(57)【要約】【課題】（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの工業的な製造方法を提供する。【解決手段】（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン又は該酸塩を塩基の存在下にアルキルカルボニルオキシアセチルハライドと反応させることにより（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンに変換し、次に脱ヒドロキシフッ素化剤と反応させることにより（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンに変換し、最後にアンモニアと反応させることにより（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを得る。本発明は、従来の製造方法の反応工程数を格段に短縮することができ、高い生産性で安価に表題化合物を供給できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式［１］
【化１】
2013023457.tif 000049
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンまたは該酸塩を塩基の存在下に、一般式［２］
【化２】
2013023457.tif 000050
で示されるアルキルカルボニルオキシアセチルハライドと反応させることにより、一般式［３］
【化３】
2013023457.tif 000051
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンに変換し、次に脱ヒドロキシフッ素化剤と反応させることにより、一般式［４］
【化４】
2013023457.tif 000052
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンに変換し、最後にアンモニア（ＮＨ３）と反応させることにより、式［５］
【化５】
2013023457.tif 000053
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを製造する方法。
［式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立にアルキル基を表し、Ｘは塩素原子または臭素原子を表す］
【請求項２】
一般式［６］
【化６】
2013023457.tif 000054
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩を有機塩基の存在下に、式［７］
【化７】
2013023457.tif 000055
で示されるアセトキシアセチルクロリドと反応させることにより、一般式［８］
【化８】
2013023457.tif 000056
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンに変換し、次に有機塩基の存在下にスルフリルフルオリド（ＳＯ２Ｆ２）と反応させることにより、一般式［９］
【化９】
2013023457.tif 000057
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンに変換し、最後にアンモニア（ＮＨ３）と反応させることにより、式［５］
【化１０】
2013023457.tif 000058
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを製造する方法。
［式中、Ｒ３は炭素数が１から４のアルキル基を表し、Ｍｅはメチル基を表す］
【請求項３】
請求項２において、さらに「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の存在下に脱ヒドロキシフッ素化を行うことを特徴とする、請求項２に記載の（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの製造方法。
【請求項４】
一般式［３］
【化１１】
2013023457.tif 000059
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン。
［式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立にアルキル基を表す］
【請求項５】
一般式［８］
【化１２】
2013023457.tif 000060
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン。
［式中、Ｒ３は炭素数が１から４のアルキル基を表し、Ｍｅはメチル基を表す］
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖尿病治療薬の中間体として重要な（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンは、糖尿病治療薬の中間体として重要である（特許文献１）。本化合物は、既にフッ素原子が導入された（２Ｓ，４Ｓ）−４−フルオロプロリン類［例えば、式［Ａ］で示されるカルボキシル基保護体（塩酸やトリフルオロ酢酸等との酸塩も含む）や、式［Ｂ］で示されるアミノ基保護体］を出発原料に用いて製造されている（特許文献１）。該フルオロプロリン類は、（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシプロリン類から製造されており（非特許文献１、非特許文献２）、これらも合わせると全体の製造方法はスキーム１の様になる。本製造方法の脱ヒドロキシフッ素化において好適な保護基として、カルボキシル基はメチル保護体、アミノ基はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護体が採用されている。
【化１】
2013023457.tif 000002
【化２】
2013023457.tif 000003
【０００３】
本出願人は、スルフリルフルオリド（ＳＯ２Ｆ２）と有機塩基の組み合わせ（必要に応じて「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の存在下に行う）によるアルコール類の脱ヒドロキシフッ素化反応を開示している（特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開２００７／１０２２８６号パンフレット
【特許文献２】特開２００６−２９０８７０号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ（英国）、１９９８年、第３９巻、ｐ．１１６９−１１７２
【非特許文献２】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ（英国）、２００２年、第５８巻、ｐ．６７１３−６７２２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの工業的な製造方法を提供することにある。そのためには、従来技術の問題点を解決する必要がある。
【０００７】
スキーム１で示される様な従来の製造方法で本発明の目的化合物を製造するには、最低でも５工程（さらにアミノ基保護体をカルボキシル基保護体に変換する場合は６工程）の反応を必要とした。よって、工程数の長さに伴う操作の煩雑さや廃棄物の増加により、工業的な観点から高い生産性で安価に目的化合物を製造することができなかった。
【０００８】
工程数を短縮するには、本発明の製造方法の様に（スキーム２を参照）、目的化合物の窒素置換基の導入に必要なＮ−アルキルカルボニルオキシアセチル化が、脱ヒドロキシフッ素化のアミノ基保護の役割も兼ね合わせることができるならば、工程短縮の極めて効果的な手法に成り得る。しかしながら、脱ヒドロキシフッ素化のアミノ基保護として、Ｎ−アルキルカルボニルオキシアセチル体、好ましくはＮ−アセトキシアセチル体が好適に利用できるかは全く不明であった。さらに、脱ヒドロキシフッ素化の原料基質の製造において、（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの４位ヒドロキシル基に優先して、１位窒素原子上で選択的にアルキルカルボニルオキシアセチル化が進行するかも全く不明であった。
【化３】
2013023457.tif 000004
【０００９】
上記の様な観点から反応工程数を短縮する検討は一切報告されておらず、高い生産性で安価に（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを供給できる工業的な製造方法が強く望まれていた。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記の課題を踏まえて鋭意検討した結果、（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンまたは該酸塩を塩基の存在下にアルキルカルボニルオキシアセチルハライドと反応させることにより（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンに変換し、次に脱ヒドロキシフッ素化剤と反応させることにより（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンに変換し、最後にアンモニア（ＮＨ３）と反応させることにより（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンが製造できることを見出した。
【００１１】
原料基質としては、２位アルコキシカルボニル部位のアルキル基の炭素数が１から４の塩酸との塩が好ましく、大量規模での入手が容易である。Ｎ−アルキルカルボニルオキシアセチル化剤としては、アセトキシアセチルクロリドが好ましく、大量規模での入手が安価である。塩基としては、有機塩基が好ましく、所望の反応が良好に進行する。脱ヒドロキシフッ素化剤としては、有機塩基の存在下にスルフリルフルオリドと反応させる方法が好ましく、大量規模での実施が可能である。該方法においては、さらに「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の存在下に行うことが特に好ましく、高い選択性で反応が進行する。
【００１２】
また、（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンは新規化合物であり、反応工程数短縮のための鍵中間体として重要である。その中でも（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンが大量規模での製造において特に重要である。
【００１３】
この様に、（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの製造方法に関する極めて有用な方法と鍵中間体を見出し、本発明に到達した。
【００１４】
すなわち、本発明は［発明１］から［発明５］を含み、（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの工業的な製造方法を提供する。
【００１５】
［発明１］
一般式［１］
【化４】
2013023457.tif 000005
【００１６】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンまたは該酸塩を塩基の存在下に、一般式［２］
【化５】
2013023457.tif 000006
【００１７】
で示されるアルキルカルボニルオキシアセチルハライドと反応させることにより、一般式［３］
【化６】
2013023457.tif 000007
【００１８】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンに変換し、次に脱ヒドロキシフッ素化剤と反応させることにより、一般式［４］
【化７】
2013023457.tif 000008
【００１９】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンに変換し、最後にアンモニア（ＮＨ３）と反応させることにより、式［５］
【化８】
2013023457.tif 000009
【００２０】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを製造する方法。
【００２１】
［式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立にアルキル基を表し、Ｘは塩素原子または臭素原子を表す］
［発明２］
一般式［６］
【化９】
2013023457.tif 000010
【００２２】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩を有機塩基の存在下に、式［７］
【化１０】
2013023457.tif 000011
【００２３】
で示されるアセトキシアセチルクロリドと反応させることにより、一般式［８］
【化１１】
2013023457.tif 000012
【００２４】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンに変換し、次に有機塩基の存在下にスルフリルフルオリド（ＳＯ２Ｆ２）と反応させることにより、一般式［９］
【化１２】
2013023457.tif 000013
【００２５】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンに変換し、最後にアンモニア（ＮＨ３）と反応させることにより、式［５］
【化１３】
2013023457.tif 000014
【００２６】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを製造する方法。
【００２７】
［式中、Ｒ３は炭素数が１から４のアルキル基を表し、Ｍｅはメチル基を表す］
［発明３］
発明２において、さらに「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の存在下に脱ヒドロキシフッ素化を行うことを特徴とする、発明２に記載の（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの製造方法。
【００２８】
［発明４］
一般式［３］
【化１４】
2013023457.tif 000015
【００２９】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン。
【００３０】
［式中、Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立にアルキル基を表す］
［発明５］
一般式［８］
【化１５】
2013023457.tif 000016
【００３１】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン。
【００３２】
［式中、Ｒ３は炭素数が１から４のアルキル基を表し、Ｍｅはメチル基を表す］
【発明の効果】
【００３３】
本発明が従来技術に比べて有利な点を以下に述べる。
【００３４】
（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンのアルキルカルボニルオキシアセチル化が１位窒素原子上で位置選択的に進行し、さらに得られたＮ−アルキルカルボニルオキシアセチル体の脱ヒドロキシフッ素化も良好に進行することを明らかにした。特に、有機塩基の存在下にスルフリルフルオリドと反応させる脱ヒドロキシフッ素化（必要に応じて「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の存在下に行う）においては、脱アシル化や隣接基関与等に起因する副反応（ジフルオロ化、４位フッ素化の反転率低下、フッ素化以外の置換等）が殆ど認められず、好適なアミノ保護基であるｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を用いた時と同等の効果を得ることができた。
【００３５】
本発明の製造方法を採用すれば、入手容易な（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンまたは該酸塩から３工程で所望の目的化合物を製造することができる（従来は５または６工程が必要であった）。反応工程数が短縮できることにより、従来技術の問題点が全て解決でき、高い生産性で安価に（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを供給することができる。
【００３６】
また、３工程の反応が全て収率良く進行し、さらに、好適な脱ヒドロキシフッ素化で用いるスルフリルフルオリドが燻蒸剤として安価に入手できるため、工業的な観点からも優れた製造方法である。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
本発明の（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの製造方法について詳細に説明する。
【００３８】
本発明は、一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンまたは該酸塩を塩基の存在下に、一般式［２］で示されるアルキルカルボニルオキシアセチルハライドと反応させることにより、一般式［３］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンに変換し（第１工程；アミノ基保護且つＮ−アルキルカルボニルオキシアセチル化）、次に脱ヒドロキシフッ素化剤と反応させることにより、一般式［４］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンに変換し（第２工程；脱ヒドロキシフッ素化）、最後にアンモニアと反応させることにより（第３工程；アミド＆脱アシル化）、式［５］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを製造する方法である。
【００３９】
先ず、第１工程のアミノ基保護且つＮ−アルキルカルボニルオキシアセチル化について詳細に説明する。
【００４０】
一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンのＲ１は、アルキル基を表す。その中でも炭素数が１から４のアルキル基が好ましく、後述の塩素アニオン（Ｃｌ−）の除去を考慮すると、エチル基およびプロピル基が特に好ましく、プロピル基が極めて好ましい。Ｒ１がプロピル基の様に立体的に嵩高くなっても第３工程のアミド化が良好に進行することも本発明において新たに見出した。アルキル基は、炭素数が１から１８の、直鎖または枝分れの鎖式、または環式（炭素数が３以上の場合）を採ることができる。
【００４１】
一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンのエナンチオマー過剰率（ｅｅ）およびジアステレオマー過剰率（ｄｅ）は、それぞれ９０％以上を用いれば良く、９５％以上が好ましく、９７％以上が特に好ましい。
【００４２】
一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンは、酸との塩を用いることもでき、係る酸としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等が挙げられる。その中でも塩酸、臭化水素酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸が好ましく、塩酸が特に好ましい。
【００４３】
一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンまたは該酸塩は、第４版  実験化学講座２２  有機合成ＩＶ  酸・アミノ酸・ペプチド（丸善、１９９２年、ｐ．１９３−３０９）を参考にして、市販の（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシプロリンから同様に製造することができる（参考例１を参照）。Ｒ１の炭素数が増加するに従い反応速度が遅くなるが、それぞれに好適な反応条件を採用することにより所望の反応を良好に行うことができる。
【００４４】
一般式［２］で示されるアルキルカルボニルオキシアセチルハライドのＲ２は、アルキル基を表す。その中でも炭素数が１から６のアルキル基が好ましく、メチル基が特に好ましい。アルキル基は、炭素数が１から１８の、直鎖または枝分れの鎖式、または環式（炭素数が３以上の場合）を採ることができる。
【００４５】
一般式［２］で示されるアルキルカルボニルオキシアセチルハライドのＸは、塩素原子または臭素原子を表す。その中でも塩素原子が好ましい。
【００４６】
一般式［２］で示されるアルキルカルボニルオキシアセチルハライドの使用量は、一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン１モルに対して０．７モル以上を用いれば良く、０．８から１０モルが好ましく、０．９から５モルが特に好ましい。実施例の様に丁度１当量用いることにより４位ヒドロキシル基上でのＯ−アルキルカルボニルオキシアセチル化を完全に制御することができる（Ｎ，Ｏ−ビスアルキルカルボニルオキシアセチル体の副生量が１％以下）。この知見も本発明において新たに見出した。
【００４７】
塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリｎ−プロピルアミン、トリｎ−ブチルアミン、ピリジン、２，６−ルチジン、２，４，６−コリジン、４−ジメチルアミノピリジン、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（ＤＢＵ）等の有機塩基、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基が挙げられる。その中でも有機塩基が好ましく、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、２，６−ルチジン、４−ジメチルアミノピリジンおよび１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エンが特に好ましい。これらの塩基は単独または組み合わせて用いることができる。
【００４８】
塩基の使用量は、一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン１モルに対して０．７モル以上を用いれば良く、０．８から１０モルが好ましく、０．９から５モルが特に好ましい。原料基質として該酸塩を用いる場合は、酸の中和に必要な塩基を余分に加えて行えば良い。
【００４９】
反応溶媒としては、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン等の脂肪族炭化水素系、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素系、塩化メチレン、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素系、テトラヒドロフラン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル系、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチル等のエステル系、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン等のアミド系、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系、エタノール、イソプロパノール等のアルコール系、ジメチルスルホキシド、水等が挙げられる。その中でもｎ−ヘプタン、トルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、イソプロパノール、ジメチルスルホキシドおよび水が好ましく、トルエン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリルおよびイソプロパノールが特に好ましい。これらの反応溶媒は単独または組み合わせて用いることができる。
【００５０】
反応溶媒の使用量は、一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン１モルに対して０．１Ｌ以上を用いれば良く、０．３から１０Ｌが好ましく、０．５から５Ｌが特に好ましい。
【００５１】
反応温度は、−４０から＋１２０℃の範囲で行えば良く、−３０から＋１１０℃が好ましく、−２０から＋１００℃が特に好ましい。
【００５２】
反応時間は、２４時間以内の範囲で行えば良く、原料基質および反応条件により異なるため、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、核磁気共鳴等の分析手段により反応の進行状況を追跡し、原料基質が殆ど消失した時点を終点とすることが好ましい。
【００５３】
後処理は、生成物である一般式［３］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンのＲ１とＲ２の脂溶性の違いにより、有機溶媒に対する溶解度が大きく異なるため、好適な態様が異なる。Ｒ２が好適なメチル基の場合に、Ｒ１がメチル基では水溶性が高いため、この様な場合には、反応終了液に貧溶媒を加えて結晶性の生成物を濾過で回収する操作が効果的である。また、Ｒ２がメチル基の場合でも、Ｒ１の炭素数が増加するに従い脂溶性が向上するため、この様な場合には、反応終了液を有機溶媒で希釈し、水、無機酸の水溶液または無機塩基の水溶液で洗浄し、有機層を濃縮して回収する操作が効果的である。得られた粗生成物は、必要に応じて活性炭処理、再結晶、カラムクロマトグラフィー等により、高い純度に精製することができる。
【００５４】
原料基質である一般式［１］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの４位の立体化学は、反応を通して保持される。
【００５５】
次に、第２工程の脱ヒドロキシフッ素化について詳細に説明する。
【００５６】
脱ヒドロキシフッ素化剤としては、スルフリルフルオリド／有機塩基（有機塩基の存在下にスルフリルフルオリドと反応させることを意味する；特許文献２）以外に、ＲｆＳＯ２Ｆ／有機塩基［式中、Ｒｆはトリフルオロメチル基（ＣＦ３）またはｎ−ノナフルオロブチル基（ｎ−Ｃ４Ｆ９）を表す。有機塩基の存在下にＲｆＳＯ２Ｆと反応させることを意味する；特開２００５−３３６１５１号公報］、３フッ化ジエチルアミノイオウ（ＤＡＳＴ；Ａ）、３フッ化ビス（２−メトキシエチル）アミノイオウ（Ｂ）、ヤロベンコ試薬（ＣＴＴ；Ｃ）、石川試薬（ＰＰＤＡ；Ｄ）、２，２−ジフルオロ−１，３−ジメチルイミダゾリジン（Ｅ）等が挙げられる（ＡからＥは図１を参照）。その中でもスルフリルフルオリド／有機塩基、Ｃ、ＤおよびＥが好ましく、スルフリルフルオリド／有機塩基が特に好ましい。ＣおよびＤは、トリフルオロクロロエチレンまたはヘキサフルオロプロペンとジエチルアミンの付加物であるが、これら以外の類似する組み合わせ（例えば、テトラフルオロエチレン等のフルオロオレフィン、ジメチルアミン等の炭素数の異なるジアルキルアミン）から成る付加物も同様の脱ヒドロキシフッ素化能を期待することができるため、本発明における脱ヒドロキシフッ素化剤として扱う。上記の全ての脱ヒドロキシフッ素化剤は、フッ化水素または「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の存在下に用いることもでき、この様な態様も本発明における脱ヒドロキシフッ素化剤として扱う。その中でも好適なスルフリルフルオリド／有機塩基において、さらに「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の存在下に脱ヒドロキシフッ素化を行う態様が特に好ましい。
【化１６】
2013023457.tif 000017
【００５７】
好適なスルフリルフルオリド／有機塩基におけるスルフリルフルオリドの使用量は、一般式［３］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン１モルに対して０．７モル以上を用いれば良く、０．８から１０モルが好ましく、０．９から５モルが特に好ましい。
【００５８】
好適なスルフリルフルオリド／有機塩基における有機塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリｎ−プロピルアミン、トリｎ−ブチルアミン、ピリジン、２，６−ルチジン、２，４，６−コリジン、４−ジメチルアミノピリジン、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン等が挙げられる。その中でもトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリｎ−プロピルアミン、トリｎ−ブチルアミン、ピリジン、２，６−ルチジンおよび２，４，６−コリジンが好ましく、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリｎ−プロピルアミン、トリｎ−ブチルアミンおよびピリジンが特に好ましい。これらの有機塩基は単独または組み合わせて用いることができる。
【００５９】
好適なスルフリルフルオリド／有機塩基における有機塩基の使用量は、一般式［３］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン１モルに対して０．７モル以上を用いれば良く、０．８から２０モルが好ましく、０．９から１０モルが特に好ましい。
【００６０】
「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の有機塩基は、「好適なスルフリルフルオリド／有機塩基」に記載した有機塩基と同じである。
【００６１】
「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の有機塩基とフッ化水素のモル比は、１００：１から１：１００の範囲で用いれば良く、５０：１から１：５０が好ましく、２５：１から１：２５が特に好ましい。アルドリッチ（Ａｌｄｒｉｃｈ、２００７−２００８総合カタログ）から市販されている「トリエチルアミン１モルとフッ化水素３モルからなる錯体」または「ピリジン〜３０％（〜１０モル％）とフッ化水素〜７０％（〜９０モル％）からなる錯体」を用いるのが便利である。
【００６２】
「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の使用量は、一般式［３］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン１モルに対してフッ素アニオン（Ｆ−）として０．１モル以上を用いれば良く、０．３から３０モルが好ましく、０．５から２０モルが特に好ましい。
【００６３】
ＲｆＳＯ２Ｆ／有機塩基におけるＲｆＳＯ２Ｆの使用量、有機塩基および該使用量は、好適なスルフリルフルオリド／有機塩基において記したスルフリルフルオリドの使用量、有機塩基および該使用量と同様である。
【００６４】
ＡからＥ等（類似付加物も対象）の使用量は、一般式［３］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン１モルに対して０．７モル以上を用いれば良く、０．８から１０モルが好ましく、０．９から５モルが特に好ましい。
【００６５】
反応溶媒としては、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン等の脂肪族炭化水素系、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素系、塩化メチレン、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素系、テトラヒドロフラン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル系、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチル等のエステル系、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン等のアミド系、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。その中でもｎ−ヘプタン、トルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリルおよびジメチルスルホキシドが好ましく、トルエン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびアセトニトリルが特に好ましい。これらの反応溶媒は単独または組み合わせて用いることができる。
【００６６】
反応溶媒の使用量は、一般式［３］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン１モルに対して０．１Ｌ以上を用いれば良く、０．２から１０Ｌが好ましく、０．３から５Ｌが特に好ましい。
【００６７】
反応温度は、−６０から＋１００℃の範囲で行えば良く、−５０から＋９０℃が好ましく、−４０から＋８０℃が特に好ましい。
【００６８】
反応時間は、２４時間以内の範囲で行えば良く、原料基質および反応条件により異なるため、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、核磁気共鳴等の分析手段により反応の進行状況を追跡し、原料基質が殆ど消失した時点を終点とすることが好ましい。
【００６９】
後処理は、反応終了液を有機溶媒で希釈し、水、無機酸の水溶液または無機塩基の水溶液で洗浄し、回収した有機層を濃縮することにより、一般式［４］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物を得ることができる。粗生成物は、必要に応じて活性炭処理、再結晶、カラムクロマトグラフィー等により、高い純度に精製することができる。
【００７０】
また、一般式［４］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンを含む反応終了液を直接、アンモニアと反応させることにより、式［５］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを得ることもできる。この様な第２工程と第３工程のワンポット反応は、工業的な観点から好ましい態様である。
【００７１】
原料基質である一般式［３］で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの４位の立体化学は、反応を通して反転する。
【００７２】
最後に、第３工程のアミドおよび脱アシル化について詳細に説明する。
【００７３】
本工程は、一般式［４］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンをアンモニアと反応させることにより、１位置換基上での脱アシル化と２位置換基上でのアミド化を１工程で行うものである。
【００７４】
アンモニアは、化合物自体であるガス状のＮＨ３以外に、該水溶液、アルコール溶液、エーテル溶液等を用いることができる。係るアルコールとしては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等、係るエーテルとしては、ジオキサン等が挙げられる。種々の濃度調整溶液（例えば、０．２から７Ｍの各種アルコール溶液、２５から２８％の水溶液）が市販されており、これらを用いるのが便利である。
【００７５】
アンモニアの使用量は、一般式［４］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジン１モルに対して１．４モル以上を用いれば良く、１．６から２０モルが好ましく、１．８から１０モルが特に好ましい。
【００７６】
反応溶媒としては、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン等の脂肪族炭化水素系、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素系、塩化メチレン、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素系、テトラヒドロフラン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル系、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン等のアミド系、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等のアルコール系、ジメチルスルホキシド、水等が挙げられる。その中でもｎ−ヘプタン、トルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ジメチルスルホキシドおよび水が好ましく、トルエン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、メタノール、エタノール、イソプロパノールおよび水が特に好ましい。これらの反応溶媒は単独または組み合わせて用いることができる。
【００７７】
反応溶媒の使用量は、一般式［４］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジン１モルに対して０．０５Ｌ以上を用いれば良く、０．１から２０Ｌが好ましく、０．１５から１０Ｌが特に好ましい。
【００７８】
反応温度は、−４０から＋１２０℃の範囲で行えば良く、−３０から＋１１０℃が好ましく、−２０から＋１００℃が特に好ましい。
【００７９】
反応時間は、２４時間以内の範囲で行えば良く、原料基質および反応条件により異なるため、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、核磁気共鳴等の分析手段により反応の進行状況を追跡し、原料基質が殆ど消失した時点を終点とすることが好ましい。
【００８０】
後処理は、特に制限はないが、生成物である式［５］で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンが有機溶媒に難溶解性の、水溶性の結晶であるため、反応終了液中に析出した結晶性の生成物を濾過で回収する操作が効果的である。得られた粗生成物は、必要に応じて活性炭処理、再結晶、カラムクロマトグラフィー等により、高い純度に精製することができる。
【００８１】
本発明においては、（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンまたは該酸塩を塩基の存在下にアルキルカルボニルオキシアセチルハライドと反応させることにより（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンに変換し、次に脱ヒドロキシフッ素化剤と反応させることにより（２Ｓ，４Ｓ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−フルオロピロリジンに変換し、最後にアンモニアと反応させることにより（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンを製造することができる（態様１）。
【００８２】
態様１の中でも、原料基質としては２位アルコキシカルボニル部位のアルキル基の炭素数が１から４の塩酸との塩、Ｎ−アルキルカルボニルオキシアセチル化剤としてはアセトキシアセチルクロリド、塩基としては有機塩基、脱ヒドロキシフッ素化剤としては有機塩基の存在下にスルフリルフルオリドと反応させる方法、これらを組み合わせることにより、工業的に実施可能な製造方法になる（態様２）。
【００８３】
態様２の中でも、さらに「有機塩基とフッ化水素からなる塩または錯体」の存在下に脱ヒドロキシフッ素化を行うことにより、工業的に実施容易な製造方法になる（態様３）。
【００８４】
また、態様１の（２Ｓ，４Ｒ）−１−アルキルカルボニルオキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンは新規化合物であり、反応工程数短縮のための鍵中間体として重要である（態様４）。
【００８５】
態様４の中でも、（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンが大量規模での製造において特に重要である（態様５）。
【００８６】
本発明者らは、本発明の製造方法について、さらに新たな知見を見出した。
【００８７】
第１工程の後処理において、脱ヒドロキシフッ素化の好適な原料基質として得られる（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン中の塩素アニオン含量を低減しておくことにより、本発明の目的化合物である（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの精製の負荷を格段に軽減できることが判明した。実施例１で示される様に、塩素アニオンとしてトリエチルアミン塩酸塩が相当量含まれる原料基質を用いて脱ヒドロキシフッ素化を行うと、対応する塩素化物である（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−クロロピロリジンを副生する（スキーム３を参照）。本不純物は、アミド＆脱アシル化を経て、最終目的化合物の粗生成物を再結晶することにより、医薬品中間体として十分な純度に精製することは可能であるが、工業的な観点からすると、脱ヒドロキシフッ素化の原料基質に含まれる塩素アニオンを予め低減しておくことが効果的である。
【化１７】
2013023457.tif 000018
【００８８】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンのＲ３がメチル基の場合は、該化合物の水溶性が高いため、実施例２で示される様に、イソプロパノール等の極性の高い有機溶媒で塩素アニオン（トリエチルアミン塩酸塩）を加熱洗浄または再結晶除去する方法が好ましい態様である（態様Ａ）。
【００８９】
また、Ｒ３がエチル基、プロピル基またはブチル基の場合は、該化合物の脂溶性が向上するため、酢酸エチルやトルエン等の有機溶媒で希釈し、塩素アニオンを水洗除去する方法（実施例４と５を参照）や、シリカゲル等のショートカラムで原点除去する方法（脂溶性が向上することで吸着ロスが殆どなくなる）も好ましい態様である（態様Ｂ）。この様な２位アルコキシカルボニル部位のアルキル基の炭素数が２から４の場合は、（２Ｓ，４Ｒ）−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩の大量規模での入手容易性と、第３工程のアミド＆脱アシル化に対する反応性および選択性を考慮すると、その中でもエチル基およびプロピル基が特に好ましく、プロピル基が極めて好ましい。
【００９０】
さらに、Ｎ−アセトキシアセチル化は炭酸カリウム等の無機塩基でも良好に進行するため、生成物である（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−アルコキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンとの物性が大きく異なるアルカリ金属塩（塩化カリウム等）として塩素アニオンを固定化し（トリエチルアミン等の有機塩基で反応を行った後に、水酸化ナトリウム等の無機塩基で中和する方法も同様の結果を与える）、濾過等の簡便な操作で分離除去する方法も好ましい態様である（態様Ｃ）。
【００９１】
当然、これらの態様を組み合わせることにより、塩素アニオンをさらに効果的に除去することができる。例えば、実施例３は態様ＢとＣを組み合わせたものである。また、塩素アニオンの除去方法は、これらの好適な態様に制限されるものではない。
【００９２】
［実施例］
実施例により本発明の実施の形態を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。Ｍｅはメチル基を表し、ｎ−Ｐｒはｎ−プロピル基を表し、ｎ−Ｂｕはｎ−ブチル基を表す。
【００９３】
［参考例１］
メタノール３００ｍＬに、下記式
【化１８】
2013023457.tif 000019
【００９４】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシプロリン５９．５ｇ（４５４ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を加え、塩化チオニル（ＳＯＣｌ２）５６．０ｇ（４７１ｍｍｏｌ、１．０４ｅｑ）を氷冷下で滴下し、室温で終夜攪拌した。反応混合液の１Ｈ−ＮＭＲ分析より変換率は１００％であった。反応終了液を減圧濃縮し、トルエン１００ｍＬを加え、再び減圧濃縮し、真空乾燥することにより、下記式
【化１９】
2013023457.tif 000020
【００９５】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩を８２．１ｇ得た。収率は１００％であった。
【００９６】
（２Ｓ，４Ｒ）−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩の１Ｈ−ＮＭＲを下に示す。
【００９７】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；２．０４−２．２６（ｍ、２Ｈ）、３．０８（ｍ、１Ｈ）、３．３３（ｍ、１Ｈ）、３．７６（ｓ、３Ｈ）、４．４２（ｍ、１Ｈ）、４．４８（ｍ、１Ｈ）、５．６０（ｂｒ、１Ｈ）／ＮＨとＨＣｌのプロトンは帰属できず。
【実施例１】
【００９８】
アセトニトリル４００ｍＬに、下記式
【化２０】
2013023457.tif 000021
【００９９】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩５０．０ｇ（２７５ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）とトリエチルアミン５５．７ｇ（５５０ｍｍｏｌ、２．００ｅｑ）を加え、下記式
【化２１】
2013023457.tif 000022
【０１００】
で示されるアセトキシアセチルクロリド３７．６ｇ（２７５ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を氷冷下で滴下し、同温度で３０分間攪拌した。反応混合液の液体クロマトグラフィー分析より変換率は１００％であった。反応終了液にトルエン１００ｍＬを加え、氷冷下で１時間熟成した。析出した結晶を濾過し、少量のトルエンで洗浄し、真空乾燥することにより、下記式
【化２２】
2013023457.tif 000023
【０１０１】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの粗生成物を５３．６ｇ得た。粗生成物には相当量のトリエチルアミン塩酸塩が含まれており、１Ｈ−ＮＭＲ分析より（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンとトリエチルアミン塩酸塩のモル比は６８：３２（重量比は７９：２１）であった。収率は６３％であった。
【０１０２】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの１Ｈ−ＮＭＲを下に示す。
【０１０３】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；１．８９（ｍ、１Ｈ）、２．０７（ｓ、３Ｈ）、２．１１（ｍ、１Ｈ）、３．４３（ｍ、１Ｈ）、３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．６１（ｓ、３Ｈ）、４．３１（ｔ、８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．３７（ｍ、１Ｈ）、４．６４（ｄ、１５．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．７７（ｄ、１５．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．２５（ｂｒ、１Ｈ）。
【０１０４】
ステンレス鋼（ＳＵＳ）製耐圧反応容器に、上記式で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの粗生成物４９．１ｇ（１５８ｍｍｏｌとする、１．００ｅｑ）、アセトニトリル１００ｍＬ、トルエン１００ｍＬとトリエチルアミン１１１ｇ（１．１０ｍｏｌ、６．９６ｅｑ）を加え、トリエチルアミン・３フッ化水素６４．５ｇ（４００ｍｍｏｌ、２．５３ｅｑ）を氷冷下で加え、スルフリルフルオリド３０．６ｇ（３００ｍｍｏｌ、１．９０ｅｑ）を−１５℃でボンベより吹き込み、−１０から０℃で２時間攪拌した。反応混合液の液体クロマトグラフィー分析より変換率は１００％であった。反応終了液をトルエン１０ｍＬとアセトニトリル１００ｍＬで希釈し、炭酸カリウムの食塩水溶液２６２ｇ［炭酸カリウム４１．５ｇ（３００ｍｍｏｌ、１．９０ｅｑ）、食塩２０ｇと水２００ｇより調製］で洗浄し、飽和食塩水１００ｍＬで洗浄し、回収した有機層を減圧濃縮し、真空乾燥することにより、下記式
【化２３】
2013023457.tif 000024
【０１０５】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物を７０．９ｇ得た。粗生成物を１９Ｆ−ＮＭＲ分析（内部標準法）で定量したところ（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−フルオロピロリジンが３１．９ｇ（１２９ｍｍｏｌ）含まれていた（重量百分率は４５．０％）。収率は８２％であった。粗生成物の液体クロマトグラフィー分析より（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−フルオロピロリジン（フッ素化物）の面積百分率は８８．７％であり、下記式
【化２４】
2013023457.tif 000025
【０１０６】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−クロロピロリジン（塩素化物）の面積百分率は６．２％であった。
【０１０７】
（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの１Ｈおよび１９Ｆ−ＮＭＲを下に示す。
【０１０８】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；２．０８（ｓ、３Ｈ）、２．３８（ｍ、２Ｈ）、３．６２（ｓ、３Ｈの一部）、３．６９（ｓ、３Ｈの一部）、３．７０（ｍ、２Ｈ）、４．７３（ｍ、３Ｈ）、５．３５（ｍ、１Ｈ）。１９Ｆ−ＮＭＲ［基準物質；Ｃ６Ｆ６、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；−９．３５（ｍ、１Ｆの一部）、−１０．１７（ｍ、１Ｆの一部）。
【０１０９】
上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物全量７０．９ｇ（１２９ｍｍｏｌとする、１．００ｅｑ）に、７Ｍアンモニアメタノール溶液７３．７ｍＬ（５１６ｍｍｏｌ、４．００ｅｑ）を加え、室温で終夜攪拌した。反応混合液の液体クロマトグラフィー分析より変換率は９７％であった。析出した結晶を濾過し、少量のイソプロパノールで洗浄し、真空乾燥することにより、下記式
【化２５】
2013023457.tif 000026
【０１１０】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗結晶を２１．０ｇ得た。収率は８６％であった。粗結晶の液体クロマトグラフィー純度は９２．１％であり、下記式
【化２６】
2013023457.tif 000027
【０１１１】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−クロロピロリジンが３．２％含まれていた。
【０１１２】
粗結晶２０．０ｇに、イソプロパノール６０ｍＬと水６０ｍＬを加え、６５℃で加熱溶解し、室温まで降温し、氷冷下で１時間熟成した。析出した結晶を濾過し、少量のイソプロパノールで洗浄し、真空乾燥することにより、上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの再結晶品を１６．２ｇ得た。回収率は８１％であった。再結晶品の液体クロマトグラフィー純度は９８．３％であり、上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−クロロピロリジンが１．０％まで低減できていた。該クロロピロリジンは
再結晶を繰り返すことにより完全に除去することができた（０．３％未満）。
【０１１３】
（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの１Ｈおよび１９Ｆ−ＮＭＲを下に示す。
【０１１４】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；ＣＤ３ＯＤ］、δ  ｐｐｍ；２．４５（ｍ、２Ｈ）、３．７８（ｍ、２Ｈ）、４．１６（ｍ、２Ｈ）、４．５７（ｍ、１Ｈ）、５．２８（ｍ、１Ｈ）／ＮＨ２とＯＨのプロトンは帰属できず。１９Ｆ−ＮＭＲ［基準物質；Ｃ６Ｆ６、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；−８．８６（ｍ、１Ｆ）。
【実施例２】
【０１１５】
イソプロパノール５ｍＬに、下記式
【化２７】
2013023457.tif 000028
【０１１６】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの粗生成物１．００ｇ［実施例１製造品；トリエチルアミン塩酸塩を３２モル％（２１重量％）含む］を加え、加熱溶解し、室温まで降温した。析出した結晶を濾過し、真空乾燥することにより、上記式で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−メトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの再結晶品を０．７５ｇ得た。回収率は７５％であった。再結晶品の１Ｈ−ＮＭＲ分析よりトリエチルアミン塩酸塩の含量は４モル％（２重量％）であった。
【実施例３】
【０１１７】
参考例１を参考にして、下記式
【化２８】
2013023457.tif 000029
【０１１８】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩を同様に製造した。反応条件は６０℃で８時間攪拌し、収率は定量的であった。
【０１１９】
アセトニトリル４８ｍＬに、上記式で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩６．００ｇ（２８．６ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）とトリエチルアミン５．７９ｇ（５７．２ｍｍｏｌ、２．００ｅｑ）を加え、下記式
【化２９】
2013023457.tif 000030
【０１２０】
で示されるアセトキシアセチルクロリド３．９１ｇ（２８．６ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を氷冷下で滴下し、同温度で３０分間攪拌した。反応混合液の液体クロマトグラフィー分析より変換率は１００％であった。反応終了液に水酸化ナトリウム水溶液［水酸化ナトリウム２．２９ｇ（５７．３ｍｍｏｌ、２．００ｅｑ）と水２４ｇより調製］を氷冷下で加え、減圧濃縮し、真空乾燥し、残渣を酢酸エチル１８ｍＬで希釈し、ショートカラム（シリカゲル６ｇ／酢酸エチル）を通し、酢酸エチル４２ｍＬで洗浄し、原点除去液と洗浄液を減圧濃縮し、真空乾燥することにより、下記式
【化３０】
2013023457.tif 000031
【０１２１】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの粗生成物を７．７４ｇ得た。粗生成物の１Ｈ−ＮＭＲ分析よりトリエチルアミン塩酸塩は全く含まれていなかった。収率は９９％であった。
【０１２２】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの１Ｈ−ＮＭＲを下に示す。
【０１２３】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；０．８６（ｔ、７．４Ｈｚ、３Ｈ）、１．５５（ｍ、２Ｈ）、１．８７（ｍ、１Ｈ）、２．０５（ｓ、３Ｈの一部）、２．０６（ｓ、３Ｈの一部）、２．１０（ｍ、１Ｈ）、３．３５（ｍ、１Ｈ）、３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．９６（ｍ、２Ｈ）、４．２９（ｔ、８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．４５（ｍ、１Ｈ）、４．６２（ｄ、１５．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．７４（ｄ、１５．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．１３（ｄ、４．０Ｈｚ、１Ｈの一部）、５．２２（ｄ、４．０Ｈｚ、１Ｈの一部）。
【０１２４】
実施例１を参考にして、上記式で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの粗生成物全量７．７４ｇ（２８．３ｍｍｏｌ）をトリエチルアミンとトリエチルアミン・３フッ化水素の存在下にスルフリルフルオリドと同様に反応させることにより、下記式
【化３１】
2013023457.tif 000032
【０１２５】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物を９．２６ｇ得た。粗生成物を１９Ｆ−ＮＭＲ分析（内部標準法）で定量したところ（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジンが７．０３ｇ（２５．５ｍｍｏｌ）含まれていた（重量百分率は７５．９％）。収率は９０％であった。粗生成物の液体クロマトグラフィー分析より（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジン（フッ素化物）の面積百分率は９１．１％であり、下記式
【化３２】
2013023457.tif 000033
【０１２６】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−クロロピロリジン（塩素化物）は全く検出されなかった。
【０１２７】
（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの１Ｈおよび１９Ｆ−ＮＭＲを下に示す。
【０１２８】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；０．８６（ｍ、３Ｈ）、１．５６（ｍ、２Ｈ）、２．０６（ｓ、３Ｈの一部）、２．０７（ｓ、３Ｈの一部）、２．３８（ｍ、２Ｈ）、３．６８（ｍ、２Ｈ）、４．０２（ｍ、２Ｈ）、４．７３（ｍ、３Ｈ）、５．３５（ｍ、１Ｈ）。１９Ｆ−ＮＭＲ［基準物質；Ｃ６Ｆ６、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；−９．０７（ｍ、１Ｆの一部）、−１０．０２（ｍ、１Ｆの一部）。
【０１２９】
実施例１を参考にして、上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物４．６３ｇ（１２．８ｍｍｏｌとする）をアンモニアと同様に反応させることにより、下記式
【化３３】
2013023457.tif 000034
【０１３０】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗結晶を２．１５ｇ得た。反応条件は３０℃で終夜攪拌し、変換率は９９％であった。収率は８８％であった。粗結晶の液体クロマトグラフィー純度は９９．０％であり、下記式
【化３４】
2013023457.tif 000035
【０１３１】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−クロロピロリジンは全く検出されなかった。
【実施例４】
【０１３２】
参考例１および実施例１を参考にして、下記式
【化３５】
2013023457.tif 000036
【０１３３】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンを同様に製造した。ｎ−ブチルエステル化は、イソプロパノールを溶解補助剤に用いて終夜還流条件下で実施した。Ｎ−アセトキシアセチル化の後処理は、反応終了液をトルエンで希釈し、トリエチルアミン塩酸塩を水洗除去する方法を採用した。粗生成物の１Ｈ−ＮＭＲ分析よりトリエチルアミン塩酸塩の含量は４モル％（２重量％）であった。２工程の収率は８２％であった。
【０１３４】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの１Ｈ−ＮＭＲを下に示す。
【０１３５】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；０．８８（ｔ、７．４Ｈｚ、３Ｈ）、１．３１（ｍ、２Ｈ）、１．５４（ｍ、２Ｈ）、１．８８（ｍ、１Ｈ）、２．０６（ｓ、３Ｈの一部）、２．０７（ｓ、３Ｈの一部）、２．１０（ｍ、１Ｈ）、３．４３（ｍ、１Ｈ）、３．６０（ｍ、１Ｈ）、４．０７（ｍ、２Ｈ）、４．３０（ｔ、７．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３７（ｍ、１Ｈ）、４．６４（ｄ、１５．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．７５（ｄ、１５．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．１６（ｄ、４．０Ｈｚ、１Ｈの一部）、５．２５（ｄ、４．０Ｈｚ、１Ｈの一部）。
【０１３６】
実施例１を参考にして、上記式で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン２３．６ｇ（８２．１ｍｍｏｌ）をトリエチルアミンとトリエチルアミン・３フッ化水素の存在下にスルフリルフルオリドと同様に反応させることにより、下記式
【化３６】
2013023457.tif 000037
【０１３７】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物を２０．８ｇ得た。粗生成物を１９Ｆ−ＮＭＲ分析（内部標準法）で定量したところ（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−フルオロピロリジンが１８．３ｇ（６３．３ｍｍｏｌ）含まれていた（重量百分率は８８．０％）。収率は７７％であった。粗生成物の液体クロマトグラフィー分析より（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−フルオロピロリジン（フッ素化物）の面積百分率は９４．７％であり、下記式
【化３７】
2013023457.tif 000038
【０１３８】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−クロロピロリジン（塩素化物）は全く検出されなかった。
【０１３９】
（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの１Ｈおよび１９Ｆ−ＮＭＲを下に示す。
【０１４０】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；０．８６（ｔ、７．４Ｈｚ、３Ｈ）、１．３１（ｍ、２Ｈ）、１．５３（ｍ、２Ｈ）、２．０６（ｓ、３Ｈの一部）、２．０７（ｓ、３Ｈの一部）、２．３８（ｍ、２Ｈ）、３．６５（ｍ、２Ｈ）、４．０５（ｍ、２Ｈ）、４．７０（ｍ、３Ｈ）、５．３５（ｍ、１Ｈ）。
【０１４１】
１９Ｆ−ＮＭＲ［基準物質；Ｃ６Ｆ６、重溶媒；（ＣＤ３）２ＳＯ］、δ  ｐｐｍ；−９．０９（ｍ、１Ｆの一部）、−１０．０５（ｍ、１Ｆの一部）。
【０１４２】
実施例１を参考にして、上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−ブトキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物全量２０．８ｇ（６３．３ｍｍｏｌとする）をアンモニアと同様に反応させることにより、下記式
【化３８】
2013023457.tif 000039
【０１４３】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗結晶を１１．２ｇ得た。反応条件は３０℃で終夜攪拌し、変換率は９５％であった。収率は９３％であった。粗結晶の液体クロマトグラフィー純度は８４．６％であり、下記式
【化３９】
2013023457.tif 000040
【０１４４】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−クロロピロリジンは全く検出されなかった。
【実施例５】
【０１４５】
ｎ−プロパノール３００ｍＬとトルエン５００ｍＬに、下記式
【化４０】
2013023457.tif 000041
【０１４６】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシプロリン１００ｇ（７６３ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を加え、塩化チオニル（ＳＯＣｌ２）９３．５ｇ（７８６ｍｍｏｌ、１．０３ｅｑ）を氷冷下で滴下し、７５℃で３時間攪拌した。反応混合液の１Ｈ−ＮＭＲ分析または液体クロマトグラフィー分析より変換率は９５％以上であった。反応終了液（均一溶液）を室温まで降温し、さらに氷冷し、析出した結晶を濾過し、少量のトルエンで洗浄し、真空乾燥することにより、下記式
【化４１】
2013023457.tif 000042
【０１４７】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩を１４３ｇ得た。収率は８９％であった。
【０１４８】
（２Ｓ，４Ｒ）−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩の１Ｈ−ＮＭＲを下に示す。
【０１４９】
１Ｈ−ＮＭＲ［基準物質；（ＣＨ３）４Ｓｉ、重溶媒；ＣＤ３ＯＤ］、δ  ｐｐｍ；０．９８（ｔ、３Ｈ）、１．７３（ｍ、２Ｈ）、２．１８（ｍ、１Ｈ）、２．４２（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｍ、１Ｈ）、３．４２（ｍ、１Ｈ）、４．２２（ｍ、２Ｈ）、４．５９（ｍ、２Ｈ）／ＯＨ、ＮＨとＨＣｌのプロトンは帰属できず。
【０１５０】
酢酸エチル５７６ｍＬに、上記式で示される（２Ｓ，４Ｒ）−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジン塩酸塩７２．０ｇ（３４３ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）とトリエチルアミン６９．４ｇ（６８６ｍｍｏｌ、２．００ｅｑ）を加え、下記式
【化４２】
2013023457.tif 000043
【０１５１】
で示されるアセトキシアセチルクロリド４６．８ｇ（３４３ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を氷冷下で滴下し、室温で終夜攪拌した。反応混合液の液体クロマトグラフィー分析より変換率は９８％であった。反応終了液中に析出した固形物（トリエチルアミン塩酸塩）を濾過し、少量の酢酸エチルで洗浄し、濾液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１４４ｍＬで洗浄し、さらに飽和硫酸ナトリウム水溶液１４４ｍＬで洗浄し、回収した有機層を減圧濃縮し、真空乾燥することにより、下記式
【化４３】
2013023457.tif 000044
【０１５２】
で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの粗生成物を８４．０ｇ得た。粗生成物の１Ｈ−ＮＭＲ分析よりトリエチルアミン塩酸塩は殆ど含まれていなかった。収率は９０％であった。
【０１５３】
（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの１Ｈ−ＮＭＲは実施例３と同様であった。
【０１５４】
ステンレス鋼（ＳＵＳ）製耐圧反応容器に、上記式で示される（２Ｓ，４Ｒ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−ヒドロキシピロリジンの粗生成物８２．０ｇ（３００ｍｍｏｌとする、１．００ｅｑ）、アセトニトリル１５０ｍＬとトリエチルアミン１０３ｇ（１．０２ｍｏｌ、３．４０ｅｑ）を加え、トリエチルアミン・３フッ化水素４８．３ｇ（３００ｍｍｏｌ、１．００ｅｑ）を氷冷下で加え、スルフリルフルオリド６１．２ｇ（６００ｍｍｏｌ、２．００ｅｑ）を−３８から−３６℃でボンベより吹き込み、−１０から０℃で２時間攪拌した。反応混合液の液体クロマトグラフィー分析より変換率は１００％であった。反応終了液をトルエン３００ｍＬで希釈し、炭酸カリウム水溶液３５４ｇ［炭酸カリウム５３．９ｇ（３９０ｍｍｏｌ、１．３０ｅｑ）と水３００ｇより調製］で洗浄し、さらに飽和食塩水３００ｍＬで洗浄し、回収した有機層を減圧濃縮し、真空乾燥することにより、下記式
【化４４】
2013023457.tif 000045
【０１５５】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物を８４．２ｇ得た。粗生成物を１９Ｆ−ＮＭＲ分析（内部標準法）で定量したところ（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジンが７６．３ｇ（２７７ｍｍｏｌ）含まれていた（重量百分率は９０．６％）。収率は９２％であった。粗生成物の液体クロマトグラフィー分析より（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジン（フッ素化物）の面積百分率は８１．６％であり、下記式
【化４５】
2013023457.tif 000046
【０１５６】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−クロロピロリジン（塩素化物）は殆ど検出されなかった。
【０１５７】
（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの１Ｈおよび１９Ｆ−ＮＭＲは実施例３と同様であった。
【０１５８】
上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−アセトキシアセチル−２−プロポキシカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗生成物８３．６ｇ（２７５ｍｍｏｌとする、１．００ｅｑ）に、メタノール１２０ｍＬと７Ｍアンモニアメタノール溶液１５７ｍＬ（１．１０ｍｏｌ、４．００ｅｑ）を加え、３０℃で終夜攪拌した。反応混合液の液体クロマトグラフィー分析より変換率は１００％であった。反応終了液（懸濁溶液）を室温まで降温し、さらに氷冷し、析出した結晶を濾過し、イソプロパノール２０ｍＬで洗浄し、真空乾燥することにより、下記式
【化４６】
2013023457.tif 000047
【０１５９】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの粗結晶を４４．６ｇ得た。収率は８５％であった。粗結晶の液体クロマトグラフィー純度は８９．４％であり、下記式
【化４７】
2013023457.tif 000048
【０１６０】
で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−クロロピロリジンは全く検出されなかった。
【０１６１】
５０℃に加熱した水１７５ｍＬに、粗結晶４３．７ｇを加え（均一溶解を確認）、イソプロパノール７００ｍＬを徐々に加え（５０から３６℃に降温し、結晶の析出を確認）、室温まで降温し、さらに１時間３０分氷冷し、析出した結晶を濾過し、少量のイソプロパノールで洗浄し、上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの１回目再結晶品（未乾燥）を４２．３ｇ得た。１回目再結晶品の液体クロマトグラフィー純度は９９．３％であり、当然、上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−クロロピロリジンは全く検出されなかった。
【０１６２】
５０℃に加熱した水１７５ｍＬに、１回目再結晶品全量４２．３ｇを加え（均一溶解を確認）、イソプロパノール７００ｍＬを徐々に加え（結晶の析出を確認）、室温まで降温し、さらに３０分間氷冷し、析出した結晶を濾過し、少量のイソプロパノールで洗浄し、真空乾燥することにより、上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの２回目再結晶品を３７．３ｇ得た。再結晶２回のトータル回収率は８５％であった。２回目再結晶品の液体クロマトグラフィー純度は９９．８％であり、当然、上記式で示される（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−クロロピロリジンは全く検出されなかった。
【０１６３】
（２Ｓ，４Ｓ）−１−ヒドロキシアセチル−２−アミノカルボニル−４−フルオロピロリジンの１Ｈおよび１９Ｆ−ＮＭＲは実施例１と同様であった。