(57)【要約】【課題】新たな腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤の提供。【解決手段】（Ａ）インターフェロン・ガンマ（ＩＦＮγ）と、（Ｂ）下記一般式（１）で表されるピロリドン類及び下記一般式（２）で表されるスルホキシド類から選ばれる１種以上とを組み合わせてなる腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤。2013256456.tif 000008（式中、Ｒ1は、水素原子または炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）2013256456.tif 000009（式中、Ｒ2及びＲ3は、それぞれ炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）インターフェロン・ガンマ（ＩＦＮγ）と、（Ｂ）下記一般式（１）で表されるピロリドン類及び下記一般式（２）で表されるスルホキシド類から選ばれる１種以上とを組み合わせてなる腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤。
【化１】
2013256456.tif 000004
（式中、Ｒ1は、水素原子または炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
【化２】
2013256456.tif 000005
（式中、Ｒ2及びＲ3は、それぞれ炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
【請求項２】
成分（Ａ）と成分（Ｂ）とが一の製剤中に含まれるものである請求項１記載の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤。
【請求項３】
成分（Ｂ）が前記ピロリドン類であり、前記ピロリドン類が、Ｎ−メチルピロリドン又はＮ−エチルピロリドンである請求項１又は２に記載の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤。
【請求項４】
成分（Ｂ）が前記スルホキシド類であり、前記スルホキシド類が、ジメチルスルホキシドである請求項１又は２に記載の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤。
【請求項５】
（Ａ）インターフェロン・ガンマ（ＩＦＮγ）と、（Ｂ）下記一般式（１）で表されるピロリドン類及び下記一般式（２）で表されるスルホキシド類から選ばれる１種以上とを組み合わせてなる免疫療法剤。
【化３】
2013256456.tif 000006
（式中、Ｒ1は、水素原子または炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
【化４】
2013256456.tif 000007
（式中、Ｒ2及びＲ3は、それぞれ炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
【請求項６】
成分（Ａ）と成分（Ｂ）とが一の製剤中に含まれるものである請求項５記載の免疫療法剤。
【請求項７】
成分（Ｂ）が前記ピロリドン類であり、前記ピロリドン類が、Ｎ−メチルピロリドン又はＮ−エチルピロリドンである請求項５又は６に記載の免疫療法剤。
【請求項８】
成分（Ｂ）が前記スルホキシド類であり、前記スルホキシド類が、ジメチルスルホキシドである請求項５又は６に記載の免疫療法剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤および免疫療法剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
主要組織適合性遺伝子複合体（ＭＨＣ）は、免疫反応に必要な多くのタンパクの遺伝子情報を含む大きな遺伝子領域である。ＭＨＣ分子は当該ＭＨＣの遺伝子産物であり、細胞表面に存在する細胞膜貫通型糖タンパク分子であり、細胞内の内因性抗原や外来性抗原をペプチド抗原として細胞表面に提示する作用を有する。
【０００３】
腫瘍細胞を認識するキラーＴ細胞又はヘルパーＴ細胞は、腫瘍細胞表面に発現しているＭＨＣ分子とＭＨＣ分子溝の腫瘍細胞タンパク質由来ペプチドをターゲットとしている。しかし、腫瘍細胞表面上に発現しているＭＨＣ分子、及び腫瘍細胞内の小胞体表面に発現しているＴＡＰ１／２タンパクの発現が通常の体細胞と比較して減少しているため、キラーＴ細胞、ヘルパーＴ細胞がＭＨＣ分子を介して認識できず、腫瘍細胞が増殖していくケースがある（非特許文献１）。上記の腫瘍細胞による免疫監視機構回避を打破するため、腫瘍細胞表面のＭＨＣ分子の発現を促進させる方法として、インターフェロン・ガンマ（ＩＦＮγ）の投与が知られている。この手法は、上記の腫瘍細胞表面ＭＨＣ、細胞内小胞体表面ＴＡＰ１／２発現促進だけではなく、腫瘍細胞に対する直接的な抗がん作用、免疫担当細胞である単球の活性化作用、マクロファージ及びＮＫ細胞による抗体依存性細胞傷害作用（Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ；ＡＤＣＣ）も期待できる（非特許文献２）。また、腫瘍細胞表面上の共役分子（ＣＤ８０や４−１ＢＢＬなど）の発現を上昇させることで、キラーＴ細胞又はヘルパーＴ細胞に認識されやすくする試みもなされている（特許文献１）。
Ｂ１６Ｆ１０はＣ５７ＢＬ／６マウス由来のメラノーマ細胞株であるが、これを皮下又は皮内投与するとその腫瘍径は素早く増大し、宿主マウスは死亡する。それに対して、試験管内でＩＦＮγで処理されたＢ１６Ｆ１０メラノーマ細胞は、皮下投与された場合にその腫瘍塊の増大は抑制される（非特許文献３）。これは、Ｂ１６Ｆ１０細胞表面のＭＨＣクラスＩ分子発現が促進されているためにキラーＴ細胞の攻撃を受けやすいためであると考えられる。また、Ｂ１６Ｆ１０細胞に対して、ＩＦＮγにスタチン又はゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ  Ｉインヒビター（ＧＧＴＩ−２９８）を添加することで、ＭＨＣクラスＩの発現が上昇するという報告がある（非特許文献３，４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２００９−５１８４２７号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｆｏｌｉａ  Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ  Ｃｙｔｏｂｉｏｌ．２００７；４５：２０５
【非特許文献２】Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．２００２；１１０：１４０７
【非特許文献３】ＦＡＳＥＢ  Ｊ．２００５；１９：１５１３
【非特許文献４】ＰＬｏｓ  Ｏｎｅ．  ２０１０；３：９０４３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、従来の薬剤の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子の発現促進効果は十分でなく、さらに優れた腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤が望まれていた。よって、本発明の課題は、新たな腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤及び免疫療法剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
そこで本発明者は、種々の成分を用いて、腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子の発現を指標としてその影響を検討してきたところ、ＩＦＮγとピロリドン誘導体又はスルホキシド類との組合せが、ＩＦＮγの単独投与に比べて強いＭＨＣ分子発現亢進作用を有しており、免疫療法剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は、（Ａ）インターフェロン・ガンマ（ＩＦＮγ）と、（Ｂ）下記一般式（１）で表されるピロリドン類及び下記一般式（２）で表されるスルホキシド類から選ばれる１種以上とを組み合わせてなる腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤及び免疫療法剤を提供するものである。
【０００９】
【化１】
2013256456.tif 000002
【００１０】
（式中、Ｒ1は、水素原子または炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
【００１１】
【化２】
2013256456.tif 000003
【００１２】
（式中、Ｒ2及びＲ3は、それぞれ炭素数１〜１２のアルキル基を示す。）
【発明の効果】
【００１３】
腫瘍細胞株にＩＦＮγを添加すると、ＭＨＣ分子の発現が促進されるが、そこへピロリドン類又はスルホキシド類を加えることで更にその発現が亢進される。よって、より優れた腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤及び免疫療法剤を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】Ｂ１６Ｆ１０メラノーマにおけるＭＨＣクラスＩの発現促進効果を示す図である。
【図２】Ｂ１６Ｆ１０メラノーマにおけるＭＨＣクラスIIの発現促進効果を示す図である。
【図３】ＨＴ１０８０細胞株におけるＭＨＣクラスＩの発現促進効果を示す図である。
【図４】ＨＴ１０８０細胞株におけるＭＨＣクラスIIの発現促進効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤及び免疫療法剤は、（Ａ）ＩＦＮγ［成分（Ａ）］と、（Ｂ）上記一般式（１）で表されるピロリドン類及び上記一般式（２）で表されるジアルキルスルホキシド類から選ばれる１種以上［成分（Ｂ）］とを組み合わせてなるものである。
【００１６】
ＩＦＮγは、体内において活性化されたマクロファージやＴ細胞などから産生される液性蛋白質であり、前述のように単独でＭＨＣ分子の発現を促進させることは知られている。しかし、ピロリドン類又はスルホキシド類と併用することによりＭＨＣ分子発現促進効果が増強されることは知られていない。ＩＦＮγとしては、天然物由来でもよいが、遺伝子組み換えによるリコンビナント製剤としても入手できる。
【００１７】
ピロリドン類を示す一般式（１）中、Ｒ1としては炭素数１〜１２のアルキル基が好ましく、炭素数１〜６のアルキル基がより好ましく、炭素数１〜３のアルキル基がさらに好ましい。Ｒ1の具体例としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基が挙げられるが、メチル基、エチル基が特に好ましい。すなわち、ピロリドン類（１）としては、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ−エチルピロリドンが特に好ましい。
【００１８】
スルホキシド類を示す一般式（２）中、Ｒ2及びＲ3としては炭素数１〜１２のアルキル基が好ましく、炭素数１〜６のアルキル基がより好ましく、炭素数１〜３のアルキル基がさらに好ましい。Ｒ2及びＲ3の具体例としては、メチル基、エチル基、イソプロピル基が挙げられ、メチル基が特に好ましい。すなわち、スルホキシド類（２）としては、ジメチルスルホキシドが特に好ましい。
【００１９】
成分（Ｂ）は、１種を用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００２０】
（Ａ）ＩＦＮγと、（Ｂ）ピロリドン類（１）及びスルホキシド類（２）から選ばれる１種以上とを組み合わせて用いれば、後記実施例に示すように、腫瘍細胞から産生されるＭＨＣ分子の産生量を増大させる作用を有することから、これらの組み合わせは、ヒトを含む哺乳動物の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤として有用であり、免疫療法剤として有用である。また、ピロリドン類（１）又はスルホキシド類（２）は単独で免疫賦活作用を有するので、ＩＦＮγの投与量を少なく抑制することができるため、安全性上特に好ましい。
【００２１】
本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤は、（Ａ）ＩＦＮγと（Ｂ）ピロリドン類（１）又はスルホキシド類（２）とを組み合わせて投与できればよく、同時投与であっても、互いに逐次投与であってもよい。また、（Ａ）ＩＦＮγと（Ｂ）ピロリドン類（１）又はスルホキシド類（２）とは、投与経路が同一でも、互いに異なっていてもよいし、一の製剤であっても、別個の製剤であってもよい。
【００２２】
本発明の免疫療法剤は、上記の成分（Ａ）及び成分（Ｂ）を含むものであり、好ましくはさらに抗原を含むものである。本発明の免疫療法剤は、成分（Ａ）、成分（Ｂ）及び抗原を含む１つの製剤としてもよいし、成分（Ａ）、成分（Ｂ）及び抗原の１種又は２種を別個の製剤として含むキットであってもよい。また、免疫賦活剤、免疫調節剤、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）、ＴＬＲ賦活剤（イミキモド、ＣｐＧヌクレオチド）等と併用してもよい。
【００２３】
本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤及び免疫療法剤の投与方法としては、経皮投与、経粘膜投与、経口投与、皮下注射、皮内注射等が挙げられるが、経皮投与がより好ましい。本発明の成分（Ａ）及び成分（Ｂ）と、抗原とを併用して投与する場合には、その抗原特異的免疫応答を誘導することができる。抗原の投与は、成分（Ａ）及び成分（Ｂ）と、抗原とを同時に投与してもよく、また成分（Ａ）及び成分（Ｂ）を投与した後に抗原を投与してもよい。
【００２４】
上記抗原としては、免疫応答を引き起こすことができる分子であれば、特に制限はないが、例えばペプチドまたはタンパク質が挙げられる。ペプチドとしては、天然由来のペプチドまたは合成ペプチドのいずれでもよく、３〜２５のアミノ酸残基からなるペプチドが好ましい。タンパク質としては、天然由来のタンパク質または合成タンパク質のいずれでもよい。具体的には、癌抗原（腫瘍抗原）、種々のウイルス由来抗原、感染原因菌由来抗原、種々のアレルギー原因抗原等が挙げられる。
【００２５】
本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤又は免疫療法剤中の成分（Ａ）の含有量は、１．０×１０-10質量％以上が好ましく、１．０×１０-9質量％以上がより好ましく、１．０×１０-8質量％以上がさらに好ましい。なお、本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤又は免疫療法剤の剤形が、後述する貼付剤である場合には、貼付剤の粘着層中に粘着剤を含むことが必要であるため、貼付剤の粘着層中の成分（Ａ）の含有量は、１．０×１０-10〜２５質量％が好ましく、１．０×１０-9〜２０質量％がより好ましく、１．０×１０-8〜１５質量％がさらに好ましい。
【００２６】
また、本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤又は免疫療法剤中の成分（Ｂ）の含有量は、０．００００１質量％以上が好ましく、０．００１質量％以上がより好ましく、０．１質量％以上がさらに好ましい。なお、本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤又は免疫療法剤の剤形が、後述する貼付剤である場合には、貼付剤の粘着層中の成分（Ｂ）の含有量は、０．００００１〜２５質量％が好ましく、０．００１〜２０質量％がより好ましく、０．１〜１５質量％がさらに好ましい。
【００２７】
また、成分（Ａ）と成分（Ｂ）との含有質量比（成分（Ａ）：成分（Ｂ））は、１：１０００００〜１０：１が好ましく、１：５００００〜１：１がより好ましく、１：５００００〜１：１００が特に好ましい。
【００２８】
また、本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤及び免疫療法剤には、希釈剤、溶解助剤、吸収促進剤等として、常温で液状又はペースト状の成分が含まれていてもよく、例えば、流動パラフィン、スクワラン、イソパラフィン等の炭化水素類；パラフィン系プロセスオイル、ナフテン系プロセスオイル等の石油系オイル；ホホバ油、ヒマシ油、ヒマワリ油、オリーブ油、ごま油、サフラワー油、スクワレン等の天然動植物油脂類；ステアリルアルコール、ラウリルアルコール、セトステアリルアルコール、オレイルアルコール、ヘキシルデカノール、オクチルドデカノール等の高級アルコール類；メチルフェニルポリシロキサン、メチルポリシロキサン等のシリコーン類；ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、イソステアリン酸、オレイン酸等の高級脂肪酸類；アルキルグリセリルエーテル等の界面活性剤；水等が挙げられ、これらのうち１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００２９】
本発明の腫瘍細胞表面ＭＨＣ分子発現促進剤又は免疫療法剤の剤形は、注射用剤または経皮投与剤であることが好ましく、経皮投与剤であることがより好ましい。経皮投与剤は、注射用剤と比較して、非侵襲的であること、また操作が塗る、貼るなどの単純な作業になるため、医療従事者である必要がなく、患者自身によっても作業可能である点で優れている。このような経皮投与剤の具体的な剤形としては、液剤、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、スプレー剤等の他、パップ剤、テープ剤等の貼付剤などが挙げられる。これらの中でも貼付剤であることがより好ましく、角質剥離機能を有する貼付剤であることが特に好ましい。
【００３０】
角質剥離機能を有する貼付剤は、その粘着力をＪＩＳ  Ｚ０２３７に準拠した測定方法（対ベークライト板）で、好ましくは３〜２０Ｎ／２５ｍｍ程度に調整することにより得ることができる。
角質剥離機能を有する貼付剤の剥離により、皮膚表皮角質層を物理的に破壊させることができ、通常免疫賦活剤の適用後に適用される抗原の経皮吸収性を向上させることが出来るうえ、角質剥離機能を有する貼付剤の剥離による皮膚表皮角質層の破壊により皮膚下層に存在する抗原提示細胞（特に表皮ランゲルハンス細胞及び真皮内樹状細胞）の活性化が引き起こされる。
【００３１】
免疫療法剤として、成分（Ａ）及び成分（Ｂ）と併用して抗原を投与する場合には、その抗原特異的免疫応答を誘導することができる。
抗原を投与する場合には、成分（Ａ）及び成分（Ｂ）の投与と同時または約９６時間以内に、好ましくは約７２時間以内に、特に好ましくは約４８時間以内に、抗原を投与する。
抗原は、そのまま投与してもよいが、抗原投与剤の形態にするのが好ましく、抗原投与剤の剤形は、注射用剤または経皮投与剤であることが好ましく、経皮投与剤であることがより好ましい。この理由は、皮下注射された抗原は投与された局所から拡散するのに時間がかかり、皮膚下層中に点在する抗原提示細胞（例えば表皮ランゲルハンス細胞や真皮内樹状細胞等）に捕獲される効率が低くなるためである。これに対して、経皮投与の場合には、表皮角質層が皮膚透過のバリアとなってしまい、抗原の経皮吸収性が低いことが問題となるが、上記のように、皮膚表皮角質層を破壊することで劇的に抗原の経皮吸収性が高まるうえ、皮下注射に比べて皮膚表皮の比較的広い範囲に抗原が投与されるため、皮膚下層中に点在する抗原提示細胞に捕獲される効率が高くなるという利点を有する。
【実施例】
【００３２】
次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。
【００３３】
（実施例１）
マウス腫瘍細胞：Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｈ−２b拘束性）由来Ｂ１６Ｆ１０メラノーマ（ＡＴＣＣより購入、ＡＴＣＣ番号：ＣＲＬ−１９９２）を、１０％ウシ胎児血清を含む液体培地（ＤＭＥＭ、ＧＩＢＣＯ製）に添加し、細胞分散液を調製した。得られた細胞分散液を、細胞数が２×１０4個となるように２４ウェルプレートに播種した後、成分（Ａ）としてリコンビナントマウスＩＦＮγ（バイオレジェンド製、製品番号：５７０２０４）を０．２ｎｇ／ｍｌとなるように添加し、さらに、成分（Ｂ）としてＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）を１０ｍＭ（９９１．３ｎｇ／ｍｌ）となるように添加した後、３７℃、５％ＣＯ2存在下で２４時間培養して試験サンプルとした。次いで、この試験サンプルから細胞を回収し、ＭＨＣクラスＩに対する蛍光標識抗体であるＦＩＴＣ−Ｈ−２b（バイオレジェンド製、クローン名：Ｍ１／４２）を添加して４℃で３０分間反応させた。その後、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）をリン酸緩衝液（ＧＩＢＣＯ社製、商品名「ＰＢＳ（−）」）で濃度１％に調製した１％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液で細胞を洗浄後、フローサイトメータによりＭＨＣクラスＩの発現量をＭＦＩ（平均蛍光強度）を指標として検出した。その結果を図１に示した。
同様にして、得られた試験サンプルから細胞を回収し、ＭＨＣクラスＩＩに対する蛍光標識抗体であるＰＥ−Ｉ−ａb（バイオレジェンド製、クローン名：２５−９−１７）を添加して４℃で３０分間反応させた。その後、１％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液で細胞を洗浄後、フローサイトメータによりＭＨＣクラスＩＩの発現量をＭＦＩ（平均蛍光強度）を指標として検出した。その結果を図２に示した。
【００３４】
（実施例２）
成分（Ｂ）としてＮ−メチルピロリドンに代えて、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を１００ｍＭ（７８１３ｎｇ／ｍｌ）となるように添加して試験サンプルを作製した以外は実施例１と同様にして試験を行った。
【００３５】
（比較例１）
成分（Ａ）及び成分（Ｂ）を添加しないで試験サンプルを作製した以外は実施例１と同様にして試験を行った。
【００３６】
（比較例２）
成分（Ｂ）を添加しないで成分（Ａ）のみを添加した試験サンプルを作製した以外は実施例１と同様にして試験を行った。
【００３７】
（実施例３）
ヒト腫瘍細胞株：ヒト線維肉腫由来ＨＴ１０８０細胞株（ＡＴＣＣより購入、ＡＴＣＣ番号：ＣＣＬ−１２１）を、１０％ウシ胎児血清を含む液体培地（ＲＰＭＩ１６４０、ＧＩＢＣＯ製）に添加し、細胞分散液を調製した。得られた細胞分散液を、細胞数が２×１０4個となるように２４ウェルプレートに播種した後、成分（Ａ）としてリコンビナントヒトＩＦＮγ（バイオレジェンド製、製品番号：５７０２０６）を０．２ｎｇ／ｍｌとなるように添加し、さらに、成分（Ｂ）としてＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）を１０ｍＭ（９９１．３ｎｇ／ｍｌ）となるように添加した後、３７℃、５％ＣＯ2存在下で２４時間培養して試験サンプルとした。次いで、この試験サンプルから細胞を回収し、ＭＨＣクラスＩに対する蛍光標識抗体であるＦＩＴＣ−ＨＬＡ−ＡＢＣ抗体（ベックマン・コールター製、クローン名：Ｂ９．１２．１）を添加して４℃で３０分間反応させた。その後、１％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液で細胞を洗浄後、フローサイトメータによりＭＨＣクラスＩの発現量をＭＦＩ（平均蛍光強度）を指標として検出した。その結果を図３に示した。
同様にして、得られた試験サンプルから細胞を回収し、ＭＨＣクラスＩＩに対する蛍光標識抗体であるＰＥ−ＨＬＡ−ＤＲ・ＤＰ・ＤＱ抗体（ベックマン・コールター製、クローン名：９−４９）を添加して４℃で３０分間反応させた。その後、１％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液で細胞を洗浄後、フローサイトメータによりＭＨＣクラスＩＩの発現量をＭＦＩ（平均蛍光強度）を指標として検出した。その結果を図４に示した。
【００３８】
（実施例４）
成分（Ｂ）としてＮ−メチルピロリドンに代えてジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を１００ｍＭ（７８１３ｎｇ／ｍｌ）となるように添加して試験サンプルを作製した以外は実施例３と同様にして試験を行った。
【００３９】
（比較例３）
成分（Ａ）及び成分（Ｂ）を添加しないで試験サンプルを作製した以外は実施例３と同様にして試験を行った。
【００４０】
（比較例４）
成分（Ｂ）を添加しないで成分（Ａ）のみを添加した試験サンプルを作製した以外は実施例３と同様にして試験を行った。
【００４１】
（試験結果）
図１〜図４より、腫瘍細胞に対して成分（Ａ）及び成分（Ｂ）を添加することにより、ＭＨＣクラスＩ及びＭＨＣクラスＩＩの発現量は顕著に増大しており、成分（Ａ）及び成分（Ｂ）の併用は腫瘍細胞ＭＨＣ分子発現促進剤及び免疫療法剤として有用であることが分かる。
【図１】
2013256456.tif 000010
【図２】
2013256456.tif 000011
【図３】
2013256456.tif 000012
【図４】
2013256456.tif 000013