(57)【要約】【課題】外部電源等から電圧を印加しやすいようにしつつ、外部観察もしやすい構造を有する電極付き細胞試験具器を提供する。【解決手段】細少なくとも片側が絶縁性である底面基材と、前記底面基材の片側に配置された電極と、を有し、かつ、細胞試験を行う細胞試験領域を１以上有し、前記細胞試験領域にあたる部位が透明である基板と、一端が前記基板上に位置して前記電極に電気的に接続し、前記細胞試験領域を避けた位置まで延びる取り出し配線と、を有することを特徴とする電極付き細胞試験具。【選択図】図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも片側が絶縁性である底面基材と、前記底面基材の片側に配置された電極と、を有し、かつ、細胞試験を行う細胞試験領域を１以上有し、前記細胞試験領域にあたる部位が透明である基板と、
一端が前記基板上に位置して前記電極に電気的に接続し、前記細胞試験領域を避けた位置まで延びる取り出し配線と、を有することを特徴とする電極付き細胞試験具。
【請求項２】
前記取り出し配線が、可撓性を有し、前記電極に電気的に接続する位置から引き出し位置までの間に、少なくとも１箇所の易切断部分を有することを特徴とする請求項１に記載の細胞試験具。
【請求項３】
さらに、前記電極と対向する対向電極を有し、
前記対向電極は、前記底面基材の前記片側に前記電極と電気的に絶縁するように形成されていることを特徴とする請求項１又は２に記載の細胞試験具。
【請求項４】
前記取り出し配線が、
前記基板の端部側において、前記底面基材と前記電極との両面に接触するように形成されていることを特徴とする請求項１から３までのいずれか１項に記載の細胞試験具。
【請求項５】
さらに、前記基板を取り付けて、前記基板を底部として容器を形成する筐体を有し、
前記取り出し配線は、前記筐体の前記底部側に露出する露出面に引き出されていることを特徴とする請求項１から４までのいずれか１項に記載の細胞試験具。
【請求項６】
前記筐体は、少なくとも前記基板を取り付けた場合に前記基板端部から立ち上がる側板部を有し、
前記取り出し配線は、前記側板部の底面又は前記側板部と前記基板とを繋ぐ底板部の下面まで引き出されていることを特徴とする請求項５に記載の細胞試験具。
【請求項７】
前記取り出し配線は、
前記側板部に前記露出面を形成していることを特徴とする請求項５又は６に記載の細胞試験具。
【請求項８】
前記細胞試験領域には細胞接着性領域と細胞非接着領域がパターン状に存在し、
前記細胞非接着領域の一部又は全部は、前記電極への電圧印加により細胞接着領域に変化することを特徴とする請求項１から７までのいずれか１項に記載の細胞試験具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、電極付き細胞試験具に関し、特に、電極の取り出し配線構造に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、様々な動物や植物の細胞培養が行われており、また、新たな細胞の培養法が開発されている。細胞培養の技術は、細胞の生化学的現象や性質の解明、有用な物質の生産などの目的で利用されている。さらに、培養細胞を用いて、人工的に合成された薬剤の生理活性や毒性を調べる試みがなされている。
【０００３】
一部の細胞、特に多くの動物細胞は、何かに接着して生育する接着依存性を有しており、生体外の浮遊状態では長期間生存することができない。このような接着依存性を有した細胞の培養には、細胞が接着するための担体が必要であり、一般的には、コラーゲンやフィブロネクチンなどの細胞接着性タンパク質を均一に塗布したプラスチック製の培養皿が用いられている。これらの細胞接着性タンパク質は、培養細胞に作用し、細胞の接着を容易にし、細胞の形態に影響を与えることが知られている。
【０００４】
一方、細胞の遊走は免疫応答や受精後の胚形態形成、組織修復および再生などの様々な段階に関与している。また、癌やアテローム動脈硬化症、関節炎などの疾患の進行においても極めて重要な役割を持つ。具体的には、血管内皮を通しての細胞の遊走は、炎症、アテローム性動脈硬化症、癌の転移といった状態の病態生理における重要な現象である。そのため、インビトロでの細胞遊走を測定する方法は、長年に渡って開発されてきた。
【０００５】
細胞遊走アッセイに関してすでに市販されている装置としては、古典的なボイデンチャンバ、細胞培養インサート、ＦｌｕｏｒｏＢｌｏｃｋ（登録商標）（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、Ｃｅｌｌ Ｍｏｔｉｌｉｔｙ ＨｉｔＫｉｔ（登録商標）（Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ）がある。しかし、こうした装置では、接着した細胞の遊走方向を制御して、定量的に細胞遊走をアッセイすることは困難である。
【０００６】
下記非特許文献１には、パターニングされていない全面が導電性の基板上で、電圧の印加により、細胞の接着および非接着を制御する技術が記載されている。しかし、この基板では、電圧の印加により基板上の全面の性質が変化してしまうため、基板上に細胞を接着させた後、特定の領域のみを細胞接着性に改変させて、その領域にのみ細胞を制御させて遊走させることはできない。
【０００７】
また、非特許文献２には、導電性領域と絶縁性領域を有する基材に細胞接着阻害性の膜を形成し、特定の導電性領域に電圧を印加することにより細胞接着阻害性の膜を細胞接着性に改変させて、その領域にのみ細胞を接着させて培養する方法が記載されている。しかし、非特許文献２の基板の導電性領域上においては、細胞接着性領域と細胞接着阻害性領域が隣り合っていない。従って、細胞接着性に改変した領域に細胞を接着させた後、別の導電性領域に電圧を印加して細胞接着性に改変させても、すでに接着した細胞を隣り合っていない別の領域に遊走させてアッセイすることはできない。
【０００８】
また、下記特許文献１は、導電性領域を有する基材、および導電性領域にシランを介して結合された細胞接着阻害性の膜を含む基板の導電性領域に正電圧を印加することにより細胞接着阻害性の膜を剥離する工程、および細胞接着阻害性の膜が剥離された領域上で細胞を培養する工程を含む、細胞培養方法を開示する。
【０００９】
また、特許文献２は、導電性領域と絶縁性領域とを有する基材、ならびに該導電性領域上および該絶縁性領域上にそれぞれ形成された細胞接着性領域と細胞接着阻害性領域とを備える細胞培養用基板であって、導電性領域上において細胞接着性領域と細胞接着阻害性領域とが隣り合っており、絶縁性領域上において細胞接着性領域と細胞接着阻害性領域とが隣り合っている構造を提案するものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２０１１−０８３２４４号公報
【特許文献２】特開２０１１−１０１６３８号公報
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｊｉａｎｇ Ｘ，Ｆｅｒｒｉｇｎｏ Ｒ，Ｍｒｋｓｉｃｈ Ｍ，Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ ＧＭ．２００３．Ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｅｄ ｍｏｎｏｌａｙｅｒｓ ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅｌｙ ｒｅｌｅａｓｅｓ ｐａｔｔｅｒｎｅｄ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｇｅｏｍｅｔｒｉｃａｌ ｃｏｎｆｉｎｅｍｅｎｔｓ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２５：２３６６−７
【非特許文献２】Ｓｕｎｎｙ Ｓ．Ｓｈａｈ，Ｊｉ Ｙｏｕｎ Ｌｅｅ，Ｓｔａｎｉｓｌａｖ Ｖｅｒｋｈｏｔｕｒｏｖ，Ｎａｚｇｕｌ Ｔｕｌｅｕｏｖａ，Ｅｍｉｌｅ Ａ．Ｓｃｈｗｅｉｋｅｒｔ，Ｅｒｌａｎ Ｒａｍａｎｃｕｌｏｖ，ａｎｄ Ａｌｅｘａｎｄｅｒ Ｒｅｖｚｉｎ．２００８．Ｅｘｅｒｃｉｓｉｎｇ Ｓｐａｔｉｏｔｅｍｐｏｒａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ ｗｉｔｈ Ｏｐｔｉｃａｌｌｙ Ｔｒａｎｓｐａｒｅｎｔ Ｍｉｃｒｏｅｌｅｃｔｒｏｄｅｓ． Ｌａｎｇｍｕｉｒ ２４：６８３７−６８４４．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
上記特許文献１及び２は、細胞接着阻害性領域と前記細胞接着阻害性領域に隣接する細胞接着性領域とを有する細胞試験用基板に電圧を印加することにより、細胞接着阻害性領域を細胞接着性領域に改変できることを応用した異なる細胞の共培養や、細胞遊走試験に関するものである。しかしながら、細胞試験用基板のサイズを大きくすると、電圧印加端子からの距離に応じて電圧降下が生じてしまう。そのため、基板全体に均一な電圧を印加する点において未だ改良の余地が残されていた。
【００１３】
さらに、本出願人は、電圧印加による細胞接着阻害物質（ＰＥＧ）の脱離を利用した細胞パターンの可変技術として、例えば、特願２０１１−２７１７０６号などにおいて、基材と、基材上に配置された電極とを備える細胞試験用基板であって、電極は、主電極と、前記主電極に導電可能に接続された補助電極とを含み、主電極上には、細胞接着性領域と、前記細胞接着性領域に隣接する細胞接着阻害性領域とが配置されていることを特徴とする細胞試験用基板を提案している。この細胞試験用基板によれば、基板全体に均一な電圧を印加することが可能となる。
【００１４】
ところで、細胞培養等に用いられる細胞試験用容器（ディッシュやプレート）は、標準的な寸法が決まっており、顕微鏡などに容器を設置する際にも、この標準的な寸法に合わせて冶具が作られる。例えば、マイクロプレートは、国際的にANSI/SBS規格で定まっているサイズ、長さ×幅が１２７．７６ｍｍ×８５．４８ｍｍに合わせることが好ましい（規格については、例えば特開２００７−３１６０６４号公報を参照）。
【００１５】
細胞試験用容器は、通常は、細胞培養等の光学観察を目的として容器設計がなされているが、容器内容物への電気印加や電気計測を行うために、細胞試験容器に電極が形成されている場合でも、通常の容器と同様の装置によって実験や観察を行うためには、細胞試験容器のサイズを変更せずに電極を設置することが好ましい。
【００１６】
さらに、外部電源等から電圧を印加するためのプローブ等により電極に接触させる必要があるため、電極の取り出し方には工夫が必要であり、特に、接続冶具等により細胞試験用の容器内の観察が阻害されない構造であることが望ましい。
【００１７】
本発明は、外部電源等から電圧を印加しやすいような電極の取り出し方を提案しつつ、外部観察もしやすい構造を有する電極付き細胞試験具を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
電極付きの培養容器としては、細胞電位計測や細胞インピーダンス計測、ECL計測、細胞への活動電位刺激等の用途が知られているが、本発明では、特に、電圧印加によるPEG等の脱離を利用した、細胞パターンの可変技術に適した試験具を発明した。PEGの脱離が目的の場合、容器内に多数のウェルがあっても一様な条件で電圧を印加すれば良いため、ウェル数に依存せず電極の本数が数本程度までと少ない場合に適する。
【００１９】
本発明の一観点によれば、少なくとも片側が絶縁性である底面基材と、前記底面基材の片側に配置された電極と、を有し、かつ、細胞試験を行う細胞試験領域を１以上有し、前記細胞試験領域にあたる部位が透明である基板と、一端が前記基板上に位置して前記電極に電気的に接続し、前記細胞試験領域を避けた位置まで延びる取り出し配線と、を有することを特徴とする電極付き細胞試験具が提供される。基板を避けた位置とは、例えば、基板の側面又は背面である。基板を避けた位置から電圧を印加できるため、基板観察が容易になるという利点がある。
【００２０】
前記取り出し配線が、可撓性を有し、前記電極に電気的に接続する位置から引き出し位置までの間に、少なくとも１箇所の易切断部分を有するようにしても良い。これにより、電圧印加後に、易切断部分から簡単に取り出し配線を切断して、試験具からの取り出し配線のはみ出し等をなくすことができる。
【００２１】
さらに、前記電極と対向する対向電極を有し、前記対向電極は、前記底面基材の前記片側に前記電極と電気的に絶縁するように形成されていても良い。このようにすると、電極と対向とを底面基板の片側に簡単に形成することができる。複数の電極を一括して形成することができる。
【００２２】
また、前記取り出し配線が、前記基板の端部側において、前記底面基材と前記電極との両面に接触するように形成されていても良い。
【００２３】
さらに、前記基板を取り付けて、前記基板を底部として容器を形成する筐体を有し、前記取り出し配線は、前記筐体の前記底部側に露出する露出面に引き出されていることが好ましい。
【００２４】
前記筐体は、少なくとも前記基板を取り付けた場合に前記基板端部から立ち上がる側板部を有し、前記取り出し配線は、前記側板部の底面又は前記側板部と前記基板とを繋ぐ底板部の下面まで引き出されているようにしても良い。
【００２５】
また、前記取り出し配線は、前記側板部に前記露出面を形成しているようにしても良い。
【００２６】
また、前記細胞試験領域には細胞接着性領域と細胞非接着領域がパターン状に存在し、前記細胞非接着領域の一部又は全部は、前記電極への電圧印加により細胞接着領域に変化するようにすることもできる。
【発明の効果】
【００２７】
本発明によれば、外部電源等から電圧を印加しやすいようにしつつ、外部観察もしやすい構造を有する電極付き細胞試験用容器を提供することを目的とする。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】本発明の実施の形態による電極付き細胞試験用容器に用いられる基板構造の製造方法の一例を示す図である。
【図２】細胞接着性領域と細胞非接着性領域とが形成された表面構造に、細胞培養液を接触させた状態を示す図である。
【図３】細胞非接着性領域に、電圧印加機構により電圧を印加する様子を示す図である。
【図４】図４（ａ）は、本発明の第１の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、ディッシュ形状の培養容器を例にして示した図である。図４（ｂ）は、対向電極の別の構造を示す図である。（３５ｍｍ径は不要と考えました。以下も同様の修正をお願いします。）・了解しました（今村）。図面の簡単な説明の欄では全て削除しております。
【図５】本発明の第１の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、マイクロプレート形状の培養容器を例にして示した断面図である。
【図６】本発明の第２の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、ディッシュ形状の培養容器を例にして示した断面図である。
【図７】本発明の第２の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、マイクロプレート形状の培養容器を例にして示した断面図である。
【図８】本発明の第３の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、ディッシュ形状の培養容器を例として示した断面図である。
【図９】本発明の第３の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、マイクロプレート形状の培養容器を例にして示した断面図である。
【図１０】本発明の第４の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、ディッシュ形状の培養容器を例として示した断面図である。
【図１１】図１１（ａ）は、本発明の第４の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、マイクロプレート形状の培養容器を例にして示した断面図である。図１１（ｂ）は、図１１（ａ）において、取り出し配線の上面側の一端が接着材に接触していない構成である。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明において細胞接着性とは、細胞が接着すること、または細胞が接着しやすい性質を意味する。細胞接着阻害性とは、細胞が接着しにくいこと、または細胞が接着しない性質を意味する。従って、細胞接着性領域と細胞接着阻害性領域とがパターン化された基板上に細胞を添加すると、細胞接着性領域には細胞が接着するが、細胞接着阻害性領域には細胞が接着しないため、基板表面には細胞がパターン状に配列されることになる。基板を避けた位置とは、例えば、基板の側面又は背面である。
【００３０】
本発明の細胞試験具における、細胞接着性領域及び細胞接着阻害性領域の構造としては、例えば、以下の２つの形態が挙げられる。
【００３１】
第一の形態は、細胞接着性領域が、炭素酸素結合を有する有機化合物を含む細胞接着阻害性の親水性膜に酸化処理及び／又は分解処理を施して細胞接着性とした領域である形態である。この形態では、電極上に炭素酸素結合を有する有機化合物を含む細胞接着阻害性の親水性膜を形成し、次いで、細胞の接着が望まれる領域に対して酸化処理及び／又は分解処理を施すことにより当該領域に細胞接着性を付与して細胞接着性領域に改変する。前記処理を施さない部分は細胞接着阻害性領域である。
【００３２】
第二の形態は、細胞接着性領域が、炭素酸素結合を有する有機化合物を低密度で含む親水性膜で形成されている形態である。この形態は、炭素酸素結合を有する有機化合物を高密度で含む親水性膜が細胞接着阻害性を有するのに対して、前記化合物を低密度で含む親水性膜は細胞接着性を有することを利用したものである。電極上に前記化合物が結合しやすい第一領域と結合しにくい第二領域とを設け、該電極上に前記化合物の膜を形成すると、第一領域は細胞接着阻害性領域となり、第二領域は細胞接着性領域となる。
【００３３】
さらに、本発明の細胞試験用具においては、電極上の細胞接着阻害性領域が、電圧印加、好ましくは凹部底面の電極への正電圧の印加によって細胞接着性に変化する。電圧の印加によって細胞接着性に変化した領域は、上記のように炭素酸素結合を有する有機化合物を含む細胞接着阻害性の親水性膜に酸化処理及び／又は分解処理を施して得られる細胞接着性領域とは、詳細な表面性状が異なる場合がある。
【００３４】
以下、本発明の実施の形態による電極付き細胞試験容器について図面を参照しながら説明を行う。導電性領域を有する基材、および導電性領域にシランを介して結合された細胞接着阻害性の膜を含む基板の導電性領域に正電圧を印加することにより細胞接着阻害性の膜を剥離する工程、および細胞接着阻害性の膜が剥離された領域上で細胞を培養する工程を含む、細胞培養方法の詳細については、特許文献１に記載の技術を援用することができ、その詳細な説明は省略する。
【００３５】
図１から図３までは、電圧印加による細胞接着阻害物質（ＰＥＧ）の脱離を利用した、細胞パターンの可変技術の一例を示す図である。図１は、本発明の実施の形態による電極付き細胞試験具の一例である試験容器に用いられる基板構造の製造方法の一例を示す図である。図１に示すように、ガラス基板１上に、例えばＣＶＤ法などの公知の技術により、酸化インジウム錫（ＩＴＯ）等の導電性材料からなるＩＴＯ層３を形成する。次いで、その上に、エポキシシラン層５と、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ：  Ｐｌｏｙｅｔｈｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）層７とを形成して細胞非接着性の表面とする（図１（ａ））。次いで、例えば公知のフォトリソグラフィー技術を利用して図１（ｂ）に示すように、クロムを含むフォトマスク１１を表面の一部領域上に形成する。フォトマスク１１を形成した状態で紫外線を照射すると、フォトマスク１１がないエリアでは紫外線が透過するため、下の層のポリエチレングリコール層７ａが分解するが、クロムがあるエリアでは紫外線が透過しないため、下の層が変化しない。次いで、フォトマスク１１を除去すると、図１（ｃ）に示すように、フォトマスクが形成されていた領域においてエポキシシラン層５ａ／ポリエチレングリコール層７ａを残して、フォトマスクが形成されていなかった領域におけるエポキシシラン層５ａ／ポリエチレングリコール層７ａを除去することで、細胞接着性領域ＡＲ１と細胞非接着性領域ＡＲ２とが連続した表面構造を形成することができる（図１（ｃ））。
【００３６】
尚、上記の説明では、紫外線を照射した領域では、分解によってポリエチレングリコール層７ａが削れるが、照射条件等に依存してポリエチレングリコール層７ａが全て分解する場合や、一部が残る場合がある。また、エポキシシラン層５ａについても同様である。図１では、エポキシシラン層５ａ／ポリエチレングリコール層７ａが全て削れた例を示したが、実際には、エポキシシラン層５ａ／ポリエチレングリコール層７ａの変化には種々の状況がありうる。
【００３７】
本実施の形態の細胞培養用基板に用いられる基材としては、導電性領域と絶縁性領域とを形成可能な材料で形成されたものであれば特に制限されない。
【００３８】
図２（ａ）は、細胞接着性領域ＡＲ１と細胞非接着性領域ＡＲ２とが形成された表面構造に、細胞培養液２１を接触させた構造Ｂを示す図であり、細胞接着性領域ＡＲ１に細胞を培養した状態では、細胞非接着性領域ＡＲ２には、細胞は接着しない。ここで、図３に示すような電圧印加機構Ｄにより、電圧を印加する。図３において、電圧印加機構からの２本の配線の先に設けられたクリップＣＬ１、ＣＬ２を、ＩＴＯ層３と培養液２１内とにそれぞれＰｔ電極からなる取り出し配線３１、３５を挟み、ＩＴＯ層３と培養液２１との間に電圧を印加することで、図２（ｂ）のように、エポキシシラン層５ａ／ポリエチレングリコール層７ａを改変することができる。
【００３９】
例えば、電圧として正電圧を印加することにより、細胞接着阻害性領域ＡＲ２を効果的に細胞接着性の領域に改変できるとともに、特に電極３がＩＴＯ膜からなる場合に黒変するのを防止することができ、細胞遊走の観察等を良好に実施できる。なお、図２（ｂ）では、電圧を印加したことによる変化を明確に表現するために細胞接着阻害性領域ＡＲ２が消失したように表現してあるが、実際には親水性膜の分解物等が残存していると推定される。また、図２（ａ）における細胞接着性領域においても、上述のように、親水性膜の酸化処理及び／又は分解処理等により生じる分解物等が残存しているものと推定される。
【００４０】
例えば、細胞非接着性領域ＡＲ２上のエポキシシラン層５ａ／ポリエチレングリコール層７ａを除去することで、細胞接着性に変化した領域に、細胞接着性領域ＡＲ１上の細胞を遊走させたり、共培養細胞を堆積させたりすることができる。このような実験を行うことで、細胞遊走実験やパターン化共培養実験を行うことができる。
【００４１】
以下、本発明の実施の形態について、具体的には、容器の構造として、３５ｍｍ径のディッシュと、マイクロプレートと、を例にして、詳細に説明する。
【００４２】
（第１の実施の形態その１）
図４（ａ）は、本発明の第１の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、３５ｍｍ径のディッシュ形状の培養容器を例にして示した図であり、上図が上面図、下図がＡ−Ａ視断面図である。図４（ａ）に示すように、電極付き細胞試験用容器１０１は、底板１１１ｂに円形の穴Ｈが形成され、側壁１１１ａが円筒状に形成されている穴空きのディッシュ又は筐体１１１と、穴空きのディッシュ１１１の裏面から穴Ｈを塞ぐように、穴Ｈよりも外周側の作用電極１１５と底板１１１ｂとの間に配置された接着材１１９により接着された底面基材１１３と作用電極１１５との積層構造と、を有している。積層構造は、図２において細胞接着性領域ＡＲ１とエポキシシラン層５ａ／ポリエチレングリコール層７ａからなる層として示したマスク１１７を形成した細胞非接着性領域ＡＲ２とが連続した表面構造を有する基板Ｓを構成している。この基板Ｓは透明であることが好ましく、この基板Ｓを介して裏面側から顕微鏡などにより基板Ｓ上の細胞等を観測できるようになっている透過観察型の試験具を構成している。以下では、試験具として、容器構造のものを例に説明するが、容器構造のものに限定するものではなく、平板などの基板状の試験具であっても良い。
【００４３】
尚、容器としては、ディッシュ形状やマイクロプレート形状、ボトル形状、大量培養に適したセルスタック、その他細胞培養等に用いる容器であっても良い。他に、培養バッグのような袋形状であっても良い。マイクロ流体デバイス、マイクロ流路チップといった形状であっても良い。
【００４４】
ここで、接着材１１９のさらに外周側に設けられ、作用電極１１５と電気的に接続する位置から、少なくとも上記積層構造を有する基板Ｓの外側まで引き出された、取り出し配線１２１が設けられている。ここでは、取り出し配線１２１は、側壁１１１ａ内の領域で、底板１１１ｂの下面を這うように外部接続プローブ１３１の先端側を裏面側から当てることができる領域にまで引き出されている。取り出し配線１２１は、作用電極１１５に電気的に接続されていれば良く、底板１１１ｂに接着材などで固定されていても良く、或いは、底板１１１ｂの下面と積層構造を有する基板Ｓの上面との間に形成されているスペース内に配置されて面接触により半固定されていても良い。
【００４５】
このように、取り出し配線１２１が、細胞試験用容器の外枠を形成し、底板１１ｂの端部から垂直方向に立ち上がる側壁１１１ａよりは内側であって、積層構造を有する基板Ｓを形成する底面基材１１３の端部よりは外周側まで伸ばされて配置されていることにより、容器の外形は定型から変化させずに、かつ、透過型の観察を阻害しないように細胞試験用容器下方側から垂直方向に接触可能となっている。
【００４６】
従って、作用電極１１５に対して電圧を印加する際に、作用電極を含む底面基材の外壁よりは外周側において、電圧印加用の外部接続プローブ１３１を下方から垂直方向に当てることができる領域が十分に確保されている。加えて、細胞試験容器内容物への電気印加や電気計測を行うために、細胞試験容器に電極が形成されていても、通常の容器と同様の装置、例えば顕微鏡により下方から容器内を観察する際に、観察に必要な領域である穴Ｈが形成される領域よりは内周側に取り出し配線１２１が形成されないため透過型の観察が阻害されず、かつ、細胞試験容器１０１のサイズを標準的なサイズから変更せずに、取り出しのための配線（電極）を設置することができる。
【００４７】
さらに、作用電極１１５と対向する対向電極１４１が設けられている。図４（ａ）の下図においては、２点鎖線で構造を省略して示している。
【００４８】
対向電極１４１は、例えば、図２（ｂ）のＰｔ電極３１のように、培養液２１内に挿入することにより形成するものでも良いし、例えば、図４（ａ）に示す位置に、作用電極１１５と対向するように配置することができる。この場合、対向電極１４１としては、平板状の電極を配置し、側壁１１１ａにおいて、この平板状の対向電極１４１を固定するようにしても良い。
【００４９】
上記のような構造において、作用電極１１５と対向電極１４１との間に電圧を印加することで、マスク１１７を除去等して、細胞接着性に改変することができる。
【００５０】
図４（ｂ）は、対向電極の別の構成例を簡単に示す図である。図４（ｂ）では、作用電極１１５、対向電極１４１及び底面基材１１３のみを示しており、その他の構成は、図４（ａ）に示すものと同様で良い。
【００５１】
この構造では、底面基材１１３上で作用電極を絶縁部を介して電気的に独立した２つ以上の電極が形成されるようにパターニングすることで、一方の電極を作用電極１１５、もう一方の電極を対向電極１４１として利用することができる。３つ以上の電極を設ける場合には、その目的に応じて、作用電極や対向電極が２つ以上設けるようにしても良い。
【００５２】
尚、２つ以上の電極を設ける場合は、底面基材１１３上において接着材より外側の領域にまで、それぞれ独立した電極が引き出され、それぞれの電極に対して独立に取り出し配線１２１が設けられるようにしても良いし、取り出し配線１２１が複数の電極を含むように構成しても良い。
【００５３】
尚、取り出し配線１２１の厚みは、接着材１１９の高さ以下であり、例えば１ｍｍ以下であることが好ましい。又、取り出し配線１２１は、引き回しの自由度が高いことから例えばＦＰＣにより形成されていても良い。また、取り出し配線１２１が、細胞試験容器の底面１１１ｂとの間で接着材により接着されていても良い。さらに、作用電極１１５と取り出し配線１２１との間に電気的接続用の部材として、ＡＣＦ（Anisotropic Conductive Film）、すなわち、フィルム状の絶縁樹脂材料の中に、微細な導電性粒子を分散させた素材で圧力と温度を加えることにより、接着と同時に、電極間に挟まれた荷電粒子を介して電気的接続、横方向には絶縁の機能をもつ部材を利用することもできる。その他、接着用に、一般的な、はんだ、導電接着剤を用いても良い。ＰＥＧの脱離が目的の場合、容器内に多数のウェルがあっても一様な条件で電圧を印加すれば良いため、ウェル数に依存せず電極の本数が数本程度までと少ない場合にも適している。
【００５４】
尚、取り出し配線の構成は、任意性が高いため、コスト面で有利な配線方法を選択することが容易にできる。例えば、取り出し配線を少ない本数で構成することで、安価な配線が可能であるという利点がある。
【００５５】
（第１の実施の形態その２）
図５は、本発明の第１の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、マイクロプレート形状の培養容器を例にして示した断面図である。基本的には、その１と同様であるが、図５では、左側の２つの収容部１６２のみが示されており、さらに複数の収容部が右側及び奥側に設けられていても良い。図５に示すように、電極付き細胞試験用容器１５１は、例えば、それぞれの収容部１６２の底面に穴Ｈが形成され、収容部１６２を形成する外周側壁１６１ｃが設けられて、穴あきプレート１６１が形成されている。穴あきプレート１６１の外周は、例えば、蓋を嵌め込むための窪み１６１ｂと、それに続く最外周の部分１６１ｅとを有している。この外周部分を、冶具で保持するようにしても良い。
【００５６】
穴空きプレート１６１の収容部１６２に形成された穴Ｈを裏面から塞ぐように、穴Ｈよりも外周側の作用電極１６５と穴空きプレート１６１の底面との間に配置された接着材１６７により接着され、底面基材１６３と作用電極１６５との積層構造（１６３／１６５）を有している。この積層構造（１６３／１６５）の基板Ｓは、図２に示すような、細胞接着性領域と、エポキシシラン層５ａ／ポリエチレングリコール層７ａからなる層として示したマスク１６９を形成した細胞非接着性領域とが連続した表面構造を有している。
【００５７】
ここで、接着材１６７のさらに外周側に設けられ、作用電極１６５と電気的に接続する位置から、少なくとも上記積層構造を有する基板Ｓの外側まで引き出された、取り出し配線１７１が設けられている。ここでは、取り出し配線１７１は、基板Ｓの端部から垂直方向に立ち上がる外周側壁１６１ｃの露出面を形成する底面１６１ｄを這うように外部接続プローブ１３１の先端側を裏面側から当てることができる領域にまで引き出されている。取り出し配線１７１は、作用電極１６５に電気的に接続されていれば良く、底面１６１ｄに接着材などで固定されていても良く、或いは、底板１６１ｄの下面と積層構造を有する基板Ｓの上面との間に形成されているスペース内に配置されて面接触により半固定されていても良い。隣接する収容部１６２は、この容器を設置する基板Ｓに設けられた図示しない配線等により接続されていても良い。
【００５８】
このように、取り出し配線１７１が、細胞試験用容器１５１の外枠を形成する外周側壁１６１ｃの外周面よりは内側であって、積層構造を有する基板Ｓにより形成される底面基材１６３の外壁よりは外周側まで伸ばされて配置されていることにより、細胞試験用容器１５１の下方側から垂直方向に接触可能となっている。
【００５９】
この場合にも、取り出し配線１７１の厚みは、接着材１６７の高さ以下であり、例えば１ｍｍ以下であることが好ましい。又、取り出し配線１７１は、引き回しの自由度が高いことから、例えばＦＰＣにより形成されていても良い。また、取り出し配線１７１が、細胞試験容器の底面１６１ｄとの間で接着材により接着されていても良い。さらに、作用電極１６５と取り出し配線１７１との間に電気的接続用の部材として、ＡＣＦを利用することもできる。その他、接着用に、一般的な、はんだ、導電接着剤を用いても良い。
【００６０】
さらに、作用電極１６５と対向する対向電極１８１が設けられている。図５においては、２点鎖線で構造を省略して示している。
【００６１】
対向電極１８１は、例えば、図２（ｂ）のＰｔ電極３１のように、培養液２１内に挿入することにより形成するものでも良いし、例えば、図５に示す位置に、作用電極１６５と対向するように配置することができる。この場合、対向電極１８１としては、平板状の電極を配置し、側壁１６１ａにおいて、この平板状の対向電極１８１を固定するようにしても良い。
【００６２】
上記のような構造において、作用電極１６５と対向電極１８１との間に電圧を印加することで、マスク１６９を除去等して、細胞接着性に改変することができる。
【００６３】
なお、その１の図４（ｂ）と同様に、底面基材１６３上で作用電極を、絶縁部を介して電気的に独立した２つ以上の電極が形成されるようにパターニングすることで、一方の電極を作用電極１６５、もう一方の電極を対向電極１８１として利用することができる。３つ以上の電極を設ける場合には、その目的に応じて、作用電極や対向電極が２つ以上設けるようにしても良い。
【００６４】
尚、２つ以上の電極を設ける場合は、底面基材１６３上において接着材より外側の領域にまで、それぞれ独立した電極が引き出され、それぞれの電極に対して独立に取り出し配線１７１が設けられるようにしても良いし、取り出し配線１７１が複数の電極を含むように構成しても良い。
【００６５】
以上に説明したように、本実施の形態による細胞試験用容器では、標準的なサイズの細胞試験用容器において、その底面側であって底面側からの顕微鏡観察等を妨げない領域に、作用電極からの取り出し配線を設けることで、細胞の観察を妨げずに作用電極に電圧を印加することができる。
【００６６】
本実施の形態によれば、電圧印加によるＰＥＧの脱離を利用した、細胞パターンの可変技術に適した配線構造として、容器内に多数のウェルがあっても一様な条件で電圧を印加すれば良いため、ウェル数に依存せず電極の本数が数本程度までと少なくすることができる。
【００６７】
次に、本発明の第２の実施の形態について説明する。
（第２の実施の形態その１）
図６は、本発明の第２の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、３５ｍｍ径のディッシュ形状の培養容器を例にして示した断面図である。上面図は、基本的に、図４（ａ）と同様であるため、図６では省略している。図６においては、図４（ａ）と同様の構成については、同じ符号を付してその詳細な説明は省略する。
【００６８】
図６に示すように、電極付き細胞試験用容器１０１においては、接着材１１９のさらに外周側に設けられ、作用電極１１５と電気的に接続する位置から、少なくとも上記積層構造を有する基板Ｓの外側−底板１１１ｂの裏面側−側壁１１１ａの側部内面側−側壁１１１ａの底面までにかけて引き出した取り出し配線１２１が設けられている。さらに、側壁１１１ａの外周面にまで延ばされていても良い。ここで、取り出し配線１２１は、側壁１１１ａの内面側に、例えば、インモールド成形によって容器内に埋め込む構造を有している。すなわち、作用電極１１５との接続部以外は、容器内に埋め込まれている形態が好ましい。
【００６９】
このように、取り出し配線１２１が、積層構造を有する基板Ｓにより形成される底面基材１１３の外壁よりは外周側から細胞試験用容器１０１の外枠を形成する側壁１１１ａまで伸ばされて配置されていることにより、細胞試験用容器下方側から垂直方向に接触可能となっている。
【００７０】
従って、作用電極１１５に対して電圧を印加する際に、作用電極を含む底面基材の外壁よりは外周側において、電圧印加用の外部接続プローブ１３１を下方又は外側から当てることができる領域が十分に確保されている。加えて、細胞試験容器内容物への電気印加や電気計測を行うために、細胞試験容器に電極が形成しても、通常の容器と同様の装置、例えば顕微鏡により下方から容器内を観察する際に、観察に必要な領域である底面基材１１３の外壁よりは内周側に取り出し配線１２１が形成されないため、基板Ｓ上の細胞の観察が阻害されず、かつ、細胞試験容器１０１のサイズを標準的なサイズから変更せずに、取り出しのための配線（電極）を設置することができる。
【００７１】
また、取り出し配線１２１は、側壁１１１ａの内面側に、例えば、インモールド成形によって容器内に埋め込む構造であるため、容器の外形が定型から変化しないという利点がある。
【００７２】
尚、図６では、取り出し配線１２１は、容器の表面に形成した例を示したが、取り出し配線１２１の少なくとも一部が、インモールド成形等により、側壁１１１ａ内面、底面１１１ｂ上面に入り込んで形成されていても良い。
【００７３】
尚、作用電極１１５との接続部分における取り出し配線１２１の厚みは、接着材１１９の高さ以下であり、例えば１ｍｍ以下であることが好ましい。
【００７４】
また、取り出し配線１２１が、細胞試験容器の底面１１１ｂとの間で接着材により接着されていても良い。さらに、作用電極１１５と取り出し配線１２１との間に電気的接続用の部材として、ＡＣＦを利用することもできる。その他、接着用に、一般的な、はんだ、導電接着剤を用いても良い。
【００７５】
また、作用電極１１５と接する取り出し配線１２１がバネ構造により弾性的に接触していても良い。
【００７６】
尚、取り出し配線１２１は、引き回しの自由度が高いことから、例えば、薄いＦＰＣにより形成されていても良い。
【００７７】
本実施の形態によれば、取り出し配線１２１が、積層構造を有する基板Ｓにより形成される底面基材１１３の外壁よりは外周側から細胞試験用容器１０１の外枠を形成する側壁１１１ａまで伸ばされて配置されていることにより、下方に露出面を広くとることができ、細胞試験用容器下方側から垂直方向に接触することがより簡単になっている。また、インモールド成形により取り出し配線１２１を形成しているため、取り出し配線１２１を容器と一体化することができ、容器を定型のサイズに保持するとともに、精度良く取り出し配線構造を形成することができる。
【００７８】
（第２の実施の形態その２）
図７は、本発明の第２の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、マイクロプレート形状の培養容器を例にして示した断面図である。上面図は、基本的に、図５と同様であるため、省略している。図７においては、図５と同様の構成については、同じ符号を付してその詳細な説明は省略する。
【００７９】
また、取り出し配線１７１の基本的な構造は、図６の第２の実施の形態（その１）と同様であり、作用電極１６５との接続分部以外は、容器にインモールド成形により形成しているが、取り出し配線１７１が、取り付け部１６１ｂの内面側、取り付け部１６１ｂに形成された貫通孔ｈを通って外周面にまで延びている。この構造では、外部接続用プローブ１３１を、電極付き細胞試験用容器１５１Ａの最外周を構成する取り付け部１６１ｂの外周面に形成された取り出し配線１７１に、その側面及び底面側のいずれからも接触させることができるため、接続の自由度が高まるという利点がある。
【００８０】
次に、本発明の第３の実施の形態について説明する。
（第３の実施の形態その１）
図８は、本発明の第３の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、３５ｍｍ径のディッシュ形状の培養容器を例として示した断面図である。上面図は、基本的に、図４（ａ）と同様であるため、省略している。図８においては、図４（ａ）と同様の構成については、同じ符号を付してその詳細な説明は省略する。
【００８１】
ここで、電極への電圧の印加・測定等の電気的処理は、必ずしも常時行われるものではなく、実験の初期段階のみで必要となる場合が多い。そこで、本実施の形態による電極付き細胞試験用容器では、取り出し配線を初期段階で用い、電気的処理が終了した後は、取り出し配線が不要になる場合も多い。
【００８２】
図８に示す電極付き細胞試験容器１０１は、基本的には、図４（ａ）と同様であるが、図８に示す取り出し配線１２１ａでは、電極付き細胞試験用容器１０１の最外周をなす側壁１１１ａよりも外側まで引き出されている点に特徴がある。取り出し配線１２１ａは、導電性のテープなどによりフレキシブルな材料とすると、取り扱いが容易になる。配線の厚みは、１ｍｍ以下であることが好ましい。このように、可撓性（可とう性、かとうせい）のある材料としては、導電性テープなどがある。
【００８３】
このような構成では、引き出された先などで、クリップ止めなどを行うことが容易である。そして、電圧印加処理を行った後には、カッターなどにより取り出し配線１２１ａの一部又は全部を切断することができる。切断を容易にするために、少なくとも１つの切断されやすい易切断部分Ｃ１〜Ｃ３までのいずれかを取り出し配線１２１ａに予め形成しておくことで、引っ張るだけでも切断できるようにしても良い。易切断部分Ｃ１〜Ｃ３は、切り欠けを形成すること、その部分を細く形成することなど種々の周知手段で形成することができる。
【００８４】
（第３の実施の形態その２）
図９は、本発明の第３の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、マイクロプレート形状の培養容器を例にして示した断面図である。上面図は、基本的に、図５と同様であるため、省略している。図９においては、図５、図７と同様の構成については、同じ符号を付してその詳細な説明は省略する。
【００８５】
また、取り出し配線１７１ａの基本的な構造は、図８の第３の実施の形態（その１）と同様であるが、取り出し配線１７１ａでは、電極付き細胞試験用容器１５１Ａの取り付け部１６１ｂの内面側、取り付け部１６１ｂの例えば下端部に沿って外周面にまで延びている。この構造では、外部接続用プローブ１３１を、電極付き細胞試験用容器１５１Ａの最外周を構成する取り付け部１６１ｂの外周面に形成された取り出し配線１７１ａに、その側面及び底面側のいずれからも接触させることができるため、接続の自由度が高まる。
【００８６】
取り出し配線１７１ａは、導電性のテープなどによりフレキシブルな材料とすると、取り扱いが容易になる。配線の厚みは、１ｍｍ以下であることが好ましい。
【００８７】
このような構成では、引き出された先などで、クリップ止めなどを行うことが容易である。そして、電圧印加処理を行った後には、カッターなどにより取り出し配線１７１ａの一部又は全部を切断することができる。切断を容易にするために、引き込みＣ１〜Ｃ３までのいずれかを取り出し配線１７１ａに予め形成しておくことで、引っ張るだけでも切断できるようにしても良い。
【００８８】
次に、本発明の第４の実施の形態について説明する。
（第４の実施の形態その１）
図１０は、本発明の第４の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、３５ｍｍ径のディッシュ形状の培養容器を例として示した断面図である。図１１は、基本的に図４（ａ）と同様であるため、図４（ａ）と同様の構成については、同じ符号を付してその詳細な説明は省略する。
【００８９】
本実施の形態においては、電極付き細胞試験用容器１０１の取り出し配線１２１が、底面基材１１３と作用電極１１５とからなる積層構造を有する基板Ｓの上面の一部（端部から接着材１１９までの間の一部）から一側面を沿って下面の一部まで断面コの字状に形成されている点を特徴とする。すなわち、取り出し配線１２１が、接着材１１９より外周側において、作用電極１１５と、両面に電極を含んで互いに電気的に導通している。取り出し配線１２１は底面基材１１３を覆うように端面において折り返されている。標準サイズを維持するため、取出し配線１２１は、電極付き細胞試験用容器１０１の最下部よりも下側にはみ出さないように配置されることが好ましい。取り出し配線１２１は、導電性テープにより形成することができる。
【００９０】
上記構造により、外部接続プローブ１３１は、電極付き細胞試験用容器１０１の下方側から垂直方向に接触可能となっている。
【００９１】
本実施の形態によれば、電極付き細胞試験用容器１０１の下方側から外部接続プローブ１３１を当てることができるため、標準的なサイズの細胞試験用容器において、その底面側であって底面側からの顕微鏡観察等を妨げない領域に、作用電極からの取り出し配線を設けることで、観察を妨げずに作用電極に電圧を印加することが簡単にできる。さらに、取り出し配線１２１を、積層構造を有する基板Ｓの上面、側面及び下面に接するように設けているため、安定して取り付けることができる。
【００９２】
取り出し配線の構成は、任意性が高いため、コスト面で有利な配線方法を選択することが容易にできる。例えば、取り出し配線を少ない本数で構成することで、安価な配線が可能であるという利点がある。
【００９３】
（第４の実施の形態その２）その１と同様の修正
図１１（ａ）は、本発明の第４の実施の形態による電極付き細胞試験用容器であって、マイクロプレート形状の培養容器を例にして示した断面図である。上面図は、基本的に、図５等と同様であるため、省略している。図１１（ａ）においては、図５、図７と同様の構成については、同じ符号を付してその詳細な説明は省略する。
【００９４】
本実施の形態においては、図９等と同様に、電極付き細胞試験用容器１５１の取り出し配線１７１ｂが、底面基材１６３と作用電極１６５とからなる積層構造を有する基板Ｓの上面の一部（端部から接着材１６７までの間の一部）から一側面を沿って下面の一部まで断面コの字状に形成されている点を特徴とする。
【００９５】
上記構造により、外部接続プローブ１３１は、電極付き細胞試験用容器１５１の下方側から垂直方向に接触可能となっている。
【００９６】
図１１（ｂ）は、図１１（ａ）において、取り出し配線１７１ｃの上面側の一端が接着材１６７に接触していない構成である。このような構造であっても、図１１（ａ）と同様に、外部接続プローブ１３１は、電極付き細胞試験用容器１５１の下方側から垂直方向に接触可能であるため、標準的なサイズの細胞試験用容器において、その底面側であって底面側からの顕微鏡観察等を妨げない領域に、作用電極からの取り出し配線を設けることで、観察を妨げずに作用電極に電圧を印加することが簡単にできる。さらに、取り出し配線１７１ｂを、積層構造を有する基板Ｓの上面、側面及び下面に接するように設けているため、安定して取り付けることができる。
【００９７】
取り出し配線の構成は、任意性が高いため、コスト面で有利な配線方法を選択することが容易にできる。例えば、取り出し配線を少ない本数で構成することで、安価な配線が可能であるという利点がある。
【００９８】
以上に説明したように、本発明の上記の各実施の形態による電極付き細胞試験用容器においては、外部電源等から電圧を印加しやすいように透過型の観察が可能な試験具の側面又は背面に電極を引き出することで電圧の印加がしやすく、かつ、外部観察もしやすい構造を有する。
【００９９】
尚、細胞培養用底面基材としては、導電性領域と絶縁性領域とを形成可能な材料で形成されたものであれば特に制限されない。また、導電性領域を構成する導電性材料の膜として、金属膜または金属酸化物膜、金属微粒子や金属ナノファイバーが絶縁体に分散された膜、導電性の有機材料からなる膜などが挙げられる。透明な膜であることが好ましく、例えば、ＩＴＯ膜、ＩＺＯ膜、導電性高分子のポリエチレンジオキシチオフェン膜などが挙げられる。導電性材料の膜の厚さは、通常、単分子膜〜１００μｍ程度であり、好ましくは２ｎｍ〜１μｍ、より好ましくは５ｎｍ〜５００ｎｍである。
【０１００】
また、細胞接着阻害性領域は、好ましくは、炭素酸素結合を有する有機化合物により形成される親水性膜により形成される。当該親水性膜は、水溶性や水膨潤性を有する、炭素酸素結合を有する有機化合物を主原料とする薄膜であり、酸化される前は細胞接着阻害性を有し、酸化および／または分解された後は細胞接着性を有しているものであれば特に限定されない。
【０１０１】
細胞は、培養容器などの支持体表面に接着した状態で増殖する。使用する装置や処理条件などは、通常の単層培養法などに準じて行う。細胞が接着して増殖する支持体表面の材料として、ポリリシン、ポリエチレンイミン、コラーゲンおよびゼラチン等の細胞の接着や増殖が良好に行われる材料を選択したり、ガラスシャーレ、プラスチックシャーレ、スライドガラス、カバーガラス、プラスチックシートおよびプラスチックフィルム等の支持体表面に、細胞の接着や増殖が良好に行われる化学物質、いわゆる細胞接着因子を塗布したりしておくことも行われる。
【０１０２】
上記の実施の形態において、添付図面に図示されている構成等については、これらに限定されるものではなく、本発明の効果を発揮する範囲内で適宜変更することが可能である。その他、本発明の目的の範囲を逸脱しない限りにおいて適宜変更して実施することが可能である。上記細胞観察方法をコンピュータに実行させるためのプログラム、当該プログラムを記録するコンピュータ読み取り可能な記録媒体であっても良い。
【産業上の利用可能性】
【０１０３】
本発明は、電極付き細胞試験用容器として利用可能である。
【符号の説明】
【０１０４】
ＡＲ１…細胞接着性領域、ＡＲ２…細胞非接着性領域、Ｃ１〜Ｃ３…切り込み線、Ｈ…円形の穴、Ｓ…積層構造を有する基板、１…ガラス基板、３…ＩＴＯ層、５…エポキシシラン層、７…ポリエチレングリコール層、１１…フォトレジストマスク、２１…細胞培養液、１０１…電極付き細胞試験用容器、１１１ａ…側壁、１１１ｂ…底板、１１１…穴空きのディッシュ、１１３…底面基材、１１５…作用電極、１１７…マスク、１１９…接着材、１３１…外部接続プローブ、１４１…対向電極、１５１…電極付き細胞試験用容器、１６１…穴あきプレート、１６１ａ…側壁、１６１ｂ…取り付け部、１６１ｃ…外周側壁、１６２…収容部、１６５…作用電極、１６７…接着材、１６９…マスク、１７１ａ…取り出し配線、１８１…対向電極。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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