(57)【要約】      （修正有）【課題】機能性フィルムを、機能性を発揮する領域（機能性化合物層）に負圧吸引による影響（損傷等）を生じさせることなく、細胞培養容器へ移送することのできる負圧吸着ヘッドを提供する。【解決手段】吸着面４１の周縁部の領域ｓ１に主に負圧吸引孔４４が形成され、機能性フィルム１０は、該周縁部の領域ｓ１に形成された負圧吸引孔４４によって吸着ヘッド４０の吸着面４１に実質的に吸着される負圧吸着ヘッド４０。【選択図】図１
2013116071.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
機能性フィルムを複数の負圧吸引孔を備えた吸着面に負圧吸引して細胞培養容器へ移送した後、負圧を開放して機能性フィルムを細胞培養容器へ落下させるのに用いる負圧吸着ヘッドであって、
前記負圧吸引孔は前記吸着面における周縁部の領域に形成され、
該周縁部の領域に形成された負圧吸引孔により前記機能性フィルムが前記吸着面に実質的に吸着されることを特徴とする負圧吸着ヘッド。
【請求項２】
前記吸着面の負圧吸引孔が形成されている周縁部の領域で囲まれた内側領域は前記周縁部の領域から凹陥した領域とされていることを特徴とする請求項１に記載の負圧吸着ヘッド。
【請求項３】
請求項１または２に記載の負圧吸着ヘッドを用いた細胞培養容器の製造方法であって、機能性フィルムを前記負圧吸着ヘッドの前記負圧吸引孔が形成されている周縁部の領域で負圧吸引した後、細胞培養容器まで移送して機能性フィルムと細胞培養容器とを対向した位置とし、その後、負圧を開放して機能性フィルムを細胞培養容器に向けて落下させることを特徴とする細胞培養容器の製造方法。
【請求項４】
請求項１または２に記載の負圧吸着ヘッドを用いた細胞培養容器の製造方法であって、前記機能性フィルムとして周縁部に機能性を備えない領域を持つ機能性フィルムを用い、該機能性フィルムの前記機能性を備えない領域を前記負圧吸着ヘッドの前記負圧吸引孔が形成されている周縁部の領域で負圧吸引した後、細胞培養容器まで移送して機能性フィルムと細胞培養容器とを対向した位置とし、その後、負圧を開放して機能性フィルムを細胞培養容器に向けて落下させることを特徴とする細胞培養容器の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、機能性フィルムを細胞培養容器へ移送するための負圧吸着ヘッドとそれを用いた細胞培養容器の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
表面に細胞培養される親水性ポリマー（温度応答性ポリマー)の層（機能性層）を被覆した細胞培養支持体（シャーレなどの細胞培養容器）が特許文献１に記載されている。この細胞培養支持体を用いることにより、温度を変化させるだけで培養・増殖後の細胞を破壊することなく細胞支持体から容易に剥離して回収することができる。しかし、特許文献１に記載のように、シャーレなどの細胞培養容器に、別個にバッチ処理により表面処理をして機能性化合物層を設けることは、多くの手間を必要としており、作業性の観点からはなお改善する余地がある。
【０００３】
また、プレプリントされていて剥離機により剥離発行されるシール類を所望の製品に貼り付けるためのシール貼り付け装置として、シールを負圧吸引する吸引部の吸引面の全面に多数の負圧吸引孔を形成した負圧吸着ヘッドを用い、シール貼り付け時には吸引を解除するようにしたシールの貼り付け装置は、特許文献２に記載されているように、広く知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平２−２１１８６５号公報
【特許文献２】特開２００９−１５４９０４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
特許文献１に記載される細胞培養支持体の持つバッチ処理による不都合を解消する手法として、機能性化合物層を備えた機能性フィルムの多数個を帯状の剥離フィルム上に配列した原反を予め作っておき、ラベリングの手法を使って、原反から機能性フィルムを連続的に剥離させるとともに、各剥離した機能性フィルムを、特許文献２に記載されるような、一般的なシール材等の搬送手段として用いられている負圧吸着ヘッドを用いて、細胞培養容器まで移送した後、負圧を開放して、機能性フィルムを細胞培養容器の底部に配置する手法が考えられる。
【０００６】
本発明者らは従来から用いられている負圧吸着ヘッドを用い、負圧吸着ヘッドの吸着面に機能性フィルムを吸着した状態で細胞培養容器の上まで移送し、そこで負圧の開放を行って機能性フィルムを細胞培養容器の底面に落下させる実験を行って来ているが、そこにおいて、落下した機能性フィルムの機能面（機能性化合物層）に負圧吸引による損傷が生じてしまう場合があることを経験した。特に、全面に負圧吸引孔を形成した負圧吸着ヘッドを用いる場合には、負圧吸引による損傷は機能性フィルムの有効面である機能性化合物層の全面に生じる場合があり、細胞の培養等に有意な支障が生じることも経験した。
【０００７】
本発明は上記の事情に鑑みてなされたものであり、機能性フィルムを負圧吸着ヘッドを用いて細胞培養容器へ移送するときに、機能性フィルムの機能性層（機能性化合物層）の全域または主たる領域に負圧吸引による影響（損傷等）を生じさせることなく移送することのできる負圧吸着ヘッドを提供することを第１の課題とする。また、その負圧吸着ヘッドを用いて機能性フィルムを細胞培養容器の底面に移送する細胞培養容器の製造方法を提供することを第２の課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明による負圧吸着ヘッドは、機能性フィルムを複数の負圧吸引孔を備えた吸着面に負圧吸引して細胞培養容器へ移送した後、負圧を開放して機能性フィルムを細胞培養容器へ落下させるのに用いる負圧吸着ヘッドであって、前記負圧吸引孔は前記吸着面における周縁部の領域に形成され、該周縁部の領域に形成された負圧吸引孔により前記機能性フィルムが前記吸着面に実質的に吸着されることを特徴とする。
【０００９】
本発明による負圧吸着ヘッドを用いて機能性フィルムを負圧吸引する場合、負圧吸着ヘッドの周縁部の領域に形成された負圧吸引孔により機能性フィルムが吸着面に実質的に吸着されるので、負圧による吸引力は、当該機能性フィルムの主に周縁部に作用することとなり、周縁部以外の領域には実質的に作用しない。したがって、機能性フィルムの機能面における前記周縁部以外の領域に負圧吸引に起因する影響（損傷等）が生じるのを回避することができる。もし、機能性フィルムとして、周縁部に機能性を備えない領域を持つ機能性フィルムを用いる場合には、機能面の全領域に負圧吸引に起因する影響（損傷等）を生じさせないで、所要の移送を行うことができる。
【００１０】
本発明による負圧吸着ヘッドの他の態様では、前記負圧吸引孔が形成されている周縁部の領域で囲まれた内側領域は前記周縁部の領域から凹陥した領域とされていることを特徴とする。この態様の負圧吸着ヘッドでは、機能性フィルムを負圧吸引したときに、機能性フィルムが負圧吸着ヘッドの吸着面と接触する領域を、負圧吸引孔が形成されている周縁部の領域のみに限定することができる。そのために、機能性フィルムの機能面に擦過などの損傷が生じるのを一層確実に回避することができる。
【００１１】
本発明は、さらに、上記の負圧吸着ヘッドを用いた細胞培養容器の製造方法として、機能性フィルムを前記負圧吸着ヘッドの前記負圧吸引孔が形成されている周縁部の領域で負圧吸引した後、細胞培養容器まで移送して機能性フィルムと細胞培養容器とを対向した位置とし、その後、負圧を開放して機能性フィルムを細胞培養容器に向けて落下させることを特徴とする細胞培養容器の製造をも開示する。
【００１２】
本出願は、さらに、上記の負圧吸着ヘッドを用いた細胞培養容器の製造方法として、前記機能性フィルムとして周縁部に機能性を備えない領域を持つ機能性フィルムを用い、該機能性フィルムの前記機能性を備えない領域を前記負圧吸着ヘッドの前記負圧吸引孔が形成されている周縁部の領域で負圧吸引した後、初期位置から細胞培養容器まで移送して機能性フィルムと細胞培養容器とを対向した位置とし、その後、負圧を開放して機能性フィルムを細胞培養容器に向けて落下させることを特徴とする細胞培養容器の製造をも開示する。
【００１３】
なお、本発明において「機能性を備えない領域」の言葉は、機能性フィルムにおいて機能性を発揮する層（機能性層である機能性化合物層）が形成されていない領域ばかりでなく、機能性層が形成されていても、当初から機能性を発揮することを期待しない機能性層の領域をも含むものとして用いている。
【００１４】
本発明において、負圧吸着ヘッドの吸着面の平面視での形状は、特に限定されないが、好ましくは、移送する機能性フィルムを収容する細胞培養容器の底面形状とほぼ一致した形状である。また、移送する機能性フィルムの平面形状も細胞培養容器の底面形状とほぼ一致した形状である。具体的には、負圧吸着ヘッドの吸着面の平面視での形状には、円形状、矩形状などを例示できる。
【発明の効果】
【００１５】
本発明による負圧吸着ヘッドを用いることにより、機能性フィルムにおける機能性を発揮する領域に負圧吸引による影響（損傷等）を生じさせることなく、適宜位置から、細胞培養容器の直上位置まで移送することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明による負圧吸着ヘッドの一例を示す断面図（ａ）と下方から見た平面図（ｂ）。
【図２】機能性フィルムの平面図であり、（ａ）は負圧吸着ヘッドでの吸着前の状態を、（ｂ）は負圧解消後の状態を示す。
【図３】本発明による負圧吸着ヘッドの他の例を示す断面図（ａ）と下方から見た平面図（ｂ）。
【図４】機能性フィルムの他の例を示す断面図。
【図５】機能性フィルムの一例を説明する模式図であり、図６のａ−ａ線に沿う断面で示している。
【図６】多数個の機能性フィルムを帯状の剥離フィルムに仮接着した原反を説明する模式図。
【図７】図５に示した原反を用いて機能性フィルムを細胞培養容器へ移送する装置の一例を説明する図。
【図８】細胞培養容器の一例を示す図。
【図９】従来の負圧吸着ヘッドの一例を示す断面図（ａ）と下方から見た平面図（ｂ）。
【図１０】図９に示す負圧吸着ヘッドを用いた場合の負圧解放後の機能性フィルムの状態を示す図。
【図１１】機能性フィルムが細胞培養容器へ落下する状態を説明する図。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明を実施の形態に基づき説明する。
図１は、本発明による負圧吸着ヘッド４０の一例を示す。負圧吸着ヘッド４０は、図１（ａ）の断面図に示すように、実質的に平坦面である吸着面４１と該吸着面４１の裏面側の空気室４２とを備える。前記空気室４２は、例えばエアーシリンダ３１の空気路３６と接続しており、前記空気路３６は適宜の図示しない空気吸引および排気手段に接続している。図１（ｂ）に示すように、この例において、前記吸着面４１の形状は平面視で円形であり、該吸着面４１における周縁部の領域ｓ１には多数の負圧吸引孔４４が形成されている。負圧吸引孔４４は、負圧吸引孔が形成されている周縁部ｓ１の領域で囲まれた内側領域ｓ２には形成されていないことが好ましい。形成する場合にも、単位面積あたりの負圧吸引孔の数は、周縁部の領域ｓ１におけるよりも少ない数、例えば１／５〜１／１０程度の数とする。
【００１８】
図２（ａ）は、後に図５および図６を参照して説明する機能性フィルム１０を機能性層側（機能性化合物層１２側）から見て示す平面図であり、機能性フィルム１０は、図１に示した負圧吸着ヘッド４０の吸着面４１と同じ形状と大きさのものである。負圧吸着ヘッド４０によって吸着される前は、図２（ａ）に示すように、前記機能性層（機能性化合物層１２）の面には、その周縁部ｐ１および該周縁部ｐ１で囲まれた内部領域ｐ２には、当然に何の損傷もない。図２（ｂ）は負圧吸着ヘッド４０によって機能性フィルム１０が負圧吸着された後、負圧が開放されて負圧吸着ヘッド４０の吸着面４１から離脱した状態を示している。図に示されるように、機能性フィルム１０の周縁部ｐ１には、負圧吸引に起因する影響（図示の例では負圧吸引孔４４の痕跡による損傷ｋ）が生じているが、周縁部ｐ１で囲まれた内部領域ｐ２には、負圧吸引に起因する影響（損傷ｋ）は生じていない。周縁部ｐ１で囲まれた内部領域ｐ２内に負圧吸引口が形成される場合であっても、その数は極めてわずかであり、負圧吸引に起因する影響（損傷ｋ）が生じるとしても、細胞培養に実質的な影響を与えることはない。
【００１９】
図９（ａ）（ｂ）は、従来から使用されている負圧吸着ヘッド１００を示しており、その吸着面１０１には全面にわたり多数の負圧吸引孔１０２が形成されている。この形態の負圧吸着ヘッド１００を用いて機能性フィルム１０を負圧吸着し、負圧を開放して負圧吸着ヘッド１００の吸着面１０１から離脱させた場合には、図１０に示すように、機能性フィルム１０の機能性層（機能性化合物層１２）の全面に負圧吸引による影響、すなわち負圧吸引孔１０２の痕跡による損傷ｋが生じるのを避けられない。離脱した機能性フィルム１０は、図１１に示すように、機能性層側を上面として細胞培養容器５０内に落下して、その底面５１に固定されるが、機能性層（機能性化合物層１２）の全面に無視できない程度の損傷ｋが生じている場合には、細胞の培養に支障をきたすことが起こり得る。
【００２０】
本発明による負圧吸着ヘッド４０を用いる場合には、前記したように、負圧吸引による影響（損傷ｋ）が生じるとしても、それは機能性フィルム１０の周縁部ｐ１のみであり、周縁部ｐ１で囲まれた内部領域ｐ２に影響（損傷ｋ）が生じることはない。そのために、機能性フィルム１０の有効面積を広く確保することができる。そして、機能性フィルム１０を用いて細胞培養等を行うときに、当初から、前記周縁部ｐ１は「機能性を備えない領域」として認識しておくことにより、内部領域ｐ２を有効領域とした所期どおりの細胞培養等を実施することが可能となる。
【００２１】
図３は、本発明による負圧吸着ヘッド４０の他の例を示す。この形態では、吸着面４１の負圧吸引孔４４が形成されている周縁部の領域ｓ１で囲まれた内側領域ｓ２は、周縁部の領域ｓ１からわずかに凹陥した凹嵌領域４５とされている。この負圧吸着ヘッド４０を用いる場合には、負圧吸着ヘッド４０での負圧吸着時に、機能性フィルム１０が負圧吸着ヘッド４０の吸着面４１に接するのは、周縁部ｐ１のみであり、領域ｐ１で囲まれた内側領域ｐ２は吸着面４１に接することはない。したがって、機能性フィルム１０の機能性層に擦過等による損傷が生じるのを一層確実に回避することができる。
【００２２】
図４は、本発明による負圧吸着ヘッド４０で負圧吸着して移送する機能性フィルム１０の他の例を示す断面図である。この機能性フィルム１０Ａは平面視で円形であり、フィルム基材層１１の一方の面に機能性層としての機能性化合物層１２が積層され、他方の面に粘着剤層１３が積層されている。フィルム基材層１１の大きさと形状は、図１あるいは図３に示した負圧吸着ヘッド４０での吸着面４１の大きさと形状と同じであるが、機能性化合物層１２の大きさと形状は、負圧吸着ヘッド４０の吸着面４１における前記した周縁部ｓ１の領域で囲まれた内側領域ｓ２の大きさおよび形状とほぼ同じとされている。したがって、機能性フィルム１０Ａでは、周縁部ｐ１は機能性化合物層１２が存在しない「機能性を備えない領域」であり、周縁部ｐ１で囲まれた内部領域ｐ２のみが機能性層となる。そのために、本発明による負圧吸着ヘッド４０によって機能性フィルム１０Ａを負圧吸着したときに、機能性層（機能性化合物層１２）に負圧吸引による影響（損傷ｋ）が生じるのを完全に回避することができる。
【００２３】
次に、図２に示した機能性フィルム１０を得るための原反２２と、そこから剥離した機能性フィルム１０を細胞培養容器５０を移送するための装置の一例を説明する。なお、本発明において、機能性フィルムとは、可撓性を有しており、かつ表面に細胞培養に適した所望の機能が付与された、粘着剤層を備えたフィルムであることが好ましい。好ましい実施形態では、図５に示すように、フィルム基材層１１の一方の面に機能性化合物層１２が積層され、他方の面に粘着剤層１３が積層されている。なお、図５において、１４は後記する帯状をなす剥離フィルムであり、２１は切り込み線である。また、機能性フィルム１０を構成する各素材については、後に詳述する。
【００２４】
図５に示す層構造の機能性フィルム１０は、任意の方法で作ることができるが、一例として次のようにして作られる。すなわち、帯状をなす剥離フィルム１４の全面に前記粘着剤層１３を塗布し、その上に、同じ幅であるやはり帯状のフィルム基材層１１と機能性化合物層１２を積層する。それにより、図に示すように、剥離フィルム１４と粘着剤層１３とフィルム基材層１１と機能性化合物層１２の層の４層構造からなる、長尺物２０（図６参照）が形成される。ここで、粘着剤層１３とフィルム基材層１１と機能性化合物層１２の３層が、機能性フィルム１０を構成する。なお、剥離フィルム１４には、必要な強度や柔軟性を有する限り特に限定されないが、例えば、ポリエチレンテレフタレート等の樹脂からなるフィルムまたはそれらの発泡フィルムに、シリコーン系剥離剤等の剥離剤で剥離処理したものを挙げることができる。
【００２５】
長尺物２０の前記剥離フィルム１４とは反対の面から、得ようとする機能性フィルム１０の外郭形状を持つ型枠（不図示）を、剥離フィルム１４の表面にまで達するように押下する。それにより、機能性化合物層１２とフィルム基材層１１と粘着剤層１３には、機能性フィルム１０の外郭形状をなす切り込み線２１が形成される。その型押し作業を所定の間隔をおいて連続的に長尺物２０に対して行うことにより、図６に示すような、複数個の切り込み線２１の入った長尺物２０が得られる。そして、前記長尺物２０は、機能性フィルム１０側が内側となるようにしてロール状に巻き込まれて原反２２（図７参照）とされ、保管される。
【００２６】
なお、機能性フィルム１０の平面視での形状には制限はなく任意の形状を取ることができ、それに応じた型枠が用いられる。図５、６に示した例では、円形の細胞培養容器５０の底面５１に配置することを予定する機能性フィルム１０を得ようとするものであり、切り込み線２１は、細胞培養容器５０の底面５１の内周輪郭の形状とほぼ同じ、円形形状とされている。
【００２７】
図７は、前記した原反２２から前記切り込み線２１で区分けされた機能性フィルム１０を分離し、分離後の機能性フィルム１０を細胞培養容器５０の底面５１に移し替える装置の一例を示している。図示の移し替え装置３０は、従来知られた３次元ロボットアーム（不図示）に取り付けられたエアーシリンダ３１を備え、該エアーシリンダ３１の下方先端に、前記した本発明による負圧吸着ヘッド４０が着脱可能に装着されている。エアーシリンダ３１は、３次元ロボットアームの制御装置（不図示）により、面方向であるＸ−Ｙ軸方向および垂直方向であるＺ軸方向に移動可能とされている。
【００２８】
エアーシリンダ３１の近傍には、水平方向またはわずかに下方に傾斜した方向に延在する案内台３２が位置しており、前記原反２２から巻き出される長尺物２０は、ガイドロール３３・・によって案内されることで、前記案内台３２の上面に沿って移動し、先端でＵターンした後、巻き取りロール３４によって巻き取られる。長尺物２０が案内台３２の先端でＵターンするときに、前記切り込み線２１によって区画された内側の領域は剥離フィルム１４から剥離し、案内台３２の上面の延長線方向に送り出される。すなわち、機能性化合物層１２とフィルム基材層１１と粘着剤層１３の３層構造からなる円形状の機能性フィルム１０が、粘着剤層１３側を下面側とした姿勢で連続的に剥離フィルム１４から剥離し、水平方向またはわずかに下方に傾斜した方向に送り出される。
【００２９】
移し替え装置３０は、さらに、細胞培養容器５０を水平姿勢に載置した状態で間欠的に移動と停止を繰り返すことのできる搬送コンベア３５を備えている。また、好ましくは、前記案内台３２の先端近傍であって送り出される機能性フィルム１０の下方位置には、機能性フィルム１０の横幅にほぼ等しい横幅を持つエアノズル３７が空気噴出方向を斜め上方に向けた姿勢で取り付けられる。エアノズル３７からの噴出空気を下方から受けることにより、剥離フィルム１４から剥離して送り出される機能性フィルム１０は、その後もほぼ水平な姿勢を維持することができる。
【００３０】
負圧吸着ヘッド４０は、前記したように、実質的に平坦面である吸着面４１と該吸着面４１の裏面側の空気室４２とを有しており、前記空気室４２は前記エアーシリンダ３１の空気路３６と接続している。
【００３１】
ロボットアームの制御装置は、送り出されてくる機能性フィルム１０を負圧吸着ヘッド４０によって負圧吸引することのできる位置に、前記エアーシリンダ３１を位置させる。そして、吸引手段によって空気室４２内の空気を吸引することで、吸着面４１に負圧を発生させ、それにより、機能性フィルム１０の周縁部ｐ１が、吸着面４１の周縁部である多数の負圧吸引孔４４が形成された領域ｓ１に負圧吸着される。
【００３２】
その状態で制御装置はロボットアームを操作して、エアーシリンダ３１を前記搬送コンベア３５で搬送されてくる細胞培養容器５０の直上位置に移動させる。移動後、細胞培養容器５０の底面と機能性フィルム１０との距離が０．１ｍｍ〜１０ｍｍ程度となるまでエアーシリンダ３１を下降させ、下降位置で、負圧を開放すると同時に、必要な場合には、排気手段を操作して空気室４２内に所定圧の空気を送り込む。この空気は吸着面４１に形成した各負圧吸引孔４４から吐出（排気）され、自重に加えて空気の吐出圧によって、機能性フィルム１０は細胞培養容器５０の底面に向けて落下する（図１１も参照）。
【００３３】
本発明による負圧吸着ヘッド４０を用いて機能性フィルム１０（１０Ａ）を負圧吸着し、その後、負圧を開放して機能性フィルム１０（１０Ａ）を細胞培養容器５０に向けて落下させ、機能性フィルム１０（１０Ａ）を容器底面に固定した細胞培養容器５０においては、前記したように、機能性フィルム１０の場合には、機能性層（機能性化合物層１２）の周縁部ｐ１のみに負圧吸引による影響が顕れるだけであり、機能性フィルム１０Ａの場合には、機能性層（機能性化合物層１２）には負圧吸引による影響はまったく顕れない。したがって、収率のよい細胞培養容器が得られる。
【００３４】
上記では、負圧吸着ヘッド４０として平面視で円形のものを説明したが、負圧吸着ヘッド４０の形状は、円形に限らず、吸着した機能性フィルム１０を移送する細胞培養容器５０の底面５１の形状に依存して定められる。一例として、図８に示すようなフラスコ型容器５０Ａを挙げることができる。
【００３５】
フラスコ型細胞培養容器５０Ａは、矩形状の平板の一方端側が狭くなった形状の底板３０１と、底板３０１の形状に沿った外郭形状である側壁部３０２と、側壁部３０２の上面を閉鎖する天面３０３とを備える。この形状のフラスコ型細胞培養容器５０Ａの場合には、図示しないが、負圧吸着ヘッド４０として底板３０１の外郭形状に沿った吸着面を持つ負圧吸着ヘッドであって、その吸着面における周縁部の領域にのみ負圧吸引孔４４が形成された負圧吸着ヘッドが用いられる。また、機能性フィルム１０にも底板３０１の外郭形状に沿った外郭形状である機能性フィルムが用いられる。機能性フィルム１０を負圧吸着した負圧吸着ヘッド４０を底板３０１の位置まで移動し、そこで負圧を開放することにより、機能性フィルム１０は、周縁部ｐ１にのみ負圧吸引による影響（損傷ｋ）が顕れた状態で、底板３０１に固定される。機能性フィルム１０を固定した底板３０１に適宜の手段により側壁部３０２を溶着し、さらにその上に天面３０３を溶着することで、フラスコ型細胞培養容器５０Ａが形成される。
【００３６】
次に、本発明において用いられる機能性フィルム１０を構成する材料を説明する。
＜フィルム基材層１１＞
限定されないが、フィルム基材層１１は、一方の表面に前記機能性化合物層１２を形成することが可能な材料を含むものであればよく、材料の種類は特に限定されない。典型的には、フィルム基材層１１の材料として、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ＴＡＣ（トリアセチルセルロース）、ポリイミド（ＰＩ）、ナイロン（Ｎｙ）、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、中密度ポリエチレン（ＭＤＰＥ）、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ポリフェニレンサルファイド、ポリエーテルサルフォン、ポリエチレンナフタレート、ポリプロピレン、アクリル等が挙げられる。
【００３７】
フィルム基材層１１の、機能性化合物層１２が形成される側の表面は、易接着処理された表面であることができる。「易接着処理」とは、例えば、ポリエステル、アクリル酸エステル、ポリウレタン、ポリエチレンイミン、シランカップリング剤、ペルフルオロオクタンスルホン酸（ＰＦＯＳ）等の易接着剤による処理を指す。
【００３８】
フィルム基材層１１の厚さ（フィルム基材層１１が基材の層に加えて易接着層を備える場合は、易接着層を含むフィルム基材層の全体の厚さを指す）は、特に制限は無いが可撓性を付与する厚さであることが好ましく、例えば５μｍ〜４００μｍ、好ましくは５０μｍ〜２５０μｍである。
【００３９】
＜機能性化合物層１２＞
機能性化合物層１２を構成する機能性化合物としては、有機化合物または無機化合物が挙げられ、より好ましくは、所定の刺激によって細胞接着性から細胞非接着性へと変化することが可能な表面を有する刺激応答性ポリマーや、１つ以上のエチレングリコール単位（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）からなるエチレングリコール鎖等の親水性化合物が挙げられる。
【００４０】
機能性化合物層の膜厚は、例えば、０．５ｎｍ〜３００ｎｍの範囲内とするのがよく、なかでも１ｎｍ〜１００ｎｍの範囲内であることが好ましい。
【００４１】
以下「刺激応答性ポリマー層」および「親水性化合物層」の好適な実施形態について説明する。
＜刺激応答性ポリマー層＞
機能性有機化合物層は、刺激応答性ポリマー層であることが特に好ましい。刺激応答性ポリマー層とは、所定の刺激によって表面の細胞の接着度合いが変化するポリマーを含む層である。刺激応答性ポリマーとしては、温度応答性ポリマー、ｐＨ応答性ポリマー、イオン応答性ポリマー、光応答性ポリマーなどを挙げることができる。なかでも温度応答性ポリマーが、刺激の付与が容易であることから好ましい。
【００４２】
温度応答性ポリマーとして、例えば、細胞を培養する温度では細胞接着性を示し、作製した細胞シートの剥離する時の温度では細胞非接着性を示すものを用いるとよい。例えば、温度応答性ポリマーは、臨界溶解温度未満の温度では周囲の水に対する親和性が向上し、ポリマーが水を取り込んで膨潤して表面に細胞を接着しにくくする性質（細胞非接着性）を示し、同温度以上の温度ではポリマーから水が脱離することでポリマーが収縮して表面に細胞を接着しやすくする性質（細胞接着性）を示すものを用いるとよい。このような臨界溶解温度は、下限臨界溶解温度と呼ばれる。下限臨界溶解温度Ｔが０℃〜８０℃、さらに好ましくは０℃〜５０℃である温度応答性ポリマーを用いるとよい。Ｔが０℃〜８０℃であると、細胞を安定的に培養できるからである。
【００４３】
好適な温度応答性ポリマーとしては、アクリル系ポリマーまたはメタクリル系ポリマーが挙げられる。具体的に好適な温度応答性ポリマーとしては、例えばポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド(Ｔ＝３２℃)、ポリ−Ｎ−ｎ−プロピルアクリルアミド(Ｔ＝２１℃)、ポリ−Ｎ−ｎ−プロピルメタクリルアミド(Ｔ＝３２℃)、ポリ−Ｎ−エトキシエチルアクリルアミド(Ｔ＝約３５℃)、ポリ−Ｎ−テトラヒドロフルフリルアクリルアミド(Ｔ＝約２８℃)、ポリ−Ｎ−テトラヒドロフルフリルメタクリルアミド（Ｔ＝約３５℃）、およびポリ−Ｎ,Ｎ−ジエチルアクリルアミド(Ｔ＝３２℃)等が挙げられる。
【００４４】
ｐＨ応答性ポリマーおよびイオン応答性ポリマーは作製しようとする細胞シートに適したものを適宜選択することができる。
【００４５】
刺激応答性ポリマー層は、重合して目的の刺激応答性ポリマーを形成するモノマーと、該モノマーを溶解しうる有機溶媒と含む塗布用組成物を調製し、これを慣用の塗布方法に従って、フィルム基材の表面に塗布して塗膜を形成し、次に、該塗膜に放射線照射等の適当な手段により塗膜中のモノマーを重合してポリマーを形成するとともに、フィルム基材の表面とポリマーとの間にグラフト化反応を生じさせることにより形成することができる。
【００４６】
＜親水性化合物層＞
機能性有機化合物層の他の実施形態として、１つ以上のエチレングリコール単位からなるエチレングリコール鎖（複数のエチレングリコール単位からなるエチレングリコール鎖は、「ポリエチレングリコール鎖」ということができる）等の親水性化合物の層が挙げられる。
【００４７】
エチレングリコール鎖の末端は水酸基により封鎖された形態であってもよいし、エチレングリコール鎖の末端に生体関連物質等の他の物質が共有結合により連結された形態であってもよい。
【００４８】
末端が水酸基により封鎖されたエチレングリコール鎖を含む層は、細胞が接着し難い親水性の表面を提供することができる。
【００４９】
エチレングリコール鎖の末端に共有結合されうる生体関連物質としては、抗原、抗体、DNA、RNA、ペプチド、ホルモン、酵素、サイトカイン、糖鎖、脂質、補酵素、酵素阻害剤、細胞、その他の機能を有するタンパク質が含まれる。更に、このような生体関連物質と親和性を有する低分子化合物、および高分子化合物も生体関連物質の範囲に含まれる。
【００５０】
エチレングリコール鎖等の親水性化合物の層を、樹脂製のフィルム基材層の表面に固定化するためには、予め、フィルム基材層の表面に、物理的に吸着可能であって、エチレングリコール鎖の末端の水酸基と反応して共有結合を形成可能な官能基を側鎖に含むポリシロキサンを含むプライマー層を設ける。ポリシロキサンの側鎖上の官能基としては、グリシジル基またはエポキシ基が好ましい。プライマー層は、フィルム基材層の表面に、所望の側鎖を有するシラノール化合物を適用し、該表面上で縮合重合してポリシロキサンに変換することにより形成することができる。
【００５１】
次いで、プライマー層の官能基と、エチレングリコールまたはエチレングリコール単位が２以上繰り返されたポリエチレングリコールの水酸基とを反応させて共有結合を形成し、エチレングリコール鎖を固定化する。このとき、触媒量の濃硫酸を含むエチレングリコールまたはポリエチレングリコールをプライマー層に接触させる。
末端が水酸基により封鎖されたエチレングリコール鎖を含む層はこのようにして形成される。
【００５２】
更に、必要に応じて、エチレングリコール鎖の一端に、他の物質との共有結合を形成することが可能な、少なくとも１つの官能基を直接的または間接的に連結させる。官能基の導入方法は特に限定されない。
【００５３】
＜粘着剤層１３＞
粘着剤層１３を構成する粘着剤としてはポリエステル樹脂、アクリル酸エステル樹脂、ポリウレタン樹脂、ポリエチレンイミン樹脂、シランカップリング剤、ペルフルオロオクタンスルホン酸（ＰＦＯＳ）等を挙げることができ、なかでもアクリル酸エステル樹脂、ポリウレタン樹脂等を好ましく用いることができる。
【００５４】
粘着剤層の厚さは特に限定されないが、１０μｍ〜３００μｍであることが好ましく、２０μｍ〜２００μｍであることがより好ましい。
【００５５】
また、本発明において、各細胞培養容器を構成する材料は特に限定されず、細胞培養において一般的に用いられる材料を用いることができる。例えば、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリエチレンテレフタレート樹脂、ポリプロピレン樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、アクリル樹脂、フッ素樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレタン樹脂、メチルペンテン樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、塩化ビニル樹脂等の樹脂材料、表面親水化処理を施した上記の少なくとも１種を含む樹脂材料、およびガラスや石英等の無機材料であることができるが、好ましくは樹脂材料である。樹脂材料としては、ポリスチレン樹脂又はポリエチレンテレフタレート樹脂であることが好ましい。
【符号の説明】
【００５６】
１０…機能性フィルム、
１１…フィルム基材層、
１２…機能性化合物層、
１３…粘着剤層、
１４…帯状をなす剥離フィルム、
２０…４層構造からなる長尺物、
２１…機能性フィルムの外郭形状をなす切り込み線、
２２…ロール状の原反、
３０…移し替え装置、
３１…エアーシリンダ、
３２…案内台、
３３…ガイドロール、
３４…巻き取りロール、
３５…細胞培養容器の搬送コンベア、
３６…空気路、
４０…負圧吸着ヘッド、
４１…吸着面、
４２…空気室、
４４…負圧吸引孔、
５０、５０Ａ…細胞培養容器、
ｓ１…負圧吸着ヘッドの周縁部、
ｓ２…負圧吸着ヘッドの負圧吸引孔が形成されている周縁部の領域で囲まれた内側領域、
ｐ１…機能性フィルムの周縁部、
ｐ２…機能性フィルムの周縁部の領域で囲まれた内側領域、
ｋ…負圧吸着により機能性フィルムの機能性層に現れた影響（損傷）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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