(57)【要約】  本明細書に開示する外傷性脳損傷（ＴＢＩ）の症状を軽減する方法はＴＢＩの症状を軽減するために有効な量のストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）を投与することを含んでいる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
外傷性脳損傷（ＴＢＩ）の症状を軽減する方法であって、前記ＴＢＩの症状を軽減するための有効量のストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）を投与することを含む、方法。
【請求項２】
前記ＴＢＩの１つ以上の症状が、健忘、混乱、方向感覚喪失、新規情報の記憶困難、頭痛、めまい、視界不良、吐き気、嘔吐、耳鳴り、理路整然と話すことの困難、感情変化および睡眠パターンの変化からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＳＬＯが、舌下投与、頬投与、経口ドレンチ投与、皮下投与、皮内投与、静脈内投与、鞘内投与、吸入投与、局所投与、筋肉内投与からなる群から選択される投与ルートにより投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ＳＬＯが舌下投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
一回の投与量当たり０．０００１６ナノグラム〜３２００ナノグラムまでの範囲の投与量で前記ＳＬＯが投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
一回の投与量当たり０．０１６ナノグラム〜３２ナノグラムまでの投与量で前記ＳＬＯが投与される、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
一回の投与量当たり０．１６ナノグラム〜３．２ナノグラムまでの投与量で前記ＳＬＯが投与される、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
前記外傷性脳損傷が慢性的な損傷である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記外傷性脳損傷が急性的な損傷である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＳＬＯの投与が外傷後の海馬内のミクログリア細胞の増加を防止する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＳＬＯの投与が脳外傷後の記憶を維持または回復させる、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、外傷性脳損傷を治療する方法に関する。
【０００２】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１５年４月８日に出願された米国特許仮出願第６２／１４４，５９０号の優先権を主張するものであり、その開示内容全体が参照により本明細書に援用されるものである。
【背景技術】
【０００３】
外傷性脳損傷（ＴＢＩ）とは、脳に対する殴打または急激な揺さぶりによりまたは穿通性頭蓋外傷により生じる脳内機能の混乱のことである。ＴＢＩの原因は、異なる要素からなっており、２段階事象であると考えることができる：１）機械的な衝撃により引き起こされる集中または分散した一次損傷であって、たとえば出血、乏血、組織裂傷および軸索損傷の如き病理学的な一次事象をもたらす、一次損傷；２）一次損傷の結果生じるたとえばびまん性炎症、細胞死およびグリオーシスの如き二次損傷。この二次損傷は負傷直後に開始し、数週間にわたって続き、神経幹細胞活動を活発に抑制すると考えられている。これらの事象はひとまとまりになって神経変性をもたらす。
【０００４】
ＴＢＩのほとんどは、穏やかなものであるため、負傷直後の診断では分からない恐れがある。診断では分からずに治療がなされないＴＢＩは危険をはらんでいる。というのは、負傷後、なんらかの兆候および症状 が現れるのが数日から数ヶ月遅れ、治療がなされないと、患者の物理的な状態、情緒的な状態、行動的な状態、社会的な状態または家族状態に重要な影響を及ぼしてしまう恐れがあり、もっといえば、機能障害をもたらしてしまう恐れさえある。初期衝撃後、負傷による二次損傷が続くので、早期の治療（したがって迅速な診断）、とくにポイントオブケア治療が望ましい。ＴＢＩに対して理想的な治療を行えば、梗塞のサイズを小さくし、二次的な炎症反応を限定的なものとすることができる。米国では、１年間で約１５０万人が脳機能を一時的にまたは永久に傷つけてしまうような物理的脳傷害をもたらす外傷性脳損傷（ＴＢＩ）になっている。このような損傷を受けた全患者のうち、約５０，０００人が死亡し、約８０，０００人が何らかの傷害を持っている。ＴＢＩの主要な原因としては、事故（自動車、自転車、歩行者）、暴行およびスポーツ関連の負傷が挙げられる。
【０００５】
頭部損傷は開放性損傷または閉鎖性損傷で説明される。開放性頭部損傷では、弾丸、とがった物体または頭蓋骨骨折により頭皮および頭蓋骨が貫通され、脳組織の裂傷が引き起こされる。
【０００６】
閉鎖性損傷は、揺れ、衝突、落下または他の突発的な損傷により脳が急激に加速されたりまたは減速されたりする時に生じる。この急激な加速または減速により、脳の接触部位（衝撃）または脳の接触部位とは反対側の部位（反対側衝撃）に損傷を与える場合がある。側頭葉や前頭葉が最も損傷を受けやすく、軸索および／または血管が引き裂かれる場合がある。引き裂かれた血管からは漏洩が発生し、血腫、打撲傷または大脳内出血およびくも膜下出血がもたらされる場合もある。
【０００７】
震盪は、突然生じる一過性の意識消失のことであり、短期間の記憶喪失を伴うものと説明されている。しかしながら、ＴＢＩの犠牲者は、呆然としているように見える場合もあれば、方向感覚を喪失したように見える場合もあれば、または、混乱しているように見える場合もある。震盪は痙攣、低血圧症、気絶および顔面蒼白が伴う場合もある。これらの兆候（ｓｉｇｎｓ）および症状（ｓｙｍｐｔｏｍｓ） は、合併症｛がっぺいしょう｝｛へいはつ しょう｝を伴わない単独の震盪の場合には通常一過性のものである。
【０００８】
外傷性脳損傷は、最近発生した急性的な場合もあれば、また、頭脳組織に対する炎症および瘢痕の影響を含む急性的な脳損傷の長期結果から生じる慢性的な場合もある。
【０００９】
フットボール選手およびサッカー選手は、他のスポーツ選手よりも著しく高い頻度で震盪を起こしているように見える。ナショナルフットボールリーグ（ＮＦＬ）のプロフットボール選手は試合日に複数の震盪を起こしているという長期的な結果が最近公表された。頻繁に報告されている兆候として、認識力の喪失、コミュニケーション能力の低下、情動的安定性の喪失、協調性の劣化、記憶喪失および認知症が挙げられる。
【００１０】
ＴＢＩの中でもますます流行している損傷は、爆風により誘発されるまたは爆風により引き起こされるＴＢＩ（ｂＴＢＩ）である。世界中のテロリズムに対する戦争において即席爆発装置（ＩＥＤ）を含む爆発物の使用がますます増加する中で、ｂＴＢＩもさらに増加している。このような損傷は、イラク戦争やアフガニスタン戦争における特徴的な損傷であり、戦闘地域における軍および民間の労働者に影響を与えている。爆風による損傷は、戦闘時の米国の兵士の中のＴＢＩの最も一般的な原因であり、軍人の間の身体障害の主要な原因でもある。 
【００１１】
爆風による損傷は、閉鎖型ＴＢＩおよび貫通型ＴＢＩを含む全範囲のＴＢＩ（軽度、中等度、重度）をもたらしうる。防護服が著しく向上しているため、現在の軍事衝突では軽度および中等度のＴＢＩが重度の損傷よりも多くなってきており、ｂＴＢＩの生存者の数が増えてきている。 
【００１２】
爆風による損傷は４つの考えうる機構力学により定義されている：（１）一次爆風：過剰大気圧の後に低圧または真空が続く；（２）二次爆風：爆風が対象体に当たることにより物が移動する；（３）三次爆風：対象体が爆風により移動する；（４）四次爆風、火傷、圧挫傷、切断、有毒ガスの如き爆風による他の損傷。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１０／０１４４６０２号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２０１３／００５２１８４号明細書
【特許文献３】米国特許出願公開第２０１３／０２４３６９６号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
ｂＴＢＩは、典型的には閉鎖性頭部外傷で、他の形態のＴＢＩに比べて複雑で、衝撃波が頭の頭蓋骨および感覚器官を通過することを含む複数の損傷機構を有したものである。復員軍人省（ＶＡ）のポリトラウマステム（ｐｏｌｙｔｒａｕｍａ  ｓｙｓｔｅｍ）においてサンプリングされた患者の中では、爆風による損傷と他の機構による損傷とで損傷パターンが異なっていた。爆風による損傷を有する患者においては、顔（目、耳、口および顎顔面を含む）に対する損傷、脳貫通損傷、外傷後ストレス症状 および聴覚損傷が他の病因による戦争での損傷を有する患者と比べてより一般的であった。Ｓａｙｅｒ  Ｎ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．、Ａｒｃｈ  Ｐｈｙｓ  Ｍｅｄ．Ｒｅｈａｂｉｌ．（２００８年）、１月、８９、１６３‐７０。このようなわけで、急性的および慢性的な外傷性脳損傷の１つ以上の症状 を軽減するのに有効でありうる治療の必要性が存在している。
【００１５】
ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）は、Ｇｒｏｕｐ  Ａベータ溶血レンサ球菌（Ｇｒｏｕｐ  Ａ  ｂｅｔａ‐ｈｅｍｏｌｙｔｉｃ  ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）から得られる一群の濾過可能な溶血素のうちの１つである。詳細にいえば、ストレプトリシンＯは６０−ｋＤペプチドであり、還元状態では溶血性を示すが、酸化されると不活性化される（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｔ．、Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．、２７、９７−１０１、１９８０年；Ａｌｏｕｆ  ｅｔ  ａｌ．、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．、３、６６１−７１７、１９８４年；Ｂｈａｋｄｉ  ｅｔ  ａｔ．、Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．、４７、５２−６０、１９８５年；これらの文献の開示内容はその全体が参照により本明細書に援用されるものとする）。Ｇｒｏｕｐ  Ａ  レンサ球菌はストレプトリシンＯを生産する。当該技術分野では、ストレプトリシンＯは細胞を透過可能にするための分析用試薬として用いられている（たとえば、Ｒａｚｉｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）、９１、７７２２−７７２６（１９９４年））。
【００１６】
共同で所有する米国特許第５，５７６，２８９号および米国特許第５，７３６，５０８号には本発明にとって興味深いことが開示されている。これらの文献の内容は参照により本明細書に援用されるものとする。米国特許第５，５７６，２８９号には、多発性硬化症および自閉症を含む運動障害を特徴とする病状を治療するための方法にストレプトリシンＯを使用することが開示されている。米国特許第５，７３６，５０８号には、瘢痕化を治療する方法にストレプトリシンＯを使用することが開示されている。
【００１７】
共同で所有する米国特許第７，１９６，０５８号および米国特許第７，６２９，０５８号には本発明にとってさらに興味深いことが開示されている。これらの文献の開示内容は参照することにより本明細書に援用されるものとする。米国特許第７，１９６，０５８号および米国特許第７，６２９，０５８号には、ストレプトリシンＯがＭＭＰ−２に対して効果があることが開示されている。ＭＭＰ−２は、ケラチノサイトの細胞表面のマーカーであり、正常な生理的プロセスにおいて細胞外マトリックスの分解に関与すると考えられている。創傷治癒にはケラチノサイトの移動が伴う。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明の１つの態様に従って、被験体の外傷性脳損傷（ＴＢＩ）の１つ以上の症状 を軽減するための方法が提供されている。実施形態によっては、かかる方法はＴＢＩの１つ以上の症状 を軽減するのに有効な量のストレプトリシンＯを被験体に投与することを含んでいる場合もある。実施形態によっては、ＴＢＩの１つ以上の症状 は、健忘、混乱、方向感覚喪失、新規情報の記憶困難、頭痛、めまい、視界不良、吐き気、嘔吐、耳鳴り、理路整然と話すことの困難、感情の変化および睡眠パターンの変化からなる群から選択される場合もある。本発明の１つの態様によれば、外傷性脳損傷の急性的形態および慢性的形態が後述のように治療されるようになっている。
【００１９】
実施形態によっては、ストレプトリシンＯは、たとえば水、生理食塩水、アルブミン、ブドウ糖、または、当該技術分野において既知になっているその他の薬学的に受け入れ可能な賦形剤を含む複数の薬学的に受け入れ可能な担体中または賦形剤中に配合される場合もあるが、これらに限定されるわけではない。正確な投与量は患者によって変わり、当業者により容易に決定されうる。実施形態によっては、ストレプトリシンＯは、一回の投与量当たり約０．０００１６ナノグラム〜約３２００ナノグラムまでの範囲の投与量で投与される場合もあり、好ましくは液体ビヒクル中に配合されている。実施形態によっては、ストレプトリシンＯは、一回の投与量当たり０．０１６ナノグラム〜約３２ナノグラムまでの範囲または一回の投与量当たり約０．１６ナノグラム〜約３．２ナノグラムの範囲の濃度で提供される場合もある。
【００２０】
本発明の１つの態様によれば、ＳＬＯの投与により、外傷後の海馬内のミクログリア細胞の増加が防止されるようになっている。本発明の他の態様によれば、ＳＬＯの投与により、脳外傷後の記憶が維持または回復される。
【００２１】
本発明のさらなる態様、構成および変形は、詳細な記載を含む本出願全体から明白であり、これらすべてが本発明に含まれる。しかしながらいうまでもなく、詳細な記載や具体的な実施形態は例示のみを意図したものであり、それらに対する複数の変更および修正も当業者とって明らかであり、それらもまた本発明に含まれるものである。
【００２２】
用語「含む」を用いて記載される本発明の態様は、明示的に記載された要素に加えて任意選択的な他の要素も含まれるものであると理解されるべきである。用語「１つの」を用いて記載される本発明の態様は、脈絡（コンテキスト）が明白に狭い意味の解釈を必要としない限り、「１つ以上」も含まれると理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１Ａ】疑似マウス、傷つけられたコントロールマウスおよび傷つけられて治療されたマウスが浸水したプラットフォームを見つけるのにかかった時間を示すマウス頭部外傷モデルの結果を示すグラフである。
【図１Ｂ】疑似マウス、傷つけられたコントロールマウスおよび傷つけられて治療されたマウスが浸水したプラットフォームを見つけるのにかかった時間を示すマウス頭部外傷モデルの結果を示すグラフである。
【図１Ｃ】疑似マウス、傷つけられたコントロールマウスおよび傷つけられて治療されたマウスが浸水したプラットフォームを見つけるのにかかった時間を示すマウス頭部外傷モデルの結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本出願は、ストレプトリシンＯが外傷性脳損傷の急性的または慢性的な影響を含む外傷性脳損傷に伴う様々な病気を軽減することができることを発見したことに関するものである。本発明の１つの態様によれば、外傷性脳損傷になった被験体にＳＬＯを投与すると、外傷後の海馬内のミクログリア細胞の増加を防止し、外傷後の記憶を維持または回復するようになっている。
【００２５】
使用方法
１つの態様によれば、被験体の外傷性脳損傷（ＴＢＩ）の１つ以上の症状 を軽減する方法は、ＴＢＩの１つ以上の症状 を軽減するのに有効な量のストレプトリシンＯを被験体に投与することを含んでいる。実施形態によっては、ＴＢＩの１つ以上のシンプトンは、健忘、混乱、方向感覚喪失、新規情報の記憶困難、頭痛、めまい、視界不良、吐き気、嘔吐、耳鳴り、理路整然と話すことの困難、感情変化および睡眠パターンの変化からなる群から選択される場合もある。実施形態によっては、ＴＢＩの１つ以上のシンプトンは、健忘、混乱、方向感覚喪失、新規情報の記憶困難、頭痛、めまい、視界不良、吐き気、嘔吐、耳鳴り、理路整然と話すことの困難、感情変化および睡眠パターンの変化からなる群から選択される場合もある。
【００２６】
本明細書に記載の方法において用いられる用語「ストレプトリシンＯ」は、酸化して細胞毒性効果を除去すると同時に重要な細胞膜コレステロール結合特性を維持するように変性されたストレプトリシンＯのことを指している。ストレプトリシンＯは、容易に溶液中で酸化され、市販されている（シグマ製品カタログ）。
【００２７】
被験体に投与されるストレプトリシンＯの投与量については、被験体の年齢、性別、体重などを考慮して内科医が決定することができる。実施形態によっては、ストレプトリシンＯは、一回の投与量当たり約０．０００１６ナノグラム〜約３２００ナノグラムまでの範囲の投与量で投与される場合もある。実施形態によっては、ストレプトリシンＯは、一回の投与量当たり約０．０１６ナノグラム、約０．０２ナノグラム、約０．０５ナノグラム、約０．１ナノグラム、約０．２ナノグラム、約０．３ナノグラム、約０．４ナノグラム、約０．５ナノグラム、約１ナノグラム、約１０ナノグラム、約２０ナノグラム、約４０ナノグラム、約６０ナノグラム、約８０ナノグラム、約１００ナノグラム、約５００ナノグラム、約１０００ナノグラム、約１５００ナノグラム、約２０００ナノグラム、約２５００ナノグラム、または、約３０００ナノグラムの投与量で提供される場合もある。実施形態によっては、ストレプトリシンＯは、一回の投与量当たり０．１６ナノグラム〜約３２ナノグラムまでの範囲または一回の投与量当たり約０．０１６ナノグラム〜約３．２ナノグラムまでの範囲の投与量で提供される場合もある。
【００２８】
実施形態によっては、ストレプトリシンＯの投与量は、国際単位で、少なくとも０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５  １００  １１０、１２０、１３０またはそれ以上の場合もある。１つの実施形態では、ストレプトリシンＯの投与量は約１．６ナノグラム（国際単位で表すと約４）である。実施形態によっては、ストレプトリシンＯは、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間またはそれを超える期間にわたって、１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回またはそれを超える回数だけ毎日投与されるようになっている場合もある。さらなる治療がたとえば毎日、毎週または毎月という期間ベースで実施されるようになっていてもよい。
【００２９】
本明細書で用いられる用語「有効量」は、特定された病気もしくは障害（または病気もしくは障害によりもたらされる症状）を治療、改善、予防するのに十分な治療剤（すなわち、ストレプトリジンＯ）の量のことを指すか、または、検出可能な治療効果、予防効果もしくは抑制効果を提供するのに十分な治療剤（すなわち、ストレプトリジンＯ）の量のことを指す。効果については、たとえば臨床状態（ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の改良または症状（ｓｙｍｐｔｏｍｓ）の軽減により検出することができる。被験体のための正確な有効量は被験体の体重、サイズおよび健康状態、すなわち病気の質および程度に応じて変わる。与えられた状況における治療上有効な量については、臨床医の技術および判断の範囲内に含まれる通常実験により決定することができる。
【００３０】
本明細書で開示されている複数の実施形態にかかる方法で治療される被験体は、ヒト被験体であることが望ましいが、いうまでもなく、ここに開示されている発明の原理により、本発明は、無脊椎動物および哺乳動物を含むすべての脊椎動物種に対しても効果があることが見出されている。ここで、用語「被験体」には無脊椎動物と哺乳動物を含むすべての脊椎動物種が含まれる。
【００３１】
調合および投与ルート
本明細書に記載のストレプトリシンＯは、薬学的に受け入れ可能な賦形剤、担体または希釈剤を含む医薬組成物中に配合されてもよい。
【００３２】
実施形態によっては、医薬組成物中には、投与および投薬形態の個々のモードに応じて、薬学的に受け入れ可能な賦形剤、たとえば担体、溶剤、安定剤、補助薬、希釈剤などが配合される場合もある。一般的に、医薬組成物は、生理学に受け入れ可能なｐＨを達成するように調合されるべきであり、医薬組成物のｐＨは、調合および投与ルートに応じて、約ｐＨ３〜約ｐＨ１１、好ましくはｐＨ３〜ｐＨ７の範囲にある。また実施形態によっては、医薬組成物のｐＨは約ｐＨ５．０〜ｐＨ８の範囲にあることが好ましい場合もある。より詳細にいえば、様々な態様にかかる医薬組成物は、治療上有効な量の本明細書に記載の少なくとも１つの組成物であり、１つ以上の薬学的に受け入れ可能な賦形剤を含んでいる。
【００３３】
用語「薬学的に受け入れ可能な賦形剤」とは、薬剤、たとえば本明細書に記載の化合物を投与するための賦形剤のことを指している。この用語は、過度な毒性を生じることなく投与可能な医薬品賦形剤のことを指している。
【００３４】
薬学的に受け入れ可能な賦形剤は、投与される個々の組成物および組成物の投与に用いられる個々の方法に基づいて部分的に決定される。このようなわけで、様々な適切な医薬組成物が存在している（たとえば、レミントンの薬学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）を参照）。
【００３５】
適切な賦形剤は、タンパク質、多糖類、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、アミノ酸重合体、アミノ酸共重合体および不活発ウイルス粒子の如き大きくて、ゆっくりと代謝される巨大分子を含む担体分子（ｃａｒｒｉｅｒ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）であってもよい。他の例示的な賦形剤としては、酸化防止剤（たとえばアスコルビン酸）、キレート試薬（たとえばＥＤＴＡ）、炭水化物（たとえばデキストリン、ヒドロキシアルキルセルロースおよび／またはヒドロキシアルキルメチルセルロース）、ステアリン酸、液体（たとえば油、水、生理食塩水、グリセリンおよび／またはエタノール）、湿潤剤 もしくは乳化剤、ｐＨ緩衝物質などが挙げられる。リポソームも薬学的に受け入れ可能な賦形剤の定義の範囲内に含まれる。
【００３６】
加えて、医薬組成物は、無菌注射水性乳剤または油性懸濁液の如き無菌注射剤の形態であってもよい。この乳剤または懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて当業者により調合されるようになっていてもよい。無菌注射剤は、非経口的に受け入れ可能な無毒性の希釈剤または溶剤からなる無菌注射溶液または無菌注射懸濁液、たとえば１，２−プロパン−ジオール溶液であってもよい。
【００３７】
使用することができる受け入れ可能なビヒクルおよび溶剤には、水、リンゲル溶液および生理食塩液が含まれる。加えて、無菌の不揮発性油が溶媒または懸濁化剤として用いられてもよい。この目的のために、合成されたモノグリセリドまたはジグリセリドを含むブランドの不揮発性油が用いられてもよい。加えて、脂肪酸（たとえばオレイン酸）が同様に注射剤の調合に用いられてもよい。
【００３８】
実施例１
以下の実施例では、前ＮＦＬ選手の脳の外傷性脳損傷（ＴＢＩ）に伴う様々な病気（ａｉｌｍｅｎｔ）を軽減するＳＬＯの能力が実証されている。この場合、ＴＢＩは、複数の震盪により引き起こされた可能性がある。
【００３９】
遂行機能の減衰、社交性の減衰、物忘れ、混乱および心配などの症状を発症したＴＢＩ履歴を有する６人の前ＮＦＬ選手がＳＬＯ投与による治療を志願して受けた。各志願者は、ＳＬＯが供給され、毎日食事後および就寝前に１滴のＳＬＯを４回とるように指示された。一滴のＳＬＯは毎回舌下に投与されることになっていた。一滴のＳＬＯは１．６ナノグラム（約４ユニット）の酸化されたＳＬＯを含有していた。選手は月単位で電話会話により観察された。
【００４０】
６人の志願者のうちの５人については、たとえば認識力の向上、記憶力の向上、明瞭に表現する能力の向上、睡眠パターンの向上、情緒的安定性の向上および生活の質の向上のような改善が報告されている。６番目の志願者は、追跡調査ができなくなってしまい、実験的治療において投与量を順守していたか否かの確認が取れなかった。有害な事象の報告はなかった。
【００４１】
さらなる追跡調査中、元の志願者のうちの他の１人が実験的治療から身を引いたものの、元の６人の被験体のうちの４人がＳＬＯの液適を投与し続けた。ただし、投与の頻度は全体的に減らされた。しかしながら、報告された４人の被験体は治療効果を継続して享受し、悪い状態に戻ることはなかった。
【００４２】
実施例２
以下の実施例は、被験体が１９才であった３０年前の自動車事故により発症した外傷性脳損傷の影響に苦しむ女性被験体の治療に向けられている。この事故により女性被験体は神経損害を発症したため軟口蓋下垂を引き起こした。このことにより女性被験体のスピーチは理解するのが困難なものとなった。女性被験体は、心配、短期記憶障害、まとめる能力の欠如、認識力の低下に苦しんでいる。
【００４３】
女性被験体には、リン酸緩衝生理食塩水の中に２ユニットの酸化ストレプトリシンＯを含有する組成物を一滴（０．０５  ｍＬ）毎日４回舌下投与（舌の下でかつ口底上）する治療が行われた。女性被験体は、この組成物を投与から１５秒間呑み飲み込まず、また、５分間何も飲食しなかった。
【００４４】
４０日後、女性被験体は、以前よりも落ち着いており、より多くの読書をし、朝の株価報道や他のテレビ番組を見るといういくつかの新たな興味を示した。
【００４５】
７０日後、女性被験体は、さらにいくつかの新しい興味を示し、落ち着いたままであり、不安の減少を示した。
【００４６】
１０６日後、女性被験体は、いくつかの新しい興味をさらに示し、女性被験体の外観からするとより楽しそうであり、読書に喜びを示し、人生に対してより前向きな姿勢を示した。  
【００４７】
１４１日後、女性被験体は落ち着いたままであり、女性被験体の健康状態については、本発明の組成物を用いて治療を開始した時の健康状態と比較して継続的な改善が見られた。
【００４８】
１７３日後、女性被験体の短期記憶についていえば、その日の始めに起きた事象や前の週に起きた事象を思い出す能力には改善が見られたように見えた。女性被験体の出来事に関するコメントは、より洞察力がありかつより適切であると思われ、また、女性被験体の落ち着きは保たれていた。
【００４９】
２１６日後、女性被験体は、芸術療法、友達とのカヤックを開始し、治療開始前にはできなかった電子メールを監督を必要とすることなく書くことができるようになった。
【００５０】
実施例３
以下の実施例はマウスモデルを用いた外傷性脳損傷の治療に向けられている。コントロール動物と試験動物とはＭａｎｎｉｘ  ｅｔ  ａｌ．、Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ．７４、Ｎｏ．１１、ページ６５〜７５（２０１３年）に記載の方法により頭部外傷を（４日間〜７日間）毎日受けた。実験グループは、実験の間毎日午前および午後においてＳＬＯ（４ＩＵ）の硬膜下に投与された。
【００５１】
上述のマウスモデルの１つの側面では、傷つけられた試験動物が水たまりの中に置かれた時、この試験動物が、浸水した（隠された）プラットフォーム、すなわち立つことができる安全な避難所を見つけ出すことができるかということ（試験動物の能力）に注目が置かれている。この試験は、試験マウスの学習過程および記憶力を調べるものである。傷つけられていないマウス（偽物コントロール（ｓｈａｍ  ｃｏｎｔｒｏｌ））は、試験一日目ではパッドを見つけ出すのに約３０秒かかった。この時間は連続する試験日から除かれた。  
【００５２】
他の２つのグループのマウスは、制御された殴打を頭に受け、次いで、治療用ストレプトリシンＯ（ＳＬＯ）組成物または偽薬の投与により治療された。図１Ａ、図１Ｂおよび図１Ｃにより示されているように、偽薬による治療を受けた動物は疑似マウスよりも全体的にパフォーマンスは悪く、ＳＬＯによる治療を受けた動物は傷つけられたコントロールマウスによりも全体的にパフォーマンスが良かった。他の一組の制限された実験（図示せず）では、記憶を試験するプローブ試験または視覚を試験するビジブル試験において、傷つけられてＳＬＯによる治療を受けた動物が傷つけられたコントロールマウスよりもパフォーマンスが良かったか否かは不明である。
【００５３】
実施例４
この実施例によれば、外傷性脳損傷を発症したマウスの脳に対して組織病理学的判定が行なわれた。マウスは、７日間にわたって「殴打」を毎日７回受け、毎日２回＋／−ＳＬＯ（４ＩＵ、皮下投与）が投与された。このＳＬＯ治療がさらに７日間継続され、次いで、動物が殺傷され、海馬が分析された。組織からタンパク質が抽出され、ゲル電気泳動によりタンパク質が分離され、ブロット分析された。アストロサイト特有のタンパク質（ＧＦＡＰ）およびミクログリア特有のタンパク質（ＩＢＡ１）がウェスタンブロット法により特定され、走査された（ベータアクチンに対して正規化された）。ＧＦＡＰ（アストロサイトマーカー）およびＩＢＡ１（ミクログリアマーカー）の実験によれば、疑似マウス、傷つけられビヒクルによる治療がなされたマウス、および、傷つけられＳＬＯによる治療がなされたマウスの間で、皮質におけるＧＦＡＰ発現とｄＩＢＡ１発現との間に差がないことが分かった。しかしながら、傷つけられビヒクルによる治療がなされたマウスと比較して、傷つけられＳＬＯによる治療がなされたマウスの海馬において皮質におけるＩＢＡ１発現が削減されているように見え、ＳＬＯによる炎症の抑制が可能であることが示唆されている。
【００５４】
さらに、いくつかのグループからの動物の脳の組織病理学的判定によれば、偽薬の投与と比較して、治療用ＳＬＯ組成物の投与により脳における記憶に関する部分である海馬内でのミクログリアの移動が抑制されたことが分かった。
【００５５】
本発明のいかなる特定の理論に拘束されるものではないが、ミクログリアの海馬内での移動を抑制することにより、治療しない場合に予測されうる有害な可能性のある炎症が防止されると考えられている。ＳＬＯが炎症誘発物質であるＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９を減少させることおよびＳＬＯが観察されたミクログリアの抑制に類似した方法でケラチノサイトの移動を抑制することがさらに観察された。
【００５６】
本発明の他の態様によれば、外傷性脳損傷の慢性的な形態が急性的な形態とは異なっていることが観察されている。ＳＬＯの投与は、脳内の細胞間通信の邪魔をする瘢痕に似た組織を形成するために生じるグリオーシスの進行を逆にするようにさらに機能しうる。次いで、このような治療活動は、長期（数年および数十年）の外傷性脳損傷病歴を有する患者のコラーゲン関連瘢痕化の進行を逆にするように機能する。 
【００５７】
本発明の実施において複数の修正および変形を加えることは当業者にとって明らかである。したがって、本発明の範囲に対する限定は添付の特許請求の範囲に記載されたもののみにより加えられる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【国際調査報告】
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