(57)【要約】  免疫抑制を伴うことなく宿主の防御および感染の消散をもたらす内因性機構は幅広く重要である１，２。本発明者らは、好中球−内皮系の共培養物において産生され、非感染性炎症または感染後のヒトおよびマウスの組織に存在する４種類の新しい宿主防御性分子の構造を解明した。これらの生物活性分子は、それぞれ１３位の炭素位置にアルコールを担持している共役型のトリエン二重結合およびジエン二重結合を含むものであり、ｎ−３ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ，Ｃ２２：５）に由来するものであった。これらの化合物（１３−シリーズのレゾルビン（ＲｖＴ）と称する）は、大腸菌感染の際のマウスの生存率を高める強力な防御作用を示した。また、ＲｖＴは、細菌食作用を刺激し、インフラマソーム成分を調節するヒトおよびマウスの食細胞の応答を調節した。好中球−内皮細胞の相互作用時の該化合物の生合成は、内皮系内のシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）によって開始され、アトルバスタチンによるＣＯＸ−２のＳ−ニトロシル化によって増大した。アトルバスタチンとＲｖＴの作用はマウスの大腸菌感染において相加的であり、この場合、これらによって炎症の消散が加速し、生存率が＞６０％に高まった。このような結果は、細菌感染における新規な宿主防御性分子、すなわち、１３−シリーズのレゾルビン細胞間生合成によってｎ−３  ＤＰＡから誘導され、アトルバスタチンによって増加することを証明するものである。これらの新規な分子は、感染の消散性炎症においてカギとなる自然防御応答を調節するものである。
2018525359.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2018525359.tif 000063
【化２】
2018525359.tif 000064
【化３】
2018525359.tif 000065
（式中、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３の各々は、存在している場合、個々に保護基または水素原子であり；
【化４】
2018525359.tif 000066
は、存在している場合、二重結合を表し、各二重結合は独立してＺ配置またはＥ配置のいずれかであり；
７位と１３位または８、１２もしくは２０位の炭素は、存在している場合、独立してＲ配置またはＳ配置であり；
Ｚは−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲｃＲｃまたは−ＣＮであり；
各Ｒａは独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、シクロヘキシル、（Ｃ４〜Ｃ１１）シクロアルキルアルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、フェニル、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、ベンジル、２〜６員のヘテロアルキル、３〜８員のシクロヘテロアルキル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピペリジニル、４〜１１員のシクロヘテロアルキルアルキル、５〜１０員のヘテロアリールまたは６〜１６員のヘテロアリールアルキルから選択され；
各Ｒｃは独立して保護基またはＲａであるか、あるいはまた、各Ｒｃは、これが結合している窒素原子と一体となって、５〜８員のシクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールを形成しており、該シクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールは、任意選択で１個以上の同じかまたは異なるさらなるヘテロ原子を含むものであってもよく、任意選択で１つ以上の同じかまたは異なるＲａ基または適当なＲｂ基で置換されていてもよく；
各Ｒｂは独立して、＝Ｏ、−ＯＲｄ、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロアルキルオキシ、−ＯＣＦ３、＝Ｓ、−ＳＲｄ、＝ＮＲｄ、＝ＮＯＲｄ、−ＮＲｃＲｃ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、−Ｓ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−ＯＳ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＯＨ）Ｒａ、−Ｃ（ＮＯＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（ＮＨ）］ｎＮＲｃＲｃまたは−［ＮＲａＣ（ＮＲａ）］ｎＮＲｃＲｃから選択され；
各ｎは、独立して０〜３の整数であり；
各Ｒｄは独立して保護基またはＲａである）
で示される化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２】
Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３（存在している場合）がすべて水素原子である場合、水素ではない、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である、請求項１または２に記載の化合物の精製された化合物。
【請求項４】
カルボン酸の薬学的に許容され得る塩である、請求項１、２または３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
さらに、組成物を得るための担体を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
インフラマソームの活性化、糖尿病、鼻咽頭炎、関節痛、下痢、四肢痛、細菌感染、消化不良、悪心、筋骨格系疼痛、筋痙攣、筋肉痛、不眠症、咽喉頭痛、炎症、組織の変性、動脈の炎症、関節炎、乾癬、蕁麻疹、血管炎、喘息、眼の炎症、肺の炎症、肺線維症、脂漏性皮膚炎、膿疱性皮膚病、心血管疾患、好中球、白血球および／またはサイトカインの動員、アレルギー、アルツハイマー病、喘息、アテローム性動脈硬化、がん、心血管疾患、糖尿病、泌尿生殖器科系の障害、高血圧、感染性疾患、神経筋障害、腎障害、経口感染または歯周病を処置または予防する方法であって、有効量の１種類以上の請求項１〜５のいずれかに記載の化合物を、それを必要とする対象に投与する工程を含み、それにより該疾患または病状が処置または予防されるようにする方法。
【請求項７】
インフラマソームの活性化、糖尿病、鼻咽頭炎、関節痛、下痢、四肢痛、細菌感染、消化不良、悪心、筋骨格系疼痛、筋痙攣、筋肉痛、不眠症、咽喉頭痛、炎症、動脈の炎症、関節炎、乾癬、蕁麻疹、血管炎、喘息、眼の炎症、肺の炎症、肺線維症、脂漏性皮膚炎、膿疱性皮膚病、心血管疾患、好中球、白血球および／またはサイトカインの動員、アレルギー、アルツハイマー病、喘息、アテローム性動脈硬化、がん、心血管疾患、糖尿病、泌尿生殖器科系の障害、高血圧、感染性疾患、神経筋障害、腎障害、経口感染または歯周病のうちの１つ以上を処置または予防するための方法であって、式：
【化５】
2018525359.tif 000067
【化６】
2018525359.tif 000068
【化７】
2018525359.tif 000069
（式中、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３の各々は、存在している場合、個々に保護基または水素原子であり；
【化８】
2018525359.tif 000070
は、存在している場合、二重結合を表し；各二重結合は独立してＺ配置またはＥ配置であり；
Ｚは−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲｃＲｃまたは−ＣＮであり；
各Ｒａは独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、シクロヘキシル、（Ｃ４〜Ｃ１１）シクロアルキルアルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、フェニル、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、ベンジル、２〜６員のヘテロアルキル、３〜８員のシクロヘテロアルキル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピペリジニル、４〜１１員のシクロヘテロアルキルアルキル、５〜１０員のヘテロアリールまたは６〜１６員のヘテロアリールアルキルから選択され；
各Ｒｃは独立して保護基またはＲａであるか、あるいはまた、各Ｒｃは、これが結合している窒素原子と一体となって、５〜８員のシクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールを形成しており、該シクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールは、任意選択で１個以上の同じかまたは異なるさらなるヘテロ原子を含むものであってもよく、任意選択で１つ以上の同じかまたは異なるＲａ基または適当なＲｂ基で置換されていてもよく；
各Ｒｂは独立して、＝Ｏ、−ＯＲｄ、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロアルキルオキシ、−ＯＣＦ３、＝Ｓ、−ＳＲｄ、＝ＮＲｄ、＝ＮＯＲｄ、−ＮＲｃＲｃ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、−Ｓ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−ＯＳ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＯＨ）Ｒａ、−Ｃ（ＮＯＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（ＮＨ）］ｎＮＲｃＲｃまたは−［ＮＲａＣ（ＮＲａ）］ｎＮＲｃＲｃから選択され；
各ｎは、独立して０〜３の整数であり；
各Ｒｄは独立して保護基またはＲａである）
を有する有効量の１種類以上の化合物またはその薬学的に許容され得る塩（ただし、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が各々、水素原子である場合、水素ではないものとする）を、それを必要とする対象に投与する工程を含み、それにより該疾患または病状が処置または予防されるようにする方法。
【請求項８】
前記化合物が精製されており、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子である場合、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記化合物がカルボン酸の薬学的に許容され得る塩である、請求項７〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
さらに、組成物を得るための担体を含む、請求項７〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
細菌感染を処置または予防するための方法であって、それを必要とする対象に請求項１〜１０に記載の化合物とスタチン化合物を投与することを含む方法。
【請求項１２】
スタチン療法を増強するための方法であって、それを必要とする対象に、スタチン療法を必要とする対象に対してスタチン化合物に加えて治療有効量の請求項１〜１１に記載の化合物を与えることを含む方法。
【請求項１３】
対象に治療量の請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、細菌感染に苦しんでいる対象の生存割合を高めるための方法。
【請求項１４】
食作用、エフェロサイトーシス、創傷治癒および組織再生の促進を、それを必要とする対象において行なうための方法であって、それを必要とする患者に治療有効量の請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１５】
白血球の刺激を必要とする対象に治療量の請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、白血球における活性酸素種の生成の刺激方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年７月２０日に出願された米国特許仮出願第６２／１９４，４８５号の優先権の恩典を主張するものであり、この仮出願は引用によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究の記載
本発明は、米国立衛生研究所によって付与された助成金番号Ｐ０１ＧＭ０９５４６７での政府の補助を伴ってなされた。米国政府は、本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
本発明により、感染に対して強力な防御作用を示し、炎症の消散において活性な、ｎ−３ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ，Ｃ２２：５）由来の新しい生物活性化合物を提供する。
【背景技術】
【０００４】
感染は、世界的に死因の第１位であり、細菌感染、例えば大腸菌によって引き起こされるものは、急を要する健康問題となっている１，２。細菌感染を処置するための広く行なわれているアプローチは、抗生物質の投与であるが、抗生物質耐性菌の増加に伴い、新しい処置ストラテジーの差し迫った必要性が存在している１，２。感染に応答して、宿主は、自己消散性である場合は防御的である炎症応答を起こす３〜５。本発明者らは以前に、強力な内在性の抗炎症性で消散促進性のメディエーター、すなわち、特殊な消散促進性メディエーター（ＳＰＭ）であることが知られているレゾルビン、プロテクチンおよびマレシンを特性評価した４。これらは、ｎ−３必須脂肪酸であるエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）から生合成される４。ＥＰＡからのＤＨＡ生合成の中間体であるドコサペンタエン酸（ｎ−３，ＤＰＡ）は、脂肪酸エロンガーゼ−２をコードしている遺伝子に単一ヌクレオチド多型を伴って個体に蓄積され６、また、３つの新しいＳＰＭファミリーの前駆体でもある７。
【０００５】
自己消散性の急性炎症の消散期では、ＳＰＭは局所的に生成され、白血球がアポトーシス細胞、残屑および細菌のクリアランスを刺激することに対して防御作用を発揮するとともに、組織再生を促進させる４，８。感染性炎症の初期に発生するシグナルが炎症応答の大きさと持続期間を決定し得る９。したがって、初期応答を微調整して消散を促進させるための、自己消散性感染の初期において生成され得る新規なメディエーターが一般的に重要である。
【０００６】
したがって、自己消散性感染の初期において生成されるメディエーターが同定され、かかるメディエーターが、その構造式と生物活性効果の両方において特性評価される必要性が存在している。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
免疫抑制を伴うことなく宿主の防御および感染の消散をもたらす内因性機構は幅広く重要である１，２。ここに、本発明者らは、好中球−内皮系の共培養物において産生され、非感染性炎症または感染後のヒトおよびマウスの組織に存在する４種類の新しい宿主防御性分子の構造を解明した。これらの生物活性分子は、それぞれ１３位の炭素位置にアルコールを担持している共役型のトリエン二重結合およびジエン二重結合を含むものであり、ｎ−３ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ，Ｃ２２：５）に由来するものであった。これらの化合物（１３−シリーズのレゾルビン（ＲｖＴ）と称する）は、大腸菌感染の際のマウスの生存率を高める強力な防御作用を示した。また、ＲｖＴは、細菌食作用を刺激し、インフラマソーム成分を調節するヒトおよびマウスの食細胞の応答を調節した。好中球−内皮細胞の相互作用時の該化合物の生合成は、内皮系内のシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）によって開始され、アトルバスタチンによるＣＯＸ−２のＳ−ニトロシル化によって増大した。アトルバスタチンとＲｖＴの作用はマウスの大腸菌感染において相加的であり、この場合、これらによって炎症の消散が加速し、生存率が＞６０％に高まった。このような結果は、細菌感染における新規な宿主防御性分子、すなわち、１３−シリーズのレゾルビン細胞間生合成によってｎ−３  ＤＰＡから誘導され、アトルバスタチンによって増加することを証明するものである。これらの新規な分子は、感染の消散性の−炎症においてカギとなる自然防御応答を調節するものである。
【０００８】
本発明により、驚くべきことに、すべてが２２個の炭素の鎖の７位および１３位の１つ以上にヒドロキシル基を有するものであるドコサペンタエン酸（ｉｓ）（ＤＰＡ）の新規なジヒドロキシおよびトリヒドロキシアナログの新規な化合物、組成物および使用方法が提供される。このような物質は生物起源的に誘導されるもの、および／または炎症滲出液から単離されるものである。
【０００９】
一実施形態では、本発明は、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（Ｉ）：
【化１】
2018525359.tif 000003
を含む化合物に関するものであり、
【００１０】
式中、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３の各々は個々に保護基または水素原子であり；
【００１１】
式中、
【化２】
2018525359.tif 000004
は二重結合であり；
【００１２】
式中、各二重結合
【化３】
2018525359.tif 000005
は独立してＺ配置またはＥ配置のいずれかであり；
【００１３】
式中、７、１３および２０の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置であり；
【００１４】
式中、Ｚは−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲｃＲｃまたは−ＣＮであり；
【００１５】
各Ｒａは独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、シクロヘキシル、（Ｃ４〜Ｃ１１）シクロアルキルアルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、フェニル、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、ベンジル、２〜６員のヘテロアルキル、３〜８員のシクロヘテロアルキル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピペリジニル、４〜１１員のシクロヘテロアルキルアルキル、５〜１０員のヘテロアリールまたは６〜１６員のヘテロアリールアルキルから選択され；
【００１６】
各Ｒｃは独立して保護基またはＲａであるか、あるいはまた、各Ｒｃは、これが結合している窒素原子と一体となって、５〜８員のシクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールを形成しており、該シクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールは、任意選択で１個以上の同じかまたは異なるさらなるヘテロ原子を含むものであってもよく、任意選択で１つ以上の同じかまたは異なるＲａ基または適当なＲｂ基で置換されていてもよく；
【００１７】
各Ｒｂは独立して、＝Ｏ、−ＯＲｄ、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロアルキルオキシ、−ＯＣＦ３、＝Ｓ、−ＳＲｄ、＝ＮＲｄ、＝ＮＯＲｄ、−ＮＲｃＲｃ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、−Ｓ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−ＯＳ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＯＨ）Ｒａ、−Ｃ（ＮＯＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（ＮＨ）］ｎＮＲｃＲｃまたは−［ＮＲａＣ（ＮＲａ）］ｎＮＲｃＲｃから選択され；
【００１８】
各ｎは、独立して０〜３の整数であり；
【００１９】
各Ｒｄは独立して保護基またはＲａである；
【００２０】
またはその薬学的に許容され得る塩、種々の態様において、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である場合、水素ではない。一態様では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である。別の態様では、８位の二重結合がＥである。さらに別の態様では、１０位の二重結合がＺである。また別の態様では、８位の二重結合がＥであり、１０位の位置の二重結合がＺである。
【００２１】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、８位の二重結合がＥである。
【００２２】
別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１０位の二重結合がＺである。
【００２３】
さらに別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、８位の二重結合がＥであり、１０位の二重結合がＺである。
【００２４】
さらにまた別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のすべてが水素原子であり、８位の二重結合がＥであり、１０位の二重結合がＺである。
【００２５】
ＤＰＡアナログ（Ｉ）の重要な具体的な異性体の１つは、式：
【化４】
2018525359.tif 000006
を構成する（Ｉａ）であり、
【００２６】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、Ｃ７、Ｃ１３およびＣ２０は独立してＲ配置またはＳ配置である。
【００２７】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（Ｉ）または（Ｉａ）：
【化５】
2018525359.tif 000007
を含む精製された化合物を提供し、
【００２８】
式中、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３、
【化６】
2018525359.tif 000008
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、１３および２０位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。一態様では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００２９】
一態様では、８位の二重結合がＥである。さらに別の態様では、１０位の二重結合がＺである。また別の態様では、８位の二重結合がＥであり、１０位の位置の二重結合がＺである。
【００３０】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、８位の二重結合がＥである。
【００３１】
別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１０位の二重結合がＺである。
【００３２】
さらに別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、８位の二重結合がＥであり、１０位の二重結合がＺである。
【００３３】
さらにまた別の実施形態では、各Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子であり、８位の二重結合がＥであり、１０位の二重結合がＺである。
【００３４】
上記のすべての実施形態において、特定の一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。他の実施形態では、化合物ＩおよびＩａが精製されている場合、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３は水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００３５】
化合物（Ｉ）および（Ｉａ）は、そのあらゆる薬学的に許容され得る塩、エステル、精製形態／単離形態、ならびに可能なヒドロキシル基のうちの一方または両方が本明細書に記載の保護基に変換されている化合物を包含していることを理解されたい。
【００３６】
別の態様において、本発明は、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＩ）：
【化７】
2018525359.tif 000009
を含む化合物に関するものであり、
【００３７】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、
【化８】
2018525359.tif 000010
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、８および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである、
またはその薬学的に許容され得る塩。一部の態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である場合、水素ではない
【００３８】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である。
【００３９】
一態様では、１１位の二重結合がＥである。別の態様では、１６位の二重結合がＺである。また別の態様では、１１位の二重結合がＥであり、１６位の二重結合がＺである。
【００４０】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１１位の二重結合がＥである。
【００４１】
別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺである。
【００４２】
さらに別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１１位の二重結合がＥであり、１６位の二重結合がＺである。
【００４３】
さらにまた別の実施形態では、各Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子であり、１４位の二重結合がＥであり、１６位の二重結合がＺである。
【００４４】
ＤＰＡアナログ（ＩＩ）の重要な具体的な異性体の１つは、式：
【化９】
2018525359.tif 000011
を構成する（ＩＩａ）であり、
【００４５】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、炭素７、８および１３は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。
【００４６】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＩ）または（ＩＩａ）：
【化１０】
2018525359.tif 000012
を含む精製された化合物を提供し、
【００４７】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、
【化１１】
2018525359.tif 000013
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりである。一態様では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００４８】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１１位の二重結合がＥである。
【００４９】
別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺである。
【００５０】
さらに別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１１位の二重結合がＥであり、１６位の二重結合がＺである。
【００５１】
さらにまた別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３の各々が水素原子であり、１１位の二重結合がＥであり、１６位の二重結合がＺである。
【００５２】
上記のすべての実施形態において、特定の一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００５３】
他の実施形態では、化合物ＩＩおよびＩＩａが精製されている場合、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３はともに水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００５４】
化合物（ＩＩ）および（ＩＩａ）は、そのあらゆる薬学的に許容され得る塩、エステル、精製形態／単離形態、ならびに可能なヒドロキシル基のうちの一方または両方が本明細書に記載の保護基に変換されている化合物を包含していることを理解されたい。
【００５５】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＩＩ）：
【化１２】
2018525359.tif 000014
を含む化合物を提供し、
【００５６】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、
【化１３】
2018525359.tif 000015
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、１２および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである、
またはその薬学的に許容され得る塩。種々の態様において、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である場合、水素ではない。
【００５７】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３がすべて水素原子である。
【００５８】
一態様では、１６位の二重結合がＺである。別の態様では、１９位の二重結合がＺである。さらに別の態様では、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００５９】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺである。
【００６０】
別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１９位の二重結合がＺである。
【００６１】
さらに別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００６２】
また別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３がともに水素原子であり、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００６３】
ＤＰＡアナログ（ＩＩＩ）の重要な具体的な異性体の１つは、式：
【化１４】
2018525359.tif 000016
を構成する（ＩＩＩａ）であり、
【００６４】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、１２および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。
【００６５】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＩＩ）または（ＩＩＩａ）：
【化１５】
2018525359.tif 000017
を含む精製された化合物を提供し、
【００６６】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、
【化１６】
2018525359.tif 000018
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、１２および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。一態様では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３がすべて水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３がすべて水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００６７】
一態様では、１６位の二重結合がＺである。別の態様では、１９位の二重結合がＺである。さらに別の態様では、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００６８】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺである。
【００６９】
別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１９位の二重結合がＺである。
【００７０】
さらに別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００７１】
また別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３が水素原子であり、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００７２】
上記のすべての実施形態において、特定の一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００７３】
他の実施形態では、化合物ＩＩＩおよびＩＩＩａが精製されている場合、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３は水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００７４】
化合物（ＩＩＩ）および（ＩＩＩａ）は、そのあらゆる薬学的に許容され得る塩、エステル、精製形態／単離形態、ならびに可能なヒドロキシル基のうちの一方または両方が本明細書に記載の保護基に変換されている化合物を包含していることを理解されたい。
【００７５】
また別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＶ）：
【化１７】
2018525359.tif 000019
を含む化合物を提供し、
【００７６】
式中、Ｐ１、Ｐ２、
【化１８】
2018525359.tif 000020
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、Ｃ７およびＣ１３は独立してＲまたはＳのいずれかである、
またはその薬学的に許容され得る塩。一部の態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１とＰ２がともに水素原子である場合、水素ではない。
【００７７】
一実施形態では、Ｐ１とＰ２がともに水素原子である。
【００７８】
一態様では、１６位の二重結合がＺである。別の態様では、１９位の二重結合がＺである。さらに別の態様では、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００７９】
一実施形態では、Ｐ１とＰ２のうち１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺである。
【００８０】
別の実施形態では、Ｐ１とＰ２のうち１つ以上が水素原子であり、１９位の二重結合がＺである。
【００８１】
さらに別の実施形態では、Ｐ１とＰ２のうち１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００８２】
また別の実施形態では、Ｐ１とＰ２の両方が水素原子であり、１６位の二重結合がＺであり、１９位の二重結合がＺである。
【００８３】
ＤＰＡアナログ（ＩＶ）の重要な具体的な異性体の１つは、式：
【化１９】
2018525359.tif 000021
を構成する（ＩＶａ）であり、
【００８４】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、Ｃ７およびＣ１３は独立してＲまたはＳのいずれかである。
【００８５】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＶ）または（ＩＶａ）：
【化２０】
2018525359.tif 000022
を含む精製された化合物を提供し、
【００８６】
式中、Ｐ１、Ｐ２、
【化２１】
2018525359.tif 000023
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。一態様では、Ｐ１とＰ２がともに水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１とＰ２がともに水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００８７】
一態様では、８位の二重結合がＺである。別の態様では、１６位の二重結合がＺである。また別の態様では、１９位の二重結合がＺである。さらに他の態様では、１４位の二重結合がＥであり、１０位の二重結合がＺである。
【００８８】
一実施形態では、Ｐ１とＰ２のうち１つ以上が水素原子であり、８位の二重結合がＥである。
【００８９】
別の実施形態では、Ｐ１とＰ２のうち１つ以上が水素原子であり、１６位の二重結合がＺである。
【００９０】
さらに別の実施形態では、Ｐ１とＰ２のうち１つ以上が水素原子であり、１９位の二重結合がＺである。
【００９１】
さらにまた別の実施形態では、Ｐ１とＰ２のうち１つ以上が水素原子であり、１０、１６および／または１９位の二重結合のうちの少なくとも２つがＺである。
【００９２】
また別の実施形態では、Ｐ１とＰ２の両方が水素原子であり、１０、１６および／または１９位の二重結合のうちの少なくとも２つがＺである。
【００９３】
さらに別の実施形態では、Ｐ１とＰ２の両方が水素原子であり、７、１６および１９位の二重結合のうちの２つがＺである。
【００９４】
上記のすべての実施形態において、特定の一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００９５】
他の実施形態では、化合物ＩＶおよびＩＶが精製されている場合、Ｐ１とＰ２はともに水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１とＰ２がともに水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【００９６】
化合物（ＩＶ）および（ＩＶａ）は、そのあらゆる薬学的に許容され得る塩、エステル、精製形態／単離形態、ならびに可能なヒドロキシル基のうちの一方または両方が本明細書に記載の保護基に変換されている化合物を包含していることを理解されたい。
【００９７】
また、本明細書に記載の任意の化合物が、本明細書の至る箇所に記載している任意の病気、疾患または罹病状態の処置または予防に使用され得ることも理解されたい。
【００９８】
別の態様において、本発明により、１種類以上の本発明の化合物を他の医薬活性成分とともに、またはなしで、薬学的に許容され得るビヒクルとの混合状態で含む医薬組成物を提供する。かかる調製物は本発明の方法に従って投与され得る。
【００９９】
また別の態様において、本発明は、哺乳動物の炎症または炎症性疾患を処置または予防するための方法に関する。該方法は、予防有効量または治療有効量の少なくとも１種類の本発明の化合物またはその医薬組成物を投与することを伴うものである。例えば、本発明の化合物は、炎症、がん、神経変性、物忘れ、シワ、乾癬、フケまたは皮膚炎の処置または予防を、それを必要とする個体に有効量の本明細書に記載の任意の化合物を投与することにより行なうために使用され得る。
【０１００】
また別の態様において、本発明は、哺乳動物の細菌による感染または疾患を処置または予防するための方法に関する。該方法は、予防有効量または治療有効量の少なくとも１種類の本発明の化合物またはその医薬組成物を投与することを伴うものである。
【０１０１】
また別の態様において、本発明は、健康のために必要とされるスタチンの量を低減させるための方法に関する。該方法は、予防有効量または治療有効量の少なくとも１種類の本発明の化合物またはその医薬組成物を投与することを伴うものである。他の実施形態では、本発明により、スタチン療法を増強するための方法であって、それを必要とする対象に、スタチン療法を必要とする対象に対してスタチン化合物に加えて治療有効量の請求項１〜５による化合物を与えることを含む方法を提供する。
【０１０２】
また他の実施形態では、本発明により、細菌感染を処置または予防するための方法であって、それを必要とする対象に上記に開示したＲｖＴ  １、１ａ、２、２ａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＶまたはＩＶａのうちのいずれかを含む化合物または組成物を投与することを含む方法を提供する。
【０１０３】
また別の実施形態では、本発明により、対象に上記に開示したＲｖＴ  １、１ａ、２、２ａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＶまたはＩＶａのうちのいずれかを含む治療量の化合物を投与することを含む、細菌感染に苦しんでいる対象の生存割合を高めるための方法を提供する。
【０１０４】
さらに別の実施形態では、本発明により、食作用、エフェロサイトーシス、創傷治癒または組織再生の促進を、それを必要とする対象において行なうための方法であって、それを必要とする患者に上記に開示したＲｖＴ  １、１ａ、２、２ａ、ＩＩＩ、ＩＩＩａ、ＩＶまたはＩＶａのうちのいずれかを含む治療有効量の化合物を投与することを含む方法を提供する。
【０１０５】
なおさらなる実施形態では、本発明により、白血球の刺激を必要とする対象に治療量の請求項１〜５のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、白血球における活性酸素種の生成の刺激方法を提供する。
【０１０６】
さらに、本発明の化合物は、神経の発達、胎児の発育、ホメオスタシス、組織リモデリングまたは創傷修復の増強を、それを必要とする個体に有効量の本明細書に記載の任意の化合物を投与することにより行なうために使用され得る。
【０１０７】
本発明のさらなる特色および利点は、以下の詳細説明および特許請求の範囲から、より明らかとなろう。
【０１０８】
多くの実施形態を開示しているが、当業者には、以下の詳細説明から本発明のさらに他の実施形態が明らかとなろう。明白なことであるが、本発明は、種々の自明の態様における修正が、すべて、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく可能である。したがって、詳細説明は、本質的に例示的なものであり、限定的なものでないとみなされたい。
【図面の簡単な説明】
【０１０９】
本発明による組成物および方法の種々の例示的な実施形態を、以下の図を参照しながら詳細に説明する。
【図１−ａ】好中球−内皮細胞の相互作用による新規な１３−シリーズのレゾルビン（ＲｖＴ）が自己消散性炎症において高値である。（ａ）画分をヒト好中球（ＰＭＮ）−内皮細胞（ＥＣ）コインキュベーション物から抽出し（方法参照）、マウスにｉ．ｖ．注射によって、大腸菌（２．５×１０７ＣＦＵ／マウス）接種の５分前に投与し、生存率を評価した。ｎ＝１０匹のマウス／群（３つの独立した実験）。大腸菌群と比べて＊ｐ＜０．０５。
【図１−ｂ】（ｂ）ヒトＰＭＮ−ＥＣコインキュベーションにおいて同定された新規な１３−シリーズのレゾルビン（ＲｖＴ）構造案。
【図１−ｃ】（ｃ）血液を健常志願者から運動前と運動後に収集し（方法参照）、ＲｖＴの量をＬＣ−ＭＳ−ＭＳを用いて評価した。ｎ＝４（４つの独立した実験での健常志願者）。運動前値と比べて＊ｐ＜０．０５。
【図１−ｄ】（ｄ）血漿をＮＩＳＴレポジトリーから入手し（ＳＲＭ  １９５０，ｄ＝３）、健常志願者（ｎ＝４）または敗血症と診断された患者（ｎ＝９）から収集し、ＲｖＴをＬＣ−ＭＳ−ＭＳを用いて評価した。結果を２つの独立した実験の平均±ｓ．ｅ．ｍ．として示す。ＳＲＭ  １９５０と比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１，健常志願者と比べて＃ｐ＜０．０５，＃＃ｐ＜０．０１。
【図１−ｅ】（ｅ）マウスに大腸菌（１×１０５ＣＦＵ／マウス）を接種し、表示した間隔で血液を収集し、ＲｖＴ量をＬＣ−ＭＳ−ＭＳを用いて評価した。
【図１−ｆ】（ｆ）マウスに１×１０５ＣＦＵ／マウスの大腸菌（自己消散性）または１×１０７ＣＦＵ／マウスの大腸菌（遅延消散）を接種し、４時間後に血液を収集し、ＲｖＴをＬＣ−ＭＳ−ＭＳを用いて評価した。ｅ，ｆの結果を平均±ｓ．ｅ．ｍ．として示す。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。０時間目の血液レベル（ｅ）または自己消散性接種材料を投与されたマウス（ｆ）と比べて＊ｐ＜０．０５。
【図２−ａ】好中球−内皮細胞による産物は直接的な抗菌作用を示さない。（ａ）画分をヒト（ｈ）好中球（ＰＭＮ）−内皮細胞（ＥＣ）コインキュベーション物から抽出した（方法参照）。この産物またはアンピシリン（１ｍＭ）をＧＦ−Ｃフィルター上に置き、次いで、大腸菌（１×１０７ＣＦＵ）を入れたＬＢ寒天プレート上に置いた。３７℃で一晩インキュベーション後、クリアランスゾーンを評価した。結果は、３つの独立した実験の代表的なものである。
【図２−ｂ】（ｂ）１３−シリーズのレゾルビン（ＲｖＴ）の構造案および生合成スキーム。
【図３−ａ】好中球内皮コインキュベーションにおける新規なｎ−３ドコサペンタエン酸由来１３−シリーズのレゾルビンの同定。（ａ〜ｄ）画分をヒト好中球（ｈＰＭＮ）−内皮細胞（ｈＥＣ）コインキュベーション物から抽出した（方法参照）。メディエーターを脂質メディエーター（ＬＭ）メタボロリピドミクス（ｍｅｔａｂｏｌｏｌｉｐｉｄｏｍｉｃｓ）を用いてプロファイリングした。（ａ）１３−シリーズレゾルビン（ＲｖＴ）１、
【図３−ｂ】（ｂ）ＲｖＴ２の同定に使用したＭＳ−ＭＳ断片化スペクトル。
【図３−ｃ】（ｃ）ＲｖＴ３の同定に使用したＭＳ−ＭＳ断片化スペクトル。
【図３−ｄ】（ｄ）ＲｖＴ４の同定に使用したＭＳ−ＭＳ断片化スペクトル。結果は、ｎ＝４の独立した細胞インキュベーションの代表的なものである。
【図３−ｅ】（ｅ）ｈＥＣをＩＬ−１βおよびＴＮＦ−α（各々、１０ｎｇ／ｍｌ，１６時間，３７℃）とともに、次いで、ビヒクル（ＰＢＳ＋０．０１％ＥｔＯＨ）、１μＭ  ＥＰＡ、ｎ−３  ＤＰＡまたはＤＨＡ（１５分，３７℃）およびヒト好中球（ｈＰＮＭ；１×１０７細胞／ｍｌ，６０分，３７℃）とともにインキュベートした。画分を固相抽出カラムを用いて抽出し、ＬＣ−ＭＳ−ＭＳを用いて同定し、定量した（詳細については方法参照）。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝３つの細胞調製物（２つの独立した実験）。ｈＰＭＮ−ＥＣインキュベーションと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図３−ｆ】（ｆ）ｈＥＣ）、ｈＰＭＮおよびｈＰＭＮ−ＥＣをｎ−３  ＤＰＡとともにインキュベートし（詳細については方法参照）、ＲｖＴをＬＣ−ＭＳ−ＭＳベースＬＭメタボロリピドミクスを用いて同定し、定量した。ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４レベルを好中球−内皮細胞共培養物において同定。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４つの細胞調製物／群（４つの独立した実験）。ｈＥＣにおける量と比べて＊ｐ＜０．０５。
【図４−ａ】ヒトＣＯＸ−２は内皮細胞においてｎ−３ＤＰＡを１３Ｒ−ＨＤＰＡに変換させる。（ａ）ヒト内皮細胞（ｈＥＣ）を、ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−α（各々、１０ｎｇ／ｍｌ，１６時間，３７℃）とともにインキュベートした後、ビヒクル（０．０１％ＥｔＯＨ含有ＰＢＳ）またはｎ−３  ＤＰＡ（１μＭ，６０分，３７℃）とともにインキュベートした。画分を抽出し（方法参照）、１３−ＨＤＰＡをＬＭメタボロリピドミクスを用いてプロファイリングした。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４つの細胞調製物（４つの独立した実験）。ｈＥＣ＋ビヒクル細胞と比べて＊ｐ＜０．０５。
【図４−ｂ】（ｂ）キラルＬＣ−ＭＳ−ＭＳによる標準的な１３Ｒ−ＨＤＰＡおよび１３Ｓ−ＨＤＰＡのＭＲＭクロマトグラム。（ｃ，ｄ）ｈＥＣを（ａ）の場合のようにしてインキュベートし、１３−ＨＤＰＡをキラルＬＭメタボロリピドミクスによって評価した。
【図４−ｃ】（ｃ）イオンペアｍ／ｚ  ３４５＞１９５のＭＲＭクロマトグラム。結果は、ｎ＝４つの細胞調製物（４つの独立した実験）の代表的なものである。
【図４−ｄ】（ｄ）１３Ｒ−ＨＤＰＡの同定に使用したＭＳ−ＭＳスペクトル。結果は、ｎ＝４つの細胞調製物（４つの独立した実験）の代表的なものである。
【図４−ｅ】（ｅ）ｈＥＣをＩＬ−１βおよびＴＮＦ−α（各々、１０ｎｇ／ｍｌ，１６時間，３７℃）とともにインキュベートした後、ビヒクル（０．０１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳ）またはセレコキシブ（２５μＭ，２５分，３７℃）とともにインキュベートし；次いでｎ−３  ＤＰＡ（１μＭ，６０分，３７℃）を添加し、産物を抽出し、１３−ＨＤＰＡレベルをＬＭメタボロリピドミクスによって測定した。
【図４−ｆ】（ｆ）内皮細胞を、対照のスクランブルド（ＣＳ）またはヒトＣＯＸ−２  ｓｈＲＮＡでトランスフェクトし；次いで細胞をＩＬ−１βおよびＴＮＦ−α（各々、１０ｎｇ／ｍｌ，１６時間，３７℃）ならびにｎ−３  ＤＰＡ（１μＭ，６０分，３７℃）とともにインキュベートした。１３−ＨＤＰＡレベルをＬＭメタボロリピドミクスによって測定した。（ｅ，ｆ）の結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４つの細胞調製物（４つの独立した実験）。（ｅ）は、ＩＬ−１β＋ＴＮＦ−αインキュベーション単独と比べて＊ｐ＜０．０５。（ｆ）は、ＣＳ−ｓｈＲＮＡ＋ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−αインキュベーションと比べて＊ｐ＜０．０５。
【図４−ｇ】（ｇ〜ｈ）ヒト組換え（ｈｒ）ＣＯＸ−２を、表示した濃度のｎ−３  ＤＰＡまたはＡＡ（０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ８．０，２０μＭブタヘマチン，０．６７ｍＭフェノール、室温，６０分）とともにインキュベートし、産物の形成を、ｎ−３  ＤＰＡからのｈｒＣＯＸ−２産物のキラルＬＭメタボロリピドミクスを用いて評価した（方法参照）（ｇ）。（ｇ）の結果は、ｎ＝６回のインキュベーションの代表的なものである。
【図４−ｈ】（ｈ）ミカエリス・メンテン速度論。（ｈ）は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝６回のインキュベーション（３つの独立した実験）。
【図５−ａ】ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４の物理的特徴。１３Ｒ−ＨＤＰＡをイモ５−ＬＯＸ（０．１Ｍリン酸バッファー，ｐＨ６．３，０．０３％Ｔｗｅｅｎ  ２０，３０分）とともにインキュベートし；産物をＲＰ−ＵＶ−ＨＰＬＣを用いて単離した（詳細については方法参照）。（ａ〜ｄ）同調して、（ａ）ＲｖＴ１について記録されたオンラインＵＶ−クロモフォア。
【図５−ｂ】（ｂ）ＲｖＴ２について記録されたオンラインＵＶ−クロモフォア。
【図５−ｃ】（ｃ）ＲｖＴ３について記録されたオンラインＵＶ−クロモフォア。
【図５−ｄ】（ｄ）ＲｖＴ４について記録されたオンラインＵＶ−クロモフォア。
【図５−ｅ】（ｅ〜ｈ）単離した産物をジアゾメタン（エーテル中）（３０分間，室温）とともにインキュベートし、ＬＭメタボロリピドミクスによって評価した。（ｅ）ＲｖＴ１−メチルエステルのナトリウム付加物のＭＳ−ＭＳ断片化スペクトル。結果は、３つの独立した実験の代表的なものである。
【図５−ｆ】（ｆ）ＲｖＴ２−メチルエステルのナトリウム付加物のＭＳ−ＭＳ断片化スペクトル。結果は、３つの独立した実験の代表的なものである。
【図５−ｇ】（ｇ）ＲｖＴ３−メチルエステルのナトリウム付加物のＭＳ−ＭＳ断片化スペクトル。結果は、３つの独立した実験の代表的なものである。
【図５−ｈ】（ｈ）ＲｖＴ４−メチルエステルのナトリウム付加物のＭＳ−ＭＳ断片化スペクトル。結果は、３つの独立した実験の代表的なものである。
【図６−ａ】分子酸素の組込みは、新規なＲｖＴの生合成における好中球リポキシゲナーゼの役割を示す。ヒト末梢血好中球（５×１０７／ｍｌ）を１３−ＨＰＤＡ（７５ｎｇ／ｍｌ；ＰＢＳ＋／＋；ｐＨ７．４５）とともに高１８Ｏ２雰囲気中でインキュベートした。次いで大腸菌を添加し（２．５×１０９／ｍｌ）、３０分後に（３７℃）インキュベーションを２容量の氷冷メタノールを用いてクエンチし、水素化ホウ素ナトリウム（１μｇ／ｍｌ，１５分間，４℃）を用いて産物を還元した。産物を抽出し、ＬＣ−ＭＳ−ＭＳを用いて同定した。（ａ）ＲｖＴ１の同定に使用した代表的な構造およびＭＳ−ＭＳスペクトル。結果は、４つの好中球調製物（４つの独立した実験）の代表的なものである。
【図６−ｂ】（ｂ）ＲｖＴ２の同定に使用した代表的な構造およびＭＳ−ＭＳスペクトル。結果は、４つの好中球調製物（４つの独立した実験）の代表的なものである。
【図６−ｃ】（ｃ）ＲｖＴ３の同定に使用した代表的な構造およびＭＳ−ＭＳスペクトル。結果は、４つの好中球調製物（４つの独立した実験）の代表的なものである。
【図６−ｄ】（ｄ）ＲｖＴ４の同定に使用した代表的な構造およびＭＳ−ＭＳスペクトル。結果は、４つの好中球調製物（４つの独立した実験）の代表的なものである。
【図７−ａ】トラッピング産物は、ＲｖＴ２およびＲｖＴ３の生合成におけるエポキシド中間体の形成を示す。ヒト好中球（５×１０７細胞／ｍｌ）を、１３Ｒ−ＨＤＰＡ（１μＭ，３７℃，ＰＢＳ  ｐＨ７．４５）および大腸菌（１×１０９ＣＦＵ／ｍｌ，２分，３７℃）とともにインキュベートした。インキュベーションを、２容量の酸性化メタノール（見かけ上ｐＨ３）を用いて停止させ、産物を抽出し、ＬＭメタボロリピドミクスを用いてプロファイリングした。（ａ）ＲｖＴ２のメトキシ−トラッピング産物のＭＲＭクロマトグラム（左パネル）およびＭＳ−ＭＳスペクトル（右パネル）。
【図７−ｂ】（ｂ）ＲｖＴ３のメトキシ−トラッピング産物のＭＲＭクロマトグラム（左パネル）およびＭＳ−ＭＳスペクトル（右パネル）。結果は、３つの独立した実験の代表的なものである。
【図８−ａ】アトルバスタチンはマウス感染時における好中球−内皮細胞画分の防御作用を増大させ、ＲｖＴ形成をＳ−ニトロシル化ＣＯＸ−２によって促進させる。（ａ）アトルバスタチンありまたはなしでのヒト好中球−内皮細胞コインキュベーション物中のＲｖＴ。平均±ｓ．ｅ．ｍ．；ｎ＝４つの独立した細胞調製物。４つの独立した実験。ＥＣ群と比べて＊ｐ＜０．０５。
【図８−ｂ】（ｂ）Ｃ１８  ＳＰＥを用いて抽出した画分（方法参照）を、大腸菌（２．５×１０７ＣＦＵ／マウス）接種の５分前にマウスに投与し（ｉ．ｖ．）、生存率を評価した。ｎ＝１４〜１７匹のマウス／群。３つの独立した実験。大腸菌と比べて＊ｐ＜０．０５，大腸菌＋ｈＰＭＮ−ＥＣと比べて＃ｐ＜０．０５，大腸菌＋ｈＰＭＮ＋ａｔｏｒｖまたは大腸菌＋ｈＥＣ＋ａｔｏｒｖと比べて§ｐ＜０．０５。
【図８−ｃ】（ｃ，ｄ）内皮細胞をＩＬ−１βおよびＴＮＦ−α、次いでビヒクル、セレコキシブおよび／またはアトルバスタチンとともにインキュベートした後、ｎ−３  ＤＰＡおよびｈＰＭＮとともにインキュベートした。（ｃ〜ｄ）画分を抽出し（ｃ）ＬＭメタボロリピドミクスを用いてプロファイリングした。平均±ｓ．ｅ．ｍ．ｎ＝４つの独立した細胞調製物／群。３つの独立した実験。ＩＬ−１β＋ＴＮＦ−αのみとのインキュベーションと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１  ＩＬ−１β＋ＴＮＦ−αおよびアトルバスタチンとのインキュベーションと比べて＃ｐ＜０．０５。
【図８−ｄ】（ｄ）大腸菌（２．５×１０７ＣＦＵ／マウス）前に投与し、生存率を評価。ｎ＝１０匹のマウス／群。２つの独立した実験。大腸菌と比べて＊ｐ＜０．０５；大腸菌＋ｈＰＭＮ−ＥＣ＋ａｔｏｒｖと比べて＃ｐ＜０．０５。（ｅ〜ｆ）マウスに大腸菌（１×１０５ＣＦＵ／マウス）を接種し、１時間後、Ｌ−ＮＡＭＥ（２４ｍｇ／ｋｇ）またはビヒクル（生理食塩水）を投与した後、アトルバスタチン（５μｇ／マウス、ｉ．ｖ．，５時間）またはビヒクル（生理食塩水＋０．０１％ＥｔＯＨ）を投与した。
【図８−ｅ】（ｅ）血漿ＲｖＴをＬＭメタボロリピドミクスを用いて定量した。
【図８−ｆ】（ｆ）滲出細胞数を数えた。平均±ｓ．ｅ．ｍ．ｎ＝４匹のマウス／群。２つの独立した実験。大腸菌と比べて＊ｐ＜０．０５。大腸菌＋アトルバスタチンと比べて＃ｐ＜０．０５。
【図８−ｇ】（ｇ）ヒト組換え（ｈｒ）ＣＯＸ−２およびＳ−ニトロシル化（ＳＮＯ）ｈｒ−ＣＯＸ２によるｎ−３  ＤＰＡの変換。平均±ｓ．ｅ．ｍ．ｎ＝３回のインキュベーション。３つの独立した実験。
【図９−ａ】一酸化窒素合成酵素の阻害により、ＲｖＴのアトルバスタチン媒介性増加が逆転される。（ａ）ヒト（ｈ）内皮細胞（ＥＣ）を、ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−α（各々、１０ｎｇ／ｍｌ，１６時間，３７℃）、ビヒクル（０．０１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳ）、Ｌ８９  ＮＡＭＥ（２５μＭ）または１４００Ｗ（１０μＭ，２５分，３７℃）とともにインキュベートした。次いで、アトルバスタチン（ａｔｏｒｖ；３０μＭ，３０分）、ｎ−３  ＤＰＡ（１μＭ，１５分，３７℃）およびＰＭＮ（１×１０７細胞／ｍｌ，６０分，３７℃）を添加し、画分を単離し、ＬＭメタボロリピドミクスを用いてプロファイリングした。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４回の独立したインキュベーション（４つの独立した実験）。ｈＰＭＮ−ＥＣインキュベーションと比べて＊ｐ＜０．０５。ｈＰＭＮ−ＥＣ＋アトルバスタチンインキュベーションと比べて＃ｐ＜０．０５。
【図９−ｂ】（ｂ）ヒト組換えＣＯＸ−２をＳ９５ニトロソグルタチオン（方法のセクションに詳述したようにして調製）なし（ＣＯＸ−２）またはあり（ＣＯＸ−２＋ＧＳＮＯ）で３０分間（室温）インキュベートした。次いで、Ｓ−ニトロシル化をウエスタンブロッティングを用いて評価した（詳細については方法参照）。結果は、ｎ＝６回のインキュベーションおよび３つの独立した実験の代表的なものである。
【図１０−ａ】図１０：ＲｖＴは白血球の応答を調節し、感染における生存率を高める。（ａ）マクロファージ（５×１０４細胞／ウェル）を、表示した濃度のＲｖＴ１、ＲｖＴ２＋ＲｖＴ３（１：１の比）、ＲｖＴ４またはビヒクル（０．０１％ＥｔＯＨ含有ＰＢＳ；１５分間，３７℃，ｐＨ７．４５）とともに、次いで蛍光標識した大腸菌（２．５×１０６ＣＦＵ／ウェル）とともにインキュベートした。
【図１０−ｂ】（ｂ）マクロファージ（５×１０４細胞／ウェル）をＨ２ＤＣＦＤＡ（５μＭ，３０分間，３７℃，ｐＨ７．４５）とともにインキュベートし、；細胞を洗浄し、表示した濃度のＲｖＴ１、ＲｖＴ２＋ＲｖＴ３（１：１の比）、ＲｖＴ４またはビヒクル（１５分，３７℃，ｐＨ７．４５）とともにインキュベートし、大腸菌（２．５×１０６ＣＦＵ／ウェル）を添加し、細胞内ＲＯＳレベルを測定した。
【図１０−ｃ】（ｃ）マクロファージ（５×１０４細胞／ウェル）を（ａ）の場合のようにしてＲｖＴとともにインキュベートし、蛍光標識アポトーシスＰＭＮ（２．５×１０５細胞／ウェル）を添加し、取込みを評価した（方法参照）。平均±ｓ．ｅ．ｍ．ｎ＝４例のドナー。３つの独立した実験。マクロファージ＋ビヒクルと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１０−ｄ】（ｄ〜ｇ）マウスにビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有生理食塩水）またはＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４の組合せ（２：１：１：８の比）（各々、単離し、ＲＰ−ＵＶ−ＨＰＬＣによって定量（方法参照））をｉ．ｐ．注射により、大腸菌（１×１０７ＣＦＵ／マウス）接種の約５分前に投与した。１２時間後、（ｄ）体温を評価した。
【図１０−ｅ】（ｅ）腹水中の滲出好中球計数を評価した。
【図１０−ｆ】（ｆ）腹水中白血球による細菌食作用（全ＣＤ１１ｂ＋集団に対する大腸菌＋の％）を評価した。
【図１０−ｇ】（ｇ）腹腔内滲出液中のマクロファージエフェロサイトーシスを評価した。平均±ｓ．ｅ．ｍ．ｎ＝５匹のマウス／群。２つの独立した実験。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。非処置マウスと比べて＃ｐ＜０．０５。
【図１０−ｈ】（ｈ）マウスに大腸菌（２．５×１０７ＣＦＵ／マウス）を接種し；２時間後、ビヒクル（生理食塩水＋０．１％ＥｔＯＨ）またはＲｖＴ（ｄ〜ｇの場合のようにして；５０ｎｇ／マウスもしくは５００ｎｇ／マウス）をｉ．ｐ．注射によって投与し、生存率を評価した。ｎ＝１０匹のマウス／群。２つの独立した実験  大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５。
【図１１−ａ】ＲｖＴは、大腸菌感染時にヒトマクロファージおよびマウスにおけるインフラマソーム成分を調節する。マクロファージ（Ｍφ；１．５×１０５細胞／ウェル）を、表示した濃度のＲｖＴ１、ＲｖＴ２＋ＲｖＴ３（１：１の比）、ＲｖＴ４またはビヒクル（０．０１％ＥｔＯＨ含有ＰＢＳ；１５分間，３７℃，ｐＨ７．４５）とともにインキュベートし、大腸菌を添加し（１．５×１０７ＣＦＵ／ウェル，１６時間，３７℃，ｐＨ７．４５）、（ａ）カスパーゼ１レベルをフローサイトメトリーによって評価し；
【図１１−ｂ】（ｂ）ＩＬ−１βレベルを上清み中において測定した。
【図１１−ｃ】（ｃ）ＬＤＨ活性を上清み中において測定した。結果を平均±ｓ．ｅ．ｍ．として示す。ｎ＝４例のドナー（３つの独立した実験）。マクロファージ＋大腸菌と比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１，＊＊＊＜０．００１；マクロファージ単独と比べて＃＃ｐ＜０．０１．マウスにビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有生理食塩水）またはＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４の組合せ（２：１：１：８の比）（これらは各々、単離し、ＲＰ−ＵＶ−ＨＰＬＣによって定量した（詳細については方法参照））をｉ．ｐ．注射により、大腸菌（１×１０７ＣＦＵ／マウス）接種の２時間後に投与し；１２時間後、（ｃ）滲出単球／マクロファージのカスパーゼ１発現を調べた。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝５匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１１−ｄ】（ｄ）滲出ＩＬ−１βレベルを調べた。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝５匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１１−ｅ】（ｅ）滲出乳酸デヒドロゲナーゼ活性を調べた。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝５匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１１−ｆ】（ｆ）末梢血白血球−血小板凝集塊を調べた。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝５匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１１−ｇ】
【図１２−ａ】ＲｖＴは滲出エイコサノイドを調節し、生物活性濃度において抗菌作用を示さない。（ａ）ＲｖＴを単離し、ＲＰ−ＵＶ−ＨＰＬＣを用いて定量した。ＲｖＴ１、ＲｖＴ２＋ＲｖＴ３、ＲｖＴ４（１０μＭ）またはアンピシリン（１０ｍＭ）を、大腸菌（１×１０７ＣＦＵ）を入れたＬＢ寒天プレートに入れた。３７℃で一晩インキュベーション後、クリアランスゾーンを評価した。結果は、３つの独立した実験の代表的なものである。
【図１２−ｂ】（ｂ）マウスに、ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４の組合せ（ＲｖＴ；１２５ｎｇずつ／マウス；ｉ．ｐ．）；（各々は単離し、ＲＰ−ＵＶ−ＨＰＬＣを用いて定量し（詳細については方法参照）、次いで混合物に合わせた）またはビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有生理食塩水）を、大腸菌（１×１０７ＣＦＵ／マウス）接種の５分前に投与し；１２時間後、腹腔内滲出液を収集し、ＬＭ  ＬＭメタボロリピドミクスを用いてプロファイリングした。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した１２７の実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１。
【図１３−ａ】アトルバスタチンとＲｖＴはマウスの感染において局所性および全身性の炎症を低減させる。マウスに、ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４の組合せ（ＲｖＴ約１２．５ｎｇずつ／マウス）；（各々は単離し、ＲＰ−ＵＶ−ＨＰＬＣを用いて定量した（詳細については方法参照））および／またはアトルバスタチン（ａｔｏｒｖ；０．５μｇ／マウスｉ．ｐ．）またはビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有生理食塩水）を、大腸菌接種（１×１０７ＣＦＵ／マウス；ｉ．ｐ）の５分前に投与した。１２時間後、（ａ）腹水中の滲出好中球計数を測定した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１３−ｂ】（ｂ）滲出細菌負荷を測定した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１３−ｃ】（ｃ）末梢血細菌負荷を測定した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１３−ｄ】（ｄ）滲出ＩＬ−１βレベルを測定した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１３−ｅ】（ｅ）滲出乳酸デヒドロゲナーゼ活性を測定した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１３−ｆ】（ｆ）腹水中白血球による細菌食作用を測定した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１３−ｇ】（ｇ）腹腔内滲出液中のマクロファージエフェロサイトーシスを測定した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。
【図１３−ｈ】（ｈ〜ｋ）マウスに大腸菌（１×１０７ＣＦＵ／マウス；ｉ．ｐ．）を接種し；２時間後、ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４；（各々は単離し、ＲＰ−ＵＶ−ＨＰＬＣを用いて定量し（詳細については方法参照）、次いで２：１：１：８の比の混合物に合わせた）（ＲｖＴ；全部で５０ｎｇ／マウス）および／またはアトルバスタチン（ａｔｏｒｖ；０．５μｇ／マウスｉ．ｐ．）またはビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有生理食塩水）を投与した。（ｈ）１２時間後、腹水中の滲出好中球計数（左パネル）および滲出細菌負荷を測定した（右パネル）。
【図１３−ｉ】（ｉ〜ｋ）大腸菌の投与の６時間後（ｉ，ｋ）、末梢血エイコサノイドレベルをＬＣ−ＭＳ−ＭＳまたはＥＬＩＳＡを用いて測定し；
【図１３−ｊ】（ｊ）エンドセリン（ＥＴ）−１およびプラスミノゲンアクチベータインヒビター（ＰＡＩ）の肺内ｍＲＮＡレベルをｑＲＴ−ＰＣＲを用いて測定した。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１，＊＊＊ｐ＜０．００１；大腸菌＋ＲｖＴマウスと比べて＃ｐ＜０．０５；大腸菌＋アトルバスタチンマウスと比べて§ｐ＜０．０５。ａ〜ｅの結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝５匹のマウス／群（２つの独立した実験）。
【図１３−ｋ】大腸菌の投与の６時間後（ｉ，ｋ）、末梢血エイコサノイドレベルをＬＣ−ＭＳ−ＭＳまたはＥＬＩＳＡを用いて測定した。
【図１４−ａ】（図４）：アトルバスタチンとＲｖＴは、マウスの細菌感染において感染の消散を加速させ、生存率を高める。（ａ）マウスに、大腸菌（１×１０５ＣＦＵ／マウス）＋ＲｖＴ（ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４の組合せ，１：１：１：１の比，単離およびＲＰ−ＵＶ−ＨＰＬＣによって定量済，全部で５０ｎｇ／マウス）を接種した。アトルバスタチン（０．５μｇ／マウス；ｉ．ｐ．）またはビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有生理食塩水）を投与し、滲出好中球計数（ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｇ＋）を、表示した時間点で、光学顕微鏡検査およびフローサイトメトリーを用いて評価した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４匹のマウス／群（２つの独立した実験）。２４時間目のビヒクル群と比べて＊＊ｐ＜０．０１。
【図１４−ｂ】（ｂ）マウスに大腸菌（２．５×１０７ＣＦＵ／マウス）を接種し；３時間後、ビヒクル（生理食塩水＋０．１％ＥｔＯＨ）、０．５μｇ／マウス（低用量ａｔｏｒｖ）、５μｇ／マウス（高用量ａｔｏｒｖ）のアトルバスタチン、０．５μｇ／マウスのアトルバスタチン＋５０ｎｇ／マウスＲｖＴ（低用量ａｔｏｒｖ＋低用量ＲｖＴ）または５μｇ／マウスのアトルバスタチン＋５００ｎｇ／マウスＲｖＴ（高用量ａｔｏｒｖ＋高用量ＲｖＴ）；（各ＲｖＴはパネル（ａ）の場合のようにして単離した）を投与し、生存率を評価した。ｎ＝１０匹のマウス／群（３つの独立した実験）。大腸菌マウスと比べて＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１。大腸菌＋低用量ａｔｏｒｖマウスと比べて＃ｐ＜０．０５。
【発明を実施するための形態】
【０１１０】
免疫抑制を伴うことなく宿主の防御および感染の消散をもたらす内因性機構は幅広く重要である１，２。したがって、本発明者らは、好中球−内皮系の共培養物において産生され、非感染性炎症または感染後のヒトおよびマウスの組織に存在する４種類の新しい宿主防御性分子の構造を解明した。これらの生物活性分子は、それぞれ１３位の炭素位置にアルコールを担持している共役型のトリエン二重結合およびジエン二重結合を含むものであり、ｎ−３酸（ＤＰＡ，Ｃ２２：５）に由来するものであった。これらの化合物（１３−シリーズのレゾルビン（ＲｖＴ）と称する）は、大腸菌感染の際のマウスの生存率を高める強力な防御作用を示した。また、ＲｖＴは、細菌食作用を刺激し、インフラマソーム成分を調節するヒトおよびマウスの食細胞の応答を調節した。好中球−内皮細胞の相互作用時の該化合物の生合成は、内皮系内のシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）によって開始され、アトルバスタチンによるＣＯＸ−２のＳ−ニトロシル化によって増大した。アトルバスタチンとＲｖＴの作用はマウスの大腸菌感染において相加的であり、この場合、これらによって炎症の消散が加速し、生存率が＞６０％に高まった。このような結果は、細菌感染における新規な宿主防御性分子、すなわち、１３−シリーズのレゾルビン細胞間生合成によってｎ−３  ＤＰＡから誘導され、アトルバスタチンによって増加することを証明するものである。これらの新規な分子は、感染の消散性の−炎症においてカギとなる自然防御応答を調節するものである。
【０１１１】
特に定義していない限り、本明細書で用いる科学技術用語はすべて、当業者に一般的に理解されているものと同じ意味を有する。矛盾する場合は、本文書（定義を含む）に支配される。好ましい方法および材料を以下に説明するが、本明細書に記載のものと同様または等価な方法および材料が本発明の実施または試験において使用され得る。本明細書で挙げた刊行物、特許出願、特許および他の参考文献はすべて、引用によりその全体が組み込まれる。本明細書に開示した材料、方法および実施例は、例示にすぎす、限定を意図するものではない。
【０１１２】
本明細書および特許請求の範囲において、用語“ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ（〜を含む）”および“ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（〜を含む）”はオープンエンドの用語であり、“ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ、ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ．．．（〜を含むが、限定されない）”を意味していると解釈されたい。このような用語は、より限定的な用語“ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ（本質的に〜からなる）”および“ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ（〜からなる）”を包含している。
【０１１３】
本明細書および添付の特許請求の範囲で用いる場合、単数形“ａ”、“ａｎ”および“ｔｈｅ”は、本文中にそうでないことを明示していない限り、複数の指示対象物を包含していることに注意されたい。同様に、用語“ａ”（または“ａｎ”）、“ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ（１以上）”および“ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ（少なくとも１）”は、本明細書において互換的に使用している場合があり得る。また、用語“ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ”、“ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ”、“ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ  ｂｙ（〜を特徴とする）”、“ｃｏｎｔａｉｎ（ｓ）（〜を含む）”および“ｈａｖｉｎｇ（〜を有する）”ならびにその語尾変化形は互換的に使用している場合があり得、さらなる作用または構造の可能性を排除しないオープンエンドの移行句、用語または語を意図していることも注意されたい。
【０１１４】
「本発明の化合物」は、ジヒドロキシおよび／またはトリヒドロキシＤＰＡアナログならびに本明細書に開示した一般式に包含される化合物をいい、構造を本明細書に開示した式の範囲に含まれる任意の具体的な化合物を包含している。本発明の化合物は、化学構造および／または化学名のいずれかによって特定され得る。化学構造と化学名が矛盾する場合、化学構造によって化合物の実体が特定される。本発明の化合物は１つ以上のキラル中心および／または二重結合を含むものであってもよく、したがって、立体異性体、例えば、二重結合異性体（すなわち、幾何異性体）、エナンチオマーまたはジアステレオマーとして存在する場合があり得る。したがって、本明細書に示した化学構造は、図示された化合物の考えられ得るすべてのエナンチオマーおよび立体異性体、例えば、立体異性体的に純粋な形態（例えば、幾何的に純粋な、エナンチオマー的に純粋な、またはジアステレオマー的に純粋な）ならびにエナンチオマー混合物および立体異性体混合物を包含している。エナンチオマー混合物および立体異性体混合物は、当業者によく知られた分離手法またはキラル合成手法を用いてそれぞれの成分のエナンチオマーまたは立体異性体に分割することができる。また、本発明の化合物は、１個以上の原子が自然界に通常みられる原子量と異なる原子量を有する同位体標識化合物も包含している。
【０１１５】
本明細書の至る箇所に示した化合物はエチレン性不飽和部位を含むものである。炭素−炭素二重結合が存在している場合、立体化学配置はシス（Ｚ）またはトランス（Ｅ）のいれかであり得、本明細書の至る箇所に図示したものは限定を意図するものではない。図示したものは、一般に、ＤＰＡ化合物の立体化学配置に基づいて示しており、理論に限定されないが、同様の化学配置を有していると考える。
【化２２】
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の使用は、これが、本明細書の至る箇所および特許請求の範囲において、シス（Ｚ）およびトランス（Ｅ）異性体の両方が想定されるようにすることを反映させている。一部の特定の実施形態では、エチレン結合の配置がわかっており、具体的に示している。
【０１１６】
本発明の一態様では、本発明の化合物（１種類ならびに複数種）は、当該技術分野で知られた手法によって実質的に精製および／または単離されている。精製された化合物の純度は一般的に少なくとも約９０％、好ましくは少なくとも約９５％、最も好ましくは少なくとも約９９％（重量基準）である。
【０１１７】
したがって、用語「精製されている」は、本明細書で用いる場合、絶対純度を必要とするものではない；そうではなく、相対的用語であることを意図する。例えば、精製されたＤＰＡアナログは、主題のＤＰＡアナログが、該アナログが生物体のその自然な環境内に存在し得る場合よりも高濃度であるものであり得る。例えば、本発明のＤＰＡアナログは、調製物中の該アナログの含有量が該調製物の全アナログ含有量の少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９８％または９９％である場合、精製されているとみなされ得る。
【０１１８】
「生物学的活性」およびその状況的等価語「活性」および「生物活性」は、化合物が任意の１つの生物学的試験アッセイにおいて統計学的妥当性のある効果を誘起するものであることを意味する。好ましくは、「活性」化合物と規定される閾値は再現性があり、１μＭ以下の濃度で未処置対象から少なくとも２５％偏差の統計学的妥当性のある効果のものである。
【０１１９】
「生物学的試験アッセイ」は、特定の実験手順を意味する。生物学的試験アッセイの非限定的な例としては：１）精製された標的、細胞成分分画、インタクトな細胞または細胞もしくは組織の抽出物に対する直接または間接的なリガンド結合；２）精製された標的、細胞成分分画、インタクトな細胞、細胞もしくは組織の抽出物に曝露されたとき、または任意の経路によってインタクトな生物体に投与されたときの半減期の向上を伴う代謝的防御；３）当業者によって抗炎症作用のサロゲートを表すことが認識される細胞ベースおよび組織ベースの機能的応答の抑制、逆転または改善（例えば、サイトカイン生成および放出の改変）；ならびに４）炎症および炎症性疾患の動物モデルにおける症状および／または疾患過程の抑制、逆転または改善が挙げられる。
【０１２０】
「検出可能な標識」は、当該技術分野で知られた適切な検出手段によって化合物を追跡、トレース、位置特定、定量、固定化、生成または同定するために使用され得る任意の化学的または生物学的モダリティを意味する。検出可能な標識の非限定的な例としては、蛍光、リン光、発行、放射能または生物学的特異的（ｂｉｏｓｐｅｃｉｆｉｃ）親和性補足による標識が挙げられる。
【０１２１】
「電気陰性基」は、化学的相互作用において電子を失うよりも獲得する傾向にある化学基である。電気陰性基の例としては、限定されないが、−ＮＯ２、アンモニウム塩、スルホニル基、カルボニル基、ハロゲン、エステル、カルボン酸、ニトリルなどが挙げられる。
【０１２２】
「インサイチュ」は、用語「インビボ」、「エキソビボ」および「インビトロ」をいい、これらの用語は当業者に一般的に認知され理解されているとおり、これらを包含している。さらに、語句「インサイチュ」は本明細書において、その最も広い内包的および外延的文脈において、観察されるかまたは所定の位置の実体、細胞または組織（供給源または起源に関係なく）、その状態（“ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ”もしくは“ｓｔａｔｕｓ”）またはその場所もしくは位置での存続期間もしくは寿命を特定するために用いている。
【０１２３】
「薬学的に許容され得る」は、動物、より特別にはヒトにおける使用が連邦および州政府の規制機関によって承認されているか、または米国薬局方もしくは他の一般的に認知されている薬局方に記載されていることを意味する。
【０１２４】
「薬学的に許容され得る塩」は、薬学的に許容され得、親化合物の所望の薬理学的活性を有する本発明の化合物の塩をいう。かかる塩としては：（１）親化合物に塩基性プロトンが存在している場合に形成される塩、例えば、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などと形成される酸付加塩；あるいは、有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、４−メチルビシクロ［２．２．２］−オクト−−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプトン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、ターシャリーブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸などと形成されるもの、；または（２）親化合物に酸性プロトンが存在しており、いずれかが金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンもしくはアルミニウムイオンで置き換えられる場合；または有機塩基、例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、トリエチルアミン、プロピルアミノ、ジアザビシクロウンデカンなどとの配位の場合に形成される塩が挙げられる。
【０１２５】
「薬学的に許容され得るビヒクル」は、本発明の化合物とともに投与される希釈剤、佐剤、賦形剤または担体をいう。
【０１２６】
語句「薬学的に許容され得る担体」は、本明細書で用いる場合、本発明の化合物（１種類ならびに複数種）が対象内において、または対象に対してその意図された機能が発揮され得るように運搬または輸送されることに関与する薬学的に許容され得る物質、組成物またはビヒクル、例えば、液状または固形の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒またはカプセル封入物質を意味する。典型的には、かかる化合物は、ある器官または身体部分から別の器官または身体部分に運搬または輸送される。各担体は、製剤のその他の成分と適合性であり、患者に対して有害でないという意味において「許容され得る」ものでなければならない。薬学的に許容され得る担体としての機能を果たし得る物質の一例としては：糖類、例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース；デンプン、例えば、コーンスターチおよびイモデンプン；セルロースおよびその誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；粉末化トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、例えば、ココアバターおよび坐剤用ワックス；油類、例えば、ピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油およびダイズ油；グリコール、例えば、プロピレングリコール；ポリオール、例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール；エステル、例えば、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウム  および水酸化アルミニウム；アルギン酸；パイロジェンフリー水；等張性生理食塩水；リンゲル液；エチルアルコール；リン酸バッファー溶液；ならびに医薬用製剤に使用される他の無毒亭の適合性の物質が挙げられる。
【０１２７】
「プロドラッグ」は、体内で活性薬物を放出するための変換が必要とされる薬物分子の誘導体をいう。プロドラッグは多くの場合（必ずしもそうではないが）、親薬物に変換されるまで薬理学的に不活性である。ヒドロキシル含有薬物は、例えばスルホネート、エステルまたはカーボネートプロドラッグに変換され得、これは、インビボで加水分解されてヒドロキシル化合物をもたらし得る。アミノ含有薬物は、例えば、カルバメート、アミド、イミン、ホスホニル、ホスホリルまたはスルフェニルプロドラッグに変換され得、これはインビボで加水分解されてアミノ化合物をもたらし得る。カルボン酸薬物はエステル（シリルエステルおよびチオエステルを含む）、アミドまたはヒドラジドプロドラッグに変換され得、これはインビボで加水分解されてカルボン酸化合物をもたらし得る。上記に示したもの以外の異なる官能基を含む薬物プロドラッグも当業者によく知られている。
【０１２８】
「プロ部分（ｐｒｏｍｏｉｅｔｙ）」は、薬物分子内の官能基をマスクするために使用すると薬物をプロドラッグに変換させる保護基の一形態をいう。典型的には、プロ部分は薬物に、インビボで酵素的または非酵素的手段によって切断される結合（１つまたは複数）によって結合される。
【０１２９】
「保護基」は、マスク分子内の反応性官能基に結合させると該官能基の反応性を低減または抑制する一群の原子をいう。保護基の例は、Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，（Ｗｉｌｅｙ，第２ｎｄ  ｅｄ．１９９１）およびＨａｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，”Ｖｏｌｓ．１−８（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９７１−１９９６）を見るとよい。代表的なアミノ保護基としては、限定されないが、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（「ＣＢＺ」）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（「Ｂｏｃ」）、トリメチルシリル（「ＴＭＳ」）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（「ＳＥＳ」）、トリチルおよび置換トリチル基、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（「ＦＭＯＣ」）、ニトロ−ベラトリルオキシカルボニル（「ＮＶＯＣ」）などが挙げられる。代表的なヒドロキシ保護基としては、限定されないが、ヒドロキシ基がアシル化されているか（例えば、メチルおよびエチルエステル、アセテートもしくはプロピオネート基あるいはグリコールエステル）またはアルキル化されているかのいずれかであるもの、例えば、ベンジル、およびトリチルエーテルならびにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテル（例えば、ＴＭＳもしくはＴＩＰＰＳ基）およびアリルエーテルが挙げられる。
【０１３０】
「対象」は、感染、炎症、炎症応答、血管収縮および骨髄抑制によって引き起こされるか、またはこれらが寄与している病状または疾患に易罹患性である生きている生物体を意味する。対象の例としては、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ヤギおよびマウスが挙げられる。対象という用語は、トランスジェニック種、例えばトランスジェニックマウスなどを包含していることをさらに意図している。
【０１３１】
「アルキル」は単独で、または別の置換基の一部として、記載の数の炭素原子を有し（すなわち、Ｃ１〜Ｃ６は１〜６個の炭素原子を意味する）、親のアルカン、アルケンまたはアルキンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される飽和または不飽和の分枝鎖、直鎖または環状の一価の炭化水素原子団をいう。典型的なアルキル基としては、限定されないが、メチル；エチル、例えば、エタニル、エテニル、エチニル；プロピル、例えば、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル、シクロプロパン−１−イル、プロプ−１−エン−１−イル、プロプ−１−エン−２−イル、プロプ−２−エン−１−イル、シクロプロプ−１−エン−１−イル；シクロプロプ−２−エン−１−イル、プロプ−１−イン−１−イル、プロプ−２−イン−１−イルなど；ブチル、例えば、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ブト−１−エン−１−イル、ブト−１−エン−２−イル、２−メチル−プロプ−１−エン−１−イル、ブト−２−エン−１−イル、ブト−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブト−１−エン−１−イル、シクロブト−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブト−１−イン−１−イル、ブト−１−イン−３−イル、ブト−３−イン−１−イルなど；などが挙げられる。具体的な飽和レベルが意図される場合、以下に定義する名称「アルカニル」、「アルケニル」および／または「アルキニル」が使用される。好ましい実施形態では、アルキル基は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである。
【０１３２】
「アルカニル」は単独で、または別の置換基の一部として、親のアルカンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される飽和型の分枝鎖、直鎖または環状のアルキルをいう。典型的なアルカニル基としては、限定されないが、メタニル；エタニル；プロパニル、例えば、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル（イソプロピル）、シクロプロパン−１−イルなど；ブタニル、例えば、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチル−プロパン−１−イル（イソブチル）、２−メチル−プロパン−２−イル（ｔ−ブチル）、シクロブタン−１−イルなど；などが挙げられる。好ましい実施形態では、アルカニル基は（Ｃ１〜Ｃ６）アルカニルである。
【０１３３】
「アルケニル」は単独で、または別の置換基の一部として、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有し、親のアルケンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される不飽和の分枝鎖、直鎖または環状のアルキルをいう。この基は、二重結合（１つまたは複数）に対してシス型またはトランス型のいずれかの立体配座であり得る。典型的なアルケニル基としては、限定されないが、エテニル；プロペニル、例えば、プロプ−１−エン−１−イル、プロプ−１−エン−２−イル、プロプ−２−エン−１−イル、プロプ−２−エン−２−イル、シクロプロプ−１−エン−１−イル；シクロプロプ−２−エン−１−イル；ブテニル、例えば、ブト−１−エン−１−イル、ブト−１−エン−２−イル、２−メチル−プロプ−１−エン−１−イル、ブト−２−エン−１−イル、ブト−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブト−１−エン−１−イル、シクロブト−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなど；などが挙げられる。好ましい実施形態では、アルケニル基は（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニルである。
【０１３４】
「アルキニル」は単独で、または別の置換基の一部として、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有し、親のアルキンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される不飽和の分枝鎖、直鎖または環状のアルキルをいう。典型的なアルキニル基としては、限定されないが、エチニル；プロピニル、例えば、プロプ−１−イン−１−イル、プロプ−２−イン−１−イルなど；ブチニル、例えば、ブト−１−イン−１−イル、ブト−１−イン−３−イル、ブト−３−イン−１−イルなど；などが挙げられる。好ましい実施形態では、アルキニル基は（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニルである。
【０１３５】
「アルキルジイル」は単独で、または別の置換基の一部として、記載の数の炭素原子を有し（すなわち、Ｃ１〜Ｃ６は１〜６個の炭素原子を意味する）、親のアルカン、アルケンもしくはアルキンの異なる２個の炭素原子の各々から１個の水素原子を除去することによって、または親のアルカン、アルケンもしくはアルキンの単一の炭素原子から２個の水素原子を除去することによって誘導される飽和または不飽和の分枝鎖、直鎖または環状の二価の炭化水素基をいう。この２つの一価の原子団中心または二価の原子団中心の各結合価は、同じ原子と結合を形成していても異なる原子と結合を形成していてもよい。典型的なアルキルジイル基としては、限定されないが、メタンジイル；エチルジイル、例えば、エタン−１，１−ジイル、エタン−１，２−ジイル、エテン−１，１−ジイル、エテン−１，２−ジイル；プロピルジイル、例えば、プロパン−１，１−ジイル、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−２，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、シクロプロパン−１，１−ジイル、シクロプロパン−１，２−ジイル、プロプ−１−エン−１，１−ジイル、プロプ−１−エン−１，２−ジイル、プロプ−２−エン−１，２−ジイル、プロプ−１−エン−１，３−ジイル、シクロプロプ−１−エン−１，２−ジイル、シクロプロプ−２−エン−１，２−ジイル、シクロプロプ−２−エン−１，１−ジイル、プロプ−１−イン−１，３−ジイルなど；ブチルジイル、例えば、ブタン−１，１−ジイル、ブタン−１，２−ジイル、ブタン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ブタン−２，２−ジイル、２−メチル−プロパン−１，１−ジイル、２−メチル−プロパン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，１−ジイル；シクロブタン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，３−ジイル、ブト−１−エン−１，１−ジイル、ブト−１−エン−１，２−ジイル、ブト−１−エン−１，３−ジイル、ブト−１−エン−１，４−ジイル、２−メチル−プロプ−１−エン−１，１−ジイル、２−メタニリデン−プロパン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，４−ジイル、シクロブト−１−エン−１，２−ジイル、シクロブト−１−エン−１，３−ジイル、シクロブト−２−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブト−１−イン−１，３−ジイル、ブト−１−イン−１，４−ジイル、ブタ−１，３−ジイン−１，４−ジイルなど；などが挙げられる。具体的な飽和レベルが意図される場合、名称アルカニルジイル、アルケニルジイルおよび／またはアルキニルジイルが使用される。２つの結合価が同じ炭素原子上に存在していることが具体的に意図される場合、名称「アルキリデン」が使用される。好ましい実施形態では、アルキルジイル基は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルジイルである。また、原子団中心が末端の炭素に存在している飽和型の非環式のアルカニルジイル基、例えば、メタンジイル（メタノ）；エタン−１，２−ジイル（エタノ）；プロパン−１，３−ジイル（プロパノ）；ブタン−１，４−ジイル（ブタノ）；など（アルキレノ（以下に定義）とも称する）も好ましい。
【０１３６】
「アルクジイル（ａｌｋｄｉｙｌ）」は単独で、または別の置換基の一部として、記載の数の炭素原子を有し（すなわち、Ｃ１〜Ｃ６は１〜６個の炭素原子を意味する）、親のアルカン、アルケンもしくはアルキンの異なる２個の炭素原子の各々から１個の水素原子を除去することによって、または親のアルカン、アルケンもしくはアルキンの単一の炭素原子から２個の水素原子を除去することによって誘導される飽和または不飽和の分枝鎖、直鎖または環状の二価の炭化水素基をいう。この２つの一価の原子団中心または二価の原子団中心の各結合価は、同じ原子と結合を形成していても異なる原子と結合を形成していてもよい。典型的なアルクジイル基としては、限定されないが、メタンジイル；エチルジイル、例えば、エタン−１，１−ジイル、エタン−１，２−ジイル、エテン−１，１−ジイル、エテン−１，２−ジイル；プロピルジイル、例えば、プロパン−１，１−ジイル、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−２，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、シクロプロパン−１，１−ジイル、シクロプロパン−１，２−ジイル、プロプ−１−エン−１，１−ジイル、プロプ−１−エン−１，２−ジイル、プロプ−２−エン−１，２−ジイル、プロプ−１−エン−１，３−ジイル、シクロプロプ−１−エン−１，２−ジイル、シクロプロプ−２−エン−１，２−ジイル、シクロプロプ−２−エン−１，１−ジイル−  、プロプ−１−イン−１，３−ジイルなど；ブチルジイル、例えば、ブタン−１，１−ジイル、ブタン−１，２−ジイル、ブタン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ブタン−２，２−ジイル、２−メチル−プロパン−１，１−ジイル、２−メチル−プロパン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，１−ジイル；シクロブタン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，３−ジイル、ブト−１−エン−１，１−ジイル、ブト−１−エン−１，２−ジイル、ブト−１−エン−１，３−ジイル、ブト−１−エン−１，４−ジイル、２−メチル−プロプ−１−エン−１，１−ジイル、２−メタニリデン−プロパン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，４−ジイル、シクロブト−１−エン−１，２−ジイル、シクロブト−１−エン−１，３−ジイル、シクロブト−２−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブト−１−イン−１，３−ジイル、ブト−１−イン−１，４−ジイル、ブタ−１，３−ジイン−１，４−ジイルなど；などが挙げられる。具体的な飽和レベルが意図される場合、名称アルカンジイル、アルケンジイルおよび／またはアルキンジイルが使用される。好ましい一実施形態では、アルクジイル基は（Ｃ１〜Ｃ６）アルクジイルである。また、原子団中心が末端の炭素に存在している飽和型の非環式のアルカニルジイル基、例えば、メタンジイル（メタノ）；エタン−１，２−ジイル（エタノ）；プロパン−１，３−ジイル（プロパノ）；ブタン−１，４−ジイル（ブタノ）；など（アルキレン（以下に定義）とも称する）も好ましい。
【０１３７】
「アルキレノ」は単独で、または別の置換基の一部として、２つの末端の一価の原子団中心を有し、直鎖の親のアルカン、アルケンまたはアルキンの２個の末端の炭素原子の各々から１個の水素原子を除去することによって誘導される直鎖の飽和または不飽和のアルキルジイル基をいう。具体的なアルキレノの二重結合または三重結合（存在している場合）のロカントは角括弧で表示される。典型的なアルキレノ基としては、限定されないが、メタノ；エチレノ、例えば、エタノ、エテノ、エチノ；プロピレノ、例えば、プロパノ、プロプ［１］エノ、プロパ［１，２］ジエノ、プロプ［１］イノなど；ブチレノ、例えば、ブタノ、ブト［１］エノ、ブト［２］エノ、ブタ［１，３］ジエノ、ブト［１］イノ、ブト［２］イノ、ブタ［１，３］ジイノなど；などが挙げられる。具体的な飽和レベルが意図される場合、名称アルカノ、アルケノおよび／またはアルキノが使用される。好ましい実施形態では、アルキレノ基は（Ｃ１〜Ｃ６）または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキレノである。また、直鎖の飽和型のアルカノ基、例えば、メタノ、エタノ、プロパノ、ブタノなども好ましい。
【０１３８】
「ヘテロアルキル」、ヘテロアルカニル」、「ヘテロアルケニル」、「ヘテロアルキニル」、「ヘテロアルキルジイル」および「ヘテロアルキレノ」は単独で、または別の置換基の一部として、それぞれ、１個以上の炭素原子が各々、独立して、同じかまたは異なるヘテロ原子またはヘテロ原子基で置き換えられているアルキル、アルカニル、アルケニル、アルキニル、アルキルジイルおよびアルキレノ基をいう。炭素原子と置き換えられ得る典型的なヘテロ原子および／またはヘテロ原子基としては、限定されないが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＰＨ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ’−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−など（その組合せを含む）が挙げられ、ここで、各Ｒ’は独立して水素または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである。
【０１３９】
「シクロアルキル」および「ヘテロシクロアルキル」は単独で、または別の置換基の一部として、それぞれ、「アルキル」および「ヘテロアルキル」基の環状異形をいう。ヘテロアルキル基では、ヘテロ原子が分子の残部に結合される位置を占めていてもよい。典型的なシクロアルキル基としては、限定されないが、シクロプロピル；シクロブチル、例えば、シクロブタニルおよびシクロブテニル；シクロペンチル、例えば、シクロペンタニルおよびシクロペンテニル；シクロヘキシル、例えば、シクロヘキサニルおよびシクロヘキセニル；などが挙げられる。典型的なヘテロシクロアルキル基としては、限定されないが、テトラヒドロフラニル（例えば、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イルなど）、ピペリジニル（例えば、ピペリジン−１−イル、ピペリジン−２−イルなど）、モルホリニル（例えば、モルホリン−３−イル、モルホリン−４−イルなど）、ピペラジニル（例えば、ピペラジン−１−イル、ピペラジン−２−イルなど）などが挙げられる。
【０１４０】
「非環式ヘテロ原子橋状結合」は、主鎖原子が排他的にヘテロ原子および／またはヘテロ原子基である二価の橋状結合をいう。典型的な非環式のヘテロ原子橋状結合としては、限定されないが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＰＨ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ’−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−など（その組合せを含む）が挙げられ、ここで、各Ｒ’は独立して水素または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである。
【０１４１】
「親の芳香族環系」は、共役型のπ電子系を有する不飽和の環式または多環式の環系をいう。具体的には、「親の芳香族環系」の定義には、１つ以上の環が芳香族であり、１つ以上の環が飽和型または不飽和型、例えば、フルオレン、インダン、インデン、フェナレン、テトラヒドロナフタレンなどである縮合環系が包含される。典型的な親の芳香族環系としては、限定されないが、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、テトラヒドロナフタレン、トリフェニレン、トリナフタレンなど、ならびにその種々のヒドロ異性体が挙げられる。
【０１４２】
「アリール」は単独で、または別の置換基の一部として、記載の数の炭素原子を有し（すなわち、Ｃ５〜Ｃ１５は５〜１５個の炭素原子を意味する）、親の芳香族環系の単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される一価の芳香族炭化水素基をいう。典型的なアリール基としては、限定されないが、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなど、ならびにその種々のヒドロ異性体に由来する基が挙げられる。好ましい実施形態では、アリール基は（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールであり、（Ｃ５〜Ｃ１０）がさらにより好ましい。特に好ましいアリールはシクロペンタジエニル、フェニルおよびナフチルである。
【０１４３】
「アリールアリール」は単独で、または別の置換基の一部として、同一の、または同一でない２つ以上の親の芳香族環系が単結合によって一体に直接連接された環系（ここで、かかる直接的な環の連接の数は関与している親の芳香族環系の数より１少ない）の単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される一価の炭化水素基をいう。典型的なアリールアリール基としては、限定されないが、ビフェニル、トリフェニル、フェニル−ナフチル、ビナフチル、ビフェニル−ナフチルなどが挙げられる。アリールアリール基の炭素原子の数が指定されている場合、この数は、親の芳香族環の各々を構成している炭素原子を示す。例えば、（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールアリールは、各芳香族環が５〜１５個の炭素を含むものであるアリールアリール基、例えば、ビフェニル、トリフェニル、ビナフチル、フェニルナフチルなどである。好ましくは、アリールアリール基の親の芳香族環系の各々は、独立して（Ｃ５〜Ｃ１５）芳香族、より好ましくは（Ｃ５〜Ｃ１０）芳香族である。また、親の芳香族環系がすべて同一であるアリールアリール基、例えば、ビフェニル、トリフェニル、ビナフチル、トリナフチルなども好ましい。
【０１４４】
「ビアリール」は単独で、または別の置換基の一部として、単結合によって一体に直接連接された２つの同一の親の芳香族系を有するアリールアリール基をいう。典型的なビアリール基としては、限定されないが、ビフェニル、ビナフチル、ビアントラシルなどが挙げられる。好ましくは、該芳香族環系は（Ｃ５〜Ｃ１５）芳香族環、より好ましくは（Ｃ５〜Ｃ１０）芳香族環である。特に好ましいビアリール基はビフェニルである。
【０１４５】
「アリールアルキル」は単独で、または別の置換基の一部として、炭素原子、典型的には末端の炭素原子またはｓｐ３炭素原子に結合している水素原子のうちの１個がアリール基で置き換えられている非環式のアルキル基をいう。典型的なアリールアルキル基としては、限定されないが、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなどが挙げられる。具体的なアルキル部分が意図される場合、名称アリールアルカニル、アリールアルケニルおよび／またはアリールアルキニルが使用される。好ましい実施形態では、アリールアルキル基は（Ｃ６〜Ｃ２１）アリールアルキルであり、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分が（Ｃ１〜Ｃ６）であり、アリール部分が（Ｃ５〜Ｃ１５）である。特に好ましい実施形態では、アリールアルキル基は（Ｃ６〜Ｃ１３）であり、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分が（Ｃ１〜Ｃ３）であり、アリール部分が（Ｃ５〜Ｃ１０）である。
【０１４６】
「親のヘテロ芳香族環系」は、１個以上の炭素原子が各々、独立して、同じかまたは異なるヘテロ原子またはヘテロ原子基で置き換えられている親の芳香族環系をいう。炭素原子と置き換えられる典型的なヘテロ原子またはヘテロ原子基としては、限定されないが、Ｎ、ＮＨ、Ｐ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、Ｓｉなどが挙げられる。具体的には、「親のヘテロ芳香族環系」の定義には、１つ以上の環が芳香族であり、１つ以上の環が飽和型または不飽和型、例えば、ベンゾジオキサン、ベンゾフラン、クロマン、クロメン、インドール、インドリン、キサンテンなどである縮合環系が包含される。また、「親のヘテロ芳香族環系」の定義には、一般的な置換基を含むことが認知されている環、例えば、ベンゾピロンおよび１−メチル−１，２，３，４−テトラゾールなども包含される。典型的な親のヘテロ芳香族環系としては、限定されないが、アクリジン、ベンゾイミダゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾジオキサン、ベンゾジオキソール、ベンゾフラン、ベンゾピロン、ベンゾチアジアゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾトリアゾール、ベンゾオキサキシン、ベンゾオキサゾール、ベンゾオキサゾリン、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどが挙げられる。
【０１４７】
「ヘテロアリール」は単独で、または別の置換基の一部として、記載の数の環内原子を有し（例えば、「５〜１４員」は５〜１４個の環内原子を意味する）、親のヘテロ芳香族環系の単一の原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される一価のヘテロ芳香族基をいう。典型的なヘテロアリール基としては、限定されないが、アクリジン、ベンゾイミダゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾジオキサン、ベンゾジオキソール、ベンゾフラン、ベンゾピロン、ベンゾチアジアゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾトリアゾール、ベンゾオキサジン、ベンゾオキサゾール、ベンゾオキサゾリン、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなど、ならびにその種々のヒドロ異性体に由来する基が挙げられる。好ましい実施形態では、ヘテロアリール基は５〜１４員のヘテロアリールであり、５〜１０員のヘテロアリールが特に好ましい。
【０１４８】
「ヘテロアリール−ヘテロアリール」は単独で、または別の置換基の一部として、同一の、または同一でない２つ以上の親のヘテロ芳香族環系が単結合によって一体に直接連接された環系（ここで、かかる直接的な環の連接の数は関与している親のヘテロ芳香族環系の数より１少ない）の単一の原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される一価のヘテロ芳香族基をいう。典型的なヘテロアリール−ヘテロアリール基としては、限定されないが、ビピリジル、トリピリジル、ピリジルプリニル、ビプリニルなどが挙げられる。原子の数が指定されている場合、この数は、親のヘテロ芳香族環系の各々を構成している原子の数を示す。例えば、５〜１５員のヘテロアリール−ヘテロアリールは、親のヘテロ芳香族環系の各々が５〜１５個の原子を含むものであるヘテロアリール−ヘテロアリール基、例えば、ビピリジル、トリプリジルなどである。好ましくは、親のヘテロ芳香族環系の各々は独立して５〜１５員のヘテロ芳香族、より好ましくは５〜１０員のヘテロ芳香族である。また、親のヘテロ芳香族環系がすべて同一であるヘテロアリール−ヘテロアリール基も好ましい。
【０１４９】
「ビヘテロアリール」は単独で、または別の置換基の一部として、２つの同一の親のヘテロ芳香族環系を有し、単結合によって一体に直接連接されたヘテロアリール−ヘテロアリール基をいう。典型的なビヘテロアリール基としては、限定されないが、ビピリジル、ビプリニル、ビキノリニルなどが挙げられる。好ましくは、ヘテロ芳香族環系は５〜１５員のヘテロ芳香族環、より好ましくは５〜１０員のヘテロ芳香族環である。
【０１５０】
「ヘテロアリールアルキル」は単独で、または別の置換基の一部として、炭素原子、典型的には末端の炭素原子またはｓｐ３炭素原子に結合している水素原子のうちの１個がヘテロアリール基で置き換えられている非環式のアルキル基をいう。具体的なアルキル部分が意図される場合、名称ヘテロアリールアルカニル、ヘテロアリールアケニルおよび／またはヘテロアリールアルキニルが使用される。好ましい実施形態では、ヘテロアリールアルキル基は６〜２１員のヘテロアリールアルキルであり、例えば、ヘテロアリールアルキルのアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分が（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、ヘテロアリール部分が５〜１５員のヘテロアリールである。特に好ましい実施形態では、ヘテロアリールアルキルは６〜１３員のヘテロアリールアルキルであり、例えば、アルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分が（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、ヘテロアリール部分が５〜１０員のヘテロアリールである。
【０１５１】
「ハロゲン」または「ハロ」は単独で、または別の置換基の一部として、特に記載のない限り、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードをいう。
【０１５２】
「ハロアルキル」は単独で、または別の置換基の一部として、１個以上の水素原子がハロゲンで置き換えられているアルキル基をいう。したがって、用語「ハロアルキル」は、モノハロアルキル、ジハロアルキル、トリハロアルキルなどからパーハロアルキルまでを包含していることを意図する。例えば、表現「（Ｃ１〜Ｃ２）ハロアルキル」は、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、１−フルオロエチル、１，１−ジフルオロエチル、１，２−ジフルオロエチル、１，１，１−トリフルオロエチル、パーフルオロエチルなどを包含している。
【０１５３】
上記に定義した基は、充分に認知されているさらなる置換基を作出するために当該技術分野で一般的に使用されている接頭辞および／または接尾辞を含んでいる場合があり得る。例として、「アルキルオキシ」または「アルコキシ」は式「−ＯＲ」の基をいい、「アルキルアミン」は式「−ＮＨＲ」の基をいい、「ジアルキルアミン」は式「−ＮＲＲ」の基をいい、ここで、各「Ｒ」は独立してアルキルである。別の例として、「ハロアルコキシ」または「ハロアルキルオキシ」は、「Ｒ」がハロアルキルである式「−ＯＲの基をいう。
【０１５４】
また、本発明は、インフラマソームの活性化、糖尿病、鼻咽頭炎、関節痛、下痢、四肢痛、細菌感染、消化不良、悪心、筋骨格系疼痛、筋痙攣、筋肉痛、不眠症、咽喉頭痛、炎症、動脈の炎症、関節炎、乾癬、蕁麻疹、血管炎、喘息、眼の炎症、肺の炎症、肺線維症、脂漏性皮膚炎、膿疱性皮膚病、心血管疾患、好中球、白血球および／またはサイトカインの動員、アレルギー、アルツハイマー病、喘息、アテローム性動脈硬化、がん、心血管疾患、糖尿病、泌尿生殖器科系の障害、高血圧、感染性疾患、神経筋障害、腎障害、経口感染または歯周病を処置するための方法に関する。
【０１５５】
本発明の医薬組成物は、「治療有効量」または「予防有効量」の１種類以上の本発明のＤＰＡアナログを含むものである。「治療有効量」は、必要投薬量および必要期間において、所望の治療結果、例えば、種々の疾患状態または病状に伴う効果の減弱または抑制が得られるのに有効な量をいう。ＤＰＡアナログの治療有効量は、個体の疾患状態、年齢、性別および体重ならびに個体において所望の応答を誘起する治療用化合物の能力などの要素に応じて異なり得る。また、治療有効量は、治療用薬剤の毒性効果または有害な効果（あれば）よりも治療的に有益な効果が勝る量である。
【０１５６】
「予防有効量」は、必要投薬量および必要期間において、所望の予防結果が得られるのに有効な量をいう。典型的には、予防用量は、対象において疾患前または疾患の初期段階に使用されるため、予防有効量は治療有効量よりも少ない。
【０１５７】
投薬量レジメンは、所望の最適な応答（例えば、治療応答または予防応答）がもたらされるように調整され得る。例えば、単回ボーラスで投与してもよく、数回の分割用量を経時的に投与してもよく、用量を、治療状況の必要要件による示唆に応じて比例的に低減または増大させてもよい。非経口組成物を、投与の容易性および投薬量の均一性のために単位投薬形態に製剤化することは特に好都合である。単位投薬形態は、本明細書で用いる場合、処置対象の哺乳動物対象に対する投薬ユニットとして適合させた物理的に独立した単位をいう；各単位には、所望の治療効果がもたらされるように計算された所定の量の活性化合物が、必要とされる医薬用担体とともに含有されている。本発明の単位投薬形態の仕様は、（ａ）ＤＰＡアナログの特有の特徴と、得ようとする具体的な治療効果または予防効果、ならびに（ｂ）個体の過敏症の処置のためのかかる活性化合物の配合技術分野に固有の制限によって決定され、これらに直接的に依存する。
【０１５８】
本発明のＤＰＡアナログの治療有効量または予防有効量の例示的で非限定的な範囲の一例は０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１〜１０ｍｇ／ｋｇである。投薬量の値は、緩和対象の病状の型および重症度により異なり得ることに注意されたい。さらに、任意の具体的な対象に対して、具体的な投薬量レジメンは経時的に、個体の必要性および組成物の投与担当者または投与監督担当者の専門的な判断に応じて調整するのがよいこと、ならびに本明細書に示した投薬量範囲は例示的にすぎず、請求項に記載の組成物の範囲または実施を限定することを意図するものではないことを理解されたい。
【０１５９】
本発明の化合物を医薬品としてヒトおよび哺乳動物に投与する場合、これを、そのままの状態で投与してもよく、例えば、０．１〜９９．５％（より好ましくは０．５〜９０％）の活性成分、すなわち、少なくとも１種類のＤＰＡアナログを薬学的に許容され得る担体との組合せで含む医薬組成物として投与してもよい。
【０１６０】
一部の特定の実施形態では、本発明の化合物は１つ以上の酸性官能基を含むものであり得、したがって、薬学的に許容され得る塩基と薬学的に許容され得る塩を形成し得るものである。用語「薬学的に許容され得る塩、エステル、アミドおよびプロドラッグ」は、本明細書で用いる場合、正しい医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを伴わずに患者の組織との接触における使用に適しており、妥当な便益／リスク比に合っており、本発明の化合物の意図された使用のために有効な本発明の化合物のカルボン酸塩、アミノ酸付加塩、エステル、アミドおよびプロドラッグをいう。用語「塩」は、本発明の化合物の比較的無毒性の無機および有機酸付加塩をいう。このような塩は、該化合物の最終の単離および精製の際にインサイチュで調製されるものであってもよく、精製した遊離の塩基形態の化合物を適当な有機酸または無機酸と別途に反応させ、かくして形成される塩を単離することによって調製されるものであってもよい。このようなものとしては、アルカリ金属およびアルカリ土類金属、例えば、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが主体のカチオン、ならびに無毒性のアンモニウム、第４級アンモニウム、およびアミンカチオン、例えば限定されないが、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどが挙げられ得る（例えば、Ｂｅｒｇｅ  Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，１９７７；６６：１  １９（これは引用により本明細書に組み込まれる）参照）。
【０１６１】
用語「薬学的に許容され得るエステル」は、本発明の化合物の比較的無毒性のエステル化生成物をいう。このようなエステルは、該化合物の最終の単離および精製の際にインサイチュで調製されるものであってもよく、精製した遊離の塩基形態の化合物またはヒドロキシルを適当なエステル化剤と別途に反応させることによって調製されるものであってもよい。カルボン酸は、触媒の存在下、アルコールでの処理によってエステルに変換され得る。この用語は、さらに、生理学的条件下で溶媒和され得る低級炭化水素基、例えば、アルキルエステル、メチル、エチルおよびプロピルエステルを包含していることを意図する。
【０１６２】
また、湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、フレーバー剤および賦香剤、保存料および酸化防止剤を組成物中に含有させてもよい。
【０１６３】
薬学的に許容され得る酸化防止剤の例としては：水溶性の酸化防止剤、例えば、アスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど；油溶性の酸化防止剤、例えば、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなど；および金属キレート剤、例えば、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などが挙げられる。
【０１６４】
本発明の製剤は、としては、静脈内、経口、経鼻、経表面、経皮、口腔内、舌下、経直腸、経膣および／または非経口投与に適したものが挙げられる。該製剤は、単位投薬形態で簡便に提示され得、製薬の技術分野でよく知られた任意の方法によって調製され得る。１つの投薬形態を作製するために担体物質と合わされ得る活性成分の量は、一般的には、治療効果がもたらされる化合物量である。一般的に、１００パーセントのうち、この量は、約１パーセント〜約９９パーセントの活性成分、好ましくは約５パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセント〜約３０パーセントの範囲である。
【０１６５】
このような製剤または組成物の調製方法は、本発明の化合物を担体と、任意選択で１種類以上の補助成分と会合させる工程を含むものである。一般に、製剤は、本発明の化合物を、液状担体または微粉砕された固形担体または両方と一様に充分に会合させ、次いで、必要であれば、製剤品を成形することにより調製される。
【０１６６】
経口投与に適した本発明の製剤は、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ剤（着香基剤、通常、スクロースおよびアカシアまたはトラガカントを使用）、散剤、顆粒剤の形態であり得るか、あるいは水性もしくは非水性液体中の液剤もしくは懸濁剤として、または水中油型もしくは油中水型の液状乳剤として、またはエリキシル剤もしくはシロップ剤として、またはトローチ剤として（不活性基剤、例えば、ゼラチンおよびグリセリン、もしくはスクロースおよびアカシアを使用）、および／またはマウスウォッシュとしてのものなどであり得る。各々は、所定の量の本発明の化合物を活性成分として含有している。また、本発明の化合物をボーラス、舐剤またはペースト剤として投与してもよい。
【０１６７】
経口投与のための本発明の固形投薬形態（カプセル剤、錠剤、丸剤、糖衣錠、散剤、顆粒剤など）では、活性成分を、１種類以上の薬学的に許容され得る担体、例えば、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム、および／または任意の以下のもの：充填剤または増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸；結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアカシアなど；保湿剤、例えば、グリセロール；崩壊剤、例えば、アガーアガー、炭酸カルシウム、イモデンプンまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のシリケート、および炭酸ナトリウム；溶解遅延剤、例えば、パラフィン；吸収促進剤、例えば、第４級アンモニウム化合物；湿潤剤、例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなど；吸収剤、例えば、カオリンおよびベントナイトクレイ；滑沢剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、ならびにその混合物；ならびに着色剤と混合する。カプセル剤、錠剤の丸剤の場合、医薬組成物にはまた、緩衝剤も含めてもよい。また、同様の型の固形組成物を充填剤として、充填型ゼラチン軟カプセル剤および硬カプセル剤において、例えば、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を用いて使用してよい。
【０１６８】
錠剤は、任意選択で１種類以上の補助成分を伴って圧縮または成型によって作製され得る。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチンもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、保存料、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムもしくは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、表面活性剤または分散化剤を用いて調製され得る。成型錠剤は、適当な機械で、粉末化し、湿潤させた化合物と不活性液状希釈剤の混合物を成型することにより作製され得る。
【０１６９】
本発明の医薬組成物の錠剤および他の固形投薬形態、例えば、糖衣錠、カプセル剤、丸剤および顆粒剤を、任意選択で、コーティングおよびシェル、例えば、腸溶性コーティングおよび医薬品製剤化技術分野でよく知られた他のコーティングを伴って得て（ｓｃｏｒｅ）もよく、または調製してもよい。また、これを、内部の活性成分の低速放出または制御放出がもたらされるように、例えば、所望の放出プロフィールを得るためのさまざな割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはミクロスフィアを用いて製剤化してもよい。これを、例えば、細菌保持フィルターに通す濾過によって、または滅菌水もしくはなんらかの他の滅菌注射用媒体に溶解され得る滅菌固形組成物の形態の滅菌剤を使用直前に組み込むことによって滅菌してもよい。また、このような組成物は、任意選択で乳白剤を含有させてもよく、活性成分（１種類または複数種）のみを、または該成分を優先的に胃腸管内の特定の部分に、任意選択で、遅延様式で放出する組成物のものにしてもよい。使用され得る埋め込み用組成物の例としては高分子物質およびワックスが挙げられる。また、適切な場合は、活性成分を、１種類以上の上記の賦形剤とともにマイクロカプセル封入形態にしてもよい。
【０１７０】
経口投与のための本発明の化合物の液状投薬形態としては、薬学的に許容され得る乳剤、マイクロエマルジョン剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が挙げられる。活性成分に加えて、液状投薬形態には、当該技術分野で一般的に使用されている不活性希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤など、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油類（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにその混合物が含有され得る。
【０１７１】
不活性希釈剤の他に、経口組成物にはまた佐剤、例えば、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、フレーバー剤、着色剤、賦香剤および保存剤を含めてもよい。
【０１７２】
懸濁剤には、活性化合物に加えて懸濁化剤、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微晶質セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、アガーアガーおよびトラガカントなど、ならびにその混合物が含有され得る。
【０１７３】
経直腸または経膣投与のための本発明の医薬組成物の組成物は坐剤として提示され得、これは、１種類以上の本発明の化合物を、例えばココアバター、ポリエチレングリコール、坐剤用ワックスまたはサリチレートを含む１種類以上の適当な非刺激性の賦形剤または担体と混合することにより調製され得、室温では固形であるが体温では液状となり、したがって、直腸または膣腔内で融解し、活性化合物を放出するものである。
【０１７４】
また、経膣投与に適した本発明の製剤としては、当該技術分野で適切であることが知られているものなどの担体を含有しているペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤またはスプレー製剤も挙げられる。
【０１７５】
本発明の化合物の経表面または経皮投与のための投薬形態としては、粉末剤、スプレー剤、軟膏、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、液剤、貼付剤および吸入剤が挙げられる。活性化合物は、滅菌条件下で薬学的に許容され得る担体と、および必要とされ得る任意の保存料、バッファーまたは噴射剤と混合され得る。
【０１７６】
軟膏、ペースト剤、クリーム剤およびゲル剤には、本発明の活性化合物に加えて賦形剤、例えば、動物性および植物性の脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはその混合物が含有され得る。
【０１７７】
粉末剤およびスプレー剤には、本発明の化合物に加えて賦形剤、例えば、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物が含有され得る。スプレー剤にはさらに、慣用的な噴射剤、例えば、クロロフルオロハイドロカーボンならびに揮発性の非置換の炭化水素、例えば、ブタンおよびプロパンが含有され得る。
【０１７８】
経皮貼付剤は、身体に対して本発明の化合物の制御された送達がもたらされるという付加的な利点を有する。かかる投薬形態は、該化合物を適正な媒体中に溶解または分散させることにより作製され得る。また、皮膚を通過する該化合物の流量を増大させるために吸収促進剤を使用してもよい。かかる流量の割合は、速度制御膜を設けること、または活性化合物をポリマーマトリックスまたはゲル中に分散させることのいずれかによって制御することができる。
【０１７９】
経眼製剤、眼用の軟膏、粉末剤、液剤などもまた、本発明の範囲に含まれることが想定される。かかる液剤は結膜炎の処置に有用である。
【０１８０】
非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、１種類以上の本発明の化合物を、１種類以上の薬学的に許容され得る滅菌された等張性の水性もしくは非水性の溶液、分散液、懸濁剤もしくは乳濁液、または滅菌粉末（これは、使用直前に滅菌注射用液剤もしくは分散剤に再構成され得る）との組合せで含むものであり、これに、酸化防止剤、バッファー、静菌剤、製剤を対象のレシピエントの血液と等張性にする溶質または懸濁化剤もしくは増粘剤を含有させてもよい。
【０１８１】
本発明の医薬組成物に使用され得る適当な水性および非水性の担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）および適当なその混合物、植物油、例えばオリーブ油、ならびに注射可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチルが挙げられる。適正な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング物質の使用によって、分散剤の場合は必要とされる粒径を維持することによって、および界面活性剤の使用によって維持され得る。
【０１８２】
また、このような組成物には佐剤、例えば、保存料、湿潤剤、乳化剤および分散化剤も含有され得る。微生物の作用の抑制は、種々の抗細菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などを含めることによって確実にされ得る。また、等張剤、例えば糖類、塩化ナトリウムなどを組成物中に含めることが望ましい場合があり得る。また、注射用医薬形態の持効性吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを含めることによってもたらされ得る。
【０１８３】
一部の場合では、薬物の効果を長引かせるため、皮下または筋肉内注射による薬物の吸収を低速化させることが望ましい。これは、不充分な水溶性を有する結晶性または非晶質の物質の液状懸濁剤の使用によって行なわれ得る。そのため、薬物の吸収速度はその溶解速度に依存し、これはさらに、結晶サイズおよび結晶形に依存し得る。あるいはまた、非経口投与された薬物形態の遅延吸収は、該薬物を油性ビヒクル中に溶解または懸濁させることにより行なわれる。
【０１８４】
注射用デポー形態は、生分解性ポリマー、例えばポリラクチド−ポリグリコリド中の主題の化合物のマイクロカプセル封入マトリックスを形成することにより作製される。ポリマーに対する薬物比および使用される具体的なポリマー性質に応じて、薬物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としてはポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。また、デポー注射用製剤は、身体組織と適合性であるリポソームまたはマイクロエマルジョン中に該薬物をトラップすることにより調製される。
【０１８５】
本発明の調製物は経口、非経口、経表面または経直腸で投与され得る。これはもちろん、各投与経路に適した形態によって投与される。例えば、これは、錠剤またはカプセル剤の形態で、注射、吸入、目薬、軟膏、坐剤などによって、注射、輸注もしくは吸入による投与で；ローション剤もしくは軟膏により経表面で；および坐剤により経直腸で投与される。静脈内注射での投与が好ましい。
【０１８６】
語句「非経口投与」および「非経口投与される」は、本明細書で用いる場合、経腸および経表面投与以外の、通常、注射による投与様式を意味し、限定されないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、包内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、気管経由、皮下、表皮内、関節内、被膜下、クモ膜下、脊髄内および胸骨内注射および輸注を包含している。
【０１８７】
語句「全身投与」、「全身投与される」、「末梢投与」および「末梢投与される」は、本明細書で用いる場合、化合物、薬物または他の物質の中枢神経系内への直接的な投与以外の、患者の系に入り、したがって代謝および他の同様のプロセスに供されるような投与、例えば、皮下投与を意味する。
【０１８８】
本化合物は、ヒトおよび他の動物に対して治療のために任意の適当な投与経路によって、例えば経口、経鼻（これは、例えば、スプレー剤によって）、経直腸、膣内、非経口、大槽内および経表面（これは、散剤、軟膏または滴剤によって）（口腔内および舌下を含む）で投与され得る。
【０１８９】
選択される投与経路に関係なく、本発明の化合物（これは適当な水和形態で使用され得る）および／または本発明の医薬組成物は、当業者に知られた慣用的な方法によって薬学的に許容され得る投薬形態に製剤化される。本発明の医薬組成物中の活性成分の実際の投薬量レベルは、具体的な患者、組成物および投与様式で、患者に対して毒性となることなく所望の治療応答が得られるのに有効な量の活性成分が得られるように変更され得る。
【０１９０】
選択される投薬量レベルは、さまざまな要素、例えば、使用される具体的な本発明の化合物の活性またはそのエステル、塩またはアミド、投与経路、投与期間、使用される具体的な化合物の排出速度、処置の持続期間、他の薬物、使用される具体的な化合物と併用して使用される化合物および／または物質、処置対象の患者の年齢、性別、体重、体調、一般健康状態および既往歴、ならびに医学分野でよく知られた同様の要素に依存する。
【０１９１】
当業者の医師または獣医は、必要とされる医薬組成物の有効量を容易に決定し、処方することができよう。例えば、医師または獣医であれば、医薬組成物中に使用される本発明の化合物の用量を、所望の治療効果を得るために必要とされるレベルより低いレベルで開始し、所望の効果が得られるまで投薬量を徐々に増やすであろう。
【０１９２】
一般に、本発明の化合物の好適な日用量は、治療効果がもたらされるのに有効な最低用量である化合物量である。かかる有効用量は一般的には上記の要素に依存する。一般的に、患者に対する本発明の化合物の静脈内および皮下用量は、指示された鎮痛効果のために使用される場合、約０．０００１〜約１００ｍｇ／キログラム体重／日、より好ましくは約０．０１〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、さらにより好ましくは約０．１〜約４０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。例えば、対象の体重２０グラムあたり約０．０１マイクログラム〜２０マイクログラム、約２０マイクログラム〜１００マイクログラムおよび約１０マイクログラム〜２００マイクログラムの本発明の化合物が投与される。
【０１９３】
所望により、活性化合物の有効日用量は、１日の間に適切な間隔で分けて投与される２、３、４、５、６回またはそれ以上の分割用量として、任意選択で単位投薬形態にて投与され得る。
【０１９４】
本発明では、包装材および該包装材内部に含有されたＤＰＡアナログ製剤を含む製造物品も取り上げて記載している。この製剤は少なくとも１種類のＤＰＡアナログを含むものであり、包装材は、該製剤が対象に対して本明細書に記載の１つ以上病状を処置するために、かかる病状（１つまたは複数）が処置または予防されるのに有効な量、頻度および持続期間で投与され得るものであることを示すラベル表示または添付文書を含むものである。かかる病状は本明細書の至る箇所に記載しており、引用により本明細書に組み込まれる。好適なＤＰＡアナログは本明細書に記載のものである。
【０１９５】
本発明により、驚くべきことに、新しい有用なＤＰＡアナログのジヒドロキシおよび／またはトリヒドロキシアナログ、例えば、式（Ｉ）：
【化２３】
2018525359.tif 000025
を含む化合物に関する新規な化合物、組成物および使用方法が提供され、
【０１９６】
式中、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３の各々は個々に保護基または水素原子であり；
【０１９７】
式中、
【化２４】
2018525359.tif 000026
は二重結合であり；
【０１９８】
ここで、各二重結合
【化２５】
2018525359.tif 000027
は独立してＺ配置またはＥ配置のいずれかであり；
【０１９９】
式中、７、１３および２０の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置であり；
【０２００】
式中、Ｚは−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲｃＲｃまたは−ＣＮであり；
【０２０１】
各Ｒａは独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、シクロヘキシル、（Ｃ４〜Ｃ１１）シクロアルキルアルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、フェニル、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、ベンジル、２〜６員のヘテロアルキル、３〜８員のシクロヘテロアルキル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピペリジニル、４〜１１員のシクロヘテロアルキルアルキル、５〜１０員のヘテロアリールまたは６〜１６員のヘテロアリールアルキルから選択され；
【０２０２】
各Ｒｃは独立して保護基またはＲａであるか、あるいはまた、各Ｒｃは、これが結合している窒素原子と一体となって、５〜８員のシクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールを形成しており、該シクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールは、任意選択で１個以上の同じかまたは異なるさらなるヘテロ原子を含むものであってもよく、任意選択で１つ以上の同じかまたは異なるＲａ基または適当なＲｂ基で置換されていてもよく；
【０２０３】
各Ｒｂは独立して、＝Ｏ、−ＯＲｄ、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロアルキルオキシ、−ＯＣＦ３、＝Ｓ、−ＳＲｄ、＝ＮＲｄ、＝ＮＯＲｄ、−ＮＲｃＲｃ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、−Ｓ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−ＯＳ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＯＨ）Ｒａ、−Ｃ（ＮＯＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（ＮＨ）］ｎＮＲｃＲｃまたは−［ＮＲａＣ（ＮＲａ）］ｎＮＲｃＲｃから選択され；
【０２０４】
各ｎは、独立して０〜３の整数であり；
【０２０５】
各Ｒｄは独立して保護基またはＲａである；
【０２０６】
またはその薬学的に許容され得る塩、
種々の態様において、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である場合、水素ではない。他の態様では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である。他の態様では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素である。
【０２０７】
ＤＰＡアナログ（Ｉ）の重要な具体的な異性体の１つは、式：
【化２６】
2018525359.tif 000028
を構成する（Ｉａ）であり、
【０２０８】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、Ｃ７、Ｃ１３およびＣ２０は独立してＲ配置またはＳ配置である。
【０２０９】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（Ｉ）または（Ｉａ）：
【化２７】
2018525359.tif 000029
を含む精製された化合物を提供し、
【０２１０】
式中、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３、
【化２８】
2018525359.tif 000030
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、１３および２０位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。一態様では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２１１】
上記のすべての実施形態において、特定の一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。他の実施形態では、化合物ＩおよびＩａが精製されている場合、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３は水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２１２】
化合物（Ｉ）および（Ｉａ）は、そのあらゆる薬学的に許容され得る塩、エステル、精製形態／単離形態、ならびに可能なヒドロキシル基のうちの一方または両方が本明細書に記載の保護基に変換されている化合物を包含していることを理解されたい。
【０２１３】
別の態様において、本発明は、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＩ）：
【化２９】
2018525359.tif 000031
を含む化合物に関するものであり、
【０２１４】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、
【化３０】
2018525359.tif 000032
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、８および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである、
またはその薬学的に許容され得る塩。一部の態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である場合、水素ではない。また他の態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である場合、水素である。
【０２１５】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である。
【０２１６】
ＤＰＡアナログ（ＩＩ）の重要な具体的な異性体の１つは、式：
【化３１】
2018525359.tif 000033
を構成する（ＩＩａ）であり、
【０２１７】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、炭素７、８および１３は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。
【０２１８】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＩ）または（ＩＩａ）：
【化３２】
2018525359.tif 000034
を含む精製された化合物を提供し、
【０２１９】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、
【化３３】
2018525359.tif 000035
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりである。一態様では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２２０】
上記のすべての実施形態において、特定の一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２２１】
他の実施形態では、化合物ＩＩおよびＩＩａが精製されている場合、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３はともに水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２２２】
化合物（ＩＩ）および（ＩＩａ）は、そのあらゆる薬学的に許容され得る塩、エステル、精製形態／単離形態、ならびに可能なヒドロキシル基のうちの一方または両方が本明細書に記載の保護基に変換されている化合物を包含していることを理解されたい。
【０２２３】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＩＩ）：
【化３４】
2018525359.tif 000036
を含む化合物を提供し、
【０２２４】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、
【化３５】
2018525359.tif 000037
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、１２および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである、
またはその薬学的に許容され得る塩。種々の態様において、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である場合、水素ではない。また他の態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３がすべて水素原子である場合、水素である。
【０２２５】
一実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３がすべて水素原子である。
【０２２６】
ＤＰＡアナログ（ＩＩＩ）の重要な具体的な異性体の１つは、式：
【化３６】
2018525359.tif 000038
を構成する（ＩＩＩａ）であり、
【０２２７】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、１２および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。
【０２２８】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＩＩ）または（ＩＩＩａ）：
【化３７】
2018525359.tif 000039
を含む精製された化合物を提供し、
【０２２９】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、
【化３８】
2018525359.tif 000040
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７、１２および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。一態様では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３がすべて水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２、およびＰ３がすべて水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２３０】
上記のすべての実施形態において、特定の一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２３１】
他の実施形態では、化合物ＩＩＩおよびＩＩＩａが精製されている場合、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３は水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２３２】
化合物（ＩＩＩ）および（ＩＩＩａ）は、そのあらゆる薬学的に許容され得る塩、エステル、精製形態／単離形態、ならびに可能なヒドロキシル基のうちの一方または両方が本明細書に記載の保護基に変換されている化合物を包含していることを理解されたい。
【０２３３】
また別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＶ）：
【化３９】
2018525359.tif 000041
を含む化合物を提供し、
【０２３４】
式中、Ｐ１、Ｐ２、
【化４０】
2018525359.tif 000042
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、Ｃ７およびＣ１３は独立してＲまたはＳのいずれかである、
またはその薬学的に許容され得る塩。一部の態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１とＰ２がともに水素原子である場合、水素ではない。他の態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１とＰ２がともに水素原子である場合、水素である。
【０２３５】
一実施形態では、Ｐ１とＰ２がともに水素原子である。
【０２３６】
ＤＰＡアナログ（ＩＶ）の重要な具体的な異性体の１つは、式：
【化４１】
2018525359.tif 000043
を構成する（ＩＶａ）であり、
【０２３７】
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、Ｃ７およびＣ１３は独立してＲまたはＳのいずれかである。
【０２３８】
別の態様において、本発明により、新しい有用なＤＰＡアナログ、例えば、式（ＩＶ）または（ＩＶａ）：
【化４２】
2018525359.tif 000044
を含む精製された化合物を提供し、
【０２３９】
式中、Ｐ１、Ｐ２、
【化４３】
2018525359.tif 000045
、Ｚ、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄおよびｎは先に規定したとおりであり、７および１３位の炭素は独立してＲ配置またはＳ配置のいずれかである。一態様では、Ｐ１とＰ２はともに水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１とＰ２がともに水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２４０】
上記のすべての実施形態において、特定の一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２４１】
他の実施形態では、化合物ＩＶおよびＩＶが精製されている場合、Ｐ１とＰ２はともに水素原子である。一態様では、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。別の実施形態では、Ｐ１とＰ２がともに水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である。
【０２４２】
化合物（ＩＶ）および（ＩＶａ）は、そのあらゆる薬学的に許容され得る塩、エステル、精製形態／単離形態、ならびに可能なヒドロキシル基のうちの一方または両方が本明細書に記載の保護基に変換されている化合物を包含していることを理解されたい。
【０２４３】
材料および方法
【０２４４】
大腸菌性腹膜炎
【０２４５】
動物実験はすべて、Ｈａｒｖａｒｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｒｅａ  Ｓｔａｎｄｉｎｇ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  Ａｎｉｍａｌｓ（プロトコル番号０２５７０）に従って実施した。マウス（雄ＦｖＢ，６−８週齢，Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，供給元によるとおりに必須脂肪酸含有ラボダイエットを給餌）をイソフルランで麻酔し、細菌性腹膜炎を起こした。簡単には、生菌の大腸菌（血清型Ｏ６：Ｋ２：Ｈ１；１×１０５または１×１０７ＣＦＵ／マウス）の５分前に試験化合物またはビヒクルをｉ．ｐ．またはｉ．ｖ．で注射した。指定の時間間隔でマウスを回収し、血液を心臓穿刺によってヘパリン中に収集し、腹腔内滲出液を４ｍｌのＰＢＳ中に収集した。滲出液中の細胞性組成物を、チュルク氏液および光学顕微鏡検査を用いて、およびフローサイトメトリーによって調べた。フローサイトメトリーのため、滲出細胞を抗マウスＣＤ１６／ＣＤ３２（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０分間，４℃，５％ウシ胎仔血清含有ＰＢＳ／染色液中）とともにインキュベートした後、ＦＩＴＣコンジュゲート抗マウスＬｙ６Ｇ抗体（クローン：１Ａ８，ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＰＥコンジュゲート抗マウスＦ４／８０抗体（クローン：ＢＭ８，ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５コンジュゲート抗マウスＣＤ１１ｂ抗体（クローン：Ｍ１／７０，ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）とともに３０分間（４℃，染色液中）インキュベーションした。腹腔滲出白血球の細菌食作用を評価するため、滲出細胞をＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５コンジュゲート抗マウスＣＤ１１ｂ抗体（３０分，４℃，染色液中）とともにインキュベートし、次いで固定し、ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）  Ｂｕｆｆｅｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を製造業者の使用説明書に従って用いて透過処理し、ＦＩＴＣコンジュゲート抗大腸菌抗体（ＧｅｎＴｅｘ，３０分，４℃，ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）  Ｂｕｆｆｅｒ中）とともにインキュベートした。感染性滲出液中におけるエフェロサイトーシスを、滲出白血球をＰＥコンジュゲート抗マウスＦ４／８０抗体（３０分，４℃，染色液中）とともにインキュベートことにより評価し、次いで固定し、ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）  Ｂｕｆｆｅｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて透過処理し、ＦＩＴＣコンジュゲート抗マウスＬｙ６Ｇ抗体とともにインキュベートした（３０分，４℃，ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）  Ｂｕｆｆｅｒ中）。体温を、赤外線放射温度計（Ｆｌｕｋｅ）を用いて評価した。末梢血および炎症滲出液中の細菌計数を、ＬＢ寒天プレート上での段階希釈した試料の一夜培養（３７℃）によって測定した。カスパーゼ１レベルを、ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５コンジュゲート抗マウスＣＤ１１ｂ抗体との滲出細胞のインキュベーション（３０分，４℃，染色液中）によって評価し、次いで固定し、ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）  Ｂｕｆｆｅｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて透過処理し、抗カスパーゼ１抗体（Ａｂｃａｍ，３０分，４℃，ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）  Ｂｕｆｆｅｒ中）とともにインキュベートした後、抗ウサギＡｌｅｘａ  ４８８コンジュゲート抗体（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，３０分，４��，ＢＤ  Ｐｅｒｍ／Ｗａｓｈ（商標）  Ｂｕｆｆｅｒ中）とともにインキュベートした。ＩＬ−１βレベルを無細胞の上清み中において、抗マウスＩＬ−１β  ＥＬＩＳＡ（Ａｂｃａｍ）を製造業者の使用説明書に従って用いて測定した。乳酸デヒドロゲナーゼ活性を無細胞の上清み中において測定し、ＮＡＤ＋からのＮＡＤＨの形成Ｌａｃｔａｔｅ  Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ  Ａｓｓａｙキット（Ｓｉｇｍａ）を製造業者の使用説明書に従って用いて評価した。
【０２４６】
選択実験では、消散指数を２７の場合のようにして計算した。Ψｍａｘ，滲出液中の最大ＰＭＮ数；Ｔｍａｘ，ＰＭＮ数が最大に達したときの時間点；Ｒ５０，最大ＰＭＮ数の５０％；Ｔ５０，ＰＭＮ数が最大の５０％まで減少したときの時間点；Ｒｉ（消散時間）、Ｔ５０−Ｔｍａｘ，５０％のＰＭＮが滲出液から消失するまでの期間。試験製剤品の消散促進作用を評価するため、これを、大腸菌（１０５ＣＦＵ）接種の１２時間後に投与し、消散指数を評価した。
【０２４７】
一部の実験では、マウスにｉ．ｐ．注射により、ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４（後で詳述するようにして単離し、それぞれ、２：１：１：８の比の混合物として合わせた）を大腸菌接種の２時間後に投与した。血液と肺を大腸菌接種の６時間後に回収した。血液は、末梢血エイコサノイドレベルを調べる（後で詳述）ために使用した。肺はＴｒｉＲｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中に入れ、ＲＮＡを製造業者の使用説明書に従って単離し、マウスエンドセリン−１およびプラスミノゲンアクチベータインヒビター−１の相対的ｍＲＮＡ発現を、Ｑｉａｇｅｎ  ＳＹＢＲ（登録商標）Ｇｒｅｅｎ  ＲＯＸ  ｑＰＣＲマスターミックスおよびＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ（登録商標）Ｐｒｉｍｅｒアッセイを製造業者の使用説明書に従って使用し、マウスグリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼをハウスキーピング遺伝子として用いて測定した。ｍＲＮＡ発現は、ＡＢＩ  ＰＲＩＳＭ  ７９００ＨＴシステム（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて測定した。測定実験では、腹腔内滲出液をマウスから大腸菌接種の１２時間後に採取し、細菌負荷を白血球計数とともに、上記に詳述したようにして測定した。
【０２４８】
生存率の試験のため、マウスに、試験化合物または好中球−内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）コインキュベーション物由来の生物学的分離物をｉ．ｐ．注射により、大腸菌（２．５×１０７ＣＦＵ）の接種の５分前に投与し、生存率を評価した。指定の実験では、ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４を、後で詳述するようにして単離し、それぞれ２：１：１：８の比の混合物として合わせ、ｉ．ｐ．注射により大腸菌（２．５×１０７ＣＦＵ）の２時間後に投与し；その後９４時間、生存率を評価した。別個の実験において、０．５μｇ（低用量）または５μｇ（高用量）のアトルバスタチンをｉ．ｐ．により、表示した濃度のＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４（これらは、後で詳述するようにして単離して定量し、混合物（２：１：１：８の比）として合わせた）とともに、またはなしで大腸菌（２．５×１０７ＣＦＵ）接種の３時間後に投与し、次の９３時間、生存率を評価した。
【０２４９】
別個の一組の実験において、マウスに大腸菌を接種し；６０分後、これらにＬ−ＮＡＭＥ（２４ｍｇ／ｋｇ）を、および５分後にアトルバスタチン（５μｇ）をｉ．ｖ．注射によって投与した。５時間後、心臓穿刺によって血漿を得、ＬＭレベルを脂質メディエーターメタボロリピドミクスによって調べた。動物実験ではすべて、マウスを非盲検的にビヒクル群または処置群に無作為化した。
【０２５０】
生合成および脂質メディエーターメタボロリピドミクス
【０２５１】
単離型ｎ−３  ＤＰＡ（Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を、ヒト組換えＣＯＸ−２とともに（Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ；０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ中，ｐＨ８．０，２０μＭブタヘマチン，０．６７ｍＭフェノール）、室温で３０分間インキュベートした。インキュベーションを１容量のメタノールを用いて停止させ、産物をジエチルエーテルを用いて抽出した（２８の場合のとおり）。１３−ＨＤＰＡを、ＲＰ−ＨＰＬＣ（１１００  Ｓｅｒｉｅｓ；Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）およびＡｇｉｌｅｎｔ  Ｃ１８  Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌカラム（２．７μｍ×４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）を用いて単離し、移動相は、メタノール／水（６０：４０，ｖｏｌ：ｖｏｌ）（０．５ｍｌ／分）からなるものを２０分間で９８：２（ｖｏｌ：ｖｏｌ）まで直線的に漸増させた。１３−ＨＤＰＡ（１０μＭ）をイモ５−ＬＯＸ（Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）とともに３０分間（４℃，０．１Ｍリン酸バッファー，ｐＨ６．３，０．０３％Ｔｗｅｅｎ  ２０）インキュベートした。インキュベーションを１容量の氷冷メタノールを用いて停止させ、産物をＮａＢＨ４（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を用いて還元し、抽出した（２８の場合のとおり）。
【０２５２】
メタノール（２容量）をインキュベーション細胞、血漿（マウスおよびヒト）ならびに感染性滲出液に添加し、試料を抽出時まで−２０℃で保存した。ＬＣ−ＭＳ−ＭＳベースのメタボロリピドミクスのための試料はすべて、固相抽出カラムを用いて既報のとおりに抽出した２９。試料の抽出前に、定量を容易にするために、クロマトグラフィー分析における関心領域である変性内部標準（ｄ４−ＰＧＥ２、ｄ５−ＬＸＡ４、ｄ４−ＲｖＤ２、ｄ４−ＬＴＢ４およびｄ８−５Ｓ−ＨＥＴＥ）（５００ｐｇずつ）を添加した。抽出した試料を、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＳＩＬ−２０ＡＣオートインジェクターおよびＬＣ−２０ＡＤバイナリーポンプ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｃｏｒｐ．）を取り付けたＬＣ−ＭＳ−ＭＳシステムＱｔｒａｐ  ６５００（ＡＢ  Ｓｃｉｅｘ）によって分析した。Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ  Ｃ１８カラム（１００×４．６ｍｍ×１．８μｍ）を、メタノール／水／酢酸を５５：４５：０．０１（ｖｏｌ：ｖｏｌ：ｖｏｌ）から１０分間で８５：１５：０．０１（ｖｏｌ：ｖｏｌ：ｖｏｌ）まで、次いで次の８分間で９８：２：０．０１（ｖｏｌ：ｖｏｌ：ｖｏｌ）まで直線的に漸増させた勾配で使用した。続いて、これを２分間、９８：２：０．０１（ｖｏｌ：ｖｏｌ：ｖｏｌ）に維持した。流速は０．４ｍｌ／分に維持した。脂質メディエーターレベルをモニタリングし、定量するため、各分子の指標イオン断片（ｍ／ｚ）を用いる多重反応モニタリング（ＭＲＭ）法を開発し、親イオン（Ｑ１）と特徴的な娘イオン（Ｑ３）をモニタリングした。同定は、最低６種類の診断用イオンを使用する公表基準を用いて実施した２９。較正曲線は、有機全合成によって得た脂質メディエーター混合物を用いて求め、このとき、これらの脂質メディエーターは入手可能ではなかった（ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３、ＲｖＴ４および１３−ＨＤＰＡ）；同様のクロマトグラフィー特性を有する既知のメディエーター（ＲｖＴ１の代わりにＲｖＤ２、ＲｖＴ２およびＲｖＴ３の代わりにＲｖＤ１；ＲｖＴ４の代わりにＲｖＤ５；１３−ＨＤＰＡの代わりに１３−ＨＤＨＡ）を使用した。各化合物のための線形較正曲線は、０．９８〜０．９９の範囲のｒ２値を用いて得た。検出限界は約０．１ｐｇであった。定量は、２９の場合のようにして行なった。６−ケト−ＰＧＦ１αレベルを測定するため、試料を上記に概略を示したとおりに抽出し、水中に懸濁させ、６−ケト−ＰＧＦ１αレベルを６−ケト−ＰＧＦ１α  ＥＬＩＳＡ（Ｎｅｏｇｅｎ）を用いて測定した。
【０２５３】
キラルリピドミクス分析には、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−ＲＨカラム（１５０ｍｍ×２．１ｍｍ×５μｍ）を使用し、９５：５：０．０１（ｖ／ｖ／ｖ）の定組成メタノール／水／酢酸を０．１５ｍｌ／分で用いた。等圧モノヒドロキシドコサペンタエン酸レベルをモニタリングするため、３０の場合のような各分子の指標イオン断片を用いる多重反応モニタリング（ＭＲＭ）法を開発した。
【０２５４】
選択実験では、ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４をジアゾメタン（エーテル中）（２８の場合のようにして調製）とともに３７℃で３０分間インキュベートし、産物をＬＣ−ＭＳ−ＭＳ（質量分析計は正イオンモードで動作）によって評価した。
【０２５５】
好中球−内皮細胞コインキュベーション物から生物学的評価用の産物を抽出するため、２容量の氷冷メタノールを添加してインキュベーションを停止させ、試料を−２０℃で少なくとも３０分間置き、タンパク質を沈殿させた。次いで産物を、Ｃ１８  ＳＰＥを用いて上記に詳述したようにして抽出し、ギ酸メチルを用いて溶出した。次いで、溶媒を窒素下で蒸発させ、産物をエタノール中に懸濁させ、生物学的評価を行なった。
【０２５６】
１３Ｒ−ＨＤＰＡおよび１３Ｓ−ＨＤＰＡは、１３−ＨＤＨＡをデス・マーチン・ペルヨージナンとともにインキュベートし（塩化メチレン中０．０３Ｍ，３０分間，室温）；得られた１３−オキソ−ＤＰＡを次いで、（Ｒ）−２−メチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジンまたは（Ｓ）−２−メチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジンのいずれかとともにインキュベートすることにより得た（３１の場合のとおり）。
【０２５７】
一部の実験では、ヒト末梢好中球（５×１０７細胞／ｍｌ）を、１３Ｒ−ＨＤＰＡ（１μＭ，３７℃，ＰＢＳ  ｐＨ７．４５）および大腸菌（１×１０９ＣＦＵ／ｍｌ，２分，３７℃）とともにインキュベートした。インキュベーションを、２容量の酸性化メタノール（見かけ上ｐＨ３）を用いて停止させ、産物を抽出し、ＬＭメタボロリピドミクスを用いてプロファイリングした。
【０２５８】
ヒト好中球（４×１０７細胞／ｍｌ）を１３Ｒ−ＨＤＰＡ（３００ｎＭ）とともにＰＢＳ中（ｐＨ７．４５，３７℃）にて高１８Ｏ２環境でインキュベートし；次いで大腸菌（２×１０９ＣＦＵ／ｍｌ）を添加した。３０分後、インキュベーションを、２容量の氷冷メタノールを用いてクエンチし、次いで、水素化ホウ素ナトリウム（１μｇ／ｍｌ，１５分間，４℃）とともにインキュベートし、産物を抽出し、ＬＭメタボロリピドミクスを用いてプロファイリングした。以下のＭＲＭトランジション：ＲｖＴ１−３８１＞１４５、ＲｖＴ２−３７９＞１４５、ＲｖＴ３−２２７およびＲｖＴ４−３６３−１４５を使用し、新しい各産物をモニタリングした。
【０２５９】
週に２〜３回、少なくとも４５分間運動し、静脈穿刺前の１０〜１４日間に非ステロイド系抗炎症薬、ＡＳＡ含有製品またはスタチンを含む薬物療法を受けていないと申告した健常志願者（ＨＶ）由来の全血液を、ヘルシンキ宣言および廃棄物に関するＰａｒｔｎｅｒｓ  Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌ  １９９９Ｐ００１２７９（ＣＮＳ）に従う書面での同意を得た後に採取した。運動前、末梢血試料採取の前に、参加者を５〜１０分間、座った姿勢で休ませた。直後に、１０分間のウォーミングアップとストレッチ運動の後、３０〜４５分間の運動強度の激しい連続自転車こぎまたはクロストレーニングを含む運動プロトコルを開始し、対象が自身の理論上マックスの約９０％に達したとき運動を終了した。これは、３２の場合のように２２０―年齢の式を用いて計算した。これらの対象から血液を、運動終了から１５分以内に収集した。血液はすべてヘパリン中に収集し、次いで、内部標準が入った４容量の氷冷メタノール中に入れ、メディエーターレベルをＬＣ−ＭＳ−ＭＳにより上記に詳述したようにして評価した。
【０２６０】
敗血症と診断された患者由来の血漿をＤｘ  Ｂｉｏｓａｍｐｌｅｓから入手した（個体群統計については表１および２参照）。健常志願者（ＨＶ）由来の血漿は、上記に概略を示したとおりに収集した。ＳＲＭ  １９５０と表示されたヒト参照血漿を米国立標準技術研究所（ＮＩＳＴ）から購入した。これらの患者および志願者由来の血漿を、内部標準が入った２容量の氷冷メタノール中に入れ、メディエーターレベルをＬＣ−ＭＳ−ＭＳにより上記に詳述したようにして評価した。
【０２６１】
マウスにおける大腸菌感染中、全血液をヘパリン中に指定の時間間隔で収集した。次いでこれを、内部標準が入った４容量の氷冷メタノール中に入れ、メディエーターレベルをＬＣ−ＭＳ−ＭＳにより上記に詳述したようにして評価した。
【０２６２】
好中球−内皮系コインキュベーション物
【０２６３】
ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ；８．５×１０５細胞／９．６ｃｍ２）を、ＩＬ−１β（１０ｎｇ／ｍｌ）およびＴＮＦ−α（１０ｎｇ／ｍｌ；１６時間，３７℃，５％ＣＯ２）とともにインキュベートした。次いで細胞をアトルバスタチン（３０ｎＭ〜３０μＭ）、セレコキシブ（２５μＭ）、Ｌ−ＮＡＭＥ（２５μＭ）、１４００Ｗ（１０μＭ）またはビヒクル（０．０１％ＤＭＳＯ含有ＰＢＳ）とともにインキュベートした後、ｎ−３  ＤＰＡ（１μＭ，１時間，３７℃，５％ＣＯ２）を添加した。選択実験では、ｎ−３  ＤＰＡ添加の３０分後、ヒト好中球（１×１０７細胞／ｍｌ）を添加し、細胞を６０分間インキュベートした（３７℃，５％ＣＯ２）。インキュベーションを２容量の氷冷メタノールを用いて停止させ、産物を上記に詳述したようにして抽出した。測定実験では、ヒトＰＭＮの添加後、大腸菌（５×１０８ＣＦＵ／ｍｌ）もまた添加し、細胞を６０分間インキュベートした（３７℃，５％ＣＯ２）。次いで、インキュベーションを２容量の氷冷メタノールを用いて停止させ、ＬＭプロフィールをＬＭ−メタボロリピドミクスを用いて評価した。
【０２６４】
内皮細胞を対照のスクランブルドｓｈ−ＲＮＡまたはヒトＣＯＸ−２  ｓｈ−ＲＮＡ（Ｏｒｉｇｅｎｅ）で、ｊｅｔＰＥＩ（登録商標）−ＨＵＶＥＣ（ＰｏｌｙＰｌｕｓ）を製造業者の使用説明書に従って用いてトランスフェクトし、次いで、ＩＬ−１β（１０ｎｇ／ｍｌ）およびＴＮＦ−α（１０ｎｇ／ｍｌ；１６時間，３７℃，５％ＣＯ２）とともにインキュベートした。次いで細胞をｎ−３  ＤＰＡ（１μＭ，３７℃，５％ＣＯ２，０．１％ＥＧＭ中）とともにインキュベートした。インキュベーションを２容量の氷冷メタノールを用いて停止させ、脂質メディエーターを脂質メディエーターメタボロリピドミクスによって評価した。
【０２６５】
ヒト好中球およびマクロファージの食作用ならびにＲＯＳ
【０２６６】
マクロファージは、Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ｓ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｂｌｏｏｄ  Ｂａｎｋ（Ｂｏｓｔｏｎ）から購入した末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）から調製し、食作用は３１の場合のようにして評価した。簡単には、マクロファージ（５×１０４細胞／ウェル）を、ＲｖＴ１（１ｐＭ〜１０ｎＭ）、ＲｖＴ２とＲｖＴ３の１：１の混合物（１ｐＭ〜１０ｎＭ）、ＲｖＴ４（１ｐＭ〜１０ｎＭ）またはビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有ＤＰＢＳ）とともに３７℃で１５分間インキュベートし、次いで、蛍光標識したアポトーシス細胞を添加し、細胞を３７℃で４５分間インキュベートした。細胞外蛍光をトリパンブルー（１：１５に希釈）を用いてクエンチし、食作用をＭ３  ＳｐｅｃｔｒａＭａｘプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて評価した。選択実験では、マクロファージ（上記に詳述したようにして調製，５×１０４細胞／ウェル）または好中球（１×１０５細胞／ウェル）（３１の場合のようにしてＰａｒｔｎｅｒｓ  Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌ（番号１９９９Ｐ００１２９７）に従ってヒト健常志願者から採取して単離）をＨ２ＤＣＦＤＡ（５μＭ，３０分，３７℃）とともにインキュベートし、過剰の染料を洗い流し、細胞をＲｖＴ１（１ｐＭ〜１０ｎＭ）、ＲｖＴ２とＲｖＴ３の１：１の混合物（１ｐＭ〜１０ｎＭ）、ＲｖＴ４（１ｐＭ〜１０ｎＭ）またはビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有ＤＰＢＳ，１５分，３７℃）とともにインキュベートし、次いで、大腸菌（白血球：大腸菌が１：５０，４５分，３７℃）とともにインキュベートした。細胞内活性酸素種を、Ｍ３  ＳｐｅｃｔｒａＭａｘプレートリーダーを用いて蛍光を測定することにより測定した。細菌食作用を評価するため、マクロファージ（５×１０４細胞／ウェル）または好中球（１×１０５細胞／ウェル）をＲｖＴ１（１ｐＭ〜１０ｎＭ）、ＲｖＴ２とＲｖＴ３の１：１の混合物（１ｐＭ〜１０ｎＭ）、ＲｖＴ４（１ｐＭ〜１０ｎＭ）またはビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有ＤＰＢＳ，１５分，３７℃）とともにインキュベートし、次いで、ＢａｃＬｉｇｈｔ  Ｇｒｅｅｎ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）で標識した大腸菌（白血球：大腸菌が１：５０，４５分，３７℃）とともにインキュベートした。次いで、細胞外蛍光をトリパンブルー（１：１５に希釈）を用いてクエンチし、食作用をＭ３  ＳｐｅｃｔｒａＭａｘプレートリーダーを用いて評価した。
【０２６７】
ヒトマクロファージのカスパーゼ１、ＩＬ−１βおよび乳酸デヒドロゲナーゼ
【０２６８】
ヒトマクロファージ（１．５×１０４細胞／ウェル）をＲｖＴ１（１０ｐＭ〜１０ｎＭ）、ＲｖＴ２とＲｖＴ３の１：１の混合物（１０ｐＭ〜１０ｎＭ）、ＲｖＴ４（１０ｐＭ〜１０ｎＭ）またはビヒクル（０．１％ＥｔＯＨ含有ＤＰＢＳ，１５分，３７℃）とともに、次いで大腸菌（７．５×１０５細胞／ウェル，ＤＰＢＳ中，１６時間，３７℃）とともにインキュベートした。マクロファージにおけるカスパーゼ１レベルはフローサイトメトリーによって、細胞の固定および透過処理、抗カスパーゼ１（Ａｂｃａｍ；４℃，３０分）および抗ウサギ−Ａｌｅｘａ  ４８８コンジュゲート抗体（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ；４℃，３０分）での染色後に評価した。ＩＬ−１βレベルは無細胞の上清み中において、抗ヒトＩＬ−１β  ＥＬＩＳＡ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を製造業者の使用説明書に従って用いて測定した。乳酸デヒドロゲナーゼ活性は無細胞の上清み中において測定し、ＮＡＤ＋からのＮＡＤＨの形成をＬａｃｔａｔｅ  Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ  Ａｓｓａｙキット（Ｓｉｇｍａ）を製造業者の使用説明書に従って用いて評価した。
【０２６９】
組換え酵素のインキュベーション
【０２７０】
ヒト組換えＣＯＸ−２（１０単位；Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ；０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ中，ｐＨ８．０，２０μＭブタヘマチン，０．６７ｍＭフェノール，３３の場合のとおり）を、表示した濃度のＡＡまたはｎ−３  ＤＰＡとともにインキュベートし（１時間，室温）、２３５ｎＭにおける吸光度を１分間隔で、Ｃａｒｙ  ＵＶ−Ｖｉｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ）を用いて調べた。
【０２７１】
指定の実験では、ｎ−３  ＤＰＡを、ｈｒＣＯＸ２、ｈｒＣＯＸ−２（これは、１００ｍＭのグルタチオンを１００ｍＭの亜硝酸ナトリウムとともに２００ｍＭ塩酸中で室温にて、３４の場合のようにしてインキュベートすることによって調製したＳ−ニトロソグルタチオンとともに事前にインキュベートした（３０分間  室温））
またはＳ−ニトロソグルタチオンとともにインキュベートした。２０分後、インキュベーションをメタノールを用いてクエンチし、１３−ＨＤＰＡレベルをＬＣ−ＭＳ−ＭＳベースのＬＭメタボロリピドミクスを用いて評価した。
【０２７２】
ＣＯＸ−２  Ｓ−ニトロシル化を、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔ  Ｓ−ｎｉｔｒｏｓｙｌａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）を製造業者の使用説明書に従って用いて評価し、全ＣＯＸ−２レベルを、ウサギ抗ＣＯＸ−２（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）抗体およびヤギ抗ウサギ−ＨＲＰコンジュゲート抗体（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を用いて測定した。
【０２７３】
抗菌作用
【０２７４】
好中球−内皮細胞分離物ＲｖＴ１（１０μＭ）、ＲｖＴ２＋ＲｖＴ３（１０μＭ）、ＲｖＴ４（１０μＭ）またはアンピシリン（１もしくは１０ｍＭ）をＧＦ−Ｃフィルター（Ｗａｔｅｒｓ）上に置き、次いでこれを、大腸菌（１×１０７ＣＦＵ）を入れたＬＢ寒天プレート上に移した。３７℃で一晩インキュベーション後、クリアランスゾーンを評価した。
【０２７５】
統計値
【０２７６】
結果はすべて、平均±ｓ．ｅ．ｍ．として表示している。本発明者らは、分析対象の異なる群間において正規性および等しい分散分布を仮定した。群間の差は、スチューデントのｔ検定（２つの群間）または一元配置ＡＮＯＶＡ（多数の群間）を用いて、その後、ボンフェローニポストホックテストを用いて比較した。実験での生存率をカプラン・マイヤー曲線で示し、ログランク（Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ）を用いて分析した。試験担当者は、群の割り付けまたは転帰の評価について盲検的でなかった。各実験のサンプルサイズは、予備実験で観察されたばらつきおよび実験系での以前の経験に基づいて決定した。統計学的有意性の基準はｐ＜０．０５とした。
【０２７７】
結果および考察
【０２７８】
好中球は、進入病原体に対する防御の第一線である１０，１１。これは、血管系から感染部位（１つまたは複数）へと速やかに動員され、細菌の封じ込めとクリアランスに参加する８。動員の最初の工程のうちの１つは、血管内皮上への好中球の捕捉である１０。このカギとなる工程中に生じる宿主防御作用を行ない得る新しい分子を同定するため、およびレゾルビンとプロテクチンは宿主の細菌感染クリアランスを向上させるため８、本発明者らは、これらの細胞型のコインキュベーションによる画分を、Ｃ１８固相抽出を用いて得た（方法参照）。大腸菌感染が急を要する世界的な健康問題であり、米国だけでも毎年、少なくとも約２７０，０００例の新しい症例が報告されていることを考慮し１２、本発明者らは、次に、マウスの大腸菌感染におけるこのような画分の作用を評価した。大腸菌接種の直前に静脈内投与した場合、このようなヒト好中球−内皮細胞コインキュベーションによる単離物は、致死性の大腸菌感染の生存率を有意に向上させたが（図１ａ；ｐ＜０．０５）、直接的な抗菌活性は示さなかった（図２ａ）。
【０２７９】
このような画分中の生物活性分子（１種類または複数種）を特性評価して解明し、その構造（１つまたは複数）を推定するため、本発明者らは最初に、脂質メディエーター（ＬＭ）−メタボロリピドミクスに基づいた液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ−ＭＳ）を使用した。古典的なエイコサノイドおよびＳＰＭとともに、好中球−内皮細胞コインキュベーションによる画分中において、活性を示すこれまでに知られていない分子もまた同定した。これにより、５つの二重結合を有する２２−炭素主鎖に特徴的な４つの相違するＭＳ−ＭＳスペクトルおよび保持時間が示され、ＤＰＡが前駆体であることが示唆された７。ＭＳ−ＭＳ断片化を使用し、これらの新しいｎ−３  ＤＰＡ由来生物活性分子の構造が：７，１３，２０−トリヒドロキシ−ドコサペンタエン酸、７，８，１３−トリヒドロキシ−ドコサペンタエン、７，１２，１３−トリヒドロキシ−ドコサペンタエン酸および７，１３−ジヒドロキシ−ドコサペンタエン酸であると推定した（図１ｂならびに図２ｂおよび３ａ〜ｄ）。これらの帰属を、各産物の物理的特徴、例えば、異なる化学誘導体のＭＳ−ＭＳおよび反応性（すなわち、１８Ｏ２組込み、酸性メタノールトラッピングおよびメチルエステル（下記およびオンライン法参照））を用いて確認した。ｎ−３  ＤＰＡとの好中球−内皮細胞のコインキュベーションではその量が３０〜５０％増大したが、ＳＰＭ４，９のＤＨＡ前駆体もＥＰＡ前駆体も増大しなかった（図３ｅ）。したがって、これらの新しい生物活性構造体は、各々、炭素−１３位にその生合成起源に由来するアルコールを担持しているため、それぞれ、１３−シリーズのレゾルビン（ＲｖＴ）であるＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４と示した（図２ｂ）。
【０２８０】
ヒトでは、運動により、血漿脂質メディエーターの増加によって顕示される自己消散性の炎症状態がもたらされるため１３、ＲｖＴ生成を運動中の健常志願者において調べた。運動前レベルと比較すると、末梢血中ＲｖＴの有意な増加が得られた（図１ｃ，表１ａ；ｐ＜０．０５）。それぞれの量は、桁が、ＡＡ、ＥＰＡまたはＤＨＡ生物活性メタボローム、すなわち、プロスタグランジン、ロイコトリエンＢ４、レゾルビン、プロテクチンおよびマレシンのものと同等であった（表１ｂ）。また、ＲｖＴは、敗血症患者由来のヒト末梢血中（図１ｄ，表２ａ）ならびに健常志願者由来の血漿中の量およびＮａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｆｏｒ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手したヒト血漿複合物（ＳＲＭ１９５０）中の量と比較した場合も存在した。また、レゾルビンおよびリポキシンも、健常志願者の血漿およびＳＲＭ１９５０血漿複合物のどちらと比較した場合も、敗血症患者の血漿中において高値であった（表２ｂ）。
【０２８１】
表１：健常志願者の運動前と運動後の末梢血中の脂質メディエーターのプロフィール
【表１】
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【表２】
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（ａ）健常志願者の個体群統計（ｂ）末梢血は健常志願者から運動前と運動後に収集し（方法参照）、脂質メディエーターレベルは、親イオン（Ｑ１）と特徴的な断片イオン（Ｑ３）のＭＲＭモニタリングを用いて定量した。結果を平均±ｓ．ｅ．ｍ．として示す。ｎ＝４名の健常志願者（４つの独立した実験）。＊＝限界未満；限界は約０．１ｐｇ。太字で示した数値は運動前の値と比べてｐ＜０．０５である。
【０２８２】
表２：健常志願者および敗血症患者由来の血漿中におけるＳＰＭおよびエイコサノイドと新規なＲｖＴ（対比）の比較
【表３】
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【表４】
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（ａ）健常志願者の個体群統計および患者の個体群統計および培養。（ｂ）血漿は、ＮＩＳＴレポジトリー（参照血漿；ｄ＝３）から入手、健常志願者（ｎ＝４）または敗血症と診断された患者（ｎ＝９）から収集し、脂質メディエーターレベルは、親イオン（Ｑ１）と特徴的な断片イオン（Ｑ３）のＭＲＭモニタリングを用いて定量した。結果を２つの独立した実験の平均±ｓ．ｅ．ｍ．として示す。＊＝限界未満；限界は約０．１ｐｇ。太字で示した数値は参照血漿値と比べてｐ＜０．０５である。
【０２８３】
次いで、マウスにおける細菌感染時のＲｖＴの時間的調節を評価した。１０５ＣＦＵの大腸菌／マウスの大腸菌で抗原刺激したＦＶＢマウスは自己消散性の（すなわち、自己限定的な）炎症応答を有し、ＰＭＮ数は約１２時間目に最大に達したが、その後、減少した８。ＲｖＴは、炎症の開始期中に急速に形成され、末梢血中の量は４時間目に最大に達し、続いてこれは減少した（図１ｅ）。比較において、ＡＡ−、ＥＰＡ−およびＤＨＡ−に由来するメディエーター（これら由来のメディエーター）もまた４時間目において高値であり、大部分が１２時間目に最大に達した。これらにはＲｖＤ２とＬＸＢ４が含まれた（表３）。注目すべきことには、ＲｖＴは、致死性ではないが炎症の増大を引き起こし、消散の遅延を伴う高負荷の大腸菌で抗原刺激したマウス由来の末梢血中の方が＞６０％少ない（１０７ＣＦＵ／マウス；図１ｆおよび表４）。
【０２８４】
表３：マウスにおける自己消散性感染時の末梢血中の脂質メディエーターのプロフィール
【表５】
2018525359.tif 000050
マウスに大腸菌（１×１０５ＣＦＵ／マウス）を接種し、表示した間隔で血液を収集し、脂質メディエーターレベルを、親イオン（Ｑ１）と特徴的な断片イオン（Ｑ３）のＭＲＭモニタリングを用いて定量した。結果を平均±ｓ．ｅ．ｍ．として示す。ｎ＝４匹マウス／群（２つの独立した実験）。＊＝限界未満；限界は約０．１ｐｇ．太字で示した数値は０時間の値と比べてｐ＜０．０５である。
【０２８５】
表４：自己消散性感染および遅延消散感染時におけるマウス末梢血中の脂質メディエーターのプロフィール
【表６】
2018525359.tif 000051
マウスに１×１０５ＣＦＵ／マウスの大腸菌（自己消散性）または１×１０７ＣＦＵ／マウスの大腸菌（遅延消散）を接種し、４時間後に血液を収集し、脂質メディエーターレベルを、親イオン（Ｑ１）と特徴的な断片イオン（Ｑ３）のＭＲＭモニタリングを用いて定量した。結果を平均±ｓ．ｅ．ｍ．として示す。ｎ＝５匹のマウス／群（２つの独立した実験）。太字で示した数値は自己消散性の場合の値と比べてｐ＜０．０５である。
【０２８６】
ヒト好中球−内皮細胞コインキュベーションに基づき、このコインキュベーションによって認識可能な量のＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４が得られたため、ＲｖＴは細胞間生合成の産物であることが推測された（図３Ｆ）。キラルＬＣ−ＭＳ−ＭＳにより、内皮細胞をｎ−３  ＤＰＡとともにインキュベートすると、単独の培養培地中に維持した細胞と比較した場合、高値の１３Ｒ−ヒドロキシ−７Ｚ，１０Ｚ，１４，１６Ｚ，１９Ｚ−ドコサペンタエン酸が得られることが示された（１３Ｒ−ＨＤＰＡ；図４ａ〜ｄ）。ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−αは内皮ＣＯＸ−２発現（これによりＤＨＡが１３−ヒドロキシ−ドコサヘキサエン酸に変換される９）を上方調節するため１４、内皮ＣＯＸ−２がｎ−３  ＤＰＡも変換して１３−ＨＤＰＡを生成させるのかどうかという疑問が生じた。ＣＯＸ−２選択的阻害薬であるセレコキシブとの内皮細胞のインキュベーションまたはＣＯＸ−２を標的化するｓｈＲＮＡでの内皮細胞のトランスフェクションでは、各々、内皮細胞誘導性１３−ＨＤＰＡの有意な低減がもたらされ（付録図３ｅ，ｆ，ｐ＜０．０５）、１３−ＨＤＰＡ生成におけるＣＯＸ−２の役割が示された。ヒト組換えＣＯＸ−２とのｎ−３  ＤＰＡのインキュベーションにより１３Ｒ−ＨＤＰＡが得られ（図４ｇ）、ＫＭ＝３．１±１．３μＭであり（付録図３ｈ）、ｎ−３  ＤＰＡが内皮ＣＯＸ−２によって１３Ｒ−ＨｐＤＰＡに変換されることが示された。次いで、この中間体またはその還元アルコール形態が好中球に提供され得、これが該中間体（１種類または複数種）をＲｖＴに変換する。この生合成経路およびＲｖＴ構造の提案は、ＵＶクロモフォア、メチル−エステル誘導体のＭＳ−ＭＳ断片化スペクトル（図５）、分子の酸素（１８Ｏ２）組込み（図６）およびエポキシド中間体の酸−アルコールトラッピング（図７）を評価することによって確証された。これらの結果は、ＣＯＸ−２誘導性１３−ＨＤＰＡがヒト好中球におけるリポキシジェネーション（ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ）によってＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４に変換されることを示す。
【０２８７】
アトルバスタチンは、マウスの細菌感染において防御性であり１５、ＣＯＸ−２を調節する１６。したがって、次に、このスタチンがＲｖＴ生合成を調節するのかどうかという疑問が生じた。ヒトにおいて達するものと関連性のある濃度（０．０３〜３０μＭ）１７のアトルバスタチンとの好中球−内皮細胞共培養物のインキュベーションにより、ＲｖＴの用量依存性の増加がもたらされた（図８ａおよび表５）。このコインキュベーションに由来する画分では、アトルバスタチンなしの好中球−内皮細胞共培養物由来の画分（図２ｂ；ｐ＜０．０５）およびアトルバスタチンとともに個々にインキュベートした好中球または内皮細胞に由来するもの（図８ｂ）と比較した場合、大腸菌感染時のマウスの生存率が有意に高まった。セレコキシブは、このインキュベーションにおいてＲｖＴを有意に低減させ（図８ｃ；ｐ＜０．０５）、アトルバスタチンとの好中球−内皮細胞コインキュベーション物から得られた単離画分の防御作用を無効にした（図８ｃ）。
【０２８８】
付録表５：ヒト内皮細胞インキュベーション物および好中球−内皮細胞コインキュベーション物における脂質メディエーターレベル
【表７】
2018525359.tif 000052
ヒト内皮細胞をＩＬ１βおよびＴＮＦ−α（各々１０ｎｇ／ｍｌ，１６時間，３７℃）、次いでビヒクル（０．０１％ＥｔＯＨ含有ＰＢＳ）またはアトルバスタチン（Ａｔｏｒｖ；３０分）とともに３０分間、その後、ｎ−３  ＤＰＡ（１μＭ，１５分，３７℃）およびヒト好中球（１×１０７細胞／ｍｌ，６０分，３７℃）またはＰＢＳとともにインキュベートした。産物を、ＬＭメタボロリピドミクスを用いてプロファイリングし、親イオン（Ｑ１）と特徴的な断片イオン（Ｑ３）のＭＲＭモニタリングを用いて定量した。結果は平均±ｓ．ｅ．ｍ．である。ｎ＝４つの独立した細胞調製物／群（４つの独立した実験）。太字で示した数値は内皮細胞単独のインキュベーションと比べてｐ＜０．０５である。
【０２８９】
アトルバスタチンの前にＬ−ＮＧ−ニトロアルギニンメチルエステル（Ｌ−ＮＡＭＥ）を投与すると、血漿ＲｖＴのアトルバスタチン媒介性増加が有意に逆転され（図８ｅ；ｐ＜０．０５）、マウス感染時における腹膜への好中球動員が増大した（図８ｆ）。ヒト内皮細胞がＮＯＳ阻害薬（Ｌ−ＮＡＭＥおよび１４００Ｗ）を伴う場合も、アトルバスタチン媒介性ＲｖＴ増加が７０〜９０％有意に低減された（図９ａ；ｐ＜０．０５）。また、Ｓ−ニトロシレートＣＯＸ−２である１８Ｓ−ニトロソグルタチオンとのヒト組換えＣＯＸ−２（ｈｒＣＯＸ−２）のインキュベーション（図９ｂ）では、天然ＣＯＸ−２と比べて１３Ｒ−ＨＤＰＡおよびｈｒＣＯＸ−２の触媒活性の増大が得られた（図８ｇ）。このような結果により、アトルバスタチンは内皮ＣＯＸ−２のＳ−ニトロシル化によってＲｖＴ生成を増大させることが示された。
【０２９０】
次に、これらの分子の生物作用をヒト白血球で試験した。ＲｖＴを、組換え酵素および一次ヒト好中球を用いて生成させ、逆相高圧液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を用いて単離した（詳細については方法参照）。ＲｖＴ１およびＲｖＴ４をその単一のＲＰ−ＨＰＬＣピークの出現および特徴的なＵＶクロモフォアに基づいて見かけ上均一であるように単離した。ＲｖＴ２およびＲｖＴ３は、同じＲＰ−ＨＰＬＣ画分中に溶出されるため一緒に試験した。ＲｖＴ１（１ｐＭ〜１０ｎＭ）は、ヒトマクロファージにおける大腸菌食作用および細胞内活性酸素種（ＲＯＳ）の生成（図１０ａ，ｂ）ならびに炎症消散のカギとなる工程である４アポトーシス好中球のエフェロサイトーシス（図１０ｃ）を用量依存的に増大させた。同様の作用がヒト好中球でも得られ、この場合、ＲｖＴ１（１ｐＭ〜１０ｎＭ）は、大腸菌食作用（２０〜５５％）および細胞内ＲＯＳ（２０〜４０％；ｎ＝４例のドナー）を用量依存的に増大させた。また、ＲｖＴ１（１０ｐＭ〜１０ｎＭ）は、インフラマソーム成分のヒトマクロファージ活性化も用量依存的にブロックし、カスパーゼ−１およびＩＬ−１βの発現ならびに細胞外乳酸デヒドロゲナーゼ活性が低下した（ＬＤＨ；図１１ａ〜ｃ）。同様の結果がＲｖＴ４およびＲｖＴ２＋ＲｖＴ３でも得られた（図１１ａ〜ｃ）。
【０２９１】
ＲｖＴが各々、ヒト感染およびマウス感染において同定されたことを考慮し、これらの複合作用をマウスの大腸菌感染において、ＲｖＴ１、ＲｖＴ２、ＲｖＴ３およびＲｖＴ４（ＲｖＴ１〜４）の混合物を腹腔内大腸菌接種の直前に投与することで評価した。１２時間後、これらの分子により、低体温症に対する用量依存的防御、炎症部位へのさらなる好中球動員の制限、腹水中白血球による細菌食作用の増大（図１０ｄ〜ｆ）、ならびに単球／マクロファージでのカスパーゼ−１の発現、ＩＬ−１βレベルおよびＬＤＨ活性の低減がもたらされ（図１１ｄ〜ｆ）、直接的な抗菌活性は発揮されなかった（図１１ａ）。また、ＲｖＴは、血小板−白血球凝集塊７の低減によって示されるように、全身性炎症を低減させた（図１１ｇ）。ＲｖＴ１〜４（５００ｎｇ／マウス）を投与したマウス由来の血漿のＬＭメタボロリピドミクスでは、感染時、インフラマソームの活性化（すなわち、エイコサノイドストーム）によって高値となる１９ＴｘＢ２、ＰＧＤ２およびＰＧＥ２の有意な低減が示された（図１２ｂ；ｐ＜０．０５）。また、ＲｖＴは滲出マクロファージエフェロサイトーシスを有意に増大させた（図１０ｇ；ｐ＜０．０５）。さらに、大腸菌接種の２時間後のＲｖＴ１〜４の投与ではマウスの生存率が用量依存的に高まった（図１０ｉ）。
【０２９２】
スタチンの長期使用は、いくつかの有害効果、例えば、インフラマソームの活性化２０、糖尿病２１、ならびに鼻咽頭炎、関節痛、下痢、四肢痛、尿路感染、消化不良、悪心、筋骨格系疼痛、筋痙攣、筋痛症、不眠症および咽喉頭痛と関連している３５。したがって、次に、ＲｖＴにより、大腸菌感染を排除するのに必要とされるアトルバスタチンの有効用量が低減され、したがってスタチン曝露を低減させることができるかどうかを試験した。大腸菌接種の直前でのＲｖＴ１〜４（各々、約１２．５ｎｇ／マウス）と閾値下限用量のアトルバスタチン（０．５μｇ／マウス）の共投与により、マウスは低体温症から有意に防御され、好中球動員（約５０％；ｐ＜０．０５）、局所および全身の細菌負荷、滲出ＩＬ−１βレベル（約４５％；ｐ＜０．０５）ならびにＬＤＨ活性（約４０％；付録図１０ａ〜ｅ；ｐ＜０．０５）が低減された。また、この共処置により、滲出白血球による細菌食作用（約９０％；ｐ＜０．０５）および滲出マクロファージによるエフェロサイトーシス（約９０％；図１３ｆ，ｇ；ｐ＜０．０５）が有意に増大した。したがって、ＲｖＴによりアトルバスタチン療法に対する曝露が低減され得、スタチン用量で観察されるスタチンの不要な副作用２０，２１のいくつかが限定的になるかもしれないことが示唆される。
【０２９３】
この処置形態が治療状況においても防御的であるかどうかを評価するため、マウスを、アトルバスタチン（０．５μｇ／マウス）および／またはＲｖＴ１〜４の混合物（５０ｎｇ／マウス）で大腸菌接種の２時間後に処置した。アトルバスタチンとＲｖＴの共投与により腹膜への好中球動員が有意に低減され、滲出細菌負荷が低減された（図１３ｈ；ｐ＜０．０５）。アトルバスタチンとＲｖＴによって活性化される潜在的機構（１つまたは複数）に対する洞察を得るため、アトルバスタチンによって調節される宿主の防御性因子２２，２３および炎症促進性因子２４の発現を調べた。０．５μｇ／マウスのスタチン単独を投与したマウスでは、宿主防御性のＰＧＩ２および１５−デオキシ−Δ−１２，１４−ＰＧＪ２の増加が測定され（図１３ｉ）、一方、炎症促進状態と関連している分子のエンドセリン−１およびプラスミノゲンアクチベータインヒビター−１は低減された（図１３ｊ）。ＲｖＴの投与（５０ｎｇ／マウス）によってこれらの分子が一部、調節されたが、アトルバスタチンよりも程度は低かった（約３０〜６０％低い）。アトルバスタチンとＲｖＴ１〜４の共投与では、ビヒクル−またはＲｖＴ−処置マウスと比較した場合、これらの分子が有意に低減された（図１３ｊ，ｋ；ｐ＜０．０５）。また、末梢血中エイコサノイドもＲｖＴ１〜４を投与すると低減され（図１３ｋ）、効果は、部分的にのみアトルバスタチンと共有されたものであった。
【０２９４】
このような防御作用を考慮し、本発明者らは、ＲｖＴとアトルバスタチンの共投与によって感染の消散が加速され得るかどうかを評価した。ＲｖＴ１〜４（５０ｎｇ／マウス）をアトルバスタチン（０．５μｇ／マウス）と一緒にピーク好中球浸潤（１２時間目）に投与すると滲出好中球クリアランスが有意に加速され、滲出白血球による細菌食作用が増大し（約５０％；ｐ＜０．０５）、炎症の消散が加速され、消散時間が約２０時間から約８時間に短縮された（図１４ａおよび図１３）。高用量（５００ｎｇのＲｖＴ＋５μｇのアトルバスタチン）および低用量（５０ｎｇのＲｖＴ＋０．５μｇのアトルバスタチン）ではどちらも、ＲｖＴ１〜４とアトルバスタチンとの共投与により、アトルバスタチン単独での処置と比べてマウスの生存率が高まった（図４ｂ）。総合すると、このような結果は、ＲｖＴにより感染時におけるアトルバスタチンの有効用量が少なくなることを示唆する。
【０２９５】
まとめると、ＬＣ−ＭＳ−ＭＳベースの脂質メディエーター−メタボロリピドミディクス（ｍｅｔａｂｏｌｏｌｉｐｉｄｏｍｉｄｉｃｓ）を使用し、本発明者らは、ヒト好中球−内皮細胞の相互作用時に細胞間生合成４，９，１４によって形成されるＲｖＴと称される４種類の新しい生物活性分子の構造を解明した（表６および図２ｂ）。ＲｖＴ生成は、ヒトおよびマウスにおいて自己消散性炎症性抗原刺激時に高値であり、マウスでは遅延感染消散時に下方調節された。ｎ−３  ＤＰＡに由来するこのような１３−シリーズのレゾルビンは、抗炎症活性および強力な消散促進活性の両方を発揮し、マウスの大腸菌感染時における宿主の応答およびヒト単離細胞による食作用を調節し、それにより免疫消散体（ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｏｌｖｅｎｔ）４としての基準を満たす：すなわち、これらは、消散の主徴候、例えば、ｅｘｐｕｒｇａｔｉｏ  ｒｅｌｉｑｕｉｏｒｕｍ（残屑のクリアランス）、ｅｘｐｕｒｇａｔｉｏ  ｃｏｎｔａｇｉｏｎｅｍ  ａｇｅｎｔｉｓ（非有効因子のクリアランス）、ｄｏｌｏｒｉｓ  ａｂｓｅｎｔｉａ（鎮痛）およびｍｕｎｅｒｉｓ  ｌｕｃｒｕｍ（機能の獲得）４を刺激する。ヒトにおける血管−内皮系の広範囲にわたるサイズおよび循環系内の好中球の存在度を考慮し、自己消散性急性炎症の初期段階でのＲｖＴの形成およびアトルバスタチンによるその調節により、感染性炎症に対する新しい処置ストラテジーの開発のための分子的基盤がもたらされ得る可能性がある。また、ＲｖＴは、スタチンマーカーおよび消散応答時のその作用のメディエーターの機能も果たし得る。
表６：１３−シリーズのレゾルビンの構造、生合成および作用の証拠
【表８】
2018525359.tif 000053
表６（続き）１３−シリーズのレゾルビンの構造，生合成および作用の証拠
【表９】
2018525359.tif 000054
【０２９６】
本明細書において具体的に挙げた刊行物および特許はすべて、本発明との関連において使用されるかもしれない刊行物に報告された化学薬品、機器、統計分析および方法論の説明および開示を含むあらゆる目的のために引用により組み込まれる。本明細書に引用した参考文献はすべて、当該技術分野の技術水準を示すものであると解釈されたい。本明細書におけるいかなるものも、先願発明という理由で本発明が、かかる開示より時間的に先行していると主張できないという是認であることの是認と解釈されるべきでない。
【０２９７】
１から１５まで連続して番号付けした以下のパラグラフは、本発明の種々のさらなる態様を示す。一実施形態では、第１パラグラフにおいて：
【０２９８】
１．式：
【化４４】
2018525359.tif 000055
【化４５】
2018525359.tif 000056
【化４６】
2018525359.tif 000057
（式中、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３の各々は、存在している場合、個々に保護基または水素原子であり；
【化４７】
2018525359.tif 000058
は、存在している場合、二重結合を表し、各二重結合は独立してＺ配置またはＥ配置のいずれかであり；
７位と１３位または８、１２もしくは２０位の炭素は、存在している場合、独立してＲ配置またはＳ配置であり；
Ｚは−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲｃＲｃまたは−ＣＮであり；
各Ｒａは独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、シクロヘキシル、（Ｃ４〜Ｃ１１）シクロアルキルアルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、フェニル、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、ベンジル、２〜６員のヘテロアルキル、３〜８員のシクロヘテロアルキル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピペリジニル、４〜１１員のシクロヘテロアルキルアルキル、５〜１０員のヘテロアリールまたは６〜１６員のヘテロアリールアルキルから選択され；
各Ｒｃは独立して保護基またはＲａであるか、あるいはまた、各Ｒｃは、これが結合している窒素原子と一体となって、５〜８員のシクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールを形成しており、該シクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールは、任意選択で１個以上の同じかまたは異なるさらなるヘテロ原子を含むものであってもよく、任意選択で１つ以上の同じかまたは異なるＲａ基または適当なＲｂ基で置換されていてもよく；
各Ｒｂは独立して、＝Ｏ、−ＯＲｄ、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロアルキルオキシ、−ＯＣＦ３、＝Ｓ、−ＳＲｄ、＝ＮＲｄ、＝ＮＯＲｄ、−ＮＲｃＲｃ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、−Ｓ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−ＯＳ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＯＨ）Ｒａ、−Ｃ（ＮＯＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（ＮＨ）］ｎＮＲｃＲｃまたは−［ＮＲａＣ（ＮＲａ）］ｎＮＲｃＲｃから選択され；
各ｎは、独立して０〜３の整数であり；
各Ｒｄは独立して保護基またはＲａである）
を有する化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【０２９９】
２．Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３（存在している場合）がすべて水素原子である場合、水素ではない、パラグラフ１の化合物。
【０３００】
３．Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３のうちの１つ以上が水素原子であり、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である、パラグラフ１および２の精製された化合物。
【０３０１】
４．カルボン酸の薬学的に許容され得る塩である、パラグラフ１、２または３のいずれかの化合物。
【０３０２】
５．さらに、組成物を得るための担体を含む、パラグラフ１〜４のいずれかの化合物。
【０３０３】
６．インフラマソームの活性化、糖尿病、鼻咽頭炎、関節痛、下痢、四肢痛、細菌感染、消化不良、悪心、筋骨格系疼痛、筋痙攣、筋肉痛、不眠症、咽喉頭痛、炎症、組織の変性、動脈の炎症、関節炎、乾癬、蕁麻疹、血管炎、喘息、眼の炎症、肺の炎症、肺線維症、脂漏性皮膚炎、膿疱性皮膚病、心血管疾患、好中球、白血球および／またはサイトカインの動員、アレルギー、アルツハイマー病、喘息、アテローム性動脈硬化、がん、心血管疾患、糖尿病、泌尿生殖器科系の障害、高血圧、感染性疾患、神経筋障害、腎障害、経口感染または歯周病を処置または予防する方法であって、有効量の１種類以上の請求項１〜５のいずれかに記載の化合物を、それを必要とする対象に投与する工程を含み、それにより該疾患または病状が処置または予防されるようにする方法。
【０３０４】
７．インフラマソームの活性化、糖尿病、鼻咽頭炎、関節痛、下痢、四肢痛、細菌感染、消化不良、悪心、筋骨格系疼痛、筋痙攣、筋肉痛、不眠症、咽喉頭痛、炎症、動脈の炎症、関節炎、乾癬、蕁麻疹、血管炎、喘息、眼の炎症、肺の炎症、肺線維症、脂漏性皮膚炎、膿疱性皮膚病、心血管疾患、好中球、白血球および／またはサイトカインの動員、アレルギー、アルツハイマー病、喘息、アテローム性動脈硬化、がん、心血管疾患、糖尿病、泌尿生殖器科系の障害、高血圧、感染性疾患、神経筋障害、腎障害、経口感染または歯周病
のうちの１つ以上を処置または予防するための方法であって、式：
【化４８】
2018525359.tif 000059
【化４９】
2018525359.tif 000060
【化５０】
2018525359.tif 000061
（式中、Ｐ１、Ｐ２および／またはＰ３の各々は、存在している場合、個々に保護基または水素原子であり；
【化５１】
2018525359.tif 000062
は、存在している場合、二重結合を表し；各二重結合は独立してＺ配置またはＥ配置であり；
Ｚは−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲｃＲｃまたは−ＣＮであり；
各Ｒａは独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、シクロヘキシル、（Ｃ４〜Ｃ１１）シクロアルキルアルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、フェニル、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、ベンジル、２〜６員のヘテロアルキル、３〜８員のシクロヘテロアルキル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピペリジニル、４〜１１員のシクロヘテロアルキルアルキル、５〜１０員のヘテロアリールまたは６〜１６員のヘテロアリールアルキルから選択され；
各Ｒｃは独立して保護基またはＲａであるか、あるいはまた、各Ｒｃは、これが結合している窒素原子と一体となって、５〜８員のシクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールを形成しており、該シクロヘテロアルキルまたはヘテロアリールは、任意選択で１個以上の同じかまたは異なるさらなるヘテロ原子を含むものであってもよく、任意選択で１つ以上の同じかまたは異なるＲａ基または適当なＲｂ基で置換されていてもよく；
各Ｒｂは独立して、＝Ｏ、−ＯＲｄ、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロアルキルオキシ、−ＯＣＦ３、＝Ｓ、−ＳＲｄ、＝ＮＲｄ、＝ＮＯＲｄ、−ＮＲｃＲｃ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、−Ｓ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−ＯＳ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＯＨ）Ｒａ、−Ｃ（ＮＯＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（ＮＨ）］ｎＮＲｃＲｃまたは−［ＮＲａＣ（ＮＲａ）］ｎＮＲｃＲｃから選択され；
各ｎは、独立して０〜３の整数であり；
各Ｒｄは独立して保護基またはＲａである）
を有する有効量の１種類以上の化合物またはその薬学的に許容され得る塩（ただし、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである場合、ＺのＲｄは、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が各々、水素原子である場合、水素ではないものとする）を、それを必要とする対象に投与する工程を含み、それにより該疾患または病状が処置または予防されるようにする方法。
【０３０５】
８．該化合物が精製されており、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３が水素原子である場合、Ｚが−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＺのＲｄが水素原子である、請求項１〜７のいずれかの方法。
【０３０６】
９．該化合物がカルボン酸の薬学的に許容され得る塩である、パラグラフ１〜８のいずれかの方法。
【０３０７】
１０．さらに、組成物を得るための担体を含む、パラグラフ１〜９のいずれかの方法。
【０３０８】
１１．細菌感染を処置または予防するための方法であって、それを必要とする対象にパラグラフ１〜１０による化合物とスタチン化合物を投与することを含む方法。
【０３０９】
１２．スタチン療法を増強するための方法であって、それを必要とする対象に、スタチン療法を必要とする対象に対してスタチン化合物に加えて治療有効量のパラグラフ１〜１１による化合物を与えることを含む方法。
【０３１０】
１３．対象に治療量のパラグラフ１〜１２のいずれかによる化合物を投与することを含む、細菌感染に苦しんでいる対象の生存割合を高めるための方法。
【０３１１】
１４．食作用、エフェロサイトーシス、創傷治癒および組織再生の促進を、それを必要とする対象において行なうための方法であって、それを必要とする患者に治療有効量のパラグラフ１〜１３のいずれかによる化合物を投与することを含む方法。
【０３１２】
１５．白血球の刺激を必要とする対象に治療量のパラグラフ１〜１４のいずれかによる化合物を投与することを含む、白血球における活性酸素種の生成の刺激方法。
【０３１３】
上記に一般的に説明したデバイスおよび化合物ならびに本発明による方法の種々の例示的な実施形態は、以下の実施例を参照することによって、より容易に理解されよう。本実施例は、実例を示す目的で示したものであり、本発明をいかなる様式でも限定することを意図したものではない。
【０３１４】
本発明を、上記に概要を示した種々の例示的な実施形態に関して説明したが、種々の択一例、修正例、変形例、改善例および／または実質的に等価物が、既知のものであれ、予測不可能なものであれ、現時点では予測不可能であり得るものであれ、少なくとも当業者には明らかとなり得よう。したがって、上記に示した本発明による例示的な実施形態は実例を示すことを意図したものであって、限定を意図したものではない。種々の変更が、本発明の趣旨および範囲を逸脱することなく行なわれ得る。したがって、本発明は、例示的な本実施形態の既知の、または後に開発されるあらゆる択一例、修正例、変形例、改善例および／または実質的に等価物を包含していることを意図する。
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【図１−ａ】
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【図１−ｂ】
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【図１−ｃ】
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【図１−ｄ】
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【図１−ｅ】
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【図１−ｆ】
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【図２−ａ】
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【図２−ｂ】
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【図３−ａ】
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【図３−ｂ】
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【図３−ｃ】
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【図３−ｄ】
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【図３−ｅ】
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【図３−ｆ】
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【図４−ａ】
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【図４−ｂ】
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【図４−ｃ】
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【図４−ｄ】
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【図４−ｅ】
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【図４−ｆ】
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【図４−ｇ】
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【図４−ｈ】
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【図５−ａ】
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【図５−ｂ】
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【図５−ｃ】
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【図５−ｄ】
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【図５−ｅ】
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【図５−ｆ】
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【図５−ｇ】
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【図５−ｈ】
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【図６−ａ】
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【図６−ｂ】
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【図６−ｃ】
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【図６−ｄ】
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【図７−ａ】
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【図７−ｂ】
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【図８−ａ】
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【図８−ｂ】
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【図８−ｃ】
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【図８−ｄ】
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【図８−ｅ】
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【図８−ｆ】
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【図８−ｇ】
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【図９−ａ】
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【図９−ｂ】
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【図１０−ａ】
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【図１０−ｂ】
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【図１０−ｃ】
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【図１０−ｄ】
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【図１０−ｅ】
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【図１０−ｆ】
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【図１０−ｇ】
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【図１０−ｈ】
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【図１１−ａ】
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【図１１−ｂ】
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【図１１−ｃ】
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【図１１−ｄ】
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【図１１−ｅ】
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【図１１−ｆ】
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【図１１−ｇ】
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【図１２−ａ】
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【図１２−ｂ】
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【図１３−ａ】
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【図１３−ｂ】
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【図１３−ｃ】
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【図１３−ｄ】
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【図１３−ｅ】
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【図１３−ｆ】
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【図１３−ｇ】
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【図１３−ｈ】
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【図１３−ｉ】
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【図１３−ｊ】
2018525359.tif 000142
【図１３−ｋ】
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【図１４−ａ】
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【図１４−ｂ】
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【国際調査報告】
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