(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）［式中、Ｒ１〜Ｒ４は、本明細書に記載される通りである］の化合物とそれらの医薬的に許容される塩、そのエナンチオマー又はジアステレオマー、及び該化合物が含まれる、ウイルス感染症の治療に使用の組成物に関する。
2018527309.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2018527309.tif 000046
［式中：
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、又はフェニルＣ１−６アルキルであり、前記フェニルＣ１−６アルキルは、未置換であるか又はＣ１−６アルキルとハロゲンより独立して選択される１〜３の置換基で置換され；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキルである］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項２】
請求項１に記載の式（Ｉａ）：
【化２】
2018527309.tif 000047
［式中：
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、又はフェニルＣ１−６アルキルであり、前記フェニルＣ１−６アルキルは、未置換であるか又はＣ１−６アルキルとハロゲンより独立して選択される１〜３の置換基で置換され；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキルである］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項３】
Ｒ１が、Ｈ、メチル、プロピル、シクロプロピル、ベンジル、フルオロベンジル、クロロベンジル、フルオロクロロベンジル、又はメチルベンジルであり；
Ｒ２は、Ｈ又はメチルであり；
Ｒ３は、メチルであり；
Ｒ４は、エチルである、請求項１又は請求項２に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項４】
Ｒ１が、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、又はフェニルＣ１−６アルキルである、請求項１〜請求項３のいずれか１項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項５】
Ｒ１が、Ｈ、メチル、又はベンジルである、請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項６】
Ｒ２がＨである、請求項１〜請求項５のいずれか１項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項７】
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（プロピルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（シクロプロピルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ベンジルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ベンジルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；及び
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオンより選択される、請求項１〜請求項６のいずれか１項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項８】
以下の工程：
（ａ）式（ＩＩＩｋ）：
【化３】
2018527309.tif 000048
の化合物の酸との反応；
（ｂ）式（ＩＶｃ）：
【化４】
2018527309.tif 000049
［式中、Ｒａは、Ｒ１又はＲ２である］の化合物の酸との反応；
（ｃ）式（Ｖｃ）：
【化５】
2018527309.tif 000050
［式中、Ｒｂは、Ｃ１−６アルキルである］の化合物の酸との反応；
［又は、式中、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒ３、Ｒ４は、請求項１〜請求項８のいずれか１項に定義される通りである］を含んでなる、請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物の製造の方法。
【請求項９】
治療活性物質としての使用のための、請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項１０】
請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物と治療不活性な担体を含んでなる医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物の、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防への使用。
【請求項１２】
請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物の、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品の製造への使用。
【請求項１３】
請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物の、ＴＬＲ７又はＴＬＲ８アゴニストとしての使用。
【請求項１４】
請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物の、ＴＬＲ７及びＴＬＲ８デュアルアゴニストとしての使用。
【請求項１５】
請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物の、インターフェロン−αの産生を誘導するための使用。
【請求項１６】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防のための、請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項１７】
請求項８の方法に従って製造される場合の、請求項１〜請求項７のいずれか１項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマー。
【請求項１８】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防のための方法であって、請求項１〜請求項７のいずれか１項に定義されるような化合物の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
【請求項１９】
本明細書の上記に記載されるような発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニズム活性を有する、新規な置換アミノチアゾロピリミジンジオンとそれらの対応する誘導体、及びそれらのプロドラッグ、並びに、それらの製造法、それらを含有する医薬組成物、並びに医薬品としてのそれらの潜在的な使用に関する。
【０００２】
本発明は、式（Ｉ）及び（Ｉａ）：
【０００３】
【化１】
2018527309.tif 000003
【０００４】
［式中、Ｒ１〜Ｒ４は、下記に記載される］の化合物、又はそれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーに関する。
【背景技術】
【０００５】
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、広範囲の保存された病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）を認識する。それらは、侵入病原体を感知することと後続の自然免疫応答の開始に重要な役割を担う。ヒトでは、ＴＬＲファミリーに１０種のメンバーが知られていて、それらは、細胞外ロイシンリッチドメインと、保存性Ｔｏｌｌ／インターロイキン（ＩＬ）−１受容体（ＴＩＲ）ドメインを含有する細胞質テールを特徴とするＩ型膜貫通タンパク質である。ＴＬＲ７とＴＬＲ８は、いずれもエンドソーム膜に対して細胞内に局在化している。それらは、系統発生学的に類似していて、異なるウイルス病原体を感知するそれらの役割の故に、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）と短鎖二本鎖ＲＮＡを認識することが可能である。ＴＬＲ７とＴＬＲ８はまた、オリゴヌクレオチドと、イミダゾキノリン類のような多様な合成化学的アゴニストで刺激され得る。ｓｓＲＮＡ又は低分子のＴＬＲ７及び/又はＴＬＲ８への結合に続いて、この受容体は、その二量体型での構造変化を受けて、続いて、骨髄分化一次応答遺伝子８８（ＭｙＤ８８）が含まれる、アダプタータンパク質をその細胞質ドメインで動員すると考えられている。ＭｙＤ８８経路を介した受容体シグナル伝達カスケードの始動に続いて、インターフェロン調節因子７（ＩＲＦ−７）及び／又は核内因子κＢ（ＮＦ−κＢ）のような細胞質転写因子がそれぞれＴＬＲ７とＴＬＲ８によって活性化される。次いで、これらの転写因子は、核内へ転座して、様々な遺伝子、例えば、Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−β）遺伝子と他の炎症性サイトカイン遺伝子（例、ＩＬ−６、ＴＮＦα、等）の活性化を開始させる。
【０００６】
ＴＬＲ８は、単球／マクロファージと骨髄樹状細胞（ｍＤＣ）において主に発現されることが知られている。一方、ＴＬＲ７は、形質細胞様ＤＣ（ｐＤＣ）において優先的に発現されて、ある程度は、Ｂ細胞や単球／マクロファージにおいて発現される。ＴＬＲ７又はＴＬＲ８の選択的アゴニストは、異なる細胞種を活性化して、異なる免疫応答を誘導することができる。しかしながら、ＴＬＲ７／８デュアルアゴニストには、広汎な免疫応答を活性化／誘導する潜在可能性がある。免疫応答を活性化するその効力の故に、ＴＬＲ７及び／又はＴＬＲ８アゴニストには、抗ウイルス及び抗腫瘍療法とワクチンアジュバントとしての使用を含めて、多種多様な応用が検討されている。
【０００７】
いくつかのＴＬＲ７及び／又はＴＬＲ８アゴニストが治療目的のために使用されてきた。イミキモド（Imiquimod）（ＡＬＤＡＲＡＴＭ）は、ヒト乳頭腫ウイルス感染による皮膚病変を治療するための局所使用に米国ＦＤＡ承認された、ＴＬＲ７アゴニスト薬である。ＴＬＲ７／８のデュアルアゴニストであるレジキモド（Resiquimod）（Ｒ−８４８）とＴＬＲ７アゴニストの８５２Ａは、ヒト性器ヘルペスと化学療法抵抗性転移性メラノーマをそれぞれ治療することについて評価中である。ＡＮＡ７７３は、慢性Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染と慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染のある患者の治療用に開発された、経口プロドラッグＴＬＲ７アゴニストである。ＧＳ−９６２０は、経口で利用可能なＴＬＲ７アゴニストである。第Ｉｂ相試験では、慢性Ｂ型肝炎患者において、ＧＳ−９６２０での治療が安全で十分に忍容されて、用量依存的なＩＳＧ１５  ｍＲＮＡ誘導をもたらすことが実証された（E. J. Gane et al, Annu Meet Am Assoc Study Liver Dis (November 1-5, Washington, D.C.) 2013, Abst 946）。より最近では、VentiRX Pharmaceuticals によって発見された（ＷＯ２００７０２４６１２）高選択性ＴＬＲ８アゴニストであるＶＴＸ−２３３７がヒト頭頚部癌患者の治療に使用されている（D. W. Northfelt et al, Clin Cancer Res 2014, 20, 3683-3691）。この十年間でかなりの数のＴＬＲ７アゴニストが報告されて、ＴＬＲ８アゴニスト又はＴＬＲ７／８デュアルアゴニストについてはごくわずかしか報告されてこなかったものの、より多くの治療解決法を提供するか又は既存の部分的に有効な治療法に置き換わるための新たな抗ウイルス及び抗腫瘍治療法として、強力で安全なＴＬＲ７及び／又はＴＬＲ８アゴニストを開発することへの高い未充足の臨床ニーズが依然として存在する。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニズム活性を有する、一連の新規３位置換５−アミノ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン化合物とそれらのプロドラッグを提供する。本発明はまた、ＴＬＲ７及び／又はＴＬＲ８受容体のようなＴｏｌｌ様受容体を活性化することによってＳＥＡＰレベルの増加を誘導するこのような化合物の生体活性、ヒト肝細胞の存在下でのプロドラッグの親化合物への代謝的変換、並びにそのような化合物と、これらの化合物とそれらのプロドラッグを含んでなるその医薬組成物の、癌、自己免疫疾患、炎症、敗血症、アレルギー、喘息、移植拒絶、移植片対宿主病、免疫不全症、及びＨＢＶ又はＨＣＶのような感染性疾患といった疾患を治療又は予防するための療法的又は予防的な使用を提供する。本発明はまた、優れた活性のある化合物を提供する。
【０００９】
本発明は、式（Ｉ）及び（Ｉａ）：
【００１０】
【化２】
2018527309.tif 000004
【００１１】
［式中：
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、又はフェニルＣ１−６アルキルであり、前記フェニルＣ１−６アルキルは、未置換であるか又はＣ１−６アルキルとハロゲンより独立して選択される１〜３の置換基で置換され；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキルである］の新規化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーに関する。
【００１２】
本発明はまた、それらの製造、本発明に準拠した化合物に基づく医薬品とそれらの生産、並びに式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそれらのプロドラッグの、ＴＬＲ７及び／又はＴＬＲ８アゴニストとしての使用に関する。従って、式（Ｉ）及び（Ｉａ）の化合物は、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニズムを用いた、ＨＢＶ及び／又はＨＣＶ感染のような抗ウイルス治療又は予防、並びに抗腫瘍治療に有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
他に定義しなければ、本明細書に使用するすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。さらに、以下の諸定義について説明するのは、本発明について記載するために使用される様々な用語の意味及び範囲を明示して定義するためである。
【００１４】
諸定義
本明細書に使用されるように、「Ｃ１−６アルキル」という用語は、１〜６個、特に１〜４個の炭素原子を含有する、飽和した直鎖又は分岐鎖アルキル基、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、等を意味する。特別な「Ｃ１−６アルキル」基は、メチル、エチル、及びｎ−プロピルである。
【００１５】
「Ｃ３−７シクロアルキル」という用語は、単独で、又は組合せにおいて、３〜７個の炭素原子、特に３〜６個の炭素原子を含有する飽和炭素環、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、等を意味する。特別な「Ｃ３−７シクロアルキル」基は、シクロプロピルである。
【００１６】
「エナンチオマー」という用語は、互いに重ね合わせることができない鏡像である、化合物の２つの立体異性体を意味する。
「ジアステレオマー」という用語は、２個以上のキラル中心があって、それらの分子が互いの鏡像ではない立体異性体を意味する。ジアステレオマーは、異なる物理特性、例えば、融点、沸点、スペクトル特性、及び反応性を有する。
【００１７】
「医薬的に許容される塩」という用語は、生物学的にも他の点でも望ましくないわけではない塩を意味する。医薬的に許容される塩には、酸付加塩と塩基付加塩の両方が含まれる。
【００１８】
「医薬的に許容される酸付加塩」という用語は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸のような無機酸と、そしてギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、及びサリチル酸のような、脂肪族、脂環式、芳香族、芳香脂肪族、複素環式、カルボン酸、及びスルホン酸の有機酸群より選択される有機酸とともに生成される医薬的に許容される塩を意味する。
【００１９】
「医薬的に許容される塩基付加塩」という用語は、有機塩基又は無機塩基とともに生成される医薬的に許容される塩を意味する。許容される無機塩基の例には、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、及びアルミニウムの塩が含まれる。医薬的に許容される無害な有機塩基より誘導される塩には、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン類、、ピペリジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、及びポリアミン樹脂のような、一級、二級、及び三級アミン、天然に存在する置換アミンが含まれる置換アミン、環式アミンと塩基性イオン交換樹脂の塩が含まれる。
【００２０】
１個又は数個のキラル中心を含有する一般式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物とそれらのプロドラッグは、ラセミ化合物、ジアステレオマー混合物、又は光学活性がある単一異性体として存在し得る。ラセミ化合物は、既知の方法に従って、エナンチオマーへ分割することができる。特に、結晶化によって分割され得るジアステレオマー塩は、ラセミ混合物より、例えば、Ｄ若しくはＬ−酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸、又はカンファースルホン酸のような光学活性酸との反応によって生成される。
【００２１】
本発明の化合物は、互変異性の現象を明示する場合がある。式図では、すべての可能な互変異性型を明確に図示することができないが、それらは、図示される化合物のどの互変異性型も表すように企図されていて、式図によって図示される特定の化合物型にのみ限定されることを企図しないと理解されたい。例えば、式（ＩＩ）では、その置換基がそれらのエノール型又はそれらのケト型で示されるかどうかに拘らず、それらが同じ化合物（下記の例に示されるような）を表すものと理解される。
【００２２】
【化３】
2018527309.tif 000005
【００２３】
［Ｒｘは、実現可能なあらゆる置換基を意味する］
本発明の化合物の中には、単一の立体異性体（即ち、本質的に他の立体異性体を含まない）、ラセミ化合物、及び／又はエナンチオマー及び／又はジアステレオマーの混合物として存在し得るものがある。すべてのそのような単一の立体異性体、そのラセミ化合物及び混合物が本発明の範囲内にあると企図される。好ましくは、光学活性のある本発明の化合物は、光学的に純粋な形態で使用される。当業者に一般的に理解されているように、１つのキラル中心（即ち、１個の不斉炭素原子）を有する光学的に純粋な化合物とは、２種の可能なエナンチオマーの１つから本質的になる（即ち、鏡像異性的に純粋である）化合物であって、１より多いキラル中心を有する光学的に純粋な化合物とは、ジアステレオ異性的に純粋であって鏡像異性的にも純粋である化合物である。好ましくは、本発明の化合物は、少なくとも９０％は光学的に純粋である形態、即ち、少なくとも９０％（８０％鏡像体過剰率（「ｅ．ｅ．」）又はジアステレオマー過剰率（「ｄ．ｅ．」））、より好ましくは少なくとも９５％（９０％  ｅ．ｅ．又はｄ．ｅ．）、なおより好ましくは少なくとも９７．５％（９５％  ｅ．ｅ．又はｄ．ｅ．）、そして最も好ましくは少なくとも９９％（９８％  ｅ．ｅ．又はｄ．ｅ．）の単一異性体を含有する形態で使用される。付言すると、本発明の式（Ｉ）及び（Ｉａ）の化合物とそれらのプロドラッグ、式（ＩＩ）及び（ＩＩａ）、並びに他の化合物には、同定された構造の非溶媒和型だけでなく溶媒和型も含まれると企図される。例えば、式（Ｉ）又は（Ｉａ）には、その指定構造の化合物が水和型と非水和型の両方で含まれる。他の溶媒和型の例には、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、又はエタノールアミンと複合した構造が含まれる。
【００２４】
「プロドラッグ」という用語は、生体内で、例えば、投与後に対象の生体液又は酵素によって該化合物の薬理活性型へ代謝されて所望される薬理効果を産生する、化合物の型又は誘導体を意味する。プロドラッグについては、例えば、「The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action（医薬設計及び医薬作用の有機化学）」、Richard B.Silverman（著）、アカデミック・プレス、サンディエゴ（2004）、第８章「Prodrugs and Drug Delivery Systems（プロドラッグとドラッグデリバリーシステム）」（497-558 頁）に記載されている。
【００２５】
「医薬活性代謝産物」とは、特定の化合物又はその塩の身体中での代謝により産生される薬理活性産物を意味すると企図される。身体中へのエントリーの後で、ほとんどの薬物は、それらの物理特性及び生物学的効果を変化させ得る化学反応の基質となる。これらの代謝的変換は、通常、本発明の化合物の極性に影響を及ぼして、薬物が身体中に分布してそこから排出されるやり方を変化させる。しかしながら、ある場合には、薬物の代謝が治療効果のために必要とされる。
【００２６】
「治療有効量」という用語は、対象へ投与される場合に、（ｉ）特別な疾患、状態、又は障害を治療するか又は予防する、（ｉｉ）特別な疾患、状態、又は障害の１以上の症状を緩和する、改善する、又は消失させる、又は（ｉｉｉ）本明細書に記載される特別な疾患、状態、又は障害の１以上の症状の発現を予防するか又は遅延させる、本発明の化合物又は分子の量を意味する。治療有効量は、該化合物、治療される病態、治療される疾患の重症度、対象の年齢と相対健常性、投与の経路及び形態、担当医又は担当獣医師の判断、及び他の要因に依存して変動するものである。
【００２７】
「医薬組成物」という用語は、治療有効量の医薬有効成分を医薬的に許容される賦形剤と一緒に含んでなり、哺乳動物（例、それを必要とするヒト）へ投与される、混合物又は溶液を意味する。
【００２８】
ＴＬＲ７及び／又はＴＬＲ８アゴニスト
本発明は、式（Ｉ）：
【００２９】
【化４】
2018527309.tif 000006
【００３０】
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、又はフェニルＣ１−６アルキルであり、前記フェニルＣ１−６アルキルは、未置換であるか又はＣ１−６アルキルとハロゲンより独立して選択される１〜３の置換基で置換され；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキルである］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーに関する。
【００３１】
本発明の別の態様は、（ｉｉ）式（Ｉａ）：
【００３２】
【化５】
2018527309.tif 000007
【００３３】
［式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、又はフェニルＣ１−６アルキルであり、前記フェニルＣ１−６アルキルは、未置換であるか又はＣ１−６アルキルとハロゲンより独立して選択される１〜３の置換基で置換され；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキルである］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーである。
【００３４】
本発明のさらなる態様は、（ｉｉｉ）Ｒ１が、Ｈ、メチル、プロピル、シクロプロピル、ベンジル、フルオロベンジル、クロロベンジル、フルオロクロロベンジル、又はメチルベンジルであり；
Ｒ２は、Ｈ又はメチルであり；
Ｒ３は、メチルであり；
Ｒ４は、エチルである、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーである。
【００３５】
本発明のさらなる態様は、（ｉｖ）Ｒ１が、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、又はフェニルＣ１−６アルキルである、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーである。
【００３６】
本発明のさらなる態様は、（ｖ）Ｒ１が、Ｈ、メチル、又はベンジルである、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーである。
【００３７】
本発明のさらなる態様は、（ｖｉ）Ｒ２がＨである、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーである。
本発明の別の態様は、（ｖｉｉ）以下：
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（プロピルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（シクロプロピルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ベンジルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ベンジルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン；及び
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオンである、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の特別な化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー又はジアステレオマーである。
【００３８】
合成
本発明の化合物は、どの慣用の手段によっても製造される。下記のスキームと実施例では、上記の化合物並びにそれらの出発材料を合成するのに適した方法を提供する。すべての置換基、特にＲ１〜Ｒ４は、他に断らなければ、上記に定義した通りである。さらに、そして他に明確に述べなければ、すべての反応、反応条件、略語、及び記号は、有機化学の当業者によく知られた意味を有する。
【００３９】
スキーム１：
【００４０】
【化６】
2018527309.tif 000008
【００４１】
目的の化合物ＩＩＩｍは、スキーム１に従って製造することができる。アルデヒド類と好適な塩基（リチウムジイソプロピルアミドやリチウムビス（トリメチルシリル）アザニドのような）とラクトンＩＩＩａのアルドール縮合により、化合物ＩＩＩｂを得る。この反応は、臭化亜鉛や塩化セリウム（ＩＩＩ）のようなルイス酸添加剤の存在下でも行うことができる。化合物ＩＩＩｂを水素化アルミニウムジイソブチルのような還元剤によって還元して、ヒドロキシル基を塩化アセチルや無水酢酸のような保護剤でさらに保護することを続けて、重要な中間体ＩＩＩｃを得ることができる。Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミドやヘキサメチルジシラザンのような適正なシリルエーテル保護剤と、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル、ヨウ化トリメチルシリル、塩化スズ（ＩＶ）、及び四塩化チタンのような好適なルイス酸の存在下での化合物ＩＩＩｃの化合物ＩＩＩｄとのカップリングにより、化合物ＩＩＩｅを得る。４−メトキシトリフェニルメチル保護基の導入によって、化合物ＩＩＩｅを化合物ＩＩＩｆへ変換する。化合物ＩＩＩｆの脱保護化により化合物ＩＩＩｇを得て、塩化メタンスルホニルのようなメシル化試薬でのメシル化を続けて化合物ＩＩＩｈを得て、アジ化ナトリウムでの置換反応を続けて、化合物ＩＩＩｉを得る。酢酸中の亜鉛粉末のような還元剤での化合物ＩＩＩｉの還元により、化合物ＩＩＩｊを得る。フッ化テトラブチルアンモニウムやフッ化アンモニウムのような適正なフッ素試薬の存在下での化合物ＩＩＩｊの脱保護化により化合物ＩＩＩｋを得て、ギ酸のような好適な酸での脱保護化によって、これを最終化合物ＩＩＩｍへ変換することができる。
【００４２】
スキーム２：
【００４３】
【化７】
2018527309.tif 000009
【００４４】
目的の化合物ＩＶｄは、スキーム２に従って製造する。化合物ＩＩＩｈの様々なアミンＩＶａでの置換により、化合物ＩＶｂを得る。フッ化テトラブチルアンモニウム又はフッ化アンモニウムのような適正なフッ素試薬の存在下での化合物ＩＶｂの脱保護化により、化合物ＩＶｃを得る。ギ酸のような好適な酸での脱保護化によって、化合物ＩＶｃを最終化合物ＩＶｄへ変換する。
【００４５】
スキーム３：
【００４６】
【化８】
2018527309.tif 000010
【００４７】
目的の化合物Ｖｄは、スキーム３に従って製造する。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３のような好適な還元剤の存在下での、化合物ＩＩＩｊ中のアミンのアルデヒドＶａでの直接還元的アミノ化により、化合物Ｖｂを得る。フッ化テトラブチルアンモニウムやフッ化アンモニウムのような適正なフッ素試薬の存在下での化合物Ｖｂの脱保護化により化合物Ｖｃを得て、ギ酸のような好適な酸での脱保護化によってこれを最終化合物Ｖｄへ変換する。
【００４８】
本発明はまた、以下の反応：
（ａ）式（ＩＩＩｋ）：
【００４９】
【化９】
2018527309.tif 000011
【００５０】
の化合物の酸との反応；
（ｂ）式（ＩＶｃ）：
【００５１】
【化１０】
2018527309.tif 000012
【００５２】
［式中、Ｒａは、Ｒ１又はＲ２である］の化合物の酸との反応；
（ｃ）式（Ｖｃ）：
【００５３】
【化１１】
2018527309.tif 000013
【００５４】
［式中、Ｒｂは、Ｃ１−６アルキルである］の化合物の酸との反応；
［又は、式中、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒ３、Ｒ４は、上記に定義される］を含んでなる、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物の製造の方法に関する。
【００５５】
工程（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）において、酸は、例えば、ギ酸であり得る。
式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物はまた、上記の方法に従って製造される場合、本発明の目的である。
【００５６】
医薬組成物と投与
別の態様は、本発明の化合物と治療上不活性な担体、希釈剤、又は賦形剤を含有する医薬組成物又は医薬品、並びに、本発明の化合物を使用してそのような組成物及び医薬品を製造する方法を提供する。１つの例では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそれらのプロドラッグを、周囲温度で、適正なｐＨで、そして所望される度合いの純度で、生理学的に許容される担体（即ち、製剤投与形態へ利用される投与量及び濃度でレシピエントに対して非毒性である担体）と混合することによって製剤化し得る。製剤のｐＨは、化合物の特別な使用とその濃度に主に依存するが、好ましくは、約３〜約８のあらゆる範囲に及ぶ。１つの例では、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそれらのプロドラッグを酢酸塩緩衝液においてｐＨ５で製剤化する。別の態様において、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそれらのプロドラッグは、無菌である。該化合物は、例えば、固形性又は非晶性の組成物として、凍結乾燥製剤として、又は水溶液剤として保存し得る。
【００５７】
組成物は、良好な医療行為に一致したやり方で製剤化、投薬、及び投与される。この状況において考慮すべき要因には、治療される特別な障害、治療される特別な哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与の方法、投与の計画、及び医療従事者に知られた他の要因が含まれる。投与される化合物の「有効量」は、そのような考慮事項によって支配されるものであって、ＴＬＲ７及び／又はＴＬＲ８受容体を活性化してＩ型インターフェロン（ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−β）と他の炎症性サイトカイン遺伝子を産生することをもたらすのに必要な最小量であり、限定されないが、抗ウイルス及び抗腫瘍の治療又は予防にこれを使用することができる。
【００５８】
１つの例において、非経口的に投与される本発明の化合物の投薬当たりの医薬有効量は、患者の体重１ｋｇにつき、１日当たり約０．１〜５０ｍｇ、あるいは約０．１〜３０ｍｇの範囲にあって、使用される化合物の典型的な初回範囲は、０．３〜１５ｍｇ／ｋｇ／日であろう。別の態様では、錠剤及びカプセル剤のような経口の単位剤形は、好ましくは、本発明の化合物の約２０〜約１０００ｍｇを含有する。
【００５９】
本発明の化合物は、経口、局部（頬内及び舌下が含まれる）、直腸、膣、経皮、非経口、皮下、腹腔内、肺内、皮内、髄腔内、及び硬膜外、及び鼻腔内と（局所治療が所望されるならば）病巣内の投与が含まれる、どの好適な手段によっても投与し得る。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下の投与が含まれる。
【００６０】
本発明の化合物は、例えば、錠剤、散剤、カプセル剤、溶液剤、分散液剤、懸濁液剤、シロップ剤、スプレー剤、坐剤、ゲル剤、乳液剤、パッチ剤、等のどの簡便な投与形態でも投与してよい。そのような組成物は、医薬調製品に慣用の成分、例えば、希釈剤、担体、ｐＨ調整剤、甘味剤、増嵩剤、及びさらなる有効成分を含有してよい。
【００６１】
典型的な製剤は、本発明の化合物と担体又は賦形剤を混合することによって調製される。好適な担体及び賦形剤は、当業者によく知られていて、例えば、Ansel, Howard C., et al.「Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems（アンセルの医薬剤形と薬物送達系）」フィラデルフィア：リッピンコット、ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（2004）；Gennaro, Alfonso R., et al.「Remington: The Science and Practice of Pharmacy（レミントン：調剤の科学及び実践）」フィラデルフィア：リッピンコット、ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（2000）；及び、Rowe, Raymond C.「医薬賦形剤ハンドブック（Handbook of Pharmaceutical Excipients）」シカゴ、ファーマシューティカル・プレス（2005）に詳しく記載されている。この製剤には、薬物（即ち、本発明の化合物又はその医薬組成物）の洗練された提示を提供するか又はその製剤製品（即ち、医薬品）の製造に役立てるために、１以上の緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、湿潤剤、滑沢剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、抗酸化剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、香味剤、希釈剤、及び他の既知の添加剤も含めてよい。
【００６２】
好適な経口剤形の例は、約２０〜１０００ｍｇの本発明の化合物を約３０〜９０ｍｇの無水乳糖、約５〜４０ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、約５〜３０ｍｇのポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）Ｋ３０、及び約１〜１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムと複合して含有する錠剤である。最初に、粉末化した成分を一緒に混合して、次にＰＶＰの溶液と混合する。生じる組成物は、慣用の機器を使用して、乾燥させ、造粒し、ステアリン酸マグネシウムと混合して、錠剤の形態へ圧縮することができる。本発明の化合物（例えば、２０〜１０００ｍｇ）を好適な緩衝溶液（例、リン酸塩緩衝液）に溶かし、所望されるならば等張化剤（例、塩化ナトリウムのような塩）を加えることによって、エアゾール製剤の例を調製することができる。この溶液剤は、例えば、０．２ミクロンのフィルターを使用して濾過して、不純物や混在物を除去してよい。
【００６３】
故に、ある態様には、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそれらのプロドラッグ、又はそれらの医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー又はジアステレオマーを含んでなる医薬組成物が含まれる。
【００６４】
さらなる態様には、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそれらのプロドラッグ、又はそれらの医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー又はジアステレオマーを医薬的に許容される担体又は賦形剤と一緒に含んでなる医薬組成物が含まれる。
【００６５】
別の態様には、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそれらのプロドラッグ、又はそれらの医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー又はジアステレオマーを含んでなる、癌又はＢ型肝炎ウイルス感染の治療に使用のための医薬組成物が含まれる。
【００６６】
適応症と治療の方法
本発明は、癌、又はＢ型肝炎ウイルス感染及び／又はＣ型肝炎ウイルス感染を治療するか又は予防することの必要な患者においてそれをするための方法を提供する。
【００６７】
さらに本発明は、癌、又はＢ型及び／又はＣ型肝炎ウイルス感染の治療及び／又は予防において、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそれらのプロドラッグ、又は本発明の他の化合物の治療有効量を患者の血流へ導入するための方法を提供する。
【００６８】
本発明の方法は、ヒト患者に特によく適している。特に、本発明の方法及び用量は、限定されないが、癌、ＨＢＶ及び／又はＨＣＶ感染患者に有用であり得る。本発明の方法及び用量は、他の抗ウイルス治療を受けている患者にも有用である。本発明の予防方法は、ウイルス感染のリスク状態にある患者に特に有用である。これらの患者には、限定されないが、医療従事者（例えば、医師、看護師、ホスピス介護者）；軍人；教師；保育士；海外現地（特に、第三世界の現地）へ旅行するか又はそこで暮らす患者（社会支援ワーカー、宣教師、及び外交官が含まれる）が含まれる。最後に、本発明の方法及び組成物には、難治性の患者、又は治療抵抗性（逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、等に対する抵抗性のような）の患者の治療が含まれる。
【００６９】
別の態様には、癌、又はＢ型肝炎ウイルス感染及び／又はＣ型肝炎ウイルス感染を治療するか又は予防するような治療の必要な哺乳動物においてそれをする方法が含まれ、ここで該方法は、式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物又はそのプロドラッグ、又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ、又は医薬的に許容される塩の治療有効量を前記哺乳動物へ投与することを含む。
【実施例】
【００７０】
本発明は、以下の実施例を参照することによって、より完全に理解されよう。しかしながら、それらは、本発明の範囲を制限するものと解釈してはならない。
略語：
ＡＣＮ：      アセトニトリル
ＢＳＡ：      Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド
ＤＩＢＡＬ−Ｈ：  水素化アルミニウムジイソブチル
ＤＭＡＰ：    ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＣＭ：      ジクロロメタン
ＥＣ５０：      アゴニストの可能な最大応答の５０％をもたらす、該アゴニストのモル濃度
ＥｔＯＡｃ：  酢酸エチル
ＦＢＳ：      胎仔ウシ血清
ＨＰＬＣ：    高速液体クロマトグラフィー
ＬＤＡ：      リチウムジイソプロピルアミド
ＭＭＴｒＣｌ：塩化４−メトキシトリフェニルメチル
ＭＳ（ＥＳＩ）：質量分析法（電子スプレーイオン化）
ｏｂｓｄ．：    実測値
ＳＦＣ：      超臨界流体クロマトグラフィー
ＴＢＡＦ：    フッ化テトラブチルアンモニウム
ＴＨＦ：      テトラヒドロフラン
ＴＢＤＰＳＣｌ：ｔｅｒｔ−ブチルクロロジフェニルシラン
ＴＭＳＯＴｆ：  トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル
ｖ／ｖ：      容量比
全般的な実験条件
中間体と最終化合物は、以下の機器の１つを使用して、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した：ｉ）Biotage SP1 システム及び Quad 12/25 Cartridge モジュール。ｉｉ）ISCO combi-フラッシュクロマトグラフィー機器。シリカゲルのブランド及び孔径：ｉ）KP-SIL 60A（オングストローム）、粒径：４０〜６０μｍ；ｉｉ）ＣＡＳ登録番号：Silica Gel：63231-67-4，粒径：４７〜６０ミクロンシリカゲル；ｉｉｉ）ＺＣＸ（Qingdao Haiyang Chemical 株式会社製）、空孔：２００〜３００又は３００〜４００。
【００７１】
中間体と最終化合物は、ＸＢｒｉｄｇｅＴＭＰｅｒｐ  Ｃ１８（５μｍ，ＯＢＤＴＭ  ３０×１００ｍｍ）カラム又はＳｕｎＦｉｒｅＴＭＰｅｒｐ  Ｃ１８（５μｍ，ＯＢＤＴＭ  ３０×１００ｍｍ）カラムを使用する逆相カラムでの分取用ＨＰＬＣによって精製した。
【００７２】
キラル分離は、ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＡＤ−１０μ（２００×内径５０ｍｍ）をＣＯ２用の移動相Ａとエタノール用の移動相Ｂとともに使用する、Thar 350 分取用ＳＦＣで実施した。ＬＣ／ＭＳスペクトルは、Waters UPLC-SQD Mass を使用して入手した。標準的なＬＣ／ＭＳ条件は、以下の通りであった（操作時間：３分）：
酸性条件：Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％ギ酸及び１％アセトニトリル；Ｂ：アセトニトリル中０．１％ギ酸；
塩基性条件：Ａ：Ｈ２Ｏ中０．０５％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ；Ｂ：アセトニトリル；
質量スペクトル（ＭＳ）：全般的には、親質量を示すイオンだけを報告して、他に述べなければ、引用される質量イオンは、正の質量イオン（Ｍ＋Ｈ）＋である。
【００７３】
ＮＭＲスペクトルは、Bruker Avance 400 MHz を使用して入手した。
空気感受性の試薬が関わるすべての反応は、アルゴン雰囲気下で実施した。他に述べなければ、試薬は、市販の供給業者より受け取ったままで、さらに精製せずに使用した。
【００７４】
製造の実施例
実施例１
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例１−Ａ）と５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例１−Ｂ）
【００７５】
【化１２】
2018527309.tif 000014
【００７６】
（２Ｓ）−５−オキソテトラヒドロフラン−２−カルボン酸の製造
【００７７】
【化１３】
2018527309.tif 000015
【００７８】
（２Ｓ）−２−アミノペンタン二酸（２．５０ｋｇ，１６．９９モル）をＨ２Ｏ（６Ｌ）と濃ＨＣｌ（３．５Ｌ）に溶かしてから、ＮａＮＯ２（１．７６ｋｇ，２５．４９モル）のＨ２Ｏ（５Ｌ）溶液を先の溶液へ−５℃〜０℃でゆっくり加えた。添加後、この反応混合物を２８℃で１６時間撹拌してから、この反応混合物を５０℃未満で濃縮して残渣を得て、これを酢酸エチル（５Ｌ）に懸濁させた。濾過後、濾液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて真空で濃縮して、１．５ｋｇの（２Ｓ）−５−オキソテトラヒドロフラン−２−カルボン酸を無色のオイルとして得て、これをさらに精製せずに次の工程に使用した。
【００７９】
塩化（２Ｓ）−５−オキソテトラヒドロフラン−２−カルボニルの製造
【００８０】
【化１４】
2018527309.tif 000016
【００８１】
（２Ｓ）−５−オキソテトラヒドロフラン−２−カルボン酸（１．００ｋｇ，７．６９モル）のＤＣＭ（１０．０Ｌ）及びＤＭＦ（１０．０ｍＬ）中の混合物へ（ＣＯＣｌ）２（２．９３ｋｇ，２３．０６モル）をＮ２下に０℃でゆっくり滴下した。この反応物を０℃で３０分間撹拌してから２５℃まで加熱して、さらに２時間撹拌した。この反応が完了した後で、この反応混合物を４０℃で真空濃縮して、１．０ｋｇの塩化（２Ｓ）−５−オキソテトラヒドロフラン−２−カルボニルを黄色のオイルとして得て、これをさらに精製せずに次の工程に使用した。
【００８２】
（５Ｓ）−５−プロパノイルテトラヒドロフラン−２−オンの製造
【００８３】
【化１５】
2018527309.tif 000017
【００８４】
塩化（２Ｓ）−５−オキソテトラヒドロフラン−２−カルボニル（１．００ｋｇ，６．７３モル）のＴＨＦ（５．０Ｌ）溶液へブロモ（エチル）マグネシウム（２．２４Ｌ，６．７３モル）をＮ２下に−７８℃で滴下した。この滴下の後で、この反応混合物を−７８℃で３時間撹拌した。次いで、この反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（１００ｍＬ）へ注いでから、酢酸エチルで抽出し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して真空で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中１０〜５０％酢酸エチルで溶出させる）によって精製して、５００ｇの（５Ｓ）−５−プロパノイルテトラヒドロフラン−２−オンを淡黄色のオイルとして得た。
【００８５】
（５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−オンの製造
【００８６】
【化１６】
2018527309.tif 000018
【００８７】
（５Ｓ）−５−プロパノイルテトラヒドロフラン−２−オン（１．５０ｋｇ，１０．５５モル）のＴＨＦ（１５．０Ｌ）溶液へＫ−セレクトリド（２．３４ｋｇ，１０．５５モル）をＮ２下に−７８℃で滴下した。この反応混合物を−７８℃で３時間撹拌した。生じる混合物を冷ＮａＨＣＯ３水溶液（１５Ｌ）へ注いで、１２時間撹拌した。水相を酢酸エチル（１０Ｌ）で４回抽出した。合わせた有機相を塩水（brine）（５Ｌ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して真空で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中０〜３０％酢酸エチルで溶出させる）によって精製して、５００ｇの（５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−オンを黄色のオイルとして得た（Eur. J. Med. Chem. 1997, 32, 617-623 を参照のこと）。
【００８８】
（５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−オンの製造
【００８９】
【化１７】
2018527309.tif 000019
【００９０】
（５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−オン（５００ｇ，３．５モル）とイミダゾール（７０８ｇ，１０．４モル）のＤＭＦ（８．０Ｌ）中の混合物へＴＢＤＰＳＣｌ（１．４３ｋｇ，５．２モル）をＮ２下に０℃で滴下した。２５℃で１２時間撹拌した後で、この反応混合物を水（１２０ｍＬ）で希釈して、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して真空で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中３０〜５０％酢酸エチルで溶出させる）によって精製して、８６０ｇの（５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−オンを白色の固形物として得た。
【００９１】
化合物１ｅ：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0.76 (t, J = 7.47 Hz, 3H), 1.08 (s, 9H), 1.36-1.52 (m, 1H), 1.61-1.75 (m, 1H), 2.06-2.24 (m, 2H), 2.41-2.67 (m, 2H), 3.61-3.74 (m, 1H), 4.56 (td, J = 7.09, 3.64 Hz, 1H), 7.31-7.57 (m, 6H), 7.61-7.82 (m, 4H)。
【００９２】
（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−オン（化合物１ｆ−Ａ）と（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−オン（化合物１ｆ−Ｂ）の製造
【００９３】
【化１８】
2018527309.tif 000020
【００９４】
（５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−オン（２００ｇ，５２０ミリモル）のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液へＬＤＡ（３９０ｍＬ，７８０ミリモル）を−７８℃でゆっくり加えて、Ｎ２下にさらに２時間撹拌した。上記の混合物へＣＨ３ＣＨＯ（３４．４ｇ，７８０ミリモル）を−７８℃でゆっくり加えて、さらに１時間撹拌した。この反応物をＮＨ４Ｃｌ溶液（２Ｌ）でクエンチし、酢酸エチル（２Ｌ）で希釈し、有機相を塩水（１Ｌ）で洗浄して無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して真空で濃縮して残渣を得て、これをカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中０〜１０％酢酸エチルで溶出させる）によって２回精製して、４２ｇの（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−オン（化合物１ｆ−Ａ）と４６ｇの（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−オン（化合物１ｆ−Ｂ）を得た。
【００９５】
５員環に関する立体化学は、２Ｄ  ＮＭＲ  ＮＯＥＳＹ実験によって確定した。化合物１ｆ−Ａと化合物１ｆ−Ｂでは、Ｃ３ＨとＣ５Ｈの相関を観測しなかった。
【００９６】
【化１９】
2018527309.tif 000021
【００９７】
化合物１ｆ−Ａ：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0.72 (t, J = 7.53 Hz, 3H), 1.07 (s, 9H), 1.23 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 1.36-1.51 (m, 1H), 1.65-1.80 (m, 1H), 2.10-2.24 (m, 1H), 2.35 (dt, J = 12.83, 9.08 Hz, 1H), 2.86 (ddd, J = 10.29, 9.03, 3.14 Hz, 1H), 3.66 (ddd, J = 8.28, 5.08, 2.95 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 6.40, 3.01 Hz, 1H), 4.58 (dt, J = 9.13, 3.15 Hz, 1H), 7.34-7.54 (m, 6H), 7.63-7.81 (m, 4H)。
【００９８】
化合物１ｆ−Ｂ：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0.72 (t, J = 7.47 Hz, 3H), 1.08 (s, 9H), 1.23 (d, J = 6.27 Hz, 3H), 1.38-1.53 (m, 1H), 1.66-1.81 (m, 1H), 1.97 (dt, J = 13.05, 9.60 Hz, 1H), 2.24 (ddd, J = 12.92, 10.16, 2.51 Hz, 1H), 2.68-2.85 (m, 1H), 3.65 (ddd, J = 8.34, 5.08, 2.89 Hz, 1H), 3.79-3.95 (m, 1H), 4.56 (dt, J = 9.29, 2.64 Hz, 1H), 7.38-7.54 (m, 6H), 7.70 (ddd, J = 10.57, 8.00, 1.51 Hz, 4H)。
【００９９】
（２Ｓ）−３，３，３−トリフルオロ−２−メトキシ−２−フェニル−プロパン酸［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｐ−Ａ）と（２Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−メトキシ−２−フェニル−プロパン酸［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｐ−Ｂ）の製造
【０１００】
【化２０】
2018527309.tif 000022
【０１０１】
（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−オン（化合物１ｆ−Ａ，２０ｍｇ，０．０４７ミリモル）、ＤＭＡＰ（０．６ｍｇ，０．００５ミリモル）、及びＥｔ３Ｎ（９．５ｍｇ，０．０９４ミリモル）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液へ塩化（２Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−メトキシ−２−フェニル−プロパノイル（２４ｍｇ，０．０９４ミリモル）を０℃でゆっくり加えて、Ｎ２下に２５〜２８℃で１２時間撹拌した。この反応混合物を水（３ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（２ｍＬ）で２回抽出して、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。真空で濃縮した後で、残渣を分取用ＴＬＣ（石油エーテル中１：８酢酸エチルで溶出させる）によって精製して、１０ｍｇの（２Ｓ）−３，３，３−トリフルオロ−２−メトキシ−２−フェニル−プロパン酸［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｐ−Ａ）を得た。
【０１０２】
化合物１ｐ−Ａに類似して、塩化（２Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−メトキシ−２−フェニル−プロパノイルの代わりに塩化（２Ｓ）−３，３，３−トリフルオロ−２−メトキシ−２−フェニル−プロパノイルを使用することによって、（２Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−メトキシ−２−フェニル−プロパン酸［（１Ｒ）−１−［（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−オキソ−テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｐ−Ｂ）を製造した。
【０１０３】
化合物１ｐ−Ａ：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0.68 (t, J = 7.47 Hz, 3H), 1.05 (s, 9H), 1.33-1.41 (m, 1H), 1.43 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 1.63-1.75 (m, 1H), 2.15-2.24 (m, 2H), 2.97 (td, J = 9.63, 3.83 Hz, 1H), 3.50-3.55 (m, 3H), 3.58-3.64 (m, 1H), 4.37-4.45 (m, 1H), 5.54-5.63 (m, 1 H), 7.37-7.48 (m, 9H), 7.48-7.54 (m, 2H), 7.63-7.72 (m, 4H)。
【０１０４】
化合物１ｐ−Ｂ：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0.66 (t, J = 7.40 Hz, 3H), 1.05 (s, 9H), 1.34 (d, J = 6.27 Hz, 3H), 1.37-1.49 (m, 1H), 1.64-1.75 (m, 1H), 2.13-2.21 (m, 2H), 2.96 (td, J = 9.41, 2.64 Hz, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.57-3.64 (m, 1H), 4.38-4.49 (m, 1H), 5.50-5.61 (m, 1H), 7.36-7.51 (m, 11H), 7.68 (t, J = 8.47 Hz, 4H)。
【０１０５】
モッシャー（Mosher）モデル（Chem. Rev. 2004, 104, 17-117）と１Ｈ  ＮＭＲの結果に従って、化合物１ｐ−Ａと化合物１ｐ−Ｂの絶対配置を上記に収載したように示す。故に、化合物１ｆ−Ａと化合物１ｆ−Ｂの絶対配置は、上記のように示される。
【０１０６】
酢酸［（３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アセトキシエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］（化合物１ｈ−Ａ）と酢酸［（３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アセトキシエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］（化合物１ｈ−Ｂ）の製造
【０１０７】
【化２１】
2018527309.tif 000023
【０１０８】
（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−オン（化合物１ｆ−Ａ，１７ｇ，４０ミリモル）のトルエン（２００ｍＬ）溶液へＤＩＢＡＬ−Ｈ（１Ｍ，１２０ｍＬ，１２０ミリモル）を−７８℃で滴下して、この反応混合物をＮ２下に−７８℃で１時間撹拌した。この反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチして、酢酸エチルで抽出した。有機相を抽出して塩水で洗浄し、乾燥させて濃縮して粗生成物を得て、これをピリジン（１００ｍＬ）に再び溶かして、ＤＭＡＰ（５００ｍｇ，４ミリモル）とＡｃ２Ｏ（３０ｇ，３００ミリモル）の０℃での添加を続けた。２５℃で１６時間撹拌した後で、この反応物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液でクエンチして、酢酸エチルで抽出した。この有機相を抽出して塩水で洗浄し、乾燥させて濃縮して粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中０〜１０％酢酸エチルで溶出させる）によって精製して、１３ｇの酢酸［（３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アセトキシエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］（化合物１ｈ−Ａ）を無色のオイルとして得た。
【０１０９】
化合物１ｈ−Ａに類似して、化合物１ｆ−Ａの代わりに（３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−オン（化合物１ｆ−Ｂ）を使用することによって、酢酸［（３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アセトキシエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］（化合物１ｈ−Ｂ）を製造した。
【０１１０】
酢酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−２−（５−アミノ−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｉ−Ａ）と酢酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−２−（５−アミノ−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｉ−Ｂ）の製造
【０１１１】
【化２２】
2018527309.tif 000024
【０１１２】
５−アミノ−３，６−ジヒドロチアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（３．６ｇ，２０ミリモル）のＭｅＣＮ（１００ｍＬ）懸濁液へＢＳＡ（１６ｇ，８０ミリモル）を２５℃で加えて、この反応混合物を８５℃まで１時間加熱すると、澄明な溶液が形成された。この混合物を０℃へ冷やした後で、酢酸［（３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アセトキシエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］（化合物１ｈ−Ａ，５．２ｇ，１０ミリモル）を加えて、ＴＭＳＯＴｆ（４．４ｇ，２０ミリモル）の添加を続けた。２５℃で１６時間撹拌した後で、この反応物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液でクエンチして、酢酸エチルで抽出した。この有機相を抽出して塩水で洗浄し、乾燥させて真空で濃縮して粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜２％メタノールで溶出させる）によって精製して、６ｇの酢酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−２−（５−アミノ−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｉ−Ａ）を黄色のフォームとして得た。
【０１１３】
化合物１ｉ−Ａに類似して、化合物１ｈ−Ａの代わりに酢酸［（３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アセトキシエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］（化合物１ｈ−Ｂ）を使用することによって、酢酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−２−（５−アミノ−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｉ−Ｂ）を製造した。
【０１１４】
酢酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｊ−Ａ）と酢酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｊ−Ｂ）の製造
【０１１５】
【化２３】
2018527309.tif 000025
【０１１６】
酢酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−２−（５−アミノ−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｉ−Ａ，３．７ｇ，５．８ミリモル）のＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液へコリジン（２．１ｇ，１７．４ミリモル）、ＡｇＮＯ３（２．９ｇ，１７．４ミリモル）、及びＭＭＴｒＣｌ（５．４ｇ，１７．４ミリモル）を０℃で加えて、この反応混合物を２０℃で２時間撹拌した。次いで、この反応物を水（８０ｍＬ）でクエンチして、この反応混合物を濾過して酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中１〜５％メタノールで溶出させる）によって精製して、５．０ｇの酢酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｊ−Ａ）を黄色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 909.3。
【０１１７】
化合物１ｊ−Ａに類似して、化合物１ｉ−Ａの代わりに酢酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−２−（５−アミノ−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｉ−Ｂ）を使用することによって、酢酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｊ−Ｂ）を製造した。
【０１１８】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｋ−Ａ）と３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｋ−Ｂ）の製造
【０１１９】
【化２４】
2018527309.tif 000026
【０１２０】
酢酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｊ−Ａ，５．０ｇ，５．５ミリモル）のメタノール（６０．０ｍＬ）溶液へＫ２ＣＯ３（４．５ｇ，３３．０ミリモル）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。固形物を濾過によって除去して、濾液を真空で濃縮した。次いで、この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中２〜５％メタノールで溶出させる）によって精製して、３．８ｇの３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｋ−Ａ）を白色の固形物として得た。
【０１２１】
化合物１ｋ−Ａに類似して、化合物１ｊ−Ａの代わりに酢酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｊ−Ｂ）を使用することによって、３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｋ−Ｂ）を製造した。
【０１２２】
メタンスルホン酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｌ−Ａ）とメタンスルホン酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｌ−Ｂ）の製造
【０１２３】
【化２５】
2018527309.tif 000027
【０１２４】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｋ−Ｂ，２．５ｇ，２．８８ミリモル）のピリジン（２０．０ｍＬ）溶液へ塩化メタンスルホニル（４９５．４ｍｇ，４．３２ミリモル）を０℃で滴下して、この反応混合物をＮ２下に２５℃で１２時間撹拌した。この反応物をＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出し、合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。濾過後、溶媒を真空で除去して、２．５ｇの粗製のメタンスルホン酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｌ−Ｂ）を茶褐色のオイルとして得て、これをさらに精製せずに次の工程にそのまま使用した。
【０１２５】
化合物１ｌ−Ｂに類似して、化合物１ｋ−Ｂの代わりに３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｋ−Ａ）を使用することによって、メタンスルホン酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｌ−Ａ）を製造した。
【０１２６】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アジドエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｍ−Ａ）と３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アジドエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｍ−Ｂ）の製造
【０１２７】
【化２６】
2018527309.tif 000028
【０１２８】
メタンスルホン酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｌ−Ｂ，１．３ｇ，１．３８ミリモル）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０．０ｍＬ）溶液へアジ化ナトリウム（２６８．２ｍｇ，４．１３ミリモル）を２５℃でゆっくり加えて、この反応混合物をＮ２下に６０〜８０℃で１２時間撹拌した。この反応溶液を２５℃へ冷やして水（５０．０ｍＬ）へ注いで、酢酸エチル（３０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。濾過後、溶媒を真空で除去して、この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜２％メタノールで溶出させる）によって精製して、０．７５ｇの３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アジドエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｍ−Ｂ）を茶褐色の固形物として得た。
【０１２９】
化合物１ｍ−Ｂに類似して、化合物１ｌ−Ｂの代わりにメタンスルホン酸［（１Ｒ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｌ−Ａ）を使用することによって、３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アジドエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｍ−Ａ）を製造した。
【０１３０】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｎ−Ａ）と３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｎ−Ｂ）の製造
【０１３１】
【化２７】
2018527309.tif 000029
【０１３２】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アジドエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｍ−Ｂ，２．１ｇ，２．３５ミリモル）のテトラヒドロフラン（２０．０ｍＬ）溶液へＺｎ（３０７．８ｍｇ，４．７ミリモル）と酢酸（２８２．７ｍｇ，４．７ミリモル）を加えてから、この反応混合物を２５℃で１２時間撹拌した。この反応物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）でクエンチして、酢酸エチル（３０ｍＬ）で２回抽出した。この有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、真空で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜２％メタノールで溶出させる）によって精製して、１．４ｇの３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｎ−Ｂ）を黄色の固形物として得た。
【０１３３】
化合物１ｎ−Ｂに類似して、化合物１ｍ−Ｂの代わりに３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アジドエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｍ−Ａ）を使用することによって、３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｎ−Ａ）を製造した。
【０１３４】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｏ−Ａ）と３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｏ−Ｂ）の製造
【０１３５】
【化２８】
2018527309.tif 000030
【０１３６】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｎ−Ｂ，０．３２ｇ，０．３６ミリモル）のフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ中３Ｍ，１０．０ｍＬ）溶液を５０℃で１２時間撹拌した。この反応溶液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して真空で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中１０〜３０％酢酸エチルで溶出させる）によって精製して、０．２１ｇの３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｏ−Ｂ）を黄色の固形物として得た。
【０１３７】
化合物１ｏ−Ｂに類似して、化合物１ｎ−Ｂの代わりに３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｎ−Ａ）を使用することによって、３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｏ−Ａ）を製造した。
【０１３８】
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例１−Ａ）と５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例１−Ｂ）の製造
【０１３９】
【化２９】
2018527309.tif 000031
【０１４０】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｏ−Ｂ，２００．０ｍｇ，０．４９ミリモル）のギ酸（５．０ｍＬ）溶液をＮ２下に２０〜２５℃で０．５時間撹拌した。この混合物を真空で濃縮して、残渣を分取用ＨＰＬＣとＳＦＣによって精製して、２３．０ｍｇの５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例１−Ｂ）を淡黄色の固形物として得た。
【０１４１】
実施例１−Ｂに類似して、化合物１ｏ−Ｂの代わりに３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｏ−Ａ）を使用することによって、５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｓ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例１−Ａ）を製造した。
【０１４２】
実施例１−Ａ：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 356.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 1.01 (t, J = 7.40 Hz, 3H), 1.19 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 1.43-1.63 (m, 2H), 1.94-2.09 (m, 1H), 2.35 (ddd, J = 12.64, 9.69, 6.02 Hz, 1H), 2.91-3.02 (m, 1H), 3.10 (quin, J = 6.74 Hz, 1H), 3.48 (dt, J = 8.50, 4.34 Hz, 1H), 4.03-4.15 (m, 1H), 6.07 (d, J = 6.78 Hz, 1H)。
【０１４３】
実施例１−Ｂ：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 356.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δppm: 0.89 (t, J = 7.34 Hz, 3H) 0.97 (d, J = 6.27 Hz, 3H), 1.21-1.36 (m, 1H), 1.37-1.56 (m, 1H), 1.89-2.01 (m, 1H), 2.09-2.21 (m, 1H), 2.82 (br. s., 1H), 2.87-2.98 (m, 1H), 3.80-3.90 (m, 1H), 4.71 (br. s., 1H), 5.83 (d, J = 5.77 Hz, 1H), 7.09 (br. s., 2H)。
【０１４４】
実施例２
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン
【０１４５】
【化３０】
2018527309.tif 000032
【０１４６】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物２ａ）の製造
【０１４７】
【化３１】
2018527309.tif 000033
【０１４８】
メタンスルホン酸［（１Ｓ）−１−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−２−［５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−２，７−ジオキソ−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−３−イル］テトラヒドロフラン−３−イル］エチル］（化合物１ｌ−Ｂ，１．８ｇ，１．９ミリモル）をＭｅＮＨ２のエタノール溶液（無水エタノール中３３重量％，２０．０ｍＬ，１４９ミリモル）に溶かして、この反応混合物をＮ２下に撹拌しながら８０℃で２０時間加熱した。この反応溶液を２５℃へ冷やして真空で濃縮して、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜２％メタノールで溶出させる）によって精製して、０．８ｇの３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物２ａ）を黄色の固形物として得た。
【０１４９】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物２ｂ）の製造
【０１５０】
【化３２】
2018527309.tif 000034
【０１５１】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物２ａ，１．７ｇ，２．０ミリモル）のフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ中１Ｍ，１０．０ｍＬ，１０．０ミリモル）溶液を５０℃で１６時間撹拌した。この反応溶液を水（５０．０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ／メタノール（１０：１，１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して真空で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜５％メタノールで溶出させる）によって精製して、１．０ｇの３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物２ｂ）を黄色のオイルとして得た。
【０１５２】
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例２）の製造
【０１５３】
【化３３】
2018527309.tif 000035
【０１５４】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物２ｂ，１．０ｇ，１．５ミリモル）のギ酸（１０．０ｍＬ）溶液をＮ２下に２０〜２５℃で２０分間撹拌した。この混合物を減圧下で濃縮して、残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、０．１２ｇの５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例２）を白色の固形物として得た。
【０１５５】
実施例２：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 370.0; 1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm: 1.001 (t, J = 7.40 Hz, 3H), 1.09 (d, J = 6.53 Hz, 3H), 1.42-1.64 (m, 2H), 2.06 (dt, J = 12.52, 7.92 Hz, 1H), 2.37-2.43 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.74-2.87 (m, 1H), 3.13-3.24 (m, 1H), 3.47 (dt, J = 8.50, 4.34 Hz, 1H), 4.03- 4.14 (m, 1H), 6.03 (d, J = 7.15 Hz, 1H)。
【０１５６】
実施例３
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（プロピルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン
【０１５７】
【化３４】
2018527309.tif 000036
【０１５８】
表題化合物は、実施例２に類似して、メチルアミンの代わりにプロピルアミンを使用することによって製造した。最終生成物を分取用ＨＰＬＣとＳＦＣによって精製して、実施例３を白色の固形物として得た。
【０１５９】
実施例３：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 398.1; 1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm: 0.95 (t, J = 7.40 Hz, 3H), 1.01 (t, J = 7.40 Hz, 3H), 1.13 (d, J = 6.4, 3H), 1.33-1.61 (m, 4H), 2.05 (dt, J = 12.36, 7.87 Hz, 1H), 2.42 (ddd, J = 12.55, 9.60, 6.09 Hz, 1H), 2.58 (ddd, J = 11.45, 8.56, 6.46 Hz, 1H), 2.67-2.77 (m, 1H), 2.94 (quin, J = 6.74 Hz, 1H), 3.17-3.28 (m, 1H), 3.49 (dt, J = 8.53, 4.39 Hz, 1H), 4.03-4.14 (m, 1H), 6.05 (d, J = 6.90 Hz, 1H)。
【０１６０】
実施例４
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（シクロプロピルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン
【０１６１】
【化３５】
2018527309.tif 000037
【０１６２】
表題化合物は、実施例２に類似して、メチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用することによって製造した。最終生成物を分取用ＨＰＬＣとＳＦＣによって精製して、実施例４を白色の固形物として得た。
【０１６３】
実施例４：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 396.1; 1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm: 0.51-0.86 (m, 4H), 1.01 (t, J = 7.40 Hz, 3H), 1.28 (d, J = 6.02 Hz, 3H), 1.40-1.69 (m, 2H), 1.98-2.15 (m, 1H), 2.31-2.57 (m, 2H), 3.25-3.37 (m, 2H), 3.49 (dt, J = 8.66, 4.33 Hz, 1H), 3.97-4.16 (m, 1H), 6.06 (d, J = 6.27 Hz, 1H)。
【０１６４】
実施例５
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ベンジルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン
【０１６５】
【化３６】
2018527309.tif 000038
【０１６６】
表題化合物は、実施例２に類似して、メチルアミンの代わりにベンジルアミンを使用することによって製造した。最終生成物を分取用ＨＰＬＣとＳＦＣによって精製して、実施例５を淡黄色の固形物として得た。
【０１６７】
実施例５：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 446.1; 1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm: 0.99 (t, J = 7.40 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 1.38 -1.64 (m, 2H), 1.87-2.09 (m, 1H), 2.38 (ddd, J = 12.30, 9.47, 6.71 Hz, 1H), 2.86 (t, J = 6.15 Hz, 1H), 3.14-3.27 (m, 1H), 3.47 (dt, J = 8.53, 4.39 Hz, 1H), 3.73 (d, J = 13.05 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 13.18 Hz, 1H), 3.98-4.07 (m, 1H), 6.07 (d, J = 6.53 Hz, 1H), 7.16-7.41 (m, 5H)。
【０１６８】
実施例６
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］−３−［（１Ｓ）−１−（メチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン
【０１６９】
【化３７】
2018527309.tif 000039
【０１７０】
表題化合物は、実施例２に類似して、化合物１ｌ−Ｂの代わりに化合物１ｌ−Ａを使用することによって製造した。最終生成物を分取用ＨＰＬＣによって精製して、実施例６を白色の固形物として得た。
【０１７１】
実施例６：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 370.0; 1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm: 1.01 (t, J = 7.47 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 6.53 Hz, 3H), 1.45-1.62 (m, 2H), 2.06 (dt, J = 12.58, 8.20 Hz, 1H), 2.24-2.31 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.77 (quin, J = 6.40 Hz, 1H), 3.17 (dt, J = 15.47, 7.64 Hz, 1H), 3.41-3.53 (m, 1H), 4.01-4.16 (m, 1H), 6.04 (d, J = 7.28 Hz, 1H)。
【０１７２】
実施例７
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ベンジルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン
【０１７３】
【化３８】
2018527309.tif 000040
【０１７４】
表題化合物は、実施例５に類似して、化合物１ｌ−Ｂの代わりに化合物１ｌ−Ａを使用することによって製造した。最終生成物を分取用ＨＰＬＣによって精製して、実施例７を淡黄色の固形物として得た。
【０１７５】
実施例７：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 446.0; 1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm: 1.01 (t, J = 7.47 Hz, 3H), 1.40 (d, J = 6.53 Hz, 3H), 1.45-1.64 (m, 2H), 2.09-2.20 (m, 1H), 2.23-2.33 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 3.36-3.43 (m, 1H), 3.48 (dt, J = 8.31, 4.31 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 13.2, 1H), 4.11 (d, J = 13.2, 1H), 4.10-4.18 (m, 1H), 6.03 (d, J = 7.40 Hz, 1H), 7.37 (s, 5H)。
【０１７６】
実施例８
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン
【０１７７】
【化３９】
2018527309.tif 000041
【０１７８】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物８ａ）の製造
【０１７９】
【化４０】
2018527309.tif 000042
【０１８０】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−アミノエチル］−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物１ｎ−Ｂ，４００．０ｍｇ，０．４６ミリモル）のジクロロエタン（２０．０ｍＬ）溶液へｓ−トリオキサン（２０８．０ｍｇ，２．３ミリモル）と酢酸（３０．０ｍｇ，０．４５６ミリモル）を加えた。この反応混合物を２５℃で０．５時間撹拌した後で、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２９３．６ｍｇ，１．４ミリモル）を加えた。添加後、この反応混合物を２５℃でさらに１２時間撹拌てから濾過して、濾液を真空で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中１０〜３０％酢酸エチルで、次いでＤＣＭ中１％メタノールで溶出させる）によって精製して、４００．０ｍｇの３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物８ａ）を黄色の固形物として得た。
【０１８１】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物８ｂ）の製造
【０１８２】
【化４１】
2018527309.tif 000043
【０１８３】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−５−［（１Ｓ）−１−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシプロピル］−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物８ａ，０．４ｇ，０．４６ミリモル）のフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ中３Ｍ，１０．０ｍＬ）溶液を５０℃で１２時間撹拌した。この反応溶液を水（２０．０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して減圧下に濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中１０〜３０％酢酸エチルで溶出させる）によって精製して、２１０．０ｍｇの３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物８ｂ）を黄色の固形物として得た。
【０１８４】
５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例８）の製造
【０１８５】
【化４２】
2018527309.tif 000044
【０１８６】
３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−５−［［（４−メトキシフェニル）−ジフェニル−メチル］アミノ］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（化合物８ｂ，２００ｍｇ，０．４９ミリモル）のギ酸（５．０ｍＬ）溶液をＮ２下に２０〜２５℃で３０分間撹拌した。この混合物を真空で濃縮して、残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、２５．２ｍｇの５−アミノ−３−［（２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ）−３−［（１Ｒ）−１−（ジメチルアミノ）エチル］−５−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン−２−イル］−６Ｈ−チアゾロ［４，５−ｄ］ピリミジン−２，７−ジオン（実施例８）を淡黄色の固形物として得た。
【０１８７】
実施例８：MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 384.1; 1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm: 0.87 (d, J = 6.40 Hz, 3H), 1.00 (t, J = 7.59 Hz, 3H), 1.51 (m, 2H), 2.22 (m, 7H), 2.31-2.41 (m, 1H), 2.67 (m., 1H), 3.17-3.25 (m, 1H), 3.48 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 5.95 (d, J = 7.15 Hz, 1H)。
【０１８８】
実施例９
ＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ−７細胞アッセイ：
InvivoGen（カタログ番号：ｈｋｂ−ｈｔｌｒ７，カリフォルニア州サンディエゴ、アメリカ）より、安定したＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ−７細胞系を購入した。これらの細胞は、ＮＦ−κＢの活性化をモニターすることによってヒトＴＬＲ７の刺激について検討するために設計された。５つのＮＦ−κＢ及びＡＰ−１結合部位へ融合したＩＦＮ−β最小プロモーターの制御下にＳＥＡＰ（分泌型胚性アルカリホスファターゼ）レポーター遺伝子を配置した。ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ｈＴＬＲ７細胞をＴＬＲ７リガンドで刺激することを介してＮＦ−κＢとＡＰ−１を活性化することによって、ＳＥＡＰを誘導した。故に、そのレポーターの発現は、ヒトＴＬＲ７の刺激時のＮＦ−κＢプロモーターによって調節された。アルカリホスファターゼの存在下で紫色〜青色になる検出媒体である、ＱＵＡＮＴＩ−ＢｌｕｅＴＭキット（カタログ番号：ｒｅｐ−ｑｂ１，Invivogen，カリフォルニア州サンディエゴ、アメリカ）を６４０ｎｍの波長で使用して、細胞培養上清のＳＥＡＰレポーター活性を定量した。
【０１８９】
ＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ７細胞を、９６ウェルプレートにおいて、４．５ｇ／ｌ  グルコース、５０Ｕ／ｍｌ  ペニシリン、５０ｍｇ／ｍｌ  ストレプトマイシン、１００ｍｇ／ｍｌ  ノルモシン（Normocin）、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１０％（ｖ／ｖ）熱不活性化胎仔ウシ血清を含有するダルベッコ改良イーグル培地（ＤＭＥＭ）中１８０μＬの容量において２５０，０００〜４５０，０００個の細胞／ｍＬの密度で２４時間インキュベートした。次いで、このＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ−７細胞を、最終ＤＭＳＯが１％で存在する系列希釈液中２０μＬの試験化合物を加えてインキュベートし、ＣＯ２インキュベーターにおいて３７℃で２０時間のインキュベーションを実施した。次いで、各ウェルからの上清の２０μＬを１８０μＬのＱｕａｎｔｉ−ｂｌｕｅ基質溶液とともに３７℃で１〜３時間インキュベートして、分光光度計を使用して６２０〜６５５ｎｍで吸光度を読み取った。ＴＬＲ７活性化が下流のＮＦ−κＢ活性化をもたらすシグナル伝達経路については広く受け入れられているので、ＴＬＲ７アゴニストについて評価するのに類似のレポーターアッセイも広く使用されてきた（Tsuneyasu Kaisho and Takashi Tanaka, Trends in Immunology, Volume 29, Issue 7, July 2008, Pages 329.sci; Hiroaki Hemmi et al, Nature Immunology 3, 2002, 196-200）。
【０１９０】
ＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ−８細胞アッセイ：
InvivoGen（カタログ番号：ｈｋｂ−ｈｔｌｒ８，カリフォルニア州サンディエゴ、アメリカ）より、安定したＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ−８細胞系を購入した。これらの細胞は、ＮＦ−κＢの活性化をモニターすることによってヒトＴＬＲ８の刺激について検討するために設計された。５つのＮＦ−κＢ及びＡＰ−１結合部位へ融合したＩＦＮ−β最小プロモーターの制御下にＳＥＡＰ（分泌型胚性アルカリホスファターゼ）レポーター遺伝子を配置した。ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ｈＴＬＲ８細胞をＴＬＲ８リガンドで刺激することを介してＮＦ−κＢとＡＰ−１を活性化することによって、ＳＥＡＰを誘導した。故に、そのレポーターの発現は、ヒトＴＬＲ８の刺激時のＮＦ−κＢプロモーターによって調節された。アルカリホスファターゼの存在下で紫色〜青色になる検出媒体である、ＱＵＡＮＴＩ−ＢｌｕｅＴＭキット（カタログ番号：ｒｅｐ−ｑｂ１，Invivogen，カリフォルニア州サンディエゴ、アメリカ）を６４０ｎｍの波長で使用して、細胞培養上清のＳＥＡＰレポーター活性を定量した。
【０１９１】
ＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ８細胞を、９６ウェルプレートにおいて、４．５ｇ／ｌ  グルコース、５０Ｕ／ｍｌ  ペニシリン、５０ｍｇ／ｍｌ  ストレプトマイシン、１００ｍｇ／ｍｌ  ノルモシン（Normocin）、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１０％（ｖ／ｖ）熱不活性化胎仔ウシ血清を含有するダルベッコ改良イーグル培地（ＤＭＥＭ）中１８０μＬの容量において２５０，０００〜４５０，０００個の細胞／ｍＬの密度で２４時間インキュベートした。次いで、このＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ−８細胞を、最終ＤＭＳＯが１％で存在する系列希釈液中２０μＬの試験化合物を加えてインキュベートし、ＣＯ２インキュベーターにおいて３７℃で２０時間のインキュベーションを実施した。次いで、各ウェルからの上清の２０μＬを１８０μＬのＱｕａｎｔｉ−ｂｌｕｅ基質溶液とともに３７℃で１〜３時間インキュベートして、分光光度計を使用して６２０〜６５５ｎｍで吸光度を読み取った。ＴＬＲ８活性化が下流のＮＦ−κＢ活性化をもたらすシグナル伝達経路については広く受け入れられているので、ＴＬＲ８アゴニストについて評価するのに類似のレポーターアッセイも広く使用されてきた。
【０１９２】
本明細書に記載のように、本発明の化合物について、そのＴＬＲ７アゴニズム活性とＴＬＲ８アゴニズム活性を上記のアッセイにおいて試験して、結果を表１に収載する。本実施例は、ＴＬＲ７アゴニズム活性のＥＣ５０を約３μＭ〜約２５０μＭに有して、ＴＬＲ８アゴニズム活性のＥＣ５０を約１μＭ〜約１９０μＭに有することがわかった。特別な式（Ｉ）又は（Ｉａ）の化合物は、ＴＬＲ７アゴニズム活性のＥＣ５０を約３μＭ〜約１００μＭに有して、ＴＬＲ８アゴニズム活性のＥＣ５０を約１μＭ〜約１００μＭに有することが分かった。
【０１９３】
表１：ＨＥＫ２９３−ｈＴＬＲ−７アッセイとＨＥＫ２９３−ｈＴＬＲ−８アッセイにおける化合物の活性
【０１９４】
【表１】
2018527309.tif 000045
【国際調査報告】
2018527309.tif 000051
2018527309.tif 000052