(57)【要約】【課題】流体試料を検出するための装置、方法およびキットを提供する。【解決手段】この装置は、試験ピース１０１および第２の試薬領域２０１を有する。試験ピース１０１は、試料適用領域１１１およびラベル領域を含む第１の試薬領域と、検出領域１３１とを有する。特定の分子が検出領域１３１に固定化される。これらの分子は、分析物に対して特異性を有さない特定の結合体のうちの１つを含む。第２の試薬領域２０１は試験ピース１０１の上流に配置されており、試験ピース１０１から分離されているが試験ピース１０１と流体連通している。第２の試薬領域２０１には分析物に対して特異性を有する分子が存在する。試料は、検出装置に加えられた後、最初に第２の試薬領域２０１内の試薬と反応し、次に装置の試験ピース１０１まで流れて反応を起こす。結果は検出領域１３１から肉眼で見ることができる。【選択図】図２
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【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
試験結果領域の上流に配置される第１の試薬領域を含んでおり、特異結合用の分子が試験結果領域の上に固定化されており、第１の試薬領域が検出領域と流体連通している、試験要素と；
前記第１の試薬領域の上流に配置されて、第１の試薬領域と流体連通しており、分析物と特異結合するための分子が第２の試薬領域上に可動状態で乾燥されている、第２の試薬領域と
を有する、液体試料中の分析物を検出するための試験装置。
【請求項２】
第２の試薬領域が第１の試薬領域から分離されている、請求項１に記載の装置。
【請求項３】
第１の試薬領域が検出可能ラベルおよび分析物模倣体を含むラベル領域を有する、請求項２に記載の装置。
【請求項４】
第２の領域が、分析物と無関係の特異結合用の分子対の第１のメンバーをさらに含み、試験結果領域上の特異結合用の分子が、特異結合用の分子対の第２のメンバーと特異結合する、請求項１に記載の装置。
【請求項５】
特異結合用の分子対の第１のメンバーが、分析物と特異結合するための分子に結合される、請求項４に記載の装置。
【請求項６】
分析物と特異結合するための分子が抗体を含む、請求項４に記載の装置。
【請求項７】
分析物が乱用薬物の化学物質を含む、請求項１に記載の装置。
【請求項８】
乱用薬物の化学物質がＴＨＣまたはＢＺＯである、請求項７に記載の装置。
【請求項９】
第２の領域が、分析物と無関係の特異結合用の分子対の第１のメンバーをさらに含み、試薬領域が、特異結合用の分子対の第２のメンバーに結合される検出可能ラベルを含むラベル領域をさらに有する、請求項２に記載の装置。
【請求項１０】
特異結合用の分子対が、ビオチン／アビジン、ビオチン／ストレプトアビジン、または、マウスＩｇＧおよびアンチマウスＩｇＧ、からなる対の１つから選択される、請求項４または９に記載の装置。
【請求項１１】
検出可能ラベルが着色剤粒子または水溶性色素を含む、請求項４または９に記載の装置。
【請求項１２】
装置が、中に第１の試薬領域および検出領域を備える収容部と、中に第２の試薬領域を備える液体試料用容器とをさらに有し、収容部および液体試料が流体連通している、請求項１に記載の装置。
【請求項１３】
液体試料用容器が収容部に接触しており、その結果液体試料が容器から収容部まで流れることができる、請求項１に記載の装置。
【請求項１４】
第１の試薬領域および検出領域が第１の多孔性膜上に配置され、第２の試薬領域が第１の多孔性膜から分離されている第２の多孔性膜上に配置される、請求項１に記載の装置。
【考案の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本考案は、液体試料中の分析物を検出するための装置および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
試験試料中に存在する分析物を検出するために、いくつかのラテラルフロー装置（Ｌａｔｅｒａｌ  ｆｌｏｗ  ｄｅｖｉｃｅ）が示されて利用されてきた。従来技術による例示のラテラルフロー装置を図１Ｃに示す。ラテラルフロー試験装置１０は、通常、試薬領域および試験領域１３を有する。試薬領域は、試料受容領域１１およびラベル領域１２を有する。試験領域１３は、試験結果領域１３２、および、試験結果領域１３２の下流に配置される対照試験結果領域１３３を含むことができる。通常、試料受容領域は多孔性の試料受容パッド１１１を含み、ラベル領域はコンジュゲートパッド１２１を含んでおり、これらの両方は、必要となるすべてのアッセイ試薬をその中に含有する試薬領域を構成する。試験領域は、通常、試験結果領域１３２とその下流側に位置される対照試験結果領域１３３とを備える試験ストリップ１３１の形態をとる。試験結果領域に現れる熱量測定から読み取れる情報は、通常、試験される分析物の存在を示す。ラテラルフロー装置は、通常、図１Ｃの矢印で示された方向に沿って要素１１、１２１および１３１と流体連通している吸収性パッド１４１を有する。従来の側方装置はニトロセルロースのストリップまたはナイロンで作られており、試験される分析物を留めておく結合剤によって固定化される。例えば、米国特許第４８５７４５３号明細書、米国特許第５０７３４８４号明細書、米国特許第５１１９８３１号明細書、米国特許第５１８５１２７号明細書、米国特許第５２７５７８５号明細書、米国特許第５４１６０００号明細書、米国特許第５５０４０１３号明細書、米国特許第５６０２０４０号明細書、米国特許第５６２２８７１号明細書、米国特許第６５４１６２号明細書、米国特許第５６５６５０３号明細書、米国特許第５６８６３１５号明細書、米国特許第５７６６９６１号明細書、米国特許第５７７０４６０号明細書、米国特許第５９１６８１５号明細書、米国特許第５９７６８９５号明細書、米国特許第６２４８５９８号明細書、米国特許第６１４０１３６号明細書、米国特許第６１８７２６９号明細書、米国特許第６１８７５９８号明細書、米国特許第６２２８６６０号明細書、米国特許第６２３５２４１号明細書、米国特許第６３０６６４２号明細書、米国特許第６３５２８６２号明細書、米国特許第６３７２５１５号明細書、米国特許第６３７９６２０号明細書および米国特許第６４０３３８３号明細書に記載されているラテラルフロー試験装置を参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第４８５７４５３号明細書
【特許文献２】米国特許第５０７３４８４号明細書
【特許文献３】米国特許第５１１９８３１号明細書
【特許文献４】米国特許第５１８５１２７号明細書
【特許文献５】米国特許第５２７５７８５号明細書
【特許文献６】米国特許第５４１６０００号明細書
【特許文献７】米国特許第５５０４０１３号明細書
【特許文献８】米国特許第５６０２０４０号明細書
【特許文献９】米国特許第５６２２８７１号明細書
【特許文献１０】米国特許第６５４１６２号明細書
【特許文献１１】米国特許第５６５６５０３号明細書
【特許文献１２】米国特許第５６８６３１５号明細書
【特許文献１３】米国特許第５７６６９６１号明細書
【特許文献１４】米国特許第５７７０４６０号明細書
【特許文献１５】米国特許第５９１６８１５号明細書
【特許文献１６】米国特許第５９７６８９５号明細書
【特許文献１７】米国特許第６２４８５９８号明細書
【特許文献１８】米国特許第６１４０１３６号明細書
【特許文献１９】米国特許第６１８７２６９号明細書
【特許文献２０】米国特許第６１８７５９８号明細書
【特許文献２１】米国特許第６２２８６６０号明細書
【特許文献２２】米国特許第６２３５２４１号明細書
【特許文献２３】米国特許第６３０６６４２号明細書
【特許文献２４】米国特許第６３５２８６２号明細書
【特許文献２５】米国特許第６３７２５１５号明細書
【特許文献２６】米国特許第６３７９６２０号明細書
【特許文献２７】米国特許第６４０３３８３号明細書
【特許文献２８】中国公開出願第２００５／０１８０８８２号明細書
【特許文献２９】米国特許第６７８０１６０号明細書
【特許文献３０】米国特許第７０４８６９３号明細書
【特許文献３１】米国特許第５２３４００１号明細書
【特許文献３２】米国特許第５８３０１５４号明細書
【特許文献３３】米国特許第５７８６４２７号明細書
【特許文献３４】米国特許第５５７３０９９号明細書
【特許文献３５】米国特許出願公開２００１／０００８６１４号明細書
【特許文献３６】国際公開第２００５／００８２１６号パンフレット
【考案の概要】
【考案が解決しようとする課題】
【０００４】
液体試料中の分析物の存在を検出するために、従来のラテラルフロー試験装置を用いて競合アッセイまたは非競合アッセイのどちらかを行うことができる。しかし、これらの装置および方法は、特に、所定の分析物濃度において陽性シグナルまたは陰性シグナルが生成されるのを可能にする検出しきい値を調整するのに適用可能ではない。また、これらの装置および方法は、特に、低濃度の分析物を高い精度で測定するのに有用ではない。分析物が液体試料中に非常に低濃度で存在する場合、試料から分析物を抽出するのに緩衝溶液が必要となるが、これは、結果に影響を及ぼして不都合を生じさせる可能性があり、さらに、アッセイを行っている人に対しての安全性の問題を引き起こす可能性がある。したがって、正確でありかつ信頼性のある試験結果を確実に得る一方で必要となる手作業を最小にするような試験装置が必要とされる。
【０００５】
本考案は試験装置に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本考案で提供される試験装置は、試験要素と、試験要素からは分離されていてよいが試験要素と流体連通している第２の試薬領域とを有しており、この試験要素は第１の試薬領域および試験領域を有する。この試験装置を用いた場合、最初に第２の試薬領域に加えられる液体試料が第１の試薬領域まで流れ、次いで試験結果領域まで流れる。この試験装置を使用することは、試験の精度および／または感度を向上させるだけでなく、試料を試験装置に加える前に液体試料に余分な緩衝溶液が付加されるのを防止する。このような緩衝剤の例として、液体試料から少量の化学物質を抽出するための緩衝剤がある。
【０００７】
本考案の一態様では、液体試料中の分析物を検出するように形成される試験装置が、（１）下流側にある試験結果領域と流体連通している第１の試薬領域を有しており、試験結果領域上に特異結合用の分子が固定化されている試験要素と、（２）分析物と特異的に結合する性質を有する可動性の乾燥結合部分を含み、試験要素と流体連通しているが試験要素から分離されていてよい第２の試薬領域とを有する。この試験装置を用いた場合、液体試料が、液体混合物を生成するために第２の試薬領域に加えられ、その後、試験要素の検出領域まで流され、検出領域上では試験結果が検出され得る。本考案の装置および方法を利用することにより、高い検出感度が得られる。いくつかの実施形態では、液体試料を試験装置に加える前におよび／または液体試料を試験装置に加えた後に余分な抽出溶液または緩衝溶液が液体試料に加えられることはない。
【０００８】
いくつかの実施形態では、本考案の装置および方法は、非競合結合を用いて試料中の分析物の存在を判定するのに使用されてよい。例えば、第２の領域は、標的分析物（Ａ）と特異結合する性質を有する第１の可動性結合部分（Ｙ１）を含むことができ、ここでは、第１の可動性分子が、分析物と無関係の特異結合対（Ｍ１／Ｍ２）の第１のメンバー（Ｍ１）に結合されてよく、第１の試薬領域が、標的分析物と特異結合する性質を有する第２の可動性結合部分（Ｙ２）に結合された検出可能ラベル（Ｌ）を含むラベル領域を有してよく、検出領域が、特異結合対の第２のメンバー（Ｍ２）を含むことができる。結合対の第１のメンバー（Ｍ１）は結合対の第２のメンバー（Ｍ２）に結合されてよい。この装置を用いた場合、液体試料は、試験装置の第２の試薬領域に加えられてよい。標的分析物が液体試料中に存在する場合、第１の可動性結合部分が標的分析物と結合して錯体（Ｍ１−Ｙ１−Ａ）を形成することができ、この錯体は、第２の試薬領域から試験要素の第１の試薬領域のラベル領域内まで流体試料によって移動させられてよく、そこで、新たな錯体が形成される（Ｍ１−Ｙ１−Ａ−Ｙ２−Ｌ）。新たな錯体は検出領域まで到達することができ、そこでは、検出可能ラベルが結合対の第２のメンバー（Ｍ２）によって捕捉されてよく、その結果、液体試料中に標的分析物が存在することが示される（陽性結果）。好適な実施形態では、第１の試薬領域は、ラベル領域と流体連通していてよい試料受容領域を有する。第１の試薬領域は第２の試薬領域から試料を受け取ることができる。標的分析物が液体試料中に存在しない場合、検出領域において検出可能ラベルは捕捉されず、陰性結果が示される。Ａ、Ｙ１、Ｙ２、Ｍ１およびＭ２の表記は、単に本考案の理解を容易にするために使用されており、本考案の範囲を限定するものではない。別の実施形態では、分析物が抗体である場合、その抗体と特異結合している第１の抗原が、その抗体と無関係である特異結合対の第１のメンバーに結合される。第１のメンバーに結合された抗原は第２の試薬領域上で可動状態で乾燥されてよく、さらに、その抗体と特異結合する性質を有する第２の抗原または結合部分に結合されているカラーラベルがラベル領域上で可動状態で乾燥され、かつ、特異結合対の第２のメンバーは試験結果領域上に固定化される。別の実施形態では、分析物が抗原である場合、抗原と特異結合しておりさらに抗体自体とは無関係である特異結合対の第１のメンバーに結合されている第１の抗体が第２の試薬領域上で可動状態で乾燥され、さらに、その抗原と特異結合している第２の抗体に結合されているカラーラベルがラベル領域上で可動状態で乾燥され、さらに、特異結合対の第２のメンバーが試験結果領域上に固定化される。試験試料が試験される分析物を含有している場合、試験領域が変色して陽性結果が示される。これに対して、分析物が存在しない場合には変色は起こらず、結果は陰性となる。
【０００９】
いくつかの実施形態では、競合結合アッセイを用いることにより、標的分析物と特異結合するための分子（Ｙ１）が第２の試薬領域上で可動状態で乾燥され、そこでは、分子Ｙ１は、標的分析物と無関係である特異結合対（Ｍ１／Ｍ２）の第１のメンバーＭ１に結合され、ラベル領域が、液体試料によって移動させられてよい分析物模倣体（Ａ＊）に結合された検出可能ラベル（Ｌ）を含み、かつ、特異結合対の第２のメンバーＭ２が試験結果領域上に固定化される。この試験装置を用いた場合、液体試料は試験装置に加えられてまず第２の試薬領域に接触する。液体試料中に標的分析物が存在する場合、分析物が特異結合用の分子に結合され、要素Ｌ−Ａ＊を有するラベル領域まで液体流れによって移動させられてよい錯体（Ａ−Ｙ１−Ｍ１）が形成され、その結果、錯体（Ａ−Ｙ１−Ｍ１）と検出可能ラベルと分析物模倣体（Ｌ−Ａ＊）とを含有する混合物が液体試料によって移動させられて、検出可能ラベルが捕捉されなくてよい検出領域まで到達することができる。陰性結果は試験結果領域上で検出される。ラベル領域では、錯体（Ａ−Ｙ１−Ｍ１）が標識性の分析物模倣体との競合によって解離してＡ＋Ｙ１−Ｍ１＋Ｌ−Ａ＊次いでＡ＋Ｌ−Ａ＊−Ｙ１−Ｍ１を形成してよい。錯体を含む液体試料は試験結果領域まで流れ、そこでは、試験結果領域上に固定化されたメンバー（Ｍ２）が錯体のＭ１と結合することにより錯体を捕捉し、それにより試験結果の判定が可能となる。検出可能ラベルが試験結果領域で捕捉されない場合、試料中に対象となる分析物が存在することを示す陽性結果が検出される。逆に、陰性結果は試料中に対象となる分析物が存在しないことを示す。
【００１０】
いくつかの好適な実施形態では、第２の試薬領域上の乾燥している分子は標的分析物と特異結合する性質を有する抗体であり、ここでは、この抗体はビオチン分子に結合されており、試験要素のラベル領域は検出可能ラベルおよび分析物模倣体を含み、さらに、ストレプトアビジンが試験結果領域に固定化されている。特異結合用の分子対（Ｍ１／Ｍ２）は以下の対のうちの１つから選択されてよい：ビオチン／アビジン、ビオチン／ストレプトアビジン、マウスＩｇＧおよびアンチマウスＩｇＧ、ローダミン／アンチローダミン、ならびに、分析物抗体および関連する分析物を含有しない抗体／抗原。
【００１１】
別のいくつかの実施形態では、試験装置は、液体試料中の分析物を検出するために、（１）検出領域と流体連通している第１の試薬領域を有しており、特異結合用の分子が固定化されている試験要素と、（２）試験要素と流体連通しているが試験要素から分離されており、分析物と特異結合する性質を有する可動性の乾燥した分子を有し、試験要素も収容しているケーシングの一部分でありさらにそのケーシングと流体連通している試料収集ウェル内に含まれることができる第２の試薬領域とを有するように形成される。液体試料中の標的分析物を検出する場合、液体試料が、まず第２の試薬領域に接触するように収集ウェルに加えられ、その後、液体試料はケーシング内に収容された試験要素まで移動させられる。好適な実施形態では、標的分析物と結合している特異結合用の分子（Ｙ１）が第２の試薬領域上で可動状態で乾燥され、そこで、分子Ｙ１は特異結合対（Ｍ１／Ｍ２）の第１のメンバーＭ１に結合され、この場合、Ｍ１およびＭ２は標的分析物とは無関係であることから標的分析物とは特異結合せず、さらに、ラベル領域が、液体試料によって移動させられてよい検出可能ラベル（Ｌ）および分析物模倣体（Ａ＊）を含んでおり、特異結合対の第２のメンバーＭ２が試験結果領域に固定される。
【００１２】
本考案の別の態様では液体試料中の分析物を検出する方法が提供され、この方法は、分析物と特異結合する性質を有する可動性の乾燥した分子を含む第２の試薬領域を有する試験装置を形成するステップを含み、ここでは、第２の試薬領域が、検出領域と流体連通している第１の試薬領域を有する試験要素と流体連通している。第１の試薬領域は乾燥したラベルを含むラベル領域を有してよい。特異結合用の分子は試験結果領域に固定化されていてよい。本考案の方法はまた、第２の試薬領域上に液体試料を加えること、液体試料を第１の試薬領域から試験結果領域まで移動させること、および、試験結果領域に基づいて試験結果を判定することを実現する。
【００１３】
本考案の別の態様では試験キットが形成される。この試験キットは上述した試験装置および試料コレクタを有しており、この試験装置は、分析物と特異結合する性質を有する可動性の乾燥した分子を含む第２の試薬領域を有し、この試薬領域は、検出領域と流体連通している第１の試薬領域を有する試験要素と流体連通している。第１の試薬領域は乾燥したラベルを含むラベル領域を有してよく、試験結果領域は固定化された特異結合用の分子を含む。第２の試薬領域は試験要素から分離されていてよい。
【００１４】
（参照による組込み）
本明細書で言及するすべての刊行物および特許出願は、個々の出版物または特許出願のそれぞれが参照により組み込まれることが具体的にかつ個別に示されているものとして、参照により本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１Ａ】流体流れの方向において以下の順序で背面パッド１５１上に配置される試料受容パッド１１１、ラベルパッド１２１、試験ストリップ１３１および吸収性パッド１３１を有するラテラルフロー装置の斜視図である。
【図１Ｂ】試験ストリップ１３１上にある試験結果領域１３２および結果調節領域（ｒｅｓｕｌｔ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｚｏｎｅ）１３１を示すラテラルフロー装置の上面図である。
【図１Ｃ】流体流れの方向に配置された試料受容領域１１、ラベル領域１２、試験結果領域１３および吸収領域１４を示すラテラルフロー装置の斜視図である。
【図２】試験装置の斜視図である。
【図３Ａ】液体試料が第２の試薬領域に加えられる前の本考案の一実施形態を示した図である。
【図３Ｂ】分析物が液体試料中に存在する場合の、液体試料が第２の試薬領域に加えられた後の試験結果領域１３上の試験結果を示した本考案の一実施形態の図である。
【図４Ａ】液体試料が第２の試薬領域に加えられる前の試験装置を示している本考案の一実施形態の図である。
【図４Ｂ】分析物が液体試料中に存在する場合の、液体試料が試験装置に加えられた後の試験結果領域１３上の試験結果を示した本考案の一実施形態の図である。
【図５Ａ】試験装置を示した図である。
【図５Ｂ】分析物が液体試料中に存在する場合の、液体試料が試験装置の第２の試薬領域に加えられた後の試験結果領域上の試験結果を示した試験装置の図である。
【図６】試験要素１０を中に含むケーシングに連結された試料収集ウェル３０２を備え、第２の試薬領域が試料収集ウェル６０１内に構成されている、試験装置を示した斜視図である。
【図７Ａ】多孔性部材２０１１上に第２の試薬領域を備える試料受容ウェル３０２を有する試験装置の斜視図である。
【図７Ｂ】組み立てられていない試料受容ウェルおよび多孔性部材２０１１の斜視図である。
【図７Ｃ】部片３０２４のところで多孔性部材２０１１に取り付けられた試料受容ウェルの斜視図である。
【図７Ｄ】部片３０２４のところで多孔性部材２０１１に取り付けられた試料受容ウェルの斜視図である。
【図８】試験装置の断面図である。
【図９】液体試料が試料受容ウェルに加えられる前の試験装置の断面図である。
【図１０】液体試料が試験受容ウェルに加えられた後の試験装置の断面図である。
【考案を実施するための形態】
【００１６】
（定義）
他に定義されていない場合、本明細書で使用されるすべての技術用語および学術用語は、本考案が属する技術分野の当業者が一般に理解しているものと同じ意味を有する。
【００１７】
「アッセイする」は、限定しないが化学物質、有機化合物、無機化合物、代謝産物、薬物または薬物代謝物、有機体またはその有機体の代謝物、核酸、蛋白質、あるいは、これらの組合せなどの物質または材料の存在を試験あるいは検出することを意味する。任意選択で、アッセイは、物質または材料の量を測定することを意味する。アッセイはさらに、免疫学的試験、化学試験、酵素試験なども意味する。
【００１８】
「試料（ｓａｍｐｌｅ）」と「標本（ｓｐｅｃｉｍｅｎ）」とは相互に入れ替えて使用されてよい。「試料」または「標本」は、試料中または標本中での分析物の存在および／または濃度をアッセイされる任意の材料、あるいは試料または標本の１つまたは複数の成分の存在および／または数を判定するための任意の材料、あるいは、試料または標本の定性的評価を行うための任意の材料を指す。試料は液体試料などの流体試料であってよい。アッセイされ得る流体試料の例には、限定しないが血液、血清、血漿、唾液、尿、眼液、精液および脊髄液を含めた体液；海洋、海、湖、川などからの水の試料などの水試料、あるいは、家庭用水源、都市用水源もしくは工業用水源、または、流出水試料または下水試料からの試料；牛乳またはワインなどの食品試料が含まれる。粘性液体標本、半固体標本、または固定標本が、液体溶液、溶出液、懸濁液、または、試料になり得る抽出物質を生成するのに使用されてよい。例えば、試料を生成するために咽喉スワブまたは生殖器スワブが液体溶液中に懸濁されてよい。試料には、液体の化合物、固体の化合物、気体の化合物、または、これらの任意の組合せが含まれてよく、例えば、緩衝剤中のまたは溶液中の細胞による懸濁液などであってよい。試料は、細胞、微生物、細胞小器官および生物化学的錯体などの生体学的材料を含んでよい。液体試料は、土、糞便、組織、臓器、生物体液、または、天然では流体ではない他の試料などの、固体材料、半固体材料、または、高粘性材料から作られてよい。例えば、これらの固体試料または半固体試料は、希釈緩衝剤または抽出緩衝剤といったような緩衝剤などの適切な溶液と混合されてよい。流体試料を生成するために、試料は、液体に浸されてふやかされ、凍結され、さらに解凍されてよく、あるいは他には、抽出されてもよい。残留粒子は、ろ過または遠心分離などの従来の手法を用いて除去されるあるいは減少させられてよい。
【００１９】
「上流」および「下流」は、境界線に沿った方向における液体流れを指している。上流は上記方向における液体流れの水上側に位置しており、下流は上記流れ方向における液体の水下側に位置する。上流および下流は、所定位置の水上から流れの下流の水下までの液体を表す相対的な概念である。
【００２０】
（試験要素）
試験要素は、幅広い分析物を試験するのにあまねく適用可能であるラテラルフロー試験ストリップであってよい。しかし、本考案では任意適切な試験要素が使用されてよい。
【００２１】
様々な試験要素が本考案に組み込まれてよい。試験要素の１つのタイプは試験ストリップである。試験ストリップは、免疫学的試験の形態または化学試験の形態などの様々な形態で使用可能である。試験ストリップは、乱用薬物または健康状態を示す代謝物などの試料中の対象の分析物を検出するためのものであってよい。試験ストリップはまた、非競合アッセイの形態または競合アッセイの形態のどちらかに合わせて構成されてよい。いくつかの形態では、図１Ｃに示すように、試験ストリップは、特異結合用の分子を含む試験結果領域１３の上流にある第１の試薬領域を有する吸水性材料を有する。好適な実施形態では、吸収領域１４が試験結果領域１３の下流にある。これらのすべての領域は流体流れの方向に配置される。液体試料を前処理するための緩衝溶液などのアッセイを行うための一定量の試薬が試料受容領域上で処理される。ラベル領域は、特異結合用の分子に結合され得る、金粒子、ラテックス粒子または水溶性色素などの任意の検出可能ラベルを含むことができる。第１の試薬領域は、試料適用領域１１、ラベル領域１２および試験結果領域を有する。試料は試料適用領域に加えられ、毛管作用により試薬領域内まで流れる。試薬領域では、試料が溶解して分析物（存在する場合）の検出に必要な試薬と混合される。この時点で試薬を含んでいる試料は試験結果領域まで継続して流れる。分析物と特異結合するための分子などの付加的な試薬は試験結果領域に固定化される。これらの試薬は分析物（存在する場合）または試薬領域からの第１の試薬のうちの１つと反応して結合する。検出可能なシグナルを提示するためのラベルが試薬領域中にまたは分離したラベル領域中に存在してよい。
【００２２】
通常、非競合の形態では、シグナルは試料が分析物を含んでいる場合に生成され、分析物が存在しない場合にはシグナルは生成されない。競合の形態では、シグナルは分析物が存在しない場合に生成されてよく、分析物が存在する場合にはシグナルは生成されない。
【００２３】
試験要素が試験ストリップである場合、この試験要素は吸水性材料または非吸収性材料で作られていてよい。試験ストリップは、後で流体連通することになる２つ以上の材料を含むことができる。試験ストリップの１つの材料は試験ストリップの別の１つの材料上に重畳されてよく、例えば、ろ紙がニトロセルロース上に重畳されてよい。別法としてあるいは加えて、試験ストリップは、１つまたは複数の材料を含む領域と、１つまたは複数の別の材料を含む領域を有することもできる。この場合、これらの領域は流体連通しているが、互いに部分的に重畳していてもしていなくてもよい。試験ストリップの１つまたは複数の材料は、取扱強度を向上させるために、プラスチックの支持シートなどの支持表面または固定表面に結合されてよい。
【００２４】
分析物と特異的に反応する１つまたは複数の酵素によってなどのシグナル生成システムによって分析物が検出されるような実施形態では、シグナル生成システムの１つまたは複数の成分は、上述したような特異結合部材が試験ストリップ材料に結合される手法と同じ手法で試験ストリップ材料の試験結果領域に結合されてよい。別法としてあるいは加えて、試験ストリップの試料適用領域、試薬領域または試験結果領域に含まれるあるいは試験ストリップ全体に含まれる標識性の試薬などのシグナル生成システムの成分は、試験ストリップの１つまたは複数の材料に含浸されてよい。これは、これらの成分の溶液を表面に塗布することによってあるいは１つまたは複数の試験ストリップ材料をこれらの成分の溶液に浸漬することによってのどちらかで実現されてよい。１回または複数回の塗布または１回または複数回の浸漬の後、試験ストリップは乾燥される。別法としてあるいは加えて、標識性の試薬として説明した、試験ストリップの試料適用領域、試薬領域または試験結果領域に含まれるあるいは試験ストリップ全体に含まれるシグナル生成システムの成分は、試験ストリップの１つまたは複数の試験ストリップ材料の表面に塗布されてもよい。
【００２５】
複数の領域は以下のように構成される：試料適用領域、１つまたは複数の試薬領域、１つまたは複数の試験結果領域、１つまたは複数の試験結果調節領域、１つまたは複数の混入領域、および、１つまたは複数の流体吸収領域。いくつかの実施形態では、試験結果判定領域が調節領域を有する。これらのすべての領域あるいはこれらの領域の組合せは、単一材料からなる単一のストリップ内に設けられてよい。別法として、これらの領域は、異なる材料で作られて流体連通するように互いにつなげられる。例えば、異なる領域は直接にあるいは間接的に流体連通していてよい。この場合、異なる領域は、端と端とを接合されることによって流体連通される、あるいは、部分的に重ねられることによって流体連通される、あるいは、ろ紙、ガラス繊維またはニトロセルロースといったような好適には吸水性の接合材料などの別の部材によって連通されてよい。接合材料を使用する場合、接合材料は、端と端とが接合された領域またはこれらの領域を含む材料、流体連通していない端と端とが接合された領域またはこれらの領域を含む材料、あるいは、部分的に（頂部から底部までとは限らない）重ねられているが流体連通していない接合された領域またはこれらの領域を含む材料と流体連通することができる。
【００２６】
（第２の試薬領域）
図２に示すように、一実施形態では、試験装置２０は、試料受容パッド１１１とラベルパッド１２１と試験ストリップ１３３と吸収性パッド１４１とを備えるラテラルフロー試験要素１０１とは流体連通しているが分離している第２の試薬パッド２０１を含む第２の試薬領域を有してよい。これらのパッドは、液体試料の流れ方向において、試験ストリップに沿って上記の順序で配置されてよい。試験結果領域１３２および結果調節領域３３は試験ストリップ１３１上に配置されてよい。
【００２７】
別の実施形態では、図３Ａ〜図３Ｂに示すように、試験装置は、第２の試薬領域と、試料受容領域１１、ラベル領域１２および試験結果領域１３を備える試験要素とを有する。分析物と無関係である特異結合対（Ｍ１／Ｍ２）の第１のメンバー（Ｍ１）に結合された第１の結合部分（Ｙ１）が第２の試薬領域上で可動状態で乾燥される。試験要素は、図３Ａに示すように、第２の試薬領域の下流にある試料受容領域１１；検出可能ラベル（Ｌ）と特異結合対の第２のメンバー（Ｍ２）とを含むラベル領域１２；第２の結合部分（Ｙ２）がその上に固定化されている試験結果領域１３を有し、ここでは、第１の結合部分および第２の結合部分が液体試料中の分析物と特異的に結合することができる。液体試料が試験装置の第２の試薬領域に加えられると、図３Ｂに示すように、液体試料中に分析物（Ａ）が存在する場合には分析物（Ａ）はまず第１の結合部分に結合されて第１の錯体（Ａ−Ｙ１−Ｍ１）を形成することができ、この錯体は、液体試料によって試料受容領域からラベル領域まで移動させられてよく、そこで、第２の錯体（Ａ−Ｙ１−Ｍ１−Ｍ２−Ｌ）が形成されてやはり試験結果領域まで移動させられ、そこで、第２の錯体は固定化されている第２の結合部分Ｙ２によって捕捉され、試験結果領域において陽性結果が検出される。
【００２８】
別の実施形態では、図４Ａ〜図４Ｂに示すように、試験装置は、第２の試薬領域と、試薬受容領域１１、ラベル領域１２および試験結果領域１３を備える試験要素とを有する。分析物とは無関係である特異結合対（Ｍ１／Ｍ２）の第１のメンバー（Ｍ１）に結合された第１の結合部分（Ｙ１）が第２の試薬領域上で可動状態で乾燥される。試験要素は、図４Ａに示すように、第２の試薬領域の下流にある試料受容領域１１；検出可能ラベル（Ｌ）および第２の結合部分（Ｙ２）を含むラベル領域１２；第２のメンバー（Ｍ２）がその上に固定化されている試験結果領域１３を有し、ここでは、第１の結合部分および第２の結合部分が液体試料中の分析物と特異結合することができる。液体試料が試験装置の第２の試薬領域に加えられると、図４Ｂに示すように、液体試料中に分析物（Ａ）が存在する場合には分析物（Ａ）はまず第１の結合部分に結合されて第１の錯体（Ａ−Ｙ１−Ｍ１）を形成することができ、この錯体は、液体試料によって試料受容領域からラベル領域まで移動させられてよく、そこで、第２の錯体（Ｌ−Ｙ２−Ａ−Ｙ１−Ｍ１）が形成されてやはり試験結果領域まで移動させられ、そこで、第２の錯体は固定化されている第２のメンバーＭ２によって捕捉され、試験結果領域において陽性結果が検出される。
【００２９】
別の実施形態では、図５Ａ〜図５Ｂに示すように、試験装置は、液体試料中の分析物と無関係である特異結合対の第１のメンバー（Ｍ１）に結合された第１の結合部分（Ｙ１）を含む第２の試薬領域を有する。第２の試薬領域は、試料受容領域１１と、検出可能ラベル（Ｌ）および分析物模倣体（Ａ＊）を含むラベル領域１２と、第２のメンバー（Ｍ２）がその上に固定化されている試験結果領域１３と有する試験要素と流体連通していてよい。これらすべての領域は、図５Ａに示すように、流体の流れ方向において上記の順序で配置されてよい。第１のメンバーに結合される第１の分子および分析物模倣体に結合されるラベルの量は調節され得る。この調節は所定の濃度Ｃを基準にしてよく、例えば薬物乱用のアッセイにおいて分析物の濃度が所定の濃度Ｃより低い場合には、検出可能ラベルを含む試験結果領域が陰性結果（例えばアッセイが競合結合を利用するか否かといったように、アッセイに応じて、検出可能ラベルが存在するかしないかのどちらかで示される）を示す。分析物の濃度が所定の濃度Ｃより高い場合、検出可能ラベルを含まない試験結果領域が陽性結果（例えばアッセイが競合結合を利用するか否かといったように、アッセイに応じて、検出可能ラベルが存在するかしないかのどちらかで示される）を示す。
【００３０】
液体試料が第２の試薬領域に加えられると、分析物（Ａ）の濃度が所定値Ｃより高い場合には第１のメンバー（Ｍ１）に結合されている第１の結合部分Ｙ１のほとんどが分析物Ａと結合して錯体（Ａ−Ｙ１−Ｍ１）を形成する。液体試料中の残っている量の分析物（Ａ）（残っている場合）を含む錯体は、液体試料によって試料受容領域からラベル領域まで移動させられ、そこで、ラベルおよび分析物模倣体が第１の錯体と競合結合する。結合体（Ｙ１−Ｍ１）の大部分は分析物によって結合され得ることから、ラベルおよび分析物模倣体はこの結合体と容易に結合することはできない。錯体を含む液体試料が試験結果領域に到達すると、錯体は固定化されている第２のメンバーＭ２によって捕捉され、検出結果領域でのラベルの存在を検出することによって陽性結果が検出される。
【００３１】
これに対して、分析物の濃度が所定値Ｃより低い場合、第１のメンバーＭ１に結合されている第１の結合部分Ｙ１の一部が分析物Ａと結合して錯体（Ａ−Ｙ１−Ｍ１）を形成し、第１のメンバーＭ１に結合されている第１の結合部分Ｙ１の結合されなかった残りは、錯体と共に流れて第２の領域の下流にあるラベル領域に到達する。ラベル領域では、結合体Ｙ１−Ｍ１の残りが、検出可能ラベルに結合されている分析物模倣体に結合されて第２の錯体Ｌ−Ａ＊−Ｙ１−Ｍ１を形成する。これら両方の錯体は試験結果領域まで移動させられて、そこで、固定化されているメンバーＭ２がラベルを含む錯体およびラベルを一切含まない錯体の第１のメンバーＭ１を捕捉する。図５Ｂに示すように、試験結果でのラベルの存在を検出することによって陰性結果が判定される。
【００３２】
図６、図７Ａ〜図７Ｄおよび図８を参照すると、ケーシング３０４および試料収集ウェル６０１を含む本考案の別の実施形態が示されている。ケーシング３０４の内側にある試験要素１０および試料収集ウェル６０１内に配置される第２の試薬領域２０１は流体連通しているが、これは、試料収集ウェル６０１からの流体が試験要素１０まで流れることができることを意味している。この種の流体連通は、重力、および、試料収集ウェルから試験要素までにおいて液体流れを形成するように構成される試料収集ウェル６０１と試験要素１０と間にある流体誘導構造体によってなされてよい。図８を詳細に参照すると、ケーシング３０４は、試験要素１０の試験結果領域と反対側の結果読取窓３０４１と、２つの試料導入ポート３０６−１および３０６−３を含む試料用ポート３０６とを有する。試料流体が試料導入ポート３０６−１から流れて試験要素１０の試料受容領域まで到達すると、分析試験は完了されてよい。
【００３３】
特定の実施形態では、試料収集ウェル６０１は、第１の収集チャンバ３０２および第２の収集チャンバ３０３を有してよい。図７Ａ〜図７Ｄに示すように、第１の収集チャンバは２つの開口端部から構成されており、一方の開口端部は液体試料または試料を受けるためのものであり、他方の開口端部は流体通過孔３０２−１、３０２−１または３０２−３を有する。直立障害物３０２４が、３０２−１などの流体通過孔のうちの１つに対向するように配置される。直立障害物３０２４の一方の端部は第１の収集チャンバ３０２の外壁上に固定されてよく、直立障害物の反対側の端部は３０２−１などの流体通過孔のうちの１つを通って延在してよい。第２の試薬領域２０１は、２つの端部２０１３および２０１２を備える多孔性ストリップ２０１１を有する。このストリップは、ストリップの端部を孔３０２−１を通して第２の収集チャンバ３０３の底部まで延在させるために、直立障害物の表面上に固定されるあるいはその表面に接触していてよい。試験部分２０１３と呼ばれるストリップ２０１１のもう一方の側は、流体通過路３２０−１を通って延在して第２の試料収集チャンバ３０３の底部まで到達していてよい。蛋白質処理剤（ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）のような特別な物質を含むストリップ２０１１は、ガラス繊維、ろ紙またはセルロース繊維などの吸水性材料で作られてよい。図９を参照すると、第２の試薬領域２０１が試料収集ウェル６０１内に別の形態で存在し得る。例えば、ストリップ２０１１は第２の試料収集チャンバ３０２の底部に直接に配置されてよい。別のいくつかの実施形態では、ストリップ２０１１は、第１の収集チャンバ３０２と第２収集チャンバ３０３とによって形成された隔離された位置に配置されてよい。第２の試薬領域のこの配置の主な目的は、第２の試薬領域が収集ウェル６０１内の液体試料と流体連通できるようにすることである。ストリップ２０１１は、液体試料と完全あるいは部分的のどちらかで接触するように設計されてよい。また、第２の試薬領域上に材料を配置する方法は多様であってよく、例えば、第２の試薬領域は直接に処理されてもよく、噴霧されてもよく、あるいは押し当てられてよい。これら上記の実施形態では、分析物と特異結合する分子または結合部分は、多孔性ストリップ２０１１に類似する第２の試薬領域上で可動状態で乾燥される。結合部分は、分析物と無関係である特異結合対（Ｍ１／Ｍ２）の第１のメンバー（Ｍ１）に結合されてよい。また、第２の試薬領域はアッセイを行うための別の試薬または緩衝剤をさらに含むことができる。
【００３４】
図８、図９および図１０を参照すると、試料収集ウェル６０１が貯蔵部３０４に連結されており、試料導入ポート３０６のブロックリング３０６−２によって保護される（ｃｏｍｅ  ｗｈｏｌｅ）。第２の収集チャンバ３０３には、一方の端部のところにあるシールリング３０５−１、３０５−２および３０５−３に固定される複数の液体通過孔３０３−１、３０３−２および３０３−３が設けられている。詳細には、試料収集ウェル６０１が、ケーシングの頂部分３０４３上にある試料導入ポート３０６内に位置される。試料用ポート３０６は、ケーシングの頂部分３０４３と一体化しており、その中に試料用ポート３０６の上側リムと平行な誘導スロット切断口を有する。第２の収集チャンバ３０３は、その外側表面から貯蔵部３０４の誘導スロットを通って延在している１つの誘導ピンを有する。２つ以上の誘導スロットおよび誘導ピンが、貯蔵部３０４および第２の収集チャンバ３０３上に配置されていてよい。第２の収集チャンバ３０３および試料用ポート３０６は、第２のチャンバが貯蔵部３０４内で回転できるように構成される。収集ウェルを備える試験装置は、中国公開出願第２００５／０１８０８８２号明細書などの別の出願公開に見られる。
【００３５】
本考案では唾液試料での薬物乱用試験の実施例が示される。図９を参照すると、この図ではアッセイの前の試料収集の段階が示されている。第１の収集チャンバ３０２が第２の収集チャンバ３０３内に配置されている。第２の収集チャンバ３０３の液体通過孔３０３−１、３０３−２および３０３−３は、試料導入領域３０６の試料導入ポート３０６−１、３０６−３と流体連通する代わりに、試料導入領域３０６の底部プレート３０６−４に対して封止される。これらの２つの部分の間の封止能力を向上させるために、別のシールリング３０５−１、３０５−２および３０５−３が、流体連通のための通路の対応する位置に固定されてよい。
【００３６】
図６〜図１０に示すように、液体試料中の分析物を検出するためにこの試験装置を使用する場合、ステップは以下のようになる：まず、被試験者の口腔から十分な量の唾液を吸収するために被試験者の口腔内に試料コレクタ３０１の吸収性部材３０１２を配置する：吸収性部材３０１２を試料収集ウェル６０１の第１の収集チャンバ３０２内に挿入して吸収性部材に圧力を加え、吸収性部材から第１のチャンバ３０２内へ試料を抽出する。抽出された試料は、試料通過孔３０２−１、３０２−２および３０２−３を通って第２の収集チャンバ３０３内まで流れる。第２の収集チャンバ３０３では、ストリップ２０１１上の試薬が一定時間だけ液体試料に接触することができる。この断面図では、試料収集ウェル６０１が第１の位置にある場合、第１の収集チャンバ３０２の出口および第２の収集チャンバ３０３の入口が位置合わせされており、試料収集ウェルの下側チャンバ内に流体連通のための通路が形成されていることが分かる。この場合、ストリップ２０１１は唾液試料と流体接触して反応することができる。１０秒、２０秒、３０秒、１分、２分、３分、４分、５分、６分、７分、８分、９分、１０分、１５分、２０分、３０分、４５分または６０分といったような適切な反応時間後、試料収集ウェル６０１は第２の位置まで回転させられてよい。この第２の位置では、液体通過路３０３−１が試料導入ポート３０６−１と連通する。同様に、液体通過路３０３−３が試料導入ポート３０６−３と連通する。この場合、試料収集ウェル６０１の下側チャンバ内に残存する流体が試験区画内まで流れて試験要素１０に接触する。試料流体が試験要素１０に接触すると、この流体が試験要素１０に吸収されてこの試験要素によるアッセイが開始される。アッセイ時間は試料の稠度または粘性および使用する試験要素に応じて変化してよい。試料が任意の薬物分子を含有している場合、陽性結果が、試験要素１０の試験結果領域内の線が欠けることによって判定されてよい。薬物分子が試料中に存在しない場合、覆われていないあるいは透明材料で覆われていてもよいケーシング３０４の窓３０４１を通して陰性試験結果が観測されてよい。本考案ではこの装置の別の（かつ任意の）使用ステップおよび蓋付けステップを例示する。唾液試料は、試験される唾液試料のさらなる確認のために、試料導入ポート３０６−３を介して確認チャンバ３０７内まで流れるように誘導されてもよい。蓋３０８は試料収集ウェル６０１の頂部に配置される。貯蔵部は依然として封止されていてよい。ここで、装置は確認試験のための別の位置に送られてよい。確認試験の場合、オリフィスシール３０７２が除去あるいは破壊されてよく、さらに、試料のアリコートがオリフィス３０７３を介して貯蔵部から除去されてよい。確認チャンバは底部３０７１および側壁から形成されてよい。上述の唾液試験は、本考案がどのように使用され得るかを説明するための実施例である。唾液試験に加えて、本考案は、限定しないが、全血試験、尿試験および糞便試験を含む他の多くの用途にも使用され得る。
【００３７】
別の実施形態では、第２の試薬領域は、試験要素を備える同一の装置内になく、ケーシングから分離している別の収集ウェル内にあってよい。本考案において開示するように、ストリップ２０１１はＹ１およびＭ１を含み、試験要素はＭ２を含む。例えば、第２の試薬領域２０１は、液体試料を受け取るのに使用される試験管内に配置されてよい。第２の試薬領域２０１上の試薬が試料と反応した後、この混合物はアッセイを行うために試験要素上に加えられてよい。試料収集装置は、米国特許第６７８０１６０号明細書、米国特許第７０４８６９３号明細書、米国特許第５２３４００１号明細書、米国特許第５８３０１５４号明細書、米国特許第５７８６４２７号明細書、米国特許第５５７３０９９号明細書、ならびに、米国特許出願公開２００１／０００８６１４号明細書および国際公開第２００５／００８２１６号パンフレットに開示されている。
【００３８】
（本考案の試験装置）
本明細書で説明する試験装置は、試料中の１つまたは複数の分析物を検出するのに使用され得る。本明細書で本考案の好適な実施形態を示して説明してきたが、これらの実施形態が単に例として示されていることは当業者には明白であろう。本考案の装置および／または方法は、試料中の１つまたは複数の分析物を検出するため、個別に、あるいは、当業者には知られている方式で他の装置、方法および／またはシステムと組み合わされて使用されてよい。
【００３９】
本考案は、生物試料中の乱用薬物を測定するための試験などの試験装置に関する。本明細書および実用新案登録請求の範囲で使用される場合、単数形の「１つの」、ならびに、「この」および「その」は、文脈で改めて指示されていない限りは複数の意味を含む。本考案の試験装置は、試験要素と、試験要素から分離されているが試験要素と流体連通する第２の試薬領域とを含み、この試験要素は第１の試薬領域および試験結果領域を含む。この試験装置を用いた場合、液体試料は第２の試料領域に加えられてよく、その後、まず第１の試薬領域まで流れて、さらに試験結果領域まで流れる。
【００４０】
（分析物）
いくつかの実施形態では、分析物は乱用薬物であってよい。「乱用薬物（ｄｒｕｇ  ｏｆ  ａｂｕｓｅ（ＤＯＡ））」という用語は、非医学的理由で摂取された薬物（精神に変化をもたらす効果であることがある）を指す。これらの薬物の乱用は、肉体的および精神的な損傷、（薬物の）常用、依存症、および／または、死をもたらす可能性がある。ＤＯＡの例には、限定しないが、コカイン、アンフェタミン（例えば、ブラックビューティー（ｂｌａｃｋ  ｂｅａｕｔｙ）、ホワイトベニー（ｗｈｉｔｅ  ｂｅｎｎｙ）、デキストロアンフェタミン、デキセドリン錠剤、ビーン（ｂｅａｎ））；メタンフェタミン（メタンフェタミン粉末（ｃｒａｎｋ）、メタ（ｍｅｔｈ）、クリスタル（ｃｒｙｓｔａｌ）、スピード（ｓｐｅｅｄ））；バルビツール剤（Ｖａｌｉｕｍ（ベイリウム）（Ｒ）、Ｒｏｃｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ、Ｎｕｔｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ）；鎮静剤（すなわち、睡眠補助薬）；リゼルギン酸ジエチルアミド（（ｌｙｓｅｒｇｉｃ  ａｃｉｄ  ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｄｅ）ＬＳＤ）；抑制剤（鎮静剤、睡眠薬（ｇｏｏｆｂａｌｌ）、バーブ（ｂａｒｂ）、ブルーデビル（ｂｌｕｅ  ｄｅｖｉｌ）、イエロージャケット（ｙｅｌｌｏｗ  ｊａｃｋｅｔ）、ルード（ｌｕｄｅ））；三環系抗鬱薬（ｔｒｉｃｙｃｌｉｃ  ａｎｔｉｄｅｐｒｅｓｓａｎｔ（ＴＣＡ）、例えば、イミプラミン、アミトリプチリンおよびドキセピン）；フェンサイクリジン（ｐｈｅｎｃｙｃｌｉｄｉｎｅ（ＰＣＰ））；テトラハイドロカナビノール（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃａｎｎａｂｉｎｏｌ（ＴＨＣ）、ポット（ｐｏｔ）、ドープ（ｄｏｐｅ）、ハッシュ（ｈａｓｈ）、ウィード（ｗｅｅｄ）など）；アヘン剤（例えば、モルヒネ、オピウム、コデイン、ヘロイン、オキシコドン）が含まれる。例えば三環系抗鬱薬（イミプラミンなど）およびアセトアミノフェンを含有する一般大衆薬製品といったような、医学的理由で摂取されるが過量の摂取が起こりやすい合法薬物も、これらのストリップを使用して試験されてよい。
【００４１】
（分析物模倣体）
薬物および薬物代謝物の代替物としての分析物模倣体Ａ＊は、抗体を含む錯体を形成することができ、さらに分析物を含む錯体を形成することもできる分析物の類似物であってよい。例えば、分析物模倣体は分析物の断片であってよく、この断片は分析物のエピトープを保持する。ラベルは、ラベルと分析物模倣体とを結びつけるリンカーに結合されてよい。通常、リンカーは、分析物、分析物模倣体（Ａ＊）またはラベル（Ｌ）には存在しない結合部位を有する。例えば、この結合部位は、分析物、分析物模倣体あるいはラベルのいずれも認識しない抗体によって認識され得るエピトープであってよい。いくつかの実施形態では、リンカーは、存在している可能性がある別のリンカーの結合部位をやはり認識することはない抗体によって認識され得る。このようなリンカーの例には、限定しないが、ウシ血清アルブミン（ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ  ａｌｂｕｍｉｎ（ＢＳＡ））、キーホールリンペットヘモシアニン結合体（ｋｅｙｈｏｌｅ  ｌｉｍｐｅｔ  ｈｅｍｏｃｙａｎｉｎｃｏｎｊｕｇａｔｅ（ＫＬＨ））、ウシベンゾイルエクゴニン（ｂｏｖｉｎｅ  ｂｅｎｚｏｙｌｅｃｇｏｎｉｎｅ（ＢＢＧ））、ウシサイログロブリン（ｂｏｖｉｎｅ  ｔｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ（ＢＴＧ））、ニワトリ卵白リゾチーム（ｈｅｎ  ｅｇｇ−ｗｈｉｔｅ  ｌｙｓｏｚｙｍｅ（ＨＥＬ））、オブアルブミン（ｏｖａｌｂｕｍｉｎ（ＯＶＡ））、マッコウクジラミオグロビン（ｓｐｅｒｍ  ｗｈａｌｅ  ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ（ＳＷＭ））、破傷風毒素（ｔｅｔａｎｕｓ  ｔｏｘｏｉｄ（ＴＴ））、メチル化ウシ血清アルブミン（ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ  ａｌｂｕｍｉｎ（ｍＢＳＡ））、ウサギ血清アルブミン（Ｒａｂｂｉｔ  Ｓｅｒｕｍ  Ａｌｂｕｍｉｎ（ＲＳＡ））が含まれる。
【実施例】
【００４２】
（唾液試料でのＢＺＯ試験）
（パート１、試験要素および装置の組立て）
図２、図６および図７Ａ〜図７Ｄを参照すると、本考案での試験装置の組立て方法が示されている。
【００４３】
（ＮＣ膜）
試験線および調節線の２つの線がＮＣすなわちニトロセルロースの膜に形成されてよく、この膜は試験パッドとして使用されてよい。試験線は、ＩｇＧおよびストレプトアビジン（ＩｇＧ溶液）を用いてこの膜を覆うことによって形成される。調節線はヤギ抗ウサギＩｇＧ溶液を用いてこの膜を覆うことによって形成される。これら両方の定着処理は自動吹付機によって実行されてよい。試験線および調節線の両方の試薬の濃度は０．３ｍｇ／ｍｌである。緩衝剤はＰＢＳ緩衝剤である。被覆後、ＮＣ膜は３７℃の乾燥器で乾燥される。
【００４４】
（コンジュゲートパッド）
コンジュゲートパッドはポリエステル膜で作られてよい。ＢＳＡおよび金コロイドと結合したＢＺＯハプテン抗原、ならびに、金コロイドを含むウサギＩｇＧ抗体がポリエステル膜上に配置される。希釈剤としてＢＳＡを１％含む１×ＰＢＳの試薬溶液の光学濃度（ｏｐｔｉｃａｌ  ｄｅｎｓｉｔｙ（ＯＤ））は７５である。試薬処理後、処理されたポリエステル膜は３７℃の乾燥器で乾燥される。
【００４５】
（試料受容パッド）
試料受容パッドはガラス繊維で作られてよい。試料受容パッド上の試薬は、ボラックス（Ｂｏｒａｘ）（０．０７Ｍ／Ｌ）、トゥイーン２０（Ｔｗｅｅｎ２０）（１％）、コール酸（Ｃｈｏｌｉｃ  Ａｃｉｄ）（１％）、トリス（０．１Ｍ）である。試薬処理後、処理されたガラス繊維は３７℃の乾燥器で乾燥される。
【００４６】
（試験要素の組立て）
図２を参照すると、試験要素の複数の部分は示したように組み立てられてよい。詳細には、試料受容パッドはコンジュゲートパッドの上流にあり、コンジュゲートパッドは試料受容パッドと試験パッドとの間に配置され、吸収性パッドは試験パッドの下に配置される。すべてのパッドは非吸水性の部片によって支持される。
【００４７】
（第２の試薬領域）
第２の試薬領域は、非吸水性の付属部分２０１２および吸水性の試験部分２０１３から構成されるストリップ２０１１を含む。ポリエステル膜上で処理される試薬は、ビオチン（Ｂｉｏｔｉｎ）に結合された抗ＢＺＯ抗体（ａｎｔｉ−ＢＺＯ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）、１×ＰＢＳ、および１％のＢＳＡを含み、この試薬は、濃度が０．１５ｍｇ／ｍｌである最終溶液を形成する。その後、ポリエステル膜のこの部分は３７℃の乾燥器で乾燥される。最後に、付属部分２０１２が試験部分２０１３に互いに連結される。
【００４８】
（装置の組立て）
図６、図７および図９を参照すると、ストリップ２０１１の付属部分２０１２が第１の試料収集チャンバ３０２の直立障害物３０２２に付着されている。試験部分は、液体孔３０２−１を通って延在して第２の試料収集チャンバ３０３の底部まで達している。図９を参照すると、試料収集ウェル６０１は、試料用ポート３０６内に配置されている、試料導入領域３０６のブロックリング３０６−２上に固定される。スリーブの底部は試料導入領域３０６の底部プレート３０６−４上に配置される。試験要素は、ケーシング３０４３の上側部分とケーシング３０４５の下側部分との間に配置される。試験要素１０の試験線は結果読取窓を基準に位置決めされ、試料受容領域は試料導入ポート３０６−１を基準に位置決めされる。試験装置の組立ては、ケーシング３０４３の上側部分とケーシング３０３５の下側部分とが互いに取り付けられたときに完了されてよい。
【００４９】
（パート２：ストリップおよび装置の組立ての比較）
上述したストリップと比較するため、比較ストリップのコンジュゲートパッドは抗ＢＺＯ抗体を用いて処理される。希釈剤としてＢＳＡを１％含む１×ＰＢＳの試薬溶液の光学濃度（ＯＤ）は７５である。試薬を用いた処理の後、比較ストリップのコンジュゲートパッドは３７℃の乾燥器で乾燥されてよい。
【００５０】
この試験膜は濃度が０．３ｍｇ／ｍｌのＢＺＯハプテンを用いて処理される。希釈緩衝剤としてＢＳＡを１％含む１×ＰＢＳの使用試薬の光学濃度（ＯＤ）は７５ＯＤである。試薬処理後、処理されたポリエステル膜は３７℃の乾燥器で乾燥されてよい。
【００５１】
唾液試料は、５ｎｇ／ｍｌ、７．５ｎｇ／ｍｌ（カットオフ）、１０ｎｇ／ｍｌ、１２．５ｎｇ／ｍｌ、１５ｎｇ／ｍｌまたは３０ｎｇ／ｍｌの濃度でＢＺＯと混合される。すべての検出結果は１０分後に読み取られる。カットオフ値は、結果が陽性として読み取られる時間を決定する。例えば、分析物の濃度がカットオフ濃度より高い場合、結果は陽性となり、対して、分析物の濃度がカットオフ濃度より低い場合は、結果は陰性となる。
【００５２】
（本試験装置でのアッセイ操作）
まず、すべての装置は図９に示したように配置されてよい。図９に示すように、試料収集ウェル６０１の第２の試料収集チャンバ３０３の底部は底部プレート３０６−４に対して封止される。
【００５３】
次に、試料が試料コレクタに加えられ、試料の標本が試料コレクタの第２の試薬領域に含まれる試薬と１分間反応させられる。
【００５４】
試料収集ウェル６０１が回転させられて、唾液試料が試料収集ウェルから試験ストリップの試料受容領域まで流れて、それにより反応が完了する。
【００５５】
結果は１０分後に記録される。
【００５６】
従来の装置を使用した場合の結果を表１に示す。
【表１】
0003157356.tif 000003
【００５７】
本考案の装置および方法を使用した場合の試験結果を表２に示す。
【表２】
0003157356.tif 000004
【００５８】
（結果および考察）
いくつかの態様では、本考案は、試料流体中の低濃度の分析物を高い感度で検出するための装置および方法を提供する。本考案の装置および方法は試料流体中の分析物を検出するための特異性を有する。比較してみると、例えば、ＢＺＯ濃度が約１２．５ｎｇ／ｍｌの低さであった場合、知られている検出方法では、概ね、陰性結果が２８回となり陽性結果はたったの２回となる。検出率は約１０％である。しかし、本考案で開示した方法および装置では陽性結果を２０回および陰性結果を１０回とすることができる。本考案の検出率は約６０％−７０％である。別の例では、ＢＺＯ濃度が１２．５ｎｇ／ｍｌおよび１５ｎｇ／ｍＬであった場合、現存する、知られている装置の検出率は約１０％−２０％である。しかし、本考案の装置では検出率を約８０％−１００％とすることができ、現行の装置の検出率を大幅に上回る。また、３０個の知られている陰性試料を本考案の装置を用いて試験したが、陽性結果は一切示されなかったことから、本考案の装置が液体試料中の分析物を検出するための特異性を不都合に変化させることがなくさらに陰性試料の結果に影響を与えないことが示された。
【符号の説明】
【００５９】
１０１  試験ピース
１１１  試料適用領域
１３１  検出領域
２０１  第２の試薬領域
【図１Ａ】
0003157356.tif 000005
【図１Ｂ】
0003157356.tif 000006
【図１Ｃ】
0003157356.tif 000007
【図２】
0003157356.tif 000008
【図３Ａ】
0003157356.tif 000009
【図３Ｂ】
0003157356.tif 000010
【図４Ａ】
0003157356.tif 000011
【図４Ｂ】
0003157356.tif 000012
【図５Ａ】
0003157356.tif 000013
【図５Ｂ】
0003157356.tif 000014
【図６】
0003157356.tif 000015
【図７Ａ】
0003157356.tif 000016
【図７Ｂ】
0003157356.tif 000017
【図７Ｃ】
0003157356.tif 000018
【図７Ｄ】
0003157356.tif 000019
【図８】
0003157356.tif 000020
【図９】
0003157356.tif 000021
【図１０】
0003157356.tif 000022
【手続補正書】
【提出日】平成21年11月26日(2009.11.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】実用新案登録請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
試験結果領域の上流に配置される第１の試薬領域を含んでおり、特異結合用の分子が試験結果領域の上に固定化されており、第１の試薬領域が検出領域と流体連通している、試験要素と；
前記第１の試薬領域の上流に配置されて、第１の試薬領域と流体連通しており、分析物との特異結合用の分子が第２の試薬領域上に可動状態で乾燥されている、第２の試薬領域と
を有する、液体試料中の分析物を検出するための試験装置。
【請求項２】
第２の試薬領域が第１の試薬領域から分離されている、請求項１に記載の試験装置。
【請求項３】
第１の試薬領域が検出可能ラベルおよび分析物模倣体を含むラベル領域を有する、請求項２に記載の試験装置。
【請求項４】
第２の試薬領域が、分析物と無関係の特異結合用の分子の対の第１のメンバーをさらに含み、試験結果領域上の特異結合用の分子が、特異結合用の分子の対の第２のメンバーと特異結合する、請求項１に記載の試験装置。
【請求項５】
特異結合用の分子の対の第１のメンバーが、分析物との特異結合用の分子に結合される、請求項４に記載の試験装置。
【請求項６】
分析物との特異結合用の分子が抗体を含む、請求項４に記載の試験装置。
【請求項７】
分析物が乱用薬物の化学物質を含む、請求項１に記載の試験装置。
【請求項８】
乱用薬物の化学物質がＴＨＣまたはＢＺＯである、請求項７に記載の試験装置。
【請求項９】
第２の試薬領域が、分析物と無関係の特異結合用の分子の対の第１のメンバーをさらに含み、第１の試薬領域が、特異結合用の分子の対の第２のメンバーに結合される検出可能ラベルを含むラベル領域をさらに有する、請求項２に記載の試験装置。
【請求項１０】
特異結合用の分子の対が、ビオチン／アビジン、ビオチン／ストレプトアビジン、または、マウスＩｇＧおよびアンチマウスＩｇＧ、からなる対の１つから選択される、請求項４または９に記載の試験装置。
【請求項１１】
検出可能ラベルが着色剤粒子または水溶性色素を含む、請求項４または９に記載の試験装置。
【請求項１２】
装置が、中に第１の試薬領域および検出領域を備える収容部と、中に第２の試薬領域を備える液体試料用容器とをさらに有し、収容部および液体試料が流体連通している、請求項１に記載の試験装置。
【請求項１３】
液体試料用容器が収容部に接触しており、その結果液体試料が容器から収容部まで流れることができる、請求項１に記載の試験装置。
【請求項１４】
第１の試薬領域および検出領域が第１の多孔性膜上に配置され、第２の試薬領域が第１の多孔性膜から分離されている第２の多孔性膜上に配置される、請求項１に記載の試験装置。