(57)【要約】本明細書において、ＣＮＳ脱髄性疾患を検出及び／または治療するための有用な、抗ＬＩＮＧ抗体分枝を含む、方法、組成物及びキットを記載する。本発明は、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を使用して、ＣＮＳ障害、例えばＣＮＳ脱髄障害を治療または予防するための方法及び組成物を少なくとも部分的に提供する。特定の実施形態では、本明細書に記載の方法及び組成物は、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を、単剤療法として、または免疫調節薬との組合せで含む。特定の実施形態では、被験体、例えば、ヒト（例えば、ヒトＭＳ患者）における髄鞘形成、再髄鞘化、分化したオリゴデンドロサイト数、または神経軸索保護の１つ以上を促進するように選択された時間間隔で修復剤を投与する。 【選択図】図１８Ｂ
2018504400.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体における多発性硬化症（ＭＳ）または視神経の炎症状態の一方または両方から選択されるＣＮＳ脱髄性疾患の治療に使用するための抗ＬＩＮＧＯ抗体分子であって、前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を：
（ｉ）前記ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発前；
（ｉｉ）前記ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後７日以内；または、
（ｉｉｉ）前記ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後３０日以内；のうちの１つ、２つ、またはすべてから選択される、選ばれた時間間隔で投与する、前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子。
【請求項２】
多発性硬化症（ＭＳ）または視神経の炎症状態の一方または両方から選択されるＣＮＳ脱髄性障害の治療または予防方法であって、それを必要とする被験体に抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を投与することを含み、ここで、前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を：
（ｉ）前記ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症もしくは再発前；
（ｉｉ）前記ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症もしくは再発後７日以内；または、
（ｉｉｉ）前記ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症もしくは再発後３０日以内；のうちの１つ、２つ、またはすべてから選択される、選ばれた時間間隔で前記ＣＮＳ脱髄性疾患を治療または予防する量で投与する、前記治療または予防方法。
【請求項３】
前記ＣＮＳ脱髄性障害がＭＳである、請求項１または２に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４】
前記ＣＮＳ脱髄性障害が視神経炎である、請求項１または２に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５】
前記視神経の前記炎症状態が急性視神経炎（ＡＯＮ）である、請求項１または２に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を単独療法または併用療法として投与することにより：
（ｉ）前記ＣＮＳ脱髄性疾患に関連する１つ以上の症状を、軽減、遅延もしくは予防し；
（ｉｉ）前記ＣＮＳ脱髄性疾患の再発または悪化を、低減、遅延もしくは予防し；及び／または、
（ｉｉｉ）前記被験体における新規病変の発生を、軽減、遅延もしくは予防すること；のうちの１つ以上をもたらす、請求項１〜５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７】
前記ＣＮＳ脱髄性疾患に関連する前記１つ以上の症状が、視力障害、浮腫、炎症、視神経及び軸索を覆う髄鞘の損傷または脱髄、網膜線維層の喪失、網膜神経節細胞層の喪失、視野欠損、彩度低下、色弱、眼の痛み、視力低下（例えば、低コントラクト（ｃｏｎｔｒａｃｔ）文字視認性または高コントラスト映像視認性によって測定するような）、ウートホフ徴候、視神経乳頭の腫脹、または相対性求心性瞳孔反応欠損（ｒｅｌａｔｉｖｅ  ａｆｆｅｒｅｎｔ  ｐａｐｉｌｌａｒｙ  ｄｅｆｅｃｔ）のうちの１種、２種、３種、４種、５種、６種、７種、８種、９種、１０種またはそれ以上（すべて）を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与を、前記被験体の片眼または両眼における眼の炎症状態、例えば急性視神経炎の１つ以上の症状の発症または再発の前に開始する、請求項１〜７のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子を予防的に投与する、請求項１〜８のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項１０】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子を慢性的に投与する、請求項１〜９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項１１】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与を、再髄鞘化または神経細胞損傷の減少によって検出する前記治療の有効な効果が減少するかまたは検出されなくなるまで継続する、請求項９または１０に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項１２】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子を、単独療法としてまたは併用療法として、約０．３、１．０、３．０、１０、３０、６０、または１００ｍｇ／ｋｇの用量で、１、２、３、４または５週間ごとに１回、静脈内、皮下、または筋肉内注射によって投与する、請求項９〜１１のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１、または方法。
【請求項１３】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与を、前記ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状を発症または再発してから、３０、２８、２５、２４、２０、１８、１５、１２、１０、５、２、または１日後に開始する、請求項１〜７のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１、または方法。
【請求項１４】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与を、ＭＳ、ＭＳの再発またはＡＯＮにおける急性病変発生後、４、３、２、または１週間未満に開始する、請求項１〜７または１３のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項１５】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与を、ＭＳ、ＭＳの再発またはＡＯＮの急性病変発生後、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１日、または数時間未満に開始する、請求項１〜７または１３〜１４のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項１６】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子を、単独療法としてまたは併用療法として、約１、３、１０、３０、６０、１００または１５０ｍｇ／ｋｇで、例えば１、２、３、４または５週間ごとに１回、静脈内、皮下、または筋肉内注射によって投与する、請求項１３〜１５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項１７】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、４週間ごとに１回、ＩＶ注入を介して、約１００ｍｇ／ｋｇで投与する、請求項１６に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項１８】
前記被験体がヒト、例えばヒト成人である、請求項１〜１７のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項１９】
前記被験体が約３０歳以上、例えば少なくとも３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０歳、またはそれ以上のヒトである、請求項１８に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２０】
前記被験体がＭＳに罹患しているか、または罹患するリスクを有する、請求項１〜１９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２１】
前記被験体が再発型ＭＳを有する、請求項２０に記載の使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２２】
前記被験体が再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）または二次性進行型ＭＳ（ＳＰＭＳ）を有する、請求項２０に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２３】
前記被験体が治療時に無症候性である、請求項１〜２０のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２４】
前記被験体がＭＳに関連する症状を有していない、請求項１〜２０のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２５】
前記被験体がＡＯＮに関連する症状を片眼または両眼に有していない、請求項１〜２０のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２６】
前記被験体が、片眼または両眼に視神経障害、例えばＡＯＮを有すると診断されるが、ＭＳ症状を呈していない、請求項１〜２０のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２７】
前記被験体が、ＭＳと診断しないか、またはＭＳと診断されるが再発に罹患していない、請求項１〜２０のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２８】
前記被験体が、片眼または両眼に視神経の炎症状態、例えばＡＯＮを有すると診断される、請求項１〜２０のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項２９】
前記被験体が、罹患した眼を有し、他方の眼、例えば正常な他眼に検出可能な症状を呈していない、請求項２８に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３０】
前記被験体への前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与が、前記罹患した眼を治療する、請求項２９に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３１】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与が、前記正常な他眼における前記視神経の炎症状態、例えばＡＯＮの発症を遅延させる、請求項３０に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３２】
前記被験体への前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与が、前記正常状態の他眼における前記視神経の炎症状態、例えばＡＯＮを予防する、請求項３０に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３３】
前記被験体が、いずれかの眼（例えば正常な眼）に、前記視神経の炎症状態、例えば急性視神経炎を有すると診断されていない、請求項２０〜２５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３４】
前記被験体への前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与が、いずれかまたは両方の眼における前記視神経の炎症状態、例えば、急性視神経炎の発症を予防または遅延させる、請求項３３に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３５】
前記被験体への前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与が、ＭＳ症状の発症または再発を遅延または予防する、請求項１〜３４のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３６】
前記被験体への前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与が、ＭＳの１つ以上の症状または視神経の炎症状態を、少なくとも１日、１週間、１か月、１年またはそれ以上の期間にわたって遅延させる、請求項１〜３５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３７】
片眼または両眼の視神経損傷または視神経伝導の一方または両方を検出することによって、前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子で治療する被験体を同定することをさらに含む、請求項１〜３６のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３８】
片眼または両眼における少なくとも最小レベルの視神経損傷、及び／または前記片眼または両眼における視神経伝導の遅延を検出することによって、被験体を治療すべき被験体として同定することを含む、請求項３７に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項３９】
視神経損傷を測定するステップが、視覚誘発電位（ＶＥＰ）振幅、例えば全視野ＶＥＰ（ＦＦ‐ＶＥＰ）振幅及び／またはマルチフィールド（ｍｕｌｔｉ‐ｆｉｅｌｄ）ＶＥＰ（ｍｆＶＥＰ）振幅の測定を含む、請求項３８に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４０】
（ｉ）基準値、例えば基準振幅を、４０ｎＶを超えない範囲で下回るｍｆＶＥＰの振幅、
（ｉｉ）基準値、例えば基準振幅を、２０％を超えない範囲で下回るＶＥＰの振幅、または、
（ｉｉｉ）１８０ナノボルト以上のｍｆＶＥＰの振幅、
の１つ以上が、眼の視神経損傷の最小レベルを表す、請求項３９に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４１】
前記基準振幅が、正常な眼、例えば視神経障害、例えばＡＯＮに罹患していない被験体の眼の平均ＶＥＰ振幅、例えばＦＦ‐ＶＥＰ振幅及び／またはｍｆＶＥＰ振幅である、請求項４０に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４２】
前記視神経伝導を測定するステップが、ＶＥＰ潜時、例えばＦＦ‐ＶＥＰ潜時またはｍｆＶＥＰ潜時の測定を含む、請求項３８に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４３】
（ｉ）基準値、例えば基準潜時よりも少なくとも３ミリ秒高いＶＥＰ潜時、
（ｉｉ）基準値、例えば基準潜時よりも少なくとも３％高いＶＥＰ潜時、または、
（ｉｉｉ）１１０ミリ秒以上のＦＦ‐ＶＥＰ潜時、
（ｉｖ）１５５ミリ秒以上のｍｆ‐ＶＥＰ潜時、
の１つ以上が、眼における視神経伝導の遅延を表す、請求項４２に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４４】
基準潜時が、正常な眼、例えば視神経の炎症状態、例えばＡＯＮに罹患していない被験体の眼のＶＥＰ潜時、例えばＦＦ‐ＶＥＰ潜時またはｍｆＶＥＰ潜時の平均値である、請求項４３に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４５】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子を、単独療法として、例えば、約１０〜３００ｍｇ／ｋｇ、２０〜２５０ｍｇ／ｋｇ、５０〜２００ｍｇ／ｋｇ、７５〜１５０ｍｇ／ｋｇ、９０〜１２０ｍｇ／ｋｇ、または約１００ｍｇ／ｋｇの範囲の量で投与する、請求項１〜１１、１３〜１５または１８〜４４のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４６】
前記抗ＬＩＮＧＯ抗体分子を、併用療法として、例えば、約１〜１５０ｍｇ／ｋｇ、または３〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲の量で投与する、請求項１〜１１、１３〜１５、または１８〜４４のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４７】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体を、少なくとも４週間（例えば、少なくとも４、８、１２、１６、２０、２４、もしくは３２週間、または少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２か月間、または少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２年、またはそれ以上）投与する、請求項４５または４６に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４８】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体を：
ＩＦＮ‐β１分子；
コルチコステロイド；
グルタミン酸、リジン、アラニン及びチロシンのポリマーまたはグラチラマー；
アルファ４インテグリンに対する抗体もしくはその断片、またはナタリズマブ；
アントラセンジオン分子もしくはミトキサントロン；
フィンゴリモドもしくはＦＴＹ７２０または他のＳＩＰ１機能調節因子；
ジメチルフマレート；
Ｔ細胞のＩＬ‐２受容体のアルファサブユニット（ＣＤ２５）に対する抗体もしくはダクリズマブ；
ＣＤ５２もしくはアレムツズマブに対する抗体；
ＣＤ２０に対する抗体；または、
ジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼもしくはテリフルノミドの阻害剤。
の１つ以上から選択される免疫抑制剤と併用して投与する、請求項１〜１１、１３〜１５、または１８〜４４、または４６に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項４９】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、髄鞘形成の促進、神経軸索保護の促進、オリゴデンドロサイトの分化及び生存の促進、シナプス数もしくはシナプス効率の増大、または伝導速度の加速の１つ以上を引き起こす、請求項１〜４８のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５０】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、ヒトＬＩＮＧＯ‐１に対するモノクローナル抗体である、請求項１〜４９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５１】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、ヒトＬＩＮＧＯ‐１に対する、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ生成した抗体である、請求項１〜５０のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５２】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、免疫グロブリンＧサブクラス１（ＩｇＧ１）である、請求項１〜５１のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５３】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、アグリコシル（ＩｇＧ１）フレームワークを有する、請求項１〜５２のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５４】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、野生型ＩｇＧ１に比べてエフェクター細胞及び補体機能を低下させるように改変されている、請求項１〜５３のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５５】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、配列番号６、７もしくは８、または配列番号２、３もしくは３０のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一の配列を有する１つ、２つもしくは３つの重鎖可変ドメインＣＤＲを含む、請求項１〜５４のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５６】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、配列番号１４、１５もしくは１６、または配列番号１０、１１もしくは１２のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一の配列を有する１つ、２つもしくは３つの軽鎖可変ドメインＣＤＲを含む、請求項１〜５５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５７】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、配列番号５もしくは配列番号６６のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一の配列を有する重鎖可変ドメインを含む、請求項１〜５６のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５８】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、配列番号１３もしくは配列番号９のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一の配列を有する軽鎖可変ドメインを含む、請求項１〜５７のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項５９】
抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、配列番号２７５のアミノ酸配列もしくはそれと実質的に同一の配列を有する重鎖；または配列番号２７６のアミノ酸配列もしくはそれと実質的に同一の配列を有する軽鎖を含む、請求項１〜５８のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６０】
前記ＩＦＮ‐β１分子が、ＩＦＮ‐β１ａもしくはＩＦＮ‐β１ｂポリペプチド、その変異体、ホモログ、断片またはペグ化変異体の１つ以上を含む、請求項４８〜５９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６１】
前記ＩＦＮ‐β１分子が、ＩＦＮ‐β１ａ分子、ＩＦＮ‐β１ｂ分子、またはＩＦＮ‐β１ａ分子もしくはＩＦＮ‐β１ｂ分子のペグ化変異体から選択されるＩＦＮ‐β剤を含む、請求項６０に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６２】
前記ＩＦＮ‐β１ａ分子が、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）またはＲｅｂｉｆ（登録商標）であり；前記ＩＦＮ‐β１ｂ分子が、Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（登録商標）またはＢｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）またはＥｘｔａｖｉａ（登録商標）である、請求項６１に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６３】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子が、配列番号５または配列番号６６のアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン；及び配列番号１３または配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメインを含み；ならびに免疫抑制剤がＡｖｏｎｅｘ（登録商標）である、請求項４８〜６２のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６４】
前記被験体が、再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）、一次性進行型ＭＳ、二次性進行型ＭＳ、臨床的単発型ＭＳ疑い症候群（ＣＩＳ）、ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｄｅｆｉｎｅｄ  ＭＳ（ＣＤＭＳ）、または良性ＭＳのうちの１つに罹患している、請求項１〜６３のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６５】
前記被験体が、１つ以上の新規発症病変を有する、請求項６４に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６６】
前記被験体が、１つ以上の既存病変を有する、請求項６４に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６７】
前記被験体が、ＲＲＭＳまたはＳＰＭＳを有する、請求項１〜６６のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６８】
前記被験体が、活動性疾患を有する患者である、請求項６７に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項６９】
前記治療ステップが、被験体における前記疾患に関連する１つ以上の症状を軽減するか；または再発もしくは障害の悪化を低減、遅延、もしくは予防することを含む、請求項１〜６８のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７０】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子及び前記免疫抑制剤を同時に投与する、請求項４８〜６９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７１】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子及び前記免疫抑制剤を連続して投与する、請求項４８〜６９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７２】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子及び前記免疫抑制剤の投与が互いに部分的に重複する、請求項４８〜６９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７３】
前記免疫抑制剤及び前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与の開始が同時に生じる、請求項４８〜６９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７４】
前記免疫抑制剤を、前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子による治療を開始する前に投与する、請求項４８〜６９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７５】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、前記免疫抑制剤による治療を開始する前に投与する、請求項４８〜６９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、またはその方法。
【請求項７６】
前記免疫抑制剤の投与を、前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与の停止後も継続する、請求項４８〜６９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７７】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与を、前記免疫抑制剤の投与の停止後も継続する、請求項４８〜６９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７８】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子がＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子であり、これを静脈内、皮下、硝子体内、くも膜下腔内または筋肉内に投与する、請求項１〜７７のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項７９】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を静脈内に投与する、請求項７８に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８０】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を１〜１００ｍｇ／ｋｇで投与する、請求項４８〜７９のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８１】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、約３ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、または約１００ｍｇ／ｋｇで投与する、請求項８０に記載の、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８２】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、ＩＶ注入によって１、２、３、４または５週ごとに１回投与する、請求項８１に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子または方法。
【請求項８３】
前記免疫抑制剤がＩＦＮ‐β１分子であり、これを静脈内、皮下または筋肉内に投与する、請求項４８〜８２のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８４】
前記ＩＦＮ‐β１分子を、以下の１つ以上：
（ｉ）筋肉内注射によって、２０〜４５マイクログラムを週１回；
（ｉｉ）皮下注射によって、２０〜３０マイクログラムを週３回、もしくは４０〜５０マイクログラムを週３回；または、
（ｉｉｉ）筋肉内に１０〜５０μｇを週に３回、もしくは５〜１０日ごとに、週１回；
で投与する、請求項８３に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８５】
前記抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、静脈内注入によって４週間に１回、約３ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、または約１００ｍｇ／ｋｇで投与し；及び、
免疫抑制剤がＩＦＮ‐β１であり、以下の１つ以上：
（ｉ）筋肉内注射によって、２０〜４５マイクログラムを週１回；
（ｉｉ）皮下注射によって、２０〜３０マイクログラムを週１回もしくは３回、または４０〜５０マイクログラムを週１回もしくは３回；または
（ｉｉｉ）筋肉内に、１０〜５０μｇの量を、例えば週３回、もしくは５〜１０日ごとに１回；
で投与する、請求項１〜８４のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８６】
前記被験体を：
神経学的検査の実施；
総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）に関する被験体の状態の取得；
多発性硬化症機能評価（ＭＳＦＣ）に関する被験体の状態の取得；
被験体の病変状態の検出；
上肢及び／または下肢機能の測定値の取得；
近距離歩行機能の測定値の取得；
長距離歩行機能の測定値の取得；
認知機能の測定値の取得；または、
視覚機能の測定値の取得；
の１つ以上によって評価しているか、または評価しようとする、請求項１〜８５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８７】
ＭＳＦＣに関する被験体の状態の取得；
神経学的検査の実施；
総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）に関する被験体の状態の取得；被験体の病変状態の検出；
上肢及び／または下肢機能の測定値の取得；
近距離歩行機能の測定値の取得；
長距離歩行機能の測定値の取得；
認知機能の測定値の取得；または、
視覚機能の測定値の取得；
の１つ以上をさらに含む、請求項１〜８５のいずれかに記載の、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８８】
前記上肢機能の測定値を９ホールペグテスト（９ＨＰ）を使用して取得する、請求項８６または８７に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項８９】
前記短距離歩行機能の測定値を、２５フィート時限歩行（Ｔ２５ＦＷ）を使用して取得する、請求項８６または８７に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９０】
前記認知機能の尺度が、学習試験、記憶検査及び／または注意／処理速度検査の評価を含む、請求項８６または８７に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９１】
前記被験体を、ＥＤＳＳアセスメント、及び短距離歩行機能、長距離歩行機能、上肢機能または下肢機能のうちの１、２、３、またはすべてから選択される歩行機能のアセスメントを用いて評価する、請求項１〜８５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９２】
四肢及び／または歩行機能の測定値における少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％またはそれ以上の増加が、前記被験体における疾患の進行を表し；四肢及び／または歩行機能の測定値における少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％またはそれ以上の減少が、前記被験体における転帰の向上を表す、請求項９１に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９３】
前記認知機能の尺度が、聴覚記憶、言語学習及び／または言語情報の記憶（例えば、選択想起検査（ＳＲＴ））；聴覚／言語記憶の評価試験（例えば、カリフォルニア言語性学習検査第２版（ＣＶＬＴ２））、レイ聴覚性言語学習検査（ＲＡＶＬＴ）；視覚／空間記憶の評価試験（例えば、簡易視空間記憶検査改訂版（ＢＶＭＴＲ））；認知検査、例えば、ＰＡＳＡＴ、ＳＤＭＴ；及び患者報告アウトカムの尺度（例えば、ＭＳＷＳ‐１２、ＭＳＩＳ‐２９、ＡＢＩＬＨＡＮＤ、ＭＳＮＱ、及び／またはＳＦ‐３６）；のうちの１つ以上の評価を含む、請求項９０に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９４】
前記認知機能の測定を、ＳＤＭＴ、ＰＡＳＡＴ‐３及び‐３、ＳＲＴ合計学習（ＳＲＴ‐ＴＬ）、ＳＲＴ遅延想起（ＳＲＴ‐ＤＲ）、ならびにＢＶＭＴＲ遅延想起（ＢＶＭＴＲ‐ＤＲ）を含むＭＳ認知評価項目の複合スコアを用いて行う、請求項８６または８７のいずれかの、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９５】
前記認知機能の測定がＭＳ‐ＣＯＧを含む、請求項９４に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９６】
前記被験体における改善が：  
ａ．ＥＤＳＳの、ベースラインスコア≦６．０からの≧１．０ポイントの減少；
ｂ．Ｔ２５ＦＷの、ベースラインからの≧１５％の改善；
ｃ．９ＨＰＴの、ベースラインからの≧１５％の改善；または、
ｄ．ＰＡＳＡＴもしくはＳＤＭＴの、ベースラインからの≧１５％の改善；
の１つ以上によって定義される、請求項８６〜９５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９７】
前記被験体の病変状態を、磁気共鳴画像法を用いて評価する、請求項８６〜９５のいずれかに記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９８】
前記磁気共鳴画像法が、磁気転写（ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｔｒａｎｓｆｅｒ）及び／または拡散テンソル画像を含む、請求項９７に記載の、使用するための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、または方法。
【請求項９９】
ＣＮＳ脱髄性障害（例えば、多発性硬化症もしくは視神経炎、またはその両方）の評価方法、例えば診断方法であって、被験体の片眼または両眼における視神経損傷または視神経伝導の測定値を取得することを含み、そこにおいて、片眼または両眼における視神経の損傷及び／または視神経伝導の遅延の存在が、前記被験体が前記ＣＮＳ脱髄性障害を発症するリスクがあることを示す、前記評価方法。
【請求項１００】
前記被験体が：
神経学的検査の実施；
総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）における被験体の状態の取得；
多発性硬化症機能評価（ＭＳＦＣ）における被験体の状態の取得；
被験体の病変状態の検出；
上肢及び／または下肢機能の測定値の取得；
近距離歩行機能の測定値の取得；
長距離歩行機能の測定値の取得；または、
認知機能の測定値の取得；
の１つ以上に従って、多発性硬化症を有するとは診断されていない、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記視神経損傷の測定値を取得するステップが、視覚誘発電位（ＶＥＰ）振幅、例えば全視野ＶＥＰ（ＦＦ‐ＶＥＰ）振幅及び／またはマルチフィールド（ｍｕｌｔｉ‐ｆｉｅｌｄ）ＶＥＰ（ｍｆＶＥＰ）振幅を測定することを含む、請求項９９または１００に記載の方法。
【請求項１０２】
（ｉ）基準振幅よりも少なくとも４０ナノボルト低いか、（ｉｉ）基準振幅よりも少なくとも２０％低いか、または（ｉｉｉ）１８０ナノボルト以下のｍｆＶＥＰ振幅が、被験体の視覚経路に損傷が存在することを表す、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
基準振幅が、正常な眼、例えば、視神経障害または病態、例えば急性視神経炎またはＭＳに罹患していない被験体の眼のＶＥＰ振幅、例えばＦＦ‐ＶＥＰ振幅及び／またはｍｆＶＥＰ振幅の平均である、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
前記視神経伝導度の測定値を取得するステップが、ＶＥＰ潜時、例えばＦＦ‐ＶＥＰ潜時またはｍｆＶＥＰ潜時を測定することを含む、請求項９９または１００に記載の方法。
【請求項１０５】
（ｉ）基準潜時よりも少なくとも３ミリ秒高いか、（ｉｉ）基準潜時よりも少なくとも３％高いか、または（ｉｉｉ）１１０ミリ秒またはそれ以上高いＦＦ‐ＶＥＰ潜時が、眼の視神経伝導の遅延を表す、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
前記基準潜時が、正常な眼、例えば視神経障害または病態、例えば急性視神経炎を有していない被験体の眼の平均ＦＦ‐ＶＥＰ潜時である、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
ヒトＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子を含むキットであって、多発性硬化症または視神経の炎症状態を治療する際に使用するための説明書を備え：
（ｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発前；
（ｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後７日以内；または、
（ｉｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後３０日以内；
の１つ、２つ、またはすべてから選択される選ばれた時間間隔で前記抗体を投与するように指示する、前記キット。
【請求項１０８】
前記抗体を、ＩＦＮ‐β１分子と併用投与する、請求項１０７に記載のキット。
【請求項１０９】
ヒトＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子を含むパッケージ組成物であって、多発性硬化症または視神経の炎症状態を治療する際に使用するための説明書を備え：
（ｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発前；
（ｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後７日以内；または、
（ｉｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後３０日以内；
の１つ、２つ、またはすべてから選択される選ばれた時間間隔で前記抗体を投与するように指示する、前記パッケージ組成物。
【請求項１１０】
前記抗体を、ＩＦＮ‐β１分子と併用投与する、請求項１０９に記載のパッケージ組成物。
【請求項１１１】
請求項１〜９８のいずれかによるＣＮＳ脱髄性疾患の治療に使用するための、ヒトＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子を含む組成物。
【請求項１１２】
請求項１〜９８のいずれかによるＣＮＳ脱髄性疾患の治療または予防用の医薬品の製造における、ヒトＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、２０１５年１月８日に出願された米国仮特許出願第６２／１０１，３３６号及び２０１５年４月１５日に出願された米国仮特許出願第６２／１４７，７８３号の利益を主張するものであり、前記各出願の内容は、その全体を参照として本明細書に援用する。
【背景技術】
【０００２】
多発性硬化症（ＭＳ）は、髄鞘の破壊をもたらす炎症の再発性病変を特徴とする脳及び脊髄の炎症性疾患である。多くの領域において、神経線維も損傷を受ける。ＭＳ患者の炎症活性は、疾患の初期段階において最も高い傾向がある。
【０００３】
ＭＳの経過の早期において不可逆的な軸索喪失が起こることが、データから明らかになってきた。中枢神経系（ＣＮＳ）内の切断された軸索は再生することができないため、ＭＳ病変形成の抑制を目的とした早期治療が重要である。疾患発症の早期において、軸索は損傷部位において切断され、これに活動性炎症が伴う（Ｔｒａｐｐ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３３８：２７８‐２８５；Ｂｊａｒｔｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｎｅｕｒｏｌ  １４：２７１‐２７８；Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｂｒａｉｎ  １２０：３９３‐３９９）。脱髄の程度は、炎症の程度及び炎症環境への脱髄した軸索の曝露、ならびに非炎症性メディエーターに相関する（Ｔｒａｐｐ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３３８：２７８‐２８５；Ｋｏｒｎｅｋ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  １５７：２６７‐２７６；Ｂｉｔｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）  Ｂｒａｉｎ  １２３：１１７４‐１１８３）。また、脱髄病変において、オリゴデンドロサイトの破壊及び再髄鞘化不全も併発する（Ｐｅｔｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ  Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ  ６１：５３９‐５４６；Ｃｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４６：１６５‐１７３）。オリゴデンドロサイトの喪失は、再髄鞘化能力の低下をもたらし、また、神経細胞及び軸索をサポートする栄養因子の喪失をもたらし得る（Ｂｊａｒｔｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｙｔｏｌ  ２８：３８３‐３９５）。
【０００４】
視神経炎、例えば急性視神経炎（ＡＯＮ）は、視神経における炎症性白質病変を特徴とする。視神経炎は、多くの場合ＭＳとの関連性が深く、また、この疾患の最も一般的な初期症状である。ＡＯＮは、構造的及び機能的な視神経損傷（例えば、神経軸索損傷及び脱髄）を引き起こし、これによって一部の患者は永久的な視力障害を被る可能性がある（Ｃｏｌｅ，Ｓ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ（２０００）４１（５）：１０１７‐１０２１；Ｍｉ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．  ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ  ２０１３：２７（７）：４９３‐５０３；Ｍａｎｇｉｏｎｅ  ＣＭ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｒｃｈ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．（１９８８）１１６（１１）：１４９６‐１５０４）。急性視神経炎に対する現在の治療法は、高用量のステロイド類投与であって、大部分が症状軽減を提供するにとどまり、ＣＮＳ再髄鞘化の促進や神経軸索保護を提供することができない（Ｂｅｃｋ  ＲＷ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  １９９２  ３２６：５８１‐８）。
ＭＳに対して現在承認されている療法は、主に免疫調節性であり、通常、ＣＮＳ修復に直接的影響を及ぼすものではない。若年患者においては、一般的にＭＳの経過の早期においてオリゴデンドロサイトによる軸索再髄鞘化がある程度は生じるものの、最終的にＣＮＳを修復する能力が失われ、不可逆的組織損傷が生じ、疾患関連障害が増大する。したがって、ＭＳ及び視神経炎のようなＣＮＳ脱髄障害における再髄鞘化及び神経軸索保護を促進するさらなる療法が必要である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｔｒａｐｐ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３３８：２７８‐２８５
【非特許文献２】Ｂｊａｒｔｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｎｅｕｒｏｌ  １４：２７１‐２７８９
【非特許文献３】Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｂｒａｉｎ  １２０：３９３‐３９
【非特許文献４】Ｋｏｒｎｅｋ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  １５７：２６７‐２７６
【非特許文献５】Ｂｉｔｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）  Ｂｒａｉｎ  １２３：１１７４‐１１８３
【非特許文献６】Ｐｅｔｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ  Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ  ６１：５３９‐５４６
【非特許文献７】Ｃｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４６：１６５‐１７３
【非特許文献８】Ｂｊａｒｔｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｙｔｏｌ  ２８：３８３‐３９５
【非特許文献９】Ｃｏｌｅ，Ｓ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ（２０００）４１（５）：１０１７‐１０２１
【非特許文献１０】Ｍｉ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．  ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ  ２０１３：２７（７）：４９３‐５０３
【非特許文献１１】Ｍａｎｇｉｏｎｅ  ＣＭ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｒｃｈ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．（１９８８）１１６（１１）：１４９６‐１５０４
【非特許文献１２】Ｂｅｃｋ  ＲＷ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  １９９２  ３２６：５８１‐８
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を使用して、ＣＮＳ障害、例えばＣＮＳ脱髄障害を治療または予防するための方法及び組成物を少なくとも部分的に提供する。特定の実施形態では、本明細書に記載の方法及び組成物は、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を、単剤療法として、または免疫調節薬との組合せで含む。特定の実施形態では、被験体、例えば、ヒト（例えば、ヒトＭＳ患者）における髄鞘形成、再髄鞘化、分化したオリゴデンドロサイト数、または神経軸索保護の１つ以上を促進するように選択された時間間隔で修復剤を投与する。特定の実施形態では、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を使用して、多発性硬化症（ＭＳ）または視神経炎（例えば、急性視神経炎（ＡＯＮ））の炎症状態を治療することができる。したがって、本明細書に記載する方法、組成物及びキットは、ＣＮＳ障害（例えば、ＣＮＳ脱髄性疾患）の治療に有用であり得る。
【０００７】
一態様では、本発明は、被験体（例えば、治療を必要とする患者）におけるＣＮＳ障害、例えばＣＮＳ脱髄性疾患（例えば、ＭＳまたは視神経の炎症状態、例えば、視神経炎（例えば、ＡＯＮ））の治療方法を特徴とする。前記方法は、障害に関連する１つ以上の症状を軽減するのに十分な量の修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を被験体に投与し、それにより障害を治療することを含む。
【０００８】
一実施形態では、治療または予防するＣＮＳ脱髄障害は、ＭＳである。別の実施形態では、治療または予防するＣＮＳ脱髄障害は、視神経炎、例えばＡＯＮである。
【０００９】
特定の実施形態では、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を、以下の１つ、２つ、またはすべてから選択される時間間隔で投与する：
（ｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症もしくは再発前；
（ｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症もしくは再発後７日以内（例えば、神経軸索保護を促進するため）；または、
（ｉｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症もしくは再発後３０日以内（例えば、再髄鞘化を促進するため）。
【００１０】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の単独療法または併用療法としての投与は、以下の１つ以上を生じる：
（ｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患に関連する１つ以上の症状の軽減、遅延もしくは予防；
（ｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の再発もしくは悪化の、軽減、遅延もしくは予防；
（ｉｉｉ）被験体における新規病変の発症の軽減、遅延もしくは予防；及び／または、
（ｉｖ）被験体における構造的及び／もしくは機能的ＣＮＳ損傷の逆転もしくは予防。
【００１１】
特定の実施形態では、ＣＮＳ脱髄性疾患に関連する１つ以上の症状は、視力障害、浮腫、炎症、視神経及び軸索を覆う髄鞘の損傷または脱髄、網膜線維層の喪失、網膜神経節細胞層の喪失、視野欠損、運動知覚欠損、彩度低下、色弱、眼の痛み、視力低下（例えば、低コントラクト（ｃｏｎｔｒａｃｔ）文字視認性または高コントラスト映像視認性によって測定するような）、ウートホフ徴候、視神経乳頭の腫脹、または相対性求心性瞳孔反応欠損（ｒｅｌａｔｉｖｅ  ａｆｆｅｒｅｎｔ  ｐａｐｉｌｌａｒｙ  ｄｅｆｅｃｔ）のうちの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０種またはそれ以上（すべて）から選択される。
【００１２】
特定の実施形態では、単独療法または併用療法としての抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与は、例えばＭＳなどの疾患に関連する１つ以上の症状の軽減；及び／または被験体における障害の再発もしくは悪化の軽減、遅延または予防をもたらす。
【００１３】
本明細書に記載の特定の実施形態において、出願人らは、単剤療法または併用療法としての修復剤の投与、例えば急性投与が、急性病変後の神経細胞／軸索損傷を軽減することができ、及び／またはより効果的に脱髄を軽減するか、もしくは再髄鞘化を増強することを見出した。したがって、特定の実施形態では、本明細書中に開示する方法を使用して、ＣＮＳ脱髄障害の急性病変（例えば、急性ＭＳ病変、ＭＳ再発、または視神経病変（例えば、ＡＯＮ））を治療または予防する。特定の実施形態では、修復剤は、ＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子であり、単剤療法または併用療法として、例えばＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状を発症または再発してから、３０、２８、２５、２４、２０、１８、１５、１２、１０、５、２、または１日後（例えば、急性病変（例えば、ＭＳにおける任意の病変、ＭＳの再発、またはＡＯＮ）後、４、３、２、１週間未満）。一実施形態では、急性投与は、急性病変後、２週間未満または１週間未満に行う（例えば、急性病変後、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１日、または数時間未満）。そのような実施形態では、抗体分子を、単独療法または併用療法として、約１、３、１０、３０、６０、１００または１５０ｍｇ／ｋｇで、例えば１、２、３、４、５、８、または１２週間に１回、注射によって投与する（例えば、静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）、または筋肉内投与（ＩＭ））。一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、静脈内注入または皮下注射を介して、４週間に１回、約３ｍｇ／ｋｇで投与する。一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、静脈内注入または皮下注射を介して、４週間に１回、約１０ｍｇ／ｋｇで投与する。一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、静脈内注入または皮下注射を介して、４週間に１回、約３０ｍｇ／ｋｇで投与する。一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、静脈内注入または皮下注射によって、４週間に１回、約１００ｍｇ／ｋｇで投与する。
【００１４】
理論に拘泥するものではないが、出願人らはさらに、単剤療法または併用療法としての修復剤の慢性投与または予防的投与が、神経細胞機能及び／または神経組織を保存し、及び／または被験体、例えば本明細書に記載のようなＭＳまたはＡＯＮ被験体における障害を予防または遅延させることができると考えている。特定の実施形態では、修復剤の慢性投与または予防的投与は、例えば、軸索／神経細胞変性及び／または軸索喪失の１つ以上を軽減することによって、発症を予防するか、または例えばＭＳなどの疾患の進行形態を遅延させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示する方法は、抗ＬＩＮＧＯ抗体分子の投与を含むことができ、被験体の一方もしくは両方の眼において、ＭＳの１つ以上の症状、または視神経の炎症状態、例えばＡＯＮなどの視神経炎が、発症または再発する前に投与を開始する。他の実施形態では、本明細書中に開示する方法は、一次性進行型ＭＳの間、例えば再発をプレシード（ｐｒｅｃｅｅｄ）することなくＭＳの進行が開始する場合に、抗ＬＩＮＧＯ抗体分子を投与することを含む。
【００１５】
一実施形態において、ＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子の投与は、慢性及び／または予防的である。特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を予防的に投与し、及び／または、例えば治療の増加性の有効効果が減少するか、または検出（例えば、再髄鞘化、神経細胞損傷の軽減、障害の軽減、または神経機能の増加の１つ以上によって検出する）ができなくなるまで、投与を長期間継続する。このような実施形態では、抗体分子を、単独療法または併用療法として、約０．３、１．０、３．０、１０、３０、６０、または１００ｍｇ／ｋｇで、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５週間に１回、注射（例えば、静脈内、皮下、または筋肉内投与）によって投与する。一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、静脈内または皮下注射によって、約１〜１００ｍｇ／ｋｇ（一般的には、約３ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇ）で、１、２、３、４または５週間に１回投与する。
【００１６】
他の実施形態では、本明細書中に開示する方法を用いて、被験体、例えばＡＯＮまたはＭＳに罹患する患者、例えば、再発型ＭＳ（ＲＲＭＳ）を有する被験体または一次性進行型ＭＳ（ＰＰＭＳ）もしくは二次性進行型ＭＳ（ＳＰＭＳ）を有する被験体の疾患の進行を治療または予防する。特定の実施形態では、修復剤はＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子であり、単独療法または併用療法として、慢性的または予防的にこれを投与する。
【００１７】
一実施形態では、病変（例えば、ＭＳまたはＡＯＮ病変）発症後、検出可能な神経細胞損傷を受けていない領域に対し、薬剤の投与、例えば慢性または予防的投与を行う。一実施形態では、不可逆的な神経細胞損傷の発生前の領域において治療を行う。例えば、被験体は、片眼だけＡＯＮに罹患している可能性があり、他方の眼（本明細書では「他眼」または「正常な眼」と呼ぶ）は検出可能な症状を示さない。特定の実施形態では、正常眼、または脳もしくは脊髄の随所（中枢神経系すなわちＣＮＳ内の任意の場所）における神経障害または病態の発症を予防または遅延させる方法として、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を単独療法として用いるか、またはこれを併用して、被験体を治療することができる。理論に拘泥するものではないが、第一の眼が急性視神経炎であると診断した後に、正常な他眼を処置することによって、正常な他眼における、神経炎、またはその後の病変もしくは損傷、及び／または視覚経路及びＣＮＳの随所にある軸索の喪失のうちの１つ以上の症状を遅延または予防し得る。
【００１８】
特定の実施形態では、被験体への修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬、例えば抗ＬＩＮＧＯ抗体分子）の投与は、例えば、いずれか一方または両方の眼における急性視神経炎などの視神経障害の発症を予防または遅延させる。
【００１９】
特定の実施形態では、被験体への修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬、例えば抗ＬＩＮＧＯ抗体分子）の投与は、ＭＳ症状の発症または再発を遅延または予防する。
【００２０】
さらに他の実施形態では、被験体への修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬、例えば抗ＬＩＮＧＯ抗体分子）の投与は、ＭＳまたは視神経障害の１つ以上の症状を少なくとも１日、１週間、１か月、１年、またはそれ以上遅延させる。
【００２１】
別の実施形態では、被験体は、一方または両方の眼に視神経障害または病態、例えば急性視神経炎を有すると識別される（例えば、診断される）が、ＭＳ症状を示していない（例えば、ＭＳと診断されていない被験体であるか、またはＭＳに罹患しているが再発していないか、もしくは疾患の進行を示していない被験体）。一実施形態では、視神経障害または病態（例えば、急性視神経炎）を有する前記被験体の予防的または慢性的治療は、ＭＳ症状の発症または再発を遅延または予防する。一実施形態では、視神経障害または病態、例えば、急性視神経炎（例えば、急性視神経乳頭炎）を有する前記被験体への修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬、例えば抗ＬＩＮＧＯ抗体分子）の投与（例えば、予防的または慢性的治療）は、ＰＰＭＳまたはＳＰＭＳの発症及び／または再発を遅延または予防する。
【００２２】
特定の実施形態では、本明細書に記載の方法は、片眼または両眼の視神経損傷または視神経機能の一方または両方を検出することによって、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子で治療する被験体を識別することをさらに含む。いくつかの実施形態では、片眼または両眼における少なくとも最小レベルの視神経損傷の検出、及び／または前記片眼または両眼における視神経伝導の遅延をもとに、被験体を治療対象として識別する。例えば、視神経損傷を測定するステップは、全視野ＶＥＰ（ＦＦ‐ＶＥＰ）の振幅及び／またはマルチフィールドＶＥＰ  （ｍｕｌｔｉ‐ｆｉｅｌｄ  ＶＥＰ）（ｍｆＶＥＰ）の振幅などの視覚誘発電位（ＶＥＰ）の振幅の尺度を含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＬＩＮＧＯ抗体の投与は、ｍｆＶＥＰによる潜時の回復を改善し、及び／または非ＡＯＮ視覚経路におけるｍｆＶＥＰ振幅の消失を予防する：
【００２３】
特定の実施形態では、例えばｍｆＶＥＰ振幅の変化によって判定するような、以下の条件の１つ以上は、眼に最小レベルの視神経損傷があることを表す。
（ｉ）基準値、例えば基準振幅を、４０ｎＶを超えない範囲で下回るｍｆＶＥＰ振幅、
（ｉｉ）基準値、例えば基準振幅を、２０％を超えない範囲で下回るｍｆＶＥＰ振幅、または、
（ｉｉｉ）１８０ナノボルト以上のｍｆＶＥＰ振幅。
【００２４】
特定の実施形態では、基準振幅は、正常な眼、例えば、ＡＯＮなどの視神経障害に罹患していない被験体の眼、の平均ＶＥＰ振幅、例えば、ＦＦ‐ＶＥＰ振幅及び／またはｍｆＶＥＰ振幅である。
【００２５】
他の実施形態では、視神経伝導を測定するステップは、ＶＥＰ潜時の測定値、例えば、ミリ秒単位で測定したＦＦ‐ＶＥＰ潜時またはｍｆＶＥＰ潜時を含む。いくつかの実施形態では、以下の条件の１つ以上は、ＦＦ‐ＶＥＰによって判定する眼内の視神経伝導の遅延を表す：
（ｉ）基準値、例えば基準潜時よりも少なくとも３ミリ秒高いＶＥＰ潜時、
（ｉｉ）基準値、例えば基準潜時よりも少なくとも３％高い（例えば、３％、５％、８％、１０％、１２％またはそれ以上）ＶＥＰ潜時、または、
（ｉｉｉ）１１０ミリ秒以上のＦＦ‐ＶＥＰ潜時、
（ｉｖ）１５５ミリ秒以上のｍｆＶＥＰ潜時。
【００２６】
特定の実施形態では、基準潜時は、正常な眼、例えばＡＯＮなどの視神経障害に罹患していない被験体の眼の、または片眼だけが冒されている場合には、同じ被験体の罹患していない方の眼、すなわち他眼の、ＶＥＰ潜時、例えばＦＦ‐ＶＥＰ潜時またはｍｆＶＥＰ潜時などの平均である。
【００２７】
本明細書に開示する方法、組成物及びキットのさらなる実施形態、特徴または改良として、以下の１つ以上が挙げられる：
【００２８】
ＣＮＳ障害及びＣＮＳ脱髄性疾患
ＣＮＳ障害（例えば、ＣＮＳ脱髄性疾患）は、脱髄、髄鞘形成、軸索損傷、軸索領域もしくは軸方向拡散率の喪失、または神経細胞のシナプシス／結合性の喪失、及び／またはオリゴデンドロサイトもしくは神経細胞の機能不全もしくは死の１つ以上に関連する任意の病態、疾患、障害もしくは傷害であり得る。特定の実施形態では、ＣＮＳ障害は、軸索の髄鞘に損傷を引き起こして神経系に影響を及ぼす。他の実施形態では、ＣＮＳ障害は、例えば脳及び脊髄における軸索伸長または神経突起伸長のＮｏｇｏ受容体１（ＮｇＲ１）媒介性阻害を含む。他の実施形態では、ＣＮＳ障害は、１つ以上の炎症性成分を有する。ＣＮＳ疾患の例として、ＣＮＳ脱髄性疾患、ＣＮＳ損傷、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、アルツハイマー病、パーキンソン病、糖尿病性ニューロパチー、特発性炎症性脱髄性疾患、多発性硬化症（ＭＳ）、視神経炎（例えば、急性視神経炎）、横断性脊髄炎、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、ビタミンＢ１２欠乏症、進行性多巣性白質脳症（ＰＭＬ）、脳脊髄炎（ＥＰＬ）、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、橋中心髄鞘崩壊症（ｃｅｎｔｒａｌ  ｐｏｎｔｉｎｅ  ｍｙｅｌｏｌｙｓｉｓ）（ＣＰＭ）、ウォラー変性、副腎白質ジストロフィー、アレクサンダー病、ペリツェウス・メルツバッヘル病（ＰＭＺ）、白質ジストロフィー、外傷性緑内障、脳室周囲白質軟化症（ｐｅｒｉｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｌｅｕｋｏｍａｌａｔｉａ）（ＰＶＬ）、本態性振戦症、白質脳卒中、脳卒中、または放射線もしくは毒物誘発性白質傷害が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。ＣＮＳ脱髄性疾患は、前述の障害の１つ以上から選択することができる。一実施形態では、ＣＮＳ脱髄性疾患は多発性硬化症である。他の実施形態では、ＣＮＳ脱髄性疾患は視神経炎、例えば急性視神経炎である。
【００２９】
視神経炎
特定の実施形態では、被験体（例えば、治療を必要とする患者）における視神経の炎症状態または障害、例えば視神経炎（例えば、急性視神経炎（ＡＯＮ））を治療または予防する方法を開示する。本方法は、単剤療法として、または第二の薬剤（例えば、本明細書に記載の免疫調節薬）と併用して、１つ以上の徴候を軽減するのに十分な量で、被験体に修復剤（例えばＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を投与し、それによって視神経の病態または障害を治療または予防する方法を含む。
【００３０】
特定の実施形態では、前記治療は：視神経の病態または障害に関連する１つ以上の症状を軽減し；視神経の病態または障害の再発または悪化を、低減、遅延または予防し；及び／または被験体における新規病変の発症を阻害または遅延させる方法を提供する。他の実施形態では、前記予防は、視神経障害または病態の１つ以上の症状または重症度を遅延または軽減することを含む。一実施形態では、視神経障害または病態に関連する１つ以上の症状（例えば、急性視神経炎）には、視力障害、ＶＥＰ潜時の遅延（例えば、網膜から視覚野に信号が到達するまでの時間）、浮腫、炎症、視神経及び軸索を覆う髄鞘の損傷もしくは脱髄、網膜線維層の喪失、または網膜神経節細胞層の喪失のうちの、１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたはそれ以上が含まれる。
【００３１】
特定の実施形態では、治療または予防の結果、ＶＥＰ潜時の遅延は回復する。一実施形態では、例えば全視野ＶＥＰ（ＦＦ‐ＶＥＰ）または多局所ＶＥＰ（ｍｆＶＥＰ）などの視覚誘発電位（ＶＥＰ）の潜時の回復は、部分的または完全である（例えば、罹患していない他眼または正常基準ＶＥＰの潜時の、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％）。
【００３２】
特定の実施形態では、治療または予防は、視神経障害または病態の１つ以上の症状、例えば急性視神経炎を少なくとも１日、１週間、１か月、３か月、６か月、１年またはそれ以上遅延させる。
【００３３】
一実施形態では、治療または予防を、神経障害または病態の１つ以上の症状、例えば、急性視神経炎の発症または再発の前に開始する。一実施形態では、ＡＯＮに罹患している被験体の状態を、視覚誘発電位の潜時及び振幅を決定することによって測定する。
【００３４】
被験体
本明細書中に開示する方法、組成物及びキットのいずれかに関して、治療対象の被験体は、例えば本明細書に記載するようなＣＮＳ障害またはＣＮＳ脱髄性疾患に罹患しているか、または罹患するリスクを有する被験体（例えば、ヒト）である。
【００３５】
特定の実施形態では、被験体はヒト、例えばヒト成人である。一実施形態では、被験体は、約３０歳以上、例えば、少なくとも３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０歳以上のヒトである。
【００３６】
一実施形態では、被験体（例えば、ヒト）は、ＭＳに罹患しているか、または罹患するリスクを有する。一実施形態では、ヒト被験体は、ＭＳに関連する１つ以上の症状（「ＭＳ症状」）を有する。ＭＳに罹患している被験体は、任意の治療段階にあり得る。特定の実施形態では、ＭＳに罹患している被験体は：良性ＭＳ、ＲＲＭＳ（例えば、静止性ＲＲＭＳ、活動性ＲＲＭＳ）、一次性進行型ＭＳ（ＰＰＭＳ）、または二次性進行型ＭＳ（ＳＰＭＳ）、活動性ＳＰＭＳ、臨床的単発型ＭＳ疑い症候群（ＣＩＳ）、またはｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｄｅｆｉｎｅｄ  ＭＳ（ＣＤＭＳ）の１種以上に罹患しているヒトから選択される。一実施形態では、被験体は再発型ＭＳに罹患している。一実施形態では、被験体はＲＲＭＳまたはＳＰＭＳに罹患している。一実施形態では、ＭＳに罹患している被験体はＳＰＭＳに罹患している。一実施形態では、ＭＳに罹患している被験体はＲＲＭＳに罹患している。他の実施形態では、被験体は、臨床的単発型ＭＳ疑い症候群（ＣＩＳ）、またはｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｄｅｆｉｎｅｄ  ＭＳ（ＣＤＭＳ）に罹患している被験体のような、１種以上のＭＳ様症状を有する。他の実施形態では、被験体は、１種以上のＭＳ再発（例えば、急性視神経炎、横断性脊髄炎、脳幹症候群、核間性眼筋麻痺など）を有する。
【００３７】
他の実施形態では、被験体はＭＳに関連する症状をまだ有してはいないが、疾患を発症するリスクを有する。一実施形態では、被験体は治療時、例えば初期治療時に無症候性である。いくつかの実施形態では、被験体は、ＭＳと診断されないか、またはＭＳと診断されるが再発はしていない。
【００３８】
一実施形態では、被験体は、再発型ＭＳ（例えば、ＲＲＭＳまたは再発性ＳＰＭＳ）を有する。一実施形態では、被験体は、ＲＲＭＳに罹患しており、例えばガドリニウム（Ｇｄ）増強によって、または磁気共鳴画像（例えば、脳または脊髄ＭＲＩ）上における新規及び／または拡大したＴ２／ＦＬＡＩＲ病変の発達によって示されるような、一種以上の進行中の臨床増悪及び／または無症候性の活性を有する。別の実施形態では、被験体はＳＰＭＳに罹患しており、ガドリニウム（Ｇｄ）増強によって、または磁気共鳴画像（例えば、脳または脊髄ＭＲＩ）上における新規及び／または拡大したＴ２／ＦＬＡＩＲ病変の発達によって示されるような、一種以上の進行中の臨床増悪及び／または無症候性の活性を有する。一実施形態では、被験体は、活動型のＭＳ、例えば活動型ＲＲＭＳに罹患している。他の実施形態では、ＭＳ被験体は、少なくとも１つの新規発症の病変を有する。他の実施形態では、ＭＳ被験体は、少なくとも１つの既存の病変を有する。一実施形態では、被験体はＲＲＭＳに罹患しており、１つ以上の新規発症の、もしくは既存の病変、またはそれらの組合せを有する。他の実施形態では、被験体は、１．５〜７のベースラインＥＤＳＳスコアを有する。
【００３９】
一実施形態では、被験体は、ＭＳ療法（本明細書に記載の薬剤の単独療法または併用療法）を投与する前のＭＳ患者（例えばＲＲＭＳまたはＳＰＭＳに罹患している患者）である。一実施形態では、被験体は、新たに診断される、または未診断のＲＲＭＳまたはＳＰＭＳ患者である。別の実施形態では、被験体は、ｒａｄｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｓｙｎｄｒｏｍｅまたは臨床的単発型ＭＳ疑い症候群を有する。さらに別の実施形態では、被験体は無症候性の所見を有する（例えば、ＭＳ症状を示さないが、検査時に記されたＭＳ関連所見を有する）。別の実施形態では、被験体は、本明細書に記載のＭＳ療法（本明細書に記載の薬剤の単独療法または併用療法）を投与した後のＭＳ患者（例えばＲＲＭＳ患者）である。他の実施形態では、被験体は、１、２週間、１か月、２か月、３か月、４か月、６か月、１年またはそれ以上にわたるＭＳ療法の投与後のＭＳ患者である。
【００４０】
他の実施形態では、被験体は、片眼または両眼にＡＯＮに関連する症状を有していない。一実施形態では、被験体は、片眼または両眼（例えば、正常な眼を有する）に視神経障害または病態、例えば、急性視神経炎を有すると診断されない。
【００４１】
一実施形態では、被験体は、本明細書で「罹患した眼（複数可）」と呼ばれる片眼または両眼に視神経障害または病態、例えば急性視神経炎を有すると診断される。一実施形態では、被験体は、罹患した眼を有し、もう片方の眼（本明細書では「他眼」または「正常な眼」と呼ぶ）に検出可能な症状を示さない。一実施形態では、被験体は、片眼または両眼に視神経障害、例えばＡＯＮを有すると診断されるが、ＭＳ症状は示さない。特定の実施形態では、被験体は、正常眼における神経障害または病態の発症を予防または遅延させる方法として、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を、単剤療法として、または併用して用いて治療することができる。理論に拘泥するものではないが、第一の眼が急性視神経炎であると診断した後、正常な他眼を治療することにより、正常な他眼または脳の他の場所の神経炎の１つ以上の症状を遅延または予防し得る。特定の実施形態では、治療または予防は、視神経障害または病態の１つ以上の症状、例えば急性視神経炎及び／またはＭＳを少なくとも１日、１週間、１か月、１年またはそれ以上遅延させる。
【００４２】
したがって、一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の被験体への投与は、罹患した眼を治療する。関連する実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与は、正常な他眼またはＣＮＳの他の場所におけるＭＳまたは視神経障害、例えばＡＯＮの発症を遅延または予防する。
【００４３】
他の実施形態では、被験体は、片眼または両眼に視神経障害または病態、例えば急性視神経炎を有すると診断されるが、他のＭＳ症状を示さない（例えば、ＭＳであると診断されない被験体か、またはＭＳに罹患しているが再発していないかもしくは進行していない被験体）。一実施形態では、視神経障害または病態、例えば急性視神経炎に罹患している前記被験体の治療は、ＭＳ症状の発症または再発を遅延または予防する。特定の実施形態において、治療または予防は、１種以上のＭＳ症状を、少なくとも１日、１週間、１か月、１年またはそれ以上、遅延させる。
【００４４】
一実施形態では、投与する修復剤は、単独療法としてのＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬（例えば、本明細書に記載の抗ＬＩＮＧＯ抗体）である。一実施形態では、修復剤は、約０．３、１．０、３．０、１０、３０、６０、または１００ｍｇ／ｋｇの範囲の量で単独療法として投与する抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体である。例えば、約３〜１００ｍｇ／ｋｇ、１０〜３００ｍｇ／ｋｇ、２０〜２５０ｍｇ／ｋｇ、５０〜２００ｍｇ／ｋｇ、７５〜１５０ｍｇ／ｋｇ、９０〜１２０ｍｇ／ｋｇ、または約１００ｍｇ／ｋｇである。
【００４５】
他の実施形態では、投与する修復剤は、第二の薬剤（例えば、本明細書に記載の免疫調節薬）と併用したＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬（例えば、本明細書に記載の抗ＬＩＮＧＯ抗体）である。一実施形態では、修復剤は、約０．３、１．０、３．０、１０、３０、６０、または１００ｍｇ／ｋｇの範囲の量で併用療法として投与する抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体である。例えば、約３〜１００ｍｇ／ｋｇ、１０〜３００ｍｇ／ｋｇ、２０〜２５０ｍｇ／ｋｇ、５０〜２００ｍｇ／ｋｇ、７５〜１５０ｍｇ／ｋｇ、９０〜１２０ｍｇ／ｋｇ、または約１００ｍｇ／ｋｇである。一実施形態では、免疫調節薬を、その薬剤の標準治療に従って投与する。別の実施形態では、ＬＩＮＧＯ拮抗薬の投与によって、投与する免疫調節薬の量を低減できる。
【００４６】
修復剤
特定の実施形態では、修復剤は、例えば被験体（例えば、それを必要とする患者）において、以下の１つ以上を引き起こす：髄鞘形成または再髄鞘化の促進、神経軸索保護の促進、軸索伸長の増加、神経発芽の増加、及び／または分化したオリゴデンドロサイト数の増加（例えば、オリゴデンドロサイトの生存または分化の１つ以上を増強することによって）。前記方法は：髄鞘形成、再髄鞘化、オリゴデンドロサイト数、または神経軸索保護の１つ以上を増強するのに十分な量で、単剤療法として、または免疫調節薬と併用して、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を被験体に投与することを含む。
【００４７】
一実施形態では、修復剤は、［Ｌ］ＲＲ及び［Ｉ］ｇドメイン含有Ｎｏｇｏ受容体相互作用タンパク質（「ＬＩＮＧＯ」、例えばＬＩＮＧＯ‐１）の拮抗薬である。以前はＳｐ３５と呼ばれていたＬＩＮＧＯ‐１は、神経細胞及びオリゴデンドロサイトの成体ＣＮＳにおいて選択的に発現する細胞表面糖タンパク質であり、オリゴデンドロサイト分化、髄鞘形成及び再髄鞘化の負の制御因子として機能すると考えられている。したがって、ＬＩＮＧＯ‐１の拮抗作用は、軸索の髄鞘形成または再髄鞘化を、例えばオリゴデンドロサイトによって促進し、ＣＮＳにおける神経軸索保護を増強することができる。ＬＩＮＧＯ‐１は、２００６年７月７日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２６２７１、２００４年３月１７日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００４／００８３２３、２００５年６月２４日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２２８８１、２００８年１月９日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００８／０００３１６に記載されており、その各々は参照としてその全体を本明細書に援用する。
【００４８】
一実施形態では、修復剤、例えばＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬は、ＬＩＮＧＯ‐１、例えばヒトＬＩＮＧＯ‐１の発現または活性を阻害または低減する。
【００４９】
一実施形態では、修復剤、例えばＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬は、ＮｇＲ１とｐ７５とＬＩＮＧＯ‐１との；及び／またはＮｇＲ１とＴＡＪ（ＴＲＯＹ）とＬＩＮＧＯ‐１との複合体（例えば、機能的シグナル伝達複合体）の形成及び／または活性を阻害または低減する。別の実施形態では、修復剤、例えばＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬は、ＮｇＲ１へのＬＩＮＧＯ‐１結合を阻害または低減する。
【００５０】
一実施形態では、修復剤、例えばＬＩＮＧＯ‐１の拮抗薬は抗体分子である。一実施形態では、抗体分子は、ＮｇＲ１とｐ７５とＬＩＮＧＯ‐１との；及び／またはＮｇＲ１とＴＡＪ（ＴＲＯＹ）とＬＩＮＧＯ‐１との複合体（例えば、機能的シグナル伝達複合体）の形成及び／または活性を低下させる。一実施形態では、抗体分子は、複合体の成分の少なくとも１つ（例えば、ＮｇＲ１、ｐ７５、及びＬＩＮＧＯ‐１の；及び／またはＮｇＲ１、ＴＡＪ（ＴＲＯＹ）及びＬＩＮＧＯ‐１のうちの少なくとも１つ）に結合し、機能的シグナル伝達を阻害または低減する。
【００５１】
一実施形態では、抗体分子はＬＩＮＧＯ、例えばヒトＬＩＮＧＯに結合する。別の実施形態では、抗体分子はＬＩＮＧＯ‐１、例えばヒトＬＩＮＧＯ‐１に結合する。抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１、例えば、哺乳類（例えば、ヒトＬＩＮＧＯ‐１（またはその機能的変異体））に結合するモノクローナル抗体もしくは単一特異性抗体、またはその抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、シングルドメイン抗体、二重特異性抗体（ｄＡＢ）、二価もしくは二重特異性抗体またはその断片、そのシングルドメイン変異体）であり得る。一実施形態では、抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１に対するモノクローナル抗体、例えばヒトＬＩＮＧＯ‐１である。一般的には、抗体分子は、ヒトＬＩＮＧＯ‐１（またはその機能的断片、例えば、本明細書に記載の抗体断片）に対する、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト、キメラ、ラクダ科、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ合成した抗体である。一般的には、抗体は、ＬＩＮＧＯ‐１の１つ以上の活性（例えば、本明細書に記載のＬＩＮＧＯ‐１の１つ以上の生物学的活性）を阻害、低減または中和する。
【００５２】
抗体分子は、完全長（例えば、少なくとも１つ、通常は２つの完全な重鎖、及び少なくとも１つ、通常は２つの完全な軽鎖を含むことができる）であるか、または抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、またはシングルドメイン抗体もしくはその断片）を含むことができる。さらに他の実施形態では、抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥから選択され；特に、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４の（例えば、ヒト）重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域を有する。別の実施形態では、抗体分子は、例えば、κまたはλの（例えば、ヒト）軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。抗体分子のフレームワーク領域または定常領域を、例えば突然変異を導入して変更し、抗体の特性を改変する（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、及び／または補体機能のうちの１つ以上を増減する）ことができる。一実施形態では、抗体分子のフレームワーク領域または定常領域を、例えば突然変異を導入して変更し、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、及び／または補体機能のうちの１つを低下させる。一実施形態では、抗体分子のフレームワーク領域を変更し、抗体グリコシル化、エフェクター細胞及び／または補体機能を低下させる。一実施形態では、抗体分子は、アグリコシルフレームワークを含む。
【００５３】
別の実施形態では、抗体分子はＬＩＮＧＯ‐１、例えばヒトＬＩＮＧＯ‐１に結合する免疫グロブリンＧサブクラス１（ＩｇＧ１）である。特定の実施形態では、抗体分子を改変して、野生型ＩｇＧ１に比べてエフェクター細胞及び補体機能を低下させる。一実施形態では、抗体分子は、アグリコシル（ＩｇＧ１）フレームワークを含む。
【００５４】
特定の実施形態では、抗体分子は、米国特許第８，０５８，４０６号及び米国特許第８，１２８，９２６号に記載されている参照モノクローナル抗体Ｌｉ６２またはＬｉ８１と同一かまたは実質的に同一のＬＩＮＧＯ‐１エピトープに特異的に結合し、これらの文献はその全体を参照として本明細書に援用する。一実施形態では、抗体分子は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域が表３に示すアミノ酸配列から選択される免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、表３に示すアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一の；またはＬｉ６２もしくはＬｉ８１の免疫グロブリン重鎖のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域に少なくとも８０％、８５％、９０、９５％もしくは１００％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる。
【００５５】
いくつかの実施形態では、抗体分子は、配列番号４もしくは配列番号８、もしくは配列番号１７〜４９のアミノ酸配列、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらに対して少なくとも８０％、８５％、９０％９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、もしくはそれからなる。
【００５６】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３がそれぞれ配列番号６、７、及び８のアミノ酸、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらに対して少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＶＨを含む。
【００５７】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３がそれぞれ配列番号２、３、及び３０のアミノ酸、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらに対して少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＶＨを含む。
【００５８】
他の実施形態では、抗体分子は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域が、表４に示すポリペプチド配列またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、表４に示すアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％もしくは９５％同一のアミノ酸配列；またはＬｉ６２もしくはＬｉ８１の免疫グロブリン軽鎖のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％もしくは１００％同一のアミノ酸配列）から選択される免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
【００５９】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３がそれぞれ配列番号１４、１５、及び１６のアミノ酸、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらに対して少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＶＬを含む。
【００６０】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３がそれぞれ配列番号１０、１１、及び１２のアミノ酸、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらに対して少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＶＬを含む。
【００６１】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３がそれぞれ配列番号６、７、及び８のアミノ酸を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＶＨ；及びＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３がそれぞれ配列番号１４、１５、及び１６のアミノ酸を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＶＬ；またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらに対して少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【００６２】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３がそれぞれ配列番号２、３、及び３０のアミノ酸を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＶＨ；及びＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３がそれぞれ配列番号１０、１１、及び１２のアミノ酸を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＶＬ；またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらに対して少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【００６３】
他の実施形態では、抗体分子は、配列番号１、５、及び５３〜８５からなる群から選択されるＶＨ、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号１、５及び５３〜８５と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【００６４】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号５、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、配列番号５と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＶＨを含む。
【００６５】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号６６のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号６６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＶＨを含む。
【００６６】
さらに他の実施形態では、抗体分子は、表４に示すように、配列番号９及び１３、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、表４に示すように、前記配列番号９及び１３と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）からなる群から選択されるＶＬを含む。
【００６７】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号１３のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号１３と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＶＬを含む。
【００６８】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号９のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号９と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＶＬを含む。
【００６９】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号５のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号５と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＶＨ；及び配列番号１３のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号１３と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＶＬを含む。
【００７０】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号６６のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号６６と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＶＨ；及び配列番号９のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号９と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＶＬを含む。
【００７１】
別の実施形態では、抗体分子は、以下に示すような、配列番号２７５のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一の配列（例えば、それと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる重鎖を含む。
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧ  ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ  ＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ  ＡＹＥＭＫＷＶＲＱＡ  ＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶ
ＩＧＰＳＧＧＦＴＦＹ  ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩ  ＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹ  ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ  ＴＡＶＹＹＣＡＴＥＧ
ＤＮＤＡＦＤＩＷＧＱ  ＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳ  ＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡ  ＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴ  ＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹ
ＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮ  ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴ  ＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬ  ＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰ  ＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩ
ＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴ  ＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳ  ＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣ  ＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳ  ＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤ
ＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶ  ＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥ  ＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶ  ＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴ  ＫＰＲＥＥＱＹＮＳＡ
ＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬ  ＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹ  ＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰ  ＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡ  ＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹ
ＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴ  ＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶ  ＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶ  ＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮ  ＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤ
ＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫ  ＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱ  ＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨ  ＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫ  ＳＬＳＬＳＰＧ  （配列番号２７５）
【００７２】
他の実施形態では、抗体分子は、以下に示すような、配列番号２７６のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一の配列（例えば、それと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる軽鎖を含む。
ＤＩＱＭＴＱＳＰＡＴ  ＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴ  ＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳ  ＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰ  ＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤ
ＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ  ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ  ＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰ  ＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱ  ＲＳＮＷＰＭＹＴＦＧ
ＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴ  ＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰ  ＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴ  ＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦ  ＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫ
ＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳ  ＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫ  ＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬ  ＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨ  ＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱ
ＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦ  ＮＲＧＥＣ  （配列番号２７６）
【００７３】
一実施形態では、抗体分子は抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体、オピシヌマブ（本明細書では「ＢＩＩＢ０３３」とも呼ぶ）である。一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、（ｉ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる重鎖、及び（ｉｉ）配列番号２７６のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる軽鎖を含む。
【００７４】
別の実施形態では、修復剤、例えばＬＩＮＧＯ‐１の拮抗薬は、可溶性ＬＩＮＧＯ分子、例えばＬＩＮＧＯ‐１分子（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１の断片）、またはＬＩＮＧＯ‐１複合体成分の可溶性形態（例えば、ＮｇＲ１、ｐ７５、またはＴＡＪ（ＴＲＯＹ）の可溶性形態）のいずれかである。
【００７５】
ＬＩＮＧＯまたは複合体成分の可溶性形態は、単独で、または第二の部分、例えば、免疫グロブリンＦｃドメイン、血清アルブミン、ペグ化、ＧＳＴ、Ｌｅｘ‐Ａ、ＭＢＰポリペプチド配列、または抗体（例えば、二重特異性または多重特異性抗体）に機能的に連結させて（例えば、化学的カップリング、遺伝子もしくはポリペプチド融合、非共有結合または他の方法によって）使用できる。融合タンパク質は、第一の部分、例えばＬＩＮＧＯ‐１の可溶性形態または複合体成分を、第二の部分へ結合するリンカー配列をさらに有してもよい。他の実施形態では、さらなるアミノ酸配列を融合タンパク質のＮ末端またはＣ末端に付加して、発現、立体的柔軟性、検出及び／または単離もしくは精製を容易にすることができる。例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥを含む様々なアイソタイプの重鎖定常領域に、ＬＩＮＧＯ‐１の可溶性形態または複合体成分を融合させることができる。一般的には、融合タンパク質は、ＬＩＮＧＯの細胞外ドメインまたは複合体成分（またはそれらに相同な配列）を含み、及び例えば、ヒト免疫グロブリンＦｃ鎖、例えば、ヒトＩｇＧ（例えば、ヒトＩｇＧ１もしくはヒトＩｇＧ２、またはそれらの変異体）に融合させる。Ｆｃ配列を１つ以上のアミノ酸で変異させ、エフェクター細胞機能、Ｆｃ受容体結合及び／または補体活性を低下させることができる。
【００７６】
別の実施形態では、１つ以上の修復剤を組み合わせて添加する。例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬と別の再髄鞘化剤とを組み合わせて添加することができる。
【００７７】
免疫調節薬
本明細書に記載の方法、キット及び組成物は、１つ以上の免疫調節薬を含むことができる。特定の実施形態では、免疫調節薬は、以下の１つ以上から選択される：
ＩＦＮ‐β１分子；
グルタミン酸、リジン、アラニン及びチロシンのポリマー、例えば、グラチラマー（例えば、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））；
アルファ４インテグリンに対する抗体またはその断片、例えば、ナタリズマブ（例えば、Ｔｙｓａｂｒｉ（登録商標））；
アントラセンジオン分子、例えば、ミトキサントロン（例えば、Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標））；
フィンゴリモド、例えばＦＴＹ７２０（例えば、Ｇｉｌｅｎｙａ（登録商標））；
フマル酸ジメチル、例えば、経口フマル酸ジメチル（例えば、Ｔｅｃｆｉｄｅｒａ（登録商標））；
Ｔ細胞ＩＬ‐２受容体アルファサブユニット（ＣＤ２５）に対する抗体、例えば、ダクリズマブ；
ＣＤ５２に対する抗体、例えば、アレムツズマブ（例えば、ＣＡＭＰＡＴＨ）；
ジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼの阻害剤、例えば、レフルノミドまたはその活性代謝物、例えば、テリフルノミド（例えば、ＡＵＢＡＧＩＯ）；
ＣＤ２０に対する抗体、例えばリツキシマブ、またはオクレリズマブ；
ＷＯ２０１２／１０９１０８に記載されているような、スフィンゴシン１‐リン酸（Ｓ１Ｐ）調節剤；または
コルチコステロイド。
【００７８】
一実施形態では、免疫調節薬はＩＦＮ‐β１分子である。ＩＦＮ‐β１分子は、ＩＦＮ‐β１ａまたはＩＦＮ‐β１ｂポリペプチド、その変異体、ホモログ、断片またはそのペグ化変異体の１つ以上から選択することができる。
【００７９】
一実施形態では、ＩＦＮ‐β１分子は、ＩＦＮ‐β１ａ分子、ＩＦＮ‐β１ｂ分子、またはＩＦＮ‐β１ａ分子もしくはＩＦＮ‐β１ｂ分子のペグ化変異体から選択されるＩＦＮ‐β剤を含む。
【００８０】
一実施形態において、ＩＦＮβ１分子は、ＩＦＮ‐β１ａ剤（例えば、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）、Ｒｅｂｉｆ（登録商標））である。別の実施形態では、ＩＦＮβ１分子は、ＩＮＦ‐β１ｂ剤（例えば、Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（登録商標）、Ｂｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）またはＥｘｔａｖｉａ（登録商標））である。
【００８１】
一実施形態において、免疫調節薬は、グルタミン酸、リジン、アラニン及びチロシンのポリマー、例えばグラチラマー（例えばＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））である。
【００８２】
一実施形態では、免疫調節薬は、アルファ４インテグリンに対する抗体またはその断片（例えば、ナタリズマブ（例えば、Ｔｙｓａｂｒｉ（登録商標）））である。
【００８３】
さらに他の実施形態において、免疫調節薬は、アントラセンジオン分子（例えば、ミトキサントロン（例えば、Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標）））である。
【００８４】
さらに別の実施形態では、免疫調節薬はフィンゴリモド（例えばＦＴＹ７２０；例えばＧｉｌｅｎｙａ（登録商標））である。
【００８５】
一実施形態において、免疫調節薬は、フマル酸ジメチル（例えば、経口フマル酸ジメチル（例えば、ＢＧ‐１２））である。
【００８６】
他の実施形態では、免疫調節薬は、Ｔ細胞のＩＬ‐２受容体のアルファサブユニット（ＣＤ２５）に対する抗体（例えば、ダクリズマブ）である。
【００８７】
他の実施形態では、免疫調節薬はＣＤ２０に対する抗体、例えばオクレリズマブである。
【００８８】
他の実施形態では、免疫調節薬はコルチコステロイド、例えばメチルプレドニゾロン（例えば、高用量のコルチコステロイド、例えばメチルプレドニゾロン）である。
【００８９】
特定の実施形態では、本方法は、とりわけ、抗うつ薬、鎮痛薬、抗振戦薬などの１つ以上の症状管理療法の使用をさらに含む。
【００９０】
修復剤（例えば、本明細書に記載の１つ以上の修復剤、例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）と免疫調節薬（例えば、本明細書に記載の１つ以上の免疫調節薬）との任意の組合せを、本明細書に記載の方法、キット及び組成物において使用できる。例えば、修復剤を、グルタミン酸、リジン、アラニン及びチロシンのポリマー、例えばグラチラマーと併用することができる。他の実施形態では、修復剤を、アルファ４インテグリンに対する抗体またはその断片、例えばナタリズマブと併用することができる。さらに別の実施形態において、修復剤を、アントラセンジオン分子、例えば、ミトキサントロンと併用することができる。さらに別の実施形態では、修復剤を、例えばＦＴＹ７２０などのフィンゴリモドと併用することができる。さらに別の実施形態では、修復剤を、フマル酸ジメチル、例えば、経口フマル酸ジメチルと併用することができる。他の実施形態では、修復剤は、Ｔ細胞のＩＬ‐２受容体のアルファサブユニット（ＣＤ２５）に対する抗体、例えばダクリズマブと併用することができる。さらに別の実施形態では、修復剤は、ＣＤ５２に対する抗体（例えば、アレムツズマブ）と併用することができる。さらに別の実施形態では、修復剤を、ジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼの阻害剤、例えばテリフルノミドと併用することができる。別の実施形態では、修復剤を、ＣＤ２０に対する抗体、例えばオクレリズマブと併用することができる。別の実施形態では、修復剤を、コルチコステロイド（例えば、メチルプレドニゾロン）と併用することができる。一実施形態では、修復剤をＳ１Ｐ調節剤と併用することができる。
【００９１】
他の実施形態では、修復剤を、２つ、３つ、４つまたはそれ以上の免疫調節薬、例えば、本明細書に記載の免疫調節薬の２つ、３つ、４つまたはそれ以上と併用する。例示的な一実施形態では、ＬＩＮＧＯ拮抗薬、ＩＦＮ‐β１分子及びコルチコステロイドを併用する。他の実施形態では、ＬＩＮＧＯ拮抗薬、ＩＦＮ‐β１分子ならびにグルタミン酸、リジン、アラニン及びチロシンのポリマー、例えばグラチラマーの組合せを使用する。さらに他の実施形態では、ＬＩＮＧＯ拮抗薬、ＩＦＮ‐β１分子及びアルファ４インテグリンに対する抗体またはその断片、例えばナタリズマブの組合せを使用する。
【００９２】
本明細書に記載の方法、キット及び組成物の特定の実施形態において、修復剤は、ＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子、例えば、本明細書に記載の抗ＬＩＮＧＯ抗体であり、免疫抑制剤は、ＩＦＮ‐β１分子、例えば、本明細書に記載のようなＩＦＮ‐β１分子である。
【００９３】
単剤療法及び併用療法；投与のタイミング
修復剤は、単独療法または併用療法として投与することができる。本明細書に記載の修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）と免疫調節薬との組合せを、任意の順序で、例えば、本明細書に記載するように、同時にまたは連続して投与することができる。一実施形態では、修復剤と免疫調節薬を同時に投与する。別の実施形態では、修復剤と免疫調節薬を連続的に投与する。例えば、修復剤と免疫調節薬の投与を、少なくとも部分的にまたは完全に、相互に重複させることができる。
【００９４】
特定の実施形態では、免疫調節薬と修復剤の投与を同時に開始する。他の実施形態では、修復剤による治療を開始する前に免疫調節薬を投与する。さらに他の実施形態では、免疫調節薬による治療を開始する前に修復剤を投与する。別の実施形態では、修復剤の投与の停止後も、免疫調節薬の投与を継続する。他の実施形態では、免疫調節薬の投与の停止後も、修復剤の投与を継続する。他の実施形態では、免疫調節薬を連続的に投与する一方で、修復剤の投与を断続的に継続する（例えば、３または６または１２か月ごとに２または３か月間、または１〜２年ごとに３〜６か月間）。他の実施形態では、例えば基礎療法として修復剤を連続的に投与する一方で、免疫調節薬の投与を断続的に継続する（例えば、３または６または１２か月ごとに２または３か月間、または１〜２年ごとに３〜６か月間）。
【００９５】
特定の実施形態では、修復剤はＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子であり、これを単剤療法または併用療法として、静脈内、皮下または筋肉内に投与する。一実施形態では、抗体分子を静脈内投与する。そのような実施形態では、抗体分子を、単独療法または併用療法として、約０．３、１．０、３．０、１０、３０、６０または１００ｍｇ／ｋｇで投与する。例えば、約１〜１５０ｍｇ／ｋｇ、例えば３〜１００ｍｇ／ｋｇ（一般的には、約３ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇ）である。いくつかの実施形態では、抗体分子は、静脈内注入によって１、２、３、４または５週毎に１回投与する。一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、ＩＶ注入またはＳＣ注射によって、４週毎に１回、約１００ｍｇ／ｋｇで投与する。一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の投与は急性であり、例えば、急性ＭＳ病変（例えば、ＭＳにおける任意の病変、再発またはＡＯＮ）の後、２週間未満に投与する。一実施形態では、急性投与を、急性ＭＳ病変の後、２週間または１週間未満に行う（例えば、急性ＭＳ病変の後、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１日、または数時間未満のうちに）。一実施形態では、投与は慢性であり、例えば予防的に投与し、及び／または、例えば、治療の有効な効果（例えば、神経傷害の再髄鞘化または神経損傷の減少によって検出されるような）が減少するか、または検出されなくなるまで、投与を長期間継続する。
【００９６】
特定の実施形態では、免疫調節薬はＩＦＮ‐β１分子であり、これを静脈内、皮下または筋肉内に投与する。例えば、ＩＦＮ‐β１分子は、以下の１つ以上で投与することができる：
（ｉ）筋肉内注射によって、例えば週１回、２０〜４５マイクログラム（例えば、３０μマイクログラムで；
（ｉｉ）皮下注射によって、例えば週３回、２０〜３０マイクログラム（例えば２２マイクログラム）で、もしくは例えば週に１回、４０〜５０マイクログラム（例えば４４マイクログラム）で；または、
（ｉｉｉ）筋肉内に、例えば週３回、もしくは５〜１０日毎に、例えば週１回、１０〜５０μｇの量で；または、
（ｉｖ）皮下注射によって、例えば１日おきに、２００〜６００μｇの間（例えば、２５０〜５００μｇの間）の量で。一実施形態では、ＩＦＮ‐β１分子はインターフェロンβ１ｂ（Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（登録商標）／Ｂｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）、またはＥｘｔａｖｉａ（登録商標））である。
【００９７】
他の実施形態では、修復剤は、ＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体分子であり、これをＩＶ注入またはＳＣ注射によって、４週毎に１回、約３ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与し；及び、
免疫調節薬であるＩＦＮ‐β１を、以下の１つ以上で投与する：
（ｉ）筋肉内注射によって、例えば週１回、２０〜４５マイクログラム（例えば、３０マイクログラム）で；
（ｉｉ）皮下注射によって、例えば週３回、２０〜３０マイクログラム（例えば２２マイクログラム）で、もしくは例えば週１回、４０〜５０マイクログラム（例えば４４マイクログラム）で；または
（ｉｉｉ）筋肉内に、例えば週３回、もしくは５〜１０日毎に、例えば週１回、１０〜５０μｇの量で。
【００９８】
被験体のモニタリング
代替的に、または本明細書中に開示する方法と組み合わせて、ＣＮＳ障害またはＣＮＳ脱髄性疾患の進行を評価、診断、及び／またはモニタリングする方法を開示する。本方法は、ＣＮＳ障害またはＣＮＳ脱髄性疾患に罹患しているか、または障害を発症するリスクを有する被験体（例えば、患者、患者群または患者集団）を評価することを含む。一実施形態では、（ｉ）神経学的検査（例えば、ＥＤＳＳ）；及び／または（ｉｉ）身体機能のアセスメントを用いて被験体を評価する。例えば、身体機能のアセスメントは、歩行機能（例えば、短距離及び／または長距離歩行機能）のアセスメントを単独で、または上肢及び／または下肢機能のアセスメントと組み合わせて含み得る。
【００９９】
特定の実施形態では、被験体を以下の１つ以上によって評価する：
神経学的検査の実施；
総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）に関する被験体の状態の取得；
多発性硬化症機能評価（ＭＳＦＣ）に関する被験体の状態の取得；
例えばＭＲＩを用いて評価するような、被験体の病変状態の検出；
上肢及び／もしくは下肢機能の測定値の取得；
歩行機能の測定値の取得（例えば、近距離歩行機能）（例えば、２５フィート時限歩行（Ｔ２５ＦＷ））；または長距離歩行機能（例えば、６分間歩行試験（６ＭＷ）；
認知機能（例えば、ＭＳ‐ＣＯＧまたはＢＩＣＡＭＳまたはＳＤＭＴ）の測定値の取得；または、
視覚機能のアセスメントの取得。
【０１００】
一実施形態では、上肢機能の測定値を、９ホールペグテスト（９ＨＰ）を使用して取得する。
【０１０１】
他の実施形態では、短距離歩行機能の測定値を、２５フィート時限歩行（Ｔ２５ＦＷ）を使用して取得する。
【０１０２】
他の実施形態では、長距離歩行機能の測定値を、６分間歩行試験（６ＭＷ）を使用して取得する。
【０１０３】
特定の実施形態では、四肢及び／または歩行機能の測定値における少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％またはそれ以上の上昇は、疾患の進行、例えば被験体の症状及び／または障害の着実な悪化を示しており；ならびに四肢及び／または歩行機能の測定値における少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％またはそれ以上の低下は、治療効果の改善（例えば、疾患の進行の低減または病態の改善）を示している。
【０１０４】
特定の実施形態では、被験体を、神経学的検査、例えばＥＤＳＳを用いて評価する。いくつかの実施形態では、ＥＤＳＳは、神経機能のアセスメント、歩行機能のアセスメント、またはその両方を含む。一実施形態において、ＥＤＳＳスコアは、ＥＤＳＳ機能システム（ＦＳ）に関する１つ以上のスコアの組合せ（例えば、視覚系、脳幹系、小脳系、運動系、感覚系、膀胱／腸系または認知系から選択されるＥＤＳＳ  ＦＳ用の各スコアのうちの、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、または７つ全部）に基づいて計算する。他の実施形態では、ＥＤＳＳは、歩行運動のスコアを含む。一実施形態では、ＥＤＳＳは、以下の１つ以上（またはすべて）のアセスメントを含む被験体の歩行運動の測定を含む：例えば予め定められた距離（例えば、５００、３００、２００、もしくは１００ｍ以上、または２００もしくは１００ｍ未満の距離）の介助もしくは休息なしでの自由歩行；片側からの介助付き；両側からの介助付き；本質的もしくは完全に車椅子限定での移動；または本質的にもしくは完全に寝たきり状態。
【０１０５】
一実施形態では、視覚機能のアセスメントは、以下の１つ以上によって得られる：例えば、視力（例えば、低コントラスト文字視認性（ＬＣＬＡ）または高コントラスト映像視認性）、Ｖｉｓｕａｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ（ＶＦＱ）、１０‐Ｉｔｅｍ  Ｎｅｕｒｏ‐Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（ＮＯＳ‐１０）、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ａｃｕｉｔｙ  Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ｔｅｓｔｉｎｇ（ＦＡＣＴ）、ＦＦ‐ＶＥＰまたはｍｆＶＥＰなどのＶＥＰ（例えばＭａｃＫａｙ，ＡＭ（２００８）  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ．４９（１）：４３８‐４１に記載の）、例えばＢａｌｃｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ７４  Ｓｕｐｐｌ  ３：Ｓ１６‐２３；Ｂｏｃｋ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（２０１２）  Ｂｒ  Ｊ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．９６（１）：６２‐７にその一部が記載されるｏｐｔｉｃａｌ  ｃｏｈｅｒｅｎｃｅ  ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ（ＯＣＴ））。
【０１０６】
さらに他の実施形態では、認知機能の測定は、学習検査、記憶検査及び／または注意／処理速度検査の評価を含む。例えば、認知機能の測定は、聴覚記憶、言語学習及び／または視覚情報の記憶（例えば、選択想起検査（ＳＲＴ））；聴覚／言語記憶（例えば、カリフォルニア言語性学習検査第二版（ＣＶＬＴ２））、レイ聴覚性言語学習検査（ＲＡＶＬＴ）などの評価試験；視覚／空間記憶（例えば、簡易視空間記憶検査改訂版（ＢＶＭＴＲ））の評価試験；連続聞き取り加算検査（ＰＡＳＡＴ）、符号数字モダリティー検査（ＳＤＭＴ）などの認知処理速度検査；ＭＳＮＱ情報、ＭＳＮＱ被験体、及び／またはＳＦ‐３６のうちの１つ以上の評価を含むことができる。一実施形態では、認知機能の測定を、ＳＤＭＴ、ＰＡＳＡＴ‐３及び‐３、ＳＲＴ合計学習（ＳＲＴ‐ＴＬ）、ＳＲＴ遅延想起検査（ＳＲＴ‐ＤＲ）及びＢＶＭＴＲ遅延想起検査（ＢＶＭＴＲ‐ＤＲ）を含むＭＳ認知評価項目を複合的に用いて実施する（例えば、Ｃａｄａｖｉｄ  ｅｔ  ａｌ，，２９ｔｈ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  ＭＳ（ＥＣＴＲＩＭＳ），２‐５  Ｏｃｔｏｂｅｒ  ２０１３に記載のＭＳ‐ＣＯＧ）。
【０１０７】
特定の実施形態では、被験体の病変状態を、磁気共鳴画像法を用いて評価する。一実施形態では、磁気共鳴画像法は、磁化移動率及び／または拡散テンソル画像を含む。
【０１０８】
特定の実施形態では、被験体における改善は、以下のうちの１つ以上によって定義される：
ａ．ＥＤＳＳの、ベースラインスコア≦６．０からの≧１．０ポイントの減少；
ｂ．Ｔ２５ＦＷの、ベースラインからの≧１５％の改善；
ｃ．９ＨＰＴの、ベースラインからの≧１５％の改善；または、
ｄ．ＰＡＳＡＴもしくはＳＤＭＴの、ベースラインからの≧１０％（例えば、１０％、１２％、２０％、３０％）の改善。
【０１０９】
他の実施形態では、本方法は、以下のうちの１つ以上をさらに含む：
（ｉ）被験体に対し、療法、例えば本明細書に記載の療法が必要であると識別し；
（ｉｉ）被験体を、療法、例えば本明細書に記載の療法に対して応答が増加または減少したと識別し；
（ｉｉｉ）被験体を、機能もしくは能力に改善が認められることから安定である（例えば、疾患非進行者である）と識別するか、または機能もしくは能力が低下している（例えば、疾患進行者である）と識別し；
（ｉｖ）被験体を診断及び／または予後診断する。
【０１１０】
本明細書に記載する方法におけるステップ（例えば、修復剤及び免疫調節薬の投与（「投与ステップ」）、ならびに被験体のモニタリング及び／または評価（「評価ステップ」）を、任意の順序で行うことができる。一実施形態では、投与ステップを、評価ステップの前に行う。別の実施形態では、評価ステップを、投与ステップの前に行う。
【０１１１】
別の態様では、本発明は、ＣＮＳ脱髄性障害（例えば、多発性硬化症もしくは視神経炎、またはその両方）の発症リスクを有する被験体を評価、例えば診断する方法を特徴とする。本方法は、被験体の片眼または両眼の視神経損傷または視神経伝導の一方または両方を測定（例えば、検出または測定）することを含み、そこにおいて、一方または両方の眼に視神経損傷が認められる場合、及び／または視神経伝導の遅延が認められる場合、それは被験体がＣＮＳ脱髄性障害の発症リスクを有していることを示している。
【０１１２】
一実施形態では、被験体は、以下の１つ以上に従って、多発性硬化症を有するとは診断されない：
神経学的検査の実施；
総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）における被験体の状態の取得；
多発性硬化症機能評価（ＭＳＦＣ）における被験体の状態の取得；
被験体の病変状態の検出；
上肢及び／もしくは下肢機能の測定値の取得；
近距離歩行機能の測定値の取得；
長距離歩行機能の測定値の取得；または、
認知機能の測定値の取得。
【０１１３】
特定の実施形態では、視神経損傷の測定値を取得するステップは、視覚誘発電位（ＶＥＰ）の振幅、例えば全視野ＶＥＰ（ＦＦ‐ＶＥＰ）の振幅及び／またはマルチフィールドＶＥＰ（ｍｆＶＥＰ）の振幅を測定するステップを含む。一実施形態において、ｍｆＶＥＰ振幅が、（ｉ）基準振幅を少なくとも４０ナノボルト下回るか、（ｉｉ）基準振幅を少なくとも２０％下回るか、または（ｉｉｉ）１８０ナノボルト以下である場合、それは被験体の眼（複数可）に視神経損傷が生じていることを示している。基準振幅は、正常な眼、例えば視神経障害または病態、例えば急性視神経炎に罹患していない被験体の眼のＶＥＰ振幅、例えばＦＦ‐ＶＥＰ振幅及び／またはｍｆＶＥＰ振幅の平均とすることができる。
【０１１４】
他の実施形態では、視神経伝導の測定値を取得するステップは、ＶＥＰ潜時、例えば、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時またはｍｆＶＥＰ潜時を測定するステップを含む。いくつかの実施形態において、ＶＥＰ潜時が（ｉ）基準潜時を少なくとも３ミリ秒上回るか、もしくは（ｉｉ）基準潜時を少なくとも３％上回るか；または（ｉｉｉ）ＦＦ‐ＶＥＰ潜時が１１０ミリ秒以上であるか、または（ｉｖ）ｍｆＶＥＰ潜時が１５５ミリ秒以上である場合、それは眼の視神経伝導の遅延を示している。さらに他の実施形態では、基準潜時は、正常な眼、例えば視神経障害または病態、例えば急性視神経炎に罹患していない被験体の眼のＶＥＰ潜時、例えばＦＦ‐ＶＥＰ潜時またはｍｆＶＥＰ潜時の平均である。
【０１１５】
キット及び組成物
別の態様では、本発明は、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬、例えば、本明細書に記載の抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子）を含むキットを特徴とする。場合により、ＣＮＳ障害、例えば、本明細書に記載のＣＮＳ脱髄性疾患の治療または予防に使用するための説明書を、キットにラベル貼りし、及び／または含ませる。一実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬を、以下のうちの１つ、２つ、またはすべてにおいて投与するように指示する：
（ｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発前；
（ｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後、７日以内（例えば、神経保護を促進するために）；または、
（ｉｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後、３０日以内（例えば、再髄鞘化を促進するために）。
【０１１６】
一実施形態において、キットは、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬と併用して投与する第二の薬剤、例えば、本明細書に記載の第二の薬剤（例えば、ＩＦＮ‐β１分子）をさらに含む。
【０１１７】
さらに別の態様では、本発明は、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬、例えば、本明細書に記載の抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子）を含む組成物（例えばパッケージ組成物）を特徴とする。場合により、ＣＮＳ障害（例えば、ＣＮＳ脱髄性疾患）の治療または予防に際して、修復剤を使用するための説明書を、組成物にラベル貼りし、及び／または含ませる。一実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬を、以下のうちの１つ、２つ、またはすべてにおいて投与するように指示する：
（ｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発前；
（ｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後、７日以内（例えば、神経保護を促進するために）；または、
（ｉｉｉ）ＣＮＳ脱髄性疾患の１つ以上の症状の発症または再発後、３０日以内（例えば、再髄鞘化を促進するために）。
【０１１８】
一実施形態では、組成物は、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬と併用して投与する第二の薬剤、例えば本明細書に記載の第二の薬剤（例えば、ＩＦＮ‐β１分子）をさらに含む。
【０１１９】
本明細書に記載の組成物、キット及びパッケージ組成物のＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬及び／または免疫調節薬は、任意の投与経路、例えば末梢投与（例えば、静脈内、皮下、筋肉内、硝子体内、くも膜下腔内、または経口投与）に適した形態であり得る。投与経路は、使用する組成に応じて、同じであるかまたは異なり得る。一実施形態では、パッケージ医薬組成物は、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体）を、静脈内投与に適した形態または調製物内に含む。別の実施形態では、パッケージ医薬組成物は、免疫調節薬（例えば、インターフェロン）を、筋肉内投与に適した形態または調製物内に含む。１つ以上の薬剤を、パッケージ医薬組成物に含めることができる。
【０１２０】
他に定義のない限り、本明細書で使用するすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般的に理解するものと同じ意味を有する。本明細書に記載するものと類似または等価な方法及び物質を本発明の実施または試験に使用することができるが、適切な方法及び物質を以下に記載する。本明細書で言及するすべての刊行物、特許出願、特許及び他の参考文献は、その全体を参照として援用する。さらに、物質、方法、及び実施例は例示的なものに過ぎず、限定することを意図するものではない。
【０１２１】
本発明の他の特徴及び利点は、詳細な説明、図面、及び特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０１２２】
【図１】実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）マウスモデルにおける視神経軸索密度の定量化のための関心領域（ＲＯＩ）の選択を示す。
【図２Ａ】ビヒクルまたは抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体で処置したＥＡＥマウスの生存曲線を示す折れ線グラフである。
【図２Ｂ】ビヒクルまたは抗ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬で処置したＥＡＥマウスにおける下半身不随の発生を示す折れ線グラフである。
【図３Ａ】マウスＥＡＥにおける冠状視神経拡散イメージング画像を含む。図３Ａは、Ｔ２強調ローカライザースキャンの画像である。
【図３Ｂ】マウスＥＡＥにおける冠状視神経拡散イメージング画像を含む。拡散方向を小さな矢印で示す。右側の視神経の位置を大きな矢印で示す。図３Ｂは、視神経に垂直な拡散強調画像法の画像である。
【図３Ｃ】マウスＥＡＥにおける冠状視神経拡散イメージング画像を含む。右側の視神経の位置を大きな矢印で示す。図３Ｃは、視神経に平行な拡散強調スキャン画像である。
【図３Ｄ】マウスＥＡＥにおける冠状視神経拡散イメージング画像を含む。拡散方向を小さな矢印で示す。右側の視神経の位置を大きな矢印で示す。図３Ｄは、視神経に垂直な拡散強調画像法の画像である。
【図３Ｅ】マウスＥＡＥにおける冠状視神経拡散イメージング画像を含む。図３Ｅは、図３Ｂの視神経画像の拡大図である。
【図３Ｆ】マウスＥＡＥにおける冠状視神経拡散イメージング画像を含む。図３Ｆは、図３Ｄの視神経画像の拡大図である。
【図４】マウスＥＡＥにおいて拡散テンソル撮像法（ＤＴＩ）によって分析した視神経の完全性を示す棒グラフである。
【図５】ビヒクルもしくは抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体で処置したＥＡＥマウスまたは健康なマウスにおける視神経の組織学的分析を示す。
【図６】ビヒクルもしくは抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体で処置したＥＡＥマウスまたは健康マウスの視神経における軸索損失の測定値を示す。図６は、視神経面積（μｍ２）、平均中枢軸索面積（μｍ２）、合計中枢軸索数、合計末梢軸索数、合計中枢軸索原形質面積（μｍ２）、及び合計末梢軸索原形質面積（μｍ２）の測定値を含む。
【図７】以下の各処置後に、抗βＩＩＩチューブリン染色及びＤＡＰＩによってそれぞれ検出した視神経切片の組織学的分析を示す：治療群（Ｖｅｈ＋対照抗体）、メチルプレドニゾロン（ＭＰ）、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体、及びＭＰ＋抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体。
【図８】示した治療群における軸索セグメント数／視野を反映する棒グラフである。抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体治療群（Ｖｅｈ＋抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体）は、５倍高い軸索数を示し、これは抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体治療が軸索喪失を予防したことを示唆している（図８）。併用治療群（ＭＰ＋抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体）は、対照治療群（Ｖｅｈ＋対照抗体）に比べて、８倍の軸索数の増加を示した。
【図９】臨床治験デザイン（ＲＥＮＥＷ  ｔｒｉａｌ  ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ  ＩＤ：ＮＣＴ０１７２１１６１）を示す概略図である。
【図１０】網膜神経節細胞層の平均厚さを計算するために使用する９つのセクター（早期治療糖尿病性網膜症のグリッドに対応する）を表す図である。
【図１１】臨床治験における離脱及び治療中止の割合を示すチャートである。
【図１２】ＲＥＮＥＷ治験における３２週目（ＭＭＲＭによる）のＰＰ及びＩＴＴ集団の罹患した眼におけるベースライン時の視神経伝導潜時（ＦＦ‐ＶＥＰによって測定）の調整平均変化を、罹患していない他眼と比較して示す棒グラフである。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【図１３】ＲＥＮＥＷ治験における３２週目までのＩＴＴ集団の罹患した眼における各来院時のＲＧＣＬ／ＩＰＬの平均厚さ（ＳＤ‐ＯＣＴにより測定）を示す棒グラフである。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【図１４】ＲＥＮＥＷ治験における３２週目までのＰＰ集団の罹患した眼における各来院時のＲＧＣＬ／ＩＰＬの平均厚さ（ＳＤ‐ＯＣＴにより測定）を示す棒グラフである。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【図１５Ａ】４週間目のＰＰ集団の罹患した眼におけるＲＧＣＬ／ＩＰＬの厚さの調整平均変化を示す棒グラフである。バーの各セットの左のバーは、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復ありの群を示し、バーの各セットの右のバーは、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復なしの群を示す。
【図１５Ｂ】２４週間目のＰＰ集団の罹患した眼におけるＲＧＣＬ／ＩＰＬの厚さの調整平均変化を示す棒グラフである。バーの各セットの左のバーは、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復ありの群を示し、バーの各セットの右のバーは、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復なしの群を示す。
【図１６Ａ】ＲＥＮＥＷ治験における３３歳未満の被験体のＰＰ集団の罹患した眼におけるベースライン時の視神経伝導潜時（ＦＦ‐ＶＥＰによって測定）の調整平均変化を、罹患していない眼と比較して示す棒グラフである。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【図１６Ｂ】ＲＥＮＥＷ治験における３３歳以上の被験体のＰＰ集団の罹患した眼におけるベースライン時の視神経伝導潜時（ＦＦ‐ＶＥＰによって測定）の調整平均変化を、罹患していない眼と比較して示す棒グラフである。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【図１７】多局所視覚誘発電位（ｍｆＶＥＰ）を用いて評価する例示的な個々のセグメントを示す図である。
【図１８Ａ】罹患した目におけるベースライン時のｍｆＶＥＰ潜時の調整平均変化を、罹患していない他眼と比較して示す棒グラフである（ＡＮＣＯＶＡによる）。ＣＩ＝信頼区間；ＩＴＴ＝治療意図；ｍｆＶＥＰ＝多局所視覚誘発電位；ＰＰ＝ＲＥＮＥＷ治験におけるｐｅｒ‐ｐｒｏｔｏｃｏｌ解析。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【図１８Ｂ】罹患した目におけるベースライン時のＦＦ‐ＶＥＰ潜時の調整平均変化を、罹患していない他眼と比較して示す棒グラフである（ＡＮＣＯＶＡによる）。ＣＩ＝信頼区間；ＦＦ‐ＶＥＰ＝全視覚誘発電位；ＩＴＴ＝治療意図；ＰＰ＝ＲＥＮＥＷ治験におけるｐｅｒ‐ｐｒｏｔｏｃｏｌ解析。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【図１９Ａ】主要評価項目測定値ＦＦ‐ＶＥＰ＊を用いて潜時回復を有すると分類される被験体における第２４週のｍｆＶＥＰ潜時の調整平均差を示す棒グラフである。ＣＩ＝信頼区間；ＦＦ‐ＶＥＰ＝全視覚誘発電位；ｍｆＶＥＰ＝多局所視覚誘発電位；＊ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復は、他眼に比べて１０％以下の悪化が認められる罹患している眼のＦＦ‐ＶＥＰ潜時として定義した；ＦＦ‐ＶＥＰ潜時は、ＲＥＮＥＷ治験の主要評価項目であった。
【図１９Ｂ】主要評価項目の尺度ＦＦ‐ＶＥＰ＊を用いて潜時回復を有すると分類される被験体における第２４週のｍｆＶＥＰ振幅の調整平均差を示す棒グラフである。ＣＩ＝信頼区間；ＦＦ‐ＶＥＰ＝全視覚誘発電位；ｍｆＶＥＰ＝多局所視覚誘発電位；＊ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復は、他眼に比べて１０％以下の悪化が認められる罹患している眼のＦＦ‐ＶＥＰ潜時として定義した；ＦＦ‐ＶＥＰ潜時は、ＲＥＮＥＷ治験の主要評価項目であった。
【図２０】罹患していない他眼のｍｆＶＥＰデータ（治療群のＩＴＴ解析によるｍｆＶＥＰ他眼の平均振幅）を示す棒グラフであり、抗ＬＩＮＧＯ‐１治療による振幅の維持を示す。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【図２１】３２週間にわたる抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体での治療中の、罹患した眼におけるＭＦ‐ＶＥＰ振幅（ｎＶ）の、罹患した眼のベースラインからの平均変化を示す一連のヒートマップである。
【図２２】３２週間にわたる抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体での治療中の、罹患していない眼におけるＭＦ‐ＶＥＰ振幅（ｎＶ）の、罹患していない眼のベースラインからの平均変化を示す一連のヒートマップである。
【図２３Ａ】ＭＭＲＭ分析によるＲＥＮＥＷ治験２４週目までの、ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５複合スコアのベースラインからの平均変化を示すグラフである。
【図２３Ｂ】ＭＭＲＭ分析によるＲＥＮＥＷ治験２４週目までの、ＮＯＳ‐１０スコアのベースラインからの平均変化を示すグラフである。
【図２３Ｃ】ＭＭＲＭ分析によるＲＥＮＥＷ治験２４週目までの、ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５とＮＯＳ‐１０との併用複合スコアのベースラインからの平均変化を示すグラフである。
【図２４】ＲＥＮＥＷ治験２４週目におけるＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５複合スコアのベースラインからの変化が、４ポイント以上の低下、４ポイント以下での維持、または４ポイント以上の上昇であった患者の割合を示す棒グラフである。バーの各セットの左のバーはプラセボ群を指し、バーの各セットの右のバーは抗ＬＩＮＧＯ‐１群を指す。
【発明を実施するための形態】
【０１２３】
発明の詳細な説明
本発明は、修復剤（抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体）が、急性視神経炎（ＡＯＮ）の発症（例えば、初回発作）後の患者の視神経の再髄鞘化を増加させ、ならびに正常な（罹患していない）眼及び罹患した眼の両方によって機能する視覚経路における新たな疾患の発症を予防する（例えば、遅延させる）ことができるという発見に、少なくとも部分的に基づいている。さらに、視神経を含む視覚経路の機能を測定する（例えば、ＶＥＰの潜時及び振幅を測定する）ために、ＶＥＰ（例えば、ＦＦ‐ＶＥＰ及びｍｆＶＥＰ）のような方法を利用することによって、再髄鞘化における修復剤の有効な効果を検出した。添付の実施例に記載するように、３２週間にわたる罹患した眼と他眼の視覚経路の両方において、ｍｆＶＥＰの振幅に対する抗ＬＩＮＧＯ‐１治療の保護効果が認められ、他眼のｍｆＶＥＰ振幅については、３２週間目において統計的に極めて有意であった。
【０１２４】
また、ＶＥＰ（例えば、ＦＦ‐ＶＥＰ及びｍｆＶＥＰ、特にｍｆＶＥＰ）などの視神経の潜時及び振幅の測定方法は、以前に記載された方法を用いる場合に比べて、ＭＳ発症リスクのある患者をより早期に診断する方法を提供する。ＶＥＰのような方法はまた、以前に記載された方法を用いる場合に比べて、例えば、片眼または両眼にＡＯＮ発症リスクを有する患者をより早期に診断／同定する方法を提供する。さらに、ＶＥＰのような方法は、本明細書に記載の修復剤、例えば抗ＬＩＮＧＯ‐１に対して陽性に応答する（例えば、神経機能が向上した）可能性が最も高い被験体を同定する方法を提供する。したがって、理論に拘束されるものではないが、本明細書に記載の方法は、例えば髄鞘形成を維持するか、または疾患の初期の損傷領域の再髄鞘化を引き起こすことによって、ＡＯＮ及びＭＳの治療及び／または予防のための早期介入を提供する。
【０１２５】
実施形態において、本明細書に記載の方法は、被験体の神経細胞（例えば、軸索）損傷、例えば視神経損傷が生じる前に、被験体のＡＯＮ及び／またはＭＳを治療及び／または予防する。実施形態では、本明細書に記載の方法は、被験体の神経細胞（例えば、軸索）損傷の前に、及び被験体の１つ以上の神経（例えば、視神経）の脱髄後に、被験体のＡＯＮ及び／またはＭＳを治療及び／または予防する。さらに他の実施形態では、本明細書に記載の方法は、神経細胞（例えば、軸索）損傷の前に、及び被験体の１つ以上の神経（例えば、視神経）の脱髄の前に、被験体のＡＯＮ及び／またはＭＳを予防する。ここで、例えば、前記被験体は、ＡＯＮに罹患した（視神経の脱髄を有する）眼を一方に、無症状の（視神経の脱髄を有していない）正常な他眼を一方に有している。
【０１２６】
したがって、いくつかの実施形態では、被験体、例えば、本明細書に記載するようなＭＳまたはＡＯＮ患者の、神経機能及び／または神経組織を保存し、及び／または障害を予防する（例えば、遅延させる）ことが可能な単剤療法または併用療法としての修復剤の慢性及び／または予防的投与を含む方法を本明細書に提供する。特定の実施形態では、修復剤の慢性的または予防的投与は、例えば、軸索／神経細胞の変性及び／または脱髄を低減することによって、ＡＯＮまたはＭＳなどの疾患の発症を予防するか、または疾患の進行を遅延させることができる。
【０１２７】
ＭＳなどの炎症性脱髄性ＣＮＳ疾患は、若年成人の非外傷性神経学的障害の一般的な原因である。ＭＳに対して現在承認されている治療法は、主に免疫調節性であり、ＣＮＳ修復に検出可能な直接的影響を与えるものではない。例えば、再発性ＭＳ患者の現在の標準治療は、免疫調節薬を用いて、再発の頻度と重症度、及び再発関連の身体障害の蓄積を低減し、ならびにうつ病、膀胱機能不全、または歩行障害に対して必要とされる様々な対症療法を提供することを含む。再発性ＭＳのためのいくつかの免疫調節薬が現在入手可能であり、インターフェロンβ（筋肉内［ＩＭ］［Ａｖｏｎｅｘ］または皮下［ＳＣ］［Ｒｅｂｉｆ（登録商標）］投与のインターフェロンβ１ａ）、インターフェロンβ１ｂ［Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ／Ｂｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）／Ｅｘｔａｖｉａ（登録商標）］）、酢酸グラチラマー（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））、ナタリズマブ（Ｔｙｓａｂｒｉ（登録商標））、及びフィンゴリモド（Ｇｉｌｅｎｙａ（登録商標））が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。短期クールのコルチコステロイドを時折投与することにより、複合的な効果が得られる。重篤な再発性ＭＳの症例では、化学療法剤、例えばミトキサントロン及びシクロホスファミドを、時折使用する。ＭＳの経過中の早期において、オリゴデンドロサイトによる軸索再髄鞘化がある程度生じるものの、ＣＮＳに対する内在的修復能力はしばしば失われ、不可逆的な組織損傷及び疾患関連障害の増加が生じる。
【０１２８】
いくつかの前臨床試験は、毒性傷害（クプリゾン）（Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，６５：３０４‐１５）、化学的損傷（リソホスファチジルコリン［ＬＰＣ］）、及び炎症性脱髄（ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質‐実験的自己免疫性脳脊髄炎［ＭＯＧ‐ＥＡＥ］）［Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎａｔ  Ｍｅｄ，１３：１２２８‐３３）；ならびに毒性（１‐メチル‐４‐フェニル‐１，２，３，６‐テトラヒドロピリジン［ＭＰＴＰ］）神経損傷（Ｉｎｏｕｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ，１０４：１４４３０‐５）、外傷性／高血圧性の視神経損傷（Ｆｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ，４９：９７５‐８５）及び脊髄損傷（Ｊｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，３３：３１１‐２０；Ｊｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，３９：２５８‐６７；Ｌｖ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔ，１７：２７０‐８）の動物モデルにおけるＣＮＳ再髄鞘化及び神経軸索保護を強化するうえでのＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用の役割を実証した。したがって、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体を用いてＬＩＮＧＯ‐１をアンタゴナイズすることにより、ＣＮＳにおける再髄鞘化及び神経軸索保護を増強することができる。抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体は、末梢投与後の軸索及びオリゴデンドロサイトの両方においてＬＩＮＧＯ‐１を遮断するのに十分な濃度でＣＮＳに到達することができる。これによって今度は、ＭＳ患者の脳に通常存在するオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）の分化を介して再髄鞘化を促進することができる。
【０１２９】
軸索及び神経細胞におけるＬＩＮＧＯ‐１に対する抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体の結合はまた、ＣＮＳ  内のＮｏｇｏ６６受容体１（ＮｇＲ１）／ｐ７５／ＬＩＮＧＯ‐１受容体複合体上のミエリンデブリによるシグナル伝達の遮断を介して、神経軸索保護を提供することもできる。ＭＳにおける軸索修復／神経突起再生の失敗は、少なくとも部分的に、損傷した軸索内のＮｇＲ１／ｐ７５／ＬＩＮＧＯ‐１複合体及びＮｇＲ１／ＴＲＯＹ／ＬＩＮＧＯ‐１複合体上のミエリンデブリのシグナル伝達に起因する可能性があるとの説が提唱されている（Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，７：２２１‐８）。ＮｇＲ１受容体複合体のシグナル伝達は、神経軸索損傷後に、軸索再生を妨げる（Ｙａｍａｓｈｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｍｏｌ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ，３２：１０５‐１１）だけでなく、神経生存も妨げる場合がある（Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，７：２２１‐８；Ｆｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ，４９：９７５‐８５；Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ，２８：７２７‐３５）。
【０１３０】
理論に拘泥することを望むものではないが、新規に発生したばかりの病変は、より大部分の軸索が保存されており、及びグリア性瘢痕からの干渉がより小さいことに少なくとも部分的に起因して、修復及び再髄鞘化がより容易であり得ると考えられている（Ｊａｓｍｉｎ  ａｎｄ  Ｏｈａｒａ（２００２）Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｔｉｓｔｓ  ８（３）：１９８‐２０３；Ｖｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ  ９  Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ９３‐１０３）。しかしながら、既存の病変に対するＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬の修復効果も起こり得る。例えば、既存の病変における抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体治療の有効性は、（１）慢性脱髄したＭＳ病変においてＯＰＣが見出されるという知見、（２）慢性脱髄した脳の再髄鞘化能力を示す動物研究、及び（３）確立された脱髄病変（例えば、クプリゾンモデル）におけるＬＩＮＧＯ‐１遮断による再髄鞘化の促進を示す研究によって裏付けられている。
【０１３１】
したがって、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体によるＬＩＮＧＯ‐１の拮抗作用は、ＭＳ及び急性視神経炎などのＣＮＳ脱髄性疾患における再髄鞘化及び神経軸索保護を促進し（したがって、軸索変性を予防し）、ＣＮＳ修復の向上と、それに対応する神経機能及び障害に対する有効な効果を導く。抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体は、ＭＳの病因の炎症成分に対して検出可能な免疫調節効果を有していないため、免疫調節薬との同時投与が望ましい。したがって、免疫調節薬、例えばＩＦＮ‐β剤、例えばＡｖｏｎｅｘ（登録商標）と；修復剤、例えば抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体との併用治療を開示する。
【０１３２】
本発明は、被験体、例えば、ヒト（例えば、ヒトＭＳ患者）における髄鞘形成、再髄鞘化、オリゴデンドロサイト数、または神経軸索保護の１つ以上を増強し、その一方で被験体の炎症状態を軽減する方法、組成物及びキットを少なくとも部分的に提供する。本明細書に記載のそのような方法、組成物及びキットは、ＣＮＳ障害、例えばＣＮＳ脱髄性疾患の治療に有用である。したがって、方法、組成物及びキットは、本明細書に記載のような修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）及び免疫調節薬を含む。
【０１３３】
他の実施形態では、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）を用いて視神経の炎症状態、例えば視神経炎（例えば、急性視神経炎（ＡＯＮ））を治療することができる。したがって、視神経の炎症状態、例えば視神経炎（例えば、ＡＯＮ）を治療するための修復剤を含む医薬組成物及び方法も開示する。
【０１３４】
本明細書中で使用する用語「修復剤」として、以下の１つ以上を引き起こす任意の薬剤が挙げられる：髄鞘形成、再髄鞘化の促進、神経軸索保護の増強、軸索伸長の増大、神経細胞発芽の増大、及び／またはオリゴデンドロサイト数の促進（例えば、実質的な（例えば、検出可能な）免疫調節効果を有さずに、オリゴデンドロサイトの生存または分化の１つ以上を増加させることによって）。一実施形態では、修復剤は、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬、例えば、本明細書に記載のようなＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬である。
【０１３５】
本発明の様々な態様を、以下のサブセクションにさらに詳細に記載する。
【０１３６】
定義
本明細書中で使用する以下の用語の各々は、本節においてその用語に関連付ける意味を有するものとする。
【０１３７】
本明細書中で使用する場合、冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、その冠詞の文法上の対象とする語が、１つまたは２つ以上（例えば、少なくとも１つ）であることを指す。
【０１３８】
用語「または」は、文脈上特に明示しない限り、「及び／または」という用語を意味するように本明細書中で用い、及びどちらも同じ意味で用いるものとする。
【０１３９】
用語「タンパク質」及び「ポリペプチド」は、本明細書中では同じ意味で用いる。
【０１４０】
「約（ａｂｏｕｔ）」及び「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」は、一般的に、測定の性質または精度を考慮して、測定した量に対する許容可能な程度の誤差を意味するものとする。例示的な誤差の程度は、所与の値または値の範囲の２０％以内（一般的には１０％以内、より一般的には５％以内）である。
【０１４１】
本明細書中で使用する用語「取得する」または「取得すること」とは、所望の結果、例えば値、例えば数値を「直接的に取得する」または「間接的に取得する」ことによって、その結果を所有、測定、または評価することを指す。「直接的に取得する」とは、プロセスを実施して（例えば、上肢及び／または下肢機能、及び／または歩行機能の測定値などの検査を実施して）、結果（例えば、値）を得ることを意味する。「間接的に取得する」とは、他の当事者または供給元（例えば、値を直接取得した第三者の臨床医または医療従事者）から結果、例えば値を受け取ることを指す。
【０１４２】
「ＣＮＳ障害」（例えば、「ＣＮＳ脱髄性疾患」）とは、脱髄、髄鞘形成、軸索損傷、及び／またはオリゴデンドロサイトもしくは神経細胞の機能不全もしくは死滅、または神経細胞性シナプス／連結性の喪失の１つ以上に関連する任意の疾患、障害または損傷であり得る。特定の実施形態において、ＣＮＳ障害は、軸索の髄鞘に損傷を引き起こすことによって神経系に影響を及ぼす。他の実施形態では、ＣＮＳ障害は、例えば脳及び脊髄における軸索伸長または神経突起伸長のＮｏｇｏ受容体１（ＮｇＲ１）媒介性阻害を含む。他の実施形態では、ＣＮＳ障害は、１つ以上の炎症性成分を有する。一実施形態では、ＣＮＳ障害（例えば、ＣＮＳ脱髄性疾患）は多発性硬化症である。一実施形態では、ＣＮＳ障害（例えば、ＣＮＳ脱髄性疾患）は、視神経の病態または障害、例えば、視神経炎、例えば、急性視神経炎である。
【０１４３】
ＣＮＳ障害（例えば、ＣＮＳ脱髄性疾患）は、その疾患または障害の少なくとも１つの症状を軽減、緩和、終結、減速または予防する場合に、「治療される」か、「阻害される」か、または「低減する」。治療または予防は、これらの用語の範疇で考えるうえで１００％である必要はなく、いくつかの実施形態では、疾患または障害の少なくとも１つの症状における少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％の低減または遅延で十分である。
【０１４４】
実施形態では、疾患または障害の少なくとも１つの症状が、例えば約４週、８週、１２週、２４週、３６週、４８週、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、またはそれ以上遅延する場合、ＣＮＳ障害は「予防」される。実施形態では、障害の最初の発症（例えば、症状の最初の発生）が、例えば約４週、８週、１２週、２４週、３６週、４８週、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、またはそれ以上遅延する場合、ＣＮＳ障害は予防される。
【０１４５】
本明細書中で使用する場合、いくつかの実施形態では、片眼または両眼の視神経の病態または障害の少なくとも１つの症状が、例えば、約４週、８週、１２週、２４週、３６週、４８週、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、またはそれ以上遅延する場合、視神経の病態または障害、例えば、視神経炎、例えば急性視神経炎は「予防」される。実施形態では、片眼または両眼の視神経の病態または障害の初期発症（例えば、症状の最初の発生）が、例えば、約４週、８週、１２週、２４週、３６週、４８週、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、またはそれ以上遅延する場合、すなわち機能が一定期間保存される場合、視神経の病態または障害、例えば視神経炎、例えば急性視神経炎は「予防」される。一実施例では、視神経炎の少なくとも１つの症状が、例えば、約４週、８週、１２週、２４週、３６週、４８週、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、またはそれ以上遅延する場合、視神経炎の症状を示さない正常な他眼における視神経炎は予防される。一実施例では、視神経炎の初期発症（例えば、症状の初期発症）が正常な他眼で、例えば約４週、８週、１２週、２４週、３６週、４８週、１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、またはそれ以上遅延する場合、視神経炎の症状を示さない正常な他眼における視神経炎は予防される。
【０１４６】
本明細書中で使用する場合、視神経の病態または障害、例えば視神経炎、例えば急性視神経炎は、この疾患の再発または再燃が、軽減、遅滞、減速、遅延または予防される場合に、「治療される」か、「阻害される」か、または「低減する」。被験体の疾患状態の判定を支援するために使用し得る急性視神経炎の例示的な臨床症状として、視力障害、浮腫、炎症、視神経及び軸索を覆う髄鞘の損傷または脱髄、網膜線維の喪失、網膜神経節細胞層の喪失、視野欠損、彩度低下、色弱、眼の痛み、視力低下、ウートホフ徴候、視神経乳頭の腫脹、または相対性求心性瞳孔反応欠損（ｒｅｌａｔｉｖｅ  ａｆｆｅｒｅｎｔ  ｐａｐｉｌｌａｒｙ  ｄｅｆｅｃｔ）が挙げられる。実施形態において、臨床試験成績を用いて、例えば視神経損傷などの被験体の疾患状態（例えば、全視野視覚誘発電位の振幅または多局所視覚誘発電位によって測定されるような）、視神経の潜時（例えば、全視野視覚誘発電位または多局所視覚誘発電位によって測定されるような）、網膜神経線維層または網膜神経節細胞層などの網膜層の厚さ（例えば、スペクトルドメイン光干渉断層撮影法によって測定されるような）、視覚機能（例えば、視力、例えば、低コントラストまたは高コントラスト文字視認性によって測定されるような）、または視覚の生活の質（例えば、ＮＩＨ‐ＮＥＩ  ｖｉｓｕａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅまたはｎｅｕｒｏ‐ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  ＮＯＳ‐１０などの患者報告アウトカム調査によって測定されるような）を判定することを支援することができる。
【０１４７】
本明細書中で使用する場合、「正常な」眼（例えば、「正常な他眼」）とは、視神経の病態または障害、例えば視神経炎、例えば急性視神経炎の１つ以上の症状を示さない被験体の眼のことである。
【０１４８】
本明細書中で使用する場合、多発性硬化症は、この疾患の再発または再燃が、軽減、減速、遅延、または予防される場合に、「治療される」か、「阻害される」か、または「低減」する。被験体の疾患状態の判定を支援するために使用し得る多発性硬化症の例示的な臨床症状として、例えば、刺痛、痺れ、筋力低下、平衡感覚障害、霧視または複視、不明瞭発語、突発性麻痺、協調運動障害、認知困難、疲労、熱感受性、痙攣、眩暈、振戦、歩行障害、発語／嚥下障害、及びＭＲＩなどの撮像技術によって評価する病変の程度が挙げられる。ＭＳの臨床的徴候は、例えば、神経学的検査及び長距離歩行に基づくＥＤＳＳ評価システムを用いて、日常的に分類及び標準化される。スケールの下限（１〜５．５）については、１つの完全なステップの減少は、有効なＭＳ治療（Ｋｕｒｔｚｋｅ，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．３６：５７３‐７９，１９９４）を示し、一方、１つの完全なステップの増加は、疾患の進行または悪化（例えば、憎悪）を示す。スケールの上限（５〜７）については、通常、半分の点が改善（減少）または悪化（増加）を示す。
【０１４９】
本明細書中で使用する場合、「総合障害度評価尺度」または「ＥＤＳＳ」は、医療行為における慣習的な意味を有することを意図する。ＥＤＳＳは、ＭＳの分類及び標準化において頻繁に用いられる評価システムである。許容されるスコアの範囲は、０（正常）〜１０（ＭＳに起因する死）である。一般的に、約４〜６のＥＤＳＳスコアを有する患者は中程度の身体障害（例えば、限定的な歩行能力）を有し、一方約７または８のＥＤＳＳスコアを有する患者は、重度の身体障害（例えば、車椅子を必要とする）を有する。より詳細には、１〜３の範囲のＥＤＳＳスコアは、完全に歩行可能であるが１つ以上の機能系に何らかの徴候を有するＭＳ患者を示し；３より高く４．５までの範囲のＥＤＳＳスコアは、中程度〜比較的重度の身体障害を示し；５〜５．５のＥＤＳＳスコアは、完全な日常活動を損なうかまたは妨げる身体障害を示し；６〜６．５のＥＤＳＳスコアは、歩行のための断続的もしくは持続的な、または片側もしくは両側の持続的介助（杖、松葉杖または装具）を必要とするＭＳ患者を示し；７〜７．５のＥＤＳＳスコアは、ＭＳ患者が、補助がある場合でも５ｍを超えて歩行することが不可能であり、本質的に車椅子に制限されることを意味し；８〜８．５のＥＤＳＳスコアは、寝たきり状態の患者を意味し；及び９〜１０のＥＤＳＳスコアは、ＭＳ患者が寝たきり状態であり、ならびにＭＳによって死に至るまでの間、効率的な情報伝達や、食事及び嚥下が徐々に不可能になっていることを意味する。
【０１５０】
本明細書で使用する場合、「疾患の進行」とは、被験体における１つ以上の症状及び／または障害の悪化の尺度（例えば、１つ以上の尺度）を含む。特定の実施形態では、疾患の進行は、１つ以上の症状及び／または障害の経時的な着実な悪化として評価され、これは、期間が比較的短い再発とは対照的である。特定の実施形態では、疾患の進行を、再発型ＭＳ（例えば、ＲＲＭＳ）または進行型ＭＳを有する被験体（例えば、一次性または二次性進行型多発性硬化症（それぞれＰＰＭＳまたはＳＰＭＳ）を有する被験体、または進行再発型ＭＳ（ＰＲＭＳ）を有する被験体）において評価する。
【０１５１】
特定の実施形態では、視神経の病態または障害、例えば片眼または両眼における、例えば視神経炎、例えば急性視神経炎などに罹患する被験体において、疾患の進行を評価する。いくつかの実施形態では、疾患の進行の評価には、本明細書に記載の急性視神経炎の臨床症状または結果の測定が含まれる。
【０１５２】
他の実施形態では、疾患の進行の評価には、上肢機能の測定（例えば、９ＨＰアセスメント）が含まれる。代替的にまたはこれと組み合わせて、疾患の進行には、下肢機能の測定が含まれる。代替的にまたはこれと組み合わせて、疾患の進行には、歩行機能、例えば近距離歩行機能（例えば、Ｔ２５ＦＷ）の測定が含まれる。代替的にまたはこれと組み合わせて、疾患の進行には、歩行機能の測定、例えば、長距離歩行機能（例えば、６分間歩行試験）が含まれる。一実施形態では、疾患の進行には、ＥＤＳＳ歩行機能以外の歩行機能の測定が含まれる。一実施形態では、疾患の進行には、上肢機能の測定（例えば、９ＨＰアセスメント）及び歩行機能の測定、例えば近距離歩行機能（例えば、Ｔ２５ＦＷ）が含まれる。一実施形態では、疾患の進行には、上肢機能の測定（例えば、９ＨＰアセスメント）及び下肢機能の測定が含まれる。一実施形態では、疾患の進行には、上肢機能の測定（例えば、９ＨＰアセスメント）、下肢機能の測定、ならびに歩行機能の測定、例えば、短距離歩行機能（例えば、Ｔ２５ＦＷ）及び／または遠距離歩行機能（例えば、時間（例えば、６分間）歩行試験（例えば、６ＭＷＴ））の測定が含まれる。一実施形態では、Ｔ２５ＦＷ、６ＭＷＴ及び９ＨＰアセスメントのうちの１つ、２つ、またはそれらの組合せを用いて、疾患進行度を取得することができる。歩行機能（例えば、短距離歩行機能（例えば、Ｔ２５ＦＷ）または長距離歩行機能（例えば、時間（例えば、６分間）歩行試験（例えば、６ＭＷＴ））及び／または上肢機能の測定（例えば、９ＨＰアセスメント）をＥＤＳＳと組み合わせて用いて、ＭＳ、例えば進行型ＭＳを評価することができる。
【０１５３】
一実施形態において、発症者は、以下の基準の少なくとも１つ、２つ、またはすべてを反映する疾患進行度を有する被験体である：
ａ．Ｔ２５ＦＷで確認される進行：少なくとも３、４、５、または６か月の間隔を空けた第二時点において確認を行った２５フィート歩行の所要時間が、ベースラインの歩行に比べて少なくとも１５％または２０％増加している；
ｂ．時間（例えば、６分間）歩行試験（例えば、６ＭＷＴ）で確認される進行：少なくとも３、４、５、または６か月の間隔を空けた第二時点において確認を行った歩行の所要時間が、ベースラインの歩行に比べて少なくとも１０％、１５％または２０％増加している；
ｃ．９ＨＰで確認される進行：少なくとも３、４、５、または６か月の間隔を空けた第二時点において確認を行った９ホールペグの所要時間が、ベースラインの所要時間に比べて少なくとも１５％または２０％増加している。９ＨＰの進行はいずれの手でも起こり得るが、同じ側の手で確認する必要がある；及び／または、
ｄ．ＥＤＳＳで確認される進行：
下記の（ｉ）または（ｉｉ）のいずれかまたは両方を、少なくとも３、４、５、または６か月の間隔（通常は少なくとも６か月の間隔）を空けた第二検査において確認する場合において、
（ｉ）ＥＤＳＳ合計スコアの変化を神経機能の変化（例えば、神経系における１つ以上の変化）の評価によって判定する（または主に判定する）場合では、ＥＤＳＳ合計スコアがベースラインから少なくとも１ポイント増加する；及び／または、
（ｉｉ）ＥＤＳＳ合計スコアの変化を歩行機能の変化によって判定する（または主に判定する）場合では、ＥＤＳＳ合計スコアがベースラインから少なくとも０．５ポイント増加する。
【０１５４】
上記の試験（例えば、Ｔ２５ＦＷ、６ＭＷＴ、ＥＤＳＳ、または９ＨＰ）のベースライン値は、最良ベースライン値または平均ベースライン値を使用して決定することができる。
【０１５５】
本明細書中で使用する場合、「ベースライン」とは、療法（例えば、本明細書に記載の療法）の適用前の値または測定値を指す。実施形態において、「他眼」に関する「ベースライン」とは、罹患した眼（例えば、視神経の病態または障害、例えば、視神経炎からの影響を被っている）ではない側の被験体の眼の、療法（例えば、本明細書に記載の療法）の適用前の値または測定値を指す。
【０１５６】
本明細書中で使用する場合、「応答性」、治療に「応答する」、及びこの用語の他の形態は、記載するような療法による治療に対する被験体の反応を指す。一例として、被験体の多発性硬化症の少なくとも１つの症状（例えば、疾患の悪化）が、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上、低下または遅延する場合、ＭＳ被験体は療法に対して応答するといえる。別の例では、例えば、上肢または下肢機能の測定値、歩行機能の測定値、または総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）のアセスメントのうちの１つ以上の任意の適切な測定法によって測定するような、被験体における多発性硬化症の少なくとも１つの症状が、約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％またはそれ以上低下する場合、ＭＳ被験体は療法に対して応答するといえる。別の例では、被験体の疾患進行に要する時間が増加している場合、ＭＳ被験体は療法による治療に応答するといえる。いくつかの方法を使用して、本明細書に記載するようなアセスメントを含む治療に、患者が応答するかどうかを判定することができる。
【０１５７】
特定の実施形態では、被験体における改善は、以下の１つ以上によって定義される：
ａ．ＥＤＳＳの、ベースラインスコア≦６．０からの、≧１．０ポイントの減少；
ｂ．Ｔ２５ＦＷの、ベースラインからの≧１５％の改善；
ｃ．９ＨＰＴの、ベースラインからの≧１５％の改善；または、
ｄ．ＰＡＳＡＴまたはＳＤＭＴの、ベースラインからの≧１０％（例えば、１０％、１２％、２０％、３０％）の改善。
【０１５８】
一例として、視神経炎（例えば、急性視神経炎）に罹患する被験体は、被験体の視神経炎の少なくとも１つの症状が、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上低下する場合、療法による治療に応答するといえる。一例において、急性視神経炎に罹患する被験体は、例えば、視神経損傷の尺度、視神経潜時の尺度、網膜層の厚さの尺度、視機能の尺度、または視覚の生活の質の尺度のうちの１つ以上の任意の適切な尺度によって判定する被験体の急性視神経炎の少なくとも１つの症状が、約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％またはそれ以上低下する場合、療法による治療に応答するといえる。
【０１５９】
「非応答者」または「発症者」とは、療法（例えば、本明細書に記載の療法）に応答して、例えば、上肢または下肢機能の尺度、歩行機能の尺度、認知機能の尺度、総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）のアセスメント、視神経損傷の尺度、視神経潜時の尺度、網膜層の厚さの尺度、視機能の尺度、または視覚の生活の質の尺度のうちの１つ以上の任意の適切な尺度によって判定する、例えば、被験体の多発性硬化症または視神経炎（例えば、急性視神経炎）の少なくとも１つの症状または障害が、約５％未満低下する場合の、被験体、例えばＭＳ患者または視神経炎（例えば、急性視神経炎）患者を指す。
【０１６０】
本明細書中に開示する方法、組成物及びキットは、指定の配列、またはそれに実質的に同一または類似の配列、例えば指定の配列と少なくとも８５％、９０％、９５％同一であるか、またはそれ以上同一である配列を有するポリペプチド及び核酸を包含する。アミノ酸配列の文脈において、用語「実質的に同一の」とは、本明細書では、第一及び第二のアミノ酸配列が共通の構造ドメイン及び／または共通の機能活性を有することができるように、第二のアミノ酸配列中のアラインメントしたアミノ酸残基とｉ）同一の、またはｉｉ）その保存的置換のアミノ酸残基を十分にまたは最小限に含む第一のアミノ酸を指すために用いる。例えば、本明細書に記載する配列と少なくとも約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の相同性を有する共通の構造ドメインを含むアミノ酸配列のことを、実質的に同一であるという。
【０１６１】
ヌクレオチド配列の文脈において、用語「実質的に同一」とは、本明細書では、第一及び第二のヌクレオチド配列が共通の機能活性を有するポリペプチドをコードするか、または共通の構造ポリペプチドドメインもしくは共通の機能ポリペプチド活性をコードするように、第二のヌクレオチド配列中のアラインメントしたヌクレオチドと同一のヌクレオチドを十分にまたは最小限に含む第一のヌクレオチド配列を指すために用いる。例えば、本明細書に記載する配列と少なくとも約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の相同性を有するヌクレオチド配列のことを、実質的に同一であるという。
【０１６２】
配列間の相同性または配列同一性（これらの用語は本明細書中では同じ意味で使用する）の計算を、以下のように実施する。
【０１６３】
２つのアミノ酸配列または２つの核酸配列の間の同一性の割合を決定するために、配列を最適な比較のためにアラインメントする（例えば、最適なアライメントのために、第一及び第二のアミノ酸または核酸の一方または両方にギャップを導入することができ、また、非相同配列は、比較目的のために無視することができる）。好ましい実施形態では、比較目的のためにアラインメントする参照配列の長さは、元の参照配列の長さの少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、６０％、さらにより好ましくは少なくとも７０％、８０％、９０％、１００％である。次いで、対応するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置のアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較する。第一の配列中の位置を、第二の配列中の対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドが占有する場合、分子はその位置で同一である（本明細書中で使用する場合、アミノ酸または核酸の「同一性」はアミノ酸または核酸の「相同性」と同じ意味である）。
【０１６４】
２つの配列間の同一性の割合は、その２つの配列の最適なアラインメントのために導入する必要があるギャップの数及び各ギャップの長さを考慮に入れたうえでの、それらの配列が共有する同一の位置の数の関数である。
【０１６５】
配列の比較及び２つの配列間の同一性の割合の決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成することができる。好ましい実施形態では、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍで入手可能）のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎと  Ｗｕｎｓｃｈ（（１９７０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４４‐４５３）のアルゴリズムを用いて、Ｂｌｏｓｓｕｍ  ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックス、ならびに１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップウェイト、及び１、２、３、４、５、または６のレングスウェイトを使用して、２つのアミノ酸配列間の同一性の割合を決定する。さらに別の好ましい実施形態では、２つのヌクレオチド配列間の同一性の割合は、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍで入手可能）のＧＡＰプログラムを使用し、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックス、ならびに４０、５０、６０、７０、または８０のギャップウェイト、及び１、２、３、４、５、または６のレングスウェイトを用いて決定する。特に好ましいパラメータセット（及び他に指定のない限り、使用すべきパラメータセット）は、１２のギャップペナルティ、４のギャップ伸長ペナルティ、及び５のフレームシフトギャップペナルティを有するＢｌｏｓｓｕｍ  ６２スコアリングマトリックスである。
【０１６６】
２つのアミノ酸配列またはヌクレオチド配列間の同一性の割合は、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれているＥ．ＭｅｙｅｒｓとＷ．Ｍｉｌｌｅｒのアルゴリズム（（１９８９）ＣＡＢＩＯＳ，４：１１‐１７）を使用し、ＰＡＭ１２０  ｗｅｉｇｈｔ  ｒｅｓｉｄｕｅ  ｔａｂｌｅ、ギャップレングスペナルティ１２及びギャップペナルティ４を用いて決定することができる。
【０１６７】
本明細書中に記載する核酸及びタンパク質配列を「クエリー配列」として使用し、公開データベースに対する検索を実施し、例えば、他のファミリーメンバーまたは関連配列を同定することができる。そのような検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ，ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３‐１０のＮＢＬＡＳＴ及びＸＢＬＡＳＴプログラム（バージョン２．０）を用いて行うことができる。ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワード長＝１２を用いてＢＬＡＳＴヌクレオチド検索を実行し、本発明のＢＭＰ‐１０／ＢＭＰ‐１０受容体核酸（配列番号１）分子と相同なヌクレオチド配列を得ることができる。ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワード長＝３を用いてＢＬＡＳＴタンパク質検索を実行し、本発明のＢＭＰ‐１０／ＢＭＰ‐１０受容体（配列番号１）タンパク質分子に相同なアミノ酸配列を得ることができる。比較を目的としたギャップありのアラインメントを得るために、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，  （１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９‐３４０２に記載されるようなＧａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴを利用できる。ＢＬＡＳＴ及びＧａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴ及びＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメータを使用することができる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ参照。
【０１６８】
ポリペプチドの断片、誘導体、類似体、または変異体、及びそれらの任意の組合せも含まれる。用語「断片」、「変異体」、「誘導体」及び「類似体」は、対応する天然ポリペプチドの少なくともいくつかの性質を保持している任意のポリペプチドを含む。ポリペプチドの断片には、タンパク質分解断片ならびに欠失断片が含まれる。ポリペプチドの変異体には、上記のような断片、及びアミノ酸置換、欠失または挿入によって変化したアミノ酸配列を有するポリペプチドが含まれる。変異体は、天然に存在してもよいし、天然に存在しないものであってもよい。天然に存在しない変異体は、当該分野で公知の突然変異誘発技術を用いて産生してもよい。変異体ポリペプチドは、保存的または非保存的アミノ酸置換、欠失または付加を含む場合がある。
【０１６９】
用語「機能的変異体」とは、天然に存在する配列と実質的に同一のアミノ酸配列を有するか、または実質的に同一のヌクレオチド配列によってコードされており、天然に存在する配列の１つ以上の活性を有することが可能なポリペプチドを指す。
【０１７０】
ポリペプチドの誘導体とは、天然のポリペプチドには認められない追加の特徴を示すように改変したポリペプチドである。例として、融合タンパク質が挙げられる。
【０１７１】
「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基を、類似の側鎖を有するアミノ酸残基に置換することである。同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野で定義されている。これらのファミリーとして、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分枝側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖（例えばチロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸が挙げられる。
【０１７２】
本発明の様々な態様を以下にさらに詳細に記載する。追加の定義を、本明細書の随所において記載する。
【０１７３】
修復剤
本明細書に記載の方法、組成物及びキットは、修復剤（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬）及び免疫調節薬の組合せを含む。一実施形態では、修復剤は、ＬＲＲ及びＩｇドメイン含有Ｎｏｇｏ受容体相互作用タンパク質（「ＬＩＮＧＯ」、例えばＬＩＮＧＯ‐１）の拮抗薬である。例えば、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬は、ＬＩＮＧＯ‐１、例えばヒトＬＩＮＧＯ‐１の発現または活性を阻害または低減することができる。一実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬は、ＮｇＲ１、ｐ７５、及びＬＩＮＧＯ‐１；及び／またはＮｇＲ１、ＴＡＪ（ＴＲＯＹ）、及びＬＩＮＧＯ‐１の複合体（例えば、機能性シグナル伝達複合体）の形成及び／または活性を阻害または低減する。別の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬は、ＮｇＲ１に対するＬＩＮＧＯ‐１の結合を阻害または低減する。
【０１７４】
ＬＩＮＧＯ‐１及びＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬
以前はＳｐ３５と呼ばれていたＬＩＮＧＯ‐１は、神経細胞及びオリゴデンドロサイトにおいて成体ＣＮＳにおいて選択的に発現する細胞表面糖タンパク質である。ＬＩＮＧＯ‐１は、３つの他のパラログ：ＬＩＮＧＯ‐２（ＧＩ：１２３０９６３０、６１％のタンパク質同一性）、ＬＩＮＧＯ‐３（ＧＩ：２３３４２６１５、５６％の同一性）、ＬＩＮＧＯ‐４（ＧＩ：２１２１１７５２、４４％の同一性）を含むタンパク質ファミリーのメンバーである。ＬＩＮＧＯ‐１は、９９．５％の同一性を共有するヒト及びマウスオーソログで高度に保存されている。ノーザンブロット分析により、ＬＩＮＧＯ‐１はヒトの脳で高度に発現することが見出され、非神経組織では検出できなかった（Ｂａｒｒｅｔｔｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，３４：５１９‐３８；Ｃａｒｉｍ‐Ｔｏｄｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｅｕｒ  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，１８：３１６７‐８２；Ｌｌｏｒｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｄｅｖ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ，６８：５２１‐４１；Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，７：２２１‐８；Ｏｋａｆｕｊｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒ  Ｐａｔｔｅｒｎｓ，６：５７‐６２；Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ，４０４：６１‐６；Ｓｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｎｅｕｒｏｎ，４５：３５３‐９）。ＬＩＮＧＯ‐１はまた、２００６年７月７日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２６２７１、２００４年３月１７日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００４／００８３２３、２００５年６月２４日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２２８８１、及び２００８年１月９日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００８／０００３１６にも詳細に記載されており、これらの各々は参照としてその全体を本明細書に援用する。
【０１７５】
ＬＩＮＧＯ‐１は、オリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）及び神経細胞の両方において選択的に発現する。ＬＩＮＧＯ‐１は、オリゴデンドロサイトの分化、髄鞘形成、及び再髄鞘化の負の制御因子として機能し；オリゴデンドロサイトによる軸索の髄鞘形成を妨げる（Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２７：２２０‐５；Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，８：７４５‐５１；Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｉｎｔ  Ｊｏｕｒｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ４０（１０）：１９７１‐８；Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，６５：３０４‐１５）。損傷後にＬＩＮＧＯ‐１の軸索及び神経細胞の発現が増加する（Ｊｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，３３：３１１‐２０）。ＬＩＮＧＯ‐１の発現は、オリゴデンドロサイトによる軸索の髄鞘形成を妨げる。いくつかの前臨床試験は、毒性（クプリゾン）（Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，６５：３０４‐１５）、化学傷害（リゾホスファチジルコリン［ＬＰＣ］）、及び炎症性（ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質‐実験的自己免疫性脳脊髄炎［ＭＯＧ‐ＥＡＥ］［Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎａｔ  Ｍｅｄ，１３：１２２８‐３３）脱髄；及び毒性（１‐メチル‐４‐フェニル‐１，２，３，６‐テトラヒドロピリジン［ＭＰＴＰ］）神経損傷（Ｉｎｏｕｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ，１０４：１４４３０‐５）、外傷性／高血圧性視神経損傷（Ｆｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ，４９：９７５‐８５）及び脊髄損傷（Ｊｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，３３：３１１‐２０；Ｊｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，３９：２５８‐６７；Ｌｖ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔ，１７：２７０‐８）の動物モデルにおいて、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用が、ＣＮＳ再髄鞘化及び神経軸索保護を促進することを実証した。軸索及びオリゴデンドロサイトにおけるＬＩＮＧＯ‐１の阻害によって生じるＣＮＳのＮｇＲ１受容体複合体上のミエリンデブリ及び／または硫酸化プロテオグリカンによるシグナル伝達の遮断を介して、再髄鞘化及び神経軸索保護を提供することができる。これは、次に、ＭＳ患者の脳に通常存在するオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）の分化を介して再髄鞘化を促進し得る。したがって、ＬＩＮＧＯ‐１の拮抗作用は、例えばオリゴデンドロサイトによる軸索の髄鞘形成または再髄鞘化を促進し、ＣＮＳにおける、及び例えば多発性硬化症（ＭＳ）及び急性視神経炎などのＣＮＳ脱髄性疾患における神経軸索保護を促進し、ＣＮＳ修復の向上をもたらす。
【０１７６】
ＬＩＮＧＯ‐１はまた、ＬＲＲＮ６、ＬＲＲＮ６Ａ、ＦＬＪ１４５９４、ＬＥＲＮ１、ＭＧＣ１７４２２及びＵＮＱ２０１の名称で当該技術分野において公知である。ヒト完全長野生型ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドは、１４個のロイシンリッチリピート（Ｎ及びＣ末端キャップを含む）、Ｉｇドメイン、膜貫通領域、及び細胞質ドメインからなるＬＲＲドメインを含む。細胞質ドメインは、標準的なチロシンリン酸化部位を含む。さらに、天然のＬＩＮＧＯ‐１タンパク質は、シグナル配列、ＬＲＲ‐Ｃ末端ドメイン（ＬＲＲＣＴ）とＩｇドメインとの間の短い塩基性領域、及びＩｇドメインと細胞質ドメインとの間の膜貫通領域を保有する。ヒトＬＩＮＧＯ‐１遺伝子（配列番号５２）は、代替となる翻訳開始コドンを保有しているため、６つの追加のアミノ酸、すなわちＭＱＶＳＫＲ（配列番号８７）は、ＬＩＮＧＯ‐１シグナル配列のＮ末端に存在してもよいし、存在していなくてもよい。表２は、本明細書に配列番号５１として示すＬＩＮＧＯ‐１アミノ酸配列に基づく、アミノ酸残基番号によるＬＩＮＧＯ‐１ドメイン及び他の領域を列挙する。ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドは、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００４／０８５６４８において、より詳細に特徴づけられており、前記文献はその全体を参照として本明細書に援用する。
【表２】
2018504400.tif 000003
【０１７７】
ヒト及びラット体内のＬＩＮＧＯ‐１の組織分布及び発生過程における発現が研究されている。実験動物（ラット）モデルにおけるＬＩＮＧＯ‐１生物学が研究されている。ノーザンブロット及び免疫組織化学染色による測定によれば、ラットＬＩＮＧＯ‐１の発現は神経細胞及びオリゴデンドロサイトに局在する。ラットＬＩＮＧＯ‐１  ｍＲＮＡ発現レベルは、発生過程中に調節を受け、出生直後、すなわち、およそ出生後１日目にピークに達する。ラット脊髄横断損傷モデルにおいて、ＲＴ‐ＰＣＲでの測定によれば、ＬＩＮＧＯ‐１は、損傷部位でアップレギュレートされる。Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔｕｒｅ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．７：２２１‐２２８（２００４）参照。
【０１７８】
ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドの種々の構造的及び機能的ドメインを含むアミノ酸の文脈において、用語「約」は、特に言及する値及びいくつかの（例えば、１０個、９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個の）アミノ酸より大きいかまたは小さい値を含む。表２に列挙するこれらのドメインの位置はコンピュータグラフィックスから予測したものであるため、当業者であれば、ドメインを構成するアミノ酸残基が、そのドメインの定義に用いる基準に応じてわずかに（例えば、約１〜１５残基だけ）変動する可能性があることを認識するであろう。
【０１７９】
全長野生型ＬＩＮＧＯ‐１は、ＮｇＲ１に結合する。ＰＣＴ公開ＷＯ２００４／０８５６４８参照。ＬＩＮＧＯ‐１はオリゴデンドロサイト内で発現し、ＬＩＮＧＯ‐１タンパク質は、オリゴデンドロサイトを介した軸索の髄鞘形成の調節に関与する。米国特許出願公開第２００６／０００９３８８Ａ１号参照。前記文献はその全体を参照として本明細書に援用する。
【０１８０】
全長ＬＩＮＧＯ‐１分子のヌクレオチド配列は以下の通りである：
ＡＴＧＣＴＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＴＧＡＧＧＡＧＣＡＴＧＣＣＣＡＧＣＣＣＣＣＴＣＣＴＧＧＣＣＴＧＣＴＧ  ＧＣＡＧＣＣＣＡＴＣＣＴＣＣＴＧＣＴＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＡＧＴＧＣＴＧＴＣＡＧＧＣＴＣＧＧＣＣＡ  ＣＧＧＧＣＴＧＣＣＣＧＣＣＣＣＧＣＴＧＣＧＡＧＴＧＣＴＣＣＧＣＣＣＡＧＧＡＣＣＧＣＧＣＴＧＴＧＣＴＧ  ＴＧＣＣＡＣＣＧＣＡＡＧＣＧＣＴＴＴＧＴＧＧＣＡＧＴＣＣＣＣＧＡＧＧＧＣＡＴＣＣＣＣＡＣＣＧＡＧＡＣ  ＧＣＧＣＣＴＧＣＴＧＧＡＣＣＴＡＧＧＣＡＡＧＡＡＣＣＧＣＡＴＣＡＡＡＡＣＧＣＴＣＡＡＣＣＡＧＧＡＣＧ  ＡＧＴＴＣＧＣＣＡＧＣＴＴＣＣＣＧＣＡＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＣＴＧＧＡＧＣＴＣＡＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣ  ＧＴＧＡＧＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＣＣＣＧＧＣＧＣＣＴＴＣＡＡＣＡＡＣＣＴＣＴＴＣＡＡＣＣＴＣＣＧＧＡＣ  ＧＣＴＧＧＧＴＣＴＣＣＧＣＡＧＣＡＡＣＣＧＣＣＴＧＡＡＧＣＴＣＡＴＣＣＣＧＣＴＡＧＧＣＧＴＣＴＴＣＡ  ＣＴＧＧＣＣＴＣＡＧＣＡＡＣＣＴＧＡＣＣＡＡＧＣＴＧＧＡＣＡＴＣＡＧＣＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＴＧＴＴ  ＡＴＣＣＴＧＣＴＧＧＡＣＴＡＣＡＴＧＴＴＴＣＡＧＧＡＣＣＴＧＴＡＣＡＡＣＣＴＣＡＡＧＴＣＡＣＴＧＧＡ  ＧＧＴＴＧＧＣＧＡＣＡＡＴＧＡＣＣＴＣＧＴＣＴＡＣＡＴＣＴＣＴＣＡＣＣＧＣＧＣＣＴＴＣＡＧＣＧＧＣＣ  ＴＣＡＡＣＡＧＣＣＴＧＧＡＧＣＡＧＣＴＧＡＣＧＣＴＧＧＡＧＡＡＡＴＧＣＡＡＣＣＴＧＡＣＣＴＣＣＡＴＣ  ＣＣＣＡＣＣＧＡＧＧＣＧＣＴＧＴＣＣＣＡＣＣＴＧＣＡＣＧＧＣＣＴＣＡＴＣＧＴＣＣＴＧＡＧＧＣＴＣＣＧ  ＧＣＡＣＣＴＣＡＡＣＡＴＣＡＡＴＧＣＣＡＴＣＣＧＧＧＡＣＴＡＣＴＣＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＣＴＣＴＡＣＣ  ＧＡＣＴＣＡＡＧＧＴＣＴＴＧＧＡＧＡＴＣＴＣＣＣＡＣＴＧＧＣＣＣＴＡＣＴＴＧＧＡＣＡＣＣＡＴＧＡＣＡ  ＣＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＴＡＣＧＧＣＣＴＣＡＡＣＣＴＧＡＣＧＴＣＣＣＴＧＴＣＣＡＴＣＡＣＡＣＡＣＴＧ  ＣＡＡＴＣＴＧＡＣＣＧＣＴＧＴＧＣＣＣＴＡＣＣＴＧＧＣＣＧＴＣＣＧＣＣＡＣＣＴＡＧＴＣＴＡＴＣＴＣＣ  ＧＣＴＴＣＣＴＣＡＡＣＣＴＣＴＣＣＴＡＣＡＡＣＣＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＴＴＧＡＧＧＧＣＴＣＣＡＴＧ  ＴＴＧＣＡＴＧＡＧＣＴＧＣＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＧＣＧＧＧＣＡＧＣＴ  ＧＧＣＣＧＴＧＧＴＧＧＡＧＣＣＣＴＡＴＧＣＣＴＴＣＣＧＣＧＧＣＣＴＣＡＡＣＴＡＣＣＴＧＣＧＣＧＴＧＣ  ＴＣＡＡＴＧＴＣＴＣＴＧＧＣＡＡＣＣＡＧＣＴＧＡＣＣＡＣＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＴＣＡＧＴＣＴＴＣＣＡＣ  ＴＣＧＧＴＧＧＧＣＡＡＣＣＴＧＧＡＧＡＣＡＣＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＣＴＣＣＡＡＣＣＣＧＣＴＧＧＣＣＴＧ  ＣＧＡＣＴＧＴＣＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＧＧＴＧＴＴＣＣＧＧＣＧＣＣＧＣＴＧＧＣＧＧＣＴＣＡＡＣＴＴＣＡ  ＡＣＣＧＧＣＡＧＣＡＧＣＣＣＡＣＧＴＧＣＧＣＣＡＣＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＧＴＣＣＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＧ  ＴＴＣＡＡＧＧＡＣＴＴＣＣＣＴＧＡＴＧＴＧＣＴＡＣＴＧＣＣＣＡＡＣＴＡＣＴＴＣＡＣＣＴＧＣＣＧＣＣＧ  ＣＧＣＣＣＧＣＡＴＣＣＧＧＧＡＣＣＧＣＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＡＧＧＴＧＴＴＴＧＴＧＧＡＣＧＡＧＧＧＣＣ  ＡＣＡＣＧＧＴＧＣＡＧＴＴＴＧＴＧＴＧＣＣＧＧＧＣＣＧＡＴＧＧＣＧＡＣＣＣＧＣＣＧＣＣＣＧＣＣ��ＴＣ  ＣＴＣＴＧＧＣＴＣＴＣＡＣＣＣＣＧＡＡＡＧＣＡＣＣＴＧＧＴＣＴＣＡＧＣＣＡＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＧＣＧ  ＧＣＴＣＡＣＡＧＴＣＴＴＣＣＣＴＧＡＴＧＧＣＡＣＧＣＴＧＧＡＧＧＴＧＣＧＣＴＡＣＧＣＣＣＡＧＧＴＡＣ  ＡＧＧＡＣＡＡＣＧＧＣＡＣＧＴＡＣＣＴＧＴＧＣＡＴＣＧＣＧＧＣＣＡＡＣＧＣＧＧＧＣＧＧＣＡＡＣＧＡＣ  ＴＣＣＡＴＧＣＣＣＧＣＣＣＡＣＣＴＧＣＡＴＧＴＧＣＧＣＡＧＣＴＡＣＴＣＧＣＣＣＧＡＣＴＧＧＣＣＣＣＡ  ＴＣＡＧＣＣＣＡＡＣＡＡＧＡＣＣＴＴＣＧＣＴＴＴＣＡＴＣＴＣＣＡＡＣＣＡＧＣＣＧＧＧＣＧＡＧＧＧＡＧ  ＡＧＧＣＣＡＡＣＡＧＣＡＣＣＣＧＣＧＣＣＡＣＴＧＴＧＣＣＴＴＴＣＣＣＣＴＴＣＧＡＣＡＴＣＡＡＧＡＣＣ  ＣＴＣＡＴＣＡＴＣＧＣＣＡＣＣＡＣＣＡＴＧＧＧＣＴＴＣＡＴＣＴＣＴＴＴＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＧＴＣＣＴ  ＣＴＴＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＣＴＧＣＴＧＴＴＴＣＴＣＴＧＧＡＧＣＣＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＣＡＡＣＡＣＡＡ  ＡＧＣＡＣＡＡＣＡＴＣＧＡＧＡＴＣＧＡＧＴＡＴＧＴＧＣＣＣＣＧＡＡＡＧＴＣＧＧＡＣＧＣＡＧＧＣＡＴＣ  ＡＧＣＴＣＣＧＣＣＧＡＣＧＣＧＣＣＣＣＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＣＡＴＧＡＡＧＡＴＧＡＴＡＴＧＡ  （配列番号５２）
【０１８１】
全長ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドのポリペプチド配列は以下の通りである：
ＭＬＡＧＧＶＲＳＭＰＳＰＬＬＡＣＷＱＰＩＬＬＬＶＬＧＳＶＬＳＧＳＡＴＧＣＰＰＲＣＥＣＳＡＱＤＲＡＶＬ  ＣＨＲＫＲＦＶＡＶＰＥＧＩＰＴＥＴＲＬＬＤＬＧＫＮＲＩＫＴＬＮＱＤＥＦＡＳＦＰＨＬＥＥＬＥＬＮＥＮＩ  ＶＳＡＶＥＰＧＡＦＮＮＬＦＮＬＲＴＬＧＬＲＳＮＲＬＫＬＩＰＬＧＶＦＴＧＬＳＮＬＴＫＬＤＩＳＥＮＫＩＶ  ＩＬＬＤＹＭＦＱＤＬＹＮＬＫＳＬＥＶＧＤＮＤＬＶＹＩＳＨＲＡＦＳＧＬＮＳＬＥＱＬＴＬＥＫＣＮＬＴＳＩ  ＰＴＥＡＬＳＨＬＨＧＬＩＶＬＲＬＲＨＬＮＩＮＡＩＲＤＹＳＦＫＲＬＹＲＬＫＶＬＥＩＳＨＷＰＹＬＤＴＭＴ  ＰＮＣＬＹＧＬＮＬＴＳＬＳＩＴＨＣＮＬＴＡＶＰＹＬＡＶＲＨＬＶＹＬＲＦＬＮＬＳＹＮＰＩＳＴＩＥＧＳＭ  ＬＨＥＬＬＲＬＱＥＩＱＬＶＧＧＱＬＡＶＶＥＰＹＡＦＲＧＬＮＹＬＲＶＬＮＶＳＧＮＱＬＴＴＬＥＥＳＶＦＨ  ＳＶＧＮＬＥＴＬＩＬＤＳＮＰＬＡＣＤＣＲＬＬＷＶＦＲＲＲＷＲＬＮＦＮＲＱＱＰＴＣＡＴＰＥＦＶＱＧＫＥ  ＦＫＤＦＰＤＶＬＬＰＮＹＦＴＣＲＲＡＲＩＲＤＲＫＡＱＱＶＦＶＤＥＧＨＴＶＱＦＶＣＲＡＤＧＤＰＰＰＡＩ  ＬＷＬＳＰＲＫＨＬＶＳＡＫＳＮＧＲＬＴＶＦＰＤＧＴＬＥＶＲＹＡＱＶＱＤＮＧＴＹＬＣＩＡＡＮＡＧＧＮＤ  ＳＭＰＡＨＬＨＶＲＳＹＳＰＤＷＰＨＱＰＮＫＴＦＡＦＩＳＮＱＰＧＥＧＥＡＮＳＴＲＡＴＶＰＦＰＦＤＩＫＴ  ＬＩＩＡＴＴＭＧＦＩＳＦＬＧＶＶＬＦＣＬＶＬＬＦＬＷＳＲＧＫＧＮＴＫＨＮＩＥＩＥＹＶＰＲＫＳＤＡＧＩ  ＳＳＡＤＡＰＲＫＦＮＭＫＭＩ  （配列番号５１）
【０１８２】
抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子
特定の実施形態では、抗体分子はＬＩＮＧＯ、例えばヒトＬＩＮＧＯに結合する。別の実施形態では、抗体分子はＬＩＮＧＯ‐１、例えばヒトＬＩＮＧＯ‐１に結合する。一実施形態では、抗体分子は、単離した、精製した、または組換え体である。「単離した」ポリペプチドまたはその断片、変異体、もしくは誘導体は、その天然の環境には存在しないポリペプチドを意図したものである。特定のレベルの精製は必ずしも必要ない。例えば、単離したポリペプチドは、その生来のまたは天然の環境から取り除くことができる。任意の適切な技術によって、分離、分画、または部分的にまたは実質的に精製した天然または組換えポリペプチドと同様に、宿主細胞中で発現する組換え産生したポリペプチド及びタンパク質は、本発明の目的のために単離したとみなされる。
【０１８３】
本明細書で使用する場合、用語「抗体分子」とは、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むタンパク質を指す。抗体分子という用語は、例えば、全長抗体、成熟抗体、断片、例えば、抗体の抗原結合断片、本明細書に開示する抗体の誘導体、類似体、または変異体、及びそれらの任意の組合せを含む。
【０１８４】
ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子または抗体ポリペプチドに言及する場合、用語「断片」、「変異体」、「誘導体」及び「類似体」には、対応する天然抗体またはポリペプチドの抗原結合特性の少なくともいくつかを保持する任意のポリペプチドが含まれる。ポリペプチドの断片には、本明細書の他の箇所に記載する特定の抗体断片に加えて、タンパク質分解断片及び欠失断片が含まれる。ＬＩＮＧＯ‐１抗体及び抗体ポリペプチドの変異体には、上記の断片、ならびにアミノ酸の置換、欠失または挿入によって改変したアミノ酸配列を有するポリペプチドが含まれる。変異体は、天然に存在していてもよいし、天然に存在していなくてもよい。天然に存在しない変異体は、当該分野で公知の突然変異誘発技術を用いて産生し得る。変異体ポリペプチドは、保存的または非保存的アミノ酸置換、欠失または付加を含み得る。ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子及び抗体ポリペプチドの誘導体は、天然のポリペプチドには見られない追加の特徴を示すように改変したポリペプチドである。例として、融合タンパク質が挙げられる。
【０１８５】
本明細書中で使用する場合、ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子または抗体ポリペプチドの「誘導体」とは、機能的側鎖の反応によって化学的に誘導体化した１つ以上の残基を有する対象ポリペプチドを指す。「誘導体」としては、２０種の標準アミノ酸のうちの１つ以上の天然アミノ酸の誘導体を含むペプチドも含まれる。例えば、プロリンを４‐ヒドロキシプロリンで置換してもよく；リジンを５‐ヒドロキシリジンで置換してもよく；ヒスチジンを３‐メチルヒスチジンで置換してもよく；セリンをホモセリンで置換してもよく；及びリジンをオルニチンで置換してもよい。
【０１８６】
例えば、抗体分子は、重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列（本明細書ではＶＨと略記する）、及び軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列（本明細書ではＶＬと略記する）を含み得る。別の例では、抗体分子は、２つの重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列及び２つの軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列を含み、それによって、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆｄ、Ｆｄ’、Ｆｖ、一本鎖抗体（例えばｓｃＦｖ）、単一可変ドメイン抗体、二重特異性抗体（Ｄａｂ）（二価及び二重特異性）、ならびにキメラ（例えばヒト化）抗体などの２つの抗原結合部位を形成し、これらは、抗体全体の修飾によって産生するか、または組換えＤＮＡ技術を用いて新規に合成したものであってもよい。これらの機能的抗体断片は、それぞれの抗原または受容体と選択的に結合する能力を保持する。抗体及び抗体断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＩｇＥを含むが必ずしもこれらに限定されない任意のクラスの抗体、ならびに抗体の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４）に由来し得る。抗体分子は、モノクローナルまたはポリクローナルであり得る。抗体は、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏで生成した抗体であってもよい。抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域を有し得る。抗体はまた、例えばκまたはλから選択される軽鎖を有し得る。
【０１８７】
抗原結合断片の例として、（ｉ）Ｆａｂ断片、すなわちＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片、すなわちヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結する２つのＦａｂ断片を含む二価の断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体のシングルアームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｖ）ＶＨドメインからなる二重特異性抗体（ｄＡｂ）断片；（ｖｉ）ラクダ科またはラクダ化可変ドメイン；（ｖｉｉ）一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３‐４２６；及びＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９‐５８８３）参照；（ｖｉｉｉ）シングルドメイン抗体が挙げられる。これらの抗体断片は、当業者に周知の従来の技術を使用して得られ、また、インタクトな抗体と同じ様式で、これらの断片に対し、その有用性についてのスクリーニングを行う。
【０１８８】
抗体分子は、シングルドメイン抗体であることも可能である。シングルドメイン抗体は、その相補性決定領域がシングルドメインポリペプチドの一部である抗体を含むことができる。例として、重鎖抗体、天然に軽鎖を欠く抗体、従来の４鎖抗体由来のシングルドメイン抗体、改変型抗体及び抗体由来のものとは異なるシングルドメイン骨格が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。シングルドメイン抗体は、当該技術分野のいずれか、または任意の将来のシングルドメイン抗体であってもよい。シングルドメイン抗体は、マウス、ヒト、ラクダ、ラマ、魚類、サメ、ヤギ、ウサギ、及びウシを含むが必ずしもこれらに限定されない任意の種に由来し得る。本発明の一態様において、シングルドメイン抗体は、例えば魚類に見出される免疫グロブリンの可変領域、例えば、サメの血清に見出される新規抗原受容体（ＮＡＲ）として公知の免疫グロブリンアイソタイプに由来する可変領域由来であり得る。ＮＡＲの可変領域から誘導するシングルドメイン抗体（「ＩｇＮＡＲ」）の産生方法は、ＷＯ０３／０１４１６１及びＳｔｒｅｌｔｓｏｖ（２００５）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉ．１４：２９０１‐２９０９に記載されている。本発明の別の態様によれば、シングルドメイン抗体は、軽鎖を欠く重鎖抗体として公知の天然起源シングルドメイン抗体である。そのようなシングルドメイン抗体は、例えばＷＯ９４０４６７８に開示されている。明確にするために、天然に軽鎖を欠く重鎖抗体に由来するこの可変ドメインは、本明細書ではＶＨＨまたはナノボディとして知られ、従来の４本鎖免疫グロブリンのＶＨとは区別する。そのようなＶＨＨ分子は、ラクダ科の生物種、例えばラクダ、ラマ、ヒトコブラクダ、アルパカ及びグアナコが産生する抗体に由来し得る。ラクダ科以外の他の生物種が、軽鎖を天然に欠く重鎖抗体を産生してもよく；そのようなＶＨＨは本発明の範囲内である。
【０１８９】
ＶＨ及びＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲ）と呼ばれる保存性の高い領域とともに点在する「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域に細分することができる。フレームワーク領域及びＣＤＲの程度は、多くの方法によって正確に定義されている（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１‐３２４２；Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１‐９１７；及びＯｘｆｏｒｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ社のＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアで用いられるＡｂＭの定義を参照。一般的には、例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｖａｒｉａｂｌｅ  Ｄｏｍａｉｎｓ．  Ｉｎ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｌａｂ  Ｍａｎｕａｌ（Ｅｄ．：Ｄｕｅｂｅｌ，Ｓ．  ａｎｄ  Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，Ｒ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ‐Ｖｅｒｌａｇ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）参照。一般的に、特段の指定のない限り、以下の定義を使用する：重鎖可変ドメインのＣＤＲ１についてはＡｂＭの定義、及び他のＣＤＲに対してはＫａｂａｔの定義。さらに、ＫａｂａｔまたはＡｂＭのＣＤＲに関して記載する本発明の実施形態は、Ｃｈｏｔｈｉａの超可変ループを用いて実施してもよい。各ＶＨ及びＶＬは、通常、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含み、これらはアミノ末端側からカルボキシ末端側へ以下の順に配置されている：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。
【０１９０】
本明細書中で使用する場合、「免疫グロブリン可変ドメイン配列」とは、免疫グロブリン可変ドメイン構造を形成することができるアミノ酸配列を指す。例えば、前記配列は、天然起源の可変ドメインのアミノ酸配列の全部または一部を含んでいてもよい。例えば、前記配列は、１残基、２残基、またはそれ以上のＮまたはＣ末端アミノ酸を含んでも含まなくてもよく、またはタンパク質構造の形成に適合する他の改変を含み得る。
【０１９１】
用語「抗原結合部位」とは、ＬＩＮＧＯ‐１またはそのエピトープに結合する界面を形成する決定基を含む抗体分子の部分を指す。タンパク質（またはタンパク質ミメティック）に関して、抗原結合部位は、通常、ＬＩＮＧＯ‐１に結合する界面を形成する（少なくとも４つのアミノ酸またはアミノ酸ミメティックの）１つ以上のループを含む。通常、抗体分子の抗原結合部位は、少なくとも１つまたは２つのＣＤＲ、またはより一般的には少なくとも３、４、５または６つのＣＤＲを含む。
【０１９２】
本明細書で使用する場合、用語「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」とは、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性及び親和性を示す。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術またはハイブリドーマ技術を使用しない方法（例えば、組換え法）によって作製することができる。
【０１９３】
「効果的なヒト」タンパク質は、中和抗体応答、例えばヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答を誘発しないタンパク質である。ＨＡＭＡは、例えば、慢性疾患または再発性疾患の病態の治療において、抗体分子を繰り返し投与する場合など、多くの状況において問題となり得る。血清からの抗体クリアランスが増加するため（例えば、Ｓａｌｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．，３２：１８０‐１９０（１９９０）参照）、及び潜在的なアレルギー反応のため（例えば、ＬｏＢｕｇｌｉｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，５：５１１７‐５１２３（１９８６）参照）、ＨＡＭＡ応答は、抗体の繰り返し投与を潜在的に無効化し得る。
【０１９４】
特定の実施形態では、抗体分子は、モノクローナルもしくは単一特異性抗体、またはその抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ断片、シングルドメイン抗体、二重特異性抗体（ｄＡｂ）、二価もしくは二重特異性抗体またはその断片、そのシングルドメイン変異体）であり、ＬＩＮＧＯ‐１、例えば哺乳類（例えば、ヒトＬＩＮＧＯ‐１（またはその機能性変異体））に結合する。一実施形態では、抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１、例えばヒトＬＩＮＧＯ‐１に対するモノクローナル抗体である。通常、抗体分子は、ヒトＬＩＮＧＯ‐１（またはその機能性断片、例えば本明細書に記載の抗体断片）に対するヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト、キメラ、ラクダ科、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ生成した抗体である。通常、抗体は、ＬＩＮＧＯ‐１の１つ以上の活性（例えば、本明細書に記載のＬＩＮＧＯ‐１の１つ以上の生物学的活性）を阻害、低減または中和する。
【０１９５】
特定の実施形態では、抗体分子は、参照としてその全体を本明細書に援用する米国特許第８，０５８，４０６号に記載される参照モノクローナル抗体Ｌｉ６２またはＬｉ８１と同一の、または実質的に同一のＬＩＮＧＯ‐１エピトープに特異的に結合する。例示的な抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、米国特許第８，０５８，４０６号に記載されている。
【０１９６】
一実施形態では、抗体分子は、少なくともＬｉ６２、Ｌｉ８１の抗原結合ドメインを含む。本明細書中で使用する場合、用語「抗原結合ドメイン」は、抗原表面のエピトープ（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１のエピトープ）に特異的に結合する部位を含む。抗体の抗原結合ドメインは、通常、免疫グロブリン重鎖可変領域の少なくとも一部及び免疫グロブリン軽鎖可変領域の少なくとも一部を含む。これらの可変領域が形成する結合部位は、抗体の特異性を決定する。
【０１９７】
他の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、Ｌｉ６２またはＬｉ８１のＬＩＮＧＯ‐１への結合を競合的に阻害する。
【０１９８】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、特定のＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチド断片またはドメインに特異的または優先的に結合する。そのようなＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチド断片として、配列番号５１のアミノ酸３４〜５３２；３４〜４１７；３４〜４２５；３４〜４９３；６６〜５３２；６６〜４１７；６６〜４２６；６６〜４９３；６６〜５３２；４１７〜５３２；４１７〜４２５（ＬＩＮＧＯ‐１塩基性領域）；４１７〜４９３；４１７〜５３２；４１９〜４９３（ＬＩＮＧＯ‐１１ｇ領域）；もしくは４２５〜５３２を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチド；または配列番号５１のアミノ酸３４〜５３２；３４〜４１７；３４〜４２５；３４〜４９３；６６〜５３２；６６〜４１７；６６〜４２６；６６〜４９３；６６〜５３２；４１７〜５３２；４１７〜４２５（ＬＩＮＧＯ‐１塩基性領域）；４１７〜４９３；４１７〜５３２；４１９〜４９３（ＬＩＮＧＯ‐１１ｇ領域）；もしくは４２５〜５３２に少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一であるＬＩＮＧＯ‐１変異型ポリペプチドが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。
【０１９９】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１の１つ以上のロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなるＬＩＮＧＯ‐１ペプチド断片に特異的または優先的に結合する。そのような断片は、例えば、配列番号５１のアミノ酸６６〜８９；６６〜１１３；６６〜１３７；９０〜１１３；１１４〜１３７；１３８〜１６１；１６２〜１８５；１８６〜２０９；２１０〜２３３；２３４〜２５７；２５８〜２８１；２８２〜３０５；３０６〜３２９；または３３０〜３５３を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれからなる断片を含む。配列番号５１のアミノ酸６６〜８９；６６〜１１３；９０〜１１３；１１４〜１３７；１３８〜１６１；１６２〜１８５；１８６〜２０９；２１０〜２３３；２３４〜２５７；２５８〜２８１；２８２〜３０５；３０６〜３２９；または３３０〜３５３に少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の相同性を有する、変異型ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドの対応する断片もまた意図される。
【０２００】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１のＬＲＲに隣接する１つ以上のシステインに富む領域を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的または優先的に結合する。そのような断片は、例えば、配列番号５１のアミノ酸３４〜６４（Ｎ末端ＬＲＲ隣接領域（ＬＲＲＮＴ））を含むか、本質的にそれからなるか、もしくはそれからなる断片、または配列番号５１のアミノ酸３６３〜４１６（Ｃ末端ＬＲＲ隣接領域（ＬＲＲＣＴ））を含むか、本質的にそれからなるか、もしくはそれからなる断片を含む。配列番号５１のアミノ酸３４〜６４及び３６３〜４１６に少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％の相同性を有する変異体ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドの対応する断片もまた意図される。
【０２０１】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５１のアミノ酸４１〜５２５；配列番号５１の４０〜５２６；配列番号５１の３９〜５２７；配列番号５１の３８〜５２８；配列番号５１の３７〜５２９；配列番号５１の３６〜５３０；配列番号５１の３５〜５３１；配列番号５１の３４〜５３１；配列番号５１の４６〜５２０；配列番号５１の４５〜５２１；配列番号５１の４４〜５２２；配列番号５１の４３〜５２３；及び配列番号５１の４２〜５２４を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的にまたは優先的に結合する。
【０２０２】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５１のアミノ酸１〜３３；配列番号５１の１〜３５；配列番号５１の３４〜６４；配列番号５１の３６〜６４；配列番号５１の６６〜８９；配列番号５１の９０〜１１３；配列番号５１の１１４〜１３７；配列番号５１の１３８〜１６１；配列番号５１の１６２〜１８５；配列番号５１の１８６〜２０９；配列番号５１の２１０〜２３３；配列番号５１の２３４〜２５７；配列番号５１の２５８〜２８１；配列番号５１の２８２〜３０５；配列番号５１の３０６〜３２９；配列番号５１の３３０から３５３；配列番号５１の３６３〜４１６；配列番号５１の４１７〜４２４；配列番号５１の４１９〜４９３；及び配列番号５１の４９４〜５５１を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的にまたは優先的に結合する。
【０２０３】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５１のアミノ酸１〜３３；配列番号５１の１〜３５；配列番号５１の１〜６４；配列番号５１の１〜８９；配列番号５１の１〜１１３；配列番号５１の１〜１３７；配列番号５１の１〜１６１；配列番号５１の１〜１８５；配列番号５１の１〜２０９；配列番号５１の１〜２３３；配列番号５１の１〜２５７；配列番号５１の１〜２８１；配列番号５１の１〜３０５；配列番号５１の１〜３２９；配列番号５１の１〜３５３；配列番号５１の１〜４１６；配列番号５１の１〜４２４；配列番号５１の１〜４９３；配列番号５１の１〜５５１；配列番号５１の１〜５３１及び配列番号５１の１〜５３２を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的にまたは優先的に結合する。
【０２０４】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５１のアミノ酸３４〜６４；配列番号５１の３４〜８９；配列番号５１の３４〜１１３；配列番号５１の３４〜１３７；配列番号５１の３４〜１６１；配列番号５１の３４〜１８５；配列番号５１の３４〜２０９；配列番号５１の３４〜２３３；配列番号５１の３４〜２５７；配列番号５１の３４〜２８１；配列番号５１の３４〜３０５；配列番号５１の３４〜３２９；配列番号５１の３４〜３５３；配列番号５１の３４〜４１６；配列番号５１の３４〜４２４；配列番号５１の３４〜４９３；及び配列番号５１の３４〜５５１を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的にまたは優先的に結合する。
【０２０５】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５１のアミノ酸３４〜５３０；配列番号５１の３４〜５３１；配列番号５１の３４〜５３２；配列番号５１の３４〜５３３；配列番号５１の３４〜５３４；配列番号５１の３４〜５３５；配列番号５１の３４〜５３６；配列番号５１の３４〜５３７；配列番号５１の３４〜５３８；配列番号５１の３４〜５３９；配列番号５１の３０〜５３２；配列番号５１の３１〜５３２；配列番号５１の３２〜５３２；配列番号５１の３３〜５３２；配列番号５１の３４〜５３２；配列番号５１の３５〜５３２；配列番号５１の３６〜５３２；配列番号５１の３０〜５３１；配列番号５１の３１〜５３１；配列番号５１の３２〜５３１；配列番号５１の３３〜５３１；配列番号５１の３４〜５３１；配列番号５１の配列番号３５〜５３１；及び配列番号５１の３６〜５３１を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的にまたは優先的に結合する。
【０２０６】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５１のアミノ酸３６〜６４；配列番号５１の３６〜８９；配列番号５１の３６〜１１３；配列番号５１の３６〜１３７；配列番号５１の３６〜１６１；配列番号５１の３６〜１８５；配列番号５１の３６〜２０９；配列番号５１の３６〜２３３；配列番号５１の３６〜２５７；配列番号５１の３６〜２８１；配列番号５１の３６〜３０５；配列番号５１の３６〜３２９；配列番号５１の３６〜３５３；配列番号５１の３６〜４１６；配列番号５１の３６〜４２４；配列番号５１の３６〜４９３；及び配列番号５１の３６〜５５１を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的にまたは優先的に結合する。
【０２０７】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５１のアミノ酸３６〜５３０；配列番号５１の３６〜５３１；配列番号５１の３６〜５３２；配列番号５１の３６〜５３３；配列番号５１の３６〜５３４；配列番号５１の３６〜５３５；配列番号５１の３６〜５３６；配列番号５１の３６〜５３７；配列番号５１の３６〜５３８；及び配列番号５１の３６〜５３９を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的にまたは優先的に結合する。
【０２０８】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５１のアミノ酸４１７〜４９３；配列番号５１の４１７〜４９４；配列番号５１の４１７〜４９５；配列番号５１の４１７〜４９６；配列番号５１の４１７〜４９７；配列番号５１の４１７〜４９８；配列番号５１の４１７〜４９９；配列番号５１の４１７〜５００；配列番号５１の４１７〜４９２；配列番号５１の４１７〜４９１；配列番号５１の４１２〜４９３；配列番号５１の４１３〜４９３；配列番号５１の４１４〜４９３；配列番号５１の４１５〜４９３；配列番号５１の４１６〜４９３；配列番号５１の４１１〜４９３；配列番号５１の４１０〜４９３；配列番号５１の４１０〜４９４；配列番号５１の４１１〜４９４；配列番号５１の４１２〜４９４；配列番号５１の４１３〜４９４；配列番号５１の４１４〜４９４；配列番号５１の４１５〜４９４；配列番号５１の４１６〜４９４；配列番号５１の４１７〜４９４；及び配列番号５１の４１８〜４９４を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる断片に特異的または優先的に結合する。
【０２０９】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１のＩｇドメインのペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチド、またはそのようなポリペプチドの断片、変異体、もしくは誘導体に、特異的にまたは優先的に結合する。具体的には、ポリペプチドは、以下のポリペプチド配列：ＩＴＸ１Ｘ２Ｘ３（配列番号８８）、ＡＣＸ１Ｘ２Ｘ３（配列番号８９）、ＶＣＸ１Ｘ２Ｘ３（配列番号９０）及びＳＰＸ１Ｘ２Ｘ３（配列番号９１）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、式中、Ｘ１は、リジン、アルギニン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンであり、Ｘ２は、リジン、アルギニン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンであり、Ｘ３は、リジン、アルギニン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンである。例えば、特定の抗体分子が結合し得るＬＩＮＧＯ‐１ペプチド断片は、以下のポリペプチド配列を含むか、本質的にそれらからなるか、それらからなる断片を含む：ＳＰＲＫＨ（配列番号９２）、ＳＰＲＫＫ（配列番号９３）、ＳＰＲＫＲ（配列番号：９４）、ＳＰＫＫＨ（配列番号：９５）、ＳＰＨＫＨ（配列番号：９６）、ＳＰＲＲＨ（配列番号：９７）、ＳＰＲＨＨ（配列番号：９８）、ＳＰＲＲＲ（配列番号９９）、ＳＰＨＨＨ（配列番号１００）  ＳＰＫＫＫ（配列番号１０１）、ＬＳＰＲＫＨ（配列番号１０２）、ＬＳＰＲＫＫ（配列番号１０３）、ＬＳＰＲＫＲ（配列番号１０４）、ＬＳＰＫＫＨ  （配列番号１０５）、ＬＳＰＨＲＨ（配列番号１０６）、ＬＳＰＲＲＨ（配列番号１０７）、ＬＳＰＲＨＨ（配列番号１０８）、ＬＳＰＲＲＲ（配列番号１０９）、ＬＳＰＨＨＨ（配列番号１１０）  ＬＳＰＫＫＫ（配列番号１１１）、ＷＬＳＰＲＫＨ（配列番号１１２）、ＷＬＳＰＲＫＫ（配列番号１１３）、ＷＬＳＰＲＫＲ（配列番号１１４）、ＷＬＳＰＫＫＨ（配列番号１１５）、ＷＬＳＰＨＫＨ（配列番号１１６）、ＷＬＳＰＲＲＨ（配列番号１１７）、ＷＬＳＰＲＨＨ（配列番号１１８）、ＷＬＳＰＲＲＲ（配列番号１１９）、ＷＬＳＰＨＨＨ（配列番号１２０）  ＷＬＳＰＫＫＫ（配列番号１２１）。これらのＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドは、ＬＩＮＧＯ‐１のＩｇドメイン中の塩基性「ＲＫＨループ」（アルギニン‐リジン‐ヒスチジンアミノ酸４５６〜４５８）を含む。塩基性トリペプチドを含む追加のＬＩＮＧＯ‐１ペプチドは、ＩＴＰＫＲＲ（配列番号１２２）、ＡＣＨＨＫ（配列番号１２３）及びＶＣＨＨＫ（配列番号１２４）である。
【０２１０】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１のＩｇドメインのペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチド、またはそのようなポリペプチドの断片、変異体、もしくは誘導体に特異的にまたは優先的に結合する。具体的には、ペプチドは、以下のポリペプチド配列：Ｘ４Ｘ５ＲＫＨ（配列番号１２５）、Ｘ４Ｘ５ＲＲＲ（配列番号１２６）、Ｘ４Ｘ５ＫＫＫ（配列番号１２７）、Ｘ４Ｘ５ＨＨＨ（配列番号１２８）、Ｘ４Ｘ５ＲＫＫ（配列番号１２９）、Ｘ４Ｘ５ＲＫＲ（配列番号１３０）、Ｘ４Ｘ５ＫＫＨ（配列番号１３１）、Ｘ４Ｘ５ＨＫＨ（配列番号１３２）、Ｘ４Ｘ５ＲＲＨ（配列番号１３３）及びＸ４Ｘ５ＲＨＨ（配列番号１３４）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、式中、Ｘ４は任意のアミノ酸であり、Ｘ５は任意のアミノ酸である。
【０２１１】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１のＩｇドメインのペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチド、またはそのようなポリペプチドの断片、変異体、もしくは誘導体に特異的にまたは優先的に結合する。具体的には、ポリペプチドは、以下のポリペプチド配列：ＩＴＸ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１３５）、ＡＣＸ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１３６）、ＶＣＸ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１３７）及びＳＰＸ６Ｘ７Ｘ８（配列番号１３８）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、式中、Ｘ６は、リジン、アルギニン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンであり、Ｘ７は任意のアミノ酸であり、Ｘ８は、リジン、アルギニン、ヒスチジン、グルタミン、またはアスパラギンである。例えば、ポリペプチドは、以下のポリペプチド配列：ＳＰＲＬＨ（配列番号１３９）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる。
【０２１２】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１のＩｇドメインにアミノ酸４５２〜４５８を含むペプチドまたはその誘導体を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドに特異的または優先的に結合し、ここで、アミノ酸４５２は、トリプトファンまたはフェニルアラニン残基である。
【０２１３】
特定の実施形態において、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１の塩基性ドメインのペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドに特異的または優先的に結合する。具体的には、ペプチドは、以下のポリペプチド配列：ＲＲＡＲＩＲＤＲＫ（配列番号１４０）、ＫＫＶＫＶＫＥＫＲ（配列番号１４１）、ＲＲＬＲＬＲＤＲＫ（配列番号１４２）、ＲＲＧＲＧＲＤＲＫ（配列番号１４３）及びＲＲＩＲＡＲＤＲＫ（配列番号１４４）を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる。
【０２１４】
さらなる例示的な可溶性ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチド、ならびに本発明の抗体または抗体断片を産生するためのこれらの分子の取得方法及び材料を、例えば国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２００４／００８３２３に見出してもよく、前記文献は、参照としてその全体を本明細書に援用する。
【０２１５】
抗体の作製方法は、当該技術分野で公知であり、本明細書に記載されている。シグナル配列を有していない様々な断片、または全長のＬＩＮＧＯ‐１に対する抗体がいったん産生されると、本明細書に記載のエピトープマッピングプロトコール、ならびに当該技術分野で公知の方法（例えば、“Ｃｈａｐｔｅｒ  １１‐‐Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，”  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｅｄ．Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｖ．２，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．（１９９６）に記載の二重抗体サンドイッチＥＬＩＳＡ）によって、抗体または抗原結合断片がＬＩＮＧＯ‐１のどのアミノ酸またはエピトープに結合するのかを、決定することができる。さらなるエピトープマッピングプロトコールを、Ｍｏｒｒｉｓ，Ｇ．  Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ：Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ（１９９６）に見出してもよく、これらの文献はいずれもその全体を参照として本明細書に援用する。エピトープマッピングは、市販の手段（すなわち、ＰｒｏｔｏＰＲＯＢＥ，Ｉｎｃ．（ミルウォーキー、ウィスコンシン））によって行うこともできる。
【０２１６】
さらに、ＬＩＮＧＯ‐１の任意の部分に結合する抗体は、その産生後、ＬＩＮＧＯ‐１の拮抗薬として作用する能力、したがって、神経突起伸長、神経細胞及びオリゴデンドロサイトの生存、増殖及び分化を促進し、ならびに髄鞘形成を促進する能力についてスクリーニングすることができる。例えば本明細書の実施例１１もしくは１２に記載の、またはその全体を参照として本明細書に援用する２００８年１月９日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００８／０００３１６及び２００６年７月７日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２６２７１に記載の方法を用いて、例えばオリゴデンドロサイト／神経細胞生存についてスクリーニングすることができる。さらに、本明細書の実施例２、６、９、１０、１１もしくは１３に記載の、またはＰＣＴ／ＵＳ２００８／０００３１６及び／またはＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２６２７１に記載の方法を用いて、抗体を、それらの髄鞘形成を促進する能力について、例えばスクリーニングすることができる。最終的に、本明細書の実施例４もしくは５に記載の、またはＰＣＴ／ＵＳ２００８／０００３１６及び／またはＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２６２７１に記載の方法を用いて、抗体を、例えば、オリゴデンドロサイトの増殖及び分化、ならびに神経突起伸長を促進するそれらの能力についてスクリーニングすることができる。本発明の抗体の他の拮抗薬機能は、参照として本明細書に援用する米国特許第８，０５８，４０６号の実施例に記載されるような他のアッセイを用いて試験することができる。
【０２１７】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１の少なくとも１つのエピトープに特異的にまたは優先的に結合し、ここでエピトープは、配列番号５の少なくとも約４〜５個のアミノ酸、配列番号５の少なくとも７個、少なくとも９個、または少なくとも約１５個〜約３０個のアミノ酸を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる。記載する配列番号５１の所与のエピトープのアミノ酸は、連続していても直鎖状であってもよいが、必ずしもそうである必要はない。特定の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１の少なくとも１つのエピトープは、細胞の表面上に、または例えばＩｇＧ  Ｆｃ領域融合型の可溶性断片として発現するＬＩＮＧＯ‐１の細胞外ドメインによって形成される非直鎖状エピトープを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる。したがって、特定の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１の少なくとも１つのエピトープは、配列番号５１の、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも２５、約１５〜約３０、または少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、もしくは１００残基の連続または非連続アミノ酸を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、ここで、非連続アミノ酸は、タンパク質フォールディングを介してエピトープを形成する。
【０２１８】
他の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１の少なくとも１つのエピトープに特異的にまたは優先的に結合し、ここでエピトープは、上記配列番号５１の１、２、３、４、５、６残基またはそれ以上の連続または非連続アミノ酸、及びタンパク質を修飾するさらなる部分を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなり、例えば、改変していないタンパク質への結合親和性に比べてより高い親和性で、改変した標的タンパク質にＬＩＮＧＯ‐１抗体が結合するように、炭水化物部分を含めてもよい。あるいは、ＬＩＮＧＯ‐１抗体は、標的タンパク質の未修飾バージョンには全く結合しない。
【０２１９】
特定の実施形態において、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドもしくはその断片、またはＬＩＮＧＯ‐１変異体ポリペプチドに、前記参照モノクローナル抗体の解離定数（ＫＤ）未満であるＫＤを特徴とする親和性で、特異的または優先的に結合する。
【０２２０】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、上記のＬＩＮＧＯ‐１または断片または変異体の少なくとも１つのエピトープに特異的または優先的に結合、すなわち、無関係またはランダムなエピトープへの結合に比べて、より容易にそのようなエピトープに結合するか；上記のＬＩＮＧＯ‐１または断片または変異体の少なくとも１つのエピトープに優先的に結合、すなわち、関連する、同様の、相同な、または類似のエピトープへの結合に比べて、より容易にエピトープに結合するか；上記のＬＩＮＧＯ‐１または断片または変異体の特定のエピトープに特異的にまたは優先的に結合する参照抗体の結合を競合的に阻害するか；または５×１０−２Ｍ、約１０−２Ｍ、約５×１０−３Ｍ、約１０−３Ｍ、約５×１０−４Ｍ、約１０−４Ｍ、約５×１０−５Ｍ、約１０−５Ｍ、約５×１０−６Ｍ、約１０−６Ｍ、約５×１０−７Ｍ、約１０−７Ｍ、約５×１０−８Ｍ、約１０−８Ｍ、約５×１０−９Ｍ、約１０−９Ｍ、約５×１０−１０Ｍ、約１０−１０１Ｍ、約５×１０−１１Ｍ、約１０−１１Ｍ、約５×１０−１２Ｍ、約１０−１２Ｍ、約５×１０−１３Ｍ、約１０−１３Ｍ、約５×１０−１４Ｍ、約１０−１４Ｍ、約５×１０−１５Ｍ、約１０−１５Ｍ未満の解離定数ＫＤを特徴とする親和性で、上記のＬＩＮＧＯ‐１または断片または変異体の少なくとも１つのエピトープに結合する。特定の態様では、抗体またはその断片は、マウスＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドまたはその断片に比べて、ヒトＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドまたはその断片に優先的に結合する。
【０２２１】
他の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドまたはその断片もしくは変異体に、５×１０−２ｓｅｃ−１、１０−２ｓｅｃ−１、５×１０−３ｓｅｃ−１または１０−３ｓｅｃ−１以下の解離速度（ｋ（ｏｆｆ））で結合する。あるいは、本発明の抗体、またはその抗原結合断片、変異体もしくは誘導体は、ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドまたはその断片もしくは変異体に、５×１０−４ｓｅｃ１、１０−４ｓｅｃ１、５×１０−５ｓｅｃ１、もしくは１０−５ｓｅｃ１、５×１０−６ｓｅｃ１、１０−６ｓｅｃ１、５×１０−７ｓｅｃ１または１０−７ｓｅｃ１以下の解離速度（ｋ（ｏｆｆ））で結合する。
【０２２２】
他の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドまたはその断片もしくは変異体に、１０３Ｍ−１ｓｅｃ−１、５×１０３Ｍ−１ｓｅｃ−１、１０４Ｍ−１ｓｅｃ−１、５×１０４Ｍ−１ｓｅｃ−１以上の結合速度（ｋ（ｏｎ））で結合する。あるいは、抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１ポリペプチドまたはその断片もしくは変異体に、１０５Ｍ−１ｓｅｃ−１、５×１０５Ｍ−１ｓｅｃ−１、１０６Ｍ−１ｓｅｃ−１、５×１０６Ｍ−１ｓｅｃ−１、または１０７Ｍ−１ｓｅｃ−１、５×１０７Ｍ−１ｓｅｃ−１以上の結合速度（ｋ（ｏｎ））で結合する。
【０２２３】
他の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１活性の拮抗薬である。特定の実施形態では、例えば、神経細胞上で発現するＬＩＮＧＯ‐１に対する拮抗薬ＬＩＮＧＯ‐１抗体の結合は、髄鞘関連神経突起伸長阻害または神経細胞死をブロックする。他の実施形態では、オリゴデンドロサイト上で発現するＬＩＮＧＯ‐１へのＬＩＮＧＯ‐１抗体の結合は、オリゴデンドロサイトの増殖または分化の阻害をブロックするか、またはＣＮＳ神経細胞の脱髄もしくは髄鞘形成をブロックする。
【０２２４】
ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の修飾形態は、当該分野で公知の技術を使用して、前駆体または親抗体全体から作製することができる。例示的な技術については、本明細書においてより詳細に説明する。
【０２２５】
特定の実施形態では、抗体分子は、組換えにより産生、例えば、ファージディスプレイによって、またはコンビナトリアル法によって産生できる。抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体を作製するためのファージディスプレイ及びコンビナトリアル法は、当該技術分野で公知である（例えば、Ｌａｄｎｅｒらの米国特許第５，２２３，４０９号；Ｋａｎｇらの国際公開第ＷＯ９２／１８６１９号；Ｄｏｗｅｒらの第ＷＯ９１／１７２７１号；Ｗｉｎｔｅｒらの国際公開ＷＯ９２／２０７９１；Ｍａｒｋｌａｎｄらの国際公開ＷＯ９２／１５６７９；Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇらの国際公開ＷＯ９３／０１２８８；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙらの国際公開第ＷＯ９２／０１０４７号；Ｇａｒｒａｒｄらの国際公開第ＷＯ９２／０９６９０号；Ｌａｄｎｅｒらの国際公開第ＷＯ９０／０２８０９号；Ｆｕｃｈｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：１３７０‐１３７２；Ｈａｙ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｈｕｍ  Ａｎｔｉｂｏｄ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ３：８１‐８５；Ｈｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４６：１２７５‐１２８１；Ｇｒｉｆｆｔｈｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）ＥＭＢＯ  Ｊ  １２：７２５‐７３４；Ｈａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２２６：８８９‐８９６；Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４‐６２８；Ｇｒａｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）ＰＮＡＳ  ８９：３５７６‐３５８０；Ｇａｒｒａｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：１３７３‐１３７７；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｕｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ  １９：４１３３‐４１３７；及びＢａｒｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）ＰＮＡＳ  ８８：７９７８‐７９８２、これらの文献のすべての内容は参照として本明細書に援用する。
【０２２６】
一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体は、完全ヒト抗体（例えば、ヒト免疫グロブリン配列から抗体を産生するためにマウスにおいて作製した遺伝子改変抗体）、または非ヒト抗体、例えば、げっ歯類（マウスまたはラット）、ヤギ、霊長類（例えば、サル）、ラクダ抗体である。非ヒト抗体は、げっ歯類（マウスまたはラットの抗体）であり得る。げっ歯類抗体の産生方法は、当該技術分野で公知である。
【０２２７】
ヒトモノクローナル抗体は、マウス系ではなくヒト免疫グロブリン遺伝子を保有するトランスジェニックマウスを用いて作製することができる。目的の抗原で免疫化したこれらのトランスジェニックマウスからの脾細胞を用いて、ヒトタンパク質由来のエピトープに対して特異的親和性を有するヒトｍＡｂを分泌するハイブリドーマを産生する（例えば、Ｗｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ＷＯ９１／００９０６，Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉ  ｅｔ  ａｌ．  ＰＣＴ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ＷＯ  ９１／１０７４１；Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ＷＯ９２／０３９１８；Ｋａｙ  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ９２／０３９１７；Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ｅｔ  ａｌ．  １９９４  Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６‐８５９；Ｇｒｅｅｎ，Ｌ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．  １９９４  Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．７：１３‐２１；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．  １９９４  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１‐６８５５；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  １９９３  Ｙｅａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ７：３３‐４０；Ｔｕａｉｌｌｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  １９９３  ＰＮＡＳ  ９０：３７２０‐３７２４；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  １９９１  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２１：１３２３‐１３２６参照）。
【０２２８】
抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体は、可変領域またはその一部、例えばＣＤＲを、非ヒト生物、例えばラットまたはマウスにおいて生成するものであり得る。キメラ、ＣＤＲグラフト、及びヒト化抗体は、本発明の範囲内にある。非ヒト生物、例えばラットもしくはマウスにおいて生成し、次いで可変フレームワークまたは定常領域において改変し、ヒトにおける抗原性を低下させた抗体も本発明の範囲内にある。
【０２２９】
キメラ抗体は、当該技術分野で公知の組換えＤＮＡ技術によって産生することができる。例えば、マウス（または他の種の）モノクローナル抗体分子のＦｃ定常領域をコードする遺伝子を制限酵素で消化してマウスＦｃコード領域を取り外し、ヒトＦｃ定常領域をコードする遺伝子の等価部分を置換する（Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、国際特許公開ＰＣＴ／ＵＳ８６／０２２６９；Ａｋｉｒａら、欧州特許出願１８４，１８７；Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ，Ｍ．、欧州特許出願１７１，４９６；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、欧州特許出願１７３，４９４；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、国際出願ＷＯ８６／０１５３３；Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｃａｂｉｌｌｙら、欧州特許出願第１２５，０２３号；Ｂｅｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０：１０４１‐１０４３）；Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７）ＰＮＡＳ  ８４：３４３９‐３４４３；Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：３５２１‐３５２６；Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７）ＰＮＡＳ  ８４：２１４‐２１８；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．４７：９９９‐１００５；Ｗｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８５）Ｎａｔｕｒｅ  ３１４：４４６‐４４９；及びＳｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｊ．Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．８０：１５５３‐１５５９参照）。
【０２３０】
ヒト化抗体またはＣＤＲグラフト抗体は、ドナーＣＤＲで置換した少なくとも１つまたは２つ、しかし通常は３つすべてのレシピエントＣＤＲ（イムノグロブリン重鎖及び／または軽鎖の）を有する。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも一部で置換され得るか、またはＣＤＲの一部のみが非ヒトＣＤＲと置換され得る。ヒト化抗体のＬＩＮＧＯ‐１またはその断片への結合に必要なＣＤＲの数を置換することだけが必要である。
【０２３１】
抗体は、当該分野で公知の方法によってヒト化することができる。ヒト化抗体は、抗原結合に直接関与しないＦｖ可変領域の配列を、ヒトＦｖ可変領域からの等価な配列で置換することによって生成することができる。ヒト化抗体を生成するための一般的な方法は、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２‐１２０７，ｂｙ  Ｏｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ４：２１４及びＱｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．米国特許第５，５８５，０８９号、米国特許第５，６９３，７６１号、及び米国特許第５，６９３，７６２号に記載されており、これらの文献のすべての内容は、参照として本明細書に援用する。ヒト化またはＣＤＲグラフト抗体は、ＣＤＲグラフトまたはＣＤＲ置換によって産生することができ、そこにおいては、免疫グロブリン鎖の１つ、２つ、またはすべてのＣＤＲを置換することができる。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．１９８６  Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５５２‐５２５；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎ  ｅｔ  ａｌ．１９８８  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４；Ｂｅｉｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．１９８８  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１：４０５３‐４０６０；米国特許第５，２２５，５３９号に記載されており、これらの文献のすべての内容は、参照として本明細書に明示的に援用する。Ｗｉｎｔｅｒは、本発明のヒト化抗体を調製するために使用してもよいＣＤＲグラフト法を記載している（１９８７年３月２６日に出願された英国特許出願ＧＢ２１８８６３８Ａ；Ｗｉｎｔｅｒ  ＵＳ５，２２５，５３９）。
【０２３２】
特定のアミノ酸を置換、欠失または付加したヒト化抗体も、本発明の範囲内にある。ヒト化抗体は、抗原への結合を改善するなど、フレームワーク領域にアミノ酸置換を有することができる。例えば、ヒト化抗体は、ドナーフレームワーク残基と同一のフレームワーク残基またはレシピエントフレームワーク残基以外の別のアミノ酸を有するであろう。そのような抗体を生成するために、ヒト化免疫グロブリン鎖の選択した少数のアクセプターフレームワーク残基を対応するドナーアミノ酸で置き換えることができる。置換の好ましい位置には、ＣＤＲに隣接するアミノ酸残基、またはＣＤＲと相互作用することができるアミノ酸残基が含まれる（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号参照）。ドナーからアミノ酸を選択するための基準は、米国特許第５，５８５，０８９号、例えば米国特許第５，５８５，０８９号の１２〜１６欄に記載されており、前記文献の内容は参照として本明細書に援用する。抗体をヒト化するための他の技術は、１９９２年１２月２３日に公開されたＰａｄｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．ＥＰ５１９５９６Ａ１に記載されている。
【０２３３】
抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体は、一本鎖抗体であることが可能である。一本鎖抗体は、改変したものであってもよい（例えば、Ｃｏｌｃｈｅｒ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９９９）  Ａｎｎ  Ｎ  Ｙ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ８８０：２６３‐８０；及びＲｅｉｔｅｒ，Ｙ．（１９９６）  Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２：２４５‐５２参照）。一本鎖抗体を二量体化または多量体化して、同じ標的ＬＩＮＧＯ‐１タンパク質の異なるエピトープに対する特異性を有する多価抗体を生成することができる。
【０２３４】
さらに他の実施形態では、抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ及びＩｇＥの重鎖定常領域から選択され；特に、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４の（例えば、ヒト）重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域を有する。別の実施形態では、抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダの（例えば、ヒト）軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。定常領域は、改変、例えば突然変異導入して、抗体の特性を改変する（例えば：Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、及び／または補体機能の１つ以上を増加または減少させる）ことができる。一実施形態では、抗体は：エフェクター機能を有し；及び補体を結合することができる。他の実施形態では、抗体は、エフェクター細胞を；リクルートせず；または補体に結合しない。別の実施形態では、抗体は、Ｆｃ受容体に結合する能力が低下しているか、または完全にない。例えば、それはアイソタイプもしくはサブタイプ、断片または他の突然変異体であり、それはＦｃ受容体への結合をサポートせず、例えば突然変異導入または欠失したＦｃ受容体結合領域を有する。
【０２３５】
ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、１つ以上のエフェクター機能を媒介する定常領域を含むことができる。例えば、補体のＣ１成分の抗体定常領域への結合は、補体系を活性化し得る。補体の活性化は、細胞病原体のオプソニン処理及び溶解において重要である。補体の活性化はまた、炎症反応を刺激し、また、自己免疫過敏症に関与し得る。さらに、抗体は、Ｆｃ領域を介して様々な細胞上の受容体に結合し、抗体Ｆｃ領域上のＦｃ受容体結合部位は、細胞上のＦｃ受容体（ＦｃＲ）に結合する。ＩｇＧ（ガンマ受容体）、ＩｇＥ（イプシロン受容体）、ＩｇＡ（アルファ受容体）及びＩｇＭ（ミュー受容体）を含む、異なるクラスの抗体に特異的な多数のＦｃ受容体が存在する。細胞表面上のＦｃ受容体への抗体の結合は、抗体コーティング粒子の貪食及び破壊、免疫複合体のクリアランス、キラー細胞による抗体コーティング標的細胞の溶解（本明細書では、抗体依存性細胞傷害、すなわちＡＤＣＣとも呼ぶ）、炎症性メディエーターの放出、胎盤移植及び免疫グロブリン産生の制御を含む、多数の重要かつ多様な生物学的応答を引き起こす。
【０２３６】
特定の実施形態では、１つ以上の定常領域ドメインの少なくとも一部を欠失させるか、または改変した抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ほぼ同一の免疫原性の非改変の全長抗体に比べて、エフェクター機能の低下、非共有結合的に二量体化する能力、腫瘍部位に局在化する能力の増加、血清半減期の減少、または血清半減期の増加などの所望の生化学的特徴を提供する。例えば、本明細書に記載の診断及び治療方法で使用する特定の抗体は、免疫グロブリン重鎖に類似するポリペプチド鎖を含むが、少なくとも１つの重鎖ドメインの一部を欠くドメイン欠失抗体である。例えば、ある種の抗体では、改変した抗体の定常領域の１つのドメイン全体を欠失させ、例えば、ＣＨ２ドメインの全部または一部を欠失させる。
【０２３７】
特定のＬＩＮＧＯ‐１抗体分子では、当該分野で公知の技術を用いて、Ｆｃ部分を突然変異させてエフェクター機能を低下させてもよい。例えば、定常領域ドメインの（点突然変異または他の手段による）欠失または不活性化によって、改変した抗体の血中でのＦｃ受容体結合が低下し、それによって腫瘍局在が増加し得る。他の場合には、本発明と一致する定常領域の改変が補体結合を緩和し、それによってコンジュゲートした細胞毒素の血清半減期及び非特異的会合を低減することができる。さらに、定常領域の他の改変を用いて、ジスルフィド結合またはオリゴ糖部分を修飾してもよく、それによって、抗原特異性または抗体の柔軟性を高めることによって局在を促進することができる。得られる生理学的特性、バイオアベイラビリティならびに腫瘍局在、生体内分布及び血清半減期などの修飾の他の生化学的効果は、周知の免疫学的技術を用いて過度の実験をすることなく容易に測定及び定量し得る。
【０２３８】
例示的な抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなり、重鎖可変領域の少なくとも１つのＣＤＲ、または重鎖可変領域の少なくとも２つのＣＤＲは、表３に記載するように、Ｌｉ６２もしくはＬｉ８１またはその変異体の参照重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である。あるいは、ＶＨのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３領域は、表３に記載するように、Ｌｉ６２またはＬｉ８１の参照重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３アミノ酸配列またはその変異体と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である。したがって、本実施形態によれば、本発明の重鎖可変領域は、表３に示すポリペプチド配列に関連するＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３ポリペプチド配列を有する。特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、表３に記載するようなＶＨポリペプチドもしくはその断片、またはそれらに少なくとも８０％、８５％、９０％、または９５％同一であるアミノ酸配列を含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる。
【表３−１】
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【表３−２】
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【表３−３】
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【表３−４】
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【表３−５】
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【０２３９】
別の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含み、少なくともＣＤＲ３領域は、配列番号４、８及び１７〜４９からなる群より選択される参照ＣＤＲ３配列と少なくとも約８０％、８５％、９０％または９５％同一である。さらなる実施形態では、ＣＤＲ３領域は、配列番号４、８及び１７〜４９からなる群から選択される参照ＣＤＲ３配列と同一である。さらに別の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含み、ＣＤＲ１及びＣＤＲ２領域は、それぞれ配列番号２及び３のＣＤＲ１及びＣＤＲ２アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または１００％同一であり、ＣＤＲ３領域は、配列番号４及び１７〜３４からなる群より選択されるＣＤＲ３アミノ酸配列と同一である。他の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含み、ＣＤＲ１及びＣＤＲ２領域は、それぞれ配列番号６及び７のＣＤＲ１及びＣＤＲ２アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または１００％同一であり、ＣＤＲ３領域は、配列番号８及び３５〜４９からなる群より選択されるＣＤＲ３アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または１００％同一である。
【０２４０】
別の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含み、そこにおいてＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３領域は、表３に示すＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３群と同一のポリペプチド配列を有する。特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１に特異的にまたは優先的に結合するＶＨポリペプチドを有する。
【０２４１】
さらなる実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号１、５及び５３〜８５から選択される参照ＶＨポリペプチド配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または１００％同一であるＶＨポリペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。特定の一実施形態では、ＶＨポリペプチドは、配列番号４、８及び１７〜４９からなる群から選択されるＣＤＲ３アミノ酸配列を含む。
【０２４２】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号１、５及び５３〜８５からなる群より選択されるＶＨポリペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。特定の実施形態では、ＶＨポリペプチドを含む抗体または抗原結合断片は、ＬＩＮＧＯ‐１に特異的または優先的に結合する。
【０２４３】
別の態様では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号１または配列番号５のアミノ酸を有するＶＨを含む。特定の実施形態では、ＶＨを含む抗体または抗原結合断片は、ＬＩＮＧＯ‐１に特異的または優先的に結合する。特定の実施形態では、ＶＨを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる抗体または抗原結合断片は、表３に記載するようなＬｉ６２、Ｌｉ８１またはその変異体と同じエピトープに特異的または優先的に結合するか、または、そのようなモノクローナル抗体がＬＩＮＧＯ‐１へ結合するのを競合的に阻害する。
【０２４４】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、以下のアミノ酸：Ｗ５０、Ｐ５３、Ｉ５７及び／またはＷ１０４の１つ以上の置換を除いては、配列番号１４６のポリペプチドと同一である免疫グロブリン重鎖を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｗ５０を、Ｈ、Ｆ、Ｌ、Ｍ、Ｇ、Ｉ、またはＤ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｐ５３を、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、またはＧ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｉ５７を、Ｇ、Ｍ、Ｎ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｓ、Ｐ、ＶまたはＴ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｗ１０４を、Ｖ、Ｈ、Ｓ、Ｑ、Ｍ、Ｌ、Ｔ、またはＩ残基で置換する。
【０２４５】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、アミノ酸Ｐ５３の置換を除いては、配列番号５のポリペプチドと同一である免疫グロブリン重鎖可変領域を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｐ５３を、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、またはＧ残基で置換する。
【０２４６】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、以下のアミノ酸：Ｗ５０、Ｐ５３、Ｉ５７及び／またはＷ１０４の１つ以上の置換を除いては、配列番号１のポリペプチドと同一である免疫グロブリン重鎖可変領域を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｗ５０を、Ｈ、Ｆ、Ｌ、Ｍ、Ｇ、Ｉ、またはＤ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｐ５３を、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、またはＧ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｉ５７を、Ｇ、Ｍ、Ｎ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｓ、Ｐ、ＶまたはＴ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｗ１０４を、Ｖ、Ｈ、Ｓ、Ｑ、Ｍ、Ｌ、Ｔ、またはＩ残基で置換する。
【０２４７】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、以下のアミノ酸：Ｗ５０、Ｐ５３、Ｉ５７及び／またはＷ１０４の１つ以上の置換を除いては、配列番号６６のポリペプチドと同一である免疫グロブリン重鎖可変領域を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｗ５０を、Ｈ、Ｆ、Ｌ、Ｍ、Ｇ、Ｉ、またはＤ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｐ５３を、Ｌ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、またはＧ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｉ５７を、Ｇ、Ｍ、Ｎ、Ｈ、Ｌ、Ｆ、Ｗ、Ｙ、Ｓ、Ｐ、ＶまたはＴ残基で置換する。いくつかの実施形態では、Ｗ１０４を、Ｖ、Ｈ、Ｓ、Ｑ、Ｍ、Ｌ、Ｔ、またはＩ残基で置換する。
【０２４８】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、上記のＶＨポリペプチドの１つ以上を含み、抗体は、表３に記載するようなＬｉ６２、Ｌｉ８１もしくはその変異体に特異的にもしくは優先的に結合するか、またはそのような抗体がＬＩＮＧＯ‐１に結合するのを競合的に阻害する。
【０２４９】
別の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含み、軽鎖可変領域の少なくとも１つのＣＤＲまたは軽鎖可変領域の少なくとも２つのＣＤＲは、本明細書に開示するモノクローナルＬＩＮＧＯ‐１抗体由来の参照重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２またはＣＤＲ３アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である。あるいは、ＶＬのＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３領域は、本明細書に開示するモノクローナルＬＩＮＧＯ‐１抗体由来の参照軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である。したがって、本実施形態によれば、抗体分子の軽鎖可変領域は、表４に示すポリペプチドに関連するＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３ポリペプチド配列を有する。特定の実施形態では、ＶＬポリペプチドを含む抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１に特異的または優先的に結合する。
【表４】
2018504400.tif 000009
【０２５０】
別の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含み、ここで、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３領域は、表４に示すＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３群と同一のポリペプチド配列を有する。特定の実施形態では、ＶＬポリペプチドを含む抗体または抗原結合断片は、ＬＩＮＧＯ‐１に特異的または優先的に結合する。
【０２５１】
さらなる実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、表４に示す配列番号９または配列番号１３から選択される参照ＶＬポリペプチドと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一であるＶＬポリペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。特定の実施形態では、ＶＬポリペプチドを含む抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１に特異的または優先的に結合する。別の態様では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、表４に示す配列番号９または配列番号１３から選択されるＶＬポリペプチドを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。特定の実施形態では、ＶＬポリペプチドを含む抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、ＬＩＮＧＯ‐１に特異的または優先的に結合する。
【０２５２】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、アミノ酸Ｗ９４の置換を除いては、配列番号１４５のポリペプチドと同一である免疫グロブリン軽鎖から本質的になるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｗ９４を、Ａ、Ｄ、Ｌ、Ｎ、Ｇ、Ｑ、Ｖ、またはＳ残基で置換する。
【０２５３】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、アミノ酸Ｗ９４の置換を除いては、配列番号５のポリペプチドと同一である免疫グロブリン軽鎖可変領域を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなるポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｗ９４を、Ａ、Ｄ、Ｌ、Ｎ、Ｇ、Ｑ、Ｖ、またはＳ残基で置換する。
【０２５４】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、上記のＶＬポリペプチドの１つ以上を含むか、本質的にそれらからなるポリペプチドを含み、抗体は、Ｌｉ６２またはＬｉ８１と同じエピトープに結合するか、またはそのようなモノクローナル抗体がＬＩＮＧＯ‐１に特異的または優先的に結合することを競合的に阻害する。
【０２５５】
他の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は：ｉ）配列番号１または配列番号５３〜７０及び配列番号９；ならびにｉｉｉ）配列番号５または配列番号７１〜８５及び配列番号１３からなる群から選択される、表３に示すようなＶＨポリペプチド、及び表４に示すようなＶＬポリペプチドを含むか、本質的にそれらからなるか、またはそれらからなる。
【０２５６】
いくつかの実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、下記の配列番号８６に示す抗体重鎖、またはそれに対して少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる。
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＡＹＥＭＫＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶ  ＩＧＰＳＧＧＦＴＦＹＡＤＩＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＥ  ＧＤＮＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＩＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫ  ＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＩＶＰＳＳＳＬＧＴＱ  ＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫ  ＰＫＤＴＬＩＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱ  ＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＩＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲ  ＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＩＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴ  ＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＩＱＫＳＬＳ  ＬＳＰＧ  （配列番号８６）
【０２５７】
他の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、アグリコシル化型の抗体重鎖を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる。例えば、アグリコシル化型Ｌｉ８１は、２００８年１月９日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００８／０００３１６及び米国特許第８，１２８，９２６号に記載されており、前記文献はその全体を参照として本明細書に援用する。アグリコシル化型Ｌｉ８１抗体は、Ｌｉ８１重鎖配列中の単一のアミノ酸（Ｔ対Ａ）を変化させることによって作製した。アグリコシル化型Ｌｉ８１重鎖の配列（配列番号５０）を以下に示す。単一のアミノ酸変化を太字で示し、下線を引いている：
【化１】
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【０２５８】
抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、配列番号５０または８６のアミノ酸を含む参照ポリペプチドと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である重鎖を含む。特定の実施形態では、重鎖を含む抗体または抗原結合断片は、ＬＩＮＧＯ‐１に特異的または優先的に結合する。
【０２５９】
一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、アグリコシル化型免疫グロブリンＧサブクラス１（ＩｇＧ１）フレームワークに設計し、エフェクター機能を低下させた完全ヒト抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体である（本明細書では、ＬＩＮＧＯ‐１抗体１とも呼ぶ。ＬＩＮＧＯ‐１ノックアウトマウスの組織学的及び機能的評価を実施し、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体１のｉｎ  ｖｉｖｏ薬理活性が、いくつかの脱髄動物モデルにおいて実証されている。これらの研究の結果は、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体１が、表１に記載する以下の特徴を有することを示している。
【表１−１】
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【表１−２】
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【０２６０】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＨを含み、そこにおいてＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、それぞれ配列番号６、７及び８のアミノ酸、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【０２６１】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＨを含み、そこにおいてＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、それぞれ配列番号２、３及び３０のアミノ酸またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【０２６２】
別の実施形態では、抗体分子は、ＶＬを含み、そこにおいてＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３は、それぞれ配列番号１４、１５及び１６のアミノ酸、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【０２６３】
別の実施形態では、抗体分子は、ＶＨを含み、そこにおいてＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のアミノ酸、またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【０２６４】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＨを含み、そこにおいてＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、それぞれ配列番号６、７及び８のアミノ酸を含み；及びＶＬを含み、そこにおいてＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３は、それぞれ配列番号１４、１５及び１６のアミノ酸を含み；またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらと少なくとも８０％、８５％、９０％、または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【０２６５】
一実施形態では、抗体分子は、ＶＨを含み、そこにおいてＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３は、それぞれ配列番号２、３及び３０のアミノ酸を含み；及びＶＬを含み、そこにおいてＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３は、それぞれ配列番号１０、１１及び１２のアミノ酸を含み；またはそれらと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それらと少なくとも８０％、８５％、９０％、または９５％同一のアミノ酸配列）を含む。
【０２６６】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号５のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号５と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有するＶＨを含む。
【０２６７】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号６６のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号６６と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有するＶＨを含む。
【０２６８】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号１３のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号１３と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有するＶＬを含む。
【０２６９】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号９のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号９と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有するＶＬを含む。
【０２７０】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号５のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号５と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有するＶＨ；及び、配列番号１３のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号１３と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有するＶＬを含む。
【０２７１】
一実施形態では、抗体分子は、配列番号６６のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号６６と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有するＶＨ；及び、配列番号９のアミノ酸配列またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、前記配列番号９と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有するＶＬを含む。
【０２７２】
別の実施形態では、抗体分子は、下記に示す配列番号２７５のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一の配列（例えば、それと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有する重鎖を含む：
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧ  ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ  ＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ  ＡＹＥＭＫＷＶＲＱＡ  ＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶ
ＩＧＰＳＧＧＦＴＦＹ  ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩ  ＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹ  ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ  ＴＡＶＹＹＣＡＴＥＧ
ＤＮＤＡＦＤＩＷＧＱ  ＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳ  ＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡ  ＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴ  ＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹ
ＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮ  ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴ  ＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬ  ＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰ  ＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩ
ＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴ  ＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳ  ＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣ  ＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳ  ＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤ
ＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶ  ＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥ  ＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶ  ＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴ  ＫＰＲＥＥＱＹＮＳＡ
ＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬ  ＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹ  ＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰ  ＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡ  ＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹ
ＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴ  ＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶ  ＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶ  ＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮ  ＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤ
ＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫ  ＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱ  ＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨ  ＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫ  ＳＬＳＬＳＰＧ  （配列番号２７５）
【０２７３】
他の実施形態では、抗体分子は、下記に示す配列番号２７６のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一の配列（例えば、それと少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一のアミノ酸配列）を有する軽鎖を含む：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＡＴ  ＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴ  ＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳ  ＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰ  ＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤ
ＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ  ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ  ＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰ  ＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱ  ＲＳＮＷＰＭＹＴＦＧ
ＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴ  ＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰ  ＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴ  ＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦ  ＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫ
ＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳ  ＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫ  ＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬ  ＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨ  ＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱ
ＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦ  ＮＲＧＥＣ  （配列番号２７６）
【０２７４】
上記のポリペプチドのいずれかは、さらなるポリペプチド、例えば、コードするポリペプチドの分泌を誘導するシグナルペプチド、本明細書に記載の抗体定常領域、または本明細書に記載の他の異種ポリペプチドをさらに含み得る。さらに、本発明のポリペプチドには、他の箇所に記載するポリペプチド断片が含まれる。さらに、本発明のポリペプチドには、本明細書に記載の融合ポリペプチド、Ｆａｂ断片及び他の誘導体が含まれる。
【０２７５】
また、本明細書の他の箇所でより詳細に記載するように、本発明は、上記のポリペプチドを有する組成物を包含する。
【０２７６】
当業者であれば、本明細書中に開示するＬＩＮＧＯ‐１抗体ポリペプチドを、それらが由来する天然に存在する結合ポリペプチドに対し、アミノ酸配列が様々に異なるように改変してもよいことを理解するであろう。例えば、指定のタンパク質に由来するポリペプチドまたはアミノ酸配列は、類似していてもよく、例えば、初期配列に対してある割合で同一性を有していてもよく、例えば、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％同一であってもよい。
【０２７７】
さらに、「非必須」アミノ酸領域での保存的置換または変化を導くヌクレオチドまたはアミノ酸の置換、欠失、または挿入を行ってもよい。例えば、指定のタンパク質に由来するポリペプチドまたはアミノ酸配列は、１つ以上の個々のアミノ酸の置換、挿入、または欠失、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０個、またはそれ以上の個々の置換、挿入、または欠失を除いては、初期配列と同一であってもよい。特定の実施形態では、指定のタンパク質に由来するポリペプチドまたはアミノ酸配列は、初期配列に対して１〜５、１〜１０、１〜１５、または１〜２０個の個々のアミノ酸置換、挿入、または欠失を有する。
【０２７８】
可溶性ＬＩＮＧＯ拮抗薬及び融合タンパク質
別の実施形態では、修復剤、例えばＬＩＮＧＯ‐１の拮抗薬は、可溶性ＬＩＮＧＯ分子、例えばＬＩＮＧＯ‐１分子（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１の断片）、またはＬＩＮＧＯ‐１複合体成分の可溶型（例えば、可溶型ＮｇＲ１、ｐ７５、またはＴＡＪ（ＴＲＯＹ））である。
【０２７９】
特定の実施形態では、可溶性ＬＩＮＧＯ分子またはＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、抗体と通常は会合しないアミノ酸配列または１つ以上の部分を含む。例示的な修飾を、以下により詳細に記載する。例えば、本発明の一本鎖ｆｖ抗体断片に、可撓性リンカー配列を含めてもよく、または機能的部分（例えば、ＰＥＧ、薬物、毒素、または標識）を付加するための修飾を加えてもよい。
【０２８０】
本明細書に記載の抗体分子、可溶型ＬＩＮＧＯ‐１、または複合体成分は、単独で用いるか、または第二の部分、異種部分、例えば、異種ポリペプチドに、機能的に連結することができる（例えば、化学的カップリング、遺伝子またはポリペプチド融合、非共有結合または他の方法によって）。ポリヌクレオチドまたはポリペプチドに用いる「異種」という用語は、自然界において天然には連結していない部分を意味する。例えば、前記ポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、比較対象の実体の残りの部分とは別個の実体に由来するものである。例えば、本明細書中で使用する場合、ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子に融合させる「異種ポリペプチド」とは、同じ種の非免疫グロブリンポリペプチド、または異なる種の免疫グロブリンもしくは非免疫グロブリンポリペプチドに由来する。
【０２８１】
異種部分の例として、免疫グロブリンＦｃドメイン、血清アルブミン、ＰＥＧ化体、ＧＳＴ、Ｌｅｘ‐Ａ及びＭＢＰポリペプチド配列が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。融合タンパク質には、さらに、第一の部分、例えば抗体分子、可溶型ＬＩＮＧＯ‐１または複合体成分を第二の部分に連結するリンカー配列を含めてもよい。他の実施形態では、さらなるアミノ酸配列を融合タンパク質のＮまたはＣ末端に付加して、発現、立体的柔軟性、検出及び／または単離もしくは精製を促進することができる。例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥをはじめとする様々なアイソタイプの重鎖定常領域に、可溶型ＬＩＮＧＯ‐１または複合体成分を融合させることができる。
【０２８２】
本明細書に記載の抗体分子及び可溶性または融合タンパク質は、とりわけ、抗体（例えば、二重特異性または多重特異性抗体）などの１つ以上の他の分子実体に機能的に連結することができる（例えば、化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合、または他の方法によって）。
【０２８３】
一実施形態では、融合タンパク質は、ＬＩＮＧＯまたは複合体成分の細胞外ドメイン（またはそれらに相同な配列）を含み、例えば、ヒト免疫グロブリンＦｃ鎖、例えばヒトＩｇＧ（例えば、ヒトＩｇＧ１もしくはヒトＩｇＧ２、またはそれらの変異体）に融合している。Ｆｃ配列を１つ以上のアミノ酸部位で変異させ、エフェクター細胞機能、Ｆｃ受容体結合及び／または補体活性を低下させることができる。
【０２８４】
特定の実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、融合タンパク質を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなることができる。本文脈における融合タンパク質は、例えば、少なくとも１つの標的結合部位を有する免疫グロブリン抗原結合ドメイン、及び少なくとも１つの異種部分を含むキメラ分子である。アミノ酸配列は、通常、別個のタンパク質中に存在しており、それらを融合ポリペプチド中に集めることが可能であるか、または通常は同じタンパク質中に存在しており、それらを融合ポリペプチド中に新たな配置で配置してもよい。融合タンパク質は、例えば、化学合成によって、またはペプチド領域が所望の関係でコードされているポリヌクレオチドを作製及び翻訳することによって作製することができる。
【０２８５】
核酸分子／組換え発現
本発明は、本明細書に記載の任意のポリペプチド、例えば修復剤及び免疫調節物質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子、宿主細胞及びベクターも包含する。
【０２８６】
例示的な一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）をコードする核酸を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる単離ポリヌクレオチドであって、重鎖可変領域の少なくとも１つのＣＤＲまたは重鎖可変領域の少なくとも２つのＣＤＲが、表３に記載のＬｉ６２もしくはＬｉ８１またはその変異体の参照重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である単離ポリヌクレオチドを提供する。あるいは、ＶＨのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３領域は、表３に記載のＬｉ６２もしくはＬｉ８１またはその変異体の参照重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である。したがって、本実施形態によれば、本発明の重鎖可変領域は、表３に示すポリペプチド配列に関連するＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３ポリペプチド配列を有する。
【０２８７】
別の例示的な実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）をコードする核酸を含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなる単離ポリヌクレオチドであって、軽鎖可変領域の少なくとも１つのＣＤＲまたは軽鎖可変領域の少なくとも２つのＣＤＲが、本明細書に記載のモノクローナルＬＩＮＧＯ‐１抗体由来の参照軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である単離ポリヌクレオチドを提供する。あるいは、ＶＬのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３領域は、本明細書に開示するモノクローナルＬＩＮＧＯ‐１抗体由来の参照軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３アミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％同一である。したがって、一実施形態によれば、本発明の軽鎖可変領域は、表４に示すポリペプチド配列に関連するＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３ポリペプチド配列を有する。
【０２８８】
上記のポリヌクレオチドのいずれかは、例えば、コードするポリペプチドの分泌を誘導するシグナルペプチド、本明細書に記載の抗体定常領域、または本明細書に記載の他の異種ポリペプチドをコードする追加の核酸を、さらに有してもよい。
【０２８９】
上記の１つ以上のポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチドを含有する組成物もまた開示する。一実施形態では、組成物は、第一のポリヌクレオチド及び第二のポリヌクレオチドを含み、前記第一のポリヌクレオチドは本明細書に記載のＶＨポリペプチドをコードし、前記第二のポリヌクレオチドは本明細書に記載のＶＬポリペプチドをコードする。
【０２９０】
他の箇所に記載するように、本発明のポリヌクレオチドの断片もまた開示する。さらに、本発明は、本明細書に記載の融合ポリヌクレオチド、Ｆａｂ断片、及び他の誘導体をコードするポリヌクレオチドも想定する。
【０２９１】
ポリヌクレオチドは、当該分野で公知の任意の方法によって生産または製造することができる。例えば、抗体のヌクレオチド配列が既知である場合、抗体をコードするポリヌクレオチドを、化学合成したオリゴヌクレオチドから組み立ててもよく（例えば、Ｋｕｔｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １７：２４２（１９９４）に記載されているように）、簡潔に述べると、その組立ては、抗体をコードする配列の部分を含むオーバーラッピングオリゴヌクレオチドの合成、それらのオリゴヌクレオチドのアニーリング及びライゲーション、次いでライゲーションしたオリゴヌクレオチドのＰＣＲによる増幅を含む。
【０２９２】
本明細書に記載のポリペプチド、例えばＬＩＮＧＯ‐１に結合する抗体分子の組換え発現には、ポリペプチド、例えば抗体分子をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターの構築が必要である。抗体分子または抗体の重鎖もしくは軽鎖、またはその一部（好ましくは重鎖または軽鎖可変ドメインを含む）をコードするポリヌクレオチドが得られたら、当該技術分野で公知の技術を使用する組換えＤＮＡ技術によって、抗体分子産生用のベクターを合成してもよい。したがって、ヌクレオチド配列をコードするポリペプチドを含有するポリヌクレオチドを発現させることによってタンパク質を調製する方法は、本明細書及び米国特許第８，０５８，４０６号に記載されており、前記文献の内容はその全体を参照として援用する。
【０２９３】
当業者に公知の方法を用いて、抗体コード配列及び適切な転写及び翻訳調節シグナルを含む発現ベクターを構築することができる。これらの方法として、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換えＤＮＡ技術、合成技術、及びｉｎ  ｖｉｖｏ遺伝子組換えが挙げられる。複製可能なベクターは、プロモーターに作動可能に連結した、本明細書に記載のポリペプチド（例えば、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子、またはその重鎖もしくは軽鎖、または重鎖もしくは軽鎖可変ドメイン）をコードするヌクレオチド配列を含む。そのようなベクターは、抗体分子の定常領域をコードするヌクレオチド配列を有してもよく（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ８６／０５８０７；ＰＣＴ公開ＷＯ８９／０１０３６；及び米国特許第５，１２２，４６４号参照）、重鎖または軽鎖全体の発現のために、そのようなベクターに抗体の可変ドメインをクローニングしてもよい。
【０２９４】
重鎖由来ポリペプチドをコードする第一のベクター及び軽鎖由来ポリペプチドをコードする第二のベクターの２つの発現ベクターを用いて、宿主細胞へ同時に遺伝子導入してもよい。２つのベクターは、重鎖及び軽鎖ポリペプチドの等しい発現を可能にする同一の選択可能なマーカーを有してもよい。あるいは、重鎖ポリペプチド及び軽鎖ポリペプチドの両方をコードする単一のベクターを使用してもよい。そのような状況では、有毒な遊離重鎖の過剰を避けるために、軽鎖を重鎖の前方に配置するのが効果的である（Ｐｒｏｕｄｆｏｏｔ，Ｎａｔｕｒｅ  ３２２：５２（１９８６）；Ｋｏｈｌｅｒ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：２１９７（１９８０））。重鎖及び軽鎖のコード配列は、ｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡを含む場合がある。
【０２９５】
用語「ベクター」または「発現ベクター」は、本明細書中では、宿主細胞中に所望の遺伝子を導入し発現させるためのビヒクルとして使用するベクターを意味するために使用する。当業者には周知のように、このようなベクターは、プラスミド、ファージ、ウイルス及びレトロウイルスからなる群から容易に選択することができる。一般的に、本発明に適合するベクターは、選択マーカー、所望の遺伝子のクローニングを容易にする適切な制限酵素部位、及び真核または原核細胞へ進入し、及び／またはそれらの細胞内で複製する能力を有する。
【０２９６】
本発明の目的のために、多数の発現ベクター系を用いることができる。例えば、ベクターの１つのクラスは、ウシパピローマウイルス、ポリオーマウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、レトロウイルス（ＲＳＶ、ＭＭＴＶまたはＭＯＭＬＶ）またはＳＶ４０ウイルスなどの動物ウイルス由来のＤＮＡエレメントを利用する。他のものは、配列内リボソーム結合部位を用いるポリシストロニック系の使用を含む。さらに、遺伝子導入した宿主細胞を選択可能な１つ以上のマーカーを導入することによって、ＤＮＡを自らの染色体に組み込んだ細胞を選択してもよい。マーカーは、栄養要求性の宿主に対する原栄養性、殺生物剤耐性（例えば、抗生物質）または銅などの重金属に対する耐性を提供し得る。選択可能なマーカー遺伝子は、発現させるＤＮＡ配列に直接連結させるか、または共形質転換によって同じ細胞内に導入することができる。ｍＲＮＡの最適な合成のための、さらなる要素が必要となる場合がある。これらの要素には、シグナル配列、スプライスシグナル、ならびに転写プロモーター、エンハンサー及び終結シグナルが含まれる場合がある。
【０２９７】
一実施形態では、上述のように、クローニングした可変領域遺伝子を、重鎖及び軽鎖定常領域遺伝子（好ましくはヒト）合成物とともに発現ベクターに挿入する。一実施形態では、これを、ＮＥＯＳＰＬＡ（米国特許第６，１５９，７３０号）と呼ばれるバイオジェンＩＤＥＣ社の独自の発現ベクターを用いて行う。本ベクターは、サイトメガロウイルスプロモーター／エンハンサー、マウスベータグロビン主要プロモーター、ＳＶ４０複製起点、ウシ成長ホルモンポリアデニル化配列、ネオマイシンホスホトランスフェラーゼエクソン１及びエクソン２、ジヒドロ葉酸レダクターゼ遺伝子及びリーダー配列を含む。本ベクターは、可変及び定常領域遺伝子の組込み、ＣＨＯ細胞への遺伝子導入、その後のＧ４１８含有培地中での選択及びメトトレキサートによる増幅において、抗体の非常に高レベルの発現をもたらすことが判明した。もちろん、本発明では、真核細胞において発現を誘導可能な任意の発現ベクターを使用してもよい。適切なベクターの例として、プラスミドｐｃＤＮＡ３、ｐＨＣＭＶ／Ｚｅｏ、ｐＣＲ３．１、ｐＥＦ１／Ｈｉｓ、ｐＩＮＤ／ＧＳ、ｐＲｃ／ＨＣＭＶ２、ｐＳＶ４０／Ｚｅｏ２、ｐＴＲＡＣＥＲ‐ＨＣＭＶ、ｐＵＢ６／Ｖ５‐Ｈｉｓ、ｐＶＡＸ１、及びｐＺｅｏＳＶ２（インビトロジェン、サンディエゴ、カリフォルニアから入手可能）、及びプラスミドｐＣＩ（プロメガ、マディソン、ウィスコンシンから入手可能）が挙げられる。一般的に、免疫グロブリンの重鎖及び軽鎖を適切に高いレベルで発現するものについて、多数の形質転換細胞をスクリーニングすることは、例えばロボットシステムによって実施可能な通例の実験法である。ベクター系はまた、米国特許第５，７３６，１３７号及び第５，６５８，５７０号に記載されており、前記の各々の文献は、参照としてその全体を本明細書に援用する。この系は、高発現レベル、例えば＞３０ｐｇ／細胞／日を提供する。他の例示的なベクター系は、例えば、米国特許第６，４１３，７７７号に記載されている。
【０２９８】
他の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、２００２年１１月１８日に出願された米国特許出願公開第２００３‐０１５７６４１Ａ１号に開示されており、その全体を本明細書に援用するポリシストロニック構築物を用いて発現させることができる。これらの新規発現系において、抗体の重鎖及び軽鎖のような目的の複数の遺伝子産物を、単一のポリシストロニック構築物から産生してもよい。これらの系は、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）を有効に利用して、真核生物宿主細胞において比較的高レベルの結合ポリペプチドを供給する。互換性のあるＩＲＥＳ配列は、米国特許第６，１９３，９８０号に記載されている。当業者であれば、そのような発現系を用いて、本願に開示する全範囲のポリペプチドを効果的に産生することができることを理解するであろう。
【０２９９】
より一般的には、ポリペプチド、例えば抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の単量体サブユニットをコードするベクターまたはＤＮＡ配列を調製した後、発現ベクターを適切な宿主細胞に導入してもよい。宿主細胞へのプラスミドの導入は、当業者に周知の様々な技術によって達成することができる。その例として、遺伝子導入（電気泳動及び電気穿孔法を含む）、プロトプラスト融合、リン酸カルシウム沈殿、エンベロープＤＮＡとの細胞融合、マイクロインジェクション、インタクトなウイルスを用いた感染が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。Ｒｉｄｇｗａｙ，  Ａ．  Ａ．  Ｇ．  “Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｖｅｃｔｏｒｓ”  Ｖｅｃｔｏｒｓ，  Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ  ａｎｄ  Ｄｅｎｈａｒｄｔ，  Ｅｄｓ．，  Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈｓ，  Ｂｏｓｔｏｎ，  Ｍａｓｓ．，  Ｃｈａｐｔｅｒ  ２４．２，  ｐｐ．  ４７０‐４７２  （１９８８）参照。一般的には、宿主へのプラスミドの導入は電気穿孔法によって行う。発現構築物を保有する宿主細胞を、軽鎖及び重鎖の産生に適した条件下で増殖させ、その重鎖及び／または軽鎖タンパク質合成についてアッセイする。アッセイ技術の例として、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、または蛍光励起セルソーター分析（ＦＡＣＳ）、免疫組織化学などが挙げられる。
【０３００】
発現ベクターを従来技術によって宿主細胞に移行させ、次に、遺伝子導入した細胞を従来技術によって培養し、本明細書に記載の方法で使用するためのポリペプチドを産生する。したがって、本発明は、異種プロモーターに作動可能に連結する、本発明の抗体またはその重鎖もしくは軽鎖をコードするポリヌクレオチドを保有する宿主細胞を包含する。二本鎖抗体の発現のための好ましい実施形態では、その内容の全体を参照として本明細書に援用する米国特許第８，０５８，４０６号に詳述されているように、免疫グロブリン分子全体の発現のために、重鎖及び軽鎖の両方をコードするベクターを宿主細胞内で同時発現させてもよい。
【０３０１】
本明細書中で使用する場合、「宿主細胞」とは、組換えＤＮＡ技術を用いて構築した、少なくとも１つの異種遺伝子をコードするベクターを保有する細胞を指す。組換え宿主から抗体を単離する方法の記載において、用語「細胞」及び「細胞培養」は、他に明確に特定しない限り、抗体の供給源を示すために同じ意味で使用する。換言すれば、「細胞」からのポリペプチドの回収物とは、全細胞をスピンダウンしたものか、または培地及び懸濁した細胞の両方を含む細胞培養物のいずれかに由来することを意味する場合がある。
【０３０２】
様々な宿主‐発現ベクター系を利用して、本明細書に記載の方法で使用するためのポリペプチド、例えば抗体分子を発現させてもよい。これらの例として、ポリペプチドコード配列を有する組換えバクテリオファージＤＮＡ、プラスミドＤＮＡまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターで形質転換した細菌（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のような微生物；抗体コード配列を有する組換え酵母発現ベクターで形質転換した酵母（例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｐｉｃｈｉａ）；ポリペプチドコード配列を有する組換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）で感染させた昆虫細胞系；組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルスＣａＭＶ；タバコモザイクウイルスＴＭＶ）で感染させるか、または抗体コード配列を有する組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転換した植物細胞系；哺乳類細胞ゲノム由来プロモーター（例えば、メタロチオネインプロモーター）または哺乳類ウイルス由来プロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーター；ワクシニアウイルス７．５Ｋプロモーター）を含む組換え発現構築物を保有する哺乳類細胞系（例えば、ＣＯＳ、ＣＨＯ、ＢＬＫ、２９３、３Ｔ３細胞）が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。通常、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉなどの細菌細胞、より一般的には、特に組換え抗体分子全体を発現させるために、真核細胞を用いて組換えポリペプチドまたは抗体分子を発現させる。例えば、ヒトサイトメガロウイルス由来の主要中間初期遺伝子プロモーターエレメントなどのベクターを保有するチャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）などの哺乳類細胞は、ポリペプチド抗体のための有効な発現系である（Ｆｏｅｃｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  ４５：１０１（１９８６）；Ｃｏｃｋｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ８：２（１９９０））。
【０３０３】
タンパク質発現のために使用する宿主細胞株は、しばしば哺乳類起源である；当業者であれば、そこで発現する所望の遺伝子産物に最も適した特定の宿主細胞株を好適に決定する能力があると考えられる。宿主細胞株の例として、ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）、ＤＧ４４及びＤＵＸＢ１１（チャイニーズハムスター卵巣株、ＤＨＦＲ−）、ＨＥＬＡ（ヒト子宮頸癌）、ＣＶＩ（サル腎臓株）、ＣＯＳ（ＳＶ４０  Ｔ抗原を有するＣＶＩの誘導体）、ＶＥＲＹ、ＢＨＫ（ベビーハムスター腎臓）、ＭＤＣＫ、２９３、Ｗ１３８、Ｒ１６１０（チャイニーズハムスター線維芽細胞）ＢＡＬＢＣ／３Ｔ３（マウス線維芽細胞）、ＨＡＫ（ハムスター腎臓株）、ＳＰ２／Ｏ（マウス骨髄腫）、Ｐ３×６３‐Ａｇ３．６５３（マウス骨髄腫）、ＢＦＡ‐１ｃ１ＢＰＴ（ウシ内皮細胞）、ＲＡＪＩ（ヒトリンパ球）及び２９３（ヒト腎臓）が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。宿主細胞株は、一般的には、商業サービス、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎまたは公開文献から入手可能である。
【０３０４】
さらに、挿入した配列の発現を調節するか、または所望の特定の様式で遺伝子産物を修飾及びプロセシングする宿主細胞株を選択してもよい。タンパク質産物のそのような修飾（例えば、グリコシル化）及びプロセシング（例えば、切断）は、タンパク質の機能にとって重要である場合がある。様々な宿主細胞が、タンパク質及び遺伝子産物の翻訳後プロセシング及び修飾のための特徴的かつ特異的な機構を有する。適切な細胞株または宿主系を選択することにより、発現させた外来タンパク質の正しい修飾及びプロセシングを保証することができる。この目的のために、一次転写産物の適切なプロセシング、遺伝子産物のグリコシル化、及びリン酸化のための細胞機構を有する真核生物宿主細胞を使用してもよい。
【０３０５】
組換えタンパク質の長期間の高収率生産のためには、安定した発現が好ましい。例えば、抗体分子を安定に発現する細胞株をエンジニアリングしてもよい。ウイルス複製起点を有する発現ベクターを使用するのではなく、適切な発現調節エレメント（例えば、プロモーター、エンハンサー、配列、転写ターミネーター、ポリアデニル化部位など）、及び選択マーカーによって制御されるＤＮＡで宿主細胞を形質転換することができる。外来ＤＮＡを導入した後、改変細胞を、富化培地中で１〜２日間増殖させてもよく、その後、選択培地に切り替える。組換えプラスミド中の選択マーカーは、選択に対する耐性を付与し、これによって細胞はプラスミドを自身の染色体に安定的に組み込み、増殖して病変を形成することができ、次いで病変をクローニングして細胞株に発展させることができる。本方法を効果的に用いて、抗体分子を安定的に発現する細胞株をエンジニアリングしてもよい。
【０３０６】
ＣＨＯ細胞が特に好ましい。特定の実施形態では、ヒトＬＩＮＧＯ‐１タンパク質に特異的なＩｇＧ１‐ａｇｌｙ重軽鎖構造遺伝子を有する発現ベクターを用いて安定に遺伝子導入したＣＨＯ細胞において、抗体分子を発現させる。小胞体関連シグナルペプチダーゼによって翻訳後に除去されることになるネイティブのヒトカッパ軽鎖シグナルペプチド及びヒト重鎖シグナルペプチドを用いて、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子の分泌を誘導することができる。抗体分子は、培地から精製し、液体として製剤化することができる。抗体分子は、鎖間ジスルフィド結合によって連結する２つの重鎖及び２つの軽鎖からなることが可能である。一実施形態では、完全な抗体分子の質量は、およそ１４４．４ｋＤａである。
【０３０７】
多くの選択系を使用してもよく、例として、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ（Ｗｉｇｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  １１：２２３（１９７７））、ヒポキサンチン‐グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｓｚｙｂａｌｓｋａ＆Ｓｚｙｂａｌｓｋｉ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ４８：２０２（１９９２））、及びアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｌｏｗｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  ２２：８１７  １９８０）が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではなく、遺伝子は、それぞれｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−またはａｐｒｔ−細胞内で用いることができる。また、代謝拮抗薬に対する耐性は、以下の遺伝子の選択の基礎として使用することができる：メトトレキサートに対する耐性を付与するｄｈｆｒ（Ｗｉｇｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：３５７（１９８０）；Ｏ’Ｈａｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７８：１５２７（１９８１））；ミトコフェノール酸に対する耐性を付与するｇｐｔ（Ｍｕｌｌｉｇａｎ＆Ｂｅｒｇ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７８：２０７２（１９８１））；アミノグリコシドＧ‐４１８に対する耐性を与えるｎｅｏ、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  １２：４８８‐５０５；Ｗｕ  ａｎｄ  Ｗｕ，Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ３：８７‐９５（１９９１）；Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３２：５７３‐５９６（１９９３）；Ｍｕｌｌｉｇａｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６０：９２６‐９３２（１９９３）；及びＭｏｒｇａｎ  ａｎｄ  Ａｎｄｅｒｓｏｎ，  Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６２：１９１‐２１７（１９９３）；ＴＩＢ  ＴＥＣＨ  １１（５）：１５５‐２１５（Ｍａｙ，  １９９３）；ハイグロマイシンに対する耐性を付与するｈｙｇｒｏ（Ｓａｎｔｅｒｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  ３０：１４７（１９８４）。組換えＤＮＡ技術の分野で一般に公知の使用可能な方法は、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（１９９３）；Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ（１９９０）；ａｎｄ  ｉｎ  Ｃｈａｐｔｅｒｓ  １２  ａｎｄ  １３，  Ｄｒａｃｏｐｏｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｌｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（１９９４）；  Ｃｏｌｂｅｒｒｅ‐Ｇａｒａｐｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５０：１（１９８１）に記載されており、これらの文献はその全体を参照として本明細書に援用する。
【０３０８】
ポリペプチド、例えば抗体の発現、産生及び／または精製のさらなる方法及び宿主系は、米国特許第８，０５８，４０６号に開示されており、前記文献の内容はその全体を参照として本明細書に援用する。
【０３０９】
核酸拮抗薬
特定の実施形態において、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬は、ＬＩＮＧＯ‐１をコードする核酸の発現を阻害する。このようなＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬の例として、ＬＩＮＧＯ‐１をコードする核酸または転写調節領域にハイブリダイズしてＬＩＮＧＯ‐１のｍＲＮＡ発現をブロックまたは低下させる、以下のような核酸分子、例えばアンチセンス分子、リボザイム、ＲＮＡｉ二本鎖分子、三重ヘリックス分子、マイクロＲＮＡ分子などが挙げられる。
【０３１０】
「アンチセンス」核酸は、タンパク質をコードする「センス」核酸に相補的な（例えば、二本鎖ｃＤＮＡ分子のコード鎖に相補的であるかまたはｍＲＮＡ配列に相補的な）ヌクレオチド配列を含み得る。アンチセンス核酸は、ＬＩＮＧＯ‐１コード鎖全体に相補的であってもよく、またはその一部のみに相補的であってもよい。別の実施形態では、アンチセンス核酸分子は、ＬＩＮＧＯ‐１をコードするヌクレオチド配列（例えば、５’及び３’非翻訳領域）のコード鎖の「非コード領域」に対してアンチセンスである。アンチセンス薬は、例えば、約８〜約８０核酸塩基（すなわち、約８〜約８０ヌクレオチド）、例えば、約８〜約５０核酸塩基、または約１２〜約３０核酸塩基を含み得る。アンチセンス化合物には、リボザイム、外部誘導配列（ＥＧＳ）オリゴヌクレオチド（オリゴザイム）、及び標的核酸にハイブリダイズしてその発現を調節する他の短い触媒ＲＮＡまたは触媒オリゴヌクレオチドが含まれる。アンチセンス化合物は、標的遺伝子中の配列に相補的である少なくとも８個の連続核酸塩基のストレッチを含むことができる。オリゴヌクレオチドは、特異的にハイブリダイズ可能なその標的核酸配列と１００％相補的である必要はない。標的へのオリゴヌクレオチドの結合が標的分子の正常な機能を妨げて有用性を失わせるとともに、特異的結合が所望される条件下で、すなわちｉｎ  ｖｉｖｏアッセイまたは治療的処置の場合は生理学的条件下で、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイの場合はアッセイを実施する条件下で、非標的配列へのオリゴヌクレオチドの非特異的結合を回避するのに十分な程度の相補性を有する場合に、オリゴヌクレオチドは特異的にハイブリダイズすることができる。例示的なアンチセンス化合物として、標的核酸、例えばＬＩＮＧＯ‐１をコードするｍＲＮＡに特異的にハイブリダイズするＤＮＡまたはＲＮＡ配列が挙げられる。相補的領域は、約８〜約８０核酸塩基の間に及び得る。前記化合物は、当該技術分野で周知の１つ以上の修飾核酸塩基を含むことができる。核酸剤についての記載が利用可能である。例えば、米国特許第４，９８７，０７１号、第５，１１６，７４２号；及び第５，０９３，２４６号；Ｗｏｏｌｆ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ；Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ＲＮＡ  ａｎｄ  ＤＮＡ，Ｄ．Ａ．Ｍｅｌｔｏｎ，Ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９８８）；８９：７３０５‐９；Ｈａｓｅｌｈｏｆｆ  ａｎｄ  Ｇｅｒｌａｃｈ（１９８８）  Ｎａｔｕｒｅ  ３３４：５８５‐５９；Ｈｅｌｅｎｅ，Ｃ．（１９９１）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．６：５６９‐８４；Ｈｅｌｅｎｅ（１９９２）Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．６６０：２７‐３６；及びＭａｈｅｒ（１９９２）Ｂｉｏａｓｓａｙｓ  １４：８０７‐１５参照。
【０３１１】
ｓｉＲＮＡは、必要に応じて、オーバーハングを含む小さな二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）である。例えば、ｓｉＲＮＡの二重鎖領域は、長さ約１８〜２５ヌクレオチド、例えば長さ約１９、２０、２１、２２、２３、または２４ヌクレオチドである。通常、ｓｉＲＮＡ配列は標的ｍＲＮＡと正確に相補的である。ｄｓＲＮＡ及びｓｉＲＮＡは、特に、哺乳類細胞（例えば、ヒト細胞）における遺伝子発現をサイレンシングするために使用することができる。ｓｉＲＮＡには、２９塩基対のステムと２ヌクレオチドの３’オーバーハングを有する短いヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）も含まれる。例えば、Ｃｌｅｍｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：６４９９‐６５０３；Ｂｉｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９８：１４４２８‐１４４３３；Ｅｌｂａｓｈｉｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｎａｔｕｒｅ．４１１：４９４‐８；Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：９９４２‐９９４７；Ｓｉｏｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００５），Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３（２）：２２７‐３１；２００４００８６８８４；Ｕ．Ｓ．２００３０１６６２８２；２００３０１４３２０４；２００４００３８２７８；及び２００３０２２４４３２参照。
【０３１２】
さらに別の実施形態では、核酸分子はリボザイムである。ＬＩＮＧＯ‐１をコードする核酸に対して特異性を有するリボザイムは、ＬＩＮＧＯ‐１  ｍＲＮＡのヌクレオチド配列に相補的な１つ以上の配列、及びｍＲＮＡ切断を担う公知の触媒配列を有する配列を含み得る（米国特許第５，０９３，２４６号またはＨａｓｅｌｈｏｆｆ  ａｎｄ  Ｇｅｒｌａｃｈ（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３３４：５８５‐５９１；Ｃｅｃｈ  ｅｔ  ａｌ．  米国特許第４，９８７，０７１号；及びＣｅｃｈ  ｅｔ  ａｌ．  米国特許第５，１１６，７４２号；Ｂａｒｔｅｌ，Ｄ．  ａｎｄ  Ｓｚｏｓｔａｋ，Ｊ．Ｗ．（１９９３）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６１：１４１１‐１４１８参照）。
【０３１３】
一実施形態では、核酸分子はマイクロＲＮＡ分子である。ＬＩＮＧＯ‐１をコードする核酸に特異性を有するマイクロＲＮＡは、ＬＩＮＧＯ‐１  ｍＲＮＡのヌクレオチド配列に相補的であって、翻訳抑制または標的分解を介して遺伝子サイレンシングを生じ得る１つ以上の配列を含み得る（Ｂａｒｔｅｌ  ＤＰ（２００９）Ｃｅｌｌ  １３６（２）：２１５‐３３；Ｋｕｓｅｎｄａ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｂｉｏｍｅｄ  Ｐａｐ  Ｍｅｄ  Ｆａｃ  Ｕｎｉｖ  Ｐａｌａｃｋｙ  Ｏｌｏｍｏｕｃ  Ｃｚｅｃｈ  Ｒｅｐｕｂ  １５０（２）：２０５‐１５参照）。
【０３１４】
ＬＩＮＧＯ‐１の調節領域（例えば、ＬＩＮＧＯ‐１プロモーター及び／またはエンハンサー）に相補的なヌクレオチド配列を標的化し、標的細胞内でのＬＩＮＧＯ‐１の転写を妨げる三重ヘリックス構造を形成することによって、ＬＩＮＧＯ‐１遺伝子発現を阻害することができる。１遺伝子を標的細胞に導入した。一般的には、Ｈｅｌｅｎｅ，Ｃ．（１９９１）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．６：５６９‐８４；Ｈｅｌｅｎｅ，Ｃ．（１９９２）Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．６６０：２７‐３６；及びＭａｈｅｒ，Ｌ．Ｊ．（１９９２）Ｂｉｏａｓｓａｙｓ  １４：８０７‐１５参照。いわゆる「スイッチバック」核酸分子を作製することによって、三重ヘリックス形成のための標的とすることができる潜在的配列を増大させることができる。
【０３１５】
ＬＩＮＧＯ‐１核酸分子を、塩基部分、糖部分またはリン酸骨格において修飾し、例えば、分子の安定性、ハイブリダイゼーション、または溶解性を改善することができる。修飾を有する合成オリゴヌクレオチドの非限定的な例としては、Ｔｏｕｌｍｅ（２００１）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．１９：１７  ａｎｄ  Ｆａｒｉａ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．１９：４０‐４４；Ｈｙｒｕｐ  Ｂ．ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４：５‐２３）を参照されたい。
【０３１６】
免疫調節薬
患者の多発性硬化症の経過を改変するために、現在、いくつかの免疫調節薬が使用されている。このような薬剤として、ＩＦＮ‐β１分子、グルタミン酸、リジン、アラニン及びチロシンのポリマー、例えばグラチラマー；アルファ４インテグリンに対する抗体またはその断片、例えば、ナタリズマブ；アントラセンジオン分子、例えば、ミトキサントロン；フィンゴリモド、例えば、ＦＴＹ７２０；ジメチルフマレート、例えば、経口ジメチルフマレート；Ｔ細胞ＩＬ‐２受容体αサブユニット（ＣＤ２５）に対する抗体、例えばダクリズマブ；ＣＤ５２に対する抗体、例えば、アレムツズマブ；ジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼの阻害剤、例えばテリフルノミド；ＣＤ２０に対する抗体、例えば、オクレリズマブ；ならびにコルチコステロイドが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。本明細書に開示する修復剤は、これらの薬剤のいずれかと併用することができる。
【０３１７】
例示的な免疫調節薬を、以下により詳細に記載する。
【０３１８】
ＩＦＮβ剤（ベータインターフェロン）
ＭＳに対する公知の一療法として、インターフェロンベータによる治療が挙げられる。インターフェロン（ＩＦＮ）は、多くの動物の免疫系の細胞が、ウイルス、細菌、寄生虫及び腫瘍細胞などの外来物質による攻撃に応答して産生する天然タンパク質である。インターフェロンは、サイトカインとして知られる糖タンパク質の大分類に属する。インターフェロンベータは１６５アミノ酸を有する。インターフェロンアルファ及びベータは、Ｔ細胞及びＢ細胞、マクロファージ、線維芽細胞、内皮細胞、骨芽細胞などを含む多くの細胞タイプが産生し、マクロファージ及びＮＫ細胞の両方を刺激する。インターフェロンガンマは免疫及び炎症反応の調節に関与している。インターフェロンガンマは、活性化Ｔ細胞及びＴｈ１細胞が産生する。
【０３１９】
いくつかの異なるタイプのインターフェロンが、現在、ヒトでの使用が承認されている。インターフェロンアルファ（インターフェロンアルファ‐２ａ、インターフェロンアルファ‐２ｂ、及びインターフェロンアルファコン‐１）は、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によってＣ型肝炎の治療薬として承認されている。現在、ＦＤＡが承認した２種類のインターフェロンベータがある。インターフェロンベータ１ａ（Ａｖｏｎｅｘ（登録商標））は、ヒトにおいて天然に見出されるインターフェロンベータと同一であり、インターフェロンベータ１ｂ（Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（登録商標））は、位置１７においてシステインの代わりにセリン残基を有することを含めて、ヒトにおいて天然に見出されるインターフェロンベータ１ａとはある程度異なっている。インターフェロンベータの他の用途には、ＡＩＤＳ、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、Ｃ型急性肝炎（非Ａ型、非Ｂ型）、カポジ肉腫、悪性黒色腫、毛状細胞白血病、及び転移性腎細胞癌の治療が含まれる。
【０３２０】
全身性（例えば、経口、非経口、皮下、静脈内、直腸内、筋肉内、硝子体内、腹腔内、鼻腔内、経皮、または吸入もしくは体腔内滴注によって）をはじめとする当該分野で周知の方法によって、ＩＦＮβ剤を患者に投与することができる。一般的には、ＩＦＮβ剤を、皮下、または筋肉内に投与する。
【０３２１】
ＩＦＮβ剤は、本明細書に記載の方法を用いて「レスポンダー」であると判定した被験体を治療するために使用することができる。一実施形態では、ＩＦＮβ剤を単独療法として用いる（すなわち、単一の「疾患修飾療法」として）が、治療レジメンは、抗鬱剤、鎮痛薬、抗振戦剤などの「症状管理療法」の使用をさらに含むことができる。一実施形態では、ＩＦＮβ剤はＩＦＮβ‐１Ａ剤（例えば、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）、Ｒｅｂｉｆ（登録商標））である。別の実施形態では、ＩＮＦβ剤は、ＩＮＦβ‐１Ｂ剤（例えば、Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（登録商標）、Ｂｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）、Ｅｘｔａｖｉａ（登録商標））である。
【０３２２】
インターフェロンβ‐１ａであるＡｖｏｎｅｘ（登録商標）は、本明細書に記載の方法を用いてレスポンダーであると判定した再発型ＭＳ患者の治療に必要であり、身体障害の蓄積を遅らせ、臨床増悪の頻度を低減する。Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）（インターフェロンベータ１ａ）は、およそ２２，５００ダルトンの予測分子量を有する１６６アミノ酸の糖タンパク質である。これは、ヒトインターフェロンベータ遺伝子を導入した遺伝子改変型チャイニーズハムスター卵巣細胞を用いた組換えＤＮＡ技術によって産生される。Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）のアミノ酸配列は、天然のヒトインターフェロンベータのものと同一である。Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）（インターフェロンベータ１ａ）の推奨用量は、週に１回、筋肉内注射で３０ｍｃｇである。Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）は、３０ｍｃｇの凍結乾燥粉末バイアルまたは３０ｍｃｇのプレフィルドシリンジとして市販されている。
【０３２３】
インターフェロンベータ１ａ（Ａｖｏｎｅｘ（登録商標））は、ヒトにおいて天然に見出されるインターフェロンβと同一である（ＡＶＯＮＥＸ（登録商標）、すなわちインターフェロンベータβ１ａ（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ登録番号Ｐ０１５７４及びｇｉ：５０５９３０１６）。インターフェロンベータの配列は以下である：
ＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭ  ＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮ  ＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦ  ＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮ  （配列番号２７７）
【０３２４】
Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）の製造方法は当該技術分野において公知である。
【０３２５】
本明細書に記載の方法を使用して同定したレスポンダーの治療においては、ＡＶＯＮＥＸ（登録商標）と実質的に同様の生物学的活性を有する組成物（例えばＩＦＮ‐β１ａ分子）を、ＡＶＯＮＥＸ（登録商標）による治療と同様の方法で投与した場合に同様の効果的な治療が期待できると考えられる。そのような他の組成物として、例えば、実質的に同様の生物学的活性を有する他のインターフェロン及びその断片、アナログ、ホモログ、誘導体及び天然変異体が挙げられる。一実施形態では、１つ以上の薬物動態特性を増加させるためにＩＮＦβ剤を修飾する。例えば、ＩＮＦβ剤は、インターフェロン１ａの修飾形態であって、ペグ化部分を含むことができる。ＰＥＧ化形態のインターフェロンβ１ａは、例えば、Ｂａｋｅｒ，Ｄ．Ｐ．  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  １７（１）：１７９‐８８；Ａｒｄｕｉｎｉ，ＲＭ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒ  Ｐｕｒｉｆ  ３４（２）：２２９‐４２；Ｐｅｐｉｎｓｋｙ，ＲＢ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２９７（３）：１０５９‐６６；Ｂａｋｅｒ，Ｄ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ  ３０（１０）：７７７‐８５に記載されている（前記文献のすべてはその全体を参照として本明細書に援用するとともに、前記文献は、Ｎ末端アルファアミノ酸で修飾したヒトインターフェロンベータ１ａがＰＥＧ部分、例えば、２０ｋＤａのｍＰＥＧ‐Ｏ‐２‐メチルプロピオンアルデヒド部分を含むことを記載している）。ペグ化形態のＩＦＮ‐ベータ１ａは、例えば、注射可能な投与経路（例えば、皮下）によって投与することができる。
【０３２６】
Ｒｅｂｉｆ（登録商標）もまた、インターフェロンβ１ａ剤であり、一方、Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（登録商標）、Ｂｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）、及びＥｘｔａｖｉａ（登録商標）はインターフェロンβ１ｂ剤である。Ｒｅｂｉｆ（登録商標）及びＢｅｔａｓｅｒｏｎ（登録商標）は、いずれも皮下注射による投与のために製剤化する。
【０３２７】
投与するＩＦＮβ剤の用量は、当業者であれば決定することができ、使用する特定のインターフェロンベータ剤に基づいて投与する臨床的に許容可能な量を含む。例えば、ＡＶＯＮＥＸ（登録商標）は、一般的には、週１回、３０μｇで、筋肉内注射によって投与する。インターフェロンβ１ａの他の形態、具体的にはＲＥＢＩＦ（登録商標）は、例えば、週３回、２２マイクログラム、または週１回、４４マイクログラムで、皮下注射によって投与する。インターフェロンβ１Ａは、例えば、筋肉内に、１０μｇ〜５０μｇの量で投与することができる。例えば、ＡＶＯＮＥＸ（登録商標）は、５〜１０日ごとに、例えば週１回投与することができ、一方、Ｒｅｂｉｆ（登録商標）は、週３回投与することができる。
【０３２８】
抗ＶＬＡ４抗体（例えば、ナタリズマブ（Ｔｙｓａｂｒｉ（登録商標）））
抗ＶＬＡ４抗体（例えば、ナタリズマブ）は、血液から中枢神経系への白血球の移動を阻害する。これらの抗体は、活性化Ｔ細胞及び他の単核白血球の表面上のＶＬＡ‐４（α４β１とも呼ばれる）に結合する。それらは、Ｔ細胞と内皮細胞との間の接着を破壊することができ、したがって、単核白血球の内皮及び実質内への移動を防止することができる。その結果、前炎症性サイトカインのレベルも低下させることができる。ナタリズマブは、再発寛解型多発性硬化症及び再発二次性進行型多発性硬化症の患者における脳病変の数及び臨床的再発ならびに障害の蓄積を低減することができる。
【０３２９】
ナタリズマブ及び関連するＶＬＡ‐４結合抗体は、例えば、米国特許第５，８４０，２９９号に記載されている。モノクローナル抗体２１．６及びＨＰ１／２は、ＶＬＡ‐４に結合する例示的なマウスモノクローナル抗体である。ナタリズマブは、マウスモノクローナル抗体２１．６のヒト化型である（例えば、米国特許第５，８４０，２９９号参照）。ＨＰ１／２のヒト化型も記載されている（例えば、米国特許第６，６０２，５０３号参照）。ＨＰ２／１、ＨＰ２／４、Ｌ２５及びＰ４Ｃ２などのいくつかの追加のＶＬＡ‐４結合モノクローナル抗体は、例えば、米国特許第６，６０２，５０３号；Ｓａｎｃｈｅｚ‐Ｍａｄｒｉｄ  ｅｔ  ａｌ，（１９８６）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６：１３４３‐１３４９；Ｈｅｍｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ，（１９８７）Ｊ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２：１１４７８‐１１４８５；Ｉｓｓｅｋｕｔｚ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４７：１０９（ＴＡ‐２  ｍａｂ）；Ｐｕｌｉｄｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｊ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６：１０２４１‐１０２４５；及び米国特許第５，８８８，５０７号）に記載されている。上記刊行物の内容（抗体組成物、用量、投与方法及び製造物を含む）は、その全体を参照として本明細書に援用する。
【０３３０】
ジメチルフマレート（Ｔｅｃｆｉｄｅｒａ（登録商標））
ジメチルフマレート、すなわちＤＭＦ（Ｔｅｃｆｉｄｅｒａ（登録商標））は、フマル酸エステルである。ＤＭＦは、血液脳関門を通過する白血球の通過を減少させ、抗酸化経路の活性化、特にＮｒｆ‐２経路の活性化による神経保護効果を発揮すると考えられている（Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｉｎｔ  ＭＳ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １５：１２‐１８）。研究はまた、ＢＧ‐１２（登録商標）がＣＮＳに対する炎症細胞の活性及び影響を低減し、ＣＮＳ細胞において直接的な細胞保護応答を誘導する可能性があることを示唆している。これらの効果は、ＣＮＳ細胞の能力を増強し、ＭＳ病態生理に影響を及ぼす有毒な炎症性及び酸化ストレスを緩和し得る。
【０３３１】
酢酸グラチラマー（Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標））
Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）（酢酸グラチラマー）は、合成ポリペプチドの酢酸塩、具体的には４つの天然に存在するアミノ酸：Ｌ‐グルタミン酸、Ｌ‐アラニン、Ｌ‐チロシン、及びＬ‐リジンからなる（Ｂｏｒｎｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．３１７：４０８‐４１４）。Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）はミエリン塩基性タンパク質と構造的類似性を示し、免疫調節薬としてＴヘルパー細胞１型応答をＴヘルパー細胞２型応答にシフトさせることによって機能すると考えられている（Ｄｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １０５：９６７‐９７６；Ｎｉｃｈｏｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ５：２５５‐２７４）。
【０３３２】
ミトキサントロン（Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標）、アントラセンジオン分子）
ミトキサントロンは、アントラセンジオン分子（１，４‐ジヒドロキシ‐５，８‐ビス［２‐（２‐ヒドロキシエチルアミノ）エチルアミノ］‐アントラセン‐９，１０‐ジオン）及び細胞のＤＮＡ合成及び修復を妨害するＩＩ型トポイソメラーゼ阻害剤である。ミトキサントロンは、癌及びＭＳを治療するために使用する。ミトキサントロンは、二次性進行型ＭＳ、進行再発型ＭＳ、及び進行性再発寛解型ＭＳを含む、進行性ＭＳのいくつかの形態を治療するために使用する。
【０３３３】
例えば、ミトキサントロンは、二次性進行型ＭＳの進行を遅らせ、再発寛解型ＭＳ及び進行再発型ＭＳの再発の時間を延長するのに効果的である（Ｆｏｘ  Ｅ（２００６）Ｃｌｉｎ  Ｔｈｅｒ  ２８（４）：４６１‐７４）。
【０３３４】
フィンゴリモド（Ｇｉｌｅｎｙａ（登録商標）；スフィンゴシン１‐リン酸受容体調節薬）
フィンゴリモドは、ＭＳの治療用に承認された免疫調節薬である。フィンゴリモドは、再発寛解型多発性硬化症の再発率を半減させたが、これは重大な副作用を伴う場合がある。フィンゴリモドは、スフィンゴシン１‐リン酸受容体調節薬であり、リンパ節のリンパ球を捕捉し、ＭＳにおける自己免疫応答のためにリンパ球が中枢神経系へ移行するのを妨げる。
【０３３５】
Ｔ細胞ＩＬ‐２受容体アルファサブユニット（ＣＤ２５）に対する抗体（例えば、ダクリズマブＨＹＰ；ＺＩＮＢＲＹＴＡ（登録商標））
Ｔ細胞ＩＬ‐２受容体のアルファサブユニット（ＣＤ２５）に対する抗体、例えばダクリズマブＨＹＰは、本明細書に開示する方法及び組成物において使用することができる。ダクリズマブＨＹＰは、Ｔ細胞ＩＬ‐２受容体アルファサブユニット（ＣＤ２５）に対する治療用ヒト化モノクローナル抗体である。ダクリズマブＨＹＰは、再発寛解型多発性硬化症患者の病変及び年間再発率の縮小において有効性を示した（Ｋａｐｐｏｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３７３（１５）：１４１８‐２８）。
【０３３６】
ＣＤ５２に対する抗体、例えばアレムツズマブ
ＣＤ５２に対する抗体、例えばアレムツズマブ（Ｌｅｍｔｒａｄａ（登録商標）として現在開発中）は、成熟リンパ球の表面に存在するが幹細胞には存在しないタンパク質であるＣＤ５２に結合する。第ＩＩＩ相試験では、再発寛解型ＭＳ（ＲＲＭＳ）患者の治療において、アレムツズマブをＲｅｂｉｆ（登録商標）（高用量皮下インターフェロンベータ１ａ）と比較したうえで、ポジティブな結果が報告された。アレムツズマブはヨーロッパで承認されている。
【０３３７】
ＣＤ２０に対する抗体、例えばオクレリズマブ
ＣＤ２０に対する抗体、例えばオクレリズマブ、リツキシマブ、オファツムマブは、成熟Ｂリンパ球を標的とする。再発寛解型ＭＳにおけるリツキシマブ及びオクレリズマブの第２相臨床試験結果は、脳病変（例えば、ＭＲＩスキャンによって測定する）によって測定する疾患活性及び再発率が、プラセボに比べて統計的に有意に低下することを実証した。オクレリズマブの第３相試験は、インターフェロンベータ１ａ（例えば、Ｒｅｂｉｆ（登録商標））に比べて、再発率及び障害の両方が減少することを示した。
【０３３８】
ジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、例えばテリフルノミド
ジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼ阻害剤、例えばテリフルノミドは、ピリミジン合成を阻害する。テリフルノミド（Ａ７７  １７２６  ｏｒとも呼ばれる）は、レフルノミドの活性代謝物である。テリフルノミドは、ＭＳにおいて疾患プロセスを推進すると考えられる活性化Ｔ細胞を含む急速に分裂する細胞を阻害する。テリフルノミドは、ＭＳ治療薬として臨床試験において調査が行われた（Ｖｏｌｌｍｅｒ  ＥＭＳ  Ｎｅｗｓ（２００９年５月２８日））。
【０３３９】
ステロイド
ステロイド（例えばコルチコステロイド）及びＡＣＴＨ剤は、再発寛解型ＭＳまたは二次性進行型ＭＳにおける急性再発の治療に使用することができる。そのような薬剤として、Ｄｅｐｏ‐Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）、Ｓｏｌｕ‐Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）、Ｄｅｌｔａｓｏｎｅ（登録商標）、Ｄｅｌｔａ‐Ｃｏｒｔｅｆ（登録商標）、Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）、Ｄｅｃａｄｒｏｎ（登録商標）、及びＡｃｔｈａｒ（登録商標）が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。
【０３４０】
以下にさらに詳細に記載し、及びＩＦＮ‐ｂと抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体との併用療法によって例示するように、上記免疫調節薬の１つ以上は、本明細書に開示する修復剤と併用することが可能である。
【０３４１】
治療法
ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬のような修復剤は、ＣＮＳ神経細胞において通常生じる軸索再生及び樹状分枝のＮｇＲ１を介した阻害を緩和することができる。これは、ＣＮＳ損傷後の脳または脊髄において軸索修復または神経突起発芽が必要とされる状況において有効である。部分的または完全な挫傷または断裂を含む脊髄損傷は、軸索修復が必要であるが、その修復が通常はＮｇＲ１経路の作動によって阻害されている状況を例示している。
【０３４２】
また、ＬＩＮＧＯ‐１はオリゴデンドロサイト内で発現し、オリゴデンドロサイトの生態に寄与する。ＬＩＮＧＯ‐１の可溶性誘導体、ポリヌクレオチド（例えばＲＮＡｉ）、ならびにＬＩＮＧＯ‐１に特異的に結合する特定の抗体は、オリゴデンドロサイト内のＬＩＮＧＯ‐１機能に対する拮抗薬として作用し、オリゴデンドロサイトの分化及び生存を促進し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏでの神経細胞の髄鞘形成を促進することができる。これは、脱髄及び髄鞘形成不全を伴う障害または病態の治療または予防に対して有効であり得る。
【０３４３】
脳内での軸索伸長及び／または神経突起出芽、及び／またはオリゴデンドロサイトの増殖、分化及び生存、及び／または髄鞘形成もしくは再髄鞘化が有効であり得る疾患または障害の例として、ＣＮＳ脱髄性疾患、ＣＮＳ傷害、脳卒中、多発性硬化症（ＭＳ）、視神経炎（例えば、急性視神経炎）、特発性炎症性脱髄性疾患、横断性脊髄炎、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、ビタミンＢ１２欠乏症、進行性多巣性白質脳症（ＰＭＬ）、脳脊髄炎（ＥＰＬ）、急性散在性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、橋中心髄鞘崩壊症（ｃｅｎｔｒａｌ  ｐｏｎｔｉｎｅ  ｍｙｅｌｏｌｙｓｉｓ）（ＣＰＭ）、ウォラー変性、副腎白質ジストロフィー、アレクサンダー病、ペリツェウス・メルツバッヘル病（ＰＭＺ）、白質ジストロフィー、外傷性緑内障、脳室周囲白質軟化症（ｐｅｒｉｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｌｅｕｋｏｍａｌａｔｉａ）（ＰＶＬ）、本態性振戦症、白質脳卒中、脳卒中、または放射線もしくは毒物誘発性白質傷害、及び他の神経変性疾患または障害、例えば多発性硬化症、副腎白質ジストロフィー、脳室周囲白質軟化症（ｐｅｒｉｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｌｅｕｋｏｍａｌａｔｉａ）（ＰＶＬ）、グロボイド細胞白質ジストロフィー（Ｌｅｕｃｏｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）（クラッベ病）及びウォラー変性、筋委縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、アルツハイマー病、パーキンソン病、脊髄損傷、外傷性脳損傷、放射線治療後障害、化学療法の神経学的合併症、神経障害（例えば、糖尿病性ニューロパチー）、急性虚血性視神経症、ビタミンＥ単独欠乏症候群、ＡＲ、バッセン・コーンツヴァイク症候群、マルキアファーヴァ・ビニャミ症候群、異染性白質ジストロフィー、三叉神経痛、ベル麻痺、脊髄損傷、外傷性緑内障、本態性振戦症、低浸透圧性低ナトリウム血症、ならびに神経細胞の細胞死に関連する神経学的疾患が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。ＣＮＳ脱髄性疾患は、上記の障害の１つ以上から選択され得る。一実施形態では、ＣＮＳ脱髄性疾患は多発性硬化症である。他の実施形態では、ＣＮＳ脱髄性疾患は視神経炎、例えば急性視神経炎である。
【０３４４】
したがって、脊髄損傷、ＣＮＳにおける神経細胞の増殖の阻害に関連する疾患または障害、オリゴデンドロサイトの増殖または分化の阻害に関連する疾患または障害、及びそのような損傷もしくは疾患に罹患しているか、またはそのような疾患に罹患しやすい被験体におけるＣＮＳ神経細胞の脱髄または髄鞘形成異常を伴う疾患の治療方法を開示する。前記方法は、有効量の修復剤、例えばＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬を単独で、または免疫調節薬と併用して被験体に投与することを含む。
【０３４５】
「治療する」、「治療」及び本単語の他の形態は、被験体、例えばＭＳ患者または視神経炎（例えば、急性視神経炎）患者に対して、単独で、または１つ以上の症状管理薬剤と組み合わせて併用治療薬を投与し、患者の病状の進行を妨げ、寛解を誘導し、被験体の予想生存期間を延長し、及びまたは医療行為（例えば、入院）の必要性を低減することを指す。それらの被験体における治療には、視神経炎に対する本明細書に記載する痺れ、刺痛、筋力低下及び／または他の症状のような１つ以上の症状の阻害または軽減；再発率または重症度の低減、硬化性病変のサイズまたは数の低減；新規病変発症の抑制または遅延；生存期間の延長、もしくは無増悪生存期間の延長、及び／または生活の質の向上が含まれるが、必ずしもこれらに限定するものではない。
【０３４６】
本明細書中で使用する場合、他に特段の指定のない限り、用語「予防する」、「予防すること」及び「予防」とは、被験体が再発に罹患する前に起こす作用及び／または疾患の重篤度を抑制または低減することを意図するものである。
【０３４７】
本明細書中で使用する場合、及び他に特段の指定のない限り、用語「管理する」、「管理すること」及び「管理」とは、既に疾患に罹患している被験体における疾患症状の進行を予防すること、及び／または、疾患に罹患している被験体が寛解状態のままでいる時間を引き延ばすことを包含する。本用語は、疾患の閾値、発症及び／または持続時間を調節すること、または患者が疾患に応答する方法を変化させることを包含する。
【０３４８】
本明細書中で使用する場合、及び他に特段の指定のない限り、化合物の「治療有効量」とは、疾患の治療または管理において、治療上の効果を与えるか、または病気と関連する１つ以上の症状を遅延させるか、最小化するのに十分な量のことである。治療有効量の化合物とは、単独で、または他の治療薬と併用して、疾患の治療または管理における治療上の効果を与える量の治療薬を意味する。用語「治療有効量」は、全体療法を改善し、疾患の症状または原因を軽減または回避するか、または別の治療薬の治療効果を高める量を包含し得る。
【０３４９】
本明細書中で使用する場合、及び他に特段の指定のない限り、化合物の「予防有効量」とは、疾患の再発、または疾患に関連する１つ以上の症状を予防するか、もしくはその再発を予防するのに十分な量のことである。予防有効量の化合物とは、単独で、または他の治療薬と併用して、疾患再発の予防における予防的効果を与える量の化合物を意味する。用語「予防有効量」は、全体的な予防を向上させるか、または別の予防薬の予防有効性を高める量を包含し得る。
【０３５０】
本明細書で使用する場合、用語「患者」または「被験体」は、一般的には、治療、観察及び／または実験の対象となり得るか、またはなっているヒト（すなわち、任意の年齢群の男性または女性、例えば小児患者（例えば、乳児、小児、少年）、または成人の患者（例えば、若年成人、中年もしくは高齢者）、または他の哺乳類、例えば霊長類（例えば、カニクイザル、アカゲザル）；商業的に関連する哺乳類（ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、及び／またはイヌを指す。本用語を化合物または薬物の投与と併せて使用する場合、患者は化合物または薬物の治療、観察及び／または投与の対象である。
【０３５１】
一実施形態では、髄鞘形成に影響を及ぼす疾患を被験体が有していると診断するか、または髄鞘形成に影響を及ぼす疾患のリスクがあると診断した場合、直ちにＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬単独または免疫調節薬との併用による治療を開始する。例えば、一実施形態では、片眼にＡＯＮを有する被験体を治療して、視覚経路における髄鞘形成促進／脱髄予防を行い、他眼をサポートする。別の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬を単独で、または免疫調節薬と併用して用いて、ＡＯＮに罹患している被験体を治療し、ＭＳへの進行を遅らせるか、または予防する。
【０３５２】
一実施形態では、本明細書の方法に従って治療する被験体は、治療開始時に軽度の症状を有する。別の実施形態では、本明細書の方法に従って治療する被験体は、治療開始時に顕著な機能障害を有する。例えば、一実施形態では、ＡＯＮに罹患している被験体は、治療時に片眼に著しい視覚障害を有している場合がある。
【０３５３】
本明細書に記載の方法に従って治療する被験体は、脱髄または髄鞘形成不全（ｄｉｓｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ）の影響を受けるか、またはそのリスクがある任意の年齢であり得る。一実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬による治療のために選択される被験体は、少なくとも約２５歳である。別の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬による治療のために選択される被験体は、少なくとも約３０歳である。さらに別の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬による治療のために選択される被験体は、少なくとも約３０歳である。さらに別の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬による治療のために選択される被験体は、少なくとも約３５歳である。さらに別の実施形態では、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬による治療のために選択される被験体は、少なくとも約４０歳である。
【０３５４】
急性視神経炎
一実施形態において、修復剤は、単独でまたは併用により、視神経の炎症状態（例えば、急性視神経炎（ＡＯＮ）などの視神経炎）の１つ以上の症状を軽減する。ＡＯＮは、多発性硬化症でしばしば起こる視神経の炎症性疾患である。ＡＯＮは、視神経への炎症性傷害によって引き起こされ、視神経及び軸索を覆う髄鞘に対する浮腫、炎症及び損傷による視力障害を呈する。ＡＯＮの結果として、網膜神経線維層及び網膜神経節細胞層は有意な損失を被る。現在のＡＯＮの治療は、高用量コルチコステロイドによる静脈内治療に限定されており、これは、浮腫の消散を留めるものの、中枢神経系（ＣＮＳ）再髄鞘化を促進したり、ＣＮＳ炎症性脱髄からの神経軸索保護を提供したりすることはない。したがって、本明細書に開示する修復剤を単独で用いるかまたは併用して、視神経のそのような炎症を治療することができる。
【０３５５】
ＭＳの治療
多発性硬化症（ＭＳ）は、炎症ならびに軸索及び髄鞘の喪失を特徴とする中枢神経系疾患である。
【０３５６】
Ｐｏｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８３）Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．１３：２２７によって定義されたｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｄｅｆｉｎｉｔｅ  ＭＳの診断を確立する臨床基準によって、ＭＳを有する被験体を同定することができる。簡潔に述べると、ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｄｅｆｉｎｉｔｅ  ＭＳを有する個体は、２回の発作ならびに２つの病変のエビデンスまたは１つの病変のエビデンスと別の別個の病変のパラクリニカルなエビデンスとを有する。ｄｅｆｉｎｉｔｅ  ＭＳはまた、２回の発作及び脳脊髄液中のオリゴクローナルＩｇＧバンドのエビデンス、または発作、２つの病変のエビデンス及び脳脊髄液中のオリゴクローナルＩｇＧバンドの組合せによって診断してもよい。また、ＭｃＤｏｎａｌｄ基準を用いてＭＳを診断することもできる（ＭｃＤｏｎａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｐａｎｅｌ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ｏｆ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，  Ａｎｎ  Ｎｅｕｒｏｌ  ５０：１２１‐１２７）；Ｐｏｌｍａｎ，ＣＨ  ｅｔ  ａｌ．（２００５  Ｄｅｃ）．  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：２００５  ｒｅｖｉｓｉｏｎｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  “ＭｃＤｏｎａｌｄ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ”  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ５８（６）：８４０‐６；Ｐｏｌｍａｎ，Ｃ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．６９（２）：２９２‐３０２）。ＭｃＤｏｎａｌｄ基準は、経時的なＣＮＳ障害のＭＲＩエビデンスの使用を含み、複数の臨床的発作がない場合に、これをＭＳの診断に用いる。ＭｃＤｏｎａｌｄ基準の更なる改訂（Ｐｏｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ，Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２０１１）により、既存の特徴的なＭＲＩ病変の発見に基づいて、最初のＣＮＳ脱髄発症時にＭＳを診断することが可能になる。多発性硬化症の有効な治療法を、いくつかの異なる方法で評価してもよい。以下のパラメータを使用して、治療の有効性を評価することができる。２つの例示的な基準には：ＥＤＳＳ（検査を実施する神経内科医が判定する総合障害度評価尺度（ｅｘｔｅｎｄｅｄ  ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ  ｓｔａｔｕｓ  ｓｃａｌｅ））、及びＭＲＩ（磁気共鳴画像法）スキャンにおける臨床症状を伴うかまたは伴わない新規病変の出現が含まれる。
【０３５７】
憎悪は、ＭＳに起因する１つ以上の新規な神経学的症状の出現として定義され、検査時にそれ相応の新規な神経学的異常を伴う。さらに、憎悪は少なくとも２４時間持続し、それに先行して少なくとも３０日間安定であるかまたは進行がなければならず、代替的説明（感染、薬物毒性、原発性精神障害など）を有するべきではない。簡潔に述べると、患者は臨床医によって標準的な神経学的検査を受ける。憎悪は、例えば、Ｓｃｒｉｐｐｓ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ（Ｓｉｐｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９８４）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ３４：１３６８）；ＥＤＳＳ；または患者報告アウトカム（例えば、ＭＳＷＳ‐１２）のような神経学的評価尺度の変化に応じて、軽度、中程度、または重度である。年間の憎悪率及び憎悪していない患者の割合を決定し、抗炎症治療の有効性をモニタリングする。
【０３５８】
臨床的尺度に関して、いずれかの治療群とプラセボ群との間で、憎悪していない患者または再発していない患者の率または割合に統計的に有意な差が存在する場合には、抗炎症療法においてこれらの臨床的尺度を用いることが有効であるとみなすことができる。さらに、最初の憎悪までの時間及び憎悪の持続時間ならびに重症度も測定してもよい。この点における療法としての有効性の尺度は、対照群と比較した治療群における最初の憎悪までの時間または持続時間及び重症度における統計的な有意差である。１年、１８か月、２０か月、または２４か月を超える無増悪期間または無再発期間は、特に有意である。臨床的尺度には、１年及び２年間隔での再発率、ならびにＥＤＳＳのベースライン１．０ユニットから、３または６か月間持続する無憎悪期間を含むＥＤＳＳの変化が含まれる。Ｋａｐｌａｎ‐Ｍｅｉｅｒ曲線上で、障害の持続的な進行に遅延があれば、それは有効性があることを示している。他の基準として、ＭＲＩ上のＴ２画像の面積及び容積の変化、ならびにガドリニウム増強画像によって測定する病変の数及び容積が含まれる。
【０３５９】
ＭＲＩは、ガドリニウム‐ＤＴＰＡ増強イメージング（ＭｃＤｏｎａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．３６：１４，１９９４）を用いた活動型炎症性病変の測定、またはＴ２重み付け技術を用いた病変の位置及び程度の測定に利用することができる。簡潔に述べると、ベースラインＭＲＩが得られる。同じ撮像面と患者体位を、その後の各調査のために使用する。病変の検出を最大化するとともに、病変の追跡を容易にするために、体位設定及び撮像順序を選択することができる。同じ体位設定及び撮像順序を後の研究に使用することができる。ＭＳ病変の存在、位置及び程度を、放射線科医によって判定することができる。全病変領域について、病変領域をスライスごとにアウトライン化し、まとめ上げることができる。以下の３つの分析を実施してもよい：新規病変のエビデンス、活動型病変の出現率、及び病変領域の変化率（Ｐａｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４３：６６５）。療法による改善は、ベースラインとの比較、または治療群とプラセボ群との比較における、個々の患者の統計的に有意な改善によって確立することができる。
【０３６０】
再髄鞘化及び／または神経軸索保護療法の効果は、磁化移動率（ＭＴＲ）、拡散テンソル画像法（ＤＴＩ）、及び脳容積変化、及び磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）の１つ以上を用いて評価することができる。上記の技術のそれぞれについて、本明細書により詳細に記載する。
【０３６１】
磁化移動率（ＭＴＲ）は、非共鳴高周波パルスの印加、及びＭＲ画像に対するそれらの影響の観察、ならびにパルス印加あり及びなしでの信号強度測定に基づいている。ＭＴＲは、標準ＭＲＩで検出できないＭＳにおける微視的白質病変を検出することが示されている（Ｓｉｇｅｒ‐Ｚａｊｄｅｌ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ２００１  ７１：７５２‐７５６）。
【０３６２】
拡散テンソル画像法（ＤＴＩ）は、神経路画像を生成するために、組織内の分子の限定された拡散の測定を可能にする磁気共鳴画像法技術である。これは、例えば、内部繊維構造を有する神経細胞及び白質の視覚化を可能にする。分子は、内部構造に対して整列する方向に、より急速に拡散し、好適な方向に垂直な方向に対しては、よりゆっくりと拡散する。ＤＴＩは、ＭＳにおける白質繊維構造の異常を明らかにすることができる。
【０３６３】
ＭＲＩを用いて、脳容積の変化を測定することができる。脳容積の喪失は、ＭＳにおける障害進行及び認知障害と相関しており、灰白質量の喪失は、白質量の喪失よりも臨床尺度とより密接に相関している。（Ｄｅ  Ｓｔｅｆａｎｏ  Ｎ．ｅｔ  ａｌ．，ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ．２０１４  Ｆｅｂ；２８（２）：１４７‐５６）
【０３６４】
磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）において、標的代謝産物の相対濃度を決定する。ＭＳの文脈において、ＭＲＳは、脱髄、炎症、及び軸索／神経細胞の機能不全などの特定のＭＳ関連事象を表す特異的な神経代謝物を定量化することができる。
【０３６５】
本明細書に記載の方法で治療するか、または症状管理療法を用いて管理することが可能な多発性硬化症に伴う例示的な症状として：視神経炎、視力低下、複視、眼振、眼球運動測定異常、核間性眼筋麻痺、運動眼閃及び音眼閃、求心性瞳孔障害、不全麻痺、不全単麻痺、不全対麻痺、不全片麻痺、四肢不全麻痺、麻痺、下半身対麻痺、片麻痺、四肢麻痺、四肢麻痺（ｑｕａｄｒａｐｌｅｇｉａ）、痙縮、構音障害、筋萎縮症、攣縮、痙攣、筋緊張低下、クローヌス、ミオクローヌス、ミオキミア、下肢静止不能症候群、下垂足、反射機能障害、錯感覚、麻酔、神経痛、神経因性疼痛及び神経原性疼痛、レルミット徴候、自己受容性機能障害、三叉神経痛、運動失調、企図振戦、測定障害、前庭性運動失調、回転性めまい、発話失調、ジストニア、拮抗運動反復不全、頻尿、膀胱痙縮、弛緩性膀胱、排尿筋・括約筋筋失症、勃起不全、無オルガスム症、冷感症、便秘症、便意切迫、便失禁、うつ病、認知機能障害、認知症、気分変動、情緒不安定、多幸症、双極性症候群、不安、失語症、不全失語症、疲労、ウートホフ徴候、胃食道逆流、及び睡眠障害が挙げられる。
【０３６６】
ＭＳのそれぞれの症例は、症状及びその後の経過のいくつかのパターンのうちの１つを示す。最も一般的には、ＭＳはまず、一連の発作と、それに続く、症状の改善に伴う完全または部分的な寛解、そして安定期の後の再発として顕在化する。これは、再発寛解型ＭＳ（ＲＲＭＳ）と呼ばれる。一次性進行型ＭＳ（ＰＰＭＳ）は、一時的な安定期または症状からの小さな軽減はあり得るが、顕著な寛解の無い漸進的な臨床的減退を特徴とする。二次性進行型ＭＳ（ＳＰＭＳ）は、再発寛解の経過から始まり、その後、再発とは無関係に一次性進行型の経過が続く。ＰＰＭＳ、ＳＰＭＳ、及びＰＲＭＳは、時には、一纏めにして、慢性進行性ＭＳと呼ばれる。
【０３６７】
少数の患者は、疾患発症後まもなくの著しい身体障害または死をももたらす、急速かつ容赦ない衰弱として定義される悪性ＭＳを経験する。治療レジメンの早期において患者が療法に応答する可能性を判定し、患者が応答する可能性が最も高い薬剤に変更することにより、この衰弱を停止または減速させてもよい。
【０３６８】
併用療法
本発明は、免疫調節薬、例えばＩＦＮ‐β剤、例えばＡｖｏｎｅｘ（登録商標）；及び修復剤、例えばＭＳなどの脱髄障害の治療のための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体の併用投与を開示する。
【０３６９】
薬剤、例えば薬剤を含む医薬組成物は、１つ以上の他の追加の治療薬または治療剤と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般的に、各薬剤は、その薬剤について定められた用量及び／または時間スケジュールで投与することができる。この組合せで利用する付加的な治療剤は、単一の組成物中に入れて一緒に投与するか、または異なる組成物で別々に投与することができることは、さらに認識されるであろう。レジメンで使用する特定の組合せは、医薬組成物と追加の治療活性物質との適合性及び／または達成すべき所望の治療効果を考慮したものとなるであろう。一般的に、併用する追加の治療剤は、それらを個別に利用するレベルを超えないレベルで利用することが期待される。いくつかの実施形態では、併用して利用するレベルは、個々に利用するレベルよりも低くなるであろう。
【０３７０】
修復剤による、疾患を有する被験体の治療は、１つ以上の免疫調節薬を併用することができる。例示的な免疫調節薬は、本明細書に記載されており、例えば、ＩＦＮ‐β１分子；グルタミン酸、リジン、アラニン及びチロシンのポリマー、例えばグラチラマー；アルファ４インテグリンに対する抗体またはその断片、例えば、ナタリズマブ；アントラセンジオン分子、例えば、ミトキサントロン；フィンゴリモド、例えば、ＦＴＹ７２０または他のＳ１Ｐ１モジュレーター、例えばＢＡＦ３１２またはオザニモドなど；ジメチルフマレート、例えば、経口ジメチルフマレート；Ｔ細胞ＩＬ‐２受容体アルファサブユニット（ＣＤ２５）に対する抗体、例えば、ダクリズマブ；ＣＤ５２に対する抗体、例えば、アレムツズマブ；ジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼの阻害剤、例えば、テリフルノミド；コルチコステロイド；ならびに抗ＣＤ２０抗体、例えばオクレリズマブが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。
【０３７１】
一実施形態では、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）及び抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体治療薬を併用投与する。特定の実施形態では、週１回のＡｖｏｎｅｘ（登録商標）筋肉内（ＩＭ）注射に加えて、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体を、静脈内（ＩＶ）注入によって、約４週ごとに１回（±約５日間）投与することができる。抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体治療の用量は、以下を含むことができる：３ｍｇ／ｋｇ；または１０ｍｇ／ｋｇ；または３０ｍｇ／ｋｇ；または５０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇのＩＶ注入；週１回のＡｖｏｎｅｘ（登録商標）注射を併用。
【０３７２】
一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体の、４週間ごとに１回、３ｍｇ／ｋｇの静脈内注入を選択した。このレジメンは、脊髄リゾレシチンモデルにおけるラット血清ＥＣ５０と同様の平均血清濃度（約０．１％ＣＮＳ浸透のために調整した）をもたらすと予想される。さらなる投薬レジメン、１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇを投与することもできる。これらの２つの投薬レジメンは、ラット血清ＥＣ９０（約０．１％の脳浸透のために調整した）よりおよそ１．２倍及び３．７倍高い平均血清濃度をもたらすと予想される。
【０３７３】
特定の実施形態では、免疫調節薬はＩＦＮ‐β１分子であり、これを静脈内、皮下または筋肉内に投与する。例えば、ＩＦＮ‐β１分子を、以下の１つ以上で投与することができる：
（ｉ）筋肉内注射によって、２０〜４５マイクログラム（例えば３０マイクログラム）を、例えば週１回；
（ｉｉ）皮下注射によって、２０〜３０マイクログラム（例えば２２マイクログラム）を、例えば週３回、もしくは４０〜５０マイクログラム（例えば４４マイクログラム）を、例えば週３回；または、
（ｉｉｉ）筋肉内に、１０〜５０μｇの量を、例えば週３回、もしくは５〜１０日ごとに、例えば週１回。
【０３７４】
一実施形態では、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）３０μｇを週１回、筋肉内注射によって投与する。適用可能な場合、滴定後に、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）を、当該技術分野で周知の投与量及び投与スケジュールに従って、ＩＭ注射によって投与することができる。
【０３７５】
一実施形態では、ＩＦＮ‐β剤、例えばＡｖｏｎｅｘ（登録商標）を、注射器具、例えば自動注射器またはペンによって投与する。
【０３７６】
一実施形態では、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子を、５０ｍｇ／ｍＬのオピシヌマブ（ＢＩＩＢ０３３）（本明細書では、配列番号２７５のアミノ酸配列を有するＶＨ及び配列番号２７６のアミノ酸配列を有するＶＬを含む抗体分子とも呼ぶ）、１０ｍＭのクエン酸ナトリウム、１６０ｍＭのＬ‐アルギニン塩酸塩（ｐＨ６．５）、ならびに０．０３％（体積あたりの重量）のポリソルベート８０を含有する液体薬品として供給する。抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体分子は、生理食塩水希釈後の静脈内注入によって投与することができる。
【０３７７】
一実施形態では、免疫調節薬はＡｖｏｎｅｘ（登録商標）であり、ＩＭ注射用の滅菌透明液体として製剤化する。プレフィルドガラスシリンジ中の各０．５ｍＬのＡｖｏｎｅｘは、３０ｍｃｇのインターフェロンβ１ａを含有する。他の成分には、ｐＨ  およそ４．８の注射用水中の酢酸ナトリウム三水和物、氷酢酸、塩酸アルギニン、及びポリソルベート２０が含まれる。免疫調節薬、例えばＡｖｏｎｅｘ（登録商標）は、任意の適切な手段、例えば、ペンまたは他の器具によって投与することができる。
【０３７８】
症状管理
本明細書に記載の併用療法による被験体の治療は、ＭＳを有する被験体の症状管理においてしばしば用いられる以下の治療薬の１つ以上と組み合わせることができる。：Ｔｅｇｒｅｔｏｌ（登録商標）（カルバマゼピン）、Ｅｐｉｔｏｌ（登録商標）（カルバマゼピン）、Ａｔｒｅｔｏｌ（登録商標）（カルバマゼピン）、Ｃａｒｂａｔｒｏｌ（登録商標）（カルバマゼピン）、Ｎｅｕｒｏｎｔｉｎ（登録商標）（ガバペンチン）、トパマックス（登録商標）（トピラメート）、Ｚｏｎｅｇｒａｎ（登録商標）（ゾニサミド）、Ｄｉｌａｎｔｉｎ（登録商標）（フェニトイン）、Ｎｏｒｐｒａｍｉｎ（登録商標）（デシプラミン）、Ｅｌａｖｉｌ（登録商標）（アミトリプチリン）、Ｔｏｆｒａｎｉｌ（登録商標）（イミプラミン）、Ｉｍａｖａｔｅ（登録商標）（イミプラミン）、Ｊａｎｉｍｉｎｅ（登録商標）（イミプラミン）、Ｓｉｎｅｑｕａｎ（登録商標）（ドキセピン）、Ａｄａｐｉｎ（登録商標）（ドキセピン）、Ｔｒｉａｄａｐｉｎ（登録商標）（ドキセピン）、Ｚｏｎａｌｏｎ（登録商標）（ドキセピン）、Ｖｉｖａｃｔｉｌ（登録商標）（プロトリプチリン）、Ｍａｒｉｎｏｌ（登録商標）（合成カンナビノイド）、Ｔｒｅｎｔａｌ（登録商標）（ペントキシフィリン）、Ｎｅｕｒｏｆｅｎ（登録商標）（イブプロフェン）、アスピリン、アセトアミノフェン、Ａｔａｒａｘ（登録商標）（ヒドロキシジン）、Ｐｒｏｚａｃ（登録商標）（フルオキセチン）、Ｚｏｌｏｆｔ（登録商標）（セルトラリン）、Ｌｕｓｔｒａｌ（登録商標）（セルトラリン）、ＥｆｆｅｘｏｒＸＲ（登録商標）（ベンラファキシン）、Ｃｅｌｅｘａ（登録商標）（シタロプラム）、Ｐａｘｉｌ（登録商標）、Ｓｅｒｏｘａｔ（登録商標）、Ｄｅｓｙｒｅｌ（登録商標）（トラゾドン）、Ｔｒｉａｌｏｄｉｎｅ（登録商標）（トラゾドン）、Ｐａｍｅｌｏｒ（登録商標）（ノルトリプチリン）、Ａｖｅｎｔｙｌ（登録商標）（イミプラミン）、Ｐｒｏｔｈｉａｄｅｎ（登録商標）（ドチエピン）、Ｇａｍａｎｉｌ（登録商標）（ロフェプラミン）、Ｐａｒｎａｔｅ（登録商標）（トラニルシプロミン）、Ｍａｎｅｒｉｘ（登録商標）（モクロベミド）、Ａｕｒｏｒｉｘ（登録商標）（モクロベミド）、Ｗｅｌｌｂｕｔｒｉｎ  ＳＲ（登録商標）（ブプロピオン）、Ａｍｆｅｂｕｔａｍｏｎｅ（登録商標）（ブプロピオン）、Ｓｅｒｚｏｎｅ（登録商標）（ネファゾドン）、Ｒｅｍｅｒｏｎ（登録商標）（ミルタザピン）、Ａｍｂｉｅｎ（登録商標）（ゾルピデム）、Ｘａｎａｘ（登録商標）（アルプラゾラム）、Ｒｅｓｔｏｒｉｌ（登録商標）（テマゼパム）、Ｖａｌｉｕｍ（登録商標）（ジアゼパム）、ＢｕＳｐａｒ（登録商標）（ブスピロン）、Ｓｙｍｍｅｔｒｅｌ（登録商標）（アマンタジン）、Ｃｙｌｅｒｔ（登録商標）（ペモリン）、Ｐｒｏｖｉｇｉｌ（登録商標）（モダフィニル）、Ｄｉｔｒｏｐａｎ  ＸＬ（登録商標）（オキシブチニン）、ＤＤＡＶＰ（登録商標）（デスモプレシン、バソプレシン）、Ｄｅｔｒｏｌ（登録商標）（トルテロジン）、Ｕｒｅｃｈｏｌｉｎｅ（登録商標）（ベタン（ｂｅｔｈａｎｅ））、Ｄｉｂｅｎｚｙｌｉｎｅ（登録商標）（フェノキシベンザミン）、Ｈｙｔｒｉｎ（登録商標）（テラゾシ��）、Ｐｒｏ‐Ｂａｎｔｈｉｎｅ（登録商標）（プロパンテリン）、Ｕｒｉｓｐａｓ（登録商標）（ヒヨスチアミン）、Ｃｙｓｔｏｐａｓ（登録商標）（ヒヨスチアミン）、Ｌｉｏｒｅｓａｌ（登録商標）（バクロフェン）、Ｈｉｐｒｅｘ（登録商標）（メテナミン）、Ｍａｎｄｅｌａｍｉｎｅ（登録商標）（メテナミン）、Ｍａｃｒｏｄａｎｔｉｎ（登録商標）（ニトロフラントイン）、Ｐｙｒｉｄｉｕｍ（登録商標）（フェナゾピリジン）、Ｃｉｐｒｏ（登録商標）（シプロフロキサシン）、Ｄｕｌｃｏｌａｘ（登録商標）（ビサコジル）、Ｂｉｓａｃｏｌａｘ（登録商標）（ビサコジル）、Ｓａｎｉ‐Ｓｕｐｐ（登録商標）（グリセリン）、Ｍｅｔａｍｕｃｉｌ（登録商標）（車前子親水性粘奬薬）、Ｆｌｅｅｔ  Ｅｎｅｍａ（登録商標）（リン酸ナトリウム）、Ｃｏｌａｃｅ（登録商標）（ドクサート）、Ｔｈｅｒｅｖａｃ  Ｐｌｕｓ（登録商標）、Ｋｌｏｎｏｐｉｎ（登録商標）（クロナゼパム）、Ｒｉｖｏｔｒｉｌ（登録商標）（クロナゼパム）、Ｄａｎｔｒｉｕｍ（登録商標）（ダントロレンナトリウム）、Ｃａｔａｐｒｅｓ（登録商標）（クロニジン）、Ｂｏｔｏｘ（登録商標）（ボツリヌス毒素）、Ｎｅｕｒｏｂｌｏｃ（登録商標）（ボツリヌス毒素）、Ｚａｎａｆｌｅｘ（登録商標）（チザニジン）、Ｓｉｒｄａｌｕｄ（登録商標）（チザニジン）、Ｍｙｓｏｌｉｎｅ（登録商標）（プリミドン）、Ｄｉａｍｏｘ（登録商標）（アセタゾラミド）、Ｓｉｎｅｍｅｔ（登録商標）（レボドパ、カルビドパ）、Ｌａｎｉａｚｉｄ（登録商標）（イソニアジド）、Ｎｙｄｒａｚｉｄ（登録商標）（イソニアジド）、Ａｎｔｉｖｅｒｔ（登録商標）（メクリジン）、Ｂｏｎａｍｉｎｅ（登録商標）（メクリジン）、Ｄｒａｍａｍｉｎｅ（登録商標）（ジメンヒドリナート）、Ｃｏｍｐａｚｉｎｅ（登録商標）（プロクロルペラジン）、Ｔｒａｎｓｄｅｒｍ（登録商標）（スコポラミン）、Ｂｅｎａｄｒｙｌ（登録商標）（ジフェンヒドラミン）、Ａｎｔｅｇｒｅｎ（登録商標）（ナタリズマブ）、Ｃａｍｐａｔｈ‐１Ｈ（登録商標）（アレムツズマブ）、Ｆａｍｐｒｉｄｉｎｅ（登録商標）（４‐アミノピリジン）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（登録商標）（ＩＶ免疫グロブリン）、Ｇａｍｍａｒ‐ＩＶ（登録商標）（ＩＶ免疫グロブリン）、ＧａｍｉｍｕｎｅＮ（登録商標）（ＩＶ免疫グロブリン）、Ｉｖｅｅｇａｍ（登録商標）（ＩＶ免疫グロブリン）、Ｐａｎｇｌｏｂｕｌｉｎ（登録商標）（ＩＶ免疫グロブリン）、Ｓａｎｄｏｇｌｏｂｕｌｉｎ（登録商標）（ＩＶ免疫グロブリン）、Ｖｅｎｏｂｌｏｇｕｌｉｎ（登録商標）（ＩＶ免疫グロブリン）、プレガバリン、ジコノチド、バクロフェン及びＡｎｅｒｇｉＸ‐ＭＳ（登録商標）。
【０３７９】
Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）と抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体との併用療法の評価のための臨床試験／アセスメント
任意の被験体における治療の有効性の評価項目を、当該技術分野で公知の試験及びアセスメントを用いて評価することができる。例えば、ＲＲＭＳ患者の場合、ＥＤＳＳを用いて被験体の状態を取得することによって被験体を評価することができる。他の実施形態では、被験体は進行性のＭＳ、例えばＳＰＭＳまたはＰＰＭＳを有し、ＥＤＳＳを使用して被験体の状態を取得することに加えて、上肢及び／または下肢機能の測定値、及び／または歩行機能の測定値、例えば近距離歩行機能を取得することによって被験体を評価することができる。特定の実施形態では、下肢歩行機能（例えば、２５フィート時限歩行（Ｔ２５ＦＷ））のアセスメント及び／または上肢機能（例えば、９ホールペグテスト（９ＨＰ））のアセスメントを行うことができる。
【０３８０】
評価可能なさらなる例示的有効性評価項目は、以下の１つ以上を含む。
【０３８１】
有効性の評価項目
［例示的な主要評価項目］
治療を通じて確認される神経生理学的及び／または認知機能の改善について、総合障害度評価尺度（ＥＤＳＳ）、２５フット時限歩行（Ｔ２５ＦＷ）、９ホールペグテスト（９ＨＰＴ）、及び（３秒間の）連続聞き取り加算検査を含む複合評価項目によって測定し、被験体を評価することができる。神経生理学的及び／または認知機能の改善は、以下の少なくとも１つとして定義することができる：
ａ）ＥＤＳＳの、ベースラインスコア≦６．０からの≧１．０ポイントの減少（３か月以上の持続的減少）；
ｂ）Ｔ２５ＦＷの、ベースラインからの≧１５％の改善（３か月以上の持続的改善）；
ｃ）９ＨＰＴの、ベースラインからの≧１５％の改善（３か月以上の持続的改善）；及び、
ｄ）ＰＡＳＡＴの、ベースラインからの≧１０％（例えば、１０％、１２％、２０％、３０％）の改善（３か月以上の持続的改善）。あるいは、符号数字モダリティー検査（ＳＤＭＴ）を使用して改善を検出することができる。
【０３８２】
一実施形態では、ＡＯＮを有する患者の状態を測定するための例示的な評価項目は、ＶＥＰ潜時の回復（例えば、信号が網膜から視覚野まで移動するための時間）の測定である。潜時は、神経細胞がどの程度良好に伝導できるか、例えばその伝導タイミングの尺度である。無傷のミエリンを有する神経細胞は、ミエリンを喪失または損傷した神経細胞より良好に伝導する（シグナルをより速く伝達する）ことができる。ＶＥＰによって測定する振幅は、機能する神経細胞（例えば、情報伝達可能な軸索を含む）の数と、不活性な（例えば、死んだ／損傷した）神経細胞の数の尺度であり、振幅が高いほど正常に機能する神経細胞が多いことを示す。そのような測定は、当該技術分野で公知の方法を用いて、例えば全視野視覚誘発電位（ＦＦ‐ＶＥＰ）を用いて行うことができる。視覚誘発電位（ＶＥＰ）は、従来の方法（全視野ＶＥＰと呼ぶ）または視覚経路のより大型の試料をより良好な精度で測定する多局所ＶＥＰ（ｍｆＶＥＰ）を含む当該技術分野で公知の方法によって測定することができる。これらの方法を用いて、検出感度を高めることができる。例えば、ＡＯＮの他眼は、ｍｆＶＥＰを用いて振幅変化を（ナノボルトで）示すことができ、これに対し、振幅変化をマイクロボルトで測定するＦＦ‐ＶＥＰは十分な感度を有しているとはいえない可能性がある。ＦＦ‐ＶＥＰは、中心視野の潜時と振幅、例えば、約５°の中心視覚（黄斑視覚）を表す視覚経路の潜時または振幅の合計を測定する。ｍｆＶＥＰは、視野の６０°までをカバーする５６セグメントまでの潜時及び振幅を個々の目ごとに測定する。（Ｈｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ．  Ｔｒａｎｓ．Ａｍ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｓｏｃ．１０４（２００６）：７１‐７７）。ｍｆＶＥＰは、視覚経路の個々のセグメントのマッピングを可能にし、傷害及び修復の程度に応じて異なる振幅及び潜時を有する可能性がある。
【０３８３】
実施形態では、潜時遅延の改善（例えば、ＦＦ‐ＶＥＰ及び／またはｍｆＶＥＰ潜時遅延のミリ秒単位での減少）は、視神経、視放線、または視覚野を含む視覚経路に沿った病変の再髄鞘化の指標である。実施形態では、保存された振幅（例えば、保存されたＦＦ‐ＶＥＰまたはｍｆＶＥＰ振幅）は、網膜内の神経節細胞神経細胞と大脳視覚皮質神経細胞との間の視覚経路に沿った神経軸索保護及び／または修復の指標である。
【０３８４】
［例示的な副次評価項目］
神経生理学的及び／または認知機能及び／または障害治療において確認される悪化について、ＥＤＳＳ、Ｔ２５ＦＷ、９ＨＰＴ、及びＰＡＳＡＴの複合評価項目によって測定し、被験体を評価することができる。障害の進行または神経物理的及び／または認知機能の悪化は、以下の少なくとも１つと定義される：
ａ）ＥＤＳＳの、ベースラインスコア≦５．５からの≧１．０ポイントの向上、またはベースラインスコア＝６．０からの≧０．５ポイントの向上（３か月以上の持続的向上）；
ｂ）Ｔ２５ＦＷの、ベースラインからの≧１５％の悪化（３か月以上の持続的悪化）；
ｃ）９ＨＰＴの、ベースラインからの≧１５％の悪化（３か月以上の持続的悪化）；及び、
ｄ）ＰＡＳＡＴの、ベースラインからの≧１０％（例えば、１０％、１２％、２０％、３０％）の悪化（３か月以上の持続的悪化）。あるいは、ベースラインからの悪化を、ＳＤＭＴによって測定することができる。
【０３８５】
一実施形態では、ＡＯＮを有する患者の状態を測定する例示的な副次評価項目は、網膜層（網膜神経節細胞のニューロン及び無髄軸索セグメント）の厚さの変化の測定及び／または網膜構造及び機能の測定を含む。網膜構造は、公知の方法、例えばスペクトルドメイン光干渉断層撮影法（ＳＤ‐ＯＣＴ）を用いて測定することができるが、臨床視覚機能は視力、例えば低コントラスト文字視認性（１．２５％及び２．５％）、及び／または高コントラスト映像視認性を用いて測定することができる。
【０３８６】
主要及び副次的薬理バイオマーカー評価項目の分析のための本明細書に記載する例示的な技術は、以下のようにさらに説明することができる：
【０３８７】
ＡＯＮ後の再髄鞘形成を介して残存（生存）軸索を修復できるかどうかを測定する全視野視覚誘発電位（ＦＦ‐ＶＥＰ）または多局所視覚誘発電位（ｍｆＶＥＰ）によって測定する潜時回復。
【０３８８】
実施形態では、ＦＦ‐ＶＥＰ及び／またはｍｆＶＥＰの振幅は、異なってはいるがいずれも等しく重要な各眼の視覚経路損傷の尺度である。実施形態において、ｍｆＶＥＰ上で振幅が基準振幅よりも少なくとも４０ナノボルト（例えば、少なくとも４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００ナノボルトまたはそれ以上）低い場合、それは被験体の２つの眼（複数可）の各々をサポートする視覚経路に損傷が生じていることを示している。実施形態において、振幅が基準振幅よりも少なくとも２０％（例えば、少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上）低い場合、それは被験体の眼（複数可）に視神経損傷が生じていることを示している。実施形態において、ｍｆＶＥＰ振幅が約１８０ｎＶ以下（例えば、約１８０、１７０、１６０、１５０、１４０、１３０、１２０、１１０、１００、９０ナノボルトまたはそれ未満）である場合、それは被験体の眼（複数可）に視神経損傷が生じていることを示している。実施形態において、基準振幅は、正常な眼、例えば視神経障害もしくは病態の１つ以上の症状（例えば、急性視神経炎）を有していない被験体の眼；または視神経障害もしくは病態の１つ以上の症状（例えば、急性視神経炎）を示していない被験体の他眼であって、視覚経路の任意の部位に沿った新規病変発生の結果として、視覚経路が経時的に影響を受ける可能性がある被験体の他眼；の平均ＶＥＰ振幅（例えば、ｍＶ単位のＦＦ‐ＶＥＰまたはｍＶ単位のｍｆＶＥＰ振幅）である。実施形態において、基準振幅は、正常な他眼のベースラインＶＥＰ振幅（例えば、ＦＦ‐ＶＥＰまたはｍｆＶＥＰ振幅）である。
【０３８９】
実施形態において、ＦＦ‐ＶＥＰ及び／またはｍｆＶＥＰ潜時は、視神経伝導の尺度である。実施形態において、潜時が基準潜時よりも少なくとも３ミリ秒高い（例えば、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０ミリ秒、またはそれ以上高い）場合、それは被験体の眼（複数可）の視神経伝導に遅延があることを示している。実施形態において、潜時が基準潜時よりも少なくとも３％（例えば、少なくとも３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１２％、１５％、２０％、３０％、４０％、６０％、８０％、またはそれ以上）高い場合、それは被験体の眼（複数可）の視神経伝導に遅延があることを示している。実施形態において、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時が少なくとも約１１０ミリ秒（例えば、少なくとも約１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０ミリ秒またはそれ以上）である場合、それは被験体の眼（複数可）の視神経伝導に遅延があることを示している。実施形態において、ｍｆＶＥＰ潜時は、少なくとも約１５５ミリ秒（例えば、少なくとも約１５５、１６５、１７５、１８５ミリ秒またはそれ以上）であり得る。実施形態において、基準潜時は、正常な眼、例えば、視神経障害もしくは病態の１つ以上の症状（例えば、急性視神経炎）を有していない被験体の眼；または視神経障害もしくは病態の１つ以上の症状（例えば、急性視神経炎）を示していない被験体の他眼；の平均ＶＥＰ潜時（例えば、ＦＦ‐ＶＥＰまたはｍｆＶＥＰ潜時）である。実施形態において、基準潜時は、正常な他眼のベースラインＶＥＰ潜時（例えば、ＦＦ‐ＶＥＰまたはｍｆＶＥＰ潜時）である。
【０３９０】
実施形態において、潜時回復を、罹患した眼の治療後のＦＦ‐ＶＥＰ及び／またはｍｆＶＥＰ潜時によって示し、それは、基準潜時のＦＦ‐ＶＥＰ及び／またはｍｆＶＥＰ潜時、例えば、同様の年齢、性別、及び頭囲（規範的データ）の健康な成体の正常な他眼または罹患していない眼のベースライン潜時の１５％以内（例えば、１５％、１２％、１０％、８％、６％、４％、またはそれ未満内）である。実施形態において、潜時回復を、罹患した眼の治療後のＦＦ‐ＶＥＰ及び／またはｍｆＶＥＰ潜時によって示し、それは、基準潜時のＦＦ‐ＶＥＰ及び／またはｍｆＶＥＰ潜時、例えば、正常な他眼のベースライン潜時の１５ミリ秒以内（例えば、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２ミリ秒以内）である。実施形態において、潜時回復を、罹患した眼の治療後のＦＦ‐ＶＥＰ潜時によって示し、それは約１２０ミリ秒以下（例えば、約１２０、１１０、１００、９０、８０ｎＶ、またはそれ未満）である。理論に拘泥するものではないが、例えばＦＦ‐ＶＥＰ及び／またはｍｆＶＥＰによって測定する、治療後の片眼または両眼における潜時回復の存在は、視神経（複数可）の再髄鞘化の指標であると考えられる。
【０３９１】
スペクトルドメイン光干渉断層撮影（ＳＤ‐ＯＣＴ）（副次評価項目）は異なっており、網膜神経線維層（ＲＮＦＬ―網膜内の視神経の無髄部分）及び網膜神経節細胞層（ＲＧＣＬ―網膜内の視神経軸索のニューロン細胞体）の厚さを測定する。ＡＯＮ後のＲＮＦＬ及びＲＧＣＬの厚さの減少は、軸索及び神経細胞の喪失（死）の証拠であると考えられる。実施形態において、ＲＮＦＬ及び／またはＲＧＣＬの厚さの喪失の減少、例えば、正常な眼（例えば、正常な他眼）のＲＮＦＬ及び／またはＲＧＣＬの厚さに比べて、１２％未満（例えば、１２％、１１％、１０％、９％、８％、６％、４％、またはそれ未満）の厚さの減少は、神経軸索保護及び／または修復の証拠である。
【０３９２】
実施形態では、視力、例えば低コントラスト（例えば、１．２５または２．５％）文字視認性（ＬＣＬＡ）または高コントラスト（例えば１００％）映像視認性（ＨＣＶＡ）によって、視覚機能を測定する。低コントラスト文字視認性（副次評価項目）は、患者が低コントラストの度合い（白地の上にかすかな灰色の文字）を区別する能力の尺度である。高コントラスト映像視認性は、高コントラストの度合い（白地の上に黒色の文字）を区別する能力の尺度である。実施形態では、視力は、被験体が正しく読むことができる文字数として報告される。実施形態では、視力、例えばＬＣＬＡ及び／またはＨＣＶＡの増加（例えば、少なくとも６文字、例えば少なくとも６、７、８、９、１０、１２、１４、１６、１８、２０、３０、４０、またはそれ以上の文字による）は、ＡＯＮに罹患した眼における視覚機能の改善または保持の証拠である。
【０３９３】
実施形態において、視覚の生活の質は、本明細書に記載の方法に従って用いる評価項目の一つである。実施形態において、本明細書の例えば実施例６に記載するように、視覚の生活の質を測定する。例えば、視覚の生活の質を、患者報告アウトカム調査によって測定する。患者報告アウトカム調査の例として、ＮＩＨ‐ＮＥＩ  Ｖｉｓｕａｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ（ＮＥＩ‐ＶＦＱ）（例えば、Ｍａｎｇｉｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｒｃｈ．Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ．１１６．１１（１９９８）：１４９６‐１５０４参照）及びｎｅｕｒｏ‐ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（ＮＯＳ‐１０）（例えば、Ｒａｐｈａｅｌ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ．Ｊ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１４２．６（２００６）：１０２６‐３５．ｅ２参照）が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。実施形態において、本明細書に記載の患者報告アウトカム調査、例えばＮＥＩ‐ＶＦＱ及び／またはＮＯＳ‐１０における少なくとも４ポイント（例えば、少なくとも４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０ポイント、またはそれ以上）の上昇は、視覚に関する生活の質の改善の証拠である。
【０３９４】
［追加の臨床効果評価項目］
特定の実施形態において、以下を含むさらなる臨床的尺度を用いて被験体を評価することができる：
ａ）処理速度に関する２つの試験（ＰＡＳＡＴ及び符号数字モダリティー検査［ＳＤＭＴ］）ならびに記憶と学習に関する２つの試験（言語記憶に対する選択想起検査［ＳＲＴ］及び視覚記憶に対する簡易視空間記憶検査改訂版［ＢＶＭＴ‐Ｒ］）を含むＭＳ認知複合評価項目によって測定する認知機能における、ベースラインからの変化；
ｂ）スクリプス神経症状評価尺度（ＳＮＲＳ）またはＥＤＳＳ検査によって判定する臨床的再発の重篤度；及び／または、
ｃ）６分間歩行（６ＭＷ）の時限歩行における、ベースラインからの≧１０％（例えば、≧１５％、≧２０％、≧３０％）の悪化（３か月以上の持続的悪化）。
【０３９５】
［例示的なＭＲＩ有効性評価項目］
新規及び既存の病変の両方を伴う局所性及びびまん性レベルでの修復の測定に焦点を当てた脳ＭＲＩの分析は、以下の１つ以上を含むことができる：
（ｉ）新規脳病変の分析：
ａ）増加した及び減少した磁化移動率（ＭＴＲ）を有するＧｄ病変体積の割合；
ｂ）測定単位としての被験体当たりの病変を伴う正常に見える白質（ＮＡＷＭ）に対する新規Ｇｄ病変の平均ＭＴＲにおける発症からの変化；
ｃ）測定単位として被験体を用い、そのＭＴＲが正常値よりも低くなる（新規ＭＴＲ病変）スキャン毎のボクセルに対するＭＴＲ信号における発症からの変化；
ｄ）測定単位として被験体を用いる、新規Ｇｄ病変の放射性拡散率における発症からの変化；
ｅ）測定単位として被験体を用い、そのＭＴＲが正常値を下回る（新規ＭＴＲ病変）スキャン毎のボクセルに対する放射拡散率における発症からの変化；または、
ｆ）新規Ｇｄ脳病変から慢性ブラックホールへの転換率（Ｔ１低強度として定義される慢性ブラックホールが、発症から少なくとも６か月後に依然として認められる）。
（ｉｉ）既存の脳病変（ベースラインスキャン時に存在する病変）の分析：
ａ．異常Ｔ１容積に対するベースラインからのＭＴＲの変化；
ｂ．異常Ｔ２容積に対するベースラインからのＭＴＲの変化；
ｃ．Ｔ１低強度に関連がない異常Ｔ２容積に対するベースラインからのＭＴＲの変化；
ｄ．異常Ｔ１容積に対するベースラインからの拡散テンソル画像（ＤＴＩ）の変化；
ｅ．異常Ｔ２容積に対するベースラインからのＤＴＩの変化；または、
ｆ．Ｔ１低強度に関連がない異常Ｔ２容積に対するベースラインからのＤＴＩの変化。
（ｉｉｉ）拡散脳ＭＲＩメトリクスの分析：
ａ）脳体積変化の割合；
ｂ）大脳皮質の脳容積におけるベースラインからの変化；
ｃ）視床容積におけるベースラインからの変化；または、
ｄ）脳全体の放射状拡散率におけるベースラインからの変化。
ｅ）全脳ＭＴＲにおけるベースラインからの機会（ｃｈａｎｃｅ）。
【０３９６】
［例示的な患者報告アウトカム（ＰＲＯ）有効性評価項目］
特定の実施形態では、被験体は、以下の１つ以上を含む患者報告アウトカムによって評価することができる：
ａ）１２項目多発性硬化症歩行尺度（ＭＳＷＳ‐１２）。
ｂ）ＡＢＩＬＨＡＮＤ  ５６項目アンケート。
ｃ）２９項目多発性硬化症影響尺度（ＭＳＩＳ‐２９）。
ｄ）簡易（３６）健康調査（ＳＦ‐３６）。
ｅ）ＭＳＮＱ情報提供者及びＭＳＮＱ患者
【０３９７】
有効性評価項目分析
［一般的な分析方法］
要約統計量を提示してもよい。連続評価項目の場合、要約統計は、通常、以下を含む：無作為化または投与した被験体の数；データ、平均値、標準偏差、中央値、及び範囲を有する被験体の数。カテゴリー評価項目の場合、要約統計は、通常、以下を含む：無作為化または投与した被験体の数；データがある被験体の数、または各カテゴリーにおけるデータがある被験体の割合。
【０３９８】
［例示的な主要評価項目分析］
例示的な主要有効性評価項目は、複合評価項目（ＥＤＳＳ、Ｔ２５ＦＷ、９ＨＰＴ、またはＰＡＳＡＴ）の構成要素のうちの１つ以上において確認される臨床的改善を有する被験体の割合を含むことができる。確認する改善個体の割合は、治療群によって提示することができ、データをロジスティック回帰モデルによって分析することができる。改善を確認するまでの時間は、コックス比例ハザードモデルを用いて分析してもよい。ベースラインＥＤＳＳ、Ｔ２５ＦＷ、９ＨＰＴ（利き手及び非利き手の両方）、ＰＡＳＡＴ、及び層別因子は、ロジスティック回帰及びコックスモデルの両方に共変量として含めてもよい。２つのベースラインＥＤＳＳアセスメントを実行する場合、より高いＥＤＳＳスコアを分析に使用することができる。ＭＲＩ活性を、潜在的な共変量と同様に調査してもよい。
【０３９９】
［例示的な副次評価項目分析］
副次有効性評価項目には、複合評価項目（ＥＤＳＳ、Ｔ２５ＦＷ、９ＨＰＴ、またはＰＡＳＡＴ）の構成要素のうちの１つ以上において確認される臨床的悪化を有する被験体の割合を含めてもよい。確認する悪化個体の割合は、治療群によって提示することができ、データをロジスティック回帰モデルによって分析することができる。悪化を確認するまでの時間は、コックス比例ハザードモデルを用いて分析してもよい。ベースラインＥＤＳＳ、Ｔ２５ＦＷ、９ＨＰＴ（利き手及び非利き手の両方）、ＰＡＳＡＴ、及び層別因子は、ロジスティック回帰及びコックスモデルの両方に共変量として含めてもよい。２つのベースラインＥＤＳＳアセスメントを実行する場合、より高いＥＤＳＳスコアを分析に使用することができる。ＭＲＩ活性を、潜在的な共変量と同様に調査してもよい。
【０４００】
探索的評価項目分析
探索的評価項目には、臨床指標、ＭＲＩ指標、及びＰＲＯ変数を含めてもよい。それらは、カテゴリー変数のための連続変数または頻度分布の要約統計量を提示することによって要約することができる。使用する統計的手法は、変数の性質に依存する。バイナリ変数は、ロジスティック回帰モデルを用いて分析することができ；連続変数は、対応するベースライン及び層別因子を調整する共分散モデルの分析を用いて分析することができる。事象までの時間変数は、コックス比例ハザード回帰モデルを使用し、対応するベースライン及び層別因子を調整することによって分析することができる。カウント変数は、負の二項回帰モデルまたはウィルコクソン順位和検定によって分析することができる。
【０４０１】
歩行アセスメント
Ｔ２５ＦＷ
Ｔ２５ＦＷは、２５フィートの時限歩行である。Ｔ２５Ｗは、短距離の定量的歩行能力の尺度であり、大部分が障害の重い、例えば、ＥＤＳＳステップ６〜６．５の被験体の悪化を反映する。これは、下肢機能の定量的尺度として使用することができる。概して、患者は、明確に表示された２５フィートのコースの一端に向けられ、可能な限り迅速に、しかし安全に２５フィートを歩くように指示される。このタスクは、患者に同じ距離を歩いて戻らせることによって、即座にもう一度行わせることができる。Ｔ２５ＦＷを行う際、患者は補助器具を使用してもよい。試験を完了するために、通常、３分の時間制限を用いる。患者が５分間の休息期間後にＴ２５Ｗの試行２を完了できない場合、または患者が３分以内に試行を完了できない場合は、検査を中止する。
【０４０２】
９ＨＰＴ
９ＨＰＴとは、９ホールペグテストのことである。これは、ＥＤＳＳまたはＴ２５ＦＷによって測定されない上肢（例えば、腕及び手）機能の臨床的に重要な側面を捉える、定量的測定である。ＥＤＳＳ及びＴ２５ＦＷとは異なり、９ＨＰＴは、広いＥＤＳＳ範囲にわたって応答する。概して、患者は、手のみを使用して９個のペグを一度に１個ずつ拾い上げ、すべての穴が埋まるまで、可能な限り迅速にペグボード上の穴にペグを入れるように求められる。次に患者は、休息せずに、ペグを一度に１個ずつ取り除き、それらを可能な限り迅速に容器に戻さなければならない。利き手及び非利き手の両方を２回試験する（利き手の２連続試験、直後に非利き手の２連続試験）。試験を完了するために、通常、５分の時間制限を用いる。患者が５分以内に９ＨＰＴの１試行を完了できない場合は、試験を中止することとし；患者が５分以内に自身の利き手で試行を完了できない場合は、通常、非利き手での試行に移るように患者に指示を与える。
【０４０３】
６ＭＷ
６分間歩行試験（６ＭＷ）を使用して、歩行距離を査定する。概して、患者は、身体介助を受けずに可能な最高速度で６分間歩くように求められ、その距離を測定する。補助器具を使用することができるが、試験間で一貫性を維持し、文書化するべきである。患者は、可能であれば連続的に歩行すべきだが、患者は、試験中に減速して停止または休息することができる。
【０４０４】
ＳＮＲＳ
スクリプス神経症状評価尺度（ＳＮＲＳ）は、精神作用及び気分；眼及び関連脳神経、例えば、視力、視野、眼球運動、眼振；下脳神経；各四肢運動機能、例えば、右上、左上、右下、左下；深部腱反射、例えば、上肢、下肢；バビンスキー徴候、例えば、左側、右側；各四肢における感覚機能、例えば、右上、左上、右下、左下；小脳徴候、例えば、上肢、下肢；ならびに歩行体幹バランス、例えば、自律神経機能障害の特別なカテゴリー、例えば、膀胱機能障害、性機能障害を含む、いくつかのパラメータを測定する。
【０４０５】
ＥＤＳＳ
上記のように、ＥＤＳＳは、ＭＳにおいて頻繁に発生する症状を中心に標準化された神経学的検査に基づいている。ＥＤＳＳは、７つの機能系：視覚、脳幹、錐体、小脳、感覚、腸／膀胱及び脳を、神経学的検査によって査定する。さらに、ＥＤＳＳは、歩行範囲のアセスメントも含む。機能系スコア及び歩行範囲に基づいて、ＥＤＳＳステップを決定する。ＥＤＳＳの範囲は、０から１０までの１９ステップを含み、ＥＤＳＳステップ０は、完全に正常な検査に対応し、ＥＤＳＳステップ１０は、ＭＳに起因する死亡に対応する。０〜４のＥＤＳＳ評価の場合、尺度は、主に個別のＦＳのスコアに依存する。４を超える評価の場合、主に歩行の能力及び範囲によってＥＤＳＳを決定する。
【０４０６】
患者報告アウトカムアセスメント
ＭＳＷＳ‐１２
多発性硬化症歩行尺度‐１２（ＭＳＷＳ‐１２）試験は、歩行能力の自己評価尺度である。試験は、リッカート型応答を伴う１２の質問を含み、歩行に対するＭＳの影響を記載する。３０名のＭＳ患者のインタビュー、専門家の意見、及び文献レビューをもとに、質問を生成した。
【０４０７】
ＡＢＩＬＨＡＮＤ  ５６項目アンケート
ＡＢＩＬＨＡＮＤ  ５６項目アンケートは、摂食、身支度、または管理タスク等の日常的なタスクを行う上での問題点についての患者経験を測定するように設計された手作業能力の尺度である。ＡＢＩＬＨＡＮＤは、５６項目の公平な両手作業を含み、患者は、４つのレベル尺度：０＝不可能、１＝非常に困難、２＝困難、３＝容易で判断するように求められる。
【０４０８】
ＭＳＩＳ‐２９
多発性硬化症影響尺度２９（ＭＳＩＳ‐２９）は、ＭＳの身体的及び心理学的パラメータを測定する、２９項目の自己報告評価尺度である。項目のうちの３つは、限定的な能力を取り扱い、残りの２６項目は、疾患の症状または結果に影響される事柄に関連する。２０項目は、身体機能に言及する。応答は、１から５の５ポイントリッカート尺度範囲を使用する。
【０４０９】
ＳＦ‐３６
簡易型３６（ＳＦ‐３６）試験は、全体的な健康関連の生活の質を測定する。ＳＦ‐３６は、患者が、一般的に医師からの介入をほとんど受けずに、またはまったく受けずに完了することが可能な構造化された自己報告アンケートである。ＳＦ‐３６に対する単一の全体スコアはないが、代わりに８つの下位尺度及び２つの要約スコアを生成する。８つの下位尺度は、身体機能、身体的問題に起因する役割制限、体痛、一般的な健康認識、活力、社会機能、情緒的問題に起因する役割制限、及び精神保健を含む。２つの要約スコアは、身体的構成要素の要約及び精神保健構成要素の要約を含む。
【０４１０】
認知機能検査のアセスメント
いくつかの認知機能検査装置を用いて、以下のように複合パラメータの値を決定することができる。
【０４１１】
符号数字モダリティー検査（ＳＤＭＴ）
ＳＤＭＴは、処理速度及び作業記憶を評価する検査であり、そこにおいて被験体に９０秒を与え、参照キーに基づいて特定の数字を所与の幾何学図形と対合させる。ＳＤＭＴは、数字符号またはコーディングタスク検査にならってモデル化されており、その検査は、長年ウェクスラー知能尺度に含まれていたものである（例えば、Ｗｅｃｈｓｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９７４）Ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｗｅｃｈｓｌｅｒ  Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｃｅ  Ｓｃａｌｅ  ｆｏｒ  Ｃｈｉｌｄｒｅｎ‐Ｒｅｖｉｓｅｄ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｗｅｃｈｓｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８１）ＷＡＩＳ‐Ｒ  Ｍａｎｕａｌ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）。一部の患者が手先の器用さを有するという制限を認識し、Ｒａｏらは、口頭応答のみを含むようにＳＤＭＴを修正した（Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４１：６８５‐６９１）。本発明において選択したこの口頭ＳＤＭＴでは、処理する数字及び符号が含まれた８．５×１１インチのシートを参加者に差し出す。最上段の刺激は、９個の符号を含み、それぞれをキーにおいて一桁の数字と対合させる。ページの残りの部分は、これらの符号の疑似ランダム化配列を有し、参加者のタスクは、可能な限り迅速に符号のそれぞれに関連付けられた数字を口頭で回答することである。スコアは、９０秒の時間枠内に被験体によって成された（１１０のうちの）正しい一致の総数である。
【０４１２】
良好な試験‐再試験信頼性（ｒ＝０．９３〜０．９７、ｐ＜０．００１）を、ＭＳ被験体において確立した（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １２：５４９‐５５８、Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  １４：９４０‐９４６）。ＭＳ患者と正常対照とを区別するための（ｄ＝１．０〜１．５、ｐ＜０．００１）（例えば、Ｄｅｌｏｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ＆Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ７６：５１９‐５２６；Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １２：５４９‐５５８；Ｈｏｕｔｃｈｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６９：１１３‐１２３；Ｓｔｒｏｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  １５：１０７７‐１０８４；Ｐａｒｍｅｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ  Ｉｎｔ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌ  Ｓｏｃ  １６：６‐１６参照）及びＲＲＭＳ患者とＳＰＭＳ患者とを区別する（ｄ＝０．８、ｐ＜０．００１）（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６３：１３０１‐１３０６参照）ための良好な弁別妥当性も確認された。さらに、性能と脳ＭＲＩとの相関も文書化されている（例えば、Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  １３：７２２‐７３０；Ｈｏｕｔｃｈｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６９：１１３‐１２３；Ｔｅｋｏｋ‐Ｋｉｌｉｃ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）ＮｅｕｒｏＩｍａｇｅ  ３６：１２９４‐１３００参照）。
【０４１３】
連続聞き取り加算検査（ＰＡＳＡＴ）
脳振盪から回復している患者を査定するためにＧｒｏｎｗａｌｌらによって最初に開発されたＰＡＳＡＴは、一連のテープに録音した６１桁の数字を患者に監視させ、連続する各数字をその直前の数字に付加することを求める（Ｇｒｏｎｗａｌｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）Ｐｅｒｃｅｐｔｕａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｔｏｒ  Ｓｋｉｌｌｓ  ４４：３６７‐３７３）。ＰＡＳＡＴは、急速な情報処理及び２つのタスクに対する注意の同時割り当ての両方、ならびに適度に完全な計算能力を必要とする。その元の形式で、ＰＡＳＡＴは、４つの刺激間間隔（２．４秒、２．０秒、１．６秒、及び１．２秒）で行った。刺激間間隔の数及び提示速度は、ＭＳ患者に使用するために、Ｒａｏらによって後に３．０秒及び２．０秒に修正された（Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｂｒｉｅｆ，Ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ  Ｂａｔｔｅｒｙ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｅｓｔｓ  ｉｎ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｓｏｃｉｅｔｙ；Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ｂａｔｔｅｒｙ  ｆｏｒ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｓｏｃｉｅｔｙ；Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４１：６８５‐６９１；Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４１：６９２‐６９６）。
【０４１４】
この後者のバージョンの試験を、ＭＳ機能性複合（ＭＳＦＣ）及びＭＡＣＦＩＭＳバッテリーの構成要素として選択した（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｓｔ  １６：３８１‐３９７）。ＭＳ集団における試験‐再試験信頼度は、ｒ＝０．７８〜０．９３の範囲である（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １６：２２８‐２３７、Ｄｒａｋｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  １６：２２８‐２３７）。ＭＳ患者と正常対照とを区別する（ｄ＝０．５〜０．７、ｐ＜０．００１〜０．３４）（Ｄｅｌｏｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ  ＆  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ７６：５１９‐５２６；Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １２：５４９‐５５８；Ｈｏｕｔｃｈｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ６９：１１３‐１２３；Ｓｔｒｏｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ１５：１０７７‐１０８４；Ｐａｒｍｅｎｔｅｒｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ  Ｉｎｔ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌ  Ｓｏｃ  １６：６‐１６、Ｄｒａｋｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  １６：２２８‐２３７）ための、及びＲＲＭＳ患者とＳＰＭＳ患者とを区別する（ｄ＝０．５、ｐ＜０．００２）（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６３：１３０１‐１３０６）ための良好な弁別妥当性が確認された。目的のＰＡＳＡＴスコアは、各提示速度での正しい応答の総数である。ＰＡＳＡＴのＲａｏ版の２つの代替形態が利用可能であり（ＰＡＳＡＴ３″及びＰＡＳＡＴ２″）、本発明においてこれらを選択した。ＰＡＳＡＴ３″では、刺激を３秒ごとに提示し、ＰＡＳＡＴ２″では、刺激を２秒ごとに提示する。
【０４１５】
選択想起検査（ＳＲＴ）
ＳＲＴは、前向性健忘症の領域において研究を行ったＢｕｓｃｈｋｅらによって最初に開発された（Ｂｕｓｃｈｋｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９７４）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２４：１０１９‐１０２５参照）。各連続学習試行において全体の単語リストを思い出すように患者に求めるのではなく、実験者は、各連続学習試行で思い出されなかった単語のみを繰り返した。後に、何人かの記憶研究者が、テストの規範的データ及び代替形態を開発した。元のバージョンは、１５単語及び１２回の学習試行を使用するテスト形式に基づいていたことに留意されたい。そのような運用は、困難で時間がかかるため、より短い形態のＳＲＴに多くの関心が集まっている。ＭＳ研究において広く用いられる運用手順は、Ｒａｏらによって開発された６回試行形態である（例えば、Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｂｒｉｅｆ，Ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ  Ｂａｔｔｅｒｙ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｅｓｔｓ  ｉｎ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｓｏｃｉｅｔｙ；Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ｂａｔｔｅｒｙ  ｆｏｒ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｓｏｃｉｅｔｙ；Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４１：６８５‐６９１；Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ４１：６９２‐６９６参照）。この６回試行形式を、本発明において利用する。多数の異なるバージョンのＳＲＴ単語リストが存在する。Ｈａｎｎａｙ及びＬｅｖｉｎの成体用単語リスト、テスト形式１及び３を、本発明において利用する（Ｈａｎｎａｙ  ｅｔ  ａｌ．（１９８５）Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌ．７：２５１‐２６３）。いくつかの研究においてＳＲＴの弁別妥当性が確立され、ＭＳ被験体と正常対照とを区別するＳＲＴは、ｄ＝０．６〜ｄ＝１．０である（例えば、Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｂｒｉｅｆ，Ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ  Ｂａｔｔｅｒｙ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｅｓｔｓ  ｉｎ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  Ｓｏｃｉｅｔｙ；Ｄｅｌｏｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ＆Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ７６：５１９‐５２６；Ｓｔｒｏｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  １５：１０７７‐１０８４参照）。ＳＲＴ所見を、脳ＭＲＩで認められる心室肥大と関連付けることが可能であることも示された（Ｒ２＝０．１４；ｐ＝０．０５）（Ｃｈｒｉｓｔｏｄｏｕｌｏｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６０：１７９３‐１７９８）。
【０４１６】
簡易視空間記憶検査改訂版（ＢＶＭＴ‐Ｒ）
ＢＶＭＴ‐Ｒは、ウェクスラー記憶尺度からの視覚再生サブテストのラインに沿って、相当する代替形態の視覚記憶検査を開発する初期の努力に基づいている（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ  ３：３７‐５１；Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｓｔ  ９：１１‐１６；Ｗｅｃｈｓｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｗｅｃｈｓｌｅｒ  Ｍｅｍｏｒｙ  Ｓｃａｌｅ‐Ｒｅｖｉｓｅｄ  Ｍａｎｕａｌ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）。当初、ＢＶＭＴは、６つの視覚デザインからなる１ページの提示に対して、一つのみを露出させていた。改訂版は、刺激に対して３回、１０秒間露出させる（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｂｒｉｅｆ  Ｖｉｓｕｏｓｐａｔｉａｌ  Ｍｅｍｏｒｙ  Ｔｅｓｔ‐Ｒｅｖｉｓｅｄ：Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ  Ｍａｎｕａｌ．Ｏｄｅｓｓａ，Ｆｌｏｒｉｄａ：Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｉｎｃ．；Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ８：１４５‐１５３）。各露出の後、被験体は、白紙に鉛筆を使用してマトリクスを再現するように求められる。正確性及び位置について、厳格な採点基準がある。２５分の遅延の後、再露出なしに、患者は再度情報を再現するように求められる。最後に、はい／いいえ認識タスクを提示する。ＢＶＭＴ‐Ｒは、ｒ＝０．８５〜ｒ＝０．９１の範囲の試験‐再試験信頼度を有する優れた再現性（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ８：１４５‐１５３；Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １１：７２７‐７３６）；ならびにＭＳ被験体と正常対照被験体との間の良好な弁別妥当性（ｄ＝０．９、ｐ＜０）（Ｓｔｒｏｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  １５：１０７７‐１０８４；Ｐａｒｍｅｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ  Ｉｎｔ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌ  Ｓｏｃ  １６：６‐１６）及びＲＲＭＳ患者とＳＰＭＳ患者との間の良好な弁別妥当性（ｄ＝０．６、ｐ＜０．００１）（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６３：１３０１‐１３０６）を有する。ＢＶＭＴ‐Ｒ性能と脳ＭＲＩ所見との間の相関関係の形式での予測妥当性も確立されている。さらに、検査の全６形態の難易度が等しいことを示す広範囲の研究がある。本発明の目的の変数は、合計学習及び遅延想起のスコアである。
【０４１７】
本発明を、以下の実施例によりさらに説明するが、限定するものとして解釈すべきではない。本願全体を通じて引用する、全ての参考文献、図面、配列表、特許及び公開済み特許出願の内容は、参照として本明細書に援用する。
【実施例】
【０４１８】
［実施例１．ＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用は、マウスにおけるＭＯＧ‐ＥＡＥから罹患率及び死亡率を低減し、炎症状態の視神経の軸索保護を促進する。］
急性視神経炎（ＡＯＮ）は、多発性硬化症でしばしば起こる視神経の炎症性疾患である。ＡＯＮは、視神経に対する炎症性傷害によって引き起こされ、視神経及び軸索を覆う髄鞘に対する浮腫、炎症、及び損傷に起因する視力障害を呈する。ＡＯＮの結果として、多くの場合、網膜神経線維層及び網膜神経節細胞層は有意な損失を被る。現在のＡＯＮの治療は、高用量コルチコステロイドによる静脈内治療に限定されており、これは、浮腫の消散を留めるものの、中枢神経系（ＣＮＳ）再髄鞘化を促進したり、ＣＮＳ炎症性脱髄からの神経軸索保護を提供したりすることはない。
【０４１９】
視神経炎の研究のための動物モデルとして、ラット及びマウスの実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルが挙げられ；このモデルでは、ＥＡＥ誘導が視神経炎の発症をもたらす。本実施例において、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用の効果を、ＥＡＥマウスモデルを用いて分析した。簡潔に述べると、８〜１２週齢のＣ５７ＢＬ／６雄及び雌マウスにおいて、完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）に乳化させた１２５μｇのＭＯＧ３５〜５５を含有する２５０μＬを、その尾基底部の両脇腹へ皮下注射し、これに続いて、その直後及び３日後にリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中の３００ｎｇの百日咳毒素を静脈内注射することによって、ＥＡＥ誘導を行った。運動系障害に対する有効性を、０〜７の範囲のＥＡＥ重症度スコアを使用して測定した。
【０４２０】
それぞれ１４匹のマウスの２つの別個のコホートを、１０ｍｇ／ｋｇの拮抗性抗ＬＩＮＧＯ‐１マウス抗体または対照モノクローナル抗体の腹腔内注射で盲検的に処置した（１コホート当たりの治療群当たりＮ＝７）。ＥＡＥ誘導後６日目から開始して３日ごと、及び臨床疾患の発症前の４回の異なる時点（６日目、９日目、１２日目、及び１５日目）にマウスを処置した。ＥＡＥ疾患ピークにおいてマウスを殺処分した。
【０４２１】
Ｂｒｕｋｅｒ  ４，７Ｔ  ＭＲＩシステムで拡散テンソル撮像（ＤＴＩ）を使用して、ＥＡＥ疾患ピークに一度、視神経を撮像した。ＭＲＩ画像は、次のパラメータを用いて取得した：ＴＲ１秒、ＴＥ３０ｍｓ、Δ１０ｍｓ、８  ＮＥＸ、スライス厚０．５ｍｍ、視野２×２ｃｍ２、データマトリクス２５６×１２８。１つの平行及び１つの垂直拡散強調用勾配配向に対して、０ｓ／ｍｍ２（非拡散加重画像）及び７００ｓ／ｍｍ２のＢ値を用いた（Ｗｕ，Ｂｕｔｚｋｕｅｖｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎｅｕｒｏｉｍａｇｅ  ３７：１３１３８‐１１４７）。
【０４２２】
ＭＲＩ分析の後直ちに、マウスをペントバルビタールで安楽死させ、ＰＢＳで灌流し、０．１Ｍ  ＰＢＳ中の４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）で固定し、視神経を除去して、２．５％グルタルアルデヒド及び０．１Ｍカコジル酸ナトリウム緩衝液を含む４％ＰＦＡ溶液中で後固定し、電子顕微鏡用に処理した。前交叉視神経全体の断面画像を、拡大率１０倍及び１００倍で撮影し、Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ  ＣＳ３ソフトウェア（Ａｄｏｂｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社（サンジョゼ、カリフォルニア、ＵＳＡ）上でマージした。それぞれおよそ３６００μｍ２を測定する、周辺４つ及び中心１つの、５つの前交叉視神経断面ＲＯＩ（関心領域）を分析のために選択した（図１）。画像Ｐｒｏ  Ｐｌｕｓソフトウェア（Ｍｅｄｉａ  Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ社、ロックビル、メリーランド、ＵＳＡ）を使用して分析を行い、各ＲＯＩで特定した軸索それぞれの軸索数、軸索面積、及び軸索原形質面積を評価した。神経の周辺部が、炎症性浸潤の大部分を含んでいた。重度に浸潤した周辺領域及び中心神経領域を、各神経について別個に査定した。
【０４２３】
抗ＬＩＮＧＯ抗体処置マウスにおいて、ＥＡＥによる死亡は観察されなかったが、プラセボ処置マウスのうち、５／１４は、ＥＡＥ重症度に起因して安楽死させる必要があった（図２Ａ）。さらに、完全な後肢麻痺（下半身対麻痺）（グレード５の疾患重症度）に達する割合は、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体処置マウス（４／１４マウス）が、プラセボ処置マウス（７／１４マウス）に比べて有意に低かった（図２Ｂ）。
【０４２４】
誘導後１６〜１７日目のＥＡＥ重症度のピーク時に、対照で処置した１６匹の生存マウス及び抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体で処置した１８匹の生存マウスに対して、視神経拡散ＭＲＩスキャンを行った。視神経ＲＯＩ画像は、前交叉レベルで視神経の中心に１０ボクセルを含んでいた。拡散テンソル画像（ＤＴＩ）は、対照で処置したマウス（平均１、１８３、標準偏差３６ミリ秒）よりも抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体で処置したマウス（平均１，４００、標準偏差２７ミリ秒）において、長軸（長手方向、軸方向、または平行拡散性もしくはλＩＩ）に平行して、有意に高い見かけの拡散計数（ＡＤＣ）値を示した（図３、図４）。対照的に、視神経長軸に垂直なＡＤＣ値に治療群による差はなかった（半径方向または垂直拡散性またはλ）（抗ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬で処置したマウスにおいて４１５±１９ミリ秒、それに対し、対照で処置したマウスでは４０３±２５ミリ秒）（図３、図４）。
【０４２５】
検査した各視神経について、５つのＲＯＩにおける中枢及び末梢軸索面積、軸索数、及び軸索原形質断面積のアセスメントを比較のために表にした（図５；図６）。１条件当たり１９個のＥＡＥ神経及び５個の健康な神経を分析した。結果は、中心または末梢とでＲＯＩにおける総視神経面積または軸索数に差がなかったことを示した（図５；図６）。しかしながら、中枢視神経ＲＯＩにおける個別の軸索面積（軸索健全性の測定）は、抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体で処置したマウスに比べて、対照で処置したマウスにおいて１３％低かった（図５；図６）。全体として、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用は、マウスにおいてＭＯＧ‐ＥＡＥによる罹患率及び死亡率を低減し；軸索面積の喪失を低減するとともに、軸索拡散性の喪失を低減することによって、炎症した視神経内の軸索保護を促進した。要約すると、ＭＯＧ‐ＥＡＥにおいて組織学的に、かつＭＲＩによって、視神経への損傷が認められ、これはＬＩＮＧＯ‐１の遮断によって低減するように思われた。
【０４２６】
［実施例２．ラットＥＡＥモデルにおいて、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用とコルチコステロイド治療との併用は、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用単独に比べて、軸索保護の増加をもたらす。］
急性視神経炎（ＡＯＮ）は、多発性硬化症においてしばしば起こる視神経の炎症性疾患である。ＡＯＮは、視神経に対する炎症性傷害によって引き起こされ、視神経及び軸索を覆う髄鞘に対する浮腫、炎症、及び損傷に起因する視力障害を呈する。ＡＯＮの結果として、網膜神経線維層及び網膜神経節細胞層は有意な損失を被る。現在のＡＯＮの治療は、高用量コルチコステロイドによる静脈内治療に限定されており、これは、浮腫の消散を留めるものの、中枢神経系（ＣＮＳ）再髄鞘化を促進したり、ＣＮＳ炎症性脱髄からの神経軸索保護を提供したりすることはない。
【０４２７】
視神経炎の研究のための動物モデルは、ラット及びマウスの実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルを含み；ＥＡＥの誘導は、視神経炎の発症をもたらす。本実施例では、ＥＡＥラットモデルを使用して、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用単独、及びコルチコステロイド治療との併用効果を分析した。簡潔に述べると、８〜１０週齢の雌ブラウンノルウェー（ＢＮ）ラットを、イソフルランの吸入により麻酔し、４００μｇの熱不活性化結核菌を含む完全フロイントアジュバントで（１：１）乳化した生理食塩水中１００μｇのｒＭＯＧ１‐１２５を含む、総量２００μＬの接種源を尾基底部に皮内注射した。
【０４２８】
臨床症状の発症後（ＥＡＥ誘導後１５〜１６日）、生理食塩水中３０ｍｇ／ｋｇ／日のメチルプレドニゾロン（ＭＰ）または生理食塩水単独（Ｖｅｈ）で静脈内に３日間連続してラットを処置した。ＭＰ注射の２日目に、６ｍｇ／ｋｇの抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体または対照抗体のいずれかをラットに与え、週１回ずつ、３週間にわたって腹腔内投与した。合計４つの異なる治療群：（１）対照治療群（Ｖｅｈ＋対照抗体（Ａｂ））；（２）ＭＰ治療群（ＭＰ＋対照抗体）；（３）抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体治療群（Ｖｅｈ＋抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体）；及び（４）併用治療群（ＭＰ＋抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体）があった。
【０４２９】
最後の処置から１週間後（症状発症の４週間後及びＥＡＥ誘導の６週間後）、ラットをＰＢＳ中の４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）で灌流し、視神経（ＯＮ）の低温槽ミクロトーム切片を、抗βＩＩＩチューブリン抗体で染色し、ＤＡＰＩを用いて軸索病態を分析し、蛍光顕微鏡により倍率４０倍で可視化した。軸索定量化のために、視神経当たり３つの異なる切片を分析し、治療群当たり３〜５匹の動物を計数した。
【０４３０】
図（図７）に示すように、対照治療群（Ｖｅｈ＋対照抗体）の視神経の切片において、抗βＩＩＩチューブリン染色により軸索喪失が検出され、深刻な軸索喪失を示唆した。ＤＡＰＩ染色によって示すように、これらの領域に炎症性浸潤も観察された（図７）。軸索の数は、ＭＰ治療群（ＭＰ＋対照抗体）においてわずかに高かった（ｐ値＝有意でない）（図８）。抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体治療群（Ｖｅｈ＋抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体）は、５倍高い軸索数を示し、抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体による処置が、軸索喪失を予防したことを示唆する（図８）。併用治療群（ＭＰ＋抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体）は、対照治療群（Ｖｅｈ＋対照抗体）に比べて、軸索数に８倍の増加を示し；抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体などの抗ＬＩＮＧＯ‐１拮抗薬と高用量コルチコステロイドとの併用治療が、相乗効果を有し得ることを示唆した（図８）。
【０４３１】
全体として、ＬＩＮＧＯ‐１拮抗作用は、ラットＥＡＥにおいて視神経内の軸索喪失を低減した。高用量静脈内メチルプレドニゾロンの１日１回、３日間の処置では軸索保護は認められなかったが、抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体の処置は、炎症性脱髄において軸索保護をもたらし；また、抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体と高用量静脈内メチルプレドニゾロンとの併用治療は、さらに優れた軸索保護をもたらした。
【０４３２】
要約すると、モノクローナル抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体によるＬＩＮＧＯ‐１遮断は、ラットＭＯＧ‐ＥＡＥにおいて軸索喪失を低減し；また、高用量ステロイドによる抗炎症治療の存在下または非存在下において、ラットＭＯＧ‐ＥＡＥにおけるＬＩＮＧＯ‐１遮断の神経保護効果が認められた。
【０４３３】
［実施例３：臨床研究における抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体の有効性］
ＡＯＮは、視神経に損傷を与え、髄鞘の喪失及び軸索損傷を引き起こし、視覚機能の喪失、例えば恒久的な構造的及び機能的視力障害をもたらす場合がある。ＡＯＮはＭＳの初期症状の１つである。ＭＳ及びＡＯＮ病変（例えば、脱髄、軸索喪失、炎症）の病理には共通点がある。現在の治療は、高用量の静脈内（ＩＶ）コルチコステロイドに限られ、これは急性期の炎症を軽減するが、長期の視覚的転帰には影響しない。したがって、急性傷害の際のＡＯＮ及びより一般的には中枢神経系（ＣＮＳ）における修復及び保護をサポートすることができる治療法の必要性は満たされていない。
【０４３４】
ＡＯＮは、抗ＬＩＮＧＯ‐１の作用機序：再髄鞘化及び神経保護を測定するための良好な臨床モデルであると考えられる。抗ＬＩＮＧＯ‐１は、オリゴデンドロサイトの分化、髄鞘形成及び再髄鞘化の阻害剤であるＣＮＳ特異的細胞表面糖タンパク質ＬＩＮＧＯ‐１（ロイシンリッチリピート及び免疫グロブリンドメイン含有神経突起伸長阻害剤受容体相互作用タンパク質１）の初めてのクラスのヒトモノクローナル抗体である。抗ＬＩＮＧＯ‐１は、再髄鞘化及び神経保護の前臨床モデルにおいて有効性を示し、第１相臨床試験で忍容性が良好であった。例えば、Ｍｉ  ｅｔ  ａｌ．  ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ  ２７．７（２０１３）：４９３‐５０３；及びＴｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍ．１．２（２０１４）：ｅ１８参照。
【０４３５】
無作為化二重盲検プラセボ対照並行群第２相（ＲＥＮＥＷ）試験（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ識別番号：ＮＣＴ０１７２１１６１）は、ＡＯＮの最初の発症後のＣＮＳ再髄鞘化に対する抗ＬＩＮＧＯ‐１、例えばＢＩＩＢ０３３、例えばオピシヌマブの有効性及び安全性を判定し、生物学的な証明を確立することが目的であった。ＲＥＮＥＷ試験では、抗ＬＩＮＧＯ‐１の以下の２つの異なる作用機序（ＭＯＡ）を研究した：（ｉ）視覚誘発電位（ＶＥＰ）によって測定する潜時回復を介した再髄鞘化；及び（ｉｉ）スペクトルドメイン光干渉断層撮影（ＳＤ‐ＯＣＴ）によって測定する網膜神経線維層（ＲＮＦＬ）及び網膜神経節細胞層（ＲＧＣＬ）薄化の低減を介した神経保護。
【０４３６】
［方法］
４週間ごとに１００ｍｇ／ｋｇの抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体またはプラセボを合計６回、静脈内注入した８２名の患者群を治療し、ＲＥＮＥＷ）臨床試験ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ識別番号：ＮＣＴ０１７２１１６１に従って、ＡＯＮの最初の発症後に治療を受けた患者における抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体の効果を評価した。
【０４３７】
対象となる被験体は１８〜５５歳であり、多発性硬化症（ＭＳ）の病歴がなく、最初の片側ＡＯＮ発症を経験していた。ＡＯＮ診断は、以下の少なくとも２つの存在に基づいていた：視力低下；求心性瞳孔障害；色覚異常；視野の異常；及び眼の動きに対する痛み。脳磁気共鳴画像において脱髄病変が存在するかどうかにかかわらず、登録を許可した。多発性硬化症（ＭＳ；新規に診断された）の発症時のＡＯＮは許容可能であった。参加者が以下のものを有する場合には、その参加者を除外した：ＭＳの指標である視神経炎の前発症歴／中枢神経系脱髄事象の発症歴；確立されたＭＳの診断；いずれかの眼に±６ジオプター以上の屈折異常；ＡＯＮによるものではない視力喪失；重度の椎間板浮腫または出血の病歴またはエビデンス；スクリーニング時における他眼の異常な全視野視覚誘発電位（ＦＦ‐ＶＥＰ）；以下のような眼科的障害の併発、例えば、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、黄斑滲出、黄斑浮腫、緑内障、重度の乱視、眼の外傷、視神経脊髄炎、虚血性視神経症、先天性眼振、または機能的及び解剖学的評価項目の査定を交絡させる可能性のある他の眼科的病態；任意の臨床的に有意な、心臓の、内分泌系の、血液系の、肝臓の、免疫系の、代謝系の、泌尿器系の、肺の、神経系の、皮膚科学の、精神系の、腫瘍の、腎臓の、重度アレルギー反応もしくはアナフィラキシー反応の、または他の主要な疾患の病歴；ＨＩＶ、Ｃ型肝炎感染、またはＢ型肝炎感染の病歴；過去２年間の薬物またはアルコール乱用歴；３か月以内に実施された別の研究への登録または抗ロイシンリッチリピート及び免疫グロブリンドメイン含有神経突起伸長阻害剤受容体相互作用タンパク質１（抗ＬＩＮＧＯ‐１）を用いた過去の研究への参加；または、研究の要求事項に従うことができない場合。また、他の理由により参加が不適切であると研究者が判断した場合や、女性の参加者が、現在妊娠中であるか、母乳哺育中であるか、または研究中に妊娠の計画があるなどの場合にも、参加者を除外した。
【０４３８】
無作為化の前に、すべての参加者にメチルプレドニゾロン１ｇ／日を３〜５日間投与した。高用量メチルプレドニゾロンによる治療後、参加者を、１：１の割合でプラセボまたは抗ＬＩＮＧＯ‐１  １００ｍｇ／ｋｇへ無作為化し、ベースラインから２０週目までの４週間ごとの静脈内投与（６回の治療）を行い、これを３２週目まで追跡した（図９）。治療／調剤モニターを準備している薬剤師だけが非盲検であった。集中型インタラクティブ音声及びウェブ応答システムを用いて、置換ブロック法によって参加者を無作為化した。ブロックサイズは４であり、ブロック数は５０であった。独立した生物統計学者が無作為化を監修した。
【０４３９】
全視野ＶＥＰ（ＦＦ‐ＶＥＰ）、スペクトルドメイン光干渉断層撮影（ＳＤ‐ＯＣＴ）、及び低コントラスト文字視認性（ＬＣＬＡ）を、スクリーニング時、ベースライン時、及び４〜８週間ごとに研究終了（第３２週目）まで査定し、有効性を査定した。主要評価項目は、全視野ＶＥＰ（ＦＦ‐ＶＥＰ）を用いた測定による、ベースライン時の罹患していない他眼と比較した罹患した眼の第２４週目の視神経伝導の潜時であった。ＦＦ‐ＶＥＰを用いての、ベースライン時の罹患していない他眼と比較した視神経伝導の潜時回復は、再髄鞘化の評価方法であった。研究終了時（３２週目）に最終潜時評価を実施した。
【０４４０】
２４週目（あらかじめ指定）時点での、罹患した眼のＦＦ‐ＶＥＰ潜時であって、他眼よりも≦１０％下回るものとして定義されるＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復に基づいて参加者の数を評価することを含め、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時に基づく多くの追加の分析を実施した。この回復閾値周辺での事後感度分析を行った。４回以上の注入（事後）を受けた参加者の治療群間の治療意図（ＩＴＴ）集団における２４週目のＦＦ‐ＶＥＰ潜時の変化も測定した。
【０４４１】
副次有効性評価項目は、第２４週時点での以下の変化を含んでいた：（ｉ）ベースライン時の罹患していない眼と比較しての罹患した眼におけるＲＮＦＬの厚さ；（ｉｉ）ベースライン時の罹患していない眼と比較しての罹患した眼におけるＲＧＣＬ／網膜内網状層（ＩＰＬ）の厚さ；（ｉｉｉ）１．２５％及び２．５％のスローン文字チャートを使用して測定したベースラインからの低コントラスト文字視認性（ＬＣＬＡ）の変化；罹患した眼の固有のベースライン値を使用した。網膜神経線維層及び神経節細胞層の厚さ（スペクトルドメイン光干渉断層撮影法（ＳＤ‐ＯＣＴ）を用いて測定）及び低コントラスト文字視認性（ＬＣＬＡ）の変化は、神経保護を評価するために用いた方法であった。
【０４４２】
以下の被験体集団における共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）及び繰り返し測定値に関する混合効果モデル（ＭＭＲＭ）の分析によって、治療間比較を評価した：（ｉ）ｐｅｒ‐ｐｒｏｔｏｃｏｌ集団（ＰＰ；研究を完了し、２回以上の治療を欠かさずに受け、ＭＳ修飾療法を受けなかった被験体）及び（ｉｉ）治療意図集団（ＩＴＴ；１回以上の研究治療を受けた無作為化した被験体）。
【０４４３】
有効性評価項目については、調整平均変化を計算し、第２４週時点での共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）及び第３２週までの繰り返し測定値に関する混合効果モデル（ＭＭＲＭ）の分析によって治療間比較を評価した。第３２週のデータを、治療終了時（２４週目）と試験終了時（３２週目）の間に治療効果が持続したかどうかを確認するための支援分析として用いた。
【０４４４】
これらの患者集団のより詳細な説明は、以下の通りである：
【０４４５】
治療意図集団（ＩＴＴ）
無作為化した患者は、抗ＬＩＮＧＯ‐１またはプラセボの少なくとも１回の投与を受けた（プロトコールの遵守に関わらず）が、必ずしも研究を完了しなかった。その場合、中断した患者ごとに、最後に観察したデータポイントを研究が終了するまで繰り越した。ＩＴＴ集団への投与量は少なく、最後の観測データを繰り越したが、このことは観察した治療効果に影響を与える可能性がある。
【０４４６】
ｐｅｒ‐ｐｒｏｔｏｃｏｌ集団
ｐｅｒ‐ｐｒｏｔｏｃｏｌ集団とは、研究を完了し、抗ＬＩＮＧＯ‐１またはプラセボの２回以上の投与を欠かさず受け、研究期間中にＭＳ修飾療法を受けなかったＩＴＴ集団に由来する被験体として定義される。ＡＮＣＯＶＡ分析における補完のために、最終観察繰越法を使用した。
【０４４７】
２４週目時点での、罹患した目のＦＦ‐ＶＥＰ潜時であって他眼よりも≦１０％下回るものとして定義されるＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復あり及びなしの患者のサブグループもまた、カイ２乗検定を用いて治療群間で比較（事後分析）し；これらの分析の１０％カットオフ周辺の感度分析は、カイ２乗検定とフィッシャー直接確率検定の両方を用いた。罹患していない他眼のベースラインを、ＡＮＣＯＶＡ及びＭＭＲＭのベースライン共変量として用いた。
【０４４８】
ＦＦ‐ＶＥＰの測定
すべてのセンターは、国際臨床視覚電気生理学会及び米国臨床神経生理学会のガイドラインの両方を遵守した標準プロトコールを用いて、すべてのＦＦ‐ＶＥＰ調査を実施することを求められた。各ＶＥＰ調査を、２名のマスキングした臨床電気生理学者が独立に解釈を行った。特定のパラメータ内にデータの合致がない場合、第３のマスキングした独立の臨床電気生理学者が、読み取り担当者の意見の相違を最良の判断と専門知識に従って調和させることによってデータを裁定し、最終的な解釈の提供を行った。各ＶＥＰは、参加者の他のＶＥＰデータを参照せずに解釈を行った。主要な読み取り担当者はデータの収集や分析には関与しなかった。
【０４４９】
ＳＤ‐ＯＣＴによるＲＧＣＬ／ＩＰＬ及びＲＮＦＬの測定
標準化された研究プロトコールに従ってＳＤ‐ＯＣＴスキャンを取得した。Ｓｐｅｃｔｒａｌｉｓ（Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、ハイデルベルグ、ドイツ）またはＣｉｒｒｕｓ（Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ  Ｍｅｄｉｔｅｃ、ダブリン、カリフォルニア）システムから各サイトで画像を得た。
【０４５０】
Ｓｐｅｃｔｒａｌｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍで画像を取得した各参加者について、以下のスキャンパターンを各眼で得た：中心窩中心点を中心とする黄斑の２００×２００の領域をカバーする高密度９７ラインのプリセットスキャンをＡＲＴ設定１６の高速モードで使用し、神経感覚網膜層及び硝子体網膜界面を画像化し；中心窩中心点を中心とする３００×５０の領域をカバーする７ラインのプリセットスキャンパターンをＡＲＴ設定２５の高解像度モードで使用し、中心部の網膜黄斑を査定し；視神経を中心とする１５０×１５０の領域をカバーする７３ラインのプリセットスキャンをＡＲＴ設定９の高速モードで使用し、視神経、乳頭周囲領域、及び対応する硝子体網膜界面を画像化し；視神経を中心とするＲＮＦＬプリセット視神経１２０直径円スキャンを使用し、ＲＮＦＬの厚さを測定した。
【０４５１】
Ｃｉｒｒｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍで画像を取得した各参加者について、以下のスキャンパターンを各眼で得た：中心窩中心点を中心とする黄斑の６ｍｍ×６ｍｍの領域をカバーする５１２×１２８の黄斑キューブを用いて、神経感覚網膜層及び硝子体網膜界面を画像化し；中心窩中心点を中心とする５線ラスター（ＨＤ）プリセットラスタースキャンパターンを用いて、中心窩を査定し；視神経を中心としする２００×２００の視神経キューブのプリセットスキャンを用いて、視神経、乳頭周囲領域、及び対応する硝子体網膜界面を画像化し、ＲＮＦＬの厚さを測定した。
【０４５２】
マスキング及び独立した方法で認定した２人の読み取り担当者が、黄斑及びＲＮＦＬの厚さを測定し、各参加者のコード化したスキャンについて形態学的査定を行った。データの専門家は、２人の読み取り担当者から得た値のうち、一致するものをすべて試験用データベースに入力し、一致しない値にはフラグを付けた。第３の認定された上級の読み取り担当者は、矛盾した値を調停した。上級の読み取り担当者は、自らの最善の判断と専門知識に従ってすべての読み取り担当者の不一致を調停し、最終的な裁定値として自分の決定を記録し、それをデータの専門家が試験用データベースに入力した。マスキングした読み取り担当者間の合意した決定または読み取り担当者の意見が合わなかった場合の調停による決定に従って、各ＳＤ‐ＯＣＴカテゴリー変数を、存在、不在、または判読不能（低品質またはスキャンの集中度のために）と評価付けた。神経節細胞複合体測定のために、２人の独立した読み取り担当者がセグメンテーションライン配置を査定し、前記２人の読み取り担当者が矛盾を裁定した。調停、裁定、及びデータ入力の終了後、試験用データベースに入力したすべての値の正確性を、別のマスキングしたデータ専門家が検証した。
【０４５３】
Ｈｅｙｅｘソフトウェア（Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）、及びＣｉｒｒｕｓソフトウェア（Ｚｅｉｓｓ  Ｍｅｄｉｔｅｃｈ）をそれぞれ用いて、黄斑ならびにＲＮＦＬ  Ｓｐｅｃｔｒａｌｉｓ及びＣｉｒｒｕｓスキャン上の中央部分領域及びＲＮＦＬの厚さを測定した。Ｓｐｅｃｔｒａｌｉｓ黄斑及びＲＮＦＬセグメンテーションラインアーチファクトを手動で補正した。Ｃｉｒｒｕｓ黄斑セグメンテーションラインアーチファクトもまた、手動で補正した。Ｃｉｒｒｕｓ  ＲＮＦＬセグメンテーションアーティファクトは、ソフトウェアの制限のために手動で補正することができなかった。カスタマイズした半自動化ソフトウェア（ＤＯＣＴＲＡＰ）を用いて、ＲＧＣＬ／ＩＰＬの厚さを含む神経節細胞複合体を測定した。図１０に示すように、糖尿病性網膜症早期治療グリッドに対応する９つのセクターのそれぞれにおいてＲＧＣＬの厚さの平均を計算した。さらに、９つのセクター全域の全体的な平均厚さを決定した。
【０４５４】
［結果］
欧州、オーストラリア、及びカナダの３３のサイトにおいて、８２の被験体を、プラセボまたは抗ＬＩＮＧＯ‐１に無作為化した。全被験体をＩＴＴ分析に含めた（各群でｎ＝４１）。ＰＰ集団は、３６の被験体をプラセボ群に含み、３３個体を抗ＬＩＮＧＯ‐１で処置した（図１１）。これらの群のベースライン人口統計（表５）ならびに研究離脱率及び治療中止率（図１１）は同等であった。
【表５】
2018504400.tif 000013
【０４５５】
しかしながら、伝導障害の有病率（ＦＦ‐ＶＥＰ応答の欠如；抗ＬＩＮＧＯ‐１とプラセボの比が２：１）ならびにステロイド治療後のＡＯＮ徴候及び症状の重症度によって示すように、ＡＯＮのより重篤な症例は、プラセボよりも抗ＬＩＮＧＯ‐１に、より頻繁に無作為化された（表６）。
【表６−１】
2018504400.tif 000014
【表６−２】
2018504400.tif 000015
【表６−３】
2018504400.tif 000016
【０４５６】
治療の平均時間は、プラセボ群では２３．０±４．１２週であり、抗ＬＩＮＧＯ‐１群では２２．５±５．０１週であった。ＰＰ及びＩＴＴ集団において、抗ＬＩＮＧＯ‐１群は、２４週目（表７）及び３２週目時点で、プラセボに比べて改善された視神経伝導潜時を示した。ＰＰ集団では、抗ＬＩＮＧＯ‐１処置患者は、プラセボに比べて有意に改善された潜時回復の平均差を示した：２４ｗｋｓで７．５５ミリ秒（９５％ＣＩ、−１５．１〜０．０、ＡＮＣＯＶＡ  ｐ＝０．０５）（図１２）及び３２ｗｋｓで９．１３ミリ秒（９５％ＣＩ、−１６．１〜−２．１、ＭＭＲＭ  ｐ＝０．０１）（図１８Ｂ）。ＩＴＴ集団での対応する平均差は、２４ｗｋｓで３．４８ミリ秒（９５％ＣＩ、−１０．６〜３．７、ｐ＝０．３３）（図１２）及び３２ｗｋｓで６．０６ミリ秒（９５％ＣＩ、−１２．７〜０．５、ｐ＝０．０７）（図１８Ｂ）であった。４回以上の注入を受けたＩＴＴ集団からの参加者では、２４週目時点のＦＦ‐ＶＥＰ潜時の改善は、ＰＰ集団の分析結果と同等であった：調整平均変化が２２．０（プラセボ；ｎ＝３８）対１５．８（抗ＬＩＮＧＯ‐１；ｎ＝３７）、ＡＮＣＯＶＡを用いた対プラセボの治療差が−６．１ｍｓ（９５％ＣＩ、−１３．３〜１．１；Ｐ＝０．１０）。
【０４５７】
３２週の期間中、副次有効性評価項目ＳＤ‐ＯＣＴ及びＬＣＬＡに差は認められなかった。（表７ならびに図１３及び１４）。有害事象（ＡＥ）の全発生率及び重症度は、治療群にわたって同等であった。治療に関連する重度ＡＥは、注入に伴う過敏症（Ｎ＝２）及び肝臓トランスアミナーゼの無症候性の一過性上昇（Ｎ＝１）であった。
【表７−１】
2018504400.tif 000017
【表７−２】
2018504400.tif 000018
【０４５８】
罹患した眼におけるベースライン時のＦＦ‐ＶＥＰ潜時が悪化した（他眼または伝導障害に比べ＞３％の悪化と定義される）ＩＴＴ集団の参加者のうち、抗ＬＩＮＧＯ‐１群の５３％の患者（１６／３０）が、２４週目時点でＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復（他眼に比べて≦１０％の範囲で悪化している罹患した眼のＦＦ‐ＶＥＰ潜時として定義される）を有しており、これに対してプラセボ群は２６％（９／３４）であった（Ｐ＝．０２７９）。１２週目時点で、抗ＬＩＮＧＯ‐１群の２９％（１０／３５）及びプラセボ群の１２％（４／３３）が正常な／軽度に延長されたＦＦ‐ＶＥＰ潜時（Ｐ＝０．０９）を有していた。同様の結果がＰＰ集団において観察され、２４週目時点で、抗ＬＩＮＧＯ‐１の５４％（１５／２８）及びプラセボ群の２７％（９／３３）が正常な／軽度に延長されたＦＦ‐ＶＥＰ潜時を有しており（Ｐ＝０．０４）、ならびに１２週目時点では、抗ＬＩＮＧＯ‐１が３０％（９／３０）及びプラセボ群が１３％（４／３１）（Ｐ＝０．１０）であった。ＰＰ集団で実施した事後感度分析の結果、潜時回復を示すために１０％が適切なカットオフであったことが明らかとなった（表８参照）。
【表８−１】
2018504400.tif 000019
【表８−２】
2018504400.tif 000020
【０４５９】
２４週目時点での、ＳＤ‐ＯＣＴによるＲＮＦＬ及びＲＧＣＬ／ＩＰＬの厚さ、または抗ＬＩＮＧＯ‐１に対するプラセボのＬＣＬＡの変化の副次有効性評価項目の治療効果は観察されなかった（ＰＰ集団については表９参照）。しかしながら、ＰＰ集団におけるＲＧＣＬ／ＩＰＬ菲薄化の大部分は初回調査の投与前に生じており、４週目時点において第２回投与を与える前にはそのすべてが起こっていた（表６、図１４；対応する他眼データを表１０に示す）。副次評価項目の結果は、ＩＴＴ集団についても同様であった（表１１、図１３）。
【表９】
2018504400.tif 000021
【表１０−１】
2018504400.tif 000022
【表１０−２】
2018504400.tif 000023
【表１１】
2018504400.tif 000024
【０４６０】
２４週目時点でのＲＧＣＬ菲薄化（ＳＤ‐ＯＣＴ測定による；事後分析）の平均は、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復のないものに比べ、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復のあるＩＴＴ集団の被験体において、より有意に低かった。平均差は４．９２μｍ（９５％ＣＩ、１．３９〜８．４６；Ｐ＝０．００７１）であった。ＲＧＣＬ／ＩＰＬの厚さの調整平均変化は、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復を有する２９の被験体（プラセボ、ｎ＝１０；抗ＬＩＮＧＯ‐１、ｎ＝１９）では−７．８３μｍ、及びＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復を有していない４０の被験体（プラセボ、ｎ＝２６；抗ＬＩＮＧＯ‐１、ｎ＝１４）では−１２．７５μｍであった。ＰＰ集団では、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復を有する被験体と、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復を有していない被験体との平均差は、４週目時点で３．２４μｍ（９５％ＣＩ、０．１０〜６．３９  ＡＮＣＯＶＡによるＰ＝．０４３５）であった。２４週目時点での平均差は４．５２μｍ（９５％ＣＩ、０．８６〜８．１７  ＡＮＣＯＶＡによるＰ＝．０１６４）であった。ＰＰ集団についての結果を図１５に示す。
【０４６１】
ＦＦ‐ＶＥＰ潜時の変化を、ベースライン特徴（事後）によってサブグループに層別化した。結果を表１２に示す。各特徴のカットオフとして中央値を用いた（脳内Ｔ２病変体積を除く）。
【表１２】
2018504400.tif 000025
【０４６２】
抗ＬＩＮＧＯ‐１の治療効果は、ＰＰ集団において年齢と相関していた。若い被験体は、年配の被験体に比べて、表１３に示すように、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時に対する抗ＬＩＮＧＯ‐１の効果がより低かった。年齢に従った２４週目時点でのＦＦ‐ＶＥＰ潜時の変化を図１６に示す。治療群における３３歳以下の被験体は１６．９３ミリ秒の遅延を示し、未治療被験体に比べて−０．８９ミリ秒の差になった（９５％ＣＩ  −１１．４３〜９．６５；ＡＮＣＯＶＡに基づくＰ＝．８７）。しかしながら、３３歳超の被験体は、１２．１５ミリ秒の遅延を示し、未治療の被験体に比べて−１４．１７ミリ秒の差を示した（９５％ＣＩ＝９５％ＣＩ  −２４．８３〜−３．５２、ＡＮＣＯＶＡに基づくＰ＝．０１）。
【表１３】
2018504400.tif 000026
【０４６３】
抗ＬＩＮＧＯ‐１の効果は、ＰＰ集団における初回投与の時間による影響を受けた。ＡＯＮ発症から２５日未満に初回用量を投与した患者では、プラセボ治療群は２０．２ミリ秒の遅延を示し、抗ＬＩＮＧＯ‐１治療群は１１．１９ミリ秒の遅延を示し、その差は−９．０１ミリ秒［９５％ＣＩ  −２０．４４〜２．４２；ｐ＝０．１２］であった。ＡＯＮ発症後２５日目以降に初回用量を投与した患者では、プラセボ治療群は２３．９１ミリ秒の遅延を示し、抗ＬＩＮＧＯ‐１治療群は１７．２３ミリ秒の遅延を示し、その差は−６．６８ミリ秒［９５％ＣＩ  −１６．７５〜３．３９；ｐ＝０．１９］であった。したがって、ＡＯＮ発症直後（例えば、ＡＯＮ発症後２５日未満）での抗ＬＩＮＧＯ‐１投与は、プラセボに比べて潜時遅延をより大幅に低減した。
【０４６４】
さらに、抗ＬＩＮＧＯ‐１の治療効果は、高コントラスト映像視認性（ＨＣＶＡ）の測定に基づく、ベースラインでのより重度の視力障害を有する患者においてより顕著であった。特に、ベースラインで４９文字未満のＨＣＶＡを有する被験体（ベースラインでのより重度の視覚障害を有する）は、−１０．９２ミリ秒の潜時回復を示した［９５％ＣＩ  −２３〜１．２；ｐ＝０．０７６］。ベースラインで４９文字以上のＨＣＶＡを有する被験体（ベースラインでの視力障害の重症度が低い）は、−４．１４ミリ秒の潜時回復を示した［−１４．１〜５．８６；ｐ＝０．４１］。
【０４６５】
ＦＦ‐ＶＥＰ潜時に対する抗ＬＩＮＧＯ‐１の有効性の概要を表１４に示す。
【表１４−１】
2018504400.tif 000027
【表１４−２】
2018504400.tif 000028
【０４６６】
ベースライン及び２４週目における障害に基づくＦＦ‐ＶＥＰレスポンダーには３つのカテゴリーが存在していた。それは以下の３つのカテゴリーである：
（１）罹患した眼において記録不能なベースライン潜時（重度の初期潜時遅延を示す）を有し、及び罹患していない他眼のベースラインよりも３％超の悪化を示した第一の記録可能な潜時を有し、罹患した眼の２４週目の潜時が、罹患していない眼の２４週目の潜時の１０％以内に戻った（軽度の改善を示す）被験体；
（２）罹患していない他眼のベースラインよりも１０％以上悪化した、罹患した眼の測定可能な潜時を有する被験体であって、（ａ）罹患した眼の２４週目の潜時が、罹患していない眼の２４週目の潜時の１０％以内に戻った（軽度の改善を示す）被験体、または（ｂ）罹患した眼の２４週目の潜時がベースラインから１５％以上改善した（実質的な改善を示す）被験体；及び、
（３）罹患している眼の測定可能なベースライン潜時が異常であって、それが罹患していない他眼のベースライン潜時の１０％以内（軽度または中程度の潜時障害を示す）であり、２４週目時点での罹患している眼の潜時が正常（２４週目時点での罹患していない眼の潜時の３％以内）に戻った被験体。
【０４６７】
また、ＭＲＩを使用して抗ＬＩＮＧＯ‐１またはプラセボ群における病変（例えば、ＧＤ増強またはＴ２病変）を検出することによって、疾患負荷を測定した。表１０は、被験体の脳内Ｔ２病変のサイズ、プラセボの潜時、及び抗ＬＩＮＧＯ‐１治療の潜時を示す。抗ＬＩＮＧＯ‐１潜時が低いほど、Ｔ２病変が小さくなるという相関関係にあるようであった。
【表１５】
2018504400.tif 000029
【０４６８】
［実施例４：ＡＯＮに対して抗ＬＩＮＧＯ‐１モノクローナル抗体ＢＩＩＢ０３３で処置した被験体における多局所視覚誘発電位による有効性］
単眼刺激に対する皮質応答の潜時の増加は、視神経の脱髄事象を示しており、これはＡＯＮの特徴であり、また、全視野（ＦＦ）視覚誘発電位（ＶＥＰ）及び多局所ＶＥＰ（ｍｆＶＥＰ）を用いて実証されている。ｍｆＶＥＰを使用すると、視覚刺激が視野の複数の領域に同時に提供され、より広い視野に刺激を提供し、より正確な分析が可能になる。Ｋｌｉｓｔｏｒｎｅｒ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ．  ２０１０；５１（５）：２７７０‐２７７７参照。
【０４６９】
実施例３に記載するように、ＲＥＮＥＷ試験は、ＡＯＮの初回発症後のＣＮＳ再髄鞘化のための抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体の有効性及び安全性を決定することを目的としていた。実施例３に記載のＲＥＮＥＷ試験では、ｍｆＶＥＰに関する補助調査も実施し、従来のＦＦ‐ＶＥＰ（研究の事前に指定した主要評価項目）よりもＡＯＮ試験における治療有効性に関する潜在的に改善された尺度として、ｍｆＶＥＰの使用を検討した。本実施例では、ｍｆＶＥＰに関する補助調査について記載する。
【０４７０】
［方法］
ＲＥＮＥＷ試験のプロトコールを実施例３に詳細に記載する。ｍｆＶＥＰに関する補助調査では、ｍｆＶＥＰによって測定する視覚誘発電位の潜時は、選択した試験部位での探索的評価項目として含まれていた。ｍｆＶＥＰを用いて評価した個々のセグメントを図１７に示す。ｍｆＶＥＰは、無作為化時点から４週間の間隔で、２４週目（主要有効性分析）及び３２週目（試験終了の経過観察）まで実施した。他眼及び罹患した眼の、それ自身のベースラインから２４週目及び３２週目時点までのｍｆＶＥＰ潜時の変化を、盲検試験者による進行分析を用いて測定した。ｍｆＶＥＰに関する補助調査のトレーニング、資格認定、品質管理、及びデータ分析に、中央リーディングセンターを使用した（デュークリーディングセンター、ビジョンサーチ、シドニー  オーストラリアの協力のもとで）。
【０４７１】
ＡＮＣＯＶＡ及びＭＭＲＭによって治療間比較を評価した。ＦＦ‐ＶＥＰと網膜神経節細胞層／内網状層の厚さとの相関を、ペアワイズ相関及びピアソン相関係数を用いて査定した。分析した被験体群（ＩＴＴ、ＰＰ、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復ありまたはなし）を実施例３に詳細に記載する。
【０４７２】
［結果］
ｍｆＶＥＰに関する補助調査は、ＲＥＮＥＷ試験に参加した被験者の４８％を含んでいた（Ｎ＝３９／８２）；１８名をプラセボで、２１名を抗ＬＩＮＧＯ‐１で処置した。これらの群は、ベースライン人口統計において同等であった（表１６）。プラセボで処置した１６人の参加者及び抗ＬＩＮＧＯ‐１で処置した１５人の参加者は、ＲＥＮＥＷ試験のＰＰ集団の一部であった。
【表１６】
2018504400.tif 000030
【０４７３】
ｍｆＶＥＰ補助調査全体（ＩＴＴ）及びＰＰ集団に含まれる被験体において、抗ＬＩＮＧＯ‐１治療群は、プラセボに比べて２４週目でのＶＥＰ潜時に改善を示した（ＩＴＴ補助調査集団では−４．９７ｍｓの差分［Ｐ＝．３７］、及び補助調査ＰＰ集団では−１１．７８［Ｐ＝．０６］；図１８）。３２週目時点で、プラセボに比べてＩＴＴ補助調査では−３．８２ｍｓ（Ｐ＝．５０）、ＰＰ集団の補助調査では−９．３８ｍｓ（Ｐ＝．１５）の改善が認められた（ＭＭＲＭによる）。
【０４７４】
補助調査に参加する全１３人の被験体（プラセボに４人、抗ＬＩＮＧＯ‐１に９人を割り当てた）を、ＦＦ‐ＶＥＰを用いて潜時回復を有する（罹患した眼の２４週目での潜時が他眼のベースライン潜時の１０％以内に戻る）ものとして識別し、有していない１８例（１１例のプラセボ；７例の抗ＬＩＮＧＯ‐１）と比較した。ｍｆＶＥＰによる潜時回復の程度をこれらの被験体で比較した。ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復を有する被験体では、２４週目においてｍｆＶＥＰ潜時の遅延は有意に少なかった（図１９）。また、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復を有する被験体において、ｍｆＶＥＰ振幅の回復に有意な差異の傾向もあり（図１９）、これはＦＦ‐ＶＥＰを用いた場合には必ずしも明らかなことではなかった。
【０４７５】
ｍｆＶＥＰ潜時に対する抗ＬＩＮＧＯ‐１の有効性に関する概要を表１７に示す。
【表１７】
2018504400.tif 000031
【０４７６】
ＲＥＮＥＷ試験ＰＰ及びＩＴＴ集団における補助調査ｍｆＶＥＰ潜時または振幅変化を、他の有効性評価項目と比較することにより、いくつかの相関関係が明らかになった（表１８）。
【表１８−１】
2018504400.tif 000032
【表１８−２】
2018504400.tif 000033
【０４７７】
さらに、ｍｆＶＥＰ潜時及び振幅による調査の間、他眼の状態を経時的に観察した。経時的な他眼のｍｆＶＥＰ振幅を表１９に示す。
【表１９】
2018504400.tif 000034
【０４７８】
振幅の損失を防止し、他眼の振幅を保存することに関してのｍｆＶＥＰの強力な治療効果を観察した。図２０参照。図２０に示すように、プラセボ治療群の他眼においては、ｍｆＶＥＰの振幅は２０週目には早くも下降するが、これは他眼に損傷があることを示している。抗ＬＩＮＧＯ‐１で治療した群では、ｍｆＶＥＰの振幅は３２週間の調査を通して保存された。このように、抗ＬＩＮＧＯ‐１は、ＡＯＮの初回発症後に、被験体の他眼に損傷が確立するのを予防した。
【０４７９】
罹患した眼及び罹患していない眼の両方について、３２週にわたる同じ眼のベースラインからのＭＦ‐ＶＥＰ振幅の変化を測定した。罹患した眼のベースラインからの、罹患した眼の治療によってもたらされるＭＦ‐ＶＥＰ振幅の平均変化（ｎＶ）を表２０及び図２１に示す。
【表２０−１】
2018504400.tif 000035
【表２０−２】
2018504400.tif 000036
【０４８０】
罹患していない眼のベースラインからの、罹患していない眼の治療によるＭＦ‐ＶＥＰ振幅の３２週間にわたる平均変化（ｎＶ）を、表２１及び図２２に示す。
【表２１】
2018504400.tif 000037
【０４８１】
また、他眼の潜時の変化（ミリ秒）を、調査時のｍｆＶＥＰによって経時的に測定した。ＭＭＲＭ‐ＩＴＴ分析をすべての時点を用いて行い、表２２に示した。抗ＬＩＮＧＯ‐１で処置した場合とプラセボで処置した場合とで、他眼においてｍｆＶＥＰによって経時的に測定した潜時に有意差はなかった。
【表２２−１】
2018504400.tif 000038
【表２２−２】
2018504400.tif 000039
【０４８２】
ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復薬と非回復薬との有効性アウトカムの測定値の比較を表２３に示す（数字はベースライン（ＩＴＴ）に対する２４週間時点での変化を示す）。
【表２３】
2018504400.tif 000040
【０４８３】
［ＲＥＮＥＷ試験の結論］
実施例３に記載する結果は、ＦＦ‐ＶＥＰによって測定する潜時回復が、プラセボに比べて抗ＬＩＮＧＯ‐１群において改善（潜時遅延がより大幅に短縮）していることを示す。ＰＰ集団における分析は統計的に有意であり；ＩＴＴ集団における分析はポジティブな傾向を示した（ＭＭＲＭ；３２週目）。個々のレベルでは、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時回復の分析結果によると、罹患した眼の潜時が正常または正常に近い状態に回復した被験体の数は、抗ＬＩＮＧＯ‐１で治療した場合（５３％）がプラセボ（２６％）を２倍上回ったことが明らかとなった。ＦＦ‐ＶＥＰ潜時が正常または正常に近い状態に回復した被験体が被ったＲＧＣＬ菲薄化（平均、−７．８３μｍ）は、回復しなかった被験体（平均、−１２．７５μｍ）に比べて有意に低かった。治療効果の大きさ（伝導遅延の約４０〜５０％の改善またはＰ１００潜時の約８〜１０ミリ秒の減少）は、ＡＯＮ後の抗ＬＩＮＧＯ‐１による視神経再髄鞘化と合致する。
【０４８４】
神経保護効果を測定したＳＤ‐ＯＣＴ菲薄化、ＬＣＬＡ、及び高コントラスト映像視認性の二次評価項目では、検出可能な治療効果は観察されなかった。しかしながら、この結果から、網膜の菲薄化は、初回投与前に少なくとも半分及び残りは二回目の投与前に、極めて急速に起こることが明らかになった。
【０４８５】
また、抗ＬＩＮＧＯ‐１による治療効果は、より高齢の群、より高いベースラインの能力障害を有する患者、及びより早期に治療を開始した患者において、より良好であった。
【０４８６】
抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体オピシヌマブは、全視野視覚誘発電位（ＦＦ‐ＶＥＰ）によって測定する研究の主要評価項目、すなわち潜時回復（網膜から視覚野まで信号が移動する時間）を、プラセボに比べて向上させることを示した。本研究は、本明細書のようにスペクトルドメイン光干渉断層撮影（ＳＤ‐ＯＣＴ）及び低コントラスト文字視認性によってそれぞれ測定する網膜層（視神経の神経細胞及び軸索）の厚さの変化及び視覚機能を含む副次的評価項目に対する検出可能な効果を示さなかった。主要及び副次的評価項目は、視覚系の薬物が有する潜在的な効果の２つの異なる態様（再髄鞘化及び神経保護）を測定するものであった。低コントラスト文字視認性及びＯＣＴのいずれの副次的評価項目においても治療効果が欠如していたことには一貫性が認められる。本研究では、ＡＯＮ病変において網膜に対する神経保護効果は検出されなかった。しかしながら、罹患した眼及び他眼の視覚経路の両方における３２週間にわたるｍｆＶＥＰの振幅について、抗ＬＩＮＧＯ‐１治療の保護治療効果が認められ、これは、３２週目時点での他眼のｍｆＶＥＰ振幅に関して、高度に統計的に有意であった。
【０４８７】
ＡＯＮの初回発症の開始後に軸索再髄鞘化を介して視神経病変の修復を可能にする抗ＬＩＮＧＯ‐１の能力を研究するために、ＮＣＴ０１７２１１６１を設計した。これは、ＦＦ‐ＶＥＰを用いて、網膜と脳の視覚野との間の神経伝導の遅延を測定することにより、再髄鞘化に対する効果を特徴付けた。主要評価項目は、２４週目時点での罹患した眼のＦＦ‐ＶＥＰ潜時を、ベースライン時の罹患していない他眼と比較して測定した。結果は、２４週目時点でのｐｅｒ−ｐｒｏｔｏｃｏｌ集団で、視神経の潜時回復においてプラセボに比べて３４％の改善（ｐ＝０．０５０４）を示し、さらに３２週目時点でより高い結果を示した。
【０４８８】
研究を完了しなかった両群の患者を含む治療意図（ＩＴＴ）集団の分析結果は、ポジティブな傾向を示したものの、統計的有意に達しなかった。
【０４８９】
本明細書の結果は、ＡＯＮの初回発症を経験したが、まだ診断可能なＭＳに罹患していない患者において、抗ＬＩＮＧＯ‐１が視神経再髄鞘化を引き起こすのに有効であったことを示す。さらに、それは、３２週間にわたり、罹患した眼の視経路及び他眼の視覚経路の両方におけるｍｆＶＥＰの振幅に対し、明らかに保護的な効果を示した。したがって、ＡＯＮの初回発症の直後及び診断可能なＭＳの発症前に、早期に抗ＬＩＮＧＯ‐１を投与することにより、ＡＯＮの悪化を予防し、及び／またはＭＳの発症を予防する可能性がある。
【０４９０】
ＲＥＮＥＷは、ＡＯＮの初回発症に続いて、視神経再髄鞘化と両立するＦＦ‐ＶＥＰ潜時の観察された短縮を伴う抗ＬＩＮＧＯ‐１の臨床効果を実証する最初の臨床試験である。多局所ＶＥＰ（ｍｆＶＥＰ）を使用して潜時を測定した補助調査では、一貫した結果を観測し、これを実施例４に記載する。ｍｆＶＥＰによって罹患した眼及び他眼の両方について、及びＦＦ‐ＶＥＰでは罹患した眼について、振幅の保護効果が認められた（データは示さず）。安全性分析の結果は、抗ＬＩＮＧＯ‐１がプラセボ処置被験体と同様のＡＥの全体的発生率及び重症度で良好に忍容したことを示している。治験からの安全性及び忍容性の分析を実施例５に記載し、治験からの患者報告アウトカムを実施例６に記載する。
【０４９１】
再発型ＭＳを有する参加者における抗ＬＩＮＧＯ‐１について調べる第二の進行中の第二相の用量範囲設定試験（ＳＹＮＥＲＧＹ）は、例えば臨床試験識別番号ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒ：ＮＣＴ０１８６４１４８に記載されている。
【０４９２】
ｐｅｒ‐ｐｒｏｔｏｃｏｌ集団は、調査を完了し、抗ＬＩＮＧＯ‐１またはプラセボの２回以上の投与を欠かすことなく、調査期間中にＭＳ修飾療法を受けなかったＩＴＴ集団からの被験体として定義する。
【０４９３】
実施例４は、無作為化臨床試験の文脈におけるｍｆＶＥＰの使用に関する最初の報告を記載する。ｍｆＶＥＰ補助調査の結果は、２４週目及び３２週目の両方において、抗ＬＩＮＧＯ‐１群におけるｍｆＶＥＰ潜時がプラセボに比べて改善（潜時遅延がより大幅に短縮）したことを示した。プラセボと抗ＬＩＮＧＯ‐１群の差は、すべての補助調査参加者ではなくＰＰ集団に含まれる補助調査の被験体を比較した場合に、より大きかった。ＦＦ‐ＶＥＰ潜時（ＲＥＮＥＷ調査の主要評価項目）が正常または正常に近いレベルに回復した被験体は、ベースラインから２４週目にかけて、回復しなかった被験体（平均２９．５３ｍｓ）に比べて、ｍｆＶＥＰ潜時の遅延が有意に少なかった（平均６．１ｍｓ）ことに加え、振幅回復の向上傾向が認められた（Ｐ＜．１０）。ｍｆＶＥＰ潜時の変化は、ＦＦ‐ＶＥＰ潜時の変化と大きく相関しており（ｒ≧０．９１）、その一方で振幅の変化の相関は低かった（ｒ＝０．６３）。
【０４９４】
ｍｆＶＥＰ補助調査からの結果は、実施例３に記載するように、主要評価項目（ＦＦ‐ＶＥＰ）の全体的な有効性の結果と一致する。これは、候補ＣＮＳ再髄鞘化及び神経保護剤の有効性を調べる臨床試験において、ｍｆＶＥＰが有効性の強力な評価項目になり得ることを示唆する。さらに、多施設での国際的な補助調査で信頼性及び情報性の高い結果を生み出すことにより、本技術の実現可能性を確立した。
【０４９５】
ＲＥＮＥＷ調査（ｍｆＶＥＰ補助調査を含む）による治療効果は、数か月（３〜６か月）以内に起こり、その程度は、抗ＬＩＮＧＯ‐１による作用のＣＮＳ再髄鞘化機構のものと同等（約８〜１０ミリ秒）であった。抗ＬＩＮＧＯ‐１治療群において、時間の経過とともに他眼にｍｆＶＥＰ振幅の有意な減少が認められることから、抗ＬＩＮＧＯ‐１は神経保護効果を有する可能性が高い。これらの結果は、予防的に用いる場合に抗ＬＩＮＧＯ‐１がＭＳにおいて神経保護性であり得ることを示唆する。これらの結果はまた、健康な眼のｍｆＶＥＰが、診断可能なＭＳ症状を発症する前及び／またはＡＯＮの発症前の早期ＭＳを診断する方法であり得ることを示唆している。振幅損失の減少はＦＦ‐ＶＥＰ調査では観察されなかったが、これは振幅変化に対するＦＦ‐ＶＥＰ測定の感度の欠如による可能性が高い。ＲＥＮＥＷ調査では網膜神経軸索保護は観察されなかったが、おそらくは菲薄化の大部分が初回投与時までにすでに行われていたためであると考えられる。しかしながら、ｍｆＶＥＰ補助調査に登録したＲＥＮＥＷ被験体の３２週間に及ぶ長期的な経過観察の中で、抗ＬＩＮＧＯ‐１処置による視覚経路における脳内神経保護を観察した可能性が高い。
【０４９６】
［実施例５：ＡＯＮにおける抗ＬＩＮＧＯ１抗体の安全性及び忍容性］
本明細書に記載のＲＥＮＥＷ試験（ＮＣＴ０１７２１１６１）（例えば、実施例３及び４における）の参加者における抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体の安全性及び忍容性を査定した。
【０４９７】
ＲＥＮＥＷ試験プロトコールは、上記の実施例に詳細に記載されている。安全性及び忍容性の査定には、有害事象（ＡＥ）及び重度ＡＥ、臨床検査結果（血液学、血液化学、尿検査）、身体検査結果、臨床関連の生命徴候異常、脳磁気共鳴画像法の結果、１２リード心電図読み取り結果、血中の抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体の測定値、ならびにＡＯＮの徴候及び症状が含まれる。治験治療の１回以上の投与を受けたすべての被験体は、安全集団に含まれていた。
【０４９８】
［結果］
８２人の被験体は、プラセボ（ｎ＝４１）または抗ＬＩＮＧＯ‐１（ｎ＝４１）の投与を受け、そのベースライン特性は大部分で同様であった（表５）。ＡＥを有する被験体の数及びＡＥの重症度は、プラセボ群と抗ＬＩＮＧＯ‐１群とで同様であった（表２４及び２５）。重度ＡＥを有し、治療を中止した被験体の数は、抗ＬＩＮＧＯ‐１群においてプラセボ群よりも高かった（表２４）。
【表２４】
2018504400.tif 000041
【表２５】
2018504400.tif 000042
【０４９９】
４人の被験体は、ＡＥにより治療を中断した。プラセボ群では、１人の患者が（ＭＳのために）治療を中止した。抗ＬＩＮＧＯ‐１処置群では、治療関連重度ＡＥのために３人の患者が治療を中止した。３人の患者のうち２人は過敏症を呈しており、両患者において２回目の注入の開始直後に反応が起こり、注入の中止直後に完全に解消した。第三の患者は、アラニン及びアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼが増加する無症候性の症例を有しており、肝臓病として報告され、この症例は２回目の点滴後に最初に観察され、治療中止後に解消した。
【０５００】
重度ＡＥは７人の被験体において発症した。プラセボ群では２人の被験体が重度ＡＥを経験した。治療を中止した被験体に加えて、２人目の被験体についてはウイルス性心膜炎を有しており、サイトメガロウイルス陽性であった。抗ＬＩＮＧＯ‐１群では、５人の被験体が重度ＡＥを有しており；３人については治療を中止する結果となり（上記参照）、１人はＭＳ再発に罹患し、及び１人は他眼に視神経炎を有していた。
【０５０１】
器官別大分類（ＳＯＣ）ごとのＡＥの発生率は、グループ間で概ね類似していた（表２６）。しかしながら、胃腸障害は、プラセボよりも抗ＬＩＮＧＯ‐１で処置した患者で頻繁に発生した。最も一般的に報告されている胃腸症状は、悪心（抗ＬＩＮＧＯ‐１が１２％に対し、プラセボ７％）及び消化不良（抗ＬＩＮＧＯ‐１が５％に対し、プラセボ２％）であった。６種のＡＥについては、治療群にかかわらず、全被験体の１０％以上に発生した（表２７）。これらのうち、以下の３種についてはプラセボよりもＬＩＮＧＯ‐１でより高い頻度で発生した：（ｉ）疲労（１５％対１２％）、（ｉｉ）悪心（１２％対７％）、及び（ｉｉｉ）感覚異常（１０％対０）。残りは、群間で同等の頻度で発生するか、またはプラセボ群でより高頻度に発生した（ウートホフ現象）。注入開始後４時間以内に発症するＡＥについては、抗ＬＩＮＧＯ‐１群がプラセボ群よりも高かった（表２８）。注入ごとに同じ事象が起こることはなく、事象は２回目及び３回目の注入後に最も高頻度で発生した。最も一般的な注入に伴う事象は、頭痛（７％）及び悪心（７％）であった。いずれの過敏症の事象も２回目の注入中に発生した。
【表２６】
2018504400.tif 000043
【表２７】
2018504400.tif 000044
【表２８】
2018504400.tif 000045
【０５０２】
１７人の被験体は、ベースラインから７％超の体重増加があった。プラセボがｎ＝４（１０％）であるのに対し、抗ＬＩＮＧＯ‐１はｎ＝１３（３２％）である。サブグループの分析結果は、調査期間中に７％超の体重増加があった被験体が、より悪いベースライン疾患（高頻度の伝導障害、高コントラスト映像視認性障害、及び視覚誘発電位の潜時遅延を含む）を有していたことを示した。３人の参加者は、体重が７％超、減少していた（プラセボ、ｎ＝２；抗ＬＩＮＧＯ‐１、ｎ＝１）。他の安全性及び忍容性の調査結果は、群間で同様であった。
【０５０３】
［安全性と忍容性に関する結論］
これらの結果は、１００ｍｇ／ｋｇ用量の抗ＬＩＮＧＯ‐１が一般的に十分に忍容性であり、ＡＥの全体的発生率及び重症度がプラセボ処置被験体のそれに匹敵することを示している。本治験では、治療に関連する重度ＡＥをわずかに観察したが、それらはすべて治療を中止することによって解決した。治療に関連しない重度ＡＥの発生率も低く、その大多数はＭＳに関連するものであった。
【０５０４】
治療と関わりなく最も一般的なＡＥは、鼻咽頭炎、頭痛、疲労、ウートホフ現象、及び悪心であった。プラセボよりも抗ＬＩＮＧＯ‐１でより高率に生じる最も一般的なＡＥは、疲労、悪心、及び感覚異常であった。治験中に死亡する例は生じなかった。重篤な有害事象（ＳＡＥ）の発生率は、抗ＬＩＮＧＯ‐１治療群（１２％）がプラセボ治療群（５％）より高かった。抗ＬＩＮＧＯ‐１で処置した２人の患者は、注入時の前後で生じる過敏反応に関するＳＡＥを有していた。１人の患者は、肝臓トランスアミナーゼの無症候性の上昇に関するＳＡＥを有し、これは薬物中止後に解消した。
【０５０５】
免疫原性は観察されなかった。ＵＬＮの３倍を上回る血清トランスアミナーゼの無症候性の上昇が、プラセボ処置群よりも抗ＬＩＮＧＯ‐１処置群においてより多く認められた（抗ＬＩＮＧＯ‐１が７％に対し、プラセボが０）。ベースライン後の７％超の体重変化（ベースライン後の任意の時点での増加）は、抗ＬＩＮＧＯ‐１を処置した被験体において高い発生率で認められた（抗ＬＩＮＧＯ‐１が３２％に対し、プラセボ１０％）。
【０５０６】
ＡＯＮの治療における抗ＬＩＮＧＯ‐１の安全性及び忍容性は、ＣＮＳ脱髄性疾患のための抗ＬＩＮＧＯ‐１の使用及び進行中の臨床開発を支持するものとなる。
【０５０７】
［実施例６：ＡＯＮを有する被験体において抗ＬＩＮＧＯ‐１抗体が視覚に関する生活の質に及ぼす効果］
ＲＥＮＥＷ臨床試験は、上記の実施例において詳細に記載されている。現時点では、ＡＯＮまたは再髄鞘化セグメント測定のための患者報告アウトカム（ＰＲＯ）は確立されていない。したがって、ＲＥＮＥＷ治験では、さらなる探索的評価項目を査定した。特に、視覚に関する生活の質（ＱｏＬ）のためのＰＲＯ測定、国立眼科研究所のＶｉｓｕａｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ‐２５（ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５）（Ｍａｎｇｉｏｎｅ  ＣＭ，ｅｔ  ａｌ．  Ａｒｃｈ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１９９８；１１６（１１）：１４９６‐１５０４）を行い、抗ＬＩＮＧＯ‐１の治療効果を評価した。この分析は、ＲＥＮＥＷにおいて、抗ＬＩＮＧＯ‐１またはプラセボに無作為化したＡＯＮ患者の自己報告による視覚機能を評価した。
【０５０８】
ＲＥＮＥＷ治験のプロトコールは、上記の実施例において詳細に記載されている。１３項の追加項目を含むＮＥＩ‐ＶＦＱ‐２５、及び１０項目のｎｅｕｒｏ‐ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（ＮＯＳ‐１０（Ｒａｐｈａｅｌ  ＢＡ，ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ  Ｊ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．２００６；１４２（６）：１０２６‐１０３５．ｅ２；探索的評価項目）は、０（高障害）〜１００（障害なし）の範囲であった。４ポイントの変化は臨床的に意味があると考えられた（Ｓｕｎｅｒ  ＩＪ，ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ．２００９；５０（８）：３６２９‐３６３５）。ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５は、ベースライン時および４、８、１２、１６、２０、２４、および３２週目に投与した。ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５及びＮＯＳ‐１０の結果を、別々に及び組み合わせて提示する。
【０５０９】
［統計的分析］
ＰＰ集団は、調査を完了し、２回以上の投与処置を欠かすことなく、調査期間中にＭＳ修飾療法を受けなかった被験体として定義した。本実施例では、ＰＰ集団から得たデータを提示する。視覚に関するＱｏＬ評価の各々に対するベースラインからのスコアの平均変化の治療間の差を、繰り返し測定値に関する混合効果モデル（ＭＭＲＭ）及び共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）によって分析した。ベースラインの視覚に関するＱｏＬの評価値及び治療群に対して、ＭＭＲＭ及びＡＮＣＯＶＡモデルを調整した。ＡＮＣＯＶＡ分析における補完のために、最終観察繰越法（ＬＯＣＦ）を使用した。
【０５１０】
［結果］
合計６９人の患者が、ＲＥＮＥＷのＰＰ集団に含まれ、プラセボ（ｎ＝３６）または抗ＬＩＮＧＯ‐１（ｎ＝３３）のいずれかの投与を受けた。人口統計的特徴はベースライン時と同様であった（表５）。患者スコアは、ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５複合スコアのベースライン時における多くの障害を反映した（表２９）。プラセボ群の患者は、抗ＬＩＮＧＯ‐１群に比べてベースライン時の平均スコアがわずかに高かった（表２９）。両方の群とも、２４週を通じて、調整平均ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５複合スコア、ＮＯＳ‐１０、及びＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５とＮＯＳ‐１０との複合スコアにおいて、ベースラインに比べて実質的に改善した（図２３）。視覚に関するＱｏＬアセスメントのそれぞれのベースラインからのスコアの平均変化の治療間の差は、いずれの時点においても有意差がなかった（図２３）。
【０５１１】
２４週目において、両群の患者の大多数が、ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５複合スコアにおいて４ポイント以上の改善を示したが、４ポイント以上の減少を経験した患者はほとんどいなかった（図２４）。ＡＮＣＯＶＡモデルに基づく、ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５複合、ＮＯＳ‐１０、及びＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５とＮＯＳ‐１０との組合せ複合スコアのベースラインからの平均変化は、治療群間で異ならなかった（表３０）。
【表２９】
2018504400.tif 000046
【表３０】
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【０５１２】
［患者報告アウトカムに関する結論］
ＲＥＮＥＷ治験は、介入を伴うＡＯＮ発症における患者報告による視覚機能を評価した。ベースラインのＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５複合及びＮＯＳ‐１０スコアは、すべての患者が調査の開始時点で視覚機能障害を有していたことを示した。初期傷害または治療群にかかわらず、患者は、ベースラインから２４週目までの間に視覚に関するＱｏＬスコアの顕著な改善を示した。改善にもかかわらず、各群の２４週目までの平均ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５複合スコアは、可能な最大スコア１００（視覚障害なし）を下回ったままであった。残りのＰＲＯ視覚機能障害は、早期に生じた永久的な神経細胞の喪失と合致し（実施例３参照）、神経保護及び視覚に関するＱｏＬアセスメントに対する治療効果を妨げた可能性が高い。ＮＥＩ  ＶＦＱ‐２５及びＮＯＳ‐１０に含まれる４９の項目のいずれかが、視神経の脱髄または再髄鞘化に感受性であるかどうかについては不明である。ＮＯＳ‐１０は、より感受性が高い可能性があり、なぜならば、ベースラインでより多くの視覚機能障害を示し、経時的な変化に対してより感受性が高いからである。
【０５１３】
参照による援用
本願全体を通じて引用する、すべての参考文献、図面、配列表、特許、及び公開済み特許出願の内容は、参照として本明細書に援用する。本明細書で言及するすべての出版物、特許、及び特許出願は、各個別出版物、特許または特許出願を特異的かつ個別に参照として援用するように示したかのように、その全体を参照として本明細書に援用する。矛盾が生じる場合には、本明細書における任意の定義を含む本願が優先する。
【０５１４】
ゲノム科学研究所（ＴＩＧＲ）によりｔｉｇｒ．ｏｒｇにおいてワールドワイドウェブ上で維持されるもの、及び／または国立バイオテクノロジー情報センター（ＮＣＢＩ）によりｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖにおいてワールドワイドウェブ上で維持されるものなど、公共データベース内のエントリに相関する受託番号を参照する任意のポリヌクレオチド及びポリペプチド配列も、参照としてその全体を援用する。
【０５１５】
均等物
当業者であれば、日常的な範囲の実験を用いて、本明細書に記載する本発明の特定の実施形態に対する多数の均等物を認識するか、または確認することができるであろう。そのような均等物を包含することを企図する。
【図１】
2018504400.tif 000048
【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図３Ｆ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2018504400.tif 000061
【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図２０】
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【図２１】
2018504400.tif 000078
【図２２】
2018504400.tif 000079
【図２３Ａ】
2018504400.tif 000080
【図２３Ｂ】
2018504400.tif 000081
【図２３Ｃ】
2018504400.tif 000082
【図２４】
2018504400.tif 000083
【手続補正書】
【提出日】平成29年9月8日(2017.9.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2018504400000001.app
【国際調査報告】
2018504400.tif 000084
2018504400.tif 000085
2018504400.tif 000086
2018504400.tif 000087
2018504400.tif 000088
2018504400.tif 000089
2018504400.tif 000090