(57)【要約】  本発明は、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを含む天然物質の組み合わせ、並びに美容用途のためのその使用に関する。本発明は、特に、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを含むベシクル（特に局所適用のためのもの）に関する。該ベシクルは、クリーム、ローション又はゲルに好ましくは添加され、結果として得られたクリーム、ローション又はゲルは、皮膚の美容的及び／若しくは皮膚科学的処置のため、並びに／又はセルライト及び／若しくは老化した皮膚の見た目の予防のため、並びに／又は皮下脂肪若しくは結合組織における変化、例えば脂肪腫及びその他の非特異的な皮下脂肪沈着の処置のため、又は疾患によって引き起こされるのではない脂肪パッド、例えば顔及び首領域における脂肪パッド（例えば目の下のたるみ等）等の退縮若しくは削減のために使用される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、並びに
ｃ）ｃ１）ホスファチジルコリン、又はｃ２）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル、のいずれか
を含むベシクル。
【請求項２】
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、及び
ｃ）ホスファチジルコリン
を含む請求項１記載のベシクル。
【請求項３】
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、並びに
ｃ）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル
を含む請求項１記載のベシクル。
【請求項４】
前記ホスファチジルコリンが、大豆レシチン又はヒマワリレシチンに由来する請求項１又は２記載のベシクル。
【請求項５】
前記ホスファチジルコリンが、大豆レシチン又はヒマワリレシチンの形態で用いられる請求項１又は２記載のベシクル。
【請求項６】
さらに植物油を含む請求項３記載のベシクル。
【請求項７】
少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステルは、１８α−グリチルレチン酸及び／若しくは１８β−グリチルレチン酸又は１種若しくは複数種のそれらの塩若しくはエステルから選択され、少なくとも１種のググルステロンは、（Ｚ）−ググルステロン及び／又は（Ｅ）−ググルステロンから選択されることを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載のベシクル。
【請求項８】
少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステルは、スペインカンゾウの形態で若しくはスペインカンゾウからの抽出物の形態で並びに／又は純粋な化学物質の形態で及び／若しくはその塩若しくはエステルの形態で用いられ、且つ／又は、少なくとも１種のググルステロンは、ググルリピッドの形態で若しくはググルリピッドからの抽出物の形態で並びに／又は純粋な化学物質の形態で用いられることを特徴とする請求項１〜７に記載のベシクル。
【請求項９】
前記食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤が、食品添加物Ｅ４７１、Ｅ４７２ａ、Ｅ４７２ｂ、Ｅ４７２ｃ、Ｅ４７２ｄ、Ｅ４７２ｅ、Ｅ４７２ｆ、Ｅ４７３、Ｅ４７４、Ｅ４７５、Ｅ４７６及びＥ４７７から選択されることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載のベシクル。
【請求項１０】
ホスファチジルコリン１０重量部に対し、
グリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル０．１〜０．５重量部、
ググルステロン０．１〜０．５重量部、及び
少なくとも１種の界面活性剤０．５〜３重量部
を含む請求項１記載のベシクル。
【請求項１１】
食用植物の種子油１５〜２０％（ｖ／ｖ）、
食品添加物群からの乳化剤２．５〜１０％（ｗ／ｖ）、
少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル２．５〜５％（ｗ／ｖ）、
エタノール１０〜２０％（ｖ／ｖ）、
１８β−グリチルレチン酸０．１〜１０％（ｗ／ｖ）、及び
（Ｚ）−ググルステロン０．１〜１０％（ｗ／ｖ）
を含み、水で１００％となされた請求項１記載のベシクル。
【請求項１２】
食品添加物群からの乳化剤７〜１７．５％（ｗ／ｖ）、
少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル３〜７．５％（ｗ／ｖ）、
エタノール１０〜２０％（ｖ／ｖ）、
１８β−グリチルレチン酸０．１〜１０％（ｗ／ｖ）、及び
（Ｚ）−ググルステロン０．１〜１０％（ｗ／ｖ）
を含み、水で１００％となされた請求項１記載のベシクル。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載のベシクルを含む、クリーム、ローション又はゲル。
【請求項１４】
少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンがそれぞれ、クリーム、ローション又はゲルの総重量を基準として０．０１〜１０％（ｗ／ｗ）、好ましくは０．１〜５％（ｗ／ｗ）の量で存在することを特徴とする請求項１３記載のクリーム、ローション又はゲル。
【請求項１５】
グリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
ググルステロン０〜５％（ｗ／ｗ）、
無水エタノール５〜２５％（ｗ／ｗ）、
エチルオレエート１〜３０％（ｗ／ｗ）、
植物油（例えば、ヒマワリ油、大豆油、菜種油）０〜３０％（ｗ／ｗ）、
ジグリセリルモノオレエート０．５〜５％（ｗ／ｗ）、
Ｉｍｗｉｔｏｒ３７５（グリセリルシトレート／ラクテート／リノレート／オレエート）０〜５％（ｗ／ｗ）、
１００％とする精製水
を含み、少なくともグリチルレチン酸若しくはその塩若しくはエステル又はググルステロンを含む、ベシクル。
【請求項１６】
グリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
ググルステロン０〜５％（ｗ／ｗ）、
無水エタノール５〜２５％（ｗ／ｗ）、
エチルオレエート１〜１０％（ｗ／ｗ）、
Ｉｍｗｉｔｏｒ３７５（グリセリルシトレート／ラクテート／リノレート／オレエート）５〜２５％（ｗ／ｗ）、
１００％とする精製水
を含み、少なくともグリチルレチン酸若しくはその塩若しくはエステル又はググルステロンを含む、ベシクル。
【請求項１７】
グリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
ググルステロン０〜５％（ｗ／ｗ）、
ホホバ油１０〜１５％（ｗ／ｗ）、
セチルパルミテート１５〜２５％（ｗ／ｗ）、
Ｉｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１の０．２〜１．０％（ｗ／ｗ）、
ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳの１〜３％（ｗ／ｗ）、
１００％とする精製水
を含み、少なくともグリチルレチン酸若しくはその塩若しくはエステル又はググルステロンを含む、ベシクル。
【請求項１８】
セルライトの美容的及び／若しくは皮膚科学的な処置及び／若しくは予防において並びに／又は老化した皮膚の見た目の処置及び／若しくは予防のために使用するためのクリーム、ローション又はゲルとしての、請求項１〜１２及び１５〜１７のいずれか１項に記載のベシクルの製剤。
【請求項１９】
少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンを含むフェイスマスク。
【請求項２０】
請求項１〜１２及び１５〜１７のいずれか１項に記載のベシクルを含むフェイスマスク。
【請求項２１】
少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンをそれぞれ、フェイスマスクの総重量を基準として０．０１〜５％（ｗ／ｗ）、好ましくは０．１〜２．５％（ｗ／ｗ）含有するフェイスマスク。
【請求項２２】
請求項１〜１２及び１５〜１７のいずれか１項に記載のベシクルの、老化した又はストレスを受けた皮膚の処置及び／又は予防のためのフェイスマスクの製造における使用。
【請求項２３】
請求項１〜１２及び１５〜１７のいずれか１項に記載のベシクル、又は少なくとも１種のグリチルレチン酸若しくはその塩若しくはエステルと少なくとも１種のググルステロンとの組み合わせの使用であって、
例えば、脂肪性浮腫、脂肪腫、腹壁の脂肪腫症、変形性皮膚組織層炎、偽性女性化乳房、ＨＩＶ患者における野牛肩、及び非特異的な皮下脂肪沈着等の、皮下脂肪若しくは結合組織における変化の処置における、又は
疾患によって引き起こされるのではない脂肪パッド、例えば顔及び首領域における脂肪パッド（例えば、目の下のたるみ、ほうれい線、たるんだ頬、二重あご等）等の退縮若しくは削減における、又は
脂肪吸引法に続く後処置における、
使用。
【請求項２４】
少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンを含むプラスター又はパッチ。
【請求項２５】
請求項１〜１２及び１５〜１７のいずれか１項に記載のベシクルを含むプラスター又はパッチ。
【請求項２６】
Ａ）
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル、並びに
ｃ）ｃ１）ホスファチジルコリン、又はｃ２）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル、のいずれか
を含むベシクル、並びに
Ｂ）
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、並びに
ｄ）ｄ１）ホスファチジルコリン、又はｄ２）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル、のいずれか
を含むベシクル
を含む組成物。
【請求項２７】
請求項２６に記載の組成物を含む、クリーム、ローション、ゲル、プラスター、パッチ又はフェイスマスク。
【請求項２８】
セルライトの美容的及び／若しくは皮膚科学的な処置及び／若しくは予防において並びに／又は老化した皮膚の見た目の処置及び／若しくは予防のために使用するためのクリーム、ローション又はゲルとしての、請求項２６記載の組成物の製剤。
【請求項２９】
老化した又はストレスを受けた皮膚の処置及び／又は予防のためのフェイスマスクの製造における、請求項２６記載の組成物の使用。
【請求項３０】
例えば、脂肪性浮腫、脂肪腫、腹壁の脂肪腫症、変形性皮膚組織層炎、偽性女性化乳房、ＨＩＶ患者における野牛肩、及び非特異的な皮下脂肪沈着等の、皮下脂肪若しくは結合組織における変化の処置における、又は
疾患によって引き起こされるのではない脂肪パッド、例えば顔及び首領域における脂肪パッド（例えば、目の下のたるみ、ほうれい線、たるんだ頬、二重あご等）等の退縮若しくは削減における、又は
脂肪吸引法に続く後処置における、
請求項２６記載の組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを含むベシクル（特に局所適用のためのもの）に関する。該ベシクルは、クリーム、ローション又はゲルに好ましく添加され、結果として得られるクリーム、ローション又はゲルは、皮膚の美容的及び／若しくは皮膚科学的な処置のため並びに／又はセルライト及び／若しくは老化した皮膚の見た目の予防のために用いられる。クリーム、ローション又はゲルは、例えば、スキンケア製品としてのクリーム、ローション又はゲルの効力、保存寿命、におい又はその他の特性を改善する補助物質（賦形剤）をさらに含むことができる。少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを含む活性成分の組み合わせのベシクル製剤は、充分な局所的浸透を確保し、そうすることで、セルライト及び／又は老化した皮膚に対する所望の美容効果及び／又は皮膚科学的効果を確保する。
【０００２】
さらに、本発明は、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを含むフェイスマスク（例えばアンチエイジングフェイスマスク）に関する。本発明のフェイスマスクは、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを有する本発明のベシクルを好ましくは含む。
【０００３】
さらに、本発明は、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを含むプラスター又はパッチ（例えば、二重あご、脂肪腫等の処置のためのもの）に関する。本発明のプラスター又はパッチは、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを有する本発明のベシクルを好ましくは含む。
【背景技術】
【０００４】
セルライト又は老化した皮膚の見た目の効果的な美容的及び／又は皮膚科学的な処置及び／又は予防は、満足いくように解決されない問題であり続けている。特にセルライトは、全ての女性の約８０％において美容上の視覚的な問題であり、皮下貯蔵脂肪に関連する女性結合組織の特徴的な構造に主に起因する。例えば、遺伝、年齢関連、体重増加の結果又は妊娠が原因となり得て結合組織が弱まった結果、皮下の脂肪沈着、特に大きな貯蔵脂肪があるところは、特徴的にでこぼこした「オレンジピール」として、皮膚表面上に見える。したがって、セルライトを処置する考え得る方法の１つは、皮膚及び皮下の脂肪層を整えること、即ち、脂肪細胞分化の阻害、脂肪細胞中での脂肪分解の増加による既存の脂肪沈着の破壊、及び脂肪細胞におけるアポトーシスの誘発、並びに脂肪組織ホメオスタシスの促進によって、過剰な貯蔵脂肪を削減することである。
【０００５】
多くの組成物、特にクリーム、ローション又はゲルの局所製剤が、この目的のための調合物として記載されてきた。ほとんどの場合、有効成分は、特に天然物質又は植物抽出物の組み合わせであり、例えば、
・ツタ、イチョウ及びトクサの抽出物の組み合わせ
・コーヒー生豆、ココア、海藻（ブラダーラック（Fucus vesiculosus）及びオドンテラ・アウリタ（Odontella aurita）（飲料としても）
・スイレン抽出物とカルニチンの組み合わせ（バイヤスドルフ社（Ｂｅｉｅｒｓｄｏｒｆ）、ハンブルク）
・ココアポリフェノール、ヤーコン葉抽出物（ニュクス社（Ｎｕｘｅ）、パリ）
・ブラジリアンミモザと黄色ツノゲシ抽出物（ニュクス社、パリ）
である。
【０００６】
多くの場合、供給会社の指示に従えば、処置は、例えば、ラッピング、マッサージ又はライディング（Reiten）によって補助される必要がある。臨床観察は、非常に少ない数の事例において、例えば、ニュクス社（パリ）からの１０のエッセンシャルオイル（ストローフラワー、シダー、クレープフルーツ等）の組み合わせについてのみ記載されている。３１人の女性に皮膚科学的な監督の下で行った臨床研究において、１日２回の適用で５６日後、参加者に腹部ベルトの減少が観察され、また、３３％の参加者で、ヒップサイズが平均で１．５ｃｍまで減少した（ニュクス社、パリ）。しかしながら、セルライトは特に上腿に影響するので、上腿の周囲長の変化を測定することは興味深い。１８人の女性（９人処置／９人プラセボ）での上腿の周囲長の二重盲検試験において、２．５％グリチルレチン酸クリーム（Ｍｉｎｕｓ Ａｄｉｐ（登録商標）クリームとして市販されている）を局所適用で９人の女性に使用した。上腿の表面脂肪層の厚さはわずかに減少したが、上腿の周囲長は、ほとんど減少しなかった（非特許文献１：Armanini D. et al., Steroids 2005, 70, 538-542）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】ＷＯ２０１０／１２１８１４
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Armanini D. et al., Steroids 2005, 70, 538-542
【非特許文献２】Stiftung Warentest, Issue 5, 2009
【非特許文献３】R.A. Isbrucker, G.A. Burdock, Regulatory Toxicology and Pharmacology 2006, 46, 167-192
【非特許文献４】Grieco A. et al., Journal of Hepatology 2009, 50(6), 1273-1277
【非特許文献５】Elias, P.M., Friends, D.S., J. Cell Biol. 1975, 20, 1-19
【非特許文献６】Artmann C. et al., Arzneimittelforschung 1990, 40 (12): 1365-1368
【非特許文献７】Blume G., Skin Delivery Systems 2008, ed. J.W. Wiechers, Allured Publishing Corp. USA, 269-282
【非特許文献８】Lampen P. et al., J. Cosmet. Sci. 2003, 54: 119-131
【非特許文献９】Zhang Y.-T. et al., Int. J. Pharm. 2014, 471: 449-452
【非特許文献１０】Li C. et al., Int. J. Nanomed. 2013, 8: 1285-1292
【非特許文献１１】Badran M. et al., Scientific World Journal 2012, Art.ID: 134876
【非特許文献１２】Cevc G. et al., Adv. Drug Deliv. Rev. 1996, 18: 349-378
【非特許文献１３】Cevc G. et al., Biochim. Biophys. Acta 1998, 1368: 201-215
【非特許文献１４】Romero E.L. et al., Int. J. Nanomed. 2013, 8: 3171-3181
【非特許文献１５】Touitou E. et al., J. Contr. Rel. 2000, 65: 403-418
【発明の概要】
【０００９】
一般に、これまで入手可能で試験された組成物の全ては、それらの抗セルライト作用に関する試験において不充分であると記載されており（非特許文献２：Stiftung Warentest, Issue 5, 2009）、これはほとんどの場合、使用された天然物質（少なくともリスクなく使用できる用量での天然物質）の低い生物化学的作用と、皮膚バリアを通した、特に角質層を通した活性成分の不充分な浸透とに帰されるであろう。
【００１０】
他の組成物は、皮膚科学的に試験された活性をもって販売促進されているが、それらは、副作用が予想されるため安全ではない。例えばエアラコス社（Ｅｒｌａｃｏｓ、エアランゲン）のＱｕａｄｒｏｌｌｏｌ（登録商標）（Ｑ−Ｌ（登録商標））は、フィトステロール（コレステロール誘導体）と、同化特性を有するとともにアンドロゲン特性も有するエステル化テストステロン誘導体であるＥＲ１４４６（１７β−Ｏ−アセチル−４−ヒドロキシ−アンドロステン−３−オン）との、いわゆる二重複体からなり、これは女性のセルライトの処置に効果的であり得るが、予想されるアンドロゲン性副作用のため望ましくないと考えられる。
【００１１】
ＷＯ２０１０／１２１８１４（特許文献１、L. Weber及びT. Wilckens）には、例えば１８β−グリチルレチン酸等の１１βＨＳＤ１阻害剤と、例えばＺ−ググルステロン等のミネラルコルチコイド受容体阻害剤とを、腫瘍等の様々な疾患の処置のための組み合わせ医薬として使用することについて記載されており、またセルライトの処置のために使用することについても記載されている。しかしながら、その特許出願において、特許請求されている組み合わせの医薬製剤については、錠剤、注射剤、坐薬又は局所製剤のいずれとしても、実施例を用いて実施されていない。同様に、使用可能な用量についても示されていない。毒性調査から、グリチルリチン形態の１８β−グリチルレチン酸は、経口投与又は他の全身経路により、平均的なヒトに１日用量でわずか約１６ｍｇまでならば、安全に投与することができることが知られている（非特許文献３：R.A. Isbrucker, G.A. Burdock, Regulatory Toxicology and Pharmacology 2006, 46, 167-192）。しかしながら、この全身最大用量は、セルライト及び／又は老化した皮膚の効果的な処置のために必要な濃度を皮膚中に蓄積するには全く低すぎることが分かった。さらに、３０ｍｇ／日を超えるググルステロンの全身投与は、ググルステロンを含む調合物であるＥｑｕｉｓｔｅｒｏｌを用いた一事例において肝炎が観察されたため、安全ではない（非特許文献４：Grieco A. et al., Journal of Hepatology 2009, 50(6), 1273-1277）。
【００１２】
したがって、本発明の目的は、特に皮膚の脂肪層を整えることによって、老化した皮膚又はセルライトの見た目の美容的及び／又は皮膚科学的な処置及び／又は予防を、これまでに比べてより効果的に可能にする、容認できる製剤（特に、例えば、クリーム、ローション又はゲル等の局所適用のためのもの）を提供することにある。
【００１３】
セルライトの処置のために用いられる物質を、深い皮膚層にあるそれらの活性部位へ輸送するためには、局所適用の場合には、上部の皮膚層（角質層、表皮、真皮）に効果的に浸透することが先ず必要であるが、このことは、ほとんどの天然物質にとって、特に角質層の天然バリア機能のために解決することが容易ではない問題である。浸透するべき上部の皮膚層に特有の性質のため、典型的には、活性成分は、従来の公知の美容局所製剤によって、例えば典型的なクリーム（Ｍｉｎｕｓ Ａｄｉｐ（登録商標）、ニューフィールズ社（Ｎｅｗｆｉｅｌｄｓ）、パリ）では、深い皮膚層中へは輸送されず、浸透深さは最大で１０μｍのみである（非特許文献５：Elias, P.M., Friends, D.S., J. Cell Biol. 1975, 20, 1-19）。
【００１４】
考え得るセルライト処置のために角質層へ浸透させる多くの方法、例えば、イオン泳動、電気化学法、電波、超音波又はマイクロニードルの使用が、専門家に知られている。しかしながら、これらの方法は、特に医療クリニックにおいて行われるのではない場合、毎日の使用で行うのは容易ではなく、それゆえ、特に毎日の適用が必要な場合には適さない。他の可能性として、ＤＭＳＯ、プロピレングリコール又は尿素等の浸透強化剤の使用がある。実際、グリチルレチン酸及びググルステロンの両方とも、ＤＭＳＯを用いるとより深い皮膚層へ浸透することができるが、浸透強化剤としてのＤＭＳＯの常用／毎日の使用は、ＤＭＳＯの公知の副作用のため、賢明ではない（米国環境保護庁のＤＭＳＯに対する否定的決定（２００６年６月１６日）を参照）。ＤＭＳＯと異なり、尿素及びプロピレングリコールは、単独では、グリチルレチン酸又はググルステロンの浸透強化剤としての充分な作用を奏しない。
【００１５】
皮膚への浸透を改善するその他の方法は、例えば、レシチン又はその主構成成分であるホスファチジルコリンをベースとしたいわゆるリポソームである脂質カプセル化物に、活性成分を製剤化することを推奨している（非特許文献６：Artmann C. et al., Arzneimittelforschung 1990, 40 (12): 1365-1368; 非特許文献７：Blume G., Skin Delivery Systems 2008, ed. J.W. Wiechers, Allured Publishing Corp. USA, 269-282）。卵レシチンを用いて製造されたリポソームは、サイズがおよそ２００ｎｍであり、そのようなリポソーム中にカプセル化されたグリチルレチン酸は、深い皮膚層まで輸送されないことが見出された。しかしながら、上部の皮膚層において抗炎症効果が達成された。
【００１６】
経皮的な活性成分の輸送に原理的に適したものとして、いわゆるトランスファーソームもあり、これは、例えばクリームとして製剤化され適用されたときに封入された活性成分を深い皮膚層中へ輸送することができる高度にフレキシブルなベシクルをもたらすＴｗｅｅｎ８０等の表面活性物質と脂質構成成分との組み合わせである（非特許文献８：Lampen P. et al., J. Cosmet. Sci. 2003, 54: 119-131; 非特許文献９：Zhang Y.-T. et al., Int. J. Pharm. 2014, 471: 449-452; 非特許文献１０：Li C. et al., Int. J. Nanomed. 2013, 8: 1285-1292; 非特許文献１１：Badran M. et al., Scientific World Journal 2012, Art.ID: 134876; 非特許文献１２：Cevc G. et al., Adv. Drug Deliv. Rev. 1996, 18: 349-378）。同様に、トランスファーソームを用いれば、非常に大きい分子、例えばタンパク質インシュリンであっても、皮膚を通して全身血流中へ経皮的に輸送され、結果的に、インシュリンの場合であれば血糖レベルの削減という顕著な全身効果を生じることが示されている（非特許文献１３：Cevc G. et al., Biochim. Biophys. Acta 1998, 1368: 201-215）。この知見に基づくと、グリチルレチン酸とググルステロンとの組み合わせのための輸送ベシクルとしてのトランスファーソームの使用は好ましくなく、なぜならば、トランスファーソームの標的部位を、処置されるべき皮膚層に限定することがほとんどできないからであり、経皮的に適用される、有効成分の組み合わせの全身投与は、全身副作用を排除するためには、いかなるものも望ましくない。
【００１７】
従来のリポソームのさらなる改変は、いわゆるエソソームであり、これは、経皮的な活性成分の輸送にも原理的に適している。エソソームは一般的に、ホスファチジルコリン／レシチン１〜５％、及びエタノール２０〜５０％を含んでいる。それらの良好な皮膚浸透作用は、特に高いエタノール含有量による浸透強化作用に基づいている（非特許文献１４：Romero E.L. et al., Int. J. Nanomed. 2013, 8: 3171-3181; 非特許文献１５：Touitou E. et al., J. Contr. Rel. 2000, 65: 403-418）。しかしながら、エソソームに対する皮膚の耐性は、非常に議論の的となっている。高いエタノール含有量は、角質層の保護脂質層の可溶化及びその結果としての皮膚の経皮的な水分損失を増加し得る（非特許文献７：Blume G., Skin Delivery Systems 2008, ed. J.W. Wiechers, Allured Publishing Corp. USA, 269-282）。このように、エソソームは、毎日の使用、特に上腿への広範囲での使用には適していない。加えて、高いエタノール含有量では、好まれる感覚特性（例えば、におい）を有するクリーム、ローション又はゲルとして容易に製剤化することはできない。したがって、グリチルレチン酸とググルステロンとの組み合わせのための輸送ベシクルとしてのエソソームの使用は好ましくない。
【００１８】
驚くべきことに、食品添加物群からの脂質性乳化剤、長鎖脂肪酸モノエステル（例えばオレエート）及び任意選択の植物油をベースとするベシクルは、少なくとも１種のグリチルレチン酸と少なくとも１種のググルステロンとの活性成分の組み合わせのカプセル化に適していることが今般見出された。この製剤は、レシチン含有リポソームに比べ、親油性物質だけでなく親水性物質をも、高い充填率であってもカプセル化することを可能にする。
【００１９】
また、驚くべきことに、少なくとも１種のグリチルレチン酸と少なくとも１種のググルステロンとの活性成分の組み合わせを有するベシクルは、ホスファチジルコリン（好ましくは大豆レシチン又はヒマワリレシチンからのホスファチジルコリン）をベースとする場合、より深い皮膚層への輸送に適している。卵レシチンと比べて、大豆及びヒマワリレシチン、又は特に大豆及びヒマワリホスファチジルコリンは、不飽和脂肪酸、例えばジ不飽和リノール酸の特に高い含有量が際立つ。さらに、驚くべきことに、不飽和脂肪酸を含有し、３５℃未満で相転移するホスファチジルコリンは、より深い皮膚層へ有効成分の組み合わせを輸送するのに特に適していることが見出された。このような脂肪酸は、特に、リノール酸、アルファ−リノレン酸、パルミトオレイン酸又はオレイン酸である。
【００２０】
さらに、特にホスファチジルコリン含有量が８０重量％以上のベシクルは、驚くべきことに、有効成分の組み合わせを、角質層を通し、また上部の皮膚層も通して、皮下脂肪組織まで効果的に輸送することが見出された。
【００２１】
本発明のベシクル中のグリチルレチン酸とググルステロンとの組み合わせは、驚くべきことに、特にセルライトの処置及び／又は予防に関して、グリチルレチン酸又はググルステロン単独の使用と比較して、顕著に改善された活性プロファイルを示す。驚くべきことに、両天然物質は、組み合わせることにより相乗的に強化された効果を奏する。
【００２２】
ググルステロンは、成熟しつつある脂肪細胞における脂質貯蔵を、グリチルレチン酸よりも著しく良好に阻害する（表１参照）。驚くべきことに、グリチルレチン酸と組み合わせたググルステロンはまた、脂肪細胞のアポトーシスの誘導及びその結果としての脂肪組織中での脂肪細胞の数の削減に対するグリチルレチン酸のポジティブな効果を相乗的に強化する（図１及び図２参照）。さらに、グリチルレチン酸と組み合わせたググルステロンは、驚くべきことに、成熟脂肪細胞に対するグリチルレチン酸の脂肪分解作用を強化する。これは、グリチルレチン酸誘導体とググルステロン誘導体との組み合わせが、驚くべきことに、２つの天然物質のいずれかが単独で可能なレベルよりも著しくさらに効果的に、成熟しつつある脂肪細胞及び成熟脂肪細胞の脂肪含有量と脂肪細胞自体の数との両方を削減することを意味する。
【００２３】
しかしながら、クリーム、ローション又はゲル等の水をベースとする局所適用用製剤中のグリチルレチン酸及びググルステロン両者の使用及び有効性は、目下の先行技術によれば、両天然物質の乏しい水溶性によって限られたものである。
【００２４】
目下の先行技術による、特にグリチルレチン酸の先行の応用におけるさらなる欠点は、既存のグリチルレチン酸含有スキンケア製品の不充分な浸透であり、それは、例えば、それらの乏しい水溶性と、皮膚の特別なバリア機能とに帰される。
【００２５】
本発明によりグリチルレチン酸及びググルステロンをベシクル中にカプセル化することによって、驚くべきことに、局所適用用の水性製剤中に、実証的に効果のある濃度でそれらを組み込むことが容易に可能となり、そうすることにより、目下の先行技術による乏しい水溶性及び不充分な局所的浸透という重大な欠点が改善される。
【００２６】
本発明は、とりわけ、本発明のベシクルを含む、例えばクリーム、ローション又はゲル等の局所製剤を提供するものである。
【００２７】
本発明は、
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、並びに
ｃ）ｃ１）ホスファチジルコリン（好ましくは、大豆レシチン若しくはヒマワリレシチンからのホスファチジルコリン）、又はｃ２）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル、のいずれか
を含むベシクル（特に局所適用用のもの）に関する。
【００２８】
本発明は、特に、
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、及び
ｃ）ホスファチジルコリン（好ましくは、大豆レシチン又はヒマワリレシチンからのホスファチジルコリン）
を含むベシクルに関する。
【００２９】
さらに、本発明は、特に、
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、並びに
ｃ）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル
を含むベシクルに関する。
【００３０】
さらに、本発明は、特に、
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、及び
ｃ）ホスファチジルコリン（好ましくは、大豆レシチン又はヒマワリレシチンからのホスファチジルコリン）
を含むベシクルに関する。
【００３１】
さらに、本発明は、特に、
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、並びに
ｃ）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル
を含むベシクルに関する。
【００３２】
さらに、本発明は、好ましくは、植物油（植物性オイル）をさらに含み、該植物油が、好ましくは、例えばヒマワリ油（ヘリアンサス・アンヌス（Helianthus annuus））、菜種油ブラシカ・ナパス（Brassica napus））又は大豆油（グリシン・マックス（Glycine max））等の、食用植物の種子油である、ベシクルに関する。
【００３３】
少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステルは、好ましくは、１８α−グリチルレチン酸及び／若しくは１８β−グリチルレチン酸又は１種若しくは複数種のそれらの塩若しくはエステルから選択される。
【００３４】
さらに好ましくは、少なくとも１種のググルステロンは、（Ｚ）−ググルステロン及び／又は（Ｅ）−ググルステロンから選択される。
【００３５】
さらに好ましくは、少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステルは、スペインカンゾウ（Glycyrrhiza glabra）の形態で若しくはスペインカンゾウからの抽出物の形態で、並びに／又は純粋な化学物質の形態で及び／若しくはその塩若しくはエステルの形態で用いられる。
【００３６】
さらに好ましくは、少なくとも１種のググルステロンは、ググルリピッドの形態で若しくはググルリピッドからの抽出物の形態で並びに／又は純粋な化学物質の形態で用いられる。
【００３７】
本発明のベシクルは、好ましくは単一ラメラである。
【００３８】
さらに好ましくは、本発明のベシクルのホスファチジルコリンは、大豆レシチン又はヒマワリレシチンに由来する。
【００３９】
さらに、ホスファチジルコリンは、２種の不飽和脂肪酸（例えば、リノール酸、オレイン酸又はアルファ−リノレン酸）を好ましくは含有する。
【００４０】
さらに、ベシクルは、好ましくは、ホスファチジルコリンを少なくとも８０重量％含む。
【００４１】
特に好ましくは、本発明のベシクルは、粒子径が２０〜２００ｎｍ、好ましくは５０〜１００ｎｍである。
【００４２】
さらに、本発明のベシクルは、特に好ましくは、多分散指数が０．２５未満である。
【００４３】
本発明のベシクルは、クリーム、ローション又はゲルとして製剤化される前に、好ましくはＰＣフィルター膜（好ましくは２００ｎｍ以下の孔径、特に好ましくは１００ｎｍ以下の孔径を有するもの）を通して押し出される、又は対応する脂質ベシクルのサイズ限定のための、当業者に公知の代わりとなる標準的方法、例えば、膜又はフィルター（好ましくは２００ｎｍ以下の孔径、特に好ましくは１００ｎｍ以下の孔径を有するもの）を用いた透析、若しくはゲルクロマトグラフィー（例えばＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５による）によって処理される。
【００４４】
あるいはまた、本発明のベシクルは、グリチルレチン酸（若しくはその塩若しくはエステル）又はググルステロンのみを含み得る。しかしながら、この場合、その後、最終的な製剤には、グリチルレチン酸（又はその塩若しくはエステル）を含むベシクルと、ググルステロンを含むベシクルとの両方が、好ましくは２：１〜１：２（特に１：１）の比の混合物の形態で添加される。
【００４５】
一実施形態によれば、本発明は、
Ａ）
ａ）少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル、並びに
ｃ）ｃ１）ホスファチジルコリン、又はｃ２）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル、のいずれか
を含むベシクル、並びに
Ｂ）
ｂ）少なくとも１種のググルステロン、並びに
ｄ）ｄ１）ホスファチジルコリン、又はｄ２）食品添加物群からの少なくとも１種の乳化剤及び少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル、のいずれか
を含むベシクル
を含む組成物に関する。
【００４６】
特に好ましくは、本発明は、
ホスファチジルコリン、好ましくは大豆又はヒマワリレシチンからのホスファチジルコリン１０重量部に対し、
グリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル（特に１８β−グリチルレチン酸）０．１〜０．５重量部、
ググルステロン（特に（Ｚ）−ググルステロン）０．１〜０．５重量部、並びに
少なくとも１種の界面活性剤（特に、コレステロール、コール酸ナトリウム、及び／又はデオキシコール酸ナトリウム）０．５〜３重量部
を含むベシクルに関する。
【００４７】
さらに、特に好ましくは、本発明は、
食用植物の種子油（例えば、ヒマワリ種子油（ヘリアンサス・アンヌス））１５〜２０％（ｖ／ｖ）、
食品添加物群からの乳化剤（例えば、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５（グリセリルシトレート／ラクテート／リノレート／オレエート）；クレメールオレオゲーエムベーハー社（Ｃｒｅｍｅｒ Ｏｌｅｏ ＧｍｂＨ）、ハンブルク）２．５〜１０％（ｗ／ｖ）、
少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル（例えば、オレイン酸ポリグリセリル−２）２．５〜５％（ｗ／ｖ）、
エタノール１０〜２０％（ｖ／ｖ）、
１８β−グリチルレチン酸０．１〜１０％（ｗ／ｖ）、及び
（Ｚ）−ググルステロン０．１〜１０％（ｗ／ｖ）
を含み、水（好ましくは二次蒸留水（aqua bidest.））で１００％となされたベシクルに関する。
【００４８】
さらに、特に好ましくは、本発明は、
食品添加物群からの乳化剤（例えば、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５（グリセリルシトレート／ラクテート／リノレート／オレエート）；クレメールオレオゲーエムベーハー社、ハンブルク））７〜１７．５％（ｗ／ｖ）、
少なくとも１種の長鎖脂肪酸モノエステル（例えばエチルオレエート）３〜７．５％（ｗ／ｖ）、
エタノール１０〜２０％（ｖ／ｖ）、
１８β−グリチルレチン酸０．１〜１０％（ｗ／ｖ）、及び
（Ｚ）−ググルステロン０．１〜１０％（ｗ／ｖ）
を含み、水（好ましくは二次蒸留水）で１００％となされたベシクルに関する。
【００４９】
好ましい実施形態によれば、本発明は、食品添加物群からの脂質性乳化剤、長鎖脂肪酸モノエステル及び植物油をベースとし、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクルに関する。あるいはまた、ベシクルは、１８β−グリチルレチン酸又は（Ｚ）−ググルステロンのみを含み得る。しかしながら、この場合、その後、最終的な製剤には、１８β−グリチルレチン酸を含むベシクルと、（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクルとの両方が、好ましくは２：１〜１：２（特に１：１）の比の混合物の形態で添加される。
【００５０】
さらに、特に好ましくは、本発明は、
グリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
ググルステロン又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
無水エタノール５〜２５％（ｗ／ｗ）、
エチルオレエート１〜３０％（ｗ／ｗ）、
植物油（例えば、ヒマワリ油、大豆油、菜種油）０〜３０％（ｗ／ｗ）、
ジグリセリルモノオレエート０．５〜５％（ｗ／ｗ）、
Ｉｍｗｉｔｏｒ３７５（グリセリルシトレート／ラクテート／リノレート／オレエート）０〜５％（ｗ／ｗ）、
１００％とするための精製水
を含み、少なくともグリチルレチン酸若しくはその塩若しくはエステル又はググルステロン若しくはその塩若しくはエステルを含む、ベシクルに関する。
【００５１】
さらに好ましい実施形態によれば、本発明は、食品添加物群からの脂質性乳化剤及び長鎖脂肪酸モノエステルをベースとし、活性成分の組み合わせである１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクルに関する。あるいはまた、ベシクルは、１８β−グリチルレチン酸又は（Ｚ）−ググルステロンのみを含み得る。しかしながら、この場合、その後、最終的な製剤には、１８β−グリチルレチン酸を含むベシクルと、（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクルとの両方が、好ましくは２：１〜１：２（特に１：１）の比の混合物の形態で添加される。
【００５２】
さらに、特に好ましくは、本発明は、
グリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
ググルステロン又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
無水エタノール５〜２５％（ｗ／ｗ）、
エチルオレエート１〜１０％（ｗ／ｗ）、
Ｉｍｗｉｔｏｒ３７５（グリセリルシトレート／ラクテート／リノレート／オレエート）５〜２５％（ｗ／ｗ）、
１００％とするための精製水
を含み、少なくともグリチルレチン酸若しくはその塩若しくはエステル又はググルステロン若しくはその塩若しくはエステルを含む、ベシクルに関する。
【００５３】
さらに好ましい実施形態によれば、本発明は、合成セチルパルミテート、植物油（例えば、ホホバ油、ヒマワリ種子油、大豆油、菜種油）、表面活性マトリックス安定剤としての植物多糖類コポリマー若しくはその誘導体（例えば、イヌリン又はＩｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１、微結晶セルロース又はＡｖｉｃｅｌ ＰＨ１０５等）、及びステアリン酸系乳化剤（例えば、ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳ、ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳＣ−３、ＴＥＧＯ（登録商標）Ｃａｒｅ４５０等）をベースとし、活性成分の組み合わせである１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクルに関する。あるいはまた、ベシクルは、１８β−グリチルレチン酸又は（Ｚ）−ググルステロンのみを含み得る。しかしながら、この場合、その後、最終的な製剤には、１８β−グリチルレチン酸を含むベシクルと、（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクルとの両方が、好ましくは２：１〜１：２（特に１：１）の比の混合物の形態で添加される。
【００５４】
さらに、特に好ましくは、本発明は、
グリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
ググルステロン又はその塩若しくはエステル０〜５％（ｗ／ｗ）、
ホホバ油１０〜１５％（ｗ／ｗ）、
セチルパルミテート１５〜２５％（ｗ／ｗ）、
Ｉｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１の０．２〜１．０％（ｗ／ｗ）、
ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳの１〜３％（ｗ／ｗ）、
１００％とするための精製水
を含み、少なくともグリチルレチン酸若しくはその塩若しくはエステル又はググルステロン若しくはその塩若しくはエステルを含む、ベシクルに関する。
【００５５】
本発明のベシクルは、クリーム、ローション又はゲルとして好ましくは製剤化される。
【００５６】
さらに好ましくは、本発明のクリーム、ローション又はゲルは、少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステルと少なくとも１種のググルステロンがそれぞれ、クリーム、ローション又はゲルの総重量を基準として０．０１〜１０％（ｗ／ｗ）、好ましくは０．１〜５％（ｗ／ｗ）の量である、活性成分の組み合わせを含むことを特徴とする。
【００５７】
さらに、本発明は、セルライトの処置及び／又は予防のためのクリーム、ローション又はゲルの製造における、本発明のベシクルの使用に関する。
【００５８】
さらに、本発明は、老化した皮膚の見た目の処置及び／又は予防のためのクリーム、ローション又はゲルの製造における、本発明のベシクルの使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【００５９】
【図１】図１は、ググルステロン、グリチルレチン酸あるいはググルステロン及びグリチルレチン酸を用いた場合の脂肪細胞数の数の削減を示す図である。
【図２】図２は、ググルステロン、グリチルレチン酸あるいはググルステロン及びグリチルレチン酸を用いた場合の脂肪細胞におけるアポトーシスの誘発を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００６０】
クリーム、ローション又はゲルにおける、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを含む本発明のベシクルの使用は、驚くべきことに、より深い皮下の皮膚層までの、活性成分の組み合わせの効果的なベシクル輸送を可能し、それによって、驚くべきことに、皮下脂肪沈着の成熟しつつある脂肪細胞及び成熟脂肪細胞に対する直接的で定量可能な作用が達成される。さらに、驚くべきことに、本発明によって、（成熟脂肪細胞における脂肪生成の抑制及びアポトーシスの誘発の結果として）皮膚及び皮下の脂肪組織中の脂肪細胞の数を持続的に削減することが可能であることが見出され、そのような削減は、皮膚の見た目及び弾力性の改善をもたらし、したがってセルライトの処置及び／又は予防（「オレンジピール」の引き締め）にとって特に興味深い。加えて、本発明によるそのようなクリーム、ローション又はゲルの使用は、水分バランスを改善し、皮膚の荒れを低減する。
【００６１】
本発明のベシクルは、好ましくは、脂質性輸送ベシクルである。
【００６２】
本発明の範囲内において、用語「ベシクル」は、水性媒体中における脂質（特に両親媒性脂質）及び／又は乳化剤の、特に球形又は丸形ないし楕円形の配列を意味する。本発明のベシクルは、その膜状シェル又はルーメン中に、親油性、親水性及び／又は両親媒性の化合物を特に受け入れることができる。膜状シェルは、脂質二重層又は脂質単層からなることができ、水性ルーメン若しくは植物油からなるルーメン又はそれら両方を取り囲むことができる。
【００６３】
本発明の範囲内において、食品添加物群からの乳化物は特に、１種又は複数種のポリヒドロキシ化合物（例えば、グリセロール、ペントース、ヘキソース又は多糖類）と、各場合において、１種又は複数種の不飽和脂肪酸（例えば、オレイン酸、リノール酸又はアルファ−リノレン酸）及び任意選択の１種又は複数種の短鎖（Ｃ２−６）有機酸（特に、炭素原子数が２〜６であり、任意選択で１個又は複数個のＯＨ基又はアセチル基で置換されていてもよい、モノ、ジ又はトリ酸；例えば、酢酸、乳酸、クエン酸、酒石酸又はジアセチル酒石酸等）とのエステル又はエステル混合物である。その例は、モノ若しくはジグリセリド、若しくは糖脂肪酸エステル、又はこれら二者の対応する混合物、例えば糖グリセリドである。糖グリセリドの例は、ショ糖グリセリドのほか、上述のエステルとの混合物である。特に好ましいものとして、ジアシルグリセリドを含むエステル及びエステル混合物が挙げられる。
【００６４】
食品添加物群からの好ましい乳化剤は、食品添加物Ｅ４７１からＥ４７７（Ｅ４７１、Ｅ４７２ａ、Ｅ４７２ｂ、Ｅ４７２ｃ、Ｅ４７２ｄ、Ｅ４７２ｅ、Ｅ４７２ｆ、Ｅ４７３、Ｅ４７４、Ｅ４７５、Ｅ４７６及びＥ４７７）であり、これらは、例えば、２０１１年１１月１１日付けのＥＵ規則Ｎｏ．１１３０／２０１１、又はListe des aid infodienstes e.V.（２０１４年３月の通り）に開示されている通りである。
【００６５】
本発明によれば、長鎖脂肪酸は、好ましくは、二重結合を０〜６つ有する炭素原子数１２〜２４の分岐していない脂肪酸である。長鎖脂肪酸モノエステルは、好ましくは、長鎖脂肪酸と、モノ又はポリヒドロキシ化合物（例えばエタノール、グリセロール、ペントース、ヘキソース又は多糖等）とのエステルである。
【００６６】
長鎖脂肪酸モノエステルの例は、ショ糖オレエート、トレハロースイソステアレート、グリセリルモノオレエート、ジグリセリルオレエート、オレイン酸ポリグリセリル−２、オレイン酸ポリグリセリル−４、プロピレングリコールオレエート、エチルオレエート、又はリノール酸、アルファ−リノレン酸、エイコサペンタエン酸若しくはステアリン酸の対応するエステルである。特に好ましいものは、不飽和長鎖脂肪酸、例えばオレイン酸、リノール酸、アルファ−リノレン酸又はエイコサペンタエン酸の、エチル及びポリグリセリルエステルである。長鎖脂肪酸モノエステルは、好ましくは膜安定作用を有する。
【００６７】
本発明の範囲内において、用語「レシチン」は、特に、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴコリン及び糖脂質等のホスホグリセリドの、天然植物源から得られた混合物を意味し、ここで、ホスホグリセリドのパーセント組成並びにエステル化された脂肪酸の性質及びパーセント組成のいずれも、植物源によって変動し得る。
【００６８】
本発明の範囲内において、ホスファチジルコリンは、具体的には、グリセロール、脂肪酸、リン酸及びコリンからなるホスホグリセリドのみを意味し、これは、天然の植物源、好ましくは、大豆若しくはヒマワリの油若しくはレシチンから得ることができ、又は合成により調製することもできる。植物源からのホスファチジルコリンは、一般的に、種々の脂肪酸がエステル化されており且つ植物源によって変動するエステル化された脂肪酸の性質及びパーセント組成を伴う、ホスファチジルコリンの混合物であるのに対し、合成ホスファチジルコリンは、２種の脂肪酸、好ましくは２種の不飽和脂肪酸（オレイン酸、リノール酸又はアルファ−リノレン酸等）の決まった組み合わせを含有することができる。
【００６９】
本発明によれば、合成セチルパルミテートは、天然の飽和及びモノ又はジ又はトリ不飽和Ｃ１２〜Ｃ２４脂肪酸と、飽和Ｃ１２〜Ｃ２４脂肪酸アルコールとのエステルの混合物を意味し、平均分子量がおよそ５００ｇ／ｍｏｌで、例えば、その名の由来である飽和パルミチン酸（Ｃ１６）と飽和セチルアルコール（Ｃ１６）とのエステルを含む。
【００７０】
本発明によれば、表面活性マトリックス安定剤としての植物多糖類コポリマーは、多糖類誘導体、例えばフルクタン誘導体又は微結晶セルロース誘導体である。フルクタン誘導体の例は、イヌリン（１００個までのフルクトース分子及び末端グルコース分子のフルクトースポリマーの混合物）、及びイヌリン誘導体、例えばＩｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１等である。微結晶セルロース、即ち部分的に解重合されたα−セルロースの例は、Ａｖｉｃｅｌ ＰＨセルロースである。
【００７１】
本発明によれば、ステアリン酸系乳化剤は、ステアリン酸とポリグリセロール（好ましくはポリグリセリル−３）及び／又はメチルグルコースとのモノ又はジエステルである。このようなステアリン酸系乳化剤の例は、メチルグルコースセスキステアレート（ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳ）、ジクエン酸ステアリン酸ポリグリセリル−３（ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳＣ−３）、及びジステアリン酸ポリグリセリル−３メチルグルコース（ＴＥＧＯ（登録商標）Ｃａｒｅ４５０）である。
【００７２】
ググル（類義語：ロバン（Loban）、デリウム樹脂（Bedolachharz）、ベデリウム（Bedellium）、デリウム（Bdellium）、ガムググル、インドミルラ（indische Myrrhe））は、バルサムの木であるコミフォラ・ムクル（Commiphora mukul）の樹脂である。
【００７３】
ググルリピッドの主要構成成分はググルステロンであり、ググルステロンには（Ｅ）配置と（Ｚ）配置がある。これまで、これら２つの形態の間において顕著な生物学的活性の違いは観察することができていない。
【００７４】
【化１】
2018514506.tif 000002
【００７５】
リコリス（スペインカンゾウ）は、マメ科植物の亜科（マメ亜科（Faboideae））の植物である。カンゾウは、グリチルリチン、グリチルリチン酸のカリウム及びカルシウム塩の混合物を含有する。グリチルリチン酸のジグルクロニドを切断することによって、グリチルリチンから、グリチルレチン酸（ＧＡ）（１８β−グリチルレチン酸と、少量割合の１８α−グリチルレチン酸との混合物）が形成される。
【００７６】
【化２】
2018514506.tif 000003
【００７７】
グリチルレチン酸の好ましい塩は、例えばナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム若しくはマグネシウム塩等のアルカリ若しくはアルカリ土類塩、アンモニウム塩、又は例えばメチルアミン、ジメチルアミン、トリエチルアミン、ピペリジン、エチレンジアミン、リジン、水酸化コリン、メグルミン、モルホリン若しくはアルギニン等の有機塩基の塩である。
【００７８】
グリチルレチン酸の好ましいエステルは、炭素原子数１〜１８の飽和で直鎖又は分岐鎖のアルコールのエステルである。特に好ましいエステルは、メチルエステル、グリセリルエステル及びステアリルエステルである。
【００７９】
本発明のベシクルは、好ましくは界面活性剤を含み、界面活性剤は、ベシクルの特性を改変するために特に用いることができ、例えば、コレステロール、コール酸ナトリウム又はデオキシコール酸ナトリウム等である。
【００８０】
本発明の好ましい実施形態によれば、例えばクリーム、ローション又はゲルの形態である本発明の組成物は、賦形剤を含むことができ、賦形剤としては、例えば、カラギーナン、１，２−ヘキサンジオール、ブチレングリコールジカプリレート、ブチルメトキシジべンゾイルメタン、シアバター、アクリレート／Ｃ１０〜Ｃ３０アルキルアクリレートクロスポリマー、Ｃ１２〜Ｃ１５アルキルベンゾエート、カプリル酸トリグリセリド、カプリロイルグリセロール／セバシン酸、ＴＥＧＯ（登録商標）Ｃａｒｂｏｍｅｒ１４０、ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳ、Ｃａｒｂｏｐｏｌ９８１、カルボキシメチルセルロース、セテアリルアルコール、セチルパルミテート、セチルアルコール、セチルステアリルアルコール、クエン酸、デシルオレエート、ジブチルアジペート、ジエチルアミノヒドロキシベンゾイルヘキシルベンゾエート、ジヘプチルオレエート、ジメチコン、ＥＤＴＡナトリウム及びＥＤＴＡ二ナトリウム、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）、エチルヘキシルグリセロール、エチルヘキシルラウレート、エチルヘキシルサリチレート、エチルヘキシルステアレート、エチルオクタノエート、グリセロール、グリセリルモノステアレート、グリセリルステアレートシトレート、尿素、水素化ココグリセリド、Ｉｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１、イソプロピルパルミテート、イソオクチルラウレート、ホホバ油、ソルビン酸カリウム、ＫｅｌｔｒｏｌＣＧ−ＳＦＴ、リモネン、リナノール、マクロゴール２０グリセリルモノステアレート、硫酸マグネシウム七水和物、マンニトール、メチルヒドロキシベンゾエート、メチルパラベン、メチルプロパンジオール、Ｍｉｇｌｙｏｌ ８１２、塩化ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、オクチルデカノール、パンテノール、粘性パラフィン、香料、ペンチレングリコール（Ｈｙｄｒｏｌｉｔｅ）、Ｐｉｏｎｉｅｒ １０３３、ポリオキシエチレンラウレートエステル（ＰＥＧ−６ Ｌ）、フェノキシエタノール、フェニルベンズイミダゾールスルホン酸、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ、プロピレングリコール、プロピルヒドロキシベンゾエート、ポリアクリル酸、ポリビニルピロリドン、ステアリルグルタミン酸ナトリウム、ＳＬＭ２０２６、ステアリルアルコール、スクワラン、ステアリン酸スクロース、トリグリセロールジイソステアレート、エチレンジアミン三ナトリウム、ミツロウ、カルボマーナトリウム、エタノール、水性乳化軟膏（Unguentum emulsificans aquosum）、ワセリンアルバム（Vasilinum album）（白色ワセリン）、ビタミンＥアセテート、水（二次蒸留水）、キサンタンガム、又は当業者に公知の他の適した賦形剤が挙げられる。
【００８１】
本発明のベシクルは、公知の方法によって、クリーム、ローション又はゲルに加工することができる。
【００８２】
本発明によれば、高い流動性及び形状の柔軟性を有する、比較的小さい単一ラメラのベシクルが特に好ましい。これらのベシクルは、粒径２０〜２００ｎｍ（特に５０〜１００ｎｍ）、多分散指数０．２５未満（両者は、例えばＺｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（マルベルンインスツルメンツ社（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）、独国）を用いて、動的光散乱（ＤＬＳ）を測定することによって検出される）、及び両天然物質の高い内包率を有することが特に好ましい。なぜならば、そのようなベシクルは、驚くべきことに、非常に有利なヒトの皮膚への浸透能力を発揮しつつ、同時に、皮膚への無視できる毒性及び刺激を有し、驚くべきことに、クリーム、ローション又はゲルとしての製剤中での高い粒子安定性もまた有するからである。
【００８３】
本発明によれば、上記した粒径、安定性、皮膚浸透、及び副作用プロファイル（例えば、皮膚刺激、全身副作用のリスク）についての要求は、特に、大豆若しくはヒマワリレシチン又は大豆若しくはヒマワリホスファチジルコリン（特に、ホスファチジルコリンを少なくとも８０重量％と大量の不飽和脂肪酸）を含有するフレキシブルなベシクル、又は食品添加物群からの脂質性乳化剤、オレエート等の長鎖脂肪酸モノエステル、及び任意選択の植物油をベースとする、フレキシブルなベシクルによって満たされる。
【００８４】
本発明のさらなる態様は、少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンを含むフェイスマスク（例えばアンチエイジングフェイスマスク）に関する。本発明のフェイスマスクは、少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンを有する本発明のベシクルを好ましくは含む。
【００８５】
本発明のフェイスマスクは、少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンがそれぞれ、フェイスマスクの総重量を基準として０．０１〜５％（ｗ／ｗ）、好ましくは０．１〜２．５％（ｗ／ｗ）の量である、有効成分の組み合わせを含むことを好ましくは特徴とする。
【００８６】
さらに、本発明は、老化した又はストレスを受けた皮膚の処置及び／又は予防のためのフェイスマスクの製造における、本発明のベシクルの使用に関する。
【００８７】
本発明によって処置することができる皮下脂肪又は結合組織におけるさらに好ましい変化は、例えば、脂肪性浮腫、脂肪腫、腹壁の脂肪腫症、変形性皮膚組織層炎（Dermato panniculosis deformans）、偽性女性化乳房、ＨＩＶ患者における野牛肩、及び非特異的な皮下脂肪沈着である。さらに、疾患によって引き起こされるのではない脂肪パッド、例えば顔及び首領域における脂肪パッド（例えば、目の下のたるみ（Tranensacke）、ほうれい線、たるんだ頬、二重あご等）を、本発明によって退縮させる又は削減することができる。さらに、本発明は、本発明のベシクル、又は少なくとも１種のグリチルレチン酸（若しくはその塩若しくはエステル）と少なくとも１種のググルステロンとの組み合わせの、脂肪吸引法に続く後処置のための使用に関する。
【００８８】
本発明のさらなる態様は、少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンを含むプラスター又はパッチに関する。本発明のプラスター又はパッチは、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを有する本発明のベシクルを好ましくは含む。
【００８９】
あるいはまた、本発明のプラスター又はパッチは、グリチルレチン酸（若しくはその塩若しくはエステル）又はググルステロンのみをそれぞれ含む本発明のベシクルを含むことができる。しかしながら、この場合、その後、プラスター又はパッチには、グリチルレチン酸（又はその塩若しくはエステル）を含むベシクルと、ググルステロンを含むベシクルとの両方を、好ましくは２：１〜１：２（特に１：１）の比の混合物の形態で添加する。
【００９０】
このようなプラスター又はパッチは、例えば、（ｉ）トップ層又はカバー層、（ii）任意選択の除去可能な保護層、及び（iii）トップ層と任意選択の除去可能な保護層との間にそれぞれ配置される、１つ又は複数の活性成分含有層又はリザーバーを含むことができる。
【００９１】
表現「活性成分含有層又はリザーバー」は、少なくとも１種のグリチルレチン酸若しくはその塩若しくはエステル及び／又は少なくとも１種のググルステロンを含む層又はリザーバーを意味する。活性成分含有層又はリザーバーは、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び少なくとも１種のググルステロンを有する本発明のベシクル、又はグリチルレチン酸（若しくはその塩若しくはエステル）若しくはググルステロンのみをそれぞれ含む本発明のベシクルの混合物を好ましくは含む。活性成分含有層又はリザーバーは、本発明のクリーム、ゲル又はローションである製剤を好ましくは含む。
【００９２】
プラスター又はパッチは、皮膚側に、接着剤層、又はカバー層によって担持された接着剤層をさらに有することができる。本発明のプラスター又はパッチにおいて、接着剤層は、自己接着ポリマーマトリックス層であり得る。
【００９３】
本発明の特定の実施形態において、接着剤層は、開口を有しており、又は少なくとも１つの領域において非接着形態にある。接着剤層は、好ましくは、活性成分含有層上に広がっていない。
【００９４】
本発明のプラスター又はパッチは、グリチルレチン酸及びググルステロンのそれぞれを、０．１から１０００ｍｇ、特に１から５００ｍｇ、好ましくは１から２５０ｍｇ含むことができる。
【００９５】
１つ若しくは複数の活性成分含有層又は１つ若しくは複数のリザーバーを有する本発明のプラスター又はパッチは、例えば、マトリックス系又はリザーバー系であり得る。
【００９６】
本発明のプラスター又はパッチにおいて、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び／又は少なくとも１種のググルステロンは、１つ若しくは複数の活性成分含有層又は１つ若しくは複数の活性成分含有リザーバー中に、好ましくは本発明のクリーム、ゲル又はローションとしての製剤の形態で、存在することができる。
【００９７】
接着剤層は、皮膚用に認可された任意の皮膚適合性接着剤からなることができ又は斯かる接着剤を含むことができる。例えば、水中でゲルを形成するポリマー、ポリイソブチレン、パップ剤、ポリアクリル酸、又はポリアクリレートをベースとするそのような接着剤系は、当業者に公知である。接着剤層は、プラスターが汗の影響で滑るのを防止するため、好ましくは耐水性である。
【００９８】
本発明のプラスター又はパッチにおける接着剤層は、天然ゴム、合成ゴム、ポリアクリレート、ポリビニルアセテート、ポリイソブチレン、シリコーン、特にポリジメチルシロキサン、並びにヒドロゲル、特に高分子量ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール及びポリエチレンオキシドオリゴマー、又はそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１種の構成成分をさらに含むことができ、又は斯かる構成成分からなることができる。
【００９９】
本発明のプラスター又はパッチにおける接着剤層は、特に、ポリアクリレートを含むことができ又はポリアクリレートからなることができる。
【０１００】
本発明のプラスター又はパッチにおいて、ポリアクリレートは、ｎ−ブチルアクリレート、イソブチルアクリレート、プロピルアクリレート、メチルアクリレート、２−エチルヘキシルアクリレート、２−ヒドロキシエチルアクリレート及び２−ヒドロキシエチルメタクリレートからなる群から選択される１種又は複数種のモノマーに由来する１種又は複数種のモノマー単位を含み得る。
【０１０１】
本発明のプラスター又はパッチにおける合成ゴムは、スチレン−ブタジエン−スチレンブロックコポリマー又はスチレン−ブタジエンブロックコポリマーであり得る。
【０１０２】
本発明のプラスター又はパッチにおける活性成分含有層及び／又は接着剤層は、架橋剤をさらに含むことができる。
【０１０３】
さらに、本発明のプラスター又はパッチにおける活性成分含有層は、皮膚の水分によって溶解し始め得る又は溶解し得る材料のマトリックスであり得る。
【０１０４】
本発明のプラスター又はパッチは、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び／又は少なくとも１種のググルステロンをヒドロゲル中にさらに含むことができる。さらに、本発明のプラスター又はパッチは、少なくとも１種のグリチルレチン酸及び／又は少なくとも１種のググルステロンを、本発明のクリーム、ゲル又はローションとしての製剤の形態で含むことができる。
【０１０５】
本発明のプラスター又はパッチは、ヒドロゲルとしてのヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カーボポール又はポリビニルアルコールを特徴とし得る。
【０１０６】
本発明のプラスター又はパッチは、増粘剤又は膨潤剤、好ましくはヒドロキシプロピルセルロース、特にＫｌｕｃｅｌをさらに含むことができる。
【０１０７】
本発明のプラスター又はパッチは、１種又は複数種の浸透促進剤をさらに含むことができる。したがって、本発明のプラスター又はパッチは、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、オクチルフェノール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、特にＰＥＧ４００、ペンチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールオクチルフェニルエーテル、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ホホバ油、大豆油、アロエベラ抽出物、ドデカノール、尿素、Ｌａｂｒａｆｉｌ、Ｌａｂｒａｓｏｌ、脂肪酸エステル、特にイソプロピルミリステート、モノラウレート、好ましくはメチルラウレート、プロピレングリコールモノラウレート、グリセロールモノラウレート及びポリエチレングリコールモノラウレート、オクチルドデシルラクテート、グリセロールモノオレエート及びグリコールモノオレエート、Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ、トコフェロール、酢酸トコフェロール、パンテノール、Ｎ−デシルメチルスルホキシド、トリアセチン並びにＮ−メチルピロリドンからなる群からの少なくとも１種の浸透促進剤を含むことができる。
【０１０８】
本発明のプラスター又はパッチは、特に、アルコール、４級アミン、有機酸、パラベン及びフェノール類からなる群からの、１種又は複数種の防腐剤をさらに含むことができる。
【０１０９】
本発明のプラスター又はパッチは、１種又は複数種の過飽和安定剤、例えばポリビニルピロリドンをさらに含むことができる。
【０１１０】
本発明のプラスター又はパッチは、ポリオレフィン、ポリエステル、ポリ塩化ビニリデン、ポリウレタン、コットン、ビスコース又はウールからなる群からの材料からなる又は斯かる材料を含むカバーフィルムをさらに特徴とし得る。カバーフィルムは、ポリエステルからなること又はポリエステルを含むことが好ましい。
【０１１１】
さらに、トップ層は、例えば、コート紙、ポリシリコーン、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン及び酢酸ビニルのコポリマー、ポリエステル、ポリウレタン、ポリアミド、ポリアクリレート並びにポリイソブチレンからなることができ、又はこれらを含むことができる。トップ層は、無孔若しくは有孔フィルム、織布、又は無孔若しくは有孔不織布の形態で使用し得る。
【０１１２】
本発明のプラスター又はパッチは、厚さ０．０１〜１．５ｍｍ、特に０．０３〜１．０ｍｍのカバーフィルムを特徴とし得る。
【０１１３】
本発明のプラスターは、１〜５０ｃｍ２のサイズを有することができ、長方形、正方形、円形、楕円形又は台形であり得る。プラスターは、辺長がおよそ１〜５ｃｍの正方形、又は辺長が１〜１０ｃｍの長方形であることが好ましい。
【０１１４】
さらに、本発明のプラスター又はパッチは、２〜１００ｃｍ２、好ましくは５〜５０ｃｍ２、特に１０〜４０ｃｍ２、例えばおよそ２０ｃｍ２の表面積を有することができる。
【０１１５】
最後に、本発明のプラスター又はパッチは、オーバーテープを備えることができる。
【０１１６】
トップ層、接着剤層及び／又はマトリックス層は、アロマオイル又は香料を含むことができる。さらに、これらの層は、装用時の快適性を改善するため、空気及び湿気透過性で有り得る。
【０１１７】
好ましい実施形態によれば、少なくとも１つの活性成分含有層は、本発明のベシクル又はベシクル混合物を含む。
【０１１８】
さらに好ましい実施形態によれば、本発明は、少なくとも１種のグリチルレチン酸又はその塩若しくはエステル及び少なくとも１種のググルステロンを含むミセルに関する。あるいはまた、本発明のミセルは、グリチルレチン酸（若しくはその塩若しくはエステル）又はググルステロンのみを含むこともできる。しかしながら、この場合、その後、最終の製剤には、グリチルレチン酸（又はその塩若しくはエステル）を含むミセルとググルステロンを含むミセルの両方が、好ましくは２：１〜１：２（特に１：１）の比の混合物の形態で添加される。このようなミセルの例は、親水性セグメント及び疎水性セグメントを有するブロックコポリマーのポリマーミセルである。
【０１１９】
本発明において記載される「親水性セグメント及び疎水性セグメントを有するブロックコポリマー」は、水性媒体中に、好ましくはコア（主に疎水性セグメントを含む）−シェル（主に親水性セグメントを含む）タイプのポリマーミセルの形態で、存在し得るコポリマーを好ましくは意味する。そのようなブロックコポリマーを形成する「親水性セグメント」としては、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（サッカライド）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビニルアルコール）及びポリ（ビニルピロリドン）セグメントが挙げられる。「疎水性セグメント」としては、ポリアミノ酸のセグメントが挙げられる。「疎水性セグメント」としては、特に、ポリ−（β−ベンジルアスパルテート）、ポリ−（γ−ベンジルグルタミネート）、ポリ−（β−アルキルアスパルテート）、ポリ（ラクチド）、ポリ−（ε−カプロラクトン）、ポリ−（δ−バレロラクトン）、ポリ−（γ−ブチロラクトン）及びポリ（α−アミノ酸）セグメント並びにそれらの２種以上が挙げられる。
【０１２０】
本発明によれば、本発明のミセルは、本発明のベシクルのように又は本発明のベシクルとともに、クリーム、ローション、ゲル若しくはフェイスマスクとして製剤化することができ、又は本発明のプラスター又はパッチ中に使用することができる。
【実施例】
【０１２１】
細胞培養
３Ｔ３−Ｌ１マウス線維芽細胞を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）及び２ｍＭのＬ−グルタミンを含有するダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で、３７℃、湿度９５％、ＣＯ２５％にて培養した。
【０１２２】
脂肪細胞の分化及び成熟を、記載の通りにして誘導した（Yang J.Y. et al., Obesity 2008, 16, 16-22; Shugart E.C. and Umek R.M., Cell Growth & Differentiation 1997, 8, 1091-1098）。細胞は、一般的に常用されているデキサメタゾンによってのみならず、より生理学的なコルチゾールによっても刺激した。
【０１２３】
細胞を９６ウェルプレートに播種し、コンフルエンスまで培養した。細胞がコンフルエンスに達した２日後（Ｄ０＝０日目）、細胞分化を、１０％ＦＣＳ、１６７ｎＭインスリン、０．５μＭのＩＢＭＸ、及び１μＭデキサメタゾン又は２００ｎＭコルチゾールを含有するＤＭＥＭを加えることによって、２日間かけて誘導した（Ｄ２）。次いで細胞を、１０％ＦＣＳ及び１６７ｎＭインスリンを含有するＤＭＥＭ中でさらに２日間培養し（Ｄ４）、その後、ＤＭＥＭ／１０％ＦＣＳ中でさらに４日間培養した（Ｄ８）。最終的に２０〜３０％超の細胞が、蓄積した貯蔵脂質を伴う成熟脂肪細胞だった。
【０１２４】
細胞の脂質含有量の測定
脂肪生成の度合いの指標として、細胞の脂質含有量（細胞内脂肪滴）を、親油性着色試薬ナイルレッドによって、記載の通りにして検出した（Yang J.Y. et al., Obesity 2008, 16, 16-22; Greenspan P., The Journal of Cell Biology 1985, 100, 965-973）。３Ｔ３−Ｌ１細胞（５０００〜１００００細胞／ウェル）を、コンフルエンスに達した後、９６ウェルプレートでさらに２日間培養した（Ｄ０）。次いで細胞を、ググルステロン及び／又はグリチルレチン酸のそれぞれ又は組み合わせで、脂肪生成期間のＤ０〜Ｄ２、Ｄ２〜Ｄ４、Ｄ４〜Ｄ６及びＤ０〜Ｄ６にわたって処理した（濃度範囲：１〜２００μＭ）。試験物質あり又はなしの培地を、２日毎に変更又は交換した。以下の通り処理した細胞をコントロールとした：（１）純粋な細胞培養培地（未分化コントロール）、（２）純粋な分化培地（未処理コントロール）、（３）試験バッチにおける最高ＤＭＳＯ濃度に対応する、分化培地中のＤＭＳＯ（ＤＭＳＯコントロール）。
【０１２５】
６日目（Ｄ６）に、細胞内脂質蓄積（脂肪滴）を、ナイルレッドアッセイによって定量した。そのために、細胞培地を捨て、細胞を１００μｌ／ウェルのＰＢＳ（ｐＨ７．４）で洗浄した。次いで細胞を、５０μｌ／ウェルのＰＢＳ中ナイルレッド（１０μｇ／ｍｌ）とともに、室温にて２０分間インキュベートした。脂質含有量をＳｙｎｅｒｇｙ２プレートリーダー（バイオテック社（ＢｉｏＴｅｋ）、ウィヌースキー、米国）を用いて蛍光定量的に測定した（励起：４８５ｎｍ、発光：５６０ｎｍ、ミラー：５５０ｎｍ）。ナイルレッドは、中性脂質、例えば、細胞内滴中のトリアシルグリセリドを選択的に染色する。
【０１２６】
蛍光顕微鏡による分析のため、細胞をＬａｂ−Ｔｅｋ（商標）チャンバースライド（ヌンク社（Ｎｕｎｃ）、ランゲンゼルボルト、独国）上に、上記した通りに処理し、ググルステロン及び／又はグリチルレチン酸（５０又は１００μＭ；単独で又は等モルの組み合わせで）とともに、脂肪生成期間のＤ２〜Ｄ４にわたってインキュベートした。次いで、インキュベーション培地を捨て、細胞をＰＢＳで洗浄し、５０μｌ／ウェルのＰＢＳ中のナイルレッド（１０μｇ／ｍｌ）及びＤＡＰＩ（１μｇ／ｍｌ）を用い、室温にて２０分間かけて染色した。染色溶液を除去した後、細胞をＰＢＳで洗浄し、ＰＢＳ中４％のパラホルムアルデヒドを用いて室温にて３０分かけて固定した。最後に、細胞をＰＢＳで３回洗浄し、Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｍｏｕｎｔｉｎｇ Ｍｅｄｉｕｍ（ダコ社（Ｄａｋｏ）、カーピンテリア、米国）によって対象スライド上に載せた。ＤＡＰＩ及びＧＦＰフィルターセッティングを用いたＡｐｏＴｏｍｅ付きＺｅｉｓｓ Ａｘｉｏ Ｏｂｓｅｒｖｅｒ．Ｚ１（カールツァイスミクロイメージング社（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ ＭｉｃｒｏＩｍａｇｉｎｇ）、イエナ、独国）を用いて、蛍光顕微鏡写真を撮影した。
【０１２７】
細胞生存率アッセイ
試験化合物で処理した後の成熟脂肪細胞の細胞生存率を、蛍光定量的なレサズリンベースアッセイによって測定した。生体的に、即ち代謝的に活性な細胞は、レサズリンを蛍光性誘導体レゾルフィンに変換することができる（Strotmann U.J. et al., Ecotox. Environ. Safety 1993, 25, 79-89）。
【０１２８】
３Ｔ３−Ｌ１細胞を９６ウェルプレートに播種し（５０００〜１００００細胞／ウェル）、上記したようにして成熟するまで培養した（Ｄ８）。Ｄ８に成熟脂肪細胞を標準的な培養条件下で、ググルステロン及び／又はグリチルレチン酸（１〜２５０μＭ）とともに２４時間インキュベートした。以下の通り処理した細胞をコントロールとした：（１）純粋な細胞培養培地（未分化コントロール）、（２）純粋な分化培地（未処理コントロール）、（３）試験バッチにおける最高ＤＭＳＯ濃度に対応する、分化培地中のＤＭＳＯ（ＤＭＳＯコントロール）、（４）ＤＭＥＭ中に１５０μｇ／ｍｌのジギトニン（細胞死コントロール）。２４時間後、インキュベーション培地を捨て、細胞を１００μｌ／ウェルのＤＭＥＭで洗浄し、次いで、５０μｌ／ウェルのレサズリン溶液（ＤＭＥＭ中に６０μＭ）とともに、標準的な培養条件下で２時間インキュベートした。最後に、レゾルフィン蛍光をＳｙｎｅｒｇｙ２プレートリーダー（バイオテック社、ウィヌースキー、米国）によって検出した（励起：５４０ｎｍ、発光：５９０ｎｍ、ミラー：５５０ｎｍ）。
【０１２９】
アポトーシスアッセイ
（Ｚ）−ググルステロン及び／又はグリチルレチン酸による処理の結果としての成熟脂肪細胞におけるアポトーシスの誘発の可能性を評価するため、Ｃａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ（登録商標）３／７アッセイキット（プロメガ社（Ｐｒｏｍｅｇａ）、マンハイム、独国）を用いた。
【０１３０】
３Ｔ３−Ｌ１細胞を９６ウェルプレートに播種し（５０００〜１００００細胞／ウェル）、上記したようにして成熟するまで培養した（Ｄ８）。Ｄ８に成熟脂肪細胞を標準的な培養条件下で、ググルステロン及び／又はグリチルレチン酸（１〜２５０μＭ）とともに２４時間インキュベートした。以下の通り処理した細胞をコントロールとした：（１）純粋な細胞培養培地（未分化コントロール）、（２）純粋な分化培地（未処理コントロール）、（３）試験バッチにおける最高ＤＭＳＯ濃度に対応する、分化培地中のＤＭＳＯ（ＤＭＳＯコントロール）。２４時間後、インキュベーション培地を捨て、細胞を１００μｌ／ウェルのＤＭＥＭで洗浄し、次いで、ＤＭＥＭ中のＣａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ（登録商標）３／７試薬（１：１、ｖ／ｖ）を１５０μｌ／ウェルで添加した。室温にて２時間インキュベートした後、試薬の蛍光シグナルをＳｙｎｅｒｇｙ２プレートリーダー（バイオテック社、ウィヌースキー、米国）によって検出した。
【０１３１】
脂肪分解アッセイ
ググルステロン及び／又はグリチルレチン酸による処理の結果としての成熟脂肪細胞の脂肪分解をグリセロール放出アッセイによって検出した。この目的のため、細胞の脂肪分解の結果として細胞培地中に放出されたグリセロールを、遊離グリセロール染色試薬（ケイマンケミカル社（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、アナーバー、米国）を用いて定量した。
【０１３２】
３Ｔ３−Ｌ１細胞を９６ウェルプレートに播種し（５０００〜１００００細胞／ウェル）、上記したようにして成熟するまで培養した（Ｄ８）。Ｄ８に成熟脂肪細胞を標準的な培養条件下で、ググルステロン及び／又はグリチルレチン酸（１〜２５０μＭ）とともに２４時間インキュベートした。以下の通り処理した細胞をコントロールとした：（１）純粋な細胞培養培地（未分化コントロール）、（２）純粋な分化培地（未処理コントロール）、（３）試験バッチにおける最高ＤＭＳＯ濃度に対応する、分化培地中のＤＭＳＯ（ＤＭＳＯコントロール）。
【０１３３】
インキュベーションに続いて、各サンプルの細胞培地２５μｌを新しい９６ウェルプレートの対応するウェルに移し、遊離グリセロール染色試薬９０μｌとともに室温にて１５分間インキュベートした。試薬に代えて蒸留水９０μｌを伴うサンプル２５μｌを、測定リファレンスとした。最後に、放出されたグリセロールの含有量を、Ｓｙｎｅｒｇｙ２プレートリーダー（バイオテック社、ウィヌースキー、米国）によって、５４０ｎｍにおける吸収に基づいて求めた。
【０１３４】
前脂肪細胞における脂質含有量
脂質含有量、即ち細胞内の脂肪滴中のトリアシルグリセリドの蓄積は、脂肪生成の度合いの指標である。３Ｔ３−Ｌ１マウス繊維芽細胞のデキサメタゾン又はコルチゾール刺激による脂肪生成に対する（Ｚ）−ググルステロン及び１８β−グリチルレチン酸それぞれの効果を研究するため、ナイルレッドアッセイを用いた。染色試薬ナイルレッドは、４８５ｎｍにおける励起及び５６０ｎｍにおける蛍光検出の際に中性脂質に対して非常に選択的であるので、脂肪生成の進行中のトリアシルグリセリドの細胞内蓄積を明確に測定することが可能であった。
【０１３５】
６日間の脂肪細胞の分化期間内における処理期間は、観察されることになる（Ｚ）−ググルステロン又は１８β−グリチルレチン酸の細胞脂質蓄積に対する効果にとって非常に重要であった。（Ｚ）−ググルステロン及び１８β−グリチルレチン酸の両化合物は、６日間の分化期間全体にわたって適用されたときに、細胞の脂質蓄積を最も高い程度まで抑制した。顕微鏡分析は、（Ｚ）−ググルステロン及び１８β−グリチルレチン酸の３Ｔ３前脂肪細胞の脂質含有量に対する効果（３Ｔ３前脂肪細胞を１００μＭ（Ｚ）−ググルステロン及び１００μＭ１８β−グリチルレチン酸それぞれで脂肪生成のＤ０〜Ｄ６の期間にわたって処理した（１μＭデキサメタゾンで刺激））を非常に明確に実証した。刺激したが未処理の細胞をレファレンスとし、これは高度の脂質貯蔵を示した。対照的に、（Ｚ）−ググルステロン及び１８β−グリチルレチン酸それぞれで細胞を処理した後には、顕著に少ない脂肪滴が検出されることとなった。
【０１３６】
大部分において、この効果は、Ｄ０〜Ｄ２の期間、即ち脂肪細胞分化の初期において誘発された。対応する処理３Ｔ３前脂肪細胞（Ｄ０〜Ｄ２の期間に、０〜１００μＭ（Ｚ）−ググルステロン及び１８β−グリチルレチン酸それぞれで処理）の脂質含有量の減少を、下記表にまとめる。
【０１３７】
【表１】
2018514506.tif 000004
【０１３８】
脂肪生成の６日目（Ｄ６）に、細胞内脂肪滴の蓄積をナイルレッドアッセイによって蛍光定量的に測定した（励起：４８５ｎｍ、発光：５６０ｎｍ、５５０ｎｍミラー）。データを正規化し、脂質蓄積をパーセントで示した。無刺激細胞を０％レファレンスとして用い、刺激したが未処理の細胞を１００％レファレンスとして用いた。
【０１３９】
６日間の脂肪細胞分化の全体（Ｄ０〜Ｄ６）にわたっての細胞の処理の際、細胞の脂質蓄積の阻害について得られたＩＣ５０値は、（Ｚ）−ググルステロンについては約５μＭ、１８β−グリチルレチン酸については約２０μＭであった。このように、（Ｚ）−ググルステロン及び１８β−グリチルレチン酸の両化合物は、脂肪生成の間、３Ｔ３−Ｌ１細胞中でのトリアシルグリセリドの蓄積を阻害するが、この点について、ググルステロンはグリチルレチン酸よりも僅かに高い効能がある。加えて、１８β−グリチルレチン酸の活性範囲（５０μＭ以上）において、等モル量で（Ｚ）−ググルステロンとともに用いると、相乗作用が検出された。
【０１４０】
同様に、分化中期（Ｄ２〜Ｄ４）における細胞の処理は、良好な脂質蓄積阻害をもたらした。脂肪細胞の分化の刺激のために、従来のデキサメタゾンに代えて、より生理学的なコルチゾールも比較のために用いたが、結果に関して実質的な違いは観察されなかった。
【０１４１】
成熟脂肪細胞の細胞生存率／数
（Ｚ）−ググルステロン及び／又は１８β−グリチルレチン酸による処理の、成熟３Ｔ３脂肪細胞の生存率及び数に対する起こり得る効果を調査するため、蛍光定量的なレサズリンベースの細胞生存率アッセイを行った。この目的のため、成熟３Ｔ３脂肪細胞を、１μＭデキサメタゾンで刺激し、次いで、増大する濃度の（Ｚ）−ググルステロン若しくは１８β−グリチルレチン酸又は両化合物の等モル混合物を用いて、標準的な培養条件下で２４時間処理した。最後に、細胞の数及び適合状態の指標として、細胞生存率をレサズリンアッセイによって測定した。
【０１４２】
図１に示すように、２５０μＭまでの（Ｚ）−ググルステロンでの２４時間の処理は、細胞生存率を損なわなかった。一方、２５０μＭ１８β−グリチルレチン酸は、同じ処理時間で、成熟脂肪細胞の細胞生存率、即ち数を２８％減少させた。（Ｚ）−ググルステロン及び１８β−グリチルレチン酸の両化合物の等モル混合物での細胞の処理は、顕著な相乗効果という結果となった。２つの化合物それぞれ２５０μＭでの組み合わせは、細胞生存率を５６％減少させた。（Ｚ）−ググルステロンは、それ自身では効果がないが、１８β−グリチルレチン酸による成熟脂肪細胞に対する細胞分裂抑制効果を増強できると考えられる。
【０１４３】
成熟脂肪細胞におけるアポトーシスの誘発
観察された細胞生存率の減少について考えられる理由は、試験化合物の抗増殖効果（即ち、細胞周期の阻止の誘発）、細胞の代謝活性の減少、又は生きた脂肪細胞の数の減少とそれに続くアポトーシスの誘発である。
【０１４４】
１８β−グリチルレチン酸の単独又は（Ｚ）−ググルステロンとの等モルでの組み合わせの、細胞生存率減少における効果が、アポトーシスの誘発に基づくものであるかどうかを試験するため、対応して処理した脂肪細胞について、エフェクターカスパーゼ３／７の活性化を調査した（アポトーシスが進んだ場合）。デキサメタゾンによるか又はコルチゾールによるかの脂肪細胞の刺激の種類にかかわらず、（Ｚ）−ググルステロンは、カスパーゼ３／７の誘発を示さなかった。これとは対照的に、２５０μＭ１８β−グリチルレチン酸で２４時間の細胞の処理は、未処理細胞と比較して、２．５〜３．０倍のカスパーゼ３／７活性増加をもたらした。（Ｚ）−ググルステロンと１８β−グリチルレチン酸の両化合物の等モルでの組み合わせは、生存率アッセイの結果と一致して、カスパーゼ活性化について２つの化合物の相乗効果を示した。２つの化合物それぞれ２５０μＭでの組み合わせは、未処理の細胞と比較して３．５〜４．０倍のカスパーゼ３／７活性増加をもたらした（図２）。
【０１４５】
要するに、１８β−グリチルレチン酸は、とりわけカスパーゼ３／７が活性化された結果としてアポトーシス性の細胞死プログラムを誘発することによって、成熟脂肪細胞の生存能力を阻害する。（Ｚ）−ググルステロンは、それ自体はこの点において不活性であるが、１８β−グリチルレチン酸の効果を増強することができる。
【０１４６】
成熟脂肪細胞における細胞分解
（Ｚ）−ググルステロン及び／又は１８β−グリチルレチン酸による処理の結果としての、成熟脂肪細胞における細胞内トリアシルグリセリドリザーバーの分解、即ち脂肪分解の可能性を研究するため、グリセロール放出アッセイを行った。トリアシルグリセリドの酵素分解はグリセロールの生成につながり、グリセロールは、膜透過性であり、そのため周囲の培養培地中へ放出される。培地中の遊離グリセロールは、特定の染色試薬によって、分光測定により定量することができる。２つの化合物（Ｚ）−ググルステロン及び１８β−グリチルレチン酸の等モルでの組み合わせ（それぞれの場合について２５０μＭ）による２４時間の処理後、細胞内トリグリセリドの分解は、未処理のコントロールと比較して約６６％増加した。
【０１４７】
以下の実施例は、本発明の例示的な実施形態を例証することを意図したものである。
【０１４８】
実施例１：有効成分の組み合わせである１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含む、フレキシブルな大豆ホスファチジルコリン含有リポソーム
フレキシブルな大豆ホスファチジルコリン含有リポソームを調製するため、大豆ホスファチジルコリン（Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ９０Ｇ；リポイド社（Ｌｉｐｏｉｄ）、ルードヴィヒスハーフェン）、及び例えばコレステロール又はコール酸ナトリウム等の界面活性剤、並びに１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを、１０／０．５〜３／０．１〜０．５／０．１〜０．５（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）の重量比で混合した。好ましい製剤は、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ（登録商標）９０Ｇ（大豆ホスファチジルコリン９５％以上）、コール酸ナトリウム、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを１０／１／０．３／０．３（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）の比で含む。脂質及び界面活性剤を、クロロホルム／ＭｅＯＨ（１：２、ｖ／ｖ）に溶解し、ロータリーエバポレーターで減圧下、４０℃にて一晩、乾燥するまで濃縮した。結果として得られた脂質フィルムを、対応する量のグリチルレチン酸及びググルステロンを含有するＰＢＳ（ｐＨ７．４）で再水和して（１時間／３０℃／２００ｒｐｍ）、１０％脂質懸濁液を得た。この懸濁液を２０分間超音波処理し（オン／オフ間隔：１０秒）、ＰＣフィルター膜（孔サイズ１００ｎｍ）を通して押し出した。ベシクルのサイズを、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（マルベルンインスツルメンツゲーエムベーハー社（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ＧｍｂＨ）、ヘレンベルク、独国：室温にて５分間）を用いて動的光散乱法によって分析したところ、５０〜１００ｎｍの範囲であった。
【０１４９】
実施例２：食品添加物群からの脂質性乳化剤、長鎖脂肪酸モノエステル及び植物油をベースとし、有効成分の組み合わせである１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクル
グリチルレチン酸及びググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを調製するため、ヒマワリ種子油（ヘリアンサス・アンヌス）１５〜２０％（ｖ／ｖ）；Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５（グリセリルシトレート／ラクテート／リノレート／オレエート；クレメールオレオゲーエムベーハー、ハンブルク）２．５〜１０％（ｗ／ｖ）；オレイン酸ポリグリセリル−２の２．５〜５％（ｗ／ｖ）；エタノール１０〜２０％（ｖ／ｖ）を、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンそれぞれ０．１〜１０％（ｗ／ｖ）と混合し、二次蒸留水で１００％にした。好ましい製剤は、ヒマワリ種子油２０％（ｖ／ｖ）；Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５の５％（ｗ／ｖ）；オレイン酸ポリグリセリル−２の２．５％（ｗ／ｖ）；エタノール１５％（ｖ／ｖ）、１８β−グリチルレチン酸５％（ｗ／ｖ）、及び（Ｚ）−ググルステロン５％（ｗ／ｖ）を、二次蒸留水中に含む。ヒマワリ種子油、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５、オレイン酸ポリグリセリル−２、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを、室温にてエタノールに振とう（５００ｒｐｍ）により溶解した。次いで、条件を一定にしたまま１００％（ｖ／ｖ）まで二次蒸留水をゆっくり均等に加え（２００μｌ／分）、全体を十分に混合した。最後に、この分散液を５分間ボルテックスミキサーにて混合し、５分間超音波処理し（オン／オフ間隔：１０秒）、ＰＣフィルター膜（孔サイズ１００ｎｍ）を通して押し出した。ベシクルのサイズを、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（マルベルンインスツルメンツゲーエムベーハー社、ヘレンベルク、独国：室温にて５分間）を用いて動的光散乱法によって分析したところ、８０〜１００ｎｍの範囲であった。
【０１５０】
実施例３：食品添加物群からの脂質性乳化剤及び長鎖脂肪酸モノエステルをベースとし、有効成分の組み合わせである１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクル
グリチルレチン酸及びググルステロンを含有する乳化剤ベシクルを調製するため、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５（グリセリルシトレート／ラクテート／リノレート／オレエート；クレメールオレオゲーエムベーハー社、ハンブルク）７〜１７．５％（ｗ／ｖ）；エチルオレエート３〜７．５％（ｗ／ｖ）；エタノール１０〜２０％（ｖ／ｖ）を、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンそれぞれ０．１〜１０％（ｗ／ｖ）と混合し、二次蒸留水で１００％にした。好ましい製剤は、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５の１０．５％（ｗ／ｖ）；Ｃｒｏｄａｍｏｌ（商標）エチルオレエート（クローダゲーエムベーハー社（Ｃｒｏｄａ ＧｍｂＨ）、ネッテタールカルデンキルヒェン）４．５％（ｗ／ｖ）；エタノール１５％（ｖ／ｖ）；１８β−グリチルレチン酸５％（ｗ／ｖ）及び（Ｚ）−ググルステロン５％（ｗ／ｖ）を、二次蒸留水中に含む。Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５、エチルオレエート、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを、室温にてエタノールに振とう（５００ｒｐｍ）により溶解した。次いで、条件を一定にしたまま１００％（ｖ／ｖ）まで二次蒸留水をゆっくり均等に加え（２００μｌ／分）、全体を十分に混合した。最後に、この分散液を５分間２００バールにて均質化した。ベシクルのサイズを、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（マルベルンインスツルメンツゲーエムベーハー社、ヘレンベルク、独国：室温にて５分間）を用いて動的光散乱法によって分析したところ、１００〜１５０ｎｍの範囲であった。
【０１５１】
実施例４：クリームとしての製剤
本発明のクリームは、実施例１の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソームを好ましくは含み、このベシクルは、グリセロールモノステアレート６０  ４ｇ、セチルアルコール６ｇ、Ｍｉｇｌｙｃｏｌ８１２の７．５ｇ、白色ワセリン（ワセリンアルバム）２５．５ｇ、マクロゴール２０グリセリルモノステアレート７ｇ、プロピレングリコール１０ｇ、及び１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むベースクリームＤＡＣ中に、１０％（ｖ／ｗ）の量で配合される。これによって、実施例１の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソームが、最新のクリーム構成成分としてのベースクリーム中に、４０℃にて均質的に配合された。
【０１５２】
実施例５：クリームとしての製剤
本発明のクリームは、実施例２の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを好ましくは含み、このベシクルは、イソオクチルラウレート１０ｇ、セチルステアリルアルコール２１ｇ、グリセロール（８５％ｖ／ｖ）５ｇ、プロピルヒドロキシベンゾエート０．０５ｇ、メチルヒドロキシベンゾエート０．１５ｇ、リモネン０．３ｇ、リナノール０．３ｇ、エタノール（９０％ｖ／ｖ）１．８ｍｇ、及び１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むクリーム中に、１０％（ｖ／ｗ）の量で配合される。これによって、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルが、最新のクリーム構成成分としてのクリーム中に、４０℃にて均質的に配合された。
【０１５３】
実施例６：クリームとしての製剤
本発明のクリームは、実施例３の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する乳化剤ベシクルを好ましくは含み、このベシクルは、ＰＥＧ−８Ｌ（ポリオキシエチレンラウレートエステル）１５ｇ、エチルオクタノエート５ｇ、Ｃ１２〜Ｃ１５アルキルベンゾエート４．５ｇ、グリセロール３ｇ、ジメチコン０．５ｇ、ＥＤＴＡ二ナトリウム０．１ｇ、及び１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むクリーム中に、１０％（ｖ／ｗ）の量で配合される。これによって、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する乳化剤ベシクルが、最新のクリーム構成成分としてのクリーム中に、４０℃にて均質的に配合された。
【０１５４】
実施例７：クリームとしての製剤
実施例２の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを、１，２−ヘキサンジオール０．５ｇ、ブチルメトキシジベンゾイルメタン４．０ｇ、ブチロスペルマム・パルキー（Butyrospermum parkii）バター（シアバター）６．０ｇ、Ｃ１２〜Ｃ１５アルキルベンゾエート２．０ｇ、Ｔｅｇｏ Ｃａｒｂｏｍｅｒ １４０の０．３ｇ、セチルパルミテート１．０ｇ、セチルアルコール１．０ｇ、セチルステアリルアルコール１．０ｇ、ジブチルアジペート３．０ｇ、エチルヘキシルサリチレート４．５ｇ、グリセロール１０．０ｇ、グリセリルモノステアレート２．５ｇ、水素化ココグリセリド１．０ｇ、メチルプロパンジオール２．０ｇ、ヒアルロン酸ナトリウム０．１５ｇ、香料、フェノキシエタノール０．６ｇ、フェニルベンズイミダゾールスルホン酸２．０ｇ、ステアリルグルタミン酸ナトリウム０．２ｇ、塩化ナトリウム０．２ｇ、ミツロウ１．０ｇ、ＥＤＴＡナトリウム／水酸化ナトリウム２．５ｇ、１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むクリーム中に、１０％（ｖ／ｗ）の量で配合した。これによって、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルが、最新のクリーム構成成分としてのクリーム中に、４０℃にて均質的に配合された。
【０１５５】
実施例８：クリームとしての製剤
実施例１の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソームを、ＳＬＭ２０２６（リポイドアーゲー社（Ｌｉｐｏｉｄ ＡＧ）、シュタインハウゼン、スイス）２５ｇ、カプリル酸トリグリセリド１８ｇ、シモンドシア・チネンシス（Simmondsia chinensis）油（ホホバ油）６ｇ、ペンチレングリコール３．７５ｇ、グリセロール３ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、パンテノール０．５ｇ、Ｔｅｇｏ Ｃａｒｂｏｍｅｒ １４０の０．２ｇ、水酸化ナトリウム（２０％ｖ／ｖ）０．１５ｇ、Ｋｅｌｔｒｏｌ ＣＧ−ＳＦＴ０．１ｇ、及び１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むラメラベースクリーム中に、１０％（ｗ／ｖ）の量で配合した。これによって、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソームが、最新のクリーム構成成分としてのラメラベースクリーム中に、４０℃にて均質的に配合された。
【０１５６】
実施例９：クリームとしての製剤
実施例１の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソームを、ＳＬＭ ２０２６（リポイドアーゲー社、シュタインハウゼン、スイス）３０ｇ、Ｍｉｇｌｙｏｌ ８１２の１５ｇ、ペンチレングリコール１０ｇ、シモンドシア・チネンシス油（ホホバ油）５ｇ、ブチロスペルマム・パルキーバター（シアバター）２．０ｇ、スクワラン１ｇ、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ９０Ｈ１ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、パンテノール０．５ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）（シムリーゼ社（Ｓｙｍｒｉｓｅ）、ホルツミンデン、独国；様々な花の抽出物の混合物）１ｇ、１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むラメラベースクリーム中に、１０％（ｗ／ｖ）の量で配合した。先ず、脂肪相と水相を別々に、６０℃で撹拌しながら混合した。脂肪相を２００００ｒｐｍで３分間均質化し、次いで、撹拌しながら脂肪相に水相を加え、混合物を２００００ｒｐｍで５分間均質化した。冷却した後、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソーム並びにＦｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）を、クリーム中に４０℃にて均質的に配合し、ｐＨを５．０〜６．０に調整した。
【０１５７】
実施例１０：クリームとしての製剤
１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇの量で、ＳＬＭ２０２６（リポイドアーゲー社、シュタインハウゼン、スイス）３０ｇ、Ｍｉｇｌｙｏｌ ８１２の１５ｇ、ペンチレングリコール１０ｇ、シモンドシア・チネンシス油（ホホバ油）５ｇ、ブチロスペルマム・パルキーバター（シアバター）２．０ｇ、スクワラン１ｇ、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ９０Ｈ１ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、パンテノール０．５ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）（シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国；様々な花の抽出物の混合物）１ｇ、１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むラメラベースクリーム中に配合した。先ず、ＳＬＭ２０２６ベースクリーム、脂肪相及び水相を別々に、６０℃で撹拌しながら混合又は加熱した。１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを、温めた脂肪相に加え、この混合物を徹底的に均質化し、次いで、撹拌しながら脂肪相を６０℃のＳＬＭ２０２６ベースクリームに加え、この混合物を徹底的に均質化した。次いで、温めた水相を撹拌しながら６０℃で加え、この混合物を２００００ｒｐｍで５分間均質化した。冷却した後、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）を、クリーム中に４０℃にて均質的に配合し、ｐＨを５．０〜６．０に調整した。
【０１５８】
実施例１１：クリームとしての製剤
実施例１の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソームを、エチルヘキシルステアレート１０ｇ、シモンドシア・チネンシス油（ホホバ油）５ｇ、グリセリルステアレートシトレート４ｇ、ペンチレングリコール３ｇ、デシルオレエート２ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）（シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国；様々な花の抽出物の混合物）１ｇ、パンテノール０．５ｇ、セテアリルアルコール０．５ｇ、ジヘプチルサクシネート０．５ｇ、カルボマー０．５ｇ、１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むクリーム中に、１０％（ｗ／ｖ）の量で配合した。先ず、脂肪相と水相を別々に、６０℃で撹拌しながら混合した。脂肪相を１５０００ｒｐｍで３分間均質化し、次いで、撹拌しながら脂肪相に水相を加え、この混合物を２００００ｒｐｍで５分間均質化した。冷却した後、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソーム及びＦｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）を、クリーム中に４０℃にて均質的に配合し、ｐＨを５．０〜６．０に調整した。
【０１５９】
実施例１２：クリームとしての製剤
１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇの量で、エチルヘキシルステアレート８ｇ、シモンドシア・チネンシス油（ホホバ油）４ｇ、グリセリルステアレートシトレート４ｇ、デシルオレエート４ｇ、グリセロール３ｇ、ペンチレングリコール３ｇ、スクロースステアレート１ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）（シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国；様々な花の抽出物の混合物）１ｇ、パンテノール０．５ｇ、セテアリルアルコール０．５ｇ、ジヘプチルサクシネート０．４ｇ、カルボマー０．４ｇ、アクリレート／Ｃ１０−Ｃ３０アルキルアクリレートクロスポリマー０．１ｇ、カプリロイルグリセロール／セバシン酸０．１ｇ、エチレンジアミン三ナトリウム０．０２ｇ、１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むラメラベースクリーム中に配合した。先ず、脂肪相と水相を別々に、６０℃で撹拌しながら混合した。脂肪相を１５０００ｒｐｍで３分間均質化し、次いで、撹拌しながら脂肪相に水相を加え、この混合物を２００００ｒｐｍで５分間均質化した。冷却した後、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）を、クリーム中に４０℃にて均質的に配合し、ｐＨを５．０〜６．０に調整した。最後に、均質化を１５０００ｒｐｍで３分間再び行った。
【０１６０】
実施例１３：ローション
本発明のローションは、実施例２の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクル２０％（ｗ／ｖ）のほか、グリセロール５ｇ、水性乳化軟膏１５ｇ、プロピルヒドロキシベンゾエート０．３ｇ、メチルヒドロキシベンゾエート０．７ｇ、エタノール（９０％ｖ／ｖ）０．９ｇ、１００ｇになるまでの二次蒸留水を、好ましくは含む。これによって、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを、最新の構成成分としてのローション中に４０℃にて均質に配合した。
【０１６１】
実施例１４：ゲル
実施例２の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクル７５％（ｗ／ｖ）に、プロピレングリコール２％、カルボマーナトリウム（ＰＮＣ４００）０．５％、及び１００％になるまでの蒸留水を加えた。これによって、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを、最新の構成成分としてのゲル中に４０℃にて均質に配合した。
【０１６２】
実施例１５：ゲル
実施例１の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソーム１５ｇを、マンニトール５ｇ、エデト酸ナトリウム０．１ｇ、プロピレングリコール１ｇ、Ｃａｒｂｏｐｏｌ９３４の１ｇ及び水９５ｇを含むゲルベース７５ｇと混合した。これによって、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソームを、最新の構成成分としてのゲル中に４０℃にて均質に配合した。
【０１６３】
実施例１６：ゲル
実施例１の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソーム１８．５ｇを、Ｌｉｐｏｉｄ ＰＧ １４：１，１４：１の１．７５ｇ、エタノール３．７５ｇ及び蒸留水７６ｇとともに加工して、ゲルを形成した。これによって、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するフレキシブルな大豆ホスファチジルコリンリポソームを、ゲル中に４０℃にて均質に配合した。
【０１６４】
実施例１７：ゲル
１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンそれぞれを、２．５ｇの量で、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ９０Ｇの１３．５ｇ、Ｌｉｐｏｉｄ ＰＧ １４：１，１４：１の１．５ｇ、エタノール３．７５ｇ及び蒸留水７６．２５ｇからなるリン脂質ゲル中に配合した。そのために、Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ９０Ｇを、加熱及び撹拌（６０℃／１００ｒｐｍ）しながらエタノールに溶解した。１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを、Ｌｉｐｏｉｄ ＰＧ １４：１，１４：１とともに６０℃で溶融し、均質に混合した。次いで、溶解したＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ９０Ｇを加え、すでに存在している成分とともに６０℃にてペーストにした。４５℃まで冷却する間に蒸留水を段階的に加え、ゆっくりと撹拌を行ってゲルを形成した。次いで、ゲルを４５℃にて放置して膨潤させ、さらに４５℃にて５分間ゆっくりと撹拌して、均質なゲルを得た。
【０１６５】
実施例１８：食品添加物群からの脂質性乳化剤、長鎖脂肪酸モノエステル及び植物油をベースとし、有効成分の組み合わせである１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクル
好ましい製剤は、大豆油８．５％（ｗ／ｗ）、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５の３．５％（ｗ／ｗ）、エチルオレエート１０％（ｗ／ｗ）、エタノール１０％（ｗ／ｗ）、ジグリセリルモノオレエート１．５％（ｗ／ｗ）、１８β−グリチルレチン酸０．７５％（ｗ／ｗ）及び（Ｚ）−ググルステロン０．７５％（ｗ／ｗ）を二次蒸留水（１００％にするための量）中に含むベシクルを含む。
また、１８β−グリチルレチン酸又は（Ｚ）−ググルステロンのいずれかを１．５％（ｗ／ｗ）含むベシクルも好ましい。
（ａ）二次蒸留水（１００％にするための量）中に、１８β−グリチルレチン酸１．５％（ｗ／ｗ）、ヒマワリ種子油１３．５％（ｗ／ｗ）、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５の３．５％（ｗ／ｗ）、エチルオレエート５％（ｗ／ｗ）、エタノール１０％（ｗ／ｗ）、ジグリセリルモノオレエート１．５％（ｗ／ｗ）
（ｂ）二次蒸留水（１００％にするための量）中に、（Ｚ）−ググルステロン１．５％（ｗ／ｗ）、ヒマワリ種子油８．５％（ｗ／ｗ）、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５の３．５％（ｗ／ｗ）、エチルオレエート１０％（ｗ／ｗ）、エタノール１０％（ｗ／ｗ）、ジグリセリルモノオレエート１．５％（ｗ／ｗ）
タイプ（ａ）及び（ｂ）の両ベシクルは、最終の製剤に１：１の比で好ましくは添加される。
植物油（大豆又はヒマワリ油）、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５、エチルオレエート、ジグリセリルモノオレエート、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを、振とう（５００ｒｐｍ）しながら室温にてエタノールに溶解した。次いで、条件を一定にしたまま１００％（ｖ／ｖ）まで二次蒸留水をゆっくり均等に加え（２００μｌ／分）、全体を十分に混合した。最後に、この分散液を５分間ボルテックスミキサーにて混合し、５分間超音波処理し（オン／オフ間隔：１０秒）、ＰＣフィルター膜（孔サイズ２００ｎｍ）を通して押し出した。ベシクルのサイズを、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（マルベルンインスツルメンツゲーエムベーハー社、ヘレンベルク、独国：室温にて５分間）を用いて動的光散乱法によって分析したところ、８０〜１４０ｎｍの範囲であった。
【０１６６】
実施例１９：食品添加物群からの脂質性乳化剤及び長鎖脂肪酸モノエステルをベースとし、有効成分の組み合わせである１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクル
１８β−グリチルレチン酸又は（Ｚ）−ググルステロンのいずれかを１．５％（ｗ／ｗ）含むベシクルが好ましい。
（ａ）二次蒸留水（１００％にするための量）中に、１８β−グリチルレチン酸１．５％（ｗ／ｗ）、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５の１０．５％（ｗ／ｗ）、エチルオレエート４．５％（ｗ／ｗ）、エタノール１６％（ｗ／ｗ）
（ｂ）二次蒸留水（１００％にするための量）中に、（Ｚ）−ググルステロン１．５％（ｗ／ｗ）、Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５の１４％（ｗ／ｗ）、エチルオレエート６％（ｗ／ｗ）、エタノール１６％（ｗ／ｗ）
タイプ（ａ）及び（ｂ）の両ベシクルは、最終の製剤に１：１の比で好ましくは添加される。
Ｉｍｗｉｔｏｒ（登録商標）３７５、エチルオレエート、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを、振とう（５００ｒｐｍ）しながら室温にてエタノールに溶解した。次いで、条件を一定にしたまま１００％（ｖ／ｖ）まで二次蒸留水をゆっくり均等に加え（２００μｌ／分）、全体を十分に混合した。最後に、この分散液を５分間ボルテックスミキサーにて混合し、５分間超音波処理し（オン／オフ間隔：１０秒）、ＰＣフィルター膜（孔サイズ２００ｎｍ）を通して押し出した。ベシクルのサイズを、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（マルベルンインスツルメンツゲーエムベーハー社、ヘレンベルク、独国：室温にて５分間）を用いて動的光散乱法によって分析したところ、８０〜１６０ｎｍの範囲であった。
【０１６７】
実施例２０：合成セチルパルミテート、植物油、植物多糖類コポリマー及びステアリン酸系乳化剤をベースとし、有効成分の組み合わせである１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含むベシクル
好ましい製剤は、セチルパルミテート２０％（ｗ／ｗ）、ホホバ油１０％（ｗ／ｗ）、１８β−グリチルレチン酸５％（ｗ／ｗ）、（Ｚ）−ググルステロン５％（ｗ／ｗ）、ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳの１．５％（ｗ／ｗ）及びＩｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１の０．５％（ｗ／ｗ）を二次蒸留水（１００％にするための量）中に含むベシクルを含む。
１８β−グリチルレチン酸又は（Ｚ）−ググルステロンのいずれかを５％（ｗ／ｗ）含むベシクルも好ましい。
（ａ）二次蒸留水（１００％にするための量）中に、１８β−グリチルレチン酸５％（ｗ／ｗ）、セチルパルミテート２０％（ｗ／ｗ）、ホホバ油１０％（ｗ／ｗ）、ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳの１．５％（ｗ／ｗ）、及びＩｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１の０．５％（ｗ／ｗ）
（ｂ）二次蒸留水（１００％にするための量）中に、（Ｚ）−ググルステロン５％（ｗ／ｗ）、セチルパルミテート２０％（ｗ／ｗ）、ホホバ油１０％（ｗ／ｗ）、ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳの１．５％（ｗ／ｗ）、及びＩｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１の０．５％（ｗ／ｗ）
タイプ（ａ）及び（ｂ）の両ベシクルは、最終の製剤に１：１の比で好ましくは添加される。
１８β−グリチルレチン酸又は（Ｚ）−ググルステロンを、撹拌しながらホホバ油中に再懸濁させた。セチルパルミテートを６０℃にて溶融させ、ＴＥＧＯ（登録商標）ＣａｒｅＰＳ、並びにグリチルレチン酸及び／又はググルステロンを含有するホホバ油を、激しく撹拌しながら加えた。Ｉｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１を６０℃にて純水中に溶解した。６０℃にて脂質混合物をＩｎｕｔｅｃ（登録商標）ＳＰ１溶液に徐々に加えた。この分散液を高圧ホモゲナイザーによって６０℃にて均質化し、最後に室温まで冷却した。
【０１６８】
実施例２１：クリームフェイスマスクとしての製剤
１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇの量で、ＳＬＭ２０２６（リポイドアーゲー社、シュタインハウゼン、スイス）８６．５ｇ、シモンドシア・シネンシス油（ホホバ油）６ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、パンテノール０．５ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇを含むラメラベースクリーム中に配合した。これによって、成分をラメラベースクリーム中に段階的に、４０℃で均質に配合した。
【０１６９】
実施例２２：クリームフェイスマスクとしての製剤
実施例１２の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを、ＳＬＭ２０２６（リポイドアーゲー社、シュタインハウゼン、スイス）８１．５ｇ、シモンドシア・シネンシス油（ホホバ油）６ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、パンテノール０．５ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇを含むラメラベースクリーム中に、１０％（ｖ／ｗ）の量で配合した。これによって、実施例１６の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを、最新のクリーム構成成分としてのベースクリーム中に４０℃にて均質に配合した。
【０１７０】
実施例２３：クリームフェイスマスクとしての製剤
本発明のクリームフェイスマスクは、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇ好ましくは含み、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンは、グリセロールモノステアレート６０  ４ｇ、セチルアルコール６ｇ、Ｍｉｇｌｙｏｌ ８１２の７．５ｇ、白色ワセリン（ワセリンアルバム）２５．５ｇ、Ｍａｃｒｏｇｏｌ２０グリセリルモノステアレート７ｇ、プロピレングリコール１０ｇ、及び１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むベースクリームＤＡＣ中に配合する。クリームフェイスマスクは、ビタミンＥアセテート１ｇ、シモンドシア・チネンシス油（ホホバ油）５ｇ及びＦｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇをさらに含む。これによって、成分をベースクリーム中に段階的に、４０℃にて均質に配合した。
【０１７１】
実施例２４：クリームフェイスマスクとしての製剤
実施例１３の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する乳化剤ベシクルを、グリセロールモノステアレート６０  ４ｇ、セチルアルコール６ｇ、Ｍｉｇｌｙｏｌ ８１２の７．５ｇ、白色ワセリン（ワセリンアルバム）２５．５ｇ、Ｍａｃｒｏｇｏｌ２０グリセリルモノステアレート７ｇ、プロピレングリコール１０ｇ、及び１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むベースクリームＤＡＣ中に、１０％（ｖ／ｗ）の量で配合した。クリームフェイスマスクは、ビタミンＥアセテート１ｇ、エタノール５ｇ、及びＦｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇをさらに含む。これによって、実施例１７の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する乳化剤ベシクルを、最新のクリーム構成成分としてのベースクリーム中に４０℃にて均質に配合した。
【０１７２】
実施例２５：クリームフェイスマスクとしての製剤
実施例１４の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するベシクルを、グリセロールモノステアレート６０  ４ｇ、セチルアルコール６ｇ、Ｍｉｇｌｙｏｌ ８１２の７．５ｇ、白色ワセリン（ワセリンアルバム）２５．５ｇ、Ｍａｃｒｏｇｏｌ２０グリセリルモノステアレート７ｇ、プロピレングリコール１０ｇ及び１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むベースクリームＤＡＣ中に、１０％（ｖ／ｗ）の量で配合した。クリームフェイスマスクは、ビタミンＥアセテート１ｇ、パンテノール０．５ｇ、及びＦｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇをさらに含む。これによって、実施例１８の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有するベシクルを、最新のクリーム構成成分としてのクリーム中に４０℃にて均質に配合した。
【０１７３】
実施例２６：クリームフェイスマスクとしての製剤
実施例１２の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを、ＰＥＧ−８Ｌ（ポリオキシエチレンラウレートエステル）１５ｇ、エチルオクタノエート５ｇ、Ｃ１２〜Ｃ１５アルキルベンゾエート４．５ｇ、グリセロール（８５％）３ｇ、プロピレングリコール３ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、ジメチコン３５０の０．５ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇ、及び１００ｇになるまでの二次蒸留水を含むクリーム中に、１０％（ｖ／ｗ）の量で配合した。これによって、実施例１６の１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンを含有する油性乳化剤ベシクルを、最新の構成成分としての製剤中に４０℃にて均質に配合した。
【０１７４】
実施例２７：ゲルフェイスマスクとしての製剤
本発明のゲルフェイスマスクは、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇ、エタノール５ｇ、マンニトール５ｇ、エデト酸ナトリウム１ｇ、プロピレングリコール１ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、Ｃａｒｂｏｐｏｌ９８１の０．５ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇ並びに１００ｇになるまでの二次蒸留水を、好ましくは含む。これによって、成分を製剤中に段階的に、４０℃にて均質に配合した。
【０１７５】
実施例２８：ゲルフェイスマスクとしての製剤
本発明のゲルフェイスマスクは、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇ、２−プロパノール１０ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、Ｃａｒｂｏｐｏｌ９８１の０．５ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇ並びに１００ｇになるまでの二次蒸留水を、好ましくは含む。これによって、成分を製剤中に段階的に、４０℃にて均質に配合した。
【０１７６】
実施例２９：軟膏フェイスマスクとしての製剤
本発明のゲルフェイスマスクは、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇ、エタノール５ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、ｕｎｇｕｅｎｔｕｍ ｅｍｕｌｓｉｆｉｃａｎｓ ａｑｕｏｓｕｍ Ｎ ＳＲ（ノニオン性乳化アルコール２１ｇ、２−エチルヘキシルラウレート１０ｇ、グリセロール（８５％）５ｇ、ソルビン酸カリウム０．１４ｇ、クエン酸塩（無水）０．０７ｇ、１００ｇとなす水を含む）、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇ並びに１００ｇになるまでの二次蒸留水を、好ましくは含む。これによって、成分を製剤中に段階的に、４０℃にて均質に配合した。
【０１７７】
実施例３０：軟膏フェイスマスクとしての製剤
本発明のゲルフェイスマスクは、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇ、シモンドシア・チネンシス油（ホホバ油）５ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、Ｌｉｎｉｍｅｎｔｕｍ ａｑｕｏｓｕｍ Ｎ（乳化セチルステアリルアルコール（タイプＡ）１１．５ｇ、２−エチルヘキシルラウレート５ｇ、グリセロール（８５％）２．５ｇ、ソルビン酸カリウム０．０７ｇ、クエン酸塩（無水）０．０３５ｇ、１００ｇとなす水を含む）、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇ並びに１００ｇになるまでの二次蒸留水を、好ましくは含む。これによって、成分を製剤中に段階的に、４０℃にて均質に配合した。
【０１７８】
実施例３１：ローションフェイスマスクとしての製剤
本発明のローションフェイスマスクは、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロンをそれぞれ２．５ｇ、エタノール２ｇ、ビタミンＥアセテート１ｇ、パンテノール０．５ｇ、グリセロール（８５％）５ｇ、Ｐｉｏｎｉｅｒ１０３３の７ｇ、粘性パラフィン２０ｇ、尿素２ｇ、白色ワセリン２０ｇ、硫酸マグネシウム七水和物０．５ｇ、メチルヒドロキシベンゾエート０．３ｇ、プロピルヒドロキシベンゾエート０．７ｇ、Ｆｌｏｗｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒｏｌｅ（登録商標）ミックス（花抽出物；シムリーゼ社、ホルツミンデン、独国）１ｇ並びに１００ｇになるまでの二次蒸留水を、好ましくは含む。これによって、成分を製剤中に段階的に、４０℃にて均質に配合した。
【０１７９】
さらに、実施例２７〜３１のフェイスマスクを、実施例１６、１７及び１８のベシクルを用いて調製した。
【０１８０】
さらに、実施例４〜１７のクリーム、ローション及びゲルを、実施例１６、１７及び１８のベシクルを用いて調製することができる。
【０１８１】
実施例３２：フェイスマスクの組成のさらなる例
成分組成Ａ
精製水
ベントナイト
グリセロール
アラビアガム
キサンタンガム
ベンジルアルコール
エタノール
デヒドロ酢酸ナトリウム
シモンドシア・チネンシス油（ホホバ油）
クエン酸ナトリウム
デヒドロ酢酸
クエン酸
花抽出物（香料）
カルボマー
１，２−ヘキサンジオール
カプリリルグリコール
安息香酸ナトリウム
乳酸
ソルビン酸カリウム
アルギン
パンテノール
酢酸トコフェロール
【０１８２】
成分組成Ｂ
精製水
シモンドシア・チネンシス油（ホホバ油）
ブチロスペルマム・パルキー（シア）バター抽出物
グリセロール
グリセリルステアレート
セテアリルアルコール
セラアルバ（ミツロウ）
カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド
ベンジルアルコール
サリチル酸ナトリウム
花抽出物（香料）
レブリン酸
キサンタンガム
レブリン酸ナトリウム
水酸化ナトリウム
デヒドロ酢酸
安息香酸ナトリウム
ソルビン酸カリウム
クエン酸
パンテノール
酢酸トコフェロール
【０１８３】
成分組成Ｃ
精製水
カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド
ヘクトライト
セテアリルアルコール
ペンチレングリコール
イソプロピルイソステアレート
グリセロール
グリセリルステアレート
セテアレス−２０
パンテノール
トコフェロール
酢酸トコフェロール
ベンジルアルコール
アラントイン
セテアレス−１２
セチルパルミテート
花抽出物（香料）
クエン酸
安息香酸
ヒアルロン酸ナトリウム（０．０１〜０．５％）
ソルビン酸
ベンジルアルコール
【０１８４】
これらの組成Ａ、Ｂ又はＣには、１８β−グリチルレチン酸及び（Ｚ）−ググルステロン又は本発明のベシクルのいずれかが添加される。
【図１】
2018514506.tif 000005
【図２】
2018514506.tif 000006
【国際調査報告】
2018514506.tif 000007
2018514506.tif 000008
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