(57)【要約】  複素環式化合物およびそれらの使用による細菌感染の予防または治療：本発明は、細菌感染症の予防または治療のための、複素環式化合物、それらの製造方法、これらの化合物を含む医薬組成物、場合により他の抗菌剤および/またはβ-ラクタム化合物と組合せた使用に関する。本発明はまた、β-ラクタマーゼ阻害剤としてのこれらの化合物の使用および/または抗菌剤としての使用に関する。
2018510190.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で示される化合物、
【化１】
2018510190.tif 000023
式中、
R1は、炭素結合され、非置換または１以上のT1により置換された、芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、5または6員複素環； -CN ; -C(O)NHQ1 ; -C(O)NHOQ1 ; -C(O)NH-NHQ1 ; -C(O)O-NHQ1 ; -C(O)OQ1 ; -(CH2)mOC(O)OQ1 ; -(CH2)mOQ1 ; -(CH2)mOC(O)Q1 ; -(CH2)mOC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)m-NHC(O)Q1 ; -(CH2)mNHS(O)2Q1 ; -(CH2)mNHS(O)2NQ1Q2 ; -(CH2)mNHC(O)OQ1 ; -(CH2)mNHC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)mNHQ3 ; -(CH2)mNH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)mNH-CH=NQ3 ; -C(NHQ3)=NQ4 ; を表し、
R2 は Oまたは NOQ5 ;を表し、
R3 はSO3H, CFHCO2Hまたは CF2CO2H ;を表し、
Q1 および Q2は、同一または異なって、独立して、水素原子; -(CH2)pNHQ3 ; -(CH2)p-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; (CH2)p-NH-CH=NQ3 ; (CH2)q-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)pOQ3 ; -(CH2)qCONHQ3 ;を表すか、または
Q1 およびQ2は、同一または異なって、独立して、非置換または１以上のT2により置換された、C1-C3-アルキル ; -(CH2)n-(4、 5 または 6員複素環) ; または
Q1, Q2 およびそれらに結合された窒素原子が一緒になって、飽和または部分的に不飽和の、1, 2 または 3 つのヘテロ原子を含む4, 5 または 6員複素環を形成し;
Q3 およびQ4 は、同一または異なって、独立して、水素原子または C1-C3-アルキル基を表し;
Q5は、 非置換または１以上のT3により置換され、C1-C3-アルキル ; C1-C3-フルオロアルキル ; -(CH2)n-C3-C6-シクロアルキル; -(CH2)n-C3-C6-シクロフルオロアルキル; -(CH2)n-(芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、 5 または 6員複素環); を表すか、または
Q5 は、水素原子; (CH2)pOQ6 ; -(CH2)q-CN ; -(CH2)pOC(O)Q6 ; -(CH2)q-C(O)OQ6 ; -(CH2)p-OC(O)OQ6 ; -(CH2)p-OC(O)NQ6Q7 ; -(CH2)q-C(O)NQ6Q7 ; -(CH2)q-C(O)NQ6OQ7 ; -(CH2)q-C(O)NQ6-NQ6Q7 ; -(CH2)p-NQ6C(O)Q7 ; -(CH2)pNQ6S(O)2Q7 ; -(CH2)pNQ6S(O)2NQ6Q7 ; -(CH2)p-NQ6C(O)OQ6 ; -(CH2)p-NQ6C(O)NQ6Q7 ; -(CH2)pNQ6Q7 ; -(CH2)p-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)p-NH-CH=NQ3 ; (CH2)q-C(NHQ3)=NQ4 ; を表し、
T1は、同一または異なって, 独立して、フッ素原子; -(CH2)nOQ1 ; -(CH2)n-CN ; -(CH2)nOC(O)Q1 ; -(CH2)n-C(O)OQ1 ; -(CH2)n-OC(O)OQ1 ; -(CH2)n-OC(O)NHQ1 ; -(CH2)n-C(O)NHQ1 ; -(CH2)n-C(O)NHOQ1 ; -(CH2)n-C(O)NH-NHQ1 ; -(CH2)n-C(O)O-NHQ1, ; -(CH2)n-NHC(O)Q1 ; -(CH2)nNHS(O)2Q1 ; -(CH2)nNHS(O)2NQ1Q2 ; -(CH2)n-NHC(O)OQ1 ; -(CH2)n-NHC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)nNHQ1 ; -(CH2)n-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)n-NH-CH=NQ3 ; (CH2)n-C(NHQ3)=NQ4 ;を表すか、または、
T1は、非置換または1以上のT2で置換され、同一または異なって、独立して、C1-C3-アルキル; C1-C3-フルオロアルキル; O-C1-C3-フルオロアルキル; -(CH2)n-(芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、 5 または 6員複素環) ; を表し、
T2は、同一または異なって、独立して、OH ; NH2または CONH2 を表し;
T3は、同一または異なって、独立して、フッ素原子; C1-C3-アルキル; C1-C3-フルオロアルキル; O-C1-C3-フルオロアルキル; -(CH2)nOQ6 -(CH2)n-C3-C6-シクロアルキル; -(CH2)n-C3-C6-シクロフルオロアルキル; -(CH2)n-ヘテロアルキル; -(CH2)n-CN ; -(CH2)nOC(O)Q6; -(CH2)n-C(O)OQ6 ; -(CH2)n-OC(O)OQ6 ; -(CH2)n-OC(O)NQ6Q7 ; -(CH2)n-C(O)NQ6Q7 ; -(CH2)n-C(O)NQ6OQ7 ; -(CH2)n-C(O)NQ6-NQ6Q7 ; -(CH2)n-C(O)O-NHQ6; -(CH2)n-NQ6C(O)Q7 ; -(CH2)nNQ6S(O)2Q7 ; -(CH2)nNQ6S(O)2NQ6Q7; -(CH2)n-NQ6C(O)OQ7 ; -(CH2)n-NQ6C(O)NQ6Q7 ; -(CH2)nNQ6Q7 ; -(CH2)n-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)n-NH-CH=NQ3 ; -(CH2)n-C(NHQ3)=NQ4 を表し;
Q6 および Q7 は同一または異なって、独立して、水素原子; C1-C3-アルキル; -(CH2)pNHQ3 ; -(CH2)p-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; (CH2)p-NH-CH=NQ3 ; (CH2)q-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)pOQ3 ; -(CH2)qC(O)NQ3Q4 ; -(CH2)n-(芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、 5 または 6員複素環) を表し; または
Q6, Q7 およびそれらに結合された窒素原子が一緒になって、1, 2 または 3 つのヘテロ原子を含む飽和または部分的に不飽和の4、 5 または 6員の複素環を形成し；
mは、同一または異なって、独立して1 または 2を表し;
nは、同一または異なって、独立して0, 1, 2 または 3を表し;
pは、同一または異なって、独立して、2 または 3を表し;
qは、同一または異なって、独立して、1, 2 または3を表し;
ここで、アルキル、シクロアルキル、フルオロアルキル、シクロフルオロアルキルおよび複素環から選択される基に存在する任意の炭素原子は、酸化されてC = O基を形成されてもよく;
複素環に存在する任意の硫黄原子は、酸化されてS = O基またはS（O）2基を形成されてもよく；
複素環内に存在するか、またはそれが３置換されて第三級アミノ基を形成する基内に存在する任意の窒素原子は、メチル基によってさらに四級化されてもよい;
および、それらのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、幾何異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、式（Ａ）および（Ｂ）で示される化合物から選択される、
【化２】
2018510190.tif 000024
式中、 R1, R2 および R3 は、請求項１に定義される、化合物。
【請求項３】
請求項１〜２に記載の化合物であって、式(A1), (A2), (B1)および(B2)で示される化合物から選択される、
【化３】
2018510190.tif 000025
式中、 R1, R3 および Q5 は、請求項１に定義される、化合物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載される化合物であって、下記式 (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)から選択される、
【化４】
2018510190.tif 000026
式中、 R1, R2, R3 および Q5 は請求項１に定義される、化合物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物であって、
R1は、炭素結合され、非置換または１以上のT1により置換された、芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、5または6員複素環； -CN ; -C(O)NHQ1 ; -C(O)NHOQ1 ; -C(O)NH-NHQ1 ; -C(O)O-NHQ1 ; -C(O)OQ1 ; -(CH2)OC(O)OQ1 ; -(CH2)2OC(O)OQ1 ; -(CH2)OQ1 ; -(CH2)2OQ1 ; -(CH2)OC(O)Q1 ; -(CH2)2OC(O)Q1 ; -(CH2)-OC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)2OC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)NHC(O)Q1 ; -(CH2)2-NHC(O)Q1 ; -(CH2)NHS(O)2Q1 ; -(CH2)2NHS(O)2Q1 ; -(CH2)NHS(O)2NQ1Q2 ; -(CH2)2NHS(O)2NQ1Q2 ; -(CH2)NHC(O)OQ1 ; -(CH2)2NHC(O)OQ1 ; -(CH2)NHC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)2NHC(O)NQ1Q2 ; 好ましくは、炭素結合され、非置換または１以上のT1により置換された、芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、5または6員複素環； -CN ; -C(O)NHQ1 ; -C(O)NHOQ1 ; -C(O)NH-NHQ1 ; -(CH2)2OQ1 ; または、
R1 は -(CH2)NHQ3 ; -(CH2)2NHQ3 ; -(CH2)NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)2NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)NH-CH=NQ3 ; -(CH2)2NH-CH=NQ3 ; -C(NHQ3)=NQ4を表し、 好ましくは-(CH2)NHQ3 ; -(CH2)NH-C(NHQ3)=NQ4を表す、化合物。
【請求項６】
請求項１〜５に記載の化合物であって、
R1 は、 -C(O)NHQ1 ; -C(O)NHOQ1 ; -C(O)NH-NHQ1 ; -C(O)OQ1 ; -(CH2)mNHQ3 ; -(CH2)mNH-C(NHQ3)=NQ4 を表し、
Q1 および Q3 は請求項１に定義され、好ましくは水素 または C1-C3-アルキルを表し、
m は請求項１に定義されるとおりであり;
R2 はO または NOQ5を表し；
Q5 は請求項１に定義され、好ましくは-(CH2)q-C(O)NQ6Q7; -(CH2)q-C(O)NQ6OQ7 ; -(CH2)q-C(O)NQ6-NQ6Q7 ; -(CH2)pNQ6Q7 ; -(CH2)p-NH-C(NHQ3)=NQ4 を表し、
p および q は請求項１に定義され、
Q4, Q6 および Q7は、請求項１に定義され、好ましくは同一または異なって、水素または; C1-C3-アルキルを表す、化合物。
【請求項７】
請求項１〜５に記載の化合物であって、
R1 は -C(O)NHQ1 ; -C(O)OQ1 ; -(CH2)mNHQ3 を表し、
Q1 および Q3 は請求項１に定義されるとおりであり、好ましくはH または C1-C3-アルキルであり;
m は請求項１に定義されるとおりであり、 好ましくは1であり;
R2 はO または NOQ5を表し;
Q5 は請求項１に定義されるとおりであり、好ましくは-(CH2)q-C(O)NQ6Q7; -(CH2)pNQ6Q7であり、
p およびq は請求項１に定義されるとおりであり、好ましくは1 または 2であり;
Q4, Q6 および Q7は請求項１に定義されるとおりであり、好ましくは、同一または異なって、独立して水素原子; C1-C3-アルキルを表す、化合物。
【請求項８】
請求項１〜７に記載の化合物であって、式中、R3 がSO3H または CF2COOHを表す、化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも１の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
抗菌化合物、好ましくはβ‐ラクタム化合物から選択された１以上の化合物をさらに含む、請求項９の医薬組成物。
【請求項１１】
請求項９〜１１のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、以下、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の単一化合物；
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、および１またはそれ以上の抗菌化合物；
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、および１またはそれ以上のβ‐ラクタム化合物；
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、１以上の抗菌化合物、および１以上のβ‐ラクタム化合物；
を含む、医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１０〜１１のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、
抗菌化合物は、アミノグリコシド系、β‐ラクタム系、グリシルサイクリン系、テトラサイクリン系、キノロン系、フルオロキノロン系、グリコペプチド系、リポペプチド系、マクロライド系、ケトライド系、リンコサミド系、ストレプトグラミン系、オキサゾリジノン系、ポリミキシン系およびそれらの混合物から選択され、または、
β‐ラクタム化合物は、β‐ラクタム系、およびそれらの混合物であって、好ましくはペニシリン、セファロスポリン、ペネム類、カルバペネム類およびモノバクタムより選択される、医薬組成物。
【請求項１３】
請求項９の医薬組成物であって、さらに請求項１〜８のいずれか１項に記載される化合物、および薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項１４】
請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の組成物であって、少なくとも請求項１〜８のいずれか１項に記載の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および(B2*) の化合物およびセフタジジムを含む、組成物。
【請求項１５】
請求項９〜１３のいずれか１項に記載の医薬組成物、および請求項９〜１３のいずれか１項に記載の少なくとも１の第２の組成物を含む、キット。
【請求項１６】
少なくとも１の請求項１〜８のいずれか１項に記載の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および(B2*)で示される化合物、および少なくともセフタジミドを含む医薬組成物を含む、請求項１５に記載のキット。
【請求項１７】
細菌感染の治療または予防に用いられる医薬としての使用のための、請求項１〜１４に記載の化合物または組成物。
【請求項１８】
１以上のβ‐ラクタマーゼ産生細菌により引き起こされる細菌感染の治療または予防のための使用のための、請求項１７に記載の化合物または組成物。
【請求項１９】
グラム陽性菌またはグラム陰性菌による細菌感染、好ましくはグラム陰性菌による細菌感染の治療または予防のための使用のための、請求項１７〜１８のいずれか１項に記載の化合物または組成物。
【請求項２０】
それを必要とする患者に対し同時に、別々にまたは連続して投与することによる、細菌感染の治療または予防のための、請求項１５〜１６に記載のキット。
【請求項２１】
下記式で示される、化合物：
【化５】
2018510190.tif 000027
好ましくは、下記式：
【化６】
2018510190.tif 000028
式中、 Q5および R1 は前記と同義であり、 Rはアルキル、特にC1-C6 アルキル, またはベンジルであり, PG, PG1 および PG2は、同一または異なって、保護基であり, 例えばアリル、ベンジル、tert-ブチルジメチルシリル（TBDMS）、tert-ブトキシカルボニル（Boc）から選択される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、複素環式化合物、それらの製造方法、該化合物を含む医薬組成物、および細菌感染の予防または治療のための、場合により他の抗菌剤および/またはβ-ラクタム化合物と組合せにおける使用に関する。本発明はまた、該化合物のβ-ラクタマーゼ阻害剤としての使用および/または抗菌剤としての使用に関する。
【０００２】
既知の抗菌剤が十分な効果を奏しない細菌株をもたらし得る抗菌耐性の持続的な進化の存在が報告されてきた。
【０００３】
したがって、細菌の抗菌耐性を克服し得る有効な化合物および組成物を提供する必要がある。
【０００４】
本発明の目的は、抗菌剤および/またはβ-ラクタマーゼ阻害剤として使用することができる複素環式化合物を提供することである。本発明の目的はまた、細菌感染症の予防または治療に用いることができる複素環式化合物を提供することである。本発明の別の目的は、細菌の抗生物質耐性を克服することができる複素環式化合物を提供することである。本発明の目的はまた、これらの複素環化合物を場合により1種以上の他の抗菌剤と組合せて含む、細菌感染症の予防または治療のための、細菌抗生物質耐性を克服することができる医薬組成物を提供することである。他の目的は、本発明の明細書全体を通じて示す。
【０００５】
したがって、本発明は式(I)の化合物を提供する：
【化１】
2018510190.tif 000003
【０００６】
式中、
R1は、炭素結合され、非置換または１以上のT1により置換された、芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、5または6員複素環； -CN ; -C(O)NHQ1 ; -C(O)NHOQ1 ; -C(O)NH-NHQ1 ; -C(O)O-NHQ1 ; -C(O)OQ1 ; -(CH2)mOC(O)OQ1 ; -(CH2)mOQ1 ; -(CH2)mOC(O)Q1 ; -(CH2)mOC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)m-NHC(O)Q1 ; -(CH2)mNHS(O)2Q1 ; -(CH2)mNHS(O)2NQ1Q2 ; -(CH2)mNHC(O)OQ1 ; -(CH2)mNHC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)mNHQ3 ; -(CH2)mNH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)mNH-CH=NQ3 ; -C(NHQ3)=NQ4 ; を表し、
R2 は Oまたは NOQ5 ;を表し、
R3 はSO3H, CFHCO2Hまたは CF2CO2H ;を表し、
Q1 および Q2は、同一または異なって、独立して、水素原子; -(CH2)pNHQ3 ; -(CH2)p-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; (CH2)p-NH-CH=NQ3 ; (CH2)q-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)pOQ3 ; -(CH2)qCONHQ3 ;を表すか、または
Q1 およびQ2は、同一または異なって、独立して、非置換または１以上のT2により置換された、C1-C3-アルキル ; -(CH2)n-(4、 5 または 6員複素環) ; または
Q1, Q2 およびそれらに結合された窒素原子が一緒になって、飽和または部分的に不飽和の、1, 2 または 3 つのヘテロ原子を含む4、 5 または 6員複素環を形成し;
Q3 およびQ4 は、同一または異なって、独立して水素原子または C1-C3-アルキル基を表し;
Q5は、 非置換または１以上のT3により置換され、C1-C3-アルキル ; C1-C3-フルオロアルキル ; -(CH2)n-C3-C6-シクロアルキル; -(CH2)n-C3-C6-シクロフルオロアルキル; -(CH2)n-(芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、 5 または 6員複素環); を表すか、または
Q5 は、水素原子; (CH2)pOQ6 ; -(CH2)q-CN ; -(CH2)pOC(O)Q6 ; -(CH2)q-C(O)OQ6 ; -(CH2)p-OC(O)OQ6 ; -(CH2)p-OC(O)NQ6Q7 ; -(CH2)q-C(O)NQ6Q7 ; -(CH2)q-C(O)NQ6OQ7 ; -(CH2)q-C(O)NQ6-NQ6Q7 ; -(CH2)p-NQ6C(O)Q7 ; -(CH2)pNQ6S(O)2Q7 ; -(CH2)pNQ6S(O)2NQ6Q7 ; -(CH2)p-NQ6C(O)OQ6 ; -(CH2)p-NQ6C(O)NQ6Q7 ; -(CH2)pNQ6Q7 ; -(CH2)p-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)p-NH-CH=NQ3 ; (CH2)q-C(NHQ3)=NQ4 ; を表し、
T1は、同一または異なって, 独立して、フッ素原子; -(CH2)nOQ1 ; -(CH2)n-CN ; -(CH2)nOC(O)Q1 ; -(CH2)n-C(O)OQ1 ; -(CH2)n-OC(O)OQ1 ; -(CH2)n-OC(O)NHQ1 ; -(CH2)n-C(O)NHQ1 ; -(CH2)n-C(O)NHOQ1 ; -(CH2)n-C(O)NH-NHQ1 ; -(CH2)n-C(O)O-NHQ1, ; -(CH2)n-NHC(O)Q1 ; -(CH2)nNHS(O)2Q1 ; -(CH2)nNHS(O)2NQ1Q2 ; -(CH2)n-NHC(O)OQ1 ; -(CH2)n-NHC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)nNHQ1 ; -(CH2)n-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)n-NH-CH=NQ3 ; (CH2)n-C(NHQ3)=NQ4 ;を表すか、または、
T1は、非置換または1以上のT2で置換され、同一または異なって、独立して、C1-C3-アルキル; C1-C3-フルオロアルキル; O-C1-C3-フルオロアルキル; -(CH2)n-(芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、 5 または 6員複素環) ; を表し、
T2は、同一または異なって、独立してOH ; NH2または CONH2 を表し;
T3は、同一または異なって、独立してフッ素原子; C1-C3-アルキル; C1-C3-フルオロアルキル; O-C1-C3-フルオロアルキル; -(CH2)nOQ6 -(CH2)n-C3-C6-シクロアルキル; -(CH2)n-C3-C6-シクロフルオロアルキル; -(CH2)n-ヘテロアルキル; -(CH2)n-CN ; -(CH2)nOC(O)Q6; -(CH2)n-C(O)OQ6 ; -(CH2)n-OC(O)OQ6 ; -(CH2)n-OC(O)NQ6Q7 ; -(CH2)n-C(O)NQ6Q7 ; -(CH2)n-C(O)NQ6OQ7 ; -(CH2)n-C(O)NQ6-NQ6Q7 ; -(CH2)n-C(O)O-NHQ6; -(CH2)n-NQ6C(O)Q7 ; -(CH2)nNQ6S(O)2Q7 ; -(CH2)nNQ6S(O)2NQ6Q7; -(CH2)n-NQ6C(O)OQ7 ; -(CH2)n-NQ6C(O)NQ6Q7 ; -(CH2)nNQ6Q7 ; -(CH2)n-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)n-NH-CH=NQ3 ; -(CH2)n-C(NHQ3)=NQ4 を表し;
Q6 および Q7 は同一または異なって、独立して水素原子; C1-C3-アルキル; -(CH2)pNHQ3 ; -(CH2)p-NH-C(NHQ3)=NQ4 ; (CH2)p-NH-CH=NQ3 ; (CH2)q-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)pOQ3 ; -(CH2)qC(O)NQ3Q4 ; -(CH2)n-(芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、 5 または 6員複素環) を表し; または
Q6, Q7 およびそれらに結合された窒素原子が一緒になって、1, 2 または 3 つのヘテロ原子を含む飽和または部分的に不飽和の4、 5 または 6員の複素環を形成し；
mは、同一または異なって、独立して1 または 2を表し;
nは、同一または異なって、独立して0, 1, 2 または 3を表し;
pは、同一または異なって、独立して2 または 3を表し;
qは、同一または異なって、独立して1, 2 または3を表し;
ここで、アルキル、シクロアルキル、フルオロアルキル、シクロフルオロアルキルおよび複素環から選択される基に存在する任意の炭素原子は、酸化されてC = O基を形成されてもよく;
複素環に存在する任意の硫黄原子、は、酸化されてS = O基またはS（O）2基を形成されてもよく；
複素環内に存在するか、またはそれが３置換されて第三級アミノ基を形成する基内に存在する任意の窒素原子は、メチル基によってさらに四級化されてもよく;
および、それらの医薬的に許容される両性イオン、光学異性体、ラセミ体、ジアステレオ異性体、エナンチオマー、幾何異性体または互変異性体である。
【０００７】
好ましくは、本発明による化合物は、式(A)および(B)の化合物から選択され、
【化２】
2018510190.tif 000004
式中、 R1, R2 および R3 は、式(I)により定義される。
【０００８】
また、好ましくは、本発明による化合物は、式（(A1), (A2), (B1)および(B2)の化合物から選択され、
【化３】
2018510190.tif 000005
式中、 R1, R3 および Q5 は、式(I)により定義される。
【０００９】
より好ましくは、本発明による化合物は、式(I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*)および(B2*)の化合物から選択され、
【化４】
2018510190.tif 000006
式中、R1, R2, R3 およびQ5 は、式(I)により定義される。
【００１０】
本発明の化合物については、好ましくは、R1 は炭素結合され、非置換または１以上のT1により置換された、芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、5または6員複素環； -CN ; -C(O)NHQ1 ; -C(O)NHOQ1 ; -C(O)NH-NHQ1 ; -C(O)O-NHQ1 ; -C(O)OQ1 ; -(CH2)OC(O)OQ1 ; -(CH2)2OC(O)OQ1 ; -(CH2)OQ1 ; -(CH2)2OQ1 ; -(CH2)OC(O)Q1 ; -(CH2)2OC(O)Q1 ; -(CH2)-OC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)2OC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)NHC(O)Q1 ; -(CH2)2-NHC(O)Q1 ; -(CH2)NHS(O)2Q1 ; -(CH2)2NHS(O)2Q1 ; -(CH2)NHS(O)2NQ1Q2 ; -(CH2)2NHS(O)2NQ1Q2 ; -(CH2)NHC(O)OQ1 ; -(CH2)2NHC(O)OQ1 ; -(CH2)NHC(O)NQ1Q2 ; -(CH2)2NHC(O)NQ1Q2を表す。さらに好ましくは、R1 は炭素結合され、非置換または１以上のT1により置換された、芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、5または6員複素環；-CN ; -C(O)NHQ1 ; -C(O)NHOQ1 ; -C(O)NH-NHQ1 ; -(CH2)2OQ1を表す。
【００１１】
本発明の化合物について、R 1は同様に、好ましくは、-(CH2)NHQ3 ; -(CH2)2NHQ3 ; -(CH2)NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)2NH-C(NHQ3)=NQ4 ; -(CH2)NH-CH=NQ3 ; -(CH2)2NH-CH=NQ3 ; -C(NHQ3)=NQ4を表す。さらに好ましくは、 R1 は -(CH2)NHQ3 ; -(CH2)NH-C(NHQ3)=NQ4,を表し、特に R1 は -(CH2)NH2 または -(CH2)NH-C(NH2)=NHを表す。
【００１２】
本発明の化合物について、R 1は、炭素結合され、非置換または１以上のT1により置換された、芳香族の、飽和の、完全にまたは部分的に不飽和の、少なくとも１つの窒素原子を含む4、5または6員複素環を表してもよい。このような4,5または6員複素環は、1個または2個以上のヘテロ原子、例えばN、O、S、S（O）またはS（O）2から選択される1,2または3個のさらなるヘテロ原子をさらに含んでいてもよい。
【００１３】
本発明による化合物において、R 3は、好ましくはSO3HまたはCF2COOHを表す。
【００１４】
本発明の化合物について、Q1 および Q2ならびにそれらが結合している窒素原子とは、一緒になって1,2または3のヘテロ原子を含む飽和または部分的に不飽和の、4、5‐または6員複素環を形成することができる。したがって、得られた4、5または6員複素環は、Q1 および Q2に結合した窒素原子および1つまたは2つのさらなる任意のヘテロ原子を含む。
【００１５】
本発明の化合物について、Q1 および Q2は、同一または異なって、好ましくは水素; メチル; -CH2-CH2-NH2 ; -CH2-CH2-NH-CNH2=NH ;-CH2-CH2-NH-CH=NH ; -CH2-C(NH2)=NH ; -CH2-CH2-OH ; -CH2-CONH2 ; -(CH2)n-(飽和、部分的または完全に不飽和または芳香族の、少なくとも1個の窒素原子を含む4,5または6員複素環）であり、ここで、複素環が1以上のT2で置換されていてもよく、nおよびT2は 式（I）により定義される。
【００１６】
本発明の化合物について、Q1 および Q2は、同一または異なって、より好ましくはH; メチル; -CH2-CH2-NH2 ; -CH2-CH2-NH-CNH2=NH ;-CH2-CH2-NH-CH=NH ; -CH2-C(NH2)=NH ; -CH2-CH2-OH ; -CH2-CONH2 ;飽和、部分的または完全に不飽和または芳香族の少なくとも1個の窒素原子を含む4,5または6員複素環であり、ここで、複素環は式（I）によって定義される1個以上のT3で置換されていてもよい。
【００１７】
本発明による化合物について、同一または異なって、Q3 および Q4は、好ましくは、Hまたはメチルを表す。
【００１８】
本発明の化合物について、Q6 および Q7ならびにそれらが結合している窒素原子とは、一緒になって1,2または3のヘテロ原子を含む飽和または部分的に不飽和の、4、5‐または6員複素環を形成することができる。したがって、得られた4、5または6員複素環は、Q6 および Q7に結合した窒素原子および1または2のさらなる任意のヘテロ原子を含む。
【００１９】
好ましくは、本発明の式（Ｉ）, (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および(B2*)において、
R1は、-C(O)NHQ1 ; -C(O)NHOQ1 ; -C(O)NH-NHQ1 ; -C(O)OQ1 ; -(CH2)mNHQ3 ; -(CH2)mNH-C(NHQ3)=NQ4 を表し、
Q1 および Q3は、前記と同義であり、好ましくは、水素またはC1-C3-アルキルを表し、
mは前記と同義であり；
R2 は O または NOQ5を表し;
Q5 は前記と同義であり、好ましくは -(CH2)q-C(O)NQ6Q7; -(CH2)q-C(O)NQ6OQ7 ; -(CH2)q-C(O)NQ6-NQ6Q7 ; -(CH2)pNQ6Q7 ; -(CH2)p-NH-C(NHQ3)=NQ4 を表し、
pおよびqは前記と同義であり；
Q4、Q6およびQ7は、前記と同義であり、好ましくは同一または異なって、独立して、水素原子; C 1 -C 3 - アルキルを表す。
【００２０】
好ましくは、本発明の式（Ｉ）, (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および(B2*)において、
R1 は、 -C(O)NHQ1 ; -C(O)OQ1 ; -(CH2)mNHQ3 を表し、
Q1 およびQ3は、前記と同義であり、好ましくは、HまたはC1-C3-アルキルを表し;
mは前記と同義であり、好ましくは、１であり;
R2 は O または NOQ5を表し；
Q5 は前記と同義であり、好ましくは -(CH2)q-C(O)NQ6Q7; -(CH2)pNQ6Q7 を表し、
pおよびqは前記と同義であり、好ましくは１または２であり;
Q4、Q6およびQ7は、前記と同義であり、好ましくは同一または異なって、独立して、水素原子; C1 -C3 - アルキルを表す。
【００２１】
本発明はまた、下記式の化合物に関する：
【化５】
2018510190.tif 000007
【００２２】
特に好ましくは、下記式の化合物に関する：
【化６】
2018510190.tif 000008
【００２３】
式中、 Q5および R1 は前記と同義であり、 Rはアルキル、特にC1-C6 アルキル, またはベンジルであり, PG, PG1 および PG2は、同一または異なって、保護基であり, 例えばアリル、ベンジル、tert-ブチルジメチルシリル（TBDMS）、tert-ブトキシカルボニル（Boc）等から選択される。前記化合物は特に、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で表される化合物の製造のため中間体に用いられる。
【００２４】
本明細書で使用される用語「アルキル」は、特段の指定がない限り、鎖中に1〜3個の炭素原子を有する、直鎖または分枝鎖であり得る脂肪族炭化水素基を指す。 好ましいアルキル基は、鎖中に1または2個の炭素原子を有する。 アルキル基の具体例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピルが挙げられるが、これらに限定されない。 好ましくは、アルキル基はメチルまたはエチル基である。
【００２５】
本明細書で使用される用語「フルオロアルキル」は、少なくとも1のフッ素原子で置換されたアルキル基を指す。 用語「アルキル」は前記と同義である。 フルオロアルキル基の具体例としては、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、フルオロメチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２６】
用語「シクロアルキル」は、3〜6の炭素原子、好ましくは3〜4の炭素原子の飽和単環式または二環式非芳香族炭化水素環を指し、これは1以上の不飽和を含んでいてもよい。単環式シクロアルキル基の具体例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルが含まれる。 好ましくは、シクロアルキル基は、シクロプロピルまたはシクロブチルである。
【００２７】
用語「フルオロシクロアルキル」は、少なくとも1のフッ素原子で置換されたシクロアルキル基を指す。 用語「シクロアルキル」は前記と同義である。フルオロシクロアルキル基の具体例には、フルオロシクロプロピル、ジフルオロシクロプロピル、フルオロシクロブチル、ジフルオロシクロブチルが含まれる。
【００２８】
本明細書で使用される用語「複素環」は、特に反対の定義の言及がない限り、単独で、または別の基と組合せて、単環式飽和、部分的にまたは完全に不飽和または芳香族の炭化水素基、好ましくは4〜10員の炭化水素基であって、N、O、S、S（O）またはS（O）2などの少なくとも1のヘテロ原子を含む基を意味する。 好ましくは、複素環は、単環式飽和、部分的にまたは完全に不飽和または芳香族の炭化水素基、好ましくは4〜6員の炭化水素基であって、少なくとも1の窒素原子、およびN、O、S、 S（O）またはS（O）2などの少なくとも1のさらなるヘテロ原子を含む基を意味する。ヘテロ環の炭素原子は、酸化されてC（O）基を形成することもできる。適切な複素環は、Handbook of Chemistry and Physics、76th Edition、CRC Press、Inc.1995-1996、p.2-25〜2-26にも開示されている。複素環基の例には、限定されるものではないが、アゼチジニル、オキセタニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、オキサジアゾリル、ピロリル、ピロリジニル、ピリジル、テトラヒドロピリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピラゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、テトラゾリル、イミダゾリル、チエニル、チアゾリル、フラニル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、2-ピロリジノニル、イミダゾール-2,4-ジオン、1,2,4-オキサジアゾール-5-オン、1,5-ジヒドロピロリル-2-オン、ピラジノン、ピリダジノン、ピリドン、ピリミドン、ジオキサニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピラニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソラニル、テトラヒドロピラニルを含む。好ましくは、本発明の化合物において、複素環は複素環の炭素原子によって（前記の炭素結合されたヘテロ原子によっても）化合物の構造に結合している。
【００２９】
さらに、本発明のいくつかの化合物は、塩基性アミノ基を含有し、酸性基(R3) -OSO3H, -OCFHCO2H または -OCF2CO2Hとともに、分子内両性イオン塩（または両性イオン）を形成することができ、このような分子内両性イオン塩も本発明に含まれる。
【００３０】
語句「場合により置換されている」は、「さらに定義された化学基によって置換されていないか、または置換されている」または「さらに定義された非置換または置換された化学基」を意味する。
【００３１】
用語「ラセミ化合物」は、本明細書では等量の2つの特定のエナンチオマーを指すために使用される。
【００３２】
用語「エナンチオマー」は、本明細書では、他方と重ね合わせることのできない鏡像体であるが反転により他の一方と関連する、２つの特定の立体異性体のうちの１つを指すために使用される。
【００３３】
本発明による化合物は、1以上の不斉炭素原子を含んでいてもよく、したがって光学異性体の形態で、同様にそのラセミまたは非ラセミ混合物の形態で存在し得る。本発明による化合物は、単一の異性体として、または立体化学異性体の混合物として利用することができる。ジアステレオ異性体、すなわち、重ね合わせることができない立体化学異性体は、クロマトグラフィー、蒸留、結晶化または昇華などの従来の手段によって分離することができる。光学活性な出発物質を使用することにより、ラセミ混合物を従来の方法に従って分割することにより、例えば光学活性酸または塩基での処理によるジアステレオ異性体塩の形成またはキラルクロマトグラフィーカラムを用いることにより、光学異性体（エナンチオマー）を得ることができる。
【００３４】
本明細書中で使用される語句「薬学上許容される塩」は、親化合物がその酸または塩基塩を作製することによって修飾される開示化合物の誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例としては、限定されるものではないが、アミンなどの塩基性残基の無機または有機酸塩、カルボン酸のような酸性残基のアルカリまたは有機塩等が挙げられる。本発明の薬学的に許容される塩は、塩基性部分または酸性部分を含む親化合物から、従来の化学的方法によって合成することができる。さらに、語句「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物の比較的非毒性の無機および有機の酸または塩基付加塩を指す。これらの塩は、化合物の最終的な単離と精製の間に系内で調製することができる。特に、酸付加塩は、精製された形態の精製化合物を有機酸または無機酸と別々に反応させ、そのようにして形成された塩を単離することによって調製することができる。酸付加塩の例には、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、スルファミン酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリル酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グルクロン酸塩、グルタミン酸塩、ラクトビオン酸塩、マロン酸塩、サリチル酸塩、メチレンビス-b-ヒドロキシナフトエ酸塩、ゲンチシン酸塩、イセチオン酸塩、ジ-p-トルオイル酒石酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、キナ酸ラウリルスルホン酸塩などが挙げられる。塩基付加塩の例には、トロメタミン、メグルミン、エポラミンなどのアンモニウム塩、ジシクロヘキシルアミン塩、N-メチル-D-グルカミンなどの有機塩基とのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、亜鉛塩またはマグネシウム塩などの金属塩が含まれる。適切な塩のリストは、Remington's Pharmaceutical Sciences、第17版、Mack Publishing Company、Easton、PA、1985、p。 1418、P.H. Stahl、C.G. Wermuth、Handbook of Pharmaceutical salts - Properties、Selection and Use、Wiley-VCH、2002 and S.M. Berge et al "Pharmaceutical Salts" J. Pharm． Sci、66：p.1-19（1977）に記載されている。
【００３５】
本発明による化合物はまた、1つ以上の原子が、同じ原子番号を有するが、通常自然界に見られる原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数で置き換えられる同位体標識化合物を含む。上記に適した同位体の例としては、限定されるものではないが、 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 18F, 19F, 13N, 15N, 33S, 34S, 35S, 36S, 17O または 18Oが挙げられる。 同位体標識化合物は、薬物および/または基質の組織分布研究において有用である。 重水素（2H）のようなより重量の大きい同位体による置換は、より大きな代謝安定性（例えば、インビボ半減期の増加または必要な用量の減少）をもたらす。同位体標識された化合物は、任意の適切な方法によって、または他の方法で使用される非標識試薬に代えて適切な同位体標識試薬に置き換えて採用するプロセスによって調製される。
【００３６】
本発明は、抗菌特性を有する化合物および/またはβ-ラクタマーゼ阻害剤として作用する化合物を提供する。
【００３７】
本発明はまた、本発明による化合物の製造方法を提供する。特に、本発明は、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)の化合物から選択される化合物の製造方法を提供する。
【００３８】
本発明の一般的方法はスキーム1〜3に表され、式中、R1は各種の置換基を表す。
【化７】
2018510190.tif 000009
【化８】
2018510190.tif 000010
【化９】
2018510190.tif 000011
【化１０】
2018510190.tif 000012
【００３９】
本発明のさらなる化合物を調製するために、スキーム1〜4の製造方法を適用することができる。 本発明の化合物のさらなる製造方法は、スキーム1〜4の方法から派生することができる。
【００４０】
本発明はまた、細菌の制御における本発明の化合物の使用を提供する。本発明による化合物は、通常、少なくとも1の薬学的に許容される賦形剤と組合せて使用される。
【００４１】
「薬学的に許容される」という語句は、これらの化合物、材料、組成物および/または投与剤型が、正当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応またはその他の問題または合併症を伴うことなく、ヒトおよび動物の臓器に関連する使用に適しており、リスク/ベネフィット比が釣り合っていることをいう。
【００４２】
本発明はまた、薬学的に許容される賦形剤と混合して、本発明の少なくとも1つの化合物を含む組成物、好ましくは医薬組成物を提供する。 したがって、本発明による組成物は、式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)から選択される少なくとも１つの化合物が、薬学的に許容される賦形剤と混合された状態を含んでいてもよい。
【００４３】
本発明による組成物は、少なくとも1以上の抗菌剤をさらに含むことができ、好ましくは、少なくとも1以上のこれらの抗菌剤はβ-ラクタムである。
【００４４】
用語「beta-ラクタム」または「β-ラクタム」は、β-ラクタムユニット、すなわちβ-ラクタム基または部分構造を含む抗菌化合物を指す。
【００４５】
用語「薬学的に許容される担体」または「薬学的に許容される賦形剤」は、任意の賦形剤、溶媒、分散媒体、吸収遅延剤、希釈剤または補助剤など、例えば、保存料または酸化防止剤、充填剤、結合剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、溶媒、分散媒体、コーティング剤、抗菌剤、等張剤および吸収遅延剤などに用いられ、ヒトまたは動物における二次反応、例えばアレルギー反応を生じないものに用いられる。典型的な例としては、これらの例に限定されるものではないが、マンニトール、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、サッカライドナトリウム、タルク、セルロース、クロスカルメロースナトリウム、グルコース、ゼラチン、デンプン、ラクトース、リン酸二カルシウム、ショ糖、カオリン、炭酸マグネシウム、湿潤剤、乳化剤、乳化剤、崩壊剤、崩壊剤、崩壊剤、滅菌水、生理食塩水、pH緩衝液、非イオン性界面活性剤、潤滑剤、安定剤、結合剤および落花生油などの食用油、ゴマ油などが含まれる。さらに、当該分野で一般的に使用される種々の賦形剤を含むことができる。医薬的に許容される担体または賦形剤は、当業者に周知であり、Remington's Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Company、Easton、USA、1985）、Merck Index（Merck＆Company、Rahway、NJ）、Gilmanら（治療学の薬理学的基礎、第8版、Pergamon press, 1990）において記載される。任意の従来の媒体またはアジュバントが本発明による活性成分と適合しない場合を除いて、治療組成物におけるその使用が意図される。
【００４６】
本明細書で使用される語句「抗菌剤」は、細菌の増殖を阻害、低減または予防することができる、対象の感染を引き起こす細菌の能力を阻害または低減できる、環境下での細菌の感染力を増幅または維持する能力を阻害または低下することができる、または細菌の感染力または病原性を低下させることができる任意の物質、化合物またはそれらの組合せをいう。
【００４７】
抗菌剤は、下記分類：アミノグリコシド系、β-ラクタム系、グリシルサイクリン系、テトラサイクリン系、キノロン系、フルオロキノロン系、グリコペプチド系、リポペプチド系、マクロライド系、ケトライド系、リンコサミド系、ストレプトグラミン系、オキサゾリジノン系およびポリミキシン系の中から単独でまたは混合物として選択される。 好ましくは、さらなる抗菌剤として、β-ラクタム系、より好ましくは、ペニシリン系、セファロスポリン系、ペネム系、カルバペネム系およびモノバクタム系の中から、単独でまたは混合物として、選択される。
【００４８】
抗菌剤は、ペニシリン系抗菌剤の中から、好ましくは、アモキシシリン、アンピシリン、アズロシリン、メゾシリン、アパラシリン、ヘタシリン、バカンピシリン、カルベニシリン、スルベニシリン、テモシリン、チカルシリン、ピペラシリン、メシリナム、ピブメシリナム、メチシリン、シクラシリン、タラムファシリン、 オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、ナフシリン、およびピブアンチピリンからなる群の中から、単独または混合物として、選択される。
【００４９】
抗菌剤は、セファロスポリン系抗菌剤の中から、好ましくは、セファトリジン、セファゾリン、セフォキシチン、セファレキシン、セファレジン、セフチゾキシム、セファセトリル、セフブフェラゾン、セフプロジル、セフトビプロール、セフタビプロールメドカリル、セフタロリン、セフタロリンフォザミニル、セファロニウム、セフミノックス、セフォラニド、セフォテタン 、セフチブテン、セフカペンピボキシル、セフダルオキシムセフロキザジン、セフトロザンおよびＳ−649266、セファロチン、セファロリジン、セファクロール、セファドロキシル、セファマンドール、セファゾリン、セファレキシン、セフラジン、セフチゾキシム、セファセトリル、セフォチアム、セフォタキシム、セフスロジン、セフォペラゾン、セフメノキシム、セフメタゾール、セファログリシン、セフォニシド、セフォジジム、セフピロム、セフタジジム、セフトリアキソン、セフピラミド、セフブペラゾン、セフォゾプラン、セフェピム、セフォセイル、セフプレナム、セフゾナム、セフピミゾール、セフクリジン、セフィキシム、セフチブテン、セフジニル、セフポドキシムアキセチル、セフポドキシムプロキセチル、セフテラムピボキシル、セフポドキシムアキセチル、セフポドキシムピボキシル、セフテラムピボキシル、セフェタメトピヴォキシル、セフカペンピボキシル、セフジトレンピボキシル、セフロキシム、セフロキシムアキセチル、ロラカルベフ、およびラタモキシフェンからなる群の中から、単独または混合物として、選択される。
【００５０】
抗菌剤は、カルバペネム系抗菌剤の中から、好ましくは、イミペネム、ドリペネム、メロペネム、ビアペネム、エトラペネムおよびパニペネムからなる群の中から、単独または混合物として、選択される。
【００５１】
抗菌剤は、モノバクタム系抗菌剤の中から、好ましくは、アズトレオナム、チゲモナム、カルモナム、BAL30072およびノカルジシンAからなる群の中から、単独または混合物として、選択される。
【００５２】
本発明はまた、少なくとも本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)の化合物、およびセフタジジム（ceftazidime）を含む組成物に関する。
【００５３】
本発明はまた、以下：本発明の医薬組成物、および１以上の抗菌剤、好ましくはこれらの抗菌剤の少なくとも１つがβ‐ラクタム系である抗菌剤を含む、少なくとも1以上のその他の組成物を含むキットを提供する。2つの組成物はそれぞれ、1の特定の薬学的に許容される担体と別々に調製され、次いで混合、特に即時に混合される。
【００５４】
本発明はまた、以下：少なくとも１つの本発明の式 (I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物を含む医薬組成物、および、セフタジジム（ceftazidime）を含む医薬組成物、を含むキットに関する。
【００５５】
本発明はまた、医薬としての使用のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物から選択される化合物を意味する。
【００５６】
本発明はまた、医薬の製造のための使用のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物から選択される化合物を意味する。
【００５７】
本発明はまた、抗菌剤としての使用のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物から選択される化合物を意味する。
【００５８】
本発明はまた、医薬を含む抗菌剤の製造のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物から選択される化合物の使用、または本発明の医薬組成物の使用を意味する。
【００５９】
本発明はまた、医薬を含むβ‐ラクタマーゼ阻害剤の製造のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物から選択される化合物の使用、または本発明の医薬組成物の使用を意味する。
【００６０】
本発明はまた、抗菌剤およびβ‐ラクタマーゼ阻害剤を含む医薬の製造のための、本発明の式式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物から選択される化合物の使用、または本発明の医薬組成物の使用を意味する。
【００６１】
本発明はまた、少なくとも１つの細菌感染の治療または予防のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物から選択される化合物の使用、または本発明の医薬組成物の使用、または本発明のキットの使用を意味する。
【００６２】
本発明はまた、少なくとも１つの細菌感染の治療または予防のために有用な医薬の調製のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物から選択される化合物の使用、または本発明の医薬組成物の使用、または本発明のキットの使用を意味する。
【００６３】
本明細書で使用される用語「予防」、「予防する」および「予防すること」は、細菌による感染を予防するため、または関連する感染症および/または疾患の発生を予防するための、本発明による化合物または組成物の投与を意図する。用語「予防」、「予防する」および「予防すること」はまた、少なくとも1つの細菌感染を予防するために、前記細菌に感染しやすい、または感染のリスクがある患者へ投与することを包含する。
【００６４】
本明細書で使用される用語「治療」、「治療する」および「治療すること」は、特に、本発明による化合物または組成物を含む治療の、感染症を患う患者への投与を意味することが意図される。 本明細書で使用される用語「治療」、「治療する」および「治療すること」はまた、以下の目的；細菌感染または細菌感染に関連する1以上の症状を軽減または排除するため、細菌感染または細菌感染に関連する1以上の症状の進行を遅らせるため、または細菌感染または細菌感染に関連する1以上の重篤な症状を軽減するため、細菌感染の臨床症状を抑制するため、または細菌感染によって引き起こされる有害な症状の発現を抑制するため、本発明の化合物または組成物を、任意に1以上のさらなる抗菌剤と組合せることができる。
【００６５】
本明細書で使用される語句「感染」または「細菌感染」は、その増殖が阻害された場合、被験体に利益をもたらすであろう被験体内または被験体上の細菌の存在を含む。このように、用語「感染」または「細菌感染」はまた、細菌の存在に加えて、正常な細菌叢であって望ましくないものの存在についても意味する。用語「感染」には、細菌によって引き起こされる感染が含まれる。このような細菌感染の例はに尿路感染（UTI）、腎臓感染（腎盂腎炎）、婦人科および産科感染症、気道感染（RTI）、慢性気管支炎の急性増悪（AECB）、市中肺炎（CAP）、院内感染性肺炎(HAP),、人工呼吸器関連肺炎(VAP)、腹内肺炎(IAI)、急性中耳炎、急性副鼻腔炎、敗血症、カテーテル関連敗血症、気管支喘息、クラミジア、皮膚感染、菌血症を含むが、これらに限定されるものではない。
【００６６】
本明細書で使用される用語「成長」は、1つ以上の微生物の成長を指し、細菌などの微生物の繁殖または増殖を含む。この用語はまた、微生物の生命維持プロセスを含む、微生物の進行中の代謝プロセスの維持を含む。
【００６７】
本発明によれば、細菌はグラム陽性細菌またはグラム陰性細菌、好ましくはグラム陰性細菌から選択される。本発明によれば、細菌は「beta-ラクタマーゼ」または「β-ラクタマーゼ」を産生する細菌の中から選択されることもできる。これらの細菌は、当業者に周知である。本明細書で使用される用語「beta-ラクタマーゼ」または「β-ラクタマーゼ」は、β-ラクタム環を分解することができる任意の酵素またはタンパク質または任意の他の物質を指す。用語「beta-ラクタマーゼ」または「β-ラクタマーゼ」は、細菌によって産生され、抗菌剤などの化合物中に存在するβ-ラクタム環を部分的にまたは完全に加水分解する能力を有する酵素を含む。
【００６８】
本発明の細菌は、グラム陽性細菌の中から、好ましくは、ブドウ球菌（Staphylococcus）,連鎖球菌（Streptococcus）, ブドウ球菌種（Staphylococcus species）（黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）, 表皮ブドウ球菌（Staphylococcus epidermidis）を含む),連鎖球菌種（Streptococcus species）（肺炎連鎖球菌（Streptococcus pneumonia）, Ｂ群連鎖球菌（Streptococcus agalactiae)を含む）, エンテロコッカス種（Enterococcus species ）（大便連鎖球菌(Enterococcus faecalis）およびフェシウム菌（Enterococcus faecium)を含む）より選択される。
【００６９】
本発明による細菌は、グラム陰性細菌の中から、好ましくはアシネトバクター属（Acinetobacter）種（アシネトバクター・バウマンニ（Acinetobacter baumannii）を含む）、シトロバクター属（Citrobacter）種、大腸菌属（Escherichia）種（大腸菌（Escherichia coli）を含む）、ヘモフィルス属（Haemophilus）インフルエンザ菌（influenza）、モルガネラ属（Morganella）モルガン菌（morganii）、クレブシエラ属（Klebsiella）種（肺炎桿菌（Klebsiella pneumoni）を含む）、エンテロバクター属（Enterobacter）種（腸内細菌科（Enterobacter cloacae）を含む）、淋菌（Neisseria gonorrhoeae）、鼻疽菌（バークホルデリア・セパシア（Burkholderia cepacia）を含む）、プロテウス属（Proteus）種（ミラビリス変形菌（Proteus mirabilis）を含む),セラチア属（Serratia）種（セラチア・マルセッセンス（Serratia marcescens）を含む）,緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）より選択される。
【００７０】
本発明は、上述のとおり好ましくは、細菌感染、好ましくは1つまたは複数のβ-ラクタマーゼを産生する細菌によって引き起こされる細菌感染の治療または予防のための使用のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物より選ばれる化合物、または本発明の医薬組成物または本発明のキットを指す。好ましくは、細菌は、グラム陽性細菌またはグラム陰性細菌、より好ましくはグラム陰性細菌の中から選択される。
【００７１】
本発明はまた、細菌感染、好ましくは1つまたは複数のβ-ラクタマーゼを産生する細菌によって引き起こされる細菌感染の治療または予防のための、本発明の式式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)の化合物より選ばれる化合物の医薬の調製のための使用、または本発明の医薬組成物を指す。好ましくは、細菌は、グラム陽性細菌またはグラム陰性細菌、より好ましくはグラム陰性細菌の中から選択される。
【００７２】
本発明はまた、細菌感染、好ましくは1種以上のβ-ラクタマーゼを産生する細菌によって引き起こされる細菌感染の治療または予防において、それを必要とする患者に同時に、別々にまたは連続して投与するための本発明によるキットを指す。好ましくは、細菌は、グラム陽性細菌またはグラム陰性細菌、より好ましくはグラム陰性細菌の中から選択される。
【００７３】
本発明はまた、１つまたはそれ以上のさらなる抗菌剤との組合せ、好ましくは少なくとも１つのさらなる抗菌剤がβ−ラクタム化合物である組合せにおける、細菌感染、好ましくは1以上のβ-ラクタマーゼを産生する細菌によって引き起こされる細菌感染の治療または予防への使用のための、本発明の式式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)の化合物より選ばれる化合物を指す。好ましくは、細菌は、グラム陽性細菌またはグラム陰性細菌、より好ましくはグラム陰性細菌の中から選択され、ここで、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)の化合物より選ばれる化合物およびさらなる抗菌剤は、同時に、別々にまたは連続して投与される。
【００７４】
本発明はまた、細菌感染、好ましくは1または複数のβ-ラクタマーゼを産生する細菌によって引き起こされる細菌感染の治療または予防のための、本発明の式(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物より選ばれる化合物、または本発明の医薬組成物または本発明のキットを指す。好ましくは、細菌は、グラム陽性細菌またはグラム陰性細菌、より好ましくはグラム陰性細菌の中から選択される。
【００７５】
本発明はまた、細菌感染、好ましくは1つまたは複数のβ-ラクタマーゼを産生する細菌によって引き起こされる細菌感染の治療または予防のための、治療有効量の本発明の(I), (A), (B), (A1), (A2), (B1), (B2), (I*), (A*), (B*), (A1*), (A2*), (B1*) および (B2*)で示される化合物、または本発明の医薬組成物または本発明のキットの投与を含む方法に関連する。好ましくは、細菌は、グラム陽性細菌またはグラム陰性細菌、より好ましくはグラム陰性細菌の中から選択される。
【００７６】
用語「患者」は、細菌、好ましくはグラム陽性細菌およびグラム陰性細菌、より好ましくはグラム陰性細菌に感染した、または感染する危険のあるヒトまたは動物を意味する。本明細書中で使用される場合、用語「患者」は、哺乳動物、好ましくはヒトまたは小児ヒトのような温血のヒトまたは動物であって、本明細書に記載される1つまたは複数の感染および状態に苦しんでいるか、または罹患する可能性があるものを指す。本明細書に記載の疾患および状態の治療を必要とする被験体の同定は、十分に当業者の能力および知識の範囲内である。 当業者である獣医師または医師は、臨床試験の使用、身体検査、医学的または家族の病歴、または生物学的および診断的検査により、当該治療を必要とする被験体を容易に同定することができる。
【００７７】
本明細書で使用される表現「治療上有効な量」または「薬学的に有効な量」は、それを必要とする患者に投与された場合に、疾患状態、症状、または化合物が有用をもつ異常の治療に十分となる本発明の化合物の量を指す。このような量は、研究者または臨床医により観察される組織系または患者における生物学的または医学的応答を生じさせるのに十分である。「治療上有効な量」を構成する本発明の化合物の量は、特に、化合物自体およびその生物学的活性、投与に使用される組成物、投与時間、投与経路、化合物の排出割合、処置の期間、処置される疾患状態または障害の型およびその重症度、本発明の化合物と組合せてまたは同時に投与される薬物、ならびに年齢、体重、全身の健康状態、性別および食生活に応じて著しく変化する。そのような「治療的に有効な量」は、所有される知識および本明細書の開示を考慮して当業者によって決定され得る。好ましくは、本発明による化合物は、1日当たり0.1〜30gの含有量で投与される。
【００７８】
本発明による化合物は、非経口投与のための水性生理学的緩衝溶液において提供されてもよい。本発明の化合物はまた、単位用量形態で投与することも可能であり、ここで、表記「単位用量」は、患者に投与することができ、容易に取扱うことができ、および包装することができる用量単位を意味し、本明細書に記載されるように、活性薬物自体を含む物理的または化学的に安定な単位用量として、または薬学的に許容される組成物としてとどまる。本明細書において提供される化合物は、1つ以上の薬学的に許容される賦形剤と混合することによって医薬組成物に製剤化されることができる。このような単位用量組成物は、経口投与用に、特に錠剤、単純カプセルまたは軟質ゲルカプセルの形態で、または鼻腔内投与用に、特に粉末、点鼻薬またはエアロゾルの形態で、例えば、軟膏、クリーム、ローション、ゲルまたはスプレー、または経皮パッチを介して局所的に投与することができる。
【００７９】
医薬組成物は、単位用量の投薬形態で適切に投与されることができ、例えば、Remington：The Science and Practice of Pharmacy、20th ed；Gennaro、A. R.、Ed. Lippincott Williams＆Wilkins：Philadelphia、PA、2000に記載されているように、製薬業界で周知の任意の方法によって調製される。好ましい製剤は、本発明の化合物が経口または非経口投与のために製剤化された医薬組成物を含む。
【００８０】
経口投与用の、錠剤、丸剤、散剤、カプセル剤、トローチ剤などは、以下の成分：微結晶性セルロースまたはトラガカントゴムなどの結合剤; デンプンまたは乳糖のような希釈剤; デンプンおよびセルロース誘導体のような崩壊剤; ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤; コロイド状二酸化ケイ素のような流動促進剤; スクロースまたはサッカリンのような甘味剤; またはペパーミントまたはサリチル酸メチルなどの香味剤、または類似の性質の化合物の1つ以上を含有することができる。カプセル剤は、硬カプセル剤または軟カプセル剤の形態であってもよく、これらは一般に、場合により可塑剤とブレンドされたゼラチンブレンドおよびデンプンカプセル剤から作られる。 さらに、投与単位形態は、投与単位の物理的形態を修飾する種々の他の物質、例えば、糖、セラックまたは腸溶性物質のコーティングを含むことができる。他の経口シロップ剤またはエリキシル剤は、甘味剤、防腐剤、染料、着色剤および香味料を含んでいてもよい。 さらに、活性化合物は、速溶性、放出調整性または徐放性調製物および製剤に組み込むことができ、このような徐放性製剤は、好ましくはバイモーダルである。好ましい錠剤は、乳糖、コーンスターチ、ケイ酸マグネシウム、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、ステアリン酸マグネシウムまたはタルクを任意の組合せで含む。
【００８１】
非経口投与のための液体製剤には、滅菌水性または非水性溶液、懸濁液およびエマルションが含まれる。液体組成物はまた、結合剤、緩衝剤、保存剤、キレート剤、甘味剤、香味剤および着色剤などを含んでいてもよい。非水性溶媒には、アルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの有機エステルが含まれる。水性担体には、アルコールと水の混合物、緩衝化媒体、および生理食塩水が含まれる。特に、生体適合性、生分解性ラクチドポリマー、ラクチド/グリコリドコポリマー、またはポリオキシエチレン - ポリオキシプロピレンコポリマーは、活性化合物の放出を制御するのに有用な賦形剤であることができる。静脈投与の賦形剤は、液体および栄養補給剤、リンゲル液デキストロースを基本とする電解質補給剤などを含むことができる。活性化合物のための潜在的に有用な他の非経口送達システムには、エチレン - 酢酸ビニルコポリマー粒子、浸透圧ポンプ、移植可能な注入システムおよびリポソームが含まれる。
【００８２】
代替の投与形式には、乾燥粉末、エアロゾルまたは液滴のような手段を含む吸入用製剤が含まれる。 それらは、例えば、ポリオキシエチレン-9-ラウリルエーテル、グリココール酸塩およびデオキシコレートを含む水溶液、または点鼻薬の形態で投与するための油性溶液、または鼻腔内に適用されるゲルであってもよい。口腔投与のための製剤には、例えば、のど飴またはトローチが含まれ、香味付けされたショ糖またはアラビアゴムのような基剤およびグリココール酸塩のような他の賦形剤が含まれていてもよい。
【００８３】
直腸投与に適した製剤は、好ましくは、単位投与坐剤として、固体ベースの担体と共に提供され、サリチル酸塩を含むことができる。皮膚への局所適用のための製剤は、好ましくは、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾルまたは油の形態をとる。 用いられる担体には、石油ゼリー、ラノリン、ポリエチレングリコール、アルコール、またはそれらの組合せが含まれる。
【００８４】
経皮投与に適した製剤は、個別のパッチとして提供されることができ、ポリマーまたは接着剤中に溶解および/または分散された親油性エマルジョンまたは緩衝水溶液であってもよい。
【００８５】
本発明は、さらなる以下の実施例の記載により例示されるが、これに限定されるものではない。
【実施例】
【００８６】
以下の実施例は、本発明を例示するために提供され、決して本発明の範囲を限定するものと解釈すべきではない。第1の部分は化合物（中間体および最終化合物）の調製を表し、第2の部分は本発明の化合物の抗菌活性の評価を表す。
【００８７】
化合物の調製および生物学的活性：
本明細書で使用される略語または記号には、下記を含む：
ACHN：1,1'-アゾビス（シクロヘキサンカルボニトリル）
ACN：アセトニトリル
AcOH：酢酸
Bn：ベンジル
Boc：tert-ブトキシカルボニル
Boc2O：tert-ブトキシカルボニル無水物
BocON：[2-（tert-ブトキシカルボニルオキシイミノ）-2-フェニルアセトニトリル]
bs：ブロードシングレット
バージェス試薬（Burgess reagent）：メチルN-（トリエチルアンモニオスルホニル）カルバメート
CFU：コロニー形成単位
CLSI：臨床検査標準研究所
d：ダブレット
DBU：1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エン
DCM：ジクロロメタン
dd：ダブルオブダブレット
ddd：ダブルオブダブルオブダブレット
ddt：ダブルオブダブルオブトリプレット
dq：ダブルオブカルテット
dt：ダブルオブトリプレット
DTA：ジ-tert-ブチルアゾジカルボキシレート
DEAD：アゾジカルボン酸ジエチル
デスマーチンペルヨージナン（Dess-Martin periodinane）：1,1,1-トリス（アセチルオキシ）-1,1-ジヒドロ-1,2-ベンゾヨードオキソ-3-（1H） - オン
DIAD：ジイソプロピルアゾジカルボキシレート
DIPEA：N、N-ジイソプロピルエチルアミン
DMAP：4-ジメチルアミノピリジン
DMF：N、N-ジメチルホルムアミド
DMSO：ジメチルスルホキシド
EtOAc：酢酸エチル
Et2O：ジエチルエーテル
h：時
HATU：1- [ビス（ジメチルアミノ）メチレン] -1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム-3-オキシヘキサフルオロホスフェート
HOBt：1-ヒドロキシベンゾトリアゾール
m：マルチプレット
min：分
MeOH：メタノール
MeONa：ナトリウムメトキシド
MIC：最小阻害濃度
MS：質量分析
Ms：メタンスルホニル
MsCl：塩化メタンスルホニル
NBS：N-ブロモスクシンイミド
NMR：核磁気共鳴分光法
Ns：ノシル、ニトロベンゼンスルホニル
Pd（Ph3）4：テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（0）
PG：保護基
PhSH：チオフェノール
PMe3：トリメチルホスフィン
PPh3：トリフェニルホスフィン
ppm：百万分の1
q：カルテット
rt：室温
s：シングレット
SEM：[2-（トリメチルシリル）エトキシ]メチル
t：トリプレット
td：トリプルオブダブレット
TBAF：テトラ-n-ブチルアンモニウムフルオライド
TBDMS：tert-ブチルジメチルシリル
TBDMSOTf:トリフルオロメタンスルホン酸tert-ブチルジメチルシリルエステル
TBSOTf：トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート
tBuOK：カリウムtert-ブトキシド
TEA：トリエチルアミン
TFA：トリフルオロ酢酸
THF：テトラヒドロフラン
THP：テトラヒドロピラニル
TLC：薄層クロマトグラフィー
TMSI：ヨードトリメチルシラン
Tr：トリチル（トリフェニルメチル）
【００８８】
実施例１：ナトリウム[（2S、5S）-2-メトキシカルボニル-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェートの合成
【化１１】
2018510190.tif 000013
【００８９】
工程1：中間体4-tert-ブチルエステル3-メチルエステル（1R、4S、6S）-7-オキサ-3-アザ - ビシクロ[4.1.0]ヘプタン-3,4-ジカルボキシレート（1a）の合成
1-tert-ブチルエステル2-メチルエステル（2S、4S、5S）-4-ヒドロキシ-5-ヨード - ピペリジン-1,2-ジカルボキシレート（J.Org.Chem 、2008、73、8661-8664に記載の方法により合成）（8.82g、22.90mmol）の無水DCM（100mL）溶液に、不活性雰囲気下、MeONaの0.5M MeOH溶液（45.81mL、22.90mmol）を加えた。反応混合物を室温で20時間撹拌し、次いで溶液を1N NaOHで洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。粗残渣をEtOAc /シクロヘキサン（50/50）の混合物に溶解させ、シリカゲルケーキで濾過して、4-tert-ブチルエステル3-メチルエステル（1R、4S、6S）-7-オキサ-3-アザ - ビシクロ[4.1.0]ヘプタン-3,4-ジカルボキシレート（1a）（5.33g、20.71mmol、90％）を黄色の油状物として得た。MS m/z ([M+Na]+) 280.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.42 and 1.47 (2s, 9H), 2.18-2.26 (m, 1H), 2.85 (ddt, J = 13.4/11.0/2.4 Hz, 1H), 3.31-3.17 (m, 2H), 3.68-3.81 (m, 4H), 3.88-3.94 (m, 1H), 4.53 and 4.73 (2dd, J = 6.3/2.0 Hz, 1H)
【００９０】
工程2：中間体1-tert-ブチルエステル2-メチルエステル（2S、4S、5S）-5-アリルオキシアミノ-4-ヒドロキシ - ピペリジン-1,2-ジカルボキシレート（1b）の合成
4-tert-ブチルエステル3-メチルエステル（1R、4S、6S）-7-オキサ-3-アザ - ビシクロ[4.1.0]ヘプタン-3,4-ジカルボキシレート（1a）（3.88g、 15.09mmol）の無水MeOH（30mL）溶液に、不活性雰囲気下、O-アリルヒドロキシルアミン（5.51g、75.45mmol）を加えた。反応器を密閉し、反応物を80℃で3日間撹拌した。 MeOHを蒸発させ、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン/ EtOAc 80/20〜0/100）で精製して、1-tert-ブチルエステル2-メチルエステル（2S、4S、5S）-5-アリルオキシアミノ-4-ヒドロキシ - ピペリジン-1,2-ジカルボキシレート（1b）（3.12g、9.44mmol、62％）を無色油状物として得た。MS m/z ([M+H]+) 331.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.45 (s, 9H), 1.94-1.98 (m, 1H), 2.21-2.28 (m, 2H), 3.10 (bs, 1H), 3.47 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.90 (dd, J = 14.2/2.6 Hz, 1H), 3.98-4.02 (m, 1H), 4.18 (dq, J = 5.9/1.3 Hz, 2H), 4.72 (bs, 1H), 5.12-5.35 (m, 2H), 5.53 (s, 1H), 5.91 (ddt, J = 17.3/10.3/5.9 Hz, 1H)
【００９１】
工程3：中間体1-tert-ブチルエステル2-メチルエステル（2S、4S、5S）-5-アリルオキシアミノ-4-（tert-ブチル - ジメチル - シラニルオキシ） - ピペリジン-1,2-ジカルボキシレート（1c）の合成
1-tert-ブチルエステル2-メチルエステル（2S、4S、5S）-5-アリルオキシアミノ-4-ヒドロキシ - ピペリジン-1,2-ジカルボキシレート（1b）（3.95g、11.97mmol）の無水DCM 溶液（50mL）に、2,6-ルチジン（1.67mL、14.36mmol）、続いてTBDMSOTf（2.88mL、12.58mmol）を0℃、不活性雰囲気下で加えた。混合物を20℃で3時間撹拌し、次いで溶液をDCMで抽出し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc 90/10）で精製して、1-tert-ブチルエステル2-メチルエステル（2S、4S、5S）-5-アリルオキシアミノ-4-（tert-ブチル - ジメチル - シラニルオキシ） - ピペリジン-1,2-ジカルボキシレート（1c）（4.55g、10.23mmol、85％）を無色油状物として得た。MS m/z ([M+H]+) 445.   1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.04 (2s, 6H), 0.86 (s, 9H), 1.46 (bs, 9H), 2.00-2.24 (m, 2H), 2.90-3.20 (m, 1H), 3.36-3.55 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.83-4.05 (m, 2H), 4.09-4.26 (m, 2H), 4.54-4.73 (2bs, 1H), 5.04-5.42 (m, 2H), 5.50 (bs, 1H), 5.91 (ddt, J = 17.3/10.4/5.9 Hz, 1H).
【００９２】
工程4：中間体メチル（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ - ピペリジン-2-カルボキシレート（1d）の合成
1-tert-ブチルエステル2-メチルエステル（2S、4S、5S）-5-アリルオキシアミノ-4-（tert-ブチル - ジメチル - シラニルオキシ） - ピペリジン-1,2-ジカルボキシレート（1c）（0.368 0.83mmol）の無水DCM（16mL）溶液に、TMSI（177μL、1.24mmol）を、室温、不活性条件下、ゆっくり加えた。反応混合物を室温で30分間撹拌した。 次いで、混合物を0℃、MeOH（1mL）でクエンチした。 混合物を真空下で蒸発させ、得られた残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（DCM / MeOH 97/3）で精製して、メチル（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ - ピペリジン-2-カルボキシレート（1d）（0.325g、0.829mmol、定量的収率）を黄色固体として得た。MS m/z ([M+H]+) 345.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.09 (2s, 6H) , 0.88 (s, 9H), 2.15 (dt, J = 15.0/8.1 Hz, 1H), 2.46 (dt, J = 14.2/4.3 Hz, 1H), 3.20-3.32 (m, 2H), 3.79 (dd, J = 12.3, 3.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 4H), 3.95-4.03 (m, 1H), 4.10-4.26 (m, 3H), 5.18-5.36 (m, 2H), 5.91 (ddt, J = 16.6/10.4/ 6.0 Hz, 1H).
【００９３】
工程5：中間体メチル（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン‐2‐カルボキシレート（1e）の合成
（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ - ピペリジン-2-カルボキシレート（1d）（0.325g、0.829mmol）および4-ピコリン （322μL、3.31mmol）の無水DCM（16mL）溶液に、ジホスゲン（55μL、0.45mmol）をDCM（4mL、流量= 0.25mL /分）中の溶液として、0℃で加えた。 添加が完了したら、反応物を室温で一晩撹拌した。 混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、次いで水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。 粗残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc 90/10）で精製して、中間体のメチル（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン‐2‐カルボキシレート（1e）（0.176g、0.47mmol、57％、2工程通算収率）を得た。MS m/z ([M+H]+) 371.1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.05 (2s, 6H), 0.86 (s, 9H), 2.21 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 2.37 (ddd, J = 15.7/8.7/4.5 Hz, 1H), 2.99-3.08 (m, 1H), 3.52 (t, J = 3.7 Hz, 1H), 3.70 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 4.05 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.23-4.27 (m, 1H), 4.38-4.54 (m, 2H), 5.27-5.43 (m, 2H), 6.02 (ddt, J = 16.9/10.3/6.4 Hz, 1H).
【００９４】
工程6：中間体メチル（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（1f）の合成
メチル（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン‐2‐カルボキシレート（1e）（0.722g、1.95mmol）の無水ACN（20mL）溶液に、TEA・3HF（320μL、1.95mmol）を、不活性化条件下、滴下した。 反応混合物を60℃で18時間撹拌した。 混合物をEtOAcで希釈し、水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。 粗生成物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc 50/50から0/100）で精製して、メチル（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（1f）（0.361g、1.40mmol、72％）を白色固体として得た。MS m/z ([M+H]+) 257.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.13 (dd, J = 16.3/2.0 Hz, 1H), 2.33 (ddd, J = 16.2/8.0/5.1 Hz, 1H), 2.95-3.04 (m, 1H), 3.36-3.45 (m, 2H), 3.67-3.76 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.08 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 4.7 Hz, 1H), 4.31-4.51 (m, 2H), 5.23-5.39 (m, 2H), 5.98 (ddt, J = 16.9/10.3/6.4 Hz, 1H).
【００９５】
工程7：中間体メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（1g）の合成
メチル（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（1f）（0.361g、1.41mmol）の無水DCM（30mL）溶液に、0℃の不活性雰囲気下、デス - マーチンペルヨージナン試薬（0.847g、1.41mmol）を加えた。 反応物を室温で18時間撹拌し、次いで混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、15％チオ硫酸ナトリウム溶液、水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。 残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc 80/20から0/100）で精製して中間体メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（1g）（0.333g、1.31mmol、92％）を無色の油状物として得た。MS m/z ([M+H]+) 255.  H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.91-3.05 (m, 2H), 3.31 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.56-3.66 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.99 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.35-4.50 (m, 2H), 4.53 (ddd, J = 6.3/4.8/1.5 Hz, 1H), 5.28-5.41 (m, 2H), 5.89-6.04 (m, 1H).
【００９６】
工程8：中間体メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン-2-カルボキシレート（1h）の合成
無水MeOH（5.5mL）中のメチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（1g）（0.140g、0.55mmol）に、不活性雰囲気下、ピリジン（93μL、1.16mmol）および2-アミノオキシ-N-メチル - アセトアミド・HCl（0.081g、0.58mmol）を連続的に添加した。 反応混合物を室温で2時間30分間撹拌した。 反応混合物を真空下で濃縮し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（DCM / MeOH 100/0から98/2）で精製して、中間体メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン-2-カルボキシレート（1h）（0.153g、0.45mmol、比Z / E：50 / 50,81 ％）を得た。MS m/z ([M+H]+) 341.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.58-2.98 (m, 4.5H), 3.05 (d, J = 12.3 Hz, 0.5H), 3.17 (d, J = 12.5 Hz, 0.5H), 3.37-3.47 (m, 1.5H), 3.76 (2s, 3H), 4.14 (d, J = 3.5 Hz, 0.5H), 4.25-4.59 (m, 5H), 5.04 (d, J = 3.3 Hz, 0.5H), 5.24-5.40 (m, 2H), 5.86-6.03 (m, 1H), 6.32 (2bs, 1H).
【００９７】
工程9：ナトリウム[（2S、5S）-2-メトキシカルボニル-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（実施例1）の合成
メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン-2-カルボキシレート（1h）（0.100g、0.29mmol）および氷酢酸（35μL、0.59mmol）を無水DCM（4.5mL）に溶解した溶液に、Pd(Ph3)4 (0.170 g, 0.15 mmol)を一度に加えた。室温で1時間撹拌した後、乾燥ピリジン（2.75mL）および三酸化硫黄ピリジン錯体（0.234g、1.47mmol）を混合物に添加し、得られた溶液を光から保護し、硫酸化（sulfatation）が完了するまで室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、DCMで希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲル（DCM /アセトン100/0〜0/100）で精製して、トリフェニル - （プロペニル） - ホスホニウム[（2S、5S）-2-メトキシカルボニル-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェートを、102 mgの無色透明の油状物として得た。この油状物を最小量の水に溶解し、Dowexナトリウム型カラム（Dowex（登録商標）50WX8水素形態、2N NaOHの水溶液で貯蔵、水で中性pHになるまで洗浄した）に適用した。所望の化合物を含有する画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥して化合物 [（2S、5S）-2-メトキシカルボニル-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェートナトリウム塩（実施例1）（0.053g、0.131mmol、Z / E比：50/50,4％、2段階で44％）を得た。MS m/z ([M+H]+) 381.  MS m/z ([M-H]-) 379.  1H NMR (300 MHz, D2O): δ (ppm) 2.81 (2s, 3H), 2.93-3.18 (m, 2H), 3.37 (d, J = 16.5 Hz, 0.5H), 3.39 (d, J = 16.9 Hz, 0.5H), 3.57 (dd, J = 19.6/2.4 Hz, 0.5H), 3.64-3.81 (m, 1H), 3.85 (2s, 3H), 4.49-4.67 (m, 3H), 5.55 (d, J = 3.4 Hz, 0.5H)
【００９８】
実施例2：
ナトリウム（2S、5S）-6-ヒドロキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2 - カルボキサミドスルフェートの合成
【化１２】
2018510190.tif 000014
【００９９】
工程1：中間体（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2 - カルボン酸（2a）の合成
メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン-2-カルボキシレート（1h）（0.310g、0.91mmol）のTHF（4.8mL）および水（2.4mL）の混合物に、LiOH（21mg、0.91mmol）を加えた。 反応混合物を室温で6時間撹拌した。 混合物をEtOAc（3×5mL）で抽出した。 水層をHCl 2Nの溶液でpH = 1に酸性化し、EtOAc（5×10mL）で抽出した。 有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ [3.2.1]オクタン-2-カルボン酸（2a）（135mg、0.41mmol、45％）を白色固体として得た（Z / E混合物）。MS m/z ([M+H]+) 327.  MS m/z ([M-H]-) 325.
【０１００】
工程2：中間体（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2 - カルボキサミド（2b）の合成
（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ [3.2.1]オクタン-2-カルボン酸（2a）（135mg、0.41mmol）の無水DCM溶液（4 mL）に、0℃、不活性化条件下、TEA（70μL、0.50mmol）、続いて塩化トリメチルアセチル 混合物を加えた。混合物を0℃で30分間撹拌し、次いで-20℃で冷却した。 アンモニア水溶液30％（69μL、1.65mmol）を加え、反応物を-20℃で1時間撹拌した。 DCMを蒸発させ、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（DCM /プロパン-2-オール：100 / 0〜0 / 100）により精製して（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2 - カルボキサミド（2b）（Z/E体混合）（103mg、0.32mmol、76％）を茶色固体で得た。MS m/z ([M+H]+) 326.  MS m/z ([M-H]-) 324.1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.55 (ddd, J = 18.4/9.3/2.2 Hz, 0.6H), 2.76-2.89 (m, 3H), 2.98 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 3.19 (dd, J = 17.8/5.0 Hz, 0.4H), 3.38-3.51 (m, 1H), 3.77-3.88 (m, 1H), 4.13-4.25 (m, 2H), 4.35-4.73 (m, 4.6H), 4.99-5.14 (m, 0.4H), 5.25-5.47 (m, 2H), 5.50-6.26 (m, 1H), 6.28-6.78 (m, 2H).
【０１０１】
工程3：ナトリウム[（2S、5S）-2-カルバモイル-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（実施例2）の合成
（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2--カルボキサミド（2b）（103mg、0.32mmol）および氷酢酸（36μL、0.63mmol）の無水DCM（3.2mL）中溶液に、Pd（PPh 3）4（0.183g、0.16mmol）を一度に加えた。室温で1時間撹拌した後、乾燥ピリジン（3.17mL）および三酸化硫黄ピリジン錯体（0.252g、1.58mmol）を混合物に添加し、得られた溶液を光から保護し、硫酸化（sulfatation）が完了するまで室温で一晩攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、DCMで希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲル（プロパン-2-オール）で精製して、トリフェニル - （プロペニル） - ホスホニウム（2S、5S）-6-ヒドロキシ-4- [2-（メチルアミノ） -2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキサミドスルフェート65 mgを橙色油状物として得た。この油状物を最小量の水に溶解し、Dowexナトリウム型カラム（Dowex（登録商標）50WX8水素形態、2N NaOHの水溶液で貯蔵、水で中性pHになるまで洗浄した）に適用した。所望の化合物を含有する画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥して不純物を含む[（2S、5S）-2-カルバモイル-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ - 1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェートナトリウム塩25mgを得て、それを逆相C-18でのクロマトグラフィー（水/ ACN：98/2）により精製した。 所望の化合物を含む画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥して、ナトリウム[（2S、5S）-2-カルバモイル-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ - 1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（実施例２）（6.8mg、0.017mmol、Z / E比率：40/60, 2工程通算で5.5％）を白色固体として得た。MS m/z ([M-H]-) 364.  1H NMR (400 MHz, D2O): δ (ppm) 2.80 (2s, 3H), 2.86-3.04 (m, 1H), 3.06-3.15 (m, 0.5H), 3.34 (dd, J = 18.4/12.6 Hz, 1H), 3.54 (ddd, J = 19.5/2.9/0.9 Hz, 0.5H), 3.64-3.86 (m, 1H), 4.31-4.40 (m, 1H), 4.54-4.64 (m, 2.6H), 5.50 (d, J = 3.2 Hz, 0.4H).
【０１０２】
実施例3：ナトリウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン-6-イル]スルフェートの合成
【化１３】
2018510190.tif 000015
【０１０３】
工程1：中間体メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] カルボキシレート（3a）の合成
実施例1（工程8）に記載された方法を用いて、（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（1g）（1.05g、4.13mmol）を2-（アミノオキシ）アセトアミド塩酸塩（0.495g、3.92mmol）との45分間の反応により、フラッシュクロマトグラフィー（DCM / MeOH：100 / 0〜95 / 5）の精製後、（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（3a）（1.14g、3.49mmol、比Z / E 50/50,85％）黄色油状物へ変換した。MS m/z ([M+H]+) 327.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm)2.73 (dd, J = 18.5, 9.3 Hz, 0.5H), 2.85-3.00 (m, 1H), 3.10 (d, J = 12.7Hz, 0.5H), 3.23 (d, J = 12.5 Hz, 0.5H), 3.40-3.55 (m,  1.5H), 3.81 (d, J = 4.0 Hz, 3H), 4.20 (d, J = 3.5 Hz, 0.5H), 4.31-4.67 (m, 5H), 5.08 (d, J = 3.2 Hz, 0.5H), 5.31-5.45 (m, 2H), 5.52 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 5.92-6.07 (m, 1H), 6.31 (bs, 1H).
【０１０４】
工程2：中間体（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボン酸（3b）の合成
（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（3a）（1.00g、3.06mmol）のアセトンおよび水（2.38mL / 0.95mL）の混合物の溶液に、-10℃以下、1N LiOH（3.06mL、3.06mmol）をゆっくり加えた。 反応物を5分間、-10℃以下で撹拌し、混合物を1N HClでpH = 7に中和した。 溶液をDCMで洗浄した。 水相を凍結し、凍結乾燥して908mgの白色固体を得た。 この固体をC18フラッシュクロマトグラフィー（H2O / ACN：98/2）で精製した。所望の化合物を含む画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥して、（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2 エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボン酸（3b）（0.671g、2.14mmol、70％）をZ / E 50/50混合物として得た。MS m/z ([M+H]+) 313.  1H NMR (400 MHz, D2O): δ (ppm)2.77-2.90 (m, 1H), 3.04 (dd, J = 17.1/3.2 Hz, 0.5H), 3.24 (dd, J = 12.5/3.3 Hz, 1H), 3.48-3.65 (m, 1H), 4.06-4.13 (m, 1H), 4.43 (d, J = 3.6 Hz, 0.5H), 4.53 (dd, J = 14.2/6.6 Hz, 2H), 4.60 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 5.40-5.53 (m, 3H), 5.98-6.14 (m, 1H).
【０１０５】
工程3：中間体（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキサミド （3c）の合成
化合物（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボン酸(3b) (0.360 g, 1.15 mmol) の無水DMF (15 mL) 溶液に、 HOBT（0.171g、1.27mmol）、DIPEA（0.42mL、2.41mmol）、塩化アンモニウム（0.123g、2.30mmol）、次いでEDAC（0.232g、1.21ミリモル）を加えた。 室温で16時間撹拌した後、混合物にHOBT（0.083g、0.614mmol）、DIPEA（0.21mL、1.20mmol）、塩化アンモニウム（0.62g、1.15mmol）およびEDAC（0.115g、0.600mmol）を再び加え、反応物を室温で29時間撹拌した。 反応混合物を窒素流下で濃縮した。 生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（DCM /プロパン-2-オール：勾配100/0〜0/100）により精製して、MeOH中で沈殿させた後（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ2-（4-メトキシ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキサミド（3c）（0.238g、0.764mmol、66％）白色固体として得た。
MS m/z ([M+H]+) 312.  1H NMR (400 MHz, MeOD): δ (ppm) 2.60-2.79 (m, 1H), 3.21-3.28 (m, 3H), 3.40-3.54 (m, 1H), 3.63-3.82 (m, 3H), 4.11-4.22 (m, 1H), 4.30 (d, J = 3.6 Hz, 0.5H), 4.42-4.51 (m, 3H), 4.54 (s, 1H), 5.27 (d, J = 3.5 Hz, 0.5H), 5.30-5.37 (m, 1H), 5.38-5.46 (m, 1H), 5.97-6.14 (m, 1H).
【０１０６】
工程4：ナトリウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン‐6−イル]スルフェート（実施例3）の合成
（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキサミド（3c ）（0.100g、0.321mmol）および氷酢酸（0.072mL、1.28mmol）の無水ＤＭＦ溶液に、Pd（PPh 3）4（0.370g、0.320mmol）を添加した。室温で48時間撹拌した後、乾燥ピリジン（3.20mL）および三酸化硫黄ピリジン錯体（0.255g、1.60mmol）を混合物に加え、得られた溶液を光から保護し、室温で16時間、次に26時間〜40時間、硫酸化が完了するまで攪拌した。反応混合物を窒素流下で濃縮し、DCMで希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（DCM /アセトン/プロパン-2-オール：勾配100/0/0〜0/100/0〜0/0/100）により精製して、トリフェニル‐（プロペニル） - ホスホニウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェートを、40mgを橙色油状物として得た。この油状物を最小量の水に溶解し、Dowexナトリウム型カラム（Dowex（登録商標）50WX8水素形態、2N NaOHの水溶液で貯蔵、水で中性pHになるまで洗浄した）に適用した。所望の化合物を含む画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥して、不純物を含む12.5mgのナトリウム（2S、5S）-6-ヒドロキシ-4- [2-（メチルアミノ）-2-オキソ - エトキシ]イミノ-7-オキソ - 1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキサミドスルフェートを得た。混合物をC18フラッシュクロマトグラフィーにより精製した（H 2 O / ACN：98/2）。所望の化合物を含む画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥して、ナトリウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソーエトキシ）イミノ-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（実施例3）（1.30mg、0.003mmol、比Z / E：30/70、 1.0％）を白色固体として得た。MS m/z ([M-H]-) 350.  1H NMR (400 MHz, D2O): δ (ppm) 2.85-3.03 (m, 1H), 3.10 (dd, J = 17.5/5.4 Hz, 0.3H), 3.27-3.39 (m, 1H), 3.54 (dd, J = 19.4/2.8 Hz, 0.7H), 3.63-3.79 (m, 1H), 4.31-4.40 (m, 1H), 4.55-4.70 (m, 2.7H), 5.49 (d, J = 3.2 Hz, 0.3H).
【０１０７】
実施例4：ナトリウムおよび2,2,2-トリフルオロアセテート[（2S、5S）-4-（2-アンモニウムメトキシイミノ）-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6 - イル]スルフェートの合成
【化１４】
2018510190.tif 000016
【０１０８】
工程1：中間体メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（tert-ブトキシカルボニルアミノ）エトキシイミノ] -7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（ 4a）の合成
実施例1（工程8）に記載の手順を使用して、メチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（1g）(0.862 g, 3.39 mmol)を、（ tert-ブチルN-（2-アミノオキシエチル）カルバメート（0.568g、3.22mmol）と27時間反応させて、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン/ EtOAc：80 / 20~0 / 100）によりメチル（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2- （tert-ブトキシカルボニルアミノ）エトキシイミノ] -7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート（4a）（0.370g、0.897mmol、比Z / E 50/50,26％）へ変換し無色油状物として得た。MS m/z ([M+H-Boc]+)/([M+H]+) 313/413.  1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm)1.44 (2s, 9H), 2.73-3.03 (m, 1H), 3.16 (t, J = 12.7 Hz, 1H), 3.29-3.56 (m, 3H), 3.80 (d, J = 0.7 Hz, 3H), 4.05-4.19 (m, 3.5H), 4.31-4.54 (m, 3H), 4.83 (d, J = 28.1 Hz, 1H), 5.08 (d, J = 3.6 Hz, 0.5H), 5.27-5.45 (m, 2H), 5.91-6.11 (m, 1H).
【０１０９】
工程2：中間体（2S、5S）-6-アリルオキシ-4- [2-（tert-ブトキシカルボニルアミノ）エトキシイミノ] -7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボン酸（ 4b）の合成
実施例3（工程2）に記載の手順を使用して、中間体 (メチル (2S, 5S)-6-アリルオキシ-4-[2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)エトキシイミノ]-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボキシレート (4a) (0.590 g, 1.43 mmol) を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー(DCM/プロパン2-オール : 80/20 〜0/100) の精製後、(2S, 5S)-6-アリルオキシ-4-[2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ) エトキシイミノ]-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボン酸(4b) を、(2S, 5S)-5-[アリルオキシ(メトキシカルボニル)アミノ]-4-[2-( tert-ブトキシカルボニルアミノ)エトキシイミノ]ピペリジン-2-カルボン酸 (0.393 g)との混合物として得た。前記組成物はこれ以上の精製をせずに次工程へ使用した。MS m/z ([M+H-Boc]+)/([M+H]+) 299/399.
【０１１０】
工程3：中間体tert-ブチルN- [2 - [（2S、5S）-6-アリルオキシ-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-4-イリデン]アミノ ]オキシエチル]カルバメート（4c）の合成
実施例2（工程2）に記載の手順を使用して、 (2S, 5S)-6-アリルオキシ-4-[2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ) エトキシイミノ]-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-カルボン酸(4b) (0.300 g, 0.753 mmol) 混合物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー （DCM /プロパン-2-オール：100 / 0~0 / 100）を経てN-[2-[[(2S,5S)-6-アリルオキシ-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-4-イリデン]アミノ]オキシエチル]カルバメート (4c) (0.202 g, 2.14 mmol, 2工程通算収率35%) Z/E 50/50 混合物へ変換した。MS m/z ([M+H-Boc]+)/([M+H]+) 298/398.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.41 (2s, 9H), 2.60-2.80 (m, 0.5H), 2.93 (t, J = 12.0 Hz, 0.5H), 3.17-3.51 (m, 3H), 3.71 (d, J = 19.0 Hz, 0.5H), 4.05 - 4.22 (m, 3H), 4.39 - 4.53 (m, 1.5H), 4.74 - 5.01 (m, 1H), 5.08 (d, J = 3.6 Hz, 0.5H), 5.27 - 5.44 (m, 2H), 5.64 (bs, 3H), 5.86-6.08 (m, 1.5H), 6.70 (d, J = 20.8 Hz, 1H)
【０１１１】
工程4：ナトリウム[（2S、5S）-4- [2-（tert-ブトキシカルボニルアミノ）エトキシイミノ] -2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（4d）の合成
実施例3（工程4）に記載の手順を使用して、中間体N-[2-[[(2S,5S)-6-アリルオキシ-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-4-イルジエン]アミノ]オキシエチル] カルバメート (4c)(0.237 g, 0.596 mmol)から、シリカゲルカラムクロマト(DCM/アセトン/プロパン-2-オール : 勾配 100/0/0 〜 0/100/0 〜 0/0/100).を経て、135 mgのトリフェニル-(プロペニル)-ホスホニウム [(2S, 5S)-4-[2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)エトキシイミノ]-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ [3.2.1]オクタン-6-イル] スルフェート を得た。油状物を最小量の水に溶解し、Dowexナトリウム型カラム（Dowex（登録商標）50WX8水素形態、2N NaOHの水溶液で貯蔵、水で中性pHになるまで洗浄した）に適用した。所望の化合物を含む画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥して、ナトリウム[（2S、5S）-4- [2-（tert-ブトキシカルボニルアミノ）エトキシイミノ] -2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2 .1]オクタン-6-イル]スルフェート（4d）（75mg、0.163mmol、比Z / E：40/60,27％）を白色固体として得た。MS m/z ([M-H]-) 436.  1H NMR (400 MHz, D2O): δ (ppm) : 1.42 (s, 9H), 2.81-2.97 (m, 1H), 3.08 (dd, J = 17.3, 5.0 Hz, 0.5H), 3.27 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.30-3.47 (m, 2.5H), 3.69 (ddd, J = 37.9/12.7/3.6 Hz, 1H), 4.07-4.20 (m, 2H), 4.29-4.36 (m, 1H), 4.57 (d, J = 3.4 Hz, 0.6H), 5.42 (d, J = 3.3 Hz, 0.4H)
【０１１２】
工程5：ナトリウムおよび2,2,2-トリフルオロアセテート[（2S、5S）-4-（2-アンモニウムメトキシイミノ）-2-カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6 - イル]スルフェート（実施例4）の合成
0℃のTFA（2mL、26.13mmol）無水DCM（2mL）溶液に、[（2S、5S）-4- [2-（tert-ブトキシカルボニルアミノ）エトキシイミノ] -2- カルバモイル-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（4d）（75mg、0.163mmol）の無水DCM（1mL）懸濁液を加えた。 混合物を0℃で20分撹拌し、濃縮した。 残留油状物を水（3mL）で希釈し、凍結し、凍結乾燥して、ナトリウムおよび2,2,2-トリフルオロアセテート[（2S、5S）-4-（2-アンモニウム - エトキシイミノ）-2-カルバモイル-7-オキソ -1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（実施例4）（56.3mg、0.118mmol、比Z / E：40 / 60,72％）を黄色固体として得た。MS m/z ([M+H]+) 338.  MS m/z ([M-H]-) 336.  1H NMR (300 MHz, D2O): δ (ppm) 2.80-3.01 (m, 1H), 3.03-3.56 (m, 4H), 3.59-3.91 (m, 1H), 4.23-4.45 (m, 3H), 4.59 (d, J = 3.4 Hz, 0.6H), 5.45 (d, J = 3.2 Hz, 0.4H)
【０１１３】
実施例5：ナトリウムおよび2,2,2-トリフルオロアセテート[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2-（アザニウムイルメチル）-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェートの合成
【化１５】
2018510190.tif 000017
【０１１４】
工程1：中間体tert-ブチル（1S、3S、6R）-3-（ヒドロキシメチル）-7-オキサ-4-アザビシクロ[4.1.0]ヘプタン-4-カルボキシレート（5a）の合成
4-tert-ブチルエステル3-メチルエステル（1R、4S、6S）-7-オキサ-3-アザ - ビシクロ[4.1.0]ヘプタン-3,4-ジカルボキシラート（1a）（5.40g、 21.01ミリモル）の無水THF（105mL）溶液に、THF中のLiAlH4 2M溶液（10.5mL、21.01ミリモル）を、不活性条件下、−７８℃以下で添加した。 反応物を-78℃〜-20℃の間で3時間攪拌した。 Na2SO4・10H2Oを加えて反応を停止させた。 混合物を20℃に加温し、30分間撹拌し、次いでセライトで濾過した。 濾液を減圧下で濃縮し、tert-ブチル（1S、3S、6R）-3-（ヒドロキシメチル）-7-オキサ-4-アザビシクロ[4.1.0]ヘプタン-4-カルボキシラート（5a）（3.76g、16.39 mmol、78％）を無色油状物として得、これを精製することなく次の工程に使用した。
MS m/z ([M+H-Boc]+) 130.
【０１１５】
工程2：中間体tert-ブチル（1S、3S、6R）-3 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] -7-オキサ-4-アザビシクロ[4.1.0]ヘプタン-4-カルボキシレート（ 5b）の合成
tert-ブチル（1S、3S、6R）-3-（ヒドロキシメチル）-7-オキサ-4-アザビシクロ[4.1.0]ヘプタン-4-カルボキシレート（5a）（3.90g、17.03mmol）の無水 DCM（170mL）溶液に、不活性雰囲気下、室温でイミダゾール（2.90g、42.57mmol）、続いてTBDMSCl（3.85g、25.55mmol）を添加した。 混合物を20℃で2時間撹拌し、次いで溶液を飽和NaHCO 3水溶液で反応停止させ、DCMで抽出した。 有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。 生成物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc：勾配90/10から50/50）により精製して、tert-ブチル（1S、3S、6R）-3 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル ] -7-オキサ-4-アザビシクロ[4.1.0]ヘプタン-4-カルボキシレート（5b）（3.79g、11.03mmol、64％）を無色油状物として得た。
MS m/z ([M+H-Boc]+) 244.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm): 0.04 and 0.05 (s, 6H), 0.88 (s, 9H), 1.45 (s, 9H), 2.01 (ddd, J = 15.5/7.1/1.7 Hz, 1H), 2.25 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 3.22-3.31 (m, 2H), 3.40-3.58 (m, 1H), 3.61 (dd, J = 9.7/7.7 Hz, 1H), 3.71 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 3.95-4.30 (m, 2H)
【０１１６】
工程3：中間体tert-ブチル（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-2 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] -4-ヒドロキシ - ピペリジン-1-カルボキシレート（5c）の合成
tert-ブチル（1S、3S、6R）-3 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] -7-オキサ-4-アザビシクロ[4.1.0]ヘプタン-4-カルボキシレート（5b） （4.35g、12.69mmol）の無水MeOH（25.4mL）溶液に、不活性条件下、O-アリルヒドロキシルアミン（5.45g、63.45mmol）を加えた。 反応器を密閉し、反応物を80℃で3日間撹拌した。 MeOHを蒸発させ、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc：勾配90/10〜0/100）で精製して、tert-ブチル（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-2- [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] -4-ヒドロキシ - ピペリジン-1-カルボキシレート（5c）（3.47g、8.32mmol、65％）を無色油状物として、および出発物質（5b）（1.05g、3.06mmol ）を得た。
MS m/z ([M+H]+) 417.  1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.09 (s, 6H), 0.91 (s, 9H), 1.46 (s, 9H), 1.76 (dt, J = 14.6/4.1 Hz, 1H), 2.17 (ddd, J = 14.6/8.0/4.0 Hz, 1H), 3.11 (s, 1H), 3.36 (dd, J = 14.3/3.4 Hz, 1H), 3.60 (dd, J = 10.5/2.6 Hz, 1H), 3.70-3.83 (m, 1H), 3.90-4.06 (m, 2H), 4.06-4.21 (m, 3H), 4.31 (s, 1H), 5.12-5.30 (m, 2H), 5.50 (s, 1H), 5.82-6.02 (m, 1H)
【０１１７】
工程４：中間体tert-ブチル（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-2 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] ピペリジン-1-カルボキシレート（5d）の合成
tert-ブチル（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-2 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] -4-ヒドロキシ - ピペリジン-1-カルボキシレート（5c）（2.63 g, 6.32 mmol) の無水DCM（25mL）溶液に、0℃の不活性雰囲気下、2,6-ルチジン（0.883mL、7.58mmol）、続いてTBDMSOTf（1.52mL、6.64mmol）を添加した。 混合物を20℃で2時間撹拌し、次いで溶液をDCMで抽出し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。 有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。 生成物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc：勾配99/1〜90/10）により精製して、tert-ブチル（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-4- [tert-ブチル ジメチル）シリル]オキシ-2 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル]ピペリジン-1-カルボキシレート（5d）（2.92g、5.50mmol、87％）を無色油状物として得た。
MS m/z ([M+H]+) 531.  1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.01 and 0.02 (s, 6H), 0.06 (s, 6H), 0.87 (s, 9H), 0.89 (s, 9H), 1.43 (s, 9H), 1.59-1.71 (m, 1H), 1.78-1.89 (ddd, J = 14.3/6.7/3.4 Hz 1H), 2.89-2.98 (m, 1H), 3.24 (dd, J = 14.2/3.1 Hz, 1H), 3.69 (dd, J = 10.2/6.4 Hz, 1H), 3.83-4.04 (m, 3H), 4.07-4.24 (m, 2H), 5.13-5.20 (m, 1H), 5.21-5.30 (m, 1H), 5.52 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.91 (ddt, J = 17.3/10.3/5.9 Hz, 1H).
【０１１８】
工程5：中間体（3S、4S、6S）-N-アリルオキシ-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-6 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル]ピペリジン-3-アミン （5e）の合成
tert-ブチル（2S、4S、5S）-5-（アリルオキシアミノ）-4- [tert-ブチル ジメチル）シリル]オキシ-2 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル]ピペリジン-1-カルボキシレート（5d）（2.92g、5.51mmol）無水DCM（110mL）中の溶液に、 不活性雰囲気下、室温で、TMSI（1.24mL、8.26mmol）をゆっくり加えた。反応混合物を室温で2時間30分間撹拌した。 次いで、混合物を0℃でMeOH（10mL）でクエンチした。混合物をNa2SO4 15％（200mL）でクエンチし、DCM（3×50mL）で抽出した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、蒸発させ、得られた残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc：90/10〜0/100）により精製して（3S、4S、6S）-N-アリルオキシ - 4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-6 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル]ピペリジン-3-アミン（5e）（1.88g、4.36mmol、79％）を黄色固体として得た。MS m/z ([M+H]+) 431.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.08 and 0.11 (s, 6H), 0.15 (s, 6H), 0.89 (s, 9H), 0.92 (s, 9H), 1.84 (q, J = 12.1 Hz, 1H), 1.98-2.08 (m, 1H), 3.00 (t, J = 11.9 Hz, 1H), 3.10-3.20 (m, 1H), 3.28-3.40 (m, 1H), 3.77 (dd, J = 12.5/4.1 Hz, 1H), 3.84-4.05 (m, 3H), 4.09-4.17 (m, 2H), 5.16-5.23 (m, 1H), 5.23-5.32 (m, 1H), 5.87 (ddt, J = 17.3/10.3/5.9 Hz, 1H), 6.11 (bs, 1H)
【０１１９】
工程6：中間体（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-2 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-7-オン（5f）の合成
（3S、4S、6S）-N-アリルオキシ-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-6 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル]ピペリジン-3-アミン（5e（1.88g、4.37mmol）およびTEA（2.43mL、17.48mmol）を無水ACN（360mL）中に溶解した溶液に、0℃でジホスゲン（0.290mL、2.40mmol）のアセトニトリル溶液（6mL、流速= 0.15mL/分）で加えた。 添加が完了したら、反応物を室温で1時間撹拌した。 混合物を水（500mL）で洗浄し、EtOAc（3×200mL）で抽出し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮した。 粗残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc：勾配100/0から0/100）により精製して、中間体（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル ]オキシ-2 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] -1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-7-オン（5f）（1.22g、2.67mmol、61％）を茶色油状物として得た。MS m/z ([M+H]+) 457.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.02-0.12 (m, 12H), 0.88 and 0.89 (s, 18H), 1.73 (dt, J = 15.4/3.7 Hz, 1H), 2.06 (ddd, J = 15.4/7.6/5.4 Hz, 1H), 2.91 (dd, J = 11.6/3.3 Hz, 1H), 3.30-3.52 (m, 3H), 3.83 (dd, J = 6.5/1.9 Hz, 2H), 4.19-4.28 (m, 1H), 4.35-4.53 (m, 2H), 5.27-5.41 (m, 2H), 5.94-6.09 (m, 1H).
【０１２０】
工程7：中間体（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-2-（ヒドロキシメチル）-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-7-オン（5g）の合成
（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4- [tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシ-2 - [[tert-ブチル（ジメチル）シリル]オキシメチル] -1,6-ジアザビシクロ[ 3.2.1]オクタン-7-オン(5f)（1.22g、2.67mmol）の無水ACN（27mL）溶液に、不活性条件下、TEA・3HF（0.436mL、2.67mmol）を滴下した。 反応混合物を70℃で6時間撹拌した。 混合物を真空下で濃縮した。 粗生成物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（DCM /プロパン-2-オール：勾配100/0〜0/100）により精製して、（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-2-（ヒドロキシメチル ）-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-7-オン（5g）（0.505g、2.21mmol、82％）を無色油状物として得た。MS m/z ([M+H]+) 229.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.60 (dt, J = 15.9/2.3 Hz, 1H), 2.27 (ddd, J = 15.8/8.3/2.3 Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 12.3/3.7 Hz, 1H), 3.39-3.50 (m, 1H), 3.62-3.70 (m, 2H), 3.76-3.92 (m, 3H), 4.16-4.26 (m, 2H), 4.35-4.50 (m, 2H), 5.27-5.41 (m, 2H), 5.92-6.07 (m, 1H)
【０１２１】
工程8：中間体[（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチルメタンスルホネート（5h）の合成
（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-2-（ヒドロキシメチル）-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-7-オン（5g）（0.505g、2.21mmol） のDCM（22mL）溶液を0℃に冷却した。 ピリジン（0.21mL、2.65mmol）およびMsCl（0.28mL、2.32mmol）を加え、反応混合物を同温度で18時間撹拌した。 真空中で濃縮した後、粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（DCM / MeOH：100/0〜90/10）により精製して、中間体[（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7 - オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチルメタンスルホネート（5h）（0.72g、2.21mmol定量収率）を黄色油状物として得た。MS m/z ([M+H]+) 307.  1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.62 (dt, J = 16/2.9 Hz, 1H), 2.25 (ddd, J = 15.9/8.0/5.2 Hz, 1H), 2.97 (dd, J = 12.3, 3.5 Hz, 1H), 3.11 (s, 3H), 3.50 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.61-3.74 (m, 2H), 4.30-4.52 (m, 5H), 4.59 (dd, J = 11.1/8.3 Hz, 1H), 5.28-5.43 (m, 2H), 5.93-6.08 (m, 1H).
【０１２２】
工程9：中間体tert-ブチルN - [[（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチル ]カルバメート（5i）の合成
中間体[（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチルメタンスルホネート（5h）（0.596g、1.95mmol ）をDMF（7.8mL）に溶解し、NaN3（0.63g、9.74mmol）を加えた。反応混合物を75℃で一晩加熱した後、減圧濃縮した。反応混合物を水でクエンチし、EtOAcで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。粗生成物をTHFおよびトルエンの混合物（5mL / 5mL）に溶解し、0℃でPMe3（1M THF中）（2.92mL、2.92mmol）を加えた。室温で30分間撹拌後、混合物を0℃に冷却し、BocON（0.72g、2.92mmol）のTHF（5mL）溶液を滴下した。混合物を室温で1時間30分撹拌し、減圧濃縮した。粗製物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc：100 / 0~0 / 100）により精製して、tert-ブチルN - [[（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7- -2-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチル]カルバメート（5i）（324mg、0.99mmol、50％）を無色油状物として得た。MS m/z ([M+H]+) 328.  1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm) 1.43 (s, 9H), 1.57 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 2.13-2.25 (m, 1H), 2.87 (dd, J = 12.1/3.6 Hz, 1H), 3.27-3.44 (m, 2H), 3.53-3.69 (m, 2H), 3.72 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 4.32 (bs, 1H), 4.36-4.53 (m, 2H), 5.10 (bs, 1H), 5.27-5.42 (m, 2H), 5.94-6.09 (m, 1H).
【０１２３】
工程10：中間体tert-ブチルN - [[（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチル]カルバメート（5j ）の合成
中間体tert-ブチルN - [[（2S、4S、5S）-6-アリルオキシ-4-ヒドロキシ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチル] カルバメート（5i）（0.350g、1.07mmol）の無水DCM（21mL）溶液に、不活性条件下、0℃で、Dess-Martinペルヨージナン試薬（0.680g、1.60mmol）を加えた。 反応物を室温で2時間30分間撹拌し、次いで混合物を飽和NaHCO 3水溶液、15％Na2S2O3溶液、水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。 残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（シクロヘキサン/ EtOAc：100 / 0~0 / 100）により精製して、中間体tert-ブチルN - [[（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1 、6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチル]カルバメート（5j）（0.300g、0.92mmol、74％）を無色油状物として得た。MS m/z ([M+H]+) 326.   1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.41 (s, 9H), 2.26-2.37 (m, 1H), 2.90 (dd, J = 17.9/9.4 Hz, 1H), 3.19-3.41 (m, 3H), 3.41-3.51 (m, 1H), 3.84-3.99 (m, 2H), 4.34-4.49 (m, 2H), 4.89-4.97 (m, 1H), 5.26-5.40 (m, 2H), 5.97 (ddt, J = 16.9/10.3/6.5 Hz, 1H).
【０１２４】
工程11：中間体tert-ブチルN - [[（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] 1]オクタン-2-イル]メチル]カルバメート（5k）の合成
tert-ブチルN - [[（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチル]カルバメート（5j）(0.107 g, 0.33 mmol)の無水MeOH (3.3 mL)溶液に、不活性条件下、ピリジン（56μL、0.69mmol）および2-（アミノオキシ）アセトアミド・HCl（0.041g、0.33mmol）を続けて添加した。 反応混合物を室温で30分間撹拌し、次いで真空下で濃縮した。 残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（DCM / MeOH：100 / 0~95 / 5）により精製して、中間体tert-ブチルN - [[（2S、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ - イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチル]カルバメート（5k）（0.101g、0.25mmol、比Z / E：60/40、 82％）を得た。MS m/z ([M+H]+) 398.1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.39 (bs, 9H), 2.24-2.35 (m, 0.6H), 2.54-2.66 (m, 0.4H), 2.69-2.88 (m, 1H), 3.06-3.21 (m, 2H), 3.22-3.51 (m, 2H), 3.54-3.73 (m, 1H), 4.10-4.16 (m, 0.4H), 4.33 - 4.59 (m, 4H), 4.96-5.20 (m, 1.6H), 5.25-5.41 (m, 2H), 5.88-6.11 (m, 2H), 6.43 (s, 0.6H), 6.68 (s, 0.4H)
【０１２５】
工程12：中間体ナトリウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2 - [（tert-ブトキシカルボニルアミノ）メチル] -7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[ 3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（5l）の合成
中間体tert-ブチルN - [[（2S、4Z、5S）-6-アリルオキシ-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1] オクタン-2-イル]メチルカルバメート（5k）（0.101g、0.254mmol）および氷酢酸（29μL、0.509mmol）の無水DCM (2.5 mL)溶液に、Pd（Ph 3）4 （0.147g、0.127mmol）を一度に加えた。室温で1時間撹拌した後、乾燥ピリジン（2.5mL）および三酸化硫黄ピリジン錯体（0.202g、1.27mmol）を混合物に加え、得られた溶液を光から保護し、硫酸化が完了するまで室温で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、DCMで希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（DCM /アセトン100/0から0/100）で精製して、トリフェニル - （プロペニル） - ホスホニウム[（2S、5S）-4-（ （2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2 - [（tert-ブトキシカルボニルアミノ）メチル] -7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート(5l) (0.016 g, 0.036 mmol, Z/E比: 60/40, 2工程通算収率14%) を白色固体として得た。
油状物を最小量の水に溶解し、Dowexナトリウム型カラム（Dowex（登録商標）50WX8水素形態、2N NaOHの水溶液で貯蔵、水で中性pHになるまで洗浄した）に適用した。所望の化合物を含む画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥してナトリウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2 - [（tert-ブトキシカルボニルアミノ）メチル] -7‐オキソ‐1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（5I）（0.016g、0.036mmol、比Z / E：60/40,２工程通算収率14％）を白色固体として得た。MS m/z ([M-H]-) 436.1H NMR (400 MHz, D2O): δ (ppm) 1.43 (s, 9H), 2.49 (dd, J = 17.3/5.5 Hz, 0.6H), 2.70-3.01 (m, 1H), 3.13- 3.59 (m, 4.4H), 3.68-3.75 (m, 1H), 4.49-4.65 (m, 2.4H), 5.46 (d, J = 2.9 Hz, 0.6H)
【０１２６】
工程13：2,2,2-トリフルオロアセテートおよびナトリウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2-（アザニウムイルメチル）-7-オキソ-1,6- ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（実施例5）
[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2 - [（tert-ブトキシカルボニルアミノ）メチル] -7-オキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2。 1]オクタン-6-イル]サルフェート（5I）（0.0167g、0.036mmol）の無水DCM（1mL）溶液に0℃でTFA（0.4mL）の無水DCM（0.5mL）溶液を加えた。 混合物を0℃に30分撹拌し、濃縮する。 得られた油状物を水（3mL）で希釈し、凍結し、凍結乾燥して、2,2,2-トリフルオロアセテートおよびナトリウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2-（アザニウムイルメチル）-7-オキソ-1,6- ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]（実施例5）（0.0164g、0.034mmol、比Z / E：40 / 60,95％ を黄色固体として得た。MS m/z ([M-H]-) 336.1H NMR (400 MHz, D2O): δ (ppm) 2.56 (dd, J = 17.4/7.5 Hz, 0.6H), 2.67 (dd, J = 19.7/4.2 Hz, 0.4H), 2.89 (dd, J = 17.4/8.0 Hz, 0.6H), 3.15-3.39 (m, 2.4H), 3.46 (dd, J = 12.8/2.7 Hz, 1H), 3.58 (dd, J = 12.9/3.1 Hz, 0.6H), 3.65 (dd, J = 12.7/3.5 Hz, 0.4H), 3.86-3.97 (m, 1H), 4.56-4.64 (m, 2.4H), 5.44 (d, J = 2.9 Hz, 0.6H)
【０１２７】
実施例6：2,2,2-トリフルオロアセテートおよびナトリウム[（2S、5S）-4-（2-アミノ-2-オキソ - エトキシ）イミノ-2-（アザニウミルメチル）-7-オキソ-1,6-ジヒドロ - ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェートの合成
【化１６】
2018510190.tif 000018
【０１２８】
工程1：中間体ナトリウム[（2S、5S）-2 - [（tert-ブトキシカルボニルアミノ）メチル] -4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（6a ）の合成
化合物tert-ブチルN - [[（2S、5S）-6-アリルオキシ-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-2-イル]メチル]カルバメート（5j）(0.080 g, 0.246 mmol)  および氷酢酸（28μL、0.492mmol）の無水DCM（2.5mL）溶液に、Pd（Ph 3）4（0.142g、0.12mmol）を一度に加えた。室温で2時間撹拌した後、乾燥ピリジン（2.5mL）および三酸化硫黄ピリジン錯体（0.196g、1.23mmol）を混合物に添加し、得られた溶液を光から保護し、硫酸化が完了するまで室温で一晩攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、DCMで希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲル（DCM /アセトン100/0〜0/100）で精製して、トリフェニル - （プロペニル） - ホスホニウム[（2S、5S）-2 - [（tert-ブトキシカルボニル）メチル] -4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェートを14.8 mgの黄色油状物として得た。この油状物を最小量の水に溶解し、Dowexナトリウム型カラム（Dowex（登録商標）50WX8水素形態、2N NaOHの水溶液で貯蔵、水で中性pHになるまで洗浄した）に適用した。所望の化合物を含む画分を合わせ、凍結し、凍結乾燥して、ナトリウム[（2S、5S）-2 - [（tert-ブトキシカルボニルアミノ）メチル] -4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（6a）（0.0095g、0.024mmol、2工程で10％）を橙色固体として得た。MS m/z ([M-H]-) 364.  1H NMR (400 MHz, D2O, under hydrate and ketone form): δ (ppm) 1.41 (s, 9H), 1.88 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 2.04 (dd, J =15.7/7.8 Hz, 0.6H), 2.52 (d, J = 18.6 Hz, 0.4H), 2.96 (dd, J = 18.6/9.2 Hz, 0.3H), 3.20-3.77 (m, 4.4H), 3.82-3.94 (m, 0.3H), 4.11 (d, J = 3.8 Hz, 0.7H), 4.35 (d, J = 3.5 Hz,0.3H)
【０１２９】
工程2：2,2,2-トリフルオロアセテートおよびナトリウム[（2S、5S）-2-（アザニルメチル）-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル]スルフェート（実施例6）の合成
実施例5（工程13）に記載の手順を用いて、ナトリウム[(2S,5S)-2-[(tert‐ブトキシカルボニルアミノ)メチル]-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル] スルフェート (6a) (0.0095 g, 0.245 mmol) を 2,2,2-トリフルオロアセテートおよびナトリウム [(2S,5S)-2-（アザニウミルメチル)-4,7-ジオキソ-1,6-ジアザビシクロ[3.2.1]オクタン-6-イル] スルフェート (実施例 6) (0.010 g, 0.024 mmol, 定量的収率) の橙色油状物に変換した。
MS m/z ([M-H]-) 264.1H NMR (400 MHz, D2O): δ (ppm) : 1.89 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 2.11-2.27 (m, 1H), 2.52-2.63 (m, 0.3H), 2.97-3.81 (m, 4.7H), 4.13 (d, J = 3.8 Hz, 0.7H), 4.35 (d, J = 3.5 Hz, 0.3H).1H NMR (400 MHz, DMSO): δ (ppm)  2.33-2.43 (m, 1H), 2.83 (dd, J = 18.5/9.5 Hz, 1H), 2.98-3.13 (m, 1H), 3.18-3.31 (m, 1H), 3.36-3.66 (m, 2H), 3.82-3.95 (m, 1H), 4.16 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 7.81-8.09 (m, 3H).19F NMR (300 MHz, DMSO): δ (ppm) : -73 (s, 3F)
【０１３０】
実施例7：生物学的活性
方法1：β-ラクタマーゼ阻害活性、IC50の測定（表1）
酵素活性は、485nm、室温およびアッセイ緩衝液A：100mMホスフェートpH7,2％グリセロールおよび0.1mg / mLウシ血清アルブミン（Sigma、B4287）中、ニトロセフィン（NCF-TOKU-E、N005）加水分解の分光光度測定により測定された。酵素を大腸菌発現ベクターにクローニングし、自社の従来法を用いて発現および精製した。透明ポリスチレンプレート（Corning、3628）の各ウェルに5μLのDMSOまたはDMSO中の阻害剤希釈物、および緩衝液A中の酵素80μLを添加した。プレートをマイクロプレート分光光度計（BioTek、PowerWave HT）において485nmで直ちに読み取り、バックグラウンド除去を可能にした。室温で30分間プレインキュベートした後、最終的に15μLのNCF（最終的に200μM）を各ウェルに添加した。最終酵素濃度は、0.1nM（TEM-1）、0.075nM（SHV-1）、0.4nM（CTX-M-15）、1nM（KPC-2）、0.2nM（P99 AmpC）、0.2nM（CMY-37）、0.4nM (AmpC 緑膿菌（P. aeruginosa）),0.2nM（OXA-1）、1.2nM（OXA-11）、0.4nM（OXA-15）および0.3nM（OXA-48）であった。室温で20分間インキュベートした後、プレートを再び485nmで読取った。酵素活性は、最終シグナルをバックグラウンドで差し引くことによって得られ、非阻害のウェルの値を用いて酵素阻害活性値へ変換された。IC50曲線は、XLFIT（IDBS）を用いて古典的ラングミュア平衡モデルへ、ヒル曲線（Hill slope）とともに適合させた。
【表１】
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【０１３１】
方法2：化合物のMICおよび細菌単離物に対するセフタジジム（ceftazidime）との相乗作用（表2および3）
本発明の化合物は、単独またはβ-ラクタムセフタジジム（CAZ）と組合せて遺伝子型細菌株に対して評価した。アッセイにおいて、前記化合物の固定濃度での前記化合物またはセフタジジムのMICは、臨床検査標準研究所（CLSI-M7-A7）に従ったブロス微量希釈法によって測定した。簡潔には、本発明による化合物単独をDMSO中で調製し、滅菌ポリスチレンプレート（Corning、3788）上にスポットした（各2μL）。化合物およびセフタジジム希釈液をDMSO中で調製し、滅菌ポリスチレンプレート（Corning、3788）上にスポットした（それぞれ1μL）。対数期バクテリア懸濁液をカチオン調整ミューラーヒントンブロス（Becton-Dickinson）中で5×105 cfu / mLの最終密度に調整し、各ウェル（98μL）に添加した。マイクロプレートを周囲空気中、35℃で16〜20時間インキュベートした。化合物のMICは、目視検査によって読み取った細菌増殖を妨げた前記化合物の最低濃度として定義した。各化合物濃度でのセフタジジムのMICは、目視検査によって読取った細菌増殖を阻止するセフタジジムの最低濃度として定義した。
【表２】
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【表３】
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【表４】
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【国際調査報告】
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