【手続補正書】
【提出日】平成26年8月15日(2014.8.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被写体に励起光および参照光を照射する光源と、
該光源からの前記励起光の照射により前記被写体において発生した蛍光を撮影し蛍光画像を取得する蛍光画像取得部と、
前記光源からの前記参照光の照射により前記被写体から戻る戻り光を撮影し参照光画像を取得する参照光画像取得部と、
前記蛍光画像または前記参照光画像の少なくとも一方に、標準試料に対して予め取得された蛍光強度の距離特性と戻り光強度の距離特性とが相互に正比例関係となる係数を乗算して補正用蛍光画像と補正用参照光画像とを生成する前処理部と、
該前処理部により生成された前記補正用蛍光画像を前記補正用参照光画像で除算し、除算画像を生成する除算画像生成部と、
該除算画像生成部により生成された前記除算画像における画素ごとの階調値の平均値に基づいて閾値を設定する閾値設定部と、
該閾値設定部により設定された前記閾値より大きい階調値を有する領域と前記閾値より小さい階調値を有する領域との前記除算画像におけるコントラストを拡大する画像調整部と、
該画像調整部により前記コントラストが拡大された前記除算画像を表示する表示部とを備える蛍光観察装置。
【請求項２】
被写体に励起光および参照光を照射する光源と、
該光源からの前記励起光の照射により前記被写体において発生した蛍光を撮影し蛍光画像を取得する蛍光画像取得部と、
前記光源からの前記参照光の照射により前記被写体から戻る戻り光を撮影し参照光画像を取得する参照光画像取得部と、
前記蛍光画像または前記参照光画像の少なくとも一方に、標準試料に対して予め取得された蛍光強度の角度特性と戻り光強度の角度特性とが相互に正比例関係となる係数を乗算して補正用蛍光画像と補正用参照光画像とを生成する前処理部と、
該前処理部により生成された前記補正用蛍光画像を前記補正用参照光画像で除算し、除算画像を生成する除算画像生成部と、
該除算画像生成部により生成された前記除算画像における画素ごとの階調値の平均値に基づいて閾値を設定する閾値設定部と、
該閾値設定部により設定された前記閾値より大きい階調値を有する領域と前記閾値より小さい階調値を有する領域との前記除算画像におけるコントラストを拡大する画像調整部と、
該画像調整部により前記コントラストが拡大された前記除算画像を表示する表示部とを備える蛍光観察装置。
【請求項３】
前記前処理部が、前記蛍光画像の各画素の蛍光強度および前記参照光画像の各画素の戻り光強度を前記蛍光撮像部および前記参照光撮像部のゲインおよび露光時間によって規格化して規格化蛍光画像および規格化参照光画像を生成し、これら規格化蛍光画像または規格化参照光画像の少なくとも一方に、前記係数を乗算して補正用蛍光画像と補正用参照光画像とを生成する請求項１または２に記載の蛍光観察装置。
【請求項４】
前記光源が、さらに白色光を照射し、
前記画像調整部が、前記閾値より小さい階調値を有する領域を非表示としたバックグラウンド除去画像を生成し、
前記白色光の照射により得られる前記被写体の白色光画像を取得する白色光画像取得部と、
該白色光画像取得部により取得された白色光画像と前記画像調整部により生成されたバックグラウンド除去画像とを重畳した合成画像を生成する画像合成部とを備え、
前記表示部が、前記画像合成部により生成された合成画像を表示する請求項１または２に記載の蛍光観察装置。
【請求項５】
前記参照光画像取得部が、前記被写体において反射または散乱されて戻る前記参照光の反射光または散乱光を取得する請求項１または２に記載の蛍光観察装置。
【請求項６】
前記光源が、前記参照光として白色光を照射し、
前記参照光画像取得部が、前記参照光画像として被写体から戻る白色光画像を取得し、
前記画像調整部が、前記閾値より小さい階調値を有する領域を非表示としたバックグラウンド除去画像を生成し、
前記参照光画像取得部により取得された前記被写体の白色光画像と前記画像調整部により生成されたバックグラウンド除去画像とを重畳した合成画像を生成する画像合成部を備え、
前記表示部が、前記画像合成部により生成された合成画像を表示する請求項１または２に記載の蛍光観察装置。
【請求項７】
前記閾値設定部が、前記階調値の平均値と標準偏差とに基づいて前記閾値を設定する請求項１または２に記載の蛍光観察装置。
【請求項８】
前記係数を記憶する記憶部を備え、
前記前処理部が、前記記憶部に記憶されている係数を前記蛍光画像または前記参照光画像の少なくとも一方に乗算する請求項１または２に記載の蛍光観察装置。
【請求項９】
観察条件を変更するために着脱される着脱部品を備え、
該着脱部品に識別情報が記録され、
該着脱部品に記憶された識別情報を読み取る識別情報読取手段とを備え、
前記記憶部に、前記識別情報と前記係数とが対応づけて記憶されている請求項８に記載の蛍光観察装置。
【請求項１０】
請求項１に記載の蛍光観察装置と、
該蛍光観察装置に接続され、前記係数を算出する較正装置とを備え、
該較正装置が、標準試料と、該標準試料に対して前記蛍光観察装置の観察距離を変更可能に設定する観察距離設定機構とを備え、
前記観察距離設定機構により設定された観察距離と、前記蛍光観察装置により前記標準試料を撮影して取得された蛍光画像および参照光画像とに基づいて、該蛍光画像および前記参照光画像の少なくとも一方に乗算することにより、蛍光強度の距離特性と戻り光強度の距離特性とが正比例することとなる係数を算出する係数決定部を有する蛍光観察システム。
【請求項１１】
請求項２に記載の蛍光観察装置と、
該蛍光観察装置に接続され、前記係数を算出する較正装置とを備え、
該較正装置が、標準試料と、該標準試料に対して前記蛍光観察装置の観察角度を変更可能に設定する観察角度設定機構とを備え、
前記観察角度設定機構により設定された観察角度と、前記蛍光観察装置により前記標準試料を撮影して取得された蛍光画像および参照光画像とに基づいて、該蛍光画像および前記参照光画像の少なくとも一方に乗算することにより、蛍光強度の角度特性と戻り光強度の角度特性とが正比例することとなる係数を算出する係数決定部を有する蛍光観察システム。
【請求項１２】
励起光を被写体に照射することにより被写体において発生した蛍光を撮影して取得された蛍光画像と、参照光を被写体に照射することにより被写体から戻る戻り光を撮影して取得された参照光画像とを用いて、
前記蛍光画像または前記参照光画像の少なくとも一方に、標準試料に対して予め取得された蛍光強度の距離特性と戻り光強度の距離特性とが相互に正比例関係となる係数を乗算して補正用蛍光画像と補正用参照光画像とを生成する前処理ステップと、
該前処理ステップにより生成された前記補正用蛍光画像を前記補正用参照光画像で除算し、除算画像を生成する除算画像生成ステップと、
該除算画像生成ステップにより生成された前記除算画像における画素ごとの階調値の平均値に基づいて閾値を設定する閾値設定ステップと、
該閾値設定ステップにより設定された前記閾値より大きい階調値を有する領域と前記閾値より小さい階調値を有する領域との前記除算画像におけるコントラストを拡大する画像調整ステップと、
該画像調整ステップにより前記コントラストが拡大された前記除算画像を表示する表示ステップとを含む蛍光画像処理方法。
【請求項１３】
励起光を被写体に照射することにより被写体において発生した蛍光を撮影して取得された蛍光画像と、参照光を被写体に照射することにより被写体から戻る戻り光を撮影して取得された参照光画像とを用いて、
前記蛍光画像または前記参照光画像の少なくとも一方に、標準試料に対して予め取得された蛍光強度の角度特性と戻り光強度の角度特性とが相互に正比例関係となる係数を乗算して補正用蛍光画像と補正用参照光画像とを生成する前処理ステップと、
該前処理ステップにより生成された前記補正用蛍光画像を前記補正用参照光画像で除算し、除算画像を生成する除算画像生成ステップと、
該除算画像生成ステップにより生成された前記除算画像における画素ごとの階調値の平均値に基づいて閾値を設定する閾値設定ステップと、
該閾値設定ステップにより設定された前記閾値より大きい階調値を有する領域と前記閾値より小さい階調値を有する領域との前記除算画像におけるコントラストを拡大する画像調整ステップと、
該画像調整ステップにより前記コントラストが拡大された前記除算画像を表示する表示ステップとを含む蛍光画像処理方法。