(57)【要約】      （修正有）【課題】細胞を活性化する機能を有した炭酸溶液の提供。【解決手段】ピロロキノリンキノン又はその塩と二酸化炭素発生源を含む組成物あるいはピロロキノリンキノン又はその塩と二酸化炭素発生源と分散媒を含む組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ピロロキノリンキノン又はその塩と二酸化炭素発生源を含む組成物。
【請求項２】
分散媒を更に含む請求項１記載の組成物。
【請求項３】
二酸化炭素発生源が炭酸塩であり、酸を更に含む請求項１記載の組成物。
【請求項４】
ピロロキノリンキノンの塩がアルカリ金属塩である請求項２又は３記載の組成物。
【請求項５】
分散媒が水を含むことを特徴とする請求項２又は４記載の組成物。
【請求項６】
ピロロキノリンキノン又はその塩が０．０００１から１０重量％、炭酸塩が５から８０重量％、酸が５から８０重量％である、請求項３又は４記載の組成物。
【請求項７】
二酸化炭素の分散媒中の濃度が０．１から１．５重量％であることを特徴とする請求項２、４又は５いずれか記載の組成物。
【請求項８】
ピロロキノリンキノン又はその塩の分散媒中の濃度が０．００１−１重量％であることを特徴とする請求項２、４、５又は６いずれか記載の組成物。
【請求項９】
ゲル形態である、請求項２、４、５、６又は７いずれか記載の組成物。
【請求項１０】
錠剤の形態である、請求項３、４又は６いずれか記載の組成物。
【請求項１１】
粉末の形態である、請求項３、４又は６いずれか記載の組成物。
【請求項１２】
入浴剤である、請求項１から１１いずれか記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピロロキノリンキノンと二酸化炭素と水からなる組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
炭酸水は二酸化炭素を水に溶かしたもので、飲料として使用されることが多いだけでなく、入浴（特許文献１、２）や美容方法（特許文献３）に使用される。二酸化炭素の濃度が低い微炭酸水や、高圧力下で二酸化炭素濃度を高めた炭酸飲料水、温水に二酸化炭素を溶解した人工炭酸泉、工業用に使用される二酸化炭素溶解液など幅広く使用されている。
【０００３】
炭酸泉等の二酸化炭素を含んだ温水に入浴した場合の血管拡張効果や、湯冷めしにくい等の温浴効果は一般によく知られ、古くから温泉を利用する浴場等で用いられている。炭酸泉の保温作用は、基本的に、含有二酸化炭素の末梢血管拡張作用により身体環境が改善されるためと考えられている。また、二酸化炭素の経皮進入によって、毛細血管床の増加及び拡張が起こり、皮膚の血行を改善する。このため退行性病変及び末梢循環障害の治療に効果があるとされている。
【０００４】
一方、ピロロキノリンキノン（以下、ＰＱＱと記すことがある）は、新しいビタミンの可能性があることが提案されており（非特許文献１）、健康補助食品、化粧品などに有用な物質として注目を集めている。さらには、ＰＱＱは、細菌に限らず、真核生物のカビ、酵母に存在し、補酵素としてとして重要な働きを行っている。また、ＰＱＱについては、近年までに細胞の増殖促進作用、抗白内障作用、肝臓疾患要望治療作用、損傷治癒作用、抗アレルギー作用、逆転写酵素阻害作用およびグリオキサラーゼＩ阻害―制癌作用など多くの生理活性が明らかにされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００５−１３７４５２号公報
【特許文献２】特開２００８−１３７９５７号公報
【特許文献３】特開２００３−０７３２５３号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】nature, vol.422, 24April, 3003, p832
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
二酸化炭素を溶解した溶液は上記の様に幅広い場面で使用されており、更に新たな機能を有することが望まれている。本発明の課題は、細胞を活性化する機能を有した炭酸溶液を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明によれば、以下の発明が提供される。
［１］ピロロキノリンキノン又はその塩と二酸化炭素発生源を含む組成物。
［２］分散媒を更に含む［１］記載の組成物。
［３］二酸化炭素発生源が炭酸塩であり、酸を更に含む［１］記載の組成物。
［４］ピロロキノリンキノンの塩がアルカリ金属塩である［２］又は［３］記載の組成物。
［５］分散媒が水を含むことを特徴とする［２］又は［４］記載の組成物。
［６］ピロロキノリンキノン又はその塩が０．０００１から１０重量％、炭酸塩が５から８０重量％、酸が５から８０重量％である、［３］又は［４］記載の組成物。
［７］二酸化炭素の分散媒中の濃度が０．１から１．５重量％であることを特徴とする［２］、［４］又は［５］いずれか記載の組成物。
［８］ピロロキノリンキノン又はその塩の分散媒中の濃度が０．００１−１重量％であることを特徴とする［２］、［４］、［５］又は［６］いずれか記載の組成物。
［９］ゲル形態である、［２］、［４］、［５］、［６］又は［７］いずれか記載の組成物。
［１０］錠剤の形態である、［３］、［４］又は［６］いずれか記載の組成物。
［１１］粉末の形態である、［３］、［４］又は［６］いずれか記載の組成物。
［１２］入浴剤である、［１］から［１１］いずれか記載の組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明は細胞活性化機能を有した炭酸溶液を提供することを可能とする。また、当該組成液は室温で容易に溶解性を向上することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、ピロロキノリンキノン類と二酸化炭素発生源とを含む組成物である。ピロロキノリンキノン類とはピロロキノリンキノン、その塩又はその水和物を示す。ピロロキノリンキノンは、下記式（１）で表される構造式の化合物である。
【化１】
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本発明において用いられるピロロキノリンキノンの塩としてはピロロキノリンキノンのアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩が挙げられ、好ましくは、アルカリ金属塩である。アルカリ金属塩としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、セシウム、ルビジュウムなどの塩が挙げられる。好ましくは、ナトリウム塩である。ピロロキノリンキノンの塩は、単独で使用してもよいし、混合して使用してもよい。
【００１１】
ピロロキノリンキノンのアルカリ金属塩における塩の置換数は、１〜３であり、モノアルカリ金属塩、ジアルカリ金属塩、トリアルカリ金属塩のどれでも良いが、好ましくは、ジアルカリ金属塩である。より好ましくは、ジナトリウム塩である。
本発明において用いられるピロロキノリンキノンの塩は、市販されているものを入手することができるし、公知の方法により製造することができる。
【００１２】
二酸化炭素発生源としては、二酸化炭素、炭酸塩、重炭酸塩等が挙げられる。二酸化炭素発生源として二酸化炭素を用いた場合、分散媒を更に含むことが好ましい。具体的な分散媒としては、水、各種有機溶媒を１種類以上用いることが出来、少なくとも水を用いることが好ましい。使用する水としては蒸留水、イオン交換水、軟水、硬水等制限なく使用できる。有機溶媒についても特に制限はないが、例えば、エタノール、プロパノール、ブタノール、グリセリン、プロピレングリコールが挙げられる。
【００１３】
二酸化炭素発生源として、炭酸塩、重炭酸塩を用いた場合は、酸を更に用いることが好ましい。炭酸塩の具体例としては、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム等の炭酸塩、重炭酸塩が挙げられる。
酸としては塩酸、硫酸、硝酸、クエン酸、酢酸、エデト酸、乳酸、リン酸、コハク酸、マロン酸又は酸性を示す塩が使用できる。酸性を示す塩としては硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム等が挙げられる。ピロロキノリンキノン類が０．０００１から１０重量％、炭酸塩が５から８０重量％、酸が５から８０重量％で混合するのがよい。
【００１４】
本発明の組成物の製造方法としては、ピロロキノリンキノン類と二酸化炭素発生源を混合する方法、
ピロロキノリンキノン類と二酸化炭素発生源を分散媒に溶かす方法、
ピロロキノリンキノン類と分散媒とを混合した後二酸化炭素発生源を加える方法、
あらかじめ二酸化炭素発生源を溶解した炭酸溶液にピロロキノリンキノン類を加える方法等が挙げられる。
【００１５】
分散媒は、ピロロキノリンキノン類の濃度が０．００１から１重量％、二酸化炭素の濃度が０．１から１．５重量％となるように添加、調製することが好ましい。二酸化炭素の濃度をこれ以上に上げるためには加圧、特殊な膜を使用する等の特別な措置が必要になる。また、この濃度より低い場合は飲んだ際の清涼感、発泡を認識できない。
【００１６】
混合した組成液は、攪拌してもよい。攪拌は、磁気攪拌、機械攪拌、手動攪拌、振とう攪拌等に供することにより実施することができるが、好ましくは、機械攪拌、手動攪拌、振とう攪拌である。
【００１７】
二酸化炭素発生源として炭酸塩を用いた場合は、更に酸を用いる必要がある。最終的な組成液のpＨは１から９が好ましく、より好ましくは２から５である。ｐＨが高すぎると二酸化炭素は重炭酸イオン、炭酸イオンを形成し、発泡性が失われやすく、好ましくない。また、pＨが低くなりすぎるとピロロキノリンキノン自身が析出して好ましくない。
【００１８】
二酸化炭素源発生源の添加は、−２０〜１００℃で行うことが好ましい。より好ましくは、−４〜６０℃である。温度が高い場合は二酸化炭素が抜けやすい。また、低すぎる場合は凍結によりこの組成物を維持できない。
【００１９】
本発明の組成物は、食品、化粧品、入浴剤、医薬品等に用いることが出来る。それに必要なその他の成分は必要に応じて添加できる。香料、酸味料、塩、うまみ成分、果汁、発酵食品、脂質、保湿剤、美白剤、甘味料、ハーブエキス、お茶、コーヒー、乳化剤、グリセリン、防腐剤、抗菌剤、ステロイド、サリチル酸メチル、ビタミン、インドメタシン等必要に応じて加えればよい。
【００２０】
食品、医薬品、化粧品の用途で使用する場合、衛生面で注意することは当然で無菌的な環境、例えば、クリーンルームで製造することが望ましい。
【００２１】
甘味料を混合する場合、単糖、二糖、オリゴ糖、人工甘味料を混合することができる。人工甘味料の例としては、フルクトース、グルコース、ガラクトース、ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、トレハロース、パラチニット、アスパルテーム、アセスルファムＫ、スクラロース、カンゾウエキス、ラカンカ、ショ糖、水あめ、蜂蜜等が挙げられる。また、抗酸化剤として使用されるコエンザイムＱ１０、ビタミン類、ポリフェノール、リン脂質等を添加することもできる。
【００２２】
本発明の組成物は、粉末、錠剤、ゲル状態の形態で提供することが可能である。ゲル状態の形態で提供する際、通常のゲル化剤を混合することも可能である。例えば、ゼラチン、寒天、カラギーナン、コラーゲン、フコイダン、ヒアルロン酸、コンニャク、グルコマンナン、ペクチン、ローカストビーンガム、キサンタンガム、ジェランガム、澱粉、卵白等が挙げられる。
【実施例】
【００２３】
実施例及び比較例によって本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの例にのみ限定されるものではない。
本実施例および比較例では、ＵＶ測定は、ＨＩＴＡＣＨＩ  Ｕ−２０００  Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒを使用して測定した。原料としてピロロキノリンキノンジナトリウム三水和物（三菱ガス化学株式会社製、粉末）を使用した。
【００２４】
実施例１−３、比較例１−８  
ピロロキノリンキノン入り炭酸水の細胞活性化試験
ピロロキノリンキノンジナトリウム三水和物を各種濃度で炭酸水に溶解して表１の濃度となるように試験液を作製した。また、比較例として水に溶かしたピロロキノリンキノンジナトリウム三水和物又は炭酸水を使用した。チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ細胞）を使用して行った。培地はαーＭＥＭ培地（ＧＩＢＣＯ）に牛胎児血清（ＦＢS）を１０％添加したものに、ペニシリン、ストレプトマイシン、カナマイシンを微量添加したものを使用した。培養は二酸化炭素５重量％添加した飽和水蒸気下３７℃で行った。培養したＣＨＯ細胞をトリプシン処理でシャーレからはがした。このはがした細胞を遠心分離で取り出し、培地を加えた。これを血球計算盤に入れ、細胞の数を数えた。
９６穴プレートを使用し、穴に５０００個細胞を入れ、培地１００μＬ/穴で一晩培養した。
一晩培養後、試験液を培地で６４倍に希釈した溶液に交換した。1日後、培地を抜き、２回培地で洗浄後、細胞数計測をＷＳＴ（doujinn Cell Counting kit 8）を使用し、プレートリーダーによる４５０ｎｍ吸光度測定で行った。このときの吸光度は細胞数に比例する。何も添加しないときの細胞数を１００として計算した。結果を表１に示す。
【表１】
2013237644.tif 000003
実施例１のＰＱＱ入りの炭酸水は比較例２，３に示す炭酸水、ＰＱＱ水溶液単独よりも増殖効果がある。相乗的に細胞を活性化している。実施例３は比較例５，６、実施例４は比較例７、８と比べて効果的である。
【００２５】
実施例４  ＰＱＱジナトリウムの炭酸水への溶解性
二酸化炭素０．９重量％の炭酸水１ｍｌにＰＱＱジナトリウム０．１ｇを加え、４０℃、３０分加熱後、室温に戻し、遠心分離して上澄みを得た。水で１／１０００に希釈してＵＶ２５０ｎｍで濃度測定した結果、溶解量８．１g／Ｌ ｐＨ３．６であった。
【００２６】
比較例９
実施例４と同様の操作を炭酸水から水に変更して使用して行った。溶解量３．０ｇ／Ｌ ｐＨ ３．５であった。
実施例４の結果を比較することにより、水への溶解性に比べて炭酸水では２．７倍溶解しており、二酸化炭素による溶解促進効果があった。
【００２７】
実施例５  糖を添加した炭酸水
二酸化炭素０．９重量％炭酸水１００ｇにショ糖１０ｇ、ピロロキノリンキノンジナトリウム三水和物１５ｍｇ添加した。均一で甘味を有する溶液を作製できた。
【００２８】
実施例６  炭酸発生固体
炭酸水素ナトリウム１．２ｇ、炭酸ナトリウム０．８ｇ、ピロロキノリンキノンジナトリウム三水和物０．００６ｇ、コハク酸１．９９４ｇを混合した。この混合物を０．２ｇとり、１Ｌのお湯（４０℃）に加えた。ほぼ無色透明発泡性のお湯になり、二酸化炭素を発生させるＰＱＱを含む溶液を作ることができた。この溶液は入浴等に適する。
【００２９】
実施例７  炭酸発生固体
炭酸水素ナトリウム１．２ｇ、炭酸ナトリウム０．８ｇ、ピロロキノリンキノンジナトリウム三水和物０．００６ｇ、クエン酸１．９９４ｇを混合した。この混合物を０．２ｇとり、１Ｌのお湯（４０℃）に加えた。ほぼ無色透明の発泡性のお湯になった。
【００３０】
比較例１０
炭酸水素ナトリウム１．２ｇ、炭酸ナトリウム  ０．８ｇ、ピロロキノリンキノンジナトリウム三水和物０．００６ｇを混合した。この混合物を０．２ｇとり、１Ｌのお湯（４０℃）に加えた。ほぼ無色二酸化炭素が発生しない溶液であった。この組成物では二酸化炭素の発生もなく、酸の添加が発泡に必要であることが分かった。
【産業上の利用可能性】
【００３１】
本発明は、飲食品、入浴剤、化粧品、医薬品等に使用することができる。