【手続補正書】
【提出日】平成26年9月16日(2014.9.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体を保持可能な窪部が形成された試料保持プレートを略水平状態に保持する保持手段と、
前記保持手段に保持された前記試料保持プレートの上方から、前記窪部に流動体が注入されてなる試料の表面に光を入射させる光照射手段と、
前記試料を撮像して前記試料の画像を取得する撮像手段と、
前記光照射手段から前記試料の表面に入射させる光の光量分布を制御する制御手段と
を備え、
前記制御手段は、予め前記光量分布を所定の標準状態に設定して前記撮像手段が前記試料を撮像した事前撮像画像から所定の空間周波数以上の高周波成分を除去したバックグラウンド画像における輝度分布に基づいて、前記試料の表面に入射させる光の光量分布を設定し、
前記撮像手段は、前記制御手段により設定された光量分布での光照射下で、前記試料の画像を取得する
ことを特徴とする撮像装置。
【請求項２】
前記制御手段は、前記バックグラウンド画像における輝度が低い位置ほど入射光量を大きくする請求項１に記載の撮像装置。
【請求項３】
液体を保持可能な窪部が形成された試料保持プレートを略水平状態に保持する保持手段と、
前記保持手段に保持された前記試料保持プレートの上方から、前記窪部に流動体が注入されてなる試料の表面に向けて光を出射する光照射手段と、
前記光照射手段から出射されて前記試料の表面に入射する光の光量分布を制御して、前記試料の表面を透過して前記試料の内部に入射する光の光量分布を均一化させる制御手段と、
前記制御手段により制御された光量分布での光照射下で、前記試料を撮像して前記試料の画像を取得する撮像手段と
を備えることを特徴とする撮像装置。
【請求項４】
前記光照射手段は、光源と、該光源と前記試料との間に配置されて光の透過量を位置ごとに設定可能な透過光量調整部とを有し、前記制御手段が前記透過光量調整部を制御する請求項１ないし３のいずれかに記載の撮像装置。
【請求項５】
前記透過光量調整部は、前記光源からの光に含まれる複数の波長成分に対して異なる透過量を設定可能である請求項４に記載の撮像装置。
【請求項６】
前記透過光量調整部が液晶シャッターである請求項４または５に記載の撮像装置。
【請求項７】
前記光照射手段は、複数の発光モジュールを配列してなる光源を有し、前記制御手段が前記複数の発光モジュールの発光量を個別に制御する請求項１ないし３のいずれかに記載の撮像装置。
【請求項８】
前記光照射手段は、光源と、該光源からの光を反射して前記試料の表面に入射させるとともにその反射方向を互いに独立して変更可能な複数の反射ミラーとを備え、前記制御手段は前記複数の反射ミラーそれぞれの反射方向を制御する請求項１ないし３のいずれかに記載の撮像装置。
【請求項９】
前記撮像手段は、前記試料保持プレートに対し相対的に走査移動して前記試料の画像を取得するラインセンサを有する請求項１ないし８のいずれかに記載の撮像装置。
【請求項１０】
前記光照射手段は、前記試料保持プレートに対する前記ラインセンサの走査移動に伴って前記ラインセンサと一体的に前記試料保持プレートに対し相対移動する請求項９に記載の撮像装置。
【請求項１１】
前記制御手段は、前記試料保持プレートに対する前記光照射手段の相対移動に同期させて前記試料の表面に入射させる光の光量分布を変化させる請求項１０に記載の撮像装置。
【請求項１２】
試料保持プレートに設けられた窪部に流動体を注入してなる試料を撮像する撮像方法において、
略水平に保持した前記試料保持プレートの上方から前記試料の表面に向けて、光量分布が所定の標準状態である光を照射し、前記試料を撮像して事前撮像画像を取得する事前撮像工程と、
前記事前撮像画像から所定の空間周波数以上の高周波成分を除去したバックグラウンド画像の輝度分布を検出する輝度分布検出工程と、
前記検出工程での検出結果に基づき前記試料に入射させる光の光量分布を設定する光量分布設定工程と、
前記光量分布設定工程で設定された光量分布での光照射下で、前記試料の画像を取得する画像取得工程と
を備えることを特徴とする撮像方法。
【請求項１３】
前記光量分布設定工程では、前記バックグラウンド画像における輝度が低い位置ほど入射光量を大きくする請求項１２に記載の撮像方法。
【請求項１４】
前記事前撮像工程および前記画像取得工程では、ラインセンサを前記試料保持プレートに対し相対的に走査移動させて前記試料を撮像する請求項１２または１３に記載の撮像方法。
【請求項１５】
前記試料に光を照射する光照射手段を、前記試料保持プレートに対する前記ラインセンサの走査移動に伴って前記ラインセンサと一体的に前記試料保持プレートに対し相対移動させる請求項１４に記載の撮像方法。
【請求項１６】
前記画像取得工程では、前記光照射手段から前記試料の表面に入射させる光の光量分布を、前記光量分布工程での設定に基づいて前記試料保持プレートに対する前記光照射手段の相対移動に同期させて変化させながら撮像を行う請求項１５に記載の撮像方法。
【請求項１７】
前記試料保持プレートに設けられた複数の前記窪部のそれぞれに保持された試料のそれぞれについて、前記事前撮像工程、前記輝度分布検出工程、前記光量分布設定工程および前記画像取得工程を実行する請求項１２ないし１６のいずれかに記載の撮像方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
この発明にかかる撮像装置の一の態様は、上記目的を達成するため、液体を保持可能な窪部が形成された試料保持プレートを略水平状態に保持する保持手段と、前記保持手段に保持された前記試料保持プレートの上方から、前記窪部に流動体が注入されてなる試料の表面に光を入射させる光照射手段と、前記試料を撮像して前記試料の画像を取得する撮像手段と、前記光照射手段から前記試料の表面に入射させる光の光量分布を制御する制御手段とを備え、前記制御手段は、予め前記光量分布を所定の標準状態に設定して前記撮像手段が前記試料を撮像した事前撮像画像から所定の空間周波数以上の高周波成分を除去したバックグラウンド画像における輝度分布に基づいて、前記試料の表面に入射させる光の光量分布を設定し、前記撮像手段は、前記制御手段により設定された光量分布での光照射下で、前記試料の画像を取得することを特徴としている。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
また、この発明の他の態様は、試料保持プレートに設けられた窪部に流動体を注入してなる試料を撮像する撮像方法であって、上記目的を達成するため、略水平に保持した前記試料保持プレートの上方から前記試料の表面に向けて、光量分布が所定の標準状態である光を照射し、前記試料を撮像して事前撮像画像を取得する事前撮像工程と、前記事前撮像画像から所定の空間周波数以上の高周波成分を除去したバックグラウンド画像の輝度分布を検出する輝度分布検出工程と、前記検出工程での検出結果に基づき前記試料に入射させる光の光量分布を設定する光量分布設定工程と、前記光量分布設定工程で設定された光量分布での光照射下で、前記試料の画像を取得する画像取得工程とを備えることを特徴としている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
このように構成された発明では、照射光の光量分布をいったん所定の標準状態に設定した上で撮像対象である試料を実際に撮像して得た事前撮像画像から高周波成分を除去したバックグラウンド画像での輝度分布に基づき、当該試料の画像を取得する際の光照射条件が設定される。このように、既定の光量分布で事前に撮像した画像から輝度分布を把握しておくことで、試料の内部を均一な光量分布の光で照射しながら試料の撮像を行うことができる。したがって、本発明によれば、照射光の光量ムラに起因する画像の輝度ムラを軽減して、例えば画像解析等に好適に利用可能な高品質の画像を得ることが可能である。撮像対象となる試料には流動体中に分布する細胞等が含まれるが、照射光の光量ムラを検出するに際してはこのような細胞等の像は誤差要因となり得る。そこで、その影響を高い空間周波数成分を除去することで排除し、残ったバックグラウンド画像における輝度分布を検出することで、より高精度に光量設定を行うことが可能となる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
これらの発明においては、例えば、バックグラウンド画像における輝度が低い位置ほど入射光量が大きくなるように、照射光の光量分布を設定することができる。バックグラウンド画像において輝度の低い位置に対してより多くの光を入射させるようにすることで、輝度ムラの少ない画像を取得することができる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
また、この発明にかかる撮像装置の他の態様は、上記目的を達成するため、液体を保持可能な窪部が形成された試料保持プレートを略水平状態に保持する保持手段と、前記保持手段に保持された前記試料保持プレートの上方から、前記窪部に流動体が注入されてなる試料の表面に向けて光を出射する光照射手段と、前記光照射手段から出射されて前記試料の表面に入射する光の光量分布を制御して、前記試料の表面を透過して前記試料の内部に入射する光の光量分布を均一化させる制御手段と、前記制御手段により制御された光量分布での光照射下で、前記試料を撮像して前記試料の画像を取得する撮像手段とを備えることを特徴としている。