(57)【要約】本実施形態は、ＤＧＡＴ２発現を阻害するために有用である方法、化合物及び組成物を提供する。これらは、ＤＧＡＴ２に関連する疾患の治療、予防または改善に有用であり得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項２】
配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも９個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項３】
配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも１０個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項４】
配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも１１個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項５】
配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも１２個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項６】
配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項７】
配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項８】
配列番号２の核酸塩基２５６３６〜３１０７６（イントロン２）に相補的な核酸塩基配列を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含み、前記修飾オリゴヌクレオチドが配列番号２に対して少なくとも８５％、９０％、９５％または１００％相補的である、化合物。
【請求項９】
配列番号２の核酸塩基２６７１１〜２６８０２、２６７７８〜２６７９７、９９３０〜９９４９、９９５３〜９９７３、９９５９〜９９７８、９９６１〜９９８１、９９７０〜９９９２、９９７５〜９９９４、９９８４〜１０００３、１００４０〜１００５９、１００４３〜１００６３、１００４５〜１００６４、１００４６〜１００６５、１００４９〜１００６８、１００５４〜１００７３、１０１６０〜１０１７９、１０２０９〜１０２２９、１０２１２〜１０２３１、１０２１４〜１０２３５、１０２１７〜１０２３６、１０２１８〜１０２３８、１０３２７〜１０３４６、１０３８９〜１０４１３、１０４９０〜１０５１１、１０５２２〜１０５４８、１０５３０〜１０５４９、１０５３１〜１０５５１、１０５３３〜１０５５３、１０６４５〜１０６６９、１０６５１〜１０６７０、１０６５３〜１０６７３、１０６５５〜１０６７４、１０６５６〜１０６７５、１０６５７〜１０６７６、１０６５８〜１０６８０、１０６６２〜１０６８１、１０６６３〜１０６８４、１０６６６〜１０６８５、１０６６７〜１０６８４、１０６７０〜１０６８９、１０７０２〜１０７２１、１０７２７〜１０７４７、１０７２９〜１０７４８、１０７３０〜１０７５０、１０７３３〜１０７５５、１０７３７〜１０７５６、１０７４２〜１０７６１、１０７６３〜１０７８２、１０８１４〜１０８３５、１０８１７〜１０８３６、１０８１８〜１０８３７、１０９４０〜１０９６４、１１００８〜１１０２７、１１０７４〜１１０９７、１１１２３〜１１１５０、１１１５８〜１１１８２、１１１６８〜１１１８７、１１１７０〜１１１９０、１１１７１〜１１１９７、１１１９９〜１１２１８、１１２００〜１１２２０、１１２０９〜１１２２８、１１３１８〜１１３４２、１１４１３〜１１４３２、１１５５９〜１１５７８、１１５９４〜１１６１８、１１７０７〜１１７３１、１１８７２〜１１８９１、１１９２０〜１１９３９、１２２４７〜１２２６６、１２２８５〜１２３０４、１２５４９〜１２５７３、１２６７１〜１２６９５、１２８０６〜１２８２６、１２８３９〜１２８６３、１２８９０〜１２９０９、１２９２７〜１２９６１、１３０９８〜１３１１７、１３２１２〜１３２３１、１３２３９〜１３２５８、１３４４１〜１３４６１、１３９２１〜１３９４５、１３９６２〜１３９９６、１４１７７〜１４２０１、１４１９４〜１４２１８、１４２３９〜１４２５８、１４３８５〜１４４０４、１４４５７〜１４５２２、１４５０４〜１４５２７、１４５３７〜１４５５６、１４６４８〜１４６９７、１４７１５〜１４７９０、１４７１５〜１４７３９、１４７３５〜１４７６４、１４７４６〜１４７６５、１４７４９〜１４７７４、１４７５６〜１４７７９、１４７６５〜１４７８９、１４７７１〜１４７９０、１４８０７〜１４８３１、１４８５２〜１４８７１、１４８８２〜１４９０１、１４９５３〜１５０１５、１４９９７〜１５０６５、１５０４１〜１５１０７、１５０４１〜１５０９２、１５０８３〜１５１０７、１５１７８〜１５１９７、１５２１４〜１５２４３、１５２１９〜１５２４３、１５２４８〜１５２７６、１５２５５〜１５２７６、１５２９２〜１５３１１、１５３１８〜１５３３８、１５３２１〜１５３４２、１５３５３〜１５３７２、１５３６８〜１５３９２、１５５１４〜１５５３３、１５５７３〜１５６６５、１５５７３〜１５５９７、１５７２９〜１５７５３、１５８０４〜１５８２８、１５８１４〜１５８３３、１５８７６〜１５９００、１５８７６〜１５８９６、１５９３３〜１５９６２、１５９３３〜１５９５４、１５９９１〜１６０１０、１６０４６〜１６０７３、１６０８２〜１６１２４、１６２３７〜１６２５６、１６２８８〜１６３１４、１６２８８〜１６４７８、１６３０８〜１６３２９、１６４２８〜１６４７８、１６５１０〜１６５２９、１６８０８〜１６８５５、１６８０８〜１６８２８、１６８１１〜１６８５５、１６８９８〜１６９２１、１７００７〜１７０３１、１７０３８〜１７０５７、１７２０７〜１７２２９、１７２６９〜１７２９８、１７２７３〜１７２９４、１７３２８〜１７３５７、１７４２０〜１７４４４、１７４５０〜１７４７１、１７５３０〜１７５５９、１７３２８〜１７５５９、１７９６０〜１７９８９、１８０７８〜１８０９７、１８１５５〜１８１７６、１８１５５〜１８１９８、１８１７７〜１８２００、１８２２５〜１８３０５、１８３０６〜１８３２７、１８３０９〜１８３３０、１８３１２〜１８３３０、１８３１２〜１８３３２、１８３１５〜１８３４４、１８３２９〜１８３５５、１８３７９〜１８３９８、１８４１７〜１８４４６、１８４３０〜１８４５１、１８１８４５０〜１８４７３、１８４７０〜１８４９４、１８５８１〜１８６０１、１８５８３〜１８６０５、１８５８１〜１８６１１、１８５８８〜１８６１１、１８８２１〜１８８５０、１８８２１〜１８８４７、１８８３６〜１８８９９、１８８９０〜１８９１４、１８８９８〜１８９１９、１９０１３〜１９０３７、１９０１３〜１９０４０、１９３６０〜１９４１１、１９３６３〜１９３８３、１９８０４〜１９８２３、１９９０９〜１９９３２、１９９８７〜２０００９、２０２３２〜２０２５６、２０２９６〜２０３２５、２０４６２〜２０４８１、２０５４１〜２０５６０、２０６６８〜２０６９２、２０７７５〜２０７９７、２０７７９〜２０７９７、２０８１７〜２０８４１、２０８２８〜２０８６３、２０８７８〜２０８９７、２０９５６〜２０９７９、２１０４６〜２１１２０、２１０９１〜２１１２０、２１１６４〜２１２０３、２１１６４〜２１１８８、２１３７４〜２１４０３、２１６５９〜２１６７８、２１７０８〜２１７２７、２１７６５〜２１７８４、２１９３３〜２１９５５、２２１５３〜２２１９１、２２１５３〜２２１７５、２２１５８〜２２１７９、２２１６７〜２２１９１、２２４３９〜２２４６３、２２５４７〜２２５６７、２２７７０〜２２７９０、２２７７０〜２２７９５、２２７７５〜２２７９５、２２８３５〜２２８７０、２２８４１〜２２８６５、２２８８１〜２２９０１、２２８８５〜２２９０５、２２８８９〜２２９１０、２３０９５〜２３１１５、２３０９８〜２３１１９、２３０９９〜２３１１９、２３１２８〜２３１５７、２３１７９〜２３２５１、２３２３８〜２３２５８、２３２４０〜２３２６０、２３２４２〜２３２６２、２３４２９〜２３４４９、２３４８０〜２３５６６、２３５４７〜２３５８１、２３５５３〜２３５７３、２３５５５〜２３５７６、２３５６２〜２３５８６、２３５９７〜２３６１６、２３６４１〜２３６７０、２４１２３〜２４１４４、２４１２３〜２４１４７、２４２０２〜２４２２３、２４２０２〜２４２４１、２４７９９〜２５０３９、２４７９９〜２４８４７、２５０１８〜２５０９、２５０２３〜２５０５３、２５０２６〜２５０５３、２５０６９〜２５０９２、２５０６９〜２５１１４、２５０７７〜２５１０４、２５０８８〜２５１１４、２５１８３〜２５２０５、２５１８３〜２５２１７、２５１９８〜２５２１７、２５２２６〜２５２５０、２５２２６〜２５２６５、２５２３６〜２５２６０、２５２４４〜２５２９１、２５３１２〜２５３９４、２５３８０〜２５４００、２５７１７〜２５７３６、２５７８２〜２５８６０、２５８４５〜２５８６６、２５８６６〜２５９３５、２５９１９〜２５９３９、２５９５０〜２５９７１、２５９５４〜２５９７３、２５９８１〜２６０３０、２６１０２〜２６１２６、２６１６２〜２６２２０、２６３００〜２６３２４、２６３３１〜２６３７２、２６３６３〜２６４０５、２６３８９〜２６４０９、２６３９６〜２６４２０、２６４７９〜２６５０４、２６５１６〜２６５５０、２６５３４〜２６５５５、２６５３４〜２６５６０、２６５４０〜２６５６０、２６６１０〜２６６３４、２６６２０〜２６６４０、２６６２６〜２６６４８、２６６２０〜２６６６４、２６６３３〜２６６５５、２６６４０〜２６６６４、２６７１６〜２６７４０、２６７１６〜２６７９９、２６７８６〜２６８０７、２６７８９〜２６８０９、２６７８６〜２６８０９、２６８１１〜２６８３１、２６８４９〜２６８６９、２６８６９〜２６８９８、２６８８３〜２６９０３、２６９２６〜２６９４３、２７０４６〜２７０７５、２７１０６〜２７１３０、２７１７４〜２７２３０、２７２２１〜２７２４１、２７２２６〜２７２５８、２７２４１〜２７２６５、２７２４９〜２７２６９、２７３６７〜２７４０６、２７３６７〜２７４０２、２７３８６〜２７４０６、２７６３８〜２７６６４、２７７６９〜２７７９１、２７７７５〜２７８１０、２７８５２〜２７８７７、２８０２６〜２８０４９、２８１２８〜２８１５４、２８４６２〜２８４９２、２８４７５〜２８５０８、２８５１６〜２８５４２、２８５８４〜２８６０５、２８８０４〜２８８２６、２９０１０〜２９０３５、２９１４３〜２９１６７、２９１５１〜２９１８０、２９１９６〜２９２１８、２９２４４〜２９２６８、２９２５３〜２９２８２、２９３６１〜２９３８３、２９３６９〜２９３９１、２９４５０〜２９４９５、２９４８０〜２９５０４、２９５３８〜２９６５４、２９６７３〜２９６９７、２９６８１〜２９７０２、２９７８１〜２９８０１、２９８０４〜２９８２８、２９８２７〜２９８４７、２９８３２〜２９８５２、２９８３８〜２９８５８、２９８４４〜２９８７８、３０４８４〜３０５０４、３０５２４〜３０５４８、３０５５４〜３０５８８、３０６６９〜３０７３１、３０９７２〜３０９９７、３０９８４〜３１００５、３１５５１〜３１５７１、３１５５４〜３１５８４、３１７９４〜３１８１８、３１９３２〜３１９５２、３１９３６〜３１９５６、３１９３９〜３１９６３、３１９４６〜３１９７１、３２１１５〜３２１３６、３２１１９〜３２１４０、３２１３０〜３２１５９、３２１７５〜３２２０１、３２４２８〜３２４５４、３２４３６〜３２４６７、３２４５９〜３２４７９、３２４６３〜３２４８９、３２４７４〜３２４９５、３２４８０〜３２５２９、３２５８６〜３２６３８、３２６２１〜３２６４１、３２７５６〜３２７７６、３２８０１〜３２８２５、３２８１６〜３２８４０、３３０７０〜３３１８０、３３１７６〜３３１９９、３３１８２〜３３２０２、３３４１１〜３３４３３、３３５７２〜３３６０１、３３７２９〜３３７５９、３３８４６〜３３８７６、３３８６０〜３３８８２、３３８６６〜３３８８６、３４０６３〜３４１１７、３４２１１〜３４２３２、３４６８６〜３４７１０、３４７３９〜３４８８７、３４９０１〜３４９５０、３５２６３〜３５２９２、３５２７７〜３５３０２、３５３２２〜３５３４６、３５４０８〜３５４３３、３５４２１〜３５４４１、３５４３６〜３５４５７、３５６６５〜３５６８５、３６２４６〜３６２６７、３６２５０〜３６２７０、３６２５３〜３６２７４、３６２５８〜３６２８１、３６２６８〜３６５３１、３６５１６〜３６５３７、３６５７３〜３６５９７、３６５８１〜３６６０３、３６６３２〜３６６６６、３６６７７〜３６６９８、３６６８２〜３６７０２、３６６８９〜３６７５７、３６７４２〜３６７７２、３６８４１〜３６８７４、３６８４６〜３６８７４、３６８６５〜３７０４１、３７０５４〜３７０７３、３７８３８〜３７８５８、３９６６８〜３９６９４、３９６８４〜３９７０５、３９８２０〜３９８４０、３９８３０〜３９８５２及び４０９０９〜４０９３３に相補的な長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含み、前記修飾オリゴヌクレオチドが配列番号２に対して少なくとも８５％、９０％、９５％または１００％相補的である、化合物。
【請求項１０】
配列番号２の核酸塩基２６７１１〜２６８０２、２６７７８〜２６７９７、９９３０〜９９４９、９９５３〜９９７３、９９５９〜９９７８、９９６１〜９９８１、９９７０〜９９９２、９９７５〜９９９４、９９８４〜１０００３、１００４０〜１００５９、１００４３〜１００６３、１００４５〜１００６４、１００４６〜１００６５、１００４９〜１００６８、１００５４〜１００７３、１０１６０〜１０１７９、１０２０９〜１０２２９、１０２１２〜１０２３１、１０２１４〜１０２３５、１０２１７〜１０２３６、１０２１８〜１０２３８、１０３２７〜１０３４６、１０３８９〜１０４１３、１０４９０〜１０５１１、１０５２２〜１０５４８、１０５３０〜１０５４９、１０５３１〜１０５５１、１０５３３〜１０５５３、１０６４５〜１０６６９、１０６５１〜１０６７０、１０６５３〜１０６７３、１０６５５〜１０６７４、１０６５６〜１０６７５、１０６５７〜１０６７６、１０６５８〜１０６８０、１０６６２〜１０６８１、１０６６３〜１０６８４、１０６６６〜１０６８５、１０６６７〜１０６８４、１０６７０〜１０６８９、１０７０２〜１０７２１、１０７２７〜１０７４７、１０７２９〜１０７４８、１０７３０〜１０７５０、１０７３３〜１０７５５、１０７３７〜１０７５６、１０７４２〜１０７６１、１０７６３〜１０７８２、１０８１４〜１０８３５、１０８１７〜１０８３６、１０８１８〜１０８３７、１０９４０〜１０９６４、１１００８〜１１０２７、１１０７４〜１１０９７、１１１２３〜１１１５０、１１１５８〜１１１８２、１１１６８〜１１１８７、１１１７０〜１１１９０、１１１７１〜１１１９７、１１１９９〜１１２１８、１１２００〜１１２２０、１１２０９〜１１２２８、１１３１８〜１１３４２、１１４１３〜１１４３２、１１５５９〜１１５７８、１１５９４〜１１６１８、１１７０７〜１１７３１、１１８７２〜１１８９１、１１９２０〜１１９３９、１２２４７〜１２２６６、１２２８５〜１２３０４、１２５４９〜１２５７３、１２６７１〜１２６９５、１２８０６〜１２８２６、１２８３９〜１２８６３、１２８９０〜１２９０９、１２９２７〜１２９６１、１３０９８〜１３１１７、１３２１２〜１３２３１、１３２３９〜１３２５８、１３４４１〜１３４６１、１３９２１〜１３９４５、１３９６２〜１３９９６、１４１７７〜１４２０１、１４１９４〜１４２１８、１４２３９〜１４２５８、１４３８５〜１４４０４、１４４５７〜１４５２２、１４５０４〜１４５２７、１４５３７〜１４５５６、１４６４８〜１４６９７、１４７１５〜１４７９０、１４７１５〜１４７３９、１４７３５〜１４７６４、１４７４６〜１４７６５、１４７４９〜１４７７４、１４７５６〜１４７７９、１４７６５〜１４７８９、１４７７１〜１４７９０、１４８０７〜１４８３１、１４８５２〜１４８７１、１４８８２〜１４９０１、１４９５３〜１５０１５、１４９９７〜１５０６５、１５０４１〜１５１０７、１５０４１〜１５０９２、１５０８３〜１５１０７、１５１７８〜１５１９７、１５２１４〜１５２４３、１５２１９〜１５２４３、１５２４８〜１５２７６、１５２５５〜１５２７６、１５２９２〜１５３１１、１５３１８〜１５３３８、１５３２１〜１５３４２、１５３５３〜１５３７２、１５３６８〜１５３９２、１５５１４〜１５５３３、１５５７３〜１５６６５、１５５７３〜１５５９７、１５７２９〜１５７５３、１５８０４〜１５８２８、１５８１４〜１５８３３、１５８７６〜１５９００、１５８７６〜１５８９６、１５９３３〜１５９６２、１５９３３〜１５９５４、１５９９１〜１６０１０、１６０４６〜１６０７３、１６０８２〜１６１２４、１６２３７〜１６２５６、１６２８８〜１６３１４、１６２８８〜１６４７８、１６３０８〜１６３２９、１６４２８〜１６４７８、１６５１０〜１６５２９、１６８０８〜１６８５５、１６８０８〜１６８２８、１６８１１〜１６８５５、１６８９８〜１６９２１、１７００７〜１７０３１、１７０３８〜１７０５７、１７２０７〜１７２２９、１７２６９〜１７２９８、１７２７３〜１７２９４、１７３２８〜１７３５７、１７４２０〜１７４４４、１７４５０〜１７４７１、１７５３０〜１７５５９、１７３２８〜１７５５９、１７９６０〜１７９８９、１８０７８〜１８０９７、１８１５５〜１８１７６、１８１５５〜１８１９８、１８１７７〜１８２００、１８２２５〜１８３０５、１８３０６〜１８３２７、１８３０９〜１８３３０、１８３１２〜１８３３０、１８３１２〜１８３３２、１８３１５〜１８３４４、１８３２９〜１８３５５、１８３７９〜１８３９８、１８４１７〜１８４４６、１８４３０〜１８４５１、１８１８４５０〜１８４７３、１８４７０〜１８４９４、１８５８１〜１８６０１、１８５８３〜１８６０５、１８５８１〜１８６１１、１８５８８〜１８６１１、１８８２１〜１８８５０、１８８２１〜１８８４７、１８８３６〜１８８９９、１８８９０〜１８９１４、１８８９８〜１８９１９、１９０１３〜１９０３７、１９０１３〜１９０４０、１９３６０〜１９４１１、１９３６３〜１９３８３、１９８０４〜１９８２３、１９９０９〜１９９３２、１９９８７〜２０００９、２０２３２〜２０２５６、２０２９６〜２０３２５、２０４６２〜２０４８１、２０５４１〜２０５６０、２０６６８〜２０６９２、２０７７５〜２０７９７、２０７７９〜２０７９７、２０８１７〜２０８４１、２０８２８〜２０８６３、２０８７８〜２０８９７、２０９５６〜２０９７９、２１０４６〜２１１２０、２１０９１〜２１１２０、２１１６４〜２１２０３、２１１６４〜２１１８８、２１３７４〜２１４０３、２１６５９〜２１６７８、２１７０８〜２１７２７、２１７６５〜２１７８４、２１９３３〜２１９５５、２２１５３〜２２１９１、２２１５３〜２２１７５、２２１５８〜２２１７９、２２１６７〜２２１９１、２２４３９〜２２４６３、２２５４７〜２２５６７、２２７７０〜２２７９０、２２７７０〜２２７９５、２２７７５〜２２７９５、２２８３５〜２２８７０、２２８４１〜２２８６５、２２８８１〜２２９０１、２２８８５〜２２９０５、２２８８９〜２２９１０、２３０９５〜２３１１５、２３０９８〜２３１１９、２３０９９〜２３１１９、２３１２８〜２３１５７、２３１７９〜２３２５１、２３２３８〜２３２５８、２３２４０〜２３２６０、２３２４２〜２３２６２、２３４２９〜２３４４９、２３４８０〜２３５６６、２３５４７〜２３５８１、２３５５３〜２３５７３、２３５５５〜２３５７６、２３５６２〜２３５８６、２３５９７〜２３６１６、２３６４１〜２３６７０、２４１２３〜２４１４４、２４１２３〜２４１４７、２４２０２〜２４２２３、２４２０２〜２４２４１、２４７９９〜２５０３９、２４７９９〜２４８４７、２５０１８〜２５０９、２５０２３〜２５０５３、２５０２６〜２５０５３、２５０６９〜２５０９２、２５０６９〜２５１１４、２５０７７〜２５１０４、２５０８８〜２５１１４、２５１８３〜２５２０５、２５１８３〜２５２１７、２５１９８〜２５２１７、２５２２６〜２５２５０、２５２２６〜２５２６５、２５２３６〜２５２６０、２５２４４〜２５２９１、２５３１２〜２５３９４、２５３８０〜２５４００、２５７１７〜２５７３６、２５７８２〜２５８６０、２５８４５〜２５８６６、２５８６６〜２５９３５、２５９１９〜２５９３９、２５９５０〜２５９７１、２５９５４〜２５９７３、２５９８１〜２６０３０、２６１０２〜２６１２６、２６１６２〜２６２２０、２６３００〜２６３２４、２６３３１〜２６３７２、２６３６３〜２６４０５、２６３８９〜２６４０９、２６３９６〜２６４２０、２６４７９〜２６５０４、２６５１６〜２６５５０、２６５３４〜２６５５５、２６５３４〜２６５６０、２６５４０〜２６５６０、２６６１０〜２６６３４、２６６２０〜２６６４０、２６６２６〜２６６４８、２６６２０〜２６６６４、２６６３３〜２６６５５、２６６４０〜２６６６４、２６７１６〜２６７４０、２６７１６〜２６７９９、２６７８６〜２６８０７、２６７８９〜２６８０９、２６７８６〜２６８０９、２６８１１〜２６８３１、２６８４９〜２６８６９、２６８６９〜２６８９８、２６８８３〜２６９０３、２６９２６〜２６９４３、２７０４６〜２７０７５、２７１０６〜２７１３０、２７１７４〜２７２３０、２７２２１〜２７２４１、２７２２６〜２７２５８、２７２４１〜２７２６５、２７２４９〜２７２６９、２７３６７〜２７４０６、２７３６７〜２７４０２、２７３８６〜２７４０６、２７６３８〜２７６６４、２７７６９〜２７７９１、２７７７５〜２７８１０、２７８５２〜２７８７７、２８０２６〜２８０４９、２８１２８〜２８１５４、２８４６２〜２８４９２、２８４７５〜２８５０８、２８５１６〜２８５４２、２８５８４〜２８６０５、２８８０４〜２８８２６、２９０１０〜２９０３５、２９１４３〜２９１６７、２９１５１〜２９１８０、２９１９６〜２９２１８、２９２４４〜２９２６８、２９２５３〜２９２８２、２９３６１〜２９３８３、２９３６９〜２９３９１、２９４５０〜２９４９５、２９４８０〜２９５０４、２９５３８〜２９６５４、２９６７３〜２９６９７、２９６８１〜２９７０２、２９７８１〜２９８０１、２９８０４〜２９８２８、２９８２７〜２９８４７、２９８３２〜２９８５２、２９８３８〜２９８５８、２９８４４〜２９８７８、３０４８４〜３０５０４、３０５２４〜３０５４８、３０５５４〜３０５８８、３０６６９〜３０７３１、３０９７２〜３０９９７、３０９８４〜３１００５、３１５５１〜３１５７１、３１５５４〜３１５８４、３１７９４〜３１８１８、３１９３２〜３１９５２、３１９３６〜３１９５６、３１９３９〜３１９６３、３１９４６〜３１９７１、３２１１５〜３２１３６、３２１１９〜３２１４０、３２１３０〜３２１５９、３２１７５〜３２２０１、３２４２８〜３２４５４、３２４３６〜３２４６７、３２４５９〜３２４７９、３２４６３〜３２４８９、３２４７４〜３２４９５、３２４８０〜３２５２９、３２５８６〜３２６３８、３２６２１〜３２６４１、３２７５６〜３２７７６、３２８０１〜３２８２５、３２８１６〜３２８４０、３３０７０〜３３１８０、３３１７６〜３３１９９、３３１８２〜３３２０２、３３４１１〜３３４３３、３３５７２〜３３６０１、３３７２９〜３３７５９、３３８４６〜３３８７６、３３８６０〜３３８８２、３３８６６〜３３８８６、３４０６３〜３４１１７、３４２１１〜３４２３２、３４６８６〜３４７１０、３４７３９〜３４８８７、３４９０１〜３４９５０、３５２６３〜３５２９２、３５２７７〜３５３０２、３５３２２〜３５３４６、３５４０８〜３５４３３、３５４２１〜３５４４１、３５４３６〜３５４５７、３５６６５〜３５６８５、３６２４６〜３６２６７、３６２５０〜３６２７０、３６２５３〜３６２７４、３６２５８〜３６２８１、３６２６８〜３６５３１、３６５１６〜３６５３７、３６５７３〜３６５９７、３６５８１〜３６６０３、３６６３２〜３６６６６、３６６７７〜３６６９８、３６６８２〜３６７０２、３６６８９〜３６７５７、３６７４２〜３６７７２、３６８４１〜３６８７４、３６８４６〜３６８７４、３６８６５〜３７０４１、３７０５４〜３７０７３、３７８３８〜３７８５８、３９６６８〜３９６９４、３９６８４〜３９７０５、３９８２０〜３９８４０、３９８３０〜３９８５２及び４０９０９〜４０９３３のうちの長さの等しい部分に１００％相補的な少なくとも８個の連続した核酸塩基部分を含む核酸塩基配列を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含み、前記修飾オリゴヌクレオチドの前記核酸塩基配列が配列番号２に対して少なくとも８５％、９０％、９５％または１００％相補的である、化合物。
【請求項１１】
配列番号２の核酸塩基配列を有するＤＧＡＴ２核酸のヌクレオチド１００４０〜１００５９、１００４４〜１００６３、１００４５〜１００６４、１００５４〜１００７３、１０２１０〜１０２２９、１０２１４〜１０２３４、１０２１７〜１０２３６、１０４９０〜１０５０９、１０４９２〜１０５１１、１０５２２〜１０５４１、１０５３０〜１０５４９、１０５３１〜１０５５０、１０５３２〜１０５５１、１０５３３〜１０５５２、１０５３５〜１０５５４、１０５３６〜１０５５５、１０６４５〜１０６６４、１０６５０〜１０６６９、１０６５５〜１０６７４、１０６５６〜１０６７５、１０６５７〜１０６７６、１０６５９〜１０６７８、１０６６０〜１０６７９、１０６６１〜１０６８０、１０６６３〜１０６８２、１０６６４〜１０６８３、１０６６５〜１０６８４、１０６６６〜１０６８５、１０６６７〜１０６８６、１０６７０〜１０６８９、１０７２７〜１０７４６、１０７３０〜１０７４９、１０７３１〜１０７５０、１０７３２〜１０７５２、１０７３４〜１０７５３、１０７３５〜１０７５４、１０７３７〜１０７５６、１０８１６〜１０８３５、１０８１８〜１０８３７、１０８１９〜１０８４０、１０９４０〜１０９６１、１０９４４〜１０９６３、１１０７４〜１１０９４、１１１２７〜１１１４９、１１１３１〜１１１７８、１１１７０〜１１１９０、１１１７２〜１１１９３、１１１７５〜１１１９６、１１１７８〜１１１９７、１１１９９〜１１２１９、１１２０１〜１１２２１、１１２０３〜１１２２２、１１５５９〜１１５７８、１１５９９〜１１６１８、１２２８５〜１２３０４、１３４４２〜１３４６１、１４４６２〜１４５２２、１４５０４〜１４５２３、１４５０５〜１４５２７、１４６４８〜１４６６９、１４６５１〜１４６７０、１４６５８〜１４６８２、１４６６６〜１４６８６、１４６７３〜１４６９７、１４７４１〜１４７６５、１４７５０〜１４７７４、１４７５７〜１４７７７、１４７５９〜１４７７９、１４７６９〜１４７８９、１４７７２〜１４７９２、１４７７３〜１４７９３、１４８０７〜１４９０１、１４９９３〜１５０１５、１４９９９〜１５０２０、１５２４８〜１５２７３、１５３２１〜１５３４２、１５５７３〜１５６６５、１５８８１〜１５９５２、１６８３０〜１６８５２、１６９００〜１６９２１、１７４５０〜１７４７０、１８１５５〜１８１７６、１８１７３〜１８１９３、１８３１０〜１８３３１、１８３２３〜１８３４４、１８３７９〜１８４３６、２０３００〜２０３２１、２０８３７〜２０８５７、２２４３９〜２２４６３、２２７７１〜２２７９２、２３２４２〜２３２６２、２５０３３〜２５０９２、２５０７５〜２５１０４、２５２４６〜２５２９１、２５７８２〜２５８６０、２５９００〜２５９３４、２５９５０〜２６０３０、２６１６５〜２６１８５、２６１６９〜２６２１９、２６３００〜２６３７２、２６５２０〜２６５５０、２６６２９〜２６６５０、２６７２１〜２６７９９、２７０５０〜２７０７５、２７２３６〜２７２５６、２７３８２〜２７４０２、２７７７５〜２７７９９、２７７８２〜２７８０９、２７８５３〜２７８７７、２８０２６〜２８０４８、２８１２８〜２８１５２、２８４６８〜２８４８８、２８４７６〜２８５００、２９０１０〜２９０３１、２９１４３〜２９１６４、２９２４５〜２９２６５、２９５４８〜２９５８９、２９８２７〜２９８４７、２９８３８〜２９８５８、２９８４４〜２９８７３、３０４８３〜３０５０３、３２４３１〜３２４５０、３２４３２〜３２４５２、３２４４６〜３２４６８、３２４５５〜３２４７５、３２４５９〜３２４７９、３２４６２〜３２４８７、３２５９１〜３２６３９、３３１７９〜３３１９９、３３４１２〜３３４３３、３３７２９〜３３７４９、３４２１１〜３４２３１、３５４３６〜３５４５７、３６２５１〜３６２７２または３６３５４〜３６４２８に相補的な修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項１２】
配列番号２の核酸塩基配列を有するＤＧＡＴ２核酸の核酸塩基１００４０〜１００５９、１００４４〜１００６３、１００４５〜１００６４、１００５４〜１００７３、１０２１０〜１０２２９、１０２１４〜１０２３４、１０２１７〜１０２３６、１０４９０〜１０５０９、１０４９２〜１０５１１、１０５２２〜１０５４１、１０５３０〜１０５４９、１０５３１〜１０５５０、１０５３２〜１０５５１、１０５３３〜１０５５２、１０５３５〜１０５５４、１０５３６〜１０５５５、１０６４５〜１０６６４、１０６５０〜１０６６９、１０６５５〜１０６７４、１０６５６〜１０６７５、１０６５７〜１０６７６、１０６５９〜１０６７８、１０６６０〜１０６７９、１０６６１〜１０６８０、１０６６３〜１０６８２、１０６６４〜１０６８３、１０６６５〜１０６８４、１０６６６〜１０６８５、１０６６７〜１０６８６、１０６７０〜１０６８９、１０７２７〜１０７４６、１０７３０〜１０７４９、１０７３１〜１０７５０、１０７３２〜１０７５２、１０７３４〜１０７５３、１０７３５〜１０７５４、１０７３７〜１０７５６、１０８１６〜１０８３５、１０８１８〜１０８３７、１０８１９〜１０８４０、１０９４０〜１０９６１、１０９４４〜１０９６３、１１０７４〜１１０９４、１１１２７〜１１１４９、１１１３１〜１１１７８、１１１７０〜１１１９０、１１１７２〜１１１９３、１１１７５〜１１１９６、１１１７８〜１１１９７、１１１９９〜１１２１９、１１２０１〜１１２２１、１１２０３〜１１２２２、１１５５９〜１１５７８、１１５９９〜１１６１８、１２２８５〜１２３０４、１３４４２〜１３４６１、１４４６２〜１４５２２、１４５０４〜１４５２３、１４５０５〜１４５２７、１４６４８〜１４６６９、１４６５１〜１４６７０、１４６５８〜１４６８２、１４６６６〜１４６８６、１４６７３〜１４６９７、１４７４１〜１４７６５、１４７５０〜１４７７４、１４７５７〜１４７７７、１４７５９〜１４７７９、１４７６９〜１４７８９、１４７７２〜１４７９２、１４７７３〜１４７９３、１４８０７〜１４９０１、１４９９３〜１５０１５、１４９９９〜１５０２０、１５２４８〜１５２７３、１５３２１〜１５３４２、１５５７３〜１５６６５、１５８８１〜１５９５２、１６８３０〜１６８５２、１６９００〜１６９２１、１７４５０〜１７４７０、１８１５５〜１８１７６、１８１７３〜１８１９３、１８３１０〜１８３３１、１８３２３〜１８３４４、１８３７９〜１８４３６、２０３００〜２０３２１、２０８３７〜２０８５７、２２４３９〜２２４６３、２２７７１〜２２７９２、２３２４２〜２３２６２、２５０３３〜２５０９２、２５０７５〜２５１０４、２５２４６〜２５２９１、２５７８２〜２５８６０、２５９００〜２５９３４、２５９５０〜２６０３０、２６１６５〜２６１８５、２６１６９〜２６２１９、２６３００〜２６３７２、２６５２０〜２６５５０、２６６２９〜２６６５０、２６７２１〜２６７９９、２７０５０〜２７０７５、２７２３６〜２７２５６、２７３８２〜２７４０２、２７７７５〜２７７９９、２７７８２〜２７８０９、２７８５３〜２７８７７、２８０２６〜２８０４８、２８１２８〜２８１５２、２８４６８〜２８４８８、２８４７６〜２８５００、２９０１０〜２９０３１、２９１４３〜２９１６４、２９２４５〜２９２６５、２９５４８〜２９５８９、２９８２７〜２９８４７、２９８３８〜２９８５８、２９８４４〜２９８７３、３０４８３〜３０５０３、３２４３１〜３２４５０、３２４３２〜３２４５２、３２４４６〜３２４６８、３２４５５〜３２４７５、３２４５９〜３２４７９、３２４６２〜３２４８７、３２５９１〜３２６３９、３３１７９〜３３１９９、３３４１２〜３３４３３、３３７２９〜３３７４９、３４２１１〜３４２３１、３５４３６〜３５４５７、３６２５１〜３６２７２または３６３５４〜３６４２８のうちの長さの等しい部分に相補的な少なくとも８個の連続した核酸塩基部分を含む核酸塩基配列を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含み、前記修飾オリゴヌクレオチドの前記核酸塩基配列が配列番号２に対して相補的である、化合物。
【請求項１３】
配列番号２のヌクレオチド２６７７８〜２６７９７、２３２４２〜２３２６１、２６６３０〜２６６４９、１５２５１〜１５２７０、２８０２６〜２８０４５、３５４３６〜３５４５５、１０８２０〜１０８３６、２３２４６〜２３２６２内に相補的な長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項１４】
配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有し、長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項１５】
配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項１６】
配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する長さ８〜８０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含み、前記修飾オリゴヌクレオチドは、
複数の結合されたデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
前記ギャップセグメントは、前記５’ウイングセグメントと前記３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、修飾糖を含む、化合物。
【請求項１７】
配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９及び３２９２に示される配列のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する長さ２０個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含み、前記修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合されたデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
前記ギャップセグメントは、前記５’ウイングセグメントと前記３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである、化合物。
【請求項１８】
配列番号４１９８及び４３７３に示される配列のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する長さ１７個の結合されたヌクレオシドの修飾オリゴヌクレオチドを含み、前記修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合されたデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
３個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
４個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
前記ギャップセグメントは、前記５’ウイングセグメントと前記３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである、化合物。
【請求項１９】
前記オリゴヌクレオチドが、配列番号１または２に対して、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または１００％相補的である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、少なくとも１つの修飾糖または少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
前記修飾ヌクレオシド間結合がホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
前記修飾糖が二環式糖である、請求項２０または２１に記載の化合物。
【請求項２３】
前記二環式糖が、４’−（ＣＨ２）−Ｏ−２’（ＬＮＡ）；４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’（ＥＮＡ）；及び４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’（ｃＥｔ）からなる群から選択される、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
前記修飾糖が２’−Ｏ−メトキシエチルである、請求項２０または２１に記載の化合物。
【請求項２５】
前記修飾核酸塩基が５−メチルシトシンである、請求項２０〜２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、
複数の結合されたデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
前記ギャップセグメントは、前記５’ウイングセグメントと前記３’ウイングセグメントとの間に直接隣接して配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、修飾糖を含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２７】
一本鎖である、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２８】
二本鎖である、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２９】
リボヌクレオチドを含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３０】
デオキシリボヌクレオチドを含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３１】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３２】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、１２〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３３】
前記修飾オリゴヌクレオチドが、１５〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３４】
配列番号１４２３に示される配列からなる核酸塩基配列を有する２０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含み、前記修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
前記ギャップセグメントは、前記５’ウイングセグメントと前記３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである、化合物。
【請求項３５】
配列番号１４２３に示される配列からなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドからなり、前記修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
前記ギャップセグメントは、前記５’ウイングセグメントと前記３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである、化合物。
【請求項３６】
次式：Ｔｅｓ  Ｇｅｓ  ｍＣｅｓ  ｍＣｅｓ  Ａｅｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ｔｄｓ  Ｇｄｓ  Ａｄｓ  Ｇｄｓ  ｍＣｄｓ  Ｔｅｓ  Ｔｅｓ  ｍＣｅｓ  Ａｅｓ  ｍＣｅ（配列番号１４２３）
（式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５’−メチルシトシン、
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’−Ｏ−メトキシエチル修飾ヌクレオシド、
ｄ＝２’−デオキシヌクレオシド、及び
ｓ＝ホスホロチオエートヌクレオシド間結合）
に従った修飾オリゴヌクレオチドを含む、化合物。
【請求項３７】
コンジュゲート基を更に含む、先行請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３８】
コンジュゲートされたＧａｌＮＡｃ部分を更に含む、先行請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３９】
次式従った修飾オリゴヌクレオチドまたはその塩。
【化１】
2018525030.tif 000335
【請求項４０】
請求項１〜３９のいずれか一項に記載の化合物の薬学的に許容される塩からなる、化合物。
【請求項４１】
前記薬学的に許容される塩がナトリウム塩である、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４２】
前記薬学的に許容される塩がカリウム塩である、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４３】
請求項１〜４２のいずれか一項に記載の化合物もしくは修飾オリゴヌクレオチドまたはその塩と、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
【請求項４４】
治療に使用するための、先行請求項のいずれか一項に記載の化合物または修飾オリゴヌクレオチドを含む、組成物。
【請求項４５】
個体のＤＧＡＴ２に関連する疾患を治療、予防または改善する方法であって、前記個体に請求項１〜４４のいずれか一項に記載の化合物もしくは組成物またはその塩を投与することを含み、これにより、前記疾患を治療、予防または改善する、前記方法。
【請求項４６】
前記疾患が、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、リポジストロフィーまたは部分型リポジストロフィーである、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記化合物または組成物を投与することが、トリグリセリド合成、脂質合成、インスリン抵抗性、インスリンシグナル伝達、インスリン感受性及び心血管リスクプロファイルを減少、阻害または改善する、請求項４５及び４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
細胞中のＤＧＡＴ２の発現を阻害する方法であって、前記細胞を、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の化合物または組成物と接触させることを含み、これにより、前記細胞中のＤＧＡＴ２の発現を阻害する、前記方法。
【請求項４９】
前記細胞が、任意の個体の肝臓中または白色脂肪組織中にある、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記個体が、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、リポジストロフィーもしくは部分型リポジストロフィーを有するか、そのリスクのある、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
ＤＧＡＴ２に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の肝臓または白色脂肪組織におけるトリグリセリド合成、脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害する方法であって、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の化合物または組成物を前記個体に投与することを含み、これにより、前記個体の肝臓または白色脂肪組織におけるトリグリセリド合成、脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害する、前記方法。
【請求項５２】
前記個体が、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、リポジストロフィーもしくは部分型リポジストロフィーを有するか、そのリスクのある、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記化合物または組成物が、前記個体に非経口的に投与される、請求項５１または５２に記載の方法。
【請求項５４】
ＤＧＡＴ２に関連する疾患を治療、予防または改善するための、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の化合物または組成物の使用。
【請求項５５】
前記疾患が、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、リポジストロフィーまたは部分型リポジストロフィーである、請求項５４に記載の使用。
【請求項５６】
ＤＧＡＴ２に関連する疾患を治療、予防または改善するための薬剤の製造または調製における、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の化合物または組成物の使用。
【請求項５７】
前記疾患が、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、リポジストロフィーまたは部分型リポジストロフィーである、請求項５６に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、電子形式の配列表とともに出願されている。配列表は、２０１６年６月８日に作成された１ｍｂのサイズのＢＩＯＬ０１７８ＷＯＳＥＱ＿ＳＴ２５．ｔｘｔと題されたファイルとして提出される。電子形式の配列表中の情報は、その全体が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
本実施形態は、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２（ＤＧＡＴ２）特異的阻害剤を個体に投与することによって、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）及び肝臓脂肪症を含む非アルコール性脂肪性肝疾患に関連する疾患を治療、予防または改善するための方法、化合物及び組成物を提供する。
【背景技術】
【０００３】
ＮＡＳＨ（非アルコール性脂肪性肝炎）を含む非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、メタボリックシンドロームの肝臓での表現型であると考えられており（Ｍａｒｃｈｅｓｉｎｉ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００３；３７：９１７−９２３）、過剰なアルコール摂取歴のない患者における肝臓中のトリグリセリドの蓄積を特徴とする。ＮＡＦＬＤ患者の大部分が肥満または病的肥満であり、インスリン抵抗性を伴う（Ｂｙｒｎｅ  ＣＤ  ａｎｄ  Ｔａｒｇｈｅｒ  Ｇ．Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ  ２０１５  Ａｐｒ；６２（１Ｓ）：Ｓ４７−Ｓ６４）。ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨの発生率は、肥満症の有病率の増加と一致して世界的に急速に増加しており、現在最も一般的な慢性肝臓疾患である。近年、ＮＡＦＬＤ及びＮＡＳＨの発生率は、ほぼ中年の集団で、それぞれ４６％及び１２％であると報告された（Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＣＤ，ｅｔ  ａｌ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２０１１；１４０：１２４−１３１）。
【０００４】
ＮＡＦＬＤは、肝臓脂肪症のみが観察される単純脂肪症と、肝臓脂肪症とともに小葉内炎症及び肝細胞の風船様変性が観察されるＮＡＳＨとに分類される。ＮＡＳＨを有するＮＡＦＬＤ患者の割合は、未だ明確ではないが、２０〜４０％の範囲であると思われる。ＮＡＳＨは、進行性疾患であり、肝硬変及び肝細胞癌に至る場合がある（Ｆａｒｒｅｌｌ  ＧＣ  ａｎｄ  Ｌａｒｔｅｒ  ＣＺ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００６；４３：Ｓ９９  Ｓ１１２；Ｃｏｈｅｎ  ＪＣ，ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０１１；３３２：１５１９−１５２３）。ＮＡＳＨ患者の２０％が肝硬変を発症すると報告されており、ＮＡＳＨ肝硬変患者の３０〜４０％が肝臓関連死を生じる（ＭｃＣｕｌｌｏｕｇｈ  ＡＪ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  ２００６；４０  Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ１７−Ｓ２９）。近年、ＮＡＳＨは、米国において３番目に多い肝移植の適応症となっている（Ｃｈａｒｌｔｏｎ  ＭＲ，ｅｔ  ａｌ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２０１１；１４１：１２４９−１２５３）。
【０００５】
現在、ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨの主な治療法は、食事及び運動による生活習慣の変更である。しかしながら、ＮＡＦＬＤの肥満患者は、多くの場合、生活習慣の改善を維持するのが困難であるので、薬理学的治療法が不可欠である。
【０００６】
リポジストロフィー症候群は、肝臓及び筋肉における異所性脂肪沈着、ならびにインスリン抵抗性、糖尿病、脂質異常症及び脂肪性肝疾患の発現をきたす脂肪組織の選択的消失を特徴とする、稀な代謝疾患の一群である（Ｓｈｕｌｍａｎ  ＧＩ．Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１４；３７１：１１３１−１１４１；Ｇａｒｇ  Ａ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ  ２０１１；９６：３３１３−３３２５；Ｃｈａｎ  ＪＬ  ａｎｄ  Ｏｒａｌ  ＥＡ．Ｅｎｄｏｃｒ  Ｐｒａｃｔ  ２０１０；１６：３１０−３２３；Ｇａｒｇ  Ａ．Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２００４；３５０：１２２０−１２３４）。これらの患者は、重篤な関連合併症（冠動脈疾患、糖尿病性腎症、肝硬変及び膵炎）のリスクを低減するために糖尿病及び高ＴＧレベルの治療に主に用いられる、現在の治療法には不応性であることから、これらの症候群は、重大なアンメットメディカルニーズを構成している。
【０００７】
全身型リポジストロフィーよりも部分型リポジストロフィーのほうが有病率が高い（推定（１００）万人中約２〜３人）が、有病率の程度は、これらの患者が概ね過小診断されているため、わかっていない（Ｃｈａｎ  ＪＬ  ａｎｄ  Ｏｒａｌ  ＥＡ．Ｅｎｄｏｃｒ  Ｐｒａｃｔ  ２０１０；１６：３１０−３２３；Ｇａｒｇ  Ａ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ  ２０１１；９６：３３１３−３３２５）。部分型リポジストロフィーは、後天性部分型リポジストロフィー（ＡＰＬ）または家族性部分型リポジストロフィー（ＦＰＬ）に更に分類される。ＰＬの診断は、主に臨床的であり、インスリン抵抗性（顕性糖尿病の有無にかかわらない）、高トリグリセリド血症の形態である著しい脂質異常症、及び脂肪肝の三主徴を示す患者において考慮する必要がある（Ｈｕａｎｇ−Ｄｏｒａｎ  Ｉ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  ２０１０；２０７：２４５−２５５）。患者は、多くの場合、高用量のインスリンを必要とする、糖尿病及び重篤なインスリン抵抗性を示す。
【０００８】
現在の治療は、カロリー摂取量の削減及び運動によるエネルギー消費の増加などの生活習慣の変更を伴う。重篤なインスリン抵抗性の治療に使用されている従来の治療法（メトホルミン、チアゾリジンジオン、ＧＬＰ−１、インスリン）及び／または高ＴＧの治療に使用されている従来の治療法（食事脂肪制限、フィブラート、魚油）は、これらの患者においてあまり有効ではない（Ｃｈａｎ  ＪＬ  ａｎｄ  Ｏｒａｌ  ＥＡ．Ｅｎｄｏｃｒ  Ｐｒａｃｔ  ２０１０；１６：３１０−３２３；Ｇａｒｇ  Ａ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ  ２０１１）。部分型リポジストロフィーは、重大なアンメットメディカルニーズがある、超希少疾患である。この病態に関連する糖尿病、ＮＡＳＨ及び／または高トリグリセリド血症は、重篤な合併症に至る場合がある（Ｈａｎｄｅｌｓｍａｎ  Ｙ，ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒ  Ｐｒａｃｔ  ２０１３；１９：１０７  １１６）。
【０００９】
ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ）は、ｓｎ  １，２ジアシルグリセロール（ＤＡＧ）のアシル−ＣｏＡとの結合を促進することによって、トリグリセリド（ＴＧ）合成の最終段階を触媒する。ＤＧＡＴには２つのアイソフォーム（ＤＧＡＴ１及びＤＧＡＴ２）があり、ＤＧＡＴ１及びＤＧＡＴ２の両方がＴＧ合成に重要な役割を果たしていることが研究により示されている。ＤＧＡＴ１が小腸及び白色脂肪組織（ＷＡＴ）で最も高度に発現されるのに対し、ＤＧＡＴ２は肝臓及びＷＡＴで主に発現される（Ｃａｓｅｓ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １９９８；９５，１３０１８  １３０２３；Ｃａｓｅｓ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２００１；２７６，３８８７０−３８８７６）。ＤＧＡＴ１及びＤＧＡＴ２の両方がＤＡＧまたはモノアシルグリセロール（ＭＡＧ）及びアシル−ＣｏＡを基質として使用するＴＧ合成で同じ反応を触媒するが、ＤＧＡＴ１及びＤＧＡＴ２は、その組織発現だけでなく、触媒特性（Ｃａｏ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ  ２００７；４８：５８３−５９１；Ｃｈｅｎｇ  Ｄ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２００８；２８３：２９８０２−２９８１１）、細胞内局在（Ｓｔｏｎｅ  ＳＪ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２００４；２７９：１１７６７−１１７７６）及び生理学的制御（Ｍｅｅｇａｌｌａ  ＲＬ，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  ２００２，２９８，３１７−３２３）における相違によって機能的に区別される。例えば、肥満症の齧歯類モデルにおいて、アンチセンスオリゴヌクレオチド処置による、ＤＧＡＴ１ではなく、ＤＧＡＴ２の抑制は、肥満とは関係なく、肝臓脂肪症及び血中脂質レベルを改善し、これらの作用は、肝臓脂質合成の減少に関連することがデータにより示された（Ｙｕ  ＸＸ，ｅｔ  ａｌ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００５；４２：３６２−３７１）。
【００１０】
これらの研究は、ＤＧＡＴ２の阻害が、トリグリセリドを減少させ、インスリン感受性を改善し、肝臓脂肪症を軽減させることによって、ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨを改善し得、更にリポジストロフィー症候群を有する患者の代謝プロファイルを改善し得ることを実証している。
【発明の概要】
【００１１】
本明細書で提供される本実施形態は、ＮＡＳＨなどのＮＡＦＬＤ及び部分型リポジストロフィーなどのリポジストロフィー症候群を治療し、予防し、改善し、またはその進行を遅らせるのに有用な効力のある及び／または忍容性のある化合物及び組成物を目的とする。
【００１２】
本明細書で提供されるいくつかの実施形態は、先に公開された出願ＷＯ２００５／０１９４１８のアンチセンスオリゴヌクレオチドよりも効力があり、かつ有効である、いくつかのアンチセンス化合物を目的とする。本明細書で提供されるいくつかの実施形態は、効力があり、かつ忍容性のある化合物及び組成物を目的とする。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
前述の全般的な説明及び以下の詳細な説明は、いずれも例示的かつ説明的なものにすぎず、特許請求される本発明を制限するものではないことを理解されたい。本明細書中、単数形の使用は、特に明記しない限り、複数を含む。本明細書で使用されるとき、「ｏｒ（または）」の使用は、別の記載がない限り、「ａｎｄ／ｏｒ（及び／または）」を意味する。更に、「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ（含む）」という用語ならびに「ｉｎｃｌｕｄｅｓ（含む）」及び「ｉｎｃｌｕｄｅｄ（含む）」などの他の形の使用は、限定的ではない。また、「要素」または「成分」などの用語は、特に明記しない限り、１単位を含む要素及び成分と、１つを超える下位単位を含む要素及び成分との両方を包含する。
【００１４】
本明細書で使用される段落見出しは、単に構成上の目的であり、記載される主題の限定を意図するものではない。限定するものではないが、特許、特許出願、記事、書籍、論文ならびにＧｅｎＢａｎｋ及びＮＣＢＩリファレンス配列記録を含む、本出願に引用される全ての文献または文献の一部は、本明細書で考察される文献の一部について、またその全体が参照により明示的に本明細書に援用される。
【００１５】
本明細書に含まれる実施例において各配列番号で記載される配列は、糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸塩基に対する何らかの修飾に依存しないことを理解されたい。したがって、配列番号によって定義されるアンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸塩基に対する修飾を１つ以上含み得る。ＩＳＩＳ番号（ＩＳＩＳ＃）によって記載されるアンチセンス化合物は、核酸塩基配列、化学修飾及びモチーフの組み合わせを示す。
【００１６】
特に指示がない限り、次の用語は、次の意味を有する。
【００１７】
「２’−デオキシヌクレオシド」とは、天然に生じるデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）に認められる、２’−Ｈ（Ｈ）フラノシル糖部分を含むヌクレオシドを意味する。特定の実施形態において、２’−デオキシヌクレオシドは、修飾核酸塩基を含み得、あるいはＲＮＡ核酸塩基（例えば、ウラシル）を含み得る。
【００１８】
「２’−Ｏ−メトキシエチル」（２’−ＭＯＥ及び２’−Ｏ（ＣＨ２）２−ＯＣＨ３も同様）は、糖環、例えば、フラノース環の２’位におけるＯ−メトキシ−エチル修飾を指す。２’−Ｏ−メトキシエチルで修飾された糖は、修飾糖である。
【００１９】
「２’−ＭＯＥヌクレオシド」（２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドも同様）とは、２’−ＭＯＥで修飾された糖部分を含むヌクレオシドを意味する。
【００２０】
「２’−置換ヌクレオシド」または「２−修飾ヌクレオシド」とは、２’−置換されたまたは２’−修飾された糖部分を含むヌクレオシドを意味する。本明細書で使用されるとき、糖部分に関する「２’−置換」または「２−修飾」とは、ＨまたはＯＨ以外の２’−置換基を含むフラノシル糖部分を意味する。
【００２１】
「３’標的部位」は、特定のアンチセンス化合物の最も３’側のヌクレオチドに相補的である標的核酸のヌクレオチドを指す。
【００２２】
「５’標的部位」は、特定のアンチセンス化合物の最も５’側のヌクレオチドに相補的である標的核酸のヌクレオチドを指す。
【００２３】
「５−メチルシトシン」とは、５位にメチル基が結合した修飾されたシトシンを意味する。５−メチルシトシンは、修飾核酸塩基である。
【００２４】
「約」は、値の±１０％以内を意味する。例えば、「ＤＧＡＴ２の少なくとも約７０％の阻害をもたらす化合物」と記載される場合、それは、ＤＧＡＴ２レベルが６０％〜８０％の範囲内で阻害されることを含意する。
【００２５】
「投与」または「投与すること」は、本明細書で提供される化合物または組成物を、その意図された機能を果たすように、個体に導入する経路を指す。使用することができる投与経路の例には、皮下、静脈内または筋肉内への注射または注入などの非経口投与が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２６】
「同時に投与される」または「共投与」とは、２つ以上の化合物の投与を意味し、患者においてその両方の薬理作用が顕在化される任意の方法での投与である。同時投与は、両方の剤を単一の医薬組成物、同じ剤形、同じ投与経路または同じ時間に投与することを必要としない。両方の剤の作用が同時に顕在化される必要はない。作用は、ある期間にわたって重複しているだけでよく、同じ時間幅を有する必要はない。同時投与または共投与は、並行投与または順次投与を包含する。
【００２７】
「改善」は、関連する疾患、障害または病態の少なくとも１つの指標、徴候または症状の軽減を指す。特定の実施形態において、改善は、病態または疾患の１つ以上の指標の進行の遅延または減速を含む。指標の重症度は、当業者に知られている、主観的または客観的尺度によって決定することができる。
【００２８】
「動物」は、ヒトまたはヒト以外の動物を指し、限定するものではないが、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ及び非ヒト霊長類（サル及びチンパンジーを含むが、これらに限定されない）が含まれる。
【００２９】
「アンチセンス活性」とは、アンチセンス化合物のその標的核酸へのハイブリダイゼーションに帰する何らかの検出可能または測定可能な活性を意味する。特定の実施形態において、アンチセンス活性は、標的核酸または当該標的核酸によってコードされているタンパク質の量または発現が、当該標的に対するアンチセンス化合物の非存在下での標的核酸レベルまたは標的タンパク質レベルと比較して、減少することである。
【００３０】
「アンチセンス化合物」とは、アンチセンスオリゴヌクレオチドと、任意選択でコンジュゲート基または末端基などの１つ以上の更なる特徴とを含む、化合物を意味する。アンチセンス化合物の例には、一本鎖及び二本鎖化合物が挙げられる。例は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｓＲＮＡ及び占有に基づく（ｏｃｃｕｐａｎｃｙ−ｂａｓｅｄ）化合物である。
【００３１】
「アンチセンス阻害」とは、アンチセンス化合物の非存在下での標的核酸レベルと比較した、標的核酸に相補的なアンチセンス化合物の存在下での標的核酸レベルの減少を意味する。
【００３２】
「アンチセンス機序」は、化合物と標的核酸とのハイブリダイゼーションを伴う全ての機序であり、このハイブリダイゼーションの結果または作用は、例えば、転写またはスプライシングを含む細胞機構の停止を伴う、標的分解または標的占有のいずれかである。
【００３３】
「アンチセンスオリゴヌクレオチド」とは、標的核酸またはその領域もしくはセグメントに相補的な核酸塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを意味する。特定の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的核酸またはその領域もしくはセグメントに特異的にハイブリダイズ可能である。
【００３４】
「二環式ヌクレオシド」または「ＢＮＡ」とは、二環式糖部分を含むヌクレオシドを意味する。本明細書で使用されるとき、「二環式糖」または「二環式糖部分」とは、２つの環を含み、第２の環が第１の環の原子中の２つを接続する架橋によって形成されることによって二環構造が形成されている、修飾糖部分を意味する。特定の実施形態において、二環式糖部分の第１の環は、フラノシル部分である。特定の実施形態において、二環式糖部分は、フラノシル部分を含まない。
【００３５】
「分岐基」とは、少なくとも３つの基との共有結合を形成することができる、少なくとも３つの位置を有する原子団を意味する。特定の実施形態において、分岐基は、コンジュゲートリンカー及び／または切断可能部分を介して、係留リガンドをオリゴヌクレオチドに接続するための複数の反応部位を提供する。
【００３６】
「細胞標的化部分」とは、１つ以上の特定の細胞型に結合することができる、コンジュゲート基またはコンジュゲート基の一部を意味する。
【００３７】
「切断可能部分」とは、生理学的条件下、例えば、細胞、動物またはヒトの内部で切断される結合または原子団を意味する。
【００３８】
「ｃＥｔ」または「拘束エチル」とは、４’−炭素と２’−炭素とを接続する架橋を含み、当該架橋が式：４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’を有する、二環式糖部分を意味する。
【００３９】
「化学修飾」とは、天然に生じる同等物と比較したときの化合物における化学的相違を意味する。オリゴヌクレオチドの化学修飾には、ヌクレオシド修飾（糖部分の修飾及び核酸塩基の修飾を含む）及びヌクレオシド間結合修飾が含まれる。オリゴヌクレオチドに関して、核酸塩基配列のみの相違は化学修飾に含まれない。
【００４０】
「化学的に異なる領域」は、同じアンチセンス化合物の別の領域とは何らかの形で化学的に異なるアンチセンス化合物の領域を指す。例えば、２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオチドを有する領域は、２’−Ｏ−メトキシエチル修飾を含まないヌクレオチドを有する領域とは化学的に異なる。
【００４１】
「キメラアンチセンス化合物」とは、少なくとも２つの化学的に異なる領域を有し、それぞれの位置が複数のサブユニットを有するアンチセンス化合物を意味する。
【００４２】
「切断可能な結合」とは、開裂が可能な任意の化学結合を意味する。特定の実施形態において、切断可能な結合は、アミド、ポリアミド、エステル、エーテル、ホスホジエステルの一方もしくは両方のエステル、リン酸エステル、カルバメート、ジスルフィドまたはペプチドのうちから選択される。
【００４３】
「切断可能部分」とは、生理学的条件下、例えば、細胞、動物またはヒトの内部で切断される結合または原子団を意味する。
【００４４】
オリゴヌクレオチドに関する「相補的」とは、当該オリゴヌクレオチドまたはその１つ以上の領域の核酸塩基配列と、別のオリゴヌクレオチドもしくは核酸またはその１つ以上の領域の核酸塩基配列とが、この２つの核酸塩基配列を逆方向に整列させたとき、一致することを意味する。核酸塩基マッチまたは相補的核酸塩基は、本明細書に記載されるとき、別の記載がない限り、アデニン（Ａ）とチミン（Ｔ）、アデニン（Ａ）とウラシル（Ｕ）、シトシン（Ｃ）とグアニン（Ｇ）、及び５−メチルシトシン（ｍＣ）とグアニン（Ｇ）に限定される。相補的なオリゴヌクレオチド及び／または核酸は、各ヌクレオシドで核酸塩基相補性を有する必要はなく、１つ以上の核酸塩基ミスマッチを含み得る。対照的に、オリゴヌクレオチドに関する「完全に相補的」または「１００％相補的」とは、当該オリゴヌクレオチドが、いかなる核酸塩基ミスマッチも含まずに各ヌクレオシドで核酸塩基マッチを有することを意味する。
【００４５】
「コンジュゲート基」とは、親化合物、例えば、オリゴヌクレオチドに直接的または間接的に結合している原子団を意味する。
【００４６】
「コンジュゲートリンカー」とは、親化合物、例えば、オリゴヌクレオチドにコンジュゲート基を接続する原子団を意味する。
【００４７】
「拘束エチルヌクレオシド」（ｃＥｔヌクレオシドも同様）とは、４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’架橋を含む二環式糖部分を含むヌクレオシドを意味する。
【００４８】
オリゴヌクレオチドとの関係における「連続した」は、互いに直接隣接するヌクレオシド、核酸塩基、糖部分またはヌクレオシド間結合を指す。例えば、「連続した核酸塩基」とは、互いに直接隣接する核酸塩基を意味する。
【００４９】
「設計」または「設計された」は、選択された核酸分子に特異的にハイブリダイズするオリゴマー化合物を設計するプロセスを指す。
【００５０】
「ＤＧＡＴ２」とは、ＤＧＡＴ２の任意の核酸またはタンパク質を意味する。「ＤＧＡＴ２核酸」とは、ＤＧＡＴ２をコードする任意の核酸を意味する。例えば、特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２核酸には、ＤＧＡＴ２をコードするＤＮＡ配列、ＤＧＡＴ２をコードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列（イントロン及びエクソンを含むゲノムＤＮＡを含む）（タンパク質をコードしない（すなわち、非コード）ＲＮＡ配列を含む）及びＤＧＡＴ２をコードするｍＲＮＡ配列が含まれる。「ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡ」は、ＤＧＡＴ２タンパク質をコードするｍＲＮＡを意味する。
【００５１】
「ＤＧＡＴ２特異的阻害剤」は、ＤＧＡＴ２  ＲＮＡ及び／またはＤＧＡＴ２タンパク質の発現または活性を分子レベルで特異的に阻害することができる任意の剤を指す。例えば、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤には、ＤＧＡＴ２  ＲＮＡ及び／またはＤＧＡＴ２タンパク質の発現を阻害することができる、核酸（アンチセンス化合物を含む）、ペプチド、抗体、小分子及び他の剤が含まれる。
【００５２】
「用量」とは、１回の投与または指定された期間内に提供される薬剤の指定量を意味する。特定の実施形態において、ある用量は、２回以上のボーラス、錠剤または注射で投与することができる。例えば、特定の実施形態において、皮下投与が望ましい場合、所望の用量は、１回の注射では容易に対応できない体積を必要とする場合がある。このような実施形態において、２回以上の注射を使用して、所望の用量を達成することができる。特定の実施形態において、ある用量は、個体の注射部位反応を最小限に抑えるために、２回以上の注射で投与してもよい。他の実施形態において、薬剤は、長期間にわたる注入または持続注入により投与される。用量は、時間、日、週または月あたりの薬剤の量として示すことができる。
【００５３】
「投薬レジメン」は、１つ以上の所望の効果を達成するために設計された用量の組み合わせである。
【００５４】
「二本鎖アンチセンス化合物」とは、互いに相補的であり二本鎖を形成する２つのオリゴマー化合物を含み、当該２つのオリゴマー化合物のうちの１つは、アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物を意味する。
【００５５】
「有効な量」とは、当該剤を必要とする個体において、所望の生理学的結果をもたらすのに十分な化合物の量を意味する。有効な量は、治療される個体の健康状態及び身体状態、治療される個体の分類群、組成物の処方、個体の医学的状態の評価、ならびに他の関連因子に応じて、個体間で変動し得る。
【００５６】
「有効性」とは、所望の効果をもたらす能力を意味する。
【００５７】
「発現」は、遺伝子のコード情報が、細胞内に存在して作用する構造に変換される、全ての機能を含む。このような構造には、転写及び翻訳の産物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
オリゴヌクレオチドに関する「完全に修飾された」とは、各ヌクレオシドが修飾されている、修飾オリゴヌクレオチドを意味する。オリゴヌクレオチドに関する「一様に修飾された」とは、各ヌクレオシドの少なくとも１つの修飾が同じである、完全に修飾されたオリゴヌクレオチドを意味する。例えば、一様に修飾されたオリゴヌクレオチドのヌクレオシドは、それぞれが２’−ＭＯＥ修飾を有するが、異なる核酸塩基修飾を有し得、またヌクレオシド間結合が異なっていてもよい。
【００５９】
「ギャップマー」とは、複数のヌクレオシドを有する内側領域が、１つ以上のヌクレオシドを有する外側領域との間に配置されており、ここで、内側領域に含まれるヌクレオシドは、外側領域に含まれる１つ以上のヌクレオシドとは化学的に異なる、キメラアンチセンス化合物を意味する。内側領域は、「ギャップ」と呼ぶことができ、外側領域は、「ウイング」と呼ぶことができる。特定の実施形態において、ギャップマーの構造は、ＲＮａｓｅ  Ｈ切断をサポートすることができる。
【００６０】
「ハイブリダイゼーション」とは、相補的なオリゴヌクレオチド及び／または核酸分子の対合またはアニーリングを意味する。特定の機序に限定されるものではないが、最も一般的なハイブリダイゼーションの機序には、ワトソン・クリック型、フーグスティーン型または逆フーグスティーン型の水素結合であり得る、相補的な核酸塩基間での水素結合が関与する。特定の実施形態において、相補的な核酸分子には、アンチセンス化合物と核酸標的が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、相補的な核酸分子には、アンチセンスオリゴヌクレオチドと核酸標的が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６１】
「疾患、障害及び／もしくは病態を有する動物、またはそのリスクのある動物を特定する」とは、当該疾患、障害及び／もしくは病態の診断を受けた動物を特定すること、または当該疾患、障害及び／もしくは病態を発症する素因のある動物を特定することを意味する。このような特定は、個体の病歴の評価及び標準的な臨床検査または臨床評価を含む任意の方法によって達成することができる。
【００６２】
「直接隣接する」とは、直接隣接する同じ種類の要素と要素との間に介在する要素が存在しない（例えば、隣接する核酸塩基と核酸塩基との間に介在する核酸塩基が存在しない）ことを意味している。
【００６３】
「個体」とは、処置または治療のために選択されるヒトまたはヒト以外の動物を意味する。
【００６４】
「発現または活性を阻害する」は、未処置または対照試料における発現または活性と比較した、発現または活性の低減、遮断を指し、必ずしも発現または活性の完全な排除を示すものではない。
【００６５】
「ヌクレオシド間結合」とは、オリゴヌクレオチドにおいて、隣接するヌクレオシド間の共有結合を形成する基または結合を意味する。本明細書で使用されるとき、「修飾ヌクレオシド間結合（修飾されたヌクレオシド間結合）」とは、天然に生じるリン酸ヌクレオシド間結合以外の任意のヌクレオシド間結合を意味する。天然に生じる非リン酸結合は、本明細書中、修飾ヌクレオシド間結合と称する。「ホスホロチオエート結合」とは、架橋していない酸素原子のうちの１つを硫黄原子で置き換えることによって、リン酸結合のホスホジエステル結合が修飾されている、ヌクレオシド間の結合を意味する。ホスホロチオエート結合は、修飾ヌクレオシド間結合である。
【００６６】
「延長型」アンチセンスオリゴヌクレオチドは、本明細書で開示されるアンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、親オリゴヌクレオチドに対して、１つ以上の追加のヌクレオシドを有するものである。
【００６７】
「線状修飾糖（線状修飾された糖）」または「線状修飾糖部分（線状修飾された糖部分）」とは、非環式または非架橋の修飾を含む修飾糖部分を意味する。このような線状修飾は、二環式糖修飾とは異なる。
【００６８】
「結合されたデオキシヌクレオシド」とは、核酸塩基（Ａ、Ｇ、Ｃ、Ｔ、Ｕ）がデオキシリボースによって置換され、それがリン酸エステルによって結合されて、ヌクレオチドを形成したものを意味する。
【００６９】
「結合されたヌクレオシド」は、連続した配列で接続されたヌクレオシドである（すなわち、結合されたヌクレオシド間に追加のヌクレオシドが存在しない）。
【００７０】
本明細書で使用されるとき、「ミスマッチ」または「非相補的」とは、第１のオリゴヌクレオチドと第２のオリゴヌクレオチドを整列させたとき、第１のオリゴヌクレオチドの核酸塩基が第２のオリゴヌクレオチドまたは標的核酸の対応する核酸塩基と相補的でないことを意味する。例えば、ユニバーサル核酸塩基のイノシン及びヒポキサンチンは、少なくとも１つの核酸塩基とハイブリダイズすることができるが、ハイブリダイズする核酸塩基に対しては依然としてミスマッチまたは非相補的である。別の例として、第１のオリゴヌクレオチドと第２のオリゴヌクレオチドとを整列させたとき、第２のオリゴヌクレオチドまたは標的核酸の対応する核酸塩基にハイブリダイズすることができない第１のオリゴヌクレオチドの核酸塩基は、ミスマッチまたは非相補的核酸塩基である。
【００７１】
「修飾核酸塩基」とは、アデニン、シトシン、グアニン、チミジンまたはウラシル以外の任意の核酸塩基を意味する。「非修飾核酸塩基」とは、プリン塩基のアデニン（Ａ）及びグアニン（Ｇ）と、ピリミジン塩基のチミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）及びウラシル（Ｕ）とを意味する。「ユニバーサル塩基」は、５つの非修飾核酸塩基のいずれか１つと対合できる核酸塩基である。
【００７２】
「修飾ヌクレオシド」とは、修飾糖部分及び／または修飾核酸塩基を独立して有するヌクレオシドを意味する。
【００７３】
「修飾ヌクレオチド」とは、修飾糖部分、修飾ヌクレオシド間結合または修飾核酸塩基を独立して有するヌクレオチドを意味する。
【００７４】
「修飾オリゴヌクレオチド」とは、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、修飾糖及び／または修飾核酸塩基を含むオリゴヌクレオチドを意味する。
【００７５】
「調節する」とは、細胞、組織、器官または生物のある特徴を変化または調整することを指す。例えば、ＤＧＡＴ２  ＲＮＡを調節するとは、細胞、組織、器官または生物のＤＧＡＴ２  ＲＮＡ及び／またはＤＧＡＴ２タンパク質のレベルを増加または減少させることを意味し得る。「調節剤」は、細胞、組織、器官または生物において変化をもたらす。例えば、ＤＧＡＴ２アンチセンス化合物は、細胞、組織、器官または生物のＤＧＡＴ２  ＲＮＡ及び／またはＤＧＡＴ２タンパク質の量を減少させる調節剤であり得る。
【００７６】
「モノマー」は、オリゴマーの１つの単位を指す。モノマーには、天然に生じるものまたは修飾されたものを問わず、ヌクレオシド及びヌクレオチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７７】
「モチーフ」とは、オリゴヌクレオチドにおける、修飾されていない及び／または修飾された糖部分、核酸塩基及び／またはヌクレオシド間結合のパターンを意味する。
【００７８】
「天然」または「天然に生じる」とは、自然に存在することを意味する。「天然に生じるヌクレオシド間結合」とは、３’−５’ホスホジエステル結合を意味する。「天然糖部分」とは、ＤＮＡ（２’−Ｈ）またはＲＮＡ（２’−ＯＨ）に認められる糖部分を意味する。「天然に生じる核酸塩基」とは、プリン塩基のアデニン（Ａ）及びグアニン（Ｇ）と、ピリミジン塩基のチミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）及びウラシル（Ｕ）とを意味する。「非相補的核酸塩基」は、互いに水素結合を形成しないか、他のいかなる形でもハイブリダイゼーションを支援しない核酸塩基の対を指す。
【００７９】
「核酸」は、ヌクレオチドモノマーからなる分子を指す。核酸には、リボ核酸（ＲＮＡ）、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、一本鎖核酸及び二本鎖核酸が含まれるが、これらに限定されない。
【００８０】
「核酸塩基」とは、別の核酸の塩基と対合することができる複素環式部分を意味する。
【００８１】
「核酸塩基配列」とは、任意の糖、結合及び／または核酸塩基の修飾に関係なく、連続した核酸塩基の順序を意味する。
【００８２】
「ヌクレオシド」とは、核酸塩基及び糖部分を含む化合物を意味する。核酸塩基及び糖部分は、それぞれ独立して、非修飾であるか、修飾されている。
【００８３】
「ヌクレオチド」とは、ヌクレオシドの糖部分にリン酸基が共有結合したヌクレオシドを意味する。
【００８４】
「オリゴマー化合物」とは、オリゴヌクレオチドと、任意選択でコンジュゲート基または末端基などの１つ以上の更なる特徴とを含む、化合物を意味する。オリゴマー化合物の例には、アンチセンス化合物、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｓＲＮＡ及び占有に基づく化合物などの一本鎖及び二本鎖化合物が挙げられる。
【００８５】
「オリゴヌクレオシド」とは、ヌクレオシド間結合がリン原子を含有しないオリゴヌクレオチドを意味する。
【００８６】
「オリゴヌクレオチド」とは、結合されたヌクレオシドの重合体を指し、ヌクレオシドのそれぞれは、互いに独立して修飾されていても修飾されていなくてもよい。
【００８７】
「親オリゴヌクレオチド」とは、類似の配列であるが、長さ、モチーフ及び化学的性質の異なるオリゴヌクレオチドをより多く設計するための基礎としてその配列が使用される、オリゴヌクレオチドを意味する。新しく設計されたオリゴヌクレオチドは、親オリゴヌクレオチドと同じ配列または重複する配列を有し得る。
【００８８】
「非経口投与」とは、注射または注入による投与を意味する。非経口投与には、皮下投与、静脈内投与、筋肉内投与、動脈内投与、腹腔内投与または頭蓋内投与、例えば、髄腔内もしくは脳室内投与が含まれる。
【００８９】
「薬学的に許容される担体または希釈剤」とは、動物への投与に使用するのに好適な媒体または希釈剤を意味する。例えば、薬学的に許容される担体は、ＰＢＳまたは注射用水などの無菌水溶液であり得る。
【００９０】
「薬学的に許容される塩」とは、オリゴマー化合物またはアンチセンス化合物などの化合物の生理学的及び薬学的に許容される塩、すなわち、親化合物の所望の生物学的活性を保持し、かつ望ましくない毒性作用を付与しない塩を意味する。
【００９１】
「薬剤」とは、個体に投与されたときに治療上の利益をもたらす化合物を意味する。
【００９２】
「医薬組成物」とは、個体への投与に好適な化合物の混合物を意味する。例えば、医薬組成物は、１つ以上の化合物またはその塩及び無菌水溶液を含み得る。
【００９３】
「ホスホロチオエート結合」とは、架橋していない酸素原子のうちの１つを硫黄原子で置き換えることによって、ホスホジエステル結合が修飾されている、ヌクレオシド間の修飾ヌクレオシド間結合を意味する。
【００９４】
「リン部分」とは、リン原子を含む原子団を意味する。特定の実施形態において、リン部分は、一リン酸、二リン酸もしくは三リン酸、またはモノ、ジもしくはトリホスホロチオエートを含む。
【００９５】
「部分（ｐｏｒｔｉｏｎ）」とは、核酸のある所定数の連続した（すなわち、結合された）核酸塩基を意味する。特定の実施形態において、部分は、標的核酸のある所定数の連続した核酸塩基である。特定の実施形態において、部分は、オリゴマー化合物のある所定数の連続した核酸塩基である。
【００９６】
「予防する」とは、疾患、障害または病態の発症、発現または進行を、数分から無期限までの期間、遅延させ、または未然に防ぐことを指す。また、予防するとは、疾患、障害または病態を発症するリスクを低減することも意味する。
【００９７】
「プロドラッグ」とは、個体に投与されたときに別の形態に代謝される形態の化合物を意味する。特定の実施形態において、代謝された形態は、活性のあるまたはより活性のある化合物（例えば、薬物）の形態である。
【００９８】
「予防上有効な量」は、動物に予防上または防止上の利益をもたらす薬剤の量を指す。
【００９９】
「ＲｅｆＳｅｑ番号」は、１つの配列に割り当てられた文字及び数字の固有の組み合わせであり、その配列が特定の標的転写物（例えば、標的遺伝子）に対するものであることを示すためのものである。標的遺伝子に関する、このような配列及び情報（総称的に遺伝子記録）は、遺伝子配列データベースで得ることができる。遺伝子配列データベースには、ＮＣＢＩ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅデータベース、ＧｅｎＢａｎｋ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ａｒｃｈｉｖｅ及び日本ＤＮＡデータバンク（後者の３つは、ＩＮＳＤＣ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｏｎ）を構成する）が含まれる。
【０１００】
「領域」は、少なくとも１つの同定可能な構造、機能または特徴を有する標的核酸の部分として定義される。
【０１０１】
「リボヌクレオチド」とは、ヌクレオチドの糖部分の２’位にヒドロキシを有するヌクレオチドを意味する。
【０１０２】
「ＲＮＡｉ化合物」とは、少なくとも部分的に、ＲＩＳＣまたはＡｇｏ２を介して作用して、標的核酸及び／または標的核酸によってコードされているタンパク質を調節するオリゴマー化合物を意味する。ＲＮＡｉ化合物には、二本鎖ｓｉＲＮＡ、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）、及びｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉｃｒｏＲＮＡ模倣体を含む）が挙げられるが、これらに限定されない。ＲＮＡｉ化合物という用語は、ＲＮａｓｅ  Ｈを介して作用するアンチセンスオリゴヌクレオチドを含まない。
【０１０３】
「セグメント」は、アンチセンス化合物、オリゴヌクレオチドまたは標的核酸内の領域のより小さな部分または下位部分として定義される。
【０１０４】
「副作用」とは、治療に起因すると考えられる、所望の効果ではない生理学的疾患及び／または病態を意味する。特定の実施形態において、副作用には、注射部位反応、肝機能検査異常、腎機能異常、肝毒性、腎毒性、中枢神経系異常、ミオパチー及び不調が含まれる。例えば、血清中アミノトランスフェラーゼレベルの増加は、肝毒性または肝機能異常を示し得る。例えば、ビリルビンの増加は、肝毒性または肝機能異常を示し得る。
【０１０５】
アンチセンス化合物またはオリゴマー化合物に関する「一本鎖」とは、その化合物中に１つのオリゴヌクレオチドが存在することを意味する。アンチセンス化合物またはオリゴマー化合物に関する「自己相補性」とは、それ自体が少なくとも部分的にハイブリダイズする化合物を意味する。１つのアンチセンス化合物またはオリゴマー化合物からなる化合物は、その化合物のオリゴヌクレオチドが自己相補性である場合、一本鎖化合物である。一本鎖のアンチセンス化合物またはオリゴマー化合物は、相補的な化合物に結合して二本鎖を形成することができる。
【０１０６】
「部位」は、本明細書で使用されるとき、標的核酸内の一意の核酸塩基位置として定義される。
【０１０７】
「進行を減速させる」とは、当該疾患の発現を減らすことを意味する。
【０１０８】
「特異的にハイブリダイズ可能」とは、アンチセンスオリゴヌクレオチドと標的核酸との間に十分な程度の相補性を有し、所望の作用を誘導するが、非標的核酸に対する作用は最小であるか、全くないアンチセンス化合物を指す。
【０１０９】
標的核酸を「特異的に阻害する」とは、標的核酸の発現を減少または遮断し、非標的核酸の減少に対する作用がより少ないか、最小であるか、全くないことを意味し、標的核酸の発現の完全な排除を必ずしも示すものではない。
【０１１０】
「糖部分」とは、核酸塩基を、ヌクレオシド間結合、コンジュゲート基または末端基などの別の基に結合させることができる原子団を意味する。特定の実施形態において、糖部分は、核酸塩基に結合してヌクレオシドを形成する。本明細書で使用されるとき、「非修飾糖部分」または「非修飾糖」とは、ＲＮＡに認められるような２’−ＯＨ（Ｈ）フラノシル部分またはＤＮＡに認められるような２’−Ｈ（Ｈ）部分を意味する。非修飾糖部分は、１’位、３’位及び４’位にそれぞれ１つの水素と、３’位に１つの酸素と、５’位に２つの水素とを有する。本明細書で使用されるとき、「修飾糖部分（修飾された糖部分）」または「修飾糖（修飾された糖）」とは、非修飾糖部分の少なくとも１つの水素の代わりに、水素以外の置換基を含む、フラノシル部分または糖代替物を意味する。特定の実施形態において、修飾糖部分は、２’−置換糖部分である。このような修飾糖部分には、二環式糖及び線状修飾糖が含まれる。
【０１１１】
「糖代替物」とは、核酸塩基を、ヌクレオシド間結合、コンジュゲート基または末端基などの別の基に結合させることができる、フラノシル部分ではない修飾糖部分を意味する。糖代替物を含む修飾ヌクレオシドは、オリゴヌクレオチド内の１つ以上の位置に組み込むことができる。特定の実施形態において、このようなオリゴヌクレオチドは、相補的なオリゴマー化合物または核酸にハイブリダイズすることができる。
【０１１２】
「相乗作用」または「相乗作用を示す」とは、各構成成分単独の作用を相加したものよりも大きい組み合わせの作用を指す。
【０１１３】
「標的遺伝子」は、標的をコードする遺伝子を指す。
【０１１４】
「標的核酸」、「標的ＲＮＡ」、「標的ＲＮＡ転写物」及び「核酸標的」とは、アンチセンス化合物によって標的化が可能な核酸を意味する。
【０１１５】
「標的化する」とは、標的核酸に特異的にハイブリダイズし、所望の作用を誘導するアンチセンス化合物の設計及び選定のプロセスを意味する。
【０１１６】
「標的領域」とは、標的核酸のうち、１つ以上のアンチセンス化合物が標的とする部分を意味する。
【０１１７】
「標的セグメント」とは、標的核酸のうち、アンチセンス化合物が標的とするヌクレオチドの配列を意味する。「５’標的部位」とは、標的セグメントの最も５’側のヌクレオチドを指す。「３’標的部位」とは、標的セグメントの最も３’側のヌクレオチドを指す。
【０１１８】
「末端基」とは、オリゴヌクレオチドの末端に共有結合した化学基または原子団を意味する。
【０１１９】
「治療上有効な量」とは、個体に治療上の利益をもたらす、化合物、薬剤または組成物の量を意味する。
【０１２０】
「治療する」とは、動物の疾患、障害または病態の変化または改善を達成するために、動物に化合物または医薬組成物を投与することを指す。
【０１２１】
「非修飾」核酸塩基とは、プリン塩基のアデニン（Ａ）及びグアニン（Ｇ）と、ピリミジン塩基のチミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）及びウラシル（Ｕ）とを意味する。
【０１２２】
「非修飾ヌクレオチド」とは、天然に生じる核酸塩基、糖部分及びヌクレオシド間結合で構成されたヌクレオチドを意味する。特定の実施形態において、非修飾ヌクレオチドは、ＲＮＡヌクレオチド（すなわち、β−Ｄ−リボヌクレオチド）またはＤＮＡヌクレオチド（すなわち、β−Ｄ−デオキシリボヌクレオチド）である。
【０１２３】
特定の実施形態
特定の実施形態は、ＤＧＡＴ２（ＤＧＡＴ２）発現を阻害するための方法、化合物及び組成物を提供する。
【０１２４】
特定の実施形態は、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化されたアンチセンス化合物を提供する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２核酸は、ＲｅｆＳｅｑ番号ＮＭ＿０３２５６４．３に記載される配列（参照により援用される；本明細書において配列番号１として開示される）またはＲｅｆＳｅｑ番号ＮＴ＿０３３９２７．５のヌクレオチド５６６９１８６〜５７１２００８（参照により援用される；本明細書において配列番号２として開示される）を有する。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドである。
【０１２５】
特定の実施形態は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物を提供する。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドである。
【０１２６】
特定の実施形態は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１または少なくとも１２個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物を提供する。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドである。
【０１２７】
特定の実施形態は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物を提供する。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドである。
【０１２８】
特定の実施形態は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物を提供する。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドである。
【０１２９】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＤＧＡＴ２核酸の２６７１１〜２６８０２を標的にする。ある特定の態様において、アンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号２（ＲｅｆＳｅｑ番号ＮＴ＿０３３９２７．５のヌクレオチド５６６９１８６〜５７１２００８）の核酸塩基配列を有するＤＧＡＴ２核酸のヌクレオチド２６７１１〜２６８０２内を標的にする。ある特定の態様において、アンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号２（ＲｅｆＳｅｑ番号ＮＴ＿０３３９２７．５のヌクレオチド５６６９１８６〜５７１２００８）の核酸塩基配列を有するＤＧＡＴ２核酸のヌクレオチド２６７１１〜２６８０２のうちの長さの等しい部分に相補的である、少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６個の連続した核酸塩基部分を有する。
【０１３０】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号２の核酸塩基２６７１１〜２６７９９、２６７１１〜２６７３０、２６７２１〜２６７４０、２６７５５〜２６７４４、２６７７８〜２６７９７、２６７７９〜２６７９８、２６７５５〜２６７９８及び２６７８０〜２６７９９内の核酸塩基配列を有するＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にする。ある特定の態様において、アンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、上述の核酸塩基領域内の少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６個の連続した核酸塩基を標的にする。
【０１３１】
特定の実施形態において、配列番号２の次のヌクレオチド領域：９９３０〜９９４９、９９５３〜９９７３、９９５９〜９９７８、９９６１〜９９８１、９９７０〜９９９２、９９７５〜９９９４、９９８４〜１０００３、１００４０〜１００５９、１００４３〜１００６３、１００４５〜１００６４、１００４６〜１００６５、１００４９〜１００６８、１００５４〜１００７３、１０１６０〜１０１７９、１０２０９〜１０２２９、１０２１２〜１０２３１、１０２１４〜１０２３５、１０２１７〜１０２３６、１０２１８〜１０２３８、１０３２７〜１０３４６、１０３８９〜１０４１３、１０４９０〜１０５１１、１０５２２〜１０５４８、１０５３０〜１０５４９、１０５３１〜１０５５１、１０５３３〜１０５５３、１０６４５〜１０６６９、１０６５１〜１０６７０、１０６５３〜１０６７３、１０６５５〜１０６７４、１０６５６〜１０６７５、１０６５７〜１０６７６、１０６５８〜１０６８０、１０６６２〜１０６８１、１０６６３〜１０６８４、１０６６６〜１０６８５、１０６６７〜１０６８４、１０６７０〜１０６８９、１０７０２〜１０７２１、１０７２７〜１０７４７、１０７２９〜１０７４８、１０７３０〜１０７５０、１０７３３〜１０７５５、１０７３７〜１０７５６、１０７４２〜１０７６１、１０７６３〜１０７８２、１０８１４〜１０８３５、１０８１７〜１０８３６、１０８１８〜１０８３７、１０９４０〜１０９６４、１１００８〜１１０２７、１１０７４〜１１０９７、１１１２３〜１１１５０、１１１５８〜１１１８２、１１１６８〜１１１８７、１１１７０〜１１１９０、１１１７１〜１１１９７、１１１９９〜１１２１８、１１２００〜１１２２０、１１２０９〜１１２２８、１１３１８〜１１３４２、１１４１３〜１１４３２、１１５５９〜１１５７８、１１５９４〜１１６１８、１１７０７〜１１７３１、１１８７２〜１１８９１、１１９２０〜１１９３９、１２２４７〜１２２６６、１２２８５〜１２３０４、１２５４９〜１２５７３、１２６７１〜１２６９５、１２８０６〜１２８２６、１２８３９〜１２８６３、１２８９０〜１２９０９、１２９２７〜１２９６１、１３０９８〜１３１１７、１３２１２〜１３２３１、１３２３９〜１３２５８、１３４４１〜１３４６１、１３９２１〜１３９４５、１３９６２〜１３９９６、１４１７７〜１４２０１、１４１９４〜１４２１８、１４２３９〜１４２５８、１４３８５〜１４４０４、１４４５７〜１４５２２、１４５０４〜１４５２７、１４５３７〜１４５５６、１４６４８〜１４６９７、１４７１５〜１４７９０、１４７１５〜１４７３９、１４７３５〜１４７６４、１４７４６〜１４７６５、１４７４９〜１４７７４、１４７５６〜１４７７９、１４７６５〜１４７８９、１４７７１〜１４７９０、１４８０７〜１４８３１、１４８５２〜１４８７１、１４８８２〜１４９０１、１４９５３〜１５０１５、１４９９７〜１５０６５、１５０４１〜１５１０７、１５０４１〜１５０９２、１５０８３〜１５１０７、１５１７８〜１５１９７、１５２１４〜１５２４３、１５２１９〜１５２４３、１５２４８〜１５２７６、１５２５５〜１５２７６、１５２９２〜１５３１１、１５３１８〜１５３３８、１５３２１〜１５３４２、１５３５３〜１５３７２、１５３６８〜１５３９２、１５５１４〜１５５３３、１５５７３〜１５６６５、１５５７３〜１５５９７、１５７２９〜１５７５３、１５８０４〜１５８２８、１５８１４〜１５８３３、１５８７６〜１５９００、１５８７６〜１５８９６、１５９３３〜１５９６２、１５９３３〜１５９５４、１５９９１〜１６０１０、１６０４６〜１６０７３、１６０８２〜１６１２４、１６２３７〜１６２５６、１６２８８〜１６３１４、１６２８８〜１６４７８、１６３０８〜１６３２９、１６４２８〜１６４７８、１６５１０〜１６５２９、１６８０８〜１６８５５、１６８０８〜１６８２８、１６８１１〜１６８５５、１６８９８〜１６９２１、１７００７〜１７０３１、１７０３８〜１７０５７、１７２０７〜１７２２９、１７２６９〜１７２９８、１７２７３〜１７２９４、１７３２８〜１７３５７、１７４２０〜１７４４４、１７４５０〜１７４７１、１７５３０〜１７５５９、１７３２８〜１７５５９、１７９６０〜１７９８９、１８０７８〜１８０９７、１８１５５〜１８１７６、１８１５５〜１８１９８、１８１７７〜１８２００、１８２２５〜１８３０５、１８３０６〜１８３２７、１８３０９〜１８３３０、１８３１２〜１８３３０、１８３１２〜１８３３２、１８３１５〜１８３４４、１８３２９〜１８３５５、１８３７９〜１８３９８、１８４１７〜１８４４６、１８４３０〜１８４５１、１８１８４５０〜１８４７３、１８４７０〜１８４９４、１８５８１〜１８６０１、１８５８３〜１８６０５、１８５８１〜１８６１１、１８５８８〜１８６１１、１８８２１〜１８８５０、１８８２１〜１８８４７、１８８３６〜１８８９９、１８８９０〜１８９１４、１８８９８〜１８９１９、１９０１３〜１９０３７、１９０１３〜１９０４０、１９３６０〜１９４１１、１９３６３〜１９３８３、１９８０４〜１９８２３、１９９０９〜１９９３２、１９９８７〜２０００９、２０２３２〜２０２５６、２０２９６〜２０３２５、２０４６２〜２０４８１、２０５４１〜２０５６０、２０６６８〜２０６９２、２０７７５〜２０７９７、２０７７９〜２０７９７、２０８１７〜２０８４１、２０８２８〜２０８６３、２０８７８〜２０８９７、２０９５６〜２０９７９、２１０４６〜２１１２０、２１０９１〜２１１２０、２１１６４〜２１２０３、２１１６４〜２１１８８、２１３７４〜２１４０３、２１６５９〜２１６７８、２１７０８〜２１７２７、２１７６５〜２１７８４、２１９３３〜２１９５５、２２１５３〜２２１９１、２２１５３〜２２１７５、２２１５８〜２２１７９、２２１６７〜２２１９１、２２４３９〜２２４６３、２２５４７〜２２５６７、２２７７０〜２２７９０、２２７７０〜２２７９５、２２７７５〜２２７９５、２２８３５〜２２８７０、２２８４１〜２２８６５、２２８８１〜２２９０１、２２８８５〜２２９０５、２２８８９〜２２９１０、２３０９５〜２３１１５、２３０９８〜２３１１９、２３０９９〜２３１１９、２３１２８〜２３１５７、２３１７９〜２３２５１、２３２３８〜２３２５８、２３２４０〜２３２６０、２３２４２〜２３２６２、２３４２９〜２３４４９、２３４８０〜２３５６６、２３５４７〜２３５８１、２３５５３〜２３５７３、２３５５５〜２３５７６、２３５６２〜２３５８６、２３５９７〜２３６１６、２３６４１〜２３６７０、２４１２３〜２４１４４、２４１２３〜２４１４７、２４２０２〜２４２２３、２４２０２〜２４２４１、２４７９９〜２５０３９、２４７９９〜２４８４７、２５０１８〜２５０９、２５０２３〜２５０５３、２５０２６〜２５０５３、２５０６９〜２５０９２、２５０６９〜２５１１４、２５０７７〜２５１０４、２５０８８〜２５１１４、２５１８３〜２５２０５、２５１８３〜２５２１７、２５１９８〜２５２１７、２５２２６〜２５２５０、２５２２６〜２５２６５、２５２３６〜２５２６０、２５２４４〜２５２９１、２５３１２〜２５３９４、２５３８０〜２５４００、２５７１７〜２５７３６、２５７８２〜２５８６０、２５８４５〜２５８６６、２５８６６〜２５９３５、２５９１９〜２５９３９、２５９５０〜２５９７１、２５９５４〜２５９７３、２５９８１〜２６０３０、２６１０２〜２６１２６、２６１６２〜２６２２０、２６３００〜２６３２４、２６３３１〜２６３７２、２６３６３〜２６４０５、２６３８９〜２６４０９、２６３９６〜２６４２０、２６４７９〜２６５０４、２６５１６〜２６５５０、２６５３４〜２６５５５、２６５３４〜２６５６０、２６５４０〜２６５６０、２６６１０〜２６６３４、２６６２０〜２６６４０、２６６２６〜２６６４８、２６６２０〜２６６６４、２６６３３〜２６６５５、２６６４０〜２６６６４、２６７１６〜２６７４０、２６７１６〜２６７９９、２６７５５〜２６７９９、２６７８６〜２６８０７、２６７８９〜２６８０９、２６７８６〜２６８０９、２６８１１〜２６８３１、２６８４９〜２６８６９、２６８６９〜２６８９８、２６８８３〜２６９０３、２６９２６〜２６９４３、２７０４６〜２７０７５、２７１０６〜２７１３０、２７１７４〜２７２３０、２７２２１〜２７２４１、２７２２６〜２７２５８、２７２４１〜２７２６５、２７２４９〜２７２６９、２７３６７〜２７４０６、２７３６７〜２７４０２、２７３８６〜２７４０６、２７６３８〜２７６６４、２７７６９〜２７７９１、２７７７５〜２７８１０、２７８５２〜２７８７７、２８０２６〜２８０４９、２８１２８〜２８１５４、２８４６２〜２８４９２、２８４７５〜２８５０８、２８５１６〜２８５４２、２８５８４〜２８６０５、２８８０４〜２８８２６、２９０１０〜２９０３５、２９１４３〜２９１６７、２９１５１〜２９１８０、２９１９６〜２９２１８、２９２４４〜２９２６８、２９２５３〜２９２８２、２９３６１〜２９３８３、２９３６９〜２９３９１、２９４５０〜２９４９５、２９４８０〜２９５０４、２９５３８〜２９６５４、２９６７３〜２９６９７、２９６８１〜２９７０２、２９７８１〜２９８０１、２９８０４〜２９８２８、２９８２７〜２９８４７、２９８３２〜２９８５２、２９８３８〜２９８５８、２９８４４〜２９８７８、３０４８４〜３０５０４、３０５２４〜３０５４８、３０５５４〜３０５８８、３０６６９〜３０７３１、３０９７２〜３０９９７、３０９８４〜３１００５、３１５５１〜３１５７１、３１５５４〜３１５８４、３１７９４〜３１８１８、３１９３２〜３１９５２、３１９３６〜３１９５６、３１９３９〜３１９６３、３１９４６〜３１９７１、３２１１５〜３２１３６、３２１１９〜３２１４０、３２１３０〜３２１５９、３２１７５〜３２２０１、３２４２８〜３２４５４、３２４３６〜３２４６７、３２４５９〜３２４７９、３２４６３〜３２４８９、３２４７４〜３２４９５、３２４８０〜３２５２９、３２５８６〜３２６３８、３２６２１〜３２６４１、３２７５６〜３２７７６、３２８０１〜３２８２５、３２８１６〜３２８４０、３３０７０〜３３１８０、３３１７６〜３３１９９、３３１８２〜３３２０２、３３４１１〜３３４３３、３３５７２〜３３６０１、３３７２９〜３３７５９、３３８４６〜３３８７６、３３８６０〜３３８８２、３３８６６〜３３８８６、３４０６３〜３４１１７、３４２１１〜３４２３２、３４６８６〜３４７１０、３４７３９〜３４８８７、３４９０１〜３４９５０、３５２６３〜３５２９２、３５２７７〜３５３０２、３５３２２〜３５３４６、３５４０８〜３５４３３、３５４２１〜３５４４１、３５４３６〜３５４５７、３５６６５〜３５６８５、３６２４６〜３６２６７、３６２５０〜３６２７０、３６２５３〜３６２７４、３６２５８〜３６２８１、３６２６８〜３６５３１、３６５１６〜３６５３７、３６５７３〜３６５９７、３６５８１〜３６６０３、３６６３２〜３６６６６、３６６７７〜３６６９８、３６６８２〜３６７０２、３６６８９〜３６７５７、３６７４２〜３６７７２、３６８４１〜３６８７４、３６８４６〜３６８７４、３６８６５〜３７０４１、３７０５４〜３７０７３、３７８３８〜３７８５８、３９６６８〜３９６９４、３９６８４〜３９７０５、３９８２０〜３９８４０、３９８３０〜３９８５２及び４０９０９〜４０９３３は、アンチセンス化合物またはオリゴヌクレオチドによって標的化される場合、少なくとも６０％の阻害を示す。
【０１３２】
特定の実施形態において、配列番号２の次のヌクレオチド領域：９９７１〜９９９１、９９７５〜９９９４、９９８４〜１０００３、１００４０〜１００５９、１００４４〜１００６３、１００４５〜１００６４、１００４９〜１００６８、１００５４〜１０１７９、１０２１０〜１０２２９、１０２１４〜１０２３４、１０２１６〜１０２３５、１０２１７〜１０２３６、１０２１８〜１０２３７、１０３２７〜１０３４６、１０４９０〜１０５０９、１０４９１〜１０５１１、１０５２２〜１０５４１、１０５２８〜１０５４８、１０５３０〜１０５４９、１０５３１〜１０５５０、１０５３２〜１０５５１、１０５３３〜１０５５３、１０５３６〜１０５５５、１０５３７〜１０５５６、１０６４５〜１０６６４、１０６４７〜１０６６６、１０６４９〜１０６６９、１０６５３〜１０６７３、１０６５５〜１０６７４、１０６５６〜１０６７５、１０６５７〜１０６７６、１０６５８〜１０６７７、１０６５９〜１０６７９、１０６６１〜１０６８０、１０６６２〜１０６８１、１０６６３〜１０６８３、１０６６５〜１０６８４、１０６６６〜１０６８５、１０６６７〜１０６８６、１０６６８〜１０６８７、１０６７０〜１０６８９、１０６７２〜１０６９１、１０７０２〜１０７２１、１０７２７〜１０７４７、１０７２９〜１０７４８、１０７３０〜１０７５０、１０７３２〜１０７５１、１０７３３〜１０７５２、１０７３４〜１０７５３、１０７３５〜１０７５４、１０７３７〜１０７５６、１０７４２〜１０７５６、１０７４２〜１０７６１、１０７６３〜１０７８２、１０８１５〜１０８３５、１０８１７〜１０８３６、１０８１８〜１０８３７、１０８１９〜１０８４０、１０９４０〜１０９５９、１０９４１〜１０９６０、１０９４２〜１０９６１、１０９４４〜１０９６３、１１００８〜１１０２７、１１０７４〜１１０９３、１１０７５〜１１０９４、１１０７６〜１１０９５、１１０７８〜１１０９７、１１１２４〜１１１４６、１１１２８〜１１１４７、１１１２９〜１１１４８、１１１３０〜１１１４９、１１１３１〜１１１７７、１１１５９〜１１１７８、１１１６０〜１１１７９、１１１６１〜１１１８０、１１１６８〜１１１８７、１１１７０〜１１１９０、１１１７２〜１１１９１、１１１７３〜１１１９２、１１１７４〜１１１９６、１１１８０〜１１２１８、１１２００〜１１２１９、１１２０１〜１１２２１、１１２０３〜１１２２２、１１２０４〜１１２２０、１１２０９〜１１２２８、１１３２３〜１１３４２、１１４１３〜１１４３２、１１５５９〜１１５７８、１１５９９〜１１６１８、１１８７２〜１１８９１、１１２２８５〜１２３０４、１２５４９〜１２５６８、１２８０６〜１２８２６、１２８０９〜１２８２８、１２９２７〜１２９４６、１２９４２〜１２９６１、１３４４１〜１３４６１、１３９２６〜１３９４５、１４１８２〜１４２０１、１４１９４〜１４２１３、１４１９６〜１４２１６、１４２３９〜１４２５８、１４３８５〜１４４０４、１４４６２〜１４５２２、１４５０４〜１４５２３、１４５０５〜１４５２４、１４５０６〜１４５２７、１４５３７〜１４５５６、１４６４８〜１４６６７、１４６４９〜１４６６８、１４６５０〜１４６６９、１４６５１〜１４６７０、１４６５８〜１４６８２、１４６６４〜１４６８３、１４６６５〜１４６８４、１４６６６〜１４６８６、１４６６８〜１４６８７、１４６７３〜１４７３９、１４７４１〜１４７６４、１４７４６〜１４７６５、１４７４９〜１４７７４、１４７５６〜１４７７５、１４７５７〜１４７７９、１４７６５〜１４７８４、１４７６７〜１４７８６、１４７６９〜１４７８９、１４７７１〜１４７９０、１４７７２〜１４７９３、１４８０７〜１４８３１、１４８５２〜１５００５、１４９９２〜１５０１２、１４９９５〜１５０１５、１４９９７〜１５０１６、１４９９８〜１５０１７、１４９９９〜１５０２０、１５０１１〜１５０４０、１５０７３〜１５０９２、１５２１４〜１５２３３、１５２１９〜１５２４３、１５２４８〜１５２６９、１５２４８〜１５２７６、１５２５１〜１５２７０、１５２５２〜１５２７２、１５２５４〜１５２７３、１５２５５〜１５２７４、１５２５６〜１５２７６、１５３２１〜１５３４２、１５５７３〜１５５９５、１５５７８〜１５６６５、１５７２９〜１５７４８、１５８０９〜１５８２８、１５８７６〜１５８９５、１５８８１〜１５９５２、１５９９１〜１６０６６、１６０５１〜１６０７０、１６０５３〜１６１０２、１６２８９〜１６３０９、１６２９２〜１６３１２、１６３１０〜１６３２９、１６２４８〜１６４４８、１６４３２〜１６４５１、１６４３８〜１６４５７、１６８０８〜１６８２８、１６８１１〜１６８３０、１６８１３〜１６８３２、１６８１５〜１６８３５、１６８２８〜１６８５２、１６８３６〜１６８５５、１６８９８〜１６９１７、１６９００〜１６９２１、１７００７〜１７０２７、１７２０７〜１７２２７、１７２１０〜１７２２９、１７２７４〜１７２９４、１７３２８〜１７３４７、１７３３０〜１７３５２、１７４５０〜１７５４９、１７９６０〜１７９７９、１８１５５〜１８１７５、１８１５７〜１８１７６、１８１６０〜１５１８０、１８１６２〜１８１８１、１８１６３〜１８１８２、１８１６４〜１８１８３、１８１６５〜１８１８４、１８１６６〜１８１８５、１８１７２〜１８１９３、１８１７５〜１８１９４、１８１７６〜１８１９４、１８１７６〜１８１９５、１８１７８〜１８１９９、１８１８１〜１８２００、１８２２５〜１８２４４、１８２３５〜１８３０５、１８３０７〜１８３２７、１８３０９〜１８３２８、１８３１０〜１８３３０、１８３１２〜１８３３２、１８３１５〜１８３３７、１８３２０〜１８３４０、１８３２２〜１８３４１、１８３２３〜１８３４２、１８３２４〜１８３４３、１８３２５〜１８３４７、１８３３０〜１８３５５、１８３７９〜１８４３６、１８４１８〜１８４３７、１８４１９〜１８４３８、１８４２０〜１８４３９、１８４２２〜１８４４１、１８４３１〜１８４５１、１８４５０〜１８４６９、１８４５１〜１８４７０、１８４５２〜１８４７１、１８４７０〜１８４８９、１８５８１〜１８６００、１８５８２〜１８６０１、１８５８３〜１８６０２、１８５８４〜１８６０４、１８５８８〜１８６１０、１８８２８〜１８８４７、１８８２９〜１８８４８、１８８３１〜１８８５０、１８８６９〜１８８８８、１８８７０〜１８８８９、１８８９９〜１８９１９、１９０１３〜１９０３２、１９０１６〜１９０３５、１９０１８〜１９０３７、１９０２０〜１９０３９、１９３６０〜１９３８０、１９３６４〜１９３８３、１９９１１〜１９９３２、１９９８７〜２０００８、２０２３２〜２０２５１、２０２９８〜２０３１７、２０３００〜２０３２５、２０６６８〜２０６８９、２０６７２〜２０６９２、２０７７５〜２０７９６、２０７８０〜２０８００、２０８２２〜２０８４１、２０８２９〜２０８５１、２０８３７〜２０８５７、２０８４０〜２０８６２、２０９５８〜２０９７９、２１１６４〜２１１８３、２１３８４〜２１４０３、２１９３３〜２１９５２、２２１５５〜２２１７５、２２４３９〜２２４６３、２２５４８〜２２５６７、２２５４９〜２２５６８、２２７７１〜２２７９０、２２７７２〜２２７９１、２２７７３〜２２７９２、２２８４６〜２２８６５、２２８８６〜２２９０５、２２８８８〜２２９０７、２２８８９〜２２９０８、２３０９５〜２３１１５、２３０９８〜２３１１７、２３０９９〜２３１１９、２３１２８〜２３１４７、２３１３８〜２３１５７、２３１８４〜２３２５１、２３２３８〜２３２５８、２３２４２〜２３２６１、２３２４３〜２３２６２、２３２４４〜２３２６３、２３２４５〜２３２６４、２３２４６〜２３２６２、２３３０５〜２３３２４、２３４２６〜２３４４６、２３４３０〜２３４４９、２３５５１〜２３５７０、２３５５２〜２３５７１、２３５５３〜２３５７２、２３５５４〜２３５７３、２３５５７〜２３５７６、２３５６２〜２３５８６、２３６４１〜２３６６５、２４１２３〜２４１４２、２４７９９〜２４８９７、２５０１９〜２５０３８、２５０２３〜２５０４２、２５０２６〜２５０４５、２５０２８〜２５０９２、２５０７５〜２５０９４、２５０７７〜２５１０１、２５０８５〜２５１０４、２５０８８〜２５２０２、２５１８６〜２５２０５、２５１９３〜２５２１２、２５１９８〜２５２５０、２５２３６〜２５２５５、２５２４５〜２５２９１、２５３１２〜２５３９４、２５３８０〜２５３９９、２５４２９〜２５４４８、２５７１７〜２５８０８、２５８４１〜２５８６０、２５８４６〜２５８６５、２５９００〜２５９２８、２５９１１〜２５９３０、２５９１３〜２５９３５、２５９２０〜２５９７１、２５９８１〜２６０２６、２６０１０〜２６０３０、２６１０２〜２６１２１、２６１６５〜２６１８６、２６１６９〜２６２１９、２６３００〜２６３２４、２６３５３〜２６３７２、２６３５８〜２６３７７、２６３６３〜２６４０４、２６３８９〜２６４０９、２６３９７〜２６４１６、２６４７９〜２６４９８、２６４８２〜２６５０３、２６５１６〜２６５３５、２６５１７〜２６５３６、２６５１８〜２６５３７、２６５１９〜２６５３８、２６５２０〜２６５４０、２６５２６〜２６５５０、２６５３５〜２６５５５、２６５３７〜２６５５６、２６５３８〜２６５５７、２６５３９〜２６５５８、２６６１５〜２６６３４、２６６２０〜２６６４０、２６６２６〜２６６４６、２６６２８〜２６６４７、２６６２９〜２６６４８、２６６３０〜２６６４９、２６６３１〜２６６５０、２６６３２〜２６６５１、２６６３３〜２６６５２、２６６３５〜２６６５４、２６６４０〜２６６５９、２６７１１〜２６７３０、２６７２１〜２６７９９、２６７８６〜２６８０７、２６８１１〜２６８３０、２６８５２〜２６８７１、２６８５４〜２６８７３、２６８６９〜２６８９８、２６８８３〜２６９０３、２６９２７〜２６９４６、２７０５０〜２７０７５、２７１０６〜２７１２５、２７２２１〜２７２４０、２７２２８〜２７２４７、２７２３１〜２７２５０、２７２３５〜２７２５７、２７２４１〜２７２６５、２７２４９〜２７２６８、２７３６７〜２７３８６、２７３７７〜２７３９６、２７３７９〜２７３９８、２７３８１〜２７４０１、２７３８３〜２７４０２、２７３８７〜２７４０６、２７４３８〜２７４５７、２７６３９〜２７６５８、２７６４２〜２７６６１、２７６４４〜２７６６４、２７７６９〜２７７９０、２７７７５〜２７７９９、２７７８２〜２７８０９、２７８５３〜２７８７７、２８０２６〜２８０４８、２８１２８〜２８１５４、２８４６３〜２８４８４、２８４６８〜２８４８９、２８４７５〜２８５００、２８５１６〜２８５４２、２８８０６〜２８８２６、２９０１０〜２８０３３、２９１４０〜２９１５９、２９１４３〜２９１６５、２９１４８〜２９１６７、２９１５４〜２９１７７、２９１６０〜２９１８０、２９１９３〜２９２１２、２９１９６〜２９２１８、２９２０１〜２９２２０、２９２４５〜２９２６５、２９２５３〜２９２７２、２９２５５〜２９２７４、２９２５７〜２９２７８、２９２６２〜２９２８２、２６３６１〜２９３８２、２９３６９〜２９３８８、２９３７１〜２９３９０、２９４８５〜２９５０４、２９５３８〜２９５５７、２９５４８〜２９５９４、２９６３５〜２９６５４、２９６７３〜２９６９２、２９６７５〜２９６９５、２９６７８〜２９６９７、２９６８２〜２９７０２、２９７８１〜２９８０１、２９８０９〜２９８２８、２９８２７〜５９８４７、２９８２９〜２９８４８、２９８３０〜２９８４９、２９８３１〜２９８５０、２９８３２〜２９８５２、２９８３８〜２９８５８、２９８４０〜２９８５９、２９８４２〜２９８６１、２９８４３〜２９８６２、２９８４４〜２９８７３、３０４８３〜３０５０２、３０４８４〜３０５０３、３０５１４〜３０５３３、３０５２９〜３０５４８、３０５５９〜３０５７８、３０６６９〜３０６９３、３０９７２〜３０９９２、３０９７７〜
３０９９６、３０９８２〜３１００１、３０９８６〜３１００５、３１５５４〜３１５７３、３１７６８〜３１７８７、３１７９７〜３１８１７、３１９３３〜３１９５２、３１９３６〜３１９５６、３１９４２〜３１９６１、３２１１６〜３２１３５、３２１２０〜３２１４０、３２１３１〜３２１５１、３２１３５〜３２１５８、３２１７７〜３２１９８、３２１８２〜３２２０１、３２３３６〜３２３５５、３２４２８〜３２４４７、３２４２９〜３２４４８、３２４３０〜３２４４９、３２４３１〜３２４５０、３２４３２〜３２４５１、３２４３３〜３２４５２、３２４３４〜３２４５０、３２４３５〜３２４５４、３２４３６〜３２４５５、３２４４６〜３２４６６、３２４４９〜３２４６８、３２４５０〜３２４６９、３２４５１〜３２４７０、３２４５２〜３２４７１、３２４５３〜３２４７２、３２４５４〜３２４７３、３２４５５〜３２４７４、３２４５６〜３２４７５、３２４５７〜３２４７６、３２４５９〜３２４７９、３２４６１〜３２４８０、３２４６２〜３２４８１、３２４６３〜３２４８３、３２４６５〜３２４８６、３２４６８〜３２４８９、３２４７５〜３２４９５、３２４７７〜３２４９６、３２４７８〜３２４９７、３２４８０〜３２５００、３２５１０〜３２５２９、３２６１９〜３２６３８、３２６２１〜３２６４０、３２６２２〜３２６４１、３２６２３〜３２６４２、３２６４５〜３２６６４、３２６７０〜３２６８９、３２７１１〜３２７３０、３２７５２〜３２７７１、３２７５３〜３２７７２、３２７５５〜３２７７４、３２７５６〜３２７７６、３２８１６〜３２８４０、３３０９６〜３３１２５、３３１６１〜３３１８０、３３１７９〜３３１９９、３３１８１〜３３２００、３３１８２〜３３２０１、３３４１２〜３３４３３、３３７２９〜３３７５０、３３８６１〜３３８８１、３３８６６〜３３８８５、３３９１８〜３３９３７、３４０１７〜３４０３６、３４２１１〜３４２３１、３４２１６〜３４２３５、３４３５０〜３４３６９、３４４６０〜３４４７９、３４７３９〜３４８８７、３４９０１〜３４９５０、３５２７８〜３５２９８、３５３２２〜３５３４６、３５３６２〜３５３８１、３５４１０〜３５４３０、３５４１４〜３５４３３、３５４２１〜３５４４０、３５４３６〜３５４５７、３５６６５〜３６６８５、３６２４６〜３６２６７、３６２４９〜３６２６８、３６２５０〜３６２６９、３６２５１〜３６２７０、３６２５２〜３６２７１、３６２５３〜３６２７２、３６２５８〜３６２７７、３６２６２〜３６２８１、３６２６８〜３６２８７、３６３５４〜３６４２８、３６５１２〜３６５３１、３６５１７〜３６５３６、３６５７３〜３６５９７、３６５８２〜３６６０２、３６６１７〜３６６３６、３６６７７〜３６６９８、３６６８０〜３６６９９、３６６８１〜３６７００、３６６８２〜３６７０２、３６６９１〜３６７５４、３６７３８〜３６７５７、３６７４３〜３６７７２、３６７５８〜３６７７７、３６８４１〜３６８６０、３６８４６〜３６８６５、３６８６５〜３６９４２、３７０５４〜３７１３８、３７３８９〜３７４０８、３７４９７〜３７５１６、３７４９９〜３７５１８、３７５０１〜３７５２０、３７７４５〜３７７６４、３９６７０〜３９６８９、３９６８５〜３９７０４、３９８２０〜３９８３９、３９８３０〜３９８４９、３９８３２〜３９８５２及び４０３３３〜４０３５２は、アンチセンス化合物またはオリゴヌクレオチドによって標的化される場合、少なくとも７０％の阻害を示す。
【０１３３】
特定の実施形態において、配列番号２の次のヌクレオチド領域：１００４０〜１００５９、１００４４〜１００６３、１００４５〜１００６４、１００５４〜１００７３、１０２１０〜１０２２９、１０２１４〜１０２３４、１０２１７〜１０２３６、１０４９０〜１０５０９、１０５３１〜１０５５０、１０５３２〜１０５５１、１０５３３〜１０５５２、１０６４５〜１０６６４、１０６５０〜１０６６９、１０６５５〜１０６７４、１０６５６〜１０６７５、１０６５７〜１０６７６、１０６５９〜１０６７８、１０６６０〜１０６７９、１０６６１〜１０６８０、１０６６３〜１０６８２、１０６６４〜１０６８３、１０６６５〜１０６８４、１０６６６〜１０６８５、１０６６７〜１０６８６、１０６７０〜１０６８９、１０７２７〜１０７４６、１０７３０〜１０７４９、１０７３１〜１０７５０、１０７３２〜１０７５１、１０７３４〜１０７５３、１０７３５〜１０７５４、１０７３７〜１０７５６、１０８１６〜１０８３５、１０８１７〜１０８３６、１０８１８〜１０８３７、１０８１９〜１０８３８、１０８２０〜１０８４０、１０９４０〜１０９５９、１０９４１〜１０９６０、１０９４２〜１０９６１、１０９４４〜１０９６３、１１０７４〜１１０９３、１１０７５〜１１０９４、１１１２７〜１１１４６、１１１２８〜１１１４７、１１１２９〜１１１４８、１１１３０〜１１１４９、１１１３１〜１１１７７、１１１５９〜１１１７８、１１１６０〜１１１７９、１１１７０〜１１１９０、１１１７２〜１１１９１、１１１７３〜１１１９２、１１１７４〜１１１９３、１１１７５〜１１１９６、１１１７８〜１１１９７、１１１９９〜１１２１８、１１２００〜１１２１９、１１２０１〜１１２２０、１１２０２〜１１２２１、１１２０３〜１１２２２、１１５５９〜１１５７８、１１５９９〜１１６１８、１２２８５〜１２３０４、１３４４２〜１３４６１、１４４６２〜１４４８１、１４５０３〜１４５２２、１４５０４〜１４５２３、１４５０５〜１４５２４、１４５０６〜１４５２７、１４６４８〜１４６６７、１４６４９〜１４６６８、１４６５０〜１４６６９、１４６５１〜１４６７０、１４６５８〜１４６８２、１４６６４〜１４６８３、１４６６６〜１４６８６、１４６７３〜１４６９７、１４７４１〜１４７６０、１４７４３〜１４７６４、１４７４６〜１４７６５、１４７５０〜０４７６９、１４７５２〜１４７７４、１４７５６〜１４７７５、１４７５７〜１４７７５、１４７５８〜１４７７７、１４７５９〜１４７７８、１４７６９〜１４７８９、１４７７１〜１４７９０、１４７７２〜１４７９１、１４７７３〜１４７９２、１４７７４〜１４７９３、１４８０７〜１４８２６、１４８８２〜１４９０１、１４９８６〜１５００５、１４９９３〜１５０１２、１４９９５〜１５０１５、１４９９７〜１５０１６、１４９９８〜１５０１７、１４９９９〜１５０１８、１５０００〜１５０１９、１５００１〜１５０２０、１５０１６〜１５０３５、１５２４８〜１５２６８、１５２５０〜１５２６９、１５２５１〜１５２７０、１５２５２〜１５２７２、１５２５４〜１５２７３、１５３１９〜１５３３８、１５３２１〜１５３４２、１５５７４〜１５５９３、１５６４６〜１５６６５、１５８８１〜１５９５２、１６３１０〜１６３２９、１６８１３〜１６８３２、１６８３０〜１６８５２、１６９００〜１６９２１、１７００７〜１７０２６、１７２０８〜１７２２７、１７４５０〜１７４７０、１８１５６〜１８１７５、１８１５７〜１８１７６、１８１６１〜１８１８０、１８１６４〜１８１８３、１８１６６〜１８１８５、１８１７３〜１８１９３、１８１７５〜１８１９４、１８１７６〜１８１９５、１８１８０〜１８１９９、１８３０８〜１８３２７、１８３１０〜１８３２９、１８３１１〜１８３３０、１８３１２〜１８３３１、１８３２１〜１８３４０、１８３２３〜１８３４２、１８３２４〜１８３４３、１８３２５〜１８３４４、１８３２６〜１８３４５、１８３２７〜１８３４６、１８３２８〜１８３４７、１８３３１〜１８３５０、１８３７９〜１８４３６、１８４３２〜１８４５１、１８４５０〜１８４６９、１８５８１〜１８６００、１８５８５〜１８６０４、１８８２８〜１８８４７、１８８２９〜１８８４８、１８９００〜１８９１９、１９９１１〜１９９３０、２０３００〜２０３２１、２０６６８〜２０６８７、２０８３０〜２０８４９、２０８３７〜２０８５７、２０９５８〜２０９７７、２２４４４〜２２４６３、２２５４８〜２２５６７、２２７７１〜２２７９０、２２７７２〜２２７９１、２２７７３〜２２７９２、２２８８６〜２２９０５、２３０９６〜２３１１５、２３１００〜２３１１９、２３２３９〜２３２５８、２３２４２〜２３２６１、２３２４３〜２３２６２、２３２４４〜２３２６３、２３２４５〜２３２６４、２３２４６〜２３２６２、２３４２７〜２３４４６、２３５５１〜２３５７０、２３５５２〜２３５７１、２３５５７〜２３５７６、２４１２３〜２４１４２、２４８７８〜２４８９７、２５０２３〜２５０４２、２５０２８〜２５０４７、２５０３３〜２５０８８、２５０７３〜２５０９２、２５０７５〜２５０９４、２５０７８〜２５１０１、２５０８５〜２５１０４、２５１８３〜２５２０２、２５１９３〜２５２１２、２５２４６〜２５２９１、２５３７５〜２５３９４、２５３８０〜２５３９９、２５７８２〜２５８０４、２５７８７〜２５８０６、２５８４１〜２５８６０、２５８４６〜２５８６５、２５９００〜２５９１９、２５９０５〜２５９２８、２５９１１〜２５９３０、２５９１５〜２５９３４、２５９５０〜２５９７０、２６００５〜２６０２５、２６０１０〜２６０２９、２６１６２〜２６１８５、２６１６９〜２６１９１、２６１７４〜２６１９４、２６１７９〜２６２１９、２６３００〜２６３１９、２６３０２〜２６３２１、２６３０４〜２６３２４、２６３５３〜２６３７２、２６３５８〜２６３７７、２６４８２〜２６５０１、２６５１７〜２６５３６、２６５１９〜２６５３８、２６５２０〜２６５３９、２６５２１〜２６５４０、２６５３６〜２６５５０、２６５３７〜２６５５６、２６５３８〜２６５５７、２６６１５〜２６６３４、２６６２０〜２６６３９、２６６２７〜２６６４６、２６６２９〜２６６４８、２６６３０〜２６６４９、２６６３１〜２６６５０、２６６３２〜２６６５１、２６６３５〜２６６５４、２６６４０〜２６６５９、２６７１１〜２６７３０、２６７７８〜２６７９８、２６７８８〜２６８０７、２６８１１〜２６８３０、２６８８４〜２６９０３、２７０５０〜２７０７０、２７０５３〜２７０７２、２７０５５〜２７０７５、２７２２１〜２７２４０、２７２３１〜２７２５０、２７２３６〜２７２５６、２７２４１〜２７２６０、２７３８２〜２７４０１、２７３８３〜２７４０２、２７３８７〜２７４０６、２７７７０〜２７７８９、２７７７５〜２７７９４、２７７７７〜２７７９６、２７７７９〜２７７９９、２７７８２〜２７８０４、２７７８７〜２７８０９、２７８５３〜２７８７７、２８０２６〜２８０４６、２８０２９〜２８０４８、２８１２８〜２８１４９、２８１３３〜２８１５２、２８４６３〜２８４８２、２８４６８〜２８４８８、２８４７６〜２８４９７、２８４８０〜２８５００、２９０１１〜２９０３０、２９１４３〜２９１６３、２９１６０〜２９１７９、２９１９３〜２９２１２、２９２４５〜２９２６５、２６２５３〜２６２７２、２９３６９〜２９３８８、２９５４８〜２９５８９、２９６７８〜２９６９７、２９６８３〜２９７０２、２９７８２〜２９８０１、２９８２７〜２９８４７、２９８２９〜２９８４８、２９８３０〜２９８４９、２９８３８〜２９８５８、２９８４０〜２９８５９、２９８４１〜２９８６０、２９８４２〜２９８６１、２９８４４〜２９８６３、２９８５４〜２９８７３、３０４８３〜３０５０２、３０４８４〜３０５０３、３０５２９〜３０５４８、３０６７４〜３０６９３、３０９８２〜３１００１、３１５５４〜３１５７３、３２１３１〜３２１５１、３２１３５〜３２１５４、３２１８２〜３２２０１、３２４３１〜３２４５０、３２４３２〜３２４５１、３２４３３〜３２４５２、３２４３４〜３２４５３、３２４４６〜３２４６６、３２４４８〜３２４６７、３２４４９〜３２４６８、３２４５０〜３２４６９、３２４５１〜３２４７０、３２４５２〜３２４７１、３２４５３〜３２４７２、３２４５４〜３２４７３、３２４５５〜３２４７４、３２４５６〜３２４７５、３２４５９〜３２４７９、３２４６１〜３２４８０、３２４６２〜３２４８１、３２４６３〜３２４８２、３２４６４〜３２４８３、３２４６５〜３２４８４、３２４６６〜３２４８５、３２４６７〜３２４８６、３２４６８〜３２４８７、３２４６９〜３２４８８、３２４７０〜３２４８９、３２４７６〜３２４９５、３２４７７〜３２４９６、３２４８０〜３２４９９、３２６１９〜３２６３８、３２６２０〜３２６３９、３２６２１〜３２６４０、３２６２３〜３２６４２、３２６４５〜３２６６４、３２７５２〜３２７７１、３２７５３〜３２７７２、３２７５７〜３２７７６、３２８１６〜３２８３５、３３１７９〜３３１９９、３３１８１〜３３２００、３３１８２〜３３２０１、３３４１２〜３３４３３、３３７２９〜３３７４９、３３８６６〜３３８８５、３４２１１〜３４２３１、３４７３９〜３４７５８、３４９３１〜３４９５０、３５４３６〜３５４５６、３５６６６〜３５６８５、３６２４７〜３６２６６、３６２４９〜３６２６８、３６２５０〜３６２６９、３６２５１〜３６２７０、３６２５２〜３６２７１、３６２５３〜３６２７２、３６２５８〜３６２７７、３６３５４〜３６３７３、３６４０９〜３６４２８、３６５１２〜３６５３１、３６５１７〜３６５３６、３６５８３〜３６６０２、３６６８０〜３６６９９、３６６８１〜３６７００、３６８４１〜３６８６０、３６８４６〜３６８６５、３９６７０〜３９６８９及び３９８３２〜３９８５１は、アンチセンス化合物またはオリゴヌクレオチドによって標的化される場合、少なくとも８０％の阻害を示す。
【０１３４】
特定の実施形態において、配列番号２の次のヌクレオチド領域：３２４４７〜３２４６６、３２４５２〜３２４７１、３２４６０〜３２４７９、３２４６２〜３２４８１、３２４６４〜３２４８３、３２４６５〜３２４８４、３２４６６〜３２４８５、３２４６７〜３２４８６、３２４６８〜３２４８７、３２６１９〜３２６３８、３２６２０〜３２６３９、３２７５３〜３２７７２、３６２５０〜３６２６９、３６５１７〜３６５３６、３２４３２〜３２４５１、３２４３１〜３２４５０、３０４８３〜３０５０２、２９８２８〜２９８４７、２９０１１〜２９０３０、２８０２６〜２８０４５、２９０１１〜２９０３０、２９８２８〜２９８４７、３０４８３〜３０５０２、３２４３１〜３２４５０、３２４３２〜３２４５１、３２４４７〜３２４６６、３２４５２〜３２４７１、３２４６０〜３２４７９、３２４６２〜３２４８１、３２４６４〜３２４８３、３２４６５〜３２４８４、３２４６６〜３２４８５、３２４６７〜３２４８６、３２４６８〜３２４８７、３２６１９〜３２６３８、３２６２０〜３２６３９、３２７５３〜３２７７２、３６２５０〜３６２６９、３６２５２〜３６２７１、３６４０９〜３６４２８及び３６５１７〜３６５３６は、アンチセンス化合物またはオリゴヌクレオチドによって標的化される場合、少なくとも９０％の阻害を示す。
【０１３５】
特定の実施形態において、次のアンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチド：ＩＳＩＳ番号４１３２３６、４１３２８４、４１３３９１、４１３３９９、４１３４１３、４１３４２２、４１３４３３、４１３４３３、４１３４４１、４１３４４６、４２３４６０〜４２３４６６、４２３５２０〜４２３５２７、４２３６０１〜４２３６０４、４７２１８２、４７２１８８、４７２１８９、４７２１９４〜４７２１９６、４７２２０３〜４７２２０６、４７２２０８、４７２３４７、４７２３４９〜４７２３５２、４７２３９８、４８３８０３、４８３８１１〜４８３８１４、４８３８１６〜４８３８１８、４８３８２１〜４８３８２３、４８３８２５〜４８３８３５、４８３８３８〜４８３８４２、４８３８４６〜４８３８４８、４８３８５２、４８３８５３、４８３８６２、４８３８６６、４８３８６８〜４８３８７５、４８３８７９、４８３８８６〜４８３８９０、４８３８９２、４８３８９５、４８３８９７〜４８３９０３、４８３９０６〜４８３９１３、４８３９１６〜４８３９２９、４８３９３２〜４８３９３４、４８３９３６、４８３９４２、４８３９４８〜４８３９５０、４８３９５２、４８３９５４、４８３９５６、４８３９６１、４８３９６８〜４８３９７３、４８３９７５〜４８３９７９、４８３９８１、４８３９８３〜４８３９８９、４８３９９２〜４８３９９７、４８４００１、４８４００２、４８４００４〜４８４００６、４８４００８〜４８４０１３、４８４０１５〜４８４０１７、４８４０１９、４８４０２０、４８４０２８、４８４０３０、４８４０３１、４８４０４１、４８４０４９、４８４０５０、４８４０５４〜４８４０５７、４８４０６３〜４８４０６５、４８４０６９〜４８４０７３、４８４０８１〜４８４０８３、４８４０８５、４８４０８９、４８４０９４、４８４０９７〜４８４１０７、４８４１１０、４８４１１１、４８４１１４〜４８４１１９、４８４１２３、４８４１２５〜４８４１２７、４８４１２９〜４８４１３７、４８４１３９〜４８４１４２、４８４１４５〜４８４１４９、４８４１５２、４８４１５４、４８４１５６〜４８４１５９、４８４１６１、４８４１６２、４８４１６４、４８４１６５、４８４１６７〜４８４１７２、４８４１７８〜４８４１８２、４８４１８４、４８４１８５、４８４１８８、４８４１９０〜４８４１９８、４８４２０２〜４８４２０４、４８４２０９〜４８４２１１、４８４２１３、４８４２１５、４８４２１７〜４８４２２１、４８４２２７、４８４２３１、４８４２３２、４８４２３４、４８４２３５、４８４２３７、４８４２４０〜４８４２４３、４８４２４８〜４８４２５０、４８４２５７、４８４２６３、４８４２６５〜４８４２７１、４８４２７３〜４８４２７６、４８４２８１〜４８４２８５、４８４２９０、４８４２９２、４８４２９３、４８４２９８、４８４２９９、４８４３０１、４８４３０２、４８４３１０、４８４３１９〜４８４３２５、４８４３２７、４８４３３６、４８４３３８、４８４３４２〜４８４３４４、４８４３４６〜４８４３５７、４８４３５９、４８４３６２〜４８４３６５、４８４３６８、４８４３７０〜４８４３８７、４８４３９０、４８４４０４、４８４４１１、４９５４２５、４９５４２８、４９５４２９、４９５４３０、４９５４３６、４９５４３８、４９５４４０〜４９５４５９、４９５４６１〜４９５４７３、４９５４７５、４９５４７６、４９５４７９〜４９５４９２、４９５４９５〜４９５５１１、４９５５１４〜４９５５４５、４９５５４８〜４９５５８０、４９５５８４、４９５５８５、４９５５８７〜４９５５９４、４９５５９６〜４９５６２６、４９５６３０〜４９５６３９、４９５６４１〜４９５６４４、４９５６４８〜４９５６５１、４９５６５６、４９５６５７、４９５６６０〜４９５６６２、４９５６６４〜４９５６６７、４９５６６９〜４９５６７１、４９５６７６、４９５６７７、４９５６８４〜４９５６８９、４９５６９２〜４９５７０７、４９５７１１、４９５７１３、４９５７１４、４９５７１７〜４９５７３２、４９５７３４、４９５７３６〜４９５７３９、４９５７４２〜４９５７５７、４９５７６２〜４９５７６６、４９５７７２〜４９５７７４、４９５７８１〜４９５７８６、４９５７８８、４９５７８９、４９５７９１、４９５７９３〜４９５７９７、４９５７９９、４９５８００、４９５８０４、４９５８０８〜４９５８１３、４９５８１７〜４９５８４４、４９５８４７〜４９５８６０、４９５８６２〜４９５８７０、４９５８７３〜４９５８８３、４９５８８６、４９５８９９〜４９５９０４、４９５９０９、４９５９１１〜４９５９１４、４９５９１８、４９５９２０〜４９５９２３、４９５９５５、４９５９５７、４９５９５８、４９５９８３、４９５９９２、４９６００４、４９６００９、４９６０１０、４９６０１２、４９６０３３、５００８４１、５００８４３、５００８４４、５００８５２、５００８５９、５００８６６、５００８６７、５００８７０、５００８７１、５００８９２、５００８９５、５００９１２、５００９１３、５００９２８、５００９２９、５００９３４、５００９３５、５００９４２、５００９４４〜５００９４６、５００９５０、５００９５３、５００９５７、５００９６０、５００９６１、５００９６６、５００９７４、５００９７５、５００９７９、５００９８２、５００９８５、５００９８６、５００９８９、５００９９０、５００９９４、５００９９５、５００９９７、５００９９８、５０１００４、５０１００７、５０１００８、５０１０１６、５０１０１８〜５０１０２０、５０１０２５、５０１０２６、５０１０２９〜５０１０３１、５０１０３３〜５０１０３５、５０１０３７〜５０１０４１、５０１０４３、５０１０５５、５０１０６１、５０１０６２、５０１０６４、５０１０６７〜５０１０７０、５０１０７６、５０１０９３〜５０１０９８、５０１１００、５０１１０３、５０１１０４、５０１１０６、５０１１０８、５０１１１１、５０１１１７〜５０１１１９、５０１１２２〜５０１１３０、５０１１４０、５０１１５４、５０１１５５、５０１１５８、５０１１６５、５０１１７１、５０１１７６、５０１１７７、５０１１８２〜５０１１８４、５０１１９３、５０１１９４、５０１１９９、５０１２００、５０１２０９、５０１２１０、５０１２１２〜５０１２１４、５０１２１７、５０１２２４、５０１２２７〜５０１２３０、５０１２４０、５０１２４１、５０１２４４、５０１２４７〜５０１２４９、５０１２５４、５０１２５６、５０１２６４、５０１２７０、５０１２８７、５０１２８９、５０１２９０、５０１２９７、５０１３１９、５０１３２２、５０１３２６、５０１３３２、５０１３３５、５０１３４２、５０１３４５、５０１３５３、５０１３５７、５０１３７０、５０１３８２〜５０１４０６、５０１４１０〜５０１４１２、５０１４１４、５０１４２６〜５０１４３１、５０１４３４〜５０１４４３、５０１４４５〜５０１４５７、５０１８３１、５０１８３５、５０１８３７、５０１８３８、５０１８４９〜５０１８５３、５０１８５５、５０１８６１、５０１８６７、５０１８７１、５０１８８０、５０１８８３、５０１８８４、５０１８８６〜５０１８９０、５０１９００、５０１９０３、５０１９１６、５０１９３２〜５０１９３４、５０１９４４、５０１９４６、５０１９４７、５０１９５０、５０１９５１、５０１９５７、５０１９５９、５０１９６０、５０１９６６、５０１９６８、５０１９７６、５０１９７７、５０１９７９、５０１９８１〜５０１９８３、５０１９９１、５０１９９６、５０２０１１、５０２０１３〜５０２０１５、５０２０１９、５０２０２４〜５０２０２８、５０２０３１、５０２０３４、５０２０３６〜５０２０４２、５０２０４５、５０２０４６、５０２０５０、５０２０５３、５０２０５５、５０２０５６、５０２０６２、５０２０６５、５０２０６８〜５０２０７０、５０２０８３〜５０２０８５、５０２０９５〜５０２１００、５０２１０２、５０２１０６、５０２１１０、５０２１１３、５０２１１４、５０２１１７、５０２１１９、５０２１２０、５０２１２２、５０２１２４、５０２１２７、５０２１３１、５０２１３５、５０２１４４、５０２１４６、５０２１４９、５０２１５０、５０２１５４〜５０２１５６、５０２１５８、５０２１６３、５０２１６４、５０２１６７、５０２１７２〜５０２１７６、５０２１７９、５０２１８６、５０２１８９、５０２１９１、５０２１９２、５０２１９４、５０２２０４、５０２２０６、５０２２１５、５０２２２０、５０２２２３、５０２２２８、５０２２３６、５０２３１４、５０２３１９、５０２３２０、５０２３２２、５０２３３４、５０２３３６、５０７６６３、５０７６６５、５０７６６７、５０７６６９、５０７６７５、５０７６７７、５０７６７９、５０７６８４、５０７６８９〜５０７６９６、５０７７０５、５０７７０９〜５０７７１９、５０７７２４、５０７７２６、５２２３６３、５２２３６５、５２２３６６、５２２３６８〜５２２３７５、５２２３８３〜５２２３８６、５２２３８９、５２２３９１、５２２３９５、５２２３９６、５２２３９８〜５２２４１３、５２２４１６〜５２２４２２、５２２４２４〜５２２４４０、５２２４４２〜５２２４５２、５２２４５４、５２２４５６、５２２４５７、５２２４６１〜５２２４６７、５２２４６９〜５２２４７４、５２２４７８〜５２２４９０、５２２４９２〜５２２５１３、５２２５１６〜５２２５１８、５２２５２１、５２２５２２、５２２５２５、５２２５２９、５２２５３０、５２２５３３〜５２２５３５、５２２５４０〜５２２５５０、５２２５５２〜５２２５５８、５２２５６１〜５２２５６５、５２２５７３、５２２５７７〜５２２５８２、５２２５８６〜５２２５９３、５２２５９７、５２２５９８、５２２６０２〜５２２６１４、５２２６１７〜５２２６２５、５２２６２７〜５２２６３９、５２２６４２〜５２２６４５、５２２６５７〜５２２６６３、５２２６６６〜５２２６６８、５２２６７１〜５２２６８４、５２２６８６〜５２２７０２、５２２７０４〜５２２７２８、５２２７３２、５２２７３３、５２２７３８〜５２２７４０、５２２７４４〜５２２７４９、５２２７５４、５２２７５７〜５２２７６１、５２２７６３〜５２２７７１、５２２７７６〜５２２７７８、５２２７８０、５２２７８２〜５２２７８５、５２２７８８〜５２２７９７、５２２８０１〜５２２８０３、５２２８０５、５２２８０７〜５２２８０９、５２２８１３、５２２８２１〜５２２８２４、５２２８２９〜５２２８３１、５２２８３５〜５２２８３９、５２２８４２、５２２８４４、５２２８４６〜５２２８５０、５２２８５２〜５２２８５４、５２２８５６、５２２８５７、５２２８６５〜５２２８７３、５２２８７５〜５２２８８０、５２２８８７〜５２２８９７〜５２２８９９、５２２９０１、５２２９０４〜５２２９０６、５２２９０９、５２２９１３、５２２９１４、５２２９１７、５２２９２４、５２２９２５、５２２９２７、５２２９３１〜５２２９３５、５２２９３９〜５２２９４３、５２２９４５〜５２２９５０、５２２９５６、５２２９６４、５２２９６５、５２２９７０、５２２９７７〜５２２９８２、５２２９８６、５２２９８７、５２２９９６、５２２９９７、５２３０００〜５２３００２、５２３０１５、５２３０１６、５２３０２２、５２３０２５〜５２３０２７、５２５３８８、５２５３９１、５２５３９４、５２５３９５、５２５３９９、５２５４０１〜５２５４０５、５２５４１４〜５２５４１６、５２５４１９、５２５４２０、５２５４２３、５２５４２４、５２５４３１、５２５４３４〜５２５４３６、５２５４４１〜５２５４４４、５２５４５０、５２５４６１、５２５４６８〜５２５４７４、５２５４７７、５２５４７９、５２５４８０、５２５４８４、５２５４８５、５２５４８８〜５２５４９１、５２５４９８〜５２５５０１、５２５５０４〜５２５５０７、５２５５１１〜５２５５１８、５２５５２０、５２５５２８、５２５５３５〜５２５５３７、５２５５３９、５２５５４１、５２５
５４２、５２５５４４、５２５５４７〜５２５５５８、５２５５６５、５２５５７７〜５２５５７９、５２５６０６、５２５６０９〜５２５６１２、５２５６１９、５２５６３１、５２５６３２、５２５６４９、５２５６５０、５２５６５８、５２５６８３、５２５６８７、５２５６８８、５２５６９０、５２５７０５〜５２５７１１、５２５７３３、５２５７３７、５２５７４０、５２５７４１及び５２５７５４は、ＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にし、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの少なくとも６０％の阻害をもたらす。
【０１３６】
特定の実施形態において、次のアンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチド：配列番号２０、３８、３９、４１、４６〜４８、６１〜６４、６８、６９、７４、７５、７６、１０３、１２０、１２１、１２２、１３１、１３４、１４４、１４５、１５０、１５２、１５３、１５４、１８１、１８２、１８３、２０２〜２０４、２２１、２２５、２２６、２２９、２３６、２３７、２４６、２４７、２５１、２５９、２６２、２７２、２７７〜２８０、２８３、３８３、３９１、４０５、４１４、４２５、４３３、４３８、４５０、４５２、４５３、４５５〜４７９、４８２〜４９６、５０４〜５０７、５０９〜５１１、５１４〜５１６、５１８〜５２８、５３１〜５３５、５３９〜５４１、５４５、５４６、５５５、５５９、５６１〜５６８、５７４、５７５、５７７、５７８、５８３、５８４、５８９、５９４〜５９６、５９７、６０１、６０７、６０８、６１３〜６１５、６２２〜６２５、６２７、６５２、６５３、６６０、６７４、７０６、７０９〜７１１、７１８〜７２０、７２６、７３８、７４０〜７４５、７４９〜７５２、７５４〜７５６、７５８〜７６９、７７４、７８９、７９３、７９４、８０７〜８１２、８１５、８１９、８２０、８３９、８４１〜８４６、８４８〜８５２、８７８〜８８０、８８４、８８５、８８９、８９０、８９２〜８９５、８９７、８９９、９００、９０２、９０４、９０７、９１０、９１３〜９１６、９２３、９３５〜９４０、９６０〜９６４、９６８、９７２〜９７７、９７９〜９８１、９８３〜９８５、９８８、９９１〜１０１０、１０１４、１０１５、１０１７、１０１８、１０２０、１０２３〜１０２５、１０３２〜１０３４、１０３６〜１０３８、１０４０、１０４３〜１０４９、１０５１〜１０５４、１０５７〜１０６１、１０６５、１０７１〜１０７３、１０７８〜１０８０、１０８３、１０８４、１０９２〜１０９８、１１０３、１１０７、１１０８、１１１７、１１１８、１１３６、１１４１、１１４２、１１４８、１１４９、１１５３、１１５５、１１５９、１１６５、１１７２〜１１７６、１１７８、１１８１、１１８３〜１１８９、１１９２〜１１９９、１２０２〜１２１５、１２１８〜１２２０、１２２２、１２２８、１２３４〜１２３６、１２３８、１２４０、１２４２、１２４７、１２５４〜１２５９、１２６１〜１２６５、１２６７、１２６９〜１２７５、１２７８〜１２８３、１２８７、１２８８、１２９０〜１２９２、１２９４〜１２９９、１３０１〜１３０３、１３０５、１３０６、１３１４、１３１６、１３１７、１３２７、１３３５、１３３６、１３４０〜１３４３、１３４９〜１３５１、１３５５〜１３５９、１３６７〜１３６９、１３７１、１３７５、１３８０、１３８３〜１３９３、１３９６、１３９７、１４００〜１４０５、１４０９、１４１１〜１４１３、１４１５〜１４２３、１４２５〜１４２８、１４３１〜１４３５、１４３８、１４４０、１４４２〜１４４５、１４４７、１４４８、１４５０、１４５１、１４５３〜１４５８、１４６４〜１４６８、１４７０、１４７１、１４７４、１４７６〜１４８４、１４８８〜１４９０、１４９５〜１４９７、１４９９、１５０１、１５０３〜１５０７、１５１３、１５１７、１５１８、１５２０、１５２１、１５２３、１５２６〜１５２９、１５３４〜１５３６、１５４３、１５４９、１５５１〜１５５７、１５５９〜１５６２、１５６７〜１５７１、１５７６、１５７８、１５７９、１５８４、１５８５、１５８７、１５８８、１５９６、１６０５〜１６１１、１６１３、１６２２、１６２４、１６２８〜１６３０、１６３２〜１６４３、１６４５、１６４８〜１６５１、１６５４、１６５６〜１６７３、１６７６、１６７７、１６９０、１６９７、１６９８、１７０１〜１７０３、１７０９、１７１１、１７１３〜１７４６、１７４８、１７４９、１７５２〜１７６５、１７６８〜１７８４、１７８７〜１８１８、１８２１〜１８５３、１８５７、１８５８、１８６０〜１８６７、１８６９〜１８９９、１９０３〜１９１２、１９１４〜１９１７、１９２１〜１９２４、１９２９、１９３０、１９３３〜１９３５、１９３７〜１９４０、１９４２〜１９４４、１９４９、１９５０、１９５７〜１９６２、１９６５〜１９８０、１９８４、１９８６、１９８７、１９９０〜２００５、２００７、２００９〜２０１２、２０１５〜２０３０、２０３５〜２０３９、２０４５〜２０４７、２０５４〜２０５９、２０６１、２０６２、２０６４、２０６６〜２０７０、２０７２、２０７３、２０７７、２０８１〜２０８６、２０９０〜２１１７、２１２０〜２１３３、２１３５〜２１４３、２１４６〜２１５６、２１５９、２１７２〜２１７７、２１８２、２１８４〜２１８７、２１９１、２１９３〜２１９６、２２２８、２２３０、２２３１、２２５６、２２６５、２２７７、２２８２、２２８３、２２８５、２３０６、２３０８、２３１０〜２３３４、２３３８〜２３４０、２３４２、２３５０、２３５１、２３５４〜２３５９、２３６２〜２３７１、２３７３〜２３８５、２４０２、２４０５、２４０９、２４１５、２４１８、２４２５、２４２８、２４３６、２４４０、２４５３、２４６５〜２４６８、２４７８、２４７９、２４８２、２４８５〜２４８７、２４９２、２４９４、２５０２、２５０８、２５２５、２５２７、２５２８、２５３５、２５４３、２５４４、２５４７、２５５４、２５６０、２５６５、２５６６、２５７１〜２５７３、２５８２、２５８３、２５８８、２５８９、２５９８、２５９９、２６０１〜２６０３、２６０６、２６１３、２６１５、２６３２〜２６３７、２６３９、２６４２、２６４３、２６４５、２６４７、２６５０、２６５６〜２６５８、２６６１〜２６６９、２６７９、２６９１、２６９２、２６９４、２６９５、２７０１、２７０４、２７０５、２７１３、２７１５〜２７１７、２７２２、２７２３、２７２６、２７２７、２７２８、２７３０〜２７３２、２７３４〜２７３９、２７４８、２７５４、２７５５、２７５７、２７６０〜２７６３、２７７９、２７８０、２７８５、２７８６、２７９３、２７９５〜２７９７、２８０１、２８０４、２８０８、２８１１、２８１２、２８１７、２８２５、２８２６、２８３０、２８３３、２８３６、２８３７、２８４０、２８４１、２８４６、２８４８、２８４９、２８５７、２８６４、２８７１、２８７２、２８７５、２８７６、２８９７、２９００、２９１７、２９１８、２９２９、２９３３、２９３５、２９３６〜２９５１、２９５３、２９５９、２９６５、２９６９、２９７８、２９８１、２９８２、２９８４〜２９８８、２９９８、３００１、３０１４、３０３０〜３０３２、３０４２、３０４４、３０４５、３０４８、３０４９、３０５５、３０５７、３０５８、３０６４、３０６６、３０７４、３０７５、３０７７、３０７９、３０８０、３０８１、３０８９、３０９４、３１０９、３１１１〜３１１３、３１１７、３１２２〜３１２６、３１２９、３１３２、３１３４〜３１４０、３１４３、３１４４、３１４８、３１５１、３１５３、３１５４、３１６０、３１６３、３１６６〜３１６８、３１７２〜３１７４、３１８１〜３１８３、３１９３〜３１９８、３２００、３２０４、３２０８、３２１１、３２１２、３２１５、３２１７、３２１８、３２２０、３２２２、３２２５、３２２９、３２３３、３２４２、３２４４、３２４７、３２４８、３２５２〜３２５４、３２５６、３２６１、３２６２、３２６５、３２７０〜３２７４、３２７７、３２８４、３２８７、３２８９、３２９０、３２９２、３３０２、３３０４、３３１３、３３１８、３３２１、３３２６、３３３４、３３８８、３３９０、３３９２、３３９３、３３９６、３３９８、３４０４、３４０８、３４１０、３４１２、３４１７、３４１８、３４２０、３４２２〜３４２９、３４３２、３４３４、３４３８、３４４２〜３４５２、３４６４、３４６６、３４６８、３４７０、３４７１、３４７３〜３４８０、３４８８〜３４９１、３４９４、３４９６、３５００、３５０１、３５０３〜３５１８、３５２１〜３５２７、３５２９〜３５４５、３５４７〜３５５７、３５５９、３５６１、３５６２、３５６６〜３５７２、３５７４〜３５７９、３５８３〜３５９５、３５９７〜３６１８、３６２１〜３６２３、３６２６、３６２７、３６３０、３６３４、３６３５、３６３８〜３６４０、３６４５〜３６５５、３６５７〜３６６３、３６６６〜３６７０、３６７８、３６８２〜３６８７、３６９１〜３６９８、３７０２、３７０３、３７０７〜３７１９、３７２２〜３７３０、３７３２〜３７４４、３７４７〜３７５０、３７６２〜３７６８、３７７１〜３７７３、３７７６〜３７８９、３７９１〜３８０７、３８０９〜３８３３、３８３７、３８３８、３８４３〜３８４５、３８４９〜３８５４、３８５９、３８６２〜３８６６、３８６８〜３８７６、３８８１〜３８８３、３８８５、３８８７〜３８９０、３８９３〜３９０２、３９０６〜３９０８、３９１０、３９１２〜３９１４、３９１８、３９２６〜３９２９、３９３４〜３９３６、３９４０〜３９４４、３９４７、３９４９、３９５１〜３９５５、３９５７〜３９５９、３９６１、３９６２、３９７０〜３９７８、３９８０〜３９８５、３９９２〜３９９５、３９９７〜４０００、４００２〜４００４、４００６、４００９〜４０１１、４０１４、４０１８、４０１９、４０２２、４０２９、４０３０、４０３２、４０３６〜４０４０、４０４４〜４０４８、４０５０〜４０５５、４０６１、４０６９、４０７０、４０７５、４０８２、４０８３、４０８５、４０８６、４０９２、４０９５〜４０９７、４１０５〜４１０９、４１１３、４１１４、４１２３、４１２４、４１２７〜４１２９、４１４３、４１４６、４１４９、４１５０、４１５４、４１５６〜４１６０、４１６９〜４１７１、４１７４、４１７５、４１７８、４１７９、４１８６、４１８９〜４１９１、４１９６〜４１９９、４２０５、４２２２、４２２９〜４２３５、４２３８、４２４０、４２４１、４２４５、４２４６、４２４９〜４２５２、４２５９〜４２６２、４２６５〜４２６８、４２７２〜４２７９、４２８１、４２８９、４２９６〜４２９８、４３００、４３０２、４３０３、４３０５、４３０８〜４３１９、４３２６、４３３８〜４３４０、４３６４、４３６７、４３６８、４３７２、４３７３、４３８０、４３９２、４３９３、４４１０、４４１１、４４１９、４４４４、４４４８、４４４９、４４５１、４４６６〜４４７２、４４９４、４４９８、４５０１、４５０２、４５１５、４５２６〜４５３０、４５３２〜４５３５、４５３７、４５３８〜４５４１、４５４４〜４５４６、４５５６〜４５７３、４５７５〜４５７８、４５８０〜４５８３、４５８８、４５８９、４５９２〜４５９４、４５９６、４５９７、４５９９〜４６０１、４６０４、４６０５、４６１２〜４６１４、４６１６、４６２０、４６２２〜４６２５、４６３４〜４６３６、４６４４、４６５２、４６５５、４６５６、４６６７〜４６７０及び４６７２は、ＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にし、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの少なくとも６０％の阻害をもたらす。
【０１３７】
特定の実施形態において、次のアンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチド：ＩＳＩＳ番号４１３２３６、４１３４３３、４１３４４６、４２３４３７、４２３４４０〜４２３４４５、４２３４４７、４２３４４９、４２３４５０、４２３４５２〜４２３４５４、４２３４６０〜４２３４６５、４２３５２２〜４２３５２８、４２３６０１〜４２３６０４、４７２２０４、４７２２０５、４７２２０８、４７２３４９〜４７２３５１、４８３８０３、４８３８１１〜４８３８１４、４８３８１６〜４８３８１８、４８３８２５、４８３８２６、４８３８２８〜４８３８３５、４８３８３８〜４８３８４２、４８３８４６、４８３８４８、４８３８５２、４８３８６２、４８３８６６、４８３８６９、４８３８７０、４８３８７２〜４８３８７５、４８３８７９、４８３８８７〜４８３８９０、４８３８９２、４８３８９５、４８３８９７〜４８３９０３、４８３９０８〜４８３９１３、４８３９１６〜４８３９２１、４８３９２３、４８３９２４、４８３９２６〜４８３９２８、４８３９３４、４８３９４８〜４８３９５０、４８３９５２、４８３９５４、４８３９６８〜４８３９７０、４８３９７２、４８３９７３、４８３９７５、４８３９７７〜４８３９７９、４８３９８４〜４８３９８９、４８３９９２〜４８３９９４、４８３９９６、４８３９９７、４８４００１、４８４００４、４８４００６、４８４０１０、４８４０１２、４８４０１７、４８４０１９、４８４０２０、４８４０３０、４８４０３１、４８４０４１、４８４０４９、４８４０５６、４８４０６４、４８４０６９、４８４０７０、４８４０７１、４８４０７３、４８４０８２、４８４０８３、４８４０８５、４８４０８９、４８４０９４、４８４０９９〜４８４１０２、４８４１０４、４８４１０５、４８４１０７、４８４１１０、４８４１１１、４８４１１４〜４８４１１８、４８４１２６、４８４１２７、４８４１２９〜４８４１３１、４８４１３３、４８４１３５〜４８４１３７、４８４１３９〜４８４１４２、４８４１４５〜４８４１４８、４８４１５６〜４８４１５８、４８４１６１、４８４１６７、４８４１６９〜４８４１７２、４８４１７８、４８４１８０〜４８４１８２、４８４１８５、４８４１９０、４８４１９２〜４８４１９４、４８４１９８、４８４２０２〜４８４２０４、４８４２０９、４８４２１１、４８４２１５、４８４２１７〜４８４２２０、４８４２３１、４８４２３２、４８４２３５、４８４２４１、４８４２４８、４８４２４９、４８４２６３、４８４２６５、４８４２６７〜４８４２７１、４８４２７３、４８４２７４、４８４２７６、４８４２８３〜４８４２８５、４８４２９０、４８４２９２、４８４２９３、４８４３０１、４８４３０２、４８４３２０〜４８４３２２、４８４３２４、４８４３２７、４８４３３６、４８４３４２〜４８４３４４、４８４３４６、４８４３４８〜４８４３５０、４８４３５２、４８４３５３、４８４３５５〜４８４３５７、４８４３５９、４８４３６８、４８４３７０〜４８４３７８、４８４３８１〜４８４３８３、４８４３９０、４９５４２５、４９５４２９、４９５４３０、４９５４４０〜４９５４４３、４９５４４５〜４９５４５４、４９５４５６、４９５４５８、４９５４６１〜４９５４７３、４９５４７６、４９５４７９〜４９５４８５、４９５４８７〜４９５４９２、４９５４９５〜４９５４９９、４９５５０１〜４９５５１１、４９５５１４〜４９５５３１、４９５５３３〜４９５５４５、４９５５４８〜４９５５５６、４９５５５８、４９５５６０〜４９５５６６、４９５５６８〜４９５５８０、４９５５８４、４９５５８５、４９５５８８〜４９５５９２、４９５５９７〜４９５６００、４９５６０２〜４９５６１０、４９５６１２〜４９５６１４、４９５６１６〜４９５６２６、４９５６３１〜４９５６３３、４９５６３６〜４９５６３９、４９５６４１〜４９５６４３、４９５６４９、４９５６５０、４９５６５６、４９５６５７、４９５６６１、４９５６６４、４９５６６６、４９５６６９〜４９５６７１、４９５６７７、４９５６８５、４９５６８６、４９５６９４、４９５６９５、４９５６９７、４９５６９９〜４９５７０２、４９５７０５〜４９５７０７、４９５７１１、４９５７１４、４９５７１８〜４９５７２０、４９５７２４、４９５７３０、４９５７３１、４９５７３６〜４９５７３９、４９５７４３〜４９５７４６、４９５７４８〜４９５７５４、４９５７５６、４９５７５７、４９５７６２、４９５７６３、４９５７６６、４９５７７２、４９５７８２、４９５７８４、４９５７８５、４９５７８９、４９５７９４、４９５７９５、４９５８００、４９５８０４、４９５８０８〜４９５８１３、４９５８１７〜４９５８２２、４９５８２５〜４９５８３３、４９５８３５〜４９５８３７、４９５８３８〜４９５８４４、４９５８４８〜４９５８５０、４９５８５２〜４９５８５７、４９５８５９、４９５８６０、４９５８６７〜４９５８６９、４９５８７３〜４９５８７８、４９５８８２、４９５８９９〜４９５９０２、４９５９０４、４９５９１１、４９５９１２、４９５９５５、４９５９５７、４９５９５８、４９５９９２、５００８４１、５００８４４、５００８５２、５００８５９、５００８６７、５００８９２、５００９１３、５００９２８、５００９４２、５００９５０、５００９５３、５００９６６、５００９７５、５００９８６、５００９８９、５００９９０、５００９９４、５００９９８、５０１０１８〜５０１０２０、５０１０２５、５０１０３０、５０１０３３〜５０１０３５、５０１０３８〜５０１０４１、５０１０６２、５０１０６４、５０１０６７、５０１０６９、５０１０９３、５０１０９４、５０１０９７、５０１０９８、５０１１００、５０１１０３、５０１１１１、５０１１１８、５０１１２２、５０１１２３、５０１１２７、５０１１２８、５０１１５４、５０１１６５、５０１１７１、５０１１７６、５０１１８３、５０１１８４、５０１１９９、５０１２００、５０１２１０、５０１２１２〜５０１２１４、５０１２２４、５０１２４０、５０１２４９、５０１２７０、５０１２８７、５０１３８２〜５０１３８５、５０１３８７〜５０１３９６、５０１３９８〜５０１４０２、５０１４０４〜５０１４０６、５０１４１０〜５０１４１２、５０１４１４、５０１４２６〜５０１４３０、５０１４３５、５０１４３６、５０１４３８〜５０１４４３、５０１４４５、５０１４４７〜５０１４５２、５０１４５４〜５０１４５７、５０１８４９、５０１８５０、５０１８５２、５０１８５５、５０１８６１、５０１８７１、５０１８８３、５０１８８４、５０１８８６、５０１８９０、５０１９１６、５０１９３２、５０１９４４、５０１９４６、５０１９５０、５０１９５１、５０１９５９、５０１９６０、５０１９６６、５０１９６８、５０１９８１〜５０１９８３、５０２０１３、５０２０１５、５０２０２５、５０２０２６、５０２０３７、５０２０４０、５０２０４５、５０２０４６、５０２０５６、５０２０８３、５０２０９８、５０２０９９、５０２１０６、５０２１１０、５０２１１９、５０２１２０、５０２１３１、５０２１３５、５０２１５４〜５０２１５６、５０２１６３、５０２１６４、５０２１７５、５０２１７９、５０２１８９、５０２１９１、５０２１９４、５０２２２０、５０２３１９、５０２３２２、５０２３３４、５０７６６３、５０７６７９、５０７６８４、５０７６９２〜５０７６９６、５０７７１０、５０７７１６〜５０７７１８、５０７７２４、５２２３６３、５２２３６６、５２２３６８、５２２３７０、５２２３７３〜５２２３７５、５２２３８３〜５２２３８５、５２２３９９、５２２４０４〜５２２４０６、５２２４０８、５２２４０９、５２２４１１、５２２４１８、５２２４２１、５２２４２２、５２２４２４、５２２４２７、５２２４２８、５２２４３４〜５２２４３７、５２２４４０、５２２４４２、５２２４４４〜５２２４４６、５２２４５０、５２２４５２、５２２４５７、５２２４６２〜５２２４６７、５２２４７０、５２２４７３、５２２４７４、５２２４７８、５２２４７９、５２２４８２、５２２４８４〜５２２４９０、５２２４９２、５２２４９４〜５２２４９６、５２２５０１、５２２５０３〜５２２５０５、５２２５０９、５２２５１０、５２２５１８、５２２５２９、５２２５３４、５２２５４０、５２２５４２〜５２２５５０、５２２５５２〜５２２５５６、５２２５６１、５２２５６２、５２２５６５、５２２５７８〜５２２５８２、５２２５８７〜５２２５９２、５２２６０２〜５２２６１０、５２２６１２〜５２２６１４、５２２６１８、５２２６１９、５２２６２１、５２２６２２、５２２６２５、５２２６２７、５２２６３０〜５２２６３８、５２２６４２〜５２２６４５、５２２６５７、５２２６５８、５２２６６１〜５２２６６３、５２２６６６、５２２６６７、５２２６７１〜５２２６８３、５２２６８７〜５２２６９４、５２２６９６〜５２２７０２、５２２７０５、５２２７０６、５２２７０９、５２２７１０、５２２７１４〜５２２７１９、５２２７２２〜５２２７２８、５２２７４０、５２２７４５〜５２２７４８、５２２７５４、５２２７５７〜５２２７５９、５２２７６１、５２２７６６〜５２２７７１、５２２７７６〜５２２７７８、５２２７８０、５２２７８３、５２２７８４、５２２７８９、５２２７９１、５２２７９３、５２２７９４、５２２７９７、５２２８０１、５２２８０２、５２２８０７、５２２８２１、５２２８３１、５２２８３８、５２２８４２、５２２８４４、５２２８５３、５２２８５７、５２２８６５、５２２８６６、５２２８６９〜５２２８７２、５２２８７７、５２２８７８、５２２８８８、５２２８８９、５２２８９４、５２２８９７、５２２８９８、５２２９０５、５２２９１３、５２２９１７、５２２９２４、５２２９２５、５２２９３２、５２２９３９、５２２９４０〜５２２９４３、５２２９４７、５２２９５０、５２２９６４、５２２９６５、５２２９９６、５２３０００、５２３００２、５２３０２６、５２５３９５、５２５４０１、５２５４０２、５２５４１５、５２５４３１、５２５４４２、５２５４４３、５２５４６８〜５２５４７２、５２５４７４、５２５４７７、５２５４７９、５２５４８０、５２５４９９〜５２５５０１、５２５５０５、５２５５０６、５２５５１２、５２５５１３、５２５５１５、５２５５３６、５２５５４４、５２５５５１〜５２５５５４、５２５５７８、５２５６１２、５２５６３１、５２５６８８、５２５７０５、５２５７０８、５２５７１１、５２５７３３及び５２５７５４は、ＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にし、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの少なくとも７０％の阻害をもたらす。
【０１３８】
特定の実施形態において、次のアンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチド：配列番号２０、３８、３９、４６、４７、６２、６３、１０３、１２０、１２１、１３１、１４４、１４５、１５０、１５２、１５３、１５４、１８２、１８３、２０２、２０３、２０４、２２１、２２５、２２９、２４６、２５９、２８３、４２５、４３８、４５２、４５３、４５５〜４５８、４６０、４６２〜４７７、４７９、４８２〜４８５、４８７〜４９６、５０４〜５０７、５０９〜５１１、５１８、５１９、５２１〜５２８、５３１〜５３５、５３９、５４１、５４５、５５５、５５９、５６２、５６３、５６５〜５６８、５７４、５７５、５７７、５９４、５９５、５９７、６２３、６２４、６２７、６５３、７０６、７１０、７４０、７４２〜７４４、７４９〜７５２、７５４〜７５６、７５８、７６０〜７６６、７６８、７６９、７８９、８０８〜８１１、８４１〜８４３、８４５、８４６、８４８、８５０〜８５２、８８０、８９０、８９３、８９５、８９７、９１４〜９１６、９３９、９４０、９６０、９６１、９７３、９７４、９８１、９９１〜９９７、１０００、１００１、１００３〜１００８、１０１５、１０２０、１０２４、１０３２、１０３４、１０３６、１０４３〜１０４５、１０４７〜１０４９、１０５２、１０５９〜１０６１、１０７９、１０８０、１０８３、１０８４、１０９２、１０９３、１０９６、１０９８、１１５５、１１６５、１１７３〜１１７６、１１７８、１１８１、１１８３〜１１８９、１１９４〜１１９９、１２０２〜１２０７、１２０９、１２１０、１２１２〜１２１４、１２２０、１２３４〜１２３６、１２３８、１２４０、１２５４〜１２５６、１２５８、１２５９、１２６１、１２６３〜１２６５、１２７０〜１２７５、１２７８〜１２８０、１２８２、１２８３、１２８７、１２９０、１２９２、１２９６、１２９８、１３０３、１３０５、１３０６、１３１６、１３１７、１３２７、１３３５、１３４２、１３５０、１３５５〜１３５７、１３５９、１３６８、１３６９、１３７１、１３７５、１３８０、１３８５〜１３８８、１３９０、１３９１、１３９３、１３９６、１３９７、１４００〜１４０４、１４１２、１４１３、１４１５〜１４１７、１４１９、１４２１〜１４２３、１４２５〜１４２８、１４３１〜１４３４、１４４２〜１４４４、１４４７、１４５３、１４５５〜１４５８、１４６４、１４６６〜１４６８、１４７１、１４７６、１４７８〜１４８０、１４８４、１４８８〜１４９０、１４９５、１４９７、１５０１、１５０３〜１５０６、１５１７、１５１８、１５２１、１５２７、１５３４、１５３５、１５４９、１５５１、１５５３〜１５５７、１５５９、１５６０、１５６２、１５６９〜１５７１、１５７６、１５７８、１５７９、１５８７、１５８８、１６０６〜１６０８、１６１０、１６１３、１６２２、１６２８〜１６３０、１６３２、１６３４〜１６３６、１６３８、１６３９、１６４１〜１６４３、１６４５、１６５４、１６５６〜１６６４、１６６７〜１６６９、１６７６、１６７７、１６９８、１７０２、１７０３、１７１３〜１７１６、１７１８〜１７２７、１７２９、１７３１、１７３４〜１７４６、１７４９、１７５２〜１７５８、１７６０〜１７６５、１７６８〜１７７２、１７７４〜１７８４、１７８７〜１８０４、１８０６〜１８１８、１８２１〜１８２９、１８３１、１８３３〜１８３９、１８４１〜１８５３、１８５７、１８５８、１８６１〜１８６５、１８７０〜１８７３、１８７５〜１８８３、１８８５〜１８８７、１８８９〜１８９９、１９０４〜１９０６、１９０９〜１９１２、１９１４〜１９１６、１９２２、１９２３、１９２９、１９３０、１９３４、１９３７、１９３９、１９４２〜１９４４、１９５０、１９５８、１９５９、１９６７、１９６８、１９７０、１９７２〜１９７５、１９７８〜１９８０、１９８４、１９８７、１９９１〜１９９３、１９９７、２００３、２００４、２００９〜２０１２、２０１６〜２０１９、２０２１〜２０２７、２０２９、２０３０、２０３５、２０３６、２０３９、２０４５、２０５５、２０５７、２０５８、２０６２、２０６７、２０６８、２０７３、２０７７、２０８１〜２０８６、２０９０〜２０９５、２０９８〜２１０６、２１０８〜２１１７、２１２１〜２１２３、２１２５〜２１３０、２１３２、２１３３、２１４０〜２１４２、２１４６〜２１５１、２１５５、２１７２〜２１７５、２１７７、２１８４、２１８５、２２２８、２２３０、２２３１、２２６５、２３０８、２３１０〜２３１３、２３１５〜２３２４、２３２６〜２３３０、２３３２〜２３３４、２３３８〜２３４０、２３４２、２３５０、２３５１、２３５４〜２３５８、２３６３、２３６４、２３６６〜２３７１、２３７３、２３７５〜２３８０、２３８２〜２３８５、２４７８、２４８７、２５０８、２５２５、２５４３、２５５４、２５６０、２５６５、２５７２、２５７３、２５８８、２５８９、２５９９、２６０１〜２６０３、２６１３、２６３２、２６３３、２６３６、２６３７、２６３９、２６４２、２６５０、２６５７、２６６１、２６６２、２６６６、２６６７、２６９１、２６９５、２７１５〜２７１７、２７２２、２７２７、２７３０〜２７３２、２７３５〜２７３８、２７５５、２７５７、２７６０、２７６２、２７７９、２７９３、２８０１、２８０４、２８１７、２８２６、２８３７、２８４０、２８４１、２８４６、２８４９、２８５７、２８６４、２８７２、２８９７、２９１８、２９４７、２９４８、２９５０、２９５３、２９５９、２９６９、２９８１、２９８２、２９８４、２９８８、３０１４、３０３０、３０４２、３０４４、３０４８、３０４９、３０５７、３０５８、３０６４、３０６６、３０７９〜３０８１、３１１１、３１１３、３１２３、３１２４、３１３５、３１３８、３１４３、３１４４、３１５４、３１７３、３１８１、３１９６、３１９７、３２０４、３２０８、３２１７、３２１８、３２２９、３２３３、３２５２〜３２５４、３２６１、３２６２、３２７３、３２７７、３２８７、３２８９、３２９２、３３１８、３３８８、３３９３、３４０４、３４１２、３４１７、３４２０、３４２５〜３４２９、３４３２、３４４３、３４４９〜３４５１、３４６４、３４６８、３４７１、３４７３、３４７５、３４７８〜３４８０、３４８８〜３４９０、３５０４、３５０９〜３５１１、３５１３〜３５１６、３５２３、３５２６、３５２７、３５２９、３５３２、３５３３、３５３９〜３５４２、３５４５、３５４７、３５４９〜３５５１、３５５５、３５５７、３５６２、３５６７〜３５７２、３５７５、３５７８、３５７９、３５８３、３５８４、３５８７、３５８９〜３５９５、３５９７、３５９９〜３６０１、３６０６、３６０８〜３６１０、３６１４、３６１５、３６２３、３６３４、３６３９、３６４５、３６４７〜３６５５、３６５７〜３６６１、３６６６、３６６７、３６７０、３６８３〜３６８７、３６９２〜３６９７、３７０７〜３７１５、３７１７〜３７１９、３７２３、３７２４、３７２６、３７２７、３７３０、３７３２、３７３５〜３７４３、３７４７〜３７５０、３７６２、３７６３、３７６６〜３７６８、３７７１、３７７２、３７７６〜３７８８、３７９２〜３７９９、３８０１〜３８０７、３８１０、３８１１、３８１４、３８１５、３８１９〜３８２４、３８２７〜３８３３、３８４５、３８５０〜３８５３、３８５９、３８６２〜３８６４、３８６６、３８７１〜３８７６、３８８１〜３８８３、３８８５、３８８８、３８８９、３８９４、３８９６、３８９８、３８９９、３９０２、３９０６、３９０７、３９１２、３９２６、３９３６、３９４３、３９４７、３９４９、３９５８、３９６２、３９７０、３９７１、３９７４〜３９７７、３９８２、３９８３、３９９３、３９９４、３９９９、４００２、４００３、４０１０、４０１８、４０２２、４０２９、４０３０、４０３７、４０４４〜４０４８、４０５２、４０５５、４０６９、４０７０、４０９６、４１２３、４１２７、４１２９、４１５０、４１５６、４１５７、４１７０、４１８６、４１９７、４１９８、４２２９〜４２３３、４２３５、４２３８、４２４０、４２４１、４２６０〜４２６２、４２６６、４２６７、４２７３、４２７４、４２７６、４２９７、４３０５、４３１２〜４３１５、４３３９、４３７３、４３９２、４４４９、４４６６、４４６９、４４７２、４４９４、４５１５、４５２６〜４５３０、４５３２、４５３３、４５３５、４５３７〜４５４０、４５４５、４５４６、４５５８〜４５６０、４５６２〜４５７０、４５７３、４５７５、４５７６、４５７８、４５８０、４５８２、４５８８、４５８９、４５９２、４５９６、４６００、４６０１、４６０４、４６１２〜４６１４、４６１６、４６２２〜４６２５、４６３４、４６３５、４６５２、４６６７及び４６６８は、ＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にし、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの少なくとも７０％の阻害をもたらす。
【０１３９】
特定の実施形態において、次のアンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチド：ＩＳＩＳ番号４１３４３３、４２３４６３、４２３４６４、４２３５２３、４２３５２４、４２３５２６、４７２３５１、４８３８１７、４８３８２５、４８３８２６、４８３８２８、４８３８３０〜４８３８３５、４８３８３９〜４８３８４１、４８３８４８、４８３８５２、４８３８６６、４８３８６９、４８３８７０、４８３８７３〜４８３８７５、４８３８８７、４８３８８９、４８３８９０、４８３８９５、４８３８９７、４８３８９８、４８３９００、４８３９０１、４８３９０８〜４８３９１０、４８３９１３、４８３９１６、４８３９１９、４８３９２１、４８３９２３、４８３９２４、４８３９２７、４８３９５２、４８３９６８〜４８３９７０、４８３９７２、４８３９８４、４８３９８６〜４８３９８８、４８３９９２、４８３９９３、４８３９９６、４８３９９７、４８４００４、４８４０１７、４８４０３１、４８４０４１、４８４０４９、４８４０６４、４８４０７０、４８４０８５、４８４０９４、４８４０９９、４８４１００、４８４１１５〜４８４１１７、４８４１２６、４８４１２７、４８４１２９〜４８４１３１、４８４１３３、４８４１３７、４８４１３９〜４８４１４１、４８４１４８、４８４１５６〜４８４１５８、４８４１６７、４８４１６９〜４８４１７１、４８４１８１、４８４１８２、４８４１９２、４８４１９３、４８４２０３、４８４２０４、４８４２０９、４８４２１５、４８４２１７、４８４２１８、４８４２２０、４８４２３１、４８４２３５、４８４２４９、４８４２６７〜４８４２７１、４８４２７３、４８４２８３、４８４２８４、４８４２９２、４８４２９３、４８４３０１、４８４３２７、４８４３３６、４８４３４３、４８４３４４、４８４３４８、４８４３５０、４８４３５３、４８４３５７、４８４３６８、４８４３７７、４８４３７８、４９５４２５、４９５４２９、４９５４４０、４９５４４２、４９５４４６、４９５４４９〜４９５４５１、４９５４５３、４９５４５４、４９５４６３、４９５４６４、４９５４６６、４９５４６７、４９５４６９〜４９５４７２、４９５４８１、４９５４８２、４９５４８４、４９５４８５、４９５４８８〜４９５４９２、４９５４９５〜４９５４９８、４９５５０５〜４９５５１０、４９５５１４〜４９５５３１、４９５５３３〜４９５５３７、４９５５３９〜４９５５４１、４９５５４３〜４９５５４５、４９５５５０〜４９５５５６、４９５５６０、４９５５６１〜４９５５６４、４９５５６６、４９５５６８〜４９５５７８、４９５５８５、４９５５９１、４９５５９８〜４９５６００、４９５６０４、４９５６０６、４９５６０８、４９５６０９、４９５６１８〜４９５６２２、４９５６３９、４９５６４９、４９５６５０、４９５６８５、４９５６８６、４９５６９７、４９５７０２、４９５７０５〜４９５７０７、４９５７１８、４９５７３０、４９５７３６、４９５７３８、４９５７３９、４９５７４４、４９５７４５、４９５７４９、４９５７５１〜４９５７５３、４９５７５６、４９５７８５、４９５８０８〜４９５８１０、４９５８１７〜４９５８２０、４９５８２２、４９５８２５〜４９５８３２、４９５８３５〜４９５８４４、４９５８４９、４９５８５２〜４９５８５４、４９５８５６、４９５８５７、４９５８６７〜４９５８６９、４９５８７４〜４９５８７８、４９５９０２、４９５９９２、５００８５９、５００８６７、５００９１３、５００９９８、５０１０２０、５０１０３４、５０１０３５、５０１０６４、５０１０９４、５０１０９８、５０１１００、５０１１０３、５０１１２７、５０１１８３、５０１１９９、５０１２１３、５０１３８５、５０１３８７〜５０１３９３、５０１３９６、５０１３９８、５０１４０４〜５０１４０６、５０１４１１、５０１４１２、５０１４２７〜５０１４３０、５０１４３５、５０１４３６、５０１４３８、５０１４４０、５０１４４２、５０１４４３、５０１４４７〜５０１４５２、５０１４５４〜５０１８５５、５０１８６１、５０１８８４、５０１９４４、５０１９５０、５０１９８３、５０２０４０、５０２０４６、５０２０５６、５０２０８３、５０２０９９、５０２１１９、５０２１５４、５０２１６４、５０２１７５、５０２１７９、５０２１８９、５０２１９１、５０２３１９、５０７６９２、５０７６９４、５０７６９６、５０７７１７、５２２３６６、５２２３７３〜５２２３７５、５２２３８３、５２２４３５〜５２２４３７、５２２４４４、５２２４４５、５２２４５０、５２２４６５、５２２４７３、５２２４８４、５２２４８５、５２２４９５、５２２５０１、５２２５０９、５２２５２９、５２２５４６、５２２５５０、５２２５５３〜５２２５５６、５２２５７９〜５２２５８２、５２２５８７〜５２２５８９、５２２６０６〜５２２６１０、５２２６１８、５２２６２１、５２２６２７、５２２６３０〜５２２６３２、５２２６３４、５２２６３８、５２２６４３、５２２６４５、５２２６６７、５２２６７１、５２２６７２、５２２６７４〜５２２６８３、５２２６８７〜５２２６９２、５２２６９４、５２２６９６〜５２２７００、５２２７０５、５２２７０９、５２２７１５〜５２２７１９、５２２７４５、５２２７５７、５２２７７０、５２２７８３、５２２７８４、５２２８０７、５２２８６５、５２２８６６、５２２８８８、５２２８８９、５２２８９７、５２２９１３、５２２９４２、５２２９６４、５２３００２、５２５４０１、５２５４６９、５２５４７０、５２５５０１及び５２５６１２は、ＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にし、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの少なくとも８０％の阻害をもたらす。
【０１４０】
特定の実施形態において、次のアンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチド：配列番号１０３、１２０、１２１、１３１、１４４、１４５、１５０、１５２、１５３、１８２、２０４、２４６、２５９、２８３、４２５、４５６、４５７、４６２、４６３、４６７〜４６９、４８７〜４９０、５０４、５０６、５０９、５１０、５１８、５１９、５２１、５２３、５２４〜５２８、５３２〜５３４、５４１、５４５、５５９、５６２、５６３、５６６〜５６８、５９４、７４２、７５０、７５１、７６２、８０８〜８１０、８４３、８４５、８９３、９１５、９３９、９７３、９９３〜９９５、９９７、１０００、１００１、１００５、１００６、１００８、１０３４、１０６０、１０６１、１０７９、１０８４、１１７３、１１７５、１１７６、１１８１、１１８３、１１８４、１１８６、１１８７、１１９４〜１１９６、１１９９、１２０２、１２０５、１２０７、１２０９、１２１０、１２１３、１２３８、１２５４〜１２５６、１２５８、１２７０、１２７２〜１２７４、１２７８、１２７９、１２８２、１２８３、１２９０、１３０３、１３１７、１３２７、１３３５、１３５０、１３５６、１３７１、１３８０、１３８５、１３８６、１４０１〜１４０３、１４１２、１４１３、１４１５〜１４１７、１４１９、１４２３、１４２５〜１４２７、１４３４、１４４２〜１４４４、１４５３、１４５５〜１４５７、１４６７、１４６８、１４７８、１４７９、１４８９、１４９０、１４９５、１５０１、１５０３、１５０４、１５０６、１５１７、１５２１、１５３５、１５５３〜１５５７、１５５９、１５６９、１５７０、１５７８、１５７９、１５８７、１６１３、１６２２、１６２９、１６３０、１６３４、１６３６、１６３９、１６４３、１６５４、１６６３、１６６４、１６７７、１６９８、１７０２、１７１３、１７１５、１７１９、１７２２〜１７２４、１７２６、１７２７、１７３６、１７３７、１７３９、１７４０、１７４２〜１７４５、１７５４、１７５５、１７５７、１７５８、１７６１〜１７６５、１７６８〜１７７１、１７７８〜１７８３、１７８７〜１８０４、１８０６〜１８１０、１８１２〜１８１４、１８１６〜１８１８、１８２３〜１８２９、１８３３〜１８３７、１８３９、１８４１〜１８５１、１８５８、１８６４、１８７１〜１８７３、１８７７、１８７９、１８８１、１８８２、１８９１〜１８９５、１９１２、１９２２、１９２３、１９５８、１９５９、１９７０、１９７５、１９７８〜１９８０、１９９１、２００３、２００９、２０１１、２０１２、２０１７、２０１８、２０２２、２０２４〜２０２６、２０２９、２０５８、２０８１〜２０８３、２０９０〜２０９３、２０９５、２０９８〜２１０５、２１０８〜２１１７、２１２２、２１２５〜２１２７、２１２９、２１３０、２１４０〜２１４２、２１４７〜２１５１、２１７５、２２６５、２３１３、２３１５〜２３２１、２３２４、２３２６、２３３２〜２３３４、２３３９、２３４０、２３５５〜２３５８、２３６３、２３６４、２３６６、２３６８、２３７０、２３７１、２３７５〜２３８０、２３８２、２３８３、２５７２、２５８８、２６０２、２６３３、２６３７、２６３９、２６４２、２６６６、２６９５、２７１７、２７３１、２７３２、２７５７、２８６４、２８７２、２９１８、２９５３、２９５９、２９８２、３０４２、３０４８、３０８１、３１３８、３１４４、３１５４、３１８１、３１９７、３２１７、３２５２、３２６２、３２７３、３２７７、３２８７、３２８９、３４０４、３４１７、３４２５、３４２７、３４２９、３４５０、３４７１、３４７８〜３４８０、３４８８、３５４０〜３５４２、３５４９、３５５０、３５５５、３５７０、３５７８、３５８９、３５９０、３６００、３６０６、３６１４、３６３４、３６５１、３６５５、３６５８〜３６６１、３６８４〜３６８７、３６９２〜３６９４、３７１１〜３７１５、３７２３、３７２６、３７３２、３７３５〜３７３７、３７３９、３７４３、３７４８、３７５０、３７７２、３７７６、３７７７、３７７９〜３７８８、３７９２〜３７９７、３７９９、３８０１〜３８０３、３８０５、３８１０、３８１４、３８２０〜３８２４、３８５０、３８６２、３８７５、３８８８、３８８９、３９１２、３９７０、３９７１、３９９３、３９９４、４００２、４０１８、４０４７、４０６９、４１２９、４１５６、４２３０、４２３１、４２６２、４３７３、４５２６、４５２９、４５３２、４５３８、４５４０、４５６０、４５６２〜４５６４、４５６６〜４５７０、４５７８、４６２３、４６２５及び４６６７は、ＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にし、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの少なくとも８０％の阻害をもたらす。
【０１４１】
特定の実施形態において、次のアンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチド：ＩＳＩＳ番号４１３４３３、４２３４６３、４８３８１７、４８３８２５、４８３８３４、４８３８４８、４８３８６６、４８３８６９、４８３８７３、４８３８７４、４８３８９５、４８３８９８、４８３９０８、４８３９１０、４８３９１３、４８３９５２、４８４０８５、４８４１４８、４８４１５７、４８４１７０、４８４１８１、４８４２３１、４８４２７１、４８４２８３、４８４３５０、４８４３５３、４９５４４９、４９５４５０、４９５４９５、４９５４９８、４９５５０５、４９５５０６、４９５５１６〜４９５５２０、４９５５２２〜４９５５２４、４９５５２６、４９５５２７、４９５５３５、４９５５５３〜４９５５５５、４９５５６２、４９５５６３、４９５５７０、４９５５７１、４９５５７５〜４９５５７７、４９５６２０、４９５７５２、４９５８０９、４９５８２５、４９５８２９、４９５８３６、４９５８３７、４９５８３９〜４９５８４２、４９５８５３、４９５８５７、４９５８７６、４９５８７８、５０１３８５、５０１３８７、５０１４０４、５０１４１２、５０１４２７、５０１４３０、５０１４４２、５０１４４３、５０１４４７、５０１４４８、５０１４５０、５０１４５２、５０１８６１、５２２６３２、５２２６８８及び５２２７４５は、ＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にし、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの少なくとも９０％の阻害をもたらす。
【０１４２】
特定の実施形態において、次のアンチセンス化合物またはアンチセンスオリゴヌクレオチド：配列番号２８３、４２５、４５７、４６７、５１０、５１８、５２７、５４１、５５９、５６２、５６６、５６７、１１８１、１１８４、１１９４、１１９６、１１９９、１２３８、１３７１、１４３４、１４４３、１４５６、１４６７、１５１７、１５５７、１５６９、１６３６、１６３９、１７２２、１７２３、１７６８、１７７１、１７７８、１７７９、１７８９〜１７９３、１７９５〜１７９７、１７９９、１８００、１８０８、１８２６〜１８２８、１８３５、１８３６、１８４３、１８４４、１８４８〜１８５０、１８９３、２０２５、２０８２、２０９８、２１０２、２１０９、２１１０、２１１２〜２１１５、２１２６、２１３０、２１４９、２１５１、２３１３、２３１５、２３３２、２３４０、２３５５、２３５８、２３７０、２３７１、２３７５、２３７６、２３７８、２３８０、２９５９、３７３７、３７９３、３８５０、４５６２、４５６４、４５６６、４５６８及び４５６９は、ＤＧＡＴ２核酸の領域を標的にし、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの少なくとも９０％の阻害をもたらす。
【０１４３】
特定の実施形態において、化合物は、配列番号２のヌクレオチド２６７７８〜２６７９７、２３２４２〜２３２６１、２６６３０〜２６６４９，１５２５１〜１５２７０、２８０２６〜２８０４５、３５４３６〜３５４５５、１０８２０〜１０８３６、２３２４６〜２３２６２内の長さの等しい部分に相補的である、少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６個の連続した核酸塩基部分を有する８〜８０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む。
【０１４４】
特定の実施形態において、化合物は、配列番号２のヌクレオチド２６７７８〜２６７９７、２３２４２〜２３２６１、２６６３０〜２６６４９，１５２５１〜１５２７０、２８０２６〜２８０４５、３５４３６〜３５４５５、１０８２０〜１０８３６、２３２４６〜２３２６２内に相補的な１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む。
【０１４５】
特定の実施形態において、化合物は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つの少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６個の連続した核酸塩基部分を含む核酸塩基配列を有する８〜８０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む。
【０１４６】
特定の実施形態において、化合物は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む。
【０１４７】
特定の実施形態において、化合物は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２に対して標的化された修飾オリゴヌクレオチドは、ＩＳＩＳ４８４１３７、４８４０８５、４８４１２９、４９５５７６、５０１８６１、５０２１９４、５２５４４３及び５２５６１２である。
【０１４８】
特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２に対して標的化された修飾オリゴヌクレオチドは、ＩＳＩＳ４８４１３７、４８４０８５、４８４１２９、４９５５７６、５０１８６１、５０２１９４、５２５４４３及び５２５６１２である。以下の実施例の項で記載するようにスクリーニングを行った約５，０００個のアンチセンスオリゴヌクレオチドのうち、ＩＳＩＳ４８４１３７、４８４０８５、４８４１２９、４９５５７６、５０１８６１、５０２１９４、５２５４４３及び５２５６１２が上位リード化合物として浮上した。特に、ＩＳＩＳ４８４１３７は、約５，０００個のアンチセンスオリゴヌクレオチドのうち、効力及び忍容性に関して最も優れた特性の組み合わせを示した。
【０１４９】
特定の実施形態において、前述の化合物またはオリゴヌクレオチドのいずれかは、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、少なくとも１つの修飾糖及び／または少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む。
【０１５０】
ある特定の態様において、前述の化合物またはオリゴヌクレオチドのいずれかは、少なくとも１つの修飾糖を含む。ある特定の態様において、少なくとも１つの修飾糖は、２’−Ｏ−メトキシエチル基を含む。ある特定の態様において、少なくとも１つの修飾糖は、４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’基、４’−ＣＨ２−Ｏ−２’基または４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’基などの二環式糖である。
【０１５１】
ある特定の態様において、修飾オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、例えば、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。
【０１５２】
特定の実施形態において、前述の化合物またはオリゴヌクレオチドのいずれかは、少なくとも１つの修飾核酸塩基、例えば、５−メチルシトシンを含む。
【０１５３】
特定の実施形態において、前述の化合物またはオリゴヌクレオチドのいずれかは、
複数の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、修飾糖を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３に示される配列を含む核酸塩基配列を有する８〜８０個の結合されたヌクレオシドからなる。ある特定の態様において、オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３に示される配列を含む核酸塩基配列を有する８〜８０個の結合されたヌクレオシドからなる。
【０１５４】
ある特定の態様において、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９または３２９２に示される配列を含む核酸塩基配列を有し、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、２０〜８０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、２０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。
【０１５５】
ある特定の態様において、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号４１９８または４３７３に示される配列を含む核酸塩基配列を有し、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
３個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
４個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’−Ｏ−メトキシエチル糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、１７〜８０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、１７〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。
【０１５６】
特定の実施形態において、化合物は、ＩＳＩＳ４８４１３７を含むか、ＩＳＩＳ４８４１３７からなり、次の化学構造またはその塩を有する。
【０１５７】
【化１】
2018525030.tif 000002
【０１５８】
特定の実施形態において、化合物は、一般に認められているオリゴヌクレオチド命名法によって命名された、以下のとおりの各３’−Ｏ→５’−Ｏ−結合ホスホロチオエートジエステルヌクレオチド間結合を示す、ＩＳＩＳ４８４１３７を含むか、ＩＳＩＳ４８４１３７からなる。
２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオグアニリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−Ｐ−チオチミジリル−（３→−Ｏ→５’−Ｏ）−Ｐ−チオチミジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−Ｐ−チオチミジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−デオキシ−Ｐ−チオアデニリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−デオキシ−Ｐ−チオアデニリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−Ｐ−チオチミジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−デオキシ−Ｐ−チオグアニリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−デオキシ−Ｐ−チオアデニリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−デオキシ−Ｐ−チオグアニリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−デオキシ−５−メチル−Ｐ−チオシチジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニリル−（３’−Ｏ→５’−Ｏ）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−シチジン，十九ナトリウム塩。
【０１５９】
前述の実施形態のいずれかにおいて、化合物またはオリゴヌクレオチドは、ＤＧＡＴ２をコードする核酸に対して、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％相補的であり得る。
【０１６０】
前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。
【０１６１】
前述の実施形態のいずれかにおいて、オリゴヌクレオチドは、８〜８０、１０〜３０、１２〜５０、１３〜３０、１３〜５０、１４〜３０、１４〜５０、１５〜３０、１５〜５０、１６〜３０、１６〜５０、１７〜３０、１７〜５０、１８〜２２、１８〜２４、１８〜３０、１８〜５０、１９〜２２、１９〜３０、１９〜５０または２０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり得る。
【０１６２】
特定の実施形態において、本明細書で提供される化合物または組成物は、修飾オリゴヌクレオチドの塩を含む。特定の実施形態において、塩は、ナトリウム塩である。特定の実施形態において、塩は、カリウム塩である。
【０１６３】
特定の実施形態において、化合物は、本明細書に記載される修飾オリゴヌクレオチドと、コンジュゲート基とを含む。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端の修飾オリゴヌクレオチドに結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端の修飾オリゴヌクレオチドに結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、少なくとも１つのＮ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、少なくとも２つのＮ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）または少なくとも３つのＮ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）を含む。
【０１６４】
特定の実施形態において、次の化学構造を有する化合物は、本明細書に記載されるようなＧａｌＮＡｃを含むコンジュゲート基を有するＩＳＩＳ４８４１３７もしくはその塩を含むか、それらからなる。
【０１６５】
【化２】
2018525030.tif 000003
【０１６６】
式中、同一環上のＲ１とＲ２の各対について、環ごとに独立して、Ｒ１は−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３（ＭＯＥ）であり、Ｒ２はＨであるか、あるいは、Ｒ１とＲ２は一緒に架橋を形成し、ここで、Ｒ１は−Ｏ−であり、Ｒ２は−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｒ１及びＲ２は、得られる架橋が−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−及び−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２−から選択されるように直接接続され、同一環上のＲ３とＲ４の各対について、環ごとに独立して、Ｒ３はＨ及び−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択され、Ｒ４はＨであるか、あるいは、Ｒ３とＲ４は一緒に架橋を形成し、ここで、Ｒ３は−Ｏ−であり、Ｒ４は−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｒ３及びＲ４は、得られる架橋が−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−及び−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２−から選択されるように直接接続され、各Ｒ５は、独立して、Ｈ及び−ＣＨ３から選択され、各Ｚは、独立して、Ｓ−及びＯ−から選択される。
【０１６７】
特定の実施形態において、化合物は、配列番号１４２３、５’−ＧａｌＮＡｃ及び次の化学構造によって表される化学修飾を含むか、当該化学修飾からなる。
【０１６８】
【化３】
2018525030.tif 000004
【０１６９】
式中、同一環上のＲ１とＲ２の各対について、環ごとに独立して、Ｒ１は−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３（ＭＯＥ）であり、Ｒ２はＨであるか、あるいは、Ｒ１とＲ２は一緒に架橋を形成し、ここで、Ｒ１は−Ｏ−であり、Ｒ２は−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｒ１及びＲ２は、得られる架橋が−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−及び−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２−から選択されるように直接接続され、同一環上のＲ３とＲ４の各対について、環ごとに独立して、Ｒ３はＨ及び−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択され、Ｒ４はＨであるか、あるいは、Ｒ３とＲ４は一緒に架橋を形成し、ここで、Ｒ３は−Ｏ−であり、Ｒ４は−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、Ｒ３及びＲ４は、得られる架橋が−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−及び−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２−から選択されるように直接接続され、各Ｒ５は、独立して、Ｈ及び−ＣＨ３から選択され、各Ｚは、独立して、Ｓ−及びＯ−から選択され、Ｘは、Ｈ、またはコンジュゲートリンカー及び／もしくは切断可能部分を任意に含むコンジュゲート基である。
【０１７０】
特定の実施形態において、化合物は、ＩＳＩＳ７６９３５５またはその塩を含む。特定の実施形態において、化合物は、ＩＳＩＳ７６９３５５またはその塩からなる。特定の実施形態において、ＩＳＩＳ７６９３５５は、次の化学構造を有する。
【０１７１】
【化４】
2018525030.tif 000005
【０１７２】
特定の実施形態において、化合物は、ＩＳＩＳ７６９３５６またはその塩を含む。特定の実施形態において、化合物は、ＩＳＩＳ７６９３５６またはその塩からなる。特定の実施形態において、ＩＳＩＳ７６９３５６は、次の化学構造を有する。
【０１７３】
【化５】
2018525030.tif 000006
【０１７４】
特定の実施形態において、化合物は、ＩＳＩＳ７６９３５７またはその塩を含む。特定の実施形態において、化合物は、ＩＳＩＳ７６９３５７またはその塩からなる。特定の実施形態において、ＩＳＩＳ７６９３５７は、次の化学構造を有する。
【０１７５】
【化６】
2018525030.tif 000007
【０１７６】
特定の実施形態は、ＤＧＡＴ２に対して標的化された修飾オリゴヌクレオチドもしくはその塩及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物のいずれかと、少なくとも１つの薬学的に許容される担体または希釈剤とを含む、組成物を提供する。
【０１７７】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物または組成物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのＩＣ５０が２ｎＭ未満、３ｎＭ未満、４ｎＭ未満、５ｎＭ未満、６ｎＭ未満、７ｎＭ未満、８ｎＭ未満、９ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、２０ｎＭ未満、３０ｎＭ未満、３５ｎＭ未満、４０ｎＭ未満、４５ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、６０ｎＭ未満、７０ｎＭ未満、８０ｎＭ未満、９０ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、１１０ｎＭ未満、３００ｎＭ未満、４００ｎＭ未満、５００ｎＭ未満、６００ｎＭ未満、７００ｎＭ未満、８００ｎＭ未満、９００ｎＭ未満、１μＭ未満、１．１μＭ未満、１．２μＭ未満、１．３μＭ未満、１．４μＭ未満、１．５μＭ未満、１．６μＭ未満、１．７μＭ未満、１．８μＭ未満、１．９μＭ未満、２μＭ未満、２．５μＭ未満、３μＭ未満、３．５μＭ未満、４μＭ未満、４．５μＭ未満、５μＭ未満、５．５μＭ未満、６μＭ未満、６．５μＭ未満または１０μＭ未満のうちの少なくとも１つを有することにより、有効である。
【０１７８】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物または組成物は、生理食塩水で処置された動物に対して４倍、３倍もしくは２倍以下のＡＬＴ値もしくはＡＳＴ値の増加、または３０％、２０％、１５％、１２％、１０％、５％もしくは２％以下の肝臓、脾臓もしくは腎臓の重量増加のうちの少なくとも１つを有することによって実証されるように、忍容性が高い。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物または組成物は、生理食塩水で処置された動物に対して、ＡＬＴまたはＡＳＴが増加しないことによって実証されるように、忍容性が高い。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物または組成物は、生理食塩水で処置された動物に対して、肝臓、脾臓または腎臓の重量が増加しないことによって実証されるように、忍容性が高い。
【０１７９】
特定の適応
本明細書で提供される特定の実施形態は、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物の投与によって、個体のＤＧＡＴ２に関連する疾患を治療、予防または改善する方法に関する。
【０１８０】
本明細書で提供される方法によって治療可能、予防可能及び／または改善可能なＤＧＡＴ２に関連する疾患の例には、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓脂肪症、脂肪性肝疾患、リポジストロフィー症候群（先天性全身型リポジストロフィー（ＣＧＬ）、後天性全身型リポジストロフィー（ＡＧＬ）、家族性部分型リポジストロフィー（ＦＰＬ）及び後天性部分型リポジストロフィー（ＰＬ）を含む）、メタボリックシンドローム及び心臓血管疾患が挙げられる。
【０１８１】
特定の実施形態において、個体のＮＡＦＬＤに関連する疾患を治療、予防または改善する方法は、当該個体にＤＧＡＴ２の特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、当該疾患を治療、予防または改善する。特定の実施形態において、個体のリポジストロフィー症候群に関連する疾患を治療、予防または改善する方法は、当該個体にＤＧＡＴ２の特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、当該疾患を治療、予防または改善する。特定の実施形態において、リポジストロフィー症候群は、部分型リポジストロフィーである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。
【０１８２】
特定の実施形態において、ＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨを治療、予防または改善する方法は、当該個体にＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、ＮＡＬＦＤ／ＮＡＳＨを治療、予防または改善する。特定の実施形態において、リポジストロフィーを治療、予防または改善する方法は、当該個体にＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、リポジストロフィー症候群を治療、予防または改善する。特定の実施形態において、リポジストロフィー症候群は、部分型リポジストロフィーである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。ある特定の態様において、アンチセンス化合物は、個体に非経口的に投与される。ある特定の態様において、アンチセンス化合物を投与すると、ＤＧＡＴ２発現の特異的減少、トリグリセリド合成速度の低下、肝臓脂肪症及び血中脂質レベルの改善、肝臓脂質の減少、食事誘発性肝臓インスリン抵抗性の逆転、ならびに肝臓インスリン感受性の改善がもたらされる。ある特定の態様において、アンチセンス化合物を投与すると、肝臓脂肪症及び線維症が軽減する。ある特定の態様において、アンチセンス化合物を投与すると、ＡＬＴレベルが改善する。ある特定の態様において、アンチセンス化合物を投与すると、ＮＡＦＬＤ活性スコア（ＮＡＳ）が低下する。ある特定の態様において、アンチセンス化合物を投与すると、血清中総コレステロール及びトリグリセリドが減少する。ある特定の態様において、アンチセンス化合物を投与すると、中性インスリン感受性及び血糖コントロールがもたらされる。ある特定の態様において、アンチセンス化合物を投与すると、中性インスリン感受性及び血糖コントロールが改善する。ある特定の態様において、個体は、ＮＡＦＬＤに関連する疾患を有するか、そのリスクがあると特定される。ある特定の態様において、個体は、リポジストロフィー症候群に関連する疾患を有するか、そのリスクがあると特定される。
【０１８３】
特定の実施形態において、ＮＡＦＬＤに関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体におけるＤＧＡＴ２の発現を阻害する方法は、当該個体にＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、当該個体におけるＤＧＡＴ２の発現を阻害する。特定の実施形態において、リポジストロフィー症候群に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体におけるＤＧＡＴ２の発現を阻害する方法は、当該個体にＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、当該個体におけるＤＧＡＴ２の発現を阻害する。ある特定の態様において、阻害剤を投与することは、肝臓におけるＤＧＡＴ２の発現を阻害する。ある特定の態様において、阻害剤を投与することは、脂肪組織におけるＤＧＡＴ２の発現を阻害する。ある特定の態様において、個体は、リポジストロフィー症候群、部分型リポジストロフィー、肝臓脂肪症、ＮＡＦＬＤもしくはＮＡＳＨを有するか、そのリスクがある。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。
【０１８４】
特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の肝臓におけるトリグリセリド合成、肝臓脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害する方法は、当該個体にＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、当該個体の肝臓におけるトリグリセリド合成、肝臓脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の脂肪組織におけるトリグリセリド合成、脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害する方法は、当該個体にＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、当該個体の脂肪組織におけるトリグリセリド合成、脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害する。ある特定の態様において、ＤＧＡＴ２阻害剤を投与すると、肝臓インスリンシグナル伝達、肝臓インスリン感受性及び心血管リスクプロファイルが改善する。ある特定の態様において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与すると、肝臓脂肪症及び線維症が軽減する。ある特定の態様において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与すると、ＡＬＴレベルが改善する。ある特定の態様において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与すると、ＮＡＦＬＤ活性スコア（ＮＡＳ）が低下する。ある特定の態様において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与すると、血清中総コレステロール及びトリグリセリドが減少する。ある特定の態様において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与すると、中性インスリン感受性及び血糖コントロールがもたらされる。ある特定の態様において、アンチセンス化合物を投与すると、中性インスリン感受性及び血糖コントロールが改善する。ある特定の態様において、個体は、ＮＡＦＬＤもしくはＮＡＳＨを有するか、そのリスクがある。ある特定の態様において、個体は、リポジストロフィー症候群もしくは部分型リポジストロフィーを有するか、そのリスクがある。ある特定の態様において、阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。ある特定の態様において、アンチセンス化合物は、個体に非経口的に投与される。
【０１８５】
特定の実施形態は、ＮＡＦＬＤに関連する疾患の治療に使用するためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤に関する。ある特定の態様において、疾患は、ＮＡＳＨである。ある特定の態様において、疾患は、肝臓脂肪症である。ある特定の態様において、疾患は、肝硬変である。ある特定の態様において、疾患は、肝細胞癌である。特定の実施形態は、リポジストロフィー症候群に関連する疾患の治療に使用するためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤に関する。ある特定の態様において、疾患は、部分型リポジストロフィーである。ある特定の態様において、阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。ある特定の態様において、アンチセンス化合物は、個体に非経口的に投与される。
【０１８６】
特定の実施形態は、ＮＡＦＬＤまたはリポジストロフィー症候群に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の肝臓におけるトリグリセリド合成、肝臓脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害するためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤に関し、当該個体にＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、当該個体の肝臓におけるトリグリセリド合成、肝臓脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害する。特定の実施形態は、ＮＡＦＬＤまたはリポジストロフィー症候群に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の脂肪組織におけるトリグリセリド合成、脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害するためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤に関し、当該個体にＤＧＡＴ２特異的阻害剤を投与することを含み、これにより、当該個体の脂肪組織におけるトリグリセリド合成、脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。
【０１８７】
特定の実施形態は、ＮＡＦＬＤに関連する疾患を治療するための薬剤の製造のためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤の使用に関する。ある特定の態様において、疾患は、ＮＡＳＨである。ある特定の態様において、疾患は、肝臓脂肪症である。ある特定の態様において、疾患は、肝硬変である。ある特定の態様において、疾患は、肝細胞癌である。特定の実施形態は、リポジストロフィー症候群に関連する疾患を治療するための薬剤の製造のためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤の使用に関する。ある特定の態様において、疾患は、部分型リポジストロフィーである。ある特定の態様において、阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。ある特定の態様において、アンチセンス化合物は、個体に非経口的に投与される。
【０１８８】
特定の実施形態は、ＮＡＦＬＤもしくはリポジストロフィー症候群に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の肝臓におけるトリグリセリド合成、肝臓脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害するための薬剤の製造のためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤の使用に関する。特定の実施形態は、ＮＡＦＬＤもしくはリポジストロフィー症候群に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の肝臓におけるトリグリセリド合成、肝臓脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害するための薬剤の製造のためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤の使用に関する。特定の実施形態は、ＮＡＦＬＤもしくはリポジストロフィー症候群に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の脂肪組織におけるトリグリセリド合成、脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害するための薬剤の製造のためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤の使用に関する。特定の実施形態は、ＮＡＦＬＤもしくはリポジストロフィー症候群に関連する疾患を有する個体またはそのリスクのある個体の脂肪組織におけるトリグリセリド合成、脂質合成及びインスリン抵抗性を減少または阻害するための薬剤の製造のためのＤＧＡＴ２特異的阻害剤の使用に関する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。
【０１８９】
特定の実施形態において、細胞におけるＤＧＡＴ２の発現を阻害する方法は、当該細胞をＤＧＡＴ２特異的阻害剤と接触させることを含む。特定の実施形態において、細胞は、肝細胞である。特定の実施形態において、細胞は、個体の肝臓中にある。特定の実施形態において、細胞は、個体の脂肪組織細胞である。特定の実施形態において、細胞は、個体の脂肪組織中にある。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物、例えば、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含む化合物またはそれらからなる化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９の核酸塩基配列のいずれかのうちの少なくとも８個の連続した核酸塩基を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなり、かつ配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、修飾オリゴヌクレオチド及びコンジュゲート基を含むアンチセンス化合物またはそれらからなるアンチセンス化合物であり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８及び４３７３のうちのいずれか１つからなる核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２である。特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＩＳＩＳ７６９３５５、ＩＳＩＳ７６９３５６及びＩＳＩＳ７６９３５７である。前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンス化合物は、一本鎖オリゴヌクレオチドであり得る。ある特定の態様において、アンチセンス化合物は、個体に非経口的に投与される。
【０１９０】
前述の実施形態のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたアンチセンス化合物であり得る。ある特定の態様において、アンチセンス化合物は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、８〜８０個の結合されたヌクレオシド、１２〜３０個の結合されたヌクレオシド、または２０個の結合されたヌクレオシドからなるアンチセンスオリゴヌクレオチドである。ある特定の態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号１〜４に示される核酸塩基配列のうちのいずれかに対して、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または１００％相補的である。ある特定の態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、少なくとも１つの修飾糖及び／または少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む。ある特定の態様において、修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合であり、修飾糖は、二環式糖または２’−Ｏ−メトキシエチルであり、修飾核酸塩基は、５−メチルシトシンである。ある特定の態様において、修飾オリゴヌクレオチドは、複数の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、複数の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、複数の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に直接隣接して配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、修飾糖を含む。
【０１９１】
前述の実施形態のいずれかにおいて、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、１２〜３０、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２４、１６〜２４、１７〜２４、１８〜２４、１９〜２４、２０〜２４、１９〜２２、２０〜２２、１６〜２０個、または１７もしくは２０個の結合されたヌクレオシドからなる。ある特定の態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号１〜４に示される核酸塩基配列のうちのいずれかに対して、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または１００％相補的である。ある特定の態様において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、少なくとも１つの修飾糖及び／または少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む。ある特定の態様において、修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合であり、修飾糖は、二環式糖または２’−Ｏ−メトキシエチルであり、修飾核酸塩基は、５−メチルシトシンである。ある特定の態様において、修飾オリゴヌクレオチドは、複数の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、複数の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、複数の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に直接隣接して配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、修飾糖を含む。
【０１９２】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
複数の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、修飾糖を含む。
【０１９３】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、コンジュゲート基と、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドとを含む化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
複数の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、修飾糖を含む。
【０１９４】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３、１３７１、１４１５、１８４９、２９５９、３２９２、４１９８または４３７３のうちのいずれか１つを含む核酸塩基配列を有する１０〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
複数の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
複数の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、修飾糖を含む。
【０１９５】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３に示される配列を含む核酸塩基配列を有する１６〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０１９６】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４２３に示される配列からなる核酸塩基配列を有する２０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０１９７】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、コンジュゲート基と、配列番号１４２３に示される配列からなる核酸塩基配列を有する２０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドとを含む化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０１９８】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１３７１に示される配列を含む核酸塩基配列を有する１６〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０１９９】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１３７１に示される配列からなる核酸塩基配列を有する２０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２００】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４１５に示される配列を含む核酸塩基配列を有する１６〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０１】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１４１５に示される配列からなる核酸塩基配列を有する２０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０２】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１８４９に示される配列を含む核酸塩基配列を有する１６〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０３】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号１８４９に示される配列からなる核酸塩基配列を有する２０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０４】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号２９５９に示される配列を含む核酸塩基配列を有する１６〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０５】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号２９５９に示される配列からなる核酸塩基配列を有する２０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０６】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号３２９２に示される配列を含む核酸塩基配列を有する１６〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０７】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号３２９２に示される配列からなる核酸塩基配列を有する２０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
５個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０８】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号４１９８に示される配列を含む核酸塩基配列を有する１４〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
３個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
４個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２０９】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号４１９８に示される配列からなる核酸塩基配列を有する１７個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
３個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
４個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２１０】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号４３７３に示される配列を含む核酸塩基配列を有する１４〜３０個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
３個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
４個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２１１】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、配列番号４３７３に示される配列からなる核酸塩基配列を有する１７個の結合されたヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物またはそれらからなる化合物であり得、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
１０個の結合された２’−デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメントと、
３個の結合されたヌクレオシドからなる５’ウイングセグメントと、
４個の結合されたヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントとを含み、
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に配置され、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドは、２’ＭＯＥ糖を含み、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合を含み、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２１２】
前述の方法または使用のいずれかにおいて、ＤＧＡＴ２特異的阻害剤は、皮下投与、例えば、皮下注射によって投与される。
【０２１３】
アンチセンス化合物
オリゴマー化合物は、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオシド、オリゴヌクレオチド類似体、アンチセンス化合物、アンチセンスオリゴヌクレオチド及びｓｉＲＮＡが挙げられるが、これらに限定されない。オリゴマー化合物は、標的核酸に対して「アンチセンス」であり得、これは、オリゴマー化合物が水素結合を介して標的核酸にハイブリダイゼーションを起こすことができることを意味する。
【０２１４】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、５’から３’の方向で記載される場合、アンチセンス化合物が標的にする標的核酸の標的セグメントの逆相補鎖を含む核酸塩基配列を有する。
【０２１５】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１０〜３０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１２〜３０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１２〜２２個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１４〜３０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１４〜２０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１５〜３０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１５〜２０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１６〜３０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１６〜２０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１７〜３０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１７〜２０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１８〜３０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１８〜２１個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１８〜２０個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、２０〜３０個の長さのサブユニットである。言い換えれば、当該アンチセンス化合物は、それぞれ、１２〜３０個の結合されたサブユニット、１４〜３０個の結合されたサブユニット、１４〜２０個のサブユニット、１５〜３０個のサブユニット、１５〜２０個のサブユニット、１６〜３０個のサブユニット、１６〜２０個のサブユニット、１７〜３０個のサブユニット、１７〜２０個のサブユニット、１８〜３０個のサブユニット、１８〜２０個のサブユニット、１８〜２１個のサブユニット、２０〜３０個のサブユニットまたは１２〜２２個の結合されたサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１４個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１６個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１７個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１８個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１９個の長さのサブユニットである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、２０個の長さのサブユニットである。他の実施形態において、アンチセンス化合物は、８〜８０、１２〜５０、１３〜３０、１３〜５０、１４〜３０、１４〜５０、１５〜３０、１５〜５０、１６〜３０、１６〜５０、１７〜３０、１７〜５０、１８〜２２、１８〜２４、１８〜３０、１８〜５０、１９〜２２、１９〜３０、１９〜５０または２０〜３０個の結合されたサブユニットである。このような特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９もしくは８０個の長さ、または前述の値のうちのいずれか２つによって定義される範囲の結合されたサブユニットである。いくつかの実施形態において、アンチセンス化合物は、アンチセンスオリゴヌクレオチドであり、結合されたサブユニットは、ヌクレオチド、ヌクレオシドまたは核酸塩基である。
【０２１６】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物またはオリゴマー化合物は、追加の特徴または要素、例えば、オリゴヌクレオチドに結合されたコンジュゲート基を更に含み得る。コンジュゲート基がヌクレオシド（すなわち、オリゴヌクレオチドにコンジュゲート基を結合するヌクレオシド）を含む実施形態では、そのコンジュゲート基のヌクレオシドは、オリゴヌクレオチドの長さの数に含まれない。
【０２１７】
特定の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、短縮または切断されてもよい。例えば、１つのヌクレオシドを５’末端から欠失させてもよいし（５’切断）、あるいは３’末端から欠失させてもよい（３’切断）。ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短縮型または切断型アンチセンス化合物は、アンチセンス化合物の５’末端から２つのサブユニットを欠失させてもよいし、あるいは３’末端から２つのサブユニットを欠失させてもよい。あるいは、例えば、５’末端から１つのヌクレオシドを欠失させ、かつ３’末端から１つのヌクレオシドを欠失させたアンチセンス化合物のように、欠失されたヌクレオシドがアンチセンス化合物全体に分散していてもよい。
【０２１８】
延長型アンチセンス化合物中に１つの追加サブユニットが存在する場合、その追加サブユニットは、アンチセンス化合物の５’末端または３’末端に位置することができる。２つ以上の追加サブユニットが存在する場合、追加されるサブユニットは、例えば、アンチセンス化合物の５’末端（５’付加）または３’末端（３’付加）に２つのサブユニットが追加されているアンチセンス化合物のように、互いに隣接していてよい。あるいは、例えば、５’末端に１つのサブユニットが追加され、３’末端に１つのサブユニットが追加されたアンチセンス化合物のように、追加されるサブユニットがアンチセンス化合物全体に分散していてもよい。
【０２１９】
活性を取り除くことなく、アンチセンスオリゴヌクレオチドなどのアンチセンス化合物の長さを増加もしくは減少させること、及び／またはミスマッチ塩基を導入することが可能である（Ｗｏｏｌｆ  ｅｔ  ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：７３０５−７３０９，１９９２；Ｇａｕｔｓｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．９３：４６３−４７１，Ｍａｒｃｈ  ２００１；Ｍａｈｅｒ  ａｎｄ  Ｄｏｌｎｉｃｋ  Ｎｕｃ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．１６：３３４１−３３５８，１９８８）。しかしながら、オリゴヌクレオチド配列、化学的性質及びモチーフにおける一見小さな変化は、臨床開発に必要とされる多くの特性の１つ以上に大きな相違をもたらすことがある（Ｓｅｔｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００９，５２，１０；Ｅｇｌｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１１，１３３，１６６４２）。
【０２２０】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１つのオリゴマー化合物からなる、一本鎖である。このような一本鎖アンチセンス化合物のオリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、一本鎖アンチセンス化合物のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、修飾されている。特定の実施形態において、一本鎖アンチセンス化合物またはオリゴマー化合物のオリゴヌクレオチドは、自己相補性核酸塩基配列を含む。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、二本鎖を形成する２つのオリゴマー化合物を含む、二本鎖である。このような特定の実施形態において、二本鎖アンチセンス化合物の一方のオリゴマー化合物は、１つ以上のコンジュゲート基を含む。特定の実施形態において、二本鎖アンチセンス化合物の各オリゴマー化合物は、１つ以上のコンジュゲート基を含む。特定の実施形態において、二本鎖アンチセンス化合物の各オリゴヌクレオチドは、修飾オリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、二本鎖アンチセンス化合物の一方のオリゴヌクレオチドは、修飾オリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、二本鎖アンチセンス化合物の一方のオリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチドである。このような特定の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、修飾オリゴヌクレオチドである。一本鎖及び二本鎖アンチセンス化合物の例には、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、オリゴヌクレオチドを標的にするｍｉｃｒｏＲＮＡ、ならびに小ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、一本鎖ｓｉＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）及びｍｉｃｒｏＲＮＡ模倣体などの一本鎖ＲＮＡｉ化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２１】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、干渉ＲＮＡ化合物（ＲＮＡｉ）であり、これには、二本鎖ＲＮＡ化合物（短い干渉ＲＮＡまたはｓｉＲＮＡとも呼ばれる）及び一本鎖ＲＮＡｉ化合物（すなわち、ｓｓＲＮＡ）が含まれる。このような化合物は、少なくとも部分的にＲＩＳＣ経路を介して作用し、標的核酸を分解及び／または隔離する（したがって、ｍｉｃｒｏＲＮＡ／ｍｉｃｒｏＲＮＡ模倣体化合物を含む）。本明細書で使用されるとき、ｓｉＲＮＡという用語は、配列特異的ＲＮＡｉを媒介することが可能な核酸分子を記載するために使用される他の用語、例えば、短い干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、小ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、短い干渉オリゴヌクレオチド、短い干渉核酸、短い干渉修飾オリゴヌクレオチド、化学修飾ｓｉＲＮＡ、転写後遺伝子サイレンシングＲＮＡ（ｐｔｇｓＲＮＡ）及びその他と同等であることが意図される。更に、本明細書で使用されるとき、ＲＮＡｉという用語は、転写後遺伝子サイレンシング、翻訳阻害またはエピジェネティクスなどの配列特異的ＲＮＡ干渉を記載するために使用される他の用語と同等であることが意図される。
【０２２２】
特定の実施形態において、二本鎖化合物は、本明細書に記載される、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたオリゴヌクレオチド配列のいずれかを含み得る。特定の実施形態において、二本鎖化合物は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個の連続した核酸塩基部分を含む第１の鎖と、第２の鎖とを含む。特定の実施形態において、二本鎖化合物は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む第１の鎖と、第２の鎖とを含む。特定の実施形態において、二本鎖化合物は、第１の鎖が、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つ中のチミン（Ｔ）に代わりウラシル（Ｕ）を有する、リボヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、二本鎖化合物は、（ｉ）配列番号１６〜４６７９のうちのいずれかが標的にするＤＧＡＴ２上の部位に相補的な核酸塩基配列を含む第１の鎖と、（ｉｉ）第２の鎖とを含む。特定の実施形態において、二本鎖化合物は、糖の２’位がハロゲン（フッ素基など；２’−Ｆ）を含有するか、アルコキシ基（メトキシ基など；２’−ＯＭｅ）を含有する修飾ヌクレオチドを１つ以上含む。特定の実施形態において、二本鎖化合物は、少なくとも１つの２’−Ｆ糖修飾及び少なくとも１つの２’−ＯＭｅ糖修飾を含む。特定の実施形態において、少なくとも１つの２’−Ｆ糖修飾及び少なくとも１つの２’−ＯＭｅ糖修飾は、ｄｓＲＮＡ化合物の鎖に沿って、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個の連続した核酸塩基について交互パターンで配置される。特定の実施形態において、二本鎖化合物は、隣接するヌクレオチド間に、天然に生じるホスホジエステル結合以外の結合を１つ以上含む。このような結合の例には、ホスホルアミド結合、ホスホロチオエート結合及びホスホロジチオエート結合が挙げられる。二本鎖化合物はまた、米国特許第６，６７３，６６１号に教示されているような化学修飾核酸分子であってもよい。他の実施形態において、ｄｓＲＮＡは、例えば、２０００年４月１９日出願のＷＯ００／６３３６４によって開示されているように、１本または２本のキャップ鎖を含有する。特定の実施形態において、二本鎖化合物の第１の鎖は、ｓｉＲＮＡガイド鎖であり、二本鎖化合物の第２の鎖は、ｓｉＲＮＡパッセンジャー鎖である。特定の実施形態において、二本鎖化合物の第２の鎖は、第１の鎖に対して相補的である。特定の実施形態において、二本鎖化合物の各鎖は、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２または２３個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、二本鎖化合物の第１の鎖または第２の鎖は、コンジュゲート基を含み得る。
【０２２３】
特定の実施形態において、一本鎖ＲＮＡｉ（ｓｓＲＮＡｉ）化合物は、本明細書に記載のＤＧＡＴ２に対して標的化されたオリゴヌクレオチド配列のいずれかを含み得る。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個の連続した核酸塩基部分を含む。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つの核酸塩基配列を含む。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれか１つ中のチミン（Ｔ）に代わりウラシル（Ｕ）が存在する、リボヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、配列番号１６〜４６７９のうちのいずれかが標的にするＤＧＡＴ２上の部位に相補的な核酸塩基配列を含む。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、糖の２’位がハロゲン（フッ素基など；２’−Ｆ）を含有するか、アルコキシ基（メトキシ基など；２’−ＯＭｅ）を含有する修飾ヌクレオチドを１つ以上含む。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、少なくとも１つの２’−Ｆ糖修飾及び少なくとも１つの２’−ＯＭｅ糖修飾を含む。特定の実施形態において、少なくとも１つの２’−Ｆ糖修飾及び少なくとも１つの２’−ＯＭｅ糖修飾は、ｓｓＲＮＡｉ化合物の鎖に沿って、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個の連続した核酸塩基について交互パターンで配置される。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、隣接するヌクレオチド間に、天然に生じるホスホジエステル結合以外の結合を１つ以上含む。このような結合の例には、ホスホルアミド結合、ホスホロチオエート結合及びホスホロジチオエート結合が挙げられる。ｓｓＲＮＡｉ化合物はまた、米国特許第６，６７３，６６１号に教示されているような化学修飾核酸分子であってもよい。他の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉは、例えば、２０００年４月１９日出願のＷＯ００／６３３６４によって開示されているように、キャップ鎖を含有する。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２または２３個の結合されたヌクレオシドからなる。特定の実施形態において、ｓｓＲＮＡｉ化合物は、コンジュゲート基を含み得る。
【０２２４】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、修飾オリゴヌクレオチドを含む。特定の修飾オリゴヌクレオチドは、１つ以上の不斉中心を有することから、エナンチオマー、ジアステレオマー及び他の立体異性体構造を生じる。これらは、絶対立体化学の観点から、（Ｒ）もしくは（Ｓ）、αもしくはβ（糖アノマーなどの場合）、または（Ｄ）もしくは（Ｌ）（アミノ酸などの場合）などで定義され得る。本明細書で提供される修飾オリゴヌクレオチドには、別の記載がない限り、そのラセミ形態及び光学的に純粋な形態を含む、全ての可能な異性体が含まれる。同様に、全てのシス及びトランス異性体ならびに互変異性形態も含まれる。
【０２２５】
特定の実施形態において、本明細書に記載されるアンチセンス化合物及びオリゴマー化合物は、修飾オリゴヌクレオチドを含む。このような修飾オリゴヌクレオチドは、本明細書に記載される修飾糖部分、修飾核酸塩基、修飾ヌクレオシド間結合、モチーフ及び／または長さの任意の組み合わせを含有し得る。
【０２２６】
特定のアンチセンス化合物の機序
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的核酸にハイブリダイズすることができ、その結果、少なくとも１つのアンチセンス活性が生じる。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、１つ以上の標的核酸に特異的に作用する。このような特異的アンチセンス化合物は、１つ以上の標的核酸にハイブリダイズして、その結果１つ以上の所望のアンチセンス活性をもたらし、かつ１つ以上の非標的核酸にハイブリダイズしないまたは望ましくないアンチセンス活性を生じるような形で１つ以上の非標的核酸にハイブリダイズしない核酸塩基配列を含む。
【０２２７】
特定のアンチセンス活性において、アンチセンス化合物の標的核酸へのハイブリダイゼーションは、標的核酸を切断するタンパク質の動員をもたらす。例えば、特定のアンチセンス化合物は、ＲＮａｓｅ  Ｈが媒介する標的核酸の切断をもたらす。ＲＮａｓｅ  Ｈは、ＲＮＡ：ＤＮＡ二本鎖のＲＮＡ鎖を切断する細胞エンドヌクレアーゼである。かかるＲＮＡ：ＤＮＡ二本鎖中のＤＮＡは、非修飾ＤＮＡである必要はない。特定の実施形態において、本発明は、ＲＮａｓｅ  Ｈ活性を惹起するのに十分に「ＤＮＡ様」であるアンチセンス化合物を提供する。更に、特定の実施形態において、ギャップマーのギャップ中の１つ以上の非ＤＮＡ様ヌクレオシドは、許容される。
【０２２８】
特定のアンチセンス活性において、アンチセンス化合物またはアンチセンス化合物の一部は、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）中に組み込まれ、最終的に標的核酸の切断をもたらす。例えば、特定のアンチセンス化合物は、アルゴノートによる標的核酸の切断をもたらす。特定の実施形態において、ＲＩＳＣ中に組み込まれるアンチセンス化合物は、ＲＮＡｉ化合物である。
【０２２９】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物の標的核酸へのハイブリダイゼーションは、標的核酸を切断するタンパク質の動員をもたらさない。このような特定の実施形態において、アンチセンス化合物の標的核酸へのハイブリダイゼーションは、標的核酸のスプライシングを変化させる。特定の実施形態において、アンチセンス化合物の標的核酸へのハイブリダイゼーションは、標的核酸とタンパク質または他の核酸との間の結合相互作用の阻害をもたらす。このような特定の実施形態において、アンチセンス化合物の標的核酸へのハイブリダイゼーションは、標的核酸の翻訳を変化させる。
【０２３０】
アンチセンス活性は、直接的または間接的に観察することができる。特定の実施形態において、アンチセンス活性の観察または検出は、標的核酸もしくは当該標的核酸によってコードされているタンパク質の量の変化、核酸のスプライスバリアントもしくはタンパク質の比率の変化、及び／または細胞もしくは動物における表現型の変化に関する観察または検出を含む。
【０２３１】
特定の実施形態において、本明細書に記載のギャップマー糖モチーフを有する修飾オリゴヌクレオチドは、非ギャップマーオリゴヌクレオチドまたは他の糖モチーフを有するギャップマーと比較して望ましい特性を有する。特定の状況において、強力なアンチセンス活性と比較的低い毒性の好ましい組み合わせをもたらすモチーフを特定することが望ましい。特定の実施形態において、本発明の化合物は、好ましい治療指数（活性尺度を毒性尺度で除算したもの）を有する。
【０２３２】
標的核酸、標的領域及びヌクレオチド配列
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的核酸に相補的な領域を含むオリゴヌクレオチドを含むか、それらからなる。特定の実施形態において、標的核酸は、内因性ＲＮＡ分子である。特定の実施形態において、標的核酸は、タンパク質をコードする。このような特定の実施形態において、標的核酸は、ｍＲＮＡ及びｐｒｅ−ｍＲＮＡ（イントロン、エクソン及び非翻訳領域を含む）から選択される。特定の実施形態において、標的ＲＮＡは、ｍＲＮＡである。特定の実施形態において、標的核酸は、ｐｒｅ−ｍＲＮＡである。このような特定の実施形態において、標的領域は、完全にイントロン内に存在する。特定の実施形態において、標的領域は、イントロン／エクソン境界にまたがる。特定の実施形態において、標的領域は、少なくとも５０％がイントロン内に存在する。
【０２３３】
ＤＧＡＴ２をコードするヌクレオチド配列には、限定するものではないが、次のもの：ＲｅｆＳｅｑ番号ＮＭ＿０３２５６４．３（参照により本明細書に援用される；本明細書において配列番号１として示される）、ＲｅｆＳｅｑ番号ＮＴ＿０３３９２７．５のヌクレオチド５６６９１８６〜５７１２００８（参照により本明細書に援用される；本明細書において配列番号２として示される）、ＲｅｆＳｅｑ番号ＮＴ＿１６７１９０．１のヌクレオチド２０７８０４００〜２０８２３４５０（参照により本明細書に援用される；本明細書において配列番号４８７８として開示される）、ＲｅｆＳｅｑ番号ＡＫ０９１８７０．１（参照により本明細書に援用される；本明細書において配列番号４８７９として示される）及びＲｅｆＳｅｑ番号ＮＷ＿００１１００３８７．１のヌクレオチド１２３２０００〜１２６８０００（参照により本明細書に援用される；本明細書において配列番号３として示される）が含まれる。
【０２３４】
ハイブリダイゼーション
いくつかの実施形態において、本明細書で開示されるアンチセンス化合物とＤＧＡＴ２核酸との間でハイブリダイゼーションが生じる。最も一般的なハイブリダイゼーションの機序には、核酸分子の相補的な核酸塩基間での水素結合（例えば、ワトソン・クリック型、フーグスティーン型または逆フーグスティーン型の水素結合）が関与する。
【０２３５】
ハイブリダイゼーションは、様々な条件下で生じ得る。ハイブリダイゼーション条件は、配列依存的であり、ハイブリダイズされる核酸分子の性質及び組成によって決まる。
【０２３６】
ある配列が標的核酸に特異的にハイブリダイズするかどうかについて決定する方法は、当該技術分野においてよく知られている。特定の実施形態において、本明細書で提供されるアンチセンス化合物は、ＤＧＡＴ２核酸と特異的にハイブリダイズ可能である。
【０２３７】
相補性
オリゴヌクレオチドは、当該オリゴヌクレオチドまたはその１つ以上の領域の核酸塩基配列と、別のオリゴヌクレオチドもしくは核酸またはその１つ以上の領域の核酸塩基配列とが、この２つの核酸塩基配列を逆方向に整列させたときに一致する場合、その別の核酸と相補的であるという。核酸塩基マッチまたは相補的核酸塩基は、本明細書に記載されるとき、別の記載がない限り、アデニン（Ａ）とチミン（Ｔ）、アデニン（Ａ）とウラシル（Ｕ）、シトシン（Ｃ）とグアニン（Ｇ）、及び５−メチルシトシン（ｍＣ）とグアニン（Ｇ）に限定される。相補的なオリゴヌクレオチド及び／または核酸は、各ヌクレオシドで核酸塩基相補性を有する必要はなく、１つ以上の核酸塩基ミスマッチを含み得る。オリゴヌクレオチドは、当該オリゴヌクレオチドがいかなる核酸塩基ミスマッチも含まずに各ヌクレオシドで核酸塩基マッチを有する場合、完全に相補的または１００％相補的である。
【０２３８】
アンチセンス化合物とＤＧＡＴ２核酸との間の非相補的核酸塩基は、そのアンチセンス化合物が依然として標的核酸に特異的にハイブリダイズすることができるのであれば、許容され得る。更に、アンチセンス化合物は、介在するまたは隣接するセグメントがハイブリダイゼーション事象に関与しないような形で、ＤＧＡＴ２核酸の１つ以上のセグメントにわたってハイブリダイズしてもよい（例えば、ループ構造、ミスマッチまたはヘアピン構造）。
【０２３９】
特定の実施形態において、本明細書で提供されるアンチセンス化合物またはその指定された部分は、ＤＧＡＴ２核酸、標的領域、標的セグメントまたはその指定された部分に対して、７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは１００％相補的であるか、少なくとも７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは１００％相補的である。このような特定の実施形態において、完全な相補性の領域は、６〜２０個の長さの核酸塩基である。このような特定の実施形態において、完全な相補性の領域は、１０〜１８個の長さの核酸塩基である。このような特定の実施形態において、完全な相補性の領域は、１８〜２０個の長さの核酸塩基である。アンチセンス化合物と標的核酸との相補性パーセントは、常法を使用して決定することができる。
【０２４０】
例えば、アンチセンス化合物の核酸塩基２０個中１８個が標的領域に対して相補的であり、そのため、特異的にハイブリダイズするアンチセンス化合物は、９０％の相補性になると言える。この例の場合、残りの非相補的核酸塩基は、ひとまとまりになっていてもよいし、相補的核酸塩基の間に散在していてもよく、また、互いに連続している必要も、相補的核酸塩基に対して連続している必要もない。したがって、標的核酸と完全に相補性な２つの領域に挟まれた４つの非相補的核酸塩基を有する１８核酸塩基長のアンチセンス化合物は、当該標的核酸と７７．８％の総相補性を有し、したがって、本発明の範囲内に包含される。アンチセンス化合物と標的核酸のある領域との相補性パーセントは、当該技術分野において知られているＢＬＡＳＴプログラム（ベーシックローカルアライメント検索ツール）及びＰｏｗｅｒＢＬＡＳＴプログラム（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９０，２１５，４０３  ４１０；Ｚｈａｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｄｄｅｎ，Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．，１９９７，７，６４９  ６５６）を使用して常法により決定することができる。相同性、配列同一性または相補性パーセントは、例えば、Ｓｍｉｔｈ及びＷａｔｅｒｍａｎのアルゴリズム（Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．，１９８１，２，４８２  ４８９）を使用するギャッププログラム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  ８  ｆｏｒ  Ｕｎｉｘ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐａｒｋ，Ｍａｄｉｓｏｎ  Ｗｉｓ．）によって、デフォルト設定を使用して決定することができる。
【０２４１】
特定の実施形態において、本明細書で提供されるアンチセンス化合物またはその指定された部分は、標的核酸またはその指定された部分に対して、完全に相補的（すなわち、１００％相補性）である。例えば、アンチセンス化合物は、ＤＧＡＴ２核酸またはその標的領域もしくは標的セグメントもしくは標的配列に完全に相補的であり得る。本明細書で使用されるとき、「完全に相補的」とは、アンチセンス化合物の各核酸塩基が、標的核酸の対応する核酸塩基と正確な塩基対を形成できることを意味する。例えば、２０個の核酸塩基のアンチセンス化合物は、対応する標的核酸の２０個の核酸塩基部分がそのアンチセンス化合物に対して完全に相補的である限り、４００核酸塩基長である標的配列に完全に相補的である。完全に相補的とは、第１及び／または第２の核酸の指定された部分に関しても使用され得る。例えば、３０個の核酸塩基のアンチセンス化合物の２０個の核酸塩基部分は、４００核酸塩基長である標的配列に「完全に相補的」であり得る。３０個の核酸塩基のオリゴヌクレオチドのうちの２０個の核酸塩基部分は、標的配列が、対応する２０個の核酸塩基部分を有し、その各核酸塩基が、アンチセンス化合物の２０個の核酸塩基部分に対して相補的であれば、その標的配列に完全に相補的である。同時に、当該３０個の核酸塩基のアンチセンス化合物全体は、そのアンチセンス化合物の残りの１０個の核酸塩基も同様に標的配列に対して相補的であるかどうかに応じて、標的配列に完全に相補的である場合もあれば、そうでない場合もある。
【０２４２】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的核酸に対して１つ以上のミスマッチ核酸塩基を含む。このような特定の実施形態において、標的に対するアンチセンス活性は、このようなミスマッチによって低減されるが、非標的に対する活性は、大きく低減される。したがって、このような特定の実施形態において、アンチセンス化合物の選択性が改善される。特定の実施形態において、ミスマッチは、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチド内に特異的に配置される。このような特定の実施形態において、ミスマッチは、ギャップ領域の５末端から１、２、３、４、５、６、７または８の位置にある。このような特定の実施形態において、ミスマッチは、ギャップ領域の３’末端から９、８、７、６、５、４、３、２、１の位置にある。このような特定の実施形態において、ミスマッチは、ウイング領域の５’末端から１、２、３または４の位置にある。このような特定の実施形態において、ミスマッチは、ウイング領域の３’末端から４、３、２または１の位置にある。
【０２４３】
非相補的核酸塩基の場所は、アンチセンス化合物の５’末端でも３’末端でもよい。あるいは、１つまたは複数の非相補的核酸塩基は、アンチセンス化合物の内側の位置に存在し得る。２つ以上の非相補的核酸塩基が存在する場合、それらは、連続していてもよいし（すなわち、結合している）、非連続でもよい。一実施形態において、非相補的核酸塩基は、ギャップマーアンチセンスオリゴヌクレオチドのウイングセグメントに位置する。
【０２４４】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的核酸に対して１つ以上のミスマッチ核酸塩基を含む。このような特定の実施形態において、標的に対するアンチセンス活性は、このようなミスマッチによって低減されるが、非標的に対する活性は、大きく低減される。したがって、このような特定の実施形態において、アンチセンス化合物の選択性が改善される。特定の実施形態において、ミスマッチは、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチド内に特異的に配置される。このような特定の実施形態において、ミスマッチは、ギャップ領域の５’末端から１、２、３、４、５、６、７または８の位置にある。このような特定の実施形態において、ミスマッチは、ギャップ領域の３’末端から９、８、７、６、５、４、３、２、１の位置にある。このような特定の実施形態において、ミスマッチは、ウイング領域の５’末端から１、２、３または４の位置にある。このような特定の実施形態において、ミスマッチは、ウイング領域の３’末端から４、３、２または１の位置にある。
【０２４５】
特定の実施形態において、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９もしくは２０個の長さの核酸塩基または最大１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９もしくは２０個の長さの核酸塩基であるアンチセンス化合物は、ＤＧＡＴ２核酸などの標的核酸またはその指定された部分に対して、４個以下、３個以下、２個以下または１個以下の非相補的核酸塩基（複数可）を含む。
【０２４６】
特定の実施形態において、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９もしくは３０個の長さの核酸塩基または最大１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９もしくは３０個の長さの核酸塩基であるアンチセンス化合物は、ＤＧＡＴ２核酸などの標的核酸またはその指定された部分に対して、６個以下、５個以下、４個以下、３個以下、２個以下または１個以下の非相補的核酸塩基（複数可）を含む。
【０２４７】
提供されるアンチセンス化合物には、標的核酸の一部分に相補的であるものも含まれる。本明細書で使用されるとき、「部分（ｐｏｒｔｉｏｎ）」は、標的核酸のある領域またはセグメント内の所定数の連続した（すなわち、結合された）核酸塩基を指す。「部分」はまた、アンチセンス化合物の所定数の連続した核酸塩基を指し得る。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的セグメントの少なくとも８核酸塩基部分に相補的である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的セグメントの少なくとも９核酸塩基部分に相補的である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的セグメントの少なくとも１０核酸塩基部分に相補的である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的セグメントの少なくとも１１核酸塩基部分に相補的である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的セグメントの少なくとも１２核酸塩基部分に相補的である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的セグメントの少なくとも１３核酸塩基部分に相補的である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的セグメントの少なくとも１４核酸塩基部分に相補的である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、標的セグメントの少なくとも１５核酸塩基部分に相補的である。また、標的セグメントの少なくとも９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０もしくはそれ以上の核酸塩基部分またはこれらの値のうちのいずれか２つによって定義される範囲の核酸塩基部分に相補的であるアンチセンス化合物も企図される。
【０２４８】
同一性
本明細書で提供されるアンチセンス化合物はまた、ある特定のヌクレオチド配列、配列番号もしくは特定のＩＳＩＳ番号によって表される化合物またはその部分に対して、所定の同一性パーセントを有し得る。本明細書で使用されるとき、アンチセンス化合物は、それが同じ核酸塩基対を形成する能力を有するのであれば、本明細書で開示される配列と同一である。例えば、開示されるＤＮＡ配列中でチミジンの代わりにウラシルを含有するＲＮＡは、ウラシルとチミジンがどちらもアデニンと対合するので、そのＤＮＡ配列と同一であるとみなされる。本明細書に記載されるアンチセンス化合物の短縮型及び延長型、ならびに本明細書で提供されるアンチセンス化合物に対して非同一塩基を有する化合物も企図される。非同一塩基は、互いに隣接していてもよいし、アンチセンス化合物全体に分散していてもよい。アンチセンス化合物の同一性パーセントは、比較対象の配列に対して同一の塩基対形成を有する塩基の数に応じて、算出される。
【０２４９】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物またはその部分は、本明細書で開示されるアンチセンス化合物もしくは配列番号またはその部分の１つ以上と、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは１００％同一であるか、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは１００％同一である。
【０２５０】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物の部分は、標的核酸のうちの長さの等しい部分と比較される。特定の実施形態において、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５核酸塩基部分は、標的核酸のうちの長さの等しい部分と比較される。
【０２５１】
特定の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドの部分は、標的核酸のうちの長さの等しい部分と比較される。特定の実施形態において、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５核酸塩基部分は、標的核酸のうちの長さの等しい部分と比較される。
【０２５２】
修飾
アンチセンス化合物に対する修飾は、ヌクレオシド間結合、糖部分または核酸塩基に対する置換または変更を包含する。修飾アンチセンス化合物は、例えば、細胞取込みの向上、核酸標的に対する親和性の向上、ヌクレアーゼ存在下での安定性の増大、または阻害活性の増加などの望ましい特性があるため、天然型よりも好ましいことが多い。
【０２５３】
短縮型または切断型アンチセンスオリゴヌクレオチドのその標的核酸に対する結合親和性を増大させるには、化学修飾ヌクレオシドを利用することもできる。したがって、より短いアンチセンス化合物でも、このような化学修飾ヌクレオシドを有するものは、多くの場合、同等の結果を得ることができる。
【０２５４】
修飾ヌクレオシド間結合
ＲＮＡ及びＤＮＡの天然に生じるヌクレオシド間結合は、３’−５’ホスホジエステル結合である。天然に生じるヌクレオシド間結合を有するアンチセンス化合物よりも、１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合、すなわち、天然に生じないヌクレオシド間結合を有するアンチセンス化合物のほうが、例えば、細胞取込みの向上、核酸標的に対する親和性の向上及びヌクレアーゼ存在下での安定性の増大などの望ましい特性を有するため、選択されることが多い。
【０２５５】
修飾ヌクレオシド間結合を有するオリゴヌクレオチドには、リン原子を保持するヌクレオシド間結合及びリン原子を持たないヌクレオシド間結合が含まれる。代表的なリン含有ヌクレオシド間結合には、ホスホジエステル、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート及びホスホロチオエートが挙げられるが、これらに限定されない。リン含有結合及びリン非含有結合の調製方法は、よく知られている。
【０２５６】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオシドは、任意のヌクレオシド間結合を使用して一緒に結合することができる。ヌクレオシド間結合基の２つの主な種類は、リン原子の有無によって定義される。代表的なリン含有ヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合（「Ｐ＝Ｏ」）（非修飾結合または天然に生じる結合ともいう）、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデートならびにホスホロチオエート（「Ｐ＝Ｓ」）及びホスホロジチオエート（「ＨＳ−Ｐ＝Ｓ」）を含有するリン酸が挙げられるが、これらに限定されない。代表的なリン非含有ヌクレオシド間結合基には、メチレンメチルイミノ（−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−）、チオジエステル（−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｓ−）、チオノカルバメート（−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）（ＮＨ）−Ｓ−）；シロキサン（−Ｏ−ＳｉＨ２−Ｏ−）；及びＮ，Ｎ’−ジメチルヒドラジン（−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−Ｎ（ＣＨ３）−）が挙げられるが、これらに限定されない。修飾ヌクレオシド間結合は、天然に生じるリン酸結合と比較して、オリゴヌクレオチドのヌクレアーゼ耐性を変更するために使用することができ、典型的には増加させるために使用することができる。特定の実施形態において、キラル原子を有するヌクレオシド間結合は、ラセミ混合物として、または別個のエナンチオマーとして調製することができる。代表的なキラルヌクレオシド間結合には、アルキルホスホネート及びホスホロチオエートが挙げられるが、これらに限定されない。リン含有ヌクレオシド間結合及びリン非含有ヌクレオシド間結合の調製方法は、当業者によく知られている。
【０２５７】
中性ヌクレオシド間結合には、限定するものではないが、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、ＭＭＩ（３’−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−Ｏ−５’）、アミド−３（３’−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−５’）、アミド−４（３’−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（＝Ｏ）−５’）、ホルムアセタール（３’−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−５’）、メトキシプロピル及びチオホルムアセタール（３’−Ｓ−ＣＨ２−Ｏ−５’）が含まれる。更なる中性ヌクレオシド間結合には、シロキサン（ジアルキルシロキサン）、カルボン酸エステル、カルボキサミド、スルフィド、スルホン酸エステル及びアミドを含む非イオン性結合が含まれる（例えば、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ；Ｙ．Ｓ．Ｓａｎｇｈｖｉ  ａｎｄ  Ｐ．Ｄ．Ｃｏｏｋ，Ｅｄｓ．，ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  ５８０；Ｃｈａｐｔｅｒｓ  ３  ａｎｄ  ４，４０−６５参照）。更なる中性ヌクレオシド間結合には、Ｎ、Ｏ、Ｓ及びＣＨ２の混合構成部分を含む非イオン性結合が含まれる。
【０２５８】
特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化されたアンチセンス化合物は、１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物の各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。
【０２５９】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、当該オリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って所定のパターンまたは所定の修飾ヌクレオシド間結合モチーフで配置された修飾ヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、ヌクレオシド間結合は、ギャップモチーフで配置される。このような実施形態において、２つのウイング領域のそれぞれにあるヌクレオシド間結合は、ギャップ領域中のヌクレオシド間結合とは異なる。特定の実施形態において、ウイング中のヌクレオシド間結合は、ホスホジエステルであり、ギャップ中のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートである。ヌクレオシドモチーフは、独立して選択されるので、ギャップヌクレオシド間結合モチーフを有するオリゴヌクレオチドは、ギャップヌクレオシドモチーフを有しても有さなくてもよく、ギャップヌクレオシドモチーフを有する場合、ウイング長及びギャップ長は、同一でも同一でなくてもよい。
【０２６０】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、交互ヌクレオシド間結合モチーフを有する領域を含む。特定の実施形態において、本発明のオリゴヌクレオチドは、一様に修飾されたヌクレオシド間結合の領域を含む。このような特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合によって一様に結合された領域を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエートによって一様に結合される。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル及びホスホロチオエートから選択される。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル及びホスホロチオエートから選択され、少なくとも１つのヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートである。
【０２６１】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも６個のホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも８個のホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１０個のホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも６個の連続するホスホロチオエートヌクレオシド間結合のブロックを少なくとも１つ含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも８個の連続するホスホロチオエートヌクレオシド間結合のブロックを少なくとも１つ含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１０個の連続するホスホロチオエートヌクレオシド間結合のブロックを少なくとも１つ含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの１２個の連続するホスホロチオエートヌクレオシド間結合のブロックを少なくとも含む。このような特定の実施形態において、当該ブロックの少なくとも１つは、オリゴヌクレオチドの３’末端に位置する。このような特定の実施形態において、少なくとも１つの当該ブロックは、オリゴヌクレオチドの３’末端の３ヌクレオシド以内に位置する。
【０２６２】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１つ以上のメチルホスホネート結合を含む。特定の実施形態において、ギャップマーヌクレオシドモチーフを有するオリゴヌクレオチドは、１または２つのメチルホスホネート結合を除き、全てがホスホロチオエート結合である結合モチーフを含む。特定の実施形態において、１つのメチルホスホネート結合は、ギャップマーヌクレオシドモチーフを有するオリゴヌクレオチドの中央ギャップ中にある。
【０２６３】
特定の実施形態において、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合とホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を、ヌクレアーゼ耐性が維持されるように調整するのが望ましい。特定の実施形態において、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数と位置及びホスホジエステルヌクレオシド間結合の数と位置を、ヌクレアーゼ耐性が維持されるように調整するのが望ましい。特定の実施形態において、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を減らし、ホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を増やすことができる。特定の実施形態において、ヌクレアーゼ耐性を維持したまま、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を減らし、ホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を増やすことができる。特定の実施形態において、ヌクレアーゼ耐性を保持したまま、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を減らすのが望ましい。特定の実施形態において、ヌクレアーゼ耐性を保持したまま、ホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を増やすのが望ましい。
【０２６４】
修飾糖部分
アンチセンス化合物は、場合により、糖基が修飾されている１つ以上のヌクレオシドを含有することができる。このような糖修飾ヌクレオシドは、ヌクレアーゼ安定性の向上、結合親和性の増大または他の何らかの有益な生物学的特性をアンチセンス化合物に付与し得る。
【０２６５】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾糖部分を含む修飾ヌクレオシドを１つ以上含む。１つ以上の糖修飾ヌクレオシドを含む、このような修飾オリゴヌクレオチドは、このような糖修飾ヌクレオシドを欠くオリゴヌクレオチドと比較して、ヌクレアーゼ安定性の向上または標的核酸との結合親和性の増大などの望ましい特性を有し得る。特定の実施形態において、修飾糖部分は、線状修飾糖部分である。特定の実施形態において、修飾糖部分は、二環式または三環式糖部分である。特定の実施形態において、修飾糖部分は、糖代替物である。このような糖代替物は、置換糖部分の置換に対応する、１つ以上の置換を含み得る。
【０２６６】
特定の実施形態において、修飾糖部分は、限定するものではないが、２’位及び／または５’位での置換基を含む、１つ以上の非環式置換基を有するフラノシル環を含む、線状修飾糖部分である。線状修飾糖部分に好適な２’−置換基の例には、２’−Ｆ、２’−ＯＣＨ３（「ＯＭｅ」または「Ｏ−メチル」）及び２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＯＣＨ３（「ＭＯＥ」）が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、２’−置換基は、ハロ、アリル、アミノ、アジド、ＳＨ、ＣＮ、ＯＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０置換アルコキシ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０置換アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ（Ｒｍ）−アルキル、Ｏ−アルケニル、Ｓ−アルケニル、Ｎ（Ｒｍ）−アルケニル、Ｏ−アルキニル、Ｓ−アルキニル、Ｎ（Ｒｍ）−アルキニル、Ｏ−アルキレニル−Ｏ−アルキル、アルキニル、アルカリル、アラルキル、Ｏ−アルカリル、Ｏ−アラルキル、Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＮ（Ｒｍ）（Ｒｎ）またはＯＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）（式中、各Ｒｍ及びＲｎは、独立して、Ｈ、アミノ保護基、または置換もしくは無置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキルである）から選択される。これらの２’−置換基の特定の実施形態は、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、カルボキシ、ベンジル、フェニル、ニトロ（ＮＯ２）、チオール、チオアルコキシ、チオアルキル、ハロゲン、アルキル、アリール、アルケニル及びアルキニルから独立して選択される１つ以上の置換基で更に置換され得る。線状修飾糖部分に好適な５’−置換基の例には、５’−メチル（ＲまたはＳ）、５’−ビニル及び５’−メトキシが挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、線状修飾糖は、２つ以上の非架橋型糖置換基、例えば、２’−Ｆ−５’−メチル糖部分（例えば、更なる２’、５’−ビス置換糖部分及びヌクレオシドについては、ＰＣＴ国際出願第ＷＯ２００８／１０１１５７号参照）を含む。
【０２６７】
特定の実施形態において、２’−置換ヌクレオシドまたは２’−線状修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＮＨ２、Ｎ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）３ＮＨ２、ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＮ（Ｒｍ）（Ｒｎ）、Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）２及びＮ−置換アセトアミド（ＯＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ））（式中、各Ｒｍ及びＲｎは、独立して、Ｈ、アミノ保護基、または置換もしくは無置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキルである）から選択される線状２’−置換基を含む糖部分を含む。
【０２６８】
特定の実施形態において、２’−置換ヌクレオシドまたは２’−線状修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＯＣＦ３、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＮ（ＣＨ３）２、Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｎ−（ＣＨ３）２及びＯＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｈ）ＣＨ３（「ＮＭＡ」）から選択される線状２’−置換基を含む糖部分を含む。
【０２６９】
特定の実施形態において、２’−置換ヌクレオシドまたは２’−線状修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＯＣＨ３及びＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択される線状２’−置換基を含む糖部分を含む。
【０２７０】
線状修飾糖部分などの修飾糖部分を含むヌクレオシドは、当該ヌクレオシドの糖部分上にある置換（複数可）の位置（複数可）によって表される。例えば、２’−置換または２−修飾糖部分を含むヌクレオシドは、２’−置換ヌクレオシドまたは２−修飾ヌクレオシドと呼ばれる。
【０２７１】
特定の修飾糖部分は、第２の環を形成して二環式糖部分をもたらす、架橋型糖置換基を含む。このような特定の実施形態において、二環式糖部分は、４’フラノース環原子と２’フラノース環原子との間の架橋を含む。このような４’−２’架橋型糖置換基の例には、４’−ＣＨ２−２’、４’−（ＣＨ２）２−２’、４’−（ＣＨ２）３−２’、４’−ＣＨ２−Ｏ−２’（「ＬＮＡ」）、４’−ＣＨ２−Ｓ−２’、４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’（「ＥＮＡ」）、４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’（Ｓ型配置であるとき、「拘束エチル」または「ｃＥｔ」ともいう）、４’−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−２’、４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−２’、４’−ＣＨ（ＣＨ２ＯＣＨ３）−Ｏ−２’（「拘束ＭＯＥ」または「ｃＭＯＥ」）及びその類似体（例えば、米国特許第７，３９９，８４５号参照）、４’−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ３）−Ｏ−２’及びその類似体（例えば、ＷＯ２００９／００６４７８参照）、４’−ＣＨ２−Ｎ（ＯＣＨ３）−２’及びその類似体（例えば、ＷＯ２００８／１５０７２９参照）、４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（ＣＨ３）−２’（例えば、ＵＳ２００４／０１７１５７０参照）、４’−ＣＨ２−Ｃ（Ｈ）（ＣＨ３）−２’（例えば、Ｃｈａｔｔｏｐａｄｈｙａｙａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００９，７４，１１８−１３４参照）、４’−ＣＨ２−Ｃ（＝ＣＨ２）−２’及びその類似体（公開されたＰＣＴ国際出願第ＷＯ２００８／１５４４０１号参照）、４’Ｃ（ＲａＲｂ）−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’、４’−Ｃ（ＲａＲｂ）−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’、４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’、及び４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’（式中、各Ｒ、Ｒａ及びＲｂは、独立して、Ｈ、保護基、またはＣ１〜Ｃ１２アルキルである）（例えば、米国特許第７，４２７，６７２号参照）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７２】
特定の実施形態において、このような４’−２’架橋は、独立して、−［Ｃ（Ｒａ）（Ｒｂ）］ｎ−、−［Ｃ（Ｒａ）（Ｒｂ）］ｎ−Ｏ−、Ｃ（Ｒａ）＝Ｃ（Ｒｂ）−、Ｃ（Ｒａ）＝Ｎ−、Ｃ（＝ＮＲａ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒａ）２−、−Ｓ（＝Ｏ）ｘ−及びＮ（Ｒａ）−から独立して選択される１〜４個の結合基を含み、
式中：
ｘは、０、１または２であり、
ｎは、１、２、３または４であり、
各Ｒａ及びＲｂは、独立して、Ｈ、保護基、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換Ｃ５〜Ｃ２０アリール、複素環基、置換複素環基、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、置換Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、ハロゲン、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＣＯＯＪ１、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、ＣＮ、スルホニル（Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ１）、またはスルホキシル（Ｓ（＝Ｏ）−Ｊ１）であり、
各Ｊ１及びＪ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換Ｃ５〜Ｃ２０アリール、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、複素環基、置換複素環基、Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキルまたは保護基である。
【０２７３】
更なる二環式糖部分も、当該技術分野において知られており、例えば、Ｆｒｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９７，２５（２２），４４２９−４４４３，Ａｌｂａｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００６，７１，７７３１−７７４０，Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９８，４，４５５−４５６；Ｋｏｓｈｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９８，５４，３６０７−３６３０；Ｗａｈｌｅｓｔｅｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，２０００，９７，５６３３−５６３８；Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９８，８，２２１９−２２２２；Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，６３，１００３５−１００３９；Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００１７，１２９，８３６２−８３７９；Ｅｌａｙａｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｉｎｖｅｎｓ．Ｄｒｕｇｓ，２００１，２，５５８−５６１；Ｂｒａａｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，２００１，８，１−７；Ｏｒｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００１，３，２３９−２４３；米国特許第７，０５３，２０７号、同第６，２６８，４９０号、同第６，７７０，７４８号、同第６，７９４，４９９号、同第７，０３４，１３３号、同第６，５２５，１９１号、同第６，６７０，４６１号及び同第７，３９９，８４５号；ＷＯ２００４／１０６３５６、ＷＯ１９９４／１４２２６、ＷＯ２００５／０２１５７０及びＷＯ２００７／１３４１８１；米国特許出願公開第ＵＳ２００４／０１７１５７０号、同第ＵＳ２００７／０２８７８３１号及び同第ＵＳ２００８／００３９６１８号；米国特許仮出願第１２／１２９，１５４号、同第６０／９８９，５７４号、同第６１／０２６，９９５号、同第６１／０２６，９９８号、同第６１／０５６，５６４号、同第６１／０８６，２３１号、同第６１／０９７，７８７号及び同第６１／０９９，８４４号；ならびにＰＣＴ国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６４５９１号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６６１５４号及び同第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６８９２２号がある。
【０２７４】
特定の実施形態において、このような二環式糖部分が組み込まれた二環式糖部分及びヌクレオシドは、異性体配置によって更に定義される。例えば、ＬＮＡヌクレオシド（上述）は、α−Ｌ配置またはβ−Ｄ配置を取り得る。
【０２７５】
【化７】
2018525030.tif 000008
【０２７６】
アンチセンスオリゴヌクレオチド中に、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）またはα−Ｌ−ＬＮＡ二環式ヌクレオシドが組み込まれており、このアンチセンスオリゴヌクレオチドは、アンチセンス活性を示した（Ｆｒｉｅｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００３，２１，６３６５−６３７２）。本明細書中、二環式ヌクレオシドに関する概要は、両方の異性体配置を含む。本明細書で例示される実施形態において特定の二環式ヌクレオシド（例えば、ＬＮＡまたはｃＥｔ）の位置が特定されているとき、それらは、別の記載がない限り、β−Ｄ配置である。
【０２７７】
特定の実施形態において、修飾糖部分は、１つ以上の非架橋型糖置換基と、１つ以上の架橋型糖置換基（例えば、５’−置換及び４’−２’架橋型糖）とを含む。（例えば、ＷＯ２００７／１３４１８１参照（当該出願では、ＬＮＡヌクレオシドは、例えば、５’−メチル基または５’−ビニル基で更に置換される）、ならびに、例えば、米国特許第７，５４７，６８４号；同第７，７５０，１３１号；同第８，０３０，４６７号；同第８，２６８，９８０号；同第７，６６６，８５４号；及び同第８，０８８，７４６号参照）。
【０２７８】
特定の実施形態において、修飾糖部分は、糖代替物である。このような特定の実施形態において、糖部分の酸素原子は、例えば、硫黄原子、炭素原子または窒素原子で置き換えられる。このような特定の実施形態において、このような修飾糖部分は、上記のような架橋型及び／または非架橋型置換基も含む。例えば、特定の糖代替物は、４’−硫黄原子と、２’位の置換（例えば、ＵＳ２００５／０１３０９２３参照）及び／または５’位の置換とを含む。
【０２７９】
特定の実施形態において、糖代替物は、５原子以外の環を含む。例えば、特定の実施形態において、糖代替物は、６員テトラヒドロピラン（「ＴＨＰ」）を含む。このようなテトラヒドロピランは、更なる修飾または置換がなされてもよい。このような修飾テトラヒドロピランを含むヌクレオシドには、ヘキシトール核酸（「ＨＮＡ」）、アニトール核酸（「ＡＮＡ」）、マニトール核酸（「ＭＮＡ」）（Ｌｅｕｍａｎｎ，ＣＪ．Ｂｉｏｏｒｇ．＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，１０，８４１−８５４参照）、フルオロＨＮＡ：
【０２８０】
【化８】
2018525030.tif 000009
【０２８１】
（「Ｆ−ＨＮＡ」、例えば、米国特許第８，０８８，９０４号、同第８，４４０，８０３号及び同第８，７９６，４３７号参照；Ｆ−ＨＮＡはＦ−ＴＨＰまたは３’−フルオロテトラヒドロピランとも呼ばれる）、及び次式を有する更なる修飾ＴＨＰ化合物を含むヌクレオシド：
【０２８２】
【化９】
2018525030.tif 000010
【０２８３】
（式中、独立して、当該修飾ＴＨＰヌクレオシドのそれぞれについて、
Ｂｘは、核酸塩基部分であり、
Ｔ３及びＴ４は、それぞれ独立して、当該修飾ＴＨＰヌクレオシドを残りのオリゴヌクレオチドに結合するヌクレオシド間結合基であり、あるいは、Ｔ３及びＴ４の一方は、当該修飾ＴＨＰヌクレオシドを残りのオリゴヌクレオチドに結合するヌクレオシド間結合基であり、Ｔ３及びＴ４の他方は、Ｈ、ヒドロキシル保護基、結合されたコンジュゲート基または５’もしくは３’−末端基であり、ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、ｑ６及びｑ７は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニルまたは置換Ｃ２〜Ｃ６アルキニルであり、Ｒ１及びＲ２のそれぞれは、独立して、水素、ハロゲン、置換または無置換アルコキシ、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、ＮＪ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２及びＣＮ（式中、ＸはＯ、ＳまたはＮＪ１であり、各Ｊ１、Ｊ２及びＪ３は独立してＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである）から選択される）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８４】
特定の実施形態において、式中、ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、ｑ６及びｑ７がそれぞれＨである修飾ＴＨＰヌクレオシドが提供される。特定の実施形態において、ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、ｑ６及びｑ７のうちの少なくとも１つは、Ｈ以外である。特定の実施形態において、ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、ｑ６及びｑ７のうちの少なくとも１つは、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ１及びＲ２の一方がＦである修飾ＴＨＰヌクレオシドが提供される。特定の実施形態において、Ｒ１はＦであり、Ｒ２はＨであり、特定の実施形態において、Ｒ１はメトキシであり、Ｒ２はＨであり、特定の実施形態において、Ｒ１はメトキシエトキシであり、Ｒ２はＨである。
【０２８５】
特定の実施形態において、糖代替物は、６個以上の原子を有し、２つ以上のヘテロ原子を有する環を含む。例えば、モルホリノ糖部分を含むヌクレオシド及びそのオリゴヌクレオチドにおける使用が報告されている（例えば、Ｂｒａａｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，４１，４５０３−４５１０ならびに米国特許第５，６９８，６８５号；同第５，１６６，３１５号；同第５，１８５，４４４号；及び同第５，０３４，５０６参照）。本明細書で使用される場合、「モルホリノ」という用語は、次の構造を有する糖代替物を意味する。
【０２８６】
【化１０】
2018525030.tif 000011
【０２８７】
特定の実施形態において、モルホリノは、例えば、上記のモルホリノ構造に種々の置換基を付加するか、上記のモルホリノ構造の種々の置換基を変更することによって、修飾されてもよい。このような糖代替物は、本明細書中、「修飾モルホリノ」ともいう。
【０２８８】
特定の実施形態において、糖代替物は、非環式部分を含む。このような非環式糖代替物を含むヌクレオシド及びオリゴヌクレオチドの例には、ペプチド核酸（「ＰＮＡ」）、非環式ブチル核酸（例えば、Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１３，１１，５８５３−５８６５参照）ならびにＷＯ２０１１／１３３８７６に記載のヌクレオシド及びオリゴヌクレオチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２８９】
修飾ヌクレオシドに使用することができる多くの他の二環式及び三環式糖ならびに糖代替物環系は、当該技術分野において知られている（例えば、Ｌｅｕｍａｎｎ，Ｊ．Ｃ，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，１０，８４１−８５４参照）。
【０２９０】
修飾核酸塩基
核酸塩基（または塩基）の修飾または置換は、天然または合成の非修飾核酸塩基と構造的に区別可能であるが、機能的には交換可能である。天然核酸塩基と修飾核酸塩基はどちらも水素結合に関与することができる。このような核酸塩基修飾は、ヌクレアーゼ安定性、結合親和性または他の何らかの有益な生物学的特性をアンチセンス化合物に付与することができる。
【０２９１】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、非修飾核酸塩基を含むヌクレオシドを１つ以上含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾核酸塩基を含むヌクレオシドを１つ以上含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、脱塩基ヌクレオシドと呼ばれる、核酸塩基を含まないヌクレオシドを１つ以上含む。
【０２９２】
特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、５−置換ピリミジン、６−アザピリミジン、アルキル置換またはアルキニル置換ピリミジン、アルキル置換プリンならびにＮ−２、Ｎ−６及びＯ−６置換プリンから選択される。特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、２−アミノプロピルアデニン、５−ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、２−アミノアデニン、６−Ｎ−メチルグアニン、６−Ｎ−メチルアデニン、２−プロピルアデニン、２−チオウラシル、２−チオチミン及び２−チオシトシン、５−プロピニル（−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ３）ウラシル、５−プロピニルシトシン、６−アゾウラシル、６−アゾシトシン、６−アゾチミン、５−リボシルウラシル（プソイドウラシル）、４−チオウラシル、８−ハロ、８−アミノ、８−チオール、８−チオアルキル、８−ヒドロキシル、８−アザ及び他の８−置換プリン、５−ハロ、特に、５−ブロモ、５−トリフルオロメチル、５−ハロウラシル及び５−ハロシトシン、７−メチルグアニン、７−メチルアデニン、２−Ｆ−アデニン、２−アミノアデニン、７−デアザグアニン、７−デアザアデニン、３−デアザグアニン、３−デアザアデニン、６−Ｎ−ベンゾイルアデニン、２−Ｎ−イソブチリルグアニン、４−Ｎ−ベンゾイルシトシン、４−Ｎ−ベンゾイルウラシル、５−メチル４−Ｎ−ベンゾイルシトシン、５−メチル４−Ｎ−ベンゾイルウラシル、ユニバーサル塩基、疎水性塩基、非特異的塩基、サイズ伸長塩基ならびにフッ素化塩基から選択される。更なる修飾核酸塩基には、１，３−ジアザフェノキサジン−２−オン、１，３−ジアザフェノチアジン−２−オン及び９−（２−アミノエトキシ）−１，３−ジアザフェノキサジン−２−オン（Ｇ−クランプ）などの三環式ピリミジンが含まれる。修飾核酸塩基にはまた、プリン塩基またはピリミジン塩基が他の複素環、例えば、７−デアザ−アデニン、７−デアザグアノシン、２−アミノピリジン及び２−ピリドンで置き換えられたものも含まれる。更なる核酸塩基には、米国特許第３，６８７，８０８号に開示されているもの、Ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  Ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ａｎｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｋｒｏｓｃｈｗｉｔｚ，Ｊ．Ｉ．，Ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９０，８５８−８５９；Ｅｎｇｌｉｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９１，３０，６１３；Ｓａｎｇｈｖｉ，Ｙ．Ｓ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  １５，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｃｒｏｏｋｅ，Ｓ．Ｔ．ａｎｄ  Ｌｅｂｌｅｕ，Ｂ．，Ｅｄｓ．，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９９３，２７３−２８８に開示されているもの；及びＣｈａｐｔｅｒｓ  ６  ａｎｄ  １５，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｒｏｏｋｅ  Ｓ．Ｔ．，Ｅｄ．，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，２００８，１６３−１６６  ａｎｄ  ４４２−４４３に開示されているものが含まれる。
【０２９３】
上述した修飾核酸塩基及び他の修飾核酸塩基のうちのいくつかの調製について教示する代表的な米国特許には、限定するものではないが、ＵＳ２００３／０１５８４０３、Ｕ．Ｓ．３，６８７，８０８；４，８４５，２０５；５，１３０，３０２；５，１３４，０６６；５，１７５，２７３；５，３６７，０６６；５，４３２，２７２；５，４３４，２５７；５，４５７，１８７；５，４５９，２５５；５，４８４，９０８；５，５０２，１７７；５，５２５，７１１；５，５５２，５４０；５，５８７，４６９；５，５９４，１２１；５，５９６，０９１；５，６１４，６１７；５，６４５，９８５；５，６８１，９４１；５，７５０，６９２；５，７６３，５８８；５，８３０，６５３及び６，００５，０９６が含まれる。
【０２９４】
特定の実施形態において、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化されたアンチセンス化合物は、１つ以上の修飾核酸塩基を含む。特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、５−メチルシトシンである。特定の実施形態において、各シトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２９５】
特定のモチーフ
オリゴヌクレオチドは、モチーフ、例えば、修飾されていない及び／または修飾された糖部分、核酸塩基及び／またはヌクレオシド間結合のパターンを有し得る。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾糖を含む修飾ヌクレオシドを１つ以上含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾核酸塩基を含む修飾ヌクレオシドを１つ以上含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合を含む。このような実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの修飾、非修飾及び修飾の異なる糖部分、核酸塩基及び／またはヌクレオシド間結合は、パターンまたはモチーフを確定する。特定の実施形態において、糖部分、核酸塩基及びヌクレオシド間結合のパターンは、それぞれ互いに独立している。したがって、修飾オリゴヌクレオチドは、その糖モチーフ、核酸塩基モチーフ及び／またはヌクレオシド間結合モチーフによって記載することができる（本明細書で使用されるとき、核酸塩基モチーフは、核酸塩基の配列に関係なく、核酸塩基に対する修飾を記載するものである）。
【０２９６】
１．特定の糖モチーフ
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、当該オリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って所定のパターンまたは所定の糖モチーフで配置された、１種以上の修飾糖及び／または非修飾糖部分を含む。ある特定の場合、当該糖モチーフは、限定するものではないが、本明細書で論ずる糖修飾のうちのいずれかを含む。
【０２９７】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、２つの外側領域、すなわち「ウイング」と、中央領域または内側領域、すなわち「ギャップ」とを含むギャップマーモチーフを有する領域を含むか、これらの領域からなる。ギャップマーモチーフの３つの領域（５’−ウイング、ギャップ及び３’−ウイング）は、連続するヌクレオシド配列を形成し、ここで、当該ウイングのそれぞれのヌクレオシドの糖部分の少なくともいくつかは、当該ギャップのヌクレオシドの糖部分の少なくともいくつかと異なる。具体的には、少なくとも、ギャップに最も近い各ウイングのヌクレオシドの糖部分（５’−ウイングの最も３’側のヌクレオシド及び３’−ウイングの最も５’側のヌクレオシド）は、隣接する、すなわち、ウイングとギャップとの間の境界（すなわち、ウイング／ギャップ境界）を画定するギャップヌクレオシドの糖部分とは異なる。特定の実施形態において、ギャップ内の糖部分は互いに同じである。特定の実施形態において、ギャップは、当該ギャップの１つ以上の他のヌクレオシドの糖部分とは異なる糖部分を有するヌクレオシドを１つ以上含む。特定の実施形態において、２つのウイングの糖モチーフは、互いに同じである（対称ギャップマー）。特定の実施形態において、５’−ウイングの糖モチーフは、３’−ウイングの糖モチーフとは異なる（非対称ギャップマー）。
【０２９８】
特定の実施形態において、ギャップマーのウイングは、１〜５個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのウイングは、２〜５個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのウイングは、３〜５個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのヌクレオシドは、全てが修飾ヌクレオシドである。
【０２９９】
特定の実施形態において、ギャップマーのギャップは、７〜１２個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのギャップは、７〜１０個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのギャップは、８〜１０個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのギャップは、１０個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのギャップの各ヌクレオシドは、非修飾２’−デオキシヌクレオシドである。
【０３００】
特定の実施形態において、ギャップマーは、デオキシギャップマーである。このような実施形態において、各ウイング／ギャップ境界のギャップ側にあるヌクレオシドは、非修飾２’−デオキシヌクレオシドであり、各ウイング／ギャップ境界のウイング側にあるヌクレオシドは、修飾ヌクレオシドである。このような特定の実施形態において、ギャップの各ヌクレオシドは、非修飾２’−デオキシヌクレオシドである。このような特定の実施形態において、各ウイングの各ヌクレオシドは、修飾ヌクレオシドである。
【０３０１】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、完全に修飾された糖モチーフを有する領域を含むか、当該領域からなる。このような実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの完全に修飾された領域の各ヌクレオシドは、修飾糖部分を含む。このような特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチド全体に対する各ヌクレオシドは、修飾糖部分を含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、完全に修飾された糖モチーフを有する領域を含むか、当該領域からなり、ここで、完全に修飾された領域内の各ヌクレオシドは、同一の修飾糖部分を含む（これを、本明細書において一様に修飾された糖モチーフという）。特定の実施形態において、完全に修飾されたオリゴヌクレオチドは、一様に修飾されたオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、一様に修飾されたオリゴヌクレオチドの各ヌクレオシドは、同一の２’−修飾を含む。
【０３０２】
２．特定の核酸塩基モチーフ
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、当該オリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って所定のパターンまたは所定のモチーフで配置された、修飾核酸塩基及び／または非修飾核酸塩基を含む。特定の実施形態において、各核酸塩基は、修飾されている。特定の実施形態において、核酸塩基はいずれも修飾されていない。特定の実施形態において、各プリンまたは各ピリミジンが修飾されている。特定の実施形態において、各アデニンが修飾されている。特定の実施形態において、各グアニンが修飾されている。特定の実施形態において、各チミンが修飾されている。特定の実施形態において、各ウラシルが修飾されている。特定の実施形態において、各シトシンが修飾されている。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチド中のシトシン核酸塩基は、そのいくつかまたは全てが５−メチルシトシンである。
【０３０３】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾核酸塩基のブロックを含む。このような特定の実施形態において、ブロックは、オリゴヌクレオチドの３’末端にある。特定の実施形態において、ブロックは、オリゴヌクレオチドの３’末端の３ヌクレオシド以内にある。特定の実施形態において、ブロックは、オリゴヌクレオチドの５’末端にある。特定の実施形態において、ブロックは、オリゴヌクレオチドの５’末端の３ヌクレオシド以内にある。
【０３０４】
特定の実施形態において、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチドは、修飾核酸塩基を含むヌクレオシドを含む。このような特定の実施形態において、修飾核酸塩基を含む１つのヌクレオシドは、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチドの中央ギャップ中にある。このような特定の実施形態において、当該ヌクレオシドの糖部分は、２’−デオキシリボシル部分である。特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、２−チオピリミジン及び５−プロピンピリミジンから選択される。
【０３０５】
３．特定のヌクレオシド間結合モチーフ
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、当該オリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って所定のパターンまたは所定のモチーフで配置された、修飾ヌクレオシド間結合及び／または非修飾ヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、本質的に、各ヌクレオシド間結合基は、リン酸ヌクレオシド間結合（Ｐ＝Ｏ）である。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合基は、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）である。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合基は、独立して、ホスホロチオエート及びリン酸ヌクレオシド間結合から選択される。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの糖モチーフは、ギャップマーであり、ギャップ内のヌクレオシド間結合は全て修飾されている。このような特定の実施形態において、ウイング中のヌクレオシド間結合は、そのいくつかまたは全てが非修飾リン酸結合である。特定の実施形態において、末端ヌクレオシド間結合が修飾されている。
【０３０６】
特定のオリゴヌクレオチド
オリゴヌクレオチドは、そのモチーフ及び全長によって特徴付けられる。特定の実施形態において、こうしたパラメータは、それぞれ互いに独立している。したがって、特に指定のない限り、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合は、修飾されていても修飾されていなくてもよく、糖修飾のギャップマー修飾パターンに従っていても従っていなくてもよい。例えば、ギャップマーのウイング領域内のヌクレオシド間結合は、互いに同じであっても異なっていてもよく、ギャップ領域のヌクレオシド間結合と同じであっても異なっていてもよい。同様に、このようなギャップマーオリゴヌクレオチドは、糖修飾のギャップマーパターンに関係なく、１つ以上の修飾核酸塩基を含み得る。更に、特に指定のない限り、完全に修飾されたオリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合及び各核酸塩基は、修飾されていても修飾されていなくてもよい。当業者であれば、かかるモチーフを組み合わせて種々のオリゴヌクレオチドを作製できることを認識するであろう。本明細書において、オリゴヌクレオチドの説明が１つ以上のパラメータに関して記載されていない場合、かかるパラメータは限定されない。したがって、更なる記載なく、ギャップマーモチーフのみを有すると記載された修飾オリゴヌクレオチドは、任意の長さ、ヌクレオシド間結合モチーフ及び核酸塩基モチーフを有し得る。特に指定のない限り、全ての修飾は、核酸塩基配列に依存しない。
【０３０７】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、第２のオリゴヌクレオチドまたは標的核酸に相補的な核酸塩基配列を有する。このような特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドのある領域は、第２のオリゴヌクレオチドまたは標的核酸に相補的な核酸塩基配列を有する。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドのある領域または全長の核酸塩基配列は、第２のオリゴヌクレオチドまたは標的核酸に対して、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または１００％相補的である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、２つのオリゴマー化合物を含み、ここで、このオリゴマー化合物の２つのオリゴヌクレオチドは、互いに少なくとも８０％、少なくとも９０％または１００％相補的である。特定の実施形態において、二本鎖アンチセンス化合物の一方または両方のオリゴヌクレオチドは、他方のオリゴヌクレオチドに相補的でないヌクレオシドを２つ含む。
【０３０８】
コンジュゲート基及び末端基
特定の実施形態において、アンチセンス化合物及びオリゴマー化合物は、コンジュゲート基及び／または末端基を含む。このような特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１つ以上のコンジュゲート基に共有結合している。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、結合されるオリゴヌクレオチドの１つ以上の特性、限定するものではないが、薬力学、薬物動態、安定性、結合、吸収、細胞分布、細胞取込み、電荷及びクリアランスなどの特性を変更する。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、結合されるオリゴヌクレオチドに新しい特性を付与し、例えば、オリゴヌクレオチドの検出を可能にするフルオロフォアまたはレポーター基である。コンジュゲート基及び／または末端基は、上術の修飾またはモチーフのいずれかを有するオリゴヌクレオチドに付加することができる。したがって、例えば、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチドを含むアンチセンス化合物またはオリゴマー化合物は、コンジュゲート基も含み得る。
【０３０９】
コンジュゲート基には、限定するものではないが、インターカレーター、レポーター分子、ポリアミン、ポリアミド、ペプチド、炭水化物、ビタミン部分、ポリエチレングリコール、チオエーテル、ポリエーテル、コレステロール、チオコレステロール、コール酸部分、葉酸、脂質、リン脂質、ビオチン、フェナジン、フェナントリジン、アントラキノン、アダマンタン、アクリジン、フルオレセイン、ローダミン、クマリン、フルオロフォア及び色素が含まれる。特定のコンジュゲート基については、これまでに記載されており、例えば、コレステロール部分（Ｌｅｔｓｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８９，８６，６５５３−６５５６）、コール酸（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９４，４，１０５３−１０６０）、チオエーテル、例えば、ヘキシル−Ｓ−トリチルチオール（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１９９２，６６０，３０６−３０９；Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔ．，１９９３，３，２７６５−２７７０）、チオコレステロール（Ｏｂｅｒｈａｕｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１９９２，２０，５３３−５３８）、脂肪族鎖、例えば、ドデカンジオール残基もしくはウンデシル残基（Ｓａｉｓｏｎ−Ｂｅｈｍｏａｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１９９１，１０，１１１１−１１１８；Ｋａｂａｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．，１９９０，２５９，３２７−３３０；Ｓｖｉｎａｒｃｈｕｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ，１９９３，７５，４９−５４）、リン脂質、例えば、ヘキサデシル−ｒａｃ−グリセロールもしくはトリエチル−アンモニウム  １，２−ジ−Ｏ−ヘキサデシル−ｒａｃ−グリセロ−３−Ｈ−ホスホネ−ト（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９５，３６，３６５１−３６５４；Ｓｈｅａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１９９０，１８，３７７７−３７８３）、ポリアミンもしくはポリエチレングリコール鎖（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ＆Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，１９９５，１４，９６９−９７３）またはアダマンタン酢酸（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９５，３６，３６５１−３６５４）、パルミチル部分（Ｍｉｓｈｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，１９９５，１２６４，２２９−２３７）、オクタデシルアミンもしくはヘキシルアミノ−カルボニル−オキシコレステロール部分（Ｃｒｏｏｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，１９９６，２７７，９２３−９３７）、トコフェロール基（Ｎｉｓｈｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，２０１５，４，ｅ２２０；ｄｏｉ：１０．１０３８／ｍｔｎａ．２０１４．７２及びＮｉｓｈｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，２００８，１６，７３４−７４０）またはＧａｌＮＡｃクラスター（例えば、Ｗ���２０１４／１７９６２０）がある。
【０３１０】
特定の実施形態において、コンジュゲート基は、有効な薬剤物質、例えば、アスピリン、ワルファリン、フェニルブタゾン、イブプロフェン、スプロフェン、フェンブフェン、ケトプロフェン、（Ｓ）−（＋）−プラノプロフェン、カルプロフェン、ダンシルサルコシン、２，３，５−トリヨード安息香酸、フィンゴリモド、フルフェナム酸、フォリン酸、ベンゾチアジアジン、クロロチアジド、ジアゼピン、インドメタシン、バルビツール酸系薬、セファロスポリン、サルファ薬、抗糖尿病薬、抗菌性物質または抗生物質を含む。
【０３１１】
コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドなどの親化合物に、直接的に、または任意のコンジュゲートリンカーを介して結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドに直接結合している。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、コンジュゲートリンカーを介して、間接的にオリゴヌクレオチドに結合している。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ヒドロカルビル鎖などの鎖構造、またはエチレングリコール単位もしくはアミノ酸単位などの反復単位のオリゴマーを含む。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、切断可能部分を含む。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、切断可能部分を介して、オリゴヌクレオチドに結合される。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、切断可能部分を含む。このような特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、切断可能部分を介して、オリゴヌクレオチドに結合される。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、切断可能部分を含み、ここで、切断可能部分は、リン酸ヌクレオシド間結合などの切断可能なヌクレオシド間結合に結合されたヌクレオシドである。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドであり、ここで、コンジュゲート基のヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドは、親オリゴヌクレオチドに間接的に結合される。
【０３１２】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、アルキル、アミノ、オキソ、アミド、ジスルフィド、ポリエチレングリコール、エーテル、チオエーテル及びヒドロキシルアミノから選択される１つ以上の基を含む。このような特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、アルキル基、アミノ基、オキソ基、アミド基及びエーテル基から選択される基を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、アルキル基及びアミド基から選択される基を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、アルキル基及びエーテル基から選択される基を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、少なくとも１つのリン部分を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、少なくとも１つのリン酸基を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、少なくとも１つの中性コンジュゲート基を含む。
【０３１３】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、上述したコンジュゲートリンカーを含め、二官能性結合部分であり、例えば、本明細書で提供されるオリゴヌクレオチドなどの親化合物にコンジュゲート基を付加するのに有用であることが当該技術分野において知られているものである。一般に、二官能性結合部分は、少なくとも２つの官能基を含む。官能基の一方は、親化合物上の特定の部位に結合するように選択され、他方は、コンジュゲート基に結合するように選択される。二官能性結合部分に使用される官能基の例には、求核性基と反応する求電子剤及び求電子性基と反応する求核剤が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、二官能性結合部分は、アミノ、ヒドロキシル、カルボン酸、チオール、アルキル、アルケニル及びアルキニルから選択される１つ以上の基を含む。
【０３１４】
コンジュゲートリンカーの例には、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸スクシンイミジル（ＳＭＣＣ）及び６−アミノヘキサン酸（ＡＨＥＸまたはＡＨＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。他のコンジュゲートリンカーには、限定するものではないが、置換もしくは無置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換もしくは無置換Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、または置換もしくは無置換Ｃ２〜Ｃ１０アルキニルが含まれ、ここで、好ましい置換基の非限定的なリストには、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、カルボキシ、ベンジル、フェニル、ニトロ、チオール、チオアルコキシ、ハロゲン、アルキル、アリール、アルケニル及びアルキニルが含まれる。
【０３１５】
特定の実施形態において、切断可能部分は、切断可能な結合である。特定の実施形態において、切断可能部分は、切断可能な結合を含む。特定の実施形態において、切断可能部分は、少なくとも１つの切断可能な結合を含む原子団である。特定の実施形態において、切断可能部分は、１、２、３、４または４つ以上の切断可能な結合を有する原子団を含む。特定の実施形態において、切断可能部分は、細胞内部またはリソソームなどの細胞内区画内部で、選択的に切断される。特定の実施形態において、切断可能部分は、ヌクレアーゼなどの内因性酵素によって選択的に分解される。
【０３１６】
特定の実施形態において、切断可能な結合は、アミド、エステル、エーテル、ホスホジエステルの一方もしくは両方のエステル、リン酸エステル、カルバメートまたはジスルフィドから選択される。特定の実施形態において、切断可能な結合は、ホスホジエステルの一方もしくは両方のエステルである。特定の実施形態において、切断可能部分は、リン酸またはホスホジエステルを含む。特定の実施形態において、切断可能部分は、オリゴヌクレオチドとコンジュゲートリンカーまたはコンジュゲート基との間のリン酸結合である。
【０３１７】
特定の実施形態において、切断可能部分は、ヌクレオシドである。このような特定の実施形態において、非修飾または修飾ヌクレオシドは、プリン、置換プリン、ピリミジンまたは置換ピリミジンから選択される、任意に保護された複素環式塩基を含む。特定の実施形態において、切断可能部分は、ウラシル、チミン、シトシン、４−Ｎ−ベンゾイルシトシン、５−メチルシトシン、４−Ｎ−ベンゾイル−５−メチル−シトシン、アデニン、６−Ｎ−ベンゾイルアデニン、グアニン及び２−Ｎ−イソブチリルグアニンから選択されるヌクレオシドである。特定の実施形態において、切断可能部分は、リン酸ヌクレオシド間結合によってオリゴヌクレオチドの３’末端または５’末端ヌクレオシドのいずれかに結合され、かつリン酸またはホスホロチオエート結合によってコンジュゲートリンカーまたはコンジュゲート基に共有結合された、２’−デオキシヌクレオシドである。このような特定の実施形態において、切断可能部分は、２’−デオキシアデノシンである。
【０３１８】
コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドの一末端もしくは両末端に結合され得、かつ／または任意の内側の位置に結合され得る。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオシドの２’位に結合される。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドの一末端または両末端に結合されるコンジュゲート基は、末端基である。このような特定の実施形態において、コンジュゲート基または末端基は、オリゴヌクレオチドの３’末端及び／または５’末端に結合される。このような特定の実施形態において、コンジュゲート基（または末端基）は、オリゴヌクレオチドの３’末端に結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドの３’末端近傍に結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基（または末端基）は、オリゴヌクレオチドの５’末端に結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドの５’末端近傍に結合される。
【０３１９】
末端基の例には、コンジュゲート基、キャップ基、リン酸部分、保護基、修飾または非修飾ヌクレオシド、及び独立して修飾または非修飾である２つ以上のヌクレオシドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３２０】
特定の実施形態において、コンジュゲート基は、細胞標的化部分である。特定の実施形態において、コンジュゲート基、任意のコンジュゲートリンカー及び任意の切断可能部分は、次の一般式を有する。
【０３２１】
【化１１】
2018525030.tif 000012
【０３２２】
式中、ｎは、１〜約３であり、ｎが１であるとき、ｍは０であり、ｎが２以上であるとき、ｍは１であり、ｊは、１または０であり、ｋは、１または０である。
【０３２３】
特定の実施形態において、ｎは１であり、ｊは１であり、ｋは０である。特定の実施形態において、ｎは１であり、ｊは０であり、ｋは１である。特定の実施形態において、ｎは１であり、ｊは１であり、ｋは１である。特定の実施形態において、ｎは２であり、ｊは１であり、ｋは０である。特定の実施形態において、ｎは２であり、ｊは０であり、ｋは１である。特定の実施形態において、ｎは２であり、ｊは１であり、ｋは１である。特定の実施形態において、ｎは３であり、ｊは１であり、ｋは０である。特定の実施形態において、ｎは３であり、ｊは０であり、ｋは１である。特定の実施形態において、ｎは３であり、ｊは１であり、ｋは１である。
【０３２４】
特定の実施形態において、コンジュゲート基は、少なくとも１つの係留リガンドを有する細胞標的化部分を含む。特定の実施形態において、細胞標的化部分は、分岐基に共有結合した２つの係留リガンドを含む。特定の実施形態において、細胞標的化部分は、分岐基に共有結合した３つの係留リガンドを含む。
【０３２５】
特定の実施形態において、細胞標的化部分は、アルキル、アミノ、オキソ、アミド、ジスルフィド、ポリエチレングリコール、エーテル、チオエーテル及びヒドロキシルアミノ基から選択される１つ以上の基を含む分岐基を含む。特定の実施形態において、分岐基は、アルキル、アミノ、オキソ、アミド、ジスルフィド、ポリエチレングリコール、エーテル、チオエーテル及びヒドロキシルアミノ基から選択される基を含む、分枝状脂肪族基を含む。このような特定の実施形態において、分枝状脂肪族基は、アルキル基、アミノ基、オキソ基、アミド基及びエーテル基から選択される基を含む。このような特定の実施形態において、分枝状脂肪族基は、アルキル基、アミノ基及びエーテル基から選択される基を含む。このような特定の実施形態において、分枝状脂肪族基は、アルキル基及びエーテル基から選択される基を含む。特定の実施形態において、分岐基は、単環式環系または多環式環系を含む。
【０３２６】
特定の実施形態において、細胞標的化部分の各テザーは、任意の組み合わせで、アルキル、置換アルキル、エーテル、チオエーテル、ジスルフィド、アミノ、オキソ、アミド、ホスホジエステル及びポリエチレングリコールから選択される１つ以上の基を含む。特定の実施形態において、各テザーは、任意の組み合わせで、アルキル、エーテル、チオエーテル、ジスルフィド、アミノ、オキソ、アミド及びポリエチレングリコールから選択される１つ以上の基を含む、線状脂肪族基である。特定の実施形態において、各テザーは、任意の組み合わせで、アルキル、ホスホジエステル、エーテル、アミノ、オキソ及びアミドから選択される１つ以上の基を含む、線状脂肪族基である。特定の実施形態において、各テザーは、任意の組み合わせで、アルキル、エーテル、アミノ、オキソ及びアミドから選択される１つ以上の基を含む、線状脂肪族基である。特定の実施形態において、各テザーは、任意の組み合わせで、アルキル、アミノ及びオキソから選択される１つ以上の基を含む、線状脂肪族基である。特定の実施形態において、各テザーは、任意の組み合わせで、アルキル及びオキソから選択される１つ以上の基を含む、線状脂肪族基である。特定の実施形態において、各テザーは、任意の組み合わせで、アルキル及びホスホジエステルから選択される１つ以上の基を含む、線状脂肪族基である。特定の実施形態において、各テザーは、少なくとも１つのリン結合基または中性結合基を含む。特定の実施形態において、各テザーは、長さが約６〜約２０個の原子の鎖を含む。特定の実施形態において、各テザーは、長さが約１０〜約１８個の原子の鎖を含む。特定の実施形態において、各テザーは、鎖長が約１０個の原子を含む。
【０３２７】
特定の実施形態において、細胞標的化部分の各リガンドは、標的細胞上の少なくとも１種の受容体に対する親和性を有する。特定の実施形態において、各リガンドは、哺乳動物の肝臓細胞の表面上にある少なくとも１種の受容体に対する親和性を有する。特定の実施形態において、各リガンドは、肝アシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰ−Ｒ）に対する親和性を有する。特定の実施形態において、各リガンドは、炭水化物である。特定の実施形態において、各リガンドは、独立して、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、マンノース、グルコース、グルコサミン及びフコースから選択される。特定の実施形態において、各リガンドは、Ｎ−アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）である。特定の実施形態において、細胞標的化部分は、３つのＧａｌＮＡｃリガンドを含む。特定の実施形態において、細胞標的化部分は、２つのＧａｌＮＡｃリガンドを含む。特定の実施形態において、細胞標的化部分は、１つのＧａｌＮＡｃリガンドを含む。
【０３２８】
特定の実施形態において、細胞標的化部分の各リガンドは、炭水化物、炭水化物誘導体、修飾炭水化物、多糖、修飾多糖または多糖誘導体である。このような特定の実施形態において、コンジュゲート基は、炭水化物クラスターを含む（例えば、Ｍａｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  ｔｏ  ａ  Ｍｕｌｔｉｖａｌｅｎｔ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｃｌｕｓｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，”  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，１４，１８−２９，ｏｒ  Ｒｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｎｏｖｅｌ  Ｎ−Ａｃｅｔｙｌｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ−Ｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ  Ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄｓ  ｆｏｒ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｈｅｐａｔｉｃ  Ａｓｉａｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，”  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，４７，５７９８−５８０８参照；これらの全体を参照により本明細書に援用する）。このような特定の実施形態において、各リガンドは、アミノ糖またはチオ糖である。例えば、アミノ糖は、当該技術分野において知られている多数の化合物、例えば、シアル酸、α−Ｄ−ガラクトサミン、β−ムラミン酸、２−デオキシ−２−メチルアミノ−Ｌ−グルコピラノース、４，６−ジデオキシ−４−ホルムアミド−２，３−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−マンノピラノース、２−デオキシ−２−スルホアミノ−Ｄ−グルコピラノース及びＮ−スルホ−Ｄ−グルコサミン及びＮ−グリコロイル−α−ノイラミン酸から選択され得る。例えば、チオ糖は、５−チオ−β−Ｄ−グルコピラノース、メチル２，３，４−トリ−Ｏ−アセチル−１−チオ−６−Ｏ−トリチル−α−Ｄ−グルコピラノシド、４−チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノース及びエチル３，４，６，７−テトラ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−１，５−ジチオ−α−Ｄ−グルコ−ヘプトピラノシドから選択され得る。
【０３２９】
特定の実施形態において、コンジュゲート基は、次式を有する細胞標的化部分を含む。
【０３３０】
【化１２】
2018525030.tif 000013
【０３３１】
特定の実施形態において、コンジュゲート基は、次式を有する細胞標的化部分を含む。
【０３３２】
【化１３】
2018525030.tif 000014
【０３３３】
特定の実施形態において、コンジュゲート基は、次式を有する細胞標的化部分を含む。
【０３３４】
【化１４】
2018525030.tif 000015
【０３３５】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物及びオリゴマー化合物は、本明細書中、「ＬＩＣＡ−１」と記載されるコンジュゲート基及びコンジュゲートリンカーを含む。
ＬＩＣＡ−１は、次式を有する。
【０３３６】
【化１５】
2018525030.tif 000016
【０３３７】
特定の実施形態において、ＬＩＣＡ−１を含むアンチセンス化合物及びオリゴマー化合物は、次式を有する。
【０３３８】
【化１６】
2018525030.tif 000017
【０３３９】
式中、オリゴは、オリゴヌクレオチドである。
【０３４０】
上述したコンジュゲート基、コンジュゲート基、テザー、コンジュゲートリンカー、分岐基、リガンド、切断可能部分及び他の修飾を含む、オリゴマー化合物及びアンチセンス化合物のいくつかの調製について教示する、代表的な米国特許、米国特許出願公開、国際特許出願公開及び他の公開物には、限定するものではないが、ＵＳ５，９９４，５１７、ＵＳ６，３００，３１９、ＵＳ６，６６０，７２０、ＵＳ６，９０６，１８２、ＵＳ７，２６２，１７７、ＵＳ７，４９１，８０５、ＵＳ８，１０６，０２２、ＵＳ７，７２３，５０９、ＵＳ２００６／０１４８７４０、ＵＳ２０１１／０１２３５２０、ＷＯ２０１３／０３３２３０及びＷＯ２０１２／０３７２５４、Ｂｉｅｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８，１８４６−１８５２，Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２０１１，１９，２４９４−２５００，Ｒｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００１，２７６，３７５７７−３７５８４，Ｒｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，４７，５７９８−５８０８，Ｓｌｉｅｄｒｅｇｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９９，４２，６０９−６１８及びＶａｌｅｎｔｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９７，５３，７５９−７７０が含まれ、これらのそれぞれの全体を参照により本明細書に援用する。
【０３４１】
特定の実施形態において、アンチセンス化合物及びオリゴマー化合物は、ギャップマーまたは完全に修飾されたモチーフを含む修飾オリゴヌクレオチドと、少なくとも１、２または３つのＧａｌＮＡｃリガンドを含むコンジュゲート基とを含む。特定の実施形態において、アンチセンス化合物及びオリゴマー化合物は、次の参考文献：Ｌｅｅ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ  Ｒｅｓ，１９７８，６７，５０９−５１４；Ｃｏｎｎｏｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，１９８２，２５７，９３９−９４５；Ｐａｖｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｅｐ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ，１９８３，２２，５３９−５４８；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ，１９８４，２３，４２５５−４２６１；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｊ，１９８７，４，３１７−３２８；Ｔｏｙｏｋｕｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ，１９９０，３１，２６７３−２６７６；Ｂｉｅｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，１９９５，３８，１５３８−１５４６；Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９７，５３，７５９−７７０；Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ，１９９７，３８，３４８７−３４９０；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ，１９９７，８，７６２−７６５；Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌ，２００１，１１，８２１−８２９；Ｒｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，２００１，２７６，３７５７７−３７５８４；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ，２００３，３６２，３８−４３；Ｗｅｓｔｅｒｌｉｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ  Ｊ，２００４，２１，２２７−２４１；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ，２００６，１６（１９），５１３２−５１３５；Ｍａｉｅｒｈｏｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，２００７，１５，７６６１−７６７６；Ｋｈｏｒｅｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，２００８，１６，５２１６−５２３１；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，２０１１，１９，２４９４−２５００；Ｋｏｒｎｉｌｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌｙｔ  Ｂｉｏｃｈｅｍ，２０１２，４２５，４３−４６；Ｐｕｊｏｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔ  Ｅｄ  Ｅｎｇｌ，２０１２，５１，７４４５−７４４８；Ｂｉｅｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，１９９５，３８，１８４６−１８５２；Ｓｌｉｅｄｒｅｇｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，１９９９，４２，６０９−６１８；Ｒｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，２００４，４７，５７９８−５８０８；Ｒｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ，２００６，２６，１６９−１７５；ｖａｎ  Ｒｏｓｓｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ，２００４，１１，４５７−４６４；Ｓａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｍ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ，２００４，１２６，１４０１３−１４０２２；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｏｒｇ  Ｃｈｅｍ，２０１２，７７，７５６４−７５７１；Ｂｉｅｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＡＳＥＢ  Ｊ，２０００，１４，１７８４−１７９２；Ｒａｊｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ，１９９７，８，９３５−９４０；Ｄｕｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ，２０００，３１３，２９７−３２１；Ｍａｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ，２００３，１４，１８−２９；Ｊａｙａｐｒａｋａｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ  Ｌｅｔｔ，２０１０，１２，５４１０−５４１３；Ｍａｎｏｈａｒａｎ，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ，２００２，１２，１０３−１２８；Ｍｅｒｗｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ，１９９４，５，６１２−６２０；Ｔｏｍｉｙａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ，２０１３，２１，５２７５−５２８１；国際出願ＷＯ１９９８／０１３３８１；ＷＯ２０１１／０３８３５６；ＷＯ１９９７／０４６０９８；ＷＯ２００８／０９８７８８；ＷＯ２００４／１０１６１９；ＷＯ２０１２／０３７２５４；ＷＯ２０１１／１２００５３；ＷＯ２０１１／１００１３１；ＷＯ２０１１／１６３１２１；ＷＯ２０１２／１７７９４７；ＷＯ２０１３／０３３２３０；ＷＯ２０１３／０７５０３５；ＷＯ２０１２／０８３１８５；ＷＯ２０１２／０８３０４６；ＷＯ２００９／０８２６０７；ＷＯ２００９／１３４４８７；ＷＯ２０１０／１４４７４０；ＷＯ２０１０／１４８０１３；ＷＯ１９９７／０２０５６３；ＷＯ２０１０／０８８５３７；ＷＯ２００２／０４３７７１；ＷＯ２０１０／１２９７０９；ＷＯ２０１２／０６８１８７；ＷＯ２００９／１２６９３３；ＷＯ２００４／０２４７５７；ＷＯ２０１０／０５４４０６；ＷＯ２０１２／０８９３５２；ＷＯ２０１２／０８９６０２；ＷＯ２０１３／１６６１２１；ＷＯ２０１３／１６５８１６；米国特許第４，７５１，２１９号；同第８，５５２，１６３号；同第６，９０８，９０３号；同第７，２６２，１７７号；同第５，９９４，５１７号；同第６，３００，３１９号；同第８，１０６，０２２号；同第７，４９１，８０５号；同第７，４９１，８０５号；同第７，５８２，７４４号；同第８，１３７，６９５号；同第６，３８３，８１２号；同第６，５２５，０３１号；同第６，６６０，７２０号；同第７，７２３，５０９号；同第８，５４１，５４８号；同第８，３４４，１２５号；同第８，３１３，７７２号；同第８，３４９，３０８号；同第８，４５０，４６７号；同第８，５０１，９３０号；同第８，１５８，６０１号；同第７，２６２，１７７号；同第６，９０６，１８２号；同第６，６２０，９１６号；同第８，４３５，４９１号；同第８，４０４，８６２号；同第７，８５１，６１５号；公開された米国特許出願公開ＵＳ２０１１／００９７２６４；ＵＳ２０１１／００９７２６５；ＵＳ２０１３／０００４４２７；ＵＳ２００５／０１６４２３５；ＵＳ２００６／０１４８７４０；ＵＳ２００８／０２８１０４４；ＵＳ２０１０／０２４０７３０；ＵＳ２００３／０１１９７２４；ＵＳ２００６／０１８３８８６；ＵＳ２００８／０２０６８６９；ＵＳ２０１１／０２６９８１４；ＵＳ２００９／０２８６９７３；ＵＳ２０１１／０２０７７９９；ＵＳ２０１２／０１３６０４２；ＵＳ��０１２／０１６５３９３；ＵＳ２００８／０２８１０４１；ＵＳ２００９／０２０３１３５；ＵＳ２０１２／００３５１１５；ＵＳ２０１２／００９５０７５；ＵＳ２０１２／０１０１１４８；ＵＳ２０１２／０１２８７６０；ＵＳ２０１２／０１５７５０９；ＵＳ２０１２／０２３０９３８；ＵＳ２０１３／０１０９８１７；ＵＳ２０１３／０１２１９５４；ＵＳ２０１３／０１７８５１２；ＵＳ２０１３／０２３６９６８；ＵＳ２０１１／０１２３５２０；ＵＳ２００３／００７７８２９；ＵＳ２００８／０１０８８０１；及びＵＳ２００９／０２０３１３２のうちのいずれかに見出されるコンジュゲート基を含み、これら参考文献のそれぞれの全体を参照により援用する。
【０３４２】
特定の実施形態において、本明細書に記載されるＤＧＡＴ２を標的にする修飾オリゴヌクレオチドは、ＧａｌＮＡｃコンジュゲート基を更に含む。特定の実施形態において、ＧａｌＮＡｃコンジュゲート基は、５’−トリスヘキシルアミノ−（ＴＨＡ）−Ｃ６  ＧａｌＮＡｃ３である。特定の実施形態において、５’−トリスヘキシルアミノ−（ＴＨＡ）−Ｃ６  ＧａｌＮＡｃ３コンジュゲートは、次式を有する。
【０３４３】
【化１７】
2018525030.tif 000018
【０３４４】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、切断可能部分によって、５’−トリスヘキシルアミノ−（ＴＨＡ）−Ｃ６  ＧａｌＮＡｃ３コンジュゲートに結合される。特定の実施形態において、切断可能部分は、リン酸基である。
【０３４５】
医薬組成物を製するための組成物及び方法
特定の実施形態において、本発明は、１つ以上のアンチセンス化合物またはその塩を含む医薬組成物を提供する。このような特定の実施形態において、医薬組成物は、好適な薬学的に許容される希釈剤または担体を含む。特定の実施形態において、医薬組成物は、滅菌生理食塩液及び１つ以上のアンチセンス化合物を含む。特定の実施形態において、かかる医薬組成物は、滅菌生理食塩液及び１つ以上のアンチセンス化合物からなる。特定の実施形態において、滅菌生理食塩水は、医薬品等級の生理食塩水である。特定の実施形態において、医薬組成物は、１つ以上のアンチセンス化合物及び滅菌水を含む。特定の実施形態において、医薬組成物は、１つのアンチセンス化合物及び滅菌水からなる。特定の実施形態において、滅菌水は、医薬品等級の水である。特定の実施形態において、医薬組成物は、１つ以上のアンチセンス化合物及びリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含む。特定の実施形態において、医薬組成物は、１つ以上のアンチセンス化合物及び滅菌ＰＢＳからなる。特定の実施形態において、滅菌ＰＢＳは、医薬品等級のＰＢＳである。医薬組成物を製するための組成物及び方法は、限定するものではないが、投与経路、疾患の程度または投与される用量を含む、多くの基準に依存する。
【０３４６】
ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化されたアンチセンス化合物は、当該アンチセンス化合物を、好適な薬学的に許容される希釈剤または担体と組み合わせることによって、医薬組成物に利用することができる。特定の実施形態において、薬学的に許容される希釈剤は、注射に適した滅菌水などの水である。したがって、一実施形態において、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化されたアンチセンス化合物と、薬学的に許容される希釈剤とを含む医薬組成物が、本明細書に記載される方法において利用される。特定の実施形態において、薬学的に許容される希釈剤は、水である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、本明細書で提供されるアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０３４７】
アンチセンス化合物を含む医薬組成物は、ヒトを含む動物に投与したときに、生物学的に活性な代謝産物またはその残基を（直接的または間接的に）もたらすことができる、あらゆる薬学的に許容される塩、エステルもしくは当該エステルの塩または任意の他のオリゴヌクレオチドを包含する。したがって、例えば、本開示はまた、アンチセンス化合物の薬学的に許容される塩、プロドラッグ、当該プロドラッグの薬学的に許容される塩及び他の生物学的同等物に関する。好適な薬学的に許容される塩には、ナトリウム塩及びカリウム塩が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３４８】
プロドラッグは、アンチセンス化合物の一端または両端に、体内の内因性ヌクレアーゼによって切断されて活性アンチセンス化合物を形成する、更なるヌクレオシドの組み込みを含み得る。
【０３４９】
特定の実施形態において、化合物または組成物は、薬学的に許容される担体または希釈剤を更に含む。
【０３５０】
特定の化合物
ヒトＤＧＡＴ２遺伝子配列に対して１００％の相補性を呈する約５，０００個のアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いて、ヒトＨｅｐＧ２細胞におけるｉｎ  ｖｉｔｒｏスクリーニングを実施した。ｉｎ  ｖｉｔｒｏで最も強力なアンチセンス化合物のいくつかであることがこれまでに決定されている、以前に設計された化合物（例えば、公開されたＰＣＴ出願第ＷＯ２００５／０１９４１８号参照）と新規化合物を比較した。これらのｉｎ  ｖｉｔｒｏスクリーニングから、ヒトＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの発現を減少させる上で最大の効力を呈したいくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドを、ｉｎ  ｖｉｖｏ忍容性アッセイのために選択した。
【０３５１】
選択したオリゴヌクレオチドの忍容性について、ＣＤ１マウスモデル及びスプラーグドーリーラットモデルで試験した。これらのモデルにおいて、体重及び器官重量、肝機能マーカー（アラニンアミノ基転移酵素、アスパラギン酸アミノ基転移酵素及びビリルビンなど）及び腎機能マーカー（ＢＵＮ及びクレアチニンなど）を測定した。
【０３５２】
全試験（実施例１〜１５）の最終評価により、配列番号１３７１（ＩＳＩＳ４８４０８５）、配列番号１４１５（ＩＳＩＳ４８４１２９）、配列番号１４２３（ＩＳＩＳ４８４１３７）、配列番号１８４４（ＩＳＩＳ４９５５７６）、配列番号２９５９（ＩＳＩＳ５０１８６１）、配列番号３２９２（ＩＳＩＳ５０２１９４）、配列番号４１９８（ＩＳＩＳ５２５４４３）及び配列番号４３７３（ＩＳＩＳ５２５６１２）の核酸塩基配列を有する８個のオリゴヌクレオチドの選択に至った。化合物は、領域２３２４２〜２３２６１、２６６３０〜２６６４９、２６７７８〜２６７９７、１５２５１〜１５２７０、２８０２６〜２８０４５、３５４３６〜３５４５５、１０８２０〜１０８３６及び２３２４６〜２３２６２に相補的である。特定の実施形態において、本明細書に詳述される列挙された領域を標的にする化合物は、本明細書に詳述されるように、その配列番号に示される配列のある核酸塩基部分を有する修飾オリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、列挙された領域を標的にする化合物または列挙された配列番号に示される配列の一核酸塩基部分を有する化合物は、本明細書に詳述されるように種々の長さであってよく、本明細書に詳述されるように種々のモチーフのうちの１つを有し得る。特定の実施形態において、ある領域を標的にする化合物または列挙された配列番号の配列の一核酸塩基部分を有する化合物は、ＩＳＩＳ番号４８４０８５、４８４１２９、４８４１３７、４９５５７６、５０１８６１、５０２１９４、５２５４４３及び５２５６１２によって示されるように、特定の長さ及びモチーフを有する。
【０３５３】
これらの８つの化合物のカニクイザルにおける活性、薬物動態プロファイル及び忍容性について試験した（実施例１６）。具体的には、このサル試験において、ＩＳＩＳ４８４１３７が強力で最も忍容性であることが判明した。別のサル試験（実施例１７）におけるＩＳＩＳ４８４１３７の更なる評価は、この知見を裏付けるものであった。
【０３５４】
ＩＳＩＳ４８４１３７のヌクレオチド配列は、アカゲザルＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡ転写物に対して完全に相同である。カニクイザルは、オリゴヌクレオチド治療薬に適切な前臨床安全性モデル系とみなされ、この種で実証されたＩＳＩＳ４８４１３７の薬理学的活性は、カニクイザルが安全評価に適した種であることを表している。サルにおける１３週間の治療についてＩＳＩＳ４８４１３７を使用して一般毒性試験を実施したところ、明らかな有害作用がなく、かつ通常の検査パラメータの変化もなく、良好な忍容性であった。ＩＳＩＳ４８４１３７は、肝臓ＤＧＡＴ２の発現を約７０％減少させた。
【０３５５】
ＩＳＩＳ４８４１３７治療の１３週間後にマウス及びサルの毒性試験で観察された所見は、全般的に、２′−ＭＯＥ  ＡＳＯに典型的な非特異的クラス効果であった。試験した最高用量（マウスの場合１００ｍｇ／ｋｇ及びサルの場合４０ｍｇ／ｋｇ）まで、薬物関連死または臨床的徴候の変化はなかった。マウス試験及びサル試験では、１２ｍｇ／ｋｇ／週までの用量で、１３週間、毒性上の有意な所見はなかった。したがって、提案されている臨床用量及びレジメンでのＩＳＩＳ４８４１３７の安全な臨床使用を裏付ける、十分な治療域がある。
【０３５６】
薬物動態の結果は、１３週間のマウス試験及びサル試験におけるＩＳＩＳ４８４１３７への連続的かつ用量依存的曝露を立証している。サルで観察されたアンチセンスオリゴヌクレオチドの薬物動態は、典型的には、ｍｇ／ｋｇ等価用量に基づいて、ヒトにおいて観察される血漿（及び予想される組織）曝露レベルを十分に予測するものである（Ｇｅａｒｙ  ｅｔ  ａｌ．２００３；３１：１４１９  １４２８；Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｐｏｓ  ２００７；３５：４６０−４６８）。
【０３５７】
したがって、ＩＳＩＳ４８４１３７によるＤＧＡＴ２発現の減少は、肝臓脂肪症を減少させる機序を提供し、これにより、後発する炎症及び線維症を減じることが見込まれる。この作用機序は、ＮＡＦＬＤ及びＮＡＳＨに関連する重大な肝臓脂肪症を有する患者にとって、魅力的な治療選択肢を提供するであろう。
【実施例】
【０３５８】
以下の実施例は、ＤＧＡＴ２に対して標的化されたリード化合物を特定するためのスクリーニング工程を記載する。スクリーニングを行った約５，０００個のアンチセンスオリゴヌクレオチドのうち、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３及びＩＳＩＳ５２５６１２が上位リード化合物として浮上した。特に、ＩＳＩＳ４８４１３７は、約５，０００個のアンチセンスオリゴヌクレオチドのうち、ＤＧＡＴ２に対する効力及び忍容性に関して、最も優れた特性の組み合わせを示した。
【０３５９】
非限定的な開示と参照による援用
本出願に添付する配列表は、必要に応じて、各配列を「ＲＮＡ」または「ＤＮＡ」のいずれかとして特定するが、実際には、これらの配列は、任意の組み合わせの化学修飾で修飾され得る。当業者であれば、修飾オリゴヌクレオチドを記述するための「ＲＮＡ」または「ＤＮＡ」という名称は、場合により、任意的であることを容易に認識するであろう。例えば、２’−ＯＨ糖部分及びチミン塩基を含むヌクレオシドを含むオリゴヌクレオチドは、修飾糖（ＤＮＡの天然２’−Ｈに対して２’−ＯＨ）を有するＤＮＡまたは修飾塩基（ＲＮＡの天然ウラシルに対してチミン（メチル化ウラシル））を有するＲＮＡと記述することができる。
【０３６０】
したがって、本明細書に記載される核酸配列は、限定するものではないが、配列表中のものを含め、天然または修飾ＲＮＡ及び／またはＤＮＡの任意の組み合わせを含有する核酸、例えば、限定するものではないが、修飾核酸塩基を有する核酸などを包含することが意図される。更なる例として、限定するものではないが、核酸塩基配列「ＡＴＣＧＡＴＣＧ」を有するオリゴヌクレオチドは、修飾または非修飾にかかわらず、当該核酸塩基配列を有するあらゆるオリゴヌクレオチドを包含し、限定するものではないが、ＲＮＡ塩基を含む化合物、配列「ＡＵＣＧＡＵＣＧ」を有するもの及び「ＡＵＣＧＡＴＣＧ」などのいくつかのＤＮＡ塩基といくつかのＲＮＡ塩基を有するものを含む。
【０３６１】
本明細書に記載される特定の化合物、組成物及び方法について、特定の実施形態に従って具体的に説明してきたが、以下の実施例は、本明細書に記載の化合物を例示するためにのみ提供するものであり、同化合物を限定するものではない。本出願で言及される参照文献のそれぞれは、その全体が参照により本明細書に援用される。
【０３６２】
実施例１：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２のアンチセンス阻害
ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２（ＤＧＡＴ２）核酸を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡに対するその効果についてｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。各実験の結果を以下の個別の表に示す。１０，０００細胞／ウェルの密度で培養したＨｅｐＧ２細胞に、Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ試薬を使用して、１２０ｎＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドをトランスフェクトした。約２４時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、定量的リアルタイムＰＣＲによってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２３６７（本明細書において配列番号４として示されるフォワード配列ＧＧＣＣＴＣＣＣＧＧＡＧＡＣＴＧＡ；本明細書において配列番号５として示されるリバース配列ＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＴＣＣＴ；本明細書において配列番号６として示されるプローブ配列ＡＧＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＣＣＡＧＣＣＴＴＣＧＧＧ）を使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。
【０３６３】
先に公開された出願ＷＯ２００５／０１９４１８のＩＳＩＳオリゴヌクレオチドもこのアッセイに含めた。これらのＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、ＩＳＩＳ２１７３１２〜２１７３２２、ＩＳＩＳ２１７３２４、ＩＳＩＳ２１７３２５、ＩＳＩＳ２１７３２８、ＩＳＩＳ２１７３３３、ＩＳＩＳ２１７３３６〜２１７３３９、ＩＳＩＳ２１７３４１〜２１７３４３、ＩＳＩＳ２１７３４６〜２１７３４８、ＩＳＩＳ２１７３５３〜２１７３５５、ＩＳＩＳ３３４１７７、ＩＳＩＳ３６６７１０、ＩＳＩＳ３６６７１４、ＩＳＩＳ３６６７２２、ＩＳＩＳ３６６７２８、ＩＳＩＳ３６６７３０、ＩＳＩＳ３６６７４１、ＩＳＩＳ３６６７４６、ＩＳＩＳ３６９２２０、ＩＳＩＳ３６９２２１、ＩＳＩＳ３６９２５５、ＩＳＩＳ３７０７２７、ＩＳＩＳ３７０７４７、ＩＳＩＳ３７０７８４である。
【０３６４】
以下の表中の新しく設計されたキメラアンチセンスオリゴヌクレオチドは、５−１０−５  ＭＯＥギャップマーとして設計した。ギャップマーは、２０ヌクレオシド長であり、中央ギャップセグメントは１０個の２’−デオキシヌクレオシドからなり、５’方向及び３’方向にそれぞれ５つのヌクレオシドを含むウイングセグメントが配されている。５’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドと３’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドは、２’−ＭＯＥ修飾を有する。各ギャップマー中のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）結合である。各ギャップマー中の全てのシトシン残基は、５−メチルシトシンである。「開始部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も５’側のヌクレオシドを示す。「終止部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も３’側のヌクレオシドを示す。以下の表に示される各ギャップマーは、本明細書において配列番号１として示されるヒトＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡ（ＲｅｆＳｅｑ番号ＮＭ＿０３２５６４．３）または本明細書において配列番号２として示されるヒトＤＧＡＴ２ゲノム配列（ヌクレオチド５６６９１８６〜５７１２００８を切り出したＲｅｆＳｅｑ番号ＮＴ＿０３３９２７．５）のいずれかを標的にする。『ｎ／ａ』は、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドがその特定遺伝子配列を１００％の相補性で標的にしないことを示す。
【０３６５】
【表１−１】
2018525030.tif 000019
【０３６６】
【表１−２】
2018525030.tif 000020
【０３６７】
【表１−３】
2018525030.tif 000021
【０３６８】
【表２−１】
2018525030.tif 000022
【０３６９】
【表２−２】
2018525030.tif 000023
【０３７０】
【表３−１】
2018525030.tif 000024
【０３７１】
【表３−２】
2018525030.tif 000025
【０３７２】
【表３−３】
2018525030.tif 000026
【０３７３】
【表３−４】
2018525030.tif 000027
【０３７４】
【表４−１】
2018525030.tif 000028
【０３７５】
【表４−２】
2018525030.tif 000029
【０３７６】
【表４−３】
2018525030.tif 000030
【０３７７】
【表５−１】
2018525030.tif 000031
【０３７８】
【表５−２】
2018525030.tif 000032
【０３７９】
【表５−３】
2018525030.tif 000033
【０３８０】
【表６−１】
2018525030.tif 000034
【０３８１】
【表６−２】
2018525030.tif 000035
【０３８２】
【表６−３】
2018525030.tif 000036
【０３８３】
実施例２：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２のアンチセンス阻害
ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２（ＤＧＡＴ２）核酸を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡに対するその効果についてｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。各実験の結果を以下の個別の表に示す。１０，０００細胞／ウェルの密度で培養したＨｅｐＧ２細胞に、Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ試薬を使用して、１２０ｎＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドをトランスフェクトした。約２４時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、定量的リアルタイムＰＣＲによってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢ（本明細書において配列番号７として示されるフォワード配列ＡＡＣＴＧＧＣＣＣＴＧＣＧＴＣＡＴＧ；本明細書において配列番号８として示されるリバース配列ＣＴＴＧＴＡＣＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＣＴＣＣＡＡＡＧＧ；本明細書において配列番号９として示されるプローブ配列ＣＴＧＡＣＣＴＧＧＴＴＣＣＣ）を使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。
【０３８４】
先に公開された出願ＷＯ２００５／０１９４１８のＩＳＩＳオリゴヌクレオチドもこのアッセイに含めた。これらのＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、ＩＳＩＳ２１７３１６、ＩＳＩＳ２１７３１７、ＩＳＩＳ２１７３２８、ＩＳＩＳ２１７３２９、ＩＳＩＳ３３４１７７、ＩＳＩＳ３３４１７８、ＩＳＩＳ３６６７３０、ＩＳＩＳ３６６７３１及びＩＳＩＳ３６９２５５である。以下の表に示すように、新たに設計されたアンチセンスオリゴヌクレオチドのいくつかは、これらのベンチマークオリゴヌクレオチドのいずれかと同等か、それ以上の効力を示した。
【０３８５】
以下の表中の新しく設計されたキメラアンチセンスオリゴヌクレオチドは、５−１０−５  ＭＯＥ、３−１４−３  ＭＯＥまたは２−１３−５  ＭＯＥギャップマーとして設計した。５−１０−５  ＭＯＥギャップマーは、２０ヌクレオシド長であり、中央ギャップセグメントは１０個の２’−デオキシヌクレオシドからなり、５’方向及び３’方向にそれぞれ５つのヌクレオシドを含むウイングセグメントが配されている。３−１４−３  ＭＯＥギャップマーは、２０ヌクレオシド長であり、中央ギャップセグメントは１４個の２’−デオキシヌクレオシドからなり、５’方向及び３’方向にそれぞれ３つのヌクレオシドを含むウイングセグメントが配されている。２−１３−５  ＭＯＥギャップマーは、２０ヌクレオシド長であり、中央ギャップセグメントは１３個の２’−デオキシヌクレオシドからなり、５’方向及び３’方向にそれぞれ２つ及び３つのヌクレオシドを含むウイングセグメントが配されている。５’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドと３’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドは、２’−ＭＯＥ修飾を有する。各ギャップマー中のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）結合である。各ギャップマー中の全てのシトシン残基は、５−メチルシトシンである。「開始部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も５’側のヌクレオシドを示す。「終止部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も３’側のヌクレオシドを示す。以下の表に示される各ギャップマーは、本明細書において配列番号１として示されるヒトＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡ（ＲｅｆＳｅｑ番号ＮＭ＿０３２５６４．３）または本明細書において配列番号２として示されるヒトＤＧＡＴ２ゲノム配列（ヌクレオチド５６６９１８６〜５７１２００８を切り出したＲｅｆＳｅｑ番号ＮＴ＿０３３９２７．５）のいずれかを標的にする。『ｎ／ａ』は、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドがその特定遺伝子配列を１００％の相補性で標的にしないことを示す。
【０３８６】
【表７−１】
2018525030.tif 000037
【０３８７】
【表７−２】
2018525030.tif 000038
【０３８８】
【表７−３】
2018525030.tif 000039
【０３８９】
【表７−４】
2018525030.tif 000040
【０３９０】
【表７−５】
2018525030.tif 000041
【０３９１】
【表８−１】
2018525030.tif 000042
【０３９２】
【表８−２】
2018525030.tif 000043
【０３９３】
【表８−３】
2018525030.tif 000044
【０３９４】
【表８−４】
2018525030.tif 000045
【０３９５】
【表８−５】
2018525030.tif 000046
【０３９６】
【表９−１】
2018525030.tif 000047
【０３９７】
【表９−２】
2018525030.tif 000048
【０３９８】
【表９−３】
2018525030.tif 000049
【０３９９】
【表９−４】
2018525030.tif 000050
【０４００】
【表９−５】
2018525030.tif 000051
【０４０１】
実施例３：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２のアンチセンス阻害
ＤＧＡＴ２核酸を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡに対するその効果についてｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。ベンチマークオリゴヌクレオチドとして、以前に開示されたオリゴヌクレオチドＩＳＩＳ２１７３１７、２１７３２８、ＩＳＩＳ３６６７２２、ＩＳＩＳ３６６７１０、ＩＳＩＳ３６６７１４、ＩＳＩＳ３６６７２８、ＩＳＩＳ３６６７４６及びＩＳＩＳ３６９２５５を本試験に含めた。各実験の結果を以下の個別の表に示す。２０，０００細胞／ウェルの密度で培養したＨｅｐＧ２細胞に４，５００ｎＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドをエレクトロポレーションを使用してトランスフェクトした。約２４時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、定量的リアルタイムＰＣＲによってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。いくつかのオリゴヌクレオチドの効力について、ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２３６７（本明細書において配列番号４として示されるフォワード配列ＧＧＣＣＴＣＣＣＧＧＡＧＡＣＴＧＡ；本明細書において配列番号５として示されるリバース配列ＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＴＣＣＴ；本明細書において配列番号６として示されるプローブ配列ＡＧＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＣＣＡＧＣＣＴＴＣＧＧＧ）により測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。結果は、いくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドがベンチマークオリゴヌクレオチドよりも高い効力を示すことを表している。
【０４０２】
以下の表中の新しく設計されたキメラアンチセンスオリゴヌクレオチドは、５−１０−５  ＭＯＥギャップマーとして設計した。５−１０−５  ＭＯＥギャップマーは、２０ヌクレオシド長であり、中央ギャップセグメントは１０個の２’−デオキシヌクレオシドからなり、５’方向及び３’方向にそれぞれ５つのヌクレオシドを含むウイングセグメントが配されている。５’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドと３’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドは、２’−ＭＯＥ修飾を有する。各ギャップマー中のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）結合である。各ギャップマー中の全てのシトシン残基は、５−メチルシトシンである。「開始部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も５’側のヌクレオシドを示す。「終止部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も３’側のヌクレオシドを示す。以下の表に示す各ギャップマーは、配列番号１、配列番号２またはその両方を標的にする。『ｎ／ａ』は、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドがその特定遺伝子配列を１００％の相補性で標的にしないことを示す。特定の表中で標的遺伝子配列の配列アライメントが示されていない場合、その表中に示されているオリゴヌクレオチドはいずれも、その標的遺伝子配列と１００％の相補性で整列しないと解釈される。
【０４０３】
【表１０−１】
2018525030.tif 000052
【０４０４】
【表１０−２】
2018525030.tif 000053
【０４０５】
【表１０−３】
2018525030.tif 000054
【０４０６】
【表１１−１】
2018525030.tif 000055
【０４０７】
【表１１−２】
2018525030.tif 000056
【０４０８】
【表１１−３】
2018525030.tif 000057
【０４０９】
【表１２−１】
2018525030.tif 000058
【０４１０】
【表１２−２】
2018525030.tif 000059
【０４１１】
【表１２−３】
2018525030.tif 000060
【０４１２】
【表１３−１】
2018525030.tif 000061
【０４１３】
【表１３−２】
2018525030.tif 000062
【０４１４】
【表１３−３】
2018525030.tif 000063
【０４１５】
【表１４−１】
2018525030.tif 000064
【０４１６】
【表１４−２】
2018525030.tif 000065
【０４１７】
【表１４−３】
2018525030.tif 000066
【０４１８】
【表１５−１】
2018525030.tif 000067
【０４１９】
【表１５−２】
2018525030.tif 000068
【０４２０】
【表１５−３】
2018525030.tif 000069
【０４２１】
実施例４：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２のアンチセンス阻害
ＤＧＡＴ２核酸を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡに対するその効果についてｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。ＩＳＩＳ４１３４３３は、上記試験において、以前に開示されたオリゴヌクレオチドのいずれよりも高い効力を一貫して示しており、これを、ベンチマークオリゴヌクレオチドとして、本試験に含めた。したがって、ＩＳＩＳ４１３４３３とほぼ同程度またはそれ以上の効力を示したアンチセンスオリゴヌクレオチドを更なる実験について考慮した。
【０４２２】
各実験の結果を以下の個別の表に示す。２０，０００細胞／ウェルの密度で培養したＨｅｐＧ２細胞に４，５００ｎＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドをエレクトロポレーションを使用してトランスフェクトした。約２４時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、定量的リアルタイムＰＣＲによってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。いくつかのオリゴヌクレオチドの効力について、ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２３６７（本明細書において配列番号４として示されるフォワード配列ＧＧＣＣＴＣＣＣＧＧＡＧＡＣＴＧＡ；本明細書において配列番号５として示されるリバース配列ＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＴＣＣＴ；本明細書において配列番号６として示されるプローブ配列ＡＧＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＣＣＡＧＣＣＴＴＣＧＧＧ）により測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。結果は、いくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドがベンチマークオリゴヌクレオチドよりも高い効力を示すことを表している。
【０４２３】
以下の表中の新しく設計されたキメラアンチセンスオリゴヌクレオチドは、５−１０−５  ＭＯＥギャップマーまたは３−１０−４  ＭＯＥギャップマーとして設計した。５−１０−５  ＭＯＥギャップマーは、２０ヌクレオシド長であり、中央ギャップセグメントは１０個の２’−デオキシヌクレオシドからなり、５’方向及び３’方向にそれぞれ５つのヌクレオシドを含むウイングセグメントが配されている。３−１０−４  ＭＯＥギャップマーは、１７ヌクレオシド長であり、中央ギャップセグメントは１０個の２’−デオキシヌクレオシドからなり、５’方向及び３’方向にそれぞれ３つ及び４つのヌクレオシドを含むウイングセグメントが配されている。５’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドと３’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドは、２’−ＭＯＥ修飾を有する。各ギャップマー中のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）結合である。各ギャップマー中の全てのシトシン残基は、５−メチルシトシンである。「開始部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も５’側のヌクレオシドを示す。「終止部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も３’側のヌクレオシドを示す。以下の表に示す各ギャップマーは、配列番号１、配列番号２またはその両方を標的にする。『ｎ／ａ』は、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドがその特定遺伝子配列を１００％の相補性で標的にしないことを示す。特定の表中で標的遺伝子の配列アライメントが示されていない場合、その表中に示されているオリゴヌクレオチドはいずれも、その標的遺伝子と１００％の相補性で整列しないと解釈される。
【０４２４】
【表１６−１】
2018525030.tif 000070
【０４２５】
【表１６−２】
2018525030.tif 000071
【０４２６】
【表１６−３】
2018525030.tif 000072
【０４２７】
【表１７−１】
2018525030.tif 000073
【０４２８】
【表１７−２】
2018525030.tif 000074
【０４２９】
【表１７−３】
2018525030.tif 000075
【０４３０】
【表１８−１】
2018525030.tif 000076
【０４３１】
【表１８−２】
2018525030.tif 000077
【０４３２】
【表１８−３】
2018525030.tif 000078
【０４３３】
【表１９−１】
2018525030.tif 000079
【０４３４】
【表１９−２】
2018525030.tif 000080
【０４３５】
【表１９−３】
2018525030.tif 000081
【０４３６】
【表２０−１】
2018525030.tif 000082
【０４３７】
【表２０−２】
2018525030.tif 000083
【０４３８】
【表２０−３】
2018525030.tif 000084
【０４３９】
【表２１−１】
2018525030.tif 000085
【０４４０】
【表２１−２】
2018525030.tif 000086
【０４４１】
【表２１−３】
2018525030.tif 000087
【０４４２】
【表２２−１】
2018525030.tif 000088
【０４４３】
【表２２−２】
2018525030.tif 000089
【０４４４】
【表２２−３】
2018525030.tif 000090
【０４４５】
【表２３−１】
2018525030.tif 000091
【０４４６】
【表２３−２】
2018525030.tif 000092
【０４４７】
【表２３−３】
2018525030.tif 000093
【０４４８】
【表２４−１】
2018525030.tif 000094
【０４４９】
【表２４−２】
2018525030.tif 000095
【０４５０】
【表２４−３】
2018525030.tif 000096
【０４５１】
【表２５−１】
2018525030.tif 000097
【０４５２】
【表２５−２】
2018525030.tif 000098
【０４５３】
【表２５−３】
2018525030.tif 000099
【０４５４】
【表２６−１】
2018525030.tif 000100
【０４５５】
【表２６−２】
2018525030.tif 000101
【０４５６】
【表２６−３】
2018525030.tif 000102
【０４５７】
【表２７−１】
2018525030.tif 000103
【０４５８】
【表２７−２】
2018525030.tif 000104
【０４５９】
【表２７−３】
2018525030.tif 000105
【０４６０】
【表２８−１】
2018525030.tif 000106
【０４６１】
【表２８−２】
2018525030.tif 000107
【０４６２】
【表２８−３】
2018525030.tif 000108
【０４６３】
【表２９−１】
2018525030.tif 000109
【０４６４】
【表２９−２】
2018525030.tif 000110
【０４６５】
【表２９−３】
2018525030.tif 000111
【０４６６】
【表３０−１】
2018525030.tif 000112
【０４６７】
【表３０−２】
2018525030.tif 000113
【０４６８】
【表３０−３】
2018525030.tif 000114
【０４６９】
【表３１−１】
2018525030.tif 000115
【０４７０】
【表３１−２】
2018525030.tif 000116
【０４７１】
【表３１−３】
2018525030.tif 000117
【０４７２】
【表３２−１】
2018525030.tif 000118
【０４７３】
【表３２−２】
2018525030.tif 000119
【０４７４】
【表３２−３】
2018525030.tif 000120
【０４７５】
【表３３−１】
2018525030.tif 000121
【０４７６】
【表３３−２】
2018525030.tif 000122
【０４７７】
【表３３−３】
2018525030.tif 000123
【０４７８】
【表３４−１】
2018525030.tif 000124
【０４７９】
【表３４−２】
2018525030.tif 000125
【０４８０】
【表３４−３】
2018525030.tif 000126
【０４８１】
【表３５−１】
2018525030.tif 000127
【０４８２】
【表３５−２】
2018525030.tif 000128
【０４８３】
【表３５−３】
2018525030.tif 000129
【０４８４】
【表３６−１】
2018525030.tif 000130
【０４８５】
【表３６−２】
2018525030.tif 000131
【０４８６】
【表３６−３】
2018525030.tif 000132
【０４８７】
【表３７−１】
2018525030.tif 000133
【０４８８】
【表３７−２】
2018525030.tif 000134
【０４８９】
【表３７−３】
2018525030.tif 000135
【０４９０】
【表３８−１】
2018525030.tif 000136
【０４９１】
【表３８−２】
2018525030.tif 000137
【０４９２】
【表３８−３】
2018525030.tif 000138
【０４９３】
【表３９−１】
2018525030.tif 000139
【０４９４】
【表３９−２】
2018525030.tif 000140
【０４９５】
【表３９−３】
2018525030.tif 000141
【０４９６】
【表４０−１】
2018525030.tif 000142
【０４９７】
【表４０−２】
2018525030.tif 000143
【０４９８】
【表４０−３】
2018525030.tif 000144
【０４９９】
【表４１−１】
2018525030.tif 000145
【０５００】
【表４１−２】
2018525030.tif 000146
【０５０１】
【表４１−３】
2018525030.tif 000147
【０５０２】
【表４２−１】
2018525030.tif 000148
【０５０３】
【表４２−２】
2018525030.tif 000149
【０５０４】
【表４２−３】
2018525030.tif 000150
【０５０５】
【表４３−１】
2018525030.tif 000151
【０５０６】
【表４３−２】
2018525030.tif 000152
【０５０７】
【表４３−３】
2018525030.tif 000153
【０５０８】
【表４４−１】
2018525030.tif 000154
【０５０９】
【表４４−２】
2018525030.tif 000155
【０５１０】
【表４４−３】
2018525030.tif 000156
【０５１１】
【表４５−１】
2018525030.tif 000157
【０５１２】
【表４５−２】
2018525030.tif 000158
【０５１３】
【表４５−３】
2018525030.tif 000159
【０５１４】
【表４６−１】
2018525030.tif 000160
【０５１５】
【表４６−２】
2018525030.tif 000161
【０５１６】
【表４６−３】
2018525030.tif 000162
【０５１７】
【表４７−１】
2018525030.tif 000163
【０５１８】
【表４７−２】
2018525030.tif 000164
【０５１９】
【表４７−３】
2018525030.tif 000165
【０５２０】
【表４８−１】
2018525030.tif 000166
【０５２１】
【表４８−２】
2018525030.tif 000167
【０５２２】
【表４８−３】
2018525030.tif 000168
【０５２３】
【表４９−１】
2018525030.tif 000169
【０５２４】
【表４９−２】
2018525030.tif 000170
【０５２５】
【表４９−３】
2018525030.tif 000171
【０５２６】
【表４９−４】
2018525030.tif 000172
【０５２７】
【表４９−５】
2018525030.tif 000173
【０５２８】
【表５０−１】
2018525030.tif 000174
【０５２９】
【表５０−２】
2018525030.tif 000175
【０５３０】
【表５０−３】
2018525030.tif 000176
【０５３１】
【表５１−１】
2018525030.tif 000177
【０５３２】
【表５１−２】
2018525030.tif 000178
【０５３３】
【表５１−３】
2018525030.tif 000179
【０５３４】
【表５２−１】
2018525030.tif 000180
【０５３５】
【表５２−２】
2018525030.tif 000181
【０５３６】
【表５２−３】
2018525030.tif 000182
【０５３７】
【表５３−１】
2018525030.tif 000183
【０５３８】
【表５３−２】
2018525030.tif 000184
【０５３９】
【表５３−３】
2018525030.tif 000185
【０５４０】
【表５４−１】
2018525030.tif 000186
【０５４１】
【表５４−２】
2018525030.tif 000187
【０５４２】
【表５４−３】
2018525030.tif 000188
【０５４３】
【表５５−１】
2018525030.tif 000189
【０５４４】
【表５５−２】
2018525030.tif 000190
【０５４５】
【表５５−３】
2018525030.tif 000191
【０５４６】
【表５６−１】
2018525030.tif 000192
【０５４７】
【表５６−２】
2018525030.tif 000193
【０５４８】
【表５６−３】
2018525030.tif 000194
【０５４９】
【表５７−１】
2018525030.tif 000195
【０５５０】
【表５７−２】
2018525030.tif 000196
【０５５１】
【表５７−３】
2018525030.tif 000197
【０５５２】
【表５８−１】
2018525030.tif 000198
【０５５３】
【表５８−２】
2018525030.tif 000199
【０５５４】
【表５８−３】
2018525030.tif 000200
【０５５５】
【表５９−１】
2018525030.tif 000201
【０５５６】
【表５９−２】
2018525030.tif 000202
【０５５７】
【表５９−３】
2018525030.tif 000203
【０５５８】
【表６０−１】
2018525030.tif 000204
【０５５９】
【表６０−２】
2018525030.tif 000205
【０５６０】
【表６０−３】
2018525030.tif 000206
【０５６１】
【表６１−１】
2018525030.tif 000207
【０５６２】
【表６１−２】
2018525030.tif 000208
【０５６３】
【表６１−３】
2018525030.tif 000209
【０５６４】
【表６２−１】
2018525030.tif 000210
【０５６５】
【表６２−２】
2018525030.tif 000211
【０５６６】
【表６２−３】
2018525030.tif 000212
【０５６７】
【表６３−１】
2018525030.tif 000213
【０５６８】
【表６３−２】
2018525030.tif 000214
【０５６９】
【表６３−３】
2018525030.tif 000215
【０５７０】
実施例５：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２のアンチセンス阻害
ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２（ＤＧＡＴ２）核酸を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡに対するその効果についてｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。各実験の結果を以下の個別の表に示す。２０，０００細胞／ウェルの密度で培養したＨｅｐＧ２細胞に１，０００ｎＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドをエレクトロポレーションを使用してトランスフェクトした。約２４時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、定量的リアルタイムＰＣＲによってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。ＩＳＩＳ４１３４３３は、上記試験において、以前に開示されたオリゴヌクレオチドのいずれよりも高い効力を一貫して示しており、これを、ベンチマークオリゴヌクレオチドとして、本試験に含めた。したがって、ＩＳＩＳ４１３４３３とほぼ同程度またはそれ以上の効力を示したアンチセンスオリゴヌクレオチドを更なる実験について考慮した。
【０５７１】
以下の表中の新しく設計されたキメラアンチセンスオリゴヌクレオチドは、５−１０−５  ＭＯＥギャップマーとして設計した。ギャップマーは、２０ヌクレオシド長であり、中央ギャップセグメントは１０個の２’−デオキシヌクレオシドからなり、５’方向及び３’方向にそれぞれ５つのヌクレオシドを含むウイングセグメントが配されている。５’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドと３’ウイングセグメント中の各ヌクレオシドは、２’−ＭＯＥ修飾を有する。各ギャップマー中のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）結合である。各ギャップマー中の全てのシトシン残基は、５−メチルシトシンである。「開始部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も５’側のヌクレオシドを示す。「終止部位」は、ギャップマーが標的にするヒト遺伝子配列中の最も３’側のヌクレオシドを示す。以下の表に示される各ギャップマーは、本明細書において配列番号２（ヌクレオチド５６６９１８６〜５７１２００８を切り出したＲｅｆＳｅｑ番号ＮＴ＿０３３９２７．５）として示されるヒトＤＧＡＴ２ゲノム配列を標的にする。『ｎ／ａ』は、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドがその特定遺伝子配列を１００％の相補性で標的にしないことを示す。特定の表中で標的遺伝子の配列アライメントが示されていない場合、その表中に示されているオリゴヌクレオチドはいずれも、その標的遺伝子と１００％の相補性で整列しないと解釈される。
【０５７２】
【表６４−１】
2018525030.tif 000216
【０５７３】
【表６４−２】
2018525030.tif 000217
【０５７４】
【表６４−３】
2018525030.tif 000218
【０５７５】
【表６４−４】
2018525030.tif 000219
【０５７６】
【表６４−５】
2018525030.tif 000220
【０５７７】
【表６５−１】
2018525030.tif 000221
【０５７８】
【表６５−２】
2018525030.tif 000222
【０５７９】
【表６５−３】
2018525030.tif 000223
【０５８０】
【表６５−４】
2018525030.tif 000224
【０５８１】
【表６５−５】
2018525030.tif 000225
【０５８２】
【表６６−１】
2018525030.tif 000226
【０５８３】
【表６６−２】
2018525030.tif 000227
【０５８４】
【表６６−３】
2018525030.tif 000228
【０５８５】
実施例６：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２の用量依存的アンチセンス阻害
上記実施例に記載する試験から、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの著しいｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害を呈するギャップマーを選択し、ＨｅｐＧ２細胞において種々の用量で試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。先に公開された出願ＷＯ２００５／０１９４１８の以前に開示されたオリゴヌクレオチドＩＳＩＳ２１３１６、ＩＳＩＳ２１７３１７、ＩＳＩＳ２１７３２８、ＩＳＩＳ３６９１８５、ＩＳＩＳ３６６７１４、ＩＳＩＳ３６６７３０、ＩＳＩＳ３６６７４６及びＩＳＩＳ３６９２４１をアッセイに含めた。各実験の結果を以下の個別の表に示す。細胞を１０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ試薬を使用して、以下の表に明示するように、６．２５ｎＭ、１２．５ｎＭ、２５．０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭまたは２００．０ｎＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２３６７を使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。『ｎ．ｄ．』は、阻害レベルが記録されなかったことを示す。
【０５８６】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。結果はまた、新たに設計されたアンチセンスオリゴヌクレオチドのいくつかが、以前に開示されたオリゴヌクレオチよりも高い有効性を有することも示している。
【０５８７】
【表６７】
2018525030.tif 000229
【０５８８】
【表６８】
2018525030.tif 000230
【０５８９】
【表６９】
2018525030.tif 000231
【０５９０】
【表７０】
2018525030.tif 000232
【０５９１】
【表７１】
2018525030.tif 000233
【０５９２】
実施例７：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２の用量依存的アンチセンス阻害
上記実施例に記載する試験から、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの著しいｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害を呈するギャップマーを選択し、ＨｅｐＧ２細胞において種々の用量で試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。先に公開された出願ＷＯ２００５／０１９４１８の以前に開示されたオリゴヌクレオチドをアッセイに含めた。各実験の結果を以下の個別の表に示す。
【０５９３】
試験１
細胞を１０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ試薬を使用して、以下の表に明示するように、１８．７５ｎＭ、３７．５ｎＭ、７５．０ｎＭまたは１５０．０ｎＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０５９４】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０５９５】
【表７２】
2018525030.tif 000234
【０５９６】
【表７３】
2018525030.tif 000235
【０５９７】
同じギャップマーを、エレクトロポレーションの使用によっても、ＨｅｐＧ２細胞において種々の用量で試験した。細胞を２０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、エレクトロポレーションを使用して、以下の表に明示するように、２．５μＭ、５．０μＭ、１０．０μＭまたは２０．０μＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０５９８】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０５９９】
【表７４】
2018525030.tif 000236
【０６００】
【表７５】
2018525030.tif 000237
【０６０１】
試験２
細胞を３５，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、エレクトロポレーションを使用して、以下の表に明示するように、０．２２μＭ、０．６７μＭ、２．０μＭ、６．０μＭまたは１８．０μＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９７７＿ＭＧＢ（本明細書において配列番号１０として示されるフォワード配列ＡＣＴＧＧＧＣＧＧＧＣＴＴＣＡＴＡＴＴ；本明細書において配列番号１１として示されるリバース配列ＣＣＣＧＧＡＧＴＡＧＧＣＧＧＣＴＡＴ；本明細書において配列番号１２として示されるプローブ配列ＡＧＣＣＡＴＧＡＡＧＡＣＣＣ）を使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６０２】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６０３】
【表７６】
2018525030.tif 000238
【０６０４】
試験３
細胞を１０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ試薬を使用して、以下の表に明示するように、１２．５ｎＭ、２５．０ｎＭ、５０．０ｎＭ、１００．０ｎＭまたは２００．０ｎＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６０５】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６０６】
【表７７】
2018525030.tif 000239
【０６０７】
試験４
細胞を１０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ試薬を使用して、以下の表に明示するように、１２．５ｎＭ、２５．０ｎＭ、５０．０ｎＭ、１００．０ｎＭまたは２００．０ｎＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６０８】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６０９】
【表７８】
2018525030.tif 000240
【０６１０】
試験５
細胞を２０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、エレクトロポレーションを使用して、以下の表に明示するように、１２．５μＭ、２５．０μＭ、５０．０μＭ、１００．０μＭまたは２００．０μＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢ（本明細書において配列番号７として示されるフォワード配列ＡＡＣＴＧＧＣＣＣＴＧＣＧＴＣＡＴＧ；本明細書において配列番号８として示されるリバース配列ＣＴＴＧＴＡＣＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＣＴＣＣＡＡＡＧＧ；本明細書において配列番号９として示されるプローブ配列ＣＴＧＡＣＣＴＧＧＴＴＣＣＣ）を使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６１１】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６１２】
【表７９】
2018525030.tif 000241
【０６１３】
試験６
細胞を２０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、エレクトロポレーションを使用して、以下の表に明示するように、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５μＭ、５．０μＭ、１０μＭまたは２０μＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６１４】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６１５】
【表８０】
2018525030.tif 000242
【０６１６】
実施例８：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２の用量依存的アンチセンス阻害
上記実施例に記載する試験から、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの著しいｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害を呈するギャップマーを選択し、ＨｅｐＧ２細胞において種々の用量で試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。各実験の結果を以下の個別の表に示す。細胞を２０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、エレクトロポレーションを使用して、以下の表に明示するように、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５０μＭ、５．００μＭまたは１０．００μＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６１７】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６１８】
【表８１】
2018525030.tif 000243
【０６１９】
【表８２】
2018525030.tif 000244
【０６２０】
【表８３】
2018525030.tif 000245
【０６２１】
【表８４】
2018525030.tif 000246
【０６２２】
【表８５】
2018525030.tif 000247
【０６２３】
【表８６】
2018525030.tif 000248
【０６２４】
【表８７】
2018525030.tif 000249
【０６２５】
【表８８】
2018525030.tif 000250
【０６２６】
【表８９】
2018525030.tif 000251
【０６２７】
【表９０】
2018525030.tif 000252
【０６２８】
【表９１】
2018525030.tif 000253
【０６２９】
【表９２】
2018525030.tif 000254
【０６３０】
【表９３】
2018525030.tif 000255
【０６３１】
【表９４】
2018525030.tif 000256
【０６３２】
【表９５】
2018525030.tif 000257
【０６３３】
【表９６】
2018525030.tif 000258
【０６３４】
【表９７】
2018525030.tif 000259
【０６３５】
【表９８】
2018525030.tif 000260
【０６３６】
【表９９】
2018525030.tif 000261
【０６３７】
【表１００】
2018525030.tif 000262
【０６３８】
【表１０１】
2018525030.tif 000263
【０６３９】
【表１０２】
2018525030.tif 000264
【０６４０】
【表１０３】
2018525030.tif 000265
【０６４１】
【表１０４】
2018525030.tif 000266
【０６４２】
【表１０５】
2018525030.tif 000267
【０６４３】
【表１０６】
2018525030.tif 000268
【０６４４】
【表１０７】
2018525030.tif 000269
【０６４５】
【表１０８】
2018525030.tif 000270
【０６４６】
【表１０９】
2018525030.tif 000271
【０６４７】
【表１１０】
2018525030.tif 000272
【０６４８】
【表１１１】
2018525030.tif 000273
【０６４９】
【表１１２】
2018525030.tif 000274
【０６５０】
実施例９：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２の用量依存的アンチセンス阻害
上記実施例に記載する試験から、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの著しいｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害を呈するギャップマーを選択し、ＨｅｐＧ２細胞において種々の用量で試験した。各アンチセンスオリゴヌクレオチドは、同様の培養条件を有する一連の実験で試験した。各実験の結果を以下の個別の表に示す。細胞を２０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、エレクトロポレーションを使用して、以下の表に明示するように、０．３１２５μＭ、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５０μＭ、５．００μＭまたは１０．００μＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６５１】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６５２】
【表１１３】
2018525030.tif 000275
【０６５３】
【表１１４】
2018525030.tif 000276
【０６５４】
【表１１５】
2018525030.tif 000277
【０６５５】
【表１１６】
2018525030.tif 000278
【０６５６】
【表１１７】
2018525030.tif 000279
【０６５７】
【表１１８】
2018525030.tif 000280
【０６５８】
【表１１９】
2018525030.tif 000281
【０６５９】
【表１２０】
2018525030.tif 000282
【０６６０】
【表１２１】
2018525030.tif 000283
【０６６１】
【表１２２】
2018525030.tif 000284
【０６６２】
【表１２３】
2018525030.tif 000285
【０６６３】
【表１２４】
2018525030.tif 000286
【０６６４】
【表１２５】
2018525030.tif 000287
【０６６５】
実施例１０：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２のアンチセンス阻害の最終確認
上記実施例に記載する試験から、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの著しいｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害を呈するギャップマーを選択し、ＨｅｐＧ２細胞において種々の用量で試験した。細胞を２０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、エレクトロポレーションを使用して、以下の表に明示するように、０．３１２５μＭ、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５０μＭ、５．００μＭまたは１０．００μＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６６６】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６６７】
【表１２６】
2018525030.tif 000288
【０６６８】
【表１２７】
2018525030.tif 000289
【０６６９】
【表１２８】
2018525030.tif 000290
【０６７０】
【表１２９】
2018525030.tif 000291
【０６７１】
【表１３０】
2018525030.tif 000292
【０６７２】
【表１３１】
2018525030.tif 000293
【０６７３】
【表１３２】
2018525030.tif 000294
【０６７４】
【表１３３】
2018525030.tif 000295
【０６７５】
【表１３４】
2018525030.tif 000296
【０６７６】
【表１３５】
2018525030.tif 000297
【０６７７】
【表１３６】
2018525030.tif 000298
【０６７８】
【表１３７】
2018525030.tif 000299
【０６７９】
【表１３８】
2018525030.tif 000300
【０６８０】
実施例１１：ＭＯＥギャップマーによるＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＤＧＡＴ２のアンチセンス阻害の最終確認
上記実施例に記載する試験から、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの著しいｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害を呈するギャップマーを選択し、ＨｅｐＧ２細胞において種々の用量で試験した。細胞を２０，０００細胞／ウェルの密度で平板培養し、エレクトロポレーションを使用して、以下の表に明示するように、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５０μＭ、５．００μＭまたは１０．００μＭ濃度のアンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞にトランスフェクトした。約１６時間の処置期間後、ＲＮＡを細胞から単離し、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲによって測定した。ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９８８＿ＭＧＢを使用してｍＲＮＡレベルを測定した。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）によって測定した全ＲＮＡ含量に従ってＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを調整した。無処置の対照細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害率（％）として結果を示す。『０』は、ｍＲＮＡレベルが阻害されなかったことを示す。
【０６８１】
各オリゴヌクレオチドの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）も示す。アンチセンスオリゴヌクレオチド処置細胞では、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルが用量依存的に著しく減少した。
【０６８２】
【表１３９】
2018525030.tif 000301
【０６８３】
【表１４０】
2018525030.tif 000302
【０６８４】
【表１４１】
2018525030.tif 000303
【０６８５】
【表１４２】
2018525030.tif 000304
【０６８６】
実施例１２：ヒトＤＧＡＴ２を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドのＣＤ１マウスにおける忍容性
ＣＤ１（登録商標）マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，ＭＡ）は、多目的マウスモデルであり、安全性及び有効性試験によく利用されている。上記試験から選択したＩＳＩＳアンチセンスオリゴヌクレオチドでマウスを処置し、種々の血漿中化学マーカーのレベル変化について評価した。処置マウスから得た肝臓組織及び腎臓組織を顕微鏡で観察したが、いずれの処置動物においても、毒性も組織損傷も認められなかった。
【０６８７】
処置
５匹のオスのＣＤ１マウス群のそれぞれに、１００ｍｇ／ｋｇのＩＳＩＳオリゴヌクレオチドを週２回（２００ｍｇ／ｋｇ／週）、６週間、皮下注射した。１０匹のオスのＣＤ１マウスの一群に、ＰＢＳを週２回、６週間、皮下注射した。最終投与から４８時間後にマウスを安楽死させ、更なる分析のために器官及び血漿を採取した。
【０６８８】
血漿中化学マーカー
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの肝機能及び腎機能に対する作用を評価するために、臨床化学自動分析装置（Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＡＵ４００ｅ（Ｍｅｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ））を使用して、アミノ基転移酵素、ビリルビン、アルブミン及びＢＵＮの血漿中レベルを２７日目に測定した。結果を以下の表に示す。肝機能または腎機能マーカーのうちのいずれかのレベル変化が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて生じたＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、更なる試験において除外した。
【０６８９】
【表１４３】
2018525030.tif 000305
【０６９０】
体重及び器官重量
マウスの体重を３５日目に測定した。これを以下の表に示す。肝臓、脾臓及び腎臓の重量を試験終了日（４１日目）に測定した。これについても以下の表に示す。体重または器官重量の何らかの変化が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて生じたＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、更なる試験から除外した。『ｎ／ａ』は、そのマウス群で特定のエンドポイントが測定されなかったことを示す。
【０６９１】
【表１４４】
2018525030.tif 000306
【０６９２】
実施例１３：ヒトＤＧＡＴ２を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドのＣＤ１マウスにおける忍容性
上記試験から選択したＩＳＩＳアンチセンスオリゴヌクレオチドでＣＤ１（登録商標）マウスを処置し、種々の血漿中化学マーカーのレベル変化について評価した。
【０６９３】
処置
５匹のオスのＣＤ１マウス群のそれぞれに、５０ｍｇ／ｋｇのＩＳＩＳ４８３８１７、ＩＳＩＳ４８３９１０、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１２７、ＩＳＩＳ４８４１３０、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４２１５、ＩＳＩＳ４８４２３１、ＩＳＩＳ４８４２７１、ＩＳＩＳ５０１８７１、ＩＳＩＳ５０２０９８、ＩＳＩＳ５０２１１９、ＩＳＩＳ５０２１５４、ＩＳＩＳ５０２１６３、ＩＳＩＳ５０２１６４、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３、ＩＳＩＳ５２５４７４、ＩＳＩＳ５２５５５２、ＩＳＩＳ５２５６１２、ＩＳＩＳ５２５６８８、ＩＳＩＳ５２５７０５、ＩＳＩＳ５２５７０８、ＩＳＩＳ５２５７１１及びＩＳＩＳ５２５７３３を週２回、６週間、皮下注射した。１０匹のオスのＣＤ１マウスの一群に、ＰＢＳを週２回、６週間、皮下注射した。最終投与から４８時間後にマウスを安楽死させ、更なる分析のために器官及び血漿を採取した。
【０６９４】
血漿中化学マーカー
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの肝機能及び腎機能に対する作用を評価するために、臨床化学自動分析装置（Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＡＵ４００ｅ（Ｍｅｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ））を使用して、アミノ基転移酵素、ビリルビン、アルブミン及びＢＵＮの血漿中レベルを２６日目に測定した。結果を以下の表に示す。肝機能または腎機能マーカーのうちのいずれかのレベル変化が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて生じたＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、更なる試験において除外した。
【０６９５】
【表１４５】
2018525030.tif 000307
【０６９６】
体重及び器官重量
マウスの体重を３６日目に測定した。これを以下の表に示す。肝臓、脾臓及び腎臓の重量を試験終了日に測定した。これについても以下の表に示す。体重または器官重量の何らかの変化が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて生じたＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、更なる試験から除外した。『ｎ／ａ』は、そのマウス群で特定のエンドポイントが測定されなかったことを示す。
【０６９７】
【表１４６】
2018525030.tif 000308
【０６９８】
実施例１４：ヒトＤＧＡＴ２を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドのスプラーグドーリーラットにおける忍容性
スプラーグドーリーラットは、安全性及び有効性評価に使用される多目的モデルである。上記試験のＩＳＩＳアンチセンスオリゴヌクレオチドでラットを処置し、種々の血漿中化学マーカーのレベル変化について評価した。
【０６９９】
処置
オスのスプラーグドーリーラットを１２時間の明暗サイクルで飼育し、Ｐｕｒｉｎａ通常ラット用飼料ダイエット５００１を不断給餌した。４匹のスプラーグドーリーラット群のそれぞれに、５０ｍｇ／ｋｇのＩＳＩＳ４８４１２９、ＩＳＩＳ４９５５７６、ＩＳＩＳ４９５６０９、ＩＳＩＳ４９５７５３、ＩＳＩＳ４９５７５６、ＩＳＩＳ５０１８４９、ＩＳＩＳ５０１８５０、ＩＳＩＳ５０１８６１、ＩＳＩＳ５０２３２２、ＩＳＩＳ５０７６９６及びＩＳＩＳ５０７７１０を週２回、８週間、皮下注射した。最終投与から４８時間後にラットを安楽死させ、更なる分析のために器官及び血漿を採取した。
【０７００】
肝機能
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの肝機能に対する作用を評価するために、臨床化学自動分析装置（Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＡＵ４００ｅ（Ｍｅｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ））を使用して、アミノ基転移酵素の血漿中レベルを５６日目に測定した。ＡＬＴ及びＡＳＴの血漿中レベルを測定した。この結果を以下の表に示し、ＩＵ／Ｌ単位で表す。ビリルビンの血漿中レベルも同じ臨床化学分析装置を使用して測定した。この結果についても以下の表に示す。肝機能マーカーのうちのいずれかのレベル変化が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて生じたＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、更なる試験において除外した。
【０７０１】
【表１４７】
2018525030.tif 000309
【０７０２】
腎機能
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの腎機能に対する作用を評価するために、臨床化学自動分析装置（Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＡＵ４００ｅ（Ｍｅｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ））を使用して、クレアチニン及び総タンパク質の尿中レベルを５６日目に測定した。結果を以下の表に示し、ｍｇ／ｄＬ単位で表す。
【０７０３】
【表１４８】
2018525030.tif 000310
【０７０４】
体重及び器官重量
ラットの体重を５０日目に測定した。これを以下の表に示す。肝臓、心臓、脾臓及び腎臓の重量を試験終了日に測定した。これについても以下の表に示す。体重または器官重量の何らかの変化が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて生じたＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、更なる試験から除外した。『ｎ／ａ』は、そのマウス群で特定のエンドポイントが測定されなかったことを示す。
【０７０５】
【表１４９】
2018525030.tif 000311
【０７０６】
実施例１５：ヒトＤＧＡＴ２を標的にするアンチセンスオリゴヌクレオチドのスプラーグドーリーラットにおける忍容性
上記試験のＩＳＩＳアンチセンスオリゴヌクレオチドでスプラーグドーリーラットを処置し、種々の血漿中化学マーカーのレベル変化について評価した。
【０７０７】
処置
オスのスプラーグドーリーラットを１２時間の明暗サイクルで飼育し、Ｐｕｒｉｎａ通常ラット用飼料ダイエット５００１を不断給餌した。４匹のスプラーグドーリーラット群それぞれに、５０ｍｇ／ｋｇのＩＳＩＳ４８３８１７、ＩＳＩＳ４８３９１０、ＩＳＩＳ４８４０８５、ＩＳＩＳ４８４１３７、ＩＳＩＳ４８４２１５、ＩＳＩＳ４８４２３１、ＩＳＩＳ５０１８７１、ＩＳＩＳ５０２０９８、ＩＳＩＳ５０２１６３、ＩＳＩＳ５０２１６４、ＩＳＩＳ５０２１９４、ＩＳＩＳ５２５４４３、ＩＳＩＳ５２５４７４、ＩＳＩＳ５２５６１２及びＩＳＩＳ５２５７０８を週２回、８週間、皮下注射した。最終投与から４８時間後にラットを安楽死させ、更なる分析のために器官及び血漿を採取した。
【０７０８】
肝機能
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの肝機能に対する作用を評価するために、臨床化学自動分析装置（Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＡＵ４００ｅ（Ｍｅｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ））を使用して、アミノ基転移酵素の血漿中レベルを５３日目に測定した。ＡＬＴ及びＡＳＴの血漿中レベルを測定した。この結果を以下の表に示し、ＩＵ／Ｌ単位で表す。ビリルビンの血漿中レベルも同じ臨床化学分析装置を使用して測定した。この結果についても以下の表に示す。肝機能マーカーのうちのいずれかのレベル変化が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて生じたＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、更なる試験において除外した。
【０７０９】
【表１５０】
2018525030.tif 000312
【０７１０】
腎機能
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの腎機能に対する作用を評価するために、臨床化学自動分析装置（Ｈｉｔａｃｈｉ  Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＡＵ４００ｅ（Ｍｅｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ））を使用して、クレアチニン及び総タンパク質の血漿中レベルを５３日目に測定した。結果を以下の表に示し、ｍｇ／ｄＬ単位で表す。クレアチニン及び総タンパク質の尿中レベルについても、同じ臨床化学自動分析装置を使用して、５３日目に測定した。結果を以下の表に示し、ｍｇ／ｄＬ単位で表す。
【０７１１】
【表１５１】
2018525030.tif 000313
【０７１２】
【表１５２】
2018525030.tif 000314
【０７１３】
体重及び器官重量
ラットの体重を４９日目に測定した。これを以下の表に示す。肝臓、心臓、脾臓及び腎臓の重量を試験終了日に測定した。これについても以下の表に示す。体重または器官重量の何らかの変化が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて生じたＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、更なる試験から除外した。『ｎ／ａ』は、そのマウス群で特定のエンドポイントが測定されなかったことを示す。
【０７１４】
【表１５３】
2018525030.tif 000315
【０７１５】
実施例１６：ヒトＤＧＡＴ２を標的にするＩＳＩＳアンチセンスオリゴヌクレオチドのカニクイザルにおける効果
上記試験から選択したＩＳＩＳアンチセンスオリゴヌクレオチドでカニクイザルを処置した。アンチセンスオリゴヌクレオチドの有効性及び忍容性を評価した。
【０７１６】
本試験に着手した時点で、カニクイザルのゲノム配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）データベースで入手できなかったため、カニクイザル遺伝子配列との交差反応性は確認できなかった。その代わりに、相同性について、カニクイザルで使用したＩＳＩＳアンチセンスオリゴヌクレオチドの配列をアカゲザル配列と比較した。アカゲザル配列に対して相同性を有するＩＳＩＳオリゴヌクレオチドは、カニクイザル配列とも十分に交差反応性であると予想される。試験したヒトアンチセンスオリゴヌクレオチドは、アカゲザルゲノム配列（ヌクレオチド１２３２０００〜１２６８０００を切り出したＲｅｆＳｅｑ番号ＮＷ＿００１１００３８７．１；本明細書において配列番号３として示される）と交差反応性である。ヒトオリゴヌクレオチドとアカゲザル配列との間の相補性が大きいほど、そのヒトオリゴヌクレオチドは、アカゲザル配列と交差反応性できる可能性が高くなる。配列番号３に対する各オリゴヌクレオチドの開始部位及び終止部位を以下の表に示す。「開始部位」は、ギャップマーが標的にするアカゲザル遺伝子配列中の最も５’側のヌクレオチドを示す。
【０７１７】
【表１５４】
2018525030.tif 000316
【０７１８】
処置
試験に先立って、サルを３０週間の隔離状態に置き、その期間中、全般的な健康状態について動物を毎日観察した。サルは２〜４歳で、体重は２〜４ｋｇであった。無作為に割り当てた５匹のオスのカニクイザルの８群それぞれに、適切なサイズのステンレス製投与針及びシリンジを使用して、サルの関節包内領域及び大腿部外側にＩＳＩＳオリゴヌクレオチドまたはＰＢＳを皮下注射した。サルには、最初の１週間は負荷投与量として週３回（１日目、３日目及び５日目）、その後２〜１３週間は週２回で、２０ｍｇ／ｋｇのＩＳＩＳオリゴヌクレオチドを投与した。カニクイザル６匹の対照群には、０．９％滅菌生理食塩水を、最初の１週間は週３回（１日目、３日目及び５日目）、その後２〜１３週間は週１回で皮下投与した。
【０７１９】
試験期間中、死亡の徴候、臨床観察及び体重、定性的摂餌量、検眼鏡検査及び心電図検査、臨床病理学及び解剖病理学についてサルを観察した。動物の計画的安楽死は、最終剖検に割り当てられた動物については９３日目に、回復剖検に割り当てられた動物については１８２日目に実施した。組織の全パネルを採取し、スライドに処理し、顕微鏡で組織病理学の検査を行った。実施例に記載のプロトコルは、動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）による承認を受けたものである。
【０７２０】
肝臓標的の減少
標的遺伝子ＲＮＡ解析
９３日目に、ＤＧＡＴ２のリアルタイムＰＣＲ分析のために、プライマープローブセットｍｋＤＧＡＴ２（本明細書において配列番号１３として示されるフォワード配列ＣＣＧＣＡＡＧＧＧＣＴＴＴＧＴＧＡＡ、本明細書において配列番号１４として示されるリバース配列ＴＴＣＴＣＴＣＣＡＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＴＧＧＧ、本明細書において配列番号１５として示されるプローブ配列ＣＣＴＧＣＧＣＣＡＴＧＧＡＧＣＣＧＡＣ）を使用して、肝臓組織からＲＮＡを抽出した。結果を、ハウスキーピング遺伝子シクロフィリンＡに対して正規化した、ＰＢＳ対照に対するＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの阻害率（％）として示す。ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）で正規化した場合にも同様の結果が得られた。以下の表に示すように、ＩＳＩＳアンチセンスオリゴヌクレオチドによる処置は、滅菌生理食塩水対照と比較して、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの著しい減少をもたらした。具体的には、ＩＳＩＳ４８４１３７及びＩＳＩＳ５０１８６１による処置が、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡ発現の著しい減少をもたらした。
【０７２１】
選択したオリゴヌクレオチドによる阻害レベルを、ヒトプライマープローブセットＲＴＳ２９７７＿ＭＧＢによっても測定した。以下の表に示すように、ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドによる処置は、ＤＧＡＴ２レベルを著しく減少させた。具体的には、ＩＳＩＳ４８４１３７及びＩＳＩＳ５０１８６１による処置が、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡ発現の著しい減少をもたらした。
【０７２２】
【表１５５】
2018525030.tif 000317
【０７２３】
【表１５６】
2018525030.tif 000318
【０７２４】
副次的な脂質遺伝子のＲＮＡ解析
副次的な脂質遺伝子ＤＧＡＴ１、ＡＣＣ１、ＡＣＣ２、ＦＡＳ及びＳＣＤ１  ２の遺伝子発現解析についても実施した。結果を以下の表に示し、ＰＢＳ対照と比較した各遺伝子の発現率（％）として表す。以下の表に示すように、ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドによる処置は、脂肪合成遺伝子レベルを著しく減少させた。具体的には、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置が、ｍＲＮＡ発現の著しい減少をもたらした。
【０７２５】
【表１５７】
2018525030.tif 000319
【０７２６】
忍容性試験
体重測定
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの動物の全体的な健康への影響を評価するために、体重を定期的に測定した。これを以下の表に示す。結果は、アンチセンスオリゴヌクレオチドによる処置の体重に対する影響が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予測される範囲内であったことを示している。具体的には、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置が、サルの体重に関して、良好な忍容性を示した。
【０７２７】
【表１５８】
2018525030.tif 000320
【０７２８】
肝機能
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの肝機能に対する影響を評価するために、全ての試験群から血液試料を採取した。血液試料は、投与から４８時間後の９３日目に大腿静脈穿刺により採取した。サルは、採血前に一晩絶食させた。いかなる抗凝固剤も含まないチューブ中に血液を採取し、血清分離のために、室温で最低３０分間維持した。次いで、このチューブを遠心分離にかけて血清を得た。Ｔｏｓｈｉｂａ  ２００ＦＲ  ＮＥＯ化学分析装置（株式会社東芝（日本））を使用して、種々の肝機能マーカーレベルを測定した。ＡＬＴ及びＡＳＴの血清中レベルを測定した。この結果を以下の表に示し、ＩＵ／Ｌ単位で表す。肝機能マーカーであるビリルビンも同様に測定した。これを以下の表に示し、ｍｇ／ｄＬ単位で表す。結果は、アンチセンスオリゴヌクレオチドが、肝機能に対して、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越える影響を与えなかったことを示している。具体的には、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置が、サルの肝機能に関して、良好な忍容性を示した。
【０７２９】
【表１５９】
2018525030.tif 000321
【０７３０】
腎機能
ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドの腎機能に対する影響を評価するために、全ての試験群から血液試料を採取した。血液試料は、投与から４８時間後の９３日目に大腿静脈穿刺により採取した。サルは、採血前に一晩絶食させた。いかなる抗凝固剤も含まないチューブ中に血液を採取し、血清分離のために、室温で最低３０分間維持した。次いで、このチューブを遠心分離にかけて血清を得た。Ｔｏｓｈｉｂａ  ２００ＦＲ  ＮＥＯ化学分析装置（株式会社東芝（日本））を使用して、ＢＵＮ及びクレアチニンのレベルを測定した。結果を以下の表に示し、ｍｇ／ｄＬ単位で表す。
【０７３１】
血漿化学データは、ＩＳＩＳオリゴヌクレオチドのほとんどで、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越える腎機能に対するいかなる影響もなかったことを示している。具体的には、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置が、サルの腎機能に関して、良好な忍容性を示した。
【０７３２】
【表１６０】
2018525030.tif 000322
【０７３３】
実施例１７：ヒトＤＧＡＴ２を標的にするＩＳＩＳ４８４１３７のカニクイザルにおける作用
カニクイザルをＩＳＩＳ４８４１３７で処置し、１３週間の投与期間と、それに続く１３週間の回復期間にわたって、このアンチセンスオリゴヌクレオチドの安全性を評価した。実施例に記載のプロトコルは、試験施設の動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）による承認を受けたものである。
【０７３４】
処置
サルは２〜４歳で、体重は２．３〜３．７ｋｇであった。無作為に割り当てた６〜１０匹のカニクイザルの５群それぞれに、適切なサイズのステンレス製投与針及びシリンジを使用して、サルの背部上に描いた４箇所の部位のうちの１つにＩＳＩＳオリゴヌクレオチドまたは０．９％滅菌生理食塩水を皮下注射した。用量レベル４ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇまたは４０ｍｇ／ｋｇのＩＳＩＳ４８４１３７を、１日目、３日目、５日目及び７日目と、その後は週１回、合計１３週間、サルに投与した。カニクイザル１０匹の対照群には、同じレジメンを使用して、０．９％滅菌生理食塩水を皮下注射した。動物１４匹（オスメス各７匹）の第６群において、用量レベル８ｍｇ／ｋｇでトキシコキネティクスを評価した。対照ならびにＩＳＩＳ４８４１３７の用量レベル１２ｍｇ／ｋｇ及び４０ｍｇ／ｋｇ（オスメス各２匹）において、回復を評価した。
【０７３５】
試験期間中、死亡の徴候、臨床観察及び体重、定性的摂餌量、検眼鏡検査及び心電図検査、臨床病理学及び解剖病理学についてサルを観察した。動物の計画的安楽死は、最終剖検に割り当てられた動物については９３日目に、回復剖検に割り当てられた動物については１８２日目に実施した。組織の全パネルを採取し、スライドに処理し、顕微鏡で組織病理学の検査を行った。
【０７３６】
体重及び器官重量の測定
ＩＳＩＳ４８４１３７の動物の全体的な健康への影響を評価するために、体重を定期的に測定した。これを以下の表に示す。安楽死後、器官重量を測定した。『ｎ．ｄ．』は、その時点についてのデータがないことを示す。結果は、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置の体重及び器官重量に対する影響が、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲内であったことを示している。具体的には、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置が、サルの体重及び器官重量に関して、良好な忍容性を示した。
【０７３７】
【表１６１】
2018525030.tif 000323
【０７３８】
【表１６２】
2018525030.tif 000324
【０７３９】
血漿ホメオスタシス
ＩＳＩＳ４８４１３７が補体活性化をもたらす可能性を評価するために、治療開始前の−７日目に１回、次いで、１日目の初回投与後４、８及び２４時間、最後に９１日目の最終投与前及び投与後４時間に、ＥＬＩＳＡの使用によって補体分解産物Ｂｂを決定するための血漿試料を得た。臨床化学自動分析装置を使用した補体Ｃ５の測定のために、−７日目、１日目（投与後２４時間）、９１日目（投与前及び投与後２４時間）、また回復した動物については１２１日目及び１８２日目に、血清試料も取得した。更に、凝固分析用の血液を１日目（投与後４時間）及び９１日目（投与前、投与後１、４、８及び２４時間）に採取し、凝固自動分析装置を使用して評価した。
【０７４０】
用量レベル４０ｍｇ／ｋｇでは、１日目及び９１日目の投与後４時間に、補体Ｂｂの一時的な急増（ベースラインに対して最大７倍）として、第２経路活性化の兆候が観察された。その後、補体Ｂｂは、１日目の２４時間でベースラインに戻るか、９１日目にほぼベースラインレベルに戻った。本試験中に観察された補体Ｃ５に有意な変化はなかった。対照に対して、ＡＰＴＴの緩やかな一時的延長（最大２９％）が投与後４〜８時間で観察されたが、投与後２４時間または４８時間には減少した。ＩＳＩＳ４８４１３７による処置後に観察された補体Ｂｂ及びＡＰＴＴの一時的な急増は、オリゴヌクレオチド処置サルで一般に認められる特有のものであった。
【０７４１】
肝機能
ＩＳＩＳ４８４１３７の肝機能に対する影響を評価するために、４４、９３、１２１及び１８２日目に、肝臓アミノ基転移酵素及び肝機能の決定のための血液試料を全ての試験群から採取した。ＡＬＴ及びＡＳＴの血清中レベルを測定した。この結果を以下の表に示し、ＩＵ／Ｌ単位で表す。肝機能マーカーであるビリルビンも同様に測定した。結果を以下の表に示し、ｍｇ／ｄＬ単位で表す。ＩＳＩＳ４８４１３７は、肝機能に対して、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越える有害作用がなかった。『ｎ．ｄ．』は、その時点についてのデータがないことを示す。結果は、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置が、サルの肝機能に関して、良好な忍容性を示したことを表している。
【０７４２】
【表１６３】
2018525030.tif 000325
【０７４３】
【表１６４】
2018525030.tif 000326
【０７４４】
【表１６５】
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【０７４５】
腎機能
ＩＳＩＳ４８４１３７の腎機能に対する影響を評価するために、４４、９３、１２１及び１８２日目に、全ての試験群から血液試料を採取した。結果を以下の表に示し、ｍｇ／ｄＬ単位で表す。
【０７４６】
血清化学データは、ＩＳＩＳ４８４１３７が、腎機能に対して、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えるいかなる影響も与えなかったことを示している。サルの尿試料でも、同様の結果が認められた。したがって、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置は、サルの腎機能に関して、良好な忍容性を示した。
【０７４７】
【表１６６】
2018525030.tif 000328
【０７４８】
【表１６７】
2018525030.tif 000329
【０７４９】
【表１６８】
2018525030.tif 000330
【０７５０】
血漿トキシコキネティクス
サルへの皮下注射後、ＩＳＩＳ４８４１３７は、体循環に速やかに吸収され、Ｔｍａｘ（最高血中濃度Ｃｍａｘに達するまでの時間）の中央値は、１〜４時間の範囲である。ピーク曝露（Ｃｍａｘ）及び総曝露（ＡＵＣ０−４８ｈ）は、１日目、７日目及び９１日目において、用量依存的であった。ＡＵＣ（曲線下面積）値は、１日目（単回投与後）と９１日目（１６投与後）との間で類似の値が観察された。これらの結果は、ＩＳＩＳ４８４１３７が反復投与後に血漿に蓄積しないことを示している。単回投与または反復投与後の全ての用量レベルでの皮下投与後のクリアランス（ＣＬ／Ｆ０−４８ｈｒ）平均値は、３１．３〜７５．８ｍＬ／ｈｒ／ｋｇの範囲であり、用量の増加に伴って減少するようであった。分布後の血中消失半減期（ｔ１／２λｚ）は、１３週間の処置後９．４２日〜２０．２日の範囲であった。ＩＳＩＳ４８４１３７の血漿トキシコキネティクスパラメータの検討では性差は認められなかった。以下の表に結果を示す。『ｎ．ｄ．』は、『決定されず』を意味する。
【０７５１】
【表１６９】
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【０７５２】
組織トキシコキネティクス
ＩＳＩＳ４８４１３７の用量の１０倍を越える、腎皮質及び肝臓中濃度の用量依存的増加があった。処置後及び回復後のＩＳＩＳ４８４１３７の組織平均濃度に基づくと、推定組織半減期は、腎臓と肝臓のそれぞれで、１６．４〜２１．３日及び１７．８〜２２．８日であった。これは、８ｍｇ／ｋｇのＩＳＩＳ４８４１３７で決定された組織半減期と同様である。これらの結果は、血中終末消失半減期の推定値とも一致する。以下の表に結果を示す。『ｎ．ｄ．』は、『決定されず』を意味する。
【０７５３】
観察された組織半減期（約２〜３週間）は、回数の少ない臨床投薬レジメンを支持している。
【０７５４】
【表１７０】
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【０７５５】
炎症促進作用
炎症マーカーレベルはいずれも、アンチセンスオリゴヌクレオチドについて予想される範囲を越えて変化しなかった。したがって、ＩＳＩＳ４８４１３７による処置は、いかなる有害な炎症も引き起こさず、サルにおいて良好な忍容性を示した。
【０７５６】
要するに、ＩＳＩＳ４８４１３７による１３週間の処置は、４０ｍｇ／ｋｇ／週までの用量で、臨床的に良好な忍容性を示した。試験中に死亡はなく、臨床所見、体重、摂餌量／食欲、検眼鏡検査及び心電図検査、血液学、尿検査または補体Ｃ３レベルにおける処置関連作用も試験中に認められなかった。全体として、本試験の結果は、ＤＧＡＴ２の阻害について試験した化合物のなかでも、ＩＳＩＳ４８４１３７が最も効力で忍容性の良好な化合物であり、ＮＡＦＬＤ及びＮＡＳＨなどの代謝疾患の治療に対する重要な候補であることを示している。
【０７５７】
実施例１８：二重盲検プラセボ対照用量漸増第Ｉ相試験
健康な過体重の志願者に単回投与及び反復投与で皮下投与したＩＳＩＳ４８４１３７の安全性、忍容性、薬物動態及び薬力学を評価するための二重盲検プラセボ対照用量漸増第Ｉ相試験を試験施設で実施する。
【０７５８】
治療プロトコル
本試験には約４８名の被験者（単回投与コホートに被験者１６名及び反復投与コホートに被験者３２名）の登録が予定される。被験者は、書面による同意が得られた、全ての試験要件を順守することができる１８歳以上６５歳以下の健康な男性または女性である。志願者のＢＭＩは、２９．０ｋｇ／ｍ２以上３８．０ｋｇ／ｍ２以下である。病歴に臨床的に意義のある異常のある任意の志願者は、本試験から除外する。ＩＳＩＳ４８４１３７の溶液またはプラセボ（０．９％滅菌生理食塩水）は、非盲検の薬剤師または資格のある代行者が無菌技術を使用して使用直前に調製する。薬物の内容について盲検化した試験スタッフが被験者に薬物を投与する。
【０７５９】
４つの単回投与コホート（コホートＡ〜Ｄ）は、１コホートあたり被験者４名でＩＳＩＳ４８４１３７：プラセボを３：１で無作為化する。各被験者の参加期間は約８週間であり、この期間には、４週間のスクリーニング期間、単回投与及び４週間の治療後評価期間が含まれる。被験者は、皮下投与によりＩＳＩＳ４８４１３７の単回投与を受ける。各コホートに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドの用量を以下の表に示す。
【０７６０】
【表１７１】
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【０７６１】
４つの反復投与コホート（コホートＡＡ〜ＤＤ）は、１コホートあたり被験者８名でＩＳＩＳ４８４１３７：プラセボを３：１で無作為化する。各被験者の参加期間は約２３週間であり、この期間には、４週間のスクリーニング期間、６週間の治療期間及び１３週間の治療後評価期間が含まれる。被験者は、最初の１週間は、皮下投与によるＩＳＩＳ４８４１３７の３回の投与（１、３及び５日目）を受け、その後、次の５週間は、週１回の１回の皮下投与（８、１５、２２、２９及び３６日目）を受け、合計８回の投与とする。被験者は、３７、４３、５０、６４、７８、９２、１０６及び１２７日目に、試験施設での追跡調査の来院を行う。
【０７６２】
【表１７２】
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【０７６３】
安全性、薬物動態及び薬力学分析のために、試験中、血液試料及び尿試料を定期的に採取する。有害事象の発生率、重症度及び用量関係、バイタルサイン、身体検査、ＥＣＧ所見ならびに臨床検査パラメータを決定することによって、ＩＳＩＳ４８４１３７の安全性及び忍容性を評価する。ＩＳＩＳ４８４１３７を投与した被験者の安全性結果を、プラセボを投与した被験者の安全性結果と比較する。
【国際調査報告】
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