(57)【要約】本開示の主題は、新生物（例えば、多発性骨髄腫）を処置するための方法および組成物を提供する。本開示の主題は、Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）、例えば、ＦｃＲＬ５のドメイン９を特異的に標的とするキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、およびかかるＣＡＲを含む免疫応答細胞に関する。本開示のＦｃＲＬ５を標的とするＣＡＲは、抗腫瘍活性を含む、増強された免疫活性化特性を有する。上記キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを含み得る。
2018504094.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であって、前記細胞外抗原結合ドメインが、Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）に特異的に結合する、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）。
【請求項２】
前記細胞外抗原結合ドメインが単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、請求項１に記載のＣＡＲ。
【請求項３】
前記細胞外抗原結合ドメインがマウスｓｃＦｖである、請求項２に記載のＣＡＲ。
【請求項４】
前記細胞外抗原結合ドメインがヒトｓｃＦｖである、請求項２に記載のＣＡＲ。
【請求項５】
前記細胞外抗原結合ドメインが、任意選択で架橋されたＦａｂである、請求項１に記載のＣＡＲ。
【請求項６】
前記細胞外抗原結合ドメインがＦ（ａｂ’）２である、請求項１に記載のＣＡＲ。
【請求項７】
前記ｓｃＦｖ、ＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２のうちの１つまたは複数が、異種配列と共に、前記細胞外抗原結合ドメインを形成するように、融合タンパク質内に含まれている、請求項２から６のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項８】
前記ＣＡＲの前記細胞外抗原結合ドメインが、約１×１０−９Ｍから約３×１０−６Ｍまでの結合アフィニティー（Ｋｄ）でＦｃＲＬ５に結合する、請求項１から７のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項９】
前記ＣＡＲの前記細胞外抗原結合ドメインが、約１×１０−９Ｍから約３×１０−６Ｍまでの結合アフィニティー（Ｋｄ）で、ＦｃＲＬ５のドメイン７、ドメイン８またはドメイン９に結合する、請求項１から８のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１０】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７および配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、前記細胞外抗原結合ドメインが、ＦｃＲＬ５に結合する、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１１】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、  配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、  配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、  配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５および配列番号９１９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、前記細胞外抗原結合ドメインがＦｃＲＬ５に結合する、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１２】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７および配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、  配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、  配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、  配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５および配列番号９１９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、前記細胞外抗原結合ドメインがＦｃＲＬ５に結合する、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１３】
前記細胞外抗原結合ドメインが    配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７、配列番号９２１およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１４】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５、配列番号９１９およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１５】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号９１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１６】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号に記載９１７の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１７】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号９１９に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１８】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号９２１に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項１９】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号１４４に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２０】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号１４３に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２１】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号２１６に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２２】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号２１５に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２３】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号２２０に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２４】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号２１９に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２５】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号２３６に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２６】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号２３５に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２７】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号２６８に記載の配列を有するアミノ酸を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２８】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号２６７に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項２９】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号１１６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３０】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号１１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３１】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号１７２に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３２】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号１７１に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３３】
前記細胞外抗原結合ドメインが、(a)配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７、配列番号９２１およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ならびに(b)配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５、配列番号９１９およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３４】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号９１５に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号９１７に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３５】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号９１９に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号９２１に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３６】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号１４４に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１４３に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３７】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号２１６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２１５に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３８】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号２２０に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２１９に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項３９】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号２３６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２３５に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４０】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号２６８に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２６７に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４１】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号１１６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１１５に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４２】
前記細胞外抗原結合ドメインが、（ａ）配列番号１７２に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１７１に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４３】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号３１１、３１７、３２３、３２８、３３４、３３７、３４２、３４７、３５１、３５６、３６２、３６８、３７４、３７６、３８０、３８４、３８９、３９４、３９６、４００、４０５、４０８、４１２、４１５、４２２、４２７、４３２、４３７、４４２、４４６、４５１、４５３、４５６、４５８、４５９、４６３、４６４、４６７、４７３、４７６、４８２、４８６、４８９、４９２、４９４、４９７、５０２、５０７、５１２、５１７、５２２、５２７、５２９、５３２、５３６、５３９、５４３、５４６、５５０、５５３、５５５、５６１、５６７、５７０、５７４、５７７、５７８、５７９、５８４、５７８、５８７、５９１、９２５および９３１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；ならびに(b)配列番号３１４、３２０、３２５、３３１、３３９、３４５、３５０、３５３、３５９、３６５、３７１、３７７、３８３、３８６、３９２、３９５、３９９、４０２、４０７、４１０、４１４、４１８、４１９、４２４、４３０、４３５、４３９、４４３、４４９、４５２、４５５、４５７、４６２、４６５、４７０、４７９、４８５、４８８、４９１、４９３、４９５、４９９、５０５、５０９、５１４、５１９、５２４、５２８、５３０、５３１、５３５、５４１、５４２、５４５、５４９、５５４、５５８、５６４、５６９、５７３、５７６、５８１、５９２、９２８および９３４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４４】
前記細胞外抗原結合ドメインが、
（ａ）配列番号３０９、３１５、３２１、３２６、３３２、３３５、３４０、３４６、３５４、３６０、３６６、３７２、３７８、３８７、３９３、４０３、４１１、４２０、４２５、４３６、４４０、４４４、４７１、４８０、５００、５１０、５１５、５２０、５２５、５３７、５５１、５５９、５６５、５８２、５８９、９２３および９２９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１；
(b)  配列番号３１０、３１６、３２２、３２７、３３３、３３６、３４１、３５５、３６１、３６７、３７３、３７９、３８８、４０４、４１２、４２１、４２６、４３１、４４１、４４５、４５０、４６６、４７２、４７５、４８１、４９６、５０１、５０６、５１１、５１６、５２１、５２６、５３８、５５２、５６０、５６６、５８３、５９０、９２４および９３０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２；
(c)  配列番号３１１、３１７、３２３、３２８、３３４、３３７、３４２、３４７、３５１、３５６、３６２、３６８、３７４、３７６、３８０、３８４、３８９、３９４、３９６、４００、４０５、４０８、４１２、４１５、４２２、４２７、４３２、４３７、４４２、４４６、４５１、４５３、４５６、４５８、４５９、４６３、４６４、４６７、４７３、４７６、４８２、４８６、４８９、４９２、４９４、４９７、５０２、５０７、５１２、５１７、５２２、５２７、５２９、５３２、５３６、５３９、５４３、５４６、５５０、５５３、５５５、５６１、５６７、５７０、５７４、５７７、５７８、５７９、５８４、５７８、５８７、５９１、９２５および９３１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；
(d)  配列番号３１２、３１８、３２４、３２９、３３８、３４３、３４８、３５２、３５７、３６３、３６９、３８１、３９０、３９７、４０１、４０６、４１６、４２３、４２８、４３３、４４７、４６０、４６８、４７４、４７７、４８３、４９０、４９８、５０３、５０８、５１８、５３３、５４０、５４４、５４７、５５６、５６２、５６８、５７１、５８０、５８５、５８８、９２６および９３１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１；
(e)  配列番号313、319、330、344、349、358、364、370、382、385、391、398、409、417、429、434、438、448、454、461、469、478、484、487、504、513、523、534、429、448、548、557、563、572、575、586、927および933からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２;ならびに
(f)  配列番号３１４、３２０、３２５、３３１、３３９、３４５、３５０、３５３、３５９、３６５、３７１、３７７、３８３、３８６、３９２、３９５、３９９、４０２、４０７、４１０、４１４、４１８、４１９、４２４、４３０、４３５、４３９、４４３、４４９、４５２、４５５、４５７、４６２、４６５、４７０、４７９、４８５、４８８、４９１、４９３、４９５、４９９、５０５、５０９、５１４、５１９、５２４、５２８、５３０、５３１、５３５、５４１、５４２、５４５、５４９、５５４、５５８、５６４、５６９、５７３、５７６、５８１、５９２、９２８および９３４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４５】
前記細胞外抗原結合ドメインが、(a)配列番号９２３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(b)配列番号９２４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、(c)配列番号９２５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、(d)配列番号９２６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(e)配列番号９２７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および(f)  配列番号９２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４６】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号９２９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(b)配列番号９３０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、(c)配列番号９３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、(d)配列番号９３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(e)配列番号９３３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および  (f)  配列番号９３４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４７】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４６３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号４１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４８】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号５１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号５１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号５３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項４９】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号４０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４０４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号５３４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号５３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５０】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５４３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５４４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号４４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号５４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５１】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号３７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４７５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５７１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号５７２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号５７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５２】
前記細胞外抗原結合ドメイン(a)配列番号４４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号４４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含むが、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５３】
前記細胞外抗原結合ドメインが(a)配列番号３０９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号３１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号４９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号４９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５４】
前記細胞外抗原結合ドメインの前記ＣＤＲのうちの１つまたは複数が、最大で約５つのアミノ酸置換を有する、請求項４３から５３のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５５】
前記細胞外抗原結合ドメインの前記ＣＤＲのうちの１つまたは複数が、最大で約３つのアミノ酸置換を有する、請求項４３から５３のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５６】
前記細胞外抗原結合ドメインが、前記細胞外抗原結合ドメインの重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間にリンカーを含む、請求項１から５５のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５７】
前記リンカーが、配列番号３０７および配列番号８９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項５６に記載のＣＡＲ。
【請求項５８】
前記細胞外抗原結合ドメインが、前記細胞外抗原結合ドメインの５’末端に共有結合によって接合されたシグナルペプチドを含む、請求項１から５７のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項５９】
前記ＦｃＲＬ５が、配列番号８９９に記載のアミノ酸配列を含む、請求項１から５８のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項６０】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号９６４に記載のアミノ酸配列を含むエピトープを結合する、請求項１から５９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項６１】
前記細胞外抗原結合ドメインが、配列番号９６５に記載のアミノ酸配列を含むエピトープに結合する、請求項１から５９のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項６２】
前記膜貫通ドメインが、ＣＤ８ポリペプチド、ＣＤ２８ポリペプチド、ＣＤ３ζポリペプチド、ＣＤ４ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＣＴＬＡ−４ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド、ＬＡＧ−３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、ＢＴＬＡポリペプチド、合成ペプチド（免疫応答と関連するタンパク質に基づかない）、またはそれらの組合せを含む、請求項１から６１のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項６３】
前記膜貫通ドメインが、ＣＤ８ポリペプチドを含む、請求項１から６２のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項６４】
前記膜貫通ドメインが、ＣＤ２８ポリペプチドを含む、請求項１から６２のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項６５】
前記細胞内ドメインが、ＣＤ３ζポリペプチドを含む、請求項１から６２のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項６６】
前記細胞内ドメインが、少なくとも１つのシグナル伝達領域をさらに含む、請求項１から６５のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項６７】
前記少なくとも１つのシグナル伝達領域が、ＣＤ２８ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド、ＣＴＬＡ−４ポリペプチド、ＬＡＧ−３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、ＢＴＬＡポリペプチド、合成ペプチド（免疫応答と関連するタンパク質に基づかない）、またはそれらの組合せを含む、請求項６６に記載のＣＡＲ。
【請求項６８】
前記シグナル伝達領域が共刺激性シグナル伝達領域である、請求項６６または６７に記載のＣＡＲ。
【請求項６９】
前記少なくとも１つの共刺激性シグナル伝達領域が、ＣＤ２８ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ−１０ポリペプチド、またはそれらの組合せを含む、請求項６８に記載のＣＡＲ。
【請求項７０】
前記少なくとも１つの共刺激性シグナル伝達領域が、ＣＤ２８ポリペプチドを含む、請求項６８に記載のＣＡＲ。
【請求項７１】
前記膜貫通ドメインがＣＤ２８ポリペプチドを含み、前記細胞内ドメインがＣＤ３ζポリペプチドを含み、前記共刺激性シグナル伝達ドメインがＣＤ２８ポリペプチドを含む、請求項１から６２のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項７２】
前記膜貫通ドメインがＣＤ８ポリペプチドを含み、前記細胞内ドメインがＣＤ３ζポリペプチドを含み、前記共刺激性シグナル伝達ドメインが４−１ＢＢポリペプチドを含む、請求項１から６２のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項７３】
組換えにより発現される、請求項１から７２のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項７４】
ベクターから発現される、請求項１から７３のいずれか一項に記載のＣＡＲ。
【請求項７５】
前記ベクターがγ−レトロウイルスベクターである、請求項７４に記載のＣＡＲ。
【請求項７６】
上記請求項のいずれか一項に記載のＣＡＲを含む単離された免疫応答細胞。
【請求項７７】
前記ＣＡＲで形質導入されている、請求項７６に記載の単離された免疫応答細胞。
【請求項７８】
前記ＣＡＲが、前記免疫応答細胞の表面上で構成的に発現される、請求項７６または７７に記載の単離された免疫応答細胞。
【請求項７９】
少なくとも１種の共刺激性リガンドを発現するように、前記少なくとも１種の共刺激性リガンドでさらに形質導入されている、請求項７６から７８のいずれか一項に記載の単離された免疫応答細胞。
【請求項８０】
前記少なくとも１種の共刺激性リガンドが、４−１ＢＢＬ、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ７０、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ４８、ＴＮＦＲＳＦ１４、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項７９に記載の単離された免疫応答細胞。
【請求項８１】
少なくとも１種のサイトカインを分泌するように、前記少なくとも１種のサイトカインでさらに形質導入されている、請求項７６から８０のいずれか一項に記載の単離された免疫応答細胞。
【請求項８２】
前記少なくとも１種のサイトカインが、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７、ＩＬ−２１、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項８１に記載の単離された免疫応答細胞。
【請求項８３】
Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、調節性Ｔ細胞、ヒト胚性幹細胞、リンパ球前駆体細胞、Ｔ細胞−先駆体細胞、およびリンパ系細胞が分化し得る多能性幹細胞からなる群から選択される、請求項７６から８２のいずれか一項に記載の単離された免疫応答細胞。
【請求項８４】
Ｔ細胞である、請求項８３に記載の単離された免疫応答細胞。
【請求項８５】
請求項１から７５のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする、単離された核酸分子。
【請求項８６】
配列番号９５１〜９５９からなる群から選択される核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸分子。
【請求項８７】
配列番号９５１に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項８８】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号９５２に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項８９】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号９５３に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項９０】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号９５４に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項９１】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号９５５に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項９２】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号９５６に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項９３】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号９５７に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項９４】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号９５８に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項９５】
前記細胞外抗原結合ドメインが配列番号９５９に記載の配列を有する核酸を含む、請求項８５に記載の単離された核酸配列。
【請求項９６】
請求項８５から９５のいずれか一項に記載の単離された核酸分子を含むベクター。
【請求項９７】
γ−レトロウイルスベクターである、請求項９６に記載のベクター。
【請求項９８】
請求項８５から９５のいずれか一項に記載の核酸分子を発現する宿主細胞。
【請求項９９】
Ｔ細胞である、請求項９８に記載の宿主細胞。
【請求項１００】
対象において腫瘍負荷を低減させる方法であって、有効量の請求項７６から８４のいずれか一項に記載の免疫応答細胞を前記対象に投与し、それによって、前記対象において腫瘍細胞死を誘導するステップを含む方法。
【請求項１０１】
腫瘍細胞の数を低減させる、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
腫瘍サイズを低減させる、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０３】
前記対象において腫瘍を根絶する、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０４】
前記腫瘍が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーキットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症からなる群から選択される、請求項１００から１０３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０５】
前記腫瘍が多発性骨髄腫である、請求項１００から１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０６】
前記対象がヒトである、請求項１００から１０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０７】
前記免疫応答細胞がＴ細胞である、請求項１００から１０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０８】
新生物を有する対象の生存を増加または延長させる方法であって、有効量の請求項７６から８４のいずれか一項に記載の免疫応答細胞を前記対象に投与するステップであって、それによって、前記対象の生存を増加または延長させるステップを含む方法。
【請求項１０９】
前記新生物が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーキットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症からなる群から選択される、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記新生物が多発性骨髄腫である、請求項１０８または１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
前記対象において腫瘍負荷を低減させるまたは根絶する、請求項１０８から１１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１２】
Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）に結合する免疫応答細胞を産生するための方法であって、前記免疫応答細胞中に、細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列を導入するステップを含み、前記細胞外抗原結合ドメインが、ＦｃＲＬ５に特異的に結合する、方法。
【請求項１１３】
有効量の請求項７６から８４のいずれか一項に記載の免疫応答細胞および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１１４】
新生物を処置するための請求項１１３に記載の医薬組成物。
【請求項１１５】
前記新生物が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーキットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症からなる群から選択される、請求項１１４に記載の医薬組成物。
【請求項１１６】
前記新生物が多発性骨髄腫である、請求項１１３、１１４または１１５に記載の医薬組成物。
【請求項１１７】
請求項７６から８４のいずれか一項に記載の免疫応答細胞を含む、新生物を処置するためのキット。
【請求項１１８】
新生物を有する対象を処置するために前記免疫応答細胞の使用についての指示書をさらに含む、請求項１１７に記載のキット。
【請求項１１９】
前記新生物が、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーキットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症からなる群から選択される、請求項１１７または１１８に記載のキット。
【請求項１２０】
前記新生物が多発性骨髄腫である、請求項１１７、１１８または１１９に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本出願は、２０１４年１２月５日に出願された米国仮特許出願番号第６２／０８８，１６４号に基づく優先権を主張しており、この仮特許出願の内容は、その全体が参考として援用され、そしてこの仮特許出願への優先権が主張される。
【０００２】
（序論）
本開示の主題は、がんを処置するための方法および組成物を提供する。本開示の主題は、Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）、例えば、ＦｃＲＬ５のドメイン９を特異的に標的とするキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、かかるＣＡＲを含む免疫応答細胞、およびがん（例えば、多発性骨髄腫）を処置するためにかかる細胞を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
細胞ベースの免疫療法は、がんの処置のための治癒的潜在力を有する治療である。Ｔ細胞および他の免疫細胞は、選択された抗原に対して特異的な、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）と呼ばれる、抗原に対する人工または合成の受容体をコードする遺伝物質の導入を介して、腫瘍抗原を標的とするように改変され得る。ＣＡＲを使用するＴ細胞標的治療は、血液悪性疾患を処置することにおいて、最近の臨床的成功を示している。
【０００４】
多発性骨髄腫（ＭＭ）は、２番目に多い死亡率を占める血液悪性疾患である（Siegelら、CA:a  cancer  journal  for  clinicians  ６３巻、１１〜３０頁（２０１３年））。患者のおよそ２５％は、２年未満の生存期間中央値の前兆となる高リスクの細胞遺伝学的異常を有する（Boydら、Genes、chromosomes  &  cancer  ５０巻、７６５〜７７４頁（２０１１年）；Shaughnessyら、Blood  １０９巻、２２７６〜２２８４頁（２００７年））。最近研究が行われてはいるが、細胞遺伝学に関わらず、この疾患は、同種移植の免疫治療的移植片対骨髄腫（ＧｖＭ）効果以外では治癒不能となおもみなされている。しかし、同種移植は、不適格さならびに高率の移植関連の罹患率および死亡率によって制限される（Gahrtonら、The  New  England  journal  of  medicine  ３２５巻、１２６７〜１２７３頁（１９９１年））。ＧｖＭ効果と同様に、潜在的に治癒的なＴ細胞効果は、自家養子Ｔ細胞治療を介して最小の毒性で達成され得る。
骨髄腫は、養子Ｔ細胞治療を試験するための理想的な疾患であると予測される。第１に、同種移植は、非骨髄破壊的移植または移植後ドナーリンパ球注入の後などに、最小の化学療法を伴ってもまたは併用の化学療法なしでも、Ｔ細胞が治癒的処置であり得ることを実証している。第２に、前処置化学療法は、おそらくは調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）を枯渇させる機構を介して、養子Ｔ細胞治療の効力をそのように増強し（Brentjensら、Blood  １１８巻、４８１７〜４８２８頁（２０１１年）およびPegramら、Blood  １１９巻、４１３３〜４１４１頁（２０１２年））、自家移植直後の期間は、Ｔ細胞を投与するために最適な時間であり得、骨髄腫は、自家幹細胞移植が標準治療である数少ない疾患の１つである。第３に、免疫調節薬レナリドミドは、マウスにおいて示されているように（Bertilaccioら、Blood  １２２巻、４１７１頁（２０１３年））、ＣＡＲベースの治療を改善し得、レナリドミドは、ＭＭを処置するために一般に使用される。第４に、養子Ｔ細胞治療は、固形腫瘍または髄外ＣＬＬ（Brentjensら（２０１１年））と比較した場合、骨髄優位型疾患、例えばＡＬＬにおいて最良に働き（Brentjensら、Science  translational  medicine  ５巻、１７７ｒａ１３８頁（２０１３年）；Davilaら、Science  translational  medicine  ６巻、２２４ｒａ２２５頁（２０１４年））、ＡＬＬと同様に、骨髄腫は骨髄の疾患である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Siegelら、CA:a  cancer  journal  for  clinicians  ６３巻、１１〜３０頁（２０１３年）
【非特許文献２】Boydら、Genes、chromosomes  &  cancer  ５０巻、７６５〜７７４頁（２０１１年）
【非特許文献３】Shaughnessyら、Blood  １０９巻、２２７６〜２２８４頁（２００７年）
【非特許文献４】Gahrtonら、The  New  England  journal  of  medicine  ３２５巻、１２６７〜１２７３頁（１９９１年）
【非特許文献５】Brentjensら、Blood  １１８巻、４８１７〜４８２８頁（２０１１年）
【非特許文献６】Pegramら、Blood  １１９巻、４１３３〜４１４１頁（２０１２年）
【非特許文献７】Bertilaccioら、Blood  １２２巻、４１７１頁（２０１３年）
【非特許文献８】Brentjensら、Science  translational  medicine  ５巻、１７７ｒａ１３８頁（２０１３年）
【非特許文献９】Davilaら、Science  translational  medicine  ６巻、２２４ｒａ２２５頁（２０１４年）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
養子Ｔ細胞治療がＭＭにおいて良好に働き得ることを予測する種々の理由が存在するが、養子Ｔ細胞治療を骨髄腫へと拡大することは、独自の難題をもたらしている。他のＢ細胞悪性疾患とは異なり、ＣＤ１９発現が、骨髄腫患者の２％のみにおいて見られる（Batailleら、Haematologica  ９１巻、１２３４〜１２４０頁（２００６年））。さらに、ＣＤ１９とは異なり、骨髄腫における共通の細胞外免疫表現型マーカー（ＣＤ１３８、ＣＤ３８およびＣＤ５６）は全て、他の必須の細胞型上で共発現され、これらの標的のいずれかに対するＣＡＲは、ＨＥＲ２を標的とするＣＡＲ（Morganら、Molecular  therapy:  the  journal  of  the  American  Society  of  Gene  Therapy  １８巻、８４３〜８５１頁（２０１０年））の場合と同様、抗体が十分に耐容される標的においてさえも致死的であり得る許容されない「オフ腫瘍（off  tumor）、オンターゲット（on  target）」毒性をもたらし得る（Brentjensら（２０１３年））。したがって、多発性骨髄腫を処置するための、ＭＭ細胞において高度に発現され正常組織では発現が限定的な抗原を標的とするＣＡＲを設計するための新規治療戦略が必要とされ、これらの戦略は、最小の毒性および免疫原性で、強力な腫瘍根絶を誘導することが可能である。
【０００７】
（発明の要旨）
本開示の主題は一般に、Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）を特異的に標的とするキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、かかるＣＡＲを含む免疫応答細胞、ならびに多発性骨髄腫を処置するためのこれらのＣＡＲおよび免疫応答細胞の使用を提供する。
【０００８】
本開示の主題は、ＣＡＲを提供する。非限定的な一例では、このＣＡＲは、細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５に特異的に結合する。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン９に結合する。
【０００９】
特定の非限定的な実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、マウスｓｃＦｖである。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、ヒトｓｃＦｖである。特定の非限定的な実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、任意選択で架橋されたＦａｂである。特定の非限定的な実施形態では、この細胞外結合ドメインは、Ｆ（ａｂ）２である。特定の非限定的な実施形態では、上述の分子のいずれかは、異種配列と共に、細胞外抗原結合ドメインを形成するように、融合タンパク質内に含まれていてもよい。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、約１×１０−１１Ｍから約３×１０−６Ｍまで、１×１０−１０Ｍから約３×１０−６Ｍまでまたは１×１０−９Ｍから約３×１０−６Ｍまでの結合アフィニティー（Ｋｄ）で、ＦｃＲＬ５に特異的に結合する。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、約１×１０−９Ｍから約３×１０−６ＭまでのＫｄで、ＦｃＲＬ５のドメイン８または９に特異的に結合する。
【００１０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７および配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５に結合する。
【００１１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５および配列番号９１９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５に結合する。
【００１２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７および配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５および配列番号９１９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５に結合する。
【００１３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７、配列番号９２１およびそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【００１４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５、配列番号９１９およびそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００１５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９１７に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９１９に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９２１に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４４に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４３に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号２１６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号２１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号２２０に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号２１９に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号２３６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号２３５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号２６８に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号２６７に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１７２に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１７１に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。
【００１６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７、配列番号９２１およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ならびに(b)配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５、配列番号９１９およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００１７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号９１５に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号９１７に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号９１９に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号９２１に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号１４４に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１４３に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号２１６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２１５に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号２２０に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２１９に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号２３６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２３５に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号２６８に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２６７に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号１１６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１１５に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号１７２に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１７１に記載の配列を有する軽鎖可変領域含む。
【００１８】
特定の非限定的な実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、重鎖および軽鎖の両方を含み、任意選択で、重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを伴う。例えば、特定の非限定的な実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号９１５に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号９１７に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含み、任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを伴う。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号９１９に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号９２に記載の配列を有する軽鎖可変領域、任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号１４４に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１４３に記載の配列を有する軽鎖可変領域、任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号２１６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２１５に記載の配列を有する軽鎖可変領域、任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号２２０に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２１９に記載の配列を有する軽鎖可変領域、任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号２３６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２３５に記載の配列を有する軽鎖可変領域、任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号２６８に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号２６７に記載の配列を有する軽鎖可変領域任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号１１６に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１１５に記載の配列を有する軽鎖可変領域任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号１７２に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号１７１に記載の配列を有する軽鎖可変領域、任意選択で、（ｃ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。
【００１９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号３１１、３１７、３２３、３２８、３３４、３３７、３４２、３４７、３５１、３５６、３６２、３６８、３７４、３７６、３８０、３８４、３８９、３９４、３９６、４００、４０５、４０８、４１２、４１５、４２２、４２７、４３２、４３７、４４２、４４６、４５１、４５３、４５６、４５８、４５９、４６３、４６４、４６７、４７３、４７６、４８２、４８６、４８９、４９２、４９４、４９７、５０２、５０７、５１２、５１７、５２２、５２７、５２９、５３２、５３６、５３９、５４３、５４６、５５０、５５３、５５５、５６１、５６７、５７０、５７４、５７７、５７８、５７９、５８４、５７８、５８７、５９１、９２５および９３１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；ならびに（ｂ）配列番号３１４、３２０、３２５、３３１、３３９、３４５、３５０、３５３、３５９、３６５、３７１、３７７、３８３、３８６、３９２、３９５、３９９、４０２、４０７、４１０、４１４、４１８、４１９、４２４、４３０、４３５、４３９、４４３、４４９、４５２、４５５、４５７、４６２、４６５、４７０、４７９、４８５、４８８、４９１、４９３、４９５、４９９、５０５、５０９、５１４、５１９、５２４、５２８、５３０、５３１、５３５、５４１、５４２、５４５、５４９、５５４、５５８、５６４、５６９、５７３、５７６、５８１、５９２、９２８および９３４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【００２０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、以下を含む：（ａ）配列番号３０９、３１５、３２１、３２６、３３２、３３５、３４０、３４６、３５４、３６０、３６６、３７２、３７８、３８７、３９３、４０３、４１１、４２０、４２５、４３６、４４０、４４４、４７１、４８０、５００、５１０、５１５、５２０、５２５、５３７、５５１、５５９、５６５、５８２、５８９、９２３および９２９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１；（ｂ）配列番号３１０、３１６、３２２、３２７、３３３、３３６、３４１、３５５、３６１、３６７、３７３、３７９、３８８、４０４、４１２、４２１、４２６、４３１、４４１、４４５、４５０、４６６、４７２、４７５、４８１、４９６、５０１、５０６、５１１、５１６、５２１、５２６、５３８、５５２、５６０、５６６、５８３、５９０、９２４および９３０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２；（ｃ）配列番号３１１、３１７、３２３、３２８、３３４、３３７、３４２、３４７、３５１、３５６、３６２、３６８、３７４、３７６、３８０、３８４、３８９、３９４、３９６、４００、４０５、４０８、４１２、４１５、４２２、４２７、４３２、４３７、４４２、４４６、４５１、４５３、４５６、４５８、４５９、４６３、４６４、４６７、４７３、４７６、４８２、４８６、４８９、４９２、４９４、４９７、５０２、５０７、５１２、５１７、５２２、５２７、５２９、５３２、５３６、５３９、５４３、５４６、５５０、５５３、５５５、５６１、５６７、５７０、５７４、５７７、５７８、５７９、５８４、５７８、５８７、５９１、９２５および９３１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；（ｄ）配列番号３１２、３１８、３２４、３２９、３３８、３４３、３４８、３５２、３５７、３６３、３６９、３８１、３９０、３９７、４０１、４０６、４１６、４２３、４２８、４３３、４４７、４６０、４６８、４７４、４７７、４８３、４９０、４９８、５０３、５０８、５１８、５３３、５４０、５４４、５４７、５５６、５６２、５６８、５７１、５８０、５８５、５８８、９２６および９３２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１；（ｅ）配列番号３１３、３１９、３３０、３４４、３４９、３５８、３６４、３７０、３８２、３８５、３９１、３９８、４０９、４１７、４２９、４３４、４３８、４４８、４５４、４６１、４６９、４７８、４８４、４８７、５０４、５１３、５２３、５３４、４２９、４４８、５４８、５５７、５６３、５７２、５７５、５８６、９２７および９３３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２；ならびに(f)配列番号３１４、３２０、３２５、３３１、３３９、３４５、３５０、３５３、３５９、３６５、３７１、３７７、３８３、３８６、３９２、３９５、３９９、４０２、４０７、４１０、４１４、４１８、４１９、４２４、４３０、４３５、４３９、４４３、４４９、４５２、４５５、４５７、４６２、４６５、４７０、４７９、４８５、４８８、４９１、４９３、４９５、４９９、５０５、５０９、５１４、５１９、５２４、５２８、５３０、５３１、５３５、５４１、５４２、５４５、５４９、５５４、５５８、５６４、５６９、５７３、５７６、５８１、５９２、９２８および９３４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３。
【００２１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号９２３に記載の配列またはその保存的改変を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９２４に記載の配列またはその保存的改変を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、および（ｃ）配列番号９２５に記載の配列またはその保存的改変を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号９２６に記載の配列またはその保存的改変を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９２７に記載の配列またはその保存的改変を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および（ｃ）配列番号９２８に記載の配列またはその保存的改変を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【００２２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号９２９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(b)配列番号９３０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変および(c)配列番号９３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号９３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(b)配列番号９３３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変および(c)配列番号９３４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【００２３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号９２３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(b)配列番号９２４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、、(c)配列番号９２５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、(d)配列番号９２６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(e)配列番号９２７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および(f)配列番号９２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【００２４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号９２９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(b)配列番号９３０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、(c)配列番号９３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、(d)配列番号９３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、(e)配列番号９３３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および(f)配列番号９３４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【００２５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、（ａ）配列番号４１１のアミノ酸配列またはその保存的改変を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１；（ｂ）配列番号４１２のアミノ酸配列またはその保存的改変を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２；（ｃ）配列番号４６３のアミノ酸配列またはその保存的改変を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；（ｄ）配列番号３１８のアミノ酸配列またはその保存的改変を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１；（ｅ）配列番号３１９のアミノ酸配列またはその保存的改変を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２；および（ｆ）配列番号４１９のアミノ酸配列またはその保存的改変を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【００２６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号５１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号５１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号５３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【００２７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合は、(a)配列番号４０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４０４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号５３４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号５３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【００２８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５４３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５４４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号４４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号５４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【００２９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号３７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４７５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)その配列番号５７１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１;(e)配列番号５７２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号５７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【００３０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号４４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号４４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【００３１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号３０９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号３１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号４９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号４９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【００３２】
特定の非限定的な実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号６６４に記載の配列またはその保存的改変を有するアミノ酸を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７００に記載の配列を有するアミノ酸またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７０２に記載の配列を有するアミノ酸またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７１０に記載の配列を有するアミノ酸またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７２６に記載の配列を有するアミノ酸:またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号６５０に記載の配列を有するアミノ酸またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号６７８に記載の配列を有するアミノ酸またはその保存的改変を含む。
【００３３】
特定の非限定的な実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号９２３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、配列番号９２４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および配列番号９２５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、および(ii)配列番号９２６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、配列番号９２７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および配列番号９２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、任意選択で、(iii)重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。
【００３４】
別の非限定的な実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(i)配列番号９２９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、配列番号９３０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および配列番号９３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、ならびに(ii)配列番号９３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変、配列番号９３３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および配列番号９３４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み、任意選択で、（ｉｉｉ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを伴う。
【００３５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４６３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号４１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、任意選択で、（ｇ）重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを伴う。
【００３６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号５１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号５１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号５３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、任意選択で、(g)重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。
【００３７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合は、(a)配列番号４０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４０４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号５３４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号５３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３、任意選択で、(g)重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。
【００３８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５４３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５４４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号４４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号５４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、任意選択で、(g)重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。
【００３９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号３７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４７５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５７１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号５７２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号５７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、任意選択で、(g)重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。
【００４０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号４４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号４４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、任意選択で、(g)重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。
【００４１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、:(a)配列番号３０９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号３１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号４９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号４９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変、任意選択で、(g)重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカー配列、例えばリンカーペプチドを含む。
【００４２】
特定の実施形態では、このリンカーペプチドは、配列番号３０７および配列番号８９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【００４３】
特定の実施形態では、上記細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９９に記載のアミノ酸配列を含むＦｃＲＬ５に結合する。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９６４に記載のアミノ酸配列を含むエピトープに結合する。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９６５に記載のアミノ酸配列を含むエピトープに結合する。
【００４４】
本開示の主題によれば、上記細胞外抗原結合ドメインは、膜貫通ドメインに共有結合によって接合される。この細胞外抗原結合ドメインは、細胞外抗原結合ドメインの５’末端に共有結合によって接合されたシグナルペプチドを含み得る。特定の実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド、ＣＤ２８ポリペプチド、ＣＤ３ζポリペプチド、ＣＤ４ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＣＴＬＡ−４ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド、ＬＡＧ−３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、ＢＴＬＡポリペプチド、合成ペプチド（免疫応答と関連するタンパク質に基づかない）、またはそれらの組合せを含む。非限定的な一実施形態では、この膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチドを含む。特定の実施形態では、この膜貫通ドメインは、ＣＤ２８ポリペプチドを含む。
【００４５】
本開示の主題によれば、特定の実施形態では、上記細胞内ドメインは、ＣＤ３ζポリペプチドを含む。特定の実施形態では、この細胞内ドメインは、少なくとも１つのシグナル伝達領域をさらに含む。特定の実施形態では、この少なくとも１つのシグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ−１０ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド、ＣＴＬＡ−４ポリペプチド、ＬＡＧ−３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、ＢＴＬＡポリペプチド、合成ペプチド（免疫応答と関連するタンパク質に基づかない）、またはそれらの組合せを含む。特定の実施形態では、上記シグナル伝達領域は、共刺激性シグナル伝達領域である。特定の実施形態では、この共刺激性シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ−１０ポリペプチド、またはそれらの組合せを含む。特定の実施形態では、この少なくとも１つの共刺激性シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチドを含む。特定の非限定的な実施形態では、上記膜貫通ドメインはＣＤ２８ポリペプチドを含み、上記細胞内ドメインはＣＤ３ζポリペプチドを含み、共刺激性シグナル伝達ドメインはＣＤ２８ポリペプチドを含む。特定の非限定的な実施形態では、上記膜貫通ドメインはＣＤ８ポリペプチドを含み、上記細胞内ドメインはＣＤ３ζポリペプチドを含み、上記共刺激性シグナル伝達ドメインは４−１ＢＢポリペプチドを含む。
【００４６】
特定の実施形態では、上記ＣＡＲは、組換えにより発現される。このＣＡＲは、ベクターから発現され得る。特定の実施形態では、このベクターは、γ−レトロウイルスベクターである。
【００４７】
本開示の主題は、上記ＣＡＲを含む単離された免疫応答細胞もまた提供する。特定の実施形態では、この単離された免疫応答細胞は、ＣＡＲで形質導入され、例えば、このＣＡＲは、免疫応答細胞の表面上で構成的に発現される。特定の実施形態では、この単離された免疫応答細胞は、その免疫応答細胞が少なくとも１種の共刺激性リガンドを発現するように、少なくとも１種の共刺激性リガンドでさらに形質導入される。特定の実施形態では、この少なくとも１種の共刺激性リガンドは、４−１ＢＢＬ、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ７０、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ４８、ＴＮＦＲＳＦ１４、およびそれらの組合せからなる群から選択される。特定の実施形態では、この単離された免疫応答細胞は、その免疫応答細胞が少なくとも１種のサイトカインを分泌するように、少なくとも１種のサイトカインでさらに形質導入される。特定の実施形態では、この少なくとも１種のサイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７、ＩＬ−２１、およびそれらの組合せからなる群から選択される。特定の実施形態では、この単離された免疫応答細胞は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、調節性Ｔ細胞、ヒト胚性幹細胞、リンパ球前駆体細胞、Ｔ細胞−先駆体細胞、およびリンパ系細胞が分化し得る多能性幹細胞からなる群から選択される。特定の実施形態では、この免疫応答細胞は、Ｔ細胞である。
【００４８】
本開示の主題は、本開示のＣＡＲをコードする核酸分子、この核酸分子を含むベクター、およびかかる核酸分子を発現する宿主細胞をさらに提供する。特定の実施形態では、この核酸分子は、配列番号９５１に記載の配列を有する核酸を含む。特定の実施形態では、この核酸分子は、配列番号９５２に記載の配列を有する核酸を含む。特定の実施形態では、このベクターは、γ−レトロウイルスベクターである。特定の実施形態では、この宿主細胞は、Ｔ細胞である。
【００４９】
さらに、本開示の主題は、対象において腫瘍負荷を低減させるために上記免疫応答細胞を使用する方法を提供する。例えば、本開示の主題は、対象において腫瘍負荷を低減させる方法であって、有効量の本開示の免疫応答細胞を対象に投与するステップであって、それによって、この対象において腫瘍細胞死を誘導するステップを含む方法を提供する。特定の実施形態では、この方法は、腫瘍細胞の数を低減させる。別の一実施形態では、この方法は、腫瘍サイズを低減させる。さらに別の一実施形態では、この方法は、対象において腫瘍を根絶する。特定の実施形態では、この腫瘍は、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーキットリンパ腫（Burketts  Lymphoma）およびワルデンストレームマクログロブリン血症からなる群から選択される。特定の実施形態では、この腫瘍は、多発性骨髄腫である。特定の実施形態では、この対象は、ヒトである。特定の実施形態では、この免疫応答細胞は、Ｔ細胞である。
【００５０】
さらに、本開示の主題は、新生物を有する対象の生存を増加または延長させるために上記免疫応答細胞を使用する方法を提供する。例えば、本開示の主題は、新生物を有する対象の生存を増加または延長させる方法であって、有効量の本開示の免疫応答細胞を対象に投与するステップであって、それによって、対象の生存を増加または延長させるステップを含む方法を提供する。特定の実施形態では、この新生物は、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーキットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症からなる群から選択される。特定の実施形態では、この新生物は、多発性骨髄腫である。特定の実施形態では、この方法は、対象において腫瘍負荷を低減させるまたは根絶する。
【００５１】
本開示の主題は、Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）、例えば、ＦｃＲＬ５のドメイン９に結合する免疫応答細胞を産生するための方法もまた提供する。非限定的な一例では、この方法は、免疫応答細胞中に、細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列を導入するステップを含み、この細胞外抗原結合ドメインは、Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）に特異的に結合する。具体的な非限定的な一実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖである。
【００５２】
本開示の主題は、有効量の本開示の免疫応答細胞および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物をさらに提供する。特定の実施形態では、これらの医薬組成物は、新生物を処置するためのものである。特定の実施形態では、この新生物は、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーキットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症からなる群から選択される。特定の実施形態では、この新生物は、多発性骨髄腫である。
【００５３】
本開示の主題は、本開示の免疫応答細胞を含む、新生物を処置するためのキットをさらに提供する。特定の実施形態では、このキットは、新生物を処置するために免疫応答細胞の使用についての指示書をさらに含む。特定の実施形態では、この新生物は、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーキットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症からなる群から選択される。特定の実施形態では、この新生物は、多発性骨髄腫である。
【００５４】
例示の方法によって示されるが、本発明を記載の具体的な実施形態に限定することを意図しない次の詳細な記載は、添付の図と合わせて理解され得る。
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１−１】図１は、種々の正常組織およびヒトがん細胞株中のＦｃＲＬ５発現を示す。
【図１−２】図１は、種々の正常組織およびヒトがん細胞株中のＦｃＲＬ５発現を示す。
【図１−３】図１は、種々の正常組織およびヒトがん細胞株中のＦｃＲＬ５発現を示す。
【図１−４】図１は、種々の正常組織およびヒトがん細胞株中のＦｃＲＬ５発現を示す。
【００５６】
【図２】図２は、ＦｃＲＬ５またはＦｃＲＬ１、２、３、４もしくは６を発現している３Ｔ３細胞を使用する抗ＦｃＲＬ５  ｓｃＦｖのスクリーニングを示す。
【００５７】
【図３Ａ】（Ａ）ＦｃＲＬ５のドメインおよびＦｃＲＬ５の可溶性、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカードおよび膜貫通形態の提示。（Ｂ）ドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書でＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９とも称される）を発現するために使用されたベクターの提示。（Ｃ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の形態のヌクレオチド配列。（Ｄ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９が欠失されたＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書で「ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９」と称される）のヌクレオチド配列中の差異の提示。
【図３Ｂ】（Ａ）ＦｃＲＬ５のドメインおよびＦｃＲＬ５の可溶性、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカードおよび膜貫通形態の提示。（Ｂ）ドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書でＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９とも称される）を発現するために使用されたベクターの提示。（Ｃ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の形態のヌクレオチド配列。（Ｄ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９が欠失されたＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書で「ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９」と称される）のヌクレオチド配列中の差異の提示。
【図３Ｃ】（Ａ）ＦｃＲＬ５のドメインおよびＦｃＲＬ５の可溶性、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカードおよび膜貫通形態の提示。（Ｂ）ドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書でＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９とも称される）を発現するために使用されたベクターの提示。（Ｃ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の形態のヌクレオチド配列。（Ｄ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９が欠失されたＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書で「ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９」と称される）のヌクレオチド配列中の差異の提示。
【図３Ｄ−１】（Ａ）ＦｃＲＬ５のドメインおよびＦｃＲＬ５の可溶性、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカードおよび膜貫通形態の提示。（Ｂ）ドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書でＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９とも称される）を発現するために使用されたベクターの提示。（Ｃ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の形態のヌクレオチド配列。（Ｄ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９が欠失されたＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書で「ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９」と称される）のヌクレオチド配列中の差異の提示。
【図３Ｄ−２】（Ａ）ＦｃＲＬ５のドメインおよびＦｃＲＬ５の可溶性、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカードおよび膜貫通形態の提示。（Ｂ）ドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書でＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９とも称される）を発現するために使用されたベクターの提示。（Ｃ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９を欠いているＦｃＲＬ５の形態のヌクレオチド配列。（Ｄ）全長ＦｃＲＬ５およびドメイン９が欠失されたＦｃＲＬ５の変異形態（本明細書で「ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９」と称される）のヌクレオチド配列中の差異の提示。
【００５８】
【図４】図４は、ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９を発現している３Ｔ３細胞上の抗ＦｃＲＬ５  ｓｃＦｖ  ＥＴ２００−３９のスクリーニングを示す。
【００５９】
【図５】図５は、ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９を発現している３Ｔ３細胞上の抗ＦｃＲＬ５  ｓｃＦｖ  ＥＴ２００−１０４のスクリーニングを示す。
【００６０】
【図６−１】図６は、ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９を発現している３Ｔ３細胞上の抗ＦｃＲＬ５  ｓｃＦｖ  ＥＴ２００−１０５のスクリーニングを示す。
【図６−２】図６は、ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９を発現している３Ｔ３細胞上の抗ＦｃＲＬ５  ｓｃＦｖ  ＥＴ２００−１０５のスクリーニングを示す。
【００６１】
【図７】図７は、ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９を発現している３Ｔ３細胞上の抗ＦｃＲＬ５  ｓｃＦｖ  ＥＴ２００−１０９のスクリーニングを示す。
【００６２】
【図８】図８は、ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９を発現している３Ｔ３細胞上の抗ＦｃＲＬ５  ｓｃＦｖ  ＥＴ２００−１１７のスクリーニングを示す。
【００６３】
【図９】本開示の主題の非限定的実施形態によるＦｃＲＬ５を標的とするキメラ抗原受容体の模式図である。（Ａ）ＣＤ２８共刺激性ドメインおよびＣＤ３ゼータを有するＦｃＲＬ５を標的とするＣＡＲの模式図。（Ｂ）４−１ＢＢ共刺激性ドメインおよびＣＤ３ゼータを有するＦｃＲＬ５を標的とするＣＡＲの模式図。
【００６４】
【図１０】図１０は、本開示の主題の一非限定的実施形態によるｓｃＦＶ  ＥＴ２００−３１を使用するＦｃＲＬ５を標的とするキメラ抗原受容体のベクターマップを示す。
【００６５】
【図１１】図１１は、本開示の主題の一非限定的実施形態によるｓｃＦＶ  ＥＴ２００−３９を使用するＦｃＲＬ５を標的とするキメラ抗原受容体のベクターマップを示す。
【００６６】
【図１２】図１２は、本開示の主題の一非限定的実施形態によるｓｃＦＶ  ＥＴ２００−６９を使用するＦｃＲＬ５を標的とするキメラ抗原受容体のベクターマップを示す。
【００６７】
【図１３】図１３は、本開示の主題の一非限定的実施形態によるｓｃＦＶ  ＥＴ２００−１０４を使用するＦｃＲＬ５を標的とするキメラ抗原受容体のベクターマップを示す。
【００６８】
【図１４】図１４は、本開示の主題の一非限定的実施形態によるｓｃＦＶ  ＥＴ２００−１０５を使用するＦｃＲＬ５を標的とするキメラ抗原受容体のベクターマップを示す。
【００６９】
【図１５】図１５は、本開示の主題の一非限定的実施形態によるｓｃＦＶ  ＥＴ２００−１０９を使用するＦｃＲＬ５を標的とするキメラ抗原受容体のベクターマップを示す。
【００７０】
【図１６】図１６は、本開示の主題の一非限定的実施形態によるｓｃＦＶ  ＥＴ２００−１１７を使用するＦｃＲＬ５を標的とするキメラ抗原受容体のベクターマップを示す。
【００７１】
【図１７】図１７は、形質導入されたＴ細胞の表面上のＦｃＲＬ５が標的とされるキメラ抗原受容体の発現を示す。
【００７２】
【図１８】図１８は、ＦｃＲＬ５発現細胞に対するＦｃＲＬ５が標的とされるキメラ抗原受容体Ｔ細胞の細胞傷害性を示す。
【００７３】
【図１９】図１９は、ＦｃＲＬ５が標的とされるキメラ抗原受容体Ｔ細胞のサイトカイン分泌の誘導を示す。
【００７４】
【図２０】図２０は、抗原刺激でのＦｃＲＬ５が標的とされるキメラ抗原受容体Ｔ細胞の増殖を示す。
【００７５】
【図２１】図２１は、ＣＬＩＰＳ技術を例示する。ＣＬＩＰＳ反応は、ＣＬＩＰＳスキャホールドの臭素基とシステインのチオール側鎖との間で起きる。反応は、穏和な条件下で急速かつ特異である。この洗練された化学を使用して、ネイティブなタンパク質配列は、さまざまな構造を有するＣＬＩＰＳ構築物に変形される。左から右に：２つの異なる単一Ｔ２ループ、Ｔ３二重ループ、コンジュゲートされたＴ２＋Ｔ３ループ、安定化されたベータシートおよび安定化されたアルファヘリックス（Timmermanら、J  Mol  Recognit  ２００７年;２０巻:２８３〜２９頁）。
【００７６】
【図２２】図２２は、コンビナトリアルクリップライブラリースクリーニングを例示する。不連続コンホメーションエピトープを含む標的タンパク質（左）は、マトリクスライブラリー（中央）に転換される。コンビナトリアルペプチドは、専用のミニカード上で合成され、空間的に規定されたＣＬＩＰＳ構築物（右）に化学的に転換される。
【００７７】
【図２３】図２３は、Ｔ３ループ化ＣＬＩＰＳＴＭ構築物を示す。
【００７８】
【図２４】図２４Ａ〜Ｄは、ヒートマップ技術を例示する。（Ａ）「ループ１」および「ループ２」と示される２個のサブ配列を有する組合せペプチドの表。（Ｂ）マトリクスとして示されるＡ由来のデータ。（Ｃ）ヒートマップ提示のカラーバー表示。（Ｄ）Ａ由来データのヒートマップ視覚化。
【００７９】
【図２５】図２５は、ハーセプチンについて記録されたデータのヒートマップ分析を示す。
【００８０】
【図２６】図２６は、ＥＴ２００−１０４について記録されたデータのヒートマップ分析を示す。
【００８１】
【図２７】図２７は、強調されたペプチドストレッチ６５７ＳＲＰＩＬＴＦＲＡＰＲ６６７を有するＦｃＲＬ５５のアミノ酸残基３８０〜７３１の３Ｄモデルを例示する。
【発明を実施するための形態】
【００８２】
（発明の詳細な説明）
本開示の主題は、ＦｃＲＬ５が標的とされるキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を一般に提供する。非限定的な一例では、このＣＡＲは、細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを含み、細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５に特異的に結合する。特定の実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン７、８または９に特異的に結合する。本開示の主題は、ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲを発現する免疫応答細胞（例えば、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、調節性Ｔ細胞、ヒト胚性幹細胞、リンパ球前駆体細胞、Ｔ細胞−先駆体細胞、およびリンパ系細胞が分化し得る多能性幹細胞）、および腫瘍、例えば多発性骨髄腫を処置するためにかかる免疫応答細胞を使用する方法もまた提供する。
Ｉ．定義
【００８３】
特に定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般に理解される意味を有する。以下の参考文献は、本発明において使用される用語の多くの一般的定義を当業者に提供する：Singletonら、Dictionary  of  Microbiology  and  Molecular  Biology（第２版、１９９４年）；The  Cambridge  Dictionary  of  Science  and  Technology（Walker編、１９８８年）；The  Glossary  of  Genetics、第５版、R  Riegerら（編）、Springer  Verlag（１９９１年）；ならびにHaleおよびMarham、The  Harper  Collins  Dictionary  of  Biology（１９９１年）。本明細書で使用する場合、以下の用語は、特記しない限り、以下に帰せられる意味を有する。
【００８４】
本明細書で使用する場合、用語「約」または「およそ」とは、その値がどのように測定または決定されたか、即ち、測定系の限界に一部依存する、当業者によって決定される特定の値についての許容される誤差範囲内を意味する。例えば、「約」とは、当技術分野における実務につき、３標準偏差以内または３標準偏差超を意味し得る。あるいは、「約」とは、所与の値の最大で２０％、好ましくは最大で１０％、より好ましくは最大で５％、より好ましくはなおも最大で１％の範囲を意味し得る。あるいは、特に、生物学的系またはプロセスに関して、この用語は、ある値の、あるオーダーの大きさ以内、好ましくは５倍以内、より好ましくは２倍以内を意味し得る。
【００８５】
本明細書で使用する場合、用語「細胞集団」とは、類似または異なる表現型を発現する少なくとも２つの細胞の群を指す。非限定的な例では、細胞集団は、類似または異なる表現型を発現する少なくとも約１０、少なくとも約１００、少なくとも約２００、少なくとも約３００、少なくとも約４００、少なくとも約５００、少なくとも約６００、少なくとも約７００、少なくとも約８００、少なくとも約９００、少なくとも約１０００個の細胞を含み得る。
【００８６】
本明細書で使用する場合、用語「抗体」とは、インタクトな抗体分子だけでなく、免疫原結合能を保持する抗体分子の断片もまた意味する。かかる断片もまた、当技術分野で周知であり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの両方で通常使用される。したがって、本明細書で使用する場合、用語「抗体」とは、インタクトな免疫グロブリン分子だけでなく、周知の活性断片Ｆ（ａｂ’）２およびＦａｂもまた意味する。Ｆ（ａｂ’）２、およびインタクトな抗体のＦｅ断片を欠くＦａｂ断片は、循環からより迅速に消え去り、インタクトな抗体のあまり非特異的でない組織結合を有し得る（Wahlら、J  Nucl  Med  ２４巻：３１６〜３２５頁（１９８３年））。本発明の抗体は、ネイティブ抗体全体、二重特異性抗体；キメラ抗体；Ｆａｂ、Ｆａｂ’、単鎖Ｖ領域断片（ｓｃＦｖ）、融合ポリペプチドおよび非定型抗体を含む。
【００８７】
本明細書で使用する場合、用語「単鎖可変断片」または「ｓｃＦｖ」は、ＶＨ：：ＶＬヘテロダイマーを形成するように共有結合によって連結された、免疫グロブリン（例えば、マウスまたはヒト）の重鎖の可変領域（ＶＨ）と軽鎖の可変領域（ＶＬ）との融合タンパク質である。重鎖（ＶＨ）と軽鎖（ＶＬ）とは、直接接合されるか、またはＶＨのＮ末端をＶＬのＣ末端に接続するかもしくはＶＨのＣ末端をＶＬのＮ末端に接続するか、ペプチドコードリンカー（例えば、１０、１５、２０、２５アミノ酸）によって接合される。このリンカーは、通常、屈曲性のためにグリシンに富んでおり、ならびに溶解性のためにセリンまたはトレオニンに富んでいる。このリンカーは、細胞外抗原結合ドメインの重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを連結し得る。リンカーの非限定的な例は、Shenら、Anal  Chem  ８０巻（６号）：１９１０〜１９１７頁（２００８年）およびＷＯ２０１４／０８７０１０に開示されており、それらの内容は、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる。特定の実施形態では、このリンカーは、Ｇ４Ｓリンカーである。
【００８８】
非限定的な一例では、このリンカーは、以下に提供される配列番号８９７に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ［配列番号８９７］。特定の実施形態では、配列番号８９７のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、以下に提供される配列番号８９８に記載される：
ＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴ［配列番号８９８］。
【００８９】
別の非限定的な例では、リンカーは以下に提供される配列番号３０７に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
SRGGGGSGGGGSGGGGSLEMA  [配列番号307]特定の実施形態では、配列番号３０７のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、以下に提供される配列番号３０５に記載される：
TCTAGAGGTGGTGGTGGTAGCGGCGGCGGCGGCTCTGGTGGTGGTGGATCCCTCGAGATGGCC[配列番号305]
【００９０】
定常領域の除去およびリンカーの導入にもかかわらず、ｓｃＦｖタンパク質は、元の免疫グロブリンの特異性を保持する。単鎖Ｆｖポリペプチド抗体は、Hustonら（Proc  Nat  Acad  Sci  USA、８５巻：５８７９〜５８８３頁、１９８８年）に記載されるように、ＶＨコード配列およびＶＬコード配列を含む核酸から発現され得る。米国特許第５，０９１，５１３号、米国特許第５，１３２，４０５号および米国特許第４，９５６，７７８号；ならびに米国特許出願公開第２００５０１９６７５４号および米国特許出願公開第２００５０１９６７５４号もまた参照のこと。阻害活性を有するアンタゴニスト性ｓｃＦｖが記載されている（例えば、Zhaoら、Hyrbidoma  (Larchmt)２００８年２７巻（６号）：４５５〜５１頁；Peterら、J  Cachexia  Sarcopenia  Muscle  ２０１２年８月１２日；Shiehら、J  Imunol  ２００９年１８３巻（４号）：２２７７〜８５頁；Giomarelliら、Thromb  Haemost  ２００７年９７巻（６号）：９５５〜６３頁；Fifeら、J  Clin  Invst  ２００６年１１６巻（８号）：２２５２〜６１頁；Brocksら、Immunotechnology  １９９７年３巻（３号）：１７３〜８４頁；Moosmayerら、Ther  Immunol  １９９５年２巻（１０号：３１〜４０頁）を参照のこと）。刺激活性を有するアゴニスト性ｓｃＦｖが記載されている（例えば、Peterら、J  Bioi  Chern  ２００３年２５２７８巻（３８号）：３６７４０〜７頁；Xieら、Nat  Biotech  １９９７年１５巻（８号）：７６８〜７１頁；Ledbetterら、Crit  Rev  Immunol  １９９７年１７巻（５〜６号）：４２７〜５５頁；Hoら、BioChim  Biophys  Acta  ２００３年１６３８巻（３号）：２５７〜６６頁を参照のこと）。
【００９１】
本明細書で使用する場合、「Ｆ（ａｂ）」とは、抗原に結合するが一価であり、Ｆｃ部分を有さない抗体構造の断片を指し、例えば、酵素パパインによって消化された抗体は、２つのＦ（ａｂ）断片および１つのＦｃ断片（例えば、重（Ｈ）鎖定常領域；抗原に結合しないＦｃ領域）を生じる。
【００９２】
本明細書で使用する場合、「Ｆ（ａｂ’）２」とは、ＩｇＧ抗体全体のペプシン消化によって生成される抗体断片を指し、この断片は、２つの抗原結合（ａｂ’）（二価）領域を有し、各（ａｂ’）領域は、２つの別々のアミノ酸鎖、抗原を結合するようにＳ−Ｓ結合によって連結されたＨ鎖の一部および軽（Ｌ）鎖を含み、残りのＨ鎖部分は、一緒に連結される。「Ｆ（ａｂ’）２」断片は、２つの個々のＦａｂ’断片へと分割され得る。
【００９３】
本明細書で使用する場合、用語「ベクター」とは、適切な制御エレメントと関連した場合に複製が可能であり、遺伝子配列を細胞中に移入できる、任意の遺伝エレメント、例えば、プラスミド、ファージ、トランスポゾン、コスミド、染色体、ウイルス、ビリオンなどを指す。したがって、この用語は、クローニングおよび発現ビヒクル、ならびにウイルスベクターおよびプラスミドベクターを含む。
【００９４】
本明細書で使用する場合、用語「発現ベクター」とは、所望のコード配列、および特定の宿主生物における作動可能に連結したコード配列の発現に必要な適切な核酸配列を含む、組換え核酸配列、即ち、組換えＤＮＡ分子を指す。原核生物における発現に必要な核酸配列には、通常、しばしば他の配列と併せた、プロモーター、オペレーター（任意選択）およびリボソーム結合部位が含まれる。真核生物細胞は、プロモーター、エンハンサー、ならびに終結シグナルおよびポリアデニル化シグナルを利用することが公知である。
【００９５】
本明細書で使用する場合、「ＣＤＲ」は、免疫グロブリン重鎖および軽鎖の超可変領域である、抗体の相補性決定領域アミノ酸配列として定義される。例えば、Kabatら、Sequences  of  Proteins  of  Immunological  Interest、第４版、U  S  Department  of  Health  and  Human  Services、National  Institutes  of  Health（１９８７年）を参照のこと。一般に、抗体は、可変領域中に、３つの重鎖および３つの軽鎖ＣＤＲまたはＣＤＲ領域を含む。ＣＤＲは、抗原またはエピトープへの抗体の結合のための接触残基の大部分を提供する。特定の実施形態では、これらのＣＤＲ領域は、Ｋａｂａｔ系（Kabat、E  Aら（１９９１年）Sequences  of  Proteins  of  Immunological  Interest、第５版、US  Department  of  Health  and  Human  Services、NIH  Publication  No  91-3242）を使用して描写される。
【００９６】
本明細書で使用する場合、用語「アフィニティー」は、結合強度の尺度を意味する。理論に束縛されないが、アフィニティーは、抗体結合部位と抗原決定基との間の立体化学的適合の近さ、それらの間の接触の面積の大きさ、ならびに荷電基および疎水性基の分布に依存する。アフィニティーは、用語「アビディティー」もまた含み、これは、可逆的複合体の形成後の抗原−抗体結合の強度を指す。抗原に対する抗体のアフィニティーを計算するための方法は、アフィニティーを計算するための結合実験の使用を含めて、当技術分野で公知である。機能性アッセイ（例えば、フローサイトメトリーアッセイ）における抗体活性はまた、抗体アフィニティーを反映する。抗体およびアフィニティーは、機能性アッセイ（例えば、フローサイトメトリーアッセイ）を使用して、表現型で特徴付けられ、比較され得る。
【００９７】
本発明の方法において有用な核酸分子は、本発明のポリペプチドをコードする任意の核酸分子またはその断片を含む。かかる核酸分子は、内因性核酸配列と１００％同一である必要はないが、典型的には、実質的な同一性を示す。内因性配列に対して「実質的な同一性」を有するポリヌクレオチドは、典型的には、二本鎖核酸分子の少なくとも一方の鎖とハイブリダイズすることが可能である。「ハイブリダイズする」とは、ストリンジェンシーの種々の条件下で、相補的ポリヌクレオチド配列（例えば、本明細書に記載される遺伝子）またはそれらの部分間で二本鎖分子を形成するように対合することを意味する（例えば、Wahl、G  MおよびS  L  Berger（１９８７年）Methods  Enzymol  １５２巻：３９９頁；Kimmel、A  R（１９８７年）Methods  Enzymol  １５２巻：５０７頁を参照のこと）。
【００９８】
例えば、ストリンジェントな塩濃度は、通常、約７５０ｍＭ未満のＮａＣｌおよび７５ｍＭ未満のクエン酸三ナトリウム、好ましくは約５００ｍＭ未満のＮａＣｌおよび５０ｍＭ未満のクエン酸三ナトリウム、より好ましくは約２５０ｍＭ未満のＮａＣｌおよび２５ｍＭ未満のクエン酸三ナトリウムである。低ストリンジェンシーのハイブリダイゼーションは、有機溶媒、例えばホルムアミドの非存在下で得られ得、高ストリンジェンシーのハイブリダイゼーションは、少なくとも約３５％のホルムアミド、より好ましくは少なくとも約５０％のホルムアミドの存在下で得られ得る。ストリンジェントな温度条件は、通常、少なくとも約３０℃の、より好ましくは少なくとも約３７℃の、最も好ましくは少なくとも約４２℃の温度を含む。様々なさらなるパラメーター、例えば、ハイブリダイゼーション時間、界面活性剤、例えばドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）の濃度、および担体ＤＮＡの包含または排除は、当業者に周知である。種々のレベルのストリンジェンシーは、これら種々の条件を必要に応じて組み合わせることによって達成される。好ましい一実施形態では、ハイブリダイゼーションは、７５０ｍＭ  ＮａＣｌ、７５ｍＭクエン酸三ナトリウムおよび１％ＳＤＳ中で３０℃で生じる。より好ましい一実施形態では、ハイブリダイゼーションは、５００ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭクエン酸三ナトリウム、１％ＳＤＳ、３５％ホルムアミドおよび１００μｇ／ｍｌ変性サケ精子ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）中で３７℃で生じる。最も好ましい一実施形態では、ハイブリダイゼーションは、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２５ｍＭクエン酸三ナトリウム、１％ＳＤＳ、５０％ホルムアミドおよび２００μｇ／ｍｌ  ｓｓＤＮＡ中で４２℃で生じる。これらの条件についての有用なバリエーションは、当業者に容易に明らかである。
【００９９】
ほとんどの適用について、ハイブリダイゼーション後の洗浄ステップもまた、ストリンジェンシーにおいて変動する。洗浄のストリンジェンシー条件は、塩濃度によっておよび温度によって規定され得る。上記のように、洗浄のストリンジェンシーは、塩濃度を減少させることによって、または温度を上昇させることによって、増加され得る。例えば、洗浄ステップのためのストリンジェントな塩濃度は、好ましくは、約３０ｍＭ未満のＮａＣｌおよび３ｍＭ未満のクエン酸三ナトリウム、最も好ましくは約１５ｍＭ未満のＮａＣｌおよび１．５ｍＭ未満のクエン酸三ナトリウムである。洗浄ステップのためのストリンジェントな温度条件は、通常、少なくとも約２５℃の、より好ましくは少なくとも約４２℃の、さらにより好ましくは少なくとも約６８℃の温度を含む。好ましい一実施形態では、洗浄ステップは、３０ｍＭ  ＮａＣｌ、３ｍＭクエン酸三ナトリウムおよび０．１％ＳＤＳ中で２５℃で生じる。より好ましい一実施形態では、洗浄ステップは、１５ｍＭ  ＮａＣｌ、１．５ｍＭクエン酸三ナトリウムおよび０．１％ＳＤＳ中で４２℃で生じる。より好ましい一実施形態では、洗浄ステップは、１５ｍＭ  ＮａＣｌ、１．５ｍＭクエン酸三ナトリウムおよび０．１％ＳＤＳ中で６８℃で生じる。これらの条件についてのさらなるバリエーションは、当業者に容易に明らかである。ハイブリダイゼーション技術は、当業者に周知であり、例えば、BentonおよびDavis（Science  １９６巻：１８０頁、１９７７年）；GrunsteinおよびRogness（Proc  Natl  Acad  Sci、USA  ７２巻：３９６１頁、１９７５年）；Ausubelら（Current  Protocols  in  Molecular  Biology、Wiley  Interscience、New  York、２００１年）；BergerおよびKimmel（Guide  to  Molecular  Cloning  Techniques、１９８７年、Academic  Press、New  York）；ならびにSambrookら、Molecular  Cloning:  A  Laboratory  Manual、Cold  Spring  Harbor  Laboratory  Press、New  Yorkに記載されている。
【０１００】
「実質的に同一な」とは、参照アミノ酸配列（例えば、本明細書に記載されるアミノ酸配列のいずれか１つ）または核酸配列（例えば、本明細書に記載される核酸配列のいずれか１つ）に対して少なくとも５０％の同一性を示す、ポリペプチドまたは核酸分子を意味する。好ましくは、かかる配列は、比較のために使用される配列に対して、アミノ酸レベルまたは核酸レベルで、少なくとも６０％、より好ましくは８０％または８５％、より好ましくは９０％、９５％またはさらには９９％同一である。
【０１０１】
配列同一性は、典型的には、配列分析ソフトウェア（例えば、Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｅｎｔｅｒ、１７１０  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ａｖｅｎｕｅ、Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｉｓ．５３７０５、ＢＬＡＳＴ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＧＡＰまたはＰＩＬＥＵＰ／ＰＲＥＴＴＹＢＯＸプログラム）を使用して測定される。かかるソフトウェアは、種々の置換、欠失および／または他の改変に、相同性の程度を割り当てることによって、同一または類似の配列を一致させる。同一性の程度を決定するための例示的なアプローチでは、ＢＬＡＳＴプログラムが、密接に関連した配列を示す、ｅ−３とｅ−１００との間の確率スコアで、使用され得る。
【０１０２】
本明細書で使用する場合、用語「アナログ」とは、参照ポリペプチドまたは核酸分子の機能を有する、構造的に関連するポリペプチドまたは核酸分子を指す。
【０１０３】
本明細書で使用する場合、用語「リガンド」とは、受容体に結合する分子を指す。特に、リガンドは、別の細胞上の受容体を結合して、細胞対細胞の認識および／または相互作用を可能にする。
【０１０４】
本明細書で使用する場合、用語「疾患」とは、細胞、組織または臓器の正常な機能を損傷または妨害する任意の状態または障害を指す。疾患の例には、新生物または細胞の病原体感染症が含まれる。
【０１０５】
本明細書で使用する場合、用語「有効量」とは、治療効果を有するのに十分な量を指す。特定の実施形態では、「有効量」は、新生物の継続した増殖、成長または転移（例えば、浸潤または遊走）を停止させる、寛解させるまたは阻害するのに十分な量である。
【０１０６】
本明細書で使用する場合、用語「異種核酸分子またはポリペプチド」とは、細胞または細胞から取得された試料中に通常は存在しない核酸分子（例えば、ｃＤＮＡ、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子）またはポリペプチドを指す。この核酸は、別の生物由来であり得るか、または、例えば、細胞もしくは試料中で通常は発現されないｍＲＮＡ分子であり得る。
【０１０７】
本明細書で使用する場合、用語「免疫応答細胞」とは、免疫応答において機能する細胞、またはそれらの前駆体、もしくは子孫を指す。
【０１０８】
本明細書で使用する場合、用語「モジュレートする」とは、正にまたは負に変更させることを指す。例示的なモジュレーションには、約１％、約２％、約５％、約１０％、約２５％、約５０％、約７５％または約１００％の変化が含まれる。
【０１０９】
本明細書で使用する場合、用語「増加させる」とは、約５％、約１０％、約２５％、約３０％、約５０％、約７５％または約１００％正に変更させることが含まれるがこれらに限定されない、少なくとも約５％正に変更させることを指す。
【０１１０】
本明細書で使用する場合、用語「低減させる」とは、約５％、約１０％、約２５％、約３０％、約５０％、約７５％または約１００％負に変更させることが含まれるがこれらに限定されない、少なくとも約５％負に変更させることを指す。
【０１１１】
本明細書で使用する場合、用語「単離された細胞」とは、細胞に天然に付随する分子および／または細胞構成要素から分離された細胞を指す。
【０１１２】
本明細書で使用する場合、用語「単離された」、「精製された」または「生物学的に純粋な」とは、そのネイティブ状態で見出される場合にそれと通常付随する構成要素から、変動する程度まで免れている材料を指す。「単離する」とは、元の供給源または周囲からのある程度の分離を示す。「精製する」とは、単離よりも高い分離の程度を示す。「精製された」または「生物学的に純粋な」タンパク質は、任意の不純物が、タンパク質の生物学的特性に実質的に影響を与えないように、または他の有害な結果を引き起こさないように、十分に、他の材料を含まない。即ち、本発明の核酸またはペプチドは、組換えＤＮＡ技術によって産生された場合には細胞材料、ウイルス材料もしくは培養培地を実質的に含まない場合、または化学合成された場合には化学物質先駆体もしくは他の化学物質を実質的に含まない場合、精製されている。純度および均一性は、典型的には、分析化学技術、例えば、ポリアクリルアミドゲル電気泳動または高速液体クロマトグラフィーを使用して決定される。用語「精製された」は、核酸またはタンパク質が、電気泳動ゲル中で本質的に１つのバンドを生じることを示し得る。改変、例えば、リン酸化またはグリコシル化に供され得るタンパク質について、異なる改変は、別々に精製され得る異なる単離されたタンパク質を生じ得る。
【０１１３】
本明細書で使用する場合、用語「分泌された」とは、小胞体、ゴルジ体を通じた分泌経路を介して、細胞原形質膜において一過的に融合して細胞の外側にタンパク質を放出する小胞として、細胞から放出されるポリペプチドを意味する。
【０１１４】
本明細書で使用する場合、用語「〜を特異的に結合する」または「〜に特異的に結合する」または「〜を特異的に標的とする」とは、目的の生物学的分子（例えば、ポリペプチド）を認識および結合するが、本発明のポリペプチドを天然に含む試料、例えば生物学的試料中の他の分子を実質的に認識および結合しない、ポリペプチドまたはその断片を意味する。
【０１１５】
本明細書で使用する場合、用語「処置すること」または「処置」とは、処置されている個体または細胞の疾患過程を変更させるための試みにおける臨床的介入を指し、予防のためまたは臨床病理学の過程の間に実施され得る。処置の治療効果には、疾患の発生または再発を予防すること、症状の軽減、疾患の任意の直接的または間接的な病理学的結果の減退、転移を予防すること、疾患進行の速度を減少させること、疾患状態の寛解または緩和、および緩解または改善された予後が含まれるがこれらに限定されない。疾患または障害の進行を予防することによって、処置は、罹患したもしくは診断された対象または障害を有する疑いがある対象において、障害に起因する増悪を予防できるが、処置はまた、障害のリスクがある対象または障害を有する疑いがある対象において、障害または障害の症状の発症を予防し得る。
【０１１６】
本明細書で使用する場合、用語「対象」とは、ヒト、非ヒト霊長類、げっ歯類など（例えば、特定の処置のレシピエントである、または細胞がそれから回収される）が含まれるがこれらに限定されない任意の動物（例えば、哺乳動物）を指す。
ＩＩ．Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）
【０１１７】
Ｆｃ受容体様５（ＦｃＲＬ５）（「ＣＤ３０７ｅ」または「ＩＲＴＡ２」としても公知）は、Ｂ細胞および形質細胞上で発現されるので、多発性骨髄腫を処置するための合理的な標的である。ＦｃＲＬ５は、ＩｇＧのＦｃ部分に結合し、Ｂ細胞受容体シグナル伝達およびＢ細胞増殖に寄与する（Francoら、Journal  of  immunology  １９０巻、５７３９〜５７４６頁（２０１３年）；Dement-Brownら、Journal  of  leukocyte  biology  ９１巻、５９〜６７頁（２０１２年））。ＦｃＲＬ５は、１０〜５５の間の平均相対ＭＦＩで、新鮮な患者試料または凍結患者試料（ｎ＝２３）から、悪性形質細胞についてのＦＡＣＳマーカーとしてのＣＤ１３８の代替手段であることが見出された（Iseら、Leukemia  ２１巻、１６９〜１７４頁（２００７年））。別の研究により、試験したほとんどの慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）およびマントル細胞リンパ腫の症例、ならびに全ての多発性骨髄腫（ＭＭ）（ｎ＝８）の症例からの一次患者試料に対するＦＡＣＳによって、ＦｃＲＬ５の細胞表面発現が確認された（Iseら（２００７年））。第３のグループは、正常骨髄（ｎ＝７）由来のＭＧＵＳ（ｎ＝１６）およびＭＭ（ｎ＝１６）において形質細胞上の高い表面染色を見出した（３つ全ての群において類似のＭＦＩ、アイソタイプ対照と比較して約１０００倍の増加）（Elkinsら、Molecular  cancer  therapeutics  １１巻、２２２２〜２２３２頁（２０１２年））。ＦｃＲＬ５は、１ｑ２１上にあり、Ｂ細胞悪性疾患における１ｑ２１異常に関与することが見出されている（Hatzivassiliouら、Immunity  １４巻、２７７〜２８９頁（２００１年））。１ｑ２１の増幅は、診断時のＭＭ患者の４８％において、および再燃時の患者の６７％において見出され、より悪い予後と相関する（Anら、Haematologica  ９９巻、３５３〜３５９頁（２０１４年））。ＦｃＲＬ５を標的とする抗体−薬物コンジュゲートは、ＭＭのｉｎ  ｖｉｖｏマウスモデルを処置する際に有効であった（Elkinsら（２０１２年））。
【０１１８】
ヒトＦｃＲＬ５アミノ酸配列の非限定的な例は、ＧｅｎＢａｎｋタンパク質受託番号：ＡＡＩ０１０７０．１；ＸＰ＿０１１５０８３３２．１；ＸＰ＿０１１５０８３３４．１；ＸＰ＿０１１５０８３３３．１；ＸＰ＿０１１５０８３３２．１；およびＮＰ＿００１１８２３１７．１の下で見出され得る。
【０１１９】
特定の非限定的な実施形態では、ＦｃＲＬ５は、配列番号８９９に記載のアミノ酸配列を有するヒトＦｃＲＬ５、またはその断片である。配列番号８９９は以下に提供される：
MLLWVILLVLAPVSGQFARTPRPIIFLQPPWTTVFQGERVTLTCKGFRFYSPQKTKWYHRYLGKEILRETPDNILEVQESGEYRCQAQGSPLSSPVHLDFSSASLILQAPLSVFEGDSVVLRCRAKAEVTLNNTIYKNDNVLAFLNKRTDFHIPHACLKDNGAYRCTGYKESCCPVSSNTVKIQVQEPFTRPVLRASSFQPISGNPVTLTCETQLSLERSDVPLRFRFFRDDQTLGLGWSLSPNFQITAMWSKDSGFYWCKAATMPHSIISDSPRSWIQVQIPASHPVLTLSPEKALNFEGTKVTLHCETQEDSLRTLYRFYHEGVPLRHKSVRCERGASISFSLTTENSGNYYCTADNGLGAKPSKAVSLSVTVPVSHPVLNLSSPEDLIFEGAKVTLHCEAQRGSLPILYQFHHEDAALERRSANSAGGVAISFSLTAEHSGNYYCTADNGFGPQRSKAVSLSITVPVSHPVLTLSSAEALTFEGATVTLHCEVQRGSPQILYQFYHEDMPLWSSSTPSVGRVSFSFSLTEGHSGNYYCTADNGFGPQRSEVVSLFVTVPVSRPILTLRVPRAQAVVGDLLELHCEAPRGSPPILYWFYHEDVTLGSSSAPSGGEASFNLSLTAEHSGNYSCEANNGLVAQHSDTISLSVIVPVSRPILTFRAPRAQAVVGDLLELHCEALRGSSPILYWFYHEDVTLGKISAPSGGGASFNLSLTTEHSGIYSCEADNGLEAQRSEMVTLKVAVPVSRPVLTLRAPGTHAAVGDLLELHCEALRGSPLILYRFFHEDVTLGNRSSPSGGASLNLSLTAEHSGNYSCEADNGLGAQRSETVTLYITGLTANRSGPFATGVAGGLLSIAGLAAGALLLYCWLSRKAGRKPASDPARSPSDSDSQEPTYHNVPAWEELQPVYTNANPRGENVVYSEVRIIQEKKKHAVASDPRHLRNKGSPIIYSEVKVASTPVSGSLFLASSAPHR［配列番号８９９］。
【０１２０】
特定の実施形態では、ＦｃＲＬ５は、９つの免疫グロブリン（Ｉｇ）様ドメイン、例えば、ドメイン１、ドメイン２、ドメイン３、ドメイン４、ドメイン５、ドメイン６、ドメイン７、ドメイン８およびドメイン９を含む（図３Ａおよび３Ｃを参照のこと）。特定の実施形態では、ＦｃＲＬ５のドメイン９は、配列番号９００に記載のアミノ酸配列を含む。配列番号９００は以下に提供される。
RPVLTLRAPGTHAAVGDLLELHCEALRGSPLILYRFFHEDVTLGNRSSPSGGASLNLSLTAEHSGNYSCEADNGLGAQRSETVTLYI［配列番号９００］。
【０１２１】
特定の実施形態では、ＦｃＲＬ５のドメイン９は、配列番号９６３に記載のアミノ酸配列、またはその断片を有し得る。配列番号９６３は以下に提供される：
GTHAAVGDLLELHCEALRGSPLILYRFFHEDVTLGNRSSPSGGASLNLSLTAEHSGNYSCEADNGLGAQRSETVTLYI［配列番号９６３］。
【０１２２】
特定の実施形態では、ドメイン１は、配列番号８９９のアミノ酸２３〜１００を含み得；ドメイン２は、配列番号８９９のアミノ酸１０５〜１８５を含み得；ドメイン３は、配列番号８９９のアミノ酸１９１〜２７３を含み得；ドメイン４は、配列番号８９９のアミノ酸２８７〜３７３を含み得；ドメイン５は、配列番号８９９のアミノ酸３８０〜４６６を含み得；ドメイン６は、配列番号８９９のアミノ酸４９０〜５５５を含み得；ドメイン７は、配列番号８９９のアミノ酸５６５〜６３８を含み得；ドメイン８は、配列番号８９９のアミノ酸６５８〜７３１を含み得；ドメイン９は、配列番号８９９のアミノ酸７５４〜８３５を含み得る。
【０１２３】
特定の実施形態では、ＦｃＲＬ５のドメイン９は、配列番号９００または９６３のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む。
ＩＩＩ．キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）
【０１２４】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、免疫エフェクター細胞上に目的の特異性を移植または付与する、操作された受容体である。ＣＡＲは、Ｔ細胞上にモノクローナル抗体の特異性を移植するために使用され得る；それらのコード配列の移入は、レトロウイルスベクターによって促進される。
【０１２５】
３つの世代のＣＡＲが存在する。「第１世代」ＣＡＲは、典型的には、Ｔ細胞受容体鎖の細胞質／細胞内ドメインに融合した膜貫通ドメインに融合した細胞外抗原結合ドメイン（例えば、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ））から構成される。「第１世代」ＣＡＲは、典型的には、内因性ＴＣＲからのシグナルの一次伝達因子であるＣＤ３ξ鎖由来の細胞内ドメインを有する。「第１世代」ＣＡＲは、ｄｅ  ｎｏｖｏ抗原認識を提供でき、ＨＬＡ媒介性抗原提示とは無関係に、単一の融合分子中のそれらのＣＤ３ζ鎖シグナル伝達ドメインを介して、ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の両方の活性化を引き起こし得る。「第２世代」ＣＡＲは、Ｔ細胞にさらなるシグナルを提供するために、種々の共刺激性分子（例えば、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０）由来の細胞内ドメインをＣＡＲの細胞質テイルに付加する。「第２世代」ＣＡＲは、共刺激（例えば、ＣＤ２８または４−１ＢＢ）および活性化（ＣＤ３ζ）の両方を提供するものを含む。前臨床研究は、「第２世代」ＣＡＲが、Ｔ細胞の抗腫瘍活性を改善できることを示している。例えば、「第２世代」ＣＡＲ改変されたＴ細胞の頑強な効力が、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を有する患者においてＣＤ１９分子を標的とする臨床試験において実証された。「第３世代」ＣＡＲは、複数の共刺激（例えば、ＣＤ２８および４−１ＢＢ）および活性化（ＣＤ３ζ）を提供するものを含む。
【０１２６】
本開示の主題によれば、これらのＣＡＲは、細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５に結合する。具体的な非限定的な一実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖである。具体的な非限定的な一実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、任意選択で架橋されたＦａｂである。具体的な非限定的な一実施形態では、この細胞外結合ドメインは、Ｆ（ａｂ）２である。具体的な非限定的な一実施形態では、上述の分子のいずれかは、細胞外抗原結合性ドメイン抗原結合ドメインを形成するために、異種配列との融合タンパク質内に含まれていてもよい。
【０１２７】
特定の非限定的な実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５またはＦｃＲＬ５のドメイン９に対する、高い結合特異性ならびに高い結合アフィニティーを有する。特定の非限定的な実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン８に対する、高い結合特異性ならびに高い結合アフィニティーを有する。特定の非限定的な実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン７に対する、高い結合特異性ならびに高い結合アフィニティーを有する。例えば、かかる実施形態では、ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖまたはそのアナログで具体化される）は、約３×１０−６Ｍまたはそれ未満の解離定数（Ｋｄ）で、ＦｃＲＬ５（またはＦｃＲＬ５のドメイン８もしくはドメイン９）に結合する。特定の実施形態では、このＫｄは、約１×１０−６Ｍもしくはそれ未満、約１×１０−７Ｍもしくはそれ未満、約１×１０−８Ｍもしくはそれ未満、約１×１０−９Ｍもしくはそれ未満、約１×１０−１０Ｍもしくはそれ未満または約１×１０−１１Ｍもしくはそれ未満である。特定の実施形態では、このＫｄは、約１×１０−１１Ｍから約３×１０−６Ｍまで、１×１０−１０Ｍから約３×１０−６Ｍまで、または約１×１０−９Ｍから約３×１０−６Ｍまで、例えば、約１×１０−９Ｍから約１×１０−８Ｍまで、約１×１０−８Ｍから約１×１０−７Ｍまで、または約１×１０−７Ｍから約１×１０−６Ｍまで、または約１×１０−６Ｍから約３×１０−６Ｍまでである。
【０１２８】
ＦｃＲＬ５（またはＦｃＲＬ５のドメイン８もしくはドメイン９）への、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖまたはそのアナログで具体化される）の結合は、例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、ＦＡＣＳ分析、バイオアッセイ（例えば、成長阻害）またはウエスタンブロットアッセイによって確認され得る。これらのアッセイの各々は、一般に、目的の複合体に対して特異的な標識された試薬（例えば、抗体またはｓｃＦｖ）を使用することによって、特定の目的のタンパク質−抗体複合体の存在を検出する。例えば、ｓｃＦｖは、放射活性標識され得、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）において使用され得る（例えば、参照によって本明細書に組み込まれるWeintraub、B、Principles  of  Radioimmunoassays、Seventh  Training  Course  on  Radioligand  Assay  Techniques、The  Endocrine  Society、３月、１９８６年を参照のこと）。放射活性アイソトープは、γカウンターもしくはシンチレーションカウンターの使用などの手段によって、またはオートラジオグラフィーによって検出され得る。特定の実施形態では、ＦｃＲＬ５が標的とされる細胞外抗原結合ドメインは、蛍光マーカーで標識される。蛍光マーカーの非限定的な例には、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、青色蛍光タンパク質（例えば、ＥＢＦＰ、ＥＢＦＰ２、ＡｚｕｒｉｔｅおよびｍＫａｌａｍａ１）、シアン蛍光タンパク質（例えば、ＥＣＦＰ、ＣｅｒｕｌｅａｎおよびＣｙＰｅｔ）、および黄色蛍光タンパク質（例えば、ＹＦＰ、Ｃｉｔｒｉｎｅ、ＶｅｎｕｓおよびＹＰｅｔ）が含まれる。特定の実施形態では、ＦｃＲＬ５が標的とされるヒトｓｃＦｖは、ＧＦＰで標識される。
【０１２９】
特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む。具体的な一実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ヒトＦｃＲＬ５に特異的に結合するヒトｓｃＦｖを含む。別の具体的な一実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ヒトＦｃＲＬ５に特異的に結合するマウスｓｃＦｖを含む。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン７の少なくとも一部分に特異的に結合するｓｃＦｖを含む。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン８の少なくとも一部分に特異的に結合するｓｃＦｖを含む。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン９の少なくとも一部分に特異的に結合するｓｃＦｖを含む。例えば、限定ではなく、ＦｃＲＬ５のドメイン９は、配列番号９００もしくは９６３に記載のアミノ酸配列、またはそれらの断片を含む。
【０１３０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、それらの各々がその全体が参照によって本明細書に組み込まれる、Francoら、Journal  of  Immunology（２０１３年）；１９０巻：５７３９〜５７４６頁；Iseら、Clinical  cancer  research:  an  official  fournal  of  the  American  Association  for  Cancer  Research（２００５年）；１１巻：８７〜９６頁；およびIseら、Clinical  chemistry  and  laboratory  medicine:  CCLM/FESCC（２００６年）；４４巻：５９４〜６０２頁において特徴付けられた、ヒトＦｃＲＬ５上の異なる細胞外エピトープを結合する２種の市販のマウスハイブリドーマから取得されたマウスｓｃＦｖである。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、ヒトＦｃＲＬ５に結合する抗体、例えば、その全体が参照によって本明細書に組み込まれるIseら（２００５年）に開示された抗体Ｆ５６およびＦ１１９の重鎖可変領域および軽鎖可変領域に由来するマウスｓｃＦｖである。
ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメイン
【０１３１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７および配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、このｓｃＦｖ抗体は、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０１３２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５および配列番号９１９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１３３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、  重鎖可変領域は、以下に提供される配列番号９１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
VKLQESGGGLVQPGGSRKLSCAASGFTFSIFGLHWVRQAPEKGLEWVAYISGDSNTIYYADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYYCARNSYYALDYWGQGTTVTVSS[配列番号915]
【０１３４】
配列番号９１５のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、以下に提供される配列番号９１６に記載される：
GTGAAGCTGCAGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGGTCCCGGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTATCTTTGGATTGCACTGGGTTCGTCAGGCTCCAGAGAAGGGGCTGGAGTGGGTCGCATACATTAGTGGTGACAGTAATACCATCTACTATGCAGACACAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATCCCAAGAACACCCTGTTCCTGCAAATGACCAGTCTAAGGTCTGAGGACACGGCCATGTATTACTGTGCAAGAAATAGCTACTATGCTCTGGACTACTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA[配列番号916]
【０１３５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、軽鎖可変領域は、以下に提供される配列番号９１７に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。
DIELTQSPAIMSVSPGEKVTMTCRASSSVSSSYLHWYQQRSGASPKIWIYSTSNLASGVPARFSGSGTGTSYSLTISSVEAEDAATYYCQQYSGYPWTFGGGTKLEI[配列番号917]
【０１３６】
配列番号９１７のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、以下に提供される配列番号９１８に記載される：
GACATTGAGCTCACCCAGTCTCCAGCAATCATGTCTGTATCTCCAGGTGAAAAGGTCACCATGACCTGCAGGGCCAGCTCAAGTGTCAGTTCCAGTTACTTGCACTGGTACCAGCAGAGGTCAGGTGCCTCCCCCAAAATCTGGATTTATAGCACATCCAACTTGGCTTCTGGAGTCCCTGCTCGCTTCAGTGGCAGTGGGACTGGGACCTCTTACTCTCTCACAATCAGCAGTGTGGAGGCTGAAGATGCTGCCACTTATTACTGCCAGCAGTACAGTGGTTACCCGTGGACGTTCGGTGGAGGGACCAAGCTGGAGATC[配列番号918]
【０１３７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、以下に提供される配列番号９１９に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。
VQLQESGGGLVQPGGSRKLSCTASGFTFSSFGMHWVRQAPEKGLEWVAYISSGSNNIYFADTVKGRFTISRDNPKNTLFLQMTSLRSEDTAMYYCARSEYYGSSHMDYWGQGTTVTVSS[配列番号919]
【０１３８】
配列番号３のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、以下に提供される配列番号９２０に記載される：
【０１３９】
GTCCAACTGCAGGAGTCAGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGGTCCCGGAAACTCTCCTGTACAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGTCAGGCTCCAGAGAAGGGGCTGGAGTGGGTCGCATACATTAGTAGTGGCAGTAATAACATCTACTTTGCGGACACAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATCCCAAGAACACCCTGTTCCTGCAAATGACCAGTCTAAGGTCTGAGGACACGGCCATGTATTACTGTGCAAGATCGGAATACTACGGTAGTAGCCATATGGACTACTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA[配列番号920]
【０１４０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、以下に提供される配列番号９２１に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。
DIELTQSPKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKPLIYSATYRNSGVPDRFTGSGSGTDFTLTITNVQSKDLADYFCQQYNRYPYTSGGGTKLEI[配列番号921]
【０１４１】
配列番号９２１のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、以下に提供される配列番号９２２に記載される：
【０１４２】
GACATTGAGCTCACCCAGTCTCCAAAATTCATGTCCACATCAGTAGGAGACAGGGTCAGCGTCACCTGCAAGGCCAGTCAGAATGTGGGTACTAATGTAGCCTGGTATCAACAGAAACCAGGACAATCTCCTAAACCACTGATTTACTCGGCAACCTACCGGAACAGTGGAGTCCCTGATCGCTTCACAGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCACTAACGTGCAGTCTAAAGACTTGGCAGACTATTTCTGTCAACAATATAACAGGTATCCGTACACGTCCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAGATC  [配列番号922]
【０１４３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号１４４に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む配列番号１４４のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号１４２に記載される。
【０１４４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号１４３に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。配列番号１４３のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号１４１に記載される。
【０１４５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号２１６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。配列番号２１６のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号２１４に記載される。
【０１４６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号２１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。配列番号２１５のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号２１３に記載される。
【０１４７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号２２０に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。配列番号２２０のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号２１８に記載される。
【０１４８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号２１９に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。配列番号２１９のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号２１７に記載される。
【０１４９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号２３６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。配列番号２３６のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号２３４に記載される。
【０１５０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号２３５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。配列番号２３５のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号２３２に記載される。
【０１５１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号２６８に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。配列番号２６８のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号２６６に記載される。
【０１５２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号２６７に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。配列番号２６７のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号２６５に記載される。
【０１５３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号１７２に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。配列番号１７２のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号１７０に記載される。
【０１５４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号１７１に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。配列番号１７１のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号１６９に記載される。
【０１５５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号１１６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む。配列番号１１６のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号１１４に記載される。
【０１５６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号１１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む。配列番号１１５のアミノ酸配列をコードする核酸配列は、配列番号１１３に記載される。
【０１５７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７、配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、配列番号188、配列番号192、配列番号196、配列番号200、配列番号204、配列番号208、配列番号212、配列番号216、配列番号220、配列番号224、配列番号228、配列番号232、配列番号236、配列番号240、配列番号244、配列番号248、配列番号252、配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１７および配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０１５８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、（ａ）配列番号３に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域、および（ｂ）配列番号４に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、を含む。
【０１５９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域:27および(b)配列番号２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号３６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号４０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号４４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１６９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号４８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号５２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号５６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号６０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号６３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号６４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号６７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号６８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号７１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号７２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号７５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号７６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号７９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号８０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号８３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号８４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１７９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号８７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号８８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号９２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号９６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１００に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１０３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１０４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１０７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１０８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１１１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１１２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１１５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１１６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１１９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１２０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１２３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１２４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１８９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１２７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１３５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１３６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１３９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１４０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１４３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１４４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１４７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１４８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１５１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１５２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１５５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１５６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１５９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１６０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１６３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１６４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０１９９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１６７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１６８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２００】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１７１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１７２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１７５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１７６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１７９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１８０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１８３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１８４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１８７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１８８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１９１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１９２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１９５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号１９６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号１９９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２００に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２０３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２０４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２０９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２０７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２０８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２１１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２１２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２１５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２１６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２１９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２２０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２２３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２２４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２２７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２３５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２３６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２３９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２４０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２４３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２４４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２１９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２４７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２４８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２５１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２５２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２５５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２５６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２５９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２６０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２６３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２６４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２６７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２６８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２７１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２７２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２７５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２７６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２７９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２８０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２８３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２８４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２２９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２８７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２８８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２９１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２９２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２７９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２８０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２８３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２８４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２８７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２８８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２９１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２９２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２９５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２９６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２９９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号３００に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３０３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号３０４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２３８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、  （ａ）配列番号９１５に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号９１７に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【０２３９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、  （ａ）配列番号９１９に記載の配列を有する重鎖可変領域および（ｂ）配列番号９２１に記載の配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【０２４０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、本明細書に記載され表１〜７６に開示されるアミノ酸配列に対して相同なアミノ酸配列を含む重鎖および軽鎖可変領域を含む。例えば、限定としてではなく、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、  配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７および配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【０２４１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、  配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、  配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、  配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５および配列番号９１９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２４２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３、配列番号７、配列番号１１、配列番号１５、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号５９、配列番号６３、配列番号６７、配列番号７１、配列番号７５、配列番号７９、配列番号８３、配列番号８７、配列番号９１、配列番号９５、配列番号９９、配列番号１０３、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１５、配列番号１１９、配列番号１２３、配列番号１２７、配列番号１３１、配列番号１３５、配列番号１３９、配列番号１４３、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５５、配列番号１５９、配列番号１６３、配列番号１６７、配列番号１７１、配列番号１７５、配列番号１７９、配列番号１８３、配列番号１８７、配列番号１９１、配列番号１９５、配列番号１９９、配列番号２０３、配列番号２０７、配列番号２１１、配列番号２１５、配列番号２１９、配列番号２２３、配列番号２２７、配列番号２３１、配列番号２３５、配列番号２３９、配列番号２４３、配列番号２４７、配列番号２５１、配列番号２５５、配列番号２５９、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２７１、配列番号２７５、配列番号２７９、配列番号２８３、配列番号２８７、配列番号２９１、配列番号２９５、配列番号２９９、配列番号３０３、配列番号９１７および配列番号９２１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ならびに(b)配列番号４、配列番号８、配列番号１２、配列番号１６、配列番号２０、配列番号２４、配列番号２８、配列番号３２、配列番号３６、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４８、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６０、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号９２、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０４、配列番号１０８、配列番号１１２、配列番号１１６、  配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１２８、配列番号１３２、配列番号１３６、配列番号１４０、配列番号１４４、配列番号１４８、配列番号１５２、配列番号１５６、配列番号１６０、配列番号１６４、配列番号１６８、配列番号１７２、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８４、  配列番号１８８、配列番号１９２、配列番号１９６、配列番号２００、配列番号２０４、配列番号２０８、配列番号２１２、配列番号２１６、配列番号２２０、配列番号２２４、配列番号２２８、配列番号２３２、配列番号２３６、配列番号２４０、配列番号２４４、配列番号２４８、配列番号２５２、  配列番号２５６、配列番号２６０、配列番号２６４、配列番号２６８、配列番号２７２、配列番号２７６、配列番号２８０、配列番号２８４、配列番号２８８、配列番号２９２、配列番号２９６、配列番号３００、配列番号３０４、配列番号９１５および配列番号９１９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【０２４３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、（ａ）配列番号１４３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、および（ｂ）配列番号１４４に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２４４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２１５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２１６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２４５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２１９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および（ｂ）配列番号２２０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２４６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、（ａ）配列番号２３５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、および(b)配列番号２３６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２４７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号２６８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域および(b)配列番号２６７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２４８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９１５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および(b)配列番号９１７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２４９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９１９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および(b)配列番号９２１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２５０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a))配列番号１１５に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変および(b)配列番号１１６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２５１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a))配列番号１７１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む軽鎖可変および(b)配列番号１７２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％相同なアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。
【０２５２】
上記の配列のＶＨ領域およびＶＬ領域に対する高い（即ち、８０％またはそれ超の）相同性を有するＶＨ領域および／またはＶＬ領域を含む細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、変異誘発（例えば、部位特異的またはＰＣＲ媒介性変異誘発）と、その後の、本明細書に記載される結合アッセイを使用した、保持された機能（即ち、結合アフィニティー）についてのコードされた変更されたｓｃＦｖの試験とによって、取得され得る。特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比較して、置換（例えば、配列の保存的改変を生成する保存的置換）、挿入または欠失を含むが、その配列を含む細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＦｃＲＬ５に結合する能力を保持する。特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入または欠失を含むが、その配列を含む細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＦｃＲＬ５に結合する能力を保持する。特定の実施形態では、合計で約１から約１０のアミノ酸が、開示された配列において、置換、挿入および／または欠失されている。例えば、限定としてではなく、ＶＨ配列またはＶＬ配列は、改変および／または置換された、最大で約１、最大で約２、最大で約３、最大で約４、最大で約５、最大で約６、最大で約７、最大で約８、最大で約９または最大で約１０のアミノ酸残基を有し得る。保存的改変の非限定的な例は、例えば、表２３１内で、以下に提供される。
【０２５３】
本開示の主題は、表２２９および２３０中で本明細書に開示される、重鎖可変領域および軽鎖可変領域のＣＤＲ、例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）をさらに提供する。これらのＣＤＲ領域は、Ｋａｂａｔ系（Kabat、E  Aら（１９９１年）Sequences  of  Proteins  of  Immunological  Interest、第５版、US  Department  of  Health  and  Human  Services、NIH  Publication  No  91-3242）を使用して描写される。本開示は、本明細書に開示される抗体配列の保存的改変を含む細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）をさらに提供する。例えば、限定としてではなく、本開示の主題の細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域ならびにＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含み、これらのＣＤＲ配列のうちの１つまたは複数は、本明細書に開示される特定されたアミノ酸配列、またはそれらの保存的改変を含み、これらの細胞外抗原結合ドメインは、所望の機能性特性を保持する。表２２９および２３０を参照のこと。
【０２５４】
特定の実施形態では、本開示の主題は、軽鎖可変領域を含む細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）を提供し、この軽鎖可変領域は、（ａ）配列番号３１２、３１１８、３２４、３２９、３３８、３４３、３４８、３５２、３５７、３６３、３６９、３８１、３９０、３９７、４０１、４０６、４１６、４２３、４２８、４３３、４４７、４６０、４６８、４７４、４７７、４８３、４９０、４９８、５０３、５０８、５１８、５３３、５４０、５４４、５４７、５５６、５６２、５６８、５７１、５８０、５８５、５８８、９２６および９３２、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１；（ｂ）配列番号３１３、３１９、３３０、３４４、３４９、３５８、３６４、３７０、３８２、３８５、３９１、３９８、４０９、４１７、４２９、４３４、４３８、４４８、４５４、４６１、４６９、４７８、４８４、４８７、５０４、５１３、５２３、５３４、４２９、４４８、５４８、５５７、５６３、５７２、５７５、５８６、９２７および９３３、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２；ならびに（ｃ）配列番号３１４、３２０、３２５、３３１、３３９、３４５、３５０、３５３、３５９、３６５、３７１、３７７、３８３、３８６、３９２、３９５、３９９、４０２、４０７、４１０、４１４、４１８、４１９、４２４、４３０、４３５、４３９、４４３、４４９、４５２、４５５、４５７、４６２、４６５、４７０、４７９、４８５、４８８、４９１、４９３、４９５、４９９、５０５、５０９、５１４、５１９、５２４、５２８、５３０、５３１、５３５、５４１、５４２、５４５、５４９、５５４、５５８、５６４、５６９、５７３、５７６、５８１、５９２、９２８および９３４、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。
【０２５５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、  重鎖可変領域であって、この重鎖可変領域が(a)配列番号309、315、321、326、332、335、340、346、354、360、366、372、378、387、393、403、411、420、425、436、440、444、471、480、500、510、515、520、525、537、551、559、565、582、589、923および929およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１;(b)配列番号310、316、322、327、333、336、341、355、361、367、373、379、388、404、412、421、426、431、441、445、450、466、472、475、481、496、501、506、511、516、521、526、538、552、560、566、583、590、924および  930およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２;ならびに(c)配列番号311、317、323、328、334、337、342、347、351、356、362、368、374、376、380、384、389、394、396、400、405、408、412、415、422、427、432、437、442、446、451、453、456、458、459、463、464、467、473、476、482、486、489、492、494、497、502、507、512、517、522、527、529、532、536、539、543、546、550、553、555、561、567、570、574、577、578、579、584、578、587、591、925および931、およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。
【０２５６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号４６３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号４１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２５７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号５１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号５１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号５３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２５８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４０４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号５３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号５３４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号５３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２５９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号５４３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５４４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号４４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号５４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２６０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４７５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号５７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５７１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号５７２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号５７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２６１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号４４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号３３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号４４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２６２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３０９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号３１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号４８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号３１３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号４９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２６３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９２３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号９２４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号９２５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号９２６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号９２７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号９２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２６４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９２９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号９３０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号９３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメインは、(a)配列番号９３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号９３３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(c)配列番号９３４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２６５】
本開示の主題は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域およびＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）を提供し、(a)重鎖可変領域CDR3は配列番号311、317、323、328、334、337、342、347、351、356、362、368、374、376、380、384、389、394、396、400、405、408、412、415、422、427、432、437、442、446、451、453、456、458、459、463、464、467、473、476、482、486、489、492、494、497、502、507、512、517、522、527、529、532、536、539、543、546、550、553、555、561、567、570、574、577、578、579、584、578、587、591、925および931、およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、(b)軽鎖可変領域CDR3は配列番号  314、320、325、331、339、345、350、353、359、365、371、377、383、386、392、395、399、402、407、410、414、418、419、424、430、435、439、443、449、452、455、457、462、465、470、479、485、488、491、493、495、499、505、509、514、519、524、528、530、531、535、541、542、545、549、554、558、564、569、573、576、581、592、928および  934およびその保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、この細胞外抗原結合ドメインはヒトＦｃＲＬ５に特異的に結合する。
【０２６６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４６３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号４１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み;この細胞外結合ドメインは、FcRL5に特異的に結合する。
【０２６７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号５３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み;この細胞外結合ドメインは、FcRL5に特異的に結合する。
【０２６８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号５３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み;抗体またはその抗原結合断片はＦｃＲＬ５に特異的に結合する。
【０２６９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５４３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号５４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み;この細胞外結合ドメインは、FcRL5に特異的に結合する。
【０２７０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号５７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み;抗体またはその抗原結合断片はＦｃＲＬ５に特異的に結合する。
【０２７１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９２５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号９２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み;この細胞外結合ドメインは、FcRL5に特異的に結合する。  
【０２７２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号９３４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２７３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号４４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み;この細胞外結合ドメインは、FcRL5に特異的に結合する。
【０２７４】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;および(b)配列番号４９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含み;この細胞外結合ドメインは、FcRL5に特異的に結合する。
【０２７５】
特定の実施形態では、本開示の主題は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域ならびにＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含む細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）を提供し、（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１は、配列番号３０９、３１５、３２１、３２６、３３２、３３５、３４０、３４６、３５４、３６０、３６６、３７２、３７８、３８７、３９３、４０３、４１１、４２０、４２５、４３６、４４０、４４４、４７１、４８０、５００、５１０、５１５、５２０、５２５、５３７、５５１、５５９、５６５、５８２、５８９、９２３および９２９、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み；（ｂ）重鎖可変領域ＣＤＲ２は、配列番号３１０、３１６、３２２、３２７、３３３、３３６、３４１、３５５、３６１、３６７、３７３、３７９、３８８、４０４、４１２、４２１、４２６、４３１、４４１、４４５、４５０、４６６、４７２、４７５、４８１、４９６、５０１、５０６、５１１、５１６、５２１、５２６、５３８、５５２、５６０、５６６、５８３、５９０、９２４および９３０、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み；（ｃ）重鎖可変領域ＣＤＲ３は、配列番号３１１、３１７、３２３、３２８、３３４、３３７、３４２、３４７、３５１、３５６、３６２、３６８、３７４、３７６、３８０、３８４、３８９、３９４、３９６、４００、４０５、４０８、４１２、４１５、４２２、４２７、４３２、４３７、４４２、４４６、４５１、４５３、４５６、４５８、４５９、４６３、４６４、４６７、４７３、４７６、４８２、４８６、４８９、４９２、４９４、４９７、５０２、５０７、５１２、５１７、５２２、５２７、５２９、５３２、５３６、５３９、５４３、５４６、５５０、５５３、５５５、５６１、５６７、５７０、５７４、５７７、５７８、５７９、５８４、５７８、５８７、５９１、９２５および９３１、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み；（ｄ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１は、配列番号３１２、３１１８、３２４、３２９、３３８、３４３、３４８、３５２、３５７、３６３、３６９、３８１、３９０、３９７、４０１、４０６、４１６、４２３、４２８、４３３、４４７、４６０、４６８、４７４、４７７、４８３、４９０、４９８、５０３、５０８、５１８、５３３、５４０、５４４、５４７、５５６、５６２、５６８、５７１、５８０、５８５、５８８、９２６および９３２、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み；（ｅ）軽鎖可変領域ＣＤＲ２は、配列番号３１３、３１９、３３０、３４４、３４９、３５８、３６４、３７０、３８２、３８５、３９１、３９８、４０９、４１７、４２９、４３４、４３８、４４８、４５４、４６１、４６９、４７８、４８４、４８７、５０４、５１３、５２３、５３４、４２９、４４８、５４８、５５７、５６３、５７２、５７５、５８６、９２７および９３３、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み；（ｆ）軽鎖可変領域ＣＤＲ３は、配列番号３１４、３２０、３２５、３３１、３３９、３４５、３５０、３５３、３５９、３６５、３７１、３７７、３８３、３８６、３９２、３９５、３９９、４０２、４０７、４１０、４１４、４１８、４１９、４２４、４３０、４３５、４３９、４４３、４４９、４５２、４５５、４５７、４６２、４６５、４７０、４７９、４８５、４８８、４９１、４９３、４９５、４９９、５０５、５０９、５１４、５１９、５２４、５２８、５３０、５３１、５３５、５４１、５４２、５４５、５４９、５５４、５５８、５６４、５６９、５７３、５７６、５８１、５９２、９２８および９３４、ならびにそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み；この細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５を特異的に結合する。
【０２７６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４６３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号４１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３  またはその保存的改変を含む。
【０２７７】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号５１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号５１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号５３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２７８】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４０３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４０４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号５３４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号５３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２７９】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号４１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５４３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５４４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号４４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号５４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２８０】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号３７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４７５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号５７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号５７１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１  またはその保存的改変;(e)配列番号５７２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号５７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３  またはその保存的改変を含む。
【０２８１】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９２３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号９２４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号９２５に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号９２６に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号９２７に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)配列番号９２８に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２８２】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、(a)配列番号９２９に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(b)配列番号９３０に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号９３１に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号９３２に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号９３３に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変、および(f)  配列番号９３４に記載の配列を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２８３】
特定の実施形態では、本開示の抗ＦｃＲＬ５抗体またはその抗原結合断片は、(a)配列番号４４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号４４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号３２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号４４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２８４】
特定の実施形態では、本開示の抗ＦｃＲＬ５抗体またはその抗原結合断片は、(a)配列番号３０９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ1またはその保存的改変;(b)配列番号３１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;(c)配列番号４８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変;(d)配列番号４９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１またはその保存的改変;(e)配列番号３１３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２またはその保存的改変;および(f)  配列番号４９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３またはその保存的改変を含む。
【０２８５】
本明細書で使用する場合、用語「保存的配列改変」および「保存的改変」とは、そのアミノ酸配列を含む本開示のＣＡＲ（例えば、細胞外抗原結合ドメイン）の結合特徴に有意に影響することも変更することもないアミノ酸改変を指す。かかる保存的改変には、アミノ酸の置換、付加および欠失が含まれる。改変は、部位特異的変異誘発およびＰＣＲ媒介性変異誘発などの、当技術分野で公知の標準的な技術によって、本開示の主題のヒトｓｃＦｖ中に導入され得る。アミノ酸は、電荷および極性などのそれらの物理化学的特性に従って、群へと分類され得る。
【０２８６】
保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が、同じ群内のアミノ酸で置き換えられる置換である。例えば、アミノ酸は、電荷によって分類され得る：正に荷電したアミノ酸には、リシン、アルギニン、ヒスチジンが含まれ、負に荷電したアミノ酸には、アスパラギン酸、グルタミン酸が含まれ、中性の電荷のアミノ酸には、アラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンが含まれる。さらに、アミノ酸は、極性によって分類され得る：極性アミノ酸には、アルギニン（塩基性極性）、アスパラギン、アスパラギン酸（酸性極性）、グルタミン酸（酸性極性）、グルタミン、ヒスチジン（塩基性極性）、リシン（塩基性極性）、セリン、スレオニンおよびチロシンが含まれ；非極性アミノ酸には、アラニン、システイン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トリプトファンおよびバリンが含まれる。したがって、ＣＤＲ領域内の１つまたは複数のアミノ酸残基は、同じ群由来の他のアミノ酸残基で置き換えられ得、変更された抗体は、本明細書に記載される機能性アッセイを使用して、保持された機能（即ち、上記（ｃ）から（ｌ）に記載の機能）について試験され得る。特定の実施形態では、特定された配列またはＣＤＲ領域内の、１以下、２以下、３以下、４以下、５以下の残基が変更される。例示的な保存的アミノ酸置換は、表２３１中に示される。
【表２３１】
2018504094.tif 000003
【０２８７】
特定の非限定的な実施形態では、ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、細胞外抗原結合ドメインの重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを接続するリンカーを含み得る。本明細書で使用する場合、用語「リンカー」とは、それらが互いに接続されるように、２またはそれ超のポリペプチドまたは核酸を共有結合によって結合させる官能基（例えば、化学物質またはポリペプチド）を指す。本明細書で使用する場合、「ペプチドリンカー」とは、２つのタンパク質を一緒にカップリングするため（例えば、ＶＨドメインとＶＬドメインとをカップリングするため）に使用される１つまたは複数のアミノ酸を指す。ペプチドリンカーの非限定的な例は、Shenら、Anal  Chem  ８０巻（６号）：１９１０〜１９１７頁（２００８年）に開示されている。
【０２８８】
非限定的な一例では、このリンカーは、配列番号８９７に記載の配列を有するアミノ酸を含むＧ４Ｓリンカーである。特定の実施形態では、配列番号８９７のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列は、配列番号８９８に記載される。非限定的な一例では、リンカーは、配列番号３０７に記載の配列を有するアミノ酸を含む。特定の実施形態では、配列番号３０７のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列は、配列番号３０５に記載される。
【０２８９】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０１に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGS  [配列番号901]  
【０２９０】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０２に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
SGGSGGS  [配列番号902]
【０２９１】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０３に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGSGGGS  [配列番号903]
【０２９２】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０４に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGSGGGGS  [配列番号904]
【０２９３】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０５に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGSGGGGSGGGGGGGS  [配列番号905]
【０２９４】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０６に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS  [配列番号906]  
【０２９５】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０７に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS  [配列番号907]
【０２９６】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０８に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS  [配列番号908]
【０２９７】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９０９に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS  [配列番号909]
【０２９８】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９１０に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
EPKSCDKTHTCPPCP  [配列番号910]
【０２９９】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９１１に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GGGGSGGGSEPKSCDKTHTCPPCP  [配列番号911]
【０３００】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９１２に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
ELKTPLGDTTHTCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCP  [配列番号912]
【０３０１】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９１３に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
GSGSGS  [配列番号913]
【０３０２】
特定の形態において、リンカーは、以下に提供される配列番号９１４に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
AAA  [配列番号914]
【０３０３】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、ならびに重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカーペプチドを含む。重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを含む本開示の細胞外抗原結合ドメイン、例えばｓｃＦｖの非限定的な例は、表７７〜１５２中に開示されている。例えば、限定としてではなく、本開示の重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを含む細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５９４、配列番号５９６、配列番号５９８、配列番号６００、配列番号６０２、配列番号６０４、配列番号６０６、配列番号６０８、配列番号６１０、配列番号６１２、配列番号６１４、配列番号６１６、配列番号６１８、配列番号６２０、配列番号６２２、配列番号６２４、配列番号６２６、配列番号６２８、配列番号６３０、配列番号６３２、配列番号６３４、配列番号６３６、配列番号６３８、配列番号６４０、配列番号６４２、配列番号６４４、配列番号６４６、配列番号６４８、配列番号６５０、配列番号６５２、配列番号６５４、配列番号６５６、配列番号６５８、配列番号６６０、配列番号６６２、配列番号６６４、配列番号６６６、配列番号６６８、配列番号６７０、配列番号６７２、配列番号６７４、配列番号６７６、配列番号６７８、配列番号６８０、配列番号６８２、配列番号６８４、配列番号６８６、配列番号６８８、配列番号６９０、配列番号６９２、配列番号６９４、配列番号６９６、配列番号６９８、配列番号７００、配列番号７０２、配列番号７０４、配列番号７０６、配列番号７０８、配列番号７１０、配列番号７１２、配列番号７１４、配列番号７１６、配列番号７１８、配列番号７２０、配列番号７２２、配列番号７２４、配列番号７２６、配列番号７２８、配列番号７３０、配列番号７３２、配列番号７３４、配列番号７３６、配列番号７３８、配列番号７４０、配列番号７４２、配列番号７４４およびそれらの保存的改変からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む（表７７〜１５２中に示される通り）。
【０３０４】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号６５０またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３０５】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号６６４またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３０６】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号６７８またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３０７】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号７００またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３０８】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号７０２またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３０９】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号７１０またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３１０】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号７２６またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３１１】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号６５０またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３１２】
特定の実施形態では、重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを有する細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号６７８またはその保存的改変のアミノ酸配列を含む。
【０３１３】
さらに、この細胞外抗原結合ドメインは、新生タンパク質を小胞体中に指向させるリーダーまたはシグナルペプチドを含み得る。シグナルペプチドまたはリーダーは、ＣＡＲがグリコシル化され細胞膜中にアンカリングされる場合、必須であり得る。このシグナル配列またはリーダーは、分泌経路へのそれらの進入を指向させる、新たに合成されたタンパク質のＮ末端に存在する、ペプチド配列（約５、約１０、約１５、約２０、約２５または約３０アミノ酸長）であり得る。非限定的な例では、このシグナルペプチドは、細胞外抗原結合ドメインの５’末端に共有結合によって接合される。特定の実施形態では、このシグナルペプチドは、以下に提供される配列番号２６に記載の配列を有するアミノ酸を含むＣＤ８ポリペプチドを含む。
MALPVTALLLPLALLLHAAR［配列番号９３５］
配列番号９３５のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列は、以下に提供される配列番号９３６に記載される：
ATGGCTCTCCCAGTGACTGCCCTACTGCTTCCCCTAGCGCTTCTCCTGCATGCAGCTCGT［配列番号９３６］
【０３１４】
別の一実施形態では、このシグナルペプチドは、以下に提供される配列番号９３７に記載の配列を有するアミノ酸を含む。
METDTLLLWVLLLWVPGSTG［配列番号９３７］
配列番号９３７のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列は、以下に提供される配列番号９３８に記載される：
ATGGAAACCGACACCCTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCAGGATCCACAGGA［配列番号９３８］
【０３１５】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒトｓｃＦｖは、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間のリンカーペプチド、ならびにＨｉｓ−タグおよびＨＡ−タグを含む。特定の実施形態では、Ｈｉｓ−タグおよびＨＡ−タグのアミノ酸配列は、配列番号３０８のアミノ酸配列を含む。配列番号３０８をコードするヌクレオチド配列は、配列番号３０６である。
【０３１６】
特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒトｓｃＦｖは、配列番号８９９に記載のアミノ酸配列を含むヒトＦｃＲＬ５ポリペプチドに結合する。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒトｓｃＦｖは、ドメイン９（例えば、配列番号８９９のアミノ酸７５４〜８３５）中のエピトープに結合する。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒトｓｃＦｖは、ドメイン８（例えば、配列番号８９９のアミノ酸６５８〜７３１）中のエピトープに結合する。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒトｓｃＦｖは、配列番号８９９のアミノ酸８２９〜８４０を含むドメイン９内のエピトープに結合する。特定の実施形態では、この細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒトｓｃＦｖは、配列番号８９９のアミノ酸６５７〜６６７を含むドメイン８内のエピトープに結合する。例えば、限定としてではなく、この細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒトｓｃＦｖは、アミノ酸配列ＲＳＥＴＶＴＬＹＩＴＧＬ（配列番号９６４）を含むエピトープに結合する。特定の実施形態では、特定の実施形態では、本開示の抗体またはその抗原結合断片は、アミノ酸配列ＳＲＰＩＬＴＦＲＡＰＲ（配列番号９６５）を含むエピトープに結合する。
ＣＡＲの膜貫通ドメイン
【０３１７】
特定の非限定的な実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、膜の少なくとも一部分に及ぶ疎水性アルファらせんを含む。異なる膜貫通ドメインは、異なる受容体安定性を生じる。抗原認識後、受容体はクラスター化し、シグナルが細胞に伝達される。本開示の主題によれば、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド、ＣＤ２８ポリペプチド、ＣＤ３ζポリペプチド、ＣＤ４ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＣＴＬＡ−４ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド、ＬＡＧ−３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、ＢＴＬＡポリペプチド、合成ペプチド（免疫応答と関連するタンパク質に基づかない）、またはそれらの組合せを含み得る。
【０３１８】
特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ２８ポリペプチドを含む。このＣＤ２８ポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号：Ｐ１０７４７もしくはＮＰ＿００６１３０を有する配列（配列番号９３９）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。非限定的な実施形態では、このＣＤ２８ポリペプチドは、少なくとも２０、または少なくとも３０、または少なくとも４０、または少なくとも５０、および最大で２２０アミノ酸長である、配列番号９３９の連続した部分であるアミノ酸配列を有し得る。あるいはまたはさらに、非限定的な種々の実施形態では、このＣＤ２８ポリペプチドは、配列番号９３９のアミノ酸１から２２０、１から５０、５０から１００、１００から１５０、１５０から２００、または２００から２２０のアミノ酸配列を有する。特定の実施形態では、本開示の主題のＣＡＲは、ＣＤ２８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン、およびＣＤ２８ポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域を含む細胞内ドメイン、を含む。特定の実施形態では、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ２８ポリペプチドは、配列番号９３９のアミノ酸１１４から２２０のアミノ酸配列を有する。
配列番号９３９は、以下に提供される：
1      MLRLLLALNL  FPSIQVTGNK  ILVKQSPMLV  AYDNAVNLSC  KYSYNLFSRE  FRASLHKGLD
61    SAVEVCVVYG  NYSQQLQVYS  KTGFNCDGKL  GNESVTFYLQ  NLYVNQTDIY  FCKIEVMYPP
121  PYLDNEKSNG  TIIHVKGKHL  CPSPLFPGPS  KPFWVLVVVG  GVLACYSLLV  TVAFIIFWVR
181  SKRSRLLHSD  YMNMTPRRPG  PTRKHYQPYA  PPRDFAAYRS［配列番号９３９］
【０３１９】
本開示の主題によれば、「ＣＤ２８核酸分子」とは、ＣＤ２８ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの膜貫通ドメインおよび細胞内ドメイン（例えば、共刺激性シグナル伝達領域）中に含まれるＣＤ２８ポリペプチド（配列番号９３９のアミノ酸１１４から２２０）をコードするＣＤ２８核酸分子は、以下に提供される配列番号９４０に記載の配列を有する核酸を含む。
ATTGAAGTTATGTATCCTCCTCCTTACCTAGACAATGAGAAGAGCAATGGAACCATTATCCATGTGAAAGGGAAACACCTTTGTCCAAGTCCCCTATTTCCCGGACCTTCTAAGCCCTTTTGGGTGCTGGTGGTGGTTGGTGGAGTCCTGGCTTGCTATAGCTTGCTAGTAACAGTGGCCTTTATTATTTTCTGGGTGAGGAGTAAGAGGAGCAGGCTCCTGCACAGTGACTACATGAACATGACTCCCCGCCGCCCCGGGCCCACCCGCAAGCATTACCAGCCCTATGCCCCACCACGCGACTTCGCAGCCTATCGCTCC［配列番号９４０］。
【０３２０】
特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチドを含む。このＣＤ８ポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号：ＡＡＨ２５７１５を有する配列（配列番号９６０）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。非限定的な実施形態では、このＣＤ８ポリペプチドは、少なくとも２０、または少なくとも３０、または少なくとも４０、または少なくとも５０、または少なくとも７０、または少なくとも１００、または少なくとも１５０、または少なくとも２００および最大で２３５アミノ酸長である、配列番号９６０の連続した部分であるアミノ酸配列を有し得る。あるいはまたはさらに、非限定的な種々の実施形態では、このＣＤ８ポリペプチドは、配列番号９６０のアミノ酸１から２３５、１から５０、５０から１００、１００から１５０、１５０から２００、１３０から２１０、または２００から２３５のアミノ酸配列を有する。特定の実施形態では、本開示の主題のＣＡＲは、ＣＤ８ポリペプチドを含む膜貫通ドメインを含む。特定の実施形態では、膜貫通ドメイン中に含まれるＣＤ８ポリペプチドは、配列番号９６０のアミノ酸１３７から２０７のアミノ酸配列を有する。
配列番号９６０は、以下に提供される：
1      malpvtalll  plalllhaar  psqfrvspld  rtwnlgetve  lkcqvllsnp  tsgcswlfqp
61    rgaaasptfl  lylsqnkpka  aegldtqrfs  gkrlgdtfvl  tlsdfrrene  gcyfcsalsn
121  simyfshfvp  vflpakpttt  paprpptpap  tiasqplslr  peacrpaagg  avhtrgldfa
181  cdiyiwapla  gtcgvlllsl  vitlycnhrn  rrrvckcprp  vvksgdkpsl  saryv［配列番号９６０］
【０３２１】
本開示の主題によれば、「ＣＤ８核酸分子」とは、ＣＤ８ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの膜貫通ドメインおよび細胞内ドメイン（例えば、共刺激性シグナル伝達領域）中に含まれるＣＤ８ポリペプチド（配列番号９６０のアミノ酸１３７から２０７）をコードするＣＤ８核酸分子は、以下に提供される配列番号９６１に記載の配列を有する核酸を含む。
CCCACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACCCCGGCGCCCACGATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCCTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAAC［配列番号９６１］
【０３２２】
特定の非限定的な実施形態では、ＣＡＲは、細胞外抗原結合ドメインを膜貫通ドメインに連結するスペーサー領域もまた含み得る。このスペーサー領域は、抗原認識を促進するために、抗原結合ドメインを異なる配向に向かせるのに十分に屈曲性であり得る。このスペーサー領域は、ＩｇＧ１由来のヒンジ領域、または免疫グロブリンのＣＨ２ＣＨ３領域およびＣＤ３の部分であり得る。
ＣＡＲの細胞内ドメイン
【０３２３】
特定の非限定的な実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、細胞（例えば、リンパ系の細胞、例えばＴ細胞）を活性化または刺激できるＣＤ３ζポリペプチドを含み得る。ＣＤ３ζは、３つのＩＴＡＭを含み、抗原が結合した後に、細胞（例えば、リンパ系の細胞、例えばＴ細胞）に活性化シグナルを伝達する。このＣＤ３ζポリペプチドは、配列番号９４１に記載の配列に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは約１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。非限定的な実施形態では、このＣＤ３ζポリペプチドは、少なくとも２０、または少なくとも３０、または少なくとも４０、または少なくとも５０、および最大で１６３アミノ酸長である、配列番号９４１の連続した部分であるアミノ酸配列を有し得る。あるいはまたはさらに、非限定的な種々の実施形態では、このＣＤ３ζポリペプチドは、配列番号９４１のアミノ酸１から１６３、１から５０、５０から１００、１００から１５０、または１５０から１６３のアミノ酸配列を有する。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ζポリペプチドは、配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３のアミノ酸配列を有する。
配列番号９４１は、以下に提供される：
1      MKWKALFTAA  ILQAQLPITE  AQSFGLLDPK  LCYLLDGILF  IYGVILTALF  LRVKFSRSAD
61    APAYQQGQNQ  LYNELNLGRR  EEYDVLDKRR  GRDPEMGGKP  RRKNPQEGLY  NELQKDKMAE
121  AYSEIGMKGE  RRRGKGHDGL  YQGLSTATKD  TYDALHMQAL  PPR［配列番号９４１］
【０３２４】
本開示の主題によれば、「ＣＤ３ζ核酸分子」とは、ＣＤ３ζポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ζポリペプチド（配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３）をコードするＣＤ３ζ核酸分子は、以下に提供される配列番号９４２に記載の配列を有する核酸を含む。
AGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAA［配列番号９４２］
【０３２５】
特定の非限定的な実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、少なくとも１つのシグナル伝達領域をさらに含む。この少なくとも１つのシグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ−１０ポリペプチド、ＰＤ−１ポリペプチド、ＣＴＬＡ−４ポリペプチド、ＬＡＧ−３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、ＢＴＬＡポリペプチド、合成ペプチド（免疫応答と関連するタンパク質に基づかない）、またはそれらの組合せを含み得る。
【０３２６】
特定の実施形態では、このシグナル伝達領域は、共刺激性シグナル伝達領域である。特定の実施形態では、この共刺激性領域は、最適なリンパ球活性化を提供し得る、少なくとも１つの共刺激性分子を含む。本明細書で使用する場合、「共刺激性分子」とは、抗原に対するリンパ球の効率的応答に必要とされる、抗原受容体またはそれらのリガンド以外の細胞表面分子を指す。この少なくとも１つの共刺激性シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチド、４−１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ−１０ポリペプチド、またはそれらの組合せを含み得る。この共刺激性分子は、その受容体への結合の際に、共刺激性応答、即ち、抗原がそのＣＡＲ分子に結合する場合に提供される刺激をもたらす細胞内応答を生じさせる、細胞表面で発現されるタンパク質である共刺激性リガンドに結合し得る。共刺激性リガンドには、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ７０、ＯＸ４０Ｌ、４−１ＢＢＬ、ＣＤ４８、ＴＮＦＲＳＦ１４およびＰＤ−Ｌ１が含まれるがこれらに限定されない。一例として、４−１ＢＢリガンド（即ち、４−１ＢＢＬ）は、ＣＡＲシグナルと組み合わさってＣＡＲ＋Ｔ細胞のエフェクター細胞機能を誘導する細胞内シグナルを提供するために、４−１ＢＢ（「ＣＤ１３７」としても公知）に結合し得る。４−１ＢＢ、ＩＣＯＳまたはＤＡＰ−１０を含む共刺激性シグナル伝達領域を含む細胞内ドメインを含むＣＡＲは、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第７，４４６，１９０号に開示されている（例えば、米国特許第７，４４６，１９０号中で、４−１ＢＢをコードするヌクレオチド配列は配列番号１５に示され、ＩＣＯＳをコードするヌクレオチド配列は配列番号１６に示され、ＤＡＰ−１０をコードするヌクレオチド配列は配列番号１７に記載される）。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、ＣＤ２８ポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域を含む。特定の実施形態では、ＣＡＲの細胞内ドメインは、２つの共刺激性分子：ＣＤ２８および４−１ＢＢまたはＣＤ２８およびＯＸ４０を含む共刺激性シグナル伝達領域を含む。
【０３２７】
４−１ＢＢは、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）リガンドとして作用し得、刺激活性を有し得る。この４−１ＢＢポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号：Ｐ４１２７３もしくはＮＰ＿００１５５２を有する配列（配列番号９４３）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチドは、配列番号９４３のアミノ酸２１４から２５５のアミノ酸配列を有する。配列番号９４３は、以下に提供される：
1      MGNSCYNIVA  TLLLVLNFER  TRSLQDPCSN  CPAGTFCDNN  RNQICSPCPP  NSFSSAGGQR
61    TCDICRQCKG  VFRTRKECSS  TSNAECDCTP  GFHCLGAGCS  MCEQDCKQGQ  ELTKKGCKDC
121  CFGTFNDQKR  GICRPWTNCS  LDGKSVLVNG  TKERDVVCGP  SPADLSPGAS  SVTPPAPARE
181  PGHSPQIISF  FLALTSTALL  FLLFFLTLRF  SVVKRGRKKL  LYIFKQPFMR  PVQTTQEEDG
241  CSCRFPEEEE  GGCEL［配列番号９４３］
【０３２８】
本開示の主題によれば、「４−１ＢＢ核酸分子」とは、４−１ＢＢポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。特定の実施形態では、本開示のＣＡＲの細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチド（配列番号９４３のアミノ酸２１４から２５５）をコードする４−１ＢＢ核酸分子は、以下に提供される配列番号９６２に記載の配列を有する核酸を含む。
AAACGGGGCAGAAAGAAGCTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTG［配列番号９６２］
【０３２９】
ＯＸ４０ポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号：Ｐ４３４８９もしくはＮＰ＿００３３１８を有する配列（配列番号９４４）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。
配列番号９４４は、以下に提供される：
1      MCVGARRLGR  GPCAALLLLG  LGLSTVTGLH  CVGDTYPSND  RCCHECRPGN  GMVSRCSRSQ
61    NTVCRPCGPG  FYNDVVSSKP  CKPCTWCNLR  SGSERKQLCT  ATQDTVCRCR  AGTQPLDSYK
121  PGVDCAPCPP  GHFSPGDNQA  CKPWTNCTLA  GKHTLQPASN  SSDAICEDRD  PPATQPQETQ
181  GPPARPITVQ  PTEAWPRTSQ  GPSTRPVEVP  GGRAVAAILG  LGLVLGLLGP  LAILLALYLL
241  RRDQRLPPDA  HKPPGGGSFR  TPIQEEQADA  HSTLAKI［配列番号９４４］
【０３３０】
本開示の主題によれば、「ＯＸ４０核酸分子」とは、ＯＸ４０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。
【０３３１】
ＩＣＯＳポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号：ＮＰ＿０３６２２４を有する配列（配列番号９４５）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。
配列番号９４５は、以下に提供される：
1      MKSGLWYFFL  FCLRIKVLTG  EINGSANYEM  FIFHNGGVQI  LCKYPDIVQQ  FKMQLLKGGQ
61    ILCDLTKTKG  SGNTVSIKSL  KFCHSQLSNN  SVSFFLYNLD  HSHANYYFCN  LSIFDPPPFK
121  VTLTGGYLHI  YESQLCCQLK  FWLPIGCAAF  VVVCILGCIL  ICWLTKKKYS  SSVHDPNGEY
181  MFMRAVNTAK  KSRLTDVTL［配列番号９４５］
【０３３２】
本開示の主題によれば、「ＩＣＯＳ核酸分子」とは、ＩＣＯＳポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。
【０３３３】
ＣＴＬＡ−４は、その対応するリガンド（それぞれ、ＣＤ８０およびＣＤ８６；Ｂ７−１およびＢ７−２）によって係合された場合に活性化Ｔ細胞阻害またはアネルギーを媒介する、活性化Ｔ細胞によって発現される阻害性受容体である。前臨床研究および臨床研究の両方において、全身抗体注入によるＣＴＬＡ−４遮断は、臨床設定において、有意な予見できない毒性があるが、内因性抗腫瘍応答を増強した。
【０３３４】
ＣＴＬＡ−４は、細胞外Ｖドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞質テイルを含む。異なるアイソフォームをコードする選択的スプライスバリアントが特徴付けられている。膜結合型アイソフォームは、ジスルフィド結合によって相互接続されたホモダイマーとして機能するが、可溶性アイソフォームはモノマーとして機能する。この細胞内ドメインは、それが固有の触媒活性を有さず、ＰＩ３Ｋ、ＰＰ２ＡおよびＳＨＰ−２を結合することが可能な１つのＹＶＫＭモチーフ、ならびにＳＨ３含有タンパク質を結合することが可能な１つのプロリン−リッチモチーフを含むという点で、ＣＤ２８のものと類似である。Ｔ細胞応答を阻害することにおけるＣＴＬＡ−４の１つの役割は、ＣＤ３およびＬＡＴなどのＴＣＲ近位シグナル伝達タンパク質のＳＨＰ−２およびＰＰ２Ａ脱リン酸化を介して、直接であるようである。ＣＴＬＡ−４はまた、ＣＤ８０／８６結合についてＣＤ２８と競合することを介して、間接的にもシグナル伝達に影響し得る。ＣＴＬＡ−４は、ＰＩ３Ｋ、ＣＤ８０、ＡＰ２Ｍ１およびＰＰＰ２Ｒ５Ａを結合し、ならびに／またはＰＩ３Ｋ、ＣＤ８０、ＡＰ２Ｍ１およびＰＰＰ２Ｒ５Ａと相互作用することもまた示されている。
【０３３５】
本開示の主題によれば、ＣＴＬＡ−４ポリペプチドは、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ参照番号：Ｐ１６４１０．３（配列番号９４６）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは約１００％相同な（本明細書の相同性は、ＢＬＡＳＴまたはＦＡＳＴＡなどの標準的なソフトウェアを使用して決定され得る）アミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。
配列番号９４６は、以下に提供される：
1      MACLGFQRHK  AQLNLATRTW  PCTLLFFLLF  IPVFCKAMHV  AQPAVVLASS  RGIASFVCEY
61    ASPGKATEVR  VTVLRQADSQ  VTEVCAATYM  MGNELTFLDD  SICTGTSSGN  QVNLTIQGLR
121  AMDTGLYICK  VELMYPPPYY  LGIGNGTQIY  VIDPEPCPDS  DFLLWILAAV  SSGLFFYSFL
181    LTAVSLSKML  KKRSPLTTGV  YVKMPPTEPE  CEKQFQPYFI  PIN［配列番号９４６］
【０３３６】
本開示の主題によれば、「ＣＴＬＡ−４核酸分子」とは、ＣＴＬＡ−４ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。
【０３３７】
ＰＤ−１は、内因性マクロファージおよび樹状細胞上に発現されるその対応するリガンドＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２との係合の際の、活性化Ｔ細胞の陰性免疫調節因子である。ＰＤ−１は、２６８アミノ酸のＩ型膜タンパク質である。ＰＤ−１は、Ｂ７ファミリーのメンバーである２種のリガンド、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２を有する。このタンパク質の構造は、膜貫通領域および細胞内テイルが後に続く細胞外ＩｇＶドメインを含む。この細胞内テイルは、ＰＤ−１がＴＣＲシグナルを負に調節する、免疫受容体チロシンベースの阻害モチーフおよび免疫受容体チロシンベースのスイッチモチーフ中に位置する２つのリン酸化部位を含む。ＳＨＰ−ＩおよびＳＨＰ−２ホスファターゼは、リガンド結合の際に、ＰＤ−１の細胞質テイルに結合する。ＰＤ−Ｌ１の上方調節は、腫瘍細胞が宿主免疫系を逃れ得る１つの機構である。前臨床試験および臨床試験において、アンタゴニスト性抗体によるＰＤ−１遮断は、宿主内因性免疫系を介して媒介される抗腫瘍応答を誘導した。
【０３３８】
本開示の主題によれば、ＰＤ−１ポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号：ＮＰ＿００５００９．２（配列番号９４７）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは約１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。
配列番号９４７は、以下に提供される：
1    MQIPQAPWPV  VWAVLQLGWR  PGWFLDSPDR  PWNPPTFSPA  LLVVTEGDNA  TFTCSFSNTS
61  ESFVLNWYRM  SPSNQTDKLA  AFPEDRSQPG  QDCRFRVTQL  PNGRDFHMSV  VRARRNDSGT
121  YLCGAISLAP  KAQIKESLRA  ELRVTERRAE  VPTAHPSPSP  RPAGQFQTLV  VGVVGGLLGS
181  LVLLVWVLAV  ICSRAARGTI  GARRTGQPLK  EDPSAVPVFS  VDYGELDFQW  REKTPEPPVP
241  CVPEQTEYAT  IVFPSGMGTS  SPARRGSADG  PRSAQPLRPE  DGHCSWPL［配列番号９４７］
【０３３９】
本開示の主題によれば、「ＰＤ−１核酸分子」とは、ＰＤ−１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。
【０３４０】
リンパ球活性化タンパク質３（ＬＡＧ−３）は、免疫細胞の負の免疫調節因子である。ＬＡＧ−３は、免疫グロブリン（ｌｇ）スーパーファミリーに属し、４つの細胞外Ｉｇ様ドメインを含む。ＬＡＧ３遺伝子は、８つのエクソンを含む。配列データ、エクソン／イントロン構成、および染色体局在は全て、ＣＤ４に対するＬＡＧ３の近い関連性を示している。ＬＡＧ３は、ＣＤ２２３（表面抗原分類２２３）とも命名されている。
【０３４１】
本開示の主題によれば、ＬＡＧ−３ポリペプチドは、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ参照番号：Ｐ１８６２７．５（配列番号９４８）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは約１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。
配列番号９４８は、以下に提供される：
1  MWEAQFLGLL  FLQPLWVAPV  KPLQPGAEVP  VVWAQEGAPA  QLPCSPTIPL  QDLSLLRRAG
61  VTWQHQPDSG  PPAAAPGHPL  APGPHPAAPS  SWGPRPRRYT  VLSVGPGGLR  SGRLPLQPRV
121  QLDERGRQRG  DFSLWLRPAR  RADAGEYRAA  VHLRDRALSC  RLRLRLGQAS  MTASPPGSLR
181  ASDWVILNCS  FSRPDRPASV  HWFRNRGQGR  VPVRESPHHH  LAESFLFLPQ  VSPMDSGPWG
241  CILTYRDGFN  VSIMYNLTVL  GLEPPTPLTV  YAGAGSRVGL  PCRLPAGVGT  RSFLTAKWTP
301  PGGGPDLLVT  GDNGDFTLRL  EDVSQAQAGT  YTCHIHLQEQ  QLNATVTLAI  ITVTPKSFGS
361  PGSLGKLLCE  VTPVSGQERF  VWSSLDTPSQ  RSFSGPWLEA  QEAQLLSQPW  QCQLYQGERL
421  LGAAVYFTEL  SSPGAQRSGR  APGALPAGHL  LLFLILGVLS  LLLLVTGAFG  FHLWRRQWRP
481  RRFSALEQGI  HPPQAQSKIE  ELEQEPEPEP  EPEPEPEPEP  EPEQL［配列番号９４８］
【０３４２】
本開示の主題によれば、「ＬＡＧ−３核酸分子」とは、ＬＡＧ−３ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。
【０３４３】
ナチュラルキラー細胞受容体２Ｂ４（２Ｂ４）は、ＮＫ細胞、およびＴ細胞のサブセット上で、非ＭＨＣ拘束細胞死滅を媒介する。これまでのところ、２Ｂ４の機能は、なおも調査中であり、２Ｂ４−Ｓアイソフォームは免疫細胞の活性化受容体であると考えられ、２Ｂ４−Ｌアイソフォームは、免疫細胞の負の免疫調節因子であると考えられる。２Ｂ４は、その高アフィニティーリガンドＣＤ４８を結合すると係合されるようになる。２Ｂ４は、タンパク質を種々のホスファターゼと関連させる分子スイッチ、チロシンベースのスイッチモチーフを含む。２Ｂ４は、ＣＤ２４４（表面抗原分類２４４）とも命名されている。
【０３４４】
本開示の主題によれば、２Ｂ４ポリペプチドは、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ参照番号：Ｑ９ＢＺＷ８．２（配列番号９４９）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは約１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。
配列番号９４９は、以下に提供される：
1  MLGQVVTLIL  LLLLKVYQGK  GCQGSADHVV  SISGVPLQLQ  PNSIQTKVDS  IAWKKLLPSQ
61  NGFHHILKWE  NGSLPSNTSN  DRFSFIVKNL  SLLIKAAQQQ  DSGLYCLEVT  SISGKVQTAT
121  FQVFVFESLL  PDKVEKPRLQ  GQGKILDRGR  CQVALSCLVS  RDGNVSYAWY  RGSKLIQTAG
181  NLTYLDEEVD  INGTHTYTCN  VSNPVSWESH  TLNLTQDCQN  AHQEFRFWPF  LVIIVILSAL
241  FLGTLACFCV  WRRKRKEKQS  ETSPKEFLTI  YEDVKDLKTR  RNHEQEQTFP  GGGSTIYSMI
301  QSQSSAPTSQ  EPAYTLYSLI  QPSRKSGSRK  RNHSPSFNST  IYEVIGKSQP  KAQNPARLSR
361  KELENFDVYS［配列番号９４９］
【０３４５】
本開示の主題によれば、「２Ｂ４核酸分子」は、２Ｂ４ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。
【０３４６】
ＢおよびＴリンパ球アテニュエーター（B-  and  T-lymphocyte  attenuator）（ＢＴＬＡ）発現は、Ｔ細胞の活性化の間に誘導され、ＢＴＬＡは、Ｔｈ１細胞上で発現されたままであるが、Ｔｈ２細胞上ではそうではない。ＰＤ１およびＣＴＬＡ４と同様、ＢＴＬＡは、Ｂ７ホモログＢ７Ｈ４と相互作用する。しかし、ＰＤ−１およびＣＴＬＡ−４とは異なり、ＢＴＬＡは、単にＢ７ファミリーの細胞表面受容体だけではなく、腫瘍壊死ファミリー受容体（ＴＮＦ−Ｒ）との相互作用を介してＴ細胞阻害を示す。ＢＴＬＡは、ヘルペスウイルスエントリーメディエーター（ＨＶＥＭ）としても公知の、腫瘍壊死因子（受容体）スーパーファミリー、メンバー１４（ＴＮＦＲＳＦ１４）に対するリガンドである。ＢＴＬＡ−ＨＶＥＭ複合体は、Ｔ細胞免疫応答を負に調節する。ＢＴＬＡ活性化は、ヒトＣＤ８＋がん特異的Ｔ細胞の機能を阻害することが示されている。ＢＴＬＡは、ＣＤ２７２（表面抗原分類２７２）とも命名されている。
【０３４７】
本開示の主題によれば、ＢＴＬＡポリペプチドは、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ参照番号：Ｑ７Ｚ６Ａ９．３（配列番号９５０）に対して少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％もしくは約１００％相同なアミノ酸配列またはそれらの断片を有し得、および／あるいは最大で１つまたは最大で２つまたは最大で３つの保存的アミノ酸置換を任意選択で含み得る。
配列番号９５０は、以下に提供される：
1  MKTLPAMLGT  GKLFWVFFLI  PYLDIWNIHG  KESCDVQLYI  KRQSEHSILA  GDPFELECPV
61  KYCANRPHVT  WCKLNGTTCV  KLEDRQTSWK  EEKNISFFIL  HFEPVLPNDN  GSYRCSANFQ
121  SNLIESHSTT  LYVTDVKSAS  ERPSKDEMAS  RPWLLYRLLP  LGGLPLLITT  CFCLFCCLRR
181  HQGKQNELSD  TAGREINLVD  AHLKSEQTEA  STRQNSQVLL  SETGIYDNDP  DLCFRMQEGS
241  EVYSNPCLEE  NKPGIVYASL  NHSVIGPNSR  LARNVKEAPT  EYASICVRS［配列番号９５０］
【０３４８】
本開示の主題によれば、「ＢＴＬＡ核酸分子」とは、ＢＴＬＡポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを指す。
【０３４９】
特定の実施形態では、ＣＡＲは、図９に示されるように、ヒトＦｃＲＬ５に特異的に結合する細胞外抗原結合領域、ＣＤ２８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン、およびＣＤ３ζポリペプチドとＣＤ２８ポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含む。図９に示されるように、このＣＡＲは、細胞外抗原結合ドメインの５’末端に共有結合によって接合されたシグナルペプチドまたはリーダーもまた含む。このシグナルペプチドは、ＣＤ８ポリペプチドを含む。
【０３５０】
特定の実施形態では、本開示の主題のＣＡＲは、ヒト細胞において核酸配列を発現させるために、誘導性プロモーターをさらに含み得る。ＣＡＲ遺伝子を発現させる際の使用のためのプロモーターは、構成的プロモーター、例えば、ユビキチンＣ（ＵｂｉＣ）プロモーターであり得る。
【０３５１】
本開示の主題はまた、本明細書に記載されるＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲまたはその機能性部分をコードする、単離された核酸分子もまた提供する。特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、ヒトＦｃＲＬ５に特異的に結合するｓｃＦｖ、ＣＤ２８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン、およびＣＤ３ξポリペプチドとＣＤ２８ポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含む本開示のＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲをコードする。特定の実施形態では、このｓｃＦｖは、完全にヒトのｓｃＦｖである。特定の実施形態では、このｓｃＦｖは、マウスｓｃＦｖである。特定の非限定的な実施形態では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５１に記載の配列を有する核酸を含む：
ATGGCTCTCCCAGTGACTGCCCTACTGCTTCCCCTAGCGCTTCTCCTGCATGCAGCTCGTGTGAAGCTGCAGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGGTCCCGGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTATCTTTGGATTGCACTGGGTTCGTCAGGCTCCAGAGAAGGGGCTGGAGTGGGTCGCATACATTAGTGGTGACAGTAATACCATCTACTATGCAGACACAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATCCCAAGAACACCCTGTTCCTGCAAATGACCAGTCTAAGGTCTGAGGACACGGCCATGTATTACTGTGCAAGAAATAGCTACTATGCTCTGGACTACTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGTGGATCAGGTGGAGGTGGATCTGGTGGAGGTGGATCTGACATTGAGCTCACCCAGTCTCCAGCAATCATGTCTGTATCTCCAGGTGAAAAGGTCACCATGACCTGCAGGGCCAGCTCAAGTGTCAGTTCCAGTTACTTGCACTGGTACCAGCAGAGGTCAGGTGCCTCCCCCAAAATCTGGATTTATAGCACATCCAACTTGGCTTCTGGAGTCCCTGCTCGCTTCAGTGGCAGTGGGACTGGGACCTCTTACTCTCTCACAATCAGCAGTGTGGAGGCTGAAGATGCTGCCACTTATTACTGCCAGCAGTACAGTGGTTACCCGTGGACGTTCGGTGGAGGGACCAAGCTGGAGATCGAACAAAAACTCATCTCAGAAGAGGATCTGGCGGCCGCAATTGAAGTTATGTATCCTCCTCCTTACCTAGACAATGAGAAGAGCAATGGAACCATTATCCATGTGAAAGGGAAACACCTTTGTCCAAGTCCCCTATTTCCCGGACCTTCTAAGCCCTTTTGGGTGCTGGTGGTGGTTGGTGGAGTCCTGGCTTGCTATAGCTTGCTAGTAACAGTGGCCTTTATTATTTTCTGGGTGAGGAGTAAGAGGAGCAGGCTCCTGCACAGTGACTACATGAACATGACTCCCCGCCGCCCCGGGCCCACCCGCAAGCATTACCAGCCCTATGCCCCACCACGCGACTTCGCAGCCTATCGCTCCAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAA［配列番号９５１］配列番号９５１のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号９１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番号９１７に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域および重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間に位置付けられた、配列番号８９７のアミノ酸配列を有するリンカーを含むマウスｓｃＦｖ、ＣＤ２８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン、およびＣＤ３ξポリペプチドとＣＤ２８ポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲをコードする。
【０３５２】
別の具体的な非限定的な例では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５２に記載の配列を有する核酸を含む：
ATGGAGACAGACACACTCCTGCTATGGGTACTGCTGCTCTGGGTTCCAGGTTCCACTGGTGACGTCCAACTGCAGGAGTCAGGGGGAGGCTTAGTGCAGCCTGGAGGGTCCCGGAAACTCTCCTGTACAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAGCTTTGGAATGCACTGGGTTCGTCAGGCTCCAGAGAAGGGGCTGGAGTGGGTCGCATACATTAGTAGTGGCAGTAATAACATCTACTTTGCGGACACAGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATCCCAAGAACACCCTGTTCCTGCAAATGACCAGTCTAAGGTCTGAGGACACGGCCATGTATTACTGTGCAAGATCGGAATACTACGGTAGTAGCCATATGGACTACTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAGGTGGAGGTGGATCAGGTGGAGGTGGATCTGGTGGAGGTGGATCTGACATTGAGCTCACCCAGTCTCCAAAATTCATGTCCACATCAGTAGGAGACAGGGTCAGCGTCACCTGCAAGGCCAGTCAGAATGTGGGTACTAATGTAGCCTGGTATCAACAGAAACCAGGACAATCTCCTAAACCACTGATTTACTCGGCAACCTACCGGAACAGTGGAGTCCCTGATCGCTTCACAGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCACTAACGTGCAGTCTAAAGACTTGGCAGACTATTTCTGTCAACAATATAACAGGTATCCGTACACGTCCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAGATCGAACAAAAACTCATCTCAGAAGAGGATCTGGCGGCCGCAATTGAAGTTATGTATCCTCCTCCTTACCTAGACAATGAGAAGAGCAATGGAACCATTATCCATGTGAAAGGGAAACACCTTTGTCCAAGTCCCCTATTTCCCGGACCTTCTAAGCCCTTTTGGGTGCTGGTGGTGGTTGGTGGAGTCCTGGCTTGCTATAGCTTGCTAGTAACAGTGGCCTTTATTATTTTCTGGGTGAGGAGTAAGAGGAGCAGGCTCCTGCACAGTGACTACATGAACATGACTCCCCGCCGCCCCGGGCCCACCCGCAAGCATTACCAGCCCTATGCCCCACCACGCGACTTCGCAGCCTATCGCTCCAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAA［配列番号９５２］。配列番号９５２のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号９１９に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番号９２１に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域および重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間に位置付けられた、配列番号８９７のアミノ酸配列を有するリンカーを含むマウスｓｃＦｖ、ＣＤ２８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン、およびＣＤ３ξポリペプチドとＣＤ２８ポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲをコードする。
【０３５３】
特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５３に記載の配列を有する核酸を含む：CCGGTGGTACCTCACCCTTACCGAGTCGGCGACACAGTGTGGGTCCGCCGACACCAGACTAAGAACCTAGAACCTCGCTGGAAAGGACCTTACACAGTCCTGCTGACCACCCCCACCGCCCTCAAAGTAGACGGCATCGCAGCTTGGATACACGCCGCCCACGTGAAGGCTGCCGACCCCGGGGGTGGACCATCCTCTAGACTGCCATGGAAACCGATACACTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCAGGATCCACAGGCTCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACAACATTGGAAGTAAAAGTGTGCACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTGTGCTGGTCATCTATTATGATAGCGACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACGGCCACCCTGACCATCAGCAGGGTCGAAGCCGGGGATGAGGCCGACTATTACTGTCAGGTGTGGGATAGTAGTAGTGATTATGTCTTCGGAACTGGGACCAAGGTCACCGTCCTAGGTTCTAGAGGTGGTGGTGGTAGCGGCGGCGGCGGCTCTGGTGGTGGTGGATCCCTCGAGATGGCCGAGGTGCAGCTGGTGGAGACTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCGTCAGTGACTACTACATGAGCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTTCATACATTAGTGGTAGTGGTAATAGCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCAAGAACTCACTGGATCTGCAAATGACCAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGCGCTCTACTAAATTCGATTACTGGGGTCAAGGTACTCTGGTGACCGTCTCCTCAGCGGCCGCACCCACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACCCCGGCGCCCACGATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCCTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAACAAACGGGGCAGAAAGAAGCTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGAGCCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAACAGCCACTCGAGGATCCGGATTAGTCCAATTTGTTAAAGACAGGATATCAGTGGTCCAGGCTCTAGTTTTGACTCAACAATATCACCAGCTGAAGCCTATAGAGTACGAGCCATAGATAAAATAAAAGATTTTATTTAGTCTCCAGAAAAAGGGGGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCACACATGCAGCATGTATCAAAATTAATTTGGTTTTTTTTCTTAAGTATTTACATTAAATGGCCATAGTACTTAAAGTTACATTGGCTTCCTTGAAATAAACATGGAGTATTCAGAATGTGTCATAAATATTTCTAATTTTAAGATAGTATCTCCATTGGCTTTCTACTTTTTCTTTTATTTTTTTTTGTCCTCTGTCTTCCATTTGTTGTTGTTGTTGTTTGTTTGTTTGTTTGTTGGTTGGTTGGTTAATTTTTTTTTAAAGATCCTACACTATAGTTCAAGCTAGACTATTAGCTACTCTGTAACCCAGGGTGACCTTGAAGTCATGGGTAGCCTGCTGTTTTAGCCTTCCCACATCTAAGATTACAGGTATGAGCTATCATTTTTGGTATATTGATTGATTGATTGATTGATGTGTGTGTGTGTGATTGTGTTTGTGTGTGTGACTGTGAAAATGTGTGTATGGGTGTGTGTGAATGTGTGTATGTATGTGTGTGTGTGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGCATGTGTGTGTGTGTGACTGTGTCTATGTGTATGACTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTTGTGAAAAAATATTCTATGGTAGTGAGAGCCAACGCTCCGGCTCAGGTGTCAGGTTGGTTTTTGAGACAGAGTCTTTCACTTAGCTTGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAACTTAATCGCCTTGCAGCACATCCCCCTTTCGCCAGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGATGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTAAAACTTCATTTTTAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCATTGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCATGATTACGCCAAGCTTTGCTCTTAGGAGTTTCCTAATACATCCCAAACTCAAATATATAAAGCATTTGACTTGTTCTATGCCCTAGGGGGCGGGGGGAAGCTAAGCCAGCTTTTTTTAACATTTAAAATGTTAATTCCATTTTAAATGCACAGATGTTTTTATTTCATAAGGGTTTCAATGTGCATGAATGCTGCAATATTCCTGTTACCAAAGCTAGTATAAATAAAAATAGATAAACGTGGAAATTACTTAGAGTTTCTGTCATTAACGTTTCCTTCCTCAGTTGACAACATAAATGCGCTGCTGAGCAAGCCAGTTTGCATCTGTCAGGATCAATTTCCCATTATGCCAGTCATATTAATTACTAGTCAATTAGTTGATTTTTATTTTTGACATATACATGTGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAAAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTATGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCATTTGGGGGCTCGTCCGGGATCGGGAGACCCCTGCCCAGGGACCACCGACCCACCACCGGGAGGTAAGCTGGCCAGCAACTTATCTGTGTCTGTCCGATTGTCTAGTGTCTATGACTGATTTTATGCGCCTGCGTCGGTACTAGTTAGCTAACTAGCTCTGTATCTGGCGGACCCGTGGTGGAACTGACGAGTTCGGAACACCCGGCCGCAACCCTGGGAGACGTCCCAGGGACTTCGGGGGCCGTTTTTGTGGCCCGACCTGAGTCCTAAAATCCCGATCGTTTAGGACTCTTTGGTGCACCCCCCTTAGAGGAGGGATATGTGGTTCTGGTAGGAGACGAGAACCTAAAACAGTTCCCGCCTCCGTCTGAATTTTTGCTTTCGGTTTGGGACCGAAGCCGCGCCGCGCGTCTTGTCTGCTGCAGCATCGTTCTGTGTTGTCTCTGTCTGACTGTGTTTCTGTATTTGTCTGAAAATATGGGCCCGGGCTAGACTGTTACCACTCCCTTAAGTTTGACCTTAGGTCACTGGAAAGATGTCGAGCGGATCGCTCACAACCAGTCGGTAGATGTCAAGAAGAGACGTTGGGTTACCTTCTGCTCTGCAGAATGGCCAACCTTTAACGTCGGATGGCCGCGAGACGGCACCTTTAACCGAGACCTCATCACCCAGGTTAAGATCAAGGTCTTTTCACCTGGCCCGCATGGACACCCAGACCAGGTCCCCTACATCGTGACCTGGGAAGCCTTGGCTTTTGACCCCCCTCCCTGGGTCAAGCCCTTTGTACACCCTAAGCCTCCGCCTCCTCTTCCTCCATCCGCCCCGTCTCTCCCCCTTGAACCTCCTCGTTCGACCCCGCCTCGATCCTCCCTTTATCCAGCCCTCACTCCTTCTCTAGGCGCCCCCATATGGCCATATGAGATCTTATATGGGGCACCCCCGCCCCTTGTAAACTTCCCTGACCCTGACATGACAAGAGTTACTAACAGCCCCTCTCTCCAAGCTCACTTACAGGCTCTCTACTTAGTCCAGCACGAAGTCTGGAGACCTCTGGCGGCAGCCTACCAAGAACAACTGGACCGA［配列番号９５３］。配列番号９５３のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号１１６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番号１１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域および重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間に位置付けられた、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するリンカーを含む完全にヒトのｓｃＦｖ（配列番号９５３のヌクレオチド２０７〜９９８によってコードされる）、配列番号９６０の１３７から２０７を有するＣＤ８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン、ならびに配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３を含むＣＤ３ξポリペプチドと配列番号９４３のアミノ酸２１４〜２５５を有する４−１ＢＢポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ（３１  ＦｃＲＬ５が標的とされるＢＢｚ  ＣＡＲと命名される）をコードする。配列番号９５３のヌクレオチド２７０〜９９８は、ヒトｓｃＦｖをコードする。配列番号９５３のヌクレオチド１００８〜１２２０は、膜貫通ドメイン中に含まれるＣＤ８ポリペプチドをコードする。配列番号９５３のヌクレオチド１２２１〜１３４６は、細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチドをコードする。配列番号９５３のヌクレオチド１３４７〜１６８５は、細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ゼータポリペプチドをコードする。配列番号９５３の他の部分は、表２３２中に示される。
【表２３２】
2018504094.tif 000004
【０３５４】
特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５４に記載の配列を有する核酸を含む：
CCGGTGGTACCTCACCCTTACCGAGTCGGCGACACAGTGTGGGTCCGCCGACACCAGACTAAGAACCTAGAACCTCGCTGGAAAGGACCTTACACAGTCCTGCTGACCACCCCCACCGCCCTCAAAGTAGACGGCATCGCAGCTTGGATACACGCCGCCCACGTGAAGGCTGCCGACCCCGGGGGTGGACCATCCTCTAGACTGCCATGGAAACCGATACACTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCAGGATCCACAGGCAATTTTATGCTGACTCAGCCCCACTCTGTGTCGGAGTCTCCGGGGAAGACGGTAACCATCTCCTGCACCCGCAGCAGTGGCAGCATTGCCAGCAACTATGTGCAGTGGTACCAGCAGCGCCCGGGCAGTTCCCCCACCACTGTGATCTATGAGGATAACCAAAGACCCTCTGGGGTCCCTGATCGGTTCTCTGGCTCCATCGACAGCTCCTCCAACTCTGCCTCCCTCACCATCTCTGGACTGAAGACTGAGGACGAGGCTGACTACTACTGTCAGTCTTATGATAGCAGCAATTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGTTCTAGAGGTGGTGGTGGTAGCGGCGGCGGCGGCTCTGGTGGTGGTGGATCCCTCGAGATGGCCGAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGCGCTCTAACTACTACTACAACGATTACTGGGGTCAAGGTACTCTGGTGACCGTCTCCTCAGCGGCCGCACCCACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACCCCGGCGCCCACGATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCCTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAACAAACGGGGCAGAAAGAAGCTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGAGCCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAACAGCCACTCGAGGATCCGGATTAGTCCAATTTGTTAAAGACAGGATATCAGTGGTCCAGGCTCTAGTTTTGACTCAACAATATCACCAGCTGAAGCCTATAGAGTACGAGCCATAGATAAAATAAAAGATTTTATTTAGTCTCCAGAAAAAGGGGGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCACACATGCAGCATGTATCAAAATTAATTTGGTTTTTTTTCTTAAGTATTTACATTAAATGGCCATAGTACTTAAAGTTACATTGGCTTCCTTGAAATAAACATGGAGTATTCAGAATGTGTCATAAATATTTCTAATTTTAAGATAGTATCTCCATTGGCTTTCTACTTTTTCTTTTATTTTTTTTTGTCCTCTGTCTTCCATTTGTTGTTGTTGTTGTTTGTTTGTTTGTTTGTTGGTTGGTTGGTTAATTTTTTTTTAAAGATCCTACACTATAGTTCAAGCTAGACTATTAGCTACTCTGTAACCCAGGGTGACCTTGAAGTCATGGGTAGCCTGCTGTTTTAGCCTTCCCACATCTAAGATTACAGGTATGAGCTATCATTTTTGGTATATTGATTGATTGATTGATTGATGTGTGTGTGTGTGATTGTGTTTGTGTGTGTGACTGTGAAAATGTGTGTATGGGTGTGTGTGAATGTGTGTATGTATGTGTGTGTGTGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGCATGTGTGTGTGTGTGACTGTGTCTATGTGTATGACTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTTGTGAAAAAATATTCTATGGTAGTGAGAGCCAACGCTCCGGCTCAGGTGTCAGGTTGGTTTTTGAGACAGAGTCTTTCACTTAGCTTGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAACTTAATCGCCTTGCAGCACATCCCCCTTTCGCCAGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGATGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTAAAACTTCATTTTTAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCATTGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCATGATTACGCCAAGCTTTGCTCTTAGGAGTTTCCTAATACATCCCAAACTCAAATATATAAAGCATTTGACTTGTTCTATGCCCTAGGGGGCGGGGGGAAGCTAAGCCAGCTTTTTTTAACATTTAAAATGTTAATTCCATTTTAAATGCACAGATGTTTTTATTTCATAAGGGTTTCAATGTGCATGAATGCTGCAATATTCCTGTTACCAAAGCTAGTATAAATAAAAATAGATAAACGTGGAAATTACTTAGAGTTTCTGTCATTAACGTTTCCTTCCTCAGTTGACAACATAAATGCGCTGCTGAGCAAGCCAGTTTGCATCTGTCAGGATCAATTTCCCATTATGCCAGTCATATTAATTACTAGTCAATTAGTTGATTTTTATTTTTGACATATACATGTGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAAAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTATGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCATTTGGGGGCTCGTCCGGGATCGGGAGACCCCTGCCCAGGGACCACCGACCCACCACCGGGAGGTAAGCTGGCCAGCAACTTATCTGTGTCTGTCCGATTGTCTAGTGTCTATGACTGATTTTATGCGCCTGCGTCGGTACTAGTTAGCTAACTAGCTCTGTATCTGGCGGACCCGTGGTGGAACTGACGAGTTCGGAACACCCGGCCGCAACCCTGGGAGACGTCCCAGGGACTTCGGGGGCCGTTTTTGTGGCCCGACCTGAGTCCTAAAATCCCGATCGTTTAGGACTCTTTGGTGCACCCCCCTTAGAGGAGGGATATGTGGTTCTGGTAGGAGACGAGAACCTAAAACAGTTCCCGCCTCCGTCTGAATTTTTGCTTTCGGTTTGGGACCGAAGCCGCGCCGCGCGTCTTGTCTGCTGCAGCATCGTTCTGTGTTGTCTCTGTCTGACTGTGTTTCTGTATTTGTCTGAAAATATGGGCCCGGGCTAGACTGTTACCACTCCCTTAAGTTTGACCTTAGGTCACTGGAAAGATGTCGAGCGGATCGCTCACAACCAGTCGGTAGATGTCAAGAAGAGACGTTGGGTTACCTTCTGCTCTGCAGAATGGCCAACCTTTAACGTCGGATGGCCGCGAGACGGCACCTTTAACCGAGACCTCATCACCCAGGTTAAGATCAAGGTCTTTTCACCTGGCCCGCATGGACACCCAGACCAGGTCCCCTACATCGTGACCTGGGAAGCCTTGGCTTTTGACCCCCCTCCCTGGGTCAAGCCCTTTGTACACCCTAAGCCTCCGCCTCCTCTTCCTCCATCCGCCCCGTCTCTCCCCCTTGAACCTCCTCGTTCGACCCCGCCTCGATCCTCCCTTTATCCAGCCCTCACTCCTTCTCTAGGCGCCCCCATATGGCCATATGAGATCTTATATGGGGCACCCCCGCCCCTTGTAAACTTCCCTGACCCTGACATGACAAGAGTTACTAACAGCCCCTCTCTCCAAGCTCACTTACAGGCTCTCTACTTAGTCCAGCACGAAGTCTGGAGACCTCTGGCGGCAGCCTACCAAGAACAACTGGACCGA  [配列番号954]配列番号９５４のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号１４４に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番１４３号に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域および  重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間に位置付けられた、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するリンカーを含む完全にヒトのｓｃＦｖ（配列番号９５３のヌクレオチド２０７〜９９８によってコードされる）、配列番号９６０の１３７から２０７を有するＣＤ８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン  ならびに配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３を含むＣＤ３ξポリペプチドと配列番号９４３のアミノ酸２１４〜２５５を有する４−１ＢＢポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含む完全にヒトのｓｃＦｖ（配列番号９５４のヌクレオチド２０７〜１０１３によってコードされる）を含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ（３９  ＦｃＲＬ５が標的とされるＢＢｚ  ＣＡＲと命名される）をコードする。配列番号９５４のヌクレオチド２０７〜１０１３は、ヒトｓｃＦｖをコードする。配列番号９５４のヌクレオチド１０２３〜１２３５は、膜貫通ドメイン中に含まれるＣＤ８ポリペプチドをコードする。配列番号９５４のヌクレオチド１２３６〜１３６１は、細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチドをコードする。配列番号９５４のヌクレオチド１３６２〜１７００は、細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ゼータポリペプチドをコードする。配列番号９５４の他の部分は、表２３３中に示される。
【表２３３】
2018504094.tif 000005
【０３５５】
特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５５に記載の配列を有する核酸を含む：  
CCGGTGGTACCTCACCCTTACCGAGTCGGCGACACAGTGTGGGTCCGCCGACACCAGACTAAGAACCTAGAACCTCGCTGGAAAGGACCTTACACAGTCCTGCTGACCACCCCCACCGCCCTCAAAGTAGACGGCATCGCAGCTTGGATACACGCCGCCCACGTGAAGGCTGCCGACCCCGGGGGTGGACCATCCTCTAGACTGCCATGGAAACCGACACCCTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCAGGATCCACAGGACAGTCTGTCGTGACGCAGCCACCCTCAGCGTCTGGGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAAGCAGCTCCAACATCGGAAGTAATTATGTATACTGGTACCAGCAGCTCCCAGGAACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAGTAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTGATTATTACTGTGCAGCATGGGATGACAGCCTGAGTGGTTATGTCTTCGGAACTGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGTTCTAGAGGTGGTGGTGGTAGCGGCGGCGGCGGCTCTGGTGGTGGTGGATCCCTCGAGATGGCCCAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAAGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGCGCCTGTACGAAGGTGGTTACCATGGTTGGGGTTCTTGGCTGTCTTCTGATTCTTGGGGTCAAGGTACTCTGGTGACCGTCTCCTCAGCGGCCGCACCCACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACCCCGGCGCCCACGATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCCTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAACAAACGGGGCAGAAAGAAGCTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGAGCCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAACAGCCACTCGAGGATCCGGATTAGTCCAATTTGTTAAAGACAGGATATCAGTGGTCCAGGCTCTAGTTTTGACTCAACAATATCACCAGCTGAAGCCTATAGAGTACGAGCCATAGATAAAATAAAAGATTTTATTTAGTCTCCAGAAAAAGGGGGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCACACATGCAGCATGTATCAAAATTAATTTGGTTTTTTTTCTTAAGTATTTACATTAAATGGCCATAGTACTTAAAGTTACATTGGCTTCCTTGAAATAAACATGGAGTATTCAGAATGTGTCATAAATATTTCTAATTTTAAGATAGTATCTCCATTGGCTTTCTACTTTTTCTTTTATTTTTTTTTGTCCTCTGTCTTCCATTTGTTGTTGTTGTTGTTTGTTTGTTTGTTTGTTGGTTGGTTGGTTAATTTTTTTTTAAAGATCCTACACTATAGTTCAAGCTAGACTATTAGCTACTCTGTAACCCAGGGTGACCTTGAAGTCATGGGTAGCCTGCTGTTTTAGCCTTCCCACATCTAAGATTACAGGTATGAGCTATCATTTTTGGTATATTGATTGATTGATTGATTGATGTGTGTGTGTGTGATTGTGTTTGTGTGTGTGACTGTGAAAATGTGTGTATGGGTGTGTGTGAATGTGTGTATGTATGTGTGTGTGTGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGCATGTGTGTGTGTGTGACTGTGTCTATGTGTATGACTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTTGTGAAAAAATATTCTATGGTAGTGAGAGCCAACGCTCCGGCTCAGGTGTCAGGTTGGTTTTTGAGACAGAGTCTTTCACTTAGCTTGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAACTTAATCGCCTTGCAGCACATCCCCCTTTCGCCAGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGATGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTAAAACTTCATTTTTAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCATTGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCATGATTACGCCAAGCTTTGCTCTTAGGAGTTTCCTAATACATCCCAAACTCAAATATATAAAGCATTTGACTTGTTCTATGCCCTAGGGGGCGGGGGGAAGCTAAGCCAGCTTTTTTTAACATTTAAAATGTTAATTCCATTTTAAATGCACAGATGTTTTTATTTCATAAGGGTTTCAATGTGCATGAATGCTGCAATATTCCTGTTACCAAAGCTAGTATAAATAAAAATAGATAAACGTGGAAATTACTTAGAGTTTCTGTCATTAACGTTTCCTTCCTCAGTTGACAACATAAATGCGCTGCTGAGCAAGCCAGTTTGCATCTGTCAGGATCAATTTCCCATTATGCCAGTCATATTAATTACTAGTCAATTAGTTGATTTTTATTTTTGACATATACATGTGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAAAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTATGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCATTTGGGGGCTCGTCCGGGATCGGGAGACCCCTGCCCAGGGACCACCGACCCACCACCGGGAGGTAAGCTGGCCAGCAACTTATCTGTGTCTGTCCGATTGTCTAGTGTCTATGACTGATTTTATGCGCCTGCGTCGGTACTAGTTAGCTAACTAGCTCTGTATCTGGCGGACCCGTGGTGGAACTGACGAGTTCGGAACACCCGGCCGCAACCCTGGGAGACGTCCCAGGGACTTCGGGGGCCGTTTTTGTGGCCCGACCTGAGTCCTAAAATCCCGATCGTTTAGGACTCTTTGGTGCACCCCCCTTAGAGGAGGGATATGTGGTTCTGGTAGGAGACGAGAACCTAAAACAGTTCCCGCCTCCGTCTGAATTTTTGCTTTCGGTTTGGGACCGAAGCCGCGCCGCGCGTCTTGTCTGCTGCAGCATCGTTCTGTGTTGTCTCTGTCTGACTGTGTTTCTGTATTTGTCTGAAAATATGGGCCCGGGCTAGACTGTTACCACTCCCTTAAGTTTGACCTTAGGTCACTGGAAAGATGTCGAGCGGATCGCTCACAACCAGTCGGTAGATGTCAAGAAGAGACGTTGGGTTACCTTCTGCTCTGCAGAATGGCCAACCTTTAACGTCGGATGGCCGCGAGACGGCACCTTTAACCGAGACCTCATCACCCAGGTTAAGATCAAGGTCTTTTCACCTGGCCCGCATGGACACCCAGACCAGGTCCCCTACATCGTGACCTGGGAAGCCTTGGCTTTTGACCCCCCTCCCTGGGTCAAGCCCTTTGTACACCCTAAGCCTCCGCCTCCTCTTCCTCCATCCGCCCCGTCTCTCCCCCTTGAACCTCCTCGTTCGACCCCGCCTCGATCCTCCCTTTATCCAGCCCTCACTCCTTCTCTAGGCGCCCCCATATGGCCATATGAGATCTTATATGGGGCACCCCCGCCCCTTGTAAACTTCCCTGACCCTGACATGACAAGAGTTACTAACAGCCCCTCTCTCCAAGCTCACTTACAGGCTCTCTACTTAGTCCAGCACGAAGTCTGGAGACCTCTGGCGGCAGCCTACCAAGAACAACTGGACCGA  [配列番号955]配列番号９５５のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号１７２に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番号１７１に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域ならびに重鎖可��領域と軽鎖可変領域との間に位置付けられた、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するリンカー、配列番号９６０の１３７から２０７を有するＣＤ８ポリペプチドを含む膜貫通ドメインならびに配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３を含むＣＤ３ξポリペプチドと配列番号９４３のアミノ酸２１４〜２５５を有する４−１ＢＢポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含む完全にヒトのｓｃＦｖ（配列番号９５５のヌクレオチド２０７〜１０３７によってコードされる）を含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ（６９  ＦｃＲＬ５が標的とされるＢＢｚ  ＣＡＲと命名される）をコードする。配列番号９５５のヌクレオチド２０７〜１０３７は、ヒトｓｃＦｖをコードする。配列番号９５５のヌクレオチド１０４７〜１２５９は、膜貫通ドメイン中に含まれるＣＤ８ポリペプチドをコードする。配列番号９５５のヌクレオチド１２６０〜１３８５は、細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチドをコードする。配列番号９５５のヌクレオチド１３８６〜１７２４は、細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ゼータポリペプチドをコードする。配列番号９５５の他の部分は、表２３４中に示される。
【表２３４】
2018504094.tif 000006
【０３５６】
特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５６に記載の配列を有する核酸を含む：  
CCGGTGGTACCTCACCCTTACCGAGTCGGCGACACAGTGTGGGTCCGCCGACACCAGACTAAGAACCTAGAACCTCGCTGGAAAGGACCTTACACAGTCCTGCTGACCACCCCCACCGCCCTCAAAGTAGACGGCATCGCAGCTTGGATACACGCCGCCCACGTGAAGGCTGCCGACCCCGGGGGTGGACCATCCTCTAGACTGCCATGGAAACCGACACCCTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCAGGATCCACAGGAAATTTTATGCTGACTCAGCCCCACTCTGTGTCGGAGTCTCCGGGGAAGACGGTAACCATCTCCTGCACCCGCAGCAGTGGCAGCATTGCCAGCAACTATGTGCAGTGGTACCAGCAGCGCCCGGGCAGTGCCCCCACCACTGTGATCTATGAGGATAACCAAAGACCCTCTGGGGTCCCTGATCGGTTCTCTGGCTCCATCGACAGCTCCTCCAACTCTGCCTCCCTCACCATCTCTGGACTGAAGACTGAGGACGAGGCTGACTACTACTGTCAGTCTTATGATAGCAGCAATGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTAGGTTCTAGAGGTGGTGGTGGTAGCGGCGGCGGCGGCTCTGGTGGTGGTGGATCCCTCGAGATGGCCGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTATGAAATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTAGTGGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTTTATTACTGTGCACGCTGGGACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAGCGGCCGCACCCACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACCCCGGCGCCCACGATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCCTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAACAAACGGGGCAGAAAGAAGCTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGAGCCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAACAGCCACTCGAGGATCCGGATTAGTCCAATTTGTTAAAGACAGGATATCAGTGGTCCAGGCTCTAGTTTTGACTCAACAATATCACCAGCTGAAGCCTATAGAGTACGAGCCATAGATAAAATAAAAGATTTTATTTAGTCTCCAGAAAAAGGGGGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCACACATGCAGCATGTATCAAAATTAATTTGGTTTTTTTTCTTAAGTATTTACATTAAATGGCCATAGTACTTAAAGTTACATTGGCTTCCTTGAAATAAACATGGAGTATTCAGAATGTGTCATAAATATTTCTAATTTTAAGATAGTATCTCCATTGGCTTTCTACTTTTTCTTTTATTTTTTTTTGTCCTCTGTCTTCCATTTGTTGTTGTTGTTGTTTGTTTGTTTGTTTGTTGGTTGGTTGGTTAATTTTTTTTTAAAGATCCTACACTATAGTTCAAGCTAGACTATTAGCTACTCTGTAACCCAGGGTGACCTTGAAGTCATGGGTAGCCTGCTGTTTTAGCCTTCCCACATCTAAGATTACAGGTATGAGCTATCATTTTTGGTATATTGATTGATTGATTGATTGATGTGTGTGTGTGTGATTGTGTTTGTGTGTGTGACTGTGAAAATGTGTGTATGGGTGTGTGTGAATGTGTGTATGTATGTGTGTGTGTGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGCATGTGTGTGTGTGTGACTGTGTCTATGTGTATGACTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTTGTGAAAAAATATTCTATGGTAGTGAGAGCCAACGCTCCGGCTCAGGTGTCAGGTTGGTTTTTGAGACAGAGTCTTTCACTTAGCTTGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAACTTAATCGCCTTGCAGCACATCCCCCTTTCGCCAGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGATGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTAAAACTTCATTTTTAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCATTGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCATGATTACGCCAAGCTTTGCTCTTAGGAGTTTCCTAATACATCCCAAACTCAAATATATAAAGCATTTGACTTGTTCTATGCCCTAGGGGGCGGGGGGAAGCTAAGCCAGCTTTTTTTAACATTTAAAATGTTAATTCCATTTTAAATGCACAGATGTTTTTATTTCATAAGGGTTTCAATGTGCATGAATGCTGCAATATTCCTGTTACCAAAGCTAGTATAAATAAAAATAGATAAACGTGGAAATTACTTAGAGTTTCTGTCATTAACGTTTCCTTCCTCAGTTGACAACATAAATGCGCTGCTGAGCAAGCCAGTTTGCATCTGTCAGGATCAATTTCCCATTATGCCAGTCATATTAATTACTAGTCAATTAGTTGATTTTTATTTTTGACATATACATGTGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAAAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTATGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCATTTGGGGGCTCGTCCGGGATCGGGAGACCCCTGCCCAGGGACCACCGACCCACCACCGGGAGGTAAGCTGGCCAGCAACTTATCTGTGTCTGTCCGATTGTCTAGTGTCTATGACTGATTTTATGCGCCTGCGTCGGTACTAGTTAGCTAACTAGCTCTGTATCTGGCGGACCCGTGGTGGAACTGACGAGTTCGGAACACCCGGCCGCAACCCTGGGAGACGTCCCAGGGACTTCGGGGGCCGTTTTTGTGGCCCGACCTGAGTCCTAAAATCCCGATCGTTTAGGACTCTTTGGTGCACCCCCCTTAGAGGAGGGATATGTGGTTCTGGTAGGAGACGAGAACCTAAAACAGTTCCCGCCTCCGTCTGAATTTTTGCTTTCGGTTTGGGACCGAAGCCGCGCCGCGCGTCTTGTCTGCTGCAGCATCGTTCTGTGTTGTCTCTGTCTGACTGTGTTTCTGTATTTGTCTGAAAATATGGGCCCGGGCTAGACTGTTACCACTCCCTTAAGTTTGACCTTAGGTCACTGGAAAGATGTCGAGCGGATCGCTCACAACCAGTCGGTAGATGTCAAGAAGAGACGTTGGGTTACCTTCTGCTCTGCAGAATGGCCAACCTTTAACGTCGGATGGCCGCGAGACGGCACCTTTAACCGAGACCTCATCACCCAGGTTAAGATCAAGGTCTTTTCACCTGGCCCGCATGGACACCCAGACCAGGTCCCCTACATCGTGACCTGGGAAGCCTTGGCTTTTGACCCCCCTCCCTGGGTCAAGCCCTTTGTACACCCTAAGCCTCCGCCTCCTCTTCCTCCATCCGCCCCGTCTCTCCCCCTTGAACCTCCTCGTTCGACCCCGCCTCGATCCTCCCTTTATCCAGCCCTCACTCCTTCTCTAGGCGCCCCCATATGGCCATATGAGATCTTATATGGGGCACCCCCGCCCCTTGTAAACTTCCCTGACCCTGACATGACAAGAGTTACTAACAGCCCCTCTCTCCAAGCTCACTTACAGGCTCTCTACTTAGTCCAGCACGAAGTCTGGAGACCTCTGGCGGCAGCCTACCAAGAACAACTGGACCGA  [配列番号956]配列番号９５６のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号２１６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番号２１５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域、ならびに重鎖可変領域と軽鎖可変��域との間に位置付けられた、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するリンカー、配列番号９６０の１３７から２０７を有するＣＤ８ポリペプチドを含む膜貫通ドメインならびに配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３を含むＣＤ３ξポリペプチドと配列番号９４３のアミノ酸２１４〜２５５を有する４−１ＢＢポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含む完全にヒトのｓｃＦｖ（ヌクレオチド２０７〜１０１０によってコードされる）を含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ（１０４  ＦｃＲＬ５が標的とされるＢＢｚ  ＣＡＲと命名される）をコードする。配列番号９５６のヌクレオチド２０７〜１０１０は、ヒトｓｃＦｖをコードする。配列番号９５６のヌクレオチド１０２０〜１２３２は、膜貫通ドメイン中に含まれるＣＤ８ポリペプチドをコードする。配列番号９５６のヌクレオチド１２３３〜１３５８は、細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチドをコードする。配列番号９５６のヌクレオチド１３５９〜１６９７は、細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ゼータポリペプチドをコードする。配列番号９５６の他の部分は、表２３５中に示される。
【表２３５】
2018504094.tif 000007
【０３５７】
特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５７に記載の配列を有する核酸を含む：  
CCGGTGGTACCTCACCCTTACCGAGTCGGCGACACAGTGTGGGTCCGCCGACACCAGACTAAGAACCTAGAACCTCGCTGGAAAGGACCTTACACAGTCCTGCTGACCACCCCCACCGCCCTCAAAGTAGACGGCATCGCAGCTTGGATACACGCCGCCCACGTGAAGGCTGCCGACCCCGGGGGTGGACCATCCTCTAGACTGCCATGGAAACCGATACACTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCAGGATCCACAGGCTCCTATGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCAGCATCACCTGCTCTGGAGATAGATTGACGAATAAATATGTTTCCTGGTATCAACAGAAGCCAGGCCAGTCCCCTGTGTTGGTCATCTATGAGGATGCCAAGCGGCCCTCAGGGATCCCTGCGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACAGCCACTCTGACCATCAGCGGGACCCAGGCTATGGATGAGTCTGAATATTACTGTCAGGCGTGGGACAGCAGTGTGGTGGTTTTTGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGTTCTAGAGGTGGTGGTGGTAGCGGCGGCGGCGGCTCTGGTGGTGGTGGATCCCTCGAGATGGCCGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTTACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGGCAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAATAGTGGTAGTATAGGCTATGCGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGATGAGGACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAAAGACCGAGGGGGGGGAGTTATCGTTAAGGATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCAGCGGCCGCACCCACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACCCCGGCGCCCACGATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCCTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAACAAACGGGGCAGAAAGAAGCTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGAGCCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAACAGCCACTCGAGGATCCGGATTAGTCCAATTTGTTAAAGACAGGATATCAGTGGTCCAGGCTCTAGTTTTGACTCAACAATATCACCAGCTGAAGCCTATAGAGTACGAGCCATAGATAAAATAAAAGATTTTATTTAGTCTCCAGAAAAAGGGGGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCACACATGCAGCATGTATCAAAATTAATTTGGTTTTTTTTCTTAAGTATTTACATTAAATGGCCATAGTACTTAAAGTTACATTGGCTTCCTTGAAATAAACATGGAGTATTCAGAATGTGTCATAAATATTTCTAATTTTAAGATAGTATCTCCATTGGCTTTCTACTTTTTCTTTTATTTTTTTTTGTCCTCTGTCTTCCATTTGTTGTTGTTGTTGTTTGTTTGTTTGTTTGTTGGTTGGTTGGTTAATTTTTTTTTAAAGATCCTACACTATAGTTCAAGCTAGACTATTAGCTACTCTGTAACCCAGGGTGACCTTGAAGTCATGGGTAGCCTGCTGTTTTAGCCTTCCCACATCTAAGATTACAGGTATGAGCTATCATTTTTGGTATATTGATTGATTGATTGATTGATGTGTGTGTGTGTGATTGTGTTTGTGTGTGTGACTGTGAAAATGTGTGTATGGGTGTGTGTGAATGTGTGTATGTATGTGTGTGTGTGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGCATGTGTGTGTGTGTGACTGTGTCTATGTGTATGACTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTTGTGAAAAAATATTCTATGGTAGTGAGAGCCAACGCTCCGGCTCAGGTGTCAGGTTGGTTTTTGAGACAGAGTCTTTCACTTAGCTTGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAACTTAATCGCCTTGCAGCACATCCCCCTTTCGCCAGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGATGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTAAAACTTCATTTTTAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCATTGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCATGATTACGCCAAGCTTTGCTCTTAGGAGTTTCCTAATACATCCCAAACTCAAATATATAAAGCATTTGACTTGTTCTATGCCCTAGGGGGCGGGGGGAAGCTAAGCCAGCTTTTTTTAACATTTAAAATGTTAATTCCATTTTAAATGCACAGATGTTTTTATTTCATAAGGGTTTCAATGTGCATGAATGCTGCAATATTCCTGTTACCAAAGCTAGTATAAATAAAAATAGATAAACGTGGAAATTACTTAGAGTTTCTGTCATTAACGTTTCCTTCCTCAGTTGACAACATAAATGCGCTGCTGAGCAAGCCAGTTTGCATCTGTCAGGATCAATTTCCCATTATGCCAGTCATATTAATTACTAGTCAATTAGTTGATTTTTATTTTTGACATATACATGTGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAAAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTATGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCATTTGGGGGCTCGTCCGGGATCGGGAGACCCCTGCCCAGGGACCACCGACCCACCACCGGGAGGTAAGCTGGCCAGCAACTTATCTGTGTCTGTCCGATTGTCTAGTGTCTATGACTGATTTTATGCGCCTGCGTCGGTACTAGTTAGCTAACTAGCTCTGTATCTGGCGGACCCGTGGTGGAACTGACGAGTTCGGAACACCCGGCCGCAACCCTGGGAGACGTCCCAGGGACTTCGGGGGCCGTTTTTGTGGCCCGACCTGAGTCCTAAAATCCCGATCGTTTAGGACTCTTTGGTGCACCCCCCTTAGAGGAGGGATATGTGGTTCTGGTAGGAGACGAGAACCTAAAACAGTTCCCGCCTCCGTCTGAATTTTTGCTTTCGGTTTGGGACCGAAGCCGCGCCGCGCGTCTTGTCTGCTGCAGCATCGTTCTGTGTTGTCTCTGTCTGACTGTGTTTCTGTATTTGTCTGAAAATATGGGCCCGGGCTAGACTGTTACCACTCCCTTAAGTTTGACCTTAGGTCACTGGAAAGATGTCGAGCGGATCGCTCACAACCAGTCGGTAGATGTCAAGAAGAGACGTTGGGTTACCTTCTGCTCTGCAGAATGGCCAACCTTTAACGTCGGATGGCCGCGAGACGGCACCTTTAACCGAGACCTCATCACCCAGGTTAAGATCAAGGTCTTTTCACCTGGCCCGCATGGACACCCAGACCAGGTCCCCTACATCGTGACCTGGGAAGCCTTGGCTTTTGACCCCCCTCCCTGGGTCAAGCCCTTTGTACACCCTAAGCCTCCGCCTCCTCTTCCTCCATCCGCCCCGTCTCTCCCCCTTGAACCTCCTCGTTCGACCCCGCCTCGATCCTCCCTTTATCCAGCCCTCACTCCTTCTCTAGGCGCCCCCATATGGCCATATGAGATCTTATATGGGGCACCCCCGCCCCTTGTAAACTTCCCTGACCCTGACATGACAAGAGTTACTAACAGCCCCTCTCTCCAAGCTCACTTACAGGCTCTCTACTTAGTCCAGCACGAAGTCTGGAGACCTCTGGCGGCAGCCTACCAAGAACAACTGGACCGA[配列番号957]配列番号９５７のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号２２０に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番号２１９に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域ならびに、重鎖可変領域と軽鎖���変領域との間に位置付けられた、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するリンカー、配列番号９６０の１３７から２０７を有するＣＤ８ポリペプチドを含む膜貫通ドメインならびに配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３を含むＣＤ３ξポリペプチドと配列番号９４３のアミノ酸２１４〜２５５を有する４−１ＢＢポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含む完全にヒトのｓｃＦｖ（ヌクレオチド２０７〜１０１９によってコードされる）を含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ（１０５  ＦｃＲＬ５が標的とされるＢＢｚ  ＣＡＲと命名される）をコードする。配列番号９５７のヌクレオチド２０７〜１０１９は、ヒトｓｃＦｖをコードする。配列番号９５７のヌクレオチド１０２９〜１２４１は、膜貫通ドメイン中に含まれるＣＤ８ポリペプチドをコードする。配列番号９５７のヌクレオチド１２４２〜１３６７は、細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチドをコードする。配列番号９５７のヌクレオチド１３６８〜１７０６は、細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ゼータポリペプチドをコードする。配列番号９５７の他の部分は、表２３６中に示される。
【表２３６】
2018504094.tif 000008
【０３５８】
特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５８に記載の配列を有する核酸を含む：
CCGGTGGTACCTCACCCTTACCGAGTCGGCGACACAGTGTGGGTCCGCCGACACCAGACTAAGAACCTAGAACCTCGCTGGAAAGGACCTTACACAGTCCTGCTGACCACCCCCACCGCCCTCAAAGTAGACGGCATCGCAGCTTGGATACACGCCGCCCACGTGAAGGCTGCCGACCCCGGGGGTGGACCATCCTCTAGACTGCCATGGAAACCGACACCCTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCAGGATCCACAGGACTGCCTGTGCTGACTCAGCCACCCTCAGCGTCTGCGACCCCCGGGCAGAGGGTCACCATCTCTTGTTCTGGAACCACCTCCAACATCGGAAGTAATACTGTACACTGGTACCAGCAGCTCCCAGGGACGGCCCCCAAACTCCTCATCTATAATAATAATCAGCGGCCCTCAGGGGTCCCTGACCGATTCTCTGGCTCCAAGTCTGGCACCTCAGCCTCCCTGGCCATCAGTGGGCTCCGGTCCGAGGATGAGGCTACATATTCCTGTGCAACATGGGATGACAGCCTGAGTGGTGTGGTCTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAGGTTCTAGAGGTGGTGGTGGTAGCGGCGGCGGCGGCTCTGGTGGTGGTGGATCCCTCGAGATGGCCGAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATCCCGCCTACGGTGACTACGAGTATGATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCAGCGGCCGCACCCACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACCCCGGCGCCCACGATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCCTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAACAAACGGGGCAGAAAGAAGCTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGAGCCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAACAGCCACTCGAGGATCCGGATTAGTCCAATTTGTTAAAGACAGGATATCAGTGGTCCAGGCTCTAGTTTTGACTCAACAATATCACCAGCTGAAGCCTATAGAGTACGAGCCATAGATAAAATAAAAGATTTTATTTAGTCTCCAGAAAAAGGGGGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCACACATGCAGCATGTATCAAAATTAATTTGGTTTTTTTTCTTAAGTATTTACATTAAATGGCCATAGTACTTAAAGTTACATTGGCTTCCTTGAAATAAACATGGAGTATTCAGAATGTGTCATAAATATTTCTAATTTTAAGATAGTATCTCCATTGGCTTTCTACTTTTTCTTTTATTTTTTTTTGTCCTCTGTCTTCCATTTGTTGTTGTTGTTGTTTGTTTGTTTGTTTGTTGGTTGGTTGGTTAATTTTTTTTTAAAGATCCTACACTATAGTTCAAGCTAGACTATTAGCTACTCTGTAACCCAGGGTGACCTTGAAGTCATGGGTAGCCTGCTGTTTTAGCCTTCCCACATCTAAGATTACAGGTATGAGCTATCATTTTTGGTATATTGATTGATTGATTGATTGATGTGTGTGTGTGTGATTGTGTTTGTGTGTGTGACTGTGAAAATGTGTGTATGGGTGTGTGTGAATGTGTGTATGTATGTGTGTGTGTGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGCATGTGTGTGTGTGTGACTGTGTCTATGTGTATGACTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTTGTGAAAAAATATTCTATGGTAGTGAGAGCCAACGCTCCGGCTCAGGTGTCAGGTTGGTTTTTGAGACAGAGTCTTTCACTTAGCTTGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAACTTAATCGCCTTGCAGCACATCCCCCTTTCGCCAGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGATGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTAAAACTTCATTTTTAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCATTGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCATGATTACGCCAAGCTTTGCTCTTAGGAGTTTCCTAATACATCCCAAACTCAAATATATAAAGCATTTGACTTGTTCTATGCCCTAGGGGGCGGGGGGAAGCTAAGCCAGCTTTTTTTAACATTTAAAATGTTAATTCCATTTTAAATGCACAGATGTTTTTATTTCATAAGGGTTTCAATGTGCATGAATGCTGCAATATTCCTGTTACCAAAGCTAGTATAAATAAAAATAGATAAACGTGGAAATTACTTAGAGTTTCTGTCATTAACGTTTCCTTCCTCAGTTGACAACATAAATGCGCTGCTGAGCAAGCCAGTTTGCATCTGTCAGGATCAATTTCCCATTATGCCAGTCATATTAATTACTAGTCAATTAGTTGATTTTTATTTTTGACATATACATGTGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAAAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTATGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCATTTGGGGGCTCGTCCGGGATCGGGAGACCCCTGCCCAGGGACCACCGACCCACCACCGGGAGGTAAGCTGGCCAGCAACTTATCTGTGTCTGTCCGATTGTCTAGTGTCTATGACTGATTTTATGCGCCTGCGTCGGTACTAGTTAGCTAACTAGCTCTGTATCTGGCGGACCCGTGGTGGAACTGACGAGTTCGGAACACCCGGCCGCAACCCTGGGAGACGTCCCAGGGACTTCGGGGGCCGTTTTTGTGGCCCGACCTGAGTCCTAAAATCCCGATCGTTTAGGACTCTTTGGTGCACCCCCCTTAGAGGAGGGATATGTGGTTCTGGTAGGAGACGAGAACCTAAAACAGTTCCCGCCTCCGTCTGAATTTTTGCTTTCGGTTTGGGACCGAAGCCGCGCCGCGCGTCTTGTCTGCTGCAGCATCGTTCTGTGTTGTCTCTGTCTGACTGTGTTTCTGTATTTGTCTGAAAATATGGGCCCGGGCTAGACTGTTACCACTCCCTTAAGTTTGACCTTAGGTCACTGGAAAGATGTCGAGCGGATCGCTCACAACCAGTCGGTAGATGTCAAGAAGAGACGTTGGGTTACCTTCTGCTCTGCAGAATGGCCAACCTTTAACGTCGGATGGCCGCGAGACGGCACCTTTAACCGAGACCTCATCACCCAGGTTAAGATCAAGGTCTTTTCACCTGGCCCGCATGGACACCCAGACCAGGTCCCCTACATCGTGACCTGGGAAGCCTTGGCTTTTGACCCCCCTCCCTGGGTCAAGCCCTTTGTACACCCTAAGCCTCCGCCTCCTCTTCCTCCATCCGCCCCGTCTCTCCCCCTTGAACCTCCTCGTTCGACCCCGCCTCGATCCTCCCTTTATCCAGCCCTCACTCCTTCTCTAGGCGCCCCCATATGGCCATATGAGATCTTATATGGGGCACCCCCGCCCCTTGTAAACTTCCCTGACCCTGACATGACAAGAGTTACTAACAGCCCCTCTCTCCAAGCTCACTTACAGGCTCTCTACTTAGTCCAGCACGAAGTCTGGAGACCTCTGGCGGCAGCCTACCAAGAACAACTGGACCGA  [配列番号958]配列番号９５８のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号２３６に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番号２３５に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域、ならびに重鎖可変��域と軽鎖可変領域との間に位置付けられた、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するリンカー、配列番号９６０の１３７から２０７を有するＣＤ８ポリペプチドを含む膜貫通ドメインならびに配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３を含むＣＤ３ξポリペプチドと配列番号９４３のアミノ酸２１４〜２５５を有する４−１ＢＢポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含む完全にヒトのｓｃＦｖ（ヌクレオチド２０７〜１０３１によってコードされる）を含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ（１０９  ＦｃＲＬ５が標的とされるＢＢｚ  ＣＡＲと命名される）をコードする。配列番号９５７のヌクレオチド２０７〜１０３１は、ヒトｓｃＦｖをコードする。配列番号９５８のヌクレオチド１０４１〜１２５３は、膜貫通ドメイン中に含まれるＣＤ８ポリペプチドをコードする。配列番号９５８のヌクレオチド１２５４〜１３７９は、細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチドをコードする。配列番号９５８のヌクレオチド１３８０〜１７１８は、細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ゼータポリペプチドをコードする。配列番号９５８の他の部分は、表２３７中に示される。
【表２３７】
2018504094.tif 000009
【０３５９】
特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、以下に提供される配列番号９５９に記載の配列を有する核酸を含む：  
CCGGTGGTACCTCACCCTTACCGAGTCGGCGACACAGTGTGGGTCCGCCGACACCAGACTAAGAACCTAGAACCTCGCTGGAAAGGACCTTACACAGTCCTGCTGACCACCCCCACCGCCCTCAAAGTAGACGGCATCGCAGCTTGGATACACGCCGCCCACGTGAAGGCTGCCGACCCCGGGGGTGGACCATCCTCTAGACTGCCATGGAAACCGATACACTGCTGCTGTGGGTGCTGCTGCTGTGGGTGCCAGGATCCACAGGCGATGTTGTGATGACTCAGTCTCCACCCTCCCTGTCCGTCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCCATCACCTGCAGGTCTAGTCAGAGCCTCCTGGAAAGAAATGCATACAACTACTTGGATTGGTACCTGCAGAGGCCAGGACAGTCTCCACAGCTCCTGATCTACTTGGGTTCTAATCGGGCCGCCGGGGTCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGCAGAGATTTTACACTGAAAATCAGCAGAGTGGAGCCTGAGGATGTTGGGGTTTATTACTGCATGCAAGCTCTACAAGCTCCGTTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAACGTTCTAGAGGTGGTGGTGGTAGCGGCGGCGGCGGCTCTGGTGGTGGTGGATCCCTCGAGATGGCCGAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAATGGGGCCCGTTTCAGGATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCAGCGGCCGCACCCACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACCCCGGCGCCCACGATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGATATCTACATCTGGGCGCCCCTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGCAACAAACGGGGCAGAAAGAAGCTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTGAGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGAGCCCCCCGCGTACCAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGCTAACAGCCACTCGAGGATCCGGATTAGTCCAATTTGTTAAAGACAGGATATCAGTGGTCCAGGCTCTAGTTTTGACTCAACAATATCACCAGCTGAAGCCTATAGAGTACGAGCCATAGATAAAATAAAAGATTTTATTTAGTCTCCAGAAAAAGGGGGGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCACACATGCAGCATGTATCAAAATTAATTTGGTTTTTTTTCTTAAGTATTTACATTAAATGGCCATAGTACTTAAAGTTACATTGGCTTCCTTGAAATAAACATGGAGTATTCAGAATGTGTCATAAATATTTCTAATTTTAAGATAGTATCTCCATTGGCTTTCTACTTTTTCTTTTATTTTTTTTTGTCCTCTGTCTTCCATTTGTTGTTGTTGTTGTTTGTTTGTTTGTTTGTTGGTTGGTTGGTTAATTTTTTTTTAAAGATCCTACACTATAGTTCAAGCTAGACTATTAGCTACTCTGTAACCCAGGGTGACCTTGAAGTCATGGGTAGCCTGCTGTTTTAGCCTTCCCACATCTAAGATTACAGGTATGAGCTATCATTTTTGGTATATTGATTGATTGATTGATTGATGTGTGTGTGTGTGATTGTGTTTGTGTGTGTGACTGTGAAAATGTGTGTATGGGTGTGTGTGAATGTGTGTATGTATGTGTGTGTGTGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGCATGTGTGTGTGTGTGACTGTGTCTATGTGTATGACTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTTGTGAAAAAATATTCTATGGTAGTGAGAGCCAACGCTCCGGCTCAGGTGTCAGGTTGGTTTTTGAGACAGAGTCTTTCACTTAGCTTGGAATTCACTGGCCGTCGTTTTACAACGTCGTGACTGGGAAAACCCTGGCGTTACCCAACTTAATCGCCTTGCAGCACATCCCCCTTTCGCCAGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTATTTCACACCGCATATGGTGCACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTTAAGCCAGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGACGCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGTGACCGTCTCCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGGTTTTCACCGTCATCACCGAAACGCGCGATGACGAAAGGGCCTCGTGATACGCCTATTTTTATAGGTTAATGTCATGATAATAATGGTTTCTTAGACGTCAGGTGGCACTTTTCGGGGAAATGTGCGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTAAAACTTCATTTTTAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACCAAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGATCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCATTGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAACGCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACATGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGAGTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGCGAGGAAGCGGAAGAGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCATGATTACGCCAAGCTTTGCTCTTAGGAGTTTCCTAATACATCCCAAACTCAAATATATAAAGCATTTGACTTGTTCTATGCCCTAGGGGGCGGGGGGAAGCTAAGCCAGCTTTTTTTAACATTTAAAATGTTAATTCCATTTTAAATGCACAGATGTTTTTATTTCATAAGGGTTTCAATGTGCATGAATGCTGCAATATTCCTGTTACCAAAGCTAGTATAAATAAAAATAGATAAACGTGGAAATTACTTAGAGTTTCTGTCATTAACGTTTCCTTCCTCAGTTGACAACATAAATGCGCTGCTGAGCAAGCCAGTTTGCATCTGTCAGGATCAATTTCCCATTATGCCAGTCATATTAATTACTAGTCAATTAGTTGATTTTTATTTTTGACATATACATGTGAATGAAAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGCATGGAAAAATACATAACTGAGAATAGAAAAGTTCAGATCAAGGTCAGGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGAACAGCTGAATATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCGGCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCAGCCCTCAGCAGTTTCTAGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAATGACCCTGTGCCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTATGCTCCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGGGCGCCAGTCCTCCGATTGACTGAGTCGCCCGGGTACCCGTGTATCCAATAAACCCTCTTGCAGTTGCATCCGACTTGTGGTCTCGCTGTTCCTTGGGAGGGTCTCCTCTGAGTGATTGACTACCCGTCAGCGGGGGTCTTTCATTTGGGGGCTCGTCCGGGATCGGGAGACCCCTGCCCAGGGACCACCGACCCACCACCGGGAGGTAAGCTGGCCAGCAACTTATCTGTGTCTGTCCGATTGTCTAGTGTCTATGACTGATTTTATGCGCCTGCGTCGGTACTAGTTAGCTAACTAGCTCTGTATCTGGCGGACCCGTGGTGGAACTGACGAGTTCGGAACACCCGGCCGCAACCCTGGGAGACGTCCCAGGGACTTCGGGGGCCGTTTTTGTGGCCCGACCTGAGTCCTAAAATCCCGATCGTTTAGGACTCTTTGGTGCACCCCCCTTAGAGGAGGGATATGTGGTTCTGGTAGGAGACGAGAACCTAAAACAGTTCCCGCCTCCGTCTGAATTTTTGCTTTCGGTTTGGGACCGAAGCCGCGCCGCGCGTCTTGTCTGCTGCAGCATCGTTCTGTGTTGTCTCTGTCTGACTGTGTTTCTGTATTTGTCTGAAAATATGGGCCCGGGCTAGACTGTTACCACTCCCTTAAGTTTGACCTTAGGTCACTGGAAAGATGTCGAGCGGATCGCTCACAACCAGTCGGTAGATGTCAAGAAGAGACGTTGGGTTACCTTCTGCTCTGCAGAATGGCCAACCTTTAACGTCGGATGGCCGCGAGACGGCACCTTTAACCGAGACCTCATCACCCAGGTTAAGATCAAGGTCTTTTCACCTGGCCCGCATGGACACCCAGACCAGGTCCCCTACATCGTGACCTGGGAAGCCTTGGCTTTTGACCCCCCTCCCTGGGTCAAGCCCTTTGTACACCCTAAGCCTCCGCCTCCTCTTCCTCCATCCGCCCCGTCTCTCCCCCTTGAACCTCCTCGTTCGACCCCGCCTCGATCCTCCCTTTATCCAGCCCTCACTCCTTCTCTAGGCGCCCCCATATGGCCATATGAGATCTTATATGGGGCACCCCCGCCCCTTGTAAACTTCCCTGACCCTGACATGACAAGAGTTACTAACAGCCCCTCTCTCCAAGCTCACTTACAGGCTCTCTACTTAGTCCAGCACGAAGTCTGGAGACCTCTGGCGGCAGCCTACCAAGAACAACTGGACCGA  [配列番号959]配列番号９５９のヌクレオチド配列を有する単離された核酸分子は、配列番号２６８に記載の配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域、配列番号２６７に記載の配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域、ならびに重鎖可変領域��軽鎖可変領域との間に位置付けられた、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するリンカー、配列番号９６０の１３７から２０７を有するＣＤ８ポリペプチドを含む膜貫通ドメインならびに配列番号９４１のアミノ酸５２から１６３を含むＣＤ３ξポリペプチドと配列番号９４３のアミノ酸２１４〜２５５を有する４−１ＢＢポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域とを含む細胞内ドメインを含む完全にヒトのｓｃＦｖ（配列番号９５９のヌクレオチド２０７〜１０２５によってコードされる）を含むＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ（１１７  ＦｃＲＬ５が標的とされるＢＢｚ  ＣＡＲと命名される）をコードする。配列番号９５９のヌクレオチド２０７〜１０２５は、ヒトｓｃＦｖをコードする。配列番号９５９のヌクレオチド１０３５〜１２４７は、膜貫通ドメイン中に含まれるＣＤ８ポリペプチドをコードする。配列番号９５９のヌクレオチド１２４８〜１３７３は、細胞内ドメイン中に含まれる４−１ＢＢポリペプチドをコードする。配列番号９５９のヌクレオチド１３７４〜１７１２は、細胞内ドメイン中に含まれるＣＤ３ゼータポリペプチドをコードする。配列番号９５９の他の部分は、表２３８中に示される。
【表２３８】
2018504094.tif 000010
【０３６０】
特定の実施形態では、この単離された核酸分子は、本開示のＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲの機能性部分をコードする。本明細書で使用する場合、用語「機能性部分」とは、本開示のＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲの任意の部分、一部または断片を指し、この部分、一部または断片は、ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ（親ＣＡＲ）の生物学的活性を保持する。例えば、機能性部分は、親ＣＡＲと類似、同じまたはさらにはより高い程度まで、標的細胞を認識する能力、疾患、例えば多発性骨髄腫を処置する能力を保持する、本開示のＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲの部分、一部または断片を包含する。特定の実施形態では、本開示のＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲの機能性部分をコードする単離された核酸分子は、親ＣＡＲ、例えば、配列番号９５１、配列番号９５２、配列番号９５３、配列番号９５４、配列番号９５５、配列番号９５６、配列番号９５７、配列番号９５８または配列番号９５９に記載の核酸配列の、例えば、約１０％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％および９５％、またはそれ超を含むタンパク質をコードし得る。
ＩＩＩ．免疫応答細胞
【０３６１】
本開示の主題は、細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを含むＣＡＲを発現する免疫応答細胞を提供し、上に記載のとおり細胞外抗原結合ドメインはＦｃＲＬ５（例えばヒトＦｃＲＬ５）に特異的に結合する。特定の実施形態では細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン７に特異的に結合する。特定の実施形態では細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン８に特異的に結合する。特定の実施形態では細胞外抗原結合ドメインは、ＦｃＲＬ５のドメイン９に特異的に結合する。免疫応答細胞は、細胞がＣＡＲを発現するように本開示のＣＡＲで形質導入され得る。本開示の主題は、腫瘍、例えば多発性骨髄腫（ＭＭ）の処置のためにそのような細胞を使用する方法も提供する。本開示の主題の免疫応答細胞は、リンパ系の細胞であってよい。Ｂ、Ｔおよびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含むリンパ系細胞は、抗体の産生存細胞性免疫系の制御、血液中の外来物質の検知、宿主に外来性である細胞の検知などを提供する。リンパ系の免疫応答細胞の非限定的例は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、制御性Ｔ細胞、胚性幹細胞および多能性幹細胞（例えば、それからリンパ球細胞が分化できるもの）を含む。Ｔ細胞は、胸腺において成熟し、細胞免疫に主に関与するリンパ球であり得る。Ｔ細胞は、適応免疫系に関与する。本開示の主題のＴ細胞は、これだけに限らないがヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、メモリーＴ細胞（セントラルメモリーＴ細胞、幹細胞様メモリーＴ細胞（または幹様メモリーＴ細胞）ならびに２種類のエフェクターメモリーＴ細胞：例えばＴＥＭ細胞およびＴＥＭＲＡ細胞を含む）、制御性Ｔ細胞（サプレッサーＴ細胞としても公知）、ナチュラルキラーＴ細胞、粘膜関連インバリアントＴ細胞ならびにγδＴ細胞を含む任意の種類のＴ細胞であってよい。特定の実施形態ではＣＡＲ発現Ｔ細胞は、Ｔ制御性表現型を達成および維持するためにＦｏｘｐ３を発現する。ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞は、細胞免疫の一部であり、自然免疫応答の際に作用するリンパ球である。ＮＫ細胞は、標的細胞にそれらの細胞傷害性効果を発揮するために先行する活性化を必要としない。細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬまたはキラーＴ細胞）は、感染した体細胞または腫瘍細胞の死を誘導できるＴリンパ球のサブセットである。
【０３６２】
本開示の主題の免疫応答細胞は、多発性骨髄腫の処置のための、ＦｃＲＬ５（例えばヒトＦｃＲＬ５）に特異的に結合する細胞外抗原結合ドメイン（例えばｓｃＦＶ、任意選択で架橋されたＦａｂ、またはＦ（ａｂ）２）を発現できる。そのような免疫応答細胞は、多発性骨髄腫の処置のためにそれを必要とする対象（例えばヒト対象）に投与されてよい。特定の実施形態では免疫応答細胞はＴ細胞である。Ｔ細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋Ｔ細胞であってよい。特定の実施形態ではＴ細胞はＣＤ４＋Ｔ細胞である。別の実施形態ではＴ細胞はＣＤ８＋Ｔ細胞である。
【０３６３】
本開示の免疫応答細胞は、免疫応答細胞がＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲおよび少なくとも１つの共刺激性リガンドを共発現するまたは共発現するために誘導されるように少なくとも１つの共刺激性リガンドでさらに形質導入されてよい。ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲと少なくとも１つの共刺激性リガンドとの間の相互作用は、免疫応答細胞（例えばＴ細胞）の完全な活性化のために重要な非抗原特異的シグナルを提供する。共刺激性リガンドは、これだけに限らないが、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーのメンバー、および免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーリガンドを含む。ＴＮＦは、全身性の炎症に関与するサイトカインであり、急性期反応を刺激する。その主な役割は、免疫細胞の制御である。ＴＮＦスーパーファミリーのメンバーは、多数の共通の特性を共有している。ＴＮＦスーパーファミリーメンバーの大部分は、短い細胞質セグメントおよび比較的長い細胞外領域を含有するＩＩ型膜貫通タンパク質（細胞外Ｃ末端）として合成される。ＴＮＦスーパーファミリーメンバーは、非限定的に神経増殖因子（ＮＧＦ）、ＣＤ４０Ｌ（ＣＤ４０Ｌ）／ＣＤ１５４、ＣＤ１３７Ｌ／４−１ＢＢＬ、ＴＮＦ−α、ＣＤ１３４Ｌ／ＯＸ４０Ｌ／ＣＤ２５２、ＣＤ２７Ｌ／ＣＤ７０、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＣＤ３０Ｌ／ＣＤ１５３、腫瘍壊死因子ベータ（ＴＮＦβ）／リンホトキシンアルファ（ＬＴα）、リンホトキシンベータ（ＬＴβ）、ＣＤ２５７／Ｂ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ）／Ｂｌｙｓ／ＴＨＡＮＫ／Ｔａｌｌ−１、グルココルチコイド誘導ＴＮＦ受容体リガンド（ＧＩＴＲＬ）およびＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）、ＬＩＧＨＴ（ＴＮＦＳＦ１４）を含む。免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーは、細胞の認識、結合または接着工程に関与する細胞表面および可溶性タンパク質の大きな群である。これらのタンパク質は、免疫グロブリンと構造的特性を共有している−それらは免疫グロブリンドメイン（フォールド）を保有している。免疫グロブリンスーパーファミリーリガンドは、これだけに限らないがＣＤ８０およびＣＤ８６、両者はＣＤ２８に対するリガンド、ＰＤ−１に対するリガンドＰＤ−Ｌ１／（Ｂ７−Ｈ１）を含む。特定の実施形態では少なくとも１つの共刺激性リガンドは、４−１ＢＢＬ、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ７０、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ４８、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＰＤ−Ｌ１およびこれらの組合せからなる群から選択される。特定の実施形態では免疫応答細胞は、４−１ＢＢＬである１つの共刺激性リガンドで形質導入される。特定の実施形態では免疫応答細胞は、４−１ＢＢＬおよびＣＤ８０である２個の共刺激性リガンドで形質導入される。少なくとも１つの共刺激性リガンドで形質導入されたＣＡＲは、その全体が参照により組み込まれる米国特許第８，３８９，２８２号に記載されている。
【０３６４】
さらに本開示の免疫応答細胞は、免疫応答細胞が少なくとも１つのサイトカインを分泌し、かつＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを発現するように少なくとも１つのサイトカインでさらに形質導入されてよい。特定の実施形態では少なくとも１つのサイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７およびＩＬ−２１からなる群から選択される。特定の実施形態ではサイトカインはＩＬ−１２である。
【０３６５】
ＦｃＲＬ５特異的またはＦｃＲＬ５標的化ＦｃＲＬ５が標的とされるヒトリンパ球は、末梢ドナーリンパ球、例えばSadelain、Mら、２００３年  Nat  Rev  Cancer  ３巻:３５〜４５頁（ＣＡＲを発現するように遺伝的に改変された末梢ドナーリンパ球を開示している）において、Morgan、RAら、２００６年Science  ３１４巻：１２６〜１２９頁（αおよびβヘテロ二量体を含む全長腫瘍抗原認識Ｔ細胞受容体複合体を発現するように遺伝的に改変された末梢ドナーリンパ球を開示している）において、Panelli、MCら、２０００年  J  Immunol  １６４巻:４９５〜５０４頁、Panelli、MCら、２０００年  J  Immunol  １６４巻:４３８２〜４３９２頁（腫瘍生検での腫瘍濾過リンパ球（ＴＩＬ）由来リンパ球培養物を開示している）において、およびDupont、Jら、２００５年  Cancer  Res  ６５巻:５４１７〜５４２７頁、Papanicolaou、GAら、２００３年  Blood  １０２巻:２４９８〜２５０５頁（人工抗原提示細胞（ＡＡＰＣ）またはパルス樹状を用いて選択的にｉｎ  ｖｉｔｒｏで増やされた抗原特異的末梢血白血球を開示している）において開示されるものにおいて使用され得る。免疫応答細胞（例えばＴ細胞）は自己、非自己（例えば同種）であってよく、または操作された前駆もしくは幹細胞からｉｎ  ｖｉｔｒｏで誘導されてよい。
【０３６６】
特定の実施形態では本開示の免疫応答細胞（例えばＴ細胞）は、本開示のＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲの細胞あたり、約１個から約４個、約２個から約４個、約３個から約４個、約１個から約２個、約１個から約３個または約２個から約３個のコピー数のベクターを発現する。
【０３６７】
ＣＴＬの未精製供給源は、骨髄、胎仔、新生仔もしくは成体または他の造血性細胞供給源、例えば胎仔肝臓、末梢血もしくは臍帯血などの任意の当技術分野において公知のものであってよい。種々の技術が細胞を分離するために用いられてよい。例えば、陰性選択法は、非ＣＴＬを最初に除去できる。モノクローナル抗体は、ポジティブおよびネガティブ選択の両方のために、具体的な細胞系列および／または分化の段階に関連するマーカーを識別するために特に有用である。
【０３６８】
高分化型細胞の大きな集団は、比較的粗い分離によって最初に除去され得る。例えば磁気ビーズ分離は、多数の無関係な細胞を除去するために最初に使用され得る。好ましくは全造血性細胞の少なくとも約８０％、通常少なくとも７０％が細胞単離に先だって除去される。
【０３６９】
分離のための手順は、これだけに限らないが密度傾斜遠心分離、再設定、細胞密度を変更する粒子へのカップリング、抗体コート磁気ビーズでの磁気分離、アフィニティークロマトグラフィー、ｍＡｂに結合されてまたは合わせて使用されるこれだけに限らないが補体および細胞毒を含む細胞傷害剤、ならびに固体マトリクス例えばプレート、チップ、に結合された抗体でのパニング、水簸または任意の他の好都合な技術を含む。
【０３７０】
分離および分析のための技術は、これだけに限らないが、さまざまな程度の精巧さ、例えば、複数の色チャネル、小角および鈍角光散乱検出チャネル、インピーダンスチャネルを有し得るフローサイトメトリーを含む。
【０３７１】
細胞は、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）などの死細胞に関連する色素を用いることによって死細胞に対して選択され得る。好ましくは細胞は、２％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）もしくは０．２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含む培地または任意の他の好適な、好ましくは滅菌、等張培地に回収される。
ＩＶ．ベクター
【０３７２】
免疫応答細胞（例えばＴ細胞、ＣＴＬ細胞、ＮＫ細胞）の遺伝的改変は、実質的に均一な細胞組成物に組換えＤＮＡまたはＲＮＡ構築物を形質導入することによって達成され得る。ベクターは、ＤＮＡまたはＲＮＡ構築物の宿主細胞ゲノムへの導入のために用いられるレトロウイルスベクター（例えば、ガンマレトロウイルス）であってよい。例えばＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲをコードするポリヌクレオチドは、レトロウイルスベクターにクローニングされてよく、発現はその内在性プロモーターから、レトロウイルス末端反復配列からまたは代替的内部プロモーターから駆動されてよい。
【０３７３】
非ウイルス性ベクターまたはＲＮＡも同様に使用され得る。無作為の染色体への組み込みもしくは標的化組み込み（例えばヌクレアーゼ、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）および／もしくはクラスター化して規則的な配置の短い回文配列リピート（ＣＲＩＳＰＲ）を使用する、または導入遺伝子発現（例えば天然または化学的に修飾されたＲＮＡを使用する）は使用され得る。
【０３７４】
ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲ発現細胞を提供するための細胞の最初の遺伝的改変のために、レトロウイルスベクターは、形質導入のために一般に用いられるが、しかし任意の他の好適なウイルス性ベクターまたは非ウイルス送達系は使用され得る。少なくとも２個の共刺激性リガンドを含む抗原提示複合体を含む細胞を提供するための細胞の続く遺伝的改変のために、レトロウイルス遺伝子移行（形質導入）は同様に有効であると証明される。レトロウイルスベクターと好適なパッケージング系の組合せも好適であり、カプシドタンパク質はヒト細胞を感染させるために機能性である。種々の両種指向性ウイルス産生存細胞株は公知であり、これだけに限らないがＰＡ１２（Millerら、（１９８５年）  Mol  Cell  Biol  ５巻:４３１〜４３７頁）、ＰＡ３１７（Millerら、（１９８６年）  Mol  Cell  Biol  ６巻:２８９５〜２９０２頁）およびＣＲＩＰ（Danosら、（１９８８年）  Proc  Natl  Acad  Sci  USA  ８５巻:６４６０〜６４６４頁）を含む。非両種指向性粒子、例えばＶＳＶＧ、ＲＤ１１４またはＧＡＬＶエンベロープおよび当技術分野において公知の任意の他のものでシュードタイプ化した粒子も好適である。
【０３７５】
形質導入の可能な方法は、例えばBregniら、（１９９２年）  Blood  ８０巻:１４１８〜１４２２頁の方法による産生存細胞との細胞の直接同時培養または、例えばXuら、（１９９４年）  Exp  Hemat  ２２巻:２２３〜２３０頁およびHughesら、（１９９２年）  J  Clin  Invest  ８９巻:１８１７頁の方法による好適な増殖因子およびポリカチオンを含むまたは含まないウイルス性上清単独もしくは濃縮ベクター保存物との培養も含む。
【０３７６】
形質導入ウイルス性ベクターは、免疫応答細胞において共刺激性リガンド（例えば４−１ＢＢＬおよびＩＬ−１２）を発現するために使用されてよい。好ましくは選択されたベクターは、高効率の感染ならびに安定な組み込みおよび発現を示す（例えばCayouetteら、Human  Gene  Therapy  ８巻:４２３〜４３０頁、１９９７年、Kidoら、Current  Eye  Research  １５巻:８３３〜８４４頁、１９９６年、Bloomerら、Journal  of  Virology  ７１巻:６６４１〜６６４９頁、１９９７年、Naldiniら、Science  ２７２巻:２６３号  ２６７頁、１９９６年およびMiyoshiら、Proc  Natl  Acad  Sci  USA  ９４巻:１０３１９頁、１９９７年を参照されたい）。使用され得る他のウイルス性ベクターは、例えばアデノウイルス、レンチウイルスおよびアデノ随伴ウイルス性ベクター、ワクチニアウイルス、ウシパピローマウイルスまたは、エプスタイン・バーウイルスなどのヘルペスウイルスを含む（例えば、Miller、Human  Gene  Therapy  １５〜１４頁、１９９０年;Friedman、Science  ２４４号:１２７５〜１２８１頁、１９８９年、Eglitisら、BioTechniques  ６号:６０８〜６１４頁、１９８８年、Tolstoshevら、Current  Opinion  in  Biotechnology  １巻:５５〜６１頁、１９９０年、Sharp、The  Lancet  ３３７巻:１２７７〜１２７８頁、１９９１年、Cornettaら、Nucleic  Acid  Research  and  Molecular  Biology  ３６巻:３１１〜３２２頁、１９８７年、Anderson、Science  ２２６巻:４０１〜４０９頁、１９８４年、Moen、Blood  Cells  １７巻:４０７〜４１６頁、１９９１年、Millerら、Biotechnology  ７巻:９８０〜９９０頁、１９８９年、Le  Gal  La  Salleら、Science  ２５９巻:９８８〜９９０頁、１９９３年およびJohnson、Chest  １０７巻:７７Ｓ−８３Ｓ、１９９５年、のベクターも参照されたい）。レトロウイルスベクターは、特に十分開発されており、臨床背景で使用されている（Rosenbergら、N  Engl  J  Med  ３２３巻:３７０頁、１９９０年;Andersonら、米国特許第５，３９９，３４６号）。
【０３７７】
特定の非限定的実施形態では本開示のＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲを発現するベクターは、レトロウイルスベクター、例えば２９３ｇａｌｖ９レトロウイルスベクターである。
【０３７８】
非ウイルス性手法も細胞におけるタンパク質の発現のために用いられ得る。例えば核酸分子は、リポフェクションの存在下で核酸を投与することによって（Feignerら、Proc  Nat'l  Acad  Sci  USA８４巻:７４１３頁、１９８７年、Onoら、Neuroscience  Letters  １７巻:２５９頁、１９９０年、Brighamら、Am  J  Med  Sci  ２９８巻:２７８頁、１９８９年、Staubingerら、Methods  in  Enzymology  １０１巻:５１２頁、１９８３年）、アシアロオロソムコイドポリリシンコンジュゲーション（Wuら、Journal  of  Biological  Chemistry  ２６３巻:１４６２１頁、１９８８年、Wuら、Journal  of  Biological  Chemistry  ２６４巻:１６９８５頁、１９８９年）、または外科的条件下でのマイクロインジェクション（Wolffら、Science  ２４７巻：１４６５頁、１９９０年）細胞に導入され得る。遺伝子移行のための他の非ウイルス性手段は、リン酸カルシウム、ＤＥＡＥデキストラン、電気穿孔法およびプロトプラスト融合を使用するｉｎ  ｖｉｔｒｏトランスフェクションを含む。リポソームも細胞へのＤＮＡの送達のために潜在的に有益である可能性がある。対象の罹患組織への正常遺伝子の移植は、ｅｘ  ｖｉｖｏ培養可能細胞型（例えば自己または異種性初代細胞またはその後代）に正常核酸を移行することによっても達成されてよく、その後細胞（またはその子孫）は標的化組織に注射される、または全身性に注射される。組換え受容体もトランスポサーゼまたは標的化ヌクレアーゼ（例えばＺｎフィンガーヌクレアーゼ、メガヌクレアーゼまたはＴＡＬＥヌクレアーゼ）を使用して誘導、または得られてよい。一過的発現は、ＲＮＡ電気穿孔法によって得ることができる。
【０３７９】
ポリヌクレオチド治療法における使用のためのｃＤＮＡ発現は、任意の好適なプロモーター（例えばヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）またはメタロチオネインプロモーター）から方向付けられてよく、任意の好適な哺乳動物制御エレメントまたはイントロン（例えば伸長因子１αエンハンサー／プロモーター／イントロン構造）によって制御されてよい。例えば所望により、特定の細胞型において遺伝子発現を優先的に方向付けることが公知であるエンハンサーは、核酸の発現を方向付けるために使用されてよい。使用されるエンハンサーは、非限定的に、組織または細胞特異的エンハンサーとして特徴付けられるものを含んでよい。代替的にゲノムクローンが治療構築物として使用される場合、制御は、同族制御配列によって、または所望により上に記載の任意のプロモーターまたは制御エレメントを含む異種性供給源由来の制御配列によって媒介され得る。
【０３８０】
得られた細胞は、未改変細胞についてのものと同様の条件下で増殖されてよく、それにより改変細胞は増やされ、種々の目的のために使用され得る。
Ｖ．ポリペプチドおよび類似体およびポリヌクレオチド
【０３８１】
本開示の主題に同様に含まれるのは、ＦｃＲＬ５（例えばヒトＦｃＲＬ５）（例えば、抗体Ｆ５６およびＦ１１９、Ｆａｂまたは（Ｆａｂ）２由来のｓｃＦｖなどのｓｃＦｖ）、ＣＤ３ζ、ＣＤ８、ＣＤ２８など、免疫応答細胞において発現された場合にそれらの抗腫瘍活性を増強する方法で改変されているポリペプチドまたはその断片、およびそれをコードするポリヌクレオチドに特異的に結合する細胞外抗原結合ドメインである。特定の実施形態では本開示の主題は、ドメイン９ＦｃＲＬ５（例えばヒトＦｃＲＬ５のドメイン７、ドメイン８またはドメイン９）（例えばｓｃＦｖ、Ｆａｂもしくは（Ｆａｂ）２）、ＣＤ３ζ、ＣＤ８、ＣＤ２８など、免疫応答細胞において発現された場合にそれらの抗腫瘍活性を増強する方法で改変されているポリペプチドまたはその断片、およびそれをコードするポリヌクレオチドに特異的に結合する細胞外抗原結合ドメインをさらに提供する。
【０３８２】
本開示の主題は、配列中に変更を生成することによってアミノ酸配列または核酸配列を最適化するための方法を提供する。そのような変更は、特定の変異、欠失、挿入または翻訳後修飾を含んでよい。本開示の主題は、本開示の主題の任意の天然に存在するポリペプチドの類似体をさらに含む。類似体は、アミノ酸配列差異によって、翻訳後修飾によってまたは両方によって本開示の主題の天然に存在するポリペプチドから異なっていてよい。本開示の主題の類似体は、本開示の主題の天然に存在するアミノ酸配列の全体または一部に少なくとも約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％またはそれ超の同一性を一般に示し得る。配列比較の長さは、少なくとも５個、１０個、１５個、２０個、２５個、５０個、７５個、１００個またはそれ超のアミノ酸残基である。再度、同一性の程度を決定する例示的アプローチにおいて、ＢＬＡＳＴプログラムは、ｅ−３からｅ−１００の間の確率スコアが密接に関連した配列を示すとして使用され得る。改変は、ｉｎ  ｖｉｖｏおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏでのポリペプチドの化学的誘導体化、例えば、アセチル化、カルボキシル化、リン酸化またはグリコシル化を含み；そのような改変は、ポリペプチド合成もしくはプロセシング中、または単離された改変酵素での処置後に生じ得る。類似体は、本開示の主題の天然に存在するポリペプチドから一次配列における変更によって異なっていてもよい。これらは、天然および誘導の両方の遺伝的変種を含む（例えば、Sambrook、FritschおよびManiatis、Molecular  Cloning:  A  Laboratory  Manual  （第２版）、CSH  Press、１９８９年またはAusubelら、上記、に記載のとおり照射もしくはエタンメチルサルフェートへの曝露による無作為変異誘発からまたは部位特異的変異誘発によって生じる）。同様に含まれるのは、Ｌ−アミノ酸（amina  acids）以外の残基、例えばＤ−アミノ酸または天然に存在しないもしくは合成アミノ酸、例えばベータ（β）もしくはガンマ（γ）アミノ酸を含有する環化ペプチド、分子および類似体である。
【０３８３】
全長ポリペプチドに加えて、本開示の主題は、本開示の主題の任意の１つのポリペプチドまたはペプチドドメインの断片も提供する。断片は、少なくとも５、１０、１３または１５アミノ酸であってよい。特定の実施形態では断片は、少なくとも２０近接アミノ酸、少なくとも３０近接アミノ酸または少なくとも５０近接アミノ酸である。特定の実施形態では断片は、少なくとも６０から８０、１００、２００、３００またはそれ超の近接アミノ酸である。本開示の主題の断片は、当業者に公知の方法によって生成されてよく、または通常のタンパク質プロセシング（例えば、新生ポリペプチドからの生物学的活性のために必要でないアミノ酸の除去または代替的ｍＲＮＡスプライシングもしくは代替的タンパク質プロセシング事象によるアミノ酸の除去）から生じてもよい。
【０３８４】
非タンパク質類似体は、本発明のタンパク質の機能活性を模倣するように設計された化学構造を有する。そのような類似体は、本開示の主題の方法により投与される。そのような類似体は、元のポリペプチドの生理学的活性を上回る場合がある。類似体設計の方法は当技術分野において周知であり、類似体の合成は、免疫応答細胞において発現された場合に生じた類似体が元のポリペプチドの抗新生物活性を増加させるように化学的構造を改変することによってそのような方法により実行され得る。これらの化学的改変は、これだけに限らないが、参照ポリペプチドの代替的Ｒ基を置換することおよび具体的な炭素原子での飽和の程度を変更することを含む。タンパク質類似体は、ｉｎ  ｖｉｖｏ分解に比較的抵抗性である場合があり、投与の際に治療効果のさらなる延長をもたらす。機能活性を測定するためのアッセイは、これだけに限らないが、以下の実施例に記載のものを含む。
【０３８５】
本開示の主題により、ＦｃＲＬ５（例えばｓｃＦＶ（例えば抗体Ｆ５６およびＦ１１９由来ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’または（Ｆａｂ’）２）、ＣＤ３ζ、ＣＤ８、ＣＤ２８）に特異的に結合する細胞外抗原結合ドメインをコードするポリヌクレオチドは、コドン最適化によって改変されてよい。コドン最適化は、任意の所与の発現系における産生の可能な最高レベルを達成するために天然に存在するおよび組換えの両方の遺伝子配列を変更できる。タンパク質発現のさまざまな段階に関与する因子は、コドン適合性、ｍＲＮＡ構造ならびに転写および翻訳の種々のｃｉｓエレメントを含む。当業者に公知である任意の好適なコドン最適化法または技術は、これだけに限らないが、ＯＰＴＩＭＵＭＧＥＮＥ（商標）、Ｅｎｃｏｒ最適化およびＢｌｕｅ  Ｈｅｒｏｎを含んで、本開示の主題のポリヌクレオチドを改変するために使用され得る。
ＶＩ．投与
【０３８６】
本開示の主題のＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲおよびそれを発現する免疫応答細胞は、新生物を処置するまたは予防するために対象に全身性にまたは直接提供されてよい。特定の実施形態ではＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲおよびそれを発現する免疫応答細胞は、目的の器官（例えば新生物によって冒された器官）に直接注射される。代替的にまたは追加的にＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲおよびそれを発現する免疫応答細胞は、目的の器官に間接的に、例えば循環系（例えば腫瘍脈管構造）に投与することによって提供される。増殖および分化剤は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏでＴ細胞の産生を増加させるために細胞および組成物の投与の前、間または後に提供されてよい。
【０３８７】
本開示の主題のＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲおよびそれを発現している免疫応答細胞は、任意の生理学的に許容されるビヒクル中で、通常血管内に投与され得るが、それらは骨または、細胞が再生および分化のための好適な部位を見出し得る他の好都合な部位（例えば胸腺）に導入されてもよい。通常、細胞少なくとも１×１０５個が投与されてよく。最終的に１×ｌ０１０またはそれ超に達する。ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを発現している免疫応答細胞を含む細胞集団は、細胞の精製された集団を含んでよい。当業者は、蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）などの種々の周知の方法を使用して細胞集団中の免疫応答細胞の百分率を容易に決定できる。ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを発現している遺伝的に改変された免疫応答細胞を含む細胞集団中の純度の範囲は、約５０％から約５５％、約５５％から約６０％、約６５％から約７０％、約７０％から約７５％、約７５％から約８０％、約８０％から約８５％、約８５％から約９０％、約９０％から約９５％または約９５から約１００％であってよい。投与量は当業者によって容易に調整され得る（例えば純度の低下は投与量の増加を必要とする場合がある）。免疫応答細胞は、注射、カテーテルなどによって導入されてよい。所望によりこれだけに限らないがインターロイキン、例えばＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ６、ＩＬ−１１、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１および他のインターロイキン、Ｇ−、Ｍ−およびＧＭ−ＣＳＦなどのコロニー刺激因子、インターフェロン、例えばγ−インターフェロンを含む因子も含まれてよい。
【０３８８】
本開示の主題の組成物は、ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを発現している免疫応答細胞および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を含む。投与は、自己または非自己であってよい。例えばＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを発現している免疫応答細胞およびそれを含む組成物は、一対象から得られてよく、同じ対象または異なる、適合性の対象に投与されてよい。本開示の主題の末梢血液由来Ｔ細胞またはその子孫（例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏ由来）は、カテーテル投与、全身性注射、局所注射、静脈内注射または非経口投与を含む局所注射を介して投与されてよい。本開示の主題の医薬組成物（例えばＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを発現している免疫応答細胞を含む医薬組成物）を投与する場合、注射可能な単位投与形態（溶液、懸濁物、乳液）に製剤化されてよい。
ＶＩＩ．製剤
【０３８９】
本開示の主題の全般にＦｃＲＬ５特異的なＣＡＲを発現している免疫応答細胞およびそれを含む組成物は、選択されたｐＨに緩衝性であってよい滅菌液体調製物、例えば等張水溶液、懸濁液、乳液、分散物または粘稠性組成物として簡便に提供され得る。液体調製物は、ゲル、他の粘稠性組成物および固体組成物より通常は調製が容易である。加えて液体組成物は、特に注射による投与にいくらか好都合である。一方粘稠性組成物は、特定の組織とのより長い接触時間を提供するように好適な粘稠性の範囲内に製剤化され得る。液体または粘稠性組成物は、例えば水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）およびその好適な混合物を含有する溶媒または分散媒体であってよい担体を含み得る。
【０３９０】
滅菌注射可能溶液は、本開示の主題の全般にＦｃＲＬ５特異的なＣＡＲを発現している免疫応答細胞を含む組成物を、所望により種々の量の他の成分を含む必要な量の適切な溶媒に組み込むことによって調製され得る。そのような組成物は、好適な担体、希釈剤または、滅菌水、生理食塩水、グルコース、ブドウ糖などの賦形剤と混合されてよい。組成物は、凍結乾燥されてもよい。組成物は、望ましい投与の経路および調製に応じて、湿潤剤、分散剤または乳化剤（例えばメチルセルロース）、ｐＨ緩衝剤、ゲル化剤または粘度増強添加物、保存剤、香味剤、着色料などの補助物質を含有してよい。参照により本明細書に組み込まれる「REMINGTON'S  PHARMACEUTICAL  SCIENCE」第１７版、１９８５年、などの標準的なテキストは過度の実験を伴わずに好適な調製物を調製するために参考にされてよい。
【０３９１】
抗菌性保存剤、抗酸化物質、キレート化薬剤および緩衝液を含む、組成物の安定性および滅菌性を増強する種々の添加物は、加えられてよい。微生物の作用の予防は、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などの種々の抗菌および抗真菌剤によって確実にされ得る。注射可能な薬学的形態の吸収の延長は、吸収を遅らせる薬剤、例えばモノステアリン酸アルミニウム（aluminurn）およびゼラチン、の使用によってもたらされ得る。しかし本発明により、使用される任意のビヒクル、希釈剤または添加物は、本開示の主題の全般にＦｃＲＬ５特異的なＣＡＲを発現している免疫応答細胞と適合性である必要がある。
【０３９２】
組成物は等張であってよい、すなわちそれらは血液および涙液と同じ浸透圧を有してよい。本開示の主題の組成物の望ましい等張性は、塩化ナトリウムまたは、ブドウ糖、ホウ酸、酒石酸ナトリウム、プロピレングリコールまたは他の無機もしくは有機溶質などの他の薬学的に許容される薬剤を使用して達成され得る。塩化ナトリウムは、ナトリウムイオンを含有する緩衝剤のために特に好ましい。
【０３９３】
組成物の粘度は、所望により、薬学的に許容される増粘剤を使用して選択されたレベルに維持され得る。メチルセルロースは、それが容易におよび経済的に利用可能であり、容易に協働することから使用され得る。他の好適な増粘剤は、例えばキサンタンゴム、カルボキシメチルセルロース、ヒロドキシプロピルセルロース、カルボマーなどを含む。濃厚剤の濃度は、選択された薬剤に依存する場合がある。重要な点は、選択された粘度を達成する量を使用することである。明らかに、好適な担体および他の添加物の選択は、投与の正確な経路および具体的な投薬形態、例えば液体投与形態（例えば組成物が溶液、懸濁物、ゲルまたは、持続放出形態もしくは液体充填形態などの別の液体形態に製剤化されているかどうか）の性質に応じる。
【０３９４】
当業者は、組成物の構成成分が化学的に不活性であるように選択されるべきであり、本開示の主題に記載の免疫応答細胞の生存率または有効性に影響を与えないことを認識する。このことは化学および薬学的原理において当業者に課題を示さない、または課題は、標準的テキストを参照することによってまたは簡単な実験（過度の実験を含まない）によって、本開示および本明細書に引用される文書から容易に回避され得る。
【０３９５】
本開示の主題の免疫応答細胞の治療的使用に関する１つの検討事項は、最適な効果を達成するために必要な細胞の量である。投与される細胞の量は、処置される対象について変化する。特定の実施形態では、本開示の主題の免疫応答細胞約１０４個から約１０１０個、約１０５個から約１０９個または約１０６個から約１０８個は対象に投与される。さらに有効な細胞は、さらに少数で投与される場合がある。特定の実施形態では、本開示の主題の免疫応答細胞少なくとも約１×１０８個、約２×１０８個、約３×１０８個、約４×１０８個および約５×１０８個がヒト対象に投与される。有効用量と見なされるものの正確な決定は、具体的な対象のサイズ、年齢、性別、体重および状態を含む各対象個々の因子に基づいてよい。投与量は、本開示および当技術分野の知識から当業者によって容易に確定され得る。
【０３９６】
当業者は、組成物中および本開示の主題の方法において投与される細胞ならびに最適な添加物、ビヒクルおよび／または担体の量を容易に決定できる。典型的には任意の添加物（活性細胞（複数可）および／または薬剤（複数可）に加えて）は、リン酸緩衝生理食塩水中に約０．００１重量％から約５０重量％の量で溶液中に存在し、活性成分は約０．０００１重量％から約５重量％、約０．０００１重量％から約１重量％、約０．０００１重量％から約０．０５重量％、約０．００１重量％から約２０重量％、約０．０１重量％から約１０重量％または約０．０５重量％から約５重量％などのマイクログラムからミリグラム程度で存在する。動物またはヒトに投与される任意の組成物について、および投与の任意の具体的な方法について、毒性は、好適な動物モデル、例えばマウスなどのげっ歯類における致死量（ＬＤ）およびＬＤ５０、ならびに好適な応答を誘発する組成物（複数可）の投薬量、その中の構成成分の濃度および組成物（複数可）を投与する時期を決定することなどによって決定されるべきである。そのような決定は、当業者、本開示および本明細書に引用される文書の知識から過度な実験を必要としない。および逐次的投与の時期は、過度の実験を伴うことなく確認できる。
ＶＩＩＩ．処置方法
【０３９７】
腫瘍微小環境。腫瘍は、免疫認識および排除からそれら自体を保護する悪性細胞による一連の機構に関与する宿主免疫応答に敵対する微小環境を有する。この「敵対する腫瘍微小環境」は、浸潤性制御ＣＤ４＋Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、骨髄系由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）、ＩＬ−１０およびＴＧＦ−βを含む免疫抑制性サイトカインならびに、活性化Ｔ細胞によって発現される免疫抑制性受容体に標的化されたリガンドの発現（ＣＴＬＡ−４およびＰＤ−１）を含む種々の免疫抑制因子を含む。免疫抑制のこれらの機構は、寛容の維持および不適切な免疫応答を抑制することに役割を演じているが、腫瘍微小環境ではこれらの機構は有効な抗腫瘍免疫応答を妨げる。合わせてこれらの免疫抑制因子は、標的化腫瘍細胞との遭遇で養子性に移行されたＣＡＲ修飾Ｔ細胞の有意なアネルギーまたはアポトーシスのいずれかを誘導できる。
【０３９８】
腫瘍免疫学における課題。有効な腫瘍免疫は、免疫エフェクター細胞による腫瘍抗原の認識および対立されない腫瘍排除を必要とする。腫瘍抗原は、腫瘍によって提示され、特異的細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）によって認識され得るペプチドエピトープを含有しなければならない。初回刺激されたＣＴＬは、十分な数に増やされ、腫瘍部位に移動しなければならず、そこでそれらは機能を発揮するためにエフェクターに成熟する、これはヘルパーＴ細胞によって増強され、Ｔｒｅｇおよび阻害性マクロファージによって弱められる。
【０３９９】
操作されたＴリンパ球での標的化Ｔ細胞治療。Ｔ細胞操作は、早期の免疫治療アプローチの以前観察された多数の欠点を解決する可能性がある画期的な戦略である。過去数年内に研究者らは再発性（Brentjensら、Blood  １１８巻、４８１７〜４８２８頁（２０１１年）およびBrentjensら、Science  translational  medicine  ５巻、１７７ｒａ１３８（２０１３年））、化学療法抵抗性白血病および転移性メラノーマ（Hunderら、N  EnglJMed  ３５８巻、２６９８〜２７０３頁（２００８年）、Rosenbergら、Nat  Rev  Cancer  ８巻、２９９〜３０８頁（２００８年）およびDudleyら、J  Clin  Oncol  ２６巻、５２３３〜５２３９頁（２００８年））において、規定の抗原（それぞれＣＤ１９およびＮＹ−ＥＳＯ−１）に標的化した自己末梢血液Ｔ細胞で得た劇的な完全寛解を報告した。
【０４００】
遺伝的アプローチへの理論的根拠：細胞工学は、Ｔ細胞を腫瘍抗原に向けて再度方向付け、Ｔ細胞機能を増強するために使用され得る。遺伝的Ｔ細胞改変の１つの推進力は、Ｔ細胞生存および増殖を増強するためならびにＴ細胞死、アネルギーおよび免疫抑制を相殺する可能性である。Ｔ細胞の遺伝的標的化は、正常組織の望ましくない破壊を予防するために改良されてもよい。
【０４０１】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）：腫瘍特異的Ｔ細胞は、ＣＡＲをコードする遺伝子の移入によって生成され得る（Brentjensら、ClinCancer  Res  １３巻、５４２６〜５４３５頁（２００７年）、Gadeら、Cancer  Res  ６５巻、９０８０〜９０８８頁（２００５年）;Maherら、NatBiotechnol  ２０巻、７０〜７５頁（２００２年）、Kershawら、J  Immunol  １７３巻、２１４３〜２１５０頁（２００４年）;Sadelainら、Curr  Opin  Immunol（２００９年）およびHollymanら、J  Immunother  ３２巻、１６９〜１８０頁（２００９年））。第２世代ＣＡＲは、Ｔ細胞を活性化できる細胞内シグナル伝達ドメインに融合された腫瘍抗原結合ドメイン、ならびにＴ細胞の効力および持続性を向上するように設計された共刺激性ドメインを含む（Sadelainら、Cancer  discovery  ３巻、３８８〜３９８頁（２０１３年））。ＣＡＲ設計は、したがって２個の別々の複合体、ＴＣＲヘテロ二量体およびＣＤ３複合体によって生理学的に担われる２つの機能、抗原認識とシグナル伝達とを調和できる。ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、通常ネズミモノクローナル抗体（ｍＡｂ）、または受容体もしくはそれらのリガンド由来である。抗原認識は、したがってＭＨＣ限定ではなく（Riviereら、Curr  Hematol  Rep  ３巻、２９０〜２９７頁（２００４年）およびStephanら、Nat  Med  １３巻、１４４０〜１４４９頁（２００７年））、したがって標的抗原を発現している任意の患者に同じＣＡＲを使用して適用可能である。ＣＡＲによる抗原結合は、細胞内ドメイン中の免疫受容体チロシンに基づく活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）のリン酸化の引き金を引き、細胞融解の誘導、サイトカイン分泌および増殖のために必要なシグナル伝達カスケードを開始する。抗原認識のＭＨＣ限定が迂回されることから、ＣＡＲ標的化Ｔ細胞の機能はＨＬＡ下方制御または抗原プロセシング機構での欠陥によって影響を受けない。
【０４０２】
増殖および生存のためのＴ細胞必要条件：腫瘍特異的Ｔ細胞の増殖は、ｅｘ  ｖｉｖｏで必要とされ、間違いなくｉｎ  ｖｉｖｏが望ましい。Ｔ細胞増殖は、完全なＴ細胞増殖および持続を可能にするためにＴ細胞生存が伴わなければならない。抗原への応答で増殖するために、Ｔ細胞は２種のシグナルを受けなければならない。１つは、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面に示された抗原ペプチド／ＭＨＣ複合体のＴＣＲ認識によって提供される（Sadelainら、Curr  Opin  Immunol（２００９年））。他方は、ＣＤ２８または４−１ＢＢ受容体などのＴ細胞共刺激性受容体によって提供される。一方Ｔ細胞の細胞溶解活性は同時の共刺激を必要としないが、以前実証されたとおり、養子性に移行されたＴ細胞の抗腫瘍機能を維持するために共刺激性シグナルの供給に必須の必要性がある（Maherら、NatBiotechnol  ２０巻、７０〜７５頁（２００２年）、Sadelainら、Cancer  discovery  ３巻、３８８〜３９８頁（２０１３年）、Krauseら、J  Exp  Med  １８８巻、６１９〜６２６頁（１９９８年）、Gongら、Neoplasia  １巻、１２３〜１２７頁（１９９９年）およびLyddaneら、JImmunol  １７６巻、３３０６〜３３１０頁（２００６年））。
【０４０３】
免疫モニタリング：リンパ球は、注入後に動的に進展する効果を示す多機能性「薬物」である。抗原との遭遇で腫瘍特異的Ｔ細胞は、腫瘍致死、Ｔ細胞増殖および他の免疫細胞の動員もしくは免疫調節を引き起こし得る種々のタンパク質を活性化および／または放出する。したがって、どのタンパク質がどの細胞から、どのような量でおよびどの時点で分泌されるかを測定することは、なぜ具体的な患者が応答するかしないかに深い洞察をもたらし、さらに有効な治験を設計するための重要なフィードバックを提供する。これらのアッセイ系は、臨床的アプローチの直接で有意義な比較を可能にし、それにより合理的な、次世代治療戦略を設計することを助ける。
【０４０４】
処置のために投与される量は、望ましい効果を産生するために有効な量である。有効量は、１回のまたは一連の投与で提供されてよい。有効量は、ボーラスでまたは連続かん流によって提供されてよい。
【０４０５】
「有効量」（または「治療有効量」）は、処置で有益なまたは望ましい臨床結果に作用するために十分な量である。有効量は、１つまたは複数の用量で対象に投与されてよい。処置において有効量は、疾患の進行を緩和する、回復させる、安定化する、戻すまたは遅くする、または他に疾患の病理学的帰結を低減するために十分である量である。有効量は、一般に医師によって場合に応じて決定され、当業者の技能の範囲内である。いくつかの要因が有効量を達成するために好適な投与量を決定する場合に典型的には考慮される。これらの要因は、対象の年齢、性別および体重、処置される状態、状態の重症度ならびに投与される免疫応答細胞の形態および有効濃度を含む。
【０４０６】
抗原特異的Ｔ細胞を使用する養子免疫治療のために約１０６個から約１０１０個の範囲（例えば約１０９個）の細胞用量が典型的には注入される。対象への免疫応答細胞の投与および続く分化で、１つの特定の抗原（例えばＦｃＲＬ５）に対して特異的に方向付けられている免疫応答細胞が誘導される。Ｔ細胞の「誘導」は、欠失またはアネルギーによるなどの抗原特異的Ｔ細胞の不活性化を含み得る。不活性化は、自己免疫性障害などにおいて寛容を確立するまたは再確立するなどために特に有用である。本開示の主題の免疫応答細胞は、これだけに限らないが、胸膜投与、静脈内投与、皮下投与、節内投与、腫瘍内投与、くも膜下腔内投与、胸膜内投与、腹腔内投与および胸腺への直接投与を含む当技術分野において公知の任意の方法によって投与されてよい。特定の実施形態では免疫応答細胞およびそれを含む組成物は、必要とする対象に静脈内投与される。
【０４０７】
本開示の主題は、ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを発現する免疫応答細胞（例えばＴ細胞）の使用の種々の方法を提供する。例えば本開示の主題は、対象における腫瘍負荷を低減する方法を提供する。一非限定的例では腫瘍負荷を低減する方法は、対象に本開示の免疫応答細胞の有効量を投与することを含み、それにより対象において腫瘍細胞死を誘導する。本開示の免疫応答細胞は、腫瘍細胞の数を低減、腫瘍サイズを低減、および／または対象における腫瘍を根絶できる。好適な腫瘍の非限定的例は、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーケットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症を含む。
【０４０８】
本開示の主題は、新生物を有する対象の生存を増加または延長する方法も提供する。一非限定的例では新生物を有する対象の生存を増加させるまたは延長する方法は、本開示の免疫応答細胞の有効量を対象に投与することを含み、それにより対象の生存を増加または延長する。方法は、対象における腫瘍負荷を低減または根絶できる。本開示の主題は、本開示の免疫応答細胞を対象に投与することを含む、対象における新生物を処置するまたは予防するための方法をさらに提供する。
【０４０９】
本明細書において使用される用語「新生物」は、細胞または組織の病理学的増殖および続く他の組織または器官へのその移動または侵入によって特徴付けられる疾患を指す。新生物増殖は、典型的には調節されず、進行性であり、正常細胞の増殖を誘発しないまたは休止を生じる条件下で生じる。新生物は、これだけに限らないが膀胱、結腸、骨、脳、乳房、軟骨、グリア、食道、卵管、胆嚢、心臓、腸、腎臓、肝臓、肺、リンパ節、神経組織、卵巣、胸膜、膵臓、前立腺、骨格筋、皮膚、脊髄、脾臓、胃、精巣、胸腺、甲状腺、気管、泌尿生殖管、尿管、尿道、子宮および膣またはその組織もしくは細胞型からなる群から選択される器官を含む種々の細胞型、組織または器官を冒し得る。新生物は、肉腫、癌腫または形質細胞腫（形質細胞の悪性腫瘍）などのがんを含む。
【０４１０】
その増殖が本開示の主題の免疫応答細胞を使用して阻害され得るがんは、典型的には免疫治療に応答のがんを含む。処置に関するがんの非限定的例は、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫（特にマントル細胞）、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、バーケットリンパ腫およびワルデンストレームマクログロブリン血症を含む。特定の実施形態ではがんは多発性骨髄腫である。
【０４１１】
加えて本開示の主題は、対象におけるがん細胞への応答において免疫活性化サイトカイン産生を増加させる方法を提供する。一非限定的例において方法は、本開示の免疫応答細胞を対象に投与することを含む。免疫活性化サイトカインは、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１１、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、インターフェロン制御因子７（ＩＲＦ７）およびそれらの組合せであってよい。特定の実施形態では本開示の主題のＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを含む免疫応答細胞は、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、および／またはＴＮＦ−αの産生を増加させる。
【０４１２】
治療のために好適なヒト対象は、臨床基準によって識別され得る２つの処置群を典型的には含む。「進行性疾患」または「高腫瘍負荷」を有する対象は、臨床的に測定可能な腫瘍（例えば多発性骨髄腫）を保持している者である。臨床的に測定可能な腫瘍は、腫瘍体積に基づいて検出可能なものである（例えば触診、ＣＡＴスキャン、超音波画像、マンモグラムまたはＸ線による；それら自体の生化学または病理組織学的マーカー陽性はこの集団を識別するために不十分である）。本開示の主題に例示される医薬組成物は、それらの状態を緩和する目的で抗腫瘍応答を誘発するためにこれらの対象に投与される。理想的には腫瘍体積の低減が結果として生じるが、いかなる臨床的改善も利益を構成する。臨床的改善は、腫瘍（例えば多発性骨髄腫）の危険性もしくは進行速度の低下または病理学的帰結の軽減を含む。
【０４１３】
好適な対象の第２の群は、当技術分野において「アジュバント群」として公知である。これらは、新生物（例えば多発性骨髄腫）の病歴を有するが、別の様式の治療に応答であった個体である。先行する治療は、これだけに限定されないが、外科的切除、放射線療法および伝統的化学療法を含む。結果としてこれらの個体は、臨床的に測定可能な腫瘍を有さない。しかし彼らは、元の腫瘍部位の近くまたは転移によってのいずれかで疾患の進行について危険性があると疑われる。この群は、高危険性と低危険性個体とにさらに細分され得る。細分は最初の処置の前後で観察された特性に基づいて行われる。これらの特性は、臨床分野で公知であり、個々の異なる新生物について適切に規定される。高危険性サブグループの典型的な特性は、腫瘍（例えば多発性骨髄腫）が近隣組織に侵入していること、またはリンパ節の関与を示す者である。別の群は、新生物（例えば多発性骨髄腫）について遺伝的素因を有するが、新生物（例えば多発性骨髄腫）の臨床徴候がまだ示されていない。例えば、乳がんに関連する遺伝子変異について陽性と検査されたがまだ出産可能年齢であり、予防的外科手術を実施するために好適になるまで新生物の発生を予防するための予防的処置において本明細書に記載の１つまたは複数の抗原結合断片を受けることを希望できる女性。
【０４１４】
対象は、進行性形態の疾患（例えば多発性骨髄腫）を有する場合があり、その場合処置目標は、疾患進行の軽減もしくは逆転および／または副作用の緩和を含み得る。対象は、既に処置されてきた状態の歴史を有する場合があり、その場合治療目標は、典型的には再発の危険性の低下または遅延を含む。
【０４１５】
さらなる改変は、免疫学的合併症（「悪性Ｔ細胞形質転換」として公知）、例えば移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の危険を防ぐもしくは最少化するために、または健康な組織が腫瘍細胞と同じ標的抗原を発現し、ＧｖＨＤと同様の帰結をもたらす場合に、ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲ発現免疫応答細胞（例えば、Ｔ細胞）に導入されてよい。この課題への潜在的解決法は、自殺遺伝子をＣＡＲ発現Ｔ細胞に操作することである。好適な自殺遺伝子は、これだけに限らないが、単純ヘルペスウイルルスチミジンキナーゼ（ｈｓｖ−ｔｋ）、誘導型カスパーゼ９自殺遺伝子（ｉＣａｓｐ−９）および短縮ヒト上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲｔ）ポリペプチドを含む。特定の実施形態では自殺遺伝子はＥＧＦＲｔポリペプチドである。ＥＧＦＲｔポリペプチドは、抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体（例えばセツキシマブ）を投与することによってＴ細胞を排除できる。ＥＧＦＲｔは、ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲの細胞内ドメインの３’末端に共有結合で結合され得る。自殺遺伝子は、本開示のＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲをコードする核酸を含むベクター内に含まれてよい。このように、悪性Ｔ細胞形質転換（例えば、ＧＶＨＤ）の際に自殺遺伝子を活性化するように設計されたプロドラッグ（例えばプロドラッグ（例えばＡＰ１９０３はｉＣａｓｐ−９を活性化できる）の投与は、自殺遺伝子活性化ＣＡＲ発現Ｔ細胞にアポトーシスを引き起こす。
ＩＸ．キット
【０４１６】
本開示の主題は、新生物（例えば多発性骨髄腫）の処置または予防のためのキットを提供する。特定の実施形態ではキットは、ＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲを含む免疫応答細胞の有効量を単位投与形態に含有する治療用または予防用組成物を含む。具体的な実施形態では細胞は、少なくとも１つの共刺激性リガンドをさらに発現する。特定の実施形態ではキットは、治療用または予防用ワクチンを含有する滅菌容器を含み；そのような容器は、箱、アンプル、ビン、バイアル、チューブ、バッグ、パウチ、ブリスター容器または当技術分野において公知の他の好適な容器形態であってよい。そのような容器は、プラスチック、ガラス、ラミネート紙、金属箔または医薬を保持するために好適な他の材料でできていてよい。
【０４１７】
所望により免疫応答細胞は、新生物（例えば多発性骨髄腫）を有するまたは発症する危険がある対象に細胞を投与するための指示書と共に提供される。指示書は、新生物（例えば多発性骨髄腫）の処置または予防のための組成物の使用についての情報を全般に含む。他の実施形態では指示書は、次の少なくとも１つを含む：治療剤の記載；新生物（例えば多発性骨髄腫）またはその症状の処置または予防のための投薬スケジュールおよび投与；使用上の注意；警告；適応症；禁忌；過量投与情報；有害反応；動物薬理作用；臨床研究；および／または参考文献。指示書は、容器（ある場合）に直接、あるいは容器に添付される表示として、または別のシート、パンフレット、カードまたは容器内もしくは共に供給されるフォルダーとして印刷されてよい。
Ｘ．例示的細胞外抗原結合ドメイン（例えばｓｃＦｖ）
【表１】
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【０４１８】
【表２】
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【０４１９】
【表３】
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【０４２０】
【表４】
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【０４２１】
【表５】
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【０４２２】
【表６】
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【０４２３】
【表７】
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【０４２４】
【表８】
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【０４２５】
【表９】
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【０４２６】
【表１０】
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【０４２７】
【表１１】
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【０４２８】
【表１２】
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【０４２９】
【表１３】
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【０４３０】
【表１４】
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【０４３１】
【表１５】
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【０４３２】
【表１６】
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【０４３３】
【表１７】
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【０４３４】
【表１８】
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【０４３５】
【表１９】
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【０４３６】
【表２０】
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【０４３７】
【表２１】
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【０４３８】
【表２２】
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【０４３９】
【表２３】
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【０４４０】
【表２４】
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【０４４１】
【表２５】
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【０４４２】
【表２６】
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【０４４３】
【表２７】
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【０４４４】
【表２８】
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【０４４５】
【表２９】
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【０４４６】
【表３０】
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【０４４７】
【表３１】
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【０４４８】
【表３２】
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【０４４９】
【表３３】
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【０４５０】
【表３４】
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【０４５１】
【表３５】
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【０４５２】
【表３６】
2018504094.tif 000046
【０４５３】
【表３７】
2018504094.tif 000047
【０４５４】
【表３８】
2018504094.tif 000048
【０４５５】
【表３９】
2018504094.tif 000049
【０４５６】
【表４０】
2018504094.tif 000050
【０４５７】
【表４１】
2018504094.tif 000051
【０４５８】
【表４２】
2018504094.tif 000052
【０４５９】
【表４３】
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【０４６０】
【表４４】
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【０４６１】
【表４５】
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【０４６２】
【表４６】
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【０４６３】
【表４７】
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【０４６４】
【表４８】
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【０４６５】
【表４９】
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【０４６６】
【表５０】
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【０４６７】
【表５１】
2018504094.tif 000061
【０４６８】
【表５２】
2018504094.tif 000062
【０４６９】
【表５３】
2018504094.tif 000063
【０４７０】
【表５４】
2018504094.tif 000064
【０４７１】
【表５５】
2018504094.tif 000065
【０４７２】
【表５６】
2018504094.tif 000066
【０４７３】
【表５７】
2018504094.tif 000067
【０４７４】
【表５８】
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【０４７５】
【表５９】
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【０４７６】
【表６０】
2018504094.tif 000070
【０４７７】
【表６１】
2018504094.tif 000071
【０４７８】
【表６２】
2018504094.tif 000072
【０４７９】
【表６３】
2018504094.tif 000073
【０４８０】
【表６４】
2018504094.tif 000074
【０４８１】
【表６５】
2018504094.tif 000075
【０４８２】
【表６６】
2018504094.tif 000076
【０４８３】
【表６７】
2018504094.tif 000077
【０４８４】
【表６８】
2018504094.tif 000078
【０４８５】
【表６９】
2018504094.tif 000079
【０４８６】
【表７０】
2018504094.tif 000080
【０４８７】
【表７１】
2018504094.tif 000081
【０４８８】
【表７２】
2018504094.tif 000082
【０４８９】
【表７３】
2018504094.tif 000083
【０４９０】
【表７４】
2018504094.tif 000084
【０４９１】
【表７５】
2018504094.tif 000085
【０４９２】
【表７６】
2018504094.tif 000086
【０４９３】
XI重鎖可変領域、軽鎖可変領域およびリンカーペプチドを含む例示的な細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）
【表７７】
2018504094.tif 000087
【０４９４】
【表７８】
2018504094.tif 000088
【０４９５】
【表７９】
2018504094.tif 000089
【０４９６】
【表８０】
2018504094.tif 000090
【０４９７】
【表８１】
2018504094.tif 000091
【０４９８】
【表８２】
2018504094.tif 000092
【０４９９】
【表８３】
2018504094.tif 000093
【０５００】
【表８４】
2018504094.tif 000094
【０５０１】
【表８５】
2018504094.tif 000095
【０５０２】
【表８６】
2018504094.tif 000096
【０５０３】
【表８７】
2018504094.tif 000097
【０５０４】
【表８８】
2018504094.tif 000098
【０５０５】
【表８９】
2018504094.tif 000099
【０５０６】
【表９０】
2018504094.tif 000100
【０５０７】
【表９１】
2018504094.tif 000101
【０５０８】
【表９２】
2018504094.tif 000102
【０５０９】
【表９３】
2018504094.tif 000103
【０５１０】
【表９４】
2018504094.tif 000104
【０５１１】
【表９５】
2018504094.tif 000105
【０５１２】
【表９６】
2018504094.tif 000106
【０５１３】
【表９７】
2018504094.tif 000107
【０５１４】
【表９８】
2018504094.tif 000108
【０５１５】
【表９９】
2018504094.tif 000109
【０５１６】
【表１００】
2018504094.tif 000110
【０５１７】
【表１０１】
2018504094.tif 000111
【０５１８】
【表１０２】
2018504094.tif 000112
【０５１９】
【表１０３】
2018504094.tif 000113
【０５２０】
【表１０４】
2018504094.tif 000114
【０５２１】
【表１０５】
2018504094.tif 000115
【０５２２】
【表１０６】
2018504094.tif 000116
【０５２３】
【表１０７】
2018504094.tif 000117
【０５２４】
【表１０８】
2018504094.tif 000118
【０５２５】
【表１０９】
2018504094.tif 000119
【０５２６】
【表１１０】
2018504094.tif 000120
【０５２７】
【表１１１】
2018504094.tif 000121
【０５２８】
【表１１２】
2018504094.tif 000122
【０５２９】
【表１１３】
2018504094.tif 000123
【０５３０】
【表１１４】
2018504094.tif 000124
【０５３１】
【表１１５】
2018504094.tif 000125
【０５３２】
【表１１６】
2018504094.tif 000126
【０５３３】
【表１１７】
2018504094.tif 000127
【０５３４】
【表１１８】
2018504094.tif 000128
【０５３５】
【表１１９】
2018504094.tif 000129
【０５３６】
【表１２０】
2018504094.tif 000130
【０５３７】
【表１２１】
2018504094.tif 000131
【０５３８】
【表１２２】
2018504094.tif 000132
【０５３９】
【表１２３】
2018504094.tif 000133
【０５４０】
【表１２４】
2018504094.tif 000134
【０５４１】
【表１２５】
2018504094.tif 000135
【０５４２】
【表１２６】
2018504094.tif 000136
【０５４３】
【表１２７】
2018504094.tif 000137
【０５４４】
【表１２８】
2018504094.tif 000138
【０５４５】
【表１２９】
2018504094.tif 000139
【０５４６】
【表１３０】
2018504094.tif 000140
【０５４７】
【表１３１】
2018504094.tif 000141
【０５４８】
【表１３２】
2018504094.tif 000142
【０５４９】
【表１３３】
2018504094.tif 000143
【０５５０】
【表１３４】
2018504094.tif 000144
【０５５１】
【表１３５】
2018504094.tif 000145
【０５５２】
【表１３６】
2018504094.tif 000146
【０５５３】
【表１３７】
2018504094.tif 000147
【０５５４】
【表１３８】
2018504094.tif 000148
【０５５５】
【表１３９】
2018504094.tif 000149
【０５５６】
【表１４０】
2018504094.tif 000150
【０５５７】
【表１４１】
2018504094.tif 000151
【０５５８】
【表１４２】
2018504094.tif 000152
【０５５９】
【表１４３】
2018504094.tif 000153
【０５６０】
【表１４４】
2018504094.tif 000154
【０５６１】
【表１４５】
2018504094.tif 000155
【０５６２】
【表１４６】
2018504094.tif 000156
【０５６３】
【表１４７】
2018504094.tif 000157
【０５６４】
【表１４８】
2018504094.tif 000158
【０５６５】
【表１４９】
2018504094.tif 000159
【０５６６】
【表１５０】
2018504094.tif 000160
【０５６７】
【表１５１】
2018504094.tif 000161
【０５６８】
【表１５２】
2018504094.tif 000162
【０５６９】
XII  重鎖可変領域、軽鎖可変領域、リンカーペプチドならびにＨｉｓ−タグおよびＨＡ−タグを含む、例示的な細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）
【表１５３】
2018504094.tif 000163
【０５７０】
【表１５４】
2018504094.tif 000164
【０５７１】
【表１５５】
2018504094.tif 000165
【０５７２】
【表１５６】
2018504094.tif 000166
【０５７３】
【表１５７】
2018504094.tif 000167
【０５７４】
【表１５８】
2018504094.tif 000168
【０５７５】
【表１５９】
2018504094.tif 000169
【０５７６】
【表１６０】
2018504094.tif 000170
【０５７７】
【表１６１】
2018504094.tif 000171
【０５７８】
【表１６２】
2018504094.tif 000172
【０５７９】
【表１６３】
2018504094.tif 000173
【０５８０】
【表１６４】
2018504094.tif 000174
【０５８１】
【表１６５】
2018504094.tif 000175
【０５８２】
【表１６６】
2018504094.tif 000176
【０５８３】
【表１６７】
2018504094.tif 000177
【０５８４】
【表１６８】
2018504094.tif 000178
【０５８５】
【表１６９】
2018504094.tif 000179
【０５８６】
【表１７０】
2018504094.tif 000180
【０５８７】
【表１７１】
2018504094.tif 000181
【０５８８】
【表１７２】
2018504094.tif 000182
【０５８９】
【表１７３】
2018504094.tif 000183
【０５９０】
【表１７４】
2018504094.tif 000184
【０５９１】
【表１７５】
2018504094.tif 000185
【０５９２】
【表１７６】
2018504094.tif 000186
【０５９３】
【表１７７】
2018504094.tif 000187
【０５９４】
【表１７８】
2018504094.tif 000188
【０５９５】
【表１７９】
2018504094.tif 000189
【０５９６】
【表１８０】
2018504094.tif 000190
【０５９７】
【表１８１】
2018504094.tif 000191
【０５９８】
【表１８２】
2018504094.tif 000192
【０５９９】
【表１８３】
2018504094.tif 000193
【０６００】
【表１８４】
2018504094.tif 000194
【０６０１】
【表１８５】
2018504094.tif 000195
【０６０２】
【表１８６】
2018504094.tif 000196
【０６０３】
【表１８７】
2018504094.tif 000197
【０６０４】
【表１８８】
2018504094.tif 000198
【０６０５】
【表１８９】
2018504094.tif 000199
【０６０６】
【表１９０】
2018504094.tif 000200
【０６０７】
【表１９１】
2018504094.tif 000201
【０６０８】
【表１９２】
2018504094.tif 000202
【０６０９】
【表１９３】
2018504094.tif 000203
【０６１０】
【表１９４】
2018504094.tif 000204
【０６１１】
【表１９５】
2018504094.tif 000205
【０６１２】
【表１９６】
2018504094.tif 000206
【０６１３】
【表１９７】
2018504094.tif 000207
【０６１４】
【表１９８】
2018504094.tif 000208
【０６１５】
【表１９９】
2018504094.tif 000209
【０６１６】
【表２００】
2018504094.tif 000210
【０６１７】
【表２０１】
2018504094.tif 000211
【０６１８】
【表２０２】
2018504094.tif 000212
【０６１９】
【表２０３】
2018504094.tif 000213
【０６２０】
【表２０４】
2018504094.tif 000214
【０６２１】
【表２０５】
2018504094.tif 000215
【０６２２】
【表２０６】
2018504094.tif 000216
【０６２３】
【表２０７】
2018504094.tif 000217
【０６２４】
【表２０８】
2018504094.tif 000218
【０６２５】
【表２０９】
2018504094.tif 000219
【０６２６】
【表２１０】
2018504094.tif 000220
【０６２７】
【表２１１】
2018504094.tif 000221
【０６２８】
【表２１２】
2018504094.tif 000222
【０６２９】
【表２１３】
2018504094.tif 000223
【０６３０】
【表２１４】
2018504094.tif 000224
【０６３１】
【表２１５】
2018504094.tif 000225
【０６３２】
【表２１６】
2018504094.tif 000226
【０６３３】
【表２１７】
2018504094.tif 000227
【０６３４】
【表２１８】
2018504094.tif 000228
【０６３５】
【表２１９】
2018504094.tif 000229
【０６３６】
【表２２０】
2018504094.tif 000230
【０６３７】
【表２２１】
2018504094.tif 000231
【０６３８】
【表２２２】
2018504094.tif 000232
【０６３９】
【表２２３】
2018504094.tif 000233
【０６４０】
【表２２４】
2018504094.tif 000234
【０６４１】
【表２２５】
2018504094.tif 000235
【０６４２】
【表２２６】
2018504094.tif 000236
【０６４３】
【表２２７】
2018504094.tif 000237
【０６４４】
【表２２８】
2018504094.tif 000238
【０６４５】
【表ＸＩＩＩ−１】
2018504094.tif 000239
【０６４６】
【表ＸＩＩＩ−２】
2018504094.tif 000240
【０６４７】
【表ＸＩＩＩ−３】
2018504094.tif 000241
【０６４８】
【表ＸＩＩＩ−４】
2018504094.tif 000242
【０６４９】
【表ＸＩＩＩ−５】
2018504094.tif 000243
【０６５０】
【表２３０】
2018504094.tif 000244
【実施例】
【０６５１】
本発明の実施は、他に示す場合を除いて、十分に当業者の範囲内である分子生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学および免疫学の従来の技術を用いる。そのような技術は「Molecular  Cloning:A  Laboratory  Manual」、第２版（Sambrook、１９８９年）、「Oligonucleotide  Synthesis」（Gait、１９８４年）、「Animal  Cell  Culture」（Freshney、１９８７年）;「Methods  in  Enzymology」「Handbook  of  Experimental  Immunology」（Weir、１９９６年）、「Gene  Transfer  Vectors  for  Mammalian  Cells」（MillerおよびCalos、１９８７）年）、「Current  Protocols  in  Molecular  Biology」（Ausubel、１９８７年）、「PCR:  The  Polymerase  Chain  Reaction」、（Mullis、１９９４年）、「Current  Protocols  in  Immunology」（Coligan、１９９１年）などの文献に完全に説明されている。これらの技術は、本発明のポリヌクレオチドおよびポリペプチドの産生に適用可能であり、従って、本発明を作製および実施することに考慮され得る。具体的な実施形態のために特に有用な技術は、以下のセクションにおいて考察される。
【０６５２】
以下の実施例は、本発明のアッセイ、スクリーニングおよび治療方法をどのように作製し、使用するかの完全な開示および記載を当業者に提供するために記載され、本発明者らが彼らの発明だと見なす範囲を限定することを意図しない。
（実施例１）
種々の組織でのＦｃＲＬ５発現
【０６５３】
ヒトＦｃＲＬ５の発現を種々の組織において評価し、判断した。図１に示すとおり、ヒトＦｃＲＬ５はリンパ腫および多発性骨髄腫において高度に発現されたが、他の組織ではされなかった。図１の上パネルは、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ（ＣＣＬＥ）由来腫瘍細胞株中のヒトＦｃＲＬ５の差次的発現を示す。図１の下パネルは、ＢｉｏＧＰＳ由来の正常組織でのヒトＦｃＲＬ５の差次的発現を示す。図１に示すとおりヒトＦｃＲＬ５発現は、他の悪性細胞と比較してＭＭおよびリンパ腫に限定されている。正常な発現は、Ｂ細胞および形質細胞に限定されているように思われた。これらの正常細胞型の潜在的ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞根絶は、ＣＤ１９が標的にされるＣＡＲ  Ｔ細胞での本発明者らの患者の経験に基づいて、有意な有害作用を有さない可能性がある。生理学的な抗体産生物のいかなる欠如も静脈内免疫グロブリン処置で対処され得る。
（実施例２）
完全ヒトファージディスプレイライブラリーを使用するＦｃＲＬ５に対して特異的なＳｃＦｖの選択
【０６５４】
ＦｃＲＬ５に対するファージディスプレイ選択を３１個のヒトｓｃＦｖ未処置および半合成ファージサブライブラリーで細胞パニング戦略を使用して実施した。ＦｃＲＬ５過剰発現３Ｔ３細胞を陽性パニングで使用し、ＦｃＲＬ１、２、３、４および６過剰発現３Ｔ３細胞（合計細胞株５個）を陰性パニングで使用した（図２）。次いで結合クローンを溶出し、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＸＬ１−Ｂｌｕｅを感染させるために使用した。細菌で発現されたｓｃＦｖファージクローンを以前記載のとおり精製した（Yasminaら、Probing  the  binding  mechanism  and  affinity  of  tanezumab、a  recombinant  humanized  anti-NGF  monoclonal  antibody、using  a  repertoire  of  biosensors  Protein  Science  ２００８年、１７巻(８号):１３２６〜１３３５頁、Robertsら、Vaccination  with  CD20  peptides  induces  a  biologically  active、specific  immune  response  in  mice  Blood  ２００２年、９９巻(１０号):３７４８〜３７５５頁）。パニングをＦｃＲＬ５に特異的に結合するｓｃＦｖファージクローンを濃縮するために約３から約４サイクル実施した。陽性クローンをＨｉｓ−タグＦｃＲＬ５に対するＥＬＩＳＡ法によって決定した。
【０６５５】
陽性クローンを生存細胞表面上のＦｃＲＬ５へのそれらの結合について、ＦｃＲＬ５過剰発現細胞株、３Ｔ３およびＲａｊｉを使用してフローサイトメトリーによってさらに検査した。次いで細胞を洗浄し、以下のステップを使用して染色を実施した：細胞は、精製ｓｃＦｖファージクローンで最初に染色されることができ、マウス抗Ｍ１３  ｍＡｂでの、最後にＰＥにコンジュゲートしたウマ抗マウスＩｇでの染色が続いた。染色の各ステップは、３０〜６０分間、氷上で完了し、細胞は染色の各ステップの間に２回洗浄した。
【０６５６】
ＦｃＲＬ５に特異的であった７６個の固有のクローンを識別し、スクリーニングによって確認した（表１〜２２９および図２を参照されたい）。
（実施例３）
ＦｃＲＬ５のドメイン９に特異的なＳｃＦｖの選択
【０６５７】
ＦｃＲＬ５は、９個の細胞外免疫グロブリン様ドメイン（ドメイン１〜９）を含有し、細胞内で可溶性アイソフォーム、グリコシルホスファチジル（phosphotidyl）イノシトール（ＧＰＩ）アンカー型アイソフォームおよび膜貫通型アイソフォームで存在できる（図３Ａ）。図２Ａに示すとおり、ＦｃＲＬ５の膜貫通型アイソフォームはドメイン９を有する；一方可溶性アイソフォームおよびＧＰＩアンカー型アイソフォームは有さない。
【０６５８】
ｓｃＦｖがＦｃＲＬ５のドメイン９に特異的であるかどうかを検査するために、７６個のクローンをドメイン９が欠失しているＦｃＲＬ５（ＦｃＲＬ５Δｄｏｍ９）をコードするベクターを過剰発現している３Ｔ３細胞でさらにスクリーニングし、全長ＦｃＲＬ５を過剰発現しているＲａｊｉ細胞でさらにスクリーニングした（図４Ｂ〜Ｄ）。いくつかのクローンは、ＦｃＲＬ５過剰発現３Ｔ３細胞に対する結合と比較して、ＦｃＲＬ５ドメイン９欠失過剰発現３Ｔ３細胞に対する結合の低減または減少を示した。図４、５、６、７および８は、ＦｃＲＬ５のドメイン９に対するＥＴ２００−３９、ＥＴ２００−１０４、ＥＴ２００−１０５、ＥＴ２００−１０９およびＥＴ２００−１１７の特異性をそれぞれ示す。
（実施例４）
ネズミＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲの構築
【０６５９】
ヒトＦｃＲＬ５を標的とするｓｃＦｖの生成のために、ヒトＦｃＲＬ５上の異なる細胞外エピトープに結合する２個の商業的に入手できるマウスハイブリドーマ（Franco（２０１３年）、Iseら、（２００５年）、Iseら、（２００６年））を得た。これらのハイブリドーマから２個のヒトＦｃＲＬ５を標的とするｓｃＦｖを得た。配列番号８９７のアミノ酸配列を有するＧ４Ｓリンカーを含む１個のｓｃＦｖを、Iseら、（２００５年）に記載のとおりネズミ抗ヒトＦｃＲＬ５抗体Ｆ５６の重鎖および軽鎖可変領域を合成することによって生成した。配列番号８９７のアミノ酸配列を有するＧ４Ｓリンカーを含む第２のｓｃＦｖをIseら、（２００５年）に記載のとおりネズミ抗ヒトＦｃＲＬ５抗体Ｆ１１９の重鎖および軽鎖可変領域を合成することによって生成した。
【０６６０】
２個のＦｃＲＬ５  ＣＡＲを生成した：Ｆ５６  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲおよびＦ１１９  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲ。Ｆ５６  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲおよびＦ１１９  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲは類似の構造を有する、図９Ａに示すとおり例えばそれぞれＣＤ２８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン、ＣＤ３ξポリペプチドを含む細胞内ドメインおよびＣＤ２８ポリペプチドを含む共刺激性シグナル伝達領域を有する。Ｆ５６  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲは抗体Ｆ５６由来ｓｃＦｖを含み、Ｆ１１９  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲは抗体Ｆ１１９由来ｓｃＦｖを含む。Ｆ５６  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲおよびＦ１１９  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲそれぞれをレトロウイルスベクター２９３ｇａｌｖ９にクローニングした。ヒトＴ細胞（健康なドナー由来未選択（ＣＤ４およびＣＤ８）ヒトＴ細胞）をＦ５６  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲおよびＦ１１９  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲのそれぞれで、Ｔ細胞がＦ５６  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲまたはＦ１１９  ＦｃＲＬ５−２８ｚ  ＣＡＲを発現するように形質導入した。
（実施例５）
ヒトＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲの構築
【０６６１】
本実施例は、本明細書に記載の完全ヒトｓｃＦｖを使用するヒトＦｃＲＬ５を標的とするＣＡＲの生成を開示する。ＥＴ２００−３１  ｓｃＦｖ、ＥＴ２００−３９  ｓｃＦｖ、ＥＴ２００−６９  ｓｃＦｖ、ＥＴ２００−１０４  ｓｃＦｖ、ＥＴ２００−１０５  ｓｃＦｖ、ＥＴ２００−１０９  ｓｃＦｖおよびＥＴ２００−１１７  ｓｃＦｖを、４−１ＢＢ共刺激性ドメインおよびＣＤ３ξポリペプチドのいずれかを有する、３１ＦｃＲＬ５  ＢＢｚ  ＣＡＲ、３９ＦｃＲＬ５  ＢＢｚ  ＣＡＲ、６９ＦｃＲＬ５  ＢＢｚ  ＣＡＲ、１０４ＦｃＲＬ５  ＢＢｚ  ＣＡＲ、１０５ＦｃＲＬ５  ＢＢｚ  ＣＡＲ、１０９ＦｃＲＬ５  ＢＢｚ  ＣＡＲおよび１１７ＦｃＲＬ５  ＢＢｚ  ＣＡＲと称される第２世代ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲを生成するために使用した（図９Ｂ〜１６を参照されたい）。ＦｃＲＬ５が標的とされる４−１ＢＢ含有ＣＡＲは類似の構造を有する、例えば図９Ｂに示すとおり、それぞれＣＤ８ａポリペプチド膜貫通ドメイン、ならびにＣＤ３ξポリペプチドおよび４−１ＢＢポリペプチドからなる共刺激性シグナル伝達領域を含む細胞内ドメインを有する。これらのＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲそれぞれをＳＦＧレトロウイルスベクターにクローニングした、例として４−１ＢＢ含有ＣＡＲベクターを図１０〜１６に示す。次いでこれらのウイルスベクターをＣＡＲ＋Ｔ細胞の生成のために安定なパッケージング株を生成するためのＨＥＫ  ２９３ｇａｌｖ９ウイルスパッケージング細胞に形質導入した。
（実施例６）
Ｔ細胞におけるヒトＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲの発現
【０６６２】
ヒト初代Ｔ細胞をＦｃＲＬ５が標的とされる４−１ＢＢｚ  ＣＡＲを発現するためにレトロウイルスｇａｌｖ９  ＨＥＫ  ２９３パッケージング細胞由来の上清を使用して形質導入した（抗ＦｃＲＬ５  ＥＴ２００−１０４  ｓｃＦｖを使用して生成）。図１７に示すとおり、ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲの細胞表面発現をＨｉｓタグを含有するように改変された組換えヒトＦｃＲＬ５への結合に続く、ＰＥコンジュゲート抗ＨＩＳタグ二次抗体の結合によって決定した。細胞表面検出をフローサイトメトリーで確認した。図１７に示すとおり、ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲは形質導入Ｔ細胞上に発現された。
（実施例７）
ヒトＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲの細胞傷害性
【０６６３】
ＦｃＲＬ５が標的とされる４−１ＢＢ  ＣＡＲ  Ｔ細胞の細胞傷害性効果を、ルシフェラーゼおよびＦｃＲＬ５抗原または対照ＧＰＲＣ５Ｄ（無関係な抗原）を発現するように形質導入したＲａｊｉ（バーケットリンパ腫細胞株）細胞を使用して分析した。抗ＦｃＲＬ５  ＥＴ２００−６９  ｓｃＦｖを使用して生成された、４−１ＢＢ  ＣＡＲを発現しているＴ細胞をこれらの実験において使用した（本明細書で「αＦｃＲＬ５−６９  ＢＢｚ」と称される）。生存細胞の数を３６時間、共培養後に生物発光画像化（ＢＬＩ）によって決定する。図１８に示すとおり、ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞は、ルシフェラーゼおよびＦｃＲＬ５抗原を発現するように形質導入したＲａｊｉ細胞を特異的に溶解した（図１８Ａ）が、ＧＰＲＣ５Ｄ標的化ＣＡＲ  Ｔ細胞によって溶解される対照ＧＰＲＣ５Ｄ発現Ｒａｊｉ細胞を溶解しなかった（図１８Ｂ）。
（実施例８）
ヒトＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲのサイトカイン分泌
【０６６４】
本実施例は、ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞のサイトカイン分泌を記載する。抗ＦｃＲＬ５  ＥＴ２００−６９  ｓｃＦｖを使用して生成された、４−１ＢＢ  ＣＡＲを発現しているＴ細胞をこれらの実験において使用した。ＦｃＲＬ５またはＣＤ１９のいずれかで形質導入した３Ｔ３細胞の単層上でのＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞の２４時間、共培養後のＩＬ−２、ＩＮＦγおよびＴＮＦα分泌をＬｕｍｉｎｅｘ  ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ分析によって評価した。図１９に示すとおり、ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞のＣＡＲを通じたシグナル伝達は、Ｔ細胞活性化と一致するサイトカイン分泌を誘導した。
（実施例９）
ヒトＦｃＲＬ５特異的ＣＡＲの増殖
【０６６５】
本実施例は、抗原刺激でのＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞の増殖を記載する。抗ＦｃＲＬ５  ＥＴ２００−６９  ｓｃＦｖを使用して生成された、４−１ＢＢ  ＣＡＲを発現しているＴ細胞をこれらの実験において使用した。ＦｃＲＬ５またはＣＤ１９を標的とするＣＡＲ＋Ｔ細胞５００，０００個／ｍｌをＦｃＲＬ５またはＣＤ１９のいずれかで形質導入された３Ｔ３細胞の単層上に置いた（３Ｔ３−ＦｃＲＬ；３Ｔ３−ＣＤ１９）。４日後、ＣＡＲ＋Ｔ細胞を染色し、既知の濃度の計数マイクロビーズの含有でフローサイトメトリーによって計数した。図２０に示すとおり、ＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞の抗原刺激は増殖を誘導した。３Ｔ３−ＦｃＲＬ５細胞と共培養されたＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞は、３Ｔ３−ＣＤ１９細胞と共培養されたＦｃＲＬ５が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞よりも２．９倍多く増えた一方で、３Ｔ３−ＣＤ１９細胞と共培養された対照のＣＤ１９が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞は、同様に、３Ｔ３−ＦｃＲＬ５細胞と共培養されたＣＤ１９が標的とされるＣＡＲ  Ｔ細胞よりも２．５倍多く増えた（図２０）。
（実施例１０）
ヒト抗ＦｃＲＬ５抗体のエピトープマッピング
【０６６６】
２個の抗ＦｃＲＬ５二特異性抗体、ＥＴ２００−１０４およびＥＴ２００−１１７を、エピトープ特異性を決定するためにＰｅｐｓｃａｎによって分析した。表２３９を参照されたい。標的タンパク質は配列番号８９９のアミノ酸１〜８５１を含むヒトＦｃＲＬ５である。
【表２３９】
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方法
【０６６７】
クリップ技術の原理。ＣＬＩＰＳ技術は、ペプチドを規定の三次元構造に構造的に固定する。これは、大部分の複合体結合部位の機能性模倣物を生じる。現在ＣＬＩＰＳ技術は、ペプチドライブラリーを単一、二重または三重ループ化構造ならびにシートおよびヘリックス様フォールドに形付けるために日常的に使用されている（図２１）。
【０６６８】
詳細なコンビナトリアルクリップライブラリースクリーニング。ＣＬＩＰＳライブラリースクリーニングは、コンビナトリアルマトリクス設計を使用する標的タンパク質の１０，０００個に至る重複するペプチド構築物のライブラリーへの転換で開始する。固体担体上で、直鎖状ペプチドのマトリクスは合成され、それは次に空間的に規定されたＣＬＩＰＳ構築物に形付けられる（図２２）。不連続エピトープの両方の部分を正確なコンホメーションで表す構築物は、高アフィニティーで抗体に結合し、検出および定量される。不完全なエピトープを示す構築物は低アフィニティーで抗体に結合し、一方エピトープを含有しない構築物は全く結合しない。アフィニティー情報は、エピトープの配列およびコンホメーションを詳細に規定するための反復スクリーニングで使用される。
【０６６９】
ヒートマップ分析。ヒートマップは、二次元マップ中の変数によって取られた値が色で表示されるデータの図画表示である。二重ループ化ＣＬＩＰＳペプチドについて、そのような二次元マップは第１のおよび第２のループの独立配列から導かれ得る。例えば図２４に示す１６個のＣＬＩＰＳペプチドの配列は、ループ１中の４個の固有のサブ配列（図２３において青に色づけられている）およびループ２中の４個の固有のサブ配列（図２３において緑に色づけられている）の有効な並べ替えである。したがって観察されるＥＬＩＳＡデータ（図２４Ａにおいて赤に色づけられている）は、４×４マトリクスにプロットされてよく、各Ｘ座標は第１のループの配列に対応し、各Ｙ座標は第２のループの配列に対応する。例えば、ＣＬＩＰＳペプチドＣＬＳＳＥＲＥＲＶＥＤＬＦＥＹＥＣＥＬＬＴＳＥＰＩＦＨＣＲＱＥＤＣ（図２３Ａ中で矢印で示される）について観察されたＥＬＩＳＡ値は、第３の列、図２４Ｂの第３のカラム（矢印および赤四角で示される）に見出され得る。さらなる視覚化を促進するために、ＥＬＩＳＡ値は連続的なグラジエントの色で置き換えられてよい。この場合極端に低い値は、緑に色づけられ、極端に高い値は赤に色づけられ、平均的値は黒に色づけられる（図２４Ｃを参照されたい）。前述の例について平均値は０．７１である。このカラーマップを図２４Ｂに示すデータマトリクスに応用すると、カラーヒートマップが得られる（図２４Ｄを参照されたい、さらなる明確さのために元のデータも示されている）。
【０６７０】
ペプチドの合成。標的分子のエピトープを再構築するためにペプチドのライブラリーを合成した。アミノ官能基化ポリプロピレン支持体を専用の親水性ポリマー製剤を接合することに続く、Ｎヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）と共にジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を使用するｔ−ブチルオキシカルボニル−ヘキサメチレンジアミン（ＢｏｃＨＭＤＡ）との反応および続くトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を使用するＢｏｃ基の切断によって得た。標準的Ｆｍｏｃペプチド合成をカスタム修正ＪＡＮＵＳ  ｌｉｑｕｉｄ  ｈａｎｄｌｉｎｇ  ｓｔａｔｉｏｎｓ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）によってアミノ官能基化固体支持体上でペプチドを合成するために使用した。構造模倣物の合成をＰｅｐｓｃａｎの専用Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  Ｌｉｎｋｅｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｏｎ  Ｓｃａｆｆｏｌｄ（ＣＬＩＰＳ）技術を使用して行った。ＣＬＩＰＳ技術は、ペプチドを単一ループ、二重ループ、三重ループ、シート様フォールド、ヘリックス様フォールドおよびこれらの組合せに構造化できるようにする。ＣＬＩＰＳ鋳型をシステイン残基にカップルする。ペプチド中の複数のシステインの側鎖を１つまたは２つのＣＬＩＰＳ鋳型にカップルした。例えば、Ｐ２  ＣＬＩＰＳ（２，６−ビス（ブロモメチル）ピリジン）の０．５ｍＭ溶液を重炭酸アンモニウム（２０ｍＭ、ｐＨ７．８）／アセトニトリル（１：３（ｖ／ｖ））に溶解した。この溶液をペプチドアレイに加えた。ＣＬＩＰＳ鋳型をペプチドアレイ（３μｌウエルを有する４５５ウエルプレート）の固相結合ペプチド中に存在する２個のシステインの側鎖に結合させた。ペプチドアレイを溶液で完全に覆って３０から６０分間、溶液中で穏やかに振とうした。最後にペプチドアレイを過剰量のＨ２Ｏで十分に洗浄し、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）中１％  ＳＤＳ／０．１％ベータメルカプトエタノールを含有する破壊緩衝液中で７０℃、３０分間超音波処理し、Ｈ２Ｏ中でのさらに４５分間の超音波処理が続いた。ペプチドを保持しているＴ３  ＣＬＩＰＳを、同様の方法だが今回は３個のシステインで作った。
【０６７１】
ＥＬＩＳＡスクリーニング。各合成ペプチドへの抗体の結合をＰＥＰＳＣＡＮベースＥＬＩＳＡで検査した。ペプチドアレイを一次抗体溶液でインキュベートした（一晩、４℃）。洗浄後、ペプチドアレイを好適な抗体ペルオキシダーゼコンジュゲート（ＳＢＡ）の１／１０００希釈物と１時間、２５℃でインキュベートした。洗浄後、ペルオキシダーゼ基質２，２’−アジノ−ジ−３−エチルベンズチアゾリンスルホネート（ＡＢＴＳ）および３パーセントＨ２Ｏ２  ２μｌ／ｍｌを加えた。１時間後、発色を測定した。発色を電荷結合素子（ＣＣＤ）−カメラおよび画像処理系で定量した。
【０６７２】
データ処理。ＣＣＤカメラから得られた値は、標準的９６ウエルプレートＥＬＩＳＡリーダーと同様に０から３０００ｍＡＵの範囲であった。結果を定量し、Ｐｅｐｌａｂデータベースに保存した。時折気泡を含有したウエルが偽陽性値を生じ、カードを手動で点検し、気泡によって生じたいかなる値も０と点数化した。
【０６７３】
合成品質管理。合成ペプチドの品質を検証するために、陽性および陰性対照ペプチドの別々のセットを並行して合成した。これらを抗体５７．９でスクリーニングした（参照  Posthumusら、J  Virology、１９９０年、６４巻:３３０４〜３３０９頁）。
結果
【０６７４】
スクリーニング。抗体結合は、抗体の濃度ならびにＥＬＩＳＡ緩衝液中で競合するタンパク質の量および性質を含む要因の組合せに依存する。同様にプレコート条件（実験試料とのインキュベーションの前のペプチドアレイの特異的処置）は、結合に影響を与えた。これらの詳細を表２４０に要約する。Ｐｅｐｓｃａｎ緩衝液およびプレコンディショニング（ＳＱ）について、数字は、競合するタンパク質（ウマ血清とオボアルブミンとの組合せ）の相対量を示す。
【表２４０】
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【０６７５】
抗体ＥＴ２００−１０４およびＥＴ２００−１１７を１μｇ／ｍｌでＥＬＩＳＡ用Ｎｕｎｃ  Ｍａｘｉｓｏｒｐプレートにコートし、ヤギ抗ヒトＩｇ−ＨＲＰ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ；＃２０１０／０５）、ミニカードスクリーニングにおいて使用するのと同じコンジュゲートで検出した。ＥＴ２００−１０４およびＥＴ２００−１１７についてシグナル＞１  ＯＤが二次Ａｂのいくつかの希釈物から得られ、二次抗体がこれらのｍＡｂの検出のために十分好適であることを示している。
【０６７６】
ハーセプチンを高濃度で、ブロッキング緩衝液の非存在で内部陰性対照として使用した。ハーセプチンは、共通配列ＬＲＧＳＰＬＩＬＹＲＦ、ＬＲＧＳＳＰＩＬＹＷＦおよびＡＰＲＧＳＰＰＩＬＹＷ（図２５）を有するペプチドに結合した。前述の配列を含有するペプチドは、検査試料のためのエピトープ候補から除外した。
【０６７７】
低ストリンジェンシー条件および高濃度下で検査した場合、抗体ＥＴ２００−１０４はすべてのセットで複数のペプチドモチーフに結合する（図２６）。結合したペプチドの大部分は、ハーセプチン（内部ネガティブ対照）について得られた結果に基づいて非特異的疎水性相互作用の結果であると疑われた。しかし、モチーフ６５７ＳＲＰＩＬＴＦＲＡＰＲ６６７を含有するペプチドの結合は特異的であると提案され、試料ＥＴ２００−１０４に固有に起因した。
【０６７８】
低ストリンジェンシー条件で検査される場合、抗体ＥＴ２００−１１７はすべてのセット上の複数のペプチドモチーフに弱い結合を生じた。すべてのセットから得られたデータの累積データ分析は、ハーセプチン内部陰性対照およびＥＴ２００−１０４とは異なり、抗体がＦｃ受容体様タンパク質５のドメイン９のペプチドストレッチ８２９ＲＳＥＴＶＴＬＹＩＴＧＬ８４０を含有する領域を固有に認識することを示唆している。再度、結合した他のペプチドの大部分は、抗体ＥＴ２００−１０４について低ストリンジェンシー条件下で記録された同じ結合パターンを共有することから、非特異的疎水性相互作用の結果であると考えられた。
結論
【０６７９】
ハーセプチンに対してＥＴ２００−１０４およびＥＴ２００−１１７について回収された結果の累積データ分析は、抗体ＥＴ２００−１０４がＦｃ受容体様タンパク質５のドメイン８内の残基６５７ＳＲＰＩＬＴＦＲＡＰＲ６６７を標的とし、抗体ＥＴ２００−１１７がドメイン９内の残基８２９ＲＳＥＴＶＴＬＹＩＴＧＬ８４０を標的とすることを示唆している。加えて、両試料について複数のシグナルがハーセプチンによって非特異的に結合されるペプチドで記録された。ＥＴ２００−１０４について識別されたエピトープ候補をＦｃ受容体様タンパク質５の公に利用可能な３Ｄモデルを使用して視覚化した（図２７）。ＥＴ２００−１１７についてのエピトープ候補は、標的の非モデル化部分内に位置し、したがって視覚化できない。
【化１】
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【化２】
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【化３】
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【０６８０】
前述の記載から変更および改変が、本明細書に記載の本発明にそれを種々の使用および条件に適合させるために行われ得ることは明らかである。そのような実施形態も続く特許請求の範囲の範囲内である。
【０６８１】
すべての特許および刊行物ならびに本明細書において述べられる受託または参照番号によって参照される配列は、それぞれ独立した特許および刊行物ならびに配列が具体的かつ個々に参照により組み込まれると示された場合と同様に参照により本明細書に組み込まれる。
【図１−１】
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【図１−２】
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【図１−３】
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【図１−４】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ−１】
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【図３Ｄ−２】
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【図４】
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【図５】
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【図６−１】
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【図６−２】
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【図７】
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【図８】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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