(57)【要約】      （修正有）【課題】癌細胞に対する増殖抑制作用を有する化合物、及びこれを有効成分とする癌治療等に有効な医薬の提供。【解決手段】以下の式（２）で表されるマクロジオライド化合物及びこれを有効成分とする癌治療等に有効な医薬。2013189420.tif 000009【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（１）、
2013189420.tif 000006
で表されるマクロジオライド化合物を有効成分として含有することを特徴とする医薬。
【請求項２】
抗癌性を有する、請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
次の式（２）、
2013189420.tif 000007
で表されるマクロジオライド化合物。
【請求項４】
次の式（２）、
2013189420.tif 000008
で表されるマクロジオライド化合物を有効成分として含有することを特徴とする医薬。
【請求項５】
抗癌性を有する、請求項４に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、新規なマクロジオライド化合物及びこれを有効成分とする医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】  従来より、抗癌剤を用いる化学療法は外科的療法や放射線療法とともに癌の治療法として重要な位置を占め、種々の抗癌剤が提供されている。抗癌剤の中には、アドリアマイシン、マイトマイシン、ブレオマイシン、ビンクリスチン、ハラヴェン等の天然物に由来する抗癌剤が数多く知られている。しかしながら、これまでの抗癌剤は必ずしも満足のいかない治療成績の点や重篤な副作用の点で問題が残っているばかりか多剤耐性の問題などもあるため、更により優れた抗癌剤の出現が求められている。これまでにない新規な構造を有する化合物は新たな作用機構を示し、より有効で、より副作用の少ない薬剤となる可能性が高い。またその作用機構により、抗癌剤以外の医薬としての効果も期待できる。【０００３】  本発明のマクロジオライド化合物（１）は、固着サンゴ藻（ｃｒｕｓｔｏｓｅ  ｃｏｒａｌｌｉｎｅ  ａｌｇａｅ、以下ＣＣＡと記す。）の１種であるＨｙｄｒｏｌｉｔｈｏｎ  ｒｅｉｎｂｏｌｄｉｉから単離・構造決定され、六射サンゴの１種であるＬｅｐｔａｓｔｒｅａ  ｐｕｒｐｕｒｅａの幼生の着底・変態誘引作用を示すことが報告されている（非特許文献１−３）。しかし、マクロジオライド化合物（１）が癌細胞の増殖を抑制することはこれまでに報告されていない。この化合物と部分的に類似した構造を有する化合物はいくつか報告されており、細胞増殖阻害作用等の生物活性の報告例（非特許文献４−１６）もあるが、いずれも骨格構造は全く異なっている。本発明のマクロジオライド化合物（２）は、平面構造のみで表されたマクロジオライド化合物（１）の立体構造を決定したものであり、これまでに報告のない新規化合物である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，５０（２００９）６６０６−６６０９．
【非特許文献２】Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，８１（２００９）１０９３−１１１１．
【非特許文献３】Ｐｒｏｃ．Ｊｐｎ．Ａｃａｄ．，Ｓｅｒ．Ｂ，８６（２０１０）１９０−２０１．
【非特許文献４】Ｐｕｒｅ  ＆  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，５８（１９８６）２６３．
【非特許文献５】Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５１（１９８６）５３００．
【非特許文献６】Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ，７２（１９８９）２３７．
【非特許文献７】Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０８（１９８６）８４６．
【非特許文献８】Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０８（１９８６）８４７．
【非特許文献９】Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１５（１９９３）１１０２０．
【非特許文献１０】Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．，５３（１９９０）１５３３．
【非特許文献１１】Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５４（１９８９）１３６０．
【非特許文献１２】Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６９（１９９４）２９７１０．
【非特許文献１３】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３０（１９８９）２９６３．
【非特許文献１４】Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．，７（２００５）１３７５．
【非特許文献１５】Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６８（２００３）５３３９．
【非特許文献１６】Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１２８（２００６）１６２２．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】  本発明は上記事情に鑑みなされたものであり、新規なマクロジオライド化合物を提供するとともに、これを有効成分とする癌治療に有効な医薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】  本発明者らは上記課題を解決するため鋭意検討を重ね本発明に想到したものであり、グアム島近海で採集したＣＣＡ（Ｈｙｄｒｏｌｉｔｈｏｎ  ｒｅｉｎｂｏｌｄｉｉ）を抽出、分離精製して得た上記式（１）および（２）で表されるマクロジオライド化合物が、マウス由来Ｂ１６メラノーマ細胞に対して増殖阻害活性を有することを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、次の式（１）【０００７】
2013189420.tif 000002
で表されるマクロジオライド化合物を有効成分として含有することを特徴とする医薬に関する（請求項１）。さらに、請求項１の医薬が、特に抗がん剤である医薬に関する（請求項２）。【０００８】  また、次の式（２）【０００９】
2013189420.tif 000003
で表されるマクロジオライド化合物に関する（請求項３）。【００１０】さらに、次の式（２）【００１１】
2013189420.tif 000004
で表されるマクロジオライド化合物を有効成分として含有することを特徴とする医薬（請求項４）、および請求項４の医薬が、特に抗がん剤である医薬に関する（請求項５）。
以下、本発明を詳細に説明する。
【発明の効果】
【００１２】  本発明は以下の効果を奏する。本発明のマクロジオライド化合物は、Ｂ１６メラノーマ細胞増殖阻害活性を有し抗癌剤として有用である。医薬としても有用である。また、化学修飾が容易で誘導体を合成しやすいので更に優れた活性を有する抗癌剤を含む医薬の開発が期待できる。【００１３】
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】本発明のマクロジオライド化合物（２）の立体構造を決定したＮＭＲ−ＲＯＥＳＹ測定及びＪＢＣＡ法の結果を表した図である。
【図２】本発明のマクロジオライド化合物（２）によるＢ１６メラノーマ細胞増殖率を表した図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】  本発明の上記式（１）または式（２）で表されるマクロジオライド化合物は、例えばグアム島近海で採集した海洋生物、ＣＣＡ（Ｈｙｄｒｏｌｉｔｈｏｎ  ｒｅｉｎｂｏｌｄｉｉ）を有機溶媒で抽出後、分離精製することにより得られる。また、市販されている試薬を用いて公知の方法により合成して得ることもできる。
【００１６】  本発明における上記式（１）に含まれる化合物としては具体的には、
2013189420.tif 000005
で表されるマクロジオライド化合物（２）を挙げることができる。
【００１７】  本発明の化合物は治療のために経口的あるいは非経口的に投与することができる。経口投与剤としては、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤などの固形製剤あるいはシロップ剤、エリキシル剤などの液状製剤とすることができる。また、非経口投与剤として注射剤、直腸投与剤、皮膚外用剤、吸入剤とすることができる。これらの製剤は有効成分に薬学的に認容である製造助剤を加えることにより常法に従って製造される。更に公知の技術により持続性製剤とすることも可能である。
【００１８】  経口投与用の固形製剤を製造するには、有効成分と賦形剤例えば乳糖、デンプン、結晶セルロース、乳糖カルシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水ケイ酸などとを混合して散剤とするか、さらに必要に応じて白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウムなどの崩壊剤などを加えて湿式又は乾式造粒して顆粒剤とする。錠剤を製造するにはこれらの散剤及び顆粒剤をそのままあるいはステアリン酸マグネシウム、タルクなどの滑沢剤を加えて打錠すればよい。これらの顆粒又は錠剤はヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタアクリル酸、メタアクリル酸メチルコポリマーなどの腸溶性基剤で被覆して腸溶性製剤、あるいはエチルセルロース、カルナウバロウ、硬化油などで被覆して持続性製剤とすることもできる。また、カプセル剤を製造するには散剤又は顆粒剤を硬カプセルに充填するか、有効成分をグリセリン、ポリエチレングリコール、ゴマ油、オリーブ油などに溶解したのちゼラチン膜で被覆し軟カプセル剤とすることができる。
【００１９】  経口投与用の液状製剤を製造するには、有効成分と白糖、ソルビトール、グリセリンなどの甘味剤とを水に溶解して透明なシロップ剤、更に精油、エタノールなどを加えてエリキシル剤とするか、アラビアゴム、トラガント、ポリソルベート８０、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどを加えて乳剤又は懸濁剤としてもよい。これらの液状製剤には所望により矯味剤、着色剤、保存剤などを加えてもよい。
【００２０】  注射剤を製造するには、有効成分を必要に応じ塩酸、水酸化ナトリウム、乳糖、乳酸ナトリウム、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムなどのｐＨ調整剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖などの等張化剤とともに注射用蒸留水に溶解し、無菌濾過してアンプルに充填するか、更にマンニトール、デキストリン、シクロデキストリン、ゼラチンなどを加えて真空下凍結乾燥し、用時溶解型の注射剤としてもよい。また、有効成分にレシチン、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などを加えて水中で乳化せしめ注射用乳剤とすることもできる。
【００２１】  直腸投与剤を製造するには、有効成分及びカカオ脂、脂肪酸のトリ、ジ及びモノグリセリド、ポリエチレングリコールなどの坐剤用基剤とを加湿して溶融し型に流しこんで冷却するか、有効成分をポリエチレングリコール、大豆油などに溶解したのちゼラチン膜で被覆すればよい。
【００２２】  皮膚外用剤を製造するには、有効成分を白色ワセリン、ミツロウ、流動パラフィン、ポリエチレングリコールなどに加えて必要ならば加湿して練合し軟膏剤とするか、ロジン、アクリル酸アルキルエステル重合体などの粘着剤と練合したのちポリエチレンなどの不織布に展延してテープ剤とする。
吸入剤を製造するには、有効成分をフロンガスなどの噴射剤に溶解又は分散して耐圧容器に充填しエアゾール剤とする。
【００２３】  上記構成を有する本発明の薬剤は、公知の製造法、例えば日本薬局方第１０版製剤総則記載の方法ないし適当な改良を加えた方法によって製造することができる。
【００２４】  本発明の有効成分の投与量は患者の年齢、体重及び病態によって異なるが、通常１日約１ｍｇ〜１０００ｍｇであり、１乃至数回に分けて投与することが望ましい。
【００２５】
【実施例】
【００２６】  実施例１（マクロジオライド化合物（２）の立体構造決定）
マクロジオライド化合物（２）のＮＭＲスペクトル（１Ｈ−ＮＭＲ；８００ＭＨｚ、１３Ｃ−ＮＭＲ；１５０ＭＨｚ、ＲＯＥＳＹ；６００ＭＨｚ、Ｊ分解ＨＭＢＣ；６００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）を詳細に解析した。即ち、３ＪＨＨ、２ＪＣＨ、３ＪＣＨのスピン結合定数およびＲＯＥＳＹスペクトルを用いて、相対立体構造について解析した。ＲＯＥＳＹスペクトルによって得られた主なＲＯＥ相関を図１に示した。３ＪＨＨ、ＲＯＥ相関の解析により得られた相対立体配置に加え、Ｃ１３〜Ｃ１５位の立体構造については、Ｊ分解ＨＭＢＣスペクトルの解析により得られた２Ｊ（Ｃ−１５，Ｈ−１４）、３Ｊ（Ｃ−１４−Ｍｅ，Ｈ−１５）、３Ｊ（Ｃ−１４−Ｍｅ，Ｈ−１３）について村田らの報告したＪＢＣＡ法（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６４（１９９９）８６６−８７６．）を適用し立体配座を求めた。なお、Ｃ３〜Ｃ２２位の相対立体配置とＣ２６〜Ｃ２８位の相対立体配置はそれぞれ独立したものである。【００２７】  試験例１（腫瘍細胞増殖阻害活性試験）
検体のマクロジオライド化合物（２）の１０ｍｇ／ｍＬ  ＤＭＳＯ溶液を調整した。これを必要に応じてメタノールで希釈し、検体溶液とした。マウス由来メラノーマ細胞であるＢ１６細胞を１０％のＦＢＳを添加したＤＭＥＭ培地に加えて、４×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬに調製した細胞懸濁液の２００μＬを９６穴プレートに播種し、ＣＯ２培養器（ＣＯ２  ５％、湿度１００％、３７℃）で２時間培養した。上記検体溶液を所定の濃度になるように添加し、ＣＯ２培養器で１２０時間培養した。ＭＴＴ比色法により生存細胞数を計測して、対照群に対する増殖率から５０％細胞増殖阻害濃度（ＩＣ５０）を求めたところ、前記マクロジオライド化合物（２）のＩＣ５０は、２．６μｇ／ｍＬであった。（図２参照）
【産業上の利用可能性】
【００２８】  本発明は、がん細胞に対する増殖抑制作用を有するマクロジオライド化合物を提供するとともに、これを有効成分とする癌治療に有効な医薬を提供することを目的とする。
本発明のマクロジオライド化合物は、Ｂ１６メラノーマ細胞増殖阻害活性を有し抗癌剤として有用である。また、これまでにない新規な構造を有するため新たな作用機構を示し、より有効で、より副作用の少ない薬剤となる可能性が高い。またその作用機構により、抗癌剤以外の医薬としての効果も期待できる。さらに、化学修飾が容易で誘導体を合成しやすいので更に優れた活性を有する抗癌剤を含む医薬の開発が期待できる。
この発明は、上記発明の実施の形態及び実施例の説明に何ら限定されるものではない。特許請求の範囲の記載を逸脱せず、当業者が容易に想到できる範囲で種々の変形態様もこの発明に含まれる。
本明細書の中で明示した論文などの内容は、その全ての内容を援用によって引用することとする。
【図１】
2013189420.tif 000010
【図２】
2013189420.tif 000011