(57)【要約】トポイソメラーゼ−１阻害薬及びＰＡＲＰ阻害薬の投与を含む、癌を処置するための併用療法が提供される。トポイソメラーゼ−１阻害薬は、腫瘍の外部と比較して、腫瘍内で、トポイソメラーゼ−１阻害薬の長い蓄積を提供するリポソーム製剤として送達することができる。それにより、腫瘍中のトポイソメラーゼ阻害薬の蓄積が、腫瘍の外部よりも十分に大きくなり、併用療法の末梢毒性を低減させながら、腫瘍内のＰＡＲＰ阻害薬及びトポイソメラーゼ阻害薬の有効性の増加をもたらすまで、ＰＡＲＰ阻害薬の投与をリポソーム型イリノテカン製剤の各投与後に遅延させることにより、治療効果を得ることができる。本明細書に開示の療法は、子宮頸癌を含む固形腫瘍を有するヒト癌の処置に有用である。例えば、リポソーム型Ｔｏｐ１阻害薬、例えば、ＭＭ−３９８及びベリパリブの組み合わせで癌患者を処置する方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
固形腫瘍の処置のための抗悪性腫瘍薬療法における、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害薬と組み合わせたリポソーム型イリノテカンの使用であって、前記リポソーム型イリノテカンが、２週毎に１回反復投与され、前記リポソーム型イリノテカンから３日以内に前記ＰＡＲＰ阻害薬を投与することなく、前記ＰＡＲＰ阻害薬が、前記リポソーム型イリノテカンの連続投与の間の３〜１０日間に毎日投与される、前記使用。
【請求項２】
前記ＰＡＲＰ阻害薬が、前記リポソーム型イリノテカンが投与される日の間の連続３日目〜１０日目のそれぞれで投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
固形腫瘍の処置のための抗悪性腫瘍薬療法における、リポソーム型イリノテカン及びポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害薬の使用であって、前記使用が、処置サイクルの１日目及び１５日目に前記リポソーム型イリノテカンを投与すること、ならびにリポソーム型イリノテカンの少なくとも３日後から開始し、かつ追加のリポソーム型イリノテカンの投与の少なくとも１日前に終了する、１日以上において、前記ＰＡＲＰ阻害薬を投与すること、からなる２８日抗悪性腫瘍薬療法処置サイクルを含む、前記使用。
【請求項４】
前記ＰＡＲＰ阻害薬が、リポソーム型イリノテカンの前記投与後の少なくとも３日間投与されない、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
前記ＰＡＲＰ阻害薬が、リポソーム型イリノテカンの次の投与前の少なくとも３日間に投与されない、請求項３〜４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６】
前記ＰＡＲＰ阻害薬が、前記抗悪性腫瘍薬療法処置サイクルの５日目〜１２日目の１日以上で投与される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
前記ＰＡＲＰ阻害薬が、前記抗悪性腫瘍薬療法処置サイクルの１９日目〜２５日目の１日以上で投与される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
前記ＰＡＲＰ阻害薬が、前記抗悪性腫瘍薬療法処置サイクルの３日目〜１２日目の１日以上で投与される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】
前記ＰＡＲＰ阻害薬が、前記抗悪性腫瘍薬療法処置サイクルの１７日目〜２５日目の１日以上で投与される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０】
前記リポソーム型イリノテカンが、２６．８時間のイリノテカン終末相排泄半減期及び３８．０マイクログラム／ｍｌの最大イリノテカン血漿濃度を有する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１】
前記ＰＡＲＰ阻害薬が、前記リポソーム型イリノテカンの前記投与の前または後の３日以内に投与されない、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２】
リポソーム型イリノテカンの各投与が、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１３】
前記ＰＡＲＰ阻害薬の各投与が、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１４】
前記ＰＡＲＰ阻害薬の各投与が、約２０ｍｇ／日〜約４００ｍｇ／日の用量で１日１回または２回投与される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１５】
前記前記ＰＡＲＰ阻害薬が、ニラパリプ、オラパリブ、ベリパリブ、ルカパリブ、及びタラゾパリブからなる群より選択される、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１６】
前記癌が、子宮頸癌、卵巣癌、トリプルネガティブ乳癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、胃癌、膵癌、結腸直腸癌、または神経内分泌癌である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１７】
前記癌が、子宮頸癌であり、かつ前記ＰＡＲＰ阻害薬が、ベリパリブである、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１８】
前記癌が、子宮頸癌であり、かつ前記ＰＡＲＰ阻害薬が、オラパリブである、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１９】
前記リポソーム型イリノテカン及びＰＡＲＰ阻害薬を投与されるべき患者を選択するための造影剤としてのフェルモキシトールの前記使用をさらに含む、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２０】
フェルモキシトールを投与すること、次に、フェルモキシトール投与の２４時間後の前記患者のＭＲＩ画像を得ることをさらに含む、請求項１９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年８月２０日に出願された米国仮特許出願第６２／２０７，７０９号；２０１５年８月２０日に出願された同第６２／２０７，７６０号；２０１５年１２月１８日に出願された同第６２／２６９，７５６号；２０１５年１２月１８日に出願された同第６２／２６９，５１１号；２０１６年４月１５日に出願された同第６２／３２３，４２２号；及び２０１６年３月１６日に出願された同第６２／３０８，９２４号の利益を主張し、この開示は、本明細書に全体として参照により組み込まれる。
【０００２】
本発明は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害薬及びトポイソメラーゼ阻害薬による癌の処置、例えば、イリノテカンリポソーム製剤（ＭＭ−３９８）ならびにＰＡＲＩＰ阻害薬、例えば、ベリパリブの組み合わせによる癌の処置に関する。
【背景技術】
【０００３】
トポイソメラーゼＩ（Ｔｏｐ１）阻害薬は、子宮頸部、卵巣、及び小細胞肺癌のトポテカンならびに結腸直腸癌のイリノテカンについて規制当局の承認を得た抗癌剤として価値があることを証明している。１型トポイソメラーゼは、ＤＮＡ複製及び修復中に１つのＤＮＡ鎖を切断してほどくことを可能にする酵素である。この阻害薬は、ＤＮＡ損傷を誘発するＤＮＡ及びＴｏｐ１の安定な複合体を生成する。Ｔｏｐ１阻害薬の活性を改善する前臨床方策は、細胞死を促進するためにＤＮＡ損傷のレベルを増加させることを目的としている。
【０００４】
ナノリポソーム型イリノテカン（ｎａｌ−ＩＲＩ）は、腫瘍中で細胞周期の感受性が高いＳ期の高い割合の細胞に、イリノテカン及び活性代謝産物ＳＮ−３８の持続的曝露を提供するイリノテカンの高度に安定化されたリポソーム製剤である。Ｎａｌ−ＩＲＩは、癌型の範囲内で有望な前臨床及び臨床活性を示しており、最近、ゲムシタビンベースの治療後の疾患増悪後の膵臓転移性腺癌患者用に５−ＦＵ／ＬＶと組み合わせて米国で承認された。
【０００５】
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害薬は、種々の癌型の処置のために現在開発中の新しいクラスの化学療法剤である。ＰＡＲＰは、ＤＮＡ修復に関与する酵素のファミリーである。修復経路の阻害は、細胞死をもたらす。
【０００６】
ＰＡＲＰ及びＴｏｐ１阻害薬を組み合わせると、インビトロアッセイにおいて相乗的であることが示されている。しかし、ＰＡＲＰ阻害薬及びＴｏｐ１阻害薬の組み合わせの臨床開発は、毒性の増加及び結果としての用量低減に起因して制限されており、それにより、組み合わせの潜在的な臨床的有用性が制限される。例えば、ベリパリブ及びトポテカンの用量漸増試験において、有意な骨髄抑制が見られ、最大耐量は、最初に計画された用量レベルを超過した。ほとんどのＰＡＲＰ阻害薬は、単独療法として単独で現在までに開発されている。
【０００７】
その結果、ＰＡＲＰ阻害薬をＴｏｐ１阻害薬と安全かつ効果的に組み合わせて癌を処置する方法が必要とされている。本開示は、この必要性に対処し、さらなる利益を提供する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は、末梢毒性が低減した、腫瘍にＴｏｐ１阻害薬及びＰＡＲＰ阻害薬の組み合わせを投与する方法を提供する。一態様では、癌、例えば、悪性腫瘍を処置する方法が提供され、この方法は、Ｔｏｐ１阻害薬及びＰＡＲＰ阻害薬の同時投与の１つ以上の例を含む治療レジメンを含み、同時投与の各例は、（ａ）有効量のイリノテカンリポソーム製剤を、それを必要とする患者に投与すること；及び（ｂ）Ｔｏｐ１阻害薬の投与が完了した後に、患者に有効量のＰＡＲＰ阻害薬を投与することを含み、ＰＡＲＰ阻害薬は、Ｔｏｐ１阻害薬及びＰＡＲＰ阻害薬の同時投与と比較して、末梢毒性の低減を可能にする間隔の後に患者に投与される。
【０００９】
本開示は、低減された末梢毒性を有するトポイソメラーゼ阻害薬及びＰＡＲＰ阻害薬を投与することにより癌を処置する方法を提供する。これは、腫瘍外部の部位と比較して、腫瘍においてトポイソメラーゼ阻害薬の蓄積を延長する形態（例えば、リポソーム型イリノテカン）のトポイソメラーゼ阻害薬を投与し、次に、トポイソメラーゼ阻害薬の投与及びＰＡＲＰ阻害薬の投与の間の間隔の後に、患者にＰＡＲＰ阻害薬（複数可）をその後に投与することにより達成することができる。この間隔は、トポイソメラーゼ阻害薬（例えば、イリノテカン及び／またはその代謝産物ＳＮ−３８）が、腫瘍内部よりも広い範囲に腫瘍外部の血漿または組織をクリアランスするのに十分な時間を提供するように選択することができる。好ましくは、間隔は、有効なトポイソメラーゼ−１阻害薬の血漿クリアランス間隔である。本明細書中で使用される場合、用語「有効なトポイソメラーゼ−１阻害薬の血漿クリアランス間隔」（例えば、イリノテカンの血漿クリアランス間隔）は、トポイソメラーゼ−１阻害薬製剤（例えば、リポソーム型イリノテカン）の投与の終了及び１つ以上のＰＡＲＰ阻害薬の投与の開始の間のその間隔であり、時間間隔は、トポイソメラーゼ−１阻害薬（例えば、イリノテカンまたはその活性代謝産物ＳＮ−３８）の、血漿（または末梢組織）からの十分なクリアランスを可能にするように選択されるが、腫瘍に所望の効果（例えば、腫瘍内に局在する複合毒性の増強）を提供するために、有効量のトポイソメラーゼ−１阻害薬（例えば、イリノテカン及び／またはＳＮ３８）が、有効量のＰＡＲＰ阻害薬の後続の投与中の患者内の１つ以上の腫瘍に残留することを可能にする。好ましくは、ＰＡＲＰ阻害薬は、１つ以上の２８日処置サイクルのそれぞれの間の１日目及び１５日目にリポソーム型イリノテカンの投与を完了した後の、３〜５日（例えば、３、４、または５日）のイリノテカンの血漿クリアランス間隔の後に投与される。
【００１０】
本明細書に開示の癌を処置する方法は、固形腫瘍の処置を含む。特定の実施例では、治療される癌は、子宮頸癌、卵巣癌、トリプルネガティブ乳癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、胃癌、膵癌、結腸直腸癌、及び神経内分泌癌からなる群より選択することができる。好ましくは、癌は、子宮頸癌である。
【００１１】
トポイソメラーゼ阻害薬は、リポソーム製剤として提供することができる。好ましくは、トポイソメラーゼ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンである。リポソーム型イリノテカンは、２６．８時間のイリノテカン終末相排泄半減期及び３８．０マイクログラム／ｍｌの最大イリノテカン血漿濃度を提供することができる。いくつかの例では、リポソーム型イリノテカンは、約１１０ｎｍのサイズを有するリン脂質小胞内にカプセル化されたイリノテカンスクロースオクトサルフェートを含むことができる。例えば、リポソーム型イリノテカンは、以前に「ＭＭ−３９８」と称された製品ＯＮＩＶＹＤＥ（登録商標）（イリノテカンリポソーム注射剤）（Ｍｅｒｒｉｍａｃｋ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ．  Ｉｎｃ．、マサチューセッツ州ケンブリッジ）とすることができる。ＰＡＲＰ阻害薬は、ニラパリブ、オラパリブ、ベリパリブ、及びルカパリブ、好ましくは、ベリパリブまたはオラパリブからなる群より選択される１つ以上の化合物を含むことができる。
【００１２】
トポイソメラーゼ−１阻害薬は、好ましくは、リポソーム型イリノテカン（例えばＭＭ−３９８）であり、これは、リポソーム型イリノテカンが投与される日にＰＡＲＰ阻害薬を投与することなく（例えば、次のリポソーム型イリノテカンの投与の１、２、または３日前にＰＡＲＰ阻害薬を投与することなく）、リポソーム型イリノテカンの投与の３〜５日後に開始する各２週間サイクル中に毎日投与されるＰＡＲＰ阻害薬（例えば、ベリパリブ、オラパリブ、ニラパリブ、またはルカパリブ）と組み合わせて、８０ｍｇ／ｍ２（塩）の用量のイリノテカンを２週間毎に１回投与することができる。好ましくは、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンの投与の３日以内（すなわち、３日後でも３日前でもない）に投与されない。
【００１３】
本明細書で提供される癌を処置する具体的な方法は、２週間毎に（例えば、２８日処置サイクルの１日目及び１５日目に）リポソーム型イリノテカンを投与すること、ならびに抗悪性腫瘍薬療法中に、他の抗悪性腫瘍薬を投与することなく、リポソーム型イリノテカンの各投与の少なくとも３日（例えば、３、４、または５日）後に開始して、１日以上（例えば、７〜９日）の間、１日１回以上（例えば、１日２回）、ＰＡＲＰ阻害薬を投与することからなる抗悪性腫瘍薬療法を投与することを含む。例えば、１つの抗腫瘍治療は、１日目及び１５日目にＯＮＩＶＹＤＥ／ＭＭ−３９８リポソーム型イリノテカン（遊離塩基）７０ｍｇ／ｍ２を投与すること、ならびに処置サイクルの５日目〜１２日目及び１９日目〜２５日目の各日に治療的有効量のＰＡＲＰ阻害薬（例えば、ベリパリブの場合、１日２回５０〜４００ｍｇ）を投与することからなる２８日処置サイクルであり、他の抗悪性腫瘍薬は、処置サイクル中に投与される。別の抗腫瘍療法は、１日目及び１５日目に、７０ｍｇ／ｍ２のＯＮＩＶＹＤＥ／ＭＭ−３９８リポソーム型イリノテカン（遊離塩基）を投与すること、ならびに処置サイクルの３日目〜１２日目及び１７日目〜２５日目の各日で、治療的有効量のＰＡＲＰ阻害薬（例えば、ベリパリブの場合、１日２回５０〜４００ｍｇ）を投与することからなる２８日処置サイクルであり、他の抗悪性腫瘍薬は、処置サイクル中に投与されない。
【００１４】
一部の実施形態では、リポソーム型イリノテカン及びＰＡＲＰ阻害薬を、固形腫瘍の処置のための抗悪性腫瘍薬療法において組み合わせることができ、これは、処置サイクルの１日目及び１５日目にリポソーム型イリノテカンを投与すること、ならびにリポソーム型イリノテカンの少なくとも３日後から開始し、かつ追加のリポソーム型イリノテカンの投与の少なくとも１日前に終了する１日以上において、ＰＡＲＰ阻害薬を投与することからなる２８日抗悪性腫瘍薬療法処置サイクルを含む。一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンの投与後の少なくとも３日間に投与されない。例えば、ＰＡＲＰ阻害薬は、抗悪性腫瘍薬療法の処置サイクルの５日目〜１２日目の１日以上で投与し、抗悪性腫瘍薬療法の処置サイクルの１９日目〜２５日目の１日以上で投与することができる。一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、抗悪性腫瘍薬療法の処置サイクルの３日目〜１２日目の１日以上で投与され、抗悪性腫瘍薬療法の処置サイクルの１７日目〜２５日目の１日以上で投与される。一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンの投与前または後の３日以内には投与されない。さらに、治療的有効用量のトポイソメラーゼ阻害薬及びＰＡＲＰ阻害薬化合物は、本明細書に提供される。一部の実施形態では、リポソーム型イリノテカンの各投与は、ＯＮＩＶＹＤＥ／ＭＭ−３９８の８０ｍｇ／ｍ２（塩）の用量で投与される。一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬の各投与は、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される。ＰＡＲＰ阻害薬の各投与は、約２０ｍｇ／日〜約４００ｍｇ／日の用量で、１日１回または２回投与することができる。
【００１５】
任意の特定の動作理論に束縛されることを望むものではないが、このような間隔は、Ｔｏｐ１阻害薬（例えば、イリノテカン及びＳＮ−３８のいずれかまたは両方）の、血漿からの十分なクリアランスの時間が、Ｔｏｐ１阻害薬及びＰＡＲＰ阻害薬の組み合わせの相乗的な毒性効果に起因する末梢毒性を回避することを可能にする一方、所望の相乗的治療効果を有する、後続のＰＡＲＰ阻害薬投与のために、有効量のＴｏｐ１阻害薬が、患者内の１つ以上の腫瘍に残留することを可能にすると考えられる。
【００１６】
本処置レジメンは、単剤処置と比較した組み合わせの有効性の増加；副作用の低減を含み得る１つ以上の属性を提供して、ＰＡＲＰ阻害薬及び非リポソーム型Ｔｏｐ１阻害薬の組み合わせの投与と比較してより高い用量で薬物を投与する。
【００１７】
さらなる態様は、患者に既存の標準的なケア療法を提供することを含み、これは、適切な単剤による処置を含んでも含まなくてもよい。一部の場合では、標準的なケアは、ＰＡＲＰ阻害薬化合物の投与を含んでもよい。
【００１８】
従って、一態様では、本開示は、癌患者及び腫瘍を有する患者を処置する方法を提供し、この方法は、
ｉ．有効量のイリノテカンリポソーム製剤を患者に非経口的に（例えば、静脈内に）投与すること；及び
ｉｉ．有効量のＰＡＲＰ阻害薬を患者に投与すること
を含み、ＰＡＲＰ阻害薬は、有効なイリノテカンの血漿クリアランス間隔の後に投与される。
【００１９】
本明細書中に開示されるように、ＰＡＲＰ阻害薬の投与は、癌性腫瘍の処置を可能にするために、リポソーム型イリノテカンの投与後の一定期間にリポソーム型イリノテカンを投与した後に遅延させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１Ａ】トポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ−３８及び種々のＰＡＲＰ阻害薬で処置したＭＥ−１８０ヒト子宮頸癌細胞の細胞生存率のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図１Ｂ】トポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ−３８及び種々のＰＡＲＰ阻害薬で処置したＭＳ−７５１ヒト子宮頸癌細胞の細胞生存率のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図１Ｃ】トポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ−３８及び種々のＰＡＲＰ阻害薬で処置したＣ−３３Ａヒト子宮頸癌細胞の細胞生存率のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図１Ｄ】トポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ−３８及び種々のＰＡＲＰ阻害薬で処置したＳＷ７５６ヒト子宮頸癌細胞の細胞生存率のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図１Ｅ】トポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ−３８及び種々のＰＡＲＰ阻害薬で処置したＳｉＨａヒト子宮頸癌細胞の細胞生存率のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図２Ａ】トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＤＭＳ−１１４小細胞肺癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図２Ｂ】トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＮＣＩ−Ｈ１０４８小細胞肺癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図２Ｃ】トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＣＦＰＡＣ−１膵癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図２Ｄ】トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＢｘＰＣ−３膵癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図２Ｅ】トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＭＤＡ−ＭＢ−２３１トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図３Ａ】トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＢＴ−２０トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）癌細胞の細胞生存のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図３Ｂ】トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＨＣＣ３８トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）癌細胞の細胞生存のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【図４Ａ】図４Ａ及びＢは、他の器官と比較して、ＭＭ−３９８投与後の腫瘍において見られるＳＮ−３８の長い蓄積を示すグラフである。（Ａ）ＨＴ−２９結腸直腸癌（ＣＲＣ）腫瘍異種移植片を有するマウスに、２０ｍｇ／ｋｇの用量のＭＭ−３９８を静脈内（ＩＶ）注射し、単回注射後に、組織試料を種々の時点（１、４、８、２４、４８、７２、１６８時間）で収集した。ＨＰＬＣ分析を使用して、これらの試料中のＳＮ−３８のレベルを測定した。（Ｂ）２０ｍｇ／ｋｇのＭＭ−３９８の後の腫瘍及び正常組織におけるＳＮ−３８の薬物動態学的プロファイルから、１２０ｎｍｏｌ／Ｌの閾値を超えるＳＮ−３８の持続の時間を計算した。
【図４Ｂ】図４Ａ及びＢは、他の器官と比較して、ＭＭ−３９８投与後の腫瘍において見られるＳＮ−３８の長い蓄積を示すグラフである。（Ａ）ＨＴ−２９結腸直腸癌（ＣＲＣ）腫瘍異種移植片を有するマウスに、２０ｍｇ／ｋｇの用量のＭＭ−３９８を静脈内（ＩＶ）注射し、単回注射後に、組織試料を種々の時点（１、４、８、２４、４８、７２、１６８時間）で収集した。ＨＰＬＣ分析を使用して、これらの試料中のＳＮ−３８のレベルを測定した。（Ｂ）２０ｍｇ／ｋｇのＭＭ−３９８の後の腫瘍及び正常組織におけるＳＮ−３８の薬物動態学的プロファイルから、１２０ｎｍｏｌ／Ｌの閾値を超えるＳＮ−３８の持続の時間を計算した。
【図５Ａ】図５Ａ〜５Ｄは、マウスＨＴ−２９結腸直腸癌（ＣＲＣ）の異種移植試験におけるＭＭ−３９８ＰＫパラメータを示すグラフである。種々の用量のＭＭ−３９８または遊離イリノテカンのＩＶ注射後の血漿ＣＰＴ−１１レベル（Ａ）またはＳＮ−３８レベル（Ｂ）。同等の用量の遊離イリノテカン（赤色）またはＭＭ−３９８（青色）のいずれかを投与した後の種々の時点で、腫瘍ＣＰＴ−１１レベル（Ｃ）またはＳＮ−３８レベル（Ｄ）を計算した。ＨＰＬＣ分析を使用して、これらの試料中のＣＰＴ−１１及びその代謝産物ＳＮ−３８のレベルを測定した。
【図５Ｂ】図５Ａ〜５Ｄは、マウスＨＴ−２９結腸直腸癌（ＣＲＣ）の異種移植試験におけるＭＭ−３９８ＰＫパラメータを示すグラフである。種々の用量のＭＭ−３９８または遊離イリノテカンのＩＶ注射後の血漿ＣＰＴ−１１レベル（Ａ）またはＳＮ−３８レベル（Ｂ）。同等の用量の遊離イリノテカン（赤色）またはＭＭ−３９８（青色）のいずれかを投与した後の種々の時点で、腫瘍ＣＰＴ−１１レベル（Ｃ）またはＳＮ−３８レベル（Ｄ）を計算した。ＨＰＬＣ分析を使用して、これらの試料中のＣＰＴ−１１及びその代謝産物ＳＮ−３８のレベルを測定した。
【図５Ｃ】図５Ａ〜５Ｄは、マウスＨＴ−２９結腸直腸癌（ＣＲＣ）の異種移植試験におけるＭＭ−３９８ＰＫパラメータを示すグラフである。種々の用量のＭＭ−３９８または遊離イリノテカンのＩＶ注射後の血漿ＣＰＴ−１１レベル（Ａ）またはＳＮ−３８レベル（Ｂ）。同等の用量の遊離イリノテカン（赤色）またはＭＭ−３９８（青色）のいずれかを投与した後の種々の時点で、腫瘍ＣＰＴ−１１レベル（Ｃ）またはＳＮ−３８レベル（Ｄ）を計算した。ＨＰＬＣ分析を使用して、これらの試料中のＣＰＴ−１１及びその代謝産物ＳＮ−３８のレベルを測定した。
【図５Ｄ】図５Ａ〜５Ｄは、マウスＨＴ−２９結腸直腸癌（ＣＲＣ）の異種移植試験におけるＭＭ−３９８ＰＫパラメータを示すグラフである。種々の用量のＭＭ−３９８または遊離イリノテカンのＩＶ注射後の血漿ＣＰＴ−１１レベル（Ａ）またはＳＮ−３８レベル（Ｂ）。同等の用量の遊離イリノテカン（赤色）またはＭＭ−３９８（青色）のいずれかを投与した後の種々の時点で、腫瘍ＣＰＴ−１１レベル（Ｃ）またはＳＮ−３８レベル（Ｄ）を計算した。ＨＰＬＣ分析を使用して、これらの試料中のＣＰＴ−１１及びその代謝産物ＳＮ−３８のレベルを測定した。
【図６Ａ】図６Ａ〜６Ｄは、種々の癌モデルにおけるＭＭ−３９８の有効性を示すグラフである。癌細胞をマウスの皮下に移植した。腫瘍が十分に確立され、平均体積が２００ｍｍ３に達した時に、遊離イリノテカン、ＭＭ−３９８、または対照による処置ＩＶを開始した。各試験に使用された遊離及びナノリポソーム型イリノテカンの用量を上に示し、投与時点は矢印で示す。（Ａ）対照（ｏ）、薬物不含ビヒクル、及びリポソーム不含ビヒクルのみ；遊離ＣＰＴ−１１（黒丸）；またはナノリポソームＣＰＴ−１１（黒四角）で処置したＢＴ４７４乳癌モデル。（Ｂ）対照（黒色）またはＭＭ−３９８（青色）で処置したＯＶＣＡＲ８卵巣癌モデル。（Ｃ）対照（黒色）、遊離イリノテカン（赤色）、またはＭＭ−３９８（青色）で処置したＨＴ−２９ＣＲＣモデル。（Ｄ）対照（ＰＢＳ、黒色）、遊離イリノテカン（赤色）、またはＭＭ−３９８（青色）を投与した同所性膵腫瘍異種移植モデル。
【図６Ｂ】図６Ａ〜６Ｄは、種々の癌モデルにおけるＭＭ−３９８の有効性を示すグラフである。癌細胞をマウスの皮下に移植した。腫瘍が十分に確立され、平均体積が２００ｍｍ３に達した時に、遊離イリノテカン、ＭＭ−３９８、または対照による処置ＩＶを開始した。各試験に使用された遊離及びナノリポソーム型イリノテカンの用量を上に示し、投与時点は矢印で示す。（Ａ）対照（ｏ）、薬物不含ビヒクル、及びリポソーム不含ビヒクルのみ；遊離ＣＰＴ−１１（黒丸）；またはナノリポソームＣＰＴ−１１（黒四角）で処置したＢＴ４７４乳癌モデル。（Ｂ）対照（黒色）またはＭＭ−３９８（青色）で処置したＯＶＣＡＲ８卵巣癌モデル。（Ｃ）対照（黒色）、遊離イリノテカン（赤色）、またはＭＭ−３９８（青色）で処置したＨＴ−２９ＣＲＣモデル。（Ｄ）対照（ＰＢＳ、黒色）、遊離イリノテカン（赤色）、またはＭＭ−３９８（青色）を投与した同所性膵腫瘍異種移植モデル。
【図６Ｃ】図６Ａ〜６Ｄは、種々の癌モデルにおけるＭＭ−３９８の有効性を示すグラフである。癌細胞をマウスの皮下に移植した。腫瘍が十分に確立され、平均体積が２００ｍｍ３に達した時に、遊離イリノテカン、ＭＭ−３９８、または対照による処置ＩＶを開始した。各試験に使用された遊離及びナノリポソーム型イリノテカンの用量を上に示し、投与時点は矢印で示す。（Ａ）対照（ｏ）、薬物不含ビヒクル、及びリポソーム不含ビヒクルのみ；遊離ＣＰＴ−１１（黒丸）；またはナノリポソームＣＰＴ−１１（黒四角）で処置したＢＴ４７４乳癌モデル。（Ｂ）対照（黒色）またはＭＭ−３９８（青色）で処置したＯＶＣＡＲ８卵巣癌モデル。（Ｃ）対照（黒色）、遊離イリノテカン（赤色）、またはＭＭ−３９８（青色）で処置したＨＴ−２９ＣＲＣモデル。（Ｄ）対照（ＰＢＳ、黒色）、遊離イリノテカン（赤色）、またはＭＭ−３９８（青色）を投与した同所性膵腫瘍異種移植モデル。
【図６Ｄ】図６Ａ〜６Ｄは、種々の癌モデルにおけるＭＭ−３９８の有効性を示すグラフである。癌細胞をマウスの皮下に移植した。腫瘍が十分に確立され、平均体積が２００ｍｍ３に達した時に、遊離イリノテカン、ＭＭ−３９８、または対照による処置ＩＶを開始した。各試験に使用された遊離及びナノリポソーム型イリノテカンの用量を上に示し、投与時点は矢印で示す。（Ａ）対照（ｏ）、薬物不含ビヒクル、及びリポソーム不含ビヒクルのみ；遊離ＣＰＴ−１１（黒丸）；またはナノリポソームＣＰＴ−１１（黒四角）で処置したＢＴ４７４乳癌モデル。（Ｂ）対照（黒色）またはＭＭ−３９８（青色）で処置したＯＶＣＡＲ８卵巣癌モデル。（Ｃ）対照（黒色）、遊離イリノテカン（赤色）、またはＭＭ−３９８（青色）で処置したＨＴ−２９ＣＲＣモデル。（Ｄ）対照（ＰＢＳ、黒色）、遊離イリノテカン（赤色）、またはＭＭ−３９８（青色）を投与した同所性膵腫瘍異種移植モデル。
【図７Ａ】図７Ａ及び７Ｂは、第ＩＩ相臨床試験のＰＫ分析を示すグラフである。胃癌患者は、３週間毎に、１２０ｍｇ／ｍ２の用量のＭＭ−３９８（濃い灰色の線）または３００ｍｇ／ｍ２の用量の遊離イリノテカン（明るい灰色線）のいずれかを投与された。ＣＰＴ−１１（Ａ）及びその活性代謝産物ＳＮ−３８（Ｂ）をサイクル１中に測定した。図７Ｃ〜７Ｅは、腫瘍組織におけるＳＮ−３８の局所活性化及び蓄積についての臨床所見を示す。（Ｃ）ｎａｌ−ＩＲＩの機序的腫瘍ＰＫモデルは、血漿と比較して、腫瘍において、より高いＳＮ−３８レベルを予測した。進行した固形腫瘍を有する患者（ｎ＝１２）の第Ｉ相試験から収集された実際のデータの範囲は、黒色（腫瘍）または灰色（血漿）の縦棒で示す。ＭＭ−３９８注入の７２時間後に収集した患者の腫瘍（黒色）及び血漿（灰色）試料から測定した場合の（Ｄ）ＣＰＴ−１１レベル及び（Ｅ）ＳＮ−３８レベル。
【図７Ｂ】図７Ａ及び７Ｂは、第ＩＩ相臨床試験のＰＫ分析を示すグラフである。胃癌患者は、３週間毎に、１２０ｍｇ／ｍ２の用量のＭＭ−３９８（濃い灰色の線）または３００ｍｇ／ｍ２の用量の遊離イリノテカン（明るい灰色線）のいずれかを投与された。ＣＰＴ−１１（Ａ）及びその活性代謝産物ＳＮ−３８（Ｂ）をサイクル１中に測定した。図７Ｃ〜７Ｅは、腫瘍組織におけるＳＮ−３８の局所活性化及び蓄積についての臨床所見を示す。（Ｃ）ｎａｌ−ＩＲＩの機序的腫瘍ＰＫモデルは、血漿と比較して、腫瘍において、より高いＳＮ−３８レベルを予測した。進行した固形腫瘍を有する患者（ｎ＝１２）の第Ｉ相試験から収集された実際のデータの範囲は、黒色（腫瘍）または灰色（血漿）の縦棒で示す。ＭＭ−３９８注入の７２時間後に収集した患者の腫瘍（黒色）及び血漿（灰色）試料から測定した場合の（Ｄ）ＣＰＴ−１１レベル及び（Ｅ）ＳＮ−３８レベル。
【図７Ｃ】図７Ａ及び７Ｂは、第ＩＩ相臨床試験のＰＫ分析を示すグラフである。胃癌患者は、３週間毎に、１２０ｍｇ／ｍ２の用量のＭＭ−３９８（濃い灰色の線）または３００ｍｇ／ｍ２の用量の遊離イリノテカン（明るい灰色線）のいずれかを投与された。ＣＰＴ−１１（Ａ）及びその活性代謝産物ＳＮ−３８（Ｂ）をサイクル１中に測定した。図７Ｃ〜７Ｅは、腫瘍組織におけるＳＮ−３８の局所活性化及び蓄積についての臨床所見を示す。（Ｃ）ｎａｌ−ＩＲＩの機序的腫瘍ＰＫモデルは、血漿と比較して、腫瘍において、より高いＳＮ−３８レベルを予測した。進行した固形腫瘍を有する患者（ｎ＝１２）の第Ｉ相試験から収集された実際のデータの範囲は、黒色（腫瘍）または灰色（血漿）の縦棒で示す。ＭＭ−３９８注入の７２時間後に収集した患者の腫瘍（黒色）及び血漿（灰色）試料から測定した場合の（Ｄ）ＣＰＴ−１１レベル及び（Ｅ）ＳＮ−３８レベル。
【図７Ｄ】図７Ａ及び７Ｂは、第ＩＩ相臨床試験のＰＫ分析を示すグラフである。胃癌患者は、３週間毎に、１２０ｍｇ／ｍ２の用量のＭＭ−３９８（濃い灰色の線）または３００ｍｇ／ｍ２の用量の遊離イリノテカン（明るい灰色線）のいずれかを投与された。ＣＰＴ−１１（Ａ）及びその活性代謝産物ＳＮ−３８（Ｂ）をサイクル１中に測定した。図７Ｃ〜７Ｅは、腫瘍組織におけるＳＮ−３８の局所活性化及び蓄積についての臨床所見を示す。（Ｃ）ｎａｌ−ＩＲＩの機序的腫瘍ＰＫモデルは、血漿と比較して、腫瘍において、より高いＳＮ−３８レベルを予測した。進行した固形腫瘍を有する患者（ｎ＝１２）の第Ｉ相試験から収集された実際のデータの範囲は、黒色（腫瘍）または灰色（血漿）の縦棒で示す。ＭＭ−３９８注入の７２時間後に収集した患者の腫瘍（黒色）及び血漿（灰色）試料から測定した場合の（Ｄ）ＣＰＴ−１１レベル及び（Ｅ）ＳＮ−３８レベル。
【図７Ｅ】図７Ａ及び７Ｂは、第ＩＩ相臨床試験のＰＫ分析を示すグラフである。胃癌患者は、３週間毎に、１２０ｍｇ／ｍ２の用量のＭＭ−３９８（濃い灰色の線）または３００ｍｇ／ｍ２の用量の遊離イリノテカン（明るい灰色線）のいずれかを投与された。ＣＰＴ−１１（Ａ）及びその活性代謝産物ＳＮ−３８（Ｂ）をサイクル１中に測定した。図７Ｃ〜７Ｅは、腫瘍組織におけるＳＮ−３８の局所活性化及び蓄積についての臨床所見を示す。（Ｃ）ｎａｌ−ＩＲＩの機序的腫瘍ＰＫモデルは、血漿と比較して、腫瘍において、より高いＳＮ−３８レベルを予測した。進行した固形腫瘍を有する患者（ｎ＝１２）の第Ｉ相試験から収集された実際のデータの範囲は、黒色（腫瘍）または灰色（血漿）の縦棒で示す。ＭＭ−３９８注入の７２時間後に収集した患者の腫瘍（黒色）及び血漿（灰色）試料から測定した場合の（Ｄ）ＣＰＴ−１１レベル及び（Ｅ）ＳＮ−３８レベル。
【図８】マウスにおけるＭＭ−３９８＋ベリパリブの組み合わせの耐量試験を示す。全てのマウスに、ベリパリブを１日目に週１回１回長期投与し、続いて、２〜４日目（Ａ）、３〜５日目（Ｂ）、４〜６日目（Ｃ）、のいずれかに連続３日間投与した。マウスを毎日体重測定し、％体重増加をＹ軸上に示した。体重減少は、その組み合わせの不耐性を示している。より詳細には、図８Ａは、リポソーム型イリノテカン（週１回、１５ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、または５０ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８（塩））を投与し、続いて、ＭＭ−３９８投与後２、３、及び４日目に、５０ｍｇ／ｋｇのベリパリブを毎日投与した後の体重の％変化を測定したマウス忍容性試験の結果を示すグラフである。図８Ｂは、異なる用量のリポソーム型イリノテカン（週１回、１５ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、または５０ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８（塩））を投与し、続いて、ＭＭ−３９８投与後３、４、及び５日目に、５０ｍｇ／ｋｇのベリパリブを毎日投与した後の体重の％変化を測定したマウス忍容性試験の結果を示すグラフである。図８Ｃは、異なる用量のリポソーム型イリノテカン（週１回、１５ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、または５０ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８（塩））を投与し、続いて、ＭＭ−３９８投与後４、５、及び６日目に、５０ｍｇ／ｋｇのベリパリブを毎日投与した後の体重の％変化を測定したマウス忍容性試験の結果を示すグラフである。
【図９】異なる群について種々の投与スケジュールを用いて、単独療法として、または固定用量のＭＭ−３９８及び変動する用量のオラパリブを使用する組み合わせで、ＭＭ−３９８及びオラパリブを比較するマウス忍容性試験デザインのグラフ表示である。
【図１０Ａ】図１０Ａ〜１０Ｄは、リポソーム型イリノテカン（１０ｍｇ／ｋｇ）、オラパリブ単独、及びＭＭ−３９８の異なる投与スケジュールのオラパリブとの組み合わせを投与した後に体重の％変化を測定したマウス忍容性試験の結果を示す一連のグラフである。
【図１０Ｂ】図１０Ａ〜１０Ｄは、リポソーム型イリノテカン（１０ｍｇ／ｋｇ）、オラパリブ単独、及びＭＭ−３９８の異なる投与スケジュールのオラパリブとの組み合わせを投与した後に体重の％変化を測定したマウス忍容性試験の結果を示す一連のグラフである。
【図１０Ｃ】図１０Ａ〜１０Ｄは、リポソーム型イリノテカン（１０ｍｇ／ｋｇ）、オラパリブ単独、及びＭＭ−３９８の異なる投与スケジュールのオラパリブとの組み合わせを投与した後に体重の％変化を測定したマウス忍容性試験の結果を示す一連のグラフである。
【図１０Ｄ】図１０Ａ〜１０Ｄは、リポソーム型イリノテカン（１０ｍｇ／ｋｇ）、オラパリブ単独、及びＭＭ−３９８の異なる投与スケジュールのオラパリブとの組み合わせを投与した後に体重の％変化を測定したマウス忍容性試験の結果を示す一連のグラフである。
【図１１Ａ】ＭＭ−３９８＋ベリパリブの組み合わせが相乗的であることを示す。２つの異なる子宮頸癌異種移植モデルを利用して、１日目に週に１回投与したＭＭ−３９８（青色矢印）、毎週４日目〜６日目に連続３日間、１日１回、経口的に５０ｍｇ／ｋｇで投与したベリパリブ、または組み合わせた単剤処置と同じスケジュールで投与した組み合わせの有効性を試験した。（Ａ）５ｍｇ／ｋｇで投与したＭＭ−３９８を使用したＭＳ７５１子宮頸癌異種移植モデル及び（Ｂ）２ｍｇ／ｋｇで投与したＭＭ−３９８を使用したＣ３３Ａ子宮頸癌異種移植モデル。
【図１１Ｂ】ＭＭ−３９８＋ベリパリブの組み合わせが相乗的であることを示す。２つの異なる子宮頸癌異種移植モデルを利用して、１日目に週に１回投与したＭＭ−３９８（青色矢印）、毎週４日目〜６日目に連続３日間、１日１回、経口的に５０ｍｇ／ｋｇで投与したベリパリブ、または組み合わせた単剤処置と同じスケジュールで投与した組み合わせの有効性を試験した。（Ａ）５ｍｇ／ｋｇで投与したＭＭ−３９８を使用したＭＳ７５１子宮頸癌異種移植モデル及び（Ｂ）２ｍｇ／ｋｇで投与したＭＭ−３９８を使用したＣ３３Ａ子宮頸癌異種移植モデル。
【図１２Ａ】下限を調整した、ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８のインビボ忍容性の結果を示し、バーはＳＥＭである。特に、ＭＭ−３９８の投与後１日目、２日目、３日目、または２日目、３日目、４日目、または３日目、４日目、５日目に与えられた５０ｍｇ／ｋｇのベリパリブと組み合わせた５０ｍｇ／ｋｇの用量のＭＭ−３９８のインビボ忍容性を示す。
【図１２Ｂ】ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８のインビボ忍容性の結果を示す。特に、ＭＭ−３９８の投与後１日目、２日目、３日目、または２日目、３日目、４日目、または３日目、４日目、５日目に与えられた２８ｍｇ／ｋｇのベリパリブと組み合わせた５０ｍｇ／ｋｇの用量のＭＭ−３９８のインビボ忍容性を示す。
【図１３Ａ】ＭＭ−３９８（ｎａｌ−ＩＲＩ）投与の７２時間後に、ベリパリブを投与したＭＳ７５１異種移植モデルにおける、ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８の抗腫瘍有効性を示す。特に、グラフは、ＭＭ３９８の投与後から３日目〜５日目に、リポソーム型イリノテカン（５ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８）及び／またはＰＡＲＰ阻害薬ベリパリブ（５０ｍｐｋ）で処置したマウスモデルにおいてＭＳ７５１子宮頸癌細胞を使用したマウス異種移植試験のデータを示す。
【図１３Ｂ】ＭＳ７５１異種移植片モデルにおいてベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８の、動物の生存への効果を示す。特に、グラフは、ＭＭ３９８の投与後から３日目〜５日目に、リポソーム型イリノテカン（５ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８）及び／またはＰＡＲＰ阻害薬ベリパリブ（５０ｍｐｋ）で処置したマウスモデルにおいてＭＳ７５１子宮頸癌細胞を使用したマウス異種移植試験の生存データを示す。
【図１３Ｃ】ＭＳ７５１異種移植モデルにおけるベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８の体重への効果を示す。ＭＭ−３９８（ｎａｌ−ＩＲＩ）の投与の７２時間後に、ベリパリブを投与した。特に、グラフは、ＭＭ３９８の投与から３日目〜５日目に、リポソーム型イリノテカン（５ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８）及び／またはＰＡＲＰ阻害薬ベリパリブ（５０ｍｐｋ）で処置したＭＳ７５１異種移植マウスモデルにおける、ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８の効果を示す。
【図１４】Ｃ３３Ａ異種移植モデルにおける、ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８の抗腫瘍有効性を示す。ＭＭ−３９８（ｎａｌ−ＩＲＩ）の投与の７２時間後に、ベリパリブを投与した。Ｃ３３子宮頸癌細胞を使用したマウス異種移植試験は、ＭＭ３９８の投与後から３〜５日目に、リポソーム型イリノテカン（２ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８）及び／またはＰＡＲＰ阻害薬ベリパリブ（５０ｍｐｋ）で処置したマウスモデルにおける試験である。
【図１５】Ｃ３３Ａ異種移植モデルにおける、ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８の動物の生存への効果を示す。Ｃ３３子宮頸癌細胞を使用したマウス異種移植試験では、マウスモデルは、ＭＭ３９８の投与後から３〜５日目に、リポソーム型イリノテカン（５ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８）及び／またはＰＡＲＰ阻害薬ベリパリブ（５０ｍｐｋ）で処置した。
【図１６】Ｃ３３Ａ異種移植モデルにおける、ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８の体重への効果を示す。ＭＭ−３９８（ｎａｌ−ＩＲＩ）の投与の７２時間後に、ベリパリブを投与した。ＭＭ３９８の投与後の３日目〜５日目の（５ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８）及び／またはＰＡＲＰ阻害薬ベリパリブ（５０ｍｐｋ）。
【図１７Ａ】図１７Ａ及び１７Ｂは、子宮頸部モデルにおけるＳＮ−３８のインビトロ活性（Ａ）及び腫瘍含有量（Ｂ）を示す。（Ａ）子宮頸部細胞株を、同時またはベリパリブがＳＮ−３８の２４時間後に添加されたスケジューリングのいずれかで、ベリパリブ及びＳＮ−３８で処置し、ＣＴＧアッセイを使用して、細胞生存率を測定した。複数の子宮頸癌細胞株について、インビトロ活性（ＩＣ５０）を測定する。（Ｂ）子宮頸部腫瘍を持つヌードマウスに、１０ｍｇ／ｋｇのｎａｌ−ＩＲＩの単回用量を注射し、ＣＰＴ−１１及びＳＮ−３８の腫瘍含有量を、ＬＣ−ＭＳで測定した。
【図１７Ｂ】図１７Ａ及び１７Ｂは、子宮頸部モデルにおけるＳＮ−３８のインビトロ活性（Ａ）及び腫瘍含有量（Ｂ）を示す。（Ａ）子宮頸部細胞株を、同時またはベリパリブがＳＮ−３８の２４時間後に添加されたスケジューリングのいずれかで、ベリパリブ及びＳＮ−３８で処置し、ＣＴＧアッセイを使用して、細胞生存率を測定した。複数の子宮頸癌細胞株について、インビトロ活性（ＩＣ５０）を測定する。（Ｂ）子宮頸部腫瘍を持つヌードマウスに、１０ｍｇ／ｋｇのｎａｌ−ＩＲＩの単回用量を注射し、ＣＰＴ−１１及びＳＮ−３８の腫瘍含有量を、ＬＣ−ＭＳで測定した。
【図１８】ＭＭ−３９８（ｎａｌ−ＩＲＩ）及びベリパリブの組み合わせを用いる第Ｉ相試験デザインのグラフ表示である。プライマリエンドポイント読み取りは、ＭＴＤ／ＲＰ２Ｄを同定するためのものであり、セカンダリーエンドポイント読み取りは、ＡＥプロファイル、ＰＫパラメータ、ならびにナノ粒子腫瘍送達及び有効性を測定するための処置前ＭＲＩを含むバイオマーカー分析である。
【図１９Ａ】ＦＭＸ  ＭＲＩが、ＭＭ−３９８の腫瘍奏効の予測ツールであり得ることを示す。（Ａ）ＭＭ−３９８及びＦＭＸは、１）拡張ＰＫ、２）ＥＰＲ効果（すなわち、漏出性脈管構造）を介して腫瘍組織に沈着する能力、及び３）マクロファージによる取り込みを含む類似の特性を有する。従って、ＭＲＩでのＦＭＸの視覚化は、ＭＭ−３９８の沈着を予測することができ得る。図１９Ａは、リポソーム型イリノテカン（例えば、ＭＭ−３９８）での癌処置のための予測バイオマーカーとしてのフェルモキシトール（ＦＭＸ）の使用を示す略図である。（Ｂ）ＦＭＸ注射の２４時間後に得られたＭＲ画像からの標準曲線を使用して、個々の患者病変のＦＭＸ濃度を算出した。（Ｃ）２４時間での病変からのＦＭＸシグナルを、ＦＭＸのＭＲＩ評価可能病変で観察された中央値に対してグループ化し、ＣＴスキャンに基づく病変サイズの最良の変化と比較した（９人の患者から入手可能なデータ；合計３１病変）ことを示すグラフである。
【図１９Ｂ】ＦＭＸ  ＭＲＩが、ＭＭ−３９８の腫瘍奏効の予測ツールであり得ることを示す。（Ａ）ＭＭ−３９８及びＦＭＸは、１）拡張ＰＫ、２）ＥＰＲ効果（すなわち、漏出性脈管構造）を介して腫瘍組織に沈着する能力、及び３）マクロファージによる取り込みを含む類似の特性を有する。従って、ＭＲＩでのＦＭＸの視覚化は、ＭＭ−３９８の沈着を予測することができ得る。図１９Ａは、リポソーム型イリノテカン（例えば、ＭＭ−３９８）での癌処置のための予測バイオマーカーとしてのフェルモキシトール（ＦＭＸ）の使用を示す略図である。（Ｂ）ＦＭＸ注射の２４時間後に得られたＭＲ画像からの標準曲線を使用して、個々の患者病変のＦＭＸ濃度を算出した。（Ｃ）２４時間での病変からのＦＭＸシグナルを、ＦＭＸのＭＲＩ評価可能病変で観察された中央値に対してグループ化し、ＣＴスキャンに基づく病変サイズの最良の変化と比較した（９人の患者から入手可能なデータ；合計３１病変）ことを示すグラフである。
【図１９Ｃ】ＦＭＸ  ＭＲＩが、ＭＭ−３９８の腫瘍奏効の予測ツールであり得ることを示す。（Ａ）ＭＭ−３９８及びＦＭＸは、１）拡張ＰＫ、２）ＥＰＲ効果（すなわち、漏出性脈管構造）を介して腫瘍組織に沈着する能力、及び３）マクロファージによる取り込みを含む類似の特性を有する。従って、ＭＲＩでのＦＭＸの視覚化は、ＭＭ−３９８の沈着を予測することができ得る。図１９Ａは、リポソーム型イリノテカン（例えば、ＭＭ−３９８）での癌処置のための予測バイオマーカーとしてのフェルモキシトール（ＦＭＸ）の使用を示す略図である。（Ｂ）ＦＭＸ注射の２４時間後に得られたＭＲ画像からの標準曲線を使用して、個々の患者病変のＦＭＸ濃度を算出した。（Ｃ）２４時間での病変からのＦＭＸシグナルを、ＦＭＸのＭＲＩ評価可能病変で観察された中央値に対してグループ化し、ＣＴスキャンに基づく病変サイズの最良の変化と比較した（９人の患者から入手可能なデータ；合計３１病変）ことを示すグラフである。
【図２０Ａ】ＭＭ−３９８（５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または２０ｍｇ／ｋｇ）の投与と比較した、５０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇの遊離（非リポソーム型）イリノテカン（ＣＰＴ−１１）投与後の腫瘍において測定した腫瘍ＳＮ−３８（ｎｍｏｌ／Ｌ）を示すグラフである。
【図２０Ｂ】腫瘍奏効を生じるのに必要なＳＮ−３８濃度の時間関数としての腫瘍成長阻害のレベルを示すグラフである。
【図２１Ａ】単剤としてＳＮ−３８またはオラパリブで、または組み合わせて処置した後の細胞生存率を示す折れ線グラフを示す。Ｃ−３３Ａ（子宮頸癌、ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−３１（商標）;Ａ）細胞、またはＯＶＣＡＲ−８（卵巣癌、ＮＣＩ−６０パネル；Ｂ）細胞、ＳＫ−ＯＶ−３（卵巣癌、ＡＴＣＣＨＴＢ−７７ＴＭ；Ｃ）細胞、ＯＶＣＡＲ−３（卵巣腺癌、ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−１６１（商標）；Ｄ）細胞を、３４８ウェルプレートに１０００細胞／ウェルでプレーティングし、ＳＮ−３８及びオラパリブでそれぞれ単独でまたは組み合わせて２４時間処理し、次に、新しい培地と、さらに７２時間インキュベーションし、この後に、細胞生存率を評価した。
【図２１Ｂ】単剤としてＳＮ−３８またはオラパリブで、または組み合わせて処置した後の細胞生存率を示す折れ線グラフを示す。Ｃ−３３Ａ（子宮頸癌、ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−３１（商標）;Ａ）細胞、またはＯＶＣＡＲ−８（卵巣癌、ＮＣＩ−６０パネル；Ｂ）細胞、ＳＫ−ＯＶ−３（卵巣癌、ＡＴＣＣＨＴＢ−７７ＴＭ；Ｃ）細胞、ＯＶＣＡＲ−３（卵巣腺癌、ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−１６１（商標）；Ｄ）細胞を、３４８ウェルプレートに１０００細胞／ウェルでプレーティングし、ＳＮ−３８及びオラパリブでそれぞれ単独でまたは組み合わせて２４時間処理し、次に、新しい培地と、さらに７２時間インキュベーションし、この後に、細胞生存率を評価した。
【図２１Ｃ】単剤としてＳＮ−３８またはオラパリブで、または組み合わせて処置した後の細胞生存率を示す折れ線グラフを示す。Ｃ−３３Ａ（子宮頸癌、ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−３１（商標）;Ａ）細胞、またはＯＶＣＡＲ−８（卵巣癌、ＮＣＩ−６０パネル；Ｂ）細胞、ＳＫ−ＯＶ−３（卵巣癌、ＡＴＣＣＨＴＢ−７７ＴＭ；Ｃ）細胞、ＯＶＣＡＲ−３（卵巣腺癌、ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−１６１（商標）；Ｄ）細胞を、３４８ウェルプレートに１０００細胞／ウェルでプレーティングし、ＳＮ−３８及びオラパリブでそれぞれ単独でまたは組み合わせて２４時間処理し、次に、新しい培地と、さらに７２時間インキュベーションし、この後に、細胞生存率を評価した。
【図２１Ｄ】単剤としてＳＮ−３８またはオラパリブで、または組み合わせて処置した後の細胞生存率を示す折れ線グラフを示す。Ｃ−３３Ａ（子宮頸癌、ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−３１（商標）;Ａ）細胞、またはＯＶＣＡＲ−８（卵巣癌、ＮＣＩ−６０パネル；Ｂ）細胞、ＳＫ−ＯＶ−３（卵巣癌、ＡＴＣＣＨＴＢ−７７ＴＭ；Ｃ）細胞、ＯＶＣＡＲ−３（卵巣腺癌、ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−１６１（商標）；Ｄ）細胞を、３４８ウェルプレートに１０００細胞／ウェルでプレーティングし、ＳＮ−３８及びオラパリブでそれぞれ単独でまたは組み合わせて２４時間処理し、次に、新しい培地と、さらに７２時間インキュベーションし、この後に、細胞生存率を評価した。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本開示は、癌患者及び腫瘍を有する患者を処置する方法を提供し、この方法は、１週以上の間隔（例えば、２週間毎、３週間毎、または４習慣毎）で繰り返し得る処置レジメンを含み、処置の各例は、
ｉ．イリノテカン、トポテカン、ルルトテカン、インドンテカン、及びインジミテカン（ｉｎｄｉｍｉｔｅｃａｎ）などのＴｏｐ１阻害薬の有効量のイリノテカンリポソーム製剤を患者に静脈内投与すること、ならびに
ｉｉ．有効量のＰＡＲＰ阻害薬を患者に投与すること
を含み、ＰＡＲＰ阻害薬は、Ｔｏｐ１阻害薬の投与の完了後の間隔、例えば、有効なイリノテカンの血漿クリアランス間隔、の後に投与される。
【００２２】
さらなる実施形態では、この方法は、
ｉ．約２６．８時間の終末相排泄半減期及び約３８．０マイクログラム／ｍｌの最大イリノテカン血漿濃度を有する有効量のイリノテカンリポソーム製剤を患者に静脈内投与すること、ならびに
ｉｉ．有効量のＰＡＲＰ阻害薬を患者に投与すること
を含み、ＰＡＲＰ阻害薬は、イリノテカンの投与の完了後２４時間または多くとも３日の間隔の後に投与される。
【００２３】
上記２つの方法の一部の実施形態では、有効な血漿クリアランス間隔は、約２４〜約２４０時間であり、例えば、有効な血漿クリアランス間隔は、約４８〜約１６８時間、例えば、約４８〜約９０時間である。上記２つの方法、上記実施形態、または本明細書の他の箇所に開示されているような一部の実施形態では、有効な血漿クリアランス間隔は、２、３、４、または５日である。上記２つの方法、上記実施形態、または本明細書の他の箇所に開示されているような一部の実施形態では、有効量のＭＭ−３９８は、約６０ｍｇ／ｍ２〜約１２０ｍｇ／ｍ２である。上記２つの方法、上記実施形態、または本明細書の他の箇所に開示されているような一部の実施形態では、有効量のＭＭ−３９８は、約８０ｍｇ／ｍ２である。上記２つの方法、上記実施形態、または本明細書の他の箇所に開示されているような一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される。上記２つの方法、上記実施形態、または本明細書の他の箇所に開示されているような一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、最大耐量の約１０パーセント〜１００パーセントの用量で投与される。上記２つの方法、上記実施形態、または本明細書の他の箇所に開示されているような一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ〜約４００ｍｇの用量で１日１回または２回投与される。一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、タラゾパリブ、ニラパリプ、オラパリブ、ベリパリブ、イニパリブ、ルカパリブ、ＣＥＰ  ９７２２、タラゾパリブ、及びＢＧＢ−２９０からなる群より選択され、例えば、ベリパリブである。上記２つの方法、上記実施形態、または本明細書の他の箇所に開示されているような一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌、卵巣癌、トリプルネガティブ乳癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、胃癌、膵癌、結腸直腸癌、または神経内分泌癌である。
【００２４】
本発明は、固形腫瘍の処置のための抗悪性腫瘍薬療法におけるポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害薬と組み合わせて、リポソーム型イリノテカンの使用も提供し、リポソーム型イリノテカンは、２週毎に１回反復投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンから３日以内にＰＡＲＰ阻害薬を投与することなく、リポソーム型イリノテカンの連続投与の間の３〜１０日間毎日投与される。ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンが投与された日の間の連続する３日目〜１０日目の各日に投与することができる。
【００２５】
本発明は、固形腫瘍の処置のための抗悪性腫瘍薬療法における、リポソーム型イリノテカン及びポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害薬の使用も提供し、使用は、処置サイクルの１日目及び１５日目にリポソーム型イリノテカンを投与すること、ならびにリポソーム型イリノテカンの少なくとも３日後から開始し、かつ追加のリポソーム型イリノテカンの投与の少なくとも１日前に終了する１日以上において、ＰＡＲＰ阻害薬を投与することからなる２８日抗悪性腫瘍薬療法処置サイクルを含む。一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンの投与後少なくとも３日間投与されず、例えば、ＰＡＲＰ阻害薬が、リポソーム型イリノテカンの次の投与の前の少なくとも３日間投与されない。
【００２６】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、抗腫瘍療法処置サイクルの５日目〜１２日目のうちの１日以上において投与される。上記使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、抗腫瘍療法処置サイクルの１９日目〜２５日目のうちの１日以上において投与される。上記使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、抗腫瘍療法処置サイクルの３日目〜１２日目のうちの１日以上において投与される。上記使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、抗腫瘍療法処置サイクルの１７日目〜２５日目のうちの１日以上において投与される。
【００２７】
既に述べたように、このセクション内に記載される方法または使用などの一部の実施形態では、リポソーム型イリノテカンは、２６．８時間のイリノテカン終末相排泄半減期及び３８．０マイクログラム／ｍｌの最大イリノテカン血漿濃度を有する。上記使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬がリポソーム型イリノテカンの投与前または後の３日以内に投与されない。
【００２８】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬の各投与は、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬の各投与は、約２０ｍｇ／日〜約４００ｍｇ／日の用量で、１日１回または２回投与される。
【００２９】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される。
【００３０】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約４００ｍｇ／日の用量で、１日１回または２回投与される。
【００３１】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬が、ニラパリプ、オラパリブ、ベリパリブ、ルカパリブ、及びタラゾパリブからなる群より選択される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌、卵巣癌、トリプルネガティブ乳癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、消化管間質腫瘍、胃癌、膵癌、結腸直腸癌、または神経内分泌癌である。
【００３２】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、ベリパリブである。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、オラパリブである。
【００３３】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、ベリパリブであり、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、オラパリブであり、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、ベリパリブであり、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約４００ｍｇ／日の用量で１日１回または２回投与される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、オラパリブであり、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約４００ｍｇ／日の用量で１日１回または２回投与される。
【００３４】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、ベリパリブであり、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される。リポソーム型イリノテカンは、２週毎に１回反復投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンから３日以内にＰＡＲＰ阻害薬を投与することなく、リポソーム型イリノテカンの連続投与の間の３〜１０日間毎日投与される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、オラパリブであり、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の用量で投与される。リポソーム型イリノテカンは、２週毎に１回反復投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンから３日以内にＰＡＲＰ阻害薬を投与することなく、リポソーム型イリノテカンの連続投与の間の３〜１０日間毎日投与される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、ベリパリブであり、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約４００ｍｇ／日の用量で１日１回または２回投与される。リポソーム型イリノテカンは、２週毎に１回反復投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンから３日以内にＰＡＲＰ阻害薬を投与することなく、リポソーム型イリノテカンの連続投与の間の３〜１０日間毎日投与される。本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、癌は、子宮頸癌であり、ＰＡＲＰ阻害薬は、オラパリブであり、リポソーム型イリノテカンは、８０ｍｇ／ｍ２（塩）または７０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）の用量で投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、約２０ｍｇ／日〜約４００ｍｇ／日の用量で１日１回または２回投与される。リポソーム型イリノテカンは、２週毎に１回反復投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンから３日以内にＰＡＲＰ阻害薬を投与することなく、リポソーム型イリノテカンの連続投与の間の３〜１０日間毎日投与される。
【００３５】
一実施形態では、癌は、乳癌関連遺伝子ＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２のうちの１つに変異を含む乳癌、例えば、転移性乳癌である。別の実施形態では、癌は、ＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２に変異を含む卵巣癌である。腫瘍抑制遺伝子ＢＲＣＡ１及びＢＲＣＡ２の変異は、乳癌のリスク増加（ＢＲＣＡ変異を有しない人の約５倍のリスク）及び／または卵巣癌のリスクの増加（ＢＲＣＡ変異を有しない人の約１０〜３０倍のリスク）と関連する。ＢＲＣＡ関連卵巣癌の統計は通常、卵巣自体の癌だけでなく、腹膜癌及び卵管癌も含まれ；ＢＲＣＡ変異を有する女性は、卵管癌の正常の割合の１００倍を超える。ＢＲＣＡ変異は、男性では前立腺癌のリスクの増加も有する。正常のＢＲＣＡ１若しくはＢＲＣＡ２（またはＡＴＭなどの他のＤＮＡ修復酵素）を欠損する癌細胞は、代わりにＰＡＲＰ制御ＤＮＡ修復に依存し、従って、ＰＡＲＰ阻害に対して過敏性である。
【００３６】
本明細書に記載の使用または方法のいずれかの一部の実施形態では、リポソーム型イリノテカン及びＰＡＲＰ阻害薬を投与される患者を選択するためのイメージング剤としてのフェルモキシトールの使用をさらに含む方法の使用であり、例えば、方法は、フェルモキシトールを投与すること、次に、フェルモキシトール投与の２４時間後に患者のＭＲＩ画像を得ることを含む。
【００３７】
イリノテカンはＴｏｐ１阻害薬である。イリノテカンの化学名は、（Ｓ）−４，１１−ジエチル−３，４，１２，１４−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−３，１４−ジオキソ１Ｈ−ピラノ［３′，４′：６，７］−インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−９−イル−［１，４′−ビピペリジン］−１′−カルボキシレートである。イリノテカンは、名称ＣＰＴ−１１及び商標名Ｃａｍｐｔｏｓａｒとも呼ばれる。イリノテカンは、プロドラッグとして機能し、より活性な代謝産物ＳＮ−３８にエステラーゼ酵素により変換される。
【００３８】
本開示は、トポイソメラーゼ−１（Ｔｏｐ１）阻害薬（例えば、イリノテカン及び／またはその代謝産物ＳＮ−３８）及びＰＡＲＰ阻害薬の組み合わせを、末梢毒性が低減した腫瘍に投与する方法も提供する。Ｔｏｐ１阻害薬は、末梢血漿及び／または健康な器官と比較して、固形腫瘍において、Ｔｏｐ１阻害薬の長い蓄積をもたらすリポソーム製剤で投与することができる。続いて、ＰＡＲＰ阻害薬は、腫瘍内のＴｏｐ１阻害薬の量に応じて、腫瘍外のＴｏｐ１阻害薬の量の低減を可能にする期間後に投与することができる。好ましくは、Ｔｏｐ１阻害薬は、固形腫瘍にＳＮ−３８を提供するリポソーム型イリノテカンとして投与される。
【００３９】
癌を処置する方法及び癌、特に、固形腫瘍を含む癌の処置のためのリポソーム型イリノテカン製剤と組み合わせたＰＡＲＰ阻害薬化合物の治療的使用が提供される。
本明細書で開示される使用及び方法は、部分的には、前臨床及びヒト臨床試験の両方におけるトポイソメラーゼ１阻害薬（例えば、リポソーム型イリノテカンまたはＳＮ−３８）及びＰＡＲＰ阻害薬の組み合わせを評価する実験に基づく。トポイソメラーゼ１阻害薬は、腫瘍外部の末梢組織及び血漿中よりも長い、固形腫瘍内部でのトポイソメラーゼ１阻害薬（例えば、イリノテカン及び／またはＳＮ−３８と称されるイリノテカン活性代謝産物）の曝露をもたらす製剤を使用して、特定のインビトロ動物モデルに投与された。トポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ３８及び／またはイリノテカンとＰＡＲＰ阻害薬化合物との組み合わせは、種々のインビトロ実験で試験された。実施例２に詳述されるように、２０を超える異なる癌細胞株（子宮頸部、乳房、卵巣、結腸直腸、膵臓、及び小細胞肺癌細胞株を含む）における、トポイソメラーゼ１阻害薬（ＳＮ３８）及び種々のＰＡＲＰ阻害薬の複数の組み合わせのインビトロ試験は全て、（図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ、１Ｄ、１Ｅ、２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２Ｄ、２Ｅ、及び１７Ａ）の減少した癌細胞株生存率の減少を実証した。リポソーム型イリノテカン（ＭＭ３９８）は、（乳癌、卵巣癌、結腸直腸癌、及び膵癌細胞株を含む）複数種の癌細胞株にわたるマウス異種移植試験において、非リポソーム型（遊離）イリノテカン（ＣＰＴ１１）よりも大きな、腫瘍体積の低減を実証した。
【００４０】
実施例３に詳述されるように、種々のＰＡＲＰ阻害薬と組み合わせて投与されるトポイソメラーゼ１阻害薬（リポソーム型イリノテカン）の忍容性は、種々の投与スケジュールを比較することにより複数のマウスモデルにおける動物（マウス）体重の変化を測定することにより評価された。一部の実験では、リポソーム型イリノテカン及びＰＡＲＰ阻害薬の両方は、同日（１日目）に一緒に投与された。他の実験では、ＰＡＲＰ阻害薬は最初に、リポソーム型イリノテカンの各投与の２、３、または４日後から毎日投与された。ＰＡＲＰ阻害薬は、複数の連続した日に（例えば、連続３日間）投与され、トポイソメラーゼ１阻害薬と同日に投与されなかった。本明細書の複数の実験で詳述されるように、リポソーム型イリノテカンの少なくとも１日後にＰＡＲＰ阻害薬を投与すると、動物の体重のパーセント変化で測定される場合、同等の併用用量のＰＡＲＰ阻害薬及びリポソーム型イリノテカン（ＭＭ−３９８）の忍容性の改善がもたらされた（例えば、図１０Ａ〜図１０Ｄ、図８Ａ、図８Ｂ、図８Ｃ、図１２Ａ、及び図１２Ｂ）。リポソーム型イリノテカンの投与の２、３、または４日後に、ＰＡＲＰ阻害薬の投与を遅延させると、同日のリポソーム型イリノテカン及びＰＡＲＰ阻害薬の投与と比較して、リポソーム型イリノテカン及びＰＡＲＰ阻害薬の併用投与のより大きい全体的な忍容性がもたらされた。例えば、１日目にリポソーム型イリノテカンを投与した後の２、３、及び４日目にベリパリブを投与すると、これら２つの薬物の組み合わせの忍容性（より高いパーセントマウス体重として測定された）が逐次的増加をもたらす（１日目の１５ｍｇ／ｋｇのリポソーム型イリノテカン用量、続いて、２日目、３日目、及び４日目のベリパリブ投与で；図１２Ｂの１日目の２８ｍｇ／ｋｇのリポソーム型イリノテカン投薬、続いて、３日目、４日目、及び５日目のベリパリブ投与、または続いて、図１２Ｂの２日目、３日目、及び４日目のベリパリブ投与で；ならびに１日目の５０ｍｇ／ｋｇのリポソーム型イリノテカン用量、続いて、４日目、５日目、及び６日目のベリパリブ投与、または続いて、図１２Ａの２日目、３日目、及び４日目のベリパリブ投与、若しくは続いて、３日目、４日目、及び５日目のベリパリブ投与で観察された）。同様に、ＭＭ３９８後の２日目または３日目からオラパリブを投与すると、１日目の両方の薬剤の投与と比較して、同等または改善された忍容性がもたらされた。例えば、１日目に１０ｍｇ／ｋｇのＭＭ３９８リポソーム型イリノテカンを投与した後の２日目、３日目、４日目、及び５日目に、２００ｍｇ／ｋｇの用量のオラパリブをマウスに投与すると、１日目、２日目、３日目、及び４日目に同用量のＭＭ３９８及びオラパリブの両方を投与することよりも、体重低減の低下がもたらされた。
【００４１】
トポイソメラーゼ１阻害薬（ＳＮ３８及び／またはイリノテカン）とＰＡＲＰ阻害薬化合物との組み合わせは、リポソーム型トポイソメラーゼ１阻害薬ＭＭ３９８の投与の３または４日後から、種々のＰＡＲＰ阻害薬を投与する有用性を評価するために、種々の前臨床インビボ実験で試験された。実施例４に詳述されるように、１日目にリポソーム型イリノテカン（ＭＭ３９８）、続いて、３日目、４日目、及び５日目、または４日目、５日目、及び６日目のいずれかでＰＡＲＰ阻害薬ベリパリブを投与すると、２つの異なる細胞株（ＭＳ７５１及びＣ３３Ａ）を使用する子宮頸癌のマウス異種移植モデルにおける腫瘍の減少及び生存率の延長がもたらされた（図１１Ａ、１１Ｂ、１３Ａ、１３Ｂ、１４、及び１５）。
【００４２】
これらの実験に部分的に基づいて、ヒト癌を処置する方法は、リポソーム型イリノテカンなどのリポソーム型トポイソメラーゼ阻害薬の投与の１日以上（好ましくは２、３、４、５、または６日）後に、ＰＡＲＰ阻害薬を投与することを含む。好ましくは、ＰＡＲＰ阻害薬及びリポソーム型イリノテカンは、同日に投与されない。実施例６は、ヒト癌、例えば、子宮頸癌、の処置のためのリポソーム型イリノテカン及び１つ以上のＰＡＲＰ阻害薬の使用のための好ましい実施形態を提供するが、他の実施形態（例えば、表３）も提供される。
【００４３】
リポソーム型イリノテカン及びカンプトテシンコンジュゲートを含むトポイソメラーゼ阻害薬
トポイソメラーゼ阻害薬は、トポイソメラーゼ阻害薬の投与後に、腫瘍外部と比較して、腫瘍内部において、トポイソメラーゼ−１阻害薬活性の長い保持を提供する任意の形態で投与することができる。例えば、トポイソメラーゼ阻害薬は、トポイソメラーゼ阻害薬の投与後の一定期間に、腫瘍外部より、腫瘍内で高濃度のＳＮ−３８を提供する量及び仕方で投与される、インビボで腫瘍細胞にＳＮ−３８を送達する製剤とすることができる。トポイソメラーゼ阻害薬の好適な製剤は、トポイソメラーゼ阻害薬のコンジュゲート分子（例えば、ポリマー若しくは抗体にコンジュゲートされたカンプトテシン）、トポイソメラーゼ阻害薬を含有するリポソーム、または他の標的放出製剤技術を含む。Ｔｏｐ１阻害薬は、腫瘍部位外部の健康な（非癌）組織（例えば、血漿ならびに／または健康な器官、例えば、結腸、十二指腸、腎臓、肝臓、肺、及び脾臓）における蓄積と比較して、腫瘍部位において、長い蓄積を提供するように製剤化されることが好ましい。種々のＴｏｐ１阻害薬リポソーム製剤が、米国特許第８，１４７，８６７号及び米国特許出願公開第２０１５／０００５３５４号に記載されており、これらの両方は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４４】
一実施形態では、トポイソメラーゼ阻害薬は、ＳＮ−３８、カンプトテシン、またはイリノテカンなどの体内でＳＮ−３８に変換される化合物である。イリノテカン及びＳＮ−３８は、Ｔｏｐ１阻害薬の例である。イリノテカンは、エステラーゼ酵素で、より活性な代謝産物であるＳＮ−３に変換される。
【００４５】
トポイソメラーゼ阻害薬は、シクロデキストリンまたはシクロデキストリンアナログ（例えば、スルホン化シクロデキストリン）などの生体適合性ポリマーにコンジュゲートされたカンプトテシンであり得る。例えば、トポイソメラーゼ阻害薬は、カンプトテシン、イリノテカン、ＳＮ−３８、または他のトポイソメラーゼ１阻害薬化合物に化学的に結合されたシクロデキストリン含有ポリマーとすることができる。シクロデキストリン−カンプトテシンがコンジュゲートされたトポイソメラーゼ１阻害薬は、６、１２、若しくは１８ｍｇ／ｍ２の週１回投与、または１２、１５、若しくは１８ｍｇ／ｍ２回の隔週投与を含む薬学的に許容される用量で投与することができる。カンプトテシン−シクロデキストリンがコンジュゲートされたトポイソメラーゼ１阻害薬（例えば、「ＣＲＬＸ１０１」と称される、カンプトテシンを有するシクロデキストリン含有ポリマーコンジュゲート）及びそれを調製するための関連中間体は、例えば、Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，６，５５１−５６２、ならびに米国特許出願第２０１０／０２４７６６８号、米国特許出願第２０１１／０１６０１５９号、及び米国特許出願第２０１１／０１８９０９２号に開示されている。
【００４６】
トポイソメラーゼ阻害薬は、イリノテカン、カンプトテシン、またはトポテカンなどのトポイソメラーゼ阻害薬のリポソーム製剤とすることもできる。リポソーム型イリノテカン（例えば、「ｎａｌ−ＩＲＩ」とも呼ばれるＭＭ−３９８）は、腫瘍中で細胞周期の感受性が高いＳ期の高い割合の細胞に、イリノテカン及び活性代謝産物ＳＮ−３８の持続的曝露を提供するイリノテカンの高度に安定化されたリポソーム製剤である。ＭＭ−３９８は、癌型の範囲内で有望な前臨床及び臨床活性を示しているリポソーム型イリノテカンであり、最近、ゲムシタビンベースの治療後の疾患増悪後の膵臓転移性腺癌患者用に５−ＦＵ／ＬＶと組み合わせて米国で承認された。遊離イリノテカンと比較して、ｎａｌ−ＩＲＩは、ＭＭ−３９８及びＳＮ−３８への局所腫瘍曝露が長い拡張ＰＫプロファイルを有する。ＳＮ−３８が、腫瘍からよりも、正常組織から迅速にクリアランスされるので、ＭＭ−３９８に対するベリパリブの遅延投与は、予想される最大のイリノテカン誘導毒性の時間帯が、同時のベリパリブ毒性の不存在下で経過することを可能にすると仮定される。しかし、ＳＮ−３８の腫瘍レベルは、後続のベリパリブ投与時に持続すると予測され、従って、両方の薬剤が同時に腫瘍組織に作用し、相乗作用を維持する能力を維持する。
【００４７】
１つの好適なリポソームＴｏｐ１阻害薬製剤は、ＦＤＡの承認前に、以前に「ＭＭ−３９８」と称された商標名ＯＮＩＶＹＤＥ（登録商標）（イリノテカンリポソーム注射剤）（Ｍｅｒｒｉｍａｃｋ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ、マサチューセッツ州ケンブリッジ）で入手できるリポソーム型イリノテカン、及びＯＮＩＶＹＤＥと生物学的に同等であるリポソーム型イリノテカン製品である。
【００４８】
本明細書で使用される場合、用語「ＭＭ−３９８」は、ナノリポソーム型イリノテカン組成物を指す。ＭＭ−３９８の用量は、別途明示のない限り、イリノテカン塩酸塩三水和物の分子量を基準にしたイリノテカンの用量を指す。
【００４９】
本明細書で使用される場合、ＯＮＩＶＹＤＥ／ＭＭ−３９８におけるイリノテカンの用量は、別途明示のない限り、イリノテカン塩酸塩三水和物の分子量（すなわち「（塩）」用量）を基準にしたイリノテカンの用量を指す。用量は、イリノテカン遊離塩基（すなわち、「（塩基）」用量）としても表されてもよい。イリノテカン塩酸塩三水和物に基づく用量を、イリノテカン遊離塩基に基づく用量に変換することは、イリノテカン塩酸塩三水和物を基準にした用量に、イリノテカン遊離塩基の分子量（５８６．６８ｇ／ｍｏｌ）及びイリノテカン塩酸塩三水和物の分子量（６７７．１９ｇ／ｍｏｌ）との比を掛け合わせることにより達成される。この比は、０．８７であり、これは、換算係数として使用することができる。例えば、イリノテカン塩酸塩三水和物を基準にした８０ｍｇ／ｍ２の用量は、イリノテカン遊離塩基に基づいた６９．６０ｍｇ／ｍ２の用量に相当する（８０×０．８７）。診療所では、潜在的な投与ミスを最小限にするために、これを７０ｍｇ／ｍ２に四捨五入する。同様に、イリノテカン塩酸塩三水和物の１２０ｍｇ／ｍ２の用量は、イリノテカン遊離塩基１００ｍｇ／ｍ２に相当する。
【００５０】
ＭＭ−３９８（イリノテカンリポソーム注射剤）は、静脈内用途のためにリポソームにカプセル化されたイリノテカンスクロソファート塩を含む。薬物製品であるリポソームは、直径約１１０ｎｍの小さな単層脂質二分子膜小胞であり、これは、スクオソファート塩として、ゲル化または沈殿状態のイリノテカンを含有する水性空間をカプセル化する。リポソーム担体は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）６．８１ｍｇ／ｍＬ；コレステロール２．２２ｍｇ／ｍＬ；及びメトキシ末端ポリエチレングリコール（ＭＷ２０００）−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＭＰＥＧ−２０００−ＤＳＰＥ）０．１２ｍｇ／ｍｌからなる。各ｍＬは、緩衝液としての２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）４．０５ｍｇ／ｍＬ；等張性試薬としての塩化ナトリウム８．４２ｍｇ／ｍＬも含有する。溶液は、ｐＨ７．２５で緩衝化される。
【００５１】
ＯＮＩＶＹＤＥ／ＭＭ−３９８は、血漿中のイリノテカンの半減期を延長させることにより、リポソーム内のイリノテカン分子の高い保持を介して、遊離イリノテカンの薬物動態及び安全性プロフィールを改善することが示されており、他の器官と比較して、腫瘍細胞のイリノテカンへの曝露を増加させた。以下の表１は、２週毎に１回投与された８０ｍｇ／ｍ２のイリノテカン（塩）の用量でＯＮＩＶＹＤＥ／ＭＭ−３９８を投与した後の、固形腫瘍を有する患者で観察された中央値（％ＩＱＲ）＊総イリノテカン及びＳＮ−３８の薬物動態パラメータの概要を提示する。
【００５２】
固形腫瘍を有する患者の中央値（％ＩＱＲ）＊総イリノテカン及びＳＮ−３８薬物動態パラメータの概要。
【表１】
2018528184.tif 000002
【００５３】
ＭＭ−３９８の場合、６０〜１８０ｍｇ／ｍ２の用量範囲にわたって、総イリノテカン及びＳＮ−３８の両方の最大濃度は、用量と共に直線的に増加する。総イリノテカンのＡＵＣは、用量と共に直線的に増加し；ＳＮ−３８のＡＵＣは、用量に比例して増加しない。総イリノテカン及びＳＮ−３８の両方の半減期は、用量と共に変化しない。３５３人の患者からプールされた分析では、より高い血漿ＳＮ−３８Ｃｍａｘは、好中球減少症を経験する可能性の増加と関連し、より高い血漿の総イリノテカンＣｍａｘは、下痢を経験する可能性の増加と関連した。リポソーム型イリノテカンの直接測定は、イリノテカンの９５％が、循環中にリポソームカプセル化されたままであることを示す。８０ｍｇ／ｍ２のＭＭ−３９８の分布容積は、２．２Ｌ／ｍ２である。イリノテカンＨＣｌの分布容積は、１１０Ｌ／ｍ２（用量＝１２５ｍｇ／ｍ２）及び２３４Ｌ／ｍ２（用量＝３４０ｍｇ／ｍ２）の間にある。ＭＭ−３９８の血漿タンパク質結合は、ＭＭ−３９８における総イリノテカンの０．４４％未満である。イリノテカンＨＣｌの血漿タンパク質結合は、３０％〜６８％であり、ＳＮ−３８の約９５％は、ヒト血漿タンパク質に結合されている。８０ｍｇ／ｍ２のＭＭ−３９８からの総イリノテカンの血漿クリアランスは、０．０７７Ｌ／Ｈ／ｍ２であり、終末相半減期は２６．８時間である。１２５ｍｇ／ｍ２のイリノテカンＨＣｌの投与後に、イリノテカンの血漿クリアランスは、１３．３Ｌ／ｈ／ｍ２であり、終末相半減期は１０．４時間である。ＭＭ３９８リポソーム型イリノテカンは、患者内部にイリノテカン及びその活性代謝産物ＳＮ−３８を提供することができ、これは、それぞれ、ヒトシトクロムＰ４５０  ３Ａ４アイソザイム（ＣＹＰ３Ａ４）及びウリジン二リン酸−グルクロン酸トランスフェラーゼ１Ａ１（ＵＧＴ１Ａ１）により代謝的にクリアランスされる。イリノテカンの活性代謝産物ＳＮ−３８への代謝変換は、カルボキシルエステラーゼ酵素により媒介される。インビトロ試験は、イリノテカン、ＳＮ−３８及び別の代謝産物、アミノペンタンカルボン酸（ＡＰＣ）が、シトクロムＰ−４５０アイソザイムを阻害しないことを示す。続いて、ＳＮ−３８は、グルクロニド代謝産物を形成するために、酵素ＵＧＴ１Ａ１により主にコンジュゲートされる。ＵＧＴ１Ａ１活性は、ＵＧＴ１Ａ１＊２８多型などの酵素活性の低減をもたらす遺伝子多形を有する個体では減少する。北米人口の約１０％は、ＵＧＴ１Ａ１＊２８対立遺伝子（ＵＧＴ１Ａ１  ７／７遺伝子型とも呼ばれる）についてホモ接合である。母集団薬物動態分析の結果に基づいて、ＵＧＴ１Ａ１＊２８アレル（ＵＧＴ１Ａ１  ７／７遺伝子型）についてホモ接合及び非ホモ接合である患者は、ＳＮ−３８の曝露と同様である。イリノテカンＨＣｌの尿中排泄は、１１％〜２０％であり；ＳＮ−３８の尿中排泄は、＜１％であり；ＳＮ−３８グルクロニドの尿中排泄は、３％である。２人の患者においてイリノテカンＨＣｌの投与後４８時間にわたるイリノテカンＨＣｌ及びその代謝産物（ＳＮ−３８及びＳＮ−３８グルクロニド）の累積胆汁及び尿中排泄は、約２５％（１００ｍｇ／ｍ２）〜５０％（３００ｍｇ／ｍ２）に及んだ。リポソームカプセル化１４Ｃ−イリノテカンを使用したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットのマスバランス試験は、イリノテカンがリポソームから放出されると、カプセル化されていないイリノテカンと同じ排泄経路をたどることを示した。糞便排泄は、１６８時間にわたりリポソームカプセル化１４Ｃ−イリノテカンの施された全放射能線量のそれぞれ７８．３％及び８３．４％を占める雄及び雌ラットにおける主要な排泄経路であった。
【００５４】
種々のイリノテカンリポソーム製剤が、米国特許第８，１４７，８６７号及び米国特許出願公開第２０１５／０００５３５４号に記載されており、これらの両方は、参照により本明細書に組み込まれる。ＭＭ−３９８は、約１００ｎｍの直径のリポソームにカプセル化されたスクオソファート塩として、ゲル化または沈殿状態の約８０，０００分子のイリノテカンを含むと考えられる。ＭＭ−３９８は、血漿中のイリノテカンの半減期を延長させることにより、リポソーム内のイリノテカン分子の高い保持を介して、遊離イリノテカンの薬物動態及び安全性プロフィールを改善することが示されており、他の器官と比較して、腫瘍細胞のイリノテカンへの曝露を増加させた。
【００５５】
本開示の方法では、有効量のリポソーム型イリノテカンは、約６０ｍｇ／ｍ２〜約１２０ｍｇ／ｍ２のＭＭ−３９８として提供される。さらなる実施形態では、有効量のＭＭ−３９８は、約８０ｍｇ／ｍ２であり、任意に、３０分かけて４００ｍｇ／ｍ２のロイコボリンと組み合わせて投与され、続いて、４６時間かけて２４００ｍｇ／ｍ２の５−フルオロウラシルを注入として静脈投与される。一部の実施形態では、用量は、（イリノテカン塩酸塩三水和物塩の重量を基準にした）７０、８０、９０、１００、１１０、または１２０ｍｇ／ｍ２であり、（イリノテカン遊離塩基の重量を基準にした）５０、６０、７０、８０、９５、及び１００ｍｇ／ｍ２の用量であり、それぞれは、２週間毎に１回（例えば、２８日抗腫瘍薬処置サイクルの１日目及び１５日目に）与えられる。一部の実施形態では、ＭＭ−３９８の有効量は、約９０ｍｇ／ｍ２（遊離塩基）である。
【００５６】
リポソーム型イリノテカンＭＭ−３９８は、トポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ−３８の腫瘍曝露を延長する。ＭＭ−３９８リポソーム型イリノテカンは、複数のマウス異種移植モデルにおいて、イリノテカンよりも活性が高いことが判明した。閾値最小濃度（例えば、１２０ｎＭ）を超えるトポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ−３８への腫瘍曝露の持続時間は、リポソーム型イリノテカンの抗腫瘍活性と相関した。さらに、ＭＭ−３９８リポソーム型イリノテカンは、非リポソーム型イリノテカンにより提供されるものを超える延長されたＳＮ−３８腫瘍持続時間を提供することができる。例えば、図１７Ｂは、複数のネズミ子宮頸癌モデルにおけるＳＮ−３８の腫瘍含有量を示す。子宮頸部腫瘍を持つヌードマウスは、１０ｍｇ／ｋｇのＭＭ−３９８の単回用量を注射され、ＣＰＴ−１１及びＳＮ−３８の腫瘍含有量は、ＬＣ−ＭＳで測定された。図２０Ａは、ＭＭ−３９８（５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または２０ｍｇ／ｋｇ）の投与と比較した、５０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇの遊離（非リポソーム型）イリノテカン（ＣＰＴ−１１）の投与後に、腫瘍において測定された腫瘍ＳＮ−３８（ｎｍｏｌ／Ｌ）を示すグラフである。グラフは、担ＨＴ−２９結腸直腸癌（ＣＲＣ）腫瘍異種移植片マウスを使用して得られた、他の器官と比較した、リポソーム型イリノテカン（ＭＭ−３９８）投与後の腫瘍において測定されたＳＮ−３８の長い蓄積（濃度）を示す。図２０Ｂは、腫瘍奏効を生じるのに必要なＳＮ−３８濃度の時間関数としての腫瘍成長阻害のレベルを示すグラフである。１２０ｎＭのＳＮ−３８のレベルは、腫瘍奏効を生じるのに必要なＳＮ−３８腫瘍濃度として特定された。細胞株へのＳＮ−３８の効果についてのインビトロＩＣ５０は、インビボ閾値として使用することができる（ＨＴ−２９についてのＧＩ５０は、約６０ｎＭであることが観察された）。ＭＭ−３９８リポソーム型イリノテカンは、１０ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇの用量でのＳＮ−３８曝露の持続時間を延長させることが観察された。
【００５７】
ＰＡＲＰ阻害薬
本開示の方法では、ＰＡＲＰ阻害薬は、タラゾパリブ、ニラパリプ、オラパリブ、ベリパリブ、イニパリブ、ルカパリブ、ＣＥＰ  ９７２２またはＢＧＢ−２９０からなる群より選択される。さらなる実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、ベリパリブである。
【００５８】
ＰＡＲＰは、２つの機序：触媒阻害及びＰＡＲＰ−ＤＮＡ複合体の捕獲、を介して作用するＤＮＡ修復に関与する酵素のファミリーであり、この修復経路の阻害は、ＤＮＡ損傷後の細胞死をもたらす可能性がある。好ましい実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬をＴｏｐ１阻害薬と組み合わせると、いずれかの薬剤単独と比較して、臨床における有効性の増加がもたらされる。ＰＡＲＰ阻害薬及びＴｏｐ１阻害薬の相乗効果が、ＰＡＲＰ触媒阻害によるものであり、ＰＡＲＰトラップを伴わないことが実証されているが、この有望な前臨床活性は、これらの組み合わせの場合に、診療所において許容できない毒性を引き起こしている。
【００５９】
ＰＡＲＰ阻害薬は、ＤＮＡ修復に関与する酵素のファミリーであるポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）を阻害する化合物から選択することができる。好ましくは、ＰＡＲＰ阻害薬は、２つの機序：触媒阻害及びＰＡＲＰ−ＤＮＡ複合体の捕捉、を介して作用する化合物である。ＰＡＲＰ阻害薬は、異なる程度であるが、両方の機序を介して作用することができる化合物を含む、１つ以上の臨床的に利用可能なＰＡＲＰ阻害薬化合物（例えば、とりわけ、タラゾパリブ、ニラパリプ、オラパリブ、及びベリパリブ）とすることができる。例えば、ニラパリブは、ベリパリブよりも、ＰＡＲＰ捕捉においてはるかに強力であるが、それらは双方ともに、同様のＰＡＲＰ触媒活性を示す。
【００６０】
さらなる実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、ベリパリブ、オラパリブ、ルカパリブ、またはニラパリブである。別の実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、ベリパリブまたはオラパリブである。ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンの後に投与されるベリパリブとすることができる。ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型イリノテカンの後に投与されるオラパリブとすることができる。
【００６１】
オラパリブは、事前の３ライン以上の化学療法で処置されている、（ＦＤＡ承認試験により検出されるように）有害なまたは起こりうる有害な生殖系列ＢＲＣＡが変異した進行卵巣癌を有する患者における単独療法として示される。この適応症のためのオラパリブの推奨用量は、１日２回、４００ｍｇ（５０ｍｇカプセル８個）であり、１日の総用量は８００ｍｇである。オラパリブを服用する患者は、強度及び中程度のＣＹＰ３Ａ阻害薬の併用を避け、かつＣＹＰ３Ａ阻害の少ない代替薬を検討するよう指示される。阻害薬が回避することができない場合は、Ｌｙｎｐａｒｚａの用量を、強度のＣＹＰ３Ａ阻害薬の場合、１日２回服用される１５０ｍｇ（５０ｍｇのカプセル３つ）に、または中程度のＣＹＰ３Ａ阻害薬の場合、１日２回服用される２００ｍｇ（５０ｍｇのカプセル４つ）に低減させる。
【００６２】
ＰＡＲＰ阻害薬は、ＰＡＲＰ１及び／またはＰＡＲＰ２を阻害することができる。例えば、ＰＡＲＰ阻害薬は、無細胞アッセイにおいて５ｎＭ／１ｎＭのＩＣ５０を有するＰＡＲＰ１／２阻害薬とすることができ、タンキラーゼ−１（例えば、オラパリブ）に対して３００倍効果が薄い。ＰＡＲＰ阻害薬は、無細胞アッセイにおいて、それぞれ５．２ｎｍ及び２．９ｎＭのＫｉを有するＰＡＲＰ１及びＰＡＲＰ２の阻害薬とすることができ、ＳＩＲＴ２（例えば、ベリパリブ）に対して不活性である。ＰＡＲＰ阻害薬は、無細胞アッセイにおいて、１．４ｎＭのＫｉを有するＰＡＲＰ１の阻害薬とすることができ、他のＰＡＲＰドメイン（例えば、ルカパリブ）に対する結合親和性を示すこともできる。ＰＡＲＰ阻害薬は、単独でまたは他の薬剤と組み合わせて、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）に有効である可能性がある。ＰＡＲＰ阻害薬は、ＰＡＲＧを阻害せず、かつＰＴＥＮ変異（例えば、タラゾパリブ）に感受性である無細胞アッセイにおいて、０．５８ｎＭのＩＣ５０を有するＰＡＲＰ１阻害薬とすることができる。ＰＡＲＰ阻害薬は、ＴＮＫＳ１／２（例えば、Ｇ００７−ＬＫ）の場合、それぞれ４６ｎＭ及び２５ｎＭのＩＣ５０を有する強力かつ選択的なタンキラーゼ阻害薬とすることができる。ＰＡＲＰ阻害薬は、無細胞アッセイ（例えば、ＡＧ−１４３６１）において、約５ｎＭ未満のＫｉを有するＰＡＲＰ１の強力な阻害薬とすることができる。ＰＡＲＰ阻害薬は、０．３マイクロモルのＩＣ５０を有するＰＡＲＰ２の選択的阻害薬とすることができ、ＰＡＲＰ１（例えば、ＵＰＦ−１０６９）に対して約２７倍選択的である可能性がある。ＰＡＲＰ阻害薬は、ＰＡＲＰ３の場合、約０．８９マイクロモルのＩＣ５０及びＰＡＲＰ１（例えば、ＭＥ０３２８）の約７倍の選択性を有する強力かつ選択的な阻害薬とすることができる。ＰＡＲＰ阻害薬は、それぞれ１ｎＭ及び１．５ｎＭのＫｉ値を有するＰＡＲＰ１及びＰＡＲＰ２の阻害薬とすることができる。
【００６３】
ＰＡＲＰ阻害薬の好ましい例は、薬学的に許容されるプロドラッグ、塩（例えば、トシラート）、及びそのエステルに加えて、以下の表２Ａで提供される。
【表２Ａ】
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【００６４】
ＰＡＲＰ阻害薬の用量及び投与頻度は、化合物の薬物動態特性（例えば、半減期）、事前投与レジメン、及び患者特性を含む、ＰＡＲＰ阻害薬の種々の特性に基づいて選択することができる。ＰＡＲＰ阻害薬の用量の選択に使用することができるパラメータは、以下の表２Ｂに列挙されるものを含む。
【００６５】
さらに、患者は、トポイソメラーゼ阻害薬及びＰＡＲＰ阻害薬を組み合わせた処置を受けるように選択することができる。例えば、患者は、ＢＲＣＡ（例えば、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ２）、相同組換え修復不全（ＨＲＤ）、ＢＲＯＣＡ−ＨＲ、または患者の他の遺伝的リスクパネル分析におけるそれらの状態に基づいて選択することができる。
【表２Ｂ】
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【００６６】
本開示の方法では、ＰＡＲＰ阻害薬は、治療上有効な用量（例えば、ベリパリブの場合、ＰＡＲＰ阻害薬単独療法のために選択される用量、例えば、約２００ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日）で投与される。さらなる実施形態では、ＰＡＲＰ阻害薬は、約１００〜約４００ｍｇの用量で１日２回投与される。一部の実施形態では、ベリパリブ、ルカパリブ、またはオラパリブは、約１００〜約４００ｍｇの用量で１日２回投与される。一部の実施形態では、１日２回２００ｍｇの用量のベリパリブは、リポソーム型イリノテカンの各投与後（例えば、３〜５日後）に患者に投与される。
【００６７】
本開示の方法では、ＰＡＲＰ阻害薬は、「有効なイリノテカンの血漿クリアランス間隔」の後に投与される。「有効なイリノテカンの血漿クリアランス間隔」は、血漿からのイリノテカン及びＳＮ３８の十分なクリアランスを可能にし、有効量のイリノテカン及び／またはＳＮ３８が、所望の治療効果を有するＰＡＲＰ阻害薬の後続の投与のために患者内の１つ以上の腫瘍に残留することを可能にする、リポソーム型イリノテカンの投与及びＰＡＲＰ阻害薬の投与の間のその間隔である。本開示の方法における有効な血漿クリアランス間隔は、４８時間〜約１６８時間を含む、約２４〜約１６８時間である。さらなる実施形態では、有効な血漿クリアランス間隔は、約４８〜約９６時間である。さらなる実施形態では、有効な血漿クリアランス間隔は、２４時間または２日、３日、４日、若しくは５日である。
【００６８】
本開示の方法では、癌は、子宮頸癌、卵巣癌、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、胃癌、膵癌、結腸直腸癌、または神経内分泌腫瘍である。
【００６９】
一実施形態では、本発明による患者を処置する方法は、病理学的完全奏効（ｐＣＲ）、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）、または安定（ＳＤ）をもたらす。
【００７０】
本開示の方法は、５−ＨＴ３アンタゴニストなどの抗嘔吐薬；ロペラミドなどの下痢を処置するための薬剤；デキサメタゾン；または他の化学療法薬を含むがこれらに限定されない１つ以上の追加の薬剤を患者に投与することをさらに含むことができる。
【００７１】
一実施形態では、本開示の方法は、病理学的完全奏効（ｐＣＲ）、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）、または安定（ＳＤ）をもたらす。別の実施形態では、ＭＭ−３９８及びＰＡＲＰ阻害薬、例えば、ベリパリブの併用療法は、治療上の相乗効果をもたらす。
【００７２】
特定の実施形態では、ＭＭ−３９８及びＰＡＲＰ阻害薬は、少なくとも１サイクルで投与される。サイクルは、第１の薬剤（例えば、第１の予防薬または治療薬）の一定期間の投与、続いて、第２の薬剤（例えば、第２の予防薬または治療薬）の一定期間の投与、任意に続いて、第３の薬剤（例えば、第３の予防剤または治療剤）の一定期間の投与など、及びこの連続投与、すなわち、サイクルを繰り返すことを含む。一実施形態では、ＭＭ−３９８及びＰＡＲＰ阻害薬の組み合わせは、少なくとも１サイクル投与される。一実施形態では、サイクルは、２週間のサイクルである。別の実施形態では、サイクルは、３週間のサイクルである。別の実施形態では、サイクルは、４週間のサイクルである。一実施形態では、ＭＭ−３９８は、サイクルの開始時に投与され、ＰＡＲＰ阻害薬（例えば、ベリパリブ）の投与は、ＭＭ−３９８の投与の少なくとも約１２、２４、４８、７２、９６、または１２０時間後まで遅延させる。一実施形態では、ＭＭ−３９８は、サイクルの開始時に投与され、ＰＡＲＰ阻害薬（例えば、ベリパリブ）の投与は、ＭＭ−３９８の投与の少なくとも約２４、４８、７２、９６、または１２０時間後まで遅延させる。一実施形態では、ＭＭ−３９８は、１日目及び１５日目に、２８日サイクルの一部として投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、３日目〜１２日目及び１７日目〜２５日目に投与される。別の実施形態では、ＭＭ−３９８は、１日目及び１５日目に、２８日サイクルの一部として投与され、ＰＡＲＰ阻害薬は、５日目〜１２日目及び１９日目〜２５日目に投与される。
【００７３】
表３のプロトコールを含む一部の実施例では、ＰＡＲＰ阻害薬は、トポイソメラーゼ１阻害薬、例えば、ＭＭ−３９８リポソーム型イリノテカンの投与の３日以内に投与されない（すなわち、ＰＡＲＰ阻害薬は、リポソーム型トポイソメラーゼ１阻害薬の投与の少なくとも２、３、４、または５日後、及びリポソーム型トポイソメラーゼ１阻害薬の次の投与の２、３、４、または５日前の両方の日に投与されるだけである）。表３は、２８日抗腫瘍薬処置サイクルの特定の日に、治療的有効量のＰＡＲＰ阻害薬及びリポソーム型イリノテカンを投与するための投与タイミングプロトコールを示す。
【表３−１】
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【表３−２】
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【００７４】
一部の実施例では、ＰＡＲＰ阻害薬は、２８日抗腫瘍薬処置サイクルの日のうちの１日以上で投与される。例えば、リポソーム型イリノテカン（例えば、ＭＭ−３９８）が、２週間毎に１回、または２８日抗腫瘍薬処置サイクルの１日目及び１５日目に投与される時に、ＰＡＲＰ阻害薬は、２８日抗腫瘍薬処置サイクルの３日目、４日目、５日目、６日目、７日目、８日目、９日目、１０日目、１１日目、及び１２日目、ならびに１９日目、２０日目、２１日目、２２日目、２３日目、２４日目、及び２５日目のうちの１日以上で投与することができる。
【００７５】
ＰＡＲＰ阻害薬及びトポイソメラーゼ阻害薬の処置方法及び治療的使用。
【実施例】
【００７６】
次の非限定例は、本開示の方法を例示する。
【００７７】
実施例１：
固形腫瘍バックグラウンドにおけるＭＭ−３９８及びベリパリブの組み合わせの第Ｉ相試験−ＰＡＲＰ阻害薬及びＴｏｐ１阻害薬
ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害薬は、種々の癌型の処置のために現在開発中の新しいクラスの化学療法剤である。ＰＡＲＰは、ＤＮＡ修復に関与する酵素ファミリーであり、この修復経路の阻害は、細胞死をもたらす。それ故、ＰＡＲＰ阻害薬は、ＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２変異を有する乳房及び卵巣腫瘍などの既知の他のＤＮＡ修復経路欠損を有する腫瘍型において研究されており、これは、合成致死性をもたらす。ＰＡＲＰ阻害薬は、２つの機序：触媒阻害及びＰＡＲＰ−ＤＮＡ複合体の捕捉、を介して作用する。臨床的に利用可能なＰＡＲＰ阻害薬（例えば、とりわけ、タラゾパリブ、ニラパリプ、オラパリブ、及びベリパリブ）は、異なる程度であるが、両方の機序を介して作用する。例えば、ニラパリブは、ベリパリブよりも、ＰＡＲＰ捕捉においてはるかに強力であるが、それらは双方ともに、同様のＰＡＲＰ触媒活性を示す。これは、ニラパリプまたはオラパリブのいずれと比較しても、ベリパリブで観察される毒性の減少につながると仮定される。しかし、ベリパリブが、ベリパリブ単独療法を受けている８８人の患者（６０人のＢＲＣＡ＋及び２８人のＢＲＣＡ−ｗｔ）の第Ｉ相試験において臨床活性を実証しているので、毒性が減少しても、有効性を妨げない。ＢＲＣＡ＋患者において、全奏効率（ＯＲＲ；ＣＲ＋ＰＲ）は２３％、臨床的有効率（ＣＢＲ；ＣＲ＋ＰＲ＋安定）は５８％であり、ＭＴＤ及びＲＰ２Ｄで、ＯＲＲは４０％、ＣＢＲは６８％であった。奏効を評価できるＢＲＣＡ−ｗｔ患者におけるＯＲＲは、４％であり、ＣＢＲは３８％であった［５］。
【００７８】
単独療法処置が合成致死性を実証しないＢＲＣＡ−ｗｔ患者では、腫瘍奏効を改善する能力は、併用療法で達成され得る。したがって、ＤＮＡを損傷する他の抗癌薬での腫瘍細胞の前処置は、腫瘍細胞をＰＡＲＰ阻害薬に感作させると考えられている。Ｔｏｐ１阻害薬は、ＤＮＡの複製を阻害することを目的とした化学療法薬のクラスであり、その修復のためのＰＡＲＰを伴うＤＮＡ鎖切断を誘導することが知られている。ＰＡＲＰ阻害薬をＴｏｐ１阻害薬と組み合わせると、いずれかの薬剤単独と比較して、診療所における有効性の増加をもたらすと仮定される。ＰＡＲＰ阻害薬は依然として、開発されているが、Ｔｏｐ１阻害薬は、上記のように、既に種々の腫瘍型において最良の臨床活性を実証している。最近、ＰＡＲＰ阻害薬及びＴｏｐ１阻害薬の相乗効果が、ＰＡＲＰ触媒阻害によるもので、ＰＡＲＰトラップを伴わないことが実証されている。それ故、２つのクラスの薬物を組み合わせた時、あまり強力でないＰＡＲＰトラッパーであるベリパリブをＴｏｐ１阻害薬と組み合わせて使用すると、用量制限毒性を最小限にしながら最適な相乗効果を可能にすることが予測され、この試験（図１）のために選択された。２つのクラスの薬物を組み合わせる時、Ｔｏｐ１阻害薬と組み合わせて、ベリパリブと比較してより強力なＰＡＲＰトラッパーであるオラパリブを使用すると、最適な相乗効果を可能にすると予想される（図２１）。オラパリブ及びＴｏｐ１阻害薬の投与をずらすことにより、オラパリブ投与に関連する毒性を減少させた。さらに、Ｔｏｐ１誘導ＤＮＡ損傷は、ＸＰＦ−ＥＲＣＣ１経路などの代替エンドヌクレアーゼ修復経路を介して修復することもできる。従って、エンドヌクレアーゼ修復経路が欠損している腫瘍は、イリノテカン（ＣＰＴ−１１）による細胞死に対してより感受性であることも予測される。前臨床的に、ベリパリブ及びＣＰＴ−１１の細胞傷害性を、ＸＰＦ欠損細胞においてさらに強化した。診療所では、イリノテカン及びベリパリブは、種々のＤＮＡ損傷応答経路に欠陥を有する腫瘍を標的とする時に、有効性の増加をもたらすと予想される。
【００７９】
Ｔｏｐ１阻害薬と組み合わせたベリパリブの臨床実験
ＰＡＲＰ阻害薬及びＴｏｐ１阻害薬の組み合わせは、第Ｉ相臨床試験において試験されている。しかし、これらの化学療法併用レジメンの開発は、観察される毒性の増加により制限されており、有効性を制限され得る用量低減をもたらす。特に、ベリパリブ及びトポテカンの用量漸増試験において、有意な骨髄抑制が見られ、最大耐量を、最初に計画された用量レベルで超過した。結果は、トポテカンの用量の減少であり、１日２回１０ｍｇの最終ベリパリブ投薬量で、ベリパリブを漸増しないと、１日２回４００ｍｇの確立された単独療法の用量と比較して４０分の１に減少した。イリノテカンと組み合わせたベリパリブの第Ｉ相試験では、用量制限毒性（ＤＬＴ）は、発熱性好中球減少症（グレード３）、白血球減少及び好中球減少（グレード４）を含み、ベリパリブの単独療法と比較して１０分の１のベリパリブ用量がもたらされた。別の第Ｉ相用量漸増試験では、進行した固形腫瘍患者において、ベリパリブを隔月でＦＯＬＦＩＲＩと組み合わせた。重要なことに、この試験における４つのＤＬＴのうち３つは、好中球減少事象であり、グレード３／４の好中球減少率は、４７％であった。さらに、これらの第Ｉ相試験では、個々の患者における一部の有効性が観察されている。例えば、ベリパリブ及びイリノテカンの試験において処置された患者３２人中で５人のＰＲが観察されたが、ＦＯＬＦＩＲＩと組み合わせてベリパリブを投与された合計９６人の患者を登録する試験で、１２人のＰＲ及び１人のＣＲが観察された。以下の表１は、ベリパリブをＴｏｐ１阻害薬と組み合わせた試験のために利用できる臨床データの概要を提供し、併用処置に伴う１つ以上の薬物の用量低減ならびに多くの毒性を示す。それ故、課題は、これらの２つのクラスの薬物を安全に組み合わせる方法を決定することであり、組み合わせの潜在的有効性は依然として有望である。
【表Ａ−１】
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【表Ａ−２】
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【表Ａ−３】
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【００８０】
ＭＭ−３９８の作用機序
ＭＭ−３９８は、直径約１００ｎｍのリポソーム中にカプセル化された約８０，０００分子のイリノテカンからなる、イリノテカン（ｎａｌ−ＩＲＩ）のナノリポソーム製剤である。この安定な製剤は、曝露を延長し、リポソーム内のイリノテカン分子を保護することにより、遊離薬物の薬物動態及び安全性プロファイルを改善するようにデザインされる。リポソームは、増強された透過性及び保持（ＥＰＲ）効果により腫瘍組織に優先的に沈着することも知られており、これにより、巨大分子の流出を可能にする異常な腫瘍脈管構造、及び腫瘍微小環境内でのこれらの分子の保持を促進する、リンパ排液の減少がもたらされる。ＥＰＲ効果は、ＭＭ−３９８への長い腫瘍組織の曝露を可能にし、それにより、細胞周期の感受性が高いＳ期の高い割合の細胞へのＭＭ−３９８曝露を可能にする。マウスの生体内分布試験では、ＭＭ−３９８の投与後の種々の組織において、イリノテカン、ＳＮ−３８の活性代謝産物を測定し、腎臓及び肝臓を含む正常組織よりも長く、腫瘍組織において、ＳＮ−３８が持続していると判断した（図４）。追加の前臨床薬物動態（ＰＫ）試験は、遊離イリノテカンの投与と比較して、ＭＭ−３９８を投与した後に、血漿ＰＫの延長及び腫瘍ＰＫの延長の両方を示す（図５）。イリノテカン及びＳＮ−３８の両方は、遊離イリノテカン投与後に、血漿から非常に迅速に（８時間以内に）クリアランスされる。しかし、図５Ａに示すように、ＭＭ−３９８クリアランスは、かなり遅く、約４８時間の半減期を有し；９０％を超えるイリノテカンは、血漿中でカプセル化されているので、イリノテカンレベルは、ＭＭ−３９８濃度を反映している。ＭＭ−３９８投与後のＣｍａｘレベルは低減するが、ＳＮ−３８血漿曝露はさらに大きく、曝露及び半減期の延長におけるリポソーム製剤の利点が示唆される（図５Ｂ）。腫瘍組織では、ＣＰＴ−１１及びＳＮ−３８は、遊離イリノテカンの投与後の約２日でクリアランスされるが、ＣＰＴ−１１及びＳＮ−３８の両方が、等価用量のＭＭ−３９８の後の少なくとも１週間、腫瘍組織に存続する。
【００８１】
腫瘍浸透性ならびにＣＰＴ−１１のＳＮ−３８への酵素的変換に関与している腫瘍組織カルボキシルエステラーゼ（ＣＥＳ）活性は、ＭＭ−３９８投与後のＳＮ−３８の局所腫瘍曝露の重要な因子であると予測される。インビボ腫瘍異種移植試験は、ＭＭ−３９８の有効性が、ＭＭ−３９８を投与した後の、ＣＰＴ−１１の高いＣＥＳ活性及び／または高い腫瘍レベルに関連することを実証している。さらに、ＭＭ−３９８は、乳房、結腸、卵巣、及び膵臓腫瘍異種移植モデルを含むいくつかの前臨床モデルにおいて、遊離イリノテカンの等価投与と比較して優れた活性を実証している（図６）。
【００８２】
ＭＭ−３９８及びフェルモキシトールＭＲＩによる臨床実験
臨床的に、ＭＭ−３９８は、ＳＮ−３８の曝露の延長も実証している。胃癌患者の第ＩＩ相試験からのＰＫ結果は、遊離イリノテカンによる処置と比較して、ＭＭ−３９８による処置では、ＣＰＴ−１１及びＳＮ−３８の両方の血漿ＰＫの延長を実証した（図７Ａ／Ｂ）。さらに、第Ｉ相試験（プロトコール＃ＭＭ−３９８−０１−０１−０２）は、処置後生検を使用して、ＭＭ−３９８で処置した後のＣＰＴ−１１及びＳＮ−３８の両方の腫瘍レベルを研究した。モデル予測に基づいて、腫瘍におけるＳＮ−３８レベルは、血漿中よりも高いことが予想され、ＭＭ−３９８を用いる腫瘍微小環境におけるＣＰＴ−１１のＳＮ−３８への局所的変換を示唆した（図７Ｃ）。投与の７２時間後の患者から収集した腫瘍生検試料中のＣＰＴ−１１及びＳＮ−３８のレベルを測定して、血漿よりも腫瘍内のＳＮ−３８のレベルが５倍高いことを実証することにより、予測を確認した（図７Ｄ〜Ｅ）。
【００８３】
一括して、証拠は、ＳＮ−３８への曝露の延長が、ＤＮＡ損傷の延長をもたらすことを示唆する。ＳＮ−３８は、トポイソメラーゼ１切断複合体（「Ｔｏｐ１ｃｃ」）に可逆的に結合する。従って、切断複合体−「捕捉された」ＳＮ−３８は、遊離ＳＮ−３８と平衡状態にある。ＩＣ５０が高いナノモル範囲にあるため、結合親和性は比較的低い（が、全選択性により補われる）。要するに、細胞内遊離ＳＮ−３８は、Ｔｏｐ１ｃｃ結合ＳＮ−３８の信頼できる反映である。ＳＮ−３８代謝は、ＵＧＴ１Ａ１によるグルクロン酸抱合及びＡＢＣＣ２を介する肝臓からの排泄に依存する。ＵＧＴ１Ａ１は、（肝細胞癌を除く）他の組織及び腫瘍よりも、正常肝臓においてはるかに高いレベルで見出される。それ故、腫瘍組織中のＳＮ−３８は、任意の有意な程度まで代謝されない。図７は、持続的循環レベル及びより顕著で持続的な腫瘍レベルを示唆する臨床データを示す。従って、ここで、（その後急速に修復される最初のＤＮＡ損傷を引き起こす、迅速にクリアランスされた遊離イリノテカンと対照的に）ＭＭ−３９８による継続的なＤＮＡ損傷が起こっていることが発見されている。
【００８４】
ＭＭ−３９８の第Ｉ相試験は、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）含有量及びＭＭ−３９８沈着を予測するために、磁気共鳴（ＭＲ）イメージングの可能性も調査した。ＴＡＭは、腫瘍微小環境内でのＭＭ−３９８の沈着、保持、及び活性化において重要な役割を果たすようである。この臨床試験では、フェルモキシトール（ＦＭＸ）（ポリグルコースソルビトールカルボキシメチルエーテルでコーティングされた超常磁性酸化鉄の微粒子調製物）イメージング造影剤として使用し、ＭＲ画像を、ＦＭＸ注射の１時間後、２４時間後、及び７２時間後に得た。ＦＭＸは、慢性腎疾患を有する成人患者における鉄欠乏性貧血の処置に適応される承認された治療法であるが、ますます多くの鉄欠乏症のない癌患者に、マクロファージ含有量及び脈管構造を可視化する造影剤としてＦＭＸが投与されている。ＭＭ−３９８のように、ＦＭＸも直径約１７〜３１ｎｍのナノ粒子である。ＭＭ−３９８の有効性において、腫瘍浸透性が重要な因子であると予測されたので、リポソーム沈着の代用物としての使用のために、ＦＭＸも研究した（図１９Ａ）。ＦＭＸの利点は、この薬剤が、不十分な薬物摂取のために、ＭＭ−３９８が奏効する可能性が低い患者を同定するのに役立つことである。診断試験としてのフェルモキシトールは、別の方法で分類されない、ＭＭ−３９８から有意に恩恵を受ける患者集団の検出を可能にする。
【００８５】
ＦＭＸ注入に伴うリスクに関しては、Ｆｅｒａｈｅｍｅ（登録商標）添付文書毎に、次の警告及び使用上の注意：過敏反応、低血圧、鉄過剰，及びＭＲＩの診断能に影響を与える能力は、ＦＭＸに適応される。ＦＭＸで処置した患者６０５人を登録した３つの無作為臨床試験で、次の有害事象が、フェルモキシトールで処置した患者の≧１％により報告された：悪心、めまい、低血圧、末梢浮腫、頭痛、浮腫、嘔吐、腹痛、胸痛、咳、かゆみ、発熱、背痛、筋痙攣、呼吸困難、及び発疹。全ての鉄（ＩＶ）製品は、潜在的に生命を脅かすアレルギー反応のリスクを伴う。主に慢性腎疾患を患者に行ったＦｅｒａｈｅｍｅ（登録商標）の初期臨床試験では、重篤な過敏反応は、Ｆｅｒａｈｅｍｅ（登録商標）を投与されている患者の０．２パーセント（３／１，７２６）で報告された。過敏症（例えば、かゆみ、発疹、蕁麻疹、または喘鳴）に潜在的に関連する他の有害反応が、これらの患者の３．７パーセント（６３／１，７２６）で報告された。慢性腎疾患患者を含まない他の試験では、アナフィラキシーを含む中程度から重度の過敏反応が、Ｆｅｒａｈｅｍｅ（登録商標）で処置した患者の２．６パーセント（２６／１，０１４）で報告された。２００９年６月３０日のＦｅｒａｈｅｍｅ（登録商標）の承認以来、死亡を含む重篤な過敏症の症例が生じている。試験ＭＭ−３９８−０１−０１−０２では、合計１５人の患者は、現在までにフェルモキシトールを投与されており、１３／１５の患者は、ＭＭ−３９８を投与される試験を継続した。フェルモキシトールに関連する過敏反応または有害事象は、これらの１５人の患者について報告されなかった。ＭＭ−３９８などの治験薬で処置されている進行した不治の癌患者は、処置選択肢が非常に限られ、かつ潜在的な疾患で死亡するリスクが非常に高い末期癌を有する。ＦＭＸ、続いて、ＭＭ−３９８で患者を処置する増加リスクは、転移性癌患者のＭＭ−３９８処置に伴う全体的なリスクと比較して小さいようである。ＭＭ−３９８臨床試験の一環として投与された場合、ＦＭＸがラベル指示に従って投与されることを確実にするために、フェルモキシトール注入中及びその後の３０分間患者の慎重なモニタリングを含む予防措置がとられる。次の状態：鉄過剰の所見、フェルモキシトール若しくは他の鉄（ＩＶ）製品に対する既知の過敏症、複数の薬物アレルギーの既往歴、またはＭＲＩが別の理由で禁忌であるもの、のいずれかを有する患者にＦＭＸを投与しないように、さらなる予防措置がとられる。
【００８６】
試験ＭＭ−３９８−０１−０１−０２からのＭＲＩの結果は、腫瘍病変におけるＦＭＸの沈着の量を定量することができたことを実証し（図１９Ｂ）、続いて、ＭＲＩによる腫瘍病変のフェルモキシトールの取り込み及びＭＭ−３９８の奏効の間に、相関が存在することが示された（図１９Ｃ）。ここで、この相関は、第Ｉ相試験の拡張でさらに試験されており、ＭＭ−３９８＋ベリパリブの試験のための相補的なイメージング試験として含まれる。
【００８７】
最終的に、コンパニオン診断薬としてのＦＭＸの開発は、奏効し得る処置した患者の割合を増加させる強化ツールとしても機能しながら、非奏効者である患者に処置関連毒性への不必要な曝露を控える両方の可能性がある。
【００８８】
処置計画
ＭＭ−３９８は、２週間毎に８０ｍｇ／ｍ２の用量で９０分間にわたり静脈内（ＩＶ）注入により投与される。５−ＦＵ及びロイコボリンと組み合わせて、膵癌においてＮＡＰＯＬＩ試験でうまく使用した用量として、８０ｍｇ／ｍ２でのＭＭ−３９８の開始用量を選択し、それ故、ＭＭ−３９８用量は、一定に保たれ、漸増しない。ベリパリブは、在宅患者に１日２回経口投与される：薬物が投与された日の投薬量及び時間を記録するために、日誌がつけられる。ベリパリブの投与日数は、以下の表の用量漸増スキームにより調査される。１日２回１００ｍｇのベリパリブの開始用量は、ＦＯＬＦＩＲＩの一部としてイリノテカンと組み合わせて投与される用量の半分であり、最近ＡＳＣＯ年次会議で報告された（Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ３２，２０１４（ｓｕｐｐｌ  １５Ｓ；ａｂｓｔｒ  ２５７４））。開始用量レベルでの安全性は、ＭＭ−３９８投与後５日目に開始するベリパリブの開始により確保される。これまでに得られたデータは、ＳＮ−３８が、この時点までに血漿からクリアランスされるが、依然として腫瘍組織に蓄積されることを示唆する（図７Ｃを参照のこと）。用量レベル２、１日２回２００ｍｇのベリパリブは、ＦＯＬＦＩＲＩレジメンで使用されたベリパリブのＭＴＤであった；それ故、用量レベル２が、評価期間の後に安全とみなされる場合、ベリパリブの投与日数を増加させることは、次の用量レベル（用量レベル３）のために計画された用量漸増ステップである。用量レベル３のベリパリブの用量及びスケジュールが安全であるとみられる場合は、次に、ベリパリブ用量の漸増が進行する。用量レベル３が安全とみられない場合は、ベリパリブの投与日数を漸減させる代わりの投与スケジュールが調査されてもよい。
【００８９】
ＭＭ−３９８を、２週間毎に８０ｍｇ／ｍ２の用量で９０分間かけて静脈内（ＩＶ）注入により投与する。以下のスケジュールに従って、ベリパリブを在宅患者に１日２回経口同時投与する：
【表Ｂ−１】
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【表Ｂ−２】
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１スポンサー、医療モニター、研究者の同意の際に、さらなる用量レベル及び代わりの投与スケジュールが調査されてもよい。
＊＊ＭＴＤに到達後、初回サイクルのためにのみ、本発明者らは、以下の相関セクションで概説された概要に従って腫瘍生検を得る約１８人の患者を登録するように計画する。
【００９０】
実施例２：インビトロ試験
インビトロ試験を実施して、種々のＰＡＲＰ阻害薬及びトポイソメラーゼ阻害薬であるリポソーム型イリノテカン及びＳＮ−３８の組み合わせを試験した。
【００９１】
図１Ａ〜１Ｄは、ＳＮ−３８及び／または種々のＰＡＲＰ阻害薬による処置後の子宮頸癌細胞生存率を示す折れ線グラフを示す。別途表記のない限り、２４時間、０．３３マイクログラム／ｍＬで、ＳＮ−３８（トポイソメラーゼ１阻害薬）及び／または３つの異なるＰＡＲＰ阻害薬（ベリパリブ、ニラパリプ、若しくはオラパリブ）で処理した３８４ウェルプレート中、１０００細胞／ウェルで、５つの異なる子宮頸癌細胞の細胞生存率（図１ＡのＭＥ−１８０、図１ＢのＭＳ−７５１、図１ＣのＣ−３３Ａ、図１ＤのＳＷ７５６、及び図１ＥのＳｉＨａ）を測定し、続いて、洗浄し、新しい培地でさらに７２時間インキュベーションすることにより、これらの図のそれぞれのデータを得た。
【００９２】
トポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ−３８及び種々のＰＡＲＰ阻害薬（ベリパリブ、オラパリブ、及びルカパリブ）の組み合わせを、種々の小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、膵癌、及び乳癌細胞株を用いてインビトロで試験した。２ｎＭのＳＮ−３８濃度では、オラパリブ、ベリパリブ、及びルカパリブと（オラパリブ及びルカパリブよりもＳＮ−３８と組み合わせてわずかに強力でないことが観察されたベリパリブと）組み合わせた癌細胞の相加的／相乗的成長阻害が観察された。試験した全ての濃度において、癌細胞集団の静的成長が達成された。図２Ａ〜２Ｅは、以下の表４〜５に従ってフォーマットされたトポイソメラーゼ１阻害薬ＳＮ３８の、種々のＰＡＲＰ阻害薬との組み合わせを評価するインビトロ実験の結果を示すグラフである（５，０００細胞／ウェル、１ウェル当たり１００マイクロリットルのプレート；１薬物当たり１０マイクロリットルの薬物を、２０倍添加し、ＤＭＥＭで合計１００マイクロリットルを上回る；次に、６８時間まで４時間毎のスキャンを開始する）。
【表４】
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【表５】
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【００９３】
ＤＭＳ−１１４  ＳＣＬＣ細胞を用いた、試験したＰＡＲＰ阻害薬オラパリブ、ベリパリブ、及びルカパリブと組み合わせた２ｎＭのＳＮ−３８の間に、相加的／相乗的効果が観察された。図２Ａは、トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＤＭＳ−１１４小細胞肺癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【００９４】
ＮＣＩ−Ｈ１０４８  ＳＣＬＣ細胞は、遅い成長を示し、オラパリブ及びルカパリブの２ｎＭのＳＮ−３８との組み合わせに対して非常に感受性であった。図２Ｂは、トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＮＣＩ−Ｈ１０４８小細胞肺癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【００９５】
ＣＦＰＡＣ−１膵癌細胞を用いた、試験したＰＡＲＰ阻害薬オラパリブ、ベリパリブ、及びルカパリブと組み合わせた２ｎＭのＳＮ−３８の間に、相加的／相乗的効果が観察された。図２Ｃは、トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＣＦＰＡＣ−１膵癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【００９６】
図２Ｄは、トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＢｘＰＣ−３膵癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。図２Ｅは、トポイソメラーゼ阻害薬ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬ルカパリブで処置したＭＤＡ−ＭＢ−２３１トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）癌細胞の経時的な％細胞数のインビトロ測定の結果を示すグラフである。
【００９７】
図１７Ａは、子宮頸部モデルにおけるＳＮ−３８のインビトロ活性を示す。子宮頸部細胞株を、同時またはＳＮ−３８の２４時間後にベリパリブを添加したスケジュールのいずれかで、ベリパリブ及びＳＮ−３８で処理し、ＣＴＧアッセイを使用して、細胞生存率を測定した。
【００９８】
実施例３：前臨床耐量試験
前臨床耐量試験を含む、リポソーム型イリノテカンに対するベリパリブの遅延投与が全身毒性を緩和することができることを評価するための種々の前臨床インビボ実験を行った。ベリパリブ及びイリノテカンの組み合わせは、この組み合わせが各薬剤の高（有効）用量で投与されることを妨げた用量制限毒性により悩まされており、それにより、臨床的有用性が制限される。この問題に対処するために、前臨床試験は、トポイソメラーゼ１阻害薬のリポソーム調製物を投与し、続いて、リポソーム型トポイソメラーゼ１阻害薬を投与した日の少なくとも１日（好ましくは２〜３日）後にＰＡＲＰ阻害薬を投与することを評価した。
【００９９】
遊離イリノテカンと比較してＭＭ−３９８を投与する利点は、拡張ＰＫ及びＭＭ−３９８への長い局所腫瘍曝露である。ＳＮ−３８が、腫瘍からよりも、正常組織から迅速にクリアランスされるので、ベリパリブの遅延投与（例えば、ＭＭ−３９８投与の数日後にベリパリブ投与を開始する）は、最大のイリノテカン誘導毒性の時間帯が、同時のベリパリブ毒性の不存在下で経過することを可能にする。しかし、ＳＮ−３８の腫瘍レベルは、健康な組織よりも長く持続する。その結果、リポソームＴｏｐ１阻害薬（例えば、ＭＭ−３９８）投与後のＰＡＲＰ阻害薬投与に際して、両方の薬物が同時に腫瘍組織に作用する。
【０１００】
ｎａｌ−ＩＲＩに対するベリパリブの遅延投与が、全身毒性を緩和することができることを実証するために、前臨床耐量試験を実施した。マウスにｎａｌ−ＩＲＩを、１日目に種々の用量で週１回、長期投与した一方、ベリパリブを、毎週連続３日間（２日目〜４日目、３日目〜５日目、または４日目〜６日目のいずれか）、固定用量で、１日１回投与し、毒性の肉眼的測定として、体重を追跡した。全てのマウスに、ベリパリブを１日目に週１回長期投与し、続いて、２日目〜４日目（８Ａ）、３日目〜５日目（８Ｂ）、または４日目〜６日目（８Ｃ）のいずれかの連続３日間投与した。マウスを毎日体重測定し、％体重増加をＹ軸上に示した。体重減少は、その組み合わせの不耐性を示している。特に、最高用量（５０ｍｇ／ｋｇ）のＭＭ−３９８リポソーム型イリノテカンは、ベリパリブを４日目、５日目、及び６日目に投与した時に、最良の忍容性であった（すなわち、実験にわたって観察された、最も低く測定された体重の％低減）（図８Ｃ）。同様に、ＭＭ−３９８投与後４日目、５日目、及び６日目にだけベリパリブを投与した場合、ベリパリブ及びＭＭ−３９８の組み合わせは、低いＭＭ−３９８リポソーム型イリノテカン用量で、最良の忍容性であった。組み合わせの毒性は、ベリパリブ用量に極めて接近して与えられた時の最高用量のＭＭ−３９８で見られた（図８Ａ）。しかし、ＭＭ−３９８を低減させる用量またはベリパリブの投与の開始を遅延させることのいずれかにより、この毒性を緩和することができ、それにより、ＭＭ−３９８を１日目に投与した後４日目〜６日目に与えられた場合のベリパリブと共に、最高用量のＭＭ−３９８をうまく投与することができた（図８Ａ〜８Ｃ）。ベリパリブ単独では有効性がなく（図１１Ａ）、かつ第２のモデルではＭＭ−３９８またはベリパリブのいずれも単剤として有効性がなかった（図１１Ｂ）が、組み合わせが腫瘍成長阻害を実証した（図１１Ｂ）２つの子宮頸癌腫瘍異種移植モデルにおける組み合わせの相乗作用を実証した後続の有効性試験では、（１日目のＭＭ３９８を投与した後）４日目〜６日目のベリパリブ投与スケジュールに従った。
【０１０１】
ＭＭ−３９８に対するオラパリブの遅延投与が全身毒性を緩和することができることを実証する実施形態を例示するために、前臨床耐量試験を行った。図９は、異なる群：群１：ＭＭ−３９８単独ＩＶ（１０ｍｇ／ｋｇ）；群２：オラパリブ単独経口（２００ｍｇ／ｋｇ）；群３：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（２００ｍｇ／ｋｇ、ｄ１−５）；群４：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（１５０ｍｇ／ｋｇ、ｄ１−５）；群５：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（２００ｍｇ／ｋｇ、ｄ１−４）；群６：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（２００ｍｇ／ｋｇ、ｄ２−５）；群７：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（２００ｍｇ／ｋｇ、ｄ３−５）；群８：ＤＭＳＯ単独経口について種々の投与スケジュールを用いて、単独療法として、または固定用量のＭＭ−３９８及び変動する用量のオラパリブを使用する組み合わせで、ＭＭ−３９８及びオラパリブを比較するマウス忍容性試験デザインのグラフ表示である。図１０Ａ〜１０Ｄは、変動する用量のオラパリブで、かつマウスモデルにおけるＭＭ−３９８の後のＰＡＲＰ阻害薬投与の変動するケジュールで、単独療法または併用療法として与えられたＭＭ−３９８及びオラパリブに関連する毒性を実証する折れ線グラフである。ＭＭ−３９８、オラパリブの単独療法を受けたマウスに、週に５回投与した。一定濃度のＭＭ−３９８（１０ｍｇ／ｋｇ）及び変動する濃度のオラパリブの組み合わせ：群３：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（２００ｍｇ／ｋｇ、ｄ１−５）；群４：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（１５０ｍｇ／ｋｇ、ｄ１−５）；群５：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（２００ｍｇ／ｋｇ、ｄ１−４）；群６：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（２００ｍｇ／ｋｇ、ｄ２−５）；群７：ＭＭ−３９８（ｄ１）＋オラパリブ（２００ｍｇ／ｋｇ、ｄ３−５）を投与されたマウスに、変動するスケジュールで投与した。（Ａ）体重及び（Ｂ）生存率をグラフ化することにより、処置依存毒性について、マウスを監視した。オラパリブの添加は、単独療法と比較してより毒性であるように見えたが、ｄ３へのオラパリブ投与の開始を遅延させることは、併用療法と比較してオラパリブ特異的毒性を減少させるように見えた。マウスにＭＭ−３９８を、１日目に種々の用量で週１回、長期投与した一方、オラパリブを、各週の連続５日間、４日間、または３日間（１日目〜５日目、１日目〜４日目、２日目〜５日目、または３日目〜５日目のいずれか）、週単位の固定用量で、１日１回投与し、体重及び生存率を、毒性の肉眼的測定として追跡した。組み合わせの毒性は、オラパリブ用量に極めて接近して与えられた時の最高用量のＭＭ−３９８で見られた（図８）。しかし、オラパリブの投与の開始を遅延させることのいずれかにより、この毒性を緩和することができ、それにより、ＭＭ−３９８を１日目に投与した後３日目〜５日目に与えられた場合のオラパリブと共に、最高用量のＭＭ−３９８をうまく投与することができた（図１０Ａ〜１０Ｄ）。
【０１０２】
マウスにＭＭ−３９８を、１日目に種々の用量で週１回、長期投与した一方、ベリパリブを、各週の連続３日間（２日目〜４日目、３日目〜５日目、または４日目〜６日目のいずれか）、固定用量で１日１回投与し、体重を、毒性の肉眼的測定として追跡した。組み合わせの毒性は、ベリパリブ投与に極めて接近して投与された時の最高用量のｎａｌ−ＩＲＩで見られた。しかし、ｎａｌ−ＩＲＩを低減させる用量またはベリパリブ投与の開始を遅延させることのいずれかにより、この毒性を緩和することができた。ベリパリブ単独では有効性がなく、かつ第２のモデルではｎａｌ−ＩＲＩまたはベリパリブのいずれも単剤として有効性がなかったが、組み合わせが腫瘍成長阻害を実証した２つの子宮頸癌腫瘍異種移植モデルにおける組み合わせの相乗作用を実証した後続のマウス有効性試験では、本投与スケジュールに従った。
【０１０３】
１日目〜３日目、２日目〜４日目、及び３日目〜５日目のベリパリブの投与と組み合わせて、マウスモデルにおける１日目のＭＭ３９８の組み合わせの忍容性を評価した。ベリパリブの初回投与が２日目及び３日目に、初回ベリパリブ投与が３日目に起こり、最も忍容性である投与スケジュールを提供するので、（２０日にわたって体重のパーセント変化を測定した）マウスにおける併用レジメンの忍容性は増加した。図１２Ａは、下限を調整した体重のパーセント変化に反映されるように、ＭＭ−３９８の投与後１日目、２日目、３日目、または２日目、３日目、４日目、または３日目、４日目、５日目に与えられた５０ｍｇ／ｋｇのベリパリブと組み合わせた１日目の５０ミリグラム／キログラム（ｍｐｋ）の用量のＭＭ−３９８のインビボ忍容性をさらに示すグラフである。図１２Ｂは、下限を調整した体重のパーセント変化に反映されるように、ＭＭ−３９８の投与後１日目、２日目、３日目、または２日目、３日目、４日目、または３日目、４日目、５日目に与えられた５０ｍｇ／ｋｇのベリパリブと組み合わせた１日目の２８ｍｐｋの用量のＭＭ−３９８のインビボ忍容性をさらに示すグラフである。
【０１０４】
図１６は、実施例５に記載のＣ３３Ａ異種移植モデルにおけるＭＭ−３９８のベリパリブとの組み合わせによるマウスの処置が、いずれかの薬物単独の投与と比較して体重の減少も、もたらすことを示すグラフである。
【０１０５】
これらの試験は、ＰＡＲＰ阻害薬の投与の開始を、好ましくは、リポソーム型イリノテカンを投与した日の２〜３日後まで遅延させることにより、この毒性を緩和することができることを実証した。（ベリパリブ単独では有効性がなく、かつ第２のモデルではＭＭ−３９８またはベリパリブのいずれも単剤として有効性がなかったが、組み合わせが、腫瘍成長阻害を実証した）２つの子宮頸癌腫瘍異種移植モデルにおけるＰＡＲＰ阻害薬及びリポソーム型イリノテカンの組み合わせの治療的相乗作用を実証するマウス有効性試験（実施例４）では、ＰＡＲＰ阻害薬がリポソーム型イリノテカンの投与後の日にだけ投与された投与スケジュールに従った。
【０１０６】
実施例４：リポソーム型イリノテカンの前臨床的有効性
インビボ腫瘍異種移植試験は、リポソーム型イリノテカンの有効性が、遊離イリノテカンよりも多いことを実証した。さらに、インビボ腫瘍異種移植試験は、ＭＭ−３９８が、ＭＭ−３９８を投与した後の、ＣＰＴ−１１の高いＣＥＳ活性及び／または高い腫瘍レベルに関連することを実証した。さらに、ＭＭ−３９８は、乳房、結腸、卵巣、及び膵臓腫瘍異種移植モデルを含むいくつかの前臨床モデルにおいて、遊離イリノテカンの等価投与と比較して優れた活性を実証している。
【０１０７】
リポソーム型イリノテカン（ＭＭ−３９８）は、非リポソーム型イリノテカンと比較して、種々の癌モデルでより大きい有効性を有する。癌細胞をマウスの皮下に移植した。腫瘍が十分に確立され、平均体積が２００ｍｍ３に達した時に、遊離イリノテカン、ＭＭ−３９８、または対照による処置ＩＶを開始した。各試験に使用された遊離及びナノリポソーム型イリノテカンの用量を上に示し、投与時点は矢印で示す。腫瘍浸透性ならびにＣＰＴ−１１のＳＮ−３８への酵素的変換に関与している腫瘍組織カルボキシルエステラーゼ（ＣＥＳ）活性は、ＭＭ−３９８投与後のＳＮ−３８の局所腫瘍曝露の重要な因子であると予測される。インビボ腫瘍異種移植試験は、ＭＭ−３９８の有効性が、ＭＭ−３９８を投与した後の、ＣＰＴ−１１の高いＣＥＳ活性及び／または高い腫瘍レベルに関連することを実証している。さらに、ＭＭ−３９８は、乳房、結腸、卵巣、及び膵臓腫瘍異種移植モデルを含むいくつかの前臨床モデルにおいて、遊離イリノテカンの等価投与と比較して優れた活性を実証している。
【０１０８】
実施例５：リポソーム型イリノテカン及びＰＡＲＰ阻害薬の前臨床活性
図１１Ａ及び図１１Ｂに関し、複数の子宮頸異種移植モデルにおいてベリパリブ（ＰＡＲＰｉ）と組み合わせて、ＭＭ−３９８の抗腫瘍活性を試験した。この試験では、子宮頸癌のＭＳ−７５１及びＣ３３Ａ異種移植モデルを用いて、最適以下の用量のＭＭ−３９８をＰＡＲＩＰ阻害薬のベリパリブと組み合わせて投与する効果を精査した。２４時間及び７２時間でのＭＭ−３９８の異なる組織レベルは、ＭＭ−３９８及び活性代謝産物ＳＮ−３８が、腫瘍よりも肝臓、脾臓、結腸、及び血漿から速くクリアランスしたことを示した。ベリパリブ及びＭＭ−３９８の組み合わせは、ベリパリブまたはＭＭ−３９８単独と比較した時に、重要なＰＤバイオマーカー（切断されたカスパーゼ及びｙＨ２ＡＸ）の改善をもたらした。図１１Ａ及び１１Ｂは、ＭＭ−３９８＋ベリパリブの組み合わせが相乗的であることを示す。２つの異なる子宮頸癌異種移植モデルを利用して、１日目に週に１回投与したＭＭ−３９８（矢印）、毎週４日目〜６日目に連続３日間、１日１回、経口的に５０ｍｇ／ｋｇで投与したベリパリブ、または組み合わせた単剤処置と同じスケジュールで投与した組み合わせの有効性を試験した。（Ａ）５ｍｇ／ｋｇで投与したＭＭ−３９８を使用したＭＳ７５１子宮頸癌異種移植モデル及び（Ｂ）２ｍｇ／ｋｇで投与したＭＭ−３９８を使用したＣ３３Ａ子宮頸癌異種移植モデル。この試験では、対照マウスは同じ株であり、マウスを試験する前に採取した（わずかに若い）。体重減少のために試験から除外されたマウスまたは終了日前にマウスが間違って除外されたマウスについては、データは提示しない。
【０１０９】
子宮頸部ＭＳ−７５１異種移植モデル
表６に、ＭＳ−７５１異種移植片モデルの詳細をまとめる。
【表６】
2018528184.tif 000014
【０１１０】
図１３Ａは、いずれの薬物単独の投与と比較しても、ＭＳ７５１異種移植モデル（ｐ＝０．０３）において、ベリパリブと組み合わせてＭＭ−３９８（５ｍｐｋ用量）を投与した時に、腫瘍体積が減少したことを示す。図１３Ｂは、ＭＳ７５１異種移植片モデルにおいて、単独で投与されたいずれの薬物による処置と比較しても、ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８（５ｍｐｋの用量）で処置したマウスの生存率が良好であったことを示す。図１３Ｃは、ＭＳ７５１異種移植片モデルにおいて、ＭＭ−３９８のベリパリブとの組み合わせによる処置が、いずれの薬物単独の投与と比較しても、体重の減少をもたらすことを示す。
【０１１１】
Ｃ３３Ａ子宮頸部異種移植モデル
表７に、Ｃ３３Ａ異種移植モデルの詳細をまとめる。
【表７−１】
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【表７−２】
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【０１１２】
図１４は、Ｃ３３Ａ異種移植モデルにおいて、ＭＭ−３９８のベリパリブとの組み合わせが、単独で投与したいずれの薬物単独と比較しても、腫瘍体積の減少をもたらすことを示す。図１５は、Ｃ３３Ａ異種移植モデルにおいて、単独で投与されたいずれの薬物と比較しても、ベリパリブと組み合わせたマウスＭＭ−３９８（５ｍｐｋの用量）の生存率がより良好であったことを示す。
【０１１３】
実施例６：リポソーム型イリノテカン及びＰＡＲＰ阻害薬の臨床的使用
リポソーム型イリノテカン及びベリパリブの臨床的使用
これは、推奨された第ＩＩ相用量として同定される最適な組み合わせ用量及びスケジュールを決定するために、ベリパリブと組み合わせたＭＭ−３９８の安全性、忍容性、ＭＴＤ、及びＰＫを特徴づける第Ｉ相ヒト用量漸増試験である。次の模式図は、ＭＭ−３９８の隔週投与と組み合わせて検討されるベリパリブ投与の２つの異なるスケジュールを概説する：
【化１】
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【０１１４】
ＭＭ−３９８は、２週間毎に８０ｍｇ／ｍ２の用量で９０分間にわたり静脈内（ＩＶ）注入により投与される。２週１回（各２８日処置サイクルの１日目及び１５日目）、８０ｍｇ／ｍ２（塩）イリノテカンの用量で９０分間かけて静脈内（ＩＶ）注入により、ＭＭ−３９８を投与する。以下のスケジュールに従って、ベリパリブを在宅患者に１日２回経口同時投与する：
【表８−１】
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【表８−２】
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１スポンサー、医療モニター、研究者の同意の際に、さらなる用量レベル及び代わりの投与スケジュールが調査されてもよい。
＊＊ＭＴＤに到達後、初回サイクルのためにのみ、本発明者らは、以下の相関セクションで概説された概要に従って腫瘍生検を得る約１８人の患者を登録するように計画する。
【０１１５】
試験には、従来の３＋３用量漸増デザインの後、１用量コホート当たり３人の患者を登録する。ＭＴＤを決定するために、処置の初回サイクル（２８日間）中に、用量制限毒性（ＤＬＴ）を評価する。安全評価期間内にＤＬＴがない場合、研究者及び医療モニターの間の合意に後に、次のコホートを開始することができる。ＤＬＴが発生した場合、コホートを、６人の患者に拡大する。２人以上の患者が所定の用量レベル内にＤＬＴを有する場合、用量をさらに漸増することはないが、より低い用量が調査されてもよい。観察された安全性、忍容性、及びＰＫに応じて、さらなる投与スケジュールも調査されてもよい。
【０１１６】
これらの個々の治療法が、以前の臨床試験で試験されていることを考えると、安全性評価が、標準用量レジメンの予想される安全性プロファイルを考慮に入れることが重要である。全ての処置レジメンでは、疾患増悪に関連する毒性は、ＤＬＴとは考えられない。試験組み合わせのサイクル１中に起こる次の事象は、薬物関連とみなされる場合、ＤＬＴと考えられる：
グレード３または４の３８．５℃以上の発熱を併発する好中球減少症（すなわち、発熱性好中球減少）及び／または記録された感染；
（治験薬及びＧＣＳＦ投与を控える）最適な治療にもかかわらず、７日以内に回復しないグレード４の好中球減少症；
７日以内に回復しないグレード４の血小板減少症または出血を併発する任意のグレード３〜４の血小板減少症；
（治験薬及び赤血球輸血を控える）最適な治療にもかかわらず７日以内に回復しないグレード４の貧血；
治験薬の毒性のため、予定日から１４日以内に後続の処置コースを開始することができない；
任意のグレード３〜４の血液学的毒性（持続時間が２週間未満の疲労／無力症；最適な制吐薬若しくは下痢止めレジメンによる処置の有無に関わりなく、７２時間未満の嘔吐若しくは下痢；またはアルカリホスファターゼの変化を除く）。
２年以上の発作。
【０１１７】
試験薬物の初回投与から８週間毎にＣＴスキャンで評価したＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１基準により決定する場合、疾患増悪まで、患者を処置する。以下の表９に、臨床試験の包含基準及び除外基準をまとめる。
【表９−１】
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【表９−２】
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【０１１８】
６人の患者が、５用量レベルのそれぞれで必要とされる場合、試験の用量漸増部分は、多くとも３０人の患者を必要とし得る。追加の１８人の患者を使用して、ベリパリブの生物学的相関性への効果を調査してもよい。従って、発生上限を、４８人の患者に設定する。
【０１１９】
この試験は、全ての固形腫瘍型を含むように提案されているが、この試験のために高い関心を示す特定の適応症には、次の：子宮頸癌、卵巣癌、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、胃癌、膵癌、及び神経内分泌腫瘍を含む。
【０１２０】
本明細書の方法及び使用は、ＰＡＲＰ阻害薬に感受性であると予測される散発性腫瘍において見出される、ＤＮＡ損傷応答（ＤＤＲ）経路欠損（または「ＢＲＣＡｎｅｓｓ」）の頻度の増加について指摘されているものを含む他の腫瘍の好適な型に適用することもできる。以前に言及したように、特にトリプルネガティブ乳癌及び高グレード漿液性卵巣癌において見出されるＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２欠損は、細胞をＰＡＲＰ阻害薬に感作させる。同様に、エンドヌクレアーゼＸＰＦ−ＥＲＣＣ１、相同組換え修復タンパク質、減数分裂組換えタンパク質１１（ＭＲＥ１１）及びＦａｎｃｏｎｉ貧血経路（ＦＡＮＣ）タンパク質を含むＤＤＲ経路に関与する他の遺伝子及びタンパク質の機能喪失も、細胞をＰＡＲＰ阻害薬に感作させる。Ｆａｎｃｏｎｉ貧血経路の欠損は、肺癌、子宮頸癌、ならびに乳癌及び卵巣癌において実証されている。これら及び他のＤＤＲ経路の欠損は、ＰＡＲＰ阻害薬治療のための予測バイオマーカーであってよく、本試験では遡及的に検討される。ベリパリブは、具体的には、ＢＲＣＡ陽性及びＢＲＣＡ野生型乳癌及び卵巣癌ならびにＦＯＬＦＩＲＩと組み合わせた胃癌を含む、多くの適応症において臨床活性も実証している。提案した試験の場合、満たされていない高い医学的ニーズだけでなく、上述の前臨床及び／または臨床経験に基づくイリノテカン及び／またはベリパリブに対する潜在的な感受性のために、適応症を選択した。ＰＡＲＰ阻害薬のオラパリブが最近、ＢＲＣＡ＋卵巣癌における単独療法としてＦＤＡに承認されているが、本試験は、併用療法の第Ｉ相試験であり、ＢＲＣＡに加えて他のＤＤＲ経路の欠損で遡及的に患者を同定し得るので、卵巣患者集団の処置は、ＢＲＣＡ＋患者に限定されない。
【０１２１】
リポソーム型イリノテカン及びオラパリブの使用
２週間毎に、（７０ｍｇ／ｍ２のイリノテカン遊離塩基と同等の、対応量のイリノテカン塩酸塩三水和物を基準にした）８０ｍｇ／ｍ２の用量で９０分間かけて静脈内（ＩＶ）注入により、ＭＭ−３９８を投与する。次のスケジュール（表１０）に従って、在宅患者に１日２回オラパリブを経口投与する。
【表１０】
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＊＝８０ｍｇ／ｍ２のＭＭ−３９８用量は、（イリノテカン遊離塩基を基準にした７０ｍｇ／ｍ２と同等の）対応量のイリノテカン塩酸塩三水和物を基準にする。
【０１２２】
実施例７：腫瘍生検におけるリン酸化Ｈ２ＡＸの測定
リン酸化されたＨ２ＡＸ（γ−Ｈ２ＡＸ）は、ＢＲＣＡ１、ＭＲＥ１１／ＲＡＤ５０／ＮＢＳ１複合体、ＭＤＣ１、及び５３ＢＰ１などのＤＮＡ修復及びチェックポイントタンパク質のリクルート及び／または保持に重要な役割を果たす。ＤＮＡ損傷は、カンプトテシンに曝露した後の癌細胞におけるＨ２ＡＸリン酸化を増加させることが示されている。ＰＡＲＰ阻害薬化合物（複数可）が、ＭＭ−３９８由来のイリノテカンによるＤＮＡ損傷の程度を増加させることができる場合、Ｈ２ＡＸリン酸化の測定により検出可能であり得る。以前の臨床試験で、免疫蛍光アッセイを使用した。容易に利用可能な疾患がある場合、患者の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、毛包、及び／または腫瘍生検試料を採取する。γ−Ｈ２ＡＸレベルで測定された薬力学的応答間の関連性は、必要に応じて、Ｆｉｓｈｅｒ検定またはＷｉｌｃｏｘｏｎ順位和検定で評価することができる：この評価は、２用量レベルの最大値のＭＴＤ＋／−で行われる（図１８）。
【表１１−１】
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【表１１−２】
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【０１２３】
実施例８：リポソーム型イリノテカンからのトポイソメラーゼ阻害薬の沈着を予測するためのフェルモキシトールの投与及び検出
図１９Ａ〜１９Ｃは、ＦＭＸ  ＭＲＩが、ＭＭ−３９８の腫瘍奏効の予測ツールであり得ることを示す。図１９Ａは、ＭＭ−３９８及びＦＭＸが、１）拡張ＰＫ、２）ＥＰＲ効果（すなわち、漏出性脈管構造）を介して腫瘍組織に沈着する能力、及び３）マクロファージによる取り込みを含む類似の特性を有することを示す概略図である。従って、ＭＲＩでのＦＭＸの視覚化は、ＭＭ−３９８の沈着を予測することができ得る。（Ｂ）ＦＭＸ注射の２４時間後に得られたＭＲ画像からの標準曲線を使用して、個々の患者病変のＦＭＸ濃度を算出した。（Ｃ）２４時間における病変部からのＦＭＸ信号は、ＦＭＸＭＲＩ評価可能な病変で観察された中央値に対してグループ化され、ＣＴスキャンに基づく病変サイズの最良の変化と比較される（９人の患者から得られたデータ。合計３１病変）。
【０１２４】
ＭＭ−３９８の第Ｉ相試験は、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）含有量及びＭＭ−３９８沈着を予測するために、磁気共鳴（ＭＲ）イメージングの可能性も調査した。ＴＡＭは、腫瘍微小環境内でのＭＭ−３９８の沈着、保持、及び活性化において重要な役割を果たすようである。この臨床試験では、フェルモキシトール（ＦＭＸ）（ポリグルコースソルビトールカルボキシメチルエーテルでコーティングされた超常磁性酸化鉄の微粒子調製物）イメージング造影剤として使用し、ＭＲ画像を、ＦＭＸ注射の１時間後、２４時間後、及び７２時間後に得た。ＦＭＸは、慢性腎疾患を有する成人患者における鉄欠乏性貧血の処置に適応される承認された治療法であるが、ますます多くの鉄欠乏症のない癌患者に、マクロファージ含有量及び脈管構造を可視化する造影剤としてＦＭＸが投与されている。ＭＭ−３９８のように、ＦＭＸも直径約１７〜３１ｎｍのナノ粒子である。ＭＭ−３９８の有効性において、腫瘍浸透性が重要な因子であると予測されたので、リポソーム沈着の代用物としての使用のために、ＦＭＸも研究した（図１９Ａ）。ＦＭＸの利点は、この薬剤が、不十分な薬物摂取のために、ＭＭ−３９８が奏効する可能性が低い患者を同定するのに役立つことである。診断試験としてのフェルモキシトールは、別の方法で分類されない、ＭＭ−３９８から有意に恩恵を受ける患者集団の検出を可能にする。
【０１２５】
ヒト臨床試験実験からのＭＲＩの結果は、腫瘍病変におけるＦＭＸの沈着の量を定量することができたことを実証し（図１９Ｂ）、続いて、ＭＲＩによる腫瘍病変フェルモキシトールの取り込み及びＭＭ−３９８の奏効の間に、相関が存在することを示した（図１９Ｃ）。ここで、この相関は、第Ｉ相試験の拡張でさらに試験されており、ＭＭ−３９８＋ベリパリブの試験のための相補的なイメージング試験として含まれる。
【０１２６】
ＦＭＸは、慢性腎疾患を有する成人患者における鉄欠乏性貧血の処置に適応する鉄代替品である。適応症として承認されていないが、フェルモキシトールは、癌患者における造影剤としても使用されており、本試験でそのように利用される。サイクル１の１日目の少なくとも２日前（最大８日前）に、５ｍｇ／ｋｇの単回用量のＦＭＸは、静脈内注射により投与される。総単回用量は、承認されたＦＭＸの最大単回用量である５１０ｍｇを超えることはない。この投与スケジュールは承認されたラベルよりも強くなく、これは、３〜８日間隔で５１０ｍｇの２回用量を推奨する；しかし、ＦＭＸが鉄欠乏症の代替品ではなく、この試験で造影剤として使用されているので、より低い用量がより適切である。３回のＭＲＩは、２日かけて各患者に対して実施される。全ての患者は、従来ＦＭＸ注入前に取得した基準画像及びＦＭＸ投与の終了の１〜４時間後に取得したもう第２の画像を有する。全ての患者は、以前と同じようなプロトコール及びシーケンスを使用した２４時間のＦＭＸ−ＭＲＩの場合、翌日には帰宅する。各患者は、スキャン間のばらつきを低減するために同じスキャナでＦＭＸ−ＭＲＩを完了する必要がある。スキャンされるべき身体領域は、患者の疾患の場所により決定される。各ＭＲＩ試験は、Ｔ１強調シーケンス、Ｔ２強調シーケンス、及びＴ２＊強調シーケンスでの腫瘍及び参照組織の画質及び信号特性について評価される。各患者からの完成した画像のセットが受信されると、定性的なレビューが実施され、解析のための定量研究室に送信される。データは、上記と同様の方法で解析される。
【表１２】
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【０１２７】
イメージング相関試験
患者は、次の基準のいずれかを満たしていない場合、ＦＭＸイメージング試験に参加するために適格である。
・以下で測定される場合の鉄過剰の徴候：
・４５％を超える空腹時トランスフェリン飽和、及び／または
・１０００ｎｇ／ｍｌを超える血清フェリチンレベル
・次のいずれかのアレルギー反応の病歴：
・フェルモキシトール注射用の完全な処方情報に記載されているようなフェルモキシトールまたはその構成成分のいずれかと類似する化合物
・鉄（ＩＶ）代替品（例えば、非経口用鉄、デキストラン、鉄デキストラン、または非経口鉄多糖調製物）
・複数の薬物
・ＭＲＩを受けることができず、またはＭＲＩが別の理由で禁忌である（例えば、規準をはずれた金属、心臓ペースメーカー、疼痛ポンプ、若しくは他のＭＲＩ非適合装置の存在；またはＭＲＩに関連する病歴の閉所恐怖若しくは不安）
【０１２８】
患者が、ＦＭＸ−ＭＲＩに同意する場合、患者は、フェルモキシトール注入を投与され、ＭＭ−３９８処置（ＦＭＸ期間）開始の約２〜６日前に必要とするＦＭＸ−ＭＲＩスキャンを受けることになる。ＦＭＸは、最大の５１０ｍｇまで５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。投与の他の全ての態様は、最新のフェルモキシトール処方情報と一致する。詳細なＦＭＸ−ＭＲＩプロトコールは、試験イメージングマニュアルに含まれる。要約すると、各患者は、スキャン間のばらつきを低減するために同じスキャナでＦＭＸ−ＭＲＩを完了する必要がある。各ＭＲＩ試験は、Ｔ１強調シーケンス、Ｔ２強調シーケンス、及びＴ２＊強調シーケンスでの腫瘍及び参照組織の画質及び信号特性について評価される。各患者からの完成した画像のセットが受信されると、画像は、定性的レビューのために閲覧ワークステーションにロードされ、次に、解析のために（中央イメージングＣＲＯにより処理される）定量研究室に送信される。
【０１２９】
複数のＭＲ画像は、１日目と同じプロトコール及びシーケンスを使用して、種々の時点でＦＭＸ期間の１日目〜２日目に収集される：ＦＭＸ注入の前に取得されたベースライン画像、ＦＭＸ投与の終了後１〜４時間に生じる第２の画像、及びＦＭＸの約２４時間後の第３の画像。スキャンされるべき身体領域は、患者の疾患の場所により決定される；詳細な使用説明書は、試験イメージングマニュアルに記載される。
【０１３０】
実施例９：５−フルオロウラシル及びロイコボリンと組み合わせたリポソーム型イリノテカンの臨床的使用
ＭＭ−３９８の臨床的有効性は、ゲムシタビン耐性転移性膵癌患者においても実証されている：無作為化第ＩＩＩ相国際試験（ＮＡＰＯＬＩ−１）において、５−フルオロウラシル／ロイコボリン（５−ＦＵ／ＬＶ）と組み合わせて、ＭＭ−３９８を投与し、５−ＦＵ／ＬＶ処置単独と比較して、全生存期間（ＯＳ）を有意に延長した。ＭＭ−３９８含有群のＯＳの中央値は、対照群の４．２ヶ月と比較して６．１ヶ月であった（ＨＲ＝０．６７、ｐ＝０．０１２２）。ＭＭ−３９８の活性医薬成分が、イリノテカンであるので、安全性プロファイルは、予想されるように、イリノテカンと質的に類似していた。最も一般的な有害事象（３０％以上）は、悪心、嘔吐、腹痛、下痢、便秘、食欲不振、好中球減少症、白血球減少（リンパ球減少症を含む）、貧血、無力症、発熱、体重減少、及び脱毛症（イリノテカン添付文書）である。表１４は、ＮＡＰＯＬＩ−１試験から、ＭＭ−３９８及び５−ＦＵ／ＬＶで処置された患者のグレード３またはより高い安全性データの概要を提供する。表１３は、比較のために第Ｉ相単独療法試験で観察された毒性を示す。
【表１３】
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【表１４】
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１用量：８０ｍｇ／ｍ２のＭＭ−３９８＋４６時間かけて２４００ｍｇ／ｍ２の／２週間毎に４００ｍｇ／ｍ２の５−ＦＵ／ＬＶ
２用量：２４時間かけて２０００ｍｇ／ｍ２の／６週間毎に、２００ｍｇ／ｍ２の５−ＦＵ／ＬＶ×４
３ＣＴＣＡＥバージョン４毎に
４少なくとも１つのベースライン後の評価が患者のみを含む
【０１３１】
実施例１０：ＳＮ−３８及びＰＡＲＰ阻害薬組み合わせ処置後の種々のＴＮＢＣ細胞株の細胞生存。
表１５及び１６は、ＳＮ−３８及び／またはＰＡＲＰ阻害薬で処置した後の細胞生存度を決定するための種々のトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）癌細胞株についての細胞生存のインビトロ測定の結果を提供する。表１５は、ＩＣ５０データを提供し、表１６は、最大死滅データを提供する。
【０１３２】
３８４ウェルフォーマットにおいて、これらのデータを生成した実験を実施した。細胞を１０００細胞／ウェルでプレーティングし、次に、２４時間インキュベーションした。ＳＮ−３８及び／または４つの異なるＰＡＲＰ阻害薬（タラゾパリブ、ニラパリブ、オラパリブ、またはルカパリブ）の１つを添加し、さらに２４時間インキュベーションし、次に、ウェルをＰＢＳで洗浄して薬物を除去し、新しい培地をウェルに添加した。次に、プレートを７２時間インキュベーションした。７２時間のインキュベーション期間後、培地を除去し、製品使用説明書に従ってのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）細胞生存率アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、ウィスコンシン州マジソン）を使用して、細胞生存率を測定した。図３Ａ及び３Ｂは、ＳＮ−３８及び／またはタラゾパリブによる処置後の、それぞれＢＴ２０及びＨＣＣ３８乳癌細胞株における細胞生存率を示す折れ線グラフである。
【表１５−１】
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【表１５−２】
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【表１５−３】
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【表１６−１】
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【表１６−２】
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【表１６−３】
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【０１３３】
本発明は、その具体的な実施形態に関連して記載されているが、それは、さらなる修正が可能になり、かつ本出願は、一般に、本発明の原理に従い、本発明が関連する技術分野内の既知のまたは慣習的な実施内に入り、かつ本明細書に記載の本質的な特徴に適用され得るような本開示からの逸脱を含む、本発明の任意の変更、使用、または適応を網羅することが意図されると理解される。本明細書で言及した全ての米国、国際、若しくは他の特許若しくは特許出願の開示または刊行物は、本明細書で全体として参照により本明細書に組み込まれる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図１Ｅ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図２Ｅ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１０Ｄ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１３Ｃ】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１８】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図１９Ｃ】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２１Ｃ】
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【図２１Ｄ】
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【国際調査報告】
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