(57)【要約】【課題】  優れたＤＮＡ損傷抑制剤を提供すること。【解決手段】  シダ目シシガシラ科（Ｂｌｅｃｈｎａｃｅａｅ）ヒリュウシダ属（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ）植物の抽出物を有効成分とするＤＮＡ損傷抑制剤；好適には、前記ヒリュウシダ属植物が、ブレクナム・ディスカラー（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ  ｄｉｓｃｏｌｏｒ）である。好適には、前記植物抽出物が、アルコール類又は含水アルコール類で抽出されたものである。好適には、前記植物抽出物が、前記アルコール類抽出物及び／又は含水アルコール類抽出物から回収された水溶性画分である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
シダ目シシガシラ科（Ｂｌｅｃｈｎａｃｅａｅ）ヒリュウシダ属（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ）植物の抽出物を有効成分とするＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項２】
前記ヒリュウシダ属植物が、ブレクナム・ディスカラー（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ  ｄｉｓｃｏｌｏｒ）である請求項１記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項３】
前記植物抽出物が、アルコール類又は含水アルコール類で抽出されたものである請求項１又は２記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項４】
前記植物抽出物が、前記アルコール類抽出物及び／又は含水アルコール類抽出物から回収された水溶性画分である請求項３記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＤＮＡ損傷抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、皮膚のＤＮＡ損傷について研究が進められており、このＤＮＡ損傷の原因として、細胞内に起因するものと環境に由来するものとに大別されている。
細胞内に起因するものとして、正常な代謝に伴って副生する活性酸素及び細胞内ｐＨ変動が挙げられる。また、環境に由来するものとして、紫外線；Ｘ線，γ線等、波長の短い電磁波；多環芳香族化合物（１−ニトロピレンなど）；アスベスト；ＤＮＡ架橋剤（ソラーレンなど）；癌の化学療法あるいは放射線療法；食物やタバコの煙、汚染大気中などに含まれる変異原性物質等が挙げられる。
【０００３】
このうち、人体の最表面を構成する皮膚のＤＮＡ損傷においては紫外線や電磁波が主な原因と考えられており、紫外線や電磁波に曝露された皮膚では、ＤＮＡ分子が直接紫外線や電磁波のエネルギーを吸収することで、ＤＮＡ損傷が引き起こされる。そして、紫外線等の外部刺激により表皮細胞や線維芽細胞のＤＮＡに損傷が生じると、アポトーシスの誘導や細胞周期の停止が起こり、ダメージを受けた皮膚組織の代謝や再生能力が低下するため、皮膚の老化が促進しやすくなることが知られている。また、ＤＮＡダメージ修復の遅延やＤＮＡの不完全な修復が生じると、細胞老化が促進することも知られている。
また、多環芳香族化合物、アスベスト、ＤＮＡ架橋剤などの化学物質は、詳細なメカニズムは解明されていないが、ＤＮＡ二重鎖切断等のＤＮＡ損傷を引き起こすことも知られている。
【０００４】
そして、ＤＮＡ損傷が修復されず、より深刻な場合には、光老化、免疫抑制、皮膚良性及び悪性腫瘍などの様々な皮膚傷害が生じることが知られている。実際に、ヒトの遺伝病である色素性乾皮症の患者は、紫外線によるＤＮＡ損傷を修復する機構に異常があるため、皮膚がんを非常に起こしやすいことが報告されている。
【０００５】
従って、ＤＮＡ損傷を抑制することは、皮膚組織の恒常性維持、皮膚の老化に伴って起こる変化（例えば、しわ、くすみ、きめの消失、弾力性の低下等）や皮膚傷害の予防のために非常に重要である。このため様々なＤＮＡ損傷抑制物質の探索が行われている。
【０００６】
例えば、特許文献１には、アスパラチンを有効成分として含有する８−ヒドロキシデオオキシグアノシン（８−ＯＨｄＧ）生成抑制剤が開示されている。しかしながら、これはＤＮＡを構成する核酸の一つのグアノシンが酸化されやすい性質を指標にしているに過ぎず、アスパラチンがより深刻なＤＮＡ損傷に対しても抑制作用を有するかは不明である。
ここで、ＤＮＡ損傷には、酸化修飾や脱アミノ化、チミジン２量体の形成、一本鎖切断、二重鎖切断等の様々な形態がある。これらのなかでも二重らせん構造を構成するＤＮＡ二重鎖が同時に切断されるいわゆる二重鎖切断は、修復するための鋳型を持たないことからより深刻な損傷であるといえる。
このように、ＤＮＡ損傷抑制の中でもＤＮＡ二重鎖切断を防止できる又は修復できる化合物がＤＮＡ損傷抑制物質として望ましく、このような化合物が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００９−２６３２４３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
よって、本発明は、斯かる実状に鑑み、優れたＤＮＡ損傷抑制剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
そこで、本発明者らは、鋭意検討した結果、天然由来のため安全性が高いと考えられるシダ植物の抽出物が、ＤＮＡ二重鎖切断を防止又は修復し、それによってＤＮＡ損傷を抑制することを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、シダ目シシガシラ科（Ｂｌｅｃｈｎａｃｅａｅ）ヒリュウシダ属（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ）植物の抽出物を有効成分とするＤＮＡ損傷抑制剤を提供するものである。
【００１０】
前記ヒリュウシダ属植物が、ブレクナム・ディスカラー（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ ｄｉｓｃｏｌｏｒ）であるのが好適である。
前記植物抽出物が、アルコール類又は含水アルコール類で抽出されたものであるのが好適である。さらに、前記植物抽出物が、前記アルコール類抽出物及び／又は含水アルコール類抽出物から回収された水溶性画分であるのが好適である。
前記アルコール類の炭素数が、１〜４であるのが好適である。
前記アルコール類が、メタノール、エタノール、１，３−ブタンジオールから選ばれる１種又は２種以上のものであるのが好適である。
前記アルコール類の濃度が、２０体積％以上であるのが好適である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】抗γＨ２ＡＸ抗体染色画像を示す図である。左側のコントロールでは、γＨ２ＡＸ発現部位が赤色に染色した細胞が多く見られた。ブレクナム・ディスカラー抽出物を添加した右側の画像では、γＨ２ＡＸ抗体染色量が減少した青色の細胞が多く見られた。
【図２】γＨ２ＡＸ陽性細胞の割合を示す図である。左側がコントロール（無添加）のときの割合、右側がブレクナム・ディスカラー抽出物添加のときの割合である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本開示における植物とは、シダ目シシガシラ科（Ｂｌｅｃｈｎａｃｅａｅ）ヒリュウシダ属（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ）等のシダ植物が挙げられる。これに属するものとして、例えば、ブレクナム  カペンセ（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ  ｃａｐｅｎｓｅ）、ブレクナム・ディスカラー（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ  ｄｉｓｃｏｌｏｒ）などが挙げられる。このうち、ブレクナム・ディスカラー（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ  ｄｉｓｃｏｌｏｒ）が好ましい。
本開示における植物は、これらの群から１種又は２種以上を選ぶことができる。
【００１３】
前記シダ植物の使用する部位は、いずれの部位を用いてもよく、例えば、根、茎、幹、葉、胞子等から選ばれる１種又は２種以上のものを用いることができる。このうち、地上部分のものを用いるのが好ましく、葉及び／又は茎を用いるのがより好ましい。これらの部位は、乾燥、細切、圧搾、又は発酵などの適宜の処理を施したものを使用することができ、処理を施した後に、抽出を行ってもよい。
【００１４】
本開示のシダ植物抽出物は、シダ植物から抽出して得ることができるものである。
【００１５】
前記シダ植物の抽出方法は、特に限定されない。例えば、シダ植物の抽出方法の一例として、特開２００３−３２１３７７号公報等を挙げることが可能であるが、これに限定されるものではない。
抽出は、前記シダ植物を一定温度（低温、常温又は加温）下にて、所定期間、浸漬等にて抽出溶媒を用いて行えば良い。
前記抽出溶媒としては、特に限定されないが、例えば水；アルコール類；アセトン等のケトン類；エチルエーテル等のエーテル類；酢酸エチル等のエステル類等の一種又は二種以上を用いることができる。
前記アルコール類として、メタノール、エタノール等の低級１価アルコール；グリセリン、プロピレングリコール、ブタンジオール等の液状多価アルコール等が挙げられる。前記アルコール類は、１価アルコール類又は２価アルコール類（例えば、１，３−ブタンジオール、１，４−ブタンジオール等のブタンジオール等）が好ましく、アルコール類の炭素数は１〜５程度であるのが好ましい。
この溶媒のうち、水及び／又はアルコール類（好適には炭素数１〜４）が好ましい。前記アルコール類は、メタノール、エタノール、ブタンジオール（好適には１，３−ブタンジオール）から選ばれる１種又は２種以上のものが好ましい。
さらに、前記溶媒として、水及び／又はエタノールがより好ましく、エタノール及び水−エタノール混合溶液が好ましい。
また、アルコール類濃度（Ｖ／Ｖ）は、好ましくは２０体積％以上、より好ましくは４０体積％以上、さらに好ましくは７０〜１００体積％であるのが好適である。また、含水エタノールを用いる場合、エタノール濃度は７０〜９０体積％とするが好適である。
【００１６】
前記シダ植物の好ましい抽出方法の例としては、前記シダ植物をアルコール類濃度０〜１００体積％のアルコール類又は水−アルコール類混合液にて、室温（例えば５〜４０℃程度）で又は加温（４０℃以上）して０．５〜５日間抽出を行う方法が挙げられる。
前記アルコール類濃度は、好ましくは４０体積％以上、より好ましくは７０体積％以上である。前記抽出温度は、好ましくは６０℃以上、より好ましくは１００℃以下、さらに好ましくは７５℃〜９５℃である。水沸点に近い温度帯で有機溶媒抽出することによって、ＤＮＡ損傷抑制作用等の有効成分を効率良く抽出することが可能である。また、抽出期間を、０．５〜２日程度で行うことも可能である。
【００１７】
前記シダ植物抽出物のさらなる精製方法の例として、前記シダ植物粗抽出物を、アルコール類−水混合液又は水に混合した後、冷温（１〜１０℃程度）にて２日〜２週間静置して、沈殿した水不溶性画分（残渣）を除去して水溶性画分（上澄み液や濾過液など）を回収する方法が挙げられる。
このときのアルコール類の濃度は、好ましくは５０体積％以下であり、より好ましくは４０体積％以下、より３０体積％以下であり、さらに好ましくは２０体積％以下の低濃度とするのが好適である。前記抽出物から水溶性画分を回収することによって、ＤＮＡ損傷抑制作用等の有効成分を効率良く抽出することを可能とする。また、処理期間を、４〜９日程度にするのが、前記抽出物中の水不溶性画分（残渣）を除去しやすいので、好適である。
さらに、得られた水溶性画分から、活性炭等の濾過剤を用いて夾雑物や着色物等の不純物を除去した後、乾固して、シダ植物抽出精製物を得るのが、より生理活性向上の点で好ましい。
【００１８】
前記のシダ植物抽出物は、そのまま有効成分として用いてもよいし、適宜の期間そのまま放置し、熟成させた後に用いることもできる。必要に応じて、さらに、抽出溶媒の留去、濾過やイオン交換樹脂等による脱臭、脱色等の精製処理を施した後に用いることもできる。又、液体クロマトグラフィー等の分離手段を用いて、活性の高い画分のみを用いることもできる。
【００１９】
前記シダ植物抽出物は、抽出液単独で又は異なる抽出方法にて得られた抽出液を混合して、そのまま用いるか、又は当該抽出物を希釈、濃縮又は乾燥させて、液状、粉末状又はペースト状に調製してもちいることもできる。
【００２０】
ところで、ＤＮＡ損傷の詳細なメカニズムは未だ解明されていないが、上述のとおり、皮膚でのＤＮＡ損傷には「活性酸素」及び「紫外線や電磁波」が関与していると考えられている。この「活性酸素」を抑制するために抗酸化剤を使用することがある。しかし、一般的な抗酸化剤はＤＰＰＨラジカルスカベンジ反応やＥＳＲなど化学的手法を用いて評価されたものがほとんどである。
このため、生細胞に添加した場合には「活性酸素」やその他の生体成分との反応生成物が、細胞やＤＮＡを損傷するなど予期せぬ事態を引き起こすこともある（例えば、参考文献１：Biochemical Pharmacology,66,(2003),1769-1778、参考文献２：Food and Chemical Toxicology,49,(2011),955-962等参照）。参考文献１及び２には、茶に含まれる強力な抗酸化成分であるカテキンやエピガロカテキンガレードが、生体内に存在する銅（II）イオンや鉄（III）イオンと相互作用し、その反応生成物がＤＮＡ損傷を引き起こすことが示されている。
さらに、ＤＮＡ損傷は生細胞内で起きているという観点で考えた場合、被験物質が化学的な抗酸化作用をどの程度示すかの試験が、生細胞内のＤＮＡの損傷抑制を評価する際に有効な手法とは言い難いものがある。
これに対し、抗γＨ２ＡＸ抗体を用いるＤＮＡ損傷抑制試験は、生細胞を用いてＤＮＡ二重鎖切断が生じた箇所近傍のヒストンＨ２ＡＸタンパク質のリン酸化を特異的に検出する手法である。ＤＮＡ損傷の中でも最も深刻な二重鎖切断の抑制効果を観察及び定量的に判別できることから、より深刻な損傷に対して有効なＤＮＡ損傷抑制を評価する際に有効な手法と言える。
【００２１】
そして、後記実施例に示すように、抗γＨ２ＡＸ抗体を用いるＤＮＡ損傷抑制試験において、本開示のシダ植物抽出物がγＨ２ＡＸ発現を抑制する作用を有することが認められた。
従って、本開示のシダ植物抽出物は、ＤＮＡ損傷抑制作用、ＤＮＡ二重鎖切断抑制作用を有するため、前記シダ植物抽出物を含有させて有効成分とするＤＮＡ損傷抑制剤、ＤＮＡ二重鎖切断抑制剤等（以下、「ＤＮＡ損傷抑制剤等」とする。）として使用することが可能である。
また、本開示のシダ植物抽出物は、ヒトを含む動物に摂取、投与又は接触させて、ＤＮＡ損傷抑制及びＤＮＡ二重鎖切断抑制等を図るために、使用することができる物質である。例えば、本開示のシダ植物抽出物は、予防、改善若しくは治療、スキンケア及び美容等の目的で使用することができる。また、本開示のシダ植物抽出物は、ＤＮＡ損傷抑制剤、ＤＮＡ二重鎖切断抑制剤等の各種製剤に使用することができ、これら各種製剤を製造するために使用することが可能である。
従って、本開示のシダ植物抽出物は、ＤＮＡ損傷抑制、ＤＮＡ二重鎖切断抑制等のために、皮膚外用剤、化粧品、医薬品、医薬部外品、食品や機能性食品（例えば特定保健用食品等）等に配合することが可能であり、本開示のＤＮＡ損傷抑制剤等は、これら皮膚外用剤、化粧品、機能性食品（例えば、錠剤、清涼飲料等）等として有用である。
【００２２】
本開示のシダ植物抽出物は、特に皮膚外用剤、化粧品、医薬部外品に用いるのが好ましく、皮膚に塗布などに接触させる製剤が好適である。皮膚外用剤、化粧品として、例えば化粧水、乳液（水中油型等）、クリーム（油中水型等）、パック化粧料、リキッドファンデーション、軟膏剤、養毛剤等が挙げられる。
前記ＤＮＡ損傷抑制剤等の製剤中におけるシダ植物抽出物の含有量は、好ましくは０．００００１〜５質量％であり、より好ましくは０．０００１〜０．５質量％であり、さらに好ましくは０．００１〜０．０５質量％である。
【００２３】
なお、前記ＤＮＡ損傷抑制剤等には、本開示のシダ植物抽出物に、必要に応じて、任意の成分を組み合わせて使用してもよい。好ましい他の成分としては、薬学的に許容される成分であればよく、例えば、細胞賦活剤、抗酸化剤、保湿剤、紫外線防止剤、溶剤（水、アルコール類等）、油剤、界面活性剤、増粘剤、粉体、キレート剤、ｐＨ調整剤、乳化剤、安定化剤、着色剤、光沢剤、矯味剤、矯臭剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、希釈剤、浸透圧調整剤、香料等が挙げられ、これらを目的とする製剤に応じて配合すればよい。
また、前記ＤＮＡ損傷抑制剤等の形態は、特に限定されず、液状、ペースト状、ゲル状、固形状、粉末状等の何れの形態でもよい。
【実施例】
【００２４】
以下、実施例、試験例等を挙げ、本発明（本技術）をさらに具体的に説明するが、本発明（本技術）はこれら実施例等に何ら制約されるものではない。
【００２５】
＜製造例１：ブレクナム・ディスカラー抽出物の調製＞
シダ目シシガシラ科（Ｂｌｅｃｈｎａｃｅａｅ）ヒリュウシダ属（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ）ブレクナム・ディスカラー（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ  ｄｉｓｃｏｌｏｒ）の葉１００ｇを細切し、これに８０体積％エタノール２Ｌを加えて８５℃で加熱して１日間抽出を行った。抽出液を濾過後濃縮し、水とエタノールを添加して、エタノール濃度を２０体積％、全量を３００ｍLに調整した後に５℃に１週間静置し生じた沈殿を取り除いた。その後、活性炭を用いて濾過を行い、溶媒を留去して乾固し、固形分であるブレクナム・ディスカラー抽出物を得た。収量は３ｇであった。
【００２６】
＜試験例１：ＤＮＡ損傷抑制試験＞
ヒトメラノサイト（クラボウ社製）を増殖因子ＨＭＧＳ添加２５４培地（ライフテクノロジーズ社製）を用いてガラスボトムディッシュに１００００個／ｃｍ２の濃度で播種した。播種翌日に製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物を最終濃度１０μｇ／ｍＬになるように添加し、３７℃５％ＣＯ２存在下で１週間培養した。その後、ＨＡＮＫＳ液に交換した後、過酸化水素を最終濃度０．１ｍｍｏｌ／Ｌ、製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物を最終濃度１０μｇ／ｍＬになるように添加し、３７℃５％ＣＯ２存在下１時間培養してＤＮＡ損傷を誘導した。またブレクナム・ディスカラー抽出物を添加せずに同様のＤＮＡ損傷誘導を行った細胞をコントロールとした。
ＤＮＡ障害を誘導した細胞をＰＢＳで洗浄し４％パラホルムアルデヒド溶液で細胞の固定を行った。さらに０．１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００含有ＰＢＳ溶液で１５分処理した後、１次抗体として抗γＨ２ＡＸ抗体（Phospho-Histone H2AX,  Cell Signaling社製）を含有するＰＢＳ溶液を添加し４℃で１２時間反応させた。続いて結合しなかった１次抗体溶液をＰＢＳで洗浄除去し、２次抗体（Alexa Flour 546 Anti-rabbit IgG, Molecular Probes社製）を含有するＰＢＳにて室温で２時間処理した。
ＰＢＳで洗浄した後に封入剤（DAPI-Fluoromount-G, SouthernBiotech社製）で処理し蛍光顕微鏡下で細胞を観察した。染色画像を図１に示す。
【００２７】
細胞の核全体はＤＡＰＩにより青色に、γＨ２ＡＸ発現部位は赤色に染色されていた。
ブレクナム・ディスカラー添加下で培養した場合にはＤＮＡ損傷マーカーであるγＨ２ＡＸ抗体染色量が減少していたことから、ブレクナム・ディスカラー抽出物が細胞のＤＮＡ損傷を抑制していたことが示されている。
【００２８】
また、全細胞数及びγＨ２ＡＸ陽性細胞の数を計測し、全細胞数に対するγＨ２ＡＸ陽性細胞数の割合を図２に示した。
コントロールでは約４５％の細胞がγＨ２ＡＸ陽性つまりＤＮＡ損傷を生じていたが、ブレクナム・ディスカラー抽出物を添加した細胞ではＤＮＡ損傷の発生率は約６％に抑制されていた。
【００２９】
ＤＮＡ二重鎖切断が生じた場合は、切断された箇所近傍のヒストンＨ２ＡＸタンパク質の１３９番目のセリン残基がリン酸化されることがわかっている。リン酸化されたＨ２ＡＸタンパク質はγＨ２ＡＸタンパク質と呼ばれ、このγＨ２ＡＸタンパク質を抗γＨ２ＡＸ抗体で特異的に検出するＤＮＡ損傷抑制試験は、ＤＮＡ損傷の発生やその程度を評価する指標として用いられている。このＨ２ＡＸ抗体を用いるＤＮＡ損傷抑制試験は、８−ヒドロキシデオオキシグアノシン（８−ＯＨｄＧ）生成抑制等の抗酸化試験よりも、ＤＮＡ損傷抑制をみるうえで、より深刻な損傷に対して有効なＤＮＡ損傷抑制剤を評価する際に有効な手法と言える。
この抗γＨ２ＡＸ抗体で特異的に検出するＤＮＡ損傷抑制試験によって、本開示のシダ植物抽出物が、ＤＮＡ損傷抑制、特にＤＮＡ二重鎖切断防止又は修復に適していることが確認できた。
【００３０】
以下は、本開示のブレクナム・ディスカラー抽出物又は本開示のＤＮＡ損傷抑制剤を含有する化粧料又は皮膚外用剤の処方例である。なお、各実施例の全量は１００質量％である。
【００３１】
［実施例１：化粧水］
（製法）
Ａ．下記成分（１）〜（８）を混合溶解する。
Ｂ．下記成分（９）〜（１２）を混合溶解する。
Ｃ．ＡにＢを加え混合し、化粧水を得た。
【００３２】
（成分）                                                        （％）
（１）クエン酸                                                  ０．０５
（２）クエン酸ナトリウム                                        ０．２
（３）ピロリドンカルボン酸ナトリウム（５０％）水溶液            ０．５
（４）グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１
（５）グリセリン                                                ３．０
（６）１，３−ブチレングリコール                                ８．０
（７）精製水                                                    残量
（８）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                  ０．０００１
（９）エタノール                                              １０．０
（１０）香料                                                    適量
（１１）防腐剤                                                  適量
（１２）モノオレイン酸ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）
ソルビタン                                              ０．５
【００３３】
［実施例２：乳液（水中油型）］
（製法）
Ａ．下記成分（１）〜（１３）を加熱溶解し、７０℃に保つ。
Ｂ．下記成分（１４）〜（１９）を加熱溶解し、７０℃に保つ。
Ｃ．ＡにＢを加え乳化し、更に下記成分（２０）を加え混合する。
Ｄ．Ｃを冷却し、下記成分（２１）を加え混合し、乳液を得た。
【００３４】
（成分）                                                        （％）
（１）ステアリン酸                                              １．０
（２）セタノール                                                ０．５
（３）親油型モノステアリン酸グリセリン                          ０．５
（４）流動パラフィン                                            ２．０
（５）スクワラン                                                ３．０
（６）ホホバ油                                                  ３．０
（７）パルミチン酸セチル                                        ０．２
（８）パルミチン酸レチノール                                    ０．２
（９）酢酸トコフェロール                                        ０．０５
（１０）防腐剤                                                  適量
（１１）モノステアリン酸ソルビタン                              ０．３
（１２）モノオレイン酸ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）
ソルビタン                                              ０．５
（１３）ジブチルヒドロキシトルエン                              ０．１
（１４）トリエタノールアミン                                    ０．５
（１５）１，３−ブチレングリコール                            １５．０
（１６）グリセリン                                              ３．０
（１７）ポリエチレングリコール６０００                          ０．５
（１８）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                ０．００５
（１９）精製水                                                  残量
（２０）カルボキシビニルポリマー１％水溶液                      ８．０
（２１）香料                                                    適量
【００３５】
［実施例３：クリーム］
（製法）
Ａ．下記成分（１）〜（１４）を加熱溶解し、７０℃に保つ。
Ｂ．下記成分（１５）〜（１９）を加熱溶解し、７０℃に保つ。
Ｃ．ＡにＢを加え乳化し、更に下記成分（２０）を加え混合する。
Ｄ．Ｃを冷却し、下記成分（２１）、（２２）を加え混合し、クリームを得た。
【００３６】
（成分）                                                        （％）
（１）ステアリン酸                                              ２．５
（２）セタノール                                                ２．５
（３）親油型モノステアリン酸グリセリン                          ２．０
（４）ワセリン                                                  ２．０
（５）ジペンタエリトリット脂肪酸エステル                        ２．０
（６）ミリスチン酸イソトリデシル                                ５．０
（７）流動パラフィン                                            ８．０
（８）スクワラン                                                ５．０
（９）ミツロウ                                                  １．０
（１０）パルミチン酸セチル                                      ２．０
（１１）セスキオレイン酸ソルビタン                              ０．５
（１２）モノオレイン酸ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）
ソルビタン                                              １．５
（１３）コエンザイムＱ１０                                      ０．１
（１４）防腐剤                                                  適量
（１５）トリエタノールアミン                                    １．２
（１６）１，３−ブチレングリコール                              ８．０
（１７）グリセリン                                              ２．０
（１８）ポリエチレングリコール２００００                        ０．５
（１９）精製水                                                  残量
（２０）カルボキシビニルポリマー１％水溶液                    １０．０
（２１）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                ０．０５
（２２）香料                                                    適量
【００３７】
［実施例４：油中水型日焼け止めクリーム］
（製法）
Ａ．下記成分（１）〜（８）を７０℃で加熱混合した。
Ｂ．下記成分（９）〜（１２）及び（１４）〜（１５）を５０℃で加温混合した。
Ｃ．ＡにＢを加えて乳化し、冷却後（１３）を添加して油中水型日焼け止めクリームを得た。
【００３８】
（成分）                                                        （％）
（１）ポリオキシアルキレン変性オルガノポリシロキサン（注１）    ２．０
（２）パルミチン酸オクチル                                    １５．０
（３）デカメチルシクロペンタシロキサン                        ２０．０
（４）トリベヘン酸グリセリル                                    １．０
（５）微粒子酸化亜鉛                                          １２．０
（６）微粒子酸化チタン                                          ３．０
（７）パラメトキシケイ皮酸２−エチルヘキシル（注２）            ７．０
（８）４−ｔｅｒｔブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン        
（注３）                                                  １．０
（９）ジプロピレングリコール                                    ５．０
（１０）エタノール                                              ５．０
（１１）ポリエチレン末                                          ３．０
（１２）防腐剤                                                  適量
（１３）香料                                                    適量
（１４）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                ０．０００５
（１５）精製水                                                  残量
（注１）ＫＦ−６０１７（信越化学工業社製）
（注２）ユビナールＭＣ８０（ＢＡＳＦ社製）
（注３）ＰＡＲＳＯＬ  １７８９（Ｌ．Ｃ．ＵＮＩＴＥＤ社製）
【００３９】
［実施例５：パック化粧料］
（製法）
Ａ．下記成分（１）〜（５）及び（１５）を７０℃で加熱混合し、室温まで冷却する。
Ｂ．Ａに下記成分（６）〜（１４）を添加混合してパック化粧料を得た。
【００４０】
（成分）                                                        （％）
（１）ポリビニルアルコール                                    １５．０
（２）グリセリン                                              １０．０
（３）ポリオキシエチレン（１０）メチルグルコール                ３．０
（４）トリオクタン酸グリセリル                                  ５．０
（５）ポリオキシエチレンアルキルエーテルリン酸ナトリウム        １．０
（６）エタノール                                              ２０．０
（７）カオリン                                                  ２．０
（８）酸化チタン                                                ２．０
（９）グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１
（１０）乳酸（５０％水溶液）                                    ０．５
（１１）乳酸ナトリウム（５０％水溶液）                          ０．５
（１２）防腐剤                                                  適量
（１３）香料                                                    適量
（１４）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                ０．００１
（１５）精製水                                                  残量
【００４１】
［実施例６：リキッドファンデーション］
（製法）
Ａ．下記成分（１）〜（７）を７０℃で加熱混合し、この混合物に下記成分（１３）〜（１８）を加えて混合し７０℃に保つ。
Ｂ．下記成分（８）〜（１２）を７０℃で加熱混合する。
Ｃ．ＢにＡを加えて乳化し、冷却後、下記成分（１９）〜（２０）を添加してリキッドファンデーションを得た。
【００４２】
（成分）                                                        （％）
（１）ジペンタエリトリット脂肪酸エステル                        ２．０
（２）流動パラフィン                                            ５．０
（３）ステアリン酸                                              ２．０
（４）セタノール                                                １．０
（５）自己乳化型モノステアリン酸グリセリル                      １．０
（６）パラメトキシケイ皮酸２−エチルヘキシル                    ８．０
（７）防腐剤                                                    適量
（８）グリセリン                                                ５．０
（９）トリエタノールアミン                                      １．０
（１０）カルボキシメチルセルロース                              ０．２
（１１）ベントナイト                                            ０．５
（１２）精製水                                                  残量
（１３）酸化チタン                                              ６．０
（１４）微粒子酸化チタン                                        ２．０
（１５）微粒子酸化亜鉛                                          ４．０
（１６）マイカ                                                  ２．０
（１７）タルク                                                  ４．０
（１８）着色顔料                                                適量
（１９）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                ０．１
（２０）香料                                                    適量
【００４３】
[実施例７：軟膏剤]
（製法）
（製造方法）
Ａ．成分１〜３を加熱混合し、７５℃に保つ。
Ｂ．成分４〜９を混合し、７５℃に保つ。
Ｃ．ＡにＢを徐々に加え、軟膏剤を得た。
【００４４】
（成分）                                                        （％）
（１）ステアリン酸                                            １８．０
（２）セタノール                                                ４．０
（３）酢酸ｄｌ−α―トコフェロール（注４）                      ０．２
（４）トリエタノールアミン                                      ２．５
（５）グリセリン                                                ５．０
（６）グリチルリチン酸ジカリウム（注５）                        ０．５
（７）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                  １．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル                                  ０．１
（９）精製水                                                      残量
（注４）エーザイ社製
（注５）和光純薬工業社製
【００４５】
［実施例８：養毛剤］
（製造方法）
Ａ.成分１〜５を混合溶解する。
Ｂ.成分６〜１０を混合溶解する。
Ｃ.ＡとＢを混合して均一にし、養毛剤を得た。
（成分）                                                        （％）
（１）エタノール                                              ５０．０
（２）ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（８０Ｅ．Ｏ．）            ０．５
（３）メントール                                                ０．０１
（４）カンファ                                                  ０．００５
（５）フェノキシエタノール                                      ０．０５
（６）精製水                                                    残量
（７）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                  ０．０１
（８）オタネニンジン抽出物  注６                                ０．５
（９）パントテニルアルコール  注７                              ０．１
（１０）グリセリン                                              ５．０
（注６）  一丸ファルコス社製
（注７）  関東化学社製
【００４６】
以下、本開示のブレクナム・ディスカラー抽出物又は本開示のＤＮＡ損傷抑制剤を食品に配合する場合における配合例を示す。
【００４７】
[実施例９：錠剤]
（製法）
Ａ.成分１〜７を均一に混合し、常法に従って錠剤を得た。
【００４８】
（処方）                                                              （％）
（１）乳糖                                                          ２４．０
（２）結晶セルロース                                                ２０．０
（３）コーンスターチ                                                １５．０ 
（４）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                        ０．１
（５）デキストリン                                                    残量
（６）グリセリン脂肪酸エステル                                        ５．０
（７）二酸化ケイ素                                                    １．０
【００４９】
[実施例１０：清涼飲料]
（製法）
Ａ.成分１〜５を均一に混合し、常法に従って清涼飲料を得た。
【００５０】
（処方）
（１）果糖ブドウ糖液糖                                              ３０．０
（２）乳化剤                                                          ０．５
（３）製造例１のブレクナム・ディスカラー抽出物                        ０．００１
（４）香料                                                            適量
（５）精製水                                                          残量
【産業上の利用可能性】
【００５１】
本技術は、以下の構成を取ることも可能である。
〔１〕  シダ目シシガシラ科（Ｂｌｅｃｈｎａｃｅａｅ）ヒリュウシダ属（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ）植物の抽出物を有効成分とするＤＮＡ損傷抑制剤。
〔２〕  前記ヒリュウシダ属植物が、ブレクナム・ディスカラー（Ｂｌｅｃｈｎｕｍ  ｄｉｓｃｏｌｏｒ）である前記〔１〕記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
〔３〕  前記植物抽出物が、アルコール類又は含水アルコール類で抽出されたものである前記〔１〕又は〔２〕記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
〔４〕  前記アルコール類抽出物及び／又は含水アルコール類抽出物から回収された水溶性画分である前記〔３〕記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
〔５〕  前記〔３〕又は〔４〕記載のアルコール類が１価アルコール類及び／又は２価アルコール類であるのが好適である。
前記〔３〕又は〔４〕記載のアルコールの炭素数が、１〜４であるのが好適である。
前記〔３〕又は〔４〕記載のアルコール類が、メタノール、エタノール、１，３−ブタンジオールから選ばれる１種又は２種以上のものであるのが好適である。
前記〔３〕又は〔４〕記載のアルコール類の濃度が、２０体積％以上であるのが好適である。
【図１】
2013189388.tif 000002
【図２】
2013189388.tif 000003