(57)【要約】【課題】本発明の目的は、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有し、より付加価値の高い牡蠣エキスを提供することにある。【解決手段】本発明は、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣に由来する、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣エキス；前記牡蠣エキスを含有する飲食品；フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する飼料を牡蠣に給餌し、その後牡蠣エキスを抽出する、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣エキスの製造方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣に由来する、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣エキス。
【請求項２】
フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣は、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する飼料が給餌された牡蠣である、請求項１に記載の牡蠣エキス。
【請求項３】
フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する飼料が、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する微細藻類である、請求項２に記載の牡蠣エキス。
【請求項４】
フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する微細藻類が、キートセラスおよびフィスチュリフェラから選ばれる珪藻である、請求項３に記載の牡蠣エキス。
【請求項５】
フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを、総和含量で２００ｐｐｍ以上含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の牡蠣エキス。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の牡蠣エキスを含有する飲食品。
【請求項７】
フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する飼料を牡蠣に給餌し、その後牡蠣エキスを抽出する、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣エキスの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、牡蠣エキスに関する。
【背景技術】
【０００２】
牡蠣エキスとは、生牡蠣の成分を抽出して濃縮させて得られるエキスである。牡蠣エキスには、主成分としてのタウリン、グリコーゲンなどの栄養成分の他に、亜鉛などのミネラル分も豊富に含まれているため、これまで健康食品などとして利用されてきた（例えば、特許文献１参照）。牡蠣エキスに更なる効能成分が付加されれば、付加価値の高い機能性食品としてより需要が高まることが期待できる。
【０００３】
一方、フコキサンチンは、特許文献２および非特許文献１で報告されているように、抗酸化作用、抗肥満（脂肪細胞減少効果）、抗糖尿、血管新生等を有することが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−２９２７４１号公報
【特許文献２】国際公開第２００６／１２６３２５号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】日本水産学会誌、７４（２），２６１−２６２（２００８）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、フコキサンチンを含有する牡蠣エキスについての報告はこれまでなされていないのが現状である（特許文献１表１参照）。
【０００７】
本発明の目的は、フコキサンチンやフコキサンチノールを含有し、より付加価値の高い牡蠣エキスを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、以下の発明を提供する。
〔１〕フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣に由来する、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣エキス。
〔２〕フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣は、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する飼料が給餌された牡蠣である、上記〔１〕に記載の牡蠣エキス。
〔３〕フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する飼料が、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する微細藻類である、上記〔２〕に記載の牡蠣エキス。
〔４〕フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する微細藻類が、キートセラスおよびフィスチュリフェラから選ばれる珪藻である、上記〔３〕に記載の牡蠣エキス。
〔５〕フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを、総和含量で２００ｐｐｍ以上含む、上記〔１〕〜〔４〕のいずれか一項に記載の牡蠣エキス。
〔６〕上記〔１〕〜〔５〕のいずれか一項に記載の牡蠣エキスを含有する飲食品。
〔７〕フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する飼料を牡蠣に給餌し、その後牡蠣エキスを抽出する、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣エキスの製造方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の牡蠣エキスは、従来の牡蠣エキスには含まれないフコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有している。そのため、本発明の牡蠣エキスはフコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールの効能も期待できる点で、従来品と比べ付加価値の高い飲食品として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本明細書において「％」は、特に断らない限り「質量％」を示す。
【００１１】
本発明の牡蠣エキスは、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣に由来する、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する。
【００１２】
牡蠣はイタボガキ科（Ｏｓｔｒｅｉｄａｅ）の牡蠣、例えば、マガキ属（Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａ）に属する牡蠣、イタボガキ属（Ｏｓｔｒｅａ）に属する牡蠣が挙げられる。具体的には、マガキ（Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａ  ｇｉｇａｓ）、イワガキ（Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａ  ｎｉｐｐｏｎａ）、スミノエガキ（Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａ  ａｒｉａｋｅｓｉｓ）、イタボガキ（Ｏｓｔｒｅａ  ｄｅｎｓｅｌａｍｅｌｌｏｓａ）、ヨーロッパヒラガキ（Ｏｓｔｒｅａ  ｅｄｕｌｉｓ）、太平洋カキ（Ｏｓｔｒｅａ  Ｌａｐｅｒｏｕｓｉ）、大連湾カキ（Ｏｓｔｒｅａ  Ｔａｌｉｅｎｅｈａｎｅｎｓｉｓ）、近江カキ（Ｏｓｔｒｅａ  ｒｉｖｕｌａｒｉｓ）、摺カキ（Ｏｓｔｒｅａ  ｃｕｃｕｌｌａｔａ）などを用いることができる。牡蠣の年齢、性別などについて特に制限はない。
【００１３】
牡蠣は、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する。フコキサンチン（Ａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ［（１Ｓ，３Ｒ）−３−ｈｙｄｒｏｘｙ−４−［（３Ｅ，５Ｅ，７Ｅ，９Ｅ，１１Ｅ，１３Ｅ，１５Ｅ）−１８−［（１Ｓ，４Ｓ，６Ｒ）−４−ｈｙｄｒｏｘｙ−２，２，６−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−７−ｏｘａｂｉｃｙｃｌｏ〔４．１．０〕ｈｅｐｔａｎ−１−ｙｌ］−３，７，１２，１６−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ−１７−ｏｘｏｏｃｔａｄｅｃａ−１，３，５，７，９，１１，１３，１５−ｏｃｔａｅｎｙｌｉｄｅｎｅ］−３，５，５−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ］ｅｓｔｅｒ）は、非プロビタミンＡ類のカロテノイドの一種であり、以下の式で表されるとおり、アレン構造、エポキシドおよびヒドロキシル基を有している。フコキサンチンは１以上の水素原子に代えて置換基を有していてもよい。フコキサンチンはその構造中に含まれる１以上の水素原子に代えて置換基を有する、いわゆる誘導体であってもよい。また、フコキサンチンは塩の形態であってもよい。
【００１４】
【化１】
2013192515.tif 000002
【００１５】
フコキサンチノールは、フコキサンチンのアセチル基が遊離して得られる、フコキサンチンの誘導体である。フコキサンチノールはその構造中に含まれる１以上の水素原子に代えて置換基を有する、いわゆる誘導体であってもよい。また、フコキサノールは塩の形態であってもよい。
【００１６】
塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、ギ酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、またはパラトルエンスルホン酸塩等の有機酸塩；ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩等の無機塩基塩、トリエチルアンモニウム塩、トリエタノールアンモニウム塩、ピリジニウム塩、ジイソプロピルアンモニウム塩等の有機塩基塩；アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸などのアミノ酸塩が挙げられる。
【００１７】
フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣とは、体内にフコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣を意味する。フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣における、フコキサンチン含量は特には限定されないが、牡蠣の重量に対するフコキサンチンの重量として、通常は５ｐｐｍ以上、好ましくは１０ｐｐｍ以上、より好ましくは１５ｐｐｍ以上、更に好ましくは２０ｐｐｍ以上である。上限は特に限定されないが、通常１５０ｐｐｍ以下である。フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣としては、フコキサンチンを２０〜１５０ｐｐｍ含む牡蠣であることが更に好ましい。牡蠣のフコキサンチンの含有量は、実施例の分析法の項目（１）の条件に従って測定することができる。
【００１８】
フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣を作出する方法は特には限定されないが、例えば、牡蠣にフコキサンチンを含む飼料を摂取させる方法、遺伝子組み換え技術などによりフコキサンチン産生に関与する酵素遺伝子を導入する方法などが挙げられるが、牡蠣にフコキサンチンを含む飼料を摂取させる方法が好ましい。フコキサンチンを含む飼料は例えば、フコキサンチンを含む天然飼料（微細藻類、植物プランクトンなど）であってもよいし、フコキサンチンを配合した人工飼料であってもよいが、天然飼料であることが好ましく、フコキサンチンを含む微細藻類であることが好ましい。フコキサンチンを含む微細藻類（植物プランクトン、ｍｉｃｒｏａｌｇａｅ）としては、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含む珪藻類が好ましく、例えば、キートセラス（例えばキートセラス・カルシトランス（Ｃｈａｅｔｏｃｅｒｏｓ  ｃａｌｃｉｔｒａｎｓ）、キートセラス・グラシリス（Ｃｈａｅｔｏｃｅｒｏｓ  ｇｒａｃｉｌｉｓ））、フィスチュリフェラ（例えば、フィスチュリフェラ  サプロフィラ（Ｆｉｓｔｕｌｉｆｅｒａ  ｓａｐｒｏｐｈｉｌａ）、フィスチュリフェラ  ペリキュロサ（Ｆｉｓｔｕｌｉｆｅｒａ  ｐｅｌｌｉｃｕｌｏｓａ）などが挙げられる。藻類の中では海水に住むものが好ましい。フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含む飼料の投与条件については適宜調整することができる。例えば、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含む飼料を、１週間以上投与する。そして、通常の飼料にて飼育後、必要に応じて一定期間絶食させ、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含む飼料を、１週間以上投与することが好ましい。給餌量は限定されないが、牡蠣が摂食する量以上の量を給餌することが好ましい。例えば、残餌をコールカウンター（自動細胞計数装置）などで確認しながら給餌することが好ましい。その他の牡蠣の飼育条件についても特に制限はなく、適宜水温、ｐＨ等を調整することができる。水温は通常１５〜３０℃の範囲で調整され得る。また、水のｐＨは通常、７．５〜８．５の範囲で調整され得る。水中には空気を通気することが好ましく、流水させることが好ましい。
【００１９】
本発明の牡蠣エキスは、上述の通りフコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣に由来するものであればよい。フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有する牡蠣からの牡蠣エキスの調製は、通常の牡蠣エキスの抽出条件に従えばよい。抽出の際の溶媒としては、水性溶媒（エタノール、水、エタノールと水の混合溶媒など）を用いることができ、エタノールと水の混合溶媒を用いることが好ましい。溶媒の量は、通常、牡蠣１００質量部に対して１００〜１，０００質量部とすることができ、２００〜８００質量部であることが好ましい。抽出時間は通常は０．５〜５時間であり、１〜３時間であることが好ましい。抽出温度は通常は２５℃〜８０℃であり、３０℃〜７０℃であることが好ましい。
【００２０】
抽出物はそのまま本発明の牡蠣エキスとして用いてもよいが、抽出物を固液分離し、抽出残渣を除いた後の抽出液を牡蠣エキスとして用いてもよい。固液分離はろ過、圧搾、静置分離、遠心分離などにより行うことができ、ろ過または遠心分離により行うことが好ましい。
【００２１】
更に、抽出液を必要に応じて濃縮し、これを牡蠣エキスとして用いてもよい。濃縮は、濃縮後の濃縮物の固形分が好ましくは１０％以上、より好ましくは２０％以上となるように行うことができる。濃縮の方法は特に限定されないが、例えば減圧留去、加熱蒸発（たとえば、常圧下で）、膜分離などにより行うことができ、より低い温度で濃縮できることから、減圧により行うことが好ましい。濃縮装置としては、例えば、撹拌槽、フラッシュ蒸発機、薄膜蒸発機などが挙げられるが、いずれの装置を用いてもよい。濃縮の際の温度条件は、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールの分解を十分に防ぎフコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールの残存率を保持できる観点から、６０℃以下であることが好ましい。下限は特に限定されないが、通常は室温以上、好ましくは３５℃以上、より好ましくは４０℃以上に設定することができる。
【００２２】
また、抽出液は、乾燥処理に供してもよい。乾燥の方法は特に限定されず、例えば、ドラム乾燥、噴霧乾燥、凍結乾燥、真空乾燥、窒素ブローによる乾燥等、いずれの方法であってもよい。
【００２３】
本発明の牡蠣エキスは、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含有している。フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールの含有量は、２００ｐｐｍ以上であることが好ましく、２５０ｐｐｍ以上であることがより好ましく、３００ｐｐｍ以上であることが更に好ましく、３５０ｐｐｍ以上であることが更により好ましく、４００ｐｐｍ以上であることが特に好ましい。
【００２４】
本発明の牡蠣エキスは、そのままの形態で、または、必要に応じて牡蠣エキス以外の成分（薬理学的に許容される基剤）と共に、最終製品（例えば、飲食品、医薬部外品など）として用いることができる。また、飲食品用の添加剤、医薬部外品用の添加剤として用いることができる。薬理学的に許容される基剤は、本発明の目的を損なわない限り、特に限定されない。例えば、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、着色剤、発色剤、矯味剤、着香剤、酸化防止剤、防腐剤、呈味剤、酸味剤、甘味剤、強化剤、ビタミン剤、膨張剤、増粘剤、界面活性剤などの中から、製剤に必要な諸特性（例えば、製剤安定性）を損なわないものであって、最終製品（例えば、医薬部外品、飲食品）の剤形に応じたものを１種または２種以上選択することができる。また、本発明の牡蠣エキス以外の牡蠣エキスを併用してもよい。
【００２５】
本発明の牡蠣エキスの投与形態は特に限定されない。例えば、経口投与（例えば、口腔内投与、舌下投与など）、非経口投与（静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、経皮投与、経鼻投与、経肺投与など）などが挙げられる。これらの中でも侵襲性の少ない投与形態が好ましく、経口投与であることがより好ましい。
【００２６】
本発明の牡蠣エキスの剤形は、飲食品および医薬部外品のいずれとするかによって適宜決定することができ、特に限定されない。経口投与される際の剤形の例としては、液状（液剤）、シロップ状（シロップ剤）、錠剤（錠剤）、カプセル状（カプセル剤）、粉末状（顆粒、細粒）、ソフトカプセル状（ソフトカプセル剤）、液状（液剤）、シロップ状（シロップ剤）、固形状、半液体状、クリーム状、ペースト状が挙げられる。
【００２７】
本発明の牡蠣エキスの摂取対象者は特に限定されないが、例えば、疲労を感じている対象者、体力の衰えを感じている対象者、肥満であることを気にしている対象者、その他、牡蠣エキスに含まれるフコキサンチン、フコキサンチノール、タウリン、グリコーゲン、亜鉛などによる効能を期待する対象者に適している。また、特段の不安などがない対象者であっても、健康の保持増進などを目的として日常的に摂取することができる。なお、フコキサンチンには抗酸化作用、抗肥満（脂肪細胞減少効果）、抗糖尿、血管新生作用があることが知られている（国際公開第２００６／１２６３２５号、日本水産学会誌、７４（２），２６１−２６２（２００８）など）。従来の牡蠣エキスにはフコキサンチンが含まれていないのでこれらの効果は期待できなかったが、本発明の牡蠣エキスにはこれらの効果が期待できるため、付加価値が高い飲食品として有用である。
【００２８】
本発明の牡蠣エキスは、各種飲食品として利用することができる。例えば、飲料（清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、粉末飲料、果実飲料、乳飲料、ゼリー飲料など）、菓子類（クッキー、ケーキ、ガム、キャンディー、タブレット、グミ、饅頭、羊羹、プリン、ゼリー、アイスクリーム、シャーベットなど）、水産加工品（かまぼこ、ちくわ、はんぺんなど）、畜産加工品（ハンバーグ、ハム、ソーセージ、ウィンナー、チーズ、バター、ヨーグルト、生クリーム、チーズ、マーガリン、発酵乳など）、スープ（粉末状スープ、液状スープなど）、主食類（ご飯類、麺（乾麺、生麺）、パン、シリアルなど）、調味料（マヨネーズ、ショートニング、ドレッシング、ソース、たれ、しょうゆなど）が挙げられる。更に、本発明の牡蠣エキスは、健康食品、機能性食品、栄養補助食品（サプリメント）、特定保健用食品、医療用食品、病者用食品、乳児用食品、介護用食品、高齢者用食品等の飲食品として利用することもでき、健康食品、機能性食品として利用することが好ましい。
【実施例】
【００２９】
実施例１
（１）牡蠣の養殖
牡蠣（マガキ、成体）養殖の仕上げ段階に、１週間絶食させた後、微細藻類（キートセラス・カルシトランス）を２週間給餌させた。生牡蠣中のフコキサンチン（ＦＸ）濃度を測定した結果、３４ｐｐｍ蓄積していた。またフコキサンチノールは３ｐｐｍを蓄積していた。
【００３０】
（２）抽出
牡蠣のむき身１００ｇ（８個分）にエタノール２８０ｇ、水２００ｇを加えて、７０℃で６０分間、攪拌した。その後、加圧ろ過して、抽出液と牡蠣残さを分離し、抽出液中の溶媒を留去し、減圧乾固させ、牡蠣エキスを得た。
【００３１】
比較例１
通常の方法で養殖した牡蠣を用いた以外は実施例１と同様の操作を行い、牡蠣エキスを調製した。
【００３２】
分析法
（１）フコキサンチン（ＦＸ）、フコキサンチノール（ＦＸＯＨ）の分析法
生牡蠣に含まれるフコキサンチン重量およびフコキサンチノール重量は下記のようにして測定した。むき身を凍結乾燥した。凍結乾燥は、液体窒素にむき身を入れ１５分間浸漬して凍結させ、凍結乾燥機（ヤマト科学製）で一晩乾燥させた。乾燥した牡蠣はミキサーで粉砕した。粉末状の牡蠣にアセトン１００ｍｌを添加後、３時間撹拌し、ろ過して得られた抽出液を乾固させた。乾燥物をメタノールで全量を溶解させてＦＸおよびＦＸＯＨ濃度５０〜１００ｐｐｍになるように調整し、ＨＰＬＣ−ＵＶ法により測定した。
【００３３】
抽出されたフコキサンチン重量は、牡蠣エキスにＨＰＬＣ−ＵＶ法を適用して測定した。
【００３４】
〔ＨＰＬＣ−ＵＶ測定条件〕
分離カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３（５μｍ，４．６ｍｍＩ．Ｄ．×１５０ｍｍ）
移動相：メタノール／水＝８５／１５
流速：１．０ｍＬ／分
オーブン温度：６０℃
注入量：１０μＬ
検出：４４０ｎｍ（ＵＶ）
【００３５】
（２）グリコーゲンの分析法
生牡蠣に含まれるグリコーゲン重量および抽出されたグリコーゲン重量は、それぞれ、生牡蠣および牡蠣エキスにフェノール硫酸法を適用して測定した。
【００３６】
すなわち、抽出されたグリコーゲン重量は以下のようにして測定した。牡蠣エキスの一部（牡蠣１個分に相当する液量）を乾固させ、水２０ｍＬで希釈して、希釈液Ａを調整した。希釈液Ａをさらに１％に水で希釈した。５０ｍｌビーカーに先ほど希釈した１％液とフェノール溶液を各々１ｍｌを加えて、振り混ぜた。そこに硫酸５ｍｌを一定時間で加えて、１０秒間激しく攪拌させた。室温で３０分間静置させ、分光光度計で４９０ｎｍの吸光度を分析した。同様にしてグルコース１０、５０、１００、２００ｐｐｍの水溶液を調製したものを上記のように反応させ、検量線を作成した。
【００３７】
一方、生牡蠣に含まれるグリコーゲン重量の測定は、以下のようにして測定した。牡蠣むき身１個をラボミルサーでミンチ状にした。１０％トリクロロ酢酸水溶液２００ｍｌを加え、１時間攪拌後、一夜放置した。その後ろ過を行い、５％トリクロロ酢酸５０ｍｌで２回で洗浄した。ろ液に水を加えて正確に５００ｍｌにし、この溶液を希釈液Ｂとした。上記抽出されたグリコーゲン重量の測定において、希釈液Ａの代わりに希釈液Ｂを用いたほかは同様に、グリコーゲン重量の測定を行った。
【００３８】
（３）タウリンの分析法
生牡蠣に含まれるタウリン重量および抽出されたタウリン重量は、それぞれ、生牡蠣および牡蠣エキスにＨＰＬＣプレカラム法を適用して測定した。
【００３９】
抽出されたタウリン重量は以下のようにして測定した。上記項目（２）で説明した希釈液Ａを、さらに２０％に水で希釈した。希釈液０．１５ｇ、緩衝溶液（炭酸Ｎａ、炭酸水素Ｎａ）６００μＬを混ぜ、ＤａｂｓＣｌ−アセトン液６００μＬを加えた。その後７０℃で１２分間加熱した。室温冷却後、ろ過して分析サンプルとした。ＨＰＬＣの測定条件は以下の通りとした。
【００４０】
一方、生牡蠣に含まれるタウリン重量の測定は、以下のようにして測定した。牡蠣むき身１個をラボミルサーでミンチ状にした。水溶液４０ｍｌを加え、１時間攪拌後ろ過を行い、ろ液にスルホサリチル酸２水和物４ｇを加えて再度１時間攪拌した。ついで６０００ｒｐｍで５分間遠心し、上澄み液を分取し、分取された溶液を溶液Ｃとした。抽出されたタウリン重量の測定において、希釈液Ａの代わりに溶液Ｃを用いたほかは同様に、タウリン重量の測定を行った。
【００４１】
〔ＨＰＬＣ条件〕
・カラム：ＯＤＳ−３（ＧＬサイエンス）
・展開溶媒：（Ａ）３５ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸Ｎａ  （Ｂ）アセトニトリル
（Ａ）／（Ｂ）＝８５／１５（０分）→７５／２５（１５分）→
３０／７０（４５分）→８５／１５（５０分）Ｇｒａｄｉｅｎｔ
・検出器：ＵＶ
・測定波長：４６５ｎｍ
・流量：１．０ｍＬ／分
・カラムオーブン：４０℃
・注入量：５μＬ
【００４２】
（４）亜鉛の分析法
抽出された亜鉛重量は、希釈液Ａ２ｍＬをるつぼに入れて加熱して炭化させ、６００℃で１時間灰化処理した。灰化物に硝酸［１＋１］を３ｍＬ加えて酸分解させて、白煙が出なくなるまで加熱した。５％硝酸に溶解させ、ＩＣＰプラズマ発光分析装置により測定した。測定波長は２１３．８ｎｍとした。
【００４３】
一方、生牡蠣に含まれる亜鉛重量の測定は、牡蠣エキスに代えて牡蠣むき身１個をラボミルサーでミンチ状にしたものを用いたほかは、抽出された亜鉛重量の測定と同様に行った。
【表１】
2013192515.tif 000003
【００４４】
表１より明らかな通り、比較例１ではフコキサンチンおよびフコキサンチノールが全く検出されなかったのに対し、実施例１においてはフコキサンチンおよびフコキサンチノールが多量に回収され、中でもフコキサンチンの回収量が多かった。
【００４５】
これらの結果は、本発明により、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを蓄積した牡蠣から、フコキサンチンおよび／またはフコキサンチノールを含む牡蠣エキスを簡便に抽出できること、およびこの牡蠣エキスには、牡蠣特有のタウリン、グリコーゲン、亜鉛などの有効成分も豊富に含まれていること、を示している。