(57)【要約】【課題】微量の液体を精度よく分注する分注方法を提供すること。【解決手段】本発明に係る分注方法は、第１液体および第２液体が収容された第１容器から管を用いて前記第１液体を第２容器に分注する分注方法であって、前記第２液体を前記管の内部に吸引する第１吸引工程、前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程、前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程、前記第３吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体を前記管から前記第２容器に吐出する第１吐出工程、前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体を前記管から前記第２容器に吐出する第２吐出工程、および前記第１吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体の少なくとも一部を前記管から前記第２容器に吐出する第３吐出工程を含む。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１液体および前記第１液体と混和せず前記第１液体よりも比重の小さい第２液体が収容された第１容器から、管を用いて前記第１液体を第２容器に分注する分注方法であって、
前記第２液体を前記管の一端から前記管の内部に吸引する第１吸引工程と、
前記第１容器に収容された前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程と、
前記第１容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程と、
前記第３吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第１吐出工程と、
前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体を前記第２容器における前記第２液体中に吐出する第２吐出工程と、
前記第１吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体の少なくとも一部を前記第２容器に吐出する第３吐出工程と、
を含む、分注方法。
【請求項２】
第１液体および前記第１液体と混和せず前記第１液体よりも比重の小さい第２液体が収容された第１容器、並びに、前記第２液体および前記第２液体と混和せず前記第２液体よりも比重の大きい第３液体が収容された第３容器から、管を用いて前記第１液体および前記第３液体を第２容器に分注する分注方法であって、
前記第２液体を前記管の一端から前記管の内部に吸引する第１吸引工程と、
前記第１容器に収容された前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程と、
前記第１容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程と、
前記第３容器に収容された前記第３液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第４吸引工程と、
前記第３容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第５吸引工程と、
前記第５吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第１吐出工程と、
前記第４吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第３液体を前記第２容器に吐出する第２吐出工程と、
前記第３吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体の一部を前記第２容器に吐出する第３吐出工程と、
前記第３吐出工程で管の内部に残された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第４吐出工程と、
前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体を前記第２容器に吐出する第５吐出工程と、
前記第１吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体の少なくとも一部を前記第２容器に吐出する第６吐出工程と、
を含む、分注方法。
【請求項３】
第１液体および前記第１液体と混和せず前記第１液体よりも比重の小さい第２液体が収容された第１容器、および、前記第２液体および前記第２液体と混和せず前記第２液体よりも比重の大きい第３液体が収容された第３容器から、一端が開放され他端に液溜が接続された管を用いて、前記第１液体および前記第３液体を第２容器に分注する分注方法であって、
前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第１吸引工程と、
前記第１容器に収容された前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程と、
前記第１容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程と、
前記第３容器に収容された前記第３液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第４吸引工程と、
前記第３容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第５吸引工程と、
前記管の内部に前記第５吸引工程で吸引された前記第２液体の少なくとも一部が残るように、前記液溜に前記管の内部の各液体を吸引して、前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体、および前記第４吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第３液体を、前記液溜内で混合させて第４液体とし、かつ、前記第１吸引工程、前記第３吸引工程、および前記第５吸引工程で吸引された前記第２液体を混合させる混合工程と、
前記管の内部に残された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第１吐出工程と、
前記第４液体を前記第２容器に吐出する第２吐出工程と、
前記混合工程で混合された前記第２液体の少なくとも一部を前記第２容器に吐出する第３吐出工程と、
を含む、分注方法。
【請求項４】
請求項１ないし請求項３のいずれか一項において、
前記第２容器にはあらかじめ前記第２液体が収容されている、分注方法。
【請求項５】
第１液体および前記第１液体と混和せず前記第１液体よりも比重の小さい第２液体が収容された第１容器から、管を用いて前記第１液体を、前記第１液体と混和せず前記第２液体と混和する第３液体が収容された第２容器に管を用いて前記第１液体を分注する分注方法であって、
前記第２液体または前記第３液体を前記管の一端から前記管の内部に吸引する第１吸引工程と、
前記第１容器に収容された前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程と、
前記第１容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程と、
前記第３吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第１吐出工程と、
前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体を前記第２容器に吐出する第２吐出工程と、
前記第１吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体または前記第３液体の少なくとも一部を前記第２容器に吐出する第１１吐出工程と、
を含む、分注方法。
【請求項６】
請求項５において、
前記第３液体は、導電性を有する、分注方法。
【請求項７】
請求項１ないし請求項６のいずれか一項において、
前記第２液体は、導電性を有する、分注方法。
【請求項８】
請求項１ないし請求項７のいずれか一項において、
前記管は、少なくとも内壁が疎水性を有する、分注方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体の分注方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
生化学の分野において、ＰＣＲ（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ：ポリメラーゼ連鎖反応）の技術が確立されている。最近、ＰＣＲ法における増幅の精度や検出感度は向上してきており、極微量の検体（ＤＮＡ等）を増幅し、検出・解析することができるようになってきた。
【０００３】
ＰＣＲに用いる検体や試薬は、稀少であり高価であることが多いので、ＰＣＲの反応液の量（体積）が小さいほど費用および効率の面で好ましい。したがって、ＰＣＲの反応液の液量を、できるだけ小さくして取り扱うことができる手法が望まれる。
【０００４】
微量の液体を取り扱う方法の例としては、特許文献１に、対象とする液体を、該液体と混和せず相分離をする送液用の液体を用いて、細い管の中で移送する方法が開示されている。また、特許文献２には、遺伝子解析装置として、ＰＣＲの反応液を流路内で移動させてＰＣＲを行う装置と、その使用方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００４−０２５１４８号公報
【特許文献２】特開２００７−１７５００２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上記先行技術文献に開示された方法は、対象とする液体を０．５μＬ（マイクロリットル）より大きい体積で取り扱うものである。そのため、対象となる液体自体は、別途さらに大きい規模で調製されていた。したがって、対象となる液体の調製は、例えば、市販の機器や実験器具を用いて行うことができた。
【０００７】
ところが、特に最近のＰＣＲでは、微量反応の技術の向上や、低コスト化の要望の高まりによって、対象となる液体を、１μＬ程度の体積で調製することが求められてきている。このような場合には、ナノリットル（ｎＬ）のオーダー（１μＬ未満）の検体や試薬の溶液を正確な体積で、計量、送液等して取り扱う必要があるが、先行文献に開示された方法などで用いられる従来の分注方法では、精密な取り扱いが難しかった。例えば、比較的精密とされる手動のピペットを用いた場合でも、液体の体積が０．２μＬ未満となると、もはや精度よく計量、送液、分注することは困難であった。
【０００８】
また、マイクロリットルあるいはナノリットルのオーダー（１００μＬ未満）の微量の液体は、計量、分注する等の作業において、液体の一部が蒸発する場合があり、液量が変動したり、溶質の濃度が変動したりするという問題もあった。
【０００９】
本発明は上記課題に鑑みてなされたものであり、その幾つかの態様に係る目的の一つは、微量の液体を精度よく分注する分注方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は前述の課題の少なくとも一部を解決するためになされたものであり、以下の態様または適用例として実現することができる。
【００１１】
［適用例１］本発明に係る分注方法の一態様は、第１液体および前記第１液体と混和せず前記第１液体よりも比重の小さい第２液体が収容された第１容器から、管を用いて前記第１液体を第２容器に分注する分注方法であって、前記第２液体を前記管の一端から前記管の内部に吸引する第１吸引工程と、前記第１容器に収容された前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程と、前記第１容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程と、前記第３吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第１吐出工程と、前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体を前記第２容器における前記第２液体中に吐出する第２吐出工程と、前記第１吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体の少なくとも一部を前記第２容器に吐出する第３吐出工程と、を含む。
【００１２】
本適用例の分注方法によれば、第１液体は、第１容器に収容された状態、並びに吸引工程および吐出工程において、第２液体によって封じられた状態であるので、気相（大気等）に接触しにくい。すなわち、本適用例の分注方法によれば、第１液体は、第１容器から第２容器に分注される際には、第２液体に接する状態で取り扱われるので、大気等に接触しにくい。そのため、第１液体から構成成分が気相に蒸発することや、気相から第１液体へ水などの他の物質が混入することが抑制される。これにより、第１液体の溶媒および溶質の濃度の変動が小さく抑えられ、正確な分注を行うことができる。
【００１３】
また、本適用例の分注方法によれば、第２吐出工程で、第１液体が、第２液体中に吐出される。そのため、第２吐出工程において、管内または管の一端付近に第１液体が残存しにくい。したがって精度よく第１液体を第１容器から第２容器へと分注することができる。
【００１４】
ここで、本明細書において、分注とは、液体をある容器から他の容器へ所定量に分けて移すことを指す。分注との文言は、生化学の分野では当業者に理解されるであろうが、英語では「ｄｉｓｐｅｎｓｅ」に相当する。なお、分注を行う器具は、分注器などと呼称され、英語では「ｄｉｓｐｅｎｓｅｒ」と称される。また、本発明に係る分注方法は、生化学の分野に限定されるものではなく、化学、薬学、生物学、工学など広範な分野に適用されうる。また、本明細書において、「分注する」とは、所定の容器から液体を取り出し、他の容器に、当該液体の少なくとも一部を導入することと、所定の容器から液体を取り出し、複数の他の所定の容器に、当該液体を所定量ずつ導入することを含む。
【００１５】
本明細書において、管とは、第１液体が当該管内でプラグ状の形状を維持できる内径を有する筒のことを指す。また、液体がプラグ状の形状を有する状態とは、管の長手方向において、実質的に当該液体のみが占める部分が存在し、他の物質が当該液体によって区画されている状態を指す。ここでの実質的にとは、例えば管の内壁に薄膜状の他の物質（第２液体等）が存在してもよいことを指す。
【００１６】
［適用例２］本発明に係る分注方法の一態様は、第１液体および前記第１液体と混和せず前記第１液体よりも比重の小さい第２液体が収容された第１容器、並びに、前記第２液体および前記第２液体と混和せず前記第２液体よりも比重の大きい第３液体が収容された第３容器から、管を用いて前記第１液体および前記第３液体を第２容器に分注する分注方法であって、前記第２液体を前記管の一端から前記管の内部に吸引する第１吸引工程と、前記第１容器に収容された前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程と、前記第１容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程と、前記第３容器に収容された前記第３液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第４吸引工程と、前記第３容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第５吸引工程と、前記第５吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第１吐出工程と、前記第４吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第３液体を前記第２容器に吐出する第２吐出工程と、前記第３吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体の一部を前記第２容器に吐出する第３吐出工程と、前記第３吐出工程で管の内部に残された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第４吐出工程と、前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体を前記第２容器に吐出する第５吐出工程と、前記第１吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体の少なくとも一部を前記第２容器に吐出する第６吐出工程と、を含む。
【００１７】
本適用例の分注方法によれば、第１液体および第３液体は、第１容器および第３容器から第２容器に収容された状態、並びに吸引工程および吐出工程において、第２液体によって封じられた状態であるので、気相（大気等）に接触しにくい。すなわち、本適用例の分注方法によれば、第１液体および第３液体は、分注される際には、第２液体に接する状態で取り扱われるので大気等に接触しにくい。そのため、第１液体および第３液体からそれらの構成成分が気相に蒸発することや、気相から第１液体または第３液体へ水などの他の物質が混入することが抑制される。これにより、第１液体および第３液体の濃度の変動が小さく抑えられ、正確な分注を行うことができる。
【００１８】
また、本適用例の分注方法によれば、第５吐出工程で、第３液体が第２液体中に吐出され、第２吐出工程で、第１液体が第２液体中に吐出される。そのため、第５吐出工程および第２吐出工程において、管内または管の一端付近に第３液体および第１液体が残存しにくい。したがって精度よく第１液体および第３液体を第２容器へと分注することができる。
【００１９】
［適用例３］本発明に係る分注方法の一態様は、第１液体および前記第１液体と混和せず前記第１液体よりも比重の小さい第２液体が収容された第１容器、および、前記第２液体および前記第２液体と混和せず前記第２液体よりも比重の大きい第３液体が収容された第３容器から、一端が開放され他端に液溜が接続された管を用いて、前記第１液体および前記第３液体を第２容器に分注する分注方法であって、前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第１吸引工程と、前記第１容器に収容された前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程と、前記第１容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程と、前記第３容器に収容された前記第３液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第４吸引工程と、前記第３容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第５吸引工程と、前記管の内部に前記第５吸引工程で吸引された前記第２液体の少なくとも一部が残るように、前記液溜に前記管の内部の各液体を吸引して、前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体、および前記第４吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第３液体を、前記液溜内で混合させて第４液体とし、かつ、前記第１吸引工程、前記第３吸引工程、および前記第５吸引工程で吸引された前記第２液体を混合させる混合工程と、前記管の内部に残された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第１吐出工程と、前記第４液体を前記第２容器に吐出する第２吐出工程と、前記混合工程で混合された前記第２液体の少なくとも一部を前記第２容器に吐出する第３吐出工程と、を含む。
【００２０】
本適用例の分注方法によれば、第１液体および第３液体を確実に混合することができる。すなわち、本適用例の分注方法によれば、混合工程において第１液体および第３液体の液滴を、液溜中で合一させて第４液体の液滴を形成できるので、第１液体および第３液体を第２容器に吐出した後に第２容器内で両者の液滴を合一させる場合に比べて、より確実に第１液体および第３液体を混合することができる。
【００２１】
また、本適用例の分注方法によれば、第１液体、第３液体および第４液体は、第１容器および第３容器から第２容器に収容された状態、並びに吸引工程、混合工程および吐出工程において、第２液体によって封じられた状態であるので、気相（大気等）に接触しにくい。すなわち、本適用例の分注方法によれば、第１液体、第３液体および第４液体は、分注される際には、第２液体に接する状態で取り扱われるので大気等に接触しにくい。そのため、第１液体、第３液体または第４液体からそれらの構成成分が気相に蒸発することや、気相から第１液体、第３液体または第４液体へ水などの他の物質が混入することが抑制される。これにより、第１液体、第３液体および第４液体の濃度の変動が小さく抑えられ、正確な分注を行うことができる。
【００２２】
また、本適用例の分注方法によれば、第２吐出工程で、第４液体が第２液体中に吐出される。そのため、第２吐出工程において、管内または管の一端付近に第４液体が残存しにくい。したがって精度よく第４液体を第２容器へと分注することができる。
【００２３】
［適用例４］適用例１ないし適用例３のいずれか一例において、前記第２容器にはあらかじめ前記第２液体が収容されていてもよい。
【００２４】
本適用例の分注方法によれば、各吐出工程において、管の一端を第２液体に接触させやすいので、管内または管の一端付近に第１液体、第３液体または第４液体がさらに残存しにくい。これにより、さらに精度よく第１液体、第３液体または第４液体を第２容器へと分注することができる。
【００２５】
［適用例５］本発明に係る分注方法の一態様は、第１液体および前記第１液体と混和せず前記第１液体よりも比重の小さい第２液体が収容された第１容器から、管を用いて前記第１液体を、前記第１液体と混和せず前記第２液体と混和する第３液体が収容された第２容器に管を用いて前記第１液体を分注する分注方法であって、前記第２液体または前記第３液体を前記管の一端から前記管の内部に吸引する第１吸引工程と、前記第１容器に収容された前記第１液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第２吸引工程と、前記第１容器に収容された前記第２液体を前記管の前記一端から前記管の内部に吸引する第３吸引工程と、前記第３吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体を前記第２容器に吐出する第１吐出工程と、前記第２吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第１液体を前記第２容器に吐出する第２吐出工程と、前記第１吸引工程で前記管の内部に吸引された前記第２液体または前記第３液体の少なくとも一部を前記第２容器に吐出する第１１吐出工程と、を含む。
【００２６】
本適用例の分注方法によれば、第１液体は、第１容器から第２容器に収容された状態、並びに吸引工程および吐出工程において、第２液体または第３液体によって封じられた状態であるので、気相（大気等）に接触しにくい。すなわち、本適用例の分注方法によれば、第１液体は、第１容器から第２容器に分注される際には、第２液体または第３液体に接する状態で取り扱われ大気等に接触しにくい。そのため、第１液体から構成成分が気相に蒸発することや、気相から第１液体へ水などの他の物質が混入することが抑制される。これにより、第１液体の溶媒および溶質の濃度の変動が小さく抑えられ、正確な分注を行うことができる。
【００２７】
また、本適用例の分注方法によれば、第２吐出工程で、第１液体が、前記第３液体および前記第２液体の混合液体中に吐出される。そのため、第２吐出工程において、管内または管の一端付近に第１液体が残存しにくい。したがって精度よく第１液体を第１容器から第２容器へと分注することができる。
【００２８】
［適用例６］適用例５において、前記第３液体は、導電性を有してもよい。
【００２９】
本適用例の分注方法によれば、第１液体および第２液体の少なくとも一方が帯電した場合に、各吐出工程において、管の先端付近で第１液体および第２液体の少なくとも一方が、第３液体との間の静電的な引力または斥力によって、予期せぬ挙動を示すことを抑制することができる。そのため、より確実に第１液体を第１容器から第２容器へと分注することができる。
【００３０】
［適用例７］適用例１ないし適用例６のいずれか一例において、前記第２液体は、導電性を有してもよい。
【００３１】
本適用例の分注方法によれば、各液体が帯電した場合に、各吐出工程において、管の先端付近で少なくとも第１液体が、第２容器またはその内容物との間の静電的な引力または斥力によって、予期せぬ挙動を示すことを抑制することができる。そのためより確実に第１液体を第２容器へと分注することができる。
【００３２】
［適用例８］適用例１ないし適用例７のいずれか一例において、前記管は、少なくとも内壁が疎水性を有してもよい。
【００３３】
本適用例の分注方法によれば、管の内壁に水性の液体が付着しにくい。これにより、第１液体、第３液体および第４液体が水溶液である場合に、第２吸引工程とそれ以降の各工程において、管内における第１液体、第３液体および第４液体の移動がより滑らかとなる。また、各吐出工程において、管内に第１液体、第３液体および第４液体がさらに残存しにくい。そのため、より精度よく液体を分注することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】第１実施形態に係る分注方法のフローチャート。
【図２】図２（ａ）は、第１実施形態に係る第１吸引工程を模式的に示し、図２（ｂ）は、第１実施形態に係る第２吸引工程を模式的に示し、図２（ｃ）は、第１実施形態に係る第３吸引工程を模式的に示し、図２（ｄ）は、第１実施形態に係る第３吸引工程を経た後の状態を模式的に示す。
【図３】図３（ａ）は、第１実施形態に係る第１吐出工程の準備状態を模式的に示し、図３（ｂ）は、第１実施形態に係る第１吐出工程を模式的に示し、図３（ｃ）は、第１実施形態に係る第２吐出工程を模式的に示し、図３（ｄ）は、第１実施形態に係る第３吐出工程を模式的に示す。
【図４】第２実施形態に係る分注方法のフローチャート。
【図５】図５（ａ）は、第２実施形態に係る第４吸引工程の準備状態を模式的に示し、図５（ｂ）は、第２実施形態に係る第４吸引工程を模式的に示し、図５（ｃ）は、第２実施形態に係る第５吸引工程を模式的に示し、図５（ｄ）は、第２実施形態に係る第５吸引工程を経た後の管の状態を模式的に示す。
【図６】第３実施形態に係る分注方法のフローチャート。
【図７】図７（ａ）は、第３実施形態に係る第５吸引工程を模式的に示し、図７（ｂ）および図７（ｃ）は、第３実施形態に係る混合工程を模式的に示し、図７（ｄ）および図７（ｅ）は、第３実施形態に係る混合工程を経た後の状態を模式的に示す。
【図８】図８（ａ）は、第３実施形態に係る第８吐出工程を模式的に示し、図８（ｂ）は、第３実施形態に係る第１０吐出工程を模式的に示す。
【図９】第４実施形態に係る分注方法のフローチャート。
【図１０】図１０（ａ）は、第４実施形態で用いる第２容器を模式的に示し、図１０（ｂ）は、第４実施形態に係る第１吐出工程を模式的に示し、図１０（ｃ）は、第４実施形態に係る第１１吐出工程を経た後の状態を模式的に示す。
【図１１】実施形態に係る分注装置の一例を模式的に示す図。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
以下に本発明のいくつかの実施形態について説明する。以下に説明する実施形態は、本発明の例を説明するものである。本発明は、以下の実施形態になんら限定されるものではなく、本発明の要旨を変更しない範囲において実施される各種の変形例も含む。なお以下の実施形態で説明される構成や工程の全てが本発明の必須構成要件であるとは限らない。
【００３６】
１．第１実施形態
本発明に係る分注方法の第１実施形態を述べる。図１は、本実施形態の分注方法のフローチャートである。図２および図３は、それぞれ本実施形態の分注方法の一部の工程を模式的に示す図である。図２（ａ）は、本実施形態に係る第１吸引工程を模式的に示し、図２（ｂ）は、本実施形態に係る第２吸引工程を模式的に示し、図２（ｃ）は、本実施形態に係る第３吸引工程を模式的に示し、図２（ｄ）は、本実施形態に係る第３吸引工程を経た後の状態を模式的に示している。図３（ａ）は、本実施形態に係る第１吐出工程の準備状態を模式的に示し、図３（ｂ）は、本実施形態に係る第１吐出工程を模式的に示し、図３（ｃ）は、本実施形態に係る第２吐出工程を模式的に示し、図３（ｄ）は、本実施形態に係る第３吐出工程を模式的に示している。
【００３７】
１．１．構成
本実施形態の分注方法は、第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２が収容された第１容器１０から、管２０を用いて第１液体Ｌ１を第２容器３０に分注する分注方法である。
【００３８】
１．１．１．第１液体
第１液体Ｌ１は、後述の第２液体Ｌ２と混和しない液体である。また、第１液体Ｌ１は、第２液体Ｌ２よりも比重が大きい液体である。第１液体Ｌ１は、このような性質を有するため、図１に示すように、第１容器１０内に第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２が共存する場合には、第１液体Ｌ１と第２液体Ｌ２の間に界面Ｉ１２が形成される。換言すると、第１液体Ｌ１と後述の第２液体Ｌ２とが共存する場合には液液相分離状態となる。界面Ｉ１２の重力の作用する方向における下側（第１容器１０の底側）に第１液体Ｌ１が位置し、界面Ｉ１２の上側（第１容器１０の開口側）に第２液体Ｌ２が位置することになる。また、第１液体Ｌ１は、表面張力を有し、第１液体Ｌ１の体積が小さくなると、第２液体Ｌ２中で液滴を形成することができる。なお、本明細書では「上」、「下」との表記は、重力の作用する方向における上下を表すものとする。
【００３９】
第１液体Ｌ１は、水性、油性のいずれであってもよい。例えば、第１液体Ｌ１が水性である場合には、第２液体Ｌ２は、油性であることができ、また、その逆であってもよい。第１液体Ｌ１は、例えば、ＰＣＲ（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ：ポリメラーゼ連鎖反応）の反応液、またはＰＣＲの反応液を調製するための溶液であってもよい。第１液体Ｌ１がＰＣＲの反応液である場合には、反応液には増幅の対象とする核酸（標的核酸）および反応に必要な試薬（例えば、ＤＮＡポリメラーゼおよびプライマーなど）が含まれる。第１液体Ｌ１を用いて調製される溶液がＰＣＲの反応液である場合には、第１溶液Ｌ１は、核酸（標的核酸）または反応に必要な試薬のうちの少なくとも一種を含む溶液であることができる。この場合などは、第２容器３０に残りの一部の試薬をあらかじめ収容しておいてもよい。また、第１液体Ｌ１としては、例えば、大気中の酸素によって酸化されやすい物質や、大気中の水等の分子と反応しやすい物質の溶液であってもよい。
【００４０】
１．１．２．第２液体
第２液体Ｌ２は、第１液体Ｌ１と混和しない液体である。また、第２液体Ｌ２は、第１液体Ｌ１よりも比重が小さい液体である。第２液体Ｌ２は、第１液体Ｌ１が水性である場合には油性であることができる。例えば、第１液体Ｌ１がＰＣＲの反応液、またはＰＣＲの反応液を調製するための溶液である場合には、第２液体Ｌ２は、オイルであることができる。このようなオイルとしては、例えば、ジメチルシリコーンオイル等のシリコーン系オイル、パラフィン系オイルおよびミネラルオイル並びにそれらの混合物を挙げることができる。
【００４１】
１．１．３．管
管２０は、両端に開口を有し、内部に該開口間を連通し液体を流通させることができる流路を有する。本明細書では、管２０の一方の端を一端といい、他方の端を他端という。また、管２０の内径とは、管２０の流路の断面における最大径である。管２０の形状は任意であるが、例えば、円筒状とすることができる。管２０の長さおよび内径は、第１液体Ｌ１のプラグを形成できる範囲で任意である。また、管２０は、直線状であっても屈曲した形状であってもよい。第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２などがＰＣＲの反応液等である場合には、管２０の内径は、例えば、０．２ｍｍ以下が好ましい。管２０の内径が０．２ｍｍである場合には、管２０内に１ｍｍの長さの液柱を形成すると、当該液柱は、約３０ナノリットル（ｎＬ）の体積となる。
【００４２】
管２０は、第１液体Ｌ１が当該管２０内でプラグ状の形状を維持できる内径を有する。第１液体Ｌ１がプラグ状の形状を有する状態とは、管２０の長手方向（流路に沿う方向）において、実質的に第１液体Ｌ１のみが占める部分が存在する状態をいう。第１液体Ｌ１がプラグ状の形状を有する場合は、管２０の長手方向において、第１液体Ｌ１によって他の物質が区画されている。この場合、例えば管２０の内壁に薄膜状の他の物質（第２液体等）が存在してもよい。
【００４３】
管２０の具体例としては、両端が開口したキャピラリー（細管）が挙げられる。管２０は、他端側から流路内が吸引（減圧）されることによって、一端側から液体、気体を流路内に吸引することができる。管２０の他端側から流路内を吸引する手段としては、特に限定されず、ポンプ、ピペッター、シリンジなどの機器を例示することができ、作業者が口で吸ってもよい。また、管２０は、他端側から流路内に圧力を印加することによって、一端側から液体、気体を吐出させることができる。すなわち、本明細書においては加圧または減圧する器具が取り付けられる管２０の端部を他端、液体が吸引または吐出される管２０の端部を一端としている。後述する吸引工程において、管２０内に、液体のプラグが形成されるため、管２０からは、管２０に吸引された順番と逆の順番で液体が吐出されることになる（いわゆる先入れ後出し（ファーストインラストアウト））。管２０の他端側から流路内に圧力を印加する手段としては、特に限定されず、吸引・加圧機能を備えたポンプ、ピペッター、シリンジなどの機器を例示することができ、作業者が口で息を吹き込んでもよい。なお、１マイクロリットル（μＬ）以下の体積の第１液体Ｌ１を吸引・吐出する場合には、管２０内の流速は、１μＬ／ｓ以下とすることが好ましく、より好ましくは１μＬ／分以下であり、ポンプ、ピペッターなどの機器は、そのような流速が得られるようなものを用いることが好ましい。
【００４４】
管２０の材質としては、無機材料（例えば耐熱性ガラス（パイレックス（登録商標）））、および有機材料（例えばポリカーボネート、ポリプロピレン、ＰＴＦＥ（ポリテトラフルオロエチレン）等の樹脂）を挙げることができ、これらの複合材料であってもよい。管２０がガラス、ポリカーボネート等の可視光を透過する材質で形成されると、管２０内に形成された第１液体Ｌ１と第２液体Ｌ２との間の（相分離）界面Ｉ１２を外部から目視することができるため好ましい。また、管２０の材質としては、撥水性と親油性の両方を備えた材料（例えば、ＰＴＦＥ）が望ましい。管２０にこのような材質を用いることにより、第１液体Ｌ１が水性であり、かつ、第２液体Ｌ２が油性である場合に、管２０の表面に第２液体Ｌ２が皮膜を形成しやすく、第１液体Ｌ１が管２０に付着しにくくできる。そのため、複数種の第１液体Ｌ１を使用する場合などに、第１液体Ｌ１が管２０の内壁に付着して生じる第１液体Ｌ１間の混合を抑制することができる。
【００４５】
管２０は、少なくとも内壁が疎水性を有することが好ましい。管２０の少なくとも内壁が疎水性を有すると、分注する液体が水性である場合に、該液体が管２０に付着しにくい。また、管２０の少なくとも内壁が疎水性を有すると、各実施形態の各工程において、管２０内における水性の液体の移動がより滑らかとなり、また、各吐出工程において、管内に水性の液体がさらに残存しにくい。そのため、より精度よく液体を分注することができる。
【００４６】
管２０の内壁を疎水性にする方法としては、管２０の材質として上述のＰＴＦＥやポリプロピレンを用いることが挙げられ、その他にも管２０が疎水性の小さい材質である場合でも、管２０の内壁に例えば、プラズマ処理を施したり、疎水性物質のコーティングを施すことによって管２０の内壁を疎水性にすることができる。コーティングの例としては、アルキルシラン等で表面処理をした疎水性シリカなどが挙げられる。
【００４７】
１．１．４．第１容器
第１容器１０は、本実施形態の分注方法によって分注される第１液体Ｌ１が収容される容器である。本実施形態の分注方法では、第１容器１０には、第２液体Ｌ２も収容される。第１容器１０の形状および容積は、第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２が収容されたときに、第１容器１０内に第１液体Ｌ１と第２液体Ｌ２との間の界面Ｉ１２が形成され、第１液体Ｌ１が大気に接触しないように配置でき、管２０の一端を後述する分注方法に適した位置まで挿入できるかぎり任意である。すなわち、例えば第１容器１０の開口および管２０の一端の断面形状が円形である場合、第１容器１０の開口の直径は管２０の一端の外形よりも大きいものが適している。第１容器１０は、例えば、試験管、バイアル、生化学の分野で一般に使用される容器などであることができる。
【００４８】
第１容器１０の材質としては、無機材料（例えば耐熱性ガラス（パイレックス（登録商標）））、及び有機材料（例えばポリカーボネート、ポリプロピレン等の樹脂）を挙げることができ、これらの複合材料であってもよい。第１容器１０がガラス、ポリカーボネート、ポリプロピレン等の可視光を透過する材質で形成されると、第１容器１０内に形成された第１液体Ｌ１と第２液体Ｌ２との間の界面Ｉ１２を外部から目視することができるため好ましい。
【００４９】
１．１．５．第２容器
第２容器３０は、本実施形態の分注方法によって第１液体Ｌ１が分注されて収容される。本実施形態の分注方法では、第２容器３０には、第２液体Ｌ２も収容される。第２容器３０の形状は、第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２が収容されたときに、第２容器３０内に第１液体Ｌ１と第２液体Ｌ２との間の界面Ｉ１２が形成され、第１液体Ｌ１を大気に接触しないように配置できるかぎり任意である。
【００５０】
本実施形態の分注方法では、第２容器３０は、複数準備されてもよい。第２容器３０は、例えば、試験管、バイアル、生化学の分野で一般にウェルと称される容器などであることができる。また、第２容器３０がウェルである場合には、複数（例えば８×１２＝９６個）のウェルが一つの部材に形成された板を使用することができる。
【００５１】
第２容器３０の材質としては、無機材料（例えば耐熱性ガラス（パイレックス（登録商標）））、及び有機材料（例えばポリカーボネート、ポリプロピレン等の樹脂）を挙げることができ、これらの複合材料であってもよい。
【００５２】
また、第２容器３０の外部から、その内部を観察するような用途（例えば、リアルタイムＰＣＲなど）に第２容器３０を用いる場合には、必要に応じて、材質を透明なものとすることができる。なお、ここでの「透明」の程度は第２容器３０の使用目的に適する程度であればよい。例えば、視覚的な観察であれば内部が視認できる程度であればよい。リアルタイムＰＣＲなどにおける蛍光測定であれば第２容器３０外部から反応液の蛍光が光学的に測定できる程度であればよい。第２容器３０の開口から蛍光測定を行う場合には、第２容器３０の材質に、カーボンブラック、グラファイト、チタンブラック、アニリンブラック、若しくは、Ｒｕ、Ｍｎ、Ｎｉ、Ｃｒ、Ｆｅ、Ｃｏ又はＣｕの酸化物、Ｓｉ、Ｔｉ、Ｔａ、Ｚｒ又はＣｒの炭化物などの黒色物質等を配合することにより、樹脂等の有する自発蛍光を抑制することができ、ＰＣＲの精度を高めることができる。またなお、第２容器３０を、ＰＣＲの反応容器として使用する場合には、第２容器３０の材質は、核酸やタンパク質の吸着が少なく、ポリメラーゼ等の酵素反応を阻害しない材質であることが好ましい。
【００５３】
１．２．分注方法
本実施形態の分注方法は、第１吸引工程と、第２吸引工程と、第３吸引工程と、第１吐出工程と、第２吐出工程と、第３吐出工程とを含む。
【００５４】
１．２．１．第１吸引工程
第１吸引工程（ステップＳ１１）では、第２液体Ｌ２を管２０の一端側から管２０内に吸引する。第１吸引工程で吸引される第２液体Ｌ２は、第１容器１０内に収容された第２液体Ｌ２であっても、他の容器に収容された第２液体Ｌ２であってもよい。第１吸引工程で吸引される第２液体Ｌ２の体積は特に限定されないが、第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１が管２０内の気体の影響を受けない程度の体積であることが好ましい。
【００５５】
第１吸引工程によって、管２０の内壁の第２液体Ｌ２が接触した領域が第２液体Ｌ２に覆われる。これにより、第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１が管２０の内壁に付着しにくくし、および第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１が管２０内で移動しやすくすることができる。第１吸引工程を行うことにより、第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１が管２０内の気体と接触しにくくすることができる。
【００５６】
図２（ａ）は、第１吸引工程において、第１容器１０内に収容された第２液体Ｌ２を管２０の一端側から吸引した様子を模式的に表している。第１吸引工程を経ると、管２０の一端側に、第２液体Ｌ２の液柱が形成される。
【００５７】
１．２．２．第２吸引工程
第２吸引工程（ステップＳ１２）は、第１吸引工程（ステップＳ１１）の後で行われる。第２吸引工程と第１吸引工程との間には、例えば、第１吸引工程で第１容器１０以外の容器から第２液体Ｌ２を吸引した場合に、管２０の一端を第１容器１０内に移動させるなどの、他の工程が行われてもよい。
【００５８】
第２吸引工程では、第１容器１０において管２０の一端が第１液体Ｌ１と第２液体Ｌ２との界面Ｉ１２より下の位置で、第１液体Ｌ１を管２０の一端側から管２０内に吸引する。第２吸引工程で界面Ｉ１２より下の位置に配置される一端は、第１吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。
【００５９】
第１吸引工程で、第１容器１０内の第２液体Ｌ２を吸引した場合には、管２０の一端を界面Ｉ１２よりも下に移動させることにより、第２吸引工程を行うことができる。第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１の体積は特に限定されない。
【００６０】
図２（ｂ）は、第２吸引工程において、第１容器１０内に収容された第１液体Ｌ１を管２０の一端側から吸引した様子を模式的に表している。第２吸引工程を経ると、管２０の一端側に、第２液体Ｌ２の液柱の下に第１液体Ｌ１の液柱が形成される。
【００６１】
１．２．３．第３吸引工程
第３吸引工程（ステップＳ１３）は、第２吸引工程（ステップＳ１２）に連続して行われる。第３吸引工程では、第１容器１０において管２０の一端が界面Ｉ１２より上の位置で、第２液体Ｌ２を管２０の一端側から管２０内に吸引する。第３吸引工程で界面Ｉ１２より上の位置に配置される一端は、第２吸引工程で第１液体Ｌ１を吸引した一端である。本明細書において、「Ａ工程がＢ工程に連続して行われる」との表現は、Ａ工程がＢ工程を行った容器において行われることを表す。また、「Ａ工程がＢ工程の後で行われる」との表現は、Ａ工程がＢ工程に連続して行われる場合と、Ａ工程とＢ工程の間に他の工程が行われる場合とを含む。
【００６２】
第３吸引工程で吸引される第２液体Ｌ２の体積は特に限定されない。第１吐出工程で、第２容器３０にあらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていない場合には、第３吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２の体積は、当該第２液体Ｌ２が第１吐出工程で吐出された際に管２０の一端の開口を浸す程度よりも大きいことが好ましい。
【００６３】
図２（ｃ）は、第３吸引工程において、第１容器１０内に収容された第２液体Ｌ２を管２０の一端側から吸引した様子を模式的に表している。第３吸引工程を経ると、管２０の内部において、第１液体Ｌ１の液柱が２つの第２液体Ｌ２の液柱に挟まれた状態となる。図２（ｄ）は、第３吸引工程を経た後の管２０の状態を示している。図２（ｄ）に示すように、第３吸引工程を経た後の管２０では、一端側から第２液体Ｌ２、第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２の順に液柱が形成されるので、第１液体Ｌ１を空気にほとんど触れさせない状態で管２０を移動させることができる。
【００６４】
１．２．４．第１吐出工程
第１吐出工程（ステップＳ２１）は、第３吸引工程（ステップＳ１３）の後で行われる。第３吸引工程と第１吐出工程との間には、少なくとも第１容器１０から管２０を第２容器３０に移動させる工程が行われる。第３吸引工程と第１吐出工程との間には、他の工程が行われてもよい。
【００６５】
第１吐出工程では、第３吸引工程（ステップＳ１３）で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第１吐出工程で第２液体Ｌ２が吐出される一端は、第３吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。
【００６６】
第１吐出工程では、第２容器３０に第２液体Ｌ２が吐出されるが、吐出された第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されるように行われる。第１吐出工程において、管２０の一端の開口が浸されることにより、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１を大気に接触させないようにすることができる。また、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されることにより、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１を管２０から吐出させやすくすることができる。
【００６７】
第１吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２を収容する第２容器３０には、あらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていてもよい。このようにすれば、第１吐出工程の前後で第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口を浸しやすく、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１をさらに大気に接触させにくくすることができる。また、第２容器３０にあらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていると、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１を管２０からさらに吐出させやすくすることができる。
【００６８】
図３（ａ）は、第３吸引工程を経た後の管２０が、第２容器３０内に配置された状態を示している。図３（ｂ）は、第１吐出工程が終了した状態を示しており、管２０内に第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２の液柱が残存している状態を示している。
【００６９】
１．２．５．第２吐出工程
第２吐出工程（ステップＳ２２）は、第１吐出工程（ステップＳ２１）に連続して行われる。第２吐出工程では、第２吸引工程（ステップＳ１２）で管２０内に吸引された第１液体Ｌ１を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第２吐出工程で第１液体Ｌ１が吐出される一端は、第２吸引工程で第１液体Ｌ１を吸引した一端である。
【００７０】
第２吐出工程は、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸された状態で行われる。これにより、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１を大気に接触させないようにすることができる。また、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されることにより、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１を管２０から吐出させやすくなっている。
【００７１】
図３（ｃ）は、第２吐出工程が終了した状態を示しており、管２０内に第２液体Ｌ２の液柱が残存し、第１液体Ｌ１が管２０から出て、管２０の一端に接触している状態を示している。第２吐出工程は、第２容器３０中の第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されて行われるため、第１液体Ｌ１が大気に接触することがない。
【００７２】
１．２．６．第３吐出工程
第３吐出工程（ステップＳ２３）は、第２吐出工程（ステップＳ２２）に連続して行われる。第３吐出工程では、第１吸引工程（ステップＳ１１）で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２の少なくとも一部を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第３吐出工程で第２液体Ｌ２が吐出される一端は、第１吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。
【００７３】
第３吐出工程は、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸された状態で行われる。これにより、第３吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２が、第２容器３０中の第２液体Ｌ２と合一し、第２吐出工程で吐出された第１液体Ｌ１を管２０から離脱させることができる。
【００７４】
第３吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２は、第１吸引工程で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２の一部であっても全部であってもよい。
【００７５】
図３（ｄ）は、第３吐出工程が終了し、第３吐出工程で第２液体Ｌ２の一部が吐出された状態を示しており、管２０内に第２液体Ｌ２の液柱が残存し、第１液体Ｌ１が管２０から離脱した状態を示している。第３吐出工程では、第２容器３０中の第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されて行われるため、第１液体Ｌ１が大気に接触しにくい。また、第３吐出工程は、第２容器３０中の第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されて行われるため、第３吐出工程によって、図示のように、管２０内の第２液体Ｌ２の液柱と第２容器３０内の第２液体Ｌ２とを連続させることができる。そのため、第１液体Ｌ１を管２０の一端の開口から容易に離脱させることができる。なお、図３（ｄ）では、離脱した第１液体Ｌ１が液滴を形成している例を示している。
【００７６】
１．２．７．変形実施形態
上記第１実施形態では、１つの第１容器１０から、１つの第２容器３０へ第１液体Ｌ１を分注する分注方法を説明した。しかし、第１実施形態の分注方法は、１つの第１容器１０から、複数の第２容器３０へ第１液体Ｌ１を分注する変形実施が可能である。以下では、１つの第１容器１０から、２つの第２容器３０へ第１液体Ｌ１を分注する方法を説明する。
【００７７】
本変形実施形態の分注方法は、第１吸引工程と、第２吸引工程と、第３吸引工程と、第１吐出工程と、第２吐出工程と、第３吐出工程とを含む。各工程は、上記第１実施形態で述べたと同様であるため、詳細な説明を省略する。
【００７８】
本変形実施形態の分注方法では、図１に示したフローチャートのＡで示す工程（第２吸引工程および第３吸引工程）が複数回行われ、最後の第３吸引工程の後、Ｂで示す工程（第１吐出工程、第２吐出工程および第３吐出工程）が複数回行われる。
【００７９】
上記第１実施形態において、第３吸引工程が終了した後、再度、第２吸引工程および第３吸引工程を行うと、２回目の第３吸引工程が終了したときに、管２０内には、一端側から第２液体Ｌ２、第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２、第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２の順に液柱が形成され、この状態で管２０を移動させることができる。
【００８０】
そして１番目の第２容器３０に対して、第１吐出工程、第２吐出工程および第３吐出工程を行うことによって、１番目の第２容器３０に２回目の第２吸引工程で吸引した第１液体Ｌ１を分注することができる。このときの第３吸引工程において、第２液体Ｌ２の一部を管２０内に残存させれば、上記第１実施形態において、第３吸引工程が終了した状態と同様の状態を形成することができる。そして、管２０を２番目の第２容器３０に移動させ、第１吐出工程、第２吐出工程および第３吐出工程を行うことによって、２番目の第２容器３０に１回目の第２吸引工程で吸引した第１液体Ｌ１を分注することができる。
【００８１】
このようにすれば、例えば、本実施形態の分注方法を分注装置等に採用した場合に、管２０を第１容器１０と第２容器３０との間で移動させる回数を減らすことができる。すなわち、管２０を移動させる工程を削減できるので、分注作業の所要時間の短縮を図ることができる。また、液体の吸引・吐出を、ポンプを用いて行う場合には、吸引および吐出の切り替えに時間がかかる場合があり、そのような場合にも、本変形実施形態では、切り替えの回数を減らすことができるため、分注作業の所要時間の短縮を図ることができる。
【００８２】
１．３．作用効果
本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１は、第１容器１０に収容された状態、並びに各吸引工程および各吐出工程において、第２液体Ｌ２によって封じられた状態であるので、気相（大気等）に接触しにくい。すなわち、本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１は、第１容器１０から第２容器３０に分注される際には、第２液体Ｌ２に接する状態で取り扱われるので大気等に接触しにくい。そのため、第１液体Ｌ１から構成成分が気相に蒸発することや、気相から第１液体Ｌ１へ水などの他の物質が混入することが抑制される。これにより、第１液体Ｌ１の溶媒および溶質の濃度の変動が小さく抑えられ、正確な分注を行うことができる。
【００８３】
また、本実施形態の分注方法によれば、第２吐出工程（ステップＳ２２）で、第１液体Ｌ１が、第２液体Ｌ２中に吐出される。そのため、第２吐出工程において、管内または管の一端付近に第１液体Ｌ１が残存しにくい。したがって精度よく第１液体Ｌ１を第１容器１０から第２容器３０へと分注することができる。
【００８４】
２．第２実施形態
本発明に係る分注方法の第２実施形態を述べる。図４は、本実施形態の分注方法を示すフローチャートである。図５は、本実施形態の分注方法の工程の一部を説明する模式図である。図５（ａ）は、本実施形態に係る第４吸引工程の準備状態を模式的に示し、図５（ｂ）は、本実施形態に係る第４吸引工程を模式的に示し、図５（ｃ）は、本実施形態に係る第５吸引工程を模式的に示し、図５（ｄ）は、本実施形態に係る第５吸引工程を経た後の管の状態を模式的に示している。
【００８５】
２．１．構成
本実施形態の分注方法は、第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２が収容された第１容器１０、並びに、第２液体Ｌ２および第３液体Ｌ３が収容された第３容器１２から、管２０を用いて第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３を第２容器２０に分注する分注方法である。
【００８６】
本実施形態における第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２、第１容器１０、管２０は、第１実施形態で述べたと同様であり、同じ符号を付して説明を省略する。
【００８７】
２．１．１．第３液体
第３液体Ｌ３は、第２液体Ｌ２と混和しない液体である。また、第３液体Ｌ３は、第２液体Ｌ２より比重が大きい液体である。第３液体Ｌ３は、このような性質を有するため、図５に示すように、第３容器１２内に第３液体Ｌ３および第２液体Ｌ２が共存する場合には、第３液体Ｌ３と第２液体Ｌ２の間に（相分離）界面Ｉ３２が形成され、界面Ｉ３２の下側（第３容器１２の底側）に第３液体Ｌ３が位置し、界面Ｉ３２の上側（第３容器１２の開口側）に第２液体Ｌ２が位置することになる。また、第３液体Ｌ３は、表面張力を有し、第３液体Ｌ３の体積が小さければ、第２液体Ｌ２中で液滴を形成することができる。
【００８８】
第３液体Ｌ３は、水性、油性のいずれであってもよい。例えば、第３液体Ｌ３が水性である場合には、第２液体Ｌ２は、油性であることができ、また、その逆であってもよい。第３液体Ｌ３は、例えば、ＰＣＲの反応液を調製するための溶液であってもよい。第３液体Ｌ３を用いて調製される溶液がＰＣＲの反応液である場合には、第３液体Ｌ３は、核酸（標的核酸）または反応に必要な試薬のうち少なくとも一種を含む溶液であることができる。この場合などは、第２容器３０に残りの一部の試薬をあらかじめ収容しておいてもよい。また、第３液体Ｌ３としては、例えば、大気中の酸素によって酸化されやすい物質や、大気中の水等の分子と反応しやすい物質の溶液であってもよい。
【００８９】
２．１．２．第３容器
第３容器１２は、第１実施形態で述べた第１容器１０と実質的に同様である。第３容器１２は、本実施形態の分注方法によって分注される第３液体Ｌ３が収容される容器である。本実施形態の分注方法では、第３容器１２には、第２液体Ｌ２も収容される。第３容器１２の形状は、第３液体Ｌ３および第２液体Ｌ２が収容されたときに、第３容器１２内に第３液体Ｌ３と第２液体Ｌ２との間の界面Ｉ３２が形成され、第３液体Ｌ３が大気に接触しないようにできるかぎり任意である。第３容器１２は、例えば、試験管、バイアル、生化学の分野で一般に使用される容器などであることができる。第３容器１２の材質は、第１容器１０と同様である。
【００９０】
２．２．分注方法
本実施形態の分注方法は、第１吸引工程と、第２吸引工程と、第３吸引工程と、第４吸引工程と、第５吸引工程と、第４吐出工程と、第５吐出工程と、第６吐出工程と、第７吐出工程と、第２吐出工程と、第３吐出工程と、を含む。
【００９１】
本実施形態における第１吸引工程、第２吸引工程、第３吸引工程、第２吐出工程と、第３吐出工程は、第２吐出工程が第７吐出工程に連続して行われる以外は、第１実施形態で述べたと同様であり、同じ符号を付して説明を省略する。本実施形態の分注方法は、第１実施形態と同様にして第１吸引工程から第３吸引工程（ステップＳ１３）が行われ、その後、以下の工程が行われる。
【００９２】
図５（ａ）は、本実施形態の分注方法において、第３吸引工程（ステップＳ１３）を経た後の管２０の状態を示している。図５（ａ）に示すように、第３吸引工程を経た後の管２０では、一端側から第２液体Ｌ２、第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２の順に液柱が形成され、この状態で管２０を移動させることができる。
【００９３】
２．２．１．第４吸引工程
第４吸引工程（ステップＳ１４）は、第３吸引工程（ステップＳ１３）の後で行われる。第４吸引工程と第３吸引工程との間には、例えば、管２０の一端を第３容器１２内に移動させるなどの、他の工程が行われてもよい。
【００９４】
第４吸引工程では、第３容器１２において管２０の一端が第３液体Ｌ３と第２液体Ｌ２との界面Ｉ３２より下の位置で、第３液体Ｌ３を管２０の一端側から管２０内に吸引する。第４吸引工程で界面Ｉ３２より下の位置に配置される一端は、第３吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。第４吸引工程で吸引される第３液体Ｌ３の体積は特に限定されない。
【００９５】
図５（ｂ）は、第４吸引工程において、第３容器１２内に収容された第３液体Ｌ３を管２０の一端側から吸引した様子を模式的に表している。第４吸引工程を経ると、管２０の一端側に、第２液体Ｌ２の液柱に対して第１液体Ｌ１の液柱とは反対側に第３液体Ｌ３の液柱が形成される。
【００９６】
２．２．２．第５吸引工程
第５吸引工程（ステップＳ１５）は、第４吸引工程（ステップＳ１４）に連続して行われる。第５吸引工程では、第３容器１２において管２０の一端が界面Ｉ３２より上の位置で、第２液体Ｌ２を管２０の一端側から管２０内に吸引する。第５吸引工程で界面Ｉ３２より上の位置に配置される一端は、第４吸引工程で第３液体Ｌ３を吸引した一端である。
【００９７】
第５吸引工程で吸引される第２液体Ｌ２の体積は特に限定されない。第４吐出工程で、第２容器３０にあらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていない場合には、第５吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２の体積は、当該第２液体Ｌ２が第４吐出工程で吐出された際に管２０の一端の開口を浸す程度よりも大きいことが好ましい。
【００９８】
図５（ｃ）は、第５吸引工程において、第３容器１２内に収容された第２液体Ｌ２を管２０の一端側から吸引した様子を模式的に表している。第５吸引工程を経ると、管２０の一端側に、第３液体Ｌ３の液柱の下に第２液体Ｌ２の液柱が形成される。図５（ｄ）は、第５吸引工程を経た後の管２０の状態を示している。図５（ｄ）に示すように、第５吸引工程を経た後の管２０では、一端側から第２液体Ｌ２、第３液体Ｌ３、第２液体Ｌ２、第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２の順に液柱が形成され、この状態で管２０を移動させることができる。
【００９９】
２．２．３．第４吐出工程
第４吐出工程（ステップＳ２４）は、第５吸引工程（ステップＳ１５）の後で行われる。第５吸引工程と第４吐出工程との間には、少なくとも第３容器１２から管２０を第２容器３０に移動させる工程が行われる。第５吸引工程と第４吐出工程との間には、他の工程が行われてもよい。
【０１００】
第４吐出工程では、第５吸引工程（ステップＳ１５）で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第４吐出工程で第２液体Ｌ２が吐出される一端は、第５吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。
【０１０１】
第４吐出工程では、第２容器３０に第２液体Ｌ２が吐出されるが、吐出された第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されるように行われる。第４吐出工程において、管２０の一端の開口が浸されることにより、第５吐出工程で吐出される第３液体Ｌ３を大気に接触させないようにすることができる。また、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されることにより、第５吐出工程で吐出される第３液体Ｌ３を管２０から吐出させやすくすることができる。
【０１０２】
第４吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２を収容する第２容器３０には、あらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていてもよい。このようにすれば、第４吐出工程の前後で第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口を浸しやすく、第５吐出工程で吐出される第３液体Ｌ３をさらに大気に接触させにくくすることができる。また、第２容器３０にあらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていると、第５吐出工程で吐出される第３液体Ｌ３を管２０からさらに吐出させやすくすることができる。
【０１０３】
２．２．４．第５吐出工程
第５吐出工程（ステップＳ２５）は、第４吐出工程（ステップＳ２４）に連続して行われる。第５吐出工程では、第４吸引工程（ステップＳ１４）で管２０内に吸引された第３液体Ｌ３を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第５吐出工程で第３液体Ｌ３が吐出される一端は、第４吐出工程で第３液体Ｌ３を吐出した一端である。
【０１０４】
第５吐出工程は、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸された状態で行われる。これにより、第５吐出工程で吐出される第３液体Ｌ３を大気に接触させないようにすることができる。また、第２吐出工程と同様に、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されることにより、第５吐出工程で吐出される第３液体Ｌ３を管２０から吐出させやすくなっている。
【０１０５】
２．２．５．第６吐出工程
第６吐出工程（ステップＳ２６）は、第５吐出工程（ステップＳ２５）に連続して行われる。第６吐出工程では、第３吸引工程（ステップＳ１３）で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２の一部を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第６吐出工程で第２液体Ｌ２が吐出される一端は、第３吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。
【０１０６】
第６吐出工程は、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸された状態で行われる。これにより、第６吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２が、第２容器３０中の第２液体Ｌ２と合一し、第５吐出工程で吐出された第３液体Ｌ３を管２０から離脱させることができる。
【０１０７】
第６吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２は、第３吸引工程で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２の一部である。これにより、第６吐出工程が終了した後、管２０は、一端側から第２液体Ｌ２、第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２の順に液柱が形成され、この状態で管２０を移動させることができる。
【０１０８】
２．２．６．第７吐出工程
第７吐出工程（ステップＳ２７）は、第６吐出工程（ステップＳ２６）の後で行われる。第６吐出工程と第７吐出工程との間には、管２０を他の第２容器３０に移動させる工程が行われてもよい。第７吐出工程は、第６吐出工程を行った第２容器３０と同一の第２容器３０に対して行われてもよいし、第６吐出工程を行った第２容器３０とは異なる第２容器３０に対して行われてもよい。
【０１０９】
第７吐出工程が、第６吐出工程を行った第２容器３０と同一の第２容器３０に対して行われる場合には、当該第２容器３０内で、第１液体Ｌ１と第３液体Ｌ３とを混合することができる。また、第７吐出工程が、第６吐出工程を行った第２容器３０とは異なる第２容器３０に対して行われる場合には、各第２容器３０に、第１液体Ｌ１と第３液体Ｌ３とをそれぞれ分注することができる。
【０１１０】
第７吐出工程では、第３吸引工程（ステップＳ１３）で管２０内に吸引され、第６吐出工程で管２０内に残された第２液体Ｌ２の一部を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第７吐出工程で第２液体Ｌ２が吐出される一端は、第３吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。
【０１１１】
第７吐出工程では、第２容器３０に第２液体Ｌ２が吐出されるが、吐出された第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されるように行われる。第７吐出工程において、管２０の一端の開口が浸されることにより、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１を大気に接触させないようにすることができる。また、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されることにより、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１を管２０から吐出させやすくすることができる。
【０１１２】
第７吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２を収容する第２容器３０には、あらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていてもよい。このようにすれば、第７吐出工程の前後で第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口を浸しやすく、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１をさらに大気に接触させにくくすることができる。また、第２容器３０にあらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていると、第２吐出工程で吐出される第１液体Ｌ１を管２０からさらに吐出させやすくすることができる。
【０１１３】
本実施形態の分注方法では、第７吐出工程の後、第１実施形態で述べたと同様に、第２吐出工程と、第３吐出工程とが行われる。
【０１１４】
２．３．作用効果
本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３は、第１容器１０および第３容器１２に収容された状態、並びに各吸引工程および各吐出工程において、第２液体Ｌ２によって封じられた状態にあるので、気相（大気等）に接触しにくい。すなわち、本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３は、分注される際には、第２液体Ｌ２に接する状態で取り扱われるので大気等に接触しにくい。そのため、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３からそれらの構成成分が気相に蒸発することや、気相から第１液体Ｌ１または第３液体Ｌ３へ水などの他の物質が混入することが抑制される。これにより、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３の濃度の変動が小さく抑えられ、正確な分注を行うことができる。
【０１１５】
また本実施形態の分注方法によれば、第５吐出工程（ステップＳ２５）で、第３液体Ｌ３が第２液体Ｌ２中に吐出され、第２吐出工程（ステップＳ２２）で、第１液体Ｌ１が第２液体Ｌ２中に吐出される。そのため、第５吐出工程および第２吐出工程において、管２０内または管２０の一端付近に第３液体Ｌ３および第１液体Ｌ１が残存しにくい。したがって精度よく第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３を第２容器３０へと分注することができる。
【０１１６】
さらに、本実施形態の分注方法によれば、第３液体Ｌ３および第１液体Ｌ１は第２液体Ｌ２によって包埋されて取り扱われるので、第３液体Ｌ３および第１液体Ｌ１が互いに混合しにくい。そのため、１つの管２０を用いて複数種の液体を分注することができる。したがって、第１実施形態の変形実施形態と同様に、本実施形態においても、複数種の液体を複数の第２容器３０にそれぞれ分注することや、複数種の液体を１つの第２容器３０に分注することができる。
【０１１７】
３．第３実施形態
本発明に係る分注方法の第３実施形態を述べる。図６は、分注方法を示すフローチャートである。図７および図８は、それぞれ本実施形態の分注方法の工程の一部を説明する模式図である。図７（ａ）は、本実施形態に係る第５吸引工程を模式的に示し、図７（ｂ）および図７（ｃ）は、本実施形態に係る混合工程を模式的に示し、図７（ｄ）および図７（ｅ）は、本実施形態に係る混合工程を経た後の状態を模式的に示している。図８（ａ）は、本実施形態に係る第８吐出工程を模式的に示し、図８（ｂ）は、本実施形態に係る第１０吐出工程を模式的に示している。
【０１１８】
３．１．構成
本実施形態の分注方法は、第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２が収容された第１容器１０、および、第２液体Ｌ２および第３液体Ｌ３が収容された第３容器１２から、一端が開放され他端側に液溜２２が接続された管２０を用いて、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３を第２容器３０に分注する分注方法である。
【０１１９】
本実施形態における第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２、第３液体Ｌ３、第１容器１０、第３容器１２、管２０は、第１実施形態または第２実施形態で述べたと同様であり、同じ符号を付して説明を省略する。本実施形態では、管２０の他端側に液溜２２が接続される。
【０１２０】
３．１．１．液溜
液溜２２は、管２０の他端側に接続される。液溜２２は、管２０の内径よりも大きい内径を有する容室である。液溜２２は、管２０と一体であっても、管２０に着脱可能であってもよい。管２０に液溜２２が接続されても、液溜２２の管２０とは異なる位置にポンプ等を接続することで、管２０は他端側から液溜２２を介して液体を吸引することができる。液溜２２の形状は、管２０の他端側から管２０内の液体が液溜２２に吸引された際に液体がプラグを形成しない形状であれば特に限定されない。
【０１２１】
液溜２２から管２０へ液体を送液する場合は、液溜２２内で液体のプラグが形成されないため、液溜２２内の液体は、管２０から液溜２２に吸引された順番とは独立に、比重の大きい順番で送液される。液溜２２内を吸引、加圧する手段は、管２０で説明した手段と同様である。また、液溜２２の材質は、管２０の材質と同様である。
【０１２２】
さらに、液溜２２は、少なくとも内壁が疎水性を有することが好ましい。液溜２２の少なくとも内壁が疎水性を有すると、分注する液体が水性である場合に、該液体が液溜２２に付着しにくい。
【０１２３】
３．２．分注方法
本実施形態の分注方法は、第１吸引工程と、第２吸引工程と、第３吸引工程と、第４吸引工程と、第５吸引工程と、混合工程と、第８吐出工程と、第９吐出工程と、第１０吐出工程と、を含む。
【０１２４】
本実施形態における第１吸引工程、第２吸引工程、第３吸引工程、第４吸引工程、第５吸引工程は、第１実施形態および第２実施形態で述べたと同様であり、同じ符号を付して説明を省略する。本実施形態の分注方法は、第２実施形態と同様に第５吸引工程（ステップＳ１５）まで行われ、その後、以下の工程が行われる。
【０１２５】
図７（ａ）は、本実施形態の分注方法において、第５吸引工程（ステップＳ１５）を経た後の管２０が第３容器１２に配置された状態を示している。図７（ａ）に示すように、第５吸引工程を経た後の管２０では、一端側から第２液体Ｌ２、第３液体Ｌ３、第２液体Ｌ２、第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２の順に液柱が形成されている。
【０１２６】
３．２．１．混合工程
混合工程（ステップＳ３０）は、第５吸引工程（ステップ１５）中または第５吸引工程（ステップ１５）の後で行われる。図７（ｂ）ないし（ｄ）の例は、混合工程が第５吸引工程中に行われる様子を表している。図７（ｅ）は、混合工程が、第５吸引工程を終えた後、管２０を大気中に移動してから行われた後の様子を表している。
【０１２７】
混合工程では、管２０内に第５吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２の少なくとも一部が残るように、液溜２２に管２０内の各液体（第１吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２、第２吸引工程で吸引された第１液体Ｌ１、第３吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２、および第４吸引工程で吸引された第３液体、並びに、必要に応じて、第５吸引工程で吸引された第２液体の一部）を吸引する。そして、第２吸引工程で管２０内に吸引された第１液体Ｌ１、および第４吸引工程で管２０内に吸引された第３液体Ｌ３を、液溜２２内で混合させて第４液体Ｌ４とする。かつ、第１吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２、第３吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２、および、場合によっては第５吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２を混合させる。
【０１２８】
本明細書において、「Ａ工程がＢ工程中に行われる」との表現は、Ｂ工程においてＡ工程が行われることを指す。したがって本実施形態の混合工程が第５吸引工程中に行われる場合は、混合工程が第５吸引工程において第２液体を管内に吸引しながら行われる場合のことを指す。またなお、本実施形態の混合工程が第５吸引工程の後に行われる場合は、混合工程が気体または他の液体を管内に吸引しながら行われる場合のことを指す。
【０１２９】
図７（ｂ）に示すように、液溜２２内に、第１吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２および第２吸引工程で吸引された第１液体Ｌ１が導入されると、第１液体Ｌ１のプラグ形状が解けて、液溜２２内に第１液体Ｌ１の液滴が形成される。続いて、図７（ｃ）に示すようにさらに吸引すると、液溜２２内に、第３吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２および第４吸引工程で吸引された第３液体Ｌ３が導入される。液溜２２に導入された第２液体Ｌ２同士は合一するので、第２液体Ｌ２よりも比重が大きい第１液体Ｌ１の液滴と第３液体Ｌ３とが液溜２２内において接触する。そして、図７（ｄ）に示すように、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３との混合液体である第４液体Ｌ４の液滴が液溜２２内に形成される。この状態においても、液溜２２内では、第４液体Ｌ４のほうが第２液体Ｌ２よりも比重が大きいため、第４液体Ｌ４は、第２液体Ｌ２に包埋されて大気に接触しにくい。なお、混合は液溜２２の管２０に接続されている側を下にして行うことが好ましい。これにより、液溜２２に空気が存在しても、第１液体Ｌ１、第３液体Ｌ３、および第４液体Ｌ４をさらに空気に触れにくくできる。
【０１３０】
第４液体Ｌ４は、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３との混合液体である。例えば、第１液体Ｌ１がＰＣＲにおける増幅対象の核酸の水溶液であり、第２液体Ｌ２がＰＣＲにおける反応に必要な試薬であれば、第４液体Ｌ４はＰＣＲの反応液である。
【０１３１】
混合工程を経ると、液溜２２内に第４液体Ｌ４の液滴と第２液体Ｌ２が存在し、管２０内には、第５吸引工程で吸引された第２液体Ｌ２の液柱が存在する状態となる。そして、この状態で管２０を移動させることができる。
【０１３２】
３．２．２．第８吐出工程
第８吐出工程（ステップＳ２８）は、混合工程（ステップＳ３０）の後に行われる。第８吐出工程では、第５吸引工程（ステップＳ１５）で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２のうち、混合工程を経て管２０内に残された第２液体Ｌ２を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。混合工程と第８吐出工程との間には、他の工程が行われてもよい。第８吐出工程で第２液体Ｌ２が吐出される一端は、第５吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。
【０１３３】
第８吐出工程は、第２容器３０に第２液体Ｌ２が吐出されるが、吐出された第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されるように行われる。第８吐出工程において、管２０の一端の開口が浸されることにより、第９吐出工程で吐出される第４液体Ｌ４を大気に接触させにくくすることができる。また、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されることにより、第９吐出工程で吐出される第４液体Ｌ４を管２０から吐出させやすくすることができる。
【０１３４】
第８吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２を収容する第２容器３０には、あらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていてもよい。このようにすれば、第８吐出工程の前後で第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口を浸しやすく、第９吐出工程で吐出される第４液体Ｌ４をさらに大気に接触させにくくすることができる。また、第２容器３０にあらかじめ第２液体Ｌ２が収容されていると、第９吐出工程で吐出される第４液体Ｌ４を管２０からさらに吐出させやすくすることができる。
【０１３５】
図８（ａ）は、第８吐出工程で管２０が、第２容器３０内に配置された状態を示している。なお、図８（ａ）は、第２容器３０内にあらかじめ第２液体Ｌ２が収容されている状態を示している。
【０１３６】
３．２．３．第９吐出工程
第９吐出工程（ステップＳ２９）は、第８吐出工程（ステップＳ２８）に連続して行われる。第９吐出工程では、混合工程（ステップＳ３０）で液溜２２内に形成された第４液体Ｌ４を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第９吐出工程で第４液体Ｌ４が吐出される一端は、管２０の液溜２２が接続されていない一端である。
【０１３７】
第９吐出工程は、第２容器３０内の第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸された状態で行われる。これにより、第９吐出工程で吐出される第４液体Ｌ４を大気に接触させないようにすることができる。また、第２吐出工程と同様に、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されることにより、第９吐出工程で吐出される第４液体Ｌ４を管２０から吐出させやすくなっている。
【０１３８】
３．２．４．第１０吐出工程
第１０吐出工程（ステップＳ２１０）は、第９吐出工程（ステップＳ２９）に連続して行われる。第１０吐出工程では、混合工程（ステップＳ３０）で混合された第２液体Ｌ２の少なくとも一部を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第１０吐出工程で第２液体Ｌ２が吐出される一端は、第１吸引工程で第２液体Ｌ２を吸引した一端である。
【０１３９】
第１０吐出工程は、第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸された状態で行われる。これにより、第１０吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２が、第２容器３０中の第２液体Ｌ２と合一し、第９吐出工程で吐出された第４液体Ｌ４を管２０から離脱させることができる。第１０吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２は、混合工程で混合された第２液体Ｌ２の一部であっても全部であってもよい。
【０１４０】
図８（ｂ）は、第１０吐出工程が終了し、第１０吐出工程で第２液体Ｌ２の一部が吐出された状態を示しており、管２０内に第２液体Ｌ２の液柱が残存し、第４液体Ｌ４が管２０から離脱した状態を示している。第１０吐出工程では、第２容器３０中の第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されて行われるため、第４液体Ｌ４が大気に接触することが抑制される。また、第１０吐出工程は、第２容器３０中の第２液体Ｌ２に管２０の一端の開口が浸されて行われるため、第１０吐出工程によって、図示のように、管２０内の第２液体Ｌ２の液柱と第２容器３０内の第２液体Ｌ２とを連続させることができる。そのため、第４液体Ｌ４を管２０の一端の開口から容易に離脱させることができる。なお、図８（ｂ）では、離脱した第４液体Ｌ４が液滴を形成している例を示している。
【０１４１】
３．３．作用効果
本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３を確実に混合することができる。すなわち、本実施形態の分注方法によれば、混合工程において第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３の液滴を、液溜２２中で合一させて第４液体Ｌ４の液滴を形成できるので、第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３を第２容器３０にそれぞれ吐出した後に第２容器３０内で両者の液滴を合一させる場合に比べて、第１液体Ｌ１と第３液体Ｌ３とを接触させやすいので、より確実に第１液体Ｌ１および第３液体Ｌ３を混合することができる。
【０１４２】
また、本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１、第３液体Ｌ３および第４液体Ｌ４は、第１容器１０および第３容器１２に収容された状態、並びに各吸引工程、混合工程および各吐出工程において、第２液体Ｌ２によって封じられるので、一貫して気相に接触しにくい。すなわち、本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１、第３液体Ｌ３および第４液体Ｌ４は、分注される際には、第２液体に接する状態で取り扱われるので大気等に接触しにくい。そのため、第１液体Ｌ１、第３液体Ｌ３または第４液体Ｌ４からそれらの構成成分が気相に蒸発することや、気相から第１液体Ｌ１、第３液体Ｌ３または第４液体Ｌ４へ水などの他の物質が混入することが抑制される。これにより、第１液体Ｌ１、第３液体Ｌ３および第４液体Ｌ４の濃度の変動が小さく抑えられ、正確な分注を行うことができる。
【０１４３】
また、本実施形態の分注方法によれば、第９吐出工程で、第４液体Ｌ４が第２液体Ｌ２中に吐出される。そのため、第９吐出工程において、管２０内または管２０の一端付近に第４液体Ｌ４が残存しにくい。したがって精度よく第４液体Ｌ４を第２容器３０へと分注することができる。
【０１４４】
４．第４実施形態
本発明に係る分注方法の第４実施形態を述べる。図９は、本実施形態に係る分注方法を示すフローチャートである。図１０は、本実施形態の分注方法の工程の一部を説明する模式図である。図１０（ａ）は、本実施形態で用いる第２容器を模式的に示し、図１０（ｂ）は、本実施形態に係る第１吐出工程を模式的に示し、図１０（ｃ）は、本実施形態に係る第１１吐出工程を経た後の状態を模式的に示している。
【０１４５】
４．１．構成
本実施形態の分注方法は、第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２が収容された第１容器１０から、管２０を用いて第１液体Ｌ１を、第５液体Ｌ５が収容された第２容器３０に分注する分注方法である。
【０１４６】
本実施形態における第１液体Ｌ１、第２液体Ｌ２、第１容器１０、管２０は、第１実施形態または第２実施形態で述べたと同様であり、同じ符号を付して説明を省略する。本実施形態では、第２容器３０にあらかじめ第５液体Ｌ５が収容されている。
【０１４７】
４．１．１．第５液体
第５液体Ｌ５は、第１液体Ｌ１と混和しない液体である。また、第５液体Ｌ５は、第１液体Ｌ１よりも比重が小さい液体である。第５液体Ｌ５としては、第２液体Ｌ２と混和する液体が使用される。第５液体Ｌ５は、第２液体Ｌ２と同様に、第１液体Ｌ１が水性である場合には油性であることができる。第１液体Ｌ１がＰＣＲの反応液である場合には、第５液体Ｌ５は、オイルであることができる。このようなオイルとしては、例えば、ジメチルシリコーンオイル等のシリコーン系オイル、パラフィン系オイルおよびミネラルオイル並びにそれらの混合物を挙げることができる。
【０１４８】
４．２．分注方法
本実施形態の分注方法は、第６吸引工程と、第２吸引工程と、第３吸引工程と、第１吐出工程と、第２吐出工程と、第１１吐出工程と、を含む。
【０１４９】
本実施形態における第２吸引工程、第３吸引工程、第１吐出工程、第２吐出工程は、第２吸引工程が第６吸引工程の後で行われる以外は、第１実施形態で述べたと同様であり、同じ符号を付して説明を省略する。図１０（ａ）は、第２容器３０に第５液体Ｌ５が収容された状態を示す。
【０１５０】
４．２．１．第６吸引工程
第６吸引工程（ステップＳ１６）では、第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５を管２０の一端側から管２０内に吸引する。第６吸引工程で第２液体Ｌ２が吸引される場合は、第１容器１０内に収容された第２液体Ｌ２であっても、他の容器に収容された第２液体Ｌ２であってもよい。第６吸引工程で第５液体Ｌ５が吸引される場合は、第２容器３０内に収容された第５液体Ｌ５であっても、他の容器に収容された第５液体Ｌ５であってもよい。第６吸引工程で吸引される第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５の体積は特に限定されないが、第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１が管２０内の気体の影響を受けない程度の体積で吸引されることが好ましい。
【０１５１】
第６吸引工程は、管２０の内壁に第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５を接触させて、第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１が管２０の内壁に付着しにくくし、および第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１が管２０内で移動しやすくする。第６吸引工程を行うことにより、第２吸引工程で吸引される第１液体Ｌ１が管２０内の気体と接触しにくくすることができる。
【０１５２】
第６吸引工程を経ると、管２０の一端側に、第２液体Ｌ２の液柱が形成される。そして、本実施形態では、第６吸引工程（ステップＳ１６）の後で第２吸引工程（ステップＳ１２）が行われ、第１実施形態で述べたと同様に、第３吸引工程（ステップＳ１３）、第１吐出工程（ステップＳ２１）、第２吐出工程（ステップＳ２２）の順で各工程が行われる。第２吐出工程を経ると、管２０内に第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５の液柱が残存し、第１液体Ｌ１が管２０から出て、第１液体Ｌ１が管２０の一端に接触している状態となる（図３（ｃ）参照）。
【０１５３】
なお、本実施形態では、第２容器３０内には、あらかじめ第５液体Ｌ５が収容されているが、第１吐出工程を経ると第５液体Ｌ５と第２液体Ｌ２が混合される。したがって、第１１吐出工程においては第２容器３０内には、第５液体Ｌ５および第２液体Ｌ２の混合液体が収容されている。
【０１５４】
４．２．２．第１１吐出工程
第１１吐出工程（ステップＳ２１１）は、第２吐出工程（ステップＳ２２）に連続して行われる。第１１吐出工程では、第６吸引工程（ステップＳ１６）で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５の少なくとも一部を、管２０の一端側から第２容器３０に吐出する。第１１吐出工程で第２液体Ｌ２または第５液体が吐出される一端は、第６吸引工程で第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５を吸引した一端である。
【０１５５】
第１１吐出工程は、第２容器３０内の第５液体Ｌ５および第２液体Ｌ２の混合液体に管２０の一端の開口が浸された状態で行われる。これにより、第１１吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５が、第２容器３０中の第５液体Ｌ５および第２液体Ｌ２の混合液体と合一し、第２吐出工程で吐出された第１液体Ｌ１を管２０から離脱させることができる。
【０１５６】
第１１吐出工程で吐出される第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５は、第６吸引工程で管２０内に吸引された第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５の一部でも全部でもよい。
【０１５７】
図１０（ｃ）は、第１１吐出工程が終了し、第１１吐出工程で第５液体Ｌ５の一部が吐出された状態を示しており、管２０内に第５液体Ｌ５の液柱が残存し、第１液体Ｌ１が管２０から離脱した状態を示している。第１１吐出工程では、第２容器３０中の第５液体Ｌ５および第２液体Ｌ２の混合液体に管２０の一端の開口が浸されて行われるため、第１液体Ｌ１が大気に接触しにくい。また、第１１吐出工程は、第２容器３０中の第５液体Ｌ５および第２液体Ｌ２の混合液体に管２０の一端の開口が浸されて行われるため、第１１吐出工程によって、図示のように、管２０内の第５液体Ｌ５の液柱と第２容器３０内の第５液体Ｌ５および第２液体Ｌ２の混合液体とを連続させることができる。そのため、第１液体Ｌ１を管２０の一端の開口から容易に離脱させることができる。なお、図１０（ｃ）では、離脱した第１液体Ｌ１が液滴を形成している例を示している。
【０１５８】
４．３．作用効果
本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１は、第１容器１０に収容された状態、並びに各吸引工程および各吐出工程において、第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５によって封じられた状態であるので、気相（大気等）に接触しにくい。すなわち、本実施形態の分注方法によれば、第１液体Ｌ１は、第１容器１０から第２容器３０に分注される際には、第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５に接する状態で取り扱われ大気等に接触しにくい。そのため、第１液体Ｌ１から構成成分が気相に蒸発することや、気相から第１液体Ｌ１へ水などの他の物質が混入することが抑制される。これにより、第１液体Ｌ１の溶媒および溶質の濃度の変動が小さく抑えられ、正確な分注を行うことができる。
【０１５９】
また、本実施形態の分注方法によれば、第２吐出工程で、第１液体Ｌ１が、第５液体Ｌ５および第２液体Ｌ２の混合液体中に吐出される。そのため、第２吐出工程において、管２０内または管２０の一端付近に第１液体Ｌ１が残存しにくい。したがって精度よく第１液体Ｌ１を第１容器１０から第２容器３０へと分注することができる。
【０１６０】
５．その他の実施形態
上述の各実施形態において、第２液体Ｌ２および第５液体Ｌ５の少なくとも一方に導電性を有してもよい。
【０１６１】
第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５に導電性を付与する方法としては、添加剤を添加することが挙げられる。このような添加剤としては、カルビノール変性オイルやトリメチルシロキシケイ酸とシクロペンタシロキサンの混合物等がある。添加剤の好ましい添加量としては、第２液体Ｌ２または第５液体Ｌ５の電気抵抗率が、１０１２［Ω・ｍ］以下となる程度である。この場合の添加剤の添加量は３%以下である。
【０１６２】
第２液体Ｌ２および第５液体Ｌ５の少なくとも一方が導電性を有すると、第１液体Ｌ１、第３液体Ｌ３、第４液体Ｌ４、管２０、第１容器１０、第３容器１２、および第２容器３０が帯電しにくくなるので、より安定した分注方法とすることができる。
【０１６３】
特に、各実施形態において、ナノリットルの規模の液体を扱う場合には、第２液体Ｌ２および第５液体Ｌ５の少なくとも一方が帯電していると、各種の不具合が生じる可能性が高くなる。不具合としては、具体的には、各工程における吸引、吐出動作の際、および管２０の移動の際に、液体が管２０から離脱しにくかったり、液体が容器から飛び出したりすることが挙げられる。しかし、第２液体Ｌ２および第５液体Ｌ５の少なくとも一方に導電性を付与すれば、このような不具合を生じにくくすることができる。
【０１６４】
上記第４実施形態において、第５液体Ｌ５に導電性を付与すれば、第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２の少なくとも一方が帯電した場合に、各吐出工程において、管２０の先端付近で第１液体Ｌ１および第２液体Ｌ２の少なくとも一方が、第５液体Ｌ５との間の静電的な引力または斥力によって、予期せぬ挙動を示すことを抑制することができる。そのため、より確実に第１液体Ｌ１を第１容器１０から第２容器３０へと分注することができる。
【０１６５】
上記第１実施形態ないし第４実施形態において、第２液体Ｌ２に導電性を付与すれば、各液体が帯電した場合に、各吐出工程において、管２０の先端付近で少なくとも第１液体Ｌ１が、第２容器３０またはその内容物との間の静電的な引力または斥力によって、予期せぬ挙動を示すことを抑制することができる。そのためより確実に第１液体Ｌ１を第２容器３０へと分注することができる。
【０１６６】
なお、本発明の分注方法は、上述の各実施形態、変形実施形態、およびその他の実施形態のそれぞれの一部または全部の工程を互いに適宜組み合わせてもよいことは容易に理解されるであろう。
【０１６７】
６．分注装置
上記各実施形態の分注方法は、作業者が行ってもよいが、以下に説明する分注装置を用いて行うことができる。以下に分注装置１００を例示する。図１１は、分注装置１００を模式的に示す図である。分注装置１００は、管２０、支持体５０、ポンプ６０、ステージ７０、移動機構８０および制御手段９０を有する。
【０１６８】
管２０は、上記実施形態で述べた管２０であり、一端が支持体５０から下方に向かって突出するように、支持体５０に支持されている。管２０の他端側には、ポンプ６０が接続されている。
【０１６９】
支持体５０は、管２０を支持する。支持体５０は、例えば、管２０を取り替えることのできる機構を有してもよい。支持体５０は、移動機構８０によって移動されることができる。
【０１７０】
ポンプ６０は、管２０内を他端側から吸引することと、管２０内に他端側から圧力を印加することとができる。ポンプ６０の吸引および加圧の動作は、制御手段９０によって制御されることができる。
【０１７１】
ステージ７０は、該ステージ７０上に容器等を載置することができる。図１１の例では、第１容器１０および第２容器３０がステージ７０上に載置されている。ステージ７０は、移動機構８０によって移動されることができる。
【０１７２】
移動機構８０は、支持体５０およびステージ７０の相対的な位置関係を変化させる機構である。図示の例では、移動機構８０は、支持体５０およびステージ７０の両者に設けられているが、いずれか一方に設けられてもよい。移動機構８０は、支持体５０およびステージ７０の相対的な位置関係を変化させて、管２０を各容器間で移動させること、および各容器内の管２０の一端の位置を変化させることができる。
【０１７３】
制御手段９０は、ポンプ６０および移動機構８０の動作を制御することができる。制御手段９０は、例えば、電子計算機（パーソナルコンピューター等）で構成することができる。制御手段９０は、上述した分注方法に従ってポンプ６０および移動機構８０の動作を制御するプログラムを備えることができる。
【０１７４】
以上のような構成により、分注装置１００によれば、上記実施形態の分注方法を行うことができ、例えば、第１容器１０から第２容器３０へ第１液体Ｌ１を分注することができる。
【０１７５】
本発明は、以上説明した実施形態に限定されるものではなく、種々の変形が可能である。例えば、本発明は、実施形態で説明した構成と実質的に同一の構成（例えば、機能、方法および結果が同一の構成、あるいは目的および効果が同一の構成）を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成の本質的でない部分を置き換えた構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成と同一の作用効果を奏する構成または同一の目的を達成することができる構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成に公知技術を付加した構成を含む。
【符号の説明】
【０１７６】
１０…第１容器、１２…第３容器、２０…管、２２…液溜、３０…第２容器、５０…支持体、６０…ポンプ、７０…ステージ、８０…移動機構、９０…制御手段、１００…分注装置、Ｌ１…第１液体、Ｌ２…第２液体、Ｌ３…第３液体、Ｌ４…第４液体、Ｌ５…第５液体、Ｉ１２，Ｉ３２…界面
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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