(57)【要約】【課題】  ガン細胞におけるＧＬＵＴを標的にした抗ガン剤のスクリーニング方法およびＧＬＵＴを発現するガン細胞を持つガン患者に適した副作用の少ない効果的な抗ガン剤の選択方法を提供すること。【解決手段】  本発明の抗ガン剤のスクリーニング方法は、被験物質のＧＳＫ３の阻害作用を調べ、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質についてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対する抗ガン剤として有用であるとの判定に基づいて行うことを特徴とする。また、本発明のガン患者に適した抗ガン剤の選択方法は、ガン患者から摘出したガン細胞がＧＬＵＴ３を発現しているかどうかを調べ、ＧＬＵＴ３を発現している場合にＧＳＫ３の阻害作用を有する物質をこの患者に適した抗ガン剤として選択することを特徴とする。本発明は、ガン患者に対する選択的なガン分子標的化学療法の実施に貢献し、ＰＥＴ診断と併用することで個々のガン患者に適した治療を可能にする。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ガン剤のスクリーニング方法であって、被験物質のＧＳＫ３の阻害作用を調べ、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質についてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対する抗ガン剤として有用であるとの判定に基づいて行うことを特徴とする方法。
【請求項２】
ガン患者に適した抗ガン剤の選択方法であって、ガン患者から摘出したガン細胞がＧＬＵＴ３を発現しているかどうかを調べ、ＧＬＵＴ３を発現している場合にＧＳＫ３の阻害作用を有する物質をこの患者に適した抗ガン剤として選択することを特徴とする方法。
【請求項３】
ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質を有効成分とすることを特徴とするＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞を持つガン患者に対する抗ガン剤。
【請求項４】
その他の抗ガン剤（ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質を除く）との組み合わせからなることを特徴とする請求項３記載の抗ガン剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、標的指向性を有する抗ガン剤のスクリーニング方法およびガン患者に適した抗ガン剤の選択方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
日本を含む先進国においてガンが死亡原因の上位を占めることは周知の通りであり、古くからその診断方法や治療薬の研究開発が行われているが、その成果は今なお十分とは言えず、今日においても精力的に研究開発が行われている。近年、ガン細胞におけるＧＬＵＴ（糖輸送タンパク質：ｇｌｕｃｏｓｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）の役割が注目されている。種々の固形ガンにおいてグルコースの取り込みが亢進していることが知られているが、これはガン細胞におけるＧＬＵＴの発現亢進によるものと考えられており、ＰＥＴ（Ｐｏｓｉｔｒｏｎ  Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）診断においてもＧＬＵＴを介した糖輸送活性が有用なマーカーとして評価されている（例えば非特許文献１）。従って、ガン細胞におけるＧＬＵＴは、ガンの診断のみならず治療の標的になると考えられ、ＧＬＵＴを標的にした抗ガン剤は、標的指向性を有することで副作用の少ない効果的なガン治療が行える薬剤の一つになりうることが期待される。しかしながら、これまでのところ、ＧＬＵＴを標的にした抗ガン剤は開発されるに至っておらず、こうした抗ガン剤をスクリーニングする方法も見出されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】ＳＳ．Ｇａｍｂｈｉｒ（２００２）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ２，６８３−６９３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そこで本発明は、ガン細胞におけるＧＬＵＴを標的にした抗ガン剤のスクリーニング方法およびＧＬＵＴを発現するガン細胞を持つガン患者に適した副作用の少ない効果的な抗ガン剤の選択方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは上記の点に鑑みて鋭意検討を行った結果、ＧＳＫ３（グリコーゲンシンターゼキナーゼ３）の阻害作用を有する物質が、ＧＬＵＴのアイソフォームの１つであるＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対し、ＧＬＵＴ３を発現していないガン細胞や正常細胞に対してよりも優先して、優れた細胞毒性作用を有することなどを見出し、この知見に基づいて、ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対して有効な抗ガン剤となる物質をＧＳＫ３の阻害作用を指標にしてスクリーニングできること、また、ガン患者に適した抗ガン剤を選択する際、ガン患者がＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞を持つかどうかを調べ、ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞を持つ場合にＧＳＫ３の阻害作用を有する物質をこのガン患者に適した抗ガン剤として選択できることに想到した。
【０００６】
即ち、本発明の抗ガン剤のスクリーニング方法は、請求項１記載の通り、被験物質のＧＳＫ３の阻害作用を調べ、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質についてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対する抗ガン剤として有用であるとの判定に基づいて行うことを特徴とする。
また、本発明のガン患者に適した抗ガン剤の選択方法は、請求項２記載の通り、ガン患者から摘出したガン細胞がＧＬＵＴ３を発現しているかどうかを調べ、ＧＬＵＴ３を発現している場合にＧＳＫ３の阻害作用を有する物質をこの患者に適した抗ガン剤として選択することを特徴とする。
また、本発明のＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞を持つガン患者に対する抗ガン剤は、請求項３記載の通り、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質を有効成分とすることを特徴とする。
また、請求項４記載の抗ガン剤は、請求項３記載の抗ガン剤において、その他の抗ガン剤（ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質を除く）との組み合わせからなることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対する抗ガン剤のスクリーニング方法を提供することができる。また、ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞を持つガン患者に適した副作用の少ない効果的な抗ガン剤の選択方法を提供することができる。本発明は、ガン患者に対する選択的なガン分子標的化学療法の実施に貢献し、ＰＥＴ診断と併用することで個々のガン患者に適した治療を可能にする。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】実施例の実験１においてＧＳＫ３阻害物質がＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対して選択的に細胞毒性作用を有することを示すグラフである。
【図２】実施例の実験２においてＧＳＫ３阻害物質がＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞のＧＬＵＴ３の発現を低下させる作用を有することを示すグラフである。
【図３】実施例の実験３においてＧＳＫ３阻害物質がＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞のグルコースの取り込みを低下させる作用を有することを示すグラフである。
【図４】実施例の実験４においてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対してＧＳＫ３阻害物質と抗ガン剤を組み合わせて投与することで相乗的な抗ガン効果が得られることを示すグラフである。
【図５】実施例の実験５においてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対してＧＳＫ３阻害物質と抗ガン剤を組み合わせて投与することで相乗的な抗ガン効果が得られることを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の抗ガン剤のスクリーニング方法は、被験物質のＧＳＫ３の阻害作用を調べ、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質についてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対する抗ガン剤として有用であるとの判定に基づいて行うことを特徴とするものである。また、本発明のガン患者に適した抗ガン剤の選択方法は、ガン患者から摘出したガン細胞がＧＬＵＴ３を発現しているかどうかを調べ、ＧＬＵＴ３を発現している場合にＧＳＫ３の阻害作用を有する物質をこの患者に適した抗ガン剤として選択することを特徴とするものである。
【００１０】
上記の通り、本発明の抗ガン剤のスクリーニング方法とガン患者に適した抗ガン剤の選択方法は、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質がＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対して優れた細胞毒性作用などを有するという本発明者らによって見出された知見に基づくものである。ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質が例えばグリオーマ細胞の細胞死を誘導するといった報告は既に存在する（例えばＫｏｔｌａｒｏｖａ  Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，６８，６６４３−６６５１．２００８）。しかしながら、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質がＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対していかなる作用を有するかについての報告は存在しない。
【００１１】
本発明の抗ガン剤のスクリーニング方法において被験物質のＧＳＫ３の阻害作用を調べる方法は、自体公知の方法であってよい。その具体的な方法としては、細胞抽出液中における被験物質存在下でのＧＳＫ３の存在量やＧＳＫ３によるグリコーゲンシンターゼのリン酸エステル化反応の程度を免疫化学的に調べる方法などが挙げられる。本発明の抗ガン剤のスクリーニング方法によってスクリーニングされるＧＳＫ３の阻害作用を有する物質は、低分子有機化合物、ペプチド、蛋白質などであってよい。また、ＧＳＫ３の機能は炎症などの活性化に関わるＮｆ−ｋＢの機能に依存するので、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質はＮｆ−ｋＢの阻害作用を有する低分子有機化合物、ペプチド、蛋白質などでもよい。
【００１２】
ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質のＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対する抗ガン作用の確認は、例えば、ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対する細胞致死作用を確認することによって行うことができる。ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞としては、腫瘍性のＨｅＬａ融合細胞株であるＣＧＬ４（例えばＳｕｚｕｋｉ  Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒｏ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２６２．５３４−５４０．１９９９）や、ヒト大腸癌由来の細胞株であるＣａｃｏ−２などが挙げられる。
【００１３】
また、本発明によれば、ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞を持つガン患者に適した抗ガン剤の選択方法が提供される。例えばＰＥＴ診断においてガンにおけるグルコースの取り込みの亢進が確認できた患者に対してバイオプシーを行ってガン細胞を摘出し、摘出したガン細胞がＧＬＵＴ３を発現しているかどうかを調べ、ＧＬＵＴ３を発現している場合にＧＳＫ３の阻害作用を有する物質をこの患者に適した抗ガン剤として選択すれば、標的指向性を有することで副作用の少ない効果的なガン治療を行うことが可能となる。摘出したガン細胞がＧＬＵＴ３を発現しているかどうかを調べる方法は、自体公知の方法であってよい。その具体的な方法としては、ＧＬＵＴ３の存在を免疫化学的な組織染色によって調べる方法やその遺伝子発現を定量的リアルタイムＰＣＲやＲＴ−ＰＣＲによって調べる方法などが挙げられる。
【００１４】
こうしてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞を持つガン患者に適した抗ガン剤として選択されたＧＳＫ３の阻害作用を有する物質は、低分子有機化合物、ペプチド、蛋白質などであってよく、ガン患者に対して経口的や非経口的に単独で投与してもよいが、化学療法剤として慣用的に使用されるその他の抗ガン剤と組み合わせて投与することで抗ガン効果の増強が期待できる。化学療法剤として慣用的に使用されるその他の抗ガン剤としては、５−フルオロウラシル、メソトレキセート、ドキシフルリジン、テガフール、シタラビン、ゲムシタビンに例示される代謝拮抗剤、シクロホスファミド、イホスファミド、チオテパ、カルボコン、塩酸ニムスチンに例示されるアルキル化剤、マイトマイシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アムルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸エピルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシンに例示される抗癌性抗生物質、ドセタキセル、パクリタキセル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビンに例示される微小管作用薬、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチンに例示される白金製剤、カンプトテシン、イリノテカン、塩酸ノギテカンに例示されるトポイソメラーゼ阻害剤、エトポシドに例示されるアルカロイド系抗ガン剤などが挙げられる。
【実施例】
【００１５】
以下、本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明は以下の記載に限定して解釈されるものではない。なお、以下の実施例において用いた細胞株のうち、腫瘍性のＨｅＬａ融合細胞株であるＣＧＬ４、非腫瘍性のＨｅＬａ融合細胞株であるＣＧＬ１（例えばＳｕｚｕｋｉ  Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒｏ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２６２．５３４−５４０．１９９９）、ヒト大腸ガン由来の細胞株であるＣａｃｏ−２、ヒト扁平上皮ガン由来の細胞株であるＡ４３１の、ＧＬＵＴ３とＧＬＵＴ１の遺伝子発現量は、表１に記載の通りであり、ＣＧＬ４とＣａｃｏ−２はＣＧＬ１とＡ４３１に比較してＧＬＵＴ３を高度に発現していることがわかる（ＴａｑＭａｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ  ＩＩ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，ＣＡ）を用いた定量的リアルタイムＰＣＲによる。条件は９５℃で１５分→（９５℃で１５秒→６０℃で１分）×４０サイクル。使用機器は７５００  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，ＣＡ）。表示はＣＧＬ１における発現量を１とした場合の相対値）。
【００１６】
【表１】
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【００１７】
実験１：ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞（ＣＧＬ４）に対するＧＳＫ３阻害物質の細胞毒性作用
（実験方法）
抗癌剤スクリーニング委員会（ＳＣＡＤＳ）から提供された２８５種類の物質からなるライブラリーを構成する個々の物質をＤＭＳＯに溶解し、１０μＭの濃度で、２枚（ｄｕｐｌｉｃａｔｅ）の９６穴プレートに播種して１日後のＣＧＬ４とＣＧＬ１のそれぞれに対して添加し、その３日後にＣＣＫ−８キットを用いたＷＳＴ−８アッセイ（Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８３．９５７１−９５７９．２００８）により、それぞれの細胞に対する細胞毒性作用をＳＣＧＬ１／ＣＧＬ４で表されるスコア（Ｌｏｇ１０（ＣＧＬ１の生存％／ＣＧＬ４の生存％）で算出）で評価した。なお、細胞の培養は、５％ＦＢＳと１００Ｕ／ｍＬのペニシリンと１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭ培地を用い、加湿した５％ＣＯ２／９５％エア中、３７℃で行った（以下同じ）。
【００１８】
（実験結果）
それぞれの物質のＳＣＧＬ１／ＣＧＬ４をプロットしたグラフを図１に示す。図１において、ＳＣＧＬ１／ＣＧＬ４がプラスの数値の物質はＣＧＬ４に対して選択的に細胞毒性作用を有することを意味し、マイナスの数値の物質はＣＧＬ１に対して選択的に細胞毒性作用を有することを意味し、ゼロの物質はＣＧＬ４とＣＧＬ１に対して同等に細胞毒性作用を有することを意味する。図１から明らかなように、ＧＳＫ３阻害物質であるインジルビン−３’−モノオキシム（Ｉｎｄｉｒｕｂｉｎ−３’−ｍｏｎｏｘｉｍｅ）、ＧＳＫ−３インヒビターＩＸ（ＧＳＫ−３  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＩＸ）、ケンパウロン（Ｋｅｎｐａｕｌｌｏｎｅ）、１−アザケンパウロン（１−Ａｚａｋｅｎｐａｕｌｌｏｎｅ）は、いずれもＳＣＧＬ１／ＣＧＬ４がプラスの数値であり、ＧＬＵＴ３を発現しているＣＧＬ４に対して選択的に細胞毒性作用を有することがわかった。ＧＳＫ−３インヒビターＩＸとケンパウロンのＣＧＬ４とＣＧＬ１とＨｅＬａ−Ｓ３に対するＩＣ５０を表２に示す。また表２には微小管作用薬であるビンブラスチン（Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）のこれらの細胞に対するＩＣ５０をあわせて示す。ＧＳＫ−３インヒビターＩＸとケンパウロンがＧＬＵＴ３を発現しているＣＧＬ４に対して選択的に細胞毒性作用を有することは、表２からも明らかである。
【００１９】
【表２】
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【００２０】
実験２：ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞（ＣＧＬ４）のＧＬＵＴ３の発現に対するＧＳＫ３阻害物質の作用
（実験方法）
ＧＳＫ−３インヒビターＩＸとケンパウロンを、各種の濃度でＣＧＬ４に添加し、ＧＬＵＴ３とＧＬＵＴ１のそれぞれの発現にどのような影響を与えるか、ＲＴ−ＰＣＲ（Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，８．１５４７−１５５７．２０１０に記載の方法による）と定量的リアルタイムＰＣＲ（方法は先に記載の通り）によって遺伝子発現の程度を調べることで評価した。また、ポジティブコントロールとしてのアルカロイド系抗ガン剤であるエトポシド（Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ：ＥＴＯＰ）（５０μＭ）による影響ついても同様にして評価した。なお、コントロールはＤＭＳＯを用いた。統計学的処理はｔ−ｔｅｓｔ（Ｐ＜０．０５）によって行った。
【００２１】
（実験結果）
図２の上段にＲＴ−ＰＣＲの結果を示す（β−Ａｃｔｉｎの発現に対する影響をあわせて示す）。また、図２の下段に定量的リアルタイムＰＣＲの結果を示す（ＤＭＳＯによる遺伝子発現量を１とした場合の相対値）。図２から明らかなように、ＧＳＫ−３インヒビターＩＸ（ＧＳＫ３  ＩＸ）とケンパウロン（ＫＰ）は、濃度依存的にＣＧＬ４のＧＬＵＴ３の発現を有意に低下させたが、ＧＬＵＴ１の発現には影響を与えなかった。よって、ＧＳＫ−３インヒビターＩＸとケンパウロンは、ＧＬＵＴ３を発現しているＧＣＬ４のＧＬＵＴ３の発現を低下させる作用を有することがわかった。この結果は、別途の実験において、ＣＧＬ４にＧＳＫ−３βｓｉＲＮＡをトランスフェクトすることでＧＬＵＴ３の発現が低下したことからも支持された。なお、ガン抑制遺伝子の１つであるｐ５３は、多くのガン組織において遺伝子変異が認められるが、このＧＳＫ３阻害物質がＧＬＵＴ３の発現を低下させる作用は、ｐ５３の遺伝子変異に影響を受けないことが別途の実験において確認できた（ｐ５３−ｓｉＲＮＡとｐ５３−ｃＤＮＡをそれぞれトランスフェクトしたＣＧＬ４の間でＧＳＫ３阻害物質によるＧＬＵＴ３の発現低下作用に差異はない）。
【００２２】
実験３：ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞（ＣＧＬ４）のグルコースの取り込みに対するＧＳＫ３阻害物質の作用
（実験方法）
ＣＧＬ４とＣＧＬ１のそれぞれを１２穴デッシュに播種し、１晩培養した後、培地を交換し、ＧＳＫ−３インヒビターＩＸを１０μＭの濃度で添加して約９０％コンフルエントの細胞を２４時間培養した。その後、グルコースアッセイキット（ＳＩＧＭＡ）を用いて培地中のグルコース濃度を測定し、それぞれの細胞のグルコース消費量を標準曲線から算出することで評価した。また、ＧＳＫ−３インヒビターＩＸを添加せずに同様の実験を行った。なお、統計学的処理はｔ−ｔｅｓｔ（Ｐ＜０．０５）によって行った。
【００２３】
（実験結果）
結果を図３に示す（ＨｅＬａ−Ｓ３のグルコース消費量をあわせて示す）。図３から明らかなように、ＧＳＫ−３インヒビターＩＸは、ＧＬＵＴ３を発現しているＣＧＬ４のグルコース消費量を有意に低減させたが、ＣＧＬ１とＨｅＬａ−Ｓ３のグルコース消費量には影響を与えなかった。よって、ＧＳＫ−３インヒビターＩＸは、ＧＬＵＴ３を発現しているＧＣＬ４のグルコースの取り込みを低下させる作用を有することがわかった。この結果は、別途の実験において、ＣＧＬ４のＧＳＫ３をノックダウンすることでグルコース消費量が低減したことからも支持された。
【００２４】
実験４：ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞（Ｃａｃｏ−２）に対してＧＳＫ３阻害物質と抗ガン剤を組み合わせて投与することによる抗ガン効果（その１）
（実験方法）
Ｃａｃｏ−２に対し、エトポシド（１．５６２５〜２００μＭ）にＧＳＫ−３インヒビターＩＸ（０．５〜１．０μＭ）を組み合わせて添加した場合の細胞毒性作用と、ＧＳＫ−３インヒビターＩＸ（０．１５６２５〜２０μＭ）にエトポシド（０．５〜１．０μＭ）を組み合わせて添加した場合の細胞毒性作用を実験１と同様にして調べることで評価した。
【００２５】
（実験結果）
結果を図４に示す。また、図４にはＡ４３１に対する細胞毒性作用をあわせて示す。図４から明らかなように、エトポシド（ＥＴＯＰ）とＧＳＫ−３インヒビターＩＸ（ＧＳＫ３  ＩＸ）の組み合わせは、ＧＬＵＴ３を発現していないＡ４３１に対する細胞毒性作用は増強しなかったが、ＧＬＵＴ３を発現しているＣａｃｏ−２に対する細胞毒性作用を増強し、その効果は相乗的であった（表３）。
【００２６】
【表３】
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【００２７】
実験５：ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞（Ｃａｃｏ−２）に対してＧＳＫ３阻害物質と抗ガン剤を組み合わせて投与することによる抗ガン効果（その２）
（実験方法）
エトポシドのかわりにトポイソメラーゼ阻害剤であるカンプトテシン（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ）をＧＳＫ−３インヒビターＩＸと組み合わせて実験４と同様にして調べることで評価した。
【００２８】
（実験結果）
結果を図５に示す。また、図５にはＡ４３１に対する細胞毒性作用をあわせて示す。図５から明らかなように、カンプトテシン（ＣＰＴ）とＧＳＫ−３インヒビターＩＸ（ＧＳＫ３  ＩＸ）の組み合わせは、ＧＬＵＴ３を発現していないＡ４３１に対する細胞毒性作用は増強しなかったが、ＧＬＵＴ３を発現しているＣａｃｏ−２に対する細胞毒性作用を増強し、その効果は相乗的であった（表４）。
【００２９】
【表４】
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【００３０】
まとめ：
以上の実験から明らかなように、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質は、ＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対し、ＧＬＵＴ３を発現していないガン細胞や正常細胞に対してよりも優先して、優れた細胞致死作用などを有する。また、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質を抗ガン剤と組み合わせてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に投与することで、相乗的な抗ガン効果を得ることができる。従って、被験物質のＧＳＫ３の阻害作用を調べ、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質についてＧＬＵＴ３を発現しているガン細胞に対する抗ガン剤として有用であるとの判定に基づいて抗ガン剤のスクリーニングを行うことができる。また、ガン患者から摘出したガン細胞がＧＬＵＴ３を発現しているかどうかを調べ、ＧＬＵＴ３を発現している場合にＧＳＫ３の阻害作用を有する物質をこの患者に適した抗ガン剤として選択することができる。本発明は、ガン患者に対する選択的なガン分子標的化学療法の実施に貢献し、ＰＥＴ診断と併用することで個々のガン患者に適した治療を可能にする。上述の通り、ＧＳＫ３の阻害作用を有する物質がＧＬＵＴ３の発現を低下させる作用はｐ５３の遺伝子変異に影響を受けないので、本発明に基づくガン分子標的化学療法は医療現場において広範に利用できる汎用性に富むものである。
【産業上の利用可能性】
【００３１】
本発明は、ガン細胞におけるＧＬＵＴを標的にした抗ガン剤のスクリーニング方法およびＧＬＵＴを発現するガン細胞を持つガン患者に適した副作用の少ない効果的な抗ガン剤の選択方法を提供することができる点において産業上の利用可能性を有する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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