【手続補正書】
【提出日】平成28年9月6日(2016.9.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
処理された微小血管組織を含む組成物であって、
前記処理された微小血管組織が、単離された多能性細胞、または多能性細胞もしくは前記微小血管組織から得たもしくはそれに由来する細胞膜を含み、
前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有し、
前記組成物が滅菌されており、かつ／または前記組成物内のウイルスが不活化されている、
組成物。
【請求項２】
（ａ）前記細胞または組織が培養されていない；
（ｂ）前記組成物中に存在する前記細胞の５０％以下が生存可能である；あるいは
（ｃ）室温付近で少なくとも１カ月保管した場合に、測定可能な血管新生活性または抗炎症活性を保持する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
（ａ）前記組成物中に存在する前記細胞の１０％以下が生存可能である；
（ｂ）前記組成物中に存在する前記細胞の実質的に全てが生存不可能である；あるいは
（ｃ）前記細胞の少なくとも１％がトリパンブルーを排除する、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
（ａ）乾燥、凍結乾燥または凍結保存されている；
（ｂ）１つまたは複数の血管壁細胞外マトリックス成分を含む；あるいは
（ｃ）放射線照射に曝露することによって滅菌されている、請求項１から３までのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
（ａ）賦形剤を含む；
（ｂ）植え込み型足場またはマトリックスをさらに含む；
（ｃ）静脈内投与用に製剤化されている；
（ｄ）前記細胞または組織が、哺乳動物ドナー、場合によってヒトから得たものである；あるいは
（ｅ）前記細胞が、幹細胞または前駆細胞を含む、請求項１から３までのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
単離された多能性細胞を含む滅菌された組成物。
【請求項７】
生存可能な細胞を全く含まない、請求項６に記載の滅菌された組成物。
【請求項８】
（ａ）多能性細胞の１０種以上の成分を含む；
（ｂ）インタクトな細胞を全く含まない；
（ｃ）トリパンブルーを排除するが増殖はしない多能性細胞を含む；
（ｄ）１または複数の血管壁細胞外マトリックス成分を含む；あるいは
（ｅ）前記組成物中に存在する多能性細胞のうちの少なくとも５０％または少なくとも９０％がトリパンブルーを排除するが増殖はしない；
請求項６に記載の滅菌された組成物。
【請求項９】
滅菌の乾燥した組成物を含む、水分不透過性の容器であって、前記組成物が、単離された多能性細胞、または処理された微小血管組織、または前記細胞もしくは組織から得たもしくはそれに由来する細胞膜を含み、前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有し、前記組成物が滅菌されており、かつ／または前記組成物内のウイルスが不活化されており、前記組成物が室温付近で少なくとも１カ月保管した場合に、測定可能な血管新生活性または抗炎症活性を保持している容器。
【請求項１０】
（ａ）前記細胞または組織が培養されていない；あるいは
（ｂ）前記組成物中に存在する前記細胞の５０％以下が生存可能である、請求項９に記載の水分不透過性の容器。
【請求項１１】
（ａ）前記組成物中に存在する前記細胞の１０％以下が生存可能である；
（ｂ）前記組成物中に存在する前記細胞の実質的に全てが生存不可能である；
（ｃ）前記細胞の少なくとも１％がトリパンブルーを排除する；
（ｄ）前記組成物が賦形剤を含む；
（ｅ）前記組成物が、植え込み型足場またはマトリックスをさらに含む；
（ｆ）前記組成物が静脈内投与用に製剤化されている；
（ｇ）前記細胞または組織が、哺乳動物ドナー、場合によってヒトから得たものである；
（ｈ）前記細胞が、幹細胞または前駆細胞を含む；
（ｉ）前記容器が、気密シールを含むバイアルである；または
（ｊ）前記容器が、滅菌の内部を含む密封包装内に存在する、請求項９に記載の水分不透過性の容器。
【請求項１２】
単離された多能性細胞を含み、血管新生活性または抗炎症活性を有する組成物を調製する方法であって、
（ａ）ドナー哺乳動物から得た組織試料を解離させて、その中の複数の多能性細胞を放出させるステップと、
（ｂ）複数の前記放出された多能性細胞を１つまたは複数の他の組織成分から分離して、単離された多能性細胞を含む組成物を作製するステップと、
（ｃ）場合により、（ｂ）または（ｄ）に従って作製された前記組成物を乾燥、凍結乾燥、または凍結保存するステップと、
（ｄ）（ｂ）もしくは（ｃ）から生じた前記組成物を滅菌し、かつ／または（ｂ）もしくは（ｃ）から生じた組成物中に存在するウイルスを不活化するステップと
を含み、（ｄ）から生じた前記組成物が測定可能な血管新生活性または抗炎症活性を保持する方法。
【請求項１３】
（ｉ）前記細胞または組織を培養しない；
（ｉｉ）前記方法が、（ｃ）の前に、前記放出された細胞または組成物を濾過するステップをさらに含む；または
（ｉｉｉ）前記（ａ）の解離が、前記組織試料を１つまたは複数のプロテアーゼと接触させることを含み、場合によって、１つまたは複数のプロテアーゼが、コラゲナーゼを含まない、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記組織が、脂肪由来組織、骨髄、骨、筋肉組織、臍帯組織、または羊水組織であり、超音波撹拌、濾過、遠心分離、または密度勾配の使用により、前記放出された多能性細胞が脂肪細胞またはもう１つの他の細胞もしくは組織成分から分離され、場合により、前記組織が脂肪由来組織であり、前記放出された多能性細胞が脂肪細胞から分離される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
処理された微小血管組織を含み、血管新生活性または抗炎症活性を有する組成物を調製する方法であって、
（ａ）ドナー哺乳動物から得た微小血管組織試料を解離させて、解離した微小血管組織を含む組成物を作製するステップと、
（ｂ）（ａ）に従って作製された前記組成物から１つまたは複数の組織成分を除去するステップと、
（ｃ）場合により、（ｂ）または（ｄ）の後に前記組成物を乾燥、凍結乾燥、または凍結保存するステップと、
（ｄ）（ｂ）もしくは（ｃ）の後に前記組成物を滅菌し、かつ／または（ｂ）もしくは（ｃ）の後に前記組成物中に存在するウイルスを不活化するステップと
を含み、
（ｃ）または（ｄ）から生じた前記組成物が測定可能な血管新生活性または抗炎症活性を保持する方法。
【請求項１６】
（ｉ）前記細胞または組織を培養しない；
（ｉｉ）前記方法が、前記組成物を濾過するステップをさらに含む；
（ｉｉｉ）前記（ａ）の解離が、前記組織試料を１つまたは複数のプロテアーゼと接触させることを含む；または
（ｉｖ）前記（ａ）の解離または（ｂ）の除去が、超音波撹拌、遠心分離、濾過、または密度勾配の使用を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
−  前記１つまたは複数のプロテアーゼが、コラゲナーゼを含まない；
−  前記１つまたは複数のプロテアーゼが、
１型コラゲナーゼ、およびディスパーゼもしくはサーモリシンのいずれか；または
ＭＭＰ２、ＭＭＰ１４、およびディスパーゼもしくはサーモリシンのいずれか
を含む、またはそれからなる；あるいは
−  前記微小血管組織が脂肪由来組織であり、前記超音波撹拌、遠心分離、濾過または密度勾配の使用により、脂肪細胞が（ａ）に従って作製された前記組成物から除去される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
哺乳動物において傷害もしくは疾患を処置もしくは予防する、または組織再生を促進することにおいて使用するための、請求項１から８までのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
（ａ）前記組成物が前記哺乳動物に外科的に植え込むのに適している；
（ｂ）前記組成物が前記哺乳動物への静脈内投与に適している；
（ｃ）前記組成物が局所投与に適している；
（ｄ）前記傷害が腱、靭帯、皮膚、骨、軟骨、椎間板、または微小血管組織に存在する；または
（ｅ）前記疾患が関節炎である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
（ａ）前記組成物が、前記哺乳動物における傷害または疾患の部位内またはその近くで、前記哺乳動物に外科的に植え込むのに適している；
（ｂ）前記傷害が軟部組織の傷害である；または
（ｃ）前記傷害または疾患が、虚血傷害、再灌流傷害、微小血管傷害、または炎症である、請求項１８に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
上で要約され、下でさらに詳細に記載されている方法は、実践者が行った特定の行為に関して記載されているが、これらには、別の人による行為に関する指示も含まれ得ることが理解されるべきである。したがって、例えば、「微小血管組織を投与する」などの行為は、「微小血管組織の投与を指示する」ことも含む。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
処理された微小血管組織を含む組成物であって、
前記処理された微小血管組織が、単離された多能性細胞、または多能性細胞もしくは前記微小血管組織から得たもしくはそれに由来する細胞膜を含み、
前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有し、
前記組成物が滅菌されており、かつ／または前記組成物内のウイルスが不活化されている、
組成物。
（項目２）
前記細胞または組織が培養されていない、項目１に記載の組成物。
（項目３）
前記組成物中に存在する前記細胞の５０％以下が生存可能である、項目１に記載の組成物。
（項目４）
前記組成物中に存在する前記細胞の１０％以下が生存可能である、項目１に記載の組成物。
（項目５）
前記組成物中に存在する前記細胞の実質的に全てが生存不可能である、項目１に記載の組成物。
（項目６）
前記細胞の少なくとも１％がトリパンブルーを排除する、項目１１に記載の組成物。
（項目７）
乾燥、凍結乾燥または凍結保存されている、項目１から６までのいずれか一項に記載の組成物。
（項目８）
室温付近で少なくとも１カ月保管した場合に、測定可能な血管新生活性または抗炎症活性を保持する、項目７に記載の組成物。
（項目９）
賦形剤を含む、項目１から８までのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０）
植え込み型足場またはマトリックスをさらに含む、項目１から９までのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１）
前記植え込み型足場またはマトリックスが、骨由来のインプラント、バイオ繊維足場、多孔質吸収性ポリマー、ヒドロゲル、組織製品を含むパテ、または縫合糸である、項目１０に記載の組成物。
（項目１２）
細胞、組織または細胞膜が、前記植え込み型足場またはマトリックスの骨、腱、または皮膚接面に存在する、項目１０または項目１１に記載の組成物。
（項目１３）
静脈内投与用に製剤化されている、項目１から１２までのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４）
前記細胞または組織が、哺乳動物ドナー、場合によってヒトから得たものである、項目１から１３までのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５）
前記ドナーが、前記細胞または組織を得た時点で健康な哺乳動物であった、項目１４に記載の組成物。
（項目１６）
前記細胞が、幹細胞または前駆細胞を含む、項目１から１５までのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７）
放射線照射に曝露することによって滅菌されている、項目１から１６までのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１８）
単離された多能性細胞を含み、血管新生活性または抗炎症活性を有する組成物を調製する方法であって、
ａ．ドナー哺乳動物から得た組織試料を解離させて、その中の複数の多能性細胞を放出させるステップと、
ｂ．複数の前記放出された多能性細胞を１つまたは複数の他の組織成分から分離して、単離された多能性細胞を含む組成物を作製するステップと、
ｃ．場合により、（ｂ）または（ｄ）に従って作製された前記組成物を乾燥、凍結乾燥、または凍結保存するステップと、
ｄ．（ｂ）もしくは（ｃ）から生じた前記組成物を滅菌し、かつ／または（ｂ）もしくは（ｃ）から生じた組成物中に存在するウイルスを不活化するステップと
を含み、（ｄ）から生じた前記組成物が測定可能な血管新生活性または抗炎症活性を保持する方法。
（項目１９）
前記細胞または組織を培養しない、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
（ｃ）の前に、前記放出された細胞または組成物を濾過するステップをさらに含む、項目１８または項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記（ａ）の解離が、前記組織試料を１つまたは複数のプロテアーゼと接触させることを含む、項目１８から２０までのいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
前記１つまたは複数のプロテアーゼが、コラゲナーゼを含まない、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記１つまたは複数のプロテアーゼが、
１型コラゲナーゼ、およびディスパーゼもしくはサーモリシンのいずれか；または
ＭＭＰ２、ＭＭＰ１４、およびディスパーゼもしくはサーモリシンのいずれか
を含む、またはそれからなる、項目２１または項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記（ａ）の解離または（ｂ）の分離が、超音波撹拌、遠心分離、濾過、または密度勾配の使用を含む、項目１８から２３までのいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記組織が、脂肪由来組織、骨髄、骨、筋肉組織、臍帯組織、または羊水組織であり、前記超音波撹拌、濾過、遠心分離、または密度勾配の使用により、前記放出された多能性細胞が脂肪細胞またはもう１つの他の細胞もしくは組織成分から分離され、場合により、前記組織が脂肪由来組織であり、前記放出された多能性細胞が脂肪細胞から分離される、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
処理された微小血管組織を含み、血管新生活性または抗炎症活性を有する組成物を調製する方法であって、
ａ．ドナー哺乳動物から得た微小血管組織試料を解離させて、解離した微小血管組織を含む組成物を作製するステップと、
ｂ．（ａ）に従って作製された前記組成物から１つまたは複数の組織成分を除去するステップと、
ｃ．場合により、（ｂ）または（ｄ）の後に前記組成物を乾燥、凍結乾燥、または凍結保存するステップと、
ｄ．（ｂ）もしくは（ｃ）の後に前記組成物を滅菌し、かつ／または（ｂ）もしくは（ｃ）の後に前記組成物中に存在するウイルスを不活化するステップと
を含み、
（ｃ）または（ｄ）から生じた前記組成物が測定可能な血管新生活性または抗炎症活性を保持する方法。
（項目２７）
前記細胞または組織を培養しない、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記組成物を濾過するステップをさらに含む、項目２６または項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記（ａ）の解離が、前記組織試料を１つまたは複数のプロテアーゼと接触させることを含む、項目２６から２８までのいずれか一項に記載の方法。
（項目３０）
前記１つまたは複数のプロテアーゼが、コラゲナーゼを含まない、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記１つまたは複数のプロテアーゼが、
１型コラゲナーゼ、およびディスパーゼもしくはサーモリシンのいずれか；または
ＭＭＰ２、ＭＭＰ１４、およびディスパーゼもしくはサーモリシンのいずれか
を含む、またはそれからなる、項目２９または項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記（ａ）の解離または（ｂ）の除去が、超音波撹拌、遠心分離、濾過、または密度勾配の使用を含む、項目２６から３１までのいずれか一項に記載の方法。
（項目３３）
前記微小血管組織が脂肪由来組織であり、前記超音波撹拌、遠心分離、濾過または密度勾配の使用により、脂肪細胞が（ａ）に従って作製された前記組成物から除去される、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
滅菌の乾燥した組成物を含む、水分不透過性の容器であって、前記組成物が、単離された多能性細胞、または処理された微小血管組織、または前記細胞もしくは組織から得たもしくはそれに由来する細胞膜を含み、前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有し、前記組成物が滅菌されており、かつ／または前記組成物内のウイルスが不活化されており、前記組成物が室温付近で少なくとも１カ月保管した場合に、測定可能な血管新生活性または抗炎症活性を保持している容器。
（項目３５）
前記細胞または組織が培養されていない、項目３４に記載の水分不透過性の容器。
（項目３６）
前記組成物中に存在する前記細胞の５０％以下が生存可能である、項目３４または項目３５に記載の水分不透過性の容器。
（項目３７）
前記組成物中に存在する前記細胞の１０％以下が生存可能である、項目３６に記載の水分不透過性の容器。
（項目３８）
前記組成物中に存在する前記細胞の実質的に全てが生存不可能である、項目３３７に記載の水分不透過性の容器。
（項目３９）
前記細胞の少なくとも１％がトリパンブルーを排除する、項目３４から３７までのい
ずれか一項に記載の水分不透過性の容器。
（項目４０）
前記組成物が賦形剤を含む、項目３４から３８までのいずれか一項に記載の水分不透過性の容器。
（項目４１）
前記組成物が、植え込み型足場またはマトリックスをさらに含む、項目３４から４０までのいずれか一項に記載の水分不透過性の容器。
（項目４２）
前記植え込み型足場またはマトリックスが骨由来のインプラント、バイオ繊維足場、多孔質吸収性ポリマー、ヒドロゲル、組織製品を含むパテ、または縫合糸である、項目４１に記載の水分不透過性の容器。
（項目４３）
細胞、組織または細胞膜が、前記植え込み型足場またはマトリックスの骨、腱または皮膚接面に存在する、項目４１または項目４２に記載の水分不透過性の容器。
（項目４４）
前記組成物が静脈内投与用に製剤化されている、項目３４から４３までのいずれか一項に記載の水分不透過性の容器。
（項目４５）
前記細胞または組織が、哺乳動物ドナー、場合によってヒトから得たものである、項目３４から４４までのいずれか一項に記載の水分不透過性の容器。
（項目４６）
前記ドナーが、前記細胞または組織を得た時点で健康な哺乳動物であった、項目４５に記載の水分不透過性の容器。
（項目４７）
前記細胞が、幹細胞または前駆細胞を含む、項目３４から４５までのいずれか一項に記載の水分不透過性の容器。
（項目４８）
気密シールを含むバイアルである、項目３４から４７までのいずれか一項に記載の水分不透過性の容器。
（項目４９）
滅菌の内部を含む密封包装内に存在する、項目３４から４８までのいずれか一項に記載の水分不透過性の容器。
（項目５０）
哺乳動物において傷害もしくは疾患を処置もしくは予防する、または組織再生を促進する方法であって、前記哺乳動物に、項目１から１６までのいずれか一項に記載の組成物または項目１８から３３までのいずれか一項に記載の方法によって調製された組成物を提供することを含む方法。
（項目５１）
前記組成物を前記哺乳動物に外科的に植え込む、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
前記組成物を、前記哺乳動物における傷害または疾患の部位内またはその近くに植え込む、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
前記組成物が前記哺乳動物の静脈内に提供される、項目５０に記載の方法。
（項目５４）
前記傷害が軟部組織の傷害である、項目５０から５３までのいずれか一項に記載の方法。
（項目５５）
前記傷害が腱、靭帯、皮膚、骨、軟骨、椎間板、または微小血管組織に存在する、項目５０から５３までのいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
前記傷害または疾患が、虚血傷害、再灌流傷害、微小血管傷害、または炎症である、項目５０から５３までのいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
前記疾患が関節炎である、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
多能性細胞、および１つまたは複数の血管壁細胞外マトリックス成分を含む組成物。
（項目５９）
多能性細胞を含む滅菌された組成物。
（項目６０）
多能性細胞の２種以上の成分を含む滅菌された組成物。
（項目６１）
多能性細胞の１０種以上の成分を含む、項目５９に記載の滅菌された組成物。
（項目６２）
多能性細胞由来の細胞膜およびタンパク質を含む組成物。
（項目６３）
生存細胞を全く含まない、項目６２に記載の組成物。
（項目６４）
インタクトな細胞を全く含まない、項目６２に記載の組成物。
（項目６５）
トリパンブルーを排除するが増殖はしない多能性細胞を含む組成物。
（項目６６）
トリパンブルーを排除するが増殖はしない滅菌された多能性細胞を含む組成物。
（項目６７）
前記組成物中に存在する前記細胞の少なくとも５０％または少なくとも９０％が、トリパンブルーを排除するが増殖はしない、項目６５または項目６６に記載の組成物。
（項目６８）
前記多能性細胞が前記対象に対して自己細胞ではない、対象における傷害または疾患の処置または予防において使用するための項目５８から６７までのいずれか一項に記載の組成物。
（項目６９）
対象の腱の傷害を修復するための、乾燥および滅菌された微小血管組織の使用。
（項目７０）
前記乾燥および滅菌された微小血管組織が多能性細胞を含む、項目６９に記載の使用。
（項目７１）
前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有する、項目６９から７０までのいずれか一項に記載の使用。
（項目７２）
多能性細胞が前記対象に対して同種異系である、項目７０から７１までのいずれか一項に記載の使用。
（項目７３）
対象の靭帯の傷害を修復するための、乾燥および滅菌された微小血管組織の使用。
（項目７４）
前記乾燥および滅菌された微小血管組織が多能性細胞を含む、項目７３に記載の使用。
（項目７５）
前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有する、項目７３から７４までのいずれか一項に記載の使用。
（項目７６）
多能性細胞が前記対象に対して同種異系である、項目７４から７５までのいずれか一項に記載の使用。
（項目７７）
対象の皮膚の傷害を修復するための、乾燥および滅菌された微小血管組織の使用。
（項目７８）
前記乾燥および滅菌された微小血管組織が多能性細胞を含む、項目７７に記載の使用。
（項目７９）
前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有する、項目７７から７８までのいずれか一項に記載の使用。
（項目８０）
多能性細胞が前記対象に対して同種異系である、項目７８から７９までのいずれか一項に記載の使用。
（項目８１）
対象の骨の傷害を修復するための、乾燥および滅菌された微小血管組織の使用。
（項目８２）
前記乾燥および滅菌された微小血管組織が多能性細胞を含む、項目８１に記載の使用。
（項目８３）
前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有する、項目８１から８２までのいずれか一項に記載の使用。
（項目８４）
多能性細胞が前記対象に対して同種異系である、項目８２から８３までのいずれか一項に記載の使用。
（項目８５）
対象の軟骨の傷害を修復するための、乾燥および滅菌された微小血管組織の使用。
（項目８６）
前記乾燥および滅菌された微小血管組織が多能性細胞を含む、項目８５に記載の使用。
（項目８７）
前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有する、項目８５から８６までのいずれか一項に記載の使用。
（項目８８）
多能性細胞が前記対象に対して同種異系である、項目８６から８７までのいずれか一項に記載の使用。
（項目８９）
対象の椎間板の傷害を修復するための、乾燥および滅菌された微小血管組織の使用。
（項目９０）
前記乾燥および滅菌された微小血管組織が多能性細胞を含む、項目８９に記載の使用。
（項目９１）
前記組成物が血管新生活性または抗炎症活性を有する、項目８９から９０までのいずれか一項に記載の使用。
（項目９２）
多能性細胞が前記対象に対して同種異系である、項目９０から９１までのいずれか一項に記載の使用。