(57)【要約】【課題】  本発明は、望ましくない効果、より具体的には、Ｔ細胞媒介性療法と関連して生じる望ましくない効果の処置または防止における使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む製剤に関する。【解決手段】望ましくない効果は、任意選択で、活性化されたＴ細胞活性によって引き起こされる、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）または胃腸（ＧＩ）炎症と関連する、例えば、潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患と関連する症状であってもよい。望ましくない効果の改善に加えて、本発明は、Ｔ細胞媒介性療法の治療効果を維持することも目的とする。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる１つまたは複数の望ましくない効果に対しての処置に使用されるＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物であって、前記望ましくない効果が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および胃腸炎症と関連する症状から選択され、前記組成物が胃腸管に投与され、それによって、前記１つまたは複数の望ましくない効果が療法の有効性を維持しながら処置される、組成物。
【請求項２】
療法がＴ細胞エンゲージング療法であり、Ｔ細胞の表面にある受容体を介して標的疾患抗原に直接的または間接的に結合した場合に、Ｔ細胞が活性化される、請求項１に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項３】
療法が免疫チェックポイント遮断療法である、請求項１に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項４】
前記療法が、Ｔ細胞阻害経路を標的化する１つまたは複数の抗体を用いる免疫チェックポイント遮断療法である、請求項３に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項５】
前記チェックポイント遮断療法が、抗ＣＴＬＡ−４抗体および／またはＰＤ１受容体に結合するリガンドを標的化する抗体を用いる、請求項４に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項６】
前記Ｔ細胞エンゲージング療法が、二特異的Ｔ細胞エンゲージャーまたはキメラ抗原受容体療法のいずれかである、請求項２に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項７】
二特異的Ｔ細胞エンゲージャーが二特異的抗体である、請求項６に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項８】
キメラ抗原受容体療法がＣＡＲ−Ｔ細胞療法である、請求項６に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項９】
ＣＡＲ療法が同種異系である、請求項８に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１０】
ＣＡＲ療法が自己系である、請求項８に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１１】
前記療法がＮＦＡＴ活性化自己Ｔ細胞によって媒介される、請求項１または２に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１２】
望ましくない効果がＣＲＳである、請求項１から１１のいずれか一項に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１３】
療法が自己ＣＡＲ−Ｔ療法であり、前記組成物の胃腸管への投与が、前記療法の有効性を維持しながら、ＣＲＳを軽減する、または防止する、請求項１に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１４】
療法が同種異系ＣＡＲ−Ｔ療法であり、前記組成物の胃腸管への投与が、前記療法の有効性を維持しながら、ＣＲＳを軽減する、または防止する、請求項１に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１５】
ＣＡＲ−Ｔ療法ががん、好ましくは、血液悪性腫瘍の処置のためのものであり；
任意選択で、ＣＡＲ−Ｔの標的抗原が、ＣＡＩＸ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４、（特にバリアント７／８）、ＣＤ１２３、ＣＤ１３８、ＣＥＡ、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ｅｒｂ−Ｂ２、ｅｒｂ−Ｂ３、ｅｒｂ−Ｂ４、ＷＴ１、ｃ−Ｍｅｔ、ＦＡＢ、ＧＤ２、ＧＤ３、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＲＴ−１、ｇｐ１００、メソテリン、ＭＵＣ１、ＮＹ−ＥＳＯ１、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、Ｌ１ＣＡＭ、ＭＵＣ１６（ｅｃｔｏ）、ＲＯＲ１、ＶＥＧＦ−Ｒ２、ＫＤＲ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−３０、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ｋ−軽鎖、ＴＮＦＲＳＦ１７（ＢＣＭＡ；ＣＤ２６９、ＳＬＡＭファミリーメンバー７（ＳＬＡＭＦ７もしくはＣＳ１））およびエプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）抗原から選択され；または
特にＣＡＲ−Ｔの標的抗原がＣＤ１９、ＣＤ２０、またはＣＤ１２３から選択される、
請求項１２または１３に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１６】
療法が患者の自己Ｔ細胞を枯渇させるためのプレコンディショニングレジメンを含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１７】
療法が、二特異的Ｔ細胞エンゲージャー、キメラ抗原受容体療法およびチェックポイント遮断療法から選択される２つ以上の療法を含み、例えば、療法が、チェックポイント遮断療法と、二特異的Ｔ細胞エンゲージャーおよびキメラ抗原受容体療法から選択される１つまたは複数の療法とを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】
１つまたは複数の望ましくない効果が、胃腸炎症と関連する症状である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項１９】
胃腸炎症の症状が炎症性腸疾患、任意選択で、過敏性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、胃腸炎、十二指腸炎、空腸炎、回腸炎、消化性潰瘍、回腸嚢炎、カーリング潰瘍、虫垂炎、大腸炎、偽膜性大腸炎、憩室症、憩室炎、コラーゲン蓄積大腸炎、任意選択でＧＩＴから発する全身性炎症、結腸直腸癌および腺癌から選択される状態と関連する、請求項１８に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２０】
炎症性腸疾患の前記症状が潰瘍性大腸炎またはクローン病と関連する、請求項１８に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２１】
前記阻害剤がカルシウム／カルシニューリン経路の阻害剤である、請求項１から２０のいずれか一項に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２２】
前記阻害剤がＮＦＡＴのカルシニューリン脱リン酸化を阻害する、請求項２１に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２３】
前記阻害剤が、シクロスポリン、シクロスポリン誘導体、タクロリムス誘導体、ピラゾール、ピラゾール誘導体、ホスファターゼ阻害剤、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、毒素、パラセタモール代謝物、真菌フェノール性化合物、冠拡張薬、フェノール性アデイド（ａｄｅｉｄｅ）、フラバノール、チアゾール誘導体、ピラゾロピリミジン誘導体、ベンゾチオフェン誘導体、ロカグラミド誘導体、ジアリールトリアゾール、バルビツレート、抗精神病薬（ペノチアジン）、セロトニンアンタゴニスト、サリチル酸誘導体、プロポリスもしくはポメグラネートに由来するフェノール性化合物、イミダゾール誘導体、ピリジニウム誘導体、フラノクマリン、アルカロイド、トリテルペノイド、テルペノイド、オリゴヌクレオチド、またはペプチドから選択される、請求項１から２２のいずれか一項に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２４】
阻害剤が、シクロスポリン、タクロリムス、Ａ２８５２２２、エンドタール、４−（フルオロメチル）フェニルホスフェートＦＭＰＰ、ノルカンタリジン、チルホスチン、オカダ酸、ＲＣＰ１０６３、ｃｙａ／ｃｙｐａ（シクロフィリンＡ）、ｉｓａ２４７（ボクロスポリン）／ｃｙｐａ、［ｄａｔ−ｓａｒ］３−ｃｙａ、ｆｋ５０６／ｆｋｂｐ１２、アスコミキシン／ｆｋｂｐ１２、ピネクロリムス／ＦＫＢＰ１２、１，５−ジベンゾイルオキシメチル−ノルカンタリジン、ａｍ４０４、ｂｔｐ１、ｂｔｐ２、ジベフリン、ジピリダモール、ゴシポール、ケンフェロール、ｌｉｅ１２０、ＮＣＩ３、ＰＤ１４４７９５、Ｒｏｃ−１、Ｒｏｃ−２、Ｒｏｃ−３、ＳＴ１９５９（ＤＬＩ１１１−ｉｔ）、チオペンタール、ペントバルビタール、チアミラール、セコバルビタール、トリフルオペラジン、トロピセトロン、ＵＲ−１５０５、ＷＩＮ５３０７１、カフェイン酸フェニルエチルエステル、ＫＲＭ−ＩＩＩ、ＹＭ−５３７９２、プニカラギン、インペラトリン、キノロンアルカロイド化合物１および３、インプレス酸（ｉｍｐｒｅｓｓｉｃ  ａｃｉｄ）、オレアナントリテルペノイド化合物３、ゴミシンＮ、ＣａＮ４５７−４８２−ＡＩＤ、ＣａＮ４２４−５２１−ＡＩＤ、ｍＦＡＴｃ２１０６−１２１−ＳＰＲＥＩＴ、ＶＩＶＩＴペプチド、ＺＩＺＩＴ  ｃｉｓ−ｐｒｏ、ＩＮＣＡ１、ＩＮＣＡ６、ＩＮＣＡ２、ＡＫＡＰ７９３３０−３５７、ＲＣＡＮ１、ＲＣＡＮ１−４１４１−１９７−エクソン７、ＲＣＡＮ１−４１４３−１６３−ＣＩＣペプチド、ＲＣＡＮ１−４９５−１１８−ＳＰリピートペプチド、ＬｘＶＰｃ  １ペプチド、ＶａｃＡ、Ａ２３８Ｌ、およびＡ２３８Ｌ２００−２１３から選択される、請求項１から２２のいずれか一項に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２５】
組成物が腸溶コーティングを含む固体組成物である、請求項１から２４のいずれか一項に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２６】
ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相をさらに含む、請求項１から２５のいずれか一項に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２７】
油相がヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されている、請求項２０に記載の使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物。
【請求項２８】
油相がＮＦＡＴ阻害剤の溶液を含む、請求項２６または２７に記載の組成物。
【請求項２９】
油相が、液体脂質および任意選択でそれと混和性の溶媒であり、またはこれらを含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３０】
液体脂質が、グリセリド組成物であり、またはそれを含み、任意選択で液体脂質が、中鎖脂肪酸トリグリセリド、またはこれらの組合せであり、またはそれを含み、あるいは液体脂質が、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド組成物であり、またはそれを含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
油相が、例えば、オメガ−３油、例えば、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、アルファ−リノール酸、および共役リノール酸から選択されるポリ不飽和脂肪酸であり、またはそれを含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
油相が、オリーブ油、ゴマ油、ヤシ油、パーム核油、およびニーム油から選択される油であり、またはそれを含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３３】
油相が、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、カプリル酸／カプリン酸／リノール酸トリグリセリド、カプリル酸／カプリン酸／コハク酸トリグリセリド、およびプロピレングリコールジカプリレート／ジカプレートから選択される油であり、またはそれを含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３４】
油相が、０〜１０、任意選択で０〜５、０〜３、または０〜２のＨＬＢを有する油であり、またはそれを含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
油相が、中鎖トリグリセリド、および２−（エトキシエトキシ）エタノールを含む油であり、またはそれを含む、請求項２６から２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３６】
界面活性剤が少なくとも２００ｍｇ／ｇのシクロスポリン溶解度を有する、請求項２６から３５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３７】
組成物が、溶媒をさらに含み、溶媒が、油相および水と混和性であり、任意選択で溶媒が、２−（２−エトキシエトキシ）エタノールおよびポリ（エチレングリコール）から選択され、特に溶媒が、２−（２−エトキシエトキシ）エタノールである、請求項１から３６のいずれかに記載の組成物。
【請求項３８】
油相が溶媒を含む、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
溶媒が、約２００〜約４００の平均分子量を有するＰＥＧ、例えば、ＰＥＧ２００またはＰＥＧ４００から選択されるポリ（エチレングリコール）であり、またはそれを含む、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
油相が、組成物の乾燥重量の１０〜８５％、例えば、２０〜３０％を占める、請求項２６から３９のいずれかに記載の組成物。
【請求項４１】
界面活性剤が、最大７、１〜８、１〜７、１〜５、２〜５、１〜４、１〜３、１〜２、２〜４、３〜４、５〜８、６〜８および６〜７から選択されるＨＬＢ値を有する、請求項２６から４０に記載の組成物、またはその使用。
【請求項４２】
界面活性剤が非イオン性である、請求項２６から４１のいずれかに記載の組成物。
【請求項４３】
界面活性剤が長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せを含むか、またはそれである、請求項２６から４２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４４】
界面活性剤が、
グリセリルモノカプレート、グリセリルジカプレート、グリセリルモノカプリレート、グリセリルジカプリレート、グリセリルカプレート、グリセリルモノカプリレート／カプレート、グリセリルカプリレート／カプレート、グリセリルジカプリレート／カプレート、グリセリルモノオレエート／ジオレエート、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルジステアレート、グリセリルモノパルミトステアレート、グリセリルジパルミトステアレート、グリセリルモノベヘネート、グリセリルジベヘネート、グリセリルモノリノレエート、グリセロールモノリノレエート、グリセリルジリノレエート、ポリグリセリルジオレエート、プロピレングリコールモノヘプタノエート、ポリグリセロールジオレエート、およびその組合せ
から選択される界面活性剤であるか、またはそれを含む、請求項２６から４２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４５】
界面活性剤が、グリセリルモノカプリレート／カプレート、グリセリルジカプリレート／カプレート、グリセリルモノオレエート、グリセロールモノリノレエート、グリセリルジオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルジステアレート、グリセリルモノパルミトステアレート、グリセリルジパルミトステアレート、グリセリルモノベヘネート、グリセリルジベヘネート、グリセリルモノリノレエート、グリセリルジリノレエート、ポリグリセリルジオレエートおよびその組合せから選択される、請求項２６から４２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４６】
界面活性剤が、グリセリルカプリレート／カプレート（Ｃａｐｍｕｌ  ＭＣＭ）、グリセリルモノオレエート／ジオレエート（Ｃａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０）、グリセロールモノリノレエート（Ｍａｉｓｉｎｅ  ３５−１）およびその組合せから選択される界面活性剤であるか、またはそれを含む、請求項２６から４２のいずれかに記載の組成物、またはその使用。
【請求項４７】
界面活性剤が、グリセリルカプリレート、グリセリルカプレート、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエート、グリセロールモノリノレエートまたはその組合せであるか、またはそれを含む、請求項２６から４２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４８】
組成物が第２の界面活性剤をさらに含み、任意選択で、第２の界面活性剤が、アルキル硫酸塩、カルボン酸塩もしくはリン脂質から任意選択で選択される陰イオン性界面活性剤、またはソルビタン系界面活性剤、ＰＥＧ−脂肪酸、もしくはグリセリル脂肪酸、またはポロキサマーから任意選択で選択される非イオン性界面活性剤、またはその組合せである、請求項２６から４７のいずれかに記載の組成物。
【請求項４９】
少なくとも１０の、例えば、２０より高いＨＬＢ値を有し、任意選択で、陰イオン性界面活性剤である、高ＨＬＢ界面活性剤をさらに含む、請求項２６から４７のいずれかに記載の組成物。
【請求項５０】
高ＨＬＢ界面活性剤が、脂肪酸塩および胆汁塩、特に、アルキル硫酸塩、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムから選択される、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】
高ＨＬＢ界面活性剤が、少なくとも連続相中に存在する、請求項４９または５０に記載の組成物。
【請求項５２】
界面活性剤、可溶化剤、浸透促進剤、崩壊剤、結晶化阻害剤、ｐＨ調節剤、安定剤、またはその組合せから選択される賦形剤をさらに含む、請求項２６から５１のいずれかに記載の組成物。
【請求項５３】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、親水コロイド、非親水コロイドガムまたはキトサンであるか、またはそれを含む、請求項２６から５２のいずれかに記載の組成物。
【請求項５４】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、可逆性親水コロイド、任意選択で、熱可逆性ヒドロゲル形成性ポリマーであるか、またはそれを含む、請求項２６から５２のいずれかに記載の組成物。
【請求項５５】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、非可逆性親水コロイドであり、またはそれを含む、請求項２６から５２のいずれかに記載の組成物。
【請求項５６】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、ゼラチン、寒天、ポリエチレングリコール、デンプン、カゼイン、キトサン、ダイズタンパク質、ベニバナタンパク質、アルギネート、ゲランガム、カラギーナン、キサンタンガム、フタル酸化ゼラチン、コハク酸化ゼラチン、セルロースフタレート−アセテート、含油樹脂、ポリビニルアセテート、アクリルもしくはメタクリルエステルのポリメリセート、およびポリビニルアセテート−フタレート、ならびに上記のいずれかの任意の誘導体、または１種もしくは複数のこのようなヒドロゲル形成性ポリマーの混合物であり、またはそれを含む、請求項２６から５２のいずれかに記載の組成物。
【請求項５７】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、カラギーナン、ゼラチン、寒天、およびペクチン、もしくはこれらの組合せから選択され、任意選択でゼラチンおよび寒天、もしくはこれらの組合せから選択される親水コロイドであり、またはそれを含み、より任意選択でヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスのポリマーが、ゼラチンであり、またはそれを含む、請求項２６から５２のいずれかに記載の組成物。
【請求項５８】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、可塑剤、任意選択でグリセリン、ポリオール、例えば、ソルビトール、ポリエチレングリコール、およびクエン酸トリエチル、またはこれらの混合物、特にソルビトールから選択される可塑剤をさらに含む、請求項２６から５７のいずれかに記載の組成物。
【請求項５９】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、アルギン酸の架橋された塩から任意選択で選択される非親水コロイドガムであり、またはそれを含む、請求項２６から５２のいずれかに記載の組成物。
【請求項６０】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、キトサンであり、またはそれを含む、請求項２６から５２のいずれかに記載の組成物。
【請求項６１】
組成物が、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含む水相プレミックスと、ＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンが溶解している油相、および界面活性剤を含む油相プレミックスとを混合して、任意選択で、エマルジョンの形態にある混合物を形成させ、混合物を固化させることによって形成される組成物の特性を有し、任意選択で、混合物を固化させる前に単開口ノズルを通過させる、請求項１から６０のいずれかに記載の組成物。
【請求項６２】
水相プレミックス中に存在する少なくとも１０のＨＬＢ値を有する界面活性剤をさらに含む、請求項６１に記載の組成物。
【請求項６３】
少なくとも１つのコーティングをさらに含み、任意選択で、少なくとも１つのコーティングが外側コーティング（第２のコーティング）である、請求項１から６２のいずれかに記載の組成物。
【請求項６４】
少なくとも１つのコーティングが少なくとも結腸中でＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンを放出するように適合される、請求項６３に記載の組成物。
【請求項６５】
回腸および結腸中でＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンを放出するように適合された、または結腸中で実質的に全てのＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンを放出するように適合された、請求項５４に記載の組成物。
【請求項６６】
少なくとも１つのコーティングがｐＨ非依存性コーティングを含む、請求項６３から６５のいずれかに記載の組成物。
【請求項６７】
ｐＨ非依存性コーティングがエチルセルロースを含む、請求項６６に記載の組成物。
【請求項６８】
ｐＨ非依存性コーティングが結腸細菌の酵素による分解を受けやすいポリマーを含む、請求項６６または６７に記載の組成物。
【請求項６９】
少なくとも１つのコーティングがｐＨ依存性コーティングを含む、請求項６６から６８のいずれかに記載の組成物。
【請求項７０】
少なくとも１つのコーティングが２％〜４０％のコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在し、任意選択で、第２のコーティングに起因する重量増加が４％〜３０％、４％〜７％、７％〜４０％、７％〜３０％、８％〜２５％、８％〜２０％、２％〜２５％、２％〜２０％、４％〜２５％、４％〜２０％、４％〜１５％、４％〜１３％、７％〜１５％、７％〜１３％、８％〜１２％、９％〜１２％および２０％〜２５％の範囲から選択される、請求項６３から６９のいずれかに記載の組成物。
【請求項７１】
２つのコーティング、第１のコーティングと第２のコーティングとを含む、請求項１から７０のいずれかに記載の組成物。
【請求項７２】
水溶性セルロースエーテルを含むか、またはそれである第１のコーティングと、請求項５７から６４のいずれかで特定された第２のコーティングとを含む、請求項７１に記載の組成物。
【請求項７３】
水溶性セルロースエーテルが、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースのいずれか１つ、またはその組合せから選択される、請求項７２に記載の組成物。
【請求項７４】
水溶性セルロースエーテルがヒドロキシプロピルメチルセルロースである、請求項７２または７３に記載の組成物。
【請求項７５】
第１のコーティングが０．５％〜２０％のコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在する、請求項７２から７４のいずれかに記載の組成物。
【請求項７６】
第１のコーティングに起因する重量増加が、０．５％〜１５％、１％〜１５％、１％〜１２％、１％〜１０％、１％〜８％、１％〜６％、１％〜４％、２％〜１０％、２％〜８％、２％〜６％、２％〜４％、４％〜８％、４％〜７％、５％〜７％、７％〜２０％、７％〜１６％、９％〜２０％、９％〜１６％、１０％〜１５％、および１２％〜１６％から選択される範囲にある、請求項７５に記載の組成物。
【請求項７７】
第２のコーティングが第１のコーティングの上にある、請求項７２から７６のいずれかに記載の組成物。
【請求項７８】
組成物の外側表面上にさらなるコーティングをさらに含み、コーティングが物理的保護コーティングである、請求項７２から７７のいずれかに記載の組成物。
【請求項７９】
０．５ｍｍ〜５ｍｍのサイズを任意選択で有するミニビーズの形態にある、請求項１から７８のいずれかに記載の組成物。
【請求項８０】
請求項７４に記載の複数のミニビーズを含む単位剤形を含む、複数ミニビーズ製剤。
【請求項８１】
組成物が、
３００〜７００ｍｇ／ｇの量のゼラチンを含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含む連続相、
最大で２００ｍｇ／ｇの量のシクロスポリンを含む分散相、および
２０〜２００ｍｇ／ｇの量の中鎖トリグリセリド
を含むコロイド組成物であって、
１００〜２５０ｍｇ／ｇの量の溶媒、
８０〜２００ｍｇ／ｇの量の最大８のＨＬＢを有する界面活性剤、および
最大５０ｍｇ／ｇの量の陰イオン性界面活性剤
をさらに含むコロイダル組成物を含む、請求項１から２４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項８２】
ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスがＤ−ソルビトールをさらに含み、
中鎖トリグリセリドがカプリル酸／カプリン酸トリグリセリドであり、
溶媒が２−（２−エトキシエトキシ）エタノールであり
界面活性剤がポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せ、例えば、グリセリルカプリレート、グリセリルカプレート、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエート、グリセロールモノリノレエートまたはその組合せを含むか、またはそれであり、
陰イオン性界面活性剤がＳＤＳである、
請求項８１に記載の組成物。
【請求項８３】
連続相が、
３０〜８０ｍｇ／ｇの量のＤ−ソルビトール；および
３８０〜５００ｍｇ／ｇの量のゼラチン
を含み、
分散相が、
９０〜１４０ｍｇ／ｇの量のシクロスポリン；および
４０〜８０ｍｇ／ｇの量のカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド
を含み、
組成物が、
１００〜２００ｍｇ／ｇの量の２−（２−エトキシエトキシ）エタノール；
１００〜１５０ｍｇ／ｇの量のグリセリルカプリレート、グリセリルカプレート、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエート、グリセロールモノリノレエートまたはその組合せ、好ましくは、グリセリルモノオレエートおよび／もしくはグリセリルジオレエート；および
１５〜５０ｍｇ／ｇの量のＳＤＳ
をさらに含む、請求項８１または８２に記載の組成物。
【請求項８４】
液体コロイドまたは固体コロイドの形態にある、請求項８１から８３のいずれかに記載の組成物。
【請求項８５】
液体コロイドまたは固体コロイドが連続相と分散相とを含み、連続相がゼラチン、ＳＤＳおよびＤ−ソルビトールを含み、分散相がシクロスポリン、２−（２−エトキシエトキシ）エタノール、グリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエートおよびカプリル酸／カプリン酸トリグリセリドを含む、請求項８４に記載の組成物。
【請求項８６】
液体コロイドが連続相と分散相とを含み、コロイドが、ゼラチン、ＳＤＳ、Ｄ−ソルビトールおよび水を含む連続相プレミックスと、シクロスポリン、２−（２−エトキシエトキシ）エタノール、グリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエートおよびカプリル酸／カプリン酸トリグリセリドを含む分散相プレミックスとを混合して液体コロイドを形成させることによって得ることができる、請求項８４に記載の組成物。
【請求項８７】
固体コロイドが連続相と分散相とを含み、コロイドが、ゼラチン、ＳＤＳ、Ｄ−ソルビトールおよび水を含む連続相プレミックスと、シクロスポリン、２−（２−エトキシエトキシ）エタノール、グリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエートおよびカプリル酸／カプリン酸トリグリセリドを含む分散相プレミックスとを混合して液体コロイドを形成させることと、液体コロイドを固化させることとによって得ることができる、請求項８４に記載の組成物。
【請求項８８】
Ｐ４５０阻害剤もしくはＰｇＰ阻害剤、またはその組合せをさらに含む、請求項１から８７のいずれかに記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、例えば、療法の望ましくない効果の改善処置、より具体的には、Ｔ細胞媒介性療法と関連して生じる１つまたは複数の望ましくない効果の処置における使用のための薬学的に活性な成分を含む組成物に関する。望ましくない効果は、任意選択で、活性化されたＴ細胞活性によって引き起こされる、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）または胃腸（ＧＩ）炎症と関連する、例えば、潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患と関連する症状であってもよい。望ましくない効果の改善に加えて、本発明は、療法の有効性を維持することも目的とする。望ましくない効果が観察される場合は、補助療法として、または予防的療法として、組成物を適用することができる。
【背景技術】
【０００２】
免疫系のＴ細胞の活性は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）への抗原結合に依存するが、刺激的と阻害的の両方の、様々なシグナリング経路の複雑な相互作用によって調節されることが長く知られてきた。抗原特異的Ｔ細胞活性化は、Ｔ細胞と抗原提示細胞（ＡＰＣ）との間の２つのシグナルを必要とする。第１のシグナルは、ＡＰＣ上の主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子と共に、ＴＣＲへの抗原の提示を必要とする。Ｔ細胞活性化を完了するために、Ｔ細胞上のＣＤ２８受容体と、ＡＰＣ上の共刺激分子との相互作用も必要である。ＣＴＬＡ−４およびＰＤ−１チェックポイント受容体などの、Ｔ細胞免疫の負の調節因子（チェックポイントタンパク質とも呼ばれる）は、Ｔ細胞活性の制御および不適切なＴ細胞応答の防止のために健康な個体において重要である。ＴＣＲによるナイーブなＴ細胞の刺激後、ＣＴＬＡ−４は上方調節され、ＣＤ２８と競合する。ＰＤ−１チェックポイントタンパク質は、慢性的に刺激されたＴ細胞上で発現される共阻害分子であり、通常そのリガンドであるＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２との相互作用によってＴ細胞活性をモジュレートするのに重要な役割を果たしている。ＰＤ−Ｌ１、およびより効力の少ないＰＤ−Ｌ２は、多くの血液性および非血液性ヒト腫瘍上で発現されることがわかった。例えば、ＣＴＬＡ−４および／またはＰＤ−１リガンド結合の抗体標的化による免疫チェックポイント遮断は、現在では、自己Ｔ細胞の活性を利用する様々な形態のがんに取り組むためのいくつかの免疫学に基づく戦略のうちの１つと認識されている（Ｇｅｌａｏら、Ｔｏｘｉｎｓ（２０１４）、６、９１４〜９３３）。
【０００３】
ＴＣＲでの抗原結合と、Ｔ細胞エフェクター機能の活性化とを関連付ける重要なタンパク質は、ＮＦＡＴ（活性化Ｔ細胞核内因子）である。ＮＦＡＴ１〜４は、カルシウム／カルシニューリンにより調節される転写因子のファミリーである。それらの発現および活性化は、異なる細胞型間で変化し、その機能は細胞状況に依存する。抗原−ＴＣＲ結合時の細胞質Ｃａ２＋の増加は、ＮＦＡＴを脱リン酸化するカルシニューリンの活性を増加させる。脱リン酸化された場合、ＮＦＡＴは核に転座し、そこで他の転写因子と相互作用して、様々な前炎症性サイトカインの発現を誘導する。核内で、ＮＦＡＴは、例えば、ＡＰ−１と相互作用することが知られている。同時に、その対はゲノム中の調節領域に結合し、Ｔ細胞を活性化する遺伝子プログラムを開始させる。最近、ＡＰ−１の利用性に応じて、ＮＦＡＴは、Ｔ細胞の活性化または消耗に局面を変える；それがない場合、ＮＦＡＴは負の調節プログラムを開始させる証拠が提示された（Ｍａｒｔｉｎｅｚら（Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２０１５）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ４２、２６５〜２７８）。ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１結合は、Ｔ細胞のＮＦＡＴ活性化に影響することが知られている。したがって、抗ＰＤ−１抗体または抗ＰＤ−Ｌ１抗体とのＰＤ−１：ＰＤ−Ｌ１相互作用の遮断は、ＮＦＡＴ活性化経路を再活性化することができる（Ｃｏｎｇら、（Ｍａｙ  ２０１５）Ｇｅｎ．Ｅｎｇ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｎｅｗｓ  ｖｏｌ．３５、Ｎｏ．１０）。ＮＦＡＴはまた、ＣＲＥＢ結合タンパク質（ＣＢＰ）およびｐ３００などの転写コアクチベーターと相互作用する。
【０００４】
ＮＦＡＴの核内進入を促進するカルシニューリンは、ＮＦＡＴ活性化における最もよく特徴付けられたシグナリング分子であるが、それのみではない。いくつかの他のＴ細胞シグナリング分子も、ＮＦＡＴ活性化と関連している。Ｒａｓおよびタンパク質キナーゼＣは、ＮＦＡＴ−ＡＰ−１複合体の完全な活性化のためにＪｕｎ／Ｆｏｓの合成および活性化を刺激する。ｃ−ＲａｆおよびＲａｃは、ＮＦＡＴ−ＣＢＰ相互作用を促進することが示されている。対照的に、グリコーゲン合成酵素キナーゼ３によるＮＦＡＴのリン酸化は、ＮＦＡＴの核外輸送をもたらす。ＮＦＡＴ活性化を遮断することにより、グリコーゲン合成酵素キナーゼ３は、Ｔ細胞活性化の負の調節因子であることが示されている。様々なＭＡＰＫのうち、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ末端キナーゼは、Ｔ細胞中でのカルシニューリンのＮＦＡＴへの標的化を阻害し、細胞外シグナルにより調節されるキナーゼは、ＮＦＡＴの核外輸送を増加させる。ｐ３８  ＭＡＰＫは、ＮＦＡＴｐおよびＮＦＡＴ３をリン酸化して、その核外輸送を促進することが示されている。ｐ３８  ＭＡＰＫは、ＮＦＡＴプロモーターを活性化し、ＮＦＡＴ  ｍＲＮＡを安定化し、ＮＦＡＴ翻訳を増加させ、ＮＦＡＴ−ＣＢＰ結合を促進する。ｐ３８  ＭＡＰＫの全体的な効果は、ＮＦＡＴの活性化である。
【０００５】
ＮＦＡＴが核から輸送され、その不活性なリン酸化形態で細胞質中に存在する休止中のＴｃｏｎｖ細胞と違って、わずかなＮＦＡＴタンパク質が一次Ｔｒｅｇの核中に構成的に局在し、そこで、様々な転写因子との相互作用を介して、Ｆｏｘｐ３標的遺伝子に選択的に結合することが示されている。したがって、Ｔｒｅｇ細胞がカルシニューリン阻害剤に曝露された場合、核からのＮＦＡＴの輸送は誘導されず、このようにその核転座はカルシニューリン活性とは無関係であることを示している。重要なことに、ＴｒｅｇはＩＬ−２の存在下ではカルシニューリン阻害剤に対して耐性であり、抗ＣＤ３抗体刺激に応答して増殖し続けるが、非Ｔｒｅｇの増殖は、カルシニューリン阻害剤によって無効化される。さらに、ＮＦＡＴではなく、Ｔ細胞活性化にとって必要とされる他の転写因子を活性化するＰＭＡは、イオノマイシンの非存在下でＴｒｅｇ増殖を選択的に誘導する。自己ＭＨＣクラスＩＩとのＴＣＲ相互作用は、ＰＭＡ誘導性Ｔｒｅｇ増殖にとって必要ではない。独自に、ＰＭＡにより増殖した、またはカルシニューリン阻害剤の存在下でのＴｒｅｇは、Ｔｒｅｇの表現型および機能を維持する（Ｌｉ，Ｑら、Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＮＦＡＴ  ｉｎ  Ｆｏｘｐ３＋  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  Ｃｅｌｌｓ  Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｏｆ  Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２０１２  Ｍａｙ  １；１８８（９）：４２６８〜７７）。
【０００６】
調節性Ｔ細胞−胸腺由来の天然に存在する調節性Ｔ細胞（ｎＴｒｅｇ）の制御におけるＮＦＡＴの役割は、Ｔｃｏｎｖ細胞における制御と同様、カルシウムシグナルを含む。しかしながら、Ｔｃｏｎｖ細胞と違って、Ｔｒｅｇの制御および活性は、ＮＦＡＴと、Ｆｏｘｐ３遺伝子のＮＦＡＴ結合領域への結合をもたらすＦｏｘｐ３（ＦｏｒｋヘッドボックスＰ３）などの異なる転写因子との相互作用を含む。ｉＴｒｅｇに分化するＣＤ４＋Ｔ細胞の能力は、ＮＦＡＴファミリーメンバーの数が失われると共に顕著に減少したため、ＴＧＦ−βによる末梢誘導性Ｔｒｅｇ（ｉＴｒｅｇ）の生成は、ＮＦＡＴ発現に依存することが知られている。ＴＧＦ−β誘導性ｉＴｒｅｇ中でのＦｏｘｐ３の発現は、存在する個々のメンバーよりもむしろ、ＮＦＡＴの閾値に依存すると結論付けることができる。ｎＴｒｅｇの頻度はＮＦＡＴ１、ＮＦＡＴ２、またはＮＦＡＴ４を単独でまたは組み合わせて欠くマウスにおいて未変化のままであったため、これはｉＴｒｅｇ発生に特異的である。重要なことに、ｎＴｒｅｇとｉＴｒｅｇの両方の機能は、ｎＴｒｅｇおよびｉＴｒｅｇにおける少ない核内ＮＦＡＴによって反映される、強固なＮＦＡＴレベルに無関係であった。Ｔｒｅｇ細胞はマウスモデルにおいて大腸炎または移植拒絶を抑制することができることが以前に示されている。Ｖａｅｔｈは、ＮＦＡＴ数の欠失が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、またはｉｎ  ｖｉｖｏでの大腸炎および移植の間に、サプレッサー活性を変化させないことを証明した。このシナリオは、Ｔｒｅｇ機能を保持しながら、前炎症性の従来のＴ細胞を選択的に標的化する、自己免疫疾患のため、および移植における処置としての高いＮＦＡＴ活性の阻害を強調する（Ｖａｅｔｈ  Ｍら（２０１２）、Ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ  ｏｎ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｆａｃｔｏｒ  ｏｆ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ（ＮＦＡＴ）ｌｅｖｅｌ  ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｅｓ  ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  Ｆｏｘｐ３＋  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １０９（４０）：１６２５８〜１６２６３）。
【０００７】
同種異系造血幹細胞移植（アロ−ＨＣＴ）の免疫学的合併症である移植片対宿主疾患（ＧｖＨＤ）は、主にＮＦＡＴ−１およびＮＦＡＴ−２により活性化されたＴ細胞によって誘導されることが最近確立された。ＧｖＨＤを促進する重要な因子は、化学療法および／または放射線療法を用いるアロ−ＨＣＴのための必要なコンディショニングレジメンである。そのようなコンディショニングは、ＧＩ障壁の損傷および炎症性サイトカインの局部放出を伴う傾向がある。これは、ＮＦＡＴ活性化によってＴ細胞活性化を促進し、その結果、前炎症性サイトカインを分泌し、サイトカインストームをもたらし得る。対照的に、アロ−ＨＣＴ処置によるドナーＴ細胞のうちでも、Ｆｏｘｐ３＋調節性Ｔ細胞の選択的阻害または欠失により、ＮＦＡＴ−１およびＮＦＡＴ−２を欠くＴｒｅｇ細胞が活性を保持することが最近確立された。また、ＧｖＨＤを誘導するＮＦＡＴ−１およびＮＦＡＴ−２が欠損しているＴｃｏｎｖ細胞の能力は限定される。したがって、移植の望ましい移植片対白血病（ＧｖＬ）効果を促進するのに重要であると考えられる細胞集団であるＴｒｅｇ中でのＮＦＡＴ活性は必須ではないことが示唆される。正常なＮＦＡＴ発現Ｔ細胞と比較して、ＮＦＡＴ欠損Ｔ細胞の増殖および標的細胞、組織または臓器へのホーミングが減少することは注目に値する（Ｖａｅｔｈら（Ｊａｎｕａｒｙ  ２０１５）  ＰＮＡＳ  １１２、１１２５〜１１３０）。
【０００８】
ＮＦＡＴ活性化は、ＴおよびＢ細胞活性化ならびにＴおよびＢ細胞発生ならびに樹状細胞などの他の様々な免疫細胞の範囲において重要な役割を果たす。移植片対宿主疾患（ＧｖＨＤ）中のＴリンパ球および同種異系造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）後のＴ細胞発生中のＴ細胞前駆体の増殖の空間−時間活性化パターンにより、ＨＳＣＴ後の１日目に、ドナーＴ細胞が末梢リンパ節および腸に移動し、腸においてＮＦＡＴ活性化が優勢であることが示されたが、これは、ＧＶＨＤの発生中の同種活性化の初期段階における腸でのＮＦＡＴ活性化ドナーＴ細胞にとって重要な役割を示唆している。ＮＦＡＴタンパク質の脱リン酸化およびその後の細胞質から核への脱リン酸化されたＮＦＡＴの転座を含む、Ｔ細胞受容体刺激後のＮＦＡＴの活性化は迅速であり、限定されるものではないが、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）などの、Ｔ細胞活性化と関連するいくつかの重要な遺伝子の調節に関与する。ＢＭＴ後の最初の２〜３日で、ドナーＴ細胞は末梢リンパ節（ＰＬＮ）および腸に移動したが、ＮＦＡＴ活性化は主に腸において見られ、ＰＬＮにおいては見られなかった。その後４〜８日で、ＮＦＡＴ活性は同等であった；しかしながら、腸管よりもＰＬＮにＴ細胞が有意に多く存在し、腸管全体における高いパーセンテージの活性化Ｔ細胞をもたらした。次いで、構成シグナル比に対するＮＦＡＴ活性化は、それぞれの時点で腸管においてより高かった（Ｎａら、Ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔ  ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ，  ｅｘｐａｎｓｉｏｎ，  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ａｎｄ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  ｉｎ  ｖｉｖｏ；  Ｂｌｏｏｄ、１６  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２０１０  ｖｏｌｕｍｅ  １１６、Ｎｏ．１１）。この観察は、腸管における細胞あたりの活性化が多いこと、または活性化された細胞のパーセンテージが相対的に高いことを示唆する。全て、ＧｖＨＤの発生中の同種活性化の初期段階における腸に関する主な役割を示している。
【０００９】
ＧｖＨＤのための従来の処置は、シクロスポリンＡまたはタクロリムス（ＦＫ５０６）などのＮＦＡＴ阻害剤を用いる。現在、それぞれの薬物の唯一の利用可能な製剤は、注射または経口による投与後の広い全身曝露を提供することが意図される。これらの薬物は両方とも、カルシニューリンの作用を阻害し、それによって、ＮＦＡＴの活性化を抑制する。最初は注射によって投与され、次いで、経口によって初期のより高用量で投与される、ＧｖＨＤにおける利益を提供するのに必要とされる用量、一般的には高用量で、全身が高レベルの広いＮＦＡＴ抑制に曝露され、その抑制はＮＦＡＴファミリーの様々なメンバー間で区別されない。そのような高用量で、全身濃度は、腎臓、肝臓、中枢神経系および心血管系などの臓器中の組織および細胞に対して直接的にいくつかの有害事象を引き起こす有意な可能性を有することが知られている。さらに、広い全身ＮＦＡＴ阻害は、全身でのＩＬ−２発現の抑制をもたらす。したがって、シクロスポリンＡおよびタクロリムスなどのＮＦＡＴ阻害剤は、重度の副作用を引き起こす既知の能力に加えて、エフェクターＴ細胞のＩＬ−２生成の障害に起因するＴｒｅｇ機能の間接的混乱ならびに寄付されたＴ細胞の増殖低下により、ＧｖＬ効果を阻害することもできる。マウスモデルにおける急性ＧｖＨＤ中のＮＦＡＴ活性化の空間−時間活性化パターンの調査により、最も強いＮＦＡＴ活性化が胃腸管にあることが示された。さらに、ＮＦＡＴ活性は、腸管ホーミング受容体α４β７インテグリンの上方調節と関連することが認識される。ＷＯ２００８／１２２９６７（本出願と共有）に開示されたＣｓＡの経口送達のための組成物は、ＧｖＨＤ処置のためのＣｓＡ使用の利益対有害効果のバランスを改善するように設計される。
【００１０】
アロ−ＨＣＴ処置において、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞は、潜在的な生命を脅かす問題の唯一の起源であり、その問題は、ＮＦＡＴ発現が低下または除去された場合に軽減することができる。Ｔｒｅｇと関連するものなどの、アロ−ＨＣＴ  Ｔ細胞と関連する有益なＧｖＬ効果は、ほんの少ししかＮＦＡＴ阻害によって影響されない。伝統的なアロ−ＨＣＴ細胞療法による免疫調節に加えて、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞の提供または促進による臨床免疫療法は、様々な疾患、特にがんならびにＨＩＶ−１／ＡＩＤＳなどの慢性感染を含む感染に立ち向かう重要な治療戦略を提供することができることも現在では認識されている。腫瘍における自己Ｔ細胞攻撃または腫瘍の促進を誘導する、既に上で言及したような免疫チェックポイント遮断は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞により媒介されるそのような免疫戦略を実証するいくつかの手法のうちのただ１つのものである。現在では多くの関心を受けている他のそのような手法は、Ｔ細胞が、Ｔ細胞の表面にある受容体を介して、標的疾患抗原、例えば、腫瘍抗原に直接または間接に結合した場合に活性化されるＴ細胞エンゲージング療法である。そのような療法は、操作されたＴＣＲが、Ｔ細胞を引き寄せる抗ＣＤ３抗体断片（ｓｃＦｖ）に連結される二特異的抗体および二特異的構築物などの、二特異的を含む多価Ｔ細胞エンゲージャーの使用を含む（Ｉｍｍｕｎｏｃｏｒｅ  Ｌｉｍｉｔｅｄにより調査中のＩｍｍＴＡＣ（がんに対する免疫移動モノクローナルＴＣＲ）により例示される）。それらはまた、キメラ抗原受容体を提示するように操作されたＴｒｅｇ細胞を含む他の改変されたＴ細胞、ＣＡＲ−Ｔ療法ならびにＴＣＲ操作されたＴ細胞の使用も含む。そのような細胞は、ｅｘ  ｖｉｖｏで操作され、同じ患者に戻された自己細胞であってもよい。しかしながら、正常なＴＣＲが遺伝子編集による不活化を受ける、操作された同種異系ＣＡＲ−Ｔ細胞も調査中である。そのような療法は免疫治療能力を有するが、それらは、いくつかの例では生命を脅かすことがわかっており、エフェクターＴ細胞におけるＮＦＡＴ活性化の固有の結果である、望ましくない副作用がある。
【００１１】
前炎症性サイトカインの過剰な放出が、ＧｖＨＤを媒介する活性化Ｔ細胞と関連する特徴であるのと同様に、そのようなサイトカインストームは、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞により媒介される細胞療法と共に生じる傾向があり、一般的にはサイトカイン放出症候群と呼ばれる。ＣＲＳは、発熱、悪心、頭痛、頻脈、低血圧、発疹および息切れを特徴とし、神経学的徴候も有し得る。ＣＲＳの出現は稀ではないが、処理しやすいことが多い。しかしながら、Ｔ細胞に基づく療法を投与され、その後、ＣＲＳを発症した対象においては致死性があった。ＣＲＳは、例えば、Ｘｕら（２０１４）  Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３４３、１７２〜１７８：「Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｗｉｔｈ  ｃｈｉｍｅｒｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ」に概説されたような血液悪性腫瘍を処置するための自己ＣＡＲ−Ｔ療法の最近の臨床試験において特に顕著なものであった。Ｍａｕｄｅら（２０１４）  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．２０、１１９〜１２２：「Ｍａｎａｇｉｎｇ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｎｏｖｅｌ  Ｔ  Ｃｅｌｌ−ｅｎｇａｇｉｎｇ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ」およびＭｉｎａｇａｗａら（Ｍａｙ  ２０１５）  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ８、２３０〜２４９：「Ｓｅａｔｂｅｌｔｓ  ｉｎ  ＣＡＲ  ｔｈｅｒａｐｙ：Ｈｏｗ  ｓａｆｅ  ａｒｅ  ＣＡＲＳ？」も参照されたい。
【００１２】
そのようなＴ細胞療法を用いた場合のＣＲＳ発生の責任および重症度は、プレコンディショニングならびにベースラインサイトカインレベル、腫瘍量およびＴ細胞用量と関連していた。ベースラインサイトカインレベルがＣＡＲ−Ｔ細胞注入の時点で高いか、または短時間で標的細胞に遭遇するＣＡＲ−Ｔ細胞が大量である場合、ＣＲＳを迅速かつ重大に誘発し得る。サイトカインプロファイルは大きく変化するが、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−６は最も頻繁にモニタリングされるサイトカインである。ＩＦＮ−γおよびＩＬ−６は、問題があるＣＲＳを有する多くの患者において１０倍を超えて増加している。
【００１３】
サイトカイン放出症候群をもたらす生物製剤の投与は、臓器移植の間に全身免疫抑制剤として投与され、ＮＦＡＴを誘導することが知られる生物製剤である、抗ＣＤ３  ｍＡｂ  ＯＴＫ３の投与と関連することが初めて報告された。ＯＫＴ３注射後１〜４時間以内に、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−γ、およびＩＬ−６などの前炎症性サイトカインの血清レベルは顕著に上昇していた。最近では、抗ＣＤ２８  ｍＡｂ  ＴＧＮ１４１２で処置された６人の患者のうちの６人において、サイトカインストームが報告された。その報告では、ＴＮＦ−αレベルは、注入後１時間以内にピークに達し、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、およびＩＦＮ−γは、次の時点で、注入の４時間後に最大レベルに到達した（他のサイトカインの上昇は、ＩＬ−４、ＩＬ−８、ＩＬ−１２、およびＩＬ−１βを含んでいた）。６人の患者全員がその試験において、集中治療室での支持療法を必要とし、６人のうちの２人が１１日および２１日の長い集中治療室での滞在を必要とした。
【００１４】
ＣＲＳの処置は、コルチコステロイドを用いて報告され、より最近では、抗ＩＬ−６モノクローナル抗体トシリズマブを用いて報告されている。コルチコステロイドはＣＲＳを処置するだけでなく、細胞療法の治療活性も停止させる。他方、トシリズマブは、完全に検証されていないが、治療効果を保持しながらＣＲＳを処置すると報告されている。また、トシリズマブはＣＲＳの処置において抗ＩＬ−６抗体を使用する利益を示唆するが、ＣＲＳを防止し、上記で概略された様々なＴ細胞調節的治療手法に対する補助療法として作用する手法として同等に効果的に用いることができるかどうかは明らかではない。また、注射可能なモノクローナル抗体として、ＩＬ−６抗体は非常に高価であり得る。したがって、関連するＴ細胞媒介性療法の治療活性を維持しながら、ＣＲＳを処置する、軽減する、および／または防止する処置が必要である。
【００１５】
炎症性腸疾患と関連する症状は、免疫チェックポイント遮断を含む、Ｔ細胞媒介性療法と関連する望ましくない「免疫関連有害事象」として留意されてきた（Ｇｅｌａｏら、同書）。これは、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）とクローン病の両方において、炎症組織に、大量のサイトカインを分泌する活性化Ｔ細胞が重度に浸潤するという事実と一致している。Ｓｈｉｈらは、ＵＣ疾患の結腸粘膜の浸潤リンパ球におけるＮＦＡＴ２の核転座および活性化を報告した（Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｅｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１４、１７５９〜１７６７）。
【００１６】
サイトカイン上昇は多くの患者において測定可能であるが、上昇の程度はＣＲＳの重症度または療法に対する応答と相関しないことがある。さらに、いくらかの患者は、サイトカインが顕著に上昇しない症状を経験するが、他の患者は臨床症状に不相応な検査所見を示す。
【００１７】
結果として、消散し得るＣＲＳを有する対象または致死性であり得るＣＲＳを有する対象を同定することは困難であり得る。したがって、Ｔ細胞媒介性療法を通して補助療法として投与することができる臨床的に有効で費用効果的な療法が必要である。
【００１８】
シクロスポリンＡは、免疫抑制の性質および抗炎症性の性質を有する環状ポリペプチドである。この化合物は、腎臓、肝臓、心臓、心臓−肺の組合せ、肺、または膵臓の移植後の臓器拒絶反応の防止について、骨髄移植後の拒絶反応の防止；移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）；乾癬；アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、およびネフローゼ症候群の処置および予防について承認されている（Ｎｅｏｒａｌ（商標）製品概要２４／０２／２０１２）。シクロスポリンＡは、重度の難治性尋常性乾癬、Ｂｅｃｈｅｔ病、貧血、重症筋無力症、ならびに過敏性腸症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、憩室炎、回腸嚢炎、直腸炎を含む大腸炎、胃腸の移植片対宿主疾患（ＧＩ−ＧＶＨＤ）、結腸直腸癌、および腺癌ならびに虚血性誘導疾患を含めたＧＩ管に影響する様々な状態の処置を含めた一連の他の疾患の処置にも有用であり得る。他の疾患の範囲は、シクロスポリンＡを用いた処置から恩恵を得ることができる。その全体が参照により本明細書に組み込まれている（Ｌａｎｄｆｏｒｄら、（１９９８）、Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ；１２８：１０２１〜１０２８）。シクロスポリンＡは、潰瘍性大腸炎（Ｌｉｃｈｔｉｇｅｒら、速報（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｅｖｅｒｅ  ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ  ｃｏｌｉｔｉｓ）、Ｌａｎｃｅｔ．、１９９０；３３６：１６〜１９；Ｃｏｈｅｎら、Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｉｎ  ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ  ｃｏｌｉｔｉｓ  （ａ  ｆｉｖｅ−ｙｅａｒ  ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ）、Ａｍ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１９９９；９４：１５８７〜１５９２）を含む炎症性腸疾患（Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ、ａ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｄｉｓｅａｓｅ、Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ．、１９９５；１：４８〜６３）を含めたいくつかの胃腸の状態を処置するのに使用されている。
【００１９】
しかし、上で注意された通り、シクロスポリンＡは、高血圧、腎機能障害、および神経毒性を含めたいくつかの望ましくない副作用を有する（Ｆｅｕｔｒｅｎら、Ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｕｔｏ−ｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｋｉｄｎｅｙ  ｂｉｏｐｓｙ  ｒｅｇｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｆｏｒ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．１９９２；３２６：１６５４〜１６６０；Ｗｉｊｄｉｃｋｓら、Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｉｎ  ｌｉｖｅｒ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ｒｅｃｉｐｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．１９９５；４５：１９６２〜１９６４；およびＰｏｒｔｅｒら、Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｉｇｈ  Ｂｌｏｏｄ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ．Ａｒｃｈ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ．１９９０；１５０：２８０〜２８３）。
【００２０】
シクロスポリンＡは、エタノールおよびポリエトキシ化ヒマシ油（例えば、Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（商標）ＥＬ）中の５０ｍｇ／ｍｌのシクロスポリンＡの溶液である静脈内投与製剤；Ｓａｎｄｉｍｍｕｎ（商標）として入手可能である。製品は、エタノール、トウモロコシ油、およびリネオイルマクロゴールグリセリド中のシクロスポリンＡの溶液を含有する軟ゼラチンカプセル剤（Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ（商標）軟ゼラチンカプセル剤）を含めた経口投与製剤として、ならびにオリーブ油、エタノール、およびラブラフィルＭ１９４４ＣＳ（ポリエトキシ化オレイン酸グリセリド）中に溶解したシクロスポリンを含有する経口投与溶液（Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ（商標）経口液剤）としても入手可能である。より最近、ＤＬ−α−トコフェロール、無水エタノール、プロピレングリコール、トウモロコシ油−モノ−、ジ−トリグリセリド、ポリオキシル４０硬化ヒマシ油中に溶解したシクロスポリンＡを含有するマイクロエマルジョン濃縮製剤が承認された（Ｎｅｏｒａｌ（商標））。経口投与後、Ｎｅｏｒａｌ（商標）製剤は、マイクロエマルジョンを形成し、経口投与されるＳａｎｄｉｍｍｕｎｅ（商標）と比較して生物学的利用能が改善されていると言われる。固形臓器拒絶または関節リウマチもしくは乾癬などの全身性自己免疫疾患を防止するのに必要であると考えられる全身性免疫抑制を可能にする意図で主に開発された、これらの経口投与されるシクロスポリンＡ組成物は、全て瞬時放出組成物であり、シクロスポリンＡは、胃および小腸内に高濃度で存在することになり、そこから全身に吸収される。
【００２１】
Ｓａｎｄｂｏｒｎら（Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９１；３１：７６〜８０）は、経口および静脈内ならびに油および水ベース浣腸後のシクロスポリンの相対的な全身吸収を判定した。浣腸投与後に観察されるごくわずかな血漿シクロスポリン濃度に基づいて、シクロスポリンは、可溶化されている場合でも、結腸から吸収されにくいことが示唆された。しかし浣腸は、炎症性腸疾患の処置においてかなりの有効性を実証した（Ｒａｎｚｉ  Ｔら、Ｌａｎｃｅｔ  １９８９；２：９７）。炎症性腸疾患の処置における静脈内または経口投与されるシクロスポリンの有効性は、用量依存性であり、十分な濃度が結腸に到達するのを保証するのに高い用量を必要とする。全身毒性は、用量および継続時間依存性であることが知られている。炎症性腸疾患を処置するための認可されたソフトゲルまたはエマルジョンに基づく製剤の経口投与または注射投与後に必要とされる濃度では、副作用を生じるリスクが高い。このようにシクロスポリンはいくつかの学習処置指針における治療選択肢として指摘されているが、その推奨される使用は３カ月以下に限定され、血圧モニタリングに言及するのではなく、血液中の薬物レベルならびに腎機能および肝機能の頻繁なモニタリングを必要とする。
【００２２】
患者への投与にとって適切な形態への薬学的に活性な成分の製剤化は、科学の先進領域である。それはまた、薬物の効能に関する重要な考慮すべき事柄でもある。薬物および他の活性成分を製剤化するための方法の多くの例が存在する。これらの製剤の目的は様々であり、全身吸収の増大、新しい投与経路の許容、生物学的利用能の改善、活性剤の代謝の減少、または望ましくない投与経路の回避であってもよい。
【００２３】
ＷＯ２００８／１２２９６５には、少なくとも結腸中でシクロスポリンを放出する放出特性が改変された経口シクロスポリンミニカプセル組成物が開示されている。ＷＯ２０１０／１３３６０９には、中に油の液滴が分散されている水溶性ポリマーマトリックスを含む、改変された放出コーティングを含む組成物が開示されている。開示された組成物は、活性成分も含有する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
ＧＩ管に送達されるＮＦＡＴ活性化阻害剤の新規使用は、療法の有効性を維持しながら、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連する免疫関連有害効果を軽減または防止することが現在提唱されている。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる１つまたは複数の望ましくない効果の処置における使用のためのＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物であって、前記望ましくない効果が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および胃腸炎症と関連する症状から選択され、前記組成物が胃腸管に投与され、それによって、前記１つまたは複数の望ましくない効果が療法の有効性を維持しながら処置される、組成物が提供される。
【００２６】
ＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物を使用して、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる１つまたは複数の望ましくない効果を処置することができる。望ましくない効果を、サイトカイン放出症候群ならびに胃腸炎症と関連する症状、例えば、潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患と関連する症状から選択することができる。組成物を、胃腸管（ＧＩＴ）に投与することができる。１つまたは複数の望ましくない効果は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法の有効性を維持しながら処置される。組成物は、ＧＩＴの特定の領域に、またはＧＩＴ全体を通してＮＦＡＴ阻害剤を供給するためのものであってもよい。組成物は任意選択で、モジュレートされたまたは限定された全身吸収を提供してもよい。本出願を通して、ＮＦＡＴ活性化の阻害剤をＮＦＡＴ阻害剤と呼んでもよい。２つの用語、「ＮＦＡＴ活性化の阻害剤」および「ＮＦＡＴ阻害剤」は、したがって、等価であると考えられる。
【００２７】
ＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物によって処置される望ましくない効果は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる。これは、望ましくない効果がＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法により引き起こされる場合、療法を、任意選択でＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物と共に同時投与することを含む。同時投与は、ＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物が、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と同時に、連続的に、または別々に投与される状況を包含する。
【００２８】
さらに、ＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる、またはそれにより引き起こされる１つまたは複数の望ましくない効果に罹患する患者の処置における使用のためのものであってよい。
【００２９】
実施形態では、望ましくない効果は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる、またはそれにより引き起こされる、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞誘導性ＣＲＳまたはＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞誘導性ＧＩ炎症である。
【００３０】
そのような投与は、好ましくは、ＮＦＡＴ活性化の阻害剤の制御放出製剤を用いる経口投与である。組成物は、ＧＩＴの特定部位にＮＦＡＴ活性化の阻害剤を放出する制御または調節放出組成物であってもよい。例えば、組成物を、胃、小腸（十二指腸、空腸もしくは回腸）、大腸（盲腸、結腸、もしくは直腸）またはその組合せにおいてＮＦＡＴ阻害剤を放出するように適合させることができる。好ましくは、用いられる組成物は、既知の製剤および以下でさらに考察される製剤などの、経口投与のためのシクロスポリンＡの制御放出製剤である。これは、望ましくない効果を処置する、例えば、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連する関心のある免疫有害事象を改善または防止する費用効果的な様式を提供する。このように、介入によって、療法と関連する望ましくない効果の出現後に生じるいかなる重篤な効果も予測する必要はない。
【００３１】
本発明の組成物を、免疫有害事象（例えば、ＣＲＳ）などの診断された望ましくない効果を処置する（改善する）ために、またはそのような望ましくない効果の発生を防止もしくは軽減するための予防的組成物として投与することができることが認識される。そのような予防的投与は、Ｔ細胞媒介性治療効果と関連する補助療法としてのものであってもよいが、例えば、プレコンディショニングレジメンの間または後に、Ｔ細胞治療作用にさらに先行してもよい。好ましくは、組成物を、任意のプレコンディショニングレジメンを通して、およびＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法を用いる補助療法として、ＧＩ管に投与することができる。
【００３２】
標的疾患抗原、特に腫瘍抗原へのＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞の提供または促進に依拠するますます多くの療法が存在する。本発明は、意図される治療利益のためにそのような活性化Ｔ細胞が用いられる場合はいつでも有用であり得る。しかしながら、その使用は、化学療法および／または放射線療法を用いる、プレコンディショニングレジメンを用いて自己Ｔ細胞を枯渇させる場合に特に好ましいことが想定される。そのような例では、プレコンディショニングレジメンを通して、またはＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法の少なくとも前に、本発明による組成物を投与することが好ましい。上記に示されたように、そのような投与はまた、実際の治療期間中に継続するのが望ましく、療法が血液障害に対するものである例では、アロ−ＨＣＴの適用中に継続してもよい。本発明の適用が有利であり得るＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法の例を、ここで、以下にさらに簡単に説明する。
【００３３】
細胞療法における投与のための細胞型は、同種異系または自己であってもよい。さらに、細胞療法は改変型または非改変型であってもよい。細胞療法は、改変型または非改変型である同種異系または自己の任意の組合せであってもよい。細胞療法は、造血幹細胞移植、全血輸血、血清輸血またはその画分を含んでもよく、それらは全て、天然細胞集団およびその一部を含む。細胞療法処置戦略はまた、特定の幹細胞集団の単離および導入、エフェクター細胞の投与、多能性細胞になる成熟細胞の誘導、および成熟細胞の再プログラミングも含む。多数のエフェクター細胞の投与は、がん患者、感染が消散していない移植患者、および眼の中の幹細胞が化学的に破壊された患者にとって利益となり得る。
【００３４】
本発明と関連する細胞療法は、以下の手法：（ｉ）患者自身の常在免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）を活性化して、腫瘍細胞を殺傷するように設計された樹状細胞などの免疫細胞を用いる療法、ならびに（ｉｉ）がん細胞を直接的に発見、認識、および殺傷するＴ細胞などの免疫細胞の直接的注入を含む。どちらの場合も、患者への注入の前に、実験室で治療細胞を収穫し、調製することができる。免疫細胞、例えばＴ細胞を所望の特性について選択し、注入前に実験室で多数に増殖させることができる。これらの細胞療法に係る課題には、療法のための十分な機能および細胞数を生成する調査者の能力も含む。
【００３５】
療法はまた、遺伝子療法と細胞療法の両方の組合せを含む療法であってもよい。具体的には、療法は、免疫細胞によって発現された場合、これらの細胞ががん細胞を特異的に認識することができる人工受容体をコードする遺伝子を含んでもよい。これは、これらの遺伝子改変された免疫細胞が患者におけるがん細胞を殺傷する能力を増大させる。この手法の一例は、免疫細胞、典型的には、患者自身の免疫細胞、例えば、Ｔ細胞への「キメラ抗原受容体」（ＣＡＲ）と呼ばれる新規人工受容体のクラスの遺伝子導入であり、これは次いで「ＣＡＲ−Ｔ」細胞と呼ばれる。したがって、療法は、Ｔ細胞が腫瘍特異的ＣＡＲを発現するように遺伝的に改変されるＴ細胞療法であってもよい。
【００３６】
本発明の療法として特に注目すべきは、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、または遺伝子操作されたＴ細胞の養子移入、ならびにＢｉＴＥおよびＩｍｍＴＡＣなどの、Ｔ細胞エンゲージング可溶性二特異的試薬を含む細胞に基づく療法である。
【００３７】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）は、ＴＣＲシグナリング複合体のゼータサブユニットを介してシグナリングを媒介することができる。これらのＣＡＲの主な制限は、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＣＡＲ操作されたＴ細胞の低い持続性であり、ＣＡＲ持続性は、進行転移がんを有する患者における腫瘍退縮と相関する。ＣＡＲは、全て免疫活性化およびＴ細胞持続性を増強するように設計される、ＣＤ２８、ＣＤ２７および４１−ＢＢに由来するものなどのさらなる共刺激シグナリングドメインを含んでもよい。
【００３８】
ＣＡＲ操作されたＴ細胞を、Ｂ細胞抗原ＣＤ１９に標的化することができる。
【００３９】
療法は、任意選択で、ＮＹ−ＥＳＯ−１のエピトープに特異的な、ＴＣＲ親和性増強されたＴ細胞であってもよい。
【００４０】
療法は、可溶性二特異的分子によるものであってもよい。可溶性生物製剤の製造は、細胞に基づく療法よりもかなり安価で、時間もかからない場合がある。典型的には、Ｔ細胞エンゲージング生物製剤は、抗体またはＴＣＲのいずれかに基づく高親和性ＴＡＡ認識とＴ細胞活性化（通常、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ抗体断片による）とを組み合わせて、Ｔ細胞の天然の特異性とは無関係である活性化をもたらす二特異的融合タンパク質である。全ての抗体に基づく手法のうち、トリオマブが最も進行しており、カツマキソマブが最近市場に出ている。これらの試薬は３種の細胞：腫瘍標的細胞、Ｔ細胞およびアクセサリー細胞（マクロファージ、樹状細胞またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞）間で架橋を形成させるさらなる断片結晶化可能（Ｆｃ）成分を含む。ＥｐＣａｍまたはＨｅｒ２を標的化するトリオマブは現在、様々な固形腫瘍適応において第１〜３相臨床試験中である。Ｔ細胞エンゲージング抗体（ＢｉＴＥ）は、単一ポリペプチド鎖として生成される２つの単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含有する。最も進行したＢｉＴＥであるＣＤ１９標的化剤により、急性リンパ芽球性白血病を有する患者における第２相試験において８０パーセントの奏功率が得られた。また、鎖間ジスルフィド結合を安定化することによって連結される別々のポリペプチドとして生成される、密接に関連する二重親和性再標的化抗体（ＤＡＲＴ）、および抗体断片が頭部から尾部に向かう配置で折り畳まれる非共有ホモダイマーとして生成される四価タンデムダイアボディ（ＴａｎｄＡｂ）も、臨床開発の初期段階にある。抗体と違って、ＴＣＲに基づく生物製剤は、標的抗原の全レパートリーに潜在的にアクセスする；しかしながら、可溶性ＴＣＲを生成する課題のため、発展は歴史的に限定されてきた。がんに対する免疫動員性モノクローナルＴＣＲ（ＩｍｍＴＡＣ）は、解決法を提供する。ＩｍｍＴＡＣは、新規鎖間ジスルフィド結合によって安定化され、ｐＭＨＣに対するピコモル濃度の親和性を有するように操作され、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖに融合され、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで強力なＴ細胞媒介性腫瘍細胞殺傷を誘発する可溶性ＴＣＲを含む。ＩｍｍＴＡＣは、Ｔ細胞腫瘍認識に対する最も関連する障害の１つを克服する、そのｐＭＨＣに対するピコモル濃度の親和性を有するＴＣＲに基づく可溶性薬剤の初めての生成である。最も進行したＩｍｍＴＡＣは、転移性メラノーマ患者における第１／２相臨床試験において現在試験されているｇｐ１００ペプチド標的化剤である：いくつかの有望な予備データがこれらの試験から出現している。
【００４１】
患者の免疫系の本来の力を利用するためのさらに他の手法は、再指向性Ｔ細胞療法の安全性および臨床的成功をさらに改善することに焦点を合わせている。手法は、好適な標的の選択におけるより良好な理解ならびにがんおよび正常組織における標的発現の改善された理解を含む。これは、特に無数の潜在的抗原にアクセスすることができるＴＣＲに基づく標的化システムにとって最重要である。同時に、臨床安全性および毒性を予測するためのより複雑なｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｓｉｌｉｃｏの手段を使用する包括的前臨床試験の適用は、最も有望なパイプライン候補の前進を確保するのに重要である。実際、有効な前臨床経路が、ＴＣＲに基づく治療剤について最近記載されている。また、誘導自殺システムなどの、養子移入されたＴ細胞のための「中止」機構の実現は、臨床安全性を改善することができる。
【００４２】
がんおよびがんが免疫系に侵入する能力の複雑性を考慮すれば、処置の成功（例えば、腫瘍の根絶または腫瘍増殖もしくは転移の阻害）には、療法の組合せが必要であろう。組合せ療法は、本明細書に記載のＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される２つ以上の療法を含んでもよく、または１つもしくは複数のそのような療法と、別の薬剤、例えば、化学療法剤もしくは抗体（以下で考察される化学療法剤など）とを組み合わせることにより、効能および応答持続性が改善され得る。組合せ療法は付加的な効果、より好ましくは、個々の薬剤単独での使用と比較して付加的なものを超える効果を提供することができる。例えば、抗ＰＤ−１抗体および再指向性Ｔ細胞などの免疫チェックポイント抗体阻害剤間の潜在的な相乗効果は、Ｔ細胞の負の調節を阻害する結果として持続的により高い活性を示してもよい。任意の組合せが、免疫刺激特性を有する分子を含んでもよい。
【００４３】
本発明は、ＧＩＴ全体、またはある特定の実施形態では、少なくとも結腸がＮＦＡＴ阻害剤に曝露されて、ＧＩの「オフターゲット」免疫誘導性有害事象に対して保護されるように、また、動力学を将来モジュレートして全身曝露を提供し、「オンターゲット」効果に影響することなく、非ＧＩの「オフターゲット」効果に対して保護することができるように、広いＮＦＡＴ阻害剤の薬物動態を選択的に制御することに焦点を合わせている。これは、ＧＩＴを通して、または少なくとも結腸において、可溶化されたＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンを放出する製剤の開発によって達成される。
【００４４】
活性化された場合、がん細胞の直接的または間接的殺傷である正の特性である炎症を誘導するエフェクターＴ細胞、主に、Ｔｈ１、Ｔｈ２およびＴｈ１７に加えて、別の型のＴ細胞である調節性Ｔ細胞が対抗勢力を提供する。このようにエフェクターＴ細胞活性化を制御して「オンターゲット」効果を提供する一方、「オフターゲット」Ｔ細胞の活性化の低下およびＴｒｅｇ細胞の選択的活性化により「オフターゲット」効果を防止するＮＦＡＴ阻害剤の組合せを提供し、Ｔｒｅｇ：Ｔｅｆｆ細胞の改善された平衡を提供する一方、「オンターゲット」効果と「オフターゲット」効果との適切な平衡も提供することができる場合、それは有益であると期待される。
【００４５】
ＮＦＡＴは末梢組織中の従来のナイーブなＣＤ４＋細胞から生成されるｉＴｒｅｇまたは適応性ＴｒｅｇにおけるＦｏｘｐ３発現にとって必要であることが報告されている。ｉＴｒｅｇに関しては、ＮＦＡＴ２は、腸管関連リンパ系組織でのｉＴｒｅｇ生成にとって非常に重要であると考えられるエレメントであるＦｏｘｐ３のＣＮＳ１に結合すると報告された。ノックアウトマウスを使用して、ＮＦＡＴ１およびＮＦＡＴ４と比較したＮＦＡＴ２へのＦｏｘＰ３発現の依存性を分析した。抗ＣＤ３／２８およびＩＬ−２と組み合わせた場合、ＴＧＦ−βはＷＴ  ＣＤ４＋ＣＤ２５−Ｔ細胞中での強固なＦｏｘｐ３発現を誘導する一方、ＮＦＡＴ２の非存在下では誘導はやや減少するが、ＮＦＡＴ１とＮＦＡＴ２の両方が失われた場合、よりそうなることが示された。ＮＦＡＴ１単一およびＮＦＡＴ１−ＮＦＡＴ４二重欠損性ＣＤ４＋ＣＤ２５−Ｔ細胞のさらなる分析により、１つのファミリーメンバーの欠如はＦｏｘｐ３発現細胞のいくらかの減少をもたらしたが、２つのメンバーの喪失はｉＴｒｅｇ誘導をほぼ無効化することが示された。同じグループが、シクロスポリンＡによる全てのＮＦＡＴメンバーの薬理学的阻害が、抗ＣＤ３／２８＋ＴＧＦ−βおよびＩＬ−２による刺激中にナイーブなＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＦｏｘｐ３誘導を完全に遮断することを実証した。胸腺細胞／Ｔ細胞特異的Ｎｆａｔ２ノックアウトを使用して、ＮＦＡＴ２の非存在下での胸腺由来ｎＴｒｅｇの発生を分析した。データにより、胸腺、脾臓、およびリンパ節（ＬＮ）におけるＣＤ４＋細胞集団のうちのＦｏｘｐ３＋ＣＤ２５＋ｎＴｒｅｇの頻度が、ＮＦＡＴメンバーの任意の個体または組合せの欠損によって影響されないことが示された。ｎＴｒｅｇはＮＦＡＴ発現とは無関係に発生するが、ｉＴｒｅｇの末梢での発生は、個々のファミリーメンバーに対する寛容性を示す高いＮＦＡＴレベルに決定的に依拠するとまとめられた。これらのデータは、Ｆｏｘｐ３を発生および発現するＮＦＡＴ転写因子に対するｉＴｒｅｇの依存性を強調するが、一度、ｎＴｒｅｇまたはｉＴｒｅｇに分化すれば、低レベルのＮＦＡＴの存在下であっても、サプレッサー機能を発揮することができる。Ｔ細胞中で発現される３種のＮＦＡＴファミリーメンバーのうちの２種の組み合わせた欠失が、いずれかの最小レベルのＮＦＡＴ活性が調節機能にとって十分であること、または抑制能力がＮＦＡＴにさらに依存しないことを示す、Ｔｒｅｇ抑制活性をわずかに減じるという知見に支持されて、このグループは、Ｔｒｅｇ機能のためには高いＮＦＡＴ活性を回避するべきであるという含意をもって結論付けた。これに基づいて、著者らは、カルシニューリン阻害剤に対する偏りを提唱した。カルシニューリン阻害剤ＣｓＡおよびＦＫ５０６はあまり好ましくなく、ＮＦＡＴ活性化を特異的に減少させることによって、Ｔｒｅｇ抑制ではなく前炎症性Ｔｅｆｆを機能的に阻害するＲ１１−ＶＩＶＩＴおよびＭＣＶ１などの新規治療剤を進行させるべきであることが提唱された（Ｖａｅｔｈら、ＰＮＡＳ、Ｏｃｔｏｂｅｒ  ２、２０１２；ｖｏｌ．１０９；Ｎｏ．４０；１６２６３）。
【００４６】
同じグループは、シクロスポリンまたはタクロリムスを使用するパン−ＮＦＡＴ薬理学的阻害が、免疫腫瘍学的治療剤同種異系造血幹細胞移植手法と関連する「オフターゲット」有害事象を軽減するのに有効であると強調した。この免疫療法の「オンターゲット」有益効果は、腫瘍細胞を攻撃する活性化Ｔ細胞に起因する。「オフターゲット」有害事象は、様々な組織および臓器を攻撃する同種異系Ｔリンパ球の活性化および増殖によって引き起こされる。Ｔｒｅｇが「オンターゲット」効果を維持しながら「オフターゲット」効果を軽減するという以前の報告、およびＴｒｅｇではなくＴｅｆｆに関するＮＦＡＴの必須の役割を強調する早期のＮＦＡＴノックアウトの調査に関する図面に基づいて、このグループは、「オフターゲット」効果の免疫病因に対する個々のＮＦＡＴファミリーメンバーの特異的寄与ならびに活性化Ｔ細胞の抗腫瘍活性に対するＮＦＡＴの影響を研究した。ＮＦＡＴが欠損した同種異系ドナーＴ細胞は、増殖、標的組織ホーミング、および損なわれたエフェクター機能を減少させるだけでなく、逆に、同種異系造血幹細胞移植後にＦｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇ頻度を増加させることが見出された。この研究により、ＮＦＡＴ欠損Ｔｒｅｇが完全に抑制的であり、「オフターゲット」効果から保護されることが実証された。以前の研究により、「オフターゲット」中の空間−時間ＮＦＡＴ  Ｔ細胞活性化パターンが、「オフターゲット」効果のための主な標的臓器である胃腸管において最も強いこと、およびこれが炎症シグナルと同時期に生じることが実証された。これが、腸管ホーミング受容体α４β７インテグリンの上方調節による標的組織ホーミングにとってＮＦＡＴが機能的に必須であるというこれらのＮＦＡＴノックアウト試験による同定と関連することが提唱された。この報告により、ＴｒｅｇがＮＦＡＴとは大まかに無関係に動作し、エフェクターＴ細胞のＩＬ−２生成の減少のため、シクロスポリン処置が間接的様式でＴｒｅｇ機能を混乱させることが示唆された。著者らは、特定のＮＦＡＴに対するより高い特異性を有する他のＮＦＡＴ阻害剤が、シクロスポリンなどのパン−ＮＦＡＴ阻害剤と関連する重度の副作用を制限する「オフターゲット」効果をモジュレートすることができるが、同時に、Ｔ細胞療法と関連する「オンターゲット」効能を否定しないと結論付けた。「オフターゲット」効果と「オンターゲット」効果の両方を減少させることができるシクロスポリンの使用に、低用量ＩＬ２を添加して、「オンターゲット」効果を維持することができると提唱された（Ｖａｅｔｈら、ＰＮＡＳ；Ｊａｎｕａｒｙ  ２７、２０１５；ｖｏｌ．１１２；Ｎｏ．４；１１２９）。上記のものは、パン／非選択的ＮＦＡＴ阻害剤から離れて、シクロスポリンの存在下でのＴｒｅｇ機能の維持が外因性ＩＬ２から利益を得ることを教示する。本発明は、パン−ＮＦＡＴ阻害剤の選択的分布（外因性ＩＬ２の非存在下での）が生存を改善し、標的臓器におけるサイトカイン発現をモジュレートし、ＮＦＡＴ−活性化Ｔ細胞療法のモデルにおいてＴｒｅｇ：Ｔｅｆｆ平衡を改善することを実証する。
【００４７】
したがって、本発明の実施形態では、ＩＬ２（例えば、外因性ＩＬ２）は本発明の組成物と同時投与されず、同時投与は、任意選択で、ＩＬ２の同時投与、連続投与、または別々の投与を指す。
【００４８】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法
本発明は、Ｔ細胞の表面の受容体を介して標的疾患抗原に直接または間接に結合された場合にＴ細胞が活性化される任意の形態のＴ細胞エンゲージング療法が用いられる場合はいつでも応用することができる。この受容体は、例えば、標的抗原、例えば、目的の同定された腫瘍抗原の一部を含むワクチンによって活性化される、天然のＴ細胞受容体、または例えば、腫瘍抗原に対する改変されたＴ細胞受容体、または例えば、高親和性Ｔ細胞受容体であってもよい。想定される他のＴ細胞エンゲージング療法は、特に上記のように、二特異的抗体およびＣＡＲ−Ｔ療法などの二特異的Ｔ細胞エンゲージャーの使用を含む本発明の適用から利益を得ることができる。
【００４９】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、本明細書および以下に考察される療法の任意のものであってもよい。任意選択で、療法は二特異的Ｔ細胞エンゲージャー（二特異的Ｔ細胞エンゲージング療法とも呼ばれる）、ＣＡＲ細胞療法（例えば、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法）、または免疫チェックポイント遮断療法である。
【００５０】
二特異的Ｔ細胞エンゲージャー
二特異的抗体などの二特異的Ｔ細胞エンゲージャーは、Ｔ細胞抗原と疾患抗原、例えば、腫瘍抗原との両方、またはＴ細胞受容体と疾患抗原、例えば、腫瘍抗原との両方に結合することができる。そのような二特異的Ｔ細胞エンゲージャーは、特に様々ながんの処置との関連で非常に興味深いものであった。そのような二特異的抗体の構築は周知であり、連結された抗体断片、例えば、組み合わせたｓｃＦｖの使用を含む。例として、治療抗体ブリナツモマブは、ＣＤ１９／ＣＤ３二特異的Ｔ細胞エンゲージング抗体である。臨床試験において、その使用はＣＲＳを生じると報告された。そのようなＣＲＳの発生を管理するための現在までの報告された試みは、ステロイドの使用またはトシリズマブのさらなる使用に焦点を合わせたものであった（例えば、Ｂｏｕｈａｓｓｉｒａら（２０１５）Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．１５、４０３〜４１６を参照されたい）。抗ＣＤ３抗体は、ＮＦＡＴの強力な活性化因子である。この経路によるＮＦＡＴの活性化は、ＮＦＡＴ活性化の阻害剤によって阻害される。したがって、本発明の組成物は、抗ＣＤ３抗体またはその断片を含む療法における使用のためのものであってよい。
【００５１】
上記のように、あるいは、抗ＣＤ３  ｓｃＦｖとモノクローナルＴＣＲとを連結して、治療的二特異的Ｔ細胞エンゲージャーを提供することが公知である。二特異的抗体の場合と同様、そのような二特異的構築物は、がん処置との関連で特に興味深い。例えば、メラノーマ関連抗原ｇｐ−１００に由来するＨＬＡ−Ａ２制限ペプチドに対して高親和性操作されたＴＣＲを含むそのような二特異的構築物が、悪性メラノーマの処置について現在調査中である。がん処置の分野における広い適用性を有する同様の構築物も想定される。再度、本発明は、Ｔ細胞標的化および活性化の治療利益が回避できない付随する副作用、特にＣＲＳおよび胃腸炎症と関連する症状のリスクをも自動的に伴う任意の臨床適用における補助療法として、または予防的に有用であり得る。
【００５２】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、ブリナツモマブ［ＣＤ１９およびＣＤ３ＩＩＩ（ＡＬＬ）］、ＭＥＨＤ７９４５Ａ［ＨＥＲ３およびＥＧＦＲＩＩ（結腸直腸がん、頭頸部がん）］、ＡＢＴ−１２２［ＴＮＦおよびＩＬ−１７ＩＩ（関節リウマチ）］、ＡＢＴ−９８１［ＩＬ−１αおよびＩＬ−１βＩＩ（変形性関節症）］、ＳＡＲ１５６５９７［ＩＬ−４およびＩＬ−１３ＩＩ（ＩＰＦ）］、ＭＭ−１１１［ＨＥＲ２およびＨＥＲ３ＩＩ（胃がん）］、ＩＭＣｇｐ１００［モノクローナルＴ細胞受容体抗ＣＤ３  ｓｃＦｖ融合タンパク質、ＧＰ１００およびＣＤ３ＩＩ（メラノーマ）］、ＲＯ５５２０９８５［ＡＮＧ２およびＶＥＧＦＡＩＩ（結腸直腸がん）］、ＸｍＡｂ５８７１［ＣＤ１９およびＣＤ３２ＢＩ／ＩＩ（関節リウマチ）］、ＣＯＶＡ３２２［ＴＮＦおよびＩＬ−１７ＡＩ／ＩＩａ（乾癬）］、ＡＬＸ−０７６１［ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７ＥＩ（乾癬）］、ＡＦＭ１３［ＣＤ３０およびＣＤ１６ＡＩ（ホジキンリンパ腫）］、ＡＦＭ１１［ＣＤ１９およびＣＤ３Ｉ（非ホジキンリンパ腫）］、ＭＥＤＩ−５６５［ＣＥＡおよびＣＤ３Ｉ（ＧＩ腺癌）］、エルツマキソマブ［ＨＥＲ２、ＣＤ３およびＦｃＲＩ（固形腫瘍）］、ＭＧＤ００６［ＣＤ１２３およびＣＤ３Ｉ（ＡＭＬ）］、ＭＧＤ００７［ＧＰＡ３３およびＣＤ３Ｉ（結腸直腸がん）］、ＬＹ３１６４５３０［ＭＥＴおよびＥＧＦＲＩ（進行がん）］から選択される二特異的抗体であってもよい。
【００５３】
二特異的Ｔ細胞エンゲージャーは、多価、例えば、三価または四価抗体またはタンパク質であってもよい。例えば、療法は、四価タンデムダイアボディ（ＴａｎｄＡｂ）であってもよく、その一例は、その結合部位のうちの２つを有するＴ細胞のＣＤ３受容体に結合し、他の２つの結合部位を使用して、腫瘍上の受容体に結合する（例えば、ＣＤ１９またはＥＧＦＲｖＩＩＩ受容体を介して）。四価タンデムダイアボディの例としては、ＡＦＭ１１およびＡＦＭ２１が挙げられる。二特異的Ｔ細胞エンゲージャーは、例えば、１つの結合部位がＴ細胞上の受容体（例えば、ＣＤ３）に結合し、他の２つの結合部位が標的腫瘍上の２つの異なる受容体に結合する、三価、例えば、タンパク質または抗体であってもよい。腫瘍上の２つの異なる部位の標的化は、Ｔ細胞エンゲージング療法のより高い選択性および／または効能を提供すると予想される。
【００５４】
療法は、四価抗体を含む多価抗体、例えば、ＡＭｖ−５６４（四価抗体模倣物質、ＣＤ３３／ＣＤ３は、Ａｍｐｈｉｖｅｎａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．によって開発されている）であってもよい。
【００５５】
高親和性Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法を、腫瘍関連抗原を認識することができる高親和性Ｔ細胞受容体で操作されたＴ細胞によって推進することができる。そのようなＴＣＲの例としては、ＮＹ−ＥＳＯ−１  ＴＣＲ１、ＨＰＶ−１６  Ｅ６  ＴＣＲ１、ＨＰＶ−１６  Ｅ６  ＴＣＲ、ＭＡＧＥ  Ａ３／Ａ６  ＴＣＲ１、ＭＡＧＥ  Ａ３  ＴＣＲ１、ＳＳＸ２  ＴＣＲ１、ＮＹ−ＥＳＯ  ＴＣＲ（ＮＹ−ＥＳＯ−１がん精巣抗原を標的化する操作されたより高親和性のＴＣＲ）、ＭＡＧＥ−Ａ−１０  ＴＣＲ（ＭＡＧＥを標的化する操作されたより高親和性のＴＣＲ）、ＢＰＸ−７０１（メラノーマにおいて選択的に発現される抗原を発現する固形腫瘍のためのＴＣＲ生成物候補、またはＰＲＡＭＥ、ＡＴＴＣＫ２０（抗体標的化腫瘍細胞殺傷２０（ＡＴＴＣＫ２０）は、ＣＤ２０を標的化するモノクローナル抗体であるリツキシマブと共に投与される患者の抗体に結合したＴ細胞受容体（ＡＣＴＲ）Ｔ細胞の組合せである。ＡＣＴＲは、２つの異なるヒト免疫細胞型であるナチュラルキラー（ＮＫ）細胞およびＴ細胞上に通常認められる受容体に由来する成分を組み合わせて、新しいがん細胞殺傷活性を作出するキメラタンパク質である。ＡＴＴＣＫは、ＡＣＴＲを発現するＴ細胞ががん細胞の表面上の腫瘍標的化抗体とエンゲージする時に生じる）から選択されるＴＣＲが挙げられる。
【００５６】
ＣＡＲ療法
ＣＡＲ療法は、ＣＡＲ−免疫細胞療法、例えば、ＣＡＲ−Ｔであってもよい。本発明によるＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物の投与はまた、自己ＣＡＲ−Ｔ療法と同種異系ＣＡＲ−Ｔ療法との両方との関連で特に興味深く見られ、特にそのような療法は、血液悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞球性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）および急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）に取り組むことを目的とする。
【００５７】
そのような療法では、標的抗原に対する受容体は、膜貫通ドメインおよびＴ細胞刺激ドメイン、一般的には正常なＴ細胞活性化にとって必要とされるＣＤ３−ゼータドメインならびに少なくとも１つの共刺激ドメイン、例えば、ＣＤ２８および／または４−１ＢＢシグナリングドメインにスペーサーによって連結された、一般的には抗体、例えば、ＳｃＦｖに由来する細胞外抗原結合部分を含むＴ細胞によって提示される、操作されたキメラ受容体である。例えば、ＣＤ２８共刺激およびＣＤ３−ゼータ鎖シグナリングドメインと融合した抗ＣＤ１９モノクローナル抗体由来ＳｃＦｖを含む融合タンパク質を発現するＣＡＲ−Ｔ細胞は、Ｂ−ＡＬＬ患者との関連で多くの注目を集めている。そのような操作されたキメラ受容体は、標的認識においてＨＬＡ制限を考慮する必要性を回避する利点を有し、Ｔ細胞活性化の通常の有益な機構を効率的に利用することが示された；抗原結合はＮＦＡＴ活性化をもたらすことが示された。しかしながら、既に上に述べた通り、ＣＲＳは、生命を脅かす結果をもたらし得るような療法の、明確に実証された、起こり得る、望ましくない副作用である。
【００５８】
白血病を有する患者では、注入されたＣＡＲ−Ｔ細胞は、末梢血中の大量のがん細胞に遭遇した後、激しく活性化され得る。ＣＡＲ−Ｔ細胞は増殖し、ＣＲＳを促進するか、またはＣＲＳのリスクを増大させ得る。さらに、ＣＡＲ−Ｔ細胞融合前のプレコンディショニングは、サイトカイン生成によるＣＲＳのリスクをかなり増大させ得る。上述のように、化学療法および／または放射線療法によるプレコンディショニングは、ＧＩ管における局所炎症と関連し、ナイーブなＴ細胞の活性化Ｔ細胞への分化をもたらす前炎症性サイトカインを生成する。また、ＮＦＡＴは活性化Ｔ細胞上の腸管ホーミング受容体α４β７インテグリンを上方調節することも知られている。
【００５９】
したがって、炎症性サイトカインのモニタリングは、ＣＡＲ−Ｔ細胞養子療法の実行における標準となっている。段階的増量法を用いて、問題のあるＣＲＳ発生のリスクを軽減することができるが、適切な出発用量を判断するのは難しく、治療効能が削減され得る。ＣＲＳを抑制するために以前に試験された他の手段は、理想には程遠い。例えば、メチルプレドニゾロンなどのコルチコステロイドは、軽度および中等度のＣＲＳを有する患者において使用されてきたが、ＣＡＲ−Ｔ細胞効能に影響する。上述のように、ＩＬ−６受容体抗体指向性療法は、より最近ＣＡＲ−Ｔ療法におけるＣＲＳを抑制するのに好ましいと提言されているが、そのような組換え生物製剤の使用には、高い関連費用がかかる。本発明は、ＣＡＲ−Ｔ細胞の通常の主要な必要とされる作用部位、例えば、血液悪性腫瘍に対する全身とは別に、ＣＲＳの望ましくない合併症の発生に関する重要部位であると予測され得るＧＩ管において、ＮＦＡＴを発現する活性化Ｔ細胞を有利に標的化する。さらに、本発明は、ＧＩ管への投与のために製剤化されるＮＦＡＴ活性化の阻害剤、好ましくは、例えば、シクロスポリンＡを用いて、ＮＦＡＴ活性化の阻害剤の日常的な予防的使用でさえ妥当にすることができる。対照的に、現在、ＣＡＲ−Ｔ療法および他のＴ細胞療法と関連するＣＲＳは通常、ＣＲＳが重度であると考えられる場合に、例えば、ステロイド処置と共に介入を目的としたモニタリングの唯一の対象である。
【００６０】
ＣＡＲ−Ｔ療法は、任意の疾患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原を標的化することができる。例えば、ＣＡＲ療法は、炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡＩＸ）、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４４（特にバリアント７／８）、ＣＤ１２３、ＣＤ１３８、癌胎児抗原（ＣＥＡ）、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ｅｒｂ−Ｂ２、ｅｒｂ−Ｂ３、ｅｒｂ−Ｂ４、ＷＴ１、ｃ−Ｍｅｔ、ＦＡＢ、ＧＤ２、ＧＤ３、メラノーマ抗原ファミリーＡ１（ＭＡＧＥ−Ａ１）、タンパク質ｍｅｌａｎ−Ａ（Ｔ細胞１によって認識されるメラノーマ抗原またはＭＡＲＴ−１）、糖タンパク質１００（ｇｐ１００）、メソテリン、ムチン１、細胞表面関連（ＭＵＣ１）、ＮＹ−ＥＳＯ１、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、Ｌ１細胞接着分子（Ｌ１ＣＡＭ；ＣＤ１７１）、ＭＵＣ１６（ｅｃｔｏ）、ＲＯＲ１、ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＫＤＲ（腫瘍新血管系）、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−３０、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ｋ−軽鎖、ＴＮＦＲＳＦ１７（ＢＣＭＡ；ＣＤ２６９、ＳＬＡＭファミリーメンバー７（ＳＬＡＭＦ７またはＣＳ１））およびエプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）抗原から選択される抗原を標的化することができる。ＣＡＲのさらなる例としては、「Ｉｎ−ｃｅｌｌ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ：ｌｏｏｋｉｎｇ  ｆｏｒｗａｒｄ」、Ｃｏｒｒｉｇａｎ−Ｃｕｒａｙら、Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．２０１４  Ｓｅｐ；２２（９）：１５６４〜７４および「ｃｈｉｍｅｒｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｔｏ  ｔａｒｇｅｔ  ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ」、Ｋｅｎｄｅｒｉａｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１４  Ｎｏｖ  １５；７４（２２）：６３８３〜９に記載のものが挙げられる。
【００６１】
ＣＡＲ−Ｔ療法は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、およびＣＤ１２３から選択される抗原を標的化してもよい。
【００６２】
自己ＣＡＲ−Ｔ療法
療法は、例えば、ＣＤ１９  ＣＡＲ１、ＫＴＥ−Ｃ１９  ＣＡＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ  ＣＡＲ、ＪＣＡＲ０１５（ＣＤ１９）、ＪＣＡＲ０１７（ＣＤ１９）、ＪＣＡＲ０１４（ＣＤ１９）、ＢＰＸ−４０１（ＣＤ１９）ＣＢＭ−Ｃ１９．１、ＣＡＲ−Ｔ  ＣＤ１９、ＣＴＬ１０９（ＣＤ１９）ＪＣＡＲ０１８（ＣＤ２２）、ＪＣＡＲ０２３（Ｌ１−ＣＡＭ）、ＪＴＣＲ０１６（ＷＴ−１）、ＭＵＣ１６、例えば、ＩＬ−１２分泌、ＭＵＣ−１６（ｅｃｔｏ）ＣＡＲ  Ｔ細胞に対するＣＡＲ−Ｔ、ＣＡＲ−Ｔに対するＲＯＲ１、ＢＰＸ−６０１（前立腺幹細胞抗原、またはＰＳＣＡ、ＢＢ２１２１を過剰発現する固形腫瘍の処置のために開発中であるＣＡＲ  Ｔ生成物（腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーメンバー１７（ＴＮＦＲＳＦ１７；ＢＣＭＡ；ＣＤ２６９）に対するＣＡＲ−Ｔ細胞療法）、ＣＡＲ−Ｔ  ＣＤ３０（ＣＤ３０抗原に特異的なＣＡＲ  Ｔ細胞）、ＣＡＲ−Ｔ  ＥＧＦＲおよびＣＡＲＴ−ｍｅｓｏ（メソテリンに対するＣＡＲ−Ｔ細胞）から選択される自己ＣＡＲ−Ｔであってもよい。
【００６３】
同種異系ＣＡＲ−Ｔ療法
療法は、例えば、ＵＣＡＲＴ１９、ＵＣＡＲＴ１２３、ＵＣＡＲＴ３８、ＵＣＡＲＴＣＳ１およびＥＢＶ−ＣＴＬから選択される同種異系ＣＡＲ−Ｔ療法であってもよい。
【００６４】
免疫チェックポイント遮断療法
免疫チェックポイント遮断療法は、自己Ｔ細胞であるが、この場合、非改変Ｔ細胞によって媒介される別の形態の療法である；１つまたは複数の公知のＴ細胞阻害経路を阻害するために、１つまたは複数の薬剤、例えば、抗体が用いられる。
【００６５】
慢性ウイルス感染におけるＴ細胞消耗は、そのような経路の動作によって媒介されるＴ細胞消耗と関連することが長く知られてきた。ＰＤ−１およびＬＡＧ−３、２Ｂ４およびＴｉｍ−３などの他の阻害受容体は、少なくとも部分的には、相乗的に作用し、非冗長シグナリング経路によってＴ細胞消耗の確立に寄与する。このように阻害受容体により媒介される消耗は、環境中のリガンドの利用可能性によって「調整」される。さらに、確立された進行がん関連におけるＴ細胞は、腫瘍微小環境中の高い腫瘍抗原量および免疫抑制因子のため、慢性感染において観察されるものと類似する消耗状態を示すことが現在では公知である。ヒト腫瘍ならびに実験腫瘍モデルから単離されたＴ細胞は、慢性感染における消耗したＴ細胞の多くの表現型特性および機能的特性を共有する：腫瘍浸潤性ＣＤ８  Ｔ細胞は、エフェクターサイトカインの生成が低下し、ＰＤ−１、ＬＡＧ−３、２Ｂ４、ＴＩＭ−３、ＣＴＬＡ−４を含む阻害受容体を発現し、消耗したＴ細胞について記載されたシグナリング経路の変化を示す。
【００６６】
この背景に対して、負のチェックポイント受容体の遮断、特にＰＤ−１：ＰＤ−Ｌ１相互作用および抗ＣＴＬＡ抗体の抗体遮断が、がんの処置のための非常に有望な手法として浮上してきた。ＣＴＬＡ−４遮断モノクローナル抗体であるイピリムマブは、メラノーマの処置のための初めてＦＤＡに認可されたがん免疫療法であった。しかしながら、ＰＤ−１および／またはＣＴＬＡ−４遮断によるＴ細胞低応答性の逆転が費用：有害免疫毒性で起こり、いくらかの重篤および致死的でさえあるものがいくらかの患者において観察された（ＳｃｈｉｅｔｉｎｇｅｒおよびＧｒｅｅｎｂｅｒｇ（２０１４）  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５、５１〜６０）。進行したメラノーマを有する合計１３５人の患者における抗ＰＤ−１モノクローナル抗体ラムブロリズマブの臨床試験により、一般的な有害事象が主に軽度であると指定される有望な結果が報告された。しかしながら、この試験では、サイトカインの過剰生成と一致する有害症状およびＧＩ管炎症と一致する症状が観察された（Ｈａｍｉｄら（２０１３）Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６９、１３４〜１４４）。しかしながら、そのような有害症状はＴ細胞低応答性の逆転の固有のリスクであり、完全に除去するか、または重症度に関して予測することが困難であることを念頭に置く必要がある。本発明は、ＧＩ管へのＮＦＡＴ活性化の阻害剤、特に、例えば、シクロスポリンＡの投与によってこのリスクを管理する有利な手段として想定される。重要なことに、そのような投与は、がんに取り組むための、特に血液悪性腫瘍の治療標的化関連における比較的高価な生物製剤の治療利益を台無しにすることなく、そのようなリスクの予防的管理を現実的で費用効果的な選択肢にすることができる。
ＮＦＡＴの阻害剤を含む組成物と共に使用することができるチェックポイント阻害剤の例としては、例えば、抗ＰＤ−１／抗ＰＤ−Ｌ１阻害剤；リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ３；ＣＤ２２３）を標的化する抗体；糖質コルチコイド誘導性腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）関連タンパク質（ＧＩＴＲ；ＴＮＦＲＳＦ１８）／Ｔｒｅｇ刺激因子を標的化する抗体；抗ＣＴＬＡ−４受容体阻害剤；および抗ＴＩＭ−３受容体阻害剤が挙げられる。
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、例えば、ＲＥＧＮ２８１０、Ｏｐｄｉｖｏ（ニボルマブ、ＰＤ−１に対するヒトＩｇＧ４  ｍＡｂ）、ＰＤ−１に対するヒト化ＩｇＧ４  ｍＡｂであるＫｅｙｔｒｕｄａ（ペンブロリズマブ）、ＰＤ−Ｌ１を標的化するヒトＩｇＧ１  ｍＡｂであるＭＥＤＩ４７３６、抗ＰＤ−Ｌ１抗体であるＭＰＤＬ３２８０ＡおよびＰＤＲ００１（ＰＤＲ１）であってもよい。
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、例えば、抗体標的化リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ３；ＣＤ２２３）、例えば、ＬＡＧ５２５であってもよい。
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、例えば、Ｙｅｒｖｏｙ（イピリムマブ、ＣＴＬＡ−４受容体に対するヒトｍＡｂ）およびＣＴＬＡ−４（ＣＤ５２）に対するヒトｍＡｂであるトレムリムマブから選択される抗ＣＴＬＡ−４受容体阻害剤であってもよい。
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、例えば、抗ＴＩＭ−３受容体阻害剤、例えば、ＭＢＧ４５３であってもよい。
【００６７】
Ｔｈ−１７関連サイトカイン遺伝子ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７ＦならびにＩＬ−２３に対するリンパ系細胞の応答性と、潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患を含む炎症疾患の病因とを関連付ける多くの証拠があることも現在注目に値する（Ｇｅｒｅｍｉａら（２０１１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０８、１１２７〜１１３３；Ｌｉｕら（２００９）Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１５、５７８４〜５７８８）。結腸直腸がんの場合、化学療法は、高レベルのＩＬ−１７Ａを分泌するように間質細胞を誘導すると報告されており、ＩＬ−１７Ａ／Ｆを生成するヘルパーＴリンパ球（Ｔｈ１７細胞）の分化を誘導するための重要な転写因子であるＲＯＲｙｔの経口低分子アンタゴニストの開発において注目に値することでもある。そのようなＲＯＲｙｔアンタゴニストは、様々なＴｈ１７細胞炎症疾患の処理における使用についてＶｉｓｉｏｎａｒｙ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによって現在開発されている。さらに、シクロスポリンＡは、Ｔｈ１７細胞およびＩＬ１７生成の減弱によってステロイド耐性炎症状態の処置において臨床効能を有することが以前に示唆されている（Ｓｃｈｗｅｉｚ−Ｂｏｗｅｒｓら（Ｍａｒｃｈ  ２０１５）ＰＮＡＳ  ４０８０〜４０８５）。したがって、ＧＩ管への経口送達のために製剤化された本発明によるＮＦＡＴ活性化の阻害剤、特にシクロスポリンＡの使用は、ＧＩ炎症と関連するＧＩ管における局所的な症状、例えば、炎症性腸疾患、例えば、大腸炎と関連する症状を軽減または防止するのに、単独でまたはＲｏＲｙｔアンタゴニストと組み合わせて有用であると考えられる。
【００６８】
また、腸上皮細胞（ＩＥＣ）アポトーシスが潰瘍性大腸炎に寄与すると報告され、炎症性サイトカインＴＮＦを標的とする療法がＩＢＤを有する患者におけるＩＥＣアポトーシスを阻害することがわかったことも注目に値する（Ｑｉｕら（２０１１）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１２１、１７２２〜１７３２）。これは、ここで提唱されるＮＦＡＴ活性化の阻害剤の使用の有効性に寄与し得る。
【００６９】
さらに、本発明により企図されるＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介されるある特定の療法は、ＧＩＴにおいてアポトーシスを引き起こす。ＧＩＴにおける細胞アポトーシスは、症状的には下痢および炎症として現れ得る。上記段落と同様、本発明の組成物は、ＧＩＴにおけるアポトーシスを阻害し、療法の有効性にさらに寄与する。
【００７０】
本発明と関連する目的のＴ細胞療法は、アロ−ＨＣＴ処置に対する架橋療法として用いられることが多い。本発明の重要な利点は、それを用いて、治療的ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞と関連して生じる望ましくない効果を処置する（改善する、または防止する）ことができ、次いで、同じ組成物の投与を継続して、アロ−ＨＣＴ処置のその後の実施と共に、ＧｖＨＤを改善または防止することができることが認識される。したがって、本発明は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法（任意選択で、Ｔ細胞療法、好ましくは、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法）と関連して生じる望ましくない効果を処置する使用のため、およびその後のアロ−ＨＣＴ療法におけるＧｖＨＤを処置する使用のための、ＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物を企図する。望ましくない効果を、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）ならびに胃腸炎症と関連する、例えば、潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患と関連する症状から選択することができる。組成物を胃腸管に投与し、それによって、療法の有効性を維持しながら、１つまたは複数の望ましくない効果を軽減または防止する。
【００７１】
アロ−ＳＣＴと関連するコンディショニング化学療法および／または放射線療法は、残存するＣＡＲ−Ｔ細胞を根絶するであろう。しかしながら、多くの患者における注入されたＣＡＲ−Ｔ細胞の寿命は３カ月未満であることを考慮すると、ＣＡＲ−Ｔ細胞機能の喪失の間接的尺度であるＢ細胞回復後までアロ−ＳＣＴを自制することにより、患者は確実に、悪性Ｂ細胞のＣＡＲ  Ｔ細胞媒介性殺傷の完全な利益を得ることができる。処置された少数の患者のうち、適格患者の７０％がＣＡＲ−Ｔ細胞療法後にアロ−ＳＣＴを受けたが、現在まで再発は報告されておらず（２〜２４カ月のフォローアップ）、これは、アロ−ＳＣＴへの橋渡しとしての養子ＣＡＲ−Ｔ細胞療法の可能性を支持し、処置選択肢が少ないか、全くない患者にとってこの疾患の臨床転帰を改善する。
【００７２】
本発明はさらに、アロ−ＳＣＴ手順中の、およびそれを超えての使用のためのものであってもよい。
【００７３】
Ｔ細胞を活性化し、活性化機構の少なくとも一部がＮＦＡＴ活性化によるものである生物製剤を用いる処置に対する前駆として、本発明を有利に使用することができる。
【００７４】
また、本発明は、療法（任意選択で、Ｔ細胞エンゲージング療法（例えば、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法））の反復注入と共に使用するため；他の手順との組合せである療法（例えば、ＣＡＲ−Ｔ細胞療法）と共に使用するため；予防剤としての使用のため；疾患の負担が大きい患者に投与される療法における使用のため；ＩＬ−６を含む全身性刺激因子との組合せである療法と共に使用するためのものであってもよい。
【００７５】
高い全身腫瘍組織量とも呼ばれる高い疾患負担は、一般的には進行がん、例えば、ステージＩ、ステージＩＩ、ステージＩＩＩまたはステージＩＶのがんを有する患者を指す。高い疾患負担は当業者には周知であり、例えば、骨髄中の芽細胞が４０％を超える、５０％を超える、６０％を超える、または７０％を超える患者と定義することができ、任意選択で、芽細胞はＢ細胞リンパ芽球である。高い疾患負担はまた、Ｕｎｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（ＵＩＣＣ）およびＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｉｎｔ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ（ＡＪＣＣ）によって受け入れられたようなＴＮＭシステムを使用して好適に定義することもできる。ＴＮＭシステムは、原発腫瘍のサイズおよび／または程度（範囲）（Ｔ）、近隣リンパ節（Ｎ）への拡散量（Ｎ）、ならびに転移の存在（Ｍ）に基づくものである。例えば、高い疾患負担は、腫瘍、様式、転移（ＴＮＭ）ステージングシステムにおいてＴ２、３、もしくは４、および／またはＮ１、２もしくは３；および／またはＭ１と定義されるがんを有する患者であってもよい。例えば、高い全身腫瘍組織量を、Ｔ４  Ｎ３  Ｍ１、Ｔ４  Ｎ３  Ｍ０、Ｔ４  Ｎ２  Ｍ１、Ｔ４  Ｎ１  Ｍ１、Ｔ４  Ｎ２  Ｍ０、Ｔ４  Ｎ１  Ｍ０、Ｔ３  Ｎ３  Ｍ１、Ｔ３  Ｎ３  Ｍ０、Ｔ３  Ｎ２  Ｍ１、Ｔ３  Ｎ１  Ｍ１、Ｔ３  Ｎ２  Ｍ０、Ｔ３  Ｎ１  Ｍ０、Ｔ２  Ｎ３  Ｍ１、Ｔ２  Ｎ３  Ｍ０、Ｔ２  Ｎ２  Ｍ１、Ｔ２  Ｎ１  Ｍ１、Ｔ２  Ｎ２  Ｍ０またはＴ２  Ｎ１  Ｍ０であるがんと定義することができる。
【００７６】
上記のことは、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞が疾患に立ち向かうために利用されるまさにいくつかの方法を示している。例えば、消耗したＴ細胞におけるＡＰ−１シグナリングのレスキューなど、多くのことが検討中である（Ｍａｒｔｉｎｅｚら（２０１５）、同書）。また、腫瘍微小環境中で生成されたＶＥＧＦ−Ａが、ＶＥＧＦ−Ａ／ＶＥＧＦＲを標的化する薬剤によって復帰させることができる、ＣＤ８＋Ｔ細胞消耗に関与するＰＤ−１および他の阻害的チェックポイントの発現を増強することも見出されている（Ｖｏｒｏｎら（Ｊａｎｕａｒｙ  ２０１５）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２１２、１３９〜１４８）。しかしながら、Ｔ細胞の活性化に依拠する任意のそのような療法が、患者における望ましくない有害事象、最も顕著には、ＣＲＳおよび胃腸炎症と関連する症状を同時に生じることなく、有効な治療効果の獲得間の平衡作用に依拠することがさらに示されている。
【００７７】
望ましくない効果
本発明の組成物によって処置されるＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる望ましくない効果は、サイトカイン放出症候群または胃腸炎症と関連する症状である。任意選択で、症状は、本明細書に開示されるもののいずれかなどの炎症性腸疾患と関連してもよい。胃腸（ＧＩ）炎症は、活性化されたＴ細胞活性によって引き起こされてもよく、任意選択で、ＧＩ炎症は、放射線または化学療法を受けた患者において活性化されたＴ細胞活性によって引き起こされる。したがって、ＧＩ炎症は、放射線または化学療法誘導性損傷がある、またはない患者において活性化されたＴ細胞活性によって引き起こされてもよい。
【００７８】
上記に示されたように、ＣＲＳは、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞の活性と関連するよく認識された望ましくない免疫有害事象である。それは重症度において大きく異なり得る。介入を望ましいものにする問題のあるＣＲＳを、診断のための以下の基準と同一視することができる：（ｉ）発熱、特に３日以上連続して持続する発熱、（ｉｉ）主要な７種の関連するサイトカイン（ＩＦＮ−γ、ＩＬ−６、Ｆｌｔ−３Ｌ、フラクタルキン、ＩＬ−５、ＩＬ−１０おおびＧＭ−ＣＳＦ）のうちの少なくとも１種のレベルの上昇、（ｉｉｉ）高血圧および低酸素症（９０％未満のＰＯ２）などの毒性の少なくとも１つの臨床徴候。神経学的変化を観察してもよい。例えば、主要な７種のＣＲＳ関連サイトカインのうちの２つのレベルの７５倍の上昇または１種のそのようなサイトカインの２５０倍の上昇は、ＣＲＳ診断のための重要な尺度であってよい。より最近では、重篤なＣＲＳを有する患者が、ＣＲＳを有さない、または問題のあるＣＲＳを有さない患者と比較した場合、血清中の２０ｍｇ／ｄｌ以上のＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のレベルの増加を一貫して示すことが観察された。したがって、約２０ｍｇ／ｄｌ以上のＣＲＰは、重度のＣＲＳの血清バイオマーカーであると提唱されている［Ｐａｔｅｌら（２０１４）Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ６、６７５〜６７８］。このように上昇した血清ＣＲＰは、本発明によるＮＦＡＴ活性化の阻害剤を投与するため、または例えば、予防的に投与される場合、ＧＩ管へのその投与の有効性をモニタリングするための、単独でまたは上記の他の診断マーカーと組み合わせて、有用なマーカーであってよい。
【００７９】
ＣＲＳは、以前に示されたように、関心のある原理的または唯一の望ましくない効果であることが多いが、胃腸炎症の症状を、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法の望ましくない効果であると予測することもできる。そのような症状は、過敏性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、胃腸炎、十二指腸炎、空腸炎、回腸炎、消化性潰瘍、回腸嚢炎、カーリング潰瘍、虫垂炎、大腸炎、偽膜性大腸炎、憩室症、憩室炎、コラーゲン蓄積大腸炎、任意選択で、ＧＩＴから生じる全身性炎症、結腸直腸癌および腺癌から選択される状態と同一視するか、またはそれと関連してもよい。本発明は、潰瘍性大腸炎またはクローン病の症状を軽減または防止するのに特に応用することができる。
【００８０】
本発明は、以下でさらに発展されるように、機能的ＮＦＡＴ発現が存在するＴ細胞によって媒介される様々な療法のいずれかとの関連においてそのような望ましくない効果を軽減または防止することに適用可能である。そのような療法は、Ｔ細胞活性化が１つを超える手段、例えば、標的抗原にキメラ抗原受容体を提示するＴ細胞を、免疫チェックポイント遮断のための手段、例えば、抗ＰＤ１抗体と組み合わせることによって促進される組合せ療法であってもよい。
【００８１】
本発明は、Ｔ細胞の表面にある受容体を介して標的疾患抗原に直接または間接に結合した場合にＴ細胞が活性化される、任意の形態のＴ細胞エンゲージング療法が用いられる場合は、いつでも応用することができる。この受容体は、例えば、標的抗原、例えば、目的の同定された腫瘍抗原の一部を含むワクチンによって活性化される、天然のＴ細胞受容体、または例えば、腫瘍抗原に対する改変されたＴ細胞受容体であってもよい。受容体は、Ｔ細胞抗原と、疾患抗原、例えば、腫瘍抗原との両方に結合する二特異的抗体であってもよい。そのような二特異的抗体の構築は周知であり、連結された抗体断片、例えば、組み合わせたｓｃＦｖの使用を含む。しかしながら、本発明によるＮＦＡＴ活性化の阻害剤を含む組成物の投与は、自己ＣＡＲ−Ｔ療法と同種異系ＣＡＲ−Ｔ療法の両方であるＣＡＲ−Ｔ療法、特に血液悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）および急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）に取り組むことを目的とするそのような療法との関連で特に関心をもって見られる。
【００８２】
そのような療法では、標的抗原のための受容体は、膜貫通ドメインおよびＴ細胞刺激ドメイン、一般的には正常なＴ細胞活性化にとって必要とされるＣＤ３−ゼータドメインならびに少なくとも１つの共刺激ドメイン、例えば、ＣＤ２８および／または４−１ＢＢシグナリングドメインにスペーサーによって連結された、一般的には抗体、例えば、ＳｃＦｖに由来する細胞外抗原結合部分を含む、Ｔ細胞によって提示される操作されたキメラ受容体である。例えば、ＣＤ２８共刺激およびＣＤ３−ゼータ鎖シグナリングドメインと融合した抗ＣＤ１９モノクローナル抗体由来ＳｃＦｖを含む融合タンパク質を発現するＣＡＲ−Ｔ細胞は、Ｂ−ＡＬＬ患者との関連で多くの注目を集めている。そのような操作されたキメラ受容体は、標的認識においてＨＬＡ制限を考慮する必要性を回避する利点を有し、Ｔ細胞活性化の通常の有益な機構を効率的に利用することが示された；抗原結合はＮＦＡＴ活性化をもたらすことが示された。しかしながら、既に上に述べた通り、ＣＲＳは生命を脅かす結果をもたらし得るそのような療法の明確に実証された、あり得る望ましくない副作用である。
【００８３】
白血病を有する患者においては、注入されたＣＡＲ−Ｔ細胞は、末梢血中の大量のがん細胞に遭遇した後、激しく活性化され得る。ＣＡＲ−Ｔ細胞は増殖し、ＣＲＳを促進するか、またはＣＲＳのリスクを増大させ得る。さらに、ＣＡＲ−Ｔ細胞融合前のプレコンディショニングは、サイトカイン生成によるＣＲＳのリスクをかなり増大させ得る。したがって、炎症性サイトカインのモニタリングは、ＣＡＲ−Ｔ細胞養子療法の実行における標準となっている。用量漸増戦略を用いて、問題のあるＣＲＳ発生のリスクを軽減することができるが、適切な出発用量を判断するのは難しく、治療効能を削減し得る。ＣＲＳを抑制するために以前に試験された他の手段は、理想には程遠い。例えば、メチルプレドニゾロンなどのコルチコステロイドは、軽度および中等度のＣＲＳを有する患者において使用されてきたが、ＣＡＲ−Ｔ細胞効能に影響する。上述のように、ＩＬ−６受容体抗体指向性療法はより最近、ＣＡＲ−Ｔ療法におけるＣＲＳを抑制するのに好ましいと提言されているが、そのような組換え生物製剤の使用には、高い関連費用がかかる。本発明は、ＣＡＲ−Ｔ細胞の通常の主要な必要とされる作用部位、例えば、血液悪性腫瘍に対する全身とは別であるが、ＣＲＳの望ましくない合併症の発生に関する重要部位であると予測され得るＧＩ管において、ＮＦＡＴを発現する活性化Ｔ細胞を有利に標的化する。
【００８４】
上記のように、これは、自己Ｔ細胞を枯渇させるためにプレコンディショニングを実行する場合特にそうであってよい。化学療法および／または放射線療法によるプレコンディショニングは、ＧＩ管における局所炎症と関連し、ナイーブなＴ細胞の活性化Ｔ細胞への分化をもたらす先天性免疫細胞および適応免疫細胞によって前炎症性サイトカインおよびケモカインを生成する。また、ＮＦＡＴは腸管ホーミング受容体α４β７インテグリンを上方調節することも知られている。さらに、本発明は、予防的使用のために、ＧＩ管への投与のために製剤化された化学物質、好ましくは、例えば、シクロスポリンを用いることができる。対照的に、ＣＲＳはＣＡＲ−Ｔ療法と関連し、重度であると考えられる場合、他のＴ細胞療法は介入を目的としたモニタリングの現在、通常唯一の対象である。
【００８５】
したがって、本発明は、療法が患者における自己Ｔ細胞を枯渇させるためのプレコンディショニングレジメンを含む使用のためのものであってもよい。プレコンディショニングは、化学療法および／または放射線療法によるものであってもよい。本発明は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法が化学療法および／または放射線療法プレコンディショニングレジメンを含む、胃腸炎症およびＣＲＳと関連する望ましくない効果を処置するためのものであってもよい。
【００８６】
サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）は、軽度なもの（発熱、悪寒、疲労および頭痛を伴う）から生命を脅かす事例（低血圧、頻脈、肺浮腫、精神状態の変化および発作を伴う）まで幅広く特徴付けることができる。最も重度の事例では、昇圧剤の支援および人工呼吸器が必要である。一般的にはこれらのものは、サイトカインおよびＣＡＲ  Ｔ細胞の同時的上昇と関連する。ＣＲＳ症状は、療法（例えば、ＣＡＲ  Ｔ細胞注入）の投与後早ければ２日で現れ始めてもよい。
【００８７】
サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）は、投与される療法と関連する集団的Ｔ細胞活性化、例えば、その標的抗原によるＣＡＲ−Ｔ細胞の集団的活性化と関連する、発熱、低血圧および神経学的変化を含む臨床毒性のセットである。この症候群と関連する重度の疾患は、より大きい患者集団へのＣＡＲ  Ｔ細胞などの療法の適合化にとって主な臨床制限である。ＣＡＲ  Ｔ細胞などの細胞療法の臨床試験中に観察される毒性としては、低血圧、発熱、疲労、腎不全および鈍麻が挙げられる。サイトカイン上昇は毒性と一致して見られたため、それらはサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）に続発すると考えられる。
【００８８】
ＣＲＳを呈する患者は、検査した３９種のサイトカインの多くが上昇の変化を示した。ＣＲＳは、ＩＬ−２、ＩＦＮ−ｇおよびＩＬ−１０などのサイトカインの上昇を特徴としてもよいが、他のものは予想ほど突出しない；例えば、ＩＬ−１ｂは、マクロファージ、樹状細胞、内皮細胞および肝細胞によって生成され、ＩＬ−１２はマクロファージおよび樹状細胞によって生成される。
【００８９】
望ましくない効果は、ＣＡＲ  Ｔ細胞活性化と関連する、臨床的に有意な、重度のＣＲＳ（ｓＣＲＳ）であってもよい。ｓＣＲＳは、ｉ）少なくとも３日連続の発熱；ｉｉ）２種のサイトカインの、ベースラインからの少なくとも７５倍の最大倍数変化または１種のサイトカインの、ベースラインからの少なくとも２５０倍の最大倍数変化（ＣＲＳを有する患者において共通して上昇することがわかった７種のサイトカインの予め選択された群のうち）；およびｉｉｉ）低血圧（少なくとも１回の静脈内血管作用性昇圧剤を必要とする）、低酸素症（９０％未満のＰＯ２）、または神経障害（精神状態の変化、鈍麻および発作を含む）などの毒性の少なくとも１つの臨床徴候からなると定義される（Ｄａｖｉｌａら）。
【００９０】
ＣＲＳの重症度およびサイトカイン上昇は、ＣＡＲ  Ｔ細胞注入の時点での全身腫瘍組織量と有意に相関する。したがって、本発明は、高い全身腫瘍組織量を有することが知られる対象に、より高用量のＮＦＡＴ阻害剤を投与することを企図する。あるいは、またはさらに、ＮＦＡＴ阻害剤を受ける患者（例えば、本発明の組成物の投与による）は、より高用量の細胞療法（例えば、ＣＡＲ−Ｔ細胞）を受けてもよい。このより高用量の細胞療法は、より高い全身腫瘍組織量と関連してもよいし、またはしなくてもよい（すなわち、より高用量の細胞療法を、処置前の全身腫瘍組織量と関係なく投与することができる）。形態学的に残存する疾患を有さない患者は、少ないか、または検出できないサイトカイン上昇を示したが、ｓＣＲＳを発症した患者は全て、形態学的に残存する白血病を有していた。ＣＲＳの重症度の区別およびいつ毒性を処置するかの決定は、ＣＡＲ  Ｔ細胞の効能を制限し得る時期尚早の不必要な介入を避けるために必須である。
【００９１】
当業者であれば理解できるように、ＮＦＡＴ阻害剤の用量を変更することもできる。投与されるＮＦＡＴ阻害剤の量は、本明細書の他の場所で考察されるものと異なっていてもよい。ＮＦＡＴ阻害剤のタイミングも異なっていてよい。例えば、ＮＦＡＴ阻害剤を、定常的に（例えば、任意選択で、同時に、それぞれの連続する日に）投与するか、またはＮＦＡＴ阻害剤をパルス様式で（例えば、非連続の日に）投与することができる。
【００９２】
ＣＲＰとＣＲＳの重症度との相関が確立され、最も重症の患者は、ＣＲＰの上昇が４０〜５０μｇ／ｍｌに達した。ｓＣＲＳを有する患者または有さない患者における平均ＣＲＰには有意差があった。したがって、ＣＲＰレベルが２０μｇ／ｍｌに達する場合、患者は差し迫った臨床毒性のリスクがあるため、集中的なモニタリングプログラムを開始するべきである。したがって、患者のＣＲＰレベルが５μｇ／ｍｌを超える、１０μｇ／ｍｌを超える、または２０μｇ／ｍｌを超える、例えば、５〜４０μｇ／ｍｌ、１０〜４０μｇ／ｍｌ、５〜３０μｇ／ｍｌ、５〜２０μｇ／ｍｌ、１０〜３０μｇ／ｍｌ、１０〜２０μｇ／ｍｌである場合、本発明の組成物を患者に投与することができる。
【００９３】
本発明は、ＣＲＳまたは同様の応答のリスクを制限しながら、免疫治療効能（例えば、ＣＡＲ−Ｔ機能）および転帰を増強する能力を有するが、予防ならびに介入のためのプロトコールの標準化を可能にする能力も有する処置アルゴリズムの開発を支援する。そのような処置アルゴリズムは、例えば、組合せ療法および／または用量レジメンを含んでもよい。
【００９４】
本発明の組成物は、１つまたは複数の望ましくない効果を軽減または防止するのに使用するためのものである。望ましくない効果を、サイトカイン放出症候群および炎症性腸疾患と関連する症状から選択することができる。組成物は、少なくとも１種のさらなる活性成分、例えば、少なくとも１種の免疫抑制剤を含んでもよい。特に望ましくない効果を、ＣＲＳおよび炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、移植片対宿主疾患、胃腸の移植片対宿主疾患、胃腸炎、十二指腸炎、空腸炎、回腸炎、消化性潰瘍、カーリング潰瘍、虫垂炎、大腸炎、偽膜性大腸炎、憩室症、憩室炎、回腸嚢炎、コラーゲン蓄積大腸炎、顕微鏡的（Ｍａｃｏｒｓｃｏｐｉｃ）大腸炎、下痢性大腸炎、子宮内膜症、結腸直腸癌および腺癌と関連する症状から選択することができる。症状は、直腸炎と関連していてもよい。症状は、原発性硬化性胆管炎、家族性腺腫様ポリープ、または肛門周囲瘻孔を含む肛門周囲クローン病と関連していてもよい。
【００９５】
樹状細胞は、望ましくない効果において役割を果たし得る。本発明の組成物は、樹状細胞中でのＮＦＡＴ活性化を阻害することができる。例えば、療法は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＣＡＩＸからなる融合タンパク質を発現するように改変された樹状細胞である、ＤＣ−Ａｄ  ＧＭ−ＣＡＩＸ（Ｋｉｔｅ  Ｐｈａｒｍａ）などの改変された樹状細胞を含んでもよい。
【００９６】
より一般的には免疫細胞、例えば、先天性免疫および適応免疫細胞が、望ましくない効果において役割を果たし得る。本発明の組成物は、免疫細胞、例えば、樹状細胞などのＧＩＴ中の免疫細胞中でのＮＦＡＴ活性化を阻害することができる。免疫細胞は、療法の一部、例えば、同種異系細胞であってもよく、療法は、前記段落で考察されたものなどの改変された樹状細胞を含んでもよく、または免疫細胞は自己であってもよい。
【００９７】
この態様によるシクロスポリン組成物を、経口投与して、例えば、瞬時放出組成物を提供することができる。また、例えば、浣腸または坐剤の形態でのＧＩ管への組成物の直腸投与も企図される。組成物の他の投与経路も企図され、例えば、組成物を、例えば、十二指腸内投与、空腸内または回腸内投与により、ＧＩＴに直接的に投与することができる。そのような投与経路は、組成物が下部ＧＩ管の特定の地点への送達のために胃（および任意選択で、ＧＩ管の他の部分）をバイパスするのを可能にする。これらの投与経路を、例えば、ＧＩ管内の所望の位置に出口を有する適切なチューブを使用して達成することができる。適切には、チューブは、ＧＩ管中に経口的または鼻内的に挿入される。あるいは、投与を、胃内チューブ、または連続的もしくは不連続的経皮内視鏡胃瘻造設（ＰＥＧ）チューブにより達成することができる。ＰＥＧは、チューブ（ＰＥＧチューブ）が腹壁を通って患者の胃中に通る内視鏡医療手順である。この投与方法は、例えば、嚥下障害または鎮静状態に起因して薬物を経口摂取できない患者にとって特に好適であり得る。
【００９８】
組成物は、固体組成物であってもよい。組成物を腸溶コーティング（例えば、遅延放出ポリマーコーティング、即時放出ポリマーコーティング）でコーティングするか、またはコーティングしなくてもよく、コーティング（またはその非存在）は、ＧＩＴの部位、例えば、小腸および／または結腸で組成物を放出することができる。組成物は、任意選択で、ＮＦＡＴ阻害剤を含む油相を含んでもよい。
【００９９】
組成物はまた、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含んでもよい。組成物は、任意選択で、界面活性剤を含んでもよい。組成物は、任意選択で、油相を含んでもよい。油相は、好ましくは、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散される。本発明の組成物は、任意選択で、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスに分散されている、ＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）およびヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、および／または（好ましくは、および）界面活性剤および／または（好ましくは、および）油相を含む組成物であってもよい。界面活性剤は、本明細書の他の場所で定義される任意の界面活性剤であってもよい。界面活性剤は、任意選択で、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであるか、またはそれを含んでもよく、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれでなくてもよい。組成物は、固体組成物であってもよい。組成物は、乾燥ビーズの形態にあってもよい。組成物は、乾燥コロイドの形態にあってもよい。好ましくは、組成物は、経口投与のためのものである。
【０１００】
任意選択で、ＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相は、コア内に含まれる。したがって、組成物は、コアを含んでもよい。したがって、組成物はコアを含んでもよく、コアは、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているシクロスポリン、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含む。
【０１０１】
コアは、任意選択で、液体コロイドの固体化によって形成される乾燥コロイドであってもよい、すなわち、それは乾燥コロイド組成物であってもよい。組成物は、固体コロイドであってもよいか、または組成物は固体コロイドの形態にあってもよい、すなわち、それは固体コロイド組成物であってもよい。液体コロイドは、ヒドロゲル形成性ポリマーであるか、またはそれを含む連続相と、ＮＦＡＴ阻害剤であるか、またはそれを含む分散相と、油相とを含んでもよく、液体コロイドは、界面活性剤（第１の界面活性剤とも言われる）をさらに含む。
【０１０２】
本発明の固体コロイド組成物は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスであるか、またはそれを含む連続相と、シクロスポリンＡであるか、またはそれを含む分散相と、油相とを含んでもよく、コロイド液体組成物または固体コロイド組成物は、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せを含むか、またはそれであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない界面活性剤（第１の界面活性剤とも言われる）をさらに含む。
【０１０３】
一実施形態では、油相は、ＮＦＡＴ阻害剤の溶液を含む。そのようなものとして、ＮＦＡＴ阻害剤は、油相中に分散されている、例えば、完全に溶解されている、実質的に完全に溶解されている、または部分的に溶解されていてもよい。したがって、油相は、ＮＦＡＴ阻害剤の溶液およびいくらかの溶解されていないＮＦＡＴ阻害剤を含んでもよい。
【０１０４】
ＮＦＡＴ阻害剤は、カルシニューリン阻害剤であってもよい。ＮＦＡＴ阻害剤は、脂質可溶性であってもよい。ＮＦＡＴ阻害剤を、シクロスポリン、シクロスポリン誘導体、タクロリムス誘導体、ピラゾール、ピラゾール誘導体、ホスファターゼ阻害剤、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、毒素、パラセタモール代謝物、真菌フェノール性化合物、冠拡張薬、フェノール性アデイド（ａｄｅｉｄｅ）、フラバノール、チアゾール誘導体、ピラゾロピリミジン誘導体、ベンゾチオフェン誘導体、ロカグラミド誘導体、ジアリールトリアゾール、バルビツレート、抗精神病薬（ペノチアジン）、セロトニンアンタゴニスト、サリチル酸誘導体、プロポリスもしくはポメグラネートに由来するフェノール性化合物、イミダゾール誘導体、ピリジニウム誘導体、フラノクマリン、アルカロイド、トリテルペノイド、テルペノイド、オリゴヌクレオチド、またはペプチドから選択することができる。
【０１０５】
ＮＦＡＴ阻害剤を、シクロスポリン、タクロリムス、Ａ２８５２２２、エンドタール、４−（フルオロメチル）フェニルホスフェートＦＭＰＰ、ノルカンタリジン、チルホスチン、オカダ酸、ＲＣＰ１０６３、ｃｙａ／ｃｙｐａ（シクロフィリンＡ）、ｉｓａ２４７（ボクロスポリン）／ｃｙｐａ、［ｄａｔ−ｓａｒ］３−ｃｙａ、ｆｋ５０６／ｆｋｂｐ１２、アスコミキシン／ｆｋｂｐ１２、ピネクロリムス／ＦＫＢＰ１２、１，５−ジベンゾイルオキシメチル−ノルカンタリジン、ａｍ４０４、ｂｔｐ１、ｂｔｐ２、ジベフリン、ジピリダモール、ゴシポール、ケンペロール、ｌｉｅ１２０、ＮＣＩ３、ＰＤ１４４７９５、Ｒｏｃ−１、Ｒｏｃ−２、Ｒｏｃ−３、ＳＴ１９５９（ＤＬＩ１１１−ｉｔ）、チオペンタール、ペントバルビタール、チアミラール、セコバルビタール、トリフルオペラジン、トロピセトロン、ＵＲ−１５０５、ＷＩＮ５３０７１、カフェイン酸フェニルエチルエステル、ＫＲＭ−ＩＩＩ、ＹＭ−５３７９２、プニカラギン、インペラトリン、キノロンアルカロイド化合物１および３、インプレス酸（ｉｍｐｒｅｓｓｉｃ  ａｃｉｄ）、オレアナントリテルペノイド化合物３、ゴミシンＮ、ＣａＮ４５７−４８２−ＡＩＤ、ＣａＮ４２４−５２１−ＡＩＤ、ｍＦＡＴｃ２１０６−１２１−ＳＰＲＥＩＴ、ＶＩＶＩＴペプチド、Ｒ１１−Ｖｉｖｉｔ、ＺＩＺＩＴ  ｃｉｓ−ｐｒｏ、ＩＮＣＡ１、ＩＮＣＡ６、ＩＮＣＡ２、ＡＫＡＰ７９３３０−３５７、ＲＣＡＮ１、ＲＣＡＮ１−４１４１−１９７−エクソン７、ＲＣＡＮ１−４１４３−１６３−ＣＩＣペプチド、ＲＣＡＮ１−４９５−１１８−ＳＰリピートペプチド、ＬｘＶＰｃ  １ペプチド、ＭＣＶ１、ＶａｃＡ、Ａ２３８Ｌ、およびＡ２３８Ｌ２００−２１３から選択することができる。
【０１０６】
好ましくは、ＮＦＡＴ阻害剤は、シクロスポリンである。本明細書を通して、用語シクロスポリンは、化合物のクラスまたはシクロスポリンＡを指してもよい。好ましくは、シクロスポリンの使用は、シクロスポリンＡに関するものである。
【０１０７】
ＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）は、コアまたは組成物の乾燥重量に対して約５重量％〜約２０重量％、約８重量％〜約１５重量％、または約９重量％〜約１４重量％の量で組成物中に適切に存在する。
【０１０８】
ＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）は、液体組成物の最大で１０重量％、任意選択で、約１重量％〜約１０重量％、約２重量％〜約８重量％、約３重量％〜約６重量％、約３重量％〜約５重量％の量で液体組成物中に適切に存在する。任意選択で、シクロスポリンは、液体組成物の約４重量％で液体組成物中に存在してもよい。
【０１０９】
本明細書に記載の組成物を使用して、ＧＩＴ中の特定の位置に局部的にＮＦＡＴ阻害剤を送達することができる、例えば、本明細書に記載の固体組成物を、少なくとも結腸中でのＮＦＡＴ阻害剤の放出を提供するように適合させることができる。組成物を使用して、活性形態、例えば、可溶化形態でＧＩＴ中に局部的にＮＦＡＴ阻害剤を提供し、それによって、ＧＩＴ内で活性（利用可能）形態にある高濃度のＮＦＡＴ阻害剤を提供し、そこでそれはがんなどの処置される状態に対する治療効果を維持しながら、療法の望ましくない効果を軽減または防止するように作用することができる。活性形態、例えば、可溶化形態でのＮＦＡＴ阻害剤の放出は、高濃度のＮＦＡＴ阻害剤を、結腸などのＧＩＴの局部組織中に直接吸収させることができる。しかしながら、上記のように、ある特定の全身曝露のＮＦＡＴ阻害剤、特にシクロスポリンＡは、いくつかの望ましくない副作用を有する。したがって、ＧＩＴの組織中で治療的に有益な濃度を維持しながら、シクロスポリンへの全身曝露を最小化するシクロスポリンＡ組成物が望ましい。
【０１１０】
また、本発明の組成物を使用して、ＮＦＡＴの全身吸収およびモジュレーションを可能にするＧＩＴの部位にＮＦＡＴ阻害剤を送達することもできる。組成物を使用して、可溶性形態にあるＮＦＡＴ阻害剤を提供し、それによって、活性（利用可能）形態にある高濃度のＮＦＡＴ阻害剤を提供することができる。例えば、組成物を、胃、小腸（十二指腸、空腸もしくは回腸）、大腸（盲腸、結腸、もしくは直腸）またはその組合せの中でＮＦＡＴ阻害剤を放出するように適合させることができる。好ましくは、ＮＦＡＴ阻害剤の全身吸収を、胃および／または小腸（十二指腸、空腸および／もしくは回腸）の中でＮＦＡＴ阻害剤を放出するように適合された組成物を用いて達成することができ、好ましくは、放出は、十二指腸、空腸および／または回腸の中で行われる。
【０１１１】
組成物は、組成物からのシクロスポリンの放出を制御またはモジュレートするためのコーティングを含んでもよい。有利なことに、コーティングは、組成物からのシクロスポリンの即時放出、遅延放出および／または持続放出をもたらすためのポリマーコーティングである。適当なこのようなコーティングは、以下に詳細に記載されており、これらには、制御放出ポリマー、持続放出ポリマー、腸溶性ポリマー、ｐＨ非依存性ポリマー、ｐＨ依存性ポリマー、および胃腸管内の細菌酵素による分解に特異的に感受性のポリマー、または２種もしくはそれ超のこのようなポリマーの組合せから選択されるコーティングであり、またはそれを含むコーティングが含まれる。特定の実施形態では、コーティングは、ｐＨ非依存性ポリマー、例えば、エチルセルロースであり、もしくはそれを含むコーティングであり、またはそれを含む。さらなる具体的な実施形態では、コーティングは、ｐＨ非依存性ポリマー、例えば、エチルセルロース、および任意選択で水溶性多糖、例えば、ペクチンもしくはキトサン、またはこれらの組合せ、特にペクチンであり、あるいはそれを含む。
【０１１２】
一実施形態では、先行する段落で記載されたコーティングは、第２のコーティングとも呼ばれる、外側コーティングである。組成物は、任意選択で、サブコートまたは第１のコーティングと呼ばれる、さらなるコーティングを含んでもよい。第１のコーティングと第２のコーティングのそれぞれのポリマーは異なる。第２のコーティングは、第１のコーティング中に見出されるポリマーを有さないことが多い；例えば、第１のコーティングがヒドロキシプロピルメチルセルロースを含む（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースである）場合、第２のコーティングはヒドロキシプロピルメチルセルロースをも含まない。さらに、第１のコーティングがセルロースエーテルの水溶性エーテルまたはエステルである、またはそれを含む状況が企図される場合、第２のコーティングの主要構成成分（例えば、５０％より多い）は、第１のコーティングのものと異なるポリマーである、またはそれを含む。したがって、第１および第２のコーティングは、適切には、組成物の一部として２層の材料を提供する。第２のコーティングが構成成分の混合物を含む場合、外側の第２のコーティングの少ない方の構成成分はサブコーティングの材料と同じであってもよいことが理解されるべきである。例として、第１のコーティングがＨＰＭＣであるか、またはそれを含み、第２のコーティングがエチルセルロースを含む場合、エチルセルロースは、任意選択で、少量（例えば、５０％、４０％、３０％または２０％未満）の第１のコーティング材料、この例ではＨＰＭＣをさらに含んでもよい。そのような実施形態では、第１のコーティングおよび第２のコーティングは、異なると考えられる。
【０１１３】
医薬組成物が第２のコーティングを含まない実施形態では、望ましくない症状は、小腸に影響する状態と関連してもよい。そのような組成物は、セリアック病またはクローン病から選択される状態と関連する症状を軽減または防止することができる。
【０１１４】
本発明の組成物は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含んでもよい。任意選択で、組成物は、第１のコーティングが上記のおよび本明細書の他の場所に記載される水溶性セルロースエーテルである、またはそれを含む、第１のコーティングをさらに含んでもよい。第１のコーティングに加えて、または第１のコーティングの代わりに、組成物は第２のコーティングを含んでもよい。任意選択で、第２のコーティングは、組成物からの活性成分の放出を制御またはモジュレートするためのコーティング、適切には、ポリマーコーティングである、またはそれを含む。ポリマーコーティングは、本明細書の他の場所にさらに記載されるようなものであってもよい。
【０１１５】
組成物が第１のコーティングと第２のコーティングを含む場合、第２のコーティングは第１のコーティングの外側にあってもよい。
【０１１６】
組成物は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含むコア；第１のコーティングが上記および本明細書の他の場所に記載される水溶性セルロースエーテルである、コアの外側の第１のコーティング；ならびに界面活性剤が本明細書に記載の通りであり、第１のコーティングの外側の第２のコーティングを含んでもよい。本明細書を通して、「コア」は、本明細書に記載の通り、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているシクロスポリン、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤、および油相を含むコアを指してもよい。
【０１１７】
本発明の実施形態によれば、界面活性剤は、任意選択で、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−グリセリド、ジ−グリセリドまたはその組合せであり、第１のコーティングは、水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含み、組成物は、第２のコーティングが組成物からの活性成分の放出を制御またはモジュレートするためのコーティング、適切には、ポリマーコーティングであるか、またはそれを含む、第１のコーティングの外側の第２のコーティングをさらに含む。ポリマーコーティングは、本明細書の他の場所にさらに記載されるものであってもよい。
【０１１８】
第１のコーティングは、適切には、水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含んでもよい。水溶性セルロースエーテルは、任意のセルロースエーテルまたはセルロースエーテルの誘導体、例えば、水に溶解するセルロースエーテルのエステルであってもよい。したがって、水溶性セルロースエーテルは、例えば、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルアルキルセルロース、およびカルボキシアルキルセルロースから選択され得る。適切には、第１のコーティングは、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロース、ならびにこれらの組合せから選択される１種もしくは複数の水溶性セルロースエーテルであり、またはそれを含む。特定の実施形態では、第１のコーティングは、水溶性ヒドロキシプロピルメチルセルロースであり、またはそれを含む。第１のコーティング（サブコート）中に存在する水溶性セルロースエーテルおよびその水溶性誘導体（例えば、セルロースエーテルの水溶性エステル）は、適切には、第１のコーティングの乾燥重量の少なくとも２０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、８０重量％、８５重量％、または９０重量％を形成する。
【０１１９】
本発明によれば、コアがヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているシクロスポリン、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含み、第１のコーティングが水溶性セルロースエーテルを含むか、またはそれであり、第１のコーティングが、コアの０．５重量％〜２０重量％の第１のコーティングのため重量増加と一致する量で存在し、界面活性剤が本明細書に記載のもの、例えば、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない、コアと第１のコーティングとを含む医薬組成物が提供される。
【０１２０】
本発明の第１のコーティングは、組成物からの活性成分の放出を調節する。組成物上のコーティングは組成物内の活性成分の放出速度を減速させることが予想される。組成物をさらなる材料でコーティングすることは、組成物中の活性成分と接触する試験液に対するさらなる障壁を提供するため、当業者はこれを合理的に予想し得る。この予想される結果とは対照的に、本発明の組成物は、コーティングがない組成物と比較して、活性成分の放出速度を増加させる水溶性セルロースエーテルを含む、またはそれであるコーティングを含む。さらに、本発明のコーティングは、活性成分を溶液中に維持する有益な効果を有するが、本発明のコーティングを欠く同等の組成物は、時間が進むにつれて溶液中の活性成分の減少をもたらす。理論によって束縛されることを望むものではないが、コーティングは、溶液からの活性成分の沈降を防止し、それによって、多量の活性剤を溶液中に維持すると考えられる。
【０１２１】
本出願を通して、活性成分、活性剤、および薬学的活性成分は、互換的に使用され、全てＮＦＡＴ阻害剤、任意選択で、シクロスポリン、好ましくは、シクロスポリンＡを指す。
【０１２２】
本発明の組成物は、当業者には公知の任意の形態を取ってもよい。好ましくは、組成物は、経口組成物である。組成物は、単一のミニビーズまたは複数のミニビーズの形態にあってもよい。したがって、本発明は、本発明の複数のミニビーズを提供する。同様に、本発明は、複数のミニビーズを含む単位剤形を含む複数ミニビーズ製剤を提供する。
【０１２３】
本発明はまた、コアがヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含み、第１のコーティングが水溶性セルロースエーテルを含むか、またはそれであり、第１のコーティングが１μｍ〜１ｍｍの厚さを有し、界面活性剤が本明細書に記載のもの、例えば、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない、コアと第１のコーティングとを含む医薬組成物も提供する。
【０１２４】
本発明の医薬組成物はいずれも、本明細書で第２のコーティングと呼ばれる、さらなるコーティングを含んでもよい。第２のコーティングは、第１のコーティングの外側にあってもよい。第２のコーティングは、遅延放出ポリマーであるか、またはそれを含んでもよい。本発明の任意の実施形態および任意の態様では、第１および第２のコーティングは異なってもよい。
【０１２５】
したがって、本発明は、コア、第１のコーティングおよび第１のコーティングの外側の第２のコーティングを含む医薬組成物であって、コアがヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含み、第１のコーティングが水溶性セルロースエーテル（例えば、ＨＰＭＣ）を含むか、またはそれであり、第２のコーティングが遅延放出ポリマー（例えば、エチルセルロース）を含むか、またはそれである、医薬組成物を企図する。
【０１２６】
本発明の任意の態様または実施形態の組成物は、固体コロイドの形態にあってもよい。さらに、組成物のコアは、固体コロイドの形態にあってもよい。コロイドは、連続相と分散相とを含む。コアを形成させるために使用することができる適切な連続相および分散相は、以下および発明の詳細な説明でより詳細に定義される。連続相は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含むか、またはそれであってもよい。したがって、連続相がヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスである場合、本発明の組成物は、分散相を含むヒドロゲル形成性ポリマーの固体単位の形態を取ってもよい。分散相は、連続相、またはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散された液滴であってもよい。分散相は油相を含むか、またはそれであってもよい。
【０１２７】
したがって、本発明は、連続相と分散相とを含む固体コロイドの形態にある組成物であって、連続相がヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含むか、またはそれであり、連続相が油相であるか、またはそれを含み、組成物がＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）および界面活性剤をさらに含む、組成物を提供する。好ましくは、界面活性剤は、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない。油相は、溶液中のシクロスポリンを含んでもよい。
【０１２８】
組成物は、連続相と分散相とを含む固体コロイドの形態にあるコアであって、連続相がヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含むか、またはそれであり、連続相が油相であるか、またはそれを含み、コアがＮＦＡＴ阻害剤および界面活性剤をさらに含む、コアを含んでもよい。油相は、ＮＦＡＴ阻害剤を、任意選択で溶液中に含んでもよい。
【０１２９】
固体コロイド組成物またはコアの連続相は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスであるか、またはそれを含む。実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、親水コロイド、非親水コロイドガムまたはキトサンであるか、またはそれを含む。特定の一実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、ゼラチン、寒天、ポリエチレングリコール、デンプン、カゼイン、キトサン、ダイズタンパク質、ベニバナタンパク質、アルギネート、ゲランガム、カラギーナン、キサンタンガム、フタル酸化ゼラチン、コハク酸化ゼラチン、セルロースフタレート−アセテート、含油樹脂、ポリビニルアセテート、アクリルまたはメタクリルエステルのポリメリセート、およびポリビニルアセテート−フタレート、ならびに上記のいずれかの任意の誘導体；または２種以上のそのようなポリマーの混合物であるか、またはそれを含む。さらなる一実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、カラギーナン、ゼラチン、寒天、およびペクチン、もしくはこれらの組合せから選択され、任意選択でゼラチンおよび寒天、もしくはこれらの組合せから選択される親水コロイドであるか、またはそれを含む。特に、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスのポリマーは、ゼラチンであるか、またはそれを含む。一実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーは、セルロースまたはセルロース誘導体を含まない、例えば、セルロースエーテルを含まない。
【０１３０】
本発明のこの態様では、組成物は、固体コロイドの形態にあってもよく、連続相と分散相とを含むコロイドおよびＮＦＡＴ阻害剤は、溶液中にあるか、または分散相中に懸濁されていてもよい。例えば、シクロスポリンは、分散相中の溶液中にあってもよい。
【０１３１】
上記の個々の実施形態を、１つまたは複数の記載された他の実施形態と組み合わせて、本発明のさらなる実施形態を提供することができることが理解される。
【０１３２】
第１のコーティングは、コアと接触していてもよい。第２のコーティングは、第１のコーティングの上にあってもよい。実施形態では、第１のコーティングはコアと接触し、第２のコーティングは第１のコーティングの上にある。
【０１３３】
第２のコーティングは、遅延放出ポリマーであるか、またはそれを含んでもよく、遅延放出ポリマーは、腸溶性ポリマー、ｐＨ非依存性ポリマー、ｐＨ依存性ポリマーおよび胃腸管中で細菌酵素による分解を特に受けやすいポリマー、または２つ以上のそのようなポリマーの組合せから選択することができる。したがって、第２のコーティングは、上記の遅延放出ポリマーのいずれかであってもよいか、またはいずれかは、以下に記載される遅延放出ポリマーと関連して記載される特徴であるか、もしくはそれを有してもよい。
【０１３４】
実施形態では、遅延放出ポリマーは、６．５より高いｐＨを有する水性媒体中で水溶性または透水性であってもよい。遅延放出ポリマーは、ｐＨ非依存性ポリマー、例えば、エチルセルロースであるか、またはそれを含んでもよい。
【０１３５】
本発明の任意の態様および任意の実施形態では、水溶性セルロースエーテルは、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースのいずれか１つまたはその組合せから選択することができる。水溶性セルロースエーテルは、好ましくは、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）であってもよい。
【０１３６】
実施形態では、第１のコーティングは、ヒドロキシプロピルメチルセルロースであるか、またはそれを含んでもよく、第２のコーティングは、エチルセルロースであるか、またはそれを含んでもよい。
【０１３７】
第１のコーティングの重量増加の開示は、コアの重量％として与えられる。同様に、第２のコーティングの重量増加は、コアの重量％として与えられ、コア上に第１のコーティング（サブコート）は存在しない。組成物が第１のコーティングを含む場合、第２のコーティングの重量増加は、第２のコーティングによってコートされる組成物、例えば、コアおよび第１のコーティングの重量％として与えられる。
【０１３８】
ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、親水コロイド、非親水コロイドガムまたはキトサンであるか、またはそれを含んでもよい。ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、可逆性親水コロイド、例えば、熱可逆性親水コロイドまたは熱可逆性ヒドロゲル形成性ポリマーであってもよい。あるいは、ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、不可逆性親水コロイドであるか、またはそれを含んでもよい。ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、ゼラチン、寒天、ポリエチレングリコール、デンプン、カゼイン、キトサン、ダイズタンパク質、ベニバナタンパク質、アルギネート、ゲランガム、カラギーナン、キサンタンガム、フタル酸化ゼラチン、コハク酸化ゼラチン、セルロースフタレート−アセテート、含油樹脂、ポリビニルアセテート、アクリルまたはメタクリルエステルのポリメリセート、およびポリビニルアセテート−フタレート、ならびに上記のいずれかの任意の誘導体；または１つもしくはそれ以上のそのようなヒドロゲル形成性ポリマーの混合物であるか、またはそれを含んでもよい。ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、カラギーナン、ゼラチン、寒天、およびペクチン、もしくはこれらの組合せから選択され、任意選択でゼラチンおよび寒天、もしくはこれらの組合せから選択される親水コロイドであるか、またはそれを含んでもよく、さらに任意選択で、ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、ゼラチンであるか、またはそれを含む。ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、任意選択で、アルギン酸の架橋塩から選択される非親水コロイドガムであるか、またはそれを含む。好ましい実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、ゼラチンであるか、またはそれを含む。
【０１３９】
実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、可塑剤、任意選択で、グリセリン、ポリオール、例えば、ソルビトール、ポリエチレングリコールおよびクエン酸トリエチルまたはその混合物、特にソルビトールから選択される可塑剤をさらに含む。
【０１４０】
ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、ＮＦＡＴ阻害剤を封入してもよい。ＮＦＡＴ阻害剤は、溶液中に封入されていてもよい。シクロスポリンは、溶液中にあるか、または別の構成成分、例えば、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスにより封入されている組成物の、他の場所に考察される油相もしくは分散相中に懸濁されていてもよい。
【０１４１】
分散相は、固体、半固体、または液体であってもよい。特に、分散相は、液体であってもよい。他の特定の事例では、分散相は、半固体であってもよく、例えば、これは、ワックス状であってもよい。
【０１４２】
分散相は、油相であるか、またはそれを含んでもよく、例えば、油相は、固体、半固体または液体であってもよい。適切には、分散相または油相は、液体脂質および任意選択で、それと混和する溶媒であるか、またはそれを含む。液体脂質は、任意選択で、中鎖モノ−、ジ−またはトリグリセリド（特に、中鎖トリグリセリド）である。
【０１４３】
ＮＦＡＴ阻害剤は、分散相中に溶解され得る。ＮＦＡＴ阻害剤は、分散相中に懸濁されてもよい。分散相は、本明細書の他の場所で記載された通りであり得、例えば、これは、直前の２つの段落中に記載された通りであり得る。
【０１４４】
油相または分散相は、液体脂質であるか、またはそれを含んでもよい。特に、油相または分散相は、短鎖、中鎖もしくは長鎖トリグリセリド製剤、またはその組合せ、例えば、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、すなわち、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド製剤を含むか、またはそれであってもよい。
【０１４５】
したがって、一実施形態では、組成物は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されている、シクロスポリン、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および短鎖、中鎖もしくは長鎖トリグリセリド製剤、またはその組合せ（任意選択で、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、すなわち、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド製剤）を含む油相を含む。組成物は、乾燥コロイドの形態にあってもよい。組成物は、ビーズの形態にあってもよい。
【０１４６】
特定の実施形態では、分散相または油相は、溶媒をさらに含み、したがって、任意選択で、分散相または油相は、液体脂質および溶媒であるか、またはそれを含んでもよい。溶媒は、液体脂質および水と混和性であってもよく、任意選択で、溶媒は２−（２−エトキシエトキシ）エタノールおよびポリ（エチレングリコール）から選択され、特に、溶媒は、２−（２−エトキシエトキシ）エタノールである。さらなる一実施形態では、分散相または油相は、中鎖モノ−、ジ−またはトリグリセリド（特に、中鎖トリグリセリド）、２−（エトキシエトキシ）エタノールおよび界面活性剤であるか、またはそれを含む。本段落で記載された分散相または油相は、シクロスポリンを含有してもよく、シクロスポリンは、任意選択で、溶液中にあってもよい。
【０１４７】
適切には、ＮＦＡＴ阻害剤は、溶媒中に可溶性である。溶媒は、アルコール（例えば、エタノールもしくはイソプロパノール）、グリコール（例えば、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコール）またはグリコールエーテルであってもよい。溶媒は、グリコールエーテル、例えば、エチレングリコールエーテル、より具体的には、アルキル、アリールまたはアラルキルエチレングリコールエーテルであってもよい。溶媒は、２−メトキシエタノール；２−エトキシエタノール；２−プロポキシエタノール；２−イソプロポキシエタノール；２−ブトキシエタノール；２−フェノキシエタノール；２−ベンジルオキシエタノール；２−（２−メトキシエトキシ）エタノール；２−（２−エトキシエトキシ）エタノール；および２−（２−ブトキシエトキシ）エタノールから選択されるグリコールエーテルであってもよい。より具体的には、溶媒は、２−（２−エトキシエトキシ）エタノールまたは２−フェノキシエタノールである。特定の溶媒は、２−（２−エトキシエトキシ）エタノールである。
【０１４８】
好ましくは、油相または分散相は、短鎖、中鎖もしくは長鎖トリグリセリド製剤、またはその組合せ（任意選択で、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、すなわち、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド製剤）を含む。油相または分散相が短鎖、中鎖もしくは長鎖トリグリセリド製剤、またはその組合せを含む場合、トリグリセリドは、実質的に全ての分散相または油相（任意選択で、液体脂質）である。例えば、油相または分散相は、油相または分散相（任意選択で、液体脂質）の８０％より多い量、任意選択で、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％または９９％より多い量の短鎖、中鎖もしくは長鎖トリグリセリド製剤を含んでもよい。適切には、短鎖、中鎖もしくは長鎖トリグリセリド製剤は、モノ−またはジ−グリセリドを実質的に含まない。例えば、界面活性剤は、１０％、８％、５％、３％、２％または１％未満のモノ−またはジ−グリセリドを含んでもよい。
【０１４９】
実施形態では、組成物は、１種または複数のさらなる界面活性剤、好ましくは、１種のさらなる界面活性剤をさらに含む。さらなる界面活性剤は、本明細書に開示される界面活性剤の任意のものであってもよい。さらなる界面活性剤は本明細書を通して第２の界面活性剤またはさらなる界面活性剤と呼んでもよく、これらの用語は、互換的に使用される。
【０１５０】
第２の界面活性剤のための適切な界面活性剤は、発明の詳細な説明中により詳細に記載される。好ましくは、第２の界面活性剤は、陰イオン性界面活性剤である。例えば、第２の界面活性剤は、硫酸アルキル、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムであってもよい。
【０１５１】
液体組成物がコロイドの形態にあるこれらの実施形態では、組成物は固体コロイドの形態にあるか、または組成物は固体コロイドの形態のコアを含み、コロイドは連続相と分散相とを含み、連続相はヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含み、第２の界面活性剤は連続相、分散相またはその両方の中に存在してもよい。好ましくは、第２の界面活性剤は連続相中に存在し、第１の界面活性剤は分散相中に存在する。したがって、液体組成物の水相は第２の界面活性剤を含んでもよく、油相は第１の界面活性剤を含んでもよい。一実施形態では、コアは、少なくとも連続相中に存在する１種のさらなる界面活性剤をさらに含み、界面活性剤は１０より高い、例えば、２０より高いＨＬＢ値を有する。
【０１５２】
組成物は、分散相を連続相と混合してコロイドを形成させることによって形成される組成物の特徴を有してもよく、連続相はヒドロゲル形成性ポリマーを含む水相であり、分散相は油相であり、薬学的活性成分は連続相または分散相中にあり、コロイドはゲル化されて組成物を形成する。したがって、組成物は、固体コロイドの形態にある。
【０１５３】
さらに、組成物は、分散相を連続相と混合してコロイドを形成させることによって形成されるコアの特徴を有するコアを含んでもよく、連続相はヒドロゲル形成性ポリマーを含む水相であり、分散相は油相であり、薬学的活性成分は連続相または分散相中にあり、コロイドはゲル化されてコアを形成する。したがって、コアは、固体コロイドの形態にある。
【０１５４】
組成物またはコアは、シクロスポリン、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含み、
（ｉ）水性液体中にヒドロゲル形成性ポリマーを溶解させて水相溶液を形成することと、
（ｉｉ）油相中にＮＦＡＴ阻害剤を溶解させて溶液を形成することと、
（ｉｉｉ）水相溶液（ｉ）と油相溶液（ｉｉ）とを混合してコロイド（任意選択で、エマルジョン）を形成することと、
（ｉｖ）ノズルを通じてコロイドを射出して液滴を形成することと、
（ｖ）ヒドロゲル形成性ポリマーをゲル化もしくは固化させ、またはゲル化もしくは固化を可能にしてヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを形成することと、
（ｖｉ）固体を乾燥させることと
を含む方法によって得られる組成物の特性を有してもよい。
【０１５５】
水相と油相とを、１：４〜１：１０、任意選択で、１：４〜１：８、１：５〜１：７の油相：水相比で混合することができる（例えば、ステップ（ｉｉｉ）において）。例えば、油相：水相比は、１：４、１：５、１：６または１：７であってもよい。
【０１５６】
油相溶液（ｉｉ）は、適当な疎水性液体中にＮＦＡＴ阻害剤を溶解または分散させることによって調製され得る。疎水性液体は、例えば、本明細書に記載の油または液体脂質のいずれかであり得る。例として、疎水性液体は、飽和もしくは不飽和脂肪酸もしくはトリグリセリド、またはポリエチレングリコールとのこれらのエステルもしくはエーテルであり得、あるいはそれを含み得る。油相の特定の油は、トリグリセリドであり、またはそれを含み、例えば、中鎖トリグリセリドを含む油であり、またはそれを含み、任意選択で、油は、６、７、８、９、１０、１１、または１２個の炭素原子を有する脂肪酸、例えば、Ｃ８〜Ｃ１０脂肪酸から選択される少なくとも１種の脂肪酸のトリグリセリドを含む。
【０１５７】
適切には、水相溶液（ｉ）は、例えば、本明細書の他の場所に記載される陰イオン性界面活性剤、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）をさらに含む。
【０１５８】
上記の方法によって得られるコア、例えば、本方法によって得られるコアの特性を有するコアをコーティングして、任意選択で、放出を制御または調節するための第２のコーティング、好ましくは、上記の、および本明細書に記載のポリマーコーティングと共に、水溶性セルロースエーテルを含む、またはそれであるコーティングを提供することができる。コーティングされた組成物は、コアにコーティングを塗布する、例えば、コアに記載された第１および第２のコーティングを塗布することによって得ることができる。コーティングを塗布する前に、コアを、上記のステップ（ｉ）〜（ｖｉ）または（ｉ）から（ｖ）を有する方法によって作製してもよい。コーティングを塗布するのに適した方法は、以下に記載されており、コーティング組成物をコア上にスプレーコーティングすることによってコーティングを塗布することを含む。ステップ（ｉ）から（ｖｉ）または（ｉ）から（ｖ）を有する方法自体が、本発明の態様を形成する。
【０１５９】
組成物またはコアは、第２の界面活性剤（さらなる界面活性剤とも呼ばれる）をさらに含んでもよく、任意選択で、第２の界面活性剤は、任意選択で、アルキル硫酸塩、カルボキシレートもしくはリン脂質から選択される陰イオン性界面活性剤、または任意選択で、ソルビタン系界面活性剤、ＰＥＧ−脂肪酸、脂肪アルコールエトキシレート、アルキルフェノールエトキシレート、脂肪酸エトキシレート、脂肪アミドエトキシレート、アルキルグルコシドもしくはグリセリル脂肪酸、またはポロキサマーから選択される非イオン性界面活性剤、またはその組合せである。したがって、本発明の液体組成物は、少なくとも以下の特徴、ヒドロゲル形成性ポリマーを含む水相、第１の界面活性剤およびシクロスポリンが溶解している水相中に分散されている油相ならびに第２の界面活性剤を含んでもよい。同様に、本発明の組成物は、少なくとも以下の特徴、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているシクロスポリン、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、第１の界面活性剤および油相ならびに第２の界面活性剤を含んでもよい。
【０１６０】
実施形態では、上記で定義された第２の界面活性剤は、組成物中の唯一の界面活性剤であってもよい。
【０１６１】
組成物が固体コロイドの形態にある実施形態では、第２の界面活性剤は、分散相または連続相中にあってもよい。第２の界面活性剤は連続相中にあってもよく、陰イオン性界面活性剤、例えば、脂肪酸塩および胆汁塩から選択される少なくとも１種の界面活性剤、特に、アルキル硫酸塩、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムであってもよい。分散相中の界面活性剤は、非イオン性界面活性剤であってもよい。
【０１６２】
実施形態では、組成物は、連続相中にある、陰イオン性界面活性剤、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムであるか、またはそれを含む第２の界面活性剤を含む。
【０１６３】
実施形態では、組成物は、陰イオン性界面活性剤および溶媒；陰イオン性界面活性剤および油；ならびに陰イオン性界面活性剤、溶媒および油から選択される賦形剤の組合せをさらに含む。好ましくは、陰イオン性界面活性剤はアルキル硫酸塩、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムであり、油は中鎖モノ−、ジ−および／またはトリ−グリセリド（任意選択で、中鎖トリグリセリド、例えば、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド）であり、溶媒は２−（エトキシエトキシ）エタノールである。
【０１６４】
組成物は、界面活性剤、可溶化剤、浸透促進剤、崩壊剤、結晶化阻害剤、ｐＨ調節剤、安定剤、またはその組合せから選択される賦形剤をさらに含んでもよい。
【０１６５】
本発明の組成物、または組成物がコアを含む場合、コアは、分散相または油相を含んでもよく、分散相または油相は、
ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）；
中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せ、例えば、グリセリルモノオレエート／ジオレエートなどの、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せ；
中鎖モノ−、ジ−またはトリ−グリセリド、例えば、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；ならびに
溶媒、例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノール
であるか、またはそれを含み、組成物またはコアはさらに、
陰イオン性界面活性剤、例えば、脂肪酸塩および胆汁塩から選択される少なくとも１種の界面活性剤、特に、アルキル硫酸塩、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム；
カラギーナン、ゼラチン、寒天およびペクチンもしくはその組合せから選択される、任意選択で、ゼラチンおよび寒天もしくはその組合せから選択される親水コロイドであるか、またはそれを含み、さらに任意選択で、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスのポリマーがゼラチンであるか、またはそれを含む、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス；ならびに
任意選択で、可塑剤、例えば、グリセリン、ポリオール、例えば、ソルビトール、ポリエチレングリコールおよびクエン酸トリエチルまたはその混合物から選択される可塑剤、特にソルビトール
であるか、またはそれを含む連続相または水相を含む。
【０１６６】
一実施形態では、組成物は、コアと、コアの外側のコーティングとを含み、コアは固体コロイドの形態にあり、コロイドは連続相と分散相とを含み、分散相は、
ＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）；
ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せ、例えば、グリセリルモノオレエート／ジオレエート；
中鎖モノ−、ジ−および／またはトリ−グリセリド、例えば、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；ならびに
共溶媒、例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノール
であるか、またはそれを含み、連続相は、
カラギーナン、ゼラチン、寒天およびペクチンもしくはその組合せから選択される、任意選択で、ゼラチンおよび寒天もしくはその組合せから選択される親水コロイドであるか、またはそれを含み、さらに任意選択で、水溶性ポリマーマトリックスのポリマーがゼラチンであるか、またはそれを含む、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス；
任意選択で、可塑剤、任意選択で、グリセリン、ポリオール、例えば、ソルビトール、ポリエチレングリコールおよびクエン酸トリエチルまたはその混合物から選択される可塑剤、特にソルビトール；ならびに
陰イオン性界面活性剤、例えば、脂肪酸塩および胆汁塩から選択される少なくとも１種の界面活性剤、特に、アルキル硫酸塩、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム
であるか、またはそれを含み、
コア上のコーティングは、本明細書に記載される第１のコーティングまたは第２のコーティングである。
【０１６７】
適切には、コーティングは、第１のコーティングと、第１のコーティングの外側の第２のコーティングとを含み、
第１のコーティングは、上記の水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含むコーティングであり、
第２のコーティングは、組成物からのシクロスポリンＡの放出を制御またはモジュレートするための上記で定義されたコーティング、適切には、ポリマーコーティングであるか、またはそれを含む。
【０１６８】
例えば、直前の段落で述べた第１のコーティングおよび／または第２のコーティングを含む実施形態では、特定の第１のコーティングは、ヒドロキシプロピルメチルセルロースであり、またはそれを含み、第１のコーティングの外側の特定の第２のコーティングは、ｐＨ非依存性ポリマー、例えば、エチルセルロースであり、またはそれを含み、より特定すると、第２のコーティングは、エチルセルロース、および任意選択で水溶性のおよび天然に存在する多糖、例えば、ペクチン、もしくは別の水溶性の天然に存在する多糖から選択される多糖であり、またはこれらを含む。したがって、第２のコーティングは、ペクチンもしくは別の前記多糖を含有する場合があり、またはこれは、ペクチンおよび他の前記多糖を実質的に含まない場合がある。したがって、制御放出ポリマーとしてエチルセルロースを含み、ペクチンまたは別の前記多糖をさらに含む第２のコーティング、および制御放出ポリマーとしてエチルセルロースを含み、ペクチンまたは別の前記多糖をさらに含まない第２のコーティングが開示されている。
【０１６９】
任意選択でゼラチンを含む、ヒドロゲル形成性ポリマーは、３００〜７００ｍｇ／ｇ（任意選択で３８０〜５００ｍｇ／ｇ）の量で存在してもよい。中鎖モノ−、ジ−および／またはトリ−グリセリドは、２０〜２００ｍｇ／ｇ（任意選択で４０〜８０ｍｇ／ｇ）の量で存在してもよい。溶媒、例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノールは、１００〜２５０ｍｇ／ｇ（任意選択で１６０〜２００ｍｇ／ｇ）の量で存在してもよい。ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−エステルまたはその組合せ、例えば、グリセリルモノオレエート／ジオレエートは、８０〜２００ｍｇ／ｇ（任意選択で１００〜１５０ｍｇ／ｇ）の量で存在してもよい。陰イオン性界面活性剤、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムは、最大１００ｍｇ／ｇまたは最大５０ｍｇ／ｇ（任意選択で１５〜５０ｍｇ／ｇ、好ましくは２５〜５０ｍｇ／ｇまたは２５〜４５ｍｇ／ｇ）の量で存在してもよい。
【０１７０】
組成物またはコアは、任意選択で、３００〜７００ｍｇ／ｇの量のゼラチンを含むヒドロゲル形成性ポリマーを含んでもよく、コアは、任意選択で２０〜２００ｍｇ／ｇの量の中鎖モノ−、ジ−および／またはトリ−グリセリドをさらに含み、組成物またはコアは、以下の構成成分：
任意選択で、１００〜２５０ｍｇ／ｇの量の溶媒、例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノール；
任意選択で、８０〜２００ｍｇ／ｇの量の、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−エステルまたはその組合せ、例えば、グリセリルモノオレエート／ジオレエート；ならびに
任意選択で、最大５０ｍｇ／ｇの量の、陰イオン性界面活性剤、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム
をさらに含む。
【０１７１】
認識されるように、組成物またはコアはＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）をさらに含む。
【０１７２】
組成物またはコアは、
例えば、３００〜７００ｍｇ／ｇの量のゼラチンであるか、またはそれを含むヒドロゲル形成性ポリマー；
最大約２５０ｍｇ／ｇ、例えば、５０〜２５０ｍｇ／ｇの量のＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）；
２０〜２００ｍｇ／ｇの量の中鎖トリグリセリド、例えば、Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１０、任意選択で、存在する場合、１００〜２５０ｍｇ／ｇの量にある溶媒、例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノール；
８０〜２００ｍｇ／ｇの量の、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−エステルまたはその組合せ、例えば、グリセリルモノオレエート／ジオレエートを含む界面活性剤；ならびに
最大５０ｍｇ／ｇ、例えば、１０〜５０ｍｇ／ｇ、または任意選択で２０〜４５ｍｇ／ｇの量の、陰イオン性界面活性剤、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム
を含んでもよい。
【０１７３】
組成物またはコアは、
３８０〜５００ｍｇ／ｇの量のゼラチン；
９０〜２５０ｍｇ／ｇ（任意選択で９０〜２００ｍｇ／ｇまたは９０〜１６０ｍｇ／ｇ）の量のシクロスポリン；ならびに
４０〜８０ｍｇ／ｇの量のカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；
１６０〜２００ｍｇ／ｇの量の２−（２−エトキシエトキシ）エタノール；
１００〜１５０ｍｇ／ｇの量のグリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエート；ならびに
１５〜５０ｍｇ／ｇ（任意選択で２５〜５０ｍｇ／ｇまたは２５〜４５ｍｇ／ｇ）の量のＳＤＳ；ならびに
任意選択で、３０〜８０ｍｇ／ｇの量のＤ−ソルビトール
を含んでもよい。
【０１７４】
組成物またはコアは、
３８０〜５００ｍｇ／ｇの量のゼラチン；
９０〜１４０ｍｇ／ｇの量のシクロスポリン；ならびに
４０〜８０ｍｇ／ｇの量のカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；
１６０〜２００ｍｇ／ｇの量の２−（２−エトキシエトキシ）エタノール；
１００〜１５０ｍｇ／ｇの量のグリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエート；ならびに
１５〜５０ｍｇ／ｇ（任意選択で２５〜５０ｍｇ／ｇまたは２５〜４５ｍｇ／ｇ）の量のＳＤＳ；ならびに
任意選択で、３０〜８０ｍｇ／ｇの量のＤ−ソルビトール
を含んでもよい。
【０１７５】
組成物またはコアはコロイドであってもよい。組成物またはコアがコロイドである場合、ＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンをコロイドの分散相中に溶解してもよい。
【０１７６】
組成物またはコアはコロイドであってもよい；したがって、組成物またはコアは、連続相と分散相とを含んでもよく、連続相は、
３８０〜５００ｍｇ／ｇの量のゼラチン；
任意選択で、３０〜８０ｍｇ／ｇの量のＤ−ソルビトール
を含み、分散相は、
９０〜１４０ｍｇ／ｇの量のシクロスポリン；ならびに
４０〜８０ｍｇ／ｇの量のカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド
を含み、組成物は、
１６０〜２００ｍｇ／ｇの量の２−（２−エトキシエトキシ）エタノール；
１００〜１５０ｍｇ／ｇの量のグリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエート；ならびに
１５〜５０ｍｇ／ｇの量のＳＤＳ
をさらに含む。
【０１７７】
コロイド組成物またはコアは、
３００〜７００ｍｇ／ｇの量のゼラチンを含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含む連続相と、
最大２００ｍｇ／ｇの量のシクロスポリン：および
２０〜２００ｍｇ／ｇの量の中鎖トリグリセリド
を含む分散相とを含み、組成物は、
１００〜２５０ｍｇ／ｇの量の溶媒；
ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれでない中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−エステルまたはその組合せ、例えば、グリセリルモノオレエート／ジオレエートであるか、またはそれを含む界面活性剤（第１の界面活性剤）；および
最大５０ｍｇ／ｇの量の陰イオン性界面活性剤（第２の界面活性剤）
をさらに含む。
【０１７８】
構成成分のｍｇ／ｇに言及する上記の実施形態では、濃度は組成物の乾燥重量に基づく。
【０１７９】
適切には、直前に記載された６つの組成物またはコアにおいて、組成物は分散相と連続相とを含むコロイドであり、分散相はシクロスポリン、中鎖トリグリセリドおよび中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−エステル界面活性剤を含み、連続相はヒドロゲル形成性ポリマー（例えば、ゼラチン）および陰イオン性界面活性剤（例えば、ＳＤＳ）を含む。
【０１８０】
本発明は、その範囲内に、コアが分散相を有するコロイドであり、コロイドの連続相（マトリックス相）が薬学的活性成分の分散粒子、例えば、マイクロ粒子またはナノ粒子をさらに含む組成物を含む。分散相と連続相は、別途本明細書の他の場所に記載されるものであってもよい。
【０１８１】
本発明の組成物および／またはコアは、ミニビーズの形態にあってもよい。コアはミニビーズであり、第１のコーティングおよび適用可能な場合、コアと同時に第２のコーティングはミニビーズの形態にあってもよい。しかしながら、コアはミニビーズであり、組成物はミニビーズではないことも可能である。組成物は、複数のミニビーズをさらに含んでもよい。したがって、本発明は、本明細書に開示される医薬組成物の特徴を有するミニビーズを企図する。
【０１８２】
組成物またはミニビーズは、約０．０１〜約５ｍｍ、例えば、１ｍｍ〜３ｍｍまたは１ｍｍ〜２ｍｍの場合のように１ｍｍ〜５ｍｍのコアの最大断面寸法を有してもよい。ミニビーズは、球状であってもよい。球状ミニビーズは、１．５以下、例えば、１．１〜１．５のアスペクト比を有してもよい。
【０１８３】
本発明の組成物は、経口投与のためのものであってもよい。組成物は、０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、任意選択で１ｍｇ〜５００ｍｇ、例えば、１０ｍｇ〜３００ｍｇ、または２５〜２５０ｍｇ、適切には、約２５ｍｇ、約３５ｍｇ、約３７．５ｍｇ、約７５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２５０ｍｇまたは約３００ｍｇのＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）を含む経口投与用単位剤形に製剤化することができる。適切には、組成物は、例えば、軟もしくは硬ゲルカプセル剤、ゼラチンカプセル剤、ＨＰＭＣカプセル剤、圧縮錠剤、またはサッシェ剤中の複数のミニビーズから選択される複数のミニビーズ単位剤形である。ミニビーズは、本明細書の他の場所で記載されている通りであり得る。
【０１８４】
本発明のさらなる特徴によれば、任意選択で、界面活性剤が中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せを含むか、またはそれである、ＮＦＡＴ阻害剤と界面活性剤とを含む組成物が提供される。適切には、組成物はポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない。適切には、界面活性剤は、組成物の少なくとも６重量％、例えば、組成物の少なくとも１０重量％、少なくとも１５重量％または少なくとも２０重量％の量で存在する。任意選択で、界面活性剤は、１０〜約５０重量％の量で存在する。
【０１８５】
本発明のこの態様による組成物は、油相、例えば、本明細書に記載の油相のいずれかをさらに含んでもよい。
【０１８６】
ＮＦＡＴ阻害剤（好ましくは、シクロスポリン）を、組成物中に部分的に、または完全に溶解させてもよい。適切には、ＮＦＡＴ阻害剤（好ましくは、シクロスポリン）は、組成物中に完全に溶解される。
【０１８７】
特定の組成物は、
（ｉ）１０〜６０部のＮＦＡＴ阻害剤（好ましくは、シクロスポリンＡ）；
（ｉｉ）５〜４０部の中鎖脂肪酸トリグリセリド、例えば、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；
（ｉｉｉ）１０〜５０部の界面活性剤；および
（ｉｖ）０〜６０部の溶媒
を含み、全ての部は重量部であり、部の和（ｉ）＋（ｉｉ）＋（ｉｉｉ）＋（ｉｖ）は１００である。
【０１８８】
別の組成物は、
（ｉ）１０〜４０部のシクロスポリンＡ；
（ｉｉ）５〜２５部の中鎖脂肪酸トリグリセリド、例えば、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；
（ｉｉｉ）１５〜３０部の界面活性剤；および
（ｉｖ）１０〜６０部の溶媒（任意選択で、２０〜４０部または２５〜３０部の溶媒）、例えば、２−（２−エトキシエトキシ）エタノール；
を含み、全ての部は重量部であり、部の和（ｉ）＋（ｉｉ）＋（ｉｉｉ）＋（ｉｖ）は１００である。
【０１８９】
任意選択で、この態様では、界面活性剤は、グリセリルカプリレート、グリセリルカプレート、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエートおよびグリセロールモノリノレエート、またはその組合せから選択される。
【０１９０】
本発明はさらに、対象の胃腸管に、本明細書に記載の組成物を（任意選択で、経口的に）投与することを含む、対象にＮＦＡＴ阻害剤を投与するための方法を提供する。前記方法を実施して、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる望ましくない効果を軽減または防止することができる。望ましくない効果を、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および炎症性腸疾患と関連する症状から選択することができる。望ましくない効果を、療法の有効性を維持しながら軽減または防止することができる。組成物は、本明細書に記載の任意の組成物であってもよい。
【０１９１】
本発明のさらなる態様は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連して生じる１つまたは複数の望ましくない効果を軽減または防止するための医薬の製造における使用のための本明細書に記載の組成物の使用を提供し、ここで、前記望ましくない効果は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および炎症性腸疾患と関連する症状から選択され、前記組成物は、胃腸管に投与されることによって、前記１つまたは複数の望ましくない効果は、前記療法の有効性を維持しながら軽減または防止される。
【０１９２】
本発明の態様では、組成物を作製するための方法であって、油相と、ヒドロゲル形成性ポリマーを含む水相とを混合することを含み、油相が溶液中のＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）を有し、界面活性剤を含み、エマルジョンの固体化を引き起こすステップをさらに含む、方法が提供される。
【０１９３】
本発明の組成物は、本明細書に記載の方法によって得られる組成物の特徴を有する組成物であってもよい。
【０１９４】
任意選択で、油相と水相とを、１：２〜１：１２、任意選択で１：４〜１：１０、１：４〜１：８、例えば、１：５または１：７の油相と水相との比で混合する。
【０１９５】
方法は、コーティングに起因する重量増加が医薬組成物の重量の０．５％〜２０％であるＨＰＭＣを含むコーティングを用いてコアをコーティングするステップをさらに含んでもよい。コアは、薬学的活性成分を含んでもよく、本明細書に記載のコアであってもよい。
【０１９６】
ある特定の活性成分について、組成物が胃および上部ＧＩ管を通過するまで組成物からの活性剤の放出を制限する、または遅延させるのが望ましい。第２のコートを含む本発明の組成物は、そのような用途にとって特に適切であり得る。第２のコートは、組成物からの放出を遅延させるように作用するが、第１のコーティングの存在（例えば、ＨＰＭＣ）は、組成物が下部ＧＩ管中で活性剤を放出する場合に放出される活性剤の量を増加させる。第２のコーティングの存在の結果として活性剤の放出を遅延させる期間を、使用される第２のコーティングの性質または量の好適な選択によって調整することができる。所与の第２のコーティング材料について、コーティングのより高い重量増加は一般に、組成物の投与と活性剤の放出との間の時間を増大させる。したがって、本発明の組成物を使用して、提供するためにＧＩ管の非常に特異的な部位における活性薬剤の高レベルの放出を提供することができる。そのような遅延放出組成物は、活性剤が、ＧＩ管中でより高い全身吸収を生じ得る望ましくない副作用を有する場合に特に有益であり得る。
【０１９７】
添付の特許請求の範囲の主題が参照により本明細書に含まれる。したがって本明細書は、特許請求の範囲と一緒に読まれるべきであり、特許請求の範囲に述べられた特徴は、本明細書の主題に適用可能である。例えば、プロセスの請求項で記載された特徴は、本明細書に述べられた生成物にも適用可能であり、この場合、特徴は、生成物において顕在化されている。例えば、生成物の請求項で述べられた特徴は、本明細書に含まれる該当するプロセスの主題にも適用可能である。同様に、プロセスとの関連で本明細書に述べられた特徴は、本明細書に述べられた生成物にも適用可能であり、この場合、特徴は、生成物において顕在化されている。また、生成物との関連で本明細書に述べられた特徴は、本明細書に含まれる該当するプロセスの主題にも適用可能である。
【０１９８】
本発明の実施形態は、添付の図面を参照して、本明細書で以下にさらに記載される。
【図面の簡単な説明】
【０１９９】
【図１】マウスの生存を示すグラフである。
【図２】試験のそれぞれのマウス群における経時的な体重変化を示すグラフである。
【図３】マウスの脾臓、肺、肝臓および腸管におけるＴ細胞レベルに関するデータを示す棒グラフである。
【図４】各群に由来するマウスの結腸におけるサイトカインレベルに関する棒グラフである。
【図５】各群に由来するマウスの小腸におけるサイトカインレベルに関する棒グラフである。
【図６】各群に由来するマウスの脾臓におけるサイトカインレベルに関する棒グラフである。
【図７】各群に由来するマウスの肺におけるサイトカインレベルに関する棒グラフである。
【図８】ＧＩにおけるＦｏｘＰ３＋細胞の棒グラフである。
【図９】ＧＩにおけるＴＮＦα生成Ｔ細胞の棒グラフである。
【図１０】各試験群に由来するマウスの小腸の組織学的スライドを示す。
【図１１】アポトーシスの量を示すための各試験群に由来するマウスの小腸の組織学的スライドである。
【発明を実施するための形態】
【０２００】
上記のように、標的疾患抗原、特に腫瘍抗原に対するＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞の提供または促進に依拠するますます多くの療法が存在する。本発明は、そのような活性化されたＴ細胞が意図される治療利益のために用いられる場合はいつでも有用であり得る。ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞は、例えば、ＮＦＡＴ活性化ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫ−Ｔ細胞）などの任意のＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞であってもよい。しかしながら、その使用は、化学療法および／または放射線療法を用いるプレコンディショニングレジメンを用いて、自己Ｔ細胞を枯渇させる場合に特に好ましいことが想定される。そのような例では、プレコンディショニングレジメンを通じて、または活性化された治療的Ｔ細胞の適用の少なくとも前に、本発明による組成物を投与することが好ましい。上記のように、そのような投与はまた、望ましくは、実際の細胞療法期間中に継続してもよく、療法が血液悪性腫瘍に対するものである例では、アロ−ＨＣＴの適用後に継続してもよい。本発明の適用が有利であり得るＴ細胞療法の例は、上記のものである。
【０２０１】
好ましくは、本発明のＮＦＡＴ阻害剤は、シクロスポリンである。本明細書の活性成分に対する言及は、ＮＦＡＴ阻害剤に対する言及である。２つの用語は、互換的に使用される。本明細書における「シクロスポリン」への言及は、シクロスポリンＡ（シクロスポリンおよびＩＮＮシクロスポリンとしても公知）への言及である。他の形態のシクロスポリン、例えば、シクロスポリン−Ｂ、−Ｃ、−Ｄまたは−Ｇおよびそのいずれかの誘導体またはプロドラッグを、本明細書に記載の組成物中で使用することができる。
【０２０２】
「細胞性療法」または「サイトテラピー」とも呼ばれる「細胞療法」は、細胞材料を患者に投与するか、または患者への療法の投与が、例えば、Ｔ細胞に基づく療法、例えば、本明細書に記載のＴ細胞療法の直接的投与により、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞応答を惹起する療法である。投与は通常、患者への注射によって実行される。細胞材料は、一般的には無傷の生細胞であってよい。例えば、細胞療法はＴ細胞を含み、細胞媒介性免疫によりがん細胞に立ち向かうことができる改変されたＴ細胞を免疫療法の過程で注射することができる。
【０２０３】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法の有効性の維持を、ＮＦＡＴの阻害剤を含む組成物を療法と共に使用する場合に、療法の治療結果が陽性であると見なすことができる。したがって、ＮＦＡＴの阻害剤を含む組成物は、療法によって処置される状態、例えば、がんに対する療法の望ましい治療効果に有害に影響しない。医師であれば、療法を開始する決定をもたらしたものと同じスコアリングシステムまたはランキングに基づいて、療法の陽性の結果を容易に同定し、潜在的に決定することができる。例えば、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法を用いる処置の前に、患者は、ステージ：Ｔ４  Ｎ３  Ｍ１、Ｔ４  Ｎ３  Ｍ０、Ｔ４  Ｎ２  Ｍ１、Ｔ４  Ｎ１  Ｍ１、Ｔ４  Ｎ２  Ｍ０、Ｔ４  Ｎ１  Ｍ０、Ｔ３  Ｎ３  Ｍ１、Ｔ３  Ｎ３  Ｍ０、Ｔ３  Ｎ２  Ｍ１、Ｔ３  Ｎ１  Ｍ１、Ｔ３  Ｎ２  Ｍ０、Ｔ３  Ｎ１  Ｍ０、Ｔ２  Ｎ３  Ｍ１、Ｔ２  Ｎ３  Ｍ０、Ｔ２  Ｎ２  Ｍ１、Ｔ２  Ｎ１  Ｍ１、Ｔ２  Ｎ２  Ｍ０またはＴ２  Ｎ１  Ｍ０で定義されたがんを有してもよい；療法の有効性の維持のために、患者のがんを、ＮＦＡＴの阻害剤を含む組成物と併用する療法を用いる処置後に、より低いステージで分類することができる。例えば、患者は、処置前にＴ４  Ｎ３  Ｍ１と分類されていてもよく、本発明の組成物の補助投与を用いる療法後にＴ３  Ｎ２  Ｍ１と分類することができる。「療法の有効性の維持」という用語は、以下のものおよびその組合せ：寛解または応答を達成する療法；有効なレベルで残存する血清中のＴ細胞レベル（任意選択で、ＣＡＲＴ細胞レベル）；本発明の組成物のほぼ投与前のレベルで残存する血清Ｔ細胞レベル；および本発明の組成物の投与前の最大５０％のレベルまで低下する血清Ｔ細胞レベルを含む。また、「療法の維持」は、寛解の維持、例えば、ＡＬＬの場合、骨髄中の芽細胞の％が５％未満、１０％未満、２０％未満、または３０％未満であることを含んでもよい。固形腫瘍の場合、「療法の維持」は、原発性または二次性腫瘍の非存在、転移の欠如または腫瘍増殖の阻害を含んでもよい。「療法の維持」はまた、あるいは、転移の防止、微小転移の防止、または転移細胞の増加の減少もしくは非存在を指してもよい。
【０２０４】
「ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法」は、患者を処置するために使用された場合、以下の効果およびその組合せを提供することができる：（１）状態（ｓｔａｔｅ）、障害、または状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）のリスクを低減し、またはそれを阻害する、例えば、その開始および／もしくは進行を遅延させること；（２）状態（ｓｔａｔｅ）状態（ｓｔａｔｅ）病状、障害、または状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）に苦しんでおり、またはそれに罹りやすい場合があるが、まだ状態（ｓｔａｔｅ）状態（ｓｔａｔｅ）病状、障害、または状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の臨床的または準臨床的症状を経験していない、または示していない患者（例えば、ヒトまたは動物）において発達している状態（ｓｔａｔｅ）状態（ｓｔａｔｅ）病状、障害、または状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の臨床症状を防止する、例えば、そのリスクを低減し、またはその出現を遅延させること；（３）状態（ｓｔａｔｅ）状態（ｓｔａｔｅ）病状、障害、または状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を阻害すること（例えば、疾患の発症、もしくは維持処置の場合におけるその再発、またはその少なくとも１つの臨床的もしくは準臨床的な症状を阻止し、低減し、または遅延させること）；ならびに／あるいは（４）状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）を軽減すること（例えば、状態（ｓｔａｔｅ）状態（ｓｔａｔｅ）病状、障害、または状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）、またはその臨床的または準臨床的症状の少なくとも１つを後退させること）。本発明の組成物が患者の処置において、例えば、療法と共に補助処置として使用される場合、処置は、患者の健康を維持すること；患者の健康を回復させ、または改善すること；および望ましくない効果の進行を遅延させることの任意の１つまたは複数を企図する。処置される患者への利益は、統計的に有意であり得、または患者もしくは医師にとって少なくとも知覚できるものであり得る。医薬は、必ずしもこれが投与されるあらゆる患者において臨床効果を生じるわけでないことが理解されることになり、本段落は、それに応じて理解されるべきである。本明細書に記載の組成物および方法は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法の望ましくない効果の療法および／または予防にとって有用である。
【０２０５】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、例えば、がんの処置のためのものであってもよい。しかしながら、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞が有益であり得る他の状態も想定される。がんは、固形腫瘍または血液がんであってもよい。がんは、肉腫、メラノーマ、皮膚がん、血液悪性腫瘍、血液腫瘍、リンパ腫、癌腫または白血病であってもよい。がんは、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞球性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、Ｂ細胞悪性腫瘍、Ｂ細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、非ホジキンリンパ腫、例えば、ＡＢＣ−ＤＬＢＣＬ、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリー細胞白血病Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、骨のがん、骨転移、免疫抑制メラノーマ、転移性非小細胞肺がん、非小細胞肺がん、転移性メラノーマ、脳腫瘍、ホルモン抵抗性前立腺がん、前立腺がん、転移性乳がん、乳がん、ステージＩＶのメラノーマ、神経芽細胞腫固形腫瘍、転移性膵がん、膵がん、骨髄異形成症候群、卵巣がん、卵管がん、腹膜腫瘍、結腸直腸がん、肺がん、子宮頸がん、精巣がん、腎臓がんまたは頭頸部がんであってもよい。実施形態では、がんは胃腸管のがんではなく、より具体的には、この実施形態では、がんは下部ＧＩ管のがんではなく、例えば、がんは結腸直腸がんではない。
【０２０６】
したがって、がんは、血液がん、例えば、リンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）または非ホジキンリンパ腫であってもよい。がんは、固形がん、例えば、乳がん、卵巣がん、膵がん、結腸がん、胃がん、肺がんもしくは前立腺がん、またはメラノーマであってもよい。がんは、メラノーマであってもよい。
【０２０７】
療法は、リンパ組織、例えば、ＧＩＴまたはリンパ節のリンパ組織中の転移細胞を標的とする療法であってもよい。
【０２０８】
任意選択で、療法によって処置されるがんは、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）または急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。
【０２０９】
ＮＦＡＴの阻害剤を含む組成物を、本明細書に記載のＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連する望ましくない効果の軽減または防止において使用することができ、これは、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法を投与され、例えば、療法による処置のため、その状態がその後改善された望ましくない効果に罹患した患者の維持療法を含んでもよい。そのような患者は前兆となる疾患に罹患していても、していなくてもよい。ＮＦＡＴの阻害剤を含む組成物を使用する維持療法は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と関連する望ましくない効果の（再）発生または進行を停止、軽減、または遅延させることを目的とする。
【０２１０】
ＮＦＡＴの阻害剤を含む組成物を、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と同時に、連続的に、または別々に投与して、療法と関連する望ましくない効果の望ましい軽減または防止を提供することができる。例えば、療法が患者に存在する場合、ＮＦＡＴ阻害剤がＧＩ管、例えば、結腸に存在するように、組成物を療法の前に、または実質的に同時に投与することができる。あるいは、患者への療法の投与後に、組成物を患者に投与してもよい。療法と関連する望ましくない効果は、療法が施された後に観察されなくてもよい。したがって、ＮＦＡＴ阻害剤を含む組成物を、療法の望ましくない効果の開始に応答する療法の投与後に使用して、その効果、例えば、ＣＲＳの開始を改善および軽減することができる。したがって、組成物を救援療法として使用して、望ましくない効果が生じた後に、療法の望ましくない効果に対抗することができる。また、組成物を予防的に使用して、ＣＲＳなどの療法の望ましくない効果の発生を防止する、またはそのリスクを軽減することもできる。本明細書に記載されるように、組成物は、ＮＦＡＴ阻害剤をＧＩ管、例えば、下部ＧＩ管に送達し、処置される状態、例えば、がんに対する前記療法の治療有効性を維持しながら、ＣＲＳなどの療法と関連する望ましくない効果を適切に調節する。
【０２１１】
「有効量」とは、所望の処置を達成する、例えば、１つまたは複数の望ましくない効果を軽減する、または防止し、療法の有効性を維持する、または所望の治療的もしくは予防的応答をもたらすのに十分な量を意味する。治療的または予防的応答は、ユーザー（例えば、臨床医）が療法に対する有効な応答として認識する任意の応答であり得る。さらに、治療的または予防的応答の評価に基づいて適切な処置継続時間、適切な用量、および任意の潜在的な組合せ療法を判定することは、当業者のスキルの範囲内である。
【０２１２】
用語「乾燥」および「乾燥した」は、本開示の組成物または組成物に適用する場合、それぞれ、５重量％未満の遊離水、例えば、１重量％未満の遊離水を含有する組成物または組成物への言及を含み得る。しかし、主に、「乾燥」および「乾燥した」は、本開示の組成物に適用する場合、最初の固化した組成物中に存在するヒドロゲルが十分に乾燥して硬質組成物を形成していることを意味する。固体コロイドに言及する場合、これは本明細書の定義による乾燥コロイドも指す。
【０２１３】
記載した組成物の成分および賦形剤は、意図された目的に適している。例えば、医薬組成物は、薬学的に許容される成分を含む。
【０２１４】
別段に述べられていない場合、本発明の組成物の成分、構成成分、賦形剤などは、本明細書の他の場所で論じられる意図された目的の１つまたは複数に適している。
【０２１５】
疑いを回避するために、表題「背景技術」の下で本明細書に先に開示した情報は、本発明に関連しており、本発明の開示の一部として読まれるべきであると本明細書に表明する。
【０２１６】
本発明が製剤に関して言及される場合、それは本発明の組成物と同じ意味を取る。したがって、製剤と組成物は互換的に使用される。
【０２１７】
本明細書の記載および特許請求の範囲全体にわたって、単語「含む」および「含有する」、ならびにこれらの変形は、「それだけに限らないが、〜を含む」を意味し、これらは、他の部分、添加剤、構成成分、整数、またはステップを除外するように意図されていない（かつ除外しない）。本明細書の記載および特許請求の範囲全体にわたって、単数形は、脈絡により別段に要求されていない限り複数形を包含する。特に、不定冠詞が使用されている場合、本明細書は、脈絡により別段に要求されていない限り複数および単一を企図していると理解されるべきである。
【０２１８】
本発明の特定の態様、実施形態、または実施例と併せて記載される特徴、整数、特性、化合物、化学部分、または基は、これらと不適合でない限り、本明細書に記載の任意の他の態様、実施形態、または実施例に適用可能であることが理解されるべきである。本明細書（任意の添付の特許請求の範囲、要約書、および図面を含む）に開示の特徴のすべて、および／またはそのように開示された任意の方法もしくはプロセスのステップのすべては、このような特徴および／またはステップの少なくとも一部が相互に排他的である組合せを除いて任意の組合せで組み合わせることができる。本発明は、任意の上記の実施形態の詳細に制限されない。本発明は、本明細書（任意の添付の特許請求の範囲、要約書、および図面を含む）に開示の特徴の任意の新規のものもしくは任意の新規の組合せ、またはそのように開示された任意の方法もしくはプロセスのステップの任意の新規のものもしくは任意の新規の組合せに及ぶ。
【０２１９】
読者の注目は、本願に関連して本明細書と同時に、またはそれの前に提出され、本明細書とともに公衆の縦覧に利用できるすべての論文および文書に向けられており、すべてのこのような論文および文書の内容は、参照により本明細書に組み込まれている。
【０２２０】
組成物
一実施形態では組成物は、マトリックスおよびＮＦＡＴ阻害剤を含む。マトリックスは、ヒドロゲル形成性ポリマーで形成することができ、ポリマーへの追加の賦形剤を含有し得る。活性成分は、マトリックス内に含有される。活性成分は、溶液もしくは懸濁液、またはこれらの組合せ中に存在し得るが、本発明は、活性な溶液または懸濁液を含む組成物に限定されず、それは、例えば、リポソームまたはシクロデキストリン中にカプセル化された活性成分を含む。マトリックスは、活性成分が含まれている含有物を含有する場合があり、例えば、含有物は、活性成分が溶解または懸濁されている疎水性媒体を含み得る。したがって、活性成分は、マトリックス中に直接溶解もしくは懸濁されている場合があり、またはこれは、活性成分が溶解もしくは懸濁されている含有物によってマトリックス中に間接的に溶解もしくは懸濁されている場合がある。
【０２２１】
したがって、組成物は、マトリックス形成性ポリマー、特に、ヒドロゲル形成性ポリマーを含む。組成物のマトリックスは、透水性ポリマー、水膨潤性ポリマー、および生分解性ポリマーから選択されるポリマーを含むポリマーマトリックスであり得、またはそれを含み得る。特に、マトリックスは、以下でより詳細に記載されるヒドロゲル形成性ポリマーであり、またはそれを含む。
【０２２２】
組成物からの活性成分の調節放出は、マトリックス材料の性質によって実現され得る。例えば、マトリックスは、中に活性成分が含有されている、例えば、溶解または分散されている浸透性または浸食性ポリマーであり得、経口投与後、マトリックスは、徐々に溶解または浸食され、それによりマトリックスから活性成分を放出する。浸食は、生分解性ポリマーマトリックスの生分解によっても実現される場合がある。マトリックスが浸透性である場合、水がマトリックスに浸透し、薬物をマトリックスから拡散させる。したがって、ヒドロゲル形成性ポリマーを用いて形成されるマトリックスは、調節放出ポリマーを含んでもよい。そのようなものとして、調節放出ポリマーは、セルロース誘導体、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール）酸、ポリ（乳酸−ｃｏグリコール酸コポリマー）、ポリエチレングリコールブロックコポリマー、ポリオルトエステル、ポリ無水物、ポリ無水物エステル、ポリ無水物イミド、ポリアミド、およびポリホスファジンを指してもよい。
【０２２３】
ポリマーマトリックス
本発明の組成物は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含む。さらに、本発明のある特定の実施形態では、本発明の組成物はコアを含み、コアは、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含む。組成物またはコアは、機械的強度をもたらすために、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスであるか、またはそれを含んでもよい、連続相またはマトリックス相を含む。実施形態において、シクロスポリンは、連続相またはマトリックス内の分散相または油相内に含まれる。ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）は、コアまたは組成物のヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス（連続相または水相）内に分散相として存在してもよい。分散相は、油相であるか、またはそれを含んでもよい。例えば、分散相は、脂質およびＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を含んでもよい。ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含む水相内に油相中に溶解されたＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を分散させてコロイドを形成した後、組成物の固化（ゲル化）を引き起こすことによってシクロスポリンをヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス内に固定することによって、コアまたは組成物を調製することができる。
【０２２４】
コアは、固体コロイドの形態を有してもよく、コロイドは、連続相および分散相を含み、連続相は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスであり、またはそれを含み、分散相は、任意選択で、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を含む油相であり、またはそれを含む。分散相は、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を含有するビヒクル、例えば、それを溶液または懸濁液または両方の組合せとして含有するビヒクルを含んでもよい。ビヒクルは、本明細書に記載の油相であってもよい。
【０２２５】
ヒドロゲル形成性ポリマーおよびＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を含む分散相を含むそのようなコアは、以下でより詳細に記載される。
【０２２６】
遅延放出コーティング
ある特定の実施形態において本発明は、コーティング形成性ポリマーを含むか、またはそれであるコーティングを有する組成物であって、コーティング形成性ポリマーがヒドロゲル形成性ポリマーであり、コーティングが第２のコーティングである外側の第１のコーティングであってもよい、組成物を提供する。第２のコーティングは遅延放出コーティングであってもよいが、本発明は、第２のコーティングが遅延放出コーティングであることを必要としない。第２のコーティングは、遅延放出ポリマーを含むか、またはそれであってもよい。
【０２２７】
第１のコーティングは、本明細書の他の場所に記載される量で存在してもよい。
【０２２８】
第１のコーティングは、コアの０．５重量％〜２０重量％の第１のコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在してもよい。
【０２２９】
さらに、組成物は、０．５％〜１５％、１％〜１５％、１％〜１２％、１％〜１０％、１％〜８％、１％〜６％、１％〜４％、２％〜１０％、２％〜８％、２％〜６％、２％〜７％、２％〜４％、４％〜８％、４％〜７％、４％〜６％、５％〜７％、７％〜２０％、７％〜１６％、９％〜２０％、９％〜１６％、１０％〜１５％、および１２％〜１６％の範囲から選択される、コーティングに起因する重量増加に対応する量で存在する第１のコーティングを含んでもよい。
【０２３０】
本発明は、コア、第１のコーティング、および第１のコーティングの外側の第２のコーティングを含む医薬組成物であって、コアが、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含み、第１のコーティングが、水溶性セルロースエーテルを含むか、またはそれであり、第２のコーティングが、遅延放出ポリマーを含むか、またはそれであり、第１のコーティングがコアの０．５重量％〜２０重量％の第１のコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在してもよく、界面活性剤が、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない、医薬組成物を提供する。
【０２３１】
本発明の組成物は、１μｍ〜１ｍｍの厚さを有する第１のコーティングを含んでもよい。したがって、上記で特定されたコーティングに起因する％重量増加は、１μｍ〜１ｍｍの厚さに対応してもよい。
【０２３２】
第１のコーティングは、１μｍ〜５００μｍ、１０μｍ〜２５０μｍ、１０μｍ〜１００μｍ、１０μｍ〜５０μｍ、１０μｍ〜２０μｍ、５０μｍ〜１００μｍ、１００μｍ〜２５０μｍ、１００μｍ〜５００μｍ、５０μｍ〜５００μｍ、５０μｍ〜２５０μｍ、１００μｍ〜１ｍｍ、５００μｍ〜１ｍｍの範囲から選択される厚さを有してもよい。この段落に開示される厚さを有するコーティングは、本出願における任意のコーティングであってもよい。特に、この段落で言及されるコーティングは、水溶性セルロースエーテルコーティングであってもよい。
【０２３３】
第１のコーティングは、１％〜２０％、４％〜７％、５％〜７％、４％〜１５％、８％〜１５％、４％〜１２％および８％〜１２％の範囲から選択される重量増加で存在してもよい。第２のコーティングは、８％〜１５％または８％〜１２％の範囲から選択される重量増加で存在してもよい。
【０２３４】
さらに、本発明は、コア、第１のコーティングおよび第１のコーティングの外側の第２のコーティングを含む医薬組成物であって、コアが、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含み、第１のコーティングが、水溶性セルロースエーテルを含むか、またはそれであり、第２のコーティングが、遅延放出ポリマーを含むか、またはそれであり、第１のコーティングが、１μｍ〜１ｍｍの厚さを有する、医薬組成物を提供する。
【０２３５】
第２のコーティングは、本明細書の他の場所に記載の量で存在してもよい。適切には、第２のコーティングは、約１０μｍ〜約１ｍｍ、例えば、約１０μｍ〜約５００μｍ、約５０μｍ〜約１ｍｍ、または約５０μｍ〜約５００μｍの組成物上でのコーティング厚さを提供する。したがって、厚さは、約１００μｍ〜約１ｍｍ、例えば、１００μｍ〜約７５０μｍまたは約１００μｍ〜約５００μｍであってもよい。厚さは、約２５０μｍ〜約１ｍｍ、例えば、約２５０μｍ〜約７５０μｍまたは２５０μｍ〜約５００μｍであってもよい。厚さは、約５００μｍ〜約１ｍｍ、例えば、約７５０μｍ〜約１ｍｍまたは約５００μｍ〜約７５０μｍであってもよい。したがって、厚さは、約１０μｍ〜約１００μｍ、例えば、約１０μｍ〜約５０μｍまたは約５０μｍ〜約１００μｍであってもよい。
【０２３６】
第２のコーティングが２％〜４０％の％重量増加で存在してもよい第２のコーティング（外側コーティングとも呼ばれる）が存在する任意の態様または実施形態が企図される。さらに、第２のコーティングは、４％〜３０％、４％〜７％、７％〜４０％、７％〜３０％、８％〜２５％、８％〜２０％、２％〜２５％、２％〜２０％、４％〜２５％、４％〜２０％、４％〜１５％、４％〜１３％、７％〜１５％、７％〜１３％、８％〜１２％、９％〜１２％および２０％〜２５％の範囲から選択されるコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在してもよい。
【０２３７】
本発明の任意の態様および実施形態では、第１のコーティングは、０．５％〜２０％、好ましくは、１％〜１６％または４％〜１６％のコアに対する％重量増加で存在してもよく、第２のコーティングは、４％〜２４％、７％〜２４％、２２％〜２４％、７％〜１５％、または８％〜１２％、好ましくは、２２％〜２４％、７％〜１５％、または８％〜１２％の％重量増加で存在してもよい。
【０２３８】
コアは、好ましくは、例えば、より詳細に本明細書の以降に記載されるようなミニビーズの形態、例えば、固体コロイドの形態にある。第２のコートは、フィルムであり得、またはこれは、膜であり得る。第２のコート、例えば、フィルムまたは膜は、胃の後まで放出を遅延させるように機能を果たすことができ、したがってコートは、腸溶コートであり得る。遅延放出コートは、１種もしくは複数の遅延放出物質、好ましくはポリマーの特質（例えば、以下でより詳細に記載されるメタクリレートなど；多糖など）、または任意選択で、他の賦形剤、例えば、可塑剤を含む１種を超えるこのような物質の組合せを含み得る。好適な可塑剤としては、これらが使用される場合、親水性可塑剤、例えば、以下に記載するように、コーティングとしてポリマーのＥｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）ファミリーを使用する場合、特に好適であるクエン酸トリエチル（ＴＥＣ）がある。エチルセルロースを用いたコーティングに関して以下でより詳細に記載される別の好適な可塑剤は、セバシン酸ジブチル（ＤＢＳ）である。代替または追加の任意選択で含められる賦形剤は、流動促進剤である。流動促進剤は、粉末または他の媒体にその流動性を改善するために添加される物質である。典型的な流動促進剤は、コーティングとしてポリマーのＥｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）ファミリーを使用する場合、特に好適であるタルクである。
【０２３９】
遅延放出コーティング（第２のコーティング）は、以下に記載するように塗布することができ、厚さおよび密度に関して様々であり得る。コートの量は、それが塗布される乾燥組成物（例えば、コア）に加えられる（により増加する）追加の重量によって規定される。重量増加は、好ましくは、コアの乾燥重量の０．１％〜５０％の範囲内、好ましくは、１％〜１５％、より好ましくは、３％〜１０％の範囲内、または５〜１２％の範囲内、または８〜１２％の範囲内である。
【０２４０】
遅延放出コーティングのポリマーコーティング材料は、メタクリル酸コポリマー、アンモニオメタクリレートコポリマー、またはこれらの混合物を含み得る。メタクリル酸コポリマー、例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＳおよびＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）Ｌ（Ｅｖｏｎｉｋ）などが特に適している。これらのポリマーは、胃抵抗性および腸溶性ポリマーである。これらのポリマーフィルムは、純水および希酸中で不溶性である。これらは、これらのカルボン酸の含有量に応じてより高いｐＨで溶解し得る。ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＳおよびＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）Ｌは、ポリマーコーティング中の単一構成成分として、または任意の比の組合せで使用することができる。ポリマーの組合せを使用することによって、ポリマー材料は、様々なｐＨレベルで、例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＬおよびＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）Ｓが別個に可溶性であるｐＨ間で溶解性を呈することができる。特に、コーティングは、この段落に記載の１種または複数のコポリマーを含む腸溶コーティングであり得る。述べられるべき特定のコーティング材料は、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ３０Ｄ−５５である。
【０２４１】
商標「ＥＵＤＲＡＧＩＴ」は、メタクリル酸コポリマー、特に、Ｅｖｏｎｉｋによって商標ＥＵＤＲＡＧＩＴの下で販売されているものを指すのに以下で使用される。
【０２４２】
遅延放出コーティングは、存在する場合、主要な割合（例えば、総ポリマーコーティング含有量の５０％超）の少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ポリマー、および任意選択で軽微な割合（例えば、総ポリマー含有量の５０％未満）の少なくとも１種の薬学的に許容される不水溶性ポリマーを含むポリマー材料を含むことができる。代わりに、膜コーティングは、主要な割合（例えば、総ポリマーコーティング含有量の５０％超）の少なくとも１種の薬学的に許容される不水溶性ポリマー、および任意選択で軽微な割合（例えば、総ポリマー含有量の５０％未満）の少なくとも１種の薬学的に許容される水溶性ポリマーを含むポリマー材料を含むことができる。
【０２４３】
アンモニオメタクリレートコポリマー、例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＳおよびＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＬ（Ｅｖｏｎｉｋ）などは、本発明で使用するのに適している。これらのポリマーは、生理的ｐＨ範囲全体にわたって純水、希酸、緩衝液、および／または消化液中で不溶性である。ポリマーは、ｐＨとは無関係に水および消化液中で膨潤する。膨潤状態において、次いでこれらは、水および溶解した活性剤に対して浸透性となる。ポリマーの浸透性は、ポリマー中のエチルアクリレート（ＥＡ）、メタクリル酸メチル（ＭＭＡ）、およびメタクリル酸塩化トリメチルアンモニオエチル（ＴＡＭＣｌ）基の比に依存する。例えば、１：２：０．２のＥＡ：ＭＭＡ：ＴＡＭＣｌ比を有するポリマー（ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＬ）は、１：２：０．１の比を有するもの（ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＳ）より浸透性である。ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＬのポリマーは、高浸透性の不溶性ポリマーである。ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＳのポリマーは、低浸透性の不溶性フィルムである。このファミリーにおける拡散制御ｐＨ非依存性ポリマーは、ＲＳ３０Ｄであり、これは、アクリル酸エチル、メタクリル酸メチル、およびポリマーを浸透性にするために塩として存在する四級アンモニウム基を有する低含有量のメタクリル酸エステルのコポリマーである。ＲＳ３０Ｄは、水性分散液として入手可能である。
【０２４４】
アミノメタクリレートコポリマーは、任意の所望の比で組み合わせることができ、比は、薬物放出速度を調節するために修正することができる。例えば、９０：１０のＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＳ：ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＬの比を使用することができる。代わりに、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＳ：ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＬの比は、約１００：０〜約８０：２０、もしくは約１００：０〜約９０：１０、またはその間の任意の比とすることができる。このような組成物では、浸透性のより低いポリマーＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＳが一般にポリマー材料の大部分を占め、より可溶性のＲＬが、これが溶解するとき、溶質がコアと接触して、活性剤を制御された様式で逃れさせることができるギャップを形成することを可能にする。
【０２４５】
薬物の放出の所望の遅延ならびに／あるいは薬物の脱出および／または固定化もしくは水溶性ポリマーマトリックスの溶解を可能にするためのコーティングの穿孔および／またはコーティング内での組成物の曝露を実現するために、アミノメタクリレートコポリマーを、ポリマー材料内でメタクリル酸コポリマーと組み合わせることができる。約９９：１〜約２０：８０の範囲内のアンモニオメタクリレートコポリマー（例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＲＳ）とメタクリル酸コポリマーとの比を使用することができる。２つのタイプのポリマーを、同じポリマー材料中に組み合わせ、またはビーズに塗布される別個のコートとして提供することもできる。
【０２４６】
ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＦＳ３０Ｄは、メタクリル酸、アクリル酸メチル、およびメタクリル酸メチルからなるアニオン性水性系アクリル酸ポリマー分散液であり、ｐＨ感受性である。このポリマーは、より少ないカルボキシル基を含有し、したがって、より高いｐＨ（＞６．５）で溶解する。このようなシステムの利点は、これが、慣例的な粉末積層および流動床コーティング技法を使用して合理的な加工時間内に大規模で容易に製造することができることである。さらなる例は、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ３０Ｄ−５５であり、これは、官能基としてメタクリル酸を有するアニオン性ポリマーの水性分散液である。これは、３０％の水性分散液として入手可能である。
【０２４７】
上述したＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ポリマーに加えて、いくつかの他のこのようなコポリマーを、薬物放出を制御するのに使用することができる。これらとしては、メタクリル酸エステルコポリマー、例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＮＥおよびＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ＮＭの範囲などがある。ＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）ポリマーについてのさらなる情報は、その全体が参照により本明細書に組み込まれているＡｑｕｅｏｕｓ  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｃｏａｔｉｎｇｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ、Ｊａｍｅｓ  ＭｃＧｉｎｉｔｙ編、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１０９〜１１４ページにおける「Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ  Ｃｏａｔｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」中に見つけることができる。
【０２４８】
ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）のいくつかの誘導体も、ｐＨ依存性溶解性を呈し、調節放出コーティングのために本発明で使用してもよい。このような誘導体の例として、ＨＰＭＣエステル、例えば、上部腸管中で急速に溶解するヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、ならびにイオン化可能カルボキシル基の存在が高いｐＨ（ＬＦグレードについて５．５超、およびＨＦグレードについて６．８超）でポリマーを溶解させるヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）を述べることができる。これらのポリマーは、Ｓｈｉｎ−Ｅｔｓｕ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．から市販されている。遅延放出コーティングに有用であると本明細書で記載した他のポリマーと同様に、ＨＰＭＣおよび誘導体（例えば、エステル）を、他のポリマー、例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ  ＲＬ−３０Ｄと組み合わせてもよい。
【０２４９】
コーティングをもたらすのに、他のポリマー、特に、腸溶またはｐＨ依存性ポリマーを使用してもよい。このようなポリマーとして、フタレート、ブチレート、スクシネート、および／またはメリテートの群を挙げることができる。このようなポリマーとしては、それだけに限らないが、酢酸フタル酸セルロース、酢酸コハク酸セルロース、フタル酸水素セルロース、酢酸トリメリト酸セルロース、ヒドロキシプロピル−メチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート、デンプンアセテートフタレート、アミロースアセテートフタレート、ポリビニル酢酸フタレート、およびポリビニルブチレートフタレートがある。
【０２５０】
ｐＨ非依存性ポリマー遅延放出コーティング
特定の実施形態では、第２のコーティングは、存在する場合、その溶出プロファイルおよび／または本発明の組成物中に組み込まれた活性成分を放出するその能力においてｐＨ非依存性であるポリマーコーティングであり、またはそれを含む。ｐＨ非依存性ポリマー遅延放出コーティングは、遅延放出ポリマー、任意選択で複数の遅延放出ポリマー、および１種または複数の他の任意選択の構成成分を含む。他の構成成分は、組成物の性質をモジュレートする機能を果たし得る。例は既に示されている（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳおよびＲＬ）。
【０２５１】
ｐＨ非依存性ポリマーコーティングの別の例は、エチルセルロースを含むか、またはそれであるコーティングである；ｐＨ非依存性ポリマーコーティングは、したがって、エチルセルロースである遅延放出ポリマーを有してもよい。剤形をコーティングするのに使用するためのエチルセルロース製剤は、エチルセルロースに加えて、液体製剤の場合では、液体ビヒクル、１種または複数の他の構成成分を含み得ることが理解されるであろう。他の構成成分は、組成物の性質、例えば、フィルムコーティングの柔軟性などのコーティングの安定性または物理的性質をモジュレートする機能を果たし得る。エチルセルロースは、このような組成物における唯一の遅延放出ポリマーであり得る。エチルセルロースは、剤形をコーティングするのに使用するためのコーティング組成物の乾燥重量の少なくとも５０重量％、少なくとも６０重量％、少なくとも７０重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも９０重量％、または少なくとも９５重量％の量で存在し得る。したがって、エチルセルロースコーティングは、エチルセルロースに加えて他の構成成分を含み得る。エチルセルロースは、エチルセルロースコーティングの少なくとも５０重量％、少なくとも６０重量％、少なくとも７０重量％、少なくとも重量８０％、少なくとも９０重量％、または少なくとも９５重量％の量で存在し得る。結果として、エチルセルロースは、第２のコーティングの乾燥重量の少なくとも５０重量％、少なくとも６０重量％、少なくとも７０重量％、少なくとも８０重量％、少なくとも９０重量％または少なくとも９５重量％の量にあってもよい。適切には、エチルセルロースコーティングは、フィルムの柔軟性を改善し、コーティングの塗布中のコーティング組成物の成膜性を改善するために、以下に記載される可塑剤をさらに含む。
【０２５２】
組成物、任意選択で、コア（すなわち、第１のコーティングの非存在下）または第１のコーティングに塗布することができる特定のエチルセルロースコーティング組成物は、乳化剤、例えば、オレイン酸アンモニウムを活用して水中に均質に懸濁された、サブミクロンからミクロンの粒径範囲、例えば、約０．１〜１０μｍのサイズのエチルセルロースの分散液である。エチルセルロース分散液は、任意選択で、かつ好ましくは可塑剤を含有し得る。適切には、可塑剤として、例えば、セバシン酸ジブチル（ＤＢＳ）、フタル酸ジエチル、クエン酸トリエチル、クエン酸トリブチル、トリアセチン、または中鎖トリグリセリドが挙げられる。コーティング組成物中に存在する可塑剤の量は、所望のコーティングの性質に応じて変動することになる。典型的には、可塑剤は、可塑剤およびエチルセルロースの合計重量の１〜５０％、例えば、約８〜約５０％を占める。このようなエチルセルロース分散液は、例えば、参照により本明細書に組み込まれている米国特許第４，５０２，８８８号に従って製造され得る。本発明で使用するのに適しており、市販されている１つのこのようなエチルセルロース分散液は、Ｃｏｌｏｒｃｏｎ  ｏｆ  Ｗｅｓｔ  Ｐｏｉｎｔ、Ｐａ．、ＵＳＡによって商標Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）の下で販売されている。この販売製品では、エチルセルロース粒子は、例えば、オレイン酸および可塑剤とブレンドされ、次いで、任意選択で押出および溶融される。次いで、溶融した可塑化したエチルセルロースは、例えば、圧力下で、任意選択で高せん断混合デバイスで、例えば、アンモニア処理水中で直接乳化される。オレイン酸アンモニウムは、例えば、可塑化エチルセルロース粒子の分散液を安定化および形成するのに、ｉｎ  ｓｉｔｕで形成することができる。次いで追加の精製水を添加して最終的な固形分を実現することができる。参照により本明細書に組み込まれている米国特許第４，１２３，４０３号も参照。
【０２５３】
商標「Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）」は、エチルセルロースコーティング材料、例えば、乳化剤、例えば、オレイン酸アンモニウムを活用して水中に均質に懸濁された、サブミクロン〜ミクロンの粒径範囲、例えば、サイズが約０．１〜１０μｍのエチルセルロースの分散液を指すのに以下で使用される。特に、商標「Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）」は、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）商標の下でＣｏｌｏｒｃｏｎによって販売されている製品を指すのに本明細書で使用される。
【０２５４】
Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）分散液は、ｐＨに対して相対的に非感受性である再現可能なプロファイルで活性成分の放出速度を調整する第２のコーティングとして使用され得る成膜性ポリマー、可塑剤、および安定剤の組合せの一例である。薬物放出の主要な手段は、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）分散膜を通じた拡散によるものであり、フィルム厚によって直接制御される。Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）の使用が特に好適であり、コーティングされた組成物の溶解を調節するためにコーティングとして塗布されるＳｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）の量を増減することが可能である。別段に明記されていない限り、用語「Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ」の使用は、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ  Ｅ−７−１９０２０、Ｅ−７−１９０３０、Ｅ−７−１９０４０、またはＥ−７−１９０５０に適用し得る。エチルセルロースコーティング配合物、例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ  Ｅ−７−１９０２０は、オレイン酸およびセバシン酸ジブチルとブレンドされ、次いで押出および溶融されたエチルセルロースを含み得る。次いで溶融した可塑化したエチルセルロースは、圧力下で、高せん断混合デバイスで、アンモニア処理水で直接乳化される。オレイン酸アンモニウムは、可塑化エチルセルロース粒子の分散液を安定化および形成するのにｉｎ  ｓｉｔｕで形成される。次いで追加の精製水が添加されて最終的な固形分が実現される。エチルセルロースコーティング配合物、例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ  Ｅ−７−１９０３０は、材料中に分散したコロイド無水シリカをさらに含み得る。エチルセルロースコーティング配合物、例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ  Ｅ−７−１９０４０は、コロイド無水シリカおよびオレイン酸を含む配合物において、特に、セバシン酸ジブチルの代わりに中鎖トリグリセリドを含み得る。エチルセルロースコーティング配合物、例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ  Ｅ−７−１９０５０は、溶融および押出の前にエチルセルロースをオレイン酸とブレンドすることから得ることができる。次いで溶融した可塑化したエチルセルロースは、圧力下で、高せん断混合デバイスで、アンモニア処理水中で直接乳化される。オレイン酸アンモニウムは、可塑化エチルセルロース粒子の分散液を安定化および形成するのにｉｎ  ｓｉｔｕで形成される。しかし、中鎖トリグリセリド、コロイドの無水シリカ、およびオレイン酸を含む配合物が好適である。Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ  Ｅ−７−１９０４０が特に好適である。
【０２５５】
本発明は、エチルセルロースの組合せ、例えば、他のコーティング構成成分、例えば、アルギン酸ナトリウム、例えば、商標名Ｎｕｔｒａｔｅｒｉｃ（商標）の下で入手可能なアルギン酸ナトリウムを含むＳｕｒｅｌｅａｓｅ配合物を使用することも企図する。
【０２５６】
上記に論じたＥＵＤＲＡＧＩＴ（商標）およびＳｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）ポリマーに加えて、適合性である場合、本明細書に開示のコーティングポリマーの任意の組合せをブレンドして追加の遅延放出プロファイルをもたらすことができる。
【０２５７】
遅延放出コーティングは、ポリマー材料の浸透性を増大させるための少なくとも１種の可溶性賦形剤をさらに含むことができる。これらの可溶性賦形剤は、孔形成剤と呼ぶこともでき、または孔形成剤である。適切には、少なくとも１種の可溶性賦形剤、または孔形成剤は、可溶性ポリマー、界面活性剤、アルカリ金属塩、有機酸、糖、多糖、および糖アルコールの中から選択される。このような可溶性賦形剤としては、それだけに限らないが、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリエチレングリコール、水溶性ヒドロキシプロピルメチルセルロース、塩化ナトリウム、界面活性剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびポリソルベートなど、有機酸、例えば、酢酸、アジピン酸、クエン酸、フマル酸、グルタル酸、リンゴ酸、コハク酸、および酒石酸など、糖、例えば、デキストロース、フルクトース、グルコース、ラクトース、およびスクロースなど、糖アルコール、例えば、ラクチトール、マルチトール、マンニトール、ソルビトール、およびキシリトールなど、キサンタンガム、デキストリン、ならびにマルトデキストリン；ならびに結腸中に通常見つかる細菌酵素による分解に感受性の多糖（例えば、多糖としては、コンドロイチン硫酸、ペクチン、デキストラン、グアーガム、およびアミラーゼ、キトサンなどがある）、ならびに上記のいずれかの誘導体がある。一部の実施形態では、ポリビニルピロリドン、マンニトール、および／またはポリエチレングリコールを、可溶性賦形剤として使用することができる。少なくとも１種の可溶性賦形剤は、ポリマーコーティングの総乾燥重量に対して約０．１重量％〜約１５重量％、例えば、ポリマーコーティングの総乾燥重量に対して例えば、約０．５％〜約１０％、約０．５％〜約５％、約１％〜約３％、適切には、約２％の範囲の量で使用することができる。遅延放出コーティングは、ＨＰＭＣを含まない場合がある。
【０２５８】
放出を遅延させ、または延長するなどのための放出速度の調節は、任意の数の方法で実現することができる。機構は、腸内の局所的なｐＨに依存性であっても非依存性であってもよく、所望の効果を実現するのに局所的な酵素活性を利用することもできる。調節放出組成物の例は、当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第３，８４５，７７０号；同第３，９１６，８９９号；同第３，５３６，８０９号；同第３，５９８，１２３号；同第４，００８，７１９号；同第５，６７４，５３３号；同第５，０５９，５９５号；同第５，５９１，７６７号；同第５，１２０，５４８号；同第５，０７３，５４３号；同第５，６３９，４７６号；同第５，３５４，５５６号；および同第５，７３３，５６６号に記載されており、これらのすべては、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれている。
【０２５９】
結腸細菌酵素による（かつ任意選択で、または代わりに膵臓のまたは他の関連した酵素による）分解に感受性である第２のポリマーのＳｕｒｅｌｅａｓｅ（商標）または他のｐＨ非依存性ポリマー物質（例えば、多糖、特にヘテロポリサッカライド）の添加は、第２のポリマーが分解されるＧＩ管の１つまたは複数の部位への活性成分の標的化放出をもたらすのに役立つ。コーティング中に存在する添加される第２のポリマーの量を変更することによって、溶出プロファイルが最適化されて、組成物からのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）の要求される放出がもたらされる場合がある。
【０２６０】
特定の実施形態では、遅延放出コーティングは、少なくとも結腸中での活性成分の放出をもたらす。したがって、一実施形態では、コーティングは、エチルセルロース（好ましくは、上記のもの、特に、例えば、オレイン酸アンモニウムなどの乳化剤および／または例えば、セバシン酸ジブチルもしくは中鎖トリグリセリドなどの可塑剤を用いて製剤化される）を含む。さらに、コーティングは、エチルセルロース（好ましくは上述したような、特に、例えば、オレイン酸アンモニウムなどの乳化剤、および／または例えば、セバシン酸ジブチルもしくは中鎖トリグリセリドなどの可塑剤とともに配合された）、ならびに結腸中に通常見つかる細菌酵素による分解に感受性の多糖の組合せを含んでもよい。このような多糖としては、コンドロイチン硫酸、ペクチン、デキストラン、グアーガム、およびアミラーゼ、キトサンなど、ならびに上記のいずれかの誘導体がある。キトサンが結腸特異的な放出プロファイルを得ることに関連して使用されてもよく、追加的にまたは代替として、ペクチンもそのように使用され得る。
【０２６１】
遅延放出コーティング目的のために多糖をそれ自体で使用することが試みられており、大した成果もなかった。非デンプン多糖のほとんどは、良好な成膜性を欠くという欠点を被っている。また、これらは、ＧＩ管中で膨潤し、多孔質となり、薬物の早期放出をもたらす傾向がある。膵臓のアルファアミラーゼによる分解に対して耐性であるが、結腸細菌酵素によって分解し得る非晶質アミロースでさえ、水性媒体中での膨潤という不利点を有するが、これは、アミロースフィルム中に不溶性ポリマー、例えば、エチルセルロースおよび／またはアクリレートを組み込むことによって制御することができる。しかしアミロースは、水溶性でなく、水不溶性の多糖は除外されないが、細菌酵素分解に感受性の水溶性多糖（ＷＳＰ）の使用は、本発明のこの実施形態に従ってコーティングとして使用される場合、特に有利な結果をもたらす。本発明のこの実施形態における特に好適な多糖は、ペクチンである。入手可能な異なるグレードの、すなわち、異なるメチル化の程度（ＤＭ）、すなわち、メタノールでエステル化されたカルボニル基の百分率を伴ったペクチン、例えば、高メトキシ（ＨＭ）ペクチンとして公知の５０％超のＤＭを有するペクチン、もしくは低メトキシ（ＬＭ）ペクチン、またはＨＭペクチンおよびＬＭペクチンを含むペクチンの組合せを含めて、様々な種類のペクチンが使用され得る。様々なアセチル化の程度（Ｄａｃ）を有するペクチンを使用することもこの実施形態では可能である。総合すると、ＤＭおよびＤａｃ、または置換の程度は、エステル化の程度（ＤＥ）として公知である。様々なＤＥのペクチンが本発明によって使用され得る。ペクチンの代替として、アルギン酸ナトリウムを本発明の一実施形態による多糖として使用してもよい。しかし、他の実施形態は、アミロースおよび／またはアミロースを含有するデンプンを好都合なことには含み得る。例えば、５６％のアミロース百分率を有するＨｙｌｏｎ  Ｖ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｒｃｈ  Ｆｏｏｄ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ）、または７０％のアミロース百分率を有するＨｙｌｏｎ  ＶＩＩを含めて、異なる百分率のアミロースを含有する様々なグレードのデンプンを使用してもよい。残りの百分率は、アミロペクチンである。多糖のペクチン、アミロース、およびアルギン酸ナトリウムは、活性成分の結腸送達を実現するのに特に好適である。
【０２６２】
水溶性多糖、適切にはペクチンは、その他ではエチルセルロース（好ましくはＳｕｒｅｌｅａｓｅ）によってもたらされる、コーティング中の孔の形成剤として作用することができることが判明した。「孔」とは、組成物の表面からコアへのシャフト様の穴を意味するのではなく、むしろ本発明のコーティング上かつコーティング内で確率論的に起こるコーティングの弱点または非存在の範囲を意味する。
【０２６３】
孔形成剤は、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅに関連して以前に記載されている（例えば、ＵＳ２００５／０２２０８７８を参照）。
【０２６４】
本発明の特定の実施形態によれば、遅延放出コーティングは、エチルセルロース、例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（商標）、および水溶性多糖（ＷＳＰ）を含み、ＷＳＰに対するエチルセルロース（特に、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（商標））の割合は、理想的には、コーティングの乾燥重量に対して９０：１０〜９９：１、好ましくは９５：５〜９９：１、より好ましくは９７：３〜９９：１の範囲内、例えば、約９８：２である。適切には、この実施形態では、エチルセルロース、例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（商標）およびＷＳＰを含むコーティングの塗布に起因する組成物の重量増加は、１〜３０％の範囲内である（例えば、３％〜２５％、５％〜１５％、８％〜１４％、１０％〜１２％、１２％〜１８％、または１６％〜１８％、適切には、重量増加は、約１１％、約１１．５％、または約１７％である）。この実施形態におけるＷＳＰはペクチンであることが特に好適である。エチルセルロース、例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（商標）を含むコーティングを使用する特に好都合な重量増加は、５〜１２％の範囲または８〜１２％の範囲内のものである。
【０２６５】
したがって一実施形態では、第２のコーティングは、エチルセルロースおよび水溶性多糖（特にペクチン）を含み、水溶性多糖（ＷＳＰ）は、第２のコーティングの乾燥重量に対して０重量％〜約１０重量％、任意選択で、０重量％または０．１重量％〜約１０重量％の量で存在する。適切には、ＷＳＰは、第２のコーティングの総乾燥重量に対して約０．５％〜約１０％、例えば、約０．５％〜約５％、約１％〜約３％、適切には約２％の量で存在する。この実施形態では、ＷＳＰは、好ましくはペクチンである。この実施形態では、第２の組成物は、適切には可塑剤をさらに含む。適当な可塑剤としては、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（商標）に関して上述したものがある。適切には、この実施形態における第２のコーティングの塗布に起因する組成物の重量増加は、１〜３０％の範囲内である（例えば、３％〜２５％、５％〜１５％、８％〜１４％、１０％〜１２％、１２％〜１８％、または１６％〜１８％、適切には、重量増加は、約１１％、約１１．５％、または約１７％である）。
【０２６６】
実施形態では、遅延放出ポリマーは、水溶性セルロースエーテルではない。第２のコーティングが遅延放出ポリマーを含むか、またはそれである場合、遅延放出ポリマーは、第１のコーティングの水溶性セルロースエーテルと同じでなくてもよい。したがって、第２のコーティングは、第１のコーティングと同じでなくてもよい。
【０２６７】
第１のコーティング
本発明は、水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含む第１のコーティングを有してもよい医薬組成物を提供する。本発明は、ポリマーが水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含む、第１のポリマーコーティングを有する医薬組成物を提供する。水溶性セルロースエーテルは、例えば、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースから選択してもよい。
【０２６８】
適切には、第１のコーティング（すなわち、サブコーティング）の材料は、組成物上の第２のコーティングとは異なる。例えば、第１のコーティングが、セルロースエーテルの水溶性エステルであり、またはそれを含む場合、第２のコーティングの主要な構成成分（例えば、５０％より多い）は、第１のコーティングのものと異なるポリマーであり、またはそれを含む。したがって、第１および第２のコーティングは、適切には、材料の２つの層を組成物の一部としてもたらす。第２のコーティングが構成成分の混合物を含む場合、外側の第２のコーティングの少数の構成成分が第１のコーティングの材料と同一であってもよいことは、理解されるべきである。例として、第１のコーティングがＨＰＭＣであり、またはそれを含み、第２のコーティングがエチルセルロースを含む場合、エチルセルロースは、少量（例えば、５０％未満、４０％未満、３０％未満、または２０％未満）の第１のコーティング材料、この例ではＨＰＭＣを任意選択でさらに含んでもよい。このような実施形態において、サブコートおよび第２のコーティングは、異なると見なされる。
【０２６９】
水溶性セルロースエーテルは、アルキルセルロース、例えば、メチルセルロース、エチルメチルセルロース；ヒドロキシアルキルセルロース、例えば、ヒドロキシエチルセルロース（Ｃｅｌｌｏｓｉｚｅ（商標）およびＮａｔｒｏｓｏｌ（商標）として入手可能）、ヒドロキシプロピルセルロース（Ｋｌｕｃｅｌ（商標）として入手可能）またはヒドロキシメチルセルロース；ヒドロキシアルキルアルキルセルロース、例えば、ヒドロキシエチルメチルセルロース（ＨＥＭＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（Ｍｅｔｈｏｃｅｌ（商標）、Ｐｈａｒｍａｃｏａｔ（商標）、Ｂｅｎｅｃｅｌ（商標）として入手可能）またはエチルヒドロキシエチルセルロース（ＥＨＥＣ）；およびカルボキシアルキルセルロース、例えば、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）から選択される水溶性セルロースエーテルであってもよい。適切には、水溶性セルロースエーテルは、例えば、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシルプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースから選択されてもよい。
【０２７０】
水溶性セルロースエーテルは、組成物へのフィルムまたはコーティングとしての塗布に適した低粘度ポリマーであってもよい。ポリマーの粘度は、約２〜約６０ｍＰａ・ｓ、例えば、約２〜約２０ｍＰａ・ｓの粘度、約２〜約８ｍＰａ・ｓの粘度、より適切には、約４〜約１０ｍＰａ・ｓ、例えば、約４〜約６ｍＰａ・ｓの粘度であってもよい。あるいは、ポリマーの粘度は、丁度述べられた範囲のいずれかまたは全ての外側にあってもよく、例えば、２０ｍＰａ・ｓより上であってもよい。あるいは、ポリマーの粘度は、丁度述べられた範囲のいずれかまたは全ての外側にあってもよく、例えば、２０ｍＰａ．ｓより上であってもよい。ポリマーの粘度は、ＡＳＴＭ標準的方法（Ｄ１３４７およびＤ２３６３）を用いたＵｂｂｅｌｏｄｅ粘度計を用いて、水中の２％のポリマー溶液の粘度を２０℃で測定することにより、決定され得る。
【０２７１】
水溶性セルロースエーテルは、水溶性ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣまたはヒプロメロース）であってもよい。ＨＰＭＣは、セルロースを修飾して、ヒドロキシ基をメトキシ基およびヒドロキシプロピル基で置換することにより、調製される。セルロース鎖中のそれぞれのアンヒドログルコース単位は、３つのヒドロキシル基を有する。アンヒドログルコース単位上の置換基の量は、置換の程度として表されてもよい。それぞれの単位上の全３つのヒドロキシル基が置換されるなら、置換の程度は３である。環上の置換基の数は、ＨＰＭＣの特質を決定する。置換の程度はまた、存在するメトキシ基およびヒドロキシプロピル基の重量％として表されてもよい。適切には、ＨＰＭＣは、約１９〜約３０％のメトキシ置換、および約７〜約１２％のヒドロキシプロピル置換を有する。特にＨＰＭＣは、２５〜３０％のメトキシ置換、および７〜１２％のヒドロキシプロピル置換を有する。適切には、ＨＰＭＣは、組成物へのフィルムまたはコーティングとしての塗布に適した低粘度ＨＰＭＣである。ＨＰＭＣの粘度は、適切には、約２〜６０ｍＰａ・ｓ、例えば、約２〜約２０ｍＰａ・ｓであり、より適切には、約４〜約１０ｍＰａ・ｓの粘度である。ＨＰＭＣの粘度は、ＡＳＴＭ標準的方法（Ｄ１３４７およびＤ２３６３）を用いたＵｂｂｅｌｏｄｅ粘度計を用いて、水中の２％のＨＰＭＣ溶液の粘度を２０℃で測定することにより、決定される。このようなＨＰＭＣは、例えば、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ（商標）、例えば、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ（商標）Ｅ５を含むＭｅｔｈｏｃｅｌ（商標）Ｅとして入手可能である。
【０２７２】
第１のコーティングがセルロースエーテルの水溶性誘導体であり、またはそれを含む場合、誘導体は、例えば、セルロースエーテルの水溶性エステルであってもよい。セルロースエーテルの水溶性エステルは周知であり、１種または複数の適切なアシル化剤で形成された、セルロースエーテルのエステルを含んでもよい。アシル化剤は、例えば、適切な酸もしくは酸無水物、またはアシルハロゲン化物であってもよい。したがって、セルロースエーテルのエステルは、混合エステルを付与するための単一のエステル部分、または２つもしくはそれ超のエステル部分を含有してもよい。セルロースエーテルの水溶性エステルの例は、セルロースエーテル（例えば、ＨＰＭＣ）の水溶性のフタル酸エステル、酢酸エステル、コハク酸エステル、プロピオン酸エステル、または酪酸エステルであり得る。適切には、セルロースエーテルの水溶性エステルは、セルロースエーテル（例えば、ＨＰＭＣ）の水溶性のフタル酸エステル、酢酸−コハク酸エステル、プロピオン酸エステル、酢酸−プロピオン酸エステル、または酢酸−酪酸エステルである。
【０２７３】
１つの実施形態において、セルロースエーテルの水溶性エステルは、サブコーティングに関連して上で記載された水溶性セルロースエーテルのいずれかの水溶性エステルであり、またはそれを含んでもよい。
【０２７４】
セルロースエーテルの特定の水溶性エステルは、ＨＰＭＣの水溶性エステルである。ｐＨ５．５超で水に可溶性であるＨＰＭＣのエステルは、イオン化可能なカルボキシル基の存在がポリマーを高いｐＨ（ＬＦグレードについて５．５超、およびＨＦグレードについて６．８超）で可溶化させる、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）またはヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）であり、またはそれを含んでもよい。これらのポリマーは、信越化学工業株式会社から市販される。
【０２７５】
セルロースエーテル含有コーティングは、ヒプロメロースを含み、またはヒプロメロースであってもよく、例えば、それは、ヒプロメロース、二酸化チタン、およびポリエチレングリコールの混合物から作製されてもよく、そのコーティングは、少なくとも２０重量％のヒプロメロース、任意選択で少なくとも５０％もしくは少なくとも７５重量％のヒプロメロース、例えば、少なくとも８０重量％、または少なくとも８５重量％もしくは９０重量％のヒプロメロースを含んでもよい。それ故、そのコーティングを形成させるために用いられるコーティング材料は、先行する文章で述べられた、乾燥重量百分率のヒプロメロースを含んでもよい。
【０２７６】
コーティングが、ヒプロメロース、二酸化チタン、およびポリエチレングリコールの混合物を用いることが所望される場合、Ｃｏｌｏｒｃｏｎにより市販される製品、Ｏｐａｄｒｙ  ｗｈｉｔｅを含む、このような混合物に対応する市販品が、入手可能である。より一般的には、商標ＯｐａｄｒｙおよびＯｐａｄｒｙ  ＩＩの下で市販される、述べられた種々の製品が存在し得る。さらに、非限定的な例は、Ｏｐａｄｒｙ  ＹＳ−１−７７０６−Ｇ  ｗｈｉｔｅ、Ｏｐａｄｒｙ  Ｙｅｌｌｏｗ  ０３Ｂ９２３５７、Ｏｐａｄｒｙ  Ｂｌｕｅ  ０３Ｂ９０８４２を含む。これらの製剤は、使用の少し前に水中に希釈され得る乾燥フィルムコーティング製剤として入手可能である。ＯｐａｄｒｙおよびＯｐａｄｒｙ  ＩＩ製剤は、セルロースフィルム形成性ポリマー（例えば、ＨＰＭＣおよび／またはＨＰＣ）を含み、ポリデキストロース、マルトデキストリン、可塑剤（例えば、トリアセチン、ポリエチレングリコール）、ポリソルベート８０、着色剤（例えば、二酸化チタン、１種または複数の染料またはレーキ）、および／または他の適切なフィルム形成ポリマー（例えば、アクリレート−メタアクリレートコポリマー）を含有してもよい。適切なＯＰＡＤＲＹまたはＯＰＡＤＲＹ  ＩＩ製剤は、可塑剤、および１種または複数のマルトデキストリン、ならびにポリデキストロース（ａ）トリアセチン、およびポリデキストロース、またはマルトデキストリンもしくはラクトース、あるいはｂ）ポリエチレングリコール、およびポリデキストロースまたはマルトデキストリンを含むが、これらに限定されない）を含んでもよい。特に好ましい市販品は、Ｏｐａｄｒｙ  Ｗｈｉｔｅ（ＨＰＭＣ／ＨＰＣベース）、およびＯｐａｄｒｙ  ＩＩ  Ｗｈｉｔｅ（ＰＶＡ／ＰＥＧベース）である。
【０２７７】
セルロースエーテル含有コーティングはまた、水、および第１のコーティングのポリマーを含む単純溶液として塗布されてもよい。例えば、ポリマーがＨＰＭＣ、例えば、Ｍｅｔｈｏｃｅｌなどである場合、第１のコーティングは、ＨＰＭＣの水溶液または水分散液としてコアに塗布されてもよい。任意選択で、コーティング溶液は、アルコールのような他の溶媒を含んでもよい。あるいは、コーティングは、揮発性有機溶媒中の溶液または分散液として塗布されてもよい。
【０２７８】
適切には、水溶性セルロースエーテルを含有する第１のコーティングは、コーティングを塗布する前の組成物の重量に対して、０．５重量％〜４０重量％（例えば、０．５重量％〜３０重量％、０．５重量％〜２０重量％、１重量％〜２５重量％、１重量％〜１５重量％、１重量％〜６重量％、１重量％〜４重量％、４重量％〜６重量％、６重量％〜１０重量％、９重量％〜１５重量％、または１２重量％〜１５重量％）のコーティングに起因する組成物の重量増加に対応する量で存在する。水溶性セルロースエーテルを含有する第１のコーティングは、コーティングを塗布する前のコアまたは組成物の重量に対して、１重量％〜１０重量％、４重量％〜１０重量％、４重量％〜８重量％、および５重量％〜８重量％のコーティングに起因する組成物の重量増加に対応する量で存在する。
【０２７９】
別の実施形態において、水溶性セルロースエーテルを含有する第１のコーティングは、第１のコーティングを塗布する前の組成物の重量に対して、９〜３０重量％、適切には、９重量％〜２０重量％、または特に１０重量％〜１５重量％から選択される範囲内のコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在する。
【０２８０】
適切には、水溶性セルロースエーテルを含有する第１のコーティングは、少なくとも５μｍ、適切には、約５μｍ〜約１ｍｍ、例えば、約１０μｍ〜約１ｍｍ、約１０μｍ〜約５００μｍ、約５０μｍ〜約１ｍｍ、または約５０μｍ〜約５００μｍの組成物上のコーティング厚をもたらす。それ故、厚さは、約１００μｍ〜約１ｍｍ、例えば、１００μｍ〜約７５０μｍ、または約１００μｍ〜約５００μｍであってもよい。厚さは、約２５０μｍ〜約１ｍｍ、例えば、約２５０μｍ〜約７５０μｍ、または２５０μｍ〜約５００μｍであってもよい。厚さは、約５００μｍ〜約１ｍｍ、例えば、約７５０μｍ〜約１ｍｍ、または約５００μｍ〜約７５０μｍであってもよい。それ故、厚さは、約１０μｍ〜約１００μｍ、例えば、約１０μｍ〜約５０μｍ、または約５０μｍ〜約１００μｍであってもよい。
【０２８１】
第１のコーティングが水溶性セルロースエーテルを含む場合、セルロースエーテルは、適切には、第１のコーティングの乾燥重量の少なくとも４０重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、８０重量％、８５重量％または９０重量％を形成する。あるいは水溶性セルロースエーテルは第１のコーティングである。
【０２８２】
コーティング方法に関連して以下でより詳細に記載される通り、水溶性セルロースエーテルを含有する第１のコーティングが塗布される前に、本発明の組成物を乾燥させることが好ましい。
【０２８３】
遅延放出コーティングを塗布する前に、水溶性セルロースエーテルを含有する、本出願の他の場所ではサブコートと呼ばれるサブコーティング（したがって、サブコートと第１のコーティングは等価である）を、薬学的活性成分を含むコアに塗布することが、予想される利点を提供することが判明した。そのようなサブコーティングの存在は、本発明による遅延放出組成物の溶解特質を増強することが判明した。特に、そのようなサブコーティングの存在は、組成物からの活性成分の放出速度を増加させ、また、そのようなサブコーティングを使用せずに調製された組成物と比較して設定された期間に放出される活性成分の量を増加させることが判明した。遅延放出外側コーティングに加えて、サブコーティングの存在は、組成物からの薬物の放出を遅延させるか、または阻害するように作用し、およびより厚いコーティングが存在するため、所与の時間で、放出される薬物が少ないと予想されたため、これらの知見は予想外のものである。しかしながら、これらの予想とは対照的に、活性成分の放出の程度と速度は両方とも、そのようなサブコーティングを含まない組成物と比較して増加する。したがって、水溶性セルロースエーテルを含むか、またはそれであるサブコートと、サブコートの外側の遅延放出コーティングとを含む本発明による遅延放出組成物は、ユニークな溶出プロファイルを提供する。そのようなサブコーティングの存在はまた、特に、コアがミニビーズの形態にある場合、バッチ間変動性を低減することも判明した。したがって、水溶性セルロースエーテルを含むか、またはそれであるサブコーティングはまた、より一貫した溶出プロファイルの結果として患者内および患者間変動性を低減させることができる。本発明によるサブコーティングされた組成物のユニークな特質（特に、溶出プロファイル）は、本発明による組成物の好ましい薬物動態特質に寄与すると予想される。本発明の水溶性セルロースエーテルを含有するコーティングは、異なるバッチのミニビーズの放出プロファイル間の変動性を低減させるのに有用であり得る。
【０２８４】
したがって、一実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含む組成物であって、組成物が第１のコーティングをさらに含み、
第１のコーティングが水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含む、
組成物が提供される。
【０２８５】
第２のコーティング
組成物は、第１のコーティングに加えて、遅延放出ポリマーを含むか、またはそれである第２のコーティングを有してもよい。組成物は、本明細書で定義される第２のコーティングを有してもよいが、第１のコーティングは存在しなくてもよい。同様に、組成物は、第１のコーティングを有してもよく、第２のコーティングは存在しなくてもよい。
【０２８６】
第２のコーティングは、４％〜２５％、任意選択で、４％〜１５％、４％〜１２％、１５％〜２５％、８％〜１３％、２％〜２０％、５％〜１５％、８％〜１５％、８％〜１２％、２％〜８％、３％〜７％、または４％〜６％の重量増加で存在してもよい。
【０２８７】
一実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含む組成物であって、組成物が第１のコーティングおよび第１のコーティングの外側の第２のコーティングをさらに含み、
第１のコーティングが水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含み、
第２のコーティングが遅延放出コーティングであるか、またはそれを含む、例えば、遅延放出ポリマーであるか、またはそれを含む、
組成物が提供される。
【０２８８】
一実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているシクロスポリン、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含む組成物であって、第１のコーティングの非存在下で第２のコーティングをさらに含み、第２のコーティングが遅延放出コーティングである、またはそれを含む、例えば、遅延放出ポリマーである、またはそれを含む、組成物が提供される。
【０２８９】
本発明の態様は、活性成分を含有するミニビーズの少なくとも２つの集団を含む複数ミニビーズ組成物であって、少なくとも１つのミニビーズ集団のメンバーが本明細書に記載のミニビーズ（すなわち、ミニビーズ形式の本発明の組成物）である、複数ミニビーズ組成物に存在する。２つの集団は異なることが理解されるであろう。そのような複数のミニビーズ集団組成物は、以下の３つの集団のうちの２つ以上：
水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含むコーティングを有するが、例えば、本明細書に記載されるような、外側コーティングを有さない集団；および／または
水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含む第１のコーティングと、例えば、本明細書に記載されるような、遅延放出コーティング、例えば、遅延放出ポリマーであるか、またはそれを含むコーティングであるか、またはそれを含む第２のコーティングとを有する集団；および／または
例えば、本明細書に記載されるような、遅延放出コーティング、例えば、第１のコーティングの非存在下で遅延放出ポリマーであるか、またはそれを含むコーティングであるか、またはそれを含む第２のコーティングであるか、またはそれを含む第２のコーティングを有する集団
を含むか、またはそれからなっていてもよい。
【０２９０】
複数のミニビーズ組成物のそれぞれの集団の対応するミニビーズは、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）および他の集団のいくつか、もしくは全部のミニビーズを含有してもよく、または一方の集団はＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を含有し、別の集団はそれと異なる活性成分、例えば、異なる組合せを含有してもよい。
【０２９１】
複数集団組成物は、胃腸管の異なる領域にＮＦＡＴ阻害剤を送達するのに使用するためのものであってもよい。
【０２９２】
複数集団組成物のミニビーズは、例として、ゲルカプセル剤またはサッシェ剤中に含有されていてもよい。
【０２９３】
第２のコーティングは、第１のコーティングの外側であり、本明細書に記載の遅延放出コーティングのいずれかであってもよい。特に、第２のコーティングは、上で記載されたｐＨ依存性ポリマー調節放出コーティングであり、またはそれを含む。例えば、第２のコーティングは、腸溶性コーティングまたはｐＨ依存性コーティングであり、またはそれを含んでもよい。第２のコーティングは、細菌酵素または他の酵素により分解可能なポリマーを含むポリマーの混合物を含んでもよい。特定の実施形態において、第２のコーティングは、エチルセルロースおよび任意選択で、水溶性多糖、特に、結腸の細菌による分解に感受性のもの、適切には、ペクチンを含む。したがって、第２のコーティングは、上で記載されたＳｕｒｅｌｅａｓｅ−ペクチン混合物を含んでもよい。
【０２９４】
第１および第２のコーティングの両方が同時に組成物中に存在する必要はない。例えば、組成物は、第１のコーティングの非存在下で第２のコーティング（外側コーティング）を含んでもよい。逆に、組成物は、第２のコーティングの非存在下で第１のコーティングを含んでもよい。
【０２９５】
第１および第２のコーティングは、独立に水性系コーティングであってもよく、または溶媒系コーティングであってもよい。これは、第１および／または第２のコーティングが、コアもしくは組成物に塗布される、および／または水性系組成物もしくは溶媒系（非水性溶媒系）組成物としてコアもしくは組成物に塗布される前にそれを製剤化することができることを意味する。水性系または溶媒系コーティング組成物は、水または溶媒中のコーティング材料の懸濁液または溶液であってもよい。
【０２９６】
一実施形態では、組成物はコアと外側コーティング（本明細書では第２のコーティングとも呼ばれる）とを含み、コアは、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含み、界面活性剤は、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない。組成物は、任意選択で、サブコートをさらに含んでもよい。
【０２９７】
本発明の一実施形態では、コア、第１のコーティング、および第１のコーティングの外側の第２のコーティングを含む組成物が提供され、
コアは、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含み、界面活性剤は、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではなく、
第１のコーティングは、水溶性セルロースエーテル、特にヒドロキシプロピルメチルセルロースであり、またはそれを含み、
第２のコーティングは、調節放出コーティングまたは遅延放出コーティング、特にｐＨ非依存性調節放出コーティングであり、またはそれを含み、
第１のコーティングは、第１のコーティングを塗布する前の組成物の重量に対して、（ｉ）８重量％〜１５重量％、（ｉｉ）８重量％〜１２重量％、例えば、約１０重量％、または（ｉｉｉ）２．５重量％〜６重量％、例えば、約５重量％から選択される範囲内の第１のコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在し、
第２のコーティングは、第２のコーティングを塗布する前の組成物の重量に対して、（ａ）４〜２０重量％、（ｂ）７．５重量％〜２０重量％、（ｃ）１０重量％〜１２重量％、例えば、約１１重量％もしくは約１１．５重量％、または（ｄ）約１６重量％〜約１８重量％、例えば、約１７重量％から選択される、第２のコーティングに起因する組成物の重量増加に対応する量で存在する。
【０２９８】
直前の段落の実施形態における第１および第２のコーティングは、適切には、上でまたは以下で記載される第１および第２のコーティングのいずれかである。したがって、必要であれば、このセクションに記載されるコーティングは、本明細書に記載される組成物のいずれかに塗布されて、遅延放出コーティングをもたらし得ることが意図される。コーティングは、本出願に記載されるポリマーマトリックスおよび薬学的活性成分を含むコアに、調節放出コーティングをもたらすのに特に有用である。
【０２９９】
外側バリアまたは保護コーティング
本明細書に記載の組成物は、第１および／または第２のコーティングの外側、例えば、第２のコーティング、調節放出コーティングの外側の保護コーティングを含んでもよい。保護コーティングは、例えば、組成物を最終剤形に製剤化することから生じる損傷から、または組成物の取り扱い、輸送もしくは貯蔵中に、調節放出コーティングを保護することを助け得る。保護コーティングは、組成物の外側表面に適切に塗布される。保護コーティングは、保護コーティングが第２のコーティング（調節放出コーティング）と接触するように、第２のコーティング（調節放出コーティング）に直接塗布されてもよい。保護コーティングは、使用での場合、適切には、組成物からのシクロスポリンＡの放出に逆に影響しない水溶性コーティングである。適切には、保護コーティングは、水溶性ポリマーであり、またはそれを含む。保護コーティングは、水溶性セルロースまたはＰＶＡフィルム形成性ポリマーを含んでもよい。適切には、保護コーティングは、本明細書に記載されるＯｐａｄｒｙ（ＨＰＭＣ／ＨＰＣベース）、Ｏｐａｄｒｙ  ＩＩ（ＰＶＡ／ＰＥＧベース）、またはポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフトコポリマー（Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ  ＩＲ）であり、またはそれを含んでもよい。保護コーティングは、約２〜約５０μｍの層として存在してもよい。適切には、保護コーティングは、保護コーティングを塗布する前の組成物の重量に対して、約０．５〜約１０％の重量増加を付与するように塗布される。
【０３００】
連続相ポリマーマトリックス（水相）
明細書のこのセクションは、両方ともヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスに関するポリマーマトリックスと連続相に関する。したがって、ポリマーマトリックスまたは連続相に対する参照は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスと同等であり得る。さらに、ポリマーマトリックスに関連する本明細書のこのセクションは、組成物の重量パーセントの点から組成要素の量を列挙する。明細書のこのセクションの文脈において、意味するものは、コーティングを除く、組成物またはコアの乾燥重量の重量パーセントである。
【０３０１】
組成物またはコアは、マトリックスまたは連続相、およびまた、分散相または油相を含んでもよい。同様に、本発明の液体組成物は、ヒドロゲル形成性ポリマーを含む水相を含む。適切には、組成物またはコアの連続相またはマトリックス相は、ヒドロゲル形成性ポリマーであるか、またはそれを含む。ヒドロゲル形成性ポリマーは、ヒドロゲルを形成する能力があるポリマーである。ヒドロゲルは、水性液体媒体の容量に広がる親水性ポリマー鎖のネットワーク（マトリックス）を含む、静止時に流動を示さない固体材料または半固体材料として記載されてもよい。ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、ヒドロゲル形成性ポリマー鎖のネットワークであり、したがって、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、マトリックスを形成させた、または形成を引き起こしたヒドロゲル形成性ポリマーである。
【０３０２】
組成物またはコアは、ゼラチン、寒天、アガロース、ペクチン、カラギーナン、キトサン、アルギネート、デンプン、キサンタンガム、アラビアゴム、グアーガム、ローカストビーンガム、ポリウレタン、ポリエーテルポリウレタン、セルロース、セルロースエステル、セルロースアセテート、セルローストリアセテート、架橋結合ポリビニルアルコール、アクリル酸のポリマーおよびコポリマー、ヒドロキシアルキルアクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ジエチレングリコールモノアクリレート、２−ヒドロキシプロピルアクリレート、３−ヒドロキシプロピルアクリレート、メタクリル酸のポリマーおよびコポリマー、ヒドロキシエチルメタクリレート、ジエチレングリコールモノメタクリレート、２−ヒドロキシプロピルメタクリレート、３−ヒドロキシプロピルメタクリレート、ジプロピレングリコールモノメチルアクリレート、ビニルピロリドン、アクリルアミドポリマーおよびコポリマー、Ｎ−メチルアクリルアミド、Ｎ−プロピルアクリルアミド、メタクリルアミドポリマーおよびコポリマー、Ｎ−イソプロピルメタクリルアミド、Ｎ−２−ヒドロキシエチルメタクリルアミド、およびビニルピロリドン、ならびにこれらの組合せからなる群から選択されるヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含んでもよい。特定の実施形態において、上の物質のいずれかの２成分または３成分などの組合せが見越される。
【０３０３】
さらなる実施形態において、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、ゼラチン、寒天、ポリエチレングリコール、デンプン、カゼイン、キトサン、ダイズタンパク質、ベニバナタンパク質、アルギネート、ゲランガム、カラギーナン、キサンタンガム、フタル酸化ゼラチン、コハク酸化ゼラチン、セルロースフタレート−アセテート、含油樹脂、ポリビニルアセテート、アクリルもしくはメタクリルエステルのポリメリセート、およびポリビニルアセテート−フタレート、ならびに上記のいずれかの任意の誘導体、または１種もしくは複数のこのようなヒドロゲル形成性ポリマーの混合物からなる群から選択される。
【０３０４】
ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスはまた、親水コロイド、すなわち、コロイド粒子が水中に分散され、入手可能な水の量により、ゲルの形成が可能になる、コロイド系としても言及され得る。実施形態において、非可逆性（単一状態）親水コロイドに相対する、可逆性親水コロイド、好ましくは、熱可逆性親水コロイド（例えば、寒天、アガロース、ゼラチンなど）を用いることが好ましい。熱可逆性親水コロイドは、ゲルおよびゾル状態で存在し、熱の付加または排出を伴う状態の間で交互に起こり得る。ゼラチン、寒天、およびアガロースは、熱可逆性の再水和可能なコロイドであり、特に好ましい。例えば、コハク酸化ゼラチンまたはフタル酸化ゼラチンのようなゼラチン誘導体も考慮される。本発明により用いられ得る熱可逆性親水コロイドは、個別に、または組合せにおいてに関わらず、例えば、カラギーナン（海藻から抽出される）、ゼラチン（ウシ、ブタ、魚、または野菜供給源から抽出される）、寒天（海藻由来）、アガロース（寒天から得られる多糖）、およびペクチン（柑橘類の皮、リンゴ、および他の果実から抽出される）のような天然供給源に由来するものを含む。非動物性ベースの親水コロイドは、ある種の適用、例えば、宗教上または健康上の理由のため動物製品を摂取することを望まないベジタリアンまたは個体への投与に好ましいかもしれない。カラギーナンの使用に関連して、米国特許出願公開第２００６／００２９６６０（Ａ１）号（Ｆｏｎｋｗｅら）が参照され、その全体が、参照により本明細書に組み込まれる。ヒドロゲル形成性ポリマーは、１つもしくは複数の他の熱可逆性親水コロイド、例えば、当該熱可逆性親水コロイドの１つもしくは複数の他のものとのゼラチンの組合せを含み、または１種もしくは複数の他の熱可逆性親水コロイド、例えば、丁度挙げられた熱可逆性親水コロイドの１種もしくは複数の他のものとのゼラチンの組合せであってもよい。ヒドロゲル形成性ポリマーは、寒天とのゼラチンの組合せを含み、または寒天とのゼラチンの組合せであってもよく、任意選択で、少なくとも１種のさらなる熱可逆性親水コロイドが、組合せ、例えば、丁度挙げられたものに含まれてもよい。
【０３０５】
熱可逆性コロイドは、他のヒドロゲル形成性ポリマーを超える利益を提示する。熱可逆性コロイドのゲル化または硬化は、例えば、液体冷却バスにおいて、または気流によりコロイドを冷却することにより起こる。化学的にもたらされる、他のヒドロゲル形成性ポリマーのゲル化は、硬化方法が起こるのに時間がかかり得るので、組成物内容物のゲル化媒体への漏出を導き得る。組成物の内容物の漏出は、組成物内の有効成分の不正確な量を導き得る。熱可逆性コロイドはまた、熱可逆性ゲルとしても公知であり、それ故、ヒドロゲル形成体は、熱可逆性ゲル化剤であることが好ましい。
【０３０６】
好適なヒドロゲル形成体に塗布され得る別の用語は、「サーモトロピック」であり、サーモトロピックゲル化剤（読者が推論するであろうものが、本発明で用いられるヒドロゲル形成体として好ましい）は、温度の変化によりゲル化を生じるものであり、このようなゲル化剤は、ゲル化が化学的に誘導されるもの、例えば、ゲル化がイオンにより誘導されるイオンチャネル型ゲル化剤、例えば、キトサンより迅速にゲル化することができる。それ故、本発明の実施形態において、ヒドロゲル形成体は、サーモトロピックゲル形成性ポリマー、またはこのようなポリマーの組合せである。
【０３０７】
コアを調製するための組成物の製造は、ヒドロゲル形成性ポリマーが溶液として存在し、好ましくは、水溶液であることが必要であり得る。ヒドロゲル形成性ポリマーは、本明細書に記載される通り、製造中の水相の５重量％から５０重量％の間、好ましくは、１０重量％から３０重量％の間、なおより好ましくは、１５重量％から２０重量％の間を表す。加えて、ヒドロゲル形成性ポリマーは、８〜３５％（例えば、１５〜２５％、好ましくは、１７〜１８％）ヒドロゲル形成性ポリマー、６５％〜８５％（好ましくは、７７〜８２％）水、および任意選択で１〜５％（好ましくは、１．５〜３％）ソルビトールを含んでもよい。水相プレミックス中の本界面活性剤（例えば、陰イオン性界面活性剤）が、０．１〜５％（好ましくは、０．５〜４％）の量で存在し得る場合、全ての部分は、水相の重量による。
【０３０８】
実施形態において、組成物は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスの組成の乾燥重量に対して、少なくとも２５重量％、適切には、少なくとも４０重量％を構成する。例えば、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、組成物の２５〜７０％、例えば、４０〜７０％、適切には、４５〜６０％存在し、ここで、％は、組成物の乾燥重量に対する重量による。
【０３０９】
実施形態において、ヒドロゲル形成性ポリマーは、薬学的に許容されるポリマーである。
【０３１０】
ある種の実施形態において、ヒドロゲル形成性ポリマーはゼラチンである。ある特定の実施形態では、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスはゼラチンである。ある種の実施形態において、ヒドロゲル形成性ポリマーは、ゼラチンを含む。ある種の実施形態において、ゼラチンは、組成物の少なくとも３０％、例えば、３０〜７０％または４０〜７０％、適切には、４０〜６０％を構成し、％は、組成物の乾燥重量に対する重量による。
【０３１１】
ヒドロゲル形成性ポリマーは、可塑剤、例えば、ソルビトールもしくはグリセリン、またはこれらの組合せを任意選択で含んでもよい。特に１種または複数の可塑剤が、ゼラチンと組み合わされてもよい。
【０３１２】
ヒドロゲル形成性ポリマーが、ゼラチンを含み、またはゼラチンである実施形態において、１９２５年にＯ．Ｔ．Ｂｌｏｏｍにより開発されたゲルまたはゼラチンの強度の測定値である、「ブルーム強度」が、本明細書により参照される。試験は、ゲル４ｍｍの表面を、それを破壊することなく偏向させるのに、プローブ（普通は、直径０．５インチを有する）により必要とされる重量（グラム）を決定する。結果は、ブルーム（グレード）で表され、通常３０から３００ブルームの間の範囲になる。ゼラチンにおいてブルーム試験を行うために、６．６７％のゼラチン溶液が、試験される前に１７〜１８時間１０℃にて保たれる。
【０３１３】
ヒドロゲル形成性ポリマーが、ゼラチンを含み、またはゼラチンであるとき、ゼラチンのブルーム強度は、１２５ブルーム〜３００ブルーム、２００ブルーム〜３００ブルーム、好ましくは、２５０ブルーム〜３００ブルームの範囲にあってもよい。より高いブルーム強度のゼラチンは、より高い濃度のより低いブルーム強度のゼラチンにより置き換えられ得ることは、理解されるべきである。
【０３１４】
本発明により、ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、ゼラチンを含み、またはゼラチンである実施形態において、ゼラチンは、種々の手段により供給され得る。例えば、それは、動物の皮膚、白色結合組織、または骨のようなコラーゲン材料の部分的加水分解により、得ることができる。Ａタイプゼラチンは、酸処理によりブタ皮膚から主にもたらされ、ｐＨ７からｐＨ９の間の等電点を示し、一方、Ｂタイプゼラチンは、骨および動物（ウシ）の皮膚のアルカリ処理からもたらされ、ｐＨ４．７からｐＨ５．２の間の等電点を示す。Ａタイプゼラチンが、若干好ましい。本発明で使用するためのゼラチンはまた、冷水魚の皮からもたらされてもよい。ＡタイプゼラチンとＢタイプゼラチンの混合物を本発明で用いて、ビーズ製造に必要な粘度およびブルーム強度特性を有するゼラチンが得られ得る。
【０３１５】
より低い温度のゼラチン（またはゼラチン誘導体、もしくは融点低下剤とのゼラチンの混合物）、またはより低い温度で固体化されることができる他のポリマーマトリックス（例えば、アルギン酸ナトリウム）がまた用いられ得る。それ故、低い温度のゼラチンを含み、または低い温度のゼラチンであるポリマーが、好ましいマトリックスポリマーであると考えられる。
【０３１６】
本発明により、ヒドロゲル形成性ポリマーまたはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスが、ゼラチンを含み、またはゼラチンである実施形態において、本発明の組成物の硬さを調整するための可塑剤または軟化剤をゼラチンに添加することにより、出発ゼラチン材料を製造前に好ましく修飾して、「軟ゼラチン」が作られる。可塑剤の添加は、溶出、および／または例えば、コーティングのようなさらなる処理を最適化するのに望ましい、増強された柔らかさおよび柔軟性を達成する。ゼラチンまたは別のヒドロゲル形成性ポリマーとの組合せに有用な本発明の可塑剤は、グリセリン（１，２，３−プロパントリオール）、Ｄ−ソルビトール（Ｄ−グルシトール）、ソルビトールＢＰ（非結晶化ソルビトール溶液）もしくはＤ−ソルビトールの水溶液、ソルビタン（例えば、Ａｎｄｉｄｒｉｂｏｒｂ  ８５／７０）、マンニトール、マルチトール、アラビアゴム、トリエチルシトレート、トリ−ｎ−ブチルシトレート、ジブチルセバケートを含む。他のまたは類似の低分子量ポリオール、例えば、エチレングリコール、およびプロピレングリコールもまた考慮される。あまり好ましくないが、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールもまた用いられ得る。グリセリン、およびＤ−ソルビトールは、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｏ．、ＵＳＡ、またはＲｏｑｕｅｔｔｅ、Ｆｒａｎｃｅから得られ得る。他の機能のため含まれるいくつかの活性剤および賦形剤が、可塑剤として作用してもよい。
【０３１７】
軟化剤または可塑剤は、利用する場合、本発明の組成物の乾燥重量によって３０％まで上昇する割合、好ましくは、最大２０％、より好ましくは、最大１０％、なおより好ましくは、３から８％の間、最も好ましくは、４％から６％の間で理想的に組み込まれ得る。
【０３１８】
本質的ではないが、本発明の組成物の崩壊の速度を増強することが特に所望される場合、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスはまた、崩壊剤を任意選択で含有してもよい。含まれ得る崩壊剤の例は、アルギン酸、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、低置換ヒドロキシプロピルセルロース、およびデンプングリコール酸ナトリウムである。
【０３１９】
結晶化阻害剤（例えば、組成物の乾燥重量によって、およそ１％）もまた、本発明の組成物に含まれてもよい。例は、例えば、乳化剤のような他の役割を果たし得るヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＣまたはＨＰＭＣ、ヒプロメロースなど）である。
【０３２０】
別の実施形態において、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、例えば、米国特許第４，６５９，７００号（Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ）において、Ｋｕｍａｒ  Ｍａｊｅｔｉ  Ｎ．Ｖ．  Ｒａｖｉにより、Ｒｅａｃｔｉｖｅ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ、４６、１、２０００において、およびＰａｕｌらにより、ＳＴ．Ｐ．  Ｐｈａｒｍａ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、１０、５、２０００（これらの全３つの全体が、参照により本明細書に組み込まれる）により記載される添加剤を含み、または含まないバイオゲルの形態で存在し得るキトサンである。キトサン誘導体、例えば、チオール化実体も考慮される。
【０３２１】
ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、非親水コロイドガムであってもよい。例は、アルギン酸の架橋結合塩である。例えば、褐藻の壁から抽出されたアルギン酸ナトリウムガムの水溶液は、２価および３価の陽イオンに曝露された場合、ゲル化という周知の特質を有する。典型的な２価の陽イオンは、多くの場合、カルシウムクロライド水溶液の形態のカルシウムである。この実施形態において、架橋結合またはゲル化は、このような多価の陽イオン、特にカルシウムとの反応を通じて生じることが好ましい。
【０３２２】
ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、少ない含水量を有してもよく、それ故、組成物は、少ない含水量を有してもよい。以下で記載される通り、コアの製造中、任意選択で、ＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンを含む分散相または油相は、ヒドロゲル形成性ポリマーの水溶液と混合され、組成物がゲル化され、例えば、ミニビーズである組成物またはコアがもたらされる。適切には、組成物またはコアを、形成後に乾燥させて、その中に存在する含水量が低減される。
【０３２３】
ある種の実施形態において、組成物は、ジスルフィド結合を含有する化合物を含まない。実施形態において、ヒドロゲル形成性ポリマーは、ジスルフィド結合を含有する化合物を含まない。
【０３２４】
コアの連続相（水相）を形成するヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスは、界面活性剤をさらに含んでもよい。組成物で用いられ得る界面活性剤は、以下の段落「界面活性剤」で記載される。
【０３２５】
組成物またはコアの連続相、水相またはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスに存在し得る界面活性剤は、例えば、陽イオン性界面活性剤、両性（双性イオン）界面活性剤、陰イオン性界面活性剤、例えば、ペルフルオロ−オクタン酸塩（ＰＦＯＡまたはＰＦＯ）、ペルフルオロ−オクタンスルホン酸塩（ＰＦＯＳ）、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、ラウリル硫酸アンモニウム、および他のアルキル硫酸塩、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）としても公知のラウレス硫酸ナトリウム、およびアルキルベンゼンスルホン酸塩、ならびに非イオン性界面活性剤、例えば、ペルフルオロカーボン、ポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル（例えば、例えば、Ｂｒｉｊ  ３５のようなＢｒｉｊ）、Ｍｙｒｊ（例えば、Ｍｙｒｊ４９、５２または５９）、脂肪アルコールエトキシレート、アルキルフェノールエトキシレート、脂肪酸エトキシレート、脂肪アミドエトキシレート、アルキルグルコシド、Ｔｗｅｅｎ  ２０もしくは８０（ポリソルベートとしても公知）（Ｂｒｉｊ、Ｍｙｒｊ、およびＴｗｅｅｎ製品は、Ｃｒｏｄａから市販される）、ポリオキシエチレン（ポリ（エチレンオキシド））の２つの親水性鎖が隣接するポリオキシプロピレン（ポリ（プロピレンオキシド））の中心の疎水性鎖から構成される非イオン性トリブロックコポリマーであるポロキサマー、または上記の組合せからなる群から選択される界面活性剤を含む。特に、界面活性剤は、陰イオン性界面活性剤およびこの組合せから選択され、またはそれを含んでもよく、陰イオン性界面活性剤は、任意選択でこの節で言及されるものである。特定の種類の界面活性剤は、硫酸塩を含む。水相中の好ましい陰イオン性界面活性剤は、ＳＤＳである。陰イオン性界面活性剤の混合物を使用することができる。さらなる界面活性剤の混合物、例えば、ペルフルオロカーボンを含む混合物も考慮される。
【０３２６】
本発明の実施形態において、コアは、理論により結び付けられることなく、水相（ポリマーマトリックス）を分けると少なくとも部分的に考えられる、親水性界面活性剤を含む。
【０３２７】
コアの水相におけるこのような包含向けのこのような界面活性剤は、好ましくは、本発明の組成物の製造および処理を促進するための容易に拡散する界面活性剤または拡散可能な界面活性剤である。
【０３２８】
界面活性剤は、少なくとも１０、任意選択で少なくとも１５、例えば、少なくとも２０、または少なくとも３０、および任意選択で３８〜４２、例えば、４０のＨＬＢを有してもよい。このような界面活性剤は、任意の特定のタイプ（イオン性、非イオン性、双性イオン）のものであることができ、組成物の乾燥重量の割合として、０．１％〜６％、例えば、０．１％〜５％、０．１％〜４％もしくは０．１％〜３％、より好ましくは、少なくとも１％、特に１．０から４．５もしくは５％の間、理想的には、２〜４％範囲内もしくは丁度外側、例えば、２〜３％、またはおよそ２％もしくはおよそ４％の割合で含んでもよい。
【０３２９】
特に指定または要求されない限り、全ての百分率および比は、重量による。
【０３３０】
一実施形態では、組成物またはコアの連続相、水相またはヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に存在してもよい陰イオン性界面活性剤は、アルキル硫酸塩、カルボキシレートもしくはリン脂質、またはその組合せから選択される陰イオン性界面活性剤であってもよい。
【０３３１】
組成物またはコアの調製中の水相への導入の時点における界面活性剤の物理的形態は、組成物またはコアの製造の軽減において役割を果たす。かくして、液体界面活性剤が用いられ得るが、特に水相がゼラチンを含む場合、室温で固体形態（例えば、結晶、顆粒、または粉末）である界面活性剤を利用することが好ましい。
【０３３２】
分散相
組成物のポリマーマトリックスもしくは連続相、またはコアが存在する実施形態では、上記のコア（例えば、ヒドロゲル形成性ポリマー）は、油相であるか、またはそれを含む分散相を含んでもよい。適切には、分散相は、存在する場合、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を含んでもよい。そのような実施形態において、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）は、好ましくは、分散相中に可溶性である、すなわち、分散相は、活性剤が溶解するビヒクルを含む。シクロスポリンが、分散相中に可溶化される実施形態が好ましく、これは、そのような組成物が、可溶化された形態のシクロスポリンを放出し、例えば、結腸粘膜への吸収を増強することにより、放出の部位において薬物の治療作用を増強し得るためである。
【０３３３】
実施形態において、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）は、分散相中にあるか、またはその中に含まれる。分散相は、油相であるか、またはそれを含む。好ましくは、分散相は、油相である。
【０３３４】
分散相は、水と混和しない相（本明細書では油相とも呼ばれる）を含んでもよい。水と混和しない相は、周囲温度（例えば、２５℃）で固体、半固体または液体であってもよく、したがって、油相は、例えば、周囲温度でワックス状であってもよい。油相は、液体脂質および任意選択でそれと混和性の溶媒であるか、またはそれを含んでもよい。ＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンは、油相中に存在してもよい。適切には、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）は、油相中に可溶性である。
【０３３５】
分散相は、油の組合せ、例えば液体脂質を含んでもよい。油相は、液体脂質であるか、またはそれを含んでもよい。液体脂質は、短鎖、中鎖、もしくは長鎖トリグリセリド製剤、またはこれらの組合せであってもよい。中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）は、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１およびＣ１２脂肪酸から選択される少なくとも１種の脂肪酸の１種または複数のトリグリセリドを含む。本発明で有用な市販のトリグリセリド組成物、特にＭＣＴ、製剤は、天然の産物からもたらされる混合物であり、少量の、ＭＣＴではない化合物を通常または常に含有し、それ故、用語「中鎖トリグリセリド製剤」は、このような製剤を含むと解釈されるべきであることが理解されるであろう。短鎖トリグリセリドは、Ｃ２〜Ｃ５脂肪酸から選択される少なくとも１種の短鎖脂肪酸の１種または複数のトリグリセリドを含む。長鎖トリグリセリドは、少なくとも１３個の炭素原子を有する少なくとも１種の長鎖脂肪酸の１種または複数のトリグリセリドを含む。
【０３３６】
液体脂質は、トリグリセリドおよび／もしくはジグリセリドであり、またはそれを含んでもよい。このようなグリセリドは、中鎖トリグリセリドもしくは短鎖トリグリセリド、またはこれらの組合せから選択されてもよい。
【０３３７】
液体脂質は、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、すなわち、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド製剤であってもよい（少量の、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリドではない化合物を含有してもよいことは理解されるであろう）。したがって、油相は、トリグリセリドおよび／またはジグリセリド、任意選択で、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、すなわち、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド製剤であってもよい。
【０３３８】
分散相は、任意選択で、溶媒を含んでもよい。したがって、油相は溶媒を含んでもよい。油相中に任意選択で含まれる当該溶媒は、液体脂質とも水とも混和性であってもよい。適切な溶媒の例は、商標Ｃａｒｂｉｔｏｌ（商標）、Ｃａｒｂｉｔｏｌ  ｃｅｌｌｏｓｏｌｖｅ、Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ（商標）、Ｄｉｏｘｉｔｏｌ（商標）、Ｐｏｌｙ−ｓｏｌｖ  ＤＥ（商標）、およびＤｏｗａｎａｌ  ＤＥ（商標）、またはより純粋なＴｒａｎｓｃｕｔｏｌ（商標）ＨＰ（９９．９）の下で市販される２−（２−エトキシエトキシ）エタノールである。Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅから市販されるＴｒａｎｓｃｕｔｏｌ  ＰまたはＨＰが好ましい。別の可能性のある共溶媒は、ポリ（エチレングリコール）である。分子量１９０〜２１０のＰＥＧ（例えば、ＰＥＧ２００）、または３８０〜４２０のＰＥＧ（例えば、ＰＥＧ４００）が、この実施形態で好ましい。多くの代替の製造元または供給業者が可能であるが、適切なＰＥＧは、Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎにより製造される名称「Ｃａｒｂｏｗａｘ」の下で市販により得ることができる。
【０３３９】
分散相は、コアの乾燥重量によって１０〜８５％を表してもよい。
【０３４０】
上で考察された通り、分散相は、任意の薬学的に適切な油、例えば、液体脂質を含む油相であってもよい。油相は、油滴として存在してもよい。コアの乾燥重量に関して、油相は、割合１０％〜８５％、例えば、１５％〜５０％、例えば、２０％〜３０％、または３５％〜４５％を含んでもよい。用語「油」は、周囲温度または周囲温度に近い温度、例えば、１０℃から４０℃の間、または１５℃から３５℃の間において全体的または部分的に液体であり、疎水性だが、少なくとも１種の有機溶媒中に可溶性である、任意の物質を意味する。油は、植物油（例えば、ニーム油）および石油化学油を含む。
【０３４１】
油は、コアの乾燥重量に対して、約２重量％〜約２５重量％、約３重量％〜約２０重量％、約３重量％〜約１０重量％、または約５重量％〜約１０重量％の量で組成物に存在してもよい。
【０３４２】
油相中に含まれ得る油は、例えば、オメガ−３油、例えば、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、アルファ−リノール酸（ＡＬＡ）、共役リノール酸（ＣＬＡ）のようなポリ不飽和脂肪酸を含む。好ましくは、超高純度、例えば、純度最大９８％または９８％より上のＥＰＡ、ＤＨＡ、またはＡＬＡ、またはＣＬＡが用いられる。オメガ油は、例えば、任意の適当な植物、例えば、ｓａｃｈａ  ｉｎｃｈｉから供給されてもよい。このような油は、単独で、例えば、ＥＰＡ、もしくはＤＨＡ、もしくはＡＬＡ、もしくはＣＬＡ、または任意の組合せで用いられてもよい。任意の比の２成分、３成分などの組合せを含むこのような構成成分の組合せ、例えば、商標Ｅｐａｘ  ６０００の下で市販される１：５の比のＥＰＡとＤＨＡの２成分混合物も考慮される。油相の油部分は、この節で言及される油を含み、またはこの節で言及される油であってもよい。
【０３４３】
油相中に含まれ得る油は、特に、オリーブ油、ゴマ油、ヤシ油、パーム核油、ニーム油を含む天然のトリグリセリドベースの油である。油は、飽和ココナッツ油およびパーム核油由来のカプリルおよびカプリン脂肪酸、ならびに例えば、商標Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）下で供給されるグリセリンであり、またはそれを含んでもよく、Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）８１０、８１２（カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド）、Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）８１８：（カプリル酸／カプリン酸／リノール酸トリグリセリド）、Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）８２９：（カプリル酸／カプリン酸／コハク酸トリグリセリド、Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）８４０：（プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート）を含む、範囲が入手可能であり、それから本発明の油相の１種または複数の構成成分が選択され得る。Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）８１０／８１２は、Ｃ８／Ｃ１０比のみが異なるＭＣＴ製剤であり、その低いＣ１０含量のため、Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）８１０の粘度および曇点はより低いことに、注意されたい。Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）範囲が、Ｓａｓｏｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓから市販される。上で注意された通り、油相中に含まれ得る油は、必ずしも、室温で液体または完全に液体である必要はない。ワックスタイプの油もまた可能であり、これらは、製造温度で液体であるが、通常の周囲温度で固体または半固体である。油相の油部分は、この節において述べられた油を含み、またはこの節において述べられた油であってもよい。
【０３４４】
本発明による油相中に含まれ得る代替またはさらなる油は、例えば、Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅにより製造されるＬａｂｒａｆａｃ（商標）Ｌｉｐｏｐｈｉｌｅ、特に製品番号ＷＬ１３４９のような他の中鎖トリグリセリド製剤である。Ｍｉｇｌｙｏｌ（商標）８１０、８１２はまた、中鎖トリグリセリド製剤である。
【０３４５】
したがって、油相は、中鎖モノ−、ジ−またはトリ−グリセリドであり、またはそれを含んでもよい。
【０３４６】
本明細書で述べられる中鎖グリセリド（例えば、モノ、ジ−またはトリ−グリセリド）は、６、７、８、９、１０、１１、または１２個の炭素原子を有する脂肪酸から選択される少なくとも１種の脂肪酸、例えば、Ｃ８〜Ｃ１０脂肪酸の１種または複数のトリグリセリドを含むものである。
【０３４７】
低いＨＬＢ（ＨＬＢ１０未満）を有する油相または分散相を含むか、またはそれであってよい適切な油は、中鎖トリグリセリド、カプリロカプロイルマクロゴールグリセリド、およびカプリル酸／カプリン酸トリグリセリドを含む。市販品に関して、より低いＨＬＢ範囲内の特に好ましい油は、Ｌａｂｒａｆａｃ（商標）Ｌｉｐｏｐｈｉｌｅ（例えば、１３４９  ＷＬ）、Ｃａｐｔｅｘ  ３５５、およびＭｉｇｌｙｏｌ  ８１０である。
【０３４８】
上記実施形態における油相または分散相は、上で述べられた１つまたは複数の溶媒、例えば、２−（２−エトキシエトキシ）エタノール、または低分子量ＰＥＧをさらに含んでもよいことが理解されるべきである。溶媒は、コーティングされていない組成物の乾燥重量またはコアの乾燥重量に対して約１重量％〜３０重量％、約５重量％〜約３０重量％、約１０重量％〜約２５重量％、または約１２重量％〜約２２重量％の量で組成物中に存在してもよい。
【０３４９】
特定の油相は、油（低いＨＬＢ）、界面活性剤、および共溶媒を含む。例えば、次の３つの市販品：Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ  Ｐ（共溶媒として）、Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１０（油として）、およびＣａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０（界面活性剤）。したがって、油相は、以下のもの：２−エトキシエタノール、ＭＣＴ、特にカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド製剤、およびグリセリルモノオレエート／ジオレエートの組合せを含むか、またはそれからなってもよい。油相は、ＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンをさらに含んでもよい。
【０３５０】
ＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンは、好ましくは、油相中に可溶性である。組成物の調製に関連して以下で考察される通り、ＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンは、油相中に適切に溶解され、油相はヒドロゲル形成性ポリマーを含む水相と混合される。
【０３５１】
分散相（油相）は、グリセリド製剤であり、またはそれを含んでもよく、任意選択で、分散相は、脂肪酸モノグリセリド、脂肪酸ジグリセリドもしくは脂肪酸トリグリセリド、またはこれらの組合せであり、またはそれを含み、あるいは分散相は、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド製剤であり、またはそれを含む。
【０３５２】
油相はまた、既に述べられた溶媒または共溶媒と同じであり、または異なってもよい、１種または複数の揮発性溶媒または非揮発性溶媒を含んでもよい。このような溶媒は、例えば、処理、例えば、コアに存在する構成成分の最初の溶出後、本発明の組成物に残存し、かつコア組成物において特定の機能を有さなくてもよい。あるいは、このような溶媒は、存在するなら、油相内で溶解された状態（溶液中）のＮＦＡＴ阻害剤、例えば、シクロスポリンを維持するために機能し、または分散、出現などを促進するために機能し得る。他の実施形態において、溶媒は、処理中に部分的または完全に蒸発し、それ故に、たとえあったとしても少量のみで存在してもよい。関連する実施形態において、特に、油にも水にも可溶性である溶媒が用いられる場合、溶媒は、コアの水相に部分的または完全に存在してもよい。このような溶媒の例は、エタノールである。別の例は、共溶媒として既に述べられた、Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌである。
【０３５３】
したがって、組成物は、連続相、ならびにシクロスポリン、低いＨＬＢ中鎖もしくは長鎖モノ−もしくはジ−エステル界面活性剤、低いＨＬＢ油、任意選択で共溶媒を含む分散相を形成するヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含んでよい。任意選択で、中鎖または長鎖モノ−またはジ−エステル界面活性剤は、中鎖または長鎖モノ−またはジ−グリセリド界面活性剤である。
【０３５４】
界面活性剤
油相は、上記および本明細書の他の場所に記載される界面活性剤をさらに含んでもよい。油相中の界面活性剤の存在はまた、油相が水相中に分散される場合、液体組成物に対する安定化効果をもたらすこともできる。さらに、油相中の界面活性剤の存在は、特に阻害剤がシクロスポリンである場合、油相中のＮＦＡＴ阻害剤の溶液からのＮＦＡＴ阻害剤の結晶化を阻害し得る。また、界面活性剤は、分散相が液体組成物、組成物またはコアの調製中に水相と混合される場合、増強された乳化をもたらし得る（すなわち、乳化剤として作用し得る）。
【０３５５】
界面活性剤は、最大で８、最大で６、または最大で５のＨＬＢ値を有してもよい。あるいは、界面活性剤は、最大で７、１〜８、１〜７、２〜６、１〜５、２〜５、１〜４、１〜３、１〜２、２〜４、３〜４、３〜６、５〜８、６〜８および６〜７から選択されるＨＬＢ値を有してもよい。好ましくは、界面活性剤は、最大で６、２〜６または３〜６のＨＬＢ値を有する。
【０３５６】
ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）は、界面活性剤中で可溶性であってもよく、例えば、シクロスポリンＡは、界面活性剤中で２００ｍｇ／ｇより高い溶解度を有してもよい。したがって、界面活性剤は、２００ｍｇ／ｇより高いシクロスポリン溶解度を有してもよい。界面活性剤は、２００ｍｇ／ｇ〜５００ｍｇ／ｇ、任意選択で、２５０ｍｇ／ｇ〜５００ｍｇ／ｇのシクロスポリン溶解度を有してもよい。
【０３５７】
界面活性剤は、２００ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇ、２２５ｍｇ／ｇ〜３７５ｍｇ／ｇ、２００ｍｇ／ｇ〜３００ｍｇ／ｇ、３００ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇ、２２５ｍｇ／ｇ〜２７５ｍｇ／ｇ、３５０ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。好ましくは、界面活性剤は、２００ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇ、または２２５ｍｇ／ｇ〜３７５ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。界面活性剤は、２５０ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇ、２５０ｍｇ／ｇ〜３７５ｍｇ／ｇ、２５０ｍｇ／ｇ〜３００ｍｇ／ｇ、３００ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇ、２５０ｍｇ／ｇ〜２７５ｍｇ／ｇ、３５０ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。好ましくは、界面活性剤は、２５０ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇまたは２５０ｍｇ／ｇ〜３７５ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有する。界面活性剤中のシクロスポリンの溶解度は、当業者には公知の技術によって、例えば、Ｌｉｑｕｉｓｏｌｉｄ  Ｃｏｍｐａｃｔ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ、Ｚｈａｏらによる、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  Ｓｅｌｆ  Ｍｉｃｒｏ−Ｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇ  Ｔａｂｌｅｔ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ−Ａ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２０１１、２（９）巻、２２９９〜２３０８ページ）（本明細書に参照により組み込まれる）に記載されるプロトコールに従うことによって決定されてもよい。
【０３５８】
界面活性剤は、最大６のＨＬＢ、および２００ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。界面活性剤は、２〜６（任意選択で３〜６）のＨＬＢ値、および２００ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。界面活性剤は、２〜６（任意選択で３〜６）のＨＬＢ値、および２２５ｍｇ／ｇ〜２７５ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。界面活性剤は、２〜６（任意選択で３〜６）のＨＬＢ値、および２５０ｍｇ／ｇ〜３００ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。
【０３５９】
界面活性剤は、最大６のＨＬＢおよび２５０ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。界面活性剤は、２〜６（任意選択で３〜６）のＨＬＢ値、および２５０ｍｇ／ｇ〜４００ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。界面活性剤は、２〜６（任意選択で３〜６）のＨＬＢ値、および２５０ｍｇ／ｇ〜３７５ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。界面活性剤は、２〜６（任意選択で３〜６）のＨＬＢ値、および２５０ｍｇ／ｇ〜３００ｍｇ／ｇのＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）溶解度を有してもよい。
【０３６０】
界面活性剤の存在は、経口投与後の組成物からのＮＦＡＴ阻害剤、特にシクロスポリンの放出の速度および／または程度を増強し得る。界面活性剤の存在は、それが組成物から下部ＧＩ管、特に、結腸中に見られるものなどの水性媒体中に放出された後に高い比率のＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を可溶化形態に維持するように作用し得る。
【０３６１】
一実施形態では、油相は、油または液体脂質を含み、界面活性剤は油または液体脂質よりも多い量で存在する。任意選択で、界面活性剤は、組成物の乾燥重量の６ｗｔ％より多い量で存在してもよい。これは、コートされていない組成物またはコアを指す。界面活性剤は、例えば、液体組成物中に１２ｗｔ％より多い油相を含んでもよい。界面活性剤は、コアの乾燥重量に対して約５重量％〜約２０重量％、約８重量％〜約２０重量％、約８重量％〜約１５重量％、または約１０重量％〜約１４重量％の量で組成物中に存在してもよい。「コアの乾燥重量」に対する参照は、水以外のコートされていないコア中に存在する構成成分の重量を意味することが理解されるべきである。
【０３６２】
界面活性剤：油の重量比は、約５：１〜約１：５、約３：１〜約１：２、約３：１〜約１：１または約２．５：１〜１．５：１であってもよい。適切には、重量比は、約１：１、約２：１、約２．５：１、約３：１、約１：１．５または約１：２であってもよい。
【０３６３】
ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤（任意選択で、シクロスポリン）、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含む組成物であって、界面活性剤がグリセリルカプリレート／カプレート（Ｃａｐｍｕｌ  ＭＣＭ）、グリセリルモノオレエート／ジオレエート（Ｃａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０）、グリセロールモノリノレエート（Ｍａｉｓｉｎｅ  ３５−１）およびその組合せから選択される界面活性剤を含むか、またはそれである、組成物が提供される。組成物は、固体組成物であってもよい。組成物は、乾燥ビーズの形態にあってもよい。組成物は、乾燥コロイドの形態にあってもよい。
【０３６４】
任意選択で、界面活性剤は、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエートまたはその組合せであるか、またはそれを含む。Ｃａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０は、グリセリルモノオレエートとグリセリルジオレエートとの組合せを含む商業的に入手可能な界面活性剤の例である。したがって、界面活性剤は、Ｃａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０であってもよい。本明細書中でＣａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０に言及する場合、それはグリセリルモノオレエートとグリセリルジオレエートとの混合物を指していることが理解される。また、Ｃａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０は、グリセリルモノオレエートのみを指してもよい。
【０３６５】
同様に、当業者であれば、例えば、グリセリルモノオレエート／ジオレエートとして記載される界面活性剤は、グリセリルモノオレエートとグリセリルジオレエートとの組合せを企図することを理解できる。換言すれば、界面活性剤名における「／」は、界面活性剤が２つの構成成分の混合物であることを示す。
【０３６６】
油相または分散相の液体脂質または油は、適切には、界面活性剤でない。しかしながら、ある特定の油、特に天然源に由来するものは、界面活性の特質を有し得る構成成分を含む。例えば、多くのトリグリセリド油は、モノおよびジグリセリド構成成分も含み、したがって、いくらかの界面活性剤のような特質を呈する場合がある。したがって、油は、適切には、０〜１０のＨＬＢ値を有するが、適切には、油は、０に近いＨＬＢ、例えば、０〜３、任意選択で約０、約１、または約２のＨＬＢを有する。
【０３６７】
油相中の界面活性剤は、例えば、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであるか、またはそれを含んでもよく、界面活性剤は、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない。任意選択で、界面活性剤は、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、任意選択で、界面活性剤は、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない。本発明によって企図される２つの特定の界面活性剤は、グリセリルカプリレート／カプレートおよびグリセリルモノオレエート／ジオレエートである。市販の調製物、例えば、少数の構成成分を含有するそれらの市販の調製物もまた、界面活性剤として用いられてもよい。好ましい例は、Ｃａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０（グリセリルモノオレエート／ジオレエート）およびＣａｐｍｕｌ  ＭＣＭ（グリセリルカプリレート／カプレート）である。
【０３６８】
実施形態内で、油のＨＬＢは、範囲０〜１０（任意選択で１〜８、例えば、１〜６、ときに１〜５）であってもよい。
【０３６９】
別の実施形態において、油相は、範囲０〜１０（好ましくは、１〜５）内のＨＬＢを有する油を含み、最大で１０、任意選択で、最大７、１〜８、１〜７、１〜５、２〜５、１〜４、１〜３、１〜２、２〜４、３〜４、５〜８、６〜８および６〜７のＨＬＢを有する。
【０３７０】
別の実施形態において、油相は、油および界面活性剤を含み、油と界面活性剤共に、範囲０〜１０内のＨＬＢを有する。例えば、油は、１〜５、例えば、１〜４、または１〜２のＨＬＢを有し、界面活性剤は、ＨＬＢ２〜８、例えば、３〜７、２〜６、または３〜４を有する。
【０３７１】
組成物は、上記の界面活性剤を含む。界面活性剤は、組成物もしくはコア、例えば、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、または分散相または両方の中に存在してもよい。界面活性剤はまた、組成物中に含まれる、またはコアに塗布されるコーティングの１種または複数に存在してもよい。
【０３７２】
組成物は、さらなる界面活性剤を含んでもよい。組成物がさらなる界面活性剤を含む場合、この界面活性剤を、第２の界面活性剤と呼ぶことができ、本発明の組成物中に存在する界面活性剤を第１の界面活性剤と呼ぶことができる。したがって、第１および第２の界面活性剤は、本明細書に詳述される任意の界面活性剤であってもよい。一実施形態では、第１の界面活性剤は、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであるか、またはそれを含む。代替的な一実施形態では、第１の界面活性剤は、陰イオン性界面活性剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムである。さらなる界面活性剤は、組成物もしくはコア、例えば、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、または分散相または両方の中に存在してもよい。さらなる界面活性剤もまた、組成物中に含まれる、またはコアに塗布されるコーティングの１種または複数に存在してもよい。適切なさらなる界面活性剤は、陰イオン性、陽イオン性、両性イオン性、または非イオン性であってもよい。
【０３７３】
本明細書の記載および請求項において、用語「界面活性剤」は、「表面活性剤」についての短縮形として利用される。この説明および請求の目的のため、界面活性剤の４種の主要な分類が存在し、それ故に、さらなる界面活性剤は、陰イオン性、陽イオン性、非イオン性、および両性（双性イオン）であってもよいと仮定される。非イオン性界面活性剤は、全体に残存し、水溶液中で電荷を有さず、正および負のイオンに解離しない。陰イオン性界面活性剤は、水溶性であり、負の電荷を有し、水中に置かれた場合、正および負のイオンに解離する。負の電荷は、水の表面張力を下げ、表面活性剤として作用する。陽イオン性界面活性剤は、正の電荷を有し、また、水中に置かれた場合、正および負のイオンに解離する。この場合において、正のイオンは、水の表面張力を下げ、界面活性剤として作用する。両性（双性イオン）界面活性剤は、酸性溶液において正の電荷を仮定し、陽イオン性界面活性剤として行動し、またはそれは、アルカリ溶液において負の電荷を仮定し、陰イオン性界面活性剤として作用する。
【０３７４】
界面活性剤（第１の界面活性剤および第２の界面活性剤）は、陰イオン性界面活性剤およびこの組合せから、非イオン性界面活性剤およびこの組合せから、ならびに陰イオン性界面活性剤（例えば、単一のこのような界面活性剤もしくはこの複数）と非イオン性界面活性剤（例えば、単一のこのような界面活性剤またはこの複数）の組合せから選択されてもよい。好ましくは、界面活性剤は、陰イオン性界面活性剤または非イオン性界面活性剤である。例えば、第１の界面活性剤は非イオン性であり、第２の界面活性剤は陰イオン性であってもよい。
【０３７５】
さらに、一実施形態では、組成物は、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているＮＦＡＴ阻害剤、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、第１の界面活性剤および油相を含み、第２の界面活性剤をさらに含む。任意選択で、第１の界面活性剤は、非イオン性界面活性剤、例えば、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであるか、またはそれを含み、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない。任意選択で、第２の界面活性剤は、陰イオン性界面活性剤である。
【０３７６】
界面活性剤は、１９４９年および１９５４年にＧｒｉｆｆｉｎにより、後にＤａｖｉｅｓにより（本来は、非イオン性界面活性剤について）記載された、分子の異なる領域についての値を計算することにより決定される、界面活性剤が親水性または親油性であることの程度の測定値である、その親水性と親油性のバランス（ＨＬＢ）に従い分類され得る。方法は、全体分子の分子量、および親水性部分および親油性部分の分子量に式を適用して、通常の範囲は０から２０の間であるが、最大４０の任意（半経験的）のスケールを付与する。０のＨＬＢ値は、完全な疎水性分子に対応し、２０の値は、親水性構成成分の完全性を作り上げる分子に対応する。ＨＬＢ値を用いて、分子の界面活性特質を推測することができる。
【０３７７】
【表１】
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【０３７８】
ＨＬＢ数は、系が考案された、非イオン性以外の界面活性剤に割り当てられるが、陰イオン性、陽イオン性、非イオン性、および両性（双性イオン）界面活性剤についてのＨＬＢは、あまり意味を有さず、しばしば相対数または比較数を表し、数学的計算の結果を表さない。これは、２０という「最大値」より上の界面活性剤を有することが可能であるためである。しかしながら、ＨＬＢ数は、良好な性能を達成するために、所定のエマルジョン系について所望される適用であるＨＬＢ要件を記載するのに有用であり得る。
【０３７９】
界面活性剤は、非イオン性界面活性剤であってもよい。界面活性剤は、ポリオキシエチル化界面活性剤であってもよい。界面活性剤は、親水性鎖、例えば、ポリオキシエチレン鎖またはポリヒドロキシル化鎖であってもよい親水性頭部を有する。
【０３８０】
界面活性剤は勿論、疎水性部分、特に、疎水性鎖を有する。疎水性鎖は、例えば、少なくとも６個の炭素原子、任意選択で少なくとも１０個の炭素原子、特に少なくとも１２個の炭素原子を有する炭化水素鎖であってもよい；いくつかの炭化水素鎖は、２２個以下の炭素原子、例えば、Ｃ１０〜Ｃ２０、Ｃ１２〜Ｃ２０、またはＣ１５〜Ｃ２０炭化水素鎖を有する。それは、例えば、すぐ上に記載した炭素原子数を有するアルキル鎖であってもよい。それは、例えば、すぐ上に記載した炭素原子数を有する１個または複数の炭素−炭素二重結合を含むアルケニル鎖であってもよい。界面活性剤は、それが疎水性特徴を維持するという条件で、置換された炭化水素鎖、例えば、アルキル鎖またはアルケニル鎖を含んでもよい。例えば、ハロゲン（例えば、ＦまたはＣｌ）、ヒドロキシ、チオールオキソ、ニトロ、シアノから選択される、例えば、１個または２個の置換基、例えば、単一の置換基が存在してもよい；ヒドロキシまたはチオール置換基を、例えば、脂肪酸によってエステル化してもよい。あるクラスの界面活性剤は、ヒドロキシによって一置換された炭化水素を含む；任意選択で、界面活性剤のアリコート、例えば、ビーズ中の界面活性剤のヒドロキシ基の少なくとも一部は、本明細書に開示される脂肪酸もしくはモノ−ヒドロキシ脂肪酸によってエステル化されるか、または例えば、少なくとも６個の炭素原子、任意選択で少なくとも１０個の炭素原子、特に少なくとも１２個の炭素原子を有する脂肪アルコールによってエーテル化されていてもよい；いくつかの炭化水素鎖は、２２個以下の炭素原子、例えば、Ｃ１０〜Ｃ２０、Ｃ１２〜Ｃ２０、またはＣ１５〜Ｃ２０脂肪アルコールを有する。
【０３８１】
疎水性鎖は、エステル化された脂肪酸Ｒ１−ＣＯＯＨまたはエーテル化もしくはエステル化された脂肪エーテルＲ１−ＣＯＨ（式中、Ｒ１は、例えば、前の段落に記載されたような疎水性鎖である）の一部であってもよい。エステル形成性基、または場合によっては、エーテル形成性基は、典型的には、親水性鎖を含むであろう。
【０３８２】
記載のように、界面活性剤は、親水性鎖を有してもよく、非イオン性界面活性剤であってもよく、両方の要件を満たしてもよい。親水性鎖は、ポリ（オキシエチレン）またはマクロゴールとしても知られる、ポリ（エチレングリコール）であってもよい。親水性鎖は、式−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｎ−ＯＲ（式中、ｎは５または６〜５０であり、ＲはＨまたはアルキル、例えば、エチルまたはメチルである）のものであってもよい。本発明は、ｎが６〜４０、例えば、６〜３５である実施を含む。いくつかの実施形態では、ｎは６〜２５であり、任意選択で８〜２５または８〜１５である。他の実施形態では、ｎは８〜５０または８〜４０であり、例えば、１０〜５０、１０〜４０または１０〜３５である。特定の実施形態では、ｎは１５である。あるクラスの実施形態においては、式−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｎ−ＯＲの全ての親水性鎖について、ＲはＨである。
【０３８３】
親水性鎖は、例えば、鎖の炭素原子上にヒドロキシル基を有するポリヒドロキシル化された鎖（例えば、Ｃ５〜Ｃ２０、例えば、Ｃ５〜Ｃ１０鎖）、例えば、グルカミドであってもよい。
【０３８４】
界面活性剤は、エチレンオキシドとヒマシ油とを反応させることによって調製することができるポリエトキシ化ヒマシ油（ポリエチレングリコールエーテル）であってもよい。市販の調製物、例えば、リシノール酸のポリエチレングリコールエステル、ポリエチレングリコールおよびグリセロールのポリエチレングリコールエーテルなどの少量成分を含有する市販の調製物を界面活性剤として使用してもよい。好ましい例は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬとしても知られる、ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐ．によるＣｒｅｍｏｐｈｏｒである。代替的な、またはさらなる可溶化剤としては、例えば、ホスファチジルコリンなどのリン脂質が挙げられる。リン脂質可溶化剤を含む本発明の組成物の実施形態では、リン脂質可溶化剤を、水性相もしくは油相またはその両方に含有させることができる。少なくとも１種のリン脂質可溶化剤がそれぞれの相に含まれる場合、それは両方の相の中の同じリン脂質可溶化剤であってもよく、またはそれぞれ異なっていてもよい。
【０３８５】
非イオン性界面活性剤
界面活性剤（第１の界面活性剤および／または第２の界面活性剤）は、次の非イオン性界面活性剤から選択される少なくとも１種の界面活性剤であり、または含んでもよい。
【０３８６】
中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せは、グリセリルモノカプレート、グリセリルジカプレート、グリセリルモノカプリレート、グリセリルジカプリレート、グリセリルカプレート、グリセリルモノカプリレート／カプレート、グリセリルカプリレート／カプレート、グリセリルジカプリレート／カプレート、グリセリルモノオレエート／ジオレエート、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルジステアレート、グリセリルモノパルミトステアレート、グリセリルジパルミトステアレート、グリセリルモノベヘネート、グリセリルジベヘネート、グリセロールモノリノレエート、グリセリルジリノレエート、ポリグリセリルジオレエート、プロピレングリコールモノヘプタノエート、およびその組合せから選択されるポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない。
【０３８７】
ＰＥＧ−脂肪酸モノエステル界面活性剤、ＰＥＧ−脂肪酸ジエステル界面活性剤、ＰＥＧ−脂肪酸モノエステルとジエステル界面活性剤の混合物、ＰＥＧグリセロール脂肪酸エステル、油およびアルコールのトランスエステル化産物、低級アルコール脂肪酸エステル、ポリグリセリル化脂肪酸、プロピレングリコール脂肪酸エステル、モノおよびジグリセリド界面活性剤、ステロールおよびステロール誘導体界面活性剤、ＰＥＧ−ソルビタン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコールアルキルエーテル、糖エステル界面活性剤、ポリエチレングリコールアルキルフェノール界面活性剤、ＰＯＥ−ＰＯＰブロックコポリマー、リン脂質。
【０３８８】
ＰＥＧ−脂肪酸モノエステル界面活性剤、例えば、ＰＥＧ４−１００モノラウレート、ＰＥＧ４−１００モノオレエート、ＰＥＧ４−１００モノステアレート、ＰＥＧ−ラウレート、ＰＥＧ−オレエート、ＰＥＧステアレート、およびＰＥＧリシノレート。ＰＥＧ−脂肪酸ジエステル界面活性剤、例えば、ＰＥＧジラウレート、ＰＥＧジオレエート、ＰＥＧジステアレート、ＰＥＧジパルミテート。ＰＥＧ−脂肪酸モノ−およびジエステルの混合物。
【０３８９】
ＰＥＧグリセロール脂肪酸エステル、例えば、ＰＥＧグリセリルラウレート、ＰＥＧグリセリルステアレート、ＰＥＧグリセリルオレエート。
【０３９０】
ＰＥＧ−ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、ＰＥＧソルビタンラウレート、ＰＥＧソルビタンモノラウレート、ＰＥＧソルビタンモノパルミテート、ＰＥＧソルビタンモノステアレート、ＰＥＧソルビタントリステアレート、ＰＥＧソルビタンテトラステアレート、ＰＥＧソルビタンモノオレエート、ＰＥＧソルビタンオレエート、ＰＥＧソルビタントリオレエート、ＰＥＧソルビタンテトラオレエート、ＰＥＧソルビタンモノイソステアレート、ＰＥＧソルビトールヘキサオレエート、ＰＥＧソルビトールヘキサステアレート。
【０３９１】
プロピレングリコール脂肪酸エステル、例えば、プロピレングリコールモノカプリレート、プロピレングリコールモノラウレート、プロピレングリコールオレエート、プロピレングリコールミリステート、プロピレングリコールモノステアレート、プロピレングリコールリシノレート、プロピレングリコールイソステアレート、プロピレングリコールモノオレエート、プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート、プロピレングリコールジオクタノエート、プロピレングリコンカプリレート／カプレート、プロピレングリコールジラウレート、プロピレングリコールジステアレート、プロピレングリコールジカプリレート、プロピレングリコールジカプレート。
【０３９２】
ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタントリオレエート、ソルビタンセスキオレエート、ソルビタントリステアレート、ソルビタンモノイソステアレート、ソルビタンセスキステアレート。
【０３９３】
低級アルコール脂肪酸エステル、例えば、エチルオレエート、イソプロピルミリステート、イソプロピルパルミテート、エチルリノレート、イソプロピルリノレート。
【０３９４】
ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー、例えば、ポロキサマー１０５、ポロキサマー１０８、ポロキサマー１２２、ポロキサマー１２３、ポロキサマー１２４、ポロキサマー１８１、ポロキサマー１８２、ポロキサマー１８３、ポロキサマー１８４、ポロキサマー１８５、ポロキサマー１８８、ポロキサマー２１２、ポロキサマー２１５、ポロキサマー２１７、ポロキサマー２３１、ポロキサマー２３４、ポロキサマー２３５、ポロキサマー２３７、ポロキサマー２３８、ポロキサマー２８２、ポロキサマー２８４、ポロキサマー２８８、ポロキサマー３３１、ポロキサマー３３３、ポロキサマー３３４、ポロキサマー３３５、ポロキサマー３３８、ポロキサマー４０１、ポロキサマー４０２、ポロキサマー４０３、ポロキサマー４０７。
【０３９５】
ポリグリセリル化脂肪酸、例えば、ポリグリセリルステアレート、ポリグリセリルオレエート、ポリグリセリルイソステアレート、ポリグリセリルラウレート、ポリグリセリルリシノレート、ポリグリセリルリノレート、ポリグリセリルペンタオレエート、ポリグリセリルジオレエート、ポリグリセリルジステアレート、ポリグリセリルトリオレエート、ポリグリセリルセプタオレエート、ポリグリセリルテトラオレエート、ポリグリセリルデカイソステアレート、ポリグリセリルデカオレエート、ポリグリセリルモノオレエート、ジオレエート、ポリグリセリルポリリシノレート。
【０３９６】
ＰＥＧアルキルエーテル、例えば、ＰＥＧオレイルエーテル、ＰＥＧラウリルエーテル、ＰＥＧセチルエーテル、ＰＥＧステアリルエーテル。
【０３９７】
ＰＥＧアルキルフェノール、例えば、ＰＥＧノニルフェノール、ＰＥＧオクチルフェノールエーテル。
【０３９８】
天然油または水素化油でのアルコールまたは多価アルコールのトランスエステル化産物、例えば、ＰＥＧヒマシ油、ＰＥＧ水素化ヒマシ油、ＰＥＧヒマシ油、ＰＥＧコーン油、ＰＥＧアーモンド油、ＰＥＧアプリコットカーネル油、ＰＥＧオリーブ油、ＰＥＧ−６ピーナッツ油、ＰＥＧ水素化パーム核油、ＰＥＧパーム核油、ＰＥＧトリオレイン、ＰＥＧコーングリセリド、ＰＥＧアーモンドグリセリド、ＰＥＧトリオレエート、ＰＥＧカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、ラウロイルマクロゴールグリセリド、ステアロイルマクロゴールグリセリド、植物油およびソルビトールのモノ、ジ、トリ、テトラエステル、ペンタエリスリチルテトライソステアレート、ペンタエリスリチルジステアレート、ペンタエリスリチルテトラオレエート、ペンタエリスリチルテトラステアレート、ペンタエリスリチルテトラカプリレート／テトラカプレート、ペンタエリスリチルテトラオクタノエート。
【０３９９】
油溶性ビタミン、例えば、ビタミンＡ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、ならびにこれらの異性体、類似体、および誘導体。誘導体は、例えば、これらの油溶性ビタミン物質の有機酸エステル、例えば、コハク酸とのビタミンＥまたはビタミンＡのエステル。これらのビタミンの誘導体は、トコフェリルＰＥＧ−１０００スクシネート（ビタミンＥ  ＴＰＧＳ）、および種々の分子量のＰＥＧ部分を有する他のトコフェリルＰＥＧスクシネート誘導体、例えば、ＰＥＧ１００〜８０００。
【０４００】
ステロールまたはステロール誘導体（例えば、ＰＥＧ化ステロールのようなエステル化またはエーテル化ステロール）、例えば、コレステロール、シトステロール、ラノステロール、ＰＥＧコレステロールエーテル、ＰＥＧコレスタノール、フィトステロール、ＰＥＧフィトステロール。
【０４０１】
糖エステル、例えば、スクロースジステアレート、スクロースジステアレート／モノステアレート、スクロースジパルミテート、スクロースモノステアレート、スクロースモノパルミテート、スクロースモノラウレート、アルキルグルコシド、アルキルマルトシド、アルキルマルトトリオシド、アルキルグリコシド、誘導体、および他の糖類、グルカミド。
【０４０２】
カルボン酸塩（特に、カルボン酸エステル）、例えば、エーテルカルボン酸塩、サクシニル化モノグリセリド、ナトリウムステアリルフマル酸塩、コハク酸化ステアロイルプロピレングリコール水素、モノ−およびジグリセリドのモノ／ジアセチル化酒石酸エステル、モノ−、ジグリセリドのクエン酸エステル、脂肪酸のグリセリル−ラクトエステル、アシル乳酸塩、脂肪酸のラクチル酸エステル、カルシウム／ナトリウムステアロイル−２−ラクチレート、カルシウム／ナトリウムステアロイルラクチレート、アルギン酸塩、プロピレングリコールアルギネート。
【０４０３】
脂肪酸モノグリセリド、ジグリセリド、もしくはトリグリセリド、またはこれらの組合せ。
【０４０４】
本発明での使用に適したマクロゴールエステルの例は、少なくとも６個の炭素原子、任意選択で少なくとも１０個の炭素原子、特に少なくとも１２個の炭素原子を有する脂肪酸のマクロゴールエステルであり、いくつかの脂肪酸は、２２個以下の炭素原子、例えば、Ｃ１０〜Ｃ２０、Ｃ１２〜Ｃ２０、またはＣ１５〜Ｃ２０脂肪酸を有する。脂肪酸は、飽和または不飽和であってもよいが、特に飽和である。述べられるべきは、マクロゴール２５セトステアリルエーテル（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）Ａ２５）、マクロゴール６セトステアリルエーテル（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）Ａ６）、マクロゴールグリセロールリシノリエート３５（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ）、マクロゴール−グリセロールヒドロキシステアレート４０（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＲＨ  ４０）、マクロゴール−１５−ヒドロキシステアレート（Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ  １５）である。本発明での使用に適したマクロゴールエーテルの例は、少なくとも６個の炭素原子、任意選択で、少なくとも１０個の炭素原子、特に少なくとも１２個の炭素原子を有する脂肪アルコールのマクロゴールエーテルであり、いくつかの脂肪アルコールは、２２個以下の炭素原子、例えば、Ｃ１０〜Ｃ２０、Ｃ１２〜Ｃ２０、またはＣ１５〜Ｃ２０脂肪アルコールを有する。脂肪アルコールは、飽和または不飽和であってもよいが、１つの実施形態において、飽和である。
【０４０５】
本発明における使用にとって適切であるコポリマーの例は、プルロニック（ポロキサマー）、ポリビニルピロリドン−ポリビニルアセテート（Ｐｌａｓｄｏｎｅ  Ｓ６３０）、アミノアルキルメタクリレートコポリマー（Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＥＰＯ）；メタクリル酸−メチルメタクリレートコポリマー（Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００、Ｌ１００）、ポリカプロラクトン−ＰＥＧ、ポリカプロラクトン−メトキシ−ＰＥＧ、ポリ（アスパラギン酸）−ＰＥＧ、ポリ（ベンジル−Ｌ−グルタミン酸）−ＰＥＧ、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）メトキシ−ＰＥＧ、ポリ（ベンジル−Ｌ−アスパラギン酸）−ＰＥＧ、またはポリ（Ｌ−リシン）−ＰＥＧである。
【０４０６】
好ましい実施形態では、ミセル形成性界面活性剤は、マクロゴールエステル、より好ましくは、ＢＡＳＦにより市販されたＫｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標）ＨＳ  １５などの、欧州薬局方モノグラフ番号２０５２に従うマクロゴールエステル、マクロゴール−１５−ヒドロキシステアレートである。
【０４０７】
陰イオン性界面活性剤
界面活性剤（第１の界面活性剤および／または第２の界面活性剤）は、少なくとも１種の陰イオン性界面活性剤であるか、またはそれを含んでもよい。
【０４０８】
界面活性剤（第１の界面活性剤および／または第２の界面活性剤）は脂肪酸塩または胆汁酸塩、例えば、カプロン酸ナトリウム、カプリル酸ナトリウム、カプリン酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウム、ミリスチン酸ナトリウム、ミリストレイン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、パルミトレイン酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム、リシノール酸ナトリウム、リノール酸ナトリウム、リノレン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、テトラデシル硫酸ナトリウム、ラウリルサルコシンナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ウロソデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ナトリウム、タウロケノデオキシコール酸ナトリウム、グリコケノデオキシコール酸ナトリウム、コリルサルコシン酸ナトリウム、およびＮ−メチルタウロコール酸ナトリウムであり得る。好ましくは、第２の界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウムである。
【０４０９】
リン脂質、例えば、タマゴ／ダイズレシチン、カルジオリピン、スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジン酸、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン。
【０４１０】
一般式ＲＯ−ＰＯ３−Ｍ＋（式中、Ｒ基は、エステル形成基、例えば、アルキル、アルケニル、またはアリール基がリン酸塩部分に結合することを介して、ＰＥＧ部分により任意選択で置換されるアルキル、アルケニル、またはアリール基である）を有するリン酸エステル。Ｒは、長鎖（例えば、Ｃ９超）アルコールまたはフェノールの残基であってもよい。具体的な例は、ジエタノールアンモニウムポリオキシエチレン−１０オレイルエーテルホスフェート、リン酸または無水物での脂肪アルコールまたは脂肪アルコールエトキシレートのエステル化産物を含む。
【０４１１】
硫酸塩およびスルホン酸塩（特に、これらのエステル）、例えば、エトキシ化アルカリ硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン、α−オレフィンスルホン酸塩、アシルイセチオン酸塩、アシルタウレート、アルキルグリセリルエーテルスルホン酸塩、スルホコハク酸オクチル二ナトリウム、ウンデシレンアミデオ−ＭＥＡ−スルホコハク酸二ナトリウム、アルキルリン酸塩、およびアルキルエーテルリン酸塩。
【０４１２】
陽イオン性界面活性剤
界面活性剤（第１の界面活性剤および／または第２の界面活性剤）は、以下の陽イオン性界面活性剤から選択される少なくとも１種の陽イオン性界面活性剤であるか、またはそれを含んでもよい。
【０４１３】
臭化三アンモニウムヘキサデシル、塩化アンモニウムドデシル、アルキルベンジルジメチルアンモニウム塩、ジイソブチルフェノキシエトキシジメチルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、ベタイン（トリアルキルグリシン）、ラウリルベタイン（Ｎ−ラウリル，Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン）、エトキシ化アミン、ポリオキシエチレン−１５ココナッツアミン、アルキル−アミン／ジアミン／四級アミン、およびアルキルエステル。
【０４１４】
本発明における使用にとって適切である両親媒性ポリマーの例は、アルキルグルカミド、ポリエトキシ化アルキルエーテルとしても知られる脂肪アルコールポリ（エトキシ）エート、ポリ（エトキシ化）脂肪酸エステル（ＭｙｒｊもしくはＳｏｌｕｔｏｌ）、脂肪アミドポリエトキシレート、脂肪アミンエトキシレート、アルキルフェノールエトキシレート、ポリエトキシ化ソルビタンエステル（ポリソルベート）、ポリエトキシ化グリセリド、またはポリ−グリセロールエステルである。
【０４１５】
乳化剤
界面活性剤は、乳化剤として作用してもよく、このような界面活性剤は、トリセテアレス−４リン酸塩、エチレングリコールパルミトステアレート、およびジエチレングリコールパルミトステアレートの混合物（例えば、商標ＳＥＤＦＯＳ（商標）７５の下で販売される）、ソルビタンエステル、例えば、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート（例えば、商標Ｓｐａｎ（登録商標）の下で販売される製品）、ＰＥＧ−８ミツロウ、例えば、商標Ａｐｉｆｉｌ（登録商標）の下で販売され、セチルアルコール、セテス−２０、およびステアレス−２０の混合物（例えば、Ｅｍｕｌｃｉｒｅ（商標）６１  ＷＬ  ２６５９）、ＰＥＧ−６ステアレートおよびＰＥＧ−３２ステアレートの混合物（例えば、Ｔｅｆｏｓｅ（登録商標）１５００）、ＰＥＧ−６パルミトステアレート、エチレングリコールパルミトステアレート、およびＰＥＧ−３２パルミトステアレートの混合物（例えば、Ｔｅｆｏｓｅ（登録商標）６３）、トリグリセロールジイソステアレート（例えば、商標Ｐｌｕｒｏｌ  Ｄｉｉｓｏｓｔｅａｒｉｑｕｅ（登録商標）の下で販売される製品）、ポリグリセリル−３ジオレエート（例えば、商標Ｐｌｕｒｏｌ（登録商標）Ｏｌｅｉｑｕｅの下で販売される製品）から選択される非イオン性乳化剤を含む。
【０４１６】
好ましい第１の界面活性剤
好ましくは、界面活性剤は、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せである。界面活性剤がポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せを含む場合、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せは、実質的に全ての界面活性剤である。例えば、界面活性剤は、８０％より多い、任意選択で、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％または９９％より多い界面活性剤の量で、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せを含んでもよい。適切には、界面活性剤は、トリグリセリドを実質的に含まない。例えば、界面活性剤は、１０％、８％、５％、３％、２％または１％未満のトリグリセリドを含んでもよい。
【０４１７】
中鎖脂肪酸モノ−エステルまたはジ−エステルは、８〜１２個の鎖中炭素原子を有する脂肪酸を含む。長鎖脂肪酸モノ−エステルまたはジ−エステルは、少なくとも１３個の鎖中炭素原子、好ましくは、１３〜２６個の鎖中炭素原子を有する脂肪酸を含む。長鎖脂肪酸は、任意選択で、１４〜２２個の鎖中炭素原子または１６〜２０個の鎖中炭素原子を有してもよい。
【０４１８】
モノ−グリセリド界面活性剤またはジ−グリセリド界面活性剤は、１個の脂肪酸にエステル化された１個のグリセロールまたは２個の脂肪酸にエステル化された１個のグリセロールを含んでもよく、脂肪酸は同じか、または異なってもよく、通常、脂肪酸は同じである。本発明の界面活性剤は、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない界面活性剤である；これは、エーテルまたはエステル結合によって界面活性剤分子に結合するポリエチレングリコール構成成分が存在しないことを意味する。例えば、オレオイルマクロゴール−６グリセリド（Ｌａｂｒａｆｉｌ  Ｍ１９４４ＣＳとして市販されている）などのペグ化された脂肪酸グリセリド。本発明の市販の界面活性剤は、供給される界面活性剤組成物内に含有される少量のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と共に供給されてもよい。非結合ＰＥＧ、換言すれば、遊離ＰＥＧを含有する界面活性剤のそのような市販の製剤の使用は、界面活性剤がポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではないという制限によって排除されない。
【０４１９】
界面活性剤は、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであるか、またはそれを含んでもよく、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれでなくてもよく、脂肪酸エステルは飽和または不飽和である。好ましくは、脂肪酸は不飽和である。不飽和脂肪酸は、１個だけまたは２個だけの二重結合を含有してもよい。
【０４２０】
界面活性剤が中鎖または長鎖脂肪酸ジ−グリセリド（グリセロールにエステル化された２個の脂肪酸が存在することを意味する）である場合、界面活性剤は、同じか、または異なる２個の脂肪酸を含んでもよい。例えば、２個の脂肪酸は、両方とも不飽和であってもよいか、または両方とも飽和であってもよい。あるいは、２個の脂肪酸のうちの１個は飽和であってあってもよく、他の脂肪酸は不飽和であってもよい。
【０４２１】
好ましくは、界面活性剤は、長鎖モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではない。さらなる好ましい界面活性剤は、長鎖モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであり、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まない、またはそれではなく、脂肪酸は１３〜２２個の炭素原子、任意選択で、１６〜２０個の炭素原子の鎖長を有する。特に、脂肪酸は、１８個の炭素原子の鎖長を有してもよい。
【０４２２】
実施形態では、界面活性剤は、グリセリルモノカプレート、グリセリルジカプレート、グリセリルモノカプリレート、グリセリルジカプリレート、グリセリルカプレート、グリセリルモノカプリレート／カプレート、グリセリルカプリレート／カプレート、グリセリルジカプリレート／カプレート、グリセリルモノオレエート／ジオレエート、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルジステアレート、グリセリルモノパルミトステアレート、グリセリルジパルミトステアレート、グリセリルモノベヘネート、グリセリルジベヘネート、グリセロールモノリノレエート、グリセリルジリノレエート、ポリグリセリルジオレエート、プロピレングリコールモノヘプタノエート、およびその組合せから選択される。
【０４２３】
好ましい界面活性剤は、グリセリルモノカプリレート／カプレート、グリセリルジカプリレート／カプレート、グリセリルモノオレエート、グリセロールモノリノレエート、グリセリルジオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルジステアレート、グリセリルモノパルミトステアレート、グリセリルジパルミトステアレート、グリセリルモノベヘネート、グリセリルジベヘネート、グリセリルモノリノレエート、グリセリルジリノレエート、ポリグリセリルジオレエートおよびその組合せから選択される界面活性剤であるか、またはそれを含んでもよい。
【０４２４】
したがって、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中に分散されているシクロスポリン、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、界面活性剤および油相を含む組成物であって、界面活性剤がグリセリルモノカプリレート／カプレート、グリセリルジカプリレート／カプレート、グリセリルモノオレエート、グリセロールモノリノレエート、グリセリルジオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルジステアレート、グリセリルモノパルミトステアレート、グリセリルジパルミトステアレート、グリセリルモノベヘネート、グリセリルジベヘネート、グリセリルモノリノレエート、グリセリルジリノレエート、ポリグリセリルジオレエートおよびその組合せから選択される界面活性剤であるか、またはそれを含んでもよい組成物が提供される。
【０４２５】
界面活性剤は、グリセリルカプリレート、グリセリルカプレート、グリセリルモノオレエート、グリセリルジオレエート、グリセロールモノリノレエートまたはその組合せから選択される界面活性剤を含むか、またはそれであってもよい。
【０４２６】
特に好ましい界面活性剤は、グリセリルカプリレート／カプレート（Ｃａｐｍｕｌ  ＭＣＭ）、グリセリルモノオレエート／ジオレエート（Ｃａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０）およびグリセロールモノリノレエート（Ｍａｉｓｉｎｅ  ３５−１）から選択される界面活性剤であるか、またはそれを含んでもよい。
【０４２７】
任意選択で、界面活性剤は、グリセリルモノステアレートＥＰ／ＮＦとＰＥＧ−７５パルミトステアレート（例えば、Ｇｅｌｔｏ（商標）６４）との混合物ではない。適切には、界面活性剤は、グリセリルモノステアレートの混合物ではないか、またはそれを含まなくてもよい。
【０４２８】
好ましい第２の界面活性剤
好ましくは、第２の界面活性剤は、陰イオン性界面活性剤である。例えば、第２の界面活性剤は、アルキル硫酸塩、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムであってもよい。
【０４２９】
第２の界面活性剤は、脂肪酸塩または胆汁塩、例えば、カプロン酸ナトリウム、カプリル酸ナトリウム、カプリン酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウム、ミリスチン酸ナトリウム、ミリストレイン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、パルミトレイン酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム、リシノール酸ナトリウム、リノール酸ナトリウム、リノレン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、テトラデシル硫酸ナトリウム、ラウリルサルコシン酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ウロソデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ナトリウム、タウロケノデオキシコール酸ナトリウム、グリコケノデオキシコール酸ナトリウム、コリルサルコシン酸ナトリウム、およびＮ−メチルタウロコール酸ナトリウムであってもよい。好ましくは、第２の界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウムである。
【０４３０】
他の賦形剤
組成物は、次のさらなる物質または物質のカテゴリーの１種または複数を任意選択で含有する。例えば、組成物は、例えば、タンパク分解性酵素阻害剤、もしくは酸分解に対して保護する物、または両方（例えば、アルカリ、例えば、水酸化ナトリウム）、例えば、粘液またはバイオ接着性のような接着性実体、活性成分の溶解度を最大にするための賦形剤、ＧＩＴでの活性成分の透水性を最大にするための賦形剤のような保護剤を含有してもよい。上皮バリアの透水性を増強するための典型的な賦形剤は、カプリン酸ナトリウム、ドデカン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ＳＮＡＣ、キトサンおよびこれらの誘導体、脂肪酸、脂肪酸エステル、ポリエーテル、胆汁酸塩、リン脂質、アルキルポリグルコシド、糖エステル、ヒドロキシラーゼ阻害剤、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸）、および／または一酸化窒素供与体を含むが、これらに限定されない。先行するリストは、回腸での透水性を増強するための特定の目的のものである。
【０４３１】
結腸での透水性を増強するために、典型的な賦形剤としては、限定されるものではないが、カプリン酸ナトリウム、ドデカン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ＳＮＡＣ、キトサンおよびその誘導体、脂肪酸、脂肪酸エステル、ポリエーテル、胆汁塩、リン脂質、アルキルポリグルコシド、ヒドロキシラーゼ阻害剤、酸化防止剤（任意選択で、クルクミノイド、フラボノイド、クルクミン、ベータ−カロテン、α−トコフェロール、アスコルビン酸、アスコルビン酸塩、ラザロイド、カルベジロール、ブチル化ヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、ヒドララジン、カルノシン酸、ビタミンＥ、レシチン、オボレシチン（ビテリン）、ベジレシチン、フマル酸もしくはクエン酸）から選択される、および／または種々の薬学的活性成分に共有結合した一酸化窒素供与体基を含む、一酸化窒素供与体が挙げられる。組成物は、小腸または結腸などの、ＧＩＴ中での局部組織生物学的利用能を増強するための賦形剤または他の活性な薬学的成分または他の成分、限定されるものではないが、ＰｇＰポンプ阻害剤（任意選択で、ＮＳＡＩＤ、シメチジン、オメプラゾール、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ、ベラパミル、キニジン、ＰＳＣ８３３、アンプレナビル（ＡＰＶ）、インジナビル（ＩＤＶ）、ネルフィナビル（ＮＦＶ）、リトナビル（ＲＴＶ）およびサキナビル（ＳＱＶ）から選択される）を含む排出ポンプ阻害剤、ならびに限定されるものではないが、任意選択で、エッセンシャルオイル、シメチジン、界面活性剤（例えば、クレモホール）、油、オメプラゾール、ベラパミル、リトナビルおよびカルバマゼピンならびに例えば、柑橘果実に由来する植物抽出物から選択される、シトクロムＰ４５０阻害剤を含む代謝阻害剤をさらに含む。組成物は、したがって、組成物の投与後のシクロスポリンの代謝をさらに減少させるＰ４５０阻害剤をさらに含んでもよい。Ｐ４５０阻害剤は、シクロスポリンの腸代謝および／または肝臓代謝を阻害するように作用してもよい。組成物は、ＰｇＰ阻害剤をさらに含んでもよい。任意選択で、組成物は、Ｐ４５０阻害剤およびＰｇＰ阻害剤を含んでもよい。
【０４３２】
組成物は、限定されるものではないが、吸収リミッター、例えば、オメガ３油のようなエッセンシャルオイル、例えば、ニームのような天然の植物抽出物、イオン交換樹脂、例えば、アゾ結合のような細菌分解性結合リンカー、例えば、アミロースのような多糖、グアールガム、ペクチン、キトサン、イヌリン、シクロデキストリン、硫酸コンドロイチン、デキストラン、グアールガムおよびローカストビーンガム、核因子カッパーＢ阻害剤、例えば、フマル酸、クエン酸およびその他のような酸、ならびにその修飾物を含む、回腸および結腸を含む胃腸管を通過する、活性成分、例えば、シクロスポリンＡまたは別の免疫抑制剤の治療可能性を増強するための賦形剤をさらに含んでもよい。
【０４３３】
組成物は、限定されるものではないが、例えば、クルクミノイド、フラバノイドのような酸化防止剤を含む、またはより具体的には、クルクミン、ベータ−カロテン、またはα−トコフェロール、アスコルビン酸塩、もしくはラザロイドを含む、小腸のようなＧＩＴでのある特定の活性剤、例えば、シクロスポリンまたは他の免疫抑制剤の吸収と関連する全身性副作用を低減するための賦形剤をさらに含んでもよい。
【０４３４】
組成物は、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸またはＢＨＴ−ブチルヒドロキシトルエンのような）、風味マスキング、または感光性構成成分もしくは光防護性構成成分をさらにまたは別々に含んでもよい。酸化防止剤は、コアの水相中（例えば、親水性酸化防止剤）または分散相中（例えば、例えば、ビタミンＥのような疎水性酸化防止剤）に、例えば、最大１重量％、好ましくは、０．０１〜０．５０重量％、より好ましくは、０．１０〜０．２０重量％取り込まれてもよい。
【０４３５】
組成物は、特に、回腸および／または結腸、例えば、結腸に標的化される免疫抑制剤の場合と同様、組成物が免疫抑制剤を含有する場合、ビタミンＡ／Ｂ／Ｃ／Ｅ、カロテノイド／ベータ−カロテン、および鉄、マンガン、セレン、亜鉛のような免疫増強栄養剤をさらに含んでもよい。このような栄養剤は、組成物に存在してもよく、または組成物がコーティングを有するなら、例えば、それがビーズの形態であるなら、栄養剤は、コーティングに含まれてもよい。
【０４３６】
組成物はまた、着色剤、風味マスキング剤、希釈剤、充填剤、結合剤などを含む、医薬組成物で用いられる他の周知の賦形剤も含んでもよい。このような最適なさらなる構成成分の存在は、採用された特定の剤形にもちろん依存するであろう。
【０４３７】
形、サイズ、および幾何学
本発明の組成物は、無制限な数の形およびサイズに形成することができる。組成物を作製する方法を記載する以下の段落において、液体分散液を、それが硬化し、または硬化を引き起こし得る型に注ぐこと、または導入することを含む、種々の方法が付与される。したがって、組成物は、どのような形が望まれても、適当な型（例えば、ディスク、ピル、または錠剤の形の）を作ることにより、作ることができる。しかしながら、型を使用することは必須ではない。例えば、組成物は、例えば、液体分散液を、それが硬化し、または硬化を引き起こし得る平らな表面に注ぐことから生じるシートに形成されてもよい。
【０４３８】
好ましくは、組成物は、以下で記載される通り作製される球または球形様の形の形態であってもよい。好ましくは、本発明の組成物は、実質的に球形、継ぎ目のないミニビーズの形態である。ミニビーズ表面上の継ぎ目の不存は、より一貫したコーティング、流動性などを可能にするので、例えば、さらなる処理、例えば、コーティングでの利点である。ミニビーズ上の継ぎ目の不存はまた、ビーズの溶出の一貫性を増強する。
【０４３９】
本発明によるミニビーズの好ましいサイズまたは直径範囲を選んで、ミニビーズの経口投与の際の胃での保持が回避される。剤形が大きいほど、胃で可変期間保持され、食物と一緒にのみ幽門括約筋を通過し、一方、粒子が小さいほど、食物と独立して幽門を通過する。したがって、適当なサイズ範囲（以下を参照）の選択は、投薬後の治療作用をより一貫させる。例えば、伝統的な圧縮されたピルのような単一の巨大な一体型経口フォーマットと比較して、ＧＩ管に放出されるビーズの集団は（本発明の剤形により予見される通り）、より高い腸管腔分散を許可し、故に、より広い上皮範囲への曝露を介して吸収を増強し、ＧＩ管（例えば、結腸）のある種の部分でのより広い局所コーティングを達成する。回盲部での滞留時間の低減は、別の可能性のある利点である。
【０４４０】
本発明の組成物は、好ましくは、マトリックス材料の可能性のある薄皮を除き、かつ任意のコーティング相を除き、内部の（すなわち、部分間での）均一を意味する一体型である。
【０４４１】
本発明の製剤により提供されるミニビーズは、一般的に、直径０．５ｍｍ〜１０ｍｍの範囲にあり、上限、好ましくは、５ｍｍ、例えば、２．５ｍｍを伴う。特に好都合な上限は、２ｍｍまたは１．７ｍｍである。下限は、好ましくは、１ｍｍ、例えば、１．２ｍｍ、より好ましくは、１．３ｍｍ〜、最も好ましくは、１．４ｍｍ〜であり得る。１つの実施形態において、直径は、０．５〜２．５ｍｍ、例えば、１ｍｍ〜３ｍｍ、１ｍｍ〜２ｍｍ、１．２ｍｍ〜３ｍｍ、または１．２ｍｍ〜２ｍｍである。ミニビーズは、その最小サイズに関わらず、２．５ｍｍ以下の直径を有してもよい。ビーズは、その最小サイズに関わらず、２ｍｍ以下の直径を有してもよい。
【０４４２】
本明細書に記載されるミニビーズは、１．５以下、例えば、１．３以下、例えば、１．２以下、特に、１．１〜１．５、１．１〜１．３、または１．１〜１．２のアスペクト比を有してもよい。本明細書に記載されるミニビーズの集団、例えば、少なくとも１０個のビーズは、１．５以下、例えば、１．３以下、例えば、１．２以下、特に、１〜１．５、１〜１．３、または１〜１．２の平均アスペクト比を有してもよい。この節で述べられるアスペクト比は、コーティングされたミニビーズに任意選択で適用され、コーティングされていないミニビーズに任意選択で適用される。平均アスペクト比は、粒子サイズ分析器、例えば、Ｉｎｎｏｐｈａｒｍａ  Ｌａｂｓ、Ｄｕｂｌｉｎ  １８、ＩｒｅｌａｎｄのＥｙｅｃｏｎ（商標）ｐａｒｔｉｃｌｅ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｅｒを用いて、ミニビーズの集団、例えば、少なくとも１０個のミニビーズについて適切に決定される。
【０４４３】
それ故、開示のミニビーズは、上で開示されたサイズ、および１〜１．５のアスペクト比を有してもよい。開示のビーズは、上で開示されたサイズ、および１．３以下、例えば、１．２以下、特に、１．１〜１．５、１．１〜１．３、または１．１〜１．２のアスペクト比を有してもよい。
【０４４４】
ビーズサイズ（直径）は、任意の適切な技術、例えば、顕微鏡検査、ふるい分け、沈降、光学的感知ゾーン法、電気的感知ゾーン法、またはレーザー光散乱により測定されてもよい。本明細書の目的のため、ビーズサイズは、ＵＳＰ  Ｇｅｎｅｒａｌ試験＜７８６＞  Ｍｅｔｈｏｄ  Ｉ（ＵＳＰ  ２４−ＮＦ  １８、（Ｕ．Ｓ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ  Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、２０００）、１９６５〜１９６７ページ）に従った分析用ふるい分けにより測定される。
【０４４５】
実施形態において、本発明のミニビーズは、単分散型である。他の実施形態において、本発明のミニビーズは、単分散型ではない。「単分散型」により、ビーズの集団（例えば、少なくとも１００個、より好ましくは、少なくとも１０００個）について、ミニビーズが、３５％またはそれ未満、任意選択で２５％またはそれ未満、例えば、１０％またはそれ未満、任意選択で８％またはそれ未満、例えば、５％またはそれ未満のような１５％またはそれ未満のそれらの直径の変動係数（ＣＶ）を有することが意味される。特定の種類のポリマービーズは、２５％またはそれ未満のＣＶを有する。この明細書で言及される場合、ＣＶは、「平均」が平均粒子直径であり、標準偏差が粒子サイズの標準偏差である場合の平均で割った１００倍（標準偏差）として定義される。ＣＶのこのような決定は、ふるいを用いて行うことが可能である。
【０４４６】
本発明は、３５％のＣＶ、および１ｍｍ〜２ｍｍ、例えば、１．５ｍｍの平均直径を有するミニビーズを含む。本発明はまた、２０％のＣＶ、および１ｍｍ〜２ｍｍ、例えば、１．５ｍｍの平均直径を有するミニビーズ、ならびに１０％のＣＶ、および１ｍｍ〜２ｍｍ、例えば、１．５ｍｍの平均直径を有するミニビーズも含む。１つの種類の実施形態において、ミニビーズの９０％は、０．５ｍｍ〜２．５ｍｍ、例えば、１ｍｍ〜２ｍｍの直径を有する。
【０４４７】
剤形
本発明の組成物は、医薬上の使用に適した経口投与可能な剤形として調製され得る。製剤がミニビーズの形態である実施形態において、本発明は、複数のミニビーズを、例えば、カプセル剤、錠剤、スプリンクル剤、またはサッシェ剤として含む剤形を提供する。ミニビーズを、例えば、浣腸または坐剤として、直腸的または経膣的に投与される組成物として投与することもできる。例えば、ミニビーズの形態にある組成物を、適切な媒体と混合して、坐剤または浣腸組成物を提供することができる。坐剤および浣腸のための適切な媒体は周知であり、例えば、坐剤のための低融点ワックスまたは浣腸組成物のための適切な水性もしくは油系媒体を含む。
【０４４８】
実施形態において、ビーズの集団を含む剤形は、単回の単位剤形で提示され、例えば、ビーズを、例えば、胃で放出する単回の硬ゲルカプセル剤に含有されてもよい。あるいは、ビーズは、サッシェ剤、あるいはビーズが、食物上に、もしくは飲料中にまきちらされること、または栄養管、例えば、鼻と胃の管もしくは鼻と十二指腸の栄養管を介して投与されることを可能にする他の容器で提示されてもよい。あるいは、ビーズは、例えば、ビーズの集団が、以下に記載される単回の錠剤に圧縮されるなら、錠剤として投与されてもよい。あるいは、ビーズは、専門的な瓶のキャップに充填、例えば、圧縮されてもよく、あるいはそうでなければ、例えば、瓶のキャップを締める際、ビーズが液体または瓶もしくはバイアルの他の内容物に放出されるように、特殊化した瓶のキャップまたは密封した容器（もしくは密封されるべき容器）の他の要素内、またはビーズが、このような内容物中でかき混ぜながら、またはかき混ぜることなく、分散（または溶解）されるように、空間を充填してもよい。瓶またはバイアルの液体または他の内容物は、任意選択で、シクロスポリン組成物と、他の活性剤との便利な同時投与を容易にするための１つまたは複数のさらなる活性剤を含有してもよい。例は、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｈａｒｍａ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  （ＨＰＩ）  Ｓ．ｐ．Ａ、Ｍｉｌａｎ、Ｉｔａｌｙにより製造されるＳｍａｒｔ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｃａｐである。ミニビーズの１より多い集団を含む実施形態では、ミニビーズの集団を、同じ剤形に製剤化するか、または別々の剤形に製剤化してもよく、剤形は任意選択で、同じか、または異なっていてもよい。
【０４４９】
剤形は、本発明のビーズをさらに発展させて、例えば、圧縮（当業者に公知の適当な油または粉末ベースの結合剤および／または充填剤を用いた）を介してビーズのより大きな塊を作ることができるような方法で、製剤化されてもよい。より大きな（例えば、圧縮された）塊は、それ自体、ピル剤形、錠剤形、カプセル剤形などを含む、様々な形を取り得る。ビーズ実施形態のこのバージョンが解決する特定の問題は、粉末またはペレットで充填された硬ゲルカプセル剤で典型的に見られる「デッドスペース」（安定した微粒子内容物より上）、および／または「空っぽの空間」（微粒子内容物要素の間）である。デッドスペース／空っぽの空間を有するこのようなペレットまたは粉末充填カプセル剤において、患者は、カプセル剤がこのようなデッドスペースを含有しないなら必要でない、より大きなカプセル剤を飲み込むことが要求される。本発明のこの実施形態のビーズは、ずっと低減された、例えば、本質的にはないデッドスペース／空っぽの空間を残して、望まれ得るカプセル剤またはシェルの内部形態に採用されるカプセル剤内に容易に圧縮され得る。あるいは、ビーズを、例えば、不活性であり得、または例えば、透水性増強もしくは増強された溶出のような機能的特質を有し得、またはビーズ中の任意の有効成分と同一または異なる有効成分を含み得る油のようなビヒクル中に懸濁させることにより、デッドスペースまたは空っぽの空間を用いて利点を得ることができる。例えば、硬ゼラチン剤またはＨＰＭＣカプセル剤は、コーティングされていないビーズおよび／またはコーティングされたビーズと組み合わされた液体媒体で充填されてもよい。液体媒体は、本明細書に記載される界面活性剤相の組成要素の１種または複数であってもよく、またはそれは、１種または複数の界面活性剤であってもよい。特に好ましいが、非限定的な例は、コーン油、ソルビタントリオレエート（商標ＳＰＡＮ  ８５の下で販売される）、プロピレングリコールジカプリロカプレート（商標Ｌａｂｒａｆａｃの下で販売される）、２−（２−エトキシエトキシ）エタノール（商標Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ  Ｐの下で販売される）、およびポリソルベート８０（商標Ｔｗｅｅｎ  ８０の下で販売される）である。
【０４５０】
代表的な実施形態において、剤形のビーズは、例えば、少なくとも次の材料：ヒドロゲル形成性ポリマー、油相、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであるか、またはそれを含み、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない界面活性剤、およびシクロスポリンＡ、適切には、ヒドロゲル形成性ポリマー中でのシクロスポリンＡの分散液を形成させるための液体脂質のような油相に溶解されているシクロスポリンＡを一緒に混合することにより、本明細書に記載される通り調製される。分散液は、単一のノズル開口部から適切な冷却液体に射出させることにより、固化されたビーズ内に固定される。冷却液体を取り除いた後、ビーズは、調節放出コーティング（第２のコーティング）（適切には、調節放出コーティング下のサブコート）でコーティングされ、コーティングされたビーズは、その後、任意選択で、医薬上の使用に適したゼラチンまたはＨＰＭＣカプセルに充填される。
【０４５１】
適切には、剤形は、シクロスポリンＡ  ０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、任意選択で１ｍｇ〜５００ｍｇ、例えば、１０ｍｇ〜３００ｍｇ、１５ｍｇ〜３００ｍｇ、または２５〜２５０ｍｇ、適切には、約１５ｍｇ、約２５ｍｇ、約３５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、または約２５０ｍｇを含む経口投与のためのから含有する単位剤形として調製される。
【０４５２】
内容物の決定および製剤の分配
本発明による組成物の構成成分の１種または複数の固有性および／または分配は、当業者に公知の任意の方法により決定することができる。組成物の１種または複数の構成成分の分配は、例えば、近赤外（ＮＩＲ）化学画像化技術により決定することができる。ＮＩＲ化学画像化技術を用いて、組成物、例えば、ミニビーズの表面または断面の画像が作成され得る。この技術により生み出される画像は、組成物の１種または複数の構成成分の分配を示す。ＮＩＲ化学画像化技術に加えて、ミニビーズのような組成物の１種または複数の構成成分の分配は、例えば、飛行時間型２次イオン質量分析（ＴｏＦＳＩＭＳ）により決定することができる。ＴｏＦＳＩＭＳ画像化は、組成物内の１種または複数の構成成分の分配を明らかにすることができる。ＴｏＦＳＩＭＳ分析またはＮＩＲ分析により生み出される画像は、組成物の表面全体の構成成分の分配、または組成物の断面を示すことができる。この節に記載される方法は、例えば、ポリマーマトリックス、例えば、乾燥されたコロイド溶液または分散液を含む組成物に適用可能である。
【０４５３】
製造方法
種々の方法を用いて、本発明の製剤が調製され得る。
【０４５４】
製剤が、活性成分を水不溶性ポリマーマトリックス中に含む実施形態において、コアを作成する基本的な方法は、マトリックス材料、例えば、ヒドロゲル形成ポリマーマトリックス材料（例えば、本明細書で別の場所でより一般的に記載される、ポリ（アミド）、ポリ（アミノ酸）、ヒアルロン酸、リポタンパク質、ポリ（エステル）、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ウレタン）、またはポリ（アクリルアミド）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸）、および対応するコポリマー（ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド酸；ＰＬＧＡ）、シロキサン、ポリシロキサン、ジメチルシロキサン／メチルビニルシロキサンコポリマー、ポリ（ジメチルシロキサン／メチルビニルシロキサン／メチルヒドロゲンシロキサン）ジメチルビニルまたはトリメチルコポリマー、シリコーンポリマー、アルキルシリコーン、シリカ、ケイ酸アルミニウム、ケイ酸カルシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、ケイ酸マグネシウム、珪藻土シリカなど）の液体形態を、活性成分と混合して、懸濁液、溶液、またはコロイドの形態をとり得る混合物を形成させる。混合物を処理して、組成物またはコアが形成される。例えば、組成物は、造型または高温溶融押し出し方法を用いて所望の形態に形づくられて、ビーズを形成してもよい。
【０４５５】
ＮＦＡＴ阻害剤、油相および水溶性ポリマーマトリックスを含む組成物を、またはある特定の実施形態ではコアを調製するための方法は、以下に記載される。一般に、これらのコアはコーティングされる。組成物はまた、任意選択で、界面活性剤を含む。
【０４５６】
一般的には、本明細書に記載される製造方法は、液体の混合を含む。このような混合方法は、液体状態で混合されるべき物質が液体形態にある温度で行われなければならない。例えば、熱可逆性ゲル化剤は、それらが、液体状態にある温度、例えば、５０〜７５℃、例えば、５０〜７０℃、または５５〜７５℃、例えば、６０〜７０℃の温度で、特定の実施形態において、水性ゼラチンを含む製剤を混合する場合、約５５℃または６５℃の温度で混合されなければならない。同様に、製剤の他の構成成分は、構成成分、例えば、分散相中で用いられ得るワックスまたは界面活性剤を溶融するために、加熱する必要があってもよい。
【０４５７】
本明細書に開示されるような、油相、ヒドロゲル形成性ポリマーおよびＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）、および任意選択で、界面活性剤を含む組成物またはコアは、例えば、水、ヒドロゲル形成性ポリマー、および任意選択で、第２の界面活性剤を含む材料を混合して、水性連続相を形成させ、分散相を混合することにより、作製されてもよい。水相および分散相の少なくとも１つは、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）を含み、ＮＦＡＴ阻害剤は、それを含有する相に溶解されてもよく、例えば、両方の相は、一緒に混合される前は、透明な液体であり得る。好ましくは、分散相（油相）は、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）（例えば、油、任意選択の溶媒、ＮＦＡＴ阻害剤、および第１の界面活性剤を含む分散相）を水相と共に含み、コロイドを形成してもよい。コロイドは、分散相が水性連続相に分散される、エマルジョンまたはマイクロエマルジョンの形態を有してもよい。このコロイドは、任意選択で、本発明の液体組成物であってもよい。次いで、本発明の組成物またはコアを調製するために、ヒドロゲル形成性ポリマーのゲル化を引き起こすか、またはゲル化を可能にして、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを形成させる。適切には、方法は、組成物を所望の形態、例えば、ビーズ（ミニビーズとも呼ばれる）に製剤化すること、または処理することを含み、形成方法は、液滴が冷却されて、例えば、ビーズを形成する、冷却媒体、例えば、水と非混和性の冷却液体に通過させる、または通過を可能にする液滴を形成するために造型することを含んでもよいが、好ましくは、水性コロイドを単一のノズル開口部を通して射出することを含む。
【０４５８】
材料の混合は、水性プレミックス（または水相もしくは連続相）と分散相プレミックス（例えば、油相プレミックス）を混合することを含んでもよく、水性プレミックスは、水および水溶性物質を含み、一方、分散相プレミックスは、ＮＦＡＴ阻害剤（例えば、シクロスポリン）および界面活性剤を含有するビヒクルを含んでもよい。ビヒクルは、疎水性液体、例えば、液体脂質であってもよく、またはそれは、自己集合構造を形成するための材料、例えば、界面活性剤であり、もしくはそれを含んでもよい。特に、分散相プレミックスは、シクロスポリンＡ、第１の界面活性剤、油、および他の油溶性構成成分、例えば、任意選択の溶媒を含んでもよい。プレミックスは、既に述べられた通り、それらが形成すべき相に適した１種または複数の界面活性剤を含有してもよく、例えば、水性プレミックスは第２の界面活性剤を含んでもよい。
【０４５９】
水性プレミックスは、水溶性組成要素、すなわち、ヒドロゲル形成性ポリマー、水溶性賦形剤および任意選択で、ＮＦＡＴ阻害剤（好ましくは、ＮＦＡＴ阻害剤が水溶性である場合）の水中溶液を含み、または通常それからなる。水性プレミックスは、本明細書において別の場所で記載される通り、ヒドロゲル形成性ポリマー用の可塑剤を含んでもよい。水性プレミックスは、例えば、ポリマー粘度を増大し、乳化を改善し、これにより、処理中の活性剤の沈殿を妨げる助けとなるための第２の界面活性剤を含んでもよい。ＳＤＳは、このような界面活性剤の例である。任意の事象において、水性プレミックスの組成要素を、構成成分を溶解／溶融するのに十分な期間、例えば、１時間〜１２時間かき混ぜて、完成した水性プレミックスが形成されてもよい。
【０４６０】
分散相プレミックスは、上で記載されたビヒクル（例えば、油相）中、例えば、油を含む液体または自己集合構造の構成成分を含む液体中の分散液、または好ましくは、溶液として、第１の界面活性剤およびＮＦＡＴ阻害剤（好ましくは、ＮＦＡＴ阻害剤が分散相に可溶性、例えば、油溶性である場合）を含んでもよい。例えば、油相プレミックスは、したがって、液体脂質、例えば、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）製剤であってもよく、中鎖トリグリセリドは、Ｃ６〜Ｃ１２脂肪酸から選択される少なくとも１種の脂肪酸の１種または複数のトリグリセリドであり、シクロスポリンＡおよび界面活性剤は、中鎖または長鎖脂肪酸モノ−またはジ−グリセリドを含むか、またはそれである。適切には、油相プレミックスを周囲温度でかき混ぜて、油および界面活性剤中のＮＦＡＴ阻害剤の溶液を形成させる。いくつかの実施形態において、油相プレミックスの構成成分を、例えば、１０分〜３時間の間混合し（またはそうでなければ、かき混ぜ）て、プレミックスを形成させる。
【０４６１】
２種のプレミックスを、例えば、数秒〜１時間、例えば、３０秒〜１時間、適切には、５分〜１時間の間合わせ、かき混ぜて、水性ヒドロゲル形成性ポリマー中の分散相の分散液を形成させて、本発明の液体組成物を形成させる。次に、その分散液をさらに処理して、組成物またはコアを形成させることができる。２種のプレミックスを、混合容器内でかき混ぜることにより、分散液中に合わせてもよく、さらに、またはあるいは、それらを、連続流混合機中で合わせてもよい。
【０４６２】
それ故、ＮＦＡＴ阻害剤およびヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含む組成物またはコアを作製する基本的方法は、ヒドロゲル形成性ポリマー（またはポリマーの混合物）の液体形態（好ましくは、溶液）を、ＮＦＡＴ阻害剤、界面活性剤（曖昧さを回避するためには、第１の界面活性剤）および油相（任意の他の分散相構成成分）と混合して、ポリマー中の分散液を形成させ、方法においてその後、ヒドロゲルを形成させることである。方法は、水性ポリマー相プレミックスおよび分散相プレミックスを一緒に混合することを通常は含む。要求される最終的な組成物を考慮して（本明細書において別の場所で記載される通り）、分散相プレミックスおよび液体のヒドロゲル形成性ポリマー（すなわち、ヒドロゲル形成性ポリマーの溶液または懸濁液、水相）は、１：１〜１：１０、特に１：４〜１：９、例えば、１：５〜１：７の重量比で混合されてもよい。一般に、磁気的または機械的システム、例えば、コロイド（例えば、水性ヒドロゲルが連続相である、エマルジョンまたはマイクロエマルジョンの形態にあってもよい）を形成するための水相中の分散相の分散液を達成するための当業者が良く知っているオーバーヘッド撹拌機を用いた、構成成分の優しい撹拌のみが要求される。連続撹拌が好ましい。混合はまた、インライン混合システムを用いて達成されてもよい。任意の適当な実験室撹拌装置または産業的スケールの混合機、例えば、Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｓｔｉｒｒｅｒ（Ｓｔｕａｒｔにより製造される）またはオーバーヘッド撹拌機（ＫＮＦまたはＦｉｓｈｅｒによる）が、この目的のため利用され得る。例えば、水のような内容物の蒸発を最小にするような方法で、機器を設定することが好ましい。本発明の方法の１つの実施形態において、この目標を達成するために、撹拌のため閉鎖システムを利用することが好ましい。インライン混合は、閉鎖システム処理に特に適し得る。適切には、２種の構成成分の混合は、５０〜７０℃、または５５〜７５℃、例えば、６０〜７０℃の温度で生じる。
【０４６３】
２種の相の混合は、水性ヒドロゲル形成性ポリマーが水性連続相であるコロイドをもたらし、水相に可溶性でない構成成分が分散相である。コロイドは、エマルジョンまたはマイクロエマルジョンの形態を有してもよい。
【０４６４】
コロイドは、上で記載された通り、撹拌しながら分散相プレミックスを液体水相と合わせることにより、形成される。次に、得られたコロイド分散液は、上で記載された固体化されたコアの製剤を有するが、液体の水がコア製剤に依然存在する。
【０４６５】
用語「乾燥」の使用により、乾燥ステップが、乾燥コアを産み出すのに必須であること（これは除外されないが）を暗示すると考えられず、むしろ、固体または固体化された水性外部相が、実質的に水のない、または利用可能な水のないことを暗示すると考えられる。水相（外部相）の固体化は、化学的（例えば、架橋結合による）、または物理的（例えば、冷却または加熱することによる）を含む種々の手段を通じて生じてもよい。この点において、用語「水相」は、それにも関わらず、水だが、コアの外部（連続）相を示すためにこの書類において利用され、ある種の実施形態において、コアの大部分が不存である（またはコアの架橋結合マトリックス内にトラップされる）。しかしながら、コアの外部相は、水溶性であり、水性媒体に溶解する。
【０４６６】
本発明の組成物をゲル化または固体化するための手段は、当業界で公知である。例えば、読者の目はＷＯ２０１５／０６７７６３、特に８１〜８８頁に向けられる。この文献の全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０４６７】
したがって、本発明は、水および水溶性／分散性材料を含む（したがって、ヒドロゲル形成性ポリマーを含む）水性プレミックス、ならびに油相、ＮＦＡＴ阻害剤、および界面活性剤、任意選択で他の賦形剤（例えば、油および油溶性／分散性材料）を含む分散相プレミックス（例えば、油相プレミックス）を形成すること、ならびに２種のプレミックスを合わせて、ヒドロゲル形成性ポリマーを含む水相内のコロイド（分散相）を形成することを含む、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス中のＮＦＡＴ阻害剤、界面活性剤、および油相を含む本発明の組成物またはコアを製造するための方法を含む。次に、コロイドを、形作られた単位、例えば、ビーズに形成させて、活性成分を含むコアを提供することができる。より具体的には、上記で定義された組成物またはコアの製造は、
（ｉ）水溶性組成要素（例えば、本明細書において別の場所で記載される、ヒドロゲル形成性ポリマー、任意の水溶性賦形剤）の水中の溶液を含む水相プレミックスを形成することと、
（ｉｉ）典型的には、分散液、好ましくは、液体脂質中のＮＦＡＴ阻害剤、および界面活性剤の溶液を、任意選択で他の分散相組成要素（例えば、本明細書において別の場所で記載される、界面活性剤、溶媒など）と一緒に含む分散相プレミックスを形成することと、
（ｉｉｉ）水相プレミックス（ｉ）と分散相プレミックス（ｉｉ）とを混合して、コロイドを形成することと、
（ｉｖ）ノズルを通じてコロイドを射出して液滴を形成することと、
（ｖ）ヒドロゲル形成性ポリマーをゲル化もしくは固化させ、またはゲル化もしくは固化を可能にして水溶性ポリマーマトリックスを形成することと、
（ｖｉ）固体を乾燥させること
を含んでもよい。
【０４６８】
本発明の液体組成物の製造は、
（ｉ）水溶性組成要素（例えば、本明細書における他の場所で記載される、ヒドロゲル形成性ポリマー、任意の水溶性賦形剤）の水中の溶液を含む水性相プレミックスを形成することと、
（ｉｉ）典型的には、分散液、または好ましくは、液体脂質中のＮＦＡＴ阻害剤、および第１の界面活性剤の溶液を、任意選択で他の分散相組成要素（例えば、本明細書において別の場所で記載される、界面活性剤、溶媒など）と一緒に含む分散相プレミックスを形成することと、
（ｉｉｉ）水相プレミックス（ｉ）と分散相プレミックス（ｉｉ）とを混合して、コロイドを形成すること
を含んでもよい。
【０４６９】
いくつかの製造方法は、以下のステップ（Ａ）〜（Ｄ）を含み、あるいは、製造方法は、単一の、ステップ（Ａ）〜（Ｄ）の１つまたは任意の組合せを含んでもよい。
【０４７０】
（Ａ）水相の例示的な調製
水相構成成分は、かき混ぜ、例えば、超音波処理または撹拌下で水、例えば、精製水に加えられる。温度は、例えば、６０〜７０℃、特に６５℃まで徐々に増大されて、固体の完全な溶出が達成される。水相構成成分は、ヒドロゲル形成性ポリマー、例えば、ゼラチンまたは寒天、任意選択で１種または複数の他の賦形剤、例えば、Ｄ−ソルビトール（可塑剤）、および界面活性剤（例えば、ＳＤＳ）を含む。可能性のある水相構成成分は、本明細書において別の場所で記載される。
【０４７１】
ゼラチンは、Ａタイプゼラチンであってもよい。いくつかのあまり好ましくない実施において、ゼラチンはタイプＢである。ゼラチンは、１２５〜３００、任意選択で２００〜３００、例えば、２２５〜３００、特に２７５のブルーム強度を有してもよい。水相の構成成分は、例えば、１時間〜１２時間の期間かき混ぜられて、水相（水性プレミックス）の調製が完了してもよい。
【０４７２】
（Ｂ）分散相の例示的な調製
ＮＦＡＴ阻害剤は、かき混ぜながら、例えば、超音波処理または撹拌しながら、適切には、周囲温度において界面活性剤、油、および他の分散相構成成分（例えば、共溶媒）と混合して、活性成分を分散させる、または好ましくは、溶解させる。
【０４７３】
（Ｃ）２つの相の例示的な混合
水相と分散相が混合される。２つの相は、所望の重量で混合されてもよく、例えば、水相に対する分散相の重量比は、１：１〜１：１０、例えば、１：４〜１：９、任意選択で約１：５または約１：７のような１：５〜１：８であってもよい。得られたコロイドは、６０〜７０℃の温度、特に６５℃の温度においてかき混ぜられ、例えば、超音波処理され、または撹拌されて、均一な分散液が達成され、次に、均一な分散液がミニビーズに形成される。特に、均一な分散液は、単一のノズル開口部を通って射出されて、冷却媒体に落ちる液滴が形成される。ノズルは、適切に振動されて、液滴形成が促進される。ノズルは、２〜２００Ｈｚ、任意選択で１５〜５０Ｈｚの頻度で振動されてもよい。
【０４７４】
冷却媒体は、例えば、空気または油であってもよく、油は、例えば、中鎖トリグリセリド、例えば、Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１  ＯＮの場合、適切には生理的に許容可能である。冷却媒体は、しばしば１５℃未満、例えば、１０℃未満だが０℃より上の冷却温度にあってもよい。いくつかの実施形態において、冷却温度は８〜１０℃である。ノズルサイズ（直径）は、典型的には、０．５〜７．５ｍｍ、例えば、０．５〜５ｍｍ、任意選択で０．５〜４ｍｍである。いくつかの実施形態において、ノズル直径は、１〜５ｍｍ、例えば、２〜５ｍｍ、任意選択で３〜４ｍｍであり、特に、３．４ｍｍであり得る。ノズル直径は１〜２ｍｍであってもよい。
【０４７５】
３．４ｍｍのノズルまたは１．５ｍｍのノズルを通した流速は、５〜３５ｇ／分、任意選択で１０〜２０ｇ／分であり、異なるサイズのノズルのため、ノズル範囲に適切に調整され得る。
【０４７６】
（Ｄ）ビーズの例示的な処理
冷却したビーズは回収され、例えば、それらは、１５〜６０分の滞留時間後、例えば、およそ３０分後に冷却油から回収されてもよい。冷却液体（例えば、油）から回収されたビーズは、遠心されて、過剰の冷却液体が除去され、次に乾燥されてもよい。適切には、乾燥は、室温、例えば、１５〜４０℃、任意選択で２０〜３５℃において実行される。乾燥は、ドラム乾燥機において、例えば、６〜２４時間、例えば、約１２時間の期間行われ、ビーズの場合、室温において乾燥される。乾燥されたビーズは、適切には、水と少なくとも部分的に混和性の揮発性非水性液体で洗浄されてもよく、例えば、それらは、酢酸エチルで洗浄されてもよい。洗浄されたビーズは、室温、例えば、１５〜２５℃、任意選択で２０〜２５℃において乾燥されてもよい。乾燥は、ドラム乾燥機において、例えば、６〜４８時間、例えば、約２４時間の期間行われてもよく、ビーズの場合、室温で乾燥される。乾燥は、任意の適切な手段により、例えば、適切には、真空下でドラム乾燥機を用いて、または単に温かい空気をビーズのバッチを通過させることにより、または温かい空気を伴った適切な機器、例えば、仮に流動床乾燥機においてビーズを流動させることにより、達成されてもよい。乾燥後、ビーズは、１〜１０ｍｍ、任意選択で２〜５ｍｍを通して、オーバーサイズのビーズが取り除かれ、次に０．５〜９ｍｍ、任意選択で１〜４ｍｍの孔サイズを有するふるいを通じて、サイズ未満のビーズが取り除かれる。
【０４７７】
ふるい分け方法により拒否されるビーズをリサイクルすることが可能であることは認識され得る。
【０４７８】
本発明のさらなる態様として、本明細書に記載される方法のいずれか（の特性を有すること）により得られ得る製剤が提供される。それ故に、本明細書に記載される方法を用いて、コアの水性連続マトリックス相を形成する適当な構成成分中のコアの分散相を形成する適当な構成成分を分散させることにより、本明細書において実施形態に記載される特定のコアのいずれかが提供され得ることは理解されるべきである。
【０４７９】
先行する段落は、コーティングされていない組成物またはコアの形成を記載する。組成物は、コーティングを含んでもよい。コアはコーティングされてもよい。組成物またはコアを、サブコートでコーティングする、および／または第２のコーティング（調節放出コーティングもしくは外側コートとも呼ばれる）でコーティングしてもよい。適切なサブコート、および調節放出コーティング（第２のコーティングまたは外側コート）は、本明細書に記載されるもののいずれかおよび第１のコーティング（サブコートのため）または第２のコーティング（調節放出コーティングのため）のいずれかである。コーティングは、周知の方法、例えば、以下で記載されるスプレーコーティングを用いて塗布され、所望のサブコートおよび調節放出コーティング重量増加が付与される。
【０４８０】
２つの同心円開口部（中心および外側）と共に上で記載される方法（任意選択で振動しているノズルを通じたエマルジョンの射出）の１つに関して、外側の液体は、本明細書に記載されるコーティング（ビーズの外側）を形成してもよい。Ｆｒｅｕｎｄにより製造されたＳｐｈｅｒｅｘ機械（Ｆｒｅｕｎｄについて、米国特許第５，８８２，６８０号を参照）が好ましくは用いられる（この特許の全体の内容は、参照により本明細書に組み込まれる）。他の類似の射出装置または押し出し装置、例えば、本明細書において上で記載された射出装置もまた用いられてもよい。
【０４８１】
Ｓｐｈｅｒｅｘ機械の使用は、非常に高い単分散性を達成する。例えば、典型的には１００ｇ中、ビーズのバッチ９７ｇは、直径１．４から２ｍｍの間、または１から２ｍｍの間であった。所望のサイズ範囲は、異なるサイズの粒子の拒絶／スクリーニングについて当該技術分野で公知の方法により達成され得る。例えば、バッチをまず例えば、２ｍｍのメッシュ、続いて１．４ｍｍのメッシュを通して通過させることにより、より大きな／小さなビーズを拒絶／スクリーニングすることが可能である。
【０４８２】
ビーズをスプレーコーティングすることが所望される場合、１．４〜２ｍｍの直径範囲が良好なサイズである（より小さいなら、コーティング機械のスプレーは、ビーズを迂回し得、大き過ぎるなら、ビーズは、一貫したコーティングを達成するために必須である流動化が困難であり得る）。
【０４８３】
コーティング方法
コーティング方法は、例えば、ポリマーコートの溶液（具体的に上で記載される）を製剤に塗布するコーティング機械の使用によるような、任意の適切な手段により実行され得る。コーティングのためのポリマーは、直接使用のための作製の準備が整った溶液で製造元により提供され、または製造元の指示に従い、使用前に調合され得る。コーティング方法は、ＷＯ２０１５／０６７７６３の「コーティング方法」の見出しの下に記載される通りであってもよく、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【０４８４】
コーティングは、コーティングを組成物またはコアに塗布するためのＷｕｒｓｔｅｒカラムのような流動床コーティングシステムを用いて適切に実行される。適当なコーティング機械は、当業者に公知であり、例えば、孔あきパン、または流動ベースのシステム、例えば、ＧＬＡＴＴ、ベクター（例えば、ＣＦ  ３６０  ＥＸ）、ＡＣＣＥＬＡＣＯＴＡ、Ｄｉｏｓｎａ、Ｏ’Ｈａｒａ、および／またはＨＩＣＯＡＴＥＲ処理機器を含む。述べられるべきは、「ボトムスプレー」配置で用いられるＭＦＬ／０１流動床塗布装置（Ｆｒｅｕｎｄ）である。
【０４８５】
典型的なコーティング条件は次の通りである。
【０４８６】
【表２】
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【０４８７】
適切には、コーティングは、コーティングのポリマー（および他の構成成分）の溶液または分散液として塗布される。必要であれば、他の溶媒系が用いられてもよいが、一般的には、コーティングは水溶液または分散液として塗布される。コーティング分散液を、流動床塗布装置においてスプレーとして組成物またはコアに塗布して、要求されるコーティング重量増加が付与される。一般的には、コーティング方法は、コアを３５〜４５℃、好ましくは、４０〜４２℃の温度で維持する温度において実行される。
【０４８８】
コーティングを塗布した後、組成物は、例えば、４０〜４５℃で乾燥させることにより、乾燥されてもよい。
【０４８９】
本発明は、本明細書に記載される得られた組成物の特性を有する製品、それが作製される方法を除き、組成物の特性により定義されるその特性に関して定義される製品をさらに提供する。
【０４９０】
本明細書において述べられる通り、記載される方法を用いて、本明細書の種々の実施形態に記載される組成物のいずれかが提供され得る。例として、コアおよび水溶性セルロースエーテルもしくはセルロースエーテルの水溶性誘導体を含む第１のコーティングおよび／または遅延放出ポリマーを含む第２のコーティングを含む本発明の組成物が提供され、コアは、ゼラチン、ＮＦＡＴ阻害剤、中鎖モノ−、ジ−、および／またはトリ−グリセリド、ポリエチレングリコールエーテルまたはエステルを含まないか、またはそれではない、中鎖もしくは長鎖脂肪酸モノ−もしくはジ−グリセリドまたはその組合せであるか、またはそれを含む第１の界面活性剤、共溶媒、および任意選択で、第２の界面活性剤を含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含み、コアは、コアの形成について上で記載されたステップ（ｉ）〜（ｖｉ）を含む方法により得られるコアの特性を有し、方法のステップ（ｉ）における水相プレミックスは、ゼラチンおよび任意選択で、第２の界面活性剤（適切には、陰イオン性界面活性剤）を含み、方法のステップ（ｉｉ）における油相プレミックスは、中鎖モノ−、ジ−、またはトリ−グリセリド、疎水性活性成分、界面活性剤（適切には、非イオン性界面活性剤）、および共溶媒を含み、コアは、任意選択で、水溶性セルロースエーテル、またはセルロースエーテルの水溶性誘導体を含む第１のコーティングおよび／または遅延放出ポリマーを含む第２のコーティングでコートされ、コーティングは本明細書に記載されるもののいずれかである。したがって、方法は、第１のコーティングおよび／または第２のコーティングを含む上記の組成物を生成してもよい。方法はさらに、第１のコーティングと、第１のコーティングの外側である第２のコーティングとを含む組成物を生成してもよい。
【０４９１】
特定の実施形態において、組成物またはコアは、固体コロイドの形態であり、コロイドは、連続相および分散相を含み、
分散相は、
シクロスポリン、
中鎖モノ−、ジ−、および／またはトリ−グリセリド、例えば、中鎖トリグリセリド、特にカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、
中鎖または長鎖モノ−またはジ−グリセリド、特に、グリセリルモノオレエート／ジオレエート、および
共溶媒（例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノール）
であり、またはそれを含み、
連続相は、
カラギーナン、ゼラチン、寒天、およびペクチン、またはこれらの組合せから選択される親水コロイド、任意選択で、ゼラチン、および寒天、またはこれらの組合せから選択される親水コロイドであり、またはそれを含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス、より具体的には、ゼラチンであり、またはそれを含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスのポリマー、
可塑剤、任意選択で、グリセリン、ポリオール、例えば、ソルビトール、ポリエチレングリコール、およびクエン酸トリエチル、またはこれらの混合物、特にソルビトールから選択される可塑剤、および
陰イオン性界面活性剤、例えば、脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、および胆汁酸塩、特にアルキル硫酸塩、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムから選択される少なくとも１種の界面活性剤
であり、またはそれを含む。
【０４９２】
別の特定の実施形態では、組成物またはコアは、固体コロイドの形態にあり、コロイドは連続相と分散相とを含み、
分散相は、
シクロスポリン；
中鎖モノ−、ジ−および／またはトリ−グリセリド、例えば、中鎖トリグリセリド、特にカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド；
非イオン性界面活性剤（例えば、ポリエトキシ化ヒマシ油（例えば、Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ  ＥＬ）、中鎖または長鎖モノ−またはジ−グリセリド、特にグリセリルモノオレエート／ジオレエート；および
共溶媒（例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノール）
であるか、またはそれを含み、
連続相は、
カラギーナン、ゼラチン、寒天、およびペクチン、もしくはこれらの組合せから選択され、任意選択でゼラチンおよび寒天、もしくはこれらの組合せから選択される親水コロイドであり、またはそれを含み、より具体的には、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスのポリマーが、ゼラチンであり、またはそれを含む、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックス；
可塑剤、任意選択でグリセリン、ポリオール、例えば、ソルビトール、ポリエチレングリコール、およびクエン酸トリエチル、またはこれらの混合物、特にソルビトールから選択される可塑剤；ならびに
陰イオン性界面活性剤、例えば、脂肪酸塩、アルキル硫酸塩および胆汁塩、特にアルキル硫酸塩、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムから選択される少なくとも１種の界面活性剤
であるか、またはそれを含む。
【０４９３】
上記実施形態では、コアは、３００〜７００ｍｇ／ｇの量のゼラチンを含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含み、コアは、シクロスポリンＡ、２０〜２００ｍｇ／ｇの量の中鎖モノ−、ジ−、またはトリ−グリセリド（例えば、中鎖トリグリセリド、特にカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド）をさらに含み、コアは、以下の構成成分：
１５０〜２５０ｍｇ／ｇの量の共溶媒（例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノール）；
８０〜２００ｍｇ／ｇの量の非イオン性界面活性剤；および
１５〜５０ｍｇ／ｇの量の陰イオン性界面活性剤
をさらに含み、
重量は、コアの乾燥重量に基づく。
【０４９４】
好適には、上記段落の実施形態では、シクロスポリンＡは、６０〜１５０ｍｇ／ｇ、例えば、８０〜１２０ｍｇ／ｇ、または特に８０〜１００ｍｇ／ｇの量で存在してもよい。非イオン性および陰イオン性界面活性剤は本明細書で定義される通り、例えば、アルキル硫酸塩、カルボキシレートもしくはリン脂質（特にＳＤＳ）から選択される陰イオン性界面活性剤；またはソルビタンに基づく界面活性剤、ＰＥＧ−脂肪酸、もしくはグリセリル脂肪酸もしくはポロキサマーから選択される非イオン性界面活性剤である。特定の非イオン性界面活性剤は、ポリエトキシ化ヒマシ油（例えば、Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（商標）ＥＬ）である。
【０４９５】
さらに特定の実施形態では、分散相は、
６０〜１８０ｍｇ／ｇの量のシクロスポリン、
４０〜８０ｍｇ／ｇの量のカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、
１００〜２００ｍｇ／ｇの量の２−（２−エトキシエトキシ）エタノール、ならびに
１００〜１５０ｍｇ／ｇの量のグリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエート
を含み、重量は組成物の乾燥重量に対するものである。
【０４９６】
油相または分散相は、
１２０〜３６０ｍｇ／ｇの量のシクロスポリン、
８０〜１６０ｍｇ／ｇの量のカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、
２００〜４００ｍｇ／ｇの量の２−（２−エトキシエトキシ）エタノール、ならびに
２００〜３００ｍｇ／ｇの量のグリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエート
を含んでもよく、重量は湿潤組成物の重量に対するものである。
【０４９７】
液体組成物は、
２０〜６０ｍｇ／ｇの量のシクロスポリン、
１３〜２７ｍｇ／ｇの量のカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、
５０〜７０ｍｇ／ｇの量の２−（２−エトキシエトキシ）エタノール、ならびに
３０〜５５ｍｇ／ｇの量のグリセリルモノオレエートおよび／またはグリセリルジオレエート
を含む油相を含んでもよく、重量は組成物、すなわち、液体組成物の湿潤重量に対するものであり、任意選択で、油相と水相との比は１．５であってもよい。
【０４９８】
実施形態では、水相または連続相は、３００〜７００ｍｇ／ｇの量のゼラチン、および１５〜５０ｍｇ／ｇの量のＳＤＳを含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含み、重量は組成物の乾燥重量に対するものである。
【０４９９】
実施形態では、水相は、１２０〜２８０ｍｇ／ｇの量のゼラチンおよび６〜２０ｍｇ／ｇの量のＳＤＳを含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含んでもよく、重量は水相の重量に対するものである。水相は、１００〜２３０ｍｇ／ｇの量のゼラチンおよび５〜１６ｍｇ／ｇの量のＳＤＳを含むヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含んでもよく、重量は組成物、すなわち、液体組成物の重量に対するものであり、任意選択で、油相と水相との比は１．５であってもよい。
【０５００】
適切には、直前の２段落の実施形態において、シクロスポリンは、９０〜１４０ｍｇ／ｇ、例えば、６０〜１５０ｍｇ／ｇ、８０〜１２０ｍｇ／ｇまたは特に８０〜１００ｍｇ／ｇの量で存在してもよい。陰イオン性界面活性剤は、本明細書で定義される通りであり、例えば、アルキル硫酸塩、カルボン酸塩、またはリン脂質（特にＳＤＳ）から選択される陰イオン性界面活性剤である。
【０５０１】
ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含む本明細書に記載の組成物またはコアを、本明細書に記載のようにコーティングしてもよい。これらの実施形態のための特定のコーティングは、
水溶性セルロースエーテル、特にヒドロキシプロピルメチルセルロースであり、またはそれを含む第１のコーティング（サブコーティング）
調節放出コーティング、特にｐＨ依存性調節放出コーティング、より特定には、エチルセルロース（例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ）を含むコーティング、なおより具体的には、エチルセルロース、およびペクチン（例えば、本明細書に記載されるＳｕｒｅｌｅａｓｅペクチンコーティング）のような水溶性多糖を含むコーティングであり、またはそれを含む第１のコーティングの外側の第２のコーティング
を含むコーティングであり、
第１のコーティングは、第１のコーティングを塗布する前の製剤の重量に対して、（ｉ）８重量％〜１２重量％、例えば、約１０重量％、または（ｉｉ）４重量％〜６重量％、例えば、約５重量％から選択される範囲内の第１のコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在し、
第２のコーティングは、第２のコーティングを塗布する前の製剤の重量に対して、（ａ）１０重量％〜１２重量％、例えば、約１１重量％、もしくは約１１．５重量％、または（ｂ）１６重量％〜１８重量％、例えば、１７重量％から選択される第２のコーティングに起因する製剤の重量増加に対応する量で存在する。
【０５０２】
同様に、ヒドロゲル形成性ポリマーマトリックスを含む上記の組成物またはコアを、
調節放出コーティング、特に、ｐＨ非依存性調節放出コーティング、より具体的には、エチルセルロース（例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ）を含むコーティング、さらにより具体的には、エチルセルロースおよびペクチンなどの水溶性多糖を含むコーティング（例えば、本明細書に記載されるＳｕｒｅｌｅａｓｅ−ペクチンコーティング）であるか、またはそれを含む第２のコーティングを含み、
第２のコーティングが、第２のコーティングを塗布する前の製剤の重量に対して、（ａ）１０重量％〜１２重量％、例えば、約１１重量％もしくは約１１．５重量％、または（ｂ）１６重量％〜１８重量％、例えば、約１７重量％から選択される、第２のコーティングに起因する製剤の重量増加に対応する量で存在する、
コーティングを用いてコーティングしてもよい。
【０５０３】
次の特性が、例えば、直前の節において適用可能である、本明細書に記載されるコアにおいて、次の特性
ゼラチンは、３００〜７００ｍｇ／ｇの量で存在してもよく、
中鎖モノ−、ジ−、またはトリ−グリセリド（例えば、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド）は、２０〜２００ｍｇ／ｇの量で存在してもよく、
共溶媒（例えば、２−（エトキシエトキシ）エタノール）は、１５０〜２５０ｍｇ／ｇの量で存在してもよく、
非イオン性界面活性剤（例えば、ソルビタンベースの界面活性剤、ＰＥＧ−脂肪酸もしくはグリセリル脂肪酸、またはポロキサマー、特にポリエトキシ化ヒマシ油、例えば、Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ  ＥＬ）は、８０〜２００ｍｇ／ｇの量で存在してもよく、
陰イオン性界面活性剤（例えば、アルキル硫酸塩、カルボン酸塩、またはリン脂質（特にＳＤＳ））は、１５〜５０ｍｇ／ｇの量で存在してもよく、
シクロスポリンＡは、６０〜１８０ｍｇ／ｇ、適切には、６０〜１５０ｍｇ／ｇ、９０〜１５０ｍｇ／ｇ、または８０〜１００ｍｇ／ｇ、例えば、８１〜９８ｍｇ／ｇの量で存在してもよく、
全ての重量は、コーティング前のコアの乾燥重量に対する、
が存在してもよい。
【０５０４】
組成物は、セルロースエーテルおよびその誘導体、特にヒドロキシプロピルメチルセルロースから選択される水溶性化合物であるか、またはそれを含む第１のコーティング（サブコーティング）を含んでもよく、またはコアは、セルロースエーテルおよびその誘導体、特にヒドロキシプロピルメチルセルロースから選択される水溶性化合物であるか、またはそれを含む第１のコーティング（サブコーティング）でコーティングされてもよい；第１のコーティングは、第１のコーティングを塗布する前のコア重量に対して、（ｉ）８重量％〜１２重量％、例えば、約１０重量％、または（ｉｉ）４重量％〜６重量％、例えば、約５重量％から選択される範囲内の第１のコーティングに起因する重量増加に対応する量で存在する。第１のコーティングは、それに塗布される調節放出コーティング（または第２のコーティング）を有する。
【０５０５】
好ましくは、任意の調節放出コーティング（第２のコーティング）は、特に、直前の段落の実施形態において、ｐＨ非依存性調節放出コーティングであるか、またはそれを含み、より具体的には、第２のコーティングは、エチルセルロース（例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ）を含む調節放出コーティング、なおより具体的には、エチルセルロースおよび水溶性多糖、ペクチン（例えば、本明細書に記載されるＳｕｒｅｌｅａｓｅ−ペクチンコーティング）を含む調節放出コーティングであってもよく、調節放出コーティングは、第２のコーティングを塗布する前の製剤の重量に対して、（ａ）１０〜１２重量％、例えば、約１１％もしくは約１１．５％、または（ｂ）１６重量％〜１８重量％、例えば、約１７重量％から選択される第２のコーティングに起因する製剤の重量増加に対応する量で存在する。
【０５０６】
さらに、本発明の組成物を形成する方法は、第１の集団と第２の集団とを混合するステップを含んでもよく、
第１の集団は、水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含むコーティングを有するが、例えば、本明細書に記載されるような外側コーティングを有さず、
第２の集団は、水溶性セルロースエーテルであるか、またはそれを含む第１のコーティングと、例えば、本明細書に記載されるような、遅延放出コーティングであるか、またはそれを含む第２のコーティング、例えば、遅延放出ポリマーであるか、またはそれを含むコーティングを有する。
【０５０７】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、限定されるものではないが、以下のものを含む、本明細書に記載される療法のいずれかであってもよい。
【０５０８】
ブリナツモマブＭＥＨＤ７９４５Ａ、ＡＢＴ−１２２、ＡＢＴ−９８１、ＳＡＲ１５６５９７、ＭＭ−１１１、ＩＭＣｇｐ１００、ＲＯ５５２０９８５、ＸｍＡｂ５８７１、ＣＯＶＡ３２２、ＡＬＸ−０７６１、ＡＦＭ１３、ＡＦＭ１１、ＭＥＤＩ−５６５、エルツマキソマブ、ＭＧＤ００６、ＭＧＤ００７、ＬＹ３１６４５３０およびＡＭｖ−５６４から選択される二特異的抗体。
【０５０９】
ＮＹ−ＥＳＯ−１  ＴＣＲ  １、ＨＰＶ−１６  Ｅ６  ＴＣＲ１、ＨＰＶ−１６  Ｅ６  ＴＣＲ、ＭＡＧＥ  Ａ３／Ａ６  ＴＣＲ１、ＭＡＧＥ  Ａ３  ＴＣＲ１、ＳＳＸ２  ＴＣＲ１、ＮＹ−ＥＳＯ  ＴＣＲ、ＭＡＧＥ−Ａ−１０  ＴＣＲ、ＢＰＸ−７０１およびＡＴＴＣＫ２０から選択される高親和性Ｔ細胞受容体Ｔ細胞。
【０５１０】
ＣＤ１９  ＣＡＲ１、ＫＴＥ−Ｃ１９  ＣＡＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ  ＣＡＲ、ＪＣＡＲ０１５、ＪＣＡＲ０１７、ＪＣＡＲ０１４、ＢＰＸ−４０１、ＣＢＭ−Ｃ１９．１、ＣＡＲ−Ｔ  ＣＤ１９、ＣＴＬ１０９、ＪＣＡＲ０１８、ＪＣＡＲ０２３、ＪＴＣＲ０１６、ＭＵＣ１６に対するＣＡＲ−Ｔ、ＲＯＲ１、ＢＰＸ−６０１、ｂｂ２１２１、ＣＡＲ−Ｔ  ＣＤ３０、ＣＡＲ−Ｔ  ＥＧＦＲおよびＣＡＲＴ−ｍｅｓｏに対するＣＡＲ−Ｔから選択される自己ＣＡＲ−Ｔ。
【０５１１】
ＵＣＡＲＴ１９、ＵＣＡＲＴ１２３、ＵＣＡＲＴ３８、ＵＣＡＲＴＣＳ１およびＥＢＶ−ＣＴＬから選択される同種異系ＣＡＲ−Ｔ療法。
【０５１２】
抗ＰＤ−１／抗ＰＤ−Ｌ１阻害剤、例えば、ＲＥＧＮ２８１０、Ｏｐｄｉｖｏ、Ｋｅｙｔｒｕｄａ、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０ＡおよびＰＤＲ００１（ＰＤＲ１）、リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ；ＣＤ２２３）を標的化する抗体、例えば、ＬＡＧ５２５、イピリムマブおよびトレムリムマブから選択される抗ＣＴＬＡ−４受容体阻害剤、ならびに抗ＴＩＭ−３受容体阻害剤、例えば、ＭＢＧ４５３から選択されるチェックポイント阻害剤。
【０５１３】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、単一の療法または２つ以上のそのような療法、好適には、本明細書に記載のいずれか２つ以上の療法であってもよい。例えば、療法は、二特異的Ｔ細胞エンゲージャー、キメラ抗原受容体療法およびチェックポイント遮断療法から選択される２つ以上の療法を含み、例えば、療法は、チェックポイント遮断療法と、二特異的Ｔ細胞エンゲージャーおよびキメラ抗原受容体療法から選択される１つまたは複数の療法とを含む。例えば、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法は、ＰＤ１チェックポイント阻害剤（例えば、Ｍｅｄｉ４７３６またはＫｅｙｔｒｕｄａ（ペンブロリズマブ））および１つまたは複数のＣＡＲ  Ｔ療法、より具体的には、ＰＤ１チェックポイント阻害剤（例えば、Ｍｅｄｉ４７３６またはＫｅｙｔｒｕｄａ（ペンブロリズマブ））と、１つまたは複数のＣＤ１９  ＣＡＲ  Ｔ療法、例えば、ＣＤ１９  ＣＡＲ１、ＫＴＥ−Ｃ１９  ＣＡＲ、ＪＣＡＲ０１５、ＪＣＡＲ０１７、ＪＣＡＲ０１４、ＢＰＸ−４０１およびＣＴＬ１０９から選択されるＣＡＲ  Ｔとの組合せを含んでもよい。さらなる特定の組合せは、Ｍｅｄｉ４７３６と、ＪＣＡＲ０１４、ＪＣＡＲ０１５およびＪＣＡＲ０１７から選択されるＣＡＲ  Ｔとである。別の組合せは、二特異的Ｔ細胞エンゲージング療法、例えば、ブリナツモマブと、ＣＡＲ  Ｔ、例えば、本明細書に記載のＣＡＲ  Ｔ療法のいずれかとである。さらに別の組合せは、ＨＩＦアンタゴニストまたはＩＤＯ阻害剤と共にチェックポイント阻害剤を含んでもよい。本発明のＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞と共に使用するための別の薬剤は、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチドである。
【０５１４】
ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法、またはその組合せを、本明細書に記載の１つまたは複数の免疫腫瘍アジュバント療法と一緒に使用することもできる。
【０５１５】
塗布
増強された溶出プロファイルが達成されるため、本発明の組成物を、経口送達薬学的活性成分のために有利に使用することができる。
【０５１６】
療法の有効性の維持とは、機能的な、構成的な、または活性化されたＮＦＡＴを発現するＴ細胞が、ＧＩ管の外部で全身的に十分な量で保持され、それによって、その所望の有益な治療効果が維持されることと理解される。本発明は、ＮＦＡＴ阻害剤の全身バイオアベイラビリティをモジュレートして、ＮＦＡＴによって誘導されるいかなる負の（「オフターゲット」）効果も制御しながら、ＮＦＡＴ  Ｔ細胞の（「オンターゲット」）有効性を可能にすることができる。
【０５１７】
本発明のある特定の実施形態の目的は、局部および全身性炎症を軽減すること、例えば、サイトカイン、特に前炎症性サイトカインのレベルを低下させることである。したがって、本発明は、局部サイトカインレベルおよび全身サイトカインレベルを低下させる、またはモジュレートすることができる組成物を企図する。あるいは、本発明は、胃腸管における局部サイトカインレベルを低下させることができるが、全身サイトカインレベルおよび／または全身リンパ球（任意選択で、Ｔ細胞もしくはＮＫ細胞）レベルには影響しない。一実施形態では、上記特徴は、本出願における他の場所で定義されるコーティングによって媒介される。例えば、サイトカインレベルの局部胃腸での低下を、遅延放出ポリマーコーティングを有する本発明の組成物を用いて達成することができる。
【０５１８】
あるいは、本発明は、限定されるものではないが、胃腸管における、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、抗原提示細胞、好酸球、好中球およびマクロファージなどの免疫細胞によって様々に放出される局部サイトカインおよびケモカインレベルを低下させることができるが、全身サイトカインレベルおよび／または全身リンパ球（任意選択で、Ｔ細胞もしくはＮＫ細胞）レベルには影響しない。一実施形態では、上記特徴は、本出願における他の場所で定義されるコーティングによって媒介される。例えば、サイトカインおよびケモカインレベルの局部胃腸での低下を、遅延放出ポリマーコーティングを有する本発明の組成物を用いて達成することができる。
【０５１９】
本発明の組成物は、シクロスポリン放出を腸管下部に標的化するための、シクロスポリンＡおよび例えば、ｐＨ非依存性ポリマーを含む調節放出コーティングを含む調節放出組成物を含む。そのような組成物は、下部消化管、特に結腸中で高いレベルのシクロスポリンＡをもたらしながら、シクロスポリンＡへの低い全身性曝露をもたらす。このような組成物は、活性な形態のシクロスポリンＡを、例えば、溶液として放出し、下部消化管の局所組織でのシクロスポリンＡの増強された吸収をもたらす。組成物がミニビーズの形態で用いられる場合、ミニビーズは、経口投与後にＧＩ管の大きなセクションに沿って好都合に分散され、それ故に、例えば、結腸の大きなセクションへのシクロスポリンのより一様な曝露をもたらすと予測される。
【０５２０】
したがって、下部ＧＩ管の局部的処置のためのシクロスポリンを含む本発明による調節放出組成物は、ＧＩＴの状態の処置または防止において有用であると予測される。特に、本発明の組成物は、シクロスポリンＡおよび／または別の免疫抑制剤を含んでもよく、下部ＧＩ管に影響する炎症状態、特に、結腸に影響する状態の防止または処置において有用であり得る。
【０５２１】
本発明の組成物は、好適には経口投与される。要求される用量は、処置される具体的な状態および状態のステージに依存して変動する。シクロスポリンＡを含有する組成物の場合、一般的には、組成物は、０．１〜１００ｍｇのシクロスポリンＡの用量、例えば、１〜５００ｍｇの用量、または特にシクロスポリンＡ  ２５〜２５０ｍｇの用量をもたらすように投与される。組成物は、単回１日用量として適切に投与される。
【０５２２】
ＮＦＡＴ阻害剤を含む組成物またはＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法と共に使用するのに好適であり得る抗がん剤としては、限定されるものではないが、
（ｉ）抗増殖薬／抗新生物薬およびその組合せ、例えば、アルキル化剤（例えば、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、窒素マスタード、ウラシルマスタード、ベンダムスチン、メルファラン、クロラムブシル、クロルメチン、ブスルファン、テモゾラミド、ニトロソウレア、イホスアミド、メルファラン、ピポブロマン、トリエチレン−メラミン、トリエチレンチオホポラミン、カルムスチン、ロムスチン、ストロプトゾシンおよびデカルバジン）；代謝拮抗剤（例えば、ゲムシタビンおよび抗葉酸剤、例えば、５−フルオロウラシルおよびテガフルのようなフルオロピリミジン、ラルチトレキセド、メトトレキサート、ペメトレキセド、シトシンアラビノシド、フロクスウリジン、シタラビン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、フルダラビンホスフェート、ペントスタチン、およびゲムシタビンおよびヒドロキシウレア）；抗生物質（例えば、アドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシンおよびミトラマイシンのようなアントラサイクリン）；抗有糸分裂剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびビノレルビンのようなビンカアルカロイドならびにタキソールおよびタキソテールのようなタキソイドならびにポロキナーゼ阻害剤）；プロテアソーム阻害剤、例えば、カルフィルゾミブおよびボルテゾミブ；インターフェロン療法；およびトポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシドおよびテニポシドのようなエピポドフィロトキシン、アムサクリン、トポテカン、イリノテカン、ミトキサントロンおよびカンプトテシン）；ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、アラ−Ｃ、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（商標））、ナブパクリタキセル、ドセタキセル、ミトラマイシン、デオキシコ−ホルマイシン、マイトマイシン−Ｃ、Ｌ−アスパラギナーゼ、インターフェロン（特に、ＩＦＮ−アルファ）、エトポシド、テニポシド、ＤＮＡ脱メチル化剤（例えば、アザシチジンまたはデシタビン）；ならびにヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤（例えば、ボリノスタット、ＭＳ−２７５、パノビノスタット、ロミデプシン、バルプロ酸、モセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）およびプラシノスタットＳＢ９３９）；
（ｉｉ）細胞増殖抑制剤、例えば、抗エストロゲン剤（例えば、タモキシフェン、フルベストラント、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェンおよびヨードキシフェン）、抗アンドロゲン剤（例えば、ビカルタミド、フルタミド、ニルタミドおよび酢酸シプロテロン）、ＬＨＲＨアンタゴニストまたはＬＨＲＨアゴニスト（例えば、ゴセレリン、ロイプロレリンおよびブセレリン）、プロゲストゲン（例えば、酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害剤（例えば、アナストロゾール、レトロゾール、ボラゾールおよびエキセメスタン）およびフィナステリドなどの５α−リダクターゼの阻害剤；ならびにナベルベン、ＣＰＴ−ＩＩ、アナストラゾール、レトラゾール、カペシタビン、レロキサフム、シクロホスファミド、イホスアミド、およびドロロキサフィン；
（ｉｉｉ）抗侵襲剤、例えば、ダサチニブおよびボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）、およびメタロプロテイナーゼ阻害剤、ウロキナーゼプラスミノゲンアクチベーター受容体機能の阻害剤またはヘパラナーゼに対する抗体；
（ｉｖ）増殖因子機能の阻害剤、例えば、そのような阻害剤は、増殖因子抗体および増殖因子受容体抗体、例えば、抗ｅｒｂＢ２抗体トラスツズマブ［Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（商標）］、抗ＥＧＦＲ抗体パニツムマブ、抗ｅｒｂＢ１抗体セツキシマブ、チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、上皮増殖因子ファミリーの阻害剤（例えば、ＥＧＦＲファミリーのチロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、６−アクリルアミド−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−（３−モルホリノプロポキシ）−キナゾリン−４−アミン（ＣＩ  １０３３）、ｅｒｂＢ２チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ラパチニブ）およびＣＴＬＡ−４、４−ＩＢＢおよびＰＤ−Ｉなどの共刺激分子に対する抗体、またはサイトカイン（ＩＬ−１０、ＴＧＦ−ベータ）に対する抗体；肝細胞増殖因子ファミリーの阻害剤；インスリン増殖因子ファミリーの阻害剤；細胞アポトーシスのタンパク質調節因子のモジュレーター（例えば、Ｂｃｌ−２阻害剤）；イマチニブおよび／またはニロチニブ（ＡＭＮ１０７）などの血小板由来増殖因子ファミリーの阻害剤；セリン／トレオニンキナーゼの阻害剤（例えば、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えば、ソラフェニブ、チピファルニブおよびロナファルニブなどのＲａｓ／Ｒａｆシグナリング阻害剤）、ＭＥＫおよび／またはＡＫＴキナーゼによる細胞シグナリングの阻害剤、ｃ−ｋｉｔ阻害剤、ａｂｌキナーゼ阻害剤、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、Ｐｌｔ３キナーゼ阻害剤、ＣＳＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ＩＧＦ受容体キナーゼ阻害剤；オーロラキナーゼ阻害剤およびサイクリン依存性キナーゼ阻害剤、例えば、ＣＤＫ２および／またはＣＤＫ４阻害剤；ならびにＣＣＲ２、ＣＣＲ４またはＣＣＲ６アンタゴニスト；
（ｖ）血管内皮増殖因子の効果を阻害するものなどの抗血管新生剤［例えば、抗血管内皮細胞増殖因子抗体ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（商標））］；サリドマイド；レナリドミド；ならびに例えば、ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、バンデタニブ、バタラニブ、スニチニブ、アキシチニブおよびパゾパニブ；
（ｖｉ）例えば、異常なｐ５３または異常なＢＲＣＡ１もしくはＢＲＣＡ２などの異常な遺伝子を置き換えるための手法を含む、遺伝子療法手法；
（ｖｉｉ）例えば、アレムツズマブ、リツキシマブ、イブリツモマブチウキセタン（Ｚｅｖａｌｉｎ（登録商標））およびオファツムマブなどの抗体療法；インターフェロンαなどのインターフェロン；ＩＬ−２（アルデスロイキン）などのインターロイキン；インターロイキン阻害剤、例えば、ＩＲＡＫ４阻害剤；ＨＰＶワクチン、例えば、Ｇａｒｄａｓｉｌ、Ｃｅｒｖａｒｉｘ、ＯｎｃｏｐｈａｇｅおよびＳｉｐｕｌｅｕｃｅｌ−Ｔ（Ｐｒｏｖｅｎｇｅ）などの予防および処置ワクチンを含むがんワクチン；ｇｐ１００；樹状細胞に基づくワクチン（Ａｄ．ｐ５３  ＤＣなど）；ｔｏｌｌ様受容体モジュレーター、例えば、ＴＬＲ−７またはＴＬＲ−９アゴニスト；ならびに
（ｖｉｉｉ）細胞傷害剤、例えば、フルダリビン（フルダラ）、クラドリビン、ペントスタチン（Ｎｉｐｅｎｔ（商標））
から選択される１つまたは複数の薬剤が挙げられる。
【０５２３】
任意選択で、抗がん剤は、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法ではない。
【０５２４】
免疫腫瘍補助療法
ＮＦＡＴによって媒介される療法を、療法の効果を強化または増強する１つまたは複数の補助療法と一緒に使用することができる。したがって、本明細書に記載の療法を、１つまたは複数の補助療法と一緒に使用することができる。例えば、ＮＦＡＴ活性化Ｔ細胞によって媒介される療法を、
アデノシンＡ２Ａ受容体阻害剤、例えば、ＨＴＬ−１０７１；
抗ＣＥＡＣＡＭ１抗体、例えば、ＣＭ−２４、癌胎児抗原（ＣＥＡ）関連細胞接着分子１（ＣＥＡＣＡＭ１；ＣＤ６６ａ）を標的化するヒト化ＩｇＧ４  ｍＡｂ；
ＢＲＡＦ阻害剤（特にチェックポイント阻害剤と共に使用する場合）、例えば、Ｔａｆｉｎｌａｒ；
ＴＧＦベータ受容体キナーゼ阻害剤（特にチェックポイント阻害剤と一緒に使用する場合）；
ＭＡＰキナーゼ阻害剤、例えば、Ｍｅｋｉｎｉｓｔ（ＭＡＰキナーゼキナーゼ１（ＭＡＰ２Ｋ１；ＭＥＫ１）およびＭＥＫ２の低分子阻害剤）；
ＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子の刺激因子）アゴニスト、例えば、ＭＩＷ８１５（ＳＴＩＮＧアゴニスト）；
ＮＫ細胞の活性化因子、例えば、α−ガラクトシルセラミド（特にチェックポイント阻害剤と一緒に使用する場合）；ならびに
前炎症性サイトカイン、例えば、ＩＬ−２、ＩＦＮγ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２１；
またはこれらの２つ以上の組合せ
のうちの１つまたは複数から選択される補助療法と共に使用することができる。
【実施例】
【０５２５】
実施例１：本発明の液体組成物の調製
一定の撹拌下でドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）およびＤ−ソルビトールを精製水と混合することにより、水相を調製した。次に、この溶液にゼラチンを加え、穏やかな加熱を約６０〜７０℃まで適用して、ゼラチンの完全な溶融を達成した。水相の組成を以下の表１に示す。
【０５２６】
【表３】
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【０５２７】
室温で撹拌しながら、２−（２−エトキシエトキシ）エタノール（Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ  ＨＰ）、グリセリルモノオレエート／ジオレエート（Ｃａｐｍｕｌ  ＧＭＯ−５０）およびカプリン酸／カプリル酸トリグリセリド（Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１０）を一緒に混合して、溶液を形成させることにより、油相を調製した。シクロスポリンＡを加え、透明溶液を得るまで混合した。油相の組成を、以下の表２に示す。
【０５２８】
【表４】
2018527342.tif 000006
【０５２９】
油相を、加熱した水相と、約１：５（油相：水相）の比で混合した。得られた混合物を、磁気撹拌装置を使用して６０〜７０℃、２５０〜３５０ｒｐｍで撹拌して、均一性を達成した。
【０５３０】
実施例２：ミニビーズの調製
本明細書に記載のミニビーズは、本発明の組成物であってもよい。あるいは、ミニビーズは、コアであってもよい。一般的には、ミニビーズを、以下の手順に従ってミニビーズを形成することによって調製した。
【０５３１】
継ぎ目のないミニビーズの形態の組成物またはコアを、以下の通りＳｐｈｅｒｅｘ方法を用いて調製した。
【０５３２】
水相と油相の混合物を、実施例１に記載の手順に従って調製した。
【０５３３】
次に、混合物を、直径３ｍｍを有する単一のノズル出口を有する、振動しているノズルを通して（温度制御管を介して）送った。溶液が、中鎖トリグリセリド（Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１０）冷却油を温度１０℃で一定に流す冷却チャンバーに、振動しているノズルを通って流動するにつれて、継ぎ目のないミニビーズが形成された。
【０５３４】
ミニビーズを冷却油から取り除き、遠心機に入れて、過剰な油を取り除いた。遠心分離後、設定された冷蔵庫温度１０℃およびヒーター温度２０℃で第１の乾燥ステップを開始した。乾燥機を１５ＲＰＭで回転させた。ビーズが乾燥ドラム中で自由に回転していることを観察した場合、乾燥していると見なした。
【０５３５】
ミニビーズを酢酸エチルで洗浄し、次に、第１の乾燥ステップにおいて上記されたものと同じ乾燥条件下でさらに２４ｈ乾燥させた。次に、乾燥したミニビーズをふるいにかけて、オーバーサイズおよびアンダーサイズのビーズを取り除いて、コア直径１ｍｍ〜２ｍｍをもたらした。この手順は、表３に示される組成を有するコアをもたらし、値は各構成成分の総重量の重量パーセントである。
【０５３６】
【表５】
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【０５３７】
実施例３：エチルセルロースのオーバーコートを有するミニビーズの調製
第１のコーティング（サブコートとも呼ばれる）であるＯｐａｄｒｙでコーティングされたミニビーズを、実施例３における手順に従って生成した。次いで、実施例２の手順によって生成されたミニビーズを、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）（エチルセルロース分散液）のオーバーコート（本明細書では第２のコーティングとも呼ばれる）でコーティングした。
【０５３８】
Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）オーバーコートを、以下の手順によって塗布した。Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）を、ステンレススチール製容器にゆっくりと加え、混合して、オーバーコートのためのＳｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）の必要なコーティング懸濁液を得た。次いで、得られたコーティング懸濁液を、ミニビーズを流動床塗布装置（Ｗｕｒｓｔｅｒ  ｃｏｌｕｍｎ）に装填し懸濁液でコーティングすることにより、ミニビーズの表面上に塗布した。入り口空気温度および入り口空気容積のような方法パラメータを調整して、要求されるコーティング重量増加に到達するまで、ミニビーズ温度を４０℃から４２℃に維持した。次いで、オーバーコーティングされたミニビーズを、塗布装置で４０〜４５℃で１時間乾燥させた。
【０５３９】
ミニビーズを、１３％重量増加のＳｕｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）でコーティングした。
【０５４０】
オーバーコートを有するミニビーズは、表４に示される組成を有する。
【０５４１】
【表６】
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【０５４２】
実施例４：注入Ｔ細胞により誘導される望ましくない効果のマウスモデル
以下のマウス株を使用した：ＮＳＧまたはＮＯＤスキッドガンマ（ＮＯＤ．Ｃｇ−ＰｒｋｄｃｓｃｉｄＩｌ２ｒｇｔｍ１Ｗｊｌ／ＳｚＪ）（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ、Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｕｒ、Ｍａｉｎｅ、ＵＳＡ）。ＮＳＧは、現在まで記載された最も免疫不全である近交系実験マウス株である。ＮＳＧマウスは、成熟Ｔ細胞、Ｂ細胞、およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を欠く。ＮＳＧマウスはまた、複数のサイトカインシグナリング経路も欠損しており、それらは先天性免疫に多くの欠陥を有する。ＮＳＧマウスにおける化合物免疫不全は、様々な一次ヒト細胞の生着を許容し、多くの領域のヒト生物学および疾患の洗練されたモデリングを可能にする。全てのマウスを、Ｄｅｐｔ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ（Ｉｒｅｌａｎｄ）の指針に従って飼育し、ＨＰＲＡからのＡＥ１９１２／Ｐ００２プロジェクト認可の条件での倫理審査による承認を受けて使用した。動物実験の試料サイズを、ＳＩＳＡを使用する統計力計算によって決定した。ＳＩＳＡソフトウェアは、ｈｔｔｐ：／／ｈｏｍｅ．ｃｌａｒａ．ｎｅｔ／ｓｉｓａ／ｐｏｗｅｒ．ｈｔｍでオンラインにある。
【０５４３】
ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の単離
赤血球、白血球および血小板を含有する全血軟膜パックは、Ｓｔ．Ｊａｍｅｓ’ｓ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ、ＤｕｂｌｉｎのＩｒｉｓｈ  Ｂｌｏｏｄ  Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅ（ＩＢＴＳ）によって供給されたものであった。ＰＢＭＣを、密度勾配遠心によって全血から単離した。軟膜パックの内容物をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）（Ｏｘｏｉｄ  Ｌｔｄ．、Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ、Ｈａｍｐｓｈｉｒｅ、Ｅｎｇｌａｎｄ）を用いて１／２に希釈した。２５ｍｌの希釈された血液を、５０ｍｌの遠心チューブ（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）中、１５ｍｌのリンホプレップ（Ａｘｉｓ−Ｓｈｉｅｌｄ  ＰｏＣ  ＡＳ、Ｏｓｌｏ、Ｎｏｒｗａｙ）の頂部に注意深く重ねた。チューブを、ブレーキなし、低加速で、室温で２５ｍｉｎ、２４００ｒｐｍで遠心分離した。遠心分離後、ＰＢＭＣを含有する白色の軟膜層を新しい滅菌５０ｍｌチューブに取り出し、赤血球および残存する血漿を残した。収集されたＰＢＭＣを、ブレーキあり、高加速設定で、４℃で１０ｍｉｎ、１８００ｒｐｍで遠心分離した。上清を除去し、ＰＢＭＣペレットを２０ｍｌのＰＢＳ中で洗浄し、合計２回、４℃で５ｍｉｎ、１５００ｒｐｍで遠心分離した。残存する赤血球を、５ｍｌの１ｘ赤血球溶解バッファー（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、Ｌｏｎｄｏｎ、ＵＫ）を使用して５ｍｉｎ溶解した。２５ｍｌの完全ＲＰＭＩ（ｃＲＭＰＩ）（１０％（ｖ／ｖ）熱不活化ＦＢＳ、５０Ｕ／ｍｌペニシリン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、５０μｇ／ｍｌストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）および０．１％（ｖ／ｖ）２−メルカプトエタノール（Ｇｉｂｃｏ）を添加したＲＰＭＩ１６４０（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ））を添加して、溶解をクエンチした。ＰＢＭＣを、４℃で１０ｍｉｎ、１０００ｒｐｍで遠心分離して、血小板を除去した。ＰＢＭＣペレットを、２５ｍｌのｃＲＰＭＩに再懸濁し、計数した。
【０５４４】
ヒトＰＢＭＣのマウスへの投与
ＮＯＤ．Ｃｇ−ＰｒｋｄｃｓｃｉｄＩＬ２ｔｍｌＷｊｌ／Ｓｚｊ（ＮＯＤ−Ｓｃｉｄ  ＩＬ−２ｒγｎｕｌｌ）（ＮＳＧ）マウスを、２．４Ｇｒａｙ（Ｇｙ）のコンディショニング線量の全身ガンマ照射に曝露した。照射後４ｈから２４ｈ、新鮮に単離されたヒトＰＢＭＣを、２７ゲージ針および１ｍｌ注射筒を使用する尾静脈への静脈内注射によって投与した。注入前に、ＰＢＭＣを滅菌ＰＢＳで３回洗浄した。以前の研究（Ｔｏｂｉｎら、２０１３）から、ＰＢＭＣの最適用量は、８．０ｘ１０５ｇ−１であることがわかった。したがって、８．０ｘ１０５ｇ−１を、本研究のために使用した。マウスを検査して、それらが体重減少、毛皮の皺、猫背の姿勢を有するかどうかを決定した。動物をそのケージに戻し、それらを、苦痛または健康障害の任意の徴候について、最初の１時間は密接に、その後は規則的な間隔でモニタリングした。動物を毎日計量し、それに応じて体重減少を文書化した。１５％を超える全体重減少を示した動物を人道的に犠牲にした。さらに、動物福祉スコアシートを、試験を通じて使用した。
【０５４５】
ヒトＭＳＣまたはＰＢＭＣの静脈内投与
注入前に、ヒトＰＢＭＣまたはＭＳＣを、滅菌ＰＢＳで３回洗浄した。ＰＢＭＣを８．０ｘ１０５ｇ−１でマウスに投与し、ＭＳＣを５．７ｘ１０４ｇ−１で投与した。ＰＢＭＣまたはＭＳＣを、２７ゲージ針および１ｍｌ注射筒を使用して尾静脈に送達した。それぞれのマウスは、合計０．３ｍｌを受けた。ＰＢＭＣを０日目に与えたが、ＭＳＣは７日目に与えた。ｉ．ｖ注射後、動物をそのケージに戻し、それらを上記のようにモニタリングした。
【０５４６】
シクロスポリン製剤の調製および投与
実施例２および実施例３のシクロスポリン組成物。即時放出ビーズ（実施例２）は、１０．８７％充填量のＣｓＡ（１０９μｇ／ｍｇ）を有していた。これらのビーズのそれぞれについて、平均重量は２〜３ｍｇの範囲にあり、得られた活性薬理成分（ＡＰＩ）はビーズあたり２２０〜３３０μ／ｍｇであった。ＣｓＡの結腸放出ビーズ（実施例３）は、１０％充填量のＣｓＡ（１００μｇ／ｍｇ）を有し、ビーズあたり２５０〜３５０μｇのＡＰＩを有していた。それぞれのビーズを、投与前に計量して、正確な用量（２５ｍｇ／ｋｇ）を確保した。投与は、強制経口投与により実行した。簡単に述べると、それぞれのビーズを、２００μｌのＰＢＳを含有する注射筒が接続された給餌針（Ｖｅｔ  Ｔｅｃｈ、Ｃｈｅｓｈｉｒｅ、ＵＫ）（Ｃｏｍｐａｎｙ、ｔｏｗｎ、Ｃｏｕｎｔｒｙ）の末端に充填した。マウスの首筋を注意深くつまみ、給餌針をマウスの口の中に挿入した。給餌針を食道に向かって下方に注意深く誘導し、そこで注射筒の中の２００μｌのＰＢＳの助けを借りてビーズを放出した。ＣｓＡのＮｅｏｒａｌ（登録商標）製剤は、１００ｍｇ錠剤の形態にあった。ＣｓＡ溶液を、針（１８Ｇ）および５ｍｌ注射筒によって錠剤の内部から取り出し、５０ｍｌチューブ中に収集した。投与前に、Ｎｅｏｒａｌ（登録商標）をＰＢＳ中に希釈して、２５ｍｇ／ｋｇ用量にし、３００μｌを上記のような強制経口投与によって送達した。ＣｓＡのＳａｎｄｉｍｍｕｎ（登録商標）製剤は、５０ｍｇ／ｍｌの注射可能溶液の形態にあった。ＣｓＡ溶液をＰＢＳ中に希釈して、投与前に２５ｍｇ／ｋｇ用量にした。Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ（登録商標）を、２７ゲージ針および１ｍｌ注射筒を使用して尾静脈に送達した。それぞれのマウスは、合計０．３ｍｌを受けた。各手順の後、動物をそのケージに戻し、そこでそれらを上記のようにモニタリングした。
【０５４７】
マウスに、即時放出（ＩＲ）および結腸放出（ＣＲ）ミニビーズの以下の組合せを投与した。
【０５４８】
【表７】
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【０５４９】
上記の組成物ＡからＥまでで処置されたマウス群に加えて、上記のようにＮｅｏｒａｌおよびＳａｎｄｉｍｍｕｎｅを投与したマウス群もあった。また、ＰＢＭＣを含まないＰＢＳを投与したマウスの対照群（結果では「ＰＢＳ」と呼ばれる）およびＰＢＭＣを含むが、シクロスポリンは含まないものを投与した群、未処置群（結果では「ＰＢＭＣのみ」と呼ばれる）もあった。
【０５５０】
マウスに由来する細胞およびサイトカインの分析
マウスからのヒト脾細胞の単離
１０％（ｖ／ｖ）熱不活化ＦＢＳ、５０Ｕ／ｍｌペニシリン、５０μｇ／ｍｌストレプトマイシンおよび２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを添加したｃＲＭＰＩを含有する５０ｍｌチューブ中に、脾臓をマウスから無菌的に取り出した（表２．１）。脾臓を、滅菌プランジャーを使用して７０μｍフィルターを通して新鮮な５０ｍｌチューブ中でホモジナイズした後、単離された脾細胞を、０．１％ｖ／ｖの２−メルカプトエタノールを含有する１０ｍｌのｃＲＰＭＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ−Ｇｉｂｃｏ）中に懸濁した。このホモジェネートを、３００ｇで５ｍｉｎ遠心分離し、室温で１０ｍｉｎ、１ｍｌの赤血球溶解バッファー溶液（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）中に再懸濁した。２ｍｌの培地を懸濁液に添加して、溶解溶液を中和した後、６００ｇで５ｍｉｎ遠心分離した。上清を除去した後、細胞を新鮮なｃＲＰＭＩ中に再懸濁し、計数した。細胞を、ＦＡＣＳ分析のために再懸濁した（セクション２．１０．１またはセクション２．１０．２）。
【０５５１】
脾細胞培養物からのサイトカイン分析
脾臓を上記のようにマウスから取り出し、単一細胞懸濁液を調製した。細胞を、９６ウェル丸底プレート中、２ｘ１０５個／ウェルで播種し、ｃＲＰＭＩ中で培養した。細胞を刺激しないか、または１０μｇ／ｍｌのホルボール１２−ミリセート１３−アセテート（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）および１０μｇ／ｍｌのイオノマイシン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）で刺激した。ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３およびＩＦＮγの検出のために、上清を７２時間後に収穫した。上清中のサイトカインを、ＥＬＩＳＡによって検出した。
【０５５２】
全てのＥＬＩＳＡを、製造業者の指示書（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）に従って実行した。ＰＢＳ中の特異的捕捉抗体（ヒトＩＦＮγ、ＩＬ１β、ＩＬ２、ＩＬ６、ＩＬ１７、またはＩＬ２３）を、９６ウェルマイクロタイタープレート（ＮＵＮＣ）に添加し、室温で一晩インキュベートした。次いで、プレートを洗浄バッファー（０．０５％ｖ／ｖのＴｗｅｅｎ２０を添加したＰＢＳ）中で３回洗浄した後、ブロッキング溶液（１％ｗ／ｖのＢＳＡを添加したＰＢＳ）中、最小で１ｈインキュベートした。次いで、プレートを洗浄し、室温で２ｈ、１００μｌ／ウェルの試料上清または対応するサイトカイン標準液と共にインキュベートした。洗浄後、プレートを室温でさらに２ｈ、特異的検出抗体と共にインキュベートした。プレートを再度洗浄し、特異的試薬希釈液（ＢＳＡを添加したＴｒｉｓ緩衝化溶液（ＴＢＳ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ））中に１／４０に希釈された１００μｌ／ウェルのストレプトアビジン西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）コンジュゲートと共に２０ｍｉｎ、インキュベートした。洗浄後、プレートを、直接光なしに室温で２０ｍｉｎ、１００μｌ／ウェルのテトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）基質（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）と共にインキュベートした。５０μｌ／ウェルの１Ｍ  Ｈ２ＳＯ４を添加することにより、２０ｍｉｎ後に反応を停止させた。試料および標準液の吸光度（光密度（Ｏ．Ｄ））を、Ｇｅｎ５  Ｄａｔａ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅを含むマイクロプレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ  ＥＬ８００）を使用して、全てのＥＬＩＳＡについて４５０ｎｍで測定した。各試料のサイトカイン濃度を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ５ソフトウェアを使用して既知のサイトカイン濃度の標準曲線との比較によって決定した。
【０５５３】
マウスの肝臓または肺からのヒト細胞の単離
肝臓および肺を、ｃＲＰＭＩを含有する５０ｍｌチューブ中にマウスから無菌的に取り出した（表２．１）。組織を、滅菌プランジャーを使用して７０μｍフィルターを通して新鮮な５０ｍｌチューブ中でホモジナイズした後、単離された細胞を２５ｍｌのｃＲＰＭＩ中に懸濁した。このホモジェネートを１５ｍｌ／リンホプレップ密度勾配（Ａｘｉｓ−Ｓｈｉｅｌｄ）上に重ね、ブレーキなし、低加速で２５ｍｉｎ、２４００ｒｐｍで遠心分離した。新鮮な標識された５０ｍｌチューブ中に、吸引によって境界面を収集した。境界面を２５ｍｌのＰＢＳで２回洗浄し、３００ｇで５ｍｉｎ遠心分離した。上清を除去し、以下に記載されるようなフローサイトメトリー分析のために細胞を再懸濁した。
【０５５４】
マウスのＧＩ管からのヒト細胞の単離
小腸および結腸を、ｃＲＰＭＩを含有する１５ｍｌチューブ中にマウスから無菌的に取り出した（表２．１）。組織試料を消化液（ＤＮａｓｅ  Ｉ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）２０Ｕ／ｍｌ、クロストリジウム・ヒストリチクム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃｕｍ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）由来のコラゲナーゼ３００Ｕ／ｍｌおよびＰＢＳ）１０ｍｌに、３７℃で、３００ｒｐｍで水平に定震盪しながら入れた。消化１時間後、滅菌プランジャーを使用して、ホモジネートを７０μｍフィルターに通して新鮮な５０ｍｌチューブに入れた後、単離された細胞を２５ｍｌのｃＲＰＭＩ中に懸濁し、１０ｍｉｎ、１５００ｒｐｍで遠心分離した。細胞を４０％Ｐｅｒｃｏｌｌ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）８ｍｌに再懸濁し、８０％Ｐｅｒｃｏｌｌ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）４ｍｌ上に重ね、ブレーキなし、低加速で２０ｍｉｎ、２２００ｒｐｍで遠心分離した。境界面を吸引除去し、新しいチューブに移した。ＰＢＳ１５ｍｌを添加し、境界面を４℃、８ｍｉｎ、１４００ｒｐｍで遠心分離した。上清を除去し、以下に記載されるようなフローサイトメトリーのために細胞を再懸濁した。
【０５５５】
マウスのＧＩ管からのサイトカイン分析
小腸および結腸を上記のようにマウスから取り出し、切片をすぐに簡易凍結し、−８０℃で保存した。組織を解凍し、腸管内容物を除去した。組織を細かく切り刻み、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘホモジナイザー（Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、１ｍｌの冷やしたホモジナイゼーションバッファー（ＰＢＳ：プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｒｏｃｈｅ）を添加した２％熱不活化ＦＢＳ）中でホモジナイズした。ホモジネートを、４℃で１５ｍｉｎ、１３，０００ｒｐｍでマイクロ遠心分離した。上清を除去し、−２０℃で保存した。ＧＩ管抽出物のタンパク質濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイによって決定した（セクション２．６．５）。タンパク質抽出物を、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３およびＩＦＮγについて分析した。上清中のサイトカインを、上記のようにＥＬＩＳＡによって検出した。
【０５５６】
フローサイトメトリーによるｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでのヒトＰＢＭＣの分析
ヒト細胞によるサイトカイン生成の検出
ＴＮＦαおよびＩＦＮγを、フローサイトメトリーによって細胞内的に分析した。簡単に述べると、同時培養アッセイまたはｉｎ  ｖｉｖｏ試験から回収されたＰＢＭＣを、１５０μｌのＦＡＣＳバッファー中で洗浄し、９６ウェルのｖ底プレート中、９５０ｒｐｍで５ｍｉｎ、遠心分離した。ＰＢＭＣをＣＤ４５  ＰｅｒｃＰ、ＣＤ４  ＡＰＣおよびＣＤ８  ＰＥまたは対応するアイソタイプ対照抗体で、４℃で１５ｍｉｎ標識した。細胞を１５０μｌのＦＳＣＳバッファー中で２回洗浄し、９５０ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心分離し、１００μｌの固定／透過処理バッファー（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で１時間または一晩固定した。次いで、細胞を２００μｌの透過処理バッファー（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で透過処理し、１５０μｌのＦＡＣＳバッファーで洗浄し、３μｌの２％ラット血清を使用して１５分間ブロックした。細胞をＴＮＦα、ＩＦＮγまたはアイソタイプ対照抗体で標識し、４℃で１時間静置した。試料を１５０μｌのＦＡＣＳバッファーで２回洗浄し、計数ビーズ（３ｘ１０５個／ｍｌ）中に再懸濁し、ＣＦｌｏｗＰｌｕｓソフトウェア（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してフローサイトメトリー（Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６フローサイトメーター、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって分析した。
【０５５７】
ＦＯＸＰ３発現を検出するための細胞の細胞内染色
ＦｏｘＰ３染色キット（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して、ＦｏｘＰ３発現を細胞内的に分析した。簡単に述べると、同時培養アッセイまたはｉｎ  ｖｉｖｏ試験から回収されたＰＢＭＣを、１５０μｌのＦＡＣＳバッファー中で洗浄し、９５０ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心分離した。ＰＢＭＣをＣＤ４  ＡＰＣおよびＣＤ２５  ＰＥまたは対応するアイソタイプ対照抗体で、４℃で１５ｍｉｎ標識した。細胞を１５０μｌのＦＡＣＳバッファー中で２回洗浄し、９５０ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心分離し、１００μｌの固定／透過処理バッファー（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で１時間固定した。次いで、細胞を２００μｌの透過処理バッファー（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で透過処理し、１５０μｌのＦＡＣＳバッファーで洗浄し、３μｌの２％ラット血清を使用して１５分間ブロックした。細胞をＦｏｘＰ３またはアイソタイプ対照抗体で標識し、４℃で１時間または一晩静置した。試料を１５０μｌのＦＡＣＳバッファーで２回洗浄し、計数ビーズ（３ｘ１０５個／ｍｌ）中に再懸濁し、ＣＦｌｏｗＰｌｕｓソフトウェア（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してフローサイトメトリー（Ａｃｃｕｒｉ  Ｃ６フローサイトメーター、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって分析した。
【０５５８】
組織学的組織調製
肺、肝臓、脾臓および小腸を、１３日目に実験マウスから収穫し、１０％（ｖ／ｖ）中性緩衝化ホルマリン中で少なくとも２４時間固定した。試料を、さらに２４時間、７０％エタノールに移した。自動化プロセッサ（Ｓｈａｎｄｏｎ  Ｐａｔｈｃｅｎｔｒｅ、Ｒｕｎｃｏｒｎ、ＵＫ）を使用して試料を組織学的分析のためにプロセッシングし、エタノール（７０％、８０％、９５％ｘ２、１００％ｘ３）およびキシレン（ｘ２）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を含む固定的および連続的脱水溶液中に組織を浸した。プロセッシング後、Ｓｈａｎｄｏｎ  Ｈｉｓｔｏｃｅｎｔｒｅ  ２（Ｓｈａｎｄｏｎ）を使用して、組織をパラフィンワックス中に埋め込み、４℃で一晩静置した。Ｓｈａｎｄｏ  Ｆｉｎｅｓｓｅ  ３２５ミクロトーム（Ｔｈｅｒｍｏ−Ｓｈａｎｄｏｎ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して、各組織の５μｍ切片に切断した。切片を冷水に入れた後、温水浴（４２℃）に移して、切片のフォールディングを除去した。組織切片を顕微鏡スライド（ＶＷＲ）上に置き、一晩空気乾燥させた。次いで、試料をＨ＆Ｅ（セクション２．１１．２）で染色し、セクション２．１１．４に概略されたシステムを使用して盲検的にスコア化した。
【０５５９】
組織学的ヘマトキシリン／エオシン染色
Ｈ＆Ｅ染色を開始する前に、スライドを最小で１時間、５６℃に加熱して、ワックスの消失を補助した。次いで、スライドをキシレン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）に１０分間移した。これを、さらに１０分間、新鮮なキシレンで繰り返した。次いで、試料を、それぞれ５分間、３つの減少する濃度のエタノール（１００％ｘ２、９０％および８０％）中に浸した後、再水和させた。次いで、試料をｄＨ２Ｏに５分間移した後、ヘマトキシリン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）中に３分間浸した。次いで、試料をＨ２Ｏ下で２分間洗浄した後、２０秒以下、１％酸アルコール中に入れた。試料をＨ２Ｏ下で再度洗浄した後、エオシンＹ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）中に３分間浸し、Ｈ２Ｏ下での洗浄に再度戻した。スライドを、それぞれ５分間、一連の増大するエタノール濃度（８０％、９０％、１００％）での浸漬により脱水した。試料を空気乾燥し、ＤＰＸマウンティング媒体（ＢＤＨ）をマウントし、光学顕微鏡下で検査した。
【０５６０】
末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ媒介性ｄＵＴＰニック末端標識化（ＴＵＮＥＬ）
アッセイを使用するアポトーシスの組織学的検出
ＴＵＮＥＬアッセイを開始する前に、スライドを最小で１時間、５６℃に加熱して、ワックスの消失を補助した。次いで、スライドをキシレン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）に１０分間移した。これを、さらに１０分間、新鮮なキシレンで繰り返した。次いで、試料を、それぞれ５分間、３つの減少する濃度のエタノール（１００％ｘ２、９０％および８０％）中に浸した後、再水和させた。次いで、試料をｄＨ２Ｏに２分間移した後、沸騰抗原脱マスキング溶液（Ｖｅｃｔｏｒ、Ｐｅｔｅｒｂｏｒｏｕｇｈ、ＵＫ）中に６分間浸した。次いで、試料をＰＢＳ中で２分間洗浄した。組織切片を、ＩｍｍＥｄｇｅ（商標）ワックスペン（Ｖｅｃｔｏｒ）で囲った。一度、ワックスを乾燥させた。１０μｌの酵素標識溶液（Ｒｏｃｈｅ）を、組織上に直接添加した。試料を、加湿チャンバ中、３７℃で１ｈインキュベートした。試料をＰＢＳ中で洗浄した後、１００ｎｇ／ｍｌのＤＡＰＩ核染色液を各組織試料に添加した。スライドを室温でインキュベートし、光から保護した。試料を空気乾燥し、ＶｅｃｔａＭｏｕｎｔ（商標）水性マウンティング媒体（Ｖｅｃｔｏｒ）をマウントし、蛍光顕微鏡下で検査した。
【０５６１】
組織学的スコアリング
Ｈ＆Ｅ染色後、スライドを、前処理を参照せずに暗号化し、盲検様式で検査した。半定量的スコアリングチャートを使用して、肺、肝臓およびＧＩ管中での疾患進行を評価した（Ｔｏｂｉｎら、２０１３）。病理学的スコアリングを、以下のように実行した。
【０５６２】
【表８】
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【０５６３】
マウスの肺、肝臓、脾臓およびＧＩ管におけるＣＳＡの検出
肺、肝臓、脾臓およびＧＩ管を、１３日目に実験マウスから収穫し、すぐに簡易凍結し、−８０℃で保存した。組織を室温に解凍した。５００μｌの２％Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を、各試料に添加した。試料を１０分間ボルテックスした後、１３０００ｒｐｍで２分間遠心分離し、液相を１５ｍｌチューブ中に収集した。液相（Ａ）および残存する残渣をこの時点で別々に調製した。５００μｌの５０％ＥｔＯＨ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２５μｌの内部希釈標準溶液と共に残存する残渣に添加した。残存する残渣中の組織を、超音波処理装置（サイクル：０．５秒、最大振幅）を使用して３０秒間破壊した。液相（Ｂ）を、１５ｍｌチューブ中に収集した。５００μｌの５０％ＥｔＯＨ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を残存する残渣に添加し、１分間ボルテックスした。全ての残存する液体を、液相（Ｂ）と共に１５ｍｌチューブに移した。５００μｌの５０％ＥｔＯＨ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を、２５μｌの内部希釈標準溶液と共に液相（Ａ）に添加した。４ｍｌのジイソプロピルエーテル（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を、液相（Ａ）および（Ｂ）に添加した。（Ａ）および（Ｂ）を５分間激しくボルテックスし、４０００ｒｐｍで２分間遠心分離した後、−８０℃で１０分間保存した。有機液相を（Ａ）および（Ｂ）から収集し、４０℃で１５分間、ｓｐｅｅｄｙ  ｖａｃ（ＤＮＡ  Ｓｐｅｅｄｙ  Ｖａｃ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｏｒ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して蒸発させた。５０μｌの５０％ＥｔＯＨ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を、（Ａ）および（Ｂ）に添加した。（Ａ）および（Ｂ）を２分間ボルテックスし、４０００ｒｐｍで１分間遠心分離した。約５０μｌを、ＬＣ−ＭＳ分析のための注射のために円錐自動サンプラーバイアル中に移した。
【０５６４】
ＧＩ組織中のシクロスポリンレベルは、ｉｖ投与されたシクロスポリン（Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ）よりも本発明の組成物Ａ〜Ｅについてより高い。
【０５６５】
実施例５：生存および体重変化のデータ
各マウス群の生存データは図１に示されるが、体重変化のデータは図２に示される。本発明の組成物が、シクロスポリンで処置されていないマウスと比較して改善された生存率を提供したことが図１から明らかである。本発明のある特定の組成物は、未処置群と比較して生存率の統計的に有意な改善を提供した。注目すべきことに、Ｎｅｏｒａｌは、生存率の統計的に有意な改善を提供しなかった。
【０５６６】
同様の傾向は、体重変化のデータについても観察される。体重減少は、未処置群と比較してシクロスポリンを投与された群において低かった。
【０５６７】
実施例６：Ｔ細胞の生着
図３ａ〜ｌは、マウスの脾臓、肺、肝臓および腸管でのＴ細胞レベルに関するデータを示す。ＣＤ４５＋細胞（図３ａ、３ｄ、３ｇおよび３ｊ）、ＣＤ４＋細胞（図３ｂ、３ｅ、３ｈおよび３ｋ）ならびにＣＤ８＋細胞（図３ｃ、３ｆ、３ｉおよび３ｌ）の総数を、マウスの各群について示す。細胞の総数は、本発明の組成物によって有意に減少しないことが明らかである。ドナーである注入されたＴ細胞の生着は、脾臓、肺、肝臓または腸管において本発明の組成物の投与によって損なわれない。
【０５６８】
実施例７：結腸前炎症性サイトカイン
図４ａ〜ｆは、各群に由来するマウスの結腸における、それぞれ、ＩＬ２、ＩＦＮｇ、ＩＬ１７、ＩＬ２３、ＩＬ６およびＩＬ１ｂの量を示す。本発明の組成物は、Ｔ細胞注入マウスの結腸においてサイトカイン放出症候群と関連するある特定のサイトカインの生成を有意に減少させる。
【０５６９】
実施例８：小腸前炎症性サイトカイン
図５ａ〜ｅは、小腸におけるＩＬ２、ＩＦＮｇ、ＩＬ１７、ＩＬ２３およびＩＬ１ｂの量を示す。結腸、および図４ａ〜ｆと同様、本発明の組成物は、小腸におけるサイトカインの数を減少させる。
【０５７０】
実施例７および図３ａ〜ｌのデータと、実施例８および実施例９のデータとを比較すると、本発明の組成物がＴ細胞の生着を損なわないが、ＣＲＳにおいて重要な役割を果たすある特定のサイトカインの量を統計的に有意に減少させることが明らかである。
【０５７１】
実施例９：脾臓前炎症性サイトカイン
図６ａ〜ｃは、シクロスポリンが、マウスの脾臓におけるＩＬ−２、ＩＦＮｇおよびＩＬ１７の生成を有意に減少させることを示す。対照的に、図３ａ〜ｃは、Ｔ細胞の生着が統計的に有意に影響されないことを示す。
【０５７２】
実施例１０：肺前炎症性サイトカイン
図７ａ〜ｅは、シクロスポリンが、肺におけるある特定の前炎症性サイトカインを統計的に有意に減少させることを示す。再度、図３ｄ〜ｆに示されるＴ細胞生着の維持に対するサイトカインの減少を対比させることにより、本発明の有益な効果が示される。
【０５７３】
実施例１１：ＧＩＴにおけるＴ細胞
図８および図９は、ＧＩＴにおける様々な型のＴ細胞のレベルを示す。図８は、ＦｏｘＰ３＋、調節性Ｔ細胞のレベルを示し、図９は、ＴＮＦα生成Ｔ細胞のレベルを示す。図８および図９の比較により、有益な調節性Ｔ細胞であるＦｏｘＰ３＋は統計的に有意に減少しないが、サイトカイン放出を促進するＴＮＦα生成Ｔ細胞はＧＩＴにおいて統計的に有意に減少することが示される。ＧＩＴにおける調節性Ｔ細胞の存在の上昇は、Ｔｒｅｇ細胞が抗炎症因子を放出することによって炎症の平衡を制御することを考慮すれば有益である。
【０５７４】
実施例１２：腸絨毛における炎症およびアポトーシス
図１０ｂおよび図１１ｂ中の組織学的スライドは、未処置のマウス群における小腸の絨毛の、それぞれ、炎症およびアポトーシスを示す。未処置のマウス群は、健康なマウスモデルと比較して、高レベルの炎症およびアポトーシスを示す。本発明の組成物を投与したマウス群は、相対的に最小の炎症および低い（自然に近い）レベルのアポトーシスを示す。
【０５７５】
実施例４のマウスモデルは、未処置のマウスにおいて高レベルのエフェクターＴ細胞を生成する。これは、健康な対照マウスと比較して未処置のマウスにおいて有意な量のＴＮＦａを生成するＴ細胞を示す図９から明らかである。これは、療法がエフェクターＴ細胞の投与を含んでもよいか、または療法がエフェクターＴ細胞を促進するＮＦＡＴ媒介性Ｔ細胞療法と同等である。本出願で提示されるデータは、高レベルのエフェクターＴ細胞の存在下で、全身（肺、肝臓、脾臓、小腸および結腸中）のサイトカインが未処置と比較して減少することを示す。図４〜７を参照されたい。対照的に、また重要なことに、全身のＴ細胞レベルは、大部分は影響されない。図３を参照されたい。さらに、異なる身体組織へのＴ細胞ホーミングは影響されなかったと考えられる。このようにＮＦＡＴ媒介性Ｔ細胞療法の維持が、本明細書に含まれるデータに基づいて期待される。さらに、全身のサイトカインレベルの低下は、サイトカイン放出症候群を改善することができることを示唆する。さらに、ＧＩＴ中のＴＮＦ−アルファ生成Ｔ細胞のパーセンテージは、本発明の組成物を投与されたマウスにおいて減少した。図９を参照されたい。ＧＩＴ中のＴＮＦ−アルファは、ＧＩ炎症プロセスにおいて重要な役割を果たす。
【０５７６】
上記の研究により、本発明者らは、Ｔ細胞におけるＮＦＡＴ活性化の役割に関する利用可能な知識と共に、ＣＡＲ−Ｔ療法などのＴ細胞によって媒介されるがん療法のための新しい形態の補助療法ならびにそのようながん療法と関連して生じる恐れがある望ましくない効果、より具体的には、ＣＲＳおよび脱調節されたＴ細胞活性の結果生じる胃腸炎症と関連する症状に立ち向かうことを目的とするチェックポイント阻害剤および二特異的抗体などのＴ細胞アクチベーターを提唱する。上記の研究は、がん療法のためのＴ細胞の望ましい作用を継続させながら、ＧＩ管へのＮＦＡＴ活性化の阻害剤の同時投与、より具体的には、例えば、ＧＩへのそのような送達のために製剤化されるシクロスポリンＡの経口投与によるそのような補助療法のための基盤を築くものである。本明細書に上記された通り、この様式で有効なＴ細胞媒介性がん療法を維持しながら、望ましくないＴ細胞活性を撃つ能力は、重要なことに、同じ目的にとって妥当であるシクロスポリンＡなどのＮＦＡＴ活性化の阻害剤の日常的な予防的使用さえ提供する。これは、Ｔ細胞媒介性療法の適用を阻止し得る一般的に報告される望ましくない効果を軽減するのに有意に寄与すると考えられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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