(57)【要約】本出願は、ＰＤ−１抗体およびＭ−ＣＳＦ抗体を含む医薬組成物に関する。組み合わせは、がんの治療に治療上有効な量で、独立して、または別々に投与することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｉ）表２で記載したＢＡＰ０４９−クローン−ＢまたはＢＡＰ０４９−クローン−ＥのＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）ならびに表２で記載したＢＡＰ０４９−クローン−ＢまたはＢＡＰ０４９−クローン−ＥのＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、ヒトプログラム細胞死−１（ＰＤ−１）に結合することができる単離された抗体分子、ならびに
ｉｉ）（ａ）配列番号３のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨ；ならびに配列番号６のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬを含む、マクロファージコロニー刺激因子１（Ｍ−ＣＳＦ）に結合することができる単離された抗体分子
を含む、医薬的組み合わせ。
【請求項２】
請求項１に記載のＰＤ−１抗体が、
（ａ）配列番号１３のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１４のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号１５のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨならびに配列番号１６のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号１８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｂ）配列番号２１から選択されたＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号２３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨならびに配列番号２６のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号２８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｃ）配列番号３１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨならびに配列番号４１のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４２のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号４３のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ、または
（ｄ）配列番号３４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号３６のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨならびに配列番号４４のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号４５のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列および配列番号４６のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬ
を含む、請求項１に記載の医薬的組み合わせ。
【請求項３】
ＰＤ−１抗体分子またはＭ−ＣＳＦ抗体分子を、別々にまたは一緒に含む、請求項１に記載の医薬的組み合わせ。
【請求項４】
ＰＤ−１抗体分子およびＭ−ＣＳＦ抗体分子を独立して同時にまたは時間間隔内で別々に投与する、医薬品として使用するための請求項１または２に記載の医薬的組み合わせ。
【請求項５】
時間間隔によって組み合わせ相手を活性化させることができる、請求項５に記載の医薬的組み合わせ。
【請求項６】
トリプルネガティブ乳がんの治療のために治療上有効な量を含む、請求項１から５のいずれかに記載の医薬的組み合わせ。
【請求項７】
卵巣がんの治療のために治療上有効な量を含む、請求項１から５のいずれかに記載の医薬的組み合わせ。
【請求項８】
メラノーマの治療のために治療上有効な量を含む、請求項１から５のいずれかに記載の医薬的組み合わせ。
【請求項９】
膵臓がんの治療のために治療上有効な量を含む、請求項１から５のいずれかに記載の医薬的組み合わせ。
【請求項１０】
ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性または難治性になったがんの治療のために治療上有効な量を含む、請求項１から５のいずれかに記載の医薬的組み合わせ。
【請求項１１】
前記がんがＴＮＢＣまたはメラノーマである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、メラノーマ、膵臓がんまたはＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性もしくは難治性になったがんの治療のための医薬品を製造するためのＭ−ＣＳＦ阻害剤と組み合わせたＰＤ−１の使用。
【請求項１３】
乳がんを治療する方法であって、請求項１から５のいずれかの組み合わせの有効量をそれを必要とする対象に投与することを含む、方法。
【請求項１４】
卵巣がんを治療する方法であって、請求項１から５のいずれかの組み合わせの有効量をそれを必要とする対象に投与することを含む、方法。
【請求項１５】
膵臓がんを治療する方法であって、請求項１から５のいずれかの組み合わせの有効量をそれを必要とする対象に投与することを含む、方法。
【請求項１６】
がんを治療する方法であって、請求項１から５のいずれかの組み合わせの有効量をそれを必要とする対象に投与することを含み、前記がんがＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性または難治性である、方法。
【請求項１７】
前記がんがＴＮＢＣである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記がんがメラノーマである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
ＰＤ−１抗体分子およびＭ−ＣＳＦ抗体を同時または順次投与する、請求項１６から１８に記載の方法。
【請求項２０】
化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項１６から１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、一つには、ＰＤ−１アンタゴニストおよびＭ−ＣＳＦアンタゴニストを含む医薬組成物に関する。本組み合わせ（併用（combination））は、がんを治療するために治療上有効な量で、独立して、または別々に投与する。本発明はさらに、薬剤（medicament）を製造するためのこのような組み合わせの使用、医薬品（medicine）としてのこのような組み合わせの使用、このような組み合わせを含む部分のキットおよび組み合わせが関与する治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
がんの固形腫瘍のより有効な治療法が必要とされている。がん療法において、近年、免疫チェックポイントを標的とする免疫療法が重要な手段となってきている。チェックポイント阻害剤としても知られる細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）およびプログラム細胞死−１（ＰＤ−１）を阻害する抗体は、一部のがん患者において有効であることが示されたことがある。患者および腫瘍の種類によって応答は大きく変動し、進行性メラノーマにおいて最も高い奏効率が認められた。チェックポイント阻害に対する非応答性および初期応答後の進行の両方が認められ、本来備わっている抵抗性および治療によって誘導された後天的な抵抗性があることが指摘された。ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１チェックポイント阻害剤に対しても疾患が進行するメラノーマ患者は、疾患の進行を安定化させるか、または逆行させることができるその他の治療選択肢を必要とする。
【０００３】
チェックポイントを阻害する抗体による治療によって利益を得ることができる１つのがんは乳がんで、乳がんは世界的に見て女性に最も一般的ながんであり、２００８年に新たに推定１３８万人が罹患しており、女性がん死亡者の最も一般的な原因であり、その死亡者数は４５８０００人である。トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）は、新たに診断された乳がんの約１５％を占めるが、その侵襲性のため、ＴＮＢＣの不釣り合いなほど多数（２５％）が転移型であると報告されている。ＴＮＢＣは、エストロゲン（ＥＲ）およびプロゲステロン（ＰＲ）受容体の発現が欠如しており、ヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）の過剰発現が欠如していることが特徴である。
【０００４】
ＴＮＢＣの臨床経過は、遠位、特に肺および脳への転移率が高いことに関係する。現在のところ、この乳がんサブタイプを標的とした療法はなく、唯一の治療選択肢は化学療法である。ＴＮＢＣは化学感受性が高い疾患であることを示唆する研究はいくつかあるが、予後は依然として悪く、初期療法後の無病期間は短く、転移型では侵襲性のより高い臨床経過をたどる。ほとんどの患者は、アジュバント療法としてアントラサイクリンおよびタキサンを投与されており、転移型ＴＮＢＣの患者にはこれ以上の標準治療法はない。しかし、新たに得られたデータによって、白金塩（すなわち、シスプラチンおよびカルボプラチン）が早期および進行型ＴＮＢＣにおいて活性が高いことが示唆され、したがって、臨床の場において広く使用されている。転移型ＴＮＢＣの生存期間中央値は約１年で、ＴＮＢＣは未だ満たされていない医療ニーズが高い疾患となっている。未だ満たされていない患者のニーズが高い他のがんにはまた、膵臓がん（特に、膵臓腺癌の患者）または子宮内膜癌の患者が含まれる。がんの治療に使用することができる新規組み合わせ療法を開発することが必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
発明の要旨
本発明は、一つには、がんの治療のために有利な効果をもたらすことができるマクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）アンタゴニストとプログラム細胞死１（ＰＤ−１）アンタゴニストとの組み合わせを対象とする。Ｍ−ＣＳＦアンタゴニストとＰＤ−１アンタゴニストとの組み合わせは、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、皮膚がん、卵巣がん、膵臓がん、神経膠芽腫（ＧＢＭ）、肺がん、腎細胞癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、中皮腫、子宮内膜がんおよび上咽頭癌（ＮＰＣ）を含むがんまたはＴＮＢＣもしくはメラノーマなどのＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性もしくは難治性になったがんの治療に使用する。
【０００６】
別の態様では、本発明は、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、皮膚がん、卵巣がん、膵臓がん、神経膠芽腫（ＧＢＭ）、肺がん、腎細胞癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、中皮腫および上咽頭癌（ＮＰＣ）を含むがんまたはＴＮＢＣもしくはメラノーマなどのその他の療法、特にＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性、再発性もしくは難治性になったがんの治療に使用するための前述の医薬的組み合わせを含む。本発明の組み合わせは、非小細胞肺がんおよび肺扁平上皮がんを含む肺がんを治療するために使用することができる。本明細書で記載した医薬的組み合わせは、治療上有効な量を含む。乳がんには、内分泌受容体（エストロゲンまたはプロゲステロン受容体）陽性、ＨＥＲ２陽性、トリプルネガティブ（エストロゲン、プロゲステロンまたはＨＥＲ２の受容体は陽性ではない）またはトリプルポジティブ（エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体およびＨＥＲ２は陽性である）が含まれ、本発明の組み合わせは特にトリプルネガティブ乳がんに対して有用である。膵臓がんは、ほとんどが腺癌または細胞癌型で、外分泌がんである。膵外分泌がんには、膵臓腺癌、膵臓の腺房細胞癌、嚢胞腺癌、膵芽腫、腺扁平上皮癌、印鑑細胞癌、肝様癌、コロイド癌、未分化型癌、破骨細胞様巨細胞を有する未分化癌、充実性偽乳頭状腫瘍および膵粘液性嚢胞腫瘍が含まれる。
【０００７】
一実施形態では、本明細書で記載した医薬的組み合わせは、内分泌受容体（エストロゲンまたはプロゲステロン受容体）陽性、ＨＥＲ２陽性、トリプルネガティブ（エストロゲン、プロゲステロンまたはＨＥＲ２の受容体は陽性ではない）またはトリプルポジティブ（エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体およびＨＥＲ２は陽性である）などの乳がんの治療に治療上有効な量を含む。別の実施形態では、本明細書で記載した医薬的組み合わせは、卵巣がんの治療のために治療上有効な量を含む。さらに別の実施形態では、本明細書で記載した医薬的組み合わせは、メラノーマを含むメラノーマの治療のために治療上有効な量を含む。さらに別の実施形態では、本明細書で記載した医薬的組み合わせは、膵臓がんの治療のために治療上有効な量を含む。さらに別の実施形態では、本明細書で記載した医薬的組み合わせは、非小細胞肺がんおよび肺扁平上皮がんを含む肺がんの治療のために治療上有効な量を含む。別の実施形態では、本明細書で記載した医薬的組み合わせは、ＴＮＢＣまたはメラノーマなどのＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性または難治性になったがんの治療のために治療上有効な量を含む。さらに別の実施形態では、本明細書で記載した医薬的組み合わせは、の治療のために治療上有効な量を含む。
【０００８】
別の態様では、本発明は、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）を含む乳がん、皮膚がん、卵巣がん、膵臓がん、神経膠芽腫（ＧＢＭ）、肺がん、腎細胞癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、中皮腫および上咽頭癌（ＮＰＣ）などのがんまたはＴＮＢＣもしくはメラノーマなどのＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性もしくは難治性になったがんの治療に使用するための本明細書で記載した医薬的組み合わせを含む。
【０００９】
別の態様では、本発明は、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）を含む乳がん、皮膚がん、卵巣がん、膵臓がん、神経膠芽腫（ＧＢＭ）、肺がん、腎細胞癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、中皮腫および上咽頭癌（ＮＰＣ）などのがんまたはＴＮＢＣもしくはメラノーマなどのＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性もしくは難治性になったがんの治療のための薬剤を製造するための本明細書で記載した医薬的組み合わせの使用を含む。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、最高レベルのＰＤ１発現（四角）によって定義された特定の患者集団内における、Ｍ２マクロファージの代用マーカー、ＣＤ１６３の高レベルの発現を示すＴＣＧＡおよび内部のデータベースから得られたＲｎａｓｅｑデータを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の具体的な説明
がんを治療するために使用することができる新規な組み合わせが必要である。本発明は、がんを治療するために使用され得る抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子などのＭ−ＣＳＦアンタゴニストおよび抗ＰＤ−１抗体分子などのＰＤ−１アンタゴニストの組み合わせを対象とする。理論に縛られることは望まないが、特定のがんを治療するために本明細書で開示した新規な組み合わせの使用は、Ｔ細胞抗腫瘍応答をレスキューし、Ｔ細胞の内在性抗腫瘍応答を拡大する免疫応答に影響を及ぼすので、有利であると考えられる。図１に示したように、Ｔ細胞は活性化されると表面上でのＰＤ−１の発現が増加し、ネガティブなシグナルを受けることができるようになり、それによってＴ細胞応答が阻害される。腫瘍細胞は、腫瘍に対するＴ細胞応答を早々に停止させるＰＤ−Ｌ１などのＰＤ−１の結合相手を発現することによってこの系を利用する。本発明の組み合わせでは、抗ＰＤ１抗体分子はＴ細胞上のＰＤ−１を認識して結合し、それによって腫瘍細胞がＰＤ−１に結合するのを妨害し、Ｔ細胞活性を抑制する。抗ＰＤ−１抗体分子はＴ細胞に結合するがＴ細胞機能は妨害せず、したがって、Ｔ細胞が腫瘍殺滅効果（killing affect）を保持していることは確かである。次に、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体は、様々な細胞軸に影響を及ぼすことによってＴ細胞活性を増大させる。腫瘍部位では、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭＳ）は、パラクリンとしてＩＬ−２産生およびＴ細胞増殖を阻害するサイトカインを分泌する。抗Ｍ−ＣＳＦ抗体を使用すると、免疫調節サイトカインを産生することによってＴ細胞機能および増殖を抑制することができるＭ２マクロファージを枯渇させ、Ｔ細胞区画のブレーキを開放する。こうして、抗ＭＳＣＦ抗体分子および抗ＰＤ１抗体分子の組み合わせは、腫瘍細胞によって損なわれ消耗したＴ細胞、および腫瘍を有する患者において治療上有利な影響を及ぼすＭ２マクロファージの機能をレスキューすると考えられる。本発明の新規な組み合わせは、ＰＤ−１マーカーおよびＣＤ１６３（マクロファージマーカー）が発現または過剰発現する適応症において有用であり得る。この組み合わせが有利な影響を及ぼすがんの例には、卵巣がん、乳がん、例えば、ＴＮＢＣ、膵臓がん、メラノーマ、非小細胞肺がんおよび肺扁平上皮がんなどの肺がん、上咽頭癌（ＮＰＣ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、中皮腫、腎細胞癌または神経膠芽腫が含まれる。さらに、本組み合わせは、メラノーマおよびトリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）を含むＰＤ１／ＰＤＬ−１治療に抵抗性または難治性のがんを治療するために有用である。
【００１２】
したがって、本発明は、組成物、例えば、医薬的に許容される担体、賦形剤または安定化剤および本明細書で記載した抗ＰＤ−１抗体分子および本明細書で記載したような抗Ｍ−ＣＳＦ抗体を含む医薬組成物ならびにがんを治療するためのそれらの使用を提供する。一実施形態では、組成物、例えば、医薬組成物には、抗ＰＤ−１および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子および１つまたは複数の薬剤、例えば、本明細書で記載したような治療剤またはその他の抗体分子の組み合わせが含まれる。
【００１３】
定義
用語「プログラム細胞死１」または「ＰＤ−１」には、アイソフォーム、ほ乳類、例えば、ヒトＰＤ−１、ヒトＰＤ−１の種相同体およびＰＤ−１と少なくとも１つの共通エピトープを含む類似体が含まれる。ＰＤ−１、例えば、ヒトＰＤ−１のアミノ酸配列は、当技術分野では公知である、例えば、Shinohara T et al. （1994） Genomics 23（3）:704-6; Finger LR, et al. Gene （1997）197（1-2）:177-87。
【００１４】
用語「共同して治療上有効な（jointly therapeutically effective）」とは、ＰＤ−１アンタゴニスト、例えば、抗ＰＤ−１抗体分子およびＭ−ＣＳＦアンタゴニスト、例えば、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子を同時に（単一剤形（one dosage form）で、もしくは反復剤形（multiple dosage form）で）または別々に（時間的にずらした方法で、特に配列特異的な方法で）、治療する対象、特にヒトにおいて好ましく、（好ましくは、改善された、もしくは相乗的な）相互作用も示す時間間隔で投与することができることを意味する。一実施形態では、この組み合わせを投与すると、単剤療法としてがんを有する対象に投与したときの治療応答と比較して改善された治療応答が示される。
【００１５】
本明細書では、冠詞「ａ」および「ａｎ」は、冠詞の文法上の対象の１つまたは２つ以上（例えば、少なくとも１つ）を意味する。
【００１６】
用語「または（or）」は、本明細書では、文脈で明らかに他の場合が示されていない限り、用語「および／または（and/or）」と同義に使用される。
【００１７】
「約（about）」および「約（approximately）」は全般的に、所与の測定値の性質または精度の測定された量の誤差の許容される程度を意味する。誤差の程度の例は、所与の値または値の範囲の２０パーセント（％）以内、典型的には１０％以内、より典型的には５％以内である。
【００１８】
本発明の組成物および方法は、特定の配列を有するポリペプチドおよび核酸、またはそれらと実質的に同一もしくは類似の配列、例えば、特定の配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％またはそれ以上同一の配列を包含する。アミノ酸配列の文脈では、用語「実質的に同一」は、本明細書では、第１および第２のアミノ酸配列が共通の構造ドメインおよび／または共通の機能的活性を有することができるように、第２のアミノ酸配列において整列したアミノ酸残基とｉ）同一であるか、またはｉｉ）保存的置換である、十分な、または最小限の数のアミノ酸残基を含有する第１のアミノ酸を意味する。例えば、参照配列、例えば、本明細書で提供した配列に少なくとも約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一性を有する共通の構造ドメインを含有するアミノ酸配列である。
【００１９】
ヌクレオチド配列の文脈では、用語「実質的に同一」は、本明細書では、第１および第２のヌクレオチド配列が、共通の機能的活性を有するポリペプチドをコードするか、または共通の構造ポリペプチドドメインまたは共通の機能的ポリペプチド活性をコードするように、第２の核酸配列において整列したヌクレオチドに同一である、十分な、または最小限の数のヌクレオチドを含有する第１の核酸配列を意味する。例えば、参照配列、例えば、本明細書で提供した配列に少なくとも約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一性を有するヌクレオチド配列である。
【００２０】
用語「機能的バリアント」とは、天然に生じる配列に実質的に同一なアミノ酸配列を有する、または実質的に同一なヌクレオチド配列によってコードされ、天然に生じる配列の１つまたは複数の活性を有することができるポリペプチドを意味する。
【００２１】
用語「抗原結合部位」とは、ＰＤ−１またはＭ−ＣＳＦポリペプチド、またはそれらのエピトープに結合する境界面を形成する決定基を含む抗体分子の部分を意味する。タンパク質（またはタンパク質様物質）に関して、抗原結合部位は典型的に、Ｍ−ＣＳＦまたはＰＤ−１ポリペプチドに結合する境界面を形成する（少なくとも４つのアミノ酸またはアミノ酸様物質の）１つまたは複数のループを含む。典型的に、抗体分子の抗原結合部位は、少なくとも１個または２個のＣＤＲおよび／または超可変ループ、より典型的には、少なくとも３、４、５または６個のＣＤＲおよび／または超可変ループを含む。
【００２２】
本明細書では、用語「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」は、単一分子組成物である抗体分子の調製物を意味する。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに単一の結合特異性および親和性を示す。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術またはハイブリドーマ技術を使用しない方法（例えば、組換え法）によって作製することができる。
【００２３】
「効率的なヒト（effectively human）」タンパク質とは、抗体応答、例えば、ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答の中和を惹起しないタンパク質である。
【００２４】
「組み合わせ（併用（combination））」とは、組み合わせ使用または組み合わせ製品のための指示がある、または指示がない別々の相手の製剤（formulation）を意味する。したがって、組み合わせ相手は、販売も互いに独立している全く別々の医薬剤形または医薬組成物であってもよく、この場合、共同して活性があるので、同時に、または順次使用するために使用を組み合わせる指示だけが包装装置、例えば、パンフレットなどにおいて、または、例えば、医師および医療従事者に提供されたその他の情報（例えば、口頭伝達、書面による伝達など）において提供されている。
【００２５】
「組み合わせ製品（combination product）」には、抗ＰＤ−１抗体および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体が同時に、または時間間隔内に別々に独立して投与することができる、特に、これらの時間間隔によって、組み合わせ相手が協同的な（＝共同的な）、例えば、改善された、増強された、または相乗的な効果を示すことができる、組み合わせ投与のための部分のキットが含まれる。本明細書では、「同時投与（co-administration）」または「組み合わせ投与（combined administration）」などの用語は、それらを必要とする単一の対象（例えば、患者）に選択された組み合わせ相手の投与を包含することを意味し、薬剤を同じ投与経路で、および／または同時に投与する必要はない治療レジメンを含むものとする。
【００２６】
用語「固定していない組み合わせ（non-fixed combination）」とは、活性成分がいずれも別々の実体として、特に時間制限なく、同時に、並行して、または順次患者に投与され、このような投与が患者の体内に２つの抗体の治療上有効なレベルをもたらすことを意味する。後者は、カクテル療法、例えば、３つ以上の活性成分の投与にも適用される。したがって、用語「固定していない組み合わせ」は、本明細書で定義したような組み合わせ相手（ｉ）抗ＰＤ−１抗体および（ｉｉ）抗Ｍ−ＣＳＦ抗体を、互いに独立して、または組み合わせ相手の明確に異なる量との様々な固定された組み合わせの使用によって、すなわち、同時に、または異なる時点で、投与することができるという意味で、特に「部分のキット」を規定し、組み合わせ相手はまた、販売も互いに独立している、それらの組み合わせ使用の可能性の指示だけが、包装装置、例えば、パンフレットなど、または、例えば、医師および医療従事者に提供されたその他の情報において提供されている、全く別々の医薬剤形または医薬組成物として使用することができる。独立した製剤または部分のキットの部分は次に、例えば、同時に、または時間的にずらして、すなわち、様々な時点で、部分のキットのいかなる部分についても同じ、または異なる時間間隔で、投与することができる。非常に好ましくは、部分の組み合わせ使用において治療する疾患に対する効果が、組み合わせ相手（ｉ）および（ｉｉ）のいずれか１つだけの使用によって得られる効果よりも大きくて、したがって、共同して活性があるように、時間間隔を選択する。組み合わせ調製物における組み合わせ相手（ｉ）の全量の投与する組み合わせ相手（ｉｉ）に対する比は、例えば、治療する患者小集団の必要性または、例えば、患者の年齢、性別、体重などによって必要性が異なる可能性がある単一の患者の必要性に対処するために、変化させることができる。
【００２７】
本明細書では、「非経口投与」および「非経口的に投与した」という表現は、腸内および局所投与以外の、通常、注射による投与様式を意味し、限定はしないが、静脈内、筋肉内、動脈内、くも膜下腔内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節腔内、嚢下、くも膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内注射および注入を含む。
【００２８】
本明細書では、「単離した」という用語は、本来の、または天然の環境（例えば、天然に生じるのであれば、天然の環境）から取り出された物質を意味する。例えば、生きた動物に存在する天然に生じるポリヌクレオチドまたはポリペプチドは単離しないが、天然系に共存する物質のいくらかまたは全てからヒトの介入によって分離された同じポリヌクレオチドまたはポリペプチドを単離する。このようなポリヌクレオチドは、ベクターの一部であってもよく、かつ／またはこのようなポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、組成物の一部であってもよく、さらにこのようなベクターまたは組成物はそれが天然に認められる環境の一部でなくても単離される。
【００２９】
本明細書では、用語「抗体分子」とは、タンパク質、例えば、イムノグロブリン鎖または少なくとも１個のイムノグロブリン可変ドメイン配列を含むその断片を意味する。用語「抗体分子」には、例えば、モノクローナル抗体（イムノグロブリンＦｃ領域を有する完全長抗体を含む）が含まれる。ある実施形態では、抗体分子は完全長抗体または完全長イムノグロブリン鎖を含む。ある実施形態では、抗体分子は完全長抗体の抗原結合もしくは機能的断片、または完全長イムノグロブリン鎖を含む。別の例では、抗体分子は２個の重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列および２個の軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列を含み、それによって、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆｄ、Ｆｄ’、Ｆｖ、１本鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、１個の可変ドメイン抗体、ダイアボディ（Ｄａｂ）（２価および２特異的）および完全な抗体もしくは組換えＤＮＡ技術を使用して新規に合成された抗体の改変によって生成することができるキメラ（例えば、ヒト化）抗体などの、２個の抗原結合部位を形成する。これらの機能的抗体断片は、それぞれの抗原または受容体と選択的に結合する能力を保持する。抗体および抗体断片は、限定はしないが、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤおよびＩｇＥを含む抗体の任意のクラス、および抗体の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４）に由来するものであり得る。抗体分子の調製は、モノクローナルまたはポリクローナルであってもよい。抗体分子はまた、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト、またはインビトロ生成抗体であってもよい。抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４から選択された重鎖定常領域を有することができる。抗体はまた、例えば、カッパまたはラムダから選択された軽鎖を有することができる。用語「イムノグロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書の「抗体」という用語と同義に使用される。
【００３０】
抗体分子の抗原結合断片の例には、（ｉ）Ｆａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインから構成される１価断片、（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結した２個のＦａｂ断片を含む２価断片、（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインから構成されるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体の１腕のＶＬおよびＶＨドメインから構成されるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインから構成されるダイアボディ（ｄＡｂ）断片、（ｖｉ）ラクダまたはラクダ化可変ドメイン、（ｖｉｉ）１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦＶ）、（ｖｉｉｉ）１ドメイン抗体が含まれる。これらの抗体断片は、当業者には公知の従来の技術を使用して得られ、断片は、有用性のためにインタクトな抗体と同じ方法でスクリーニングする。用語「抗体」には、インタクトな分子およびそれらの機能的断片が含まれる。抗体の定常領域は、抗体の特性を変更するために（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体糖鎖付加、システイン残基の数、エフェクター細胞機能または補体機能の１つまたは複数を増加、または減少させるために）変化、例えば、変異させることができる。
【００３１】
ＶＨおよびＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲまたはＦＷ）と称される、より保存された領域が組み込まれた「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と称する超可変領域に細分することができる。
【００３２】
フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲は、いくつかの方法によって正確に定義された（Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917; and the AbM definition used by Oxford Molecular's AbM antibody modeling softwareを参照のこと。全般的に、例えば、Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. In: Antibody Engineering Lab Manual (Ed.: Duebel, S. and Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg)を参照のこと）。
【００３３】
本明細書では、用語「相補性決定領域」および「ＣＤＲ」は、抗原特異性および結合親和性を付与する抗体可変領域内のアミノ酸の配列を意味する。一般的に、各重鎖可変領域には３つのＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）があり、各軽鎖可変領域には３つのＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）がある。
【００３４】
所与のＣＤＲの正確なアミノ酸配列範囲は、Kabat et al. (1991), “Sequences of Proteins of Immunological Interest,” 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム）、Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）に記載されているものを含むいくつかの周知のスキームのいずれかを使用して判定することができる。本明細書では、「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキームに従って定義されたＣＤＲはまた、時々「超可変ループ」と称される。
【００３５】
例えば、Ｋａｂａｔでは、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）のＣＤＲアミノ酸残基は３１〜３５（ＨＣＤＲ１）、５０〜６５（ＨＣＤＲ２）および９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）に番号付けられ、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）のＣＤＲアミノ酸残基は２４〜３４（ＬＣＤＲ１）、５０〜５６（ＬＣＤＲ２）および８９〜９７（ＬＣＤＲ３）に番号付けられる。Ｃｈｏｔｈｉａでは、ＶＨのＣＤＲアミノ酸は２６〜３２（ＨＣＤＲ１）、５２〜５６（ＨＣＤＲ２）および９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）に番号付けられ、ＶＬのアミノ酸残基は２６〜３２（ＬＣＤＲ１）、５０〜５２（ＬＣＤＲ２）および９１〜９６（ＬＣＤＲ３）に番号付けられる。ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの両方のＣＤＲ定義を組み合わせることによって、ＣＤＲは、ヒトＶＨにおけるアミノ酸残基２６〜３５（ＨＣＤＲ１）、５０〜６５（ＨＣＤＲ２）および９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）ならびにヒトＶＬにおけるアミノ酸残基２４〜３４（ＬＣＤＲ１）、５０〜５６（ＬＣＤＲ２）および８９〜９７（ＬＣＤＲ３）から構成される。
【００３６】
全般的に、特に指定しなければ、抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、表２で記載した１つまたは複数のＫａｂａｔ  ＣＤＲおよび／またはＣｈｏｔｈｉａ超可変ループのいずれかの組み合わせを含むことができる。一実施形態では、以下の定義：ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの両方を組み合わせたＣＤＲ定義によるＨＣＤＲ１ならびにＫａｂａｔのＣＤＲ定義によるＨＣＣＤＲ２〜３およびＬＣＣＤＲ１〜３は、表２で記載した抗ＰＤ−１抗体分子のために使用する。定義全てに基づいて、各ＶＨおよびＶＬは典型的に、アミノ末端からカルボキシ末端まで、以下の順番：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で配置された３個のＣＤＲおよび４個のＦＲを含む。
【００３７】
ある実施形態では、抗体分子は単一特異的抗体分子であり、単一のエピトープに結合する。例えば、単一特異的抗体分子は複数のイムノグロブリン可変ドメイン配列を有し、それぞれは同じエピトープに結合する。
【００３８】
ある実施形態では、抗体分子は、多特異的抗体分子であり、例えば、複数のイムノグロブリン可変ドメイン配列を含み、複数のうち第１のイムノグロブリン可変ドメイン配列は第１のエピトープに結合特異性を有し、複数のうち第２のイムノグロブリン可変ドメイン配列は第２のエピトープに結合特異性を有する。ある実施形態では、第１および第２のエピトープは同じ抗原、例えば、同じタンパク質（または多量体タンパク質のサブユニット）上にある。ある実施形態では、第１および第２のエピトープは重なっている。ある実施形態では、第１および第２のエピトープは重なっていない。ある実施形態では、第１および第２のエピトープは異なる抗原、例えば、異なるタンパク質（または多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。ある実施形態では、多特異的抗体分子は第３、第４または第５のイムノグロブリン可変ドメインを含む。ある実施形態では、多特異的抗体分子は２特異的抗体分子、３特異的抗体分子または４特異的抗体分子である。
【００３９】
ある実施形態では、多特異的抗体分子は２特異的抗体分子である。２特異的抗体は２つ以下の抗原に特異性を有する。２特異的抗体分子は、第１のエピトープに結合特異性を有する第１のイムノグロブリン可変ドメイン配列および第２のエピトープに結合特異性を有する第２のイムノグロブリン可変ドメイン配列が特徴である。ある実施形態では、第１および第２のエピトープは同じ抗原、例えば、同じタンパク質（または多量体タンパク質のサブユニット）上にある。ある実施形態では、第１および第２のエピトープは重なっている。ある実施形態では、第１および第２のエピトープは重なっていない。ある実施形態では、第１および第２のエピトープは異なる抗原、例えば、異なるタンパク質（または多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。ある実施形態では、２特異的抗体分子は、第１のエピトープに結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列および軽鎖可変ドメイン配列ならびに第２のエピトープに結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列および軽鎖可変ドメイン配列を含む。ある実施形態では、２特異的抗体分子は、第１のエピトープに結合特異性を有する半抗体および第２のエピトープに結合特異性を有する半抗体を含む。ある実施形態では、２特異的抗体分子は、第１のエピトープに結合特異性を有する半抗体またはその断片および第２のエピトープに結合特異性を有する半抗体またはその断片を含む。ある実施形態では、２特異的抗体分子は、第１のエピトープに結合特異性を有するｓｃＦｖまたはその断片および第２のエピトープに結合特異性を有するｓｃＦｖまたはその断片を含む。ある実施形態では、第１のエピトープはＰＤ−１上に位置し、第２のエピトープはＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＥＡＣＡＭ（例えば、ＣＥＡＣＡＭ−１および／またはＣＥＡＣＡＭ−５）、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２上に位置する。
【００４０】
ヒト化またはＣＤＲグラフト抗体は、ドナーＣＤＲと置換された（イムノグロブリン重鎖および軽鎖の）少なくとも１個または２個の、しかし一般的には３個全てのレシピエントＣＤＲを有する。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも一部分と置換されていてもよく、またはＣＤＲのいくつかのみが非ヒトＣＤＲと置換されていてもよい。必要なのは、ヒト化抗体のＰＤ−１への結合に必要なＣＤＲの数を置換することだけである。好ましくは、ドナーは齧歯類の抗体、例えば、ラットまたはマウスの抗体で、レシピエントはヒトフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークである。典型的には、ＣＤＲをもたらすイムノグロブリンは「ドナー」と呼ばれ、フレームワークをもたらすイムノグロブリンは「アクセプター」と呼ばれる。一実施形態では、ドナーイムノグロブリンは非ヒト（例えば、齧歯類）である。アクセプターフレームワークは天然に生じる（例えば、ヒト）フレームワークもしくはコンセンサスフレームワーク、またはそれらに約８５％以上、好ましくは９０％、９５％、９９％以上同一の配列である。
【００４１】
本明細書では、用語「コンセンサス配列」とは、関連する配列のファミリーにおいて、最も頻繁に生じるアミノ酸（またはヌクレオチド）から形成される配列を意味する。タンパク質のファミリーでは、コンセンサス配列におけるそれぞれの位置は、ファミリーにおいてその位置で最も頻繁に生じるアミノ酸によって占有されている。２つのアミノ酸が同じ頻度で生じるならば、いずれもコンセンサス配列に含めることができる。「コンセンサスフレームワーク」とは、コンセンサスイムノグロブリン配列におけるフレームワーク領域を意味する。
【００４２】
本発明の医薬組成物は、「治療有効量」または「予防有効量」の本発明の抗体または抗体部分を含むことができる。「治療有効量」または「共同して治療有効量」とは、所望する治療結果を実現するために、投薬量および必要な期間中における有効な量を意味する。改変された抗体または抗体断片の治療上有効な量は、個体の病状、年齢、性別および体重、ならびに個体において所望する応答を惹起する抗体または抗体部分の能力などの要素によって変動し得る。治療有効量はまた、改変された抗体または抗体断片のいかなる毒性効果または有害な効果よりも治療上有益な効果が上回る量である。開示した組み合わせの治療上有効な投薬量は、好ましくは測定可能なパラメーター、例えば、腫瘍増殖速度を未治療の対象に対して少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約４０％、さらにより好ましくは少なくとも約６０％、さらにより好ましくは少なくとも約８０％阻害する。本明細書で開示した組み合わせが測定可能なパラメーター、例えば、がんを阻害する能力は、臨床試験において評価することができ、熟練の医師が評価することができる。
【００４３】
「予防有効量」とは、所望する予防結果を実現するために、投薬量および必要な期間中における有効な量を意味する。典型的には、予防用量は疾患の前または初期段階において対象に使用するので、予防有効量は治療有効量よりも少ない。
【００４４】
本明細書で記載したような抗ＰＤ−１抗体分子および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子を含むキットも本発明の範囲内である。このキットには、使用指示書、その他の試薬、例えば、標識、治療剤またはキレートもしくはその他の方法の結合に有用な薬剤、標識もしくは治療剤に対する抗体、または放射線防御組成物、投与用の抗体を調製するための装置またはその他の材料、医薬的に許容される担体および対象に投与するための装置またはその他の材料を含む、１つまたは複数のその他の要素を含めることができる。
【００４５】
配列リスト
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出され、全体を参考として本明細書に組み込んだ配列リストを含む。２０１６年７月１１日に作成された前記ＡＳＣＩＩ文書の名称はＰＡＴ０５７０００＿ＳＬ．ｔｘｔで、５５２４３バイトの大きさである。
【００４６】
マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）抗体アンタゴニストの例
以下に記載したような様々な形態のＭ−ＣＳＦは、標的細胞上の受容体（Ｍ−ＣＳＦＲ）に結合することによって機能を果たす。Ｍ−ＣＳＦＲは、５個の細胞外イムノグロブリン様ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞内断続的Ｓｒｃ関連チロシンキナーゼドメインを有する膜貫通分子である。Ｍ−ＣＳＦＲは、ｃ−ｆｍｓ癌原遺伝子によってコードされる。Ｍ−ＣＳＦのＭ−ＣＳＦＲの細胞外ドメインへの結合は、受容体の二量体化を導き、細胞質キナーゼドメインを活性化し、自己リン酸化およびその他の細胞タンパク質のリン酸化を生じさせる（Hamilton J. A., J Leukoc Biol.,62(2):145-55 (1997); Hamilton J, A., Immuno Today., 18(7): 313-7(1997)。
【００４７】
完全長ヒトＭ−ＣＳＦ（コロニー刺激因子（ＣＳＦ−１）としても知られる）ｍＲＮＡは、５５４個のアミノ酸の前駆タンパク質をコードする。選択的ｍＲＮＡスプライシングおよび異なる翻訳後タンパク質分解プロセシングを通じて、Ｍ−ＣＳＦは糖タンパク質もしくはコンドロイチン硫酸含有プロテオグリカンとして循環中に分泌されるか、またはＭ−ＣＳＦ産生細胞の表面に膜貫通糖タンパク質として発現され得る。完全なインビトロ生物活性のために必要な最小配列である、細菌において発現されたヒトＭ−ＣＳＦのアミノ末端の１５０個のアミノ酸の３次元構造は、このタンパク質が、それぞれの単量体が４個のアルファヘリックス束および逆平行ベータシートからなるジスルフィド結合二量体であることを示す（Pandit et al., Science 258: 1358-62 (1992)）。３つの明確に区別できるＭ−ＣＳＦ種が選択的ｍＲＮＡスプライシングによって生成される。３つのポリペプチド前駆体は、２５６個のアミノ酸のＭ−ＣＦＳα、５５４個のアミノ酸のＭ−ＣＳＦβおよび４３８個のアミノ酸のＭ−ＣＳＦγである。Ｍ−ＣＳＦβは、膜結合型では生じない分泌型タンパク質である。Ｍ−ＣＳＦαは、タンパク質分解切断によってゆっくり放出される内在性膜タンパク質として発現する。Ｍ−ＣＳＦαは、アミノ酸１９１〜１９７で切断される。膜結合型のＭ−ＣＳＦは、近くの細胞の受容体と相互作用することができ、したがって、特定の細胞−細胞接触を媒介する。用語「Ｍ−ＣＳＦ」はまた、アミノ酸３６〜４３８を含むことができる。
【００４８】
Ｍ−ＣＳＦアンタゴニストについては記載されたことがある。組み合わせのＭ−ＣＳＦアンタゴニストは低分子、抗体もしくはその他の抗原結合タンパク質、低分子、核酸（ｓｉＲＮＡなど）またはＭ−ＣＳＦ活性化もしくは機能を妨害する任意のこのようなその他の分子であってもよい。
【００４９】
一例では、Ｍ−ＣＳＦアンタゴニストは抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子である。本発明に有用であり得る抗Ｍ−ＣＳＦ抗体には、Ｍ−ＣＳＦ抗体に関するその教示のために全体を参考として本明細書に組み込んだ国際公開第２００５／０６８５０３号パンフレットで開示された抗Ｍ−ＣＳＦ抗体が含まれる。国際公開第２００５／０６８５０３号パンフレットは、例えば、抗体ＲＸ１、５Ｈ４、ＭＣ１および／またはＭＣ３と同じエピトープに結合する抗体、前記の抗体の抗Ｍ−ＣＳＦ特異的抗体Ｈｕｍａｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ（商標）型を含む医薬製剤およびこの医薬製剤の調製方法を開示している。用語「抗体」は広義に使用され、完全に組み立てられた抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異的抗体（例えば、２特異的抗体）、抗原に結合することができる抗体断片（例えば、Ｆａｂ’、Ｆ’（ａｂ）２、Ｆｖ、１本鎖抗体、ダイアボディ）および所望する生物学的活性を示す限り前記を含む組換えペプチドを含む。
【００５０】
本発明において有用であり得るその他の抗Ｍ−ＣＳＦ抗体には、それぞれＭ−ＣＳＦ抗体分子に関するその教示のために全体を参考として本明細書に組み込んだ国際公開第２００３／０２８７５２号パンフレット、米国特許出願公開第２００９１１７１０３号および米国特許出願公開第２００５０５９１１３号で開示された抗Ｍ−ＣＳＦ抗体が含まれる。
【００５１】
一実施形態では、本発明の方法に有用な抗体分子には、ＲＦＲＤＮＴＰＮ（配列番号４２）またはＲＦＲＤＮＴＡＮ（配列番号４３）によって表される直鎖状エピトープに結合する抗体分子が含まれる。このような抗体は、国際公開第２００５／０６８５０３号パンフレットで開示されたヒトの遺伝子操作ＲＸ１（Ｈ−ＲＸ１）抗体である。別の実施形態では、抗体は、ＩＴＦＥＦＶＤＱＥ（配列番号４４）によって表される直鎖状エピトープに結合する抗体分子であってもよい。このような抗体は、国際公開第２００５／０６８５０３号パンフレットで開示された５Ｈ４である。
【００５２】
一実施形態では、Ｈ−ＲＸ１は本発明の組み合わせにおいて使用される。Ｈ−ＲＸ１抗体の重鎖および軽鎖定常、可変領域および相補性決定領域（ＣＤＲ）またはそれらの抗原結合断片を表１に示す。
【００５３】
【表１】
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2018525367.tif 000003
2018525367.tif 000004
【００５４】
一実施形態では、Ｍ−ＣＳＦアンタゴニスト抗体は、配列番号１で記載した重鎖可変領域配列および配列番号２で記載した軽鎖可変領域配列を有するヒト化抗体分子である。別の実施形態では、抗体分子はＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む重鎖可変領域ならびにＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３ドメインを含む軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域ＣＤＲ３は配列番号５で記載した配列を有するアミノ酸を含み、軽鎖可変領域ＣＤＲ３は配列番号８で記載した配列を有するアミノ酸を含み、抗体またはその抗原結合部分は約１０−７Ｍの結合親和性でヒトＭ−ＣＳＦに結合する。抗体またはその断片はさらに、配列番号４で記載した配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２および配列番号７で記載した配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２を含むことができる。抗体またはその断片はさらに、配列番号３で記載した配列を有するアミノ酸を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１および配列番号６で記載した配列を有するアミノ酸を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１を含むことができる。
【００５５】
さらに別の例では、本発明の方法で有用なヒト化抗体またはヒトの遺伝子操作された抗体もしくはその断片はヒトＭ−ＣＳＦに結合し、前記抗体は、ＲＦＲＤＮＴＰＮ（配列番号４２）またはＲＦＲＤＮＴＡＮ（配列番号４３）の少なくとも４個の近接した残基を含むＭ−ＣＳＦのエピトープに結合し、前記抗体のヒトＭ−ＣＳＦに関する親和性Ｋｄ（解離平衡定数）は少なくとも１０−７Ｍで、前記抗体は上記で特定したような３つの重鎖ＣＤＲ全てを含む。
【００５６】
本明細書で開示した抗体は、１本鎖抗体、ダイアボディ、ドメイン抗体、ナノボディおよびユニボディの誘導体であってもよい。例えば、本発明は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む単離されたモノクローナル抗体（またはその機能的断片）を提供し、前述した配列で示した可変領域と比較したとき、重鎖可変領域は、配列番号１のアミノ酸配列に少なくとも８０％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一なアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号２のアミノ酸配列に少なくとも８０％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一なアミノ酸配列を含み、抗体はＭ−ＣＳＦ（例えば、ヒトおよび／またはカニクイザルＭ−ＣＳＦ）に結合し、Ｍ−ＣＳＦのシグナル伝達活性を中和する。
【００５７】
その他の実施形態では、可変重鎖（ＶＨ）および／または可変軽鎖（ＶＬ）アミノ酸配列は、上記の表１で記載した配列と５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一であってもよい。
【００５８】
ある特定の実施形態では、本発明の抗体は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域およびＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を有し、これらのＣＤＲ配列の１つまたは複数は本明細書で記載した抗体をベースにした特定のアミノ酸配列またはそれらの保存的改変を有し、この抗体は表１で記載したＭ−ＣＳＦ結合抗体の所望する機能的特性を保持している。
【００５９】
したがって、本発明は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域およびＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域から構成される、単離されたＭ−ＣＳＦモノクローナル抗体またはその断片を提供し、重鎖可変領域ＣＤＲ１アミノ酸配列は配列番号３およびその保存的改変を含み、重鎖可変領域ＣＤＲ２アミノ酸配列は配列番号４およびその保存的改変を含み、重鎖可変領域ＣＤＲ３アミノ酸配列は配列番号５およびその保存的改変を含み、軽鎖可変領域ＣＤＲ１アミノ酸配列は配列番号６およびその保存的改変を含み、軽鎖可変領域ＣＤＲ２アミノ酸配列は配列番号７およびその保存的改変を含み、ＣＤＲ３アミノ酸配列の軽鎖可変領域は配列番号８およびその保存的改変を含み、抗体分子は特異的にＭ−ＣＳＦに結合し、Ｍ−ＣＳＦ活性を中和する。
【００６０】
本発明で使用した抗体は、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ２）’、Ｆ（ａｂ）２’、ｓｃＦｖ、ＶＨＨ、ＶＨ、ＶＬ、ｄＡｂからなる群から選択される、Ｍ−ＣＳＦに結合する抗体の断片であってもよい。Ｍ−ＣＳＦ抗体を産生する方法は、国際公開第２００５／０６８５０３号パンフレットに記載されている。
【００６１】
抗体ＰＤ−１アンタゴニストの例
本発明に有用なＰＤ−１分子は、いかなるＰＤ−１アンタゴニストであってもよい。一例では、抗ＰＤ−１抗体分子などのＰＤ−１アンタゴニスト分子は、ＰＤ−１の１つまたは複数の活性を阻害、抑制または中和することができ、免疫チェックポイントの遮断または抑制を引き起こす。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体などのＰＤ−１アンタゴニスト分子は、腫瘍浸潤性リンパ球の増加、Ｔ細胞受容体媒介性増殖の増加、がん細胞による免疫回避の減少、エフェクター細胞機能の復活（例えば、Ｔ細胞増殖、ＩＦＮ−アルファ分泌または細胞溶解性機能の１つまたは複数）、制御性Ｔ細胞機能の阻害または制御性Ｔ細胞、エフェクターＴ細胞およびＮＫ細胞などの多数の細胞種の活性に対する効果の１つまたは複数を生じる。
【００６２】
本発明に有用なＰＤ−１分子は表１に示し、全体を参考として本明細書に組み込んだ国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０１２７５４に記載された通りである。
【００６３】
一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子はヒト化抗ＰＤ−１抗体で、重鎖可変ドメインおよび定常領域、軽鎖可変ドメインおよび定常領域またはその両方を含み、表２で記載したようなＢＡＰ０４９−クローン−ＢまたはＢＡＰ０４９−クローン−Ｅのアミノ酸配列を含むか、または表２のヌクレオチド配列によってコードされる。抗ＰＤ−１抗体分子は、場合によって、表３に示したように重鎖、軽鎖またはその両方のリーダー配列あるいはそれらと実質的に同一の配列を含む。
【００６４】
さらに別の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子は、本明細書で記載した抗体、例えば、表２で記載したＢＡＰ０４９−クローン−ＢまたはＢＡＰ０４９−クローン−Ｅのいずれかから選択される、または表２のヌクレオチド配列によってコードされる抗体の重鎖可変領域の少なくとも１個、２個または３個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
【００６５】
ある実施形態、例えば、可変領域、ＣＤＲ（例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲもしくはＫａｂａｔ  ＣＤＲ）、または本明細書で、例えば、表２で述べたその他の配列を含む実施形態では、抗体分子は単一特異的抗体分子、２特異的抗体分子であるか、または抗体の抗原結合断片、例えば、半抗体または半抗体の抗原結合断片を含む抗体分子である。
【００６６】
【表２】
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2018525367.tif 000007
【００６７】
【表３】
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【００６８】
【表４】
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2018525367.tif 000011
【００６９】
ヒト化ＢＡＰ０４９−クローン−ＢおよびＢＡＰ０４９−クローンＥの生成およびそれらの特徴付け
マウス抗ＰＤ−１モノクローナル抗体ＢＡＰ０４９をヒト化した。特有の可変領域配列を有する１６個のヒト化ＢＡＰ０４９クローンの配列および試験試料が得られた。これらのクローンの生物学的機能（例えば、抗原結合およびリガンドブロック）、構造特性およびＣＨＯ細胞における一過性発現をさらに分析した。
【００７０】
結合親和性および特異性
ヒトＰＤ−１タンパク質に対するヒト化抗ＰＤ−１抗体の一例の結合を、Ｂｉａｃｏｒｅ法を使用して測定した。結果は、Ｋａ＝２．７８×１０５Ｍ−１ｓ−１；Ｋｄ＝２．１３×１０−４ｓ−１；ＫＤ＝０．０８２７±０．００５５０５ｎＭである。
【００７１】
ヒト化技術および方法
ＢＡＰ０４９のヒト化は、ヒト生殖系列可変領域フレームワーク（ＦＷ）のコンビナトリアルライブラリーを使用して実施した。この技術は、ヒト生殖系列ＦＷ１、ＦＷ２およびＦＷ３配列を無作為に組み合わせることによって構築したヒト可変領域（ＶＲ）のライブラリーにインフレームでマウスＣＤＲを移動させることが必要である。重鎖（ＨＣ）（ＫａｂａｔヒトＨＣサブグループＩ）用にＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号４５）、軽鎖（ＬＣ）（ＫａｂａｔヒトκサブグループＩ）用にＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号４６）の１個だけのＦＷ４配列を使用した。ＶＲ配列のライブラリーをヒト定常領域（ＣＲ）配列、ＨＣのヒトＩｇＧ４（Ｓ２２８Ｐ）およびＬＣのヒトκＣＲに融合させ、得られた完全なＩｇＧのライブラリーをスクリーニングのためにＣＨＯ細胞で発現させた。スクリーニングは、組織培養上清を用いて実施し、完全な細胞のＥＬＩＳＡ法またはＦＡＣＳで抗原発現細胞に対する結合力を測定した。
【００７２】
ヒト化方法は、ヒト化クローンのスクリーニングのための比較対象として役立ち得る、適切なキメラｍＡｂ（マウスＶＲ、ＩｇＧ４（Ｓ２２８Ｐ）、ヒトκ）の構築および発現から開始するステップワイズ法で実施した。ＬＣおよびＨＣのＶＲのヒト化は、２つの独立したステップで実施した。ヒト化ＬＣ（ｈｕＬＣ）のライブラリーをキメラＨＣ（マウスＶＲ、ＩｇＧ４（Ｓ２２８Ｐ））と組み合わせ、得られた「半ヒト化」ｍＡｂの結合活性をＥＬＩＳＡによってスクリーニングした。適切な結合活性（≧キメラｍＡｂの結合）を備えたクローンのｈｕＬＣを選択した。同様に、ヒト化ＨＣ（ｈｕＨＣ）のライブラリーをキメラＬＣ（マウスＶＲ、ヒトκ）と組み合わせ、結合活性をＥＬＩＳＡによってスクリーニングした。適切な結合活性（≧キメラｍＡｂの結合）を備えたクローンのｈｕＨＣを選択した。
【００７３】
次に、選択したｈｕＬＣおよびｈｕＨＣの可変領域の配列を決定して、特有の配列を有するｈｕＬＣおよびｈｕＨＣを同定した（最初の選択方法から得られたいくつかのクローンは同じＬＣまたはＨＣを共有し得る）。次に、特有のｈｕＬＣおよびｈｕＨＣを無作為に組み合わせてヒト化ｍＡｂ（ｈｕｍＡｂ）の小さなライブラリーを作製し、ＣＨＯ細胞で発現させ、抗原発現細胞においてＥＬＩＳＡおよびＦＡＣＳ法でスクリーニングした。キメラ比較対象ｍＡｂの結合と同じかまたは優れた結合活性を有するクローンがヒト化方法の最終生成物である。
【００７４】
キメラ抗体の構築
ＬＣ配列の１０２位にＣｙｓ、ＴｙｒまたはＳｅｒ残基のいずれかを有するキメラ抗体の３つのバリアントを調製した。３つのキメラ抗体、すなわち、ＢＡＰ０４９−ｃｈｉ（Ｃｙｓ）、ＢＡＰ０４９−ｃｈｉ（Ｔｙｒ）およびＢＡＰ０４９−ｃｈｉ（Ｓｅｒ）（それぞれＢＡＰ０４９−ｃｈｉ、ＢＡＰ０４９−ｃｈｉ−ＹおよびＢＡＰ０４９−ｃｈｉ−Ｓとしても知られている）をＣＨＯ細胞で発現させ、ＰＤ−１発現Ｊｕｒｋａｔ細胞に対する結合について標識したマウス抗体と競合する能力を試験した。３つのバリアントは競合実験で区別がつかなかった。結果は、３つのキメラｍＡｂ（Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ）が同様に、標識したマウスｍＡｂ  ＢＡＰ０４９の結合と十分に競合することを示している。キメラｍＡｂ曲線とマウスｍＡｂ曲線の間のわずかな差は、おそらくｍＡｂ濃度を判定するために使用した方法の違いによるものだろう。マウスｍＡｂの濃度は、ＯＤ２８０測定値によって判定し、一方、上清中のキメラｍＡｂ濃度はＥＬＩＳＡでＩｇＧ４標準物を使用して判定した。生殖系列残基Ｔｙｒは、ヒト化抗体のために選択した。
【００７５】
ヒト化抗体クローン
ヒト化の方法によって、キメラ抗体の結合親和性と同程度の結合親和性を備えた１６個のクローンが生成した。各クローンについて、結合データに加えてＶＲ配列をｍＡｂの試料と共に提供した。試料は、ＣＨＯ細胞の一過性トランスフェクションによって調製し、組織培養上清を濃縮した。溶液中の抗体濃度は、ＩｇＧ４特異的ＥＬＩＳＡによって判定した。
【００７６】
１６個の特有のクローンは、４個の特有のＨＣ配列および９個の特有のＬＣ配列の組み合わせである。ＨＣ  ＦＷ領域については、ＨＣ配列は２個の異なるＶＨＦＷ１の１個、３個の異なるＶＨＦＷ２の１個および２個の異なるＶＨＦＷ３配列の１個の組み合わせである。ＬＣ  ＦＷ領域については、ＬＣ配列は５個の異なるＶＬＦＷ１の１個、３個の異なるＶＬＦＷ２の１個および４個の異なるＶＬＦＷ３配列の１個の組み合わせである。ヒト化ＢＡＰ０４９クローンＢおよびＥの重鎖および軽鎖可変ドメインのアミノ酸およびヌクレオチド配列を表２に示す。ヒト化ＢＡＰ０４９クローンの重鎖および軽鎖ＣＤＲのアミノ酸およびヌクレオチド配列も表２に示す。
【００７７】
ヒト化クローンの選択
クローンＢおよびＥを含む選択したクローンはさらに、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２のＰＤ−１への結合をブロックする能力およびヒトＰＢＭＣによるインビトロアッセイにおけるＴ細胞活性の増強を試験した。
【００７８】
ヒト化抗ＰＤ−１抗体、ＢＡＰ０４９の発現
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞における発現を評価するために５個のヒト化クローンを選択した。
【００７９】
Ｌｏｎｚａ’ｓ  ＧＳ  Ｘｃｅｅｄベクター（重鎖についてはＩｇＧ４ｐｒｏΔｋおよび軽鎖についてはカッパ）を使用して、単一遺伝子ベクター（ＳＧＶ）を構築した。ＳＧＶを増幅して、容量２．８Ｌで発現させるためにＣＨＯＫ１ＳＶ  ＧＳ−ＫＯ細胞に一過性同時トランスフェクトした。
【００８０】
発現培養物をトランスフェクションの６日後に収集し、遠心および滅菌濾過によって清澄にした。清澄にした細胞培養物上清は、１ステップタンパク質Ａクロマトグラフィーを使用して精製した。精製した物質を１ｍｇ／ｍｌの濃度で使用して、対照試料である抗体を含めて、ＳＥ−ＨＰＬＣ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、ＩＥＦおよびＬＡＬの形態の生成物品質分析を実施した。
【００８１】
ベクター構築
軽鎖および重鎖可変ドメインをコードする領域の配列は、ＧｅｎｅＡｒｔ  ＡＧによって合成された。Ｎ末端制限部位ＨｉｎｄＩＩＩおよびＣ末端制限部位ＢｓｉＷＩ（軽鎖）およびＡｐａＩ（重鎖）を使用して、軽鎖可変ドメインをコードする領域はｐＸＣ−Ｋａｐｐａに、重鎖可変ドメインをコードする領域はｐＸＣ−ＩｇＧ４ｐｒｏ  ΔＫベクターにそれぞれサブクローニングした。陽性クローンはＰＣＲ増幅（プライマー１０５３：ＧＣＴＧＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＧＡＣＴＧＴＴＣＣ（配列番号４７）および１０７２：ＣＡＡＡＴＧＴＧＧＴＡＴＧＧＣＴＧＡ（配列番号４８））によってスクリーニングし、制限酵素消化（ＥｃｏＲＩ−ＨＦおよびＨｉｎｄＩＩＩ−ＨＦの２重消化を使用する）および関心のある遺伝子のヌクレオチド配列決定によって確認した。
【００８２】
ＤＮＡ増幅
単一の細菌コロニーをアンピシリン５０μｇ／ｍｌを含有するＬｕｒｉａ  Ｂｅｒｔａｎｉ（ＬＢ）培地（ＬＢ  Ｂｒｏｔｈ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｌ７２７５）１５ｍｌに採取し、２２０ｒｐｍで震盪しながら３７℃で一晩インキュベートした。得られた開始培養物を使用して、アンピシリン５０μｇ／ｍｌを含有するＬｕｒｉａ  Ｂｅｒｔａｎｉ（ＬＢ）培地１Ｌに接種し、２２０ｒｐｍで震盪しながら３７℃で一晩インキュベートした。ベクターＤＮＡはＱＩＡＧＥＮ  Ｐｌａｓｍｉｄ  Ｐｌｕｓ  Ｇｉｇａｐｒｅｐ  ｓｙｓｔｅｍ（ＱＩＡＧＥＮ、１２９９１）を使用して単離した。いずれの場合も、ＤＮＡ濃度はＮａｎｏｄｒｏｐ１０００分光光度計（Ｔｈｅｒｍｏ−Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して測定し、ＥＢ緩衝液（Ｔｒｉｓ−Ｃｌ１０ｍＭ、ｐＨ８．５）で１ｍｇ／ｍｌに調節した。単一遺伝子ベクターのＤＮＡ品質は、吸光度比Ａ２６０／Ａ２８０を測定することによってアセスメントした。これは、１．８８と１．９０の間であることが確認された。
【００８３】
ＣＨＯＫ１ＳＶ  ＧＳ−ＫＯ細胞の培養
ＣＨＯＫ１ＳＶ  ＧＳ−ＫＯ細胞は、グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、２５０３０−１２３）６ｍＭを補給したＣＤ−ＣＨＯ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１０７４３−０２９）で培養した。細胞は震盪培養器で３６．５℃、５％ＣＯ２、８５％湿度、１４０ｒｐｍでインキュベートした。細胞は、常法通り２×１０５細胞／ｍｌを接種して３〜４日毎に継代培養して、トランスフェクションに利用するために十分な細胞を得るために増殖させた。２０回継代した細胞は廃棄した。
【００８４】
ＣＨＯＫ１ＳＶ  ＧＳ−ＫＯ細胞の一過性トランスフェクション
一過性トランスフェクションは、最短２週間培養したＣＨＯＫ１ＳＶ  ＧＳ−ＫＯ細胞を使用して実施した。トランスフェクションの２４時間前に細胞を継代培養し、細胞の生存能はトランスフェクト時に＞９９％であった。
【００８５】
トランスフェクトは全て、プレートをベースにしたエレクトロポレーションシステム、Ｇｅｎｅ  Ｐｕｌｓｅ  ＭＸＣｅｌｌ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を使用してエレクトロポレーションによって実施した。各トランスフェクションでは、生細胞を予め温めた培地に２．８６×１０７細胞／ｍｌになるように再懸濁した。ＤＮＡ（重鎖および軽鎖ＳＧＶの比１：１）８０μｇおよび細胞懸濁液７００μｌを各キュベット／ウェルに分注した。細胞を３００Ｖ、１３００μＦでエレクトロポレーションした。トランスフェクトした細胞をエルレンマイヤーフラスコ内の予め温めた培地に移し、キュベット／ウェルを予め温めた培地で２回濯ぎ、これもフラスコに移した。トランスフェクトした細胞培養物は震盪培養器で３６．５℃、５％ＣＯ２、８５％湿度、１４０ｒｐｍで６日間インキュベートした。細胞生存能および生細胞濃度は、Ｃｅｄｅｘ  ＨｉＲｅｓ自動細胞計数機（Ｒｏｃｈｅ）を使用して収集時に測定した。
【００８６】
ヒト化抗ＰＤ−１抗体の特徴
結合親和性および特異性
表２に示したようなクローンＢおよびクローンＥを含むヒト化抗ＰＤ−１抗体の一例のヒトＰＤ−１タンパク質に対する結合は、Ｂｉａｃｏｒｅ法を使用して測定した。結果は、Ｋａ＝２．７８×１０５Ｍ−１ｓ−１；Ｋｄ＝２．１３×１０−４ｓ−１；ＫＤ＝０．０８２７±０．００５５０５ｎＭである。
【００８７】
ヒトＰＤ−１発現３００．１９細胞に対する同じヒト化抗ＰＤ−１抗体の結合は、ＦＡＣＳ分析を使用して測定した。その結果は、抗ＰＤ−１抗体（ヒトＩｇＧ４）がヒトＩｇＧ４アイソタイプ対照と比較してヒトＰＤ−１に対して高い親和性で結合することを示す。
【００８８】
例示されたヒト化抗ＰＤ−１抗体は、カニクイザルＰＤ−１タンパク質およびカニクイザルＰＤ−１発現３００．１９細胞に対して高い親和性を表すことが見いだされた。Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定したように、抗ＰＤ−１抗体はカニクイザルＰＤ−１に０．０９３±０．０１５ｎＭのＫＤで結合する。カニクイザルＰＤ−１に対する結合親和性は、ヒトＰＤ−１に対する結合親和性と同程度である。
【００８９】
さらに結合を分析することによって、例示されたヒト化抗ＰＤ−１抗体は、マウスＰＤ−１と交差反応しないか、または親細胞系と交差反応することが示される。
【００９０】
ＰＤ−１とそのリガンドとの相互作用のブロック
例示されたヒト化抗ＰＤ−１抗体がＰＤ−１とその公知のリガンド、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の両方との相互作用をブロックする能力を調べた。その結果は、抗ＰＤ−１抗体がヒトＩｇＧ４アイソタイプ対照および抗体を含まない対照と比較して、ヒトＰＤ−１を発現する３００．１９細胞上のＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の結合をブロックすることを示す。抗ＰＤ−１抗体は、３００．１９細胞上のＰＤ−Ｌ１結合を０．９４±０．１５ｎＭのＩＣ５０でブロックした。同抗体は、３００．１９細胞上のＰＤ−Ｌ２結合を１．３±０．２５ｎＭのＩＣ５０でブロックした。
【００９１】
抗ＰＤ−１抗体の生物学的活性および機能
その他の実施形態では、前記抗体分子は、ヒトＰＤ−１に約０．２ｎＭ未満の解離定数（ＫＤ）で結合することができる。
【００９２】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定すると、ヒトＰＤ−１に約０．２ｎＭ未満、０．１５ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０５ｎＭ、または０．０２ｎＭ、例えば、約０．１３ｎＭから０．０３ｎＭ、例えば、約０．０７７ｎＭから０．０８８ｎＭ、例えば、約０．０８３ｎＭのＫＤで結合する。
【００９３】
その他の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定すると、カニクイザルＰＤ−１に約０．２ｎＭ未満、０．１５ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０５ｎＭ、または０．０２ｎＭ、例えば、約０．１１ｎＭから０．０８ｎＭ、例えば、約０．０９３ｎＭのＫＤで結合する。
【００９４】
ある特定の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定すると、ヒトＰＤ−１およびカニクイザルＰＤ−１の両方に類似のＫＤ、例えば、ｎＭの範囲で結合する。一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、ＥＬＩＳＡによって測定すると、ヒトＰＤ−１−Ｉｇ融合タンパク質に約０．１ｎＭ未満、０．０７５ｎＭ、０．０５ｎＭ、０．０２５ｎＭまたは０．０１ｎＭ、例えば、約０．０４ｎＭのＫＤで結合する。
【００９５】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、ＦＡＣＳ分析によって測定すると、ヒトＰＤ−１を発現するＪｕｒｋａｔ細胞（例えば、ヒトＰＤ−１をトランスフェクトしたＪｕｒｋａｔ細胞）に約０．１ｎＭ未満、０．０７５ｎＭ、０．０５ｎＭ、０．０２５ｎＭまたは０．０１ｎＭ、例えば、約０．０６ｎＭのＫＤで結合する。
【００９６】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、ＦＡＣＳ分析によって測定すると、カニクイザルＴ細胞に約１ｎＭ未満、０．７５ｎＭ、０．５ｎＭ、０．２５ｎＭまたは０．１ｎＭ、例えば、約０．４ｎＭのＫＤで結合する。
【００９７】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、ＦＡＣＳ分析によって測定すると、カニクイザルＰＤ−１を発現する細胞（例えば、カニクイザルＰＤ−１をトランスフェクトした細胞）に約１ｎＭ未満、０．７５ｎＭ、０．５ｎＭ、０．２５ｎＭまたは０．０１ｎＭ、例えば、約０．６ｎＭのＫＤで結合する。
【００９８】
その他の実施形態では、前記抗体分子はＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２もしくはその両方、またはＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２もしくはその両方を発現する細胞への結合を抑制することができる。一部の実施形態では、前記抗体分子はＰＤ−１を発現する細胞（例えば、ヒトＰＤ−１発現３００．１９細胞）へのＰＤ−Ｌ１結合を約１．５ｎＭ未満、１ｎＭ、０．８ｎＭ、０．６ｎＭ、０．４ｎＭ、０．２ｎＭもしくは０．１ｎＭ、例えば、約０．７９ｎＭと約１．０９ｎＭの間、例えば、約０．９４ｎＭまたは約０．７８ｎＭもしくはそれ未満、例えば、約０．３ｎＭのＩＣ５０で抑制する（例えば、ブロックする）。一部の実施形態では、前記抗体はＰＤ−１を発現する細胞（例えば、ヒトＰＤ−１発現３００．１９細胞）へのＰＤ−Ｌ２結合を約２ｎＭ未満、１．５ｎＭ、１ｎＭ、０．５ｎＭもしくは０．２ｎＭ、例えば、約１．０５ｎＭと約１．５５ｎＭの間、または約１．３ｎＭもしくはそれ未満、例えば、約０．９ｎＭのＩＣ５０で抑制する（例えば、ブロックする）。
【００９９】
その他の実施形態では、前記抗体分子は抗原特異的Ｔ細胞応答を増強することができる。
【０１００】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、ＳＥＢ  Ｔ細胞活性化アッセイまたはヒト全血エクスビボアッセイで測定すると、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用したときのＩＬ−２の発現と比較して、ブドウ球菌性（staphylococcal）エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）（例えば、２５μｇ／ｍＬで）によって活性化した細胞のＩＬ−２の発現を、少なくとも約２、３、４、５倍、例えば、約２から３倍、例えば、約２から２．６倍、例えば、約２．３倍増加させる。
【０１０１】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、ＩＦＮ−γ活性アッセイで測定すると、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用したときのＩＮＦ−γの発現と比較して、抗ＣＤ３（例えば、０．１μｇ／ｍＬで）によって刺激したＴ細胞のＩＦＮ−γの発現を少なくとも約２、３、４、５倍、例えば、約１．２から３．４倍、例えば、約２．３倍増加させる。
【０１０２】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、ＩＦＮ−γ活性アッセイで測定すると、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用したときのＩＦＮ−γの発現と比較して、ＳＥＢ（例えば、３ｐｇ／ｍＬで）によって活性化したＴ細胞のＩＦＮ−γの発現を少なくとも約２、３、４、５倍、例えば、約０．５から４．５倍、例えば、約２．５倍増加させる。
【０１０３】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、ＩＦＮ−γ活性アッセイで測定すると、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用したときのＩＦＮ−γの発現と比較して、ＣＭＶペプチドで活性化したＴ細胞のＩＦＮ−γの発現を少なくとも約２、３、４、５倍、例えば、約２から３．６倍、例えば、約２．８倍増加させる。
【０１０４】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、少なくともｎ（例えば、ｎ＝２または４）細胞分裂を経過したＣＤ８＋Ｔ細胞のパーセンテージによって測定すると、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用したときのＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖と比較して、ＣＭＶペプチドで活性化したＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を少なくとも約１、２、３、４、５倍、例えば、約１．５倍増加させる。
【０１０５】
ある特定の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、サルで測定すると、Ｃｍａｘが約１００μｇ／ｍＬと約５００μｇ／ｍＬの間、約１５０μｇ／ｍＬと約４５０μｇ／ｍＬの間、約２５０μｇ／ｍＬと約３５０μｇ／ｍＬの間、または約２００μｇ／ｍＬと約４００μｇ／ｍＬの間、例えば、約２９２．５μｇ／ｍＬである。
【０１０６】
ある特定の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、サルで測定すると、Ｔ１／２が約２５０時間と約６５０時間の間、約３００時間と約６００時間の間、約３５０時間と約５５０時間の間、または約４００時間と約５００時間の間、例えば、約４６５．５時間である。
【０１０７】
一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定すると、ＰＤ−１に５×１０−４より小さい、１×１０−４、５×１０−５または１×１０−５ｓ−１、例えば、約２．１３×１０−４ｓ−１Ｋｄで結合する。一部の実施形態では、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定すると、ＰＤ−１に１×１０４より速い、５×１０４、１×１０５または５×１０５Ｍ−１ｓ−１、例えば、約２．７８×１０５Ｍ−１ｓ−１のＫａで結合する。
【０１０８】
さらなる組み合わせ相手
任意の実施形態における抗ＰＤ−１抗体および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体の組み合わせ相手は、好ましくは共同して治療上活性があるように製剤化または使用する。これは特に、少なくとも１つの有益な効果、例えば、組み合わせ相手の効果の相互増強、特に、例えば、相加効果を上回る相乗作用、さらに有利な効果（例えば、単一の抗体のいずれにおいても見いだされないさらなる治療効果）、少ない副作用、および／または組み合わせ相手の１つまたは両方の効力のない投薬量での組み合わせ治療効果があることを意味する。例えば、「共同して（治療上）活性がある」という用語は、化合物は、好ましくは治療する温血動物、特にヒトにおいて、まだ（好ましくは、相加的を上回って、または相乗的に増強した）相互作用（共同治療効果）を示すような時間間隔で、別々に、または順次（時間的にずらした方法、特に、配列特異的な方法で）投与してもよいことを意味する。共同治療効果は、特に、腫瘍量の縮小または症状の低減によって、以下に記載したように判定することができる。
【０１０９】
一態様では、本発明は、本明細書で記載したがん性腫瘍の増殖が阻害または抑制されるように、抗ＰＤ−１抗体分子および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子の組み合わせを使用して、インビボにおいて対象を治療することに関する。抗ＰＤ−１抗体および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子の組み合わせは、単独で使用してがん性腫瘍の増殖を阻害するか、あるいは標準治療（例えば、がん用）、別の抗体もしくはその抗原結合断片、免疫調節因子（例えば、共刺激分子の活性化因子または阻害分子の阻害剤）またはワクチン、例えば、細胞免疫療法のその他の形態である治療用がんワクチンの１つまたは複数と組み合わせて使用することができる。
【０１１０】
一例では、本明細書で記載した組み合わせは、内分泌受容体（エストロゲンまたはプロゲステロン受容体）陽性、ＨＥＲ２陽性、トリプルネガティブ（エストロゲン、プロゲステロンの受容体またはＨＥＲ２が陽性ではない）またはトリプルポジティブ（エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体およびＨＥＲ２が陽性である）などの乳がんの治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療（乳がんの病期に応じている）で治療されたことがある、または標準治療で治療されている患者、またはいかなる治療もまだ受けていない患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療した、または標準治療を受けているが、疾患進行を示す進行型のトリプルネガティブ乳がんの患者を治療するために使用する。
【０１１１】
別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、メラノーマの治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療（例えば、カルボプラチンおよびパクリタキセルまたはカルボプラチン／ゲムシタビン、またはパクリタキセル）で治療されたことがある、または治療されている、またはその他の免疫調節チェックポイント阻害剤（ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１）に抵抗または難治性である患者、またはいかなる治療もまだ受けたことがない患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１で治療された、このような治療に抵抗性もしくは難治性の、または標準治療を受けているが疾患進行を示すメラノーマ患者を治療するために使用する。
【０１１２】
別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、卵巣がんの治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療（例えば、カルボプラチンおよびパクリタキセルまたはカルボプラチン／ゲムシタビンまたはパクリタキセル）で治療されたことがある、または治療されている患者、またはいかなる治療もまだ受けたことがない患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療されたことがある、または標準治療を受けているが、疾患進行を示す進行型の卵巣がんの患者を治療するために使用する。
【０１１３】
一例では、本明細書で記載した組み合わせは、膵臓がんの治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療（例えば、ゲムシタビン）で治療されたことがある、または標準治療で治療されている、またはいかなる治療もまだ受けたことがない膵臓がんの患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療されたことがある、または標準治療を受けているが、疾患進行を示す進行型の膵臓がんの患者を治療するために使用する。本明細書で記載した組み合わせは、標準治療を受けている、または標準治療を受けたことがある患者に投与することができる。
【０１１４】
別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、神経膠芽腫の治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療で治療されたことがある、または標準治療で治療されている、またはいかなる治療もまだ受けたことがない患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療されたことがあるが、疾患進行を示す神経膠芽腫の患者を治療するために使用する。
【０１１５】
別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、肺腺癌または扁平上皮細胞肺がんなどの肺がんの治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療（例えば、カルボプラチン／ゲムシタビンまたはパクリタキセル）で治療されたことがある、または標準治療で治療されている、またはいかなる治療もまだ受けたことがない肺がんの患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療されたことがあるが、疾患進行を示す肺がんの患者を治療するために使用する。
【０１１６】
別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、腎細胞癌の治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療で治療されたことがある、または標準治療で治療されている、またはいかなる治療もまだ受けたことがない患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療されたことがあるが、疾患進行を示す腎細胞癌の患者を治療するために使用する。
【０１１７】
別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫の治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療で治療されたことがある、または標準治療で治療されている、またはいかなる治療もまだ受けたことがない患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療されたことがあるが、疾患進行を示すびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫の患者を治療するために使用する。
【０１１８】
別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、中皮腫の治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療で治療されたことがある、または標準治療で治療されている、またはいかなる治療もまだ受けたことがない患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療されたことはあるが、疾患進行を示す中皮腫の患者を治療するために使用する。
【０１１９】
別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、上咽頭癌の治療のために使用することができる。組み合わせを投与されているがん対象者は、以前に標準治療で治療したことがある、または標準治療で治療されている、またはいかなる治療もまだ受けたことがない患者であってもよい。一例では、本明細書で記載した組み合わせは、標準治療で治療されたことがあるが、疾患進行を示す上咽頭癌の患者を治療するために使用する。
【０１２０】
さらに別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、免疫チェックポイント分子の阻害剤などの免疫調節因子に抵抗性または難治性のがんの治療のために使用することができる。一実施形態では、免疫調節因子は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４および／またはＴＧＦＲベータの阻害剤である。別の例では、免疫調節因子は抗ＰＤ−１または抗ＰＤ−Ｌ１である。この例では、本明細書で記載した組み合わせは、以前に抗ＰＤ−１または抗ＰＤＬ１で治療されたことがあるが、疾患進行を示す進行型のトリプルネガティブ乳がんの患者を治療するために使用する。別の例では、本明細書で記載した組み合わせは、以前に抗ＰＤ−１または抗ＰＤＬ１で治療されたことがあるが、疾患進行を示すメラノーマの患者を治療するために使用する。
【０１２１】
したがって、本発明の組み合わせは、本明細書で記載した組み合わせの治療有効量を対象に投与することを含む、対象における腫瘍細胞の増殖を阻害する方法を提供する。別の実施形態では、本発明の組み合わせは、単独で、または１つもしくは複数のその他の薬剤と組み合わせて投与することができ、この組み合わせは、いずれかの順番で、または同時に投与することができる。一例では、本明細書で開示した併用治療は、１つまたは複数のさらなる治療剤、例えば、１つまたは複数の抗がん剤、細胞傷害性薬剤もしくは細胞分裂阻害剤、ホルモン治療薬、ワクチンおよび／またはその他の免疫療法薬と同時に製剤化された、および／または同時に投与された本発明の組成物を含むことができる。その他の実施形態では、本明細書で記載した組み合わせは、手術、照射、凍結療法および／または温熱療法を含むその他の治療処置様式と組み合わせて投与することができる。このような併用療法によって、投与治療剤のより少ない投薬量を有利に利用することができ、したがって、様々な単独療法に伴う毒性または合併症の可能性を回避することができる。
【０１２２】
「と組み合わせた」とは、療法または治療剤を、同時に投与および／または一緒に送達するために製剤化しなければならないことを意味するものではないが、これらの送達方法は本明細書で記載した範囲内である。抗ＰＤ−１抗体および抗Ｍ−ＣＳＦ分子は、１つまたは複数のその他のさらなる療法もしくは治療剤と平行して、または前に、または後で投与することができる。抗ＰＤ−１抗体および抗Ｍ−ＣＳＦ分子およびその他の薬剤または治療プロトコールは、いかなる順番で投与してもよい。全般的に、各薬剤は、その薬剤のために決定された用量および／または時間スケジュールで投与する。使用したさらなる治療剤は、単一の組成物と一緒に投与するか、様々な組成物と別々に投与することができることはさらに理解されるだろう。全般的に、組み合わせて使用したさらなる治療剤のレベルは、それらを個々に使用するときのレベルを超えないレベルで使用されることが予測される。一部の実施形態では、組み合わせて使用するレベルは、個々の使用するレベルよりも低くなる。
【０１２３】
ある特定の実施形態では、本発明の組み合わせは、当技術分野で公知のＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２の１つまたは複数のその他の阻害剤と組み合わせて投与する。アンタゴニストは、抗体、それらの抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質またはオリゴペプチドであってもよい。一部の実施形態では、その他の抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ−１１０６、Ｍｅｒｃｋ３４７５またはＣＴ−０１１から選択する。一部の実施形態では、ＰＤ−１阻害剤は、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、イムノグロブリン配列のＦｃ領域）に融合したＰＤ−ＬｌもしくはＰＤ−Ｌ２の細胞外もしくはＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシン）である。一部の実施形態では、ＰＤ−１阻害剤はＡＭＰ−２２４である。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌｌ阻害剤は抗ＰＤ−Ｌｌ抗体である。一部の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌｌ結合アンタゴニストは、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ−００１０７１８ＣまたはＭＤＸ−１１０５から選択する。ＢＭＳ−９３６５５９としても知られているＭＤＸ−１１０５は、国際公開第２００７／００５８７４号パンフレットに記載された抗ＰＤ−Ｌｌ抗体である。抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０（それぞれ配列番号２０および２１で示された重鎖および軽鎖可変領域配列）は、国際公開第２０１０／０７７６３４号パンフレットで記載された抗ＰＤ−Ｌｌである。
【０１２４】
ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８またはＢＭＳ−９３６５５８としても知られているＭＤＸ−１１０６は、国際公開第２００６／１２１１６８号パンフレットに記載された抗ＰＤ−１抗体である。ＭＫ−３４７５またはＳＣＨ−９００４７５としても知られているＭｅｒｃｋ３７４５は、国際公開第２００９／１１４３３５号パンフレットに記載された抗ＰＤ−１抗体である。ピリディズマブ（ＣＴ−０１１；Ｃｕｒｅ  Ｔｅｃｈ）は、ＰＤ−１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である。ピリディズマブおよびその他のヒト化抗ＰＤ−１モノクローナル抗体は国際公開第２００９／１０１６１１号パンフレットに開示されている。その他の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はペンブロリズマブである。ペンブロリズマブ（ＭＫ−３４７５としても知られている商品名キイトルーダ、以前はランブロリズマブ）は、例えば、Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44において開示されている。ＡＭＰ−２２４（例えば、国際公開第２０１０／０２７８２７号パンフレットおよび国際公開第２０１１／０６６３４２号パンフレットにおいて開示されたＢ７−ＤＣＩｇ；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）は、ＰＤ−１とＢ７−Ｈ１との間の相互作用をブロックするＰＤ−Ｌ２  Ｆｃ融合可溶性受容体である。その他の抗ＰＤ−１抗体には、ＡＭＰ５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、特に、例えば、米国特許第８６０９０８９号明細書、米国特許出願公開第２０１００２８３３０号明細書および／または米国特許出願公開第２０１２０１１４６４９号明細書で開示された抗ＰＤ−１抗体が含まれる。
【０１２５】
本発明の組み合わせと組み合わせることができるその他の薬剤の例には、標準治療の化学療法剤を含めることができ、限定はしないが、アナストロゾール（Ａｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標））、ビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標））、硫酸ブレオマイシン（Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標））、ブスルファン（Ｍｙｌｅｒａｎ（登録商標））、ブスルファン注入（Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標））、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ（登録商標））、Ｎ４−ペントキシカルボニル−５−デオキシ−５−フルオロシチジン、カルボプラチン（Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標））、カルムスチン（ＢｉＣＮＵ（登録商標））、クロランブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標））、シスプラチン（Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標））、クラドリビン（Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（登録商標））、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）またはＮｅｏｓａｒ（登録商標））、シタラビン、シトシンアラビノシド（Ｃｙｔｏｓａｒ−Ｕ（登録商標））、シタラビンリポソーム注入（ＤｅｐｏＣｙｔ（登録商標））、ダカルバジン（ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標））、ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ、Ｃｏｓｍｅｇａｎ）、塩酸ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標））、クエン酸ダウノルビシンリポソーム注入（ＤａｕｎｏＸｏｍｅ（登録商標））、デキサメタゾン、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、塩酸ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ｒｕｂｅｘ（登録商標））、エトポシド（Ｖｅｐｅｓｉｄ（登録商標））、リン酸フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａ（登録商標））、５−フルオロウラシル（Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）、Ｅｆｕｄｅｘ（登録商標））、フルタミド（Ｅｕｌｅｘｉｎ（登録商標））、テザシチビン、ゲムシタビン（ジフルオロデオキシシチジン）、ヒドロキシウレア（Ｈｙｄｒｅａ（登録商標））、イダルビシン（Ｉｄａｍｙｃｉｎ（登録商標））、イホスファミド（ＩＦＥＸ（登録商標））、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標））、Ｌ−アスパラギナーゼ（ＥＬＳＰＡＲ（登録商標））、ロイコボリンカルシウム、メルファラン（Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標））、６−メルカプトプリン（Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標））、メトトレキサート（Ｆｏｌｅｘ（登録商標））、ミトキサントロン（Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標））、マイロターグ、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、フェニックス（Ｙｔｔｒｉｕｍ９０／ＭＸ−ＤＴＰＡ）、ペントスタチン、カルムスチンインプラント（Ｇｌｉａｄｅｌ（登録商標））を伴うポリフェプロザン２０、クエン酸タモキシフェン（Ｎｏｌｖａｄｅｘ（登録商標））、テニポシド（Ｖｕｍｏｎ（登録商標））、６−チオグアニン、チオテパ、チラパザミン（Ｔｉｒａｚｏｎｅ（登録商標））、注入用塩酸トポテカン（Ｈｙｃａｍｐｔｉｎ（登録商標））、ビンブラスチン（Ｖｅｌｂａｎ（登録商標））、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））、ビノレルビン（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標））、イブリチニブ、イデラリシブおよびブレンツキシマブベドチンが含まれる。
【０１２６】
アルキル化剤の例には、限定はしないが、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン誘導体、アルキルスルホン酸塩、ニトロソウレアおよびトリアゼン）：ウラシルマスタード（Ａｍｉｎｏｕｒａｃｉｌ  Ｍｕｓｔａｒｄ（登録商標）、Ｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎａｃｉｌ（登録商標）、Ｄｅｍｅｔｈｙｌｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｈａｅｍａｎｔｈａｍｉｎｅ（登録商標）、Ｎｏｒｄｏｐａｎ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌ  ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｍｕｓｔａｒｄ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌｌｏｓｔ（登録商標）、Ｕｒａｃｉｌｍｏｓｔａｚａ（登録商標）、Ｕｒａｍｕｓｔｉｎ（登録商標）、Ｕｒａｍｕｓｔｉｎｅ（登録商標））、クロルメチン（Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標））、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）、Ｎｅｏｓａｒ（登録商標）、Ｃｌａｆｅｎ（登録商標）、Ｅｎｄｏｘａｎ（登録商標）、Ｐｒｏｃｙｔｏｘ（登録商標）、Ｒｅｖｉｍｍｕｎｅ（商標））、イホスファミド（Ｍｉｔｏｘａｎａ（登録商標））、メルファラン（Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標））、クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標））、ピポブロマン（Ａｍｅｄｅｌ（登録商標）、Ｖｅｒｃｙｔｅ（登録商標））、トリエチレンメラミン（Ｈｅｍｅｌ（登録商標）、Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）、Ｈｅｘａｓｔａｔ（登録商標））、トリエチレンチオホスホラミン、テモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標））、チオテパ（Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標））、ブスルファン（Ｂｕｓｉｌｖｅｘ（登録商標）、Ｍｙｌｅｒａｎ（登録商標））、カルムスチン（ＢｉＣＮＵ（登録商標））、ロムスチン（ＣｅｅＮＵ（登録商標））、ストレプトゾシン（Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標））およびダカルバジン（ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標））が含まれる。さらなる例示的なアルキル化剤には、限定はしないが、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））；テモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）およびＴｅｍｏｄａｌ（登録商標））；ダクチノマイシン（アクチノマイシン−Ｄとしても知られる、Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（登録商標））；メルファラン（Ｌ−ＰＡＭ、Ｌ−サルコリシンおよびフェニルアラニンマスタードとしても知られる、Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標））；アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても知られる、Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標））；カルムスチン（ＢｉＣＮＵ（登録商標））；ベンダムスチン（Ｔｒｅａｎｄａ（登録商標））；ブスルファン（Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標）およびＭｙｌｅｒａｎ（登録商標））；カルボプラチン（Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標））；ロムスチン（ＣＣＮＵとしても知られる、ＣｅｅＮＵ（登録商標））；シスプラチン（ＣＤＤＰとしても知られる、Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）およびＰｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）−ＡＱ）；クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標））；シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）およびＮｅｏｓａｒ（登録商標））；ダカルバジン（ＤＴＩＣ、ＤＩＣおよびイミダゾールカルボキサミドとしても知られる、ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標））；アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても知られる、Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標））；イホスファミド（Ｉｆｅｘ（登録商標））；プレドニムスチン；プロカルバジン（Ｍａｔｕｌａｎｅ（登録商標））；メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード、ムスチンおよびメクロロエタミン塩酸塩としても知られる、Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標））；ストレプトゾシン（Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標））；チオテパ（チオホスホラミド、ＴＥＳＰＡおよびＴＳＰＡとしても知られる、Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標））；シクロホスファミド（Ｅｎｄｏｘａｎ（登録商標）、Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）、Ｎｅｏｓａｒ（登録商標）、Ｐｒｏｃｙｔｏｘ（登録商標）、Ｒｅｖｉｍｍｕｎｅ（登録商標））；およびベンダムスチンＨＣｌ（Ｔｒｅａｎｄａ（登録商標）が含まれる。
【０１２７】
アントラサイクリンの例には、例えば、ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）およびＲｕｂｅｘ（登録商標））；ブレオマイシン（ｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標））；ダウノルビシン（ダウノルビシン塩酸塩、ダウノマイシンおよびルビドマイシン塩酸塩、Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標））；ダウノルビシンリポソーム型（ダウノルビシンクエン酸塩リポソーム、ＤａｕｎｏＸｏｍｅ（登録商標））；ミトキサントロン（ＤＨＡＤ、Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標））；エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ（商標））；イダルビシン（Ｉｄａｍｙｃｉｎ（登録商標）、Ｉｄａｍｙｃｉｎ  ＰＦＳ（登録商標））；マイトマイシンＣ（Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ（登録商標））；ゲルダナマイシン；ハービマイシン；ラビドマイシン；およびデスアセチルラビドマイシンが含まれる。
【０１２８】
単独の、または別の免疫調節剤（例えば、抗ＬＡＧ−３、抗ＰＤ−Ｌ１または抗ＴＩＭ−３抗体分子）と組み合わせた抗ＰＤ−１抗体分子と組み合わせて使用することができるビンカアルカロイドの例には、限定はしないが、ビノレルビン酒石酸塩（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標））、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））およびビンデシン（Ｅｌｄｉｓｉｎｅ（登録商標））；ビンブラスチン（ビンブラスチン硫酸塩、ビンカロイコブラスチンおよびＶＬＢとしても知られる、Ａｌｋａｂａｎ−ＡＱ（登録商標）およびＶｅｌｂａｎ（登録商標））；ならびにビノレルビン（Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標））が含まれる。
【０１２９】
組成物および使用
本発明は、がんの治療において、（特に、共同して活性を有するように）特に、それらを同時に、別々に、または順次使用するための指示と一緒に、本明細書で記載した本発明による組み合わせ製品を含む医薬製品または包装商品に関する。一態様では、本発明は、医薬的に許容される担体と一緒に製剤化された、本明細書で記載したようなＰＤ−１抗体分子および本明細書で記載したようなＭ−ＣＳＦ抗体分子を含む組成物、例えば、医薬的に許容される組成物を提供する。本明細書では、「医薬的に許容される担体」には、生理学的に適合した、ありとあらゆる溶媒、分散媒、等張剤および吸収遅延剤などが含まれる。担体は、（例えば、注射または注入による）静脈内、筋肉内、皮下、非経口、直腸内、脊髄内または表皮投与に適することができる。
【０１３０】
本発明の組成物は、様々な形態であってもよい。これらには、例えば、液体、半固体および固体剤形、例えば、液体溶液（例えば、注射可能および注入可能な溶液）、分散剤または懸濁剤、リポソームおよび坐剤が含まれる。好ましい形態は、企図する投与様式および治療用途によって決まる。典型的に好ましい組成物は、注射可能または注入可能な溶液の形態である。好ましい投与様式は非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）である。好ましい実施形態では、本明細書で開示した組み合わせは、静脈内注入または注射によって投与する。別の好ましい実施形態では、本明細書で開示した組み合わせは、筋肉内または皮下注射によって投与する。
【０１３１】
治療用組成物は典型的には製造および保存条件下において無菌かつ安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、分散液、リポソームまたは高い抗体濃度に適したその他の秩序構造物として製剤化することができる。滅菌した注射可能溶液は、上記に列記した成分の１つまたは組み合わせを含む適切な溶媒に必要な量で活性化合物（すなわち、抗体または抗体部分）を組み込み、必要ならば、濾過滅菌することによって調製することができる。一般的に、分散剤は、基本的な分散媒体および前記で列記した成分以外の必要な成分を含有する滅菌媒体に活性成分を組み込むことによって調製する。滅菌した注射可能な溶液を調製するための滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、前もって滅菌濾過したそれらの溶液から活性成分および任意の追加的な所望の成分の粉末を生成する真空乾燥および凍結乾燥である。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散剤の場合は必要な粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって維持することができる。注射可能な組成物の吸収の持続は、組成物に吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを含めることによってもたらすことができる。
【０１３２】
開示した方法で使用するための医薬組成物は、従来の方法で製造することができる。医薬品の活性成分としての抗体の使用は今では広く普及しており、製品Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（トラスツズマブ）、Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）（リツキシマブ）、Ｓｙｎａｇｉｓ（登録商標）（パリビズマブ）などが含まれる。水性製剤の凍結乾燥、調製および抗体の医薬品グレードへの精製の技術は、当技術分野では周知である。
【０１３３】
抗体は典型的に、非経口投与のために準備された水性形態か、または投与前に適切な希釈剤で再構成するための凍結乾燥物として製剤化される。開示した方法および使用の一部の実施形態では、本発明の抗体は凍結乾燥物として製剤化する。適切な凍結乾燥製剤は、皮下投与を可能にするために、少量の液体（例えば、２ｍｌ以下）で再構成することができ、抗体凝集レベルの低い溶液を提供することができる。すぐに投与するために、適切な水性担体、例えば、注射用滅菌水または滅菌緩衝生理食塩水中に溶解する。ボーラス注射ではなく注入によって投与するために大量の溶液を作製することが望ましいと考えられるならば、製剤化と同時に生理食塩水にヒト血清アルブミンまたは患者自身のヘパリン化血液を組み込むことが有利であり得る。このような生理学的に不活性なタンパク質が過剰に存在すると、注入溶液で使用した容器およびチューブの壁に吸着することによる抗体の損失が防がれる。アルブミンを使用する場合、生理食塩水溶液の適切な濃度は０．５から４．５重量％である。
【０１３４】
投与方法および速度（Rate）
本明細書で開示した組み合わせの抗体分子は、当技術分野で公知の様々な方法によって投与することができ、治療的適用は多いが、好ましい投与経路／様式は静脈内注射または注入である。例えば、Sachs et al., Optimal Dosing for Targeted Therapies in Oncology: Drug Development Cases Leading by Example, Clin. Cancer Res; 22(6) 2016; Bai et al, A Guide to Rational Dosing of Monoclonal Antibodies, Clin. Pharmacokinet. 2012: 51 (2) 119-135; Le Tourneau, J., Dose Escalation Methods in Phase I Cancer Clinical Trials, J Natl Cancer Inst 2009; 101:708-720; Wang, D. et al., Fixed Dosing Versus Body Size-Based Dosing of Monoclonal Antibodies in Adult Clinical Trials, J Clin Pharmacol 2009;29:1012-1024; Hempel, G. et ano, Flat-Fixed Dosing Versus Body Surface Aread-Based Dosing of Anticancer Drugs: There Is a Difference, The Oncologist 2007: 12:924-926, Mathijssen, R., Flat-Fixed Dosing Versus Body Surface Area-Based Dosing of Anticancer Drugs in Adults: Does It Make a Difference?, The Oncologist, 2007;12:913-923; Leveque, Evaluation of Fixed Dosing of New Anticancer Agents in Phase I Studies, Anticancer Research 28:300275-2078 (2008), Gurney, How to calculate the dose of chemotherapy, British Journal of Cancer (2002) 86, 1297-1302を参照のこと。例えば、抗体分子は、用量が約３５から４４０ｍｇ／ｍ２、典型的に約７０から３１０ｍｇ／ｍ２、より典型的に約１１０から１３０ｍｇ／ｍ２に達するように、２０ｍｇ／分超、例えば、２０〜４０ｍｇ／分、典型的には４０ｍｇ／分以上の速度で静脈注入によって投与することができる。実施形態では、抗体分子は、用量が約１から１００ｍｇ／ｍ２、好ましくは約５から５０ｍｇ／ｍ２、約７から２５ｍｇ／ｍ２、より好ましくは約１０ｍｇ／ｍ２に達するように、１０ｍｇ／分未満、好ましくは５ｍｇ／分以下の速度で静脈注入によって投与することができる。投与経路および／または様式は、所望する結果に応じて変化する。
【０１３５】
投薬レジメン（dosage regimen）
投薬レジメンは、最適な所望する応答（例えば、治療応答）を実現するために調節する。例えば、単回でボーラス投与してもよく、数回に分けた用量を徐々に投与してもよく、または治療状況の緊急性によって適応となれば、用量を比例的に低減または増加させてもよい。投与を簡単にするため、および投薬を均一にするために、非経口用組成物を単位投与形態で製剤化することが特に有利である。本明細書では、単位投与形態（dosage unit form）とは、治療する対象のための単位投薬として適した物理的に分離された単位を意味し、各単位は、必要な医薬担体と関連して所望する治療効果を生じるように計算された活性化合物の予め決定された量を含有する。本発明の単位投与形態の詳細は、（ａ）活性化合物の特有の特性および実現する特定の治療効果、ならびに（ｂ）個々の感受性を治療するためにこのような活性化合物の調合の当技術分野固有の制限によって決定され、直接左右される。
【０１３６】
体重による投薬量（weight dosage）
抗体は、患者の体重に応じて投与することができる。抗体分子の治療または予防有効量の非限定的な範囲の一例は、０．１〜３０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１〜２５ｍｇ／ｋｇである。本細書で開示した組み合わせの投薬量および治療レジメンは、当業者が決定することができる。別々に、または同時に送達することができる。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、注射によって（例えば、皮下または静脈内）約１から４０ｍｇ／ｋｇ、例えば、１から３０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約３から２５ｍｇ／ｋｇ、約３から２０ｍｇ／ｋｇ、約１から５ｍｇ／ｋｇ、１から１０ｍｇ／ｋｇ、３から１０ｍｇ／ｋｇ、５から１５ｍｇ／ｋｇ、１０から２０ｍｇ／ｋｇ、１５から２５ｍｇ／ｋｇまたは約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体は注射によって（例えば、皮下または静脈内）約１から４０ｍｇ／ｋｇ、例えば、１から３０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約３から２５ｍｇ／ｋｇ、約１０から２０ｍｇ／ｋｇ、約１から５ｍｇ／ｋｇ、３から１０ｍｇ／ｋｇ、１から１０ｍｇ／ｋｇ、５から１５ｍｇ／ｋｇ、１０から２０ｍｇ／ｋｇ、１５から２５ｍｇ／ｋｇまたは約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。
【０１３７】
一定用量（flat dosage）
抗体はまた、各患者に固定された、または予め決定された投薬量を投与する、一定用量で患者に投与することができる。一定用量および固定用量という用語は同義に使用される。一定または固定用量投与は、例えば、薬物供給を節約したり薬局による過誤を低減したりするために、患者にとって有益であり得る。
【０１３８】
一部の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子は注射（例えば、皮下または静脈内）によって、約２００ｍｇから５００ｍｇ、例えば、約２５０ｍｇから４５０ｍｇ、約３００ｍｇから４００ｍｇ、約２５０ｍｇから３５０ｍｇ、約３５０ｍｇから４５０ｍｇまたは約３００ｍｇもしくは約４００ｍｇの用量（例えば、一定用量）で投与する。投与スケジュール（例えば、一定用量投与スケジュール）は、例えば、週１回から２、３、４、５または６週間に１回まで変化させることができる。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子は、約３００ｍｇから４００ｍｇまでの用量で３週間に１回または４週間に１回投与する。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子は、約３００ｍｇの用量で３週間に１回投与する。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子は、約４００ｍｇの用量で４週間に１回投与する。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子は、約３００ｍｇの用量で４週間に１回投与する。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体分子は、約４００ｍｇの用量で３週間に１回投与する。
【０１３９】
抗Ｍ−ＣＳＦ抗体は、同様に一定用量で投与することができる。一部の実施形態では、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子は注射（例えば、皮下または静脈内）によって、約２００ｍｇから５００ｍｇ、例えば、約２５０ｍｇから４５０ｍｇ、約３００ｍｇから４００ｍｇ、約２５０ｍｇから３５０ｍｇ、約３５０ｍｇから４５０ｍｇまたは約３００ｍｇもしくは約４００ｍｇの用量（例えば、一定用量）で投与する。さらに、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子はまた、約８００ｍｇを含む約３００ｍｇから８００ｍｇの一定用量で注射によって投与することができる。投与スケジュール（例えば、一定用量投与スケジュール）は、例えば、週１回から２、３、４、５または６週間に１回まで変化させることができる。一実施形態では、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子は、約３００ｍｇから４００ｍｇまでの用量で３週間に１回または４週間に１回投与する。一実施形態では、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子は、約３００ｍｇの用量で３週間に１回投与する。一実施形態では、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子は、約４００ｍｇの用量で４週間に１回投与する。一実施形態では、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子は、約３００ｍｇの用量で４週間に１回投与する。一実施形態では、抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子は、約４００ｍｇの用量で３週間に１回投与する。
【０１４０】
投与スケジュール
投与スケジュールは、例えば、週１回から２、３または４週間に１回まで変化させることができる。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体または両分子は、１週間おきに約３から１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。投薬量の値は、軽減する病状の種類および重症度によって変化させてもよいことに注意されたい。任意の特定の対象では、具体的な投薬レジメンは個体の必要性および組成物を投与者または監督者の専門的な判断に応じて時間と共に調整するべきであり、本明細書で記載した投薬範囲は例示に過ぎず、特許請求した組成物の範囲および実施を制限するものではないことをさらに理解されたい。
【０１４１】
３つ（またはそれ以上）の薬剤のレジメンにおける用量の例は以下の通りである。抗ＰＤ−１抗体および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体または両分子は、例えば、約１から４０ｍｇ／ｋｇ、例えば、１から３０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約５から２５ｍｇ／ｋｇ、約１０から２０ｍｇ／ｋｇ、約１から５ｍｇ／ｋｇ、または約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。Ｍ−ＣＳＦ抗体は、例えば、約１から４０ｍｇ／ｋｇ、例えば、１から３０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約５から２５ｍｇ／ｋｇ、約１０から２０ｍｇ／ｋｇ、約１から５ｍｇ／ｋｇ、または約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。
【０１４２】
バイオマーカー
本発明はさらに、抗ＰＤ−１抗体分子および抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子の組み合わせで治療することによって最も利益を得ることができる患者を選択することを含む。患者の選択は、ＰＤ−１の存在または腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭＳ）の存在を判定することによって実現することができる。理論に縛られることは望まないが、一部の実施形態では、患者がＰＤ−Ｌ１の発現が高いがんを有している、および／またはがんに抗腫瘍免疫細胞、例えば、ＴＩＬが浸潤している、および／または以下に記載したＣＤ１６３もしくはＣＤ１６３／ＣＤ８を検索することによって判定されたＴＡＭＳレベルが高い場合、患者は本発明の組み合わせによる治療に応答しやすい。
【０１４３】
さらに、組み合わせの潜在的有効性を予測し得るその他の予測変数には、ベースラインでのＦｏｘＰ３、ＰＤ−Ｌ１およびＣＤ６８発現レベル（ＴＡＭおよびＴＩＬ表現型の変化型）および抗腫瘍活性評価項目（例えば、全体の応答速度）が含まれる。本発明の一実施形態では、患者の血液は、組み合わせの有効性の１つの予測変数としてＣＤ１６３またはＣＤ１６３／ＣＤ８のいずれかをアッセイすることができる。
【０１４４】
組み合わせの薬力学的効果は、ベースラインおよびベースライン後のＣＤ８、ＣＤ１６３、ＦｏｘＰ３、ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ６８発現レベル（ＴＡＭおよびＴＩＬ表現型の変化型）、ＣＤ４、ＬＡＧ３またはＴＩＭ３（ならびに、利用可能ならば、ＣＤ８０、ＬＫＢ２、ＣＣＬ２）によってアセスメントすることが可能であり得る。さらに、ベースラインおよびベースライン後の全身サイトカインレベルは、薬力学（例えば、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１８、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＴＮＦ−αまたはＴＮＦ−β）をアセスメントするために測定することができる。
【０１４５】
ＢＲＣＡ１／ＢＲＣＡ２が変異した、および変異していないＴＮＢＣ患者におけるＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１によるＯＲＲはそれぞれ、ＢＲＣＡ１およびＢＲＣＡ２状態がＴＮＢＣ患者の治療に対する応答に影響を及ぼすかどうかを評価するために使用することができる。ＭＳＩ状態および変異負荷によるＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１によるＯＲＲは、マイクロサテライト不安定性状態および変異負荷が全体応答率に影響を及ぼすかどうかを評価する。ＰＤ−１／ＰＤＬ−１標的化療法に対して本来または後天的に抵抗性を有するメラノーマ患者におけるＭＣＳ１１０とＰＤＲ００１との組み合わせの抗腫瘍活性はそれぞれ、（臨床歴に示された）ＰＤ−１に対して本来または後天的に抵抗性を有するメラノーマ患者におけるＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１によるＯＲＲで評価することができる。
【０１４６】
ＰＤ−１を有する患者の選択
一例では、ＰＤ−１の存在の判定は、ＣＤ８、ＰＤ−Ｌ１および／またはＩＦＮ−γが陽性の細胞をアッセイすることによって抗腫瘍免疫細胞を判定することであってもよく、したがって、ＣＤ８、ＰＤ−Ｌ１および／またはＩＦＮ−γのレベルは、微小環境におけるＴＩＬレベルの表示として役立ち得る。ある特定の実施形態では、がんの微小環境とは、ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８／ＩＦＮ−γのトリプルポジティブを意味する。
【０１４７】
したがって、特定の態様では、本出願は、腫瘍試料のＰＤ−Ｌ１、ＣＤ８およびＩＦＮ−γの１つまたは複数が陽性であるかどうかを判定する方法を提供し、腫瘍試料のマーカーの１つまたは複数、例えば、２つ、または３つ全てが陽性であるならば、場合によって、１つまたは複数のその他の免疫調節剤または抗がん剤と組み合わせて、治療有効量の抗ＰＤ−１抗体分子を患者に投与する。
【０１４８】
以下の適応症において、患者の大部分は、ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８／ＩＦＮ−γについてトリプルポジティブ：ＴＮ乳がんである。患者の大部分または一部がこれらのマーカーについてトリプルポジティブであるかどうかにかかわらず、これらのマーカーについて患者をスクリーニングすることによって、Ｍ−ＣＳＦ−１および場合によっては１つまたは複数のその他の免疫調節剤（例えば、抗ＴＩＭ−３抗体分子、抗ＬＡＧ−３抗体分子または抗ＰＤ−Ｌ１抗体分子）および／または抗がん剤と組み合わせたＰＤ−１抗体（例えば、ＰＤ−１ブロッキング抗体）による療法にうまく応答する可能性が特に高い一部の患者を同定することが可能である。
【０１４９】
一部の実施形態では、がん試料は、ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８／ＩＦＮ−γのトリプルポジティブとして分類される。この測定は、おおまかに、２つの閾値、１個の細胞が陽性に分類されるかどうか、およびその試料が全体として陽性に分類されるかどうかに分けることができる。第１に、１個の細胞内で、ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ８および／またはＩＦＮ−γのレベルを測定することができる。一部の実施形態では、これらのマーカーの１つまたは複数が陽性の細胞は、対照細胞または参照値と比較して、マーカーのレベルがより高い細胞である。例えば、一部の実施形態では、所与の細胞において高いＰＤ−Ｌ１レベルとは、患者の対応する非がん性組織におけるＰＤ−Ｌ１のレベルよりも高いレベルのことである。別の例では、一部の実施形態では、所与の細胞において高いＣＤ８またはＩＦＮ−γレベルとは、典型的にＴＩＬで認められるタンパク質レベルのことである。第２に、試料においてＰＤ−Ｌ１、ＣＤ８および／またはＩＦＮ−γが陽性の細胞のパーセンテージを測定することもできる。（１個の細胞が３つのマーカー全てを発現する必要はない）。一部の実施形態では、トリプルポジティブ試料とは、これらのマーカーが陽性の細胞のパーセンテージが、例えば、参照値よりも高い、または対照試料よりも高い試料のことである。
【０１５０】
その他の実施形態では、試料中のＰＤ−Ｌ１、ＣＤ８および／またはＩＦＮ−γ全体のレベルを測定することができる。この場合、試料中の高いＣＤ８またはＩＦＮ−γレベルとは、ＴＩＬが浸潤した腫瘍において典型的に認められるタンパク質のレベルであってもよい。同様に、高いＰＤ−Ｌ１レベルとは、腫瘍試料、例えば、腫瘍微小環境において典型的に認められるタンパク質のレベルであってもよい。
【０１５１】
ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８／ＩＦＮ−γがトリプルポジティブの患者のサブセットを同定することによって、ＰＤ−１抗体療法に応答しやすい患者の特定の小集団を明らかにする。例えば、多くのＩＭ−ＴＮ（免疫調節性トリプルネガティブ）乳がん患者は、ＰＤ−Ｌ１／ＣＤ８／ＩＦＮ−γについてトリプルポジティブである。ＩＭ−ＴＮ乳がんは、例えば、Brian D. Lehmann et al., “Identification of human triple-negative breast cancer subtypes and preclinical models for selection of targeted therapies”, J Clin Invest. Jul 1, 2011; 121(7): 2750-2767に記載されている。トリプルネガティブ乳がんは、エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）およびＨｅｒ２／ｎｅｕを発現しないがんである。これらのがんは典型的に、ＥＲ、ＰＲおよびＨｅｒ２／ｎｅｕを標的とする薬剤に応答しないので、治療が困難である。トリプルネガティブ乳がんはさらに様々なクラスに分類することができ、その１つは免疫調節性である。Ｌｅｈｍａｎｎ等によって記載されたように、ＩＭ−ＴＮ乳がんは、免疫細胞プロセスに関与する因子、例えば、１つまたは複数の免疫細胞シグナル伝達（例えば、ＴＨ１／ＴＨ２経路、ＮＫ細胞経路、Ｂ細胞受容体シグナル伝達経路、ＤＣ経路およびＴ細胞受容体シグナル伝達）、サイトカインシグナル伝達（例えば、サイトカイン経路、ＩＬ−１２経路およびＩＬ−７経路）、抗原プロセシングおよび提示、核となる免疫シグナル伝達経路によるシグナル伝達（例えば、ＮＦＫＢ、ＴＮＦおよびＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達）、Ｔ細胞機能、免疫転写、インターフェロン（ＩＦＮ）応答および抗原プロセシングに関与する遺伝子が豊富である。したがって、一部の実施形態では、治療するがんは、ＩＭ−ＴＮ乳がんの１つまたは複数のマーカー、例えば、１つまたは複数の免疫細胞シグナル伝達（例えば、ＴＨ１／ＴＨ２経路、ＮＫ細胞経路、Ｂ細胞受容体シグナル伝達経路、ＤＣ経路およびＴ細胞受容体シグナル伝達）、サイトカインシグナル伝達（例えば、サイトカイン経路、ＩＬ−１２経路およびＩＬ−７経路）、抗原プロセシングおよび提示、核となる免疫シグナル伝達経路によるシグナル伝達（例えば、ＮＦＫＢ、ＴＮＦおよびＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達）、Ｔ細胞機能、免疫転写、インターフェロン（ＩＦＮ）応答および抗原プロセシングに関与する遺伝子を促進する因子が陽性である、または陽性であることが判定されたがんである。
【０１５２】
ＴＡＭを使用した患者の選択
本発明は、トリプルネガティブ乳がんなどのがんの治療のために、表１に記載した抗Ｍ−ＣＳＦ抗体と表２に記載したＰＤ−１抗体との組み合わせの使用を対象とする。現在のところ、この乳がんサブタイプを標的とした療法はなく、唯一の治療の選択肢は化学療法である。本発明は、Ｍ−ＣＳＦ治療による治療の前にうまく応答しやすい患者を同定することによって、がん集団における抗Ｍ−ＣＳＦ抗体分子の使用の利益を最大限にし、危険性を最小限にする個別化療法を提供する。一例では、本発明には、患者がＭ−ＣＳＦアンタゴニストによる治療に応答しやすいことを示す腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）レベルを有する、トリプルネガティブ乳がん患者などのがんを有する患者を同定することが含まれる。具体的には、患者のＴＡＭのレベルは、患者の試料中におけるＣＤ１６３（例えば、ｍＲＮＡまたはタンパク質）のレベルを判定することによって測定し、次に患者のＣＤ１６３レベルは、患者がＭ−ＣＳＦ治療にうまく応答しやすいかどうかを示すために使用する。一例では、患者のＣＤ１６３レベルが対照と比較して増加しているならば、その患者はＭ−ＣＳＦアンタゴニストに対して応答しやすい患者として同定される。別の例では、患者のＣＤ１６３レベルが予め決定したＣＤ１６３レベル（カットオフ）以上であるならば、その患者はＭ−ＣＳＦアンタゴニストに対して応答しやすい患者として同定される。がん患者から得られた試料でアッセイしたＣＤ１６３発現のレベルは、例えば、ｍＲＮＡ発現および／またはタンパク質であってもよい。
【０１５３】
試料の調製
がんを有する個体から採取した任意の適切な試料または細胞の試験試料を使用することができる。一般的に、細胞または組織試料の試験試料は、がんを有する対象から、生検または手術による切除によって得られる。細胞、組織または液体の試料は、針穿刺吸引生検によって取り出してもよい。このために、シリンジに取り付けた微細針を皮膚から関心のある組織に挿入する。針は、典型的に、超音波またはコンピューター断層撮影（ＣＴ）画像処理を使用して関心のある領域に誘導する。一旦針が組織に挿入されたら、細胞または液体が針から吸い込まれ、シリンジ内に収集されることができるように、シリンジで真空にする。細胞または組織の試料はまた、切開生検またはコア生検によって取り出してもよい。このために、組織の円錐、円柱または小さな小片を関心のある領域から取り出す。この種の生検を誘導するために、全般的にＣＴ画像、超音波、または内視鏡を使用する。より詳細には、がん病変全体を切除生検または手術切除によって取り出してもよい。本発明では、試験試料は典型的に、手術切除の一部として取り出した細胞の試料である。
【０１５４】
例えば、組織の試験試料はまた、後で使用するために、例えば、ＲＮＡｌａｔｅｒ（Ａｍｂｉｏｎ；Ａｕｓｔｉｎ  Ｔｅｘ．）中で保存するか、または急速冷凍して−８０℃で保存してもよい。生検の組織試料はまた、固定液、例えば、ホルムアルデヒド、パラホルムアルデヒドまたは酢酸／エタノールで固定してもよい。固定した組織試料は、ワックス（パラフィン）または可塑性樹脂に包埋してもよい。包埋した組織試料（または凍結した組織試料）は、薄い切片に切断することができる。ＲＮＡまたはタンパク質はまた、固定した、もしくはワックスに包埋した組織試料または凍結した組織試料から抽出することができる。一旦細胞の試料または組織の試料をがんを有する対象から取り出したら、ＲＮＡまたはタンパク質を単離するために、当技術分野で周知の、以下に記載したような技術を使用して処理することができる。
【０１５５】
がん患者から採取した生検からＲＮＡを抽出する一例は、例えば、チオシアン酸グアニジン溶解およびその後のＣｓＣｌ遠心分離を含むことができる。単一細胞のＲＮＡは、単一細胞からｃＤＮＡライブラリーを調製するための方法で記載したように得ることができる。一実施形態では、ＲＮＡ集団はＣＤ１６３が豊富であってもよい。例えば、ランダムヘキサマーおよびプライマー特異的ｃＤＮＡ合成によって、またはｃＤＮＡ合成および鋳型特異的なインビトロ転写をベースにした直線的増幅を複数回繰り返して、濃縮を実現することができる。
【０１５６】
腫瘍またはがんを有する対象は一般的に、霊長類などのほ乳類対象である。例示的実施形態では、対象はヒトである。
【０１５７】
ＴＡＭの存在は、ＣＤ１６３＋の存在を検出することによってアセスメントすることができる
本明細書で開示した方法は、特に、ＣＤ１６３レベルの判定を使用する。ＣＤ１６３レベルによって、個体がＭ−ＣＳＦアンタゴニストに応答しやすいかどうかが予測される。一例では、予測に用いられるＣＤ１６３レベルは、がんにおけるＣＤ１６３発現の中央値レベル（対照）よりも高いか、予め決定したカットオフ値よりも大きい発現レベルのことである。
【０１５８】
一実施形態では、ＣＤ１６３タンパク質発現のレベルは、Ｍ−ＣＳＦアンタゴニストで治療する患者を選択するために、対照またはカットオフに対して比較し、例えば、対照と比較したＣＤ１６３発現のレベルで、患者がＨ−ＲＸ１などのＭ−ＣＳＦアンタゴニストに応答しやすいか、または応答しにくいかを予測することができる。一実施形態では、閾値レベルを１０％、１５％、２０％、３０％、４０％またはそれ以上上回るＣＤ１６３タンパク質発現（「ＴＡＭ密度」とも称する）の発現レベルを有する患者を、Ｍ−ＣＳＦアンタゴニストで治療するために選択する。ＣＤ１６３の対照レベルは、ＣＤ１６３発現の測定と本質的に同時に判定することができ、または前もって判定しておいてもよい。
【０１５９】
ＣＤ１６３核酸発現の検出
患者の生物学的試料は、任意の適用可能な手段によって、ｍＲＮＡなどのＣＤ１６３発現の存在をアッセイすることができる。ＣＤ１６３発現のレベルが高いと、がん、例えば、ＴＢＮＣの患者のＭ−ＣＳＦアンタゴニズムに対する応答の改善を予測するために有用であり得る。
【０１６０】
ＣＤ１６３タンパク質の検出
場合によっては、ＣＤ１６３の存在は、ＣＤ１６３ポリペプチド生成物を分析することによって判定することができる。ポリペプチド生成物の検出は、限定はしないが、免疫化学染色、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー、ウェスタンブロット、分光光度法、ＨＰＬＣおよび質量分析を含む当技術分野で公知の任意の方法を使用して実施することができる。
【０１６１】
対照
本明細書では、比較の対照は、当業者が決定することができる。一例では、対照は、カットオフ値を定義するＴＡＭ密度値を有する対照試料を選択することによって決定する。例えば、値は、例えば、個体のＣＤ１６３（もしくはＴＡＭ密度）が１５％未満の試験試料間、または個体のＣＤ１６３（もしくはＴＡＭ密度）が１５％ＣＤ１６３（もしくはＴＡＭ密度）以上の試験試料間、または個体がＭ−ＣＳＦアンタゴニスト療法によって利益を得やすい試験試料と利益を得にくい試験試料との間を区別する値であってもよい。
【０１６２】
別の例では、対照は、健康なボランティアの試料またはＣＤ１６３発現（ｍＲＮＡもしくはタンパク質）が低いことが知られているがん患者の試料であってもよく、判定したＣＤ１６３値が対照よりも大きい場合、患者を治療のために選択する。
【０１６３】
さらに別の例では、対照値は、数学的モデルをベースとした歴史的対照によって予め決定した値であってもよい。分類器（classifier）とも呼ばれるモデルは、がん患者（例えば、ＴＢＮＣ）の集まりの発現レベル（例えば、ｍＲＮＡもしくはタンパク質）を使用することによって作製することができる。数学的モデルは、例えば、任意のクラス予測方法またはその変種であってもよく、得られた対照値は閾値として使用することができる。発現レベルが閾値またはそれを上回る場合、患者はＭ−ＣＳＦアンタゴニストによる治療に応答しやすい。一実施形態では、ＣＤ１６３発現レベルが閾値以上、例えば、１５％、２０％、３０％、４０％またはそれ以上である個体を選択する。
【０１６４】
がん患者の選択および治療
ＣＤ１６３核酸発現またはＣＤ１６３タンパク質のレベルによって、医師はＴＢＮＣ、膵臓がん、卵巣がん、メラノーマ、上咽頭癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、中皮腫、腎細胞癌または神経膠芽腫などのがん患者の個別化療法を提供することができ、すなわち、Ｍ−ＣＳＦアンタゴニストで患者を選択的に治療することができるかどうかを判定することができる。このようにして、医師はがんに罹患した患者集団全体においてＭ−ＣＳＦアンタゴニズムの利益を最大限にして、危険性を最小限にすることができる。本発明の様々な態様をさらに詳細に以下に記載する。さらなる定義は明細書全体にわたって記載する。
【０１６５】
実施例１
第Ｉｂ相臨床試験は、ｉ．ｖ．注入によってＭＣＳ１１０を３０分間、ＰＤＲ００１を１時間３週間毎に１回投与して実施する。薬物は、２つの抗体の間を少なくとも３０分間あけて別々に投与する。各抗体の注入は、臨床的に適応となれば最高２時間延長することができる。以下の投与レジメンは、以下の表１０で使用する。
【０１６６】
【表５】
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【０１６７】
いずれの試験薬物も同じ静脈投与部位を使用して注入することができる。患者全てに対して同じ投与順で行い、すなわち、ＰＤＲ００１を最初に注入すべきである。ＰＤＲ００１投与後に注入反応が生じるならば、治験責任医師の臨床判断に基づいて患者に対するＭＣＳ１１０の投与が安全になるまで、その後のＭＣＳ１１０注入は延期する。ＰＤＲ００１およびＭＣＳ１１０注入の間の遅れは、臨床的に適応となれば、最高４時間にすることができる。
【０１６８】
現行の試験薬物のスケジュールされた投与は、以前のＡＥから回復するため、または来院できなかった場合は最高７日間延期してもよい。ＡＥが消退していないために現行の試験薬物のスケジュールされた投与の延期が７日を超える場合は、投与を省き、次にスケジュールされた投与時に（ＤＬＴの基準に合致する場合）、より低い用量レベルで治療を再開するべきである。したがって、アセスメントスケジュールも変更されることになる。投与延期とは、現行の試験薬物全て、併用治療ではＭＣＳ１１０およびＰＤＲ００１の両方および単剤治療ではＭＣＳ１１０またはＰＤＲ００１、を意味する。ＭＣＳ１１０試験薬物の用量は、スクリーニング来院時およびその後の投与前来院時に測定した個々の対象の体重から計算する。
【０１６９】
開始用量
ＭＣＳ１１０の開始用量およびレジメンは、３週間毎に３ｍｇ／ｋｇの静脈注射であり、ＰＶＮＳ患者に投与した単剤用量（ＮＣＴ０１６４３８５０、ＣＭＣＳ１１０Ｘ２２０１試験における４週毎に１０ｍｇ／ｋｇ）の約４０％およびＴＮＢＣにおけるカルボプラチン／ゲムシタビンと併用して投与した用量（ＮＣＴ０２４３５６８０、ＣＭＣＳＺ２２０１試験における３週毎に１０ｍｇ／ｋｇ）の３０％に相当する。
【０１７０】
ＭＣＳ１１０の用量１０ｍｇ／ｋｇは、ＰＶＮＳ患者では十分な忍容性があり、ＰＶＮＳ患者では有意な腫瘍縮小を示した。健康なボランティアにおいてＭＣＳ１１０  ３ｍｇ／ｋｇを単回投与した後、約２１日間のＣＭＣＳＸ２１０１でＣＳＦ−１はＭＣＳ１１０によって飽和したことが認められた。ＨＶ試験で実施した薬力学的分析は、循環バイオマーカー応答は、５ｍｇ／ｋｇ以上の用量では最大に近く、３ｍｇ／ｋｇ未満の用量では最小に近いはずであることを示している。毒性が重複し得る危険性を考慮して、試験の用量漸増部ではＭＣＳ１１０  ３ｍｇ／ｋｇの用量を開始用量として選択する。
【０１７１】
ＰＤＲ００１の開始用量およびレジメンは、３週間毎に１００ｍｇの静脈注射である。ＰＤＲ００１は、現行のＮＣＴ０２４０４４４１、ＣＰＲＤ００１Ｘ２１０１試験において、２週間毎に最高１０ｍｇ／ｋｇの用量で試験した。ＭＴＤは判定されず、計画した２つの相では推奨用量（ＲＰ２Ｄ）は、３週間毎３００ｍｇ（３．７５ｍｇ／ｋｇ）または４週間毎に４００ｍｇ（５ｍｇ／ｋｇ）である。提案したＲＰ２Ｄはいずれも、０．４２μｇ／ｍＬとアセスメントされたＰＤＲ００１のインビトロ／エクスビボ効力ＥＣ５０よりも約７７倍高い一定した平均Ｃｔｒｏｕｇｈ（Ｃ  ｔｈｒｏｕｇｈ）濃度を実現することができる。開始用量１００ｍｇでＱ３Ｗで曝露したＰＤＲ００１は、ＤＬＴを含まないＣＰＤＲ００１Ｘ２１０１試験で認められたものの範囲内である。ＰＤＲ００１は、３週間毎に１００ｍｇ以上の用量で抗腫瘍活性を示すことが予測される。
【０１７２】
【表６】
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【０１７３】
潜在毒性
これは、ＭＣＳ１１０およびＰＤＲ００１の組み合わせを評価する最初の試験である。重複による潜在毒性には、免疫誘導（ＰＤＲ００１）または肝酵素の排除低減（ＭＣＳ１１０）によって生じる肝酵素上昇、免疫媒介有害事象および皮膚毒性の頻度上昇または増悪が含まれる。
【０１７４】
投与量制限毒性（ＤＬＴ）は、疾患、疾患進行、介入性疾病、または併用薬物療法に関連しない、併用治療の最初の２回以内の治療で生じる、表ＸＸに含まれる基準のいずれかに合致することがアセスメントされたＣＴＣＡＥグレード≧３の有害事象または臨床検査値異常と定義される。
【０１７５】
免疫−免疫併用試験の新規な分野から得られたデータによって、一部の免疫関連有害事象は、潜伏期間が長いことが示唆される。したがって、この治験における併用のためのコホートのＤＬＴウィンドウは、サイクル２回または４２日間の長さまで延長される。
【０１７６】
米国国立がん研究所の有害事象共通用語基準（ＮＣＩ  ＣＴＣＡＥ）バージョン４．０３を全グレード評価で使用する。用量漸増決定のために、ＤＬＴを考慮して、はベイジアンロジスティック回帰分析モデル（ＢＬＲＭ）に含める。
【０１７７】
プロトコール特定の用量スケジュールに忍容しない患者については、患者がＤＬＴを経験している場合にのみ用量変更が許容されるとき、患者に試験治療を継続することができるように、最初の２回の間を除いて用量調整が可能である。以下の指針を適用する必要がある。
【０１７８】
６．２．４項で概略を示したＤＬＴの基準に合致するＡＥを患者が経験している場合、治療を中止すべきである。試験治療薬に関連した毒性による用量変更は、表６〜４４にまとめて示す。グレード１または患者のベースライン値まで毒性が消退した後、ｉｒＲＣにより疾患進行の証拠がない場合、患者は（同じ投与スケジュールで）そのときに試験したレベルよりも低い用量レベルで試験治療を再開することができる。ＤＬＴの発生後治療を再開する決定は、治験責任医師の判断である。ＤＬＴの基準に合致したＡＥの後、患者が試験治療を再開する場合、一段低い用量レベルであるべきである。ＭＣＳ１１０  ０．３ｍｇ／ｋｇ／ＰＤＲ００１  １００ｍｇ  Ｑ３Ｗを下回る用量まで用量を低減することは許容されない。試験治療関連毒性によって２回超連続して投与を省略する場合、患者が治験責任医師の意見で患者が臨床上の利益を経験しない限り、患者は試験を中止しなければならない。この場合、ノバルティスおよび治験責任医師が承諾した用量で治療を継続することができる。
【０１７９】
試験薬物の１つを中断した場合、治験責任医師が、患者にとって一番の利益になると考えるならば、患者に残りの試験薬物を継続してもよい。残りの試験薬物の用量は、ノバルティスおよび治験責任医師が承諾しなければならない。
【０１８０】
下痢／大腸炎、腎臓、肺、内分泌、肝臓および皮膚のＡＥについては、まず非炎症性の原因は除外する。炎症性の原因が感じられたならば、付録１４．３：コルチコステロイド療法に組み込まれている、疑いのある毒性の推奨管理アルゴリズムに従って治療する。
【０１８１】
【表７】
2018525367.tif 000014
【０１８２】
【表８】
2018525367.tif 000015
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【０１８３】
実施例２
第Ｉｂ相部の後、明らかになったＰＫ、ＰＤおよび安全性データによってＭＣＳ１１０の固定用量投与戦略が適切であることが示された場合、固定用量投与戦略を治験の第２相部で実行することができる。この治験の第Ｉｂ相部で得られたＰＫデータは、固定用量投与対体重をベースにした投与をアセスメントするためにその他のＭＣＳ１１０臨床試験のＰＫデータと組み合わせて、この治験の第ＩＩ相部のための固定用量を同定することができる。
【０１８４】
実施例３
ＴＣＧＡデータベースのＲｎａｓｅｑデータは、最高レベルのＰＤ１発現によって定義された患者集団内では、Ｍ２マクロファージの代用マーカー、ＣＤ１６３の発現が高レベルであることを示す。様々な種類の腫瘍の分析は、様々な種類の腫瘍におけるＣＤ１６３およびＰＤ１の発現を判定するために行った。ＴＣＧＡデータベースおよびトリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、皮膚がん、卵巣がん、膵臓がん、神経膠芽腫（ＧＢＭ）、肺がん、腎細胞癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、中皮腫、および上咽頭癌（ＮＰＣ）を含む様々ながんにおける内部データベースのＲＮＡｓｅｑを使用して、ＣＤ１６３に関連したＰＤ−１の発現レベルを観察した。図ａは、ＰＤ−１の発現を高から低に振り分けることによって、ＣＤ１６３に関連したＰＤ−１の発現レベルの関係を示す。結果は、全般的に、高いＰＤ−１発現は高レベルのＣＤ１６３とよく相関することを示す。
【０１８５】
実施例４
ＰＤ−１  ＢＡＰ０４９−クローン−Ｅ抗体分子（配列番号１１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号１２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体分子）と組み合わせたＭ−ＣＳＦ抗体Ｈ−ＲＸ１（配列番号１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体）を、標準治療を受けた進行性のトリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）の患者に投与する。腫瘍の応答は、Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) v1.1 (Therasse et al., (2000) New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16); New Guidelines to Evaluate the Response in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16 and revised RECIST guidelines (version 1.1) (Eisenhauer et al 2009) European Journal of Cancer; 45:228-247に従って地域で判定する。
【０１８６】
実施例５
ＰＤ−１  ＢＡＰ０４９−クローン−Ｅ抗体分子（配列番号１１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号１２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体分子）と組み合わせたＭ−ＣＳＦ抗体Ｈ−ＲＸ１（配列番号１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体）を、膵臓がんの患者に投与する。腫瘍の応答は、Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) v1.1 (Therasse et al., (2000) New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16); New Guidelines to Evaluate the Response in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16 and revised RECIST guidelines (version 1.1) (Eisenhauer et al 2009) European Journal of Cancer; 45:228-247に従って地域で判定する。
【０１８７】
実施例６
ＰＤ−１  ＢＡＰ０４９−クローン−Ｅ抗体分子（配列番号１１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号１２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体分子）と組み合わせたＭ−ＣＳＦ抗体Ｈ−ＲＸ１（配列番号１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体）を、子宮内膜癌の患者に投与する。腫瘍の応答は、Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) v1.1 (Therasse et al., (2000) New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16); New Guidelines to Evaluate the Response in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16 and revised RECIST guidelines (version 1.1) (Eisenhauer et al 2009) European Journal of Cancer; 45:228-247に従って地域で判定する。
【０１８８】
実施例７
ＰＤ−１  クローンＥ抗体分子（配列番号１１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号１２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体分子）と組み合わせたＭ−ＣＳＦ抗体Ｈ−ＲＸ１（配列番号１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体）を、標準治療を受け、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１療法に抵抗性のメラノーマの患者に投与する。腫瘍の応答は、Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) v1.1 (Therasse et al., (2000) New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16); New Guidelines to Evaluate the Response in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16 and revised RECIST guidelines (version 1.1) (Eisenhauer et al 2009) European Journal of Cancer; 45:228-247に従って地域で判定する。
【０１８９】
実施例８
ＰＤ−１  ＢＡＰ０４９−クローン−Ｅ抗体分子（配列番号１１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号１２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体分子）と組み合わせたＭ−ＣＳＦ抗体Ｈ−ＲＸ１（配列番号１で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号２で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体）を、標準治療を受け、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１療法に難治性または抵抗性の進行性トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）の患者に投与する。腫瘍の応答は、Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) v1.1 (Therasse et al., (2000) New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16); New Guidelines to Evaluate the Response in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16 and revised RECIST guidelines (version 1.1) (Eisenhauer et al 2009) European Journal of Cancer; 45:228-247に従って地域で判定する。
【０１９０】
実施例９
ＰＤ−１  ＢＡＰ０４９−クローン−Ｅ抗体分子（配列番号３７で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号４７で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体分子）と組み合わせたＭ−ＣＳＦ抗体Ｈ−ＲＸ１（配列番号２で記載したアミノ酸を含む重鎖可変領域および配列番号４で記載したアミノ酸を含む軽鎖可変領域を有する抗体）を、非小細胞肺がんおよび扁平上皮細胞肺がんのいずれかまたは両方の患者に投与する。腫瘍の応答は、Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) v1.1 (Therasse et al., (2000) New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16); New Guidelines to Evaluate the Response in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16 and revised RECIST guidelines (version 1.1) (Eisenhauer et al 2009) European Journal of Cancer; 45:228-247に従って地域で判定する。
【０１９１】
本明細書に記載された出版物、特許出願、特許およびその他の参考文献は全て、全体が参考として本明細書に組み込まれる。本発明のその他の特性、目的および利点は、説明および図面ならびに特許請求の範囲から明らかである。
【図１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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