【手続補正書】
【提出日】平成26年2月25日(2014.2.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト第１１番染色体の１１ｑ１２．２〜１１ｑ１３．２領域（Ｄ１１Ｓ４１９１〜Ｄ１１Ｓ９８７）における、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーに対する連鎖不平衡解析により決定され、且つ配列番号１〜５のいずれかで示される塩基配列からなるハプロタイプブロックの塩基配列の部分塩基配列であって、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）及び当該ＳＮＰと連鎖しているＳＮＰを一以上含む連続する塩基配列からなる部分塩基配列を含む、オリゴまたはポリヌクレオチドあるいはそれらの相補鎖である、毛髪形状判定マーカー。
【請求項２】
前記ＳＮＰが以下からなる群より選択される塩基におけるＳＮＰである、請求項１記載の毛髪形状判定マーカー：
（１）配列番号１で表される塩基配列中、塩基番号１（ｄｂＳＮＰデータベースＩＤ：ｒｓ１０７９２３６７、ＧまたはＣ）、７６３３（ｒｓ２２７６２９９、ＡまたはＴ）、及び９３１５（ｒｓ４１４９１８２、ＧまたはＣ）で示される塩基；
（２）配列番号２で表される塩基配列中、塩基番号１（ｒｓ１１２２７４０３、ＣまたはＴ）、１６７２２（ｒｓ１１６０７３９３、ＡまたはＣ）、１９９９２（ｒｓ３８２５０６７、ＴまたはＣ）、２１０５１（ｒｓ１１２２７４１１、ＴまたはＣ）、２１９２７（ｒｓ１０８９６０８１、ＴまたはＡ）、２５２６９（ｒｓ１１２２７４１３、ＡまたはＧ）、２７０３２（ｒｓ１１２２７４１５、ＣまたはＴ）、３５９９７（ｒｓ３８６２３８６、ＣまたはＧ）、４９５３７（ｒｓ９６４５６８４、ＡまたはＧ）、５５４０５（ｒｓ１０８９６０８５、ＴまたはＡ）、６９１８０（ｒｓ９１８２９９、ＴまたはＣ）、８４６２７（ｒｓ７９４３９１１、ＡまたはＧ）、８６１８５（ｒｓ２１７７０５４、ＡまたはＣ）、９０２２１（ｒｓ１０７５０７７８、ＣまたはＴ）、９１２４７（ｒｓ６５９１２０７、ＡまたはＴ）、９２３９８（ｒｓ１０８９６０９１、ＣまたはＴ）、９８１５０（ｒｓ７９４６９１７、ＧまたはＡ）、１００７７９（ｒｓ１０８９６０９４、ＴまたはＣ）、１０１７３０（ｒｓ７９４１４３１、ＡまたはＧ）、１０２９２０（ｒｓ２２９３１２１、ＧまたはＴ）、１０５３１０（ｒｓ１０７９１８５５、ＧまたはＡ）、１２６７４１（ｒｓ５１２４２１、ＡまたはＧ）、１３３９１７（ｒｓ２１５５２０１、ＣまたはＴ）、１３４７８６（ｒｓ７９２５１２３、ＣまたはＧ）、１４２９９１（ｒｓ２２３６６５１、ＴまたはＣ）、１４４２５４（ｒｓ２２３６６５２、ＡまたはＧ）、１４７８９６（ｒｓ４７６５５１、ＣまたはＧ）、１５００４３（ｒｓ１０７９１８６１、ＡまたはＧ）、１５２８５３（ｒｓ２２９８４６６、ＣまたはＴ）、１６８９３１（ｒｓ１０７９１８６３、ＴまたはＣ）、１７２５００（ｒｓ２１５５０３１、ＴまたはＣ）、１７５００３（ｒｓ２２７６０３６、ＴまたはＣ）、１８４５３５（ｒｓ２２９８４６８、ＡまたはＧ）、１８９８５３（ｒｓ１１２２７４４７、ＣまたはＧ）、１９４４０５（ｒｓ２２８２５６８、ＧまたはＣ）、及び２０２１１１（ｒｓ３８１４７３８、ＴまたはＧ）で示される塩基；
（３）配列番号３で表される塩基配列中、塩基番号５２９７（ｒｓ５２３５８３、ＡまたはＣ）、１８２８０（ｒｓ３７４１３６７、ＴまたはＣ）、及び１８９３３（ｒｓ３７４１３６８、ＧまたはＡ）で示される塩基；
（４）配列番号４で表される塩基配列中、塩基番号１（ｒｓ１７８９１６５、ＡまたはＧ）、８３７８（ｒｓ１０７９６８２８、ＧまたはＴ）、１２６２４（ｒｓ１７８９１７２、ＴまたはＣ）、２０１４７（ｒｓ１１９２９２１、ＧまたはＣ）、２２３０９（ｒｓ１１９２９２３、ＡまたはＴ）、２４５１２（ｒｓ１１９２９２４、ＴまたはＣ）、及び２６５９９（ｒｓ１７８９１６８、ＴまたはＣ）で示される塩基；ならびに
（５）配列番号５で表される塩基配列中、塩基番号１７０００（ｒｓ２６６４、ＴまたはＣ）、１８８９５（ｒｓ７９３４０５５、ＴまたはＧ）、２６１４３（ｒｓ１７３６３７２３、ＧまたはＡ）、２６５４５（ｒｓ１１２３４１７４、ＡまたはＧ）、２７０９０（ｒｓ１０７９２７８１、ＣまたはＴ）、２７７５１（ｒｓ７１０７６７８、ＧまたはＡ）、及び３０２７４（ｒｓ７１０６３６２、ＴまたはＣ）で示される塩基。
【請求項３】
１０〜６０１塩基長の連続した塩基配列からなる、請求項１又は２記載の毛髪形状判定マーカー。
【請求項４】
以下の工程（ａ）〜（ｃ）を含む被験者の毛髪形状に対する遺伝的感受性の判定方法：
（ａ）被験者由来のゲノムＤＮＡを調製する工程；
（ｂ）当該ゲノムＤＮＡから、ヒト第１１番染色体の１１ｑ１２．２〜１１ｑ１３．２領域（Ｄ１１Ｓ４１９１〜Ｄ１１Ｓ９８７）における、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーに対する連鎖不平衡解析により決定され、且つ配列番号１〜５のいずれかで示される塩基配列からなるハプロタイプブロックに存在する、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）及び当該ＳＮＰと連鎖している一塩基多型（ＳＮＰ）を検出する工程；及び
（ｃ）当該検出したＳＮＰのアリル頻度が非くせ毛者集団におけるよりもくせ毛者集団において統計学的に有意に高い場合、当該被験者はくせ毛の遺伝的素因を有していると判定し、当該検出したＳＮＰのアリル頻度がくせ毛者集団におけるよりも任意の非くせ毛者集団において統計学的に有意に高い場合、当該被験者はくせ毛の遺伝的素因を有していないと判定する工程。
【請求項５】
被験者由来のゲノムＤＮＡ中の配列番号１〜５で表される塩基配列における下記表に示される塩基番号の塩基のいずれか一以上において、当該塩基が塩基(i)であるか塩基(ii)であるかを識別し、塩基(i)である場合には被験者がくせ毛の素因を有していると判定し、塩基(ii)である場合には被験者がくせ毛の素因を有していないと判定する工程を含む、被験者の毛髪形状に対する遺伝的感受性の判定方法。
【表１５−１】
2011097926.tif 000001
【表１５−２】
2011097926.tif 000002
【請求項６】
請求項１〜３のいずれか１項記載の毛髪形状判定マーカーにストリンジェントな条件下でハイブリダイズするプローブ及び／又はプライマーを含む、被験者の毛髪形状に対する遺伝的感受性の判定用試薬。
【請求項７】
前記プローブ及び／又はプライマーが前記マーカーにおける請求項２記載のＳＮＰを含む領域とハイブリダイズする、請求項６記載の試薬。
【請求項８】
請求項６又は７記載の試薬を含む、被験者の毛髪形状に対する遺伝的感受性判定用キット。
【請求項９】
以下の工程（ａ）及び（ｂ）を含む毛髪形状調節剤をスクリーニングする方法：
（ａ）以下の（i）又は（ii）の遺伝子を含有する細胞に被験物質を投与する工程
（i）ヒト第１１番染色体の１１ｑ１２．２〜１１ｑ１３．２領域（Ｄ１１Ｓ４１９１〜Ｄ１１Ｓ９８７）における、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーに対する連鎖不平衡解析により決定され、且つ配列番号１〜５のいずれかで示される塩基配列からなるハプロタイプブロックにオーバーラップする遺伝子であって、当該ハプロタイプブロックの塩基配列の一部または全てを含有する遺伝子
（ii）ＳＬＣ２２Ａ８、ＰＡＣＳ１、ＫＬＣ２、ＲＡＢ１Ｂ、ＣＮＩＨ２、ＹＩＦ１Ａ、ＭＧＣ３３４８６、ＣＤ２４８、ＯＲＡＯＶ１、ＫＲＴＡＰ５−８、ＫＲＴＡＰ５−９、及びＫＲＴＡＰ５−１０から選択される遺伝子；及び
（ｂ）投与した被験物質の中から、当該（i）又は（ii）の遺伝子上又はその近傍に存在する、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）及び当該ＳＮＰと連鎖している一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーの塩基の多型をもう一方の多型に変換させる物質を毛髪形状調節剤として選択する工程。
【請求項１０】
配列番号３４、配列番号３６、配列番号３８若しくは配列番号４０に示される塩基配列、これらと相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、又はこれらの部分ポリヌクレオチドからなるか、あるいは配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９若しくは配列番号４１に示されるアミノ酸配列からなるポリペプチド又はその部分ポリペプチドからなる、毛髪形状タイプのマーカー。
【請求項１１】
部分ポリヌクレオチドが１５塩基以上のポリヌクレオチドである請求項１０記載のマーカー。
【請求項１２】
配列番号３４、配列番号３６、配列番号３８若しくは配列番号４０に示される塩基配列又はこれと相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチドの部分ポリヌクレオチドからなる、請求項１０記載のマーカーを増幅するためのプライマー。
【請求項１３】
配列番号３４、配列番号３６、配列番号３８若しくは配列番号４０に示される塩基配列又はこれと相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、又はこれらの部分ポリヌクレオチドからなる、請求項１０記載のマーカーを検出するためのプローブ。
【請求項１４】
配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９若しくは配列番号４１に示されるアミノ酸配列からなるポリペプチド又はその部分ポリペプチドを特異的に認識する、請求項１０記載のマーカーを検出するための抗体。
【請求項１５】
下記の工程（ａ）〜（ｃ）を含む毛髪形状タイプの検出及び／又は判定方法：
（ａ）被験者由来の試料における請求項１０に記載のマーカーの発現量を測定する工程、
（ｂ）当該（ａ）の測定結果を非くせ毛者のそれと比較する工程；及び
（ｃ）（ｂ）の結果に基づいて毛髪形状タイプを判断する工程。
【請求項１６】
前記被験者由来の試料が、被験者より採取された生体試料から調製されたＲＮＡ又は当該ＲＮＡから転写された相補的ポリヌクレオチドである、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記工程（ａ）が、被験者より採取された生体試料と請求項１４記載の抗体とを接触させて、当該抗体と結合した当該生体試料中の請求項１０記載のマーカーの量を測定する工程である、請求項１５記載の方法。
【請求項１８】
被験者より採取された生体試料が上皮系組織又は上皮系細胞由来のものである、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
以下の（ａ）〜（ｄ）の工程を含むことを特徴とする毛髪形状調節剤の評価又は選択方法。
（ａ）以下の（i）又は（ii）の遺伝子又は当該遺伝子にコードされたタンパク質が発現可能な細胞に、被験物質を接触させる工程
（i）ヒト第１１番染色体の１１ｑ１２．２〜１１ｑ１３．２領域（Ｄ１１Ｓ４１９１〜Ｄ１１Ｓ９８７）における、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーに対する連鎖不平衡解析により決定され、且つ配列番号１〜５のいずれかで示される塩基配列からなるハプロタイプブロックにオーバーラップする遺伝子であって、当該ハプロタイプブロックの塩基配列の一部または全てを含有する遺伝子
（ii）ＳＬＣ２２Ａ８、ＰＡＣＳ１、ＫＬＣ２、ＲＡＢ１Ｂ、ＣＮＩＨ２、ＹＩＦ１Ａ、ＭＧＣ３３４８６、ＣＤ２４８、ＯＲＡＯＶ１、ＫＲＴＡＰ５−８、ＫＲＴＡＰ５−９、及びＫＲＴＡＰ５−１０から選択される遺伝子、
（ｂ）接触させた細胞の当該遺伝子又は当該タンパク質の発現量を測定する工程、
（ｃ）（ｂ）で測定された発現量を被験物質に接触させない対照細胞の当該遺伝子又は当該タンパク質の発現量と比較する工程、
（ｄ）（ｃ）の結果に基づいて、当該遺伝子又は当該タンパク質の発現量を減少又は増加させる被験物質を毛髪形状調節剤として選択する工程。
【請求項２０】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含むことを特徴とする毛髪形状調節剤の評価又は選択方法。
（ａ）以下の（i）又は（ii）の遺伝子が発現可能な細胞に、当該遺伝子の発現制御領域とレポーター遺伝子との融合遺伝子を導入し、当該細胞を被験物質の存在下及び非存在下で培養する工程
（i）ヒト第１１番染色体の１１ｑ１２．２〜１１ｑ１３．２領域（Ｄ１１Ｓ４１９１〜Ｄ１１Ｓ９８７）における、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーに対する連鎖不平衡解析により決定され、且つ配列番号１〜５のいずれかで示される塩基配列からなるハプロタイプブロックにオーバーラップする遺伝子であって、当該ハプロタイプブロックの塩基配列の一部または全てを含有する遺伝子
（ii）ＳＬＣ２２Ａ８、ＰＡＣＳ１、ＫＬＣ２、ＲＡＢ１Ｂ、ＣＮＩＨ２、ＹＩＦ１Ａ、ＭＧＣ３３４８６、ＣＤ２４８、ＯＲＡＯＶ１、ＫＲＴＡＰ５−８、ＫＲＴＡＰ５−９、及びＫＲＴＡＰ５−１０から選択される遺伝子、
（ｂ）被験物質の存在下で培養した細胞培養物中のレポーター遺伝子発現産物の発現量を測定し、当該量を被験物質の非存在下で培養した細胞培養物中のレポーター遺伝子発現産物の発現量と比較する工程、
（ｃ）上記（ｂ）の比較結果に基づいて、レポーター遺伝子発現産物の発現量の発現量を増減させる被験物質を毛髪形状調節剤として選択する工程。
【請求項２１】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含むことを特徴とする毛髪形状調節剤の評価又は選択方法。
（ａ）被験物質と以下の（i）又は（ii）の遺伝子にコードされるタンパク質を含む水溶液、細胞又は当該細胞から調製した細胞画分とを接触させる工程
（i）ヒト第１１番染色体の１１ｑ１２．２〜１１ｑ１３．２領域（Ｄ１１Ｓ４１９１〜Ｄ１１Ｓ９８７）における、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーに対する連鎖不平衡解析により決定され、且つ配列番号１〜５のいずれかで示される塩基配列からなるハプロタイプブロックにオーバーラップする遺伝子であって、当該ハプロタイプブロックの塩基配列の一部または全てを含有する遺伝子
（ii）ＳＬＣ２２Ａ８、ＰＡＣＳ１、ＫＬＣ２、ＲＡＢ１Ｂ、ＣＮＩＨ２、ＹＩＦ１Ａ、ＭＧＣ３３４８６、ＣＤ２４８、ＯＲＡＯＶ１、ＫＲＴＡＰ５−８、ＫＲＴＡＰ５−９、及びＫＲＴＡＰ５−１０から選択される遺伝子、
（ｂ）被験物質を接触させた水溶液、細胞又は細胞画分における当該タンパク質の機能又は活性を測定し、当該機能又は活性を、被験物質を接触させない対照水溶液、対照細胞又は対照細胞画分における上記当該タンパク質の機能又は活性と比較する工程、
（ｃ）上記（ｂ）の比較結果に基づいて、当該タンパク質の機能又は活性を増減させる被験物質を毛髪形状調節剤として選択する工程。
【請求項２２】
ヒト毛髪毛根部における以下の（i）又は（ii）の遺伝子の発現を制御することを特徴とする毛髪形状タイプの調節方法。
（i）ヒト第１１番染色体の１１ｑ１２．２〜１１ｑ１３．２領域（Ｄ１１Ｓ４１９１〜Ｄ１１Ｓ９８７）における、アリル頻度がくせ毛形質を有する集団と非くせ毛形質を有する集団との間で統計学的に有意に異なる一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーに対する連鎖不平衡解析により決定され、且つ配列番号１〜５のいずれかで示される塩基配列からなるハプロタイプブロックにオーバーラップする遺伝子であって、当該ハプロタイプブロックの塩基配列の一部または全てを含有する遺伝子
（ii）ＳＬＣ２２Ａ８、ＰＡＣＳ１、ＫＬＣ２、ＲＡＢ１Ｂ、ＣＮＩＨ２、ＹＩＦ１Ａ、ＭＧＣ３３４８６、ＣＤ２４８、ＯＲＡＯＶ１、ＫＲＴＡＰ５−８、ＫＲＴＡＰ５−９、及びＫＲＴＡＰ５−１０から選択される遺伝子