(57)【要約】【課題】本発明は、簡便な製造工程により製造可能な高分子ゲル粒子を提供することを目的とする。【解決手段】本発明は、高分子ゲル粒子の製造方法であって、温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子と、前記高分子に対する良溶媒とを含むゾルを準備する工程、および前記高分子に対する貧溶媒であって、前記ゾルをゲルに相転移させる温度の前記貧溶媒に、前記ゾルを接触させる工程を含む、前記方法。に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
高分子ゲル粒子の製造方法であって、
温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子と、前記高分子に対する良溶媒とを含むゾルを準備する工程、および
前記高分子に対する貧溶媒であって、前記ゾルをゲルに相転移させる温度の前記貧溶媒に、前記ゾルを接触させる工程
を含む、前記方法。
【請求項２】
前記高分子が多糖類およびタンパク質から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記高分子が、アガロースおよびゼラチンから選択される、請求項２記載の方法。
【請求項４】
貧溶媒が、オクタノール／水分係数（ＬｏｇＰｏｗ）が−１．５〜＋０．５である溶媒である、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
高分子がアガロースであり、良溶媒が水であり、貧溶媒がエタノールである、請求項１〜４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子であって、疎水性基を実質的に含まない前記高分子を含み、粒径が１μｍ未満である、高分子ゲル粒子。
【請求項７】
前記高分子が、アガロースおよびゼラチンから選択される、請求項６記載の高分子ゲル粒子。
【請求項８】
粒径が１０〜２００ｎｍである、請求項６または７記載の高分子ゲル粒子。
【請求項９】
高分子ゲル粒子と溶媒とを含む高分子ゲル粒子分散体であって、前記高分子ゲル粒子が温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子を含み、前記高分子が疎水性基を実質的に含まず、前記高分子ゲル粒子が前記溶媒中に６．０×１０−４〜５．０×１０−３重量％の濃度で分散されている、前記高分子ゲル粒子分散体。
【請求項１０】
請求項１〜５のいずれか１項記載の方法によって製造された高分子ゲル粒子または請求項６〜８のいずれか１項記載の高分子ゲル粒子と、前記高分子ゲル粒子に内包された薬物とを含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子を用いた高分子ゲル粒子、およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、ドラッグデリバリーシステム（ＤＤＳ）やナノテクノロジーの分野で、ナノ粒子とゲルの特性を併せ持つナノメーターサイズの高分子ゲル粒子であるナノゲルが注目されている。ドラッグデリバリーシステムの分野において、直径が数ｎｍ〜数百ｎｍであるナノ粒子は、薬物やタンパク質などを内包させ、細胞内や生体内に薬物やタンパク質などを送達するキャリアとして期待されている。細胞内や生体内に使用する際は、生体適合性が高い材料を用いる必要があり、一般的に生体適合性の高い材料として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）や２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（ＭＰＣ）ポリマーや多糖類などの高分子が知られている。
【０００３】
ＰＥＧやＭＰＣポリマーや多糖類をナノ粒子として用いる場合、疎水性相互作用や静電相互作用の基礎となる結合部位を高分子に付与する手法が知られている。例えば、特許文献１には、非荷電性セグメントと荷電性セグメントとを有するブロック共重合体からなる静電結合型高分子ミセルに、前記荷電性セグメントと反対の荷電を有する薬物と架橋剤とを含む混合物を添加することを特徴とする、薬物担持高分子ミセルの製造方法が記載されている。特許文献２には、アルキル基やケタールなどの疎水性基を付与したＰＥＧを水に溶解させ、疎水性相互作用によりナノ粒子を形成させる方法が記載されている。非特許文献１には、疎水性基であるコレステロールを導入したプルランを水溶液中に溶解させ、疎水性相互作用によりナノ粒子を形成させる方法が記載されている。
【０００４】
特許文献３には、疎水化多糖類のナノゲルが報告されており、該多糖類は、水酸基含有炭化水素またはステロールとジイソシアナート化合物とを反応させて、水酸基含有炭化水素またはコレステロールが１分子反応したイソシアナート基含有疎水性化合物を製造する第１段階反応と、第１段階反応で得られたイソシアナート基含有疎水性化合物と多糖類とをさらに反応させて疎水性基含有多糖類を製造する第２段階反応とからなる方法で製造される。
【０００５】
上記のような従来の方法においては、粒子形成に必要な疎水性基などの部位を高分子に付与することにより粒子を形成しており、これらの部位を高分子に導入する際には、煩雑な合成が必要となり大量生産には向かないという問題があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第４７６３４５９号
【特許文献２】特許第４２５７６９７号
【特許文献３】ＷＯ００／１２５６４
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２６（１２）巻，３０６２−３０６８頁，１９９３年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、簡便な製造工程により製造可能な高分子ゲル粒子を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、ゾル−ゲル転移を起こす高分子、ならびに該高分子に対する溶解度の異なる二種以上の溶媒を用い、温度を制御することにより、簡便に高分子ゲル粒子を製造できることを見出し、本発明を完成した。
【００１０】
すなわち、本発明は以下の発明を包含する。
（１）高分子ゲル粒子の製造方法であって、
温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子と、前記高分子に対する良溶媒とを含むゾルを準備する工程、および
前記高分子に対する貧溶媒であって、前記ゾルをゲルに相転移させる温度の前記貧溶媒に、前記ゾルを接触させる工程
を含む、前記方法。
（２）前記高分子が多糖類およびタンパク質から選択される、（１）記載の方法。
（３）前記高分子が、アガロースおよびゼラチンから選択される、（２）記載の方法。
（４）貧溶媒が、オクタノール／水分係数（ＬｏｇＰｏｗ）が−１．５〜＋０．５である溶媒である、（１）〜（３）のいずれかに記載の方法。
（５）高分子がアガロースであり、良溶媒が水であり、貧溶媒がエタノールである、（１）〜（４）のいずれかに記載の方法。
（６）温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子であって、疎水性基を実質的に含まない前記高分子を含み、粒径が１μｍ未満である、高分子ゲル粒子。
（７）前記高分子が、アガロースおよびゼラチンから選択される、（６）記載の高分子ゲル粒子。
（８）粒径が１０〜２００ｎｍである、（６）または（７）記載の高分子ゲル粒子。
（９）高分子ゲル粒子と溶媒とを含む高分子ゲル粒子分散体であって、前記高分子ゲル粒子が温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子を含み、前記高分子が疎水性基を実質的に含まず、前記高分子ゲル粒子が前記溶媒中に６．０×１０−４〜５．０×１０−３重量％の濃度で分散されている、前記高分子ゲル粒子分散体。
（１０）（１）〜（５）のいずれかに記載の方法によって製造された高分子ゲル粒子または（６）〜（８）のいずれかに記載の高分子ゲル粒子と、前記高分子ゲル粒子に内包された薬物とを含む、医薬組成物。
【発明の効果】
【００１１】
本発明により、疎水性基などの特別な部位を高分子に付与する煩雑な工程を経ることなく、簡便な製造工程により製造可能な高分子ゲル粒子が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】高分子ゲル粒子の製造方法を説明する模式図である。
【図２】実施例１のアガロース粒子の粒径分布図である。
【図３】実施例２のアガロース粒子の粒径分布図である。
【図４】実施例３のアガロース粒子の粒径分布図である。
【図５】実施例４のアガロース粒子の粒径分布図である。
【図６】実施例５のアガロース粒子の粒径分布図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の高分子ゲル粒子の製造方法は、温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子と、前記高分子に対する良溶媒とを含むゾルを準備する工程（第１工程）、および前記高分子に対する貧溶媒であって、前記ゾルをゲルに相転移させる温度の前記貧溶媒に、前記ゾルを接触させる工程（第２工程）を含む。
【００１４】
温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子
ゾルは、コロイド溶液とも称され、通常、液体を分散媒とし、固体を分散粒子とするコロイドをさす。ゲルは、ゾル（コロイド溶液）がゼリー状に固化したものをさし、液体成分または空隙を含むことが多いが、系全体にわたる支持構造をもち、その形状を保つことができる。ゾル−ゲル転移は、ゾルにおける高分子間の架橋形成が徐々に進行することにより、高分子ゾルが液体状態から柔らかい固体状態に変化することをさす。温度応答性ゾル−ゲル転移においては、通常、高分子間の架橋は、水素結合、イオン結合、配位結合などによって形成される。温度応答性ゾル−ゲル転移は、好ましくは可逆的なゾル−ゲル転移である。温度応答性ゾル−ゲル転移によって形成されるゲルは、架橋方法の違いにより、物理ゲルと称される場合もある。温度応答性ゾル−ゲル転移により形成される本発明の高分子ゲル粒子は、架橋した高分子鎖で構成される粒子である。
【００１５】
温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子には、高温でゾル状態にあって低温でゲル状態にある高分子と、高温でゲル状態にあって低温でゾル状態にある高分子がある。そして、ゾル−ゲル転移点は、徐々に温度を変化させた場合に、高分子がゾル状態からゲル状態に相転移する温度を意味する。前者の場合は、高温でゾル状態にある高分子は、冷却により分子間に架橋が生じ、ゾル−ゲル転移点未満の温度で相転移してゲルを形成する。この場合、ゾルをゲルに相転移させる温度は、ゾル−ゲル転移点未満の温度をさすことになる。一方、後者の場合、低温でゾル状態にある高分子は、昇温により分子間に架橋が生じ、ゾル−ゲル転移点以上の温度で相転移してゲルを形成する。この場合、ゾルをゲルに相転移させる温度は、ゾル−ゲル転移点以上の温度をさすことになる。
【００１６】
本発明で用いる温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子は、好ましくは高温でゾル状態にあって低温でゲル状態にある高分子であり、本発明では、そのゾル−ゲル転移点が４５〜８０℃にあるものを用いるのが好ましい。なぜなら、４５℃以下がゾル−ゲル転移点の場合、常温での粒子化が難しくなり、８０℃以上の場合は、ゲルに核酸やタンパク質を内包させた場合に変性などが起こりやすくなってしまうからである。
【００１７】
温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子としては、特に制限されないが、アルキル基などの疎水性基を実質的に含まない高分子が好ましい。ここで疎水性基を実質的に含まないとは、疎水性基を含まない、または細胞に毒性を及ぼさない量で含んでいてもよいことを意味する。例えば、高分子の質量に対し、疎水性基の占める質量が１％以下、好ましくは０．１％以下であることを意味する。用いる高分子が分子内にアルキル基などの疎水性基を相当量含む場合、細胞への毒性が懸念されることがあるが、疎水性基を実質的に含まない高分子から調製される高分子ゲル粒子は、細胞への毒性の懸念が少ない。
【００１８】
温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子は、多糖類およびタンパク質から選択することが好ましい場合もある。従来、細胞内取り込みキャリアとして高分子ゲル粒子を用いる場合には、細胞が負電荷を帯びているため、内部への取り込みを促進するために高分子ゲルに正電荷を付与する場合があった。しかし、正電荷の付与にあたっては、官能基を導入する必要があり、工程が煩雑なものであった。また、導入される官能基によっては細胞への悪影響が無視できない場合もあった。タンパク質や糖から調製される高分子ゲル粒子は、電気的に中性、あるいは極微弱な負電荷を帯び、正の電荷を持たない場合もあるが、生体適合性が高いことから、ドラッグデリバリーシステムなどの医療用途で、薬物を内包させ、細胞内や生体内に薬物を送達するキャリアとして好適に用いることができる。
【００１９】
従来のナノ粒子の製造法は、疎水性相互作用や静電相互作用を利用してナノ粒子を形成するものが主流であったが、本発明では、疎水性基を実質的に含まない高分子や、電気的に中性、あるいは極微弱な負電荷を帯び、正の電荷を持たない高分子を用いてナノレベルの高分子ゲル粒子を調製することができる。そのため、疎水性基や電荷を有する官能基を導入する必要がなく、煩雑な工程が不要で、大量生産に好適であるとともに、細胞毒性の懸念も少ない。したがって、本発明の高分子ゲル粒子の製造方法は、官能基を導入する工程を含まない、または官能基が導入された高分子を用いないことが好ましい。
【００２０】
本発明で用いられる温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子の具体例としては、キサンタンガム、ローカストビーンガム、アガロース、アミロース、カードラン、カゼイン、グルコマンナン、紅藻デンプン、ゼラチン、タマリンドシードガム、デンプン、トラガカントガム、分解キシログルカン、カラギーナン、グアーガム、ジェランガム、ペクチン、アルギン酸ナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、メチルセルロースなどが挙げられる。
【００２１】
温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子としては、アガロースおよびゼラチンが特に好ましい。これらの高分子は、温度転移点が上記の範囲内であり、かつ生体適合性が高いことがよく知られているからである。
【００２２】
アガロースは冷却によりゲルを形成する代表的な多糖であり、できたゲルは熱可逆性を示す。アガロース粉末の水溶液は、加熱しながら攪拌して得たゾルを約３０〜４０℃に冷却し、等温保持するとゲルを形成する。一方、ゲルを昇温すると約８０〜９０℃でゾルに戻る。アガロースは、ゾル−ゲルおよびゲル−ゾル転移温度のヒステリシスが大きいことが知られている。アガロースのゲル化メカニズムは、以下のように考えられている。アガロース分子は高温ではランダムコイルであるが、徐々に冷却していくと分子鎖間に水素結合による架橋が生じ、二重らせんのミセルを形成する。これが初期のゲル化機構で、さらに冷却が進むにつれて二重らせんの凝集が生じ、三次元構造のゲルが形成される。
【００２３】
良溶媒
良溶媒とは、特定の溶質に対して溶解度の高い溶媒をさし、温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子に対する良溶媒は、当業者であれば適宜選択することができ、特に制限されない。高分子としてアガロースを用いる場合、良溶媒として、例えば、水、エタノールを用いることができ、好ましくは水を用いる。高分子としてゼラチンを用いる場合、良溶媒として、例えば、水、エタノールを用いることができ、好ましくは水を用いる。
【００２４】
高分子ゾルの形成
第１工程においては、温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子と、前記高分子に対する良溶媒とを含むゾルを形成する。得られるゾルにおいては、良溶媒中に、温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子が分散されており、コロイド溶液が形成される。ゾルにおける高分子の量は、高分子が良溶媒中でゾルを形成するかぎり特に制限されないが、通常０．１ｗｔ％〜２０ｗｔ％であり、好ましくは０．３ｗｔ％〜５ｗｔ％である。高分子の濃度を一定濃度以下とすることにより、粘度上昇を抑制でき、高分子ゲル粒子を均一に形成できるとともに、製造上の取り扱いも容易となる。また、ゾル中の高分子量を少なくすることにより、より小さい粒径の高分子ゲル粒子を得ることができる。
【００２５】
ゾルの形成は、高分子を良溶媒に添加し、高分子のゾルが形成される温度に調整する。例えば、高分子としてアガロースを用いる場合は、通常４５℃以上、好ましくは５０〜７０℃に調整する。高分子としてゼラチンを用いる場合は、通常６０℃以上、好ましくは６０〜７０℃に調整する。
【００２６】
貧溶媒
貧溶媒とは、特定の溶質に対して溶解度の低い溶媒をさし、温度応答性ゾル−ゲル転移を起こす高分子に対する貧溶媒は、当業者であれば適宜選択することができ、特に制限されず、該高分子に対する溶解度が上記良溶媒より低いものであればよい。
【００２７】
また、貧溶媒として、オクタノール／水分係数（ＬｏｇＰｏｗ）が−１．５〜＋０．５の範囲である溶媒を用いることが好ましい。より粒径の小さい高分子ゲル粒子を得るには、オクタノール／水分係数（ＬｏｇＰｏｗ）が−０．５〜＋０．１の範囲である溶媒を用いることが好ましい。ここで、オクタノール／水分係数（ｌｏｇＰｏｗ）は、１−オクタノールと水の２つの溶媒相中に被験物質を加えて平衡状態となった時の、その２相における被験物質の濃度比（Ｐｏｗ）の対数値である。分配係数は、次の式により算出される。
Ｐ＝ｌｏｇ１０Ｐｏｗ
Ｐｏｗ：Ｃｏ／Ｃｗ
Ｃｏ：１−オクタノール層中の被験物質濃度（ｍｏｌ／Ｌ）
Ｃｗ：水層中の被験物質濃度（ｍｏｌ／Ｌ）
【００２８】
本明細書において、被験物質の濃度比は、日本工業規格Ｚ７２６０−１０７（２０００）「分配係数（１−オクタノール／水）の測定−フラスコ振とう法」によって測定することとする。
【００２９】
アガロースに対する貧溶媒の具体例としては、エタノール、イソプロピルアルコール、１−メトキシ−２−プロパノール、１，３−ブタンジオール、酢酸メチル、アミノエタノール、酢酸ブチル、１−ブタノールなどが挙げられるが、好ましくはエタノールを用いる。
【００３０】
ゼラチンに対する貧溶媒の具体例としては、エタノール、イソプロピルアルコール、１−メトキシ−２−プロパノール、１，３−ブタンジオール、酢酸メチル、アミノエタノール、酢酸ブチル、１−ブタノールなどが挙げられるが、好ましくはエタノールを用いる。
【００３１】
高分子としてアガロースを用いる場合、良溶媒として水を用い、貧溶媒としてエタノールを用いるのが特に好ましい。水とエタノールを組み合わせることにより、粒子径が小さい、例えば平均粒子径１００ｎｍ以下の高分子ゲル粒子を得ることが可能になる。
【００３２】
高分子ゲル粒子の形成
第２工程においては、上記貧溶媒を、ゾルをゲルに相転移させる温度に調整し、これに上記高分子ゾルを接触させることにより、高分子ゲル粒子を形成することができる。すなわち、ゾル状態にあった高分子が、ゾルをゲルに相転移させる温度の貧溶媒に接触することにより、ゲルに相転移して粒子として析出する。
【００３３】
貧溶媒は、好ましくは高分子のゾル−ゲル転移点より１０℃以上低い温度、より好ましくは２５℃以上低い温度に調整する。例えば、高分子としてアガロースを用いる場合は、通常４５℃以下、好ましくは０〜３５℃に調整する。高分子としてゼラチンを用いる場合は、通常４５℃以下、好ましくは０〜３５℃に調整する。用いる貧溶媒の量は、添加する高分子ゾルの体積に対し、通常５〜２０倍、好ましくは８〜１５倍の体積とする。
【００３４】
高分子ゾルを貧溶媒に接触させる際には、貧溶媒をスターラーや超音波振動子などで攪拌および／または振動を行うことが好ましい。攪拌および／または振動を行うことで、良溶媒から貧溶媒への置換が速やかに行われ、高分子ゲル粒子を効果的に析出させることができる。また、より粒径の小さい高分子ゲル粒子を得ることができる。
【００３５】
高分子ゾルを貧溶媒に接触させた後で、沈殿物が確認された場合は、沈殿物の分散処理を行うことが好ましい。沈殿物の分散は、湿式微粒化装置、ホモジナイザー等を用いて実施できる。特に、高分子ゲル粒子の大量生産を行う場合は、上記のような分散処理を行うことが好ましい。分散処理を行うことにより、より粒径の小さい高分子ゲル粒子を得ることができる。
【００３６】
高分子ゲル粒子
上述した方法で得られる本発明の高分子ゲル粒子の粒径は、通常１０μｍ以下とすることができ、好ましくは５５００ｎｍ以下、より好ましくは１μｍ未満、さらに好ましくは２００ｎｍ以下である。また、本発明の高分子ゲル粒子の粒径は、通常１０ｎｍ以上、場合により３０ｎｍ以上である。ここで、高分子ゲル粒子の粒径は、動的光散乱測定器で測定した場合の平均粒径を意味する。本発明で製造された高分子ゲル粒子は、その粒径分布が正規分布に近いので、中心の粒径値近傍の高分子ゲル粒子を高収率で得られる点で有利である。
【００３７】
本発明の高分子ゲル粒子は、上記溶媒中に分散された高分子ゲル粒子分散体として提供することもできる。このような分散体において高分子ゲルは、溶媒中に通常６．０×１０−４〜５．０×１０−３重量％、好ましくは１．０×１０−３〜２．０×１０−３重量％の濃度で分散されている。溶媒は、高分子ゲル粒子を製造したときに用いた貧溶媒でもよいし、高分子ゲル粒子の形成後に別の溶媒と置換してもよい。置換可能な溶媒としては、エタノールやイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）などの比較的生体適合性の高い溶媒が挙げられる。該分散体における溶媒は、好ましくは高分子ゲル粒子を製造したときに用いた貧溶媒である。
【００３８】
本発明の高分子ゲル粒子に薬物を内包させることにより、医薬組成物を調製することができる。医薬組成物を調製する場合、生体適合性の観点から、高分子として多糖類やタンパク質を用いることが好ましい。高分子ゲル粒子の調製において、高分子ゾルを貧溶媒に接触させる際に、一緒に薬物を添加することにより、高分子ゲル粒子に薬物を内包させることができる。本発明の高分子ゲル粒子をキャリアとして含む医薬組成物により、目的の薬物を細胞内や生体内に送達することができる。本発明の高分子ゲル粒子の製造方法は、粒子形成のための官能基を高分子に導入する必要がないことから、細胞や生体に対する毒性の懸念が少ない点で有利である。
【００３９】
内包させる薬物は、特に制限されないが、温度変化により変性しない低分子化合物のような薬剤が望ましい。例えば、天然または人為的に合成された各種ペプチド、タンパク質（酵素又は抗体を含む）、核酸（ポリヌクレオチド（ＤＮＡ若しくはＲＮＡ）、オリゴヌクレオチド（ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡまたはデコイオリゴなど）、またはペプチド核酸（ＰＮＡ）など）、有機化合物、無機化合物、低分子化合物、およびその他の高分子化合物などが挙げられる。
以下、本発明を実施例により説明するが、本発明は実施例の範囲に限定されない。
【実施例】
【００４０】
（実施例１）
１００ｍｌの蒸留水に対し、０．５ｍｇのアガロース（シグマアルドリッチ社製）を加え、５００Ｗの電子レンジにて１分間×３回加熱し、０．５ｗｔ％のアガロースゾルを調製した。このアガロースゾル５００μＬ（６０℃）をマイクロピペットで採取し、スクリュー管に入った液温２３℃の４ｍＬのエタノールに注入し、振動させ十分にアガロースゾルとエタノール（ＬｏｇＰｏｗ＝−０．３２）を懸濁させた。得られた懸濁液の中にアガロース粒子を得た。得られた粒子を動的光散乱測定器（ＥＬＳＺ―２：大塚電子製）にて測定を行い、平均粒径は７６．７ｎｍであることを確認した。
【００４１】
（実施例２）
実施例１で調製したアガロースゾル５００μＬ（６０℃）をマイクロピペットで採取し、スクリュー管に入った液温２３℃の４ｍＬのイソプロピルアルコールに注入し、振動させ十分にアガロースゾルとイソプロピルアルコール（ＬｏｇＰｏｗ＝０．０５）を懸濁させた。得られた懸濁液の中にアガロース粒子を得た。得られた粒子を動的光散乱測定器（ＥＬＳＺ―２：大塚電子製）にて測定を行い、平均粒径は１１２．５ｎｍであることを確認した。
【００４２】
（実施例３）
実施例１で調製したアガロースゾル５００μＬ（６０℃）をマイクロピペットで採取し、スクリュー管に入った液温２３℃の４ｍＬの１−メトキシ−２−プロパノール（ＬｏｇＰｏｗ＝−０．４９）に注入し、振動させ十分にアガロースゾルと１−メトキシ−２−プロパノールを懸濁させた。得られた懸濁液の中にアガロース粒子を得た。得られた粒子を動的光散乱測定器（ＥＬＳＺ―２：大塚電子製）にて測定を行い、平均粒径は１４０．９ｎｍであることを確認した。
【００４３】
（実施例４）
実施例１で調製したアガロースゾル５００μＬ（６０℃）をマイクロピペットで採取し、スクリュー管に入った液温２３℃の４ｍＬの１，３−ブタンジオールに注入し、振動させ十分にアガロースゾルと１，３−ブタンジオール（ＬｏｇＰｏｗ＝−０．８３）を懸濁させた。得られた懸濁液の中にアガロース粒子を得た。得られた粒子を動的光散乱測定器（ＥＬＳＺ―２：大塚電子製）にて測定を行い、平均粒径は３３２７ｎｍであることを確認した。
【００４４】
（実施例５）
実施例１で調製したアガロースゾル５００μＬ（６０℃）をマイクロピペットで採取し、スクリュー管に入った液温２３℃の４ｍＬの酢酸メチル（ＬｏｇＰｏｗ＝０．１８）に注入し、振動させ十分にアガロースゾルと酢酸メチルを懸濁させた。得られた懸濁液の中にアガロース粒子を得た。得られた粒子を動的光散乱測定器（ＥＬＳＺ―２：大塚電子製）にて測定を行い、平均粒径は５４２５ｎｍであることを確認した。
【００４５】
（実施例６）
実施例１で調製したアガロースゾル５００μＬ（６０℃）をマイクロピペットで採取し、スクリュー管に入った液温２３℃の４ｍＬのアミノエタノール（ＬｏｇＰｏｗ＝−１．３１）に注入し、振動させ十分にアガロースゾルとアミノエタノールを懸濁させた。得られた懸濁液の中にアガロース粒子を得た。得られた粒子を動的光散乱測定器（ＥＬＳＺ―２：大塚電子製）にて測定を行い、平均粒径は４０５９ｎｍであることを確認した。
【００４６】
（実施例７）
１００ｍｌの蒸留水に対し、０．５ｍｇ、１．０ｍｇ、２．０ｍｇのアガロース（シグマアルドリッチ社製）をそれぞれ加え、５００Ｗの電子レンジにて１分間×３回加熱し、０．５ｗｔ％、１．０ｗｔ％、２．０ｗｔ％のアガロースゾルを調製した。
【００４７】
調製したアガロースゾル１００μＬ、５００μＬ、１０００μＬ（６０℃）をマイクロピペットで採取し、スクリュー管に入った液温２３℃の４ｍＬのエタノールまたはイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）に注入し、振動させ十分にアガロースゾルとエタノールまたはイソプロピルアルコールを懸濁させた。得られた懸濁液の中にアガロース粒子を得た。得られた粒子の粒径を動的光散乱測定器（ＥＬＳＺ―２：大塚電子製）にて測定した。製造三日後の粒径も同様に測定した。結果を以下の表１に示す。
【００４８】
【表１】
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【００４９】
アガロースゾルにおけるアガロース濃度が、得られる高分子ゲル粒子の粒径に影響を及ぼすことが確認された。一方、アガロースゲル粒子分散体におけるアガロース終濃度が高分子ゲル粒子の粒径に及ぼす影響は小さいことが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００５０】
本発明の高分子ゲル粒子は、薬物を細胞内輸送するキャリアとして医薬品の製造に有用である。また、化粧品、食品、トナー、塗料、インクなど分野においても有用と考えられる。
【符号の説明】
【００５１】
１：貧溶媒
２：高分子ゾル
３：高分子ゲル粒子
４：高分子ゲル粒子分散体
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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