(57)【要約】  本明細書では、それを必要とする対象におけるＨＢＶ感染の治療に有用な式（Ｉ）の化合物、その医薬組成物、及び対象においてＨＢＶ感染を阻害、抑制、又は予防する方法が提供される。    【化１】2018510159.tif 000160
2018510159.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2018510159.tif 000152
の化合物、又はその医薬的に許容される塩であって、
式中、
Ｒ４は、Ｈ又はＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｈ２ＰＯ４、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０アリール）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール）であり、式中、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリール基は、任意にハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、又は−ＮＯ２で１〜５回置換され、
Ｒ２は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、Ｒ６、又はＯＲ６であり、式中、Ｒ６は、各出現で独立して、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリール、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０アリール）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリール）であり、式中、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリール基は、任意にハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、又は−ＮＯ２で１〜５回置換され、
Ｃｙは、
【化２】
2018510159.tif 000153
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０アリール）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール）であり、式中、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリール基は、任意にハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、又は−ＮＯ２で１〜５回置換され、あるいは２つのＲ１１基が、それらが結合している炭素と共に合わさって環状ホスフェート環を形成し、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、
ｘは、０、１、２、３、４、又は５であり、
ｙは、０、１、２、３、又は４である、化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
式中、
Ｒ４は、Ｈであり、
ｍは、０、１、２、又は３であり、
ｘは、０、１、２、又は３であり、
ｙは、０、１、２、又は３である、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
式中、
Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）であり、式中、アルキル基は、任意にハロ、又は−ＯＨで１〜５回置換される、請求項１又は２に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項４】
式中、
Ｒ２は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、Ｒ６、又はＯＲ６であり、式中、Ｒ６は、各出現で独立して、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）であり、式中、アルキル基は、任意にハロ、又は−ＯＨで１〜５回置換される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）であり、式中、アルキル基は、任意にハロ、又は−ＯＨで１〜５回置換される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項７】
式中、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、又は−Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２は、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、及び−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルから選択され、式中、アルキル基及びシクロアルキル基は、任意にハロで１〜５回置換され、
Ｃｙは、
【化３】
2018510159.tif 000154
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、又はハロであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは、０、１、２、又は３である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項８】
式中、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、又はハロであり、
Ｒ２は、−ＯＨ、ハロ、及び−Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、式中、アルキル基は、任意にハロで１〜５回置換され、
Ｃｙは、
【化４】
2018510159.tif 000155
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは、０、１、２、又は３である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項９】
式中、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、又はハロであり、
Ｒ２は、ハロ、及び−Ｃ１〜Ｃ３アルキルから選択され、式中、アルキル基は、任意にハロで１〜３回置換され、
Ｃｙは、
【化５】
2018510159.tif 000156
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ３アルキル、−Ｃ１〜Ｃ４ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクロアルキルであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは、０、１、２、又は３である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
式中、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、ハロであり、
Ｒ２は、ハロ、及び−Ｃ１アルキルから選択され、式中、アルキル基は、任意にハロで１〜３回置換され、
Ｃｙは、
【化６】
2018510159.tif 000157
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ３アルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは、２又は３である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
式中、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、ハロであり、
Ｒ２は、ハロ、及び−Ｃ１アルキルから選択され、式中、アルキル基は、任意にハロで１〜３回置換され、
Ｃｙは、
【化７】
2018510159.tif 000158
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ３アルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは、２又は３である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１２】
前記化合物が、
【化８】
2018510159.tif 000159
から選択される、請求項１１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩を含む、組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、医薬組成物であり、かつ少なくとも１種類の医薬的に許容される担体を更に含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
ＨＢＶ感染を治療することを要する個体において前記ＨＢＶ感染を治療する方法であって、前記個体に治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１６】
ＨＢＶ感染に伴うウイルス負荷を低減させることを要する個体において前記ＨＢＶ感染に伴うウイルス負荷を低減させる方法であって、前記個体に治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１７】
ＨＢＶ感染の再発を低減させることを要する個体において前記ＨＢＶ感染の再発を低減させる方法であって、前記個体に治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１８】
ＨＢＶ感染の有害な生理学的影響を低減させることを要する個体において前記ＨＢＶ感染の有害な生理学的影響を低減させる方法であって、前記個体に治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項１９】
ＨＢＶ感染による肝損傷の寛解を誘発することを要する個体において前記ＨＢＶ感染による肝損傷の寛解を誘発する方法であって、前記個体に治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２０】
ＨＢＶ感染の長期的抗ウイルス療法の生理学的影響を低減させることを要する個体において前記ＨＢＶ感染の長期的抗ウイルス療法の生理学的影響を低減させる方法であって、前記個体に治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２１】
ＨＢＶ感染を予防的に治療することを要する個体において前記ＨＢＶ感染を予防的に治療する方法であって、前記個体は、潜伏性ＨＢＶ感染に罹患しており、前記方法は、前記個体に治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、方法。
【請求項２２】
ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、免疫調節剤、ペグ化インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、カプシド集合調節剤、逆転写酵素阻害剤、シクロフィリン／ＴＮＦ阻害剤、ＴＬＲアゴニスト、及びＨＢＶワクチン、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの追加の治療剤を前記個体に投与することを更に含む、請求項１５〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記治療剤は、逆転写酵素阻害剤であって、かつ、ジドブジン、ジダノシン、ザルシタビン、２’，３’−ジデオキシアデノシン、スタブジン、ラミブジン、アバカビル、エムトリシタビン、エンテカビル、アプリシタビン、アテビラピン、リバビリン、アシクロビル、ファムシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、テノホビル、アデホビル、シドホビル、エファビレンツ、ネビラピン、デラビルジン、及びエトラビリンのうちの少なくとも１つである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＴＬＲアゴニストが、ＳＭ３６０３２０（９−ベンジル−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシ−エトキシ）アデニン）、及びＡＺＤ  ８８４８（メチル［３−（｛［３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロピル］［３−（４−モルホリニル）プロピル］アミノ｝メチル）フェニル］アセテート）からなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記治療剤が、インターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）、インターフェロンベータ（ＩＦＮ−β）、インターフェロンラムダ（ＩＦＮ−λ）、及びインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）からなる群から選択されるインターフェロンである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記インターフェロンが、インターフェロン−アルファ−２ａ、インターフェロン−アルファ−２ｂ、又はインターフェロン−アルファ−ｎ１である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記インターフェロン−アルファ−２ａ又は前記インターフェロン−アルファ−２ｂが、ペグ化されている、請求項２５又は２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記インターフェロン−アルファ−２ａが、ペグ化インターフェロン−アルファ−２ａ（ＰＥＧＡＳＹＳ）である、請求項２６又は２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することで、ＨＢＶ感染を予防的に治療することを要する個体において前記ＨＢＶ感染を予防的に治療することにおいて同様の結果を達成するために要求される前記少なくとも１つの追加の治療剤を単独で投与することと比較して、より低用量又は低頻度で前記少なくとも１つの追加の治療剤を投与することが可能となる、請求項２２〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の前記化合物を前記投与することによって、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、異なるカプシド集合調節剤、抗ウイルス化合物、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される化合物の投与と比較して、前記個体における前記ウイルス負荷をより大きい程度、又はより速い速度で低減させる、請求項１５〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を投与することで、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、カプシド集合調節剤、抗ウイルス化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物を投与することよりもウイルス変異又はウイルス抵抗性の発生率を低下させる、請求項１５〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
少なくとも１種類のＨＢＶワクチン、ヌクレオシドＨＢＶ阻害剤、インターフェロン、又はこれらの任意の組み合わせを、前記個体に投与することを更に含む、請求項１５〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＨＢＶワクチンが、ＲＥＣＯＭＢＩＶＡＸ  ＨＢ、ＥＮＧＥＲＩＸ−Ｂ、ＥＬＯＶＡＣ  Ｂ、ＧＥＮＥＶＡＣ−Ｂ、及びＳＨＡＮＶＡＣ  Ｂからなる群から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
ＨＢＶ感染を治療することを要する個体において前記ＨＢＶ感染を治療する方法であって、前記個体に治療有効量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物を単独で又は逆転写酵素阻害剤と組み合わせて投与することによって、前記ＨＢＶウイルス負荷を低下させること、および、前記個体に治療有効量のＨＢＶワクチンを更に投与することを含む、方法。
【請求項３５】
前記対象の前記ＨＢＶウイルス負荷をモニタリングすることを更に含み、前記方法が、前記ＨＢＶウイルスが検出不能となるような期間実施される、請求項１５〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本願は、２０１５年３月１９日出願の米国特許仮出願第６２／１３５，２４３号の優先権を主張する。この出願の全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
慢性Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）の感染は世界的に重大な健康問題であり、世界人口の５％以上（世界中で３億５０００万人超、米国内では１２５万人）が感染している。
【０００３】
予防的なＨＢＶワクチンが存在するものの、慢性ＨＢＶ感染の負担は、発展途上国の大部分では治療選択肢が最適とは言えず、また新たな感染の割合が依然高いことから、重要な未解決の世界的な医療上の問題であり続けている。現行の治療法は、治癒をもたらさず、また２種類の薬剤のみに限定されており（ウイルスポリメラーゼのインターフェロン及びヌクレオシドアナログ／阻害剤）、薬剤耐性、低い有効性、及び忍容性の問題によりその効果は限定的である。ＨＢＶの低い治癒率は、少なくとも部分的に、感染した肝細胞の核内の共有結合閉環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）の存在及び残存が原因である。しかしながら、ＨＢＶ  ＤＮＡの持続的な抑制は、肝臓疾患の進行を遅らせるため、肝細胞癌の防止に役立つ。ＨＢＶ感染患者の現在の治療目標は、血清中のＨＢＶのＤＮＡを低いレベル、又は検出不能なレベルにまで低減させ、肝硬変及び肝細胞癌の発症を低下又は防止することにある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
当該技術分野において、ＨＢＶ感染を治療、改善、又は防止する治療剤に対するニーズが存在する。ＨＢＶ感染患者に対するこれらの治療剤の投与は、単独療法、又は他のＨＢＶ治療剤若しくは補助治療剤との併用療法のいずれかとして、予後の大幅な改善をもたらし、疾患の進行を抑え、セロコンバージョン率を高める。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本明細書は、ＨＢＶ感染の治療を要する対象のＨＢＶ感染を治療するうえで有用な化合物が提供される。
【０００６】
一態様では、本明細書は、式Ｉ：
【０００７】
【化１】
2018510159.tif 000003
を有する化合物、又はその医薬的に許容される塩が提供され、式中、Ｃｙは、
【０００８】
【化２】
2018510159.tif 000004
である。
【０００９】
別の態様では、本明細書は、式Ｉの化合物を含む組成物、又はその医薬的に許容される塩が提供される。
【００１０】
一実施形態では、組成物は医薬組成物であり、少なくとも１種類の医薬的に許容される担体を更に含む。
【００１１】
別の態様では、本明細書は、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法であって、個体に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１２】
更に別の態様では、本明細書は、ＨＢＶ感染に伴うウイルス負荷を低減させることを要する個体においてＨＢＶ感染に伴うウイルス負荷を低減させる方法であって、個体に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１３】
また更に別の態様では、本明細書は、ＨＢＶ感染の再発を低減させることを要する個体においてＨＢＶ感染の再発を低減させる方法であって、個体に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１４】
本明細書は、ＨＢＶ感染の有害な生理学的影響を低減させることを要する個体においてＨＢＶ感染の有害な生理学的影響を低減させる方法であって、個体に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法も提供する。
【００１５】
別の態様では、本明細書は、ＨＢＶ感染による肝損傷の寛解を誘発すること要する個体においてＨＢＶ感染による肝損傷の寛解を誘発する方法であって、個体に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１６】
更に別の態様では、本明細書は、ＨＢＶ感染の長期的抗ウイルス療法の生理学的影響を低減させることを要する個体においてＨＢＶ感染の長期的抗ウイルス療法の生理学的影響を低減させる方法であって、個体に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１７】
更に別の態様では、本明細書は、ＨＢＶ感染を予防的に治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を予防的に治療する方法であって、個体が潜伏性のＨＢＶ感染に罹患しており、個体に治療有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１８】
上記の方法のいずれも、個体に少なくとも１種類の追加の治療剤を投与することを更に含んでよい。一実施形態では、追加の治療剤は、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、免疫調節剤、ペグ化インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、カプシド集合調節剤、逆転写酵素阻害剤、シクロフィリン／ＴＮＦ阻害剤、ＴＬＲアゴニスト、及びＨＢＶワクチン、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００１９】
別の実施形態では、治療剤は逆転写酵素阻害剤であって、かつ、ジドブジン、ジダノシン、ザルシタビン、２’，３’−ジデオキシアデノシン、スタブジン、ラミブジン、アバカビル、エムトリシタビン、エンテカビル、アプリシタビン、アテビラピン、リバビリン、アシクロビル、ファムシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、テノホビル、アデホビル、シドホビル、エファビレンツ、ネビラピン、デラビルジン、及びエトラビリンのうちの少なくとも１つである。
【００２０】
別の実施形態では、追加の治療剤は、ＴＬＲアゴニストである。好ましい実施形態では、ＴＬＲ−アゴニストは、ＳＭ３６０３２０（９−ベンジル−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシ−エトキシ）アデニン）、及びＡＺＤ  ８８４８（メチル［３−（｛［３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロピル］［３−（４−モルホリニル）プロピル］アミノ｝メチル）フェニル］アセテート）からなる群から選択される。
【００２１】
本発明の併用療法の更なる実施形態では、追加の治療剤はインターフェロンであり、インターフェロンは任意にペグ化されてもよい任意のインターフェロンである。なお更なる実施形態では、治療剤は、インターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）、インターフェロンベータ（ＩＦＮ−β）、インターフェロンラムダ（ＩＦＮ−λ）、及びインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）からなる群から選択されるインターフェロンである。好ましい実施形態では、インターフェロンは、インターフェロン−アルファ−２ａ、インターフェロン−アルファ−２ｂ、インターフェロン−アルファ−ｎ１、ペグ化インターフェロン−アルファ−２ａ、又はペグ化インターフェロン−アルファ−２ｂである。別の好ましい実施形態では、インターフェロンは、インターフェロン−アルファ−２ａ、インターフェロン−アルファ−２ｂ、又はインターフェロン−アルファｎ１である。更に別の好ましい実施形態では、インターフェロン−アルファ２ａ又は−インターフェロン−アルファ−２ｂはペグ化されている。また別の好ましい実施形態では、インターフェロン−アルファ−２ａはペグ化インターフェロン−アルファ−２ａ（ＰＥＧＡＳＹＳ）である。
【００２２】
本明細書に提供される方法の別の実施形態では、式Ｉの化合物を投与することで、ＨＢＶ感染を予防的に治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を予防的に治療することにおいて同様の結果を達成するために要求される少なくとも１つの追加の治療剤を単独で投与することと比較して、より低用量又は低頻度で少なくとも１つの追加の治療剤を投与することが可能となる。
【００２３】
本明細書に提供される方法の更に別の実施形態では、式Ｉの化合物を投与することによって、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、異なるカプシド集合調節剤（distinct capsid assembly modulator）、抗ウイルス化合物、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される化合物の投与と比較して、個体におけるウイルス負荷をより大きい程度、又はより速い速度で（faster rate）低減させる。
【００２４】
本明細書に提供される方法の更に別の実施形態では、式Ｉの化合物を投与することで、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、カプシド集合調節剤、抗ウイルス化合物、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される化合物を投与することと比較して、ウイルス変異又はウイルス抵抗性の発生率はより低下する。
【００２５】
本明細書で提供する方法のいずれかにおいて、方法は、少なくとも１つのＨＢＶワクチン、ヌクレオシドＨＢＶ阻害剤、インターフェロン、又はこれらの任意の組み合わせを個体に投与することを更に含んでもよい。一実施形態では、ＨＢＶワクチンは、ＲＥＣＯＭＢＩＶＡＸ  ＨＢ、ＥＮＧＥＲＩＸ−Ｂ、ＥＬＯＶＡＣ  Ｂ、ＧＥＮＥＶＡＣ−Ｂ、及びＳＨＡＮＶＡＣ  Ｂからなる群から選択される。
【００２６】
別の態様では、本明細書は、個体に治療有効量の式Ｉの化合物を単独で又は逆転写酵素阻害剤と組み合わせて投与することによって、ＨＢＶウイルス負荷を低下させること、及び個体に治療有効量のＨＢＶワクチンを更に投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。一実施形態では、逆転写酵素阻害剤は、ジドブジン、ジダノシン、ザルシタビン、２’，３’−ジデオキシアデノシン、スタブジン、ラミブジン、アバカビル、エムトリシタビン、エンテカビル、アプリシタビン（Apricitabine）、アテビラピン（Atevirapine）、リバビリン、アシクロビル、ファムシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、テノホビル、アデホビル、シドホビル、エファビレンツ、ネビラピン、デラビルジン、及びエトラビリンのうちの少なくとも１つである。
【００２７】
別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、対象のＨＢＶウイルス負荷のモニタリングを更に含み、方法は、ＨＢＶウイルスが検出不能となる期間実施される。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本明細書は、ヒトＨＢＶ感染の治療及び予防に有用な化合物を提供する。非限定的な態様では、これらの化合物は、ＨＢＶカプシドと相互作用して毒性が大幅に低減した欠陥ウイルス粒子を産出することによって、感染性粒子の生成に必要なＨＢＶ集合及び他のＨＢＶコアタンパク質機能を調節するか又は破壊させ得る。本発明の化合物は、強力な抗ウイルス活性を有し、好ましい代謝プロファイル、組織分布プロファイル、安全性プロファイル、及び薬物プロファイルを示し、ヒトにおける使用に対して好適である。
【００２９】
ＨＢＶカプシドタンパク質は、ウイルスのライフサイクルの間に必須の機能を果たす。ＨＢＶカプシド／コアタンパク質は、細胞内通過の間にウイルスゲノムを保護する準安定性ウイルス粒子又はタンパク質殻を形成し、かつゲノムカプシド形成、ゲノム複製、並びにビリオンの形態形成及び排出を含むウイルス複製プロセスにおいて中心的な役割を果たす。カプシド構造は、また、ウイルス侵入後に脱殻を可能にする環境合図に応答する。一貫して、適切なカプシド集合及びコアタンパク質の機能がウイルス感染性に重要であることが判明している。
【００３０】
ＨＢＶカプシドタンパク質の重要な機能により、ウイルスカプシドタンパク質配列に厳密な進化的制約が課され、観察された低い配列変動性及び高い保存性をもたらす。一貫して、その集合を破壊するＨＢＶカプシド中の変異は致死的であり、カプシドの安定性を乱す変異によりウイルス複製が著しく減弱する。薬剤標的がより保護されるほど、患者が得る複製可能な耐性変異はより少なくなる。実際に、慢性感染患者に対するＨＢＶカプシドの自然変異は、完全長タンパク質中の１８３の残基のうち４つでしか蓄積しない。したがって、ＨＢＶカプシド集合及び機能阻害剤は、既存のＨＢＶ抗ウイルス剤と比較してより低い薬剤耐性出現率を誘発する場合がある。更に、ＨＢＶカプシドを標的とする薬物療法は、従来のノイラミニダーゼ酵素活性部位を標的とする薬剤と比較すると、薬剤耐性変異を起こす傾向がより低下する可能性がある。ウイルスカプシドに結合し、ＨＩＶ、ライノウイルス、及びＨＢＶの複製を阻害する化合物を記載する報告書により、抗ウイルス薬標的としてのウイルスカプシドタンパク質に関する概念の強い薬理学的証明が提供される。
【００３１】
一態様では、本発明の化合物は、未成熟若しくは成熟粒子の正常なウイルスカプシドの集合及び／又は脱集合を破壊、促進、低減、遅延、及び／又は阻害することによりＨＢＶ治療において有用であり、それにより、異常なカプシド形態を誘導して、ビリオン集合及び／若しくは脱集合の破壊、ビリオン成熟、並びに／又はウイルス排出などの抗ウイルス効果をもたらす。一実施形態では、カプシド集合の破壊剤は、成熟又は未成熟ウイルスカプシドと相互作用してカプシドの安定性を乱すことで、集合及び／又は脱集合に影響を及ぼす。別の実施形態では、カプシド集合の破壊剤は、ウイルスカプシドの安定性、機能、及び／又は正常形態に要求されるタンパク質フォールディング及び／又は塩橋を乱し、それにより、カプシド集合及び／又は脱集合を破壊及び／又は促進させる。更に別の実施形態では、本発明の化合物はカプシドに結合し、細胞のポリタンパク質及び前駆体の代謝を変化させ、タンパク質モノマー及び／又はオリゴマー及び／又は異常粒子の異常蓄積をもたらし、それにより細胞毒性及び感染細胞の死滅が起こる。別の実施形態では、本発明の化合物により、最適な安定性のカプシド形成の失敗が起こり、（例えば、感染の間での）ウイルスの効率的な脱殻及び／又は脱集合に影響を及ぼす。
【００３２】
一実施形態では、本発明の化合物は、カプシドタンパク質が未成熟である場合、カプシドの集合及び／又は脱集合を破壊及び／又は促進する。別の実施形態では、本発明の化合物は、カプシドタンパク質が成熟している場合、カプシドの集合及び／又は脱集合を破壊及び／又は促進する。更に別の実施形態では、本発明の化合物は、ウイルス感染の間にカプシドの集合及び／又は脱集合を破壊及び／又は促進する。更に別の実施形態では、カプシド集合及び／又は脱集合の破壊及び／又は促進により、ＨＢＶウイルス感染性が減弱し、かつ／又はウイルス負荷が低減する。更に別の実施形態では、カプシドの集合及び／又は脱集合の破壊、促進、阻害、遅延、及び／又は低減により、ウイルスを宿主生物から根絶する。更に別の実施形態では、ＨＢＶを宿主から根絶することにより、有利にも、慢性長期治療の必要性が防がれ、及び／又は長期治療の持続時間が低減される。
【００３３】
一実施形態では、本明細書に記載される化合物は単独療法に好適であり、天然又は自然のＨＢＶ株に対して、及び現在知られている薬剤に耐性を有するＨＢＶ株に対して効果的である。別の実施形態では、本明細書に記載される化合物は、併用療法での使用のために好適である。
【００３４】
別の実施形態では、本発明の化合物は、ＨＢＶのｃｃｃＤＮＡの活性、安定性、機能、及びウイルス複製特性を調節（例えば阻害又は破壊）する方法において使用することができる。更に別の実施形態では、本発明の化合物は、ＨＢＶのｃｃｃＤＮＡの生成を減少させるか又は防止する方法において使用することができる。
【００３５】
別の実施形態では、本発明の化合物を、ＨＢＶのｃｃｃＤＮＡの活性を調節（例えば阻害、又は妨害）する方法において使用することができる。更に別の実施形態では、本発明の化合物を、ＨＢＶのｃｃｃＤＮＡの生成を減少させるか又は防止する方法において使用することができる。
【００３６】
定義
本発明を説明するために使用される種々の用語の定義が以下に記載されている。これらの定義は、特定の場合において個別に又はより大きな群の一部として別途限定されない限り、本明細書及び特許請求の範囲を通して使用される用語に適用される。
【００３７】
別途定義されないかぎり、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野における当業者により一般的に理解される意味と同じ意味を一般的に有する。一般的に、本明細書で使用される命名法、並びに細胞培養、分子遺伝学、有機化学、及びペプチド化学における実験法は、当該技術分野では周知のものであり、一般的に用いられているものである。
【００３８】
本明細書で使用する時、冠詞「ａ（１つの）」及び「ａｎ（１つの）」は、１乃至複数（すなわち少なくとも１つ）の冠詞の文法上の目的語を指す。例として「ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ（１つの要素）」とは、１つの要素又は複数の要素を意味する。更に、「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ（含む）」なる用語、並びに「ｉｎｃｌｕｄｅ（含む）」、「ｉｎｃｌｕｄｅｓ（含む）」、及び「含んだ（included）といった他の形態の使用は非限定的である。
【００３９】
本明細書で使用する時、「約」なる用語は、当業者には理解されるものであり、この用語が用いられる文脈によってある程度異なる。本明細書で使用する時、量及び持続時間などの測定可能な値を指す場合には、「約」なる用語は、特定された値から、±２０％又は±１０％、より好ましくは±５％、更により好ましくは±１％、いっそうより好ましくは±０．１％のばらつきを包含することを意味するが、かかるばらつきは、本開示の方法を実施するうえで適切なものである。
【００４０】
本明細書で使用する時、「カプシド集合調節剤」なる用語は、（例えば、成熟の間での）正常なカプシド集合又は（例えば、感染の間での）正常なカプシド脱集合を破壊又は促進又は阻害又は妨害又は遅延又は低減又は修飾する、或いはカプシドの安定性を乱し、それにより異常なカプシド形態及び機能を誘導する化合物を指す。一実施形態では、カプシド集合調節剤は、カプシドの集合又は脱集合を促進させ、それにより異常なカプシド形態を誘導する。別の実施形態では、カプシド集合調節剤は、主要カプシド集合タンパク質（ＣＡ）と相互作用し（例えば、活性部位で結合し、アロステリック部位で結合し、折り畳みなどを修飾及び／又は妨害する）、それによりカプシドの集合又は脱集合を破壊する。更に別の実施形態では、カプシド集合調節剤は、ＣＡの構造又は機能（例えば、集合、脱集合、基質への結合、好適なコンフォメーションへの折り畳みなどのＣＡの能力）において撹乱を起こし、これはウイルスの感染性を減弱させ、かつ／又はこれはウイルスに対して致死的である。
【００４１】
本明細書で使用する時、「治療」又は「治療する」なる用語は、ＨＢＶ感染、ＨＢＶ感染の症状、又はＨＢＶ感染を発症する可能性に対する治療、治癒、緩和、軽減、改変、救済、好転、向上、又は影響の目的で、ＨＢＶ感染、ＨＢＶ感染の症状、又はＨＢＶ感染を発症する可能性を有する患者への治療剤、すなわち本発明の化合物の（単独で又は別の薬剤と併用での）適用若しくは投与、又はこうした患者から（例えば、診断又はエクスビボの用途のために）単離された組織又は細胞株に対する治療剤の適用若しくは投与として定義される。かかる治療は、薬理ゲノミクスの分野より得られる知識に基づいて具体的に調整又は改変される場合がある。
【００４２】
本明細書で使用する時、「予防する」又は「予防」なる用語は、疾患若しくは病気の発症が生じていない場合には疾患若しくは病気の発症がまったくないことを、又は既に疾患若しくは病気の発症があった場合には更なる疾患若しくは病気の発症がないことを意味する。疾患又は病気にともなう症状の一部又はすべてを予防する個体の能力も考慮される。
【００４３】
本明細書で使用する時、「患者」、「個体」、又は「対象」なる用語は、ヒト又は非ヒト哺乳動物のことを指す。非ヒト哺乳動物としては、例えば、ヒツジ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、及びネズミ科の哺乳動物などの家畜及びペットが挙げられる。好ましくは、患者、対象、又は個体は、ヒトである。
【００４４】
本明細書で使用する時、「有効量」、「医薬有効量」、及び「治療有効量」なる用語は、毒性を示さないで、所望の生物学的結果をもたらすうえで充分な薬剤の量のことを指す。そのような結果は、病気の徴候、症状、又は原因の低減及び／若しくは緩和、あるいは生物学的な系の任意の他の望ましい変化であってもよい。任意の個別のケースにおける適当な治療量は、当業者によって通常の実験を用いて決定されてもよい。
【００４５】
本明細書で使用する時、「医薬的に許容される」なる用語は、化合物の生物活性又は特性を損なわず、かつ比較的無毒性の（すなわち、かかる材料は、望ましくない生物学的作用を引き起こすことなく、また、それが含まれる組成物の成分のいずれかと有害な様式で相互作用することなく、個体に投与され得る）担体又は希釈剤などの材料を指す。
【００４６】
本明細書で使用する時、「医薬的に許容される塩」なる用語は、既存の酸又は塩基部分をその塩の形態に変換することによって親化合物が改質された開示される化合物の誘導体のことを指す。医薬的に許容される塩類の例としては、限定されないが、アミンなどの塩基性残基の鉱酸塩又は有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ又は有機塩、及びこれらに類するものが挙げられる。本発明の医薬的に許容される塩としては、例えば、無毒性の無機酸又は有機酸から形成された親化合物の、従来の無毒性塩が挙げられる。本発明の医薬的に許容される塩は、従来の化学的方法によって、塩基性又は酸性部分を含有する親化合物から合成することができる。一般的に、かかる塩は、これらの化合物の遊離酸又は塩基の形を、水中若しくは有機溶媒中、又はその両方の混合物中で、化学量論的量の適切な塩基又は酸と反応させることにより、調製することができる。有機溶媒としては、一般的には、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、又はアセトニトリルのような非水性媒質が好ましい。好適な塩のリストは、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５，ｐ．１４１８及びＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２（１９７７）に見出され、そのそれぞれは、その全容にわたって参照により本明細書に組み込まれる。
【００４７】
本明細書で使用する時、「組成物」又は「医薬組成物」なる用語は、本発明の範囲内で有用な少なくとも１つの化合物と医薬的に許容される担体との混合物のことを指す。医薬組成物は、患者又は対象への化合物の投与を容易にするものである。当該技術分野では、これらに限定されるものではないが、静脈内投与、経口投与、エアロゾル投与、非経口投与、眼内投与、肺内投与、及び局所投与を含む、化合物を投与するための多くの技法が存在している。
【００４８】
本明細書で使用する時、「医薬的に許容される担体」なる用語は、本発明の範囲内で有用な化合物を、その目的とする機能を行い得るように患者の体内で、又は患者に、搬送若しくは輸送することに関係した、液体若しくは固体の充填剤、安定化剤、分散剤、懸濁剤、希釈剤、賦形剤、増粘剤、溶媒又はカプセル化材料などの医薬的に許容される材料、組成物、又は担体を意味する。典型的には、かかる構造体は、身体のある臓器又は部分から、身体の別の臓器又は部分に搬送又は輸送される。それぞれの担体は、本発明の範囲内で有用な化合物を含む、製剤の他の成分と適合性を有し、かつ患者に有害ではないという意味において「許容される」ものでなければならない。医薬的に許容される担体として機能し得る材料のいくつかの例としては、ラクトース、グルコース、及びスクロースなどの糖類；コーンスターチ及びジャガイモデンプンなどのデンプン；カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、及び酢酸セルロースなどのセルロース及びその誘導体；粉末トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；カカオバター及び坐剤ワックスなどの賦形剤；落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブオイル、コーン油、及び大豆油などの油類；プロピレングリコールなどのグリコール；グリセリン、ソルビトール、マンニトール、及びポリエチレングリコールなどのポリオール；オレイン酸エチル、及びラウリン酸エチルなどのエステル；寒天；水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；界面活性剤；アルギン酸；パイロジェンフリー水；等張生理食塩水；リンゲル液；エチルアルコール；リン酸緩衝液；及び医薬製剤に用いられる他の無毒性適合性物質が挙げられる。本明細書で使用する時、「医薬的に許容される担体」には、本発明の範囲内で有用な化合物の活性と適合性を有し、患者に対して生理学的に許容されるありとあらゆるコーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、並びに吸収遅延剤なども含まれる。補助的活性化合物を本組成物に添加することもできる。「医薬的に許容される担体」は、本発明内で有用な化合物の医薬的に許容される塩を更に含んでもよい。本発明を実施するうえで用いられる医薬組成物に含まれ得る他の更なる成分は当該技術分野では既知のものであり、例えば、本明細書に参照により組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｇｅｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，１９８５，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）に記載されている。
【００４９】
本明細書で使用する時、「アルキル」なる用語は、それ自体で、又は別の置換基の一部として、別段の指示がない限り、指定された数の炭素原子（すなわち、Ｃ１〜６は、１個〜６個の炭素原子を意味する）を有する直鎖又は分枝鎖の炭化水素を意味し、直鎖、分枝鎖、又は環状置換基を含む。例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、及びシクロプロピルメチルが挙げられる。（Ｃ１〜６）アルキル、特にエチル、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、及びシクロプロピルメチルが最も好ましい。
【００５０】
本明細書で使用する時、「ハロ」又は「ハロゲン」なる用語は、単独で、又は別の置換基の一部として、別段の指示がない限り、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を意味し、好ましくはフッ素、塩素、又は臭素を意味し、より好ましくはフッ素又は塩素を意味する。
【００５１】
本明細書で使用する時、「シクロアルキル」なる用語は、環を構成する原子のそれぞれ（すなわち、骨格原子）が炭素原子である単環式又は多環式の非芳香族ラジカルを指す。一実施形態では、シクロアルキル基は、飽和又は部分飽和している。別の実施形態では、シクロアルキル基は、芳香環と融合している。シクロアルキル基としては、３〜１０の環原子を有する基（Ｃ３〜１０シクロアルキル）、又は３〜７の環原子を有する基（Ｃ３〜７シクロアルキル）が挙げられる。
【００５２】
シクロアルキルなる用語には、「不飽和非芳香族カルボシクリル」又は「非芳香族不飽和カルボシクリル」基が含まれ、これらはいずれも、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合又は１個の炭素−炭素三重結合を含む、本明細書で定義される非芳香族炭素環を指す。
【００５３】
本明細書で使用する時、「ヘテロアルキル」なる用語は、それ自体で又は別の用語と組み合わせて、別段の指示がない限り、定められた数の炭素原子、並びにＯ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される１つ又は２つのヘテロ原子からなる安定な直鎖又は分枝鎖アルキル基を意味する。ヘテロ原子は、ヘテロアルキル基の残りと、それが結合するフラグメントと、の間を含むヘテロアルキル基の任意の位置に配置されてもよく、のみならずヘテロアルキル基中で最も遠位の炭素原子と結合してもよい。例としては、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、及び−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ３が挙げられる。例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３、又は−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−ＣＨ３のように、２個以下のヘテロ原子が連続していてもよい。好ましいヘテロアルキル基は、１〜１０個の炭素を有する。
【００５４】
本明細書で使用する時、「ヘテロシクロアルキル」又は「ヘテロシクリル」なる用語は、それぞれＯ、Ｓ、及びＮから選択される１〜４個の環ヘテロ原子を含むヘテロ脂環式基を指す。一実施形態では、各ヘテロシクロアルキル基は、上記の基の環が２つの隣接するＯ又はＳ原子を含まないことを条件に、その環系中に４〜１０個の原子を有する。別の実施形態では、ヘテロシクロアルキル基は、芳香族環と融合している。一実施形態では、窒素及び硫黄ヘテロ原子は、場合により酸化されてもよく、窒素原子は場合により四級化されてもよい。ヘテロ環系は、別段の指示がない限り、安定した構造を与える任意のヘテロ原子又は炭素原子に結合してもよい。ヘテロ環は、本来、芳香族であっても又は非芳香族であってもよい。一実施形態では、ヘテロ環はヘテロアリールである。
【００５５】
本明細書で使用する時、「芳香族」なる用語は、１つ以上の多価不飽和環を伴い、芳香族性を有する、すなわち、（４ｎ＋２）非局在化π（パイ）電子（ｎは整数である）を有する炭素環又は複素環を指す。
【００５６】
本明細書で使用する時、「アリール」なる用語は、単独で、又は他の用語と組み合わせて用いられて、別段の指示がない限り、１個以上の環（典型的には、１個、２個、又は３個の環）を有する炭素環式芳香族系を意味し、かかる環はビフェニルのようにペンダント式に互いに結合されていてもよく、又はナフタレンのように縮合していてもよい。アリール基の例としては、フェニル、アントラシル、及びナフチルが挙げられる。好ましい例は、フェニル及びナフチルであり、フェニルが最も好ましい。いくつかの実施形態では、アリール基は、６個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、アリール基は、６〜１０個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、アリール基は、６〜１６個の炭素原子を有する。
【００５７】
本明細書で使用する時、「ヘテロアリール」又は「ヘテロ芳香族」なる用語は、芳香族特性を有するヘテロ環のことを指す。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール又はヘテロ芳香族基は、２〜５個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール又はヘテロ芳香族基は、２〜１０個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール又はヘテロ芳香族基は、２〜１６個の炭素原子を有する。多環式ヘテロアリールは、部分飽和した１個以上の環を含んでもよい。いくつかの実施形態では、多環式ヘテロアリール基は２〜５個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、多環式ヘテロアリール基は２〜１０個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、多環式ヘテロアリール基は２〜１６個の炭素原子を有する。
【００５８】
本明細書で使用する時、「置換された」なる用語は、原子又は原子群が、別の基に付着した置換基として水素を置換していることを意味する。「置換された」なる用語は、こうした置換が許容される場合に、任意の置換レベル、すなわちモノ−、ジ−、トリ−、テトラ−、又ペンタ−置換を更に指す。置換基は、独立して選択され、置換は化学的に接近可能な任意の位置であってもよい。一実施形態では、置換基の数は１〜４個の間で変化する。別の実施形態では、置換基の数は１〜３個の間で変化する。更に別の実施形態では、置換基の数は１〜２個の間で変化する。
【００５９】
本発明の化合物
本発明は、ヒトにおけるＨＢＶ感染の治療及び予防に有用な化合物の発見に関するものである。一態様では、本発明の化合物は、未成熟若しくは成熟粒子の正常なウイルスカプシドの集合又は脱集合を破壊、促進、低減、遅延、又は阻害することによりＨＢＶ治療において有用であり、それにより、異常なカプシド形態を誘導して、ビリオン集合若しくは脱集合の破壊、ビリオン成熟、又はウイルス排出などの抗ウイルス効果をもたらす。
【００６０】
別の態様では、本発明の化合物はコアタンパク質に結合して、それにより異常なビリオンを誘導してビリオン集合、脱集合、成熟、又はウイルス排出の破壊などの抗ウイルス作用をもたらす。
【００６１】
本明細書に開示されるカプシド集合破壊剤（capsid assembly disruptor）は、ヒトにおけるＨＢＶ感染を治療するために、単独療法として、又はクラス横断的併用レジメン（cross-class combination regimen）で使用されてもよい。ウイルス生活環の異なる段階で作用する異なる作用機序（ＭＯＡ）を示す薬剤との併用療法は、相加的又は相乗的抗ウイルス作用によってより高い有効性を与える場合がある。臨床評価が行われたＨＩＶ治療レジメンによって、併用療法がウイルス負荷低減の有効性を高め、抗ウイルス耐性の出現を劇的に低下させることが示されている。Ｃ型肝炎（ＨＣＶ）ウイルス感染に対する併用療法によっても、持続的な抗ウイルス反応及び根絶率の大幅な改善がもたらされている。したがって、本発明のＨＢＶカプシド集合阻害剤と、例えばノイラミニダーゼ薬との併用により、現在の治療標準と比較してより顕著な抗ウイルス効果及びより高い疾患根絶率がもたらされる可能性が高い。
【００６２】
カプシド集合はＨＢＶゲノム複製において中心的な役割を果たす。ＨＢＶポリメラーゼは、プレゲノムＨＢＶ  ＲＮＡ（ｐｇＲＮＡ）と結合し、ｐｇＲＮＡカプシド形成は、ＨＢＶ  ＤＮＡ合成の前に起きるはずである。更に、ヌクレオシド抑制療法の存在下で慢性ＨＢＶ複製の維持の原因となるｃｃｃＤＮＡ複製中間体の核蓄積が、この核へのＨＢＶ  ＤＮＡのシャトリングのためにカプシドを必要とすることは十分に立証されている。したがって、本発明のＨＢＶカプシド集合破壊剤は、単独で使用するか又は既存のヌクレオシド薬と併用すると、ウイルスゲノム複製の相乗的又は相加的な抑制によってＨＢＶ根絶速度を高め、更に、ｃｃｃＤＮＡ蓄積を低減させる能力を有している。本発明のカプシド集合破壊剤は、更に、正常なコアタンパク質の機能又は分解も変化させて、変化したＭＨＣ−１抗原提示をもたらす可能性があり、これが続いて免疫刺激活性を通じてセロコンバージョン／根絶速度を高めて、感染した細胞をより効果的に取り除く場合がある。
【００６３】
一態様では、薬剤耐性は慢性ＨＢＶ感染の現在の治療法に対する主要な脅威となっており、クラス横断的併用療法は、薬剤耐性株の出現を遅らせるための実証されている１つの方法である。本発明のカプシド集合破壊剤は、単独で、又は他のＨＢＶ治療剤と併用して投与される場合に薬剤耐性プロファイルを向上させ、慢性ＨＢＶの管理を改善することができる。
【００６４】
本発明の範囲内で有用な化合物は、有機合成の技術分野で周知の技法を用いて合成することができる。合成に必要とされる出発物質及び中間体は、市販の供給元から入手するか又は当業者には既知の方法にしたがって合成することができる。
【００６５】
一態様では、本発明の化合物は、式Ｉの化合物：
【００６６】
【化３】
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又はその医薬的に許容される塩であり、
式中、
Ｒ４は、Ｈ又はＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｈ２ＰＯ４、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０アリール）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール）であり、式中、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリール基は、任意にハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、又は−ＮＯ２で１〜５回置換され、
Ｒ２は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、Ｒ６、又はＯＲ６であり、式中、Ｒ６は、各出現で独立して、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリール、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０アリール）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ５〜Ｃ１０ヘテロアリール）であり、式中、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリール基は、任意にハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、又は−ＮＯ２で１〜５回置換され、
Ｃｙは、
【００６７】
【化４】
2018510159.tif 000006
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０アリール）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール）であり、式中、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリール基は、任意にハロ、−ＯＨ、−ＣＮ、又は−ＮＯ２で１〜５回置換され、あるいは２つのＲ１１基が、それらが結合している炭素と共に合わさって環状ホスフェート環を形成し、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、
ｘは０、１、２、３、４、又は５であり、
ｙは０、１、２、３、又は４である。一実施形態では、ｙは０、１、又は２である。
【００６８】
本明細書で提供される式Ｉの一実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ４は、Ｈであり、
ｍは、０、１、２、又は３であり、
ｘは０、１、２、又は３であり、
ｙは０、１、２、又は３である。更なる実施形態では、ｙは０、１、又は２である。更に別の実施形態（ambodiment）では、ｙは１である。
【００６９】
本明細書で提供される式Ｉの別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）であり、式中、アルキル基は、任意にハロ、又は−ＯＨで１〜５回置換される。
【００７０】
本明細書で提供される式Ｉの更に別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ２は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、Ｒ６、又はＯＲ６であり、式中、Ｒ６は、各出現で独立して、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）であり、式中、アルキル基は、任意にハロ、又は−ＯＨで１〜５回置換される。
【００７１】
本明細書で提供される式Ｉの更に別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル）、又は−Ｃ１〜Ｃ４アルキル−（Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキル）であり、式中、アルキル基は、任意にハロ、又は−ＯＨで１〜５回置換される。
【００７２】
本明細書で提供される式Ｉの別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルである。
【００７３】
本明細書で提供される式Ｉの更に別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、又は−Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ２は、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、及び−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルから選択され、式中、アルキル及びシクロアルキル基は、任意にハロで１〜５回置換され、
Ｃｙは、
【００７４】
【化５】
2018510159.tif 000007
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、又はハロであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは０、１、２、又は３である。
【００７５】
本明細書で提供される式Ｉの更に別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、又はハロであり、
Ｒ２は、−ＯＨ、ハロ、及び−Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、式中、アルキル基は、任意にハロで１〜５回置換され、
Ｃｙは、
【００７６】
【化６】
2018510159.tif 000008
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ１０ヘテロシクロアルキルであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは０、１、２、又は３である。
【００７７】
本明細書で提供される式Ｉの別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、−ＯＨ、又はハロであり、
Ｒ２は、ハロ、及び−Ｃ１〜Ｃ３アルキルから選択され、式中、アルキル基は、任意にハロで１〜３回置換され、
Ｃｙは、
【００７８】
【化７】
2018510159.tif 000009
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ３アルキル、−Ｃ１〜Ｃ４ヘテロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクロアルキルであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは０、１、２、又は３である。
【００７９】
本明細書で提供される式Ｉの更に別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、ハロであり、
Ｒ２は、ハロ、及び−Ｃ１アルキルから選択され、式中、アルキル基は、任意にハロで１〜３回置換され、
Ｃｙは、
【００８０】
【化８】
2018510159.tif 000010
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ３アルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは、２又は３である。
【００８１】
本明細書で提供される式Ｉの更に別の実施形態、又はその医薬的に許容される塩では、
Ｒ４は、Ｈであり、
各Ｒ１は、各出現で独立して、ハロであり、
Ｒ２は、ハロ、及び−Ｃ１アルキルから選択され、式中、アルキル基は、任意にハロで１〜３回置換され、
Ｃｙは、
【００８２】
【化９】
2018510159.tif 000011
であり、
式中、
Ｒ１１は、各出現で独立して、−ＯＨ、ハロ、−Ｃ１〜Ｃ３アルキル、又は−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキルであり、
ｍは、０、１、又は２であり、
ｘは、２又は３である。
【００８３】
本明細書で提供される式Ｉの別の実施形態では、化合物は
【００８４】
【化１０】
2018510159.tif 000012
又はその医薬的に許容される塩から選択される。
【００８５】
式Ｉの特定の好ましい実施形態（その医薬的に許容される塩を含む）を、以下の表１に示す。式Ｉのすべての化合物及び医薬的に許容されるそれらの塩、並びに表１の化合物及び医薬的に許容されるそれらの塩は、「本発明の化合物」であると考えられる。
【００８６】
合成法コードは、実験の項で提供される合成方法を指す。例えば「Ａ０１Ｂ０１Ｃ０１」は、領域Ａに対する中間体Ａ０１、領域Ｂに対する中間体Ｂ０１、及び領域Ｃに対する中間体Ｃ０１、の使用を指す。
【００８７】
【表１−１】
2018510159.tif 000013
【００８８】
【表１−２】
2018510159.tif 000014
【００８９】
【表１−３】
2018510159.tif 000015
【００９０】
【表１−４】
2018510159.tif 000016
【００９１】
【表１−５】
2018510159.tif 000017
【００９２】
【表１−６】
2018510159.tif 000018
【００９３】
【表１−７】
2018510159.tif 000019
【００９４】
【表１−８】
2018510159.tif 000020
【００９５】
【表１−９】
2018510159.tif 000021
【００９６】
【表１−１０】
2018510159.tif 000022
【００９７】
【表１−１１】
2018510159.tif 000023
【００９８】
【表１−１２】
2018510159.tif 000024
【００９９】
【表１−１３】
2018510159.tif 000025
【０１００】
【表１−１４】
2018510159.tif 000026
【０１０１】
【表１−１５】
2018510159.tif 000027
【０１０２】
【表１−１６】
2018510159.tif 000028
【０１０３】
【表１−１７】
2018510159.tif 000029
【０１０４】
【表１−１８】
2018510159.tif 000030
【０１０５】
【表１−１９】
2018510159.tif 000031
【０１０６】
【表１−２０】
2018510159.tif 000032
【０１０７】
【表１−２１】
2018510159.tif 000033
【０１０８】
【表１−２２】
2018510159.tif 000034
【０１０９】
【表１−２３】
2018510159.tif 000035
【０１１０】
【表１−２４】
2018510159.tif 000036
【０１１１】
【表１−２５】
2018510159.tif 000037
【０１１２】
本発明の化合物は、１つ以上の立体中心を持つ場合があるが、各立体中心は、Ｒ構成又はＳ構成のいずれかにおいて独立して存在する場合がある。一実施形態では、本明細書に記載の化合物は、光学活性体又はラセミ体で存在する。本明細書に記載の化合物は、本明細書に記載の治療的に有用な特性を持つラセミ体、光学活性体、位置異性体、及び立体異性体、又はこれらの組み合わせを含むことを理解すべきである。
【０１１３】
光学活性体の調製は、非限定的な例として、再結晶技法によるラセミ体の分解、光学活性出発材料からの合成、キラル合成、又はキラル固定相を使用したクロマトグラフィ分離を含む、任意の好適な様式で達成される。一実施形態では、１つ以上の異性体の混合物が、本明細書に記載の治療化合物として利用される。別の実施形態では、本明細書に記載の化合物は、１つ以上のキラル中心を含む。これらの化合物は、立体選択的合成、エナンチオ選択的合成、並びに／或いはエナンチオマー及び／又はジアステレオマーの混合物の分離を含む任意の手段により調製される。化合物及びその異性体の分解は、非限定的な例として、化学プロセス、酵素プロセス、分別結晶化、蒸留、及びクロマトグラフィを含む任意の手段により達成される。
【０１１４】
一実施形態では、本発明の化合物は互変異性体として存在してもよい。すべての互変異性体は、本明細書に提示する化合物の範囲内に含まれる。
【０１１５】
本明細書に記載の化合物は、また、１つ以上の原子が、同じ原子番号を有するが、原子質量又は質量数が通常天然に見出される原子質量又は質量数とは異なる原子で置き換えられる同位体標識化合物も含む。本明細書に記載の化合物に含むのに好適な同位体の例としては、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、３６Ｃｌ、１８Ｆ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、３２Ｐ、及び３５Ｓが挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、同位体標識化合物は、薬物及び／又は基質組織分布試験において有用である。別の実施形態では、重水素などのより重い同位体による置換によって、より大きな代謝安定性（例えば、インビボ半減期の増加又は用量要件の低減）がもたらされる。更に別の実施形態において、陽電子放出同位体（例えば、１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏ、及び１３Ｎなど）による置換は、基質受容体占有率を検証するための陽電子放射トポグラフィー（ＰＥＴ）試験において有用である。同位体標識化合物は、任意の好適な方法により、又は別途用いられる非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を使用するプロセスにより調製される。
【０１１６】
一実施形態では、本明細書に記載の化合物は、発色団若しくは蛍光部分、生物発光標識、又は化学発光標識の使用を含むが、これらに限定されない他の手段により標識される。
【０１１７】
本明細書に記載される化合物、及び異なる置換基を有する他の関連化合物は、本明細書に記載される技法及び材料を用い、また、例えば、Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １〜１７（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９１）、Ｒｏｄｄ’ｓ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １〜５  ａｎｄ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９８９）、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １〜４０（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９１），Ｌａｒｏｃｋ’ｓ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ（ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｉｎｃ．，１９８９），Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４ｔｈ  Ｅｄ．，（Ｗｉｌｅｙ，１９９２）、Ｃａｒｅｙ  ａｎｄ  Ｓｕｎｄｂｅｒｇ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４ｔｈ  Ｅｄ．，Ｖｏｌｓ．Ａ  ａｎｄ  Ｂ（Ｐｌｅｎｕｍ  ２０００，２００１）、及びＧｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ３ｒｄ  Ｅｄ．，（Ｗｉｌｅｙ  １９９９）に記載される技法及び材料を用いて、合成される（これらはすべて、かかる開示に対してその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。本明細書に記載の化合物の一般的な調製方法は、本明細書に提供する式で見出される種々の部分の導入のための適切な試薬及び条件の使用により改変される。
【０１１８】
本明細書に記載の化合物は、商業的供給源から入手可能であるか、又は本明細書に記載の手順を使用して調製される化合物から開始する任意の好適な手順を使用して合成される。
【０１１９】
一実施形態では、反応性官能基（ヒドロキシル基、アミノ基、イミノ基、チオ基、又はカルボキシ基など）は、反応における望ましくない関与を回避するために保護される。保護基を使用し、反応性部分の一部又は全部をブロックし、そのような基が、保護基が除去されるまで化学反応に関与しないようにする。別の実施形態では、各保護基は、異なる手段により除去可能である。完全に異種の反応条件下で切断される保護基は、異なる除去の要件を満たす。
【０１２０】
一実施形態では、保護基は、酸、塩基、還元条件（例えば、水素化分解など）、及び／又は酸化条件によって除去される。トリチル、ジメトキシトリチル、アセタール、及びｔ−ブチルジメチルシリルなどの基は、酸に不安定であり、水素化分解によって除去可能なＣｂｚ基、及び塩基に不安定なＦｍｏｃ基で保護されたアミノ基の存在下でカルボキシ及びヒドロキシ反応性部分を保護するために用いられる。カルボン酸及びヒドロキシ反応性部分は、ｔ−ブチルカルバメートなどの酸不安定性基、又は酸及び塩基の両方に安定性であるが、加水分解で除去可能であるカルバメートでブロックされたアミンの存在下で、メチル基、エチル基、及びアセチル基などであるがこれらに限定されない塩基不安定性基でブロックされる。
【０１２１】
本発明の方法
本発明は、個体に治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１２２】
本発明は、個体に治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、ＨＢＶ感染に伴うウイルス負荷を低減させることを要する個体においてＨＢＶ感染に伴うウイルス負荷を低減させる方法も提供する。
【０１２３】
本発明は、個体に治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、ＨＢＶ感染の再発を低減させることを要する個体においてＨＢＶ感染の再発を低減させる方法も提供する。
【０１２４】
本発明は、個体に治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、ＨＢＶ感染の有害な生理学的影響を低減させることを要する個体においてＨＢＶ感染の有害な生理学的影響を低減させる方法を更に提供する。
【０１２５】
本発明は、個体に治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、ＨＢＶ感染による肝損傷の寛解を誘発することを要する個体においてＨＢＶ感染による肝損傷の寛解を誘発する方法を更に提供する。
【０１２６】
本発明は、個体に治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、ＨＢＶ感染の長期的抗ウイルス療法の生理学的影響を低減させることを要する個体においてＨＢＶ感染の長期的抗ウイルス療法の生理学的影響を低減させる方法も提供する。
【０１２７】
本発明は、個体に治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、ＨＢＶ感染を予防的に治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を予防的に治療する方法であって、個体が潜伏性ＨＢＶ感染に罹患している、方法も提供する。
【０１２８】
一実施形態では、本明細書に記載される方法は、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、免疫調節剤、ペグ化インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、カプシド集合調節剤、逆転写酵素阻害剤、シクロフィリン／ＴＮＦ阻害剤、ＴＬＲアゴニスト、及びＨＢＶワクチン、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。別の実施形態では、本発明の化合物及び少なくとも１つの追加の治療剤を共配合する。更に別の実施形態では、本発明の化合物及び少なくとも１つの追加の治療剤を同時投与する。
【０１２９】
一実施形態では、本発明の化合物を投与することによって、ＨＢＶ感染を予防的に治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を予防的に治療することにおいて同様の結果を達成するために要求される少なくとも１つの追加の治療剤を単独で投与することと比較して、より低用量又は低頻度で少なくとも１つの追加の治療剤を投与することが可能となる。
【０１３０】
一実施形態では、本発明の化合物を投与することによって、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、異なるカプシド集合調節剤、抗ウイルス化合物、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される化合物の投与と比較して、個体におけるウイルス負荷をより大きい程度、又はより速い速度で、低減させる。
【０１３１】
一実施形態では、本発明の化合物を投与することによって、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、カプシド集合調節剤、抗ウイルス化合物、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される化合物の投与より、ウイルス変異又はウイルス抵抗性の発生率を低下させる。
【０１３２】
本発明は、個体に治療有効量の本発明の化合物を単独で又は逆転写酵素阻害剤と組み合わせて投与することによって、ＨＢＶウイルス負荷を低下させること、及び個体に治療有効量のＨＢＶワクチンを更に投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法も提供する。
【０１３３】
一実施形態では、本発明の方法は、対象のＨＢＶウイルス負荷のモニタリングを更に含み、方法は、ＨＢＶウイルスが検出不能となるような期間実施される。
【０１３４】
したがって、一実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の式Ｉの化合物又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療する必要のある個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１３５】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２０３９、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１３６】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２０３９＿Ｅ１、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１３７】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２０３９＿Ｅ２、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１３８】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２０４０、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１３９】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２０４０＿Ｅ１、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４０】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２０４０＿Ｅ２、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４１】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２２８５＿Ｄ１、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４２】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２２８５＿Ｄ２、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４３】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２４３５、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４４】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２４３６、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４５】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２５２０、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４６】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２５２０＿Ｅ１、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４７】
別の実施形態では、本明細書は、個体に治療有効量の化合物２５２０＿Ｅ２、又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。
【０１４８】
併用療法
本発明の化合物は、ＨＢＶ感染の治療に有用な１つ又は２つ以上の追加の化合物との組み合わせで有用となるように意図される。これらの追加の化合物は、本発明の化合物、或いはＨＢＶ感染の症状若しくは影響を治療、予防、又は低減することが既知である化合物を含んでもよい。このような化合物としては、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、文献記載のカプシド集合調節剤、逆転写酵素阻害剤、ＴＬＲアゴニスト、並びにＨＢＶのライフサイクルに影響を及ぼす、かつ／又はＨＢＶ感染の転帰に影響を及ぼす異なる又は未知の機序を伴う他の薬剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４９】
非限定的な例では、本発明の化合物は、以下からなる群から選択される１つ又は２つ以上の薬剤（又はその塩）と併用されてもよい。
ＨＢＶ逆転写酵素阻害剤、並びに、ラミブジン（３ＴＣ、Ｚｅｆｆｉｘ、Ｈｅｐｔｏｖｉｒ、Ｅｐｉｖｉｒ、及びＥｐｉｖｉｒ−ＨＢＶ）、エンテカビル（Ｂａｒａｃｌｕｄｅ、Ｅｎｔａｖｉｒ）、アデホビルジピボキシル（Ｈｅｐｓａｒａ、Ｐｒｅｖｅｏｎ、ｂｉｓ−ＰＯＭ  ＰＭＥＡ）、テノホビルジソプロキシルフマレート（Ｖｉｒｅａｄ、ＴＤＦ、又はＰＭＰＡ）が挙げられるがこれらに限定されないＤＮＡ及びＲＮＡポリメラーゼ阻害剤；
インターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）、インターフェロンラムダ（ＩＦＮ−λ）、及びインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）が挙げられるがこれらに限定されないインターフェロン；
ウイルス侵入阻害剤；
ウイルス成熟阻害剤；
ＢＡＹ４１−４１０９などの、しかしこれらに限定されない、文献記載のカプシド集合調節剤；
逆転写酵素阻害剤；
ＴＬＲアゴニスト；並びに
ＡＴ−６１（（Ｅ）−Ｎ−（１−クロロ−３−オキソ−１−フェニル−３−（ピペリジン−１−イル）プロパ−１−エン−２−イル）ベンズアミド）、ＡＴ−１３０（（Ｅ）−Ｎ−（１−ブロモ−１−（２−メトキシフェニル）−３−オキソ−３−（ピペリジン−１−イル）プロパ−１−エン−２−イル）−４−ニトロベンズアミド）、及び類似の類似体などの、しかしこれらに限定されない、異なる又は未知の機序の薬剤。
【０１５０】
一実施形態では、追加の治療剤はインターフェロンである。「インターフェロン」又は「ＩＦＮ」なる用語は、ウイルス複製及び細胞増殖を阻害し、免疫応答を調節する、高度に相同な種特異的タンパク質のファミリーの任意のメンバーを指す。ヒトインターフェロンは、以下の３つのクラス、すなわちインターフェロ−ンアルファ（ＩＦＮ−α）、インターフェロン−ベータ（ＩＦＮ−β）、及びインターフェロン−オメガ（ＩＦＮ−ω）を含むＩ型、インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）を含むＩＩ型、並びにインターフェロン−ラムダ（ＩＦＮ−λ）を含むＩＩＩ型にグループ化される。開発され、市販されている組換え型のインターフェロンは、本明細書で使用する時、「インターフェロン」なる用語により包含される。化学修飾インターフェロン又は変異インターフェロンなどのインターフェロンのサブタイプも、本明細書で使用する時、「インターフェロン」なる用語に包含される。化学修飾インターフェロンとしては、ペグ化インターフェロン及びグリコシル化インターフェロンが挙げられる。インターフェロンの例としては、インターフェロン−アルファ−２ａ、インターフェロン−アルファ−２ｂ、インターフェロン−アルファ−ｎ１、インターフェロン−ベータ−１ａ、インターフェロン−ベータ−１ｂ、インターフェロン−ラムダ−１、インターフェロン−ラムダ−２、及びインターフェロン−ラムダ−３が挙げられるが、これらに限定されない。ペグ化インターフェロンの例としては、ペグ化インターフェロン−アルファ−２ａ及びペグ化インターフェロン−アルファ−２ｂが挙げられる。
【０１５１】
したがって、一実施形態では、式Ｉの化合物は、インターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）、インターフェロンベータ（ＩＦＮ−β）、インターフェロンラムダ（ＩＦＮ−λ）、及びインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）からなる群から選択されるインターフェロンと併用投与することができる。１つの特定の実施形態では、インターフェロンは、インターフェロン−アルファ−２ａ、インターフェロン−アルファ−２ｂ、又はインターフェロン−アルファ−ｎ１である。別の特定の実施形態では、インターフェロン−アルファ−２ａ又はインターフェロン−アルファ−２ｂはペグ化されている。好ましい実施形態では、インターフェロン−アルファ−２ａはペグ化インターフェロン−アルファ−２ａ（ＰＥＧＡＳＹＳ）である。
【０１５２】
別の実施形態では、追加の治療剤は逆転写酵素阻害剤であって、かつこれは、ジドブジン、ジダノシン、ザルシタビン、２’，３’−ジデオキシアデノシン、スタブジン、ラミブジン、アバカビル、エムトリシタビン、エンテカビル、アプリシタビン、アテビラピン、リバビリン、アシクロビル、ファムシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、テノホビル、アデホビル、シドホビル、エファビレンツ、ネビラピン、デラビルジン、及びエトラビリンのうちの少なくとも１つである。
【０１５３】
一実施形態では、追加の治療剤は、ＴＬＲ−７アゴニスト若しくはＴＬＲ−９アゴニストなどのＴＬＲ調節因子又はＴＬＲアゴニストである。併用療法の更なる実施形態では、ＴＬＲアゴニストは、ＳＭ３６０３２０（９−ベンジル−８−ヒドロキシ−２−（２−メトキシ−エトキシ）アデニン）、及びＡＺＤ８８４８（メチル［３−（｛［３−（６−アミノ−２−ブトキシ−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−９Ｈ−プリン−９−イル）プロピル］［３−（４−モルホリニル）プロピル］アミノ｝メチル）フェニル］アセテート）からなる群から選択される。
【０１５４】
本明細書で提供する方法のいずれかにおいて、方法は、少なくとも１つのＨＢＶワクチン、ヌクレオシドＨＢＶ阻害剤、インターフェロン、又はこれらの任意の組み合わせを個体に投与することを更に含んでもよい。一実施形態では、ＨＢＶワクチンは、ＲＥＣＯＭＢＩＶＡＸ  ＨＢ、ＥＮＧＥＲＩＸ−Ｂ、ＥＬＯＶＡＣ  Ｂ、ＧＥＮＥＶＡＣ−Ｂ、及びＳＨＡＮＶＡＣ  Ｂからなる群から選択される。
【０１５５】
別の態様では、本明細書は、個体に治療有効量の本発明の化合物を単独で、又は逆転写酵素阻害剤と組み合わせて投与することによって、ＨＢＶウイルス負荷を低下させること、及び個体に治療有効量のＨＢＶワクチンを更に投与することを含む、ＨＢＶ感染を治療することを要する個体においてＨＢＶ感染を治療する方法を提供する。逆転写酵素阻害剤は、ジドブジン、ジダノシン、ザルシタビン、ｄｄＡ、スタブジン、ラミブジン、アバカビル、エムトリシタビン、エンテカビル、アプリシタビン（Apricitabine）、アテビラピン（Atevirapine）、リバビリン、アシクロビル、ファムシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、テノホビル、アデホビル、シドホビル、エファビレンツ、ネビラピン、デラビルジン、又はエトラビリンのうちの１つであってもよい。
【０１５６】
薬剤間には、相加的、相乗的、及び拮抗的の３つの種類の相互作用が存在する可能性がある。相加的相互作用とは、２つの薬剤の効果が、同じ用量で個別に取られた２つの薬剤の効果の合計と等しいことを意味する。相乗的相互作用とは、一緒に取られた２つの薬剤の効果が、同じ用量でのこれらの個別の効果の合計よりも大きいことを意味する。拮抗的相互作用とは、２つの薬剤の作用が、同じ用量で相互に独立して取られた２つの薬剤の作用の合計よりも小さいことを意味する。
【０１５７】
本明細書に記載される任意の併用療法では、例えば、Ｓｉｇｍｏｉｄ−Ｅｍａｘ式（Ｈｏｌｆｏｒｄ  ＆  Ｓｃｈｅｉｎｅｒ，１９９８１，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．６：４２９〜４５３）、Ｌｏｅｗｅ加法の式（Ｌｏｅｗｅ  ＆  Ｍｕｉｓｃｈｎｅｋ，１９２６，Ａｒｃｈ．Ｅｘｐ．Ｐａｔｈｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１１４：３１３〜３２６）、及びメジアン効果式（Ｃｈｏｕ  ＆  Ｔａｌａｌａｙ，１９８４，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌ．２２：２７〜５５）などの適切な方法を使用して、相乗効果が計算される場合がある。上記で引用した各等式を実験データに適用し、対応するグラフを生成して、薬物併用の効果を評価するのに役立ててもよい。上記で引用した等式に関連付けられた対応するグラフは、それぞれ濃度−効果曲線、アイソボログラム曲線、及び組み合わせインデックス曲線である。
【０１５８】
投与／用量／処方
別の態様では、本明細書は、本発明の化合物又はその医薬的に許容される塩を、医薬的に許容される担体と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【０１５９】
本発明の医薬組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、患者に対して有毒にならずに、特定の患者、組成、及び投与様式について所望の治療応答を達成するのに有効である量の活性成分を得るように変動させてもよい。
【０１６０】
特に、選択された投与量レベルは、用いられる特定の化合物の活性、投与時間、化合物の排泄速度、治療期間、化合物と併用される他の薬物、化合物、又は物質、治療される患者の年齢、性別、体重、状態、全般的な健康状態、及び過去の病歴、並びに医学分野で周知の同様の因子を含む、種々の因子に依存する。
【０１６１】
当業者である医師、例えば、内科医又は獣医は、必要な医薬組成物の有効量を容易に決定し、処方する場合がある。例えば、内科医又は獣医は、で医薬組成物中に用いられる本発明の化合物の用量を、所望の治療効果を達成するために要求されるレベルより低いレベル開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることができる。
【０１６２】
特定の実施形態では、投与の容易さ及び投与量の均一性のために、化合物を投与単位形態で処方することが特に有利である。本明細書で使用する時、投与単位形態とは、治療される患者のための単位投与量として適した物理的に異なる単位を指し、各単位には、要求される医薬賦形剤と関連して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の治療化合物が含まれる。本発明の投薬単位形態は、（ａ）治療化合物の独特の特徴及び達成すべき特定の治療効果、並びに（ｂ）患者におけるＨＢＶ感染の治療のためのそのような治療剤の配合／製剤化の技術に固有の制限により定められ、かつ直接的に依存している。
【０１６３】
一実施形態では、本発明の組成物は、１つ以上の医薬的に許容される賦形剤又は担体を使用して製剤化される。一実施形態では、本発明の医薬組成物は、治療有効量の本発明の化合物及び医薬的に許容される担体を含む。
【０１６４】
投与される本発明の化合物は、約１μｇ〜約１０，０００ｍｇ、約２０μｇ〜約９，５００ｍｇ、約４０μｇ〜約９，０００ｍｇ、約７５μｇ〜約８，５００ｍｇ、約１５０μｇ〜約７，５００ｍｇ、約２００μｇ〜約７，０００ｍｇ、約３０５０μｇ〜約６，０００ｍｇ、約５００μｇ〜約５，０００ｍｇ、約７５０μｇ〜約４，０００ｍｇ、約１ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２，５００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２，０００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１，５００ｍｇ、約３０ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約４０ｍｇ〜約９００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約６００ｍｇ、約８０ｍｇ〜約５００ｍｇの範囲、及びそれらの間のありとあらゆる全体的又は部分的増分であってもよい。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物の用量は、約１ｍｇ〜約２，５００ｍｇである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物中で使用される本発明の化合物の用量は、約１０，０００ｍｇ未満、約８，０００ｍｇ未満、約６，０００ｍｇ未満、約５，０００ｍｇ未満、約３，０００未満、約２，０００ｍｇ未満、約１，０００ｍｇ未満、約５００ｍｇ未満、約２００ｍｇ未満、又は約５０ｍｇ未満である。同様に、いくつかの実施形態では、本明細書に記載の第２の化合物（すなわち、ＨＢＶ治療のための別の薬剤）の用量は、約１，０００ｍｇ未満、約８００ｍｇ未満、約６００ｍｇ未満、約５００未満、約４００ｍｇ未満、約３００ｍｇ未満、約２００ｍｇ未満、約１００ｍｇ未満、約５０ｍｇ未満、約４０ｍｇ未満、約３０ｍｇ未満、約２５ｍｇ未満、約２０ｍｇ未満、約１５ｍｇ未満、約１０ｍｇ未満、約５ｍｇ未満、約２ｍｇ未満、約１ｍｇ未満、又は約０．５ｍｇ未満、並びにありとあらゆる全体的又は部分的な増分である。
【０１６６】
一実施形態では、本発明は、治療有効量の本発明の化合物を、単独で、又は第２の医薬品と組み合わせて保持する容器、及び患者におけるＨＢＶ感染の１つ以上の症状を治療、予防、又は低減するための化合物の使用説明書を含む包装された医薬組成物を目的とする。
【０１６７】
本発明の組成物のいずれかの投与経路としては、経口、経鼻、直腸、膣内、非経口、頬側、舌下、又は局所が挙げられる。本発明での使用のための化合物は、経口又は非経口、例えば経皮、経粘膜（例えば、舌下、舌、（経）頬、（経）尿道、膣（例えば、経膣及び膣周囲）、鼻（内）及び（経）直腸）、膀胱内、肺内、十二指腸内、胃内、髄腔内、皮下、筋肉内、皮内、動脈内、静脈内、気管支内、吸入、及び局所投与などの任意の好適な経路による投与のために処方されてもよい。
【０１６８】
好適な組成物及び投薬形態としては、例えば、錠剤、カプセル、カプレット、ピル、ゲルキャップ、トローチ、分散液、懸濁液、溶液、シロップ、顆粒、ビーズ、経皮パッチ、ゲル、粉末、ペレット、マグマ剤、トローチ剤、クリーム剤、ペースト、軟膏、ローション、ディスク、坐剤、鼻又は経口投与用液体スプレー、吸入用の乾燥粉末又はエアロゾル化製剤、膀胱内投与用のための組成物及び製剤などが挙げられるが、これらに限定されない。本発明において有用となる製剤及び組成物は、本明細書に記載される特定の製剤及び組成物に限定されないことを理解すべきである。
【０１６９】
経口適用のために特に好適なのは、錠剤、糖衣錠、液体、滴剤、坐剤、又はカプセル、カプレット及びゲルキャップである。経口使用が意図される組成物は、当該分野で既知の任意の方法に従って調製されてもよく、かかる組成物は、錠剤の製造に対して好適な不活性で非毒性の医薬的賦形剤からなる群から選択される１つ以上の薬剤を含んでもよい。かかる賦形剤としては、例えば、乳糖などの不活性希釈剤、コーンスターチなどの造粒剤及び崩壊剤、デンプンなどの結合剤、及びステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤が挙げられる。錠剤はコーティングされていなくてもよく、又はそれらは、活性成分の放出の正確さ若しくは遅延のために既知の技法によりコーティングされていてもよい。経口使用のための製剤は、活性成分が不活性希釈剤と混合された硬質ゼラチンカプセルとして提供されてもよい。
【０１７０】
非経口投与のために、本発明の化合物は、注射又は注入、例えば、静脈内、筋肉内又は皮下注射若しくは注入、或いはボーラス用量での投与及び／又は連続注入のために処方されてもよい。懸濁剤、安定剤及び／又は分散剤などの他の処方剤を任意に含む、油性又は水性賦形剤中の懸濁剤、溶液、又はエマルジョンを使用してもよい。
【０１７１】
当業者は、ルーチンの実験だけを使用し、本明細書に記載の特定の手順、実施形態、特許請求の範囲、及び実施例に対する多数の等価物を認識する、又は確認することができるであろう。そのような等価物は、本発明の範囲内であり、添付の特許請求の範囲の対象となると見なされる。例えば、当技術分野において認知された代替法を用いて、ルーチンの実験だけを使用し、反応時間、反応サイズ／容積、及び例えば溶媒、触媒などの実験試薬、圧力、例えば窒素雰囲気などの大気条件、並びに還元剤／酸化剤などを含むが、これらに限定されない反応条件における改変が本出願の範囲内であることを理解すべきである。
【０１７２】
本明細書において値及び範囲がどこに提供されようとも、これらの値及び範囲に包含されるすべての値及び範囲が、本発明の範囲内に包含されることが意図されることを理解されたい。更に、これらの範囲内にあるすべての値、及び値の範囲の上限又は下限も本出願により想到される。
【０１７３】
以下の実施例は、本発明の態様を更に例示する。しかしながら、これらは、本明細書に記載する本発明の教示又は開示を決して限定するものではない。
【実施例】
【０１７４】
ここで、本発明を以下の実施例を参照しながら説明する。これらの実施例は、例示のみを目的として提供されるものであり、本発明はこれらの実施例に限定されず、むしろ本明細書で提供される教示の結果として明らかなすべての変形を包含するものである。
【０１７５】
材料：
別段の記載がないかぎり、すべての出発物質及び樹脂は、商業的な供給業者より入手したものを精製せずに使用した。
【０１７６】
ライブラリの基本設計
【０１７７】
【化１１】
2018510159.tif 000038
【０１７８】
領域Ａ：
【０１７９】
【化１２】
2018510159.tif 000039
【０１８０】
領域Ｂ：
【０１８１】
【化１３】
2018510159.tif 000040
【０１８２】
領域Ｃ：
【０１８３】
【化１４】
2018510159.tif 000041
【０１８４】
第１部中間体の合成（領域Ａ）
１．１  化合物Ａ０２の調製
【０１８５】
【化１５】
2018510159.tif 000042
【０１８６】
１．１．１  化合物２Ａ／２Ｂの調製
【０１８７】
【化１６】
2018510159.tif 000043
【０１８８】
−７８℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（２８０ｍＬ）中の化合物１（１４．０ｇ、５６．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＢＦ３−Ｅｔ２Ｏ（２４．８ｍＬ、１９８．４ｍｍｏｌ）、及びエチル−２−ジアゾアセテート（２２．７ｇ、１９９．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を−７８℃で１．５時間攪拌し、次に２５℃に加温して１．５時間攪拌した。得られた混合物をＮａＨＣＯ３（飽和）でクエンチし、ＥＡ（６００ｍＬ）で抽出した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、化合物２Ａと２Ｂとの混合物（１９．０ｇ、粗製）を得た。ＬＣＭＳ：３３４．０［Ｍ＋１］。
【０１８９】
１．１．２  化合物３Ａ／３Ｂの調製
【０１９０】
【化１７】
2018510159.tif 000044
【０１９１】
ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中の化合物２Ａ及び２Ｂ（１９．０ｇ、粗製）の溶液に、Ｈ２Ｏ（４０ｍＬ）中のＫＯＨ（４．８ｇ、８５．６ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を５５℃に加熱してから２時間攪拌した。混合物をＥＡ（８００ｍＬ）で希釈してから生理食塩水（６００ｍＬ）で洗浄した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、化合物３Ａ（４．５ｇ、３１％収率）及び化合物３Ｂ（３．８ｇ、２６％収率）を得た。化合物３Ａ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．３６〜７．４２（ｍ、５Ｈ）、５．２１〜５．２４（ｍ、２Ｈ）、３．９２〜３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．５４〜３．５７（ｍ、２Ｈ）、２．４１〜２．４５（ｍ、２Ｈ）、１．５８〜１．７３（ｍ、６Ｈ）。化合物３Ｂ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．２８〜７．４１（ｍ、５Ｈ）、５．１８（ｓ、２Ｈ）、３．６８〜３．７５（ｍ、２Ｈ）、３．１９〜３．２５（ｍ、２Ｈ）、２．６２〜２．６８（ｍ、２Ｈ）、２．４０〜２．４４（ｍ、２Ｈ）、１．６２〜１．９２（ｍ、４Ｈ）。
【０１９２】
１．１．３  化合物４Ａの調製
【０１９３】
【化１８】
2018510159.tif 000045
【０１９４】
０℃にて、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物３Ａ（１．０ｇ、３．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．２２ｇ、５．８ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を１８℃にて１時間攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥＡ（１００ｍＬ）で抽出した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して化合物４Ａ（０．９５ｇ、粗製）を得、これを次の工程で直接使用した。
【０１９５】
１．１．４  化合物Ａ０２の調製
【０１９６】
【化１９】
2018510159.tif 000046
【０１９７】
ＭｅＯＨ（６０ｍＬ）中の化合物４Ａ（０．９５ｇ、３．６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２００ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を２５℃にて１６時間、Ｈ２（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で攪拌した。触媒を濾過して、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．４５ｇ、９７％）。
【０１９８】
１．２  化合物Ａ０３の調製
【０１９９】
【化２０】
2018510159.tif 000047
【０２００】
１．２．１  化合物２の調製
【０２０１】
【化２１】
2018510159.tif 000048
【０２０２】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（３ｍＬ）中ＣＨ３Ｍｒ（５．８ｍＬ、１１．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（７ｍＬ）中の化合物１（１．０ｇ、３．８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この反応混合物を２０℃で２時間にわたって攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して所望の生成物（０．５２ｇ、４９％）を得た。
【０２０３】
１．２．２  化合物Ａ０３の調製
【０２０４】
【化２２】
2018510159.tif 000049
【０２０５】
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中の化合物２（０．５２ｇ、１．９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２（１００ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を２５℃にて１６時間、Ｈ２（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で攪拌した。触媒を濾過して、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．２６ｇ、９７％）。
【０２０６】
１．３  化合物Ａ０４の調製
【０２０７】
【化２３】
2018510159.tif 000050
【０２０８】
１．３．１  化合物２の調製
【０２０９】
【化２４】
2018510159.tif 000051
【０２１０】
０℃にて、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物１（０．８０ｇ、３．１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．１７ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を添加して、２５℃にて混合物を１時間攪拌した。得られた混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥＡ（１００ｍＬ）で抽出した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して化合物２（０．７６ｇ、粗製）を得、これを次の工程で直接使用した。
【０２１１】
１．３．２  化合物Ａ０４の調製
【０２１２】
【化２５】
2018510159.tif 000052
【０２１３】
ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中の化合物２（０．７６ｇ、２．９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１５０ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を２５℃にて１６時間、Ｈ２（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で攪拌した。触媒を濾過して、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．３７ｇ、９９％）。
【０２１４】
１．４  化合物Ａ０５の調製
【０２１５】
【化２６】
2018510159.tif 000053
【０２１６】
１．４．１  化合物２の調製
【０２１７】
【化２７】
2018510159.tif 000054
【０２１８】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＭｅＭｒ（３Ｍ、３．８３ｍＬ、３．００当量）の混合物に、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のベンジル−４−オキソアゾカン（oxoazocane）−１−カルボキシレート（１．００ｇ、３．８３ｍｍｏｌ、１．００当量）を添加した。混合物を０℃にて１０分間攪拌し、次に１５℃に加温し、２時間攪拌した。ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）に注入して２０分間攪拌した。水相をＥＡ（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和生理食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥させ、濾過して真空中で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１）で精製して、黄色油としてベンジル−４−ヒドロキシ−４−メチル−アゾカン−１−カルボキシレート（９５０．００ｍｇ、３．４３ｍｍｏｌ、８９．４３％収率）を得た。
【０２１９】
１．４．２  化合物Ａ０５の調製
【０２２０】
【化２８】
2018510159.tif 000055
【０２２１】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中のベンジル−４−ヒドロキシ−４−メチル−アゾカン−１−カルボキシレート（９５０．００ｍｇ、３．４３ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２（２００．００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、０．４２当量）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２バルーン下で、１５℃にて６時間攪拌した。ＴＬＣは、出発物質が完全に消費されたことを示した。この反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して、黄色油として４−メチルアゾカン（methylazocan）−４−オール（４００．００ｍｇ、２．７９ｍｍｏｌ、８１．４２％収率）を得た。
【０２２２】
１．５  化合物Ａ０６の調製
【０２２３】
【化２９】
2018510159.tif 000056
【０２２４】
１．５．１  化合物２の調製
【０２２５】
【化３０】
2018510159.tif 000057
【０２２６】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のブロモ（シクロプロピル）マグネシウム（０．５Ｍ、３．２１ｍＬ、７．００当量）の混合物に、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のベンジル−４−オキソアゾカン−１−カルボキシレート（８００．００ｍｇ、３．０６ｍｍｏｌ、１．００当量）を添加した。混合物を０℃にて１０分間攪拌し、次に１５℃に加温し、１５時間攪拌した。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。混合物を飽和ＮＨ４（５０ｍＬ）に注入して２０分間攪拌し、水相をＥＡ（４０ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機相を飽和生理食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過して真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１）で精製して、黄色油としてベンジル−４−シクロプロピル−４−ヒドロキシ−アゾカン−１−カルボキシレート（６５０．００ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ、７０．０１％収率）を得た。ＬＣＭＳ：３０４．０［Ｍ＋１］。
【０２２７】
１．５．２  化合物Ａ０６の調製
【０２２８】
【化３１】
2018510159.tif 000058
【０２２９】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中のベンジル−４−シクロプロピル−４−ヒドロキシ−アゾカン−１−カルボキシレート（６５０．００ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２（１００．００ｍｇ、７２２．４４μｍｏｌ、０．３４当量）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２下で、１５℃にて６時間攪拌した。ＴＬＣは、出発物質が完全に消費されたことを示した。この反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して、黄色油として４−シクロプロピルアゾカン（cyclopropylazocan）−４−オール（３５０．００ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ、９６．６３％収率）を得た。
【０２３０】
１．６  化合物Ａ０７の調製
【０２３１】
【化３２】
2018510159.tif 000059
【０２３２】
１．６．１  化合物２の調製
【０２３３】
【化３３】
2018510159.tif 000060
【０２３４】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＮａＨ（２４０．４８ｍｇ、１０．０２ｍｍｏｌ、１．５０当量）の混合物に、１−ｔｅｒｔ−ブチル５−エチル４−オキソアゾカン−１，５−ジカルボキシレート（２．００ｇ、６．６８ｍｍｏｌ、１．００当量）を添加した。混合物を０℃で０．５時間攪拌し、次にＭｅＩ（２．８４ｇ、２０．０４ｍｍｏｌ、３．００当量）を０℃にて混合物に加え、混合物を１８℃にて６時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（１５０ｍＬ）に注入し、２０分間攪拌した。水相をＥＡ（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和生理食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１）で精製して、黄色油として１−ｔｅｒｔ−ブチル５−エチル５−メチル−４−オキソ−アゾカン−１，５−ジカルボキシレート（２．００ｇ、６．３８ｍｍｏｌ、９５．５４％収率）を得た。
【０２３５】
１．６．２  化合物３の調製
【０２３６】
【化３４】
2018510159.tif 000061
【０２３７】
１８℃にて、Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の１−ｔｅｒｔ−ブチル５−エチル５−メチル−４−オキソ−アゾカン−１，５−ジカルボキシレート（２．２８ｇ、７．２８ｍｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、ＫＯＨ（８１６．９６ｍｇ、１４．５６ｍｍｏｌ、２．００当量）を一度に添加した。混合物を６０℃に３時間加熱した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を１８℃に冷却して減圧下で濃縮した。水相をＥＡ（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和生理食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１）で精製して、黄色油としてｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−４−オキソ−アゾカン−１−カルボキシレート（１．５３ｇ、６．３４ｍｍｏｌ、８７．０９％収率）を得た。
【０２３８】
１．６．３  化合物４の調製
【０２３９】
【化３５】
2018510159.tif 000062
【０２４０】
１８℃にて、Ｎ２下で、ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−４−オキソ−アゾカン−１−カルボキシレート（１．５３ｇ、６．３４ｍｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、ＮａＢＨ４（２８７．８１ｍｇ、７．６１ｍｍｏｌ、１．２０当量）を一度に添加した。混合物を１８℃にて２時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を水（１００ｍＬ）中に注入した。水相をＥＡ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和生理食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１、５／１）で精製して、黄色油としてｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドロキシ−５−メチル−アゾカン−１−カルボキシレート（１．３４ｇ、５．５１ｍｍｏｌ、８６．８６％収率）を得た。
【０２４１】
１．６．４  化合物Ａ０７の調製
【０２４２】
【化３６】
2018510159.tif 000063
【０２４３】
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ヒドロキシ−５−メチル−アゾカン−１−カルボキシレート（３００．００ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（１０ｍＬ、４Ｍ）を添加した。混合物を１８℃にて２時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を濃縮して、黄色油として５−メチルアゾカン−４−オール（２００．００ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ、９０．４９％収率）を得た。
【０２４４】
１．７  化合物Ａ０８の調製
【０２４５】
【化３７】
2018510159.tif 000064
【０２４６】
１．７．１  化合物２Ａ／２Ｂの調製
【０２４７】
【化３８】
2018510159.tif 000065
【０２４８】
−７８℃にて、Ｎ２下で、Ｅｔ２Ｏ（２００ｍＬ）中の化合物１（９．３ｇ、３７．７ｍｍｏｌ）の溶液に、エチル−２−ジアゾアセテート（６．０ｇ、５２．７ｍｍｏｌ）及びＢＦ３−Ｅｔ２Ｏ（５．４ｍＬ、４３．３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を−７８℃にて１．５時間攪拌し、次に２５℃に１６時間加温した。得られた混合物をＮａＨＣＯ３（飽和）でクエンチし、ＥＡ（３００ｍＬ）で抽出した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、化合物２Ａ（４．３ｇ、３５％）及び化合物２Ｂ（２．６ｇ、２１％）を得た。
【０２４９】
１．７．２  化合物３Ａの調製
【０２５０】
【化３９】
2018510159.tif 000066
【０２５１】
ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中の化合物２Ａ（４．３ｇ、粗製）の溶液に、Ｈ２Ｏ（８ｍＬ）中のＫＯＨ（１．１ｇ、１９．６ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を５５℃に加熱し、２時間攪拌した。混合物をＥＡ（２００ｍＬ）で希釈してから生理食塩水（１２０ｍＬ）で洗浄した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、化合物３Ａ（１．５ｇ、４５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．３３〜７．４４（ｍ、５Ｈ）、５．１２（ｓ、２Ｈ）、３．３４〜３．４６（ｍ、４Ｈ）、２．４１〜２．４４（ｍ、４Ｈ）、２．１１〜２．１８（ｍ、４Ｈ）。
【０２５２】
１．７．３  化合物４Ａの調製
【０２５３】
【化４０】
2018510159.tif 000067
【０２５４】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（３ｍＬ）中のＣＨ３Ｍｒ（５．８ｍＬ、１１．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（７ｍＬ）中の化合物３Ｂ（１．０ｇ、３．８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この反応混合物を２０℃にて２時間にわたって攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して所望の生成物を得た（０．５５ｇ、５１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．３３〜７．３９（ｍ、５Ｈ）、５．１６（ｓ、２Ｈ）、３．３３〜３．５１（ｍ、４Ｈ）、１．５８〜２．０７（ｍ、８Ｈ）、１．２３（ｓ、３Ｈ）。
【０２５５】
１．７．４  化合物Ａ０８の調製
【０２５６】
【化４１】
2018510159.tif 000068
【０２５７】
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中の化合物４Ｂ（０．５５ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１００ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を２５℃にてＨ２バルーン下で１６時間攪拌した。触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．２６ｇ、９２％）。
【０２５８】
１．８  化合物Ａ０９の調製
【０２５９】
【化４２】
2018510159.tif 000069
【０２６０】
１．８．１  化合物３の調製
【０２６１】
【化４３】
2018510159.tif 000070
【０２６２】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（３ｍＬ）中の化合物２（３２ｍＬ、１６．１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（３ｍＬ）中の化合物１（０．６０ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この反応混合物を２０℃にて１６時間攪拌した。得られた混合物を飽和ＮＨ４Ｃでクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１２０ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して所望の生成物を得た（０．２４ｇ、３４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．２８〜７．３９（ｍ、５Ｈ）、５．１６〜５．１７（ｍ、２Ｈ）、３．５１〜３．５４（ｍ、２Ｈ）、３．３３〜３．３６（ｍ、２Ｈ）、１．８５〜１．８７（ｍ、２Ｈ）、１．６０〜１．７１（ｍ、４Ｈ）、０．９３〜０．９７（ｍ、１Ｈ）、０．３４〜０．３７（ｍ、４Ｈ）。
【０２６３】
１．８．２  化合物Ａ０９の調製
【０２６４】
【化４４】
2018510159.tif 000071
【０２６５】
ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物３（０．２４ｇ、０．８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（４８ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を２５℃にて１６時間、Ｈ２バルーン下で攪拌した。触媒を濾過して、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．１３ｇ、９７％）。
【０２６６】
１．９  化合物Ａ１０／１１の調製
【０２６７】
【化４５】
2018510159.tif 000072
【０２６８】
１．９．１  化合物２Ａ／２Ｂの調製
【０２６９】
【化４６】
2018510159.tif 000073
【０２７０】
Ｎ２下で、ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の化合物１Ａ及び１Ｂ（２．５ｇ、７．５ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２．１ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）の混合物に、ＣＨ３Ｉ（１．６ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１６℃にて１６時間攪拌した。得られた混合物を生理食塩水で希釈して、ＥＡ（１５０ｍＬ）で抽出した。この有機層を生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して化合物２Ａと２Ｂとの混合物（２．５ｇ、粗製）を得、これを次の工程で直接使用した。ＬＣＭＳ：３４８．１［Ｍ＋１］。
【０２７１】
１．９．２  化合物３Ａ／３Ｂの調製
【０２７２】
【化４７】
2018510159.tif 000074
【０２７３】
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の化合物２Ａ及び２Ｂ（２．５ｇ、粗製）の溶液に、Ｈ２Ｏ（４ｍＬ）中のＫＯＨ（０．７３ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を７０℃に加熱し、２時間攪拌した。混合物をＥＡ（１００ｍＬ）で希釈してから生理食塩水（８０ｍＬ）で洗浄した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、化合物３Ａ（（０．８２ｇ、３９％）及び化合物３Ｂ（０．６８ｇ、３３％）を得た。化合物３Ａ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．２８〜７．４２（ｍ、５Ｈ）、５．１０〜５．３２（ｍ、２Ｈ）、４．４８〜４．７２（ｍ、１Ｈ）、４．１０〜４．４０（ｍ、１Ｈ）、３．２８〜３．３９（ｍ、１Ｈ）、２．８１〜２．８８（ｍ、２Ｈ）、１．３５〜１．８５（ｍ、５Ｈ）、０．９３〜１．０５（ｍ、３Ｈ）。化合物３Ｂ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．２８〜７．４０（ｍ、５Ｈ）、５．１４〜５．３２（ｍ、２Ｈ）、４．７３（ｓ、１Ｈ）、３．７６〜４．１５（ｍ、２Ｈ）、３．２０〜３．２２（ｍ、１Ｈ）、２．３２〜２．７６（ｍ、３Ｈ）、１．４５〜２．０７（ｍ、４Ｈ）、０．９９〜１．０４（ｍ、３Ｈ）。
【０２７４】
１．９．３  化合物４Ａの調製
【０２７５】
【化４８】
2018510159.tif 000075
【０２７６】
０℃にて、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物３Ａ（０．８２、３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．１７ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を１６℃にて１時間攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、ＥＡ（８０ｍＬ）で抽出した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して化合物４Ａ（０．７９ｇ、粗製）を得、これを次の工程で直接使用した。
【０２７７】
１．９．４  化合物Ａ１０の調製
【０２７８】
【化４９】
2018510159.tif 000076
【０２７９】
ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中の化合物４Ａ（０．７９ｇ、２．９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１６０ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。Ｈ２雰囲気（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で混合物を１６℃にて２時間攪拌した。触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．３８ｇ、９４％）。
【０２８０】
１．９．５  化合物４Ｂの調製
【０２８１】
【化５０】
2018510159.tif 000077
【０２８２】
０℃にて、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物３Ｂ（０．６８、２．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．１４ｇ、３．７ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を１６℃にて１時間攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、ＥＡ（８０ｍＬ）で抽出した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して化合物４Ｂ（０．６４ｇ、粗製）を得、これを次の工程で直接使用した。
【０２８３】
１．９．６  化合物Ａ１１の調製
【０２８４】
【化５１】
2018510159.tif 000078
【０２８５】
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中の化合物４Ｂ（０．６４ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１３０ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。Ｈ２雰囲気（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で混合物を１８℃にて２時間攪拌した。触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．３２ｇ、９５％）。
【０２８６】
１．１０  化合物Ａ１２の調製
【０２８７】
【化５２】
2018510159.tif 000079
【０２８８】
１．１０．１  化合物２の調製
【０２８９】
【化５３】
2018510159.tif 000080
【０２９０】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＮａＨ（０．２７ｇ、６．８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の化合物１（１．５ｇ、４．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、続いて、０．５時間後にＤＭＦ（１０ｍＬ）中のセレクトＦ（１．９ｇ、５．４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この反応混合物を１８℃にて２時間攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、ＥＡ（１５０ｍＬ）で抽出した。この有機層を生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（１．８ｇ、粗製）。
【０２９１】
１．１０．２  化合物３の調製
【０２９２】
【化５４】
2018510159.tif 000081
【０２９３】
ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（４８ｍＬ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝５：１）中の化合物２（１．８ｇ、粗製）とＫＯＨ（０．５２ｇ、９．３ｍｍｏｌ）との混合物を７０℃に加熱して２時間攪拌した。混合物をＥＡ（１５０ｍＬ）で希釈してから生理食塩水（１２０ｍＬ）で洗浄した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、化合物３（（０．９１ｇ、７２％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．２８〜７．４１（ｍ、５Ｈ）、５．１３〜５．１４（ｍ、２Ｈ）、４．８６〜４．８８（ｍ、１Ｈ）、３．６７〜３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．１０〜３．２０（ｍ、１Ｈ）、２．６０〜３．０３（ｍ、３Ｈ）、２．０７〜２．４０（ｍ、４Ｈ）。
【０２９４】
１．１０．３  化合物４の調製
【０２９５】
【化５５】
2018510159.tif 000082
【０２９６】
０℃にて、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物３（０．９１ｇ、３．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．１８ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を１８℃にて１時間攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、ＥＡ（８０ｍＬ）で抽出した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して化合物４（０．８８ｇ、粗製）を得、これを次の工程で直接使用した。
【０２９７】
１．１０．４  化合物Ａ１２の調製
【０２９８】
【化５６】
2018510159.tif 000083
【０２９９】
ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中の化合物４（０．４４ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１００ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。Ｈ２雰囲気（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で混合物を１８℃にて２時間攪拌した。触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．２２ｇ、９５％）。
【０３００】
１．１１  化合物Ａ１３の調製
【０３０１】
【化５７】
2018510159.tif 000084
【０３０２】
１．１１．１  化合物２の調製
【０３０３】
【化５８】
2018510159.tif 000085
【０３０４】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のＮａＨ（０．２７ｇ、６．８ｍｍｏｌ、６０％）の懸濁液に、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の化合物１（１．５ｇ、４．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、続いて、０．５時間後にＣＨ３Ｉ（０．９６ｇ、６．８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を２５℃にて２時間攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、ＥＡ（１５０ｍＬ）で抽出した。この有機層を生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（１．７ｇ、粗製）。
【０３０５】
１．１１．２  化合物３の調製
【０３０６】
【化５９】
2018510159.tif 000086
【０３０７】
ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（３３ｍＬ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ＝１０：１）中の化合物２（１．７ｇ、粗製）とＫＯＨ（０．１７ｇ、４．５ｍｍｏｌ）との混合物を７０℃に加熱して２時間攪拌した。混合物をＥＡ（１５０ｍＬ）で希釈してから生理食塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、化合物３（０．８０ｇ、６５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．２８〜７．４０（ｍ、５Ｈ）、５．１３〜５．１５（ｍ、２Ｈ）、３．４５〜３．７１（ｍ、２Ｈ）、３．１５〜３．２０（ｍ、２Ｈ）、２．５７〜２．７０（ｍ、１Ｈ）、２．３９〜２．４３（ｍ、２Ｈ）、２．０７〜２．１２（ｍ、４Ｈ）、１．０７〜１．１４（ｍ、３Ｈ）。
【０３０８】
１．１１．３  化合物４の調製
【０３０９】
【化６０】
2018510159.tif 000087
【０３１０】
０℃にて、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物３（０．８０、３．１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．１７ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を添加して、混合物を１８℃にて１時間攪拌した。得られた混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和）でクエンチし、ＥＡ（８０ｍＬ）で抽出した。この有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮して化合物４（０．８０ｇ、粗製）を得、これを次の工程で直接使用した。
【０３１１】
１．１１．４  化合物Ａ１３の調製
【０３１２】
【化６１】
2018510159.tif 000088
【０３１３】
ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中の化合物４（０．４０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１００ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。Ｈ２雰囲気（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で混合物を１８℃にて２時間攪拌した。触媒を濾過し、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、これを次の工程で直接使用した（０．１９ｇ、９４％）。
【０３１４】
１．１２  化合物Ａ１４の調製
【０３１５】
【化６２】
2018510159.tif 000089
【０３１６】
１．１２．１  化合物２の調製
【０３１７】
【化６３】
2018510159.tif 000090
【０３１８】
Ｎ２下で、ＣＨ３ＣＮ（５００ｍＬ）中の化合物１（３１．００ｇ、３１２．７２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（６３．２９ｇ、６２５．４４ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ２Ｏ（８８．７３ｇ、４０６．５４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．９１ｇ、１５．６４ｍｍｏｌ）を分割（in portions）添加した。混合物を１８℃にて１６時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を３５℃にて減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝３０／１〜５／１）で精製して、黄色油として化合物２（４１．９０ｇ、２１０．２９ｍｍｏｌ、６７．２５％収率）を得た。ＬＣＭＳ：２００［Ｍ＋１］。
【０３１９】
１．１２．２  化合物３の調製
【０３２０】
【化６４】
2018510159.tif 000091
【０３２１】
Ｎ２下で、ＴＨＦ（６００ｍＬ）中のｔ−ＢｕＯＫ（１７．９ｇ、１６０．６０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｍｅ３ＳＯＣｌ（３０．９８ｇ、２４０．９０ｍｍｏｌ）を一度に添加した。混合物を１００℃に加熱し、２時間攪拌した。次に混合物を−１０℃に冷却し、−１０℃下で、ＴＨＦ（６００ｍＬ）中の化合物２（３２．００ｇ、１６０．６０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加し、形成された混合物を−１０℃から０℃にて１時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物に水（１００ｍＬ）を加え、ＥＡ（２００ｍＬ×３）で抽出した。混ぜ合わせた有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をＰＥ／ＥＡ（５０ｍＬ、ＰＥ／ＥＡ＝１０／１）で洗浄し、濾過して、白色固形分として化合物３（３７．６０ｇ、８０．３４％）を得た。ＬＣＭＳ：２９２［Ｍ＋１］。
【０３２２】
１．１２．３  化合物４の調製
【０３２３】
【化６５】
2018510159.tif 000092
【０３２４】
Ｎ２下で、ＤＣＥ（８００ｍＬ）中の化合物３（１０ｇ、０．０３４ｍｏｌ）の溶液に、［Ｉｒ（ＣＯＤ）Ｃｌ］２（２２９ｍｇ、０．３４μｍｏｌ）を一度に添加した。混合物を７０℃に加熱し、１６時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を１８℃に冷却して、４０℃にて減圧下で濃縮した。残渣を水（５０ｍＬ）で洗浄し、ＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥させ、真空中で濃縮して、油として化合物４（６．７ｇ、粗製）を得た。ＬＣＭＳ：２１４［Ｍ＋１］。
【０３２５】
１．１２．４  化合物５の調製
【０３２６】
【化６６】
2018510159.tif 000093
【０３２７】
ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の化合物４（１２．９ｇ、０．０６０ｍｏｌ）の混合物に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（３０ｍＬ、４Ｍ）を添加した。混合物を１８℃にて０．５時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。溶液をＭｅＯＨ（３０ｍＬ×３）で洗浄して、濃縮して溶媒を除去した。次にＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）を添加し、続いてＮａ２ＣＯ３（１２．７２ｇ、０．１２ｍｏｌ）、ＣｂｚＣｌ（１５．３ｇ、０．０９ｍｏｌ）を添加した。混合物を１８℃にて２時間攪拌した。混合物をＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝３０／１〜１０／１）で精製して、黄色油として化合物５（１４．３ｇ、９６％収率）を得た。ＬＣＭＳ：２４８［Ｍ＋１］。
【０３２８】
１．１２．５  化合物６Ａ／６Ｂの調製
【０３２９】
【化６７】
2018510159.tif 000094
【０３３０】
−３０℃にて、Ｎ２下で、Ｅｔ２Ｏ（１０００ｍＬ）中の化合物５（１３．１０ｇ、５２．９７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＢＦ３．Ｅｔ２Ｏ（２６．３１ｇ、１８５．４０ｍｍｏｌ）、Ｎ２ＣＨＣＯ２Ｅｔ（２１．１５ｇ、１８５．４０ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加した。混合物を−３０℃にて１時間攪拌した。次にこの溶液を１８℃にて１６時間攪拌した。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）でクエンチして、Ｅｔ２Ｏ（３００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝３０／１〜５／１）で精製して、混合物として化合物６（１９．８０ｇ、粗製）を得た。ＬＣＭＳ：３３４［Ｍ＋１］。
【０３３１】
１．１２．６  化合物７Ａ／７Ｂの調製
【０３３２】
【化６８】
2018510159.tif 000095
【０３３３】
Ｎ２下で、−１０℃にて、ＴＨＦ（４００ｍＬ）中混合物としての化合物６（１９．８０ｇ、５９．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（２．８５ｇ、７１．２７ｍｍｏｌ、６０％）を分割添加して、−１０℃にて１時間攪拌した。次に、−１０℃にて、Ｎ２下で、ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のセレクトＦ（２５．２５ｇ、７１．２７ｍｍｏｌ）の溶液を混合物に分割添加した。混合物を−１０℃にて３０分間攪拌した。次に混合物を１８℃に加温し、２．５時間攪拌した。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）に注入して、ＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝３０／１〜１０／１）で精製して、黄色油として、７Ａと７Ｂとの混合物として化合物７（１３．４０ｇ、粗製）を得た。ＬＣＭＳ：３５２［Ｍ＋１］。
【０３３４】
１．１２．７  化合物８Ａ／８Ｂの調製
【０３３５】
【化６９】
2018510159.tif 000096
【０３３６】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）中の化合物７（１３．４０ｇ、３８．１４ｍｍｏｌ）の混合物に、ＫＯＨ（４．２８ｇ、７６．２８ｍｍｏｌ）を一度に添加した。混合物を４０℃にて２時間攪拌した。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。混合物を１８℃に冷却し、０℃下でＨＣｌ（４Ｎ）によってｐＨ＝７に調節した。混合物をＥＡ（２００ｍＬ×２）で抽出し、有機層に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィで精製して、黄色油として、化合物８Ａ（４３０．００ｍｇ、４．２２％）、並びに化合物８Ａ及び８Ｂの混合物（４．５ｇ、混合物）を得た。ＬＣＭＳ：２８０［Ｍ＋１］。
【０３３７】
１．１２．８  化合物９Ａの調製
【０３３８】
【化７０】
2018510159.tif 000097
【０３３９】
１８℃にて、Ｎ２下で、ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物８Ａ（４３０．００ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（８７．３９ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）を一度に添加した。混合物を１８℃にて２時間攪拌した。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。混合物を３５℃にて、減圧下で濃縮した。残渣を水（１０ｍＬ）に注入し、ＥＡ（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝２０／１〜３／１）で精製して、黄色油として化合物９Ａ（３７０．００ｍｇ、８５．４０％）を得た。ＬＣＭＳ：２８２［Ｍ＋１］。
【０３４０】
１．１２．９  化合物Ａ１４の調製
【０３４１】
【化７１】
2018510159.tif 000098
【０３４２】
１８℃にて、Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物９Ａ（３７０．００ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２（１００．００ｍｇ、７２２．４４μｍｏｌ）を一度に添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２下で１８℃にて１６時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を濾過して真空中で濃縮し、黄色油として化合物Ａ１４（１８０．００ｍｇ、粗製）を得た。
【０３４３】
１．１３  化合物Ａ１５の調製
【０３４４】
【化７２】
2018510159.tif 000099
【０３４５】
１．１３．１  化合物２の調製
【０３４６】
【化７３】
2018510159.tif 000100
【０３４７】
ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物１（１．２ｇ、３．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＫＯＨ水溶液（１１．６ｍＬ、１Ｍ）を添加した。得られた混合物を８０℃にて３時間攪拌した。この混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中に溶解し、ＥＡ（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濾液が乾燥するまで濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１〜５：１）で精製して、無色油として所望の化合物２（０．６ｇ、６３．８％収率）を得た。
【０３４８】
１．１３．２  化合物３の調製
【０３４９】
【化７４】
2018510159.tif 000101
【０３５０】
ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物２（０．６ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（８７ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５〜３０℃にて２時間攪拌した。混合物を濃縮して溶媒を除去し、残渣をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中に溶解し、次に水層をＥＡ（２５ｍＬ×３）で抽出し、有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮して、黄色油として所望の化合物３（０．５１ｇ、８５％）を得た。
【０３５１】
１．１３．３  化合物Ａ１５の調製
【０３５２】
【化７５】
2018510159.tif 000102
【０３５３】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物３（０．５１ｇ、１．９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ）を加えた。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で２５℃にて１６時間攪拌した。混合物を真空下で濃縮して、化合物Ａ１５を得た（２００ｍｇ、８３．３％）。
【０３５４】
１．１４  化合物Ａ１６の調製
【０３５５】
【化７６】
2018510159.tif 000103
【０３５６】
１．１４．１  化合物３の調製
【０３５７】
【化７７】
2018510159.tif 000104
【０３５８】
０℃にて、ＤＭＦ（３００ｍＬ）中の化合物１（２０ｇ、０．１２４ｍｏｌ）の混合物に、ＮａＨ（１２．０ｇ、０．３ｍｏｌ、６０％）を添加し、続いて化合物２（１６ｇ、０．１２４ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２５℃にて１６時間攪拌した。混合物をＮＨ４Ｃｌ（６００ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を生理食塩水で洗浄し（１５０ｍＬ×３）、Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過して、乾燥するまで濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１〜５：１）で精製して、茶色の固形分として所望の化合物３（１．２ｇ、４．６％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ５．９１−５．７４（ｍ、１Ｈ）、５．６５−５．４１（ｍ、１Ｈ）、４．２８−４．１７（ｍ、２Ｈ）、４．０５−３．８９（ｍ、２Ｈ）、３．７９−３．６６（ｍ、２Ｈ）、３．５４−３．３８（ｍ、２Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）。
【０３５９】
１．１４．２  化合物４の調製
【０３６０】
【化７８】
2018510159.tif 000105
【０３６１】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物３（０．２ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（０．０５ｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下、２０℃にて１６時間攪拌した。混合物を真空下で濃縮して、化合物４を得た（２００ｍｇ、９３．３％）。
【０３６２】
１．１４．３  化合物Ａ１６の調製
【０３６３】
【化７９】
2018510159.tif 000106
【０３６４】
０℃にて、ジオキサン（３ｍＬ）中の化合物４（０．２ｇ、２１．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ、４Ｍ）を添加し、混合物を０℃にて１時間攪拌した。次に混合物を濃縮して、白色固形分として化合物Ａ１６（０．１ｇ、粗製）を得た。
【０３６５】
１．１５  化合物Ａ１７／Ａ１８の調製
【０３６６】
【化８０】
2018510159.tif 000107
【０３６７】
１．１５．１  化合物２Ａ／２Ｂの調製
【０３６８】
【化８１】
2018510159.tif 000108
【０３６９】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の化合物１（１．０ｇ、４．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＢＨ３（０．９ｍＬ、９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２５〜３０℃にて１６時間攪拌した。次に、水性ＮａＯＨ（０．３０ｇ、２ｍＬ）、Ｈ２Ｏ２（０．８ｇ、１８ｍｍｏｌ）を滴下添加した。そして混合物をＥＡ（２５ｍＬ×３）で抽出し、有機層にＮａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濾液を乾燥するまで濃縮した。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１〜１：２）で精製し、黄色油として化合物２Ａ（４００ｍｇ）、及び化合物２Ｂ（１５０ｍｇ）を得た。
【０３７０】
１．１５．２  化合物Ａ１７の調製
【０３７１】
【化８２】
2018510159.tif 000109
【０３７２】
ＨＣｌ／ジオキサン（１０．００ｍＬ、４Ｍ）中の化合物２Ａ（２００ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の溶液を、２５℃にて１６時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを検知した。溶媒を蒸発させて化合物Ａ１７を得た。
【０３７３】
１．１５．３  化合物Ａ１８の調製
【０３７４】
【化８３】
2018510159.tif 000110
【０３７５】
ＨＣｌ／ジオキサン（１０．００ｍＬ、４Ｍ）中の化合物２Ｂ（２００ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の溶液を、２５℃にて１６時間攪拌した。溶媒を蒸発させて化合物Ａ１８を得た。
【０３７６】
１．１６  化合物Ａ１９の調製
【０３７７】
【化８４】
2018510159.tif 000111
【０３７８】
１．１６．１  化合物２の調製
【０３７９】
【化８５】
2018510159.tif 000112
【０３８０】
２０℃にて、Ｎ２下で、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−１，４−オキサゾカン−４−カルボキシレート（１．４０ｇ、６．０５ｍｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、デス・マーチン（３．８５ｇ、９．０８ｍｍｏｌ、１．５０当量）を一度に添加した。混合物を２０℃にて１２時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（３０ｍＬ）に注入し、２０分間攪拌した。水相をＤＣＭ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和生理食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１０／１）で精製して、黄色油としてｔｅｒｔ−ブチル６−オキソ−１，４−オキサゾカン−４−カルボキシレート（１．１０ｇ、４．８０ｍｍｏｌ、７９．３０％収率）を得た。
【０３８１】
１．１６．２  化合物３の調製
【０３８２】
【化８６】
2018510159.tif 000113
【０３８３】
０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のＭｅＭｒ（１．４０ｇ、１１．７８ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル６−オキソ−１，４−オキサゾカン−４−カルボキシレート（９００．００ｍｇ、３．９３ｍｍｏｌ、１．００当量）を添加した。混合物を０℃にて１時間攪拌した。次に２０℃に加熱し、２時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物をＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）に注入し、２０分間攪拌した。水相をＥＡ（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和生理食塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝１５／１）で精製して、黄色油としてｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−６−メチル−１，４−オキサゾカン−４−カルボキシレート（７５０．００ｍｇ、３．０６ｍｍｏｌ、７７．８０％収率）を得た。
【０３８４】
１．１６．３  化合物Ａ１９の調製
【０３８５】
【化８７】
2018510159.tif 000114
【０３８６】
２０℃にて、Ｎ２下で、ＤＣＭ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−６−メチル−１，４−オキサゾカン−４−カルボキシレート（１．００ｇ、４．０８ｍｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、ＴＦＡ（４ｍＬ）を添加した。混合物を２０℃にて２時間攪拌した。ＴＬＣは反応が完了したことを示した。混合物を濃縮して、粗生成物として６−メチル−１，４−オキサゾカン−６−オール（１．５０ｇ、粗製）を得た。
【０３８７】
１．１７  化合物Ａ２０の調製
【０３８８】
【化８８】
2018510159.tif 000115
【０３８９】
１．１７．１  化合物２の調製
【０３９０】
【化８９】
2018510159.tif 000116
【０３９１】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の化合物１（１０．００ｇ、４６．８９ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（２０ｍＬ、４Ｍ）を添加した。混合物を０℃にて１時間攪拌した。混合物を濃縮して、白色固形分として化合物２（６．５０ｇ、４３．４４ｍｍｏｌ、９２．６５％収率）を得た。
【０３９２】
１．１７．２  化合物３の調製
【０３９３】
【化９０】
2018510159.tif 000117
【０３９４】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の化合物２（３．５０ｇ、２３．３９ｍｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、ＴＥＡ（５．９２ｇ、５８．４８ｍｍｏｌ、２．５０当量）、及びＣｂｚＣｌ（５．９９ｇ、３５．０９ｍｍｏｌ）を一度に添加した。混合物を２５℃にて１６時間攪拌した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ＰＥ／ＥＡ＝５／１〜３／１）で精製して、黄色油として化合物３（４．１０ｇ、１６．５８ｍｍｏｌ、７０．８８％収率）を得た。
【０３９５】
１．１７．３  化合物４の調製
【０３９６】
【化９１】
2018510159.tif 000118
【０３９７】
ＤＣＭ（４０ｍＬ）中の化合物３（４．００ｇ、１６．１２ｍｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、ｍ−ＣＰＢＡ（６．９６ｇ、４０．４ｍｍｏｌ、２．５０当量）を添加した。混合物を、２５℃にて２時間攪拌した。混合物をＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）及びＮａ２ＳＯ３（３０ｍＬ）、生理食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、乾燥するまで濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝５：１〜３：１）によって精製し、化合物４（１．９ｇ、４５．２％）を得た。
【０３９８】
１．１７．４  化合物５の調製
【０３９９】
【化９２】
2018510159.tif 000119
【０４００】
−５０℃にて、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のＣｕＩ（１．９２ｇ、１０．０６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＭｅＭｒ（１．２ｇ、１０．０６ｍｍｏｌ）を添加し、次に−５０℃にて０．５時間攪拌した。−５０℃にて、化合物４（０．５３ｇ、２ｍｍｏｌ）を混合物に添加し、反応を２５℃に加温させ、２時間攪拌すると、ＴＬＣは材料が完全に消費されたことを示した。反応をＮＨ４Ｃｌ（４０ｍＬ）でクエンチし、ＥＡ（１００ｍＬ）で抽出し、有機層に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、乾燥するまで濃縮し、残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝５：１〜３：１）によって精製し、化合物５Ｂ（０．２ｇ）を得た。
【０４０１】
１．１７．５  化合物Ａ２０の調製
【０４０２】
【化９３】
2018510159.tif 000120
【０４０３】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の化合物５（１００．００ｍｇ、３７４．１１μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（０．０２ｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を２５℃にて１６時間、Ｈ２（５０ｐｓｉ（３．４ｂａｒ））下で攪拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）は、出発物質が完全に消費されたことを示した。反応混合物を濾過して濾液（filter）を濃縮し、無色油として化合物Ａ２０（５０．００ｍｇ、３００．３９μｍｏｌ、８５．２９％収率）を得た。
【０４０４】
１．１８  化合物Ａ２１／Ａ２２調製
【０４０５】
【化９４】
2018510159.tif 000121
【０４０６】
１．１８．１  化合物２Ａ／２Ｂの調製
【０４０７】
【化９５】
2018510159.tif 000122
【０４０８】
化合物１（１．１０ｇ、４．１８ｍｍｏｌ）及びＨＦ／Ｅｔ３Ｎ（５．３８ｇ、３３．４ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬの一口丸底フラスコに投入した。Ｎ２下で混合物を１００℃にて１６時間攪拌した。ＴＬＣが、反応が完了したことを示した。次に混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）中で希釈し、水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、乾燥するまで濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）で精製して、無色油として化合物２Ａと２Ｂとの分離不可能な混合物（３００ｍｇ、２５．３３％）を得た。
【０４０９】
１．１８．２  Ａ２１／Ａ２２の調製
【０４１０】
【化９６】
2018510159.tif 000123
【０４１１】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物２Ａ及び２Ｂ（２５０．００ｍｇ、８８２．４９μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、Ｐｄ／Ｃを添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を２５℃にて１６時間、Ｈ２（１５ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で攪拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）は、出発物質が完全に消費されたことを示した。反応混合物を濾過して濾液（filter）を濃縮して、黄色油としてＡ２１とＡ２２との分離不可能な混合物（１００．００ｍｇ、６７０．４２μｍｏｌ、７５．９７％収率）を得た。混合物は、最終目標を直接調製するのに使用され、超臨界流体クロマトグラフィによってレジオマーを分離させた。
【０４１２】
１．１９  化合物Ａ２３の調製
【０４１３】
【化９７】
2018510159.tif 000124
【０４１４】
１．１９．１  化合物３の調製
【０４１５】
【化９８】
2018510159.tif 000125
【０４１６】
−１０℃にて、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の化合物１（１．００ｇ、５．７１ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＮａＨ（５２５．３２ｍｇ、１３．１３ｍｍｏｌ、６０％、２．３０当量）を添加し、−１０〜０℃にて３０分間攪拌し、Ｎ２下で０℃にて、化合物２（７１３．３９ｍｇ、５．７１ｍｍｏｌ、１．００当量）を１５分間にわたって滴下添加した。反応混合物を２５℃にて２時間攪拌した。ＴＬＣ（ＰＥ／ＥＡ＝３：１）は、出発物質が完全に消費されたことを示した。反応を氷水でゆっくりとクエンチして、次にＥＡで抽出した。合わせた有機相を飽和生理食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）で精製して、無色油として純粋な化合物３（２５０．００ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ、１９．２６％収率）を得た。
【０４１７】
１．１９．２  化合物４の調製
【０４１８】
【化９９】
2018510159.tif 000126
【０４１９】
ＴＨＦ（６ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３ｍＬ）中の化合物３（２５０．００ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液を２５℃にて１時間攪拌し、ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、混合物をＥＡで希釈し、Ｎａ２ＳＯ３及び生理食塩水で洗浄し、有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濃縮して、薄黄色油として化合物４（１８０．００ｍｇ、７８５．１０μｍｏｌ、７１．３７％収率）を得た。
【０４２０】
１．１９．３  化合物５の調製
【０４２１】
【化１００】
2018510159.tif 000127
【０４２２】
０℃にて、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物４（１８０．００ｍｇ、７８５．１０μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＮａＢＨ４（８９．１０ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ、３．００当量）を添加した。混合物を２７℃にて１時間攪拌し、ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌに注入し、ＥＡで抽出し、有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濃縮して、無色油として化合物５（１４０．００ｍｇ、６０５．３０μｍｏｌ、７７．１０％収率）を得た。
【０４２３】
１．１９．４  化合物Ａ２３の調製
【０４２４】
【化１０１】
2018510159.tif 000128
【０４２５】
ジオキサン（５ｍＬ）中の化合物５（１４０．００ｍｇ、６０５．３０μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＨＣｌ／ジオキサン（５ｍＬ、４Ｍ）を添加し、混合物を２７℃にて１時間攪拌し、ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、反応溶液を濃縮して、白色固形分として化合物Ａ２３（８０．００ｍｇ、粗製）を得た。
【０４２６】
１．２０  化合物Ａ２４の調製
【０４２７】
【化１０２】
2018510159.tif 000129
【０４２８】
１．２０．１  化合物２の調製
【０４２９】
【化１０３】
2018510159.tif 000130
【０４３０】
２７℃にて、ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の化合物１（１．００ｇ、４．０４ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ｍ−ＣＰＢＡ（２．０５ｇ、１０．１０ｍｍｏｌ、２．５０当量）を添加し、３時間攪拌し、ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、混合物をＥＡで希釈し、飽和Ｎａ２ＳＯ３及び生理食塩水で洗浄し、有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濃縮して、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）で精製して、黄色油として化合物２（７５０．００ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ、７０．５１％収率）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．３５〜７．３９（ｍ、５Ｈ）、５．１５〜５．１９（ｍ、２Ｈ）、４．１９〜４．３３（ｍ、１Ｈ）、４．１５〜４．１６（ｍ、１Ｈ）、３．９４（ｍ、３Ｈ）、３．４７〜３．５０（ｍ、１Ｈ）、３．３２〜３．３５（ｍ、３Ｈ）、３．００〜３．０４（ｍ、１Ｈ）。
【０４３１】
１．２０．２  化合物３の調製
【０４３２】
【化１０４】
2018510159.tif 000131
【０４３３】
ジオキサン（４．１ｍＬ）中の化合物２（２７０．００ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液にＨ２ＳＯ４（１．４ｍＬ）を添加し、混合物を５０℃にて４時間攪拌し、ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、反応溶液をＤＣＭで希釈して、飽和ＮａＨＣＯ３及び生理食塩水で洗浄し、有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濃縮して、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）で精製して、無色油として化合物３（１２０．００ｍｇ、４２６．５９μｍｏｌ、４１．４２％収率）を得た。
【０４３４】
１．２０．３  化合物Ａ２４の調製
【０４３５】
【化１０５】
2018510159.tif 000132
【０４３６】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の化合物３（１２０．００ｍｇ、４２６．５９μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（２０．００ｍｇ、４２６．５９μｍｏｌ、１．００当量）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物を２８℃にて３時間、Ｈ２（１５ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））下で攪拌した。ＴＬＣは、出発物質が完全に消費されたことを示した。反応混合物を濾過して濾液（filter）を濃縮し、無色油として化合物Ａ２４（５０．００ｍｇ、３３９．７４μｍｏｌ、７９．６４％収率）を得た。
【０４３７】
１．２１  化合物Ａ２５の調製
【０４３８】
【化１０６】
2018510159.tif 000133
【０４３９】
１．２１．１  化合物２の調製
【０４４０】
【化１０７】
2018510159.tif 000134
【０４４１】
ＴＨＦ（６ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３ｍＬ）中の化合物１（４９９．０５ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＮＭＯ（６３０．５０ｍｇ、５．３８ｍｍｏｌ、２．３０当量）及びＫ２ＯｓＯ４（８６．２２ｍｇ、２３４．００μｍｏｌ、０．１０当量）を添加した。混合物を２５℃にて２時間攪拌し、ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、反応溶液をＥＡで希釈し、飽和Ｎａ２ＳＯ３及び生理食塩水で洗浄し、有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濃縮して、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ：ＤＣＭ＝１：１：１）で精製して、無色油として化合物２（３００．００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ、５１．８４％収率）を得た。
【０４４２】
１．２１．２：化合物Ａ２５の調製
【０４４３】
【化１０８】
2018510159.tif 000135
【０４４４】
ＥＡ（２ｍＬ）中の化合物２（３００．００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液にＨＣｌ／ＥＡ（４ｍＬ、４Ｍ）を添加した。混合物を２５℃にて１時間攪拌し、ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、混合物を濃縮して、白色固形分として化合物Ａ２５（２００．００ｍｇ、粗製）を得た。
【０４４５】
１．２２  Ａ２６の調製
【０４４６】
【化１０９】
2018510159.tif 000136
【０４４７】
１．２２．１  化合物２の調製
【０４４８】
【化１１０】
2018510159.tif 000137
【０４４９】
Ｎ２雰囲気下で、アセトン（５０ｍＬ）中の１，２−ビス（２−クロロエトキシ）エタン（５．００ｇ、２６．７３ｍｍｏｌ、１．００当量）及びＮａＩ（１２．０２ｇ、８０．１９ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物を５６℃にて７２時間攪拌した。大半の固形塩化ナトリウムが形成された。得られた塩化ナトリウムを濾過した後、溶液を真空中で濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）で希釈し、溶液を水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、真空中で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝１００：１〜１０：１で溶出）で精製して、無色油として純粋な生成物１，２−ビス（２−ヨードエトキシ）エタン（９．１０ｇ、２４．６０ｍｍｏｌ、９２．０２％収率）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ３．８０（ｔ，Ｊ＝６．９０Ｈｚ、４Ｈ）、３．７０（ｓ、４Ｈ）、３．２９（ｔ、Ｊ＝６．７８Ｈｚ、４Ｈ）。
【０４５０】
１．２２．２  化合物３の調製
【０４５１】
【化１１１】
2018510159.tif 000138
【０４５２】
ＭｅＣＮ（２００ｍＬ）中の１，２−ビス（２−ヨードエトキシ）エタン（２．００ｇ、５．４１ｍｍｏｌ、１．００当量）、Ｎａ２ＣＯ３（２．２９ｇ、２１．６４ｍｍｏｌ、４．００当量）、及びＬｉＣｌＯ４（２．３０ｇ、２１．６４ｍｍｏｌ、４．００当量）の混合物に、フェニルメタンアミン（５７９．２４ｍｇ、５．４１ｍｍｏｌ、１．００当量）を添加した。混合物をＮ２保護下で８０℃にて２４時間攪拌した。ＴＬＣが、材料が消費されたことを示すと、混合物を濃縮し、残渣を水（６０ｍＬ）で洗浄し、ＥＡ（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濃縮して、残渣をクロマトグラフィによって精製し（シリカゲル、ＰＥ：ＥＡ＝１０：１〜３：１で溶出）、無色油として７−ベンジル−１，４，７−ジオキサゾナン（dioxazonane）（３７０．００ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ、３０．９１％収率）の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．２３〜７．４３（ｍ、５Ｈ）、３．６９〜３．８４（ｍ、１０Ｈ）、２．８６〜３．００（ｍ、４Ｈ）。
【０４５３】
１．２２．３  化合物Ａ２６の調製
【０４５４】
【化１１２】
2018510159.tif 000139
【０４５５】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の７−ベンジル−１，４，７−ジオキサゾナン（３７０．００ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（５０．００ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ（３．４ｂａｒ））下、２８℃で２４時間攪拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）は、出発物質が完全に消費されたことを示した。この反応混合物を濾過し、濾液（filter）を濃縮して、薄黄色油として粗生成物の１，４，７−ジオキサゾナン（１７０．００ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ、７７．６１％収率）を得た。
【０４５６】
１．２３  Ａ２７の調製
【０４５７】
【化１１３】
2018510159.tif 000140
【０４５８】
１．２３．１  化合物Ａ２７の調製
【０４５９】
【化１１４】
2018510159.tif 000141
【０４６０】
−１０℃にて、Ｎ２下で、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の化合物１（２．００ｇ、１４．１６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬＡＨ（１．６１ｇ、４２．４８ｍｍｏｌ）を分割添加した。混合物を−１０℃にて１６時間攪拌した。次に混合物を、Ｈ２Ｏ（１．６ｍＬ）、１５％のＮａＯＨ（１．６ｍＬ）、及びＨ２Ｏ（３．２ｍＬ）でクエンチした。混合物をＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈し、濾過し、濾液をＮＨ４Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、水層をＥＡ（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を、ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ、４Ｍ）に添加した。混合物を真空中で濃縮して、茶色の固形分として化合物Ａ２７を得た（２．２０ｇ、ＨＣｌ塩、９４．９２％）。
【０４６１】
１．２４  化合物Ａ２８の調製
【０４６２】
【化１１５】
2018510159.tif 000142
【０４６３】
１．２４．１  化合物２の調製
【０４６４】
【化１１６】
2018510159.tif 000143
【０４６５】
Ｅｔ２Ｏ（２０ｍＬ）中の化合物１（１．００ｇ、３．８３ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液を−３５℃に冷却し、ＢＦ３．Ｅｔ２Ｏ（２．１７ｇ、１５．３１ｍｍｏｌ、４．００当量）、及びエチル−２−ジアゾアセテート（１．７５ｇ、１５．３１ｍｍｏｌ、４．００当量）を添加し、混合物を−３５〜２５℃にて１時間攪拌し、次に２５℃に加温して１時間攪拌した。ＴＬＣが、ＳＭが完全に消費されなかったことを示すと、混合物をＥＡで希釈して、ＮａＨＣＯ３で洗浄し、有機相を乾燥させ、濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１）で精製して、黄色油として粗生成物の化合物２（１８０．００ｍｇ、粗製）を得た。
【０４６６】
１．２４．２  化合物３の調製
【０４６７】
【化１１７】
2018510159.tif 000144
【０４６８】
ＭｅＯＨ（２ｍＬ）及びＨ２Ｏ（４ｍＬ）中の化合物２（１８０．００ｍｇ、５１８．１３μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＫＯＨ（５８．１４ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ、２．００等量）を添加し、混合物を攪拌して８０℃にて３時間還流させた。ＬＣＭＳが、反応が完了したことを示すと、混合物をＥＡで希釈して、水で洗浄し、有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濃縮して、残渣をフラッシュカラムで精製して、無色油として化合物３（６０．００ｍｇ、２１７．９１μｍｏｌ、４２．０６％収率）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ７．３１〜７．４５（ｍ、５Ｈ）、５．１５（Ｓ、２Ｈ）、３．２３〜３．３４（ｍ、４Ｈ）、２．４３〜２．４５（ｍ、４Ｈ）、２．１０〜２．１７（ｍ、２Ｈ）、１．８２〜１．９２（ｍ、４Ｈ）。ＬＣＭＳ：２７６．１［Ｍ＋１］、２９８．１［Ｍ＋２３］。
【０４６９】
１．２４．３  化合物４の調製
【０４７０】
【化１１８】
2018510159.tif 000145
【０４７１】
０℃にて、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の化合物３（６０．００ｍｇ、２１７．９１μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＮａＢＨ４（２４．７３ｍｇ、６５３．７３μｍｏｌ、３．００当量）を添加し、混合物を２５℃にて３０分間攪拌し、ＴＬＣが、反応が完了したことを示すと、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（２０ｍＬ）に注入し、ＥＡ（２０ｍＬ×３）で抽出し、生理食塩水で洗浄し、有機相に無水Ｎａ２ＳＯ４を入れて乾燥させ、濾過し、濃縮して、無色油として生成物の化合物４（５６．００ｍｇ、２０１．９０μｍｏｌ、９２．６５％収率）を得た。
【０４７２】
１．２４．４  化合物Ａ２８の調製
【０４７３】
【化１１９】
2018510159.tif 000146
【０４７４】
Ｎ２下で、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の化合物４（５６．００ｍｇ、２０１．９０μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０．００ｍｇ、２０１．９０μｍｏｌ、１．００当量）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ（１．０ｂａｒ））で、２５℃にて１時間攪拌した。ＴＬＣは、出発物質が完全に消費されたことを示した。反応混合物を濾過し、濾液（filter）を濃縮して、白色固形分として化合物Ａ２８（３５．００ｍｇ、粗製）を得た。
【０４７５】
第２部  標的に対する一般的手順
【０４７６】
【化１２０】
2018510159.tif 000147
【０４７７】
室温で、ＭｅＣＮ（３ｍＬ）中の化合物１（０．３ｍｍｏｌ）の溶液に、アミン（０．３ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（３０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温にて２時間攪拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）で希釈して水で洗浄した。有機相を真空中で濃縮して粗生成物を得、これをプレップＨＰＬＣによって精製して所望の生成物を得た。
【０４７８】
キラル化合物の分解
表２に列挙された条件に従い、選択された本発明の化合物のキラル分解を実施した。
【０４７９】
【表２−１】
2018510159.tif 000148
【０４８０】
【表２−２】
2018510159.tif 000149
【０４８１】
実施例：ＨＢＶ集合アッセイ
蛍  光クエンチングインビトロ集合ＨＢＶアッセイを、Ｚｌｏｔｎｉｃｋ及び共同研究者によって説明された方法（Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２００６，２４：３５８）に従って開発した。アッセイは、カプシド形成中に一緒に集団化するＨＢＶコアタンパク質のＣ末端の観察に基づいている。このアッセイは、すべての野生型システインがアラニンに変異しているが、Ｃ末端システイン残基が保存され、蛍光ＢｏＤＩＰＹ−ＦＬ色素で標識されている変異体Ｃ１５０ＨＢＶカプシドタンパク質を用いる。ＨＢＶ  Ｃ１５０Ｂｏタンパク質は、高蛍光性であるが、その蛍光は、カプシド集合プロセス中に大幅に低減される。したがって、アッセイは、標識カプシドＣ１５０Ｂｏタンパク質の蛍光をモニタリングすることによって、試験化合物がカプシド集合を調節する能力および効力を測定する。
【０４８２】
典型的なアッセイでは、変異体ＨＢＶ  Ｃ１５０タンパク質（アミノ酸１−１５０、Ｃ４９Ａ、Ｃ６１Ａ、Ｃ１０７Ａ、１５０Ｃ）をＴ７  ＲＮＡポリメラーゼベースの発現ベクターにクローニングし、大腸菌中で発現させて、二量体として均質に精製する。精製したＨＢＶコアタンパク質を脱塩し、ＢＯＤＩＰＹ−ＦＬ色素で標識する。
【０４８３】
非限定的な実施形態において、集合アッセイは、９６ウェルプレート形式で実施される。集合反応は、５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ緩衝液、ｐＨ７．５及び１５０ｍＭ  ＮａＣｌ中で実施される。化合物をＨＢＶ  ＣＡタンパク質と１５分間プレインキュベートし、集合反応をＮａＣｌの添加によって開始する。反応を室温にて１時間継続させる。
【０４８４】
カプシド集合に対する効果を判定するために、各試験化合物を、最初に、少なくとも４つの異なる濃度で２重にスクリーニングする。主なヒットは、集合アッセイにおいて１０μＭで活性を示す化合物である。特定された主なヒット化合物を、本明細書の他の箇所に記載される追跡研究において確認される。ＨＡＰ−１及びＢＡＹ  ４１−４１０９などの、ＨＢＶ  ＣＡ集合の既知の調節物質は、これらの実験における対照化合物として使用され、文献と一致するＥＣ５０値を示す。試験化合物に関するＥＣ５０値は、用量反応曲線の分析によって判定される。
【０４８５】
上記で説明した通り、選択された本発明の化合物を、ＨＢＶ集合アッセイ中でアッセイした。集合アッセイは、９６ウェルプレート形式で実施された。集合反応は、５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ緩衝液、ｐＨ７．５及び１５０ｍＭ  ＮａＣｌ中で実施された。化合物をＨＢＶ  ＣＡタンパク質と１５分間プレインキュベートし、集合反応をＮａＣｌの添加によって開始した。反応を室温で１時間継続させた。９６ウェルプレート集合アッセイは、プレートごと（plate-to-plate）及び日ごと（day-to-day）の両方で一貫して０．７を超えるＺ’因子を有し、ロバストかつ再現可能であった。
【０４８６】
カプシド集合に対する効果を判定するために、各試験化合物を、最初に、５つの異なる濃度（約３０μＭ、１０μＭ、３μＭ、１μＭ、及び０．３μＭ）で２重にスクリーニングした。主なヒットは、約１０μＭでの集合アッセイで＞５０％活性を示した化合物であり、これらの活性化合物の代表的な群を表３に示す。
【０４８７】
【表３】
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【０４８８】
実施例  ＨＢＶ複製の阻害のドットブロットアッセイ
ＨＢＶ集合アッセイにおいて活性を示す化合物を、それらの活性及び毒性について細胞アッセイで試験する。第１の抗ウイルスアッセイでは、ドットブロット法を用いて、ＨＢＶ産生肝細胞癌細胞株におけるＨＢＶ複製を阻害する各化合物の能力の評価を行う。
【０４８９】
簡単に述べると、ＨｅｐＧ２−２．２．１５細胞のコンフルエンスに達した単層を異なる濃度の試験化合物を含んだ完全培地とインキュベートする。３日後、培地を、適切に希釈した試験化合物を含んだ新鮮な培地に置換する。試験化合物の最初の投与の６日後、細胞培養物の上清を回収し、細胞溶解を行う。試料をＮｙｌｏｓ膜上に塗布し、ＵＶ架橋によってＤＮＡを膜に固定化する。プレハイブリダイゼーションの後、ＨＢＶプローブを加え、一晩ハイブリダイゼーションを行う。膜をＫｏｄａｋフィルムに曝露し、抗ウイルス活性を、ＨＢＶ  ＤＮＡレベルにおける低減（ＥＣ５０）から算出する。抗ウイルス活性のＥＣ５０を活性化合物の用量反応曲線から計算する。経時的なアッセイ性能を、標準陽性対照化合物であるＥＴＶ、ＢＡＹ  ４１−４１０９、及びＨＡＰ−１を使用してモニタリングする。
【０４９０】
化合物の細胞毒性（ＴＣ５０）を、この同じＨｅｐＧ２−２．２．１５細胞株中で、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅに基づく細胞毒性アッセイを製造者（Promega）が推奨する通りに用いて測定する。これらの結果を確認及び発展させるため、安定したＨＢＶ細胞株ＨｅｐＧ２．２．１５を用い、リアルタイムＰＣＲにより抗ＨＢＶ作用を、またＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅにより細胞毒性を測定して、活性化合物に第２の抗ウイルスアッセイを実施した。このアッセイでは、細胞の播種の２４時間後に、ＨｅｐＧ２−２．２．１５細胞を、陽性対照として使用したＢＡＹ  ４１−４１０９及びＨＡＰ−１とともに異なる濃度の試験化合物を含む完全培地とインキュベートする。３日後、培地を、適切に希釈した試験化合物を含んだ新鮮な培地と置換する。細胞培養物を試験化合物の最初の投与の６日後に回収した後、ＱＩＡａｍｐ  ９６  ＤＮＡ  Ｂｌｏｏｄ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用してＨＢＶのＤＮＡを抽出する。抽出したＨＢＶのＤＮＡを希釈し、リアルタイムＰＣＲにより分析する。ＨＢＶプラスミドスタンダードの量に対してＣｔ値をプロットすることにより標準曲線を作成する。色素取り込み法（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅ  ｋｉｔキット、Ｐｒｏｍｅｇａ）を適用することにより、上記で説明した方法と同様に細胞毒性を判定する。
【０４９１】
選択された化合物をそれらの活性及び毒性について細胞アッセイで試験した。第１の抗ウイルスアッセイでは、ドットブロット法を用いて、ＨＢＶ産生肝細胞癌細胞株におけるＨＢＶ複製を阻害する各化合物の能力が評価された。
【０４９２】
ＨｅｐＧ２−２．２．１５細胞のコンフルエント単層を様々な濃度の試験化合物を含む完全培地を用いてインキュベートした。３日後、培地を、適切に希釈した試験化合物を含む新鮮な培地と置換した。試験化合物の最初の投与から６日後に、細胞培養物の上清を回収し、細胞溶解を実施した。試料をＮｙｌｏｓ膜上に塗布し、ＵＶ架橋によってＤＮＡを膜に固定化した。プレハイブリダイゼーションの後、ＨＢＶプローブを加え、一晩ハイブリダイゼーションを行った。膜をＫｏｄａｋフィルムに露光し、抗ウイルス活性を、ＨＢＶ  ＤＮＡレベルにおける低減（ＥＣ５０）から算出した。抗ウイルス活性のＥＣ５０を活性化合物の用量反応曲線から計算した。経時的なアッセイ性能を、標準陽性対照化合物であるＥＴＶ、ＢＡＹ  ４１−４１０９、及びＨＡＰ−１を使用してモニタリングした。選択された本発明の化合物についての結果を、表４に示す。
【０４９３】
細胞毒性（ＣＣ５０）を、この同じＨｅｐＧ２−２．２．１５細胞株でＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅに基づいた細胞毒性アッセイを製造者（Ｐｒｏｍｅｇａ）により推奨される通りに用いて測定した。
【０４９４】
【表４】
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【０４９５】
本明細書で引用したそれぞれ及びすべての特許、特許出願、及び刊行物の開示内容は、それらの全体を参照することにより本明細書に組み込まれる。
【０４９６】
本発明は、特定の実施形態を参照して開示されているが、本発明の真の趣旨及び範囲から逸脱することなく、当業者によって本発明の他の実施形態及び変更が考案され得ることは明らかである。添付の特許請求の範囲は、すべてのかかる実施形態及び均等な変形を含むと解釈されることが意図される。
【国際調査報告】
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