(57)【要約】【課題】ツルレイシに含まれる有効成分の抽出の効率化を図り、有効成分の量及び質の向上を図ることのできる育毛剤を提供すること。【解決手段】ツルレイシ（momorudica charantia）を着蕾させずに育成し、当該ツルレイシの葉及び茎のみを採取して原料とする。採取された原料の粒径がナノサイズ（１μｍ未満）となるように粉末化し、当該粉末から抽出された成分を育毛剤に含有させたこと。着蕾させずに育成することによってツルレイシの葉及び茎に成分を集約させることができ、且つナノサイズの原料から成分を抽出することによって、優れた効果を得ることとした。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ツルレイシの葉及び茎のみから抽出される抽出物を含有する育毛剤。
【請求項２】
請求項１に記載の育毛剤であって、
前記ツルレイシは、着蕾させずに育成されたものである
育毛剤。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載の育毛剤であって、
アントシアニン、アミノ酸又はミネラルを少なくとも含有する
育毛剤。
【請求項４】
請求項１乃至請求項３のいずれかに記載の育毛剤であって、
前記抽出物の乾燥重量は、前記育毛剤の重量の０．０００１％以上３０％以下である
育毛剤。
【請求項５】
請求項１乃至請求項４のいずれかに記載の前記育毛剤を含有してなる毛髪用化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ツルレイシから抽出された成分を含有する育毛剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、毛髪の成長促進及び脱毛予防に対する意識の高まりから、育毛剤の需要者層が拡大している。需要者の中には、育毛剤の成分の安全性や快適な使用感を得るために天然成分由来の育毛剤を選択する者も多く、このような成分を配合した育毛剤も多種販売されている。特許文献１には、ツルレイシを熱水に浸して得られる熱水抽出液を含有させた育毛剤が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００３−１７６２１３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
一般に、天然物から抽出できる有効成分はわずかであるため、抽出量を増やすためには、原料の量を増やしたり、抽出を効率良く行ったりする必要がある。引用文献１には原料となるツルレイシから溶媒抽出によって有効成分の抽出を行うことが記載されているが、抽出される有効成分の量及び質の向上を図る点においては不十分である。
【０００５】
本発明は、ツルレイシに含まれる成分の抽出の効率化を図り、抽出物の量及び質の向上を図ることのできる育毛剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
即ち、本発明によれば、第１の育毛剤として、ツルレイシの葉及び茎のみから抽出される抽出物を含有する育毛剤が得られる。
【０００７】
また、本発明によれば、第２の育毛剤として、第１の育毛剤であって、前記ツルレイシは、着蕾させずに育成されたものである育毛剤が得られる。
【０００８】
また、本発明によれば、第３の育毛剤として、第１又は第２の育毛剤であって、アントシアニン、アミノ酸又はミネラルを少なくとも含有する育毛剤が得られる。
【０００９】
また、本発明によれば、第４の育毛剤として、第１乃至第３のいずれかの育毛剤であって、前記抽出物の乾燥重量は、前記育毛剤の重量の０．０００１％以上３０％以下である育毛剤が得られる。
【００１０】
また、本発明によれば、第１乃至第４のいずれかの育毛剤を含有してなる毛髪用化粧料が得られる。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、ツルレイシ（momordica charantia）の成分のうち、特に葉及び茎に豊富に含まれる、モモルディシン（momordicin）、チャランチン（charantin）及びコロソリン酸等の成分を育毛剤に含有させたことから使用者の頭皮全体の血行を促進することができ、毛包の休眠状態の解除を促して発毛の促進を図ることができる。特に、ツルレイシの着蕾（蕾がつくこと）を防止して育成することにより、本来であれば花・実を形成するために消費されるはずの栄養成分が茎及び葉に集約され、育毛剤の原料の質をより高めることができる。更に、活動中の毛包細胞周辺の血行を促進できることから、脱毛の予防をも図ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本発明の実施の形態による育毛剤の製造工程の一例を示すフロー図である。
【図２】本発明の実施例の結果を示すグラフ図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、図１を参照して、本実施の形態による育毛剤の製造工程を説明する。本実施の形態による育毛剤は、ツルレイシ（momordica charantia）の葉及び茎のみから抽出される抽出物を含有している。抽出物の主成分は、モモルディシン（momordicin）、チャランチン（charantin）及びコロソリン酸であるが、他の成分が入っていても良い。原料となるツルレイシの葉及び茎は、着蕾させずに育成されたツルレイシから採取されたものである。着蕾を防ぐ方法としては、育成中のツルレイシから蕾を摘み取ること（摘蕾処理）の他、植物ホルモンの投与や温度管理によって出蕾し難い環境で育成してもよい。これにより、ツルレイシの栄養成分を葉及び茎に集約させることができる。なお、より多くの栄養成分を葉及び茎に集約させるために、摘蕾処理は、出蕾した後できるだけ早く行うことが好ましく、出蕾した全ての蕾に対して行うことが好ましい。特に、出蕾した蕾の長直径が１ｃｍに達する前に摘蕾処理を行うことが好ましい。
【００１４】
このようにして育成されたツルレイシは、葉及び茎の部分のみを採取され本実施の形態による育毛剤の原料とされる（採取工程）。採取する葉及び茎の割合は１：１としてもよいし、生育度合いに応じて割合を変更してもよい。原料から抽出物を得る方法としては、ローラーや遠心分離機等で原料を潰すことにより抽出物を得る圧搾法、粉砕された原料に水蒸気を通してその熱により抽出物を放出させて回収する水蒸気蒸留法、及び所定の溶媒に溶出させて抽出物を得る溶媒抽出法を適宜用いることができる。抽出物が熱によって分解されてしまうことを防ぐ観点からは、圧搾法や溶媒抽出法が好ましく、圧搾による負荷を低減するためには溶媒抽出法が最も好ましい。
【００１５】
採取された葉及び茎は、適当な大きさに切断された後、粉砕機により粉砕される（粉砕工程）。なお、原料を乾燥させてから粉砕することとしてもよい。粉砕機としては、各種ミル、乳鉢、ホモジナイザー及び超音波処理等のように物理的に粉砕する装置を用いてもよいし、セルラーゼ又はペクチナーゼ等の細胞壁を分解する酵素を使用して化学的に粉砕してもよい。凍結粉砕法により粉砕することとすれば、粉砕過程での成分の流出を最低限とすることができる。
【００１６】
粉砕工程を経た原料は、数μｍ〜数百μｍの粒径を有しているが、本実施の形態においては、粒径が数ｎｍ〜数百ｎｍの大きさになるまで更に微細化される（ナノ化工程）。これにより、原料の表面積を最大化し抽出量を増加させることができる。また、上述したツルレイシ成分の密集化を防止することが可能となるから、頭皮への浸透率を上げることができる。ナノ化工程は、超高圧湿式微粒化法、超音速液滴衝突法、レーザーアブレーション法等を使用することができるが、方法はこれに限定されない。
【００１７】
次に、ナノ化工程を経た原料を適当な溶媒に浸漬させる（浸漬工程）。溶媒としては、水や各種有機溶媒を用いることができる。使用される水は、塩類や残留塩素等の不純物が除去された状態のものが良い。例えば、蒸留水、ＲＯ水（逆浸透膜を通した水）、脱イオン水（イオン交換樹脂などにより金属イオン等を除去した水）等の純水であることが好ましい。有機溶媒の例としては、１価又は多価アルコール、エーテル、エステル、芳香族炭化水素等が挙げられる。取扱が容易であることや、入手が容易なことを考慮すると、エタノール、プロピレングリコール（ＰＧ）、ジプロピレングリコール（ＤＰＧ）、エチレングリコール（ＥＧ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、１，３−ブチレングリコール（ＢＧ）、グリセリン等が望ましい。特に、皮膚への低刺激性を考慮すると、有機溶媒の中では１，３−ブチレングリコールが特に好ましい。
【００１８】
溶媒として水を使用した場合には、溶液を１００℃に加熱することにより、抽出時間を短時間化することができる。有機溶媒を使用した場合には、溶媒の沸点等を考慮した上で加熱温度を決定すればよい。加熱中においては、溶液を撹拌することにより、より多くの成分を溶出させることができることから抽出物の回収率を向上させることもできる。撹拌には、回転翼式のミキサーや、加熱と共に撹拌を行うことのできるヒートプレート付きマグネティックスターラー等を用いることもできるが、加熱しながら撹拌棒等で撹拌してもよい。
【００１９】
次に、分離工程によって、抽出物及び溶媒を含む液体部分（以下、「抽出物含有溶液」と呼ぶ）と、葉及び茎の残渣部分とを分離する。分離の方法としては、濾過機によって自然濾過、加圧濾過、減圧濾過を行うこととしてもよいし、遠心分離機によって分離しても良い。なお、使用した溶媒をそのまま育毛剤の溶剤として使用しない場合には、抽出物含有溶液から溶媒を更に分液すればよい（溶媒分離工程）。溶媒分離工程の例としては、使用した溶媒が水の場合には緩やかに加熱して水分を蒸発等させればよいし、使用した溶媒が有機溶媒の場合は当該溶媒のみが溶解することのできる別の溶媒によって分液すればよい。
【００２０】
なお、育毛剤の生産量等に応じて、上記浸漬工程及び分離工程（溶媒分離工程）は、ソックスレー法、高速溶媒抽出法（ＡＳＥ法）、超音波抽出法、マイクロ波抽出法、高圧液体抽出法（ＰＬＥ法）、超臨界流体抽出法（ＳＦＥ法）等を行う装置を用いることとしても良い。
【００２１】
抽出物含有溶液には、他の成分を含めることとしても良い。例えば、ポリフェノール類、アミノ酸又はミネラル等を添加することができる（添加工程）。添加されるポリフェノール類としては、頭皮の殺菌や抗菌等の観点からフラボノイド系（カテキン、アントシアニン、タンニン、ルチン、イソフラボン）が良く、皮脂の抗酸化作用を有するアントシアニン類が特に好ましい。アントシアニン類のうち、黒、栗色、黄色、金色やそれに近い色を呈する物質（例えば、シアニジン−３−グルコシド、デルフィニジン、シアニジン又はこれらのキレート錯体等）を含めることにより、これらの色素を毛髪に取り入れることができ、いわゆる白髪染めと同様の機能を持たせることもできる。なお、アントシアニン類を天然物から抽出する場合は、当該天然物に対して上記ナノ化工程を施してアントシアニンを抽出することとしてもよい。また、必要に応じて、アントシアニンを抽出する天然物（例えば草花等）と、上記ツルレイシとを混合した後に粉砕してナノ化工程を行い、ツルレイシの成分と、アントシアニン類を同時に抽出することとしてもよい。添加されるアミノ酸は、必須アミノ酸のいずれでも構わないが、毛髪を構成するケラチンのアミノ酸構成割合を考慮すると、特にシスチン、グルタミン酸、アルギニン酸等が好ましい。添加されるミネラルとしては、ミネラルの主要元素であるナトリウム、マグネシウム、リン、硫黄、塩素、カリウム、カルシウムの他、髪の成長に特に関係のある亜鉛、銅、マンガン、ヨウ素等を添加してもよい。また、必要に応じて、他の植物由来エキス、海藻由来エキス、鉱物由来エキス、動物由来エキス、血行促進成分、毛母細胞を活性化させる成分、頭皮を殺菌する成分、頭皮の脂質を除去する成分、頭皮の炎症を抑える成分、ビタミン類等の栄養補給成分、保湿成分、香料、防腐剤等を添加してもよい。
【００２２】
以上のようにして製造される溶液は、適当な溶剤と混合され、ツルレイシから抽出した抽出物の乾燥重量が育毛剤の重量の０．０００１％以上３０％以下となるように調整される（調整工程）。溶剤としては、上述した溶媒の水溶液等を用いることができる。なお、本実施の形態による育毛剤は液体のものであるが、例えば、ジェル状、クリーム状又は、ムース状としてもよい。また、育毛剤をエアロゾルやミスト状態として使用可能な容器に入れてもよい。
【００２３】
シャンプー等の毛髪用化粧料に上記育毛剤を含有させることとしてもよい。毛髪用化粧料としては、上記シャンプー及び石鹸等の毛髪洗浄剤や、リンス、コンディショナー、トリートメント、ヘアパック及びヘアローション等の毛髪ケア用品に含めても良い。更には、染毛剤、ブリーチ剤及びパーマネントウェーブ剤等に含めることによって、髪に加わる負担を軽減してもよい。
【実施例】
【００２４】
以下、本発明の実施例及び育毛効果の試験方法について説明する。なお、本発明は以下の実施例に限定されない。
【００２５】
（原料の採取）
以下の２種類のツルレイシから原料を採取した。
（１）摘蕾ツルレイシ
育成期間：発芽から５０日
育成方法：摘蕾処理（※）を行って育成
採取部位：葉及び茎のみ
※摘蕾処理：出蕾した全ての蕾に対して、その長径が１ｃｍに達する前に摘み取る処理
（２）対照ツルレイシ
育成期間：発芽から５０日
育成方法：摘蕾処理は行わずに育成
採取部位：葉、茎、果実（種子を除く）及び根部
【００２６】
（原料の粉末化）
上記各原料から下記の原料粉末を得た
（１）摘蕾ナノ原料粉末        粒径：１μｍ未満（平均粒径：５００ｎｍ）
（２）摘蕾マイクロ原料粉末    粒径：１００μ以上（平均粒径５００μｍ）
（３）対照ナノ原料粉末        粒径：１μｍ未満（平均粒径：５００ｎｍ）
（３）対照マイクロ原料粉末    粒径：１００μ以上（平均粒径５００μｍ）
摘蕾ナノ原料粉末及び対照ナノ原料粉末は、それぞれ、摘蕾ツルレイシ及び対照ツルレイシから採取された原料をそれぞれナノ粒子製造装置（テクノガード社製）にてナノ化処理を施して得た。摘蕾マイクロ原料粉末及び対照マイクロ原料粉末は、摘蕾ツルレイシ及び対照ツルレイシから採取された原料をそれぞれミキサーで一次粉砕後、乾燥させた後にブレード式ミキサー（岩谷産業社製）で粉末化して得た。
【００２７】
（試料溶液の調製）
（１）摘蕾ナノ溶液の調製
摘蕾ナノ原料粉末５０ｇを精製水（日本薬局方）５００ｍＬに浸漬し、ヒートプレート付きマグネティックスターラーで撹拌しながら加熱し、１００℃にて３０分間沸騰させた。その後、１００００ｒｐｍで１５分間遠心分離し、上清みの部分を採取して抽出原液を得た。当該抽出原液５ｇにエタノール２０ｇを加え、更に上記精製水を加えて全量を５０ｇとして摘蕾ナノ溶液１を得た。また、抽出原液１５ｇにエタノール２０ｇを加え、更に上記精製水を加えて全量を５０ｇとして摘蕾ナノ溶液２を得た。なお、５ｇの抽出物及び１５ｇの抽出物を８０℃の乾燥機によって水分をゆるやかに蒸発させたところ、得られた固形物の乾燥重量はそれぞれ０．５ｇ及び１．５ｇであった。即ち、摘蕾ナノ溶液１及び摘蕾ナノ溶液２に含まれる抽出原液の乾燥重量は、それぞれ１％及び３％である。
（２）摘蕾マイクロ溶液の調製
摘蕾マイクロ原料粉末に対しても同様の処理を施し、当該抽出原液５ｇにエタノール２０ｇを加え、更に上記精製水を加えて全量を５０ｇとして摘蕾マイクロ溶液１を得た。また、抽出原液１５ｇにエタノール２０ｇを加え、更に上記精製水を加えて全量を５０ｇとして摘蕾マイクロ溶液２を得た。なお、摘蕾ナノ溶液と同様に、摘蕾マイクロ溶液１及び摘蕾マイクロ溶液２に含まれる抽出物の乾燥重量もそれぞれ１％及び３％である。
（３）対照ナノ溶液の調製
対照ナノ原料粉末に対しても同様の処理を施し、当該抽出原液５ｇにエタノール２０ｇを加え、更に上記精製水を加えて全量を５０ｇとして対照ナノ溶液１を得た。また、抽出原液１５ｇにエタノール２０ｇを加え、更に上記精製水を加えて全量を５０ｇとして対照ナノ溶液２を得た。なお、摘蕾ナノ溶液と同様に、対照ナノ溶液１及び対照ナノ溶液２に含まれる抽出物の乾燥重量もそれぞれ１％及び３％である。
（４）対照マイクロ溶液の調製
対照マイクロ原料粉末に対しても同様の処理を施し、当該抽出原液５ｇにエタノール２０ｇを加え、更に上記精製水を加えて全量を５０ｇとして対照マイクロ溶液１を得た。また、抽出原液１５ｇにエタノール２０ｇを加え、更に上記精製水を加えて全量を５０ｇとして対照マイクロ溶液２を得た。なお、摘蕾ナノ溶液と同様に、対照マイクロ溶液１及び対照マイクロ溶液２に含まれる抽出物の乾燥重量もそれぞれ１％及び３％である。
（５）対照溶液１及び対照溶液２
エタノール２０ｇに精製水を加えて全量を５０ｇとしたものを対照溶液１とした。ミノキシジル３００μＭ溶液５０ｇを対照溶液２とした。
【００２８】
（試験方法）
特許文献１の試験方法を参考に、次の通りに行った。マウス（Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ  Ｃｒｊ系  １週齢）の背部から２ｃｍ×２ｃｍの皮膚を採取した。次に当該皮膚を２ｍｍ幅の短冊状に切り、リン酸緩衝生理食塩水（Phosphate Buffered Saline／ＰＢＳ：和光純薬社製）で洗浄した。洗浄された小片を細胞培養液（Dulbecco's Modified Eagle Medium／Ｄ−ＭＥＭ：和光純薬社製）に浸して４℃にて１６時間静置した。その後、ピンセットで各小片から真皮層のみを剥離し、得られた真皮層を解剖顕微鏡下にてハサミで細かく切断した。その後、細胞分散用コラゲナーゼ溶液（Collagenase：ＳＥＲＶＡ社製）と上記細胞培養液との混合溶液に浸漬し、３７℃で１時間処理をした。得られた溶液を低速（１０００ｒｐｍ）で５分間遠心分離して上清みを除去した後に、上述したリン酸緩衝生理食塩水を加えた。その後、ゆるやかにピペッティングして溶液を毛球と毛球周囲の真皮繊維芽細胞とを含む懸濁液とし、１５分間静置した。静置した溶液から真皮繊維芽細胞を含む上清みを除去した。この「ピペッティング→沈殿→上清みの除去」の操作を３回繰り返すことによって、毛球のみ単離した。
【００２９】
得られた毛球を細胞レベルで分散させるためにトリプシンＥＤＴＡ溶液（0.05w/v％
trypsin-1mmol/l EDTA・4Na溶液：和光純薬社製）に浸して３７℃にて１５分間処理をした。得られた溶液を低速（１０００ｒｐｍ）で５分間遠心分離した。上清みを除去して得られた溶液に上記細胞培養液と抗生物質溶液（１％Penicillin-Streptomycin溶液：和光純薬社製）とを追加した。このようにして得られた溶液を９６マイクロウェルプレート（コスモ・バイオ社製）の各ウェルに１００μＬ播種し、炭酸ガスインキュベーター（アステック社製）内で５％ＣＯ２の下、３７℃にてインキュベートした。
【００３０】
２４時間後、各ウェルから細胞培養液を除去し、培養細胞をＭＣＤＢ１５３培地で洗浄した。各ウェルに対して、上記調整した試料溶液を１００μＬずつ入れた。当該マイクロウェルプレートを上記炭酸ガスインキュベーター内で５％ＣＯ２の下、３７℃にてインキュベートした。４日後、各ウェルにCell Counting Kit-8（同仁化学研究所社製）を１０μＬずつ入れて３時間呈色反応をさせた。その後、マイクロプレートリーダ（SpectraMax M2：モレキュラーデバイス社製）を用いて吸光度（測定波長：４５０ｎｍ）を測定し、細胞数を評価した。評価は、対照溶液１における細胞増殖度との比率を百分率で算出することにより行った。なお、各溶液の細胞増殖度は、平均値±標準偏差（ｎ＝５）として算出した。
【００３１】
（結果）
結果を表１に示す。原料別にみると、対照ツルレイシを原料に用いた試料溶液（対照マイクロ溶液１、２及び対照ナノ溶液１、２）よりも、摘蕾ツルレイシを原料に用いた試料溶液の方が細胞増殖度が高く、このことから、着蕾させずに育成したツルレイシの成分を含有する育毛剤の方が育毛剤としての効果が高いことがわかる。また、摘蕾マイクロ原料粉末及び対照マイクロ原料粉末を用いた試料溶液の方が、それぞれ、摘蕾ナノ原料粉末及び対照ナノ原料粉末を用いた試料溶液よりも細胞増殖度が高い。即ち、原料粉末の粒径をナノサイズ（１μｍ未満）とする方が高い効果を得られることがわかる。
【００３２】
【表１】
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【００３３】
以上より、葉及び茎の部分に成分を集約させたツルレイシ（摘蕾ツルレイシ）から抽出される成分を含有する育毛剤は、優れた育毛効果を発揮することがわかる。また、ナノ化されたツルレイシから成分を抽出することによって優れた育毛効果を発揮することができる。更に、これらの条件を共に備えて抽出された成分を含有する育毛剤が最も育毛効果に優れているといえる。
【図１】
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【図２】
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