(57)【要約】高い表面積を有する脆性マトリックス粒子として配合される、薬剤併用二重及び三重療法が、本明細書において提供される。これらの粒子製剤を、肺に薬剤の組み合わせを提供する吸入またはエアロゾル投与技術に使用することができる。いくつかの態様において、これらの組成物を使用して、喘息またはＣＯＰＤなどの呼吸器疾患または障害を治療することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．以下の群：
ｉ．長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）、
ｉｉ．長時間作用性ムスカリン拮抗薬（ＬＡＭＡ）及び
ｉｉｉ．コルチコステロイド（ＣＳ）のそれぞれの活性薬学的成分の治療有効量を含む三重療法、または
ｂ．以下の群：
ｉ．長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）及び
ｉｉ．コルチコステロイド（ＣＳ）の両方の活性薬学的成分の治療有効量を含む二重療法
のいずれかを含み、
５ｍ２／ｇを超える比表面積を有する脆性マトリックス粒子として製剤化されている、薬学的組成物。
【請求項２】
１つ以上の賦形剤を更に含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
前記賦形剤が、糖、糖誘導体、またはアミノ酸である、請求項２に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
前記賦形剤が、糖または糖誘導体である、請求項３に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
前記賦形剤が、ラクトース、マンニトール、またはトレハロースである、請求項４に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
前記賦形剤がアミノ酸である、請求項２に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
前記賦形剤がグリシンである、請求項６に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
前記長時間作用性β−作動薬が、サルメテロールまたはホルモテロールの塩である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
前記長時間作用性β−作動薬がサルメテロールキシナホ酸塩である、請求項８に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
前記長時間作用性β−作動薬がホルモテロールフマル酸塩である、請求項８に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
コルチコステロイドが、モメタゾンフロ酸エステルまたはブデソニドである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬がチオトロピウム塩である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬がチオトロピウム臭化物である、請求項１２に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
前記二重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
前記二重療法が、前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約５：２２の重量比を有する、請求項１４に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と、前記コルチコステロイドとの約１：０．１：０．１〜約１：１００：１００の重量比を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と、前記コルチコステロイドとの約１：２：３５．５である、請求項１６に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬との約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、請求項１〜１２、１６、または１７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬との約１：２である、請求項１８に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、請求項１〜１２、または１６〜１９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約２：７０である、請求項２０に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１０００の重量比を含む、請求項１〜１２、または１６〜２１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と前記コルチコステロイドとの約４：７０である、請求項２２に記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
前記薬学的組成物が、組成物中に前記二重療法または前記三重療法と前記賦形剤との約１：０〜約１：９のモル比を有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２５】
前記モル比が、前記二重療法または前記三重療法と前記賦形剤との約１：１である、請求項２４に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
前記薬学的組成物が単位用量で製剤化されている、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約５００μｇの前記長時間作用性β−作動薬の用量を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
前記長時間作用性β−作動薬がサルメテロールキシナホ酸塩である場合、前記長時間作用性β−作動薬の前記用量が約５０μｇである、請求項２７に記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
前記長時間作用性β−作動薬がホルモテロールフマル酸塩である場合、前記長時間作用性β−作動薬の前記用量が約４．５μｇである、請求項２７に記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約１００μｇの前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬の用量を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬の前記用量が約９μｇである、請求項２７に記載の薬学的組成物。
【請求項３２】
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約１０００μｇの前記コルチコステロイドの用量を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３３】
前記コルチコステロイドがモメタゾンフロ酸エステルである場合、前記コルチコステロイドの前記用量が約２２０μｇである、請求項３２に記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
前記コルチコステロイドがブデソニドである場合、前記コルチコステロイドの前記用量が約１６０μｇである、請求項３２に記載の薬学的組成物。
【請求項３５】
前記薬学的組成物が、鼻腔内への、エアロゾルによる、肺への、または吸入による投与のために製剤化されている、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３６】
前記薬学的組成物が、吸入器による使用のために製剤化されている、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３７】
前記吸入器が、定量吸入器、乾燥粉末吸入器、単一用量吸入器、多単位用量吸入器、ネブライザー、または加圧式定量吸入器である、請求項３６に記載の薬学的組成物。
【請求項３８】
前記薬学的組成物が、サルメテロールキシナホ酸塩及びモメタゾンフロ酸エステルを含む前記二重療法である、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３９】
前記薬学的組成物が、ホルモテロールフマル酸塩、チオトロピウム臭化物及びブデソニドを含む前記三重療法である、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４０】
前記薬学的組成物が、約５ｍ２／ｇ〜約１０００ｍ２／ｇの比表面積を有する、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４１】
前記薬学的組成物が、約１０ｍ２／ｇ〜約５００ｍ２／ｇの比表面積を有する、請求項４０に記載の薬学的組成物。
【請求項４２】
前記薬学的組成物が、約２０ｍ２／ｇ〜約２５０ｍ２／ｇの比表面積を有する、請求項４１に記載の薬学的組成物。
【請求項４３】
前記薬学的組成物が、８５％を超える総放出用量（ＴＥＤ）を有する、請求項１〜４２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４４】
前記総放出用量（ＴＥＤ）が約９０％〜約１００％である、請求項４３に記載の薬学的組成物。
【請求項４５】
前記薬学的組成物があらゆる不純物を含まない、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４６】
前記薬学的組成物が、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、またはポリスチレンを本質的に含まない、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４７】
前記薬学的組成物が、あらゆるポリマー賦形剤を本質的に含まない、請求項１〜４６のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４８】
前記薬学的組成物が、ポロキサマー、ポリエチレングリコール、またはポリプロピレングリコールを本質的に含まない、請求項１〜４７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４９】
前記薬学的組成物が、あらゆる界面活性剤を本質的に含まない、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項５０】
前記薬学的組成物が、前記賦形剤及び前記活性薬学的組成物以外の他の化合物を含まない、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項５１】
呼吸器疾患または障害を、その必要性のある患者において治療または予防する方法であって、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の治療有効量を前記患者に投与することを含む、前記方法。
【請求項５２】
前記呼吸器疾患または障害が、前記肺または洞の炎症を伴う障害である。請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記呼吸器疾患または障害が喘息である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
前記呼吸器疾患または障害が慢性閉塞性肺疾患である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
前記薬学的組成物が吸入により投与される、請求項５１〜５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記治療有効量が、１回の吸入により前記患者に投与される、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記治療有効量が、２回以上の吸入により前記患者に投与される、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
前記治療有効量が、２、３、または４回の吸入により投与される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記方法が、前記治療有効量を前記患者に１日１回投与することを含む、請求項５１〜５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
前記方法が、前記治療有効量を前記患者に１日２回以上投与することを含む、請求項５１〜５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
脆性マトリックス薬学的組成物を調製する方法であって、
（Ａ）２つ以上の活性薬学的作用物質を、有機溶媒及び水を含む溶媒中に混合して、薬学的組成物を形成し、前記薬学的組成物が、前記溶媒中に約０．０１％〜約１０％（ｗ／ｖ）の前記活性薬学的作用物質の量を含むことと、
（Ｂ）前記薬学的組成物を、表面が約−７０℃〜約−１２０℃の温度である回転面に適用することと、
（Ｃ）前記薬学的組成物を凍結して、脆性マトリックス薬学的組成物を形成することと
を含む、前記方法。
【請求項６２】
前記活性薬学的成分が、長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬及びコルチコステロイドから選択される、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記薬学的組成物が、１つ以上の賦形剤を更に含む、請求項６１または請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記方法が、前記脆性マトリックス薬学的組成物を凍結乾燥することを更に含む、請求項６１〜６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
前記量が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約６％（ｗ／ｖ）である、請求項６１〜６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記量が、約０．１％（ｗ／ｖ）〜約５％（ｗ／ｖ）である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
請求項６１に記載の方法によって調製された薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１５年５月１日出願の米国特許仮出願第６２／１５６，０５２号の優先権の利益を主張し、その全ての内容が参照として本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
１．発明の分野
本発明は、一般に、薬学的組成物の分野に関する。より詳細には、脆性マトリックス粒子として調製された２つ、または３つの活性薬学的成分を有する薬学的組成物に関する。
【０００３】
２．関連技術の説明
喘息は、重大な健康問題であり、世界中の家族に相当な負担を与えている。日々の暮らしを厳しく制約し、致死的でありうる。全ての年代の人々が、この慢性気道障害に罹患し、喘息の発生率は、大部分の国々において、とりわけ小児に増加している（Ｂａｔｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。喘息に指示された治療方法の１つは、長時間作用性β２−作動薬（ＬＡＢＡ）を伴う、または伴わないコルチコステロイド（ＩＣＳ）である（Ｓｉｌｖａｓｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ  ａｎｄ  Ｐａｎ，２０１０）。加えて、ＩＣＳ／ＬＡＢＡの組み合わせは、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に有効な療法であり、他の療法と比較して、増悪、入院、緊急外来受診及び医療費を低減することが示されている（Ｍａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０）。
【０００４】
グルココルチコステロイド受容体を刺激する長時間作用性β２−作動薬の能力は、吸入コルチコステロイドの活性を改善する。吸入した組み合わせは肺の内部に同時沈着することが重要であり、それは、この相乗作用が細胞／分子レベルで生じるからである（Ｇｒｅｅｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４）。加えて、サルメテロールキシナホ酸塩（ＳＸ）は、難溶性であり、モメタゾンフロ酸エステル（ＭＦ）は、実質的に水不溶性であり（Ｊｏｕｙｂａｎ−Ｇｈａｒａｍａｌｅｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００１、Ｚｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，２００７）、これらの低溶解性は吸収及び生物学的利用能を制限し、このことは臨床使用に影響を与える。異なる結晶改変戦略が、１つを超えるＡＰＩ構成成分からなる製剤の同時沈着を達成することができる特定の化合物、最近では、とりわけ共結晶系（Ｓｏｗａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４、Ｅｖｏｒａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１）及び非共晶系（Ｌｏｂｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３、Ｓｈａｙａｎｆａｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）の物理化学的特性を変更し、経口生物学的利用能を増強することに有効である。
【０００５】
しかし、同じ粒子内に含有されたＳＸ及びＭＦを含有する、吸入用の固定用量を組み合わせた市販製品は、今のところ存在しない。同じ粒子内にＳＸとＭＦを有することは、肺の内部の同じ標的部位へのＡＰＩの沈着を可能にする。２つのＡＰＩを含有する現在利用可能な製品は、典型的には別々に微粒子化され、製剤及び装置内に別個の粒子として留まっている（Ｐａｔｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）。更に、微粒子化ＡＰＩ粒子は、異なる結晶学及び形態学を有し、空気力学的性能に差をもたらす可能性がある（Ｐａｒｉｋｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）。研究者たちは、多剤を改変して単一粒子にすることによって、伝統的なブレンドの問題に対する解決策を提示している（Ｐａｒｉｋｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２、Ｗｅｅｒｓ  ａｎｄ  Ｔａｒａｒａ，２０１４）。このように、多数の活性薬学的成分を同じ粒子に含有する新たな組成物が、必要とされる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示は、鼻腔内への、吸引による、エアロゾルによる、または肺への投与のための脆性マトリックス粒子として配合される薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態において、これらの組成物は、長時間作用性β−作動薬及びコルチコステロイド、または長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬及びコルチコステロイドを含む。これらの組成物を使用して、喘息または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）が含まれるが、これらに限定されない呼吸器疾患または障害を治療することができる。
【０００７】
いくつかの態様において、本開示は、
ａ．以下の群：
ｉ．長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）、
ｉｉ．長時間作用性ムスカリン拮抗薬（ＬＡＭＡ）及び
ｉｉｉ．コルチコステロイド（ＣＳ）のそれぞれの活性薬学的成分の治療有効量を含む三重療法、または
ｂ．以下の群：
ｉ．長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）及び
ｉｉ．コルチコステロイド（ＣＳ）の両方の活性薬学的成分の治療有効量を含む二重療法
のいずれかを含む薬学的組成物を提供し、
ここで薬学的組成物は、５ｍ２／ｇを超える比表面積を有する脆性マトリックス粒子として配合される。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、１つ以上の賦形剤を更に含む。使用されうる賦形剤には、糖、糖誘導体、またはアミノ酸が含まれる。賦形剤は、ラクトース、マンニトール、またはトレハロースなどの糖または糖誘導体でありうる。他の実施形態において、賦形剤はグリシンなどのアミノ酸である。
【０００８】
いくつかの実施形態において、長時間作用性β−作動薬は、サルメテロールキシナホ酸塩またはホルモテロールフマル酸塩などのサルメテロールまたはホルモテロールの塩である。いくつかの実施形態において、コルチコステロイドは、モメタゾンフロ酸エステルまたはブデソニドである。いくつかの実施形態において、長時間作用性ムスカリン拮抗薬は、チオトロピウム臭化物などのチオトロピウム塩である。
【０００９】
二重療法は、組成物中に長時間作用性β−作動薬とコルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００の重量比を含むことができる。いくつかの実施形態において、二重療法は、長時間作用性β−作動薬とコルチコステロイドとの約５：２２の重量比を有する。他の実施形態において、三重療法は、組成物中に長時間作用性β−作動薬と長時間作用性ムスカリン拮抗薬とコルチコステロイドとの約１：０．１：０．１〜約１：１００：１００、例えば、長時間作用性β−作動薬と長時間作用性ムスカリン拮抗薬とコルチコステロイドとの約１：２：３５．５の重量比を含む。いくつかの実施形態において、三重療法は、組成物中に長時間作用性β−作動薬と長時間作用性ムスカリン拮抗薬との約１：０．１〜約１：１００、例えば、長時間作用性β−作動薬と長時間作用性ムスカリン拮抗薬との約１：２の重量比を含む。いくつかの実施形態において、三重療法は、組成物中に長時間作用性β−作動薬とコルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００、例えば、長時間作用性β−作動薬とコルチコステロイドとの約２：７０の重量比を含む。いくつかの実施形態において、三重療法は、組成物中に長時間作用性ムスカリン拮抗薬とコルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１０００、例えば、長時間作用性ムスカリン拮抗薬とコルチコステロイドとの約４：７０の重量比を含む。薬学的組成物は、組成物中に二重療法または三重療法と賦形剤との約１：０〜約１：９、例えば、二重療法または三重療法と賦形剤との約１：１のモル比を有することができる。
【００１０】
いくつかの態様において、薬学的組成物は、単位用量で配合される。薬学的組成物の単位用量は、長時間作用性β−作動薬がサルメテロールキシナホ酸塩である場合には約５０μｇ、または長時間作用性β−作動薬がホルモテロールフマル酸塩である場合には約４．５μｇなど、約１〜約５００μｇの長時間作用性β−作動薬の用量を含むことができる。いくつかの実施形態において、薬学的組成物の単位用量は、約１〜約１００μｇ用量、例えば約９μｇの単位用量の長時間作用性ムスカリン拮抗薬を含む。いくつかの実施形態において、薬学的組成物の単位用量は、コルチコステロイドがモメタゾンフロ酸エステルである場合には約２２０μｇ、またはコルチコステロイドがブデソニドである場合には約１６０μｇなど、約１〜約１０００μｇの用量のコルチコステロイドを含む。
【００１１】
いくつかの態様において、薬学的組成物は、鼻腔内への、エアロゾルによる、肺への、または吸入による投与のために配合される。薬学的組成物は、定量吸入器、乾燥粉末吸入器、単一用量吸入器、多単位用量吸入器、ネブライザー（ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ）、または加圧式定量吸入器が含まれる吸入器における使用のために配合されうる。
【００１２】
いくつかの態様において、薬学的組成物は、サルメテロールキシナホ酸塩及びモメタゾンフロ酸エステルを含む二重療法である。他の態様において、薬学的組成物は、ホルモテロールフマル酸塩、チオトロピウム臭化物及びブデソニドを含む三重療法である。
【００１３】
いくつかの態様において、薬学的組成物は、約５ｍ２／ｇ〜約１０００ｍ２／ｇ、約１０ｍ２／ｇ〜約５００ｍ２／ｇ、または約２０ｍ２／ｇ〜約２５０ｍ２／ｇの比表面積を有する。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、８５％を超える、例えば約９０％〜約１００％の総放出用量（ＴＥＤ）を有する。
【００１４】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、あらゆる不純物を含まない。薬学的組成物は、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、またはポリスチレンを実質的に含まないこともある。薬学的組成物は、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、またはポリスチレンを本質的に含まないこともある。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、あらゆるポリマー賦形剤を本質的に含まない。薬学的組成物は、ポリキサマー、ポリエチレングリコール、またはポリプロピレングリコールを実質的に含まないこともある。薬学的成物は、ポリキサマー、ポリエチレングリコール、またはポリプロピレングリコールを本質的に含まないこともある。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、あらゆる界面活性剤を本質的に含まない。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、賦形剤及び活性薬学的組成物以外の他の化合物を含まない。
【００１５】
なお別の態様において、本開示は、呼吸器疾患または障害を、その必要性のある患者において治療または予防する方法であって、本明細書に開示されている薬学的組成物の治療有効量を患者に投与することを含む方法を提供する。治療されうる呼吸器疾患または障害には、肺または副鼻腔の炎症を伴う障害が含まれる。加えて、呼吸器疾患または障害は、喘息または慢性閉塞性肺疾患でありうる。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は吸入により投与される。治療有効量を１回の吸入により、または２回以上の吸入により患者に投与することができる。いくつかの実施形態において、治療有効量は２、３、または４回の吸入により投与される。いくつかの実施形態において、本方法は、治療有効量を患者に１日１回投与することを含む。いくつかの実施形態において、本方法は、治療有効量を患者に１日２回以上投与することを含む。
【００１６】
なおさらに別の態様において、本開示は、脆性マトリックス薬学的組成物を調製する方法であって、
（Ａ）２つ以上の活性薬学的作用物質を、有機溶媒及び水を含む溶媒中に混合して、薬学的組成物を形成し、薬学的組成物が、溶媒中に約０．０１％〜約１０％（ｗ／ｖ）の活性薬学的作用物質の量を含むことと、
（Ｂ）薬学的組成物を、表面が約−７０℃〜約−１２０℃の温度である回転面に適用することと、
（Ｃ）薬学的組成物を凍結して、脆性マトリックス薬学的組成物を形成することと
を含む方法を提供する。
【００１７】
いくつかの実施形態において、活性薬学的成分は、長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬及びコルチコステロイドから選択される。本方法は、１つ以上の賦形剤を薬学的組成物に添加することを更に含むこともできる。いくつかの実施形態において、本方法は、脆性マトリックス薬学的組成物を凍結乾燥することを更に含む。いくつかの実施形態において、量は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約６％（ｗ／ｖ）である。いくつかの実施形態において、量は、約０．１％（ｗ／ｖ）〜約５％（ｗ／ｖ）である。
【００１８】
なおさらに別の態様において、本開示は、
（Ａ）２つ以上の活性薬学的作用物質を、有機溶媒及び水を含む溶媒中に混合して、薬学的組成物を形成し、薬学的組成物が、溶媒中に約０．０１％〜約１０％（ｗ／ｖ）の活性薬学的作用物質の量を含むことと、
（Ｂ）薬学的組成物を、表面が約−７０℃〜約−１２０℃の温度である回転面に適用することと、
（Ｃ）薬学的組成物を凍結して、脆性マトリックス薬学的組成物を形成することと
を含む方法により調製された脆性マトリックス薬学的組成物を提供する。
【００１９】
いくつかの実施形態において、活性薬学的成分は、長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬及びコルチコステロイドから選択される。本方法は、１つ以上の賦形剤を薬学的組成物に添加することを更に含むこともできる。いくつかの実施形態において、本方法は、脆性マトリックス薬学的組成物を凍結乾燥することを更に含む。いくつかの実施形態において、量は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約６％（ｗ／ｖ）である。いくつかの実施形態において、量は、約０．１％（ｗ／ｖ）〜約５％（ｗ／ｖ）である。
【００２０】
本明細書に使用されるとき、「ａ」または「ａｎ」は、１つ以上を意味してもよい。請求項（複数可）において本明細書で使用されるとき、語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」と共に使用される場合、語「ａ」または「ａｎ」は、１つ、または１つを超えることを意味してもよい。
【００２１】
請求項における用語「または（ｏｒ）」の使用は、代替案のみ、または代替案が相互排他的であることを指すために特に明確に指示されない限り、「及び／または（ａｎｄ／ｏｒ）」を意味するために使用されるが、本開示は、代替案のみ、ならびに「及び／または」を指す定義を支持する。本明細書に使用されるとき、「別の」は、少なくとも第２またはそれ以上を意味してもよい。
【００２２】
本明細書の全体を通して、用語「約」は、装置、値を決定するために用いられる方法、または研究対象の間に存在するばらつきの固有の誤差変動を、値が含むことを示すために使用される。
【００２３】
用語「有効」は、この用語が明細書及び／または特許請求の範囲に使用されるとき、所望の予測される、または意図される結果を達成するのに適切であることを意味する。「有効量」、「治療有効量」、または「薬学的有効量」は、化合物により患者または対象を治療する文脈で使用される場合、疾患の治療のために対象または患者に投与されるときに、そのような疾患の治療を行うのに十分である化合物の量を意味する。
【００２４】
「予防」または「予防する」は、（１）疾患の危険性がありうる及び／または疾患に罹患しやすくなっていることがありうるが、疾患の任意または全ての病理または症候を経験または示していない対象または患者において、疾患の発症を抑制すること、ならびに／あるいは（２）疾患の危険性がありうる及び／または疾患に罹患しやすくなっていることがありうるが、疾患の任意または全ての病理または症候を経験または示していない対象または患者において、疾患の病理または症候の発症を緩徐することを含む。
【００２５】
用語「含まない」は、提示された構成成分の少なくとも９５％を含有し、組成物または粒子が含まない構成成分の５％未満を含有する粒子を示唆するために使用される。用語「実施的に含まない」は、提示された構成成分の９８％を含有し、組成物または粒子が実質的に含まない構成成分の２％未満を含有する粒子を示唆するために使用される。いくつかの実施形態において、用語「本質的に含まない」は、提示された構成成分の少なくとも９９％を含有し、本質的に含まれない構成成分の任意の構成成分の１％未満を含有する粒子または組成物を記載するために使用される。
【００２６】
本明細書に使用されるとき、二重療法または三重療法という用語は、本明細書に提示されている少なくとも２つ、または３つの活性薬学的成分を含む。これらの用語は、これらの療法が２つ、または３つの活性薬学的成分だけを含むのではなく、むしろ少なくとも２つ、または少なくとも３つの活性薬学的成分を含むことを示唆することが意図されることも、考慮される。
【００２７】
本発明の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明によって明らかとなる。しかし、詳細な説明及び特定の例は、本発明の好ましい実施形態を示しているが、本発明の精神及び範囲内の様々な変更及び修正がこの詳細な説明によって当業者に明白となるので、例示のためだけに提示されていることが理解されるべきである。
【００２８】
以下の図面は、本明細書の一部を形成し、本発明の特定の態様を更に示すために含まれる。本発明は、これらの図面の１つ以上を、本明細書に提示されている特定の実施形態の詳細な説明と組み合わせて参照することによって、より良好に理解することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】ＨａｎｄｉＨａｌｅｒ（登録商標）による投与前後のＢＭＰの幾何学的粒径分布を示す。
【図２】微粒子化（上側）及びＢＭＰ（下側）製剤を使用した三重組み合わせエアロゾルの空気力学的粒径分布を示し、ホルモテロール、チオトロピウム及びブデソニドの値を各部位において左から右に示す。エアロゾルは、ＨａｎｄｉＨａｌｅｒ（登録商標）を使用して５１ｌ／分で発生させた。
【図３】ＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦ（下側から上側へ）の変調ＤＳＣプロファイルを示す。Ｔｇが小窓で示されている。
【図４Ａ】組成物の粉末Ｘ線回折パターンを示す。図４Ａは、微粒子化ＳＸＭＦ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦ、微粒子化ＳＸＭＦＬａｃ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、微粒子化ＳＸＭＦＭａｎ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、微粒子化ＳＸＭＦＧｌｙ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、微粒子化ＳＸＭＦＴｒｅ、ＴＦＦ  ＳＸＭＦＴｒｅ（下側から上側へ）のＸ線粉末回折パターンを示す。図４Ｂは、２５℃／３０％ＲＨで６か月間の貯蔵したＢＭＰ組み合わせ：ＢＭＰ  ＳＸＭＦ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅ（下側から上側へ）のＸ線粉末回折パターンを示す。
【図４Ｂ】組成物の粉末Ｘ線回折パターンを示す。図４Ａは、微粒子化ＳＸＭＦ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦ、微粒子化ＳＸＭＦＬａｃ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、微粒子化ＳＸＭＦＭａｎ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、微粒子化ＳＸＭＦＧｌｙ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、微粒子化ＳＸＭＦＴｒｅ、ＴＦＦ  ＳＸＭＦＴｒｅ（下側から上側へ）のＸ線粉末回折パターンを示す。図４Ｂは、２５℃／３０％ＲＨで６か月間の貯蔵したＢＭＰ組み合わせ：ＢＭＰ  ＳＸＭＦ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅ（下側から上側へ）のＸ線粉末回折パターンを示す。
【図５Ａ】（図５Ａ）微粒子化ＳＸＭＦ及び（図５Ｂ）ＢＭＰ  ＳＸＭＦのＳＥＭ画像を示す。
【図５Ｂ】（図５Ａ）微粒子化ＳＸＭＦ及び（図５Ｂ）ＢＭＰ  ＳＸＭＦのＳＥＭ画像を示す。
【図６Ａ】（図６Ａ）微粒子化単一成分及び（図６Ｂ）ＴＦＦ加工共薬剤（ｃｏ−ｄｒｕｇ）沈着非晶質形態のフーリエ変換赤外分光法を示す。
【図６Ｂ】（図６Ａ）微粒子化単一成分及び（図６Ｂ）ＴＦＦ加工共薬剤（ｃｏ−ｄｒｕｇ）沈着非晶質形態のフーリエ変換赤外分光法を示す。
【図７】０％〜９０％の１サイクル後に生成された（□）ＢＭＰ  ＳＸＭＦ、（◇）ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、（△）ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、（×）ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ及び（○）ＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅの吸着（−）及び脱着（−−−）の等温線を示す。
【図８Ａ】Ｍｉａｔにより９０Ｌ／分で生成された後の（図８Ａ）微粒子化ＳＸＭＦ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦ、（図８Ｂ）微粒子化ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、（図８Ｃ）微粒子化ＳＸＭＦＭａｎ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、（図８Ｄ）微粒子化ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、ならびに（図８Ｅ）微粒子化ＳＸＭＦＴｒｅ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅにおけるＳＸ及びＭＦの空気力的直径分布を示す。値を平均±ＳＤ（ｎ＝３）で表した。
【図８Ｂ】Ｍｉａｔにより９０Ｌ／分で生成された後の（図８Ａ）微粒子化ＳＸＭＦ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦ、（図８Ｂ）微粒子化ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、（図８Ｃ）微粒子化ＳＸＭＦＭａｎ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、（図８Ｄ）微粒子化ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、ならびに（図８Ｅ）微粒子化ＳＸＭＦＴｒｅ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅにおけるＳＸ及びＭＦの空気力的直径分布を示す。値を平均±ＳＤ（ｎ＝３）で表した。
【図８Ｃ】Ｍｉａｔにより９０Ｌ／分で生成された後の（図８Ａ）微粒子化ＳＸＭＦ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦ、（図８Ｂ）微粒子化ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、（図８Ｃ）微粒子化ＳＸＭＦＭａｎ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、（図８Ｄ）微粒子化ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、ならびに（図８Ｅ）微粒子化ＳＸＭＦＴｒｅ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅにおけるＳＸ及びＭＦの空気力的直径分布を示す。値を平均±ＳＤ（ｎ＝３）で表した。
【図８Ｄ】Ｍｉａｔにより９０Ｌ／分で生成された後の（図８Ａ）微粒子化ＳＸＭＦ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦ、（図８Ｂ）微粒子化ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、（図８Ｃ）微粒子化ＳＸＭＦＭａｎ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、（図８Ｄ）微粒子化ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、ならびに（図８Ｅ）微粒子化ＳＸＭＦＴｒｅ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅにおけるＳＸ及びＭＦの空気力的直径分布を示す。値を平均±ＳＤ（ｎ＝３）で表した。
【図８Ｅ】Ｍｉａｔにより９０Ｌ／分で生成された後の（図８Ａ）微粒子化ＳＸＭＦ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦ、（図８Ｂ）微粒子化ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、（図８Ｃ）微粒子化ＳＸＭＦＭａｎ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、（図８Ｄ）微粒子化ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、ならびに（図８Ｅ）微粒子化ＳＸＭＦＴｒｅ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅにおけるＳＸ及びＭＦの空気力的直径分布を示す。値を平均±ＳＤ（ｎ＝３）で表した。
【図９】通気器（Ｉｎｓｕｆｆｌａｔｏｒ）により５１Ｌ／分で生成された後の微粒子化ＳＸＭＦ及びＴＦＦ  ＳＸＭＦにおけるＳＸ及びＭＦの空気力的直径分布を示す。
【図１０Ａ】倍率１０．０Ｋの（図１０Ａ）ブデソニド、（図１０Ｂ）チオトロピウム臭化物及び（図１０Ｃ）ホルモテロールフマル酸塩、（図１０Ｄ）マンニトール及び（図１０Ｅ）ラクトース一水和物（１．０Ｋ）のＳＥＭ画像を示す。
【図１０Ｂ】倍率１０．０Ｋの（図１０Ａ）ブデソニド、（図１０Ｂ）チオトロピウム臭化物及び（図１０Ｃ）ホルモテロールフマル酸塩、（図１０Ｄ）マンニトール及び（図１０Ｅ）ラクトース一水和物（１．０Ｋ）のＳＥＭ画像を示す。
【図１０Ｃ】倍率１０．０Ｋの（図１０Ａ）ブデソニド、（図１０Ｂ）チオトロピウム臭化物及び（図１０Ｃ）ホルモテロールフマル酸塩、（図１０Ｄ）マンニトール及び（図１０Ｅ）ラクトース一水和物（１．０Ｋ）のＳＥＭ画像を示す。
【図１０Ｄ】倍率１０．０Ｋの（図１０Ａ）ブデソニド、（図１０Ｂ）チオトロピウム臭化物及び（図１０Ｃ）ホルモテロールフマル酸塩、（図１０Ｄ）マンニトール及び（図１０Ｅ）ラクトース一水和物（１．０Ｋ）のＳＥＭ画像を示す。
【図１０Ｅ】倍率１０．０Ｋの（図１０Ａ）ブデソニド、（図１０Ｂ）チオトロピウム臭化物及び（図１０Ｃ）ホルモテロールフマル酸塩、（図１０Ｄ）マンニトール及び（図１０Ｅ）ラクトース一水和物（１．０Ｋ）のＳＥＭ画像を示す。
【図１１Ａ】（図１１Ａ）ジェットミル粉砕ブデソニド、（図１１Ｂ）ジェットミル粉砕チオトロピウム、（図１１Ｃ）ジェットミル粉砕ホルモテロール、ならびに物理的混合物の（図１１Ｄ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ及び（図１１Ｅ）ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭのＳＥＭ画像（５．０Ｋ）を示す。
【図１１Ｂ】（図１１Ａ）ジェットミル粉砕ブデソニド、（図１１Ｂ）ジェットミル粉砕チオトロピウム、（図１１Ｃ）ジェットミル粉砕ホルモテロール、ならびに物理的混合物の（図１１Ｄ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ及び（図１１Ｅ）ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭのＳＥＭ画像（５．０Ｋ）を示す。
【図１１Ｃ】（図１１Ａ）ジェットミル粉砕ブデソニド、（図１１Ｂ）ジェットミル粉砕チオトロピウム、（図１１Ｃ）ジェットミル粉砕ホルモテロール、ならびに物理的混合物の（図１１Ｄ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ及び（図１１Ｅ）ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭのＳＥＭ画像（５．０Ｋ）を示す。
【図１１Ｄ】（図１１Ａ）ジェットミル粉砕ブデソニド、（図１１Ｂ）ジェットミル粉砕チオトロピウム、（図１１Ｃ）ジェットミル粉砕ホルモテロール、ならびに物理的混合物の（図１１Ｄ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ及び（図１１Ｅ）ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭのＳＥＭ画像（５．０Ｋ）を示す。
【図１１Ｅ】（図１１Ａ）ジェットミル粉砕ブデソニド、（図１１Ｂ）ジェットミル粉砕チオトロピウム、（図１１Ｃ）ジェットミル粉砕ホルモテロール、ならびに物理的混合物の（図１１Ｄ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ及び（図１１Ｅ）ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭのＳＥＭ画像（５．０Ｋ）を示す。
【図１２Ａ】ＴＦＦ製剤の（図１２Ａ）Ｂｕｄ＿Ｌａｃ、（図１２Ｂ）Ｂｕｄ＿Ｍａｎ、（図１２Ｃ）Ｔｉｏ＿Ｌａｃ及び（図１２Ｄ）Ｔｉｏ＿ＭａｎのＳＥＭ画像を１．０Ｋ倍率で示す。
【図１２Ｂ】ＴＦＦ製剤の（図１２Ａ）Ｂｕｄ＿Ｌａｃ、（図１２Ｂ）Ｂｕｄ＿Ｍａｎ、（図１２Ｃ）Ｔｉｏ＿Ｌａｃ及び（図１２Ｄ）Ｔｉｏ＿ＭａｎのＳＥＭ画像を１．０Ｋ倍率で示す。
【図１２Ｃ】ＴＦＦ製剤の（図１２Ａ）Ｂｕｄ＿Ｌａｃ、（図１２Ｂ）Ｂｕｄ＿Ｍａｎ、（図１２Ｃ）Ｔｉｏ＿Ｌａｃ及び（図１２Ｄ）Ｔｉｏ＿ＭａｎのＳＥＭ画像を１．０Ｋ倍率で示す。
【図１２Ｄ】ＴＦＦ製剤の（図１２Ａ）Ｂｕｄ＿Ｌａｃ、（図１２Ｂ）Ｂｕｄ＿Ｍａｎ、（図１２Ｃ）Ｔｉｏ＿Ｌａｃ及び（図１２Ｄ）Ｔｉｏ＿ＭａｎのＳＥＭ画像を１．０Ｋ倍率で示す。
【図１３Ａ】ＴＦＦ製剤の（図１３Ａ）Ｆｏｒ＿Ｌａｃ、（図１３Ｂ）Ｆｏｒ＿Ｍａｎ、（図１３Ｃ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ及び（図１３Ｄ）ＢＴＦ＿ＭａｎのＳＥＭ画像を１．０Ｋの倍率で示す。
【図１３Ｂ】ＴＦＦ製剤の（図１３Ａ）Ｆｏｒ＿Ｌａｃ、（図１３Ｂ）Ｆｏｒ＿Ｍａｎ、（図１３Ｃ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ及び（図１３Ｄ）ＢＴＦ＿ＭａｎのＳＥＭ画像を１．０Ｋの倍率で示す。
【図１３Ｃ】ＴＦＦ製剤の（図１３Ａ）Ｆｏｒ＿Ｌａｃ、（図１３Ｂ）Ｆｏｒ＿Ｍａｎ、（図１３Ｃ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ及び（図１３Ｄ）ＢＴＦ＿ＭａｎのＳＥＭ画像を１．０Ｋの倍率で示す。
【図１３Ｄ】ＴＦＦ製剤の（図１３Ａ）Ｆｏｒ＿Ｌａｃ、（図１３Ｂ）Ｆｏｒ＿Ｍａｎ、（図１３Ｃ）ＢＴＦ＿Ｌａｃ及び（図１３Ｄ）ＢＴＦ＿ＭａｎのＳＥＭ画像を１．０Ｋの倍率で示す。
【図１４】未加工のラクトース一水和物、マンニトール、ブデソニド、チオトロピウム及びホルモテロール、ジェットミル粉砕されたブデソニド、チオトロピウム及びホルモテロールとマンニトール（ＢＴＦ＿Ｍａｎ）との及びラクトース（ＢＴＦ＿Ｌａｃ）との物理的混合製剤、ならびにジェットミル粉砕されたチオトロピウム、ホルモテロール及びブデソニドの変調ＤＳＣ熱流サーモグラムを示す。
【図１５】未加工のラクトース一水和物、マンニトール、ブデソニド、ホルモテロール及びチオトロピウム、ＴＦＦ製剤のＢｕｄ＿Ｍａｎ、Ｆｏｒ＿Ｍａｎ、Ｔｉｏ＿Ｍａｎ及びＢＴＦ＿Ｍａｎの変調ＤＳＣ熱流サーモグラムを示す。
【図１６】未加工のラクトース一水和物、マンニトール、ブデソニド、ホルモテロール及びチオトロピウム、ＴＦＦ製剤のＢＴＦ＿Ｌａｃ、Ｂｕｄ＿Ｌａｃ、Ｆｏｒ＿Ｌａｃ及びＴｉｏ＿Ｌａｃの変調ＤＳＣ熱流サーモグラムを示す。
【図１７Ａ−１７Ｎ】（図１７Ａ）マンニトール、（図１７Ｂ）ラクトース一水和物、（図１７Ｃ）ブデソニド、（図１７Ｄ）チオトロピウム、（図１７Ｅ）ホルモテロール、（図１７Ｆ）Ｂｕｄ＿Ｍａｎ、（図１７Ｇ）Ｔｉｏ＿Ｍａｎ、（図１７Ｈ）Ｆｏｒ＿Ｍａｎ、（図１７Ｉ）ＢＴＦ＿Ｍａｎ、（図１７Ｊ）Ｂｕｄ＿Ｌａｃ、（図１７Ｌ）Ｔｉｏ＿Ｌａｃ、（図１７Ｍ）Ｆｏｒ＿Ｌａｃ及び（図１７Ｎ）ＢＴＦ＿Ｌａｃの粉末Ｘ線パターンを示す。
【図１８Ａ−１８Ｈ】（図１８Ａ）ラクトース一水和物、（図１８Ｂ）マンニトール、（図１８Ｃ）ブデソニド、（図１８Ｄ）ジェットミル粉砕ブデソニド、（図１８Ｅ）チオトロピウム、（図１８Ｆ）ジェットミル粉砕チオトロピウム、（図１８Ｇ）ホルモテロール及び（図１８Ｈ）ジェットミル粉砕ホルモテロールの粉末Ｘ線パターンを示す。
【図１９】ＴＦＦホルモテロール＿ラクトース、ＴＦＦブデソニド＿ラクトース、ＴＦＦチオトロピウム＿ラクトース、三剤併用（ｔｒｉｐｌｅ  ｄｒｕｇ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）の物理的混合物、ＴＦＦ三剤併用、ホルモテロール、ブデソニド、チオトロピウム、ＴＦＦラクトース及びラクトースのＦＴＩＲ走査を示す。
【図２０】ＴＦＦホルモテロール＿マンニトール、ＴＦＦブデソニド＿マンニトール、ＴＦＦチオトロピウム＿マンニトール、ＴＦＦ三剤併用、ホルモテロール、ブデソニド、チオトロピウム、三剤併用の物理的混合物、ＴＦＦマンニトール及びマンニトールのＦＴＩＲ走査を示す。
【図２１Ａ】（図２１Ａ）次世代カスケードインパクターに沈着したＴＦＦ三剤併用ＢＴＦ＿Ｌａｃ製剤の空気力学的粒径分布及び（図２１Ｂ）次世代カスケードインパクターに沈着したＴＦＦ三剤併用ＢＴＦ＿Ｍａｎ製剤の空気力学的粒径分布を示す。
【図２１Ｂ】（図２１Ａ）次世代カスケードインパクターに沈着したＴＦＦ三剤併用ＢＴＦ＿Ｌａｃ製剤の空気力学的粒径分布及び（図２１Ｂ）次世代カスケードインパクターに沈着したＴＦＦ三剤併用ＢＴＦ＿Ｍａｎ製剤の空気力学的粒径分布を示す。
【図２２Ａ】（図２２Ａ）次世代カスケードインパクターに沈着したＴＦＦ単剤製剤のＦｏｒ＿Ｌａｃ、Ｔｉｏ＿Ｌａｃ及びＢｕｄ＿Ｌａｃの空気力学的粒径分布、ならびに（図２２Ｂ）次世代カスケードインパクターに沈着したＴＦＦ単剤製剤のＦｏｒ＿Ｍａｎ、Ｔｉｏ＿Ｍａｎ及びＢｕｄ＿Ｍａｎの空気力学的粒径分布を示す。
【図２２Ｂ】（図２２Ａ）次世代カスケードインパクターに沈着したＴＦＦ単剤製剤のＦｏｒ＿Ｌａｃ、Ｔｉｏ＿Ｌａｃ及びＢｕｄ＿Ｌａｃの空気力学的粒径分布、ならびに（図２２Ｂ）次世代カスケードインパクターに沈着したＴＦＦ単剤製剤のＦｏｒ＿Ｍａｎ、Ｔｉｏ＿Ｍａｎ及びＢｕｄ＿Ｍａｎの空気力学的粒径分布を示す。
【図２３Ａ】（図２３Ａ）次世代カスケードインパクターに沈着した三剤併用物理的混合ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ製剤の空気力学的粒径分布、ならびに（図２３Ｂ）次世代カスケードインパクターに沈着した三剤併用物理的混合ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭ製剤の空気力学的粒径分布を示す。
【図２３Ｂ】（図２３Ａ）次世代カスケードインパクターに沈着した三剤併用物理的混合ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ製剤の空気力学的粒径分布、ならびに（図２３Ｂ）次世代カスケードインパクターに沈着した三剤併用物理的混合ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭ製剤の空気力学的粒径分布を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
いくつかの態様において、本開示は、吸入器による、エアロゾルによる、または化合物を肺に送達する他の方法による投与のために、２つ以上の活性薬学的成分（ＡＰＩ）を伴って脆性マトリックス粒子として配合される薬学的組成物を提供する。本明細書に記載されている薬学的組成物は、高い表面積及び高い総放出用量を構成することができる。いくつかの実施形態において、これらの薬学的組成物は、２つ以上の活性薬学的成分を患者の肺へ送達する有効性を増加している。
【００３１】
Ｉ．脆性マトリックス粒子
いくつかの態様において、本開示は脆性マトリックス粒子（ＢＭＰ）の使用を提供する。本明細書に使用することができる脆性マトリックス粒子は、高い表面性及び高い多孔性を有する低密度形状によって特徴づけられる。これらの脆性マトリックス粒子は、本明細書において、ならびに両方とも参照として本明細書に組み込まれる米国特許出願第２０１０／０２２１３４３号及びＷａｔｔｓ，ｅｔ  ａｌ．，２０１３において記載されている噴霧凍結乾燥または薄膜凍結などの従来の方法を使用して、調製することができる。いくつかの実施形態では、薄膜凍結が、本明細書に記載されている脆性マトリックス粒子を調製するために使用される。凍結した後、これらの粒子を更に乾燥に付して、エアロゾル投与に適した乾燥粉末を得ることができる。脆性マトリックス粒子を、凍結乾燥及び当業者に既知の他の方法によって乾燥することができる。あらゆる理論に束縛されることなく、脆性マトリックス粒子及び急速凍結乾燥方法は、粒子の混合を可能にし、同時に異なる構成成分の分離を防止しながら、混合物の均質性を維持することを可能にする。改善された均質性は、エアロゾル適用過程において示されることもある。
【００３２】
いくつかの態様において、脆性マトリックス粒子は、薄膜凍結（ＴＦＦ）法を使用して調製される。そのような調製は、２つ以上の活性薬学的成分（ＡＰＩ）及び１つ以上の賦形剤を同時沈着させて、薬学的組成物を提供することを可能にするような方法で用いることができる。いくつかの実施形態において、この方法は、薬学的組成物を溶媒に溶解することを含む。本明細書に記載されている方法に使用できるいくつかの溶媒には、水、有機溶媒、またはこれらの混合物が含まれる。本明細書に使用することができる有機溶媒には、アルコール、複素環式化合物、アルキルニトリル、またはこれらの混合物などの極性有機溶媒が含まれる。極性有機溶媒のいくつかの非限定例には、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノール（第三級ブタノール）、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、１，４−ジオキサン、またはアセトニトリルが含まれる。いくつかの態様では、これらの溶媒の混合物が考慮される。そのような混合物は、１つ以上の有意溶媒と水を含むことができる。これらの混合物の１つの非限定例には、ｔｅｒｔ−ブタノール、１，４−ジオキサン、アセトニトリル及び水の溶媒混合物が含まれる。溶媒混合物は、第三級ブタノール、１，４−ジオキサン、アセトニトリル及び精製水の２：１：３：３（ｖ／ｖ）の比の混合物を含んでもよい。
【００３３】
いくつかの態様において、本開示は、２つ以上の活性薬学的成分（ＡＰＩ）の組み合わせを含む。これらの組み合わせは、１つ以上の賦形剤を更に含むことができる。本明細書に使用することができるいくつかの賦形剤のいくつかの非限定例には、マンニトール、トレハロース、もしくはラクトースなどの糖もしくは糖誘導体、またはグリシンなどのアミノ酸が含まれる。これらの組成物を、本明細書に記載されている溶媒に溶解することができる。いくつかの実施形態において、活性薬学的成分（ＡＰＩ）には、吸入コルチコステロイド（ＩＣＳ）、長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）、または長時間作用性ムスカリン拮抗薬（ＬＡＭＡ）が含まれるが、これらに限定されない。活性薬学的成分のいくつかの非限定例には、サルメテロールキシナホ酸塩、モメタゾンフロ酸エステル、ホルモテロールフマル酸塩、チオトロピウム臭化物、またはブデソニドが含まれる。そのような作用物質は、ＬＡＢＡとＩＣＳについては約１：０．１〜約１：１００の比で存在しうる。いくつかの実施形態において、サルメテロールキシナホ酸塩及びモメタゾンフロ酸エステルが使用される場合、ＬＡＢＡとＩＣＳの比は、約１：４．４である。この比は、それぞれの作用物質の量を有効臨床用量で生成する。
【００３４】
いくつかの態様において、薬学的組成物は賦形剤を含む。他の態様において、活性薬学的成分は、賦形剤を用いることなく薬学的組成物に配合される。組成物が賦形剤を含む場合、賦形剤は、およそ賦形剤なしから、活性薬学的成分と賦形剤との約１：９のモル比まで存在しうる。いくつかの実施形態において、活性薬学的成分と賦形剤のモル比は、ほぼ賦形剤を含まない組成から、活性薬学的成分と賦形剤との比の約１：１を含むモル比までである。活性薬学的成分と賦形剤のモル比は、約１：１でありうる。
【００３５】
この組成物を、本明細書に記載されている溶媒に溶解することができる。組成物が溶媒に溶解される場合、溶媒中の薬学的組成物の総量は、約０．１％〜約１０％（ｗ／ｖ）でありうる。薬学的組成物の総量は、約０．１％〜約６％（ｗ／ｖ）でありうる。いくつかの態様において、薬学的組成物の総量は、６％、５％、４％、３．５％、３％、２．５％、２．０％、１．７５％、１．５％、１．２５％、１．０％、０．９％、０．８％、０．７％、０．６％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％、もしくは０．１％未満、またはこれらから導き出される任意の範囲である。溶媒中の薬学的組成物の総量は、好ましくは６％未満、より好ましくは５％未満である。溶媒中の少量の薬学的組成物を使用することは、脆性マトリックス粒子の形成をもたらすなどの有益な特性を与えると考えられ、したがって、６％未満（ｗ／ｖ）、好ましくは５％未満（ｗ／ｖ）の使用が推奨される。低量の化合物が有益であるが、０．０１％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．１％（ｗ／ｖ）を下回る濃度は、有用な薬学的組成物を得るためには希薄すぎる溶液をもたらすことがある。いくつかの実施形態において、薬学的組成物の総量は、約０．５％（ｗ／ｖ）である。
【００３６】
いくつかの態様において、組成物は薄膜用機器を使用して調製される。この機器を使用して、溶液をステンレス鋼などの表面に適用し、次に凍結させることができる。この表面は回転することもでき、それは、あらゆる理論に束縛されることなく、回転が溶媒の均一な表面への適用を促進すると考えられるからである。溶液を、−５０℃を下回る温度などの極低温度で凍結することができる。極低温度には、約−５０℃〜約−２７０℃、約−７０℃〜約−１２０℃、または約−７５℃〜約−１００℃の温度が含まれる。いくつかの実施形態において、極低温度は約９０℃±３℃である。いくつかの実施形態において、試料は凍結貯蔵される。他の態様において、試料は、乾燥粉末を得るために凍結乾燥される。凍結乾燥は、当業者に知られており、米国特許第５，７５６，４６８号、同第６，４４０，１０１号、同第８，５７９，８５５号及びＰＣＴ特許出願公開第２００９／１２５９８６号に教示されており、これらは参照として本明細書に組み込まれる。いくつかの態様では、組成物を室温で貯蔵することが有益でありうる。凍結乾燥試料は、温度が−４０℃未満の凍結乾燥温度から約２５℃のほぼ室温の温度まで徐々に増加するようにして、調製することができる。また、温度の増加は、真空もしくは減圧環境下及び／または乾燥器などの低減された水分含量を有する環境下で実施することができる。
【００３７】
本開示は、ジェットミル粉砕または物理的混合物などの他の技術と比較して高い表面積を有する、脆性マトリックス粒子を提供する。いくつかの態様において、２つ以上の活性薬学的組成物を伴う脆性マトリックス粒子は、５ｍ２／ｇを超える比表面積を有する。脆性マトリックス粒子は、約５ｍ２／ｇ〜約１０００ｍ２／ｇ、約１０ｍ２／ｇ〜約５００ｍ２／ｇ、または約２０ｍ２／ｇ〜約２５０ｍ２／ｇの比表面積を有する。いくつかの態様において、比表面積は、約５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２２５、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、６００、７００、８００、９００〜約１０００ｍ２／ｇ、またはこれらから導き出される任意の範囲である。組成物の表面積の計算方法は、実施例のセクションにおいて本明細書に記載されている。
【００３８】
本明細書に記載されている薬学的組成物を含む脆性マトリックス粒子は、活性薬学的成分の８０％を超える総放出用量（または、放出用量）を有することができる。総放出用量は、約８０％〜約１００％、約８５％〜約１００％、または約約９０％〜約１００％であってもよい。本明細書に記載されている薬学的組成物の製剤は、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％を超える、またはこれらから導き出される任意の範囲の総放出用量を有することができる。総放出用量の計算方法は、実施例のセクションにおいて本明細書に記載されている。
【００３９】
本明細書に記載されている薬学的組成物は、１つ以上の賦形剤を含むことができる。賦形剤は、治療活性ではないが、薬学的組成物の形成に使用することができる構成成分である。本明細書に使用される賦形剤には、アミノ酸、糖、糖誘導体、または当業者に既知の他の賦形剤が含まれる。特に、本開示には、トレハロース、ラクトース、グルコース、フルクトース、もしくはマンノースなどの糖、またはグルコサミンなどのアミノ糖などの糖誘導体、またはマンニトールなどの糖アルコールの使用が含まれる。使用することができる他の賦形剤には、アラニンまたはグリシンなどのアミノ酸が含まれる。
【００４０】
いくつかの態様において、脆性マトリックス粒子構成成分は、薬学的組成物を形成するために、２つ以上の薬剤分子と１つ以上の賦形剤を含有する。したがって、薬学的組成物は、脆性マトリックス粒子内に、非晶質形態または特定の結晶形態で配合されうる。いくつかの実施形態において、薬学的組成物は非晶質形態で配合される。加えて、使用することができる脆性マトリックス粒子は、低密度粒子である。
【００４１】
本開示は、薬学的組成物のエアロゾル投与に脆性マトリックス粒子を使用する方法を提供する。あらゆる理論に束縛されることなく、脆性マトリックス粒子はエアロゾル適用の際に容易に破砕し、これによって薬学的組成物の送達を増強すると考えられる。粒子の破砕を使用して、投与の際に組成物のエアロゾル化及び分散の能力を増強することができる。
【００４２】
特定の実施形態において、薬学的組成物は、吸入及び／または他のエアロゾル送達ビヒクルによって送達されうる。鼻腔エアロゾルスプレーを介して組成物を肺に直接送達する方法は、例えば、米国特許第５，７５６，３５３号及び同第５，８０４，２１２号（それぞれ、その全体が参照として本明細書に特定的に組み込まれる）に記載されている。同様に、鼻腔内微粒子樹脂を使用する薬剤送達（Ｔａｋｅｎａｇａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８）及びリゾホスファチジル−グリセロール化合物（その全体が参照として本明細書に特定的に組み込まれる、米国特許第５，７２５，８７１号）も、製剤技術において良く知られており、いくつかの実施形態に使用することができる。ポリテトラフルオロエチレン支持マトリックスの形態の経粘膜薬剤送達は、米国特許第５，７８０，０４５号（その全体が参照として本明細書に特定的に組み込まれる）に記載されている。
【００４３】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている活性剤または薬剤を含む脆性マトリックス粒子組成物を、鼻腔内に、肺に、または吸入もしくはエアロゾル送達を介して送達することができる。いくつかの実施形態において、活性剤または薬剤を含む脆性マトリックス粒子組成物を、吸入器（吸入器（ｐｕｆｆｅｒ）とも呼ばれる）または定量吸入器によって送達することができる。吸入機器は、当該技術において良く知られており、喘息またはＣＯＰＤの治療薬の送達に使用することができる。
【００４４】
エアロゾルという用語は、液化または加圧ガス噴射剤中に分散されたコロイド系の微細固体または液体粒子を指す。典型的な本発明の吸入用エアロゾルは、液体噴射剤中の、または液体噴射剤と適切な溶媒の混合物中の活性成分の懸濁剤からなる。適切な噴射剤には、炭化水素及び炭化水素エーテルが含まれる。適切な容器は、噴射剤の圧力要件に応じて変わる。エアロゾルの投与は、対象の年齢、体重、ならびに症状の重篤度及び応答性に応じて変わる。
【００４５】
ＩＩ．活性薬学的成分
いくつかの態様において、本開示は、２つ以上の活性薬学的成分を含む脆性マトリックス粒子として配合される薬学的組成物を提供する。これらの活性薬学的成分は、短時間作用性β−作動薬、長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬、またはコルチコステロイドから選択されうる。任意の短時間作用性β−作動薬、長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬、またはコルチコステロイドを、本明細書において調製される薬学的組成物に使用できることが考慮される。いくつかの実施形態において、本開示は、長時間作用性β−作動薬及びコルチコステロイドを含む組成物、または長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬及びコルチコステロイドを有する組成物のいずれかを提供する。これらの活性薬学的成分は、表１に記載されている比に従って、本明細書に記載されている薬学的組成物に存在することができる。
表１：本明細書に記載されている組成物における活性薬学的成分の投与及び組成比
【表１】
2018514569.tif 000002
【００４６】
いくつかの態様において、本明細書に使用される組成物は、長時間作用性β−作動薬とコルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００の比を含むことができる。加えて、組成物は、長時間作用性β−作動薬と長時間作用性ムスカリン拮抗薬との比によって特徴づけることができ、ここで比は、約１：０．１〜約１：１００である。本明細書に使用することができる組成物は、長時間作用性ムスカリン拮抗薬とコルチコステロイドとの約０．１：１００〜約１００：０．１の比を有する。比が三重療法において測定される場合、組成物は、長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬及びコルチコステロイドの約１：０．１：０．１〜約１：１００：１００の比を含むことができる。二重療法または三重療法に使用される場合の比の非限定例には、１：４．４または１：２：３５．５が含まれる。いくつかの態様において、薬学的組成物は、組成物中に約１０ｗｔ％〜約１００ｗｔ％の活性薬学的成分の重量率を含む。
【００４７】
これらの薬学的組成物は、約１μｇ〜約５００μｇの用量の長時間作用性β−作動薬及び約１μｇ〜約１，０００μｇの用量のコルチコステロイドを有する単位用量として配合することもできる。いくつかの態様において、薬学的組成物は、約１μｇ〜約１００μｇの用量の長時間作用性ムスカリン拮抗薬を更に含むことができる。
【００４８】
いくつかの態様では、任意の長時間作用性β−作動薬を本明細書に記載されている製剤に使用できることが考慮される。長時間作用性β−作動薬のいくつかの非限定例には、ホルモテロールフマル酸塩、サルメテロールキシナホ酸塩、バンブテロール、クレンブテロール、インダカテロール、アルホルモテロール（ａｒｆｏｒｍｏｔｅｒｏｌ）、カルモテロール（ｃａｒｍｏｔｅｒｏｌ）、ＧＳＫ−１５９７９７、ＧＳＫ−５９７９０１、ＧＳＫ−１５９８０２、ＧＳＫ−６４２４４４、ＧＳＫ−６７８００７、または当該技術に既知の他の長時間作用性β−作動薬が含まれる。長時間作用性β−作動薬を、約１μｇ、５μｇ、１０μｇ、２０μｇ、４０μｇ、６０μｇ、８０μｇ、１００μｇ、１２０μｇ、１４０μｇ、１６０μｇ、１８０μｇ、２００μｇ、２２５μｇ、２５０μｇ、２７５μｇ、３００μｇ、３２５μｇ、３５０μｇ、４００μｇ、４５０μｇ、もしくは５００μｇ、またはこれらから導き出される任意の範囲の用量で配合することができる。
【００４９】
いくつかの態様では、任意の長時間作用性ムスカリン拮抗薬を本明細書に記載されている製剤に使用できることが考慮される。長時間作用性ムスカリン拮抗薬のいくつかの非限定例には、チオトロピウム、アクリジニウム、デキスピロニウム（ｄｅｘｐｉｒｒｏｎｉｕｍ）、イプラトロピウム、オキシトロピウム、ダロトロピウム（ｄａｒｏｔｒｏｐｉｕｍ）、グリコピロニウム、もしくはグリコピロレート誘導体の塩、または、参照として本明細書に組み込まれる、米国特許出願第２００９／０１８１９３５号、ＰＣＴ特許出願公開第２０１０／００７５６１号及びＰＣＴ特許出願公開第２００８／０３５１５７号に教示されているものなど、当該技術に既知の他の長時間作用性ムスカリン拮抗薬が含まれる。長時間作用性ムスカリン拮抗薬を、約１μｇ、５μｇ、１０μｇ、２０μｇ、３０μｇ、４０μｇ、５０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、もしくは１００μｇ、またはこれらから導き出される任意の範囲の用量で配合することができる。
【００５０】
いくつかの態様では、任意のコルチコステロイドを本明細書に記載されている製剤に使用できることが考慮される。コルチコステロイドのいくつかの非限定例には、ベクロメタゾンジプロピオン酸エステル、ブデソニド、フルニソリド、フルチカゾンプロピオン酸エステル、モメタゾンフロ酸エステル、シクレソニド、ロフレポニドパルミテート（ｒｏｆｌｅｐｏｎｉｄｅ  ｐａｌｍｉｔａｔｅ）、トリアムシノロンアセトニド、または当該技術に既知の他のコルチコステロイドが含まれる。コルチコステロイドを、約１μｇ、５μｇ、１０μｇ、２５μｇ、５０μｇ、７５μｇ、１００μｇ、１５０μｇ、２００μｇ、２５０μｇ、３００μｇ、３５０μｇ、４００μｇ、４５０μｇ、５００μｇ、５５０μｇ、６００μｇ、６５０μｇ、７００μｇ、７５０μｇ、８００μｇ、８５０μｇ、９００μｇ、９５０μｇ、もしくは１，０００μｇ、またはこれらから導き出される任意の範囲の用量で配合することができる。それぞれの活性薬学的成分の特定の用量は、薬学的組成物に存在する特定の化合物に応じて変わる。
【００５１】
いくつかの態様では、それぞれの活性薬学的成分を別々の薬学的組成物として個別に配合できることが考慮される。
【００５２】
ＩＩＩ．呼吸器適応症
いくつかの態様では、本開示の組成物を呼吸器疾患及び状態の治療に使用することができる。呼吸器疾患及び状態のいくつかの非限定例には、喘息、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性肺炎症性疾患（ＣＯＰＤ）、反応性気道機能不全症候群（ｒｅａｃｔｉｖｅ  ａｉｒｗａｙｓ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）（ＲＡＤＳ）、気道過敏性、サルコイドーシスもしくは好酸球性多発血管炎性肉芽腫症などの好酸球性もしくは間質性肺疾患、化学物質誘発性肺傷害、鋳型気管支炎（ｐｌａｓｔｉｃ  ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ）、気管支炎、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺（気道）疾患、珪肺症、吸入煙（ｉｎｈａｌａｔｉｏｎａｌ  ｓｍｏｋｅ）誘発性急性肺損傷（ＩＳＡＬＩ）、またはアレルギー性鼻炎及び慢性副鼻腔炎などの免疫性疾患及び状態が含まれる。本明細書に記載されている薬学的組成物を、喘息及び慢性閉塞性肺疾患、ならびに他の閉塞性気道疾患などの呼吸器状態の治療に使用することができる。
【００５３】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、数か月間にわたって改善されない減少気流などの臨床的に不十分な気流によって特徴づけられる疾患である。長期間の喫煙を含む喫煙は、ＣＯＰＤの主な原因であると考えられる。ＣＯＰＤにおける気流閉塞は、通常、喫煙を続けている患者にとって進行性であり、最終的に身体障害及び生存期間の短縮をもたらす。禁煙は、減退速度を非喫煙者まで緩徐することが示されているが、喫煙により引き起こされた損傷は非可逆的である。他の病因因子（（例えば、気道応答性亢進または過敏性）、空気汚染（例えば、二酸化硫黄及び受動喫煙の可能性）、職業性の化学物質（ｏｃｃｕｐａｔｉｏｎａｌ  ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）（例えば、カドミウム）、ならびに一般的なアレルギー）が、文献において特定されているが、ＣＯＰＤの症例においてはほんの僅かな部分しか占めていないと考えられる。他の危険因子には、遺伝、受動喫煙、職場及び環境における空気汚染への曝露、ならびに小児期呼吸器感染の病歴が含まれる。
【００５４】
ＣＯＰＤのいくつかの非限定例には、慢性咳嗽、頻繁な胸部絞扼感、息切れ、呼吸努力の増加、粘液産生の増加及び頻繁な咳払いが含まれる。いくつかのＣＯＰＤの場合では、気道閉塞は不完全に可逆性であるが、他のＣＯＰＤ患者は、治療によって気道閉塞にいくらかの改善を示す。異常な気道粘液の慢性的で過剰な分泌、炎症、気管支痙攣及び感染に起因する気道閉塞は、慢性気管支炎を引き起こし、慢性咳嗽、粘液産生、またはその両方をもたらすと考えられる。気腫では、そうではなく、終末細気管支におけるエラスチンが破壊され、気道壁の崩壊及び呼気不能をもたらす。気腫は、明白な線維症を有することなく壁の崩壊を伴っている肺胞の破壊及び終末細気管支の遠位にある気腔の異常な永久的拡大によって特徴づけられる。
【００５５】
喘息は、特に気道における炎症の増加に関連する慢性呼吸器疾患である。喘息症状のいくつかの非限定例には、喘鳴、咳嗽、胸部絞扼感、息切れ及び呼吸困難の増加が含まれる。喘息は一般にＣＯＰＤの一種とは見なされず、それは、喘息が一般に可逆性であるからである。咳嗽は痰の産生をもたらすことがあり、高レベルの好酸球を有する痰が含まれる。喘息症状の頻度及び重篤度は、トリガーの存在によって大きく増加しうる。喘息トリガーのいくつかの非限定例には、運動、粉塵、汚染、ペットの鱗屑、ならびに他の刺激物質及びアレルゲンが含まれる。喘息は、一般に、症状パターンの観察、治療への応答及び肺活量測定によって診断される。いくつかの実施形態では、職業性、咳嗽異型、運動誘発性、アスピリン誘発性、またはアルコール誘発性喘息など、喘息のいくつかの特定のサブタイプがある。喘息のサブタイプの別の非限定例は、再発性の重篤な発作により特徴づけられるブリットル（ｂｒｉｔｔｌｅ）喘息である。更に、喘息は、気管支炎またはアレルギーなどの他の呼吸器状態に関連している、または他の呼吸器状態によって重篤度が増加していることがある。
【００５６】
喘息の臨床的分類は、症状の頻度、１秒量（ＦＥＶ１）及び最大呼気流量に基づいて指定される、または喘息は、その起源（アトピー性または外因性及び非アトピー性（ｔｏｐｉｃ）または内因性）によって分類されうる。アトピー性または外因性喘息は、アレルゲンまたは他の外因子によって誘起されるが、非アトピー性または内因性喘息は、アレルゲンまたは他の外因子によって影響を受けない。加えて、喘息の分類は、症状の頻度または重篤度に基づいている。臨床的分類には、間欠性、軽度の持続性、中程度の持続性及び重度の持続性が含まれる。間欠性の分類では、患者は、一般に１週間あたり２回未満の症状発生、１か月あたり２回未満の夜間の症状発生、２０％未満の変動性で８０％以上のＦＥＶ１、または１日あたり２回以下の短時間作用性β作動薬の使用の必要性を経験する。軽度の持続性の分類では、患者は、一般に１週間あたり２回未満の症状発生、１か月あたり３〜４回の夜間の症状発生、２０〜３０％の変動性で８０％以上のＦＥＶ１、または１日あたり２回を超える短時間作用性β作動薬の使用の必要性を経験する。中程度の持続性の分類では、患者は、毎日の症状、１週間あたり１回を超える夜間の症状発生、３０％を超える変動性で約６０％〜約８０％のＦＥＶ１、または毎日の短時間作用性β作動薬の使用の必要性を経験する。重度の持続性の分類では、患者は、連続的な症状、頻繁な夜間症状の経験（通常、１週間あたり７回を超える）、３０％を超える変動性で約６０未満のＦＥＶ１、または１日に２回を超える短時間作用性β作動薬の使用の必要性を経験する。
【００５７】
更に、喘息発作または喘息増悪は、最大呼気流量に基づいて、軽度、中程度または重度に分類される。軽度の発作では、最大呼気流量は、予測最高値の５０％を超える、または２００Ｌ／分を超える。中程度の発作では、最大呼気流量は、予測最高値の２５％〜５０％である、または８０〜２００Ｌ／分である。重度の発作では、最大呼気流量は、予測最高値の２５％未満である、または８０Ｌ／分未満である。加えて、重度の発作は、１つ以上の追加の症状または状態を有することもある。重度の発作を、３つの分類：急性、生命を脅かす、または致命的に更に細分化することができる。急性の重度発作では、患者は、１分あたり２５回を超える呼吸の呼吸数、１分あたり１１０回の拍動を超える心拍数を経験する、または一息で完全な文章を話せないことがある。生命を脅かす重度の発作では、患者は、意識水準変化、極度疲労、不整脈、低血圧、チアノーゼ、サイレントチェスト（ｓｉｌｅｎｔ  ｃｈｅｓｔ）、呼吸効果不足、９２％未満の酸素飽和度、８ｋＰａ未満のＰａＯ２、または正常から上昇したＰａＣＯ２を経験することがある。致命的な重度発作では、患者は、高もしくは上昇したＰａＣＯ２を経験する、または用手換気（ｍａｎｕａｌ  ｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎ）を必要とすることがある。
【００５８】
喘息、慢性閉塞性肺疾患、ならびに他の呼吸器疾患及び傷害を、βアドレナリン作動性受容体作動薬により治療することができ、それは、これらの化合物が患者に気管支拡張薬効果を提供し、息切れの症状の軽減をもたらすことが知られているからである。β作動薬を使用して気管支収縮の症状の軽減を患者にもたらすことができるが、喘息または慢性閉塞性肺疾患の別の構成要素は炎症であり、多くの場合に別の治療を必要とする。これらの呼吸器疾患により引き起こされる炎症を治療する１つの非限定的方法は、ステロイドまたはコルチコステロイドの使用を介するものである。いくつかの態様において、単一組成物によるステロイド、βアドレナリン作動性受容体作動薬及びムスカリン拮抗薬の組み合わせの投与は、喘息及び慢性閉塞性肺疾患などの呼吸器疾患において、気管支収縮、炎症及び気道の粘液分泌の治療に対して増強された相乗効果を示している。
【００５９】
ＩＶ．実施例
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を実証するために含まれる。以下の実施例に開示されている技術は、本発明を実施するのに十分に機能することが本発明者たちによって発見された技術を表しており、したがってその実施に好ましい様式を構成すると考慮できることが、当業者には理解されるはずである。しかし、当業者は、本開示を踏まえて、開示されている特定の実施形態に多くの変更を行い、依然として、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく同様または類似した結果を得られることを理解するはずである。
【００６０】
実施例１−方法
２つの異なる併用療法を、極低温粒子改変技術であるＴＦＦにより生成し（Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）、空気力学的特性によって特徴決定した。第１は、サルメテロールキシナホ酸塩（ＳＸ）及びモメタゾンフロ酸エステル（ＭＦ）の二重併用療法を、ＳＸとＭＦの５：２２の質量比で生成した。ＢＭＰ製剤を、無希釈粉末として生成し、ならびに安定化賦形剤のラクトース及びマンニトールと共に生成し、薬剤装填量は合計で５０％であった。ＴＦＦにより生成された第２の薬剤併用療法は、ホルモテロールフマル酸塩（ＦＦ）、チオトロピウム臭化物（ＴＢ）及びブデソニド（Ｂ）の、１：２：３５．５のＦＦ：ＴＢ：Ｂの質量比の三重組み合わせであった。マンニトールを、安定化賦形剤として、総薬剤装填量が５０％になるように含めた。比較として、二重及び三重組み合わせの両方において、微粒子化薬剤を生成し、微粒子化賦形剤とブレンドした。乾燥粉末エアロゾルを、ＨａｎｄｉＨａｌｅｒ（登録商標）またはＭｏｎｏｄｏｓｅ（登録商標）乾燥粉末吸入器に装填したＨＰＭＣカプセルから発生させた。エアロゾルを、装置の全体にわたる４ｋＰａの圧力降下のために十分な流量で操作されたＮｅｘｔ  Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｍｐａｃｔｉｏｎ（ＮＧＩ）によって特徴決定した。これは、ＨａｎｄｉＨａｌｅｒ（登録商標）の５１Ｌ／分及びＭｏｎｏｄｏｓｅ（登録商標）の９０Ｌ／分と同等であった。
【００６１】
実施例２−結果
噴霧乾燥及びＴＦＦなどの粒子改変技術は、製剤の複数の活性物質が単一の吸入用粒子になることを可能にする。ＴＦＦにより作り出されたＢＭＰは、乾燥粉末吸入におけるパラダイムシフトを表している。図１に例示されているように、別個の粒子に解凝塊（ｄｅａｇｇｌｏｍｅｒａｔｅ）することに吸気エネルギーを使用するのではなく、このプラットフォームは、患者／ＤＰＩがＢＭＰを呼吸可能な低密度粒子に脆性破砕することによって発生するエネルギーを使用する。
【００６２】
ＴＦＦが溶液から開始されるボトムアップ生成方法であるので、ＡＰＩ及び賦形剤は、急速凍結用の極低温表面に適用される前、最初の段階では分子レベルで均質である。このＤＰＩ製剤への特有の手法を使用することにより、併用療法は、エアロゾル粒子内に均質に分散され、一様に送達された用量及び組み合わせ生成物内の各ＡＰＩの同時沈着をもたらす。表２に提示されているデータは、ＢＭＰ組み合わせ製剤中のＳＸ及びＭＦのエアロゾル特性が、両方のＡＰＩにおいて極めて類似していることを示す。逆に、組み合わせ粉末ブレンドにより送達された微粒子化粉末のＳＸ及びＭＦは、異なる微細粒子画分（ＦＰＦ）及び空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を実証した。加えて、賦形剤を有さない（無希釈）ＢＭＰ  ＳＸ／ＭＦ製剤は、両方の装填薬剤のほぼ５０％を微細粒子として送達することができた。
表２：Ｍｏｎｏｄｏｓｅ（登録商標）吸入器により送達されたＳＸ／ＭＦ組み合わせＢＭＰ製剤及び微粒子化製剤の空気力学的特性
【表２】
2018514569.tif 000003
【００６３】
ＦＦ、ＴＢ及びＢのＢＭＰ三重組み合わせの空気力学的性能の評価は、ＢＭＰ  ＳＸ／ＭＦ製剤と類似した結果を生じた。ＢＭＰ製剤は、個別のＡＰＩが均質的に送達及び沈着されることを確実にした。図２から明らかなように、ＢＭＰ製剤の局所沈着は、全てのＡＰＩにおいてほぼ同一であった。このＢＭＰ三重組み合わせは、β２−作動薬受容体が下方制御され、長時間作用性ムスカリン拮抗薬（ＬＡＭＡ）感受性が増加している患者において、療法を改善することができた（Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０）。装填用量の率であるＦＰＦは３つのＢＭＰ配合ＡＰＩの全てにおいて５０％を超えているが、製剤／装置の更なる最適化が、これらの製剤の上気道（ステージ１及び２）沈着を低減するために必要である。
【００６４】
実施例３−材料及び方法
Ａ．材料
サルメテロールキシナホ酸塩及びモメタゾンフロ酸エステルは、Ｍａｓｃｏｔ  Ｉ．Ｅ．ＣＯ．，ＬＴＤ（Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ）から購入した。α−ラクトース一水和物及びマンニトールは、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ＮＪ，ＵＳＡ）から購入し、Ｄ−トレハロース無水物は、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ（ＮＪ，ＵＳＡ）から購入し、グリシンは、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ（ＰＡ，ＵＳＡ)から購入した。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等級のアセトニトリル及びメタノールは、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ＮＪ，ＵＳＡ）から購入した。水は、逆浸透（ＭｉｌｌｉＱ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｆｒａｎｃｅ）によって精製した。
【００６５】
Ｂ．製剤の調製
薄膜凍結技術を使用して、同時沈着用のＢＭＰ製剤を生成した。簡潔には、サルメテロールキシナホ酸塩（ＳＸ）、モメタゾンフロ酸エステル（ＭＦ）及び薬学的賦形剤を、第三級ブタノール、１，４−ジオキサン、アセトニトリル及び精製水（２：１：３．３、ｖ／ｖ）の共溶媒混合物に溶解した（Ｊｏｕｙｂａｎ−Ｇｈａｒａｍａｌｅｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００１）。ａ）サルメテロールキシナホ酸塩、モメタゾンフロ酸エステル及びラクトースの組み合わせ（ＳＸＭＦＬａｃ）、ｂ）サルメテロールキシナホ酸塩、モメタゾンフロ酸エステル及びマンニトールの組み合わせ（ＳＸＭＦＭａｎ）、ｃ）サルメテロールキシナホ酸塩、モメタゾンフロ酸エステル及びグリシンの組み合わせ（ＳＸＭＦＧｌｙ）、ｄ）サルメテロールキシナホ酸塩、モメタゾンフロ酸エステル及びトレハロースの組み合わせ（ＳＸＭＦＴｒｅ）及びｅ）賦形剤なしのサルメテロールキシナホ酸塩とモメタゾンフロ酸エステルの組み合わせ（ＳＸＭＦ）を、共溶媒溶液に溶解した。サルメテロールキシナホ酸塩とモメタゾンフロ酸エステルの比は、質量で５０対２２０であり、臨床用量に対応しており、一方、ＡＰＩと賦形剤の比は、１：１のモル比に制御された。溶解性に応じて、共溶媒の総固形分濃度は０．５％（ｗ／ｖ）であった。共溶媒溶液を、薄膜機器の極低温冷却（−９０±３℃）回転ステンレス鋼表面によって急速凍結した。スクレーパーにより取り出した後、凍結膜を、液体窒素が充填された容器に収集して、凍結状態を維持した。凍結試料を、ＶｉｒＴｉｓ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  Ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｒ（ＶｉｒＴｉｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ  Ｉｎｃ．，Ｇａｒｄｉｎｅｒ，ＮＹ）に移して、乾燥粉末を得た。製剤を、２００ｍＴｏｒｒ未満の圧力、−４０℃で２４時間かけて凍結乾燥し、次に棚温度を、更に２４時間かけて２５℃に徐々に増加した。最終生成物を真空乾燥器に室温で保存した。
【００６６】
比較の目的で、ＢＭＰ製剤に使用したものと同じ比によるＳＸ、ＭＦ及び賦形剤の微粒子化結晶物理的ブレンドを、ジェットミル粉砕により調製した。単一バルク材料を、８０ｐｓｉの供給圧及び６５ｐｓｉの摩砕圧でエアジェットミル（Ａｌｊｅｔ  ｍｉｌｌ，Ｆｌｕｉｄ  Ｅｎｅｒｇｙ，Ｐｌｕｍｓｔｅａｄｖｉｌｌｅ，ＰＡ，ＵＳＡ）に供給した。それぞれのバルク材料を、粒径が呼吸可能範囲（１〜５μｍ）に達するまで加工し（Ｗａｔｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）、これは５回から７回まで様々であった。試料を収集チャンバーから回収し、分析した。粉砕前後の粒径は、Ｒ３レンズを備えたＳｙｍｐａｔｅｃ  Ｈｅｌｏｓレーザー回折計器（Ｓｙｍｐａｔｅｃ  ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して測定した。等量の微粒子化ＳＸ、ＭＦ及び賦形剤を正確に計量し、幾何学的希釈技術を使用して別々に混合し、次にステンレス鋼混合容器に入れ、Ｔｕｒｂｕｌａ  Ｂｌｅｎｄｅｒ  Ｔ２Ｆ（Ｂａｃｈｏｆｅｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）により４８毎分回転数（ｒｐｍ）で３０分間ブレンドした。
【００６７】
Ｃ．示差走査熱量測定
ＢＭＰ  ＳＸＭＦ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅ及びそれぞれの微粒子化構成成分の熱分析は、ＴＡ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ２０００  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）と連結した冷蔵冷却システムを備えた変調温度ＤＳＣ（Ｍｏｄｅｌ  ２９２０，ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）を使用して実施した。ＤＳＣ計器の較正は、標準としてインジウムを使用して実施した。試料粉末（５〜１０ｍｇ）をアルミニウムパンに装填し、アルミニウム蓋でプレス密閉（ｐｒｅｓｓ−ｓｅａｌｅｄ）した（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）。圧着した空のパンを基準として使用した。空の試料パンそれぞれの質量を、空の基準パンの質量と、±０．１ｍｇまで釣り合わせた。融解吸熱を、１０℃／分の加熱勾配速度及びＤＳＣセルを介した４０ｍＬ／分の窒素ガス流速下、３０〜３５０℃の範囲で１℃の変調温度増幅により分析した。ＢＭＰ製剤のガラス転移温度（Ｔｇ）を、変調ＤＳＣであるが、５℃／分の加熱勾配速度で測定した。
【００６８】
Ｄ．粉末Ｘ線回折
粉末試料の形態は、ＣｕＫα放射線（λ＝１．５４１８Å）を用いるグラファイトモノクロメーターを使用する画像平面検出器を備えた広角ＸＲＤ（Ｒｉｇａｋｕ  Ｒ−Ａｘｉｓ  Ｓｐｉｄｅｒ，Ｊａｐａｎ）によって評価した。４０ｋＶの加速電圧及び４０ｍＡの電流を使用した。試料をＨａｍｐｔｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＣｒｙｏＬｏｏｐに載せた。二次元画像平面データを、Ｒｉｇａｋｕの２ＤＰ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．０データ変換プログラムの使用によって、従来の一次元粉末パターンに変換した。この研究において、変換範囲は、０．０１°の２θステップサイズで２°〜４０°であった。データを、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡｎａｌｙｔｉｃａｌのＤｉｆｆｒａｃＰＬＵＳ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｐａｃｋａｇｅ，ＥＶＡ（Ｖ．２００９）の使用によって分析した。ＸＲＰＤパターンを、新たに調製されたＢＭＰ製剤及び微粒子化ブレンド、ならびに微粒子化した及びＢＭＰの個別のＡＰＩによって確立した。
【００６９】
Ｅ．走査電子顕微鏡法
走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）を用いて、微粒子化性剤とＢＭＰ製剤の両方の表面形態を評価した。画像化する前に、試料を両面炭素テープに装填し、スパッター塗布機２０８ＨＲ（Ｃｒｅｓｓｉｎｇｔｏｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｗａｔｆｏｒｄ，Ｅｎｇｌａｎｄ）の使用によって、１２ｎｍの厚さを目標に白金／パラジウムを塗布した。ＳＥＭ画像は、５ｋＶのＥｌｅｃｔｒｏｎ  Ｈｉｇｈ  Ｔｅｎｓｉｏｎ（ＥＨＴ）で稼働する高真空モードのＣａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ  Ｓｕｐｒａ（登録商標）４０ＶＰ（Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ，Ｏｂｅｒｋｏｃｈｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）により、ＳｍａｒｔＳＥＭ（登録商標）グラフィカル・ユーザー・インターフェースソフトウエアを使用して獲得した。
【００７０】
Ｆ．比表面積分析
比表面性（ＳＳＡ）は、粉末多孔性に関連し、吸着ガスとしてヘリウム中３０％の窒素を用いるＭｏｎｏｓｏｒｂ  ＭＳ−２２急速表面積分析機（Ｑｕａｎｔａｃｈｒｏｍｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｂｏｙｎｔｏｎ  Ｂｅａｃｈ，Ｆｌｏｒｉｄａ）を使用して測定した。粉末試料を、分析の前に、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｏｗ（商標）Ｄｅｇａｓｓｅｒにより、窒素ガスを使用して３０℃で少なくとも２時間かけて脱ガスした。Ｍｏｎｏｓｏｒｂは、極めて急速な表面積一点決定のための修正ＢＥＴ方程式を用いる（Ｐ／Ｐ０＝０．２９４）。
【００７１】
Ｇ．フーリエ変換赤外分光法
赤外線スペクトルは、Ｐｏｌａｒｉｓ（商標）長寿命ＩＲ源（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）及びＤＬａＴＧＳ−ＫＢｒ検出器を備えたＮｉｃｏｌｅｔ（商標）ｉＳ（商標）５０  ＦＴ−ＩＲ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して取得した。各試料を、乳鉢及び乳棒を使用してＫＢｒに分散し、次に圧力を加えることによって、ペレットを形成した。
【００７２】
ＦＴＩＲ測定を、透過様式で実施した。走査範囲は、４ｃｍ−１の解像度で７００ｃｍ−１〜３６００ｃｍ−１であり、１６回の走査を、それぞれのスペクトルにおいて記録し、スペクトルをバックグラウンドスペクトルに対して修正した。全ての測定を室温で実施した。
【００７３】
２．８．水分吸着
水分吸着プロファイルを、Ｄｙｎａｍｉｃ  Ｖａｐｏｒ  Ｓｏｒｐｔｉｏｎ（Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｌｔｄ，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ）の使用によりＢＭＰ製剤について決定した。ガラス試料セルの容量（０．５ｍＬ）を考慮して、粒子密度に応じて３〜６ｍｇの試料を装填した。全ての実験の初期ステップとして、貯蔵または装填中の環境曝露により吸着した水分は、試料を相対湿度（ＲＨ）０％で４８０分間保持することによって、または質量が４０分間のｄｍ／ｄｔで０．００２％未満の変化を有するまで、除去した。それぞれの製剤には、０〜９０％の相対湿度（ＲＨ）の完全吸着／脱着サイクルを１０％ＲＨの段階により２５℃で実施した。計器をｄｍ／ｄｔモードで稼働させて、いつ平衡に達した時を決め、５分間の間隔の範囲内で０．００２％未満ｄｍ／ｄｔによって決定した。吸着等温線を計算し、初期乾燥製剤重量を差し引いた質量の変化率に従ってプロットした。吸着（脱着）質量％は、水分吸着（脱着）に起因する質量の増加（減少）を、０％ＲＨでの初期平衡後の乾燥ＢＭＰ製剤の質量で割り、１００を掛けることによって計算した。
【００７４】
Ｈ．空気力学的粒径分析
Ｎｅｘｔ  Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｉｍｐａｃｔｏｒ（ＮＧＩ）（ＭＳＰ  Ｃｏｒｐ．，Ｓｈｏｒｅｖｉｅｗ，ＭＮ）を使用して、ＤＰＩ装置の影響を決定し、ＢＭＰ製剤及び結晶微粒子化ブレンドの空気力学的特性と比較した。ほぼ２ｍｇの粉末を、サイズ３のＨＰＭＣカプセル（Ｃａｐｓｕｇｅｌ，Ｐｅａｐａｃｋ，ＮＪ）に手作業で充填し、成形シリコーンマウスピースアダプターにより導入口に取り付けたＭｉａｔ  ｍｏｎｏｄｏｓｅ  ｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）ＤＰＩ装置を使用してエアロゾル化した。動物研究においてＢＭＰ製剤及び微粒子化粉末の性能をインビトロにおいて特徴決定するため、粉末を、カプセルを用いることなく、通気器チャンバーにも充填した。エアロゾルは、４Ｌの吸入量及び装置全体にわたる４ｋＰａの圧力降下を達成するため、Ｍｉａｔ  ｍｏｎｏｄｏｓｅ  ｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）により９１Ｌ／分の空気流速で２．７秒間及び通気器により５１Ｌ／分の空気流速で４秒間にわたって生成した（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４、Ｗａｔｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）。両方の装置における直径のステージカットオフサイズを、ステージ１〜７及びマイクロオルフィスコレクター（ｍｉｃｒｏ−ｏｒｉｆｉｃｅ  ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ）（ＭＯＣ）における。６．４８、３．６１、２．３０、１．３７、０．７６、０．４３、０．２６及び０．２６μｍと計算した（Ｍａｒｐｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００３）。それぞれの実施の前に、ＮＧＩ収集表面を、エタノール中１％（ｖ／ｖ）のポリソルベート８０で塗布し、これは、粒子バウンド及び再同伴により引き起こされる偏向を避けるためにＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｅｒｏｓｏｌ  Ｇｒｏｕｐ（ＥＰＡＧ）によって推奨されている塗布材料である［４１］。エアロゾル化した後、全ての収集表面を既知の体積の移動相ですすいだ。カプセル、装置、アダプター、咽喉、プレセパレーター（ｐｒｅ−ｓｅｐａｒａｔｏｒ）及びステージ１−ＭＯＣに沈着した粉末を、それぞれ抽出した。０．２μｍのＰＴＦＥフィルターに通した後、溶液をＳＸ及びＭＦ含有量についてＨＰＬＣにより分析した。ＤＰＩ装置はプレセパレーターを装備していたが、通気器は、装備していなかった。それぞれの試験において、総放出用量（ＴＥＤ）を、カプセルへの総装填用量に対する、吸入器から放出されたＡＰＩの率と定義した。幾何的標準偏差（ＧＳＤ）及び空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を、ステージ１−ＭＯＣに沈着した用量に基づいて、ＵＳＰ  ３２−ＮＦ  ２７  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｃｈａｐｔｅｒ  ６０１に従って計算した（ＤｉＮｕｎｚｉｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。微細粒子画分（ＦＰＦ）を、放出用量で５．０μｍ未満の質量粒子画分と定義した。空気力学的直径（各ステージのカットオフサイズ）に対する記述された空気力学的直径よりも少ない質量の累積率のプロットを構築し、Ｓｉｇｍａｐｌｏｔ（Ｓｙｓｔａｔ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）を使用して４つパラメーターロジスティック曲線に当てはめた。
【００７５】
Ｉ．クロマトグラフィー分析
カプセル、装置、アダプター、スロート、プレセパレーター及びステージ１−ＭＯＣからの、すすぎ洗いした表面収集物を、全て濾過し、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により分析した。ＨＰＬＣを使用して、収集したＳＸ及びＭＦを定量化した。試料は、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）逆相Ｃ１８カラム５μｍ、１５０ｍｍ×４．６０ｍｍを備えたＤｉｏｎｅｘ  ３０００高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）系を使用して分析した。全ての試験を、１．２ｍＬ／分の流速により室温で実施した。移動相は、リン酸によりｐＨ３．５に調整された、９０／１０（ｖ／ｖ）のメタノール／水から構成された。注入量は２０μＬであり、検出波長は２５０ｎｍであった。直線性試験溶液は、１μｇ／ｍＬ〜２５０μｇ／ｍＬの範囲の７濃度レベルによりＳＸ及びＭＦ貯蔵溶液から調製した。
【００７６】
ＳＸは、ラセミ混合物として市販されており、（Ｓ）−サルメテロールが対応する（Ｒ）−サルメテロールと比較して異なる効果を有する証拠は示されておらず、したがってキラルクロマトグラフィー分析を用いて、ＢＭＰ製剤のキラリティーを特定した。吸入粉末におけるＳＸの光学活性を決定するため、Ｄｉｏｎｅｘ  ３０００  ＨＰＬＣ及びＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）順相キラルカラムＬｕｘ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ−４（５μｍ、２５０×４．６０ｍｍ）を使用して、キラルクロマトグラフィーを実施した。（Ｒ）−サルメテロールと（Ｓ）−サルメテロールの立体化学分離を、０．１％のＤＥＡを有するｎ−ヘキサン／２−プロパノール（９０：１０、ｖ／ｖ）を含有する移動相の使用によって達成した。分析は、２５０ｎｍのＵＶにより１．０ｍＬ／分の流速を使用して周囲温度で実施した。
【００７７】
Ｊ．インビボ薬物動態研究
動物研究は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｔｅｘａｓ  ａｔ  Ａｕｓｔｉｎ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＡＣＵＣ）により承認された。体重が２５０〜３００ｇで平均体重が２７０ｇである、頸静脈にカテーテル挿入のある及びカテーテル挿入のない雄及び雌のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）を、インビボ挿管及び乾燥粉末通気手順に使用した。一週間の順化期間の際に、ラットを、飼料及び水を自由に入手させながら１２時間明暗サイクルにより１ケージあたり２匹で収容した。カテーテルを、５００単位／ｍＬのヘパリン化生理食塩水により、研究の３日前に毎回フラッシュした。動物を２つの群に分け、各群は、肺試料収集用の１２匹のカテーテル挿入なしのラット及び血液試料収集用の４匹のカテーテル挿入ありのラットを含んだ。
【００７８】
ＤＰ−４Ｍ  Ｄｒｙ  ｉｎｓｕｆｆｌａｔｏｒ（商標）装置、ＡＰ−１空気ポンプ及びＬＳ−２小動物喉頭鏡を使用した（Ｐｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ，Ｉｎｃ．，Ｗｙｎｄｍｏｏｒ，ＰＡ）。ＢＭＰ及び微粒子化ブレンドを計量し、容量調整式（ａｄｊｕｓｔａｂｌｅ−ｖｏｌｕｍｅ）空気ポンプに接続する前に、通気器のチャンバーに装填した（標的ＳＸ用量＝４５０μｇ／ｋｇ、標的ＭＦ用量＝１９８０μｇ／ｋｇ）。各ラットを、ケタミンＨＣｌ／キシラジンＨＣｌの０．２ミクロ濾過混合物（８０ｍｇ／ｋｇのケタミンＨＣｌ、６ｍｇ／ｋｇのキシラジンＨＣｌ）により腹腔内で麻酔をかけ、約０．２〜０．３ｍＬの混合物を体重に基づいて投与した。ラットに麻酔をかけた後、４５度の角度で仰向けに置き、切歯を小さな輪ゴムで固定した。喉頭鏡を使用して、気管を可視化し、次に通気装置を気管に挿入し、空気ポンプを通気装置に取り付けた。空気の所望量（ラットでは１回のポンプ送風で２ｍＬの空気）を、取り付けた空気ポンプから与えて、粉末を、通気装置のチャンバーから、ＰＥ管と金属先端カニューレを通して、ラットの気管の中に押し出した（Ｍｏｒｅｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）。全ての粉末を、４〜７回のポンプ送風の使用によって肺の中に送った。通気器を、粉末の充填及び投与の前後に計量して、実際に通気された用量を質量で確認した。
【００７９】
通気した後、血液試料を、５分、１５分、３０分、１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間及び２４時間の時点で頸静脈カテーテルから抜き取り、その後に等量の温生理食塩水をラットに注射し、ＢＤ  Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）血液収集管に保存した。各群において、３匹のラットを各時点（１５分、１時間、２時間、６時間及び２４時間）で殺処分し、肺を採取した。下気道に沈着したＡＰＩの量を調査するため、修正気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）手順を、肺試料収集の前に流体収集のために気道を３ｍＬの滅菌リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）により２回洗浄することによって、実施した（Ｃｈｏｕｇｕｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００７）。およそ４〜５ｍＬのＢＡＬが生じた。全ての生体試料を、分析するまで−８０℃の冷凍庫に保存した。
【００８０】
Ｋ．肺組織、ＢＡＬ及び血液中のＳＸ及びＭＦ濃度の定量化
肺組織、ＢＡＬ及び血漿中のＳＸ及びＭＦ濃度を、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）により定量化した。ロルカセリン（ＬＯＲ）を内部標準として用いた。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ系は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＣＢＭ−２０Ａ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｒ、２台のＬＣ−２０ＡＤポンプ、ＳＩＬ−２０ＡＣ自動試料採取器、ＣＴＯ−２０ＡＣカラムオーブン及びターボイオンスプレーを備えたＡＢ  Ｓｃｉｅｘ  ＡＰＩ  ４０００−ＱＴｒａｐ質量分析機  から構成された。クトマトグラフ分離は、ＭａｃＭｏｄ（Ｃｈａｄｄｓ  Ｆｏｒｄ，ＰＡ）から購入したＡｃｅ  Ｅｘｃｅｌ  ３  Ｓｕｐｅｒ  Ｃ１８（３×７５ｍｍ、３μ）によって達成し、クロマトグラフィーを実施している間は４０℃に維持した。移動相Ａは、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｈ２Ｏ中の０．１％ギ酸を含有し、移動相Ｂは、アセトニトリル中の０．１％ギ酸を含有した。移動粗の流速は０．７ｍＬ／分であった。ＳＸ及びＭＦを、段階勾配で溶出した。カラムを６０％移動相Ｂと平衡にした。注入した２．５分後、系を９５％移動相Ｂに交換した。６分の時点で系を６０％移動相Ｂに交換して、次の注入に備えた。Ｑ１／Ｑ３移行の追跡をモニターした。ＳＸではｍ／ｚ  ４１６．１→２３２．０であり、ＭＦではｍ／ｚ  ５２１．９→３５５．２であり、ＬＯＲ（ＩＳ）ではｍ／ｚ  １９６．０→１２９．１であった。下線を付けた移行を定量化に使用した。
【００８１】
血漿中のＳＸ及びＭＦの定量化：ＳＸ／ＭＦを血漿中で定量化した（ＥＤＴＡ）。簡潔には、１００μＬの標準物質及び不明な血漿試料を、１０μＬのＬＯＲ希釈標準貯蔵溶液（ｗｏｒｋｉｎｇ  ｓｔｏｃｋ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）（内部標準）及び３００μＬの移動相Ｂ（アセトニトリル中の０．１％ギ酸）と混合した。試料を２分間にわたって激しくボルテックス（ｖｏｒｔｅｘｅｄ）し、次に３２００ｇにより２３℃で２０分間遠心分離した。上澄みを１．５ｍＬのマイクロフィルターフュージ（ｍｉｃｒｏｆｉｌｔｅｒｆｕｇｅ）管に移し、遠心分離し、次に５０μＬの最終抽出物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳに注入した。それぞれの不明試料におけるＳＸ及びＭＦと内部標準ＬＯＲとのピーク面積比（応答比）を、０、０．５、１、１０、５０、１００、５００、１０００ｎｇ／ｍＬにおいて標準物質応答比の線形回帰と比較して、ＳＸ及びＭＦを定量化した。それぞれの分析物の濃度を、血漿のｎｇ／ｍＬで表した。
【００８２】
肺組織におけるＳＸ及びＭＦの定量化：肺の重量は、平均で１．６グラムであった。簡潔には、標準物質、対照及び不明の組織試料を１０体積の移動相Ｂと混合し、組織ホモジナイザーで均質にした。試料を３２００ｇにより２０分間遠心分離し、次に１００μＬの上澄みを１．５ｍＬのマイクロフィルターフュージ管に移し、１０μＬのＬＯＲ希釈標準貯蔵溶液を添加した。試料を２分間にわたって激しくボルテックスし、１．５ｍＬのマイクロフィルターフュージ管に移し、遠心分離し、次に１０μＬの最終抽出物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳに注入した。それぞれの不明試料におけるＳＸ及びＭＦと内部標準ロルカセリンとのピーク面積比（応答比）を、０、１０、１００、１０００、２５００、５０００、７５００、１００００ｎｇ／ｍＬにおいて標準物質応答比の線形回帰と比較して、ＳＸ及びＭＦを定量化した。ＳＸ及びＭＦの濃度をタンパク質含有量に正規化し、組織のμｇ／ｇ（百万分の一）で表した。
【００８３】
ＢＡＬ中のＳＸ及びＭＦの定量化：１００μＬの標準物質、対照及び不明の試料を、３００μＬの移動相Ｂとボルテックスした。ボルテックスした後、試料を１．５ｍｌのマイクロフィルターフュージ管に移し、次に３２００ｇにより２３℃で１５分間遠心分離した。濾液を自動試料採取器管に移し、１０μＬの最終抽出物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳに注入した。それぞれの不明試料におけるＳＸ及びＭＦのピーク面積を、０、０．５、１．０、５、１０、５０、１００、１０００、５０００、１００００ｎｇ／ｍＬにおいて標準物質ピーク面積の線形回帰と比較して、ＳＸ及びＭＦを定量化した。ＳＸ及びＭＦの濃度を、ＢＡＬのｎｇ／ｍＬで表した。
【００８４】
実施例４−ＳＸとＭＦとの組み合わせの結果
Ａ．示差走査熱量測定
図３に示されている結果は、ＢＭＰ製剤が融解吸熱のないことを示しているが、１０１．７７℃〜１２４．４３℃の温度範囲に単一ガラス転移（Ｔｇ）、続いて１３８．８５℃〜１４７．３２℃の温度範囲に単一再結晶化ピークが変調ＤＳＣによってそれぞれ観察されたことを示している。
【００８５】
Ｂ．Ｘ線粉末回折
結晶性の不在は、凍結乾燥後のＢＭＰ  ＳＸＭＦ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅの固定用量組み合わせのディフラクトグラムにおけるハロパターンの存在によって、図４Ａにおいて確認された。しかし、固定用量組み合わせ薬剤混合物における賦形剤は、ＸＲＰＤにより明白となった異なる結晶特性を示した。Ｇｌｙ及びＭａｎのピークが、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎにおいて観察された。微粒子化薬剤の物理的ブレンドは、ＳＸ及びＭＦのそれぞれにおいて特徴的な結晶ピークを示した。
【００８６】
２５℃／３０％ＲＨで６か月間にわたってＴＦＦにより調製された固定用量組み合わせによって実施された、図４Ｂに示されている安定性の結果は、６か月間にわたってＢＭＰ  ＳＸＭＦ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅのＸＲＰＤピーク強度において変化を示さず、粉末は非晶質のままであった。対照的に、ＳＸに対応する小さな結晶ピーク（４．２１  ２θ）を示したＸＲＰＤ回折パターンが、同じ期間にわたってＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙにおいて観察された。
【００８７】
Ｃ．走査電子顕微鏡法及び比表面積分析
図５Ａ及び５Ｂに例示されているように、ＢＭＰ固定用量組み合わせは、緩く連結して隣接する凝集体とスポンジ様構造を形成する多孔質微粒子凝集体を示し、これは均質で脆性であるように見えた。対照的に、微粒子化薬剤物理的ブレンドは、均質ではなかった。
【００８８】
ＢＥＴ表面積測定の結果を表３に示す。微粒子化ＳＸＭＦの比表面積は、０．８９ｍ２／ｇであることが見出された。一般に、同時沈着用のＢＭＰ固定用量組み合わせの比表面積は、ほぼ２６．８７〜３５．６１ｍ２／ｇに変動した。ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅは、他のＢＭＰ製剤と比較して大きな表面積を示した。しかし、ＢＭＰ製剤の値に有意な差はなかった。
表３：微粒子化された  ＳＸＭＦ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅの比表面積（ＳＳＡ）。値は平均±ＳＤ（ｎ＝３）で表されている。
【表３】
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【００８９】
Ｄ．フーリエ変換赤外分光法
図６Ａ及び６Ｂに示されているように、個別の構成成分及びＴＦＦ加工粉末のフーリエ変換赤外分光（ＦＴＩＲ）スペクトルを調査し、検査した。１７２４ｃｍ−１における−Ｃ＝Ｏ伸縮のピークを、全てのＢＭＰに観察することができ、単一のＳＸ及びＭＦも含まれた。３２００ｃｍ−１〜３７００ｃｍ−１の領域に位置する強いピークは、−ＯＨ又は−ＮＨに対応することができ、全ての単一材料において観察された。単一のＳＸは、３２７８ｃｍ−１に強いピークを示し（図６Ａに示されている）、これは、第二級アミドの−ＮＨ伸縮に起因した。ＳＸの−Ｃ−Ｎ伸縮は、１２６８ｃｍ−１における比較的鋭角なピークの存在によって確認された。カルボニル領域では、個別の結晶形態が、固定用量組み合わせと比較して広いピークを示した。結晶質ＭＦと比較して、全ての固定用量組み合わせにおいて１７２４ｃｍ−１の−Ｃ＝Ｏ伸縮ピークにバンドシフトは観察されなかった。３２００ｃｍ−１〜３４００ｃｍ−１の領域に強く広い−ＮＨ及び−ＯＨピークが、単一材料、とりわけ賦形剤に見られた。全体的に、−Ｃ＝Ｏまたは−ＮＨ及び−ＯＨのいずれかの波数は、ＴＦＦ過程の後、固定用量組み合わせにおいてシフトしなかった。このシフトの欠如は、Ｈ結合の証拠がないことを示している。
【００９０】
Ｅ．水分吸着
図７は、１サイクルのＤＶＳの後に決定された、ＢＭＰ固定用量組み合わせの吸着及び脱着等温線についての結果を示した。ゆっくりとした水分取り込みが、吸着試験の際にＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅにおいて観察された。ゆっくりとした水分取り込み（及び対応するゆっくりとしたベースライン安定化）が、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ（１２時間）、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ（１１．５時間）及びＢＭＰ  ＳＸＭＦ（１１時間）と比較して長いサイクル時間を意味するので、吸着／脱着サイクルを完了するために要した時間は、それぞれ２２時間及び１９時間であった。重量増加（％）として測定された水分取り込みは、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ（約３５％）、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅ（約３０％）、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ（約５％）、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙ（約４％）及びＢＭＰ  ＳＸＭＦ（約２％）であった。これは、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅが、他の構成成分より吸湿性があったことを示唆している。
【００９１】
Ｆ．インビトロエアロゾル性能
固定用量ＢＭＰ製剤及び微粒子化ＡＰＩブレンドのＮＧＩ分散データをプロットし、表４に示した。Ｍｉａｔ  ｍｏｎｏｄｏｓｅ  ｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）により投与された全ての固定用量組み合わせのエアロゾル特性は、高いＦＰＦ（３８％〜５７％）及び小さいＭＭＡＤ（ほぼ４μｍ）を明らかにした。
表４：Ｍｉａｔ  ｍｏｎｏｄｏｓｅ  ｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）による９０Ｌ／分でのＢＭＰ及び結晶微粒子化粉末の共薬剤沈着のためのＳＸ及びＭＦの空気力学的特性。値は平均±ＳＤ（ｎ＝３）で表されている。
【表４−１】
2018514569.tif 000005
【表４−２】
2018514569.tif 000006
【００９２】
しかし、ＳＸのエアロゾル特性は、固定用量ＢＭＰのＭＦに相当した。微粒子化ブレンドＳＸＭＦのＦＰＦは、３４．２９±５．７８％のＭＦに対して５９．５１±７．０７％のＳＸであったが、ＢＭＰ  ＳＸＭＦのＦＰＦは、５２．０８±４．４０％のＭＦに対して５５．５２±４．７８％のＳＸであり、類似していた。驚くべきことに、両方の製剤のＭＭＡＤは類似した値を示し、３〜５μｍの範囲で装填であった。しかし、２つのＡＰＩのＭＭＡＤは、固定容量組み合わせと近似していた。逆に、ＳＸ及びＭＦの微粒子化ブレンドは、異なるＭＭＡＤを示した。加えて、ＢＭＰ製剤の２つのＡＰＩのＴＥＤは、およそ９３％を上回り、微粒子化ブレンドのＴＥＤは、８２％を下回った。
【００９３】
図８Ａ〜８ＥのＮＧＩデータの検査は、ＳＸとＭＦの異なるステージでの沈着率がＢＭＰ製剤において類似していたことを示した。同時沈着用のＢＭＰ固定用量組み合わせは、沈着率として、他の構成成分ＭＦと同等の性能を有するＳＸのエアロゾルを用量比例的に生成した。微粒子ブレンドは、図８Ａ〜８Ｅに示されているように構成されたものと同じ構成成分を有するＳＸ及びＭＦの一様ではない分布を示した。更に、微粒子化ブレンドは主にカプセル及び咽喉に沈着し、一方、ＢＭＰ製剤は主にプレセパレーター及びステージ１に沈着した。ＢＭＰ  ＳＸＭＦ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙは、高いＦＰＦ及び低いＭＭＡＤを示した。
【００９４】
ＮＧＩ機器により５１Ｌ／分の空気流速を使用して通気器により実施されたＢＭＰ  ＳＸＭＦ及び微粒子化ＳＸＭＦの空気力学的特性を、図９に報告した。ＢＭＰ  ＳＸＭＦのＦＰＦは、ＳＸ及びＭＦが  ４６．０２±４．７７％及び４５．６５±６．４３％であり、微粒子化ＳＸＭＦのＦＰＦは、２３．１５±０．０１％及び２１．１１±０．０１％であった。ＭＭＡＤ及びＧＳＤの値は両方の製剤で近似していた、ＢＭＰ  ＳＸＭＦのＴＥＤはほぼ９９％であった。
【００９５】
Ｇ．クロマトグラフィー
ＳＸ及びＭＦの直線性試験溶液を、１μｇ／ｍＬ〜２５０μｇ／ｍＬの範囲の７つの濃度で実施した（ｒ＞０．９９）。回収率（％）は８５〜１０５％であり、これは信頼性があると見なされ、そうでなければ試験を繰り返した。
【００９６】
キラルクロマトグラフィーにおいて、２つのピークが全ての固定用量組み合わせにおいて観察され、ピーク面積は類似しており、キラリティーが凍結乾燥の後で変化しなかったことを示しており、ＳＸキラリティーの保持時間は、およそ１８分間及び２１分間であった。
【００９７】
実施例４−ＳＸとＭＦとの併用療法の考察
ＳＸ及びＭＦ（質量比５：２２）の組み合わせＢＭＰをＴＦＦにより生成して、気道全体にわたって一定した率で２つのＡＰＩの同時沈着を可能にした。比較用の微粒子化基準ブレンドを調製するために、ジェットミル粉砕を使用した。ラクトース（Ｌａｃ）、マンニトール（Ｍａｎ）、グリシン（Ｇｌｙ）及びトレハロース（Ｔｒｅ）を用いて、ＳＸ及びＭＦ  ＢＭＰ製剤を調製した。担体粒子として賦形剤を使用する粗ブレンドＤＰＩ生成物と異なり、ＢＭＰの薬学的賦形剤は、マトリックス構造を形成し、非晶質ＡＰＩを安定化する。ラクトース、マンニトール及びグリシンは、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により吸入用賦形剤として承認されており、異なる量でＤＰＩに使用されている（例えば、２５ｍｇまでのラクトース（Ｗａｔｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）、０．０５１％のマンニトール及び０．０１％のグリシン）。トレハロースは、比較的高いＴｇ及び低い結晶化傾向のため、薬学的製剤に溶解保護剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）として広く使用されている（Ｓｉｍｐｅｒｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００６）。分子レベルでは、本明細書に使用されるＳＸ、ＭＦ及び賦形剤は官能基を有し、これは、カルボン酸、アミド及びアルコールなどの水素結合供与体及び受容体をもたらし、組み合わせに使用されると非晶質系の安定性を改善することが示されている（Ｊｅｆｆｒｅｙ  Ｇ．Ａ．，１９９７）。
【００９８】
同時沈着用にＢＭＰ組み合わせを配合するため、ＴＦＦ加工の後にＳＸ及びＭＦが熱力学的に混和性であることが望ましい。ＢＭＰ製剤の２つのＡＰＩにおける単一のＴｇ及び再結晶化ピークの出現、ならびに融解ピークの不在によって、１つのＡＰＩが他のＡＰＩまたは賦形剤に溶解したＡＰＩ−ＡＰＩ均質非晶質相の形成が確認された。ＤＳＣサーモグラムに基づくと、ＢＭＰ  ＳＸＭＦが共非晶質（ｃｏ−ａｍｏｒｐｈｏｕｓ）状態に移行したことを示唆している。賦形剤の熱特性は、ＡＰＩの分解のため、推定するには十分に明確ではなかった。しかし、個別の構成成分の形態学的状態は、ＸＲＰＤ研究によって明確となる。ＢＭＰのＸＲＰＤパターンは、非晶質ＡＰＩがＤＳＣサーモグラムと一致していることを示している。賦形剤の結晶学も明確に観察される。図４Ａから分かるように、ＢＭＰ製剤における特徴的なＳＸ及びＭＦ結晶ピークの不在、ならびに典型的なハロ回折パターンの出現は、ＳＸ及びＭＦの非晶質形態を示唆した。これらの結果は、非晶質二成分（ＢＭＰ  ＳＸＭＥ）または三成分（ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃもしくはＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅ）固体分散体が、高Ｔｇ構成成分の導入によって形成されたことを示し、ＭＦ、Ｌａｃ及びＴｒｅのＴｇは、およそ１５０℃、１１６℃（Ｃｒａｉｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０００）及び９４℃（Ｓｉｍｐｅｒｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００６）であった。ＳＸ及びＭＦは、結晶性Ｇｌｙ及びＭａｎを含有するＢＭＰ製剤において非晶質であるが、ＡＰＩの結晶化が、核生成及び結晶種付けに起因して生じることがある（Ｓｕｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）。
【００９９】
共非晶質固体が生成されて、溶解性、安定性及び生物学的利用能を増加するので、非晶質ＡＰＩは、これらの利点を維持するため、結晶化への熱力学的傾向に対して耐性がなければならない。非晶質系の安定性の増加は、一般に、Ｔｇの増加によって説明され、これは、特定の貯蔵温度での結晶化に必要な分子運動性を低減することができる（Ｊａｎｓｓｅｎｓ  ａｎｄ  Ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｍｏｏｔｅｒ，２００９）。この研究において、ＢＭＰ  ＳＸＭＦ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＴｒｅは、２５℃／３０％ＲＨで６か月間貯蔵した後、依然として良好な共非晶質状態を維持した。しかし、４．２１  ２θにおけるＳＸの小さな結晶ピークが、同じ期間にわたってＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃ、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＭａｎ及びＢＭＰ  ＳＸＭＦＧｌｙにおいて観察された。
【０１００】
あらゆる理論の束縛されることなく、ＡＰＩ粒子の比表面積及び形態学は、動力学及び熱力学の両方の効果を介してＡＰＩの放出特徴に有意な影響を及ぼしうると考えられる（ＤｉＮｕｎｚｉｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００８）。サイズ、密度、比表面積及び形態の差は、粒子形成過程に起因しうる（Ａｌｉ  ａｎｄ  Ｌａｍｐｒｅｃｈｔ，２０１４）。不規則で凝集性の微粒子化ブレンドと異なり、ＢＭＰ製剤の利点は、多孔性で脆性の構造が肺液（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｆｌｕｉｄ）におけるＡＰＩの急速な溶解の潜在性を促進することであった（Ｊａｎｓｓｅｎｓ  ａｎｄ  Ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｍｏｏｔｅｒ，２００９）。ＢＭＰ製剤のＳＳＡは、多孔質マトリックス構造に起因して、微粒子化性剤と比較して大きく増加した。全てのＴＦＦ加工粉末は、非常に低いバルク密度を示し、容易にエアロゾル化することが予測された。
【０１０１】
水分吸着は、ＢＭＰ製剤のエアロゾル特徴において主要な役割を果たす。賦形剤としてラクトースを用いてＴＦＦにより調製された呼吸可能なＢＭＰは、水分誘導性マトリックス崩壊を起こしやすく、吸湿性であり、対照的に、ＢＭＰのエアロゾル化特性は、マンニトールを用いて加工した場合、高い湿度により影響をうけなかった（Ｗａｔｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）。あらゆる理論に束縛されることなく、吸湿性賦形剤は、共非晶質ＢＭＰ製剤において（安定性の研究によると）不安定性の危険を増加しうるが、非吸湿性賦形剤により加工されたＢＭＰ製剤または賦形剤のないＢＭＰ製剤は、より堅牢であったと考えられる（インビトロエアロゾル性能によって明らかとなった）。
【０１０２】
フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）測定を実施して、ＢＭＰ製剤におけるＳＸ、ＭＦと賦形剤との分子レベルでの可能な相互作用についての洞察を得た。この研究における比較を容易にするため、単一結晶成分を分析した（Ｈｅｉｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）。賦形剤における振動様式に対する熱励起の作用に起因して、−ＯＨ伸縮に対応する３０００ｃｍ−１及び３５００ｃｍ−１の領域における水素結合相互作用が原因のシフトがあるかを決定することが可能であった。
【０１０３】
単一材料の３２００ｃｍ−１及び３４００ｃｍ−１の領域における強い−ＮＨ及び−ＯＨピークは形状を変化させたが、全てのＢＭＰ固定用量組み合わせにおいて、−Ｃ＝Ｏ、または−ＮＨ及び−ＯＨのいずれにも有意なピークシフトを検出することができなかった。したがって、あらゆる理論に束縛されることなく、相互作用が生じなかったと考えられる。水素結合相互作用は、通常、共非晶質製剤において、とりわけ、潜在的な水素受容体及び供与体により構造化された材料から構成される製剤において観察されるが、このことが生じるのは必然的なことではなく、必ずしも物理化学的特性を改善するとは限らない（Ｄｅｎｇａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４、Ｌｏｂｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）。
【０１０４】
空気力学的性能は、肺沈着に相関するので、吸入乾燥粉末製剤の性能を測定する１つの要素である（Ａｌｉ  ａｎｄ  Ｌａｍｐｒｅｃｈｔ，２０１４）。ＢＭＰ製剤は、大きな幾何的直径を生成するが、低粒子密度は、有効な肺沈着のために十分に小さい空気力学的直径を可能にする（Ｃａｒｖａｌｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４、Ｗａｔｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）。Ｍｉａｔ  ｍｏｎｏｄｏｓｅ  ｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）を本明細書に用い、これは、脆性マトリックスを呼吸可能な粒子に分解するのに必要な剪断力を提供した。加えて、粉末通気器から送達された粉末を、インビボ研究用の調製のために特徴決定した。
【０１０５】
高いＴＥＤによって実証されたように、微粒子化ブレンドより多くのＢＭＰ製剤をカプセル及びアダプターから出した。ＢＭＰ製剤のＳＸのＦＰＦ（送達％）は、抗溶媒沈殿（ａｎｔｉ−ｓｏｌｖｅｎｔ  ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ）により調製された以前に調査されたＳＸ組み合わせ製剤（Ｍｕｒｎａｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）と比較して、２５％改善された。ＭＦ  Ｔｗｉｓｔｈａｌｅｒの単独療法では、２００μｇ強度のＦＰＦは２７．９％であったことが報告されており（Ｂｅｒｇｅｒ  ａｎｄ  Ｂｅｒｇｅｒ，２０１３）、したがって、ＭＦ−ＤＰＩのＦＰＦは、この研究においても有意に増加した。表４に提示されたデータは、ＢＭＰ製剤のＳＸ及びＭＦのエアロゾル特性が類似していることを示し、両方のＡＰＩがインビトロに吸入後に同時沈着したことを示唆している。逆に、組み合わせ粉末ブレンドにより送達された微粒子化ＳＸ及びＭＦは、異なるＦＰＦ及びＭＭＡＤを示した。
【０１０６】
図８Ａ〜８Ｅに示されているＮＧＩ内の空気力学的粒径分布は、ＢＭＰ製剤のＡＰＩが高い一貫性を持って全てのステージに送達され、一方、微粒子化ブレンドが、ばらつきの結果をもたらしたことを示唆した。単一吸入器からのＳＸ及びコルチコステロイドのフルチカゾンプロピオン酸エステルの投与後に、細胞レベルでの同じ位置は、臨床有効性を増加する潜在性をもたらすことが報告されている（Ｎｅｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３）。したがって、この固定用量組み合わせは、２つの別々の吸入器による同じ用量よりも、相乗的相互作用の生じる機会を増やすことができる。
【０１０７】
非吸湿性賦形剤と配合した粉末、または賦形剤を配合しなかった粉末は、吸湿性粉末と比較して高いＦＰＦを示し、例えば、表４に示されているように、ＢＭＰ  ＳＸＭＦＬａｃに対するＢＭＰ  ＳＸＭＦである。ＳＸとＭＦの沈着率の比較に基づいて、あらゆる理論に束縛されることなく、ＢＭＰ製剤の表面凝集力の低減は、伝統的な製剤おいて通常はファンデルワールス力、毛管力及び静電力によってき起こされた、低いカプセル保持力をもたらすと考えられる（Ｗａｔｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）。装填用量の率であるＦＰＦは２つのＴＦＦ配合ＡＰＩの全てにおいて、およそ３８％〜５７％であるが、製剤／装置の更なる最適化が、これらの製剤の上気道（ステージ１及び２）沈着を低減するために必要である。ＢＭＰ  ＳＸＭＦ粉末は、その安定性及び良好な空気力学的性能によってインビボ研究に選択され、一方、結晶微粒子化ＳＸＭＦブレンドを基準として用いた。更に、インビトロエアロゾル性能研究は、通気器が両方の製剤において動物研究用の微細エアロゾル粒子を生成しうることを示唆した。
【０１０８】
固定用量組み合わせのＢＭＰ  ＳＸＭＦは、肺組織への両方ＡＰＩの沈着量の増加、ならびに肺及び血液における生物学的利用能の有意な増加を示した。ＭＦの全身的な吸着の程度を減少するため、更なる配合手法を考慮することができる。長時間作用性β２−作動薬（ＬＡＢＡ）が、グルココルチコステロイド受容体を刺激する及び吸入コルチコステロイドの活性を改善する能力を有するので、固定用量組み合わせのＢＭＰ  ＳＸＭＦは、潜在的に、従来の結晶微粒子化ＳＸＭＦブレンドより良好な薬物動態を有した。
【０１０９】
実施例５−三重療法の方法及び材料
Ａ．材料
ブデソニド、ホルモテロールフマル酸塩及びチオトロピウム臭化物を、Ｃｈｅｍｉｅｌｉｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）から購入した。Ｄ−（＋）−マンニトールは、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ（Ｇｅｅｌ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）から購入し、ラクトース一水和物（Ｌａｃｔｏｈａｌｅ（登録商標）ＬＨ  ２００）は、Ｆｒｉｅｓｌａｎｄ  Ｆｏｏｄｓ  Ｄｏｍｏ（Ｚｗｏｌｌｅ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から贈呈された。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等級アセトニトリルは、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｆａｉｒ  Ｌａｗｎ，ＮＪ）から購入し、過塩素酸８％ｗ／ｖ水溶液は、Ｒｉｃｃａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＴＸ）から購入した。水は、逆浸透（ＭｉｌｌｉＱ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｆｒａｎｃｅ）によって精製した。
【０１１０】
Ｂ．製剤の調製
薄膜凍結技術を、本明細書及びＯｖｅｒｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）に記載されているように、低密度乾燥粉末の調製に使用した。三剤併用製剤は、ホルモテロール、チオトロピウム及びブデソニドのそれぞれ１：２：３５．５の重量比を使用して調製した。選択された比は、Ｇｌｏｂａｌ  ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ  ｆｏｒ  ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  Ｌｕｎｇ  Ｄｉｓｅａｓｅ（ＧＯＬＤ），Ｉｎｃ．に従って、ＣＯＰＤ患者の治療に使用される典型的な用量に基づいていた。以下の混合物は、構成成分を、３部のアセトニトリル及び２部の水の共溶媒混合物に溶解することによって調製した。ブデソニド／チオトロピウム／ホルモテロール及びマンニトール（ＢＴＦ＿Ｍａｎ）、ブデソニド及びマンニトール（Ｂｕｄ＿Ｍａｎ）、チオトロピウム及びマンニトール（Ｔｉｏ＿Ｍａｎ）、ホルモテロール及びマンニトール（Ｆｏｒ＿Ｍａｎ）、ブデソニド／チオトロピウム／ホルモテロール及びラクトース（ＢＴＦ＿Ｌａｃ）、ブデソニド及びラクトース（Ｂｕｄ＿Ｌａｃ）、チオトロピウム及びラクトース（Ｔｉｏ＿Ｌａｃ）、ホルモテロール及びラクトース（Ｆｏｒ＿Ｌａｃ）。薬剤（複数可）と糖賦形剤との比は１対１であり、最終固体装填濃度は０．５０％（ｗ／ｖ）であった。
【０１１１】
溶液を、薄膜機器の使用によって、極低温冷却（−８０℃）ステンレス鋼表面において急速凍結した。凍結ディスクを、液体窒素充填容器に収集して、融解を回避した。凍結製剤を、液体窒素が完全に蒸発するまで−７０℃の冷凍庫に移し、次に、溶媒を除去するためにＶｉｒＴｉｓ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  Ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｒ（ＶｉｒＴｉｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ  Ｉｎｃ．，Ｇａｒｄｉｎｅｒ，ＮＹ）に移した。製剤を４００ｍＴｏｒｒの圧力により−４０℃で２４時間かけて凍結乾燥し、温度を、２００ｍＴｏｒｒ未満の圧力下で２４時間かけて徐々に２５℃に勾配させ、２５℃で２４時間保持した。
【０１１２】
比較の目的において、ブデソニド／チオトロピウム臭化物／ホルモテロールフマル酸塩及びマンニトール（ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭ）、ならびにブデソニド／チオトロピウム臭化物／ホルモテロールフマル酸塩及びラクトース（ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ）の同等の物理的混合物を、前述と同じ重量比の使用によって調製した。活性物質は、プッシャー（ｐｕｓｈｅｒ）圧力を８０ｐｓｉに設定し、摩砕圧力を１００ｐｓｉに設定した流体エネルギー実験室用Ｊｅｔ−ｏ−ｍｉｓｅｒ（Ｆｌｕｉｄ  Ｅｎｅｒｇｙ，Ｔｅｌｆｏｒｄ，ＰＡ）を使用して微粒子化した。微粒子化粉末の正確な量を計量し、幾何学的希釈技術を使用して混合し、次にステンレス鋼容器に移した。容器をＴｕｒｂｕｌａミキサー（Ｇｌｅｎ  ｇｒｅｓｔｏｎ  Ｌｔｄ．，Ｍｉｄｄｘ，ＵＫ）に設置し、混合を４５毎分回転数（ｒｐｍ）で２０分間実施した。製剤を、混合の前後に１００及び４５μｍメッシュサイズの篩にかけた。
【０１１３】
Ｃ．熱分析
冷蔵冷却系を備えたＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ変調Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｃａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ（ｍＤＳＣ  ２９２０）（Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）を使用して、粉末の熱特性及び結晶化度を分析した。乾燥窒素を、パージガスとして４０ｍＬ／分の流速でｍＤＳＣセルに使用した。重量が４〜１０ｍｇの試料を開放アルミニウムパンに入れ、気密封止した（キット０２１９−００４１、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ）。実験を、１０〜３５０℃の範囲にわたって１０℃／分の加熱速度及び１℃／分の変調温度振幅で実施した。データを、ＴＡ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ２０００ソフトウエア（ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）の使用によって分析した。
【０１１４】
Ｄ．粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）
購入したままの原料活性物質の乾燥粉末、ならびにジェットミル粉砕及びＴＦＦ粉末製剤の結晶化特性を、Ｐｈｉｌｉｐｓ  １７１０  Ｘ線回折計（Ｐｈｉｌｉｐｓ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．Ｍａｈｗａｈ，ＮＪ）の使用によって調査した。測定は、０．０３°／秒のステップサイズ及び５秒間の滞留時間により２θスケールの５°〜３５°で行った。
【０１１５】
Ｅ．粒径分析
ジェットミル粉砕の前後のブデソニド、チオトロピウム臭化物及びホルモテロールフマル酸塩の粒径分布の測定値は、レーザー回折（ＨＥＬＯＳ、Ｓｙｍｐａｔｅｃ  ＧｍｂＨ，Ｃｌａｕｓｔｈａｌ−Ｚｅｌｌｅｒｆｅｌｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して測定した。少量のホルモテロールフマル酸塩及びチオトロピウム臭化物を、１０ｍＬの０．０１％ツイーン８０鉱油に別々に分散し、少量のブデソニドを、１０ｍＬの脱イオン水中０．０１％ツイーン８０に分散した。試料を５分間超音波処理し、１５〜２０％の範囲で光を不明瞭化するのに十分な溶媒で希釈した。報告されたサイズは、少なくとも３回の測定の平均値である。結果をＤ（Ｘ）及びスパン（ｓｐａｎ）で表し、ここでＸは、基準サイズの粒子の累積率である（例えば、Ｄ（５０）は、粒子の直径中央値に相当する）。スパンは、［（Ｄ（９０）−Ｄ（１０）］／Ｄ（５０）と計算される粒径分布の測定値である。
【０１１６】
Ｆ．走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）
粉末の形態及び粒径の推定値を、ＳＥＭの使用によって決定した。試料を炭素テープの上に置き、Ｃｒｅｓｓｉｎｇｔｏｎ  ２０８  Ｂｅｎｃｈｔｏｐ  Ｓｐｕｔｔｅｒ  Ｃｏａｔｅｒ（Ｗａｔｆｏｒｄ，Ｅｎｇｌａｎｄ）を使用して、高真空下で金／白金（６０／４０）を２０秒間塗布した。ＳＥＭ画像は、１９ｍｍの作動距離及び５ｋＶのＥｌｅｃｔｒｏｎ  Ｈｉｇｈ  Ｔｅｎｓｉｏｎ（ＥＨＴ）により真空下で稼働するＣａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ  Ｓｕｐｒａ（登録商標）４０ＶＰ（Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ，Ｏｂｅｒｋｏｃｈｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）において、ＳｍａｒｔＳＥＭ（登録商標）グラフィカル・ユーザー・インターフェースソフトウエアを使用して獲得した。
【０１１７】
Ｇ．Ｂｒｕｎａｕｅｒ−Ｅｍｍｅｔｔ−Ｔｅｌｌｅｒ（ＢＥＴ）比表面積（ＳＳＡ）分析
粉末多孔性は、Ｍｏｎｏｓｏｒｂ  ＭＳ−２２急速比表面積分析計（Ｑｕａｎｔａｃｈｒｏｍｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｂｏｙｎｔｏｎ  Ｂｅａｃｈ，Ｆｌｏｒｉｄａ）を使用する比表面積（ＳＳＡ）の測定によって決定した。この計器は、ＳＳＡ決定に修正ＢＥＴ方程式を使用する。試料を、Ｔｈｅｒｍｏｆｌｏｗ（商標）Ｄｅｇａｓｓｅｒにより、脱着ガスとしてヘリウム中３０％窒素を使用して２５℃で少なくとも２時間かけて脱ガスした。
【０１１８】
Ｈ．フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）
ＦＴＩＲ分光法を使用して、それぞれの試料の化学相互作用、ならびに／または非晶質及び結晶形態を特徴決定した。乾燥試料のＦＴＩＲ走査を、Ｄｅｕｔｅｒｉａｔｅｄトリグリセリドスルフェート（ｄＴＧＳ）検出器を備えたＮｉｃｏｌｅｔ  ＩＲ１００分光計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）に収集した。ＫＢｒディスク方法は、およそ１％（ｗ／ｗ）の試料装填を用いて使用した。合計３２回の走査を４０００〜６００ｃｍ−１の範囲で４ｃｍ−１の解像度によって蓄積した。
【０１１９】
Ｉ．インビトロエアロゾル性能
空気力学的粒径分布及び沈着均質性は、シリコン製マウスピースアダプターにより導入口に取り付けたＨａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）装置を使用して、Ｎｅｘｔ  Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  Ｃａｓｃａｄｅ  Ｉｍｐａｃｔｏｒ  （ＮＧＩ）（ＭＳＰ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｈｏｒｅｖｉｅｗ，ＭＮ）により評価した。カスケードインパクターを、ＵＳＰ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｃｈａｐｔｅｒ＜６０１＞Ａｅｒｏｓｏｌ，Ｎａｓａｌ  Ｓｐｒａｙ，Ｍｅｔｅｒｅｄ−ｄｏｓｅ  Ｉｎｈａｌｅｒｓ  ａｎｄ  Ｄｒｙ  Ｐｏｗｄｅｒ  Ｉｎｈａｌｅｒｓに従って組み立て、操作した。装置を、５４Ｌ／分の流速に相当する、装置全体にわたる４ｋＰａの圧力降下により４．４秒間稼働させ、ＴＳＩ質量流量計（Ｍｏｄｅｌ  ４０００，ＴＳＩ  Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｐａｕｌ，ＭＮ）を使用して較正した。ＮＧＩ収集プレートをヘキサン中１％（ｖ／ｖ）シリコーン油で塗布して、粒子のバウンド、破砕及び再同伴を防止した。３つのカプセルを順番にＮＧＩの中に撃ち込み、調査する各製剤に実験を３回実施した。エアロゾル化した後、試料を既知の量の希釈剤の使用により収集し、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により分析した。
【０１２０】
放出用量（ＥＤ）を、ＤＰＩから放出された薬剤の率として計算した。微細粒子画分（ＦＰＦ）を、≦４．４６μｍの空気力学的直径を有する粒子に対応するマイクロオリフィスコレクター（ＭＯＣ）により、テージ２に沈着したアッセイ用量の合計として計算した。空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を、カットオフ直径に対する累積率の対数確率プロット回帰によって計算し、幾何的標準偏差（ＧＳＤ）を、８４番目／１６番目の率の平方根として計算した。
【０１２１】
Ｊ．ＨＰＬＣアッセイ
全ての薬剤の化学分析を、２３０ｎｍの波長に設定したＵＶ検出器を備えたＤｉｏｎｅｘ  ３０００  ＨＰＬＣ系の使用により実施した。２０μＬの注入量を、２６℃に維持したＩｎｅｒｔｉｓｉｌ  Ｃ８  ５μｍ  １５０×４．６ｍｍ逆相カラム（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）に注入した。勾配溶出を使用し、移動相は、溶媒Ａとして０．２％ｖ／ｖの過塩素酸溶液及び溶媒Ｂとしてアセトニトリルから構成され、１．２ｍＬ／分の流速及び１０分の稼働時間で稼働させ、これは他の部分に記載されている（１７）。この方法を変動性、回収、直線性、検出限界及び範囲について試験し、この研究に適していることが示された。
【０１２２】
Ｋ．統計分析
データは平均±標準偏差（ＳＤ）で表される。統計分析をＮＣＳＳ／ＰＡＳＳソフトウエアＤａｗｓｏｎエディションの使用によって実施した。製剤における有意な差及びＮＧＩステージにおける３つ全ての薬剤の分布率における有意な差を、Ｏｎｅ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡ（ｐ＜０．０５）の使用によって分析した。
【０１２３】
実施例６−三重療法の結果及び考察
Ａ．製剤の粒径及び形態
バルク薬剤及び賦形剤粉末のレーザー回折及び走査電子顕微鏡画像による粒径分析は、粒子のサイズが肺送達に適していないことを示した。ブデソニド及びチオトロピウムのＳＥＭ画像は、それぞれ、２２．１１±１６．９２及び５．１４±０．０３μｍのＤ５０値を有し、かつ２．３１及び２．１４の大きなスパン値により確認された広い粒径分布を有する不規則な形状を示す（表５、ならびに図１０Ａ及び１０Ｂ）。一方、ホルモテロールは、６．２７±０．９７μｍのＤ５０値及び７．７５のより大きなスパン値を有するプレート様形状を示す（表５及び図１０Ｃ）。加えて、比表面積測定（ＳＳＡ）は、ブデソニドでは３．０５±０．２１ｍ２／ｇ、チオトロピウムでは２．０８±０．１３ｍ２／ｇ及びホルモテロールでは２．９７±０．０５ｍ２／ｇの小さな表面積値を提示し、バルク粉末が多数の粒子を含有することを示した。
表５：バルク薬剤及び賦形剤、ジェットミル粉砕薬剤及びＴＦＦ製剤の粒径分布及び比表面積
【表５】
2018514569.tif 000007
【０１２４】
粗いラクトース及びマンニトールを担体として使用して、エアロゾル化の時点の粉末分散を増強した。両方の粉末のＳＥＭ画像は、ラクトースでは３９．７８±１．３２μｍ、マンニトールでは５２．７０±０．５９μｍのＤ５０値を有する不規則な形状を示す。ラクトース及びマンニトールの粒径は原料薬剤よりも大きいが、いずれにしても、粒径分布は、それぞれのスパン値の２．４３及び１．８０と類似していた（表５、ならびに１０Ｄ及び１０Ｅ）。
【０１２５】
ＴＦＦ製剤と比較する目的で三剤併用物理的混合物製剤を調製するため、３つの薬剤粉末の粒径の低減が必要であった。レーザー回折の結果は、サイズ低減方法が、３．４０±０．０９μｍのＤ５０値及び２．５８のスパン値の広い粒径分布を有するバルクブデソニド粉末のみに有意であったことを示している。バルクブデソニドのＳＳＡは、粒径の低減にかかわりなく、２．７５±０．１３ｍ２／ｇに減少した（表５）。あらゆる理論に束縛されることなく、これはミクロサイズの粒子の凝集に起因することがあり、図１１Ａに示されているような不均質な形状を有する静電気帯電粒子をもたらす、制御されていない粉砕過程の際に生じる凝集力が原因でありうると考えられる。チオトロピウム及びホルモテロールのレーザー回折の結果は、粉砕過程の後、粒径に僅かな低減を示し、それぞれ、４．６５±０．０４及び４．５１±０．０２μｍのＤ５０値を有する。更に、チオトロピウムの粒径分布は、２．０のスパン値を有して、小さな低減を示し、一方、ホルモテロールは、１．９６のスパン値を有して、粒径範囲に有意な低減を示した（表５）。チオトロピウム及びホルモテロールのＳＥＭ画像は、不規則な形状を有する凝塊微粒子化粉末を示し、ＳＳＡの結果は、それぞれ、２．８６±０．１１及び５．０８±０．２６ｍ２／ｇの増加した値での粒径の低減を確認した（図１１Ｂ及び１１Ｃ）。粗いラクトース及び粗いマンニトールの微粒子化薬剤の物理的混合物のＳＥＭ画像が、図１１Ｄ及び１１Ｅに示されている。画像は、粗いラクトース及びマンニトールの表面に接着した微粒子化薬剤粉末を示しており、このことは、吸入の時点での粉末の分散及びエアロゾル化を改善することができる。粗いラクトース及びマンニトールの混合物によって、物理的混合物の製剤は、小さなＳＳＡ値の０．４３±０．０５及び０．３２±０．０３ｍ２／ｇを生じた（表５）。
【０１２６】
ＴＦＦ粉末製剤のＳＳＡ測定は、凍結ディスクの凍結乾燥によって形成された高度に多孔質のケーキ粉末に起因して、表面積の有意な増加を示している（表５）。チオトロピウム製剤は、最も多孔性が小さいケーキを生成し、Ｔｉｏ＿Ｍａｎでは３８．７９±０．８１ｍ２／ｇ、Ｔｉｏ＿Ｌａｃでは４８．９０±２．４２ｍ２／ｇのＳＳＡ値であった。ブデソニドのＳＳＡ値は、チオトロピウム製剤よりはるかに高く、Ｂｕｄ＿Ｍａｎでは４６．９７±２．２２ｍ２／ｇ、Ｂｕｄ＿Ｌａｃでは９０．３９±６．１５ｍ２／ｇであった。しかし、ホルモテロール製剤は、Ｆｏｒ＿Ｍａｎでは６４．１４±０．６８ｍ２／ｇ、Ｆｏｒ＿Ｌａｃでは１９３．８６±１０．６３ｍ２／ｇの最大のＳＳＡ値を表した。三重療法製剤も、ＢＴＦ＿Ｍａｎでは５４．５５±１．１０ｍ２／ｇ、ＢＴＦ＿Ｌａｃでは８１．３１±１．７１ｍ２／ｇの大きなＳＳＡ値を生じた。これらの値は、三重療法製剤が製剤中に高い率のブデソニドを有するので、ブデソニド製剤のＳＳＡ値と極めて類似している（表５）。粉末密度及び多孔性における差が、ＳＥＭ画像から分かる。最大のＳＳＡ値を有する粉末製剤は、図１２Ａ〜１２Ｄ及び１３Ａ〜１３Ｄに示されているように、より多くの多孔質ケーキ構造も示す。
【０１２７】
Ｂ．結晶化度の評価
１．ブデソニド
ブデソニドは、微粒子化粉末として提供された。ブデソニドのＰＸＲＤパターンは、２θの１１．８１°、１５．２°、１５．７７°、１８．１４°及び２２．４６°に高い強度ピークを示し、図１８Ｃに示されているように、その結晶質構造を示しており、Ｔａｊｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．により報告されたデータと一致している（Ｔａｊｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）。バルクブデソニド粉末のｍＤＳＣプロファイルは、２５１．４℃に単一の吸熱性融解ピークを示し（図１４）、Ｖｅｌａｇａ  ｅｔ  ａｌ．により報告されたデータと類似しており、その結晶質特性が確認される（Ｖｅｌａｇａ  ｅｔ  ａｌ．，２００２）。ジェットミル粉砕過程の後、微粒子化ブデソニド粉末は、ｍＤＳＣピークプロファイル（図１４）及びＰＸＲＤパターン（図１８Ｃ）によって示されているように、結晶質を維持した。ｍＤＳＣプロファイルは、吸熱性融解ピークに僅かなシフトを示し、２５２．６℃に最大ピークを有した。このように、ＰＸＲＤパターンはピーク強度に低減を示すが、試料はほぼ結晶質を維持した。観察された吸熱性融解ピークのシフト及びＰＸＲＤピーク強度の低減は、微粉砕の時点での粉末の結晶質構造における変化の結果でありうる。粉砕過程は、粒子表面の結晶構造を壊し、非晶質ドメインを作り出す（Ｒａｓｅｎａｃｋ  ａｎｄ  Ｍｕｌｌｅｒ，２００４）。
【０１２８】
マンニトールを用いて調製されたブデソニド製剤の薄膜凍結（ＴＦＦ）は、部分的に結晶質の粉末を生じ、ｍＤＳＣ（図１５）及びＰＸＲＤ（図１７Ｆ）の結果によって確認された。Ｂｕｄ＿ＭａｎのＰＸＲＤパターンは、部分的に結晶質の製剤に特徴的である、小さな強度を有するピークを示している。ｍＤＳＣプロファイルによると、Ｂｕｄ＿Ｍａｎは、１つの発熱性再結晶化ピークを１２６．２℃に示し、２つの吸熱性融解ピークを示し、１つ目はマンニトールの融点に対応する１６７．４℃であり、２つ目はブデソニドの融解に対応する２４２．３℃である。これらの結果は、Ｂｕｄ＿Ｍａｎ製剤の部分的に非晶質の性質を示唆している。Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．は、凍結乾燥後のマンニトールの物理化学的特徴を調査し、凍結乾燥マンニトールが、１３℃で観察される、純粋な非晶質粉末の低いガラス転移温度の結果として、部分的に結晶質の粉末を生じることを報告した。この開示は、製剤中の結晶質マンニトールの相対濃度が、ＰＸＲＤにより検出して３０％（ｗ／ｗ）を超えるはずであることも示唆している（Ｗａｔｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）。
【０１２９】
図１７Ｊに示されているように、ＴＦＦ  Ｂｕｄ＿Ｌａｃ製剤のＰＸＲＤパターンに関して広範囲に散乱したハロが存在し、特徴的な結晶質ピークが不在であり、非晶質構造を示している。図１６は、２つの再結晶化事象を示す変調ＤＳＣサーモグラムを示し、第１のピークは、１３１．４℃にラクトースの再結晶化を表すことができ、第２のピークは、１８０．２℃にブデソニドの再結晶化を表すことができる。再結晶化事象は、非晶質構造が超高速凍結方法によって形成されることを確認する。２つの吸熱性融解ピークも観察され、２１２．８℃はラクトースの融解及び２４５．７℃はブデソニドの融解に相当する。２つの発熱性及び吸熱性ピークは、固体分散系の形成、ならびに分析の時点でのブデソニドとラクトースの後相分離を示しうる（Ｏｖｅｒｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，２００７）。
【０１３０】
２．チオトロピウム臭化物
チオトロピウム臭化物のＰＸＲＤパターンは、２θの５．８１°、１６．１３°、１９．７９°及び２６．６°に高い強度ピークを持つ結晶性を示している（図１８Ｅ）。この試料の結晶性は、バルクチオトロピウム粉末のｍＤＳＣプロファイルによって確認されており、２１９．０℃に単一の吸熱性融解ピークを示している（図１４）。ジェットミル粉砕により得た微粒子化チオトロピウム粉末は、結晶質を維持し、ｍＤＳＣプロファイルにおける発熱性再結晶化ピークの不在及び２１９．３℃での吸熱性融解ピークの存在によって示された（図１４）。しかし、ＰＸＲＤパターンは、結晶質ピーク回折の強度に有意な減少を示し、これは、粉末結晶質の損失及び非晶質ドメインの形成の結果でありうる（Ａｌｈａｌａｗｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）。
【０１３１】
安定化糖としてマンニトールを用いて調製されたＴＦＦ  Ｔｉｏ＿Ｍａｎも部分的な結晶質を示し、チオトロピウム及びマンニトールに類似した低い強度の結晶質ピーク回折によりＰＸＲＤにおいて観察された（図１７Ｇ）。Ｔｉｏ＿Ｍａｎの部分的な結晶質は、１３４．３℃の発熱性再結晶化ピーク、続いて１５８．８℃の吸熱性融解ピークによって確認される（図１５）。単一の再結晶化及び融解ピークのみが存在した。ＴＦＦ  Ｔｉｏ＿Ｌａｃ製剤のＰＸＲＤパターンが図１７Ｌに示されている。Ｂｕｄ＿Ｌａｃと同様に、Ｔｉｏ＿Ｌａｃ粉末は、広範囲に散乱したハロを示し、特徴的な結晶質ピークが不在であり、非晶質構造を示している。粉末の非晶質形態は、ｍＤＳＣサーモグラムによって確認される（図１６）。サーモグラムプロファイルは、６７．９℃に発熱性再結晶化事象、ほぼラクトースに起因して１１９．７℃、ほぼチオトロピウムによって１８９．２℃に２つの吸熱性融解ピークを示している。
【０１３２】
３．ホルモテロールフマル酸塩
ホルモテロールフマル酸塩のＰＸＲＤパターンが図１８Ｇに示されており、結晶質の高い強度ピークを、２θの５．７５°、１５．２９°、１６．１０°、１８．３８°、１９．７６°及び２６．６０°において見ることができる。ＰＸＲＤパターンは、Ｔａｊｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．及びＪａｒｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．により報告されているように（Ｖｅｈｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２、Ｔｒｉｖｅｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）、分析された材料がホルモテロールフマル酸塩の二水和物形態であることを示している。ホルモテロールの変調ＤＳＣ熱流サーモグラムは、図１４に示されているように１１８．２℃及び１４３．５４℃に生じる２つの吸熱性融解ピークを示している。ｍＤＳＣ逆熱流によって分析すると、ホルモテロールフマル酸塩のサーモグラムは、１１１．４、１２３．１及び１３９．１℃に３つの吸熱性ピークを示している。Ｔａｊｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．は、ホルモテロールフマル酸塩の熱力学的特性も調査し、３つの融解ピークを見出したと報告した。最初の最大ピークは、およそ１２２℃で生じ、このことから脱水事象が予想される。後の２つのピークは、およそ１３０℃及び１５０℃に現れた。ジェットミル粉砕ホルモテロールのＰＸＲＤパターンは、材料が、ほぼ結晶質形態を維持していることを示し、ピーク回折は、図１８Ｈに示されているように、強度にほんの僅かな低減を表している。ｍＤＳＣプロファイルは、１１８．３℃に第１のピーク、１４２．３℃に第２のピークを示す、微粒子化材料の結晶質状態を確認している（図１４）。
【０１３３】
ＴＦＦ  Ｆｏｒ＿Ｍａｎ粉末は、ＰＸＲＤ分析に付されたとき、小さなピーク回折を表示し、結晶質構造の存在を示した（図１７Ｈ）。材料の結晶性は、１６１．２℃での単一吸熱性融解ピークの存在によっても確認され、これはマンニトールの融解に関連しうる。ホルモテロールの融解ピークは観察されず、このことは材料が非晶質の状態であることを示唆している（図１５）。ＴＦＦ  Ｆｏｒ＿Ｌａｃ粉末のｍＤＳＣ逆熱サーモグラム分析は、１５２．９℃に再結晶ピーク、続いて１６３．８℃に融解ピークを示している。ｍＤＳＣ熱流サーモグラムは、１５８．４℃に融解ピークを示し、６７．１９℃にもピークを示し、これは製剤のガラス転移温度を表す可能性がある（図１６）。ＰＸＲＤは、結晶質ピークが不在のハロパターンを示す、粉末の非晶質の特徴を確認している（図１７Ｍ）。
【０１３４】
４．三剤併用
ＴＦＦ単剤製剤と同じように、ＴＦＦ  ＢＴＦ＿ＭａｎのＰＸＲＤパターンは小さい強度回折ピークを示し、結晶質であることを示している（図１７Ｉ）。ＢＴＦ＿Ｍａｎ粉末のｍＤＳＣサーモグラムは、１４１．２℃に発熱性再結晶化ピーク、続いて２つの吸熱性ピークを示している。第１の最大ピークは、メタノールの融解にほぼ対応する１６５．４℃に生じ、第２のピークは、おそらくブデソニドの融解を表す２３６．５℃に生じた（図１５）。更に、ＴＦＦ  ＢＴＦ＿Ｌａｃ粉末は、広範囲に散乱したハロを示し、特徴的な結晶質ピークが不在であり、非晶質構造を示している。ｍＤＳＣサーモグラムプロファイルは非晶質製剤に特徴的であり、１３０．９℃及び１７０．０℃に２つの発熱性再結晶化ピークを示している。この後に、ラクトースの融解に関連しうる２０７．２℃、ブデソニドの融解に対応する２４５．７℃に２つの吸熱性融解ピークが続いた。あらゆる理論に束縛されることなく、ラクトース及びブデソニドのピークは、製剤中のこれらの材料の最大量の存在に起因して、三剤併用製剤の特徴決定においてより明白となると考えられる。
【０１３５】
Ｃ．ＦＴＩＲによる試料の分析
ＯＨ伸縮振動のＩＲ振動数は、これらの基の水素結合によって影響を受ける。しかし、薬剤の二成分及び三成分混合物のＯＨ伸縮領域は、ラクトース及びマンニトールの振動様式に対する熱励起の作用から、広範囲なエンベロープによって占められている。このように、このスペクトルの領域における水素結合の相互作用に起因して、シフトが存在するかを決定することが困難である。対照的に、ＩＲスペクトルのカルボニル伸縮領域は、薬剤の官能基の可能な水素結合相互作用に対するいくらかの洞察を提供する。チオトロピウム臭化物の場合では、二成分Ｔｉｏ＿Ｌａｃ製剤におけるエステルカルボニル伸縮の振動数に、１７４９から１７２９ｃｍ−１への有意な２０ｃｍ−１のシフトが存在する。カルボニルのより小さいシフトの約１５ｃｍ−１が、二成分Ｔｉｏ＿Ｍａｎ製剤の１７４９から１７３４ｃｍ−１において観察される。これらのシフトは水素結合相互作用を開始させ、図１９に示されているように、カルボニル伸縮の振動数に減少をもたらす。このカルボニル伸縮振動数シフトから明らかなように、チオトロピウムとラクトースとの明らかに強力な水素結合相互作用に加えて、相互作用についての更なる証拠が、ＩＲスペクトルの低振動数領域の分析によってもたらされる。この領域における最も顕著な特徴は、Ｔｉｏ＿Ｌａｃ製剤におけるラクトースの約９００〜８７０ｃｍ−１バンドの明白な不在である。これらのバンドは、原料ラクトースでは解消しているが、ＴＦＦ加工ラクトースでは単一広帯域バンドとして出現している。二成分混合物では、これらのバンドは、おそらく約８６０ｃｍ−１にシフトすることもあり、８６０ｃｍ−１バンドは、チオトロピウム単独のスペクトルにも出現するが、二成分製剤のバンドより強度はかなり小さい。このＩＲスペクトルの領域は、実質的な結合を伴う移行から構成されるので、このバンドの起源を最終的に特定すること、したがってこのスペクトル変化を生じる相互作用の性質を最終的に特定することが困難となる。しかし、チオトロピウムのカルボニル水素結合についての証拠を鑑みると、あらゆる理論に束縛されることなく、この変化は、ラクトースとの水素結合相互作用に起因すると考えられる（図１９）。
【０１３６】
二成分Ｆｏｒ＿Ｌａｃ及びＢｕｄ＿Ｌａｃ製剤のＩＲスペクトルは、より穏やかなシフトをカルボニル領域において示す。ホルモテロールの場合では、１６８７ｃｍ−１のカルボニル伸縮バンドは、著しい強度の減少を伴って、１６６０ｃｍ−１に僅かにシフトしている。ブデソニドの飽和ケトンカルボニル伸縮バンドは、二成分製剤において１７２２ｃｍ−１から１７１２ｃｍ−１へ僅かに移動している。同様に、ジエノンカルボニルも、二成分製剤において１６６６ｃｍ−１から１６５０ｃｍ−１へ僅かにシフトしている。これらのシフトは、二成分製剤のカルボニル基への最小限の水素結合が存在することを示唆している。
【０１３７】
ＢＴＦ＿Ｌａｃ製剤のＩＲスペクトルは、主な構成成分のブデソニドによって占められており、対応する二成分薬剤ラクトース製剤と比べて、カルボニル伸縮ピーク位置にほとんど変化を示していない。
【０１３８】
マンニトールを用いる製剤の場合には、僅かに異なる像がＩＲスペクトルの分析から現れる。二成分薬剤マンニトール混合物では、図２０から分かるように、薬剤単独のスペクトルと比較すると、カルボニル伸縮バンドに僅かな変化が存在する。例えば、チオトロピウムのカルボニルバンドは、１７４９から１７３４ｃｍ−１にシフトし、ホルモテロールホルムアミドのカルボニルバンドは、１６８７から１６６４ｃｍ−１にシフトするが、ブデソニド飽和ケトンのカルボニルバンドは、１７２３ｃｍ−１において変わらないままである。対照的に、三成分製剤では、ブデソニドの飽和ケトンのカルボニルバンドは、１７１７から１７１０ｃｍ−１へ、二成分混合物の場合より低い振動数に更にシフトしている。対照的に、ブデソニドのジエノンのカルボニルバンドは、二成分混合物と変わらないままである。まとめると、これらのＩＲバンドのシフトは、相互作用の証拠がほとんどないラクトースの三成分混合物の場合と対照的に、マンニトールとの三成分混合物において、ブデソニドが関与する有意な水素結合相互作用が存在することを示唆している。
【０１３９】
ラクトースを用いて調製された物理的混合物製剤（ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ）のＩＲスペクトルは、製剤中の最小重量の構成成分であるという事実にもかかわらず、ホルモテロールのバンドによって占められた。あらゆる理論に束縛されることなく、この結果は、粉末製剤の低い含量均一性に起因することがあり、これも均一ではないＫＢｒディスクを生成しうると考えられる。その結果、ＦＴＩＲのビーム内にあるＫＢｒディスクの部分は、ほぼホルモテロールを有し、ホルモテロールのスペクトルに類似したスペクトルを生じた。対照的に、マンニトールを用いる物理的混合物は、予測されたように、原料薬剤と変わらないカルボニルバンドを有している。全てのＴＦＦ製剤のカルボニル基の伸縮振動数シフトを示すＦＴＩＲのスペクトル変化の要約を、表６に表す。
表６：全てのＴＦＦ製剤のカルボニル基の伸縮振動数シフトを示すＦＴＩＲのスペクトル変化の要約
【表６】
2018514569.tif 000008
【０１４０】
Ｄ．製剤のインビトロエアロゾル性能及びＮＧＩによる沈着均質性
ＴＦＦ製剤及び物理的混合物の空気力学的粒径分布を、ＮＧＩを５４Ｌ／分で使用し、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）乾燥粉末吸入装置を使用して評価した。ラクトースを用いて調製された三剤併用粉末製剤（ＢＴＦ＿Ｌａｃ）の粒径分布を、図２１Ａに示す。重要なことに、製剤に存在する３つの薬剤全てのステージ毎の分布率の分析は、統計的に異なっていなかった。薄膜凍結粉末は、希釈薬剤溶液から調製され、急速凍結され、次に凍結乾燥される（Ｐａｒｉｋｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）。得られたケーキ粉末は均質及び多孔質であり、吸入空気流によって容易に分散可能である。したがって、この結果は、製剤の各構成成分が凍結乾燥ケーキの全体にわたって均質に分散され、その結果としてエアロゾル化の時点で均質に分散されるという仮説と一致していた。値における小さな差が、３つ全ての構成成分のＦＰＦ率において注目され、表７によって分かるように、ホルモテロール、チオトロピウム及びブデソニドでは、それぞれ、３１．６５±１０．２５、２６．１８±０．６７及び３３．０８±９．１９％であった。
表７：三重療法製剤における各薬剤の放出用量及び微細粒子画分
【表７】
2018514569.tif 000009
【０１４１】
マンニトールを用いて調製された三剤併用粉末製剤（ＢＴＦ＿Ｍａｎ）の空気力学的粒径分布を、図２１Ｂに示す。製剤に存在する３つの薬剤全てのステージ毎の沈着率は、統計的に異なっていなかった。分布類似性もＦＰＦ率の値に見られ、ホルモテロール、チオトロピウム及びブデソニドでは、それぞれ、５２．９５±３．９１、５２．９６±３．４８及び５３．６０±２．８９％である（表７）。ＢＴＦ＿Ｍａｎ製剤は、ＢＴＦ＿Ｌａｃ製剤の高い比表面積（ＳＳＡ）及び多孔性にもかかわらず、最大のＦＰＦ率を表した。あらゆる理論に束縛されることなく、ＢＴＦ＿Ｌａｃの劣った性能は、非晶質粉末に対して可塑剤として機能する、粒子表面への水分吸着に関連しうると考えられる。いくつかの場合において、ＴＦＦ製剤を調製する場合には、制御低湿度環境下でラクトースにより粉末を処理することが望ましいこともある。２つのＴＦＦ三剤併用製剤の放出用量は、脆性ケーキ粉末が容易に分散可能であり、乾燥粉末吸入器及びカプセルから放出されるという事実によって、９０％を超えていた（Ｗａｔｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）。
【０１４２】
個別にエアロゾル化される場合、単剤により調製された各ＴＦＦ製剤のステージ分布及びエアロゾル性能は、統計的に異なっていなかった。差は、ステージ１において特に有意であり、沈着したチオトロピウムの量は、図２２Ａ及び２２Ｂから分かるように、ラクトース及びマンニトール製剤ではホルモテロール及びブデソニドの量のほぼ２倍であった。単剤ＴＦＦ製剤のエアロゾル性能における差も、表８に示されているように、ＦＰＦ値によって確認される。ラクトースを用いて調製されたホルモテロール、チオトロピウム及びブデソニド製剤（Ｆｏｒ＿Ｌａｃ、Ｔｉｏ＿Ｌａｃ及びＢｕｄ＿Ｌａｃ）のＦＰＦ率は、それぞれ、５５．５１±５．７９、２２．５６±５．７５及び５８．６７±４．２８％であった。マンニトール用いて調製されたホルモテロール、チオトロピウム及びブデソニド製剤（Ｆｏｒ＿Ｍａｎ、Ｔｉｏ＿Ｍａｎ及びＢｕｄ＿Ｍａｎ）のＦＰＦ沈着率も、それぞれ、５８．３２±５．９９、３７．４５±０．７１及び６４．６２±１．２８％であり、有意な差を示した。マンニトールを用いて調製された単剤は、ラクトースを用いて調製された製剤よりも大きなＦＰＦ率を表した。この現象は、吸湿性ラクトース製剤が粉末表面への水分吸着及び凍結乾燥ケーキ構造の後崩壊を起こしやすいという仮説に一致している。チオトロピウムを用いて調製されたＴＦＦ製剤は、最小のＦＰＦ及びＳＳＡ値を表し、これは、粉末の物理化学的特徴に関連しうる。
表８：全ての単剤製剤の微細粒子画分の放出用量及び率
【表８】
2018514569.tif 000010
【０１４３】
このように、チオトロピウムが、三剤併用製剤により生じる低いエアロゾル性能及びＦＰＦ値の原因でありうる。これらの結果は、患者が単剤製剤の多回投与により治療されるとき、肺への薬剤の同時沈着の利益及び潜在的な相乗作用を受けていない場合があることを暗示している（Ｓｉｎ  ａｎｄ  Ｍａｎ，２００７、Ｎｅｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３）。三剤併用ＴＦＦ製剤と同様に、吸入器からの高い率の放出用量の値が、全ての単剤製剤において見られ、ＴＦＦ粉末に特徴的である（表８）。
【０１４４】
ジェットミル粉砕薬剤粉末を粗いラクトースまたはマンニトールと物理的にブレンドすることによって調製された三剤併用製剤（ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ及びＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭ）粒子のステージ分布及びエアロゾル性能の差も、調査した。ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭ製剤のステージ毎沈着は、図２３Ｂに示されているように、有意に異なっていた。３つの薬剤は、互いに異なる沈着率を表し、高い率の粉末が導入口に沈着している。カスケードインパクターステージにおける３つの薬剤全ての沈着率は有意に異なっていたが、ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭ製剤の３つの薬剤全てのＦＰＦ率は類似しており、ホルモテロール、チオトロピウム及びブデソニドでは、それぞれ、２６．３６±０３．８４、２８．６５±  ０．３０及び２５．８０±１．９６％であった（表７）。加えて、放出用量率の値は、表７に示されているように、両方の製剤のエアロゾル化の後にカプセルに残留した多量の粉末に起因して、ＢＴＦ＿Ｍａｎ＿ＰＭ及びＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭでは９０％超からおよそ７０〜８０％に低減した。物理的混合物製剤の低い放出用量及び高いくびれ（ｎｅｃｋ）沈着が、過小量投与または過剰投与の可能性のある投与のばらつきの原因でありうる。この事実は、粉末混合物が強力な薬剤から構成される場合に増大する（Ｗｅｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０、Ｆｒｅｎｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６）。
【０１４５】
ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭ製剤のステージ毎粉末沈着は、図２３Ａに示されているように、統計的に異なっていなかった。ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭは低いエアロゾル化性能も示し、ホルモテロール、チオトロピウム及びブデソニドでは、それぞれ、２８．６４±３．８９、２５．２２±３．５６及び２５．０５±５．８２％のＦＰＦ率の値を表した。しかし、１〜３μｍの粒径が沈着し、かつ肺深部に到達する高い可能性を有するステージ３〜５の沈着は、ＢＴＦ＿Ｌａｃ＿ＰＭよりＴＦＦ製剤のほうがより均質である。また、ラクトース及びマンニトールを用いて調製された物理的混合物製剤の粉末エアロゾル化性能の差は、調製方法の堅牢性の欠如を示唆している。あらゆる理論に束縛されることなく、物理的混合物製剤の低いエアロゾル性能は、粒子のサイズ及び表面特性に関連しうること、ならびに肺薬剤送達に影響を及ぼしうる完全な粉末分散及びエアロゾル性能のばらつきをもたらしうることが考えられる（Ｈｉｃｋｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００７、Ｚｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８）。
【化１】
2018514569.tif 000011
【０１４６】
本明細書に開示及び特許請求されている全ての組成物及び方法は、本開示を鑑みると、過度な実験を行うことなく作製及び実施することができる。本開示の組成物及び方法は、好ましい実施形態によって記載されてきたが、本発明の概念、精神及び範囲を逸脱することなく、本明細書に記載されている組成物または方法及び方法のステップもしくはステップの順番に変動が適用されうることが、当業者には明白である。より詳細には、化学的にも生理学的にも関連する特定の作用物質を、本明細書に記載されている作用物質と置き換えることができ、同じ、または類似した結果が達成されることが理解される。当業者に明白なそのような類似した置換及び修正は、全て、添付された特許請求の範囲により定義された本発明の精神、範囲及び概念の範囲内であると認められる。
【０１４７】
参考文献
以下の参考文献は、本明細書の記載を補足する例示的な手順または他の詳細を提供する程度において、参照として本明細書の特定的に組み込まれる。
米国特許第５，７２５，８７１号
米国特許第５，７５６，４６８号
米国特許第５，７８０，０４５号
米国特許第６，４４０，１０１号
米国特許第８，５７９，８５５号
米国特許出願第２０１０／０２２１３４３号
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Ｗｅｅｒｓ  Ｊ  ａｎｄ  Ｔａｒａｒａ  Ｔ，Ｔｈｅ  ＰｕｌｍｏＳｐｈｅｒｅ（商標）ｐｌａｔｆｏｒｍ  ｆｏｒ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ５：２７７−２９５，２０１４。
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１０Ｄ】
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【図１０Ｅ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１１Ｄ】
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【図１１Ｅ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１２Ｄ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１３Ｃ】
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【図１３Ｄ】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７Ａ−１７Ｎ】
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【図１８Ａ−１８Ｈ】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２２Ａ】
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【図２２Ｂ】
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【図２３Ａ】
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【図２３Ｂ】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年1月5日(2018.1.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．以下の群：
ｉ．長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）、
ｉｉ．長時間作用性ムスカリン拮抗薬（ＬＡＭＡ）及び
ｉｉｉ．コルチコステロイド（ＣＳ）のそれぞれの活性薬学的成分の治療有効量を含む三重療法、または
ｂ．以下の群：
ｉ．長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）及び
ｉｉ．コルチコステロイド（ＣＳ）の両方の活性薬学的成分の治療有効量を含む二重療法
のいずれかを含み、
１０ｍ２／ｇを超える比表面積を有する脆性マトリックス粒子として製剤化されている、薬学的組成物。
【請求項２】
１つ以上の賦形剤を更に含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
前記賦形剤が、糖、糖誘導体、またはアミノ酸である、請求項２に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
前記賦形剤が、糖または糖誘導体である、請求項３に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
前記賦形剤が、ラクトース、マンニトール、またはトレハロースである、請求項４に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
前記賦形剤がアミノ酸である、請求項２に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
前記賦形剤がグリシンである、請求項６に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
前記長時間作用性β−作動薬が、サルメテロールまたはホルモテロールの塩である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
前記長時間作用性β−作動薬がサルメテロールキシナホ酸塩である、請求項８に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
前記長時間作用性β−作動薬がホルモテロールフマル酸塩である、請求項８に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
コルチコステロイドが、モメタゾンフロ酸エステルまたはブデソニドである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬がチオトロピウム塩である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬がチオトロピウム臭化物である、請求項１２に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
前記二重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
前記二重療法が、前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約５：２２の重量比を有する、請求項１４に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と、前記コルチコステロイドとの約１：０．１：０．１〜約１：１００：１００の重量比を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と、前記コルチコステロイドとの約１：２：３５．５である、請求項１６に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬との約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、請求項１〜１２、１６、または１７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬との約１：２である、請求項１８に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、請求項１〜１２、または１６〜１９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約２：７０である、請求項２０に記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１０００の重量比を含む、請求項１〜１２、または１６〜２１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と前記コルチコステロイドとの約４：７０である、請求項２２に記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
前記薬学的組成物が、組成物中に前記二重療法または前記三重療法と前記賦形剤との約１：０〜約１：９のモル比を有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２５】
前記モル比が、前記二重療法または前記三重療法と前記賦形剤との約１：１である、請求項２４に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
前記薬学的組成物が単位用量で製剤化されている、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約５００μｇの前記長時間作用性β−作動薬の用量を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
前記長時間作用性β−作動薬がサルメテロールキシナホ酸塩である場合、前記長時間作用性β−作動薬の前記用量が約５０μｇである、請求項２７に記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
前記長時間作用性β−作動薬がホルモテロールフマル酸塩である場合、前記長時間作用性β−作動薬の前記用量が約４．５μｇである、請求項２７に記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約１００μｇの前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬の用量を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬の前記用量が約９μｇである、請求項２７に記載の薬学的組成物。
【請求項３２】
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約１０００μｇの前記コルチコステロイドの用量を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３３】
前記コルチコステロイドがモメタゾンフロ酸エステルである場合、前記コルチコステロイドの前記用量が約２２０μｇである、請求項３２に記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
前記コルチコステロイドがブデソニドである場合、前記コルチコステロイドの前記用量が約１６０μｇである、請求項３２に記載の薬学的組成物。
【請求項３５】
前記薬学的組成物が、鼻腔内への、エアロゾルによる、肺への、または吸入による投与のために製剤化されている、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３６】
前記薬学的組成物が、吸入器による使用のために製剤化されている、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３７】
前記吸入器が、定量吸入器、乾燥粉末吸入器、単一用量吸入器、多単位用量吸入器、ネブライザー、または加圧式定量吸入器である、請求項３６に記載の薬学的組成物。
【請求項３８】
前記薬学的組成物が、サルメテロールキシナホ酸塩及びモメタゾンフロ酸エステルを含む前記二重療法である、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項３９】
前記薬学的組成物が、ホルモテロールフマル酸塩、チオトロピウム臭化物及びブデソニドを含む前記三重療法である、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４０】
前記薬学的組成物が、約１０ｍ２／ｇ〜約５００ｍ２／ｇの比表面積を有する、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４１】
前記薬学的組成物が、約２０ｍ２／ｇ〜約２５０ｍ２／ｇの比表面積を有する、請求項４０に記載の薬学的組成物。
【請求項４２】
前記薬学的組成物が、８５％を超える総放出用量（ＴＥＤ）を有する、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４３】
前記総放出用量（ＴＥＤ）が約９０％〜約１００％である、請求項４２に記載の薬学的組成物。
【請求項４４】
前記薬学的組成物があらゆる不純物を含まない、請求項１〜４３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４５】
前記薬学的組成物が、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、またはポリスチレンを本質的に含まない、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４６】
前記薬学的組成物が、あらゆるポリマー賦形剤を本質的に含まない、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４７】
前記薬学的組成物が、ポロキサマー、ポリエチレングリコール、またはポリプロピレングリコールを本質的に含まない、請求項１〜４６のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４８】
前記薬学的組成物が、あらゆる界面活性剤を本質的に含まない、請求項１〜４７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項４９】
前記薬学的組成物が、前記賦形剤及び前記活性薬学的組成物以外の他の化合物を含まない、請求項１〜４３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項５０】
呼吸器疾患または障害を、その必要性のある患者において治療または予防するための請求項１〜３９のいずれか一項に記載の薬学的組成物であって、前記薬学的組成物の治療有効量が前記患者に投与されることを特徴とする、薬学的組成物。
【請求項５１】
前記呼吸器疾患または障害が、肺または洞の炎症を伴う障害である。請求項５０に記載の薬学的組成物。
【請求項５２】
前記呼吸器疾患または障害が喘息である、請求項５０に記載の薬学的組成物。
【請求項５３】
前記呼吸器疾患または障害が慢性閉塞性肺疾患である、請求項５０に記載の薬学的組成物。
【請求項５４】
前記薬学的組成物が吸入により投与されることを特徴とする、請求項５０〜５３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項５５】
前記治療有効量が、１回の吸入により前記患者に投与されることを特徴とする、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項５６】
前記治療有効量が、２回以上の吸入により前記患者に投与されることを特徴とする、請求項５４に記載の薬学的組成物。
【請求項５７】
前記治療有効量が、２、３、または４回の吸入により投与されることを特徴とする、請求項５６に記載の薬学的組成物。
【請求項５８】
前記薬学的組成物の前記治療有効量が前記患者に１日１回投与されることを特徴とする、請求項５０〜５７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項５９】
前記薬学的組成物の前記治療有効量が前記患者に１日２回以上投与されることを特徴とする、請求項５０〜５７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項６０】
脆性マトリックス薬学的組成物を調製する方法であって、
（Ａ）長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬及びコルチコステロイドから選択される２つ以上の活性薬学的作用物質を、有機溶媒及び水を含む溶媒中に混合して、薬学的組成物を形成し、前記薬学的組成物が、前記溶媒中に約０．０１％〜約１０％（ｗ／ｖ）の前記活性薬学的作用物質の量を含むことと、
（Ｂ）前記薬学的組成物を、表面が約−７０℃〜約−１２０℃の温度である回転面に適用することと、
（Ｃ）前記薬学的組成物を凍結して、１０ｍ２／ｇを超える比表面積を有する脆性マトリックス薬学的組成物を形成することとを含む、前記方法。
【請求項６１】
前記薬学的組成物が、１つ以上の賦形剤を更に含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記方法が、前記脆性マトリックス薬学的組成物を凍結乾燥することを更に含む、請求項６０〜６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
前記量が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約６％（ｗ／ｖ）である、請求項６０〜６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
前記量が、約０．１％（ｗ／ｖ）〜約５％（ｗ／ｖ）である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
請求項６０に記載の方法によって調製された薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
本発明の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明によって明らかとなる。しかし、詳細な説明及び特定の例は、本発明の好ましい実施形態を示しているが、本発明の精神及び範囲内の様々な変更及び修正がこの詳細な説明によって当業者に明白となるので、例示のためだけに提示されていることが理解されるべきである。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
ａ．以下の群：
ｉ．長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）、
ｉｉ．長時間作用性ムスカリン拮抗薬（ＬＡＭＡ）及び
ｉｉｉ．コルチコステロイド（ＣＳ）のそれぞれの活性薬学的成分の治療有効量を含む三重療法、または
ｂ．以下の群：
ｉ．長時間作用性β−作動薬（ＬＡＢＡ）及び
ｉｉ．コルチコステロイド（ＣＳ）の両方の活性薬学的成分の治療有効量を含む二重療法
のいずれかを含み、
５ｍ２／ｇを超える比表面積を有する脆性マトリックス粒子として製剤化されている、薬学的組成物。
（項目２）
１つ以上の賦形剤を更に含む、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目３）
前記賦形剤が、糖、糖誘導体、またはアミノ酸である、項目２に記載の薬学的組成物。
（項目４）
前記賦形剤が、糖または糖誘導体である、項目３に記載の薬学的組成物。
（項目５）
前記賦形剤が、ラクトース、マンニトール、またはトレハロースである、項目４に記載の薬学的組成物。
（項目６）
前記賦形剤がアミノ酸である、項目２に記載の薬学的組成物。
（項目７）
前記賦形剤がグリシンである、項目６に記載の薬学的組成物。
（項目８）
前記長時間作用性β−作動薬が、サルメテロールまたはホルモテロールの塩である、項目１〜７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目９）
前記長時間作用性β−作動薬がサルメテロールキシナホ酸塩である、項目８に記載の薬学的組成物。
（項目１０）
前記長時間作用性β−作動薬がホルモテロールフマル酸塩である、項目８に記載の薬学的組成物。
（項目１１）
コルチコステロイドが、モメタゾンフロ酸エステルまたはブデソニドである、項目１〜１０のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目１２）
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬がチオトロピウム塩である、項目１〜１１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目１３）
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬がチオトロピウム臭化物である、項目１２に記載の薬学的組成物。
（項目１４）
前記二重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、項目１〜１３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目１５）
前記二重療法が、前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約５：２２の重量比を有する、項目１４に記載の薬学的組成物。
（項目１６）
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と、前記コルチコステロイドとの約１：０．１：０．１〜約１：１００：１００の重量比を含む、項目１〜１２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目１７）
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と、前記コルチコステロイドとの約１：２：３５．５である、項目１６に記載の薬学的組成物。
（項目１８）
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬との約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、項目１〜１２、１６、または１７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目１９）
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬との約１：２である、項目１８に記載の薬学的組成物。
（項目２０）
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１００の重量比を含む、項目１〜１２、または１６〜１９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目２１）
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性β−作動薬と前記コルチコステロイドとの約２：７０である、項目２０に記載の薬学的組成物。
（項目２２）
前記三重療法が、組成物中に前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と前記コルチコステロイドとの約１：０．１〜約１：１０００の重量比を含む、項目１〜１２、または１６〜２１のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目２３）
前記三重療法の重量比が、前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬と前記コルチコステロイドとの約４：７０である、項目２２に記載の薬学的組成物。
（項目２４）
前記薬学的組成物が、組成物中に前記二重療法または前記三重療法と前記賦形剤との約１：０〜約１：９のモル比を有する、項目１〜２３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目２５）
前記モル比が、前記二重療法または前記三重療法と前記賦形剤との約１：１である、項目２４に記載の薬学的組成物。
（項目２６）
前記薬学的組成物が単位用量で製剤化されている、項目１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目２７）
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約５００μｇの前記長時間作用性β−作動薬の用量を含む、項目１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目２８）
前記長時間作用性β−作動薬がサルメテロールキシナホ酸塩である場合、前記長時間作用性β−作動薬の前記用量が約５０μｇである、項目２７に記載の薬学的組成物。
（項目２９）
前記長時間作用性β−作動薬がホルモテロールフマル酸塩である場合、前記長時間作用性β−作動薬の前記用量が約４．５μｇである、項目２７に記載の薬学的組成物。
（項目３０）
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約１００μｇの前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬の用量を含む、項目１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目３１）
前記長時間作用性ムスカリン拮抗薬の前記用量が約９μｇである、項目２７に記載の薬学的組成物。
（項目３２）
前記薬学的組成物の前記単位用量が、約１〜約１０００μｇの前記コルチコステロイドの用量を含む、項目１〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目３３）
前記コルチコステロイドがモメタゾンフロ酸エステルである場合、前記コルチコステロイドの前記用量が約２２０μｇである、項目３２に記載の薬学的組成物。
（項目３４）
前記コルチコステロイドがブデソニドである場合、前記コルチコステロイドの前記用量が約１６０μｇである、項目３２に記載の薬学的組成物。
（項目３５）
前記薬学的組成物が、鼻腔内への、エアロゾルによる、肺への、または吸入による投与のために製剤化されている、項目１〜３３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目３６）
前記薬学的組成物が、吸入器による使用のために製剤化されている、項目１〜３３のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目３７）
前記吸入器が、定量吸入器、乾燥粉末吸入器、単一用量吸入器、多単位用量吸入器、ネブライザー、または加圧式定量吸入器である、項目３６に記載の薬学的組成物。
（項目３８）
前記薬学的組成物が、サルメテロールキシナホ酸塩及びモメタゾンフロ酸エステルを含む前記二重療法である、項目１〜３７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目３９）
前記薬学的組成物が、ホルモテロールフマル酸塩、チオトロピウム臭化物及びブデソニドを含む前記三重療法である、項目１〜３７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目４０）
前記薬学的組成物が、約５ｍ２／ｇ〜約１０００ｍ２／ｇの比表面積を有する、項目１〜３９のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目４１）
前記薬学的組成物が、約１０ｍ２／ｇ〜約５００ｍ２／ｇの比表面積を有する、項目４０に記載の薬学的組成物。
（項目４２）
前記薬学的組成物が、約２０ｍ２／ｇ〜約２５０ｍ２／ｇの比表面積を有する、項目４１に記載の薬学的組成物。
（項目４３）
前記薬学的組成物が、８５％を超える総放出用量（ＴＥＤ）を有する、項目１〜４２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目４４）
前記総放出用量（ＴＥＤ）が約９０％〜約１００％である、項目４３に記載の薬学的組成物。
（項目４５）
前記薬学的組成物があらゆる不純物を含まない、項目１〜４４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目４６）
前記薬学的組成物が、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、またはポリスチレンを本質的に含まない、項目１〜４５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目４７）
前記薬学的組成物が、あらゆるポリマー賦形剤を本質的に含まない、項目１〜４６のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目４８）
前記薬学的組成物が、ポロキサマー、ポリエチレングリコール、またはポリプロピレングリコールを本質的に含まない、項目１〜４７のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目４９）
前記薬学的組成物が、あらゆる界面活性剤を本質的に含まない、項目１〜４８のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目５０）
前記薬学的組成物が、前記賦形剤及び前記活性薬学的組成物以外の他の化合物を含まない、項目１〜４４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
（項目５１）
呼吸器疾患または障害を、その必要性のある患者において治療または予防する方法であって、項目１〜３９のいずれか一項に記載の薬学的組成物の治療有効量を前記患者に投与することを含む、前記方法。
（項目５２）
前記呼吸器疾患または障害が、前記肺または洞の炎症を伴う障害である。項目５１に記載の方法。
（項目５３）
前記呼吸器疾患または障害が喘息である、項目５１に記載の方法。
（項目５４）
前記呼吸器疾患または障害が慢性閉塞性肺疾患である、項目５１に記載の方法。
（項目５５）
前記薬学的組成物が吸入により投与される、項目５１〜５４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
前記治療有効量が、１回の吸入により前記患者に投与される、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記治療有効量が、２回以上の吸入により前記患者に投与される、項目５５に記載の方法。
（項目５８）
前記治療有効量が、２、３、または４回の吸入により投与される、項目５７に記載の方法。
（項目５９）
前記方法が、前記治療有効量を前記患者に１日１回投与することを含む、項目５１〜５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６０）
前記方法が、前記治療有効量を前記患者に１日２回以上投与することを含む、項目５１〜５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６１）
脆性マトリックス薬学的組成物を調製する方法であって、
（Ａ）２つ以上の活性薬学的作用物質を、有機溶媒及び水を含む溶媒中に混合して、薬学的組成物を形成し、前記薬学的組成物が、前記溶媒中に約０．０１％〜約１０％（ｗ／ｖ）の前記活性薬学的作用物質の量を含むことと、
（Ｂ）前記薬学的組成物を、表面が約−７０℃〜約−１２０℃の温度である回転面に適用することと、
（Ｃ）前記薬学的組成物を凍結して、脆性マトリックス薬学的組成物を形成することとを含む、前記方法。
（項目６２）
前記活性薬学的成分が、長時間作用性β−作動薬、長時間作用性ムスカリン拮抗薬及びコルチコステロイドから選択される、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
前記薬学的組成物が、１つ以上の賦形剤を更に含む、項目６１または項目６２に記載の方法。
（項目６４）
前記方法が、前記脆性マトリックス薬学的組成物を凍結乾燥することを更に含む、項目６１〜６３のいずれか一項に記載の方法。
（項目６５）
前記量が、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約６％（ｗ／ｖ）である、項目６１〜６４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６６）
前記量が、約０．１％（ｗ／ｖ）〜約５％（ｗ／ｖ）である、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
項目６１に記載の方法によって調製された薬学的組成物。
【国際調査報告】
2018514569.tif 000059
2018514569.tif 000060
2018514569.tif 000061