(57)【要約】【課題】安全性の高い天然物の中からＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有するものを見出し、それを有効成分とする毛髪はり・こし改善剤及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤を提供する。【解決手段】本発明の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤の有効成分として、甘草の葉部からの抽出物を含有させる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする毛髪はり・こし改善剤。
【請求項２】
甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、毛髪のはり・こしを改善する毛髪はり・こし改善剤、及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
毛髪は人々の印象に多大なる影響を与えることから、その変化や異常は古来より人々の重大な関心事となっている。毛髪に関する問題としては、抜け毛、薄毛等といった毛根・毛包の状態に関するもののほかに、毛髪が硬い、柔らかい、細い、はり・こしがない、枝毛、くせ毛等といった毛髪の髪質に関するもの等があり、実に様々である。さらに、毛髪の髪質に関する問題としても、日常のヘアケア、ヘアメイク、紫外線暴露等による毛髪の損傷に起因するものや、毛幹形成における問題に起因するものなどがあり、極めて多様な要因が関与している。
【０００３】
従来、毛髪の細さや、はり・こしのなさを改善するために、例えば育毛有効成分を配合した育毛剤や養毛剤などが利用されてきた。しかしながら、従来の育毛剤や養毛剤では、髪は太くならず、はり・こしを与えるほどの効果は期待できないという問題があった。これらを改善するため、アルコキシシランの加水分解で生成したシラノール化合物を毛髪に浸透させ、かつ毛髪内部で重合させる方法が提案されている（例えば、特許文献１参照）。しかし、化学物質を用いて毛髪を改質するこの方法では、毛髪に自然なはり・こしを付与するという点で十分とはいえなかった。
【０００４】
一方、生化学的・分子生物学的に髪質を改善する試みもなされている。毛髪は、その表面を覆うキューティクル（毛小皮）、その内部にある毛皮質（コルテックス）及び毛髪の中心を占める毛髄質（メデュラ）から構成されている。このうち、毛髪の損傷においては、その表面を覆うキューティクルがもっとも影響を受けやすく、また毛髪の硬さ、はり・こし等にはキューティクルが重要な役割を担っていることが知られている（例えば、非特許文献１参照）。そのため、キューティクルを効果的に再生することができれば、毛髪の硬さ、はり・こし等の髪質の改善が可能になると考えられる。
【０００５】
ここで、最近、ケラチン関連タンパク質（Keratin-associated protein；ＫＡＰ）のうち、ＫＡＰ５ファミリー遺伝子のｍＲＮＡ発現量と毛髪のはり・こしの強さとの間に相関関係があることが明らかにされた（例えば、特許文献２参照）。また、ＫＡＰ５ファミリーの一つであるＫＡＰ５．１が、成長過程にあるキューティクルに局在することも報告されている（例えば、非特許文献２参照）。このため、ＫＡＰ５ファミリー、特にＫＡＰ５．１ｍＲＮＡの発現を促進することができれば、キューティクルの再生、ひいては毛髪の硬さ、はり・こし等の髪質の改善につながると期待されている。
【０００６】
このような中、ＫＡＰ５．１ｍＲＮＡの発現を促進するものとして、セリン、グリシン、システイン及びその誘導体等が報告されている（例えば、特許文献３参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００５−３２０３１４号公報
【特許文献２】特開２００６−０１４７２１号公報
【特許文献３】特開２００６−１４３６４９号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】曽我部敦ら，日本化粧品技術者会誌，２００２年，第３６巻，第３号，p.207-216
【非特許文献２】Jones LN. et al.，Int J Trichology，２０１０年，Vol.2，No.2，p.89-95
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、安全性の高い天然物の中からＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有するものを見出し、それを有効成分とする毛髪はり・こし改善剤及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題を解決するために、本発明の毛髪はり・こし改善剤及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、優れたＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有し、かつ安全性の高い毛髪はり・こし改善剤及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有するものである。
【００１３】
ここで、本実施形態において「甘草の葉部からの抽出物」には、甘草の葉部を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１４】
甘草は、マメ科グリチルリーザ（Glycyrrhiza）属に属する多年生草本である。甘草には、グリチルリーザ・グラブラ（Glychyrrhiza glabra）、グリチルリーザ・インフラータ（Glychyrrhiza inflata）、グリチルリーザ・ウラレンシス（Glychyrrhiza uralensis）、グリチルリーザ・アスペラ（Glychyrrhiza aspera）、グリチルリーザ・ユーリカルパ（Glychyrrhiza eurycarpa）、グリチルリーザ・パリディフロラ（Glychyrrhiza pallidiflora）、グリチルリーザ・ユンナネンシス（Glychyrrhiza yunnanensis）、グリチルリーザ・レピドタ（Glychyrrhiza lepidota）、グリチルリーザ・エキナタ（Glychyrrhiza echinata）、グリチルリーザ・アカンソカルパ（Glychyrrhiza acanthocarpa）等、様々な種類のものがあり、これらのうち、いずれの種類の甘草を抽出原料として使用してもよいが、特にグリチルリーザ・グラブラ（Glychyrrhiza glabra）、グリチルリーザ・ウラレンシス（Glychyrrhiza uralensis）、及びグリチルリーザ・インフラータ（Glychyrrhiza inflata）を抽出原料として使用することが好ましい。
【００１５】
本実施形態において、抽出原料として使用する甘草の構成部位は、葉部である。ここで、甘草は、その根部が古代より薬用又は甘味料の原料として利用され、グリチルリチンその他の有用成分が含有されていることが知られており、一般に「甘草」といえばその根部を指す。しかし、本実施形態においては、根部を利用した後の残部に着目した結果、甘草の葉部がＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有することを見出したものである。なお、根部に含まれるグリチルリチンその他の有用成分は甘草の葉部には含有されておらず、葉部に含まれるＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有する物質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般に用いられている抽出方法によって、甘草の葉部からＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有する抽出物を得ることができる。
【００１６】
例えば、抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、甘草の葉部の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１７】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用することが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。
【００１８】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００１９】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２０】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００２１】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００２２】
なお、上述のようにして得られた抽出液はそのままでも毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００２３】
また、甘草の葉部からの抽出物は特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、化粧料等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００２４】
以上のようにして得られる甘草の葉部からの抽出物は、優れた毛髪はり・こし改善作用及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有しているため、毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤の有効成分として用いることができる。本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、医薬品、医薬部外品、化粧品等の幅広い用途に使用することができる。
【００２５】
ここで、甘草の葉部からの抽出物が有する毛髪はり・こし改善作用は、例えば、ＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用に基づいて発揮される。ただし、甘草の葉部からの抽出物が有する毛髪はり・こし改善作用は、上記作用に基づいて発揮される毛髪はり・こし改善作用に限定されるものではない。
【００２６】
本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、甘草の葉部からの抽出物のみからなるものでもよいし、甘草の葉部からの抽出物を製剤化したものでもよい。
【００２７】
本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味・矯臭剤等を用いることができる。毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、他の組成物（例えば、頭皮（頭髪）外用剤等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００２８】
本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤を製剤化した場合、甘草の葉部からの抽出物の含有量は、特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定することができる。
【００２９】
なお、本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、必要に応じて、毛髪はり・こし改善作用又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有する他の天然抽出物等を、甘草の葉部からの抽出物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００３０】
本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤の患者に対する投与方法としては、経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。
【００３１】
また、本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００３２】
本実施形態の毛髪はり・こし改善剤及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、甘草の葉部からの抽出物が有するＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を通じて、毛髪の髪質、特に毛髪のはり・こしを改善することができる。ただし、本実施形態の毛髪はり・こし改善剤及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、これらの用途以外にもＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００３３】
また、本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、優れた毛髪はり・こし改善作用又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有するため、例えば、頭皮（頭髪）外用剤又は飲食品に配合するのに好適である。この場合に、甘草の葉部からの抽出物そのまま配合してもよいし、甘草の葉部からの抽出物から製剤化した毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤を配合してもよい。
【００３４】
ここで、頭皮（頭髪）外用剤としては、その区分に制限はなく、経皮的に使用される医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものであり、具体的には、例えば、ヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアリキッド、シャンプー、ポマード、リンス、ヘアトリートメント、ヘアスプレー、パーマ剤、染毛剤等が挙げられる。また、剤形としては、液状、クリーム状、ペースト状、泡状、霧状、粉末状等を採用することができる。
【００３５】
飲食品としては、その区分に制限はなく、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品等を幅広く含むものである。
【００３６】
また、本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、優れた毛髪はり・こし改善作用又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を有するので、毛髪のはり・こしに関連する研究やケラチン関連タンパク質（ＫＡＰ）に関連する研究、例えばＫＡＰ５ファミリーの発現制御機構に関連する研究のための試薬としても好適に利用することができる。
【００３７】
なお、本実施形態の毛髪はり・こし改善剤又はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば，マウス，ラット，ハムスター，イヌ，ネコ，ウシ，ブタ，サル等）に対して適用することもできる。
【実施例】
【００３８】
以下、製造例及び試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。なお、本試験例においては、甘草葉部抽出物として甘草葉抽出液（丸善製薬社製，試料１）の凍結乾燥品を使用した。
【００３９】
〔試験例１〕ＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用試験
上記甘草葉部抽出物（試料１）について、以下のようにしてＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用を試験した。
【００４０】
正常ヒト新生児表皮角化細胞（normal human epidermal keratinocyte，ＮＨＥＫ）を７５ｃｍ２フラスコで正常ヒト表皮角化細胞増殖培地（ＫＧＭ）を用いて３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で前培養し、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を４０×１０４ｃｅｌｌｓ／２ｍＬの細胞密度になるようにＫＧＭ培地で希釈した後、３５ｍｍシャーレ（FALCON社製）に２ｍＬずつ播種し（４０×１０４ｃｅｌｌｓ／シャーレ）、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で２４時間培養した。
【００４１】
培養後、培地を正常ヒト表皮角化細胞基礎培地（ＫＢＭ，上記ＫＧＭ培地に増殖因子（ｈＥＧＦ，ＢＰＥ，インスリン）を添加していないもの）に交換し、さらに２４時間培養した。培養後に培地を除去し、被験試料（試料１，試料濃度は下記表１を参照）を添加したＫＢＭ培地又は試料無添加のＫＢＭ培地を各シャーレに２ｍＬずつ添加し、さらに２４時間培養した。培養後、培地を除去し、ＩＳＯＧＥＮ  ＩＩ（ニッポンジーン社製，Cat.No.311-07361）にて総ＲＮＡを抽出し、それぞれのＲＮＡ量を分光光度計にて測定し、２００ｎｇ／μＬになるように総ＲＮＡを調製した。
【００４２】
この総ＲＮＡを鋳型とし、ＫＡＰ５．１及び内部標準であるＧＡＰＤＨのｍＲＮＡの発現量を測定した。検出はリアルタイムＰＣＲ装置Smart Cycler（Cepheid社製）を用いて、TaKaRa SYBR PrimeScript RT-PCR Kit（Perfect Real Time）（タカラバイオ社製，code No.RR063A）によるリアルタイム2 Step RT-PCR反応により行った。ＫＡＰ５．１ｍＲＮＡの発現量は、試料無添加、被験試料添加でそれぞれ培養した細胞から調製した総ＲＮＡ標品を基にして、ＧＡＰＤＨｍＲＮＡの値で補正値を求め、さらに試料無添加の補正値を１００とした時の被験試料添加の補正値を算出した。得られた結果から、下記式によりＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進率（％）を算出した。
【００４３】
ＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進率(％)＝（Ａ／Ｂ）×１００
式中Ａは「被験試料添加時の補正値」を表し、Ｂは「試料無添加時の補正値」を表す。
結果を表１に示す。
【００４４】
【表１】
2013193959.tif 000002
【００４５】
表１に示すように、試料１はＫＡＰ５．１ｍＲＮＡの発現を促進した。したがって、甘草の葉部抽出物が優れたＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進作用及び毛髪はり・こし改善作用を有していると認められた。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明の毛髪はり・こし改善剤及びＫＡＰ５．１ｍＲＮＡ発現促進剤は、毛髪の髪質、特に毛髪のはり・こしの改善に大きく貢献できる。