平成28年3月3日(2016.3.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７４】
「置換された」という用語は、原子または原子団が形式的に水素と置き換わって、別の基と結合した「置換基」となることを意味する。「置換された」という用語は、別段に示されない限り、そのような置換が可能であるあらゆるレベルの置換、例えば、一置換、二置換、三置換、四置換、または五置換を指す。置換基は独立して選択されており、置換はあらゆる化学的に利用可能な位置で起こり得る。所与の原子での置換は結合価によって制限されていることが理解される。「随意に置換されていてもよい」という表現は、非置換または置換を意味する。「置換された」という用語は、水素原子が取り除かれ、置換基に置き換えられていることを意味する。単一の二価の置換基、例えばオキソは、２個の水素原子と置き換わることができる。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７６】
単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される「アルキル」という用語は、直鎖または分枝鎖であり得る飽和炭化水素基を指す。「Ｃｎ−ｍアルキル」という用語は、ｎ〜ｍ個の炭素原子を有するアルキル基を指す。アルキル基は、形式的に、１つのＣ−Ｈ結合がアルキル基の化合物残部との結合点に置き換えられているアルカンに相当する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１〜６個の炭素原子、１〜４個の炭素原子、１〜３個の炭素原子、または１〜２個の炭素原子を含有する。アルキル部分の例として、限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル等の化学基；２−メチル−１−ブチル、ｎ−ペンチル、３−ペンチル、ｎ−ヘキシル、および１，２，２−トリメチルプロピルといったもの等の高級同族体が挙げられる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７７】
単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される「アルケニル」という用語は、１つ以上の炭素−炭素二重結合を有するアルキル基に相当する直鎖または分枝炭化水素基を指す。アルケニル基は、形式的に、１つのＣ−Ｈ結合がアルケニル基の化合物残部との結合点に置き換えられているアルケンに相当する。「Ｃｎ−ｍアルケニル」という用語は、ｎ〜ｍ個の炭素を有するアルケニル基を指す。いくつかの実施形態において、アルケニル部分は、２〜６個、２〜４個、または２〜３個の炭素原子を含有する。アルケニル基の例として、限定されないが、エテニル、ｎ−プロペニル、イソプロペニル、ｎ−ブテニル、およびｓｅｃ−ブテニルといったものが挙げられる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７８】
単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される「アルキニル」という用語は、１つ以上の炭素−炭素三重結合を有するアルキル基に相当する直鎖または分枝炭化水素基を指す。アルキニル基は、形式的に、１つのＣ−Ｈ結合がアルキル基の化合物残部との結合点に置き換えられているアルキンに相当する。「Ｃｎ−ｍアルキニル」という用語は、ｎ〜ｍ個の炭素を有するアルキニル基を指す。アルキニル基の例として、限定されないが、エチニル、プロピン−１−イル、およびプロピン−２−イルといったものが挙げられる。いくつかの実施形態において、アルキニル部分は、２〜６個、２〜４個、または２〜３個の炭素原子を含有する。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７９】
単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される「アルキレン」という用語は、二価のアルキル連結基を指す。アルキレン基は、形式的に、２つのＣ−Ｈ結合がアルキレン基の化合物残部との結合点に置き換えられているアルカンに相当する。「Ｃｎ−ｍアルキレン」という用語は、ｎ〜ｍ個の炭素原子を有するアルキレン基を指す。アルキレン基の例として、限定されないが、エタン−１，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、プロパン−１，２−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ブタン−１，３−ジイル、ブタン−１，２−ジイル、および２−メチル−プロパン−１，３−ジイルといったものが挙げられる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８２】
本明細書にて用いられる場合、「ハロアルキル」という用語は、１個以上の水素原子がハロゲン原子に置き換えられているアルキル基を指す。「Ｃｎ−ｍハロアルキル」という用語は、ｎ〜ｍ個の炭素原子、および同一であるかまたは異なっているかのいずれかであってもよい少なくとも１〜｛２（ｎ〜ｍ）＋１｝個までのハロゲン原子を有するＣｎ−ｍアルキル基を指す。いくつかの実施形態において、ハロゲン原子はフルオロ原子である。いくつかの実施形態において、ハロアルキル基は、１〜６個または１〜４個の炭素原子を有する。ハロアルキル基の例として、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、ＣＨＦ２、ＣＣｌ３、ＣＨＣｌ２、およびＣ２Ｃｌ５といったものが挙げられる。いくつかの実施形態において、ハロアルキル基はフルオロアルキル基である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８３】
単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される「ハロアルコキシ」という用語は式−Ｏ−ハロアルキルの基を指し、ハロアルキル基は上に定義した通りである。「Ｃｎ−ｍハロアルコキシ」という用語は、ハロアルキル基がｎ〜ｍ個の炭素を有するハロアルコキシ基を指す。ハロアルコキシ基の例として、トリフルオロメトキシといったものが挙げられる。いくつかの実施形態において、ハロアルコキシ基は１〜６個、１〜４個、または１〜３個の炭素原子を有する。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９４】
単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される「シクロアルキル」という用語は、環化アルキルおよびアルケニル基を含む、非芳香族、飽和、単環式、二環式、または多環式炭化水素環系を指す。「Ｃｎ−ｍシクロアルキル」という用語は、ｎ〜ｍ個の環員炭素原子を有するシクロアルキルを指す。シクロアルキル基には、単環式または多環式の（例えば、２、３、または４個の縮合環を有する）基、およびスピロ環が含まれ得る。シクロアルキル基は、３、４、５、６、または７個の環形成炭素（Ｃ３−７）を有していてもよい。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、３〜６個の環員、３〜５個の環員、または３〜４個の環員を有する。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は単環式である。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は単環式または二環式である。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基はＣ３−６単環式シクロアルキル基である。シクロアルキル基の環形成炭素原子は、オキソまたはスルフィドによって随意に置換されていてもよい。シクロアルキル基はまた、シクロアルキリデンも含む。シクロアルキル基の例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、ノルボルニル、ノルピニル、ビシクロ［２．１．１］ヘキサニル、およびビシクロ［１．１．１］ペンタニルといったものが挙げられる。いくつかの実施形態において、シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである。シクロアルキルの定義にはまた、シクロアルキル環に縮合した（すなわち、共通した結合を有する）１個以上の芳香環を有する部分、例えば、シクロペンタン、シクロヘキサンといったもののベンゾまたはチエニル誘導体も含まれる。縮合芳香環を含有するシクロアルキル基は、縮合芳香環の環形成原子を含むあらゆる環形成原子を介して結合することができる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９５】
単独でまたは他の用語と組み合わせて使用される「ヘテロシクロアルキル」という用語は、１個以上のアルケニレン基を環構造の一部として随意に含有していてもよく、窒素、硫黄、酸素、およびリンから独立して選択された少なくとも１個のヘテロ原子環員を有し、ならびに４〜１０個の環員、４〜７個の環員、または４〜６個の環員を有する、非芳香環または環系を指す。ヘテロシクロアルキルには、単環式の４員、５員、６員、および７員ヘテロシクロアルキル基が含まれる。ヘテロシクロアルキル基には、単環式または二環式（例えば、２個の縮合環または架橋環を有する）の環系が含まれていてもよい。いくつかの実施形態において、ヘテロシクロアルキル基は、窒素、硫黄、および酸素から独立して選択された１個、２個、または３個のヘテロ原子を有する単環式の基である。ヘテロシクロアルキル基の環形成炭素原子およびヘテロ原子は、オキソもしくはスルフィドによって随意に置換されていてもよいか（例えば、Ｃ（＝Ｏ）、Ｓ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｓ）、もしくはＳ（＝Ｏ）２等）、または窒素原子は四級化され得る。ヘテロシクロアルキル基は、環形成炭素原子または環形成ヘテロ原子を介して結合することができる。いくつかの実施形態において、ヘテロシクロアルキル基は０〜３個の二重結合を含有する。いくつかの実施形態において、ヘテロシクロアルキル基は、０〜２個の二重結合を含有する。ヘテロシクロアルキルの定義にはまた、例えば、ピペリジン、モルホリン、アゼピン等のベンゾまたはチエニル誘導体といった、ヘテロシクロアルキル環に縮合した（すなわち、共通した結合を有する）１個以上の芳香環を有する部分も含まれる。縮合芳香環を含有するヘテロシクロアルキル基は、縮合芳香環の環形成原子を含むあらゆる環形成原子を介して結合することができる。ヘテロシクロアルキル基の例として、アゼパン、アゼチジン、ジアゼパン（例えば、１，４−ジアゼパン）、ジヒドロベンゾフラン、ジヒドロフラン、ジヒドロピラン、ピペラジン、ピペリジン、ピロリジン、ピラン、モルホリン、テトラヒドロピラン、テトラヒドロフラン、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン、およびチオモルホリンといったものが挙げられる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９８】
ある特定の箇所において、定義または実施形態は特定の環（例えば、アゼチジン環、ピリジン環等）に関する。別段指定されない限り、これらの環はあらゆる環員と結合することができるが、ただし原子価は超過しない。例えば、アゼチジン環は環のあらゆる位置で結合してもよいが、一方でアゼチジン−３−イル環は３位で結合する。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９９】
本明細書に記載される化合物は不斉性（例えば、１個以上の立体中心を有する）であってもよい。別段指示されない限り、エナンチオマーおよびジアステレオマー等の全ての立体異性体が意図される。非対称的に置換された炭素原子を含有する本発明の化合物は光学活性形態またはラセミ形態で単離することができる。光学活性形態を光学不活性出発物質から調製する方法は当該技術分野において既知であり、ラセミ混合物の分割、または立体選択的合成等による方法が挙げられる。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合およびそれに類似のものの複数の幾何異性体もまた本明細書に記載の化合物中に存在していてもよく、全てのそのような安定異性体が本発明において企図される。本発明の化合物のシスおよびトランス幾何異性体が説明され、異性体の混合物としてまたは別々の異性体として単離されてもよい。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２００】
化合物のラセミ混合物の分割は、当該技術分野にて既知である多くの方法のいずれかによって実施することができる。１つの方法として、光学活性の塩形成有機酸であるキラル分割酸を用いた分別再結晶が挙げられる。分別再結晶法に対して適切な分割剤は、例えば、酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸のＤ型およびＬ型、またはβカンファースルホン酸等の様々な光学活性カンファースルホン酸等の光学活性酸である。分別再結晶法に対して適切な他の分割剤として、α−メチルベンジルアミンの立体異性的に純粋な形態（例えば、Ｓ型およびＲ型、またはジアステレオマー的に純粋な形態）、ならびに２−フェニルグリシノール、ノルエフェドリン、エフェドリン、Ｎ−メチルエフェドリン、シクロヘキシルエチルアミンおよび１，２−ジアミノシクロヘキサンの立体異性的に純粋な形態といったものが挙げられる。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０６】
全ての化合物およびその薬剤的に許容可能な塩は、水および溶媒等の他の物質と共に見出されてもよい（例えば、水和物および溶媒和物）か、または単離されていてもよい。固体であるとき、本明細書に記載の化合物およびその塩は様々な形態で発生してもよく、例えば、水和物を含む溶媒和物の形態を取ることができる。化合物は多形または溶媒和物等のあらゆる固体形態であることができ、したがって別段明確に示されない限り、本明細書における化合物およびその塩への言及は、化合物のあらゆる固体形態を包含するものとして理解すべきである。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２０８】
本明細書にて使用されている「薬剤的に許容可能」という表現は、医学的良識の範囲内において、過剰な毒性、刺激作用、アレルギー性反応、または他の問題もしくは合併症なしに、ヒトおよび動物の組織との接触における使用に適しており、適切な利益／リスク比と釣り合った化合物、物質、組成物、および／または剤形を指す。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２１０】
本発明にはまた、本明細書に記載の化合物の薬剤的に許容可能な塩が含まれる。「薬剤的に許容可能な塩」という用語は開示された化合物の誘導体を指し、親化合物は存在する酸または塩基部分をその塩形態に変換することによって修飾される。薬剤的に許容可能な塩の例として、限定されないが、アミン等の塩基性残基の鉱酸塩または有機酸塩；カルボン酸等の酸性残基のアルカリ塩または有機塩；および同様のものが挙げられる。本発明の薬剤的に許容可能な塩には、例えば非毒性無機酸または有機酸から作られる、親化合物の無毒性塩が含まれる。本発明の薬剤的に許容可能な塩は、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から従来の化学的手法によって合成することができる。一般的に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を理論量の適当な塩基または酸と、水中もしくは有機溶媒中、またはそれら２つの混合物中において反応させることで調製することができる；概して、エーテル、酢酸エチル、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、もしくはブタノール）、またはアセトニトリル（ＭｅＣＮ）のような非水系媒体が好ましい。適切な塩の一覧は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  Ｅｄ．，（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，１９８５），ｐ．１４１８、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７，６６（１），１−１９、およびＳｔａｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ，（Ｗｉｌｅｙ，２００２）中に見出される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の化合物にはＮ−オキシド形態が含まれる。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２１１】
以下の略語を本明細書にて使用することができる：ＡｃＯＨ（酢酸）；Ａｃ２Ｏ（無水酢酸）；ａｑ．（水性）；ａｔｍ．（気圧）；Ｂｏｃ（ｔ−ブトキシカルボニル）；ＢＯＰ（（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロリン酸）；ｂｒ（幅広）；Ｃｂｚ（カルボキシベンジル）；ｃａｌｃ．（計算値）；ｄ（二重線）；ｄｄ（２組の二重線）；ＤＣＭ（ジクロロメタン）；ＤＩＡＤ（Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルアゾジカルボキシレート）；ＤＩＣ（Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド）；ＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）；ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）；ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）；Ｅｔ（エチル）；ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）；ＥｔＯＨ（エタノール）；Ｆｍｏｃ（９−フルオレニルメチルメトキシカルボニル）；ｇ（グラム）；ｈ（時間）；ＨＡＴＵ（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムヘキサフルオロリン酸）；ＨＣｌ（塩酸）；ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）；Ｈｚ（ヘルツ）；ｉ−Ｐｒ（イソプロピル）；Ｊ（結合定数）；Ｋ３ＰＯ４（リン酸カリウム）；ＬＣＭＳ（液体クロマトグラフィー質量分析）；ｍ（多重線）；Ｍ（モル）；ｍＣＰＢＡ（３−クロロペルオキシ安息香酸）；Ｍｅ（メチル）；ＭｅＣＮ（アセトニトリル）；ＭｅＯＨ（メタノール）；ｍｇ（ミリグラム）；ＭｇＳＯ４（硫酸マグネシウム）；ｍｉｎ．（分）；ｍＬ（ミリリットル）；ｍｍｏｌ（ミリモル）；ＭＳ（質量分析）；Ｎ（規定）；ＮａＨＣＯ３（炭酸水素ナトリウム）；ＮａＯＨ（水酸化ナトリウム）；Ｎａ２ＳＯ４（硫酸ナトリウム）；Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（チオ硫酸ナトリウム）；ｎ−Ｂｕ（ｎ−ブチル）；ｎ−ＢｕＬｉ（ｎ−ブチルリチウム）；ＮＨ４Ｃｌ（塩化アンモニウム）；ＮＨ４ＯＨ（水酸化アンモニウム）；ｎＭ（ナノモル）；ＮＭＲ（核磁気共鳴分光法）；Ｐｄ（パラジウム）；ｐＭ（ピコモル）；ＰＯＣｌ３（塩化ホスホリル）；ＰＴＦＥ（ポリテトラフルオロエチレン）；ＲＰ−ＨＰＬＣ（逆相高速液体クロマトグラフィー）；ｓ（一重線）；ｔ（三重線または３級）；ｔｅｒｔ（第３級）；ｔｔ（３組の三重線）；ｔ−Ｂｕ（ｔｅｒｔ−ブチル）；ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）；ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）；Ｔｒｉｓ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）；μｇ（マイクログラム）；μＬ（マイクロリットル）；μｍ（マイクロメートル）；μＭ（マイクロモル）；ｗｔ％（重量パーセント）。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２１４】
本発明の化合物の調製は様々な化学基の保護および脱保護と関与し得る。保護および脱保護の必要性、ならびに適切な保護基の選択は、当業者が容易に決定することができる。保護基の化学的性質は、例えば、Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ，（Ｔｈｉｅｍｅ，２００７）；Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，２０００）；Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，６ｔｈ  Ｅｄ．（Ｗｉｌｅｙ，２００７）；Ｐｅｔｕｒｓｓｉｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，”Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄｕｃ．，１９９７，７４（１１），１２９７；およびＷｕｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，４ｔｈ  Ｅｄ．，（Ｗｉｌｅｙ，２００６）に記載されている。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２１】
スキーム２に記載の工程において、式２−１の適切な芳香族縮合芳香族化合物を酸化させてＮ−オキシド２−２を得ることができる。適切な酸化剤の例として、ｍＣＰＢＡ等の過酸が挙げられる。次いでＮ−オキシド基は、例えば、Ｎ−オキシドと酸塩化物または無水物との初回求核反応を介して進行し、芳香環への求核付加が続く、適切な求電子剤との反応、または適切な酸塩化物または無水化合物との反応による、Ｎ−オキシド含有環の４位を官能基化させるために使用することができる。適切な酸塩化物または無水物の例として、Ｎ−オキシドと反応して塩素を４位に導入することができるＰＯＣｌ３が挙げられる。したがって、Ｎ−オキシド２−２はＰＯＣｌ３と反応して、４−クロロ−置換化合物２−３を生成することができる。４−クロロ置換基は、適切なクロスカップリング化学作用、例えば塩素の求核置換または適切な金属触媒クロスカップリング反応によって、環Ｄを式（Ｉ）の化合物中へ導入することを可能にする官能基化を提供する。式（Ｉ）のアミド結合を形成するアミノ基を導入するために、ニトロ基を求電子的ニトロ化によって３位にて導入し、次いで所望のアミン基へと還元することができる。したがって、クロロ化合物２−４を適切なニトロ化剤と反応させて、式２−５の芳香族ニトロ化合物を得ることができる。適切なニトロ化剤の例として、硝酸が挙げられる。ニトロ基は求核性カップリング反応のために４位でクロロを活性化させるので、特に環Ｄが窒素原子を介して結合したヘテロ環であるとき、３−ニトロ−４−クロロ化合物の反応によって環Ｄを導入することが有用であり得る。したがって、化合物２−４と環Ｄの適切な前駆体との反応によって式２−５のニトロ化合物を得ることができる。環Ｄが窒素原子を介して結合したヘテロ環であるとき、反応は、適切な塩基、例えば水素化ナトリウムまたはナトリウムｔ−ブトキシドの存在下における求核置換によって実施することができる。反応はまた、ブッフバルト・ハートウィッグクロスカップリング化学作用などの適切な金属触媒クロスカップリング反応によって行うこともできる。環Ｄが窒素を介して結合していないとき、他の適切なクロスカップリング反応、例えばスティルまたは鈴木クロスカップリング反応。他の場合においては、ニトリル等の適切な官能基を導入してもよく、環Ｄを合成するための前駆体として使用してもよい。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２５】
したがって、スキーム３にて説明される工程において、市販のシクロペンタピリジン３−１をｍＣＰＢＡで酸化させて、対応するＮ−オキシド３−２を得ることができ、その後、ＰＯＣｌ３で処理をしてクロロピリジン３−３を得ることができる。化合物３−３をナトリウムメトキシドと共に加熱することでメトキシ化合物３−４へと変換することができる。次いで、メトキシピリジン３−４を適切なニトロ化剤でニトロ化することができる。ニトロ化に適した条件には、硝酸カリウムおよび硫酸と共に加熱することを含む。得られたニトロ化合物３−５を脱メチル化反応に供して、ヒドロキシピリジン３−６を得ることができる。脱メチル化に適した条件には、例えば、ＨＢｒと共に加熱することが含まれる。次いで、ヒドロキシピリジン３−６は、ＰＯＣｌ３等の適切な酸塩化化合物と反応させることによってクロロピリジン３−７へと再変換され得る。その後、上記の通り、クロロ化合物３−７を、求核置換、またはブッフバルト・ハートウィッグ、スティル、もしくは鈴木クロスカップリング反応といったクロスカップリング反応等の環Ｄの性質に依存し得る適切な手段によって、環Ｄを導入するために反応させることができる。次いで、ニトロ化合物３−８を、例えばＰｄ炭素といった触媒の存在下において水素等の適切な還元剤で処理することによって、または塩化アンモニウムの存在下において鉄と反応させることによって、アミノピリジン３−９へと還元することができる。その後、得られたアミノピリジンを式３−１０のカルボン酸とのアミドカップリングに供して、環Ｂが縮合シクロペンタン環である式（Ｉ）の化合物に相当する式３−１１のアミドを得ることができる。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２８】
したがって、カップリングして環Ｄを導入した後、化合物４−１（スキーム３の化合物３−８と対応）は、ｍＣＰＢＡ等の好適な酸化剤でＮ−オキシド４−２へと酸化させることができる。その後、シクロペンタン環の官能基化は、Ｎ−オキシド４−２を無水酢酸等の適切な求電子試薬との反応によって達成され、これは最初にＮ−オキシドをアセチル化し、これが次に転位を起こして酢酸化合物４−３を得る。次いで、上に記載されるものと同一の方法で、ニトロ化合物を、水素／Ｐｄ炭素、または鉄等の適切な還元剤を用いてアミノ化合物４−４へと還元し、続いて式４−５の適切な酸とアミドカップリングして式４−６のアミドを得る。その後、例えば、炭酸カリウムまたは水酸化リチウムといった好適な塩基で加水分解すること等によって、化合物４−６のアセチル基を取り除くことができる。次いで、化合物４−７のヒドロキシ基を、当業者に既知の方法および実施例に説明されている方法を用いて、他の官能基へとさらに変換することができる。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２９】
環Ｂが縮合ジヒドロフラン環である化合物の合成のための上に記載した一般的なスキームの変更は、スキーム５に示されている。スキーム５の工程において、市販のフルオロヨードピリジン５−１をＬＤＡで処理し、続いてエチレンスルフェートによる処理を行い、転位反応（「ハロゲンダンス」）を介して、化合物５−２を得ることができる。化合物５−２を、例えばＨＣｌといった酸で処理することによって、アルコール５−３へと加水分解することができる。続くアルコール５−３のジヒドロフロピリジン５−４への環化は、例えば、ジオキサン中でリン酸カリウムと共に加熱する等の適切な塩基条件下において反応させることで達成することができる。その後、ジヒドロフロピリジン化合物５−４を硫酸中の硝酸等の適切なニトロ化剤でニトロ化して、ニトロピリジン化合物５−５を得ることができる。そして、環Ｄを導入する化合物５−５のカップリングは、求核置換、またはブッフバルト・ハートウィッグ、スティル、もしくは鈴木クロスカップリング反応等のクロスカップリング反応といった上記の方法を用いて達成することができる。次いで上記の手順と類似して、得られたニトロ化合物５−６を、水素／Ｐｄ炭素、または鉄等の適切な還元剤を用いてアミノピリジン５−７へと還元することができ、続いて式５−８の適切な酸とアミドカップリングして環Ｂが縮合ジヒドロフラン環である式（Ｉ）の化合物に相当する式５−９を得る。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３１】
式（Ｉ）のさらなる化合物を、スキーム６に説明されているように合成することができる。市販のＮ−アミノフタルイミド６−１を２，５−ジメトキシテトラヒドロフランで高い温度にて処理して、イソインドリンジオン化合物６−２を得ることができる。ヒドラジン一水和物で処理した場合、６−２を加水分解して１−アミノ−ピロール６−３を得ることができる。アミノピロール６−３を、ジエチル−２−（エトキシメチレン）マロネートでの縮合、および生成されたエタノールの除去によって６−４へと変換することができる。化合物６−４をＤｏｗｔｈｅｒｍ  Ａ等の高沸点の溶媒中で高い温度で環化させて、ピロロピリダジン化合物６−５を生成する。化合物６−５をＰＯＣｌ３と反応させて、対応するクロロピロロピリダジン６−６を得ることができる。６−６と適当な環Ｄ化合物とのカップリングは、環Ｄが窒素を介してピロロピリダジンと結合していた場合は直接カップリングもしくはブッフバルト・ハートウィッグカップリング；または環Ｄが炭素を介してピロロピリダジンと結合していた場合は鈴木カップリングなどの、当業者に既知である方法で達成することができる。次いで、カルボン酸６−８を得るための化合物６−７のエステル基のけん化、続いてＢｏｃ保護アミノ化合物６−９を得るためのクルチウス転位およびＢｏｃ基の脱保護により、アミノピロロピリダジン６−１０を得ることができる。最後に、６−１０と適切な環Ａ酸とのアミドカップリングは所望の式６−１１の化合物を生じることができる。６−１１上での置換は、最終産物中にて、または合成ステップのいずれかにて、当業者に既知の方法を用いて所望の官能基へとさらに変換することができる。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３６】
ＩＩＩ．化合物の使用
本発明の化合物はＰｉｍキナーゼファミリーの１つ以上のメンバーの活性を阻害することができるため、Ｐｉｍキナーゼの活性と関連する疾患および障害の治療に有用である。本明細書に記載されている用途について、本発明の化合物のいずれか（その実施形態のいずれかを含む）を使用してもよい。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３７】
本発明の化合物はＰｉｍ１、Ｐｉｍ２、およびＰｉｍ３のうち１つ以上を阻害することができる。いくつかの実施形態において、化合物は１つのＰｉｍキナーゼに対して別のＰｉｍキナーゼよりも選択的である。この文脈における「選択的」とは、化合物が、別のＰｉｍキナーゼ等の参照酵素と比べてそれぞれより大きな親和性または作用強度を持って、Ｐｉｍキナーゼに結合するまたはＰｉｍキナーゼを阻害することを意味する。例えば、化合物はＰｉｍ１に対してＰｉｍ２およびＰｉｍ３よりも選択的であり得るか、Ｐｉｍ２に対してＰｉｍ１およびＰｉｍ３よりも選択的であり得るか、またはＰｉｍ３に対してＰｉｍ１およびＰｉｍ２よりも選択的であり得る。いくつかの実施形態において、化合物は全てのＰｉｍファミリーメンバー（例えば、Ｐｉｍ１、Ｐｉｍ２、およびＰｉｍ３）を阻害する。いくつかの実施形態において、化合物はＰｉｍに対して、Ａｋｔ１、Ａｋｔ２、Ａｋｔ３、ＴＧＦ−βＲ、ＰＫＡ、ＰＫＧ、ＰＫＣ、ＣａＭ−キナーゼ、ホスホリラーゼキナーゼ、ＭＥＫＫ、ＥＲＫ、ＭＡＰＫ、およびｍＴＯＲ等の受容体および非受容体Ｓｅｒ／Ｔｈｒキナーゼ；ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ＩＮＳ−Ｒ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ−Ｒ、ＰＤＧＦαＲ、ＰＤＧＦβＲ、ＣＳＦＩＲ、ＫＩＴ、ＦＬＫ−ＩＩ、ＫＤＲ／ＦＬＫ−１、ＦＬＫ−４、ｆｌｔ−１、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ｃ−Ｍｅｔ、Ｒｏｎ、Ｓｅａ、ＴＲＫＡ、ＴＲＫＢ、ＴＲＫＣ、ＦＬＴ３、ＶＥＧＦＲ／Ｆｌｔ２、Ｆｌｔ４、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ４、Ｔｉｅ２等の受容体Ｔｙｒキナーゼ；ならびにＳｒｃ、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ、Ｆｇｒ、Ｂｔｋ、Ｆａｋ、ＳＹＫ、ＦＲＫ、ＪＡＫ、またはＡＢＬ等の非受容体Ｔｙｒキナーゼ等の他のキナーゼよりも選択的であり得る。一般的に選択性は、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍であり得る。Ｐｉｍ１、Ｐｉｍ２、またはＰｉｍ３キナーゼを阻害する方法には、適当な酵素を式（Ｉ）の化合物、またはその実施形態のいずれか、またはその薬剤的に許容可能な塩と接触させることが含まれる。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４５】
ＰｉｍキナーゼがＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路によって制御されるという事実によって、本発明の化合物はＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達の調節が有益である疾患を治療するのに有用である。したがって、本発明の化合物を用いて治療することができる他の疾患として、クローン病、過敏性腸症候群、膵臓炎、憩室症、グレーブス病、若年性関節リウマチ、変形性関節炎、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、重症筋無力症、血管炎、自己免疫性甲状腺炎、皮膚炎、乾癬、強皮症、全身性硬化症、白斑、移植片対宿主病、シェーグレン症候群、糸球体腎炎、および糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｍｅｌｌｉｔｉｓ）（Ｉ型）が挙げられる。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４６】
式（Ｉ）の化合物、またはその実施形態のいずれかは、毒性プロフィール、代謝作用、および薬物動態的特性、溶解性、および浸透性等の良好な薬理学的特性ならびに有望な生物薬剤学的特性を有し得ると考えられる。適当な生物薬剤学的特性の決定は、例えば、ＨＥＫ−２９３細胞の細胞傷害性を決定すること、またはｈＥＲＧカリウムイオンチャネルを阻害して潜在毒性を決定することといった当業者の知識の範囲内にあることが理解されるであろう。
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４８】
「治療有効量」という表現は、組織、系、動物、個体またはヒトにおいて研究者、獣医師、医師またはその他の臨床医によって求められる生物学的反応または薬物応答を誘発する活性化合物または医薬品の量を指す。
【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４９】
「治療すること」または「治療」という用語は、（１）疾患を阻害すること；例えば、疾患、病態、もしくは障害の病状または症状を経験しているまたは示している個体において、該疾患、病態、または障害を阻害すること（すなわち、病状および／または症状のさらなる発症を抑止すること）；ならびに（２）疾患を寛解すること；例えば、疾患の重症度を減少させることなどの、疾患、病態、もしくは障害の病状または症状を経験しているまたは示している個体において、該疾患、病状、または障害を寛解すること（すなわち、病状および／または症状を回復させること）のうち１つ以上を指す。一実施形態において、治療することまたは治療には、疾患の発症の危険性を予防することまたは減少させること；例えば、疾患、病態、または障害に罹患しやすいが、該疾患の病状または症状をまだ経験していないまたは示していない個体において、該疾患、病態、または症状の発症の危険性を予防することまたは減少させることが含まれる。
【手続補正２９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２５０】
併用療法
がん細胞増殖および生存は複数のシグナル経路に影響され得る。したがって、そのような病態を治療するために、異なるキナーゼ阻害剤であって、それらによって活性度が調節されるキナーゼにおいて異なる優先度を示すこの異なるキナーゼ阻害剤を併用することは有用である。２つ以上のシグナル経路（または所与のシグナル経路に関係する２個以上の生体分子）を標的化することで、細胞集団にて生じる薬物耐性の尤度を減少させ、および／または治療の毒性を減少させることができる。
【手続補正３０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２５５】
ＩＶ．処方、剤形、および投与
医薬品として使用する場合、本発明の化合物を医薬組成物の形態にて投与することができる。したがって、本開示は、式（Ｉ）の化合物、もしくはその薬剤的に許容可能な塩、またはその実施形態のいずれか、および少なくとも１つの薬剤的に許容可能な担体を含む組成物を提供する。これらの組成物は医薬品分野にてよく知られた方法で調製することができ、局所的または全身的治療が指示されているかどうかに応じて、および治療する領域に応じて様々な経路で投与することができる。投与は、局所的（経皮、上皮、眼、ならびに鼻腔内、膣内、および直腸送達を含む粘膜に対する投与を含む）、肺（例えば、散剤もしくはエアロゾルの吸引または吸入による投与を含む（噴霧器；気管内または鼻腔内による投与を含む））、経口、または非経口であってもよい。非経口投与には、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、または注射もしくは点滴；または頭蓋内、例えば、くも膜下腔内、もしくは脳室内といった投与が含まれる。非経口投与は単回ボーラス投与の形態であってもよいか、または例えば、連続灌流ポンプによってでもよい。局所投与のための医薬組成物および製剤には、経皮貼付剤、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、点滴剤、坐剤、噴霧剤、液剤、および散剤が含まれ得る。従来の医薬担体、水性基剤、粉末基剤、または油性基剤、および増粘剤といったものは必要であるか、または望ましくあり得る。
【手続補正３１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２５６】
本発明にはまた、活性成分として、本発明の化合物またはその薬剤的に許容可能な塩を、１つ以上の薬剤的に許容可能な担体（賦形剤）と組み合わせて含有する医薬組成物も含まれる。いくつかの実施形態において、組成物は局所投与に適している。本発明の組成物の調製において、活性成分は概して、賦形剤と混合されるか、賦形剤で希釈されるか、または例えば、カプセル、サシェ、紙、もしくは他の容器の形態である担体内に封入される。賦形剤を希釈剤として使用する場合、賦形剤は、活性成分の媒体、担体、または媒体として働く、固体、半固体、または液体材料であってもよい。したがって組成物は、例えば活性化合物を最大１０重量％含有する、錠剤、丸剤、散剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、水剤、シロップ剤、エアロゾル（固形でまたは液状媒体中で）、軟膏剤、軟および硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、滅菌注射剤、ならびに滅菌パッケージ入り散剤の形態であってもよい。
【手続補正３２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２６４】
医薬組成物を処方するのに使用される成分は高純度であり、潜在的有害混入物を実質的に含まない（例えば、少なくとも米国食品（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｏｄ）グレード、一般的には少なくとも分析グレード、およびより典型的には少なくとも医薬品グレード）。特にヒトの消費用について、組成物は、好ましくは、米国食品医薬品局の適用規制にて規定される医薬品適正製造基準（Good Manufacturing Practice standards）に基づいて、製造または処方される。例えば、好適な製剤は無菌であってもよく、および／もしくは実質的に等張性であってもよく、ならびに／または米国食品医薬品局の全ての医薬品適正製造基準を全面的に遵守していてもよい。
【手続補正３３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２６５】
活性化合物は広範な用量範囲に渡って有効であり得、一般的に治療有効量で投与される。しかしながら、実際に投与される化合物の量は通常、治療される状態、選択された投与経路、投与される実際の化合物、個々の患者の年齢、体重および反応、ならびに患者の症状の重症度といったものを含む関係する状況に応じて医師によって決定されると、理解されるであろう。
【手続補正３４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２６６】
本発明の化合物の治療用量は、例えば、治療がなされる特定の使用、化合物の投与方法、患者の健康および状態、ならびに処方医師の判断に従って変動し得る。医薬組成物中の本発明の化合物の割合または濃度は、用量、化学的特性（例えば、疎水性）、および投与経路を含むいくつかの要因に応じて変動し得る。例えば、本発明の化合物は、非経口投与のためには約０．１〜約１０％ｗ／ｖの化合物を含有する水性生理緩衝液中にて提供されてもよい。いくつかの典型的な用量範囲は、１日あたり体重１ｋｇにつき約１μｇ〜約１ｇである。いくつかの実施形態において、用量範囲は、１日あたり体重１ｋｇにつき約０．０１ｍｇ〜約１００ｍｇである。用量は、疾患または障害の進行のタイプおよび程度、特定の患者の健康状態全般、選択した化合物の生物学的効率比、賦形剤の処方、ならびにその投与経路のような変数に依存する可能性がある。効果的な用量はインビトロまたは動物モデル試験システムからの用量反応曲線から外挿することができる。
【手続補正３５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２６７】
錠剤等の固体組成物を調製するために、主要な活性成分を医薬品賦形剤と混合して、本発明の化合物の均質な混合物を含有する固形の予備製剤組成物を形成する。これらの予備製剤組成物を均質であると言う場合、組成物を錠剤、丸剤およびカプセル剤等の同等に効果的な単位剤形へと容易に細分することができるように、活性成分は概して組成物全体へ均等に分散される。そして、この固形の予備製剤を、例えば、約０．１〜約１０００ｍｇの本発明の活性成分を含有する上記のタイプの単位剤形に細分する。
【手続補正３６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２６８】
本発明の錠剤または丸剤はコーティングされていてもよいか、そうでなければ持続性作用の利点が得られる剤形を提供するように配合されてもよい。例えば、錠剤または丸剤は内側および外側の用量成分を含んでいてもよく、後者は前者を包む形態であり得る。この２つの成分は、胃の中での分解に抵抗して内側の成分を十二指腸中へと変化することなく通過させるかまたは放出を遅らせる役割を果たす腸溶性の層により分離されることができる。種々の物質をそのような腸溶性の層またはコーティングのために用いることができ、そのような物質はいくつかのポリマー酸およびポリマー酸と、セラック、セチルアルコール、および酢酸セルロースといった物質との混合物を含む。
【手続補正３７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７０】
吸引または吸入用の組成物には、薬剤的に許容可能な、水性もしくは有機溶媒またはその混合物中の液剤および懸濁剤、ならびに散剤が含まれる。液体または固体組成物は上記に記載される適切な薬剤的に許容可能な賦形剤を含有してもよい。いくつかの実施形態において、組成物は経口または経鼻の呼吸器経路によって局所または全身作用のために投与される。組成物は不活性ガスを用いて噴霧することができる。噴霧溶液は噴霧器から直接吸入されてもよいか、または噴霧器をフェイスマスク、テント、または間欠的陽圧呼吸装置に取り付けることができる。溶液、懸濁液、または粉末組成物を、経口または経鼻で適切な方法で製剤を送達する装置から投与することができる。
【手続補正３８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７３】
患者へ投与される組成物は上に記載される医薬組成物の形態であり得る。これらの組成物は従来の滅菌技術で滅菌することができ、または滅菌ろ過してもよい。水溶液はそのままで使用するために包装してもよく、または凍結乾燥してもよく、該凍結乾燥製剤は滅菌水性担体と投与の前に合わせられる。配合製剤のｐＨは典型的には３〜１１の間であり、より好ましくは５〜９、および最も好ましくは７〜８の間である。ある特定の前述の賦形剤、担体、または安定剤の使用により、医薬塩が形成されることが理解されるであろう。
【手続補正３９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７４】
本発明の化合物の治療用量は、例えば、治療がなされる特定の使用、化合物の投与方法、患者の健康および状態、ならびに処方医師の判断に応じて変動し得る。医薬組成物における本発明の化合物の割合または濃度は、用量、化学的特性（例えば、疎水性）、および投与経路を含むいくつかの要因に応じて変動し得る。例えば、本発明の化合物は、非経口投与のためには、約０．１〜約１０％ｗ／ｖの化合物を含有する水性生理緩衝液中に提供されてもよい。いくつかの典型的な用量範囲は、１日あたり体重１ｋｇにつき約１μｇ〜約１ｇである。いくつかの実施形態において、用量範囲は、１日あたり体重１ｋｇにつき約０．０１ｍｇ〜約１００ｍｇである。用量は、疾患または障害の進行のタイプおよび程度、特定の患者の健康状態全般、選択した化合物の相対的生物学的効率、賦形剤の処方、ならびにその投与経路のような変数に依存する可能性がある。効果的な用量はインビトロまたは動物モデル試験システムからの用量反応曲線から推定することができる。
【手続補正４０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７５】
Ｖ．標識化合物およびアッセイ方法
本発明の化合物はさらに、正常組織および異常な組織において、キナーゼシグナル伝達を含む生物学的過程の研究に有用であり得る。したがって、本発明の別の態様は本発明の標識化合物（放射標識、蛍光標識等）に関係しており、画像処理技術だけでなく、インビトロおよびインビボの両方で、ヒトを含む組織試料中のＰｉｍキナーゼを局在化および定量化するためのアッセイ、ならびに標識化合物の阻害結合によりＰｉｍキナーゼリガンドを同定するためのアッセイにも有用である。したがって、本発明にはそのような標識化合物を含有するＰｉｍキナーゼアッセイが含まれる。
【手続補正４１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７６】
本発明にはさらに、本発明の同位体標識化合物が含まれる。「同位体」または「放射標識」化合物は、１個以上の原子が典型的に自然界に見られる（すなわち、自然発生する）原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を持つ原子によって、置き換えられたまたは置換された本発明の化合物である。本発明の化合物に組み込まれ得る適切な放射性核種には、限定されないが、３Ｈ（トリチウムとしてはＴとも記載される）、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、１８Ｆ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、８２Ｂｒ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、および１３１Ｉが含まれる。本発明の放射標識化合物に組み込まれる放射性核種は、放射標識化合物の特定の用途に応じる。例えば、インビトロのＰｉｍキナーゼ標識および競合アッセイについて、３Ｈ、１４Ｃ、８２Ｂｒ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓ、または、を組み込む化合物が一般的に最も有用である。放射性画像処理の用途について、１１Ｃ、１８Ｆ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、または７７Ｂｒが一般的に最も有用である。
【手続補正４２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２９８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２９８】
ステップ１．  ５−ニトロチエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール
【化５８】
2016505020.tif 000001
−１０℃のＤＣＭ（１５ｍＬ）中チエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オール（Ｊ＆Ｗ  ＰｈａｒｍＬａｂ、１．０１５ｇ、６．７１４ｍｍｏｌ）の溶液へ、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリブチルブタン−１−アミニウム硝酸塩（３．１２５ｇ、１０．２６ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。トリフルオロ無水酢酸（２．３３４ｇ、１１．１１ｍｍｏｌ）を滴加した。−１０℃で３０分間撹拌した後、混合物を室温まで温め、２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下において濃縮した。得られた残渣をエーテル（５０ｍＬ）で粉砕し、ろ過した。ろ過ケーキを水（１００ｍＬ）およびエーテル／ＭｅＯＨ（１：１、８０ｍＬ）で洗浄し、その後乾燥して、副題化合物を黄色の固体（９３７．２ｍｇ、７１％）として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ７Ｈ５Ｎ２Ｏ３Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝１９７．０；実測値１９７．０。
【手続補正４３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０５】
ステップ１．  ｔｅｒｔ−ブチル｛（３Ｓ）−１−［５−（｛［２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−イル］カルボニル｝アミノ）チエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル］ピペリジン−３−イル｝カルバメート
【化６４】
2016505020.tif 000002
ＤＣＭ（１．０ｍＬ）中１−クロロ−Ｎ，Ｎ，２−トリメチルプロペニルアミン（８８．５ｍｇ、０．６６２ｍｍｏｌ）の溶液を、ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボン酸（実施例２のステップ２より、５６．９ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）の懸濁液へゆっくりと加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、ＤＣＭ（２．０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｓ）−１−（５−アミノチエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）ピペリジン−３−イル］カルバメート（７３．３ｍｇ、０．２１０ｍｍｏｌ）の溶液を加え、続いてピリジン（１６２．６ｍｇ、２．０５６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温でさらに２時間撹拌した。その後、反応混合物を減圧下において濃縮し、得られた残渣をクロマトグラフィーによってシリカゲル（ヘキサン中０〜１００％ＥｔＯＡｃ）上で精製して、副題化合物を暗色の油（１１８．２ｍｇ、９８％）として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ２７Ｈ２８Ｆ２Ｎ５Ｏ３Ｓ２（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝５７２．２；実測値５７２．２。
【手続補正４４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３０８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３０８】
ステップ１．  ６−ニトロチエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−オール
【化６６】
2016505020.tif 000003
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリブチルブタン−１−アミニウム硝酸塩（４．７８０ｇ、１５．７０ｍｍｏｌ）の溶液を、ＤＣＭ（１５ｍＬ）中チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−オール（Ａｌｄｒｉｃｈ、１．５４５ｇ、１０．２２ｍｍｏｌ）の溶液へ−１０℃で加えた。次いで、トリフルオロ無水酢酸（３．５２４ｇ、１６．７８ｍｍｏｌ）を滴加した。−１０℃で３０分間撹拌した後、混合物を室温まで温め、２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下において濃縮した。得られた残渣をエーテル（５０ｍＬ）で粉砕し、ろ過した。ろ過ケーキを水（１００ｍＬ）およびエーテル／ＭｅＯＨ（１：１、８０ｍＬ）で洗浄し、次いで乾燥して、副題化合物を黄色の固体（１．５６ｇ、７８％）として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ７Ｈ５Ｎ２Ｏ３Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝１９７．０；実測値１９７．０。
【手続補正４５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１８】
ステップ１．  ４−クロロ−１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン
【化７４】
2016505020.tif 000004
ＤＣＭ（１５０ｍＬ）中４−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（Ａｒｋ  Ｐｈａｒｍ、５．０２３ｇ、３２．９２ｍｍｏｌ）の溶液へ、ＤＭＡＰ（４１８．１ｍｇ、３．４２２ｍｍｏｌ）を加え、続いてトリエチルアミン（４．９８４ｇ、４９．２５ｍｍｏｌ）および塩化ベンゼンスルホニル（６．９０４ｇ、３９．０９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１５時間撹拌した後、混合物を１Ｍ  ＨＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下において濃縮した。得られた残渣をクロマトグラフィーによってシリカゲル（ヘキサン中０〜１００％ＥｔＯＡｃ）上で精製して、副題化合物を淡黄色の固体（９．３９ｇ、９７％）として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１３Ｈ１０ＣｌＮ２Ｏ２Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２９３．０；実測値２９３．０。
【手続補正４６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３１９】
ステップ２．  ４−クロロ−５−ニトロ−１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン
【化７５】
2016505020.tif 000005
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリブチルブタン−１−アミニウム硝酸塩（４．８９５ｇ、１６．０８ｍｍｏｌ）の溶液を、ＤＣＭ（４０ｍＬ）中４−クロロ−１−（フェニルスルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（３．０３８ｇ、１０．３８ｍｍｏｌ）の溶液へ−１０℃で加えた。次いで、トリフルオロ無水酢酸（３．８９０ｇ、１８．５２ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。−１０℃で３０分間撹拌した後、反応混合物を室温まで温め、２４時間撹拌した。その後、反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、水（２×７５ｍＬ）およびブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下において濃縮した。得られた残渣をクロマトグラフィーによってシリカゲル（ヘキサン中０〜１００％ＥｔＯＡｃ）上で精製して、副題化合物を淡黄色の固体（３２８４．５ｍｇ、９４％）として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１３Ｈ９ＣｌＮ３Ｏ４Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３３８．０；実測値３３８．０。
【手続補正４７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３３２】
ステップ５．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｓ）−１−（５−アミノ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）ピペリジン−３−イル］カルバメート
【化８６】
2016505020.tif 000006
１０％Ｐｄ炭素（１０８．７ｍｇ、０．１０２１ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下においてＭｅＯＨ（５．００ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｓ）−１−（５−ニトロ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）ピペリジン−３−イル］カルバメート（４１１．２ｍｇ、１．１２８ｍｍｏｌ）の溶液へ加えた。反応混合物を水素ガスでパージし、水素（１ａｔｍ．）下において１４時間撹拌した。その後、反応混合物を珪藻土パッドを通じてろ過した。パッドをＭｅＯＨでさらに溶出した。ろ液を減圧下において濃縮して、副題化合物をオフホワイトの固体（３８７．９ｍｇ）として得た。この固体はさらに精製することなく次のステップで直接使用した。ＬＣＭＳ：Ｃ１７Ｈ２７Ｎ４Ｏ３（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３３５．２；実測値３３５．２。
【手続補正４８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３６３】
ステップ５：  ５−アミノ−Ｎ−｛４−［（３Ｓ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボキサミド
ＭｅＯＨ（０．５９ｍＬ）中３−（｛［５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−イル］カルボニル｝アミノ）−４−｛（３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−７−イルアセテート（３０ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を、１．０Ｍ  ＮａＯＨ（０．３０ｍＬ、０．３０ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（０．３ｍＬ）と混合した。反応混合物を室温で２５分間撹拌した。有機溶媒を減圧下において除去した。水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層を乾燥し、ろ過し、減圧下において濃縮して、中間体（１９ｍｇ）を得た。中間体をＤＣＭ中氷冷ＴＦＡ（４．０Ｍ；１．０ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）で処理した。２０分間室温で撹拌した後、反応混合物を減圧下において濃縮した。残渣をＭｅＯＨで希釈し、少量のＮＨ４ＯＨで中和した。得られた混合物をろ過し、分取ＬＣ−ＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ３０×１０ｍｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、流速６０ｍＬ／分、０．１５％ＮＨ４ＯＨを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、表題化合物を２つのジアステレオ異性体として得た。
【手続補正４９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３６６】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正５０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３７２】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正５１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３７４】
中間体をＤＣＭ（０．０１８ｍＬ）中ＴＦＡ（０．００９０ｍＬ、０．１２ｍｍｏｌ）の混合物に溶解し、得られた混合物を室温で１時間反応させた。反応混合物を減圧下において濃縮し、次いでＭｅＯＨで希釈し、ＮＨ４ＯＨで中和した。ろ過後、粗生成物を分取ＬＣ−ＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ３０×１０ｍｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、流速６０ｍＬ／分、０．１５％ＮＨ４ＯＨを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、表題化合物をジアステレオ異性体の混合物（１．６ｍｇ、５５％）として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ２４Ｈ２７Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝５０１．２。実測値：５０１．１。生成物は表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体の混合物である。
【手続補正５２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３８０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３８０】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正５３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３８４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３８４】
ステップ３：  ５−アミノ−Ｎ−｛４−［（３Ｓ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−７−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボキサミド
ＴＦＡ（０．０２ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（０．０１ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル｛（３Ｓ）−１−［３−（｛［５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−イル］カルボニル｝アミノ）−７−ヒドロキシ−７−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル］ピペリジン−３−イル｝カルバメート（４．０ｍｇ、０．００４４ｍｍｏｌ）の溶液へ加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いでＭｅＯＨで希釈し、ＮＨ４ＯＨで中和した。ろ過の後、粗生成物を分取ＬＣ−ＭＳ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ３０×１０ｍｍカラム、流速６０ｍＬ／分、０．１％ＴＦＡを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、２つのジアステレオ異性体として表題化合物のトリス−トリフルオロアセテート塩を得た。
【手続補正５４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３８６】
ジアステレオ異性体２．  第２のピーク。保持時間１．３８１分、ＬＣＭＳ：Ｃ２４Ｈ２７Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝５０１．２。実測値：５０１．１。
【手続補正５５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３８７】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正５６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３９７】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正５７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４０３】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正５８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４１１】
ステップ４：  ｔｅｒｔ−ブチル（３，４−ｔｒａｎｓ−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝ピペリジン−３−イル）カルバメート（エナンチオマー１）
【化１３２】
2016505020.tif 000007
キラル分離（ステップ３、ピーク１）から得られたベンジル３，４−ｔｒａｎｓ−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（０．５０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）（エナンチオマー１）を、１Ｈ−イミダゾール（０．１１ｇ、１．６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．０１７ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（１５ｍＬ）、およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（０．２４ｇ、１．６ｍｍｏｌ）と混合した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。真空ろ過の後、ろ液を減圧下において濃縮し、ヘキサン中ＥｔＯＡｃ（０〜３０％）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、中間体（０．５０ｇ）を得た。中間体をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）およびＭｅＯＨ（５ｍＬ）中に溶解し、１０％Ｐｄ炭素（０．１０ｇ）を加え、反応混合物を２５ｐｓｉで２時間水素付加した。真空ろ過の後、ろ液を真空下において濃縮して、副題化合物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１６Ｈ３５Ｎ２Ｏ３Ｓｉ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３３１．２。実測値：３３１．３。生成物の立体化学を、仮に（３Ｓ，４Ｓ）と定めた。
【手続補正５９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４１３】
ステップ６：  ５−アミノ−Ｎ−｛４−［（３，４−ｔｒａｎｓ−３−アミノ−４−ヒドロキシピペリジン−１−イル］−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボキサミド（エナンチオマー１）
ｔｅｒｔ−ブチル（１−（３−アミノ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル）−３，４−ｔｒａｎｓ−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝ピペリジン−３−イル）カルバメート（エナンチオマー１）（０．０１０ｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）、５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボン酸（０．００８５ｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．０３３ｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（０．１５ｍＬ）、およびＤＩＰＥＡ（０．０１１ｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）を含有する混合物を、室温で１８時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ水溶液で洗浄した。有機抽出物を減圧下において濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１００％ＥｔＯＡｃで溶出）によって精製して、中間体（８ｍｇ）を得た。中間体をジオキサン中ＨＣｌ（４．０Ｍ；２．５ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）で処理し、室温で１時間撹拌し、その後減圧下において濃縮した。残渣をＭｅＯＨ中に溶解し、ＮＨ４ＯＨ水溶液で中和し、分取ＬＣ−ＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ３０×１０ｍｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、流速６０ｍＬ／分、０．１５％ＮＨ４ＯＨを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、表題化合物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ２３Ｈ２５Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝４８７．２。実測値：４８７．１。生成物の立体化学を、仮に（３Ｓ，４Ｓ）と定めた。
【手続補正６０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４１５】
ステップ１：  ｔｅｒｔ−ブチル（３，４−ｔｒａｎｓ−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝ピペリジン−３−イル）カルバメート（エナンチオマー２）
【化１３５】
2016505020.tif 000008
キラル分離（実施例２４、ステップ３、ピーク２）から得られたベンジル３，４−ｔｒａｎｓ−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（０．５０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）（エナンチオマー２）を、１Ｈ−イミダゾール（０．１１ｇ、１．６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．０１７ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（１５ｍＬ）、およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（０．２４ｇ、１．６ｍｍｏｌ）と混合した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで真空ろ過によってろ過し、減圧下において濃縮した。残渣を、ヘキサン中ＥｔＯＡｃ（０〜３０％）で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、中間体（０．５５ｇ）を得た。中間体をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）およびＭｅＯＨ（５ｍＬ）の混合物中に溶解し、１０％Ｐｄ炭素（０．１０ｇ）を加え、反応混合物を２５ｐｓｉで２時間水素付加した。その後反応混合物を、真空ろ過によって珪藻土を通じてろ過し、ろ液を減圧下において濃縮して、副題化合物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１６Ｈ３５Ｎ２Ｏ３Ｓｉ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３３１．２。実測値：３３１．３。生成物の立体化学を、仮に（３Ｒ，４Ｒ）と定めた。
【手続補正６１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４１９】
ステップ１：  ベンジル３，７−ｃｉｓ−２−オキソヘキサヒドロ［１，３］オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−カルボキシレート（エナンチオマー１）
【化１３８】
2016505020.tif 000009
キラル分離（実施例２４、ステップ３、ピーク１）から得られたベンジル３，４−ｔｒａｎｓ−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（エナンチオマー１）（０．５０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１２ｍＬ）、トリエチルアミン（０．３０ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）、および塩化メタンスルホニル（０．２１ｇ、１．８ｍｍｏｌ）と混合した。反応混合物を室温で１８時間撹拌し、次いでＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチした。水層をＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、真空下において濃縮して、メシル酸塩中間体を得た。その後、メシル酸塩をピリジン（１０ｍＬ）と混合し、１２０℃で２時間加熱した。真空下において濃縮した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中５０〜１００％ＥｔＯＡｃで溶出）によって精製して、副題化合物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１４Ｈ１７Ｎ２Ｏ４（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２７７．１。実測値：２７７．１。生成物の立体化学を、仮に（３ａＳ，７ａＲ）と定めた。
【手続補正６２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４２０】
ステップ２：  ｔｅｒｔ−ブチル３，７−ｃｉｓ２−オキソヘキサヒドロ［１，３］オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−３（２Ｈ）−カルボキシレート（エナンチオマー１）
【化１３９】
2016505020.tif 000010
ベンジル３，７−ｃｉｓ−２−オキソヘキサヒドロ［１，３］オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−カルボキシレート（エナンチオマー１）（０．３５ｇ、１．３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（６．０ｍＬ）中に溶解し、続いてトリエチルアミン（０．５０ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．０１６ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．３１ｇ、１．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１８時間撹拌し、その後減圧下において濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜８０％ＥｔＯＡｃで溶出）によって精製して、中間体を得た。中間体をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１０ｍＬ）、ならびに１０％Ｐｄ炭素混合物（０．２０ｇ）と混合した。得られた混合物を２５ｐｓｉで１時間水素付加した。触媒を真空ろ過によって取り除いた。透明なろ液を真空下において濃縮して、副題化合物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１１Ｈ１９Ｎ２Ｏ４（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２４３．１。実測値：２４３．１。生成物の立体化学を、仮に（３ａＳ，７ａＲ）と定めた。
【手続補正６３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４２４】
ステップ１：  ベンジル３，７−ｃｉｓ−２−オキソヘキサヒドロ［１，３］オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−カルボキシレート（エナンチオマー２）
【化１４２】
2016505020.tif 000011
キラル分離（実施例２４、ステップ３、ピーク２）から得られたベンジル３，４−ｔｒａｎｓ−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（０．５０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）（エナンチオマー２）を、ＤＣＭ（１２ｍＬ）、トリエチルアミン（０．３０ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）、および塩化メタンスルホニル（０．２１ｇ、１．８ｍｍｏｌ）と混合し、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物をＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチした。水層をＤＣＭで３回抽出した。合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、減圧下において濃縮して、メシル酸塩中間体を得た。次いで、メシル酸塩をピリジン（１０ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）と混合し、１２０℃で２時間加熱し、その後反応混合物を減圧下において濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中５０〜１００％ＥｔＯＡｃで溶出）によって精製して、副題化合物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１４Ｈ１７Ｎ２Ｏ４（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２７７．１。実測値：２７７．１。生成物の立体化学を、仮に（３ａＲ，７ａＳ）と定めた。
【手続補正６４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４２５】
ステップ２：  ｔｅｒｔ−ブチル３，７−ｃｉｓ−２−オキソヘキサヒドロ［１，３］オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−３（２Ｈ）−カルボキシレート（エナンチオマー２）
【化１４３】
2016505020.tif 000012
ベンジル３，７−ｃｉｓ−２−オキソヘキサヒドロ［１，３］オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−カルボキシレート（０．３２ｇ、１．２ｍｍｏｌ）（エナンチオマー２）、ＤＣＭ（１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．０１４ｇ）、およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．２８ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を含有する混合物を、室温で１８時間撹拌し、次いで減圧下において濃縮した。混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜８０％ＥｔＯＡｃで溶出）によって精製して、中間体を得た。中間体をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１０ｍＬ）、ならびに１０％Ｐｄ炭素（０．２０ｇ）と混合した。得られた混合物を２５ｐｓｉで１時間水素付加した。触媒を真空ろ過によって取り除いた。透明なろ液を真空下において濃縮して、副題化合物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１１Ｈ１９Ｎ２Ｏ４（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２４３．１。実測値：２４３．１。生成物の立体化学を、仮に（３ａＲ，７ａＳ）と定めた。
【手続補正６５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４３３】
ステップ５．  ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ）−４−アジド−２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−１−（ヒドロキシメチル）−３−メチルブチル］カルバメート
【化１５０】
2016505020.tif 000013
ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−４−（（１Ｒ，２Ｓ）−３−アジド−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−メチルプロピル）−２，２−ジメチル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレート（１．０９ｇ、２．６ｍｍｏｌ）の溶液へ、ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（１．３ｇ、５．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流下において２日間加熱した。室温まで冷却した後、反応混合物を減圧下において濃縮した。残渣をＤＣＭ（２５ｍＬ）中に溶解し、ＤＩＰＥＡ（０．６７ｍＬ、３．８ｍｍｏｌ）を加え、続いてジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．６７ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で５時間撹拌し、その後減圧下において濃縮した。残渣をクロマトグラフィーによってシリカゲル（ヘキサン中０〜２５％ＥｔＯＡｃ）上で精製して、副題化合物（０．５６ｇ、５６％）を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１２Ｈ２９Ｎ４Ｏ２Ｓｉ（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２８９．２；実測値２８９．２。
【手続補正６６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４３５】
ステップ７．  ｔｅｒｔ−ブチル（（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−５−メチルピペリジン−３−イル）カルバメート
【化１５２】
2016505020.tif 000014
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−５−アジド−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−メチルペンチルメタンスルホネート（０．５９ｇ、１．３ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ２で２０分間脱酸素化した。ＤＩＰＥＡ（０．５５ｍＬ、３．２ｍｍｏｌ）を加え、続いて１０重量％Ｐｄ炭素（０．１ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１ａｔｍで２時間水素付加し、その後ろ過した。ろ液を濃縮して、副題化合物（０．４３ｇ、９８％）を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１７Ｈ３７Ｎ２Ｏ３Ｓｉ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３４５．３；実測値３４５．２。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４．３５（ｂｓ，１Ｈ），３．３２（ｄｔ，Ｊ＝１３．１，６．３Ｈｚ，１Ｈ），３．２５（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），３．０４（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９４（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．１，４．１，１．５Ｈｚ，１Ｈ），２．３３（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，１０．５Ｈｚ，１Ｈ），２．２４（ｄｄ，Ｊ＝１３．１，１０．９Ｈｚ，１Ｈ），１．７６（ｂｓ，１Ｈ），１．５５（ｔｄｄ，Ｊ＝８．９，６．７，４．２Ｈｚ，１Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ），０．９２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），０．８７（ｓ，９Ｈ），０．０７（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【手続補正６７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５０】
ステップ６．  ｔｅｒｔ−ブチル６−アミノ−５−｛（３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート
【化１６４】
2016505020.tif 000015
鉄粉（０．２６ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル５−｛（３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝−６−ニトロ−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（０．６０ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＡｃＯＨ（９ｍＬ）、および水（１ｍＬ）を含有する混合物へ加えた。反応混合物を、室温で２時間撹拌した。溶液をろ過し、ろ液を減圧下において濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で中和した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下において濃縮して、副題化合物（０．５１ｇ、９０％）を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ２３Ｈ３８Ｎ５Ｏ４（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝４４８．３；実測値：４４８．１。
【手続補正６８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５１】
ステップ７．  ５−アミノ−Ｎ−｛４−［（３Ｓ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル｝−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボキサミド
【化１６５】
2016505020.tif 000016
ＤＭＦ（２ｍＬ）ならびにＤＩＰＥＡ（０．０２１ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）中ｔｅｒｔ−ブチル６−アミノ−５−｛（３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（０．０４９ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボン酸（０．０３９ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（０．０６３ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の混合物を、５０℃で２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水、およびブラインで洗浄した。有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、得られた残渣を分取ＬＣ−ＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ３０×１０ｍｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、流速６０ｍＬ／分、０．１％ＴＦＡを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、Ｂｏｃ保護中間体を得た（ＬＣＭＳ（Ｍ＋１）：７８６．１）。中間体をＤＣＭ中５０％ＴＦＡ（２ｍＬ）で処理し、得られた混合物は室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下において取り除いた。残渣を分取ＬＣ−ＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ３０×１０ｍｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、流速６０ｍＬ／分、０．１５％ＮＨ４ＯＨを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、表題化合物（５ｍｇ、１０％）を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ２３Ｈ２６Ｆ２Ｎ７ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝４８６．２；実測値：４８６．１。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）：δ９．２４（ｓ，１Ｈ），７．９９（ｓ，３Ｈ），７．５６（ｍ，３Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．６３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．３５−３．６５（ｍ，５Ｈ），３．２０（ｍ，４Ｈ），２．７０（ｍ，２Ｈ），２．００（ｍ，１Ｈ），１．７８（ｍ，３Ｈ），１．４２（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ。
【手続補正６９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５７】
ステップ３．  エチル４−クロロ−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−カルボキシレート
【化１７１】
2016505020.tif 000017
１，２−ジクロロエタン（９．８ｍＬ）中エチル１−（４−メトキシベンジル）−４−オキソ−４，７−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−５−カルボキシレート（４．０ｇ、１３ｍｍｏｌ）の溶液へ、ＰＯＣｌ３（２．４ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を９０℃で３時間加熱した。冷却の後、ほとんどの揮発性物質を吸引で除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｎａ２ＣＯ３水溶液で洗浄した。有機層を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下において濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって、ヘキサン中１０〜６０％ＥｔＯＡｃで溶出するＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）装置を用いてシリカゲル上にて精製して、副題化合物（３．９ｇ、９５％）を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１７Ｈ１７ＣｌＮ３Ｏ３（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３４６．１；実測値：３４６．１。
【手続補正７０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４６１】
ステップ７．  ｔｅｒｔ−ブチル｛（３Ｓ）−１−［５−アミノ−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル］ピペリジン−３−イル｝カルバメート
【化１７５】
2016505020.tif 000018
ｔｅｒｔ−ブチル｛（３Ｓ）−１−［５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−（４−メトキシベンジル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−４−イル］ピペリジン−３−イル｝カルバメート（０．５０ｇ、０．９０ｍｍｏｌ）、およびジオキサン中ＨＣｌ（４．０Ｍ；１０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で２時間撹拌した。次いで、溶液を減圧下において蒸発させた。得られた残渣をＴＨＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、ＴＨＦ（５ｍＬ）中ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．２０ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（０．３７ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。その後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、得られた溶液をＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄した。次いで、有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下において濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーによって、ヘキサン中２０〜１００％ＥｔＯＡｃで溶出するＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）装置を用いてシリカゲル上にて精製して、０．３０ｇ（７３％）の副題化合物を得た。ＬＣＭＳ：Ｃ２４Ｈ３３Ｎ６Ｏ３（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝４５３．３；実測値：４５３．１。
【手続補正７１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４６９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４６９】
ステップ５．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｓ，５Ｒ）−５−メチルピペリジン−３−イル］カルバメート
【化１８２】
2016505020.tif 000019
１０重量％Ｐｄ炭素（１２０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（１５．０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｓ，５Ｒ）−１−ベンジル−５−メチルピペリジン−３−イル］カルバメート（０．３４ｇ、１．１ｍｍｏｌ）の溶液へ加えた。混合物を室温で水素雰囲気（１ａｔｍ．）下において１５時間撹拌した。反応を珪藻土パッドを通じてろ過し（ＭｅＯＨで溶出）、次いで減圧下において濃縮した。得られた粗生成物（０．２１ｇ、８８％）は次のステップ残渣にてさらに精製することなく直接使用した。ＬＣＭＳ：Ｃ１１Ｈ２３Ｎ２Ｏ２（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２１５．２；実測値２１５．２．  １Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ４．３３（１Ｈ，ｍ），３．４６（１Ｈ，ｍ），３．２５（１Ｈ，ｍ），２．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．６および１２．８Ｈｚ），２．１８−２．０２（３Ｈ，ｍ），１．６０（１Ｈ，ｍ），１．４３（９Ｈ，ｓ），０．８５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）ｐｐｍ。
【手続補正７２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４７１】
ステップ７．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｓ，５Ｒ）−１−（５−アミノ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−５−メチルピペリジン−３−イル］カルバメート
【化１８４】
2016505020.tif 000020
ＭｅＯＨ（２．００ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｓ，５Ｒ）−５−メチル−１−（５−ニトロ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）ピペリジン−３−イル］カルバメート（４４．５ｍｇ、０．１１８ｍｍｏｌ）の溶液へ、１０重量％Ｐｄ炭素（９．３ｍｇ、０．００８７ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下において加えた。次いで、混合物を４時間水素付加（１ａｔｍ．）した。その後、反応混合物を珪藻土パッドを通じてろ過した（ＭｅＯＨで溶出）。ろ液を減圧下において濃縮して、粗生成物を赤色の半固体（４１．０ｍｇ）として得た。粗生成物は次のステップにてさらに精製することなく直接使用した。ＬＣＭＳ：Ｃ１８Ｈ２９Ｎ４Ｏ３（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３４９．２；実測値３４９．２。
【手続補正７３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４７９】
ステップ６：  Ｎ−｛４−［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミド
ｔｅｒｔ−ブチル｛（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−［３−（｛［６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピリジン−２−イル］カルボニル｝アミノ）−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル］−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−３−イル｝カルバメート（６ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ中ＴＦＡ（４．０Ｍ；２．０ｍＬ、８．０ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１時間撹拌した。溶媒を取り除いた後、次いで残渣をＭｅＯＨ（４ｍＬ）およびＮＨ４ＯＨ溶液（０．５ｍＬ）で希釈し、ろ過した。ろ液を分取ＬＣＭＳ（ｐＨ＝１０法；ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、３０×１０ｍｍ、６０ｍＬ／分、０．１５％ＮＨ４ＯＨを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、表題化合物の２つのジアステレオ異性体を白色の粉末として得た。
【手続補正７４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４８２】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正７５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５０２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５０２】
ステップ４．  ３−アミノ−４−［（３Ｓ，５Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル］−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−７−イルアセテート
【化２０８】
2016505020.tif 000021
４−［（３Ｓ，５Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル］−３−ニトロ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−７−イルアセテート（９２．３ｍｇ、０．１８９ｍｍｏｌ）および鉄粉（２９５．６ｍｇ、５．２９３ｍｍｏｌ）の混合物へ、ＡｃＯＨ（２．０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、珪藻土パッドを通じてろ過した（ＥｔＯＡｃで溶出）。ろ液を飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮して、粗副題化合物を暗色の半固体（８６．６ｍｇ）として得た。粗生成物は次のステップでさらに精製することなく直接使用した。ＬＣＭＳ：Ｃ２１Ｈ３０Ｆ３Ｎ４Ｏ４（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝４５９．２；実測値４５９．２。
【手続補正７６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５０７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５０７】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正７７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５２４】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正７８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５３０】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正７９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５３３】
ステップ２：  ３−アミノ−Ｎ−｛４−［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミド
ｔｅｒｔ−ブチル｛（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−［３−（｛［３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピリジン−２−イル］カルボニル｝アミノ）−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル］−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−３−イル｝カルバメート（７．０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）、およびＤＣＭ中４．０Ｍ  ＴＦＡ（２．０ｍＬ）の混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下において取り除いた後、残渣をＭｅＯＨで希釈し、ろ過し、分取ＬＣ−ＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、３０×１０ｍｍ、６０ｍＬ／分、０．１％ＮＨ４ＯＨを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、表題化合物のジアステレオ異性体を両方とも、白色の粉末として得た。分析用ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ（商標）Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、５μｍ；流速３ｍＬ／分；注入量２μＬ；３分で２〜８０％Ｂ勾配（Ａ＝０．０２５％ＴＦＡを有する水、Ｂ＝ＭｅＣＮ））において、該ジアステレオ異性体は以下の特徴を持つ：
【手続補正８０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５３６】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正８１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５３９】
ステップ２：  ５−アミノ−Ｎ−｛４−［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボキサミド
ｔｅｒｔ−ブチル｛（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−［３−（｛［５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−（２，６−ジフルオロフェニル）−１，３−チアゾール−４−イル］カルボニル｝アミノ）−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル］−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−３−イル｝カルバメート（７．０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ中４．０Ｍ  ＴＦＡ（２．０ｍＬ）の混合物を、室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下において取り除いた後、残渣をＭｅＯＨで希釈し、ろ過し、分取ＬＣ−ＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、３０×１０ｍｍ、６０ｍＬ／分、０．１％ＮＨ４ＯＨを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、表題化合物のジアステレオ異性体を両方とも、白色の粉末として得た。分析用ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ（商標）Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、５μｍ；流速３ｍＬ／分；注入量２μＬ；３分で２〜８０％Ｂ勾配（Ａ＝０．０２５％ＴＦＡを有する水、Ｂ＝ＭｅＣＮ））において、該ジアステレオ異性体は以下の特徴を持つ：
【手続補正８２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５４２】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正８３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５５０】
ステップ３：  Ｎ−｛４−［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−（４−エトキシ−２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミド
ｔｅｒｔ−ブチル｛（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−［３−（｛［６−（４−エトキシ−２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピリジン−２−イル］カルボニル｝アミノ）−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル］−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−３−イル｝カルバメート（６ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ中４．０Ｍ  ＴＦＡ（２．０ｍＬ）の混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下において取り除いた後、残渣をＭｅＯＨで希釈し、ろ過し、分取ＬＣ−ＭＳ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、３０×１０ｍｍ、６０ｍＬ／分、０．１％ＮＨ４ＯＨを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、ジアステレオ異性体の両方を白色の粉末として得た。分析用ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ（商標）Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、５μｍ；流速３ｍＬ／分；注入量２μＬ；３分で２〜８０％Ｂ勾配（Ａ＝０．０２５％ＴＦＡを有する水、Ｂ＝ＭｅＣＮ））において、該ジアステレオ異性体は以下の特徴を持つ：
【手続補正８４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５５３】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正８５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５５８】
ステップ１．  メチル５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−（２，６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル）−１，３−チアゾール−４−カルボキシレート
【化２３３】
2016505020.tif 000022
バイアルへ、メチル２−ブロモ−５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１，３−チアゾール−４−カルボキシレート（実施例１、ステップ３より、１０４ｍｇ、０．３０９ｍｍｏｌ）、（２，６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル）ボロン酸（Ａｌｄｒｉｃｈより、２０７ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）、ジシクロヘキシル（２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル−２−イル）ホスフィン−（２’−アミノビフェニル−２−イル）（クロロ）パラジウム（１：１）（３７．５ｍｇ、０．０４７７ｍｍｏｌ）、およびリン酸カリウム（２７６ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を加えた。バイアルをＰＴＦＥねじ口で密封し、次いで窒素で３回パージした。１，４−ジオキサン（４．０ｍＬ）を加え、続いて脱酸素水（２．０ｍＬ）を加えた。混合物を４０℃で１時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却した。さらなる（２，６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル）ボロン酸（２６２ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）およびジシクロヘキシル（２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル−２−イル）ホスフィン−（２’−アミノビフェニル−２−イル）（クロロ）パラジウム（１：１）（４０．２ｍｇ、０．０５１１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１５時間撹拌した。混合物を珪藻土パッドを通じてろ過し（ＥｔＯＡｃで溶出）、濃縮した。残渣をシリカゲル（ヘキサン中０〜５０％ＥｔＯＡｃで溶出）上で精製して、副題化合物を白色の固体（４８．５ｍｇ、３９％）として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１７Ｈ１９Ｆ２Ｎ２Ｏ５Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝４０１．１；実測値：４０１．１。
【手続補正８６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５６４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５６４】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正８７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５７１】
ステップ１：  メチル６−（２，６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル）−５−フルオロピリジン−２−カルボキシレート
【化２３９】
2016505020.tif 000023
密封した管中において、ＴＨＦ（６．０ｍＬ）ならびに水（０．６ｍＬ）中メチル６−ブロモ−５−フルオロピリジン−２−カルボキシレート（３７４ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）および（２，６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル）ボロン酸（１５０ｍｇ、０．７９８ｍｍｏｌ）の混合物へ、フッ化カリウム（１５３ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ２で５分間パージし、続いてトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１８０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）およびトリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン（８１ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、反応混合物を１００℃で３０分間加熱した。溶液をろ過および減圧下において濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）（ヘキサン中０〜４０％ＥｔＯＡｃ）を用いて精製して、副題化合物を白色の粉末（８３．３ｍｇ、３５％）として得た。ＬＣＭＳ：Ｃ１４Ｈ１１Ｆ３ＮＯ３（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２９８．１。実測値：２９８．２。
【手続補正８８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５７７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５７７】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正８９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５８３】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正９０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５９８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５９８】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正９１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６２０】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正９２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６２３】
ステップ２．  ３−アミノ−６−（２，６−ジフルオロフェニル）ピラジン−２−カルボン酸
【化２６７】
2016505020.tif 000024
ＴＨＦ（４．０ｍＬ）および水（２．０ｍＬ）中メチル３−アミノ−６−（２，６−ジフルオロフェニル）ピラジン−２−カルボキシレート（２５８ｍｇ、０．９７３ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム一水和物（２００ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）の溶液を、６０℃で密封したバイアル中において２時間加熱した。反応混合物を外気温まで冷却し、水中１．０Ｍ塩化水素（４．８ｍＬ、４．８ｍｍｏｌ）を添加することで中和して、沈殿物を形成した。沈殿物をろ過によって集め、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で洗浄し、減圧下において乾燥して、副題化合物（１７０ｍｇ）を得た。ろ液をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で希釈し、層を分離した。有機層をＨ２Ｏ（３ｍＬ）で洗浄し、合わせた水相をＥｔＯＡｃ（３ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、減圧下において濃縮して、さらなる副題化合物を得た。粗生成物は、続く反応にてさらに精製することなく使用された（７０ｍｇ）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１１Ｈ８Ｆ２Ｎ３Ｏ２（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２５２．１；実測値：２５１．９。
【手続補正９３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６２５】
ステップ４．  ３−アミノ−Ｎ−｛４−［（３Ｓ）−３−アミノピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−（２，６−ジフルオロフェニル）ピラジン−２−カルボキサミド
ＭｅＯＨ（３００μＬ）ならびに水（３００μＬ）中３−（｛［３−アミノ−６−（２，６−ジフルオロフェニル）ピラジン−２−イル］カルボニル｝アミノ）−４−｛（３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ピペリジン−１−イル｝−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−７−イルアセテート（１８ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム［１．０］−水（１１．１ｍｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）の溶液を、外気温で１．５時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、水中１．０Ｍ塩化水素（２６０μＬ、０．２６ｍｍｏｌ）で中和した。層を分離し、有機層をＨ２Ｏ（３ｍＬ）で洗浄し、合わせた水相をＥｔＯＡｃで抽出した（３ｍＬ×３）。合わせた有機層をブライン（３ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、減圧下において濃縮して、中間体（１３ｍｇ、８７％）を得た。粗中間体を１，２−ジクロロエタン（３００μＬ）およびＴＦＡ（３００μＬ、３．８９ｍｍｏｌ）中に溶解し、得られた溶液を外気温で１．５時間撹拌した。粗反応混合物を減圧下において濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）分取Ｃ１８  ５μｍ  ＯＢＤ（商標）カラム、３０×１０ｍｍ、６０ｍＬ／分、０．０５％ＴＦＡを有するＭｅＣＮおよび水の勾配で溶出）によって精製して、表題化合物のトリス（トリフルオロ酢酸）塩を２つのジアステレオ異性体として得た。分析用ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ（商標）Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、５μｍ；流速３ｍＬ／分；注入量２μＬ；３分で２〜８０％Ｂ勾配（Ａ＝０．０２５％ＴＦＡを有する水、Ｂ＝ＭｅＣＮ））において、該ジアステレオ異性体は以下の特徴を持つ：
【手続補正９４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６２８】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正９５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６３４】
ステップ５．  ｔｅｒｔ−ブチル−［（３Ｒ，５Ｓ）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−３−イル］カルバメート
【化２７４】
2016505020.tif 000025
バイアル中のベンジル−（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−１−カルボキシレート（４１４ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解し、１０％パラジウム炭素（１００ｍｇ）を加えた。バイアルを隔壁で閉じ、水素を充填したバルーンへ接続した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶液をろ過してパラジウム炭素を取り除き、溶媒を減圧下において蒸発させて、副題化合物を無色の油（２４５ｍｇ、９２％）として得た。これは次のステップにてさらに精製することなく使用された。ＬＣＭＳ：Ｃ１２Ｈ２５Ｎ２Ｏ３（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２４５．２；実測値２４５．１。
【手続補正９６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６３６】
ステップ７．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，５Ｓ）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチル−１−（３−ニトロ−１−オキシド−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル）ピペリジン−３−イル］カルバメート
【化２７６】
2016505020.tif 000026
ｍＣＰＢＡ（２６０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（３．２ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，５Ｓ）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチル−１−（３−ニトロ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル）ピペリジン−３−イル］カルバメート（３１２ｍｇ、０．７６８ｍｍｏｌ）の混合物へ加えた。２時間後、ＬＣＭＳは出発物質の３０％のみが転換したことを示した。ｍＣＰＢＡをさらにもう数回（総量が約１０当量になるまで）、ＬＣＭＳが出発物質の消費の完了を示す（およそ７時間後）まで、加えた。次いで、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液を混合物へ加え、得られた混合物をＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し、その後減圧下において濃縮乾固した。粗副題化合物は次のステップでさらに精製することなく使用された。ＬＣＭＳ：Ｃ２０Ｈ３１Ｎ４Ｏ６（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝４２３．２；実測値４２３．２。
【手続補正９７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６４０】
ステップ１１．  Ｎ−｛４−［（３Ｒ，５Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミド
４−｛（３Ｒ，５Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−１−イル｝−３−（｛［６−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−フルオロピリジン−２−イル］カルボニル｝アミノ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−７−イルアセテート（１１８ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（１ｍＬ）およびＴＨＦ（１ｍＬ）の混合物中に溶解し、ＮａＯＨ水溶液の０．５Ｍ溶液（１ｍＬ、０．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応を１時間撹拌し、次いで減圧下において濃縮乾固した。残渣へ、ジオキサン中塩化水素の４．０Ｍ溶液（３ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間撹拌し、その後蒸発乾固させた。得られた残渣をＭｅＣＮ中に溶解し、ＲＰ−ＨＰＬＣ（ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ（商標）Ｃ１８カラム、１９ｍｍ×１００ｍｍ、粒径５μｍ、０．１％ＴＦＡを含有するＭｅＣＮ／水の勾配で溶出、流速３０ｍＬ／分）によって精製して、表題化合物のビス（トリフルオロアセテート）の４つの異なるジアステレオ異性体を白色の固体として得た。
【手続補正９８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６４５】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，７Ｒ）、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）、および（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正９９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６５３】
アミド中間体へ、ＴＨＦ（６ｍＬ）、ＭｅＯＨ（６ｍＬ）、および１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（６．３２ｍＬ、６．３２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２０分間撹拌した。揮発溶媒を減圧下において取り除いた。得られた残渣をＥｔＯＡｃで抽出した（２回）。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、その後濃縮乾固して、ｔｅｒｔ−ブチル（（３Ｓ，５Ｒ）−１−｛３−［（｛６−［２，６−ジフルオロ−４−（メトキシメチル）フェニル］−５−フルオロピリジン−２−イル｝カルボニル）アミノ］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル｝−５−メチルピペリジン−３−イル）カルバメートを第２の中間体として得た。
【手続補正１００】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６５７】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正１０１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６７３】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正１０２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６８０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６８０】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正１０３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６８２】
ステップ１．  ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−４−｛（１Ｒ，２Ｒ）−３−［（４Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−２−シクロプロピル−１−ヒドロキシ−３−オキソプロピル｝−２，２−ジメチル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレート
【化２９５】
2016505020.tif 000027
−４０℃の無水ＤＣＭ（４５ｍＬ）中（４Ｒ）−４−ベンジル−３−（シクロプロピルアセチル）−１，３−オキサゾリジン−２−オン（２．０ｇ、７．７ｍｍｏｌ）の溶液へ、ＤＣＭ（９．３ｍＬ）中１．０Ｍ四塩化チタンの溶液を窒素雰囲気下において滴加して、黄色のスラリーを形成した。１０分後、ＤＩＰＥＡ（３．３６ｍＬ、１９．３ｍｍｏｌ）を滴加し、色が黄色から濃い紫色に変わった。反応混合物を徐々に−２０℃まで、１時間撹拌しながら温めた。反応混合物を再度−４０℃まで冷却し、無水ＤＣＭ（５ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−４−ホルミル−２，２−ジメチル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレート（Ａｌｄｒｉｃｈ）（１．８ｇ、７．８５ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を徐々に０℃まで１時間かけて温め、次いでさらに１．５時間０℃で撹拌した。反応を、飽和ＮＨ４Ｃｌ（水溶液）（１５ｍＬ）を添加することでクエンチした。得られた２つの層を分離した後すぐに、有機層を水およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧下において濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル１２０ｇ、０〜６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）によって精製して、副題化合物（１．９ｇ、５０％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ２６Ｈ３６Ｎ２Ｏ７Ｎａに対する計算値：ｍ／ｚ＝５１１．２［Ｍ＋Ｎａ］＋、実測値５１１．１。
【手続補正１０４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６８５】
ステップ４．  ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−４−（（１Ｒ，２Ｓ）−３−アジド−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−シクロプロピルプロピル）−２，２−ジメチル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレート
【化２９８】
2016505020.tif 000028
無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−４−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−シクロプロピル−３−ヒドロキシプロピル）−２，２−ジメチル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレート（１．３ｇ、３．０ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．６ｇ、６．１ｍｍｏｌ）の溶液へ、ＤＩＡＤ（１．２ｍＬ、５．９ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下において滴加した。添加が終わるとすぐに、沈殿物が形成された。反応混合物を３０分間撹拌し、次いで無水ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中ジフェニルホスホン酸アジド（１．３ｍＬ、６．２ｍｍｏｌ）を加えた。外気温で３時間撹拌した後、揮発有機溶媒を減圧下において取り除き、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（１２０ｇのシリカゲル、０〜１５％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンで溶出）によって精製して、副題化合物を淡黄色の油（１．１８ｇ、８６％）として得た。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１７Ｈ３５Ｎ４Ｏ２Ｓｉに対する計算値：ｍ／ｚ＝３５５．３０［Ｍ−Ｂｏｃ＋Ｈ］＋、実測値：３５５．１。
【手続補正１０５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６８６】
ステップ５．  ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−５−アジド−４−シクロプロピル−１，３−ジヒドロキシペンタン−２−イルカルバメート
【化２９９】
2016505020.tif 000029
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｒ）−４−（（１Ｒ，２Ｓ）−３−アジド−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−シクロプロピルプロピル）−２，２−ジメチル−１，３−オキサゾリジン−３−カルボキシレート（１．１６ｇ、２．５５ｍｍｏｌ）の溶液を、氷浴にて冷却し、次いでＴＦＡ（４．９ｍＬ、６４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を外気温まで温め、３０分間撹拌した。揮発有機溶媒を減圧下において取り除き、残渣をトルエンで数回共沸蒸発させた。その後、残渣を無水ＤＣＭ（１８ｍＬ）中に溶解し、ＤＩＰＥＡ（０．９９ｇ、７．６ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．８４ｇ、３．８ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を外気温で４時間撹拌した。粗反応混合物を減圧下において濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル４０ｇ、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭで溶出）によって精製して、所望の生成物（０．３３ｇ、４３％）およびｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ）−４−アジド−２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−シクロプロピル−１−（ヒドロキシメチル）ブチル］カルバメート（０．５０ｇ、５０％）を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１３Ｈ２５Ｎ４Ｏ４に対する計算値：ｍ／ｚ＝３０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋、実測値：３０１．２。ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ）−４−アジド−２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−シクロプロピル−１−（ヒドロキシメチル）ブチル］カルバメートについて：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１９Ｈ３８Ｎ４Ｏ４ＳｉＮａ［Ｍ＋Ｎａ］＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝４３７．３、実測値４３７．０。
【手続補正１０６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６８８】
ステップ７．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−５−シクロプロピル−４−ヒドロキシピペリジン−３−イル］カルバメート
【化３０１】
2016505020.tif 000030
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−５−アジド−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−シクロプロピル−３−ヒドロキシペンチル４−メチルベンゼンスルホネート（０．５０６ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．３１ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）、および１０％パラジウム活性炭素（乾燥基準）（湿潤、ＤｅｇｕｓｓａタイプＥ１０１  ＮＥ／Ｗ）（０．１ｇ）の混合物を、バルーンを介して導入された水素の雰囲気下において撹拌した。３時間後、粗反応混合物を珪藻土パッドを通じてろ過し、固体を充分にＭｅＯＨで洗浄した。揮発有機溶媒を減圧下において取り除き、残渣を高真空下において乾燥して、副題化合物を固体として得た。粗生成物は、続く置換反応にてさらに精製することなく直接使用した。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ１３Ｈ２５Ｎ２Ｏ３に対する計算値：ｍ／ｚ＝２５７．２［Ｍ＋Ｈ］＋、実測値２５７．２。
【手続補正１０７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６９２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６９２】
ステップ１１．（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−［７−（アセチルオキシ）−３−アミノ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−シクロプロピルピペリジン−４−イルアセテート
【化３０５】
2016505020.tif 000031
ＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１．０ｍＬ）中４−｛（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルオキシ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−シクロプロピルピペリジン−１−イル｝−３−ニトロ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−７−イルアセテート（０．０５５ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液を脱酸素化し、窒素でパージし、その後１０％パラジウム活性炭素（乾燥基準）（湿潤、ＤｅｇｕｓｓａタイプＥ１０１  ＮＥ／Ｗ）（０．０２５ｇ）を加えた。反応混合物を、バルーンを介して導入した水素雰囲気下において２時間撹拌した。粗反応混合物を珪藻土パッドを通じてろ過し、固体を充分にＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨで洗浄した。ろ液を減圧下において濃縮して、副題化合物（０．０５２ｇ、１００％）を得た。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ２５Ｈ３７Ｎ４Ｏ６に対する計算値：ｍ／ｚ＝４８９．３［Ｍ＋Ｈ］＋、実測値４８９．０。
【手続補正１０８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６９６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６９６】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体に相当する。
【手続補正１０９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７２１】
ステップ５．  Ｎ−｛４−［（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノ−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル］−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−［２，６−ジフルオロ−４−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）フェニル］−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミド
【化３１７】
2016505020.tif 000032
ＭｅＯＨ（０．８ｍＬ）、ＴＨＦ（０．８ｍＬ）、および１．０Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（０．８ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）中４−［（３Ｓ，５Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル］−３−［（｛６−［２，６−ジフルオロ−４−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）フェニル］−５−フルオロピリジン−２−イル｝カルボニル）アミノ］−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−７−イルアセテート（０．０１５ｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で０．５時間撹拌した。その後、溶液を減圧下において濃縮し、残った水相をＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を減圧下において濃縮乾固した。残渣をジオキサン中４．０Ｍ  ＨＣｌ（０．２０ｍＬ、０．８０ｍｍｏｌ）で２０分間処理した。次いで、反応混合物を減圧下において濃縮した。残渣を４．５ｍＬのＭｅＯＨ中に溶解し、ＮＨ４ＯＨ溶液で中和し、分取ＬＣＭＳ（Ｗａｔｅｒｓ  ＳｕｎＦｉｒｅ（商標）Ｃ１８カラム、１９ｍｍ×１００ｍｍ、粒径５μｍ、０．１％ＮＨ４ＯＨを含有するＭｅＣＮ／水の勾配で溶出、流速３０ｍＬ／分）によって精製して、表題化合物の２つの分離したジアステレオ異性体を白色の粉末として得た。
【手続補正１１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７２４】
該ジアステレオ異性体は、表題化合物の（７Ｒ）および（７Ｓ）ジアステレオ異性体、Ｎ−｛４−［（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノ−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル］−（７Ｒ）−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−［２，６−ジフルオロ−４−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）フェニル］−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミド、およびＮ−｛４−［（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノ−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル］−（７Ｓ）−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−［２，６−ジフルオロ−４−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）フェニル］−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミドに相当する。別のエナンチオマーである、Ｎ−｛４−［（３Ｒ，５Ｓ）−３−アミノ−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル］−（７Ｒ）−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−［２，６−ジフルオロ−４−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）フェニル］−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミド、およびＮ−｛４−［（３Ｒ，５Ｓ）−３−アミノ−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル］−（７Ｓ）−７−ヒドロキシ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−３−イル｝−６−［２，６−ジフルオロ−４−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）フェニル］−５−フルオロピリジン−２−カルボキサミドを、ステップ１よりｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，５Ｓ）−１−（３−ニトロ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−４−イル）−５−（トリフルオロメチル）ピペリジン−３−イル］カルバメート（エナンチオマー１）を使用することから開始して類似の経路で調製する。
【手続補正１１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７２９】
ステップ２．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−３−イル］カルバメート
【化３２３】
2016505020.tif 000033
ＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）中ベンジル（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−１−カルボキシレート（１００ｍｇ、０．２６５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液へ、１０重量％Ｐｄ炭素（３３ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で水素雰囲気（バルーン圧）下において３時間撹拌した。反応を珪藻土パッドを通じてろ過し（ＭｅＯＨで溶出）、次いで減圧下において濃縮した。得られた粗生成物は次のステップでさらに精製することなく直接使用した（６０ｍｇ、９２％）。ＬＣＭＳ：Ｃ１２Ｈ２５Ｎ２Ｏ３（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝２４５．２；実測値２４５．０。
【手続補正１１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７３１】
ステップ４．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−（５−アミノ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−３−イル］カルバメート
【化３２５】
2016505020.tif 000034
ＭｅＯＨ（３．０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチル−１−（５−ニトロ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）ピペリジン−３−イル］カルバメート（６８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液へ、１０重量％Ｐｄ炭素（２５ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で水素雰囲気（バルーン圧）下において６時間撹拌した。混合物を珪藻土パッドを通じてろ過し（ＭｅＯＨで溶出）、その後減圧下において濃縮した。得られた粗生成物は、次のステップでさらに精製することなく直接使用した（６２ｍｇ、９８％）。ＬＣＭＳ：Ｃ１９Ｈ３１Ｎ４Ｏ４（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３７９．２；実測値３７９．０。
【手続補正１１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７３４】
ステップ１．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−３−イル］カルバメート
【化３２８】
2016505020.tif 000035
ＭｅＯＨ（４．０ｍＬ）中ベンジル（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−１−カルボキシレート（８１ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液へ、１０重量％Ｐｄ炭素（２９ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で水素雰囲気（バルーン圧）下において３時間撹拌した。反応混合物を珪藻土パッドを通じてろ過し（ＭｅＯＨで溶出）、その後減圧下において濃縮した。得られた粗生成物は、次のステップでさらに精製することなく直接使用した（４６ｍｇ、８８％）。ＬＣＭＳ：計算値Ｃ１２Ｈ２５Ｎ２Ｏ３（Ｍ＋Ｈ）＋に対する：ｍ／ｚ＝２４５．２；実測値２４５．０。
【手続補正１１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７３６】
ステップ３．  ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（５−アミノ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチルピペリジン−３−イル］カルバメート
【化３３０】
2016505020.tif 000036
ＭｅＯＨ（３．０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル［（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−ヒドロキシ−４，５−ジメチル−１−（５−ニトロ−２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）ピペリジン−３−イル］カルバメート（５１ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液へ、１０重量％Ｐｄ炭素（１９ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で水素雰囲気（バルーン圧）下において６時間撹拌した。混合物を珪藻土パッドを通じてろ過し（ＭｅＯＨで溶出）、その後減圧下において濃縮した。得られた粗生成物は、次のステップでさらに精製することなく直接使用した（４４ｍｇ、９２％）。ＬＣＭＳ：Ｃ１９Ｈ３１Ｎ４Ｏ４（Ｍ＋Ｈ）＋に対する計算値：ｍ／ｚ＝３７９．２；実測値３７９．０。
【手続補正１１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７４２】
実施例Ｂ．  Ｐｉｍ細胞アッセイ
本発明の１つ以上の化合物を、ＰＩＭの阻害活性について少なくとも１つの以下の細胞アッセイに従って試験した。Ｐｉｍキナーゼ活性について以下に開示される細胞アッセイ条件下において試験したときに１０μＭ以下のＩＣ５０を有する本発明の化合物は、活性となり得、かつ活性であると判断された。