【手続補正書】
【提出日】平成26年8月29日(2014.8.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トランスフォーミング増殖因子−β（TGF-β）阻害剤からなる、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進剤。
【請求項２】
トランスフォーミング増殖因子−β（TGF-β）阻害剤からなり、ここで該TGF-β阻害剤がTGF-β受容体阻害剤である、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進剤。
【請求項３】
TGF-β阻害剤が、下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物からなるTGF-β受容体阻害剤である、請求項1または2に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進剤。
【化１】
2012070731.tif 000001
【化２】
2012070731.tif 000002
【化３】
2012070731.tif 000003
【請求項４】
下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物からなる、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進剤。
【化４】
2012070731.tif 000004
【化５】
2012070731.tif 000005
【化６】
2012070731.tif 000006
【請求項５】
多能性幹細胞がヒト多能性幹細胞である、請求項1から4のいずれか1項に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進剤。
【請求項６】
多能性幹細胞が人工多能性幹細胞である、請求項1から5のいずれか1項に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進剤。
【請求項７】
下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物からなる、ヒト人工多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進剤。
【化７】
2012070731.tif 000007
【化８】
2012070731.tif 000008
【化９】
2012070731.tif 000009
【請求項８】
トランスフォーミング増殖因子−β（TGF-β）阻害剤を含む、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進用組成物。
【請求項９】
トランスフォーミング増殖因子−β（TGF-β）阻害剤を含み、ここで該TGF-β阻害剤がTGF-β受容体阻害剤である、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進用組成物。
【請求項１０】
TGF-β阻害剤が下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物からなるTGF-β受容体阻害剤である、請求項8または9に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進用組成物。
【化１０】
2012070731.tif 000010
【化１１】
2012070731.tif 000011
【化１２】
2012070731.tif 000012
【請求項１１】
下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物を含む、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進用組成物。
【化１３】
2012070731.tif 000013
【化１４】
2012070731.tif 000014
【化１５】
2012070731.tif 000015
【請求項１２】
多能性幹細胞がヒト多能性幹細胞である、請求項8から11のいずれか1項に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進用組成物。
【請求項１３】
多能性幹細胞が人工多能性幹細胞である請求項8から12のいずれか1項に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進用組成物。
【請求項１４】
下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物を含む、ヒト人工多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進用組成物。
【化１６】
2012070731.tif 000016
【化１７】
2012070731.tif 000017
【化１８】
2012070731.tif 000018
【請求項１５】
下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物を試薬として含む、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導促進用試薬キット。
【化１９】
2012070731.tif 000019
【化２０】
2012070731.tif 000020
【化２１】
2012070731.tif 000021
【請求項１６】
トランスフォーミング増殖因子−β（TGF-β）阻害剤の存在下で、多能性幹細胞を生体外で培養することを特徴とする、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【請求項１７】
トランスフォーミング増殖因子−β（TGF-β）阻害剤の存在下で、多能性幹細胞を生体外で培養することを特徴とし、ここで該TGF-β阻害剤がTGF-β受容体阻害剤である、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【請求項１８】
TGF-β阻害剤が下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物からなるTGF-β受容体阻害剤である、請求項16または17に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【化２２】
2012070731.tif 000022
【化２３】
2012070731.tif 000023
【化２４】
2012070731.tif 000024
【請求項１９】
下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物の存在下で、多能性幹細胞を生体外で培養することを特徴とする、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【化２５】
2012070731.tif 000025
【化２６】
2012070731.tif 000026
【化２７】
2012070731.tif 000027
【請求項２０】
トランスフォーミング増殖因子−β（TGF-β）阻害剤および造血因子の存在下で、多能性幹細胞を生体外で培養することを特徴とする、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【請求項２１】
トランスフォーミング増殖因子−β（TGF-β）阻害剤および造血因子の存在下で、多能性幹細胞を生体外で培養することを特徴とし、ここで該TGF-β阻害剤がTGF-β受容体阻害剤である、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【請求項２２】
TGF-β阻害剤が下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物からなるTGF-β受容体阻害剤である、請求項20または21に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【化２８】
2012070731.tif 000028
【化２９】
2012070731.tif 000029
【化３０】
2012070731.tif 000030
【請求項２３】
下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物および造血因子の存在下で、多能性幹細胞を生体外で培養することを特徴とする、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【化３１】
2012070731.tif 000031
【化３２】
2012070731.tif 000032
【化３３】
2012070731.tif 000033
【請求項２４】
多能性幹細胞がヒト多能性幹細胞である、請求項16から23のいずれか1項に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【請求項２５】
多能性幹細胞が人工多能性幹細胞である、請求項16から24のいずれか1項に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【請求項２６】
下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物および造血因子の存在下で、ヒト人工多能性幹細胞を生体外で培養することを特徴とする、多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法。
【化３４】
2012070731.tif 000034
【化３５】
2012070731.tif 000035
【化３６】
2012070731.tif 000036
【請求項２７】
下記工程を含むヒト人工多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法：
(1)ヒト人工多能性幹細胞を、ヒト骨形成タンパク質4（bone morphogenetic protein 4；BMP4）およびヒト塩基性線維芽細胞成長因子（basic fibroblast growth factor；bFGF）を含む培地中で培養する工程、
(2)前記工程（1）で培養した細胞を、さらに下記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物、ヒトBMP4およびヒトヒト血管内皮細胞増殖因子（vascular endothelial growth factor；VEGF）を含む培地中で培養する工程、
【化３７】
2012070731.tif 000037
【化３８】
2012070731.tif 000038
【化３９】
2012070731.tif 000039
および
(3)前記工程（2）で培養した細胞を、さらに上記式（1）から（3）のいずれかの式で表される化合物、ヒトBMP4、ヒトVEGF、ヒトトロンボポイエチン（thrombopoietin）およびヒト幹細胞因子（stem cell factor）を含む培地中で培養する工程。
【請求項２８】
請求項16から27のいずれか1項に記載の多能性幹細胞から造血幹細胞および／または造血前駆細胞への分化誘導方法により得られる細胞培養物。