【手続補正書】
【提出日】平成28年6月10日(2016.6.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｍｉＲＮＡのシード領域と相補的な配列を含むオリゴヌクレオチドであって、該配列が、少なくとも５つのロックド核酸（ＬＮＡ）を含み、該オリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの非ロックドヌクレオチドを含み、該オリゴヌクレオチドが、５’末端および／または３’末端にＬＮＡを含む、オリゴヌクレオチド。
【請求項２】
３つ以下の連続したＬＮＡを含む、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３】
少なくとも１６ヌクレオチドの長さである、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４】
１６ヌクレオチドの配列を含むオリゴヌクレオチドであって、該配列が、少なくとも５つのロックド核酸（ＬＮＡ）、５’末端にあるＬＮＡ、３’末端にあるＬＮＡ、および３つ以下の連続したＬＮＡを含む、オリゴヌクレオチド。
【請求項５】
前記配列の５’末端から３’末端までの、１位、５位、８位、１０位、および１６位がＬＮＡである、請求項４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項６】
前記配列の５’末端から３’末端までの、１位、６位、１０位、１１位、１３位、および１６位がＬＮＡである、請求項４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項７】
前記配列の５’末端から３’末端までの、１位、５位、６位、８位、１０位、１１位、１３位、１５位、および１６位がＬＮＡである、請求項４に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項８】
前記非ロックドヌクレオチドの少なくとも１つが２’デオキシ、２’Ｏ−アルキル、または２’ハロである、請求項１から７のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項９】
少なくとも１つのＬＮＡが２’−４’メチレン架橋を有する、請求項１から８のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１０】
５’キャップ構造、３’キャップ構造、または５’および３’キャップ構造を有する、請求項１から９のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１１】
１つまたは複数のホスホロチオエート結合を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１２】
ペンダント親油基または親水基をさらに含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１３】
約１８〜５０ヌクレオチドの長さである、請求項１から１２のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１４】
前記オリゴヌクレオチドが成熟ｍｉＲＮＡのヌクレオチド配列と実質的にまたは完全に相補的である配列を含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１５】
前記ｍｉＲＮＡがｍｉＲ−１５ａ、ｍｉＲ−１５ｂ、ｍｉＲ−１６−１、ｍｉＲ−１６−２、ｍｉＲ−２４、ｍｉＲ−２５、ｍｉＲ−２６ａ、ｍｉＲ−４９７、ｍｉＲ−１９５、ｍｉＲ−４２４、ｌｅｔ７ファミリーのメンバー、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−１９９ａ−ｂ、ｍｉＲ−２１４、ｍｉＲ−１０ａ−ｂ、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−１２５ｂ、ｍｉＲ−１４６ａ−ｂ、ｍｉＲ−２２１、ｍｉＲ−２２２、ｍｉＲ−３０ファミリーのメンバー、ｍｉＲ−１２６、ｍｉＲ−１３３、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１４３、ｍｉＲ−１４５、ｍｉＲ−４８６、ｍｉＲ−９２ａ、ｍｉＲ−３２０、ｍｉＲ−１−１、ｍｉＲ−１−２、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−３７８、ｍｉＲ−３７８＊、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−３４ａ、ｍｉＲ−３４ｂ、ｍｉＲ−３４ｃ、ｍｉＲ−２９、またはｍｉＲ−３３である、請求項１から４および請求項１４のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項１６】
有効量の請求項１から１５のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド、または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１７】
前記薬学的に許容される担体が、コロイド分散系、高分子複合体、ナノカプセル、ナノ粒子、ミクロスフェア、ビーズ、水中油エマルション、ミセル、混合ミセル、またはリポソームを含む、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記薬学的に許容される担体または希釈剤が、生理食塩水から本質的になる、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
対象におけるｍｉＲＮＡの活性に付随するまたはそれに媒介される状態を予防または処置する方法において使用するための、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記状態が心臓の状態または血管の状態である、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記心臓の状態が病的心肥大、心筋梗塞、心筋虚血、または心不全である、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記医薬組成物が、非経口投与によって、または心臓組織への直接注射によって投与される、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記非経口投与が静脈内投与、皮下投与、腹腔内投与、または筋肉内投与である、請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記組成物が、経口投与、経皮投与、持続放出投与、制御放出投与、遅延放出投与、坐薬投与、カテーテル投与、または舌下投与によって投与される、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記対象がヒトである、請求項１９から２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記オリゴヌクレオチドが２５ｍｇ／ｋｇ以下の用量で送達される、請求項１９から２５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記オリゴヌクレオチドが生理食塩水中で製剤化され、皮下投与される、請求項１９から２６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
対象におけるＲＮＡの発現に付随するまたはそれに媒介される状態を予防または処置する方法も提供される。当該方法は、対象に、本明細書に開示されているオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物を投与することを含んでよい。一実施形態では、対象におけるｍｉＲＮＡの活性に付随するまたはそれに媒介される状態を予防または処置する方法は、対象に、本明細書に開示されているオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物を投与することを含む。別の実施形態では、対象におけるｍＲＮＡの活性に付随するまたはそれに媒介される状態を予防または治療する方法は、対象に、本明細書に開示されているオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物を投与することを含む。状態は、病的心肥大、心筋梗塞、心筋虚血、虚血再灌流傷害、心筋症、または心不全などの心臓の状態であってよい。医薬組成物は、非経口投与によって、例えば、静脈内投与、皮下投与、腹腔内投与、または筋肉内投与によって投与することができる。一部の実施形態では、投与は、心臓組織に直接注射することによるものである。さらに一部の実施形態では、組成物を、経口投与、経皮投与、持続放出投与、制御放出投与、遅延放出投与、坐薬投与、カテーテル投与、または舌下投与によって投与する。さらに、対象はヒトであってよい。一部の実施形態では、本明細書に開示されているオリゴヌクレオチドを約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの用量で送達する。一部の実施形態では、本明細書に開示されているオリゴヌクレオチドを約１００ｍｇ／ｋｇ以下、約５０ｍｇ／ｋｇ以下、約２５ｍｇ／ｋｇ以下、または約１０ｍｇ／ｋｇ以下の用量で送達する。一実施形態では、オリゴヌクレオチドを生理食塩水中で製剤化し、皮下投与する。
本発明は、例えば、以下の項目も提供する。
（項目１）
ｍｉＲＮＡのシード領域と相補的な配列を含むオリゴヌクレオチドであって、該配列が、少なくとも５つのロックド核酸（ＬＮＡ）を含み、該オリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの非ロックドヌクレオチドを含み、同じ配列およびＬＮＡ組成、ならびに異なるＬＮＡモチーフを含む第２のオリゴヌクレオチドと比較してｉｎ  ｖｉｖｏ有効性が増大している、オリゴヌクレオチド。
（項目２）
５’末端にＬＮＡを含む、項目１に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目３）
３’末端にＬＮＡを含む、項目１または２に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目４）
３つ以下の連続したＬＮＡを含む、項目１から３のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目５）
少なくとも１６ヌクレオチドの長さである、項目１から４のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目６）
１６ヌクレオチドの配列を含むオリゴヌクレオチドであって、該配列が、少なくとも５つのロックド核酸（ＬＮＡ）、５’末端にあるＬＮＡ、３’末端にあるＬＮＡ、および３つ以下の連続したＬＮＡを含む、オリゴヌクレオチド。
（項目７）
前記配列の５’末端から３’末端までの、１位、５位、６位、８位、１０位、１１位、１３位、１５位、および１６位がＬＮＡである、項目６に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目８）
前記非ロックドヌクレオチドの少なくとも１つが２’デオキシである、項目１から７のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目９）
前記非ロックドヌクレオチドの全てが２’デオキシである、項目１から８のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１０）
少なくとも１つの非ロックドヌクレオチドが２’Ｏ−アルキルまたは２’ハロである、項目１から８のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１１）
少なくとも１つのＬＮＡが２’−４’メチレン架橋を有する、項目１から１０のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１２）
５’キャップ構造、３’キャップ構造、または５’および３’キャップ構造を有する、項目１から１１のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１３）
１つまたは複数のホスホロチオエート結合を含む、項目１から１２のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１４）
完全にホスホロチオエート結合している、項目１３に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１５）
１つ〜３つのリン酸結合を有する、項目１３に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１６）
ペンダント親油基または親水基をさらに含む、項目１から１５のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１７）
約１８〜５０ヌクレオチドの長さである、項目１から１６のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１８）
ｍｉＲＮＡ阻害剤である、項目１から１７のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目１９）
前記配列がｍｉＲＮＡのヌクレオチド配列と実質的に相補的である、項目１から１８のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２０）
ｍｉＲＮＡと完全に相補的である、項目１から１８のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２１）
前記ｍｉＲＮＡが心臓組織において発現される、項目１から５および項目１８から２０のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２２）
前記ｍｉＲＮＡが心臓組織において選択的に発現される、項目１から５および項目１８から２０のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２３）
前記ｍｉＲＮＡが表１または表２から選択される、項目１から５および項目１８から２０のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２４）
前記ｍｉＲＮＡがｍｉＲ２０８ａ、ｍｉＲ２０８ｂ、またはｍｉＲ−４９９ではない、項目２３に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２５）
前記ｍｉＲＮＡがｍｉＲ−１５ａ、ｍｉＲ−１５ｂ、ｍｉＲ−１６−１、ｍｉＲ−１６−２、ｍｉＲ−２４、ｍｉＲ−２５、ｍｉＲ−２６ａ、ｍｉＲ−４９７、ｍｉＲ−１９５、ｍｉＲ−４２４、ｌｅｔ７ファミリーのメンバー、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−１９９ａ−ｂ、ｍｉＲ−２１４、ｍｉＲ−１０ａ−ｂ、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−１２５ｂ、ｍｉＲ−１４６ａ−ｂ、ｍｉＲ−２２１、ｍｉＲ−２２２、ｍｉＲ−３０ファミリーのメンバー、ｍｉＲ−１２６、ｍｉＲ−１３３、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１４３、ｍｉＲ−１４５、ｍｉＲ−４８６、ｍｉＲ−９２ａ、ｍｉＲ−３２０、ｍｉＲ−１−１、ｍｉＲ−１−２、ｍｉＲ−４５１、ｍｉＲ−３７８、ｍｉＲ−３７８＊、ｍｉＲ−９２、ｍｉＲ−３４ａ、ｍｉＲ−３４ｂ、ｍｉＲ−３４ｃ、ｍｉＲ−２９、またはｍｉＲ−３３である、項目１から５および項目１８から２０のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２６）
前記配列がｍＲＮＡのヌクレオチド配列と実質的に相補的である、項目６から１７のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２７）
前記配列がｍＲＮＡのヌクレオチド配列と完全に相補的である、項目６から１７のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２８）
同じ配列およびＬＮＡ組成、ならびに異なるＬＮＡモチーフを含む第２のオリゴヌクレオチドと比較してｉｎ  ｖｉｖｏ有効性が増大している、項目６から２７のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
（項目２９）
有効量の項目１から２８のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド、または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物。
（項目３０）
前記薬学的に許容される担体が、コロイド分散系、高分子複合体、ナノカプセル、ナノ粒子、ミクロスフェア、ビーズ、水中油エマルション、ミセル、混合ミセル、またはリポソームを含む、項目２９に記載の医薬組成物。
（項目３１）
前記薬学的に許容される担体または希釈剤が、生理食塩水から本質的になる、項目２９に記載の医薬組成物。
（項目３２）
細胞におけるｍｉＲＮＡの活性を低下させまたは阻害する方法であって、該細胞を項目１から２５のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチドと接触させることを含む、方法。
（項目３３）
細胞におけるｍＲＮＡの発現を低下させる方法であって、該細胞を項目６から１７、２６および２７のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチドと接触させることを含む、方法。
（項目３４）
前記細胞が哺乳動物細胞である、項目３２または３３に記載の方法。
（項目３５）
前記細胞が心臓細胞である、項目３２または３３に記載の方法。
（項目３６）
前記細胞がｉｎ  ｖｉｖｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏにある、項目３２または３３に記載の方法。
（項目３７）
対象におけるｍＲＮＡの発現に付随するまたはそれに媒介される状態を予防または処置する方法であって、該対象に項目６から１７、２６および２７のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物を投与することを含む、方法。
（項目３８）
対象におけるｍｉＲＮＡの活性に付随するまたはそれに媒介される状態を予防または処置する方法であって、該対象に項目１から２５のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物を投与することを含む、方法。
（項目３９）
前記状態が心臓の状態または血管の状態である、項目３７または３８に記載の方法。
（項目４０）
前記心臓の状態が病的心肥大、心筋梗塞、心筋虚血、または心不全である、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
前記医薬組成物を、非経口投与することによって、または心臓組織に直接注射することによって投与する、項目３７から４０のいずれか一項に記載の方法。
（項目４２）
前記非経口投与が静脈内投与、皮下投与、腹腔内投与、または筋肉内投与である、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記組成物を、経口投与、経皮投与、持続放出投与、制御放出投与、遅延放出投与、坐薬投与、カテーテル投与、または舌下投与によって投与する、項目３７から４０のいずれか一項に記載の方法。
（項目４４）
前記対象がヒトである、項目３８から４３のいずれか一項に記載の方法。
（項目４５）
前記オリゴヌクレオチドを２５ｍｇ／ｋｇ以下の用量で送達する、項目３８から４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記オリゴヌクレオチドを生理食塩水中で製剤化し、皮下投与する、項目３８から４５のいずれか一項に記載の方法。