(57)【要約】【課題】ステロイドを含有しない、安全な抗炎症のための皮膚外用組成物を提供する。【解決手段】ビタミンＡ、ビタミンＢ６、ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥを有効成分として含有する、抗炎症のための皮膚外用剤組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビタミンＡ、ビタミンＢ６、ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥを有効成分として含有する、抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
【請求項２】
ビタミンＢ６及びビタミンＣが、それぞれ脂溶性ビタミンＢ６及び脂溶性ビタミンＣである、請求項１に記載の抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
【請求項３】
脂溶性ビタミンＢ６が、トリ２−ヘキシルデカン酸ピリドキシンである、請求項２に記載の抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
【請求項４】
ビタミンＡがパルミチン酸レチノールであり、脂溶性ビタミンＣがテトラ２−ヘキシルデカン酸アスコルビルであり、ビタミンＤがコレカルシフェロールであり、ビタミンＥが酢酸トコフェロールである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
【請求項５】
抗炎症が、肌荒れ、かさつき、炎症による色素沈着、炎症後角化症（皮膚の硬化）、痒み、及び、アトピー性皮膚炎からなる群より選択される皮膚疾患の予防及び／又は治療である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗炎症作用を有することにより、肌荒れ、かさつき、角化症（皮膚の弾力低下）や色素沈着の防止・改善作用を奏する、ステロイドを含有しない、安全な抗炎症のための皮膚外用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
最近、皮膚化粧料や皮膚外用剤の分野において、皮膚細胞を賦活し、皮膚の機能そのものを活性化して、皮膚症状の改善や抗炎症効果又は創傷治癒効果を発揮させるための研究が多くなされている。LPS、UV、アレルゲンや活性酸素に曝された皮膚ではNF-κB（Nuclear Factor Kappa B）などの炎症関連遺伝子の発現により、炎症が誘導される。
NF-κBは、免疫グロブリンκ鎖遺伝子のエンハンサーに結合する転写因子であり、p50とp65の２種のサブユニットからなる。NF-κBは実刺激の状態では細胞質にI-κB（inhibitor kappa B）との複合体として存在しているが、細胞外からサイトカインや紫外線などのシグナルが加わるとI-κBがリン酸化をうけて解離し、NF-κBが核内へ移行する。核内に移行したNF-κBは、染色体上のNF-κB結合部位に結合し、その下流にある遺伝子の転写を促進する。NF-κB結合部位の下流にある遺伝子として、例えば炎症性サイトカイン［インターロキン(IL)-1、腫瘍壊死因子(TNF)-α、TNF-β、IL-6、IL-8、IL-2等］や、細胞接着分子［E-セレクチン(selectin)、ICAM-1、VCAM-1］があり(例えば、非特許文献１参照)、これらの分子はがん・白血病，動脈硬化，関節リウマチ、乾癬などの炎症性疾患、自己免疫疾患，ＡＩＤＳなどに関与することが示唆されている。（例えば、非特許文献２、３参照）
NF-κBは、それ自身がNF-κBの構成成分を発現誘導することから、炎症惹起に伴うNF-κBの活性化は炎症を拡大すると考えられており（例えば、非特許文献４参照）、NF-κBの活性化を抑制することにより炎症反応を効果的に鎮めることができると考えられている。
また、皮膚においても、NF-κBなどの炎症関連遺伝子が活性化し炎症が誘導されることで、肌荒れ・かさつき・炎症による色素沈着・炎症後角化症（皮膚の硬化）や痒み等の皮膚疾患が認められることが知られている（例えば、非特許文献５参照）。
【０００３】
これら皮膚疾患の治療の多くには、炎症を抑制するため、抗炎症剤やステロイド剤が用いられてきた。しかしながら、ステロイド剤には副作用が多いという欠点があり、長期間使用することが難しかった。しかも大半の炎症症状はその原因から薬での奏効による改善は一過性で根治せず、従って、近年、継続的に無理なく長期間使用でき、かつ副作用の無い抗炎症効果を持つ外用剤が要望されていた。
外用剤としてのビタミン類の抗炎症作用については、ビタミンＡ類では、逆に炎症を惹起する危険性が示唆されており、炎症作用の少ないビタミンＡ誘導体の開発研究が行われているが、薬理効果の副作用として炎症を避けられない現状がある（例えば、非特許文献６参照）。
また、ビタミンＤ類では、活性型ビタミンＤ３が免疫細胞であるT細胞の増殖を抑制し、炎症性サイトカインの産生を抑制することが知られ（例えば、非特許文献７参照）、本邦では尋常性乾癬等角化症治療剤としてマキサカルシトールが認可されている（例えば、非特許文献８参照）。
ビタミンＣ類及びＥ類では、抗酸化作用から派生して、抗炎症作用をもつことが報告されている（例えば、非特許文献９参照）。しかしながら、抗酸化作用から派生する抗炎症作用は、活性酸素による炎症のみに効果があり、炎症を抑制するには不充分であった。
従前のビタミン類の単剤または併用技術では、表皮細胞の抗炎症作用は充分とは言い難いのが現状であり、更に、皮膚外用組成物においてビタミンの組合せが表皮細胞の抗炎症作用を高めるかどうかについては全く知られていないのが実情であった。
なお、これまでに、ビタミンＡ類に単剤では全く作用を有さないＢ６類を配合すると、ビタミンＡのヒアルロン酸産生促進作用が増強すること、ビタミンＡ、Ｂ６、Ｃ、Ｄ及びＥ類を全て配合したものにより一層優れたヒアルロン酸産生促進作用が発現することが本発明者らによって開示されている（特許文献1参照）。
しかし、現在のところ、かかるビタミンの組み合わせによる抗炎症作用の有無については不明であり、示唆もない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１１−１２０５５号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Annu. Rev. Immunol.,12, 141, 1994
【非特許文献２】J. Biol. Chem., 275, 4383-4390, 2000
【非特許文献３】J. Biol. Chem., 274, 15662-15670, 1999
【非特許文献４】Mol. Cell. Biol., 11, 259, 1991
【非特許文献５】Nature, 379, 335-339, 1996
【非特許文献６】日薬理誌、134、37〜45頁、2009年
【非特許文献７】日薬理誌、110、39〜43頁、1997年
【非特許文献８】医療用医薬品集2009年版、JAPIC 2008 p.2445
【非特許文献９】J. Am. Acad. Dermatol., 59, 418-25, 2008
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、ステロイドを使用しなくても優れた抗炎症作用を有し、かつ安全性に優れた皮膚外用組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上述の課題を解決するため、表皮細胞の抗炎症作用を向上させる手段について鋭意研究した結果、ビタミンＡと、ビタミンＢ６、ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥ；好ましくはビタミンＡと、脂溶性のビタミンＢ６、脂溶性ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥを併用することにより、炎症に関与するNFκBの遺伝子発現が抑制されること、更にこれらを組み合わせた皮膚の抗炎症剤を用いて製造した皮膚外用組成物は、ＬＰＳ、ＵＶ照射、アレルゲン、活性酸素などによる皮膚の炎症を改善し、ひいては、肌荒れ・かさつき・炎症による色素沈着・炎症後角化症（皮膚の硬化）・痒み・アトピー性皮膚炎等を抑制することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、下記の（１）〜（５）を提供するものである。
（１）ビタミンＡ、ビタミンＢ６、ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥを有効成分として含有する、抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
（２）ビタミンＢ６及びビタミンＣが、それぞれ脂溶性ビタミンＢ６及び脂溶性ビタミンＣである、（１）に記載の抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
（３）脂溶性ビタミンＢ６が、トリ２−ヘキシルデカン酸ピリドキシンである、（２）に記載の抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
（４）ビタミンＡがパルミチン酸レチノールであり、脂溶性ビタミンＣがテトラ２−ヘキシルデカン酸アスコルビルであり、ビタミンＤがコレカルシフェロールであり、ビタミンＥが酢酸トコフェロールである、（１）〜（３）のいずれか１に記載の抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
（５）抗炎症が、肌荒れ、かさつき、炎症による色素沈着、炎症後角化症（皮膚の硬化）、痒み、及び、アトピー性皮膚炎からなる群より選択される皮膚疾患の予防及び／又は治療である、（１）〜（４）のいずれか１に記載の抗炎症のための皮膚外用剤組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、著しく優れた皮膚の炎症抑制作用を有する皮膚外用組成物又は化粧料が得られた。これにより、NFκBが関与する皮膚の炎症が抑制できる。具体的には、肌荒れ、かさつき、炎症による色素沈着、炎症後角化症（皮膚の硬化）、痒み、アトピー性皮膚炎等の皮膚疾患の予防または治療に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１はIL-1αの添加により増加したNFκBの発現量を、実施例１の組成物（パルミチン酸レチノール、トリ２−ヘキシルデカン酸ピリドキシン、テトラ２−ヘキシルデカン酸アスコルビル、コレカルシフェロール、及び酢酸トコフェロール含有）を添加することにより、その発現量を抑えて炎症抑制効果を有することを示した図である。ここで、ΔCtが小さいほどNFκBの発現量は高いことを示す。なお、ΔCt値は以下の式１によって求めた。
【００１１】
【数１】
2013100267.tif 000002
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明に用いられる「ビタミンＡ」としては、例えば、レチノール；レチノールのパルミチン酸エステル、ステアリン酸エステル、酢酸エステル等の各種脂肪酸エステル；レチノールの乳酸エステル、グリコール酸エステル等の各種有機酸エステル；及びレチノールのリン酸、ピロリン酸、硫酸等の各種無機酸ジエステル複合体等が挙げられる。好適には、オール-trans-レチノール及びその異性体、オール-trans-レチノイン酸及びその異性体、オール-trans-レチナール及びその異性体、それらの３-デヒドロ体、３，４-ジデヒドロ体、さらには、広く市販されており、安定性が比較的良好なパルミチン酸レチノールが挙げられる。特に好適には、パルミチン酸レチノールである。これらのビタミンＡは、合成によって得られたものであっても、天然抽出物より得られたものであっても、それを精製したものであっても良い。
【００１３】
本発明に用いられる「ビタミンＢ６」としては、脂溶性ビタミンＢ６が好ましい。「脂溶性ビタミンＢ６」としては、脂溶性であれば特に限定されないが、例えば、トリ２−ヘキシルデカン酸ピリドキシンが好ましい。
【００１４】
本発明に用いられる「ビタミンＣ」としては、脂溶性ビタミンＣが好ましい。「脂溶性ビタミンＣ」としては、脂溶性であれば特に限定されないが、例えば、パルミチン酸アスコルビル、及び、テトラ２−ヘキシルデカン酸アスコルビル等を好適なものとして挙げることができる。
【００１５】
本発明に用いられる「ビタミンＤ」及び「ビタミンＥ」は、例えば、「ビタミンＤ」としてはコレカルシフェロール、及び、エルゴカルシフェロール、「ビタミンＥ」としてはトコフェロール、コハク酸トコフェロール、及び、酢酸トコフェロール等が挙げられる。「ビタミンＤ」としてはコレカルシフェロールが好適であり、「ビタミンＥ」としては酢酸トコフェロールが好適に挙げられる。
【００１６】
本発明の「抗炎症のための皮膚外用組成物」とは、ビタミンＡ、ビタミンＢ６、ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥ；好ましくは、ビタミンＡ、脂溶性ビタミンＢ６、脂溶性ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥからなり、皮膚の炎症を抑制する組成物である。本剤を医療用のみではなく、化粧用組成物も含む皮膚外用組成物に含有させることによって、本剤の効果を有する皮膚外用組成物を製造することができる。
本発明の「皮膚外用組成物」は、皮膚に塗布して用いられる組成物であれば特に限定はないが、例えば、医療用の皮膚外用組成物又は化粧料組成物である。
【００１７】
本発明の組成物には、ビタミンＡ、ビタミンＢ６、ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥ；好ましくは、ビタミンＡ、脂溶性ビタミンＢ６、脂溶性ビタミンＣ、ビタミンＤ、及び、ビタミンＥ、等の有効成分以外に、通常、医薬品、医薬部外品、化粧品などの皮膚外用医療用組成物に用いられる成分、例えば、水性成分、油性成分、粉末成分、アルコール類、保湿剤、増粘剤、紫外線吸収剤、美白剤、防腐剤、酸化防止剤、界面活性剤、香料、色素等の添加剤を適宜必要に応じて配合することができる。かかる添加剤の配合の方法は、日局製剤総則に記載の方法に従って行うことができる。
【００１８】
本発明の皮膚外用組成物の「剤型」としては、皮膚に適用できる剤型であれば特に限定されないが、クリーム剤、軟膏剤、液剤、ゲル剤、ローション剤などの塗布剤、パップ剤、テープ剤、パッチ剤などの貼付剤などが好適である。  本発明の皮膚外用組成物はまた、例えば、医薬品、医薬部外品、化粧品などとして利用することができ、これを1日1〜数回皮膚に塗布すればよい。
【実施例】
【００１９】
本発明の実施例を以下に記載するが、これらに限定されるものではない。
【００２０】
（実施例１）美容液
表１に記載の成分を混合し、美容液を製造した。また、各成分の入手先及び濃度を表２に示した。なお、表２の成分の濃度は、培地への添加濃度を示す。また、スクワランは日光ケミカルズ株式会社のものを使用した。
【００２１】
【表１】
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【００２２】
【表２】
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【００２３】
（試験例１）ヒト表皮角化細胞におけるNFκB量測定
24穴プレートに正常ヒト表皮角化細胞（クラボウ）をMedium 154S培地（Invitrogen）にて播種し、１日後、実施例１の表２に記載の成分を2-プロパノールで希釈して調製した（被験物質）。Medium 154S培地（Invitrogen）にIL-1α（R&D Systems） 10ng/mL及び被験物質を表２の濃度となるように添加し、被験物質添加培地とした。培養中の正常ヒト表皮角化細胞の培地を被験物質添加培地に交換した。
なお、コントロールは2-プロパノールを0.1%添加したMedium 154S培地を使用した。
被験物質添加から3時間後に細胞を採取し、RNeasy Mini Kit（QIAGEN）を用いてRNAを回収し、リアルタイム定量RT-PCRによりNFκBの発現量（ΔCt値）を調べた。
ΔCtの結果を図１に示した。なお、ΔCtが小さいほどNFκBの発現量が高いことを示す。各投与群はＮ＝２の平均値を示した。
【００２４】
図１に示したように、コントロールの場合と比較して、IL-1αを添加すると、ΔCt値が低下し（NFκBの発現量が上昇）、炎症状態となっている。これに、実施例１の組成物を添加すると、ΔCt値が上昇し（NFκBの発現量が減少）、優れた抗炎症効果を有することが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００２５】
本発明の組成物は優れた皮膚の炎症抑制作用を有するため、肌荒れ、かさつき、炎症による色素沈着、炎症後角化症（皮膚の硬化）、痒み、アトピー性皮膚炎等の皮膚疾患の予防または治療のための皮膚外用組成物又は化粧料として利用できる。
【図１】
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