(57)【要約】本発明は、固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の治療における、タンパク質キナーゼ阻害剤、特に本明細書に記載されるような式（Ｉ）のＪＡＫ２阻害剤の使用を提供する。また、固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病の治療のための併用療法も提供される。固形臓器移植片拒絶反応は、移植組織がレシピエントの免疫系に拒絶されるときに生じ、移植組織を破壊する。固形臓器移植片拒絶反応の典型的な治療は、短期の高用量コルチコステロイドを含み、多くの場合、抗増殖剤と併用される。また、抗体治療も免疫抑制療法に加えられてきた。しかし、ＯＫＴ３などの特定の抗体は、サイトカイン放出症候群および移植後リンパ球増殖性障害を引き起こすため禁忌である。
2018528250.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
固形臓器または細胞移植を受けていた哺乳動物における移植片拒絶反応を治療する方法であって、移植片拒絶反応の治療を必要とする哺乳動物に、治療有効量の式Ｉの化合物
【化１７】
2018528250.tif 000019
［式中、
Ｒ１およびＲ２はＨであり、
Ｚ２は−Ｎ（Ｈ）−であり、
Ａｒ１は
【化１８】
2018528250.tif 000020
（式中、Ｒ１０はメトキシまたはフッ素であり、
（ｉ）ｋは０または１から選択される整数である）からなる群から選択され、
Ａｒ２は式
【化１９】
2018528250.tif 000021
（式中、Ｒ１１は、Ｈであるか、または
【化２０】
2018528250.tif 000022
からなる群から選択される）の基であり、
Ｌは、式：
−Ｘ１−Ｙ−Ｘ２−
（式中、Ｘ１はＡｒ１に結合し、Ｘ２はＡｒ２に結合し、Ｘ１、Ｘ２およびＹは、基Ｌが直鎖中に５〜１５個の原子を有するように選択され、
Ｘ１は、
（ａ）−ＯＣＨ２−、
（ｂ）−ＯＣＨ２ＣＨ２−、および
（ｃ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−
からなる群から選択され、
Ｘ２は、
（ａ）−ＣＨ２Ｏ−、
（ｂ）−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、および
（ｃ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−
からなる群から選択され、
Ｙは、式−ＣＲａ＝ＣＲｂ−の基であり、
ＲａおよびＲｂはＨである）の基である］またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシドを投与することを含む方法。
【請求項２】
Ｘ１が−ＣＨ２ＯＣＨ２−である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｘ２が−ＣＨ２ＯＣＨ２−である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｙが、
【化２１】
2018528250.tif 000023
からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記化合物が、
【化２２】
2018528250.tif 000024
【化２３】
2018528250.tif 000025
【化２４】
2018528250.tif 000026
【化２５】
2018528250.tif 000027
【化２６】
2018528250.tif 000028
【化２７】
2018528250.tif 000029
【化２８】
2018528250.tif 000030
またはこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記式（Ｉ）の化合物が、式：
【化２９】
2018528250.tif 000031
またはその薬学的に許容される塩を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記式（Ｉ）の化合物が、式：
【化３０】
2018528250.tif 000032
またはその薬学的に許容される塩を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記哺乳動物が、細胞移植を受けていた、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記細胞移植が、同種異系骨髄または造血幹細胞移植である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物が、同種異系骨髄または造血幹細胞移植と同時に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物が、１日当たり約０．１ｍｇ／ｋｇから１日当たり約１０００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の化合物の量が、１日当たり約１００ｍｇ／ｋｇである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記化合物が経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物が、１日に２回投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記哺乳動物が、固形臓器移植を受けていた、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記固形臓器が、肺、肝臓、腎臓、心臓、膵臓、皮膚、胃、または血管柄付複合移植片である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記式Ｉの化合物が、前記固形臓器移植と同時に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記式Ｉの化合物が、１日当たり約０．１ｍｇ／ｋｇから１日当たり約１０００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記式Ｉの化合物の投与量が、１日当たり約１００ｍｇ／ｋｇである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記式Ｉの化合物が経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記式Ｉの化合物が、１日に２回投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記式Ｉの化合物が、コルチコステロイド、カルシニューリン阻害剤、抗増殖剤、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体からなる群から選択される抗拒絶反応剤と組み合わせて投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
哺乳動物におけるＧｖＨＤを治療する方法であって、ＧｖＨＤの治療を必要とする哺乳動物に、治療有効量の式Ｉの化合物
【化３１】
2018528250.tif 000033
［式中、
Ｒ１およびＲ２はＨであり、
Ｚ２は−Ｎ（Ｈ）−であり、
Ａｒ１は
【化３２】
2018528250.tif 000034
（式中、Ｒ１０はメトキシまたはフッ素であり、
（ｉｉ）ｋは０または１から選択される整数である）からなる群から選択され、
Ａｒ２は式
【化３３】
2018528250.tif 000035
（式中、Ｒ１１は、Ｈであるか、または
【化３４】
2018528250.tif 000036
からなる群から選択される）の基であり、
Ｌは、式：
−Ｘ１−Ｙ−Ｘ２−
（式中、Ｘ１はＡｒ１に結合し、Ｘ２はＡｒ２に結合し、Ｘ１、Ｘ２およびＹは、基Ｌが直鎖中に５〜１５個の原子を有するように選択され、
Ｘ１は、
（ａ）−ＯＣＨ２−、
（ｂ）−ＯＣＨ２ＣＨ２−、および
（ｃ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−
からなる群から選択され、
Ｘ２は、
（ａ）−ＣＨ２Ｏ−、
（ｂ）−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、および
（ｃ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−
からなる群から選択され、
Ｙは、式−ＣＲａ＝ＣＲｂ−の基であり、
ＲａおよびＲｂはＨである）の基である］またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシドを投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
参照による援用
本明細書は、米国特許第８，１５３，６３２号および第８，４１５，３３８号、ならびに米国特許出願公開第２０１３／０１７２３３８号を参照によって援用し、本明細書中で言及される他の全ての刊行物は、個々の特許または刊行物の各々が、具体的かつ個別に参照によって援用されることが示されている場合と同程度に援用する。
【背景技術】
【０００２】
本開示の背景
固形臓器移植片拒絶反応は、移植組織がレシピエントの免疫系に拒絶されるときに生じ、移植組織を破壊する。固形臓器移植片拒絶反応の典型的な治療は、短期の高用量コルチコステロイドを含み、多くの場合、抗増殖剤と併用される。また、抗体治療も免疫抑制療法に加えられてきた。しかし、ＯＫＴ３などの特定の抗体は、サイトカイン放出症候群および移植後リンパ球増殖性障害を引き起こすため禁忌である。
【０００３】
移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）は、同種異系組織移植後の一般的な合併症であり、多くの場合、幹細胞または骨髄移植に関連する。実質的に、ＧｖＨＤは、移植骨髄により宿主に入る成熟移植リンパ球が、新しい宿主組織を異物と認識して宿主の組織を破壊するときに生じる。ＧｖＨＤは、移植後、最初の１００日を超えて生存する患者の約５０％に影響を及ぼす。急性ＧｖＨＤは、一般に、肝臓、皮膚、粘膜および胃腸管、ならびに造血系および肺を標的とし、一方で慢性ＧｖＨＤは、同じ器官ならびに結合組織および外分泌腺に影響を与える。急性ＧｖＨＤ（以下、「ａＧｖＨＤ」）は、普通、移植後最初の１００日以内に観察され、慢性ＧｖＨＤ（以下、「ｃＧｖＨＤ」）は普通、１００日後に生じる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本開示の概要
本明細書では、固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の治療を必要とする患者における固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）を治療する方法であって、治療有効量のヤーヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤（例えばＪＡＫ２）を投与することを含む方法が開示される。一部の実施形態では、本開示は、患者における固形臓器移植片拒絶反応およびＧｖＨＤを治療する方法であって、固形臓器移植片拒絶反応およびＧｖＨＤの治療を必要とする患者に、治療有効量の、以下の構造を有する式（Ｉ）の化合物
【化１】
2018528250.tif 000003
［式中、
Ｒ１およびＲ２はＨであり、
Ｚ２は−Ｎ（Ｈ）−であり、
Ａｒ１は
【化２】
2018528250.tif 000004
（式中、Ｒ１０はメトキシまたはフッ素であり、
ｋは０または１から選択される整数である）からなる群から選択され、
Ａｒ２は式
【化３】
2018528250.tif 000005
（式中、Ｒ１１は、Ｈであるか、または
【化４】
2018528250.tif 000006
【化５】
2018528250.tif 000007
からなる群から選択される）の基であり、
Ｌは、式：
−Ｘ１−Ｙ−Ｘ２−
（式中、Ｘ１はＡｒ１に結合し、Ｘ２はＡｒ２に結合し、Ｘ１、Ｘ２およびＹは、基Ｌが直鎖中に５〜１５個の原子を有するように選択され、
Ｘ１は、
（ａ）−ＯＣＨ２−、
（ｂ）−ＯＣＨ２ＣＨ２−、および
（ｃ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−
からなる群から選択され、
Ｘ２は、
（ａ）−ＣＨ２Ｏ−、
（ｂ）−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、および
（ｃ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−
からなる群から選択され、
Ｙは、式−ＣＲａ＝ＣＲｂ−の基であり、
ＲａおよびＲｂはＨである）の基である］またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシドを投与することを含む方法を提供する。
【０００５】
一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１１−（２−ピロリジン１−イル−エトキシ）−１４，１９−ジオキサ−５，７，２６−トリアザテトラシクロ［１９．３．１．１２，６．１８，１２］ヘプタコサ−１（２５），２（２６），３，５，８，１０，１２（２７），１６，２１，２３−デカエン（パクリチニブ）またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシド、例えばそのクエン酸塩またはマレイン酸塩である。ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、９Ｅ−１５−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−７，１２，２５−トリオキサ−１９，２１，２４−トリアザ−テトラシクロ［１８．３．１．１（２，５）．１（１４，１８）］ヘキサコサ−１（２４），２，４，９，１４，１６，１８（２６），２０，２２−ノナエン、またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシド、例えばそのクエン酸塩またはマレイン酸塩である。一部の実施形態では、患者は、固形臓器移植片拒絶反応またはＧｖＨＤの１つまたは複数の症状を示す。一部の実施形態では、ＧｖＨＤは、多臓器ＧｖＨＤである。一部の実施形態では、患者は、固形臓器移植を受けていた。一部の実施形態では、固形臓器移植片は、肺、肝臓、腎臓、心臓、膵臓、皮膚、胃、または血管柄付複合移植片である。一部の実施形態では、患者は、細胞移植を受けていた。一部の実施形態では、細胞移植は、同種異系骨髄または造血幹細胞移植である。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、固形臓器移植、同種異系骨髄または造血幹細胞移植と同時に投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、固形臓器移植、同種異系骨髄または造血幹細胞移植に後続して投与される。一部の実施形態では、ＪＡＫ阻害剤化合物（例えば、式（Ｉ）の化合物）の量は、固形臓器移植片拒絶反応またはＧｖＨＤを予防または軽減すると同時に、同種異系造血幹細胞移植（アロ−ＨＣＴ）後の誘導性制御性Ｔ細胞（ｉＴｒｅｇ）応答を促進する。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１日当たり約０．１ｍｇ／ｋｇから１日当たり約１０００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与量は、約１０ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日または約７００ｍｇ／日である。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、固形臓器移植または同種異系骨髄もしくは造血幹細胞移植後１日目から約２０００日目まで、毎日１回投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、移植片拒絶反応の症状の発症から約２０００日目まで、あるいは固形臓器移植または同種異系骨髄もしくは造血幹細胞移植後の拒絶反応の症状が消散するまで投与される。他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１日に２回、１日に３回、または１日に４回投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は経口投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１種または複数の追加の治療剤と組み合わせてまたは併用して投与される。
【０００６】
本開示はまた、有効量の式（Ｉ）の化合物および薬学的に許容される担体を投与することを含む、固形臓器移植片拒絶反応およびＧｖＨＤの発生の予防、治療もしくは軽減、またはそれらの重症度の軽減を必要とする患者における固形臓器移植片拒絶反応およびＧｖＨＤの発生の予防、治療もしくは軽減、またはそれらの重症度の軽減のための組成物も提供する。
【０００７】
本開示のこれらおよび他の実施形態は、本明細書における開示内容を考慮して当業者にとって容易に明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、ＧｖＨＤマウスの生存率を示す。プロットは、ＪＡＫ２−／−Ｔ細胞の骨髄（ＢＭ）移植の全生存率が、野生型（ＷＴ）またはＪＡＫ２富化（ＪＡＫ２＋／＋）ドナーと比べて有意に低いＧｖＨＤに関連することを示す。
【０００９】
【図２】図２は、ＧｖＨＤマウスの生存率を示す。プロットは、末梢血単核細胞（ＰＭＢＣ）の注入後のビヒクル対照対パクリチニブ１００ｍｇ／ｋｇ投与の移植片の生存率を示し、代表的画像は、抜糸時（−３０日目）および＋３５日目の皮膚を示す。
【００１０】
【図３】図３は、移植片拒絶反応の発症前の、＋２１日目の皮膚移植片（ｓｋｉｎ  ｇｒａｎｔｓ）のＨ＆Ｅ（上の画像）およびＣＤ３（茶色／下の画像）のＩＨＣ染色を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本開示の詳細な説明
本明細書では、固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の治療を必要とする患者における固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）を治療する方法であって、治療有効量のヤーヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤（例えばＪＡＫ２）を投与することを含む方法が開示される。一部の実施形態では、本開示は、患者における固形臓器移植片拒絶反応およびＧｖＨＤを治療する方法であって、固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の治療を必要とする患者に、治療有効量の、以下の構造を有する式（Ｉ）の化合物
【化６】
2018528250.tif 000008
［式中、
Ｒ１およびＲ２はＨであり、
Ｚ２は−Ｎ（Ｈ）−であり、
Ａｒ１は
【化７】
2018528250.tif 000009
（式中、Ｒ１０はメトキシまたはフッ素であり、
ｋは０または１から選択される整数である）からなる群から選択され、
Ａｒ２は式
【化８】
2018528250.tif 000010
（式中、Ｒ１１は、Ｈであるか、または
【化９】
2018528250.tif 000011
からなる群から選択される）の基であり、
Ｌは、式：
−Ｘ１−Ｙ−Ｘ２−
（式中、Ｘ１はＡｒ１に結合し、Ｘ２はＡｒ２に結合し、Ｘ１、Ｘ２およびＹは、基Ｌが直鎖中に５〜１５個の原子を有するように選択され、
Ｘ１は、
（ａ）−ＯＣＨ２−、
（ｂ）−ＯＣＨ２ＣＨ２−、および
（ｃ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−
からなる群から選択され、
Ｘ２は、
（ａ）−ＣＨ２Ｏ−、
（ｂ）−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、および
（ｃ）−ＣＨ２ＯＣＨ２−
からなる群から選択され、
Ｙは、式−ＣＲａ＝ＣＲｂ−の基であり、
ＲａおよびＲｂはＨである）の基である］またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシドを投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１１−（２−ピロリジン１−イル−エトキシ）−１４，１９−ジオキサ−５，７，２６−トリアザテトラシクロ［１９．３．１．１２，６．１８，１２］ヘプタコサ−１（２５），２（２６），３，５，８，１０，１２（２７），１６，２１，２３−デカエン（パクリチニブ）またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシド、例えばそのクエン酸塩またはマレイン酸塩である。ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、９Ｅ−１５−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−７，１２，２５−トリオキサ−１９，２１，２４−トリアザ−テトラシクロ［１８．３．１．１（２，５）．１（１４，１８）］ヘキサコサ−１（２４），２，４，９，１４，１６，１８（２６），２０，２２−ノナエン、またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシド、例えばそのクエン酸塩またはマレイン酸塩である。一部の実施形態では、患者は、固形臓器移植片拒絶反応またはＧｖＨＤの１つまたは複数の症状を示す。一部の実施形態では、ＧｖＨＤは、多臓器ＧｖＨＤである。一部の実施形態では、患者は、固形臓器移植を受けていた。一部の実施形態では、固形臓器移植片は、肺、肝臓、腎臓、心臓、膵臓、皮膚、胃、または血管柄付複合移植片である。一部の実施形態では、患者は、細胞移植を受けていた。一部の実施形態では、細胞移植は、同種異系骨髄または造血幹細胞移植である。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、固形臓器移植、同種異系骨髄または造血幹細胞移植と同時に投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、固形臓器移植、同種異系骨髄または造血幹細胞移植に後続して投与される。一部の実施形態では、ＪＡＫ阻害剤化合物（例えば、式（Ｉ）の化合物）の量は、固形臓器移植片拒絶反応またはＧｖＨＤを予防または軽減すると同時に、同種異系造血幹細胞移植（アロ−ＨＣＴ）後の誘導性制御性Ｔ細胞（ｉＴｒｅｇ）応答を促進する。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１日当たり約０．１ｍｇ／ｋｇから１日当たり約１０００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物の投与量は、約１０ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約５００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日または約７００ｍｇ／日である。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、固形臓器移植または同種異系骨髄もしくは造血幹細胞移植後１日目から約２０００日目まで、毎日１回投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ＧｖＨＤの症状の発症から、固形臓器移植または同種異系骨髄もしくは造血幹細胞移植後、約２０００日目まで投与される。他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１日に２回、１日に３回、または１日に４回投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は経口投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は非経口投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１種または複数の追加の治療剤と組み合わせてまたは併用して投与される。
【００１２】
本開示はまた、有効量の式（Ｉ）の化合物および薬学的に許容される担体を投与することを含む、固形臓器移植片拒絶反応およびＧｖＨＤの発生の予防、治療もしくは軽減、またはそれらの重症度の軽減を必要とする患者における固形臓器移植片拒絶反応およびＧｖＨＤの発生の予防、治療もしくは軽減、またはそれらの重症度の軽減のための組成物も提供する。
【００１３】
本開示はまた、移植患者における同種移植片拒絶反応を遅延させる方法であって、同種移植片拒絶反応の遅延を必要とする患者に、治療有効量の上記の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む方法も提供する。
【００１４】
本明細書では、さらなる実施形態において、移植患者におけるＴ細胞増殖を低減する方法であって、Ｔ細胞増殖の低減を必要とする患者に、治療有効量の上記の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む方法が開示される。
【００１５】
本明細書では、いくつかの用語が使用されるが、それらは当業者に周知である。それにもかかわらず、明確にするという目的で、いくつかの用語は以下に定義される。
【００１６】
本発明の方法において使用される式（Ｉ）の化合物のファミリーには、ジアステレオ異性体、鏡像異性体、互変異性体、ならびに「Ｅ」もしくは「Ｚ」立体配置異性体における幾何異性体またはＥおよびＺ異性体の混合物を含めた異性体の形態が含まれることを理解されたい。また、ジアステレオマー、鏡像異性体、および幾何異性体などの一部の異性体の形態は、物理的および／または化学的方法によって、ならびに当業者によって分離することができることも理解されたい。
【００１７】
本発明の方法を実践する上で使用される本開示の実施形態の化合物の一部は、単一立体異性体、ラセミ体、ならびに／または鏡像異性体および／もしくはジアステレオマーの混合物として存在し得る。このような単一立体異性体、ラセミ体およびこれらの混合物は全て、記載および特許請求される主題の範囲内にあることが意図される。加えて、式（Ｉ）は、該当する場合、溶媒和および非溶媒和の形態の化合物を包含することが意図される。
【００１８】
したがって、各式は、水和および非水和形態を含めた示される構造を有する化合物を含む。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物に加えて、本発明の方法を実践する上で使用される様々な実施形態の化合物は、該化合物の薬学的に許容される塩、プロドラッグ、Ｎ−オキシドおよび活性代謝産物、ならびに該代謝産物の薬学的に許容される塩を含む。
【００２０】
用語「薬学的に許容される塩」は、上で特定した化合物の所望の生物学的活性を保持する塩を指し、薬学的に許容される酸付加塩および塩基付加塩を含む。本発明の方法を実践する上で使用される式（Ｉ）の化合物の好適な薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸または有機酸から調製することができる。このような無機酸の例は、塩酸、硫酸、およびリン酸である。適切な有機酸は、脂肪族、脂環式、芳香族、複素環式カルボン酸およびスルホン酸のクラスの有機酸から選択することができ、それらの例は、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、アルキルスルホン酸、アリールスルホン酸である。式（Ｉ）の化合物の好適な薬学的に許容される塩基付加塩としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム、および亜鉛からつくられる金属塩、ならびにコリン、ジエタノールアミン、モルホリンなどの有機塩基からつくられる有機塩が挙げられる。有機塩の他の例は、アンモニウム塩、テトラメチルアンモニウム塩などの第４級塩、グリシンおよびアルギニンとの塩などのアミノ酸付加塩である。薬学的に許容される塩に関するさらなる情報は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１９版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．１９９５年で見つけることができる。固形物である薬剤の場合、当業者は、本発明の化合物、薬剤および塩は、異なる結晶または多形形態で存在し得、これらは全て、本発明および規定の式の範囲内にあることが意図されることを理解している。
【００２１】
「プロドラッグ」は、代謝手段によって（例えば、加水分解、還元または酸化によって）ｉｎ  ｖｉｖｏで式（Ｉ）の化合物に変換可能な化合物を意味する。例えば、ヒドロキシル基を含む式（Ｉ）の化合物のエステルプロドラッグは、ｉｎ  ｖｉｖｏでの加水分解によって親分子に変換可能であり得る。ヒドロキシル基を含む式（Ｉ）の化合物の好適なエステルは、例えば、酢酸エステル、クエン酸エステル、乳酸エステル、酒石酸エステル、マロン酸エステル、シュウ酸エステル、サリチル酸エステル、プロピオン酸エステル、コハク酸エステル、フマル酸エステル、マレイン酸エステル、メチレン−ビス−ｐ−ヒドロキシナフトエ酸エステル、ゲンチジン酸エステル（ｇｅｓｔｉｓａｔｅ）、イソチオン酸エステル、ジ−ｐ−トルオイル酒石酸エステル、メタンスルホン酸エステル、エタンスルホン酸エステル、ベンゼンスルホン酸エステル、ｐ−トルエンスルホン酸エステル、シクロヘキシルスルファミン酸エステル、およびキニン酸エステルである。別の例として、カルボキシ基を含む式（Ｉ）の化合物のエステルプロドラッグが、ｉｎ  ｖｉｖｏでの加水分解によって親分子に変換可能であり得る。
【００２２】
用語「治療有効量」または「有効量」は、有益なまたは所望の臨床結果をもたらすのに十分な量である。有効量は、単回または複数回の投与において投与され得る。有効量は、典型的には、病状（例えば、固形臓器移植片拒絶反応またはＧｖＨＤ）の進行を軽減、改善、安定化、低減、好転、治療、減速または遅延させるのに十分である。
【００２３】
本発明の方法を実践する上で使用される特定の化合物には、以下の
【化１０】
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【化１１】
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【化１２】
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【化１３】
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【化１４】
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【化１５】
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【化１６】
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またはこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００２４】
一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、１１−（２−ピロリジン１−イル−エトキシ）−１４，１９−ジオキサ−５，７，２６−トリアザテトラシクロ［１９．３．１．１２，６．１８，１２］ヘプタコサ−１（２５），２（２６），３，５，８，１０，１２（２７），１６，２１，２３−デカエン（パクリチニブ）またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシド、例えばそのクエン酸塩またはマレイン酸塩である。ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、９Ｅ−１５−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−７，１２，２５−トリオキサ−１９，２１，２４−トリアザ−テトラシクロ［１８．３．１．１（２，５）．１（１４，１８）］ヘキサコサ−１（２４），２，４，９，１４，１６，１８（２６），２０，２２−ノナエン、またはその薬学的に許容される塩もしくはＮ−オキシド、例えばそのクエン酸塩またはマレイン酸塩である。
【００２５】
固形臓器移植片拒絶反応およびＧｖＨＤの発生の予防、治療もしくは軽減、またはそれらの重症度の軽減を目的とした、ヒトへの式（Ｉ）内の化合物の投与は、経口もしくは直腸などの腸内投与の許容される様式のいずれかによって、または皮下、筋内、静脈内および皮内経路などの非経口投与によって行うことができる。注射は、ボーラス投与であっても、または一定もしくは間欠的注入によってもよい。活性化合物は、典型的には、薬学的に許容される担体または希釈剤の中に、患者に治療有効用量を送達するのに十分な量で含まれる。
【００２６】
本発明の方法を実践する上で使用される化合物は、化合物を生物学的に利用可能にする任意の形態または様式で投与することができる。製剤を調製する当業者は、選択した化合物の具体的な特性、治療される状態、および他の関連状況に応じて適正な投与形態および様式を容易に選択することができる。さらなる情報については読者は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１９版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（１９９５年）を参照されたい。本発明の方法を実践する上で使用される化合物は、単独で投与しても、薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせた医薬組成物の形態で投与してもよい。本発明の方法を実践する上で使用される化合物は、それら自体で有効であるものの、典型的には、それらの薬学的に許容される塩の形態で製剤化され投与されるが、その理由は、これらの形態が、典型的には、より安定性であり、より容易に結晶化し、高い溶解性を有するからである。本発明の方法を実践する上で使用される化合物はまた、典型的には、所望の投与様式に応じて製剤化される医薬組成物の形態で使用される。組成物は、当技術分野において周知の方法で調製される。
【００２７】
本発明の方法を実践する上で使用される化合物は、１種または複数の追加の薬物、例えば固形臓器移植片拒絶反応および／またはＧｖＨＤの症状の治療または軽減に適した抗拒絶反応薬と組み合わせて使用または投与してよい。本発明の方法を実践する上で使用される化合物と組み合わせて使用または投与することができる代表的な薬物としては、プレドニゾンまたはメチルプレドニゾンなどのコルチコステロイド；シクロスポリンおよびタクロリムスなどのカルシニューリン阻害剤；ミコフェノール酸モフェチル；アザチプリン（ａｚａｔｈｉｐｒｉｎｅ）、エベロリムスおよびシロリムスなどの抗増殖剤；バシリキシマブ、ダクリズマブ、およびリツキシマブなどのモノクローナル抗体；ならびにウマ抗胸腺細胞グロブリンおよびウサギ抗胸腺細胞グロブリンなどのポリクローナル抗体が挙げられる。成分は、同じ製剤または別々の製剤で投与することができる。別々の製剤で投与する場合、本発明の方法を実践する上で使用される化合物は、他の薬物と連続的にまたは同時に投与してよい。抗拒絶反応薬を含む１種または複数の追加の薬物と組み合わせて投与することができることに加えて、本発明の方法を実践する上で使用される化合物は、併用療法において使用することができる。これを行うとき、化合物は、典型的には、互いに組み合わせて投与される。したがって、本発明の方法を実践する上で使用される化合物の１種または複数は、同時に（合わせた調合薬として）または連続的に投与して、所望の効果を実現することができる。これは、各化合物の治療プロファイルが異なることで、２種の薬物の複合効果が改善された治療結果をもたらすので、特に望ましい。
【００２８】
非経口注射用であり、本発明の方法を実践する上で使用される医薬組成物は、薬学的に許容される滅菌水性もしくは非水性溶液、分散液、懸濁液またはエマルションおよび使用直前に滅菌注射用液または分散液に再構成するための滅菌粉末を含む。好適な水性および非水性担体、希釈剤、溶媒またはビヒクルの例としては、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、およびこれらの好適な混合物、植物油（オリーブオイルなど）、ならびにオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルが挙げられる。適正な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用により、分散液の場合、必要な粒径の維持により、および界面活性剤の使用により維持することが可能である。
【００２９】
本発明の方法を実践する上で使用されるこれらの組成物は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、および分散剤などのアジュバントも含有し得る。微生物の作用の防止は、様々な抗菌および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などを含めることによって確実にすることができる。また、糖類、塩化ナトリウムなどの等張剤を含むことも望ましいことがある。注射用医薬品形態の持続的吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延させる作用剤を含めることによってもたらすことができる。必要に応じて、より効果的に分配させるために、化合物を、ポリマーマトリクス、リポソーム、およびマイクロスフェアなどの徐放性または標的化送達システムに組み込むことができる。
【００３０】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターに通す濾過により、または使用直前に滅菌水もしくは他の滅菌注射用媒体に溶解もしくは分散させることができる滅菌固形組成物の形態の滅菌剤を組み込むことによって、滅菌することができる。
【００３１】
経口投与用の、本発明の方法を実践する上で使用される固形剤形としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、粉末剤、および顆粒剤が挙げられる。このような固形剤形中、活性化合物は、クエン酸ナトリウムもしくは第二リン酸カルシウムなどの少なくとも１種の不活性の薬学的に許容される賦形剤もしくは担体、ならびに／またはａ）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸などの充填剤もしくは増量剤、ｂ）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、スクロース、およびアカシアなどの結合剤、ｃ）グリセロールなどの保湿剤、ｄ）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のシリケート、および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、ｅ）パラフィンなどの溶解遅延剤、ｆ）第４級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、ｇ）例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなどの湿潤剤、ｈ）カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤、ならびにｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの潤滑剤、およびこれらの混合物と混合される。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形は緩衝剤も含み得る。
【００３２】
同様のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用した軟および硬充填ゼラチンカプセル剤中の充填剤として用いてもよい。
【００３３】
錠剤、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の固形剤形は、腸溶コーティングおよび医薬製剤化の技術分野において周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。これらは、任意選択で乳白剤を含有していてもよく、また、有効成分のみを放出する、または優先的に腸管の特定の部位で、任意選択で遅延させて放出する組成物であってもよい。使用可能な包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。
【００３４】
必要に応じて、より効果的に分配させるために、本発明の方法を実践する上で使用される化合物を、ポリマーマトリクス、リポソーム、およびマイクロスフェアなどの徐放性または標的化送達システムに組み込むことができる。
【００３５】
本発明の方法を実践する上で使用される活性化合物はまた、適切な場合、上記の賦形剤の１種または複数を含む、マイクロカプセル化形態であってもよい。
【００３６】
経口投与用の液体剤形としては、薬学的に許容されるエマルション、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが挙げられる。活性化合物に加えて、液体剤形は、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブオイル、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｒｆｕｒｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物などの当技術分野において一般に使用される不活性希釈剤を含有してよい。
【００３７】
不活性希釈剤の他、経口用組成物はまた、湿潤剤、乳化および懸濁化剤、甘味剤、香料、ならびに芳香剤などのアジュバントも含むことができる。本発明の化合物の局所投与用の剤形としては、粉末、パッチ、スプレー、軟膏および吸入剤が挙げられる。本発明の方法を実践する上で使用される活性化合物を、滅菌条件下で、薬学的に許容される担体および任意の必要な防腐剤、緩衝剤、または噴射剤と混合する（必要な場合がある）。
【００３８】
本発明の方法を実践する上で投与される化合物の量は、好ましくは、状態を治療および低減または緩和するであろう。治療有効量は、担当診断医もしくは医師または他の医療従事者によって、従来技術を使用し、類似の状況下で得られた結果を観察することによって容易に決定することができる。治療有効量を決定する上で、これらに限定されないが、動物種、そのサイズ、年齢および全体的な健康、関連する特有の状態、状態の重症度、治療に対する患者の応答、投与する特定の化合物、投与様式、投与する調合薬のバイオアベイラビリティ、選択した用法、他の薬の使用および他の関連状況を含めたいくつかの因子が考慮される。
【００３９】
好ましい投与量は、１日に体重１キログラム当たり約０．０１〜１０００ｍｇの範囲であろう。より好ましい投与量は、１日に体重１キログラム当たり０．１〜１００ｍｇ、より好ましくは１日に体重１キログラム当たり０．２〜８０ｍｇ、さらにより好ましくは１日に体重１キログラム当たり０．２〜５０ｍｇの範囲であろう。好適な用量を、１日に細分した用量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅｓ）で複数回投与してもよい。
【００４０】
本明細書では、一部の実施形態において、固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の発生または重症度の予防、治療または低減を必要とする患者における固形臓器移植片拒絶反応および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の発生または重症度を予防、治療または低減する方法であって、治療有効量のＪＡＫ阻害剤（例えば、ＪＡＫ２阻害剤）を投与することを含む方法が記載される。本明細書では、細胞移植を必要とする患者における移植片対宿主病の発生を低減する、またはＧｖＨＤ発生の重症度を低減する方法であって、患者に治療有効量のＪＡＫ阻害剤化合物（例えば、例えばパクリチニブなどのＪＡＫ２阻害剤）を含む組成物を投与することを含む方法がさらに記載される。一実施形態では、ＧｖＨＤは、造血幹細胞移植などの同種異系移植後の同種抗体産生に一部起因して発症する同種抗体により駆動されるＧｖＨＤである。一部の実施形態では、患者は、末梢血幹細胞移植を受けていた。一部の実施形態では、患者は、骨髄移植を受けていた。一部の実施形態では、ＪＡＫ阻害剤化合物（例えば、パクリチニブ）は、細胞移植の施行前に投与される。別の実施形態では、ＪＡＫ阻害剤化合物は、細胞移植の施行に後続して投与される。さらに別の実施形態では、ＪＡＫ阻害剤化合物は、細胞移植の施行と同時に投与される。
【００４１】
本明細書では、幹細胞移植を必要とする患者における同種抗体により駆動されるＧｖＨＤの発生を予防、治療もしくは低減する、または同種抗体により駆動されるＧｖＨＤ発生の重症度を低減する方法であって、患者に治療有効量のパクリチニブを含む組成物を投与することを含む方法が記載される。
【００４２】
本明細書では、一部の実施形態において、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）および固形臓器移植片拒絶反応の治療を必要とする患者における同種抗体により駆動される移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）および固形臓器移植片拒絶反応を治療する方法であって、治療有効量のＪＡＫ阻害剤（例えば、ＪＡＫ２阻害剤）を投与することを含む方法が記載される。本明細書では、細胞移植を必要とする患者における移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の発生を予防する、またはＧｖＨＤ発生の重症度を低減する方法であって、患者に治療有効量のＪＡＫ阻害剤化合物（例えば、例えばパクリチニブなどのＪＡＫ２阻害剤）を含む組成物を投与することを含む方法がさらに記載される。
【００４３】
本明細書では、骨髄介在性疾患の緩和およびその結果として発症する移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の緩和のために患者を治療する方法であって、患者に同種異系造血幹細胞および／または同種異系Ｔ細胞を投与することを含み、治療有効量のＪＡＫ阻害剤化合物（例えば、例えばパクリチニブなどのＪＡＫ２阻害剤）が、同種異系造血幹細胞および／または同種異系Ｔ細胞の前にまたは同時に投与される方法がさらに記載される。
【実施例】
【００４４】
パクリチニブが既成のＧｖＨＤを治療できるかを判定するために、同種異系造血細胞移植のマウスモデルを利用した。加えて、ＪＡＫ２阻害剤が、固形臓器移植片拒絶反応の重症度を予防または低減できるかを判定するために、ヒト皮膚／ＮＳＧマウス異種移植片モデルを用いた。アロ−ＨＣＴのマウスモデルを使用して、本発明者らは、ドナーＪＡＫ２−／−Ｔ細胞の移動が、野生型またはＪＡＫ２富化ドナーと比べて、有意に低いＧＶＨＤと関連することを実証した（図１を参照されたい、それぞれＰ＝０．００３および０．０１）。ＪＡＫ２−／−Ｔ細胞間のＴｈ１分化は、対照と比べて激減している。逆に、ｉＴｒｅｇ極性化および安定性は、ＪＡＫ２欠損Ｔ細胞間で有意に高くなっている。
【００４５】
薬理的ＪＡＫ２阻害のＴ細胞アロ応答（ａｌｌｏｒｅｓｐｏｎｓｅｓ）への影響を調べるために、ＪＡＫ１／ＪＡＫ２阻害剤とは異なり、骨髄抑制を誘発しないまたは骨髄線維症患者における日和見感染のリスクを上げないという理由でパクリチニブ（ＣＴＩ  ＢｉｏＰｈａｒｍａより供給）を選択した。パクリチニブは、ＪＡＫ２を強く阻害するが、ＪＡＫ３、ＣＳＦ１Ｒ、およびＩＲＡＫ１に対して抑制活性も有する。パクリチニブは、ＭＨＣが異なるアロ−ＨＣＴの日から開始して４週間、経口胃管栄養法により、１日に２回１００ｍｇ／ｋｇで投与し、レシピエントマウスにおけるＧＶＨＤが有意に低減された。
【００４６】
次いで、本発明者らは、ヒト皮膚／ＮＳＧマウス異種移植片モデルを使用して、ＪＡＫ２阻害が固形臓器移植片拒絶反応を予防できたかを評価した。１×１ｃｍ分層ヒト皮膚移植片を動物の背部に移植し、続いて５×１０６個の同種異系末梢血単核細胞（ＰＭＢＣ）を手術の３０日後に腹腔内注射した。パクリチニブを、ＮＳＧマウスに許容されるように、ＰＢＭＣ注射時から開始して１５日間、経口胃管栄養法により、１日に２回１００ｍｇ／ｋｇを投与した。治療は、ビヒクル対照と比べて、ヒトドナーＰＢＭＣによる同種移植片および異種移植片拒絶反応を有意に遅延させた（図２を参照されたい：移植片の平均生存期間３２．５対５１日、＋６０日目の生存率０％対３３．３％、２つの実験からの統合データ、ｎ＝５〜６匹のマウス／アーム、Ｐ＝０．００１１；図３を参照されたい：＋２１日目の皮膚移植片の代表的切片は、パクリチニブが組織のリンパ球浸潤を低減することを示す（Ｈ＆Ｅ（上の画像）およびＣＤ３［茶色／下の画像］）。
【００４７】
ヒト細胞を使用した同種異系混合白血球反応において、パクリチニブ（２．５μＭ）は、５日間の培養後にＴ細胞増殖を有意に低減した（平均増殖率１００％対２３．７％、ＤＣ：Ｔ細胞比１：３０、ｎ＝４、３連、Ｐ＜０．０００１）。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究は、パクリチニブ（２．５μＭ）が、ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞中のＩＬ−６によりＳＴＡＴ３活性を除去し、一方でＪＡＫ３へのその効果にもかかわらず、ＩＬ−２誘発ＳＴＡＴ５リン酸化を可能にしたことを検証した。これにより、Ｔｈ１７の発生を低減し、一方でＴｒｅｇ集合を促進するプラットフォームがもたらされる。したがって、パクリチニブは、ＤＭＳＯと比べて、同種異系樹状細胞（ＤＣ）により刺激されたナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞間でのＴｈ１７の分化を劇的に抑制する（相対的ＲＯＲガンマＴ発現１対０．１２、ｎ＝２、３連、Ｐ≦０．０００１）。ｉＴｒｅｇを、５日間、パクリチニブまたはＤＭＳＯの存在下、同種異系ＤＣを用いて生じさせ、次いで自己Ｔ細胞レスポンダーおよび新鮮なＤＣを用いて、追加の薬物曝露なしで培養した。パクリチニブまたはＤＭＳＯで処置したｉＴｒｅｇの抑制効力は同様であり、ｉＴｒｅｇ機能にＪＡＫ２が必要でないことを示唆した。まとめると、これらのデータは、同種異系造血細胞移植（ＨＣＴ）または固形臓器移植の後に、ドナーの同種反応性を制御し、ｉＴｒｅｇ応答を促進するための治療標的としてＪＡＫ２を明確に特定する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
2018528250.tif 000040
2018528250.tif 000041