(57)【要約】【課題】  外毛根鞘細胞増殖促進作用を有しており、特に脱毛症に対して有効な育毛剤を提供することを目的とするものである。【解決手段】  本発明は、イソアセトシドを有効成分とする育毛剤を提供するものである。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソアセトシドを有効成分とする育毛剤。
【請求項２】
脱毛症の予防及び／又は治療に用いる請求項１に記載の育毛剤。
【請求項３】
イソアセトシドを含有してなる洗髪料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イソアセトシドを有効成分とする育毛剤に関し、詳しくは外毛根鞘細胞増殖促進作用を有する育毛剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
脱毛症には、男性ホルモン、食習慣、ストレス、遺伝などが関わっているとされるが、はっきりとした原因については分かっていない。その症状についても、壮年性脱毛症、男性型脱毛症、円形脱毛症など様々である。
現在、脱毛症の治療に用いられている育毛剤有効成分は、毛母細胞活性化剤（例えば、特許文献１参照）、血行促進剤、抗男性ホルモン剤、殺菌・皮脂除去・保湿成分等があるが、効果の程度は必ずしも明瞭ではなく、さらに高い改善率を示す育毛剤成分が求められている。
【０００３】
毛髪は、毛球の毛母細胞が角化したものであるが、現在、この過程に至る仕組みについて明らかになってきている。毛球は、毛包幹細胞が活性化し、その子孫細胞により毛包下部が再生されて作られる。毛包幹細胞は、バルジと呼ばれる微環境（ニッチ）に存在し、この未分化な幹細胞を由来として成長期、退行期、休止期のヘアーサイクルを形成している。バルジ幹細胞は、毛芽のへ移動、形成とその分化系統細胞のゆっくりとしたサイクリングで全ての髪の再生に関与している（非特許文献１参照）。
【０００４】
即ち、初期の毛の成長過程で、バルジ幹細胞の一つが休止期のニッチから外側へと出ていき、この未分化なバルジ幹細胞は、成長期に移行するため分化・増殖を繰り返し、子孫細胞となり毛乳頭細胞付近に移動する。その後、毛母細胞となり、内毛根鞘細胞や毛幹を形成すると考えられている。
一方、退行期の毛母細胞や外毛根鞘細胞は、アポトーシスが誘導されると増殖が止まり、休止期へと移行する。このヘアーサイクルが乱れると、脱毛症の原因にもつながる。外毛根鞘細胞には、上記のようにバルジ幹細胞や幹細胞から派生した毛芽、また、その分化系統細胞の子孫細胞など毛包形成能をもつ細胞が含まれており、ヘアーサイクルに深く関与している（非特許文献２参照）。
このことから、太く長い毛の形成には、毛包上皮系細胞である外毛根鞘細胞の維持、増殖が非常に重要であり、脱毛症に対して有効な手段と考えられる。
【０００５】
しかしながら、バルジ幹細胞、バルジ幹細胞から派生した毛芽、その分化系統細胞の子孫細胞等が含まれている外毛根鞘細胞の増殖性を有する育毛剤有効成分は、これまで見出されていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開平８−１５７４６４
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Cell Stem Cell 4:155-169.（2009）
【非特許文献２】PLoS Genet 7(12): e1002403（2011）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は上記課題を解決し、外毛根鞘細胞増殖促進作用を有しており、特に脱毛症に対して有効な育毛剤を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は、上記課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、バルジ幹細胞、バルジ幹細胞から派生した毛芽、その分化系統細胞の子孫細胞等が含まれている外毛根鞘細胞の増殖性を有する成分を見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。
即ち、請求項１に係る本発明は、イソアセトシドを有効成分とする育毛剤を提供するものである。
請求項２に係る本発明は、脱毛症の予防及び／又は治療に用いる請求項１に記載の育毛剤を提供するものである。
請求項３に係る本発明は、イソアセトシドを含有してなる洗髪料を提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の育毛剤の有効成分であるイソアセトシドは、外毛根鞘細胞増殖促進作用を有しており、特に脱毛症に対してこれまでに利用されている有効成分とは異なった作用点を有し、高い脱毛防止作用、高い抜け毛防止作用を発揮する。
即ち、これまで、育毛剤については必ずしも効果が明瞭ではなく、脱毛症に対してさらに高い改善効果を有する育毛成分の開発が望まれてきた。
本発明のイソアセトシドを有効成分とする育毛剤は、これまでに認められている育毛剤有効成分とは作用機構が異なり、最近になって明らかとなったヘアーサイクルに入る重要な初期の成長期、即ち幹細胞、幹細胞から派生する毛芽、子孫細胞、分化系統細胞を含むヒト外毛根鞘細胞に対して高い増殖促進作用を有する優れた育毛剤である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実験例２におけるイソアセトシドの細胞増殖作用（ヒト外毛根鞘細胞増殖作用）を示す図である。
【図２】実験例３におけるイソアセトシドの細胞増殖作用（ヒト外毛根鞘細胞増殖作用）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明は、イソアセトシド（iso-acetoside）を有効成分とする育毛剤に関する。換言すると、外毛根鞘細胞増殖促進作用を有する育毛剤に関する。
【００１３】
本発明の育毛剤の有効成分としてのイソアセトシドは、既知の化合物であり、次式で表されるものである。
【００１４】
【化１】
2013163661.tif 000002
【００１５】
上記式で表されるイソアセトシドについて、ヒト由来の外毛根鞘細胞を用いて細胞増殖作用を調べたところ、細胞増殖促進作用があることが確認された。
なお、上記式で表されるイソアセトシドには、構造異性体としてアセトシドがあるが、後記実験結果から明らかなように、このアセトシドには、細胞増殖促進作用は示されなかった。
なお、本発明の育毛剤は、上記式で表されるイソアセトシドを有効成分とするものであればよく、本発明の効果を奏するものである限り、精製品の他に、粗製品であってもよい。本発明に用いるイソアセトシドは、薬品メーカーより市販されている。
【００１６】
本発明の育毛剤には、本発明の効果を損なわない範囲で、公知の殺菌・皮脂除去・保湿成分や育毛剤成分（毛母細胞活性化剤、血行促進剤、抗男性ホルモン剤など）等を配合して用いることができる。
【００１７】
また、本発明の育毛剤には、必要に応じて、本発明の効果を損なわない範囲で、アルコール類、精製水、酸化防止剤、乳化剤、香料、防腐剤、抗菌剤、界面活性剤等を適宜配合することもできる。
【００１８】
本発明の育毛剤は、通常、溶液状、乳液状、クリーム状、ペースト状、ゼリー状、エアゾール状などの形態で使用されるが、溶液の形態で使用することが使用上の面から好ましい。
【００１９】
本発明の育毛剤は、化粧品、医薬部外品、医薬品などとして用いることができる。
ここで化粧品として具体的には、例えば、ヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアローション、ヘアリキッド、ヘアトリートメント、ヘアムース、ヘアシャンプー、ヘアリンスなどの頭髪用化粧品を挙げることができる。
【００２０】
本発明の育毛剤中のイソアセトシドの配合量は、通常、0.001％〜1％重量／容量％、好ましくは0.005〜0.1重量／容量％、より好ましくは0.01〜0.05重量／容量％である。
ここで育毛剤中のイソアセトシドの配合量が0.001重量／容量％未満であると、十分な脱毛防止効果乃至育毛効果を奏することができない。一方、育毛剤中にイソアセトシドを1重量／容量％を超えて配合しても、配合量に見合うだけの脱毛防止効果乃至育毛効果が得られない。
【００２１】
本発明の育毛剤の使用方法については、一般の育毛剤や頭髪用化粧品と同様に使用すればよく、滴下、塗布などにより、患部に対して適用すればよい。患部への適用は、通常、１日に１乃至３回程度を、所期の脱毛防止効果乃至育毛効果が得られるまで、継続して経皮的に行えばよく、３ヶ月以上連用することが好ましい。
【００２２】
さらに、本発明は、イソアセトシドを含有してなる洗髪料を提供するものである。
ここで洗髪料とは、文字通り、髪を洗う際に用いられるものを総称するものである。洗髪料として具体的には例えば、ヘアーシャンプー、ヘアーリンス、ヘアコンディショナーなどを挙げることができる。
【００２３】
本発明の洗髪料は、イソアセトシドを育毛成分として含有するものであるが、その他、通常の洗髪料において洗浄基剤として用いられている界面活性剤、さらには防腐剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、香料、着色料などを適宜配合することができる。また、必要に応じて、他の育毛剤成分（毛母細胞活性化剤、血行促進剤、抗男性ホルモン剤など）を配合することもできる。
【００２４】
本発明の洗髪料中のイソアセトシドの配合量は、通常、0.001〜1重量／容量％、好ましくは0.005〜0.1重量／容量％、より好ましくは0.01〜0.05重量／容量％である。
ここで洗髪料中のイソアセトシドの配合量が0.001重量／容量％未満であると、十分な脱毛防止効果乃至育毛効果を奏することができない。一方、洗髪料中にイソアセトシドを1重量／容量％を超えて配合しても、配合量に見合うだけの脱毛防止効果乃至育毛効果が得られない。
【００２５】
本発明の洗髪料の使用方法については、一般の洗髪料と同様に使用すればよく、患部に対して適用すればよい。患部への適用は、通常、１日に１回程度を、所期の脱毛防止効果乃至育毛効果が得られるまで、継続して経皮的に行えばよく、３ヶ月以上連用することが好ましい。
【実施例】
【００２６】
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらにより限定されるものではない。
【００２７】
実験例１
式（Ｉ）で表されるイソアセトシドについて、ヒト由来の外毛根鞘細胞を用いて細胞増殖作用を調べた。
【００２８】
【化２】
2013163661.tif 000003
【００２９】
即ち、正常ヒト外毛根鞘細胞を、継代用培地（10%FBS含有DMEM）を用いて培養した後、トリプシン処理にて細胞を回収した。回収した細胞を、継代用培地を用いて4.0×104 cells/mlの細胞密度に希釈した後、コラーゲンコートした24ウェルプレートに、500 μlとなるように播種した。播種後の翌日と3日目に、サンプルを溶解した試験培地に交換して、７日間培養した。
なお、培地中に、イソアセトシドを、25μｇ／ｍｌの割合で添加したもの（本発明区）の他、対照として無添加のもの（無添加区）を用意して試験した。
外毛根鞘細胞増殖促進作用は、Cell Counting Kit-8（DOJINDO製）を用いて測定した。培養終了後、Cell Counting Kit-8溶液を各wellに50 μl添加して、炭酸ガスインキュベーター内で2時間培養した。培養後、マイクロプレートリーダーを用いて、450 nm（参照波長：650 nm）における吸光度を測定して、ブルーホルマザン生成量とした。得られた結果から、次式に基づき、外毛根鞘細胞増殖促進率（％）を算出した。
【００３０】
【数１】
2013163661.tif 000004
【００３１】
A：イソアセトシド添加時の吸光度
B：イソアセトシド無添加時の吸光度
【００３２】
その結果、本発明区の外毛根鞘細胞増殖促進率は、無添加区に比べて本発明区は145％であり、細胞増殖作用が認められた。
【００３３】
実験例２
培地中に、式（Ｉ）で表されるイソアセトシドを、２０μｇ／ｍｌの割合で添加したもの、５０μｇ／ｍｌの割合で添加したもの（いずれも本発明区）を用意して試験したこと以外は、実験例１と同様にして450 nm（参照波長：650 nm）における吸光度を測定し、細胞増殖作用を調べた。
結果を図１に示す。
【００３４】
図１によれば、無添加区（０μｇ／ｍｌ）に比べ、本発明区（２０μｇ／ｍｌ添加区、５０μｇ／ｍｌ添加区）では、濃度依存的に、細胞増殖作用（ヒト外毛根鞘細胞増殖作用）が認められた。
【００３５】
実験例３（イソアセトシドと、その構造異性体アセトシドとの活性比較）
ここでは、イソアセトシドについて、その構造異性体であるアセトシドとの活性比較を行った。
培地中に、式（Ｉ）で表されるイソアセトシドを、５μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌの割合でそれぞれ添加したもの（いずれも本発明区）を用意して試験したこと以外は、実験例１と同様にして450 nm（参照波長：650 nm）における吸光度を測定し、１週間後の細胞増殖作用を調べた。
なお、比較のために、構造異性体であるアセトシド（和光純薬工業製）についても、同様にして吸光度を測定し、１週間後の細胞増殖作用を調べた。
結果を図２に示す。
【００３６】
図２によれば、本発明区（イソアセトシド添加区）では、５μｇ／ｍｌから５０μｇ／ｍｌまで、濃度依存的に、細胞増殖作用（ヒト外毛根鞘細胞増殖作用）が認められた。
しかしながら、構造異性体であるアセトシド添加区については、濃度依存性は見られず、細胞増殖作用は示されなかった。
【００３７】
実施例１、比較例１、及び比較例２（ヒト育毛試験）
本発明の育毛剤を配合した育毛料を下記に示す処方で調製し、下記のヒト育毛試験方法により育毛効果を評価した（実施例１）。
また、比較のために、実施例１において、イソアセトシドを用いずに下記に示す処方で育毛料を調製し、下記のヒト育毛試験方法により育毛効果を評価した（比較例１）。
さらに、実施例１において、イソアセトシドの代わりにアセトシドを用いたこと以外は、実施例１と同様にして下記に示す処方で育毛料を調製し、下記のヒト育毛試験方法により育毛効果を評価した（比較例２）。
【００３８】
（実施例１の処方）
イソアセトシド                  20mg
1.3ブチレングリコール            1 g 
無水エタノール                  70 ml 
精製水                          適量  
100 ml 
【００３９】
（比較例１の処方）
1.3ブチレングリコール            1 g 
無水エタノール                  70 ml 
精製水                          適量  
100 ml 
【００４０】
（比較例２の処方）
アセトシド                      20mg
1.3ブチレングリコール            1 g 
無水エタノール                  70 ml 
精製水                          適量  
100 ml 
【００４１】
＜ヒト育毛試験方法＞
薄毛の悩みを持つ６０名の被験者を３群（各群２０名ずつ）に分け、試験群として実施例１の育毛料を、対照群として比較例１の育毛料を、さらに比較群として比較例２の育毛料を、それぞれ毎日朝夕２回、１回２mlを頭皮に滴下し、軽くマッサージしてもらった。4ヶ月間連用塗布後に、以下の内容のアンケートを行うことで有効性を評価した。
【００４２】
・アンケート内容
Ａ．抜け毛の程度
１：減った、２：変わらない、３：増えた
Ｂ．髪のハリ/コシ
１：出てきた、２：変わらない、３：減った
Ｃ．髪のボリューム
１：増えた、２：変わらない、３：減った
Ｄ．刺激性
１：ない、２：気にならない、３：ある
Ｅ．匂い
１：ない、２：気にならない、３：ある
【００４３】
＜評価結果＞
表１にヒト育毛試験の結果を示す。
表１から明らかなように、本発明（実施例１）のイソアセトシドを配合した育毛剤は、抜け毛、髪のハリコシ、髪のボリューム、いずれの項目についても対照群（比較例１）に比べて優れた育毛効果を示した。
また、アセトシドを用いた比較例2については、対照群に対して育毛効果は示されなかった。なお、比較例２においては、途中脱落者が1名おり、回答が19名の場合と20名の場合がある。
【００４４】
【表１】
2013163661.tif 000005
【００４５】
本発明のイソアセトシドを含有する育毛剤は、保湿成分や他の育毛成分と共に配合して各種の育毛剤を提供することができる。
以下にその例を挙げるが、本発明はこれらに限定されるものではない。尚、％は全て質量％である。
【００４６】
（配合例１）
イソアセトシド                          20mg
フィトステロール                        0.03 g
ポリオキシエチレンフィトステロール      0.2 g
無水エタノール                          74 ml
香料                                    適量
精製水                                  適量
100 ml
【００４７】
（配合例２）
イソアセトシド                          20mg
β−グリチルレチン酸                    0.1 g
ニコチン酸アミド                        0.05 g
カモミラエキス−１                      1 ml
グリセリン                              0.05 g
無水エタノール                          74 ml
香料                                    適量
精製水                                  適量
100 ml
【産業上の利用可能性】
【００４８】
薄毛は、人の印象を大きく変えるため、外見を意識する現代社会において、薄毛は大きな悩みの一つであるが、ストレスや食習慣、睡眠不足とも関連し、さらに増大しているといわれる。
育毛効果が明瞭な育毛剤については、今後ますます需要は増大していくと考えられ、る。
従って、本発明は、育毛剤、特に脱毛防止剤，脱毛症治療剤などとして有効に利用することが期待される。
【図１】
2013163661.tif 000006
【図２】
2013163661.tif 000007