(57)【要約】      （修正有）【課題】流体核磁気共鳴分析システムを用いて、液体状態である混合物に対しての微小容器が有する混合性能を評価する方法等を提供する。【解決手段】液体状態である混合物に対しての微小容器が有する混合性能を、流体核磁気共鳴分析システムを用いて評価する方法であり、１）前記混合物の試料を、性能評価対象とする被験微小容器を経て流体核磁気共鳴分析装置に送液する工程、２）前工程によって送液された試料の核磁気共鳴スペクトルを前記流体核磁気共鳴分析装置により取得する工程、及び、３）得られた核磁気共鳴スペクトルと、対照とする核磁気共鳴スペクトルとの間での差異に基づき、前記混合物に対しての前記被験微小容器が有する混合性能を評価する工程を含む。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体状態である混合物に対しての微小容器が有する混合性能を、流体核磁気共鳴分析システムを用いて評価する方法であり、
１）前記混合物の試料を、性能評価対象とする被験微小容器を経て流体核磁気共鳴分析装置に送液する工程、
２）前工程によって送液された試料の核磁気共鳴スペクトルを前記流体核磁気共鳴分析装置により取得する工程、及び、
３）得られた核磁気共鳴スペクトルと、対照とする核磁気共鳴スペクトルとの間での差異に基づき、前記混合物に対しての前記被験微小容器が有する混合性能を評価する工程
を含むことを特徴とする評価方法。
【請求項２】
対照とする核磁気共鳴スペクトルが、（ａ）微小容器を経ることなく、流体核磁気共鳴分析装置に送液された前記混合物の試料、又は、（ｂ）前記被験微小容器以外の他の微小容器を経て流体核磁気共鳴分析装置に送液された前記混合物の試料、に基づき前記流体核磁気共鳴分析装置により取得された核磁気共鳴スペクトルであることを特徴とする請求項１記載の評価方法。
【請求項３】
前記被験微小容器が、オンラインによる連続操作が可能である混合装置であることを特徴とする請求項１乃至３のいずれかの請求項記載の評価方法。
【請求項４】
前記混合装置が、スタティックミキサーまたはマイクロリアクターであることを特徴とする請求項３記載の評価方法。
【請求項５】
前記流体核磁気共鳴分析システムが、液体クロマトグラフ−流体核磁気共鳴分析システムであり、液体クロマトグラフィー装置と前記流体核磁気共鳴分析装置とを連結する流路上に、前記被験微小容器を具備しており、且つ、前記混合物の試料が、前記液体クロマトグラフィー装置から順次溶出される試料画分であることを特徴とする請求項１乃至４のいずれかの請求項記載の評価方法。
【請求項６】
前記液体クロマトグラフィー装置から順次溶出される試料画分が、二種類以上の溶媒を除々にその比率が変えて試料分離用移動相とするグラジエント溶離法により分画して得られる試料画分であることを特徴とする請求項５記載の評価方法。
【請求項７】
前記試料を流体核磁気共鳴分析装置に送液し、送液された試料の核磁気共鳴スペクトルを前記流体核磁気共鳴分析装置により取得するための測定が、オフフローモードでの測定であることを特徴とする請求項１乃至６のいずれかの請求項記載の評価方法。
【請求項８】
前記オフフローモードでの測定が、ストップ・アンド・フロー測定またはフラクション・ループ測定であることを特徴とする請求項７記載の評価方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
流体核磁気共鳴分析システムを用いた、微小容器が有する液体の混合性能を評価する方法等に関する。
【背景技術】
【０００２】
通常の流体核磁気共鳴分析（以下、流体ＮＭＲ分析と記すこともある。）において、質の高い核磁気共鳴スペクトルを取得するためには、流体ＮＭＲ分析のための測定セル中に存在する試料溶液にかかる磁場を均一にする磁場の微調整（以下、シム調整と記すこともある。）が必要であり、シム調整によってシグナルを先鋭化することにより、当該シグナルの測定感度および溶媒シグナルの消去効率等の向上を図ることがしばしば行われる（例えば、特許文献１等参照）。
具体的には例えば、流体核磁気共鳴分析装置（以下、流体ＮＭＲ分析装置と記すことがある。）を用いて、液体状態である混合物である試料の中に含まれる各種成分の核磁気共鳴スペクトルを取得する分析システムでは、流体ＮＭＲ分析装置による分析のための測定セル中に存在する試料溶液が均一であることがシム調整を効率的に行うための前提となる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００２−２５７９１５号
【特許文献２】米国特許５２８３０３６号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
液体状態である混合物を試料とする場合、各種の分析システムには、前記試料である液体を前記分析システムに含まれる分析装置の内外に送液するための流路が１つ又は複数存在している。そして、前記流路上には、例えば、前記試料である液体、及び/又は、当該試料を流路内で移動させるための移動相である液体を、均一状態にするために微小容器を設置することが考えられる。しかしながら、今までに、前記微小容器が有する、これら液体を混合する性能（以下、液体の混合性能と記すことがある。）についての評価方法は知られておらず、このような微小容器が有する液体の混合性能を精度よく且つ簡便に評価する方法の開発が期待される。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
このような状況下、本発明者らは鋭意検討した結果、以下の本発明に至った。
すなわち、本発明は、
１．液体状態である混合物に対しての微小容器が有する混合性能を、流体核磁気共鳴分析システムを用いて評価する方法であり、
１）前記混合物の試料を、性能評価対象とする被験微小容器を経て流体核磁気共鳴分析装置に送液する工程、
２）前工程によって送液された試料の核磁気共鳴スペクトルを前記流体核磁気共鳴分析装置により取得する工程、及び、
３）得られた核磁気共鳴スペクトルと、対照とする核磁気共鳴スペクトルとの間での差異に基づき、前記混合物に対しての前記被験微小容器が有する混合性能を評価する工程
を含むことを特徴とする評価方法（以下、本発明評価方法と記すこともある。）；
２．対照とする核磁気共鳴スペクトルが、（ａ）微小容器を経ることなく、流体核磁気共鳴分析装置に送液された前記混合物の試料、又は、（ｂ）前記被験微小容器以外の他の微小容器を経て流体核磁気共鳴分析装置に送液された前記混合物の試料、に基づき前記流体核磁気共鳴分析装置により取得された核磁気共鳴スペクトルであることを特徴とする前項１記載の評価方法；
３．前記被験微小容器が、オンラインによる連続操作が可能である混合装置であることを特徴とする前項１乃至３のいずれかの前項記載の評価方法；
４．前記混合装置が、スタティックミキサーまたはマイクロリアクターであることを特徴とする前項３記載の評価方法；
５．前記流体核磁気共鳴分析システムが、液体クロマトグラフ−流体核磁気共鳴分析システムであり、液体クロマトグラフィー装置と前記流体核磁気共鳴分析装置とを連結する流路上に、前記被験微小容器を具備しており、且つ、前記混合物の試料が、前記液体クロマトグラフィー装置から順次溶出される試料画分であることを特徴とする前項１乃至４のいずれかの前項記載の評価方法；
６．前記液体クロマトグラフィー装置から順次溶出される試料画分が、二種類以上の溶媒を除々にその比率が変えて試料分離用移動相とするグラジエント溶離法により分画して得られる試料画分であることを特徴とする前項５記載の評価方法；
７．前記試料を流体核磁気共鳴分析装置に送液し、送液された試料の核磁気共鳴スペクトルを前記流体核磁気共鳴分析装置により取得するための測定が、オフフローモードでの測定であることを特徴とする前項１乃至６のいずれかの前項記載の評価方法；
８．前記オフフローモードでの測定が、ストップ・アンド・フロー測定またはフラクション・ループ測定であることを特徴とする前項７記載の評価方法；
等を提供するものである。
【発明の効果】
【０００６】
本発明評価方法によれば、例えば、液体クロマトグラフ−流体核磁気共鳴分析システム（以下、ＬＣ−ＮＭＲ分析システムと記すこともある。）におけるオンフローモードでの測定、具体的には、ストップ・アンド・フロー測定、フラクション・ループ測定等のオフフローモードでの測定等によって流体ＮＭＲ分析装置に送液された各試料分画が、流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブ内の測定セル（即ち、フローセル）中に試料溶液として存在する場合において、当該試料溶液を均一化するために設置される被験微小容器が有する液体の混合性能を精度よく且つ簡便に評価することができる。その結果、前記試料溶液を均一化する被験微小容器を容易に選択可能になる。そして、選択された、試料溶液を均一化する被験微小容器を使用することにより、前記試料溶液にかかる磁場が均一になり、質の高い核磁気共鳴スペクトルを取得することが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、本発明評価方法で用いられるＬＣ−ＮＭＲ分析装置の構成の一例（フラクション・ループ測定の場合）を示す図である。
【図２】図２は、本発明評価方法で用いられるＬＣ−ＮＭＲ分析装置の構成の一例（ストップ・アンド・フロー測定の場合）を示す図である。
【図３】図３は、本発明評価方法で用いられるＬＣ−ＮＭＲ分析システムにおける実施例で取得された測定区での核磁気共鳴スペクトルを示す図である。
【図４】図４は、本発明評価方法で用いられるＬＣ−ＮＭＲ分析システムにおける実施例で取得された対照区での核磁気共鳴スペクトルを示す図である。
【図５】図５は、実施例において、本発明評価方法で用いられるＬＣ−ＮＭＲ分析装置に設置される被験微小容器である混合装置の写真に基づき輪郭が強調された図である。図中の左部がピーク（PEEK：Polyether Ether Ketone）ミキシングティーであり、右部が容量固定式のスタティックミキサーである。
【図６】図６は、実施例において、本発明評価方法で用いられるＬＣ−ＮＭＲ分析装置に設置される被験微小容器である混合装置に組み込まれているピークミキシングティーの内部構造を示す図である。左図は全体を示した図であり、右図は中心部に位置する混合部を拡大して示した図である。尚、当該ピークミキシングティーは、（株）島津ジーエルシーが販売する「ピークミキシングティー  P/N JR-9000-0665」である。その内部構造を示す図は、同社ホームページ上での製品案内に公開されており、これを転記したものである。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明評価方法は、液体状態である混合物に対しての微小容器が有する混合性能を、流体核磁気共鳴分析システムを用いて評価する方法であり、
１）前記混合物の試料を、性能評価対象とする被験微小容器を経て流体核磁気共鳴分析装置に送液する工程、
２）前工程によって送液された試料の核磁気共鳴スペクトルを前記流体核磁気共鳴分析装置により取得する工程、及び、
３）得られた核磁気共鳴スペクトルと、対照とする核磁気共鳴スペクトルとの間での差異に基づき、前記混合物に対しての前記被験微小容器が有する混合性能を評価する工程
を含むことを特徴とする。
【０００９】
本発明評価方法により評価される対象は、被験微小容器が有する液体の混合性能、詳細には、液体状態である混合物の混合性能である。
前記の被験微小容器としては、例えば、オンラインによる連続操作が可能である混合装置を挙げることができる。具体的には例えば、スタティックミキサー、マイクロリアクター等を挙げることができる。
【００１０】
本発明評価方法において用いられる分析システムとしては、例えば、流体ＮＭＲ分析装置を用いて、液体状態である混合物である試料の中に含まれる各種成分の核磁気共鳴スペクトルを取得する分析システム等を挙げることができる。また更に、例えば、高速液体クロマトグラフ分析装置等の液体クロマトグラフ分析装置（以下、ＬＣ分析装置と記すことがある。）と流体ＮＭＲ分析装置とを連結しを用いて、液体状態である混合物である試料の中に含まれる各種成分の分離と同時に、分離された各種成分の核磁気共鳴スペクトルを取得する分析システムが挙げられる。
【００１１】
ここで、例えば、本発明評価方法において用いられる分析システムとして、液体クロマトグラフ−流体核磁気共鳴分析システム（以下、ＬＣ−ＮＭＲ分析システムと記すこともある。）を用いる場合には、当該ＬＣ−ＮＭＲ分析システムは、ＬＣ分析装置と流体ＮＭＲ分析装置とを連結する流路上に、前記被験微小容器を設置する。
【００１２】
このような分析システムでは、前記被験微小容器を設置していないこと以外は同一の分析システムに含まれるＬＣ分析装置から順次溶出される試料画分を、本発明評価方法により被験微小容器が有する混合性能を評価するための基準（即ち、対照）とすればよい。
更に、例えば、ＬＣ分析装置による分析として、二種類以上の溶媒を除々にその比率が変えて試料分離用移動相とするグラジエント溶離法が用いられる場合には、前記被験微小容器を設置していないこと以外は同一の分析システムに含まれるＬＣ分析装置から順次溶出される試料画分が、二種類以上の溶媒を除々にその比率が変えて試料分離用移動相とするグラジエント溶離法により分画して得られる試料画分となり、これを本発明評価方法により被験微小容器が有する混合性能を評価するための基準（即ち、対照）とすればよい。
【００１３】
本発明評価方法における第一工程は、前記混合物の試料を、性能評価対象とする被験微小容器を経て流体核磁気共鳴分析装置に送液する工程である。
【００１４】
当該第一工程において、前記試料を流体ＮＭＲ分析装置に送液し、次いで、後述する第二工程において、送液された試料の核磁気共鳴スペクトルを前記流体ＮＭＲ分析装置により取得するための測定としては、例えば、オフフローモードでの測定等を挙げることができる。
ここで、「オフフローモードでの測定」としては、例えば、ストップ・アンド・フロー測定、フラクション・ループ測定等を挙げることができる。
【００１５】
本発明評価方法における第二工程は、前工程（即ち、第一工程）によって送液された試料の核磁気共鳴スペクトルを前記流体ＮＭＲ分析装置により取得する工程である。
【００１６】
本発明評価方法における第三工程は、得られた核磁気共鳴スペクトルと、対照とする核磁気共鳴スペクトルとの間での差異に基づき、前記混合物に対しての前記被験微小容器が有する混合性能を評価する工程である。
【００１７】
第三工程における「対照とする核磁気共鳴スペクトル」としては、例えば、（ａ）微小容器を経ることなく、（即ち、前記被験微小容器を設置していないこと以外は同一の分析システムに含まれる）流体ＮＭＲ分析装置に送液された前記混合物の試料に基づき前記流体ＮＭＲ分析装置により取得された核磁気共鳴スペクトル、又は、（ｂ）前記被験微小容器以外の他の微小容器を経て、（即ち、前記被験微小容器に代わり、前記被験微小容器以外の他の微小容器が設置されること以外は同一の分析システムに含まれる）流体ＮＭＲ分析装置に送液された前記混合物の試料に基づき前記流体ＮＭＲ分析装置により取得された核磁気共鳴スペクトル、等を挙げることができる。
【００１８】
本発明評価方法で用いられる分析システムおよび本発明評価方法の利用の一例を述べる。
本発明評価方法で用いられる分析システムが、混合物試料を注入したＬＣ分析装置から順次溶出する試料分画を流体ＮＭＲ分析装置に送液し、送液された各試料分画の核磁気共鳴スペクトルを前記流体ＮＭＲ分析装置により取得するＬＣ−ＮＭＲ分析システムであって、前記ＬＣ分析装置による分析が、二種類以上の溶媒を除々にその比率が変えて試料分離用移動相とするグラジエント溶離法が用いられる分析であり、且つ、前記ＬＣ分析装置と前記流体ＮＭＲ分析装置とを連結する流路上に、前記各試料分画を均一化するための被験微小容器（例えば、オンラインによる連続操作が可能である混合装置）を設置しているもの（測定区）及び設置していないもの（対照区）を用いる場合について説明する。
【００１９】
まず、本発明評価方法で用いられる分析システムに供される混合物試料は、ＬＣ分析装置のインジェクターからＬＣ分析装置の流路内に注入される。
ＬＣ分析装置が有する分離セクションでは、試料分離用移動相の供給用容器（図１及び図２中の符号１）から送液ポンプ（図１及び図２中の符号２）により試料分離用移動相が流路を通じて送出され、当該試料分離用移動相とともに前記混合物試料が前記流路に連結した分離カラム（図１中の符号３）に送られる。前記混合物試料が当該分離カラムを通過することにより得られる試料分画が、前記分離カラムに流路を介して連結した検出器（図１及び図２中の符号４）に送られる。
ここで使用される試料分離用移動相は、二種類以上の溶媒を除々にその比率が変えて混合される移動相である。このようなＬＣ分析における分離方法をグラジエント溶離法という。前記溶媒としては、ＬＣ分析において一般的に用いられる溶媒であればどのようなものでもよいが、例えば、水、メタノール、エタノール、２−プロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、アセトン、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン及びｎ−ヘキサン、並びに、これらの重水素化溶媒、各種酸、塩基、緩衝液の混合溶媒等を挙げることができる。
【００２０】
次いで、ＬＣ分析装置が有するサンプリングセクションにおいて、オンフローモードでの測定の場合には、ＬＣ分析装置から順次溶出する試料分画をそのまま、前記検出器に流路を介して連結した流体ＮＭＲ分析装置（図１及び図２中の符号６）に送液する。また、オフフローモードでの測定の場合には、ＬＣ分析装置から順次溶出する試料分画を、例えば、ストップ・アンド・フロー測定、フラクション・ループ（図１中の符号７）測定等のオフフローモードでの測定によって、前記検出器に流路を介して連結した流体ＮＭＲ分析装置（図１及び図２中の符号６）に送液する。
ここで使用されるストップ・アンド・フロー測定は、試料分画が流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブ内の測定セル（具体的には、フローセル）に到達した段階で送液を一時的に止めることにより、測定時間を稼ぎ、流体ＮＭＲ分析装置による積算測定を行うものである。また、フラクション・ループ測定は、試料分画が送液される流路を切り換えて試料分画の一部をフラクション・ループに蓄え、ＬＣ分析装置による分離終了後に各試料分画をフラクション・ループから順次流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブ内の測定セル（具体的には、フロ−セル）に送液することにより、測定時間を稼ぎ、流体ＮＭＲ分析装置による積算測定を行うものである。
このようにして、流体ＮＭＲ分析装置による積算測定の結果から、各試料分画の核磁気共鳴スペクトルを取得する。
【００２１】
本発明評価方法で用いられる分析システムにおける測定区は、ＬＣ分析装置から順次溶出された時点から流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブ内の測定セル（即ち、フローセル）に格納される時点までの間のいずれかの時点において、前記ＬＣ分析装置と前記流体ＮＭＲ分析装置とを連結する流路上に設置された被験微小容器（具体的には、オンラインによる連続操作が可能である混合装置（図１中の符号５、図１ではスタティックミキサーが示されている。））により、流体ＮＭＲ分析前までに各試料分画が均一化される。
【００２２】
ここで、被験微小容器の具体的な一例である「オンラインによる連続操作が可能である混合装置」としては、各試料分画を効率的に混合するものであればどのようなものでもよく、前記ＬＣ分析装置と連結する流路との連結部（例えば、ＬＣ用フィッティング）と、前記流体ＮＭＲ装置と連結する流路との連結部（例えば、ＬＣ用フィッティング）と、１つの液を混合するための本体とを有するものである。ここで「ＬＣ用フィッティング」としては、例えば、島津ジーエルシー製ダブルフェラル型ピーク製ナット、ピーク製ワンピースナット等を挙げることができる。また「１つの液を混合するための本体」としては、例えば、容量固定式のスタティックミキサー（ANALYTICAL SCIENTIFIC INSTRUMENT社製インラインミキサーアッセンブリ、ＳＳ  ５０μＬ  型番：４１１−００５０）、ピークミキシングティー（島津ジーエルシー社製ピークミキシングティー  型番ＪＲ−９０００−０６６５）、それらを組み合わせたミキサー等を挙げることができる。
尚、本来２つの液を混合する目的で使用されるミキサーであり、２つの供給口（ＩＮ）と１つの排出口（ＯＵＴ）とを有するものであれば、後述の実施例のように、前記２つの供給口の一方を塞ぐことにより、１つの液を混合するための極小容量型混合装置とすればよい。
より具体的な「オンラインによる連続操作が可能である混合装置」として、例えば、スタティックミキサー等を好ましく挙げることができる。なかでも、容易に混合状態を最適化できるように容量可変式のスタティックミキサーをより好ましいものとして挙げられる。
前記スタティックミキサーは市販品を入手することが可能である。市販品であるスタティックミキサーとしては、例えば、ステンレス製容量固定式スタティックミキサー（Analytical Scientific Instruments社製:容量2、5、10、25、50、150、250、350、500μL）、ピーク製容量固定式スタティックミキサー（Analytical Scientific Instruments社製、容量50、150、250 μL）、容量可変式スタティックミキサー（Upcherch Scientific社製NanoMixer：容量30-60 nL）等を挙げることができる。尚、２液混合用ミキサーの場合には、後述の実施例１の如く、一つ流路を塞ぐことにより、１液混合用ミキサーとして利用すればよい。
【００２３】
このような「オンラインによる連続操作が可能である混合装置」の設置位置は、上述のように、ＬＣ分析装置と流体ＮＭＲ分析装置とを連結する流路上であり、ＬＣ分析装置から順次溶出された時点から流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブ内の測定セル（即ち、フローセル）に格納される時点までの間のいずれかの時点において試料分画を混合できる設置位置であればどのような設置位置でもよいが、例えば、設置の容易性と混合後の拡散の影響を最小化する観点等から、ＬＣ分析装置に連結された流路が、流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブに連結する直前の位置を好ましいものとして挙げられる。
尚、対照区では、「オンラインによる連続操作が可能である混合装置」を設置することなく、前記設置位置は（単純な）流路自体のままである。
【００２４】
ＬＣ分析装置から順次溶出された試料分画が、流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブ内の測定セル（即ち、フローセル）中に試料溶液として存在する場合において、当該試料溶液が不均一であれば、取得される核磁気共鳴スペクトルの中の溶媒シグナルがブロードニングを起こしたり、変形が生じたり、また溶媒シグナルを完全に消去できない場合がある。このため、ダイナミックレンジの低下によって特に微量成分由来の強度が小さいシグナルの測定が困難となる場合もある。更にまた、このような溶媒シグナルのみならず測定対象成分由来の核磁気共鳴スペクトルの品質低下を招くこともある。
しかしながら、前記ＬＣ分析装置と前記流体ＮＭＲ分析装置とを連結する流路上に設置された被験微小容器（具体的には、オンラインによる連続操作が可能である混合装置）が優れた液体を混合する性能（即ち、優れた液体の混合性能）を有する場合には、上記のような溶媒シグナルの望ましくない状態での存在や、測定対象成分由来の核磁気共鳴スペクトルの品質低下を抑制し、又は、生じることなく、得られた核磁気共鳴スペクトルと、対照とする核磁気共鳴スペクトルとの間での差異に基づき、前記混合物に対しての前記被験微小容器が有する混合性能を精度よく且つ簡便に評価することができる。そして更に、測定対象成分由来の質のより高い核磁気共鳴スペクトルを取得すれば、より優れた混合性能を有するものであると評価すればよい。
【実施例】
【００２５】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明する。
【００２６】
実施例１  （本発明評価方法で用いられる分析システムの構築及び本発明評価方法の実施）
図１で示されるように、本発明ＬＣ−ＮＭＲ分析装置（フラクション・ループ測定）を構築した。
構築された本発明評価方法で用いられるＬＣ−ＮＭＲ分析装置を用いて、下記のＨＰＬＣ分析条件で混合物試料をＨＰＬＣ分析した後、フラクション・ループ測定によって、溶出されたカプサイシンの試料分画の１Ｈ  核磁気共鳴スペクトルを下記の流体ＮＭＲ分析条件で取得した。得られたスペクトルを図３で示す。得られたスペクトル結果に基づき、シグナルのピークが先鋭化度及び当該ピークの対称性を、ピーク半値幅及びシンメトリー係数を算出することにより評価した。その算出結果を表１（測定区：被験微小容器Ａ）に示した。
【００２７】
尚、表１中に記載されるピーク半値幅及びシンメトリー係数の算出方法は、以下のとおりである。
（１）半値幅（W0.5h）：ピークの高さの中点におけるピーク幅（ppm）
ピークの高さ（mm）の中点におけるピーク幅（mm）に、「mm」から「ppm」に変換するための変換係数を乗じることにより、半値幅（W0.5h）（ppm）を算出する。
（２）シンメトリー係数（S）：
ピークの基線からピーク高さ（mm）の1/20の高さ（mm）におけるピーク幅（mm）W0.05hを、W0.05hのピーク幅をピークの頂点から記録紙の横軸へ下ろした垂線で二分したときのピークの立ち上がり側の距離（mm）の２倍数で除することにより、シンメトリー係数（S）を算出する。
【００２８】
＜オンラインによる連続操作が可能である混合装置（以下、「被験微小容器Ａ」と記すこともある。）＞
１．混合装置（即ち、「被験微小容器Ａ」）：容量固定式のスタティックミキサー（ANALYTICAL SCIENTIFIC INSTRUMENT社製インラインミキサーアッセンブリ、ＳＳ  ５０μＬ  型番：４１１−００５０）及びピークミキシングティー（島津ジーエルシー社製ピークミキシングティー  型番ＪＲ−９０００−０６６５）を組み合わせた装置（図５参照）
因みに、前記ピークミキシングティー（図６参照）は、本来２つの液を混合する目的で使用されるものであるため、２つの供給口（ＩＮ）と１つの排出口（ＯＵＴ）とを有しているが、本実施例では、前記２つの供給口の一方を塞ぐことにより、１つの液を混合するための極小容量型混合装置としている。尚、当該ピークミキシングティーの内部構造を示す図は、同社ホームページ上での製品案内に公開されており、これを図６として転記したものである。
２．設置位置：ＬＣ分析装置に連結された流路が、流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブ内の測定セル（即ち、フローセル）に連結する直前の位置
【００２９】
対照例１  （対照区：被験微小容器無し）
図１で示される本発明ＬＣ−ＮＭＲ分析装置（フラクション・ループ測定）からスタティックミキサー５を外したＬＣ−ＮＭＲ分析装置（フラクション・ループ測定）を構築した。
構築されたＬＣ−ＮＭＲ分析装置を用いて、下記のＨＰＬＣ分析条件で混合物試料をＨＰＬＣ分析した後、フラクション・ループ測定によって、溶出されたカプサイシンの試料分画の１Ｈ  核磁気共鳴スペクトルを下記の流体ＮＭＲ分析条件で取得した。得られたスペクトル結果に基づき、シグナルのピークが先鋭化度及び当該ピークの対称性を、実施例１と同様にして、ピーク半値幅及びシンメトリー係数を算出することにより評価した。その算出結果を表１（対照区：被験微小容器無し）に示した。
【００３０】
＜ＨＰＬＣ分析条件＞
１．カラム：  ＳＵＭＩＰＡＸ  ＯＤＳ  Ｚ−ｃｌｕｅ  ４．６×１５０ｍｍ（５μｍ）
２．試料分離用移動相Ａ：  重水
３．試料分離用移動相Ｂ：  アセトニトリル
４．グラジエント溶離条件：  「試料分離用移動相Ａ：試料分離用移動相Ｂ」の混合比率を「９０：１０」から「１０：９０」まで直線勾配的に１５ｍｉｎ間で変える。
５．分離カラムの温度：４０℃
６．検出器での検出波長：２３０ｎｍ（ＵＶ）
７．分析試料：３ｍｇカプサイシン／１ｍＬアセトニトリル
【００３１】
＜１Ｈ  ＮＭＲ分析条件＞
１．スキャン：１回
２．測定温度：２９８Ｋ
３．測定セル（即ち、フローセル）容量：３０μＬ
４．シム調整：重水素化アセトニトリルの重水素シグナルを基準とした。
【００３２】
【表１】
2013174485.tif 000003
【００３３】
尚、表１にある「被験微小容器ａ」、「被験微小容器ｂ」及び「被験微小容器ｃ」は、本発明評価方法を詳細に説明するための仮想例であり、「被験微小容器ａ」は「被験微小容器Ａ」よりも優れた混合性能を有するものとしての一例であり、一方、「被験微小容器ｂ」及び「被験微小容器ｃ」は「被験微小容器Ａ」よりも劣る混合性能を有するものとしての一例として示したものである。
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明評価方法によれば、例えば、液体クロマトグラフ−流体核磁気共鳴分析システム（以下、ＬＣ−ＮＭＲ分析システムと記すこともある。）におけるオンフローモードでの測定、具体的には、ストップ・アンド・フロー測定、フラクション・ループ測定等のオフフローモードでの測定等によって流体ＮＭＲ分析装置に送液された各試料分画が、流体ＮＭＲ分析装置が有するプローブ内の測定セル（即ち、フローセル）中に試料溶液として存在する場合において、当該試料溶液を均一化するために設置される被験微小容器が有する液体の混合性能を精度よく且つ簡便に評価することができる。その結果、前記試料溶液を均一化する被験微小容器を容易に選択可能になる。そして、選択された、試料溶液を均一化する被験微小容器を使用することにより、前記試料溶液にかかる磁場が均一になり、質の高い核磁気共鳴スペクトルを取得することが可能になる。
【符号の説明】
【００３５】
１．ＬＣ分析装置における試料分離用移動相の供給用容器
２．ＬＣ分析装置における送液ポンプ
３．ＬＣ分析装置における分離カラム
４．ＬＣ分析装置における検出器
５．スタティックミキサー
６．流体ＮＭＲ分析装置
７．フラクション・ループ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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