(57)【要約】      （修正有）【課題】大面積であり、活着率の高いコケシートを大量に効率よく製造する方法を提供する。【解決手段】コケ類の茎葉体を基材上に配置し、ついで該茎葉体を基材上で成長させ基材に活着させる工程を有するコケシートの製造方法であって、前記コケ類の茎葉体は、コケ類の原糸体を液中で培養して得られた茎葉体である。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
コケ類の茎葉体を基材上に配置し、ついで該茎葉体を基材上で成長させ基材に活着させる工程を有するコケシートの製造方法であって、前記コケ類の茎葉体は、コケ類の原糸体を液中で培養して得られた茎葉体であることを特徴とするコケシートの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はコケシートの大量かつ効率的な製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
コケは古くから園芸の対象として親しまれ、その供給としては野生のコケを採取し、それを人工的に自然環境下で栽培することが長年行われてきた。近年は緑化用資材としての価値が見出され、例えば建物の屋上、壁面等にマット状に被覆することが行われつつある（特許文献１）。
【０００３】
このような緑化用資材としての利用に際しては、大量に安価なコケが必要となり、コケの供給が追い付かない状況が発生し始めた。
特許文献２では、コケの原糸体を粉砕し、それを多孔質基材に塗布し、当該多孔質基材の一部を培養液に浸漬することによる大量培養技術が示されている。
【０００４】
この方法では、板状レンガ、素焼きの壺等の多孔質基材上でコケを成長させるため、そのままではコケシートとすることができない。また、多孔質基材上で成長したコケを移植して他のシートに密生させようとしても、シートへの活着率（シート上にしっかりと根付いて、取れにくくなる状態の割合）が低く、大面積のコケシートを製造する方法には不適であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００２−５８３３６号公報
【特許文献２】特開２０１１−３６１５４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、大面積であり、活着率の高いコケシートを大量に効率よく製造する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の目的は、下記手段によって達成された。
１．コケ類の茎葉体を基材上に配置し、ついで該茎葉体を基材上で成長させ基材に活着させる工程を有するコケシートの製造方法であって、前記コケ類の茎葉体は、コケ類の原糸体を液中で培養して得られた茎葉体であることを特徴とするコケシートの製造方法。
【０００８】
本発明の特徴は、液中で（つまり多孔質基材等に担持させずに）原糸体を茎葉体まで培養し、当該培養した茎葉体をシートに活着させることである。このようにすることにより、大面積シートへの活着率が高くなる。
【０００９】
この本発明の効果が発現する理由として、茎葉体の分化状態が揃っていること、このようにして成長させた茎葉体は原糸体に比べより基材を欲しているのでないかと推測している。
【００１０】
さらに、原糸体から茎葉体への成長環境は無菌状態を保つことができるため、茎葉体の純度も高く保つことが可能である。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、大面積のコケシートを大量に製造することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本発明における、原糸体を液中で培養する工程に用いられる培養器の概略図である。
【図２】本発明における、茎葉体を基材上に活着させる工程（水耕栽培方式）に用いられるコケシート成長装置の概略図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
＜コケ類＞
本発明のコケシートに使用可能なコケ類としては、セン類、タイ類が挙げられる。
セン類としては、例えば、スナゴケ、ハイスナゴケ、エゾスナゴケ、シモフリゴケ、クロカワキゴケ、キスナゴケ、ヒメスナゴケ、ミヤマスナゴケ、ナガエノスナゴケ、チョウセンスナゴケ、マルバナスナゴケ等のシモフリゴケ属（Rhacomitrium Bird.）、トヤマシノブゴケ、ヒメシノブゴケ、オオシノブゴケ、コバノエゾシノブゴケ、エゾシノブゴケ、アオシノブゴケ、チャボシノブゴケ等のシノブゴケ属（Thuidium B.S.G）、コウヤノマンネングサ、フロウソウ等のコウヤノマンネングサ属（Climacium Web et Mohr）、カモジゴケ、シッポゴケ、オオシッポゴケ、チャシッポゴケ、チシマシッポゴケ、アオシッポゴケ、ナミシッポゴケ、ナガシッポゴケ、ヒメカモジゴケ、コカモジゴケ、タカネカモジゴケ、フジシッポゴケ、カギカモジゴケ、ナスシッポゴケ等のシッポゴケ属（Dicranum Hedw.）、ハイゴケ、オオベニハイゴケ、ヒメハイゴケ、チチブハイゴケ、フジハイゴケ、ハイヒバゴケ、イトハイゴケ、キノウエノコハイゴケ、キノウエノハイゴケ、ミヤマチリメンゴケ、ハイサワラゴケモドキ、タチヒラゴケモドキ、エゾハイゴケ等のハイゴケ属（Hypnum Hedw.）、ヒノキゴケ、ヒロハヒノキゴケ、ハリヒノキゴケ等のヒノキゴケ属（Rhizogonium Brid.）、クモマタマゴケ、コウライタマゴケ、オオタマゴケ等のタマゴケ属（Bartramia Hedw.）等を用いることができる。
【００１４】
タイ類としては、例えばツクシウロコゴケ、ウロコゴケ、オオウロコゴケ、トサカゴケモドキ、マルバソコマメゴケ、アマノウロコゴケ等のウロコゴケ属（Heteroscyphus Schiffn.）、クラマゴケモドキ、カハルクラマゴケモドキ、トサクラマゴケモドキ、ヒメクラマゴケモドキ、ヤマトクラマゴケモドキ、ナガバクラマゴケモドキ、オオクラマゴケモドキ、ニスビキカヤゴケ、ケクラマゴケモドキ、ホソクラマゴケモドキ等のクラマゴケモドキ属（Porella.L）、ヤマトムチゴケ、ヨシナガムチゴケ、フォウリィムチゴケ、エゾムチゴケ、タマゴバムチゴケ、フタバムチゴケ、サケバムチゴケ、ヤマムチゴケ、ムチゴケ、コムチゴケ、マエバラムチゴケ等のムチゴケ属（Bazzania S.Gray）等に属するコケ類を用いることができる。
【００１５】
特に、スナゴケ（R. Canescens）、ハイスナゴケ（R. ericoides (Web. et Brid.) Brid.）、エゾスナゴケ（R. japonicum Dozy et Molk.）などのスナゴケが、コケシートのような緑化資材に用いるコケとして好ましい。
【００１６】
＜原糸体、茎葉体＞
原糸体とは、コケの胞子が発芽して形成する細胞が一列に並んだ糸状の構造体をいう（プロトネマ：protonema）。原糸体は以下の２種類の細胞より成る。
【００１７】
1）クロロネマ（chloronema）と呼ばれる大型で多数の葉緑体を持つ細胞
2）カウロネマ（caulonema）と呼ばれる成長の早い細胞
原糸体は従来公知の方法として、コケの胞子を土壌や培地上で培養し、発芽、伸長させることにより容易に得られる。原糸体は、懸濁培養や寒天培養などで増殖し得る。本発明では、この原糸体を液中で培養して茎葉体まで成長させる。
【００１８】
茎葉体とは、上記原糸体が培養により細胞分裂を繰り返して成長し、茎と葉が明確に区別できるようになった構造体をいう（ガメトフォア：gametophore）。なお、本発明で用いる茎葉体には、原糸体が１０質量％以下含まれていてもよいものとする。
【００１９】
＜液中で培養する工程＞
本発明では原糸体を茎葉体まで液中（養液ともいう）で培養することを特徴とする。
養液の温度は、０〜６０℃、好ましくは５〜５０℃、更に好ましくは１５〜２５℃である。養液の温度が０℃未満であると養液が凍るため、また６０℃を超えると微生物等の繁殖がし易くなりため、避けることが好ましい。
【００２０】
養液の肥料濃度は、電気伝導度（ｍＳ／ｃｍ）で０〜１．０、好ましくは０〜０．２であり、低濃度又は肥料を含まない養液であってもよい。肥料としては通常の肥料（例えばハイポネックス）を用いることができる。
【００２１】
養液には植物ホルモンを含むことが好ましい。植物ホルモンにはエチレン、アブシジン酸、オーキシン（インドール酢酸）、サイトカイニン（ゼアチン）、ジベレリン（ジベレリン酸）等が挙げられるが、植物成長ホルモンが好ましく、中でもオーキシン、サイトカイニン、ジベレリンが好ましい。これらは単独で用いられてもよく混合又は併用して用いてもよい。また、天然の植物ホルモンでなく、類似の化学構造を有する合成した化合物を用いることも可能である。植物成長ホルモン濃度は、好ましくは０．０１〜２ｐｐｍ、より好ましくは０．０５〜１．０ｐｐｍである。
【００２２】
原糸体の生育には光が必要である。光は自然光でも人工光でもよく光源は特に限られないが、光合成でき、成長を阻害しない波長域の成分を有することが必要である。人工環境下で育成させる場合には、通常の白熱灯、蛍光灯、水銀灯、ＬＥＤ等を用いることができるが、最適な成長に合わせた波長を設定でき、熱制御の容易さ、メンテナンスの容易さからＬＥＤが好ましく、中でも赤、橙色光を発光するＬＥＤが好ましい。
【００２３】
光合成有効光量子束密度（ＰＰＦＤ）は２００（μｍｏｌｍ-2ｓ-1）以下、好ましくは５０（μｍｏｌｍ-2ｓ-1）以下、更に好ましくは光補償点以上であって２０〜３０（μｍｏｌｍ-2ｓ-1）である。
【００２４】
培養の間、明暗期を繰り返して調光することが好ましい。特に、２４時間またはそれ以下の時間の周期で明暗期を繰り返して生育させることが好ましい。一定周期で明暗期を繰り返すことにより、光合成と代謝のバランスが確保される。従って、例えば最初は１２時間ごと、一定期間後６時間ごとにするなど、明暗期のサイクル時間を原糸体の生育に応じて制御することによって、発芽量乃至速度等を制御することができる。
【００２５】
また、本発明の方法では、曝気攪拌などにより、養液中で酸素を含む気体を断続的に原糸体に接触させ、攪拌しながら生育させることが重要である。空気などの気体をバブリングして攪拌する方法は曝気攪拌に限定されないが、曝気攪拌が簡便な方法であるため好ましい。
【００２６】
本発明では、７日から６０日程度で原糸体から茎葉体に成長する。茎葉体は、養液からネット等により濾別される。濾別された茎葉体は、切断等されて大きさが揃えられることが好ましい。ここまでは無菌状態で作業することが好ましい。
【００２７】
＜基材上に活着させる工程＞
本発明では、茎葉体を基材上に活着させる。活着とは、一般に植物が根づいて成長しはじめることをいう。本発明ではシート上に固定され、成長を開始している状態をいうものとする。
【００２８】
基材としては、通常のコケシートに使用できる市販のものを使用することができる。例えば、紙（不織布）、布、構成樹脂（吸水性シート等の積層体）、網等が挙げられる。コケが基材上で成長できるよう、ある程度の保水性のある素材からなるものが好ましい。
【００２９】
基材の保水量は、５ｃｍ×５ｃｍに断裁した基材を水に５分間つけて、５分間水平において水切りをした後の保水された水量を測定したときに、０．１ｋｇ／ｍ2から２０ｋｇ／ｍ2の水を含む程度が好ましい。
【００３０】
基材の厚さは任意だが、取り扱いが容易であることから、０．５ｃｍから１５ｃｍが好ましい。
茎葉体を基材上に配置するためには、水中に分散した茎葉体を塗布することが好ましい。通常、０．１質量％〜１０質量％の茎葉体を含む培養液を、基材上の茎葉体量が５ｇ／ｍ2から５００ｇ／ｍ2となるように、基材上に塗布する。塗布する方法としては、例えば、バーコーター、グラビアコーター、スロットダイ、エアードクターコーター、ブレードコーター、ナイフコーター、含浸コーターなどが挙げられる。また、茎葉体を含む培養液を基材上に噴霧する方法でもよい。いずれの方法でも、基材が吸水性であるため、少量の水をプレ浸漬させてから、塗布または噴霧することが好ましい。
【００３１】
茎葉体を配置した後に活着させるための条件は、温度は１５〜２６℃、光は２０００〜６０００ＬＸの照明（蛍光灯、ＬＥＤ）を２４時間照射で、基材に水を供給する水耕栽培方式または基材の上部から水滴を噴霧するミスト方式等が好ましい。
【００３２】
上記方法により、茎葉体を基材上に配置してから６０日程度で、当該茎葉体が基材に活着したコケシートにまで成長させることができる。
【実施例】
【００３３】
［実施例］
タマゴケの胞子から発芽させた先端の頂端細胞を分裂させることにより入手した、タマゴケ原糸体５ｇを、０．５〜５ｍｍ程度に切断し、下記組成の培養液中、曝気拡散しながら、下記条件で茎葉体まで３０日かけて成長させた。その間、培養開始から７日経過後にＢＰＡ（６−ベンジルアミノプリン：合成サイトカイニン）を１μＭ添加した。
【００３４】
<組成>
塩化カルシウム・２水和物  ：  ４４０ｍｇ／Ｌ
硫酸マグネシウム・７水和物  ：  ３７０ｍｇ／Ｌ
硫酸マンガン・４〜５水和物  ：  ２２．３ｍｇ／Ｌ
ホウ酸  ：  ６．２ｍｇ／Ｌ
硫酸亜鉛・７水和物  ：  １０．７ｍｇ／Ｌ
モリブデン酸ナトリウム・２水和物  ：  ０．２５ｍｇ／Ｌ
硫酸銅・５水和物    ：  ０．０２５ｍｇ／Ｌ
塩化コバルト・６水和物    ：  ０．０２５ｍｇ／Ｌ
ヨウ化カリウム  ：  ０．８３ｍｇ／Ｌ
リン酸一カリウム  ：  ０．１７ｍｇ／Ｌ
硝酸カリウム  ：  ４ｇ／Ｌ
エチレンジアミン四酢酸・２ナトリウム  ：  ４７ｍｇ／Ｌ
硫酸鉄・７水和物  ：  ２７．８４７ｍｇ／Ｌ
<培養条件>
温度    ：２２℃
光      ：３０００ＬＸの照明（蛍光灯）を２４時間連続照射
撹拌速度：５００ｒｐｍ
このようにして得られた茎葉体を不織布シート（ＬＭＷ−９００４日本バイリーン(株)製）に塗布し、下記条件で３０日成長させた。
【００３５】
<成長条件>
温度    ：２０℃
光      ：６０００ＬＸの照明（蛍光灯）を２４時間連続照射
水散布  ：２ｇの茎葉体に対して２ｇの水を霧状に上面より散布する。これを８時間毎に３回／日行う。
【００３６】
［比較例］
特許文献１（特開２０１１−３６１５４号公報）の実施例１に記載の方法でコケを培養し、そのコケを本発明の実施例１と同様の不織布シートに載せて、同様の成長条件で２０日間成長させた。
【００３７】
［活着率の評価］
活着率を試験するため、上記実施例（本発明）および比較例で作製したシートにヘアドライアーの冷風（風速７ｍに相当）を３０秒間当てた。上記試験前後のシート質量およびコケを含まないシートの質量を測定し、上記試験後にシート上に残ったコケの質量）／（上記試験前のシート上のコケの質量）を活着率として算出したところ、実施例は９５％であったが、比較例は６５％であった。
【図１】
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【図２】
2013165686.tif 000004