(57)【要約】【課題】合成が容易で、抗菌性に優れ、安価に大量合成が可能な人工的な抗菌剤を提供する【解決手段】下記一般式で示されるシクロデキストリン誘導体又はその塩（ただし、R1はアルキレン基を示し、R2は分岐してもよいアシル基を示す）。2013177477.tif 000017【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式で示されるシクロデキストリン誘導体又はその塩（ただし、R1はアルキレン基を示し、R2は分岐してもよいアシル基を示す）。
【化１】
2013177477.tif 000015
【請求項２】
R1はメチレン基であることを特徴とする請求項１記載のシクロデキストリン誘導体又はその塩。
【請求項３】
R2は炭素数が４以下の分岐してもよいアシル基であることを特徴とする請求項１又は２に記載のシクロデキストリン誘導体又はその塩。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれか1項に記載のシクロデキストリン誘導体及び／又はその塩を有効成分として含有する抗菌剤。
【請求項５】
下記一般式に示されるシクロデキストリン誘導体又はその塩（ただし、R3はアルキレン基を示す）。
【化２】
2013177477.tif 000016
【請求項６】
R3はメチレン基であることを特徴とする請求項５記載のシクロデキストリン誘導体又はその塩。
【請求項７】
請求項５又は６に記載のシクロデキストリン誘導体及び／又はその塩を有効成分として含有する抗菌活性増強剤。
【請求項８】
抗菌剤と、請求項５又は６に記載のシクロデキストリン誘導体及び／又はその塩と、を有効成分として含有する活性化抗菌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シクロデキストリン誘導体並びにそれを用いた抗菌剤及びそれを用いた抗菌活性増強剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペニシリンの発見以来、様々な抗生物質や合成抗菌薬が開発され、感染症治療のために使用されてきた。しかし、メシチリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）に代表される既存の抗菌薬に対して耐性を持つ多剤耐性菌が深刻なまでに増加し、新たな抗菌薬の発展が渇望されている。
【０００３】
一般に薬剤耐性が起こりにくい抗菌性物質として、ポリミキシンBなどの膜作動型機構により抗菌性を示す物質が存在する。しかし、これらは複雑な構造を有する天然物であり、単離したり、人工合成したりすることは困難である。このため、人工的な抗菌性物質を合成することも行われており、特異な化学構造を有するシクロデキストリンを化学修飾して抗菌剤として用いたり（例えば特許文献１、２）、抗生物質の増強剤として用いたり（例えば特許文献３）することが行われている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】WO2006-075580
【特許文献１】WO2006-083678
【特許文献１】WO2009-058327
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
抗菌作用のメカニズムが詳細には解明されていないことが多く、人工的な抗菌性物質を合成しようとしても、どのような化学構造としたらよいのかが分からないという問題がある。また、たとえ人工的な抗菌性物質を見出したとしても、複雑な合成プロセスが必要であって技術的な困難性を有するのでは、製造コストが高騰化するという問題がある。さらには、ペプチドからなる抗菌剤ではアミノ酸配列を変化させることで二次構造も変化してしまう可能性が高く、その場合、細菌の細胞膜との相互作用に影響を生じ、抗菌性を消失すると考えられる。こうした人工的な抗菌性物質の合成の困難性から、抗菌剤は天然物から得られた抗菌物質と類似の化合物を合成し、その抗菌活性を調べることが主流とされていた。
【０００６】
本発明は、上記従来の実情に鑑みてなされたものであって、合成が容易で、抗菌性に優れ、安価に大量合成が可能な人工的な抗菌剤を提供することを解決すべき課題としている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、シクロデキストリンの特異的な化学構造に着目し、これが新たな抗菌物質に利用できるのではないかと考え、次のような分子設計を考えた。
シクロデキストリンはブドウ糖の連なった約１ナノメータの直径を持つオリゴ糖である。ブドウ糖の数が８個のものは、γシクロデキストリン[1]と呼ばれている（下記化１参照）。シクロデキストリンは穴のあいた円錐台構造をしており、ブドウ糖の６位に存在する第一級水酸基は狭い開口部に、２位と３位に存在する第二級水酸基は広い開口部に配向している。２位の水酸基が隣接するブドウ糖の３位の水酸基と水素結合しているため、剛直な円筒形が保持されている。また、上記それぞれの水酸基は反応性に違いがあり、選択的に化学修飾をすることが可能である。すなわちシクロデキストリンを基盤分子として用いる最大の利点は、第一級水酸基側と第二級水酸基側のそれぞれに別の官能基を導入することによって目的構造を容易に構築できることにある。
【０００８】
【化１】
2013177477.tif 000002
【０００９】
グラム陰性菌に抗菌性を示すペプチドであるポリミキシンＢの構造を化２に示す。これは天然に存在する環状ペプチドである。ポリミキシンＢは、グラム陰性菌の外膜中のリポ多糖と結合して膜構造を破壊する。さらに細胞質膜をも傷害して抗菌性を示す。それを可能にする要因である構造的な特徴として、陽イオン性アミノ基と疎水性基をそれぞれ複数有することが挙げられる。
【００１０】
【化２】
2013177477.tif 000003
【００１１】
そこで、本発明者はグラム陰性菌への抗菌性を実現するべく、シクロデキストリン上に陽イオン性アミノ基と疎水性アルキル基を集積させることを考えた。このアミノ基がまず菌体膜のリン酸部と結合し、引き続きアルキル鎖が膜内部に侵入することで膜構造を破壊すると予想したのである。
アミノ基の形成については、シクロデキストリン上に導入したアジド基を化学変換することでアミノ基を導入する方法を検討した。この化学変換の鍵段階はクリックケミストリーを採用した。クリックケミストリーとは、以下のような特徴を有する反応のことである。
（１）汎用性が高い
（２）高効率、高収率
（３）副生成物を生じない
（４）立体特異的である
（５）精製が容易である
（６）出発物質と試薬が手に入れやすい。
【００１２】
クリックケミストリーとして最も一般的なものとされているのがＨｕｉｓｇｅｎ反応である（化３参照）。この反応は、アジドと末端アルキンがトリアゾール環を形成する反応である。銅を触媒にすることで１，４-二置換体が選択的に形成し、かつ反応は大幅に加速する。また、アジドとアルキンは互いの間でのみ穏やかに反応し、そして標準的な反応条件でよく用いられる求核剤、求電子剤および溶媒に対して安定である。生成するトリアゾール環も安定な官能基である。このような特徴からＨｕｉｓｇｅｎ反応は広い分野で利用されている。
【００１３】
【化３】
2013177477.tif 000004
【００１４】
本発明者らは、このＨｕｉｓｇｅｎ反応を利用し、シクロデキストリンにアミノ基を導入した化合物が抗菌剤として機能することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本第１発明は、下記一般式で示されるシクロデキストリン誘導体又はその塩（ただし、R1はアルキレン基を示し、R2は分岐してもよいアシル基を示す）である。
ここで、R1はメチレン基とすることができる。また、R2は炭素数が４以下の分岐してもよいアシル基とすることができる。本発明者らは、これらのシクロデキストリン誘導体又はその塩が抗菌剤として機能することを確認している。
【００１５】
【化４】
2013177477.tif 000005
【００１６】
本第２発明は、下記一般式に示されるシクロデキストリン誘導体又はその塩（ただし、R3はアルキレン基を示す）である。R3はメチレン基とすることができる。
本発明者らは、これらのシクロデキストリン誘導体又はその塩を抗菌剤と併用することにより、抗菌作用が活性化され、抗菌活性増強剤として使用できることを確認している。また、抗菌剤とシクロデキストリン誘導体又はその塩とを含有する剤は、抗菌作用が活性化された活性化抗菌剤となる。
【００１７】
【化５】
2013177477.tif 000006
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】化合物[4]のＨ-ＮＭＲチャートである。
【図２】マイクロ波加熱（左側）とオイルバス加熱（右側）での反応容器内温度分布（Angew. Chem. Int. Ed. 2004, 43, 6250より引用）
【図３】化合物[8]のＨ-ＮＭＲチャートである。
【図４】化合物[9]のＨ-ＮＭＲチャートである。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
【００１９】
以下に示す合成ルートに従い、実施例１〜５のシクロデキストリン誘導体を合成した。
【００２０】
（オクタアジ化γシクロデキストリン[３]の合成）
下記化６に示すように、Ｈｕｉｓｇｅｎ反応の原料であるオクタアジ化されたγシクロデキストリン[３]を、オクタクロロ化シクロデキストリン[２]を経由して合成した。具体的には、シクロデキストリンをジメチルホルムアミドに溶解し、これに塩化メタンスルホニルを加えて６５℃にて２０時間攪拌することでオクタクロロ化シクロデキストリン[２]を得た。これをジメチルホルムアミドに溶解した後、アジ化ナトリウムを加え、１００℃にて１７時間反応してオクタアジ化γシクロデキストリン[３]を得た。その構造はＨ−ＮＭＲ、ＩＲによって確認した。
【００２１】
【化６】
2013177477.tif 000007
【００２２】
以下、オクタクロロ化シクロデキストリン[２]及びオクタアジ化γシクロデキストリン[３]の合成方法及び化合物データについて具体的に述べる。
【００２３】
（オクタクロロ化シクロデキストリン[２]）
γシクロデキストリン[1] 2.11 g (1.62 mmol) を乾燥DMF 20 mlに溶解し、氷浴中で塩化メタンスルホニル 7.44 g (64.9 mmol) を加えた。アルゴン雰囲気下、室温で30分間攪拌し、その後、65 ℃の油浴中で20時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣にメタノール10 mlを加えた。氷浴中で3 M ナトリウムメトキシド/メタノール溶液をpH 9になるまで加え、生じた沈殿をろ取した。ろ取した固体を氷水を用いて洗浄し、凍結乾燥し、白色固体の目的物1.94 g (1.34 mmol, 83%) を得た。
Rf = 0.62 (H2O/1-PrOH/AcOEt=5/7/7 (v/v/v))
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ＝3.33-3.40 (16H, H-2,4), 3.60 (t, 8H, J = 9.0 Hz, H-3), 3.82-3.84 (16H, H-5,6), 4.02 (d, 8H, J5,6 = 10 Hz, H-6), 4.98 (d, 8H, J1,2 = 2.8 Hz, H-1), 5.94 (d, 8H, J3,OH = 1.6 Hz, OH-3), 5.98 (d, 8H, J2,OH = 6.8 Hz, OH-2) 
MALDI-TOF-MS: 
[M+Na]+ Calcd. for C48H7235Cl637Cl2NaO32: 1467, Found: 1467. 
[M+K]+ Calcd. for C48H7235Cl637Cl2KO32: 1483, Found: 1483.
【００２４】
（オクタアジ化γシクロデキストリン[３]）
オクタクロロ化CD [２] 1.00 g (692 μmol) を乾燥DMF 20 mlに溶解し、アジ化ナトリウム1.80 g (27.7 mmol) を加え、アルゴン雰囲気下、100 ℃の油浴中で17時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、水を用いた洗浄を行い、固体を遠心分離にて回収した。得られた固体を凍結乾燥し、白色固体の目的物909 mg (607 μmol, 88%) を得た。
Rf = 0.62 (H2O/1-PrOH/AcOEt=5/7/7 (v/v/v))
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ＝3.32-3.40 (16H, H-4,6), 3.54-3.60 (16H, H-5,6), 3.71-3.74 (16H, H-2,3), 4.93 (d, 8H, J1,2 = 3.6 Hz, H-1), 5.88-5.94 (16H, CD-OH)
FT-IR (KBr, cm-1) 669.18, 757.89, 842.74, 943.02, 1049.09, 1078.98, 1156.12, 1288.22, 1437.67, 1630.52, 1741.41, 2105.89, 2925.48, 3397.96
【００２５】
（イソブチリル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[４]の合成）
次に、膜傷害による最適な活性を実現するために種々のアルキル基の導入を試みた。ここではヒドロキシ基のアシル化による導入を検討した。
汎用される酸塩化物による反応では反応数が異なると推定される複雑な反応混合物を与えた。そこで酸無水物による反応によって、疎水性アルキル部を含むアシル基をシクロデキストリン上に１６個の導入を実現した。
ポリミキシンB中の分枝アミノ酸側鎖を参考にしたイソブチリル基の導入については、下記化７に示すように、オクタアジ化・シクロデキストリン[３]をジメチルアミノピリジンを含むピリジン中で無水酢酸と反応させ、分液抽出、引き続く順相シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、オクタアジ化・シクロデキストリンの１６個の二級水酸基が全てイソブチリル化された目的物[４]を収率８０％で得た。その構造はＨ−ＮＭＲおよび質量分析によって確認した。Ｈ−ＮＭＲのデータを図１に示す。
【００２６】
【化７】
2013177477.tif 000008
【００２７】
以下、イソブチリル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[４]の合成方法及び化合物データについて具体的に述べる。
【００２８】
（イソブチリル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[４]）
オクタアジ化シクロデキストリン [３] 202 mg (135 μmol) に乾燥ピリジン4.0 mlを加えて溶解し、DMAP 52.8 mg (432 μmol)、無水イソ酪酸2.74 g (17.3 mmol) を加え、アルゴン雰囲気下、室温で24時間攪拌した。氷水浴中でメタノール5 mlを加え、室温で30分攪拌した。溶液を減圧留去し、ジクロロメタン200 mlを加え、1 N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水を用いて洗浄した。硫酸ナトリウムを用いて乾燥した後、溶媒を減圧留去し、トルエンを加え、それを順相シリカゲルカラム (ヘキサン/酢酸エチル = 8/1 → 7/1) にて精製した。該当分画を回収し、溶媒を減圧留去し, 白色結晶282 mg (108 μmol, 80%) を得た。
Rf = 0.55 (Hexane/AcOEt=3/1 (v/v))
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝1.09-1.19 (96H, (CH3)2CH), 2.48-2.56 (m, 16H, (CH3)2CH), 3.51 (d, 8H, J = 13.2 Hz, H-6), 3.76 (d, 8H, J = 13.6 Hz, H-6), 3.94-3.96 (16H, H-4,5), 4.78 (dd, 8H, J1,2 = 4.0 Hz, J2,3 = 9.6 Hz H-2), 5.18 (d, 8H, J1,2 = 4.0 Hz, H-1), 5.30-5.34 (m, 8H, H-3) 
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ＝18.36 ((CH3)2CH), 18.63 ((CH3)2CH), 18.69 ((CH3)2CH), 18.80 ((CH3)2CH), 33.66 ((CH3)2CH), 33.75 ((CH3)2CH), 51.25 (C-6), 69.94 (C-5), 70.22 (C-2), 70.50 (C-3), 73.37 (C-4), 94.82 (C-1), 174.87 (COCH), 176.11 (COCH)
ESI-MS: [M + Na]+ Calcd. for C112H168N24NaO48: 2641.1374, Found: 2641.1353.
FT-IR:(KBr, cm-1) 465.72, 671.11, 744.39, 849.49, 1042.34, 1156.12, 1191.79, 1242.90, 1289.18, 1348.00, 1384.64, 1471.42, 1746.23, 2105.89, 2879.20, 2938.02, 2975.62, 3413.39
Anal.: + 0.6H2O Calcd. for C112H169.2N24O48.6: C 51.16, H 6.49, N 12.78. Found: C 51.30, H 6.79, N 12.60.
【００２９】
次に同様の手法により、化８に示すように、直鎖状のアセチル基[５]、ブチリル基[６]、引き続き抗菌ペプチド中の分枝アミノ酸側鎖を参考にしたイソバレリル基[７]を同様の収率で導入した。これにより、長さ（疎水性）の異なる直鎖状アシル基、そして抗菌ペプチド中に頻出する分枝アミノ酸側鎖に類似した分枝アシル基を効率よく導入することに成功した。本試験の結果は、アルキル化に比較して、アシル化がより容易に疎水性基を導入する方法であることを示している。特に、アルキル化による分枝アルキル基の導入は脱離反応が優先するため非常に困難な場合があり、本試験によってそれに代わる有効な手段を確立した。
【００３０】
【化８】
2013177477.tif 000009
【００３１】
以下、アセチル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[５]、ブチリル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[６]及びイソバレリル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[７]の合成方法及び化合物データについて具体的に述べる。
【００３２】
（アセチル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[５]）
オクタアジ化シクロデキストリン [３] 108 mg (72.3 μmol) に乾燥ピリジン1 ml、無水酢酸1 ml (10.6 mmol) を加え、アルゴン雰囲気下、室温で15時間攪拌した。溶液を減圧留去し、残渣にジクロロメタン20 mlを加え、水を用いた洗浄、飽和食塩水を用いた脱水後、硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。綿栓ろ過した後、 溶媒を減圧留去し、それを順相シリカゲルカラム (ヘキサン/酢酸エチル = 1/1 → 1/3) にて精製した。該当分画を回収し, 溶媒を減圧留去し, 白色結晶121 mg (56.0 μmol, 77%) を得た。
Rf = 0.58 (CH2Cl2/CH3OH=9/1 (v/v))
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝2.08-2.09 (48H, CH3), 3.60 (dd, 8H, J = 4.4 Hz, J = 13.6 Hz, H-6), 3.71-3.79 (16H, H-4,6), 3.96-3.98 (br, 8H, H-5), 4.77 (dd, 8H, J = 4.0 Hz, J = 10.4 Hz, H-2), 5.16 (d, 8H, H-1, J1,2 = 4.0 Hz), 5.32 (t, 8H, J = 9.2 Hz, H-3)
MALDI-TOF-MS: 
[M + Na]+ Calcd. for C80H104N24NaO48: 2192, Found: 2192.
[M + K]+ Calcd. for C80H104KN24O48: 2208, Found: 2208.
【００３３】
（ブチリル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[６]）
オクタアジ化シクロデキストリン [３] 212 mg (142 μmol) に乾燥ピリジン4.2 mlを加えて溶解し、そこにDMAP 55.3 mg (453 μmol)、無水酪酸2.86 g (18.1 mmol) を加え、アルゴン雰囲気下、室温で24時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、ジエチルエーテル50 mlを加えた。0.1 N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を用いて洗浄した。飽和食塩水を用いて脱水後、硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。綿栓ろ過した後、減圧留去し、残渣にトルエン2を加えた。それを順相シリカゲルカラム (第１回；ヘキサン/酢酸エチル = 8/1 → 3/1、第２回；ヘキサン/酢酸エチル = 10/1 → 7/1) にて精製した。該当分画を回収し、溶媒を減圧留去し、白色固体210 mg (80.2 μmol, 57%) を得た。
Rf = 0.55 (Hexane/AcOEt=3/1 (v/v))
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝0.91-0.98 (48H, CH3CH2), 1.59-1.65 (32H, CH3CH2), 2.13-2.42 (m, 32H, CH3CH2CH2), 3.57 (dd, 8H, J = 4.0 Hz, J = 13.6 Hz, H-6), 3.59-3.82 (16H, H-4,6), 3.94-3.96 (br, 8H, H-5), 4.73 (dd, 8H, J1,2 = 3.6 Hz, J2,3 = 10.0 Hz, H-2), 5.17 (d, 8H, J1,2 = 3.6 Hz, H-1), 5.34 (dd, 8H, J3,4 = 9.2 Hz, J2,3 = 10.0 Hz, H-3)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ＝13.54 (CH3-Bu), 13.55 (CH3-Bu), 35.68 (COCH2), 35.83 (COCH2), 51.25 (C-6), 69.88 (C-3), 70.52 (C-2,5), 74.79 (C-4), 95.56 (C-1), 171.78 (CO-Bu), 172.98 (CO-Bu)
ESI-MS [M+Na]+ Calcd. for C112H168N24NaO48: 2641.1369, Found: 2641.1328
FT-IR (KBr, cm-1) 751.14, 797.42, 919.88, 953.63, 1045.23, 1168.65, 1250.61, 1287.25, 1361.50, 1415.49, 1459.85, 1752.01, 2105.89, 2877.27, 2966.95, 3460.63
Anal.: +CH3COCH3 Calcd. for C115H174N24O49: C 51.60, H 6.55, N 12.56. Found: C 51.67, H 6.84, N 12.37.
【００３４】
（イソバレリル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[７]）
オクタアジ化シクロデキストリン [３] 219 mg (146 μmol) に乾燥ピリジン4.2 mlを加えて溶解した。そこにDMAP 57.2 mg (468 μmol)、 無水イソ吉草酸3.49 g (18.7 mmol) を加え、アルゴン雰囲気下、室温で72時間攪拌した。氷浴中でメタノール5 mlを加え、室温で30分攪拌した。溶液を減圧留去し、ジクロロメタン100 mlを加え、1 N 塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水を用いて洗浄した。飽和食塩水を用いて脱水後、硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。綿栓ろ過した後、溶媒を減圧留去し、順相シリカゲルカラム ( ヘキサン/酢酸エチル = 10/1) にて精製した。該当分画を回収し、溶媒を減圧留去し、白色結晶323 mg (114 μmol, 78%) を得た。
Rf = 0.73 (Hexane/AcOEt=3/1 (v/v))
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝0.92-0.97 (96H, (CH3)2CH), 2.00-2.27 (40H, (CH3)2CH, (CH3)2CHCH2), 2.407 (dd, J = 4.8 Hz, J = 14.8 Hz, (CH3)2CHCH2), 3.60 (dd, 8H, J = 4.0 Hz, J = 13.6 Hz, H-6), 3.76 (16H, H-4,6), 3.96-3.98 (br, 8H, H-5), 4.70 (dd, 8H, J1,2 = 3.6 Hz, J2,3 = 10.4 Hz H-2), 5.17 (d, 8H, J1,2 = 3.6 Hz, H-1), 5.38 (t, 8H, J2,3 = 10.0 Hz, J3,4 = 9.2 Hz, H-3) 
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ＝22.29 ((CH3)2CH), 22.34 ((CH3)2CH), 22.40 ((CH3)2CH), 25.04 ((CH3)2CH), 25.15 ((CH3)2CH), 42.79 ((CH3)2CHCH2), 51.28 (C-6), 69.33 (C-3), 70.68 (C-2), 70.73 (C-5), 75.07 (C-4), 95.63 (C-1), 171.15 (COCH), 172.41 (COCH)
ESI-MS: [M+Na]+ Calcd. for C128H200N24NaO48: 2865.3873, Found: 2865.3850
FT-IR:(KBr, cm-1) 477.30, 1045.23, 1106.94, 1164.79, 1251.58, 1294.00, 1370.18, 1467.56, 1752.98, 2105.89, 2873.42, 2961.16
Anal.: +H2O+CH3COCH3 Calcd. for C131H208N24O50: C 53.90, H 7.18, N 11.52. Found: C 54.14, H 7.48, N 11.39.
【００３５】
こうして得たアシル化されたオクタアジ化γシクロデキストリン[５]〜[７]を原料にクリック反応を行った。クリック反応によるアミノ基導入のための試薬として第三ブトキシカルボニル化されたプロパルギルアミンを用いた。前述のようにＨｕｉｓｅｇｅｎ反応は、通常、高効率で目的とする化学変換を起こすことが知られている。しかしシクロデキストリン上に導入した複数のアジド基を同時に変換するのは、この反応を用いても困難であった。１つのアジドを持つ化合物での試験の結果、室温で１２０分間反応させた場合は収率１０％ にしか達せず、油浴を用いた８０℃での加熱で１２０分反応させた条件でようやく収率８０％であった。これではγシクロデキストリン上の８個のアジド基全てを反応させるには、著しい収率の低下と長すぎる反応時間が必要となる。
【００３６】
そこで反応容器内を内部から効率的に加熱するマイクロ波照射を適用した。近年、マイクロ波加熱が様々な有機反応を促進するという結果が報告されており、クリック反応においても、優れた結果が数多く報告されている。例えば、Angew. Chem. Int. Ed. 2004, 43, 6250の記載によると、図２に示すように、オイルバスなどの従来の加熱方法は、熱伝導によりエネルギーが伝えられるため、効率が悪く比較的遅い。一方、マイクロ波加熱は、溶媒や試薬、触媒などに直接エネルギーが伝えられるため、効率が良いとされる。
【００３７】
（化合物[８]の合成）
そこで、下記化９で示すように前述で得たブチリル化オクタアジド[６]をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、これに第三ブトキシカルボニルプロパルギルアミン加え、硫酸銅とアスコルビン酸ナトリウムの存在下、マイクロ波加熱(１２０℃)で反応を行った。その結果、１０分という短時間で原料の消失が確認できた。分液抽出、引き続く順相シリカゲルカラムクロマトグラフィーでの精製によりクリック反応が予定通りに進行した目的物[８]を収率８０％で得た。
【００３８】
【化９】
2013177477.tif 000010
【００３９】
以下、ブチリル化されたクリック反応生成物[８]の合成方法及び化合物データについて具体的に述べる。
【００４０】
（ブチリル化されたクリック反応生成物[８]）
CuSO4・5H2O水溶液 100 μl (53.4 mg/ml, 21.4 μmol) にアスコルビン酸ナトリウム水溶液 100 μl (530 mg/ml, 268 μmol) を加えた。このCuSO4・5H2O/アスコルビン酸ナトリウム混合溶液100 μlを化合物 [６] のDMSO溶液 500 μl (70.0 mg/ml, 13.4 μmol) に加え、さらにここにBoc-プロパルギルアミンのDMSO溶液 500 μl (41.4 mg/ml) を加え、マイクロ波加熱 (120 ℃) 下で10分間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテル30 mlを加え、水30 ml、5% EDTA二ナトリウム二水和物水溶液い、水を用いて洗浄した。飽和食塩水を用いて脱水後、硫酸ナトリウムで乾燥した。綿栓ろ過した後、溶媒を減圧留去し、それを順相シリカゲルカラム (塩化メチレン/メタノール = 40/1 → 20/1) にて精製した。該当分画を回収し, 溶媒を減圧留去し, 黄白色結晶41.0 mg (10.3 μmol, 80%) を得た。
Rf = 0.45 (CH2Cl2/CH3OH=10/1 (v/v)) 
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝0.89-0.96 (48H, CH3CH2), 1.39 (s, 72H, (CH3)3C), 1.56-1.68 (m, 32H, CH3CH2), 2.09-2.40 (m, 32H, CH3CH2CH2), 3.50 (t, 8H, J = 8.8 Hz, H-4), 4.20-4.32 (br, 16H, CH2NH), 4.40-4.52 (16H, H-5,6), 4.69-4.79 (16H, H-2,6), 5.35-5.48 (24H, H-3,1, NH), 7.64 (s, 8H, CH-triazole)
13C NMR (150 MHz, CDCl3): δ＝13.51, 13.54, 17.97, 18.02, 28.33, 28.42, 35.61, 35.74, 35.98, 49.96, 69.71, 76.79, 79.47, 96.09, 124.69, 145.11, 155.90, 171.65, 172.83
【００４１】
上記で得た目的物[８]の化学構造は、ＩＲ、Ｈ−ＮＭＲ、および質量分析によって決定した。原料であるアジ化シクロデキストリンはＩＲスペクトルにおいて２１００ｃｍ−１にアジド基の特徴的な吸収が見られる。クリック反応では、アジド基はアルキンと環化付加しトリアゾール環を形成するため、この吸収が消失する。得られた化合物のスペクトル上にはアジド基の吸収が見られず、全てのアジド基がトリアゾール環に変換したことが判明した。また、図３に示すＨ−ＮＭＲスペクトルでは、あたかも１種類のブドウ糖のようなシグナルが現れ、構成する全てのブドウ糖が同一であることを示し、同時にクリック反応により導入された第三ブトキシカルボニルアミノメチルトリアゾール部分のシグナル（δ（ｐｐｍ） １.３９、１.５７〜１.６３、２.１１〜２.３６、７.６５）を示した。質量分析では目的構造に相当する分子イオンピークを示した。
【００４２】
（実施例１の化合物 [９]の合成）
続いて、下記化１０に示すように、第三ブトキシカルボニル基の脱保護を、トリフルオロ酢酸処理によって行い、アミノ基を形成した。ブチリル基を持つ化合物は、反応は定量的に進行し、[９]を与えた。その構造は、図４に示すＨ−ＮＭＲおよび質量分析によって決定した。
【００４３】
【化１０】
2013177477.tif 000011
【００４４】
以下、ブチリル化されたアミノ化シクロデキストリン[９]の合成方法及び化合物データについて具体的に述べる。
【００４５】
（ブチリル化されたアミノ化シクロデキストリン[９]）
化合物 [８] 50.8 mg (14.9 μmol) にトリフルオロ酢酸2.0 mlを加え、室温で10分間攪拌した。溶液を減圧留去し、得られた固体に水を加え、凍結乾燥し、白色固体52.4 mg (14.9 μmol, 8個のトリフルオロ酢酸塩として100%)を得た。
Rf＝0.4 (28% NH3aq./H2O/1-PrOH/AcOEt=3/2/7/7 (v/v/v/v))
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6:δ＝0.867 (t, J=7.2 Hz, 48H), 1.39 (q, J=7.2 Hz, 32H), 2.08-2.31 (32H), 3.41-3.57 (br, 8H), 3.98-4.03 (br, 16H), 4.42 (br, 8H), 4.65-4.71 (br, 24H), 5.36 (br, 16H), 8.11 (s, 8H), 8.39 (s, 24H)
13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ＝13.21, 17.43, 17.61, 33.85, 35.04, 49.40, 69.51, 126.13, 140.35, 171.62, 172.16
MALDI-TOF-MS: 
[M+Na]+ Calcd. for C136H208N32NaO48: 3081.4745, Found: 3081.4785
[M+K]+ Calcd. for C136H208N32KO48: 3097.4484, Found: 3097.4893
【００４６】
（実施例２〜４の合成）
下記に示す実施例２〜４の化合物を上記と同様の方法により合成した。すなわち、上記化８に示す化合物[５]、[６]及び[７]を出発原料とし、上記と同様にＨｕｉｓｅｇｅｎ反応を行った後、保護基を外して実施例２〜４の化合物（アセチル [１１]、イソブチリル [１３]、イソバレリル [１５]）を合成した。
【００４７】
【化１１】
2013177477.tif 000012
【００４８】
以下、化合物 [１０]〜[１５]の合成方法及び化合物データについて具体的に述べる。
【００４９】
（アセチル化されたクリック反応生成物[１０]）
CuSO4・5H2O水溶液 100 μl (55.4 mg/ml, 22.2 μmol) にアスコルビン酸ナトリウム水溶液 100 μl (549 mg/ml, 277 μmol) を加えた。このCuSO4・5H2O/アスコルビン酸ナトリウム混合溶液100 μlをアセチル化オクタアジ化シクロデキストリン [５] のDMSO溶液 500 μl (60.0 mg/ml, 13.8 μmol) に加え、さらにここにBoc-プロパルギルアミンのDMSO溶液 500 μl (43.0 mg/ml, 138 μmol, CDに対して10倍mol) を加え、マイクロ波加熱 (120 ℃) 下で10分間攪拌した。この溶液に酢酸エチル10 mlを加え、分液漏斗に移し、5% EDTA二ナトリウム二水和物水溶液を用いた洗浄を行なった。有機相に酢酸エチル20 mlを加え、水を用いて洗浄した。飽和食塩水を用いて脱水後、硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。綿栓ろ過した後、溶媒を減圧留去し、それを順相シリカゲルカラム (塩化メチレン/メタノール = 40/1 → 20/1 → 9/1) にて精製した。該当分画を回収し、溶媒を減圧留去し、黄白色結晶40.4 mg (11.8 μmol, 85%) を得た。
Rf = 0.45 (CH2Cl2/CH3OH=9/1 (v/v))
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝1.49 (s, 72H, (CH3)3C), 2.06-2.08 (m, 48H, CH3CO), 3.54 (t, 8H, J = 8.8 Hz, H-4), 4.20-4.33 (16H, CH2NH), 4.45-4.52 (16H, H-5,6), 4.69-4.79 (16H, H-2,6), 5.37 (t, 8H, J = 9.0 Hz, H-3), 5.47-5.60 (16H, H-1, NH), 7.65 (s, 8H, CH-triazole)
13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ＝20.61 (CH3-Ac), 20.71 (CH3-Ac), 28.31 (CH3-Boc), 35.96 (CH2), 49.96 (C-6), 69.67 (C-5), 69.96 (C-2), 70.34 (C-3), 76.24 (C-4), 79.55 (C(CH3)), 95.95 (C-1), 124.65 (C-5, triazole), 145.24 (C-4, triazole), 155.91 (CO-Boc), 169.44 (CO-Ac), 170.33 (CO-Ac)
MALDI-TOF-MS: 
[M+Na]+ Calcd. for C144H208N32NaO64: 3433, Found: 3433.
[M+K]+ Calcd. for C144H208KN32O64: 3449, Found: 3449.
FT-IR: (KBr, cm-1) 602.65, 789.71, 863.95, 904.45, 937.24, 1048.12, 1170.58, 1249.65, 1369.21, 1457.92, 1509.99, 1703.80, 1752.98, 2345.02, 2370.09, 2977.55, 3404.71
Anal.: + 3H2O Calcd. for C144H214N32O67: C 49.91, H 6.22, N 12.93. Found: C 50.06, H 6.30, N 12.64.
【００５０】
（アセチル化されたアミノ化シクロデキストリン[１１]）
化合物 [1０] 50.8 mg (14.9 μmol) にトリフルオロ酢酸2 mlを加え、室温で20分間攪拌した。溶液を減圧留去し、得られた固体に水を加え、凍結乾燥し、白色固体52.4 mg (14.9 μmol, 8個のトリフルオロ酢酸塩として100%) を得た。
Rf＝0.38 (28% NH3aq./H2O/1-PrOH/AcOEt=3/2/7/7 (v/v/v/v))
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ＝2.00-2.02 (m, 48H, CH3CO), 3.58 (m, 8H, H-4), 4.00-4.08 (m, 16H, CH2NH), 4.36 (br, 8H, H-5), 4.61-4.73 (24H, H-2,6), 5.28 (t, 8H, J = 9.2 Hz, H-3), 5.38 (br, 8H, H-1), 8.11 (s, 8H, CH-triazole), 8.41 (s, 24H, NH)
13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ＝20.39 (CH3), 20.54 (CH3), 33.86(CH2), 49.43 (C-6), 69.59 (C-5), 69.72 (C-2,3), 76.15 (C-4), 95.93 (C-1), 117.04 (q, J = 1184 Hz, CO-TFA), 126.19 (C-5, triazole), 140.33 (C-4, triazole), 158.78 (q, J = 128 Hz, CF3), 169.37 (CO-Ac), 169.89 (CO-Ac)
MALDI-TOF-MS: 
[M+H]+ Calcd. for C104H145N32O48: 2610.9918, Found: 2611.0267
[M+Na]+ Calcd. for C104H144N32NaO48: 2632.9737, Found: 2633.0036
【００５１】
(イソブチリル化されたクリック反応生成物[１２])
CuSO4・5H2O水溶液 150 μl (53.4 mg/ml, 32.0 μmol) にアスコルビン酸ナトリウム水溶液 150 μl (530 mg/ml, 400 μmoll) を加えた。このCuSO4・5H2O/アスコルビン酸ナトリウム混合溶液150 μlを化合物 [4] のアセトン溶液 750 μl (70.0 mg/ml, 20.0 μmol) に加え、さらにここにBoc-プロパルギルアミンのDMSO溶液 750 μl (41.4 mg/ml, 200 μmol, CDに対して10倍mol) を加え、マイクロ波加熱 (120 ℃) 下で10分間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテル50 mlを加え、5% EDTA二ナトリウム二水和物水溶液、水を用いた洗浄を行った。飽和食塩水を用いて脱水後、硫酸ナトリウムで乾燥した。綿栓ろ過した後、溶媒を減圧留去し、黄白色の固体を得た。それを順相シリカゲルカラム (塩化メチレン/メタノール = 50/1 → 20/1) にて精製した。該当分画を回収し、溶媒を減圧留去し、白色固体 74.9 mg (19.4 μmol, 97%) を得た。
Rf = 0.45 (CH2Cl2/CH3OH=10/1 (v/v))
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝1.05-1.18 (96H), 1.40 (s, 72H), 2.45-2.62 (16H), 3.52 (br, 8H), 4.25-4.82 (br, 48H), 5.27-5.52 (br, 24H), 7.62 (bs, 8H)
FT-IR:(KBr, cm-1) 850.45, 1044.26, 1161.90, 1191.79, 1249.65, 1367.28, 1390.42, 1471.42, 1509.99, 1707.66, 1750.08, 2976.59, 3393.14
【００５２】
（イソブチリル化されたアミノ化シクロデキストリン[１３]）
化合物 [１２] 56.0 mg (14.5 μmol) にトリフルオロ酢酸2.0 mlを加え、室温で10分間攪拌した。溶液を減圧留去、固体に水を加えて凍結乾燥し、白色固体57.6 mg (14.5 μmol, 8個のトリフルオロ酢酸塩として100%) を得た。
Rf＝0.40 (28% NH3aq./H2O/1-PrOH/AcOEt=3/2/7/7 (v/v/v/v))
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ＝0.99-1.03 (96H), 2.40-2.50 (16H), 3.38 (br, 8H), 4.05-4.76 (br, 48H), 5.27 (br, 16H), 8.07-8.44 (br, 32H)
13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ＝17.90, 18.50, 32.94, 33.74, 49.68, 69.17, 126.69, 140.09, 174.24, 175.40
MALDI-TOF-MS: [M+Na]+ Calcd. for C136H208N32NaO48: 3081.4745, Found: 3081.5070
【００５３】
（イソバレリル化されたクリック反応生成物[１４]）
CuSO4・5H2O水溶液 150 μl (53.4 mg/ml, 32.0 μmol) にアスコルビン酸ナトリウム水溶液 150 μl (530 mg/ml, 400 μmol) を加えた。このCuSO4・5H2O/アスコルビン酸ナトリウム混合溶液150 μlを化合物 [７] のアセトン溶液 750 μl (76.0 mg/ml, 20.0 μmol) に加え、さらにここにBoc-プロパルギルアミンのDMSO溶液 750 μl (41.4 mg/ml, 200 μmol) を加え、マイクロ波加熱 (120 ℃) 下で10分間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテル50 mlを加え、5% EDTA二ナトリウム二水和物水溶液、水を用いた洗浄を行った。飽和食塩水を用いて脱水後、硫酸ナトリウムで乾燥した。綿栓ろ過した後、溶媒を減圧留去し、黄白色の固体を得た。それを順相シリカゲルカラム (塩化メチレン/メタノール = 50/1 → 20/1) にて精製した。該当分画を回収し、溶媒を減圧留去し、白色固体 79.5 mg (19.5 μmol, 97%) を得た。
Rf = 0.58 (CH2Cl2/CH3OH=10/1 (v/v))
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝0.90-0.95 (96H), 1.40 (s, 72H), 1.96-2.27 (40H), 2.36-2.39 (br, 8H), 3.47-3.48 (br, 8H), 4.20-4.80 (br, 48H), 5.47 (br, 24H), 7.60 (bs, 8H)
13C NMR (100 MHz, CDCl3):δ＝22.23, 22.25, 22.32, 22.38, 24.94, 25.18, 28.35, 35.97, 42.66, 42.75, 49.95, 69.00, 69.81, 79.47, 96.27, 124.63, 145.05, 155.91, 171.04, 172.20
FT-IR:
(KBr, cm-1) 478.26, 578.54, 788.74, 835.03, 864.92, 915.06, 930.48, 1044.26, 1117.55, 1167.69, 1250.61, 1294.97, 1367.28, 1390.42, 1412.60, 1467.56, 1509.99, 1709.59, 1752.98, 2873.42, 2934.16, 2961.16, 3150.15, 3394.10
【００５４】
（イソバレリル化されたアミノ化シクロデキストリン[１５]）
化合物 [１４] 41.6 mg (10.2 μmol) にトリフルオロ酢酸2.5 mlを加え、室温で10分間攪拌した。溶液を減圧留去し、固体に水を加えて凍結乾燥し、白色固体42.7 mg (10.2 μmol, 8個のトリフルオロ酢酸塩として100%) を得た。
Rf＝0.42 (28% NH3aq./H2O/1-PrOH/AcOEt=3/2/7/7 (v/v/v/v))
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ＝0.86 (96H), 1.96-2.30 (48H), 3.41 (br, 8H), 4.07 (br, 16H), 4.63-4.78 (br, 24H), 5.35 (br, 16H), 8.11 (s, 8H), 8.40 (s, 24H)
MALDI-TOF-MS: [M+Na]+ Calcd. for C152H240N32NaO48: 3305.7249, Found: 3305.7083
Anal.: +3.5H2O Calcd. for C168H255F24N32O67.5: C 47.38, H 6.03, N 10.52. Found: C 47.31, H 6.13, N 10.25. 
【００５５】
（実施例５の合成）
以下、実施例５の化合物 [１６]の合成方法及び化合物データについて具体的に述べる。
【００５６】
（アシル基を脱保護したシクロデキストリン[１６]）
化合物 [１１] 15.6 mg (4.57 μmol) にメタノール600 μlを加えて溶解し、ナトリウムメトキシドをpHが9になるまで加え、室温で24時間攪拌した。その後、陽イオン交換樹脂ダイヤイオンSK1BをpHが7になるように加え、綿栓ろ過し、溶媒を減圧留去し、そこにトリフルオロ酢酸500 μlを加え、室温で10分間攪拌した。溶媒を減圧留去し、凍結乾燥し、白色固体13.0 mg (4.56 μmol, 8個のトリフルオロ酢酸塩として100%) を得た。
Rf＝0.00 (28% NH3aq./H2O/1-PrOH/AcOEt=3/2/7/7 (v/v/v/v))
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ＝3.24-3.37 (16H, H-2,4), 3.68 (t, 8H, J = 4.6 Hz, H-3), 3.95-4.04 (48H, CH2NH, H-5), 4.29-4.44 (br, 16H, H-6), 5.10 (d, J = 2.8 Hz, 8H, H-1), 6.08-6.12 (br, 8H, OH), 7.12 (br, 8H, NH), 8.01 (s, 8H, H-triazole), 8.37 (s, 24H, NH)
MALDI-TOF-MS: 
[M+Na]+ Calcd. for C72H112N32NaO32: 1960, Found: 1960.
[M+K]+ Calcd. for C72H112KN32O32: 1976, Found: 1976.
【００５７】
（評価）
合成した実施例１〜４のシクロデキストリン誘導体の抗菌性を最小発育濃度（ＭＩＣ）で評価した。評価にはグラム陽性菌として黄色ブドウ球菌 (Staphylococcus aureus)を使用し、グラム陰性菌として大腸菌（Escherichia coli）を使用した。
【００５８】
評価方法は以下の通りである。
すなわち、細菌は、一般細菌用乾燥ブイヨンあるいは大腸菌はポリペプトンを加えた最小塩培地で培養し、対数増殖期の状態のものを使用した。最小発育濃度は、Ｍｕｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ培地、菌液、各濃度の候補化合物溶液を、３７℃で２０時間、培養することにより、試験化合物がその細菌の生育を阻止した最小濃度とした。なお初期の菌濃度は１ｘ１０５ 細胞/ｍＬとした。ノボビオシンの活性増強実験においては実施例５の化合物[１６]の当該濃度下で試験を行った。
【００５９】
最小発育濃度（ＭＩＣ）で評価の結果を表１に示す。
【００６０】
【表１】
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【００６１】
一般に最小発育濃度が１０００μｇ/mLを上回る場合には、その物質には抗菌性はないと判断され、１０〜１０００μｇ/ｍLの場合には中程度、１０μｇ/ｍL以下では有効な抗菌性ありとされる。グラム陽性菌である黄色ブドウ球菌に対するＭＩＣ値は、いずれの物質も、１２８μg/ｍＬを上回る値であった。一方、グラム陰性菌である大腸菌に対するＭＩＣ値は疎水性基に依存した。ブチリル基およびイソバレリル基を持つ化合物[９]、[１５]の値は１２８μｇ/ｍＬ以上であり、イソブチリル基を持つ化合物[１３]の値は６４μg/ｍＬと中程度の抗菌性を示した。このイソブチリル基とブチリル基は、その構成炭素数が同じである。直鎖状に比して分子状の疎水性アルキル基が抗菌性に有効である事実は天然抗菌ペプチド中に分枝アミノ酸が頻出するという事実に合致し、膜作動型抗菌物質設計のための重要な構造情報を得た。さらに注目すべきはアセチル基を持つ化合物[１１]が大腸菌に対して８μg/mLという有効な抗菌性を示したことである。そこでこの物質の、グラム陽性菌である枯草菌（Bacillus subtilis）およびグラム陰性菌であるネズミチフス菌（Salmonella typhimurium）に対する抗菌性を調べた。その結果、枯草菌に対するＭＩＣ値は黄色ブドウ球菌のそれと同様に１２８μｇ/ML以上であった。一方、グラム陰性菌であるネズミチフス菌に対しては中程度の抗菌性（６４μg/mL）を示した。以上の結果、細菌膜構造傷害能力はアルキル基の種類に依存することが判明した。
【００６２】
さらに、アシル基を脱保護した化合物[１６]について、細菌膜の傷害性による他の抗菌物質の活性増強について検討した（表２）。既存の抗菌物質の中には、細菌膜が物理的障壁となり、本来の抗菌性を発揮できないものが存在する。特に、細胞質膜に加えて外膜を擁するグラム陰性菌についてこの耐性が顕著である。病原菌に効果的に抗するには抗菌物質が本来の抗菌性を有効に発揮できることが重要である。そこで細菌膜を傷害して物理的障壁を排除できる膜傷害性物質と、抗菌物質との併用が有効であると合理的に推定できる。ここで用いたノボビオシンが、その単独での最小発育濃度は１２８μｇ/ｍＬであり、その作用は弱い。これに対し、当該シクロデキストリン誘導体併用投与下での上記抗菌物質の最小発育濃度は著しく低下し、顕著な抗菌活性を示した。これは当該物質による外膜透過性増大の結果であり、顕著な細菌膜傷害性を示している。
【００６３】
【表２】
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【００６４】
この発明は上記発明の実施の態様及び実施例の説明に何ら限定されるものではない。特許請求の範囲を逸脱せず、当業者が容易に想到できる範囲で種々の変形態様もこの発明に含まれる。
【産業上の利用可能性】
【００６５】
本発明は抗菌剤や抗菌活性増強剤として利用可能である。抗菌性については、既存の治療薬に匹敵する活性が得られた。さらに細菌膜傷害性による併用抗菌物質の活性増強も実現した。なお2010年7月に、日本国において「細胞膜機能阻害」型機構によるメシチリン耐性黄色ブドウ球菌感染症治療薬であるダプトマイシンが認可された。このことは多剤耐性菌対策としての膜作動型抗菌剤の有望性を示している。しかしながらダプトマイシンは抗グラム陽性菌薬である。ゆえにグラム陰性菌に有効な物質の実用化が待たれており、それに関する本技術は有望と考える。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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