(57)【要約】【課題】誤穿針を発生させることなく細胞を取り出せる細胞保存容器を提供すること。【解決手段】細胞保存容器１は、細胞を収容する細胞収容室１１と、細胞収容室１１に細胞を導入する細胞導入口１２と、細胞収容室１１に収容された細胞を導出する細胞導出口１３と、細胞導出口１３に配置され、一端部及び他端部が開放された筒部２１、筒部２１の内部に配置される栓部２２、及び筒部２１の内面と栓部２２の外面との間に設けられ、筒部２１と栓部２２とを接続する隔膜部２３を有するポート部材２０と、を備える。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を収容する細胞収容室と、
前記細胞収容室に細胞を導入する細胞導入口と、
前記細胞収容室に収容された細胞を導出する細胞導出口と、
前記細胞導出口に配置され、一端部及び他端部が開放された筒部、該筒部の内部に配置される栓部、及び前記筒部の内面と前記栓部の外面との間に設けられ、該筒部と該栓部とを接続する隔膜部を有するポート部材と、を備える細胞保存容器。
【請求項２】
前記栓部は、円錐台形状を有する栓本体と、該栓本体の少なくとも一方の面に形成される凹部と、を備える請求項１に記載の細胞保存容器。
【請求項３】
前記隔膜部は、前記筒部の内面と、前記栓部の下面の周縁部と、を接続する請求項１又は２に記載の細胞保存容器。
【請求項４】
前記隔膜部は、前記筒部の内面から前記栓部の下面に向かって上り傾斜して形成される請求項３に記載の細胞保存容器。
【請求項５】
前記隔膜部は、前記筒部の内面から前記栓部の下面に向かって下り傾斜して形成される請求項３に記載の細胞保存容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体試料から採取された幹細胞や臍帯血等を保存する細胞保存容器に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、再生医療分野においては、生体試料から採取された幹細胞が、例えば、造血幹細胞移植や各種組織の再構築等の様々な用途に用いられている。幹細胞は、生体試料から採取された後、再生医療に用いられるまでの間、細胞保存容器に収容された状態で凍結保存される（例えば、特許文献１参照）。
【０００３】
特許文献１で提案された細胞保存容器は、可撓性を有する樹脂部材により構成されており、細胞を収容可能な細胞収容室と、この細胞収容室に細胞を導入する細胞導入口と、細胞収容室に収容された細胞を導出する細胞導出口と、を備える。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２００１−５１７１０３号公報
【０００５】
以上の細胞保存容器に細胞を収容して保存する場合には、まず、細胞導入口から細胞が導入される。次いで、細胞導入口は、この細胞導入口を形成する樹脂部材を溶着等することにより密閉される。一方、細胞導出口には、この細胞導出口を閉鎖する隔膜が設けられている。これにより、細胞が収容された細胞収容室の気密性は保たれる。
細胞保存容器に収容された細胞を使用する場合には、まず、細胞導出口に、樹脂製又は金属製の針を挿入して隔膜を貫通させる。次いで、針に接続されたシリンジ等により細胞収容室に収容された細胞を取り出す。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、従来の細胞保存容器では、針により隔膜を貫通させるときに、誤って作業者の指等に針が刺さってしまう誤穿針が発生する危険性があった。
【０００７】
従って、本発明は、誤穿針を発生させることなく細胞を取り出せる細胞保存容器を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、細胞を収容する細胞収容室と、前記細胞収容室に細胞を導入する細胞導入口と、前記細胞収容室に収容された細胞を導出する細胞導出口と、前記細胞導出口に配置され、一端部及び他端部が開放された筒部、該筒部の内部に配置される栓部、及び前記筒部の内面と前記栓部の外面との間に設けられ、該筒部と該栓部とを接続する隔膜部を有するポート部材と、を備える細胞保存容器に関する。
【０００９】
また、前記栓部は、円錐台形状を有する栓本体と、該栓本体の少なくとも一方の面に形成される凹部と、を備えることが好ましい。
【００１０】
また、隔膜部は、前記筒部の内面と、前記栓部の下面の周縁部と、を接続することが好ましい。
【００１１】
また、隔膜部は、前記筒部の内面から前記栓部の下面に向かって上り傾斜して形成されることが好ましい。
【００１２】
また、隔膜部は、前記筒部の内面から前記栓部の下面に向かって下り傾斜して形成されることが好ましい。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の細胞保存容器によれば、誤穿針を発生させることなく細胞を取り出せる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】本発明の第１実施形態に係る細胞保存容器を示す斜視図である。
【図２】図１に示す細胞保存容器の正面図である。
【図３】図１に示す細胞保存容器の分解斜視図である。
【図４】図２のＡ−Ａ線断面図である。
【図５】第１実施形態の細胞保存容器におけるポート部材を示す斜視図であり、ポート部材を上方から視た状態を示す図である。
【図６】第１実施形態の細胞保存容器におけるポート部材を示す斜視図であり、ポート部材を斜め上方から視た状態を示す図である。
【図７】ポート部材の縦断面図である。
【図８】ポート部材の製造方法における第１の工程を示す図である。
【図９】ポート部材の製造方法における第２の工程を示す図である。
【図１０】ポート部材の製造方法における第３の工程を示す図である。
【図１１】第１実施形態の細胞保存容器のポート部材における隔膜部を破断する前の状態を示す正面図である。
【図１２】図７に示すポート部材において隔膜部が破断された状態を示す縦断面図である。
【図１３】第１実施形態の細胞保存容器のポート部材における隔膜部を破断した後の状態を示す正面図である。
【図１４】第２実施形態の細胞保存容器におけるポート部材を示す縦断面図である。
【図１５】第３実施形態の細胞保存容器におけるポート部材を示す縦断面図である。
【図１６】第４実施形態の細胞保存容器におけるポート部材を示す縦断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明の細胞保存容器の好ましい各実施形態について、図面を参照しながら説明する。本発明の細胞保存容器１は、生体試料から採取された幹細胞や臍帯血等の細胞を保存する場合に用いられる。
【００１６】
まず、第１実施形態の細胞保存容器１について、図１〜図７を参照しながら説明する。
第１実施形態の細胞保存容器１は、図１〜図３に示すように、保存容器本体１０と、ポート部材２０と、細胞導入チューブ３０と、を備える。
保存容器本体１０は、ＥＶＡ樹脂（エチレン−酢酸ビニル共重合樹脂）等の可撓性を有する熱可塑性樹脂からなる２枚のシート状部材それぞれの周縁部の大部分及び所定の部位（後述の第１細胞収容室と第２細胞収容室との境界部分）が接合されて構成され、第１面１０ａと、この第１面１０ａに対向して配置される第２面１０ｂと、を有する平面視で矩形の扁平形状に形成される。より具体的には、保存容器本体１０は、平面視において幅方向ＷＤが高さ方向ＨＤよりも長い矩形形状に形成されると共に、厚さ方向ＴＤの一方に第１面１０ａが配置され、厚さ方向ＴＤの他方に第２面１０ｂが配置されて構成される。この保存容器本体１０には、細胞収容室１１と、細胞導入口１２と、細胞導出口１３と、が形成される。
【００１７】
細胞収容室１１は、生体試料から採取された細胞を収容する。第１実施形態では、細胞収容室１１は、図１及び図２に示すように、比較的多くの量（例えば、１０ｍｌ〜３０ｍｌ）の細胞を収容可能な第１細胞収容室１１１と、この第１細胞収容室１１１よりも少ない量（例えば、３ｍｌ〜１０ｍｌ）の細胞を収容可能な第２細胞収容室１１２と、これら第１細胞収容室１１１と第２細胞収容室１１２とを連通させる連通部１１３と、を備える。
第１実施形態では、第１細胞収容室１１１及び第２細胞収容室１１２は、図４に示すように、第１面１０ａ及び第２面１０ｂの面方向に沿って、保存容器本体１０の幅方向ＷＤに隣り合って配置される。また、連通部１１３は、保存容器本体の高さ方向ＨＤの一端側である上端側及び他端側である下端側の２箇所に設けられる。
【００１８】
細胞導入口１２は、細胞収容室１１に細胞を導入する入口となる。この細胞導入口１２は、図３に示すように、保存容器本体１０を構成する２枚のシート状部材の周縁部の一部を非接合とすることにより構成される。第１実施形態では、細胞導入口１２は、図１及び図２に示すように、保存容器本体１０の幅方向ＷＤの一端側の上端部に設けられる。また、細胞導入口１２は、第１細胞収容室１１１に設けられる。
【００１９】
細胞導出口１３は、細胞収容室１１に収容された細胞を導出する出口となる。この細胞導出口１３は、細胞導入口１２と同様に、保存容器本体１０を構成する２枚のシート状部材の周縁部の一部を非接合とすることにより構成される。第１実施形態では、細胞導出口１３は、第１細胞収容室１１１及び第２細胞収容室１１２のそれぞれの上端部に設けられる。
【００２０】
ポート部材２０は、図１〜図３に示すように、細胞導出口１３に配置される。このポート部材２０は、図５〜図７に示すように、筒部２１と、栓部２２と、隔膜部２３と、複数のリブ部２４と、を備える。
【００２１】
筒部２１は、一端部及び他端部が開放された円筒形状に構成される。この筒部２１の外径は、細胞導出口１３の内径とほぼ等しく設定されている。また、筒部２１の内径は、一般に使用されているシリンジ５００の先端筒部５２０（図１１及び図１３参照）が挿入できる大きさに形成され、好ましくは、先端筒部５２０が密に挿入できる大きさに形成される。
【００２２】
栓部２２は、筒部２１の内径よりも小さい外径を有する円錐台形状に形成され、筒部２１の内部に配置される。この栓部２２は、栓本体２２１と、この栓本体２２１の一方の面が凹んで構成された凹部２２２と、を備える。
栓本体２２１は、栓部２２の主要部を構成する。この栓本体２２１は、上面（小径の側の面）が後述のリブ部２４が設けられた側を向いて配置される。
凹部２２２は、栓本体２２１の上面の中央部に形成される。この凹部２２２の凹んだ部分の容積は、後述するように、栓部２２を筒部２１から好適に分離させる観点から、栓部２２の体積の０％〜７０％であることが好ましい。
【００２３】
隔膜部２３は、筒部２１の内面と栓部２２の外面との間に設けられ、筒部２１と栓部２２とを接続する。より具体的には、隔膜部２３は、筒部２１の内面と栓本体２２１の下面（大径の側の面）の周縁とを接続する。また、隔膜部２３は、筒部２１の軸方向に直交する方向に延びて設けられる。
隔膜部２３の厚さＴは、細胞保存容器１の液密性を好適に保ち、かつ、栓部２２を筒部２１から好適に分離させる観点から、０．２ｍｍ〜１ｍｍであることが好ましい。
【００２４】
リブ部２４は、筒部２１の軸方向の一端部に設けられ、筒部２１の外周面から径方向の外方に延出する。第１実施形態では、リブ部２４は２つ設けられる。
【００２５】
以上のポート部材２０は、ＥＶＡ樹脂又はＥＶＡとポリエチレンとの混合樹脂等の軟質の熱可塑性樹脂により一体的に形成される。
ここで、ポート部材２０の製造方法の一実施態様について、図８〜図１０を参照しながら説明する。図８〜図１０は、ポート部材２０の製造方法における各工程を示す図である。
【００２６】
ポート部材２０は、水平方向に開閉する一対の金型１１０と、鉛直方向に開閉する上側ピン１２０及び下側ピン１３０と、を用いて一体成形される。
【００２７】
一対の金型１１０は、筒部２１及びリブ部２４の外面形状に対応した形状を有する。一対の金型１１０には、溶融した樹脂が充填される充填口１１５が形成される。
上側ピン１２０は、リブ部２４の上面、筒部２１の内面の一部、隔膜部２３の上面、並びに栓部２２の上面及び周面に対応した形状を有する。
下側ピン１３０は、筒部２１の下面及び内面の一部、隔膜部２３の下面、並びに栓部２２の下面に対応した形状を有する。
【００２８】
具体的には、ポート部材２０は、第１の工程〜第３の工程を経て製造される。
まず、第１の工程では、図８に示すように、一対の金型１１０、並びに上側ピン１２０及び下側ピン１３０が閉鎖される。この状態では、一対の金型１１０、並びに上側ピン１２０及び下側ピン１３０により、ポート部材２０の形状に対応した形状の空間が形成されている。
【００２９】
次いで、第２の工程では、図９に示すように、一対の金型１１０、並びに上側ピン１２０及び下側ピン１３０により形成された空間に、充填口１１５から溶融した樹脂が充填される。これにより、充填口１１５から充填された樹脂は、筒部２１、栓部２２、隔膜部２３及びリブ部２４に対応する空間に充填される。ここで、栓部２２を形成する空間には、隔膜部２３を形成する小さな空間を経由して樹脂が充填されるが、第１実施形態では、栓部２２を、凹部２２２を含んで形成することで、栓部２２に充填される樹脂の量を低減できる。
【００３０】
次いで、第３の工程では、図１０に示すように、樹脂が充填された閉鎖状態の金型が冷却された後、一対の金型１１０、並びに上側ピン１２０及び下側ピン１３０が開かれて、一体成型されたポート部材２０が取り出される。
【００３１】
以上のポート部材２０は、図１〜図３に示すように、リブ部２４が保存容器本体１０の外側に位置するように細胞導出口１３に配置される。
【００３２】
細胞導入チューブ３０は、生体試料から採取された細胞を無菌的かつ気密の状態で細胞導入口１２まで導く。この細胞導入チューブ３０は、ＥＶＡ樹脂等の熱可塑性樹脂により構成される。第１実施形態では、細胞導入チューブ３０の一端部は、細胞導入口１２に接続され、細胞導入チューブ３０の他端側は、血液等の生体試料を収容する生体試料収容容器（図示せず）に無菌的かつ気密に接続される。
【００３３】
以上の細胞保存容器１は、上述のように、細胞導入チューブ３０を介して血液バッグ等の生体試料収容容器に無菌的かつ気密に接続されて用いられる。
細胞保存容器１に細胞を収容する場合、生体試料収容容器において分離された所定の細胞（例えば、血清や臍帯血）は、細胞導入チューブ３０を介して細胞導入口１２から細胞収容室１１（第１細胞収容室１１１及び第２細胞収容室１１２）に導入される。細胞収容室１１に細胞が収容された後、細胞導入チューブ３０は、溶断される。これにより、細胞保存容器１は密閉される。また、必要に応じて連通部１１３が溶着等により遮断され、第１細胞収容室１１１及び第２細胞収容室１１２は分離される。
この状態で、細胞保存容器１は、凍結保存等される。
【００３４】
細胞保存容器１に保存された細胞を使用する場合には、例えば、図１１及び図１３に示すように、ロックシリンジ５００を用いて細胞を取り出す。
ロックシリンジ５００は、筒状のシリンジ本体５１０と、このシリンジ本体５１０の先端部に設けられた先端筒部５２０と、この先端筒部５２０の外側に設けられ内周面に雌ネジ部５３１が形成された筒状のロック部５３０と、シリンジ本体５１０に進退可能に挿入されるピストン５４０と、を有する。
【００３５】
細胞保存容器１に保存された細胞を使用する場合には、まず、シリンジ５００の先端筒部５２０をポート部材２０の筒部２１に挿入し、先端筒部５２０の先端面を栓部２２の上面に当接させる。この状態から、ロックシリンジ５００を更に押しこむ。すると、図１２及び図１３に示すように、栓部２２が下方に押し込まれることにより、この栓部２２に加えられた力が隔膜部２３に集中し、隔膜部２３が破断される。そして、栓部２２は、図１２及び図１３に示すように、細胞保存容器１００の内部に落下する。これにより、栓部２２及び隔膜部２３によって閉鎖されていた細胞導出口１３が開放される。
【００３６】
ここで、第１実施形態では、ポート部材２０の筒部２１にリブ部２４が設けられている。これにより、ロックシリンジ５００により栓部２２を押し込むとき、又は栓部２２を押し込んだ後に、リブ部２４をロック部５３０の雌ネジ部５３１に螺合させて、細胞導出口１３にロックシリンジ５００を容易かつ好適に接続できる。
【００３７】
第１実施形態の細胞保存容器１は、以下の工程により製造される。
まず、保存容器本体１０を構成する２枚のシート状部材のうちの一方のシート状部材に真空成形等の成形加工を施して第１細胞収容室１１１、第２細胞収容室１１２、細胞導入口１２及び細胞導出口１３に対応する形状を形成する。
【００３８】
次いで、一方のシート状部材における細胞導入口１２に対応する位置に細胞導入チューブ３０の一端部を配置し、細胞導出口１３に対応する位置にポート部材２０を配置する。
次いで、細胞導入チューブ３０及びポート部材２０が配置された一方のシート状部材に、２枚のシート状部材のうちの他方のシート状部材を重ねて配置し、これら２枚のシート状部材の周縁部及び第１細胞収容室１１１と第２細胞収容室１１２との境界部分を溶着する。これにより、２枚のシート状部材が接合されて保存容器本体１０が形成されると共に、細胞導入チューブ３０及びポート部材２０が保存容器本体１０に溶着されて強固に固定された細胞保存容器１が製造される。
【００３９】
以上の工程を経て製造された第１実施形態の細胞保存容器１は、図４に示すように、第１面１０ａ側に、主として細胞収容室１１の形状に起因した凹凸が形成されており、第２面１０ｂ側は平面状に形成される。
【００４０】
以上説明した第１実施形態の細胞保存容器１によれば、以下のような効果を奏する。
【００４１】
（１）ポート部材２０を、筒部２１と、この筒部２１の内部に配置される栓部２２と、筒部２１と栓部２２とを接続する隔膜部２３と、を含んで構成し、このポート部材２０を細胞導出口１３に取り付けて細胞保存容器１を構成した。これにより、細胞保存容器１に収容した細胞を取り出す場合に、ロックシリンジ５００等により栓部２２を押し込むことで隔膜部２３を破断させて細胞導出口１３を開放させられる。よって、針を用いることなく細胞導出口１３を開放させられるので、誤穿針を発生させることなく細胞収容室１１に収容された細胞を取り出せる。
【００４２】
（２）ポート部材２０を一体成形する場合、栓部２２を形成する空間には、隔膜部２３を形成する小さな空間を経由して樹脂が充填される。そこで、栓部２２を、凹部２２２を含んで形成した。これにより、栓部２２に充填する樹脂の量を低減できるので、ポート部材２０の製造に係る時間を短縮できる。
【００４３】
（３）隔膜部２３を、筒部２１の内面と栓部２２の下面の周縁部とを接続して構成したこれにより、栓部２２を、ロックシリンジ５００等が挿入される上面側に突出させられる。よって、ロックシリンジ５００等により栓部２２を押し込む力を隔膜部２３に伝達させやすくできるので、ロックシリンジ５００等を用いた細胞導出口１３の開放作業をより容易に行える。
【００４４】
（４）従来、医療分野において、内面に雌ネジ部５３１が形成された筒状の部材からなるロック部５３０が先端部に設けられたロックシリンジ５００が用いられている。そこで、ポート部材２０を、リブ部２４を含んで構成した。これにより、リブ部２４をロック部５３０の雌ネジ部５３１に係合（螺合）させることで、ポート部材２０とロックシリンジ５００とを容易に接続できる。よって、細胞保存容器１とロックシリンジ５００との接続を簡易かつ安定的に行えるので、細胞保存容器１に収容された細胞の取り出しをより容易に行え、また、細胞の無菌性をより安定的に維持できる。
【００４５】
次に、本発明の細胞保存容器の第２実施形態〜第４実施形態について、図１４〜図１６を参照しながら説明する。尚、第２実施形態以降の説明にあたって、同一構成要件については同一符号を付し、その説明を省略もしくは簡略化する。
第２実施形態〜第４実施形態の細胞保存容器は、ポート部材２０の形状において第１実施形態と相違する。
【００４６】
図１４は、第２実施形態の細胞保存容器１のポート部材２０Ａを示す縦断面図である。
図１４に示すように、第２実施形態に係るポート部材２０Ａは、隔膜部２３Ａが筒部２１の内面から栓部２２の下面に向かって上り傾斜して形成される点で、第１実施形態と相違する。
第２実施形態のポート部材２０Ａを具備する細胞保存容器１によれば、上記（１）〜（４）の効果を奏する他、以下のような効果を奏する。
【００４７】
（５）隔膜部２３Ａを、筒部２１の内面から栓部２２の下面に向かって上り傾斜して形成した。これにより、栓部２２を下方に押しこむ力を隔膜部２３Ａにより集中させられるので、ロックシリンジ５００等を用いた細胞導出口１３の開放作業をより容易に行える。
【００４８】
図１５は、第３実施形態の細胞保存容器１のポート部材２０Ｂを示す縦断面図である。
図１５に示すように、第３実施形態に係るポート部材２０Ｂは、隔膜部２３Ｂが筒部２１の内面から栓部２２の下面に向かって下り傾斜して形成される点で、第１実施形態と相違する。
第３実施形態のポート部材２０Ｂを具備する細胞保存容器１によれば、上記（１）〜（４）の効果を奏する他、以下のような効果を奏する。
【００４９】
（６）隔膜部２３Ｂを、筒部２１の内面から栓部２２の下面に向かって下り傾斜して形成した。これにより、隔膜部２３Ｂを破断させて栓部２２を下方に落下させる場合に、破断して筒部２１の内面側に残存した隔膜部２３Ｂにより栓部２２の落下を阻害しにくくできる。よって、細胞導出口１３を好適に開放させられる。
【００５０】
図１６は、第４実施形態の細胞保存容器１のポート部材２０Ｃを示す縦断面図である。
図１６に示すように、第４実施形態に係るポート部材２０Ｃは、主として、凹部２２２Ｃが栓本体２２１Ｃの下面に形成されている点で、第１実施形態と相違する。
第４実施形態のポート部材２０Ｃを具備する細胞保存容器１によれば、上記（１）〜（４）の効果を奏する他、以下のような効果を奏する。
【００５１】
（７）栓部２２Ｃを、凹部２２２Ｃを栓本体２２１Ｃの下面に形成して構成した。これにより、栓本体２２１Ｃの上面を平面状に形成できるので、ロックシリンジ５００等を用いて栓部２２Ｃを押しこむ場合に、栓部２２Ｃをより押し込みやすくできる。
【００５２】
以上、本発明の細胞保存容器の好ましい各実施形態について説明したが、本発明は、上述した各実施形態に制限されるものではなく、適宜変更が可能である。
例えば、第１実施形態〜第４実施形態では、本発明を、幹細胞や臍帯血を凍結して保存する細胞保存容器１に適用したがこれに限らない。即ち、本発明を、血液を凍結することなく収容して一時的に保存する細胞保存容器（例えば、血液バッグ）に適用してもよい。
【００５３】
また、第１実施形態〜第４実施形態では、ポート部材２０をＥＶＡ等の軟質の剛性樹脂により構成したが、これに限らない。即ち、ポート部材をポリプロピレン等の硬質の剛性樹脂により構成してもよい。
【００５４】
また、第１実施形態〜第４実施形態では、凹部を栓本体の上面又は下面のいずれかに形成したが、これに限らない。即ち、凹部を栓本体の上面及び下面の両方の面に形成してもよい。
【符号の説明】
【００５５】
１、  細胞保存容器
１１  細胞収容室
１２  細胞導入口
１３  細胞導出口
２０、２０Ａ、２０Ｂ、２０Ｃ  ポート部材
２１  筒部
２２、２２Ｃ  栓部
２３、２３Ａ、２３Ｂ  隔膜部
２４  リブ部
２５  リブ部
３０  細胞導入チューブ
２２１、２２１Ｃ  栓本体
２２２、２２２Ｃ  凹部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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