【手続補正書】
【提出日】平成28年7月14日(2016.7.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）融合タンパク質又はその断片の１４８〜２１６位からのアミノ酸残基（例えば、ＲＳＶ融合タンパク質の１９６〜２０９位からのアミノ酸残基）、及び／又はＲＳＶ融合タンパク質の６２〜６９位若しくは６２〜７６位からのアミノ酸残基に特異的に結合することができる、モノクローナル抗体及びその抗原結合断片であって、
前記モノクローナル抗体が、１）配列番号２０に記載される重鎖ＣＤＲ１、２）配列番号２１に記載される重鎖ＣＤＲ２、３）配列番号２２に記載される重鎖ＣＤＲ３、４）配列番号２３に記載される軽鎖ＣＤＲ１、５）配列番号２４に記載される軽鎖ＣＤＲ２、及び６）配列番号２５に記載される軽鎖ＣＤＲ３のＣＤＲを含み；
好ましくは、前記モノクローナル抗体が、下記の特徴の１つ以上を有する：
（１）前記モノクローナル抗体が、ａ）配列番号１７に記載される重鎖可変領域及びｂ）配列番号１９に記載される軽鎖可変領域を含み；
（２）前記モノクローナル抗体又はその抗原結合断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、ｄＡｂ、相補性決定領域断片、単鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、マウス抗体、ウサギ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、キメラ抗体（例えば、ヒトマウスキメラ抗体）、又は二重特異的又は多重特異的抗体から選択され；
（３）前記モノクローナル抗体が非ＣＤＲ領域を含み、前記非ＣＤＲ領域がマウス種以外の種に由来し、例えば、ヒト抗体に由来し；
（４）前記モノクローナル抗体が、ＲＳＶに特異的に結合し、前記ウイルスに関する中和活性を有し；
（５）前記モノクローナル抗体が、ポスト−Ｆタンパク質に結合しない又は実質的に結合しないが、プレ−Ｆタンパク質に結合し、それを安定化し；
（６）前記モノクローナル抗体が、中国タイプカルチャーコレクションセンター（ＣＣＴＣＣ）に寄託されており、ＣＣＴＣＣの寄託番号：Ｃ２０１２１４７を有するハイブリドーマ細胞系５Ｃ４によって産生されるモノクローナル抗体に由来する又はこの抗体である、上記モノクローナル抗体及びその抗原結合断片。
【請求項２】
中国タイプカルチャーコレクションセンター（ＣＣＴＣＣ）に寄託されており、ＣＣＴＣＣの寄託番号：Ｃ２０１２１４７を有するハイブリドーマ細胞系５Ｃ４。
【請求項３】
プレ−Ｆタンパク質を安定化する、又は試料中のプレ−Ｆタンパク質の存在若しくはレベルを検出する、又は対象がＲＳＶに感染しているかどうかを診断するための方法であって、請求項１に記載のモノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片、又はＤ２５若しくはＡＭ２２モノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片を用いるステップを含む上記方法。
【請求項４】
プレ−Ｆタンパク質又は抗原−抗体複合体を発現させるための方法であって、請求項１に記載のモノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片又はＤ２５若しくはＡＭ２２モノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片をコードする核酸、及びＦタンパク質をコードする核酸を細胞中で共発現させるステップを含む上記方法。
【請求項５】
（１）請求項１に記載のモノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片；又は
（２）請求項１に記載のモノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片又はＤ２５若しくはＡＭ２２モノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片をコードする核酸、及びＦタンパク質をコードする核酸
を含むキット。
【請求項６】
単離されたエピトープペプチド又はそのバリアントであって、前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質又はその断片の１４８〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、少なくともＲＳＶ融合タンパク質の１９６〜２０９位からのアミノ酸残基を含み、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し、
好ましくは、前記単離されたエピトープペプチド又はそのバリアントが、下記からなる群から選択される：
（１）前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１９６〜２０９位からのアミノ酸残基からなり、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３又は４）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し；
（２）前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１９６〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し；
（３）前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１８５〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し；
（４）前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１８５〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、１８５〜１９４位からのアミノ酸が、前記タンパク質の二次構造においてβシートを形成し、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し；
（５）前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１７６〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し；
（６）前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１７６〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、１７６〜１８１位からのアミノ酸及び１８５〜１９４位からのアミノ酸残基が、前記タンパク質の二次構造においてβシートを形成し、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し；
（７）前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１４８〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し；及び
（８）前記エピトープペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１４８〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、１７６〜１８１位からのアミノ酸及び１８５〜１９４位からのアミノ酸が、前記タンパク質の二次構造においてβシートを形成し、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持する、上記単離されたエピトープペプチド又はそのバリアント。
【請求項７】
第１のペプチド及び第２のペプチドからなる単離されたエピトープペプチド又はそのバリアントであって、前記第１のペプチドが、請求項６で定義される単離されたエピトープペプチドからなり、前記第２のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の６２〜６９位又は６２〜７６位からのアミノ酸残基からなり、前記バリアントが、それが由来するエピトープペプチドと単に１つ又はいくつかの（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８又は９）アミノ酸残基の保存的置換によって異なり且つそれが由来するエピトープペプチドの生物学的機能を保持し；
前記第１のペプチド及び前記第２のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質のプレ−Ｆコンホメーションに存在する空間的な構造を共に形成し；
好ましくは、前記第１のペプチドが、下記の１つである：
（１）前記第１のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１９６〜２０９位からのアミノ酸残基からなり；
（２）前記第１のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１９６〜２１６位からのアミノ酸残基からなり；
（３）前記第１のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１８５〜２１６位からのアミノ酸残基からなり；
（４）前記第１のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１８５〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、１８５〜１９４位からのアミノ酸が、前記タンパク質の二次構造においてβシートを形成し；
（５）前記第１のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１７６〜２１６位からのアミノ酸残基からなり；
（６）前記第１のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１７６〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、１７６〜１８１位からのアミノ酸及び１８５〜１９４位からのアミノ酸が、前記タンパク質の二次構造においてβシートを形成し；
（７）前記第１のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１４８〜２１６位からのアミノ酸残基からなり；及び
（８）前記第１のペプチドが、ＲＳＶ融合タンパク質の１４８〜２１６位からのアミノ酸残基からなり、１７６〜１８１位からのアミノ酸及び１８５〜１９４位からのアミノ酸が、前記タンパク質の二次構造においてβシートを形成する、
上記単離されたエピトープペプチド又はそのバリアント。
【請求項８】
請求項６又は７に記載の単離されたエピトープペプチド又はそのバリアント及び担体タンパク質を含む組換えタンパク質であって、天然に存在するタンパク質又はその断片ではない上記組換えタンパク質。
【請求項９】
下記の１つをコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸分子：
（１）請求項１に記載のモノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片；
（２）請求項１に記載のモノクローナル抗体の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域；
（３）請求項６若しくは７に記載のエピトープペプチド若しくはそのバリアント又は
（４）請求項８に記載の組換えタンパク質。
【請求項１０】
請求項１８９に記載の単離された核酸分子を含むベクター。
【請求項１１】
請求項９に記載の単離された核酸分子又は請求項１０に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項１２】
薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤及び下記を含む薬学的組成物：
請求項１に記載のモノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片、
請求項６若しくは７に記載のエピトープペプチド若しくはそのバリアント、
請求項８に記載の組換えタンパク質、並びに薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤（例えば、アジュバント）、
請求項９に記載の単離された核酸分子、又は
請求項１０に記載のベクター
。
【請求項１３】
ＲＳＶに特異的に結合しそれを中和し、Ｆタンパク質のプレ−Ｆコンホメーションを安定化し維持する能力のある抗体を産生するための方法であって、
１）抗体が動物において生成されるように、非ヒト動物（例えば、マウス）を請求項６若しくは７に記載のエピトープペプチド若しくはそのバリアント又は請求項８に記載の組換えタンパク質で免疫化するステップ；及び
２）ＲＳＶに関する中和活性を有するが、ポスト−Ｆタンパク質と反応性ではない抗体をスクリーニングするステップ
を含む上記方法。
【請求項１４】
対象におけるＲＳＶ感染又はＲＳＶ感染に関連する疾患（例えば、乳児の肺炎などの肺炎）を防止する、治療する又は阻害するために使用される、請求項１に記載のモノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片又は請求項６若しくは７に記載のエピトープペプチド若しくはそのバリアント又は請求項８に記載の組換えタンパク質又は請求項９に記載の単離された核酸分子又は請求項１０に記載のベクター。
【請求項１５】
Ｆタンパク質のプレ−Ｆコンホメーションとポスト−Ｆコンホメーションとを区別するための方法であって、請求項１に記載のモノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片、又はＤ２５若しくはＡＭ２２モノクローナル抗体若しくはその抗原結合断片を用いるステップを含む上記方法。