【手続補正書】
【提出日】平成26年8月5日(2014.8.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
内部に試薬配置領域を有する空間として流路が形成され、流路の開口部である流入口、排出口を有し、該流入口、排出口が自己修復性機能を有するシリコーンゲルにより気密に閉塞されたマイクロチップへの試薬供給方法であって、
先端部が針状に形成され流体放出口となる開口を有する流体放出手段と、先端部が針状に形成され流体回収口となる開口を有する流体回収手段を、上記流入口、排出口に設けられたシリコーンゲルをそれぞれ貫通させて上記試薬配置領域を有する空間に進入させ、上記流体放出手段と流体回収手段の上記開口を上記試薬配置領域を有する空間に連通させる第１の工程と、
上記流体放出手段から試薬を注入するとともに、上記流体回収手段から試薬を排出させることにより、試薬を上記試薬配置領域の空間に供給する第２の工程と、
試薬の供給後、上記流体放出手段と流体回収手段を上記シリコーンゲルから離脱させる第３の工程からなり、
上記流体放出手段から、マイクロチップの試薬配置領域を有する流路に対して複数種類の試薬が順次注入され、
上記流体回収手段は、上記流路中に順次注入された試薬を順次排出し、
上記複数種類の試薬には上記試薬配置領域に固定される嫌気性抗体含有溶液が含まれ、
上記試薬は、該試薬の液面レベルが、上記試薬配置領域に固定される嫌気性抗体を完全に浸漬する高さとなるように注入される
ことを特徴とするマイクロチップへの試薬供給方法。
【請求項２】
請求項１の方法により試薬が供給されるマイクロチップであって、
上記マイクロチップは、内部に試薬配置領域を有する空間として流路が形成され、該流路に連通する流入口と排出口となる開口が設けられ、
上記流路の開口部である流入口、排出口は共に自己修復性機能を有するシリコーンゲルにより気密に閉塞されている
ことを特徴とするマイクロチップ
【請求項３】
内部に試薬配置領域を有する空間として流路が形成され、流路の開口部である流入口、排出口を有し、該流入口、排出口が自己修復性機能を有するシリコーンゲルにより気密に閉塞されたマイクロチップの上記流路に対して試薬を供給する試薬供給装置であって、
上記流路に対して試薬を放出する流体放出手段と、上記流路中の試薬を排出する流体回収手段とを備え、
上記流体放出手段および上記流体回収手段はいずれも中空筒状部材からなり、当該中空状部材の先端部は閉鎖され、該先端部は針状に形成され、上記中空筒状部材の内部空洞と連通する開口部が上記中空筒状部材の円筒部側面に設けられており、
上記流体放出手段および上記流体回収手段は、それぞれ、上記マイクチップの流入口と排出口となる開口を閉塞する自己修復性機能を有するシリコーンゲルを貫通し、上記流体放出手段および上記流体回収手段のそれぞれの開口が上記空間に連通するように上記空間へ進入し、かつ、該空間から離脱されるように構成されており、
上記流体回収手段は、マイクロチップの試薬配置領域を有する流路に対して上記流入口から複数種類の試薬を順次注入し、
上記流体回収手段は、上記排出口から上記流路中に順次注入された試薬を排出し、
上記複数種類の試薬には上記試薬配置領域に固定される嫌気性抗体含有溶液が含まれ、
上記流体放出手段の開口部および流体回収手段の開口部は互いに対向するように配置され、上記流体回収手段の開口部の下端の位置は、上記流路に供給される試薬の液面レベルが上記試薬配置領域に固定される嫌気性抗体を完全に浸漬する高さとなるように設定されている
ことを特徴とするマイクロチップへの試薬供給装置。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
次に、図１１（ｄ）に示すように、試薬溶液注入管１０１から抗体含有溶液をマイクロチップ１０の流路１４に注入する。抗体含有溶液中の抗体は、アルカンチオールのＳＡＭ膜１６と反応して化学的に結合し、前記ＳＡＭ膜１６上に固定される。すなわち、金属薄膜１５上に抗体Ｉｇが固定される。
なお、ＳＡＭ膜１６に固定された抗体Ｉｇ表面に固定されていない抗体が残留していたり、流路１４のＳＡＭ膜１６以外の領域に抗体が残留していたりするので、図１１（ｅ）に示すように、試薬溶液注入管１０１からＰＢＳをマイクロチップ１０の流路１４に注入し、このような残留した抗体をＰＢＳによりパージする。残留抗体を含むＰＢＳは、流路１４の排出口１３ｂと接続された試薬溶液排出管１０２により外部へ排出される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
上記課題を解決するため、本発明においては、内部に試薬配置領域を有する空間として流路が形成され該流路に連通する流入口と排出口を有するマイクロチップにおいて、流入口、排出口を自己修復性機能を有するシリコーンゲルにより気密に閉塞した。
そして、先端部が針状に形成され流体放出口となる開口を有する流体放出手段と、この流体放出手段と同様な形状を有する流体回収手段を、上記流入口、排出口に設けられたシリコーンゲルをそれぞれ貫通させて、上記試薬配置領域を有する空間に進入させ、上記試薬配置領域である流路に、嫌気性抗体等の試薬を上記流体放出手段の開口から供給し、また、該流路に供給された試薬を上記流体改出手段の開口から回収するようにした。
これにより、殆ど空気と接触させることなく、嫌気性抗体等の試薬を試薬配置領域に供給したり該領域から試薬を回収することができる。
なお、シリコーンゲルは金型では成型しにくいので、後述するように例えば流入口、排出口の周辺部等に凹部（段差部）を形成し、シリコーンゲルをこの凹部（段差部）に流し込んで流入口、排出口を閉塞するようにしてもよい。この場合には、シリコーンゲルを流し込んで流出口、排出口を閉塞する際、シリコーンゲルが上記流路内に流入しないように、例えば薄板の部材により上記流入口、排出口を閉塞しておくのが望ましい。
上記薄板の部材は、上記流体放出手段と流体回収手段が容易に貫通可能な厚さにしておくことが望ましく、例えば、上記流入口、排出口を形成する際、マイクロチップを構成する部材と一体の薄板の部材で、上記流入口、排出口を覆うようにしてもよい。
また、上記マイクロチップに試薬を供給する試薬供給装置を、上記流体放出手段と流体回収手段と、この流体放出手段と流体回収手段を、上記自己修復性機能を有するシリコーンゲルを貫通して試薬配置領域を有する空間に進入させ、また、該空間から離脱させる手段とから構成する。
試薬供給装置を上記構成とすることにより、殆ど空気と接触させることなく、また、ばらつき無く安定に嫌気性抗体等の試薬を上記マイクロチップの試薬配置領域に供給したり、該領域から回収することができる。
すなわち、本発明に前記課題を次のように解決する。
（１）内部に試薬配置領域を有する空間として流路が形成され、流路の開口部である流入口、排出口を有し、該流入口、排出口が自己修復性機能を有するシリコーンゲルにより気密に閉塞されたマイクロチップへの試薬供給を以下のように行う。
第１の工程：先端部が針状に形成され流体放出口となる開口を有する流体放出手段と、先端部が針状に形成され流体回収口となる開口を有する流体回収手段を、上記流入口、排出口に設けられたシリコーンゲルをそれぞれ貫通させて上記試薬配置領域を有する空間に進入させ、上記流体放出手段と流体回収手段の上記開口を上記試薬配置領域を有する空間に連通させる。
第２の工程：上記流体放出手段から試薬を注入するとともに、上記流体回収手段から試薬を排出させることにり、試薬を上記試薬配置領域の空間に供給する。
第３の工程：試薬の供給後、上記流体放出手段と流体回収手段を上記シリコーンゲルから離脱させる。
そして、上記流体放出手段から、マイクロチップの試薬配置領域を有する流路に対して複数種類の試薬を順次注入し、上記流体回収手段により、上記流路中に順次注入された試薬を順次排出する。
また、上記複数種類の試薬には上記試薬配置領域に固定される嫌気性抗体含有溶液が含まれ、上記試薬は、該試薬の液面レベルが、上記試薬配置領域に固定される嫌気性抗体を完全に浸漬する高さとなるように注入される。
（２）上記（１）の方法により試薬が供給されるマイクロチップを以下のように構成する。
内部に試薬配置領域を有する空間として流路を形成し、該流路に連通する流入口と排出口となる開口を設け、該流路の開口部である流入口、排出口を共に自己修復性機能を有するシリコーンゲルにより気密に閉塞する。
（３）内部に試薬配置領域を有する空間として流路が形成され、流路の開口部である流入口、排出口を有し、該流入口、排出口が自己修復性機能を有するシリコーンゲルにより気密に閉塞されたマイクロチップの上記流路に対して試薬を供給する試薬供給装置を以下のように構成する。
上記流路に対して試薬を放出する流体放出手段と、上記流路中の試薬を排出する流体回収手段とを設ける。該流体放出手段および流体回収手段はいずれも中空筒状部材からなり、当該中空状部材の先端部は閉鎖され、該先端部は針状に形成され、上記中空筒状部材の内部空洞と連通する開口部が上記中空筒状部材の円筒部側面に設けられている。
上記流体放出手段および上記流体回収手段は、それぞれ、上記マイクチップの流入口と排出口となる開口を閉塞する自己修復性機能を有するシリコーンゲルを貫通し、上記流体放出手段および上記流体回収手段のそれぞれの開口が上記空間に連通するように上記空間へ進入し、かつ、該空間から離脱されるように構成される。
また、上記流体回収手段は、マイクロチップの試薬配置領域を有する流路に対して上記流入口から複数種類の試薬を順次注入し、上記流体回収手段は、上記排出口から上記流路中に順次注入された試薬を排出する。
上記複数種類の試薬には上記試薬配置領域に固定される嫌気性抗体含有溶液が含まれ、上記流体放出手段の開口部および流体回収手段の開口部は互いに対向するように配置され、上記流体回収手段の開口部の下端の位置は、上記流路に供給される試薬の液面レベルが上記試薬配置領域に固定される嫌気性抗体を完全に浸漬する高さとなるように設定されている。