(57)【要約】      （修正有）【課題】少量のサンプルについて２つ以上のアッセイを実行することを容易にし、「指刺し」または「指穿刺」の手順を使用する家庭用検査キットにおいて使用するために適しているアッセイ装置を提供する。【解決手段】この装置は、サンプル液体を、磁気感受性粒子を含んでいるアッセイ試薬に今後することができる。装置は、サンプル液体によってサンプル液体−空気のインターフェースを生成するように構成されている。磁気感受性粒子を、第２の液体をインターフェースに接触させて液体−液体のインターフェースを形成するときに、（磁界を加えることによって）液体−空気のインターフェースに配置できる。磁性粒子が、液体−液体のインターフェースを横切って第２の液体へと移動する。磁気感受性粒子が、分析対象をインターフェースを横切って第２の液体へと運ぶ。分析対象についてのアッセイが、第２の液体において行われる。さらに、別の分析対象についてのアッセイを、サンプル液体において実行できる。【選択図】図１【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
・チャネルの第１の部分に流体接続しており、液体を受け取るように構成されている導入口、
・ジャンクションにおいて前記第１の部分へと接続された前記チャネルの第２の部分、および
・前記第１のチャネル部に配置された磁気感受性粒子
を備えており、
前記導入口によって受け取られる液体で、前記ジャンクションの付近に液体のインターフェースを形成するように構成されている、装置。
【請求項２】
前記液体が、第１の液体であり、
前記装置が、或る量の第２の液体を収容しているリザーバをさらに備えており、前記リザーバが、前記リザーバから放出される第２の液体を、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるように前記第２のチャネル部へと送達するように構成されている、請求項１に記載の装置。
【請求項３】
・チャネルの第１の部分に流体接続しており、液体を受け取るように構成されている導入口、
・ジャンクションにおいて前記第１の部分へと接続された前記チャネルの第２の部分であって、前記ジャンクションと前記第２のチャネル部の検出ゾーンとの間に流動可能媒体を収容している第２の部分、および
・前記第１のチャネル部に配置された磁気感受性粒子
を備えており、
前記導入口によって受け取られる液体で、前記ジャンクションの付近に「液体」対「流動可能媒体」のインターフェースを形成するように構成されている、装置。
【請求項４】
前記流動可能媒体が、液体またはゲルである、請求項３に記載の装置。
【請求項５】
前記第２のチャネル部において前記第２の液体からの信号を検出するように構成された少なくとも１つのセンサをさらに備えている、請求項１〜４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６】
前記第１のチャネル部が、前記第１の部分の長手軸に実質的に直角である２．５ｍｍの最大横寸法を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項７】
前記第１のチャネル部が、毛管である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８】
前記チャネルが、前記ジャンクションまたは前記ジャンクションの付近に毛管ストップを有している、請求項１〜７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項９】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部の断面積が、前記第２のチャネル部の断面積よりも小さい、請求項１〜８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１０】
前記第１のチャネル部に１つ以上の試薬を備えている、請求項１〜９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１１】
前記試薬が、前記第１のチャネル部の内表面の試薬堆積物である、請求項１０に記載の装置。
【請求項１２】
前記第１のチャネル部が、前記第１のチャネル部の内表面の第１の位置に第１の試薬堆積物、および前記第１のチャネル部の内表面の第２の位置に第２の試薬堆積物を有している、請求項１０または１１に記載の装置。
【請求項１３】
前記第１のチャネル部の内表面の第３の位置に第３の試薬堆積物を有している、請求項１２に記載の装置。
【請求項１４】
前記第１のチャネル部の内表面の第４の位置に第４の試薬堆積物を有している、請求項１３に記載の装置。
【請求項１５】
前記試薬堆積物の少なくとも２つが、物理的に別個である、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１６】
前記試薬堆積物の少なくとも２つが、前記第１のチャネル部の長さに沿って離間している、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１７】
前記試薬堆積物が、乾燥試薬堆積物である、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１８】
第１の試薬が、前記第１の液体中の分析対象に結合するように適合された磁気感受性粒子を含んでいる、請求項１０〜１７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１９】
前記第１の試薬が、抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体へと結合した磁気感受性粒子を含んでいる、請求項１０〜１８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２０】
前記抗体が、モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ５Ｂ６、７Ｂ５、１３Ｇ１２、１１Ｄ１、１６Ｅ６、１５Ｄ７、２４Ｅ１１、２８Ｆ８、１８Ｈ５、１６Ｆ３のうちの１つから選択される、請求項１９に記載の装置。
【請求項２１】
前記抗体が、モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｃ４（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ１）である、請求項１９に記載の装置。
【請求項２２】
第２の試薬が、前記第１の液体中の分析対象に結合することができる結合剤を含んでいる、請求項１０〜１８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２３】
前記結合剤が、第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体である、請求項２２に記載の装置。
【請求項２４】
前記第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体が、前記第１の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体とは異なるエピトープにおいてＮＴｐｒｏＢＮＰへと結合する、請求項２３に記載の装置。
【請求項２５】
前記第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体が、モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ５Ｂ６、７Ｂ５、１３Ｇ１２、１１Ｄ１、１６Ｅ６、１５Ｄ７、２４Ｅ１１、２８Ｆ８、１８Ｈ５、１６Ｆ３（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ１）のうちの１つから選択される、請求項２３または２４に記載の装置。
【請求項２６】
前記第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体が、１５Ｆ１１（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ１）である、請求項２３または２４に記載の装置。
【請求項２７】
前記第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体が、２９Ｄ１２（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ１）である、請求項２３または２４に記載の装置。
【請求項２８】
前記結合剤が、ゾル粒子に共役している、請求項２２〜２６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項２９】
前記第２の試薬が、酵素ラベルをさらに含んでいる、請求項２２〜２７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３０】
前記酵素ラベルが、西洋わさびペルオキシダーゼである、請求項２９に記載の装置。
【請求項３１】
前記酵素ラベルが、前記ゾル粒子に共役している、請求項２７〜３０のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３２】
前記ゾル粒子が、金ゾルである、請求項２７〜３１のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３３】
前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションが、前記第１のチャネル部の長手軸に実質的に直角である、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３４】
前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションが、前記第２のチャネル部の長手軸に実質的に直角である、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３５】
前記第１および第２のチャネル部が、共通の長手軸を有している、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３６】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、高さｈ１を有し、前記第２のチャネル部が、高さｈ２を有し、ｈ２＞ｈ１であって、比ｈ１：ｈ２が、少なくとも１：２である、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３７】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、断面積Ａ１を有し、前記第２のチャネル部が、断面積Ａ２を有し、Ａ１＜Ａ２であって、Ａ１：Ａ２の比が、少なくとも１：３である、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３８】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、幅ｗ２を有し、前記第２のチャネル部が、幅ｗ５を有し、ｗ５＞ｗ２であって、比ｗ２：ｗ５が、少なくとも１：３である、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項３９】
前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションの付近において、前記第２のチャネル部のベースが、前記第２の部分のうちの前記ジャンクションから遠い領域であって、高さｈ３を有している領域と、前記第２の部分のうちの前記ジャンクションに隣接する領域であって、高さｈ２を有している領域との間に、勾配を有しており、ｈ２＞ｈ３である、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項４０】
ｈ２が、約０．６ｍｍ未満である、請求項３９に記載の装置。
【請求項４１】
ｈ３が、約０．４ｍｍ未満である、請求項３９または４０に記載の装置。
【請求項４２】
前記勾配が、前記第２のチャネル部を横切って斜めに延びている、請求項３９に記載の装置。
【請求項４３】
前記第２のチャネル部が、曲げ部を有しており、
前記曲げ部の内側壁が、前記第２のチャネルの第１の壁によって形成され、前記曲げ部の外側壁が、前記第２のチャネルの第２の壁によって形成され、
前記第１または第２の壁がさらに、少なくとも部分的に、前記第１および第２のチャネルの前記ジャンクションを含んでいる、請求項１〜４２のいずれか一項に記載の装置。
【請求項４４】
前記第２の壁が、少なくとも部分的に、前記第１および第２のチャネルの前記ジャンクションを含んでいる、請求項４３に記載の装置。
【請求項４５】
前記曲げ部の前記内側壁が、液体の流れを減速するための手段を備えている、請求項４３または４４に記載の装置。
【請求項４６】
前記曲げ部が、前記第２のチャネルの第１の壁に位置する毛管ストップと、勾配を有するベースとを備えており、
前記勾配を有するベースが、前記毛管ストップの領域の前記第１の壁から、前記第２のチャネルにおいて前記第２の部分がより大きな幅を有している領域に向かって、前記チャネルを横切って斜めに延びる上縁を有している、請求項４３〜４５のいずれか一項に記載の装置。
【請求項４７】
前記勾配が、傾斜角度θを有しており、θが、５〜２５°の範囲にある、請求項３９〜４６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項４８】
前記第２のチャネル部の壁が、毛管ストップを有しており、
前記勾配の上縁が、前記毛管ストップの領域または前記毛管ストップに隣接する領域から、前記第２のチャネル部の反対側の壁に向かって、前記第２のチャネル部を横切って延びている、請求項３９〜４７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項４９】
前記勾配の前記上縁が、前記チャネルを横切って前記ジャンクションに向かって斜めに延びている、請求項４８に記載の装置。
【請求項５０】
前記第２のチャネル部が、前記ジャンクションから遠い第１の領域であって、前記チャネルが幅ｗ６および高さｈ３を有している第１の領域を有しており、
前記第２のチャネル部が、前記第１の領域と前記ジャンクションとの間に形成された先細りのネック領域であって、前記チャネルの幅および高さが前記ジャンクションにおける高さｈ２および幅ｗ５へと増加する先細りのネック領域を有している、請求項３９〜４９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項５１】
前記リザーバから第２の液体を放出させるための手段をさらに備えている、請求項１〜５０のいずれか一項に記載の装置。
【請求項５２】
前記手段が、鋭い突起を備えている、請求項５１に記載の装置。
【請求項５３】
前記鋭い突起が前記リザーバの壁に穴を開けるよう、前記リザーバおよび突起の一方が、他方に向かって可動である、請求項５２に記載の装置。
【請求項５４】
前記ジャンクションが、約１ｍｍ２以下の断面積を有している、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項５５】
前記ジャンクションが、約０．８ｍｍ２以下の断面積を有している、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項５６】
前記ジャンクションが、約０．７５ｍｍ２以下の断面積を有している、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項５７】
前記ジャンクションが、約０．６ｍｍ２以下の断面積を有している、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項５８】
前記ジャンクションが、約０．４ｍｍ２以下の断面積を有している、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項５９】
前記ジャンクションが、約０．２ｍｍ２以下の断面積を有している、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６０】
前記ジャンクションが、少なくとも約０．１５ｍｍ２の断面積を有している、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６１】
前記ジャンクションが、約０．１５ｍｍ２〜約１ｍｍ２の範囲の断面積を有している、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６２】
前記第１のチャネル部が、体積Ｖμｌを有し、前記ジャンクションが、断面積Ａｍｍ２を有しており、Ｖ：Ａの比が、約１．０以下である、請求項１〜６１のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６３】
Ｖ：Ａの比が、約０．５以下である、請求項６２に記載の装置。
【請求項６４】
Ｖ：Ａの比が、約０．３以下である、請求項６２に記載の装置。
【請求項６５】
Ｖ：Ａの比が、少なくとも約０．２である、請求項６２に記載の装置。
【請求項６６】
Ｖ：Ａの比が、約０．２〜約１．０の範囲にある、請求項６２〜６５のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６７】
第１の液体が、前記チャネルの前記第１の部分に配置され、前記第１の液体が、前記ジャンクションに「液体」対「気体」のインターフェースを形成する、請求項１〜６６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６８】
第２の別の液体が、前記チャネルの前記第２の部分に配置され、前記第２の液体が、前記第１の液体に接して前記第１の液体に対して流れ、前記第２の液体の流れが、前記第１の液体−気体のインターフェースの面積を減少させる、請求項１〜６７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項６９】
前記第１の液体が、或る量のヒトの血液である、請求項６８に記載の装置。
【請求項７０】
磁気感受性粒子が、前記インターフェースの付近の前記第１の液体に集められている、請求項６８または６９に記載の装置。
【請求項７１】
前記第２の液体が、バッファ溶液である、請求項６８〜７０のいずれか一項に記載の装置。
【請求項７２】
第１の液体が、前記チャネルの前記第１の部分に配置され、前記第１の液体が、前記第２のチャネル部に配置されて前記第１の液体に流体接触する第２の別の液体と、前記ジャンクションにおいて「液体」対「液体」のインターフェースを形成する、請求項１〜６６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項７３】
前記第１の液体が、或る量のヒトの血液である、請求項７２に記載の装置。
【請求項７４】
磁気感受性粒子が、前記インターフェースの付近の前記第１の液体に集められている、請求項７２または７３に記載の装置。
【請求項７５】
前記第２の液体が、バッファ溶液である、請求項７２〜７４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項７６】
前記バッファ溶液が、分析対象を含んでいない、請求項７１または７５に記載の装置。
【請求項７７】
前記インターフェースにおける前記第２の流体の流れの主方向が、前記第１の液体の面を横方向に横切っている、請求項７２〜７６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項７８】
前記第２の液体の流れを、前記ジャンクションの直前の前記第１のチャネル部の前記第１の液体の流れの方向に実質的に直角な方向に、前記第１の液体の面を横切って案内するように構成されている、請求項７２〜７７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項７９】
前記第２の液体の流れを、前記ジャンクションの手前の距離Ｄにおいて前記第１のチャネル部に生じる第１の液体の流れの方向に実質的に直角な方向に、前記第１の液体の面を横切って案内するように構成されており、Ｄは１０ｍｍ未満である、請求項７２〜７７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８０】
前記第１のチャネル部が、２０μｌ未満の体積を有している、請求項１〜７９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８１】
前記第１のチャネル部が、１０μｌ未満の体積を有している、請求項１〜７９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８２】
前記第１のチャネル部が、５μｌ未満の体積を有している、請求項１〜７９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８３】
前記第１のチャネル部が、約５μｌの体積を有している、請求項１〜７９のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８４】
前記第１のチャネル部が、断面において矩形であって、高さｈ１および幅ｗ２を有しており、ｈ１が少なくとも約０．０６ｍｍであって、ｗ２が少なくとも約１．０ｍｍである、請求項１〜８３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８５】
前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションにおいて、前記第２のチャネル部が、断面においておおむね矩形であって、高さｈ２および幅ｗ５を有しており、ｈ２が少なくとも約０．３５ｍｍであって、ｗ５が少なくとも約９ｍｍである、請求項１〜８４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８６】
前記第２のチャネル部が、前記ジャンクションからの距離ｄ２において、高さｈ３および幅ｗ６を有しており、ここでｄ２は、少なくとも約３．５ｍｍであり、
さらに前記第２のチャネル部が、前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションにおいて、高さｈ２および幅ｗ５を有しており、
ｈ２＞ｈ３であって、ｗ５＞ｗ６である、請求項８５に記載の装置。
【請求項８７】
前記第１または第２のチャネル部、あるいは前記導入口に、膜またはフィルタを有していない、請求項１〜８６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８８】
前記装置が、分析対象を含んでいる可能性がある液体サンプルにおいて使用するためのアッセイ装置であり、前記チャネルが形成される支持体を備えている、請求項１〜８７のいずれか一項に記載の装置。
【請求項８９】
前記センサが、前記装置において、前記第２の液体からの信号を検出するために、前記第２のチャネル部の流体と接するように構成されている、請求項３〜８８のいずれか一項に記載の装置。
【請求項９０】
前記第２のチャネル部が、第１および第２のセンサを備えており、
前記第１のセンサが、前記第２のチャネル部の第１の部位に配置され、前記第２のセンサが、前記第２のチャネル部の第２の部位に配置され、前記ジャンクションが、前記第１および第２の部位の間に位置している、請求項８９に記載の装置。
【請求項９１】
前記第１のチャネル部において前記第１の液体からの信号を検出するように構成された少なくとも１つのセンサをさらに備えている、請求項３〜９０のいずれか一項に記載の装置。
【請求項９２】
センサが、少なくとも１つの電極を備えている、請求項３〜９１のいずれか一項に記載の装置。
【請求項９３】
センサが、少なくとも２つの電極を備えている、請求項９２に記載の装置。
【請求項９４】
センサが、前記装置において前記第２のチャネル部の液体からの電気化学信号を検出するように構成された電極を備えており、前記信号が、分析対象の存在を表わしている、請求項８９〜９３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項９５】
前記第１および／または第２のチャネル部の少なくとも１つの壁、ベース、または蓋が、光に対して透過性である、請求項１〜９３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項９６】
マイクロ流体装置である、請求項１〜９５のいずれか一項に記載の装置。
【請求項９７】
・前記装置を受け入れるように構成されたハウジング、
・受け入れた前記装置の第１の位置および少なくとも１つの第２の位置に磁界を局在させるように構成された磁石、および
・第１の位置と第２の位置との間で可動であって、第２の位置において前記リザーバに接触するアクチュエータ
を備えているメータに配置される、請求項２〜９６のいずれか一項に記載の装置。
【請求項９８】
実質的に図４３Ａ〜Ｉを参照して本明細書において説明されたとおりの装置。
【請求項９９】
・ヒトの血液サンプルを受け取るように構成されており、或る量のヒトの血液を含んでいるチャネルの第１の部分に流体接続している導入口、
・前記第１のチャネル部に配置され、第１の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体へと共役した磁気感受性粒子と、酵素ラベルへと共役した第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体を含んでおり、前記第１および第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体が、前記第１のチャネル部に含まれているヒトの血液に含まれているＮＴｐｒｏＢＮＰに結合している試薬、および
・前記第１の部分へとジャンクションにおいて接続された前記チャネルの第２の部分
を備え、前記ジャンクションの付近に「血液」対「気体」のインターフェースを有しているマイクロ流体装置であって、
・酵素ラベルの基質を含んでいる或る量の第２の液体を含んでおり、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるよう、前記第２の液体をリザーバから放出して前記第２のチャネル部へと送達するように構成されているリザーバ、および
・前記第２のチャネル部において前記第２の液体から電気化学信号を検出するように構成された少なくとも１つの電極
をさらに備えている、マイクロ流体装置。
【請求項１００】
・チャネルの第１の部分に流体接続しており、液体を受け取るように構成されている導入口、
・ジャンクションにおいて前記第１の部分へと接続された前記チャネルの第２の部分、および
・前記第１のチャネル部に配置された磁気感受性粒子
を備えており、前記導入口によって受け取られた液体で、前記ジャンクションの付近に液体のインターフェースを形成するように構成されている装置であって、
・或る量の第２の液体を含んでおり、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるよう、前記第２の液体をリザーバから放出して前記第２のチャネル部へと送達するように構成されたリザーバ、および
・前記第２のチャネル部において前記第２の液体から信号を検出するように構成された少なくとも１つのセンサ
をさらに備えている、装置。
【請求項１０１】
・チャネルの第１の部分へと接続された導入口、
・前記チャネルの前記第１の部分に配置された磁気感受性粒子、
・前記チャネルの前記第１の部分へと前記チャネルのジャンクションにおいて接続された前記チャネルの第２の部分、
・前記チャネルの前記第１の部分に配置され、前記ジャンクションの付近に「液体」対「気体」のインターフェースを形成する第１の液体、および
・前記チャネルの前記第２の部分に配置され、前記第１の液体に接して前記第１の液体に対して流れる第２の別の液体であって、前記第２の液体の流れが、前記第１の「液体」対「気体」のインターフェースの面積を減少させ、「液体」対「液体」のインターフェースを形成する第２の液体
を備えている、装置。
【請求項１０２】
前記第１の液体が、或る量のヒトの血液である、請求項１０１に記載の装置。
【請求項１０３】
磁気感受性粒子が、前記インターフェースの付近の前記第１の液体に集められている、請求項１０１または１０２に記載の装置。
【請求項１０４】
前記第２の液体が、バッファ溶液である、請求項１０１〜１０３のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１０５】
前記第２の液体の流れを、前記インターフェースの直前の前記第１のチャネル部の前記第１の液体の流れの方向に実質的に直角な方向に、前記インターフェースの前記第１の液体の面を横切って案内するように構成されている、請求項１０１〜１０４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１０６】
前記第２の液体の流れを、前記インターフェースの手前の距離Ｄにおいて前記第１のチャネル部に生じる第１の液体の流れの方向に実質的に直角な方向に、前記インターフェースの前記第１の液体の面を横切って案内するように構成されており、Ｄは１０ｍｍ未満である、請求項１０１〜１０４のいずれか一項に記載の装置。
【請求項１０７】
分析対象を含んでいる可能性がある液体サンプルについて使用するための可搬型のアッセイ装置であって、
・導入口から液体を受け取るように適合された浅い液体流通チャネルをもたらすように構成された支持体、
・液体の流れを前記導入口から前記チャネルの全長の範囲内の中間位置までに制御するように適合された前記チャネルの第１の部分、および
・前記中間位置において前記第１のチャネル部へと接続された第２のチャネル部
を有しており、
前記チャネルの前記第１の部分の液体の流れへとアクセスできる少なくとも１つの表面が、液体サンプル内の分析対象に結合するように適合された複数の磁気感受性粒子を含んでいる乾燥試薬を、前記表面に堆積させて有しており、
前記第２のチャネル部が、前記装置が液体サンプルについて使用される際に前記液体サンプルの特性を検出できるよう、前記装置上に設定されて前記チャネルに並置されたセンサを備えている、アッセイ装置。
【請求項１０８】
第１および第２のチャネル部分を有するチャネルを備えている装置であって、
第１の液体を受け取るように構成された導入口を有しており、
前記導入口が、前記導入口からの第１の液体が前記第１のチャネル部分へと流入できるように、前記第１のチャネル部分に流体接続しており、
前記第１および第２のチャネル部分が、ジャンクションにおいて接続されており、
前記ジャンクションにおいて「第１の液体」対「気体」のインターフェースが形成されるように構成されており、
前記第２のチャネル部分が、第２の液体を受け取って前記ジャンクションへと案内し、前記第１および第２の液体のインターフェースを形成すべく、前記第２の液体を前記第１の液体に接触させて気体を追い出すように構成されている、装置。
【請求項１０９】
（ａ）液体サンプルをマイクロ流体装置のチャネルの第１の部分へと導入するステップ、
（ｂ）分析対象に結合するように構成された結合剤を含んでいる磁気感受性粒子を、前記マイクロ流体装置において前記液体サンプルに接触させるステップ、
（ｃ）前記チャネルの前記第１の部分と前記チャネルの第２の部分との間のジャンクションの付近に、「液体サンプル」対「気体」のインターフェースを形成するステップ、
（ｄ）前記液体サンプル対気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって、「液体サンプル」対「第２の液体」のインターフェースを形成するステップ、および
（ｅ）前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップ
を含んでいる、方法。
【請求項１１０】
液体サンプル中の分析対象を検出するための方法であり、前記磁気感受性粒子が前記分析対象に結合するように適合されており、
前記第２の液体において分析対象を検出するステップ
をさらに含んでいる、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
分析対象を検出するための方法であり、前記分析対象の量を割り出すステップを含んでいる、請求項１０９または１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
分析対象を前記液体サンプルから前記第２の液体へと分離する方法である、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１３】
体外での方法である、請求項１０９〜１１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１４】
前記第１および第２の液体が、異なっている、請求項１０９〜１１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１５】
前記第１の液体が、ヒトまたは哺乳類からの体液である、請求項１０９〜１１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１６】
前記体液が、血液、血清、または血漿から選択される、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
ヒトからの血液、血漿、または血清の液体サンプルにおいて分析対象を検出するための体外での方法であって、
（ａ）前記液体サンプルをマイクロ流体装置のチャネルの第１の部分へと導入するステップ、
（ｂ）分析対象に結合するように構成された結合剤を含んでいる磁気感受性粒子を、前記マイクロ流体装置において前記液体サンプルに接触させるステップ、
（ｃ）前記チャネルの前記第１の部分と前記チャネルの第２の部分との間のジャンクションの付近に、「液体サンプル」対「気体」のインターフェースを形成するステップ、
（ｄ）前記液体サンプル対気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって、液体サンプル対第２の液体のインターフェースを形成するステップ、および
（ｅ）前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップ
を含んでいる、方法。
【請求項１１８】
アッセイ結果を決定するステップをさらに含んでいる、請求項１０９〜１１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
前記分析対象の量を割り出すステップをさらに含んでいる、請求項１０９〜１１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２０】
前記割り出された分析対象の量を基準量と比較して、アッセイ結果を生成するステップをさらに含んでいる、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
前記割り出された分析対象の量を表示するステップをさらに含んでいる、請求項１１９または１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
アッセイ結果にもとづいて情報を表示するステップをさらに含んでいる、請求項１０９〜１２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２３】
アッセイ結果を表示するステップをさらに含んでいる、請求項１０９〜１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
前記表示されるアッセイ結果が、前記第２の液体中の分析対象の量を表わしている、請求項１２０、１２２、または１２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２５】
前記表示されるアッセイ結果が、前記第２の液体中の分析対象の量に比例している、請求項１２０、１２２、１２３、または１２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２６】
前記第２のチャネル部に含まれている液体中の分析対象を検出するステップをさらに含んでいる、請求項１１７に記載の方法。
【請求項１２７】
磁気感受性粒子を液体サンプルに接触させるステップが、液体サンプルおよび磁性粒子の混合物を形成する工程を含んでいる、請求項１０９〜１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２８】
磁気感受性粒子を液体サンプルに接触させるステップが、磁気感受性粒子の分析対象への結合を可能にする工程を含んでいる、請求項１０９〜１２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２９】
磁気感受性粒子を液体サンプルに接触させるステップが、分析対象に結合するように構成された結合剤に液体サンプルを接触させる工程をさらに含んでいる、請求項１０９〜１２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３０】
磁気感受性粒子を液体サンプルおよび分析対象に結合するように構成された結合剤に接触させるステップが、磁気感受性粒子、分析対象、および結合剤の錯体を形成する工程を含んでいる、請求項１２９に記載の方法。
【請求項１３１】
前記結合剤が、検出可能ラベルへと共役している、請求項１３０に記載の方法。
【請求項１３２】
前記検出可能ラベルが、酵素ラベルである、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
前記酵素ラベルが、西洋わさびペルオキシダーゼである、請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３４】
前記第２の液体が、酵素ラベルの基質を含んでいる、請求項１３２または１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
前記磁気感受性粒子が、分析対象に結合するように構成された第１の抗体に共役している、請求項１３０〜１３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３６】
前記結合剤が、前記第１の抗体と異なるエピトープにおいて分析対象に結合するように構成された第２の抗体である、請求項１３５に記載の方法。
【請求項１３７】
前記酵素ラベルおよび第２の抗体が、ゾル粒子へと取り付けられている、請求項１３６に記載の方法。
【請求項１３８】
前記ゾル粒子が、金ゾルである、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１３９】
前記第２の液体が、前記第１の液体と異なっている、請求項１０９〜１３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４０】
前記第２の液体が、前記液体サンプルと実質的に非混和である、請求項１０９〜１３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４１】
前記第２の液体が、バッファ溶液である、請求項１０９〜１４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４２】
「液体サンプル」対「気体」のインターフェースを形成するステップが、地球のその場の重力場の向きに実質的に平行に前記インターフェースを形成する工程を含んでいる、請求項１０９〜１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４３】
「液体サンプル」対「第２の液体」のインターフェースを形成するステップが、地球のその場の重力場の向きに実質的に平行に前記インターフェースを形成する工程を含んでいる、請求項１０９〜１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４４】
「液体サンプル」対「気体」のインターフェースを形成するステップが、実質的に垂直な平面に前記インターフェースを形成する工程を含んでいる、請求項１０９〜１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４５】
「液体サンプル」対「第２の液体」のインターフェースを形成するステップが、実質的に垂直な平面に前記インターフェースを形成する工程を含んでいる、請求項１０９〜１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４６】
前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップが、前記第１のチャネル部の第１の位置へと磁界を印加する工程、および前記印加磁界を前記チャネルに沿って前記ジャンクションを通過して前記第２のチャネル部の第２の位置へと移動させる工程を含んでいる、請求項１０９〜１４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４７】
前記磁界が、休止なしで連続的に前記第１および第２の位置の間を移動させられる、請求項１４６に記載の方法。
【請求項１４８】
前記ジャンクションの領域において前記磁界の移動を休止させるステップ、および磁気感受性粒子を前記インターフェースに隣接する前記液体サンプル中に位置させるステップ
をさらに含んでいる、請求項１４６に記載の方法。
【請求項１４９】
前記ジャンクションの領域において前記磁界の移動を休止させるステップ、および磁気感受性粒子を前記インターフェースに隣接する前記第２の液体中に位置させるステップ
をさらに含んでいる、請求項１４６に記載の方法。
【請求項１５０】
前記磁界が、前記第１の位置から前記ジャンクションへと第１の速度Ｓ１で移動させられ、さらに前記ジャンクションに隣接する前記第１および／または第２のチャネル部の領域から前記第２の位置に向かって第２の速度Ｓ２で移動させられ、Ｓ２＞Ｓ１である、請求項１４６〜１４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５１】
前記磁界の移動の速度が、前記磁界が前記ジャンクションを通過して移動させられるときに高められる、請求項１４６〜１５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５２】
前記第２の位置の前記第２の液体の特性を割り出すステップをさらに含んでいる、請求項１４６〜１５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５３】
複数の磁気感受性粒子を前記液体サンプルに接触させるステップの後、かつ前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップの前に、磁気感受性粒子を前記液体サンプル対気体のインターフェースに隣接する前記第１の液体中に磁気によって位置させるステップ
をさらに含んでいる、請求項１０９〜１５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５４】
複数の磁気感受性粒子を前記液体サンプルに接触させるステップの後、かつ前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップの前に、磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースに隣接する前記第１の液体中に磁気によって位置させるステップ
をさらに含んでいる、請求項１０９〜１５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５５】
前記磁気感受性粒子を位置させるステップが、前記チャネルの外部に位置する磁石を使用する工程を含んでいる、請求項１５３または１５４に記載の方法。
【請求項１５６】
前記磁石が、前記磁気感受性粒子に直接的に接触することがない、請求項１５５に記載の方法。
【請求項１５７】
磁気感受性粒子が、所定の時間期間ＤＫにわたって、前記液体サンプル対気体のインターフェースおよび／または液体サンプル対第２の液体のインターフェースに隣接する前記第１の液体中に、磁気によって位置させられ、ＤＫが１〜６０秒の範囲である、請求項１５３〜１５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５８】
前記液体サンプル対気体のインターフェースおよび前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースの形成の間の時間が、時間ＴＫ未満であり、ＴＫが１分である、請求項１０９〜１５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５９】
前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対気体または液体サンプル対第２の液体のインターフェースに隣接する前記液体サンプル中に磁気によって位置させてから、前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って磁気によって移動させるまでの時間が、ＴＪ未満であり、ＴＪが５分である、請求項１５３〜１５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６０】
前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップが、前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースの形成から時間ＴＰだけ後に実行され、ＴＰが１０秒未満である、請求項１０９〜１５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６１】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル対気体および／または液体サンプル対第２の液体のインターフェースに隣接する前記第１の液体中に磁気によって位置させるステップにおいて、前記磁気感受性粒子が該当のインターフェースから距離Ｄｍｍの範囲へと動かされ、Ｄが１０ｍｍである、請求項１５３〜１６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６２】
前記液体サンプル対気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって液体サンプル対第２の液体のインターフェースを形成するステップにおいて、前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースが、前記液体サンプル対気体のインターフェースの前記液体サンプルの面を横切って前記第２の液体を案内することによって形成される、請求項１０９〜１６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６３】
前記液体サンプル対気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって液体サンプル対第２の液体のインターフェースを形成するステップにおいて、前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースが、前記液体サンプル対気体のインターフェースの前記液体サンプルの面を横切って前記第２の液体の流れを案内して、前記液体サンプル対気体のインターフェースの面積を減少させることによって形成される、請求項１０９〜１６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６４】
前記第２の液体が前記液体サンプルの面を横切って流れる際に、前記第１の液体が実質的に静止に保たれる、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１６５】
インターフェースを横切る液体の塊の移動が実質的に生じない液体サンプル対第２の液体のインターフェースを形成するステップ
を含んでいる、請求項１０９〜１６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６６】
磁気感受性粒子を前記第２のチャネル部の所定の検出ゾーンに磁気によって集中させるステップ
を含んでいる、請求項１０９〜１６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６７】
磁気感受性粒子を、前記装置の前記第２のチャネル部に位置し、あるいは前記装置の前記第２のチャネル部に並置されたセンサの付近に、磁気によって移動させるステップ
をさらに含んでいる、請求項１０９〜１６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６８】
前記粒子を、前記センサによって前記第２の液体の特性を検出するための充分な時間にわたって、前記センサの付近に磁気によって保持するさらなるステップ
を含んでいる、請求項１６６または１６７に記載の方法。
【請求項１６９】
前記センサにおいて前記第２の液体の特性を検出するステップ
をさらに含んでいる、請求項１６７または１６８に記載の方法。
【請求項１７０】
前記第２の液体に接するように前記第２のチャネル部に構成された１つ以上の電極の付近に、磁気感受性粒子を磁気によって位置させるステップ
を含んでいる、請求項１０９〜１６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７１】
前記電極において前記第２の液体の特性を検出するステップ
をさらに含んでいる、請求項１７０に記載の方法。
【請求項１７２】
特性を検出するステップが、前記第２の液体の電気化学信号を検出する工程を含んでいる、請求項１７１に記載の方法。
【請求項１７３】
前記粒子を、前記電極によって前記第２の液体の電気化学信号を検出するための充分な時間にわたって、前記１つ以上の電極の付近に磁気によって保持するステップ
をさらに含んでいる、請求項１７０〜１７２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７４】
前記検出が、前記第２の液体における分析対象の存在を検出するステップを含んでいる、請求項１６８または１７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７５】
前記検出が、前記第２の液体における分析対象の量を検出するステップを含んでいる、請求項１６８〜１７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７６】
前記第２の液体における分析対象の検出が、
ａ．時間Ｔ１において、作業電極において電気化学信号Ｑ１を測定するステップ、
ｂ．Ｑ１をＴ１用の較正データセットと比較し、Ｑ１がＴ１用のデータセットに存在する場合に、Ｔ１用のデータセットを使用してバッファ液内の分析対象の量を割り出すステップ、
ｃ．Ｑ１がＴ１用の較正データセットに存在しない場合に、Ｔ２＞Ｔ１である時間Ｔ２において、作業電極において電気化学信号Ｑ２を測定するステップ、および
ｄ．Ｑ２をＴ２用の較正データセットと比較し、Ｑ２およびＴ２の有効な比較がなされた場合に、バッファ液内の分析対象の量を割り出すステップ
を含んでいる、請求項１７２〜１７５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７７】
１つ以上のその後の時間ＴＸおよび電気化学信号ＱＸについて、ステップ（i）〜（iv）のうちの１つ以上を繰り返すステップ
をさらに含んでいる、請求項１７６に記載の方法。
【請求項１７８】
前記液体サンプルを導入するステップが、或る量の前記液体サンプルを前記装置の導入口に堆積する工程を含んでおり、
前記導入口が、前記第１のチャネル部に流体接続している、請求項１０９〜１７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７９】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが、約１ｍｍ２以下の断面積を有している、請求項１０９〜１７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８０】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが、約０．１５ｍｍ２以上の断面積を有している、請求項１０９〜１７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８１】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが、第１の寸法Ｈおよび第２の寸法Ｗを有しており、Ｈに対するＷの比が、少なくとも５である、請求項１０９〜１８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８２】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが、第１の寸法Ｈおよび第２の寸法Ｗを有しており、Ｈに対するＷの比が、３０以下である、請求項１０９〜１８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８３】
前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースが、前記液体サンプル対気体のインターフェースとほぼ同じ、またはそれ未満の断面積を有している、請求項１０９〜１８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８４】
前記液体サンプル対気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースの形成との間の時間ＴＩが、少なくとも３０秒である、請求項１０９〜１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８５】
前記液体サンプル対気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースの形成との間の時間ＴＩが、２０分以下である、請求項１０９〜１８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８６】
前記液体サンプル対気体のインターフェースの形成後の時間ＴＤにわたり、前記粒子の移動を実質的に生じさせないステップ
を含んでおり、
ＴＤが、時間ＴＩの少なくとも５％である、請求項１８４〜１８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８７】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体サンプル対気体のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、
前記方法が、前記第１の液体対気体のインターフェースの形成後、かつ前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースの形成前に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含んでいる、請求項１０９〜１８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８８】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体サンプル対気体のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、
前記方法が、前記液体空気のインターフェースの形成後、かつ前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースの形成前に、総時間ＴＯにわたって前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含んでおり、ＴＯが時間ＴＩの少なくとも３０％である、請求項１０９〜１８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８９】
ＴＯが時間ＴＩの９０％以下である、請求項１８８に記載の方法。
【請求項１９０】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記第１の液体サンプル対気体のインターフェースの上流の前記チャネルの総体積Ｖを占め、
前記方法が、前記液体サンプル対気体のインターフェースの形成後に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって動かすことによって、前記サンプル液体を混合するステップを含んでいる、請求項１０９〜１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９１】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記第１の液体サンプル対気体のインターフェースの上流の前記チャネルの総体積Ｖを占め、
前記方法が、前記液体サンプル対気体のインターフェースの形成後、かつ前記サンプル液体対第２の液体のインターフェースの形成前に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって動かすことによって、前記サンプル液体を混合するステップを含んでいる、請求項１０９〜１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９２】
前記液体サンプル対気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースの形成との間に、前記液体サンプル対気体のインターフェースを前記チャネルに沿って距離ＤＣ以下だけ動かすステップ
を含んでおり、
ＤＣは３ｍｍである、請求項１０９〜１９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９３】
前記液体サンプル対気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースの形成との間において、前記液体サンプル対気体のインターフェースが、前記チャネルに沿った移動に関して基本的に静止している、請求項１０９〜１９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９４】
前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースが形成されたとき、前記インターフェースに隣接するサンプル液体および第２の液体が、時間ＴＭにわたって基本的に静止しており、ＴＭは少なくとも１秒である、請求項１０９〜１９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９５】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップが、磁性または磁気感受性粒子の実質的にすべてを前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含んでいる、請求項１０９〜１９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９６】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップが、総数Ｎの磁性または磁気感受性粒子の少なくとも約７０％を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含んでいる、請求項１０９〜１９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９７】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップが、総数でＮ個の粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含んでおり、前記Ｎ個の粒子の実質的にすべてが、互いに時間ＴＮ内で前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って移動させられ、ＴＮは３秒である、請求項１０９〜１９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９８】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、Ｖは０．５μｌ以上である、請求項１０９〜１９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９９】
Ｖが５μｌ以上である、請求項１９８に記載の方法。
【請求項２００】
前記液体サンプル対気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、Ｖは、約２μｌ、約３μｌ、約μｌ、５μｌ、約６μｌ、約７μｌ、約８μｌ、約９μｌ、約１０μｌ、約１５μｌ、約２０μｌのうちの１つから選択される、請求項１０９〜１９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０１】
前記第２のチャネル部における前記第２の液体の流れを検出するステップをさらに含んでいる、請求項１０９〜２００のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０２】
前記検出が、第２の流体の流れを前記第１の液体と接触する前に検出するステップを含んでいる、請求項２０１に記載の方法。
【請求項２０３】
前記検出が、第２の流体の流れを前記第１の液体との接触の後で検出するステップを含んでいる、請求項２０１または２０２に記載の方法。
【請求項２０４】
診断方法である、請求項１０９〜２０３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０５】
ヒトの血液サンプルにおけるＮＴｐｒｏＢＮＰの存在を検出するためのものである、請求項１０９〜２０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０６】
（i）ＮＴｐｒｏＢＮＰ、
（ii）ＢＮＰ、
（iii）カリウムイオン、
（iv）シスタチン  Ｃ、
（v）トロポニン  Ｔ、
（vi）トロポニン  Ｉ、
（vii）ミエロペルオキシダーゼ、および
（viii）クレアチンキナーゼ  ＭＢ
からなる群より選択される分析対象を検出するためのものである、請求項１０９〜２０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０７】
医者の助けなしでヒトによって実行される、請求項１０９〜２０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０８】
ヒトからの血液、血漿、または血清の液体サンプルについてＮＴｐｒｏＢＮＰを検出するための体外での方法であって、
（ａ）液体サンプルをマイクロ流体装置のチャネルの第１の部分へと導入するステップ、
（ｂ）前記液体サンプルを、前記マイクロ流体装置において、第１の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体に共役した磁気感受性粒子と酵素ラベルに共役した第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体とを含んでいる試薬に接触させ、磁気感受性粒子とＮＴｐｒｏＢＮＰと酵素ラベルとを含む錯体を形成するステップ、
（ｃ）前記チャネルの前記第１の部分と前記チャネルの第２の部分との間のジャンクションの付近に、液体サンプル対気体のインターフェースを形成するステップ、
（ｄ）前記液体サンプル対気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって、液体サンプル対第２の液体のインターフェースを形成するステップ、
（ｅ）前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル対第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップ、および
（ｆ）前記第２の液体においてＮＴｐｒｏＢＮＰを検出するステップ
を含んでいる、方法。
【請求項２０９】
マイクロ流体装置のチャネル内の液体サンプルと第２の別の液体とのインターフェースであって、
前記インターフェースが、液体サンプル対気体のインターフェースに接触させ、前記液体サンプル対気体のインターフェースを横切るように流れる前記第２の液体を有しており、
前記第２の液体の流れによって、前記液体サンプル対気体のインターフェースの面積が減少して、液体対液体のインターフェースが形成され、
前記液体サンプルが、ヒトの血液、血漿、または血清から選択され、前記インターフェースの付近に磁性粒子を含んでいる、インターフェース。
【請求項２１０】
前記磁性粒子が、前記液体サンプル中の分析対象に結合する結合剤に共役している、請求項２０９に記載のインターフェース。
【請求項２１１】
請求項２０９または２１０に記載のインターフェースを備えている、マイクロ流体装置。
【請求項２１２】
マイクロ流体アッセイ装置とメータとを備えるアッセイ・システムであって、
前記アッセイ装置が、
・チャネルの第１の部分に流体接続しており、液体を受け取るように構成されている導入口、
・ジャンクションにおいて前記第１の部分へと接続された前記チャネルの第２の部分、および
・前記第１のチャネル部に配置された磁気感受性粒子
を備えていて、
前記導入口によって受け取られる液体で、前記ジャンクションの付近に液体のインターフェースを形成するように構成されており、
さらに前記アッセイ装置が、
・或る量の第２の液体を収容しており、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるように、前記第２の液体をリザーバから放出して前記第２のチャネル部へと送達するように構成されているリザーバ、および
・前記第２のチャネル部において前記第２の液体からの信号を検出するように構成された少なくとも１つのセンサ
を備えており、
前記メータが、
・前記アッセイ装置を受け入れるように構成されたハウジング、および
・前記受け入れたアッセイ装置の第１の位置および少なくとも１つの第２の位置に磁界を局在させるように構成された磁石
を備えている、アッセイ・システム。
【請求項２１３】
前記メータが、キャリッジに搭載された磁石を備えており、
前記キャリッジが、前記磁石を前記第１および第２の位置に位置させるべく可動である、請求項２１２に記載のシステム。
【請求項２１４】
前記アッセイ装置が、鋭い突起を備えており、
前記リザーバおよび突起の一方が、前記鋭い突起によって前記リザーバの壁に穴が開けられるように他方に向かって可動であり、
前記メータが、前記リザーバを前記突起に向かって動かすべく動作することができるアクチュエータを備えている、請求項２１２または２１３に記載のシステム。
【請求項２１５】
アッセイ結果の決定に使用するためのメータであって、
・マイクロ流体アッセイ装置を収容するように構成されたハウジング、
・前記収容したアッセイ装置の第１の位置および少なくとも１つの第２の位置に磁界を局在させるように構成された磁石、および
・第１の位置と第２の位置との間で可動であって、第２の位置において前記メータに収容されたアッセイ装置のリザーバに接触するアクチュエータ
を備えている、メータ。
【請求項２１６】
前記磁石が、キャリッジに搭載されており、
前記キャリッジが、前記磁石を前記第１または第２の位置に位置させるべく可動である、請求項２１５に記載のメータ。
【請求項２１７】
請求項１〜１０８のいずれか一項に記載のアッセイ装置を収容している、請求項２１５または２１６のいずれか一項に記載のメータ。
【請求項２１８】
・液体−気体のインターフェースを形成するステップ、
・磁性または磁気感受性粒子を、前記インターフェースの付近に磁気によって位置させるステップ、および
・前記液体−気体のインターフェースの気体を押しのけることによって液体−第２の液体のインターフェースを形成することで、前記磁気感受性粒子が前記液体−液体のインターフェースを横断するステップ
を含んでいる、方法。
【請求項２１９】
・マイクロ流体装置のチャネル内に液体−気体のインターフェースを形成するステップ、
・磁気感受性粒子を前記インターフェースの距離Ｄｍｍの範囲内へと磁気によって移動させるステップ、
・前記液体−気体のインターフェースの気体を押しのけることによって、液体−第２の液体のインターフェースを形成するステップ、および
・前記粒子を前記液体−気体のインターフェースの距離Ｄｍｍの範囲内へと移動させてから時間Ｔ秒以内に、前記磁気感受性粒子を前記液体−第２の液体のインターフェースを横切って磁気によって移動させるステップ
を含んでおり、
前記距離Ｄが、５ｍｍであり、
前記時間Ｔが、１０秒である、方法。
【請求項２２０】
前記磁気感受性粒子を移動させるステップが、前記粒子に直接的に触れることなく実行される、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２２１】
前記液体−気体のインターフェースが、１ｍｍ２以下の断面積を有している、請求項２１８〜２２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２２】
前記液体−気体のインターフェースが、約０．１５ｍｍ２以上の断面積を有している、請求項２１８〜２２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２３】
前記液体−気体のインターフェースが、第１の寸法Ｈおよび第２の寸法Ｗを有しており、Ｈに対するＷの比が、少なくとも５である、請求項２１８〜２２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２４】
前記液体−気体のインターフェースが、第１の寸法Ｈおよび第２の寸法Ｗを有しており、Ｈに対するＷの比が、３０以下である、請求項２１８〜２２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２５】
前記液体−第２の液体のインターフェースが、前記液体−気体のインターフェースとほぼ同じ、またはそれ未満の断面積を有している、請求項２１８〜２２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２６】
前記液体−気体のインターフェースの形成と前記液体−第２の液体のインターフェースの形成との間の時間ＴＩが、少なくとも３０秒である、請求項２１８〜２２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２７】
前記液体−気体のインターフェースの形成と前記液体−第２の液体のインターフェースの形成との間の時間ＴＩが、２０分以下である、請求項２２６に記載の方法。
【請求項２２８】
前記液体−空気のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、
前記方法が、前記液体空気のインターフェースの形成後、かつ前記液体対第２の液体のインターフェースの形成前に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含んでいる、請求項２１８〜２２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２９】
前記液体−気体のインターフェースの形成と前記液体−第２の液体のインターフェースの形成との間の時間ＴＩが、少なくとも３０秒であり、
前記方法が、前記液体−空気のインターフェースの形成後の時間ＴＤにわたり、前記粒子の移動を実質的に生じさせないステップを含んでおり、
ＴＤが、時間ＴＩの少なくとも５％である、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２３０】
前記液体空気のインターフェースの形成後、かつ前記液体−第２の液体のインターフェースの形成前に、総時間ＴＯにわたって前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含んでおり、
ＴＯが時間ＴＩの少なくとも３０％である、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２３１】
ＴＯが時間ＴＩの９０％以下である、請求項２３０に記載の方法。
【請求項２３２】
前記液体−気体のインターフェースの形成と前記液体−第２の液体のインターフェースの形成との間に、前記液体−空気のインターフェースを前記チャネルに沿って距離ＤＣ以下だけ動かすステップ
を含んでおり、ＤＣは３ｍｍである、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２３３】
前記液体−気体のインターフェースの形成と前記液体−第２の液体のインターフェースの形成との間において、前記液体−空気のインターフェースが、前記チャネルに沿った移動に関して基本的に静止している、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２３４】
総数でＮ個の粒子を前記液体−第２の液体のインターフェースを横切って移動させるステップを含んでおり、
前記粒子を前記液体−第２の液体のインターフェースを横切って移動させるステップにおいて、前記Ｎ個の粒子の実質的にすべてが前記液体−第２の液体のインターフェースを横切って移動させられる、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２３５】
前記Ｎ個の粒子の実質的にすべてが、前記Ｎ個の粒子の少なくとも約７０％を含んでいる、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２３６】
総数でＮ個の粒子を前記液体−第２の液体のインターフェースを横切って移動させるステップを含んでおり、
前記Ｎ個の粒子の実質的にすべてが、互いに時間ＴＮ内で前記液体−第２の液体のインターフェースを横切って移動させられ、ＴＮは３秒である、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２３７】
前記液体−空気のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、Ｖは０．５μｌ以上である、請求項２１８または２１９に記載の方法。
【請求項２３８】
Ｖが５μｌ以上である、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２３９】
前記液体−気体のインターフェースの液体が、血液である、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２４０】
・第１の液体と磁気感受性粒子とを含んでいる混合物と気体との間に、液体−気体のインターフェースを形成するステップ、
・前記粒子に、前記液体−気体のインターフェースへと少なくとも部分的に向けられた磁気の力を加えるステップ、および
・前記粒子に前記力を加えた状態で、前記気体の少なくとも一部を第２の液体で押しのけて、前記第１および第２の液体の間の液体−液体のインターフェースを形成することで、前記粒子が前記第２の液体へと前記液体−液体のインターフェースを横切るステップ
を含んでいる、方法。
【請求項２４１】
前記液体−気体のインターフェースの形成後、かつ前記粒子が前記液体−液体のインターフェースを横切るまで、前記粒子に直接的に触れることなく実行される、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２４２】
前記粒子が前記液体−気体のインターフェースを横切ることが基本的にない、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２４３】
前記液体−気体のインターフェースを横切る粒子の数の前記液体−液体のインターフェースを横切る粒子の数に対する比が、１０％未満である、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２４４】
前記液体−気体のインターフェースを横切る粒子の数の前記液体−液体のインターフェースを横切る粒子の数に対する比が、５％未満である、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２４５】
前記液体−気体のインターフェースを横切る粒子の数の前記液体−液体のインターフェースを横切る粒子の数に対する比が、２％未満である、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２４６】
前記液体−気体のインターフェースを横切る粒子の数の前記液体−液体のインターフェースを横切る粒子の数に対する比が、１％未満である、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２４７】
前記第１の液体が、血液であり、前記第２の液体が、バッファ溶液である、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２４８】
前記液体−気体および液体−液体のインターフェースが、マイクロ流体装置のマイクロ流体ネットワークにおいて形成されるステップを含んでいる、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２４９】
前記混合物の液体の総体積が、１０μｌ以下である、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２５０】
前記液体−気体および液体−液体のインターフェースのそれぞれの総断面積が、０．０２ｃｍ２である、請求項２４０に記載の方法。
【請求項２５１】
・マイクロ流体装置において、第１の試薬と液体サンプルとを含む第１の混合物であって、前記第１の試薬が、磁性または磁気感受性の粒子と分析対象のための結合剤とを含んでいる第１の混合物を形成するステップ、
・前記第１の試薬を、前記混合物と流体との間のインターフェースを横切って運ぶステップ、および
・前記粒子によって前記インターフェースを横切って運ばれた分析対象の存在を判定するステップ
を含んでいる、方法。
【請求項２５２】
前記流体が、気体である、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２５３】
前記気体が、空気である、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２５４】
前記運ぶステップの後で、前記粒子を液体試薬に接触させるステップ
をさらに含んでおり、
前記判定するステップが、前記液体試薬中の分析対象の存在を判定する工程を含んでいる、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２５５】
前記流体が、液体試薬である、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２５６】
前記判定するステップが、前記液体試薬中の前記分析対象の存在を判定する工程を含んでいる、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２５７】
・第１および第２の分析対象を含んでいる第１の液体と、第２の別の液体との間に、液体−液体のインターフェースを形成するステップ、
・前記第１の液体において前記第１の分析対象を測定するステップ、
・前記第２の分析対象を、前記液体−液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと移動させるステップ、および
・前記第２の液体において前記第２の分析対象を測定するステップ
を含んでいる、方法。
【請求項２５８】
前記第１の分析対象を測定するステップが、前記第１の分析対象を間接的に測定する工程を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２５９】
前記第１の液体が、前記第１の分析対象と錯体を形成できる第１の試薬をさらに含んでおり、
前記第１の分析対象を間接的に測定するステップが、前記第１の液体において前記第１の試薬を測定する工程を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６０】
前記第１の試薬を測定するステップが、前記第１の試薬を電気化学的に測定する工程を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６１】
前記第１の試薬が、金属または金属のイオンである、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６２】
前記第１の試薬が、コバルトであり、前記第１の分析対象が、アルブミンである、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６３】
前記液体−液体のインターフェースの形成前に、前記第１および第２の分析対象を含むサンプル材料をマイクロ流体ネットワークを備えるマイクロ流体装置へと導入するステップ
をさらに含んでおり、
前記第１の液体が、前記サンプル材料の少なくとも一部を含み、
前記液体−液体のインターフェースを形成するステップが、前記マイクロ流体ネットワーク内に前記インターフェースを形成する工程を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６４】
前記サンプル材料が、血液または血液から由来した液体を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６５】
前記サンプル材料が、血液を含んでおり、
前記サンプル材料を前記マイクロ流体装置へと導入するステップが、血液を前記マイクロ流体装置へと導入する工程を含んでおり、
前記方法が、指刺しから血液を得るステップをさらに含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６６】
前記サンプル材料を導入するステップの後で、前記サンプル材料を前記第１の試薬および第２の試薬に混ぜ合わせるステップ
をさらに含んでおり、
前記第２の試薬が、前記第２の分析対象への親和性を有している、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６７】
前記第２の試薬が、前記第２の分析対象への親和性を有する第１の部分と粒子とを含んでいる微粒子試薬である、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６８】
前記混ぜ合わせるステップに先立ち、前記第１および第２の試薬が、前記マイクロ流体ネットワーク内に乾燥状態で存在し、
前記方法が、前記乾燥している前記第１および第２の試薬を前記第１の液体で濡らすステップを含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２６９】
前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるステップが、前記第２の試薬へと力を加える工程を含んでおり、前記第２の分析対象が、前記第２の試薬に組み合わせられている、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７０】
前記第２の試薬の前記粒子が、磁気感受性または磁性であり、
前記第２の分析対象を移動させるステップが、前記第２の試薬を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるための充分な磁界を前記第２の試薬に加える工程を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７１】
前記第２の分析対象を測定するステップが、前記第２の分析対象を電気化学的に測定する工程を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７２】
前記サンプル材料を前記第１の試薬および第２の試薬に混ぜ合わせるステップが、前記サンプル材料を第３の試薬に混ぜ合わせる工程をさらに含んでおり、
前記第２の分析対象、前記第２の試薬、および前記第３の試薬が、錯体を形成することができ、
前記第３の試薬が、前記第２の分析対象の電気化学的な測定に関与する、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７３】
前記第３の試薬が、酵素であり、
前記第２の分析対象を電気化学的に測定するステップが、前記酵素を前記酵素のための基質に接触させる工程を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７４】
前記酵素が、グルコースオキシダーゼであり、前記基質が、グルコースである、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７５】
前記第１の分析対象の測定が、前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させる前に行われる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７６】
前記液体−液体のインターフェースを形成するステップが、基板内のチャネルの第１の位置に前記第１の液体を導入する工程、および前記チャネルの第２の位置に前記第２の液体を導入する工程を含んでおり、
前記第２の位置が、前記第１の位置から離間しており、前記液体−液体のインターフェースが、前記第１および第２の位置の間に形成される、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７７】
前記第１および第２の位置の間の前記チャネルの最大断面積が、約５ｍｍ２以下である、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７８】
前記最大断面積が、約１ｍｍ２以下である、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２７９】
前記液体のインターフェースを形成するステップが、前記第１および第２の液体の少なくとも一方を毛管作用によって前記チャネルに沿って移動させる工程を含んでいる、請求項２５７に記載の方法。
【請求項２８０】
・タンパク質および第２の生物学的分析対象を含んでいるサンプル材料と、前記タンパク質と錯体を形成することができる金属イオンと、前記生物学的分析対象と錯体を形成することができる酵素試薬と、を含む混合物を形成するステップ、
・前記タンパク質との錯体を形成していない金属イオンの量を検出するステップ、
・前記タンパク質との錯体を形成していない金属イオンの量にもとづいて、前記タンパク質の量を割り出すステップ、
・前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬と、前記生物学的分析対象との錯体を形成していない酵素試薬とを分離するステップ、
・前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬を、前記酵素試薬との酵素反応に関与することができる第２の試薬に接触させるステップ、
・前記酵素反応の生成物の量を検出するステップ、および
・前記生成物の量にもとづいて、前記生物学的試薬の量を割り出すステップ
を含んでいる、方法。
【請求項２８１】
前記タンパク質が、アルブミンである、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８２】
前記金属イオンが、コバルトイオンである、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８３】
前記サンプル材料が、血液または血液から由来した液体である、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８４】
前記生物学的分析対象が、ナトリウム利尿ペプチドである、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８５】
前記酵素試薬が、酵素であり、前記第２の試薬が、前記酵素のための基質である、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８６】
前記酵素反応の生成物の量を検出するステップが、前記生成物を間接的に検出する工程を含んでいる、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８７】
前記酵素試薬が、グルコースオキシダーゼであり、前記第２の試薬が、グルコースオキシダーゼのための基質であり、前記生成物が、前記基質の酸化された形態である、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８８】
前記混合物が、前記酵素試薬および前記生物学的分析対象と錯体を形成することができる磁性微粒子試薬をさらに含んでおり、
前記分離するステップが、前記混合物に磁界を加える工程を含んでいる、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２８９】
前記混合物へと磁界を加えることで、前記酵素試薬、前記生物学的分析対象、および前記磁性微粒子試薬を含む錯体を、第１の位置から前記第１の位置から離間した第２の位置へと動かす、請求項２８０に記載の方法。
【請求項２９０】
前記分離するステップが、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬を、前記混合物を含んでいる第１の液体と前記第１の液体とは異なる第２の液体との間の液体−液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含んでいる、請求項２８０に記載の方法。
【考案の詳細な説明】
【関連出願】
【０００１】
本出願は、２００６年３月２９日付の英国実用新案登録仮出願第ＧＢ０６０６２６３．２号、２００６年１２月４日付の米国実用新案登録仮出願第６０／８６８，４８０号、および２００７年３月２９日付の米国実用新案登録仮出願第６０／９０８，７２９号の優先権を主張する。本出願は、２００６年２月１５日付の英国実用新案登録仮出願第ＧＢ０６０３０４９．８号および２００４年１２月１２日付の米国実用新案登録出願第１１／０１３，３５３号に関する。上記出願のそれぞれは、その全体が参照により本明細書に引用される。
【技術分野】
【０００２】
本考案は、アッセイに関する。
【背景】
【０００３】
心不全は、世界人口のかなりの割合を襲う慢性の進行性の疾患である。心不全の患者数および罹患率は、高齢化および心筋梗塞を生き延びる患者数の増加ゆえに、高まり続けている。
【０００４】
臨床的には、心不全は、息切れおよびけん怠感の症候群を特徴とし、多くの場合に、頸静脈圧の高まりおよび浮腫によって知ることができる体液の滞留を伴う。心不全の進行は、４つの段階に定義される。心不全という用語は、それらのすべてを指す。段階Ａ−リスク有り：心不全の発現の危険が高い患者（冠動脈心疾患、糖尿病、高血圧症、および／または心臓弁膜症をかかえる患者）。段階Ｂ−前期心不全：器質的心疾患を抱えるが、臨床的な心不全の症状はない患者。多くは、収縮機能の低下を抱えている。段階Ｃ−心不全：収縮機能障害または拡張機能障害に起因する症候性心不全が現在または過去にあり、治療を受けている患者。段階Ｄ−進行性心不全：最終段階または治療が無効な患者。
【０００５】
心不全を正確かつ成功裏に診断、管理、および治療するための検査および手順の多くは、複雑であり、高価であり、病院または他の医療の環境においてのみ利用可能である。
【概要】
【０００６】
本考案は、アッセイに関する。
【０００７】
一態様においては、或る方法が、サンプル試薬混合物と別の媒体（例えば、気体または液体などの流体）との間のインターフェースを横切って磁性または磁気感受性の粒子を移動させるステップを含んでいる。粒子が、分析対象または分析対象の錯体のための結合剤を含んでいる。分析対象が、粒子および結合している分析対象をインターフェースを横切って移動させた後で測定される。少なくとも移動のステップを、マイクロ流体装置において行うことができる。
【０００８】
このアッセイ方法および装置を、血液に存在する種を分析するための家庭用検査キットにおいて使用することができる。とくには、この装置および方法は、少量のサンプルについて２つ以上のアッセイを実行することを容易にし、「指刺し」または「指穿刺」の手順を使用する家庭用検査キットにおいて使用するために適している。
【０００９】
このアッセイ装置および方法は、少量の流体サンプルを単純な工程にて受け取ることができ、少量の流体サンプルを信頼性および再現性のあるやり方での迅速な検査に供することができる。本考案は、同じサンプルについて一連の検査を実行できるようにすることで、家庭用検査キットにおいて得られた血液サンプルを利用する効率的なやり方を提供する。
【００１０】
最後に、本考案の装置および方法は、複合混合物において目標の分析対象を分離および絶縁することによって、同じ血液サンプルについて２つ以上のアッセイの実行を容易にする。これは、検出手順による分析対象の視覚化を可能にする。とくには、本考案は、被験者の病状を知らせるべく分析対象に関係付けられたマーカーの視覚化および分析対象の存在の信頼できる定量化を行うための特定の試薬の使用を可能にする。
【００１１】
いくつかの実施形態が、被験者の病状を表わす分析対象など、複数の分析対象の測定を検出可能にする。
【００１２】
一態様において、本考案は装置に関する。いくつかの実施形態においては、装置が、チャネルの第１の部分に流体接続しており、液体を受け取るように構成されている導入口、ジャンクションにおいて前記第１の部分へと接続された前記チャネルの第２の部分、および前記第１のチャネル部に配置された磁気感受性粒子
を備えており、前記導入口によって受け取られる液体で、前記ジャンクションの付近に液体のインターフェースを形成するように構成されている。
【００１３】
前記液体が、第１の液体であってもよく、前記装置が、或る量の第２の液体を収容しているリザーバをさらに備えており、前記リザーバが、前記リザーバから放出される第２の液体を、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるように、前記第２のチャネル部へと送達するように構成されている。
【００１４】
いくつかの実施形態においては、装置が、チャネルの第１の部分に流体接続しており、液体を受け取るように構成されている導入口、ジャンクションにおいて前記第１の部分へと接続された前記チャネルの第２の部分であって、前記ジャンクションと前記第２のチャネル部の検出ゾーンとの間に流動可能媒体を収容している第２の部分、および前記第１のチャネル部に配置された磁気感受性粒子を備えており、前記装置は、前記導入口によって受け取られる液体で、前記ジャンクションの付近に液体：第２の媒体のインターフェースを形成するように構成されている。
【００１５】
前記第２の媒体は、液体（例えば、バッファ）またはゲルであってもよい。
【００１６】
装置は、前記第２のチャネル部に配置され、前記第２の液体内の分析対象を検出するように構成された少なくとも１つのセンサをさらに備えることができる。
【００１７】
前記第１のチャネル部について、前記第１の部分の長手軸に実質的に直角である最大横寸法は、２．５ｍｍ以下であってもよい。前記第１のチャネル部は、毛管であってもよい。
【００１８】
装置は、前記ジャンクションまたは前記ジャンクションの付近に、毛管ストップを備えることができる。
【００１９】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部の断面積は、典型的には、前記第２のチャネル部の断面積よりも小さい。
【００２０】
装置は、１つ以上の試薬を、前記第１のチャネル部に配置して備えることができる（例えば、試薬を、前記第１のチャネル部の内表面に乾燥させた形態で配置することができる）。例えば、試薬を、乾燥試薬の堆積物として配置することができる。
【００２１】
第１の試薬を、前記第１のチャネル部の内表面の第１の位置に配置することができ、第２の試薬を、前記第１のチャネル部の内表面の第２の位置に配置することができる。第３の試薬を、前記第１のチャネル部の内表面の第３の位置に配置することができる。第４の試薬を、前記第１のチャネル部の内表面の第４の位置に配置することができる。
【００２２】
前記試薬のうちの少なくとも２つが配置される位置は、物理的に別個であってもよい。例えば、少なくとも２つの試薬の位置を、前記第１のチャネル部の長さに沿って離間させることができる。試薬を、前記第１のチャネル部に沿って所定の順序で堆積することができる。磁気感受性粒子を前記導入口に近く堆積し、第１および第２の結合剤を、前記ジャンクションにより近く堆積することができる。同じ種類の試薬堆積物を、一まとめにすることができ、あるいは異なる試薬を、前記第１のチャネル部に沿って交互の並び堆積してもよい。磁気感受性粒子の堆積物を一まとめにすることができ、第１および第２の結合剤の堆積物を、交互の並びで位置させることができる。
【００２３】
第１の試薬が、前記第１の液体中の分析対象に結合するように適合された結合剤を含む磁気感受性粒子を含むことができる。例えば、第１の試薬が、抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体または抗ＢＮＰ抗体へと結合した磁気感受性粒子を含むことができる。抗体は、モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ５Ｂ６、７Ｂ５、１３Ｇ１２、１１Ｄ１、１６Ｅ６、１５Ｄ７、２４Ｅ１１、２８Ｆ８、１８Ｈ５、１６Ｆ３、またはこれらの組み合わせからなる群より選択可能である。いくつかの実施形態においては、抗体が、モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｃ４（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ１）である。
【００２４】
第２の試薬が、前記第１の液体中の分析対象に結合することができる結合剤を含むことができる。第２の試薬の結合剤は、分析対象のエピトープであって、前記第１の試薬の結合剤とは異なるエピトープへと結合可能であってもよい。第２の試薬の結合剤は、第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体または第２の抗ＢＮＰ抗体であってもよい。第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体または第２の抗ＢＮＰ抗体は、第１の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体（または、第１の抗ＢＮＰ抗体）とは異なるエピトープにおいて、ＮＴｐｒｏＢＮＰ（または、ＢＮＰ）へと結合できる。第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体を、モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ５Ｂ６、７Ｂ５、１３Ｇ１２、１１Ｄ１、１６Ｅ６、１５Ｄ７、２４Ｅ１１、２８Ｆ８、１８Ｈ５、１６Ｆ３（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ１）、またはこれらの組み合わせからなる群より選択することができる。第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体は、１５Ｆ１１（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ１）であってもよい。第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体は、２９Ｄ１２（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ１）であってもよい。
【００２５】
第２の試薬を、第２の粒子（例えば、ゾル粒子（例えば、金ゾル）などの非磁気感受性粒子）へと共役させることができる。第２の粒子が、少なくとも１つ（例えば、複数）のラベルを備えることができる。ラベルは、酵素ラベル（例えば、西洋わさびペルオキシダーゼ）であってもよい。いくつかの実施形態においては、金ゾルが、金ゾルへと共役させた複数の酵素ラベルを含んでいる。
【００２６】
前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションは、前記第１のチャネル部の長手軸に実質的に直角であってもよい。ジャンクションは、前記第２のチャネル部の長手軸に実質的に直角であってもよい。前記第１および第２のチャネル部は、共通の長手軸を有することができる。
【００２７】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、高さｈ１を有することができ、前記第２のチャネル部が、高さｈ２を有することができ、ｈ２＞ｈ１であってもよい。比ｈ１：ｈ２が、少なくとも１：２であってもよい。
【００２８】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、断面積Ａ１を有することができ、前記第２のチャネル部が、断面積Ａ２を有することができ、Ａ１＜Ａ２であってもよい。Ａ１：Ａ２の比が、少なくとも１：３であってもよい。
【００２９】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、幅ｗ２を有することができ、前記第２のチャネル部が、幅ｗ５を有することができ、ｗ５＞ｗ２であってもよい。比ｗ２：ｗ５が、少なくとも１：３であってもよい。
【００３０】
前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションの付近において、前記第２のチャネル部のベースが、前記第２の部分のうちの前記ジャンクションから遠い領域であって、高さｈ３を有している領域と、前記第２の部分のうちの前記ジャンクションに隣接する領域であって、高さｈ２を有している領域との間に、勾配を有することができ、ｈ２＞ｈ３であってもよい。勾配は、前記第２のチャネル部の長手軸に対して、斜めに延びることができる。
【００３１】
高さｈ２は、約０．６ｍｍ未満であってもよい。高さｈ３は、約０．４ｍｍ未満であってもよい。
【００３２】
前記第２のチャネル部が、曲げ部を含むことができ、前記曲げ部の内側壁が、前記第２のチャネルの第１の壁によって形成され、前記曲げ部の外側壁が、前記第２のチャネルの第２の壁によって形成され、前記第１または第２の壁がさらに、少なくとも部分的に、前記第１および第２のチャネルの前記ジャンクションを含んでいる。いくつかの実施形態においては、前記第２の壁が、少なくとも部分的に、前記第１および第２のチャネルの前記ジャンクションを含んでいる。
【００３３】
前記曲げ部の前記内側壁が、前記内側壁に沿った液体の流れを減速するための手段（例えば、毛管ストップ、刻み目）を備えることができる。
【００３４】
前記曲げ部が、前記第２のチャネルの第１の壁に位置する毛管ストップと、勾配を有するベースとを含むことができ、前記勾配を有するベースが、前記毛管ストップの領域の前記第１の壁から、前記第２のチャネルにおいて前記第２の部分がより大きな幅を有している領域に向かって、前記チャネルを横切って斜めに延びる上縁を有する。
【００３５】
前記勾配は、前記第２のチャネルのベースに対して傾斜角度θを有することができ、θは５〜２５°の範囲にある。
【００３６】
前記第２のチャネル部の壁が、毛管ストップを有することができ、前記勾配の上縁が、前記毛管ストップの領域または前記毛管ストップに隣接する領域から、前記第２のチャネル部の反対側の壁に向かって、前記第２のチャネル部を横切って延びている。前記勾配の前記上縁は、前記チャネルを横切って前記ジャンクションに向かって斜めに延びることができる。
【００３７】
前記第２のチャネル部が、前記ジャンクションから遠い第１の領域であって、前記チャネルが幅ｗ６および高さｈ３を有している第１の領域を有することができ、前記第２のチャネル部が、前記第１の領域と前記ジャンクションとの間に形成された先細りのネック領域であって、前記チャネルの幅および高さが前記ジャンクションにおける高さｈ２および幅ｗ５へと増加する先細りのネック領域を有することができる。
【００３８】
装置は、前記リザーバから第２の液体を放出させるための手段をさらに備えることができる。この手段は、鋭い突起を備えることができ、鋭い突起は、放出された第２の液体が前記突起を通過できるように中空であってもよい。
【００３９】
前記鋭い突起によって前記リザーバの壁に穴を開けるため、前記リザーバおよび突起の少なくとも一方が、他方に向かっていてもよい。
【００４０】
いくつかの実施形態においては、前記ジャンクションが、約１ｍｍ２以下（例えば、約０．８ｍｍ２以下、約０．７５ｍｍ２以下、約０．６ｍｍ２以下、約０．４ｍｍ２以下、約０．２ｍｍ２以下）の断面積を有している。前記ジャンクションは、少なくとも約０．１５ｍｍ２の断面積を有することができる。いくつかの実施形態においては、前記ジャンクションが、約０．１５ｍｍ２〜約１ｍｍ２の範囲の断面積を有している。
【００４１】
前記第１のチャネル部が、体積Ｖμｌを有することができ、前記ジャンクションが、断面積Ａｍｍ２を有することができる。Ｖ：Ａの比が、約１．０以下（例えば、約０．５以下、約０．３以下）であってもよい。比Ｖ：Ａは、少なくとも約０．２であってもよい。いくつかの実施形態においては、Ｖ：Ａの比が、約０．２〜約１．０の範囲にある。
【００４２】
装置が、前記チャネルの前記第１の部分に配置された第１の液体（例えば、ヒトの血液）を含むことができ、前記第１の液体が、前記ジャンクションに液体：気体のインターフェースを形成する。磁気感受性粒子を、前記インターフェースの付近の前記第１の液体に配置する（例えば、集合させる）ことができる。第２の別の液体（例えば、バッファ溶液）を、前記チャネルの前記第２の部分に配置することができる。前記第２の液体の少なくとも一部を、前記第１の液体に接させて前記第１の液体に対して流すことができ、前記第２の液体の流れが、前記第１の液体−気体のインターフェースの面積を減少させる。前記インターフェースにおける前記第２の液体の流れの主たる方向は、前記第１の液体の液体−気体のインターフェースに対して横方向であってもよい。バッファ溶液は、分析対象を含まなくてもよい。
【００４３】
装置が、前記チャネルの前記第１の部分に配置された第１の液体（例えば、ヒトの血液）を含むことができ、前記第１の液体が、前記第２のチャネル部に配置されて前記第１の液体に流体接触する第２の別の液体（例えば、バッファ溶液）と、前記ジャンクションにおいて液体：液体のインターフェースを形成する。磁気感受性粒子を、前記インターフェースの付近の前記第１の液体に配置する（例えば、集合させる）ことができる。バッファ溶液は、分析対象を含まなくてもよい。
【００４４】
前記第２の液体の流れを、前記ジャンクションの直前の前記第１のチャネル部の前記第１の液体の流れの方向に実質的に直角な方向に、前記第１の液体の面を横切って案内するように、装置を構成することができる。
【００４５】
前記第２の液体の流れを、前記ジャンクションの手前の距離Ｄにおいて前記第１のチャネル部に生じる第１の液体の流れの方向に実質的に直角な方向に、前記第１の液体の面を横切って案内するように、装置を構成することができ、Ｄは１０ｍｍ未満である。前記第１のチャネル部が、２０μｌ未満の体積（例えば、約１０μｌの体積、約５μｌ以下の体積）を有することができる。
【００４６】
いくつかの実施形態においては、前記第１のチャネル部が、断面において矩形であって、高さｈ１および幅ｗ２を有しており、ｈ１が少なくとも約０．０６ｍｍであって、ｗ２が少なくとも約１．０ｍｍである。いくつかの実施形態においては、前記チャネルの前記第１の部分が、約５μｌの体積を有する。
【００４７】
いくつかの実施形態においては、前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションにおいて、前記第２のチャネル部が、断面においておおむね矩形であって、高さｈ２および幅ｗ５を有しており、ｈ２が少なくとも約０．３５ｍｍであって、ｗ５が少なくとも約９ｍｍである。前記第２のチャネル部は、前記ジャンクションからの距離ｄ２において、高さｈ３および幅ｗ６を有することができ、ここでｄ２は、少なくとも約３．５ｍｍであり、さらに前記第２のチャネル部は、前記第１および第２のチャネル部の前記ジャンクションにおいて、高さｈ２および幅ｗ５を有しており、ｈ２＞ｈ３であって、ｗ５＞ｗ６である。
【００４８】
装置は、前記第１または第２のチャネル部（例えば、前記第１または第２のチャネル部分の前記ジャンクション）、ならびに／あるいは前記導入口に、膜またはフィルタを有さなくてもよい。
【００４９】
装置は、分析対象を含んでいる可能性がある液体サンプルにおいて使用するためのアッセイ装置であってもよく、前記チャネルが形成される支持体を備えることができる。
【００５０】
前記装置の前記センサを、前記第２の液体内の分析対象を測定するために、前記第２のチャネル部に配置することができる。
【００５１】
前記第２のチャネル部が、第１および第２のセンサを備えることができ、第１のセンサが、前記第２のチャネル部の第１の部位に配置され、第２のセンサが、前記第２のチャネル部の第２の部位に配置され、前記ジャンクションが、前記第１および第２の部分の間に位置している。
【００５２】
装置は、前記第１の液体内の分析対象または前記第１の液体の特性を測定するために、前記第１のチャネル部に配置された少なくとも１つのセンサを備えることができる。
【００５３】
装置は、前記液体サンプル−第２の液体のインターフェースが形成されるときに溢れる量の第２の液体を受け取るように構成されたオーバーフローチャネルを備えることができる。オーバーフローチャネルが、オーバーフローチャネル内の第２の液体の存在を判定するように構成されたセンサを備えることができる。
【００５４】
装置のいずれのセンサも、少なくとも１つの電極（例えば、少なくとも２つの電極）を備えることができる。
【００５５】
センサが、前記装置において前記第２のチャネル部の液体からの電気化学信号を検出するように構成された電極を備えることができ、前記信号が、分析対象の存在を表わしている。
【００５６】
前記第１および／または第２のチャネル部の少なくとも１つの壁、ベース、または蓋は、光に対して透過性であってもよい。
【００５７】
装置は、マイクロ流体装置であってもよい。
【００５８】
いくつかの実施形態においては、装置が、メータの内部に配置される。メータは、前記装置を受け入れるように構成されたハウジング、受け入れた前記装置の第１の位置および少なくとも１つの第２の位置に磁界を局在させるように構成された磁石、および第１の位置と第２の位置との間で可動であって、第２の位置において前記リザーバに接触するアクチュエータ、を備えることができる。
【００５９】
いくつかの実施形態においては、装置がマイクロ流体装置であって、ヒトの血液サンプルを受け取るように構成されており、或る量のヒトの血液を含んでいるチャネルの第１の部分に流体接続している導入口、前記第１のチャネル部に配置され、第１の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体へと共役した磁気感受性粒子と、酵素ラベルへと共役した第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体を含んでおり、前記第１および第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体が、前記第１のチャネル部に含まれているヒトの血液に含まれているＮＴｐｒｏＢＮＰに結合している試薬、および前記第１の部分へとジャンクションにおいて接続された前記チャネルの第２の部分を備えており、前記ジャンクションの付近に血液：気体のインターフェースを有している。この装置が、酵素ラベルの基質を含んでいる或る量の第２の液体を含んでおり、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるよう、前記第２の液体をリザーバから放出して前記第２のチャネル部へと送達するように構成されているリザーバ、および前記第２のチャネル部において前記第２の液体から電気化学信号を検出するように構成された少なくとも１つの電極をさらに備えることができる。
【００６０】
いくつかの実施形態においては、装置が、チャネルの第１の部分に流体接続しており、液体を受け取るように構成されている導入口、ジャンクションにおいて前記第１の部分へと接続された前記チャネルの第２の部分、および前記第１のチャネル部に配置された磁気感受性粒子を備えており、前記導入口によって受け取られた液体で、前記ジャンクションの付近に液体のインターフェースを形成するように構成されている。この装置が、或る量の第２の液体を含んでおり、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるよう、前記第２の液体をリザーバから放出して前記第２のチャネル部へと送達するように構成されたリザーバ、および前記第２のチャネル部において前記第２の液体から信号を検出するように構成された少なくとも１つのセンサをさらに備えることができる。
【００６１】
いくつかの実施形態においては、装置が、チャネルの第１の部分へと接続された導入口、前記チャネルの前記第１の部分に配置された磁気感受性粒子、前記チャネルの前記第１の部分へと前記チャネルのジャンクションにおいて接続された前記チャネルの第２の部分、前記チャネルの前記第１の部分に配置され、前記ジャンクションの付近に液体：気体のインターフェースを形成する第１の液体、および前記チャネルの前記第２の部分に配置され、前記第１の液体に接して前記第１の液体に対して流れる第２の別の液体であって、前記第２の液体の流れが、前記第１の液体：気体のインターフェースの面積を減少させ、液体：液体のインターフェースを形成する第２の液体を備えている。
【００６２】
前記第１の液体は、或る量のヒトの血液であってもよい。磁気感受性粒子を、前記インターフェースの付近の前記第１の液体に集めることができる。
【００６３】
前記第２の液体は、バッファ溶液であってもよい。
【００６４】
前記第２の液体の流れを、前記インターフェースの直前の前記第１のチャネル部の前記第１の液体の流れの方向に実質的に直角な方向に、前記インターフェースの前記第１の液体の面を横切って案内するように、装置を構成することができる。
【００６５】
前記第２の液体の流れを、前記インターフェースの手前の距離Ｄにおいて前記第１のチャネル部に生じる第１の液体の流れの方向に実質的に直角な方向に、前記インターフェースの前記第１の液体の面を横切って案内するように、装置を構成することができ、Ｄは１０ｍｍ未満である。
【００６６】
いくつかの実施形態においては、装置が、分析対象を含んでいる可能性がある液体サンプルについて使用するための可搬型のアッセイ装置であって、導入口から液体を受け取るように適合された浅い液体流通チャネルをもたらすように構成された支持体、液体の流れを前記導入口から前記チャネルの全長の範囲内の中間位置までに制御するように適合された前記チャネルの第１の部分、および前記中間位置において前記第１のチャネル部へと接続された前記第２のチャネル部を有しており、前記チャネルの前記第１の部分の液体の流れへとアクセスできる少なくとも１つの表面が、液体サンプル内の分析対象に結合するように構成された複数の磁気感受性粒子を含んでいる乾燥試薬を、前記表面に堆積させて有しており、前記第２のチャネル部が、前記装置が液体サンプルについて使用される際に前記液体サンプルの特性を検出できるよう、前記装置上に構成されて前記チャネルに並置されたセンサを備えている。
【００６７】
いくつかの実施形態においては、装置が、第１および第２のチャネル部を有するチャネルを備えており、第１の液体を受け取るように構成された導入口を有しており、前記導入口が、前記導入口からの第１の液体が前記第１のチャネル部へと流入できるように、前記第１のチャネル部に流体接続しており、前記第１および第２のチャネル部が、ジャンクションにおいて接続されており、前記ジャンクションにおいて第１の液体：気体のインターフェースが形成されるように構成されており、前記第２のチャネル部が、第２の液体を受け取って前記ジャンクションへと案内し、前記第１および第２の液体のインターフェースを形成すべく、前記第２の液体を前記第１の液体に接触させて気体を追い出すように構成されている。
【００６８】
別の態様において、本考案は方法に関する。
【００６９】
いくつかの実施形態において、この方法は、液体サンプルをマイクロ流体装置のチャネルの第１の部分へと導入するステップ、分析対象に結合するように構成された結合剤を含んでいる磁気感受性粒子を、前記マイクロ流体装置において前記液体サンプルに接触させるステップ、前記チャネルの前記第１の部分と前記チャネルの第２の部分との間のジャンクションの付近に、液体サンプル：気体のインターフェースを形成するステップ、前記液体サンプル：気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって、液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップ、および前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップを含んでいる。
【００７０】
この方法は、液体サンプル中の分析対象を検出するための方法であってもよく、前記磁気感受性粒子が前記分析対象に結合するように適合されており、前記方法が、前記第２の液体において分析対象を検出するステップをさらに含んでいる。
【００７１】
この方法は、分析対象を検出するための方法であってもよく、前記分析対象の量を割り出すステップを含むことができる。
【００７２】
この方法は、分析対象を前記液体サンプルから分離するステップ、および前記分析対象を前記第２の液体へと運ぶステップを含むことができる。
【００７３】
この方法は、体外での方法であってもよい。
【００７４】
前記第１および第２の液体は、典型的には異なっている。前記第１の液体は、ヒトまたは哺乳類からの体液（例えば、血液、血清、または血漿）であってもよい。前記第２の液体は、バッファ溶液であってもよい。
【００７５】
いくつかの実施形態においては、この方法が、ヒトからの血液、血漿、または血清の液体サンプルにおいて分析対象を検出するための体外での方法であって、液体サンプルをマイクロ流体装置のチャネルの第１の部分へと導入するステップ、分析対象に結合するように構成された結合剤を含んでいる磁気感受性粒子を、前記マイクロ流体装置において前記液体サンプルに接触させるステップ、前記チャネルの前記第１の部分と前記チャネルの第２の部分との間のジャンクションの付近に、液体サンプル：気体のインターフェースを形成するステップ、前記液体サンプル：気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって、液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップ、および前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップを含んでいる。
【００７６】
この方法は、アッセイ結果を決定するステップを含むことができる。この方法は、前記分析対象の量を割り出すステップを含むことができる。この方法は、前記割り出された分析対象の量を基準量と比較して、アッセイ結果を生成するステップを含むことができる。この方法は、前記割り出された分析対象の量を表示するステップを含むことができる。この方法は、アッセイ結果にもとづいて情報を表示するステップを含むことができる。この情報は、アッセイ結果を表わすことができる（例えば、前記第２の液体中の分析対象の量を表わすことができる）。表示されるアッセイ結果は、前記第２の液体中の分析対象の量に比例してもよい。
【００７７】
この方法は、前記第２のチャネル部に含まれている液体中の分析対象を判定するステップを含むことができる。
【００７８】
磁気感受性粒子を液体サンプルに接触させるステップは、典型的には、液体サンプルおよび磁性粒子の混合物を形成する工程を含んでいる。
【００７９】
この方法は、磁気感受性粒子の結合試薬の分析対象への結合を可能にするステップを含むことができる。
【００８０】
磁気感受性粒子を液体サンプルに接触させるステップは、前記液体サンプルを分析対象に結合するように構成された第２の結合剤に接触させる工程を含むことができる。この方法は、磁気感受性粒子、分析対象、および第２の結合剤の錯体を形成するステップを含むことができる。
【００８１】
いくつかの実施形態においては、前記結合剤が、検出可能ラベル（例えば、西洋わさびペルオキシダーゼなどの酵素ラベル）へと共役している。前記第２の液体が、酵素ラベルの基質を含むことができる。
【００８２】
いくつかの実施形態においては、前記磁気感受性粒子が、分析対象に結合するように構成された第１の抗体に共役している。いくつかの実施形態においては、前記第２の結合剤が、前記第１の抗体と異なるエピトープにおいて分析対象へと結合するように構成された第２の抗体である。
【００８３】
前記検出可能ラベル（例えば、酵素ラベル）および第２の結合試薬（例えば、第２の抗体）を、非磁気感受性粒子（例えば、金ゾル微粒子などのゾル粒子）へと取り付けることができる。
【００８４】
前記第２の液体は、典型的には、前記第１の液体と異なっている。前記第２の液体は、前記液体サンプルと実質的に非混和であってもよい。前記第２の液体は、バッファ溶液であってもよい。
【００８５】
液体サンプル：気体のインターフェースを形成するステップは、地球のその場の重力場の向きに実質的に平行に前記インターフェースを形成する工程を含むことができる。
【００８６】
液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップは、地球のその場の重力場の向きに実質的に平行に前記インターフェースを形成する工程を含むことができる。
【００８７】
液体サンプル：気体のインターフェースを形成するステップは、実質的に垂直な平面に前記インターフェースを形成する工程を含むことができる。
【００８８】
液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップは、実質的に垂直な平面に前記インターフェースを形成する工程を含むことができる。
【００８９】
前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、前記第１のチャネル部の第１の位置へと磁界を印加する工程、および前記印加磁界を前記チャネルに沿って前記ジャンクションを通過して前記第２のチャネル部の第２の位置へと移動させる工程を含むことができる。
【００９０】
前記磁界を、休止なしで連続的に前記第１および第２の位置の間を移動させることができる。
【００９１】
この方法は、前記ジャンクションの領域において前記磁界の移動を休止させ、磁気感受性粒子を前記インターフェースに隣接する前記液体サンプル中に位置させるステップを含むことができる。
【００９２】
この方法は、前記ジャンクションの領域において前記磁界の移動を休止させ、磁気感受性粒子を前記インターフェースに隣接する前記第２の液体中に位置させるステップを含むことができる。
【００９３】
この方法は、前記磁界を前記第１の位置から前記ジャンクションへと第１の速度Ｓ１で移動させるステップ、および前記磁界を前記ジャンクションに隣接する前記第１および／または第２のチャネル部の領域から前記第２の位置に向かって第２の速度Ｓ２で移動させるステップを含むことができ、ここで、Ｓ２＞Ｓ１である。
【００９４】
前記磁界の移動の速度を、前記磁界が前記ジャンクションを通過して移動するときに高めることができる。
【００９５】
この方法は、前記第２の位置の前記第２の液体の特性を割り出すステップを含むことができる。
【００９６】
この方法は、複数の磁気感受性粒子を前記液体サンプルに接触させるステップの後、かつ前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップの前に、磁気感受性粒子を前記液体サンプル：気体のインターフェースに隣接する前記第１の液体中に磁気によって位置させるステップを含むことができる。
【００９７】
この方法は、複数の磁気感受性粒子を前記液体サンプルに接触させるステップの後、かつ前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップの前に、磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースに隣接する前記第１の液体中に磁気によって位置させるステップを含むことができる。
【００９８】
前記磁気感受性粒子を位置させるステップを、前記チャネルの外部に位置する磁石を使用して実行することができる。いくつかの実施形態においては、粒子が磁石に接触しない。
【００９９】
前記磁気感受性粒子を、所定の時間期間ＤＫにわたって、前記液体サンプル：気体のインターフェースおよび／または液体サンプル：第２の液体のインターフェースに隣接する前記第１の液体中に、磁気によって位置させることができ、ＤＫは、少なくとも１秒（例えば、少なくとも５秒、少なくとも１０秒）であってもよい。ＤＫは、約１２０秒以下（例えば、約６０秒以下）であってもよい。
【０１００】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成および液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成の間の時間は、時間ＴＫ未満であってもよく、ＴＫは、約１２０秒以下（例えば、約６０秒以下、約３０秒以下）であってもよい。時間ＴＫは、少なくとも約１秒（例えば、少なくとも約５秒、少なくとも約１０秒、少なくとも約２０秒）であってもよい。
【０１０１】
前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：気体または液体サンプル：第２の液体のインターフェースに隣接する前記液体サンプル中に磁気によって位置させてから、前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って磁気によって移動させるまでの時間は、ＴＪ未満であってもよく、ＴＪは約３００秒以下（例えば、約２００秒以下、約１００秒以下、約６０秒以下）であってもよい。
【０１０２】
前記磁気感受性粒子を、前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成後の時間ＴＰのうちに、前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと移動させることができ、ＴＰは約１２０秒以下（例えば、約６０秒以下、約３０秒以下、約１５秒以下、約１０秒以下）であってもよい。
【０１０３】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル：気体および／または液体サンプル：第２の液体のインターフェースに隣接する前記第１の液体中に磁気によって位置させるステップは、粒子を前記当のインターフェースから距離Ｄｍｍの範囲内に位置させる工程を含むことができ、Ｄは約１０ｍｍ以下（例えば、約５ｍｍ以下）であってもよい。
【０１０４】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップは、前記液体サンプル：気体のインターフェースの前記液体サンプルの面を横切って前記第２の液体を案内する工程を含むことができる。
【０１０５】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップは、前記液体サンプル：気体のインターフェースの前記液体サンプルの面を横切って前記第２の液体の流れを案内して、前記液体サンプル：気体のインターフェースの面積を減少させる工程を含むことができる。前記第２の液体が前記液体サンプルの面を横切って流れる際、前記第１の液体を実質的に静止に保つことができる。
【０１０６】
この方法は、インターフェースを横切る（拡散以外の）液体の塊の移動が実質的に生じない液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップを含むことができる。
【０１０７】
この方法は、磁気感受性粒子を前記第２のチャネル部の所定の検出ゾーンに磁気によって位置させるステップを含むことができる。
【０１０８】
この方法は、磁気感受性粒子を、前記装置の前記第２のチャネル部に位置し、あるいは前記装置の前記第２のチャネル部に並置されたセンサの付近または上方に、磁気によって移動させるステップを含むことができる。前記粒子を、前記センサによって前記第２の液体の特性を検出するための充分な時間にわたって、前記センサの付近または上方に磁気によって保持することができる。
【０１０９】
この方法は、前記第２の液体に接するように前記第２のチャネル部に構成された１つ以上の電極の付近に、磁気感受性粒子を磁気によって位置させるステップを含むことができる。この方法は、前記電極において前記第２の液体の特性を検出するステップを含むことができる。特性を検出するステップは、前記第２の液体の電気化学信号を検出する工程を含むことができる。前記磁気感受性粒子を、前記電極によって前記第２の液体の電気化学信号を検出するための充分な時間にわたって、前記１つ以上の電極の付近または上方に磁気によって保持することができる。前記検出は、前記第２の液体における分析対象の存在の検出を含むことができる。前記検出は、前記第２の液体における分析対象の量の検出を含むことができる。
【０１１０】
前記第２の液体における分析対象の検出は、時間Ｔ１において、作業電極において電気化学信号Ｑ１を測定するステップ、
・Ｑ１をＴ１用の較正データセットと比較し、Ｑ１がＴ１用のデータセットに存在する場合に、Ｔ１用のデータセットを使用してバッファ液内の分析対象の量を割り出すステップ、Ｑ１がＴ１用の較正データセットに存在しない場合に、Ｔ２＞Ｔ１である時間Ｔ２において、作業電極において電気化学信号Ｑ２を測定するステップ、およびＱ２をＴ２用の較正データセットと比較し、Ｑ２およびＴ２の有効な比較がなされた場合に、バッファ液内の分析対象の量を割り出すステップを含むことができる。この方法は、１つ以上のその後の時間Ｔｘおよび電気化学信号Ｑｘについて上記ステップのうちの１つ以上を繰り返すステップを含むことができる。
【０１１１】
前記液体サンプルを導入するステップは、或る量の前記液体サンプルを前記装置の導入口に堆積する工程を含むことができ、前記導入口が、前記第１のチャネル部に流体接続している。
【０１１２】
前記液体サンプル：気体のインターフェースは、約１ｍｍ２以下の断面積を有することができる。前記液体サンプル：気体のインターフェースは、約０．１５ｍｍ２以上の断面積を有することができる。前記液体サンプル：気体のインターフェースは、第１の寸法Ｈおよび第２の寸法Ｗを有することができ、Ｈに対するＷの比は、少なくとも２（例えば、少なくとも３．５、少なくとも５）であってもよい。Ｈに対するＷの比は、約３０以下（例えば、約２０以下、約１０以下）であってもよい。
【０１１３】
前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースは、前記液体サンプル：気体のインターフェースとほぼ同じ、またはそれ未満の断面積を有することができる。
【０１１４】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間の時間ＴＩは、少なくとも５秒（例えば、少なくとも１５秒、少なくとも３０秒）であってもよい。時間ＴＩは、約６００秒以下（例えば、約３００秒以下、約１５０秒以下、約６０秒以下）であってもよい。この方法は、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成後の時間ＴＤにわたり、前記粒子の移動を実質的に生じさせないステップを含むことができ、ＴＤは、時間ＴＩの少なくとも５％（例えば、少なくとも１０％、少なくとも２５％）であってもよい。
【０１１５】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、前記方法が、前記第１の液体：気体のインターフェースの形成後、かつ前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成前に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含むことができる。
【０１１６】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、前記方法が、前記液体空気のインターフェースの形成後、かつ前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成前に、総時間ＴＯにわたって前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含んでおり、ＴＯが時間ＴＩの少なくとも３０％であってもよい。ＴＯは、時間ＴＩの９０％以下であってもよい。
【０１１７】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記第１の液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの総体積Ｖを占めることができ、前記方法が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成後に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって動かすことによって、前記サンプル液体を混合するステップを含むことができる。
【０１１８】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記第１の液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの総体積Ｖを占めることができ、前記方法が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成後、かつ前記サンプル液体：第２の液体のインターフェースの形成前に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって動かすことによって、前記サンプル液体を混合するステップを含むことができる。
【０１１９】
この方法は、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間に、前記液体サンプル：気体のインターフェースを前記チャネルに沿って距離ＤＣ以下だけ動かすステップを含むことができ、ＤＣは約３ｍｍ以下（例えば、約２ｍｍ以下、約１ｍｍ以下）であってもよい。ＤＣは、基本的にゼロであってもよい。
【０１２０】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間において、前記液体サンプル：気体のインターフェースは、前記チャネルに沿った移動に関して基本的に静止していてもよい。
【０１２１】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースが形成されたとき、前記インターフェースに隣接するサンプル液体および第２の液体を、時間ＴＭにわたって基本的に静止させておくことができ、ＴＭは少なくとも１秒（例えば、少なくとも５秒、少なくとも１０秒、少なくとも３０秒）であってもよい。時間ＴＭは、前記粒子を前記サンプル液体：第２の液体のインターフェースを横切って移動させて、移動させた粒子に結び付いている分析対象を検出できるよう、充分に長くてもよい。
【０１２２】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、磁性または磁気感受性粒子の実質的にすべてを前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができる。
【０１２３】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、総数Ｎの磁性または磁気感受性粒子の少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％）を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができる。
【０１２４】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、総数でＮ個の粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができ、前記Ｎ個の粒子の実質的にすべてが、互いに時間ＴＮ内で前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させられ、ＴＮは約１０秒以下（例えば、約５秒以下、約３秒以下）である。
【０１２５】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記サンプル液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、Ｖは０．５μｌ以上（例えば、少なくとも約１μｌ）であってもよい。Ｖは約１０μｌ以下（例えば、約７．５μｌ以下、約５μｌ以下）であってもよい。
【０１２６】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記サンプル液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、Ｖは、約２μｌ、約３μｌ、約μｌ、５μｌ、約６μｌ、約７μｌ、約８μｌ、約９μｌ、約１０μｌ、約１５μｌ、約２０μｌのうちの１つから選択可能である。
【０１２７】
この方法は、前記第２のチャネル部における前記第２の液体の存在を検出する（例えば、前記第２の液体の流れを検出する）ステップを含むことができる。前記第２のチャネル部における前記第２の液体の存在を、前記第２の液体が前記サンプル液体に接する前に検出することができる。これに加え（あるいは、これに代えて）、前記第２のチャネル部および／またはオーバーフローチャネル部における前記第２の液体の存在の検出するステップを、前記第２の液体が前記サンプル液体に接触した後で実行してもよい。
【０１２８】
この方法は、診断方法であってもよい。
【０１２９】
この方法を、医師の存在しないところで実行することができる。
【０１３０】
いくつかの実施形態においては、この方法が、ヒトからの血液、血漿、または血清の液体サンプルについてＮＴｐｒｏＢＮＰを検出するための方法であり、液体サンプルをマイクロ流体装置のチャネルの第１の部分へと導入するステップ、前記液体サンプルを、前記マイクロ流体装置において、第１の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体に共役した磁気感受性粒子と酵素ラベルに共役した第２の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体とを含んでいる試薬に接触させ、磁気感受性粒子とＮＴｐｒｏＢＮＰと酵素ラベルとを含む錯体を形成するステップ、前記チャネルの前記第１の部分と前記チャネルの第２の部分との間のジャンクションの付近に、液体サンプル：気体のインターフェースを形成するステップ、前記液体サンプル：気体のインターフェースの気体を第２の液体で押しのけることによって、液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップ、前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップ、および前記第２の液体においてＮＴｐｒｏＢＮＰを検出するステップを含んでいる。
【０１３１】
本考案の別の態様は、マイクロ流体装置のチャネル内の液体サンプルと第２の別の液体とのインターフェースに関する。このインターフェースは、前記第２の液体を、液体サンプル：気体のインターフェースに接触させ、前記液体サンプル：気体のインターフェースを横切るように流れる前記第２の液体を含み、前記第２の液体の流れによって、前記液体サンプル：気体のインターフェースの面積が減少して、液体：液体のインターフェースが形成され、前記液体サンプルは、ヒトの血液、血漿、または血清から選択され、前記インターフェースの付近に磁性粒子を含んでいる。前記粒子を、前記液体サンプル中の分析対象に結合する結合剤に共役させることができる。このインターフェースを、マイクロ流体装置の内部に配置することができる。
【０１３２】
本考案の別の態様は、マイクロ流体アッセイ装置とメータとを備えるアッセイ・システムであって、アッセイ装置が、チャネルの第１の部分に流体接続しており、液体を受け取るように構成されている導入口、ジャンクションにおいて前記第１の部分へと接続された前記チャネルの第２の部分、および前記第１のチャネル部に配置された磁気感受性粒子を備えていて、前記導入口によって受け取られる液体で、前記ジャンクションの付近に液体のインターフェースを形成するように構成されているアッセイ・システムに関する。さらにアッセイ装置は、或る量の第２の液体を収容しており、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるように、前記第２の液体をリザーバから放出して前記第２のチャネル部へと送達するように構成されているリザーバ、および前記第２のチャネル部において前記第２の液体からの信号を検出するように構成された少なくとも１つのセンサを備えることができる。前記メータが、アッセイ装置を受け入れるように構成されたハウジング、および受け入れたアッセイ装置の第１の位置および少なくとも１つの第２の位置に磁界を局在させるように構成された磁石を備えることができる。
【０１３３】
いくつかの実施形態においては、前記メータが、キャリッジに搭載された磁石を備えており、前記キャリッジが、前記磁石を前記第１および第２の位置に位置させるべく可動である。前記アッセイ装置が、鋭い突起を備えており、前記リザーバおよび突起の一方が、前記鋭い突起によって前記リザーバの壁に穴が開けられるように他方に向かって可動であり、前記メータが、前記リザーバを前記突起に向かって動かすべく動作することができるアクチュエータを備えている。
【０１３４】
本考案の別の態様は、アッセイ結果の決定に使用するためのメータであって、マイクロ流体アッセイ装置を収容するように構成されたハウジング、前記収容したアッセイ装置の第１の位置および少なくとも１つの第２の位置に磁界を局在させるように構成された磁石、および第１の位置と第２の位置との間で可動であって、第２の位置において前記メータに収容されたアッセイ装置のリザーバに接触するアクチュエータ、を備えているメータに関する。いくつかの実施形態においては、前記磁石が、キャリッジに搭載されており、前記キャリッジが、前記磁石を前記第１または第２の位置に位置させるべく可動である。メータは、上述のとおりのアッセイ装置をメータ内に収容して備えることができる。
【０１３５】
本考案の別の態様は、液体−気体のインターフェースを形成するステップ、磁性または磁気感受性粒子を、前記インターフェースの付近に磁気によって位置させるステップ、および前記液体−気体のインターフェースの気体を押しのけることによって液体−第２の液体のインターフェースを形成することで、前記磁気感受性粒子が前記液体−液体のインターフェースを横断するステップを含んでいる方法に関する。
【０１３６】
本考案の別の態様は、マイクロ流体装置のチャネル内に液体−気体のインターフェースを形成するステップ、磁気感受性粒子を前記インターフェースの距離Ｄｍｍの範囲内へと磁気によって移動させるステップ、前記液体−気体のインターフェースの気体を押しのけることによって、液体−第２の液体のインターフェースを形成するステップ、および前記粒子を前記液体−気体のインターフェースの距離Ｄｍｍの範囲内へと移動させてから時間Ｔ秒以内に、前記磁気感受性粒子を前記液体−第２の液体のインターフェースを横切って磁気によって移動させるステップを含んでいる方法に関する。距離Ｄは、１０ｍｍ以下（例えば、５ｍｍ以下）であってもよく、時間Ｔは、２０秒以下（例えば、１０秒以下）であってもよい。
【０１３７】
前記磁気感受性粒子を移動させるステップを、前記粒子に直接的に触れることなく実行することができる。
【０１３８】
いくつかの実施形態においては、前記ジャンクションが、約５ｍｍ２以下（例えば、約２．５ｍｍ２以下、約１．５ｍｍ２以下、約１ｍｍ２以下、約０．８ｍｍ２以下、約０．７５ｍｍ２以下、約０．６ｍｍ２以下、約０．４ｍｍ２以下、約０．２ｍｍ２以下）の断面積を有している。前記ジャンクションは、少なくとも約０．１５ｍｍ２（例えば、約０．５ｍｍ２以上）の断面積を有することができる。いくつかの実施形態においては、前記ジャンクションが、約０．１５ｍｍ２〜約１ｍｍ２の範囲の断面積を有している。
【０１３９】
前記液体サンプル−気体のインターフェースは、第１の寸法Ｈおよび第２の寸法Ｗを有することができ、Ｈに対するＷの比が、少なくとも２（例えば、少なくとも３．５、少なくとも５）であってもよい。Ｈに対するＷの比は、約３０以下（例えば、約２０以下、約１０以下）であってもよい。
【０１４０】
前記液体−第２の液体のインターフェースは、前記液体−気体のインターフェースとほぼ同じ、またはそれ未満の断面積を有することができる。
【０１４１】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、前記方法が、前記第１の液体：気体のインターフェースの形成後、かつ前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成前に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含むことができる。
【０１４２】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間の時間ＴＩは、少なくとも５秒（例えば、少なくとも１５秒、少なくとも３０秒）であってもよい。時間ＴＩは、約６００秒以下（例えば、約３００秒以下、約１５０秒以下、約６０秒以下）であってもよい。この方法は、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成後の時間ＴＤにわたり、前記粒子の移動を実質的に生じさせないステップを含むことができ、ＴＤは、時間ＴＩの少なくとも５％（例えば、少なくとも１０％、少なくとも２５％）であってもよい。
【０１４３】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、前記方法が、前記液体空気のインターフェースの形成後、かつ前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成前に、総時間ＴＯにわたって前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含んでおり、ＴＯは時間ＴＩの少なくとも３０％であってもよい。ＴＯは時間ＴＩの９０％以下（例えば、７５％以下）であってもよい。
【０１４４】
この方法は、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間に、前記液体サンプル：気体のインターフェースを前記チャネルに沿って距離ＤＣ以下だけ動かすステップを含むことができ、ＤＣは約３ｍｍ以下（例えば、約２ｍｍ以下、約１ｍｍ以下）であってもよい。ＤＣは、基本的にゼロであってもよい。
【０１４５】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間において、前記液体サンプル：気体のインターフェースを、前記チャネルに沿った移動に関して基本的に静止させておくことができる。
【０１４６】
前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、総数でＮ個の磁性または磁気感受性粒子の少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％）を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができる。
【０１４７】
前記磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、総数でＮ個の粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができ、前記Ｎ個の粒子の実質的にすべてが、互いに時間ＴＮ内で前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させられ、ＴＮは約１０秒以下（例えば、約５秒以下、約３秒以下）である。
【０１４８】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記サンプル液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、Ｖは０．５μｌ以上（例えば、少なくとも約１μｌ）であってもよい。Ｖは、約１０μｌ以下（例えば、約７．５μｌ以下、約５μｌ以下）であってもよい。
【０１４９】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記サンプル液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、Ｖは、約２μｌ、約３μｌ、約μｌ、５μｌ、約６μｌ、約７μｌ、約８μｌ、約９μｌ、約１０μｌ、約１５μｌ、約２０μｌのうちの１つから選択可能である。
【０１５０】
前記液体−気体のインターフェースの液体は、血液であってもよい。
【０１５１】
いくつかの実施形態においては、或る方法が、第１の液体と磁気感受性粒子とを含んでいる混合物と気体との間に、液体−気体のインターフェースを形成するステップ、前記粒子に、前記液体−気体のインターフェースへと少なくとも部分的に向けられた磁気の力を加えるステップ、および前記粒子に前記力を加えた状態で、前記気体の少なくとも一部を第２の液体で押しのけて、前記第１および第２の液体の間の液体−液体のインターフェースを形成することで、前記粒子が前記第２の液体へと前記液体−液体のインターフェースを横切るステップを含んでいる。この方法を、前記液体−気体のインターフェースの形成後、かつ前記粒子が前記液体−液体のインターフェースを横切るまで、前記粒子に直接的に触れることなく実行することができる。
【０１５２】
いくつかの実施形態においては、前記粒子が前記液体−気体のインターフェースを横切ることが基本的にない。
【０１５３】
前記液体−気体のインターフェースを横切る粒子の数の前記液体−液体のインターフェースを横切る粒子の数に対する比は、０．１未満（例えば、０．０５未満、０．０１未満、０．００１未満）であってもよい。
【０１５４】
前記第１の液体は、血液であってもよく、前記第２の液体は、バッファ溶液であってもよい。
【０１５５】
いくつかの実施形態においては、この方法が、前記液体−気体および液体−液体のインターフェースを、マイクロ流体装置のマイクロ流体ネットワークにおいて形成するステップを含んでいる。マイクロ流体装置は、前記液体−液体のインターフェースに隣接して（例えば、前記インターフェースの約１０ｍｍ以下の範囲内、約７．５ｍｍ以下の範囲内、約５ｍｍ以下の範囲内に）配置されたセンサを有することができる。センサは、電気化学センサであってもよい。前記液体−液体のインターフェースを横切る粒子を、直接的にセンサへと移動させることができる。例えば、前記液体−液体のインターフェースを横切る粒子を、前記インターフェースを横切った後に、最初にマイクロ流体装置の別の表面に接触させることなく、センサの表面へと移動させることができる。例えば、センサの表面は、センサが電気化学センサである実施形態においては、センサの電極の表面であってもよい。
【０１５６】
前記混合物の液体の総体積は、約１０μｌ以下（例えば、約７．５μｌ以下、約５μｌ以下）であってもよい。
【０１５７】
いくつかの実施形態においては、前記液体−気体および液体−液体のインターフェースのそれぞれの断面積が、約５ｍｍ２以下（例えば、約２．５ｍｍ以下、約１．５ｍｍ２以下、約１ｍｍ２以下、約０．８ｍｍ２以下、約０．７５ｍｍ２以下、約０．６ｍｍ２以下、約０．４ｍｍ２以下、約０．２ｍｍ２以下）である。前記液体−気体および液体−液体のインターフェースのそれぞれの断面積は、少なくとも約０．１５ｍｍ２（例えば、約０．５ｍｍ２以上）であってもよい。いくつかの実施形態においては、前記液体−気体および液体−液体のインターフェースのそれぞれの断面積が、約０．１５ｍｍ２〜約１ｍｍ２の範囲であってもよい。
【０１５８】
いくつかの実施形態においては、或る方法が、マイクロ流体装置において、第１の試薬と液体サンプルとを含む第１の混合物であって、前記第１の試薬が、磁性または磁気感受性の粒子と分析対象のための結合剤とを含んでいる第１の混合物を形成するステップ、前記第１の試薬を、前記混合物と流体との間のインターフェースを横切って運ぶステップ、および前記粒子によって前記インターフェースを横切って運ばれた分析対象の存在を判定するステップ
【０１５９】
を含んでいる。前記流体は、気体（例えば、空気）であってもよい。
【０１６０】
この方法は、前記運ぶステップの後で、前記粒子を液体試薬に接触させるステップを含むことができ、前記判定するステップが、前記液体試薬中の分析対象の存在を判定する工程を含んでいる。
【０１６１】
前記流体は、液体試薬（例えば、バッファ溶液）であってもよい。
【０１６２】
前記判定するステップが、前記液体試薬中の分析対象の存在を判定する工程を含むことができる。
【０１６３】
いくつかの実施形態においては、前記方法が、第１および第２の分析対象を含んでいる第１の液体と、第２の別の液体との間に、液体−液体のインターフェースを形成するステップ、前記第１の液体において前記第１の分析対象を測定するステップ、前記第２の分析対象を、前記液体−液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと移動させるステップ、および前記第２の液体において前記第２の分析対象を測定するステップを含んでいる。
【０１６４】
前記第１の分析対象を測定するステップは、前記第１の分析対象を間接的に測定する工程を含んでいる。前記第１の液体が、前記第１の分析対象と錯体を形成できる第１の試薬をさらに含むことができ、前記第１の分析対象を間接的に測定するステップが、前記第１の液体において前記第１の試薬を測定する工程を含むことができる。前記第１の試薬を測定するステップは、前記第１の試薬を電気化学的に測定する工程を含むことができる。前記第１の試薬は、金属または金属のイオンであってもよい。前記第１の試薬は、コバルトであってもよく、前記第１の分析対象は、アルブミンであってもよい。
【０１６５】
この方法は、前記液体−液体のインターフェースの形成前に、前記第１および第２の分析対象を含むサンプル材料をマイクロ流体ネットワークを備えるマイクロ流体装置へと導入するステップを含むことができ、前記第１の液体が、前記サンプル材料の少なくとも一部を含んでおり、前記液体−液体のインターフェースを形成するステップが、前記マイクロ流体ネットワーク内に前記インターフェースを形成する工程を含んでいる。
【０１６６】
前記サンプル材料は、血液または血液から由来した液体を含むことができる。前記サンプル材料が、血液を含むことができ、前記サンプル材料を前記マイクロ流体装置へと導入するステップが、血液を前記マイクロ流体装置へと導入する工程を含むことができ、前記方法が、指刺しから血液（例えば、血液のすべて）を得るステップをさらに含むことができる。
【０１６７】
この方法は、前記サンプル材料を導入するステップの後で、前記サンプル材料を前記第１の試薬および第２の試薬に混ぜ合わせるステップをさらに含むことができ、前記第２の試薬が、前記第２の分析対象への親和性を有している。
【０１６８】
前記第２の試薬が、前記第２の分析対象への親和性を有する第１の部分と粒子とを含んでいる微粒子試薬であってもよい。前記混ぜ合わせるステップに先立ち、前記第１および第２の試薬は、前記マイクロ流体ネットワーク内に乾燥状態で存在することができ、前記方法が、乾燥している前記第１および第２の試薬を前記第１の液体で濡らすステップを含んでいる。
【０１６９】
前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるステップは、前記第２の試薬へと力を加える工程を含むことができ、前記第２の分析対象が、前記第２の試薬に組み合わせられている。
【０１７０】
前記第２の試薬の前記粒子は、磁気感受性であることができ、前記第２の分析対象を移動させるステップが、前記第２の試薬を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるための充分な磁界を前記第２の試薬に加える工程を含んでいる。
【０１７１】
前記第２の分析対象を測定するステップは、前記第２の分析対象を電気化学的に測定する工程を含むことができる。
【０１７２】
前記サンプル材料を前記第１の試薬および第２の試薬に混ぜ合わせるステップが、前記サンプル材料を第３の試薬に混ぜ合わせる工程をさらに含むことができ、前記第２の分析対象、前記第２の試薬、および前記第３の試薬が、錯体を形成することができ、前記第３の試薬が、前記第２の分析対象の電気化学的な測定に関与する。
【０１７３】
前記第３の試薬は、酵素であってもよく、前記第２の分析対象を電気化学的に測定するステップが、前記酵素を前記酵素のための基質に接触させる工程を含むことができる。
【０１７４】
前記酵素は、グルコースオキシダーゼであってもよく、前記基質は、グルコースであってもよい。
【０１７５】
前記第１の分析対象を測定するステップは、前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させる前に行うことができる。
【０１７６】
前記液体−液体のインターフェースを形成するステップは、基板内のチャネルの第１の位置に前記第１の液体を導入する工程、および前記チャネルの第２の位置に前記第２の液体を導入するステップを含むことができ、前記第２のチャネルが、前記第１の位置から離間しており、前記液体−液体のインターフェースが、前記第１および第２の位置の間に形成される。
【０１７７】
前記第１および第２の位置の間の前記チャネルの最大断面積は、約５ｍｍ２以下（例えば、約１ｍｍ２以下）であってもよい。
【０１７８】
液体のインターフェースを形成するステップは、前記第１および第２の液体の少なくとも一方を毛管作用によって前記チャネルに沿って移動させる工程を含むことができる。
【０１７９】
いくつかの実施形態においては、この方法が、タンパク質および第２の生物学的分析対象を含んでいるサンプル材料と、前記タンパク質と錯体を形成することができる金属イオンと、前記生物学的分析対象と錯体を形成することができる酵素試薬と、を含む混合物を形成するステップ、前記タンパク質との錯体を形成していない金属イオンの量を検出するステップ、前記タンパク質との錯体を形成していない金属イオンの量にもとづいて、前記タンパク質の量を割り出すステップ、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬と、前記生物学的分析対象との錯体を形成していない酵素試薬とを分離するステップ、記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬を、前記酵素試薬との酵素反応に関与することができる第２の試薬に接触させるステップ、前記酵素反応の生成物の量を検出するステップ、および前記生成物の量にもとづいて、前記生物学的試薬の量を割り出すステップを含んでいる。前記タンパク質は、アルブミンであってもよい。前記金属イオンは、コバルトイオンであってもよい。前記サンプル材料は、血液または血液から由来した液体であってもよい。前記生物学的分析対象は、ナトリウム利尿ペプチドであってもよい。前記酵素試薬は、酵素であってもよく、前記第２の試薬は、前記酵素のための基質であってもよい。前記酵素反応の生成物の量を検出するステップは、前記生成物を間接的に検出する工程を含むことができる。前記酵素試薬が、グルコースオキシダーゼであってもよく、前記第２の試薬が、グルコースオキシダーゼのための基質であってもよく、前記生成物が、前記基質の酸化された形態であってもよい。
【０１８０】
前記混合物が、前記酵素試薬および前記生物学的分析対象と錯体を形成することができる磁性微粒子試薬をさらに含むことができ、前記分離するステップが、前記混合物に磁界を加える工程を含んでいる。前記混合物へと磁界を加えることで、前記酵素試薬、前記生物学的分析対象、および前記磁性微粒子試薬を含む錯体を、第１の位置から前記第１の位置から離間した第２の位置へと移動させることができる。前記分離するステップが、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬を、前記混合物を含んでいる第１の液体と前記第１の液体とは異なる第２の液体との間の液体−液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含んでいる。
【０１８１】
別の態様において、本考案は、他のサンプル成分のうち目標の少なくとも１つの化学部分を含んでいる水性液体サンプルの複数の特性を選択的に測定するためのアッセイに関する。このアッセイは、アッセイの実行に使用するための横流れ装置であって、少なくとも１つの横流れチャネルと、サンプル収集部と、前記横流れチャネルに近接した少なくとも１つの試薬堆積ゾーンと、前記横流れチャネルに対して機能的に並置されたセンサ手段とを備えている横流れ装置を用意するステップ、アッセイにおいて測定すべき目標の化学部分に対して選択的な親和性を呈するように適合された粒子であって、磁界による操作に対して感受性を有している粒子を用意するステップ、液体サンプルを前記サンプル収集部へと、前記横流れチャネルおよび前記少なくとも１つの試薬堆積ゾーンへの流入を可能にするための充分な量にて、前記粒子がサンプル中に存在する化学部分と適切に相互作用して前記化学部分を捕捉することができる充分な期間にわたって、適用するステップ、前記粒子および捕捉された化学部分を局在させるべく制御された様相で磁界を印加するステップ、前記印加磁界による操作によって、前記粒子および捕捉された化学部分を、前記液体サンプルの表面を通過して移動させることで、前記粒子および捕捉された化学部分を、前記液体サンプル中に残る他のサンプル成分から分離するステップ、および前記センサ手段を使用して、光学特性、電気化学特性、放射特性、および免疫学的特性からなる群より選択される特性のうちの少なくとも１つを検出するステップを含んでいる。
【０１８２】
サンプルをサンプル収集部へと加えて横流れチャネルへと流入できるようにした後で、さらなる液体を横流れ装置へと導入することができる。このさらなる液体は、インターフェースが横流れチャネル内の予測可能な位置において液体サンプルとさらなる液体との間に形成されるよう、サンプル収集部に向かって流れることができるようにサンプル収集部から離れた地点において前記横流れチャネルへと導入される。
【０１８３】
サンプルを適用するステップに続くステップは、電極を備えるセンサ手段を使用して電気化学的測定を実行する工程を含むことができる。
【０１８４】
サンプルを適用するステップは、サンプルを前記粒子と混合する工程を含むことができる。
【０１８５】
前記粒子を用意するステップは、粒子をサンプル収集部に堆積する工程を含むことができる。
【０１８６】
サンプルを、光学的に検出可能なラベル、免疫応答ラベル、放射性ラベル、および上述のラベルの共役物からなる群より選択される少なくとも１つの試薬で処理することができる。
【０１８７】
ラベルを、酵素、キャリア−ハプテン共役物、アプタマー、抗体、ラジオアイソトープ、蛍光化合物、コロイド金属、化学発光化合物、リン光化合物、および生物発光化合物からなる群より選択することができる。
【０１８８】
ラベルを、不溶性の固体の支持粒子（例えば、樹脂ビーズ）へと結合させることができる。
【０１８９】
本考案の別の態様は、いくつかの異なる成分を含んでいる液体サンプルの複数の特性を選択的に測定するためのアッセイに関する。このアッセイは、液体サンプルの成分に対して選択的な親和性を呈する或る量の粒子であって、磁界による操作に対して感受性を有する粒子を、液体サンプルへと導入するステップ、液体サンプルを、液体メニスカスが形成される所定の地点まで、横流れチャネルへと流すステップ、前記粒子を液体メニスカスに局在させるべく、印加される磁化によって前記粒子を操作するステップ、サンプル液体の前記液体メニスカスまで横方向の流れによってさらなる液体を導入することによって、液体／液体のインターフェースを形成するステップ、および前記局在させた粒子を前記液体／液体のインターフェースを通って移動させるべく、印加される磁化によって前記局在させた粒子を操作するステップを含んでいる。
【０１９０】
電気化学的な測定を、前記粒子を前記液体サンプルへと導入する前に、前記液体サンプルについて実行することができる。
【０１９１】
電気化学的な測定を、前記粒子を前記液体サンプルへと導入した後で、前記液体サンプルについて実行することができる。
【０１９２】
前記粒子は、液体サンプル中の生体分子種と相互作用するように官能化された表面を有することができる。そのような官能化表面は、生体分子種と結合できる抗体または抗体の官能結合フラグメントを備えることができる。官能化表面は、タンパク質、オリゴペプチド、ペプチド、リポタンパク質、多糖類、糖残基、ビタミン、酵素、酵素共役物、およびリガンドからなる群より選択される少なくとも１つの種を備えることができる。官能化表面は、細胞表面タンパク質、免疫グロブリン結合タンパク質、ストレプトアビジン、およびビオチンからなる群より選択されるタンパク質を有することができる。
【０１９３】
前記粒子は、液体サンプル中の化学部分と相互作用するように官能化された表面を呈することができる。表面を、カルボキシル、アミン、アルデヒド、エポキシド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、クロロメチル、ポリグルタルアルデヒド、チオール、シアヌル、トシル、ヒドラジド、およびヒドロキシルからなる群より選択される官能基で官能化させることができる。
【０１９４】
前記横流れチャネルは、水性液体の毛管流を促進するように適合された少なくとも一部分を含むことができる。
【０１９５】
本考案の別の態様は、他のサンプル成分のうち目標の少なくとも１つの化学部分を含んでいる水性液体サンプルの複数の特性を選択的に測定するためのアッセイに関する。このアッセイは、アッセイの実行に使用するための横流れ装置であって、少なくとも１つの毛管流チャネルと、サンプル収集部と、前記毛管流チャネルに近接した少なくとも１つの試薬堆積ゾーンと、前記毛管流チャネルに対して機能的に並置された電極とを備えている横流れ装置を用意するステップ、アッセイにおいて測定すべき目標の化学部分に対して選択的な親和性を呈するように適合された粒子であって、磁界による操作に対して感受性を有している粒子を用意するステップ、液体サンプルを前記サンプル収集部へと、前記毛管流チャネルおよび前記少なくとも１つの試薬堆積ゾーンへの流入を可能にするための充分な量にて、前記粒子がサンプル中に存在する化学部分と適切に相互作用して前記化学部分を捕捉することができる充分な期間にわたって、適用するステップ、前記粒子および捕捉された化学部分を局在させるべく制御された様相で磁界を印加するステップ、前記印加磁界による操作によって、前記粒子および捕捉された化学部分を、前記液体サンプルの表面を通過して移動させることで、前記粒子および捕捉された化学部分を、前記液体サンプル中に残る他のサンプル成分から分離するステップ、および前記電極を使用して、電気化学的な分析ステップを実行するステップを含んでいる。
【０１９６】
サンプルの特性の測定を容易にするために、サンプル液体へと酸化還元メディエータを導入することができる。
【０１９７】
液体サンプルは、横流れ装置のサンプル収集部へと直接的に適用される新鮮な生理学的流体（例えば、血液）であり、サンプル収集部には、前記粒子とサンプルの１つの成分を別の成分から選択的に識別するように適合されたラベル手段とを含む試薬の堆積物が用意されている。
【０１９８】
サンプルと試薬との混合を、磁界を印加し、前記印加磁界で前記粒子を操作して、前記粒子をサンプル内で移動させることによって、促進することができる。
【０１９９】
本考案の別の態様は、分析対象を含んでいる可能性がある液体サンプルについて使用するための可搬型の横流れアッセイ装置に関する。この装置は、２つ以上の点から液体を受け取るように適合された浅い液体流通チャネルをもたらすように構成された支持体を備えており、前記チャネルの少なくとも大部分が覆われており、前記チャネルの少なくとも１つのさらなる部分が、前記チャネルの全長の範囲内の少なくとも１つの中間位置までに液体の流れを制御するように構成されており、前記液体流通チャネルへとアクセスできる少なくとも１つの表面が、乾燥試薬を外表面に堆積させて有している。この装置が、前記装置が液体サンプルについて使用される際に前記液体サンプルの特性を検出できるよう、前記装置上に構成されて前記チャネルに対して並置されたセンサ手段を備えている。
【０２００】
前記センサ手段は、前記流通チャネルの内部（例えば、前記流通チャネルの一端）に配置された電極を備えることができる。
【０２０１】
乾燥試薬が堆積させられている表面は、センサ手段から遠方であってもよい。
【０２０２】
乾燥試薬が堆積させられている表面は、センサ手段に隣接していてもよい。
【０２０３】
前記チャネルを、前記チャネルの全長の範囲内の中間位置にストップを設けるために、少なくとも１つの通気孔の存在によって毛管流を制御するように適合することができる。
【０２０４】
前記チャネルを、複数の可溶の通気孔の存在によって毛管流を制御することで、毛管流の選択的な阻止または延伸を可能にするように適合することができる。
【０２０５】
チャネル内の横流れを制御するために、前記チャネルの構成に段差状の変化を設けることができる。
【０２０６】
チャネルは、広い部位および狭い部位を有することができ、狭い部位が、広い部位の間に設けられる。
【０２０７】
チャネルは、全体にわたって実質的に真っ直ぐな直線の経路に従うことができる。
【０２０８】
装置は、サンプル適用部が前記チャネルの近位端に設けられ、ポートが前記チャネルの遠位端に設けられるように構成された直線状かつ平坦な装置であってもよい。ポートを、チャネルへと導入される液体を受け取るように適合することができる。
【０２０９】
チャネルは、複数の直線部をもたらすように構成された経路に従うことができ、経路の全体は、前記装置のただ１つの平面内に位置する。チャネルは、分岐していてもよい。
【０２１０】
チャネルを、通気孔およびチャネルの寸法の段差状の変化からなる群より選択される毛管流制御手段によって隔てることができる複数の連続する部分からなることができる。
【０２１１】
チャネルの各部分を、前記部分の表面に堆積させられた選択された試薬の存在、センサ手段の存在、ならびに流体の進入または排出のためのポートの存在からなる群より選択される１つ以上の適合化によって、異なる分析工程の目的に合わせて適合することができる。チャネルは、曲線状の経路（例えば、らせん形の経路）に従ってもよい。
【０２１２】
装置は、間に前記流通チャネルを定めるように構成された疎水性のベース部および親水性のカバー部を備えることができ、装置上に構成される前記センサ手段が、流通チャネルの一端において前記ベース部の表面に配置されたスクリーン印刷による電極を備えており、前記流通チャネルの一端が、サンプル液体を適用するための部分として機能するように適合される一方で、粒子とサンプル液中の分析対象の存在を特定するためのラベルとを含むアッセイ試薬が乾燥させられて堆積される第１の表面へと曝露されている。流通チャネルは、少なくともＲＥＤＯＸメディエータを含んでいるさらなるアッセイ試薬が乾燥させられて堆積される第２の表面を有しており、前記第２の表面は、前記第１の表面から横方向に離間している。さらに流通チャネルは、反応バッファを導入するために、前記第２の表面の近くにポートを備えている。
【０２１３】
前記第２の表面は、前記さらなるアッセイ試薬への曝露の後でサンプルの特性を検出するためのさらなるセンサ手段に隣接できる。
【０２１４】
液体をチャネルへと加えるために、袋をチャネルに流体連通させて備えることができる。
【０２１５】
センサ手段を、凹所内に位置させることができる。
【０２１６】
センサ手段は、電極を備えることができる。
【０２１７】
チャネルの上方のカバーの少なくとも一部分は、チャネルの観察を可能にするために充分に透明である。
【０２１８】
チャネルを、曇り止め材料によって覆うことが可能である。
【０２１９】
本考案の他の態様は、生理学的流体において、患者における心臓血管の機能不全の可能性を表わすバイオマーカーの存在を検出するためのアッセイに関する。このアッセイは、浅いくぼみを液体を収容するために利用することができる横流れ装置であって、バイオマーカーの検出の助けとして機能すべく予測可能なやり方で第１のバイオマーカーと相互作用することができる少なくとも１つの乾燥試薬が前記浅いくぼみに堆積されている横流れ装置を用意するステップ、生理学的流体のサンプルと、磁気の影響のもとでの操作に感受性を有する粒子であって、前記サンプルに存在するすべてのバイオマーカーが前記粒子に結び付きがちである程度までバイオマーカーへの選択的な親和性を有している粒子とを、前記くぼみへと導入し、次いで前記装置に磁界を加えて前記粒子を選択された位置に局在させ、前記試薬−バイオマーカーの組み合わせに対して感受性を有するセンサ手段を使用してバイオマーカーの存在を検出するステップ、液体を、サンプルまで流れて液体−サンプルのインターフェースを形成すべく前記くぼみへと導入するステップ、前記粒子を操作して前記サンプルから前記液体−サンプルのインターフェースを横切って前記液体へと移動させるために、前記装置へと磁界を加えるステップ、および前記液体において別のバイオマーカーについてのさらなる検査を実行するステップを含んでいる。
【０２２０】
最初のバイオマーカーは、虚血変性アルブミン（ＩＭＡ）であってもよく、最初のアッセイ工程は、ＩＭＡを間接的に検出すべく電極を使用する電気化学的な検査であってもよい。
【０２２１】
さらなるバイオマーカーは、ＮＴプロホルモン脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴｐｒｏＢＮＰ）であってもよく、前記さらなる検査は、試薬変性のＮＴｐｒｏＢＮＰ種の形成を可能にする試薬を導入するステップを含むことができ、前記試薬変性のＮＴｐｒｏＢＮＰ種の存在が、光学特性、電磁気特性、電気化学特性、放射特性、および免疫学的特性からなる群より選択される弁別的特性を呈する。
【０２２２】
さらなるバイオマーカーは、ＮＴプロホルモン脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴｐｒｏＢＮＰ）であってもよく、前記さらなる検査は、試薬変性のＮＴｐｒｏＢＮＰ種の形成を可能にする試薬を導入するステップを含み、前記試薬変性のＮＴｐｒｏＢＮＰ種の形成が、光学特性、電磁気特性、電気化学特性、放射特性、および免疫学的特性からなる群より選択される前記試薬の弁別的特性を抑制する。前記変性されたＮＴｐｒｏＢＮＰ種は、ＮＴｐｒｏＢＮＰのための結合相手を含んでいる試薬であって、そのような結合相手がラベル付けされている試薬を使用して形成することができる。
【０２２３】
前記変性されたＮＴｐｒｏＢＮＰ種を、ＮＴｐｒｏＢＮＰに共有結合できるラベル付きの分子プローブ、ラベル付きのＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体、ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体のラベル付きの結合フラグメント、およびＮＴｐｒｏＢＮＰを吸収するように官能化された不溶性の樹脂製捕捉ビーズからなる群より選択される試薬を使用して形成することができる。
【０２２４】
本考案の別の態様は、液体の形態のサンプルについて、生物学的、生化学的、化学的、および物理的特性からなる群より選択される特性の複数の測定を実行するための方法に関する。この方法は、少なくとも１つの浅いカバー付きのチャネルを液体を受け入れるために使用することができる可搬型の横流れ装置を用意するステップを含んでいる。チャネルが、チャネルを通る液体の二方向の横流れを提供できるように構成されており、チャネル内に間隔を空けて配置された複数の試薬処理ゾーンを有している。そのようなゾーンのそれぞれに、測定すべき特性のうちの少なくとも１つの促進または視覚化の目的のために、乾燥試薬が堆積させられている。さらに装置は、内部の液体の横流れを選択的に阻止または延伸させることによって、前記ゾーンへの液体の流れを制御するための手段と、前記装置が液体サンプルについて使用される際に前記液体が前記ゾーンへと流れることによって前記液体サンプルの特性を前記試薬処理ゾーンのうちの２つ以上において選択的に検出できるよう、前記装置上に構成されて前記チャネルに対して並置されたセンサ手段とを備えている。
【０２２５】
本考案の他態様は、平たい装置を備えるマイクロ分析システムに関する。装置は、液体のための横流路を定める壁を協働してもたらしているベース部分およびカバー部分を備えており、前記部分の少なくとも一方が、流路の空気の排除または流路への空気の導入によって装置内部の液体の流れを選択的に制御するための可溶性の通気手段を有している。
【０２２６】
液体のリザーバを、前記流路に組み合わせることができ、そのようなリザーバに、リザーバと流路との間の液体の移動によって流路内の液体の流れを制御すべく動作することができる手段を備えることができる。
【０２２７】
リザーバは、液体の移動を実現すべく圧縮することができる表面を備えることができる。
【０２２８】
少なくとも１つの乾燥試薬を、前記横流路を定めている壁のうちの１つの少なくとも一部分の表面に堆積させて、試薬処理ゾーンを定めることができる。装置に並置されて、局所化された所定の位置において装置へと磁界を加えるべく動作することができる磁界の源を、備えることができる。
【０２２９】
前記センサ手段は、装置が液体について使用されるときに前記液体の電気化学特性を測定できるよう、前記ベース部分のくぼみに配置されて前記チャネルに対して並置された電極を備えることができる。
【０２３０】
本考案の別の態様は、ベース部分およびカバー部分を備えている電気化学的な横流れ装置に関する。前記部分の少なくとも一方が、液体中の分析対象を検出するように構成された電極と、対向電極とを含む第１の電極セットを表面に構成される。ベース部分およびカバー部分が、間に少なくとも１つのくぼみをもたらすように適合され、さらに前記くぼみへと液体を導入し、前記くぼみから液体を排出するためのポートをもたらすように構成されている。くぼみには、少なくとも１つの乾燥試薬が堆積されている。くぼみは、くぼみへと導入された液体が電極セットへと達し、乾燥試薬が液体へと組み込まれて液体中の分析対象の存在が検出可能になるように、第１の電極セットに対して配置されている。さらに、装置の前記部分の間に覆われたチャネルが形成されており、前記チャネルが、前記くぼみに近位端開口を有することで、横流れによって液体で満たされるように適合されている。さらに、前記部分の少なくとも一方が、さらなる電気化学的検査の実行の目的で、前記第１の電極セットから離間して前記チャネルの遠位端に配置されたさらなる電極セットを有している。
【０２３１】
本考案の別の態様は、少なくとも１つの分析対象（ＡＯＩ）を含む液体媒体において、分析対象の存在を判定する方法に関する。この方法は、前記少なくとも１つのＡＯＩを捕捉して検出可能な捕捉粒子種を形成するように適合された磁性粒子を用意するステップ、前記少なくとも１つのＡＯＩを含んでいる液体媒体を前記磁性粒子とともに毛管へと導入し、前記毛管を所定の横流れ限界点まで満たすことができるようにするステップ、前記毛管へと磁界を印加して、前記磁性粒子を毛管内の選択された点に徐々に局在させることで、前記検出可能な捕捉粒子種を前記選択された点に絶縁するステップ、および前記選択された位置の前記捕捉粒子種について分析的検査を実行するステップ、を含んでいる。
【０２３２】
本考案の別の態様は、少なくとも１つの分析対象（ＡＯＩ）を含む液体媒体から分析対象を分離する方法に関する。この方法は、前記少なくとも１つのＡＯＩを捕捉して検出可能な捕捉粒子種を形成するように適合された磁性粒子を用意するステップ、前記少なくとも１つのＡＯＩを含んでいる液体媒体を前記磁性粒子とともに毛管へと導入し、前記毛管を所定の横流れ限界点まで満たすことができるようにするステップ、前記毛管へと磁界を印加して、前記磁性粒子および検出可能な捕捉粒子種を前記横流れ限界点の近傍の選択された点に徐々に局在させるステップ、前記毛管へと第２の液体を導入して、前記横流れ限界点に液体−液体のインターフェースを形成するステップ、および前記毛管へと磁界を加えて、前記局在させた磁性粒子および検出可能な捕捉粒子種を前記液体−液体のインターフェースを通って前記第２の液体へと移動させるステップ、を含んでいる。
【０２３３】
本考案の別の態様は、液体サンプルについて、生物学的、生化学的、化学的、および物理的特性からなる群より選択される特性の複数の測定を実行するための検査装置に関する。この装置は、おおむね平坦なベース部とベース部に重ねられる対応するカバー部とを備えており、第１のゾーンにおいて液体サンプルを受け取るために、ベース部とカバー部との間に少なくとも１つの浅いくぼみを定めるように構成されている。前記くぼみは、前記第１のゾーンと互いに離間した複数の個々の遠位側ゾーンとの間の液体の横流れを促進するように寸法付けられており、前記個々の遠位側ゾーンのうちの少なくともいくつかが、それぞれ堆積された乾燥試薬を有している。さらに装置は、装置が液体サンプルについて使用されるときに前記液体サンプルの特性を前記遠位側ゾーンのうちの２つ以上において選択的に検出できるよう、装置上に構成されて前記遠位側ゾーンに対して並置されたセンサ手段を備えている。
【０２３４】
候補液体サンプル中の分析対象を検出するための使い捨ての１回限り使用の検査装置。この装置は、第１の位置に定められたサンプル堆積ゾーンを有している平坦な基板と、前記第１の位置の付近に乾燥させて堆積された試薬であって、候補液体サンプルに接したときに分析対象を捕捉するように適合された解放可能な磁性粒子を含んでいる試薬と、液体のための横流れ領域を形成すべく前記平坦な基板に重なるように配置できる液体を通さない膜と、前記サンプル堆積ゾーンから離れ、前記膜の縁に並置され、使用時に前記横流れ領域から流れた液体であって捕捉された分析対象を含んでいる可能性がある液体を、前記分析対象を検出すべく受け入れる検出ゾーンと、を備えている。
【０２３５】
本考案の他の態様は、第１および第２の分析対象を含んでいる第１の液体と前記第１の液体とは異なる第２の液体との間に液体−液体のインターフェースを形成するステップ、前記第１の液体内の前記第１の分析対象を測定するステップ、前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと移動させるステップ、および前記第２の液体内の前記第２の分析対象を測定するステップ、を含んでいる方法に関する。前記第１の分析対象を測定するステップは、前記第１の分析対象を間接的に測定する工程を含んでいる。
【０２３６】
前記第１の液体が、前記第１の分析対象と錯体を形成することができる第１の試薬をさらに含むことができ、前記第１の分析対象を間接的に測定するステップが、前記第１の液体内の前記第１の試薬を測定する工程を含んでいる。
【０２３７】
前記第１の試薬を測定するステップは、前記第１の試薬を電気化学的に測定する工程を含むことができる。前記第１の試薬は、金属または金属のイオンであってもよい。前記第１の試薬は、コバルトであってもよく、前記第１の分析対象が、アルブミンである。
【０２３８】
この方法は、前記液体−液体のインターフェースの形成に先立ち、前記第１および第２の分析対象を含むサンプル材料をマイクロ流体ネットワークを備えるマイクロ流体装置へと導入するステップを含むことができ、前記第１の液体が、前記サンプル材料の少なくとも一部を含んでおり、前記液体−液体のインターフェースを形成するステップが、前記マイクロ流体ネットワーク内に前記インターフェースを形成する工程を含んでいる。前記サンプル材料は、血液または血液から由来した液体を含むことができる。前記サンプル材料は、血液を含むことができ、前記サンプル材料を前記マイクロ流体装置へと導入するステップが、血液を前記マイクロ流体装置へと導入する工程を含むことができ、前記方法が、指刺しから血液を得るステップをさらに含むことができる。
【０２３９】
この方法は、前記サンプル材料を導入するステップの後で、前記サンプル材料を前記第１の試薬および第２の試薬に混ぜ合わせるステップをさらに含むことができ、前記第２の試薬が、前記第２の分析対象への親和性を有している。
【０２４０】
前記第２の試薬が、前記第２の分析対象への親和性を有する第１の部分と粒子とを含んでいる微粒子試薬であってもよい。
【０２４１】
前記混ぜ合わせるステップに先立ち、前記第１および第２の試薬は、前記マイクロ流体ネットワーク内に乾燥状態で存在することができ、前記方法が、乾燥している前記第１および第２の試薬を前記第１の液体で濡らすステップを含んでいる。
【０２４２】
前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるステップは、前記第２の試薬へと力を加える工程を含むことができ、前記第２の分析対象が、前記第２の試薬に結び付けられている。
【０２４３】
前記第２の試薬の前記粒子は、磁気感受性であることができ、前記第２の分析対象を移動させるステップが、前記第２の試薬を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるための充分な磁界を前記第２の試薬に加える工程を含むことができる。
【０２４４】
前記第２の分析対象を測定するステップは、前記第２の分析対象を電気化学的に測定する工程を含んでいる。
【０２４５】
前記サンプル材料を前記第１の試薬および第２の試薬に混ぜ合わせるステップが、前記サンプル材料を第３の試薬に混ぜ合わせる工程をさらに含むことができ、前記第２の分析対象、前記第２の試薬、および前記第３の試薬が、錯体を形成することができ、前記第３の試薬が、前記第２の分析対象の電気化学的な測定に関与する。
【０２４６】
前記第３の試薬は、酵素であってもよく、前記第２の分析対象を電気化学的に測定するステップが、前記酵素を前記酵素のための基質に接触させる工程を含むことができる。
【０２４７】
前記酵素は、グルコースオキシダーゼであってもよく、前記基質は、グルコースであってもよい。
【０２４８】
前記第１の分析対象の測定するステップを、前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるステップの前に行うことができる。
【０２４９】
前記液体−液体のインターフェースを形成するステップは、基板内のチャネルの第１の位置に前記第１の液体を導入する工程、および前記チャネルの第２の位置に前記第２の液体を導入する工程を含むことができ、前記第２のチャネルが、前記第１の位置から離間しており、前記液体−液体のインターフェースが、前記第１および第２の位置の間に形成される。
【０２５０】
前記第１および第２の位置の間の前記チャネルの最大の断面積は、約５ｍｍ２以下（例えば、約１ｍｍ２以下）であってもよい。
【０２５１】
液体のインターフェースを形成するステップは、前記第１および第２の液体の少なくとも一方を毛管作用によって前記チャネルに沿って移動させる工程を含むことができる。
【０２５２】
本考案の別の態様においては、或る方法が、タンパク質および第２の生物学的分析対象を含んでいるサンプル材料と、前記タンパク質と錯体を形成することができる金属イオンと、前記生物学的分析対象と錯体を形成することができる酵素試薬と、を含む混合物を形成するステップ、前記タンパク質との錯体を形成していない金属イオンの量を検出するステップ、前記タンパク質との錯体を形成していない金属イオンの量にもとづいて、前記タンパク質の量を割り出すステップ、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬と、前記生物学的分析対象との錯体を形成していない酵素試薬とを分離するステップ、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬を、前記酵素試薬との酵素反応に関与することができる第２の試薬に接触させるステップ、前記酵素反応の生成物の量を検出するステップ、および前記生成物の量にもとづいて、前記生物学的試薬の量を割り出すステップを含んでいる。
【０２５３】
前記タンパク質は、アルブミンであってもよい。前記金属イオンは、コバルトイオンであってもよい。前記サンプル材料は、血液または血液から由来した液体であってもよい。前記生物学的分析対象は、ナトリウム利尿ペプチドであってもよい。
【０２５４】
前記酵素試薬は、酵素であってもよく、前記第２の試薬は、前記酵素のための基質であってもよい。
【０２５５】
前記酵素反応の生成物の量を検出するステップは、前記生成物を間接的に検出する工程を含むことができる。前記酵素試薬が、グルコースオキシダーゼであってもよく、前記第２の試薬が、グルコースオキシダーゼのための基質であってもよく、前記生成物が、前記基質の酸化された形態であってもよい。
【０２５６】
前記混合物が、前記酵素試薬および前記生物学的分析対象と錯体を形成することができる磁性微粒子試薬をさらに含むことができ、前記分離するステップが、前記混合物に磁界を加える工程を含んでいる。
【０２５７】
前記混合物へと磁界を加えることで、前記酵素試薬、前記生物学的分析対象、および前記磁性微粒子試薬を含む錯体を、第１の位置から前記第１の位置から離間した第２の位置へと移動させることができる。
【０２５８】
前記分離するステップは、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬を、前記混合物を含んでいる第１の液体と前記第１の液体とは異なる第２の液体との間の液体−液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができる。
【０２５９】
本考案の別の態様は、液体−気体のインターフェースを形成するステップ、磁性または磁気感受性粒子を、前記インターフェースの付近に磁気によって位置させるステップ、および前記液体−気体のインターフェースの気体を押しのけることによって液体−第２の液体のインターフェースを形成することで、前記磁気感受性粒子が前記液体−液体のインターフェースを横断するステップを含んでいる方法に関する。
【０２６０】
本考案の別の態様は、マイクロ流体装置のチャネル内に液体−気体のインターフェースを形成するステップ、磁気感受性粒子を前記インターフェースの距離Ｄｍｍの範囲内へと磁気によって移動させるステップ、前記液体−気体のインターフェースの気体を押しのけることによって、液体−第２の液体のインターフェースを形成するステップ、および前記粒子を前記液体−気体のインターフェースの距離Ｄｍｍの範囲内へと移動させてから時間Ｔ秒以内に、前記磁気感受性粒子を前記液体−第２の液体のインターフェースを横切って磁気によって移動させるステップ
【０２６１】
を含んでいる方法であって、距離Ｄが約１０ｍｍ以下（例えば、約５ｍｍ以下、約３ｍｍ以下、約２．５ｍｍ以下）である方法に関する。時間Ｔは、約１５秒以下（例えば、１０秒以下、約７．５秒以下、約５秒以下、約３秒以下）であってもよい。
【０２６２】
前記磁気感受性粒子を移動させるステップを、前記粒子に直接的に触れることなく実行することができる。
【０２６３】
いくつかの実施形態においては、前記ジャンクションが、約５ｍｍ２以下（例えば、約２．５ｍｍ２以下、１．５ｍｍ２以下、１ｍｍ２以下、約０．８ｍｍ２以下、約０．７５ｍｍ２以下、約０．６ｍｍ２以下、約０．４ｍｍ２以下、約０．２ｍｍ２以下）の断面積を有している。前記ジャンクションは、少なくとも約０．１５ｍｍ２（例えば、約０．５ｍｍ２以上）の断面積を有することができる。いくつかの実施形態においては、前記ジャンクションが、約０．１５ｍｍ２〜約１ｍｍ２の範囲の断面積を有している。
【０２６４】
前記液体サンプル−気体のインターフェースは、第１の寸法Ｈおよび第２の寸法Ｗを有することができ、Ｈに対するＷの比が、少なくとも２（例えば、少なくとも３．５、少なくとも５）であってもよい。Ｈに対するＷの比は、約３０以下（例えば、約２０以下、約１０以下）であってもよい。
【０２６５】
前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースは、前記液体サンプル：気体のインターフェースとほぼ同じ、またはそれ未満の断面積を有することができる。
【０２６６】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間の時間ＴＩは、少なくとも５秒（例えば、少なくとも１５秒、少なくとも３０秒）であってもよい。時間ＴＩは、約６００秒以下（例えば、約３００秒以下、約１５０秒以下、約６０秒以下）であってもよい。この方法は、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成後の時間ＴＤにわたり、前記粒子の移動を実質的に生じさせないステップを含むことができ、ＴＤは、時間ＴＩの少なくとも５％（例えば、少なくとも１０％、少なくとも２５％）であってもよい。
【０２６７】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、前記方法が、前記第１の液体：気体のインターフェースの形成後、かつ前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成前に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含むことができる。
【０２６８】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占め、前記方法が、前記液体空気のインターフェースの形成後、かつ前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成前に、総時間ＴＯにわたって前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって振動させるステップを含んでおり、ＴＯは時間ＴＩの少なくとも３０％であってもよい。ＴＯは時間ＴＩの９０％以下であってもよい。
【０２６９】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記第１の液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの総体積Ｖを占めることができ、前記方法が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成後に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって動かすことによって、前記サンプル液体を混合するステップを含むことができる。
【０２７０】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記液体が、前記第１の液体サンプル：気体のインターフェースの上流の前記チャネルの総体積Ｖを占めることができ、前記方法が、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成後、かつ前記サンプル液体：第２の液体のインターフェースの形成前に、前記体積Ｖにおいて前記粒子を磁気によって動かすことによって、前記サンプル液体を混合するステップを含むことができる。
【０２７１】
この方法は、前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間に、前記液体サンプル：気体のインターフェースを前記チャネルに沿って距離ＤＣ以下だけ動かすステップを含むことができ、ＤＣは約３ｍｍ以下（例えば、約２ｍｍ以下、約１ｍｍ以下）であってもよい。ＤＣは、基本的にゼロであってもよい。
【０２７２】
前記液体サンプル：気体のインターフェースの形成と前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間において、前記液体サンプル：気体のインターフェースは、前記チャネルに沿った移動に関して基本的に静止していてもよい。
【０２７３】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースが形成されたとき、前記インターフェースに隣接するサンプル液体および第２の液体を、時間ＴＭにわたって基本的に静止させておくことができ、ＴＭは少なくとも１秒（例えば、少なくとも５秒、少なくとも１０秒、少なくとも３０秒）であってもよい。時間ＴＭは、前記粒子を前記サンプル液体：第２の液体のインターフェースを横切って移動させて、移動させた粒子に結び付いている分析対象を検出できるよう、充分に長くてもよい。
【０２７４】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、磁性または磁気感受性粒子の実質的にすべてを前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができる。
【０２７５】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、総数Ｎの磁性または磁気感受性粒子の少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％）を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができる。
【０２７６】
磁気感受性粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、総数でＮ個の粒子を前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができ、前記Ｎ個の粒子の実質的にすべてが、互いに時間ＴＮ内で前記液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って移動させられ、ＴＮは約１０秒以下（例えば、約５秒以下、約３秒以下）である。
【０２７７】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記サンプル液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、Ｖは０．５μｌ以上（例えば、少なくとも約１μｌ）であってもよい。Ｖは約１０μｌ以下（例えば、約７．５μｌ以下、約５μｌ以下）であってもよい。
【０２７８】
いくつかの実施形態においては、前記液体サンプル：気体のインターフェースが形成されたとき、前記サンプル液体が、前記液体−空気のインターフェースの上流の前記チャネルの体積Ｖを占めることができ、Ｖは、約２μｌ、約３μｌ、約μｌ、５μｌ、約６μｌ、約７μｌ、約８μｌ、約９μｌ、約１０μｌ、約１５μｌ、約２０μｌのうちの１つから選択可能である。
【０２７９】
前記液体−気体のインターフェースの液体は、血液であってもよい。
【０２８０】
本考案の別の態様は、第１の液体と磁気感受性粒子とを含んでいる混合物と気体との間に、液体−気体のインターフェースを形成するステップ、前記粒子に、前記液体−気体のインターフェースへと少なくとも部分的に向けられた磁気の力を加えるステップ、および前記粒子に前記力を加えた状態で、前記気体の少なくとも一部を第２の液体で押しのけて、前記第１および第２の液体の間の液体−液体のインターフェースを形成することで、前記粒子が前記第２の液体へと前記液体−液体のインターフェースを横切るステップを含んでいる方法に関する。
【０２８１】
この方法を、前記液体−気体のインターフェースの形成後、かつ前記粒子が前記液体−液体のインターフェースを横切るまで、前記粒子に直接的に触れることなく実行することができる。
【０２８２】
いくつかの実施形態においては、前記粒子が前記液体−気体のインターフェースを横切ることが基本的にない。
【０２８３】
前記液体−気体のインターフェースを横切る粒子の数の前記液体−液体のインターフェースを横切る粒子の数に対する比は、０．１未満（例えば、０．０５未満、０．０１未満、０．００１未満）であってもよい。
【０２８４】
前記第１の液体は、血液であってもよく、前記第２の液体は、バッファ溶液であってもよい。
【０２８５】
この方法は、前記液体−気体および液体−液体のインターフェースを、マイクロ流体装置のマイクロ流体ネットワークにおいて形成するステップを含むことができる。前記混合物の液体の総体積は、約１０μｌ以下（例えば、約７．５μｌ以下、約５μｌ以下）であってもよい。
【０２８６】
いくつかの実施形態においては、前記液体−気体および液体−液体のインターフェースのそれぞれの断面積が、約５ｍｍ２以下（例えば、約２．５ｍｍ以下、約１．５ｍｍ２以下、約１ｍｍ２以下、約０．８ｍｍ２以下、約０．７５ｍｍ２以下、約０．６ｍｍ２以下、約０．４ｍｍ２以下、約０．２ｍｍ２以下）である。前記液体−気体および液体−液体のインターフェースのそれぞれの断面積は、少なくとも約０．１５ｍｍ２（例えば、約０．５ｍｍ２以上）であってもよい。いくつかの実施形態においては、前記液体−気体および液体−液体のインターフェースのそれぞれの断面積が、約０．１５ｍｍ２〜約１ｍｍ２の範囲であってもよい。
【０２８７】
本考案の別の態様は、マイクロ流体装置において、第１の試薬と液体サンプルとを含む第１の混合物であって、前記第１の試薬が、磁性または磁気感受性の粒子と分析対象のための結合剤とを含んでいる第１の混合物を形成するステップ、前記第１の試薬を、前記混合物と流体との間のインターフェースを横切って運ぶステップ、および前記粒子によって前記インターフェースを横切って運ばれた分析対象の存在を判定するステップを含んでいる方法に関する。
【０２８８】
前記流体は、気体（例えば、空気）であってもよい
【０２８９】
この方法は、前記運ぶステップの後で、前記粒子を液体試薬に接触させるステップをさらに含むことができ、前記判定するステップが、前記液体試薬中の分析対象の存在を判定する工程を含んでいる。前記流体は、液体試薬であってもよい。
【０２９０】
以下の典型的な実施形態は、複合混合物（例えば、血液）における分析対象の測定に関する。存在する分析対象の量を、間接的かつ正確に検出することができ、したがって被験者における医療事象の発生の有無を知らせるために使用することが可能である。本考案は、目標とする種々の分析対象をただ１つの小型な装置においてさまざまな技法によって分析するために、少量のサンプルを効率的に使用できるようにする。とくには、本考案は、生理学的流体中の分析対象の捕捉を可能にし、捕捉した分析対象を、同時または連続的なアッセイ手順において前記生理学的流体の他の成分に通常関係する諸問題を防止または軽減するように意図されたやり方でアッセイ試薬によって処理するために、操作することを可能にする。
【０２９１】
本考案の一態様によれば、他のサンプル成分のうち目標の少なくとも１つの化学部分を含んでいる水性液体サンプルの複数の特性を選択的に測定するためのアッセイが提供される。このアッセイの実行において使用するために適した横流れ装置が、少なくとも１つの横流れチャネルと、サンプル収集部と、前記横流れチャネルに近接した少なくとも１つの試薬堆積ゾーンと、前記横流れチャネルに対して機能的に並置されたセンサ手段とを備えている。このアッセイにおいて使用される１つの試薬は、アッセイにおいて測定すべき目標の化学部分に対して選択的な親和性を呈するように適合された粒子を含んでおり、さらに前記粒子が、磁界による操作に対して感受性を有している。
【０２９２】
典型的には、液体サンプルが前記サンプル収集部へと、前記横流れチャネルおよび前記試薬堆積ゾーンへの流入を可能にするための充分な量にて、前記粒子がサンプル中に存在する化学部分と適切に相互作用して前記化学部分を捕捉することができる充分な期間にわたって、適用される。
【０２９３】
磁界が、例えば前記粒子および捕捉された化学部分を前記液体サンプルの表面を通過して移動させることで、前記粒子および捕捉された化学部分を前記液体サンプル中に残る他のサンプル成分から分離することができるよう、前記粒子および捕捉された化学部分を局在させるべく制御された様相で印加される。
【０２９４】
前記分離を達成するための１つのやり方は、前記粒子および捕捉された化学部分を別の媒体（例えば、別の液体）へと移動させることである。これは、サンプルをサンプル収集部へと加えて横流れチャネルへと流入を許した後で、さらなる液体を横流れ装置へと導入する場合に、達成できると考えられる。さらなる液体は、インターフェースが横流れチャネル内の予測可能な位置において液体サンプルとさらなる液体との間に形成されるよう、サンプル収集部に向かって流れることができるようにサンプル収集部から離れた地点において前記横流れチャネルへと導入される。
【０２９５】
上記手順において、サンプルの成分の以下の特性、すなわち光学特性、電気化学特性、放射特性、および免疫学的特性のうちの少なくとも１つを検出するための適切なセンサ手段を選択することができる。電気化学的特性を、最初または後で測定できる一方で、他の特性は、前記粒子をサンプルから分離した後により良好に測定することができる。
【０２９６】
広くには、以下の典型的な実施形態のアッセイ方法は、液体サンプルの成分に対して選択的な親和性を呈する或る量の粒子であって、磁界による操作に対して感受性を有する粒子を、液体サンプルへと導入するステップ、液体サンプルを、液体メニスカスが形成される所定の地点まで、横流れチャネルにおいて流すステップ、前記粒子を液体メニスカスに局在させるべく、印加される磁化によって前記粒子を操作するステップ、随意により、さらなる液体を前記サンプル液体の前記液体メニスカスまで横方向の流れによって導入することによって、液体／液体のインターフェースを形成するステップ、および前記局在させた粒子を前記液体／液体のインターフェースを通って移動させるべく、印加される磁化によって前記局在させた粒子を操作するステップ
を含んでいる。
【０２９７】
したがって、以下の典型的な実施形態によれば、生理学的流体について、患者に生じうる心臓血管の機能障害を知らせるバイオマーカーの存在を判定するように、アッセイを設計することができる。そのようなアッセイは、浅いくぼみを液体を収容するために利用することができる横流れ装置であって、バイオマーカーの検出の助けとして機能すべく予測可能なやり方で第１のバイオマーカーと相互作用することができる少なくとも１つの乾燥試薬が前記浅いくぼみに堆積されている横流れ装置を用意するステップ、および生理学的流体のサンプルと、磁気の影響のもとでの操作に感受性を有する粒子であって、前記サンプルに存在するすべてのバイオマーカーが前記粒子に結び付きがちである程度までバイオマーカーへの選択的な親和性を有している粒子とを、前記くぼみへと導入し、次いで前記装置に磁界を加えて前記粒子を選択された位置に局在させ、前記試薬−バイオマーカーの組み合わせに対して感受性を有するセンサ手段を使用してバイオマーカーの存在を検出するステップを含んでおり、さらに液体を、サンプルまで流れて液体−サンプルのインターフェースを形成するように前記くぼみへと導入するステップ、および前記粒子を操作して前記サンプルから前記液体−サンプルのインターフェースを横切って前記液体へと移動させるために、前記装置へと磁界を加え、前記液体において別のバイオマーカーについてのさらなる検査を実行するステップを含んでいる。
【０２９８】
そのようなアッセイにおいて、最初のバイオマーカーは、虚血変性アルブミン（ＩＭＡ）であってもよく、最初のアッセイ工程は、ＩＭＡを間接的に検出すべく電極を使用する電気化学的な検査であってもよい。
【０２９９】
さらに、そのようなアッセイにおいて、さらなるバイオマーカーは、ＮＴプロホルモン脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴｐｒｏＢＮＰ）であってもよく、前記さらなる検査は、試薬変性のＮＴｐｒｏＢＮＰ種の形成を可能にする試薬を導入するステップを含むことができ、前記試薬変性のＮＴｐｒｏＢＮＰ種の存在が、光学特性、電磁気特性、電気化学特性、放射特性、および免疫学的特性などの弁別的かつ検出可能な特性を呈する。
【０３００】
本考案のさらなる態様によれば、液体の形態のサンプルについて、生物学的、生化学的、化学的、および物理的特性からなる群より選択される特性の複数の測定を実行するための方法が提供される。この方法は、少なくとも１つの浅いカバー付きのチャネルを液体を受け入れるために使用することができる可搬型の横流れ装置を用意するステップを含んでいる。チャネルが、チャネルを通る液体の二方向の横流れを提供するように構成されており、チャネル内に間隔を空けて配置された複数の試薬処理ゾーンを有している。そのようなゾーンのそれぞれに、測定すべき特性のうちの少なくとも１つの促進または視覚化の目的のために、乾燥試薬が堆積させられている。さらに装置は、内部の液体の横流れを選択的に阻止または延伸させることによって、前記ゾーンへの液体の流れを制御するための手段と、前記装置が液体サンプルについて使用される際に前記液体が前記ゾーンへと流れることによって前記液体サンプルの特性を前記試薬処理ゾーンのうちの２つ以上において選択的に検出できるよう、前記装置上に構成されて前記チャネルに対して並置されたセンサ手段とを備えている。
【０３０１】
本考案のさらなる態様によれば、第１および第２の分析対象を含んでいる第１の液体と前記第１の液体とは異なる第２の液体との間に液体−液体のインターフェースを形成するステップ、前記第１の液体内の前記第１の分析対象を測定するステップ、前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って前記第２の液体へと移動させるステップ、および前記第２の液体内の前記第２の分析対象を測定するステップを含んでいる方法が提供される。
【０３０２】
前記第１の分析対象を測定するステップは、前記第１の分析対象を間接的に測定する工程を含むことができる。また、前記第１の液体が、前記第１の分析対象と錯体を形成することができる第１の試薬をさらに含むことができ、前記第１の分析対象を、前記第１の液体内の前記第１の試薬を測定することによって、間接的に測定することができる。さらに、前記第１の試薬の測定は、前記第１の試薬を電気化学的に測定するステップを含むことができる。
【０３０３】
前記第１の試薬は、これらに限られるわけではないが、金属または金属のイオンであってもよい。いくつかの実施形態においては、前記第１の試薬が、コバルトであってもよく、前記第１の分析対象が、アルブミンであってもよい。
【０３０４】
この方法は、前記液体−液体のインターフェースの形成に先立ち、前記第１および第２の分析対象を含むサンプル材料をマイクロ流体ネットワークを備えるマイクロ流体装置へと導入するステップをさらに含むことができる。前記第１の液体が、前記サンプル材料の少なくとも一部を含むことができ、前記液体−液体のインターフェースを形成するステップが、前記マイクロ流体ネットワーク内に前記インターフェースを形成する工程を含むことができる。
【０３０５】
前記サンプル材料は、血液または血液から由来した液体を含むことができる。前記サンプル材料が血液を含む場合には、前記サンプル材料を前記マイクロ流体装置へと導入するステップが、血液を前記マイクロ流体装置へと導入する工程を含むことができる。さらに、前記サンプル材料が血液を含む場合には、前記方法が、血漿分離のステップをさらに含むことができる。
【０３０６】
この方法は、前記サンプル材料を導入するステップの後で、前記サンプル材料を前記第１の試薬および第２の試薬に混ぜ合わせるステップをさらに含むことができ、前記第２の試薬が、前記第２の分析対象への親和性を有している。前記第２の試薬は、前記第２の分析対象への親和性を有する第１の部分と粒子とを含んでいる微粒子試薬であってもよい。
【０３０７】
前記混ぜ合わせるステップに先立ち、前記第１および第２の試薬は、前記マイクロ流体ネットワーク内に乾燥状態で存在することができ、前記方法が、乾燥している前記第１および第２の試薬を前記第１の液体で濡らすステップを含むことができる。
【０３０８】
前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるステップは、前記第２の試薬へと力を加える工程を含むことができ、前記第２の分析対象が、前記第２の試薬に結び付けられている。前記第２の試薬の前記粒子が、磁性であることができ、前記第２の分析対象を移動させるステップが、前記第２の試薬を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させるための充分な磁界を前記第２の試薬に加える工程を含むことができる。
【０３０９】
前記第２の分析対象を測定するステップは、前記第２の分析対象を電気化学的に測定する工程を含むことができる。
【０３１０】
前記サンプル材料を前記第１の試薬および第２の試薬に混ぜ合わせるステップは、前記サンプル材料を第３の試薬に混ぜ合わせる工程をさらに含むことができる。前記第２の分析対象、前記第２の試薬、および前記第３の試薬が、錯体を形成することができ、前記第３の試薬が、前記第２の分析対象の電気化学的な測定に関与する。
【０３１１】
前記第３の試薬は、酵素であってもよい。前記第２の分析対象を電気化学的に測定するステップが、前記酵素を前記酵素のための基質に接触させる工程を含むことができる。前記酵素は、これに限られるわけではないが、グルコースオキシダーゼであってもよく、前記基質は、これに限られるわけではないが、グルコースであってもよい。
【０３１２】
前記第１の分析対象の測定するステップは、前記第２の分析対象を前記液体−液体のインターフェースを横切って移動させる工程の前に行うことができる。また、前記液体−液体のインターフェースを形成するステップは、基板内のチャネルの第１の位置に前記第１の液体を導入する工程、および前記チャネルの第２の位置に前記第２の液体を導入する工程を含むことができ、前記第２のチャネルが、前記第１の位置から離間しており、前記液体−液体のインターフェースが、前記第１および第２の位置の間に形成される。
【０３１３】
前記第１および第２の位置の間の前記チャネルの最大の断面積は、約５ｍｍ２以下であってもよい。いくつかの実施形態においては、前記最大の断面積が、約１ｍｍ２以下であってもよい。
【０３１４】
液体のインターフェースを形成するステップは、前記第１および第２の液体の少なくとも一方を毛管作用によって前記チャネルに沿って移動させる工程を含むことができる。
【０３１５】
本考案のさらなる態様によれば、第１の試薬および磁性粒子を含んでいる第２の試薬を、第１および第２の分析対象を含んでいる液体サンプル材料に接触させるステップ、および前記第２の試薬に磁界を加えることによって、前記液体サンプル材料、前記第１の試薬、および前記第２の試薬を混合するステップを含んでいる方法が提供される。
【０３１６】
本考案のまたさらなる態様によれば、タンパク質および第２の生物学的分析対象を含んでいるサンプル材料と、前記タンパク質と錯体を形成することができる金属イオンと、前記生物学的分析対象と錯体を形成することができる酵素試薬と、を含む混合物を形成するステップ、前記タンパク質との錯体を形成していない金属イオンの量を検出するステップ、前記タンパク質との錯体を形成していない金属イオンの量にもとづいて、前記タンパク質の量を割り出すステップ、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬と、前記生物学的分析対象との錯体を形成していない酵素試薬とを、分離するステップ、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬を、前記酵素試薬との酵素反応に関与することができる第２の試薬に接触させるステップ、前記酵素反応の生成物の量を検出するステップ、および前記生成物の量にもとづいて、前記生物学的試薬の量を割り出すステップを含んでいる方法が提供される。
【０３１７】
前記タンパク質は、これに限られるわけではないが、アルブミンであってもよく、前記金属イオンは、これに限られるわけではないが、コバルトイオンであってもよい。前記サンプル材料は、血液または血液から由来した液体を含むことができ、前記生物学的分析対象は、これに限られるわけではないが、ナトリウム利尿ペプチドであってもよい。前記酵素試薬は、これに限られるわけではないが、酵素であってもよく、前記第２の試薬は、これに限られるわけではないが、前記酵素のための基質であってもよい。
【０３１８】
前記酵素反応の生成物の量を検出するステップは、前記生成物を間接的に検出する工程を含むことができる。
【０３１９】
一実施形態においては、前記酵素試薬が、グルコースオキシダーゼであってもよく、前記第２の試薬が、グルコースオキシダーゼのための基質であってもよく、前記生成物が、前記基質の酸化された形態であってもよい。
【０３２０】
前記混合物が、前記酵素試薬および前記生物学的分析対象と錯体を形成することができる磁性微粒子試薬をさらに含むことができ、前記分離するステップが、前記混合物に磁界を加える工程を含むことができる。
【０３２１】
前記混合物へと磁界を加えることで、前記酵素試薬、前記生物学的分析対象、および前記磁性微粒子試薬を含む錯体を、第１の位置から前記第１の位置から離間した第２の位置へと移動させることができる。
【０３２２】
前記分離するステップは、前記生物学的分析対象との錯体を形成している酵素試薬を、前記混合物を含んでいる第１の液体と前記第１の液体とは異なる第２の液体との間の液体−液体のインターフェースを横切って移動させる工程を含むことができる。
【０３２３】
本考案の一般的な実施形態によれば、２つ以上のアッセイを実行するためのアッセイ装置が提供される。そのようなアッセイ装置は、少なくとも２つの検出ゾーンと前記検出ゾーン間の少なくとも１つの線状のチャネルとを有する検査片を備えている。チャネルが、サンプル（血液など）またはバッファを装置へと加えることができる少なくとも１つの適用ゾーンを有している。検出ゾーンは、サンプルの成分を検出するために適した電極（または、他の装置）を備えている。２つの検出エリアから実質的に等距離な地点に、可溶性の通気孔が設けられている。この通気孔が、チャネル内のサンプルの流れを防止または促進するように作用する。
【０３２４】
チャネルには、血液またはバッファなどの流体が加えられたときに再懸濁する乾燥試薬が用意されている。乾燥試薬のうちの少なくとも１つが、血液サンプル中の抗原と結合する抗体へと取り付けられた磁性粒子を含んでいる。
【０３２５】
このアッセイ装置に、チャネル内の磁性粒子へと作用する磁石をさらに備えることができる。磁石を、磁性粒子および磁性粒子へと結合しているすべてのものを、検査片の或る領域から別の領域へと移動させるために使用することができる。検査片は、読み取り器への挿入に適しており、読み取り器が、前記２つのアッセイの結果をユーザに提示する。
【０３２６】
このアッセイ装置は、サンプル中に存在する第１の分析対象を検出する第１のアッセイ、およびサンプル中に存在する第２の分析対象を検出する第２のアッセイを実行するために適している。第１および第２の分析対象は、異なる種であってもよく、第１および第２のアッセイを、同じまたは異なる技法（例えば、電気化学的技法および光化学的技法）を使用して実行することができる。
【０３２７】
本方法の一般的な実施形態においては、血液サンプルが、アッセイ装置の検査片の第１の適用ゾーンへと加えられる。検査片の第１のチャネルへと乾燥させられている第１の試薬が、血液サンプルが加えられることで再懸濁する。第１の試薬が、サンプル中の第１の分析対象と相互作用し、第１の分析対象が、例えば電気化学的なやり方によって間接的に検出される。抗体へと結び付けられた第１の試薬および抗体へと結び付けられた磁性粒子が、どちらも検査片の第１のチャネルへと乾燥させられていて、やはり血液サンプルが加えられたとえきに再懸濁する。抗体が第２の分析対象の抗原を認識し、抗体に結合している磁性粒子および抗体に結合している酵素を含む第２の分析対象の三重錯体を形成すべく作用する。
【０３２８】
磁性粒子および磁性粒子へと結合しているものすべてが、磁石を使用することで、第１のチャネルを通って通気孔へと動かされ、通気孔においてサンプル構成物質の流れが停止する。磁石は通気孔を過ぎて動かされるが、磁性粒子および磁性粒子へと結合しているすべてのものは、通気孔に形成されたメニスカスにとどまる。
【０３２９】
バッファであってもよい第２の流体が、第２のチャネルへと接続された第２の適用ゾーンにおいて導入される。第２の流体が、第２のチャネルに乾燥させられているさらなる試薬（酸化還元メディエータ、および前記第１の酵素のための基質、など）を再懸濁させるように作用する。第２の流体が、第２のチャネルに沿って通気孔まで流れ、通気孔の地点において第１および第２の流体が流体−流体のインターフェースを形成する。
【０３３０】
液体−液体のインターフェースが形成されることで、妨げとなるものおよび対象でない分析対象を第１の流体（血液）に残しつつ、磁性粒子を第１の流体（血液）から第２の流体（バッファ）へと選択的に移動させることが容易になる。すなわち、磁性粒子および磁性粒子へと結合しているすべてのもの（第２の分析対象（抗体に結合している磁性粒子および抗体に結合している酵素を含む第２の分析対象の三重錯体の形態である）など）だけが、第２の毛管チャネルの第２の流体へと移される。磁性粒子が、第２の検出ゾーンへと動かされ、ここで第２の分析対象が、例えば電気化学的なやり方によって間接的に検出される。
【０３３１】
アッセイ装置は、家庭用検査キットであってもよく、アッセイは、心臓病などの病状の有無に関する情報をもたらすことができる。
【０３３２】
さらに詳しくは、アッセイ装置（例えば、カートリッジまたは検査片）が、通常は、ベースおよび蓋を備えている。ベースと蓋との間の空洞が、流体が通過して流れることができる特定の体積の少なくとも第１の毛管流通チャネルを定めている。あるいは、ベースと蓋との間の第３の構成部品が、前記空洞を定める壁をもたらすことができる。装置の構成は、選択された地点に流体を導入することで、流体の経路によって接続された地点への流体の流れ、または流体の経路によって接続された地点からの流体の流れが、不可避的に生じるような構成である。すなわち、毛管流通チャネルが、適用される流体の流れを促進するために、少なくとも１つの適用ゾーンおよび少なくとも１つの検出ゾーンへと流体接続されている。さらに、少なくとも１つの試薬ゾーンが、前記毛管流通チャネルへと流体接続して存在できる。適用ゾーンが、流体を受け入れるための導入口を備えている。適用ゾーンは、適用されたサンプルの流れを促進するために、前記毛管流通チャネルおよび前記検出ゾーンへと流体接続されている。随意により、アッセイ装置は、少なくとも１つの参照ゾーンをさらに備えることができる。試薬ゾーン、適用ゾーン、検出ゾーン、および参照ゾーンを、これらのゾーンのうちの少なくとも２つが同じゾーンへと組み込まれるように、さまざまなやり方で組み合わせることができる。さらに、ベースおよび蓋が、前記毛管流通チャネルの毛管流を選択的に阻止または延伸させるように適合された少なくとも１つの通気孔を定めている。通気孔は、可溶性の通気孔であってもよく、堰の形態をとることができる。
【０３３３】
随意により、アッセイ装置は、少なくとも１つの試薬ゾーン、参照ゾーン、検出ゾーン、適用ゾーン、またはこれらの組み合わせを、ベース、蓋、または両方の表面に備えることができる。あるいは、少なくともベースと蓋との間の第３の構成部品に、試薬ゾーン、参照ゾーン、検出ゾーン、および適用ゾーンの少なくとも１つが配置される。いくつかの実施形態においては、アッセイ装置が、複数の試薬ゾーン、参照ゾーン、適用ゾーン、および検出ゾーンを備えている。試薬ゾーンが、お互いに重なっていてもよく、あるいは参照ゾーン、検出ゾーン、または適用ゾーンと重なっていてもよい。試薬ゾーンが、お互いに離れていてもよく、あるいは参照ゾーン、検出ゾーン、または適用ゾーンから離れていてもよい。また、流通チャネルを、毛管流を支持するためには適さないように構成してもよい。チャネル内の流れを、例えばポンプあるいは磁石と磁性粒子との組み合わせによって生じさせることができる。
【０３３４】
典型的には、参照ゾーンおよび検出ゾーンは、お互いから離れている。検出ゾーンおよび参照ゾーンは、毛管流通チャネル内のサンプルが検出ゾーンおよび参照ゾーンに接するように位置することができる。試薬ゾーンは、サンプル導入口へと適用された後のサンプルが試薬ゾーンに接するように位置することができる。例えば、試薬ゾーンは、適用ゾーン、検出ゾーン、参照ゾーン、または毛管チャネルにあってもよい。
【０３３５】
アッセイ装置は、第２のアッセイを実行するため、第２の試薬ゾーンおよび第２の検出ゾーンを備えることができる。随意により、アッセイ装置は、第２の適用ゾーンおよび第２の参照ゾーンをさらに備えることができる。これらのゾーンを、上述のとおりに流体接続させることができる。第２の適用ゾーンを、アッセイ装置に第２の流体を加えるために使用することができる。随意により、第２の流体は、食塩水などの溶液であってもよい。食塩水は、バッファであってもよい。あるいは、第２の流体が、生理学的流体であってもよい。生理学的流体は、血液または少なくとも部分的に血液から由来する流体であってもよい。
【０３３６】
アッセイ装置は、通気孔へと流体接続した第２の毛管流通チャネルを備えることができる。通気孔が、第１および第２の毛管流通チャネルの間の境界をもたらすことができる。第２の毛管流通チャネルを、第１の毛管流通チャネルへと流体接続させることができる。また、第２の毛管流通チャネルを、第２の試薬ゾーン、第２の検出ゾーン、第２の適用ゾーン、および第２の参照ゾーンへと流体接続させることができる。
【０３３７】
少なくとも１つの試薬ゾーンが、所望の分析対象を認識することができる第１の試薬を含んでいる。認識は、分析対象との結合を含むことができる。例えば、認識が、分析対象と選択的に結合することを含み、すなわち分析対象に、サンプル中の他の成分よりも高い親和性にて結合することを含む。この認識試薬は、例えば、タンパク質、ペプチド、抗体、核酸、小分子、変性された抗体、キメラ抗体、可溶性受容体、アプタマー、または分析対象と結合できるその他の種であってもよい。
【０３３８】
認識試薬は、随意により、検出可能な変化を生み出すことができる。例えば、認識試薬が、分析対象の少なくとも１つのエピトープへと結合する元素または前記元素のイオンのうちの１つであってもよい。これに代え、あるいはこれに加えて、認識試薬が、検出可能な変化を生み出すことができるさらなる試薬へと（例えば、共有結合、静電相互作用、吸着、あるいは他の化学的または物理的なつながりによって）結び付けられる。検出可能な変化は、例えば電気特性（例えば、酸化還元電位、電圧、電流、など）または光学特性の変化（例えば、光の吸収、反射、屈折、透過、または放射の変化）であってもよい。
【０３３９】
さらに、試薬ゾーンが、所望の分析対象を認識することができる第２の試薬を含んでいる。第２の試薬は、同じまたは異なる分析対象を認識することができる。第１および第２の認識試薬を、同時に同じ分析対象を認識するように選択することができる。例えば、第１および第２の認識試薬が、それぞれ、分析対象の別個のエピトープを認識する抗体であってもよい。このやり方で、分析対象、第１の認識試薬、および第２の認識試薬の三重（すなわち、３成分）錯体を形成することができる。一般に、第１および第２の認識試薬は、分析対象が存在しないときは互いに結び付くことがない。しかしながら、分析対象の存在が、第１および第２の認識試薬を一緒に三重錯体へと結び付けることができる。試薬ゾーンは、酸化還元メディエータ、特定の酵素のための基質、およびバッファ溶液の形成に適した塩など、さらなる試薬を含むことができる。
【０３４０】
第２の認識試薬を、そのように形成された三重錯体に移動性をもたらすことができる粒子へと結び付けることができる。そのような粒子は、例えばポリマーマイクロスフェア、金属ナノ粒子、または磁性粒子であってもよい。磁性粒子は、磁界による影響を受ける粒子である。磁性粒子は、例えば米国実用新案登録出願公開第２００５０１４７９６３号、米国実用新案登録出願公開第２００５０１００９３０号、または米国実用新案登録第５，３４８，８７６号（それぞれ、その全体が参照により組み込まれる）に記載の磁性粒子であってもよく、あるいは例えばＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（商標）という商品名でＤｙｎａｌ  ＡＳによって製造されているビーズなど、市販のビーズであってもよい。とくには、磁性粒子へと結び付けられた抗体が、例えば米国実用新案登録出願第２００５０１４９１６９号、第２００５０１４８０９６号、第２００５０１４２５４９号、第２００５００７４７４８号、第２００５０１４８０９６号、第２００５０１０６６５２号、および第２００５０１００９３０号、ならびに米国実用新案登録第５，３４８，８７６号（これらのそれぞれの教示は、その全体が参照により組み込まれる）に記載されている。
【０３４１】
一般に、検出ゾーンが分析対象を集め、検出可能な変化の場所となる。検出可能な変化の程度を、検出ゾーンにおいて測定することができる。通常は、分析対象の量が多いほど、より大きな検出可能な変化がもたらされる。しかしながら、アッセイを、分析対象がより大量に存在するときに、より小さな変化を生じるように構成することも可能である。検出ゾーンは、分析対象を（例えば、分析対象に結合する試薬であって、検出ゾーンに固定されている試薬によって）固定することで、分析対象を集めることができる。あるいは、検出ゾーンが、分析対象に結び付いた成分を引きつけることができ、あるいは固定することができる。例えば、分析対象に結合し、かつ磁性粒子へと結び付いている認識試薬を、１つ以上の検出ゾーンにもたらされる磁界によって、特定の検出ゾーンへと引き付けることができる。
【０３４２】
いくつかの実施形態においては、検出ゾーンの１つ以上が、１つ以上の電極を含んでいる。電極を、例えば銀、金、アルミニウム、パラジウム、白金、イリジウム、導電性カーボン、ドーピングされた酸化スズ、ステンレス鋼、または導電ポリマーなど、電気導電性およびサンプルの成分との低い反応性のために選択される材料で形成することができる。検出ゾーンの電極（作業電極）が、参照ゾーンの第２の電極（参照電極）との協働において、電圧または電流などといったサンプルの電気特性を測定することができる。あるいは、検出ゾーンおよび参照ゾーンのそれぞれが、少なくとも１つの作業電極および対向電極を有することができる。すなわち、検出および参照ゾーンが、別個独立の測定を行うことができる。随意により、対向電極も、アッセイ装置に備えることができる。サンプルの電気特性を測定するための電極を備えているアッセイ装置が、それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる米国実用新案登録第５，７０８，２４７号、第６，２４１，８６２号、および第６，７３３，６５５号に記載されている。
【０３４３】
いくつかの実施形態においては、アッセイ装置のベース、アッセイ装置の蓋、または両方が、検出ゾーンに整列した半透明または透明な窓を有している。検出ゾーンにおいて生じる光学的な変化を、窓を通して検出することができる。検出を、視覚的に行う（すなわち、変化がユーザの眼によって測定される）ことができ、あるいは計器（例えば、フォトダイオード、光電子増倍管、など）によって測定することができる。一般に、参照ゾーンが、その性状において検出ゾーンに類似している。換言すると、検出ゾーンが電極を備える場合、参照ゾーンも、同様に電極を備えることができる。検出ゾーンが光学的測定のための窓に整列している場合、参照ゾーンを、同様に光学的測定のための窓に整列させることができる。いくつかの実施形態において、参照ゾーンは、分析対象を集めるようには構成されていない。あるいは、参照ゾーンが、分析対象を集めるように適合されているが、この分析対象について別の分析を実行する。すなわち、参照ゾーンにおいて測定される検出可能な変化を、サンプル中に存在する分析対象の量を判断するときに考慮すべきバックグラウンド測定と考えることができる。
【０３４４】
サンプルは、例えば血液、血漿、血清、尿、唾液、粘液、涙、または他の体液など、任意の生物学的流体であってもよい。分析対象は、例えばタンパク質、ペプチド、核酸、代謝産物、単糖類または多糖類、脂質、薬物または薬物代謝産物、あるいは他の成分など、サンプルにおいて発見される（あるいは、発見される可能性がある）任意の成分であってもよい。随意により、アッセイ装置において、全血がサンプルとして利用可能である場合に血漿のみが検出ゾーンに達するように、血液分離膜をサンプル導入口と検出ゾーンとの間に配置して設けることができる。
【０３４５】
アッセイ装置および含まれている試薬は、典型的には、乾燥状態にて用意される。アッセイ装置へと（すなわち、毛管チャネルへと）液体サンプルを加えることで、乾燥試薬を再び懸濁させることができる。
【０３４６】
上記のいずれにおいても、分析対象を、ナトリウム利尿ペプチド（例えば、ＮＴｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、これらの組み合わせ）、カリウムイオン、シスタチンＣ、トロポニンＴ、トロポニンＩ、ミエロペルオキシダーゼ、クレアチンキナーゼＭＢ、またはこれらの組み合わせからなる群より選択することができる。いくつかの実施形態においては、分析対象が、ナトリウム利尿ペプチド（例えば、ＮＴｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、これらの組み合わせ）を含んでおり、前記方法が、ヒトの血液中の分析対象を測定するステップを含んでいる。例えば、分析対象が、ＮＴｐｒｏＢＮＰであってもよく、前記方法が、ヒトの血液中の分析対象を測定するステップを含むことができる。
【０３４７】
本考案は、上述の態様および特徴の組み合わせを、そのような組み合わせが明らかに許されない場合または明示的に排除されている場合を除き、包含する。
【０３４８】
本明細書において言及されるすべての文献は、参照により本明細書に組み込まれる。
【詳細な説明】
【０３４９】
サンプル材料（例えば、生物学的サンプル）中の１つ以上の分析対象または指標を（例えば、定量的または定性的に）割り出すためのアッセイが説明される。典型的な分析対象は、哺乳類の対象における或る生理学的状態の存在に関する（例えば、存在を示す）バイオマーカーである。生理学的状態の存在を、少なくとも部分的にバイオマーカーの割り出しの結果にもとづいて（例えば、結果を基準値と比較することによって）判断することができる。
【０３５０】
アッセイは、診断または予測への到達において使用するためのものであってよい。アッセイ方法は、ユーザの病的状態または病状を診断または予測し、あるいは病的状態または病状に対するユーザの感受性を診断または予測する方法を含むことができる。アッセイ装置を、ユーザの病的状態または病状を診断または予測し、あるいは病的状態または病状に対するユーザの感受性を診断または予測する方法において使用するために、提供することができる。典型的な実施形態においては、アッセイ方法が、人体や動物の体において実行されるのではない体外での方法である。典型的な実施形態においては、アッセイ方法は、人体または動物の体から採取されるサンプル（例えば、ヒト血液サンプルなどの体液サンプル）であってよい液体サンプルについて実行される。典型的な実施形態においては、サンプルがアッセイを実行するために使用され、その後に廃棄され、採取元のヒトまたは動物へと戻されることがない。
【０３５１】
典型的な実施形態においては、磁気感受性粒子が、分析対象を補足し、分析対象を液体サンプルから分離し、分析対象を検出ゾーンの近傍に位置させるために使用される。
【０３５２】
いくつかの実施形態においては、分析対象が液体サンプルから分離される。分離の後に、分析対象が、第２の媒体（例えば、別の流体（例えば、空気などの気体、バッファなどの別の液体）または流動性媒体（例えば、電気泳動ゲルなどのゲル））において検出される。典型的な方法は、分析対象に結合するように適合された磁気感受性粒子を液体サンプルに混合し、磁気感受性粒子が結合してなる分析対象の錯体を形成することを含む。典型的な実施形態においては、この混合が、時間変化する磁界を液体サンプルへと加えることによって促進される。錯体が、液体サンプルから第２の媒体へと磁気的に分離される。
【０３５３】
液体サンプルから第２の媒体（例えば、別の流体（例えば、空気などの気体、バッファなどの別の液体）または流動性媒体（例えば、電気泳動ゲルなどのゲル））への錯体の分離は、典型的には、液体サンプルと第２の媒体との間のインターフェースの形成を含む方法によって達成される。いくつかの実施形態においては、インターフェースが安定であり、基本的に静止している（すなわち、インターフェースに関して拡散が生じうるが、インターフェースの位置は基本的に不変である）。例えば、インターフェースがマイクロ流体装置の内部に前もって形成される実施形態においては、マイクロ流体装置に対するインターフェースの位置が、少なくとも後述のように磁気感受性粒子がインターフェースを横切って運ばれる前は、基本的に不変（例えば、相対位置の変化が、約５ｍｍ以下、約２．５ｍｍ以下、あるいは約１ｍｍ以下）であってよい。典型的には、液体サンプルおよび第２の媒体の少なくとも一方（例えば、両方）の塊の移動は、少なくとも粒子がインターフェースを横切って運ばれるまでは、インターフェースに対して生じることはない。典型的な実施形態においては、インターフェースの位置が、少なくとも分析対象の割り出しの前は、基本的に不変である。
【０３５４】
インターフェースは、典型的には、気泡を実質的に含んでいない。例えば、気泡をまったく含んでおらず、あるいはインターフェースに隣接する液体サンプル中に群集した実質的にすべての磁気感受性粒子のインターフェースを横切る移動を妨げない少数の気泡を含んでもよい。ここで、実質的にすべての磁気感受性粒子とは、群集した磁気感受性粒子の少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％）である。
【０３５５】
典型的な実施形態においては、インターフェースが、液体サンプルと第２の媒体（例えば、別の流体（例えば、空気などの気体、バッファなどの別の液体）または流動性媒体（例えば、電気泳動ゲルなどのゲル））との間に形成される。典型的な実施形態においては、インターフェースが、液体サンプルおよび第２の媒体の接触部分によって定められる。
【０３５６】
磁界が、液体サンプル中の磁気感受性粒子：分析対象の錯体へと加えられ、錯体が、液体サンプル：第２の媒体のインターフェースに向かって磁気的に移動する。磁界が、錯体をインターフェースを横切って第２の媒体へと移動させる。インターフェースを横切る移動によって、錯体が液体サンプルから分離される。
【０３５７】
典型的な実施形態においては、液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切る実質的にすべての磁気感受性粒子：分析対象の錯体の移動が、インターフェースへと向かい、インターフェースを横切る磁界の移動の速度を制御することによって最適化される。インターフェースを横切る磁気感受性粒子：分析対象の錯体の移動のタイミングを、液体サンプル：第２の媒体のインターフェースの形成に一致し、あるいは液体サンプル：第２の媒体のインターフェースの形成のきわめて直後となるように、制御することができる。
【０３５８】
液体サンプルからの錯体の分離の後に、錯体を、分析対象の存在を直接的または間接的に検出できるセンサ（例えば、１つ以上の電極を備えている電気化学センサ）へと、さらに磁気的に移動させることができる。
【０３５９】
典型的な実施形態においては、錯体が、１つ以上の酵素基質および／または共同因子の存在下で検出可能な反応を生み出すことができる酵素ラベルを含んでおり、間接的な検出が実行される。例えば、酵素が、酸化または還元された酵素基質、共同因子、または副産物などの生成物を生み出すことができる。生成物を、電気化学センサを使用して電気化学的に検出することができる。例えば、電気化学センサは、１つ以上の電極を第２の媒体に接触させて備えることができる。
【０３６０】
典型的な実施形態においては、液体サンプルからの分析対象の分離が、その後に分析対象の存在を液体サンプル中の混入物質（例えば、生体化合物などの分子成分）に妨げられることなく検出できるため、望ましい。例えば、一部の液体サンプル（例えば、血液サンプル）は、特定の分析対象の電気化学的な割り出しを妨げうる無視できないバックグラウンド電気化学信号をもたらす。したがって、分析対象を血液から分離することが、分析対象の存在を正確に判断するために望ましいと考えられる。
【０３６１】
この分析対象の検出方法を実行するための装置が提供される。検出方法は、液体サンプル中の分析対象の存在についてのアッセイであり、装置は、この方法のためのアッセイ装置である。
【０３６２】
アッセイ装置は、チャネル・ネットワークを有するマイクロ流体装置である。このネットワークは、第１のチャネル部へと接続された導入口を備えており、第１のチャネル部は、チャネル・ネットワークの中間位置に位置するジャンクション（例えば、毛管ストップ）において、第２のチャネル部へと接続されている。ジャンクションにおいて、第２のチャネル部が第１のチャネル部よりも大きな断面積を有することができ、毛管ストップ圧力（ｐｃａｐｓｔｏｐ）を生み出して毛管ストップを形成することができる。代案として、疎水パッチをチャネルの１つ以上の内表面に配置して使用するなど、毛管ストップを別の手段によって形成することも可能である。
【０３６３】
導入口に堆積された液体サンプルが、第１のチャネル部へと流入して、ジャンクションまで第１のチャネル部を満たすことができる。液体サンプルが、第１および第２のチャネル部のジャンクションの付近にインターフェース（例えば、液体サンプル：第２の媒体のインターフェース）を形成する。第２の媒体は、典型的には、別の流体（例えば、空気などの気体、バッファなどの別の液体）または流動性媒体（例えば、電気泳動ゲルなどのゲル）である。いくつかの実施形態においては、第２の媒体が気体であり、インターフェースが、液体サンプル−気体のインターフェース（例えば、メニスカス）である。
【０３６４】
いくつかの実施形態においては、インターフェースが、（ａ）液体サンプルおよび第２の媒体の一方と（ｂ）第３の媒体との間の第１のインターフェースを、液体サンプルおよび第２の媒体の他方に接触させ、液体サンプルおよび第２の媒体の他方によって第３の媒体を第１のインターフェースから押しのけることによって形成される。いくつかの実施形態においては、第３の媒体が、第２の液体（例えば、バッファ）であり、装置が、第２の液体をジャンクションに向かって（例えば、インターフェースに向かって）流れるように第２のチャネル部へと放出できる第２の液体のリザーバをさらに備えており、あるいはそのようなリザーバと協働できるように構成されている。例えば、インターフェースが液体サンプル−気体のインターフェースである実施形態においては、第２のチャネル部が、放出された第２の液体を液体サンプル：気体のインターフェースへと導き、気体（例えば、空気）を押しのけて、液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成する。
【０３６５】
典型的な実施形態においては、第２のチャネル部においてジャンクションに隣接する領域が、液体サンプル：空気のインターフェースの面を横方向に横切って第２の液体を案内するように構成されており、第２の液体が液体サンプル：空気のインターフェースの面を横切って流れるにつれて、液体サンプル：空気のインターフェースの面積が徐々に減少する。液体サンプル：第２の液体のインターフェースが形成された後、インターフェースは基本的に静止であってよく、さらに／またはインターフェースに対する液体の塊の移動は、少なくともインターフェースを横切る上述のとおりの移動までは存在しなくてよい。
【０３６６】
インターフェースに隣接する第２のチャネル部の構成は、第２のチャネル部の高さおよび／または幅の変化を含むことができる。典型的な実施形態においては、インターフェースに隣接する第２のチャネル部の構成が、ジャンクションにおける第２のチャネル部の幅および高さを増すための第２のチャネル部の幅および高さのテーパを含んでいる。さらに、第２のチャネル部は、ジャンクションに隣接する第２のチャネル部の曲げ部によってもたらされるジャンクションの付近の方向の変化を含んでいる。さらに、曲げ部の内壁が、毛管ストップ（例えば、内壁の切り欠きまたは通気孔、ならびに／あるいは疎水パッチ）を備えることができる一方で、曲げ部の外壁は、対応する毛管ストップを有さない。ジャンクションに向かって前進する第２の液体が、曲げ部の内壁の毛管ストップにおいて減速され、第２の液体が、第１および第２のチャネル部のジャンクションを（少なくとも部分的に）位置させることができる曲げ部の外壁の周囲において、より速やかに前進する。典型的には、第２の液体の外壁に隣接する部分が、毛管ストップに対して枢動する。これが、ジャンクションに形成された液体サンプル：空気のインターフェースの面を横方向に横切るように第２の液体の流れを案内し、実質的に気泡の存在しない液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成を促進する。
【０３６７】
第１のチャネル部の試薬が、液体サンプル内の分析対象と磁気感受性粒子：分析対象の錯体を形成する。今や、これらの錯体を、液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切り、第２のチャネル部のセンサ（例えば、１つ以上の電極）に向かって磁気的に移動させることができ、ここで分析対象の存在を検出することができる。
【０３６８】
装置は、前記装置が挿入されるメータまたは読み取り器と連動して動作するように構成されている。メータは、磁気感受性粒子および錯体を磁気的に移動させるための磁石（電磁石であってよい）を備えている。さらに、メータは、アッセイ装置から信号を受信するように構成された部品、ならびにアッセイ結果を判断して表示するプロセッサおよびディスプレイを備えている。
【０３６９】
装置を、２つ以上の分析対象を検出するように構成することができる。
【０３７０】
サンプル材料（例えば、生物学的サンプル）中の１つ以上の分析対象または指標を（例えば、定量的または定性的に）割り出すためのアッセイが説明される。典型的な分析対象は、哺乳類の対象における或る生理学的状態の存在に関する（例えば、存在を示す）バイオマーカーである。生理学的状態の存在を、少なくとも部分的にバイオマーカーの割り出しの結果にもとづいて（例えば、結果を基準値と比較することによって）判断することができる。分析対象の割り出しは、直接的であっても、間接的であってもよい。例えば、分析対象の存在を、分析対象に結合した検出可能なラベル（例えば、酵素ラベル）からもたらされる信号（例えば、電気化学信号または光信号）を検出することによって、間接的に判断することができる。分析対象を、例えば分析対象そのものからもたらされる信号（例えば、電気化学信号または光信号）を検出することによって、直接的に割り出すことができる。
【０３７１】
さらに、本明細書に記載される任意の装置または方法を、少なくとも部分的に割り出しの結果にもとづき、さらには／あるいは割り出しの結果を使用して、少なくとも１つのアクションを実行するように構成または実現することができる。例えば、上記少なくとも１つのアクションを、結果を保存すること、結果をさらなる処理に利用できるようにすること、少なくとも１つの結果を表示すること、結果を記録すること、結果を遠方の位置へと伝達すること、結果を基準値と比較すること、結果に関係する情報を表示すること、結果にもとづいて複数のアクションの中からの選択を行うこと、あるいはこれらの組み合わせからなる群より選択することができる。ここで、用語「結果」は、結果を表わす値または指標を包含する。
【０３７２】
例えば、アッセイが、或る特性の割り出しまたは分析対象の割り出しをもたらすことができる。さらに、割り出しまたは検出の結果を、保存することができ、さらに／または処理することができ、さらに／または記録することができ、さらに／または遠方の場所へと伝達することができ、さらに／または基準値（例えば、標準的な被験者集団の基準値または個々の被験者の基準値（例えば、前記患者からの分析対象の１回以上の過去の割り出しから決定されるベースライン））と比較することができ、さらに／またはアッセイ結果として（例えば、装置のユーザへと）表示することができ、さらに／または作用を加える（例えば、治療の計画または戦略を変更することによって）ことができる。割り出しまたは検出の遠方の場所への伝達を、例えばＬＡＮ、ＷＡＮなどの通信ネットワークによって実行でき、インターネットを介して実行できる。伝達は、サーバ、ホスト、またはプロキシへの無線伝送であってよい。無線伝送を、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）伝送プロトコルを使用して実現することができる。
【０３７３】
分析対象は、任意の分析対象であってよく、さらに詳しくは、抗体などの結合剤を励起させて磁気感受性粒子へと結合させることができる任意の分析対象であってよい。
【０３７４】
典型的な実施形態においては、分析対象が、ＢＮＰまたはＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのうちの少なくとも１つなど、ナトリウム利尿ペプチドである。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ（脳性ナトリウム利尿ペプチド前駆体Ｎ端フラグメント）は、ＢＮＰ（脳性ナトリウム利尿ペプチドまたはＢ型ナトリウム利尿ペプチド）のアミノ基末端フラグメントである。ＢＮＰは、心室細胞によって合成される３２アミノ酸（ａａ）ペプチド心臓ホルモンであり、１０８ａａプロペプチドとして貯蔵され、心室の拡張または圧負荷に応答して分泌される。プロペプチドが切断されて、３２ａａアクティブＢＮＰおよび７６ａａＮ端フラグメント（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）が放出される。ＢＮＰおよびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、心室拡大および過負荷のマーカーである。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、慢性心不全を抱える通院患者の通院の心充満圧に相関付けられ（ＢｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇらのＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅａｒｔ  Ｆａｉｌｕｒｅ  ８  （２００６）  ７９７〜８０３）、心筋の伸びおよび慢性心不全のバイオマーカーとして示され（Ｍｕｒｄｏｃｈら、ＡＭ  Ｈｅａｒｔ  Ｊ  １３８（６）：１１２６〜１１３２、１９９９）、急性心不全における死亡率の予測材料として示されている（Ｓａｋｈｕｊａら、Ｃｌｉｎｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ５３：３  ４１２〜４２０（２００７））。
【０３７５】
したがって、ヒトの血液サンプル中のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの濃度または量（定性的または定量的）を割り出すための典型的なアッセイを、例えば心臓の状態または疾病、心不全、慢性心不全、うっ血性心不全、心筋梗塞症、高血圧症、から選択される病的状態または疾病の監視、診断、予後診断、リスク評価、および／または感受性評価に使用することができる。
【０３７６】
他の典型的な実施形態においては、分析対象を、カリウムイオン、シスタチンＣ、トロポニンＴ、トロポニンＩ、ミエロペルオキシダーゼ、クレアチンキナーゼＭＢから選択することができる。
【０３７７】
分析対象は、哺乳類の体を苦しめる状態についてのバイオマーカーであってよい。用語「バイオマーカー」は、状態、疾患、または疾病の診断ならびに状態、疾患、または疾病の影響および進行の測定または標示に有用となりうる特定の分子的特徴を有する体内の生化学物質を指す。例えば、ヒトの体液（すなわち、呼気または血液）において見られる一般的なバイオマーカーおよびそのようなバイオマーカーのもたらすヒトのそれぞれの診断の状態として、これらに限られるわけではないが、虚血変性アルブミン「ＩＭＡ」（原因：血液への酸素の不足；診断：冠動脈疾患）、脳性ナトリウム利尿ペプチド前駆体Ｎ端フラグメント「ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ」（原因：筋細胞の伸び；うっ血性心不全に関する典型的な診断結果）、アセトアルデヒド（原因：エタノール；診断：中毒）、アセトン（原因：アセトアセテート；診断：ダイエット；ケトン原生／糖尿病）、アンモニア（原因：アミノ酸の脱アミノ化；診断：尿毒症および肝疾患）、ＣＯ（一酸化炭素）（原因：ＣＨ２Ｃｌ２、高い割合のＣＯＨ；診断：屋内空気の汚染）、クロロホルム（原因：ハロゲン化合物）、ジクロロベンゼン（原因：ハロゲン化合物）、ジエチルアミン（原因：コリン；診断：腸内細菌の異常増殖）、Ｈ（水素）（原因：腸；診断：乳糖不耐症）、イソプレン（原因：脂肪酸；診断：代謝的負荷）、メタンチオール（原因：メチオニン；診断：腸内細菌の異常増殖）、メチルエチルケトン（原因：脂肪酸；診断：屋内空気の汚染／ダイエット）、Ｏ−トルイジン（原因：がんの代謝産物；診断：気管支がん）、硫化ペンタンおよび硫化物（原因：脂質過酸化反応；診断：心筋梗塞症）、Ｈ２Ｓ（原因：代謝；診断：歯周病／排卵）、ＭｅＳ（原因：代謝；診断：肝硬変）、ならびにＭｅ２Ｓ（原因：感染症；診断：塹壕口腔炎）が挙げられる。バイオマーカーは、心不全（例えば、慢性心不全、心疾患、あるいは心筋梗塞症（ＭＩ）への感受性、例えばＭＩリスクのマーカー）のマーカーであってよく、あるいは腎臓に関するマーカー（例えば、血液容量についての情報をもたらすことができる糸球体ろ過量のマーカー）であってよい。
【０３７８】
典型的な実施形態においては、サンプル材料が、生物学的液体（例えば、血液、血漿、血清、尿、唾液、粘液、涙、精液、脳脊髄液（ＣＳＦ）、リンパ液、または他の体液）などの液体である。典型的な実施形態においては、サンプル材料が、哺乳類（例えば、男性または女性であってよいヒト）からの体液である。典型的な実施形態においては、サンプル材料が、ヒトからの全血である。分析対象は、例えばタンパク質、ペプチド、核酸、代謝産物、単糖類または多糖類、脂質、薬物または薬物代謝産物、あるいは他の成分など、サンプルにおいて発見される（あるいは、発見される可能性がある）任意の成分であってよい。随意により、アッセイ装置において、全血がサンプルとして利用可能である場合に血漿のみが検出ゾーンに達するように、サンプル導入口と検出ゾーンとの間に血液分離膜を設けることができる。
【０３７９】
磁気感受性粒子は、磁性粒子、あるいは磁界によって操作（例えば、移動）および／または配置が可能な粒子を含むことができる。磁気感受性粒子は、非磁性であるが磁界による操作または配置を受けることができ、あるいは磁性を有してよい（例えば、磁力線の源であってよい）。磁気感受性粒子は、球形のビーズであってよく、少なくとも約０．０５ミクロン、少なくとも約１ミクロン、少なくとも約２．５ミクロン、典型的には約２０μｍ未満の直径を有することができる。磁気感受性粒子は、例えば米国実用新案登録出願公開第２００５０１４７９６３号、米国実用新案登録出願公開第２００５０１００９３０号、または米国実用新案登録第５，３４８，８７６号（いずれも、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の磁性粒子であってよく、あるいは例えばＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（商標）および／またはＭＹＯＮＥ（商標）という商品名でＤｙｎａｌ  ＡＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  ＵＳＡ）によって製造されているビーズなど、市販のビーズであってよい。とくには、磁性粒子へと結び付けられた抗体が、例えば米国実用新案登録出願公開第２００５０１４９１６９号、第２００５０１４８０９６号、第２００５０１４２５４９号、第２００５００７４７４８号、第２００５０１４８０９６号、第２００５０１０６６５２号、および第２００５０１００９３０号、ならびに米国実用新案登録第５，３４８，８７６号（いずれも、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。磁気感受性粒子は、鉄粒子であってよい。
【０３８０】
粒子に影響をおよぼす磁界を、永久磁石、一時磁石、または電磁石を含む任意の種類の磁石であってよい磁石によって加えることができる。磁石を、磁気感受性粒子に向かって磁界を加えるための磁気の源として使用することができる。
【０３８１】
典型的な実施形態においては、成分あるいは液体：気体または液体：液体のインターフェースを、物理的構造に近接して配置することができる。近接配置とは、物理的構造の近くに配置することを指す。配置が、物理的構造に位置することができ、あるいは物理的構造に隣接することができる。
【０３８２】
典型的な実施形態は、マイクロ流体装置を含んでいる。マイクロ流体装置は、チャネル・ネットワークをもたらすべく１つ以上のチャネルが形成された支持体を備えることができ、そのようなネットワークが、ネットワークの一部または全体を通って液体の流れを導くことができ、随意により制御することができる。典型的には、チャネル・ネットワークは、複数のチャネル部を有する。典型的な実施形態においては、マイクロ流体装置が、所望のアッセイを実行するように構成され、さらにマイクロ流体装置を、アッセイ結果をもたらすためにメータとやり取りをするように構成することができる。マイクロ流体装置は、通常は、研究室の作業台に適合するように充分に小さく、典型的な実施形態においては、個々のヒトユーザが片手または両手で運ぶことができるように充分に小さい。
【０３８３】
典型的な実施形態においては、チャネルおよびチャネル部が、周囲の壁によって定められるおおむね囲まれた空間である。チャネルは、任意の断面形状（例えば、矩形、台形、または円形）を有することができる。チャンネルは、開口（例えば、導入口、排出口、または通気孔）によってマイクロ流体装置の外部の大気に流体連通できる。チャネルまたはチャネル部は、例えば閉じ蓋を持たないことによって、長さの一部または全部において大気へと開くことができる。チャネルまたはチャネル部は、毛管（すなわち、毛管作用によって液体を保持または輸送することができる内径の小さいチャネル）を備えることができ、毛管作用とは、液体をチャネルへと（あるいは、チャネルに沿って）引き込む表面張力の（少なくとも一部の）働きである。
【０３８４】
いくつかの実施形態による装置を、例えば血液サンプルについてのアッセイの実行に使用することができる。ユーザは、ヒト（男性または女性）であってよい。典型的な実施形態においては、ユーザが、医療専門家（例えば、看護師、内科医、医師、一般開業医、外科医、または瀉血専門医）が存在しないときにアッセイを実行でき、医療専門家の直接の手助け（口頭など）のもとでアッセイを実行することができる。したがって、アッセイ装置を、病院、診療所、医院、または他の医療施設から離れて使用されるように構成することができ、家庭または職場などのドメスティックな環境あるいは任意の好都合な場所で使用することができる。
【０３８５】
方法および／または装置および／またはメータを、約３０分未満（例えば、約２０分未満、約１５分未満、約１０分未満）の合計検査時間にて（一実施形態においては、約１０、１１、または１２分で）アッセイを実行してアッセイ結果をユーザへともたらすように構成することができる。
【０３８６】
典型的な実施形態においては、１つ以上のセンサを、液体の特徴を割り出すため、および／または信号を検出するために使用することができる。信号は、或る成分（例えば、分析対象または酸化化合物）の存在または非存在であってよい。好ましい典型的な実施形態においては、センサが、１つ以上の電極を含んでいる電気化学センサであり、信号が、電気化学信号（例えば、電極における酸化化合物の還元または電極における還元化合物の酸化によって形成される信号）であり、この信号を、電極において電流測定および／または電圧測定によって検出および／または測定することができる。他のセンサとして、放射線（例えば、光、Ｘ線、γ線の放射）および／または光（例えば、蛍光、反射、または吸収）の検出器が挙げられる。
【０３８７】
典型的な実施形態においては、成分を、錯体を形成すべく互いに拘束または結合させることができる（例えば、磁気感受性粒子を結合剤へと結合させることができる）。成分の拘束または結合は、直接的（例えば、分析対象の抗分析対象の抗体への結合）であっても、間接的（例えば、ストレプトアビジンおよびビオチンなどのリンカーを介する磁気感受性粒子の結合剤への結合）であってもよい。
【０３８８】
典型的な実施形態においては、結合剤が、選択されたターゲットへと、前記ターゲットについて約１００μＭ以下（例えば、約５０μＭ未満、約１０μＭ未満、約１μＭ未満、約１００ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、約１００ｐＭ未満、約１０ｐＭ未満）のＫｄを有する高い親和性にて特定的に結合できる分子である。第１および第２の結合剤を、抗体（単クローン性または多クローン性）、抗体フラグメント（例えば、ｓｃＦＶフラグメント）、抗体結合ドメイン、アプタマー、または他の認識試薬からそれぞれ選択することができる。第１および第２の結合剤が、例えば抗体およびアプタマーなど、異なっていてもよい。
【０３８９】
典型的な実施形態においては、試薬がアッセイ装置に（例えば、乾燥の形態で）用意される。試薬を、例えば分析対象の存在を検出するために、アッセイに関与するように構成することができ、共役を形成し、さらに／あるいは分析対象に結合するように構成することができる。典型的な実施形態においては、試薬が、磁気感受性粒子および分析対象に結合して磁気感受性粒子とともに三重錯体を形成するように構成された少なくとも１つの試薬（例えば、抗体ラベル酵素）の共役を含んでいる。典型的な実施形態においては、磁気感受性粒子および試薬の共役が、三重錯体を形成すべく第１および第２の結合剤を巻き込むサンドイッチ・アッセイに関与するように構成される。
【０３９０】
典型的な実施形態は、ただ１つの小さな体積の血液サンプル（あるいは、他の生物学的材料または複合混合物）についてアッセイを実行するための装置および方法を提供する。
【０３９１】
以下で、典型的な実施形態を、添付の図面を参照して詳しく説明する。本考案は、典型的な実施形態において説明される特徴の組み合わせを、そのような組み合わせが明らかに許されない場合または明示的に回避される場合を除き、包含する。
【０３９２】
図１８を参照すると、アッセイ方法２１００が、混合物の形成ステップ２１０１、試薬／分析対象の捕捉ステップ２１０２、錯体の輸送ステップ２１０３、錯体の測定ステップ２１０４、およびアッセイ結果の形成ステップ２１０５を含んでいる。典型的には、方法２１００は、サンプルが試薬と反応する試薬ゾーン、分析対象の測定が（定性的または定量的に）実行される検出ゾーン、および試薬ゾーンと検出ゾーンとの間のインターフェースをもたらすインターフェース・ゾーンを備えるアッセイ装置を使用して実行される。
【０３９３】
混合物の形成ステップ２１０１において、或る量のサンプル材料（例えば、ヒトからの血液などのサンプル液体）および分析対象に結合できる試薬を含む混合物が形成される。典型的な実施形態においては、分析対象に結合できる試薬は、分析対象に結合できる抗体または抗体ドメインまたは抗体フラグメント（例えば、ｓｃＦＶ）であってよい。試薬／分析対象の捕捉ステップ２１０２において、分析対象に結合できる試薬が、サンプル中に存在する分析対象と錯体を形成する。錯体の輸送ステップ２１０３において、先のステップにおいて形成された試薬：分析対象の錯体を、非複合の材料を取り除くべく洗浄でき、検出ゾーンへと運ぶことができる。錯体の測定ステップ２１０４において、検出ゾーンへと運ばれた試薬：分析対象の錯体の存在が、（例えば、定性的または定性的に）判断される。ステップ２１０５において、先のステップにおける試薬：分析対象の錯体の検出の程度の結果として、アッセイ結果が形成される。例えば、試薬：分析対象の錯体の検出が、ユーザまたは患者の病状または病的状態の（新規または継続の）診断または予後診断を示すことができる。したがって、試薬：分析対象の錯体の検出を、アッセイ結果（ユーザへと表示することができる）を提供するために使用または処理（例えば、基準値と比較することによって）することができる。
【０３９４】
次に、アッセイ方法２１００を、さらに詳しく説明する。
【０３９５】
混合物の形成ステップ２１０１において、アッセイ装置の試薬ゾーンに配置された試薬材料と、アッセイ装置の試薬ゾーンを満たすための充分な量のサンプル材料との間で、混合物が形成される。血液サンプルを、指刺しまたは静脈穿刺から得ることができる。
【０３９６】
いくつかの実施形態においては、試薬ゾーンを満たすために必要とされる血液の量を、少数回（例えば、３回以下、２回以下、１回）の指刺しから得ることができる。例えば、いくつかの実施形態においては、試薬ゾーンを満たすために必要とされる血液の量を、１回の指刺しから得ることができる。血液の体積は、典型的には、約１０μｌまたは約５μｌである（例えば、少なくとも約０．５μｌ、少なくとも約１μｌ、少なくとも約５μｌ、少なくとも約１５μｌ、少なくとも約２５μｌ、少なくとも約５０μｌ）。いくつかの実施形態においては、試薬ゾーンを満たすために必要とされる血液の量が、約５０μｌ以下である（例えば、約４０μｌ以下、約２５μｌ以下、約１５μｌ以下、約１０μｌ以下、約５μｌ以下）。１つの典型的な実施形態においては、装置を満たすために必要とされるサンプルの量が、１０μｌである。別の典型的な実施形態においては、装置を満たすために必要とされるサンプルの量が、５μｌである。
【０３９７】
いくつかの試薬が、アッセイ装置の試薬ゾーン内に存在している。試薬は、典型的には、以下の種を含んでいる。すなわち、磁気感受性粒子、分析対象に結合できる第１の試薬、第１の試薬と同時に分析対象に結合（例えば、サンドイッチにおけるように）できる第２の試薬である。典型的には、試薬が、分析対象の第１の特有の領域に結合し、第２の試薬が、分析対象の第２の特有の領域に結合する。第１の試薬が、（例えば、非特定の結合反応において）たとえ分析対象が存在しなくても磁気感受性粒子に結合するように構成される。例えば、第１の試薬が、ビオチン部分を含むことができ、粒子を、ビオチン変性の第１の試薬を捕捉するストレプトアビジンでコートすることができる。第２の試薬が、検出可能なラベル（例えば、酵素などの酵素ラベル）を含んでいる。典型的な実施形態においては、第２の試薬が、分析対象のための結合試薬（例えば、分析対象のための抗体）および酵素ラベルに共役されたラベル付けされた粒子（例えば、金コロイドゾル粒子などの非磁気感受性粒子）である。典型的には、粒子が複数の酵素ラベルを含んでおり、試薬：分析対象の錯体の一部となる酵素ラベルの数を多くしている。第２の抗体−酵素の共役が、典型的には、ラベル付けされた粒子に前もって組み合わせられて用意される。
【０３９８】
一般に、第１および第２の認識試薬は、分析対象が存在しないときは互いに結び付くことがない。しかしながら、分析対象の存在が、第１および第２の認識試薬を三重錯体へと結び付けることができる。
【０３９９】
第２試薬は、同じまたは異なる分析対象を認識することができ、同じまたは別の分析対象に特定的に結合する結合剤であってよい。試薬ゾーンは、酸化還元メディエータ、特定の酵素のための基質、およびバッファ溶液の形成に適した塩など、さらなる試薬を含むことができる。第２の結合剤を、そのように形成された三重錯体に移動度を誘起できる粒子へと結び付けることができる。粒子は、例えばポリマーマイクロスフェア、金属ナノ粒子、または磁気感受性粒子であってよい。
【０４００】
試薬が分析対象を含んでいるサンプル液体によって可動にされると、試薬が分析対象に相互作用し、磁気感受性粒子、第１の試薬、分析対象、および第２の試薬を含んでいる錯体が形成される。ストレプトアビジンでコートされた磁気感受性粒子が、分析対象へと結合できるいくつかのビオチン変性試薬を収容することができる。したがって、それぞれの錯体は、複数の分析対象分子および複数の第２の試薬を含むことができる。
【０４０１】
試薬ゾーンは、例えば試薬ゾーンにおいて血液が固まることがないようにするための抗凝血剤および／またはバッファ塩など、１つ以上の追加の試薬を含むことができる。試薬ゾーンに存在するバッファ塩は、混合物のｐＨを制御して、錯体の形成に好ましいｐＨをもたらす。ｐＨ値が所望のｐＨに維持され、例えばｐＨを、約ｐＨ７．２〜約ｐＨ７．６（例えば、約６．９以上、約７．０以上、約７．１以上、約７．２以上、約７．３以上、約７．４以上、約７．５以上）（例えば、約８．０以下、約７．９以下、約７．８以下、約７．７以下、約７．６以下、約７．５以下、約７．４以下）の間の範囲に維持することができる。
【０４０２】
サンプル材料が血液である場合、血液サンプルが試薬ゾーンにおいて凝固して試薬ゾーンから検出ゾーンへの錯体の移動の可能性を下げることがないよう、試薬−分析対象の錯体の形成を妨げない抗凝血剤が、典型的には含まれる。
【０４０３】
試薬／分析対象の捕捉ステップ２１０２は、試薬とサンプルに含まれている分析対象との間の錯体の形成を含んでいる。サンプルがアッセイ装置へと加えられたとき、乾燥している試薬が、最初にサンプルとの非一様な混合物を形成する。短い時間間隔（約１秒、約５秒、約２０秒、約６０秒）のうちに、試薬が充分な水を得て、サンプルとの相互作用を始める。存在するのであれば、抗凝血剤がサンプル中に分散し、凝血塊の形成を防止して、サンプルを流体の状態に保つ。バッファ塩がサンプル中に分散し、サンプルのｐＨを、試薬：分析対象の錯体の形成に好ましい所望の値に保つ。第１および第２の抗体が、分析対象に結合し、錯体を形成する。ビオチンでラベル付けされた第１の試薬が、ストレプトアビジンでコートされた磁気感受性粒子に結合する。第２の試薬（例えば、酵素ラベルおよび分析対象のための結合剤に結合した非磁気感受性粒子）が、分析対象に結合する。
【０４０４】
サンプルおよび試薬は、所望の濃度範囲における分析対象の検出を可能にするため、適切な錯体の形成が生じるように保証するために充分な時間期間にわたって、接触したままである。試薬／分析対象の捕捉ステップ２１０２においてサンプルおよび試薬を接触したままに保つ時間期間は、少なくとも約３０秒（例えば、少なくとも約６０秒、少なくとも約１２０秒、少なくとも約２４０秒、少なくとも約４２０秒、少なくとも約６００秒、少なくとも約９００秒、少なくとも約１８００秒）であってよい。試薬／分析対象の捕捉ステップ２１０２においてサンプルおよび試薬を接触したままに保つ時間期間は、約２０００秒以下（例えば、約１５００秒以下、約１０００秒以下、約８００秒以下）であってよい。典型的な実施形態においては、この時間期間が、約６００秒である。
【０４０５】
いくつかの実施形態においては、サンプルおよび試薬が接触している時間期間の間、時間変化する磁界が試薬ゾーンへと加えられる。磁界が、試薬ゾーンにおいて磁気感受性粒子を動かし、サンプルおよび試薬の組み合わせ（例えば、混合）を促進し、目標の分析対象が第１および第２の抗体と錯体を形成する可能性を高める。例えば、磁気感受性粒子を、血液サンプルの攪拌を生じさせるべく試薬ゾーンにおいて振動／運動させることができる。
【０４０６】
錯体の輸送／洗浄ステップ２１０３は、試薬：抗体の錯体を試薬ゾーンから検出ゾーンへと移動させることを含んでいる。サンプルのアッセイの過程において、検出ゾーンがバッファ溶液で（例えば、能動的に）満たされる。バッファが、サンプルがアッセイ装置へと加えられた後の所定の時点において、リザーバから放出される。バッファ溶液が、検出ゾーンおよびインターフェース・ゾーンを満たす。バッファ溶液がインターフェース・ゾーンへと送達されたとき、バッファが、（さらに詳しく後述されるとおり）試薬ゾーンのサンプルとサンプル液体：第２の液体のインターフェースを形成する。余分なバッファ溶液は、オーバーフローチャネルへと移動する。バッファがサンプルに接触して、サンプルとインターフェースを形成したとき、アッセイ装置のマイクロ流体ネットワークを通過する連続的な液体の経路が存在する。したがって、試薬：分析対象の錯体を、連続的な液体の流れに支持されて、アッセイ装置の全長にわたって移動させることができる。
【０４０７】
磁界を、アッセイ装置内で試薬：分析対象の錯体を操作するために使用することができる。試薬：分析対象の錯体を、試薬ゾーンに沿って、インターフェース・ゾーンを通り、検出ゾーンへと磁界によって引き込むことができる。いくつかの実施形態においては、磁界が、駆動機構に位置する永久磁石であってよく、駆動機構が、アッセイ装置のマイクロ流体ネットワークの下方に位置する経路であって、アッセイ装置のマイクロ流体ネットワークに平行な経路に従う。磁石の経路が、磁気感受性粒子の錯体を試薬ゾーンから検出ゾーンへと運ぶ方向に移動する。他の実施形態においては、磁界が、磁気感受性錯体をアッセイ装置において試薬ゾーンから検出ゾーンへと移動させる磁界の勾配を生み出すことができる電磁石による磁界であってよい。
【０４０８】
試薬：分析対象の捕捉ステップ２１０２において試薬ゾーン内で試薬：分析対象の錯体が形成されるとき、他のサンプル成分が、そのように形成される錯体に捕捉され、あるいは結び付く可能性がある。そのような無関係な物質が、目標の分析対象の検出を妨げる可能性があり、したがって錯体の測定ステップ２１０４に先立って、錯体に結び付いた無関係な物質の量を最小限にすることが望ましい。この段階において、分析対象および第１の試薬：磁気感受性粒子に結び付いていない酵素ラベルの第２の試薬は、無関係な物質であると考えられる。錯体の測定ステップ２１０４に先立って、無関係な物質を最小限にまで減らすことが望ましい。試薬：分析対象の錯体が、磁界の影響のもとで液体サンプル：バッファのインターフェースを横切ってインターフェース・ゾーンへと運ばれるとき、バッファが、試薬：分析対象の錯体の移動の方向と反対の方向に流れることができ、あるいは試薬：分析対象の錯体の移動の方向を横切って流れることができる。バッファを、錯体が試薬ゾーンから検出ゾーンへと運ばれる最中に、検出ゾーンを通り、インターフェース・ゾーンを横切り、オーバーフローへと連続的に送達することができる。試薬：分析対象の錯体に対するバッファの対向流が、磁気感受性の錯体から無関係な物質を効果的に分離する。このようにして、無関係な物質が、検出ゾーンからオーバーフローへと運び去られる。このようにして、磁気感受性の錯体を、錯体に付随する無関係な物質を最小限にしつつ、検出ゾーンへと運ぶことができる。
【０４０９】
通常は、検出ゾーンが分析対象を集め、検出ゾーンが検出可能な変化の場所である。検出可能な変化の程度を、検出ゾーンにおいて測定することができる。通常は、分析対象の量が多いほど、より大きな検出可能な変化がもたらされる。しかしながら、アッセイを、分析対象がより大量に存在するときに、より小さな変化を生じるように構成することも可能である。検出ゾーンは、分析対象を（例えば、分析対象に結合する試薬であって、検出ゾーンに固定されている試薬によって）固定することによって分析対象を集めることができる。あるいは、検出ゾーンが、分析対象に結び付いた成分を引きつけることができ、あるいは固定することができる。例えば、分析対象に結合し、かつ磁気感受性粒子へと直接的または間接的に結び付けられる認識試薬を、１つ以上の検出ゾーンにもたらされる磁界によって特定の検出ゾーンへと引きつけることができる。
【０４１０】
いくつかの実施形態においては、検出ゾーンの１つ以上が、１つ以上の電極を含んでいる。電極を、例えば銀、金、アルミニウム、パラジウム、白金、イリジウム、導電性カーボン、ドーピングされた酸化スズ、ステンレス鋼、または導電ポリマーなど、電気導電性およびサンプル成分との低い反応性のために選択される材料で形成することができる。検出ゾーンの電極（作業電極）が、参照ゾーンの第２の電極（参照電極）との協働において、電圧または電流などといったサンプルの電気特性を測定することができる。あるいは、検出ゾーンおよび参照ゾーンのそれぞれが、少なくとも１つの作業電極および対向電極を有することができる。すなわち、検出および参照ゾーンが、別個独立の測定を行うことができる。随意により、対向電極も、アッセイ装置に備えることができる。サンプルの電気特性を測定するための電極を備えているアッセイ装置が、それぞれその全体参照により本明細書に組み込まれる米国実用新案登録第５，７０８，２４７号、第６，２４１，８６２号、および第６，７３３，６５５号に記載されている。
【０４１１】
いくつかの実施形態においては、アッセイ装置のベース、アッセイ装置の蓋、または両方が、検出ゾーンに整列した半透明または透明な窓を有している。検出ゾーンにおいて生じる視覚的な変化を、窓を通して検出することができる。検出を、視覚的に行う（すなわち、変化がユーザの眼によって測定される）ことができ、あるいは計器（例えば、フォトダイオード、光電子増倍管、など）によって測定することができる。一般に、参照ゾーンが、その性状において検出ゾーンに類似している。換言すると、検出ゾーンが電極を備える場合、参照ゾーンも、同様に電極を備えることができる。検出ゾーンが視覚的測定のための窓に整列している場合、参照ゾーンを、同様に視覚的測定のための窓に整列させることができる。いくつかの実施形態において、参照ゾーンは、分析対象を集めるようには構成されていない。あるいは、参照ゾーンが、分析対象を集めるように適合されているが、この分析対象について別の分析を実行する。このように、参照ゾーンにおいて測定される検出可能な変化を、サンプル中に存在する分析対象の量または濃度を判断するときに考慮すべきバックグラウンド測定と考えることができる。
【０４１２】
錯体の測定ステップ２１０４において、検出ゾーンへと運ばれた磁気感受性の試薬：分析対象の錯体を、測定することができる。典型的な実施形態においては、検出ゾーンが、サンプルの電気化学的分析の実行するために使用することができる電極を備えている。試薬：分析対象の錯体の一部である酵素ラベルの第２の試薬が、検出ゾーンを満たすために使用されたバッファ中に存在する基質を変換できる。基質を、検出不可能な第１の形態から、検出可能な第２の形態へと変換できる。検出ゾーン内の測定電極を、基質の検出可能な形態を測定するために使用することができる。例えば、作業電極を参照電極（例えば、銀／塩化銀（Ａｇ／ＡｇＣｌ）参照電極）に対して特定の電位へと偏極させ、電流の測定を行うことができる。例えば、フェリシアン化カリウムを、グルコースオキシダーゼによって、グルコースのグルコン酸への変換の際に、フェロシアン化カリウムへと変換（還元）することができる。形成されるフェロシアン化カリウムを、約＋４００ｍＶ対Ａｇ／ＡｇＣｌにおいて正の電流として測定することができる。フェロシアン化物は、作業電極によって再びフェリシアン化物へと酸化される。電気活性な種を酸化することができ、その場合には、電気活性な種が電極へと電子を失い、電気活性な種を還元することができ、その場合には、電気活性な種が電極から電子を受け取る。電極と電気活性な物質との間の電子の受け渡しが、正または負の電流であってよい測定可能な電流をもたらす。
【０４１３】
電気活性な物質の電流の測定を、較正線を確立するために使用することができる。公知の量の物質が、式（式１）ｙ＝ｍｘ＋ｃによって表わすことができる一意な電流をもたらし、ここでｙは、測定される電流を表わし、ｘは、物質の濃度を表わし、ｍは、この線の勾配であり、ｃは、この線のｙ軸上の切片である。したがって、測定された電流を、溶液中の未知の量の物質の濃度を割り出すために、（式２）ｘ＝（ｙ−ｃ）／ｍを与える式１の変形に従って使用することができる。
【０４１４】
アッセイ装置のリザーバに含まれるバッファは、バッファ塩および酵素のための基質を含んでいる。バッファ塩は、基質を検出可能な生成物へと変換する酵素にとって適切な環境をもたらすために、ｐＨを緩衝する。例えば、バッファ塩は、緩衝酢酸溶液（例えば、酢酸ナトリウム）であってよい。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約１００ｍＭの酢酸ナトリウム（例えば、少なくとも約１１０ｍＭの酢酸ナトリウム）を含むことができる。いくつかの実施形態においては、バッファが、約１５０ｍＭの酢酸ナトリウム（例えば、約１３５ｍＭの酢酸ナトリウム）を含むことができる。典型的な実施形態においては、バッファ塩が、約１２５ｍＭの酢酸ナトリウム（例えば、１２５ｍＭの酢酸に１２５ｍＭの酢酸ナトリウムを加えることによってｐＨ４．０にされる）を含んでいる。さらに、バッファ溶液は、分析の最中の参照電極の電気化学を安定にするために、塩化物（例えば、塩化カリウム（ＫＣｌ））を含むことができる。いくつかの実施形態においては、塩化物が、少なくとも約１００ｍＭのＫＣｌ（例えば、少なくとも約１２５ｍＭのＫＣｌ）を含むことができる。いくつかの実施形態においては、塩化物が、少なくとも約２００ｍＭのＫＣｌ（例えば、少なくとも約１７５ｍＭのＫＣｌ）であってよい。典型的な実施形態においては、塩化物が、１５０ｍＭのＫＣｌを含む。さらに、バッファ溶液は、抗体の錯体がマイクロ流体ネットワーク５０８の内表面に付着する可能性を少なくするために、洗浄剤を含むことができる。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約０．０５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標）（例えば、少なくとも約０．０７５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標））を含むことができる。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約０．２５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標）（例えば、少なくとも約０．１５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標））を含むことができる。典型的な実施形態においては、バッファ溶液が、約０．１％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標）を含んでいる。さらに、バッファは、西洋わさびペルオキシダーゼの場合には２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）および過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）である酵素ラベルのための基質を含んでいる。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約５ｍＭのＡＢＴＳおよび少なくとも約５ｍＭのＨ２Ｏ２（例えば、少なくとも約７．５ｍＭのＡＢＴＳおよび少なくとも約７．５ｍＭのＨ２Ｏ２）を含んでいる。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約１５ｍＭのＡＢＴＳおよび少なくとも約１５ｍＭのＨ２Ｏ２（例えば、少なくとも約１２．５ｍＭのＡＢＴＳおよび少なくとも約１２．５ｍＭのＨ２Ｏ２）を含んでいる。他の典型的な実施形態においては、バッファが、約５ｍＭ以下のＡＢＴＳ（例えば、約４ｍＭ未満のＡＢＴＳ、約３ｍＭ未満のＡＢＴＳ、約２ｍＭ未満のＡＢＴＳ、約１ｍＭ未満のＡＢＴＳ）および約５ｍＭ以下のＨ２Ｏ２（例えば、約４ｍＭ未満のＨ２Ｏ２、約３ｍＭ未満のＨ２Ｏ２、約２ｍＭ未満のＨ２Ｏ２、約１ｍＭ未満のＨ２Ｏ２）を含むことができる。典型的な実施形態においては、バッファが、１０ｍＭのＡＢＴＳおよび１０ｍＭのＨ２Ｏ２を含んでいる。バッファ溶液は、４．２に等しい最終的なｐＨ（例えば、少なくとも約３．８のｐＨ、少なくとも約４．０のｐＨ）（例えば、４．６以下のｐＨ、４．４以下のｐＨ）を有する。
【０４１５】
第２の結合剤に共役する酵素ラベルは、例えば西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）であってよい。ＨＲＰは、過酸化水素およびＡＢＴＳの水および酸化ＡＢＴＳへの変換を触媒する（図５７を参照）。生成された酸化ＡＢＴＳを、作業電極において電気化学的に測定することができる。したがって、錯体の測定ステップ２１０４において、アッセイ装置のマイクロ流体ネットワークを通って運ばれた任意の試薬：抗体の錯体を、測定電極の近傍において生成される酸化ＡＢＴＳの量に従って測定することができる。測定される電流は、式２に従い、酸化ＡＢＴＳの量に比例し、したがって測定される電流は、電極へと運ばれた錯体中の分析対象の量に比例する。
【０４１６】
アッセイ結果の形成ステップ２１０５において、錯体の測定ステップ２１０４において得られた測定結果が、アッセイ結果を決定するために使用される。典型的な実施形態においては、アッセイ結果が、アッセイにおいて検出された分析対象の量または濃度を（定量的または定性的に）表わす値または信号の表示または通信を含んでいる。典型的な実施形態においては、アッセイ結果が、分析対象に関してユーザの状態を判断することを含んでいる。調査対象の分析対象に応じて、高い測定結果が、分析対象に関連する病状または病的状態についての診断または予後診断を示すことができる。高い結果は、特定の状態にない（例えば、心不全を抱えていない）ことが既知である集団の断面において測定されると考えられる水準よりも高い結果（集団間の偏差）であってよい。あるいは、高い結果は、個々のユーザについて過去に割り出されたベースライン水準よりも高い結果（ユーザ内の偏差）であってよい。
【０４１７】
アッセイ結果の形成ステップ２１０５において、アッセイ装置のユーザに情報を提示することができる。ユーザが臨床判断の有資格（医師など）である場合には、情報は、無資格の者（自身で検査の測定を実行するユーザなど）の場合と比べて異なる情報であってよい。検査に続いて生成される情報を、ユーザの資格に従ってグループに分類することができる。第１のグループにおいては、情報が、例えば測定結果が心不全を示しているか否かなど、正または負の知らせであってよい。第２のグループにおいては、情報が、サンプル中に存在する分析対象の量または濃度を表わす数値であってよい。第３のグループにおいては、情報を、例えば「担当の医療専門家に連絡せよ」、「追加の錠剤を摂取せよ」、「睡眠をとれ」など、１つ以上の「文字による促し」として提示することができる。このようにして、アッセイ結果の形成ステップ２１０５において、錯体の測定ステップ２１０４において得られた測定データの応用を、情報の最終使用者に応じて変えることができる。医療専門家は、典型的には、予後診断を容易にし、あるいは診断をもたらす数値データを望むと考えられる。最終ユーザは、典型的には、「自身の自覚症状」が（i）例えば消化不良などの無関係な問題の結果であるのか、あるいは（ii）心不全の発生または再発の結果であるのかについて、確認したいと考えられ、後者の場合には、例えば９１１番へと電話するように促される。
【０４１８】
アッセイ装置
次に、図３および４を参照すると、アッセイ装置５００が、マイクロ流体ネットワーク５０８を定める複合体５０１を備えている。典型的な実施形態においては、複合体５０１が、第１の基板５０２、第２の基板５０４、および第３の基板５０６を備えている。マイクロ流体ネットワーク５０８は、インターフェース・ゾーン５２２において検出ゾーン５１４に連絡している試薬ゾーン５１２を含む１つ以上のゾーンを備えている。さらに、マイクロ流体ネットワーク５０８は、試薬ゾーン５１２に連絡しているサンプル導入口５１０、および検出ゾーン５１４に連絡しているバッファ導入口５２０を備えている。検出ゾーン５１４が、バッファ導入口５２０を介してリザーバ５０７に連絡している。インターフェース・ゾーン５２２が、サンプルを試薬ゾーン５１２に含むように作用する毛管ストップ５３０を含んでいる。マイクロ流体ネットワーク５０８は、インターフェース・ゾーン５２２に連絡したオーバーフローチャネル５２４を有している。オーバーフローチャネル５２４は、第１の基板５０２を貫く通気孔５２６を有している。オーバーフローチャネル５２４は、リザーバ５０７から検出ゾーン５１４およびインターフェース・ゾーン５２２を通って移動したバッファを受け取る。
【０４１９】
サンプル導入口５１０が、サンプル（例えば、血液サンプル）を受け取る領域を定めており、サンプルを試薬ゾーン５１２へと運ぶ。
【０４２０】
試薬ゾーン５１２は、少なくとも約０．５ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約２．５ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約４ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ、少なくとも約８ｍｍ）（例えば、約３ｍｍ未満、約３．５ｍｍ未満、約４ｍｍ未満）の幅ｗ２を有している。一典型的な実施形態においては、ｗ２が約２．５ｍｍである。
【０４２１】
試薬ゾーン５１２は、少なくとも約０．０４ｍｍ（例えば、少なくとも約０．０６ｍｍ、少なくとも約０．０８ｍｍ、少なくとも約０．１ｍｍ、少なくとも約０．１５ｍｍ、少なくとも約０．２ｍｍ、少なくとも約０．４ｍｍ、少なくとも約０．５０ｍｍ、約１ｍｍ未満）の高さｈ１を有している。一典型的な実施形態においては、ｈ１が約０．０９ｍｍである。別の典型的な実施形態においては、ｈ１が約０．１５ｍｍである。
【０４２２】
試薬ゾーン５１２は、少なくとも約２５ｍｍ（例えば、少なくとも約５ｍｍ、少なくとも約７ｍｍ、少なくとも約１０ｍｍ、少なくとも約１５ｍｍ、少なくとも約２０ｍｍ、少なくとも約２６．７ｍｍ、少なくとも約３０ｍｍ、少なくとも約５０ｍｍ）（例えば、約３０ｍｍ未満、約２０ｍｍ未満、約１５ｍｍ未満）の長さｌ２を有している。一典型的な実施形態においては、ｌ２が約１０ｍｍである。別の典型的な実施形態においては、ｌ２が約２５ｍｍである。
【０４２３】
したがって、試薬ゾーン５１２は、少なくとも約２μｌ（例えば、少なくとも約５μｌ、少なくとも約７．５μｌ、少なくとも約７．５μｌ、少なくとも約１０μｌ、少なくとも約２０μｌ）の体積を有する。サンプルが、毛管力によって試薬ゾーン５１２へと引き込まれ、毛管ストップ５３０に達するまで試薬ゾーン５１２へと移動する。
【０４２４】
ひとたびサンプルが毛管ストップに達すると、サンプル・ゾーンとバッファ・ゾーンとの間の毛管力の変化が、さらなるサンプルが試薬ゾーン５１２へと引き込まれないために充分である。典型的には、少なくとも約４ミリバール（例えば、少なくとも約２ミリバール、少なくとも約６ミリバール）の圧力差が、サンプルが毛管ストップに達したときにサンプルの流れを停止させる。毛管ストップを、チャネルの寸法の変化を導入することによって達成でき、あるいは例えばチャネルに沿った流体の流れが妨げられるように疎水パッチ（例えば、表面の接触角を変化させる）を導入することによって達成できる。ジャンクションにおいて流れを停止させるために必要とされる圧力差を、液体の前進を停止させるために前進している液体の前側へと加えなければならない圧力として定めることができる。
【０４２５】
試薬ゾーン５１２は、（例えば、方法２１００の混合物形成ステップ２１０１に関して上述したような）試薬を含んでいる。典型的には、試薬ゾーン５１２は、第１、第２、第３、および第４の試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４を含んでいる。試薬５１３ｒ１は、磁気感受性粒子を含んでおり、試薬５１３ｒ２は、第１の結合剤を含んでおり、試薬５１３ｒ３は、（例えば、方法２１００の混合物形成ステップ２１０１に関して上述したような）第２の結合剤を含んでいる。第４の試薬５１３ｒ４は随意であり、抗凝血剤などのさらなる試薬を含むことができる。
【０４２６】
サンプルが（例えば、毛管力によって）試薬ゾーン５１２へと引き込まれるとき、試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４が、最初にサンプルと混ざり合い、非一様な混合物を形成する。方法２１００の試薬／分析対象の捕捉ステップ２１０２に関して上述したように、試薬５１３ｒ１を攪拌して、サンプル内で運動させるために、磁界を使用することが可能である。例えば、試薬５１３ｒ１を、サンプル全体への各試薬の分配を向上させて、サンプルの特定の成分に試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４のうちの１つ以上が接触する可能性を高めるために、試薬ゾーンにおける試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４の分散および混合のために使用することができる。試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４が、（例えば、方法２１００の試薬／分析対象の捕捉ステップ２１０２に関して上述したように）或る時間期間にわたってサンプルと相互作用する。
【０４２７】
図４が、複合体５０１を形成するために使用されるそれぞれの層を示している。第１の基板５０２が、第１の主表面および第２の主表面を有しており、幅ｗ１、長さｌ１、および厚さｔ１を有している。第１の基板５０２の１つの主表面が、マイクロ流体ネットワーク５０８を備えている。第１の基板５０２のもう１つの主表面が、リザーバ５０７およびバッファ導入口５２０を備えている。第１の基板５０２を、ポリスチレンまたはポリカーボネートなど、疎水性の材料から形成することができる。また、第１の基板５０２を、ポリエステルなど、親水性の材料から形成することも可能である。第１の基板５０２を、射出成型、熱間エンボス、レーザ・アブレーション、エッチング、圧延、によって形成することができる。幅ｗ１は、少なくとも約２５ｍｍ（例えば、少なくとも約１５ｍｍ、少なくとも約２０ｍｍ、少なくとも約３０ｍｍ、少なくとも約５０ｍｍ）であってよい。長さｌ１は、少なくとも約１００ｍｍ（例えば、少なくとも約５０ｍｍ、少なくとも約７５ｍｍ、少なくとも約１２５ｍｍ、少なくとも約１５０ｍｍ、少なくとも約２００ｍｍ）であってよい。厚さｔ１は、少なくとも約１．５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．５ｍｍ、少なくとも約０．７５ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２．０ｍｍ、少なくとも約２．５ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）であってよい。一典型的な実施形態においては、ｔ１が約１．５ｍｍである。
【０４２８】
試薬ゾーン５１２は、第１の基板５０２のマイクロ流体ネットワーク５０８を備えている主表面へと塗布することができる試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４を含んでいる。それぞれの試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４を、試薬ゾーン５１２を呈する領域の境界の範囲内で、第１の基板５０２の表面へと塗布することができる。基板５０２が疎水性特性を有する場合には、試薬が塗布先の位置から離れて移動する可能性は無視できる。基板５０２が親水性特性を有する場合、試薬が塗布先の位置から移動する可能性が大きくなる。試薬を、マイクロスポッティング（ｍｉｃｒｏｓｐｏｔｔｉｎｇ）、インクジェット印刷、ピペッティング（ｐｉｐｅｔｔｉｎｇ）、スロットダイ印刷（ｓｌｏｔ  ｄｙｅ  ｐｒｉｎｔｉｎｇ）、などのプロセスによって塗布することができ、これらの堆積方法は、それぞれの試薬を正確かつ制御された量にて施すことができる。試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４を、それらが物理的に離れるように別個の領域に塗布することができ、あるいは積層または散在した点として塗布することができる。試薬を、サンプルに触れたときの速やかな可溶化を促進するように調合することができる。
【０４２９】
試薬を、例えばノズルからの送出または吸引、電磁弁ならびにサーボ駆動またはステッパ駆動シリンジの使用など、いくつかの公知の技法を使用して試薬ゾーンに堆積させることができる。これらの方法は、試薬の液滴または線を、接触または非接触の様式で堆積させることができる。試薬を堆積させる他の方法として、パッド印刷、スクリーン印刷、圧電印刷ヘッド（例えば、インクジェット印刷）、あるいは試薬を放出すべく圧縮される袋（「ケーキ・アイサー（ｃａｋｅ  ｉｃｅｒ）」）からの堆積が挙げられる。堆積は、好ましくは、湿度および温度が制御された環境で実行される。異なる試薬を、同じまたは別のステーションにおいて送出することができる。
【０４３０】
所望の堆積ゾーンの外への試薬の交差汚染またははみ出しを検出できるようにするために、随意により蛍光剤または着色剤を試薬へと加えることができる。製品の性能が、交差汚染によって損なわれる可能性がある。堆積ゾーンは、近接していても、離れていてもよい。蛍光剤または着色剤は、アッセイ装置の動作、とくには分析対象の検出を妨げることがないように選択される。
【０４３１】
堆積の後に、試薬は乾燥させられる。乾燥は、大気での乾燥、赤外線乾燥、強制空気によって補助された赤外線乾燥、紫外光乾燥、暖かい強制空気、制御された相対湿度での乾燥、またはこれらの組み合わせによって達成できる。
【０４３２】
第２の基板５０４は、第１の主表面および第２の主表面を有しており、マイクロ流体ネットワーク５０８の輪郭の内側に開口を備えている。基板５０４は、幅ｗ１、長さｌ１、および厚さｔ２を有している。厚さｔ２は、約０．０６２ｍｍ（例えば、少なくとも約５０μｍ、少なくとも約２０μｍ、少なくとも約４０μｍ、少なくとも約６０μｍ、少なくとも約１００μｍ）であってよい。第２の基板５０４は、接着性を有しており、第１の基板５０２を第３の基板５０６へと物理的に取り付けるために使用可能である。第２の基板５０４は、単一の材料または複合材料であってよい。例えば、第２の基板は、担体層のそれぞれの主表面にそれぞれ接着層が配置されている両面接着層であってよい。接着層は、接着層を別の基板へと押し付けるべく圧力が加えられたときにその基板に貼り付く感圧式の接着剤であってよい。接着層は、感熱式の接着剤であってよく、その場合には、高い温度および圧力によって接着剤が基板へと結合する。第２の基板５０４は、疎水性または親水性を有することができる。第２の基板５０４が担体層上の複合材料である場合には、一方の主表面が、感圧式の接着剤であってよく、他方の主表面が、感熱式の接着剤であってよい。第２の基板５０４が、内側担体層との複合体である場合には、それぞれの主表面が、必要に応じて感圧式の接着剤または感熱式の接着剤であってよい。マイクロ流体ネットワーク５０８の輪郭が、第２の基板５０４に設けられる。第２の基板５０４が第１の基板５０２へと貼り付けられるとき、マイクロ流体ネットワーク５０８の輪郭が、第１の基板５０２の上方に位置合わせされる。
【０４３３】
いくつかの実施形態においては、第１の基板５０２が、マイクロ流体ネットワーク５０８を備えていない。その場合、マイクロ流体ネットワーク５０８の造作を備える第２の基板５０４が、第１の基板５０２と第３の基板５０６との間に接着されたときにマイクロ流体ネットワーク５０８の外形を定める。
【０４３４】
第３の基板５０６は、第１の主表面および第２の主表面を有しており、幅ｗ１、長さｌ１、および厚さｔ３を有している。一方の主表面に、一連の１つ以上の電極および端子を定める導電ネットワーク５０９が配置されている。導電ネットワーク５０９を、例えばカーボンペースト、金ペースト、銀ペースト、白金めっきカーボンペーストなど、導電ペーストのスクリーン印刷のプロセスによって形成できる。また、導電ネットワーク５０９を、金属または金属化フィルムにパターンを定めるためのフォトリソグラフィ、グラビア印刷、レーザ・アブレーション、レーザ・エッチングのプロセスによって形成することも可能である。金属または金属化フィルムは、スパッタ、電気めっき、または圧延によって形成可能である。
【０４３５】
導電ネットワーク５０９は、マイクロ流体ネットワーク５０８内の流体に接触するように意図された電極を、メータ４００内の検出器および／またはプロセッサに接続する１つ以上の独立した導電路を含むことができる。電極を、アッセイ装置５００へと加えられたサンプルについて、対象の物質またはパラメータを測定するために使用することができる。対象の物質として、例えばＮＴ−ｐｒｏＢＮＰなど、心臓の状態を表わすバイオマーカーを挙げることができる。対象のパラメータは、サンプル内の赤血球の割合であるヘマトクリット値であってよい。
【０４３６】
複合体５０１を得るための第１、第２、および第３の基板５０２、５０４、５０６の積層は、各層のそれぞれの互いの位置合わせを伴う。例えば、第１の基板５０２および第２の基板５０４が、第１の基板５０２に形成されたマイクロ流体ネットワーク５０８の外形が第２の基板５０４のマイクロ流体ネットワーク５０８の外形に整列するように、一緒に配置される。次いで、第３の基板５０６が、導電ネットワーク５０９（とくには、第１、第２、および第３の電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃ）が検出ゾーン５１６の上方に正確に整列するように第２の基板５０４の上へと配置される。図５が、アッセイ装置５００の上方からの平面図を表わしており、装置の種々の造作の空間的な位置を示している。マイクロ流体ネットワーク５０８が、一連の寸法パラメータ、すなわち長さｌ２、長さｌ３、長さｌ４、長さｌ５、長さｌ６、幅ｗ２、幅ｗ３、幅ｗ４、幅ｗ５、幅ｗ６、面積ａ１、距離ｄ１によって定められている。
【０４３７】
サンプル導入口５１０は、距離ｄ１および幅ｗ４によって定められる少なくとも約１．５７ｍｍ２（例えば、少なくとも約１ｍｍ２、少なくとも約１．２５ｍｍ２、少なくとも約１．７５ｍｍ２、少なくとも約２ｍｍ２）の面積ａ１を有している。幅ｗ４は、少なくとも約２．５ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）であり、距離ｄｌは、少なくとも約１．２４ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．１５ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ、少なくとも約７．５０ｍｍ、少なくとも約７．６５ｍｍ、約８．０ｍｍ未満、約７．９０ｍｍ未満、約７．８０ｍｍ未満）である。一典型的な実施形態においては、ｄ１が約７．７５ｍｍである。
【０４３８】
試薬ゾーン５１２は、長さｌ３および幅ｗ３の小部分と、毛管ストップ５３０を終端とする長さｌ２および幅ｗ２の主部分とを有している。長さｌ３は、少なくとも約２ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）であり、幅ｗ３は、少なくとも約０．４５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．１ｍｍ、少なくとも約０．２ｍｍ、少なくとも約０．３ｍｍ、少なくとも約０．４０ｍｍ、少なくとも約０．５ｍｍ、少なくとも約０．６ｍｍ）（例えば、約０．６０ｍｍ未満、約０．５５ｍｍ未満、約０．５０ｍｍ未満）である。
【０４３９】
インターフェース・ゾーン５２２は、長さｌ７および幅ｗ５を有しており、面取り５３４および毛管ストップ５３２を備えている。長さｌ７は、少なくとも約４．９ｍｍ（例えば、少なくとも約２．５ｍｍ、少なくとも約４ｍｍ、少なくとも約６ｍｍ）であり、幅ｗ５は、少なくとも約１１ｍｍ（例えば、少なくとも約６ｍｍ、少なくとも約８ｍｍ、少なくとも約９ｍｍ、少なくとも約１０ｍｍ、少なくとも約１２ｍｍ、少なくとも約１５ｍｍ、約２０ｍｍ未満）である。一典型的な実施形態においては、ｗ５が約１０．３７ｍｍである。インターフェース・ゾーン５２２については、図６を参照してさらに詳しく説明される。検出ゾーン５１４は、長さｌ４、長さｌ５、および幅ｗ６を有している。長さｌ４は、少なくとも約５３ｍｍ（例えば、少なくとも約３５ｍｍ、少なくとも約４０ｍｍ、少なくとも約４５ｍｍ、少なくとも約５５ｍｍ、少なくとも約６５ｍｍ）であり、長さｌ５は、少なくとも約１４．６ｍｍ（例えば、少なくとも約１０ｍｍ、少なくとも約２０ｍｍ、少なくとも約２５ｍｍ、少なくとも約３０ｍｍ）であり、幅ｗ６は、少なくとも約２．５ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）（例えば、約３．５０ｍｍ未満、約４ｍｍ未満、約６ｍｍ未満）である。
【０４４０】
長さｌ５は、毛管ストップ５３０から測定電極５１６ｗまでの距離を表わしている。長さｌ６は、バッファ導入口５２０から毛管ストップ５３０までの距離を表わしている。
【０４４１】
サンプルをアッセイ装置５００へと加える前に、マイクロ流体ネットワーク５０８が、例えば空気などの気体で満たされる。サンプルが適用ゾーン５１０へと加えられると、このサンプルが、例えば毛管力によって試薬ゾーン５１２へと引き込まれる。試薬ゾーン５１２内の気体が、液体が試薬ゾーン５１２へと進入して試薬ゾーン５１２を通って移動するにつれて、インターフェース・ゾーン５２２を経由して追い出される。前進する液体の前面に加わる背圧は、サンプル液体：気体のインターフェースを毛管チャネルに沿って前進させる毛管力に比べ、無視できる。したがって、サンプル液体：気体のインターフェースが、試薬ゾーンに沿ってさらに移動し、前方の気体を追い出し、さらなる流体がサンプル・ゾーン５１０から引き込まれる。試薬ゾーン５１２内の流体が毛管ストップ５３０に近付くにつれ、毛管ストップの各側の圧力の差が、液体の流れを停止させるために充分になる。
【０４４２】
毛管ストップ５３０は、液体の前面に加わる有効背圧が、毛管ストップの検出ゾーン５１４の側において、試薬ゾーン５１２の側よりも大きくなるように構成される。毛管ストップの試薬ゾーン５１２の側の駆動力が、毛管ストップの検出ゾーン５１４の側によってもたらされる背圧よりも小さい。流体が検出ゾーン５１４から毛管ストップに近付くとき、毛管ストップ５３０は、毛管圧力が毛管ストップの流体が近付いている側において最大であるため、試薬ゾーン５１２への流体の流れを妨げないであろう。一方で、流体が試薬ゾーン５１２から毛管ストップ５３０に近付くとき、サンプル：気体のインターフェースが、毛管ストップに形成される。
【０４４３】
検出ゾーン５１４は、第１の電極５１６ｗ、第２の電極５１６ｒ、および第３の電極５１６ｃを備えている。第１、第２、および第３の電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒは、端子５１８ｗ、５１８ｃ、５１８ｒに連絡している。端子５１８ｗ、５１８ｃ、５１８ｒは、図２に関して本明細書において説明されるとおり、メータ４００とやり取りをする。サンプルがアッセイ装置５００へと加えられらとき、バッファ溶液が、リザーバ５０７から検出ゾーン５１４へと導入される。いくつかの実施形態においては、バッファ溶液が、方法２１００の捕捉ステップ２１０２に関して上述したように、試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４がサンプルと相互作用して試薬と分析対象（例えば、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）との間の錯体を形成できる充分な時間期間の後でのみ、導入される。
【０４４４】
リザーバ５０７が、（図８に関してさらに詳しく説明されるとおり）プロセッサの制御のもとでリザーバ・アクチュエータ４０８によって加圧される。バッファが、マイクロ流体ネットワーク５０８への気泡の噛み込みの可能性を少なくする速度（例えば、少なくとも１μｌ／ｓ、少なくとも５μｌ／ｓ、少なくとも１０μｌ／ｓの流量）で、リザーバ５０７から駆動される。典型的な実施形態においては、バッファが、最初に、アッセイ装置５００のサンプルが加えられている方の端部とは反対側の端部から、検出ゾーン５１４を満たす。前進するバッファ：気体（例えば、空気）のインターフェースが、検出ゾーン５１４の縁の壁に沿って毛管ストップ５３０に向かって一様に移動する。検出ゾーン５１４に含まれている気体が、オーバーフローチャネル５２４内の通気孔５２６を通ってアッセイ装置５００から吐き出される。
【０４４５】
インターフェース・ゾーン５２２が、毛管ストップ５３０、面取り５３４、および毛管ストップ５３２を備えている。面取り５３４および毛管ストップ５３２が、インターフェース・ゾーン５２２を通過するバッファの制御された移動を可能にする。前進するバッファ：気体のインターフェースがインターフェース・ゾーン５２２に達するとき、毛管ストップ５３２が、マイクロ流体ネットワーク５０８の１つの縁の壁に沿って、前進するバッファの前面の移動を遅くする。ストップ５３２の反対側のバッファは、前進を続け、ストップ５３２を中心にして枢動する。このようにして、毛管ストップ５３２が、バッファ：気体のインターフェースを、毛管ストップ５３２が位置している角を中心にして操舵するように作用する。したがって、前進するバッファ：気体のインターフェースが、面取り５３４を下って移動し、マイクロ流体ネットワーク５０８の毛管ストップ５３０が形成されている縁に沿って移動する。バッファが、毛管ストップ５３０に保持されているサンプル：気体のインターフェースを横方向に横切って移動し、サンプル：バッファ（例えば、液体：液体）のインターフェースを形成する。サンプル：バッファのインターフェースが、インターフェースにおける気泡の滞留が最小になるようなやり方で形成される。ひとたびサンプル：バッファのインターフェースが形成されると、余分なバッファは、オーバーフロー５２４へと移動して通気孔５２６に達する。
【０４４６】
試薬ゾーン５１２のサンプルとインターフェース・ゾーン５２２のバッファとの間の気泡のない液体：液体のインターフェースの形成が、インターフェース・ゾーン５２２の拡大斜視図を示している図６に関して説明されるとおりのインターフェースの設計によって達成される。図６は、液体サンプルとバッファとの間の安定したインターフェースの形成を可能にするインターフェース・ゾーン５２２の種々の態様を示している。
【０４４７】
図６を参照すると、図の左手側において、試薬ゾーン５１２が、幅ｗ２および高さｈ１を有し、毛管ストップ５３０を終端としている。試薬ゾーン５１２は、試薬ゾーン５１２からインターフェース・ゾーン５２２への変わり目を形成する開口を呈している縁５２８を有している。縁５２８は、曲率半径を無視することができる矩形の外形（例えば、２つの縁の間の角度が、典型的には９０度に近い）を有している。縁５２８は、液体サンプルが毛管ストップ５３０を破る可能性を無視できるように充分に明瞭に定められている。したがって、液体サンプルが、インターフェースを横切って気体で満たされているインターフェース・ゾーン５２２に進入することがない。
【０４４８】
インターフェース・ゾーン５２２は、少なくとも約０．４５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．２ｍｍ、少なくとも約０．３ｍｍ、少なくとも約０．３５ｍｍ、少なくとも約０．４０ｍｍ、少なくとも約０．５ｍｍ、少なくとも約０．７５ｍｍ）の高さｈ２を有している。一典型的な実施形態においては、ｈ２が約０．４５ｍｍである。インターフェース・ゾーン５２２は、幅ｗ５を有している。角５３６は、試薬ゾーン５１２の液体が縁５２８を破ってインターフェース・ゾーン５２２に進入する可能性を少なくするため、高さｈ１およびｈ２の間に明確かつはっきりとした分離が存在するよう、試薬ゾーン５１２の長手方向の中心線から少なくとも約３ｍｍ（例えば、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約４．５ｍｍ）である。面取り５３４が、検出ゾーン５１４の高さｈ３とオーバーフローチャネル５２４へとつながるインターフェース・ゾーン５２２の高さｈ２との間に、滑らかな変わり目をもたらしている。検出ゾーン５１４は、少なくとも約０．２５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．１ｍｍ、少なくとも約０．１５ｍｍ、少なくとも約０．２ｍｍ、少なくとも約０．４ｍｍ、少なくとも約０．５ｍｍ）（例えば、約０．３０ｍｍ未満、約０．３５ｍｍ未満、約０．４０ｍｍ未満）の高さｈ３を有している。一典型的な実施形態においては、ｈ３が約０．２５ｍｍである。バッファが検出ゾーン５１４からインターフェース・ゾーン５２２に近付く（図の右から左へと流れる）とき、バッファ：気体のインターフェースが、毛管ストップ５３２に接触する。
【０４４９】
次に、図６の線Ａ−Ａ’を通る断面図を示しており、インターフェース・ゾーン５２２の外形を表わしている図７を参照する。図７は、試薬ゾーン５１２、インターフェース・ゾーン５２２、および検出ゾーン５１４からの変わり目におけるマイクロ流体ネットワーク５０８のそれぞれの高さｈ１、ｈ２、ｈ３を示している。液体は、試薬ゾーン５１２に沿って方向Ｘにマイクロ流体ネットワーク５０８へと移動するとき、毛管ストップ５３０の縁５２８に近付く。高さｈ２と比べた高さｈ１の相違は、試薬ゾーン５１２における毛管力がインターフェース・ゾーン５２２における毛管力と異なるような相違である。インターフェース・ゾーン５２２によって方向Ｙにもたらされる毛管圧力が、試薬ゾーン５１２によって方向Ｘにもたらされる毛管力よりも大きい。したがって、サンプル液体が毛管ストップ５３０の縁５２８に接近および到達すると、サンプルの流れが停止し、液体：気体のインターフェースが形成される。その結果、液体：気体のメニスカスが、試薬ゾーン５１２に収容されている液体の体積の一方の端壁を定める。このように、毛管ストップ５３０の効果によって、液体サンプルが試薬ゾーン５１２内に封じ込められる。本明細書においてすでに説明したように、チャネル内の液体の流れを制御する他の手段も存在する。そのような一例は、疎水パッチの使用であり、そのような疎水パッチを、毛管チャネルの壁を巡るリングとして設けることができる。疎水性材料の特性は、液体が疎水パッチのリングに接近するとき、液体が毛管ストップ５３０とほぼ同じやり方で減速されるような特性である。疎水リングが、毛管ストップ５３０がもたらす力と同等のＹ方向の力をもたらす。
【０４５０】
次に、アッセイ装置５００の長手方向の断面を示しており、図７の断面を含んでいる図８を参照する。図８は、流体リザーバ５０７、バッファ導入口５２０、検出ゾーン５１４、インターフェース・ゾーン５２２、試薬ゾーン５１２、およびサンプル導入口５１０を含んでいる。さらに図８は、リザーバ駆動子４０８を示している。リザーバ駆動子４０８が、定義された速度でメータ４００のプロセッサの制御のもとで流体リザーバ５０７に向かって付勢され、流体が流体リザーバ５０７からバッファ導入口５２０を通って放出され、バッファが検出ゾーン５１４に入る。
【０４５１】
ユーザがアッセイ装置５００をメータ４００へと正しく挿入すると、プロセッサが、測定サイクルを実行すべく作動する。プロセッサが、測定に関する情報を、インターフェース４０６に表示させる。情報は、サンプルをアッセイ装置５００へと適用するようにとの促しを含んでいる。サンプルがアッセイ装置５００へと適用されると、検出器が、試薬ゾーン５１２のサンプルの存在を検出し、プロセッサへとフィードバックをもたらす。次いで、プロセッサが、リザーバ・アクチュエータ４０８を作動させる。試薬ゾーン５１２のサンプルの存在が検出されてから所定の時間間隔の後に、リザーバ駆動子４０８が、リザーバ５０７に向かって付勢され、リザーバ５０７に接触する。リザーバ５０７との最初の接触の後で、リザーバ駆動子４０８は、さらにリザーバ５０７へと付勢され続ける。リザーバ駆動子４０８がリザーバ５０７に圧力を加え、結果として、リザーバ５０７がバッファ導入口５２０に押し付けられる。バッファ導入口５２０は、リザーバ５０７に向かって突き出す鋭い部材を有している。メータ４００への挿入まで、リザーバ５０７を、リザーバが時期尚早に破られて流体が意図せずにリザーバから放出されることがないようにする着脱式のカバーで保護することができる。その場合、ユーザが、アッセイ装置５００をメータ４００へと挿入する前に、最初に保護カバーを取り除く。いくつかの例では、アッセイ装置５００に保護カバーを備えなくてもよく、他の場合には、保護カバーを、アッセイ装置５００をメータ４００へと挿入する前に取り除かなくてもよい。
【０４５２】
プロセッサ４１４の制御のもとでリザーバ５０７へと向かうリザーバ駆動子４０８の動きは、最初にリザーバ５０７が破られて内部に収容されている流体が解放された後で、流体が制御された所定の流量にてバッファ導入口５２０を通って検出ゾーンへと送達されるような速度で生じる。典型的な実施形態においては、バッファが、約０．５ｍＬ／ｍｉｎ（例えば、少なくとも約０．１ｍＬ／ｍｉｎ、少なくとも約０．３ｍＬ／ｍｉｎ、約０．７ｍＬ／ｍｉｎ以下、約０．９ｍＬ／ｍｉｎ以下）の流量でマイクロ流体ネットワークを通って移動する。流体が、メニスカスが毛管ストップ５３２に達するまでインターフェース・ゾーン５２２に向かって送られる。その後、流体の前部が、毛管ストップ５３２を中心にして回転させられる。リザーバ駆動子がプロセッサの制御のもとでリザーバ５０７へとさらに付勢されるため、メニスカスは、インターフェース・ゾーン５２２の毛管ストップ５３２とは反対側の縁の壁の周囲において、さらに押され続ける。前進する流体の前部がひとたび試薬ゾーン５１２の端部を横切って移動すると、試薬ゾーン５１２の液体とリザーバ５０７から押し込まれた流体との間のインターフェースが形成され、さらに流体は、通気孔５２６に向かってオーバーフローチャネル５２４へと駆動される。
【０４５３】
図３０〜３９を参照すると、アッセイ装置の典型的な実施形態が示されている。組み立てられた装置が、図３８Ｊに示されている。アッセイ装置は、上述のとおり厚さｔ１を有している薄くて細長いストリップの形態である。図３８Ｉを参照すると、アッセイ装置は、チャネルのネットワーク５０８が形成されているマイクロ流体装置である。装置は、ポリカーボネートなどのプラスチック基板から形成することができるベース５０２を有している。チャネル・ネットワーク５０８を、（上述のとおり）成型、レーザ・アブレーション、または基板の圧延など、当業者にとって周知の技法によって形成することができる。
【０４５４】
装置は、（図４、３０〜３４、３６、および３９に示されているとおり）複数の層で構成される積層構造を有している。マイクロ流体ネットワーク５０８が、上述のとおり第１の基板層５０２が接着片を備える第２の基板層５０４によって第３の基板層５０６へと接合されている３つの層の積層によって定められている。図３０〜３４、３６、および３９を参照すると、典型的な実施形態においては、さらなる接着片３５０１が、第３の基板層５０６を包装部品３５０２と接合し、５つの層を積層してなる装置を形成している。包装部品は、メータ４００の磁石２８０３を第３の基板層５０６の外表面の近傍に配置できるように構成されたＵ字形の切り抜き部３５１１を有している。
【０４５５】
第１の基板層５０２は、液体導入口５２０を中心付近に有している高くされた環３５１０と、導入口または導入口の付近に配置された鋭い突起３５０６とをさらに備えている。Ｏリング・シール３５０４が、環へと据えられ、液体を含んでいるリザーバ５０７（上述のとおり）が、環に収容され、環の壁が、鋭い部材または突起３５０６（上述のとおり）に隣接して位置している。
【０４５６】
図４４を参照すると、鋭い突起３５０６を、金属（例えば、鋼）またはプラスチック材料で製作できる。突起３５０６は、Ｃ字形の断面４９０２を有するベース部から突起の尖った部分を形成している先端へと延びるただ１つの湾曲した壁を有することができる。この壁を、リザーバ５０７を容易に破る切断縁をもたらすために、先端４９０１に出会う斜めの縁をもたらすように面取りすることができる。装置５００の組み立ての際に、突起３５０６が、高くされた環３５１０によって定められる空間の中央へと突き出し、環へと収容されたときのリザーバ５０７のベース壁に向かうように、液体導入口５２０を通って挿入される。突起３５０６の湾曲した壁が、破られたリザーバ５０７から液体導入口５２０を通って第２のチャネル部４３０４へと入る液体のための流路を形成する部分筒構造を定める。
【０４５７】
図４３を参照すると、一典型的な実施形態においては、鋭い突起が、環状のインサート４８０１の一部を形成している。インサート４８０１は、薄い円柱形の本体を有しており、本体の周囲を巡ってＯリング・シールまたはガスケットが延びている。突起３５０６が、インサート４８０１の平坦な表面の一方に形成され、開口４８０３に隣接して位置している。開口４８０３が、一方の平坦な表面から反対側の平坦な表面までインサートを貫き、例えばインサートのほぼ中央を貫いて延びており、リザーバ５０７から液体導入口５２０を通って第２のチャネル部４３０４へと入る液体のための流路を定めている。突起３５０６の湾曲した壁が、突起３５０６の先端４９０１の位置が開口の中心からずれるよう、開口の外周の弧状の線に沿っており、突起の湾曲した壁が、開口へと液体の流れを案内するためのガイドを形成している。
【０４５８】
インサート４８０１を、第１の基板層５０２の環３５１０において、第１の基板層５０２に形成された対応するサイズの開口に配置することができる。Ｏリング・シール４８０２が、液体または気体が第２のチャネル部４３０４から失われることがないように、第１の基板層５０２との気密のシールを提供する。
【０４５９】
典型的な実施形態においては、リザーバ５０７が、アッセイ装置５００の鋭い突起３５０６（例えば、針）によって破ることができる壁（例えば、ベース壁）を有している袋である。一典型的な実施形態においては、リザーバ５０７の壁が、袋の内容積に向かう方向に延びるくぼみであって、鋭い突起に整列するように構成されているくぼみを形成する凹部を有することができる。他の典型的な実施形態においては、ベース壁が、おおむね平坦または凸状であってよいおおむね平滑な外表面を有している。
【０４６０】
例えば約４００〜６００μｍの厚さであって、鋭い突起３５０６の基部の直径に対応する内径（例えば、約１ｍｍ）を有しているシールまたはガスケット（例えば、Ｏリング・シール）を、鋭い突起３５０６の周囲に配置することができ、これにより、リザーバ５０７がアッセイ装置および鋭い突起３５０６に向かって押し付けられたときに、リザーバとアッセイ装置との間に気密なシールが形成されて、導入口５２０を介するアッセイ装置への空気の進入が防止され、したがって第２のチャネル部４３０４の液体が実質的に空気または他の気泡を含むことがない。いくつかの典型的な実施形態においては、リザーバ５０７がプラスチック材料で製作されて、液体（例えば、バッファ液）を収容する袋、バッグ、または小袋を形成すべく封じられる。リザーバ５０７を、第１および第２のプラスチック材料から製作してもよく、一方のプラスチック材料が他方よりも柔らかく、柔らかい方のプラスチック材料が、アッセイ装置５００の鋭い突起３５０６によって破られるように構成された壁の少なくとも一部を形成することができる。柔らかい方のプラスチック材料は、約３０（例えば、約２８、約２９、約３１、約３２）のショア硬さを有することができる。リザーバ５０７は、少なくとも約１５０μｌ（例えば、少なくとも約１６０μｌ、少なくとも約１７０μｌ、少なくとも約１８０μｌ）かつ約３００μｌ未満（例えば、約２９０μｌ未満、約２８０μｌ未満、約２７０μｌ未満、約２６０μｌ未満、約２５０μｌ未満）の体積を有することができる。一典型的な実施形態においては、リザーバ５０７が、約１８０μｌの体積を有している。別の典型的な実施形態においては、リザーバ５０７が、約２５０μｌの体積を有している。
【０４６１】
図３１を参照すると、第１の基板層５０２が、ピン３５０７ならびに高くされたフィン３５０８および３５０９をもたらすように形作られている。フィン３５０８および３５０９が、（後述のとおり）メータ４００における装置５００の位置決めおよび固定を提供する。
【０４６２】
図３５を参照すると、装置５００の上側の主たる面を形成する第１の基板層５０２の平面図が示されており、高くされた環３５１０、高くされたフィン３５０８、３５０９、ならびに位置決めピン３５０７が示されている。第１の基板層５０２は、装置の一方の短辺に端子５１８ｗ、５１８ｃ、５１８ｒを露出させるように形作られている。これらの端子の露出は、メータ４００の対応する電位接点とのやり取りをもたらす。第３の基板層５０６も、導入口５１０において第１の基板層５０２を超えて露出されている。導入口５１０が、第１の基板層５０２の三角形の切り欠き部によって形成されている。第３の基板層５０６は、対応する切り欠き部を有しておらず、導入口５１０に液体サンプルを堆積することができる支持面（ここから、液体サンプルが第１のチャネル部（図３５には示されていない）へと進入できる）を形成すべく重なり合っている。アッセイ装置が血液サンプルについて使用される典型的な実施形態においては、導入口５１０を形成している第３の基板層の重なり合いの部分を、導入口５１０における血液サンプルの凝固を防止または軽減するために、例えばヘパリンなどの抗凝血の試薬でコートすることができる。
【０４６３】
装置の一方の長辺４００１に、メータ４００の対応するセンサ（例えば、フォトセンサ、バーコード読み取り器）によって読み取られる符号（例えば、バーコード）を印する（例えば、印刷によって）ことができる。この符号は、装置を説明する情報を持つことができ、そのような情報として、装置のバッチ番号、装置に含まれている試薬の種類および量、アッセイの種類、較正特性のうちの１つ以上を挙げることができる。この情報を、メータ４００によって読み取り、ユーザへと表示できるアッセイ結果を生成するために、検出された信号を評価するために使用することができる。
【０４６４】
図３５を参照すると、さらに基板層を、メータ４００（例えば、メータ４００の固定部材２９０２）に係合するように構成された装置の１つ以上の辺に切り欠き部を形成するように構成することができる。
【０４６５】
図３８Ｉを参照すると、装置は、ストリップの一端に導入口５１０を有しており、導入口５１０が、導入口において受け取られたサンプル液体がチャネル・ネットワーク５０８に進入できるように、チャネル・ネットワーク５０８へと接続されている。チャネル・ネットワーク５０８は、試薬ゾーン５１２を形成する第１のチャネル部４３０２を有している。典型的な実施形態においては、第１のチャネル部４３０２が、導入口５１０へと直接に接続されている。他の典型的な実施形態においては、導入チャネル４３０３が、導入口５１０および第１のチャネル部４３０２を接続している。
【０４６６】
導入チャネル４３０３は、導入チャネル４３０３の幅および／または高さがより小さいがため、第１のチャネル部４３０２よりも小さな断面積を有している。導入チャネルは、幅ｗ３および長さｄｌを有している（上述のとおり）。導入チャネルを、例えば毛管作用によって導入口５１０から第１のチャネル部４３０２への液体サンプルの引き込みを促進するように構成することができる。導入チャネル４３０３は、例えば導入口５１０に堆積された液体サンプルが少量である場合に、第１のチャネル部４３０３の完全な充填を促進する。
【０４６７】
第１のチャネル部４３０２は、ジャンクション４３０５において第２のチャネル部４３０４へと接続されている。典型的な実施形態においては、ジャンクションの平面が、第２のチャネル部の主たる長手軸に対して実質的に直角である。第１および第２のチャネル部は、共通の長手軸を有することができる。
【０４６８】
導入チャネル４３０３は、チャネル内に堆積され、あるいはチャネルの壁の１つ以上をコーティングする或る量の凝固剤を有することができる。凝固剤は、導入される血液サンプルにすぐには反応せず、血液の流れの第１のチャネル部４３０２への通過を許すが、或る時間期間（例えば、少なくとも約５秒、少なくとも約１０秒、少なくとも約２０秒、少なくとも約３０秒、少なくとも約１分）の後に導入チャネル４３０３において静止している血液と反応し、導入チャネル４３０３において血液を凝固させるが、第１のチャネル部４３０２の血液の実質的にすべてに対しては影響を及ぼさない。導入チャネル４３０３において凝固した血液が、例えば血液：液体のインターフェースの形成時に第２の液体と接触するときに、ジャンクション４３０５において血液サンプルへと加わりうる背圧（血液を第１のチャネル部４３０２から導入口５１０に向かって押し戻すように作用しうる）に抗するように作用する。
【０４６９】
第１のチャネル部４３０２は、通常は断面が矩形であるが、例えば円形など、別の断面形状を有してもよい。ジャンクション４３０５において、第１のチャネル部４３０２は、ジャンクション４３０５における第２のチャネル部４３０４の断面積Ａ２よりも小さい断面積Ａ１を有している。ジャンクション４３０５において第１および第２のチャネル部の断面積が異なることで、上述のとおり毛管ストップ５３０がもたらされる。導入口５１０に堆積された液体サンプルが、第１のチャネル部４３０２へと（例えば、毛管作用によって）流れ込み、毛管ストップ５３０に達すると、液体サンプルのメニスカスが、第２のチャネル部に含まれている空気と液体サンプル：空気のインターフェースを形成する。このインターフェースは、ジャンクション４３０５の近傍に位置する。
【０４７０】
毛管ストップは、ジャンクション４３０５における第１および第２のチャネル部の間の毛管圧力の差によって形成される。この差を、チャネルの寸法の変化によってもたらすことができる。この典型的な実施形態においては、第１のチャネル部の高さｈ１が、ジャンクションにおいて、第２のチャネル部の高さｈ２へと増やされており、第１のチャネル部の幅ｗ２が、ジャンクションにおいて第２のチャネル部の幅ｗ５へと増やされている。
【０４７１】
断面積Ａ１は、少なくとも約０．３７５ｍｍ２（例えば、少なくとも約０．１ｍｍ２、少なくとも約０．２ｍｍ２、少なくとも約０．３ｍｍ２、約０．４ｍｍ２未満、約０．６ｍｍ２未満、約０．８ｍｍ２未満、約１．０ｍｍ２未満）であり、Ａ２は、およそ４．６７ｍｍ２（例えば、少なくとも約４ｍｍ２、少なくとも約３．５ｍｍ２、少なくとも約３ｍｍ２、少なくとも約２ｍｍ２、約６ｍｍ２未満、約５ｍｍ２未満、約４．５ｍｍ２未満）である。Ａ１：Ａ２の比は、およそ１：１２（例えば、少なくとも約１：２、少なくとも約１：３、少なくとも約１：４、少なくとも約１：５、少なくとも約１：７、少なくとも約１：９、少なくとも約１：１０、少なくとも約１：１２、約１：１５未満、約１：２０未満）である。液体サンプル：気体および／または液体サンプル：液体のインターフェースは、実質的に面積Ａ１と同じ断面積Ａ３を有するが、わずかに小さくても、あるいはわずかに大きくてもよく、例えばＡ３を、少なくとも約０．１ｍｍ２、少なくとも約０．２ｍｍ２、少なくとも約０．３ｍｍ２、約０．４ｍｍ２未満、約０．６ｍｍ２未満、約０．８ｍｍ２未満、約１．０ｍｍ２未満のうちの１つから選択することができる。
【０４７２】
また、毛管ストップを、ジャンクション４３０５の第２のチャネル部４３０４に第１のチャネル部と比べた高さのみの増加または幅のみの増加（やはり、第１のチャネル部から第２のチャネル部へと移動する場合のジャンクション４３０５における断面積の増加をもたらす）を設けることによって、ジャンクション４３０５またはジャンクション４３０５の近傍に設けることができる。
【０４７３】
ｗ２：ｗ５の比は、約１：４（例えば、少なくとも約１：２、少なくとも約１：３、少なくとも約１：５、約１：６未満）である。ｈ１：ｈ２の比は、約１：３（例えば、少なくとも約１：２、少なくとも約１：４、少なくとも約１：５、約１：６未満）である。
【０４７４】
図４５および４６を参照すると、高さｈ（ｍｍ）および幅ｂ（ｍｍ）を有する矩形の断面のチャネルについて、毛管圧力ｐｃａｐ（ｍｂａｒ）は、式
【数１】
0003157523.tif 000002
によって計算される。
【０４７５】
毛管ストップを、チャネルの寸法に変化を導入することによって達成することができる。図４６を参照すると、「流れの停止」の計算が、第１の高さおよび幅のチャネルが第２の高さおよび幅のチャネルになるように変化させられるときの毛管ストップ圧力ｐｃａｐｓｔｏｐ（ｍａｂｒ）を示しており、式
【数２】
0003157523.tif 000003
によって計算され、ここでσ＝表面張力（Ｎ／ｍ）およびα＝接触角（度）である。
【０４７６】
図４６を参照すると、第１のチャネル高さｈの第２のチャネル高さＨ（ここで、Ｈ＞ｈ）に対する比ｈ：Ｈが、約１：２〜約１：３（例えば、約１：１．７、約１：１．８、約１：１．９、約１：２、約１：２．５、約１：３、約１：４）であれば、チャネルのジャンクションにおいて毛管ストップを達成するために充分である。同様に、第１のチャネル幅ｂの第２のチャネル幅Ｂ（ここで、Ｂ＞ｂ）に対する比ｂ：Ｂが、約１：２〜約１：３（例えば、約１：１．７、約１：１．８、約１：１．９、約１：２、約１：２．５、約１：３、約１：４）であれば、チャネルのジャンクションにおいて毛管ストップを達成するために充分である。毛管ストップを、チャネルのジャンクションにおいてチャネルの高さおよび幅の両者を増加させることによって、すなわち断面積を第１のチャネルにおけるＡ１から第２のチャネルにおけるＡ２へと増加させる（すなわち、Ａ１＜Ａ２）ことによって、達成することができる。チャネルのジャンクションにおいて毛管ストップを達成するために充分なＡ１：Ａ２の比は、少なくとも約１：２（例えば、約１：２、約１：２．５、約１：３、約１：４、少なくとも約１：３、少なくとも約１：４、少なくとも約１：５）である。
【０４７７】
他の典型的な実施形態においては、毛管ストップが、上述のとおり疎水パッチまたは疎水リングをジャンクションの近傍の第１のチャネル部に適用することによってもたらされる。
【０４７８】
第１のチャネル部４３０２は、おおむね矩形の断面を有しており、幅ｗ２を有している。第１のチャネル部は、長さｌ２および高さｈ１を有している。第１のチャネル部は、約５μｌ（例えば、少なくとも約１μｌ、少なくとも約２μｌ、少なくとも約３μｌ、少なくとも約４μｌ、約２０μｌ未満、約１５μｌ未満、約１０μｌ未満、約１０μｌ、約２０μｌ）の体積を有している。
【０４７９】
液体サンプル：液体のインターフェースの断面積（ｍｍ２）またはジャンクション４３０５の断面積（ｍｍ２）の第１のチャネル部の体積（μｌ）に対する比は、約１：１３（例えば、少なくとも約１：１、少なくとも約１：３、少なくとも約１：５、少なくとも約１：７、少なくとも約１：９、少なくとも約１：１１、約１：１９未満、約１：１７未満、約１：１５未満）である。
【０４８０】
第１のチャネル部４３０２は、「開放」チャネルであってよく、すなわちチャネルが、液体で一杯であるときの第１のチャネル部の液体の体積（例えば矩形または円形など、第１のチャネル部４３０２の断面形状を考慮する）が、第１のチャネル部４３０２の幅、高さ、および長さによって定められる体積空間と実質的に同じであるように、中央のチャネル空間（試薬を含むことができる）を定める壁によって境界付けられ、それ以外は始めから終わりまで流体の流れのために開いている。
【０４８１】
図４２を参照すると、一典型的な実施形態においては、第１のチャネル部を、第１のチャネル部４３０２に形成された複数の柱４７０１によって部分的に妨げることができる。柱４７０１を、例えばレーザ・アブレーションによって第１の基板５０２の材料から形成することができ、あるいは導入口５１０およびジャンクション４３０５を接続する液体の流路を有する第１のチャネル部４３０２を、第１のチャネル部４３０２内の基板の柱部分を手つかずに保ちつつ形成するように、基板の各部を成型することによって形成することができる。妨げは、壁または柱の形態であってよく、導入口５１０とジャンクション４３０５との間の液体の流路が保たれる限りにおいて、第１のチャネル部４３０２の全高または全幅にわたって延びることができ、あるいは第１のチャネル部４３０２の高さまたは幅の一部について延びてもよい。壁または柱は、任意の形状または設計であってよい。図４２を参照すると、柱４７０１が、第１のチャネル部４３０２に進入する液体サンプルの流れを乱して、液体サンプルの第１のチャネル部４３０２に含まれている試薬との混合を促進するように作用する。
【０４８２】
第２のチャネル部４３０４は、おおむね矩形の断面を有している。ジャンクション４３０５から離れて、第２のチャネル部は、上述のように幅ｗ６および高さｈ３を有している。第２のチャネル部は、ジャンクション４３０５から液体導入口５２０に向かって約５０ｍｍ（例えば、少なくとも約２０ｍｍ、少なくとも約３０ｍｍ、少なくとも約４０ｍｍ、約６０ｍｍ未満、約７０ｍｍ未満、約８０ｍｍ未満）の長さ（ｌ４）にわたって延びており、約５５μｌ（例えば、少なくとも約４０μｌ、少なくとも約４５μｌ、少なくとも約５０μｌ、約６０μｌ未満、約６５μｌ未満、約７０μｌ未満）の体積を有している。
【０４８３】
図３８Ｅを参照すると、ジャンクション４３０５に隣接し、第２のチャネル部４３０４は、第２のチャネル部に沿って液体導入口５２０からジャンクション４３０５に向かって移動するときに第２のチャネル部４３０４の幅および高さが増加する先細りのネック領域４３０６を有している。先細りのネック領域４３０６は、第２のチャネル部の幅を、ジャンクション４３０５の遠方の幅ｗ６からジャンクション４３０５における幅ｗ５へと増加させ、第２のチャネル部の高さを、ジャンクション４３０５の遠方の高さｈ３からジャンクション４３０５における高さｈ２へと増加させている。
【０４８４】
図３８Ｅを参照すると、第２のチャネル部の先細りのネック領域４３０６は、第２のチャネル部４３０４によって定められる流路が、実質的にジャンクション４３０５に向かう方向から実質的にジャンクション４３０５を横切る方向へと変化する曲げ部をさらに備えている。曲げ部は、第２のチャネル部４３０４の内側壁４３０７および外側壁４３０８によって形成されている。外側壁４３０８は、角５３６を含んでおり、内側壁４３０７は、ジャンクション４３０５へと向かう液体の流れを遅らせるための手段５３２を有している。手段５３２は、毛管ストップであってよい。さらに、外側壁４３０８は、少なくとも部分的に、第１および第２のチャネル部のジャンクション４３０５を含んでいる。
【０４８５】
角５３６と毛管ストップ５３２との間において、第２のチャネル部の底部は、第２のチャネル部４３０４の領域４３０９（ジャンクション４３０５から遠く、高さｈ３を有している）を第２のチャネル部４３０４の領域４３１０（ジャンクション４３０５に近接し、高さｈ２（ここで、ｈ２＞ｈ３）を有している）に接続する傾斜または面取り５３４を有している。傾斜５３４は、毛管ストップ５３２の付近の領域から反対側のチャネルの壁および角５３６に向かって、第２のチャネル部を斜めに横切って広がっている。傾斜５３４の上縁は、曲げ部の内側壁４３０７に位置する毛管ストップ５３２の付近の領域から、ジャンクション４３０５に向かって前方へと斜めに、第２のチャネル部４３０４を横切って延びている。斜面５３４の上縁は、毛管ストップ５３２の付近の領域から、ジャンクション４３０５および第２のチャネル部のより大きな幅を有している領域に向かって、斜め前方へと延びている。第２のチャネル部４３０４の高さｈ２を有している領域４３１０に接している傾斜５３４の下縁は、ジャンクション４３０５の平面と約３６°（例えば、少なくとも約２５°、少なくとも約３０°、少なくとも約３５°、約４５°未満、約４０°未満）の角度を形成している。したがって、ジャンクションに向かって第２のチャネル部を横切る傾斜の斜めの方向を、第２のチャネル部４３０４の主たる幅ｗ２から約５４°（例えば、少なくとも約６５°、少なくとも約６０°、少なくとも約５５°、約４５°未満、約５０°未満）の斜めの傾きと記述することもでき、ここで、主たる幅ｗ２は、ジャンクション４３０５に向かって延びる第２のチャネル部４３０４の主たる長手軸に対して垂直である。
【０４８６】
（ジャンクション４３０５から遠い）傾斜５３４の上縁は、毛管ストップ５３２の領域においてジャンクションから最も遠く、ジャンクション４３０５が形成されている第２のチャネル部４３０４の壁から、第２のチャネル部の主たる長手軸に平行な線に沿う方向に約４．５ｍｍである。この距離ｄ２は、約４．５ｍｍ（例えば、少なくとも約３．５ｍｍ、少なくとも約４．０ｍｍ、約５．５ｍｍ未満、約５．０ｍｍ未満）である。（ジャンクション４３０５に近い）傾斜５３４の下縁について、ジャンクション４３０５が形成されている第２のチャネル部４３０２の壁から、第２のチャネル部４３０４の主たる長手軸に平行な線に沿う方向に最も遠い距離は、ｄ３と呼ばれ、約１．６ｍｍ（例えば、少なくとも約１．２ｍｍ、少なくとも約１．４ｍｍ、約２．０ｍｍ未満、約１．８ｍｍ未満）である。傾斜５３４の上縁から傾斜５３４の下縁までの最短距離は、ｄ４であり、約２．９ｍｍ（例えば、少なくとも約２．０ｍｍ、少なくとも約２．５ｍｍ、約３．０ｍｍ未満、約３．５ｍｍ未満、約４．０ｍｍ未満）である。
【０４８７】
傾斜５３４は、約８°（例えば、少なくとも約５°、約１５°未満、約２５°未満）の傾きの角度θ（図７に示されており、ジャンクション４３０５に隣接して高さｈ３を有している第２のチャネル部４３０４の底部からの傾斜５３４の傾きの角度である）を有している。
【０４８８】
傾斜５３４および毛管ストップ５３２が、液体導入口５２０からジャンクション４３０５に向かって第２のチャネル部４３０４を通過する液体の移動を制御する。液体導入口５２０からジャンクション４３０５に向かって第２のチャネル部４３０４を通過して移動する液体は、ジャンクション４３０５に向かって前進する液体：気体のインターフェースを形成している前進する液体メニスカスを有している。ジャンクション４３０５に達する前に、前進するメニスカスが毛管ストップ５３２に遭遇し、毛管ストップ５３２が、曲げ部の内側壁４３０７において、前進する液体メニスカスの移動を遅くする。このようにして、毛管ストップ５３２が、上述のとおり、液体：気体のインターフェースを、毛管ストップ５３２が位置している角を中心にして操舵するように作用する。したがって、前進する液体：気体のインターフェースが、面取り５３４を下って移動し、第１および第２のチャネル部のジャンクション４３０５の面を横切って移動する。
【０４８９】
液体サンプルが第１のチャネル部４３０２に含まれていて、ジャンクションに液体サンプル：空気のインターフェースを形成している場合、ジャンクション４３０５に向かって第２のチャネル部を通過してジャンクション４３０５の面を横切る液体の移動が、液体サンプル：空気のインターフェースから空気を追い出して、液体サンプルおよび第２のチャネル部に含まれている液体（例えば、バッファ液）のインターフェースを形成するように作用する。
【０４９０】
曲げ部、毛管ストップ５３２、および傾斜５３４の協働により、第２のチャネル部４３０４の液体の流れが、最初に曲げ部の外側壁４３０８を巡って角５３６を過ぎて、ジャンクション４３０５に向かって前進し、したがって液体の流れが、
ジャンクション４３０５が形成されている壁を横切るように案内される。これが、液体サンプル：空気のインターフェースから空気を押しのけて、液体サンプル：液体のインターフェースをインターフェースでの気泡の滞留を最小限に抑えて形成するように作用する。第２のチャネルを流れる過剰な液体は、オーバーフローチャネル５２４へと移動し、通気孔５２６に達する。
【０４９１】
このようにして、液体サンプル：液体のインターフェースが、第２のチャネル部４３０４の液体を液体サンプル：空気のインターフェースの面を横切るように流すことで、このインターフェースから空気を押しのけて液体サンプル：空気のインターフェースの面積を徐々に減少させ、最終的に空気を押しのけて液体サンプル：空気のインターフェースを液体サンプル：液体のインターフェースで置換することによって、ジャンクション４３０５に形成される。
【０４９２】
第２のチャネル部４３０４の流体が液体サンプル：空気のインターフェースを横切って流れる間、第１のチャネル部の液体サンプルは、実質的に動かぬように保持される。ひとたび液体サンプル：液体のインターフェースが形成され、第２のチャネル部４３０４およびオーバーフロー５２４の液体の流れが停止すると、液体サンプル：液体のインターフェースもやはり実質的に動かず、インターフェースを横切る液体の塊の移動は、いずれの方向にも生じない。
【０４９３】
典型的な実施形態においては、液体サンプル：液体のインターフェースを形成すべくアッセイ装置５００の第２のチャネル部へと導入される第２の液体の使用が、流動可能媒体を第２のチャネル部に封入することによって置き換えられる。液体サンプルを第１のチャネル部４３０２へと導入したとき、液体サンプル：流動可能媒体のインターフェースが、ジャンクション４３０５の近傍に形成される。次いで、別の実施形態に関して本明細書において説明されるとおり、磁気感受性粒子が、インターフェースを横切って流動可能媒体および作業電極へと磁気によって移動させられる。そのような実施形態においては、アッセイ装置５００にリザーバ５０７を組み込む必要がない。
【０４９４】
流動可能媒体は、液体であってよい。しかしながら、典型的な実施形態においては、流動可能媒体が、粘性液またはゲルである。例えば、ゲルは、アガロースまたはポリアクリルアミド・ゲルなどのマトリクスまたは電気泳動ゲル、あるいは他の架橋ポリマーであってよい。ゲルが、インターフェースとセンサ（例えば、作業電極５１６ｗ）との間に、磁気感受性粒子：第１の結合剤：分析対象の錯体がインターフェースからゲルを通ってセンサへと移動できるようにする連続的な流動可能媒体の経路をもたらさなければならない。ゲルは、センサにおいて分析対象を検出するために必要な基質（例えば、ＡＢＴＳおよびＨ２Ｏ２）をさらに含むことができる。
【０４９５】
第１のチャネル部４３０２は、試薬を含んでいる。試薬は、複数の磁気感受性粒子（例えば、少なくとも約５０、少なくとも約１００、少なくとも約１５０の磁気感受性粒子）、および分析対象に結合するように構成された第１の結合剤を含んでいる。第１の結合剤は、試薬に分析対象を含んでいる液体サンプルが触れたときに分析対象：第１の結合剤：磁気感受性粒子の錯体が形成されるよう、磁気感受性粒子にも結合するように構成されている。これらの錯体を、磁気によって液体サンプル：液体のインターフェースを通過して移動させることができる。
【０４９６】
一典型的な実施形態においては、試薬が、分析対象上の第１の結合剤とは異なる、空間的な位置（エピトープ）において分析対象に結合するように構成された第２の結合剤を含んでいる。第１および第２の結合剤の両者は、同時に分析対象の分子へと結合して「サンドイッチ」錯体を形成することができる。サンドイッチ錯体は、分析対象に結合した第１および第２の結合剤と、第１の結合剤に結合した磁気感受性粒子とを含むことができる。これらの錯体を、磁気によって液体サンプル：液体のインターフェースを通過して移動させることができる。
【０４９７】
第１または第２の結合剤は、検出可能なマーカーと共役できる。検出可能なマーカーは、例えば酵素ラベル、蛍光マーカー、放射性ラベルなど、任意の検出可能なラベルであってよい。酵素ラベルは、酵素の基質との相互作用の後に、例えば電気化学信号（電極における酸化または還元）など、検出可能な信号を提供または発生できる。蛍光マーカーは、光センサまたはシンチレーション・カウンタによって検出できる光信号（蛍光）をもたらすことができる。放射性ラベルは、電磁放射を検出することができるセンサによって検出することができる電磁信号をもたらすことができる。
【０４９８】
典型的な実施形態においては、第２の結合剤が、例えば西洋わさびペルオキシダーゼなどの酵素ラベルと共役する。第２の結合剤：酵素ラベルの共役が、例えば金コロイドゾル粒子などのコロイドゾル粒子へとさらに吸収される。コロイドゾル粒子は、約２０ｎｍまたは約４０ｎｍの直径を有することができる。
【０４９９】
磁気感受性粒子および第１の結合剤は、磁気感受性粒子および第１の結合剤の共役をもたらすために、相補的なリンカー（例えば、ビオチンおよびストレプトアビジンの一方）を組み込むように変性される。磁気感受性粒子および第１の結合剤を、あらかじめ共役させた形態で第１のチャネル部に堆積することができ、あるいは試薬が液体サンプル中で混ざり合うときに共役が形成されるよう、別個に堆積することができる。
【０５００】
図４１が、第１のチャネル部４３０２に堆積された試薬の典型的な実施形態を示している。試薬の堆積物が、第１の試薬の堆積物４６０１、第２の試薬の堆積物４６０２、および第３の試薬の堆積物４６０３を含んでいる。試薬は、上述のとおり乾燥して堆積させられている。個々の試薬の堆積物は、互いに離間している。典型的な実施形態においては、第１の試薬の堆積物４６０１が、ストレプトアビジンでコートされた磁気感受性粒子であり、第２の試薬の堆積物４６０２が、金コロイドゾル：第２の結合剤：酵素ラベルの共役であり、第３の試薬の堆積物４６０３が、ビオチン化した第１の結合剤である。
【０５０１】
第１のチャネル部４３０２は、複数の別個の試薬の堆積物を有しており、典型的な実施形態においては、試薬が、例えば第１の試薬が導入口５１０に最も近く堆積され、第２および第３の試薬がジャンクション４３０５に向かって堆積されるなど、所定の順序で堆積されている。第１および／または第２および／または第３の試薬の堆積物を、別の順序で作製することも可能である。さらなる第４および第５の試薬を堆積させてもよい。
【０５０２】
典型的な実施形態においては、第１および第２の結合剤が、選択されたターゲットへと、前記ターゲットについて約１００μＭ以下（例えば、約５０μＭ未満、約１０μＭ未満、約１μＭ未満、約１００ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、約１００ｐＭ未満、約１０ｐＭ未満）のＫｄを有する高い親和性にて特定的に結合できる分子である。第１および第２の結合剤を、抗体（単クローン性または多クローン性）、抗体フラグメント（例えば、ｓｃＦＶフラグメント）、抗体結合ドメイン、またはアプタマーからそれぞれ選択することができる。第１および第２の結合剤が、例えば抗体およびアプタマーなど、異なっていてもよい。
【０５０３】
典型的な実施形態においては、第１のチャネル部に収容された血液サンプルにおいて検出される分析対象は、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ（例えば、ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）である。第１および第２の結合剤が、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの異なるエピトープに結合する抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体である。第１の結合剤が、
・モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｃ４（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．，Ｉｎｔｅｌｌｉｇａｔｅ  ６ｔｈ  ｆｌｏｏｒ，Ｊｏｕｋａｈａｉｓｅｎｋａｔｕ  ６，２０５２０，Ｔｕｒｋｕ  Ｆｉｎｌａｎｄ；カタログ番号：４ＮＴ１）
であり、第２の結合剤が、
・モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．，Ｉｎｔｅｌｌｉｇａｔｅ  ６ｔｈ  ｆｌｏｏｒ，Ｊｏｕｋａｈａｉｓｅｎｋａｔｕ  ６，２０５２０，Ｔｕｒｋｕ  Ｆｉｎｌａｎｄ；カタログ番号：４ＮＴ１）、
・モノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ２９Ｄ１２（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．，Ｉｎｔｅｌｌｉｇａｔｅ  ６ｔｈ  ｆｌｏｏｒ，Ｊｏｕｋａｈａｉｓｅｎｋａｔｕ  ６，２０５２０，Ｔｕｒｋｕ  Ｆｉｎｌａｎｄ；カタログ番号：４ＮＴ１）
から選択される。
【０５０４】
第１の結合剤を、ストレプトアビジンでコートされた磁気感受性粒子との共役を促進するために、ビオチン化させることができる。第２の結合剤を、西洋わさびペルオキシダーゼならびに直径２０ｎｍまたは４０ｎｍの金コロイドゾル粒子に共役させることができる。
【０５０５】
他のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへの抗体が、例えばＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．（Ｉｎｔｅｌｌｉｇａｔｅ  ６ｔｈ  ｆｌｏｏｒ，Ｊｏｕｋａｈａｉｓｅｎｋａｔｕ  ６，２０５２０，Ｔｕｒｋｕ  Ｆｉｎｌａｎｄ）から入手可能な例えばモノクローナルマウス抗ヒトＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ５Ｂ６、７Ｂ５、１３Ｇ１２、１１Ｄ１、１６Ｅ６、１５Ｄ７、２４Ｅ１１、２８Ｆ８、１８Ｈ５、１６Ｆ３（カタログ番号：４ＮＴ１）など、公に入手可能である。
【０５０６】
図３０および３１を参照すると、第３の基板層５０６が、第２のチャネル部４３０４の液体に接するように構成された電極３６０１、５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒの形態のセンサである。電極は、上述のとおり一連の１つ以上の電極および端子を定める導電ネットワークによって形成されている。導電ネットワークは、マイクロ流体ネットワーク５０８内の流体に接するように意図された電極を、メータ４００内の検出器および／またはプロセッサに接続する１つ以上の独立した導電路を備えることができる。電極を、アッセイ装置５００へと適用されたサンプル中の対象の物質またはパラメータを測定するために使用することができる。
【０５０７】
導電ネットワークは、上述のように、電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒを端子５１８ｗ、５１８ｃ、５１８ｒへと接続して備えている。さらに、導電ネットワークは、オーバーフローチャネル５２４において装置に配置された電極３６０１を備えている。使用時、電極３６０１がオーバーフローへの液体の流れを検出でき、液体が電極に接することで検出可能な電気信号が生み出され、端子３６０２を介してメータ４００に連絡される。この信号は、液体サンプル：液体のインターフェースが形成された旨の知らせをもたらし、したがってこの信号を、ひとたび液体サンプル：液体のインターフェースが形成されたときに、メータ４００のアクチュエータ機構によるアクチュエータ４０８へのさらなる圧力の印加を防止して、第２のチャネル部４３０４の液体がさらに攪拌されることがないようにするために使用することができる。電極３６０１は、銀／塩化銀（Ａｇ／ＡｇＣｌ）電極であってよい。
【０５０８】
したがって、典型的な実施形態においては、メータが、液体サンプル：液体のインターフェースが形成されたかどうかを検出できる。電極３６０１が濡れていない場合、メータは、エラーメッセージを表示して、ユーザに再検査を支持することができる。同じ電極の濡れの原理を、第２のチャネル部が満たされたかどうかを確認するためにも使用することができる。すなわち、ある典型的な実施形態においては、メータ４００が、電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒのうちの１つ以上が濡れることで、バッファ袋５０７の破れを監視することができる。濡れが検出されない場合、メータは、エラーメッセージを表示して、ユーザに再検査を求めることができる。電極の濡れは、電位差の測定によって検出可能である。
【０５０９】
さらに、いくつかの典型的な実施形態においては、電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒを、磁気感受性粒子が作業電極に到着したことを確認して、電気化学信号の測定を開始させるために使用することができる。例えば、作業電極５１６ｗにおける電位差の測定を、磁気感受性粒子が作業電極５１６ｗに到達したことを示すために使用することができる。メータ４００は、ベースラインの測定を確立するために、磁気感受性粒子がインターフェースを横切って移動するよりも前に測定を開始することができ、磁気感受性粒子が到着するときに、ベースラインからの変化を検出することができる。例えば、磁石２８０３が作業電極５１６ｗに到達したときに電圧変化が測定されないならば、磁気感受性粒子が、インターフェースを横切って移動して作業電極５１６ｗに到達することに失敗しており、メータはエラーメッセージを表示することができる。同じ電圧変化を、例えば電圧変化が検出されてから約１分（例えば、少なくとも約５秒、少なくとも約１０秒、少なくとも約２０秒、少なくとも約３０秒、少なくとも約４０秒、少なくとも約５０秒、少なくとも約２分、少なくとも約３分、少なくとも約４分、少なくとも約５分、少なくとも約６分、少なくとも約７分、少なくとも約８分、少なくとも約９分、少なくとも約１０分、約１１分未満、約１２分未満、約１３分未満、約１４分未満、約１５分未満）のインキュベーション時間の後など、メータにいつ測定を開始するのかを知らせるために使用することもできる。また、電圧の追跡を、粒子が作業電極５１６ｗ上にあるのか、あるいは作業電極５１６ｗを過ぎてしまったのかを示すために使用することも可能である。
【０５１０】
図３１を参照すると、導電ネットワークは、第１のチャネル部４３０２に位置する電極（例えば、１対の電極）を形成する電路３６０３を備えることができる。これらの電極は、第１のチャネル部における導通または電気化学信号を検出することができる。液体サンプルが血液サンプルである場合には、それらを、血液サンプルのヘマトクリット値を測定するために使用することができる。検出されたヘマトクリット値を、アッセイ装置５００およびメータ４００によって実行された測定を補正および／または正規化して、アッセイ結果を生成するために使用することができる。
【０５１１】
電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒが、第２の液体の電気化学信号を検出できる電極セットを形成する。信号は、電気化学的な変化であってよい。典型的な実施形態においては、電気化学的な変化が、酵素による基質の酸化または還元である。酵素は、結合剤に共役した酵素ラベルであってよく、その場合、酵素ラベルが、磁気感受性粒子：分析対象：酵素ラベルの錯体の一部である。酵素基質は、第２のチャネル部に含まれる液体中に存在できる。
【０５１２】
典型的な実施形態においては、電極セット５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒが、第２のチャネル部４３０４に配置される。作業電極５１６ｗが、ジャンクション４３０５に最も近く配置され、ジャンクションから電極の中心線までの距離は、少なくとも約１５ｍｍ（例えば、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ、少なくとも約７ｍｍ、少なくとも約１０ｍｍ、少なくとも約１３ｍｍ、約２０ｍｍ未満、約２５ｍｍ未満）である。電極５１６ｗは、約１．６ｍｍ（例えば、少なくとも約１．０ｍｍ、少なくとも約１．３ｍｍ、約２．０ｍｍ未満、約１．８ｍｍ未満）の幅を有している。作業電極と参照電極５１６ｒとの間に、対向電極５１６ｃが位置している。作業電極および対向電極は、カーボンペーストから製作され、参照電極は、銀ペーストから製作されている。参照電極は、Ａｇ／ＡｇＣｌ参照電極であり、約１ｍｍ（例えば、少なくとも約０．６ｍｍ、少なくとも約０．８ｍｍ、約１．４ｍｍ未満、約１．２ｍｍ未満）の幅であり、ジャンクション４３０５から電極の中心線まで約２２．５ｍｍ（例えば、少なくとも約１５ｍｍ、少なくとも約１８ｍｍ、約２６ｍｍ未満、約３０ｍｍ未満）である。
【０５１３】
一典型的な実施形態においては、上述のとおり、酵素ラベルが、西洋わさびペルオキシダーゼであり、第２のチャネル部４３０４の液体が、酢酸ナトリウム・バッファ、過酸化水素基質、および酸化還元メディエータとしての２，２’−アジノ−ビス‐（３−エチルベンゾチアゾリン−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）を含む反応バッファである。一典型的な実施形態においては、バッファ液が、１０ｍＭのＡＢＴＳ、１０ｍＭのＨ２Ｏ２、１５０ｍＭのＫＣｌ、１２５ｍＭの酢酸ナトリウム、０．１％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標）であり、最終的にｐＨ４．２にされる。
【０５１４】
第２のチャネル部における分析対象の検出が、電気化学的検出以外（例えば、蛍光または色の検出）による別の実施形態においては、センサが、例えば蛍光または色などといった信号を検出することができる第２のチャネル部の領域を備えることができる。そのような実施形態においては、センサが、メータ４００の検出器（例えば、光検出器またはシンチレーション・カウンタ）とのやり取りを可能にする装置の透明部分を備えることができる。
【０５１５】
装置は、装置の正しい動作のチェックポイントとして機能する１つ以上の「オンボード制御」を有することができる。例えば、第１のオンボード制御は、液体導入口５２０からジャンクション４３０５へと向かう液体の流れを検出するために、電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒのうちの１つを使用することであってよい。第２のチャネル部４３０４を通過する液体の流れが、電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒのうちの２つの間に導電ブリッジを形成する。液体が第２のチャネル部４３０４を通ってジャンクション４３０５に向かって流れる間に、２つの電極（例えば、作業および対向電極５１６ｗおよび５１６ｒ）を通る電流を検出するようにメータ４００を動作させることで、メータは、ジャンクション４３０５へと向かう液体の前進を検出することができる。図５０Ａを参照すると、第２のオンボード制御は、オーバーフローチャネルへの液体の流入を検出して、ジャンクション４３０５において液体サンプル：液体のインターフェースが形成された旨の知らせをもたらす（上述のとおり）ために、オーバーフローチャネル５２４に配置された電極または電極ペア３６０１を使用することであってよい。
【０５１６】
さらなるオンボード制御は、実行されるアッセイのための制御として作用することができる。例えば、基質または試薬は、時間とともに分解し、あるいは活性を失う可能性があるため、これらの基質または試薬（例えば、第２のチャネル部４３０４へと導入された液体に含まれている基質）の活性を検査することが望まれるであろう。１つの典型的な構成においては、酵素ラベルが、過酸化水素およびＡＢＴＳの水および酸化ＡＢＴＳへの変換を触媒する西洋わさびペルオキシダーゼであってよい。過酸化水素およびＡＢＴＳが、第２のチャネル部４３０４へと導入されるバッファ液にてもたらされる。図５０Ｂを参照すると、過酸化水素およびＡＢＴＳの存在および／または活性を、所定の量の西洋わさびペルオキシダーゼ酵素ラベル５５０１をオーバーフローチャネル５２４の電極３６０１に固定することによって、検証することができる。活性なバッファ液成分がオーバーフローに到達すると、触媒反応によって酸化ＡＢＴＳおよび電極３６０１によって検出できる電気化学信号が生成される。信号の検出が、バッファの成分が活性であることを知らせて、作業電極５１６ｗにおいてなされる測定の有効性を証明するように機能する。図５０Ｃを参照すると、別の構成においては、西洋わさびペルオキシダーゼを固定する代わりに、西洋わさびペルオキシダーゼが第２の結合剤に共役している磁気感受性粒子：第１の結合剤：分析対象：第２の結合剤の錯体を固定することができる。このような構成は、作業電極５１６ｗにおいて形成される三重錯体の形態をより正確に反映し、改善された制御をもたらすことができる。
【０５１７】
図５０Ｂおよび５０Ｃに示した制御の変種が、それぞれ図４９Ａおよび４９Ｂに示されている。図４９Ａを参照すると、第１および第２の電極（または、１対の電極）５４０５、５４０６が、オーバーフローチャネル５２４に設けられている。所定の量の西洋わさびペルオキシダーゼ５４０１が、第１の電極ペア５４０５に固定され、過酸化水素およびＡＢＴＳを含んでいるバッファ液が存在する場合に、第１の電気化学信号Ｒ１をもたらす。第２の所定の量の西洋わさびペルオキシダーゼ５４０２が、電極ペア５４０６に固定され、ここで第２の量は、電極で第１の量５４０１よりも多い。この第２の量の西洋わさびペルオキシダーゼが、過酸化水素およびＡＢＴＳを含んでいるバッファ液が存在する場合に、電気化学信号Ｒ２をもたらし、Ｒ２＞Ｒ１である。Ｒ２およびＲ１を、選択されたアッセイに関して、高および低の制御電気化学信号をもたらし、アッセイの動作可能範囲の確認をもたらすように構成することができる。図４９Ｂを参照すると、代案となる構成においては、西洋わさびペルオキシダーゼを固定する代わりに、西洋わさびペルオキシダーゼが第２の結合剤に共役している磁気感受性粒子：第１の結合剤：分析対象：第２の結合剤の錯体を固定することができる。そのような構成は、作業電極５１６ｗにおいて形成される三重錯体の形態をより正確に反映し、改善された制御をもたらすことができる。
【０５１８】
液体サンプル：液体のインターフェースを横切る磁気感受性粒子の移動が不適切（「ビーズ喪失」）であると、作業電極５１６ｗにおいて検出される信号が小さくなる原因となりうる。図５０Ｄを参照すると、１つの典型的な実施形態においては、この問題に対する制御が、或る量の酵素ラベル基質（例えば、酵素ラベルが西洋わさびペルオキシダーゼである場合には、過酸化水素およびＡＢＴＳ）および制御電極５５０２を第１のチャネル部４３０２に備えることによってもたらされる。制御電極５５０２における電気化学信号の検出が、磁気感受性粒子：第１の結合剤：分析対象：第２の結合剤：西洋わさびペルオキシダーゼの三重錯体が形成されていることを知らせる。
【０５１９】
いくつかの典型的な実施形態においては、アッセイを、電極のうちの１つ以上がチャネル・ネットワーク５０８の上面に配置されるように実行することができ、すなわち電極が、その場に広がる局所の重力場に対してチャネルの最も上に位置し、重力場が粒子を電極から引き離すように作用する。このような実施形態は、試薬または他の粒子が電極上に集まること（電気化学信号の検出という電極の能力を低下させかねない）を防止するうえで役に立つことができる。アッセイ装置５００の電極のうちの１つ以上（または、すべて）を、このやり方にて構成することができる。例えば、いくつかの実施形態においては、１つ以上の電極が、第１のチャネル部４３０２に含まれる血液サンプルのヘマトクリット値を測定するために、第１のチャネル部４３０２に配置される。血液サンプル中の赤血球が、第１のチャネル部４３０２の下面に集まる可能性があり、したがってヘマトクリット値を測定すべくこの下面に配置された電極に集まる可能性がある。一典型的な実施形態においては、これらの電極が、第１のチャネル部４３０２の上面、例えば天井に配置される。
【０５２０】
一般に、アッセイ装置を、試薬をベース上に乗せ、ベースを覆って蓋を封じることによって製作することができる。ベースは、マイクロ成型プラットフォームまたは積層プラットフォームであってよい。
【０５２１】
マイクロ成型プラットフォーム
光学的検出のために準備されるアッセイ装置においては、ベース、蓋、あるいはベースおよび蓋の両者が、所望の光の波長に対して透過性であってよい。典型的には、ベースおよび蓋の両者が、例えば４００〜７００ｎｍの光の可視の波長に対して透過性である。ベースおよび蓋が、例えば２００ｎｍ〜１０００ｎｍ、または３００ｎｍ〜９００ｎｍなど、検出のために使用することができる波長の範囲をもたらすために、近ＵＶおよび近ＩＲの波長に対して透過性であってよい。
【０５２２】
電気化学的な検出を使用するアッセイ装置においては、電極が、ベースの表面に堆積される。電極を、カーボンまたは銀インクのベースへのスクリーン印刷、ならびにその後の絶縁インクによって設けることができ、導電材料（例えば、金、銀、またはアルミニウム）のベースへの蒸着またはスパッタリング、ならびにその後のレーザ・アブレーションによって設けることができ、あるいは導電材料（例えば、金、銀、またはアルミニウム）のベースへの蒸着またはスパッタリング、ならびにその後のフォトリソグラフィック・マスキングおよび湿式または乾式エッチングによって設けることができる。
【０５２３】
電極を、２つのやり方の一方にて蓋に形成することができる。剛性の蓋に１つ以上の貫通穴を設け、真空ベースへと取り付け、カーボンまたは銀インクを堆積させるためにスクリーン印刷を使用することができる。剛性の蓋の下面で真空を引きつつ、スクリーン印刷を行うことで、導電インクが貫通穴へと引き込まれ、蓋の上面および下面の間の電気的接触が生み出され、穴が封じられて、液体が漏れないように保証される。
【０５２４】
あるいは、蓋を貫通穴を全く備えずに製造し、反転させてスクリーン印刷台へと配置し、カーボンまたは銀インクを印刷することができる。ひとたび電極が製作されると、マイクロ成型されたベースが装填され、試薬を堆積するための既知の位置へと位置合わせされる。試薬の堆積は、ノズルからの送出または吸引、電磁弁ならびにサーボ駆動またはステッパ駆動シリンジの使用によって達成できる。これらの方法は、試薬の液滴または線を、接触または非接触の様式で堆積することができる。試薬を堆積するための他の方法として、パッド印刷、スクリーン印刷、圧電印刷ヘッド（例えば、インクジェット印刷）、あるいは試薬を放出すべく圧縮される袋（「ケーキ・アイサー」）からの堆積が挙げられる。堆積は、好ましくは、湿度および温度が制御された環境で実行される。異なる試薬を、同じまたは別のステーションにおいて送出することができる。所望の堆積の領域の外への試薬の交差汚染またははみ出しを検出できるようにするために、随意により蛍光剤または着色剤を、試薬へと加えることができる。製品の性能が、交差汚染によって損なわれる可能性がある。堆積の領域は、近接していても、離れていてもよい。蛍光剤または着色剤は、アッセイ装置の動作、とくには分析対象の検出を妨げることがないように選択される。
【０５２５】
堆積の後で、試薬は乾燥させられる。乾燥は、大気での乾燥、赤外線乾燥、強制空気によって補助された赤外線乾燥、紫外光乾燥、暖かい強制空気、制御された相対湿度での乾燥、またはこれらの組み合わせによって達成できる。次いで、マイクロ成型されたベースに、上部に柔軟または剛性の蓋を接合することによって蓋を設けることができる。ベースおよび蓋の位置合わせは、２つが貼り合わせられる前に行われる。ベースおよび蓋を、（前もって蓋またはベースに塗布される感熱接着剤を使用して）熱シールによって、２つの類似の材料を接合するための超音波溶接によって、レーザ溶接（２つの類似の材料を接合するためのマスクまたは線レーザ）によって、シアノアクリレート系接着剤によって、前もって蓋またはベースへと塗布されるエポキシ接着剤によって、あるいは前もって蓋またはベースへと塗布される感圧接着剤によって接合することができる。蓋を取り付けた後に、組み立てられたアッセイ装置の一部またはすべてを、アッセイ装置が設計どおりに機能するように保証するため、重要な寸法について検査することができる。検査として、視覚検査、レーザ検査、接触測定、あるいはこれらの組み合わせを挙げることができる。
【０５２６】
アッセイ装置は、バッファ袋を含むことができる。バッファ袋は、底部および上部開口を有する成型くぼみであってよい。下方の開口を、破れやすい箔またはプラスチックで封じることができ、くぼみをバッファで満たすことができる。次いで、より丈夫な箔または薄板が、上部の開口を覆ってシールされる。あるいは、前もって形成されてバッファで満たされるブリスター袋を、くぼみに配置して、くぼみに貼り付けることができる。ブリスター袋は、５０〜２００μＬのバッファを含むことができ、標準的なブリスター法を使用して形成され、満たされ、封じられる。ブリスター材料は、箔またはプラスチックであってよい。ブリスターを、感圧接着剤またはシアノアクリレート系接着剤でくぼみへと貼り付けることができる。
【０５２７】
積層プラットフォーム
特定の幅のロールの形態で供給される３枚以上の薄板を、アッセイ装置を構築するために使用することができる。ベース薄板は、プラスチック材料であり、１つの表面が親水性材料でコートされている。この薄板が、導電電極および絶縁インクを堆積するために印刷ステーションへと供給される。ベース薄板が位置合わせ（横ウェブ（ｃｒｏｓｓ  ｗｅｂ））され、導電電極が、すでに述べた技法によって親水性表面に堆積される。次いで、ベース薄板が堆積ステーションへと送られ、１つ以上の試薬が薄板へと塗布される。横ウェブおよび縦ウェブ（ｄｏｗｎ  ｗｅｂ）の両方の位置合わせは、上述の方法によって試薬が堆積される前に行われる。試薬が、堆積の後で、上述の方法によって乾燥させられる。中間薄板が、指定の幅のロールの形態で供給される。アッセイ装置において、２つ以上の中間薄板が存在してもよい。中間という用語は、ベース薄板または蓋薄板でないことを示す目的である。中間薄板は、薄板のそれぞれの面に感圧接着剤または熱シール接着剤のいずれかを有しているプラスチック・スペーサであってよい。感圧接着剤には、接着剤を保護するためにいずれかの面に保護ライナーが設けられる。中間薄板およびその接着剤の厚さのばらつきは、１５％未満または１０％未満である。
【０５２８】
チャネルおよび造作が、レーザ源（例えば、ＣＯ２レーザ、ＹＡＧレーザ、エキシマレーザ、あるいはその他）を使用して中間薄板へと切り込まれる。チャネルおよび造作を、中間薄板の厚さの全体を貫いて切り込むことができ、あるいは造作およびチャネルを、薄板の一方の面から制御された深さまで切除することができる。中間薄板およびベース薄板が、横ウェブおよび縦ウェブの両方向について位置合わせされ、一体に貼り合わせられる。感圧接着剤が使用される場合には、下方のライナーが中間薄板から取り去られ、ベースを中間薄板へと貼り付けるべく圧力が加えられる。熱シール接着剤が使用される場合には、ベースおよび中間薄板が、熱および圧力を使用して接合される。
【０５２９】
アッセイ装置の蓋を形成する上側薄板が、指定の幅のロールの形態で供給される。上側薄板は、プラスチック材料であってよい。造作を、上述のようにレーザ源を使用して上側薄板へと切り込むことができる。上側薄板が、ベース薄板および中間薄板へと位置合わせ（横ウェブおよび縦ウェブ）され、使用されている接着剤に応じ、圧力による積層あるいは熱および圧力による積層によって接合される。積層体を横ウェブおよび縦ウェブ方向に位置合わせした後、個々のアッセイ装置または試験片を、高出力のレーザ（例えば、ＣＯ２レーザ、ＹＡＧレーザ、エキシマレーザ、またはその他、など）を使用して積層体から切り出すことができる。
【０５３０】
組み立てられたアッセイ装置の一部またはすべてを、アッセイ装置が設計どおりに実行するように保証するため、重要な寸法について検査することができる。検査として、視覚検査、レーザ検査、接触測定、あるいはこれらの組み合わせを挙げることができる。
【０５３１】
分析対象を検出するためのアッセイの使用を利用する１つの用途の例は、血液サンプルなどの生理学的流体サンプルの分析である。とくには、疾病または病気を知らせることができる分析対象に関して血液サンプルを分析することが、ますます一般的になってきている。そのような分析を、分析対象を直接的または間接的に検出するアッセイを使用して実行することができる。
【０５３２】
アッセイ装置およびメータの相互作用
図２および１９〜２０を参照すると、メータ４００が、検査用のアッセイ装置５００を受け入れ、ディスプレイ４０６を備えている。ディスプレイ４０６を、例えばテキスト、ジョイント・フォトグラフィック・エキスパート・グループ（ＪＰＥＧ）フォーマット、タグ付き画像ファイル・フォーマット（ＴＩＦＦ）、グラフィクス・インターチェンジ・フォーマット（ＧＩＦ）、またはビットマップなど、種々のフォーマットの像を表示するために使用することができる。ディスプレイ４０６を、文字メッセージ、ヘルプ・メッセージ、指示、照会、検査結果、および種々の情報を患者へと表示するために使用することも可能である。ディスプレイ４０６は、ユーザに入力領域４０４を提供することができる。入力領域４０４は、キーを含むことができる。一実施形態においては、入力領域４０４を、例えばディスプレイ４０６がタッチ式スクリーンである場合に、ディスプレイ４０６上に表示されるシンボルとして実現できる。ユーザへの指示および照会を、ディスプレイ４０６上でユーザへと示すことができる。ユーザは、入力領域によって照会に応答することができる。
【０５３３】
さらに、メータ４００は、読み取りのために診断検査アッセイ装置５００を受け付けるアッセイ装置読み取り器を備えている。アッセイ装置読み取り器は、検査アッセイ装置５００において生じる例えば光学的変化、電気的変化、または他の検出可能な変化の大きさにもとづいて、分析対象のレベルを測定することができる。分析対象に応答して光学的変化を生じるアッセイ装置を読み取るために、アッセイ装置読み取り器は、例えば光源、フィルタ、および格子検出器（例えば、フォトダイオード、光電子増倍管、またはアバランシェ・フォトダイオード）など、検出可能な変化を測定するための光学システムを備えることができる。分析対象に応答して電気的変化を生じるアッセイ装置を読み取るために、アッセイ装置読み取り器は、例えば電圧計または電流計など、検出可能な変化を測定するための電気システムを備えることができる。
【０５３４】
メータ４００は、通信ポート（図示されていない）をさらに備えることができる。通信ポートは、例えば電話回線またはコンピュータ・ネットワークへの接続であってよい。メータ４００は、測定の結果を、出力装置、リモート・コンピュータ、または遠方の場所からの医療提供者へと通信することができる。患者、医療提供者、または他のユーザが、例えばバイオマーカー、代謝産物、または乱用薬物など、種々の分析対象のレベルを検査および記録するために、メータ４００を使用することができる。
【０５３５】
診断メータ４００のさまざまな実施が、記録媒体（例えば、ハードディスクドライブ（ＨＤＤ）、フラッシュメモリ、ビデオカセットレコーダ（ＶＣＲ）テープまたはデジタルビデオディスク（ＤＶＤ）、コンパクトディスク（ＣＤ）、あるいはフロッピーディスク）に保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。さらに、さまざまな実施が、直接的なケーブル接続、コンピュータ・ネットワーク、無線ネットワーク、衛星ネットワーク、などといった通信媒体を介して、別のコンピュータ・システムに保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。
【０５３６】
メータ４００は、例えばＷＡＮなどの遠方のコンピュータ・ネットワークへのハードウェアおよびソフトウェア・アクセスを備えることができ、遠方のコンピュータ・ホスト、プロキシ、またはサーバとの調和を可能にすることができる。アクセスは無線アクセスであっても、インターネットを介してもよい。メータは、無線アクセスを容易にするために、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）互換のハードウェアおよびソフトウェアを備えることができる。
【０５３７】
メータを制御するソフトウェアは、汎用の演算装置、携帯情報端末（ＰＤＡ）、特殊用途の演算装置、ノート型コンピュータ、手持ち用コンピュータ、またはネットワーク家電などといった任意の処理装置において動作するソフトウェア・アプリケーションの形態であってよい。メータを、プロセッサ、１つ以上の入力装置、１つ以上の出力装置、コンピュータで読み取り可能な媒体、およびコンピュータ・メモリ装置を含むハードウェアの構成を使用して実現してもよい。プロセッサを、汎用のマイクロプロセッサまたは特定用途向け集積回路（ＡＳＩＣ）など、任意のコンピュータ処理装置を使用して実現することができる。
【０５３８】
プロセッサを、センサ・データおよび／または入力データを受信するための機構を提供するため、ならびに照会および結果を保守技術員へと表示または他の方法で出力するための機構を提供するために、入力／出力（Ｉ／Ｏ）装置に一体化させることができる。入力装置として、例えば、マウス、キーボード、タッチ式スクリーン・ディスプレイ、ボタン、センサ、およびカウンタのうちの１つ以上を挙げることができる。ディスプレイ４０６を、液晶表示装置（ＬＣＤ）、テレビ、プリンタ、および発光ダイオード（ＬＥＤ）など、任意の出力技術を使用して実現することができる。
【０５３９】
コンピュータで読み取り可能な媒体が、固定式または着脱式のいずれかの媒体上にプログラムおよびデータを保存するための機構を提供する。コンピュータで読み取り可能な媒体を、従来からのコンピュータ用ハードドライブまたは他のリムーバブル・メディアを使用して実現することができる。最後に、システムは、読み取り器の動作を助けるために、ランダム・アクセス・メモリ（ＲＡＭ）などのコンピュータ・メモリ装置を使用する。読み取り器の実施は、ユーザを装置の使用において案内し、測定の結果を保存するソフトウェアを含むことができる。メータ４００は、医療記録データベースまたは患者の介護に使用される他のシステムなど、アプリケーションへのアクセスを提供することができる。一例においては、装置が通信ポートを介して医療記録データベースへと接続する。さらに、メータ４００は、インターネットに接続して、既存のデータベースを統合し、他のウェブサイトをリンクする能力を有することができる。
【０５４０】
図２を参照すると、メータ４００が、アッセイ装置５００とともに示されている。メータ４００は、アッセイ装置５００を受け入れるポート４０２を有している。サンプルの分析を実行する前に、メータ４００のユーザが、アッセイ装置５００をポート４０２を通って挿入する。メータ４００は、測定の実行の過程においてユーザに適切な情報を伝えるために使用されるインターフェース４０６を有している。ユーザがアッセイ装置５００をポート４０２を通ってメータ４００へと挿入すると、インターフェース４０６が、ユーザに情報を提示する。例えば、（i）サンプルの適用のやり方、（ii）測定結果の値、（iii）特定の測定結果が得られた場合にすべきこと、を説明する情報を、提示することが可能である。
【０５４１】
メータ４００は、アッセイ装置５００がポート４０２を通って挿入されたときに、アッセイ装置５００を動作させるように構成されている。メータ４００は、液体リザーバ・アクチュエータ４０８、磁気アクチュエータ、電気化学検出器、およびプロセッサを備えている。リザーバ・アクチュエータ４０８が、図８に関して説明されるとおり、装置５００のリザーバ５０７を動作させるように構成されている。磁気アクチュエータが、アッセイ装置５００のマイクロ流体ネットワーク５０８内の磁気感受性粒子を操作する（移動させ、さらには／あるいは位置させる）ように構成されている。電気化学検出器が、磁気感受性粒子によって電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃへと運ばれた分析対象の存在を測定するように構成されている。電気化学検出器は、メータ４００内に収容されたとき装置５００の電気接点５１８ｗ、５１８ｒ、５１８ｃにそれぞれ連絡する電気接点を備えている。プロセッサが、リザーバ・アクチュエータ４０８、磁気アクチュエータ、電気化学検出器、電気接点、およびインターフェース４０６に、動作可能に連絡している。インターフェース４０６が、情報（例えば、装置の状態および／またはアッセイ結果）をユーザへと表示するように構成されている。
【０５４２】
使用時、アッセイ装置５００が、ポート４０２を介してメータ４００へと挿入される。サンプル（例えば、血液サンプル）が、アッセイ装置５００の導入口５１０へと適用される。或る量（例えば、少なくとも約５μｌまたは１０μｌ）のサンプルが、（例えば、毛管作用によって）マイクロ流体ネットワーク５０８へと移動する。サンプルが、試薬ゾーン５１２の試薬と相互作用する。次いで、目標の分析対象が検出ゾーン５１４へと運ばれ、ここで電気化学信号が記録される。目標の分析対象が、電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃと相互作用し、信号が電気化学検出器によって検出される。プロセッサが、電気化学検出器によって検出された信号を解釈し、インターフェース４０６にてユーザへと情報を表示する。
【０５４３】
メータ４００のユーザは、スイッチ４０４を使用してメータ４００を作動させることによって、これまでの測定の結果を見直すことができる。ディスプレイ４０６が、さまざまなデータを表示する。例えば、測定のデータおよび時刻、測定された分析対象のレベル、測定前にユーザが何をしていたか、ユーザがどんな薬物を摂取していたか、などを、ユーザが検査を実行するときにメータに保存することができる。このようにして、メータ４００のユーザは、自身の状態についてより優れた管理を容易にするために、履歴データを使用することができる。
【０５４４】
図１９を参照すると、ディスプレイ４０６およびポート４０２を有するメータ４００の典型的な実施形態が示されている。ディスプレイ４０６が、検出された分析対象（この例では、分析対象はＮＴ−ｐｒｏＢＮＰである）の量に関する情報の形態であるアッセイ結果、サンプルの種類（例えば、血液）、アッセイ結果に関連して生成されたユーザへのメッセージ（この例では、「高結果、医師に連絡せよ（Ｈｉｇｈ  ｒｅｓｕｌｔ，ｃｏｎｔａｃｔ  ｄｏｃｔｏｒ）」、ならびに時刻および日付の情報など、典型的な情報を示している。スイッチ４００が、ボタン・パネルとして設けられており、メータを動作させ、随意によりディスプレイ４０６を操作するための制御手段をユーザにもたらしている。図示のメータ４００は、約１５６ｍｍの幅、約９７ｍｍの高さ、および約１８５ｍｍの長さを有している。
【０５４５】
次に図２０を参照すると、メータ４００の内部機構が示されており、バッファ・アクチュエータ２５０１、アッセイ装置を受け入れるように構成されたポート４０２、モータ２５０２、主回路基板２５０３、および充電式電池２５０４を備えている。動作時、アッセイ装置５００がメータ４００に挿入され、サンプルがアッセイ装置の導入口５１０に堆積される。メータ４００が、アッセイ装置の下面に隣接して位置する磁石を、アッセイ装置５００の試薬ゾーン５１２に隣接する第１の位置から、検出ゾーンの電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃに隣接する第２の位置へと移動させるように動作し、これによって、磁気感受性粒子および結合している分析対象が、アッセイ装置５００の検出ゾーン５１２からアッセイ装置の検出ゾーンの電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃへと動かされ、ここでアッセイ信号を検出して、メータのディスプレイ４０６への表示のためにアッセイ結果をもたらすべく処理することができる。次に、メータの動作を、種々の構成部品に関し、図２１〜２９を参照して説明する。
【０５４６】
図２１Ａを参照すると、メータ４００は、磁石を取り付けて第１および第２の位置の間で移動させるためのラック・アンド・ピニオン伝達システム（図２１Ｂの下面からの拡大図に示されている）を備えている。ラック２６０１が、歯車系列２６０３へと機械的に接続された一式の歯２６０２を備えており、歯車系列２６０３は、ステッピング・モータ２５０２へと機械的に接続されている。ラック２６０２は、第１および第２の位置の間の移動の経路を定めている案内棒２６０４に取り付けられている。
【０５４７】
図２２Ａを参照すると、モータ２５０２は、ブラケット２７０１に取り付けられており、ブラケット２７０１に、歯車系列２６０３が、モータの駆動軸と機械的に相互作用するように配置されている。図２２Ｂを参照すると、モータ２５０２が、ブラケット２７０１への取り付けによってメータ４００のベース部２７０２に取り付けられている。さらに、ベース部２７０２は、歯車系列２６０３をモータ２５０２に機械的に連絡させて搭載するように構成されている。
【０５４８】
図２３Ａ〜Ｃを参照すると、ラック２６０２が、２つの案内棒２６０４にスライド可能に取り付けられている。キャリッジ２８０２が、ラック２６０２の一端に、メータ４００へと挿入されたときのアッセイ装置５００（図示されていない）のベースの下面に隣接して位置する磁石２８０３のためのホルダを形成している。光学センサ２８０５が、キャリッジ２８０２内の磁石２８０３に隣接して配置され、アッセイ装置５００の検出ゾーン５１２がサンプルで満たされたことを検出するように構成されている。キャリッジ２８０２は、磁石２８０３とアッセイ装置５００の下面との間の距離を最小限にして、効果的な磁界の強度がアッセイ装置５００の隣接する領域に向けられるように保証するため、矢印２８０４によって示されるとおりキャリッジ２８０２の位置の垂直方向の調節ならびにアッセイ装置５００の下面へと向かう磁石２８０３の付勢を可能にすべく、弾性的に取り付けられている。キャリッジ２８０２は、案内レール２６０４の主たる長手軸に直交する主たる長手軸を有している固定バー２８０６をさらに備えており、固定バーは、キャリッジ２８０２に取り付けられてばねで装填された球ベアリング２８０８との相互作用のための２つの戻り止め２８０７を有している。球ベアリング２８０８および戻り止め２８０７の相互作用によって、固定バーを、それぞれ挿入されているアッセイ装置の排出を阻止および許可する第１の位置と第２の位置との間で切り換えることができる。
【０５４９】
図２４Ａを参照すると、メータ４００は、案内レール２６０４およびラック２６０２が取り付けられる主シャシ２９０１を有している。シャシ２９０１は、アッセイ装置の挿入および排出機構との相互作用のための斜面２９０９および２９０８を提供している。さらに、シャシ２９０１は、固定部材２９０２のための凹所および取り付け具、弾性的に取り付けられた面取り２９０３、弾性的に取り付けられた排出部材２９０４、ならびに弾性的に取り付けられた第１および第２の後部ロック部材２９０５（ａ）（ｂ）、および３０Ｎのカウンタバランス棒２９０６を提供している。図２４Ａにおいて、メータ４００は休止構造にある。図２４Ｂを参照すると、シャシ２９０１が、前部ロック用面取り２９０７のための取り付け具をさらに提供している。
【０５５０】
次に、メータ４００におけるアッセイ装置５００の挿入および排出を、図２４Ｂ〜Ｊ（アッセイ装置は図示されていない）および図２５Ａ〜Ｉ（アッセイ装置は、図２５Ａおよび２５Ｇ〜Ｉに示されている）を参照して説明する。
【０５５１】
図２４Ｂを参照すると、アッセイ装置５００をポート４０２を通って挿入する前は、後部ロック部材２９０５が排出部材２９０４から切り離されており、したがって排出部材２９０４が、ラック２６０２を前部ロック用面取り２９０７に抗してポート４０２に向かって付勢し、前部ロック用面取り２９０７をラック２６０２から離れるように付勢することができる。したがって、アッセイ装置５００を、ポート４０２を通って挿入し、アッセイ装置の平坦な下面がラック２６０２におおむね平行かつ磁石２８０３に隣接して位置するように、メータ４００内に収容することができる。
【０５５２】
メータ４００の動作の最中に、モータ２５０２が、磁石２８０３をアッセイ装置５００のベースに実質的に平行かつアッセイ装置５００のベースに隣接する平面において、挿入されたアッセイ装置の試薬ゾーン５１２に隣接する第１の位置から、電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒに隣接する挿入されたアッセイ装置の検出ゾーン５１４の第２の位置へと移動させるため、歯車２６０３およびラック２６０２を駆動すべく作動する。これら第１および第２の位置の間の磁石２８０３の移動の経路は、磁石がアッセイ装置５００の第１および第２のチャネル部のインターフェース・ゾーン５２２およびジャンクション４３０５に隣接する中間位置へと、磁石がもたらされるような経路である。一典型的な実施形態においては、メータ４００が、（後述のとおり）磁石の動きを前記中間位置において所定の時間にわたって休止させるように構成さている。図２４Ｃを参照すると、磁石２８０３が中間位置に位置している。
【０５５３】
磁石２８０３が、隣接するアッセイ装置５００の領域へと磁界を加え、磁石が第１の位置から第２の位置へと移動することによって、磁界がアッセイ装置の第１および第２のチャネル部４３０２および４３０４の経路に沿って、試薬ゾーン５１２と検出ゾーン５１４との間を移動する。磁界が第１および第２の位置の間を移動することで、試薬ゾーンの磁気感受性粒子が、試薬ゾーン５１２に収容されている液体サンプルを通ってアッセイ装置５００の第１および第２のチャネル部のジャンクション４３０５へと引っ張られ、次いでジャンクション４３０５を横切って電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒへと引っ張られる。一典型的な実施形態においては、磁石が、休止なしで連続的に第１の位置から第２の位置へと動かされる。磁石（したがって、磁界）の移動の速度は、一定であってよい。しかしながら、典型的な実施形態においては、磁石の移動の速度が、モータ２５０２の速度を制御することによって変化させられる。検出ゾーン５１２を通過する磁石（したがって、磁界）の移動が、約３６ｍｍ／ｍｉｎ（±５％）（例えば、少なくとも約２０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約２５ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約３５ｍｍ／ｍｉｎ、約４０ｍｍ／ｍｉｎ未満、約４５ｍｍ／ｍｉｎ未満、約５０ｍｍ／ｍｉｎ未満、約６０ｍｍ／ｍｉｎ未満、約８０ｍｍ／ｍｉｎ未満）の速度Ｓ１で実行される。速度Ｓ１は、磁気感受性粒子が集められてジャンクション４３０５へともたらされる「収集速度」である。磁界がジャンクション４３０５を過ぎて動かされるとき、磁石２８０３の移動の速度は、約１４４ｍｍ／ｍｉｎ（±５％）（例えば、少なくとも約１２０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１２５ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１３０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１３５ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１４０ｍｍ／ｍｉｎ、約１４５ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１５０ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１５５ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１６０ｍｍ／ｍｉｎ未満）の速度Ｓ２へと高められる。ジャンクションにおける磁石２８０３の移動の速度は、「ジャンプ速度」と呼ばれる。一典型的な実施形態においては、ジャンプ速度が、磁石が磁気感受性粒子を検出ゾーン５１４の第２の位置へと移動させるときに、維持され、あるいは高められる。別の典型的な実施形態においては、ジャンプ速度が、磁界がジャンクションから電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒへと移動する際に、約１０８ｍｍ／ｍｉｎ（±５％）（例えば、少なくとも約７０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約９０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約９５ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１００ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１０５ｍｍ／ｍｉｎ、約１１０ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１１５ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１２０ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１２５ｍｍ／ｍｉｎ未満）へと下げられる。このより遅い速度は、「電極引きずり速度」と呼ばれる。
【０５５４】
一典型的な実施形態においては、ジャンクション４３０５および検出ゾーン５１４へと向かう磁石２８０３の移動を開始する前に、液体サンプルを攪拌し、液体サンプルの磁気感受性粒子および試薬ゾーン５１２に含まれている他の試薬との混合を生じさせるために、磁石が、例えば磁石を振動または回転させることによって、検出ゾーンの隣で動かされる。この磁石２８０３の往復移動の速度が、「混合速度」と呼ばれ、約１４４ｍｍ／ｍｉｎ（±５％）（例えば、少なくとも約１２０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１２５ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１３０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１３５ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１４０ｍｍ／ｍｉｎ、約１４５ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１５０ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１５５ｍｍ／ｍｉｎ未満、約１６０ｍｍ／ｍｉｎ未満）である。
【０５５５】
典型的な実施形態においては、磁石２８０３の設計が、隣接するアッセイ装置５００の局所化された位置に磁束の線を集中させるように構成される。図４８Ａ〜Ｃを参照すると、３つの典型的な配置構成が示されている。図４８Ａを参照すると、磁石２８０３が幅広くて薄く、Ｌ字形の磁極片５３０１を有しており、磁極片５３０１が、磁束の線をＮ極の磁極面の背端と磁極片との間に集中させる。図４８Ｂを参照すると、磁石２８０３が細長く、磁極片５３０２、５３０３が、磁束の線を磁石２８０３から離れていてもよい所望の位置へと導くチャネルを形成するように形作られている。図４８Ｃを参照すると、磁極片５３０４の厚さの変化が、磁石の長さに沿った磁界を変化させるために使用されている。
【０５５６】
磁界の源を、成形された磁界をもたらすように構成することができる。成形された磁界は、磁気感受性粒子を装置５００の検出ゾーンに向かって案内するように設計された磁力線を有することができる。そのような成形された磁界は、磁気感受性粒子およびラベル粒子の拡散または移動を制御するために有用でありうる。とくには成形された磁界が望まれる場合に、磁界の源を２つ以上設けることができる。例えば、磁界の源を、アッセイ装置の両端に設けることができ、一方を磁気感受性粒子を引きつけるように構成し、他方を磁気感受性粒子を追い出すように構成することができる。そのような構成は、すべての磁気感受性粒子をアッセイ装置の一端に位置させるうえで有利となりうる。
【０５５７】
上述の実施形態においては、アッセイ装置へと加えられる磁界の移動が、アッセイ装置５００のチャネル・ネットワークの下面に隣接して配置された磁石２８０３の移動によって達成される。チャネルに沿った磁界の移動を、１つの磁石をアッセイ装置に隣接した経路に沿って移動させるのではなく、達成することが可能である。
【０５５８】
例えば、図４７Ａ〜Ｅを参照すると、別の典型的な実施形態においては、複数の磁石が、アッセイ装置５００のチャネル・ネットワークの異なる部分へと磁界を加えるために使用される。モータ２５０２が、３つの磁石５２０１、５２０２、５２０３によって置き換えられている。２つの磁石５２０１、５２０２が、磁石５２０１、５２０２の一方がアッセイ装置５００の下面の近くへと移動するときに、他方がアッセイ装置５００の下面から離れるように移動するように、枢支点５２０４を中心にして可動であり、あるいはそれぞれのソレノイドの一部として可動である。第１の磁石５２０１が、導入口５１０に向かって配置され、第２の磁石５２０２が、ジャンクション４３０５の付近に配置されている。第３の電極５２０３は、作業電極５１６ｗの直下に位置しており、ソレノイド上でアッセイ装置５００の近くおよび遠くへと可動である。
【０５５９】
試薬ゾーン５１２における混合は、第１および第２の磁石５２０１、５２０２を交互に試薬ゾーン５１２の下面に近付けることによって達成される（図４７Ａ、Ｂ）。磁気感受性粒子が、第２の磁石５２０２をアッセイ装置５００に向かって移動させることによって、ジャンクション４３０５へと動かされる（図４７Ｃ）。次いで、バッファがジャンクション４３０５に到達して液体サンプル：バッファのインターフェースを形成したときに、第３の磁石５２０３が、作業電極５１６ｗの近くへと動かされる（図４７Ｄ）。第２の磁石５２０２をアッセイ装置５００から離れるように移動させることで、磁気感受性粒子が、インターフェースを横切って「ジャンプ」し、検出ゾーン５１４および作業電極５１６ｗへと引き寄せられる（図４７Ｅ）。
【０５６０】
またさらなる典型的な実施形態においては、作業電極５１６ｗが、例えば電極を印刷するために使用されるカーボンインクに磁化可能な材料（例えば、ネオジム）を入れることによって磁化される。この構成を、メータにおいて作業電極の近傍における磁石の配置または移動の必要をなくすために使用することができる。磁気によって第２のチャネル部４３０４に配置された磁気感受性粒子が、磁化された作業電極へと引きつけられる。
【０５６１】
図２４Ｄを参照すると、磁石２８０３が第２の位置に向かって移動することで、固定バー２８０６が、シャシ２９０１に形成されている斜面２９０８に接触して、それにより固定バー２８０６が面取り２９０３に向かってずらし、面取り２９０３をラック２６０２および挿入されたアッセイ装置５００から離れるように付勢する。図２４Ｅを参照すると、斜面２９０８との接触によって固定バー２９０８および戻り止め２８０８が面取り２９０３に向かって平行移動することで、結果として、球ベアリング２８０８が、第１の戻り止め２８０７から押し出され、面取り２９０３から遠い第２の戻り止め２８０７に再配置される。この結果、戻り止め２９０３に対する固定バー２８０６の作用によって、ラック２６０２がポート４０２に向かって戻ることが防止される。今や、磁石が、アッセイ装置の検出ゾーンの電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒに隣接する第２の位置に位置し、電気化学信号を、アッセイ装置から電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃおよび電気接点を介して検出することができる。
【０５６２】
図２４Ｇを参照すると、ポート４０２へと向かうラック２６０２の戻りの移動において、固定バー２８０６は、固定部材２９０２に遭遇し、固定部材２９０２の斜面の外形（図示されていない）に当接して、固定部材２９０２をずらし（図２４Ｈ）、ラック２６０２およびアッセイ装置の通過を可能にする。図２４Ｉを参照すると、ラック２６０２およびアッセイ装置５００のさらなる戻りの移動において、固定バー２８０６がシャシ２９０１の斜面２９０９と相互作用することで、固定バー２８０６が、球ベアリング２８０８が第１の戻り止め２８０７に再び位置する（図２４Ｊ）ようにラック２６０２を横切って戻り、固定バーの位置が図２４Ａに関して上述した出発位置に復帰する。
【０５６３】
図２５Ａを参照すると、アッセイ片５００が、ユーザがサンプルを導入口５１０に堆積できるように導入口５１０をメータのハウジングから突き出させた状態で、ポート４０２を通ってメータ４００へと挿入されて示されている。前部ロック用面取り２９０７が、アッセイ装置５００の凹部４００２に係合している。アッセイ装置５００の挿入およびポート４０２から遠ざかるラック２６０２の移動に続いて、前部ロック用面取り２９０７が凹所４００２に進入し、アッセイの実行および信号の検出の最中にアッセイ装置５００が排出されることを防止する。
【０５６４】
図２５Ｂを参照すると、後部ロックが、排出部材２９０４と協働する第１および第２の後部ロック部材２９０５（ａ）（ｂ）によって形成されている。出発位置において、第２の後部ロック部材２９０５（ｂ）が、ポート４０２から離れる排出部材２９０４の移動を防止するように位置している。図２５Ｃ〜Ｇを参照すると、ラック２６０２がポート４０２から離れるように移動することで、ラック２６０２が第２の後部ロック部材２９０５（ｂ）を過ぎて移動するときに、ラック２６０２に形成された突起３００２が、第２の後部ロック部材２９０５（ｂ）に形成された面取り３００１に接触し、第２の後部ロック部材２９０５（ｂ）を排出部材２９０４から離れるように移動させる。この結果、第１の後部ロック部材２９０５（ａ）が第２の後部ロック部材２９０５（ｂ）の端部を横切って移動し、排出部材２９０４が、アッセイ装置５００の挿入に応答してポート２９０４から離れる方向に移動できるようになる。
【０５６５】
図２５Ｈ〜Ｉを参照すると、ポート４０２へと向かうラック２６０２の戻りの移動において、排出部材２９０４が、アッセイ装置５００の排出を達成すべく、ポート４０２を通ってアッセイ装置５００を弾性的に付勢する。第２の後部ロック２９０５（ｂ）が、第１の後部ロック部材２９０５（ａ）を阻止して、排出−後部ロックの機構を出発位置に戻すべく、排出部材２９０４に向かって付勢される。
【０５６６】
図２９Ｂを参照すると、アッセイ装置５００が、導入口５１０がポート４０２から突き出して導入口５１０への液体サンプルの堆積を可能にするように、メータ４００に挿入されている。アッセイ装置５００が、前部ロック用面取り２９０７および固定部材２９０２によって動かぬように固定され、付勢部材３４０１によって水平方向に付勢されている。アッセイ装置５００を排出部材２９０４に逆らって挿入することで、排出部材が、ポート４０２から離れる方向に圧縮状態へと付勢される。
【０５６７】
図２９Ａ〜Ｂを参照すると、メータ４００は、可動のキャリッジに取り付けられた光学センサ３４０２を備えている。いくつかの実施形態においては、アッセイ装置５００の挿入時に、光学センサ３４０２が、アッセイ装置５００の１つの縁に沿って移動して、アッセイ装置５００の上面または下面４００１に印刷された符号（例えば、バーコード）を読み取るように配置されている。
【０５６８】
図２６Ａを参照すると、メータ４００が、アッセイ装置５００の試薬ゾーン５１２のサンプル液体を検出するための光学センサを備えている。光学センサは、試薬ゾーンに向かって光を導くように構成された発光ダイオード（ＬＥＤ）３１０１を備えている。試薬ゾーン５１２を形成しているアッセイ装置５００の光学的に透明な部分を通過する光の透過が、血液などの液体サンプルの存在によって減じられる。アッセイ装置５００を通過するＬＥＤ３１０１からの光を検出するためにキャリッジ２８０２に配置された光学センサ２８０５において、光の透過の減少が検出されることが、試薬ゾーン５１２が液体サンプルで満たされ、液体サンプル：気体のインターフェースが形成された旨の通知をもたらす。
【０５６９】
図２６Ｂを参照すると、メータ４００は、挿入されたアッセイ装置５００に向かって付勢され、アッセイ装置５００の上面へと圧力を加えるように作用して、装置５００を磁石２８０３に向かって付勢する位置決め部材３１０２を備えている。位置決め部材３１０２によってアッセイ装置５００へと加えられる付勢が、磁石２８０３とアッセイ装置５００に形成されたチャネル・ネットワークとの間のすき間を最小限にする。
【０５７０】
図２７を参照すると、メータ４００は、アッセイ装置５００上のリザーバ５０７と相互作用して、リザーバからアッセイ装置５００の第２のチャネル部４３０４へとバッファ液を放出および／または送入すべく、リザーバに圧力を加えるように構成されたアクチュエータ２５０１を備えている。アクチュエータ機構が、回路３２０１によって制御される直線アクチュエータ・モータを有している。アクチュエータ／プランジャ４０８が、モータへと接続され、モータによって、メータ４００に挿入されたアッセイ装置に向かうように可動であり、メータ４００に挿入されたアッセイ装置から離れるように可動である。スイッチ３２０３が、リザーバへと向かうプランジャ４０８の移動行程の終わりを位置合わせしている。
【０５７１】
図２８Ａ〜Ｂを参照すると、アクチュエータ機構３３０１が、アッセイ装置５００が収容される溝の上方において、メータ４００に取り付けられている。さらに、メータ４００は、ＤＣ電源のための入力ポート３３０２およびシリアル通信出力ポート３３０３を有している。
【０５７２】
アッセイ装置の使用
次に、装置５００の使用の方法を、典型的な実施形態に関して説明する。
【０５７３】
この方法は、液体サンプルをチャネル・ネットワーク５０８の第１のチャネル部４３０２へと導入するステップ、液体サンプルを液体サンプル中の分析対象に結合するように構成された磁気感受性粒子に接触させるステップ、チャネルの第１の部分４３０２とチャネルの第２の部分４３０４との間のジャンクション４３０５の付近に、液体サンプル：気体のインターフェースを形成するステップ、液体サンプル：気体のインターフェースの気体を第２の液体によって押しのけることで、液体サンプル：第２の液体のインターフェースを形成するステップ、および磁気感受性粒子を液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って第２の液体へと磁気によって移動させるステップ、を含んでいる。
【０５７４】
典型的な実施形態においては、この方法が、メータ４００における装置５００の相互作用によって達成され、液体サンプル：気体のインターフェースおよび液体サンプル：液体のインターフェースが、装置内で形成され、磁気感受性粒子が、装置５００の相互作用の相手であるメータ４００から装置へと磁界を印加することで、磁気によって動かされる。
【０５７５】
装置のユーザ（例えば、人間）が、装置５００がメータ４００に収容され、導入口５１０が液体サンプルを堆積すべくアクセス可能であるように、装置５００をメータ４００へと挿入する。ユーザが液体サンプル（例えば、指刺しによって得られた或る量の人血）を導入口５１０に堆積し、ここから液体サンプルが、例えば毛管作用によって第１のチャネル部に進入する。液体サンプルの進入を、導入口５１０および第１のチャネル部４３０３を接続する随意による導入チャネル４３０３によって促進してもよい。導入チャネル４３０３は、第１のチャネル部４３０３が完全に満たされるように助ける体積バッファとして作用することができる。
【０５７６】
液体サンプルを第１のチャネル部４３０２へと進入させて、第１のチャネル部４３０２をジャンクション４３０５に設けられた毛管ストップまで満たすことで、液体：気体（例えば、液体：空気）のインターフェースが、ジャンクションの付近に形成される。インターフェースは、第１のチャネル部４３０２の長さに沿ったインターフェースの塊の移動がほとんど、またはまったく存在せず、実質的に静止している。
【０５７７】
このように、使用時に、液体サンプル（例えば、指刺しまたは静脈穿刺から得られた或る量の哺乳類の血液）が、サンプル導入口５１０においてアッセイ装置５００へと加えられる。サンプルは、或る量の分析対象（例えば、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）を含んでいる。いくつかの場合には、サンプル中に存在する分析対象の量が、検出不可能であるほどに少ないかもしれず、他の場合には、サンプル中に存在する分析対象の量が、ゼロ（すなわち、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰがサンプルに存在しない）かもしれない。
【０５７８】
所望であれば、液体サンプル：気体のインターフェースの位置の小さな調節を、液体サンプル：気体のインターフェースの形成と液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成との間に、液体サンプル：気体のインターフェースをチャネルに沿って距離ＤＣ以下だけ移動させることによって行うことが可能であり、ここでＤＣは、３ｍｍ（例えば、少なくとも約２．５ｍｍ、少なくとも約２．０ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約１．０ｍｍ、少なくとも約０．５ｍｍ）である。この移動は、チャネルへと加わる毛管圧力を変えることによって達成でき、あるいは磁気感受性粒子を第１のチャネル部に沿って液体サンプル：気体のインターフェースに向かう方向に磁気によって移動させることで、インターフェースを第１のチャネル部に沿って引っ張ることによって達成できる。
【０５７９】
第１のチャネル部４３０２に進入する液体サンプルは、第１のチャネル部に堆積された試薬に接触する。試薬および液体サンプルが混ざり合い、第１および第２の結合剤が分析対象に結合して、磁気感受性粒子：第１の結合剤：分析対象（さらに随意により、第２の結合剤）の錯体を形成できるサンプル−試薬の混合物を形成することができる。試薬および液体サンプルの混合は、少なくとも約１分（例えば、少なくとも約１０秒、少なくとも約３０秒、少なくとも約４５秒、約１５分未満、約１０分未満、約５分未満、約３分未満、約２分未満）である或る長さの時間ＴＡにわたって生じることができる。試薬および液体サンプルの混合を、混合物を攪拌することによって助けることができる。この攪拌を、第１のチャネル部へと磁界を加えて、この磁界を動かすことで、第１のチャネル部４３０２において磁気感受性粒子を移動させて、磁気感受性粒子を試薬と混ぜ合わせることによって達成できる。磁界を、メータ４００内の磁石２８０３によって加えることができ、磁石２８０３を磁界の移動を達成すべく動かすことができる。この磁界の移動は、第１のチャネル部４３０２における磁気感受性粒子の移動に限定される。混合を、磁界を上述の混合速度で動かすことによって達成できる。
【０５８０】
このように、液体サンプルが試薬ゾーン５１２へと（例えば、毛管作用によって）引き込まれ、試薬ゾーン５１２において、試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４に最初に接触し、次いでこれらの試薬と混ざり合う。典型的な実施形態においては、試薬が、ストレプトアビジンへと結び付けられた磁気感受性粒子と、ビオチンへと結び付けられた抗分析対象の抗体（例えば、抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１）と、少なくとも約４０ｎｍの平均粒子径を有する金コロイドゾルへと結び付けられた抗分析対象の抗体（例えば、抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ２４Ｅ１１）へと共役した検出可能なラベル（西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ））（すなわち、抗体に結び付けられた酵素）とを含んでいる。試薬が、液体サンプルとの溶液中に再び懸濁し、非一様な混合物を形成する。ストレプトアビジン（磁気感受性粒子に結び付いている）がビオチン（抗分析対象の抗体に結び付いている）に結合し、抗体：磁気感受性粒子の錯体が形成される。分析対象が抗体：磁気感受性粒子の錯体および抗体に結び付けられた酵素によって拘束され、三重錯体が形成される。所望であれば、（上述のとおり）サンプルにおける試薬の再懸濁および混合を促進または向上させるため、磁気感受性粒子の運動（例えば、周期運動または振動運動）を誘起するように、磁界を加えることが可能である。典型的な実施形態においては、磁界が、混合速度で試薬を混合させるべく試薬ゾーン５１２の下方で振動させられる。次いで、抗体の錯体が、収集速度で共通の場所へと集められる。次いで、錯体は、（上述の）ジャンプ速度および電極引きずり速度の組み合わせによって、試薬ゾーン５１２から検出ゾーン５１４へと移動させられる。
【０５８１】
液体サンプル：気体のインターフェースおよび液体サンプル：第２の液体のインターフェース（後述）の形成の間の時間は、時間ＴＫ未満であり、ここでＴＫは約１分であるが、より短くても（例えば、約５秒以下、約１０秒以下、約２０秒以下、約３０秒以下、約４０秒以下、約５０秒以下）、より長くても（例えば、約２分未満、約５分未満、約１０分未満、約１５分未満）よい。
【０５８２】
液体サンプルを導入口５１０に堆積してから所定の時間に、メータ４００が、プランジャ３２０３をリザーバ５０７に向かって移動させるべくアクチュエータ・モータを作動させるように動作し、プランジャ３２０３がリザーバ５０７に接して、リザーバ５０７を鋭い突起３５０６に接触するように動かし、鋭い突起３５０６によってリザーバ５０７の壁に穴が開けられる。バッファ液が、穴の開いたリザーバ５０７から放出され、導入口５２０を通って第２のチャネル部４３０４に入り、ジャンクション４３０５に向かって流れる。第２のチャネル部４３０４を通ってジャンクション４３０５へと向かうバッファ液の流れを、電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒのうちの１つによって検出して、メータ４００内のプロセッサへと電気信号をもたらすことができ、リザーバ５０７に上手く穴が開いたこと、およびバッファ液が第２のチャネル部へと送達されたことを知らせることができる。
【０５８３】
ジャンクション４３０５に向かって前進するバッファ液は、第２のチャネル部４３０４の一方の壁の毛管ストップ５３２に遭遇する。毛管ストップ５３２が、第２のチャネル部のこの壁に沿ったバッファ液の流れを減速させる。反対側の壁においてはバッファ液の流れが続き、したがってバッファ液の流れは、曲げ部４３０８を中心とし、角５３６を過ぎて傾斜５３４を下る。この結果、バッファ液が、液体サンプル：気体のインターフェースを横切るように流れ、気体が押しのけてられてバッファ液で置き換えられ、液体サンプル：気体のインターフェースの面積が減少して、最終的に液体サンプル：バッファ液のインターフェースが形成される。
【０５８４】
バッファ液は、オーバーフローチャネル５２４へと流れ続け、空気を通気孔５２６を通って第２のチャネル部４３０４から追い出す。オーバーフローチャネル５２４へのバッファ液の流入を、電極３６０１によって検出することができ、電気信号を生成して、端子３６０２を介してメータ４００内のプロセッサへと送信し、液体サンプル：バッファ液のインターフェースが形成された旨を知らせることができる。
【０５８５】
次に、インターフェースの形成を、図９Ａ〜Ｄおよび１０Ａ〜Ｂを参照して説明する。図９Ａは、アッセイ装置５００について、サンプル液体がサンプル導入口５１０へと加えられた後のインターフェース・ゾーン５２２の領域の上面図および側面図を示している。サンプル液体（例えば、血液）が、試薬ゾーン５１２を満たすべく（例えば、毛管作用によって）引き込まれる。毛管ストップ５３０に達すると、液体がメニスカス５９０を形成する。サンプル液体は、試薬ゾーン５２０から毛管ストップ５３０に近付くとき、インターフェース・ゾーン５２２が試薬ゾーン５２０よりも大きな深さおよび幅を有している毛管ストップ５３０において、チャネルの断面積の急激な増加に直面する。断面形状のこの急激な変化が、サンプル液体のインターフェース・ゾーン５２２への進入を防止する。メニスカス５９０における表面張力が、サンプル液体をインターフェース・ゾーン５１２へと引き込もうとする毛管力を上回る。この段階で、液体サンプル：気体のインターフェース（例えば、血液：空気のインターフェース）が、メニスカス５９０において形成される。さらに図９Ａは、血液中に分散した磁気感受性粒子２００も示している。
【０５８６】
磁界が試薬ゾーン５１２へと加えられる。加えられる磁界を、磁気感受性粒子２００（したがって、磁気感受性粒子上の抗体によって捕捉された分析対象）を移動させるように操作する（例えば、永久磁石を検査片に対して動かすことによって、あるいは電磁石ソレノイドを作動させることによって）ことができる。磁気感受性粒子２００が、試薬ゾーン５１２に沿って毛管ストップ５３０に向かって移動する。
【０５８７】
磁界の源を、成形された磁界をもたらすように構成することができる。成形された磁界は、磁気感受性粒子を検出ゾーン５１４に向かって案内するように設計された磁力線を有することができる。そのような成形された磁界は、磁気感受性粒子の錯体の拡散または移動を制御するために有用でありうる。とくには成形された磁界が望まれる場合に、磁界の源を２つ以上設けることができる。例えば、磁界の源を、アッセイ装置の両端に設けることができ、一方を磁気感受性粒子を引きつけるように構成し、他方を磁気感受性粒子を追い出すように構成することができる。そのような構成は、すべての磁気感受性粒子をアッセイ装置の一端に位置させるうえで有利となりうる。
【０５８８】
図９Ｂは、磁界の印加（磁界の源２１０によって加えられる）によって磁気感受性粒子２００がメニスカス５９０に向かって引き寄せられた後の装置の上面図および側面図を示している。磁界の源２１０を、磁気感受性粒子２００をメニスカス５９０の付近に保つように構成する（例えば、位置、磁界の強度、および磁界の形状に関して）ことができる。磁界の源２１０を、磁界の源から離れようとする拡散に抗するための充分な磁力がメニスカス１９０において粒子２００に作用するように、操作することができる。
【０５８９】
サンプルが、分析対象（例えば、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）とそれぞれの抗分析対象の抗体との間の錯体の形成を可能にするために充分な所定の時間間隔にわたって試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４と接触したとき、第２の液体が、バッファ導入口５２０を介してアッセイ装置５００へと導入される。西洋わさびペルオキシダーゼが検出可能な酵素ラベルとして使用される場合には、第２の液体は、酢酸ナトリウム・バッファ、過酸化水素基質、および酸化還元メディエータとしての２，２’−アジノ−ビス‐（３−エチルベンゾチアゾリン−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）を含んでいる。第２の液体が、リザーバ駆動子４０８によって加えられる正の圧力のもとで検出ゾーン５１４に沿って流れる。第２の流体が、メニスカス１９０において血液サンプルに接し、液体：液体のインターフェースを形成する。液体：液体のインターフェースが形成されることで、磁界の源２１０の影響のもとでの磁気感受性粒子の共役錯体の液体サンプルから第２の液体への移動が容易になる。分析対象を、磁気感受性粒子の共役錯体の一部として液体サンプルから第２の液体へと移動させることで、潜在的に妨げとなりうるサンプル成分ならびに対象外である分析対象が第２の液体へと移動する可能性が、最小限になる。磁気感受性粒子ならびに分析対象（抗体−磁気感受性粒子の錯体および抗体に結び付けられた酵素を含む分析対象の三重錯体の形態である）を含む磁気感受性粒子に結合しているすべてのものが、検出ゾーン５１４の第２の液体へと移動する。
【０５９０】
インターフェース・ゾーン５２２を、第２の液体の前面が、正面からメニスカス５９０に出会うのではなく、メニスカス５９０を横方向に横切って流れるように、形作ることができる。図９Ｃが、インターフェース・ゾーン５２２の領域について、アッセイ装置５００の上方からの平面図を示している。図９Ｃは、第２の液体が検出ゾーン５１４から毛管ストップ５３０に向かって流れるときの移動する液体の前部を示す輪郭の時系列を表わしている。とくには、液体の前部の順次の位置２１１、２１２、２１３、２１４、２１５が、第２の液体の前部を毛管ストップ５３０に保持されたメニスカス５９０を横方向に横切って流れるように案内するために、どのようにインターフェース・ゾーン５１２を形作ることができるのかを説明している。第２の液体のメニスカス２１５が液体サンプルのメニスカス５９０を横切って横方向に移動することで、気泡が第１の液体と第２の液体との間に捕捉される可能性が少なくなる。液体：液体のインターフェースに気泡が存在すると、血液サンプルから第２の液体への磁気感受性粒子の移動の効率が、低下する可能性がある。したがって、サンプルの移動の効率の低下の可能性を少なくするために、気泡のないインターフェースをもたらすことが望ましいと考えられる。
【０５９１】
図９Ｄは、第２の液体がインターフェース・ゾーン５１２を満たして、液体：液体のインターフェース２２０を形成した後のアッセイ装置５００の上面図および側面図である。第２の液体の前部２１６が、オーバーフローチャネル５２４を通って通気孔５２６に向かって流れ続ける。磁気感受性粒子：分析対象の錯体２００が、源２１０によって加えられる引き付けの磁界のおかげで、液体：液体のインターフェース２２０を横切って運ばれる。磁気感受性粒子：分析対象の錯体２００が、磁界の源２１０の影響のもとで検出ゾーン５１４に沿って徐々に移動する。液体：液体のインターフェース２２０が形成された後に、第２の液体が、バッファ導入口５２０から検出ゾーン５１４、インターフェース・ゾーン５２２、およびオーバーフローチャネル５２４を通って流れ続けることで、非磁性の材料を磁気感受性粒子：分析対象の錯体２００から離れるように洗い流すことを助けることができる。このような洗浄は、磁気感受性粒子に結び付けられた材料のみが検出ゾーン５１４の電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒによって検出されるように保証するうえで、役立つことができる。
【０５９２】
アッセイ装置へと組み込まれた流体リザーバ５０７が、反応バッファを送達することができ、バッファの組成は、さまざまであってよい（例えば、酢酸ナトリウム、クエン酸リン酸塩、クエン酸ナトリウム、あるいは任意の適切な濃度またはｐＨの他の任意のバッファ）。任意の適切な液体を、バッファの代わりに使用することができる（例えば、その全体参照により本明細書に組み込まれる２００５年１１月１５日付の米国実用新案登録出願第６０／７３６，３０２号を参照）。いくつかの実施形態においては、リザーバ５０７を、アッセイ装置５００の一体ではない部品として用意することができ、その場合には、リザーバ５０７をバッファ導入口５２０に一体化させるインターフェース・ポートを設けることができる。
【０５９３】
図１０Ａおよび１０Ｂが、磁気感受性粒子：分析対象の錯体を、液体：液体のインターフェースを横切って、抗体に組み合わせられた非磁気感受性粒子から分離することを、さらに詳しく説明している。図１０Ａにおいて（図９Ｂと同様に）、磁気感受性粒子２００が、磁界の源２１０によって加えられる磁界のおかげで、メニスカス５９０の付近に位置している。磁気感受性粒子２００の一部は、抗体：磁気感受性粒子の錯体において第２の分析対象へと結合しており、これが次に、抗体に結び付けられた酵素２３０に結合している。試薬ゾーン５１２において抗体に結び付けられた酵素は、第２の分析対象２４０に比べて余分に存在しており、抗体に結び付けられた酵素の一部２５０が、目標の分析対象に結合せずに残る可能性がある。磁気による分離は、抗体に結び付けられた結合していない酵素２５０が検出ゾーン５１４に達することがないように保証するうえで役に立ち、すなわち換言すると、磁気感受性粒子：分析対象の錯体に結び付いた酵素２３０のみが、磁界の源２１０の影響のもとで電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒに到着し、検出可能な信号に寄与する。このようにして、検出可能な信号を、再現性を伴って、サンプル内の分析対象（例えば、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）２４０の量または濃度に関連付けることができる。
【０５９４】
バッファ液の流れが終わるとき、安定な液体サンプル：液体のインターフェースが形成される。液体サンプル：液体のインターフェースは、実質的に動かず、液体サンプル：気体のインターフェースの形成から液体サンプル：液体のインターフェースの形成の間、チャネルに沿った移動に関して基本的に静止したままであり、すなわちサンプル液体：液体のインターフェースを横切って拡散は生じることができるが、インターフェースを横切る液体の塊の移動は生じることがない。液体サンプルとバッファ液との間のインターフェースを横切る液体の塊の移動は、実質的に生じない。液体サンプル：液体のインターフェースは、時間ＴＭにわたって基本的に静止したままであり、ここでＴＭは、少なくとも１秒（例えば、少なくとも２秒、少なくとも３秒、少なくとも５秒、少なくとも１０秒、少なくとも３０秒、少なくとも１分）である。
【０５９５】
液体サンプル：気体および液体サンプル：バッファ液のインターフェースは、どちらも、アッセイ装置に対して実質的に垂直に形成される。アッセイ装置は、細長いストリップとして形成され、測定のあいだ実質的に水平な平面に保持され、インターフェースは、この平面に実質的に垂直に形成される。インターフェースを、地球のその場の重力場の力線（すなわち、装置５００および周囲のメータ４００の直近の空間であって、装置およびメータを含んでいる空間を支配している重力の力線）に実質的に平行に形成されると言うこともできる。
【０５９６】
液体サンプル：バッファ液のインターフェースが形成されたことを知らせる電極３６０１からの信号を受け取ると、メータ４００は、第１のチャネル部へと磁界を加え、磁気によって磁気感受性粒子を液体サンプル：液体のインターフェースを横切って移動させるべく動作する。この移動が、磁気感受性粒子を（第１および／または第２の結合剤ならびに分析対象に結合しているかにかかわらず）液体サンプルからバッファ液へと分離する。磁気感受性粒子に結合していない試薬は、液体サンプル中に残される。
【０５９７】
磁気感受性粒子をバッファ液へと磁気によって移動させるために、粒子が、最初に、磁気感受性粒子をクラスタへと集合させるべく磁界を第１のチャネル部４３０２を通って比較的低速で移動させることによって集められる。磁気感受性粒子が、粒子がジャンクション４３０５に隣接して液体サンプル中に保持されるまで、約３６ｍｍ／ｍｉｎ（上述のとおり）の「収集速度」（Ｓ１）でジャンクション４３０５に向かってゆっくりと引き寄せられる。
【０５９８】
このジャンクションへと向かう磁気感受性粒子の移動は、磁気感受性粒子が最初に液体：気体のインターフェースの付近に集められるように、液体サンプル：バッファ液のインターフェースの形成よりも前に生じてもよい。あるいは、液体サンプル：バッファ液のインターフェースが形成された後で、集められてもよい。一典型的な実施形態においては、第１のチャネル部を通る磁界の移動の時期が、液体サンプル：バッファ液のインターフェースが形成されるときに磁気感受性粒子がこのインターフェースの付近に集まるように設定される。
【０５９９】
第１のチャネル部４３０２に含まれている磁気感受性粒子のすべて、または実質的にすべて（例えば、磁気感受性粒子の少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％）が、液体サンプル：気体または液体サンプル：液体のインターフェースの付近に集められる。
【０６００】
磁気感受性粒子が、液体サンプル：液体のインターフェースの形成よりも前に液体サンプル中でジャンクションの付近に集められる場合、集まった磁気感受性粒子が、液体サンプル：気体のインターフェースに隣接して液体サンプル中に保持されるように、磁界の移動を休止することができる。液体サンプル：液体のインターフェースが形成された後で、磁界を第２のチャネル部に向かって移動させ、磁気感受性粒子を液体サンプル：バッファ液のインターフェースを横切ってバッファ液へと引き込むことができる。
【０６０１】
典型的な実施形態においては、液体サンプルにおけるジャンクションの付近への磁気感受性粒子の集合が、液体サンプル：バッファ液のインターフェースがすでに形成されたときに生じ、あるいは液体サンプル：バッファ液のインターフェースの形成と同時に生じる。このような構成においては、磁界を、休止を必要とすることなく、第２のチャネル部に向かって連続的に動かして、磁気感受性粒子を液体サンプル：バッファ液のインターフェースを横切ってバッファ液へと引き込むことができる。磁気感受性粒子を液体サンプル：第２の液体のインターフェースを横切って第２の液体へと磁気によって移動させるステップは、液体サンプル：第２の液体のインターフェースの形成後の所定の時間期間ＤＫであってよく、ここでＤＫは、１〜６０秒の範囲（例えば、約１秒以上、約２秒未満、約５秒未満、約１０秒未満、約２０秒未満、約３０秒未満、約４０秒未満、約５０秒未満、約６０秒未満）であり、典型的な実施形態においては、少なくとも約１０秒未満（例えば、少なくとも約８秒未満、少なくとも約６秒未満、少なくとも約５秒、少なくとも約３秒、少なくとも約２秒、少なくとも約１秒、少なくとも約０．５秒）である。
【０６０２】
集合した磁気感受性粒子を液体サンプル：バッファ液のインターフェースを横切って引き込むとき、磁界の移動の速度を、例えば少なくとも約２秒（少なくとも約０．５秒、少なくとも約１秒、約３秒未満、約４秒未満）などの短い時間期間の間、「ジャンプ速度」へと高めることができる。この磁界の移動の速度の一時的な加速は、液体サンプル：バッファ液のインターフェースに隣接して液体サンプル中に集まった磁気感受性粒子の実質的にすべてを、バッファ液へと成功裏に移動させることを助ける。液体サンプルに含まれている全部でＮ個の磁気感受性粒子のうち、少なくとも７０％（例えば、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％）が、液体サンプル：バッファ液のインターフェースを横切ってバッファ液へと移される。磁気感受性粒子は、互いの時間ＴＮのうちに液体サンプル：バッファ液のインターフェースを横切って移動させられ、ここでＴＮは３秒である（例えば、ＴＮは２．５秒であり、ＴＮは２．０秒であり、ＴＮは１．５秒であり、ＴＮは１．０秒であり、ＴＮは０．５秒である）。典型的な実施形態においては、液体サンプル：液体のインターフェースを横切る磁気感受性粒子の移動の方向は、インターフェースを形成するときの第２の液体の流れの方向に実質的に直角である。移動の方向は、第１および／または第２のチャネル部の主たる長手軸に平行であってよい。
【０６０３】
ひとたび磁気感受性粒子がバッファ液へと移動すると、加えられる磁界が、「電極引きずり速度」Ｓ２で電極５１６ｗ、５１６ｃ、および５１６ｒに向かって動かされる。
【０６０４】
次いで、加えられる磁界を、磁気感受性粒子を第２のチャネル部４３０４の作業電極５１６ｗに局在させるように位置させることができ、随意により集中させることができる。
【０６０５】
作業電極５１６ｗに達したとき、電気化学信号の測定を、磁気感受性粒子：第１の結合剤：分析対象：第２の結合剤：検出可能ラベルの錯体がバッファ液中の基質および共同因子と反応して検出可能な信号を生み出すことできる後述のとおりのインキュベーション期間（または、ターンオーバー時間）の間、遅らせることができる。このインキュベーション期間は、錯体が作業電極に到着したときに始まる。インキュベーション期間の終わりにおいて、電気化学的な測定が、約３秒（例えば、約０．５秒、約１秒、約２秒、約４秒、約５秒、約７秒、約９秒、約１０秒）の測定期間にわたって実行される。
【０６０６】
典型的な実施形態においては、バッファ液へと移動した磁気感受性粒子が、磁気感受性粒子：第１の結合剤：分析対象：第２の結合剤および酵素ラベルの錯体を含んでおり、酵素ラベルが、１つ以上の酵素基質および／または共同因子を還元または酸化することができる。この酸化または還元によって、作業電極において電流測定または電圧測定によって検出できる検出可能な信号がもたらされる。検出された信号が、端子５１８ｗ、５１８ｃ、５１８ｒによってメータ４００およびメータのプロセッサに伝えられる。
【０６０７】
この検出が、例えば、バッファ液における分析対象の存在の有無、および／またはバッファ液に存在する分析対象の量、および／またはバッファ液に存在する分析対象の量の通知など、バッファ液の特性についての測定をもたらす。メータ４００が、検出された信号によってもたらされるこの情報を処理して、アッセイ結果をもたらすことができる。処理は、測定された分析対象の量を基準の量と比較してアッセイ結果を生成するステップを含むことができる。アッセイ結果は、サンプルに分析対象が存在するとの判定、サンプル中に存在する分析対象の定性的または定量的な量の判定、ならびに／あるいは上記判定にもとづく情報の通信または表示の形態をとることができる。アッセイ結果を、メータ上に表示することができる。これに代え、あるいはこれに加えて、例えば「治療が必要」または「９１１番に電話せよ」または「薬物［ｘ］を用量［ｙ］だけ服用せよ」などといったユーザへのメッセージなど、アッセイ結果にもとづく情報を表示してもよい。
【０６０８】
少量または多量の分析対象をただ１つのアッセイ・システムによって検出するためには、システムが、検出可能範囲の全体にわたる感度を有する必要がある。システムが、２倍の量の分析対象を検出できることが有用である。これは、サンプルの分析対象の濃度について、例えば５０ｐＭの分析対象から１００ｐＭの分析対象への変化、または例えば、１０，０００ｐＭの分析対象から２０，０００ｐＭの分析対象への変化の検出を必要とする。一典型的な実施形態においては、バッファ液において検出される分析対象の量の測定が、検出された電気化学的電流（または、電位）を標準の較正曲線と比較することを含んでいる。較正曲線のデータセットを、メータ４００のメモリ装置（例えば、ＲＡＭまたはＲＯＭ）に保存することができ、作業電極５１６ｗからの検出電流信号を較正データセットと比較して、バッファ液中の分析対象の量の測定をもたらすことができる。この量を、ディスプレイ４０６上でメータ４００に表示することができる。メータ４００は、２つ以上の較正曲線または直線を記述する情報を保存することができる。例えば、正確な結果をもたらすためには、（上記式１によって記述されるような）線形または対数線形な較正曲線が好ましい。較正データは、パラメータの所与の範囲にわたり、線形であってよく、あるいは実質的に一定の曲線を有することができる。少量の分析対象（例えば、１〜１０ｐＭのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）を検出するとき、較正データは、電気化学信号が磁気感受性粒子が作業電極に達した後に短い時間（例えば、１〜１０秒）で測定される場合、線形でありうるが、測定が長い時間期間（例えば、５〜１０分）の後に行われる場合には、非線形となりうる。多量の分析対象（例えば、１０，０００ｐＭのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）の検出においては、較正データは、電気化学信号が磁気感受性粒子が作業電極に達した後のより遅い時点（例えば、５〜１０分）で検出される場合に、線形となりうる。したがって、２つ以上の較正データセットを用意する（例えば、メータ４００のメモリ装置に保存する）ことができる。アッセイ結果の判定に使用するためのデータセットを、信号が検出される測定ステップの開始からの時点に応じて選択することができる。
【０６０９】
このように、バッファ液中の分析対象の検出は、
（i）時間Ｔ１において、作業電極において電気化学信号Ｑ１を測定するステップ、
（ii）Ｑ１をＴ１用の較正データセットと比較し、Ｑ１がＴ１用のデータセットに存在する場合に、Ｔ１用のデータセットを使用してバッファ液内の分析対象の量を割り出すステップ、
（iii）Ｑ１がＴ１用の較正データセットに存在しない場合に、Ｔ２＞Ｔ１である時間Ｔ２において、作業電極において電気化学信号Ｑ２を測定するステップ、ならびに
（iv）Ｑ２をＴ２用の較正データセットと比較し、Ｑ２およびＴ２の有効な比較がなされた場合に、バッファ液内の分析対象の量を割り出すステップ
を含むことができる。
【０６１０】
Ｔ１、Ｔ３、Ｔ３、Ｔ４は、測定期間に対応し、磁気感受性粒子が電気化学信号の検出によるバッファ液中の分析対象の測定を開始できるように作業電極５１６ｗの付近にもたらされた時点Ｔ＝０にて開始される時点または範囲である。
【０６１１】
その後の時間Ｔ３、Ｔ４について、ステップ（i）〜（iv）の１つ以上を、それぞれの時点（Ｑ３、Ｑ４、・・・）のためのデータセットを使用して、測定された電気化学信号が該当の較正データセットの範囲に適合して、分析対象の量の割り出しを行うことができるまで、繰り返すことができる。電気化学信号は、標準的な電気化学的電流または電圧の測定技法に従って作業電極において測定される電流または電位（参照電極との比較）であってよい。データセットが、作業電極において検出される所与の電気化学的電流（または、電位）について、サンプル中の分析対象の量についての情報をもたらすことができる。
【０６１２】
割り出される分析対象の量は、定性的な量（例えば、高、低、または中など、比較によってもたらすことができる定性的な指標）または定量的な量（例えば、５０ｐＭの分析対象）であってよい。
【０６１３】
メータ４００を、所定の時間間隔Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４等において作業電極５１６ｗ（さらに、必要であれば他の電極５１６ｒおよび５１６ｃ）から電気化学的測定Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３、Ｑ４、・・・を採取し、メータ４００内のプロセッサを使用して検出された電気化学的信号をメータ４００内のメモリ装置に保存されたそれぞれの較正データセットと比較するように、プログラムすることができる。
【０６１４】
作業電極５１６ｗにおける電気化学的信号を測定するために、磁気感受性粒子を、測定を行うための充分な時間期間にわたって磁気によって作業電極に保持することができる。この時間の量は、較正データセットＴＸに適合して、バッファ液中の分析対象の量の定性的または定量的指標を入手できるようにする電気化学的信号ＱＸを測定するために、少なくとも充分に長くあるべきである。典型的な実施形態においては、ジャンクション４３０５から作業電極５１６ｗへの磁気感受性粒子の移動が、作業電極５１６ｗ（ここで、電気化学的信号の検出によって反応を測定することができる）への到着よりも前に生じる酵素ラベルとバッファ基質との間の反応の程度を最小限にするために、迅速に実行される。
【０６１５】
時間ＴＸは、磁気感受性粒子が作業電極に達したとき、または作業電極５１６ｗにおける測定が開始されたときに始まる。典型的な実施形態においては、作業電極における測定が、磁気感受性粒子が作業電極に到着したときに始まる。典型的な実施形態においては、ＴＸが、少なくとも約２秒、少なくとも約５秒、少なくとも約１０秒、少なくとも約２０秒、少なくとも約３０秒、少なくとも約４５秒、少なくとも約１分、少なくとも約２分、少なくとも約３分、少なくとも約４分、少なくとも約５分、少なくとも約６分、少なくとも約７分、少なくとも約８分、少なくとも約９分、少なくとも約１０分、少なくとも約１２分、少なくとも約１５分、あるいは約１０秒未満、約２０秒未満、約３０秒未満、約４５秒未満、約１分未満、約２分未満、約３分未満、約４分未満、約５分未満、約６分未満、約７分未満、約８分未満、約９分未満、約１０分未満、約１２分未満、約１５分未満、少なくとも約２〜３０秒、少なくとも約３０〜６０秒、少なくとも約１〜３分、少なくとも約３〜５分、少なくとも約５〜８分、少なくとも約８〜１０分、少なくとも約１０〜１２分、少なくとも約１３〜１５分、少なくとも約１５〜２０分のうちの１つから選択される。
【０６１６】
典型的な実施形態においては、磁気感受性粒子が最初に液体サンプル：バッファ液のインターフェースを横切ってバッファに進入する点から、磁気感受性粒子が作業電極５１６ｗに達する点までに要する時間が、約６０秒未満（例えば、約４５秒未満、約３０秒未満、約２０秒未満、約１５秒未満、約１０秒未満、約５秒未満、約３秒未満、約２秒未満、約１秒未満）である。
【０６１７】
さらなる典型的な実施形態の説明−ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの検出
典型的な実施形態においては、分析対象が、Ｎ末端プロ脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）であり、サンプル材料が、ヒトからの全血である。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの存在は、心臓の状態（すなわち、心臓に関する生理学的状態（例えば、心不全などの心機能の異常））の指標である。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの測定の結果に少なくとも部分的にもとづいて、心臓の病気の存在を判断することができる。例えば、ヒトが心不全を経験し、直面しており、あるいは心不全の発現の傾向を有しているか否かを、判断することが可能である。
【０６１８】
図１を参照すると、アッセイ方法１０００が、混合物の形成ステップ１０１０、試薬／分析対象の捕捉ステップ１０２０、錯体の輸送／洗浄ステップ１０３０、錯体の測定ステップ１０４０、および心臓の状態の判定ステップ１０５０を含んでいる。混合物の形成ステップ１０１０において、ヒトからの血液およびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへと結合できる抗体試薬を含む混合物が形成される。試薬／分析対象の捕捉ステップ１０２０において、抗体試薬が血液のサンプルに存在するＮＴ−ｐｒｏＢＮＰと錯体を形成する。錯体の輸送／洗浄ステップ１０３０において、先のステップにおいて形成された抗体試薬−ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの錯体が、非錯体の材料を取り除くべく洗浄され、検出ゾーンへと運ばれる。錯体の測定ステップ１０４０において、検出ゾーンへと運ばれた抗体試薬−ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの錯体の存在が、（例えば、定性的または定量的に）測定される。心臓の状態の判定ステップ１０５０において、被験者の心臓の状態が、錯体の測定ステップ１０４０の結果に少なくとも部分的にもとづいて判定される。
【０６１９】
次に、アッセイ方法１０００を、さらに詳しく説明する。
【０６２０】
混合物の形成ステップ１０１０において、アッセイ装置の試薬ゾーンに配置された試薬材料と、アッセイ装置を満たすために充分なヒトの血液サンプルとの間で、混合物が形成される。血液サンプルを、指刺しまたは静脈穿刺から得ることができる。いくつかの試薬が、アッセイ装置の試薬ゾーン内に存在している。試薬は、以下の種を含んでいる。すなわち、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへと結合できる第１の抗体、第１の抗体と同時にＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへと結合できる第２の抗体、試薬ゾーンにおける血液サンプルの凝固を防止するための抗凝血剤、少なくとも１つの磁性粒子、検出可能な種を生成するために使用することができる酵素ラベル、バッファ塩、および少なくとも１つのコロイド粒子である。第１の抗体を、ビオチンで修飾することができ、第２の抗体を、酵素ラベルと共役させることができる。第２の抗体−酵素の共役を、抗体−酵素の共役の数を増すために、金コロイドゾル粒子に吸収することができる。磁性粒子を、ビオチン変性の第１の抗体を捕まえるために使用することができるストレプトアビジンでコートすることができる。試薬がＮＴ−ｐｒｏＢＮＰと相互作用するとき、以下のように様式的に表わすことができる共役錯体が形成される。
【表１】
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【０６２１】
ストレプトアビジンでコートされた磁性粒子が、いくつかのビオチン変性の抗体を受け入れることができる。ビオチン変性の第１の抗体が、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの第１の特有の領域に結合する。第２の抗体−酵素の共役が、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの第２の特有の領域に結合する。第２の抗体−酵素の共役は、金ゾル粒子にあらかじめ組み合わせられてもたらされ、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ−抗体の錯体の一部となる酵素ラベルの数を多くしている。典型的な実施形態においては、第１の単クローン性抗体であるクローン  １５Ｆ１１が、ビオチン変性され、第２の抗体であるクローン  ２４Ｅ１１が、ＨＲＰと共役にされている。
【０６２２】
試薬ゾーンに存在するバッファ塩が、混合物のｐＨを制御して、錯体の形成に有利なｐＨ値をもたらす。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ−抗体の錯体の形成を妨げない抗凝血剤も含まれており、血液サンプルが試薬ゾーンにおいて凝固して試薬ゾーンから検出ゾーンへの錯体の移動の可能性を低下させることが、生じないようにしている。
【０６２３】
いくつかの実施形態においては、試薬ゾーンを満たすために必要とされる血液の量を、少数回（例えば、３回以下、２回以下、１回）の指刺しから得ることができる。例えば、いくつかの実施形態においては、試薬ゾーンを満たすために必要とされる血液の量を、１回の指刺しから得ることができる。血液の量は、典型的には、約１０μｌ（例えば、少なくとも約０．５μｌ、少なくとも約１μｌ、少なくとも約５μｌ、少なくとも約１５μｌ、少なくとも約２５μｌ、少なくとも約５０μｌ）である。いくつかの実施形態においては、試薬ゾーンを満たすために必要とされる血液の量が、約５０μｌ以下（例えば、約４０μｌ以下、約２５μｌ以下、約１５μｌ以下、約１０μｌ以下、約５μｌ以下）である。典型的な実施形態においては、装置を満たすために必要とされる血液の量が、１０μｌである。
【０６２４】
試薬を、例えばノズルからの送出または吸引、電磁弁ならびにサーボ駆動またはステッパ駆動シリンジの使用など、いくつかの公知の技法を使用して試薬ゾーンへと堆積することができる。これらの方法は、試薬の滴または線を、接触または非接触の様式で堆積することができる。試薬を堆積するための他の方法として、パッド印刷、スクリーン印刷、圧電印刷ヘッド（例えば、インクジェット印刷）、あるいは試薬を放出すべく圧縮される袋（「ケーキ・アイサー」）からの堆積が挙げられる。堆積は、好ましくは、湿度および温度が制御された環境で実行される。異なる試薬を、同じまたは別のステーションにおいて堆積することができる。
【０６２５】
所望の堆積ゾーンの外への試薬の交差汚染またははみ出しを検出できるようにするために、随意により蛍光剤または着色剤を試薬へと加えることができる。製品の性能が、交差汚染によって損なわれる可能性がある。堆積ゾーンは、近接していても、離れていてもよい。蛍光剤または着色剤は、アッセイ装置の動作、とくには分析対象の検出を妨げることがないように選択される。
【０６２６】
堆積の後に、試薬は乾燥させられる。乾燥は、大気での乾燥、赤外線での乾燥、強制空気によって補助された赤外線での乾燥、紫外光での乾燥、暖かい強制空気、制御された相対湿度での乾燥、またはこれらの組み合わせによって達成できる。
【０６２７】
試薬／分析対象の捕捉ステップ１０２０は、試薬と血液サンプルに含まれているＮＴ−ｐｒｏＢＮＰとの間の錯体の形成を含んでいる。血液サンプルがアッセイ装置へと加えられたとき、乾燥している試薬が、最初に血液との非一様な混合物を形成する。短い時間間隔（例えば、少なくとも約１秒、少なくとも約５秒、少なくとも約２０秒、少なくとも約６０秒）のうちに、試薬が充分な水を得て、サンプルとの相互作用を始める。抗凝血剤がサンプル中に分散し、凝血塊の形成を防止して、サンプルを流体の状態に保つ。バッファ塩がサンプル中に分散し、サンプルのｐＨを、抗体：分析対象の錯体の形成に好ましい所望の値に保つ。ｐＨ値は、例えば約７．４である血液のｐＨに保たれ、ｐＨを、約ｐＨ７．２〜約ｐＨ７．６の間の範囲（例えば、約６．９以上、約７．０以上、約７．１以上、約７．２以上、約７．３以上、約７．４以上、約７．５以上）（例えば、約８．０以下、約７．９以下、約７．８以下、約７．７以下、約７．６以下、約７．５以下、約７．４以下）に保つことができる。第１および第２の抗体が、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰに結合し、錯体を形成する。ビオチンでラベル付けされた第１の抗体が、ストレプトアビジンでコートされた磁性粒子に結合する。酵素でラベル付けされた第２の抗体が、試薬ゾーンへの堆積に先立ってあらかじめ金ゾルに混ぜ合わせられる。サンプルの試薬との混合を、分析対象（この場合には、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）の検出を可能にするための適切な錯体の形成が生じるように保証するために充分な所定の時間間隔にわたって、試薬と混同することができる。試薬／分析対象の捕捉ステップ１０２０は、少なくとも約５分（例えば、少なくとも約数秒、少なくとも約６０秒、少なくとも約２分、少なくとも約４分、少なくとも約７分、少なくとも約１０分、少なくとも約１５分、少なくとも約３０分）を要することができる。典型的な実施形態においては、試薬／分析対象の捕捉ステップ１０２０が、１０分を要する。
【０６２８】
いくつかの実施形態においては、磁界を試薬ゾーンへと加えることができる。磁界を、試薬ゾーンにおいて磁性粒子を操作するために使用することができる。磁性粒子を試薬ゾーンにおいて振動／移動させ、血液サンプルの攪拌を生じさせることができる。すなわち、磁性粒子を、試薬をサンプルと混ぜ合わせて、目標の分析対象（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）が第１および第２の抗体と錯体を形成する可能性を高めるために、使用することができる。
【０６２９】
錯体の輸送／洗浄ステップ１０３０は、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰと抗体との錯体を試薬ゾーンから検出ゾーンへと移動させることを含んでいる。アッセイ装置が、サンプルが試薬と反応する試薬ゾーン、試薬ゾーンと検出ゾーンとの間のインターフェースを提供するインターフェース・ゾーン、およびサンプル中に存在する分析対象（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）が（定性的または定量的に）測定される検出ゾーンを備えている。サンプルのアッセイの過程において、検出ゾーンがバッファ溶液で積極的に満たされる。バッファが、サンプルがアッセイ装置へと加えられた後の所定の時点において、リザーバから放出される。バッファ溶液が、検出ゾーンおよびインターフェース・ゾーンを満たす。バッファ溶液がインターフェース・ゾーンへと送達されたとき、バッファが、（さらに詳しく後述されるとおり）試薬ゾーンのサンプルと液体−液体のインターフェースを形成する。余分なバッファ溶液は、オーバーフローチャネルへと移動する。バッファがサンプルに接触して、サンプルとインターフェースを形成したとき、アッセイ装置のマイクロ流体ネットワークを通過する連続的な液体の経路が存在する。したがって、試薬／分析対象の錯体を、連続的な液体の流れに支持されて、アッセイ装置の全長にわたって移動させることができる。
【０６３０】
磁界を、アッセイ装置内で試薬／分析対象の錯体を操作するために使用することができる。試薬／分析対象の錯体を、移動する磁界によって、試薬ゾーンに沿い、インターフェース・ゾーンを通過し、検出ゾーンへと引き込むことができる。いくつかの実施形態においては、磁界が、駆動機構に位置する永久磁石であってよく、駆動機構が、アッセイ装置のマイクロ流体ネットワークの下方に位置する経路であって、アッセイ装置のマイクロ流体ネットワークに平行な経路に従う。磁石の経路が、磁気感受性の錯体を試薬ゾーンから検出ゾーンへと運ぶ方向に移動する。他の実施形態においては、磁界が、磁気感受性の錯体をアッセイ装置において試薬ゾーンから検出ゾーンへと移動させる磁界の勾配を生み出すことができる電磁界であってよい。
【０６３１】
試薬／分析対象の捕捉ステップ１０２０において試薬ゾーン内で試薬／分析対象の錯体が形成されるとき、他のサンプル成分が、そのように形成される錯体に捕捉され、あるいは結び付く可能性がある。そのような無関係な物質が、目標の分析対象（すなわち、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）の検出を妨げる可能性があり、したがって錯体の測定ステップ１０４０に先立って、錯体に結び付いた無関係な物質の量を最小限にすることが望ましい。この段階において、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰおよび第１の抗体磁性粒子に結び付いていない酵素ラベルの第２の抗体は、無関係な物質であると考えられる。錯体の測定ステップ１０４０に先立って、無関係な物質を最小限にまで減らすことが望ましい。試薬／分析対象の錯体が、磁界の影響のもとでサンプル−バッファのインターフェースを横切ってインターフェース・ゾーンへと運ばれるとき、バッファが、試薬／分析対象の錯体の移動の方向と反対の方向に流れることができる。バッファを、錯体が試薬ゾーンから検出ゾーンへと運ばれる最中に、検出ゾーンを通り、インターフェース・ゾーンを横切り、オーバーフローへと連続的に送達することができる。試薬／分析対象の錯体に対するバッファの対向流が、磁気感受性の錯体から無関係な物質を効果的に分離する。このようにして、無関係な物質が、検出ゾーンからオーバーフローへと運び去られる。このようにして、磁気感受性の錯体を、錯体に付随する無関係な物質を最小限にしつつ、検出ゾーンへと運ぶことができる。
【０６３２】
錯体の測定ステップ１０４０において、検出ゾーンへと運ばれた磁気感受性の試薬／分析対象の錯体を、測定することができる。典型的な実施形態においては、検出ゾーンが、サンプルの電気化学的分析を実行するために使用することができる電極を備えている。試薬／分析対象の錯体の一部である酵素ラベルの抗体が、検出ゾーンを満たすために使用されたバッファ中に存在する基質を変換できる。基質を、検出不可能な第１の形態から、検出可能な第２の形態へと変換できる。検出ゾーン内の測定電極を、基質の検出可能な形態を測定するために使用することができる。例えば、作業電極を参照電極（例えば、銀／塩化銀（Ａｇ／ＡｇＣｌ）参照電極）に対して特定の電位へと偏極させ、電流の測定を行うことができる。例えば、フェリシアン化カリウムを、グルコースオキシダーゼによって、グルコースのグルコン酸への変換の際に、フェロシアン化カリウムへと変換（還元）することができる。形成されるフェロシアン化カリウムを、約＋４００ｍＶ対Ａｇ／ＡｇＣｌにおいて正の電流として測定することができる。フェロシアン化物は、作業電極によって再びフェリシアン化物へと酸化される。電気活性な種を酸化することができ、その場合には、電気活性な種が電極へと電子を失い、電気活性な種を還元することができ、その場合には、電気活性な種が電極から電子を受け取る。電極と電気活性な物質との間の電子の受け渡しが、正または負の電流であってよい測定可能な電流をもたらす。
【０６３３】
電気活性な物質の電流の測定を、較正線を確立するために使用することができる。既知の量の物質が、式（式１）ｙ＝ｍｘ＋ｃによって表わすことができる一意な電流をもたらし、ここでｙは、測定される電流を表わし、ｘは、物質の濃度を表わし、ｍは、この線の勾配であり、ｃは、この線のｙ軸上の切片である。したがって、測定された電流を、溶液中の未知の量の物質の濃度を割り出すために、（式２）ｘ＝（ｙ−ｃ）／ｍを与える式１の変形に従って使用することができる。
【０６３４】
アッセイ装置のリザーバに含まれるバッファは、バッファ塩および酵素のための基質を含んでいる。バッファ塩は、基質を検出可能な生成物へと変換する酵素にとって適切な環境をもたらすために、ｐＨを緩衝する。例えば、バッファ塩は、緩衝酢酸溶液（例えば、酢酸ナトリウム）であってよい。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約１００ｍＭの酢酸ナトリウム（例えば、少なくとも約１１０ｍＭの酢酸ナトリウム）を含むことができる。いくつかの実施形態においては、バッファが、約１５０ｍＭの酢酸ナトリウム（例えば、約１３５ｍＭの酢酸ナトリウム）を含むことができる。典型的な実施形態においては、バッファ塩が、約１２５ｍＭの酢酸ナトリウム（例えば、１２５ｍＭの酢酸に１２５ｍＭの酢酸ナトリウムを加えることによってｐＨ４．０にされる）を含んでいる。さらに、バッファ溶液は、分析の最中の参照電極の電気化学を安定にするために、塩化物（例えば、塩化カリウム（ＫＣｌ））を含むことができる。いくつかの実施形態においては、塩化物が、少なくとも約１００ｍＭのＫＣｌ（例えば、少なくとも約１２５ｍＭのＫＣｌ）を含むことができる。いくつかの実施形態においては、塩化物が、少なくとも約２００ｍＭのＫＣｌ（例えば、少なくとも約１７５ｍＭのＫＣｌ）であってよい。典型的な実施形態においては、塩化物が、１５０ｍＭのＫＣｌを含む。さらに、バッファ溶液は、抗体の錯体がマイクロ流体ネットワーク５０８の内表面に付着する可能性を少なくするために、洗浄剤を含むことができる。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約０．０５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標）（例えば、少なくとも約０．０７５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標））を含むことができる。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約０．２５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標）（例えば、少なくとも約０．１５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標））を含むことができる。典型的な実施形態においては、バッファ溶液が、約０．１％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０（商標）を含んでいる。さらにバッファは、西洋わさびペルオキシダーゼの場合には２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）および過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）である酵素ラベルのための基質を含んでいる。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約５ｍＭのＡＢＴＳおよび少なくとも約５ｍＭのＨ２Ｏ２（例えば、少なくとも約７．５ｍＭのＡＢＴＳおよび少なくとも約７．５ｍＭのＨ２Ｏ２）を含んでいる。いくつかの実施形態においては、バッファが、少なくとも約１５ｍＭのＡＢＴＳおよび少なくとも約１５ｍＭのＨ２Ｏ２（例えば、少なくとも約１２．５ｍＭのＡＢＴＳおよび少なくとも約１２．５ｍＭのＨ２Ｏ２）を含んでいる。典型的な実施形態においては、バッファが、１０ｍＭのＡＢＴＳおよび１０ｍＭのＨ２Ｏ２を含んでいる。バッファ溶液は、４．２に等しい最終的なｐＨ（例えば、少なくとも約３．８のｐＨ、少なくとも約４．０のｐＨ）（例えば、４．６以下のｐＨ、４．４以下のｐＨ）を有する。
【０６３５】
第２の抗体と共役する酵素ラベルは、例えば西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）であってよい。ＨＲＰは、過酸化水素およびＡＢＴＳの水および酸化ＡＢＴＳへの変換を触媒する。生成された酸化ＡＢＴＳを、作業電極において電気化学的に測定することができる。したがって、錯体の測定ステップ１０４０において、アッセイ装置のマイクロ流体ネットワークを通って運ばれた任意のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体の錯体を、測定電極の近傍において生成される酸化ＡＢＴＳの量に従って測定することができる。測定される電流は、式２に従い、酸化ＡＢＴＳの量に比例し、したがって測定される電流は、電極へと運ばれた錯体中のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの量に比例する。
【０６３６】
心臓の状態の判定ステップ１０５０において、錯体の測定ステップ１０４０において得られた測定結果が、患者の状態を判断するために使用される。
高い測定結果は、患者が心不全に直面しており、あるいは最近に心不全を経験したことを示している可能性がある。高い結果は、心不全を抱えていないことが既知である集団の断面において測定されると考えられる水準よりも高い結果である。
【０６３７】
心臓の状態の判定ステップ１０５０において、アッセイ装置のユーザに情報を提示することができる。ユーザが臨床判断の有資格者（医師など）である場合には、情報は、無資格の者（自身で検査の測定を実行する患者など）の場合と比べて異なってよい。検査に続いて生成される情報を、ユーザの資格に応じてグループに分類することができる。第１のグループにおいては、情報が、例えば測定結果が心不全を示しているか否かなど、陽性または陰性の知らせであってよい。第２のグループにおいては、情報が、サンプル中に存在する分析対象の量を表わす数値であってよい。第３のグループにおいては、情報を、例えば「担当の医療専門家に連絡せよ」、「追加の錠剤を摂取せよ」、「睡眠をとれ」など、１つ以上の「文字による促し」として提示することができる。このようにして、心臓の状態の判定ステップ１０５０において、錯体の測定ステップ１０４０において得られた測定データの応用を、情報の最終使用者に応じて変えることができる。医療専門家は、典型的には、予後診断を容易にする数値データを望むと考えられる。最終ユーザは、典型的には、「自身の自覚症状」が（i）例えば消化不良などといった無関係な問題の結果であるのか、あるいは（ii）心不全の発生または再発の結果であるのかについて、再確認したいと考えられ、後者の場合には、例えば９１１番へと電話するように促される。
【０６３８】
次に、アッセイ方法１０００において使用されるアッセイ装置を、図２〜１１を参照してさらに詳しく説明する。
【０６３９】
図２を参照すると、メータ４００が、アッセイ装置５００とともに示されている。メータ４００は、アッセイ装置５００を受け入れるポート４０２を有している。サンプルの分析を実行する前に、メータ４００のユーザが、アッセイ装置５００をポート４０２を通って挿入する。メータ４００は、測定の実行の過程においてユーザに適切な情報を伝えるために使用されるインターフェース４０６を有している。ユーザがアッセイ装置５００をポート４０２を通ってメータ４００へと挿入すると、インターフェース４０６が、ユーザに情報を提示する。例えば、（i）サンプルの適用のやり方、（ii）測定結果の値、（iii）特定の測定結果が得られた場合にすべきこと、を表現する情報を、提示することができる。
【０６４０】
メータ４００は、アッセイ装置５００がポート４０２を通って挿入されたときに、アッセイ装置５００を動作させるように構成されている。メータ４００は、液体リザーバ・アクチュエータ４０８、磁気アクチュエータ、電気化学検出器４１２、およびプロセッサ４１４を備えている。リザーバ・アクチュエータ４０８が、図８に関して説明されるとおり、装置５００のリザーバ５０７を動作させるように構成されている。磁気アクチュエータ４１０が、アッセイ装置５００のマイクロ流体ネットワーク５０８内の磁性試薬５１３ａを操作する（移動させ、さらには／あるいは位置させる）ように構成されている。電気化学検出器４１２が、磁性試薬５１３ａによって電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃへと運ばれた分析対象の存在を測定するように構成されている。電気化学検出器４１２は、メータ４００内に収容された装置５００の電気接点５１８ｗ、５１８ｒ、５１８ｃにそれぞれ連絡する電気接点４１６ｗ、４１６ｃ、４１６ｒを備えている。プロセッサ４１４が、リザーバ・アクチュエータ４０８、磁気アクチュエータ４１０、電気化学検出器４１２、電気接点４１６ｗ、４１６ｃ、４１６ｒ、およびインターフェース４０６に、動作可能に連絡している。インターフェース４０６が、情報（例えば、装置の状態および／またはアッセイ結果）をユーザへと表示するように構成されている。
【０６４１】
使用時、アッセイ装置５００が、ポート４０２を介してメータ４００へと挿入される。サンプル（例えば、血液サンプル）が、アッセイ装置５００の導入口５１０へと適用される。或る量（例えば、少なくとも約１０μｌ）のサンプルが、毛管作用によってマイクロ流体ネットワーク５０８へと移動する。血液サンプルが、試薬ゾーン５１２の試薬と相互作用する。次いで、目標の分析対象が検出ゾーン５１６へと運ばれ、ここで電気化学的信号が記録される。目標の分析対象が、電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃと相互作用し、信号が電気化学検出器４１２によって検出される。プロセッサ４１４が、電気化学検出器４１２によって検出された信号を解釈し、インターフェース４０６にてユーザへと情報を表示する。
【０６４２】
メータ４００のユーザは、スイッチ４０４を使用してメータ４００を作動させることによって、これまでの測定の結果を見直すことができる。ディスプレイ４０６が、さまざまなデータを表示する。例えば、測定の日時、測定された分析対象のレベル、測定前にユーザが何をしていたか、ユーザがどんな薬物を摂取していたか、などを、ユーザが検査を実行するときにメータに保存することができる。このようにして、メータ４００のユーザは、自身の状態についてより優れた管理を容易にするために、履歴データを使用することができる。
【０６４３】
次に、図３および４を参照すると、アッセイ装置５００が、マイクロ流体ネットワーク５０８を定める複合体５０１を備えている。一典型的な実施形態においては、複合体５０１が、第１の基板５０２、第２の基板５０４、および第３の基板５０６を備えている。マイクロ流体ネットワーク５０８は、インターフェース・ゾーン５２２において検出ゾーン５１４に連絡している試薬ゾーン５１２を含む１つ以上のゾーンを備えている。さらに、マイクロ流体ネットワーク５０８は、試薬ゾーン５１２に連絡しているサンプル導入口５１０、および検出ゾーン５１４に連絡しているバッファ導入口５２０を備えている。検出ゾーン５１４が、バッファ導入口５２０を介してリザーバ５０７に連絡している。インターフェース・ゾーン５２２が、サンプルを試薬ゾーン５１２に封じ込めるように作用する毛管ストップ５３０を含んでいる。マイクロ流体ネットワーク５０８は、インターフェース・ゾーン５２２に連絡したオーバーフローチャネル５２４を有している。オーバーフローチャネル５２４は、第１の基板５０２を貫く通気孔５２６を有している。オーバーフローチャネル５２４は、リザーバ５０７から検出ゾーン５１４およびインターフェース・ゾーン５２２を通って移動したバッファを受け取る。
【０６４４】
サンプル導入口５１０が、サンプル（例えば、血液サンプル）を受け取る領域を定めており、サンプルを試薬ゾーン５１２へと運ぶ。試薬ゾーン５１２は、少なくとも約２．５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約４ｍｍ、少なくとも約８ｍｍ）の幅、少なくとも約０．１５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．０４ｍｍ、少なくとも約０．０８ｍｍ、少なくとも約０．１ｍｍ、少なくとも約０．２ｍｍ、少なくとも約０．４ｍｍ）の高さ、および少なくとも約２６．７ｍｍ（例えば、少なくとも約１０ｍｍ、少なくとも約１５ｍｍ、少なくとも約２０ｍｍ、少なくとも約３０ｍｍ、少なくとも約５０ｍｍ）の長さを有しており、少なくとも約１０μｌ（例えば、少なくとも約２μｌ、少なくとも約５μｌ、少なくとも約７．５μｌ、少なくとも約１５μｌ、少なくとも約２０μｌ）の体積を定めている。サンプルが、毛管力によって試薬ゾーン５１２へと引き込まれ、毛管ストップ５３０に達するまで試薬ゾーン５１２へと移動する。ひとたびサンプルが毛管ストップ５３０に達すると、サンプル・ゾーンとバッファ・ゾーンとの間の毛管力の変化が、さらなるサンプルが試薬ゾーン５１２へと引き込まれないために充分である。典型的には、少なくとも約４ミリバール（例えば、少なくとも約２ミリバール、少なくとも約６ミリバール）の圧力差が、サンプルが毛管ストップに達したときにサンプルの流れを停止させる。毛管ストップを、チャネルの寸法の変化を導入することによって達成でき、あるいは例えばチャネルに沿った流体の流れが妨げられるように疎水パッチ（表面の接触角を変化させる）を導入することによって達成できる。ジャンクションにおいて流れを停止させるために必要とされる圧力差を、液体の前進を停止させるために前進している液体の前側へと加えなければならない圧力として定めることができる。
【０６４５】
試薬ゾーン５１２が、第１、第２、第３、および第４の試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４を含んでいる。試薬５１３ｒ１は、磁界の影響を受けやすい。サンプルが毛管力によって試薬ゾーン５１２へと引き込まれるとき、試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４が、最初にサンプルと混ざり合い、非一様な混合物を形成する。試薬５１３ｒ１を攪拌して、サンプル内で運動させるために、磁界を使用することが可能である。すなわち、試薬５１３ｒ１を、サンプル全体への各試薬の分配を向上させて、サンプルの特定の成分に試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４のうちの１つ以上が接触する可能性を高めるために、囲まれたサンプル体積における試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４の分散および混合のために使用することができる。試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４が、所定の時間間隔（例えば、少なくとも約５秒、少なくとも約３０秒、少なくとも約２分、少なくとも約５分、少なくとも約１０分）にわたってサンプルと相互作用し、サンプル内の対象の成分と錯体を形成する。
【０６４６】
図４が、複合体５０１を形成するために使用されるそれぞれの層を示している。第１の基板５０２が、第１の主表面および第２の主表面を有しており、幅ｗ１、長さｌ１、および厚さｔ１を有している。第１の基板５０２の１つの主表面が、マイクロ流体ネットワーク５０８を備えている。第１の基板５０２のもう１つの主表面が、リザーバ５０７およびバッファ導入口５２０を備えている。第１の基板５０２を、ポリスチレンまたはポリカーボネートなど、疎水性の材料から形成することができる。また、第１の基板５０２を、ポリエステルなど、親水性の材料から形成することも可能である。第１の基板を、射出成型、熱エンボス加工、レーザ・アブレーション、エッチング、圧延、によって形成することができる。幅ｗ１は、少なくとも約２５ｍｍ（例えば、少なくとも約１５ｍｍ、少なくとも約２０ｍｍ、少なくとも約３０ｍｍ、少なくとも約５０ｍｍ）であってよい。長さｌ１は、少なくとも約１００ｍｍ（例えば、少なくとも約５０ｍｍ、少なくとも約７５ｍｍ、少なくとも約１２５ｍｍ、少なくとも約１５０ｍｍ、少なくとも約２００ｍｍ）であってよい。厚さｔ１は、少なくとも約２ｍｍ（例えば、少なくとも約０．５ｍｍ、少なくとも約０．７５ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２．５ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）であってよい。
【０６４７】
試薬ゾーン５１２は、第１の基板５０２のマイクロ流体ネットワーク５０８を備えている主表面へと塗布することができる試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４を含んでいる。それぞれの試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４を、試薬ゾーン５１２を呈する領域の境界の範囲内で、第１の基板５０２の表面へと塗布することができる。基板５０２が疎水性である場合には、試薬が塗布先の位置から離れて移動する可能性は無視できる。基板５０２が親水性である場合、試薬が塗布先の位置から移動する可能性が大きくなる。試薬を、マイクロスポッティング、インクジェット印刷、ピペッティング、スロットダイ印刷、などのプロセスによって塗布することができ、これらの堆積方法は、それぞれの試薬を正確かつ制御された投与を可能にする。試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４を、それらが物理的に離れるように別個の領域に塗布することができ、あるいは積層または散在した点として塗布することができる。試薬を、サンプルに触れたときの速やかな可溶化を促進するように調合することができる。
【０６４８】
第２の基板５０４は、第１の主表面および第２の主表面を有しており、マイクロ流体ネットワーク５０８の外形を有する開口を備えている。基板５０４は、幅ｗ１、長さｌ１、および厚さｔ２を有している。厚さｔ２は、少なくとも約５０ミクロン（例えば、少なくとも約２０ミクロン、少なくとも約４０ミクロン、少なくとも約６０ミクロン、少なくとも約１００ミクロン）であってよい。第２の基板５０４は、接着性を有しており、第１の基板５０２を第３の基板５０６へと物理的に取り付けるために使用可能である。第２の基板５０４は、単一の材料または複合材料であってよい。例えば、第２の基板は、担体層のそれぞれの主表面にそれぞれ接着層が配置されている両面接着層であってよい。接着層は、接着層を別の基板へと押し付けるべく圧力が加えられたときにその基板に貼り付く感圧式の接着剤であってよい。接着層は、感熱式の接着剤であってよく、その場合には、接着剤を基板へと接合するために高い温度および圧力が必要である。第２の基板５０４は、疎水性または親水性を有することができる。第２の基板５０４が担体層上の複合材料である場合には、一方の主表面が、感圧式の接着剤であってよく、他方の主表面が、感熱式の接着剤であってよい。第２の基板５０４が、内側担体層との複合体である場合には、それぞれの主表面が、必要に応じて感圧式の接着剤または感熱式の接着剤であってよい。マイクロ流体ネットワーク５０８の外形が、第２の基板５０４に設けられる。第２の基板５０４が第１の基板５０２へと貼り付けられるとき、マイクロ流体ネットワーク５０８の外形が、第１の基板５０２の上方に位置合わせされる。
【０６４９】
いくつかの実施形態においては、第１の基板５０２が、マイクロ流体ネットワーク５０８を備えていない。その場合、マイクロ流体ネットワーク５０８の外形を備える第２の基板５０４が、第１の基板５０２と第３の基板５０６との間に接着されたときにマイクロ流体ネットワーク５０８の輪郭を定める。
【０６５０】
第３の基板５０６は、第１の主表面および第２の主表面を有しており、幅ｗ１、長さｌ１、および厚さｔ３を有している。一方の主表面に、一連の１つ以上の電極および端子を定める導電ネットワーク５０９が配置されている。導電ネットワーク５０９を、例えばカーボンペースト、金ペースト、銀ペースト、白金めっきカーボンペーストなど、導電ペーストのスクリーン印刷のプロセスによって形成できる。また、導電ネットワーク５０９を、金属または金属化フィルムにパターンを定めるためのフォトリソグラフィ、グラビア印刷、レーザ・アブレーション、レーザ・エッチングのプロセスによって形成することも可能である。金属または金属化フィルムは、スパッタリング、電気めっき、または圧延によって形成可能である。
【０６５１】
導電ネットワーク５０９は、マイクロ流体ネットワーク５０８内の流体に接触するように意図された電極を、メータ４００内の検出器および／またはプロセッサに接続する１つ以上の独立した導電路を含むことができる。電極を、アッセイ装置５００へと加えられたサンプルについて、対象の物質またはパラメータを測定するために使用することができる。対象の物質として、例えばＮＴ−ｐｒｏＢＮＰなど、心臓の状態を表わすバイオマーカーを挙げることができる。対象のパラメータは、サンプル内の赤血球の割合であるヘマトクリット値であってよい。
【０６５２】
複合体５０１を得るための第１、第２、および第３の基板５０２、５０４、５０６の積層は、各層のそれぞれの互いの位置合わせを伴う。例えば、第１の基板５０２および第２の基板５０４が、第１の基板５０２に形成されたマイクロ流体ネットワーク５０８の外形が第２の基板５０４のマイクロ流体ネットワーク５０８の外形に整列するように、一緒に配置される。次いで、第３の基板５０６が、導電ネットワーク５０９（とくには、第１、第２、および第３の電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃ）が検出ゾーン５１６の上方に正確に整列するように、第２の基板５０４の上へと配置される。図５が、アッセイ装置５００の上方からの平面図を表わしており、装置の種々の造作の空間的な位置を示している。マイクロ流体ネットワーク５０８が、一連の寸法パラメータ、すなわち長さｌ２、長さｌ３、長さｌ４、長さｌ５、長さｌ６、幅ｗ２、幅ｗ３、幅ｗ４、幅ｗ５、幅ｗ６、面積ａ１、距離ｄ１によって定められている。
【０６５３】
サンプル導入口５１０は、距離ｄ１および幅ｗ４によって定められる少なくとも約１．５７ｍｍ２（例えば、少なくとも約１ｍｍ２、少なくとも約１．２５ｍｍ２、少なくとも約１．７５ｍｍ２、少なくとも約２ｍｍ２）の面積ａ１を有している。幅ｗ４は、少なくとも約２．５ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）であり、距離ｄｌは、少なくとも約１．２４ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．１５ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ）である。
【０６５４】
試薬ゾーン５１２は、長さｌ３および幅ｗ３の小部分と、毛管ストップ５３０を終端とする長さｌ２および幅ｗ２の主部分とを有している。長さｌ３は、少なくとも約２ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）であり、幅ｗ３は、少なくとも約０．４５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．１ｍｍ、少なくとも約０．３ｍｍ、少なくとも約０．３ｍｍ、少なくとも約０．５ｍｍ、少なくとも約０．６ｍｍ）である。長さｌ２は、少なくとも約２５ｍｍ（例えば、少なくとも約１０ｍｍ、少なくとも約１５ｍｍ、少なくとも約２０ｍｍ、少なくとも約３０ｍｍ、少なくとも約５０ｍｍ）であり、幅ｗ２は、少なくとも約２．５ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）である。
【０６５５】
インターフェース・ゾーン５２２は、長さｌ７および幅ｗ５を有しており、面取り５３２および毛管ストップ５３４を備えている。長さｌ７は、少なくとも約４．９ｍｍ（例えば、少なくとも約２．５ｍｍ、少なくとも約４ｍｍ、少なくとも約６ｍｍ）であり、幅ｗ５は、少なくとも約１１ｍｍ（例えば、少なくとも約６ｍｍ、少なくとも約８ｍｍ、少なくとも約１０ｍｍ、少なくとも約１２ｍｍ、少なくとも約１５ｍｍ）である。インターフェース・ゾーン５２２については、図６を参照してさらに詳しく説明される。
【０６５６】
検出ゾーン５１４は、長さｌ４、長さｌ５、および幅ｗ６を有している。長さｌ４は、少なくとも約５３ｍｍ（例えば、少なくとも約３５ｍｍ、少なくとも約４０ｍｍ、少なくとも約４５ｍｍ、少なくとも約５５ｍｍ、少なくとも約６５ｍｍ）であり、長さｌ５は、少なくとも約１４．６ｍｍ（例えば、少なくとも約１０ｍｍ、少なくとも約２０ｍｍ、少なくとも約２５ｍｍ、少なくとも約３０ｍｍ）であり、幅ｗ６は、少なくとも約２．５ｍｍ（例えば、少なくとも約１ｍｍ、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約２ｍｍ、少なくとも約３ｍｍ、少なくとも約５ｍｍ）である。長さｌ５は、毛管ストップ５３０から測定電極５１６ｗまでの距離を表わしている。長さｌ６は、バッファ導入口５２０から毛管ストップ５３０までの距離を表わしている。
【０６５７】
サンプルをアッセイ装置５００へと加える前に、マイクロ流体ネットワーク５０８が、例えば空気などの気体で満たされる。サンプルが適用ゾーン５１０へと加えられると、このサンプルが、毛管力によって試薬ゾーン５１２へと引き込まれる。試薬ゾーン５１２内の気体が、液体が試薬ゾーン５１２へと進入して試薬ゾーン５１２を通って移動するにつれて、インターフェース・ゾーン５２２を経由して追い出される。前進する液体の前面に加わる背圧は、メニスカス（液体−気体のインターフェース）を毛管チャネルに沿って前進させる毛管力に比べ、無視できる。したがって、メニスカスが、試薬ゾーンに沿ってさらに移動し、前方の気体を追い出し、さらなる流体がサンプル・ゾーン５１０から引き込まれる。試薬ゾーン５１２内の流体が毛管ストップ５３０に近付くにつれ、毛管ストップの各側の圧力の差が、液体の流れを停止させるために充分になる。少なくとも約４ミリバールの圧力差であれば、液体が毛管ストップ５３０を横切ってインターフェース・ゾーン５２２へと移動することを防止するために充分である。液体がチャネルから空気をさらに追い出すことがない。
【０６５８】
毛管ストップ５３０は、液体の前面に加わる有効背圧が、毛管ストップの検出ゾーン５１４の側において、試薬ゾーン５１２の側よりも大きくなるように構成されている。毛管ストップの試薬ゾーン５１２の側の駆動力が、毛管ストップの検出ゾーン５１４の側によってもたらされる背圧よりも小さい。流体が検出ゾーン５１４から毛管ストップに近付くとき、毛管ストップ５３０は、毛管圧力が毛管ストップの流体が近付いている側において最大であるため、試薬ゾーン５１２への流体の流れを妨げない。一方で、流体が試薬ゾーン５１２から毛管ストップ５３０に近付くとき、サンプルと気体とのインターフェースが、毛管ストップに形成される。
【０６５９】
検出ゾーン５１４は、第１の電極５１６ｗ、第２の電極５１６ｒ、および第３の電極５１６ｃを備えている。第１、第２、および第３の電極５１６ｗ、５１６ｒ、５１６ｃは、端子５１８ｗ、５１８ｃ、５１８ｒに連絡している。端子５１８ｗ、５１８ｃ、５１８ｒは、図２に関して上述したとおり、読み取り器６００とやり取りをする。サンプルがアッセイ装置５００へと加えられ、試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４がサンプルと相互作用して試薬と分析対象（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）との間の錯体を形成できる充分な時間が過ぎたとき、バッファ溶液が、リザーバ５０７から検出ゾーン５１４へと導入される。リザーバ５０７が、（図８に関してさらに詳しく説明されるとおり）プロセッサ４１４の制御のもとでリザーバ・アクチュエータ４０８によって加圧される。バッファが、マイクロ流体ネットワーク５０８への気泡の噛み込みの可能性を少なくする速度（例えば、少なくとも１μｌ／ｓ、少なくとも５μｌ／ｓ、少なくとも１０μｌ／ｓの流量）で、リザーバ５０７から駆動される。典型的な実施形態においては、バッファが、最初に、アッセイ装置５００のサンプルが加えられている方の端部とは反対側の端部から、検出ゾーン５１４を満たす。前進するバッファと気体（例えば、空気）のインターフェースが、検出ゾーン５１４の縁の壁に沿って毛管ストップ５３０に向かって一様に移動する。検出ゾーン５１４に含まれている気体が、オーバーフローチャネル５２４内の通気孔５２６を通ってアッセイ装置５００から吐き出される。
【０６６０】
インターフェース・ゾーン５２２が、マイクロ流体ネットワーク５０８へのサンプルの移動を制御する毛管ストップ５３０を備えている。さらにインターフェース・ゾーン５２２は、面取り５３２および毛管ストップ５３４を備えている。面取り５３２および毛管ストップ５３４が、インターフェース・ゾーン５２２を通過するバッファの制御された移動を可能にする。前進するバッファと気体のインターフェースがインターフェース・ゾーン５２２に達するとき、毛管ストップ５３４が、マイクロ流体ネットワーク５０８の１つの縁の壁において、前進するバッファの前面の移動を遅くする。すなわち、毛管ストップ５３４が、バッファと気体のインターフェースを、毛管ストップ５３４が位置している角を中心にして操舵するように作用する。したがって、前進するバッファと気体のインターフェースが、面取り５３２を下って移動し、マイクロ流体ネットワーク５０８の毛管ストップ５３０が形成されている縁に沿って移動する。バッファが、毛管ストップ５３０に保持されているサンプルと気体のインターフェースを横方向に横切って移動し、サンプル−バッファ（例えば、液体−液体）のインターフェースを形成する。サンプル−バッファのインターフェースが、インターフェースにおける気泡の滞留が最小になるようなやり方で形成される。ひとたびサンプルとバッファのインターフェースが形成されると、余分なバッファは、オーバーフロー５２４へと移動して通気孔５２６に達する。
【０６６１】
試薬ゾーン５１２の血液サンプルとインターフェース・ゾーン５２２のバッファとの間の気泡のない液体−液体のインターフェースの形成が、インターフェース・ゾーン５２２の拡大斜視図を示している図６に関して説明されるとおりのインターフェースの設計によって達成される。図６は、血液とバッファとの間に安定したジャンクションの形成を可能にするインターフェース・ゾーン５２２の種々の態様を示している。
【０６６２】
図６を参照すると、図の左手側において、試薬ゾーン５１２が、幅ｗ２および少なくとも約０．１５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．０７５ｍｍ、少なくとも約０．９ｍｍ、少なくとも約０．１２５ｍｍ、少なくとも約０．１７５ｍｍ、少なくとも約０．２ｍｍ）の高さｈ１を有し、毛管ストップ５３０を終端としている。試薬ゾーン５１２は、試薬ゾーン５１２からインターフェース・ゾーン５２２への変わり目を形成する開口を呈している縁５２８を有している。縁５２８は、無視しうる曲率半径を有する矩形の外形（例えば、２つの縁の間の角度が、可能な限り９０度に近い）を有している。縁５２８は、血液が毛管ストップ５３０を破る可能性を無視できるように充分に明瞭に定められている。したがって、血液が、インターフェースを横切って気体で満たされているインターフェース・ゾーン５２２へと進入することがない。
【０６６３】
インターフェース・ゾーン５２２は、毛管ストップ５３０、毛管ストップ５３２、面取り５３４、および角５３６を備えている。インターフェース・ゾーン５２２は、少なくとも約０．４５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．２ｍｍ、少なくとも約０．３ｍｍ、少なくとも約０．５ｍｍ、少なくとも約０．７５ｍｍ）の高さｈ２および幅ｗ５を有している。角５３６は、試薬ゾーン５１２の液体が縁５２８を破ってインターフェース・ゾーン５２２に進入する可能性を少なくするため、高さｈ１およびｈ２の間に明確かつはっきりとした分離が存在するよう、試薬ゾーン５１２の長手方向の中心線から少なくとも約３ｍｍ（例えば、少なくとも約１．５ｍｍ、少なくとも約４．５ｍｍ）である。面取り５３４が、検出ゾーン５１６のｈ３とオーバーフローチャネル５２４へとつながるインターフェース・ゾーン５２２のｈ２との間に、滑らかな変わり目をもたらしている。検出ゾーン５１６は、少なくとも約０．２５ｍｍ（例えば、少なくとも約０．１ｍｍ、少なくとも約０．２ｍｍ、少なくとも約０．４ｍｍ、少なくとも約０．５ｍｍ）の高さｈ３を有している。バッファが検出ゾーン５１６からインターフェース・ゾーン５２２に近付く（図の右から左へと流れる）とき、メニスカス（バッファ−気体のインターフェース）が、毛管ストップ５３２に接触する。移動するバッファのメニスカスが、検出ゾーン５１６とインターフェース・ゾーン５２２との間の変わり目の毛管チャネルの一方の壁の毛管ストップ５３２によって、減速させられる。一方で、メニスカスは、毛管ストップ５３２の反対側の壁に沿って、角５３６に向かって移動を続ける。バッファが角５３６に近付くとき、毛管ストップ５３２は、インターフェース・ゾーン５２２へのバッファの流れを減速させ続けている。前進するバッファのメニスカスが、面取り５３４を下り、角５３６を巡り、縁５２８および毛管ストップ５３０を含んでいる毛管の壁に沿って流れる。このようにして、バッファのメニスカスが試薬ゾーン５１２の端部を横切って移動し、そのような移動の際に、試薬ゾーン５１２内の液体（例えば、血液）に接触する。バッファのメニスカスが試薬ゾーン５１２の端部を横切って移動すると、高さｈ２のインターフェース・ゾーン５２２のバッファが、毛管ストップ５３２の反対側から毛管ストップ５３２（高さｈ３）に保持されているバッファに接して圧力差を無効にするため、毛管ストップ５３２の作用は打ち消される。次いで、バッファはオーバーフローチャネル５２６へと流入する。
【０６６４】
次に、図６の線Ａ−Ａ’を通る断面図を示しており、インターフェース・ゾーン５２２の外形を表わしている図７を参照する。図７は、試薬ゾーン５１２、インターフェース・ゾーン５２２、および検出ゾーン５１４からの変わり目におけるマイクロ流体ネットワーク５０８のそれぞれの高さｈ１、ｈ２、ｈ３を示している。液体は、試薬ゾーン５１２に沿って方向Ｘにマイクロ流体ネットワーク５０８へと移動するとき、毛管ストップ５３０の縁５２８に近付く。高さｈ２と比べた高さｈ１の相違は、試薬ゾーン５１２における毛管力がインターフェース・ゾーン５２２における毛管力と異なるような相違である。インターフェース・ゾーン５２２によって方向Ｙにもたらされる毛管圧力が、試薬ゾーン５１２によって方向Ｘにもたらされる毛管力よりも大きい。したがって、サンプル液体が毛管ストップ５３０の縁５２８に接近および到達すると、サンプルの流れが停止し、液体と気体のインターフェースが形成される。その結果、液体と気体とのメニスカスが、試薬ゾーン５１２に収容された液体の体積の一方の端壁を定める。このように、毛管ストップ５３０の効果によって、液体が試薬ゾーン５１２内に封じ込められる。本明細書においてすでに説明したように、チャネル内の液体の流れを制御する他の手段も存在する。そのような一例は、疎水パッチの使用であり、そのような疎水パッチを、毛管チャネルの壁を巡るリングとして設けることができる。疎水性材料の特性は、液体が疎水パッチのリングに接近するとき、液体が毛管ストップ５３０とほぼ同じやり方で減速されるような特性である。疎水リングが、毛管ストップ５３０がもたらす力と同等のＹ方向の力をもたらす。
【０６６５】
次に、アッセイ装置５００の長手方向の断面を示しており、図７の断面を含んでいる図８を参照する。図８は、流体リザーバ５０７、バッファ導入口５２０、検出ゾーン５１４、インターフェース・ゾーン５２２、試薬ゾーン５１２、およびサンプル導入口５１０を含んでいる。さらに図８は、リザーバ駆動子４０８を示している。リザーバ駆動子４０８が、所定の速度でメータ４００のプロセッサ４１４の制御のもとで流体リザーバ５０７に向かって駆動され、流体が流体リザーバ５０７からバッファ導入口５２０を通って放出され、バッファが検出ゾーン５１４に入る。
【０６６６】
ユーザがアッセイ装置５００をメータ４００へと正しく挿入すると、プロセッサ４１４が、測定サイクルを実行すべく作動する。プロセッサ４１４が、測定に関する情報を、インターフェース４０６に表示させる。情報は、サンプルをアッセイ装置５００へと適用するようにとの促しを含んでいる。サンプルがアッセイ装置５００へと適用されると、検出器４１２が、試薬ゾーン５１２のサンプルの存在を検出し、プロセッサ４１４へとフィードバックをもたらす。次いで、プロセッサ４１４が、リザーバ・アクチュエータ４０８を作動させる。試薬ゾーン５１２においてサンプルの存在が検出されてから所定の時間間隔の後に、リザーバ駆動子４０８がリザーバ５０７に向かって付勢され、リザーバ５０７に接触する。リザーバ５０７との最初の接触の後で、リザーバ駆動子４０８は、さらにリザーバ５０７へと付勢され続ける。リザーバ駆動子４０８がリザーバ５０７に圧力を加え、結果として、リザーバ５０７がバッファ導入口５２０に押し付けられる。バッファ導入口５２０は、リザーバ５０７に向かって突き出す鋭い部材を有している。メータ４００への挿入まで、リザーバ５０７を、リザーバが時期尚早に破られて流体が意図せずに放出されることがないようにする着脱式のカバーで保護することができる。その場合、ユーザが、アッセイ装置５００をメータ４００へと挿入する前に、最初に保護カバーを取り除く。いくつかの例では、アッセイ装置５００に保護カバーを備えなくてもよく、他の場合には、保護カバーを、アッセイ装置５００をメータ４００へと挿入する前に取り除かなくてもよい。
【０６６７】
プロセッサ４１４の制御のもとでリザーバ５０７へと向かうリザーバ駆動子４０８の動きは、最初にリザーバ５０７が破られてそれゆえ内部に収容されている流体が解放された後で、この流体が制御された所定の流量にてバッファ導入口５２０を通って検出ゾーンへと送達されるような速度で生じる。典型的な実施形態においては、バッファが、約０．５ｍＬ／ｍｉｎ（例えば、少なくとも約０．１ｍＬ／ｍｉｎ、少なくとも約０．３ｍＬ／ｍｉｎ、約０．７ｍＬ／ｍｉｎ以下、約０．９ｍＬ／ｍｉｎ以下）の流量でマイクロ流体ネットワークを通って移動する。流体が、メニスカスが毛管ストップ５３２に達するまでインターフェース・ゾーン５２２に向かって送られる。その後、流体の前部が、毛管ストップ５３２を中心にして回転させられる。リザーバ駆動子がプロセッサ４１４の制御のもとでリザーバ５０７へとさらに付勢されるため、メニスカスは、インターフェース・ゾーン５２２の毛管ストップ５３２とは反対側の縁の壁の周囲において、さらに押され続ける。前進する流体の前部がひとたび試薬ゾーン５１２の端部を横切って移動し終えると、試薬ゾーン５１２の液体とリザーバ５０７から押し込まれた流体との間のインターフェースが形成され、さらに流体は、通気孔５２６に向かってオーバーフローチャネル５２４へと駆動される。
【０６６８】
使用時、サンプル（例えば、指刺しまたは静脈穿刺から得られた或る量のヒトの血液）が、サンプル導入口５１０においてアッセイ装置５００へと加えられる。血液は、或る量のＮ末端プロ脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、すなわち分析対象を含んでいる。いくつかの場合には、サンプル中に存在するＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの量が、検出不可能であるほどに少ないかもしれず、他の場合には、サンプル中に存在するＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの量が、ゼロである（すなわち、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰがサンプルに存在しない）かもしれない。
【０６６９】
血液サンプルが毛管作用によって試薬ゾーン５１２へと引き込まれ、試薬ゾーン５１２において、試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４に最初に接触し、次いでこれらの試薬と混ざり合う。試薬は、ストレプトアビジンへと結び付けられた磁性粒子と、ビオチンへと結び付けられた抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１と、少なくとも約４０ｎｍの平均粒子径を有する金コロイドゾルへと結び付けられた抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ２４Ｅ１１へと共役した西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）（すなわち、抗体に結び付けられた酵素）とを含んでいる。試薬が、血液との溶液中に再び懸濁し、一様な混合物を形成する。ストレプトアビジン（磁性粒子に結び付いている）がビオチン（抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１に結び付いている）に結合し、抗体−磁性粒子の錯体が形成される。分析対象が抗体−磁性粒子の錯体および抗体に結び付けられた酵素によって拘束され、三重錯体が形成される。所望であれば、サンプルにおける試薬の再懸濁および混合を促進または向上させるため、磁性粒子の運動（例えば、周期運動または振動運動）を誘起するように、磁界を加えることが可能である。典型的な実施形態においては、磁界が、第１の速度で試薬を混合させるべく試薬ゾーン５１２の下方で振動させられる。次いで、抗体の錯体が、第２の速度で共通の場所へと集められる。次いで、錯体は、第３の速度で試薬ゾーン５１２から検出ゾーン５１４へと移動させられる。第１の速度は、少なくとも約１００ｍｍ／ｍｉｎ（例えば、少なくとも約１２０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１４０ｍｍ／ｍｉｎ）であってよい。第１の速度は、約１８０ｍｍ／ｍｉｎ以下（例えば、約１６０ｍｍ／ｍｉｎ以下、約１４０ｍｍ／ｍｉｎ以下）であってよい。典型的な実施形態においては、第１の速度が１４４ｍｍ／ｍｉｎであってよい。第２の速度は、少なくとも約１０ｍｍ／ｍｉｎ（例えば、少なくとも約２０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも３５ｍｍ／ｍｉｎ）であってよい。第２の速度は、約８０ｍｍ／ｍｉｎ以下（例えば、約６０ｍｍ／ｍｉｎ以下、約４０ｍｍ／ｍｉｎ以下）であってよい。典型的な実施形態においては、第２の速度が３６ｍｍ／ｍｉｎであってよい。第３の速度は、少なくとも約７０ｍｍ／ｍｉｎ（例えば、少なくとも約９０ｍｍ／ｍｉｎ、少なくとも約１１０ｍｍ／ｍｉｎ）であってよい。第３の速度は、約１５０ｍｍ／ｍｉｎ以下（例えば、約１３０ｍｍ／ｍｉｎ以下、約１１０ｍｍ／ｍｉｎ以下）であってよい。典型的な実施形態においては、第３の速度が１０８ｍｍ／ｍｉｎであってよい。
【０６７０】
図９Ａが、アッセイ装置５００について、サンプル液体がサンプル導入口５１０へと加えられた後のインターフェース・ゾーン５２２の領域の上面図および側面図を示している。サンプル液体（例えば、血液）が、試薬ゾーン５１２を満たすべく毛管作用によって引き込まれる。毛管ストップ５３０に達すると、液体がメニスカス５９０を形成する。サンプル液体は、試薬ゾーン５２０から毛管ストップ５３０に近付くとき、インターフェース・ゾーン５２２が試薬ゾーン５２０よりも大きな深さおよび幅を有している毛管ストップ５３０において、チャネルの断面積の急激な増加に直面する。この断面形状の急激な変化が、サンプル液体のインターフェース・ゾーン５２２への進入を防止する。メニスカス５９０における任意の表面張力が、サンプル液体をインターフェース・ゾーン５１２へと引き込もうとする任意の毛管力を上回る。この段階で、液体−気体のインターフェース（例えば、血液−空気のインターフェース）が、メニスカス５９０において形成される。さらに図９Ａは、血液中に分散した磁性粒子２００も示している。
【０６７１】
磁界が試薬ゾーン５１２へと加えられる。加えられる磁界を、磁性粒子２００（したがって、磁性粒子上の抗体によって捕捉された分析対象）を移動させるように操作する（例えば、永久磁石を検査片に対して動かすことによって、あるいは電磁石ソレノイドを作動させることによって）ことができる。磁性粒子２００が、試薬ゾーン５１２に沿って毛管ストップ５３０に向かって移動する。
【０６７２】
磁界の源を、成形された磁界をもたらすように構成することができる。成形された磁界は、磁性粒子を検出ゾーン５１４に向かって案内するように設計された磁力線を有することができる。そのような成形された磁界は、磁性粒子の錯体の拡散または移動を制御するために有用でありうる。とくには成形された磁界が望まれる場合に、磁界の源を２つ以上設けることができる。例えば、磁界の源を、アッセイ装置の両端に設けることができ、一方を磁性粒子を引きつけるように構成し、他方を磁性粒子を追い出すように構成することができる。そのような構成は、すべての磁性粒子をアッセイ装置の一端に位置させるうえで有利となりうる。
【０６７３】
図９Ｂが、磁界の印加（磁界の源２１０によって印加される）によって磁性粒子２００がメニスカス５９０に向かって引き寄せられた後の装置の上面図および側面図を示している。磁界の源２１０を、磁性粒子２００をメニスカス５９０の付近に保つように構成する（例えば、位置、磁界の強度、および磁界の形状に関して）ことができる。磁界の源２１０を、磁界の源から離れようとする拡散に抗するための充分な磁力がメニスカス１９０において粒子２００に作用するように、操作することができる。
【０６７４】
サンプルが、分析対象であるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰとそれぞれの抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体との間の錯体の形成を可能にするための充分な所定の時間間隔にわたって試薬５１３ｒ１、５１３ｒ２、５１３ｒ３、５１３ｒ４に接触したとき、第２の液体が、バッファ導入口５２０を介してアッセイ装置５００へと導入される。第２の液体は、酢酸ナトリウム・バッファ、過酸化水素基質、および酸化還元メディエータとしての２，２’−アジノ−ビス‐（３−エチルベンゾ−チアゾリン−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）を含んでいる。第２の液体が、リザーバ駆動子４０８によって加えられる正の圧力のもとで検出ゾーン５１４に沿って流れる。第２の流体が、メニスカス１９０において血液サンプルに接し、液体−液体のインターフェースを形成する。液体−液体のインターフェースが形成されることで、磁界の源２１０の影響のもとでの磁性粒子の共役錯体の血液から第２の液体への移動が容易になる。分析対象を、磁性粒子の共役錯体の一部として血液から第２の液体へと移動させることで、妨げとなりうるサンプル成分ならびに対象外である分析対象が第２の液体へと移動する可能性が、最小限になる。磁性粒子ならびにＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ（抗体−磁性粒子の錯体および抗体に結び付けられた酵素を含むＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの三重錯体の形態である）を含む磁性粒子に結合しているすべてのものが、検出ゾーン５１４の第２の液体へと移動する。
【０６７５】
インターフェース・ゾーン５２２を、第２の液体の前面が、正面からメニスカス５９０に出会うのではなく、メニスカス５９０を横方向に横切って流れるように、形作ることができる。図９Ｃが、インターフェース・ゾーン５２２の領域について、アッセイ装置５００の上方からの平面図を示している。図９Ｃは、第２の液体が検出ゾーン５１４から毛管ストップ５３０に向かって流れるときの移動する液体の前部を示す輪郭の時系列を表わしている。とくには、液体の前部の順次の位置２１１、２１２、２１３、２１４、２１５が、第２の液体の前部を毛管ストップ５３０に保持されたメニスカス５９０を横方向に横切って流れるように案内するために、どのようにインターフェース・ゾーン５１２を形作ることができるのかを説明している。第２の液体のメニスカス２１５が血液のメニスカス５９０を横切って横方向に移動することで、気泡が第１の液体と第２の液体との間に捕捉される可能性が少なくなる。液体−液体のインターフェースに気泡が存在すると、血液サンプルから第２の液体への磁性粒子の移動の効率が、低下する可能性がある。したがって、サンプルの移動の効率の低下の可能性を少なくするために、気泡のないインターフェースを有することが望ましい。
【０６７６】
図９Ｄは、第２の液体がインターフェース・ゾーン５１２を満たして、液体−液体のインターフェース２２０を形成した後のアッセイ装置５００の上面図および側面図である。第２の液体の前部２１６が、オーバーフローチャネル５２４を通って通気孔５２６に向かって流れ続ける。磁性粒子−分析対象の錯体２００が、源２１０によって加えられる引き付けの磁界のおかげで、液体−液体のインターフェース２２０を横切って運ばれる。磁性粒子−分析対象の錯体２００が、磁界の源２１０の影響のもとで検出ゾーン５１４に沿って徐々に移動する。液体−液体のインターフェース２２０が形成された後に、第２の液体が、バッファ導入口５２０から検出ゾーン５１４、インターフェース・ゾーン５２２、およびオーバーフローチャネル５２４を通って流れ続けることで、非磁性の材料を磁性粒子−分析対象の錯体２００から離れるように洗い流すことを助けることができる。このような洗浄は、磁性粒子に結び付けられた材料のみが検出ゾーン５１４の電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒによって検出されるように保証するうえで、役立つことができる。
【０６７７】
検査片へと組み込まれた流体リザーバ５０７が、反応バッファを送達することができ、バッファの組成は、さまざまであってよい（例えば、酢酸ナトリウム、クエン酸リン酸塩、クエン酸ナトリウム、あるいは任意の適切な濃度またはｐＨの他の任意のバッファ）。任意の適切な液体を、バッファの代わりに使用することができる（例えば、その全体参照により本明細書に組み込まれる２００５年１１月１５日付の米国実用新案登録出願第６０／７３６，３０２号を参照）。いくつかの実施形態においては、リザーバ５０７を、アッセイ装置５００の一体ではない部品として用意することができ、その場合には、リザーバ５０７をバッファ導入口５２０に一体化させるインターフェース・ポートを設けることができる。
【０６７８】
図１０Ａおよび１０Ｂが、磁性粒子：分析対象の錯体を、液体−液体のインターフェースを横切って、抗体に組み合わせられた非磁性粒子から分離することを、さらに詳しく説明している。図１０Ａにおいて（図９Ｂと同様に）、磁性粒子２００が、磁界の源２１０によって加えられる磁界のおかげで、メニスカス５９０の付近に位置している。磁性粒子２００の一部は、抗体−磁性粒子の錯体にて第２の分析対象２４０へと結合しており、これが次に、抗体に結び付けられた酵素２３０に結合している。試薬ゾーン５１２において抗体に結び付けられた酵素は、第２の分析対象２４０に比べて余分に存在しており、抗体に結び付けられた酵素２５０の一部が、目標の分析対象に結合せずに残る可能性がある。磁気による分離は、抗体に結び付けられた結合していない酵素２５０が検出ゾーン５１４に達することがないように保証するうえで役に立ち、すなわち換言すると、磁性粒子：分析対象の錯体に結び付いた酵素２３０のみが、磁界の源２１０の影響のもとで電極５１６ｗ、５１６ｃ、５１６ｒに到着し、検出可能な信号に寄与する。このようにして、検出可能な信号を、再現性を伴って、サンプル内の分析対象（例えば、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）２４０の量または濃度に関連付けることができる。
【０６７９】
分析対象は、哺乳類の体を苦しめる状態についてのバイオマーカーであってよい。用語「バイオマーカー」は、状態、疾患、または疾病の診断ならびに状態、疾患、または疾病の影響および進行の測定または標示に有用となりうる特定の分子的特徴を有する体内の生化学物質を指す。例えば、ヒトの体液（すなわち、呼気または血液）において見られる一般的なバイオマーカー、およびそのようなバイオマーカーをもたらすヒトのそれぞれの診断の状態として、これらに限られるわけではないが、虚血変性アルブミン「ＩＭＡ」（原因：血液への酸素の不足；診断：冠動脈疾患）、脳性ナトリウム利尿ペプチド前駆体Ｎ端フラグメント「ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ」（原因：筋細胞の伸び；診断：うっ血性心不全）、アセトアルデヒド（原因：エタノール；診断：中毒）、アセトン（原因：アセトアセテート；診断：ダイエット；ケトン原生／糖尿病）、アンモニア（原因：アミノ酸の脱アミノ化；診断：尿毒症および肝疾患）、ＣＯ（一酸化炭素）（原因：ＣＨ２Ｃｌ２、高い割合のＣＯＨ；診断：屋内空気の汚染）、クロロホルム（原因：ハロゲン化合物）、ジクロロベンゼン（原因：ハロゲン化合物）、ジエチルアミン（原因：コリン；診断：腸内細菌の異常増殖）、Ｈ２（水素）（原因：腸；診断：乳糖不耐症）、イソプレン（原因：脂肪酸；診断：代謝的負荷）、メタンチオール（原因：メチオニン；診断：腸内細菌の異常増殖）、メチルエチルケトン（原因：脂肪酸；診断：屋内空気の汚染／ダイエット）、Ｏ−トルイジン（原因：がんの代謝産物；診断：気管支がん）、硫化ペンタンおよび硫化物（原因：脂質の過酸化；診断：心筋梗塞症）、Ｈ２Ｓ（原因：代謝；診断：歯周病／排卵）、ＭｅＳ（原因：代謝；診断：肝硬変）、ならびにＭｅ２Ｓ（原因：感染症；診断：塹壕口腔炎）が挙げられる。
【０６８０】
さらに、試薬ゾーンは、所望の分析対象を認識できる第２の試薬を含むことができる。第２の試薬は、同じまたは別の分析対象を認識することができる。第１および第２の認識試薬を、同時に同じ分析対象を認識するように選択することができる。例えば、第１および第２の認識試薬が、それぞれ、分析対象の別個のエピトープを認識する抗体であってよい。このやり方で、分析対象、第１の認識試薬、および第２の認識試薬の三重（すなわち、３成分）錯体を形成することができる。一般に、第１および第２の認識試薬は、分析対象が存在しないときは互いに結び付くことがない。しかしながら、分析対象の存在が、第１および第２の認識試薬を一緒に三重錯体へと結び付けることができる。試薬ゾーンは、酸化還元メディエータ、特定の酵素のための基質、およびバッファ溶液の形成に適した塩など、さらなる試薬を含むことができる。
【０６８１】
第２の認識試薬を、そのように形成された三重錯体に移動性をもたらすことができる粒子へと結び付けることができる。粒子は、例えばポリマーマイクロスフェア、金属ナノ粒子、または磁性粒子であってよい。
【０６８２】
通常は、検出ゾーンが分析対象を集め、検出ゾーンが、検出可能な変化の場所である。検出可能な変化の程度を、検出ゾーンにおいて測定することができる。通常は、分析対象の量が多いほど、より大きな検出可能な変化がもたらされる。しかしながら、アッセイを、分析対象がより大量に存在するときに、より小さな変化を生じるように構成することも可能である。検出ゾーンは、分析対象を（例えば、分析対象に結合する試薬であって、検出ゾーンに固定されている試薬によって）固定することで、分析対象を集めることができる。あるいは、検出ゾーンが、分析対象に結び付いた成分を引きつけることができ、あるいは固定することができる。例えば、分析対象に結合し、かつ磁性粒子へと直接的または間接的に結び付けられる認識試薬を、１つ以上の検出ゾーンにもたらされる磁界によって、特定の検出ゾーンへと引きつけることができる。
【０６８３】
いくつかの実施形態においては、検出ゾーンの１つ以上が、１つ以上の電極を含んでいる。電極を、例えば銀、金、アルミニウム、パラジウム、白金、イリジウム、導電性カーボン、ドーピングされた酸化スズ、ステンレス鋼、または導電ポリマーなど、電気導電性およびサンプルの成分との低い反応性のために選択される材料で形成することができる。検出ゾーンの電極（作業電極）が、参照ゾーンの第２の電極（参照電極）との協働において、電圧または電流などといったサンプルの電気特性を測定することができる。あるいは、検出ゾーンおよび参照ゾーンのそれぞれが、少なくとも１つの作業電極および対向電極を有することができる。すなわち、検出および参照ゾーンが、別個独立の測定を行うことができる。随意により、対向電極も、アッセイ装置に備えることができる。サンプルの電気特性を測定するための電極を備えているアッセイ装置が、それぞれその全体参照により本明細書に組み込まれる米国実用新案登録第５，７０８，２４７号、第６，２４１，８６２号、および第６，７３３，６５５号に記載されている。
【０６８４】
いくつかの実施形態においては、アッセイ装置のベース、アッセイ装置の蓋、または両方が、検出ゾーンに整列した半透明または透明な窓を有している。検出ゾーンにおいて生じる光学的な変化を、窓を通して検出することができる。検出を、視覚的に行う（すなわち、変化がユーザの眼によって測定される）ことができ、あるいは計器（例えば、フォトダイオード、光電子増倍管、など）によって測定することができる。一般に、参照ゾーンが、その性状において検出ゾーンに類似している。換言すると、検出ゾーンが電極を備える場合、参照ゾーンも、同様に電極を備えることができる。検出ゾーンが光学的測定のための窓に整列している場合、参照ゾーンを、同様に光学的測定のための窓に整列させることができる。いくつかの実施形態において、参照ゾーンは、分析対象を集めるようには構成されていない。あるいは、参照ゾーンが、分析対象を集めるように適合されているが、この分析対象について別の分析を実行する。すなわち、参照ゾーンにおいて測定される検出可能な変化を、サンプル中に存在する分析対象の量を判断するときに考慮すべきバックグラウンド測定と考えることができる。
【０６８５】
サンプル材料は、例えば血液、血漿、血清、尿、唾液、粘液、涙、または他の体液など、任意の生物学的流体であってよい。分析対象は、例えばタンパク質、ペプチド、核酸、代謝産物、単糖類または多糖類、脂質、薬物または薬物代謝産物、あるいは他の成分など、サンプルにおいて発見される（あるいは、発見される可能性がある）任意の成分であってよい。随意により、アッセイ装置において、全血がサンプルとして利用可能である場合に血漿のみが検出ゾーンに達するように、サンプル導入口と検出ゾーンとの間に血液分離膜を設けることができる。
【０６８６】
アッセイ装置および含まれている試薬は、典型的には、乾燥状態にて用意される。アッセイ装置へと（すなわち、毛管チャネルへと）液体サンプルを加えることで、乾燥試薬を（アッセイ方法１０００に関して上述したように）再び懸濁させることができる。
【０６８７】
図１１Ａを参照すると、装置１００が、ベース１０２を備えている。ベース１０２は、第１の導入口１１０を備えている。導入口１１０は、第１の流体流通チャネル１２０に流体接続している。流通チャネル１２０は、導入口１１０からジャンクション１３０まで延びている。
【０６８８】
さらにベース１０２は、第２の導入口１４０を備えている。導入口１４０は、第２の流体流通チャネル１５０に流体接続している。第２のチャネル１５０は、導入口１４０からジャンクション１３０まで延びている。さらにチャネル１２０および１５０は、ジャンクション１３０において互いに流体接続している。第２のチャネル１５０は、通気孔１６０にも流体接続している。通気孔１６０は、導入口１４０において導入される液体が、チャネル１５０を完全に満たすように位置している。換言すると、液体が（例えば、毛管作用によって）導入口１４０からジャンクション１３０に向かって前進するにつれて、液体がチャネル１５０をチャネル１５０に気泡を全く捕らえることなく満たすように、チャネル１５０の気体が通気孔１６０を介して逃げ出す。
【０６８９】
第１の検出ゾーン１７０が、第１のチャネル１２０に位置している。検出ゾーン１７０は、リード１７４へと電気的に接続された電極１７２を備えている。同様に、第２の検出ゾーン１８０が、第２のチャネル１５０に位置している。検出ゾーン１８０は、リード１８４へと電気的に接続された電極１８２を備えている。
【０６９０】
電極を、例えば銀、金、アルミニウム、パラジウム、白金、イリジウム、導電性カーボン、ドーピングされた酸化スズ、ステンレス鋼、または導電ポリマーなど、電気導電性およびサンプルの成分との低い反応性のために選択される材料で形成することができる。電極は、電圧または電流などといったサンプルの電気特性を測定することができる。サンプルの電気特性を測定するための電極を備えているアッセイ装置が、それぞれその全体参照により本明細書に組み込まれる米国実用新案登録第５，７０８，２４７号、第６，２４１，８６２号、および第６，７３３，６５５号に記載されている。
【０６９１】
第１のチャネル１２０が、１つ以上の試薬ゾーンを含むことができる。試薬ゾーンは、１つ以上の試薬をチャネル１２０の表面に乾燥状態で備えている。試薬ゾーンは、導入口１１０と検出ゾーン１７０との間、検出ゾーン１７０とジャンクション１３０との間、あるいは検出ゾーン１７０の近傍など、チャネル１２０に沿った任意の位置に位置できる。試薬を、１つ以上の電極上または１つ以上の電極セット上に堆積することができる。試薬を、検出が行われる前にサンプル中の分析対象との相互作用を促進するチャネル内の任意の部分に堆積することができる。サンプルまたは他の流体が（例えば、サンプルをサンプル導入口に接触させることによって）チャネルへと導入されるとき、液体が、チャネルを満たしてベースの表面に接触し、表面に堆積されている試薬を再懸濁させることができる。
【０６９２】
ベース１０２が、ベース１０２の表面に向かって封じられる蓋１０４によって覆われている。ベース１０２と蓋１０４との間のシールが、流体チャネル１２０および１５０から液体が漏れないように保証している。蓋１０４は、適切な位置（例えば、導入口１４０および通気孔１６０）に穴を備えることができる。
【０６９３】
図１１Ｂが、ジャンクション１３０の側面図を示している。第１のチャネル１２０が、第１の深さ１２２を有する領域を含んでいる。個々の位置におけるチャネル１２０の深さを、チャネル１２２内のベース１０２の表面からチャネル１２０内の蓋１０４の表面までの垂直距離として表わすことができる。チャネル１２０は、ジャンクション１３０の近くに、小さくされた深さ１３２の領域を有している。図１１Ｂに見て取ることができるとおり、第１のチャネル１２０および第２のチャネル１５０が、ベース１０２と蓋１０４との間に連続的な空間を定めている。したがって、ジャンクション１３０（第１のチャネル１２０が第２のチャネル１５０から概念的に区別される位置を示す）の位置を、小さくされた深さ１３２の領域がチャネル１５０のより大きな深さに当接する位置として表わすことができる。
【０６９４】
ジャンクション１３０は、第１のチャネル１２０の小さくされた深さ１３２の領域によって定められる小さな断面積が、チャネル１５０によって定められる大幅に大きな断面積に当接する交差点によって特徴付けられる。ジャンクション１３０において、チャネル１２０は、チャネル１５０よりも小さな深さおよび幅を有している。大幅に異なる断面積を有するチャネルの出会いは、後述されるとおり、装置の動作に有用な特性をもたらすことができる。
【０６９５】
チャネル１２０の試薬ゾーンは、第１の分析対象を検出するための試薬および第２の分析対象を検出するための試薬を含むことができる。例えば、第１の分析対象がアルブミンである場合、第１の試薬は、アルブミンへの結合が可能であって、電気化学的な検出が可能である金属イオンを含むことができる。そのような金属イオンの１つは、ＣｏＣｌ２などのコバルト塩として第１の試薬に存在できるコバルト（ＩＩ）である。
【０６９６】
第２の分析対象を検出するための試薬は、磁性粒子および所望の分析対象に特定的に結合できる第１の認識試薬（分析対象に対する抗体など）を含むことができる。磁性粒子を、第１の認識試薬に結び付けることができる。さらに、第２の分析対象を検出するための試薬は、同じ分析対象に特定的に結合できる第２の認識試薬を含むことができる。第１および第２の認識試薬は、同時に分析対象へと結合することができる。この第２の認識試薬が、分析対象の検出を容易にすべく、例えば電気化学的変化を生み出すことができる酵素へと結び付けられることによってラベル付けされる。例えば、第２の分析対象がＮＴ−ｐｒｏＢＮＰである場合には、第１のチャネル１２０の試薬ゾーンは、抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体へと結び付けられた磁性粒子を含むことができる。さらに試薬ゾーンは、グルコースオキシダーゼ（ＧＯＤ）または西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）などの酸化還元酵素へと結び付けられた第２の抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体を含むことができる。認識試薬は、第２の分析対象に対して過剰に存在することができ、例えば、それぞれの認識試薬の一部を未結合に残しつつ、第２の認識試薬の実質的にすべてに結合するための充分な量の認識試薬を存在させることができる。
【０６９７】
磁性粒子は、磁界による影響を受ける粒子である。磁性粒子は、例えば米国実用新案登録出願公開第２００５０１４７９６３号、米国実用新案登録出願公開第２００５０１００９３０号、または米国実用新案登録第５，３４８，８７６号（いずれも、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の磁性粒子であってよく、あるいは例えばＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（商標）という商品名でＤｙｎａｌ  ＡＳによって製造されているビーズなど、市販のビーズであってよい。とくには、磁性粒子へと結び付けられた抗体が、例えば米国実用新案登録出願第２００５０１４９１６９号、第２００５０１４８０９６号、第２００５０１４２５４９号、第２００５００７４７４８号、第２００５０１４８０９６号、第２００５０１０６６５２号、および第２００５０１００９３０号、ならびに米国実用新案登録第５，３４８，８７６号（いずれも、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０６９８】
第２のチャネル１５０も、チャネル１５０の表面で乾燥状態にある１つ以上の試薬を含む１つ以上の試薬ゾーンを、例えば導入口１４０と検出ゾーン１８０との間、検出ゾーン１８０とジャンクション１３０との間、または検出ゾーン１８０の近傍に含むことができる。乾燥試薬が、液体（例えば、バッファ）と接触したときに再懸濁可能である。バッファを、導入口１４０を介してチャネル１５０へと導入することができる。例えば、チャネル１５０内の試薬ゾーンは、酸化還元酵素および酸化還元メディエータのための基質を含むことができる。
【０６９９】
装置の動作
サンプル（例えば、指刺しによって得られた或る量のヒトの血液）が、導入口１１０において検査片へと加えられる。血液は、アルブミン、すなわち第１の分析対象を含んでおり、その一部は、虚血変性アルブミン（ＩＭＡ）として存在している可能性がある。さらに、血液は、或る量のＮ末端プロ脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、すなわち第２の分析対象を含んでいる。いくつかの場合には、サンプル中に存在するＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの量が、検出不可能であるほどに少ないかもしれず、いくつかの場合には、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰがサンプルに存在しない。
【０７００】
血液サンプルが、毛管作用によってチャネル１２０に進入し、第１の試薬ゾーンにおいて試薬と混ざり合う。第１の試薬ゾーンの試薬は、コバルト、抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  ７２０６へと結合した磁性粒子（抗体に結び付けられた磁性粒子）、および抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１に共役した西洋わさびペルオキシダーゼ「ＨＲＰ」（抗体に結び付けられた酵素）を含んでいる。試薬が、血液との溶液中に再び懸濁し、混合物を形成する。混合物において、コバルトの一部にアルブミンが結合できる一方で、コバルトの一部は、溶液中で自由なままである。第１の試薬ゾーンのコバルトの量は、サンプルのコバルト結合能力よりも多く、したがって一部のコバルトが溶液中で自由なままである。同時に、第２の分析対象に、抗体に結び付けられた磁性粒子および抗体に結び付けられた酵素が結合し、三重錯体が形成される。所望であれば、サンプルにおける試薬の再懸濁および混合を促進または向上すべく、磁性粒子の運動（例えば、周期運動または振動運動）を誘起するように、磁界を加えることが可能である。
【０７０１】
図９Ａが、サンプル液体が導入口１１０へと加えられた後の装置の上面図および側面図を示している。サンプル液体（例えば、血液）が、チャネル１２０を満たすべく毛管作用によって引き込まれる。ジャンクション１３０に達すると、液体がメニスカス１９０を形成する。ジャンクション１３０におけるチャネルの断面積の変化ゆえ、サンプル液体は、チャネル１５０を満たすことはできない。むしろ、メニスカス１９０における表面張力が、サンプル液体をチャネル１５０へとさらに引き込もうとする任意の毛管力を上回る。このように、ジャンクション１３０が毛管ストップとして作用し、この地点を超える実質的な流体の流れを阻止する。この段階で、気体−液体のインターフェース（すなわち、血液−空気のインターフェース）が、メニスカス１９０において形成される。さらに図９Ａは、血液中に分散した磁性粒子２００も示している。
【０７０２】
次いで、結合せずに残っているコバルトの濃度を測定するために、第１の混合物について電気化学的分析が実行される。サンプル中のＩＭＡの存在が、サンプルのコバルト結合能力を低下させるため、未結合のコバルトの濃度がより高いことが、ＩＭＡの存在の指標となることができる。ＩＭＡについてのアッセイを、参照により本明細書に組み込まれる出願第ＧＢ０６０３０４９．８号に従って最適化することができる。
【０７０３】
第１のアッセイが完了した後、磁界がチャネル１２０へと加えられる。加えられる磁界を、（例えば、永久磁石を0検査片に対して動かすことによって）磁性粒子２００および磁性粒子へと結合したすべての成分を移動させるべく操作することができる。磁性粒子２００が、チャネル１２０に沿ってジャンクション１３０に向かって移動する。
【０７０４】
磁界の源を、成形された磁界をもたらすように構成することができる。成形された磁界は、磁性粒子を第１または第２の検出ゾーンに向かって案内するように設計された磁力線を有することができる。そのような成形された磁界は、磁性粒子およびラベル粒子の拡散または移動を制御するために有用でありうる。とくには成形された磁界が望まれる場合に、磁界の源を２つ以上設けることができる。例えば、磁界の源を、アッセイ装置の両端に設けることができ、一方を磁性粒子を引きつけるように構成し、他方を磁性粒子を追い出すように構成することができる。そのような構成は、すべての磁性粒子をアッセイ装置の一端に位置させるうえで有利となりうる。
【０７０５】
図９Ｂが、磁界の印加（磁界の源２１０によって印加される）によって磁性粒子２００がメニスカス１９０に向かって引き寄せられた後の装置の上面図および側面図を示している。磁界の源２１０を、磁性粒子２００をメニスカス１９０の付近に保つように構成（例えば、位置、磁界の強度、および磁界の形状に関して）することができる。磁界の源２１０を、磁界の源から離れようとする拡散に抗するための充分な磁力がメニスカス１９０において粒子２００に作用するように、操作することができる。
【０７０６】
次いで、第２の液体が、第２の導入口５２０において検査片へと加えられる。第２の液体は、酢酸ナトリウム・バッファ、過酸化水素基質、および酸化還元メディエータとしての２，２’−アジノ−ビス‐（３−エチルベンゾ−チアゾリン−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）を含んでいる。第２の液体が、第２のチャネル１５０に沿って毛管作用によってジャンクション１３０へと流れ、メニスカス１９０において血液サンプルに接し、液体−液体のインターフェースを形成する。液体−液体のインターフェースが形成されることで、妨げとなりうるサンプル成分ならびに対象外である分析対象を第１のチャネルの血液中に残しつつ、磁性粒子（および、磁性粒子へと結合しているものすべて）を、血液から第２の液体へと移動させることが、容易になる。磁性粒子ならびに磁性粒子に結合しているすべてのもの（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ（抗体に結び付けられた磁性粒子および抗体に結び付けられた酵素を含むＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの三重錯体の形態である）を含む）が、第２のチャネル１５０の第２の液体へと移される。
【０７０７】
図９Ｃが、第２の液体が第２のチャネル１５０へと加えられた後の装置の上面図および側面図を示している。粒子２００が、源２１０によって加えられる磁界のおかげで、液体−液体のインターフェースを横切って移動している。粒子２００は、磁界の源２１０の近傍に位置している。
【０７０８】
検査片へと組み込まれたバッファ袋が、反応バッファを送達することができ、バッファの組成は、さまざまであってよい（例えば、酢酸ナトリウム、クエン酸リン酸塩、クエン酸ナトリウム、あるいは任意の適切な濃度またはｐＨの任意の他のバッファ）。任意の適切な液体を、バッファの代わりに使用することができる（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる２００５年１１月１５日付の米国実用新案登録出願第６０／７３６，３０２号を参照）。
【０７０９】
図１０Ａおよび１０Ｂが、液体−液体のインターフェースを横切る磁気的分離を、さらに詳しく説明している。図１０Ａにおいて（図９Ｂと同様に）、磁性粒子２００が、源２１０によって加えられる磁界のおかげで、メニスカス１９０の付近に位置している。磁性粒子２００の一部が、第２の分析対象２４０へと結合しており、これが次に、検出可能な粒子２３０へと結合している。チャネル１２０内の検出可能な粒子は、第２の分析対象２４０に比べて余分に存在しており、検出可能な粒子の一部２５０が、結合しないままである。磁気的分離は、未結合の粒子２５０が第２の検出ゾーン１８０に達することがないように保証するうえで役に立ち、すなわち換言すると、結合した粒子２３０のみが検出可能な信号に寄与するように保証するうえで役に立ち、したがって検出可能な信号を、再現性を伴って、サンプル内の第２の分析対象２４０の量または濃度に関連付けることができる。
【０７１０】
次に、磁性粒子は、印加される磁界を（例えば、永久磁石を動かすことによって）操作することによって、第２の検出ゾーン１８０へと動かされる。磁性粒子が、第２の検出ゾーンに保持され、ここで第２の分析対象が電気化学的に検出される。
【０７１１】
分析対象は、哺乳類の体を苦しめる状態についてのバイオマーカーであってよい。用語「バイオマーカー」は、状態、疾患、または疾病の診断ならびに状態、疾患、または疾病の影響および進行の測定または標示に有用となりうる特定の分子的特徴を有する体内の生化学物質を指す。例えば、ヒトの体液（すなわち、呼気または血液）において見られる一般的なバイオマーカー、およびそのようなバイオマーカーもたらすヒトのそれぞれの診断の状態として、これらに限られるわけではないが、虚血変性アルブミン「ＩＭＡ」（原因：血液への酸素の不足；診断：冠動脈疾患）、脳性ナトリウム利尿ペプチド前駆体Ｎ端フラグメント「ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ」（原因：筋細胞の伸び；診断：うっ血性心不全）、アセトアルデヒド（原因：エタノール；診断：中毒）、アセトン（原因：アセトアセテート；診断：ダイエット；ケトン原生／糖尿病）、アンモニア（原因：アミノ酸の脱アミノ化；診断：尿毒症および肝疾患）、ＣＯ（一酸化炭素）（原因：ＣＨ２Ｃｌ２、高い割合のＣＯＨ；診断：屋内空気の汚染）、クロロホルム（原因：ハロゲン化合物）、ジクロロベンゼン（原因：ハロゲン化合物）、ジエチルアミン（原因：コリン；診断：腸内細菌の異常増殖）、Ｈ（水素）（原因：腸；診断：乳糖不耐症）、イソプレン（原因：脂肪酸；診断：代謝的負荷）、メタンチオール（原因：メチオニン；診断：腸内細菌の異常増殖）、メチルエチルケトン（原因：脂肪酸；診断：屋内空気の汚染／ダイエット）、Ｏ−トルイジン（原因：がんの代謝産物；診断：気管支がん）、硫化ペンタンおよび硫化物（原因：脂質の過酸化；診断：心筋梗塞症）、Ｈ２Ｓ（原因：代謝；診断：歯周病／排卵）、ＭｅＳ（原因：代謝；診断：肝硬変）、ならびにＭｅ２Ｓ（原因：感染症；診断：塹壕口腔炎）が挙げられる。
【０７１２】
さらに、試薬ゾーンは、所望の分析対象を認識できる第２の試薬を含むことができる。第２の試薬は、同じまたは別の分析対象を認識することができる。第１および第２の認識試薬を、同時に同じ分析対象を認識するように選択することができる。例えば、第１および第２の認識試薬が、それぞれ、分析対象の別個のエピトープを認識する抗体であってよい。このやり方で、分析対象、第１の認識試薬、および第２の認識試薬の三重（すなわち、３成分）錯体を形成することができる。一般に、第１および第２の認識試薬は、分析対象が存在しないときは互いに結び付くことがない。しかしながら、分析対象の存在が、第１および第２の認識試薬を一緒に三重錯体へと結び付けることができる。試薬ゾーンは、酸化還元メディエータ、特定の酵素のための基質、およびバッファ溶液の形成に適した塩など、さらなる試薬を含むことができる。
【０７１３】
第２の認識試薬を、そのように形成された三重錯体に移動性をもたらすことができる粒子へと結び付けることができる。粒子は、例えばポリマーマイクロスフェア、金属ナノ粒子、または磁性粒子であってよい。磁性粒子は、磁界による影響を受ける粒子である。磁性粒子は、例えば米国実用新案登録出願公開第２００５０１４７９６３号、米国実用新案登録出願公開第２００５０１００９３０号、または米国実用新案登録第５，３４８，８７６号（いずれも、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の磁性粒子であってよく、あるいは例えばＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（商標）という商品名でＤｙｎａｌ  ＡＳによって製造されているビーズなど、市販のビーズであってよい。とくには、磁性粒子へと結び付けられた抗体が、例えば米国実用新案登録出願第２００５０１４９１６９号、第２００５０１４８０９６号、第２００５０１４２５４９号、第２００５００７４７４８号、第２００５０１４８０９６号、第２００５０１０６６５２号、および第２００５０１００９３０号、ならびに米国実用新案登録第５，３４８，８７６号（これらのそれぞれの教示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０７１４】
通常は、検出ゾーンが分析対象を集め、検出ゾーンが、検出可能な変化の場所である。検出可能な変化の程度を、検出ゾーンにおいて測定することができる。通常は、分析対象の量が多いほど、より大きな検出可能な変化がもたらされる。しかしながら、アッセイを、分析対象がより大量に存在するときに、より小さな変化を生じるように構成することも可能である。検出ゾーンは、分析対象を（例えば、分析対象に結合する試薬であって、検出ゾーンに固定されている試薬によって）固定することで、分析対象を集めることができる。あるいは、検出ゾーンが、分析対象に結び付いた成分を引きつけることができ、あるいは固定することができる。例えば、分析対象に結合し、かつ磁性粒子へと直接的または間接的に結び付けられる認識試薬を、１つ以上の検出ゾーンにもたらされる磁界によって、特定の検出ゾーンへと引きつけることができる。
【０７１５】
いくつかの実施形態においては、検出ゾーンの１つ以上が、１つ以上の電極を含んでいる。電極を、例えば銀、金、アルミニウム、パラジウム、白金、イリジウム、導電性カーボン、ドーピングされた酸化スズ、ステンレス鋼、または導電ポリマーなど、電気導電性およびサンプルの成分との低い反応性のために選択される材料で形成することができる。検出ゾーンの電極（作業電極）が、参照ゾーンの第２の電極（参照電極）との協働において、電圧または電流などといったサンプルの電気特性を測定することができる。あるいは、検出ゾーンおよび参照ゾーンのそれぞれが、少なくとも１つの作業電極および対向電極を有することができる。すなわち、検出および参照ゾーンが、別個独立の測定を行うことができる。随意により、対向電極も、アッセイ装置に備えることができる。サンプルの電気特性を測定するための電極を備えているアッセイ装置が、それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる米国実用新案登録第５，７０８，２４７号、第６，２４１，８６２号、および第６，７３３，６５５号に記載されている。
【０７１６】
いくつかの実施形態においては、アッセイ装置のベース、アッセイ装置の蓋、または両方が、検出ゾーンに整列した半透明または透明な窓を有している。検出ゾーンにおいて生じる光学的な変化を、窓を通して検出することができる。検出を、視覚的に行う（すなわち、変化がユーザの眼によって測定される）ことができ、あるいは計器（例えば、フォトダイオード、光電子増倍管、など）によって測定することができる。一般に、参照ゾーンが、その性状において検出ゾーンに類似している。換言すると、検出ゾーンが電極を備える場合、参照ゾーンも、同様に電極を備えることができる。検出ゾーンが光学的測定のための窓に整列している場合、参照ゾーンを、同様に光学的測定のための窓に整列させることができる。いくつかの実施形態において、参照ゾーンは、分析対象を集めるようには適合されていない。あるいは、参照ゾーンが、分析対象を集めるように適合されているが、この分析対象について別の分析を実行する。すなわち、参照ゾーンにおいて測定される検出可能な変化を、サンプル中に存在する分析対象の量を判断するときに考慮すべきバックグラウンド測定と考えることができる。
【０７１７】
サンプル材料は、例えば血液、血漿、血清、尿、唾液、粘液、涙、または他の体液など、任意の生物学的流体であってよい。分析対象は、例えばタンパク質、ペプチド、核酸、代謝産物、単糖類または多糖類、脂質、薬物または薬物代謝産物、あるいは他の成分など、サンプルにおいて発見される（あるいは、発見される可能性がある）任意の成分であってよい。随意により、アッセイ装置において、全血がサンプルとして利用可能である場合に血漿のみが検出ゾーンに達するように、サンプル導入口と検出ゾーンとの間に血液分離膜を設けることができる。
【０７１８】
アッセイ装置および含まれている試薬は、典型的には、乾燥状態にて用意される。アッセイ装置へと（すなわち、毛管チャネルへと）液体サンプルを加えることで、乾燥試薬を再び懸濁させることができる。
【０７１９】
図１７を参照すると、読み取り器１０００が、検査用のアッセイ装置１１００を受け入れ、ディスプレイ１２００を備えている。ディスプレイ１２００を、例えばテキスト、ジョイント・フォトグラフィック・エキスパート・グループ（ＪＰＥＧ）フォーマット、タグ付き画像ファイル・フォーマット（ＴＩＦＦ）、グラフィクス・インターチェンジ・フォーマット（ＧＩＦ）、またはビットマップなど、種々のフォーマットの像を表示するために使用することができる。ディスプレイ１２００を、文字メッセージ、ヘルプ・メッセージ、指示、照会、検査結果、および種々の情報を患者へと表示するために使用することも可能である。ディスプレイ１２００は、ユーザに入力領域１４００を提供することができる。入力領域１４００は、キー１６００を含むことができる。一実施形態においては、入力領域１４００を、例えばディスプレイ１２００がタッチ式スクリーンである場合に、ディスプレイ１２００上に表示されるシンボルとして実現できる。ユーザへの指示および照会を、ディスプレイ１２００上でユーザへと示すことができる。ユーザは、入力領域によって照会に応答することができる。
【０７２０】
さらに、読み取り器１０００は、読み取りのために診断検査アッセイ装置１１００を受け付けるアッセイ装置読み取り器を備えている。アッセイ装置読み取り器は、検査アッセイ装置１１００において生じる例えば光学的変化、電気的変化、または他の検出可能な変化の大きさにもとづいて、分析対象のレベルを測定することができる。分析対象に応答して光学的変化を生じるアッセイ装置を読み取るために、アッセイ装置読み取り器は、例えば光源、フィルタ、および光子検出器（例えば、フォトダイオード、光電子増倍管、またはアバランシェ・フォトダイオード）など、検出可能な変化を測定するための光学システムを備えることができる。分析対象に応答して電気的変化を生じるアッセイ装置を読み取るために、アッセイ装置読み取り器は、例えば電圧計または電流計など、検出可能な変化を測定するための電気システムを備えることができる。
【０７２１】
装置１０００は、通信ポート（図示されていない）をさらに備えることができる。通信ポートは、例えば電話回線またはコンピュータ・ネットワークへの接続であってよい。装置１０００は、測定の結果を、出力装置、リモート・コンピュータ、または遠方の場所からの医療提供者へと通信することができる。患者、医療提供者、または他のユーザが、例えばバイオマーカー、代謝産物、または乱用薬物など、種々の分析対象のレベルを検査および記録するために、読み取り器１０００を使用することができる。
【０７２２】
診断装置１０００のさまざまな実施が、記録媒体（例えば、ハードディスクドライブ（ＨＤＤ）、フラッシュメモリ、ビデオカセットレコーダ（ＶＣＲ）テープまたはデジタルビデオディスク（ＤＶＤ）、コンパクトディスク（ＣＤ）、あるいはフロッピーディスク）に保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。さらに、さまざまな実施が、直接的なケーブル接続、コンピュータ・ネットワーク、無線ネットワーク、衛星ネットワーク、などといった通信媒体を介して、別のコンピュータ・システムに保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。
【０７２３】
読み取り器を制御するソフトウェアは、汎用の演算装置、携帯情報端末（ＰＤＡ）、特殊用途の演算装置、ノート型コンピュータ、手持ち用コンピュータ、またはネットワーク家電などといった任意の処理装置において動作するソフトウェア・アプリケーションの形態であってよい。読み取り器を、プロセッサ、１つ以上の入力装置、１つ以上の出力装置、コンピュータで読み取り可能な媒体、およびコンピュータ・メモリ装置を含むハードウェアの構成を使用して実現してもよい。プロセッサを、汎用のマイクロプロセッサまたは特定用途向け集積回路（ＡＳＩＣ）など、任意のコンピュータ処理装置を使用して実現することができる。
【０７２４】
プロセッサを、センサ・データおよび／または入力データを受信するための機構を提供するため、ならびに照会および結果を保守技術員へと表示または他の方法で出力するための機構を提供するために、入力／出力（Ｉ／Ｏ）装置に一体化させることができる。入力装置として、例えば、マウス、キーボード、タッチ式スクリーン・ディスプレイ、ボタン、センサ、およびカウンタのうちの１つ以上を挙げることができる。ディスプレイ１２００を、液晶表示装置（ＬＣＤ）、テレビ、プリンタ、および発光ダイオード（ＬＥＤ）など、任意の出力技術を使用して実現することができる。
【０７２５】
コンピュータで読み取り可能な媒体が、固定式または着脱式のいずれかの媒体上にプログラムおよびデータを保存するための機構を提供する。コンピュータで読み取り可能な媒体を、従来からのコンピュータ用ハードドライブまたは他のリムーバブル・メディアを使用して実現することができる。最後に、システムは、読み取り器の動作を助けるために、ランダム・アクセス・メモリ（ＲＡＭ）などのコンピュータ・メモリ装置を使用する。読み取り器の実施は、ユーザを装置の使用において案内し、測定の結果を保存するソフトウェアを含むことができる。読み取り器１０００は、医療記録データベースまたは患者の介護に使用される他のシステムなど、アプリケーションへのアクセスを提供することができる。一例においては、装置が通信ポートを介して医療記録データベースへと接続する。さらに、装置１０００は、インターネットに接続して、既存のデータベースを統合し、他のウェブサイトをリンクする能力を有することができる。
【０７２６】
一般に、アッセイ装置を、試薬をベース上に堆積させ、ベースを覆って蓋を封じることによって製作することができる。ベースは、マイクロ成型プラットフォームまたは積層プラットフォームであってよい。
【０７２７】
マイクロ成型によるプラットフォーム
光学的検出のために準備されるアッセイ装置においては、ベース、蓋、あるいはベースおよび蓋の両者が、所望の光の波長に対して透過性であってよい。典型的には、ベースおよび蓋の両者が、例えば４００〜７００ｎｍの光の可視の波長に対して透過性である。ベースおよび蓋が、例えば２００ｎｍ〜１０００ｎｍ、または３００ｎｍ〜９００ｎｍなど、検出のために使用することができる波長の範囲をもたらすために、近ＵＶおよび近ＩＲの波長に対して透過性であってよい。
【０７２８】
電気化学的な検出を使用するアッセイ装置においては、電極が、ベースの表面に堆積される。電極を、カーボンまたは銀インクでのベースへのスクリーン印刷、ならびにその後の絶縁インクによって設けることができ、導電材料（例えば、金、銀、またはアルミニウムなど）のベースへの蒸着またはスパッタリング、ならびにその後のレーザ・アブレーションによって設けることができ、あるいは導電材料（例えば、金、銀、またはアルミニウムなど）のベースへの蒸着またはスパッタリング、ならびにその後のフォトリソグラフィック・マスキングおよび湿式または乾式エッチングによって設けることができる。
【０７２９】
電極を、２つのやり方の一方にて蓋に形成することができる。剛性の蓋に１つ以上の貫通穴を設け、真空ベースへと取り付け、カーボンまたは銀インクを堆積させるためにスクリーン印刷を使用することができる。剛性の蓋の下面で真空を引きつつ、スクリーン印刷を行うことで、導電インクが貫通穴へと引き込まれ、蓋の上面および下面の間の電気的接触が生み出され、穴が封じられて、液体が漏れないように保証される。
【０７３０】
あるいは、蓋を貫通穴を全く備えずに製造し、反転させてスクリーン印刷台へと配置し、カーボンまたは銀インクを印刷することができる。ひとたび電極が製作されると、マイクロ成型されたベースが装填され、試薬を堆積するために既知の位置へと位置合わせされる。試薬の堆積は、ノズルからの送出または吸引、電磁弁ならびにサーボ駆動またはステッパ駆動シリンジの使用によって達成できる。これらの方法は、試薬の液滴または線を、接触または非接触の様式で堆積することができる。試薬を堆積するための他の方法として、パッド印刷、スクリーン印刷、圧電印刷ヘッド（例えば、インクジェット印刷）、あるいは試薬を放出すべく圧縮される袋（「ケーキ・アイサー」）からの堆積が挙げられる。堆積は、好ましくは、湿度および温度が制御された環境で実行される。異なる試薬を、同じまたは別のステーションにおいて送出することができる。所望の堆積ゾーンの外への試薬の交差汚染またははみ出しを検出できるようにするために、随意により蛍光剤または着色剤を、試薬へと加えることができる。製品の性能が、交差汚染によって損なわれる可能性がある。堆積ゾーンは、近接していても、あるいは離れていてもよい。蛍光剤または着色剤は、アッセイ装置の動作、とくには分析対象の検出を妨げることがないように選択される。
【０７３１】
堆積の後で、試薬は乾燥させられる。乾燥は、大気での乾燥、赤外線での乾燥、強制空気によって補助された赤外線での乾燥、紫外光での乾燥、暖かい強制空気、制御された相対湿度での乾燥、またはこれらの組み合わせによって達成できる。次いで、マイクロ成型されたベースに、上部に柔軟または剛性の蓋を接合することによって蓋を設けることができる。ベースおよび蓋の位置合わせが、２つが貼り合わせられる前に行われる。ベースおよび蓋を、（前もって蓋またはベースに塗布される感熱接着剤を使用して）熱シールによって、２つの類似の材料を接合するための超音波溶接によって、レーザ溶接（２つの類似の材料を接合するためのマスクまたは線レーザ）によって、シアノアクリレート系接着剤によって、前もって蓋またはベースへと塗布されるエポキシ接着剤によって、あるいは前もって蓋またはベースへと塗布される感圧接着剤によって接合することができる。蓋を取り付けた後に、組み立てられたアッセイ装置の一部またはすべてを、アッセイ装置が設計どおりに機能するように保証するため、重要な寸法について検査することができる。検査として、視覚検査、レーザ検査、接触測定、あるいはこれらの組み合わせを挙げることができる。
【０７３２】
アッセイ装置は、バッファ袋を含むことができる。バッファ袋は、底部および上部開口を有する成型くぼみであってよい。下方の開口を、破れやすい箔またはプラスチックで封じることができ、くぼみをバッファで満たすことができる。次いで、より丈夫な箔または薄板が、上部の開口を覆ってシールされる。あるいは、前もって形成されてバッファで満たされたブリスター袋を、くぼみに配置して、くぼみに貼り付けることができる。ブリスター袋は、５０〜２００μＬのバッファを含むことができ、標準的なブリスター法を使用して形成され、満たされ、封じられる。ブリスター材料は、箔またはプラスチックであってよい。ブリスターを、感圧接着剤またはシアノアクリレート系接着剤でくぼみへと貼り付けることができる。
【０７３３】
積層によるプラットフォーム
特定の幅のロールの形態で供給される３枚以上の薄板を、アッセイ装置を構築するために使用することができる。ベース薄板は、プラスチック材料であり、１つの表面が親水性材料でコートされている。この薄板が、導電電極および絶縁インクを堆積するために印刷ステーションへと供給される。ベース薄板が位置合わせ（横ウェブ）され、導電電極が、すでに述べた技法によって親水性表面に堆積される。次いで、ベース薄板が堆積ステーションへと送られ、１つ以上の試薬が薄板へと適用される。横ウェブおよび縦ウェブの両方の位置合わせは、上述の方法によって試薬の堆積が行われる前に行われる。試薬が、堆積の後で、上述の方法によって乾燥させられる。中間薄板が、指定の幅のロールの形態で供給される。アッセイ装置において、２つ以上の中間薄板が存在してもよい。中間という用語は、ベース薄板または蓋薄板でないことを示す目的である。中間薄板は、それぞれの面に感圧接着剤または熱シール接着剤のいずれかを有しているプラスチック・スペーサであってよい。感圧接着剤には、接着剤を保護するためにいずれかの面に保護ライナーが設けられる。中間薄板およびその接着剤の厚さのばらつきは、１５％未満または１０％未満である。
【０７３４】
チャネルおよび造作が、レーザ源（例えば、ＣＯ２レーザ、ＹＡＧレーザ、エキシマレーザ、あるいはその他）を使用して中間薄板へと切り込まれる。チャネルおよび造作を、中間薄板の厚さの全体を貫いて切り込むことができ、あるいは造作およびチャネルを、薄板の一方の面から制御された深さまで切除することができる。中間薄板およびベース薄板が、横ウェブおよび縦ウェブの両方向について位置合わせされ、一体に貼り合わせられる。感圧接着剤が使用される場合には、下方のライナーが中間薄板から取り去られ、ベースを中間薄板へと貼り付けるべく圧力が加えられる。熱シール接着剤が使用される場合には、ベースおよび中間薄板が、熱および圧力を使用して接合される。
【０７３５】
アッセイ装置の蓋を形成する上側薄板が、指定の幅のロールの形態で供給される。上側薄板は、プラスチック材料であってよい。造作を、上述のようにレーザ源を使用して上側薄板へと切り込むことができる。上側薄板が、ベース薄板および中間薄板へと位置合わせ（横ウェブおよび縦ウェブ）され、使用されている接着剤に応じ、圧力による積層あるいは熱および圧力による積層によって接合される。積層体を横および縦ウェブ方向に位置合わせした後、個々のアッセイ装置または試験片を、高出力のレーザ（例えば、ＣＯ２レーザ、ＹＡＧレーザ、エキシマレーザ、またはその他、など）を使用して積層体から切り出すことができる。
【０７３６】
組み立てられたアッセイ装置の一部またはすべてを、アッセイ装置が設計どおりに上手く機能するように保証するため、重要な寸法について検査することができる。検査として、視覚検査、レーザ検査、接触測定、あるいはこれらの組み合わせを挙げることができる。
【０７３７】
分析対象を検出するためのアッセイの使用を利用する１つの用途の例は、血液サンプルなどの生理学的流体サンプルの分析である。とくには、疾病または病気を知らせることができる分析対象に関して血液サンプルを分析することが、ますます一般的になってきている。そのような分析を、分析対象を直接的または間接的に検出するアッセイを使用して実行することができる。
【０７３８】
いくつかの実施形態は、ただ１つの少量の血液サンプルまたは他の生物学的物質あるいは複合混合物について２つ以上のアッセイを実行するための装置および方法を提供する。また、この装置および方法は、少なくとも第２の分析対象の検出を、アッセイ試薬の非特定の反応による汚染および細胞残屑による目標の分子の物理的な閉塞を伴うことなく、もたらすことができる。
【０７３９】
他の典型的な実施形態の説明
次に、図１２を参照すると、アッセイ装置において使用するために適した検査片が、全体として１０１で指し示されている。検査片が、第１の検出ゾーン１０２および第２の検出ゾーン１０３を、第１の直線チャネル１０４および第２の直線チャネル１０５によって流体接続させて有している。第１の直線チャネル１０４は、第１の適用ゾーン１０６へと流体接続しており、第２の直線チャネル１０５は、第２の適用ゾーン１０７へと流体接続している。第１および第２の検出ゾーン１０２および１０３には、それぞれ第１組の電極１０８および第２組の電極１０６が備えられている。電極は、サンプルの成分を直接的または間接的に検出するために適している。２つの検出ゾーン１０２および１０３から実質的に等距離の地点に、溶解可能な通気孔１１０が設けられ、第１のチャネル１０４および第２のチャネル１０５に流体接続して、第１のチャネル１０４および第２のチャネル１０５の間の接続を形成している。通気孔１１０は、第１および第２のチャネル１０４および１０５における流体の流れを防止または促進するように作用する。
【０７４０】
第１の試薬ゾーン１１１が、第１のチャネル１０４に流体接続して設けられ、第１の適用ゾーン１０６と第１の検出ゾーン１０２との間に位置している。同様に、第２の試薬ゾーン１１２が、第２のチャネル１０５に流体接続して設けられ、第２の適用ゾーン１０７と第２の検出ゾーン１０３との間に位置している。第１の試薬ゾーン１１１は、分析対象（例えば、ＩＭＡ）へと結合する基質（例えば、コバルト）を含んでいる。さらに、第１の試薬ゾーン１１１は、酸化還元活性な酵素基質を酸化または還元できる酵素へと結び付けられた第１の認識試薬を含んでいる。例えば、酸化還元活性な酵素基質がグルコースである場合、酵素は、グルコースオキシダーゼ（ＧＯＤ）であってもよい。さらに、第１の試薬ゾーン１１１は、所望の分析対象に結合するように選択された第２の認識試薬を含んでいる。詳しくは、第２の認識試薬は、第１の認識試薬と同時に所望の分析対象に結合して、三重錯体を形成するように選択される。第２の認識試薬は、磁性粒子へと結び付けられている。第２の試薬ゾーン１１２は、酸化還元活性な酵素基質（例えば、グルコース）および酸化還元メディエータ（例えば、フェリシアン化カリウムＫ３Ｆｅ（ＣＮ）６）を含んでいる。試薬は、試薬ゾーンにおいて乾燥させられており、血液またはバッファなどといった流体を加えることで再び懸濁させることができる。
【０７４１】
さらに、アッセイ装置は、チャネル内の磁性粒子に作用する磁石（図示されていない）を備えている。磁石は、磁性粒子および磁性粒子へと結合したすべてのものを、検査片の或る領域から別の領域へと移動させるために使用される。検査片は、実行された任意のアッセイの結果をユーザに提示する読み取り器への挿入に適している。
【０７４２】
この方法の詳細な実施形態においては、電子読み取り器による読み取りに適した検査片を備えるアッセイ装置が、最初に用意される。検査片に、虚血変性アルブミン「ＩＭＡ」（第１の分析対象）および脳性ナトリウム利尿ペプチド前駆体Ｎ端フラグメント「ＮＴｐｒｏＢＮＰ」（第２の分析対象）を含んでいる疑いがある哺乳類の血液サンプルが加えられる。血液サンプルが、検査片上に乾燥させられているコバルトと混ざり合い、コバルトを溶液中に再懸濁させ、第１の分析対象のコバルトとの相互作用に適した条件のもとで混合物を形成する。この混合物において、一部のコバルトが血液中のＩＭＡに結合して錯体を形成する一方で、一部のコバルトは、結合せずに残る。また、血液サンプルは、検査片上に乾燥させられている抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体  ７２０６へと結合した磁性粒子（抗体に結び付けられた磁性粒子）および抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１に共役した西洋わさびペルオキシダーゼ「ＨＲＰ」（抗体に結び付けられた酵素）とも混ざり合い、これらの成分を溶液中に再懸濁させ、第２の分析対象の抗体に結び付けられた磁性粒子および抗体に結び付けられた酵素との相互作用に適した条件のもとで混合物を形成して、三重錯体を形成する。
【０７４３】
次いで、第１の混合物について電気化学的分析が実行される。この分析は、第１の混合物に存在する未結合のコバルトの量を知らせる。結果として、サンプル中に存在するＩＭＡの量を割り出すことができる。このＩＭＡを検出するための検査手順を、参照により本明細書に組み込まれる本出願と同時に係属中の我々の出願第ＧＢ０６０３０４９．８号に従って最適化することができる。
【０７４４】
上述の方法のこの工程は、通常は、複合混合物中の任意の分析対象の間接的な検出を可能にするが、この方法が、単純な混合物中の分析対象の間接的な検出にも適していることを、理解できるであろう。この方法は、検出可能な物質と分析対象との間の相互作用によって前記検出可能な物質の検出可能性が変化する任意のアッセイに、適用可能である。
【０７４５】
第１のアッセイが完了した後、磁石が検査片に沿って動かされ、磁性粒子ならびに（三重錯体などとして）磁性粒子へと結合したすべての成分を、第１のチャネルに沿って通気孔へと移動させる。磁石が、約５ｍｍほど通気孔を超えるまで第２のチャネルに向かって動かされ、そこで保持される。これは、磁性粒子を流体−空気のインターフェースに保持する。なぜならば、磁性粒子が、そのように形成されたメニスカスを通過することができないためである。
【０７４６】
第２の流体が、第２の適用ゾーンにおいて検査片へと加えられる。第２の液体は、酢酸ナトリウム・バッファ、過酸化水素基質、およびＡＢＴＳ酸化還元メディエータを含んでいる。第２の液体が、第２のチャネルに沿って通気孔へと流れ、血液サンプルに接して、液体−液体のインターフェースを形成する。流体−流体のインターフェースが形成されることで、妨げとなりうるものならびに対象外である分析対象を第１のチャネルの血液中に残しつつ、磁性粒子（および、磁性粒子へと結合しているものすべて）を、血液から第２の液体へと移動させることが容易になる。磁性粒子ならびに磁性粒子に結合しているすべてのもの（ＮＴｐｒｏＢＮＰ（抗体に結び付けられた磁性粒子および抗体に結び付けられた酵素を含むＮＴｐｒｏＢＮＰの三重錯体の形態である）を含む）だけが、第２のチャネルの第２の液体へと移される。磁性粒子は、磁石を使用して第２の検出ゾーンへと動かされる。磁性粒子が第２の検出ゾーンに保持され、ここで第２の分析対象が間接的に電気化学的に検出される。
【０７４７】
この実施形態において、第１、第２、および任意のさらなるアッセイは、随意により順次実行される。別の実施形態においては、少なくとも２つのアッセイが同時に実行される。
【０７４８】
次に、図１３を参照すると、組み立てられた検査片２０１が、スペーサ２１５によって蓋２１４から隔てられたベース２１３を備えている。スペーサ２１５を、ベース２１３または蓋２１４の一体の一部分として形成することができる。あるいは、ベース２１３、蓋２１４、およびスペーサ２１５を、別個に形成して一体に組み合わせることができる。一体に組み合わせられるとき、ベース２１３、蓋２１４、およびスペーサ２１５の接続を、例えば接着剤または溶接によってシールすることができる。ベース２１３、蓋２１４、およびスペーサ２１５が、液体を漏らさないチャネル２０４、２０５を定めることができ、液体サンプルが、ベース２１３の表面など、チャネル２０４、２０５を定める内表面に接することができる。これらの液体を漏らさないチャネルの間に、毛管流を促進または阻止することができる通気孔（図示されていない）が位置している。スペーサ２１５の寸法を、チャネル２０４、２０５の内部に面するベース２１３および蓋２１４の表面が毛管を形成するように、すなわちベースおよび蓋がチャネル２０４、２０５の内部の液体に対して毛管作用をもたらすように選択することができる。あるいは、ベース２１３または蓋２１４が、お互いとは別個独立に毛管作用をもたらすことができる。チャネル２０４、２０５は、１００マイクロリットル未満、２０マイクロリットル未満、１０マイクロリットル未満、あるいは５マイクロリットル以下の体積を有することができる。
【０７４９】
次に、図１４を参照すると、ベース３１３への試薬の堆積の別の構成が、検査片の短辺に平行な断面として示されている。図１４Ａにおいて、第１の電極セット３０８が、ベース３１３の表面３１６に配置されている。第１の試薬混合物３１７が、第１の電極セット３０８の少なくとも１つの電極を覆って堆積されている。第１の試薬混合物３１７は、第１の試薬、第２の試薬、および第３の試薬を含んでおり、第２の試薬および第３の試薬が、図１５Ａに示されている。第１の試薬が、コバルトを含んでおり、第１の分析対象と相互作用することができる。図１５Ａを参照すると、第２の試薬４１９が、第１の抗体４２２へと結び付けられた磁性粒子４２１を含んでいる。第３の試薬４２０は、第２の抗体４２４へと結び付けられた検出可能成分４２３を含んでいる。
【０７５０】
別の構成が図１４Ｂに示されており、電極セット３０８からの少なくとも１つの電極が、ベース３１３の表面３１６に配置されて、第１の試薬混合物３１７によって覆われており、次いで第１の試薬混合物３１７が、第２の試薬混合物３２５によって覆われている。第１の試薬混合物３１７が、第１の試薬を含んでいる。第２の試薬混合物３２５が、第２の試薬および第３の試薬を含んでいる。種々の試薬の別の組み合わせを１つ以上の層へと組み込むことができることは、明らかであろう。試薬の堆積の順序を選択することによって、アッセイの動力学に適するように、さらには感度を向上させるために、サンプルに接したときの試薬の選択的な放出またはタイミングを合わせた放出を可能にできる。
【０７５１】
試薬を、１つ以上の電極上または１つ以上の電極セット上に堆積することができる。試薬を、検出が行われる前にサンプル中の分析対象との相互作用を促進するチャネル内の任意の部分に堆積することができる。
【０７５２】
あるいは、図１４Ｃを参照すると、第２の試薬混合物３２５が、ベース３１３の表面３１６に堆積されている。
【０７５３】
サンプルまたは他の流体が（例えば、サンプルをサンプル導入口に接触させることによって）チャネルへと導入されるとき、液体が、チャネルを満たしてベースの表面に接触し、表面に堆積されている試薬を再懸濁させることができる。
【０７５４】
サンプルが第１の試薬が結合する第１の分析対象を含んでいる場合、第１の試薬が第１の分析対象に結合する。第１の試薬は、アルブミンおよびＩＭＡへと結合するコバルトを含むように選択される。コバルトの結合を、とりわけ電気化学的技法または光化学的技法によって分析することができる。
【０７５５】
再び図１５を参照すると、サンプルが第１および第２の抗体４２２および４２４によって認識される第２の分析対象４２６を含んでいる場合、抗体４２２、４２４が、第２の分析対象に結合する。抗体４２２、４２４は、図１５Ｂに示されるとおり、分析対象４２６の異なるエピトープへと結合して、試薬４１９、分析対象４２６、試薬４２０の三重錯体４２７の形成を可能にするように選択されている。
【０７５６】
図１６Ａおよび１６Ｂは、動作時のアッセイ装置、例えばカートリッジまたは検査片１０１を示している。図１６Ａに、第１のチャネル５０４および第２のチャネル５０５の側面図が示されている。ベース５１３および蓋５１４が、溶解した第１の試薬５１８、第２の試薬５１９、および第３の試薬５２０、ならびに第１の分析対象５２８および第２の分析対象５２６を含んでいる液体サンプルを閉じ込めている。試薬５１８、５１９、５２０を、すべての分析対象５２８、５２６が結合する一方で、試薬５１８、５１９、５２０の一部が未結合のまま残ることができるように、サンプル中に存在する分析対象５２８、５２６の量に対して過剰に供給することができる。蓋５１４に、第１の適用ゾーン５０６および第２の適用ゾーン５０７、ならびに通気孔５１０が位置している。血液サンプルがアッセイ装置１０１へと導入され、試薬がサンプルによって再び懸濁させられる。サンプルが、第１のチャネル５０４に沿って通気孔５１０へと流れ、ここで毛管流が停止し、空気とのメニスカス５２９が形成される。試薬、分析対象、および錯体を、試薬の出所であるチャネル５０４または５０５内の位置の付近に、拡散によって分布させることができる。第１の試薬５１８の分析が、第１組の電極５０８において実行され、第１の分析対象５２８の存在についての指標がもたらされる。
【０７５７】
第１のアッセイが完了した後、ベース５１３の下方に位置して第１の適用ゾーン５０６に近接している磁界の源５３０が、抗体に結合した磁性粒子５１９、ならびに抗体に結合した磁性粒子５１９とともに三重錯体を形成している第２の分析対象５２６および検出可能成分５２３を、メニスカス５２９に向かって移動させるように構成されている。磁界の源５３０は、第２のチャネル５０５の付近に保たれる。検出可能成分５２３のための基質（図示されていない）および酸化還元メディエータ（図示されていない）を含んでいるバッファ溶液（図示されていない）が、第２の適用ゾーン５０７を介して第２のチャネル５０５へと加えられる。バッファ溶液が、第２のチャネル５０５に沿ってメニスカス５２９へと移動し、メニスカス５２９において、サンプル流体と液体−液体のインターフェースを形成する。液体−液体のインターフェースが形成されるとき、磁性粒子が第２のチャネル５０５の付近に位置する磁界の源５３０へと引きつけられ、磁性粒子に結合した抗体５１９およびこれに結合しているすべてのものが、速やかにサンプル流体からバッファ溶液へと移動する。磁性粒子が液体−液体のインターフェースを横切って速やかに移動することで、不純物が第２のチャネル５０５へと引きずり込まれることが防止される。これにより、第２のチャネル５０５の第２の電極セット５０９において正確な第２のアッセイを実行することができる。磁界の源５３０が、第２の電極セット５０９に向かって動かされ、第２の分析対象５２６をこれらの電極５０９の上方に局在させる。
【０７５８】
磁界の源を、成形された磁界をもたらすように構成することができる。成形された磁界は、磁性粒子を第１または第２の検出ゾーンに向かって案内するように設計された磁力線を有することができる。そのような成形された磁界は、磁性粒子およびラベル粒子の拡散または移動を制御するために有用でありうる。とくには成形された磁界が望まれる場合に、磁界の源を２つ以上設けることができる。例えば、磁界の源を、アッセイ装置の両端に設けることができ、一方を磁性粒子を引きつけるように構成し、他方を磁性粒子を追い出すように構成することができる。そのような構成は、すべての磁性粒子をアッセイ装置の一端に位置させるうえで有利となりうる。
【０７５９】
図１５を再び参照すると、検出可能成分４２３は、直接的に検出可能（例えば、色の変化を観察することによって検出される色付きの粒子）であってもよく、あるいは間接的に検出されてもよい。成分４２３が、直接的に検出される生成物を生み出してもよく、そのような生成物の検出が、成分４２３の間接的な検出である。例えば、成分４２３が酵素であって、その生成物が直接的に（例えば、視覚的または電気化学的に）検出可能であってもよい。形成された生成物の量、または生成物の形成の速度を、検出可能成分４２３の量に相関付けることができる。
【０７６０】
グルコースオキシダーゼ（ＧＯＤ）が、検出可能成分４２３として使用することができる１つの酵素である。グルコースまたはメディエータの存在において、ＧＯＤ（関連付けられた粒子が、分析対象４２６を介して磁性粒子４２１へと結合しているか否かにかかわらず）は、グルコースをグルコン酸へと変換し、メディエータ（例えば、フェリシアン化物）を酸化された形態から還元された形態へと変換する。
【０７６１】
再び図１６を参照すると、所定の時間期間が過ぎた後、第２の検出ゾーン（示されていない）の作業電極５０９を、オンにすることができる。塊の流体中の還元されたメディエータの量が、作業電極５０９における電流として測定される。ＧＯＤがサンプル中に一様に分布しているときに生成されるこの電流が、バックグラウンド信号である。磁界の源５３０が、第２の検出ゾーン（示されていない）の近傍に磁界を加えると、抗体に結合している磁性粒子５１９および磁性粒子５１９に結合しているすべての試薬が、第２の検出ゾーンの付近に局在することとなる。磁界が、粒子を、粒子が試薬に結合しているか否かにかかわらず局在させる。源５３０による磁界の印加によって、第２の検出ゾーンの付近の酵素５２３の濃度が高くなる。次いで、酵素５２３が、第２の検出ゾーンにおいて検出できる変化を生み出す。
【０７６２】
酵素５２３がＧＯＤである場合、作業電極５０９の表面における還元されたメディエータの高い濃度が、磁界の印加時の電極におけるより大きな電流として反映される。分析対象５２６の濃度が高いほど、電流は大きくなる。
【０７６３】
磁界の印加および除去を、複数回行うことができ、一連の磁化および非磁化の作業電極の電流を、測定することができる。集められたデータによって、サンプル中の分析対象の濃度を割り出すことができる。いくつかの実施形態においては、一方が磁石を備え、一方が備えていない２つの作業電極を、それぞれチャネルの向かい合う内面において使用することができる。この場合、一方の電極が磁化され、他方の電極は磁化されず、両方の電極が同時に作動させられる。次いで、２つの作業電極の電流が比較される。検出可能成分を、光学的な変化を生じるように選択することができる。例えば、化学発光信号における検出可能な変化を、サンプル中の分析対象分子が２つの粒子（または、ビーズ）を密に近接するように引き合わせたときに生成することができる。ドナー粒子と呼ばれる第１の粒子が、第１の抗体へと結び付けられ、第２の粒子（アクセプタ粒子）が、第２の抗体へと結び付けられる。第１および第２の抗体が、同じ抗原の異なるエピトープへと結合し、ドナー粒子・抗原・アクセプタ粒子の三重錯体を形成することができる。ビーズの近接（したがって、分析対象の存在）に依存する化学的反応の連鎖が、大きく増幅された信号をもたらすことができる。アトモル（すなわち、１０−１８モル程度）の濃度の分析対象の検出が可能である。
【０７６４】
フタロシアニンを含んでいる感光粒子（ドナー粒子）が、６８０ｎｍの波長を有する光で照射されたときに一重項酸素を生み出すことができる。生成された一重項酸素は、約４マイクロ秒というきわめて短い半減期を有しており、したがって速やかに基底状態へと崩壊する。短い半減期ゆえ、一重項酸素は、基底状態へと崩壊する前に、粒子の表面から数百ミクロンの距離までしか拡散することができない。しかしながら、一重項状態は、すぐ近傍に保持された第２の粒子へと入るためには充分に長く生き残る。第２の粒子（アクセプタ粒子）は、一重項酸素によって活性化されて化学発光の放射をもたらす染料を含んでいる。この化学発光の放射が、同じ粒子に含まれる蛍光色素分子をさらに活性化して、続いて５２０〜６２０ｎｍの光の放射を生じさせることができる。例えば、それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれるＰｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ９１：５４２６〜５４３０  １９９４および米国実用新案登録第６，１４３，５１４号を参照されたい。また、光学的な変化を、抗体に結び付けられたビーズによって生み出すことも可能である。ビーズは、ポリマー材料、例えばラテックスまたはポリスチレンを含むことができる。光学的な変化を生み出すために、ビーズは、光吸収または発光の化合物を含むことができる。例えば、ラテックスビーズが、染料または蛍光化合物を含むことができる。試薬は、複数のビーズを含むことができる。複数のビーズを、１つ以上の異なる抗体へと結び付けることができる。ただ１つのビーズを、２つ以上の異なるの抗体へと結び付けることができ、あるいはそれぞれのビーズに、ただ１つの異なる抗体を結び付けることができる。試薬は、それぞれ同じ分析対象へと結合できる２つ以上の異なる抗体を有することができ、あるいは別個の分析対象を認識する抗体を有することができる。ビーズが光吸収化合物を含んでいる場合、光学的測定は、透過率、吸収度、または反射率の測定であってもよい。蛍光化合物の場合には、放射される光の強度を測定することができる。測定される光学的変化の程度を、サンプル中の分析対象の濃度に相関付けることができる。
【０７６５】
検出可能な変化を、酵素増感免疫アッセイ（ＥＭＩＴ）技法によって生み出すことができる。ＥＭＩＴアッセイ形式においては、酵素−分析対象の共役が使用される。第１の試薬が、分析対象に特有の抗体、酵素基質を含むことができ、（随意により）補酵素を含むことができる。第２の試薬が、ラベル付けされた分析対象、すなわち酵素に結び付けられて修飾された分析対象を含むことができる。例えば、酵素は、グルコース−６−リン酸脱水素（Ｇ−６−ＰＤＨ）であってもよい。Ｇ−６−ＰＤＨは、グルコース−６−リン酸のＮＡＤ（Ｐ）との反応を触媒して、６−ホスホグルコノ−Ｄ−ラクトンおよびＮＡＤ（Ｐ）Ｈをもたらすことができる。ＮＡＤ（Ｐ）Ｈが、３４０ｎｍの波長を有する光を吸収する一方で、ＮＡＤ（Ｐ）は、そのようなことがない。したがって、Ｇ−６−ＰＤＨの触媒反応の結果としての３４０ｎｍの光の吸収の変化を、検出可能な変化とすることができる。第１の試薬がサンプルに混ぜ合わせられたとき、第１の試薬中の抗体が、分析対象に結合する。
【０７６６】
第２の試薬が加えられ、任意の自由な抗体結合部位が、第２の試薬の酵素に結び付けられた分析対象によって占められる。残っている自由な抗体がすべて、ラベル付けされた分析対象に結合し、結び付けられている酵素を不活化する。ラベル付けされた分析対象のうち、抗体が結合したものは不活化され、すなわち検出可能な変化に寄与しない。ラベル付けされた分析対象のうち、抗体が結合していないもの（その量は、サンプル中の分析対象の量に比例する）が、基質と反応して検出可能な生成物（例えば、ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ）を形成する。
【０７６７】
別のアッセイ形式は、クローン化酵素ドナー免疫アッセイ（ＣＥＤＩＡ）である。ＣＥＤＩＡは、２つの不活性なフラグメントへと遺伝子操作された大腸菌の細菌酵素Ｅ−ガラクトシダーゼにもとづくホモジニアスな免疫アッセイである。これら２つの不活性なフラグメントを再び結合させて、活性な酵素を形成することができる。一方の部分は、分析対象−フラグメントの共役で構成され、他方は抗体−フラグメント５共役で構成される。信号を生み出す活性な酵素の量が、分析対象の濃度に比例する。例えば、それぞれ参照により本明細書に組み込まれるＫｈａｎｎａ，Ｐ．Ｌ．およびＣｏｔｙ，Ｗ．Ａ．  （１９９３）  Ｉｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ，ｖｏｌｕｍｅ  １（Ｍａｓｓｅｙｅｆｆ，Ｒ．Ｆ．、Ａｌｂｅｒｔ，Ｗ．Ｈ．、およびＳｔａｉｎｅｓ，Ｎ．Ａ．、ｅｄｓ．）  Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，ＦＲＧ：ＶＣＨ  Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ  ＭｂＨ，１９９３：４１６〜４２６；Ｃｏｔｙ，Ｗ．Ａ．、Ｌｏｏｒ，Ｒ．、Ｐｏｗｅｌｌ，Ｍ．、およびＫｈａｎｎａ，Ｐ．Ｌ．  （１９９４）  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  １７（３）：１４４〜１５０；ならびにＣｏｔｙ，Ｗ．Ａ．、Ｓｈｉｎｄｅｌｍａｎ，Ｊ．、Ｒｏｕｈａｎｉ，Ｒ．、およびＰｏｗｅｌｌ，Ｍ．Ｊ．  （１９９９）  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｎｅｗｓ  １９（７）を参照されたい。
【０７６８】
アッセイ装置を、検出可能な変化を測定するように構成された読み取り器に組み合わせて使用することができる。読み取り器は、分析領域からの光を検出するための光学システムを含むことができる。検出されるべき光を、例えば検出ゾーンから放射、伝達、反射、または散乱させることが可能である。放射される光を、例えば化学発光または蛍光の放射からもたらすことができる。光学システムは、例えば蛍光、吸収、または光の反射の変化の検出に使用される照明源を備えることができる。電気化学的測定に合わせて構成されたアッセイ装置については、読み取り器が、作業電極および参照電極に電気的に接触できる。アッセイ装置の電極が、電極をアッセイ空洞の外部の接点へとつなげる電気リードを有することができる。接点が、アッセイ装置の対応する接点に位置合わせされて接触し、電気的接続をもたらす。さらに、読み取り器は、測定の結果をユーザへと表示するように構成された出力ディスプレイを備えることができる。
【０７６９】
アッセイ装置の読み取り器は、磁界の源を備えることができる。アッセイ装置の読み取り器を、アッセイ装置にサンプルを適用してから所定の時間期間が経過した後など、所定の時点において源から磁界を加えるように構成することができる。磁界の源は、例えば電磁石または永久磁石であってもよい。電磁石は、電磁石へと電流が供給されたときに選択的に磁界を加えることができる。永久磁石を、検出ゾーンにおける磁界の強度を制御するために、検出ゾーンに近付き、あるいは検出ゾーンから離れるように移動させることができる。
【０７７０】
図１７を参照すると、読み取り器１０００が、検査用のアッセイ装置１１００を受け入れ、ディスプレイ１２００を備えている。ディスプレイ１２００を、例えばテキスト、ジョイント・フォトグラフィック・エキスパート・グループ（ＪＰＥＧ）フォーマット、タグ付き画像ファイル・フォーマット（ＴＩＦＦ）、グラフィクス・インターチェンジ・フォーマット（ＧＩＦ）、またはビットマップなど、種々のフォーマットの像を表示するために使用することができる。ディスプレイ１２００を、文字メッセージ、ヘルプ・メッセージ、指示、照会、検査結果、および種々の情報を患者へと表示するために使用することも可能である。ディスプレイ１２００は、ユーザに入力領域１４００を提供することができる。入力領域１４００は、キー１６００を含むことができる。一実施形態においては、入力領域１４００を、例えばディスプレイ１２００がタッチ式スクリーンである場合に、ディスプレイ１２００上に表示されるシンボルとして実現できる。ユーザへの指示および照会を、ディスプレイ１２００上でユーザへと示すことができる。ユーザは、入力領域によって照会に応答することができる。
【０７７１】
さらに、読み取り器１０００は、読み取りのために診断検査アッセイ装置１１００を受け付けるアッセイ装置読み取り器を備えている。アッセイ装置読み取り器は、検査アッセイ装置１１００において生じる例えば光学的変化、電気的変化、または他の検出可能な変化の大きさにもとづいて、分析対象のレベルを測定することができる。分析対象に応答して光学的変化を生じるアッセイ装置を読み取るために、アッセイ装置読み取り器は、例えば光源、フィルタ、および光子検出器（例えば、フォトダイオード、光電子増倍管、またはアバランシェ・フォトダイオード）など、検出可能な変化を測定するための光学システムを備えることができる。分析対象に応答して電気的変化を生じるアッセイ装置を読み取るために、アッセイ装置読み取り器は、例えば電圧計または電流計など、検出可能な変化を測定するための電気システムを備えることができる。
【０７７２】
装置１０００は、通信ポート（図示されていない）をさらに備えることができる。通信ポートは、例えば電話回線またはコンピュータ・ネットワークへの接続であってもよい。装置１０００は、測定の結果を、出力装置、リモート・コンピュータ、または遠方の場所からの医療提供者へと通信することができる。患者、医療提供者、または他のユーザが、例えばバイオマーカー、代謝産物、または乱用薬物など、種々の分析対象のレベルを検査および記録するために、読み取り器１０００を使用することができる。
【０７７３】
診断装置１０００のさまざまな実施が、記録媒体（例えば、ハードディスクドライブ（ＨＤＤ）、フラッシュメモリ、ビデオカセットレコーダ（ＶＣＲ）テープまたはデジタルビデオディスク（ＤＶＤ）、コンパクトディスク（ＣＤ）、あるいはフロッピーディスク）に保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。さらに、さまざまな実施が、直接的なケーブル接続、コンピュータ・ネットワーク、無線ネットワーク、衛星ネットワーク、などといった通信媒体を介して、別のコンピュータ・システムに保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。
【０７７４】
読み取り器を制御するソフトウェアは、汎用の演算装置、携帯情報端末（ＰＤＡ）、特殊用途の演算装置、ノート型コンピュータ、手持ち用コンピュータ、またはネットワーク家電などといった任意の処理装置において動作するソフトウェア・アプリケーションの形態であってもよい。読み取り器を、プロセッサ、１つ以上の入力装置、１つ以上の出力装置、コンピュータで読み取り可能な媒体、およびコンピュータ・メモリ装置を含むハードウェアの構成を使用して実現してもよい。プロセッサを、汎用のマイクロプロセッサまたは特定用途向け集積回路（ＡＳＩＣ）など、任意のコンピュータ処理装置を使用して実現することができる。
【０７７５】
プロセッサを、センサ・データおよび／または入力データを受信するための機構を提供するため、ならびに照会および結果を保守技術員へと表示または他の方法で出力するための機構を提供するために、入力／出力（Ｉ／Ｏ）装置に一体化させることができる。入力装置として、例えば、マウス、キーボード、タッチ式スクリーン・ディスプレイ、ボタン、センサ、およびカウンタのうちの１つ以上を挙げることができる。ディスプレイ１２００を、液晶表示装置（ＬＣＤ）、テレビ、プリンタ、および発光ダイオード（ＬＥＤ）など、任意の出力技術を使用して実現することができる。
【０７７６】
コンピュータで読み取り可能な媒体が、固定式または着脱式のいずれかの媒体上にプログラムおよびデータを保存するための機構を提供する。コンピュータで読み取り可能な媒体を、従来からのコンピュータ用ハードドライブまたは他のリムーバブル・メディアを使用して実現することができる。最後に、システムは、読み取り器の動作を助けるために、ランダム・アクセス・メモリ（ＲＡＭ）などのコンピュータ・メモリ装置を使用する。読み取り器の実装は、ユーザを装置の使用において案内し、測定の結果を保存するソフトウェアを含むことができる。読み取り器１０００は、医療記録データベースまたは患者の介護に使用される他のシステムなど、アプリケーションへのアクセスを提供することができる。一例においては、装置が通信ポートを介して医療記録データベースへと接続する。さらに、装置１０００は、インターネットに接続して、既存のデータベースを統合し、他のウェブサイトをリンクする能力を有することができる。
【０７７７】
いくつかの実施形態によれば、本方法が、湿式アッセイを使用して実行される。使用される器具類は、６回路のマルチスタットおよびＧＰＥＳ（商標）ソフトウェアを備えるＥｃｏ  Ｃｈｅｍｉｅ（商標）のＡｕｔｏｌａｂ（商標）を含んでいる。使用した電極は、自前にてスクリーン印刷した。作業電極および対向電極を、カーボン  Ｄ２（ＧＥＭ（商標）Ｌｔｄ）を使用して作成し、銀／塩化銀電極を、ＡｇＣｌ  ７０：３０（ＧＥＭ（商標）ＬｔｄまたはＤｕＰｏｎｔ（商標））を使用して作成し、誘電電極を、誘電体  Ｄ１（ＧＥＭ（商標）Ｌｔｄ）を使用して作成した。
【０７７８】
検査片に使用される材料は、疎水性のポリエステル製ベースおよび親水性の曇り止めの蓋、ならびに両者の間にチャネルを形成する両面接着スペーサ（２００μｍ）を含んでいる。曇り止めの蓋を、洗浄および乾燥の前に、ｐＨ７．３のリン酸緩衝生理食塩水中の４０ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン、１．５％のＴｗｅｅｎ（商標）であらかじめブロックした。あるいは、基板が、アルミナセラミックまたはポリエステルカードを備えている。
【０７７９】
この実施形態において、第１のアッセイにおいて使用される試薬は、塩化コバルト、４−モルホリンプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、塩化カリウムを含む。ｐＨ７．４のバッファが、１００ｍＭのＭＯＰＳおよび１５０ｍＭの塩化カリウムを使用して作成され、１．５Ｍの塩化カリウム中の４５ｍＭの塩化コバルト標準液も作成される。第２のアッセイにおいて使用される試薬は、２００ｍＭのグルコース、ｐＨ７．３の５Ｍの酢酸アンモニウム・バッファ中の１００ｍＭのフェリシアン化カリウム、抗体  １５Ｆ１１に共役したグルコースオキシダーゼ（ＧＯＤ）、および抗体  ７２０６へと結合した１μｍの磁性粒子（表面にＣＯＯＨを有するＣｈｅｍｉｃｅｌｌ）を含む。
【０７８０】
分析に使用されるサンプルは、凍結血清および有志からの全血サンプルを含む。
【０７８１】
５μｌのコバルト標準液が、チューブ内の１００μｌの血液サンプル（血清、血漿、または血液）へと加えられる。このようにして形成された混合物が、渦巻き機を使用して１０秒間にわたって混合され、その後に２分間にわたってインキュベート可能にされる。コバルトがアルブミンに結合し、程度は低いが血液中のＩＭＡに結合する。磁性粒子（抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体  ７２０６が結合している）および抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１へと共役したＧＯＤが、サンプルへと加えられ、サンプルが６００ｒｐｍで３０分間にわたって混合される。次いで、７．５μＬ〜１５μＬの間の混合物が取り出され、検査片の第１の適用ゾーンを介して第１のチャネルへと適用される。
【０７８２】
サンプル混合物が、第１のチャネルに沿って移動し、この第１のチャネルのいずれかの側の通気孔が位置している特定の点で停止する。これらの通気孔は、第２のチャネルへと開いたままである。
【０７８３】
サンプル流体に存在するＩＭＡの量を検出するための第１の測定が、第１の電極セットにおいて実行される。作業電極が、４０秒間にわたって＋１ボルトに置かれ、次いで０．７Ｖ／秒の走査速度で＋１ボルトから−０．５ボルトへと直線状の掃引が加えられる。行われる測定を、本明細書においてすでに参照した本出願と同時に係属中の我々の出願第ＧＢ０６０３０４９．８号に従って、最適化することができる。
【０７８４】
コバルト２＋イオンが酸化され、＋１Ｖにある電極表面にコバルト３＋のヒドロキシ種として吸収される。走査の際に、コバルト３＋が再びコバルト２＋へと還元され、＋０．７ボルトの付近に陰極信号のピークをもたらす。検査の較正のために、電極の性能が、或る範囲のバッファ内のコバルト濃度について検査される。サンプル中のＩＭＡの量を割り出すために、記録された値が、ＩＭＡについてのアルブミン・コバルト結合（ＡＣＢ（商標））テストに相関付けられる。
【０７８５】
磁性粒子（および、磁性粒子に結合しているものすべて）が、磁石を使用して通気孔に位置する液体／空気のインターフェースまで引かれる。磁石が、液体−空気のインターフェースを５ｍｍ過ぎるまで引かれ、空の第２のチャネルの上方に保持される。これは、磁性粒子を液体−空気のインターフェースに保持する。なぜならば、磁性粒子は、このようにして形成されたメニスカスを通過することができないからである。
【０７８６】
５Ｍの酢酸アンモニウム（ｐＨ７．３）、２００ｍＭのグルコース、および１００ｍＭのフェリシアン化物を含んでいる約１１μｌの反応バッファが、第２の適用ゾーンを介して第２のチャネルへと加えられる。これが、液体−空気のインターフェースに向かって流れるが、この流れは、このインターフェースに配置された通気孔の存在によって容易にされる。反応バッファが、血液サンプルと液体−液体のインターフェースを形成する。この時点で、磁性粒子が、第２のチャネルの近傍に位置する磁石によって引かれて、液体−液体のインターフェースを横切って「ジャンプ」する。この「ジャンプ」は、インターフェースにおける粒子の喪失を最小限にするとともに、血液の反応バッファ・ゾーンへの持ち込みを最小限にする。
【０７８７】
次いで、磁石が、制御された速度（粒子の喪失を最小限にする）で第２の電極セットの作業電極の上方の位置へと動かされる。磁石が、ブロックされた蓋の下面に沿って粒子を引きずる。これが、磁性粒子を第２の電極セットの作業電極の上方へと引きずる一方で、磁性粒子を、残余の未結合のＧＯＤ共役物から分離する。第２の電極セットの上方に到着したとき、磁性粒子が磁石によってその場に保持され、さらなる５０μｌの反応バッファ（磁性粒子をさらに洗浄するため）が、第２の適用ゾーンを介して第２のチャネルへと加えられる。ひとたびこれが送達されると、磁石が取り除かれ、磁性粒子を第２の電極セットの作業電極上に位置させた状態で、１０分間にわたって反応を進行させうる。この設定において、３つのカーボン電極のシステムが使用される。
【０７８８】
１０分間の反応の後で、装置がポテンショスタットへと取り付けられ、電位が開路から＋０．４Ｖへと上げられる。１０秒後に電流が測定され、較正曲線と比較されて、ＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度が与えられる。フェリシアン化物、ＧＯＤ、およびグルコースの間の反応によって生成されたフェロシアン化物イオンが、＋０．４Ｖの電極表面においてフェリシアン化物の種へと変換される。
【０７８９】
いくつかの実施形態においては、両方のアッセイが、全血において実行される。この実施形態においては、ＩＭＡ結合試薬、磁性粒子、および酵素共役物が、第１のチャネルに乾燥の形態で設けられる一方で、反応基質およびメディエータが、第２のチャネルに乾燥の形態で設けられる。乾燥した試薬が、血液を加えることによって再び懸濁する。再懸濁したＩＭＡ結合試薬が、溶液中のＩＭＡと結合し、アッセイが第１組の電極において実行される。磁性粒子および酵素ラベルが、血液中のＮＴｐｒｏＢＮＰと混合される。次いで、磁性粒子およびその共役物が、磁気的な操作によって第２組の電極へと動かされ、磁性粒子が未結合の酵素から分離される。次いで、第２の反応が、第２の電極セットの上方で進行する。
【０７９０】
さらなる代案においては、磁性粒子が、「フィルタ」として使用される。磁性粒子および酵素共役物が、検査片上に乾燥させられ、血液を加えることによって再び懸濁させられる。結合した抗体とともに、それらを血液サンプル中の中央に位置した電極の上方に位置させることができる。次いで、血液サンプルを、磁性粒子を横切って往復運動させて、ＮＴｐｒｏＢＮＰの磁性粒子抗体錯体および酵素共役物への最大限の結合を可能にする一方で、それらをその場に保持することができる。次いで、バッファ袋が、血液をビーズからシンク領域へと洗い流すために使用される。ＩＭＡのための第２のアッセイを、さらなる電極セットが存在しているシンク領域において実行することができる。ＩＭＡアッセイのための試薬を、検査片上に乾燥させることができ、あるいはバッファ液中に存在させることができる。磁性粒子が取り除かれたバッファが、電極の上方で生じて電気化学的に測定することができる酵素共役物との反応のための基質およびメディエータを含んでいる。
【０７９１】
またさらなる実施形態においては、ＩＭＡアッセイを、上述のように実行することができ、第２のアッセイが、ストレプトアビジンでコートされた磁性粒子、およびビオチン化された抗体（例えば、７２０６）を使用する。ビオチン化された抗体がＮＴｐｒｏＢＮＰに結合し、これがさらに、全血中の酵素共役物に結合する。これは、結合した磁性粒子の非存在において優先的な結合の動態を有している。次いで、磁性粒子を結合している錯体に混ぜ合わせ、ストレプトアビジン−ビオチンの組み合わせによって抗体へと結合させることができる。次いで、磁性粒子の錯体が、上述のように電極へと引かれる。また、代わってラベルと抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体（例えば、１５Ｆ１１）の間にストレプトアビジン−ビオチンの組み合わせを使用することも可能である。やはり、ストレプトアビジンを磁性粒子へと結合した抗体およびビオチンに結合させることができる。
【０７９２】
別の実施形態においては、ＮＴｐｒｏＢＮＰへと結合した磁性粒子の電極表面への平面キャプチャが存在する。抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体が、電極または電極の上方の蓋へと取り付けられる。磁気ビーズが、別の抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体ならびにそれらの表面へと結合した酵素ラベルを有している。これらのビーズが、先の例と同様に血液サンプル中のＮＴｐｒｏＢＮＰに結合し、電極の上方へと引かれ、表面に結合している抗体と結合できる。未結合の磁性ビーズ（ＮＴｐｒｏＢＮＰに結合していない）が、反応バッファによる洗浄によって洗い流される。次いで、ビーズに結合している酵素ラベルの反応によって、ＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度に比例した信号が生成される。
【０７９３】
さらに、この平面キャプチャは、磁性粒子を抗体（例えば、７２０６）へと結合させるためのビオチン−ストレプトアビジンの組み合わせを伴うとができ、磁性粒子の表面に、酵素ラベルの他にストレプトアビジンも結合している。抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体（例えば、７２０６）は、ビオチン化されている。ビオチン化された抗体および表面に結合した抗体へのＮＴｐｒｏＢＮＰの結合は、ストレプトアビジンでコートされた磁性粒子をビオチン化された抗体へと取り付ける前に生じる。このシステムの変種においては、表面に結合した抗体をビオチン化させることができ、これが付着する表面をストレプトアビジンでコートすることができる。このやり方で、抗体および取り付けられた酵素を有する磁性粒子がＮＴｐｒｏＢＮＰに結合し、ＮＴｐｒｏＢＮＰがビオチン化された抗体に結合した後で、この錯体を、ストレプトアビジン−ビオチンの組み合わせによって表面へと付着させることができる。また、ストレプトアビジン−ビオチンのカップリングを逆にすることも可能であり、例えばストレプトアビジンを抗体へとカップリングすることができ、ビオチンを磁性粒子または表面へとカップリングすることができる。
【０７９４】
またさらなる実施形態においては、第１のアッセイが、上記の例において述べたように実行される。第２のアッセイにおいて、作業電極が、液体−液体のインターフェースの形成後に磁性粒子がジャンプする地点に配置される。これは、ビーズを作業電極の上方に位置させる固定の磁石の使用を可能にする。これは、反応バッファがビーズを通過して流れて血液サンプルを「シンク」領域へと洗い流す一方で、ビーズがこの流れに抗して動かぬように保持されることを必要とする。これは、シーソーの構成に配置された２つまたは３つの磁石を使用し、ビーズをチャネルに沿った特定の領域に集めることで実行することも可能である。１つの磁石が粒子を操作すべく装置に向かって下げられるとき、接続されている磁石が同時に取り除かれ、この磁石の粒子への作用が取り除かれる。また、永久磁石の代わりに、電磁石を使用することも可能である。複数の固定の電磁石を順次にオン／オフし、磁性粒子の位置を制御することができる。
【０７９５】
これらに限られるわけではないが、１５Ｆ１１−２４Ｅ１１、１５Ｃ４−２９Ｄ１２、１５Ｃ４−１３Ｇ１２、１５Ｃ４−１８Ｈ５、７２０６−１５Ｆ１１など、任意の適切な抗体ペアを使用できることが、明らかである。また、これらに限られるわけではないが、カルボキシル、アミン、アルデヒド、エポキシド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、クロロメチル、ポリグルタルアルデヒド、チオール、シアヌル、トシル、ヒドラジド、ヒドロキシル、タンパク質、プロテインＧ、ストレプトアビジン、またはビオチンの表面コーティングを有するＣｈｅｍｉｃｅｌｌ（商標）、Ｂａｎｇｓ（商標）、Ｓｐｈｅｒｏｔｅｃｈ（商標）、Ａｄｅｍｔｅｃｈ（商標）、Ｐｏｌｙｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ（商標）、Ｃｈｅｍａｇｅｎ（商標）、Ｄｙｎａｌ（商標）、Ｃｏｐｒｔｅｘ（商標）、Ｍｉｃｒｏｍｏｄ（商標）、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ（商標）、Ｅｓｔａｐｏｒ（商標）、Ｓｅｒａｄｙｎ（商標）、またはＢｉｏｃｌｏｎｅ（商標）からの直径０．１〜１μｍの粒子など、さまざまなサイズ、成り立ち、および表面コーティングの磁性粒子を使用することができる。
【０７９６】
本方法を、これらに限られるわけではないが、グルコースオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、グルコースデヒドロゲナーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、およびアセチルコリン・エステラーゼ、などといった別の酵素など、種々のラベルを使用して実行することができる。使用できる他のラベルとして、蛍光分子／粒子（例えば、ＴＲＦ（商標）ラテックスビーズ）、吸収ラベル（例えば、Ｇｏｌｄｓｏｌ（商標））、および放射性ラベルを挙げることができる。信号を増幅するために、ポリＨＲＰデキストラン共役物、あるいはグルコースオキシダーゼおよび抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体でコートされたビーズなどを使用することができる。
【０７９７】
流体の停止の点を、チャネルの高さ／深さへの段差の導入または溶解できる通気孔の使用など、他の適切な機構によって制御することができる。また、混合を、磁気、熱、および（超）音波の混合技法を使用して、アッセイ装置において実行することができる。赤血球を分離して血漿のみを装置のチャネルへと導入できるよう、血液分離器を導入することができる。
【０７９８】
検査片へと組み込まれたバッファ袋が、反応バッファを送達することができ、バッファの組成は、さまざまであってもよい（例えば、酢酸ナトリウム、クエン酸リン酸塩、クエン酸ナトリウム、あるいは任意の適切な濃度またはｐＨの任意の他のバッファ）。任意の適切な液体を、バッファの代わりに使用することができる。
【０７９９】
酸化還元メディエータおよび酵素基質の濃度は、さまざまであってもよい。ＴＭＢ（テトラメチルベンゼン）、フェロセンおよびその誘導体、あるいはＲｕ（フェニルイミダゾール）（フェナントロリン）ＰＦ６、またはインドファン・ブルー（ｉｎｄｏｐｈａｎｅ  ｂｌｕｅ）などといった別のメディエータを、ＨＲＰならびに過ホウ酸ナトリウムまたは過酸化尿素などといった他の基質において使用することができる。使用される酵素ラベルに応じて、該当の基質／メディエータ／溶液の条件を含んでいる反応バッファを使用することができる。蛍光粒子などの他のラベルは、例えば蛍光の測定に適合する溶液（水、バッファ、食塩水、油、あるい他の有機または水性溶媒）のみを必要とする。電気化学的でない検出法が使用される場合には、磁性粒子を電極上に堆積する必要はない。他の検出法として、吸収、蛍光、表面プラスモン共鳴、シンチレーション計数、放射線撮影、および発光が挙げられる。
【０８００】
検査片は、余分の５０μＬの洗浄の使用を軽減するより長いチャネルを備えることができる。磁性粒子を電極上で単純に引きずるだけで、妨害物を取り除くために充分である。
【０８０１】
使用される磁石を、磁性粒子が磁界による影響を受ける限りにおいて、インターフェースから５ｍｍ未満に、あるいはインターフェースから５ｍｍよりも遠くに、位置させることができる。磁性粒子を、液体−液体のインターフェースが形成された後まで、（インターフェースにではなく）血液サンプル内に位置させることができる。また、磁性粒子を、液体−液体のインターフェースが形成された後で、磁石を液体−液体のインターフェースを横切って第１のチャネルから第２のチャネルへと移動させることによって、液体−液体のインターフェースを通って引き込むことができる。
【０８０２】
磁石は、反応および／または測定の最中、磁性粒子を電極の上方の位置に保持することができる。また、磁石は、チャネルのベースに沿い、あるいはチャネルの中央において、磁性粒子を引っ張ることができる。磁石を、粒子を電極へと引き寄せる前に、非直線の方向（例えば、ビーズを、例えば回転磁石によって直線、円形、またはらせんなどの任意の形状のチャネルにおいて動かすことができる）に動かすことができ、かつ／または円を描く動きにて動かすことができる。
【０８０３】
使用されるラベルについて、より長い時間期間またはより短い時間期間にわたって電極上での反応を許すことができる。別のラベル（蛍光または吸収など）が使用される場合には、信号の検出を、インキュベーション期間を必要とすることなく実行することができる。
【０８０４】
金またはカーボン電極を備える３つまたは２つの電極システムを使用することができる。電極を、磁性粒子を容易に位置させることができるように、ピットまたは凹所あるいは横チャネルに配置することができる。ピットまたは凹所に堆積されるとき、装置の蓋を押し下げてビーズをピット／凹所に囲い、反応体積を少なくして、相対の反応濃度を高めることができる。また、電極を、液体−液体のインターフェースのいずれかの側に位置させることができ、インターフェースの形成の監視を可能にする注入の指標として作用させることも可能である。
【０８０５】
磁性粒子は、ビーズを電極の上方の蓋または電極の近傍の任意の場所に位置させることができる。磁性粒子を、基質／メディエータの酵素への接近を改善するために、反応の際に混ぜることができる。
【０８０６】
チャネルの形状およびインターフェースの寸法は、例えばインターフェースにおいてチャネルを狭くすることで別個のチャネル内の２つの別個の流体の拡散混同を抑制するなど、試薬の混合の向上、インターフェースにおける混ざり合いの低減、および電極上で生み出される信号の最大化のために、さまざまであってもよい。
【０８０７】
電気化学式のアッセイ工程においては、酸化された種を還元する任意の電圧、または還元された種を酸化する任意の電圧を使用することができる。例えば、別の種の測定のために別の電位が使用される。蛍光または吸収など、他のラベルが使用される場合には、適切な光学的測定が行われる。
【０８０８】
提示した例においては、サンプルが血液から由来しているが、本方法が、別の媒体に含まれる別の分析対象の検出に適していることを、理解できるであろう。例えば、第１の分析対象は、これらに限られるわけではないが、タンパク質、血漿タンパク、アルブミン、虚血変性アルブミン、アルブミンおよび虚血変性アルブミンの混合物、ならびに分析および／または検出に適した任意の他の化学的または生物学的な種であってもよい。いくつかの実施形態においては、第１の分析対象が、虚血変性アルブミンを含むことができる。
【０８０９】
上記の例においては、第１のアッセイにおける試薬が、コバルトである。使用される試薬は、分析対象との相互作用に適した任意の試薬であってもよい。例えば、試薬は、これらに限られるわけではないが、金属、二価の陽イオン、遷移金属、コバルト、および分析対象との相互作用に適した任意の他の試薬であってもよい。いくつかの実施形態においては、試薬がコバルトを含むことができる。
【０８１０】
提示した電気化学的な例では、電気化学的分析が、ボルタンメトリースイープ（ｖｏｌｔａｍｍｅｔｒｉｃ  ｓｗｅｅｐ）（１回または複数回）を含むことができ、ボルタンメトリースイープの際に、検出可能成分がそれらの酸化および／または還元電流の大きさによって定量化される。さらに、アッセイ期間は、すでに述べたように、電気化学的な酸化または還元の予備期間を含むことができる。しかしながら、使用できる多数の電気化学的な電流測定法またはボルタンメトリー法が存在することを、理解できるであろう。
【０８１１】
アッセイ装置は、３つ以上のアッセイ領域を直列、並列、または両方の組み合わせにて備えることができる。そのような装置は、複数のチャネルを有することができ、それら複数のチャネルが、ただ１つのサンプルが別個のチャネルを移動できるように分岐および合流することができる。装置の別の実施形態は、コークスクリュ、らせん、またはジグザグのチャネルを備え、そのようなチャネルに沿ってアッセイを実行することができる。
【０８１２】
装置のさらなる実施形態においては、流通チャネルを放射状に延在させる中央のサンプル適用領域が設けられる。放射状の流通チャネルが、アッセイ検出ゾーンおよびさらなるサンプル適用ゾーン、ならびに他の追加の造作を有することができる。
【０８１３】
上述の装置、検査片、および流通チャネルのすべてが、これまでにさらに詳しく説明した装置、検査片、および流通チャネルの任意の造作を有することができる。
【０８１４】
一般に、アッセイ装置を、試薬をベースに堆積し、ベースを覆って蓋を封じることによって製作できる。ベースは、マイクロ成型によるプラットフォームまたは積層によるプラットフォームであってもよい。
【０８１５】
マイクロ成型によるプラットフォーム
光学的検出のために準備されるアッセイ装置においては、ベース、蓋、あるいはベースおよび蓋の両者が、所望の光の波長に対して透過性であってもよい。典型的には、ベースおよび蓋の両者が、例えば４００〜７００ｎｍの光の可視の波長に対して透過性である。ベースおよび蓋が、例えば２００ｎｍ〜１０００ｎｍ、または３００ｎｍ〜９００ｎｍなど、検出のために使用することができる波長の範囲をもたらすために、近ＵＶおよび近ＩＲの波長に対して透過性であってもよい。
【０８１６】
電気化学的な検出を使用するアッセイ装置においては、電極が、ベースの表面に堆積される。電極を、カーボンまたは銀インクでのベースへのスクリーン印刷、ならびにその後の絶縁インクによって設けることができ、導電材料（例えば、金、銀、またはアルミニウムなど）のベースへの蒸着またはスパッタリング、ならびにその後のレーザ・アブレーションによって設けることができ、あるいは導電材料（例えば、金、銀、またはアルミニウムなど）のベースへの蒸着またはスパッタリング、ならびにその後のフォトリソグラフィック・マスキングおよび湿式または乾式エッチングによって設けることができる。
【０８１７】
電極を、２つのやり方の一方にて蓋に形成することができる。剛性の蓋に１つ以上の貫通穴を設け、真空ベースへと取り付け、カーボンまたは銀インクを堆積させるためにスクリーン印刷を使用することができる。剛性の蓋の下面で真空を引きつつ、スクリーン印刷を行うことで、導電インクが貫通穴へと引き込まれ、蓋の上面および下面の間の電気的接触が生み出され、穴が封じられて、液体が漏れないように保証される。
【０８１８】
あるいは、蓋を貫通穴を備えずに製造し、反転させてスクリーン印刷台へと配置し、カーボンまたは銀インクを印刷することができる。ひとたび電極が製作されると、マイクロ成型されたベースが装填され、試薬を堆積するために既知の位置へと位置合わせされる。試薬の堆積は、ノズルからの送出または吸引、電磁弁ならびにサーボ駆動またはステッパ駆動シリンジの使用によって達成できる。これらの方法は、試薬の液滴または線を、接触または非接触の様式で堆積することができる。試薬を堆積するための他の方法として、パッド印刷、スクリーン印刷、圧電印刷ヘッド（例えば、インクジェット印刷）、あるいは試薬を放出すべく圧縮される袋（「ケーキ・アイサー」）からの堆積が挙げられる。堆積は、好ましくは、湿度および温度が制御された環境で実行される。異なる試薬を、同じまたは別のステーションにおいて送出することができる。所望の堆積ゾーンの外への試薬の交差汚染またははみ出しを検出できるようにするために、随意により蛍光剤または着色剤を、試薬へと加えることができる。製品の性能が、交差汚染によって損なわれる可能性がある。堆積ゾーンは、近接していても、あるいは離れていてもよい。蛍光剤または着色剤は、アッセイ装置の動作、とくには分析対象の検出を妨げることがないように選択される。
【０８１９】
堆積の後で、試薬は乾燥させられる。乾燥は、大気での乾燥、赤外線での乾燥、強制空気によって補助された赤外線での乾燥、紫外光での乾燥、暖かい強制空気、制御された相対湿度での乾燥、またはこれらの組み合わせによって達成できる。次いで、マイクロ成型されたベースに、上部に柔軟または剛性の蓋を接合することによって蓋を設けることができる。ベースおよび蓋の位置合わせが、２つが貼り合わせられる前に行われる。ベースおよび蓋を、（前もって蓋またはベースに塗布される感熱接着剤を使用して）熱シールによって、２つの類似の材料を接合するための超音波溶接によって、レーザ溶接（２つの類似の材料を接合するためのマスクまたは線レーザ）によって、シアノアクリレート系接着剤によって、前もって蓋またはベースへと塗布されるエポキシ接着剤によって、あるいは前もって蓋またはベースへと塗布される感圧接着剤によって接合することができる。蓋を取り付けた後に、組み立てられたアッセイ装置の一部またはすべてを、アッセイ装置が設計どおりに機能するように保証するため、重要な寸法について検査することができる。検査として、視覚検査、レーザ検査、接触測定、あるいはこれらの組み合わせを挙げることができる。
【０８２０】
アッセイ装置は、バッファ袋を含むことができる。バッファ袋は、底部および上部開口を有する成型くぼみであってもよい。下方の開口を、破れやすい箔またはプラスチックで封じることができ、くぼみをバッファで満たすことができる。次いで、より丈夫な箔または薄板が、上部の開口を覆ってシールされる。あるいは、前もって形成されてバッファで満たされたブリスター袋を、くぼみに配置して、くぼみに貼り付けることができる。ブリスター袋は、５０〜２００μＬのバッファを含むことができ、標準的なブリスター法を使用して形成され、満たされ、封じられる。ブリスター材料は、箔またはプラスチックであってもよい。ブリスターを、感圧接着剤またはシアノアクリレート系接着剤でくぼみへと貼り付けることができる。
【０８２１】
積層によるプラットフォーム
特定の幅のロールの形態で供給される３枚以上の薄板を、アッセイ装置を構築するために使用することができる。ベース薄板は、プラスチック材料であり、１つの表面が親水性材料でコートされている。この薄板が、導電電極および絶縁インクを堆積するために印刷ステーションへと供給される。ベース薄板が位置合わせ（横ウェブ）され、導電電極が、すでに述べた技法によって親水性表面に堆積される。次いで、ベース薄板が堆積ステーションへと送られ、１つ以上の試薬が薄板へと適用される。横ウェブおよび縦ウェブの両方の位置合わせは、上述の方法によって試薬の堆積が行われる前に行われる。試薬が、堆積の後で、上述の方法によって乾燥させられる。中間薄板が、指定の幅のロールの形態で供給される。アッセイ装置において、２つ以上の中間薄板が存在してもよい。中間という用語は、ベース薄板または蓋薄板でないことを示す目的である。中間薄板は、それぞれの面に感圧接着剤または熱シール接着剤のいずれかを有しているプラスチック・スペーサであってもよい。感圧接着剤には、接着剤を保護するためにいずれかの面に保護ライナーが設けられる。中間薄板およびその接着剤の厚さのばらつきは、１５％未満または１０％未満である。
【０８２２】
チャネルおよび造作が、レーザ源（例えば、ＣＯ２レーザ、ＹＡＧレーザ、エキシマレーザ、あるいはその他）を使用して中間薄板へと切り込まれる。チャネルおよび造作を、中間薄板の厚さの全体を貫いて切り込むことができ、あるいは造作およびチャネルを、薄板の一方の面から制御された深さまで切除することができる。中間薄板およびベース薄板が、横ウェブおよび縦ウェブの両方向について位置合わせされ、一体に貼り合わせられる。感圧接着剤が使用される場合には、下方のライナーが中間薄板から取り去られ、ベースを中間薄板へと貼り付けるべく圧力が加えられる。熱シール接着剤が使用される場合には、ベースおよび中間薄板が、熱および圧力を使用して接合される。
【０８２３】
アッセイ装置の蓋を形成する上側薄板が、指定の幅のロールの形態で供給される。上側薄板は、プラスチック材料であってもよい。造作を、上述のようにレーザ源を使用して上側薄板へと切り込むことができる。上側薄板が、ベース薄板および中間薄板へと位置合わせ（横ウェブおよび縦ウェブ）され、使用されている接着剤に応じ、圧力による積層あるいは熱および圧力による積層によって接合される。積層体を横および縦ウェブ方向に位置合わせした後、個々のアッセイ装置または試験片を、高出力のレーザ（例えば、ＣＯ２レーザ、ＹＡＧレーザ、エキシマレーザ、またはその他、など）を使用して積層体から切り出すことができる。
【０８２４】
組み立てられたアッセイ装置の一部またはすべてを、アッセイ装置が設計どおりに上手く機能するように保証するため、重要な寸法について検査することができる。検査として、視覚検査、レーザ検査、接触測定、あるいはこれらの組み合わせを挙げることができる。
【０８２５】
分析対象を検出するためのアッセイの使用を利用する１つの用途の例は、血液サンプルなどの生理学的流体サンプルの分析である。とくには、疾病または病気を知らせることができる分析対象に関して血液サンプルを分析することが、ますます一般的になってきている。そのような分析を、分析対象を直接的または間接的に検出するアッセイを使用して実行することができる。
【０８２６】
いくつかの実施形態は、ただ１つの少量の血液サンプルまたは他の生物学的物質あるいは複合混合物について２つ以上のアッセイを実行するための装置および方法を提供する。また、この装置および方法は、少なくとも第２の分析対象の検出を、アッセイ試薬の非特定の反応による汚染および細胞残屑による目標の分子の物理的な閉塞を伴うことなく、もたらすことができる。
【０８２７】
上記のアッセイ方法および装置を、血液中に存在する種を分析するための家庭用検査キットにおいて使用することができる。とくには、実施形態が小さなサンプル体積での２つ以上のアッセイの実行を容易にするため、上記のアッセイ装置および方法は、「指刺し」または「指穿刺」の手順を使用する家庭用検査キットにおける使用に適している。
【０８２８】
アッセイ装置および方法の実施形態は、簡単な工程で少量の流体サンプルを受け入れることができ、少量のサンプルを、確実かつ再現性のある様相での速やかな検査に提供することができる。これらは、同じサンプルについて一連のテストの実行を可能にすることによって、家庭用検査キットにおいて得られた血液サンプルを利用するための効率的なやり方を提供することができる。
【０８２９】
最後に、同じ実施形態の装置および方法は、複合混合物において目標の分析対象を分離および絶縁することによって、同じ血液サンプルについて２つ以上のアッセイを実行することを容易にする。これは、検出手順による分析対象の視覚化を可能にする。とくには、本考案は、被験者の病状を知らせるべく分析対象に関係付けられたマーカーの視覚化および分析対象の存在の信頼できる定量化を行うための特定の試薬の使用を可能にする。分析対象が、被験者の病状を知らせることができる。
【実施例】
【０８３０】
以下は、特定の実施形態の実施例である。ただし、本考案がこれらの実施例に限られるわけではない。
【０８３１】
実施例１：ヒト血液サンプルにおけるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの検出
ヒトの血液サンプルを、導入口５１０においてアッセイ装置５００へと加える。血液は、或る量の分析対象、すなわちＮ末端プロ脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）を含んでいる。
【０８３２】
血液サンプルが、例えば毛管作用によって第１のチャネル部４３０２に進入し、試薬ゾーンの試薬と混ざり合う。試薬ゾーンの試薬は、ストレプトアビジンでコートされた磁気感受性粒子、ビオチン化された第１の結合剤（抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｃ４（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ））、および第２の結合剤（抗ＮＴｐｒｏ−ＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１または２９Ｄ１２（ＨｙＴｅｓｔ  Ｌｔｄ．；カタログ番号：４ＮＴ））へと共役した西洋わさびペルオキシダーゼ（「ＨＲＰ」）（抗体に結び付けられた酵素）を含んでいる。アッセイ装置および含まれている試薬は、乾燥状態で用意される。液体サンプルをアッセイ装置へと（すなわち、導入口および第１のチャネルへと）加えることで、乾燥している試薬が再び懸濁する。
【０８３３】
試薬が、血液との溶液中に再び懸濁し、混合物を形成する。ストレプトアビジンでコートされた磁気感受性粒子が、ビオチン化された第１の結合剤へと結合し、共役物（抗体に結び付けられた磁気感受性粒子）を形成する。第１の結合剤は、血液中のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰにも結合し、抗体に結び付けられた磁気感受性粒子にＮＴ−ｐｒｏＢＮＰが結合してなる三重錯体が形成される。サンプルにおける試薬の再懸濁および混合を促進するために、磁気感受性粒子の運動（例えば、周期運動または振動運動）を誘起するように、磁界が加えられる。
【０８３４】
図３８Ｊが、サンプル液体が導入口５１０へと加えられた後の装置５００の下面の斜視図を示している。血液サンプルが、第１のチャネル部４３０２を満たしている。ジャンクション４３０５に達すると、液体はメニスカスを形成する。ジャンクション４３０５におけるチャネルの断面積の変化ゆえ、血液サンプルは、第２のチャネル部４３０４を満たすことはできない。むしろ、第２のチャネル部における毛管圧力が、サンプル液体をジャンクション４３０５を超えて第２のチャネル部４３０４へと引き込もうとする任意の毛管力を上回る。このように、ジャンクション４３０５が毛管ストップとして作用し、この地点を超える流体サンプルの流れを実質的に阻止する。この段階で、血液サンプル：空気のインターフェースが、ジャンクション４３０５において血液のメニスカスによって形成される。
【０８３５】
試薬および血液サンプルの混合の後で、磁界が第１のチャネル部４３０２へと加えられる。加えられる磁界が、磁気感受性粒子および磁気感受性粒子へと結合しているすべての成分を移動させるように操作される。磁気感受性粒子が、第１のチャネル部４３０２に沿ってジャンクション４３０５に向かって磁気によって動かされる。
【０８３６】
バッファ液が、第２の導入口５２０において装置へと加えられる。装置へと組み込まれたバッファ袋５０７が、反応バッファを送達する。バッファ液は、１０ｍＭの酸化還元メディエータ、すなわち２，２’−アジノ−ビス−（３−エチルベンゾ−チアゾリン−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）、１０ｍＭのＨ２Ｏ２、１５０ｍＭのＫＣｌ、１２５ｍＭの酢酸ナトリウム；０．１％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ２０を含んでおり、最終的なｐＨは４．２にする。バッファは、分析対象（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）を含んでいない。バッファ液が、第２のチャネル部４３０４に沿ってジャンクション４３０５へと流れ、そこでバッファ液が血液：空気のインターフェースの血液サンプルに接触し、血液：バッファのインターフェースが形成される。
【０８３７】
磁気感受性粒子（ならびに、磁気感受性粒子へと結合しているすべてのもの）が、印加される磁界をジャンクション４３０５を横切って第２のチャネル部４３０４へと作業電極５１６ｗに向かって移動させることによって、血液：バッファのインターフェースを横切って移動させられる。血液：バッファのインターフェースが形成されていることで、妨げとなりうるサンプル成分ならびに対象外である分析対象を第１のチャネル部４３０２の血液中に残しつつ、磁気感受性粒子（および、磁気感受性粒子へと結合しているものすべて）を、血液からバッファへと磁気によって移動させることが、容易になる。磁気感受性粒子ならびに磁気感受性粒子に結合しているすべてのもの（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ（抗体に結び付けられた磁気感受性粒子および抗体に結び付けられた酵素を含むＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの三重錯体の形態である）を含む）が、第２のチャネル部４３０４の第２の液体へと移される。
【０８３８】
図９Ａおよび９Ｂが、血液：バッファのインターフェースを横切る磁気的分離を、さらに詳しく説明している。図９Ａにおいて、磁気感受性粒子２００が、源２１０によって加えられる磁界のおかげで、血液のメニスカス１９０の付近に位置している。磁気感受性粒子２００の一部が、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへと結合しており、これが次に、第２の結合剤および検出可能ＨＲＰ酵素ラベルへと結合している。第１のチャネル部４３０２の第２の結合剤：ＨＲＰの共役物は、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰに比べて余分に存在しているので、第２の結合剤：ＨＲＰの共役物の一部は、結合しないままである。磁気的分離は、未結合の第２の結合剤：ＨＲＰの共役物が第２のチャネル部４３０４あるいは検出ゾーン５１４の電極５１６ｗ、５１６ｃ、および５１６ｒへと達することがないように保証するうえで役に立ち、すなわち換言すると、第１の結合剤を介してＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへと結合した磁気感受性粒子のみが検出可能な信号に寄与し、したがって検出可能な信号を、再現性を伴って、サンプル内のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの量または濃度に関連付けることができる。
【０８３９】
次に、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへと結合した磁気感受性粒子は、印加される磁界を操作することによって作業電極５１６ｗへと移動させられる。磁気感受性粒子が、例えば１分間のインキュベーション時間にわたって検出ゾーンに磁気によって配置および保持される。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへと結合した磁気感受性粒子および第２の結合剤：ＨＲＰの共役物が、過酸化水素およびＡＢＴＳの水および酸化ＡＢＴＳへのＨＲＰ仲介の触媒反応によって、電気化学的に検出される。インキュベーション時間の終わりにおいて、電極において酸化ＡＢＴＳの換言によって生み出される電気化学的電流が、測定期間（例えば、３秒）にわたって作業電極において測定される。
【０８４０】
検出された電気化学的電流が、メータ４００において受信され、対応する較正データセットと比較されて、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの量および／または濃度が割り出される。メータが、アッセイ結果をユーザへと表示または通信する。
【０８４１】
実施例２−測定可能なＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ範囲の拡大／線形化−ダイナミックレンジの拡大のための２点の電気化学的測定
電気化学的測定を、ＨＲＰターンオーバー時間のただ１つの時点を使用して行うことができる。液体サンプル中の０〜２０，０００ｐｇ／ｍｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度について、典型的な用量応答曲線が図５２に示されている。電気化学的なＮＴ−ｐｒｏＢＮＰアッセイの性能を、測定可能範囲の拡大およびより高いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度における応答の線形化によって最適化することができる。これを達成するため、プラトー効果が試薬、電気化学、あるいは試薬および電気化学の組み合わせの限界のいずれであるかを特定した。
【０８４２】
現在のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの電気化学的測定においては、実質的には、ＨＲＰの濃度が測定されており、これが図５３に示されている。したがって、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの用量応答曲線は、実質的には、図５４に示されるとおり電流対ＨＲＰ濃度である。
【０８４３】
メディエータＡＢＴＳによって電気化学的にＨＲＰ濃度を測定する能力は、免疫学的アッセイをチューンするための柔軟性を提供する。典型的には、粒子を血液の外へと移動させて電極へと引き寄せた後に、捕らえられているＨＲＰについて、１分間のターンオーバー期間（インキュベーション時間）にわたって反応を可能にした。１分間のＨＲＰターンオーバー期間の後まで、電極へは電位を印加せず、その後に印加される電位を、ＨＲＰによって生成された酸化ＡＢＴＳを還元するために使用した。
【０８４４】
１分間のＨＲＰターンオーバー期間の限界を調査するために、応答の感度、線形性、および範囲についてＨＲＰターンオーバー時間を調査するために、ＨＲＰ滴定を実行した。これらの実験において、ＨＲＰをチャネル内に一様に分布させ、磁性粒子を介して電極上に配置されるとき、電極の近傍に集中させなかった。
【０８４５】
ＨＲＰの線形の範囲が、ターンオーバー時間につれて変化することが見て取れる。１０分のターンオーバー時間が、おおよそ５０００ｐＭ  ＨＲＰまでの線形範囲をもたらし、１分のターンオーバー時間が、おおよそ２０，０００ｐＭ  ＨＲＰまでの線形範囲をもたらし、３０秒のターンオーバー時間が、おおよそ５０，０００ｐＭ  ＨＲＰまでの線形範囲をもたらし、１５秒のターンオーバー時間が、おおよそ８０，０００ｐＭ  ＨＲＰまでの線形範囲をもたらす。
【０８４６】
ＨＲＰターンオーバー時間の影響が、図５３に要約されている。ＨＲＰ範囲（ｐＭ）が高くなるにつれてＨＲＰ測定の感度が低くなるため（例えば、１０分−検出限界（ＬＯＤ）は少なくとも２５ｐＭ；１分−ＬＯＤは５０〜１００ｐＭ；３０秒−１００ｐＭ；１５秒−ＬＯＤは１００ｐＭ）、ＨＲＰ応答の線形性の向上と感度との間にトレードオフが存在する。
【０８４７】
滴定データから、測定可能なＨＲＰ濃度（ｐＭ）の範囲および線形成分を大きく増加させることができると結論づけられる。
【０８４８】
この仮説を検証するために、実験を実行した。結果の概要を図５４に示す。
【０８４９】
より短いＨＲＰターンオーバー時間の適用が、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ応答の拡大および線形化に大きな効果を有している。これは、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの電気化学的測定に大いなる最適化をもたらす。
【０８５０】
５０〜２０，０００ｐｇ／ｍｌ範囲にわたるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度を測定できることが望まれる。これは、測定すべき免疫学的アッセイのダイナミックレンジである。また、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度の倍増を見分けることが望まれるであろう。さらに、より高いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度にわたって電気化学的応答を線形化することが望まれるであろう。
【０８５１】
例えば、１５秒のターンオーバー時間が、４０，０００ｐｇ／ｍｌまでのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの測定を可能にし、５０００から１００００、さらに２００００、さらには４００００ｐｇ／ｍｌへの倍増を測定する能力を容易に可能にする。この結果は、どのようにしてアッセイを最適な性能のために調節できるかを実証している。例えば、１５秒の測定を半対数の曲線にプロットした場合、図５５（ｘ軸がＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度を示している）に示されるとおり良好な線形応答が観察される。
【０８５２】
この結果は、多数のパラメータの間の複雑な相互作用を理解するための良好なモデル・システムを提供している。例えば、最大の感度および性能のための２つの較正曲線をもたらす図示のとおりの高いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度を捕まえるための１５秒の測定および低いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度を測定するための第２の測定（例えば、１、２、３分）など、２点の電気化学的測定を、所望の範囲を最適な性能で測定するために行うことができる。
【０８５３】
さらなるＨＲＰ滴定実験を、ＨＲＰターンオーバー時間の延長とＨＲＰのＬＯＤの向上との関係を調べるために実行した。図５６Ａ〜Ｂに要約されるとおりの明確な傾向が観察される。
【０８５４】
ＬＯＤおよび関連の応答の勾配は、ＨＲＰターンオーバー時間の関数として変化する。具体的には、１０ｐＭというＬＯＤが、１０分、７分、および５分のＨＲＰターンオーバー時間において観察される一方で、３分においては２５ｐＭが観察され、１分のＨＲＰターンオーバー時間においては１００ｐＭというＬＯＤが観察される。より低いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度の測定においては、より長いＨＲＰ時間期間を使用することで、先に使用した１分のターンオーバー時間に比べて、性能の大きな向上が観察できた。例えば、５分のＨＲＰターンオーバーの後の第２の時点での測定が、１００ｐＭから１０ｐＭへのＨＲＰ  ＬＯＤの変化（１０倍の相違）をもたらす。
【０８５５】
２点のＨＲＰ滴定実験を実行した。単一のＨＲＰ濃度を単一の時点のやり方または２つの時点のやり方のどちらで測定しても、同一の滴定応答が観察され、３秒の期間にわたる生成された酸化ＡＢＴＳの減少は、第２の時点の測定（３００秒）において得られる信号に影響を及ぼさない。より短い酸化ＡＢＴＳの測定時間（＜３００秒）は、複数の時点での測定を可能にできる。
【０８５６】
実施例３−血液対血液の正規化
血液サンプル間の血液対血液のばらつきが、大きい可能性がある。血液サンプル内のＣＶ（変動係数）は、通常は良好（１０％以下）である。
【０８５７】
血液対血液および血漿対血漿のばらつきを、ただ１つのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰストック溶液を使用（ストック対ストックのばらつきの除去）して検査アッセイ装置において再調査した。電極の周囲の装置からのＡＢＴＳの漏れを除いた。対応する血漿測定を、血液の検討において使用した血液から由来する血漿において行った。
【０８５８】
５．１７％という血液サンプル間のＣＶが、２０，０００ｐｇ／ｍｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度におけるすべての繰り返しの平均について見られる一方で、平均の平均から計算されたとき、１．５３％という血液サンプル間のＣＶが、２０，０００ｐｇ／ｍｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度について観察される。血漿測定における対応するＣＶは、血液ベースの測定よりも大幅に高い。
【０８５９】
興味深いことに、血液測定を、３８〜４９のヘマトクリット（ＨＣＴ）範囲を有する血液について行った。より高いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度において、測定される電流にＨＣＴの影響はほとんど、または全くないように見受けられる。対応する血漿測定は、血液測定におけるそれぞれのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度についてゼロのＨＣＴ測定を呈する。しかしながら、ＨＣＴは、低いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度においてより重要な役割を果たしうる。０および５００ｐｇ／ｍｌのデータにおいて、より大きな広がりが存在している。
【０８６０】
所定のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度における電流とＨＣＴとの間の関係が、きわめて低いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度において存在しうる。バックグラウンドが、ＨＣＴによって影響されるように見受けられ、すなわち０ｐｇ／ｍｌにおいてはＨＲＰの制御がなく、低いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度へと追加の電流をもたらしている。データの正規化を、いくつかのやり方で達成できる。
【０８６１】
ヘマトクリットの増加の影響は、バックグラウンド信号を増加させることである。ヘマトクリットの増加の影響は、各場合で下端において常に同じ量による電流を増加させることである（上端においては、この影響は、より大きな信号に対して重要でない）。
【０８６２】
信号対ヘマトクリットの同じ勾配が、それぞれのデータセットにおいて見られ、これは、影響が追加の電流の影響であることを示しており、特定の信号からバックグラウンド信号を減算できることを示している。勾配は、％ＨＣＴの増加について約５０ｎＡの増加であり、アッセイの線形部分において見られるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの１ｐｇ／ｍｌ当たりの約２．２ｎＡと匹敵する。これは、ＨＣＴの影響の大きさが、ヘマトクリットの１％の増加につき測定される信号の約２５ｐｇ／ｍｌの増加であることを意味する。これは、アッセイの下端においては明らかに有意であるが、上端においてはそれほどではない。
【０８６３】
データを、バックグラウンドを減算することによって補正することができ、これは、ゼロＨＲＰデータを通過する最良適合線にもとづき、それぞれのヘマトクリット値について理論的なゼロのＨＲＰ結果を計算することによって実行された。次いで、これがゼロおよび５００ｐｇ／ｍｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰデータセットから減算され、アウトライアーは取り除かれた。
【０８６４】
補正は、ゼロＮＴ−ｐｒｏＢＮＰデータを通過する最良適合線にもとづくそれぞれのヘマトクリット値について計算された理論的なゼロのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ結果を減算することによっても適用された。次いで、これがゼロおよび５００ｐｇ／ｍｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰデータセットから減算され、得られたデータがプロットされた。
【０８６５】
記録されたデータは、１％のＨＣＴの増加につき約２５ｐｇ／ｍｌの増加というＨＣＴの影響を示している。この分析は、血液サンプルについて、アッセイ応答対ＨＣＴの予測可能な傾向を有し、かつＨＣＴが既知である場合、補正係数を適用することによって信号へのＨＣＴの影響が取り除かれることを示している。装置／メータにおけるＨＣＴ測定が、応答を正規化すべく低いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度へと理論的な補正計数を適用することを可能にする。この測定を、第１のチャネル部に配置された電極によって電気化学的に行うことができる。代案は、例えば試薬の化学の変更、電気化学的な種の遮断物の使用、または電気化学的な種の特定的な不活化によって、信号へのＨＲＰなしの寄与を取り除くことである。
【０８６６】
さらに、或る範囲のＨＣＴを、ただ１つの血液サンプルにおいて人工的に生成し、２０，０００ｐｇ／ｍｌにおける電流／信号へのＨＣＴの影響を検討した。幅広い範囲のＨＣＴにおいて、ＨＣＴが２０，０００ｐｇ／ｍｌの信号をゆがめることはなかった。
【０８６７】
実施例４−液体サンプル：液体のインターフェースを横切る磁気感受性粒子の移動
血液対血液のＣＶは、きわめて一貫しているが、２０，０００ｐｇ／ｍｌにおいてバッファならびに血液または血漿において実行される結合反応の間に、約５μＡの差が観察されている。この差について、考えられる原因がいくつか存在する。
【０８６８】
１．試薬が制限的である
これまでの実験／データは、試薬が、バッファにおける測定においては制限因子でないことを示している。血液における測定においては、そうではない可能性が高い。
【０８６９】
２．血液または血漿などの粘性物質中では捕捉の効率が低くなる
バッファに比べて血液の粘性が高いことで、拡散速度が影響を受け、成功裏の結合の衝突の効率が低くなると予想される。
【０８７０】
３．信号を消す妨害物の存在
妨害物（電気化学的）ゆえの信号の一定のレベルまたは低減は、妨害物が通常は生理学的範囲にわたりサンプル間でさまざまであるため、期待できない。尿酸およびアスコルビン酸が、ＡＢＴＳのラジカルカチオンの形態と反応することが知られており、この性状の反応は、ＡＢＴＳのＨＲＰリサイクル（図５７を参照）を妨げることによって生成される信号を抑えると考えられる。
【０８７１】
４．バッファサンプルに比べ、血液サンプルにおいてはより多くの磁気感受性粒子が失われる
バッファサンプルに比べ、血液サンプルにおいては、液体サンプルから電極への磁気感受性粒子の移動の効率が低くなる可能性がある（「ビーズ損失」）。
【０８７２】
５μＡの減少が、捕捉の効率（すなわち、磁気感受性粒子のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰへの結合の効率）に起因するものであって、ビーズ損失（磁気感受性粒子の作業電極への移動の失敗）に起因するものではないという仮説を、実験的に確かめた。結合反応物（２０，０００ｐｇ／ｍｌ）を、エッペンドルフにおいて設定した。１０分間の結合時間の後、１０μｌの結合反応溶液（バッファ）をピペットで装置へと取り（通常の装置の分離および引き付け）、あるいは洗浄工程（ＨＲＰの除去）を装置外で実行し、次いで洗浄後の１０μｌの結合反応物をピペットで装置へと取り、液体サンプル：液体のインターフェースを横切る通常の移動および電極への引き付けを実行した。この方法論を、血液反応物にも同様に適用し、すなわち１０μｌの血液結合反応物をピペットで装置へと取り（次いで、通常どおり液体サンプル：液体のインターフェースを横切って移動させ、電極へと引き寄せ）、あるいは血液反応物を装置外で洗浄（ＨＲＰを除去）し、磁気感受性粒子をバッファに再び懸濁させ、１０μｌをピペットで装置へと取って、液体サンプル：液体のインターフェースを横切る通常の移動および電極への引き付けを実行した。これにより、バッファ測定および血液測定の間で信号の減少があれば、その原因が、磁気感受性粒子または血液中での捕捉効率であると判断することができる。
【０８７３】
結果は、バッファ測定に対し、血液ベースの測定において信号の減少が常に存在することを示した。統計的には、血液またはバッファのそれぞれにおいて、アッセイ装置外での洗浄またはアッセイ装置上での洗浄の場合に、測定の間にわずかな差が存在する。重要なことに、洗浄および非洗浄の血液の間に差がないことが、血液において捕捉効率が低くなることが、バッファ信号に比べて信号が小さくなることの最もありそうな原因であることを示している。洗浄の血液の測定においては、捕捉の出来事が血液中で実行され、洗浄され、バッファ中に再構成され、次いで血液サンプル：液体のインターフェースを横切っての移動および電極への引き寄せがアッセイ装置において実行される（バッファ測定と同じ）。対照的に、非洗浄の血液の測定は、アッセイ装置に収容された血液中での捕捉の出来事の実行、ならびにアッセイ装置における血液サンプル：液体のインターフェースを横切っての通常の移動および電極への引き寄せを伴う。したがって、非洗浄および洗浄の血液の間の信号の変化が、ビーズ損失に起因すると考えられる。しかしながら、信号はきわめて類似しており、血液において捕捉の効率が低くなることを示唆している。
【０８７４】
さらなる実験において、血液およびバッファにおけるシステムの捕捉効率およびビーズ損失を測定するために、作業電極に固定したＨＲＰを使用して、この実験を繰り返した。
【０８７５】
血液におけるビーズ損失が問題である場合、ＨＲＰに結合している磁気感受性粒子の錯体があまり失われず、作業電極に達するＨＲＰ−金ゾルラベルの数が多くなって、測定される電気化学信号が大きくなるよう、より高い磁気感受性粒子の濃度を加えることができる。この手法は、磁気感受性粒子のうちのある割合が失われるのではなく、特定の数の磁気感受性粒子が失われる場合に、有益である。磁気感受性粒子のうちのある割合が失われる場合には、信号は変化しないと予想される。
【０８７６】
追加の磁気感受性粒子は、血液またはバッファにおいて信号を大きくは増加させない。実際、４倍の磁気感受性粒子を血液へと加えると、信号がわずかに減少する。これは、おそらくは、磁気感受性粒子が電極表面上の空間を占め、ＡＢＴＳｏｘを反応から閉め出しているためである。さらに、電極の上方の磁気感受性粒子が多くなると、（より多くの磁気感受性粒子が、電極の上方のより大きな体積を占めるため）ＨＲＰラベルがより大きな体積にわたって分散させられるため、測定を変化させると考えられる。すなわち、一部のＨＲＰラベルが電極表面からさらに遠くなり、電極への信号の拡散ゆえに測定に影響する。
【０８７７】
磁気感受性粒子の濃度が２倍にされるとき、バッファにおいてバックグラウンド信号も２倍になることを見て取ることができる。これは、ＨＲＰ−金ゾルの磁気感受性粒子への非特定の結合の増加に起因する。しかしながら、血液において磁気感受性粒子の濃度が２倍にされるとき、バックグラウンドは、約１５％しか増加しない（これは、実験誤差において些少である）。これは、誤差の範囲において、バッファと同じバックグラウンドレベルである。したがって、（他の実験において実証されているとおり）追加の磁気感受性粒子の追加がアッセイの感度および精度を向上させる場合、これは、バックグラウンドには大きな影響を及ぼさないと考えられる。おそらくは、血液が磁気感受性粒子を部分的にブロックし、結合できるＨＲＰ−金ゾルの量を少なくすることができる。
【０８７８】
アッセイの捕捉の効率が、血液においてバッファよりも低い場合、血液においてより低い信号が見られると予想される。これを調査するために、結合反応をバッファおよび血液において実行し、しかしながらその後に、アッセイにおいてサンプルを走行させる前に、結合混合物を取り除き（磁気選別機を使用して磁気感受性粒子から分離し）、バッファで置き換える反応を実行した。信号が結合によって制限されているならば、血液における信号は、バッファへと移動させられたときに増加することがない。
【０８７９】
しかしながら、磁気感受性粒子をアッセイ装置の血液から集めるときに磁気感受性粒子の損失が生じる場合、これは磁気選別機を使用しても生じる可能性がある。また、磁気感受性粒子がバッファへと移されるときに取り除かれない一部の血液剤によってＨＲＰが妨げられる可能性もある。また、電気化学的な妨害物が、磁気感受性粒子に結合し、バッファ液へと移されるときに取り除かれない可能性もある。
【０８８０】
これらの可能性のうちの第１（磁気感受性粒子が磁気的分離の際に失われる）を調べるために、血液における１０分間の結合反応の後で、反応物をバッファで１０倍に希釈し、選別機へと加えられたときの血液の粘性を低下させた。次いで、希釈された反応混合物を取り除き、元の体積のバッファで置き換えた。結果は、血液信号の増加、およびこれらの結合反応物がアッセイの実行前に希釈されてバッファへと移された場合のバッファ電気化学信号の減少を示した。
【０８８１】
バッファによって示された電気化学信号の減少は、洗浄手順の際のビーズの喪失に起因している可能性があり、あるいは結合の平衡に影響を及ぼして、サンドイッチ錯体の解離を引き起こすサンプルの希釈の影響に起因している可能性がある。これは、血液においても生じると予想され、したがって希釈および洗浄後に血液信号が上昇しているという事実は、血液信号が、バッファのそれと同様の信号に鑑み、さらに高くなければならないことを示している。これは、捕捉の効率が血液において低くないことを暗示している。
【０８８２】
一実験においては、結合反応をバッファおよび血液において実行し、アッセイの実行の前に、結合混合物を取り除き、磁気感受性粒子を血液に再懸濁させた。この実験において、血液の結合反応物を血液に再懸濁させても、信号の大きさに影響はないが、バッファの結合反応物を血液に再懸濁させると、血液の結合反応の信号と同じ大きさまで信号が減少することが観察された。この結果は、血液において結合が少ないのではなく、血液におけるビーズ損失、血液剤からの電気的妨害、または血液剤からのＨＲＰの抑制のいずれかを示唆している。
【０８８３】
ビーズ損失の可能性をさらに調べるために、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰアッセイの通常のやり方においてアッセイ装置内の血液またはバッファを通って磁気感受性粒子を引きずるアッセイを設定した（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰまたはＨＲＰ−金ゾルはなし）。磁気感受性粒子をＡＢＴＳ反応バッファ（Ｈ２Ｏ２なし）へと移動させた後で、それらが、装置の成型ベースに配置された直径４ｍｍの穴を通ってピペットで取り出すことによって、装置から取り除かれる。次いで、磁気感受性粒子を、ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）で１回だけ洗浄し、その後に３００μｌのＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）へと希釈し、６６０ｎｍで分光光度法で測定した。測定は、ＡＢＴＳまたは血液からのあらゆる汚染物質を示すために４００〜８００ｎｍの走査として実行した。磁気感受性粒子の６６０ｎｍにおける吸収の線形な相関を示す較正を実行した。
【０８８４】
１０μｌの磁気感受性粒子がＮＴ−ｐｒｏＢＮＰアッセイへと加えられることに注意すべきである。この濃度において、血液中の２００００ｐｇ／ｍｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰにおけるアッセイは、バッファ中の２００００ｐｇ／ｍｌにおいて見られる信号のおおむね７８％をもたらす。このビーズ損失アッセイにおける信号は、血液においてわずかに低い（実験誤差において些少であるが）ように見受けられるが、これは、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰアッセイにおいて見られる２２％の差を説明するために充分ではない。しかしながら、このアッセイは、血液／バッファサンプルからの移動後、かつ電極の位置へと引き寄せられる前の磁気感受性粒子を測定している。このさらなる引き寄せが、血液またはバッファから取り出された後の磁気感受性粒子の引き寄せの特性が異なる可能性があるため、さらなるビーズ損失の影響を有する可能性がある。また、このアッセイにおいては、血液／バッファサンプルからバッファ溶液へと移されるときの磁気感受性粒子の特性に影響しうるＡＢＴＳのターンオーバーが存在しない。血液からの信号の減少について、異なる要因からの複数の寄与が存在しうる。
【０８８５】
バッファと比べ、血液から引き寄せられた磁気感受性粒子の濃度の間の唯一の大きな差は、５μｌの磁気感受性粒子を使用した場合である。この場合、バッファから取り出される磁気感受性粒子のわずかに６５％を、血液から取り出すことができる。他のすべての磁気感受性粒子の濃度においては、バッファから取り出される磁気感受性粒子の９０％超が、血液からも取り出される。
【０８８６】
液体サンプルとしてバッファを使用したときのアッセイ装置におけるビーズ損失は、１８〜２８％の損失の間で一貫している。これは、装置からの磁気感受性粒子の除去に起因するようには見受けられないが、光学的測定に先立って磁気感受性粒子からＡＢＴＳ／血液を取り除くために使用される洗浄工程が寄与している可能性がある。これを、インターフェースを横切る移動および作業電極への引き寄せの段階において失われる磁気感受性粒子の数を割り出すために、測定および考慮することができる。
【０８８７】
実施例５−湿式および乾式アッセイ
検査アッセイ装置のサンプル導入口へと導入される溶液を形成するために試薬と液体サンプルとを混合することによって湿式アッセイを実行した。液体サンプル：バッファのインターフェースを横切る磁気感受性粒子の磁気による移動、および作業電極における電気化学信号の測定を実行した。
【０８８８】
湿式アッセイを、アッセイ装置のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの検出における実現可能性を証明するために、血液サンプルにおいて実行した。湿式アッセイを、
１．装置の第２のチャネル部へとバッファ液を放出すべくバッファ袋を破り、液体サンプル：バッファのインターフェースを形成し、液体サンプル：バッファのインターフェースを横切って磁気感受性粒子を磁気によって移動させるなど、液体サンプル（血液サンプルを含む）において液体サンプル間のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度の倍増（例えば、２００から４００ｐｇ／ｍｌへ）を測定および識別し、
２．アッセイを５０ｐｇ／ｍｌというＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの下限を検出するために最適化し、
３．アッセイを５０〜２０，０００ｐｇ／ｍｌの範囲にわたるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰを検出するために最適化し、
４．アッセイを約１１分の総検査時間においてＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの検出を実行するように最適化し、
５．アッセイを５μＬの血液サンプルにおいて使用するために最適化する
ために実行した。
【０８８９】
湿式および乾式アッセイを、慢性心不全を有して診断される患者からの多数（例えば、７０〜１００）の血液サンプルについて実行することができる。湿式および乾式アッセイを、＜１０％のサンプル内ＣＶ（変動係数）およびＲ２＝０．９（Ｒ２＝相関係数の平方）を達成するために最適化することができる。
【０８９０】
乾式アッセイの実験を、湿式アッセイ試薬の成功裏の乾燥固定、ならびに液体サンプル中への効果的な再懸濁およびアッセイ性能を証明するために実行した。乾式アッセイを、アッセイ装置のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの検出における実現可能性を証明するために、血液サンプルならびに（例えば図４１に従って）乾燥試薬を堆積してなるアッセイ装置を使用して実行した。乾式アッセイを、
１．装置の第２のチャネル部へとバッファ液を放出すべくバッファ袋を破り、液体サンプル：バッファのインターフェースを形成し、液体サンプル：バッファのインターフェースを横切って磁気感受性粒子を磁気によって移動させるなど、液体サンプル（血液サンプルを含む）において液体サンプル間のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度の倍増（例えば、２００から４００ｐｇ／ｍｌへ）を測定および識別し、
２．アッセイを５０ｐｇ／ｍｌというＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの下限を検出するために最適化し、
３．アッセイを５０〜２０，０００ｐｇ／ｍｌの範囲にわたるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰを検出するために最適化し、
４．アッセイを約１０分の総検査時間においてＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの検出を実行するように最適化し、
５．アッセイを５μＬの血液サンプルにおいて使用するために最適化し、
６．ストレプトアビジンでコートされた磁気感受性粒子、乾燥させたビオチン変性の抗体、乾燥させたＨＲＰ／抗体金ゾル、などの乾燥試薬の使用を実証する
ために実行した。
【０８９１】
乾式アッセイにおいて、乾燥試薬は、
・ストレプトアビジンでコートされた磁気感受性粒子（直径１μｍ）（Ｄｙｎａｌ（登録商標）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  ＵＳＡ）６．６％の固体（１％の固体の５００μｌ、４６２．１μｌの上澄みを除去、３７．９μｌの１０％  トレハロース、１０％  ＰＶＰ５５Ｋを追加）；
・ビオチン化させた抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体（例えば、１５Ｃ４（Ｈｙｔｅｓｔ  Ｌｔｄ））６６μｇ／ｍＬ（９２．２μｌの５％  トレハロース、５％  ＰＶＰ５５Ｋ中の０．８４５ｍｇ／ｍＬの７．８μｌ）；
・抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体（例えば、２４Ｅ１１、１５Ｆ１１、２９Ｄ１２（Ｈｙｔｅｓｔ  Ｌｔｄ））ＨＲＰ金ゾル（４．３×）（４００μｌのストック、遠心分離１２，０００ｒｃｆ、１０分間、１５℃、３５３．５μｌの上澄みを除去、４６．５μｌの１０％  トレハロース、１０％  ＰＶＰ５５Ｋを追加）
であった。
【０８９２】
それぞれの試薬を、９個の装置を保持するベースプレート上に３つの１００ｎｌの液滴として堆積した。
【０８９３】
乾燥および組み立て：
堆積の後に、ベースプレートを３０℃で１５分間にわたってオーブンへと移した。１５分間の乾燥期間の後、装置を、いくつかの乾燥剤袋を有するホイル袋（シールされていない）に配置した。次いで、蓋を接着層へと取り付け、装置を積層してホイル袋へと戻し（装置をすぐに使用しない場合には、袋を封じた）、アッセイにおいて使用した。
【０８９４】
乾式アッセイの手順：
（湿式アッセイにおけるビオチン化された抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体（例えば、１５Ｃ４）、磁気感受性粒子、および金ゾルの添加を説明するために）５μｌの２％  Ｔｗｅｅｎ、２６．５μｌのＰＢＳ、および８０μｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰを混ぜ合わせ、１０μｌのこの溶液を装置の導入口へと加えた。次いで、これを治具上で約１０分間にわたって混合（混合時間はさまざまであり、通常は９分４５秒である）し、次いで磁気感受性粒子をインターフェースを横切って磁気によって移動させ、磁気によって作業電極へと引き寄せた。１分間のターンオーバー時間の後で、電気化学信号を測定した。
【０８９５】
１週間にわたる乾燥試薬（磁気感受性粒子：抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体および抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体：金ゾル：ＨＲＰ）の安定を試験し、最適化された試薬共役物を選択した。
【０８９６】
湿式および乾式アッセイにおける電気化学信号の測定が、図５８Ａ〜Ｂに示されている。
【０８９７】
実施例６−作業電極におけるインキュベーション時間
作業電極におけるインキュベーション時間（ターンオーバー期間）の影響を調べるために、実験を行った。
【０８９８】
ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのアッセイにおいて、磁気感受性粒子：抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体：ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ：抗ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ抗体：金ゾル：ＨＲＰ三重錯体が、磁気によって作業電極へと動かされ、作業電極において、ＡＢＴＳの酸化が電気化学的電流として測定される。三重錯体が最初に作業電極に接触してから、電気化学的電流の検出までの時間期間が、インキュベーション時間（ターンオーバー期間とも呼ばれる）である。この時間の変化が測定される電気化学的信号に与える影響を調べた。
【０８９９】
１０ｍＭのＡＢＴＳ、１０ｍＭのＨ２Ｏ２を含んでいるバッファを使用したときに得られた結果の要約が、図６０および６２に示されている。５ｍＭのＡＢＴＳ、１０ｍＭのＨ２Ｏ２を含んでいるバッファを使用したときに得られた結果の要約が、図６１に示されている。
【０９００】
図６２は、約５０００〜４００００ｐＭのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの濃度範囲にわたり、５秒間のインキュベーション時間について、電気化学的電流がＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの濃度とともに線形またはほぼ線形に増加することを示している。この線が、５０００〜４００００ｐＭの範囲のＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度について、測定された電気化学的電流におけるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度を割り出すための値のデータセットの基盤をもたらす。
【０９０１】
結果は、約２５０ｐＭ〜１０，０００ｐＭのＨＲＰの濃度範囲にわたり、１５秒間のインキュベーション時間について、電気化学的電流がＨＲＰの濃度とともにほぼ線形に増加することを示している。この線が、約２５０ｐｇ／ｍｌおよびそれ以上のＨＲＰ（または、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）濃度について、測定された電気化学的電流におけるＨＲＰ（または、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）濃度を割り出すための値のデータセットの基盤をもたらす。
【０９０２】
図６０は、０〜１００ｐＭのＨＲＰの濃度範囲にわたり、１０分間のインキュベーション時間について、電気化学的電流がＨＲＰの濃度とともに線形またはほぼ線形に増加することを示している。この線が、０〜１００ｐＭの範囲のＨＲＰ（または、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）濃度について、測定された電気化学的電流におけるＨＲＰ（または、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）濃度を割り出すための値のデータセットの基盤をもたらす。
【０９０３】
図６１は、０〜１００ｐＭのＨＲＰの濃度範囲にわたり、１０分間のインキュベーション時間について、電気化学的電流がＨＲＰの濃度とともに線形またはほぼ線形に増加することを示している。この線が、０〜１００ｐＭの範囲のＨＲＰ（または、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）濃度について、測定された電気化学的電流におけるＨＲＰ（または、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）濃度を割り出すための値のデータセットの基盤をもたらす。
【０９０４】
この実験から得られた結果は、複数のインキュベーション時間におけるＨＲＰまたはＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの濃度を割り出すための複数のデータセットの構築を可能にする。ただ１回のインキュベーションを実行し、該当のインキュベーション時間についてのデータセットに有効な対応値を有している電気化学的測定が特定されるまで、インキュベーションを続けることが可能である。複数のデータセットを用意することで、例えば高いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度（例えば、＞１０，０００ｐｇ／ｍｌ）および低いＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度（例えば、＜１００ｐｇ／ｍｌ）の両方においてＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度の倍増を検出する能力を改善することによって、アッセイの感度を最適化することが可能である。
【０９０５】
メータのメモリを、インキュベーション時間Ｔｘの後に測定される電気化学的電流に対応するＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ濃度の情報を提供する複数（例えば、２つ以上）の較正データセットでプログラムすることによって、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのアッセイにおいて測定される電気化学的電流Ｑｘを、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの検出濃度へと変換することができる。
【０９０６】
例えば、インキュベーション時間Ｔｘ＝１５秒（Ｔ１５ｓ）において、Ｔ１５ｓのデータセット内に有効な対応値としてＱ１５ｓが存在していない場合、インキュベーションを続行し、より長いインキュベーション時間（例えばＴ１ｍｉｎｉｔｕｅ）の後で第２の測定を行い、Ｔ１ｍｉｎｉｔｕｅのデータセット内に有効な対応値としてＱ１ｍｉｎｉｔｕｅが存在するか否かを確認することができる。このプロセスを、対応するデータセット内に有効な対応値が特定されるまで繰り返すことができる。
【０９０７】
実施例７−作業電極と液体サンプル：液体のインターフェースとの近接
第２のチャネル部における作業電極の位置の変化の影響について、調査を行った。
【０９０８】
作業電極が第１および第２のチャネル部のジャンクションから３ｍｍに位置しており、インターフェースを横切って磁気感受性粒子を磁気によって移動させることが磁気感受性粒子を作業電極に位置させることに直結するアッセイ装置（「直接移動装置」）を用意した。
【０９０９】
作業電極が第１および第２のチャネル部のジャンクションから１３．５ｍｍに位置している別のアッセイ装置（「間接移動装置」）を用意した。このアッセイ装置においては、磁気感受性粒子をインターフェースを横切り、第２のチャネル部を通って作業電極へと磁気的に移動させるために、電極への引き寄せ工程が必要である。
【０９１０】
用量応答曲線が、図６３および６４に示されている。
【０９１１】
磁気感受性粒子を作業電極へと直接移動させた場合（「直接移動装置」）に、感度の向上が観察された。直接移動装置を使用し、血液サンプルにおいて１００ｐｇ／ｍｌが容易に観察された。仮説として、粒子が作業電極へと引き寄せられるときに失われ、結果として特定信号が低くなると考えられる。このデータは、直接移動装置を使用してより高感度な測定が可能であることを示唆している。
【０９１２】
実施例８−ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰメータのソフトウェアの構成
この実施例では、アッセイ装置５００からの電気化学的信号を検出するためのアッセイにおけるメータ４００の動作の一典型例を説明する。方法の各段階を、アッセイの際にメータの動作を制御すべくメータ４００において実行されるソフトウェア（例えば、コンピュータプログラム製品）として実現することができる。ソフトウェアを、メータのプロセッサとの連動のために、メモリ装置（例えば、ＲＯＭ）上でメータに一体化させることができる。
【０９１３】
この実施例の目的において、（対向電極がアナログフロントエンド回路から切り離されていないときに）対向電極と参照電極との間に電圧低下は存在しないと仮定される。アッセイにおいて、対向電極がアナログフロントエンド電子機器へと接続されたとき、対向電極において生み出される電圧は、参照電極に所望の電圧を保つために連続的に変化している。
【０９１４】
アッセイ装置への血液の適用が光学センサによって認識され、メータが、印加磁界の移動および第１のチャネル部におけるサンプルの混合を開始させ、次いで磁気感受性粒子を集めて、血液：バッファ液のインターフェースに隣接する血液サンプル内に集合させるべく磁界を操作する。ひとたび磁界がインターフェースに位置して、バッファ液への磁気感受性粒子の移動を実行すべく構成されると、バッファ液が垂直取り付けのプランジャを使用して放出される。
【０９１５】
図５９が、本考案によるメータにおけるソフトウェアの実現（例えば、コンピュータプログラム製品として）のための測定アルゴリズムを示している。図５９に示されている参照番号１〜７は、以下のステップに対応する。
【０９１６】
１．アッセイのこの部分において、アッセイ装置／メータが実質的な開路状態にあるよう、対向電極がアナログフロントエンド電子機器から切り離される。バッファ溶液がバッファチャネルを満たすにつれ、最初に作業、対向、および参照電極が濡れ、結果として参照電極において電位（例えば、−０．２Ｖ）が測定される。この電位は、アッセイ装置の電気化学によってのみ生み出され、ポテンショメトリック（ｐｏｔｅｎｔｉｏｍｅｔｒｉｃ）な測定であって、すなわち電流の流れがない。このとき、バッファ溶液は、オーバーフローチャネルに配置されたバッファ検出電極に達しておらず、したがってこの電極における電位は、依然として浮いたままである。
【０９１７】
２．バッファがバッファ検出電極に達すると、電位の測定（例えば、−０．２Ｖ）が、バッファ検出電極にも存在することになる。この電位は、アッセイ装置の電気化学によってのみ生み出され、純粋にポテンショメトリックな測定であって、すなわち電流の流れがない。これにより、メータは、血液：バッファ液のインターフェースが形成されたことを知ることができる。バッファ検出電極の作業電極からの距離ゆえ、参照電極に比べ、バッファ検出電極に小さな電圧低下が存在するかもしれないことに、注意すべきである。しかしながら、この低下は、ごくわずかであると予想される。
【０９１８】
３．磁気感受性粒子は、血液からバッファへと成功裏に移されると、バッファを通って作業電極に向かって磁気的に引き寄せられる。磁気感受性粒子が作業電極の前縁に触れると、参照電極の電位が再び低下する。電位の低下の大きさは、検査対象のサンプルに含まれているＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの濃度に依存する。
【０９１９】
４．ひとたび粒子の電極への到着が検出されると、磁石は終端位置に停止し、対向電極は、インキュベーション期間（例えば、さらなる６０秒間）にわたって切り離されたままとされる。
【０９２０】
５．インキュベーション期間の終わりにおいて、対向電極が再び接続され、−０．１５Ｖの電圧を出力するように設定される。
【０９２１】
６．この電位の段差により、アッセイ装置によって電流過渡が生み出され、アッセイ装置からメータの作業電極用オペアンプへと電流が流れる。
【０９２２】
７．−０．１５Ｖの印加から３秒後の電流過渡の値が、血液サンプル中に含まれているＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの濃度に関係する電流値である。
【０９２３】
実施例９
本方法を、湿式アッセイを使用して実行することができる。６回路のマルチスタットおよびＧＰＥＳ（商標）ソフトウェアを備えるＥｃｏ  Ｃｈｅｍｉｅ（商標）のＡｕｔｏｌａｂ（商標）を含む器具を使用した。使用した電極は、自前にてスクリーン印刷した。作業および対向電極を、カーボン  Ｄ２（ＧＥＭ（商標）Ｌｔｄ）を使用して作成し、銀／塩化銀電極を、ＡｇＣｌ  ７０：３０（ＧＥＭ（商標）ＬｔｄまたはＤｕＰｏｎｔ（商標））を使用して作成し、誘電電極を、誘電体  Ｄ１（ＧＥＭ（商標）Ｌｔｄ）を使用して作成した。
【０９２４】
検査片に使用される材料は、疎水性のポリエステル製ベースおよび親水性の曇り止めの蓋、ならびに両者の間にチャネルを形成する両面接着スペーサ（２００μｍ）を含んでいる。曇り止めの蓋を、洗浄および乾燥の前に、ｐＨ７．３のリン酸緩衝生理食塩水中の４０ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン、１．５％のＴｗｅｅｎ（商標）であらかじめブロックした。あるいは、基板が、アルミナセラミックまたはポリエステルカードを備えている。
【０９２５】
塩化コバルト、４−モルホリンプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、塩化カリウムを含む試薬を、第１のアッセイにおいて使用した。ｐＨ７．４のバッファが、１００ｍＭのＭＯＰＳおよび１５０ｍＭの塩化カリウムを使用して作成され、１．５Ｍの塩化カリウム中の４５ｍＭの塩化コバルト標準液も作成される。５ｍＭの過酸化水素、５ｍＭの２，２’−アジノビス−（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）をｐＨ４．５の１２５ｍＭの酢酸ナトリウム・バッファに含む試薬を、第２のアッセイにおいて使用した。他の試薬は、抗体  １５Ｆ１１に共役した西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、および抗体  ７２０６へと結合した１μｍの磁性粒子（表面にＣＯＯＨを有するＣｈｅｍｉｃｅｌｌ（商標））を含んでいた。
【０９２６】
凍結血清および有志からの全血サンプルを含むサンプルを、分析に使用した。５μｌのコバルト標準液を、チューブ内の１００μｌの血液サンプル（血清、血漿、または血液）へと加えた。このようにして形成された混合物を、渦巻き機を使用して１０秒間にわたって混合し、その後に２分間にわたってインキュベート可能にした。磁性粒子（抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体  ７２０６が結合している）および抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１へと共役したＨＰＲが、サンプルへと加えられ、サンプルが６００ｒｐｍで３０分間にわたって混合される。次いで、７．５μＬ〜１５μＬの間の混合物を取り出し、検査片の第１の適用ゾーンを介して第１のチャネルへと適用した。
【０９２７】
サンプル混合物を、第１のチャネルに沿って移動させ、第２のチャネルとのジャンクションに停止させた。
【０９２８】
サンプル流体中に存在するＩＭＡの量を検出するための第１の測定を、第１の電極セットにおいて実行した。作業電極を、４０秒間にわたって＋１Ｖに置き、次いで０．７Ｖ／秒の走査速度で＋１Ｖから−０．５Ｖへと直線状の掃引を加えた。行われる測定を、その全体が参照により本明細書に組み込まれる本出願と同時に係属中の出願第ＧＢ０６０３０４９．８号に従って最適化することができる。
【０９２９】
コバルト２＋イオンが酸化され、＋１Ｖにある電極表面にコバルト３＋のヒドロキシ種として吸収された。走査の際に、コバルト３＋が再びコバルト２＋へと還元され、＋０．７ボルトの付近に陰極信号のピークをもたらした。検査の較正のために、電極の性能を、或る範囲のバッファ内のコバルト濃度について検査した。サンプル中のＩＭＡの量を割り出すために、記録された値を、ＩＭＡについてのアルブミン・コバルト結合（ＡＣＢ（商標））テストに相関付けた。
【０９３０】
磁性粒子（および、磁性粒子に結合しているものすべて）を、磁石を使用して通気孔に位置する液体／空気のインターフェースへと引き寄せる。磁石が、液体−空気のインターフェースを５ｍｍ過ぎるまで引かれ、空の第２のチャネルの上方に保持される。これは、磁性粒子を液体−空気のインターフェースに保持する。なぜならば、磁性粒子は、このようにして形成されたメニスカスを通過することができないからである。
【０９３１】
ｐＨ４．５の１２５ｍＭの酢酸ナトリウム、５ｍＭのＡＢＴＳ（２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸））、および５ｍＭの過酸化水素を含む約１１μｌの反応バッファを、第２の適用ゾーンを介して第２のチャネルへと加えた。これが、液体−空気のインターフェースに向かって流れるが、この流れは、このインターフェースに配置された通気孔の存在によって容易にされる。反応バッファが、血液サンプルとの液体−液体のインターフェースを形成した。この時点で、磁性粒子が、第２のチャネルの近傍に位置する磁石によって引かれて、液体−液体のインターフェースを横切って移動した。
【０９３２】
次いで、磁石を、制御された速度（粒子の喪失を最小限にする）で第２の電極セットの作業電極の上方の位置へと動かした。磁石が、ブロックされた蓋の下面に沿って粒子を引き寄せた。これが、磁性粒子を第２の電極セットの作業電極の上方へと引き寄せる一方で、磁性粒子を、残余の未結合のＨＲＰ共役物から分離した。第２の電極セットの上方に到着したとき、磁性粒子が磁石によってその場に保持され、さらなる５０μｌの反応バッファ（磁性粒子をさらに洗浄するため）が、第２の適用ゾーンを介して第２のチャネルへと加えられる。これが送達された後に、磁石が取り除かれ、磁性粒子を第２の電極セットの作動電極上に位置させた状態で、１０分間にわたって反応の進行が許される。この設定において、３つのカーボン電極のシステムが使用される。
【０９３３】
１０分間の反応の後で、検査片をポテンショスタットへと取り付け、電位を開路から＋０．０Ｖへと進めた。３秒後に電流が測定され、較正曲線と比較されて、ＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度が与えられる。還元されたＡＢＴＳ、ＨＲＰ、および過酸化水素の間の反応によって生成された酸化ＡＢＴＳイオンが、＋０．０Ｖの電極表面において還元ＡＢＴＳ種へと変換される。
【０９３４】
実施例１０
本考案の一実施形態によれば、本方法を、湿式アッセイを使用して実行することができる。６回路のマルチスタットおよびＧＰＥＳ（商標）ソフトウェアを備えるＥｃｏ  Ｃｈｅｍｉｅ（商標）のＡｕｔｏｌａｂ（商標）を含む器具を使用した。使用した電極は、自前にてスクリーン印刷した。作業および対向電極を、カーボン  Ｄ２（ＧＥＭ（商標）Ｌｔｄ）を使用して作成し、銀／塩化銀電極を、ＡｇＣｌ  ７０：３０（ＧＥＭ（商標）ＬｔｄまたはＤｕＰｏｎｔ（商標））を使用して作成し、誘電電極を、誘電体  Ｄ１（ＧＥＭ（商標）Ｌｔｄ）を使用して作成した。
【０９３５】
検査片に使用される材料は、疎水性のポリエステル製ベースおよび親水性の曇り止めの蓋、ならびに両者の間にチャネルを形成する両面接着スペーサ（２００μｍ）を含んでいる。曇り止めの蓋を、洗浄および乾燥の前に、ｐＨ７．３のリン酸緩衝生理食塩水中の４０ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン、１．５％のＴｗｅｅｎ（商標）であらかじめブロックした。あるいは、基板が、アルミナセラミックまたはポリエステルカードを備えている。
【０９３６】
この実施形態において、第１のアッセイにおいて使用される試薬は、塩化コバルト、４−モルホリンプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、塩化カリウムを含む。ｐＨ７．４のバッファが、１００ｍＭのＭＯＰＳおよび１５０ｍＭの塩化カリウムを使用して作成され、１．５Ｍの塩化カリウムの４５ｍＭの塩化コバルト標準液も作成される。第２のアッセイにおいて使用される試薬は、５ｍＭの過酸化水素、５ｍＭの２，２’−アジノビス−（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）をｐＨ４．５の１２５ｍＭの酢酸ナトリウム・バッファに含んでいる。西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）は抗体  １５Ｆ１１に共役した。１μｍの磁性粒子は抗体  ７２０６に結合した（表面にＣＯＯＨを有するＣｈｅｍｉｃｅｌｌ（商標））。
【０９３７】
分析に使用されるサンプルは、凍結血清および有志からの全血サンプルを含む。
【０９３８】
５μｌのコバルト標準液が、チューブ内の１００μｌの血液サンプル（血清、血漿、または血液）へと加えられる。このようにして形成された混合物が、渦巻き機を使用して１０秒間にわたって混合され、その後に２分間にわたってインキュベート可能にされる。コバルトがアルブミンに結合し、程度は低いが血液中のＩＭＡに結合する。磁性粒子（抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体  ７２０６が結合している）および抗ＮＴｐｒｏＢＮＰ抗体  １５Ｆ１１へと共役したＨＲＰが、サンプルへと加えられ、サンプルが６００ｒｐｍで３０分間にわたって混合される。次いで、７．５μＬ〜１５μＬの間の混合物が取り出され、検査片の第１の適用ゾーンを介して第１のチャネルへと適用される。
【０９３９】
サンプル混合物が、第１のチャネルに沿って移動し、この第１のチャネルのいずれかの側の通気孔が位置している特定の点で停止する。これらの通気孔は、第２のチャネルへと開いたままである。
【０９４０】
サンプル流体に存在するＩＭＡの量を検出するための第１の測定が、第１の電極セットにおいて実行される。作業電極が、４０秒間にわたって＋１ボルトに置かれ、次いで０．７Ｖ／秒の走査速度で＋１ボルトから−０．５ボルトへと直線状の掃引が加えられる。行われる測定を、本明細書においてすでに述べられた本出願と同時に係属中の我々の出願第ＧＢ０６０３０４９．８号に従って、最適化することができる。
【０９４１】
コバルト２＋イオンが酸化され、＋１ボルトにある電極表面にコバルト３＋のヒドロキシ種として吸収される。走査の際に、コバルト３＋が再びコバルト２＋へと還元され、＋０．７ボルトの付近に陰極信号のピークをもたらす。検査の較正のために、電極の性能が、或る範囲のバッファ内のコバルト濃度について検査される。サンプル中のＩＭＡの量を割り出すために、記録された値が、ＩＭＡについてのアルブミン・コバルト結合（ＡＣＢ（商標））テストに相関付けられる。
【０９４２】
磁性粒子（および、磁性粒子に結合しているものすべて）が、磁石を使用して通気孔に位置する液体／空気のインターフェースまで引かれる。磁石が、液体−空気のインターフェースを５ｍｍ過ぎるまで引かれ、空の第２のチャネルの上方に保持される。これは、磁性粒子を液体−空気のインターフェースに保持する。なぜならば、磁性粒子は、このようにして形成されたメニスカスを通過することができないからである。
【０９４３】
ｐＨ４．５の１２５ｍＭの酢酸ナトリウム、５ｍＭのＡＢＴＳ（２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸））、および５ｍＭの過酸化水素を含む約１１μｌの反応バッファが、第２の適用ゾーンを介して第２のチャネルへと加えられる。これが、液体−空気のインターフェースに向かって流れるが、この流れは、このインターフェースに配置された通気孔の存在によって容易にされる。反応バッファが、血液サンプルと液体−液体のインターフェースを形成する。この時点で、磁性粒子が、第２のチャネルの近傍に位置する磁石によって引き付けられて、液体−液体のインターフェースを横切って「ジャンプ」する。この「ジャンプ」は、インターフェースにおける粒子の喪失を最小限にするとともに、血液の反応バッファ・ゾーンへの持ち込みを最小限にする。
【０９４４】
次いで、磁石が、制御された速度（粒子の喪失を最小限にする）で第２の電極セットの作業電極の上方の位置へと動かされる。磁石が、ブロックされた蓋の下面に沿って粒子を引きずる。これが、磁性粒子を第２の電極セットの作業電極の上方へと引き寄せる一方で、磁性粒子を、残余の未結合のＨＲＰ共役物から分離する。第２の電極セットの上方に到着したとき、磁性粒子が磁石によってその場に保持され、さらなる５０μｌの反応バッファ（磁性粒子をさらに洗浄するため）が、第２の適用ゾーンを介して第２のチャネルへと加えられる。ひとたびこれが送達されると、磁石が取り除かれ、磁性粒子を第２の電極セットの作業電極上に位置させた状態で、１０分間にわたって反応の進行が許される。この設定において、３つのカーボン電極のシステムが使用される。
【０９４５】
１０分間の反応の後で、検査片がポテンショスタットへと取り付けられ、電位が開路から＋０．０ボルトへと進められる。３秒後に電流が測定され、較正曲線と比較されて、ＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度が与えられる。還元されたＡＢＴＳ、ＨＲＰ、および過酸化水素の間の反応によって生成される酸化ＡＢＴＳイオンが、＋０．０Ｖの電極表面において還元ＡＢＴＳ種へと変換される。
【０９４６】
実施例１１
ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの連続監視
心不全の初期段階にある患者は、心臓の心筋が正常に収縮できず左心室が広がる左心室収縮機能障害（ＬＶＳＤ）を抱えている可能性が高い。患者が、心臓の機能の低下に起因して体内に流体が蓄積される結果として、高血圧症になる可能性があり、すなわち高い血圧に悩む可能性がある。高血圧症の影響を抑制または軽減するために、体が、利尿効果を有する分子を生成し、すなわち腎臓系を通じての流体の排出を高める分子を生成する。そのような利尿効果を有する分子の１つが、脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）である。ＢＮＰは、圧負荷に応答して心室から分泌される。プロホルモンとして生成され、分割されてＢＮＰおよびアミノ端末部分（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）を生む。ＢＮＰおよびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのどちらも、うっ血性心不全を抱える患者の機能状態に相関しており、心不全の診断に役立つことが示されている。急性心筋梗塞を呈する患者において、ＢＮＰおよびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのレベルは、左心室の拡張、リモデリング（ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）、および機能障害、ならびにＣＨＦの進展または死亡のリスクに相関している。
【０９４７】
ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの連続監視が、心臓病の進行に関する患者の状態の指標をもたらす。患者が、例えば実施例１において説明した一連の測定を実行し、検査装置によって取得されるデータを、或る時間期間にわたる平均のベースライン値を記録するために使用することができる。例えば毛管指刺しサンプルなどの血液サンプルが、（例えば、数日にわたる）複数の場合について規則的なやり方でＮＴ−ｐｒｏＢＮＰレベルを割り出すために分析される。装置によって割り出されたデータ値が、遠方のデータベースへと送信されて分析され、場合によっては医療の有資格者によって精査され、適切であれば患者への連絡が行われる。ベースライン値が、複数の測定から得られ、将来の或る時点において行われるサンプルの測定について、検査装置に保存されたベースライン平均から有意に相違する結果であるか否かを判断するために使用される。履歴のベースラインに比べて最新のデータ値に大きな逸脱が生じた場合、これは、病態が大きく悪化したことを示している。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの連続監視から得られるデータを、適切な診療を与えるうえで、より時宜にかなった介入を提供するために使用することができる。
【０９４８】
さらなる例では、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの連続監視が、腎臓系の状態の指標をもたらすために使用される。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、腎臓系によってのみ体から取り除かれ、ｐｒｏＢＮＰ分子のこの部分は、利尿薬として作用するＢＮＰと異なり、生物学的活性を有さない。すなわち、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰは、いかなる生化学的な相互作用にも関与しない。したがって、ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰのレベルが大きく上昇した場合、これが、腎機能の低下の知らせをもたらすことができる。ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰとともに、例えば血清中クレアチニンまたはシスタチンＣなどの腎機能のマーカーをさらに監視することで、患者の状態についてより詳細な臨床像をもたらすことができる。とくには、腎臓の状態ならびに心臓の状態の両者を判断することが可能である。さらに、そのようなマーカーを連続的に追跡することで、時間の関数としての病態の推移を追うことが可能である。患者の幸福の維持を保証すべく適切な診療を行うことが可能である。ＢＮＰおよびＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの連続監視は、参照により本明細書に組み込まれる２００４年１２月１２日付の米国出願第１１／０１３，３５３号に記載されている。
【０９４９】
他の実施形態は、添付の実用新案登録請求の範囲の技術的範囲に包含される。
【図面の簡単な説明】
【０９５０】
【図１】アッセイ方法のフロー図である。
【図２】アッセイ方法の実行に適したアッセイ装置およびメータの斜視図である。
【図３】典型的なアッセイ装置の斜視図である。
【図４】アッセイ装置の分解斜視図である。
【図５】アッセイ装置の上方からの平面図である。
【図６】アッセイ装置のインターフェース形成造作の分解図である。
【図７】図６の断面図である。
【図８】アッセイ装置の長手断面図である。
【図９Ａ】図６のインターフェース形成造作を通過する試薬の動きを示している。
【図９Ｂ】図６のインターフェース形成造作を通過する試薬の動きを示している。
【図９Ｃ】図６のインターフェース形成造作を通過する試薬の動きを示している。
【図９Ｄ】図６のインターフェース形成造作を通過する試薬の動きを示している。
【図１０Ａ】アッセイ装置における試薬の分離の詳細図を示している。
【図１０Ｂ】アッセイ装置における試薬の分離の詳細図を示している。
【図１１Ａ】アッセイ装置の個々の層の斜視図である。
【図１１Ｂ】インターフェース・ゾーンの側面図である。
【図１２】手持ち式の電気化学分析装置において使用するための検査片を概略的に表わした斜視図である。
【図１３】組み立てられた検査片の概略の端面図である。
【図１４Ａ】組み立てられた検査片の短辺に平行な断面の概略図である。
【図１４Ｂ】組み立てられた検査片の短辺に平行な断面の概略図である。
【図１４Ｃ】組み立てられた検査片の短辺に平行な断面の概略図である。
【図１５Ａ】試薬および分析対象の概略図である。
【図１５Ｂ】試薬および分析対象の概略図である。
【図１６Ａ】組み立てられた検査片の長辺に平行な断面の概略図である。
【図１６Ｂ】組み立てられた検査片の長辺に平行な断面の概略図である。
【図１７】手持ち式のアッセイ装置読み取り器を示している。
【図１８】アッセイ方法のフロー図である。
【図１９】メータの正面図である。
【図２０】メータの内部機構の配置を示している。
【図２１Ａ】メータの内部機構の下面を示している。
【図２１Ｂ】ラック２６０２の拡大図を示している。
【図２２Ａ】メータの構成をモータ２５０２および駆動歯車２６０３について示している。
【図２２Ｂ】メータの構成をモータ２５０２および駆動歯車２６０３について示している。
【図２３Ａ】磁石移動システムの斜視図を示している。
【図２３Ｂ】固定用バーを示している。
【図２３Ｃ】磁石移動システムにおける固定用バーの位置を示している。
【図２４Ａ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｂ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｃ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｄ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｅ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｆ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｇ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｈ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｉ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２４Ｊ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ａ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ｂ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ｃ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ｄ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ｅ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ｆ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ｇ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ｈ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２５Ｉ】動作時のメータの内部の構成を示している。
【図２６Ａ】メータの付勢部材と装置との相互作用を示している。
【図２６Ｂ】メータの付勢部材と装置との相互作用を示している。
【図２７】アクチュエータ・アセンブリの斜視図を示している。
【図２８Ａ】メータ内のアクチュエータ・アセンブリの構成を示している。
【図２８Ｂ】メータ内のアクチュエータ・アセンブリの構成を示している。
【図２９Ａ】アッセイ装置が存在していないときのメータの内部の構成を示している。
【図２９Ｂ】アッセイ装置が存在しているときのメータの内部の構成を示している。
【図３０】アッセイ装置の構成部品の斜視側面図を示している。
【図３１】アッセイ装置の構成部品の上方からの側面図を示している。
【図３２】アッセイ装置の構成部品の側面図を示している。
【図３３】アッセイ装置の構成部品の後面図を示している。
【図３４】アッセイ装置の構成部品の別の側面図を示している。
【図３５】上記のアッセイ装置の平面図を示している。
【図３６】アッセイ装置の構成部品の正面図を示している。
【図３７】アッセイ装置の下方からの平面図を示している。
【図３８Ａ】図３８Ｃの線Ａ−Ａを通る断面を示している。
【図３８Ｂ】アッセイ装置の側面図を示している。
【図３８Ｃ】アッセイ装置の上方からの平面図を示している。
【図３８Ｄ】導入チャネルおよび第１のチャネル部を示している。
【図３８Ｅ】インターフェース・ゾーンを示している。
【図３８Ｆ】インターフェース・ゾーンの断面を示している。
【図３８Ｇ】高くされた環および導入口５２０の断面を示している。
【図３８Ｈ】図３８Ｉの線Ｂ−Ｂを通る断面を示している。
【図３８Ｉ】アッセイ装置の上方からの平面図を示している。
【図３８Ｊ】血液サンプル、バッファ液、および血液：バッファのインターフェースを含むアッセイ装置の下面の斜視図を示している。
【図３９】アッセイ装置を構成する各層の斜視図を示している。
【図４０】図５のアッセイ装置の斜視図を示している。
【図４１】第１のチャネル部における乾燥試薬堆積物の配置を示している。
【図４２】第１のチャネル部に形成された柱を示している。
【図４３】環状のインサートおよび鋭い突起を示している。
【図４４】鋭い突起を示している。
【図４５】毛管圧力の計算を説明する表である。
【図４６】毛管ストップ圧力の計算を説明する表である。
【図４７Ａ】磁石のアッセイ装置に対する典型的な配置を示している。
【図４７Ｂ】磁石のアッセイ装置に対する典型的な配置を示している。
【図４７Ｃ】磁石のアッセイ装置に対する典型的な配置を示している。
【図４７Ｄ】磁石のアッセイ装置に対する典型的な配置を示している。
【図４７Ｅ】磁石のアッセイ装置に対する典型的な配置を示している。
【図４８Ａ】磁石の構成を示している。
【図４８Ｂ】磁石の構成を示している。
【図４８Ｃ】磁石の構成を示している。
【図４９Ａ】オンボード制御の構成を示している。
【図４９Ｂ】オンボード制御の構成を示している。
【図５０Ａ】オンボード制御の構成を示している。
【図５０Ｂ】オンボード制御の構成を示している。
【図５０Ｃ】オンボード制御の構成を示している。
【図５０Ｄ】オンボード制御の構成を示している。
【図５１】０〜２０，０００ｐｇ／ｍｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ（濃度）について、典型的な用量応答曲線を示している。
【図５２】電気化学式ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰアッセイに使用される試薬を示している。
【図５３】１０分、１分、３０秒、および１５秒のターンオーバー時間におけるＨＲＰ滴定データの要約を示している。
【図５４】０、５０００、１０，０００、２０，０００、および４０，０００ｐｇ／ｍｌのＮＴ−ｐｒｏＢＮＰについて、１分、３０秒、１５秒、および５秒のＨＲＰターンオーバー時間におけるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの電気化学アッセイ結果を示している。
【図５５】１５秒のターンオーバー時間におけるＮＴ−ｐｒｏＢＮＰの電気化学アッセイ結果の半対数のプロットを示している。
【図５６Ａ】ＨＲＰターンオーバー時間の延長とＨＲＰ  ＬＯＤの改善との関係を示すＨＲＰ滴定実験の結果を示している。
【図５６Ｂ】ＨＲＰターンオーバー時間の延長とＨＲＰ  ＬＯＤの改善との関係を示すＨＲＰ滴定実験の結果を示している。
【図５７】ＡＢＴＳの電気化学的測定を示している。
【図５８Ａ】湿式および乾式アッセイの結果を示している。
【図５８Ｂ】湿式および乾式アッセイの結果を示している。
【図５９】メータにおけるソフトウェアの実現のための測定アルゴリズムを示している。
【図６０】１０ｍＭのＡＢＴＳおよび１０ｍＭのＨ２Ｏ２を使用し、インキュベーション時間を変化させたときの検出される電気化学的電流への影響の要約を示している。
【図６１】５ｍＭのＡＢＴＳおよび１０ｍＭのＨ２Ｏ２を使用し、インキュベーション時間を変化させたときの検出される電気化学的電流への影響の要約を示している。
【図６２】１０ｍＭのＡＢＴＳおよび１０ｍＭのＨ２Ｏ２を使用し、インキュベーション時間を変化させたときの測定される電気化学的電流への影響を示している。
【図６３】磁気感受性粒子をインターフェースを通って作業電極へと直接的に移動させる効果を、磁気感受性粒子を第２のチャネル部を通って作業電極へと引き寄せる場合と比べて示している。
【図６４】磁気感受性粒子をインターフェースを通って作業電極へと直接的に移動させる効果を、磁気感受性粒子を第２のチャネル部を通って作業電極へと引き寄せる場合と比べて示している。
【図１】
0003157523.tif 000005
【図２】
0003157523.tif 000006
【図３】
0003157523.tif 000007
【図４】
0003157523.tif 000008
【図５】
0003157523.tif 000009
【図６】
0003157523.tif 000010
【図７】
0003157523.tif 000011
【図８】
0003157523.tif 000012
【図９Ａ】
0003157523.tif 000013
【図９Ｂ】
0003157523.tif 000014
【図９Ｃ】
0003157523.tif 000015
【図９Ｄ】
0003157523.tif 000016
【図１０ａ】
0003157523.tif 000017
【図１０ｂ】
0003157523.tif 000018
【図１１Ａ−Ｂ】
0003157523.tif 000019
【図１２】
0003157523.tif 000020
【図１３】
0003157523.tif 000021
【図１４ａ】
0003157523.tif 000022
【図１４ｂ】
0003157523.tif 000023
【図１４ｃ】
0003157523.tif 000024
【図１５ａ】
0003157523.tif 000025
【図１５ｂ】
0003157523.tif 000026
【図１６ａ】
0003157523.tif 000027
【図１６ｂ】
0003157523.tif 000028
【図１７】
0003157523.tif 000029
【図１８】
0003157523.tif 000030
【図２０】
0003157523.tif 000031
【図２１Ａ−Ｂ】
0003157523.tif 000032
【図２２Ａ】
0003157523.tif 000033
【図２２Ｂ】
0003157523.tif 000034
【図２３Ａ−Ｃ】
0003157523.tif 000035
【図２４Ａ】
0003157523.tif 000036
【図２４Ｂ】
0003157523.tif 000037
【図２４Ｃ】
0003157523.tif 000038
【図２４Ｄ−Ｅ】
0003157523.tif 000039
【図２４Ｆ−Ｈ】
0003157523.tif 000040
【図２４Ｉ】
0003157523.tif 000041
【図２４Ｊ】
0003157523.tif 000042
【図２５Ａ】
0003157523.tif 000043
【図２５Ｂ−Ｄ】
0003157523.tif 000044
【図２５Ｅ−Ｇ】
0003157523.tif 000045
【図２５Ｈ−Ｉ】
0003157523.tif 000046
【図２６Ａ】
0003157523.tif 000047
【図２６Ｂ】
0003157523.tif 000048
【図２７】
0003157523.tif 000049
【図２８】
0003157523.tif 000050
【図２９】
0003157523.tif 000051
【図３０】
0003157523.tif 000052
【図３１】
0003157523.tif 000053
【図３２】
0003157523.tif 000054
【図３３】
0003157523.tif 000055
【図３４】
0003157523.tif 000056
【図３５】
0003157523.tif 000057
【図３６】
0003157523.tif 000058
【図３７】
0003157523.tif 000059
【図３８Ａ】
0003157523.tif 000060
【図３８Ｂ】
0003157523.tif 000061
【図３８Ｃ−Ｅ】
0003157523.tif 000062
【図３８Ｆ】
0003157523.tif 000063
【図３８Ｇ】
0003157523.tif 000064
【図３８Ｈ】
0003157523.tif 000065
【図３８Ｉ】
0003157523.tif 000066
【図３８Ｊ】
0003157523.tif 000067
【図３９】
0003157523.tif 000068
【図４０】
0003157523.tif 000069
【図４１】
0003157523.tif 000070
【図４２】
0003157523.tif 000071
【図４３】
0003157523.tif 000072
【図４４】
0003157523.tif 000073
【図４７Ａ】
0003157523.tif 000074
【図４７Ｂ】
0003157523.tif 000075
【図４７Ｃ】
0003157523.tif 000076
【図４７Ｄ】
0003157523.tif 000077
【図４７Ｅ】
0003157523.tif 000078
【図４８Ａ】
0003157523.tif 000079
【図４８Ｂ】
0003157523.tif 000080
【図４８Ｃ】
0003157523.tif 000081
【図５０Ａ】
0003157523.tif 000082
【図５０Ｂ】
0003157523.tif 000083
【図５０Ｃ】
0003157523.tif 000084
【図５０Ｄ】
0003157523.tif 000085
【図５７】
0003157523.tif 000086
【図５９】
0003157523.tif 000087
【図１９】
0003157523.tif 000088
【図４５】
0003157523.tif 000089
【図４６】
0003157523.tif 000090
【図４９Ａ】
0003157523.tif 000091
【図４９Ｂ】
0003157523.tif 000092
【図５１】
0003157523.tif 000093
【図５２】
0003157523.tif 000094
【図５３】
0003157523.tif 000095
【図５４】
0003157523.tif 000096
【図５５】
0003157523.tif 000097
【図５６Ａ】
0003157523.tif 000098
【図５６Ｂ】
0003157523.tif 000099
【図５８Ａ】
0003157523.tif 000100
【図５８Ｂ】
0003157523.tif 000101
【図６０】
0003157523.tif 000102
【図６１】
0003157523.tif 000103
【図６２】
0003157523.tif 000104
【図６３】
0003157523.tif 000105
【図６４】
0003157523.tif 000106
【手続補正書】
【提出日】平成20年12月3日(2008.12.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】実用新案登録請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
ヒトの血液サンプルまたは血漿サンプルを受け取るように構成されており、或る量のヒトの血液または血漿を含んでいるチャネルの第１の部分に流体的に接続している導入口と、
前記第１のチャネル部に配置され、第１の抗ナトリウム利尿ペプチド抗体へと共役した磁気感受性粒子と、酵素ラベルへと共役した第２の抗ナトリウム利尿ペプチド抗体とを含んでいる試薬であって、前記第１のチャネル部に含まれているヒトの血液または血漿が、
前記第１の抗ナトリウム利尿ペプチド抗体および前記第２の抗ナトリウム利尿ペプチド抗体に結合されたナトリウム利尿ペプチドを含んでいる、試薬と、
前記第１の部分にジャンクションにおいて接続された前記チャネルの第２の部分と
を備え、前記ジャンクションの付近に「血液／血漿」対「気体」のインターフェースを有しているマイクロ流体装置であって、
酵素ラベルの基質を含んでいる或る量の第２の液体を含んでおり、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるよう、前記第２の液体をリザーバから放出して前記第２のチャネル部へと送達するように構成されているリザーバと、
前記第２のチャネル部にて、前記第２の液体から電気化学信号を検出するように構成された少なくとも１つの電極と
をさらに備えている、マイクロ流体装置。
【請求項２】
前記チャネルが、前記ジャンクションに、または前記ジャンクションの付近に毛管ストップを有しており、
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部の断面積が、前記第２のチャネル部の断面積よりも小さく、
前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部が、前記第１のチャネル部分の長手軸および前記第２のチャネル部分の長手軸に実質的に直角であり、
前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部が、共通の長手軸を有している、請求項１に記載のマイクロ流体装置。
【請求項３】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、高さｈ１を有し、前記第２のチャネル部が、高さｈ２を有し、ｈ２＞ｈ１であって、比ｈ１：ｈ２が、少なくとも１：２であり、
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、断面積Ａ１を有し、前記第２のチャネル部が、断面積Ａ２を有し、Ａ１＜Ａ２であって、Ａ１：Ａ２の比が、少なくとも１：３であり、
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、幅ｗ２を有し、前記第２のチャネル部が、幅ｗ５を有し、ｗ５＞ｗ２であって、比ｗ２：ｗ５が、少なくとも１：３であり、
前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部の前記ジャンクションの付近において、前記第２のチャネル部のベースが、前記第２の部分のうちの前記ジャンクションから遠い領域であって、高さｈ３を有している領域と、前記第２の部分のうちの前記ジャンクションに隣接する領域であって、高さｈ２を有している領域との間に、勾配を有しており、ｈ２＞ｈ３である、請求項１または２に記載のマイクロ流体装置。
【請求項４】
前記第２のチャネル部の壁が、毛管ストップを有しており、
前記勾配の上縁が、前記毛管ストップの領域または前記毛管ストップに隣接する領域から、前記第２のチャネル部の反対側の壁に向かって、前記第２のチャネル部を横切って延びており、
前記勾配の前記上縁が、前記チャネルを横切って前記ジャンクションに向かって斜めに延びている、請求項１〜３のいずれか一項に記載のマイクロ流体装置。
【請求項５】
前記第２のチャネル部が、前記ジャンクションから遠い第１の領域であって、前記チャネルが幅ｗ６および高さｈ３を有している第１の領域を有しており、
前記第２のチャネル部が、前記第１の領域と前記ジャンクションとの間に形成された先細りのネック領域であって、前記チャネルの幅および高さが前記ジャンクションにおける高さｈ２および幅ｗ５へと増加する先細りのネック領域を有しており、
前記第１のチャネル部が、断面において矩形であって、高さｈ１および幅ｗ２を有しており、ｈ１が少なくとも約０．０６ｍｍであって、ｗ２が少なくとも約１．０ｍｍであり、
前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部の前記ジャンクションにおいて、前記第２のチャネル部が、断面において矩形であり、高さｈ２および幅ｗ５を有しており、ｈ２が少なくとも約０．３５ｍｍであって、ｗ５が少なくとも約９ｍｍであり、
前記第２のチャネル部が、前記ジャンクションからの距離ｄ２において、高さｈ３および幅ｗ６を有しており、ｄ２は、少なくとも約３．５ｍｍであり、
前記第２のチャネル部が、前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部の前記ジャンクションにおいて、高さｈ２および幅ｗ５を有しており、ｈ２＞ｈ３であって、ｗ５＞ｗ６である、請求項１〜４のいずれか一項に記載のマイクロ流体装置。
【手続補正書】
【提出日】平成21年12月1日(2009.12.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】実用新案登録請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
ヒトの血液サンプルまたは血漿サンプルを受け取るように構成されており、気体と或る量のヒトの血液または血漿とを含んでいるチャネルの第１の部分に流体的に接続している導入口と、
前記第１のチャネル部に配置され、第１の抗ナトリウム利尿ペプチド抗体へと共役した磁気感受性粒子と、酵素ラベルへと共役した第２の抗ナトリウム利尿ペプチド抗体とを含んでいる試薬であって、前記第１のチャネル部に含まれているヒトの血液または血漿が、前記第１の抗ナトリウム利尿ペプチド抗体および前記第２の抗ナトリウム利尿ペプチド抗体に結合されたナトリウム利尿ペプチドを含んでいる、試薬と、
前記第１の部分にジャンクションにおいて接続された前記チャネルの第２の部分と
を備え、前記ジャンクションの付近に「血液／血漿」対「気体」のインターフェースを有しているマイクロ流体装置であって、
酵素ラベルの基質を含んでいる或る量の第２の液体を含んでおり、前記第２の液体が前記ジャンクションに向かって流れるよう、前記第２の液体をリザーバから放出して前記第２のチャネル部へと送達するように構成されているリザーバと、
前記第２のチャネル部にて、前記第２の液体から電気化学信号を検出するように構成された少なくとも１つの電極と
をさらに備えている、マイクロ流体装置。
【請求項２】
前記チャネルが、前記ジャンクションに、または前記ジャンクションの付近に毛管ストップを有しており、
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部の断面積が、前記第２のチャネル部の断面積よりも小さく、
前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部が、前記第１のチャネル部分の長手軸および前記第２のチャネル部分の長手軸に実質的に直角であり、
前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部が、共通の長手軸を有している、請求項１に記載のマイクロ流体装置。
【請求項３】
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、高さｈ１を有し、前記第２のチャネル部が、高さｈ２を有し、ｈ２＞ｈ１であって、比ｈ１：ｈ２が、少なくとも１：２であり、
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、断面積Ａ１を有し、前記第２のチャネル部が、断面積Ａ２を有し、Ａ１＜Ａ２であって、Ａ１：Ａ２の比が、少なくとも１：３であり、
前記ジャンクションにおいて、前記第１のチャネル部が、幅ｗ２を有し、前記第２のチャネル部が、幅ｗ５を有し、ｗ５＞ｗ２であって、比ｗ２：ｗ５が、少なくとも１：３であり、
前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部の前記ジャンクションの付近において、前記第２のチャネル部のベースが、前記第２の部分のうちの前記ジャンクションから遠い領域であって、高さｈ３を有している領域と、前記第２の部分のうちの前記ジャンクションに隣接する領域であって、高さｈ２を有している領域との間に、勾配を有しており、ｈ２＞ｈ３である、請求項１または２に記載のマイクロ流体装置。
【請求項４】
前記第２のチャネル部の壁が、毛管ストップを有しており、
前記勾配の上縁が、前記毛管ストップの領域または前記毛管ストップに隣接する領域から、前記第２のチャネル部の反対側の壁に向かって、前記第２のチャネル部を横切って延びており、
前記勾配の前記上縁が、前記チャネルを横切って前記ジャンクションに向かって斜めに延びている、請求項３に記載のマイクロ流体装置。
【請求項５】
前記第２のチャネル部が、前記ジャンクションから遠い第１の領域であって、前記チャネルが幅ｗ６および高さｈ３を有している第１の領域を有しており、
前記第２のチャネル部が、前記第１の領域と前記ジャンクションとの間に形成された先細りのネック領域であって、前記チャネルの幅および高さが前記ジャンクションにおける高さｈ２および幅ｗ５へと増加する先細りのネック領域を有しており、
前記第１のチャネル部が、断面において矩形であって、高さｈ１および幅ｗ２を有しており、ｈ１が少なくとも約０．０６ｍｍであって、ｗ２が少なくとも約１．０ｍｍであり、
前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部の前記ジャンクションにおいて、前記第２のチャネル部が、断面において矩形であり、高さｈ２および幅ｗ５を有しており、ｈ２が少なくとも約０．３５ｍｍであって、ｗ５が少なくとも約９ｍｍであり、
前記第２のチャネル部が、前記ジャンクションからの距離ｄ２において、高さｈ３および幅ｗ６を有しており、ｄ２は、少なくとも約３．５ｍｍであり、
前記第２のチャネル部が、前記第１のチャネル部および前記第２のチャネル部の前記ジャンクションにおいて、高さｈ２および幅ｗ５を有しており、ｈ２＞ｈ３であって、ｗ５＞ｗ６である、請求項１〜４のいずれか一項に記載のマイクロ流体装置。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５３５】
診断メータ４００のさまざまな実施が、記録媒体（例えば、ハードディスクドライブ（ＨＤＤ）、フラッシュメモリ、ビデオカセットレコーダ（ＶＣＲ）テープまたはデジタルビデオディスク（ＤＶＤ）、コンパクトディスク（ＣＤ）、あるいはフロッピー（登録商標）ディスク）に保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。さらに、さまざまな実施が、直接的なケーブル接続、コンピュータ・ネットワーク、無線ネットワーク、衛星ネットワーク、などといった通信媒体を介して、別のコンピュータ・システムに保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７２２】
診断装置１０００のさまざまな実施が、記録媒体（例えば、ハードディスクドライブ（ＨＤＤ）、フラッシュメモリ、ビデオカセットレコーダ（ＶＣＲ）テープまたはデジタルビデオディスク（ＤＶＤ）、コンパクトディスク（ＣＤ）、あるいはフロッピー（登録商標）ディスク）に保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。さらに、さまざまな実施が、直接的なケーブル接続、コンピュータ・ネットワーク、無線ネットワーク、衛星ネットワーク、などといった通信媒体を介して、別のコンピュータ・システムに保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０７７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０７７３】
診断装置１０００のさまざまな実施が、記録媒体（例えば、ハードディスクドライブ（ＨＤＤ）、フラッシュメモリ、ビデオカセットレコーダ（ＶＣＲ）テープまたはデジタルビデオディスク（ＤＶＤ）、コンパクトディスク（ＣＤ）、あるいはフロッピー（登録商標）ディスク）に保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。さらに、さまざまな実施が、直接的なケーブル接続、コンピュータ・ネットワーク、無線ネットワーク、衛星ネットワーク、などといった通信媒体を介して、別のコンピュータ・システムに保存されたプログラムおよび／またはデータにアクセスすることができる。