(57)【要約】【課題】被験体におけるＨＳＶ感染を処置する際に使用するための組成物を提供すること。【解決手段】上記組成物は、少なくとも１つの位置でＣ１〜Ｃ３０の基でエステル化された緑茶ポリフェノールを有効量で含有し、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染の少なくとも１つの症状を処置することによって、被験体におけるＨＳＶ感染を処置する際に使用する。一実施形態において、上記緑茶ポリフェノールは、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートである。別の実施形態において、上記緑茶ポリフェノールは、本明細書に記載される構造にしたがう、４’位で脂肪酸エステルでエステル化された（−）−エピガロカテキン−３−ガレートである。【選択図】図１
2013014568.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの位置でＣ１〜Ｃ３０の基でエステル化された緑茶ポリフェノールを有効量で含有する組成物であって、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染の少なくとも１つの症状を処置することによって、被験体におけるＨＳＶ感染を処置する際に使用するための、組成物。
【請求項２】
前記緑茶ポリフェノールが、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートである、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項３】
前記緑茶ポリフェノールが、以下の構造
【化５３】
2013014568.tif 000075
による、４’位で脂肪酸エステルでエステル化された（−）−エピガロカテキン−３−ガレートであり、該脂肪酸エステルが、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートと、ブタン酸、ヘキサン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸（パルミチン酸）、９−ヘキサデセン酸、オクタデカン酸（ステアリン酸）、９−オクタデセン酸、１１−オクタデセン酸、９，１２−オクタデカジエン酸、９，１２，１５−オクタデカトリエン酸、６，９，１２−オクタデカトリエン酸、エイコサン酸、９−エイコセン酸、５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸、５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸、ドコサン酸、１３−ドコセン酸、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸、またはテトラコサン酸とのエステルである、請求項１または２に記載の使用のための組成物。
【請求項４】
前記脂肪酸エステルが、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートとステアリン酸とのエステルである、請求項３に記載の使用のための組成物。
【請求項５】
前記脂肪酸エステルが、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートとパルミチン酸とのエステルである、請求項３に記載の使用のための組成物。
【請求項６】
前記被験体がヒトである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
【請求項７】
前記組成物が麻酔薬をさらに含有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
【請求項８】
前記組成物が局所投与のために処方されている、請求項１〜７のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
【請求項９】
前記組成物が経口投与のために処方されている、請求項１〜８のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
【請求項１０】
前記緑茶ポリフェノールが、（−）−エピカテキン、（−）−エピガロカテキン、（−）−エピカテキン−３−ガレート、これらのエナンチオマー、これらの異性体、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項１１】
前記ＨＳＶがＨＳＶ−１である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
【請求項１２】
前記組成物が、少なくとも２種の緑茶ポリフェノールを含有し、該緑茶ポリフェノールは独立して、Ｃ１〜Ｃ３０の基でエステル化されており、該Ｃ１〜Ｃ３０の基は、同じであるかまたは異なる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
【請求項１３】
ＨＳＶが、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ−２）、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、水痘−帯状ヘルペスウイルス（ＶＺＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（突発性発疹または小児バラ疹）およびヒトヘルペスウイルス８（カポージ肉腫関連ヘルペスウイルス）のうちのいずれかである、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本出願は、２０１０年７月６日に出願された米国仮出願番号６１／３６１，７５２の利益を主張し、ならびに、本出願は、２００８年２月７日に出願された米国特許出願番号１２／０６３，１３９の一部継続出願であり、これは２００６年８月６日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００６／０３１１２０の国内段階であり、これは２００５年８月１１日に出願された米国仮特許出願番号６０／７０７，２３４への優先権を主張し、上記出願の全ては、許容される場合に、本明細書によってその全容が参照によって本明細書に援用される。
【０００２】
（配列表への言及）
「ＭＣＧ＿２００９＿０１７＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿Ｔｅｘｔ＿Ｆｉｌｅ．ｔｘｔ」という名称のテキストファイル（２０１１年に６月２３日に作成され、１４，４７１バイトのサイズを有する）として、本明細書と共に提出された配列表は、３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５２（ｅ）（５）に従って、本明細書によって参照により援用される。
【０００３】
（発明の分野）
本発明は、概して、ウイルス感染を処置するための組成物および方法、より詳しくは、緑茶ポリフェノール組成物および単純ヘルペスウイルスの処置または予防におけるその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
（発明の背景）
単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）は、２つの一般的なウイルス感染症で現れるウイルスであり、これらの２つの一般的なウイルス感染症は各々、皮膚または粘膜（例えば口または唇）における有痛の水様水疱または性器における有痛の水様水疱によって特徴付けられる。この疾患は接触感染性であり、ＨＳＶに対する療法またはワクチンは現在のところ存在しない。唇における感染は、「単純ヘルペス（ｃｏｌｄ  ｓｏｒｅ）」または「熱性水疱」として一般に知られている。無症候性である場合、ＨＳＶは神経細胞体中で休止しており、アウトブレイク中、皮膚に向かう軸索内で複製する。アウトブレイクが過ぎたとき、ウイルスは、神経体にのみ存在するようになるまで、神経に沿って「死滅（ｄｉｅ  ｂａｃｋ）」する。神経体内でのウイルスの休止は処置の困難さの一因となっている。
【０００５】
現在、利用可能な処置としては、抗ウイルス医薬、例えば、アシクロビル、ファムシクロビル（ｆａｍｃｉｃｌｏｖｉｒ）、ペンシクロビル（ｐａｎｃｙｃｌｏｖｉｒ）、バラシクロビル（ｖａｌａｃｙｃｌｏｖｉｒ）等の経口投与が挙げられ、これらは、症状の持続期間を低減し、治癒を促進する。処置は、典型的には、アウトブレイクの最初の症状の時に開始する。別の選択肢は、連日抑制療法（ｄａｉｌｙ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｔｈｅｒａｐｙ）の使用であり、これは、抗ウイルス薬を数年にわたって毎日服用する。抑制療法は、症状の出現頻度およびアウトブレイクの再発を低減し得る。さらに、抑制療法は、無症状の排出（ｓｈｅｄｄｉｎｇ）を低減し、性的接触またはキスを通じた伝染のリスクを低下させる。
【０００６】
単純ヘルペスに対する処方箋無しでの処置は、典型的には、短期間の間有効であり、しばしば毒性要因を含む。
【０００７】
任意の抗ウイルス医薬を服用することに伴なう重大な問題は、副作用、例えば、錯乱、幻覚、渇きの増大、発赤（ｒｅｄｎｅｓｓ）、皮膚（口の内側を含む）の水疱形成、剥脱または弛緩、尿排泄量の低減、発作、皮膚発疹またはじんま疹、胃痛、振せん、異常な衰弱または疲労感、下痢、めまい感、頭痛、太陽への感受性の増大、食欲の減退、悪心または嘔吐であり得る。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
したがって、本発明の目的は、被験体においてウイルス感染の１つまたは複数の症状を処置するための、副作用の低減を伴なった、改善された組成物および方法を提供することである。
【０００９】
本発明のさらに別の目的は、被験体においてＨＳＶ感染を処置するための方法および組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
（発明の概要）
ウイルス、特に、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染を処置するための組成物および方法が提供される。１つの実施形態は、ＨＳＶによって引き起こされる病変を処置するための治療組成物を提供する。有用な組成物としては、１つまたは複数の緑茶ポリフェノール（ＧＴＰ）またはその誘導体を含む組成物が挙げられる。コントロールと比較して、組成物は、前駆期に投与された場合、ＨＳＶによる病変の形成を阻害し、病変が現れた後に投与された場合、ＨＳＶ感染による病変の持続期間を大いに低減する。例示的方法は、細胞を、１つまたは複数のＧＴＰまたはその誘導体を含む組成物と接触させることによって、細胞におけるＨＳＶ複製を阻害することを含む。別の方法は、被験体に１つまたは複数のＧＴＰまたはその誘導体を含む組成物を局所的に投与することによって、被験体におけるＨＳＶの１つまたは複数の症状を処置することを含む。
【００１１】
代表的緑茶ポリフェノールとしては、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート、（−）−エピカテキン、（−）−エピガロカテキン、および（−）−エピカテキン−３−ガレートが挙げられるが、これに限定されない。プロアントシアニジン、これらＧＴＰのエナンチオマー、異性体、薬学的に受容可能な塩、およびプロドラッグもまた挙げられる。好ましいＧＴＰは、Ｃ１〜Ｃ３０基を有する１つまたは複数の炭化水素鎖を含むように修飾されている。
【００１２】
本発明はここで以下の項目を参照しながら記載される：
（項目１Ａ）
少なくとも１つの位置でＣ１〜Ｃ３０の基でエステル化された緑茶ポリフェノールを有効量で含有する組成物であって、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染の少なくとも１つの症状を処置することによって、被験体におけるＨＳＶ感染を処置する際に使用するための、組成物。
（項目２Ａ）
上記緑茶ポリフェノールが、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートである、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目３Ａ）
上記緑茶ポリフェノールが、以下の構造
【００１３】
【化１】
2013014568.tif 000003
による、４’位で脂肪酸エステルでエステル化された（−）−エピガロカテキン−３−ガレートであり、該脂肪酸エステルが、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートと、ブタン酸、ヘキサン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸（パルミチン酸）、９−ヘキサデセン酸、オクタデカン酸（ステアリン酸）、９−オクタデセン酸、１１−オクタデセン酸、９，１２−オクタデカジエン酸、９，１２，１５−オクタデカトリエン酸、６，９，１２−オクタデカトリエン酸、エイコサン酸、９−エイコセン酸、５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸、５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸、ドコサン酸、１３−ドコセン酸、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸、またはテトラコサン酸とのエステルである、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目４Ａ）
上記脂肪酸エステルが、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートとステアリン酸とのエステルである、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目５Ａ）
上記脂肪酸エステルが、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートとパルミチン酸とのエステルである、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目６Ａ）
上記被験体がヒトである、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目７Ａ）
上記組成物が麻酔薬をさらに含有する、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目８Ａ）
上記組成物が局所投与のために処方されている、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目９Ａ）
上記組成物が経口投与のために処方されている、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目１０Ａ）
上記緑茶ポリフェノールが、（−）−エピカテキン、（−）−エピガロカテキン、（−）−エピカテキン−３−ガレート、これらのエナンチオマー、これらの異性体、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目１１Ａ）
上記ＨＳＶがＨＳＶ−１である、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目１２Ａ）
上記組成物が、少なくとも２種の緑茶ポリフェノールを含有し、該緑茶ポリフェノールは独立して、Ｃ１〜Ｃ３０の基でエステル化されており、該Ｃ１〜Ｃ３０の基は、同じであるかまたは異なる、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目１３Ａ）
ＨＳＶが、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ−２）、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、水痘−帯状ヘルペスウイルス（ＶＺＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（突発性発疹または小児バラ疹）およびヒトヘルペスウイルス８（カポージ肉腫関連ヘルペスウイルス）のうちのいずれかである、上記項目のうちのいずれかに記載の使用のための組成物。
（項目１Ｂ）  被験体において単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染を処置するための方法であって、該方法は、ＨＳＶ感染の少なくとも１つの症状を処置するために、少なくとも１つの位置でＣ１〜Ｃ３０の基でエステル化された緑茶ポリフェノールを有効量で含有する組成物を該被験体に投与する工程を包含する、方法。
（項目２Ｂ）  上記緑茶ポリフェノールが、４’位でステアリン酸でエステル化された（−）−エピガロカテキン−３−ガレートである、上記項目に記載の方法。
（項目３Ｂ）  上記緑茶ポリフェノールが少なくとも２つの位置でエステル化されている、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
（項目４Ｂ）  上記被験体がヒトである、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
（項目５Ｂ）  上記組成物が麻酔薬をさらに含有する、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
（項目６Ｂ）  上記組成物が局所投与のために処方されている、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
（項目７Ｂ）  上記組成物が経口投与のために処方されている、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
（項目８Ｂ）  上記緑茶ポリフェノールが、（−）−エピカテキン、（−）−エピガロカテキン、（−）−エピカテキン−３−ガレート、これらのエナンチオマー、これらの異性体、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
（項目９Ｂ）  上記ＨＳＶがＨＳＶ−１である、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
（項目１０Ｂ）  被験体において単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）を処置する方法であって、該方法は、少なくとも２種の緑茶ポリフェノールを含有する組成物を投与する工程を包含し、該緑茶ポリフェノールは独立して、Ｃ１〜Ｃ３０の基でエステル化されており、該Ｃ１〜Ｃ３０の基は、同じであるかまたは異なる、方法。
（項目１１Ｂ）  上記２種以上の緑茶ポリフェノールは、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート（−）−エピカテキン、（−）−エピガロカテキン、（−）−エピカテキン−３−ガレート、これらのエナンチオマー、これらの異性体、およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
（項目１２Ｂ）  上記被験体がヒトである、上記項目のうちのいずれかに記載の方法。
【００１４】
（摘要）
緑茶ポリフェノール組成物、および単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）を処置する際に使用するためのそれらの使用が提供される。代表的な緑茶ポリフェノールとしては、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート、および１つ以上のエステル結合した脂肪酸を有する緑茶ポリフェノールが挙げられるが、これらに限定されない。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１は、ＥＧＣＧエステル濃度（μＭ）に対するＶｅｒｏ細胞／ｍｌの線グラフである。上側の線は生細胞を表し、下側の線は死細胞を表す。
【図２】図２は、ポリフェノール濃度（μＭ）に対する４９０ｎｍの吸光度の棒グラフである。各セットの左側の棒はＥＧＣＧを表す。各セットの右側の棒はＥＧＣＧエステルを表す。
【図３】図３は、ポリフェノール濃度（μＭ）に対するＨＳＶ−１ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍｌ）の棒グラフである。
【図４】図４は、ＥＧＣＧエステル濃度（μＭ）に対するＨＳＶ１ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍｌ）のウイルス力価の棒グラフである。
【図５】図５は、希釈に対する蛍光の線グラフである。ひし形は、Ｅ．ｃｏｌｉ＋ＧＦＰを表す。四角は、Ｅ．ｃｏｌｉ−ＧＦＰを表す。読み取りは蛍光計で行われた。
【図６】図６は、細胞のみ、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏまたは７５μＭのＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏに対する蛍光の棒グラフである。ＧＦＰ発現が測定された。
【図７】図７は、ＧＦＰをＨＳＶ１の遺伝子ＵＬ４６に導入するためのクローニングストラテジーの概略である。
【図８】図８は、コントロール、ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルに対する閾値サイクルの棒グラフである。このグラフは、ＨＳＶ１糖タンパク質ＤのリアルタイムＰＣＲデータを提供する。
【図９】図９は、コントロール、ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルに対する相対量の棒グラフである。このデータは、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞、ＥＧＣＧ−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞およびＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞におけるＨＳＶ１糖タンパク質Ｄの増幅を示す。
【図１０】図１０は、ポジティブコントロール、ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルに対するパーセンテージの棒グラフである。
【図１１】図１１は、ＨＳＶ１に対するＥＧＣＧエステルの、考えられる作用モードの概略図である。
【図１２Ａ】図１２Ａ〜図１２Ｃは、１人の被験体の口の領域の写真である。図１２Ａ〜図１２Ｃは、初期段階の単純ヘルペス形成（１２Ａ）、および図１２Ａに示したものと同じエピソードにおける１１時間の処置後（１２Ｂ）を示す。図１２Ｃは、発生後の１１時間の処置無しでの、別のエピソードにおける同じ被験体を示す。
【図１２Ｂ】図１２Ａ〜図１２Ｃは、１人の被験体の口の領域の写真である。図１２Ａ〜図１２Ｃは、初期段階の単純ヘルペス形成（１２Ａ）、および図１２Ａに示したものと同じエピソードにおける１１時間の処置後（１２Ｂ）を示す。図１２Ｃは、発生後の１１時間の処置無しでの、別のエピソードにおける同じ被験体を示す。
【図１２Ｃ】図１２Ａ〜図１２Ｃは、１人の被験体の口の領域の写真である。図１２Ａ〜図１２Ｃは、初期段階の単純ヘルペス形成（１２Ａ）、および図１２Ａに示したものと同じエピソードにおける１１時間の処置後（１２Ｂ）を示す。図１２Ｃは、発生後の１１時間の処置無しでの、別のエピソードにおける同じ被験体を示す。
【図１３Ａ】図１３Ａ〜図１３Ｈは、単純ヘルペスの水疱段階における、ＥＧＣＧステアレート適用後の、７日間の期間にわたる被験体の口の写真である。
【図１３Ｂ】図１３Ａ〜図１３Ｈは、単純ヘルペスの水疱段階における、ＥＧＣＧステアレート適用後の、７日間の期間にわたる被験体の口の写真である。
【図１３Ｃ】図１３Ａ〜図１３Ｈは、単純ヘルペスの水疱段階における、ＥＧＣＧステアレート適用後の、７日間の期間にわたる被験体の口の写真である。
【図１３Ｄ】図１３Ａ〜図１３Ｈは、単純ヘルペスの水疱段階における、ＥＧＣＧステアレート適用後の、７日間の期間にわたる被験体の口の写真である。
【図１３Ｅ】図１３Ａ〜図１３Ｈは、単純ヘルペスの水疱段階における、ＥＧＣＧステアレート適用後の、７日間の期間にわたる被験体の口の写真である。
【図１３Ｆ】図１３Ａ〜図１３Ｈは、単純ヘルペスの水疱段階における、ＥＧＣＧステアレート適用後の、７日間の期間にわたる被験体の口の写真である。
【図１３Ｇ】図１３Ａ〜図１３Ｈは、単純ヘルペスの水疱段階における、ＥＧＣＧステアレート適用後の、７日間の期間にわたる被験体の口の写真である。
【図１３Ｈ】図１３Ａ〜図１３Ｈは、単純ヘルペスの水疱段階における、ＥＧＣＧステアレート適用後の、７日間の期間にわたる被験体の口の写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
（発明の詳細な説明）
（Ｉ．定義）
本開示の種々の実施形態を説明する前に、本発明は、その用途が以下の説明に記載される構成の細部および成分の配置に限定されないことが理解されるべきである。他の実施形態が、種々の方法で実施または実行され得る。また、本明細書中で使用される語句および専門用語は、説明の目的であり、限定であるとみなされるべきではないことが理解されるべきである。
【００１７】
本開示全体にわたって、種々の刊行物、特許および公開特許明細書が参照される。許容される場合、これらの刊行物、特許および公開特許明細書の開示は、技術水準をより完全に記載するために、その全体が本開示に参考として援用される。
【００１８】
本開示の理解を容易にするために、以下の定義が提供される：
本明細書中で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、その文脈がそうではないことを明示的に示さない限り、複数の対象物を含む。従って、例えば、「因子（ａ  ｆａｃｔｏｒ）」への言及は、１つの因子または因子の混合物をいい、そして「処置の方法（ｔｈｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」への言及は、当業者に公知である等価な工程および方法への言及を含む、などである。
【００１９】
「アシルオキシ」とは、本明細書中で使用される場合、以下の化学式：
【００２０】
【化２】
2013014568.tif 000004
を有する置換基をいい、この式において、Ｒは、直鎖、分枝鎖、または環状の、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基である。
【００２１】
「アルコキシカルボニル」とは、本明細書中で使用される場合、以下の化学式：
【００２２】
【化３】
2013014568.tif 000005
を有する置換基をいい、この式において、Ｒは、直鎖、分枝鎖、または環状のアルキル基である。
【００２３】
用語「アルケニル」とは、１つ以上の二重結合を有する、一価の、非分枝または分枝の炭化水素鎖をいう。アルケニル基の二重結合は、共役していなくても、別の不飽和基と共役していてもよい。
【００２４】
用語「アルキニル」とは、１つ以上の三重結合を有する、一価の、非分枝または分枝の炭化水素鎖をいう。アルキニル基の三重結合は、共役していなくても、別の不飽和基と共役していてもよい。
【００２５】
用語「細胞」とは、複製または分裂が可能な、膜に囲まれた生物学的単位をいう。
【００２６】
用語「エマルジョン」とは、互いに不溶性の成分から調製された混合物をいう。これらの成分から、混合条件の適切な選択および操作によって、均質な巨視的外見の混合物を生成することが可能である。エマルジョンの最も一般的な型は、水性成分と親油性成分とが使用されるものであり、これらは、当該分野において頻繁に、水中油エマルジョンおよび油中水エマルジョンと称される。水中油エマルジョンにおいては、親油性相が水相中に分散しており、一方で、油中水エマルジョンにおいては、水相が親油性相中に分散している。一般的に公知である、皮膚に塗布されるエマルジョンベースの処方物としては、化粧品（例えば、クリーム、ローション、洗剤、洗顔乳液、および乳剤など）、ならびに皮膚の状態、疾患または異常を処置するための成分を含有する皮膚用製品が挙げられる。
【００２７】
用語「緑茶ポリフェノールまたはＧＴＰ」とは、Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓの葉に存在するポリフェノール化合物をいう。緑茶ポリフェノールとしては、（−）−エピカテキン（ＥＣ）、（−）−エピガロカテキン（ＥＧＣ）、（−）−エピカテキン−３−ガレート（ＥＣＧ）、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート（ＥＧＣＧ）、プロアントシアニジン、これらのエナンチオマー、これらのエピマー、これらの異性体、これらの組み合わせ、およびこれらのプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。修飾緑茶ポリフェノールとは、１つ以上の炭化水素鎖（例えば、Ｃ１〜Ｃ３０）を有する緑茶ポリフェノール、ならびに本明細書中に開示される式Ｉおよび式ＩＩによる化合物をいう。
【００２８】
用語「宿主」とは、生存生物をいい、哺乳動物（例えば、霊長類であり、特にヒト）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
「親水性」とは、本明細書中で使用される場合、水と容易に相互作用する強い極性基を有する物質をいう。
【００３０】
「疎水性」とは、本明細書中で使用される場合、水に対する親和性を欠き、水をはじく傾向があり、水を吸収せず、そして水中に溶解せず、水と混合もしない、物質をいう。
【００３１】
用語「単離された」とは、本明細書中に開示される種々の組成物を説明するために使用される場合、その天然環境の成分から同定され、そして分離および／または回収された、物質を意味する。例えば、単離されたポリペプチドまたはポリヌクレオチドは、天然では会合する少なくとも１種の成分との会合がない。その天然環境の夾雑成分とは、そのポリペプチドまたはポリヌクレオチドについての診断用途または治療用途を代表的に妨害する物質であり、そしてそれらとしては、酵素、および他のタンパク質性溶質または非タンパク質性溶質が挙げられ得る。単離された物質は、組換え細胞内にインサイチュでその物質を含む。しかし、単離された物質は、通常、少なくとも１回の精製工程により調製される。
【００３２】
「脂溶性」とは、本明細書中で使用される場合、疎水性液体（例えば、ヒマシ油）中で５ｇ／１００ｍｌ以上の溶解度を有する物質をいう。
【００３３】
用語「脂溶性緑茶ポリフェノール」とは、そのポリフェノールに結合した、例えばＣ１〜Ｃ３０の基を有する１つ以上の炭化水素鎖を有する緑茶ポリフェノールをいう。Ｃ１〜Ｃ３０の基としては、例えば、コレステロールが挙げられる。代表的な脂溶性緑茶ポリフェノールとしては、本明細書中に開示される式Ｉおよび式ＩＩによるものが挙げられる。この用語は、「修飾緑茶ポリフェノール」と交換可能に使用される。
【００３４】
用語「作動可能に連結した」とは、成分がその通常の機能を実施するように構成された並置物をいう。例えば、コード配列に作動可能に連結したコントロール配列またはプロモーターは、このコード配列の発現を行うことが可能であり、そしてタンパク質に作動可能に連結した細胞小器官局在化配列は、この連結したタンパク質を特定の細胞小器官に局在させるように方向付ける。
【００３５】
用語「薬学的に受容可能なキャリア」とは、生物に重大な刺激を引き起こさず、そして投与される化合物の生物学的活性および特性を阻止しない、キャリアまたは希釈剤をいう。
【００３６】
用語「薬学的に受容可能な塩」とは、遊離塩基の生物学的有効性および特性を保持し、そして無機酸または有機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、リンゴ酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、およびクエン酸など）との反応により得られる塩をいう。
【００３７】
「薬学的組成物」とは、本明細書中に記載される緑茶ポリフェノールまたはその薬学的に受容可能な塩のうちの１つ以上と、他の化学成分（例えば、生理学的に受容可能なキャリアおよび賦形剤）との混合物をいう。薬学的組成物の目的は、生物への化合物の投与を容易にすることである。
【００３８】
用語「プロドラッグ」とは、インビボで生物学的に活性な形態に転換する剤（核酸およびタンパク質が挙げられる）をいう。プロドラッグは、しばしば有用である。なぜなら、いくつかの状況において、プロドラッグは、親化合物より投与が容易であり得るからである。プロドラッグは、例えば、経口投与により生体利用可能であり得、一方で、その親化合物はそうではないかもしれない。プロドラッグはまた、薬学的組成物中で、親薬物より溶解度が改善しているかもしれない。プロドラッグは、種々の機構（酵素プロセスおよび代謝加水分解が挙げられる）によって、親薬物に転換され得る。Ｈａｒｐｅｒ，Ｎ．Ｊ．（１９６２）．Ｄｒｕｇ  Ｌａｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｊｕｃｋｅｒ編，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４：２２１−２９４；Ｍｏｒｏｚｏｗｉｃｈら（１９７７）．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｔｏ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｉｎ  Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編．Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｓ，ＡＰｈＡ；Ａｃａｄ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．；Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編，（１９７７）．Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，ＡＰｈＡ；Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編，（１９８５）Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ；Ｗａｎｇら（１９９９）Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇ，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ．５（４）：２６５−２８７；Ｐａｕｌｅｔｔｉら（１９９７）．Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ：Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．２７：２３５−２５６；Ｍｉｚｅｎら（１９９８）．Ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｅｓｔｅｒｓ  ａｓ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  β−Ｌａｃｔａｍ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１１，：３４５−３６５；Ｇａｉｇｎａｕｌｔら（１９９６）．Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  Ｉ．Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｐｒａｃｔ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．６７１−６９６；Ｍ．Ａｓｇｈａｒｎｅｊａｄ（２０００）．Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  Ｏｒａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｖｉａ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｇ．Ｌ．Ａｍｉｄｏｎ，Ｐ．Ｉ．ＬｅｅおよびＥ．Ｍ．Ｔｏｐｐ編，Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，ｐ．１８５−２１８；Ｂａｌａｎｔら（１９９０）Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｖｉａ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｒｏｕｔｅｓ  ｏｆ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａ��ｍａｃｏｋｉｎｅｔ．，１５（２）：１４３−５３；ＢａｌｉｍａｎｅおよびＳｉｎｋｏ（１９９９）．Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｒａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．，３９（１−３）：１８３−２０９；Ｂｒｏｗｎｅ（１９９７）．Ｆｏｓｐｈｅｎｙｔｏｉｎ（Ｃｅｒｅｂｙｘ）、Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０（１）：１−１２；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（１９７９）．Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ−−ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ，Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｃｈｅｍｉ．８６（１）：１−３９；Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編，（１９８５）Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｅｌｓｅｖｉｅｒ；Ｆｌｅｉｓｈｅｒら（１９９６）．Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ：ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．１９（２）：１１５−１３０；Ｆｌｅｉｓｈｅｒら（１９８５）．Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｅｎｚｙｍｅ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１１２：３６０−８１；Ｆａｒｑｕｈａｒ  Ｄ，ら（１９８３）．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，７２（３）：３２４−３２５；Ｈａｎ，Ｈ．Ｋ．ら（２０００）．Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｄｅｓｉｇｎ  ｔｏ  ｏｐｔｉｍｉｚｅ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ，ＡＡＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉ．，２（１）：Ｅ６；Ｓａｄｚｕｋａ  Ｙ．（２０００）．Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ  ａｎｄ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｔｏ  ａｃｔｉｖｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ，Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．，１（１）：３１−４８；Ｄ．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ（２０００）Ｒａｔｉｏｎａｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  脂質ｓ  ａｓ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｃａｒｒｉｅｒｓ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１１補遺２：Ｓ１５−２７；Ｗａｎｇ，Ｗ．ら（１９９９）Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇｓ．Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，５（４）：２６５−８７。
【００３９】
用語「置換Ｃ１〜Ｃ３０」とは、１個〜３０個の炭素のアルキル鎖、アルケニル鎖、またはアルキニル鎖であって、１つ以上の炭素が独立して、１つ以上の基（ハロゲン、ヒドロキシ基、アリール基、複素環式基、またはアルキルエステルが挙げられるが、これらに限定されない）で置換されている、鎖をいう。Ｃ１〜Ｃ３０の範囲は、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９などの、Ｃ３０まで、およびＣ１〜Ｃ３０に入る範囲（例えば、Ｃ１〜Ｃ２９、Ｃ２〜Ｃ３０、Ｃ３〜Ｃ２８など）を含む。この範囲はまた、Ｃ３０未満、Ｃ１９未満などを含む。
【００４０】
用語「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）または処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」とは、疾患、障害、症状または状態の１つ以上の症状または生理学的局面を、軽減すること、減少させること、または阻害することをいう。
【００４１】
「水溶性」とは、本明細書中で使用される場合、５ｇ／１００ｍｌ以上の水への溶解度を有する物質をいう。
【００４２】
用語「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）または処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」とは、疾患、障害、症状または状態の１つ以上の症状または生理学的局面を、軽減すること、減少させること、または阻害することをいう。
【００４３】
本明細書中に提供される数値範囲は、間にある各整数を含むことが理解される。
【００４４】
（ＩＩ．単純ヘルペスウイルス）
単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）１型および２型は、Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅファミリー、Ａｌｐｈａｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅサブファミリー、およびＳｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ属に属している。
【００４５】
（Ａ．ＨＳＶ構造）
ＨＳＶウイルスは、直径約２００ｎｍの大きさを有する。ＨＳＶ１および２は、エンベロープを有する約１５２Ｋｂ長の２本鎖ＤＮＡウイルスであり、ユニーク長（Ｕｌ）およびユニーク短（Ｕｓ）領域として公知である２つのＤＮＡセグメントを含む（Ｇａｒｎｅｒ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ．２００３；５５：１４９７−１５１３）。ビリオンは、３つの主要な構造；エンベロープと呼ばれる外側部分（これは、１１個の糖タンパク質（ｇＢ、ｇＣ、ｇＤ、ｇＥ、ｇＧ、ｇＨ、ｇＩ、ｇＪ、ｇＫ、ｇＬ、ｇＭ）を含む）、１５個のタンパク質からなるテグメント層、ならびにウイルスＤＮＡおよび４個の構造タンパク質を封入する正二十面体のカプシドを有する（Ｆｏｓｔｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．１９９８；７５：１５１−１６０；Ｇａｒｎｅｒ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ．２００３；５５：１４９７−１５１３；Ｗｉｌｌａｒｄ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００２；１０：５２２０−５２３２）。
【００４６】
（Ｂ．ＨＳＶライフサイクル）
ヒトがＨＳＶに曝露されるとすぐに、細胞、分子および免疫システム生物学における一連の重要なイベントが起こる。ウイルスエンベロープ上に位置するいくつかの糖タンパク質は、細胞認識、細胞融合、最終的には細胞侵入に関与する（Ｓｐｅａｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００５；３４４：１７−２４；Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ，ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ．２００６；１０４（８）：２９０３−２９０８）。ＨＳＶとその宿主細胞との最初の接触は、細胞表面プロテオグリカンに含まれるヘパラン硫酸（ｈｅｐａｒｉｎ  ｓｕｌｆａｔｅ）鎖への結合による。ウイルス糖タンパク質ＢおよびＣは、この結合反応を補助し、これにより、糖タンパク質Ｄは、宿主細胞受容体の１つにリクルートされて結合する。一旦、糖タンパク質Ｄが細胞受容体に結合すると、糖タンパク質Ｂ、ＨおよびＬは、糖タンパク質Ｄおよび細胞受容体と共に融合複合体を形成する。この融合複合体は、ビリオンの形質膜が宿主細胞形質膜に融合することを可能にし、この後、ウイルスのヌクレオカプシドおよびテグメントが侵入する。結果として、糖タンパク質Ｄは、細胞認識および受容体結合に必須であるが、５個の糖タンパク質全てが、ウイルス吸着および融合が首尾よく行われるために必要である（Ｃａｒｆｉ，ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ．２００１；８：１６９−１７９；Ｓｐｅａｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００５；３４４：１７−２４）。
【００４７】
ＨＳＶ−１の糖タンパク質Ｂ内の短いリシンリッチ領域（ＫＰＫＫＮＫＫＰＫ（配列番号１））が、Ｖｅｒｏ細胞を用いた実験において除去された場合、ヘパラン硫酸（ｈｅｐａｒｉｎ  ｓｕｌｆａｔｅ）が、受容体によって結合されないことがあった。糖タンパク質ＢおよびＣは、ヘパラン硫酸鎖での最初の結合において必要とされないが、これらは、このプロセスをより効率的にする。したがって、ｇＤだけでなく、ｇＢ内のこのリシンリッチ領域も、宿主細胞への十分なウイルス侵入になくてはならないようである（Ｃａｒｆｉ，ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ．２００１；８：１６９−１７９；Ｓｐｅａｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００５；３４４：１７−２４）。
【００４８】
糖タンパク質Ｄは、いくつかの宿主受容体のうちの１つを認識し、結合し得る。これらとしては、ＨＶＥＭ（ヘルペスウイルス侵入メディエーター）、ＴＮＦ−受容体ファミリーのメンバー；ネクチン−１またはネクチン−２、免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバー；ならびにヘパラン硫酸（ｈｅｐａｒｉｎ  ｓｕｌｆａｔｅ）および３−Ｏ−スルホトランスフェラーゼの反応によって生じた細胞表面上の場所が挙げられる（Ｓｈｕｋｌａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ．２００１；１０８：５０３−５１０；Ｓｐｅａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００５；３４４：１７−２４）。ＨＳＶ−１糖タンパク質Ｄの構造は、Ｘ線結晶学によって得られており、ｇＤ内のいくつかのアミノ酸残基は、受容体ＨＶＥＭおよびネクチン−１の結合に重要であることが分かっている（Ｃａｒｆｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ．２００１；８：１６９−１７９；Ｍａｎｏｊ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ．２００４；１０１（３４）：１２４１４−１２４２１；Ｗｈｉｔｅｂｅｃｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．１９９７；７１（８）：６０８３−６０９３）。ＨＳＶ−１糖タンパク質ＤとＨＳＶ−２糖タンパク質Ｄとは、８２％のアミノ酸類似性を含んでいることが分かっている。
【００４９】
一旦、細胞内に入ると、ＨＳＶは、内部細胞コンパートメントにアクセスするために細胞輸送機構を乗っ取る。ウイルス粒子は、ウイルス成分が、非常に効率的な方法でそれらの目的地に到達することを可能にしている極めて迅速な様式で、細胞質の様々な領域の至る所に移動する（Ｗｉｌｌａｒｄ，Ｍ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００２；１０：５２２０−５２３２）。ウイルス粒子は、ヌクレオポア（ｎｕｃｌｅｏｐｏｒｅ）を介して核に送られ、そこでウイルスゲノムの侵入が起こり、ウイルス転写および複製が開始される。ＨＳＶは、微小管を使用し、ダイニンモーターシステムの助けを借りながら、逆方向の輸送によって核へ移動する（Ｂｅａｒｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅ．２０００；９７（１４）：８１４６−８１５０．Ｇａｒｎｅｒ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ．２００３；５５：１４９７−１５１３．Ｓｔａｎｂｅｒｒｙ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ  ｏｆ  Ｍｉｓｓｉｓｓｉｐｉ．２ｎｄ  Ｅｄ．２００６）。核に侵入することができることは、ウイルス転写、翻訳、複製、および子孫ヌクレオカプシド中へのＤＮＡのパッケージングに必須である。興味深いことに、扁平な細胞、例えば、Ｖｅｒｏ細胞において、微小管の使用を介したウイルス粒子の輸送プロセスは、首尾よく感染が達成されるために必ずしも必要というわけではないのかもしれない。Ｖｅｒｏ細胞は、ビリオンの核への輸送に拡散を使用することができる（Ｎｅｗｃｏｍｂ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ．２００７；３７０：６３３−６４２．）。
【００５０】
ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２は溶解感染中に上皮細胞に感染し、潜伏感染においては感覚ニューロンに移動する。潜伏感染中、ウイルスは溶解サイクルへと誘発されるまで、神経細胞内で休止状態のままでいる（Ｋａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００３；３１２：２３３−２４４；Ｓｔａｎｂｅｒｒｙ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ  ｏｆ  Ｍｉｓｓｉｓｓｉｐｉ．２ｎｄ  Ｅｄ．２００６）。これは、ＨＳＶ感染患者の生涯にわたってＨＳＶが永続的に生き残り、複製することを可能にする（Ｋａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００３；３１２：２３３−２４４；Ｗｙｓｏｃｋａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．２００３；２８（６）：２９４−３０４．）。ウイルスが潜伏するためには、ウイルス粒子は、初めの感染部位での神経軸索から、感覚神経節（ｇａｎｇｌｉａ３）へと移動しなければならない。潜伏感染神経細胞は、ＨＳＶのＤＮＡを複製しないが、これらの細胞は、潜伏関連転写物（ＬＡＴ）として公知の、ゲノムの短い配列のｍＲＮＡを生じる。この配列を除去した研究が行われ、ウイルスが再発性感染を引き起こすことができなかったことが示された（Ｋａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００３；３１２：２３３−２４４．）。
【００５１】
これらの潜伏感染細胞は、長期間にわたって非反応性であり得るが、その一生の間、いつでも再活性化し得る。ウイルス再活性化に関連し得るいくつかの因子としては、例えば、ストレス、熱、寒さ、紫外線光、情動応答、および下垂体ホルモンまたは副腎ホルモンがある。ウイルスが再活性化されると、ウイルスゲノムは、軸索内での順方向の輸送によって上皮に移動し、そこで、ウイルス複製が起こる（Ｆａｔａｈｚａｄｅｈ，ｅｔ  ａｌ．Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ．２００７；６（２７）：７３７−７６３；Ｓｐｅａｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００５；３４４：１７−２４）。
【００５２】
ＨＳＶ感染の天然宿主として唯一公知であるのはヒトであるが、種々の様々な動物由来の培養細胞、例えば、ミドリザル腎臓細胞由来のＶｅｒｏ細胞も、実験室内でＨＳＶを感染させることができる（Ｆｏｓｔｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．１９９８；７５：１５１−１６０）。ＨＳＶビリオンを用いたインビトロ実験は、動物の免疫システムを伴なわないため、ウイルスが細胞に効率的に感染することを可能にする。したがって、いくつかの細胞は、ＨＳＶのエンベロープ糖タンパク質ｇＤによるウイルス侵入に必要な受容体のうちの少なくとも１つを含む（Ｓｐｅａｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００５；３４４：１７−２４．）。
【００５３】
処置されない場合、単純ヘルペスには、初期発現から完全治癒まで５つの段階がある。最初の徴候は、前駆段階（本明細書では発生段階ともいう）であり、これは病変が出現するまさにその場所における、刺痛、かゆみ、炎症、紅斑、過敏症、および／またはうずきからなる。前駆（発生）は、通例、１〜２日間続き、水疱が現れたときに（これは水疱段階の開始のシグナルである）、終わる。水疱は透明な黄色の流体で満たされている。いくつかの別々の水疱が現れて合体し、さらなる水疱が介在スペース中に出現する場合もある。約２日後、水疱は破裂を開始して紅斑性開放創が露出し、色が灰色になる。これは湿潤段階である。高度に感染性の黄色流体が１日程度にわたって創傷から滲み出す。創傷は、痂皮段階において、黄色の痂皮で覆われ、これは、２〜３日間続く。痂皮の下の皮膚では、痛みとかゆみが続き、痂皮は破れて出血が開始する。この段階がゆっくりと消散するにつれて、患者は治癒段階に入る。２次的な痂皮は次第に小さくなっていき、ゆっくりと脱落してピンクの皮膚が現れ、周囲の影響を受けていない表皮の外観を徐々に呈する。発生から治癒までの上記状態の通常の持続期間は、７〜１０日間であるが、２週間も長く続くことがあり得る。
【００５４】
本発明の１つの局面は、ＨＳＶ感染の１つまたは全ての段階、例えば、単純ヘルペス形成を緩和および／排除する組成物の供給である。
【００５５】
（Ｃ．ＨＳＶの処置）
最も店頭販売されている単純ヘルペスの局所処置薬は、痛みを低減するための局所麻酔薬、皮膚保護剤（石油または酸化亜鉛）、または消毒剤である。これらの局所処置薬の大多数は、痛み、不快感および単純ヘルペスの出現を低減しようとするものであるが、通例、病変の持続期間にはほとんど効果がない。さらに、抗ウイルス医薬は、病変のアウトブレイクの発生を低減しようとする試み、および身体中のウイルス活性を損なわせようとする試みにおいて開発されてきた。これらの抗ウイルス医薬の多くは、経口投与される。抗ウイルス医薬はまた、病変内のウイルスの活性をスローダウンさせようとする試みにおいて局所処置薬として開発されてきており、通例、小疱形成の前に投与されたときに、最も有効である。
【００５６】
口部または性器ＨＳＶ感染の処置のための、現在の好ましい抗ウイルス薬物は、アシクロビル（Ｚｏｖｉｒａｘ，Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐａｒｋ，ＮＣ）、バラシクロビル（Ｖａｌｔｒｅｘ，Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐａｒｋ，ＮＣ）、パンシクロビル（ｐｅｎｃｉｃｌｏｖｉｒ）（Ｄｅｎａｖｉｒ，Ｎｏｖａｒｉｓ  Ｐｈａｒｍａ  ＧｍｂＨ，Ｗｅｈｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、およびファムシクロビル（ｆａｍｉｃｉｃｌｏｖｉｒ）（Ｆａｍｖｉｒ，Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｅａｓｔ  Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪ）である。これらの薬物は、しばしば、７〜１０日間にわたって経口投与される。バラシクロビルおよびファムシクロビルは両方とも、身体中で、薬の活性形態（アシクロビルおよびパンシクロビル）へと分解される。ヌクレオシドの類似体であることから、これらの薬物は、ウイルス複製を停止させることができる（Ｂｒａｄｙ，ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２００３；６１：７３−８１；Ｆａｔａｈｚａｄｅｈ，ｅｔ  ａｌ．Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ．２００７；６（２７）：７３７−７６３；Ｍｏｒｆｉｎ，ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００２；２６：２９−３７）。
【００５７】
ＨＳＶチミンキナーゼは、アシクロビルをリン酸化し、宿主細胞は、それをさらにリン酸化して、結果として活性なアシクロビル三リン酸塩が生じる。活性アシクロビルは、その後、ウイルスＤＮＡポリメラーゼを阻害し得、これにより、ウイルスＤＮＡの延長を防ぐ。これらの薬物を使用することに伴なう１つの問題は、これらの薬物は、ＨＳＶがそのチミンキナーゼを変え始め、そしてアシクロビルおよびヌクレオシドの類似体として機能する他の薬物に対して抵抗性となるまでに限り有効であることである（Ｆｒｏｂｅｒｔ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２００８；７９２８-７９３６；Ｌｅｂｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００６；３７：３４−３７）。
【００５８】
ファムシクロビルの作用モードはまた、アシクロビルと同様のプロセスにおいてウイルスＤＮＡポリメラーゼを阻害することによるが、その効能はアシクロビルより弱い。ファムシクロビルは、細胞内で、より高い濃度を得ることができ、アシクロビルと比較して、より長い半減期を有する。ファムシクロビルはまた、アシクロビルよりも低頻度での投与を可能にする。最後に、非環式ヌクレオシド５’−一リン酸であるシドフォビル（ｃｉｄｏｆｏｖｉｒ）は、宿主細胞キナーゼによってリン酸化され、上記様式でウイルスＤＮＡポリメラーゼを阻害することができる。シドフォビルへのＨＳＶ抵抗性はまた、ＤＮＡポリメラーゼ遺伝子が変異したときに生じ得る（Ｂｒａｄｙ，ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２００３；６１：７３−８１；Ｓｔａｎｂｅｒｒｙ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ  ｏｆ  Ｍｉｓｓｉｓｓｉｐｉ．２ｎｄ  Ｅｄ．２００６）。これらの様々な薬物の服用から生じる強い抵抗性から、ＨＳＶの排出を防ぐために、新規かつより有効な医薬が開発されることが必要とされている（Ｍｏｒｆｉｎ，ｅｔ  ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００２；２６：２９−３７）。
【００５９】
（ＩＩＩ．緑茶ポリフェノール）
１つの実施形態は、１種以上の緑茶ポリフェノール、好ましくは、Ｃ１〜Ｃ３０の基を有する１つ以上の炭化水素鎖で修飾された１種以上の緑茶ポリフェノール、またはこれらの組み合わせを有する組成物を提供する。代表的な緑茶ポリフェノールとしては、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート、（−）−エピカテキン、（−）−エピガロカテキン、および（−）−エピカテキン−３−ガレートが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい修飾ＧＴＰとしては、修飾（−）−エピガロカテキン−３−ガレート、その薬学的に受容可能な塩、プロドラッグ、または誘導体が挙げられ、コントロールと比較して、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染を処置するために有効な量である。実験用のコントロールまたはコントロール群は、当該分野において公知である。一般に、ＨＳＶ複製の阻害に対する緑茶ポリフェノール組成物の効果は、ＨＳＶの阻害に対する、緑茶ポリフェノールを含まない組成物の効果と比較され得る。代表的な宿主としては、哺乳動物（例えば、ヒト）、または哺乳動物（例えば、ヒト）由来の細胞が挙げられる。
【００６０】
修飾ＧＴＰ（緑茶ポリフェノールの誘導体または改変物）としては、溶解度または宿主におけるバイオアベイラビリティを増加させるための化学修飾を有する緑茶ポリフェノールが挙げられる。特定の実施形態において、これらの化学修飾としては、生理学的条件下で電荷を有する化学基の付加が挙げられる。他の実施形態において、修飾としては、緑茶ポリフェノールと、他の生物学的部分（例えば、ポリペプチド、炭水化物、脂質、またはこれらの組み合わせ）との結合が挙げられる。好ましい修飾としては、Ｃ１〜Ｃ３０の基を有する１つ以上の炭化水素鎖での修飾が挙げられる。
【００６１】
別の実施形態は、１種以上の緑茶ポリフェノール、修飾緑茶ポリフェノールを、必要に応じて薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて含有する、薬学的組成物を提供する。これらの１種以上の緑茶ポリフェノールおよび／または修飾緑茶ポリフェノールは、宿主におけるウイルス感染の１つ以上の症状の処置（例えば、ＨＳＶ複製の阻害）のために有効な量である。好ましい組成物は、抗ウイルス量の修飾緑茶ポリフェノールを含有する。他の実施形態において、この組成物中の活性成分は、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート、Ｃ１〜Ｃ３０の基を有する１つ以上の炭化水素鎖で修飾された（−）−エピガロカテキン−３−ガレート、またはこれらの組み合わせ、その薬学的に受容可能な塩もしくはプロドラッグから本質的になる。この活性成分は、単一の光学異性体の形態であり得る。代表的に、１つの光学異性体は、他の光学異性体と比較して、８５重量％、９０重量％、９５重量％、または９９重量％多く存在する。この組成物はまた、少なくとも１種のさらなる活性成分（例えば、第二の治療剤）を含有し得ることが理解される。本開示の薬学的組成物のさらなる説明が、以下に提供される。
【００６２】
（Ａ．没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ））
緑茶は、植物Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓから製造される。Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓは、カテキンポリフェノール、特に、没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ）に富む。ＥＧＣＧは、他のいずれの植物においても見出されておらず、チャにおいて見出される主要なカテキンである（Ｓｈａｒａｎｇｉ，Ｆｏｏｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００９；４２：５−６）。ＥＧＣＧは、ＦＤＡのリストに、安全な消費製品として載っている（Ｐａｔｅｒｓｏｎら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００５；３１０：４５１−４５３）。科学者らは、ＥＧＣＧが、エンベロープ糖タンパク質（ｇｐ１２０）のその受容体（ＣＤ４）への結合を阻害することによって、ＨＩＶを阻害し得ることを示した（Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２００６；１１８：１３６９−１３７４）。インフルエンザもまた、ＥＧＣＧによって、赤血球凝集素エンベロープ糖タンパク質との相互作用（これは、エンベロープ構造の変化をもたらし得る）を介して阻害される（Ｓｏｎｇら，Ａｎｔｉｖｉｒｕｓ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ．２００５；６８：６６−７４）。さらに、ＥＧＣＧはまた、ウイルスＤＮＡ合成を妨害し、これによりウイルス複製を止めることによって、Ｂ型肝炎を阻害する（Ｈｅら，Ｗｏｒｌｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０１１；１７（１１）：１５０７−１５１４）。
【００６３】
緑茶はまた、他の数種の研究の主題であるが、ウイルス学者らは、緑茶が様々なウイルス感染を阻害する能力を有するか否かに焦点を当てることを試みている。ベロ細胞、およびＨＳＶ−１とＨＳＶ−２との両方を用いて実施された研究において、研究者らは、ＥＧＣＧがＨＳＶ感染を濃度依存様式で首尾よく阻害すると結論付けた。他の緑茶カテキンもまた試験されたが、ＥＧＣＧのみが阻害効果を生じた。結果はまた、ＨＳＶ−１の吸着および侵入後にＥＧＣＧで処理したベロ細胞の処理が、ウイルス産生を阻害しないことを示した。ＥＧＣＧは、効果が見られるために、ウイルスが吸着される前に適用される必要がある。また、ＥＧＣＧでのベロ細胞の処理後、ＨＳＶビリオンのエンベロープが損傷された。その結果として、ＥＧＣＧは、ＨＳＶの阻害に対して直接的影響を有するようであった（Ｉｓａａｃｓら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．２００８；５２（３）：９６２−９７０）。
【００６４】
ＥＧＣＧで処理したＨＳＶ−１および処理していないＨＳＶ−１を、ｇＢ、ｇＤ、およびキャプシドタンパク質に対する抗体でＩｍｍｕｎｏｇｏｌｄ標識すると、処理していないビリオンと比較して、処理したビリオンにおいて３０％および４０％の低下があった。従って、一旦、ウイルスをＥＧＣＧで処理すると、そのエンベロープ糖タンパク質は、モノクローナル抗体に結合する能力が低下する（Ｉｓａａｃｓら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．２００８；５２（３）：９６２−９７０）。
【００６５】
緑茶中のＥＧＣＧ化合物がＨＳＶを阻害することはもはや疑いがないが、ＥＧＣＧを含む局所外用薬を調製する際に直面する問題は、ＥＧＣＧが非常に不安定であり、非常に急速に酸化され、適用し得るかなり前にその抗ウイルス活性を失うことである。ＥＧＣＧを用いてなされた研究のほとんどは、新たに調製したＥＧＣＧを用いて行われる必要がある。そうでなければ、ＥＧＣＧは、その強力な抗ウイルス活性を失う（Ｃｈｅｎら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｚｈｅｊｉａｎｇ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００３；６：７１４−７１８；Ｃｈｅｎら，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｇｒｅｅｎ  Ｔｅａ  ａｎｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．ＩＳＢＮ  ９７８−１−６０７４１−０４５−４，編者：Ｈ．ＭｃＫｉｎｌｅｙおよびＭ．Ｊａｍｉｅｓｏｎ，ｐｐ．（Ｃ）２００９  Ｎｏｖａ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．）。また、ＥＧＣＧは水溶性であるので、局所外用薬として利益を得ることができない。
【００６６】
（Ｂ．修飾緑茶ポリフェノール組成物）
緑茶ポリフェノールは、脂質媒体への溶解度が乏しい。従って、親油性茶ポリフェノールはまた、脂溶性媒体中での使用について開示される。親油性茶ポリフェノール（ＬＴＰまたは修飾緑茶ポリフェノール）は、緑茶ポリフェノール（ＧＴＰ）の触媒エステル化により調製され得る。
【００６７】
従って、非修飾緑茶ポリフェノールに対して、皮膚および細胞膜への緑茶ポリフェノールの透過性を増加させるため、または疎水性媒体中での溶解度を増加させるために修飾された緑茶ポリフェノールを含有する組成物が、提供される。修飾され得る緑茶ポリフェノールとしては、（−）−エピカテキン（ＥＣ）、（−）−エピガロカテキン（ＥＧＣ）、（−）−エピカテキン−３−ガレート（ＥＣＧ）、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート（ＥＧＣＧ）、プロアントシアニジン、これらのエナンチオマー、これらのエピマー、これらの異性体、これらの組み合わせ、およびこれらのプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。１つの実施形態は、エステル結合したＣ１〜Ｃ３０の炭化水素鎖（例えば、脂肪酸）を１つ以上の位置に有する、緑茶ポリフェノールを提供する。別の実施形態は、ポリフェノールに結合した１つ以上のコレステロール基を有する、緑茶ポリフェノールを提供する。このコレステロール基は、例えば、エーテル結合によってこのポリフェノールに直接結合し得るか、またはＣ１〜Ｃ１０のリンカーが、このコレステロール基をこのポリフェノールに接続し得る。
【００６８】
別の実施形態は、１つ以上のアシルオキシ基を有する緑茶ポリフェノール化合物を提供し、このアシル基は、Ｃ１〜Ｃ３０である。アルキル鎖、アルケニル鎖、またはアルキニル鎖の、例えば脂肪酸エステル化を介する緑茶ポリフェノールへの付加は、非修飾緑茶ポリフェノールと比較して、緑茶ポリフェノールの安定性を増加させ、そして疎水性媒体（脂質、脂肪、石鹸、洗剤、界面活性剤または油が挙げられる）への緑茶ポリフェノールの溶解度を増加させると考えられる。１つ以上の炭化水素鎖（例えば、エステル結合したＣ１〜Ｃ３０の基またはＣ１〜Ｃ３０のアシルオキシ基）を有する緑茶ポリフェノールは、非修飾緑茶ポリフェノールと比較して、皮膚または細胞膜により透過しやすく、これによって、エステル結合した炭化水素鎖を含む緑茶ポリフェノールまたはアシルオキシを含む緑茶ポリフェノールが、細胞に容易に侵入できるようにし、そして細胞に対する生物学的効果（例えば、遺伝子発現の調節）を有するようにすると考えられる。１つ以上の炭化水素鎖は、エステル結合以外の結合（例えば、チオ結合）を使用して、緑茶ポリフェノールに結合してもよいことが理解される。エステル化緑茶ポリフェノールは、皮膚をきれいにして緑茶ポリフェノールを皮膚に送達する組成物を製造するために、油、洗剤、界面活性剤、またはこれらの組み合わせと合わせられ得る。これらの油、洗剤、または界面活性剤は、有利なことに、緑茶ポリフェノールと水性媒体との接触を減少させることによって、緑茶ポリフェノールの安定性を増大させる。特定の実施形態は、本開示の修飾緑茶ポリフェノールの単一の光学異性体、エナンチオマー、またはエピマーを提供する。他の実施形態は、本開示の修飾緑茶ポリフェノールの単一の光学異性体、エナンチオマー、またはエピマーを含有する組成物を提供する。
【００６９】
１つの実施形態は、式Ｉ：
【００７０】
【化４】
2013014568.tif 000006
による化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供し、式Ｉにおいて、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ７は各々独立して、Ｈ、ＯＨ、
【００７１】
【化５】
2013014568.tif 000007
であり；
ここでＲ８は、直鎖、分枝鎖または環状の、飽和または不飽和の、置換または非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ８が環状である場合、Ｒ８はＣ３〜Ｃ３０の基であり；そして
Ｒ６は、Ｏ、−ＮＲ９Ｒ１０、またはＳであり、ここでＲ９およびＲ１０は独立して、水素であるか、または直鎖、分枝鎖、もしくは環状の、飽和もしくは不飽和の、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ９および／またはＲ１０が環状である場合、Ｒ９および／またはＲ１０はＣ３〜Ｃ３０の基であり；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ９、またはＲ１０のうちの少なくとも１つは、
【００７２】
【化６】
2013014568.tif 000008
であり；
この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００７３】
式Ｉの好ましい実施形態において、Ｒ８は、直鎖または分枝鎖のアルキル鎖である。式Ｉのより好ましい実施形態において、Ｒ８は、直鎖または分枝鎖のＣ１６〜Ｃ２５アルキル基である。式Ｉの特に好ましい実施形態において、Ｒ８はＣ１７Ｈ３５基である。
【００７４】
１つの実施形態は、上記のとおりであるが、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、およびＲ７がＯＨである場合はＲ４が
【００７５】
【化７】
2013014568.tif 000009
ではない、式Ｉによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００７６】
１つの実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、またはＲ７のうちの少なくとも２つが独立して
【００７７】
【化８】
2013014568.tif 000010
であり；
ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５がＯＨであり、そしてＲ７が
【００７８】
【化９】
2013014568.tif 000011
である場合、Ｒ４が
【００７９】
【化１０】
2013014568.tif 000012
ではない、上記のような式Ｉによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００８０】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、またはＲ７のうちの少なくとも３つが独立して
【００８１】
【化１１】
2013014568.tif 000013
である、上記のような式Ｉによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００８２】
なお別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、またはＲ７のうちの少なくとも４つが独立して
【００８３】
【化１２】
2013014568.tif 000014
である、上記のような式Ｉによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００８４】
別の実施形態は、式ＩＩ：
【００８５】
【化１３】
2013014568.tif 000015
による化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供し、式ＩＩにおいて、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は各々独立して、Ｈ、ＯＨ、
【００８６】
【化１４】
2013014568.tif 000016
であり；
Ｒ１１は、直鎖、分枝鎖、または環状の、飽和または不飽和の、置換または非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ１１が環状である場合、Ｒ１１はＣ３〜Ｃ３０の基であり；
Ｒ５およびＲ６は独立して、Ｏ、−ＮＲ１２Ｒ１３またはＳであり、ここでＲ１２およびＲ１３は独立して、水素であるか、または直鎖、分枝鎖、もしくは環状の、飽和もしくは不飽和の、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ１２および／またはＲ１３が環状である場合、Ｒ１２および／またはＲ１３はＣ３〜Ｃ３０の基であり；そして
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも１つは独立して
【００８７】
【化１５】
2013014568.tif 000017
であり；
この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００８８】
式ＩＩの好ましい実施形態において、Ｒ１１は、直鎖または分枝鎖のアルキル鎖である。式ＩＩのより好ましい実施形態において、Ｒ１１は、直鎖または分枝鎖のＣ１６〜Ｃ２５アルキル基である。式ＩＩの特に好ましい実施形態において、Ｒ１１はＣ１７Ｈ３５基である。
【００８９】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも２つが独立して
【００９０】
【化１６】
2013014568.tif 000018
である、式ＩＩによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００９１】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも３つが独立して
【００９２】
【化１７】
2013014568.tif 000019
である、上記のような式ＩＩによる化合物を提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００９３】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも４つが独立して
【００９４】
【化１８】
2013014568.tif 000020
である、上記のような式ＩＩによる化合物を提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００９５】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０が各々独立して、Ｈ、ＯＨ、
【００９６】
【化１９】
2013014568.tif 000021
であり；
Ｒ１１が、直鎖、分枝鎖、または環状の、飽和または不飽和の、置換または非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ１１が環状である場合、Ｒ１１はＣ３〜Ｃ３０の基であり；
Ｒ５およびＲ６が独立して、Ｏ、−ＮＲ１２Ｒ１３またはＳであり、ここでＲ１２およびＲ１３は独立して、水素であるか、または直鎖、分枝鎖、または環状の、飽和または不飽和の、置換または非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ１２および／またはＲ１３が環状である場合、Ｒ１２および／またはＲ１３はＣ３〜Ｃ３０の基であり；そして
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも１つは独立して、
【００９７】
【化２０】
2013014568.tif 000022
であり；
そしてＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０がＯＨである場合、Ｒ４は
【００９８】
【化２１】
2013014568.tif 000023
ではない、式ＩＩによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【００９９】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも２つが独立して
【０１００】
【化２２】
2013014568.tif 000024
である、式ＩＩによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを、必要に応じて賦形剤と組み合わせて含有する、組成物を提供する。
【０１０１】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも３つが独立して
【０１０２】
【化２３】
2013014568.tif 000025
である、上記のような式ＩＩによる化合物を、必要に応じて賦形剤と組み合わせて含有する、組成物を提供する。
【０１０３】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも４つが独立して
【０１０４】
【化２４】
2013014568.tif 000026
である、上記のような式ＩＩによる化合物を、必要に応じて賦形剤と組み合わせて含有する、組成物を提供する。
【０１０５】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０が各々独立して、Ｈ、ＯＨ、
【０１０６】
【化２５】
2013014568.tif 000027
であり；
Ｒ１１が、直鎖、分枝鎖、または環状の、飽和または不飽和の、置換または非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ１１が環状である場合、Ｒ１１はＣ３〜Ｃ３０の基であり；
Ｒ５およびＲ６が独立して、Ｏ、−ＮＲ１２Ｒ１３またはＳであり、ここでＲ１２およびＲ１３は独立して、水素であるか、または直鎖、分枝鎖、もしくは環状の、飽和もしくは不飽和の、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ１２および／またはＲ１３が環状である場合、Ｒ１２および／またはＲ１３はＣ３〜Ｃ３０の基であり；そして
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも１つは独立して
【０１０７】
【化２６】
2013014568.tif 000028
であり；
そしてＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０がＯＨである場合、Ｒ４は
【０１０８】
【化２７】
2013014568.tif 000029
ではない、式ＩＩによる化合物あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを、必要に応じて賦形剤と組み合わせて含有する、組成物を提供する。
【０１０９】
１つの実施形態は、式ＩＩＩ：
【０１１０】
【化２８】
2013014568.tif 000030
による化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供し、式ＩＩＩにおいて、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ７は各々独立して、Ｈ、ＯＨ、
【０１１１】
【化２９】
2013014568.tif 000031
であり；
ここでＲ８は、直鎖または分枝鎖のＣ１６〜Ｃ２５アルキル基であり、
Ｒ６は、Ｏ、−ＮＲ９Ｒ１０、またはＳであり、ここでＲ９およびＲ１０は独立して、水素であるか、または直鎖、分枝鎖、もしくは環状の、飽和もしくは不飽和の、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ９および／またはＲ１０が環状である場合、Ｒ９および／またはＲ１０はＣ３〜Ｃ３０の基であり；
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ９、またはＲ１０のうちの少なくとも１つは、
【０１１２】
【化３０】
2013014568.tif 000032
であり、この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【０１１３】
式ＩＩＩの特に好ましい実施形態において、Ｒ８はＣ１７Ｈ３５基である。
【０１１４】
１つの実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、またはＲ７のうちの１つ以上が
【０１１５】
【化３１】
2013014568.tif 000033
である、上記のような式ＩＩＩによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【０１１６】
１つの実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、またはＲ７のうちの少なくとも２つが独立して
【０１１７】
【化３２】
2013014568.tif 000034
である、上記のような式ＩＩＩによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【０１１８】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、またはＲ７のうちの少なくとも３つが独立して
【０１１９】
【化３３】
2013014568.tif 000035
である、上記のような式ＩＩＩによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【０１２０】
なお別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、またはＲ７のうちの少なくとも４つが独立して
【０１２１】
【化３４】
2013014568.tif 000036
である、上記のような式ＩＩＩによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【０１２２】
別の実施形態は、式ＩＶ：
【０１２３】
【化３５】
2013014568.tif 000037
による化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。式ＩＶにおいて、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は各々独立して、Ｈ、ＯＨ、
【０１２４】
【化３６】
2013014568.tif 000038
であり；
Ｒ１１は、直鎖または分枝鎖のＣ１６〜Ｃ２５アルキル基であり；
Ｒ５およびＲ６は独立して、Ｏ、−ＮＲ１２Ｒ１３またはＳであり、ここでＲ１２およびＲ１３は独立して、水素であるか、または直鎖、分枝鎖、もしくは環状の、飽和もしくは不飽和の、置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ３０の基であり、ここでＲ１２および／またはＲ１３が環状である場合、Ｒ１２および／またはＲ１３はＣ３〜Ｃ３０の基であり；そして
ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも１つは独立して
【０１２５】
【化３７】
2013014568.tif 000039
である。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【０１２６】
式ＩＶの特に好ましい実施形態において、Ｒ１１はＣ１７Ｈ３５基である。
【０１２７】
１つの実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの１つ以上が
【０１２８】
【化３８】
2013014568.tif 000040
である、上記のような式ＩＶによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【０１２９】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも２つが独立して
【０１３０】
【化３９】
2013014568.tif 000041
である、式ＩＶによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを提供する。この化合物は、必要に応じて賦形剤と組み合わせられる。
【０１３１】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも３つが独立して
【０１３２】
【化４０】
2013014568.tif 000042
である、上記のような式ＩＶによる化合物を、必要に応じて賦形剤と組み合わせて提供する。
【０１３３】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも４つが独立して
【０１３４】
【化４１】
2013014568.tif 000043
である、上記のような式ＩＶによる化合物を、必要に応じて賦形剤と組み合わせて提供する。
【０１３５】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも１つが独立して
【０１３６】
【化４２】
2013014568.tif 000044
である、式ＩＶによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを、必要に応じて賦形剤と組み合わせて含有する、組成物を提供する。
【０１３７】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも２つが独立して
【０１３８】
【化４３】
2013014568.tif 000045
である、式ＩＶによる化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩またはプロドラッグを、必要に応じて賦形剤と組み合わせて含有する、組成物を提供する。
【０１３９】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも３つが独立して
【０１４０】
【化４４】
2013014568.tif 000046
である、上記のような式ＩＶによる化合物を、必要に応じて賦形剤と組み合わせて含有する、組成物を提供する。
【０１４１】
別の実施形態は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０のうちの少なくとも４つが独立して
【０１４２】
【化４５】
2013014568.tif 000047
である、上記のような式ＩＶによる化合物を、必要に応じて賦形剤と組み合わせて含有する、組成物を提供する。
【０１４３】
１つの実施形態において、１つの脂肪酸でエステル化された緑茶ポリフェノールが提供される。別の実施形態は、少なくとも２つの脂肪酸でエステル化された緑茶ポリフェノールを提供する。特定の実施形態は、１６炭素より大きい炭化水素鎖を有する１つ以上の脂肪酸でエステル化された緑茶ポリフェノールを提供する。好ましい実施形態は、１７〜２５炭素長の炭化水素鎖を有する１つ以上の脂肪酸でエステル化された緑茶ポリフェノールを提供する。特に好ましい実施形態は、１つ以上のステアリン酸鎖でエステル化された緑茶ポリフェノールを提供する。
【０１４４】
代表的な緑茶ポリフェノールとしては、（−）−エピカテキン（ＥＣ）、（−）−エピガロカテキン（ＥＧＣ）、（−）−エピカテキン−３−ガレート（ＥＣＧ）、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート（ＥＧＣＧ）が挙げられるが、これらに限定されない。代表的な脂肪酸としては、ブタン酸、ヘキサン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、９−ヘキサデセン酸、オクタデカン酸（ステアリン酸）、９−オクタデセン酸、１１−オクタデセン酸、９，１２−オクタデカジエン酸、９，１２，１５−オクタデカトリエン酸、６，９，１２−オクタデカトリエン酸、エイコサン酸、９−エイコセン酸、５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸、５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸、ドコサン酸、１３−ドコセン酸、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸、およびテトラコサン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４５】
（ＥＧＣＧのエステル化）
ＨＳＶ１とＨＳＶ２との両方が、世界中のヒト集団にとって重大な脅威をもたらし、そして毎年この疾患に感染するヒトの数は、増加していることが示されている。ＥＧＣＧの治療用途は、以前から提唱されているが、その元の形態のＥＧＣＧは、急激な酸化および抗ウイルス活性の損失なしに、局所塗布において実行するのに適切ではない。他方で、ＥＧＣＧエステルは、この目的のために理想的な候補である。ＥＧＣＧの脂質エステルは、酵素的にかまたは化学的にかのいずれかで、形成され得る（Ｃｈｅｎら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｚｈｅｊｉａｎｇ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００３；６：７１４−７１８）。
【０１４６】
ＥＧＣＧエステルは、以前に中国のＣｈｅｎらにより精製された。これは、緑茶ポリフェノールとＣ１６−脂肪酸との間での触媒エステル化から達成された。このエステル化は、４グラムの緑茶ポリフェノールと６．５グラムのヘキサデカノイルクロリドとを混合することによりもたらされた。次に、５０ｍＬの酢酸エチルおよび触媒を４０℃でこの混合物に添加した。３時間の撹拌後、この溶液を３０ｍＬの脱イオン水で３回洗浄した。次いで、その有機層をエバポレートし、そして減圧を使用して４０℃でさらに乾燥させた。これにより、８．７ｇの粉末生成物が得られた。ＧＴＰとヘキサデカノイルクロリドとの間での類似のエステル化の合成の機構を、以下に示す（Ｃｈｅｎら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｚｈｅｊｉａｎｇ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００３；６：７１４−７１８）。
【０１４７】
【化４６】
2013014568.tif 000048
次に、高速（ｈｉｇｈ  ｃｕｒｒｅｎｔ）クロマトグラフィー分離を使用して、このＥＧＣＧエステル生成物を精製した。ｎ−ヘキサン−酢酸エチル−メタノール−水からなる２相（１：１）溶媒を、この分離カラムにおいて使用した。５グラムのＥＧＣＧエステルを５０ｍＬの上相溶液に溶解した。精製およびＨＰＬＣ分析の後に、ＥＧＣＧエステルが首尾よく精製されたようであった。ＥＧＣＧアシル誘導体の構造を以下に示す（この誘導体は、本明細書中でＥＧＣＧ−パルミテートとも称される）。（Ｃｈｅｎら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｚｈｅｊｉａｎｇ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００３；６：７１４−７１８）。
【０１４８】
【化４７】
2013014568.tif 000049
好ましい実施形態において、ＥＧＣＧは、上記構造による４’位でステアリン酸でエステル化される。
【０１４９】
特定の好ましい実施形態において、（−）−エピガロカテキン−３−ガレート（ＥＧＣＧ）は、以下の構造により、４’位で脂肪酸エステルでエステル化される：
【０１５０】
【化４８】
2013014568.tif 000050
ここでこの脂肪酸エステルは、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートと、ブタン酸、ヘキサン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸  （パルミチン酸）、９−ヘキサデセン酸、オクタデカン酸（ステアリン酸）、９−オクタデセン酸、１１−オクタデセン酸、９，１２−オクタデカジエン酸、９，１２，１５−オクタデカトリエン酸、６，９，１２−オクタデカトリエン酸、エイコサン酸、９−エイコセン酸、５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸、５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸、ドコサン酸、１３−ドコセン酸、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸またはテトラコサン酸とのエステルである。
【０１５１】
好ましい実施形態において、この脂肪酸エステルは、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートとステアリン酸とのエステルである。この好ましい実施形態におけるエステル化ＥＧＣＧの構造は、本明細書中で、ＥＧＣＧ−ステアレートと称される。
【０１５２】
好ましい実施形態において、この脂肪酸エステルは、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートとパルミチン酸とのエステルである。
【０１５３】
（Ｃ．生物活性成分および併用療法）
本開示の緑茶ポリフェノールを含有する組成物は、必要に応じて、もう１種の生物活性剤またはさらなる治療剤を含有する。特定の実施形態において、１種以上の生物活性剤は、緑茶ポリフェノールと結合体化し得る。生物活性剤としては、治療剤、予防剤および診断剤が挙げられる。これらは、有機分子または無機分子、タンパク質、ペプチド、糖類、多糖類、茶サポニン、ビタミン類、コレステロール、または核酸分子であり得る。代表的なビタミンとしては、脂溶性ビタミン（例えば、ビタミンＤ、ビタミンＥ、またはこれらの組み合わせ）が挙げられるが、これらに限定されない。治療剤の例としては、タンパク質（例えば、ホルモン、抗原、および増殖エフェクター分子）；核酸（例えば、アンチセンス分子）；ならびに有機低分子または無機低分子（例えば、抗菌剤、抗ヒスタミン薬、免疫調節剤、うっ血除去薬、神経活性剤、麻酔薬、アミノ酸、および鎮静剤）が挙げられる。診断剤の例としては、放射性同位体および放射線不透過剤が挙げられる。
【０１５４】
（１．抗乾癬剤）
修飾緑茶ポリフェノールに加えて、適切な抗乾癬剤としては、サリチル酸；フランカルボン酸モメタゾン；ステロイド（コルチゾンなどのコルチコステロイドおよびプロピオン酸オルクスクロベタゾール（ｏｌｕｘｃｌｏｂｅｔａｓｏｌ  ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）が挙げられる）；５−フルオロウラシル；エピネフリン；アントラリン；ビタミンＤ３アナログ（例えば、カルシポトリエン（ｃａｌｃｉｐｏｔｒｉｅｎｅ））；メトトレキサート；マソプロコール（ｍａｓｐｒｏｃｏｌ）；グルコン酸トリメタキセート（ｔｒｉｍｅｔｈａｘａｔｅ  ｇｌｕｃｏｎａｔｅ）；レチノイド；シクロスポリン；パクリタキセル；５−アミノレブリン酸；ベルガソール（ｂｅｒｇａｓｏｌ）；スズ−エチルエチオプルプリン（ｔｉｎ−ｅｔｈｙｌ  ｅｔｉｏ  ｐｕｒｐｕｒｉｎ）；ベンゾポルフィリン誘導体；抗体（例えば、ＡＢＸ−ＩＬ８抗体、ＣＤ１１ａモノクローナル抗体およびＩＣＭ３モノクローナル抗体）；酵素インヒビター（トリプターゼインヒビターおよびホスホリパーゼＡ−２インヒビターが挙げられる）；新脈管形成遮断剤；Ｔ細胞遮断剤、ならびにこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５５】
（２．抗真菌剤）
種々の公知の抗真菌剤が、記載される組成物を調製するために使用され得る。潜在的な抗真菌剤のリストは、「Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ-Ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」，第３２版，Ｋａｔｈｌｅｅｎ  Ｐａｒｆｉｔｔ，（１９９９）の３６７−３８９頁に見出され得る。適切な抗真菌薬としては、アンホテリシン、アモロルフィン、ビフォナゾール、ブロモクロロサリチルアニリド（ｂｒｏｍｏｃｈｌｏｒｏｓａｌｉｃｙａｎｉｌｉｄｅ）、ブクロサミド、ブテナフィン、ブトコナゾール、カンジシジン、クロルダントイン、クロルミダゾール、クロルフェネシン、クロロキシレノール（ｃｈｌｏｒｘｙｌｅｎｏｌ）、シクロピロックスオラミン、シロフンギン、クロトリマゾール、クロコナゾール、エベルコナゾール（ｅｂｅｒｃｏｎａｚｏｌｅ）、エコナゾール、エニルコナゾール、フェンチクロール、フェンチコナゾール、フルコナゾール、フルシトシン、グリセオフルビン、ハチマイシン、ハロプロジン、ヒドロキシスチルバミン、イセチオネート、ヨードクロロヒドロキシキノン、イソコナゾール、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ラノコナゾール、ルフルカルバン（ｌｕｆｌｕｃａｒｂａｎ）、メパルトリシン、ミコナゾール、ナフチフィン、ナタマイシン、ネチコナゾール、ニフロキシム、ナイスタチン、オモコナゾール、オキシコナゾール、ペンタマイシン、プロピオン酸、プロチオファート、ピロールニトリン、ラブコナゾール（ｒａｖｕｃｏｎａｚｏｌｅ）、サペルコナゾール、硫化セレン、セルタコナゾール、スルベンチン、スルコナゾール、テルビナフィン、テルコナゾール（ｔｅｒｃｏｎａｚｏｌｅ）、チオコナゾール、トルシクラート、トルナフテート、トリアセチン、チミダゾール（ｔｉｍｉｄａｚｏｌｅ）、ウンデセン酸、ボリコナゾール、およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。これらの剤のうちのいくつかは、抗菌活性もまた有することが公知である。
【０１５６】
１つの実施形態において、抗真菌剤（単数または複数）は、アゾールである。適切なイミダゾール抗真菌剤およびトリアゾール抗真菌剤は、フルコナゾール、チミダゾール、セクニダゾール、硝酸ミコナゾール、エコナゾール、ハロプロジン、メトロニダゾール、イトラコナゾール、テルコナゾール、ポサコナゾール（ｐｏｓａｃｏｎａｚｏｌｅ）、ラブコナゾール、ケトコナゾール、クロトリマゾール、サピルコナゾール（ｓａｐｉｒｃｏｎａｚｏｌｅ）およびこれらの組み合わせである。
【０１５７】
代替の実施形態において、抗真菌剤（単数または複数）は、クロロキシレノール、ウンデシレン酸、硫化セレン、ヨードクロロヒドロキシキノン、ブロモクロロサリチルアニリド、トリアセチン、またはこれらの組み合わせである。
【０１５８】
他の抗真菌剤としては、ベンスルダジン酸、安息香酸、ビフェナミン、クロコナゾール（ｃｌｏｃｏｎａｚｏｌｅ）、クロキシキン、デルモスタチン（ｄｅｒｍｏｓｔａｔｉｎ）、ハレタゾール、モネンシン、オキシコナゾール、ニトレート、ペチロシン、ピリチオン（ｐｙｒｉｔｈｉｏｎｅ）、ルビジェルビン（ｒｕｂｉｊｅｒｖｉｎｅ）、テルビナフィン、チオコナゾール（ｔｉｃｏｎａｚｏｌｅ）、およびウンデシレン酸（ｕｎｄｅｃｙｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）が挙げられる。
【０１５９】
（３．抗菌剤）
種々の公知の抗菌剤が、記載される組成物を調製するために使用され得る。潜在的な抗菌剤の列挙は、「Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ-Ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」，第３２版，Ｋａｔｈｌｅｅｎ  Ｐａｒｆｉｔｔ，（１９９９）の１１２−２７０頁に見出され得る。有用な抗菌剤のクラスとしては、アミノ配糖体、抗マイコバクテリア薬、セファロスポリンおよびβ−ラクタム、クロラムフェニコール、グリコペプチド、リンコサミド（ｌｉｎｃｏｓａｍｉｄｅ）、マクロライド、ペニシリン、キノロン、スルホンアミドおよびジアミノピリジン、テトラサイクリン、および多様なものが挙げられる。好ましい実施形態において、抗菌剤は、メトロニダゾール、チミダゾール、セクニダゾール、エリスロマイシン、バクトバン（ｂａｃｔｏｂａｎ）、ムピロシン、ネオマイシン、バシトラシン、シクロピロクス（ｃｉｃｌｏｐｒｏｘ）、フルオロキノロン、オフロキサシン、セファレキシン、ジクロキサシリン、ミノサイクリン、リファンピン、ファムシクロビル、クリンダマイシン、テトラサイクリンおよびゲンタマイシンからなる群より選択される。
【０１６０】
適切なアミノ配糖体としては、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓおよび他の放線菌目由来の抗生物質が挙げられ、ストレプトマイシン、フラマイセチン、カナマイシン、ネオマイシン、パロモマイシン（ｐａｒａｍｏｍｙｃｉｎ）、およびトブラマイシン、ならびにゲンタマイシン、シソマイシン（ｓｉｓｓｏｍｙｃｉｎ）、ネチルマイシン、イセパマイシン、およびミクロノマイシン（ｍｉｃｒｏｎｏｍｙｃｉｎ）が挙げられる。
【０１６１】
適切な抗マイコバクテリア薬としては、リファマイシン、リファキシミン、リファンピシン、リファブチニソニアジド（ｒｉｆａｂｕｔｉｎｉｓｏｎｉａｚｉｄ）、ピラジンアミド、エタンブトール、ストレプトマイシン、チオアセタゾン、アミノサリチル酸、カプレオマイシン、シクロセリン、ダプソン、クロファジミン、エチオナミド、プロチオナミド、オフロキサシン、およびミノサイクリンが挙げられる。
【０１６２】
セファロスポリンおよびβ−ラクタムは一般に、グラム陽性菌に対する活性を有し、そしてより新しい世代の化合物は、グラム陰性菌に対する活性もまた有する。適切なセファロスポリンおよびβ−ラクタムとしては、以下が挙げられる：
第一世代；セファロチン、セファゾリン（ｃｅｐｈａｚｏｌｉｎ）、セファラジン、セファロリジン、セフロキサジン、セファドロキシル（ｃｅｐｈａｄｒｏｘｉｌ）、セファトリジン、セファレキシン、ピブセファレキシン（ｐｉｖｃｅｐｈａｌｅｘｉｎ）、セファクロール、およびセフプロジル。
【０１６３】
第二世代；セファマンドール（ｃｅｐｈａｍａｎｄｏｌｅ）、セフロキシムアキセチル、セフォニシド、セフォラニド、セフォチアム、およびセファマイシン。
【０１６４】
第三世代；セフォタキシム、セフメノキシム、セフォジジム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフィキシム、セフジニル、セフェタメト、セフポドキシム、セフチブテン、ラタモキセフ、セフタジジム、セフォペラゾン、セフピラミド、およびセフスロジン。
【０１６５】
第四世代：セフェピムおよびセフピローム。
【０１６６】
他のセファロスポリンとしては、セフォキシチン、セフメタゾール、セフォテタン、セフブペラゾン、セフミノクス、イミペネム、メロペネム、アズトレオナム、カルモナム、およびロラカルベフ（ｌｏｒａｃａｒｂｅｆ）が挙げられる。
【０１６７】
クロラムフェニコールは、グラム陽性菌およびグラム陰性菌を阻害する。適切なクロラムフェニコールとしては、クロラムフェニコール、そのコハク酸ナトリウム誘導体、チアンフェニコール、およびアジドアムフェニコールが挙げられる。
【０１６８】
適切なグリコペプチドとしては、バンコマイシン、テイコプラニン、およびラモプラニンが挙げられる。適切なリンコサミドとしては、リンコマイシンおよびクリンダマイシンが挙げられ、これらは、主として好気性の感染を処置するために使用される。
【０１６９】
マクロライドは、ラクタム環を有し、このラクタム環に、糖が結合している。適切なマクロライドとしては、エリスロマイシン、ならびにスピラマイシン（ｓｐｉｒｏｍｙｃｉｎ）、オレアンドマイシン、ジョサマイシン、キタマイシン（ｋｉｔａｍｙｃｉｎ）、ミデカマイシン、ロキタマイシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、ロキシスロマイシン、フルリスロマイシン（ｆｌｕｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ）、タイロシン；およびストレプトグラミン（ｓｔｒｅｐｔｇｒａｍｉｎ）（またはシネルギスチン（ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｎ））（プリスチナマイシン、およびバージニアマイシンが挙げられる）；ならびにこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１７０】
適切なペニシリンとしては、天然ペニシリンならびに半合成ペニシリンＦ、Ｇ、Ｘ、Ｋ、およびＶが挙げられる。より新しいペニシリンとしては、フェネチシリン、プロピシリン、メチシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、オキサシリン、ナフシリン、アンピシリン、アモキシシリン、バカンピシリン、ヘタシリン、メタンピシリン、ピバンピシリン、カルベニシリン（ｃａｒｂｅｎｅｃｉｌｌｉｎ）、カルフェシリン、カリンダシリン、スルベニシリン（ｓｕｌｂｅｎｅｃｉｌｌｉｎ）、チカルシリン、アズロシリン、メズロシリン、ピペラシリン、テモシリン、メシリナム、およびピブメシリナム（ｐｉｖｅｍｅｃｉｌｌｉｎａｍ）が挙げられる。ラクタマーゼインヒビター（例えば、クラブラン酸、スルバクタム、およびタゾバクタム（ｔａｚｏｂａｃｙｔａｍ））が、しばしば同時に投与される。
【０１７１】
適切なキノロンとしては、ナリジクス酸、オキソリン酸、シノキサシン、アクロソキサシン（ａｃｒｏｓｏｘａｃｉｎ）、ピペミド酸（ｐｉｐｅｍｅｄｉｃ  ａｃｉｄ）、ならびにフルオロキノロンであるフルメキン、シプロフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、グレパフロキサシン（ｇｒｅｐａｆｌｏｘａｃｉｎ）、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ルフロキサシン、スパルフロキサシン、トロバフロキサシン（ｔｒｏｖａｆｌｏｘａｃｉｎ）、ダノフロキサシン、エンロフロキサシン、およびマルボフロキサシン（ｍａｒｂｏｆｌｏｘａｃｉｎ）が挙げられる。
【０１７２】
スルホンアミドおよびジアミノピリジンとしては、「サルファ」剤の元であるスルファニルアミド、ならびに多数の誘導体（スルファピリジン、スルファジアジン、スルファフラゾール、スルファメトキサゾール、スルファジメトキシン、スルファジメトキシジアジン、スルファドキシン、スルファメトピラジン（ｓｕｌｆａｍｅｔｏｐｙｒａｚｉｎｅ）、スルファジアジン銀、酢酸マフェナイド、およびスルファサラジン（ｓｕｌｆａｓａｌｉｚｉｎｅ）が挙げられる）、ならびに関連化合物（トリメトプリム、バキロプリム、ブロジモプリム、オルメトプリム、テトロキソプリムが挙げられる）が挙げられ、コ・トリモキサゾールなどの他の薬物と組み合わせられる。
【０１７３】
テトラサイクリンは代表的に、スペクトルが広く、そして天然産物であるクロルテトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサイクリン、デメクロサイクリン、ならびに半合成のメタサイクリン、ドキシサイクリン、およびミノサイクリンが挙げられる。
【０１７４】
上記カテゴリーのいずれにも当てはまらない適切な抗菌剤としては、スペクチノマイシン、ムピロシン、ニューマイシン、ホスホマイシン、フシジン酸、ポリミキシン、コリスチン、バシトラシン、グラミシジン、チロスリシン、クリオキノール，クロルキナルドール（ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎａｌｄｏｌ）、ハロキナール（ｈａｌｏｑｕｉｎａｌ）、ニトロフラントニン（ｎｉｔｒｏｆｕｒａｎｔｏｎｉｎ）、ニトロイミダゾール（メトロニダゾール（ｍｅｔｒｏｎｉｚｏｌｅ）、チミダゾールおよびセクニダゾールが挙げられる）、ならびにヘキサミンが挙げられる。
【０１７５】
抗生物質および抗真菌剤は、イオン交換樹脂と錯化してレジネートを生成するために適切な、遊離酸もしくは遊離塩基、薬学的に受容可能な塩、またはエステルもしくは他の容易に加水分解可能な基との不安定な結合体として、存在し得る。
【０１７６】
（４．防腐剤）
防腐剤が、局所投与のために処方される組成物中に含まれ得る。適切な防腐剤としては、ヨウ素、ヨードフォア（カデキソマーヨードが挙げられる）、クロルヘキシジン、グルコネート、チメロサール、過酸化水素、ならびに過酸化物および過塩素酸塩（有機過酸化物および有機過塩素酸塩が挙げられる）が挙げられる。
【０１７７】
（５．皮膚保護剤）
皮膚保護剤が、局所投与のために処方される組成物中に含まれ得る。このような剤は、皮膚を滑らかにするのみでなく、皮膚の一体性を維持して損傷を防止することもまた補助し得る。適切な皮膚保護剤としては、アラントイン；カカオ脂；ジメチコーン；カオリン；サメ肝油；ワセリン；ラノリン；植物油；エトキシ化された油および脂質；ポリマー（例えば、ポリアルキレンオキシド、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリ（メタ）アクリレート、エチルビニルアセテート、ポリアルキレングリコール）；多糖類および修飾多糖類（例えば、ヒアルロン酸、セルロースエーテル、セルロースエステル、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、クロスカルメロース，およびデンプン）；天然ゴムおよび樹脂（ゲル化してもゲル化しなくてもよく、例えば、アルギネート、カラゲナン、寒天、ペクチン、グルコマンナン（グアー、イナゴマメなど）、ガラクトマンナン（例えば、コンニャク）、アラビアゴム、トラガカントゴム（ｇｕｍ  ｔｒａｇａｎｔｈ）、キサンタン、スクレログルカン（ｓｃｈｌｅｒｏｇｌｕｃａｎ）およびシェラック）；ならびにコロイド状不溶性物質（例えば、酸化亜鉛および他の不溶性亜鉛塩、滑石粉末および他の微細天然鉱物）；ならびにコロイド状シリカ、アルミナおよび他の金属酸化物が挙げられる。さらなる保護剤としては、フェノール系または非フェノール系の植物化学物質が挙げられ、リコペン、β−カロチン、α−カロチン、ルテイン、ゼアキサンチン、アスタキサンチン、非カルチノイド、テルペノイド（ｅｒｐｅｎｉｏｄｓ）、ペリリルアルコール（ｐｅｒｉｌｌｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）、サポニン、テルペノール、テルペンリモノイド、アントシアニン、カテキン、イソフラボン、ヘスペリジン（ｈｅｓｐｅｒｅｔｉｎ）、ナリンギン、ルチン、ケルセチン、シリマリン（ｓｉｌｙｍａｒｉｎ）、タンゲレチン（ｔａｎｇｅｒｅｔｉｎ）、タンニン、フェノール酸、エラグ酸、クロロゲン酸、ｐ−クマリン酸（パラ−クマリン酸（ｐａｒａ−ｃｏｕｍｅｒｉｃ  ａｃｉｄ））、フィチン酸、フェルラ酸、バニリン、ケイ皮酸、ヒドロキシケイ皮酸、クルクミン、レスベラトロール（ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ）、リグニン（ｌｉｇｎａｎ）、グルコシノレーツ、イソチオシアネート、フェネチル、イソチオシアネート（ｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）、イソチオシアン酸ベンジル、スルフォラファン（ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ）、インドール、インドール−３−カルビノール、チオスルホネート、フィトステロール、β−シトステロール、アントラキノン、センナ、バルバロイン、ヒペリシン（ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ）、カプサイシン、ピペリン、クロロフィル、ベタイン、およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７８】
広範な種々の遮光活性剤が適切である。使用される遮光剤の正確な量および型は、望まれる光保護のレベルに依存する。一般に、紫外放射線を吸収、散乱または反射することによって、紫外放射線に対する保護を与える任意の剤が、本明細書中で使用され得る。本明細書中で使用される遮光剤は、日光放射線の以下の形態のうちの１つ以上に対する保護を与え得る：ＵＶＡ、ＵＶＢ、ＵＶＣ、可視光および赤外放射線。一般に、最終処方物における日光阻止因子（ＳＰＦ）は、２〜３０で変化するが、１００までのＳＰＦを有する製品が処方され得る。本明細書中で使用される遮光剤は、化学的光保護または物理的光保護を与え得る。
【０１７９】
適切な遮光剤としては、アミノ安息香酸および誘導体（例えば、パラ−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）、グリセリル−ＰＡＢＡ（Ｌｉｓａｄｉｍａｔｅ）、パジマートＯ、Ｒｏｘａｄｉｍａｔｅ）；アントラニレート（ａｎｔｈｒｉｎａｌａｔｅ）（メチルアントラニレート（ｍｅｔｈｙｌａｎｔｈｒｙｎｉｌａｔｅ）が挙げられる）；ベンゾフェノン（ジオキシベンゾン、オキシベンゾンおよびスルイソベンゾン、３−ベンゾフェノン（Ｕｖｉｎｕｌ  Ｍ４０）、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノンとの４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ安息香酸エステルが挙げられる）；ショウノウ誘導体（３−（４−メチルベンジリデン）ショウノウ、３−ベンジリデンショウノウが挙げられる）；シンナメート（ＤＥＡ−ｐ−メトキシシンナメート、ｐ−メトキシケイ皮酸エチル−ヘキシル、オクトクリレン、メトキシケイ皮酸オクチルが挙げられる）；ジベンゾイルメタン（ブチルメトキシジベンゾイルメタンが挙げられる）、サリチレート（サリチル酸ホモメチル、サリチル酸オクチル、トロラミンメチルサリチレートが挙げられる）；金属酸化物（二酸化チタン、酸化亜鉛および酸化鉄が挙げられる）；２−フェニルベンゾイミダゾール−５−スルホン酸；４，４−メトキシ−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン；ならびにこれらの組み合わせからなる群より選択されるものが挙げられる。
【０１８０】
本発明に従って有用な遮光剤のさらなる非限定的な例は、Ｈａｆｆｅｙらに対する米国特許第５，０８７，４４５号、Ｔｕｒｎｅｒらに対する米国特許第５，０７３，３７２号、およびＳａｂａｔｅｌｌｉらに対する米国特許第５，１６０，７３１号に記載されており、これらの全ては、その全体が本明細書中に参考として援用される。
【０１８１】
（６．局所麻酔薬）
局所麻酔薬もまた、局所感染により引き起こされる疼痛およびかゆみを低減させる目的で、局所処方物において使用され得る。適切な局所麻酔薬としては、ベンゾカイン、リドカイン、ジブカイン、エチドカイン、ベンジルアルコール、ショウノウ、レゾルシノール、およびメタノールが挙げられる。
【０１８２】
（７．抗ヒスタミン薬）
本開示の組成物に含まれ得る適切な抗ヒスタミン薬としては、塩酸ジフェンヒドラミン、クロルフェニラミン、ジメンヒドリネート、ロラタジン、セチリジン、フェキソフェナジン、およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８３】
（８．酸化防止剤）
本開示の組成物はまた、１種以上の酸化防止剤を含有し得る。適切な酸化防止剤としては、亜鉛、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、α−カロチン、β−カロチン、クリプトキサンチン、リコペン、ルテイン、ゼアキサンチン（ｚｅａｘａｔｈｉｎ）、カテキン、レスベラトロール（ｒｅｓｅｒｖｅｒａｔｒｏｌ）、プロアントシアニジン、補酵素Ｑ１０、およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８４】
特定の実施形態において、これらの組成物は、塩化ベンザルコニウム、コルチコステロイド、またはこれらの組み合わせを含有する。
【０１８５】
（Ｄ．処方物）
式Ｉ、式ＩＩ、またはこれらの両方による脂溶性緑茶ポリフェノールを含む、本明細書中に開示される化合物の処方物は、安全かつ有効であると考えられる材料からなる薬学的に受容可能な賦形剤を使用して調製され得、そして望ましくない生物学的副作用も望まれない相互作用も引き起こさずに、個体に投与され得る。これらの賦形剤は、本明細書中に開示される１種以上の脂溶性緑茶ポリフェノール化合物以外の、薬学的処方物中に存在する全ての成分である。本明細書中で一般的に使用される場合、「賦形剤」としては、界面活性剤、乳化剤、エマルジョン安定剤、皮膚軟化剤、緩衝剤、溶媒および防腐剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８６】
（１．賦形剤）
好ましい賦形剤としては、界面活性剤（特に、非イオン性界面活性剤）；乳化剤（特に、乳化蝋）；および液体の不揮発性非水性材料（特に、プロピレングリコールなどのグリコール）が挙げられる。油相は、薬学的に認可されている他の油性賦形剤を含有し得る。例えば、ヒドロキシ化されたヒマシ油またはゴマ油などの材料が、油相において、界面活性剤または乳化剤として使用され得る。
【０１８７】
（ａ．皮膚軟化剤）
適切な皮膚軟化剤としては、当該分野において一般的に公知であり、そして「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ」，第４版，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２００３などの概説書に列挙されているものが挙げられる。これらとしては、扁桃油、ヒマシ油、セラトニア（ｃｅｒａｔｏｎｉａ）抽出物、セトステアロイルアルコール（ｃｅｔｏｓｔｅａｒｏｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）、セチルアルコール、セチルエステル蝋、コレステロール、綿実油、シクロメチコーン（ｃｙｃｌｏｍｅｔｈｉｃｏｎｅ）、パルミトステアリン酸エチレングリコール、グリセリン、モノステアリン酸グリセリン、モノオレイン酸グリセリル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ラノリン、レシチン、軽鉱物油、中鎖トリグリセリド、鉱油およびラノリンアルコール、ワセリン、ワセリンおよびラノリンアルコール、ダイズ油、デンプン、ステアリルアルコール、ヒマワリ油、キシリトールおよびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。１つの実施形態において、皮膚軟化剤は、エチルヘキシルステアレートおよびパルミチン酸エチルヘキシルである。
【０１８８】
（ｂ．界面活性剤）
適切な界面活性剤としては、陰イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤および両性界面活性剤が挙げられる。陰イオン性界面活性剤としては、硫酸アルキル、アルキルエーテルスルフェート、アルキルアミドエーテルスルフェート、アルキルアリールポリエーテルスルフェート、硫酸モノグリセリド；スルホン酸アルキル、スルホン酸アルキルアミド、スルホン酸アルキルアリール、スルホン酸オレフィン、スルホン酸パラフィン；スルホコハク酸アルキル、アルキルエーテルスルホスクシネート、スルホコハク酸アルキルアミド；スルホスクシンアミド酸アルキル；スルホ酢酸アルキル；リン酸アルキル、アルキルエーテルホスフェート；サルコシン酸アシル、イセチオン酸アシルおよびＮ−アシルタウレート（Ｎ−ａｃｙｌ  ｔａｕｒａｔｅ）の、アルカリ性塩、アンモニウム塩、アミン塩、アミノアルコール塩およびマグネシウム塩が挙げられる。これらの種々の化合物中のアルキル基またはアシル基は、一般に、８個〜３０個の炭素原子を含む炭素ベースの鎖からなる。
【０１８９】
適切な陰イオン性界面活性剤としては、脂肪酸塩（例えば、オレイン酸塩、リシノール酸塩、パルミチン酸塩およびステアリン酸塩）；ヤシ油酸または硬化ヤシ油酸；ラクチル酸アシル（ここでアシル基は、８個〜３０個の炭素原子を含む）が挙げられる。
【０１９０】
弱陰イオン性であると考えられる界面活性剤（例えば、ポリオキシアルキレン化カルボキシル基を含むアルキルエーテル酸もしくはアルキルアリールエーテル酸またはその塩、ポリオキシアルキレン化カルボキシル基を含むアルキルアミドエーテル酸またはその塩、およびアルキルＤ−ガラクトシドウロン酸またはその塩）もまた使用され得る。
【０１９１】
適切な両性界面活性剤は、第二級または第三級の脂肪族アミン誘導体（ここでその脂肪族基は、８個〜２２個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖であり、そして少なくとも１つのカルボキシレート基、スルホネート基、スルフェート基、ホスフェート基またはホスホネート水溶性化陰イオン性基を含む）；（Ｃ８〜Ｃ２０）アルキルベタイン、スルホベタイン、（Ｃ８〜Ｃ２０）アルキル−アミド（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルベタインまたは（Ｃ８〜Ｃ２０）アルキル−アミド（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルスルホベタインである。
【０１９２】
これらの非イオン性界面活性剤は、より特定すると、ポリエトキシ化、ポリプロポキシ化、またはポリグリセロール化された、脂肪酸またはアルキルフェノールまたはアルコール（８個〜３０個の炭素原子を含む脂肪鎖を有し、エチレンオキシド基またはプロピレンオキシド基の数は、２個〜５０個であり、そしてグリセロール基の数は、２個〜３０個である）から選択される。
【０１９３】
ココアンホ二酢酸二ナトリウム、ラウロアンホ二酢酸二ナトリウム、カプリロアンホ二酢酸二ナトリウム、カプロアンホ二酢酸二ナトリウム、ココアンホ−二プロピオン酸二ナトリウム、ラウロアンホ二プロピオン酸二ナトリウム、カプロアンホ二プロピオン酸二ナトリウム、カプリロアンホ二プロピオン酸二ナトリウム、ラウロアンホ二プロピオン酸、およびココアンホ二プロピオン酸もまた使用され得る。
【０１９４】
代表的な陽イオン性界面活性剤は、特に、必要に応じてポリオキシアルキレン化された第一級、第二級または第三級の脂肪アミン塩；第四級アンモニウム塩；イミダゾリン誘導体；あるいは陽イオン性のアミンオキシドから選択される。
【０１９５】
適切な第四級アンモニウム塩は、テトラアルキルアンモニウムハロゲン化物（例えば、塩化物）（例えば、ジアルキルジメチルアンモニウムまたはアルキルトリメチルアンモニウムクロリドであり、ここでこのアルキル基は、約１２個〜２２個の炭素原子を含む）であり、特に、ベヘニルトリメチルアンモニウム、ジステアリル−ジメチルアンモニウム、セチルトリメチルアンモニウムまたはベンジル−ジメチルステアリルアンモニウムクロリド、あるいはステアルアミドプロピルジメチル（酢酸ミリスチル）アンモニウムクロリドである。
【０１９６】
ジアシルオキシエチルジメチルアンモニウム塩、ジアシルオキシエチルヒドロキシエチルメチルアンモニウム塩、モノアシルオキシエチルジヒドロキシエチルメチルアンモニウム塩、トリアシルオキシエチルメチルアンモニウム塩およびモノアシルオキシエチルヒドロキシエチルジメチルアンモニウム塩（特に、塩化物または硫酸メチル）、ならびにこれらの組み合わせもまた使用され得る。これらのアシル基は、好ましくは、１４個〜１８個の炭素原子を含み、そしてより特定すると、植物油（例えば、パーム油またはヒマワリ油）から得られる。
【０１９７】
使用され得るさらなる界面活性剤としては、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム（ＤＯＣ）、Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム塩、ラウリルジメチルアミン−オキシド（ＬＤＡＯ）、セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）、およびビス（２−エチルヘキシル）スルホコハク酸ナトリウム塩が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１９８】
さらなる非イオン性界面活性剤としては、乳化蝋、モノオレイン酸グリセリル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリソルベート、ソルビタンエステル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、シクロデキストリン、モノステアリン酸グリセリン、ポロキサマー、ポビドンおよびこれらの組み合わせが挙げられる。１つの実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ステアリルアルコールである。
【０１９９】
代表的な洗剤としては、アルキルベンジルジメチルアンモニウムクロリド、アルキルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、ビス（２−エチルヘキシル）スルホコハク酸ナトリウム、ビス（２−エチルヘキシル）スルホコハク酸ナトリウム塩、３−［（３−コールアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネートが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２００】
（ｃ．乳化剤）
適切な乳化剤としては、アカシア、陰イオン性乳化蝋、ステアリン酸カルシウム、カルボマー、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、コレステロール、ジエタノールアミン、パルミトステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリン、モノオレイン酸グリセリル、ヒドロキシプロピルセルロース、ハイプロメロース（ｈｙｐｒｏｍｅｌｌｏｓｅ）、ラノリン、含水物質（ｈｙｄｒｏｕｓ）、ラノリンアルコール、レシチン、中鎖トリグリセリド、メチルセルロース、鉱油およびラノリンアルコール、一塩基性リン酸ナトリウム、モノエタノールアミン、非イオン性乳化蝋、オレイン酸、ポロキサマー、ポロキサマー、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、アルギン酸プロピレングリコール、自己乳化性モノステアリン酸グリセリル、クエン酸ナトリウム脱水和物、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンエステル、ステアリン酸、ヒマワリ油、トラガカント、トリエタノールアミン、キサンタンゴムおよびこれらの組み合わせが挙げられる。１つの実施形態において、乳化剤は、ステアリン酸グリセロールである。
【０２０１】
（ｄ．緩衝剤）
緩衝剤は、好ましくは、組成物を約４のｐＨ〜約７．５のｐＨ、より好ましくは、約４のｐＨ〜約７のｐＨ、そして最も好ましくは、約５のｐＨ〜約７のｐＨに緩衝する。
【０２０２】
本開示の組成物はまた、化粧品において通常使用されるアジュバント（例えば、香料、防腐剤、金属イオン封鎖剤、湿潤剤、糖、両性ポリマー、メントール、ニコチネート誘導体、毛の損失を防止するための剤、泡安定剤、噴射剤、色素、ビタミンもしくはプロビタミン、酸性化剤もしくは塩基性化剤、または他の周知の化粧用アジュバント）から選択される、少なくとも１種のアジュバントを含有し得る。
【０２０３】
（２．カプセル化）
別の実施形態において、緑茶ポリフェノールは、マイクロカプセルへのカプセル化によって、ポリマー成分に組み込まれ得る。マイクロカプセルは、キャリア、コーティング、またはマトリックスの大部分の材料とは異なる材料から製造され得る。適切なマイクロカプセルは、宿主において腐食する材料から製造されるもの、または緑茶ポリフェノールがマイクロカプセルから拡散することを可能にするように製造されるものである。このようなマイクロカプセルは、カプセル化された緑茶ポリフェノールの、マイクロカプセルからの制御された放出を提供するために使用され得る。
【０２０４】
任意の特定のサイズ範囲の微粒子を調製するための、多数の方法が公知である。本発明の種々の送達ビヒクルのうちで、微粒子のサイズは、約０．２μｍから約１００μｍまでの範囲であり得る。ゲル粒子微粒子、または融解材料製の微粒子についての合成方法は、公知であり、そしてエマルジョン中、スプレーされた液滴中、および分離した相中での重合が挙げられる。固体材料または予備形成されたゲルについて、公知の方法としては、湿式ミリングまたは乾式ミリング、粉砕、微粉砕、エアジェットによるサイズ分離、およびふるい分けなどが挙げられる。
【０２０５】
微粒子は、当業者に公知である種々の異なる方法を使用して、様々なポリマーから製造され得る。例示的な方法としては、ポリ乳酸および他の微粒子の調製を詳述する以下に記載される方法が挙げられる。ポリ乳酸微粒子は、好ましくは、以下の３つの方法のうちの１つを使用して製造される。すなわち、溶媒エバポレーション（Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚら，（１９９０）Ｊ．Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  ４：３２９；Ｂｅｃｋら，（１９７９）Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．３１：５４５；およびＢｅｎｉｔａら，（１９８４）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．７３：１７２１に記載されるような）；ホットメルトマイクロカプセル化（Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚら，Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ６：２７５（１９８７）に記載されるような）；ならびに噴霧乾燥。マイクロカプセル化された生物活性物質を調製するための例示的な方法が、以下に記載される。
【０２０６】
溶媒エバポレーション法において、マイクロカプセルポリマーが、揮発性有機溶媒（例えば、塩化メチレン）に溶解される。緑茶ポリフェノール（可溶であるか、または微細な粒子として分散可能であるかのいずれか）がこの溶液に添加され、そしてこの混合物が、表面活性剤（例えば、ポリ（ビニルアルコール））を含有する水溶液中に懸濁される。得られたエマルジョンは、ほとんどの有機溶媒が蒸発して固体の微粒子を残すまで、撹拌される。この溶液は、緑茶ポリフェノールを入れられ、そして激しく撹拌されている、ポリ（ビニルアルコール）（Ｓｉｇｍａ）を含有する蒸留水中に懸濁される。撹拌時間後、有機溶媒をポリマーから蒸発させ、そして得られた微粒子が水で洗浄され、そして凍結乾燥機で一晩乾燥させられる。様々なサイズ（１μｍ〜１０００μｍ）および形態を有する微粒子が、この方法により得られ得る。この方法は、ポリエステルおよびポリスチレンなどの、比較的安定なポリマーについて有用である。ポリ酸無水物などの不安定なポリマーは、水の存在に起因して、この製造プロセス中に分解し得る。これらのポリマーについては、以下の２つの方法（完全に無水の有機溶媒中で実施される）が、好ましくは使用される。
【０２０７】
ホットメルトカプセル化法において、ポリマーが最初に融解され、次いで生物学的に活性な材料の固体粒子（これは好ましくは、５０ミクロン未満にふるい分けされている）と混合される。この混合物が非混和性溶媒（シリコーン油など）に懸濁され、そして撹拌を続けながら、このポリマーの融点より約５℃高い温度に加熱される。一旦、このエマルジョンが安定化したら、ポリマー粒子が固化するまで冷却する。得られた微粒子は、石油エーテルなどの溶媒でのデカンテーションにより洗浄されて、自由に流動する粉末を与える。約１ミクロン〜約１０００ミクロンの範囲のサイズを有する微粒子が、この方法を用いて得られる。この技術を用いて調製されたカプセルの外側表面は、通常、滑らかかつ濃密である。この手順は、好ましくは、ポリエステルおよびポリ酸無水物から作製される微粒子を調製するために使用される。
【０２０８】
溶媒除去技術は、ポリ酸無水物について好ましい。この方法において、緑茶ポリフェノールは、塩化メチレンなどの揮発性有機溶媒中の、選択されたポリマーの溶液に、分散または溶解される。この混合物は、撹拌により、有機油（例えば、シリコーン油）中に懸濁されて、エマルジョンを形成する。溶媒エバポレーションとは異なり、この方法は、融点が高く、分子量が異なるポリマーから、微粒子を作製するために使用され得る。約１μｍ〜約３００μｍの範囲の微粒子が、この手順により得られ得る。この技術を用いて製造される球の外部の形態は、ポリマーの型に非常に依存する。噴霧乾燥において、ポリマーは、塩化メチレンに溶解される。既知の量の緑茶ポリフェノールが、このポリマー溶液に懸濁または共溶解される。次いで、この溶液または分散物が、噴霧乾燥される。約１μｍ〜約１０μｍの範囲の微粒子が得られ、その形態は、使用されるポリマーの型に依存する。
【０２０９】
１つの実施形態において、緑茶ポリフェノールは、アルギン酸ナトリウムエンベロープを有するマイクロカプセルにカプセル化される。ゲル型ポリマー（例えば、アルギネート）から作製された微粒子は、従来のイオンゲル化技術によって生成される。ポリマーは最初に、水溶液に溶解され、硫酸バリウムまたは何らかの生物活性剤と混合され、次いで、微小液滴形成デバイス（このデバイスは、いくつかの例において、液滴を破壊するために窒素ガスの流れを使用する）を通して押し出される。ゆっくりと撹拌されている（約１００ＲＰＭ〜１７０ＲＰＭ）イオン硬化浴を、この押出しデバイスの下方に配置して、形成する微細液滴を捕捉する。これらの微粒子は、ゲル化が起こるために充分な時間を許容する目的で、約２０分〜３０分間、この浴内でインキュベートされたままにされる。微粒子のサイズは、種々のサイズの押し出し機を使用すること、または窒素ガスもしくはポリマー溶液のいずれかの流量を変更することによって、制御される。
【０２１０】
リポソームは、緑茶ポリフェノールを特定の組織に送達することを補助し得、そしてまた、緑茶ポリフェノールの半減期を増加させ得る。リポソームは、種々の供給者から市販されている。あるいは、リポソームは、当業者に公知である方法（例えば、Ｅｐｐｓｔｅｉｎら，米国特許第４，５２２，８１１号に記載されるような方法）によって、調製され得る。一般に、リポソームは、標準的な小胞形成脂質から形成され、これらの脂質は一般に、中性または負に荷電したリン脂質、およびコレステロールなどのステロールを含む。脂質の選択は一般に、望ましいリポソームサイズ、および血流中でのリポソームの半減期などの要因を考慮することによって、支配される。リポソームを調製するための種々の方法が公知であり、例えば、Ｓｚｏｋａら，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｂｉｏｅｎｇ．９：４６７（１９８０）；ならびに米国特許第４，２３５，８７１号、同第４，５０１，７２８号、同第４，８３７，０２８号、および同第５，０１９，３６９号に記載されるものである。１つの実施形態において、緑茶ポリフェノールをカプセル化するリポソームは、リポソームの標的を、ＨＳＶ感染またはその近くの特定の細胞または組織に定め得る、リガンド分子を含む。
【０２１１】
１つの実施形態において、本開示の緑茶ポリフェノールをカプセル化するリポソームは、単核性のマクロファージおよび細網内皮系によるクリアランスを回避するように、例えば、その構造の表面に結合したオプソニン作用阻害部分を有することによって、改変される。１つの実施形態において、リポソームは、オプソニン作用阻害部分とリガンドとの両方を含む。リポソームを調製する際に使用するための、オプソニン作用阻害部分は、１つの実施形態において、リポソーム膜に結合した、大きい親水性ポリマーである。本明細書中で使用される場合、オプソニン作用阻害部分は、リポソーム膜に化学的または物理的に付着する場合（例えば、リポソーム膜自体への脂溶性アンカーの挿入により、または膜脂質の活性基に直接結合することにより）、このリポソーム膜に「結合」している。これらのオプソニン作用阻害性の親水性ポリマーは、保護表面層を形成し、この層は、マクロファージ−単球系（「ＭＭＳ」）および細網内皮系（「ＲＥＳ」）によるこれらのリポソームの取り込みを、有意に減少させる（例えば、米国特許第４，９２０，０１６号に記載されるように）。従って、オプソニン作用阻害部分で改変されたリポソームは、改変されていないリポソームよりもかなり長期間、循環中に残る。この理由により、このようなリポソームはときどき、「ステルス」リポソームと呼ばれる。ステルスリポソームは、多孔性または「漏れやすい」微小血管により供給される組織に蓄積することが公知である。さらに、ＲＥＳによる取り込みが低下することにより、肝臓および脾臓への有意な蓄積が防止されることによって、ステルスリポソームの毒性が低下する。
【０２１２】
リポソームを改変するために適切なオプソニン作用阻害部分は、好ましくは、約５００ダルトン〜約４０，０００ダルトン、そしてより好ましくは約２，０００ダルトン〜約２０，０００ダルトンの分子量を有する、水溶性ポリマーである。このようなポリマーとしては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）誘導体またはポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）誘導体；例えば、メトキシＰＥＧもしくはメトキシＰＰＧ、およびステアリン酸ＰＥＧもしくはステアリン酸ＰＰＧ；合成ポリマー（例えば、ポリアクリルアミドまたはポリＮ−ビニルピロリドン）；線状、分岐状、または樹状のポリアミドアミン；ポリアクリル酸；カルボキシル基またはアミノ基が化学結合しているポリアルコール（例えば、ポリビニルアルコールおよびポリキシリトール）、ならびにガングリオシド（例えば、ガングリオシドＧＭ１）が挙げられる。ＰＥＧ、メトキシＰＥＧ、またはメトキシＰＰＧ、あるいはこれらの誘導体のコポリマーもまた、適切である。さらに、オプソニン作用阻害ポリマーは、ＰＥＧと、ポリアミノ酸、多糖類、ポリアミドアミン、ポリエチレンアミン、またはポリヌクレオチドのいずれかとの、ブロックコポリマーであり得る。オプソニン作用阻害ポリマーはまた、アミノ酸またはカルボン酸を含む天然多糖類（例えば、ガラクツロン酸、グルクロン酸、マンヌロン酸、ヒアルロン酸、ペクチン酸、ノイラミン酸、アルギン酸、カラゲナン）；層状の多糖類またはオリゴ糖（線状もしくは分岐状）；あるいはカルボキシル化された多糖類またはオリゴ糖（例えば、カルボン酸の誘導体と反応してカルボン酸基の結合を生じたもの）であり得る。好ましくは、オプソニン作用阻害部分は、ＰＥＧ、ＰＰＧ、またはその誘導体である。ＰＥＧまたはＰＥＧ誘導体で改変されたリポソームは、ときどき「ＰＥＧ化リポソーム」と呼ばれる。オプソニン作用阻害部分は、多数の周知の技術のうちのいずれか１つによって、リポソーム膜に結合し得る。例えば、ＰＥＧのＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルが、ホスファチジル−エタノールアミン脂溶性アンカーに結合し得、次いで、膜に結合し得る。同様に、デキストランポリマーが、Ｎａ（ＣＮ）ＢＨ３および溶媒混合物（例えば、３０：１２の比のテトラヒドロフランおよび水）を使用する６０℃での還元的アミノ化によって、ステアリルアミン脂溶性アンカーで誘導体化され得る。
【０２１３】
本開示の微粒子およびリポソーム、ならびに微粒子およびリポソームを調製する方法は、例として与えられたのであり、本開示において役立つ微粒子またはリポソームの範囲を限定することは意図されない。様々な方法により製造された微粒子またはリポソームのアレイが、本発明において役立つことは、当業者に明らかである。
【０２１４】
（Ｅ．薬学的組成物）
別の実施形態は、１種以上の緑茶ポリフェノール、修飾緑茶ポリフェノール、特に、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートの、薬学的に受容可能な塩、あるいはその薬学的に受容可能な多型、溶媒和物、水和物、脱水和物、共晶、無水物、非晶質形態、およびこれらの組み合わせを含有する、薬学的組成物および剤形を提供する。本開示の化合物の特定の塩としては、ナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、およびこれらの水和物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１５】
緑茶ポリフェノールの薬学的単位剤形は、患者への経口投与、粘膜（例えば、鼻腔、舌下、膣、頬、または直腸）投与、非経口（例えば、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射、動脈内注射、またはボーラス注射）、局所投与、あるいは経皮投与のために適切である。剤形の例としては、錠剤；カプレット；カプセル剤（例えば、硬ゼラチンカプセルおよび軟らかい弾性ゼラチンカプセル）；カシェ剤；トローチ剤；ロゼンジ；分散物；坐剤；軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）；ハップ剤（湿布）；ペースト；散剤；包帯剤；クリーム；硬膏剤；液剤；パッチ；エアロゾル（例えば、鼻用スプレーまたは吸入器）；ゲル；患者への経口投与または経粘膜投与に適した液体剤形（懸濁物（例えば、水性または非水性の液体懸濁物、水中油エマルジョン、または油中水型の液体エマルジョン）、溶液およびエリキシル剤が挙げられる）；患者への非経口投与に適した液体剤形；ならびに患者への非経口投与に適した液体剤形を提供するために再構成され得る滅菌固体（例えば、結晶性固体または非晶質固体）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１６】
本開示の緑茶ポリフェノールの剤形の組成、形状、および型は、代表的に、それらの用途に依存して変わる。非経口剤形は、同じ疾患または障害を処置するために使用される経口剤形よりも少ない量の活性成分を含有し得る。本開示により包含される特定の剤形が互いから変わる、これらおよび他の方法は、当業者に容易に明らかになる。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１８版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９９０）を参照のこと。
【０２１７】
本開示の薬学的組成物および単位剤形は代表的に、１種以上の薬学的に受容可能な賦形剤または希釈剤もまた含有する。本開示の特定の化合物により提供される利点（例えば、増加した溶解度および／または増強された流動、純度、もしくは安定性（例えば、吸湿性）の特性であるが、これらに限定されない）は、本開示の化合物を、薬学的処方物のため、および／または患者への投与のために、先行技術よりもよく適したものにし得る。適切な賦形剤は、薬剤学または薬学の当業者に周知であり、そして適切な賦形剤の非限定的な例は、本明細書中に提供される。特定の賦形剤が薬学的組成物または剤形への組み込みに適しているか否かは、当該分野において周知である種々の要因（剤形が患者に投与される方法が挙げられるが、これに限定されない）に依存する。例えば、経口剤形（例えば、錠剤またはカプセル剤）は、非経口剤形における使用に適さない賦形剤を含有するかもしれない。特定の賦形剤の適切さもまた、剤形中の特定の活性成分に依存し得る。例えば、いくらかの活性成分の分解は、いくらかの賦形剤（例えば、ラクトース）によって、または水に曝露される際に、加速され得る。第一級アミンまたは第二級アミンを含む活性成分は、このような加速された分解を特に受けやすい。
【０２１８】
本開示は、活性成分（例えば、緑茶ポリフェノール）が分解する速度を低下させる１種以上の化合物を含有する、薬学的組成物および剤形をさらに包含する。このような化合物（本明細書中で「安定剤」と称される）としては、アスコルビン酸などの酸化防止剤、ｐＨ緩衝剤、または塩緩衝剤が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、本開示の薬学的組成物または剤形は、１種以上の溶解度モジュレーター（例えば、塩化ナトリウム、硫酸ナトリウム、リン酸ナトリウムもしくはリン酸カリウム、または有機酸）を含有し得る。特定の溶解度モジュレーターは、酒石酸である。
【０２１９】
賦形剤の量および型と同様に、剤形中の緑茶ポリフェノールの量および特定の型は、患者に投与される経路が挙げられるがそれに限定されない要因に依存して、異なり得る。しかし、本開示の緑茶ポリフェノール化合物の代表的な剤形は、薬学的に受容可能な塩、またはその薬学的に受容可能な多型、溶媒和物、水和物、脱水和物、共晶、無水物、もしくは非晶質形態を、約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇの量、好ましくは約２５ｍｇ〜約７５０ｍｇの量、より好ましくは５０ｍｇ〜５００ｍｇの量、なおより好ましくは約３０ｍｇ〜約１００ｍｇの量で、含有する。
【０２２０】
さらに、これらの化合物および／または組成物は、脂質ベースまたはポリマーベースのナノ粒子を使用して送達され得る。例えば、これらのナノ粒子は、非経口投与される薬物の薬理学的特性および治療特性を改善するように設計され得る（Ａｌｌｅｎ，Ｔ．Ｍ．，Ｃｕｌｌｉｓ，Ｐ．Ｒ．Ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ：ｅｎｔｅｒｉｎｇ  ｔｈｅ  ｍａｉｎｓｔｒｅａｍ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．３０３（５６６５）：１８１８−２２（２００４））。
【０２２１】
本開示の局所剤形としては、クリーム、ローション、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、ゲル、スプレー、エアロゾル、溶液、エマルジョン、および当業者に公知である他の形態が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１８版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９９０）；およびＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，第４版，Ｌｅａ  ＆  Ｆｅｂｉｇｅｒ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．（１９８５）を参照のこと。噴霧不可能な局所剤形については、局所用途に適合性であり、そして好ましくは水より大きい動粘性率を有する、キャリアまたは１種以上の賦形剤を含有する、粘性から半固体または固体の形態が、代表的に使用される。適切な処方物としては、溶液、懸濁物、エマルジョン、クリーム、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、粉末、リニメント剤、および軟膏（ｓａｌｖｅ）などが挙げられるが、これらに限定されず、これらは所望であれば、滅菌されるか、または種々の特性（例えば、浸透圧）に影響を与えるための補助剤（例えば、防腐剤、安定剤、湿潤剤、緩衝剤、または塩）と混合される。他の適切な局所剤形としては、噴霧可能なエアロゾル調製物が挙げられ、ここで活性成分は、好ましくは固体または液体の不活性キャリアと組み合わせられて、加圧された揮発性物質（例えば、フレオンなどの気体噴射剤）との混合物中で包装されるか、またはスクイーズボトルに包装される。加湿剤または湿潤剤もまた、所望であれば、薬学的組成物および剤形に添加され得る。このようなさらなる成分の例は、当該分野において周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１８版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９９０）を参照のこと。
【０２２２】
本開示の組成物の経皮剤形および経粘膜剤形としては、点眼剤、パッチ、スプレー、エアロゾル、クリーム、ローション、坐剤、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、ゲル、溶液、エマルジョン、懸濁物、または当業者に公知である他の形態が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１８版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９９０）；およびＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，第４版，Ｌｅａ  ＆  Ｆｅｂｉｇｅｒ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．（１９８５）を参照のこと。口腔内の粘膜組織を処置するために適切な剤形は、うがい薬、口腔ゲル、または頬パッチとして処方され得る。さらなる経皮剤形としては、「レザバ型」または「マトリックス型」のパッチが挙げられ、これらは、皮膚に付けられ得、そして所望の量の活性成分の浸透を許容するための特定の期間にわたって、装着され得る。
【０２２３】
本開示の緑茶ポリフェノールを投与するために使用され得る、経皮剤形およびこれらを投与する方法の例としては、米国特許第４，６２４，６６５号；同第４，６５５，７６７号；同第４，６８７，４８１号；同第４，７９７，２８４号；同第４，８１０，４９９号；同第４，８３４，９７８号；同第４，８７７，６１８号；同第４，８８０，６３３号；同第４，９１７，８９５号；同第４，９２７，６８７号；同第４，９５６，１７１号；同第５，０３５，８９４号；同第５，０９１，１８６号；同第５，１６３，８９９号；同第５，２３２，７０２号；同第５，２３４，６９０号；同第５，２７３，７５５号；同第５，２７３，７５６号；同第５，３０８，６２５号；同第５，３５６，６３２号；同第５，３５８，７１５号；同第５，３７２，５７９号；同第５，４２１，８１６号；同第５，４６６；４６５号；同第５，４９４，６８０号；同第５，５０５，９５８号；同第５，５５４，３８１号；同第５，５６０，９２２号；同第５，５８５，１１１号；同第５，６５６，２８５号；同第５，６６７，７９８号；同第５，６９８，２１７号；同第５，７４１，５１１号；同第５，７４７，７８３号；同第５，７７０，２１９号；同第５，８１４，５９９号；同第５，８１７，３３２号；同第５，８３３，６４７号；同第５，８７９，３２２号；および同第５，９０６，８３０号（これらの各々は、その全体が本明細書中に参考として援用される）に開示されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２４】
本開示により包含される経皮剤形および経粘膜剤形を提供するために使用され得る、適切な賦形剤（例えば、キャリアおよび希釈剤）ならびに他の材料は、薬学分野の当業者に周知であり、そして所定の薬学的組成物または剤形が塗布される特定の組織または器官に依存する。この事実を考慮して、非毒性であり薬学的に受容可能である剤形を形成するための代表的な賦形剤としては、水、アセトン、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタン−１，３−ジオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、鉱油、ならびにこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２５】
処置されるべき特定の組織に依存して、さらなる成分が、本開示の緑茶ポリフェノールの薬学的に受容可能な塩での処置前、処置と同時、または処置後に、使用され得る。例えば、浸透増強剤が、組織へ、または組織を横切って、活性成分を送達することを補助するために使用され得る。適切な浸透増強剤としては、アセトン；種々のアルコール（例えば、エタノール、オレイルアルコール、およびテトラヒドロフリルアルコール）；アルキルスルホキシド（例えば、ジメチルスルホキシド）；ジメチルアセトアミド；ジメチルホルムアミド；ポリエチレングリコール；ピロリドン（例えば、ポリビニルピロリドン）；Ｋｏｌｌｉｄｏｎ等級（ポビドン、ポリビドン）；尿素；ならびに種々の水溶性または水不溶性の糖エステル（例えば、ＴＷＥＥＮ  ８０（ポリソルベート８０）およびＳＰＡＮ  ６０（モノステアリン酸ソルビタン））が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２６】
薬学的組成物もしくは剤形のｐＨ、またはこの薬学的組成物もしくは剤形が塗布される組織のｐＨもまた、活性成分（単数または複数）の送達を改善するために調整され得る。同様に、溶媒キャリアの極性、そのイオン強度、または張度が、送達を改善するために調整され得る。ステアレートなどの化合物もまた、薬学的組成物または剤形に添加されて、送達を改善するために、その活性成分（単数または複数）の親水性または親油性を有利に変更し得る。この点に関して、ステアレートは、この処方物のための脂質ビヒクルとして、乳化剤または界面活性剤として、および送達増強剤または浸透増強剤として、働き得る。接着結合モジュレーターの薬学的に受容可能な塩の、異なる水和物、脱水和物、共晶、溶媒和物、多型、無水物、または非晶質形態が、得られる組成物の特性をさらに調整するために使用され得る。
【０２２７】
本開示の緑茶ポリフェノール組成物はまた、延長放出処方物または遅延放出処方物として、処方され得る。種々の活性成分のための延長放出処方物および遅延放出処方物は、当該分野において公知であり、例えば、カプセル化による。
【０２２８】
なお別の実施形態は、緑茶ポリフェノール局所皮膚用スプレーを提供する。
【０２２９】
緑茶ポリフェノール化合物（特に、Ｃ１〜Ｃ３０の炭化水素鎖でエステル化された緑茶ポリフェノール）は、約０．００１％ｗ／ｖ〜約５０％ｗ／ｖ、代表的には約０．２５％ｗ／ｖ〜約２０％ｗ／ｖ、より代表的には約１％ｗ／ｖ〜約１５％ｗ／ｖで存在する。特定の実施形態において、これらの緑茶ポリフェノールは、約１０％ｗ／ｖで存在する。
【０２３０】
（ＩＶ．使用の方法）
１種以上のＧＴＰ、修飾ＧＴＰ、またはこれらの組み合わせを含有する、本開示の組成物は、ウイルス感染の１つ以上の症状を処置するために有用である。好ましくは、本開示の組成物は、ヒトまたは動物の身体の表面領域（皮膚、粘膜、毛、歯、爪および唇が挙げられる）への局所塗布のために、処方される。
【０２３１】
１つの実施形態は、本開示のＧＴＰまたは修飾ＧＴＰ（例えば、式Ｉまたは式ＩＩによるもの）のうちの１種以上を含有する、ＨＳＶを処置するための組成物を提供する。このような処方物は、上記のように、皮膚への局所塗布のために処方される。これらの処方物は、ローション、クリーム、軟膏（ｓａｌｖｅ）、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、流体、ヒドロゲル、泡沫、コロイド、懸濁物、または乾燥粉末の形態で、皮膚に直接塗布され得る。
【０２３２】
このＧＴＰ組成物は、ウイルス感染（例えば、ＨＳＶ）の１つ以上の症状を処置するために有効な量で、ある量の１種以上の緑茶ポリフェノール、修飾ＧＴＰ、その薬学的に受容可能な塩、プロドラッグ、または誘導体を含有する。
【０２３３】
これらの緑茶ポリフェノール組成物は、被験体（好ましくは、ヒト被験体）に、必要に応じて１日、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、局所投与され得る。この組成物は、必要に応じて、１日あたり１回、２、３回、またはより多い回数で、局所塗布され得る。
【０２３４】
（Ｖ．組成物を作製する方法）
（Ａ．修飾緑茶ポリフェノール）
修飾緑茶ポリフェノール（好ましくは、非修飾緑茶ポリフェノールと比較して脂質溶解度が増加している修飾緑茶ポリフェノール）は、例えば、ＣｈｅｎおよびＤｕ，（２００３）Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｊ  Ｃｈｅｍ，２１：９７９−９８１（これは、許容される場合、その全体が本明細書中に参考として援用される）により記載された方法によって生成され得る。手短に言えば、緑茶ポリフェノールを、望ましい数の炭素を有する塩化アシルと酢酸エチル中で反応させる。この反応物を濾過し、そしてその反応溶液を脱イオン水で洗浄する。上層である有機層をエバポレートし、そして減圧下で乾燥させる。この脂溶性緑茶ポリフェノールは、例えばＣｈｅｎら（２００２）Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，９８２：１６３−１６５（これは、許容される場合、その全体が本明細書中に参考として援用される）に記載されるような高速向流クロマトグラフィーを使用して、単離され得る。次いで、この単離された脂溶性緑茶ポリフェノールは、組成物（例えば、局所処方物）に処方され得る。
【０２３５】
油中水型の局所組成物は、エマルジョン（例えば、クリーム、ローション、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、粉末、マイクロエマルジョン、リポソーム）の形態であっても、ゲル、液体、および泡沫の形態であってもよい。これらはまた、乾燥粉末処方物中に存在してもよい。
【０２３６】
（Ｂ．エマルジョン）
一般に、エマルジョンは、乳化と粘度と安定性と外観との望ましい釣り合いを達成する目的で、他の多数の物質の存在下で調製される。例えば、エマルジョンの処方は通常、少なくとも１種、そして頻繁には数種の組み合わせの乳化剤を必要とする。これらの剤は、一方の非混和性相の他方への分散を容易にし、そしてこのエマルジョンを安定化するのを補助する。乳化剤およびそれらの用途の包括的な概説は、Ｂｅｃｈｅｒ，Ｐ．Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｅｍｕｌｓｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｄｅｋｋｅｒ編，１９８３に見出され得る。
【０２３７】
１つの実施形態において、油相は、１種以上の界面活性剤、必要に応じて１種以上の乳化剤、および本開示の脂溶性緑茶ポリフェノールのうちの１種以上を一緒に混合し、必要であれば融解することにより調製される。水相は、必要に応じて加熱しながら、防腐剤を水に溶解することにより、別に調製される。この水相がこの油相に、例えば、連続高剪断混合を行いながら添加されて、白濁したエマルジョンを生成する。このエマルジョンが冷却され、そしてそのｐＨが、緩衝剤の添加により調整される。この処方物は、水の添加により、最終重量にされる。
【０２３８】
界面活性剤または洗剤は、組成物の総重量に対して０．０１重量％〜５０重量％の割合で、この組成物において必要に応じて使用される。この組成物がシャンプーの形態である場合、これらの界面活性剤または洗剤は一般に、この組成物の総重量に対して少なくとも１重量％、好ましくは５重量％〜５０重量％、そして特に、８％〜３５％の割合で使用される。
【０２３９】
乳化剤（単数または複数）の濃度は、最終組成物の約０．５重量％〜約５０重量％である。緩衝剤（単数または複数）の濃度は、最終組成物の約１重量％〜約２５重量％であり、そして安定剤（単数または複数）の濃度は、最終組成物の約１重量％〜約２５重量％である。
【０２４０】
緑茶ポリフェノール化合物（単数または複数）の濃度は、最終組成物の約０．００１重量％〜約４０重量％であり、特に、約０．００１重量％〜約０．０１重量％である。他の実施形態は、約１．０％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、または約３５％の濃度の緑茶ポリフェノール化合物（単数または複数）を含有する。特定の実施形態において、１種以上の緑茶ポリフェノールは、投与される場合に、皮膚の炎症を減少させるため、またはふけを処置するために有効な量で存在する。別の実施形態において、１種以上の緑茶ポリフェノールは、被験体におけるウイルス複製を減少させるために有効な量で存在する。緑茶ポリフェノールの量は、処置されるべき障害に従って変わる。
【０２４１】
必要に応じての局所麻酔薬（ｔｏｐｉｃａｌ  ａｎｅｓｔｈｅｔｉｃｓ）の濃度は、約１重量％〜約１０重量％であり、そして抗真菌剤および他の抗生物質の濃度は、約０．３重量％〜約５重量％である。
【実施例】
【０２４２】
（実施例１：Ｖｅｒｏ細胞におけるＥＧＣＧエステルの細胞生存率研究）
（材料および方法）
（緑茶ポリフェノール溶液）
２つの異なるポリフェノール、ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステル、すなわち、ＥＧＣＧパルミテートを試験した。ＥＧＣＧパルミテート（以下、ＥＧＣＧエステルともいう）は、以下の構造：
【０２４３】
【化４９】
2013014568.tif 000051
を有する。
【０２４４】
本発明者らが使用した濃度範囲は１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ、および１００μＭであった。
【０２４５】
（細胞生存率アッセイ）
Ｖｅｒｏ細胞を６ウェルプレートで平板培養し、２４時間後、様々な濃度のＥＧＣＧまたはＥＧＣＧエステル（１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ、１００μＭ）を、それぞれ各ウェルに添加した。１時間後、ポリフェノールを吸引によって除去し、細胞をＰＢＳで洗った。ＤＭＥＭ培地を各ウェルに入れ、細胞を２４時間にわたってインキュベートした。その後、細胞を血球計およびトリパンブルー（これは、死細胞を青く染色するが、生細胞は白色のままにする）を用いて数えた。
【０２４６】
（細胞培養の維持）
Ｖｅｒｏ細胞をＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入し、５％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）および１ｕｇ／ｍＬゲンタマイシンを補充したダルベッコ最小必須培地（ＤＭＥＭ）を含むＴ２５フラスコ中で、３７℃および５％ＣＯ２においてコンフルエントまで培養した。細胞増殖を、Ｍｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃｓデジタルカメラが取り付けられたＡＣＣＵ−ＳＣＯＰＥ位相差顕微鏡およびＭｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃ  ＳＥ  Ｐｒｅｍｉｕｍソフトウェアを用いて注意深くモニターした。この培養を維持するために、Ｖｅｒｏ細胞のコンフルエントな単層を、５００μＬのトリプシン／ＥＤＴＡを用いて５分間トリプシン処理した。その後、４．５ｍＬの培地をＴ−２５フラスコに添加し、細胞を６ウェルプレートまたは他のＴ−２５フラスコ中で二次培養し、コンフルエントまでインキュベートした。
【０２４７】
（結果）
Ｖｅｒｏ細胞を用いたＨＳＶプラークアッセイを、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）の添加を伴なって、およびこれを伴なわずに行った。無処理ＨＳＶプラークは結果として、１．０３×１０７ＰＦＵ／ｍｌのウイルス力価であった。１００μＭのＥＧＣＧを加えた場合、ウイルスプラークは観察されなかった。これらの結果は、ＥＧＣＧがＨＳＶ感染を阻害したことを示している。
【０２４８】
さらに、細胞生存率アッセイを、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）および親油性茶ポリフェノール（ＬＴＰ）の添加を伴なって、およびこれを伴なわずに行った。これらのアッセイの結果を表１に示す。
【０２４９】
【表１】
2013014568.tif 000052
細胞傷害性研究は、１２．５μＭ〜７５μＭの濃度でのＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルは、細胞形態変化を誘導しないことを示した。細胞生存率を、トリパンブルーおよび血球計の直接細胞計数を用いて決定し、Ｖｅｒｏ細胞におけるＥＧＣＧエステルの影響を検出した。結果を図１および表２に示す。ＥＧＣＧエステルの濃度が増大するにつれて、死細胞のパーセンテージが変化することはない。したがって、最大非毒性濃度である、７５μＭのＥＧＣＧエステルを使用してＨＳＶ１を処理し、その阻害効果を研究することが可能である。
【０２５０】
【表２】
2013014568.tif 000053
細胞をＥＧＣＧエステルで処理したとき、細胞死のパーセンテージは、コントロールと比較してあまり変化がなかった。
【０２５１】
（実施例２：ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルについての細胞傷害性研究）
（方法および材料）
（細胞傷害性アッセイ）
Ｖｅｒｏ細胞を、様々な濃度（１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ、１００μＭ）のＥＧＣＧまたはＥＧＣＧエステルと共に６ウェルプレートで平板培養した。細胞を、カメラが取り付けられたＡＣＣＵ−Ｓｃｏｐｅ  ３００２顕微鏡を用いて、４８時間後に形態および増殖の変化について研究した。
【０２５２】
あるいは、Ｖｅｒｏ細胞を６ウェルプレートで平板培養し、２４時間後に様々な濃度（１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ、１００μＭ）のＥＧＣＧまたはＥＧＣＧエステルを、それぞれ、各ウェルに添加した。１時間後、ポリフェノールを吸引によって除去し、細胞をＰＢＳで洗った。細胞を、付属のカメラを伴なったＡＣＣＵ−Ｓｃｏｐｅ  ３００２顕微鏡を用いて、２４時間後に形態および増殖の変化について研究した。
【０２５３】
（細胞培養の維持）
Ｖｅｒｏ細胞をＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入し、５％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）および１ｕｇ／ｍＬゲンタマイシンを補充したダルベッコ最小必須培地（ＤＭＥＭ）を含むＴ２５フラスコ中で、３７℃および５％ＣＯ２においてコンフルエントまで培養した。細胞増殖を、Ｍｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃｓデジタルカメラが取り付けられたＡＣＣＵ−ＳＣＯＰＥ位相差顕微鏡およびＭｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃ  ＳＥ  Ｐｒｅｍｉｕｍソフトウェアを用いて注意深くモニターした。この培養を維持するために、Ｖｅｒｏ細胞のコンフルエントな単層を、５００μＬのトリプシン／ＥＤＴＡを用いて５分間トリプシン処理した。その後、４．５ｍＬの培地をＴ−２５フラスコに添加し、細胞を６ウェルプレートまたは他のＴ−２５フラスコ中で二次培養し、コンフルエントまでインキュベートした。
【０２５４】
（結果）
細胞は、より高濃度のＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルを用いたことによって顕著な影響を受けることはなかった。
【０２５５】
ＨＳＶ１処理のために使用するのに適当なＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルの濃度を決定するために、細胞におけるポリフェノールの影響を研究した。様々な濃度のＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステル（１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ、１００μＭ）を評価し、細胞の増殖および形態の両方について４８時間で観察した。この実験において、ポリフェノールを、細胞をプレートに入れたのと同時に添加し、その後除去しなかった。
【０２５６】
培養真核生物細胞への緑茶ポリフェノールの細胞傷害性を評価するための実験は、細胞培養物におけるこれらのポリフェノールの中程度の毒性挙動を示す。結果は、ＥＧＣＧをＶｅｒｏ細胞に添加したとき、使用した濃度においては、形態変化は観察されないことを示す。ＥＧＣＧエステルの存在下で、最大非毒性濃度を７５μＭと評価した。１００μＭの濃度において、細胞形態は、ある程度まで影響を受ける。
【０２５７】
さらに、様々な濃度のＥＧＣＧエステルのＶｅｒｏ細胞への影響を、２４時間で観察した。ＨＳＶ１感染培養についての手順において、１時間の吸着の後、培地および吸着しなかったウイルスを吸引によって除去するので、類似の条件下でポリフェノールの影響を決定することが重要である。この研究において、Ｖｅｒｏ細胞を最初に２４時間プレートで平板培養し、その後様々な濃度のＥＧＣＧエステル（１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ、１００μＭ）を細胞に添加し、１時間吸着させた。その後、ＥＧＣＧエステルを吸引によって除去し、細胞を２４時間後に観察した。
【０２５８】
ＥＧＣＧエステル濃度が増大するにつれて、細胞形態が大きく影響を受けるということはなかった。したがって、その後の実験に使用する方法はこれである。
【０２５９】
ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルのＨＳＶ１およびＶｅｒｏ細胞への影響について、様々なアプローチを用いて研究し、宿主細胞には影響がないが、ウイルスを効果的に阻害する濃度を確立した。初めに、細胞細胞傷害性アッセイにおいて、ポリフェノールの濃度が増大するにつれて、細胞形態は少し変化した。これは、細胞をプレートに入れたのと同時にポリフェノールを添加したときに観察した。一方で、細胞をあらかじめ２４時間にわたってプレートに入れておいた後、ポリフェノールを１時間にわたって添加し、その後に除去したとき、細胞形態は影響を受けてはいないようだった。
【０２６０】
（実施例３：ＨＳＶ感染におけるＥＧＣＧエステルの効果）
（方法および材料）
（細胞培養の維持）
Ｖｅｒｏ細胞をＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入し、５％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）および１ｕｇ／ｍＬゲンタマイシンを補充したダルベッコ最小必須培地（ＤＭＥＭ）を含むＴ２５フラスコ中で、３７℃および５％ＣＯ２においてコンフルエントまで培養した。細胞増殖を、Ｍｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃｓデジタルカメラが取り付けられたＡＣＣＵ−ＳＣＯＰＥ位相差顕微鏡およびＭｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃ  ＳＥ  Ｐｒｅｍｉｕｍソフトウェアを用いて注意深くモニターした。この培養を維持するために、Ｖｅｒｏ細胞のコンフルエントな単層を、５００μＬのトリプシン／ＥＤＴＡを用いて５分間トリプシン処理した。その後、４．５ｍＬの培地をＴ−２５フラスコに添加し、細胞を６ウェルプレートまたは他のＴ−２５フラスコ中で二次培養し、コンフルエントまでインキュベートした。
【０２６１】
（蛍光顕微鏡検査）
緑色蛍光ＨＳＶ生合成を、蛍光顕微鏡検査および微分干渉コントラスト（ＤＩＣ）顕微鏡検査を用いてコントロールＶｅｒｏ細胞において観察した。細胞をガラスカバースリップ上で増殖させ、コンフルエンスまで到達させた。その後これらを、コントロールＨＳＶまたは事前処理したＨＳＶのいずれかに１時間感染させた。経時的研究を行い、その中で、ウイルスを１時間にわたって吸着させ、その後、吸引によって除去した。細胞をＰＢＳで洗い、培地を各ウェルに添加した。８時間後、１０時間後および１２時間後、細胞を１：１アセトンおよびメタノール溶液を用いて固定し、微分干渉コントラスト設定を用いて、Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｖｉｓｉｏｎ蛍光顕微鏡下で可視化した。
【０２６２】
ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の溶解サイクルを、感染後８時間、１０時間、１２時間で観察し、感染細胞内での分子的変化を研究した。ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞をポジティブコントロールとして使用し、Ｖｅｒｏ細胞をネガティブコントロールとして使用した。７５μＭのＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞もまたモニターし、コントロールと比較した。ＧＦＰ−ＨＳＶ１、ＤＡＰＩ染色の核およびリソソーム染色を用いて、Ｖｅｒｏ細胞における細胞変性効果を同定した。一連の研究は３連で実施した。
【０２６３】
単一の細胞をＨＳＶ１感染およびＥＧＣＧエステル処理無しで処理した。この無処理細胞を参照として使用し、処理サンプルの全てと比較した。ＤＡＰＩ染色された核を有する細胞は、非常になめらかな縁を有し、核中に顆粒は無い。緑色蛍光画像において、明らかな緑色バックグラウンドがあるが、緑色蛍光粒子は無い。リソソーム染色において、赤色バックグラウンドがあるが、細胞内に明らかな蛍光赤色粒子は無い。
【０２６４】
次に、何ら処理を行っていない単層中の非感染Ｖｅｒｏ細胞を、４００×の倍率下で観察した。位相差顕微鏡検査、ＤＡＰＩ、ＧＦＰ、ＤＡＰＩ＋ＧＦＰ、ＤＡＰＩ＋ＧＦＰ＋リソソーム染色および全染色オーバーレイの画像を取得した。全体として、この実験は、細胞形態および全ての蛍光染色についてのバックグラウンドの情報を提供する。
【０２６５】
（結果）
ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞およびＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞を、感染後８時間で観察した。ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞についての位相差画像は、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞のものとは非常に異なる。ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の細胞形態は、大きく変化しており、この細胞における溶解ウイルス感染を示していた。ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏの細胞形態は、細胞単独の画像に非常に類似している。１００μＭのＥＧＣＧまたは１００μＭのＥＧＣＧエステルで処理したウイルスは、複製したり、さらなるビリオンを形成したりすることはできなかった。この結果は、ＥＧＣＧエステルで処理された場合、ＨＳＶ１は、その溶解サイクルを続けることができなかったことを意味している。ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞をＤＡＰＩ染色で染色したとき、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞と比較して、細胞核において明らかな差異が存在する。顕著な顆粒化および縁の異常（ｄｅｍａｒｇｉｎａｔｉｏｎ）はＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞においてのみ見られ、このことは、ウイルス感染の正常な発生を示している。
【０２６６】
ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／ｖｅｒｏ細胞は、自身の核の完全性をなお維持し、細胞のみの画像に類似した外見を示した。緑色蛍光画像は、明らかに、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において顕著な量のＧＦＰ発現を示すが、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞においては、ほとんど発現を示さない。さらに、リソソーム染色は、ＨＳＶ１／ｖｅｒｏ細胞でのリソソーム活性化を示すが、ＥＧＣエステル−ＨＳＶ１／ｖｅｒｏ細胞においては示さない。
【０２６７】
感染後１０時間での画像において、細胞形態は、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において顕著に変化しており、感染８時間後よりもさらに変化している。ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞は、細胞のみの画像に非常に類似しているように見える。ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞のＤＡＰＩ染色において、細胞核におけるなおさらなる顆粒化および縁の異常がある。さらに、緑色蛍光粒子を、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞でのみ観察する。リソソーム染色は、感染の１０時間後、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞での顕著な活性化を示さなかった。対照的に、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞は、全ての蛍光画像において、感染の８時間後に類似の結果を示す。
【０２６８】
感染後１２時間の実験において、細胞形態は、感染後８時間および１０時間における細胞に類似したままであった。ＤＡＰＩで染色した場合、より多くの顆粒化および縁の異常を、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞のこの感染段階で観察する。緑色蛍光粒子も観察する。リソソーム活性化は観察されなかった。ＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞は、全ての蛍光画像において、感染後８時間および１０時間の細胞と類似の結果を示し、細胞のみの画像とも類似する。
【０２６９】
要約すると、蛍光顕微鏡検査の結果を比較および対比させた場合、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞と７５μＭのＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞との間の差異は、観察者にとって明らかである。ＨＳＶ１感染細胞においては可視のウイルス粒子が存在するが、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１感染細胞では、ビリオンは、ほとんどない。
【０２７０】
細胞の核はまた、非常に異なっている。ＨＳＶ１感染細胞においては、細胞の縁が損なわれ、染色体の顆粒化がおこる。ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１感染細胞において、細胞の核は影響を受けなかった。
【０２７１】
緑色蛍光粒子を、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において、感染後８〜１２時間に観察する。核の顆粒化および縁の異常の量は、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において、感染後８時間から１０時間までに増大する。リソソーム活性化をＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において、感染の８時間後に観察することができるが、１０時間後には低減する。これらの結果はＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞溶解感染において報告されているイベントと良好な相関がある。ＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において、これらのいずれも観察することは無く、このことは、７５μＭでのＥＧＣＧエステルはＨＳＶ１感染を阻害することができることを示す。
【０２７２】
蛍光計の実験において、ＧＦＰ発現は、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞と比較して、７５μＭのＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において、大きく低下する。したがって、ウイルス生合成の一部としてのＧＦＰ発現は、ＨＳＶ１をＥＧＣＧエステルで処理したときに、低減する。さらに、蛍光顕微鏡検査の分析は、ＧＦＰおよびＤＡＰＩ染色の両方で注目すべき結果を示した。ＧＦＰ発現は、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞と比較して、７５μＭのＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において低減した。さらに、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞に対してＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の核の形態を評価すると、いくつかの差異が認められる。感染中、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の核では、その縁が損なわれ、染色体の多数の顆粒化がおこる。対照的に、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の核は、感染を通じて、その完全性を保つ。
【０２７３】
（実施例４．ＥＧＣＧエステルは細胞増殖を阻害しない）
（材料および方法）
（細胞増殖アッセイ）
細胞増殖キット（Ｇ５４２１，Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．）を使用した。これは、細胞増殖を決定するための比色定量の方法である。このキットは、テトラゾリウム化合物および電子カップリング試薬（フェナジンメトサルフェート）を含む。生細胞のみがテトラゾリウム化合物を可溶性ホルマザンに生物的に還元する（ｂｉｏｒｅｄｕｃｅ）ことができる。したがって、形成され、４９０ｎｍの吸光度で測定されたホルマザンの量は、生細胞数に正比例する。細胞を９６ウェルプレートで平板培養し、２４時間後、様々な濃度（１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ、１００μＭ）のポリフェノールで処理して１時間吸着させた。その後、ポリフェノールを吸引によって除去し、１００μＬの新鮮なＤＭＥＭを各ウェルに添加した。２４時間後、２０μＬのＭＴＳ試薬を培地中の細胞１００μＬ毎に添加した。プレートを、３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートし、その後、プレートリーダーを用いて吸光度を読み取った。
【０２７４】
（結果）
以前の結果は、ＥＧＣＧエステルが、Ｖｅｒｏ細胞の細胞傷害および生存率に対して顕著な影響を示さないことを示した。本研究では、細胞増殖を以前に記載されたものと同じ条件下で調査した。各実験は３連でアッセイし、この比色定量アッセイの吸光度を、９６ウェルＥＬＩＳＡプレートリーダーを使用して、４９０ｎｍで記録した。結果を表３および図２に示す。
【０２７５】
表３および図４の増殖アッセイ結果は、ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルは両方とも、細胞増殖を大きくは阻害していないことを示す。コントロールと比較して、細胞は、４９０ｎｍの吸光度レベルにおいて、ほんのわずかな低減を示した。これは、大部分の細胞が、ＭＴＳテトラゾリウムのホルマザンへの高い還元を誘導していること、したがって、高い細胞生存率を保っていることを示している。７５μＭまでのＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステル濃度の増大は、細胞増殖の顕著な低減を誘導しない。
【０２７６】
【表３】
2013014568.tif 000054
（実施例５．ＨＳＶ１粒子の生産に対するＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルの効果）
（材料および方法）
（プラークアッセイを用いたウイルス力価研究）
Ｖｅｒｏ細胞を６ウェルプレートで平板培養し、コンフルエンスまで到達させた。ＨＳＶビリオンを細胞感染の前に、それぞれの濃度のポリフェノール（１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ、１００μＭ）で１時間処理した。その後、細胞をＨＳＶに感染させ、１時間吸着させた。その後、吸着しなかったウイルスを吸引によって除去した。その後、プレートを栄養培地含有寒天で覆った。５０時間以内に、クリスタルバイオレットで細胞を染色してプラークを可視化し、観察して、数えた。
【０２７７】
（細胞培養の維持）
Ｖｅｒｏ細胞をＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入し、５％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）および１ｕｇ／ｍＬゲンタマイシンを補充したダルベッコ最小必須培地（ＤＭＥＭ）を含むＴ２５フラスコ中で、３７℃および５％ＣＯ２においてコンフルエントまで培養した。細胞増殖を、Ｍｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃｓデジタルカメラが取り付けられたＡＣＣＵ−ＳＣＯＰＥ位相差顕微鏡およびＭｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃ  ＳＥ  Ｐｒｅｍｉｕｍソフトウェアを用いて注意深くモニターした。この培養を維持するために、Ｖｅｒｏ細胞のコンフルエントな単層を、５００μＬのトリプシン／ＥＤＴＡを用いて５分間トリプシン処理した。その後、４．５ｍＬの培地をＴ−２５フラスコに添加し、細胞を６ウェルプレートまたは他のＴ−２５フラスコ中で二次培養し、コンフルエントまでインキュベートした。
【０２７８】
（結果）
プラークアッセイを使用してウイルス力価を決定し、ウイルス粒子生産に対する５０μＭのＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルの効果を研究した。ウイルス溶解物の連続希釈を１０−１から１０−７で実施し、その後、細胞をこの希釈物でそれぞれ感染させた。ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の実験において、プラークを１０−３から１０−５ウイルス溶解物の希釈で観察し、ウイルス力価は、１．２５×１０６ＰＦＵ／ｍｌであった。５０μＭのＥＧＣＧ−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の実験において、プラークを、１０−３から１０−４でしか観察せず、ウイルス力価は、１×１０５ＰＦＵ／ｍｌであった。最後に、５０μＭのＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の実験において、全てのウイルス溶解物の希釈において、プラーク形成を観察しなかった。この結果を、図３において要約する。この図は、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ力価とＥＧＣＧ−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ力価とを比較したとき、１／１０に低減することを示している。さらに、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ力価と比較したＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ力価においては、さらなる大きな低減を示す。これは、ＥＧＣＧエステルが、ＨＳＶ１阻害において、ＥＧＣＧと比較したときに、より強力であることを示す。
【０２７９】
ＨＳＶ１に対するＥＧＣＧエステルの最小阻害濃度を得るために、様々な濃度（１２．５μＭ、２５μＭ、５０μＭ、７５μＭ）のＥＧＣＧエステルを、より低い希釈のウイルス溶解物（１０−１および１０−２）で使用した。この結果は、ＥＧＣＧエステル濃度が増大するにつれて、ＨＳＶ１力価が低減することを示した。図６に示すように、５０μＭ以上のＥＧＣＧエステル濃度において、ＨＳＶ１のプラークを形成する能力は、＞９９％低減する。
【０２８０】
ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルの両方についての最大非毒性濃度を、７５μＭと同定し、その後、これらの濃度を、ＨＳＶ１ウイルス生産に対するＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルの効果を研究するために使用した。プラークアッセイにおいて、ウイルスを事前に５０μＭのＥＧＣＧで処理したとき、結果は、１／１０に低減したプラーク形成を示した。一方で、ＨＳＶを、５０μＭ以上の濃度のＥＧＣＧエステルで処理するとき、プラークは観察されない。その後、様々な濃度のＥＧＣＧエステルを使用して、最小ＨＳＶ１阻害濃度を決定した。この結果は、５０μＭ以上の濃度において、ＥＧＣＧエステルは完全にＰＦＵ形成を阻害することを示す。
【０２８１】
（実施例６．ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞およびＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞における緑色蛍光タンパク質発現の研究）
（材料および方法）
（緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を伴なったＥｓｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉアンピシリン耐性プラスミド）
Ｅｓｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉのアンピシリン耐性株を、アンピシリンおよびＬ−アラビノース（Ｌａｒａｂｉｎｏｓｅ）存在下のＬｕｒｉａ  Ｂｒｏｔｈ（ＬＢ）で当初増殖させた純粋なコロニーから単離した。コロニーを、コロニー移動の前に１００μｌのアンピシリンおよび１００μｌのＬ−アラビノースを補充した新たなＬＢに移動させた。使用したアンピシリンの濃度は１００ｎｇ／ｍＬであった。Ｌ−アラビノースの濃度を、連続希釈を用いて作り、５％パーセント溶液を作るためには１：１０比と設定した。
【０２８２】
（蛍光計を用いたＧＦＰ発現研究）
ＧＦＰ発現を、ＧＦＰプラスミドを含むＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、およびＧＦＰプラスミドを含まないＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉにおいて研究した。使用した蛍光計はＴｕｎｅｒデジタル蛍光計−モデル４５０であった。サンプルを３ｍＬのＨ２Ｏに入れ、連続希釈を各サンプルの最初の３ｍＬから行った。標準希釈曲線をこの連続希釈物から得た。次に、Ｖｅｒｏ細胞をＴ−７５フラスコで増殖させ、コンフルエンスに到達させた。ＨＳＶ１ビリオンを、細胞感染の前に７５μＭのポリフェノールで３時間処理した。その後、細胞を、処理したＨＳＶ１−ＵＬ４６および無処理のＨＳＶ１−ＵＬ４６に感染させ、１時間吸着させた。その後、吸着しなかったウイルスを、ＰＢＳで細胞を２回洗うことで除去した。その後、細胞を３７℃で１２時間インキュベートした。その後、細胞をトリプシン処理し、ペレットにした。最後に、細胞を３ｍＬのＨ２Ｏに再懸濁させ、蛍光計を用いてＧＦＰ発現について分析した。３ｍｌの水をブランクサンプルとして使用した。より高い蛍光感度のためにＧａｉｎ  ｋｎｏｂを１０００にセットした。
【０２８３】
（ＧＨＳＶ−ＵＬ４６）
緑色蛍光タンパク質タグを有するＨＳＶを用いて、ＨＳＶウイルスのライフサイクルを研究すること、およびインビトロＨＳＶ感染に対する親油性茶ポリフェノールの潜在的効果を研究することが可能である（Ｗｉｌｌａｒｄ，Ｍ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００２；１０：５２２０−５２３２）。エステル修飾ＥＧＣＧが、ＨＳＶ感染に対して類似またはより良好な結果を有することを証明すれば、将来の動物およびヒト研究を、ヒトの単純ヘルペスウイルス感染を防ぐための、安定で、効果的な局所適用に向けて行うことができる。性的伝染ＨＳＶは、宿主細胞に非常に迅速に感染する。したがって、初期ウイルス感染の前にＨＳＶを阻害するための有効な抗ウイルス薬物が作製されることが必要である（Ｉｓａａｃｓ  ＣＥ，ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．２００８；５２（３）：９６２−９７０）。
【０２８４】
ＨＳＶ１ウイルスモデルは、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅにおいて、研究者のチームによって改変された。緑色蛍光タンパク質を、テグメントタンパク質であるＶＰ１１／１２をコードするウイルス遺伝子ＵＬ４６に結合させた。概略図は図７で見ることができる。ＧＦＰ配列を、相同組換えベクターおよび所望の配列を増幅するようにデザインされたプライマーを用いて、ＵＬ４６遺伝子に加えた（Ｗｉｌｌａｒｄ，Ｍ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２００２；１０：５２２０−５２３２）。
【０２８５】
（細胞培養の維持）
Ｖｅｒｏ細胞をＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入し、５％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）および１ｕｇ／ｍＬゲンタマイシンを補充したダルベッコ最小必須培地（ＤＭＥＭ）を含むＴ２５フラスコ中で、３７℃および５％ＣＯ２においてコンフルエントまで培養した。細胞増殖を、Ｍｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃｓデジタルカメラが取り付けられたＡＣＣＵ−ＳＣＯＰＥ位相差顕微鏡およびＭｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃ  ＳＥ  Ｐｒｅｍｉｕｍソフトウェアを用いて注意深くモニターした。この培養を維持するために、Ｖｅｒｏ細胞のコンフルエントな単層を、５００μＬのトリプシン／ＥＤＴＡを用いて５分間トリプシン処理した。その後、４．５ｍＬの培地をＴ−２５フラスコに添加し、細胞を６ウェルプレートまたは他のＴ−２５フラスコ中で二次培養し、コンフルエントまでインキュベートした。
【０２８６】
（ＨＳＶ１−ＵＬ４６ウイルスの維持）
ＨＳＶ１−ＵＬ４６ウイルスをＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入した。ウイルスの継代を、Ｔ−２５フラスコ中で行い、細胞を完全細胞変性効果（ＣＰＥ）に到達させた。その後、培地を１５ｍＬのトルネードチューブに収集し、１０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して、細胞の残屑を除去した。その後、ウイルス含有上清を、必要なときまで−８０℃未満に置いておいた。
【０２８７】
（結果）
本研究で使用したウイルスモデルシステムであるＨＳＶ−ＧＦＰＵＬ４６は、ＨＳＶ１  ＵＬ４６遺伝子に緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）タグを有する。本研究において、蛍光計を使用して、感染Ｖｅｒｏ細胞における緑色蛍光タンパク質発現を測定した。細胞中のＧＦＰ発現を定量的に決定するため、標準希釈曲線を、ＧＦＰ挿入物を含むＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（Ｅ．ｃｏｌｉ）を用いて生成した。さらに、ＧＦＰ挿入物を有さないＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉを、ネガティブコントロールとして使用した。Ｅ．ｃｏｌｉ培養物の連続希釈物を材料および方法のセクションに記載したように調製した。結果を表４および図５に示す。結果で示されているように、線形の希釈曲線を、ＧＦＰを伴なったＥ．ｃｏｌｉの連続希釈培養物を用いて首尾よく生成した。ネガティブコントロールは、非常に低い読み取り値を示す。この実験は、蛍光計の使用が、ＧＦＰ発現の定量的測定を提供するのに適していることを示した。
【０２８８】
【表４】
2013014568.tif 000055
この実験は、蛍光計を使用して、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞およびＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の両方においてＧＦＰ発現を研究すること、および定量的に測定することができることを示している。本実験において、Ｖｅｒｏ細胞のみ、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞、および７５μＭのＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞を使用して、ＧＦＰ発現を定量的に測定した。結果を図６に示す。
【０２８９】
ＧＦＰ発現は、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞と比較して、７５μＭのＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において大きく低下する。したがって、ウイルス生合成の一部としてのＧＦＰ発現は、ＨＳＶ１がＥＧＣＧエステルで処理された場合に低減する。
【０２９０】
（実施例７．ＰＣＲベースアッセイを用いた、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞およびＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞における糖タンパク質Ｄ、ＧＦＰ、およびＶＰ１１／１２のアンプリコンの比較）
（方法および材料）
【０２９１】
【表５−１】
2013014568.tif 000056
【０２９２】
【表５−２】
2013014568.tif 000057
プライマーセットを使用して、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞およびＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞から単離したＤＮＡを伸長開始させた（ｐｒｉｍｅ）。ＰＣＲ産物を１％ゲル電気泳動を使用して分析した。全てのプライマーは、ＤＮＡサンプルを伸長開始させることができ、アンプリコンは、予想したサイズを有した。
【０２９３】
（ＰＣＲ産物の配列決定）
各プライマーセット１〜９についてのＰＣＲ産物を配列決定し、ＮＣＢＩ相同性サーチを用いて分析した。その結果は、報告されたＨＳＶ１配列への高い相同性を示唆した。表６〜１４は、各配列で行ったＢｌａｓｔサーチからの結果を示している。したがって、デザインしたプライマーを用いて、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞に対するＥＧＣＧエステルの阻害の分子機構を首尾よく研究することができる。プライマーの配列は以下の通りである。
【０２９４】
【数１】
2013014568.tif 000058
【０２９５】
【数２】
2013014568.tif 000059
【０２９６】
【数３】
2013014568.tif 000060
【０２９７】
【数４】
2013014568.tif 000061
（ポリメラーゼ連鎖反応）
公表された配列に基づいて９つのセットのプライマーを、ＨＳＶ１ゲノムの様々な領域を伸長開始させるようにデザインした。ＨＳＶ１糖タンパク質Ｄを標的とするように、２つのセットのプライマーをデザインした。これらは、フォワードが５’−ＡＧＡＣＧＴＣＣＧＧＡＡＡＣＡＡＣＣＣＴＡＣＡＡ−３’（配列番号２）、リバースが５’−ＡＣＡＣＡＡＴＴＣＣＧＣＡＡＡＴＧＡＣＣＡＧＧＧ−３’（配列番号３）を含む。第２のセットは、フォワードが５’−ＴＴＧＴＴＴＧＴＣＧＴＣＡＴＡＧＴＧＧＧＣＣＴＣ−３’（配列番号４）、リバースが５’ＴＧＧＡＴＣＧＡＣＧＧＴＡＴＧＴＧＣＣＡＧＴＴＴ−３’（配列番号５）を含む。次に、ＨＳＶ１糖タンパク質Ｂを標的とするように、２つのセットのプライマーをデザインした。プライマーは以下：フォワードが５’ＡＧＡＴＴＣＴＧＣＧＧＴＡＣＴＧＣＧＡＴＣＡＣＴ−３’（配列番号６）、リバースが５’−ＡＣＧＧＡＡＣＡＣＡＡＡＣＡＡＧＣＡＣＧＧＡＴＧ−３’（配列番号７）である。第２のセットは、フォワードが５’−ＡＧＣＴＧＡＴＴＡＴＣＧＣＣＡＣＣＡＣＡＣＴＣＴ−３’（配列番号８）、リバースが５’−ＴＧＧＣＧＴＴＧＡＴＣＴＴＧＴＣＧＡＴＣＡＣＣＴ−３’（配列番号９）を含む。第３のセットのプライマーは、以前にデザインされており、Ｓ．Ｍｏｉｒａ  ＢｒｏｗｎおよびＡｌａｓｄａｉｒ  Ｒ．ＭａｃＬｅａｎによって、書物、Ｈｅｒｐｅｓ  Ｓｉｍｐｌｅｘ  Ｖｉｒｕｓ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓにおいて公表されている。このセットは、フォワードが５’ＡＴＴＣＴＣＣＴＣＣＧＡＣＧＣＣＡＴＡＴＣＣＡＣＣＴＴ−３’（配列番号１０）、リバースが５’−ＡＧＡＡＡＧＣＣＣＣＣＡＴＴＧＧＣＣＡＧＧＴＡＧＴ−３’（配列番号１１）を含む。１セットのプライマーを、ＨＳＶ１のＵＬ４６遺伝子に結合した緑色蛍光タンパク質を標的とするようにデザインした。これは、フォワードが５’−ＧＡＣＣＣＴＧＡＡＧＴＴＣＡＴＣＴＧＣＡＣＣＡ−３’（配列番号１４）、リバースが５’−ＡＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＧＡＣＣＡＴＧＴＧＡＴ−３’（配列番号１５）を含む。ＧＦＰに対してデザインされた第２のセットのプライマーは、すでにデザインされている４２。これは、フォワードが５’−ＧＴＣＡＡＡＧＣＴＴＡＡＧＡＴＧＧＴＧＡＧＣＡＡＧＧ−３’（配列番号１２）、リバースが５’−ＣＴＴＧＡＡＧＣＴＴＣＴＴＧＴＡＣＡＧＣＴＣＧＴＣＣ−３’（配列番号１３）を含む。最後に、ＵＬ４６遺伝子に対応するＨＳＶ１テグメントタンパク質ＶＰ１１／１２を標的とするように２つのセットのプライマーをデザインした。プライマーは以下：フォワードが５’−ＡＣＣＡＡＧＣＣＴＴＧＡＴＧＣＴＣＡＡＣＴＣＣＡ−３’（配列番号１６）、リバースが５’−ＡＣＡＡＣＡＣＧＧＴＴＣＣＣＧＡＧＡＧＴＴＴＧＡ−３’（配列番号１７）である。第２のセットは、フォワードが５’−ＡＣＣＡＡＧＣＣＴＴＧＡＴＧＣＴＣＡＡＣＴＣＣＡ−３’（配列番号１８）、リバースが５’ＡＣＡＣＡＡＣＡＣＧＧＴＴＣＣＣＧＡＧＡＧＴＴＴ−３’（配列番号１９）を含む。反応混合物は、１μＬの抽出ＤＮＡ、１μＬのフォワードプライマーおよび１μＬのリバースプライマー、１２．５μＬのＭａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ、ならび���９．５μＬのｄｉＨ２Ｏを含んだ。この混合物をＰＣＲチューブに入れ、Ｌａｂｎｅｔ  ＭｕｌｔｉＧｅｎｅ  ＩＩサーマルサイクラー（Ｌａｂｎｅｔ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｅｄｉｓｏｎ  ＮＪ）内に置いた。反応プロファイルは、９５℃で２分間の初期変性、その後、９５℃で３０秒間の変性、６０℃で１分間のアニーリング、および７２℃で３０秒間の伸長のサイクルであった。最後のステップは、７２℃で１０分間の最終伸長段階を含んだ。一旦、サイクルが終われば、サンプルを４度まで冷却し、その後、アガロースゲル電気泳動での将来の分析のために、−２０℃のフリーザーに保管した。
【０２９８】
（ＰＣＲ産物の分析）
ポリメラーゼ連鎖反応産物を、１％アガロースゲル上で分析し、可視化した。各ゲルは、０．５ｇのアガロース（ＵＳＢ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｔ  Ｎｏ３２８０２）を秤量し、それを５０ｍＬの１×ＴＡＥ（Ｔｒｉｓ−酢酸−ＥＤＴＡ）緩衝液と合わせて、作製した。この混合物を、アガロースが完全に溶解するまで、電子レンジで１分間加熱した。その後、この混合物をゲル用具に注ぎ、凝固させた。ウェルを作るために、ゲルコームをゲルの一端で使用した。一旦、ゲルが凝固したら、サンプルを各ウェルにロードした（２μＬの１０×ローディング色素＋１０μＬのＰＣＲ産物）。Ｈｉ−Ｌｏ  ＤＮＡマーカーを第１のウェルにロードした。１１５Ｖで１時間ゲル泳動を行った（ｒｕｎ）。その後、このゲルをエチジウムブロマイドで１５分間染色し、さらに１５分間水で洗った。その後、このゲルを、Ｋｏｄａｋ  Ｉｍａｇｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ  ４４０  ＣＦ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を用いてＵＶ光下で分析した。
【０２９９】
（リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応）
リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応において用いるために、ＨＳＶ１糖タンパク質Ｄを伸長開始する１セットのプライマーをデザインした。このセットは、フォワードが５”−ＣＡＡＣＣＣＴＡＣＡＡＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣ−３’（配列番号２０）、リバースが５’ＴＴＧＴＡＧＧＡＧＣＡＴＴＣＧＧＴＧＴＡＣ−３’（配列番号２１）を含む。各チューブ（ネガティブコントロール−ＤＮＡ無しを除く）は、１０μＬのＦａｓｔ  ＳＹＢＲ緑色マスター混合物（ＡＢＩ  Ｆａｓｔ  ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ）、１μＬのフォワードプライマー、１μＬのリバースプライマー、１μＬのゲノムＤＮＡおよび６μＬのＤｉ  Ｈ２Ｏを含んだ。サンプルにＡＢＩ  ＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓリアルタイムＰＣＲシステムを実行した（ｒｕｎ）。この実行方法は、９５℃で５分間の保持段階、その後、９５℃で１分間の変性、６０℃で１分間のアニーリングおよび７２℃で３０秒間の伸長を４０サイクルであった。次に、融解曲線段階は、９５℃で１５秒間、その後、６０℃で１分間、そして９５℃で１５秒間を含んだ。
【０３００】
（ＨＳＶ１感染細胞からのＤＮＡ抽出）
細胞を６０ｍｍプレートで増殖させ、コンフルエンシーまで到達させた。その後、細胞を、処理ＨＳＶ１および無処理ＨＳＶ１に、１時間、３７℃および５％ＣＯ２で感染させた。吸収期間の後、細胞をＰＢＳで洗い、培地をプレートに添加した。１２時間後、細胞をトリプシン処理し、ＤＮＡを、ＤＮｅａｓｙ  Ｂｌｏｏｄ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ（Ｑｉａｇｅｎ  ２００６）を用いて抽出した。その後、ＤＮＡ濃度を、Ｎａｎｏｄｒｏｐ  Ｓｐｅｃｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒを用いて測定した。
【０３０１】
【表６】
2013014568.tif 000062
【０３０２】
【表７】
2013014568.tif 000063
【０３０３】
【表８】
2013014568.tif 000064
【０３０４】
【表９】
2013014568.tif 000065
【０３０５】
【表１０】
2013014568.tif 000066
【０３０６】
【表１１】
2013014568.tif 000067
【０３０７】
【表１２】
2013014568.tif 000068
【０３０８】
【表１３】
2013014568.tif 000069
【０３０９】
【表１４】
2013014568.tif 000070
（結果）
ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞およびＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞から抽出したＤＮＡを精製および単離し、その量および純度をＮａｎｏｄｒｏｐ分光光度計ＮＤ１０００によって決定した。コントロールサンプルは、５６６．４ｎｇ／μＬを含み、７５μＭのＥＧＣＧエステルサンプルは５６０．１ｎｇ／μＬを含み、細胞のみのサンプルは、５６２．８ｎｇ／μＬを含んだ。量における各サンプル中のＤＮＡ濃度が類似しているので、比較ＰＣＲベースアッセイを行うために、一定量の糖タンパク質Ｄのプライマーと共に、各サンプル由来の１μＬを使用した。Ｋｏｄａｋ  Ｉｍａｇｅ  ａｎａｌｙｚｅｒ４４０ＣＦを用いて、各実験のバンド強度を測定した。コントロールバンドの読み取りは、４４５．９２、５８８．２４、および５４１．７３であり、平均は５２５．２９であった。７５μＭのＥＧＣＧエステルのバンドの読み取りは３５３．８７、４３８．４７および４０７．８２であり、平均は４００．０５であった。ＰＣＲ産物の７５μＭのＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の強度は、ＨＳＶ１／ｖｅｒｏ細胞の強度より低かった。
【０３１０】
ＰＣＲベースアッセイを行うため、糖タンパク質Ｄ、ＧＦＰおよびＶＰ１１／１２についてのプライマーを用いて、さらなる実験を行った。結果は、ＨＳＶ１を７５μＭのＥＧＣＧで処理したときに、ＤＮＡバンド強度が低減することを示す。ＨＳＶ１を７５μＭのＥＧＣＧエステルで処理したときに、ＤＮＡバンド強度はさらに低減する。これは、ＨＳＶ１のみを感染させたＶｅｒｏ細胞と比較して、ＥＧＣＧで処理したとき、より少ないＨＳＶ１粒子しかＶｅｒｏ細胞に感染できなかったこと、ＥＧＣＧエステルで処理したときは、さらに少なくなったことを意味する。しかし、定量的測定を行うために、リアルタイムＰＣＲを用いたさらなる分析を行うことが必要である。
【０３１１】
以前の実験は、糖タンパク質Ｄの増幅が、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞と比較して、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞において低下することを示しており、したがって、リアルタイムＰＣＲを用いた糖タンパク質の定量的研究を行うことが重要である。表１５に示しているように、本研究のために特別なプライマーをデザインした。リアルタイムＰＣＲのプロセスは、各反応サイクルの終わりに蛍光データを収集することで機能する。本実験で用いたＳＹＢＲ緑色色素は、２本鎖ＰＣＲ産物に結合し、これによってＰＣＲ産物が蛍光を発するようになる。反応が継続するにつれて、機器は、各サンプルについての閾値を呼び出す。閾値サイクル（Ｃｔ）は、蛍光の最初の顕著な増大が検出される決定的なサイクルである。一旦、ＰＣＲサイクルが終了したら、データを収集し、各サンプルのＣｔ値を分析し、相対量（ＲＱ）の蛍光を報告した。Ｃｔ値を比較するための基準は、以下である：Ｃｔにおける１の差は、ＤＮＡ量における２倍の差に相当する。１００ｎｇ／μＬのＤＮＡを全てのサンプル；細胞のみ、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ、およびＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏにおいて使用した。結果は図８および図９に示す。
【０３１２】
【表１５】
2013014568.tif 000071
結果は、ＥＧＣＧＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ対ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏで、糖タンパク質Ｄの量において３２倍の差を示し、ＨＳＶ１／ｖｅｒｏからＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏでは２５６倍の差を示す。この結果は、ＥＧＣＧは、ＨＳＶ１を９５％阻害し、ＥＧＣＧエステルはＨＳＶ１を９９．４６％阻害することを示す（図１０）。この作用モードは、ビリオンエンベロープの糖タンパク質に干渉すること、またはウイルス吸着および細胞侵入のためのウイルス化合物に干渉することによると考えられる（Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｉｖｉｒｕｓ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ６８：６６−７４，２００５；Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １１８：１３６９−１３７４，２００６）。明らかに、阻害は、ウイルスの浸透後ではなく、吸着中に起きるようである（図１１）。緑色蛍光タンパク質タグを用いることで、ＧＦＰ発現が、コントロールウイルスと比較して、処理ウイルスにおいて大きく低減することを確認した。
【０３１３】
ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏの糖タンパク質ＤのＰＣＲベースＤＮＡアッセイは、ＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞と比較して、より高いバンド強度を示した。これは、７５μＭのＥＧＣＧエステル−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏと比較して、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ感染細胞において、より多くのウイルスＤＮＡが存在したことを示す。
【０３１４】
さらに、リアルタイムＰＣＲベースアッセイは、ＥＧＣＧ−ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞の糖タンパク質ＤのＤＮＡ量が、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞のＤＮＡと比較して３２倍異なること、ＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞からＥＧＣＧエステルＨＳＶ１／Ｖｅｒｏ細胞では２５６倍異なることを示した。これらの結果は、ＥＧＣＧエステルが、ＨＳＶ１を大きく阻害すること、ならびに、ＥＧＣＧのみと比較したとき、ＨＳＶ１に対してより有効であることを示している。
【０３１５】
要約すると、ＥＧＣＧおよびＥＧＣＧエステルは両方ともＨＳＶ１を阻害することができるが、ＥＧＣＧエステルは、インビトロでのＨＳＶ１感染に対する阻害作用において、ＥＧＣＧと比較してより強力であることを証明した。ＥＧＣＧとは反対に、ＥＧＣＧエステルは安定な化合物であり、膣のｐＨにおいても安定であり、局所適用のための理想的な候補である。ＨＳＶ１およびおそらくＨＳＶ２に対するＥＧＣＧエステル局所適用は、毎年、何百万人ものヒトに有益である。さらに、疾患の広がりを止めることができることによって、ヒトが、ＨＳＶとＨＩＶとの間のつながりをできる限り止めることを可能にする。ヒトにおけるＥＧＣＧエステルの作用モードを完全に理解するためには、さらなる研究を行うことが必要であるが、本研究から得られた結果は、非常に有望である。天然産物の使用は多くの生涯を改善し得、したがって、患者に、より良好でより健康な将来についての希望を与える。
【０３１６】
（実施例８．単純ヘルペス形成の発生段階におけるＥＧＣＧステアレートの適用）
図１２Ａ〜１２Ｂは、１人のボランティア被験体の口の領域の写真である。この被験体は、単純ヘルペス発生を報告した。図１２Ａに示した単純ヘルペスの発生において（すなわち、１０分以内から１２時間まで、その間いつも、この被験体は、刺痛、かゆみ、炎症、紅斑、過敏症および／または苦痛を、病変がおそらく出現する領域において経験した）、本発明による組成物、すなわち、ＥＧＣＧステアレートを含む組成物、すなわち、
【０３１７】
【化５０】
2013014568.tif 000072
（ここで、脂肪酸エステルは、ステアリン酸との（−）−エピガロカテキン−３−ガレートのエステルである）を適用した。毎回、適用量は５０μｌ〜１００μｌであり、その間の各量およびあらゆる量であった。被験体に適用した組成物中のＥＧＣＧステアレートの濃度は、０．１〜２０％  ｗｔ／ｖｏｌ（重量／容積）であり、その間の各パーセンテージおよびあらゆるパーセンテージであった。ＥＧＣＧステアレートを含む組成物を、さらに３回、規則的な間隔で、次の１１時間にわたって適用した。図１２Ｂは、１１時間の処置後の被験体の口の領域を示している。領域は回復し、発生の徴候が無い。言い換えれば、単純ヘルペスが形成されず、ＨＳＶ発生が阻害され、上皮組織が治癒した。図１２Ｃは、別の単純ヘルペスのエピソードにおいて１１時間の処置を行っていない、唇での発生の出現を示す。図１２Ｃは、単純ヘルペスの出現を示している。
【０３１８】
（実施例９．単純ヘルペス形成の発生段階後のＥＧＣＧステアレートの適用）
図１３Ａ〜１３Ｈは、ボランティア被験体の口の写真である。この被験体は、単純ヘルペス発生を報告した。単純ヘルペスの発生を図１３Ａに示す。単純ヘルペスの水疱段階において（すなわち、１２時間後、単純ヘルペス形成の水疱段階の開始時）、本発明による組成物、すなわち、ＥＧＣＧステアレートを含む組成物、すなわち、
【０３１９】
【化５１】
2013014568.tif 000073
（ここで、脂肪酸エステルは、ステアリン酸との（−）−エピガロカテキン−３−ガレートのエステルである）を適用した。毎回、適用量は５０μｌ〜１００μｌであり、その間の各量およびあらゆる量であった。被験体に適用した組成物中のＥＧＣＧステアレートの濃度は、０．１〜２０％  ｗｔ／ｖｏｌ（重量／容積）であり、その間の各パーセンテージおよびあらゆるパーセンテージであった。図を参照し、図１３Ｂの写真を撮った後すぐに、すなわち、水疱段階の開始時に、本組成物を適用した。ＥＧＣＧステアレートを含む組成物を、さらに３回、次の２日間にわたって適用した。図１３Ｂから図１３Ｈまでの写真は、同じ口の領域を１日間隔で示している。図１３Ｃは、痂皮段階を示す。図１３Ｄは、さらなる痂皮段階を示す。図１３Ｅは、さらなる痂皮段階を示す。図１３Ｆは、治癒段階の開始を示し、これは、図１３Ａの写真を撮った５日後である。図１３Ｇは、治癒段階を示し、これは、図１３Ｆの写真を撮った１日後である。図１３Ｈは、治癒した口の領域を示し、これは、図１３Ａの写真を撮った７日後である。図１３Ａから図１３Ｈまでは、ＨＳＶ発生後のＥＧＣＧステアレートを含む組成物の適用は、水疱段階を阻害し、潰瘍段階を排除することを示す。感染した領域は、７日以内に治癒する。言い換えれば、水疱段階の開始時（すなわち、単純ヘルペス発生後）における、本発明による組成物の適用は、水疱段階の長さを低減し、潰瘍段階を排除して、十分な治癒までの期間を３〜４日間短縮する。
【０３２０】
他の実施形態において、ＥＧＣＧ−ステアレートについて上に示された効果と類似の効果は、ＥＧＣＧ−ステアレートが代わりに、以下の構造：
【０３２１】
【化５２】
2013014568.tif 000074
による、４’位で脂肪酸エステルでエステル化された（−）−エピガロカテキン−３−ガレートである場合に見られ、ここでこの脂肪酸エステルは、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートと、ブタン酸、ヘキサン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸（パルミチン酸）、９−ヘキサデセン酸、９−オクタデセン酸、１１−オクタデセン酸、９，１２−オクタデカジエン酸、９，１２，１５−オクタデカトリエン酸、６，９，１２−オクタデカトリエン酸、エイコサン酸、９−エイコセン酸、５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸、５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸、ドコサン酸、１３−ドコセン酸、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸またはテトラコサン酸とのエステルである。好ましくは、この脂肪酸エステルは、（−）−エピガロカテキン−３−ガレートとヘキサデカン酸（パルミチン酸）とのエステルである。
【０３２２】
本発明による組成物は、少なくとも以下のウイルスを阻害および／または緩和する際に有効である：単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ−２）、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、水痘−帯状ヘルペスウイルス（ＶＺＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（突発性発疹または小児バラ疹）およびヒトヘルペスウイルス８（カポージ肉腫関連ヘルペスウイルス）。
【０３２３】
他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者により一般的に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書中で引用される刊行物、およびこれらの刊行物が引用される目的となっている材料は、明示的に参考として引用される。
【０３２４】
本明細書中に記載される本発明の具体的な実施形態の多くの均等物を、当業者は認識するか、または慣用的な実験に過ぎないものを使用して確認し得る。このような均等物は、添付の特許請求の範囲により包含されることが意図される。
【図１】
2013014568.tif 000076
【図２】
2013014568.tif 000077
【図３】
2013014568.tif 000078
【図４】
2013014568.tif 000079
【図５】
2013014568.tif 000080
【図６】
2013014568.tif 000081
【図７】
2013014568.tif 000082
【図８】
2013014568.tif 000083
【図９】
2013014568.tif 000084
【図１０】
2013014568.tif 000085
【図１１】
2013014568.tif 000086
【図１２Ａ】
2013014568.tif 000087
【図１２Ｂ】
2013014568.tif 000088
【図１２Ｃ】
2013014568.tif 000089
【図１３Ａ】
2013014568.tif 000090
【図１３Ｂ】
2013014568.tif 000091
【図１３Ｃ】
2013014568.tif 000092
【図１３Ｄ】
2013014568.tif 000093
【図１３Ｅ】
2013014568.tif 000094
【図１３Ｆ】
2013014568.tif 000095
【図１３Ｇ】
2013014568.tif 000096
【図１３Ｈ】
2013014568.tif 000097
【配列表】
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