(57)【要約】【課題】多発性硬化症の発症の遅延または予防のための方法を提供すること。【解決手段】一態様において、本発明は、多発性硬化症（ＭＳ）の危険性がある、例えば進行性ＭＳまたは再発性ＭＳの危険性がある対象を治療する方法を特徴とする。方法は、ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体（例えば完全長ＶＬＡ−４結合抗体またはＶＬＡ−４結合抗体フラグメント）を対象に投与することを包含する。一実施形態において、該方法は、ＭＳの臨床発現の開始（例えば、再発性弛張性ＭＳ）を防止または遅延（例えば少なくとも１年、２年、３年、４年、５年、１０年またはそれ以上）することもできれば、後の（例えば二次的な）臨床発現の重症度を最低限にすることもできる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は参考として全体が本明細書に組み込まれる２００５年１２月３日出願の米国仮出願６０／６３３，０２２の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
多発性硬化症（ＭＳ）は中枢神経系の慢性、多病巣性、脱髄性の自己免疫疾患である。全世界で２百万人超、合衆国で４００，０００人がＭＳを有している。ＭＳ患者の約８０％が再発性の形態を有し、それらの患者の８０％超が２５年内に二次的な進行性のＭＳに進行している。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
（発明の要旨）
一態様において、本発明は、多発性硬化症（ＭＳ）の危険性がある、例えば進行性ＭＳまたは再発性ＭＳの危険性がある対象を治療する方法を特徴とする。方法は、ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体（例えば完全長ＶＬＡ−４結合抗体またはＶＬＡ−４結合抗体フラグメント）を対象に投与することを包含する。一実施形態において、該方法は、ＭＳの臨床発現の開始（例えば、再発性弛張性ＭＳ）を防止または遅延（例えば少なくとも１年、２年、３年、４年、５年、１０年またはそれ以上）することもできれば、後の（例えば二次的な）臨床発現の重症度を最低限にすることもできる。一実施形態において、対象は限局性神経学的欠損の臨床エピソードを二つ未満有したことがある。
【０００４】
一実施形態において、対象は、限局性神経学的欠損の臨床エピソード一つを経験している。神経学的欠損は、例えば一つ以上の四肢の虚弱、一つ以上の四肢の麻痺、一つ以上の四肢の振せん、制御不可能な筋肉の痙性、感覚の喪失または異常、協調低下、平衡感覚喪失、抽象的思考能力喪失、一般化能力喪失、会話困難、会話理解困難のような一つ以上の症状により明示する場合がある。
【０００５】
ＶＬＡ−４遮断薬は、臨床エピソードの６、４、３、２または１週間以内に投与することができる。
【０００６】
別の実施形態において、対象は、神経学的損傷の検出により多発性硬化症の危険性を有していると示される。例えば、対象は、例えば頭部スキャンを使用して、例えば、放射線撮影スキャン、コンピュータ連動断層撮影（ＣＴ）スキャン、または磁気共鳴画像化（ＭＲＩ）スキャンにより評価することができる。脳組織炎症またはミエリン鞘損傷の物理的証拠の検出は、臨床エピソードの非存在下における、または臨床エピソード一つを伴った治療を対象に示すことができる。別の例において、対象は、例えばＭＲＩにより少なくとも２、３、５、１０、１５、２０または２５の個々の脳病変または瘢痕（例えば１．５または３ｍｍ以上のサイズのもの）が検出可能である場合に治療することができる。
【０００７】
別の実施形態において、対象は、生化学的または生理学的基準により、例えば、臨床エピソードの非存在下で、または臨床エピソード一つを伴って、多発性硬化症の危険性を有していると示される。例えば、ミエリン稀突起神経膠細胞糖タンパク質（ＭＯＧ）およびミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の一方または両方に対する血清抗体の存在は、対象が危険性を有していることを示すことができる。
【０００８】
対象は又、本明細書に記載される基準の組み合わせにより治療が示されることもできる。対象は、例えばＭＳの少なくとも１、２、３、４または５つの危険因子、例えば本明細書に記載される危険因子を有する場合に、ＶＬＡ−４遮断薬を与えることができる。例えば、神経学的欠損の臨床エピソード一つを経験し、検出可能な神経学的損傷または指標となる生化学的または生理学的基準を有する対象は治療することができる。別の例において、対象は、神経学的欠損の臨床エピソードを経験していないが、検出可能な神経学的損傷または指標となる生化学的または生理学的基準により示される。例えば、限局性神経学的欠損の臨床エピソードを経験していない対象は、以下の特徴の一つ以上により治療が示される場合がある：即ち、（ａ）頭部スキャンにより検出可能な３ｍｍ以上のサイズの脳の病変または瘢痕を複数有する；（ｂ）ミエリン稀突起神経膠細胞糖タンパク質（ＭＯＧ）およびミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の一方または両方に対する血清抗体を有する；（ｃ）対照と比べてＣＳＦ  ＩｇＧの水準が上昇している；および（ｄ）対照と比べてミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の水準が上昇している。
【０００９】
別の実施形態において、対象は、多発性硬化症の家族歴、例えば多発性硬化症を有した親、兄弟または祖父母の少なくとも１人を有する。一実施形態において、対象は、一つの急性孤立性脱髄事象、例えば視神経、脊髄または小脳の関与する事象を有していたことがある。別の実施形態において、対象は、多発性硬化症の臨床上サイレントな特徴を有する。例えば、対象は、３ｍｍ以上のサイズの臨床上サイレントな脳ＭＲＩ病変を少なくとも１、２、５または１０個を有する。一実施形態において、対象は横断脊髄炎または視神経炎を有する。
【００１０】
対象は場合により、ＭＳ以外の障害に関連する病的状態の除外に関して評価することができる。例えば、対象は、神経学的欠損を誘発する可能性がある代謝、血管、コラーゲン−血管、感染および／または新生物性の疾患を有さないと判断することができる。又例えば、対象は、卒中、ＣＮＳリンパ腫、脳幹神経膠腫またはリソソーム貯蔵疾患を有さないと判断される。
【００１１】
一実施形態において、少なくとも初回投与時点に、対象は、３、２、１．５または１未満のＥＤＳＳ評点を有する。
【００１２】
一実施形態において、対象は、成人、例えば年齢が１６、１８、１９、２０、２４または３０歳以上の対象である。例えば、対象は１９〜４０歳である。対象は女性であっても、男性であってもよい。対象は、１４週間を超える、例えば６または９ヶ月を超える、１、１．５または２年を超える期間にわたり、例えば一般的に一定間隔で、ＶＬＡ−４遮断薬の用量を投与されてもよい。
【００１３】
一つの実施例において、方法は、投与手順の前に、（ａ）ミエリン鞘損傷の証拠を有する頭部スキャン、（ｂ）ＭＯＧおよびＭＢＰの一方または両方に対する血清抗体の存在、（ｃ）上昇した水準のＣＳＦ  ＩｇＧの存在、（ｄ）上昇した水準のＭＢＰの存在、および（ｅ）限局性神経学的欠損の臨床エピソードの一つの発生、の一つ以上に基づきＭＳの危険性があるものとして対象を選択することをさらに包含する。
【００１４】
一実施形態において、ＶＬＡ−４遮断薬は、ＶＬＡ−４結合抗体、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４のような完全長抗体を包含する。抗体は、効果的にヒトであってもよければ、ヒトであってもよく、またはヒト化であってもよい。ＶＬＡ−４結合抗体は、ＶＬＡ−４の同属体リガンド、例えばＶＣＡＭ−１とのＶＬＡ−４の相互作用を抑制できる。ＶＬＡ−４結合抗体は、ＶＬＡ−４の少なくともα鎖、例えば、α４サブユニットの細胞外ドメインに結合する。例えば、ＶＬＡ−４結合抗体は、ＶＬＡ−４のα鎖上のエピトープＢ（例えば、Ｂ１またはＢ２）を認識する。例えば、ＶＬＡ−４結合抗体は、ＶＬＡ−４への結合に関して、ナタリズマブ、ＨＰ１／２、または本明細書に記載される別のＶＬＡ−４結合抗体と競合する場合がある。好ましい実施形態において、ＶＬＡ−４結合抗体は、ナタリズマブであるか、または、ナタリズマブの重鎖および軽鎖の可変ドメインを包含する。
【００１５】
初期の治療では、例えば長期間にわたる能力障害の発生の防止、一定時間にわたるＴ２およびＧｄ＋病変の低減、二次的な進行性ＭＳの発生の防止、および／または、（例えば、ＭＲＩにて検出される）永久的脳組織傷害の発生の防止が可能である。
【００１６】
別の態様において、本開示は、対象を評価する、または対象の評価に関する情報を受領すること；および対象がＭＳの危険性を有することを評価が示している場合にＶＬＡ−４結合抗体を対象に投与することを包含する方法を特徴とする。一実施形態において、方法は、対象に対してスキャンを実施すること、および、ＭＳの臨床上サイレントな特徴（例えば、早期ＭＳ）の証拠をスキャンが示している場合にＶＬＡ−４遮断薬を対象に投与することを包含する。臨床上サイレントな特徴の例には、脳組織炎症またはミエリン鞘損傷、例えば神経学的欠損の臨床エピソードの非存在下におけるＧｄ＋、Ｔ１またはＴ２病変の存在が包含される。その他の代表的な評価は、本明細書に記載される危険因子の評価が包含される。対象は、少なくとも一つ、二つ、三つまたは四つの危険因子に関して評価することができる。対象は、少なくとも一つ、二つ、三つまたは四つの危険因子が検出される場合に、ＶＬＡ−４遮断薬を投与することができる。
【００１７】
別の態様において、本開示は、単相性脱髄障害を有する対象を同定すること、およびＶＬＡ−４結合抗体を、例えば障害を治療する上で有効な量で、対象に投与することを包含する方法を特徴とする。例えば、対象は、臨床上明確な多発性硬化症ではない障害を有する。対象は、例えば横断脊髄炎、視神経炎、または急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）を有してもよい。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
再発性または進行性の多発性硬化症の危険性がある対象を治療する方法であって、ＶＬＡ−４結合抗体を該対象に投与する工程を包含する、方法。
（項目２）
前記対象が限局性神経学的欠損の一つの臨床エピソードを経験している、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記抗体が前記臨床エピソードの４週間以内に投与される、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記神経学的欠損が、一つ以上の四肢の虚弱、一つ以上の四肢の麻痺、一つ以上の四肢の振せん、制御不可能な筋肉の痙性、感覚の喪失または異常、協調低下、平衡感覚喪失、抽象的思考能力喪失、一般化能力喪失、会話困難、会話理解困難、単眼または両眼の視力喪失、および膀胱または腸の制御困難からなる群より選択される一つ以上の症状により明示される、項目２に記載の方法。
（項目５）
前記対象が脳組織炎症またはミエリン鞘損傷の物理的証拠を示す頭部スキャンを受けたことがある、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記頭部スキャンが放射線撮影スキャン、コンピュータ連動断層撮影（ＣＴ）スキャンおよび磁気共鳴画像化（ＭＲＩ）スキャンからなる群より選択される、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記対象がＭＲＩにより検出可能な１〜５０個の個別の脳病変を有する、項目５に記載の方法。
（項目８）
前記対象がミエリン稀突起神経膠細胞糖タンパク質（ＭＯＧ）およびミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の一方または両方に対する血清抗体を有する、項目１に記載の方法。（項目９）
前記対象が神経学的欠損の一つの臨床エピソードを経験している、項目５に記載の方法。
（項目１０）
前記対象が神経学的欠損の臨床エピソードを経験していない、項目５に記載の方法。
（項目１１）
前記対象が神経学的欠損の一つの臨床エピソードを経験している、項目８に記載の方法。
（項目１２）
前記対象が神経学的欠損の臨床エピソードを経験していない、項目８に記載の方法。
（項目１３）
前記対象が限局性神経学的欠損の臨床エピソードを経験しておらず、以下の特徴：
（ａ）頭部スキャンにより検出可能な３ｍｍ以上のサイズの脳の病変または瘢痕を複数有する、
（ｂ）ミエリン稀突起神経膠細胞糖タンパク質（ＭＯＧ）およびミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の一方または両方に対する血清抗体を有する、
（ｃ）陰性対照と比べてＣＳＦ ＩｇＧの水準が上昇している、および、
（ｄ）陰性対照と比べてミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の水準が上昇している、
のうちの一つ以上を有する、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記対象が限局性神経学的欠損の一つの臨床エピソードを経験しており、以下の特徴：（ａ）頭部スキャンにより検出可能な３ｍｍ以上のサイズの脳の病変または瘢痕を複数有する、
（ｂ）ミエリン稀突起神経膠細胞糖タンパク質（ＭＯＧ）およびミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の一方または両方に対する血清抗体を有する、
（ｃ）陰性対照と比べてＣＳＦ ＩｇＧの水準が上昇している、および、
（ｄ）陰性対照と比べてミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の水準が上昇している、
のうちの一つ以上を有する、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記投与手順の前に、（ａ）ミエリン鞘損傷の頭部スキャン証拠、（ｂ）ＭＯＧおよびＭＢＰの一方または両方に対する血清抗体の存在、（ｃ）上昇した水準のＣＳＦ ＩｇＧの存在、（ｄ）上昇した水準のＭＢＰの存在、および（ｅ）限局性神経学的欠損の臨床エピソードの一つの発生、のうちの一つ以上に基づきＭＳの危険性があるものとして対象を選択することをさらに包含する、項目１に記載の方法。
（項目１６）
前記対象が多発性硬化症の家族歴を有する、項目１に記載の方法。
（項目１７）
前記対象が視神経、脊髄または小脳の関与する一つの急性孤立性脱髄事象を有していたことがある、項目１に記載の方法。
（項目１８）
前記対象が３ｍｍ以上のサイズの臨床上サイレントな脳ＭＲＩ病変を複数有する、項目１に記載の方法。
（項目１９）
前記対象が横断脊髄炎を有する、項目１に記載の方法。
（項目２０）
前記対象が視神経炎を有する、項目１に記載の方法。
（項目２１）
対象を治療する方法であって、
対象に対しスキャンを実施する工程、および、
該スキャンが臨床上サイレントな脳組織炎症またはミエリン鞘損傷の証拠を示す場合にＶＬＡ−４結合抗体を該対象に投与する工程、
を包含する、方法。
（項目２２）
単相性脱髄障害に関して対象を治療する方法であって、単相性脱髄障害を有する対象を同定すること；およびＶＬＡ−４結合抗体を対象に投与する工程を包含する、方法。
（項目２３）
前記対象が横断脊髄炎を有する、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記対象が視神経炎を有する、項目２２に記載の方法。
（項目２５）
前記対象が急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）を有する、項目２２に記載の方法。
（項目２６）
前記ＶＬＡ−４結合抗体がＶＬＡ−４の少なくともα鎖に結合する、項目１、１３、１４、１５、２１および２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
前記ＶＬＡ−４結合抗体がナタリズマブを含む、項目１、１３、１４、１５、２１および２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
前記ＶＬＡ−４結合抗体がＶＬＡ−４への結合に関してＨＰ１／２またはナタリズマブと競合する、項目１、１３、１４、１５、２１および２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２９）
前記ＶＬＡ−４結合抗体がヒト抗体またはヒト化抗体である、項目１、１３、１４、１５、２１および２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３０）
前記ＶＬＡ−４結合抗体が第２の治療薬と組み合わせて投与される、項目１、１３、１４、１５、２１および２２のいずれか一項に記載の方法。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
（詳細な説明）
（定義）
「神経学的欠損」とは、中枢神経系の機能の低下である。例としては、会話不能、知覚低下、平衡感覚喪失、虚弱、認知機能不全、視野変化、異常反射、および問題歩行が包含される。「限局性神経学的欠損」とは、特定の位置（例えば、左顔面、右顔面、左腕、右腕）または特定の機能（例えば、会話には影響あるが、筆記能力には影響ない）の何れかに影響するものである。神経学的欠損に言及する場合、「臨床エピソード」という用語は、数時間、数日、または数週間にわたり持続し（但し、そこから部分的または完全な回復が起こる可能性がある）、検査や内部身体組織の画像化のみにより観察可能なものとは異なり、患者の対外的な身体兆候により直接観察できる神経学的欠損を意味する。臨床上の神経学的欠損は、一般的に医療歴および／または身体的神経学的検査により判断される。
【００１９】
「治療する」という用語は、障害に関連する状態、症状またはパラメータを改善する、または障害の進行を防止または低減する上で有効な量、態様および／または様式にて、統計学的に有意な程度まで、または当業者が検出できる程度まで、治療薬を投与することを指す。有効な量、態様または様式は、対象により変動する可能性があり、又、対象に合わせて設定される場合がある。
【００２０】
「頭部スキャン」とは、生存者における脳を検査し、画像を撮る技法である。例としては、ＣＴスキャンおよびＭＲＩスキャンが包含される。
【００２１】
「生物製剤」という用語は、タンパク質に基づく治療薬を指す。
【００２２】
「ＶＬＡ−４結合剤」とは、１０−６Ｍ未満のＫｄでＶＬＡ−４インテグリンに結合する何れかの化合物を指す。ＶＬＡ−４結合剤の例には、ＶＬＡ−４結合タンパク質、例えばナタリズマブのような抗体がある。
【００２３】
「ＶＬＡ−４拮抗剤」とは、ＶＬＡ−４インテグリンの活性、特にＶＬＡ−４インテグリンの結合活性またはシグナリング活性、例えばＶＬＡ−４媒介シグナルを伝達する能力を少なくとも部分的に阻害する何れかの化合物を指す。例えば、ＶＬＡ−４拮抗剤は、ＶＬＡ−４の同属体リガンド、例えばＶＣＡＭ−１のような細胞表面タンパク質への、またはフィブロネクチン若しくはオステオポンチンのような細胞外基質成分へのＶＬＡ−４の結合を抑制する場合がある。代表的なＶＬＡ−４拮抗剤は、ＶＬＡ−４に、またはＶＬＡ−４リガンド（例えばＶＣＡＭ−１）若しくは細胞外基質成分（例えばフィブロネクチンまたはオステオポンチン）に結合してもよい。ＶＬＡ−４に結合するＶＬＡ−４拮抗剤は、α４サブユニット若しくはβ１サブユニットの何れか、またはその両方に結合する場合がある。ＶＬＡ−４拮抗剤は又、他のα４サブユニット含有インテグリン（例えばα４β７）と、または他のβ１含有インテグリンと相互作用する場合もある。ＶＬＡ−４拮抗剤は、１０−６、１０−７、１０−８、１０−９または１０−１０Ｍ未満のＫｄでＶＬＡ−４またはＶＬＡ−４リガンドに結合する場合もある。
【００２４】
本明細書で使用される「抗体」という用語は、少なくとも一つの免疫グロブリン可変領域、例えば免疫グロブリン可変ドメインまたは免疫グロブリン可変ドメイン配列を与えるアミノ酸配列を含むタンパク質を指す。例えば、抗体は、重（Ｈ）鎖可変領域（本明細書においてはＶＨと略記）および軽（Ｌ）鎖可変領域（本明細書においてはＶＬと略記）を包含してもよい。別の例において、抗体は、二つの重（Ｈ）鎖可変領域および二つの軽（Ｌ）鎖可変領域を包含する。「抗体」という用語は、抗体の抗原結合フラグメント（例えば、一本鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄフラグメント、ＦｖフラグメントおよびｄＡｂフラグメント）並びに完全な抗体、例えばＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＭ型（並びにそのサブタイプ）の未損傷の免疫グロブリンを包含する。免疫グロブリンの軽鎖は、カッパまたはラムダ型のものである場合がある。一実施形態において、抗体はグリコシル化される。抗体は、抗体依存性細胞毒性および／または補体媒介細胞毒性に関して機能的であってもよく、或いはこれらの活性の一方または両方に関して非機能的である場合もある。
【００２５】
ＶＨおよびＶＬ領域は、より保存的な「フレームワーク領域」（ＦＲ）と称される領域が点在する、「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域にさらに細分できる。フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲は、厳密に定義されている（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２、およびＣｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １９６：９０１−９１７を参照）。本明細書では、Ｋａｂａｔの定義を使用する。各ＶＨおよびＶＬは、一般的に以下の順序（即ち、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４）でアミノ末端からカルボキシル末端に配置した三つのＣＤＲおよび四つのＦＲからなる。
【００２６】
「免疫グロブリンドメイン」とは、免疫グロブリン分子の可変または定常ドメインに由来するドメインを指す。免疫グロブリンドメインは、一般的に約七つのβ鎖より形成された二つのβシートおよび保存されたジスルフィド結合を含有する（例えば、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８  Ａｎｎ．  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ６：３８１−４０５を参照）。
【００２７】
本明細書で使用される「免疫グロブリン可変ドメイン配列」とは、免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成できるアミノ酸配列を指す。例えば、配列は、天然に存在する可変ドメインのアミノ酸配列の全てまたは一部を含む場合がある。例えば、配列はＮまたはＣ末端のアミノ酸、内部アミノ酸の一つ、二つまたはそれ以上を省略する場合もあれば、一つ以上の挿入または追加の末端アミノ酸を含む場合もあり、その他の改変を含む場合もある。一実施形態において、免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むポリペプチドは、別の免疫グロブリン可変ドメイン配列と会合して、標的結合構造（または「抗原結合部位」）、例えばＶＬＡ−４と相互作用する構造を形成することができる。
【００２８】
抗体のＶＨまたはＶＬ鎖はさらに、重鎖または軽鎖の定常領域の全てまたは一部を含み、それによって重鎖または軽鎖の免疫グロブリン鎖をそれぞれ形成することができる。一実施形態において、抗体は、免疫グロブリン重鎖二つおよび免疫グロブリン軽鎖二つの４量体である。免疫グロブリン重鎖および軽鎖は、ジスルフィド結合により連結されてもよい。重鎖定常領域は、一般的に三つの定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３を含む。軽鎖定常領域は、一般的にＣＬドメインを含む。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は一般的に、免疫系の種々の細胞（例えばエフェクター細胞）および古典的な補体系の第１成分（Ｃｌｑ）を含めた、宿主の組織または因子への抗体の結合を媒介する。
【００２９】
抗体の一つ以上の領域は、ヒトのものであってもよければ、効果的にヒトのものであってもよい。例えば、可変領域の一つ以上が、ヒトのものであってもよければ、効果的にヒトのものであってもよい。例えば、ＣＤＲの一つ以上、例えばＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、ＨＣ  ＣＤＲ３、ＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２およびＬＣ  ＣＤＲ３が、ヒトのものであってもよい。軽鎖ＣＤＲの各々がヒトのものであってもよい。ＨＣ  ＣＤＲ３がヒトのものであってもよい。フレームワーク領域の一つ以上、例えばＨＣまたはＬＣのＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３およびＦＲ４がヒトのものであってもよい。一実施形態において、フレームワーク領域の全てがヒトのものであり、例えばヒト体細胞、例えば免疫グロブリンを生産する造血細胞、または非造血細胞に由来するものである。定常領域の一つ以上がヒトのものであってもよければ、効果的にヒトのものであってもよい。別の実施形態において、フレームワーク領域（例えば集合的にＦＲ１、ＦＲ２およびＦＲ３、並びに集合的にＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３およびＦＲ４）の少なくとも７０、７５、８０、８５、９０、９２、９５または９８％、または全体の抗体が、ヒトのものであってもよければ、効果的にヒトのものであってもよい。例えば、集合的にＦＲ１、ＦＲ２およびＦＲ３が、ヒト生殖細胞系統セグメントによりコード化されるヒト配列に少なくとも７０、７５、８０、８５、９０、９２、９５、９８または９９％同一であってもよい。
【００３０】
「効果的にヒト」の免疫グロブリン可変領域は、免疫グロブリン可変領域が正常なヒトにおいて免疫原性応答を誘発しない程度に十分な数のヒトフレームワークアミノ酸位置を含む免疫グロブリン可変領域である。「効果的にヒト」の抗体は、抗体が正常なヒトにおいて免疫原性応答を誘発しない程度に十分な数のヒトアミノ酸位置を含む抗体である。
【００３１】
「ヒト化」免疫グロブリン可変領域は、免疫グロブリン可変領域が正常なヒトにおいて免疫原性応答を誘発しない程度に十分な数のヒトフレームワークアミノ酸位置を含むように改変された免疫グロブリン可変領域である。「ヒト化」免疫グロブリンの説明には、例えば米国特許６，４０７，２１３および米国特許５，６９３，７６２が包含される。場合によっては、ヒト化免疫グロブリンがフレームワークアミノ酸位置一つ以上において非ヒトアミノ酸を含んでもよい。
【００３２】
抗体の全てまたは一部は、免疫グロブリン遺伝子またはそのセグメントでコード化することができる。代表的なヒト免疫グロブリン遺伝子には、カッパ、ラムダ、アルファ（ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）、ガンマ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、デルタ、イプシロンおよびミュウ定常領域遺伝子、並びに多数の免疫グロブリン可変領域遺伝子が包含される。完全長免疫グロブリン「軽鎖」（約２５Ｋｄまたは２１４個のアミノ酸）は、ＮＨ２末端における可変領域遺伝子（約１１０アミノ酸）およびＣＯＯＨ末端におけるカッパまたはラムダ定常領域遺伝子によりコード化されている。完全長免疫グロブリン「重鎖」（約５０Ｋｄまたは４４６個のアミノ酸）も同様に、可変領域遺伝子（約１１６個のアミノ酸）およびその他の前述の定常領域遺伝子の一つ、例えば（約３３０個のアミノ酸をコード化する）ガンマによりコード化されている。
【００３３】
完全長抗体の「抗原結合フラグメント」という用語は、対象となる標的、例えばＶＬＡ−４に特異的に結合する能力を保持する完全長抗体のフラグメント一つ以上を指す。完全長抗体の「抗原結合フラグメント」という用語に包含される結合フラグメントの例には、（ｉ）Ｆａｂフラグメント、即ち、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる１価のフラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、即ち、ヒンジ領域においてジスルフィド架橋により連結されたＦａｂフラグメント二つを含む２価のフラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；（ｉｖ）抗体のシングルアームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；および（ｖｉ）機能性を保持する単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が包含される。さらに又、Ｆｖフラグメントの二つのドメインであるＶＬおよびＶＨは、別個の遺伝子によりコード化されているが、それらは組み換え法を使用して、ＶＬとＶＨ領域が対となって一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる１価の分子を形成する単一のタンパク質鎖としてそれらを作製できるようにする合成リンカーにより連結することができる。例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３を参照のこと。
【００３４】
（詳細な説明）
（多発性硬化症）
ＭＳの診断は、限局性神経学的欠損の複数の臨床エピソードに基づいて、或いは、ＭＲＩのような補助的試験から得られる神経学的損傷を裏付ける証拠とは空間的時間的に分離された限局性神経学的欠損の臨床エピソードに基づいて、行うことができる（ＭｃＤｏｎａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．  Ｎｅｕｒｏｌ．，２００１，５０：１２１−７）。ＭｃＤｏｎａｌｄの基準は、二回目の発作をＭＲＩで観察される新しい病変により随時特定できるようにする。又、ＭａｃＤｏｎａｌｄの基準は、ＭＲＩにおける９種の代表的な白質病変または１種の増強中病変の何れかに基づいて、空間的な播種度を明確化できるようにする。初期の臨床的顕在性は変動する場合があり、身体性の感覚変化、視神経炎または虚弱を包含する場合がある。真実の臨床診断のためには、少なくとも二つの神経学的減損（ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃ  ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ）が観察される必要があり、これらは解剖学的および時間的に分離する必要がある。さらに、減損はＭＳを有する患者において観察される減損と合致する必要があり、このことは一般的に、欠損の持続時間が数日から数週間であることを意味する。本明細書に記載される方法は、例えば臨床的に確定したＭＳまたは再発性のＭＳへの進行を防止または低減するために使用できる。
【００３５】
神経学的減損の単回エピソードの後にＭＳ（例えば、再発性ＭＳ）を発症する全体的危険性は、１２％もの低値（Ｂｅｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．
Ｍｅｄ．  ３２９：１７６４−１７６９）から５８％もの高値（Ｒｉｚｚｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ３８：１８５−９０）に推定されている。ＭＲＩは、ＭＳへの進行を予測する上で最も有用な検査であることが証明されている。臨床的に孤立した事象を有する患者の１０年間の追跡調査試験において、異常なＭＲＩ所見を有していた５４人中４５人の患者（８３％）が臨床的ＭＳを発症するに至ったのに対し、正常なＭＲＩ所見を有していた患者２７人中僅か３人がＭＳを発症している（Ｏ’Ｒｉｏｒｄａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｂｒａｉｎ  １２１  （Ｐｔ  ３）：４９５−５０３）。
【００３６】
Ｔｉｎｔｏｒｅ’ｅｔ  ａｌ．は、孤立性神経学的事象から平均２８．３ヶ月後の患者７０例を追跡調査し、Ｐａｔｙ  ｅｔ  ａｌ．、Ｆａｚｅｋａｓ  ｅｔ  ａｌ．およびＢａｒｋｈｏｆ  ｅｔ  ａｌ．により定義されたＭＳの診断に関する種々のＭＲＩ基準を比較した（Ｔｉｎｔｏｒｅ’  ｅｔ  ａｌ．，２０００，ＡＪＮＲ  Ａｍ．  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｒａｄｉｏｌ．  ２１：７０２−７０６；Ｐａｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ３８：１８０−１８５；Ｆａｚｅｋａｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ３８：１８２２−１８２５；Ｂａｒｋｈｏｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｂｒａｉｎ  １２０：２０５９−２０６９）。３または４病変（うち一つは室周）を必要とするＰａｔｙ等の方法を使用した場合、著者等によると、感度は８６％であったが、特異性は僅か５４％であった。
【００３７】
Ｆａｚｅｋａｓ等の基準も、同じ感度および特異性となった。これらの基準は、以下の三つの特徴（即ち、テント下位置、室周位置、および６ｍｍ超の病変）のうち二つを有する３病変を必要とする。Ｂａｒｋｈｏｆの基準は、一つのテント下病変、一つの傍骨病変、三つの室周病変、並びに一つのガドリニウム増強病変または９つを超える病変を、Ｔ２加重ＭＲＩにおいて必要とする。これらの基準では、感度７３％および特異性７３％となった。即ち、ＭＳの診断においてＭＲＩ基準がより厳格になるにつれて、感度が低下する代わりに特異性が上昇する。
【００３８】
（臨床孤立症候群（ＣＩＳ）および単相性炎症障害）
神経学的減損の単回の発生は、症状をＶＬＡ−４遮断薬で改善できる患者の指標となる。臨床孤立症候群（ＣＩＳ）とは、脱髄またはその他の単相性のＣＮＳ炎症性障害（例えば、脊髄症候群、脳幹／小脳症候群、および後述するその他の症候群）の単一の臨床エピソードの検出を指す。
【００３９】
Ｆｒｏｈｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．  ２００３  Ｓｅｐ
９；  ６１（５）：６０２−１１では、ＣＩＳを有する対象において、Ｔ２加重ＭＲＩスキャンにおける三つ以上の白質病変（特にこれらの病変の一つが室周領域に位置する場合）が以後７〜１０年以内のＣＤＭＳの後発の極めて高感度な予測子（＞８０％）であることが報告されている。ベースラインにおける二つ以上のガドリニウム（Ｇｄ）増強病変の存在、並びに追跡調査スキャンにおける新しいＴ２病変または新しいＧｄ増強の何れかの出現も又、短期内のＣＤＭＳの後発を高度に予測するものである。Ｄａｌｔｏｎ  ｅｔ
ａｌ．（２００４）Ｂｒａｉｎ  １２７  （Ｐｔ  ５）：１１０１−７では、灰白質の比容量（ＧＭＦ；頭部全容量の割合）の平均減少がＭＳに進行する可能性が高いＣＩＳ対象の指標となることが報告されている。
【００４０】
本明細書に記載されるＶＬＡ−４遮断薬は、例えば後発エピソードの開始を遅延する上で有効な量で、例えば少なくとも１年、２年、３年以上、ＣＩＳを有する対象に投与することができる。この薬剤は、Ｔ２加重ＭＲＩスキャンにおいて白質病変の少なくとも一つ、二つまたは三つをも有しており、その一つ以上が室周領域に位置する場合があるＣＩＳ対象に投与することができる。該方法はさらに、ＭＲＩ検出可能な病変の数または灰白質比容量の変化を決定するために、例えばＭＲＩスキャンによって、対象を周期的に評価することを包含してもよい。
【００４１】
本明細書に記載されるＶＬＡ−４遮断薬は又、単相性のＣＮＳ炎症性障害、例えば横断脊髄炎、視神経炎または急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）を有する対象に治療有効量で投与することもできる。
【００４２】
（脊髄症候群）
脊髄症候群を有する対象は、脱髄事象と合致する脊髄ＭＲＩを有し、脊髄症の症状、例えば以下、即ち、（ａ）ブラウンセカール症候群；（ｂ）下腿および／または上腕不全麻痺または麻痺（片側性または両側性）；（ｃ）尿失禁または貯留；（ｄ）便失禁または貯留；（ｅ）発作性失調症；（ｆ）レールミット現象の一つ以上を有する。
【００４３】
（脳幹／小脳症候群）
脳幹／小脳症候群を有する対象は、熟練した神経内科医により判定される対象の症状と合致した神経学的検査の異常を有する。症状には以下、即ち、（ａ）眩暈、（ｂ）三叉神経痛、（ｃ）核間眼筋不全麻痺（麻痺）、（ｄ）眼振、（ｅ）動揺視および二重視、（ｆ）共同または非共同注視麻痺（不全麻痺）、（ｇ）交差運動症候群、（ｈ）交差感覚症候群、（ｉ）片側顔面痙攣、（ｊ）運動失調、（ｋ）振せん、（ｌ）構語障害の少なくとも二つが包含される。
【００４４】
（横断脊髄炎／部分脊髄炎）
横断脊髄炎は、脊髄の一つの高さまたは分節において両側に渡る炎症により生じる神経学的障害である。炎症の攻撃により、ミエリンが損傷または破壊され、脊髄と身体残余部分との神経の間の連絡が遮断され得る。横断脊髄炎の症状には、数時間から数週間にわたる脊髄機能の喪失が包含される。下背部痛、筋肉虚弱または踵および足の異常な衝撃の突然の発生として開始したものが、急速に進行してより重度の症状、例えば麻痺、尿貯留および腸制御喪失に至り得る。患者によっては横断脊髄炎から回復でき、残った問題は僅かまたは皆無であった者もいるが、日常生活の通常の作業を行う能力に影響する永久的な障害を有する者もいる。大部分の患者は、横断脊髄炎のエピソードを一つしか有さない。再発する百分率は低いかもしれない。
【００４５】
横断脊髄炎の急性の急速に進行する形態は、時として多発性硬化症（ＭＳ）の初回発作のシグナルとなるが；研究では、横断脊髄炎を発症した者の大部分がＭＳを発症するに至らないことが示されている。にもかかわらず、この診断を有する患者は異なる治療を必要とする場合があるため、横断脊髄炎を有する患者は、ＭＳのスクリーニングを行うことができる。部分的脊髄炎は、より一般的にＭＳを予測することができる。
【００４６】
（視神経炎）
視神経炎は眼の網膜に作用する視神経（第２脳神経）の脱髄を伴った炎症である。これは以下の症状（即ち、かすみ眼、視力の喪失、一部または全ての色覚の喪失、完全または部分的な盲目、および眼後方の疼痛）の何れか一つ以上と共に生じる場合がある。発現は症例の７０％で片側性（一方の眼）である。視神経炎は、ＭＳ患者の約２０％においてＭＳの初期の顕在化（初回発作）となる。視神経炎の診断試験には、視覚的誘発電位（ＶＥＰ）および視覚的誘発反応（ＶＥＲ）試験が包含され、これらの試験では視神経に沿った神経伝達の速度を検出することができる。
【００４７】
視神経炎を有する患者は、以下（即ち、（ａ）片側性（両側性とは対照的）の視神経炎；（ｂ）通常は疼痛を伴った突然の視覚の喪失歴；（ｃ）視神経機能不全の証拠（例えば相対的急進的瞳孔作用（ＲＡＰＤ）および罹患眼における視野欠損の存在）；（ｄ）罹患眼の正常または腫大した（蒼白ではない）視神経円板；（ｅ）痕跡量未満の黄斑浸出物、虹彩またはガラス体細胞；（ｆ）視覚症状を説明する試験におけるその他何れかの所見の非存在）の一つ以上（好ましくは全て）の存在により同定することができる。
【００４８】
（急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ））
ＡＤＥＭは、ウィルス性の症候群またはワクチン接種が一般的に先行するＣＮＳの単相性の脱髄障害である。ミエリン喪失と軸索の相対的枯渇を伴う場合がある。細静脈周囲のリンパ球および単核細胞の浸潤および脱髄が観察される場合が多い。
【００４９】
（ＭＳの危険性）
多発性硬化症の病因は複雑である。一つ以上の因子が多発性硬化症の危険性に寄与する場合があり、そのような因子には当業者により現在知られているもの、および当業者により統計学的に有意な影響であると今後判定されるものが包含されるる。
【００５０】
臨床孤立症候群または単相性炎症障害の顕在化は、対象が多発性硬化症の危険性にあることを示すことができる一つの事象である。危険因子のその他の例には、地理的位置、環境因子、および遺伝子の多型が包含されてもよい。環境因子には、医薬品およびワクチンへの以前の曝露が包含されてもよい。例えば、Ｈｅｒｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００４，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６３：８３８−４２）では、Ｂ型肝炎に関するワクチン接種が多発性硬化症の危険性に寄与し得ると報告されている。
【００５１】
遺伝子的な因子も又、多発性硬化症の危険性に寄与する可能性があり、家族集積性が広く報告されている。多発性硬化症の危険性は又、遺伝子的な家族のメンバーが多発性硬化症を有する場合に、一般的集団と比べて約２〜４０倍増大する。例えば、一卵性双生児には２０倍増の危険性が当てはまる場合がある。
【００５２】
ＭＳ１、主要組織適合性複合体。染色体６の短腕上の主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）内のＨＬＡ−ＤＲ２ハプロタイプ（ＤＲＢ１＊１５０１  ＤＱＢ１＊０６０２）は、ＭＳで同定される最強の遺伝子的作用であり、家族および症例対照研究において連鎖および関連の両方が一貫して明らかにされている（Ｏｌｅｒｕｐ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｔｉｓｓｕｅ  Ａｎｔｉｇｅｎｓ  ３８：１−１５）。加えて、ＭＳは又、特定のヒト白血球抗原（ＨＬＡ）のハプロタイプ、特にＤＲ２、ＤＲ（１＊１５０１）、ＤＱ（１＊６０２）、ＤＱＡ１０２およびＤＷ２ハプロタイプと関連付けられている。ゲノムスクリーンは、この領域への連鎖を一部裏付けており、四つ全てのゲノムスクリーンのメタ分析では、ＭＨＣに次ぐ第２の最も有意な領域として１９ｑ１３が同定されている（Ｂａｒｃｅｌｌｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）ＪＡＭＡ  ２７８：１２５６−１２７１；およびＰｅｒｉｃａｋ−Ｖａｎｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｔｉｃｓ３：１９５−２０１）。
【００５３】
Ｂｉｌｉｎｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．では、ＣＴＬＡ−４遺伝子の第１エクソンにおける特定のＳＮＰがＭＳに関連していると報告されている（Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｓｃａｎｄ．  ２００４  Ｊｕｌ；  １１０（１）：６７−７１）。多発性硬化症の危険性をモジュレートできるその他の遺伝子座には、ＡｐｏＥをコード化する遺伝子が包含される。例えば、Ｓｃｈｍｉｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．  Ｊ．  Ｈｕｍ．  Ｇｅｎｅｔ．  （２００２）７０：７０８−７１７を参照のこと。
【００５４】
地理的および環境因子も又、多発性硬化症の危険性に寄与する場合がある。例えばＳｃｈｉｆｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（（２００１）Ａｒｃｈ  Ｅｎｖｉｒｏｎ  Ｈｅａｌｔｈ．
５６（５）：３８９−９５）では、亜鉛精錬所に起因する顕著な環境重金属曝露の場所である北部中央のイリノイ小地区における多発性硬化症（ＭＳ）症例の集団が報告されている。Ｐｕｇｌｉａｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．  （２００２）５８（２）：２７７−８２）では、サルジニアにおける多発性硬化症の不均一な分布が発見されている。
【００５５】
（代表的な危険因子の検出）
脳脊髄液検査をＭＳ危険性の検出に使用することができる。例えば、一つの因子は、例えばベースラインまたはマッチした正常個体との相対比較における上昇した水準のＣＳＦ
ＩｇＧにより、またはＣＳＦ  ＩｇＧのＣＳＦアルブミンに対する上昇した比率により示される。例えば、Ｐｅｒｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８３）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｓｃｉ．  ６０（３）：３２５−３６を参照のこと。例えば、異常な比率は、０．７以上のＩｇＧ指数により示すことができる。免疫固定電気泳動による異なるＩｇＧオリゴクローンバンドの存在も又、ＭＳの危険の指標となり得る。
【００５６】
ＭＯＧおよびＭＢＰに対する抗体は、これらのタンパク質の組み換え型に対象の血清を接触させることにより検出することができる。ヒト組み換えＭＯＧ  Ｉｇドメインおよびヒトミエリン由来ＭＢＰは、例えばＲｅｉｎｄｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｂｒａｉｎ
１２２：２０４７−２０５６に従って調製することができる。例えば、１ｍｇの組み換えＭＯＧ−Ｉｇまたは２ｍｇのＭＢＰは、ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル上で電気泳動に付し、ニトロセルロースまたはニトランメンブレンに移され得る。次に、メンブレンを０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０添加リン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）（ＰＢＳ−Ｔ）中２％粉乳で遮断し得る。その後、メンブレンを対象由来の希釈血清（ＰＢＳ−Ｔ中２％粉乳で、ＩｇＧの場合１：１０００、ＩｇＭまたはＩｇＡの場合１：２００）に接触させる。次いで、メンブレンを洗浄し、室温で１時間、二次抗体、例えばアルカリホスファターゼコンジュゲート抗ヒトＩｇＧ、ＩｇＭまたはＩｇＡ（例えば、全て１：５０００；Ｇ６９０７、Ｇ５２０４またはＧ５４１５；全てＡｘｅｌｌ［米国、ウエストベリー］）を使用して評価する。洗浄後、二次抗体を適切なアルカリホスファターゼ検出系（例えば、ｐ−ニトロブルーテトラゾリウムクロリドおよび５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリルホスフェート（共にＲｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ［ドイツ、マンハイム］））を使用して検出し得る。二次抗体をその他の検出剤に結合する場合は、それに応じてプロトコルを変更できる。例えば、Ｓｏｄｅｒｓｔｒｏｍ  ｅｔ
ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  （１９９８）５０：７０８−１４を参照のこと。
【００５７】
視覚的誘発電位試験も又、ＭＳの危険因子を同定するために使用できる。例えば、Ｃｕｙｐｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｄｏｃ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  ９０（３）：２４７−５７を参照のこと。
【００５８】
（ＶＬＡ−４結合抗体）
α４インテグリン結合抗体であるナタリズマブは、血液から中枢神経系への白血球の遊走を抑制する。ナタリズマブは、活性化Ｔ細胞およびその他の単核白血球の表面上においてＶＬＡ−４に結合する。これはＴ細胞と内皮細胞の間の接着を妨害し得、これにより単核白血球が内皮を通過して実質にまで遊走することを防止し得る。その結果、前炎症サイトカインの濃度も低減できる。
【００５９】
ナタリズマブは、再発性弛張性多発性硬化症および再発性の二次的進行性の多発性硬化症を有する患者において、脳の病変および臨床再発の数を低減できる。ナタリズマブは、インターフェロンβ−１ａ（ＩＦＮβ−１ａ）療法と組み合わせた場合に多発性硬化症の患者に安全に投与できる。その他のＶＬＡ−４結合抗体は、これらまたは同様の特性を有してもよい。
【００６０】
ナタリズマブおよび関連するＶＬＡ−４結合抗体は、例えば米国特許５，８４０，２９９に記載されている。モノクローナル抗体２１．６およびＨＰ１／２は、ＶＬＡ−４を結合する代表的なネズミモノクローナル抗体である。ナタリズマブは、ネズミｍＡｂ  ２１．６のヒト化型である（例えば、米国特許５，８４０，２９９を参照）。ＨＰ１／２のヒト化型も又記載されている（例えば、米国特許６，６０２，５０３を参照）。数種の追加のＶＬＡ−４結合モノクローナル抗体、例えばＨＰ２／１、ＨＰ２／４、Ｌ２５およびＰ４Ｃ２も記載されている（例えば、米国特許６，６０２，５０３；Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｍａｄｒｉｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６：１３４３−１３４９；Ｈｅｍｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．
２：１１４７８−１１４８５；Ｉｓｓｅｋｕｔｚ  ａｎｄ  Ｗｙｋｒｅｔｏｗｉｃｚ，１９９１，Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：１０９  （ＴＡ−２  ｍａｂ）；Ｐｕｌｉｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，２６６（１６）：１０２４１−１０２４５；および米国特許５，８８８，５０７）。
【００６１】
一部のＶＬＡ−４結合抗体は、同属体リガンド、例えばＶＣＡＭ−１またはフィブロネクチンへの結合に関与するα４サブユニットのエピトープを認識する。多くのこのような抗体が、同属体リガンドとの結合（例えば、ＶＣＡＭ−１およびフィブロネクチンの結合）を抑制する。
【００６２】
多くの有用なＶＬＡ−４結合抗体が、細胞、例えばリンパ球上のＶＬＡ−４と相互作用するが、細胞凝集は起こさない。しかしながら、その他の抗ＶＬＡ−４結合抗体は、このような凝集を起こすことが観察されている。ＨＰ１／２は、細胞凝集を起こさない。ＨＰ１／２  ＭＡｂ（Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｍａｄｒｉｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６）は、非常に高い効力を有し、ＶＣＡＭ−１およびフィブロネクチンの両方とのＶＬＡ−４の相互作用を遮断し、ＶＬＡ−４上のエピトープＢに対する特異性を有する。この抗体およびその他のＢエピトープ特異的抗体（例えばＢ１またはＢ２エピトープ結合抗体；Ｐｕｌｉｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，前掲）は、有用なＶＬＡ−４結合抗体の一つのクラスとなっている。
【００６３】
代表的なＶＬＡ−４結合抗体は、一つ以上のＣＤＲ、例えば本明細書に記載される特定の抗体の全３種のＨＣ  ＣＤＲおよび／または全３種のＬＣ  ＣＤＲ、またはこのような抗体、例えばナタリズマブと合計で少なくとも８０、８５、９０、９２、９４、９５、９６、９７、９８、９９％同一であるＣＤＲを有する。一実施形態において、Ｈ１およびＨ２超可変ループは、本明細書に記載される抗体のものと同様の極限構造を有する。一実施形態において、Ｌ１およびＬ２超可変ループは、本明細書に記載される抗体のものと同様の極限構造を有する。
【００６４】
一実施形態において、ＨＣおよび／またはＬＣ可変ドメイン配列のアミノ酸配列は、本明細書に記載される抗体、例えばナタリズマブのＨＣおよび／またはＬＣ可変ドメインのアミノ酸配列と少なくとも７０、８０、８５、９０、９２、９５、９７、９８、９９または１００％同一である。ＨＣおよび／またはＬＣ可変ドメイン配列のアミノ酸配列は、少なくとも一つのアミノ酸、但し１０、８、６、５、４、３または２を超えないアミノ酸の分だけ、例えばナタリズマブのような本明細書に記載される抗体の相当する配列とは異なることができる。例えば、差は主にまたは全体的にフレームワーク領域にある場合がある。
【００６５】
ＨＣおよびＬＣ可変ドメイン配列のアミノ酸配列は、本明細書に記載される核酸配列若しくは可変ドメインをコード化するものと、または本明細書に記載されるアミノ酸配列をコード化する核酸と、高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする配列によりコード化されてもよい。一実施形態において、ＨＣおよび／またはＬＣ可変ドメインの一つ以上のフレームワーク領域（例えばＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３および／またはＦＲ４）のアミノ酸配列は、本明細書に記載される抗体のＨＣおよびＬＣ可変ドメインの相当するフレームワーク領域と少なくとも７０、８０、８５、９０、９２、９５、９７、９８、９９または１００％同一である。一実施形態において、一つ以上の重鎖または軽鎖のフレームワーク領域（例えばＨＣ  ＦＲ１、ＦＲ２およびＦＲ３）は、ヒト生殖細胞系統の抗体由来の相当するフレームワーク領域の配列と少なくとも７０、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８または１００％同一である。
【００６６】
二つの配列間の「相同性」または「配列同一性」の計算（該用語は本明細書で交換可能に使用される）は、以下の通り実施する。配列は最適な比較を行うためにアライメントする（例えば、最適にアライメントするために、第１および第２のアミノ酸または核酸配列の一方または両方にギャップを導入し、非相同の配列を比較のために無視することができる）。最適なアライメントは、ギャップペナルティー１２、ギャップエクステンドペナルティー４およびフレームシフトギャップペナルティー５でＢｌｏｓｓｕｍ  ６２スコアリングマトリックスによるＧＣＧソフトウェアパッケージにおけるＧＡＰプログラムを使用し、最高のスコアとして求める。次に、相当するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置におけるアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較する。第１配列における位置が、第２配列の相当する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドで占有されている場合、分子はその位置において同一である（本明細書において、アミノ酸または核酸の「同一性」は、アミノ酸または核酸の「相同性」と等しい）。二つの配列間のパーセント同一性は、配列により共有される同一位置の数の関数である。
【００６７】
本明細書で使用される「高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする」という用語は、ハイブリダイゼーションおよび洗浄の条件を説明している。ハイブリダイゼーション反応を実施する指針は、参考として本明細書に組み込まれるＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８９），６．３．１−６．３．６に見出され得る。水性および非水性の方法は、当該文献に記載されており、何れかを使用できる。高ストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件には、６Ｘ  ＳＳＣ、約４５℃でのハイブリダイゼーションの後、０．２Ｘ  ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、６５℃での一回以上の洗浄、または実質的に同様の条件が含まれる。
【００６８】
抗体は機能的特性、例えばＶＬＡ−４結合に関して、例えば米国特許６，６０２，５０３に記載の通り試験することができる。
【００６９】
（抗体作成）
ＶＬＡ−４に結合する抗体は、例えば動物を使用した免疫化により作成することができる。ＶＬＡ−４の全体または一部を免疫原として使用することができる。例えば、α４サブユニットの細胞外領域を免疫原として使用することができる。一実施形態において、免疫化した動物は、天然、ヒトまたは部分的にヒトの免疫グロブリン遺伝子座を有する免疫グロブリン産生細胞を含有する。一実施形態において、非ヒト動物は、ヒト免疫グロブリン遺伝子の少なくとも一部を包含する。例えば、ヒトＩｇ遺伝子座の大型フラグメントを使用してマウス抗体の生成が欠損しているマウス系統を操作することが可能である。ハイブリドーマ技術を使用することにより、所望の特異性を有する遺伝子由来の抗原特異的モノクローナル抗体が生成され、選択される場合がある。例えば、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅＴＭ、Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ７：１３−２１（１９９４）、ＵＳ２００３−００７０１８５、米国特許５，７８９，６５０およびＷＯ９６／３４０９６を参照のこと。
【００７０】
ＶＬＡ−４に対する非ヒト抗体も又、例えばげっ歯類において生成することができる。非ヒト抗体は、例えば米国特許６，６０２，５０３、ＥＰ２３９４００、米国特許５，６９３，７６１および米国特許６，４０７，２１３に記載の通り、ヒト化することができる。
【００７１】
ＥＰ２３９４００（Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．）には、ある種の相補性決定領域（ＣＤＲ）を他の種のものと（所定の可変領域内で）置換することによる抗体の改変が記載されている。ＣＤＲ置換抗体は、かなり少ない非ヒト成分を含有することから、真のキメラ抗体と比べてヒトにおいて免疫応答を誘発する可能性が低いと予測される（Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６）。一般的に、ネズミ抗体のＣＤＲを、組み換え核酸手法を使用することによりヒト抗体内の相当する領域に置換することで、所望の置換抗体をコード化する配列を生成する。所望のアイソタイプのヒト定常領域遺伝子セグメント（通常は、ＣＨの場合ガンマＩ、並びにＣＬの場合カッパ）を付加することができ、ヒト化された重鎖および軽鎖の遺伝子を哺乳類細胞において同時発現することにより、可溶性ヒト化抗体を生成する。
【００７２】
Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ
８６：１００２９−１００３３  （１９８９）、およびＷＯ９０／０７８６１では、元のネズミ抗体のＶ領域フレームワークに対する最適なタンパク質配列相同性に関するコンピュータ分析によりヒトＶフレームワーク領域を選択すること、並びにネズミＣＤＲと相互作用する可能性があるフレームワークアミノ酸残基を可視化するためにネズミＶ領域の３次構造をモデリングすることを包含するプロセスが記載されている。これらのネズミアミノ酸残基は、次に相同ヒトフレームワーク上に重ね合わされる。米国特許５，６９３，７６２；５，６９３，７６１；５，５８５，０８９；および５，５３０，１０１も参照のこと。Ｔｅｍｐｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：２６６−２７１）では、マウス残基をラジカル導入することなく、ＣＤＲグラフトのためにそれぞれＮＥＷＭおよびＲＥＩの重鎖および軽鎖に由来するＶ領域フレームワークを、標準物質として利用している。ＮＥＷＭおよびＲＥＩに基づくヒト化抗体を構築するためにＴｅｍｐｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ．のアプローチを使用する利点は、ＮＥＷＭおよびＲＥＩの可変領域の３次元構造がエックス線結晶撮影研究から既知であり、そのためＣＤＲとＶ領域フレームワーク残基の間の特異的な相互作用をモデル化できるという点である。
【００７３】
非ヒト抗体は、特定の位置において、例えば以下の位置、即ち（軽鎖の可変ドメインのＦＲにおいては）４Ｌ、３５Ｌ、３６Ｌ、３８Ｌ、４３Ｌ、４４Ｌ、５８Ｌ、４６Ｌ、６２Ｌ、６３Ｌ、６４Ｌ、６５Ｌ、６６Ｌ、６７Ｌ、６８Ｌ、６９Ｌ、７０Ｌ、７１Ｌ、７３Ｌ、８５Ｌ、８７Ｌ、９８Ｌ、および／または（重鎖の可変ドメインのＦＲにおいては）２Ｈ、４Ｈ、２４Ｈ、３６Ｈ、３７Ｈ、３９Ｈ、４３Ｈ、４５Ｈ、４９Ｈ、５８Ｈ、６０Ｈ、６７Ｈ、６８Ｈ、６９Ｈ、７０Ｈ、７３Ｈ、７４Ｈ、７５Ｈ、７８Ｈ、９１Ｈ、９２Ｈ、９３Ｈ、および／または１０３Ｈ（Ｋａｂａｔの番号付けによる）の一つ以上（好ましくは少なくとも５、１０、１２箇所または全て）において、ヒト免疫グロブリン配列、例えばコンセンサスヒトアミノ酸残基を挿入する置換を包含するように改変することができる。例えば、米国特許６，４０７，２１３を参照のこと。
【００７４】
ＶＬＡ−４に結合する完全ヒトモノクローナル抗体は、例えばＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７，８６−９５に記載の通り、インビトロプライミングされたヒト脾細胞を使用して生成することができる。これらの抗体は、Ｐｅｒｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８８：２４３２−２４３６；またはＨｕａｎｇ  ａｎｄ  Ｓｔｏｌｌａｒ，１９９１，Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １４１：２２７−２３６；米国特許５，７９８，２３０に記載の通り、レパートリーのクローン化により調製される場合がある。大型の非免疫化ヒトファージディスプレイライブラリも又、標準的なファージ技術を使用してヒト治療薬として開発することができる高親和性抗体を単離するために使用される場合がある（例えば、Ｖａｕｇｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  ３：３０９−３１４；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ４：１−２０；およびＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｏｄａｙ  ２：３７１−８；ＵＳ２００３−０２３２３３３を参照）。
【００７５】
（抗体の生成）
抗体は、原核生物および真核生物の細胞において生成することができる。一実施形態において、抗体（例えばｓｃＦｖ）は、ピチア（例えば、Ｐｏｗｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２５１：１２３−３５参照）、ＨａｎｓｅｕｌａまたはＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓのようなコウボ細胞中で発現させる。
【００７６】
一実施形態において、抗体、特に完全長抗体、例えばＩｇＧは、哺乳類細胞内で生成される。組み換え発現のための代表的な哺乳類宿主細胞には、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ細胞）（例えばＫａｕｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８２）Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  １５９：６０１−６２１に記載の通り、ＤＨＦＲ選択マーカーと共に使用される、Ｕｒｌａｕｂ  ｅｔ  ａｌ  （１９８０）Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ７７：４２１６−４２２０に記載のｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を包む）、リンパ球細胞系統、例えばＮＳ０ミエローマ細胞およびＳＰ２細胞、ＣＯＳ細胞、Ｋ５６２、並びにトランスジェニック動物由来、例えばトランスジェニック哺乳類由来の細胞が包含される。例えば、細胞は哺乳類上皮細胞である。
【００７７】
免疫グロブリンドメインをコード化する核酸配列に加えて、組み換え発現ベクターは、追加の配列、例えば宿主細胞内のベクターの複製を調節する配列（例えば複製起点）および選択マーカー遺伝子を担持する場合がある。選択マーカー遺伝子は、ベクターが導入されている宿主細胞の選択を容易にする（例えば、米国特許４，３９９，２１６、４，６３４，６６５および５，１７９，０１７を参照）。代表的な選択マーカー遺伝子には、ジヒドロフォレート還元酵素（ＤＨＦＲ）遺伝子（メトトレキセート選択／増幅と共にｄｈｆｒ−宿主細胞において使用）およびｎｅｏ遺伝子（Ｇ４１８選択のため）が包含される。
【００７８】
抗体（例えば、完全長抗体またはその抗原結合部分）の組み換え発現のための代表的な系において、抗体重鎖および抗体軽鎖の両方をコード化する組み換え発現ベクターは、リン酸カルシウム媒介トランスフェクションによりｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞に導入する。組み換え発現ベクター内において、抗体重鎖および軽鎖の遺伝子は、それぞれエンハンサー／プロモーター調節エレメント（例えば、ＳＶ４０、ＣＭＶ、アデノウィルス等に由来、例えばＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメント、またはＳＶ４０エンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメント）に作動可能に連結することにより、遺伝子の高水準転写を駆動する。組み換え発現ベクターは又、ＤＨＦＲ遺伝子を担持し、この遺伝子がメトトレキセート選択／増幅を使用した、ベクターでトランスフェクトされているＣＨＯ細胞の選択を可能にする。選択された形質転換体宿主細胞を培養することで、抗体重鎖および軽鎖の発現が可能となり、未損傷の抗体を培養培地から回収する。組み換え発現ベクターを調製し、宿主細胞をトランスフェクトし、形質転換体を選択し、宿主細胞を培養し、培養培地から抗体を回収するには、標準的な分子生物学の技法を使用する。例えば、抗体によっては、プロテインＡまたはプロテインＧを使用したアフィニティークロマトグラフィーにより単離することができる。米国特許６，６０２，５０３にも又、ＶＬＡ−４結合抗体を発現して精製するための方法例が記載されている。
【００７９】
抗体は又、例えばＦｃ受容体若しくはＣ１ｑまたはその両方との相互作用を低減または排除するために、改変、例えばＦｃ機能を改変する改変を含む場合がある。例えば、ヒトＩｇＧ１定常領域を一つ以上の残基、例えば残基２３４および２３７の一つ以上において、例えば米国特許５，６４８，２６０における番号付けに従い、突然変異させることができる。その他の代表的な改変には、米国特許５，６４８，２６０に記載される改変が包含される。
【００８０】
Ｆｃドメインを含む一部の抗体の場合、抗体生成系は、Ｆｃ領域がグリコシル化される抗体を合成するように設計される場合がある。例えば、ＩｇＧ分子のＦｃドメインが、ＣＨ２ドメインのアスパラギン２９７においてグリコシル化される。このアスパラギンは、２触角型オリゴ糖による修飾のための部位である。このグリコシル化は、Ｆｃγ受容体および補体Ｃｌｑにより媒介されるエフェクター機能に関与している（Ｂｕｒｔｏｎ  ａｎｄ  Ｗｏｏｆ  （１９９２）Ａｄｖ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ５１：１−８４；Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｒｅｖ．  １６３：５９−７６）。Ｆｃドメインは、アスパラギン２９７に相当する残基を適切にグリコシル化する哺乳類発現系において生成することができる。Ｆｃドメインは又、その他の真核生物翻訳後修飾を含んでもよい。
【００８１】
抗体は又、トランスジェニック動物により生成することもできる。例えば、米国特許５，８４９，９９２には、トランスジェニック哺乳類の乳腺において抗体を発現するための方法が記載されている。乳汁特異的プロモーター、および対象となる抗体をコード化する核酸、および分泌のためのシグナル配列を含む導入遺伝子を構築する。そのようなトランスジェニック哺乳類のメスにより生成される乳汁は、そこに分泌された状態で対象となる抗体を含む。抗体は乳汁から精製するか、または用途によっては直接使用することができる。
【００８２】
抗体は、例えば血液、血清、リンパ、気管支肺胞洗浄液、またはその他の組織のような循環系において、その安定化および／または滞留を、例えば少なくとも１．５、２、５、１０または５０倍向上させる部分を使用して改変することができる。
【００８３】
例えば、ＶＬＡ−４結合抗体は、重合体、例えば実質的に非抗原性の重合体、例えばポリアルキレンオキシドまたはポリエチレンオキシドと会合させることができる。適切な重合体は、実質的には重量により異なる。約２００〜約３５，０００（または約１，０００〜約１５，０００および２，０００〜約１２，５００）の範囲の数平均分子量を有する重合体を使用できる。
【００８４】
例えば、ＶＬＡ−４結合抗体は、水溶性重合体、例えば、親水性のポリビニル重合体、例えば、ポリビニルアルコールおよびポリビニルピロリドンに結合することができる。このような重合体の非限定的な例には、ポルアルキレンオキシドホモポリマー、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレン化ポリオール、その共重合体およびそのブロック共重合体が包含されるが、但し、ブロック共重合体の水溶性は維持されていなければならない。別の有用な重合体には、ポリオキシアルキレン、例えばポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、およびポリオキシエチレンとポリオキシプロピレンのブロック共重合体（Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ）；ポリメタクリレート；カルボマー；糖類の単量体であるＤ−マンノース、Ｄ−およびＬ−ガラクトース、フコース、フラクトース、Ｄ−キシロース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−グルクロン酸、シアル酸、Ｄ−ガラクツロン酸、Ｄ−マンヌロン酸（例えば、ポリマンヌロン酸またはアルギン酸）、Ｄ−グルコサミン、Ｄ−ガラクトサミン、Ｄ−グルコースおよびノイラミン酸を含む分枝鎖または未分枝鎖の多糖類、例えばホモ多糖類およびヘテロ多糖類、例えば乳糖、アミロペクチン、澱粉、ヒドロキシエチル澱粉、アミロース、デキストランスルフェート、デキストラン、デキストリン、グリコーゲン、または酸性ムコ多糖類の多糖類サブユニット、例えばヒアルロン酸；糖アルコールの重合体、例えばポリソルビトールおよびポリマンニトール；ヘパリンまたはヘパロンが包含される。
【００８５】
（医薬組成物）
ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体（例えばナタリズマブ）は、医薬組成物として製剤できる。一般的に、医薬組成物には、薬学的に許容可能な担体が含まれる。本明細書で使用される「薬学的に許容可能な担体」には、生理学的に適合する如何なる全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗細菌および抗カビ剤、等張性付与および吸収遅延剤等も包含される。
【００８６】
「薬学的に許容可能な塩」とは親化合物の所望の生物学的活性を保持しており、そして如何なる望ましくない毒性学的作用も付与しない塩を指す（例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．  ６６：１−１９を参照）。そのような塩の例には、酸付加塩および塩基付加塩が包含される。酸付加塩には、非毒性の無機酸、例えば塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、臭化ヨウ素酸、亜リン酸等、並びに、非毒性の有機酸、例えば脂肪族モノおよびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族のスルホン酸等から誘導したものが包含される。塩基付加塩には、アルカリ土類金属、例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等から、並びに、非毒性の有機アミン、例えばＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカイン等から誘導したものが包含される。
【００８７】
ナタリズマブおよび本明細書に記載されるその他の薬剤は標準的な方法に従って製剤できる。医薬品製剤は十分確立された技術であり、さらに、Ｇｅｎｎａｒｏ  （ｅｄ．），Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  （２０００）（ＩＳＢＮ：０６８３３０６４７２）；Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ  Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  （１９９９）（ＩＳＢＮ：０６８３３０５７２７）；およびＫｉｂｂｅ  （ｅｄ．），Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，３ｒｄ  ｅｄ．  （２０００）（ＩＳＢＮ：０９１７３３０９６Ｘ）に記載されている。
【００８８】
一実施形態において、ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体、例えばナタリズマブは、賦形剤材料、例えば塩化ナトリウム、２塩基性リン酸ナトリウム７水和物、１塩基性リン酸ナトリウムおよびポリソルベート８０と共に製剤できる。例えば約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で緩衝液中で提供され、２〜８℃で保存できる。ナタリズマブ（ＴＹＳＡＢＲＩ（登録商標））は製造元のラベルに記載されている通り製剤できる。
【００８９】
医薬組成物は又、種々の他の形態であってよい。これらには例えば液体、半固体および固体の剤型、例えば液状の溶液（例えば注射用および注入用の溶液）、分散液または懸濁液、錠剤、丸薬、粉末、リポソームおよび坐剤が包含される。好ましい形態は意図される投与様式および治療用途に依存し得る。一般的に本明細書に記載される薬剤の組成物は注射用および注入用の溶液の形態である。
【００９０】
このような組成物は非経腸の様式（例えば静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内注射）により投与することができる。本明細書で使用される「非経腸投与」および「非経腸で投与される」という表現は、経腸および局所投与以外の、通常は注射による投与の様式を意味し、例えば、静脈内、筋肉内、動脈内、クモ膜下腔内、被膜内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、クモ膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨下の注射および注入が包含されるが、これらに限定されない。
【００９１】
医薬組成物は一般的に滅菌され製造および保存の条件下で安定でなければならない。医薬組成物は又投与に関する規制および産業上の基準に合致することを確認するために試験することができる。
【００９２】
組成物は溶液、マイクロエマルジョン、分散液、リポソームまたは高い薬剤濃度に適する他の秩序のある構造として製剤できる。滅菌注射溶液は必要に応じて上記列挙した成分の一つまたは組み合わせと共に適切な溶媒中に必要量の活性化合物を配合することにより製造でき、続いて濾過滅菌できる。一般的に、分散液は基剤となる分散媒体および上記列挙したもののうちの必要な他の成分を含有する滅菌されたベヒクル内に活性化合物を配合することにより製造する。滅菌注射溶液の製造のための滅菌粉末の場合は、製造の好ましい方法は、活性成分＋何れかの追加の所望の成分の粉末をその予め滅菌濾過された溶液から形成する真空乾燥および凍結乾燥である。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティングの使用により、分散液の場合は必要な粒径の維持により、そして、界面活性剤の使用により、維持することができる。注射用組成物の延長された吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えばモノステアレート塩およびゼラチンを組成物中に含有させることにより可能である。
【００９３】
（投与）
ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体、例えばナタリズマブは対象、例えばヒト対象に対し種々の方法で投与できる。多くの用途のためには、投与経路は静脈内注射または注入、皮下注射、または、筋肉内注射のうちの一つである。ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体、例えばナタリズマブは固定用量で、または、ｍｇ／ｋｇ用量で、但し、好ましくは固定用量で投与できる。抗体は静脈内（ＩＶ）または皮下（ＳＣ）で投与できる。
【００９４】
ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体、例えばナタリズマブは５０〜１０００ｍｇＩＶ、例えば１００〜６００ｍｇＩＶ、例えば約３００ｍｇＩＶの固定単位用量で投与できる。単位用量は４週ごとに、またはより低頻度または高頻度で、例えば２週ごとまたは毎週、投与できる。皮下投与する場合は、抗体は一般的に５０〜１００ｍｇＳＣ（例えば７５ｍｇ）の用量で、例えば少なくとも週一回（例えば週二回）投与する。瞬時注射により、１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量、例えば約６．０、４．０、３．０、２．０、１．０ｍｇ／ｋｇで投与することもできる。一部の場合においては、例えば皮下ポンプを介した連続投与が示されてよい。
【００９５】
用量は又、ＶＬＡ−４結合抗体に対する抗体の生産を低減または回避するか、α４サブユニットの４０、５０、７０、７５または８０％超の飽和を達成するか、α４サブユニットの８０、７０、６０、５０または４０％未満の飽和を達成するか、または、循環白血球濃度上昇を防止するように選択することもできる。
【００９６】
さらに又、臨床的に明確な多発性硬化症を有さない対象は、臨床的に明確な多発性硬化症を有する対象と相対比較して、低減された用量のＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体、例えばナタリズマブを投与されてよい。例えば、多発性硬化症の危険性を有するが臨床的に明確な多発性硬化症を有さない対象は、ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体、例えばナタリズマブを、固定単位用量として、２０〜３００ｍｇＩＶ、例えば２０〜１５０ｍｇＩＶ（例えば４週ごと）、または２０〜７０または２０〜４０ｍｇＳＣ（例えば約３５ｍｇ）を例えば少なくとも週一回、投与を受けることができる。
【００９７】
特定の実施形態において、活性薬剤は急速な放出に対して化合物を保護する担体を使用して製造してよく、例えば制御放出製剤、例えば、インプラント、ポンプおよびマイクロカプセル化された送達系が挙げられる。生体分解性、生体適合性の重合体、例えばエチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸を使用できる。このような製剤の製造のための多くの方法が特許付与されているか一般的に知られている。例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ
Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｊ．  Ｒ．  Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９７８を参照のこと。
【００９８】
医薬組成物は医療デバイスを使用して投与することができる。例えば医薬組成物はニードルレスの皮下注射デバイス、例えば米国特許５，３９９，１６３、５，３８３，８５１、５，３１２，３３５、５，０６４，４１３、４，９４１，８８０、４，７９０，８２４および４，５９６，５５６に開示されているデバイスを使用して投与できる。よく知られたインプラントおよびモジュールの例には、制御された速度で医薬を与えるためのインプラント処置可能なマイクロ注入ポンプを開示している米国特許４，４８７，６０３；皮膚を通過して医薬を投与するための治療用デバイスを開示している米国特許４，４８６，１９４；厳密な注入速度で医薬を送達するための医薬注入ポンプを開示している米国特許４，４４７，２３３；連続薬物送達のための可変流動インプラント処置用注入器具を開示している米国特許４，４４７，２２４；多重チャンバーコンパートメントを有する浸透圧式薬物送達系を開示している米国特許４，４３９，１９６；および浸透圧式薬物送達系を開示している米国特許４，４７５，１９６が包含される。当然ながら多くの他のこのようなインプラント、送達系およびモジュールも知られている。
【００９９】
用法用量は所望の応答、例えば治療応答または治療作用の組み合わせが得られるように調節できる。投薬単位剤型または「固定用量」は、本明細書において使用される場合は、治療すべき対象に対する単位用量として適する物理的に個別の単位を指し；各単位は必要な薬品用担体と共に、そして場合により他剤と共に、所望の治療作用をもたらすように計算された所定量の活性化合物を含有する。
【０１００】
医薬組成物は本明細書に記載される薬剤の「治療有効量」を含んでよい。薬剤の治療有効量は個体の疾患の状態、年齢、性別および体重、および、個体において所望の応答、例えば危険因子の調節、神経学的欠損の臨床エピソードの開始の遅延または重症度の減衰、少なくとも一つの障害パラメータ、例えば多発性硬化症パラメータの低減、または、少なくとも一つの障害症状、例えば多発性硬化症の緩和を誘発する化合物の能力のような要因に応じて変動してよい。治療有効量は又、組成物の如何なる毒性または有害な作用も、治療上有益な作用により打ち消されるものである。
【０１０１】
（組合せ療法）
特定の実施形態において、対象、例えば本明細書に記載される多発性硬化症の危険性を有する対象には、ＶＬＡ−４遮断薬、例えばＶＬＡ−４結合抗体、例えばナタリズマブと組み合わせて、第２の薬剤を投与することができる。ＶＬＡ−４遮断薬と共に投与できる多発性硬化症を治療または予防するための薬剤の非限定的な例には、「Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ」との発明の名称の同時係属中の２００４年８月２０日出願のＵ．Ｓ．Ｓ．Ｎ．６０／６０３，４６８、代理人事件番号１０２８７−０８７Ｐ０１／Ｐ０６０８に記載されている薬剤が包含される。
【０１０２】
本明細書に包含される全ての特許出願、特許、参考文献および出版物は、参考として本明細書に組み込まれている。
【０１０３】
その他の実施形態は、以下の請求項の範囲内に包含される。
【外国語明細書】
2013060469000001.pdf