(57)【要約】  本発明は、加熱滅菌組成物であって、該組成物の５〜２０重量％の量のタンパク質源を含み、該タンパク質源が加水分解されたタンパク質を含み、かかるタンパク質源が、典型的には有限時間、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて処理されている組成物を目的とする。更に、本発明は、低粘度を有しかつ苦味を有しない加熱滅菌された高タンパク質組成物であって、２０〜５０％のタンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）を有する加水分解された感熱性タンパク質源と、少なくとも１つの熱失活したエンドペプチダーゼとを含む組成物に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
加熱滅菌組成物であって、
前記組成物の５〜２０重量％の量のタンパク質源を含み、前記タンパク質源が加水分解されたタンパク質を含み、
前記タンパク質源が、２〜２０分間から選択される有限時間、４０〜９０℃で加熱することによって、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて処理されている、組成物。
【請求項２】
前記タンパク質源が、動物又は植物由来の感熱性タンパク質から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記タンパク質源が、ホエイタンパク質、エンドウ豆タンパク質、ジャガイモタンパク質、小麦タンパク質、ヒマワリタンパク質、大豆タンパク質、又はこれらの混合物から選択される、請求項１又は請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
タンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）が２０〜５０％である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記少なくとも１種のエンドペプチダーゼが、セリンプロテアーゼを含む又はセリンプロテアーゼのみからなる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
液体組成物であり、好ましくは２０℃／１００ｓ−１で８７５ｍＰａ  ｓ未満又は２０℃／１００ｓ−１で２００ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
組成物１ｍＬ当たり１７ｇ以下のタンパク質濃度を有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
経腸組成物又は非経口組成物である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
栄養組成物、栄養サプリメント、乳児用フォーミュラ、フォローアップフォーミュラ、ベビーフードフォーミュラ、乳児用穀物フォーミュラ又はグローイングアップミルク、乳児用食品サプリメント又は小児用食品サプリメント、小児用フォーミュラ、成人用栄養組成物、妊婦用栄養サプリメント、肥満用フォーミュラ、又は高齢者用栄養組成物又はヘルスケアフォーミュラである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
栄養を必要としている人への栄養の提供において使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物であって、前記人は、好ましくは、高齢者、病気の状態にある人、病気の状態から回復しつつある人、栄養失調の人、又はスポーツマン若しくはスポーツウーマン若しくは活動的な高齢者などの健康な人である、組成物。
【請求項１１】
低粘度を有しかつ苦味を有しない加熱滅菌された高タンパク質組成物であって、２０〜５０％のタンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）を有する加水分解された感熱性タンパク質源と、少なくとも１つの熱失活したエンドペプチダーゼとを含む、組成物。
【請求項１２】
１０〜２０重量％の全タンパク質を含む組成物を調製するための、加水分解されたタンパク質の使用であって、前記加水分解されたタンパク質は、２〜２０分間から選択される有限時間、４０〜９０℃で加熱することによって、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて調製されている、使用。
【請求項１３】
１０〜２０重量％の全タンパク質を含む液体組成物の粘度を制御するための、加水分解されたタンパク質の使用であって、前記加水分解されたタンパク質は、２〜２０分間から選択される有限時間、４０〜９０℃で加熱することによって、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて調製されている、使用。
【請求項１４】
加熱滅菌された高タンパク質組成物の、粘度を制御し、苦味を防ぐ方法であって、タンパク質源の水溶液を提供するステップと、前記タンパク質源の水溶液を少なくとも１種のエンドペプチダーゼで連続的に加水分解した後、前記エンドペプチダーゼを熱失活させるステップとを含む、方法。
【請求項１５】
加水分解されたタンパク質を含有するタンパク質源を含む加熱滅菌組成物を調製するための連続プロセスであって、
（ｉ）タンパク質源の水溶液を提供するステップと、
（ｉｉ）２〜２０分間から選択される有限時間、４０〜９０℃で加熱することによって、前記タンパク質源の水溶液を少なくとも１種のエンドペプチダーゼで処理する、連続加水分解ステップを実施するステップと、
（ｉｉｉ）前記エンドペプチダーゼを熱失活させるステップと、を含む、プロセス。
【請求項１６】
ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）の後、前記加水分解されたタンパク質を含むタンパク質源が、２０〜５０％のタンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）を有する、請求項１５に記載のプロセス。
【請求項１７】
ステップ（ｉ）及び（ｉｉ）、好ましくはステップ（ｉｉｉ）も、６〜１１のｐＨで実施される、請求項１５又は請求項１６に記載のプロセス。
【請求項１８】
前記エンドペプチダーゼを熱失活させる前記ステップ（ｉｉｉ）が、７０℃超で実施され、好ましくは、前記熱失活が、２〜６０秒間である、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１９】
ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）の後、加熱滅菌された液体組成物であって、前記組成物の５〜２０重量％の量のタンパク質源を含む加熱滅菌された液体組成物が得られ、前記液体組成物が、好ましくは、２０℃／１００ｓ−１で８７５ｍＰａ  ｓ未満又は２０℃／１００ｓ−１で２００ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有する、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２０】
ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）の後、前記加熱滅菌組成物を、好ましくは噴霧乾燥によって、乾燥させて粉末を形成する、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２１】
タンパク質源を含む組成物であって、前記タンパク質源が、請求項１５〜２０のいずれか一項に記載のプロセスによって得ることができる加水分解されたタンパク質を含む、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、加熱滅菌組成物（ｈｅａｔ  ｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ：加熱滅菌された組成物）であって、該組成物の５〜２０重量％の量のタンパク質源を含み、該タンパク質源が加水分解されたタンパク質を含み、かかるタンパク質源が、典型的には有限時間、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて処理されている組成物を目的とする。更に、本発明は、低粘度を有しかつ苦味を有しない加熱滅菌された高タンパク質組成物であって、２０〜５０％のタンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）を有する加水分解された感熱性タンパク質源と、少なくとも１つの熱失活したエンドペプチダーゼとを含む組成物に関する。本発明は、更に、加水分解されたタンパク質を含有するタンパク質源を含む加熱滅菌組成物を調製するための連続プロセスであって、（ｉ）タンパク質源の水溶液を提供するステップと、（ｉｉ）２〜２０分間の有限時間、４０〜９０℃で加熱することによって、該タンパク質源の水溶液を少なくとも１種のエンドペプチダーゼで処理する、連続加水分解ステップを実施するステップと、（ｉｉｉ）かかるエンドペプチダーゼを熱失活させるステップとを含むプロセスを目的とする。また、本発明は、加熱滅菌された高タンパク質組成物の粘度を制御し、苦味を防ぐ方法であって、タンパク質源の水溶液を提供するステップと、かかるタンパク質源の水溶液を少なくとも１種のエンドペプチダーゼで連続的に加水分解した後、該エンドペプチダーゼを熱失活させるステップとを含む方法に関する。最後に、本発明は、加熱滅菌組成物を調製する及び／又は液体組成物の粘度を制御するための、加水分解されたタンパク質の使用であって、かかる加水分解されたタンパク質は、有限時間、少なくとも１種のエンドペプチダーゼで処理することによって本明細書に記載される連続プロセスで調製されており、かかる組成物が５〜２０重量％の全タンパク質を含む、使用に関する。また、本発明は、本発明の加熱滅菌組成物を適用又は使用する医学的使用及び治療に関する。
【０００２】
［背景技術］
多くの場合、タンパク質含量の高い組成物を提供することが有利である。これは、例えば、製品を摂取する能力は高齢者になると低下し得ることによる。あるいは、スポーツマン又はスポーツウーマンは、スポーツに参加している間に栄養を必要とする場合があるが、該栄養を摂取するのにかかる時間がパフォーマンスを妨げるべきではない。
【０００３】
しかし、栄養液体組成物におけるカロリー及び／又はタンパク質の濃度を増大させると、製品全体の粘度及び安定性が増大し、これは、組成物の嗜好性に対して不都合な影響を及ぼす。更に、タンパク質に組み込まれ得るか又は更には結合し得るミネラルは、タンパク質濃度が増加した製品におけるミネラルのレベルを許容栄養限度を超える程増加させる恐れがある。粘度が増加すると、液体栄養組成物の摂取又は投与が困難になることがあり、また、組成物の味が低下することもある。更に、このようなタンパク質及びエネルギー密度の高い液体製品の安定性が問題になる場合もある。この問題は、貯蔵寿命中の塩結晶形成が問題となり得ることが原因で生じるが、栄養製品は、少なくとも９ヶ月間、好ましくは少なくとも１年間の貯蔵寿命を有することが望ましい。
【０００４】
タンパク質を含有する栄養製品の粘度を減少させる一方法は、該製品中のタンパク質源を加水分解するか、又は該製品を調製するために加水分解されたタンパク質源を使用するというものである。
【０００５】
従来のタンパク質加水分解プロセスは、例えば、以下のようなバッチプロセスに基づいている：
【０００６】
簡易バッチプロセス−加熱ユニットに生成物を輸送することによって、加水分解時間後に酵素を失活させることを含む。工業規模では、バッチプロセスは、多くの場合、かなりの長さの時間、典型的には少なくとも１〜３時間を必要とする。更に、このようなプロセスは、タンパク質源の加水分解度に関する制御がほとんどできず、その結果、相当に苦味のある生成物が得られる。このようなバッチプロセスの例は、例えば、国際公開第２０１２／０４２０１３（Ａ１）号である。
【０００７】
膜バッチ反応器−プロテアーゼ、タンパク質、及びより大きなペプチドは濃縮液に保持され、より小さなペプチドは、透過液と共に膜を通過することができる。膜バッチ反応器を使用することのいくつかの利点は、酵素は膜を通過しないので、同じ酵素量を比較的多量の基質に用いることができる点である。更に、酵素は最終加水分解物において失活していない。
【０００８】
米国特許出願公開第２０１５／０１５９１８９（Ａ１）号には、膜反応器において加水分解されたタンパク質を調製するための連続プロセスが記載されている。特に、タンパク質の加水分解は、プロテアーゼ酵素の存在下、１０〜４５℃で、膜反応器において実施される。かかるプロセスによって、高いタンパク質加水分解度が得られるが、その理由は、任意の未反応のタンパク質が酵素と共に濃縮液中に残り、加水分解されたタンパク質のみが膜を通過して透過液に移動可能であるためである。更に、このプロセスは、酵素を失活させるステップを含まないが、その理由は、酵素が膜に残存することから、タンパク質源との更なる反応に再利用されるためである。
【０００９】
バッチ又は連続プロセスにおいて膜反応器を使用すると、基質タンパク質と比較して透過液のアミノ酸プロファイルが異なる、膜が汚れる、複雑な膜バッチ反応器を使用するプロセスと同様に生産コストがかさむなどのいくつかの問題点に悩まされることになる。更に、膜プロセスは、タンパク質源の加水分解の程度に関する制御がほとんどできず、その結果、相当に苦味のある生成物が得られる。
【００１０】
このようなプロセスでは、酵素は、遊離形態で直接適用されてもよく、担体に固定化されていてもよい。固定化酵素は、繰り返し使用されるという利点を有し、その結果、特に高価な酵素については、コスト削減の可能性が生じる。問題点としては、微生物汚染、サイクル数の増加に伴う酵素活性の低下、酵素の漏出、及びタンパク質の担体への非特異的吸着などの恐れがある。
【００１１】
したがって、既存のタンパク質加水分解プロセスからは、典型的には、広範囲のタンパク質加水分解を含む生成物が得られる。これらのプロセスでは、多くの因子が加水分解のプロセスに影響を与えるので、これらプロセスの制御が困難になり、得られる生成物が、強い苦味を有する、又は粘性が高すぎるため不適切なものとなるリスクが高くなる。これは、少なくとも一部には、例えば最初の加水分解ステップ中、酵素失活中、輸送時間、又は膜反応器における滞留時間に得られる様々なタンパク質加水分解度が平均される結果である。また、考慮すべき更なる因子は、タンパク質加水分解を実施するために使用される酵素である。
【００１２】
したがって、上記に鑑み本発明の端緒となる課題は、タンパク質内容物の加水分解度が信頼できかつ明確に決定できるものであり、かつ更には苦味の少ない又は好ましくは苦味のない、組成物を提供すること、である。更に、このような組成物は、低粘度を有していなければならない。最後に、本発明は、このような組成物を調製することを可能にするプロセスを提供するという課題に取り組む。
【００１３】
［発明を実施するための形態］
本発明者らは、驚くべきことに、エンドペプチダーゼによる加水分解ステップを好ましくは有限時間実施し、続いて、酵素を熱失活させる連続プロセスでエンドペプチダーゼを使用することによって、部分的に加水分解されたタンパク質を既に含有している生成物でさえも、非常に狭い範囲のタンパク質加水分解が得られることを見出した。
【００１４】
本発明によれば、端緒となる課題は、したがって、好ましくは独立請求項に記載されている加熱滅菌組成物、更にこのような加熱滅菌組成物を調製するためのプロセス、及び本明細書に記載される独立請求項にかかる使用によって解決される。従属請求項は、本発明の実施形態の好ましい態様について更に有利に例示する。
【００１５】
より好ましくは、本発明の端緒となる課題は、加熱滅菌組成物であって、該組成物の少なくとも５重量％の量のタンパク質源を含み、該タンパク質源が加水分解されたタンパク質を含み、該タンパク質源が、典型的には、好ましくは２〜２０分間から選択される有限時間、好ましくは４０〜９０℃で加熱することによって、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて処理されている、加熱滅菌組成物によって、第１の実施形態に従って解決される。
【００１６】
第２の実施形態によれば、本発明の端緒となる課題は、好ましくは、加熱滅菌された、好ましくは高タンパク質の組成物であって、好ましくは低粘度を有しかつ好ましくは苦味を有さず、２０〜５０％のタンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）を有する加水分解された感熱性タンパク質源と、少なくとも１つの熱失活したエンドペプチダーゼとを含み、好ましくは、該エンドペプチダーゼが熱によって失活している、組成物によって解決される。
【００１７】
好ましい態様によれば、加熱滅菌組成物は、液体組成物である。このような液体組成物は、好ましくは、低粘度、好ましくは、２０℃／１００ｓ−１で８７５ｍＰａ  ｓ未満又は２０℃／１００ｓ−１で６００ｍＰａ  ｓ未満、最も好ましくは、２０℃／１００ｓ−１で２１０〜３００ｍＰａ  ｓ、又は２０℃／１００ｓ−１で２５０〜４００ｍＰａ  ｓ、又は２０℃／１００ｓ−１で３５０〜５００ｍＰａ  ｓの粘度を有する。最も好ましくは、２０℃／１００ｓ−１で８７５ｍＰａ  ｓ未満又は２０℃／１００ｓ−１で６００ｍＰａ  ｓ未満の粘度では、タンパク質源は、組成物の１５〜２０重量％、好ましくは組成物の１６〜１８重量％の量である。
【００１８】
特定の態様では、このような液体組成物は、好ましくは、低粘度、好ましくは、２０℃／１００ｓ−１で４００ｍＰａ  ｓ未満、又は更には２００ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有し、典型的には、下限は２０℃／１００ｓ−１で少なくとも１０ｍＰａ  ｓであり、好ましくは２０℃／１００ｓ−１で１０〜１９５ｍＰａ  ｓ未満である。
【００１９】
同様に、このような液体組成物は、好ましくは、低粘度、好ましくは、７０℃／１００ｓ−１で３５０ｍＰａ  ｓ未満又は７０℃／１００ｓ−１で２４０ｍＰａ  ｓ未満、最も好ましくは、７０℃／１００ｓ−１で８２〜１２０ｍＰａ  ｓ、又は７０℃／１００ｓ−１で９８〜１５６ｍＰａ  ｓ、又は７０℃／１００ｓ−１で１３７〜１９５ｍＰａ  ｓの粘度を有する。最も好ましくは、７０℃／１００ｓ−１で３５０ｍＰａ  ｓ未満又は７０℃／１００ｓ−１で２４０ｍＰａ  ｓ未満の粘度では、タンパク質源は、組成物の５〜１２重量％、好ましくは組成物の８〜１０重量％の量である。
【００２０】
更なる態様では、このような液体組成物は、好ましくは、低粘度、好ましくは、７０℃／１００ｓ−１で８０ｍＰａ  ｓ未満、好ましくは７０℃／１００ｓ−１で４〜７８ｍＰａ  ｓの粘度を有する。
【００２１】
粘度は、当業者に公知の方法によって、例えば、コーン／プレート形状を使用する回転粘度計を使用することによって、好ましくは、Ｈａａｋｅ  Ｒｅｏｍｅｔｅｒ  Ｈａａｋｅ  ＲｈｅｏＳｔｒｅｓｓ  １００  ５ｎ．ｃｍ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｇｅｒｍａｎｙ−測定設定：０〜６００ｓ−１（ｃｒ．Ｌｉｎ．）；３００秒；２０℃又は７０℃＋／−  ０．１°；Ｄａｔａ＃３００温度制御装置Ｐｅｌｔｉｅｒ  ＴＣ８０、測定形状：直径６０ｍｍギャップ２ｍｍのプレート−プレートによって求めることができる。
【００２２】
更なる好ましい一態様によれば、加熱滅菌組成物は、少なくとも１．５ｋｃａｌ／ｍＬ（組成物）、好ましくは少なくとも１．８ｋｃａｌ／ｍＬ、好ましくは少なくとも２．０ｋｃａｌ／ｍＬ、好ましくは少なくとも２．２ｋｃａｌ／ｍＬ（組成物）のカロリー密度を有し得、好ましくは、該カロリー密度は、１．５ｋｃａｌ／ｍＬ〜６ｋｃａｌ／ｍＬ、又は１．５ｋｃａｌ／ｍＬ〜３．５ｋｃａｌ／ｍＬ、又は１．９ｋｃａｌ／ｍＬ〜２．４ｋｃａｌ／ｍＬ、又は２．３ｋｃａｌ／ｍＬ〜２．８ｋｃａｌ／ｍＬ、又は２．６ｋｃａｌ／ｍＬ〜３．２ｋｃａｌ／ｍＬである。
【００２３】
好ましい態様によれば、本発明の加熱滅菌組成物は、経腸組成物又は非経口組成物であり、最も好ましくは経腸組成物である。
【００２４】
タンパク質源
本発明の加熱滅菌組成物の一態様によれば、該組成物に含有されるタンパク質源は、動物又は植物由来の感熱性タンパク質であるか又は該タンパク質を含む。
【００２５】
本発明の加熱滅菌組成物に含有される感熱性タンパク質は、単独で又は組み合わせて、ホエイタンパク質、例えば、ホエイタンパク質分離物、酸性化ホエイタンパク質分離物、ホエイタンパク質濃縮物、ホエイパウダー、若しくは更にはホエイタンパク質源から選択され得るか、又は卵タンパク質若しくはカゼインから、若しくはエンドウ豆タンパク質、ジャガイモタンパク質、大豆タンパク質、大豆タンパク質分離物、ヒマワリタンパク質、及びこれらの画分などの植物タンパク質から選択され得るか、又は任意のこのようなタンパク質源の組み合わせから選択され得る。
【００２６】
更により好ましくは、本発明の加熱滅菌組成物に含有されるタンパク質源は、ホエイタンパク質、エンドウ豆タンパク質、ジャガイモタンパク質、小麦タンパク質、ヒマワリタンパク質、大豆タンパク質、又はこれらの混合物である。最も好ましい態様では、タンパク質源はホエイタンパク質である。
【００２７】
好ましくは、タンパク質源は天然のものである。
【００２８】
一般的に、本発明の加熱滅菌組成物は、タンパク質源としてカゼインも含有し得る。しかしながら、特定の一態様によれば、本発明の加熱滅菌組成物はカゼインを含有しない。しかし、カゼインが存在する場合、カゼインは、好ましくは、ホエイタンパク質と組み合わせて、好ましくは、３０／７０〜７０／３０、好ましくは４０／６０〜６０／４０、好ましくは４５／５５〜５５／４５のホエイタンパク質／カゼイン重量比で存在する。特に好ましい態様では、カゼインは、５０／５０のホエイタンパク質／カゼイン重量比で存在する。
【００２９】
いくつかの態様では、本発明の加熱滅菌組成物のタンパク質源は、当業者によく知られている加工及び抽出の技術によって、対応する原材料から得ることができる。次いで、このようにして得られたタンパク質源を、本明細書に記載される連続プロセスにおいて加水分解してよい。
【００３０】
この観点から、本発明の加熱滅菌組成物のタンパク質源が植物タンパク質を含む又は含有するとき、該植物タンパク質は、例えば、当業者に公知であるとおり、脱皮及び挽き割りした大豆などの対応するタンパク質含有植物部分の抽出プロセス又は溶媒抽出によって得ることができる。大豆タンパク質の場合、例えば、大豆タンパク質分離物をタンパク質源とする場合、例えば、以下を含むプロセスによって得ることができる：
１．任意で、溶媒抽出によって植物成分を脱脂すること。
２．水又は弱アルカリに再可溶化し、不溶分（繊維）を分離し、例えばトリプシン阻害剤を失活させるために抽出物を熱処理すること。
３．酸沈殿によってオリゴ糖及びフィチン酸を分離し、タンパク質を洗浄すること。
４．任意で、沈殿した大豆タンパク質を中和及び可溶化すること。
【００３１】
次いで、このようにして得られたタンパク質源を、本明細書に記載される連続プロセスにおいて加水分解してよい。
【００３２】
いくつかの態様では、本発明の加熱滅菌組成物のタンパク質源は、更に、以下から選択される少なくとも１つの成分を含み得る；
（ａ）組成物の０．５〜７．５重量％の量の糖成分であって、該糖が、スクロース、マルトデキストリン、ラクトース、若しくはグルコースからなる群から選択される糖成分、及び／又は
（ｂ）組成物の０．０３重量％〜０．５重量％、好ましくは０．０６重量％〜０．１２５重量％の量のリン酸塩成分、及び／又は
組成物の０．０７重量％〜１．０５重量％、好ましくは０．１３重量％〜０．２６重量％の量のシトレート成分。
【００３３】
第１及び第２の定義された実施形態によれば、本発明の加熱滅菌組成物は、該組成物の少なくとも５重量％の量のタンパク質源を含有する。より好ましくは、タンパク質源は、組成物の少なくとも１０重量％、少なくとも１２重量％、少なくとも１４重量％、又は少なくとも１６重量％の量で含有され得る。特に好ましい態様によれば、本発明の組成物は、タンパク質源がかかる組成物の５〜２０重量％、好ましくは１１〜２０重量％、又は１３〜２０重量％、又は１５〜２０重量％の量、あるいはかかる組成物の５〜１５重量％、又は６〜８重量％、又は１０〜１５重量％、又は１５〜２０重量％、最も好ましくはかかる組成物の８〜１５重量％の量で存在する、加熱滅菌された高タンパク質組成物である。
【００３４】
更に好ましい態様によれば、タンパク質源は、１７ｇ／ｍＬ（組成物）以下、好ましくは１１ｇ／ｍＬ〜１７ｇ／ｍＬ（組成物）、好ましくは１２ｇ／ｍＬ〜１６ｇ／ｍＬ（組成物）、好ましくは１３ｇ／ｍＬ〜１５ｇ／ｍＬ（組成物）のタンパク質濃度で本発明の加熱滅菌組成物中に存在し得る。
【００３５】
上に定義されたとおり、本発明の加熱滅菌組成物のタンパク質源は、好ましくは４０〜９０℃、より好ましくは６０〜８０℃、更により好ましくは７０〜８５℃で加熱することによって、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスで処理されている。
【００３６】
更に、このような熱処理は、有限時間実施される。加水分解されたタンパク質を得るためのこのような有限時間は、好ましくは２〜２０分間、例えば、２〜１０分間、５〜１５分間、又は１０〜２０分間、２〜５分間、５〜１０分間、１０〜１５分間、又は１５〜２０分間である。
【００３７】
本発明の組成物の更に好ましい一態様によれば、加水分解されるタンパク質源は、６〜１１のｐＨ、例えば、６．０〜８．０のｐＨ、又は７．０〜９．０のｐＨ、又はｐＨ８．０〜１０．０、又はｐＨ９．０〜１１．０、好ましくはｐＨ６．０〜８．０のｐＨを有する。
【００３８】
タンパク質加水分解度
更に好ましい一態様によれば、本発明の加熱滅菌組成物は、２０〜５０％、好ましくは２２〜３０％、又は２３〜２６％、又は２５〜３２％、又は２８〜３５％、又は３２〜３８％、又は３４〜４０％、又は３６〜４２％、又は３８〜４４％のタンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）を有する。好ましくは、これは、本発明のプロセスによって得られる最終生成物中に含有されるタンパク質加水分解度である。
【００３９】
ＮＰＮ／ＴＮによって本明細書で決定されるとき、タンパク質加水分解度は、非タンパク態窒素（ＮＰＮ）と全窒素（ＴＮ）との比を指す。この文脈では、全窒素（ＴＮ）及び非タンパク態窒素（ＮＰＮ）は、好ましくは、１２％三塩素酸可溶性画分として決定され、典型的には、ケルダール法を使用して分析される。次いで、タンパク質濃度は、全窒素に係数６．２５を乗じたものに基づく（ＴＮ：ＬＩ−００．５５６−２／ＡＳ−ＩＮＣ−１１４．０１；ＮＰＮ：ＬＩ−００．５６１−２／ＡＳ−ＩＮＣ−０４７．０１）。この文脈では、「Ｒｏｗｌａｎｄ  Ｓ．Ｊ．：Ｔｈｅ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｉｌｋ，Ｊ．Ｄａｉｒｙ  Ｒｅｓ．９（１９３８）４２−４６」が参照され、その内容は参照によって本明細書に組み込まれる。
【００４０】
本発明の加熱滅菌組成物の具体的な態様では、タンパク質加水分解度は、α−アミノ態Ｎ／ＴＮの比として求めることができる。このような比は、本発明の目的のために、例えば、４．５〜６．５％、好ましくは４．８〜５．１％、又は５．０〜５．４％、又は５．２〜５．８％、又は５．５〜６．０％、又は５．８〜６．３％α−アミノ態Ｎ／ＴＮであり得る。
【００４１】
別の態様では、タンパク質加水分解度は、α−アミノ態Ｎ／ＴＮの比として求めることができる。このような比は、本発明の目的のために、例えば、３〜１０％、好ましくは５〜７％、又は６〜８％、又は７〜９％のα−アミノ態Ｎ／ＴＮであり得る。
【００４２】
好ましくは、これが、本発明のプロセスによって得られる最終生成物中に含有されるタンパク質加水分解度である。
【００４３】
本明細書で定義されるα−アミノ態窒素度［α−アミノ態Ｎ／ＴＮ（％）］は、その内容が参照によって本明細書に組み込まれる「ＬＩ−０８．０８８−２．Ａｄｌｅｒ−Ｎｉｓｓｅｎ，Ｊ．（１９７９）．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｄｅｇｒｅｅ  ｏｆ  ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｆｏｏｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ  ｂｙ  ｔｒｉｎｉｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ：Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．，２７：１２５６−１２６２」に記載されているＴＮＢＳ法を使用して求めることができる。
【００４４】
エンドペプチダーゼ
第１及び第２の実施形態によれば、本発明の加熱滅菌組成物のタンパク質源は、好ましくは、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて処理されている。本発明の加熱滅菌組成物の文脈において定義されるエンドペプチダーゼは、典型的には、タンパク質分解ペプチダーゼであり、これは、非末端アミノ酸のペプチド結合を破壊する。
【００４５】
好ましい一態様によれば、少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、エンドペプチダーゼを含有する酵素製剤であり得、より好ましくは、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを含み得るか又は該エンドペプチダーゼからなり得る。このようなエンドペプチダーゼは、セリンプロテアーゼから選択され得、より好ましくは、該セリンプロテアーゼは、トリプシン、トリプシン様エンドペプチダーゼ、サブチリシン、又はこれらの組み合わせのうちの少なくとも１つから選択される。
【００４６】
一態様では、少なくとも１つのトリプシン様エンドペプチダーゼは、フザリウム属の株、好ましくはフザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）に由来し、ＳＷＩＳＳＰＲＯＴ番号Ｐ３５０４９によって示される配列に対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列相同性を有する。
【００４７】
更なる態様では、少なくとも１つのトリプシン様エンドペプチダーゼは、クツネリア（Ｋｕｔｚｎｅｒｉａ）属の株、好ましくはクツネリア・アルビダ（Ｋｕｔｚｎｅｒｉａ  ａｌｂｉｄａ）に由来し、成熟ポリペプチド配列番号１に対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列相同性を有する。
【００４８】
セリンプロテアーゼは、一般的に、単独で又は上述のペプチダーゼと組み合わせて、キモトリプシン及び／若しくはキモトリプシン様エンドペプチダーゼ、又はエラスターゼ、エラスターゼ様プロテアーゼも含み得る。しかし、好ましい一態様によれば、本明細書に定義されるタンパク質源の加水分解に使用される少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、キモトリプシン及び／又はキモトリプシン様エンドペプチダーゼを含まない。
【００４９】
最も好ましくは、少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、サブチリシンを含有するプロテアーゼ製剤であり、好ましくはａｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌである。
【００５０】
更に、好ましい一態様によれば、少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、サーモリシン、アスパラギン酸プロテアーゼ、ペプシン、グルタミルエンドペプチダーゼ、酸性エンドペプチダーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ、及び類似の微生物エンドペプチダーゼ、又はこれらの組み合わせから選択され得る。
【００５１】
更に、好ましい一態様によれば、少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、植物系プロテアーゼ、好ましくはパパイン、ブロメライン、又はこれらの組み合わせから選択され得る。
【００５２】
特に好ましい態様によれば、本発明の加熱滅菌組成物のタンパク質源を加水分解するために使用されるエンドペプチダーゼは、タンパク質源に基づいて０．５〜５重量％、好ましくは１〜３重量％、又は２〜４重量％で使用され得る。
【００５３】
いくつかの態様では、本発明の加熱滅菌組成物のタンパク質源を加水分解するために使用されるエンドペプチダーゼの濃度は、タンパク質源１グラム当たり０．０５〜５ｍｇ、好ましくはタンパク質源１グラム当たり０．１〜０．５ｍｇ、又は０．３〜１ｍｇ、又は０．８〜１．５ｍｇ、又は１．２〜２ｍｇ、又は１．６〜２．５ｍｇ、又は２．２〜３ｍｇ、又は２．７〜３．５ｍｇ、又は３．１〜４ｍｇ、又は３．８〜４．５ｍｇであり得る。
【００５４】
他の成分
更なる態様に従って、本発明の加熱滅菌組成物は、ビタミン、ミネラル、及び微量元素から選択される微量栄養素も含み、これらは単独で又は組み合わせて存在し得る。あるいは、いくつかの態様では、本発明の加熱滅菌組成物は、微量栄養素を全く含有していなくてもよい。
【００５５】
本明細書で使用するとき、用語「微量栄養素」は、ヒトの食事に極微量が必要とされるビタミン及び（食事由来の）ミネラルを指す。
【００５６】
本明細書で使用するとき、用語「ビタミン」は、ほとんどの動物の栄養にとって微量が必須とされる、特に代謝プロセスの制御において補酵素及び補酵素の前駆体として作用する任意の様々な有機物質を指す。ビタミンは、ホルモン（例えば、ビタミンＤ）、抗酸化物質（例えば、ビタミンＣ及びビタミンＥ）、並びに細胞のシグナル伝達、細胞増殖の制御、組織成長及び分化のメディエーター（例えば、ビタミンＡ）としての機能を含む多様な生化学的機能を有する。最も数の多いビタミンＢ群は、代謝において触媒及び基質としての作用を補助する生体分子の酵素補因子（補酵素）の前駆体として機能する。例えば、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２である。存在し得る他のビタミンとしては、ビタミンＫ、チアミン、リボフラビン、ナイアシン、葉酸、ビオチン、及びパントテン酸が挙げられる。
【００５７】
特に好ましい態様によれば、本発明の加熱滅菌組成物は、タンパク質源に基づいて１．５〜５重量％、好ましくは、タンパク質源に基づいて１．５〜２重量％、又は１．８〜２．５重量％、又は２．３〜３重量％、又は２．８〜３．５重量％、又は３．３〜４重量％、又は３．８〜４．５重量％、最も好ましくは、タンパク質源に基づいて１．６〜２．２重量％のミネラル含量を含む。
【００５８】
この文脈では、ミネラルは、好ましくは、食物ミネラル、例えば、カルシウム、マグネシウム、リン、カリウム、ナトリウム、及び硫黄である。好ましくは、カルシウムがミネラルとして本発明の加熱滅菌組成物に含有され、任意で、上記の少なくとも１つの更なる食事由来のミネラルも含有される。
【００５９】
本発明の加熱滅菌組成物において必要であり得かつ使用し得る更なるミネラルは、微量元素であり得る。このような微量元素は、典型的には、比較的少量が必要とされるミネラル、例えば、クロム、コバルト、銅、塩化物、フッ素、ヨウ素、マンガン、モリブデン、セレン、及び亜鉛である。
【００６０】
したがって、いくつかの態様では、本発明の加熱滅菌組成物は、患者に適切な栄養を与えるのに有用なビタミン、ミネラル、及び微量元素の任意の組み合わせを含み得る。ビタミン、ミネラル、及び微量元素は、混合物又は製剤の形態で使用され得る。本発明の加熱滅菌組成物中の具体的なビタミン及びミネラルの量は、当業者によって決定され得る。
【００６１】
更なる態様によれば、本発明の加熱滅菌組成物は、フードマトリクスとしても提供され得る。フードマトリクスは、液体又は粉末の形態の任意の種類の食品、例えば、飲料、栄養補助食品などとして本明細書では定義され、フードマトリクスは、本明細書に定義される本発明の加熱滅菌組成物と、任意で、更にタンパク質及び／又は脂質及び／又は炭水化物を含有する。好ましくは、本発明の加熱滅菌組成物は、液体であり、より好ましくは飲料として提供される。
【００６２】
特に好ましい態様によれば、本発明の加熱滅菌組成物は、栄養組成物、栄養サプリメント、乳児用フォーミュラ、フォローアップフォーミュラ（ｆｏｌｌｏｗ−ｕｐ  ｆｏｒｍｕｌａ）、ベビーフードフォーミュラ、乳児用穀物フォーミュラ（ｉｎｆａｎｔ  ｃｅｒｅａｌ  ｆｏｒｍｕｌａ）又はグローイングアップミルク（ｇｒｏｗｉｎｇ−ｕｐ  ｍｉｌｋ）、乳児用食品サプリメント又は小児用食品サプリメント、小児用フォーミュラ、成人用栄養組成物、妊婦用栄養サプリメント、肥満用フォーミュラ、高齢者用栄養組成物又はヘルスケアフォーミュラであり、最も好ましくは、前述の組成物は、経腸組成物又は非経口組成物である。
【００６３】
更に、いくつかの態様では、本発明の加熱滅菌組成物は、サプリメントの形態であってもよく、あるいは栄養の唯一の供給源として使用されてもよく、例えば十分な食事として提供されてもよい。本明細書で使用するとき、用語「サプリメント」は、その食物又は食事に添加することができる栄養を指す。
【００６４】
上記文脈において、乳児は、本明細書では１歳以下と定義され、一方、小児は、少なくとも１歳〜７歳として定義される。
【００６５】
更に、この文脈では、フォローアップフォーミュラは、好ましくは、乳児後半期（ｏｌｄｅｒ  ｉｎｆａｎｔ）の食物の変化を補完し、通常のミルクよりもこの年齢の幼児の栄養必要量により適応した、よりバランスのとれた完全食を提供するように設計される。グローイングアップミルク（ＧＵＭ）は、フォローアップフォーミュラの下位群であると考えてよく、これも上に説明された定義に含まれる。このようなＧＵＭは、より具体的には、１歳以上、例えば１〜６歳の小児の栄養必要量に適応する。一般的に、ＧＵＭは、特定の年齢の小児の栄養必要量に特に適応する。例えば、１〜３歳、３〜５歳、及び５歳超の小児に対するＧＵＭが存在する。
【００６６】
最後に、母親用の栄養は、典型的には、妊娠中及び授乳中の女性用のものとして定義され、妊娠を希望している女性への妊娠前投与も更に包含する。
【００６７】
好ましい一態様によれば、フードマトリクスは、任意で、炭水化物、プロバイオティクス、プレバイオティクス、ミネラル、増粘剤、緩衝剤又はｐＨ調整剤、キレート剤、着色剤、乳化剤、賦形剤、着香剤、浸透圧剤、保存料、安定剤、糖、甘味料、調質剤、及び／又はビタミンを含有し得る。例えば、栄養組成物は、大豆レシチン、モノ及びジグリセリドのクエン酸エステルなどの乳化剤及び安定剤を含有し得る。任意成分を、任意の好適な量で添加することができる。
【００６８】
具体的な実施形態によれば、本発明の加熱滅菌組成物は、上に定義されたフードマトリクス、好ましくは、飲料、栄養補助食品、より好ましくは、栄養組成物、栄養サプリメント、乳児用フォーミュラ、フォローアップフォーミュラ、ベビーフードフォーミュラ、乳児用穀物フォーミュラ又はグローイングアップミルク、乳児用食品サプリメント又は小児用食品サプリメント、小児用フォーミュラ、成人用栄養組成物、妊婦用栄養サプリメント、肥満症用フォーミュラ、高齢者用栄養組成物又はヘルスケアフォーミュラを調製するために使用することができる。
【００６９】
更なる実施形態では、本発明の加熱滅菌組成物は、医薬品及び／又はニュートラシューティカル製品として使用することもできる。
【００７０】
更なる実施形態によれば、最初に記載した又は下記本発明のプロセスに従って得られる若しくは得ることができる、本明細書に記載される本発明の加熱滅菌組成物の使用が企図される。一実施形態では、本発明の加熱滅菌組成物は、栄養を必要としている人に栄養を与えるのに使用してよく、人は、好ましくは高齢者、乳児又は幼児、疾患状態にある人、病気の状態にある人、病気の状態から回復しつつある人、栄養失調の人、又はスポーツマン若しくはスポーツウーマン若しくは活動的な高齢者などの健康な人などである。
【００７１】
本発明の状況において、加熱滅菌組成物の栄養成分は、典型的には、タンパク質、脂質、及び炭水化物を含み、これらは製品の種類に応じて選択される。
【００７２】
更なる実施形態によれば、本明細書に記載されるとおりの加水分解されたタンパク質の使用が企図され、該タンパク質は、好ましくは、５〜２０重量％の全タンパク質を含む本明細書に定義される加熱滅菌加熱滅菌組成物、好ましくは液体組成物を調製するための、典型的には、例えば２〜２０分間から選択される有限時間、好ましくは４０〜９０℃で加熱することによる、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて調製されており、好ましくは、液体組成物は、経腸組成物又は非経口組成物である。より好ましくは、本明細書に定義される加熱滅菌組成物。
【００７３】
一実施形態によれば、本明細書に記載されるとおりの、加熱滅菌された高タンパク質組成物の粘度を制御し、苦味を防ぐ方法であって、タンパク質源の水溶液を提供するステップと、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いてかかるタンパク質源の水溶液を連続的に加水分解した後、かかるエンドペプチダーゼを失活させるステップとを含み、好ましくは、該失活が熱失活である方法が提供される。好ましくは、本発明の加熱滅菌組成物について上に概説された成分及び条件が、ここでも適用される。
【００７４】
本発明の実施形態の別の実施形態によれば、５〜２０重量％の全タンパク質を含む本明細書に定義される加熱滅菌された液体組成物の粘度を制御するための、上に記載されたとおりの加水分解されたタンパク質の使用が企図され、該タンパク質は、好ましくは、典型的には、例えば２〜２０分間から選択される有限時間、好ましくは４０〜９０℃で加熱することによる、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいて調製されており、好ましくは、かかる液体組成物は、経腸組成物又は非経口組成物である。より好ましくは、加熱滅菌組成物は、本明細書に定義されるとおりである。好ましくは、本発明の加熱滅菌組成物について上に概説された成分及び条件が、ここでも適用される。
【００７５】
好ましくは、本明細書に定義される本発明の加熱滅菌組成物は、当業者に好適な任意のプロセスにより得ることができる。より好ましくは、本発明の加熱滅菌組成物は、以下に更に詳細に定義されるプロセスによって得ることができる。
【００７６】
更なる実施形態によれば、本発明の端緒となる課題は、したがって、好ましくは、加熱滅菌組成物、好ましくは本明細書に定義される加熱滅菌組成物、好ましくは加熱滅菌された経腸組成物又は加熱滅菌された非経口組成物、最も好ましくは加熱滅菌された経腸組成物を調製するプロセスによっても解決される。
【００７７】
したがって、本発明は、また、上記加熱滅菌組成物、好ましくは、本明細書に定義されるこのような組成物を調製するためのプロセスに従って得られる又は得ることができる加熱滅菌組成物についても記載する。これに関して、かかるプロセスは、本発明の加熱滅菌組成物について定義された量及び成分のいずれかを含有し得る又は含み得る。
【００７８】
プロセス
したがって、特に好ましい実施形態によれば、本発明の端緒となる課題は、加水分解されたタンパク質を含有するタンパク質源を含む加熱滅菌組成物、より好ましくは、本明細書に記載される加熱滅菌組成物を調製するための連続プロセスによって解決される。
【００７９】
本発明にかかる連続プロセスは、典型的には、以下のステップを含む：
（ｉ）タンパク質源の水溶液を提供するステップと、
（ｉｉ）典型的には、例えば２〜２０分間から選択される有限時間、好ましくは４０〜９０℃で加熱することによって、かかるタンパク質源の水溶液を少なくとも１種のエンドペプチダーゼで処理する、連続加水分解ステップを実施するステップと、
（ｉｉｉ）かかるエンドペプチダーゼを熱失活させるステップ。
【００８０】
本発明のプロセスのステップ（ｉ）
タンパク質源
本発明のプロセスのステップ（ｉ）によれば、タンパク質源の水溶液が提供される。このようなタンパク質源は、好ましくは、本明細書に定義される感熱性タンパク質であるか又はかかるタンパク質を含む。
【００８１】
本発明のプロセスのステップ（ｉ）において提供されるこのような感熱性タンパク質は、単独で又は組み合わせて、ホエイタンパク質、例えば、ホエイタンパク質分離物、酸性化ホエイタンパク質分離物、ホエイタンパク質濃縮物、ホエイパウダー、若しくは更にはホエイタンパク質源から選択され得る、又は卵タンパク質若しくはカゼインから、若しくはエンドウ豆タンパク質、ジャガイモタンパク質、大豆タンパク質、大豆タンパク質分離物、ヒマワリタンパク質、及びこれらの画分などの植物タンパク質から選択され得る、又は任意のこのようなタンパク質源の組み合わせから選択され得る。
【００８２】
更により好ましくは、本発明のプロセスにおいて提供されるタンパク質源は、ホエイタンパク質、エンドウ豆タンパク質、ジャガイモタンパク質、小麦タンパク質、ヒマワリタンパク質、大豆タンパク質、又はこれらの混合物である。最も好ましい態様では、タンパク質源はホエイタンパク質である。
【００８３】
好ましくは、タンパク質源は天然のものである。
【００８４】
一般的に、本発明のプロセスは、また、タンパク質源としてカゼインを提供し得る。しかしながら、特定の一態様によれば、本発明のプロセスはカゼインを適用しない。しかし、カゼインを使用する場合、カゼインは、好ましくは、ホエイタンパク質と組み合わせて、好ましくは、３０／７０〜７０／３０、好ましくは４０／６０〜６０／４０、好ましくは４５／５５〜５５／４５のホエイタンパク質／カゼイン重量比で存在する。特に好ましい態様では、カゼインは、５０／５０のホエイタンパク質／カゼイン重量比で使用される。
【００８５】
いくつかの態様では、本発明のプロセスのステップ（ｉ）で提供されるタンパク質源は、例えば、上記のとおりの、当業者によく知られている加工及び抽出の技術によって、対応する原材料から得ることができる。次いで、このようにして得られたタンパク質源を、本明細書に記載される連続プロセスにおいて加水分解してよい。
【００８６】
いくつかの態様では、本発明のプロセスのステップ（ｉ）で提供されるタンパク質源は、更に、以下から選択される少なくとも１つの成分を含み得る；
（ａ）かかるタンパク質源又は好ましくは最終加熱滅菌組成物の０．５〜７．５重量％の量の糖成分であって、かかる糖がスクロース、マルトデキストリン、ラクトース、若しくはグルコースからなる群から選択される糖成分；及び／又は
（ｂ）かかるタンパク質源又は好ましくはかかる最終加熱滅菌組成物の０．０３重量％〜０．５重量％、好ましくはかかるタンパク質源又はかかる最終加熱滅菌組成物の０．０６重量％〜０．１２５重量％の量のリン酸塩成分；及び／又は
かかるタンパク質源又はかかる最終加熱滅菌組成物の０．０７重量％〜１．０５重量％、好ましくはかかるタンパク質源又はかかる加熱滅菌組成物の０．１３重量％〜０．２６重量％の量のシトレート成分。
【００８７】
上に定義された本発明のプロセスによれば、タンパク質源は、かかる組成物の少なくとも５重量％の量で提供される。より好ましくは、タンパク質源は、かかる組成物の少なくとも１０重量％、少なくとも１２重量％、少なくとも１４重量％、又は少なくとも１６重量％の量で提供され得る。特に好ましい態様によれば、タンパク質源は、加熱滅菌された高タンパク質組成物の５〜２０重量％、好ましくはかかる組成物の１１〜２０重量％、又は１３〜２０重量％、又は１５〜２０重量％の量、あるいはかかる組成物の５〜１５重量％、又は６〜８重量％、又は１０〜１５重量％、又は１５〜２０重量％、最も好ましくはかかる組成物の８〜１５重量％の量で提供される。
【００８８】
更に好ましい態様によれば、タンパク質源は、１７ｇ／ｍＬ（組成物）以下、好ましくは１１ｇ／ｍＬ〜１７ｇ／ｍＬ（組成物）、好ましくは１２ｇ／ｍＬ〜１６ｇ／ｍＬ（組成物）、好ましくは１３ｇ／ｍＬ〜１５ｇ／ｍＬ（組成物）のタンパク質濃度で本発明のプロセスに提供され得る。
【００８９】
本発明のプロセスの好ましい一態様によれば、ステップ（ｉｉ）の前に、最も好ましくはタンパク質源のｐＨ調整後に、タンパク質加水分解ステップを実施してよく、該加水分解ステップは、好ましくは、１０分間〜２時間、例えば、最も好ましくは、２０〜３０分間、又は２５〜４０分間、又は３５分間〜１時間、又は４５分間〜１時間２０分間、又は１時間１０分間〜１時間３０分間、最も好ましくは５５分間〜１時間５分間である。かかる加水分解ステップは、好ましくは、４０〜９０℃、より好ましくは６０〜８０℃、更により好ましくは７０〜８５℃、例えば、４０〜９０℃、好ましくは４５〜５０℃、又は４８〜５５℃、又は５２〜６０℃、又は５８〜６５℃、又は６２〜７０℃、又は６８〜７０℃、又は７１〜７５℃、又は７２〜７８℃、又は７７〜８３℃、又は８１〜８６℃で実施される。
【００９０】
本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）
本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）によれば、典型的には、例えば２〜２０分間から選択される有限時間、好ましくは４０〜９０℃で加熱することによって、かかるタンパク質源の水溶液が少なくとも１種のエンドペプチダーゼで処理される、加水分解ステップが実施される。
【００９１】
タンパク質加水分解度
本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）、好ましくはステップ（ｉ）、（ｉｉ）、及び（ｉｉｉ）のすべてのステップの加水分解は、好ましくは、かかるプロセスの最終生成物において２０〜５０％、好ましくは２２〜３０％、又は２３〜２６％、又は２５〜３２％、又は２８〜３５％、又は３２〜３８％、又は３４〜４０％、又は３６〜４２％、又は３８〜４４％のタンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）をもたらす。
【００９２】
別の一態様によれば、ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）に従う本明細書に記載される本発明のプロセスは、該プロセスの最終生成物においてタンパク質（最終）加水分解度（α−アミノ態Ｎ／ＴＮ）が４．５〜６．５％、好ましくは４．８〜５．１％、又は５．０〜５．４％、又は５．２〜５．８％、又は５．５〜６．０％、又は５．８〜６．３％のα−アミノ態Ｎ／ＴＮであるタンパク質源を提供する。
【００９３】
更なる別の一態様によれば、ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）に従う本明細書に記載される本発明のプロセスは、該プロセスの最終生成物においてタンパク質（最終）加水分解度（α−アミノ態Ｎ／ＴＮ）が３〜１０％、好ましくは５〜７％、又は６〜８％、又は７〜９％のα−アミノ態Ｎ／ＴＮであるタンパク質源を提供する。
【００９４】
好ましい実施形態では、本発明のプロセスによって提供されるタンパク質加水分解度は、本発明の組成物について既に記載された方法によって求めることができる。
【００９５】
エンドペプチダーゼ
好ましい一態様によれば、本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）において使用される少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、エンドペプチダーゼを含有する酵素製剤を含む又はかかる酵素製剤のみからなり、より好ましくは、少なくとも１種のエンドペプチダーゼを含み得るか又はからなり得る。
【００９６】
特に好ましい態様によれば、本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）において使用される少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、セリンプロテアーゼから選択され得、好ましくは、該セリンプロテアーゼは、トリプシン、トリプシン様、サブチリシン、キモトリプシン、キモトリプシン様、若しくはエラスターゼ、エラスターゼ様プロテアーゼ、又はこれらの組み合わせ、好ましくはトリプシン様エンドペプチダーゼのうちの少なくとも１種から選択される。
【００９７】
一態様では、少なくとも１種のトリプシン様エンドペプチダーゼは、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属の株、好ましくはフザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）に由来し、ＳＷＩＳＳＰＲＯＴ番号Ｐ３５０４９によって示される配列に対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列相同性を有する。
【００９８】
更なる態様では、少なくとも１種のトリプシン様エンドペプチダーゼは、クツネリア属（Ｋｕｔｚｎｅｒｉａ）の株、好ましくはクツネリア・アルビダ（Ｋｕｔｚｎｅｒｉａ  ａｌｂｉｄａ）に由来し、成熟ポリペプチド配列番号１に対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列相同性を有する。
【００９９】
セリンプロテアーゼは、一般的に、単独で又は上述のペプチダーゼと組み合わせて、キモトリプシン及び／又はキモトリプシン様エンドペプチダーゼも含み得る。しかし、好ましい一態様によれば、本明細書に定義されるタンパク質源の加水分解に使用するときの少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、キモトリプシン及び／又はキモトリプシン様エンドペプチダーゼを含まない。
【０１００】
最も好ましくは、少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、サブチリシンを含有するプロテアーゼ製剤、好ましくはａｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌである。
【０１０１】
更なる態様では、本発明のプロセスで使用される少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、サーモリシン、アスパラギン酸プロテアーゼ、ペプシン又はグルタミルエンドペプチダーゼ、酸性エンドペプチダーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ、及び類似の微生物エンドペプチダーゼ、又はこれらの組み合わせを含む又はかかるエンドペプチダーゼのみからなる。
【０１０２】
更に、好ましい一態様によれば、本発明のプロセスで使用される少なくとも１種のエンドペプチダーゼは、植物系プロテアーゼ、好ましくはパパイン、ブロメライン、又はこれらの組み合わせを含む又はかかるエンドプロテアーゼのみからなる。
【０１０３】
特に好ましい態様によれば、本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）で使用されるエンドペプチダーゼは、かかるタンパク質源に基づいて０．５〜５重量％、好ましくは１〜３重量％、又は２〜４重量％の量で添加され得る。
【０１０４】
いくつかの態様では、本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）で使用されるエンドペプチダーゼの濃度は、タンパク質源１グラム当たり０．０５〜５ｍｇ、好ましくはタンパク質源１グラム当たり０．１〜０．５ｍｇ、又は０．３〜１ｍｇ、又は０．８〜１．５ｍｇ、又は１．２〜２ｍｇ、又は１．６〜２．５ｍｇ、又は２．２〜３ｍｇ、又は２．７〜３．５ｍｇ、又は３．１〜４ｍｇ、又は３．８〜４．５ｍｇであり得る。
【０１０５】
他の成分
更に、他の好ましい一態様によれば、本発明のプロセスのステップ（ｉ）又はステップ（ｉｉ）のいずれかにおいて、微量栄養素をタンパク質源に添加してよい。このような微量栄養素は、ビタミン、ミネラル、及び微量元素から選択される微量栄養素から選択され得、これらは単独で又は組み合わせて存在し得る。あるいは、本発明のプロセスで使用されるタンパク質源は、微量栄養素を全く含有せず、又は微量栄養素を本発明のプロセスに添加しなくてもよい。
【０１０６】
特に好ましい態様によれば、タンパク質源に基づいて１．５〜５重量％、好ましくは、タンパク質源に基づいて１．５〜２重量％、又は１．８〜２．５重量％、又は２．３〜３重量％、又は２．８〜３．５重量％、又は３．３〜４重量％、又は３．８〜４．５重量％、最も好ましくは、タンパク質源に基づいて１．６〜２．２重量％のミネラル含量が、本発明のプロセスのステップ（ｉ）又はステップ（ｉｉ）のいずれかにおいてタンパク質源に添加され得る。
【０１０７】
本発明のプロセスにおいて使用される具体的なビタミン及びミネラルの量は、当業者により決定され得る。より好ましくは、このような具体的なビタミン及びミネラルは、本発明の組成物について上に定義されたとおりである。
【０１０８】
本発明のプロセスのステップ（ｉ）又はステップ（ｉｉ）のいずれかにおいてタンパク質源に添加され得る更なるミネラルは、微量元素であり得る。このような微量元素は、例えば、クロム、コバルト、銅、塩化物、フッ素、ヨウ素、マンガン、モリブデン、セレン、及び亜鉛を含み得る。
【０１０９】
したがって、いくつかの態様では、本発明のプロセスは、患者に適切な栄養を与えるのに有用なビタミン、ミネラル、及び微量元素の任意の組み合わせを含み得る。ビタミン、ミネラル、及び微量元素は、混合物又は製剤の形態で使用され得る。
【０１１０】
特に好ましい態様によれば、本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）では、加水分解されたタンパク質を得るための有限時間は、好ましくは２〜２０分間、例えば、２〜１０分間、５〜１５分間、又は１０〜２０分間、又はより具体的には、２〜５分間、５〜１０分間、１０〜１５分間、又は１５〜２０分間である。
【０１１１】
本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）におけるいくつかの態様では、加熱は、４０〜９０℃、好ましくは４０〜９０℃、より好ましくは６０〜８０℃、更により好ましくは７０〜８５℃、例えば、４５〜５０℃、又は４８〜５５℃、又は５２〜６０℃、又は５８〜６５℃、又は６２〜７０℃、又は６８〜７０℃、又は７１〜７５℃、又は７２〜７８℃、又は７７〜８３℃、又は８１〜８６℃で実施される。
【０１１２】
更なる態様では、本発明のプロセスは、少なくとも１種のエンドペプチダーゼの非存在下でタンパク質源に対して実施され得る、ステップ（ｉｉ）の前の予熱ステップを含む。本発明のプロセスの一態様では、ステップ（ｉｉ）の前の予熱ステップは、少なくとも１種のエンドペプチダーゼの存在下でタンパク質源の水溶液に対して実施される。好ましい態様では、かかる予熱ステップは、上に定義された本発明の加熱ステップについて概説された温度、好ましくは４０〜９０℃、より好ましくは６０〜８０℃、更により好ましくは７０〜８５℃、例えば、４０〜９０℃、好ましくは４５〜５０℃、又は４８〜５５℃、又は５２〜６０℃、又は５８〜６５℃、又は６２〜７０℃、又は６８〜７０℃、又は７１〜７５℃、又は７２〜７８℃、又は７７〜８３℃、又は８１〜８６℃で実施される。
【０１１３】
本発明のプロセスの更なる好ましい態様では、かかる予熱ステップは、５秒間〜５分間、好ましくは５〜１０秒間、又は８〜１５秒間、又は１１〜２０秒間、又は１４〜２５秒間、又は１７〜３０秒間、又は２０〜３５秒間、又は２３〜４０秒間、又は２６〜４５秒間、又は２９〜５０秒間、又は３２〜５５秒間、又は３５秒間〜１分間、又は３８秒間〜１分５秒間、又は１分間〜２分間、又は１分３０秒間〜３分間、又は２分間〜４分間の期間にわたって実施される。
【０１１４】
本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）の特に好ましい態様によれば、加熱及び／又は任意の予熱ステップは、６０〜８０℃、好ましくは７０〜８５℃、好ましくは６０〜７０℃、又は６８〜７０℃、又は７１〜７５℃、又は７２〜７８℃、又は７７〜８０℃で実施される。本発明者らは、驚くべきことに、これが微生物のバイオフィルムの形成を回避する非常に効率的なプロセスを提供することを見出したので、かかる温度が有利である。
【０１１５】
いくつかの態様では、本発明のプロセスは、４０〜６０℃などのより低温でも実行可能であるが、本発明者らは、これによって、より長い連続プロセスの実行中に微生物のバイオフィルムが形成されることを見出した。これは、例えば、硝酸塩ＮＯ３から硝酸塩ＮＯ２が形成されることに起因すると考えられる。
【０１１６】
更に、本発明者らは、驚くべきことに、４０〜６０℃における加熱と比較すると、いくつかの態様において本発明のプロセスを６０〜８０℃、好ましくは７０〜８５℃、最も好ましくは７４〜７８℃で実施したとき、より少ない量、例えば１／３量のエンドペプチダーゼを使用することができ、加熱時間を１５〜５分間短縮したときでさえも、同様のタンパク質加水分解度が得られることを見出した。更に、特に好ましい態様によれば、本発明のプロセスのステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）に従って得られる組成物は、苦味を全く有しない。
【０１１７】
本発明のプロセスのステップ（ｉｉｉ）
更に好ましい一態様によれば、本発明のプロセスのステップ（ｉｉｉ）では、好ましくは、エンドペプチダーゼの熱失活は、７０℃超、好ましくは７０〜１５０℃、好ましくは７５〜８０℃、又は７８〜８５℃、又は８２〜９０℃、又は８６〜９３℃、又は９０〜９８℃、又は９５〜１０５℃、又は９６〜１０５℃、又は１０２〜１１０℃、又は１０６〜１１５℃、又は１０９〜１２０℃、又は１１８〜１２４℃、又は１２１〜１３０℃、又は１２６〜１３４℃、又は１３２〜１４０℃、又は１３６〜１４４℃で実施される。
【０１１８】
本発明のプロセスのいくつかの態様では、熱失活は、２〜６０秒間、好ましくは５〜１５秒間、又は１０〜２０秒間、又は１８〜２５秒間、又は２２〜３０秒間、又は２８〜３５秒間、又は３２〜４０秒間、又は３８〜４６秒間、又は４２〜５０秒間、又は４８〜５６秒間である。
【０１１９】
本発明のプロセスの更に好ましい態様では、熱失活ステップは、平板熱交換器、押出成形機を用いて、又は蒸気噴射によって実施される。
【０１２０】
したがって、本発明のプロセスのステップ（ｉｉｉ）のいくつかの態様では、エンドペプチダーゼの熱失活は、好ましくは１３５℃超、好ましくは１３６〜１６０℃、好ましくは１４０〜１４８℃、又は１４５〜１５２℃、又は１４８〜１５５℃における１〜５秒間のＵＨＴ処理によって実施される。
【０１２１】
本発明のプロセスのステップ（ｉｉｉ）エンドペプチダーゼの熱失活の特に好ましい態様によれば、次いで、好ましくは１３５℃超における１〜５秒間のＵＨＴ処理ステップが実施される。
【０１２２】
本発明のプロセスのいくつかの態様では、ステップ（ｉ）及び（ｉｉ）、好ましくはステップ（ｉｉｉ）も、６〜１１のｐＨ、例えば、６．０〜８．０のｐＨ、又は７．０〜９．０のｐＨ、又はｐＨ８．０〜１０．０、又はｐＨ９．０〜１１．０、好ましくはｐＨ６．０〜８．０のｐＨで実施される。
【０１２３】
本発明のプロセスの好ましい態様によれば、ｐＨを調整するためにＫＯＨなどの塩基が使用されるが、ＮａＯＨ、水酸化カルシウム、酸化マグネシウム、又はそれほど好ましくないが水酸化アルミニウムを含む他の塩基を使用して、ｐＨを６〜１１のｐＨに調整してもよい。
【０１２４】
本発明のプロセスの好ましい態様によれば、ｐＨを調整するためにクエン酸又はリン酸などの酸が使用される。かかる手段のために本発明のプロセスで使用され得る他の酸は、酢酸及び塩酸を含み、最も好ましくは塩酸を含む。当業者は、ｐＨを調整するのに好適な他の手段を認識する。
【０１２５】
本発明のプロセスの更なる態様では、ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）後、本発明のプロセスの生成物として加熱滅菌された液体組成物が得られ、該加熱滅菌された液体組成物は、好ましくは、本明細書において上に定義されたとおりであり、より好ましくは、かかる組成物の５〜２０重量％の量のタンパク質源を含み、かかる液体組成物は、低粘度、好ましくは２０℃／１００ｓ−１で８７５ｍＰａ  ｓ未満、又は２０℃／１００ｓ−１で６００ｍＰａ  ｓ未満、又は同様に２０℃／１００ｓ−１で２００ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有し、典型的には、下限は２０℃／１００ｓ−１で少なくとも１０ｍＰａ  ｓであり、好ましくは、かかる加熱滅菌された液体組成物は、経腸組成物又は非経口組成物である。最も好ましくは、２０℃／１００ｓ−１で８７５ｍＰａ  ｓ未満又は２０℃／１００ｓ−１で６００ｍＰａ  ｓ未満のかかる粘度では、タンパク質源は、組成物の１５〜２０重量％、好ましくは組成物の１６〜１８重量％の量である。
【０１２６】
本発明のプロセスの更なる態様では、ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）後、本発明のプロセスの生成物として加熱滅菌された液体組成物が得られ、該加熱滅菌された液体組成物は、好ましくは、本明細書において上に定義されたとおりであり、より好ましくは、かかる組成物の５〜２０重量％の量のタンパク質源を含み、かかる液体組成物は、低粘度、好ましくは７０℃／１００ｓ−１で３５０ｍＰａ  ｓ未満、又は７０℃／１００ｓ−１で２４０ｍＰａ  ｓ未満、又は同様に７０℃／１００ｓ−１で８０ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有し、好ましくは、かかる加熱滅菌された液体組成物は、経腸組成物又は非経口組成物である。最も好ましくは、７０℃／１００ｓ−１で３５０ｍＰａ  ｓ未満又は７０℃／１００ｓ−１で２４０ｍＰａ  ｓ未満のかかる粘度では、タンパク質源は、組成物の５〜１２重量％、好ましくは組成物の８〜１０重量％の量である。
【０１２７】
本発明のプロセスの更なる態様では、ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）後、本発明のプロセスの生成物として加熱滅菌された液体組成物が得られ、該加熱滅菌された液体組成物は、好ましくは、本明細書において上に定義されたとおりであり、より好ましくは、加熱滅菌された高タンパク質組成物は、低粘度を有しかつ苦味を有さず、２０〜５０％のタンパク質加水分解度（ＮＰＮ／ＴＮ）を有する加水分解された感熱性タンパク質源と少なくとも１種の熱失活したエンドペプチダーゼとを含み、好ましくは、かかる加熱滅菌された液体組成物は、経腸組成物又は非経口組成物である。
【０１２８】
粘度は、例えば、本発明の組成物について本明細書に既に記載されたコーン／プレート形状を用いる回転粘度計を使用することによって、当業者に公知の方法によって決定され得る。
【０１２９】
本発明のプロセスのいくつかの態様では、本発明のプロセスのステップ（ｉｉ）又はステップ（ｉｉｉ）後にカゼイン、カゼイン塩、又はカゼイン含有成分を添加してよい。
【０１３０】
本発明のプロセスのいくつかの態様では、ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）後、任意のステップ（ｉｖ）において、加熱滅菌組成物を、好ましくは、噴霧乾燥、フリーズドライ、凍結乾燥、又は流動床凝集によって、乾燥させて粉末を形成する。
【０１３１】
本発明のプロセスの特に好ましい態様によれば、ステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）後、任意のステップ（ｖ）において、加熱滅菌組成物を、０〜１５℃、好ましくは２〜５℃、又は４〜８℃、又は６〜１１℃、又は９〜１４℃、最も好ましくは４℃に冷却する。
【０１３２】
好ましい態様によれば、本発明のプロセスのステップ（ｉ）〜（ｉｉｉ）に従って得られる組成物全体が、貯蔵安定性である。本発明のプロセスのいくつかの態様では、貯蔵寿命は、好ましくは最後のプロセスステップ後、より好ましくは最後のプロセスステップ（ｉｉｉ）後から、少なくとも９ヶ月間、好ましくは少なくとも１年間である。
【０１３３】
更に、いくつかの態様では、本発明のプロセスのステップ（ｉ）〜（ｉｉ）に従って得られる組成物全体が、実質的に苦い味ではなく、得られる液体組成物は、比較的低粘度を有する、ジェリー状にならない低い重量オスモル濃度（ｏｓｍｏｌａｌｉｔｙ）を有する、及び／又は凝集しない。
【０１３４】
更なる態様では、本発明のプロセスのステップ（ｉ）〜（ｉｉ）に従って得られる組成物全体が、改善された安定性、好ましくは、延長された貯蔵寿命を有する。
【０１３５】
更なる実施形態によれば、最初に記載したとおり又は本発明のプロセスに従って得られる若しくは得ることができる、本明細書に記載される本発明の組成物の使用が企図される。一実施形態によれば、本発明の組成物は、病気の状態にある人、又は病気の状態から回復しつつある人、又は栄養失調の人に栄養を与えるのに使用するために特に好適である。
【０１３６】
本明細書で使用するとき、用語「疾患」は、機能の何らかの撹乱又は異常；身体的又は精神的に病的な状態を指す。Ｄｏｒｌａｎｄ’ｓ  Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ，（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ  Ｃｏ．２７ｔｈ  ｅｄ．１９８８）を参照されたい。
【０１３７】
いくつかの態様では、このような疾患又は栄養不良の治療は、好ましくは、それを必要としている対象に、本発明に従って定義される加熱滅菌組成物を治療的に有効な量で投与することによって達成される。特に好ましい態様によれば、このような加熱滅菌組成物は、１日１回、好ましくは１日２回、より好ましくは１日３回投与すべきであり、投与中、好ましくは、本明細書に定義されるとおり、投与単位又は投与用量が少なくとも１つ提供される。投与の際、好ましくは、１日あたりに投与されるエネルギーの総量は、既に定義されたとおりである。本明細書で使用するとき、用語「対象」は動物を指す。好ましくは、動物は哺乳類である。また、対象は、例えば、霊長類（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚、鳥なども指す。いくつかの態様では、対象は、ヒトである。
【０１３８】
本発明の加熱滅菌された組成物についての用語「治療的に有効な量」は、対象の生物学的若しくは医学的応答を誘発する、又は症状を寛解させる、疾患の進行を減速若しくは遅延させる、又は疾患を予防するなどの本発明の化合物の量を指す。更なる態様では、このような「治療的に有効な量」は、得られたとおりのパッケージ化された用量又は単位である。
【０１３９】
一実施形態によれば、最初に記載したとおり又は本発明のプロセスに従って得られるか若しくは得ることができる、本明細書に記載される本発明の加熱滅菌組成物は、好ましくは、乳児（１歳未満の小児）に使用するのに好適である。いくつかの態様では、本発明の組成物は、成人及び幼児によって使用するのにも好適である。
【０１４０】
一態様によれば、本発明のプロセスから得ることができる加熱滅菌組成物は、栄養組成物、栄養補給剤、調整粉乳、フォローアップフォーミュラ、ベビーフードフォーミュラ、乳児用穀物フォーミュラ又はグローイングアップミルク、乳児用又は小児用栄養補助食品、小児用フォーミュラ、成人用栄養組成物、母親用栄養補給剤、肥満症用フォーミュラ、高齢者用栄養組成物又はヘルスケアフォーミュラである。最も好ましくは、本発明のプロセスから得ることができる加熱滅菌組成物は、経腸組成物又は非経口組成物である。
【０１４１】
いくつかの態様では、本発明のプロセスから得ることができる加熱滅菌組成物は、栄養を必要としている人に栄養を与えるのに使用するためのものであり、かかる人は、好ましくは高齢者、乳児又は幼児、病気の状態にある人、病気の状態から回復しつつある人、栄養失調の人、又はスポーツマン若しくはスポーツウーマン若しくは活動的な高齢者などの健康な人である。
【０１４２】
本発明の様々な実施形態を上記した。これらの記載は例示を意図するものであり、限定を意図するものではない。したがって、以下に記載する特許請求の範囲の範囲から逸脱することなく、記載される発明に対して特定の変形例を作製し得ることが当業者には明らかであろう。
【０１４３】
例えば、本明細書に記載されるとき、「好ましい実施形態」は、「本発明の好ましい実施形態」を意味する。同様に、本明細書に記載されるとき、「様々な実施形態」及び「別の実施形態」は、それぞれ、「本発明の様々な実施形態」及び「本発明の別の実施形態」を意味する。
【０１４４】
別途記載のない限り、本発明の文脈において、用語「少なくとも」は、典型的には、一連の要素のうち最低限のものを意味するものであり、一連の要素に含まれるすべての要素を指すものであることは理解されたい。当業者であれば、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するであろうし、又は通常の実験を超えない実験を用い調査可能であるだろう。このような均等物は、本発明に包含されるものと意図される。
【０１４５】
本明細書及び添付の特許請求の範囲を通して、別途記載のない限り、用語「含む」及び「含んでいる」などのその変形は、記載の整数又はステップ又は整数群又は複数のステップを包含するものであり、任意の他の整数又はステップ又は整数若しくはステップ群を除外することを意味するものではないと理解される。本明細書で使用するとき、用語「含む」は、用語「含有する」で可換であり、本明細書で使用するとき、場合によっては用語「有する」で可換である。本明細書で使用するとき、「からなる」は、特許請求の範囲において明記されていない任意の要素、ステップ、又は原材料を排除する。本明細書で使用するとき、「本質的に〜からなる」は、特許請求の範囲の基本的及び新規特性に顕著に作用しない物質又はステップを排除しない。本明細書に記載のそれぞれの例において、用語「含む」、「から本質的になる」、及び「からなる」は、その他の２つの用語のいずれかにより可換な場合もある。
【０１４６】
更に、本発明に記載される百分率は、具体的に指定しない限り、互換的に、重量−重量（ｗ／ｗ）％又は重量−体積（ｗ／ｖ）％のいずれであってもよい。
【０１４７】
最終的に、本開示で引用したすべての刊行物及び特許文献は、参照によりその全体が援用される。参照により本明細書の記載と矛盾する又は一致する文献が組み込まれるとき、本明細書の記載は任意のこのような文献の記載よりも優先される。
【図面の簡単な説明】
【０１４８】
以下の図面は、本発明を更に例証することを意図する。それは、本発明の主題を限定することを意図するものではない。
【図１】本明細書に記載されるプロセスの概略を示す。見て取れるとおり、本発明のプロセスは、好ましくは、典型的には溶液の形態のタンパク質源を使用し、エンドペプチダーゼは、好ましくは溶液としてかかるタンパク質源に添加される。次いで、得られる混合物を、典型的には４０〜９０℃に予熱し、次いで、例えば保持管内において、２〜２０分間から選択される有限時間、４０〜９０℃で加水分解を実施し得る。加水分解後、酵素を失活させ、次いで、典型的には冷却して、このようにして得られる加水分解物を含む加熱滅菌された組成物を提供する。
【図２】先行技術のタンパク質を加水分解するための典型的なバッチプロセスの概略を示す。ＲＨＳ長方形（破線）から見て取れるとおり、タンパク質が広範囲に加水分解されていることから、反応終了時の加水分解の程度又は加水分解度の範囲にほとんど影響がない。  これは、加水分解度又は加水分解の程度の範囲が約２０〜７５％である、部分的加水分解についての加水分解度の範囲において大きな影響を示すＬＨＳ長方形（実線）とは全く対照的である。
【図３】少なくとも１種のエンドペプチダーゼを用いる連続プロセスにおいてタンパク質源を処理する本発明のプロセスの概略を示す。ＲＨＳ長方形（破線）は、比較目的のためのものであり、加水分解が完結するかどうかにほとんど影響を示さない、すなわち、有限時間が適用されないとき、本発明の範囲内ではない広範囲に加水分解されたタンパク質を提供する。  全く対照的に、ＬＨＳ長方形（実線）によって示されるとおり、本発明のプロセスに従って、２〜２０分間から選択される有限時間を使用したとき、タンパク質源の部分的加水分解の加水分解の程度又は加水分解度の範囲にほとんど影響はない。この例示では、加水分解の程度又は加水分解度は、約３５〜４５％の範囲である。
【実施例】
【０１４９】
以下の実施例は、本発明を更に例示することを意図する。これら実施例は、本発明の主題を限定することを意図するものではない。
【０１５０】
実施例１：ホエイタンパク質濃縮物から加熱滅菌組成物を調製するための例示的な連続プロセス−中温
【表１】
2018537098.tif 000002
を、水酸化カリウム溶液を用いて６０℃でｐＨ７．４に調整し、続いて、１０分間水和して水溶液を得た。かかる水溶液に、ホエイタンパク質源に基づいて３重量％のａｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌのエンドペプチダーゼ溶液を添加した。次いで、かかる混合物を、約３０秒間プレート熱交換器を使用して５５℃に予熱し、続いて、５５℃で１５分間保持管内において加水分解した。次いで、９５℃で１０秒間加熱することによって、この混合物に対して直接酵素失活を実施した。次いで、得られた加水分解物を４℃に冷却した。
【０１５１】
得られた液体組成物は、味／苦味を全く有さず、４０．４のＮＰＮ／ＴＮ％を有していた。更に、これは、コーン／プレート形状を使用する回転粘度計を使用して求められた、２０℃／１００ｓ−１で６００ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有していた。
【０１５２】
実施例２：ホエイタンパク質濃縮物から加熱滅菌組成物を調製するための例示的な連続プロセス−中温
【表２】
2018537098.tif 000003
を、水酸化カリウム溶液を用いて６０℃でｐＨ７．４に調整し、続いて、１０分間水和して水溶液を得た。かかる水溶液に、ホエイタンパク質源に基づいて３重量％のａｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌのエンドペプチダーゼ溶液を添加した。次いで、かかる混合物を、約３０秒間プレート熱交換器を使用して５５℃に予熱し、続いて、５５℃で１５分間保持管内において加水分解した。次いで、９５℃で１０秒間加熱することによって、この混合物に対して直接酵素失活を実施した。次いで、得られた加水分解物を４℃に冷却した。
【０１５３】
得られた液体組成物は、味／苦味を全く有さず、４０．４のＮＰＮ／ＴＮ％を有していた。更に、これは、コーン／プレート形状を使用する回転粘度計を使用して求められた、２０℃／１００ｓ−１で８００ｍＰａ  ｓ未満及び７０℃／１００ｓ−１で３２０ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有していた。
【０１５４】
実施例３：ホエイタンパク質濃縮物から加熱滅菌組成物を調製するための例示的な連続プロセス−高温
【表３】
2018537098.tif 000004
を、水酸化カリウム溶液を用いて６０℃でｐＨ７．４に調整し、続いて、１０分間水和して水溶液を得た。かかる水溶液に、ホエイタンパク質源に基づいて１重量％のａｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌのエンドペプチダーゼ溶液を添加した。次いで、かかる混合物を、約３０秒間プレート熱交換器を使用して７８℃に予熱し、続いて、７８℃で５分間保持管内において加水分解した。次いで、９５℃で１０秒間加熱することによって、この混合物に対して直接酵素失活を実施した。次いで、得られた加水分解物を４℃に冷却した。
【０１５５】
得られた液体組成物は、味／苦味を全く有さず、３８．６のＮＰＮ／ＴＮ％を有していた。更に、これは、コーン／プレート形状を使用する回転粘度計を使用して求められた、２０℃／１００ｓ−１で２０５ｍＰａ  ｓ未満及び７０℃／１００ｓ−１で８０ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有していた。
【０１５６】
実施例４：カゼイン：ホエイ（３０：７０）から加熱滅菌組成物を調製するための例示的な連続プロセス−中温
【表４】
2018537098.tif 000005
を、水酸化カリウム溶液を用いて６０℃でｐＨ７．４に調整し、続いて、１０分間水和して水溶液を得た。かかる水溶液に、タンパク質源に基づいて３重量％のａｌｃａｌａｓｅ２．４Ｌのエンドペプチダーゼ溶液を添加した。次いで、かかる混合物を、約３０秒間プレート熱交換器を使用して５５℃に予熱し、続いて、５５℃で５分間保持管内において加水分解した。次いで、９５℃で１０秒間加熱することによって、この混合物に対して直接酵素失活を実施した。次いで、得られた加水分解物を４℃に冷却した。
【０１５７】
得られた液体組成物は、味／苦味を全く有さず、３９．０のＮＰＮ／ＴＮ％を有していた。更に、これは、コーン／プレート形状を使用する回転粘度計を使用して求められた、２０℃／１００ｓ−１で２００ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有していた。
【０１５８】
実施例５：大豆タンパク質分離物／カードから加熱滅菌組成物を調製するための例示的な連続プロセス
【表５】
2018537098.tif 000006
【０１５９】
次いで、以下を変更した実施例１及び実施例２のプロトコールに従っていくつかの試験４ａ〜４ｄを実施した−水酸化カリウム溶液を使用して６０℃でｐＨ６．８〜ｐＨ８にｐＨを調整して水溶液を得、予熱ステップを６８〜７０℃で約３０秒間にし、加水分解を６８〜７０℃で１５〜２０分間実施し、これらに加えて更に以下を変更した：
【表６】
2018537098.tif 000007
【０１６０】
試験４ａ〜４ｄのすべてにおいて、コーン／プレート形状を使用する回転粘度計を使用して求められた、２０℃／１００ｓ−１で２００ｍＰａ  ｓ未満の粘度を有する液体組成物が提供された。
【０１６１】
更に、４ａ〜４ｄのすべてについて、液体組成物は、苦味を全く有さず、約６％のアミノ態Ｎ／ＴＮ  ＴＮＢＳ法％を有していた。
【０１６２】
実施例６：５５℃で実施した、典型的なバッチプロセスと本発明のプロセスとの比較。
典型的なバッチ加水分解プロセスを本発明の連続プロセスと比較するために、以下の試験を実施した。すべての場合において、投入したタンパク質源は、ＮＰＮ／ＴＮ％＝１１．１；アミノ態Ｎ／ＴＮ  ＴＮＢＳ法％＝３．５を有していた。
【０１６３】
試験５ａ−実施例２のホエイタンパク質源を、水酸化カリウム溶液でｐＨ調整することによって、ｐＨ７．４にて５５℃で２時間バッチ加水分解プロセスに供した。
【０１６４】
試験５ｂは、実施例２に記載したとおりの条件下で、５５℃で本発明の連続加水分解プロセスに供した。
【０１６５】
試験５ｃは、実施例４に記載したとおりの条件下で、５５℃で本発明の連続加水分解プロセスに供した。
【０１６６】
【表７】
2018537098.tif 000008
【０１６７】
見て取れるとおり、典型的なバッチ加水分解プロセス（５ａ）は、非常に苦味のある生成物を提供した。対照的に、試験５ｂ及び５ｃに概説した本発明の連続加水分解プロセスは、苦味のない生成物を提供した。
【図１】
2018537098.tif 000009
【図２】
2018537098.tif 000010
【図３】
2018537098.tif 000011
【配列表】
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【国際調査報告】
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2018537098.tif 000013
2018537098.tif 000014
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