(57)【要約】      （修正有）【課題】血圧上昇などの副作用が軽減された尿失禁治療剤の提供。【解決手段】α１Ｌ選択性の高い一般式（Ｉ）、2013199431.tif 000017（式中、Ｚはクロロ又はメチルを表し、そして、Ｒ１及びＲ２は同一又は異なっていても良く水素又はメチルを表す。）で表されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学上許容される塩を尿失禁治療剤として用いる。【選択図】図２
2013199431.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（Ｉ）、
【化１】
2013199431.tif 000016
（式中、Ｚはクロロ又はメチルを表し、
そして、Ｒ１及びＲ２は同一又は異なっていても良く水素又はメチルを表す。）
で表されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学上許容される塩。
【請求項２】
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン、
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン、
２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン、
２−（２−クロロ−５−ジメチルアミノ−３−イソプロピルベンジル）イミダゾリン、
２−（２−クロロ−３−イソプロピル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン、
２−（５−アミノ−２−クロロ−３−イソプロピルベンジル）イミダゾリン、
から選択される請求項１記載のイミダゾリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項３】
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン、
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン及び
２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン
から選択される請求項１記載のイミダゾリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項４】
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項５】
請求項１〜４記載のイミダゾリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する排尿障害治療剤。
【請求項６】
排尿障害が尿失禁である請求項５記載の治療剤。
【請求項７】
尿失禁が腹圧性尿失禁である請求項６記載の治療剤。
【請求項８】
請求項1〜４記載のイミダゾリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するα１Ｌアドレナリン受容体作動薬。
【請求項９】
請求項1〜４記載のイミダゾリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するα１Bアドレナリン受容体に比べ、α１Lアドレナリン受容体の関与が高い疾患に対する治療剤。
【請求項１０】
請求項1〜４記載のイミダゾリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するα１Ａアドレナリン受容体に比べ、α１Lアドレナリン受容体の関与が高い疾患に対する治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はイミダゾリン誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
尿失禁は、不随意に尿が漏れる状態であると定義されており、直接生命に関わることはないものの、生活の質（ＱＯＬ）を著しく阻害し、患者の自尊心を傷つけて生活意欲を失わせるなど心理的影響も大きい。また、尿失禁の罹患率は高齢者において高く、尿路感染症や褥瘡の発生頻度を上昇させて、尿失禁を患っている高齢者自身にとっては当然のこと、介護者にとっても大きな問題となっており、尿失禁への対策の必要性は増大している。
そうした中で腹圧性尿失禁は、咳やくしゃみなどの生理的な反応、大きな声で笑う、怒るなどの感情表現、さらには重いものを持ち上げるなどの日常生活動作時の腹圧の上昇により、膀胱が圧迫されることで尿の意図しない溢流をきたすものである。こうした病態が示すように、腹圧性尿失禁は、自律的な活動性を失わない段階から自発的な活動や感情表現にも少なからず影響を及ぼし、解剖学的に尿道の短い女性、特に出産を経験した女性において発症率が高い。
尿失禁の治療法としては、下部尿路リハビリテーション、薬物治療、外科的治療がある。薬物治療に用いられる薬剤は尿失禁のタイプにより異なるが、腹圧性尿失禁においては、エフェドリン、クレンブテロール、イミプラミン等が使用されている。しかしながらこれらの薬物には、それぞれに有害な副作用があることが知られており、十分な効果が期待される量を服用できない場合があることが知られている。特にαアドレナリン作動薬であるエフェドリンについては、同時に血管を収縮させ、血圧を上昇させることが治療上の障害となっている。そのため、副作用の少ない新たな尿失禁治療剤の登場が望まれているが、今日までこの試みに成功した例はない。
α１アドレナリン受容体はα１Ａサブタイプ、α１Ｂサブタイプ、α１Ｄサブタイプ及びα１Ｌサブタイプの４種類のサブタイプに分類され、このうちα１Ｌサブタイプについては、α１Ａサブタイプと同一の遺伝子に由来することが知られていた。  しかし、α１Ｌサブタイプを特異的に細胞膜上に発現させる方法は知られていなかった。最近、村松らによりその方法が解明され、α１Ｌサブタイプを発現する細胞が樹立された。（非特許文献１、特許文献１）
α１Ｌサブタイプは、他のサブタイプと異なり、尿道の収縮に選択的に関与することが知られている。また、α１Ｌサブタイプは、瞳孔散大筋の収縮や、一部の末梢血管の収縮にも関与することが知られている。一方、α１Ｌサブタイプと同一の遺伝子から発現するα１Ａサブタイプは、眼房水産生に関与するだけでなく、α１Ｂサブタイプ及びα１Ｄサブタイプと同様、血管収縮や血管緊張の維持に主に関与しているとされている。
従って、α１Ｌアドレナリン受容体に選択的に作用する薬物は血圧上昇などの副作用を引き起こすことなく、腹圧性尿失禁を治療することが期待される。
ところで、発明者らは、次式（Ａ）、
【０００３】
【化１】
2013199431.tif 000003
【０００４】
で表されるイミダゾリジン誘導体（ＥＳＲ１１５０ＣＬ）等がα１Ｌ受容体の作動薬であり、尿失禁治療剤として有用であることを見出し、特許出願している。（特許文献２〜５）
さらに本発明者らは、次式（Ｂ）、
【０００５】
【化２】
2013199431.tif 000004
【０００６】
で表されるイミダゾリン誘導体が優れた代謝安定性を有し、α１Ｌサブタイプに対する親和性がα１Ｂサブタイプよりも高いことを見出し、特許出願している。(特許文献６)
しかしながら上記式（Ａ）で表されるイミダゾリジン誘導体及び式（Ｂ）で表されるイミダゾリン誘導体の何れもα１Ａサブタイプと比べた時のα１Ｌサブタイプに対する選択性は不十分であり、よりα１Ｌサブタイプに対する選択性の高い薬物の提供が求められている。
なお、本発明化合物は、前記特許文献２の一般式Ｉに広義には含まれるが、この特許には具体的に本発明化合物は記載されていない。
ところで、特許文献２の一般式Ｉ又はＩ’には、塩酸トラゾリン（２−ベンジル−２−イミダゾリン塩酸塩）やクロニジン塩酸塩（２−（２，６−ジクロロフェニルイミノ）イミダゾリジン  モノ塩酸塩）が広義には含まれている。
塩酸トラゾリンはα受容体拮抗剤として知られ、そしてクロニジン塩酸塩はα２受容体作動薬として各種高血圧症の治療剤として市販されているが、クロニジンが作用するα２受容体は本発明化合物の標的受容体であるα１Ｌ受容体とは全く別の受容体である（上述のとおりα１Ｌ受容体はα１受容体の一つである）。また、何れの化合物も尿失禁治療剤として使用されていない。即ち、特許文献２の一般式Ｉ又はＩ’に含まれる個々の化合物がアドレナリン受容体のどのサブタイプに作用するのか、また、尿失禁治療剤として使用できるか否かは、更なる研究が必要と考えられる。
一方、特許文献７、８には、尿失禁治療剤の用途を有するイミダゾリン誘導体が記載されているが、フェニル基の置換基としてスルホンアミド基を有する点で本発明化合物とは明確に相違する。
また特許文献９には後記一般式（Ｉ）で表される本発明のイミダゾリン誘導体と構造類似の次式（Ｃ）、
【０００７】
【化３】
2013199431.tif 000005
【０００８】
で表されるイミダゾリン誘導体が記載されているが、その用途は鼻づまりの治療であり、尿失禁治療剤の用途の記載はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】ＷＯ２００８／１４６７０７
【特許文献２】ＷＯ９６／３２９３９
【特許文献３】ＷＯ２００２／６４５７０
【特許文献４】ＷＯ２００２／３２８７６
【特許文献５】ＷＯ２００３／６４３９８
【特許文献６】特許第４１６８０８６号
【特許文献７】特開平１１−７１３５３
【特許文献８】ＷＯ２００３／０９１２３６
【特許文献９】スペイン特許第３３５６４１号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｎｉｓｈｉｍｕｎｅ  Ａ，Ｓｕｚｕｋｉ  Ｆ，Ｙｏｓｈｉｋｉ  Ｈ，Ｍｏｒｉｓｈｉｍａ  Ｓ，Ｍｕｒａｍａｔｓｕ  Ｉ、  Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，１１３，１６９−１８１（２０１０）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は尿失禁治療剤として有用なイミダゾリン誘導体を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
即ち、本発明は次の一般式（Ｉ）、
【００１３】
【化４】
2013199431.tif 000006
【００１４】
（式中、Ｚはクロロ又はメチルを表し、
そして、Ｒ１及びＲ２は同一又は異なっていても良く水素又はメチルを表す。）
で表されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学上許容される塩に関する。
【００１５】
また、本発明は上記一般式（Ｉ）で表されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学上許容される塩を有効成分として含有する排尿障害の治療剤に関する。
また本発明は上記一般式（Ｉ）で表されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学上許容される塩を有効成分として含有するα１Ｌアドレナリン受容体作動薬に関する。
また本発明は上記一般式（Ｉ）で表されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学上許容される塩を有効成分として含有するα１Ｂアドレナリン受容体に比べ、α１Ｌアドレナリン受容体の関与が高い疾患に対する治療剤に関する。
さらにまた本発明は上記一般式（Ｉ）で表されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学上許容される塩を有効成分として含有するα１Ａアドレナリン受容体に比べ、α１Ｌアドレナリン受容体の関与が高い疾患に対する治療剤に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１はα１アドレナリン受容体サブタイプを強制発現させた細胞におけるノルアドレナリンの濃度−反応曲線を示す図である。
【図２】図２はα１アドレナリン受容体サブタイプを強制発現させた細胞における実施例２記載の本発明化合物の濃度−反応曲線を示す図である。
【図３】図３はα１アドレナリン受容体サブタイプを強制発現させた細胞における比較化合物Ａの濃度−反応曲線を示す図である。
【図４】図４はα１アドレナリン受容体サブタイプを強制発現させた細胞における比較化合物Ｂの濃度−反応曲線を示す図である。
【図５】図５はラットの摘出組織を用いた４種のα１アドレナリン受容体サブタイプを介するノルアドレナリンの濃度−反応曲線を示す図である。
【図６】図６はラットの摘出組織を用いた４種のα１アドレナリン受容体サブタイプを介する実施例２記載の本発明化合物の濃度−反応曲線を示す図である。
【図７】図７はラットの摘出組織を用いた４種のα１アドレナリン受容体サブタイプを介する比較化合物Ａの濃度−反応曲線を示す図である。
【図８】図８はラットの摘出組織を用いた４種のα１アドレナリン受容体サブタイプを介する比較化合物Ｂの濃度−反応曲線を示す図である。
【図９】図９はウレタン麻酔ウサギにおける拡張期血圧（ＤＢＰ）に及ぼす実施例２記載の本発明化合物、比較化合物Ｂ及びフェニレフリンの影響を示す図である。
【図１０】図１０はウレタン麻酔ウサギにおける尿道内圧（ＩＵＰ）に及ぼす実施例２記載の本発明化合物、比較化合物Ｂ及びフェニレフリンの影響を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
次に本発明を詳細に説明する。
（１）本発明のイミダゾリン誘導体又はその薬理学上許容される塩としては、以下の化合物が挙げられる。
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン、
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン、
２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン、
２−（２−クロロ−５−ジメチルアミノ−３−イソプロピルベンジル）イミダゾリン、
２−（２−クロロ−３−イソプロピル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン、
２−（５−アミノ−２−クロロ−３−イソプロピルベンジル）イミダゾリン、
から選択されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
（２）
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン、
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン及び
２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン
から選択されるイミダゾリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
（３）
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン又はその薬理学的に許容される塩。
【００１８】
本発明化合物の薬理学的に許容される塩としては、塩酸、臭化水素酸、メタンスルホン酸等の酸付加塩が挙げられる、
本発明化合物は例えば次の合成スキームに記載した方法等で製造することができる。
（Ａ）上記一般式（Ｉ）で表されるイミダゾリン誘導体で、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈである化合物
【００１９】
【化５】
2013199431.tif 000007
【００２０】
【化６】
2013199431.tif 000008
【００２１】
【化７】
2013199431.tif 000009
【００２２】
(式中、Ｒはメチル、エチルを表し、そしてＺは前記と同じ)
１）出発原料（ａ）は公知の方法（Ｇ．Ｄｅｓｓｅｉｇｎｅ，Ｃｏｍｐｔ．ｒｅｎｄ．，２００，４６６−４６８（１９３５））又は後述する方法により合成することができる。
２）第１工程
一般式（ｂ）の化合物は、濃硫酸又はトリフルオロメタンスルホン酸中、出発原料（ａ）にＮ−ヨードコハク酸イミドを−１０℃〜室温で反応させることにより得ることができる。
３）第２工程
化合物（ｂ）とシアノ酢酸エステルとの反応は、ジメチルスルホキシド、１，４−ジオキサン又はヘキサメチルリン酸トリアミド等の反応に関与しない溶媒中、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム又は水素化ナトリウム等の塩基、並びにヨウ化銅等の触媒の存在下に、７０℃〜１７０℃の温度で行われる。
４）第３工程
化合物（ｃ）の化合物（ｄ）への変換は、酸性条件下又は塩基性条件下における通常の加水分解／脱炭酸反応により行われる。また、この変換は塩化リチウム又は塩化ナトリウムの存在下、ジメチルスルホキシドと水の混合溶媒中で化合物（ｃ）を加熱するという方法によっても行うことができる。後者の反応の場合、反応温度は８０〜１６０℃である。
５）第４工程
一般式（ｅ）で表わされるイミダゾリン誘導体は、触媒としてチオアセトアミドの存在下、６０〜１２０℃の温度で化合物（ｄ）にエチレンジアミンを反応させることにより合成することができる。この場合、エチレンジアミンは溶媒としても使用することができる。
また、一般式（ｅ）のイミダゾリン誘導体は次の２段階反応によっても合成することができる。まず、ジクロロメタン等の反応に関与しない溶媒中、化合物（ｄ）に−１０℃〜室温で塩化水素ガス及びエタノールを作用させ、次に、得られたイミダート塩酸塩にエタノール中、室温〜８０℃でエチレンジアミンを反応させることにより一般式（ｅ）のイミダゾリン誘導体は得られる。
６）第５工程
一般式（ｆ）で表わされる本発明化合物は、化合物（ｅ）のニトロ基を還元することによって合成することができる。還元方法としては、鉄粉等の金属による還元反応又はパラジウム−炭素等を触媒とした接触水素添加反応が用いられる。前者の反応では反応溶媒としては酢酸、及び酢酸―水―メタノール等の混合溶媒が用いられ、反応温度は室温〜８０℃である。また、後者ではメタノール、エタノール等が反応溶媒としては用いられ、反応温度は室温〜６０℃である。
原料化合物（ａ）の製造法
【００２３】
【化８】
2013199431.tif 000010
【００２４】
(式中、ＨａｌはＢｒ、Ｉを表し、そしてＺは前記と同じ)
１）第１工程
一般式（ｏ）の化合物は、化合物（ｎ）に濃硫酸中でＮ−ヨードコハク酸イミド又はＮ−ブロモコハク酸イミドを作用させる方法、若しくはトリフルオロメタンスルホン酸中でＮ−ヨードコハク酸イミドを作用させる方法のいずれかによって合成することができる。両反応における反応温度は−１０℃〜室温である。
２）第２工程
一般式（ｐ）で表わされる化合物は、一般式（ｏ）の化合物とイソプロペニルボロン酸ピナコールエステルとのクロスカップリング反応によって合成することができる。本反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の溶媒中、[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II)ジクロリド ジクロロメタン付加物などのパラジウム触媒及び炭酸セシウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等の塩基の存在下に行われる。反応温度は５０〜１２０℃である。
３）第３工程
化合物（ｐ）から化合物（ｑ）への変換は、パラジウム−炭素又は酸化白金（ＩＶ）等を触媒とした接触水素添加反応によって行うことができる。反応溶媒としてはメタノール、エタノール等が用いられ、反応温度は室温〜６０℃である。
４）第４工程
化合物（ｑ）から化合物（ａ）への変換は、ヨウ化カリウムの存在下でのｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドによる酸化反応によって行うことができる。反応溶媒としてアセトニトリル、テトラヒドロフラン等が用いられ、反応温度は室温〜８０℃である。
（Ｂ）上記一般式（Ｉ）で表されるイミダゾリン誘導体で、Ｒ１＝Ｒ２＝メチルである化合物
【００２５】
【化９】
2013199431.tif 000011
【００２６】
(式中、Ｚは前記と同じ)
１）第１工程
一般式（ｇ）の化合物は、一般式（ｄ）で表わされる化合物（前記の製法（Ａ）に記載）のニトロ基を還元することによって得ることができる。該還元方法としては、メタノール、エタノール等の溶媒中でのパラジウム−炭素又は酸化白金（ＩＶ）等を触媒とした接触水素添加反応、あるいは酸性又は中性条件下における亜鉛末、鉄粉等の金属による還元反応が用いられる。
２）第２工程
化合物（ｈ）で表わされる化合物は、化合物（ｇ）のホルムアルデヒドとの還元的アミノ化反応によって合成することができる。この反応では、アセトニトリル等の反応に関与しない溶媒中、還元剤としてシアノ水素化ホウ素ナトリウム等が使用される。
３）第３工程
化合物（ｈ）の一般式（ｉ）で表わされる本発明化合物への変換は、製造法Ａの第４工程で述べた方法と同様にして行うことができる。
（Ｃ）上記一般式（Ｉ）で表されるイミダゾリン誘導体で、Ｒ１＝Ｈで、Ｒ２＝メチルである化合物
【００２７】
【化１０】
2013199431.tif 000012
【００２８】
(式中、Ｎｓ−Ｃｌは２−ニトロベンゼンスルホニルクロリドを表し、そしてＺは前記と同じ)
１）第１工程
一般式（ｊ）の化合物は、一般式（ｇ）の化合物（上記の（Ｂ）の製法に記載）に２−ニトロベンゼンスルホニルクロリドを作用させることにより合成することができる。溶媒としてはピリジン、ジクロロメタン等が用いられ、後者の場合にはトリエチルアミン等を塩基として使用する。いずれの場合も反応温度は０℃〜室温である。
２）第２工程
一般式（ｋ）の化合物は、一般式（ｊ）の化合物に無水炭酸カリウム等の塩基存在下、ヨウ化メチルを反応させることにより合成することができる。本反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の反応に関与しない溶媒中、０〜５０℃の温度で行われる。
２）第３工程
一般式（ｍ）で表わされる本発明化合物は、チオアセトアミド存在下、化合物（ｋ）にエチレンジアミンを反応させることにより合成することができる。反応温度は６０〜１２０℃であり、アミノ基の保護基である２−ニトロベンゼンスルホニル基は本反応において除去される。
（Ｄ）上記一般式（Ｉ）で表されるイミダゾリン誘導体で、Ｒ１＝Ｈで、Ｒ２＝メチルである化合物
【００２９】
【化１１】
2013199431.tif 000013
【００３０】
(式中、Ｚは前記と同じ)
１）第１工程
一般式（ｒ）の化合物は、ジクロロメタン等の反応に関与しない溶媒中、トリフェニルホスフィン及び２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノベンゾキノン存在下に、一般式（ｇ）の化合物にメタノールを反応させることによって合成することができる。反応温度は１０〜４０℃である。
２）第２工程
化合物（ｒ）の一般式（ｍ）で表わされる本発明化合物への変換は、製造法Ａの第４工程で述べた方法と同様にして行うことができる。
【００３１】
次に薬理実験について記載する。
ヒトα１アドレナリン受容体を強制発現させた細胞におけるサブタイプ選択性に関し、細胞内Ｃａ２＋濃度の指標として蛍光強度を測定し、Ｉ．Ａ．（内活性：ノルアドレナリンの最大反応を１とした時、各々の被験化合物の最大反応が示す割合）とｐＥＣ５０値（各々の最大反応の５０％の反応を引き起こす濃度のネガティブロガリズム）を算出した。
本発明化合物（後記の実施例２記載の化合物）は、ノルアドレナリン、比較化合物Ａ及び比較化合物Ｂに比べ、α１Ａサブタイプとα１Ｌサブタイプとの反応性の比較においてα１Ｌサブタイプに選択的であることが明らかになった。（実施例４、図１〜４、表１）
次にラットの摘出組織を用いてα１アドレナリン受容体のサブタイプへの選択性に関する実験を行ったところ、本発明化合物（後記の実施例２記載の化合物）はα１Ｌサブタイプ（ラット前立腺）に最も高い親和性を示し、ポテンシーはα１Ｌ＞α１Ａ＞α１Ｄ＞α１Ｂの順であった。（実施例５、図５〜８、表２）
ウレタン麻酔ウサギにおける尿道内圧（ＩＵＰ）及び拡張期血圧（ＤＢＰ）に及ぼす影響について実験を行ったところ、フェニレフリン３０μｇ／ｋｇの静脈内投与によるＤＢＰ及びＩＵＰの上昇に対し、上記実施例２記載の本発明化合物１μｇ／ｋｇを静脈内投与した時の反応は、ＩＵＰではやや持続的でほぼ同等の、ＤＢＰ（投与初期に接触不良によるデータの欠損あり）では明らかに小さな反応が示された。
一方、比較化合物Ｂの１μｇ／ｋｇを静脈内投与した時の反応は、ＩＵＰが非常に持続的に上昇したもののその最大反応はフェニレフリンに及ばず、ＤＢＰではフェニレフリンと同程度の上昇を示した。（実施例６、図９及び１０）
【００３２】
従って、本発明化合物は高いα１Ｌ選択性を有することから、血圧上昇などの副作用の軽減を期待できる排尿障害、好ましくは尿失禁、さらに好ましくは腹圧性尿失禁の治療剤の有効成分として有用である。
また本発明化合物は、α１Ｌアドレナリン受容体作動薬として有用である。
さらにまた本発明化合物は、α１Ｂアドレナリン受容体に比べ、α１Ｌアドレナリン受容体の関与が高い疾患に対する治療剤の有効成分として有用である。
さらにまた本発明化合物は、α１Ａアドレナリン受容体に比べ、α１Ｌアドレナリン受容体の関与が高い疾患に対する治療剤の有効成分として有用である。
【００３３】
本発明化合物は、ヒトに対して一般的な経口投与又は非経口投与のような適当な投与方法によって投与することができる。
製剤化するためには、製剤の技術分野における通常の方法で錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、懸濁剤、注射剤、坐薬等の剤型に製造することができる。
これらの調製には、通常の賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、色素、希釈剤などが用いられる。ここで、賦形剤としては、乳糖、Ｄ−マンニトール、結晶セルロース、ブドウ糖などが、崩壊剤としては、デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム（ＣＭＣ−Ｃａ）などが、滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどが、結合剤としては、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ゼラチン、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などが挙げられる。
【００３４】
投与量は通常成人においては、注射剤で有効成分である本発明化合物を１日約０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ，経口投与で１日０．１ｍｇ〜５００ｍｇであるが、年齢、症状等により増減することができる。
次に、実施例を挙げ、本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例１】
【００３５】
２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン塩酸塩
（１）１−ヨード−３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロベンゼン
濃硫酸（２５０ｍＬ）を内温５℃に冷却し、Ｎ−ヨードコハク酸イミド（８７．０ｇ）を加え、氷冷下４０分撹拌した。この溶液に２−イソプロピル−１−メチル−４−ニトロベンゼン（５２．７ｇ）の濃硫酸（３８０ｍＬ）溶液を、内温が５℃以下になるような速度で滴下し、滴下終了後室温で１時間撹拌した。得られた反応混合物を氷水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた結晶をメタノールで洗浄後乾燥し、表題化合物（７４．３ｇ）を淡黄色結晶として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．２７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．５８（３Ｈ，ｓ）、３．２８（１Ｈ，ｍ）、８．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、８．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）
（２）２−シアノ−２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロフェニル）酢酸エチル
１−ヨード−３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロベンゼン（３５．０ｇ）、シアノ酢酸エチル（２４．０ｍＬ）、炭酸カリウム（６１．６ｇ）、及びヨウ化銅（２．１４ｇ）の無水ジメチルスルホキシド（４２０ｍＬ）懸濁液を窒素雰囲気下１２０℃で２時間撹拌した。得られた反応混合物を５％塩酸水溶液（８００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、９０：１０）で精製し、表題化合物（２５．６ｇ）を黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．２−１．４（９Ｈ，ｍ）、２．４４（３Ｈ，ｓ）、３．２８（１Ｈ，ｍ）、４．２−４．４（２Ｈ，ｍ）、４．９９（１Ｈ，ｓ）、８．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、８．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）
（３）２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロフェニル）アセトニトリル
２−シアノ−２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロフェニル）酢酸エチル（２５．６ｇ）に５０％酢酸水溶液（１３０ｍＬ）、濃硫酸（４．７ｍＬ）を加え、９０℃で２日間撹拌した。得られた反応混合物に水（１００ｍＬ）を加え、析出した結晶を濾取し、水で洗浄後乾燥し、表題化合物（１７．０ｇ）を淡黄色結晶として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．２９（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．４２（３Ｈ，ｓ）、３．２８（１Ｈ，ｍ）、３．７８（２Ｈ，ｓ）、８．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、８．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）
（４）２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロベンジル）イミダゾリン
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロフェニル）アセトニトリル（２１８ｍｇ）及び無水エタノール（１．０ｍＬ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に氷冷下塩化水素ガスを５０分間吹き込んだ。反応混合物を室温で３時間撹拌後、減圧下に濃縮乾固した。得られた残渣を無水エタノール（５．０ｍＬ）に溶解し、この溶液にエチレンジアミン（３０１ｍｇ）の無水エタノール（２．０ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を室温で一晩撹拌後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（メタノール／トリエチルアミン、９９：１）で精製し、表題化合物（８７ｍｇ）を白色結晶として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．２７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．３８（３Ｈ，ｓ）、３．２６（１Ｈ，ｍ）、３．６１（４Ｈ，ｂｒｓ）、３．６９（２Ｈ，ｂｒｓ）、７．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、８．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）
（５）２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロベンジル）イミダゾリン（３９７ｍｇ）の酢酸（６．０ｍＬ）／水（１．２ｍＬ）／メタノール（６．０ｍＬ）溶液に鉄粉（４２４ｍｇ）を加え、６０℃で３時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、シリカゲル（２０ｇ）を加え、溶媒を減圧留去した。残渣に酢酸エチル（４０ｍＬ）、トルエン（４０ｍＬ）及び１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（８０ｍＬ）を加え、室温で２時間撹拌し、セライト濾過した。水層をクロロホルムで抽出し、有機層を合わせて無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（メタノール／トリエチルアミン、９９：１）で精製し、表題化合物（２２７ｍｇ）を褐色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．１９（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．１６（３Ｈ，ｓ）、３．１２（１Ｈ，ｍ）、３．４−３．７（６Ｈ，ｍ）、６．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、６．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）
（６）２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン塩酸塩
２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン（２２７ｍｇ）のメタノール（２．０ｍＬ）／酢酸エチル（５．０ｍＬ）溶液に４Ｍ塩化水素／酢酸エチル溶液（０．５ｍＬ）を室温で加え、氷冷下に１時間攪拌した。減圧下溶媒留去後、表題化合物（２８８ｍｇ）を褐色結晶として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）  δ：１．２４（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．３０（３Ｈ，ｓ）、３．９５（４Ｈ，ｂｒｓ）、４．０８（２Ｈ，ｂｒｓ）、７．１８（１Ｈ，ｂｒｓ）、７．３０（１Ｈ，ｂｒｓ）
【実施例２】
【００３６】
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン塩酸塩
（１）２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルフェニル）アセトニトリル
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ニトロフェニル）アセトニトリル（１０．６ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、触媒として１０％パラジウム−炭素（４．２４ｇ）を用いて常温常圧下で１１時間接触水素添加した。反応混合物をセライト濾過し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、２：１）により精製し、表題化合物（７．９４ｇ）を黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．１９（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．１６（３Ｈ，ｓ）、３．１３（１Ｈ，ｍ）、３．６０（２Ｈ，ｓ）、６．６０（１Ｈ，ｓ）、６．６１（１Ｈ，ｓ）
（２）２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルフェニル）アセトニトリル
２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルフェニル）アセトニトリル（１８８ｍｇ）のアセトニトリル（４ｍＬ）溶液にホルマリン（０．８ｍＬ）、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１９８ｍｇ）及び酢酸（０．１ｍＬ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル（１５ｍＬ）、トルエン（５ｍＬ）及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、有機層を分取して飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、得られた残渣を減圧蒸留（１５０℃／０．３ｍｍＨｇ）により精製し、表題化合物（１５６ｍｇ）を無色油状物として得た。
（３）２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン 
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルフェニル）アセトニトリル
（１５６ｍｇ）を用い、実施例１（４）と同様の方法によって表題化合物（１４８ｍｇ）を白色結晶として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．２２（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．１９（３Ｈ，ｓ）、２．９２（６Ｈ，ｓ）、３．１７（１Ｈ，ｍ）、３．５−３．７（６Ｈ，ｍ）、６．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、６．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）
（４）２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン塩酸塩
２−（５−ジメチルアミノ−３−イソプロピル−２−メチルベンジル）イミダゾリン（１４８ｍｇ）を用い、実施例１（６）と同様の方法によって表題化合物（２０５ｍｇ）を白色結晶として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）  δ：１．２８（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．３１（３Ｈ，ｓ）、３．９６（４Ｈ，ｂｒｓ）、４．０６（２Ｈ，ｂｒｓ）、７．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）
【実施例３】
【００３７】
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン塩酸塩
（１）Ｎ−［３−（シアノメチル）−５−イソプロピル−４−メチルフェニル］−２−ニトロベンゼンスルホンアミド
２−（５−アミノ−３−イソプロピル−２−メチルフェニル）アセトニトリル（５００ｍｇ）の無水ピリジン（１０ｍＬ）溶液に２−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（６４７ｍｇ）を加え、室温で３０分撹拌した。得られた反応混合物に１Ｍ塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、３：１）で精製し、表題化合物（８３３ｍｇ）を黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．１１（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．２３（３Ｈ，ｓ）、３．１２（１Ｈ，ｍ）、３．６１（２Ｈ，ｓ）、７．０２（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２，８Ｈｚ）、７．２０（１Ｈ，ｂｒｓ）、７．６０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１，８Ｈｚ）、７．７１（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１，８Ｈｚ）、７．８−７．９（２Ｈ，ｍ）
（２）Ｎ−［３−（シアノメチル）−５−イソプロピル−４−メチルフェニル］−Ｎ−メチル−２−ニトロベンゼンスルホンアミド
Ｎ−［３−（シアノメチル）−５−イソプロピル−４−メチルフェニル］−２−ニトロベンゼンスルホンアミド（８３３ｍｇ）の無水ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（６１７ｍｇ）及びヨウ化メチル（１６７μＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル、１：１）で精製し、表題化合物（８４４ｍｇ）を黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．１２（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．２９（３Ｈ，ｓ）、３．１５（１Ｈ，ｍ）、３．３７（３Ｈ，ｓ）、３．６３（２Ｈ，ｓ）、７．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、７．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、７．５−７．７（４Ｈ，ｍ）
（３）２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン
Ｎ−［３−（シアノメチル）−５−イソプロピル−４−メチルフェニル］−Ｎ−メチル−２−ニトロベンゼンスルホンアミド（８４４ｍｇ）のエチレンジアミン（２．９ｍＬ）溶液にチオアセトアミド（３３ｍｇ）を加え、１２０℃で３時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール／アンモニア水、９０：１０：１）で精製し、表題化合物（１９ｍｇ）を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ：１．２０（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．１７（３Ｈ，ｓ）、２．８２（３Ｈ，ｓ）、３．１４（１Ｈ，ｍ）、３．５６（４Ｈ，ｂｒｓ）、３．６０（２Ｈ，ｂｒｓ）、６．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、６．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）
（４）２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン塩酸塩
２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−メチルアミノベンジル）イミダゾリン（１９ｍｇ）を用い、実施例１（６）と同様の方法で表題化合物（２０ｍｇ）を淡黄色結晶として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ：１．１７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）、２．１６（３Ｈ，ｓ）、２．８２（３Ｈ，ｓ）、３．１７（１Ｈ，ｍ）、３．８４（４Ｈ，ｂｒｓ）、３．９１（２Ｈ，ｂｒｓ）、６．９−７．３（２Ｈ，ｂｒｓ）、１０．０（２Ｈ，ｂｒｓ）
【実施例４】
【００３８】
α１アドレナリン受容体強制発現細胞におけるサブタイプ選択性の検討
（実験方法）
Ｎｉｓｈｉｍｕｎｅら（非特許文献１）の方法（α１アドレナリン受容体を強制発現させたチャイニーズハムスター卵母細胞（ＣＨＯ細胞）を用い、細胞内Ｃａ２＋濃度の上昇を指標としてα１アゴニスト活性をサブタイプ別に検出）に従って、本発明化合物とノルアドレナリン、比較化合物Ａ及び比較化合物Ｂのα１サブタイプ選択性を調べた。
即ち、ＣＨＯ細胞にヒトアドレナリン受容体のα−１Ａ遺伝子（ＡＤＲＡ１Ａ）、α−１Ｂ遺伝子（ＡＤＲＡ１Ｂ）及びα−１Ｄ遺伝子（ＡＤＲＡ１Ｄ）をＦｕＧｅｎ  ６  ｒｅａｇｅｎｔ（Ｒｏｃｈｅ）により導入して、ピューロマイシン（１０μｇ／ｍＬ）によるセレクションを実施し、それぞれｈα１Ａ、ｈα１Ｂ及びｈα１Ｄサブタイプを安定発現する細胞株を樹立した。ｈα１Ａサブタイプを安定発現する細胞にｈｕｍａｎ  ｃｙｓｔｅｉｎｅ−ｒｉｃｈ  ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ−ｌｉｋｅ  ｄｏｍａｉｎ  １α（ＣＲＥＬＤ１α）遺伝子を導入し、Ｇ−４１８（１．５ｍｇ／ｍＬ）によるセレクションを実施して、ｈα１Ｌサブタイプの存在比率の高い安定発現細胞株を樹立した（特許文献１）。
各細胞に０．０２％（ｗ／ｖ）のＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−１２５及び１．４ｍｍｏｌ／Ｌのプロベネシドを含む５μｍｏｌ／ＬのＦｕｒａ−２  ＡＭ（ＤＯＪＩＮ）を４５分間取り込ませて洗浄した。その後、１．４ｍｍｏｌ／Ｌのプロベネシド及び３％（ｖ／ｖ）のＦＢＳを含むＣａ２＋アッセイバッファーに細胞を再懸濁し、Ｆｕｒａ−２の蛍光強度比を指標として蛍光分光光度計ＣＡＦ−１１０（日本分光株式会社）により細胞内Ｃａ２＋濃度を測定した（励起波長３４０及び３８０ｎｍ、蛍光波長５１０ｎｍ、２５０ｍｓ間隔）。なお、α１Ｌサブタイプを介する反応を選択的に記録する場合、ｈα１Ｌサブタイプの存在比率の高い安定発現細胞に共発現するｈα１Ａサブタイプはプラゾシン（５ｎｍｏｌ／Ｌ）を処置することにより遮断した。
【００３９】
（実験結果）
ノルアドレナリン、本発明化合物、比較化合物Ａ及び比較化合物Ｂは、各々のｈα１アドレナリン受容体サブタイプの強制発現細胞系において、いずれも用量に依存した細胞内Ｃａ２＋濃度の上昇を示した。この結果を濃度−反応曲線として図１〜４に示す。
図１〜４から明らかなように、本発明化合物及び比較化合物Ａ及びＢは、ノルアドレナリンに比べ、ｈα１Ｂ及びｈα１Ｄサブタイプの強制発現細胞においては最大反応が小さく、若干の程度の差はあるものの、４種のｈα１サブタイプのうちｈα１Ｂ及びｈα１Ｄサブタイプにはほとんど作用しなかった。次に、この濃度−反応曲線から、ｈα１Ａサブタイプとｈα１Ｌサブタイプの間で選択性を比較するために、Ｉ．Ａ．（内活性；ノルアドレナリンの最大反応を１とした時、各々の被験化合物の最大反応が示す割合）とｐＥＣ５０値（各々の最大反応の５０％の反応を引き起こす濃度のネガティブロガリズム）を算出した。結果を表１に示す。
【００４０】
【表１】
2013199431.tif 000014
【００４１】
比較化合物Ａ：２−（６−ブロモ−３−ジメチルアミノ−２−メチルフェニルイミノ）                イミダゾリジン塩酸塩（ＥＳＲ１１５０ＣＬ）
比較化合物Ｂ：２−［（５−クロロ−３−イソプロピル−２−メチルフェニル）メチル                ］イミダゾリン塩酸塩（特許文献６記載の上記式（Ｂ）の化合物）
本発明化合物：２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ジメチルアミノベンジル）                イミダゾリン塩酸塩（実施例２）
本発明化合物のｈα１Ｌサブタイプ発現細胞におけるｐＥＣ５０値はアドレナリンより大きく、その差は１．３であった。これは本発明化合物がｈα１Ｌサブタイプ発現細胞ではノルアドレナリンのおよそ１／２０倍の濃度で、最大反応の５０％の反応を引き起こすことを示している。一方、本発明化合物は、ｈα１Ａサブタイプ発現細胞ではノルアドレナリンよりやや大きなｐＥＣ５０値を示し、その差は０．３であった。これは本発明化合物がｈα１Ａサブタイプ発現細胞ではノルアドレナリンのおよそ１／２倍の濃度で、最大反応の５０％の反応を引き起こすことを示している。
一方、比較化合物Ａはノルアドレナリンに比べｈα１Ｌサブタイプ発現細胞でやや大きなｐＥＣ５０値を示し、ｈα１Ａサブタイプ発現細胞で大きなｐＥＣ５０値を示した。それぞれの差は０．５及び０．８であり、比較化合物Ａがノルアドレナリンの約１／３倍及び１／６倍の濃度でそれぞれの細胞において最大反応の５０％の細胞内Ｃａ２＋濃度上昇反応を引き起こすことを示している。また、比較化合物Ｂはノルアドレナリンに比べ、ｈα１Ｌサブタイプ発現細胞及びｈα１Ａサブタイプ発現細胞で大きなｐＥＣ５０値を示し、それぞれの差は１．８及び２．０であった。これは比較化合物Ｂがそれぞれの細胞においてノルアドレナリンの約１／６３倍及び約１／１００倍の濃度で最大反応の５０％の反応を引き起こすことを示している。さらに、本発明化合物のｈα１Ｌサブタイプ発現細胞におけるＩ．Ａ．は１に近く、本発明化合物により得られるｈα１Ｌサブタイプを介する最大反応がノルアドレナリンにより得られる最大反応に近いことが示された。
アゴニストのポテンシーは、受容体に対する結合親和性や効力、受容体発現密度などさまざまな因子で影響される。そこで、両細胞におけるノルアドレナリンのポテンシーを同じと考えｐＥＣ５０値を標準化して、ｈα１Ｌ及びｈα１Ａサブタイプに対する各被験化合物の選択性を比較した。表１のＳｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ（値が大きいほどα１Ｌ選択的であることを示す）に示すごとく、本発明化合物が大きい値（１０．０）を示したのに対し、比較化合物Ａ及びＢは１よりも小さい値を示した。１０倍のＳｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙは、ノルアドレナリンの５０％反応濃度がｈα１Ｌサブタイプ発現細胞とｈα１Ａサブタイプ発現細胞の間で約２００倍（１０（８．３−６．０））の開きがあるのに対し、本発明化合物ではその開きが約２０倍（１０（８．６−７．３））であることを示している。即ち、本発明化合物は、ノルアドレナリン、比較化合物Ａ（約３９８倍）及び比較化合物Ｂ（約３１６倍）に比べ、ｈα１Ａサブタイプとｈα１Ｌサブタイプの比較においてｈα１Ｌサブタイプに選択的であった。
培養細胞は人工的にα１サブタイプを発現させた系である。そこで、本発明化合物がネイティブな組織で実際どのようなサブタイプ選択性を示すのかを、各サブタイプを介する収縮反応を選択的に検出できる試験条件を設定し、ラット摘出標本を用いて検討した。
【実施例５】
【００４２】
ラットの摘出組織を用いたα１アドレナリン受容体サブタイプ選択性の検討
（実験方法）
ペントバルビタールナトリウム（５０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔したＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（約３００ｇ）から以下の組織を摘出し、３７℃のＫｒｅｂｓ液中にて張力の変化を等尺性に記録した。なお、用いたＫｒｅｂｓ液中には、神経及び神経外組織へのノルアドレナリン取り込みを抑制するためにデシプラミン（０．３μｍｏｌ／Ｌ）と酢酸デオキシコルチコステロン（５μｍｏｌ／Ｌ）を、β−アドレナリン受容体刺激を抑制するためにプロプラノロール（１μｍｏｌ／Ｌ）を添加した。実験は、同一標本において、初めに累積的に投与したノルアドレナリンの濃度作用曲線を２時間間隔で２回記録した。その後、２時間の洗浄・安定化を待って、被験化合物の累積的な反応を記録した。被験化合物の反応は、同一標本で得られたノルアドレナリン最大反応（２回目）に対する％として表示した。
ラット前立腺標本：本組織は、α１Ｌサブタイプを介する反応を検討する標本として使用した。前立腺は一葉ごとに分離し、それぞれを実験に用いた。
ラット尾動脈標本：本組織は、α１Ａサブタイプを介する反応を検討する標本として使用した。尾動脈の中央部から、２ｍｍの長さのリング標本を作製した。なお、血管内皮細胞由来ＮＯの関与を除外するためＬ−ＮＡＭＥ（１００μｍｏｌ／Ｌ）を、共存するα１Ｄ受容体とα２受容体を抑制するためＢＭＹ  ７３７８（１０ｎｍｏｌ／Ｌ）とラウオルシン（０．１μｍｏｌ／Ｌ）をそれぞれ処置した。
ラット大腿動脈標本：本組織は、α１Ｂサブタイプを介する反応を検討する標本として使用した。大腿動脈起始部から２ｍｍの長さのリング標本を作製し、輪状筋の反応を記録した。なお、血管内皮細胞由来ＮＯの関与を除外するためＬ−ＮＡＭＥ（１００μｍｏｌ／Ｌ）を、共存するα１Ａ受容体とα１Ｄ受容体の反応を除外するためにシロドシン（３ｎｍｏｌ／Ｌ）とＢＭＹ  ７３７８（２０ｎｍｏｌ／Ｌ）を処置した。
ラット胸部大動脈標本：本組織は、α１Ｄサブタイプを介する反応を検討する標本として使用した。長さ２ｍｍのリング標本を作製し、輪状筋の反応を記録した。なお、血管内皮細胞由来ＮＯの関与を除外するためＬ−ＮＡＭＥ（１００μｍｏｌ／Ｌ）を処置した。
【００４３】
（実験結果）  
図５に示すように、ノルアドレナリンはα１Ｄサブタイプ（ラット胸部大動脈）に高い親和性を示し、残りの３つのサブタイプ間では明確な差を認めなかった。したがって、ノルアドレナリンのポテンシーは、α１Ｄ＞α１Ｌ、α１Ｂ、α１Ａの順であった。これに対し、本発明化合物は、図６に示すように、α１Ｌサブタイプ（ラット前立腺）に最も高い親和性を示し、ポテンシーはα１Ｌ＞α１Ａ＞α１Ｄ＞α１Ｂの順であった。一方、比較化合物Ａは、図７に示すように、α１Ｌサブタイプ（ラット前立腺）とα１Ａサブタイプ（ラット尾動脈）にほぼ同等の高い親和性を示し、ポテンシーはα１Ｌ≧α１Ａ＞α１Ｄ＞α１Ｂの順であり、比較化合物Ｂでは、図８に示すように、α１Ｌ、α１Ａ及びα１Ｄの差が小さく、ポテンシーはα１Ｌ、α１Ａ、α１Ｄ＞α１Ｂであった。表２に各被験化合物のラット摘出標本におけるｐＥＣ５０値およびＲａｔｉｏ値（α１Ｌサブタイプでの５０％反応濃度に対する各サブタイプの５０％反応濃度の比）を示す。
この結果より、ラットのネイティブな組織においても、本発明化合物が比較化合物Ａや比較化合物Ｂとは異なり、α１Ｌサブタイプに高い選択性を有することが示された。
【００４４】
【表２】
2013199431.tif 000015
【００４５】
比較化合物Ａ：上記式（Ａ）の化合物（ＥＳＲ１１５０ＣＬ）
比較化合物Ｂ：特許文献６記載の上記式（Ｂ）の化合物
本発明化合物：２−（３−イソプロピル−２−メチル−５−ジメチルアミノベンジル）イミダゾリン塩酸塩（実施例２）
【実施例６】
【００４６】
ウレタン麻酔ウサギにおける尿道内圧及び拡張期血圧に及ぼす影響
（実験方法）
体重３ｋｇ程度の雌性日本白色種ウサギ（Ｋｂｌ：ＪＷ、北山ラベス株式会社）を２４時間絶食絶水した後に使用した。ペントバルビタールを耳介静脈より投与し、軽麻酔を施してウサギを背位に固定した。生理食塩水に２５％の濃度で溶解したウレタンを１．５ｇ／ｋｇの用量で皮下投与し、手術部位（頚部正中線付近、下腹部）の毛をバリカンにより刈り取った。頸部を電気メスにより切開（約５ｃｍ）し、頸動脈に血圧測定用のカニューレを挿入した。恥骨結合より約１０ｃｍ上方の下腹部を電気メスにより慎重に切開して、膀胱を露出させた。膀胱に小切開（約１ｃｍ）を加え、膀胱内に残留する尿を排出した。尿道内圧測定用のバルーンカテーテルを膀胱の小切開部より挿入して、一旦バルーン先端を外尿道口に導いた。バルーン先端に装着した絹糸の目印を目安にバルーン位置を定めて固定し、１５〜２０ｍｍＨｇの内圧が発生するようにバルーンに注水した。耳介静脈に翼付き静注針を刺入し、基部をアロンアルファで固定した。頸動脈カニューレより得られた全身血圧及び尿道バルーンより得られた尿道内圧を熱書記録器により記録した。標本の安定を待って、フェニレフリン３０μｇ／ｋｇをインフュージョンポンプにより５分間かけて静脈内投与し、標本の反応性を確認した。その後、生理食塩水に溶解した被験化合物を同様の方法により静脈内投与した。
【００４７】
（実験結果）
本発明化合物、比較化合物Ｂ及び非選択的なα１アドレナリン受容体アゴニストであるフェリレフリンを静脈内投与した時の、ウサギの拡張期血圧（ＤＢＰ）及び尿道内圧（ＩＵＰ）に及ぼす影響の検討結果を図９及び１０に示す。
フェニレフリン３０μｇ／ｋｇの投与によるＤＢＰ及びＩＵＰの上昇に対し、本発明化合物１μｇ／ｋｇを静脈内投与した時の反応は、ＩＵＰではやや持続的でほぼ同等の、ＤＢＰ（投与初期に接触不良によるデータの欠損あり）では明らかに小さな反応が示された。一方、比較化合物Ｂ  １μｇ／ｋｇを静脈内投与した時の反応は、ＩＵＰが非常に持続的に上昇したもののその最大反応はフェニレフリンに及ばず、ＤＢＰではフェニレフリンと同程度の上昇を示した。
上記の結果は、本発明化合物がα１Ｌサブタイプを介して尿道の収縮力を高めることで尿失禁を抑制しながら、α１Ａサブタイプを介する血圧上昇という副作用を回避しようとする薬剤コンセプトに相応しい化合物であることを示す結果である。
【符号の説明】
【００４８】
図１〜４の□はｈα１Ｌ発現細胞を表す。
図１〜４の●はｈα１Ａ発現細胞を表す。
図１〜４の▲はｈα１Ｂ発現細胞を表す。
図１〜４の▽はｈα１Ｄ発現細胞を表す。
図５〜８の◇は前立腺（α１Ｌ）を表す。
図５〜８の●は尾動脈（α１Ａ）を表す。
図５〜７の△は大腿動脈（α１Ｂ）を表す。
図５〜７の■は胸部大動脈（α１Ｄ）を表す。
図８の□は大腿動脈（α１Ｂ）を表す。
図８の◆は胸部大動脈（α１Ｄ）を表す。
図９及び１０の◇は実施例２記載の本発明化合物を表す。
図９及び１０の●は比較化合物Ｂを表す。
図９及び１０の▲はフェニレフリンを表す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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