(57)【要約】  本開示は、分解性ポリマーの小さいナノ粒子の製造方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマーナノ粒子の調製方法であって、前記方法は、
（ａ）薬学的に許容されるポリマーを第１の溶媒に溶解し、ポリマー溶液を形成すること、
（ｂ）前記ポリマー溶液を第２の溶媒中で乳化し、エマルションを形成することであって、前記第１の溶媒は、前記第２の溶媒と相溶性ではない又は部分的にのみ相溶性であり、及び
（ｃ）前記第１の溶媒を除去して前記ナノ粒子を形成すること、
を含む単独エマルションプロセスを含み、前記ナノ粒子は、約１５０ｎｍ以下のＺ平均粒子径を有する、方法。
【請求項２】
前記ナノ粒子は、約１ｎｍ〜約１５０ｎｍ、約１０ｎｍ〜約１００ｎｍ、及び約２０ｎｍ〜約９０ｎｍからなる群から選択されるＺ平均粒子径を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
乳化前に医薬品有効成分（ＡＰＩ）を前記第１の溶媒に溶解、又は分散させることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ＡＰＩは前記第１の溶媒に可溶性である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ポリマー溶液は界面活性剤を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
所望により乳化前に界面活性剤は前記第２の溶媒中に溶解される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記第２の溶媒は、所望により前記第１の溶媒の分画を含有する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記第２の溶媒は、前記第１の溶媒で飽和している、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ポリマーナノ粒子の調製方法であって、前記方法は、
（ａ）薬学的に許容されるポリマーを第１の溶媒に溶解し、ポリマー溶液を形成すること、
（ｂ）少量（例えば０．５％（ｖ／ｖ）、１％（ｖ／ｖ）、５％（ｖ／ｖ））の第２の溶媒を前記ポリマー溶液に添加して混合物を形成することであって、前記第１の溶媒は、前記第２の溶媒と相溶性ではない又は部分的にのみ相溶性であり、
（ｃ）前記混合物を乳化して第１のエマルションを形成すること、
（ｄ）前記第１のエマルションを第３の溶媒中で乳化して、第２のエマルションを形成すること、及び
（ｅ）前記第１の溶媒を除去して前記ナノ粒子を形成すること、
を含む複合エマルションプロセスを含み、前記ナノ粒子は、約１５０ｎｍ以下のＺ平均粒子径を有する、方法。
【請求項１０】
乳化前に医薬品有効成分（ＡＰＩ）を前記第１の溶媒に溶解、又は分散させることを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＡＰＩは前記第１の溶媒に可溶性である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
乳化前に医薬品有効成分（ＡＰＩ）を前記第２の溶媒に溶解、又は分散させることを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＡＰＩは前記第２の溶媒に可溶性である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＡＰＩは生物学的エンティティである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記生物学的エンティティは、タンパク質、ペプチド、成長因子、オリゴヌクレオチド、抗体、多糖質、酵素、アミノ酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、及びリガンドからなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
第１のＡＰＩを前記第１の溶媒中に溶解又は分散すること、及び第２のＡＰＩを前記第２の溶媒中に溶解又は分散することを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
前記第１のＡＰＩは前記第１の溶媒に可溶性である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記第２のＡＰＩは前記第２の溶媒に可溶性である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記第２のＡＰＩは生物学的エンティティである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記第２及び第３の溶媒は同一である、請求項９に記載の方法。
【請求項２１】
前記第３の溶媒は、所望により前記第２の溶媒の分画を含有する、請求項９に記載の方法。
【請求項２２】
前記第３の溶媒は、前記第２の溶媒で飽和している、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
乳化前に界面活性剤は前記第３の溶媒中に溶解される、請求項９に記載の方法。
【請求項２４】
前記界面活性剤がポリビニルアルコールである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
乳化が、超音波処理、撹拌、均質化、マイクロ流動化及びこれらの組み合わせからなる群から選択される方法を使用して実施される、請求項１又は９に記載の方法。
【請求項２６】
前記乳化がマイクロ流動化を使用して実施される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記マイクロ流動化が、１〜１００，０００ｐｓｉ、１，０００〜７０，０００ｐｓｉ、及び１０，０００〜５０，０００ｐｓｉからなる群から選択される加圧下で実施される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記マイクロ流動化が、１ｍＬ／分〜１００Ｌ／分、好ましくは１ｍＬ／分〜１Ｌ／分の流速で実施される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記エマルションは前記マイクロ流動化装置に１〜１００回、好ましくは２〜１０回循環される、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記薬学的に許容されるポリマーが、ＰＬＡ、ＰＬＧＡ、ＰＥＧ−ＰＬＧＡコポリマー、ＰＥＧ−ＰＬＡコポリマー、ＰＥＧ−ＰＧＡコポリマー、ポリ（エチレングリコール）、ポリカプロラクトン、ポリ無水物、ポリ（オルトエステル）、ポリシアノアクリレート、ポリ（ヒドロキシアルカノエート）、ポリ（セバシン酸）、ポリホスファゼン、ポリホスフォエステル、修飾ポリ（サッカライド）、これらの混合物、及びコポリマーからなる群から選択される、請求項１又は９に記載の方法。
【請求項３１】
前記薬学的に許容されるポリマーがＰＬＧＡである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記薬学的に許容されるポリマーがＰＥＧ−ＰＬＧＡコポリマーである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記薬学的に許容されるポリマーが所望により官能基を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３４】
前記官能基が、カルボキシル、アミノ、ジアミン、チオール、アルデヒド、ヒドロキシこはく酸イミドエステル、ジヒドラジド、ヒドロキシこはく酸イミド−スルホン酸、マレイミド、及びアジドを含有する基から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
生物学的又は化学的エンティティを前記ナノ粒子の表面に吸着又は結合することを更に含む、請求項１又は９に記載の方法。
【請求項３６】
前記第１の溶媒が、酢酸エチル若しくは塩化メチレン若しくはクロロホルム、又はこれらの組み合わせである、請求項１又は９に記載の方法。
【請求項３７】
前記第１の溶媒は、所望により共溶媒と混合される、請求項１又は９に記載の方法。
【請求項３８】
前記共溶媒が水と相溶性である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記第２の溶媒がエタノール又は水を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４０】
前記第２の溶媒が水を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４１】
前記第３の溶媒がエタノール又は水を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項４２】
前記第３の溶媒が水を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項４３】
前記ポリマー溶液は、１μｇ／ｍＬ〜１ｇ／ｍＬ重量％、１ｍｇ／ｍＬ〜５００ｍｇ／ｍＬ重量％、及び１０ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ重量％からなる群から選択される濃度を有する、請求項１又は９に記載の方法。
【請求項４４】
先行請求項のいずれか一項に記載の方法で作成されるポリマーナノ粒子。
【請求項４５】
ポリマーナノ粒子であって、０〜１００％の薬学的に許容されるポリマー（ＰＬＧＡなど）、０〜１００％のＰＥＧ化したポリマー（ＰＥＧ−ＰＬＧＡなど）、０〜１００％の官能化ポリマー（官能化ＰＬＧＡ又は官能化ＰＥＧ−ＰＬＧＡなど）、及び０〜５０％の蛍光性ポリマー誘導体（蛍光性−ＰＬＧＡ誘導体など）を含む、ポリマーナノ粒子。
【請求項４６】
ポリマーナノ粒子であって、０〜７０％の薬学的に許容されるポリマー（ＰＬＧＡなど）、０〜５０％のＰＥＧ化したポリマー（ＰＥＧ−ＰＬＧＡなど）、０〜３０％の官能化ポリマー（官能化ＰＬＧＡ又は官能化ＰＥＧ−ＰＬＧＡなど）、及び０〜３０％の蛍光性ポリマー誘導体（蛍光性−ＰＬＧＡ誘導体など）を含む、請求項４５に記載のポリマーナノ粒子。
【請求項４７】
少なくとも１つのＡＰＩを更に含む、請求項４５に記載のポリマーナノ粒子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、３５合衆国法典１１９条の下で、２０１５年８月１７日に出願された米国仮特許出願第６２／２０６，００３号に対する出願日の利益を主張し、その内容全体は参照することにより本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
分解性及び吸収性ポリマー、特に生分解性ポリマーであって、例えば、ポリ乳酸、ポリラクチド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリカプロラクトン、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリ（ヒドロキシアルカノエート）、ポリ（セバシン酸）、ポリホスフォエステル、及びポリホスファゼンなどのポリマーから調製される粒子、特にナノ粒子は、生物医学的調査、開発、及び製造において非常に有用である。例えば、ＰＬＧＡの微粒子及びナノ粒子が世界的に製造されており、薬物送達用途を含む多くの用途に使用されている。様々な種類の医薬品有効成分（ＡＰＩ）は、制御放出及び標的化薬物送達のために、生分解性及び生体吸収性粒子中に封入されてよい。これらの粒子は数百ミクロン程の大きさ又は数百ナノメートル程の小ささで作成できるが、２００ｎｍ、特に１００ｎｍ以下のポリマーナノ粒子中への薬物の調製及び充填への課題が、依然として存在する。小さいナノ粒子の製造が困難なことの理由の１つは、小さい粒子は極めて高い表面エネルギーを有しており、それにより、非常に容易に結合又は凝集してより大きな粒子となってしまうということである。それはまた、ポリマー原料をそのような小さいサイズの粒子まで破砕するために、非常に大きな機械的出力を要求する。好適な界面活性剤及び表面安定化剤は更に、製造過程、保管中、及び前述の非常に小さいナノ粒子の適用において必要とされてよく、したがって、生体分解性及び生体吸収性ポリマーの小さいナノ粒子を調製するため、及びそのような小さいナノ粒子にＡＰＩを封入するための式及びプロセスの開発に対するニーズが存在する。
【０００３】
近年、５ｎｍ程の小ささのＰＬＧＡナノ粒子の製造のために、マイクロ流体系を利用する沈殿法が開発された（ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０７１９０１，２０１０）が、この方法はいかなる封入ＡＰＩをも含有しない通常のＰＬＧＡナノ粒子、又は溶媒溶性薬物のみを封入したＰＬＧＡナノ粒子の調製にのみ使用可能である。この方法を使用して、ＰＬＧＡナノ粒子に水溶性薬物を封入することはできない。多くの重要な薬物分子は水溶性であり、これらの薬物分子を生分解性ポリマーの小さいナノ粒子に封入可能とすることが望まれるために課題が提起される。例えば、ほとんどの生物学的ＡＰＩが含有するタンパク質、ペプチド類、抗体、酵素、成長因子、オルガノヌクレオチド、ＤＮＡ、ＲＮＡは水溶性である。このような理由によって、水溶性、親水性薬物分子の封入に加えて、疎水性、非水溶性薬物の封入を可能にする非常に小さい粒子を製造可能な、生分解性及び生体吸収性ポリマーのナノ粒子の異なる合成方法及びプロセス開発への需要が存在する。
【発明の概要】
【０００４】
本明細書に記載される発明は、水溶性薬物を封入するために、ポリマー（例えばＰＬＧＡポリマー）を水不混和性溶媒中に溶解させることを必要とする複合エマルションプロセスが一般に使用され、これに対して沈殿法で使用される溶媒は通常水混和性であるという実状に一部基づいている。したがって、本問題を解決するために、本発明は本明細書に記載された単独エマルション技術を利用した小さいポリマーナノ粒子の合成方法を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された複合エマルション技術を利用した小さいポリマーナノ粒子の合成方法を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された単独エマルション技術を利用した、治療薬を充填した小さいポリマーナノ粒子の合成方法を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された複合エマルション技術を利用した、治療薬を充填した小さいポリマーナノ粒子の合成方法を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された小さいポリマーナノ粒子組成物を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された治療薬を充填した小さいポリマーナノ粒子組成物を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された非治療薬でコーティングした小さいポリマーナノ粒子組成物を提供する。
【０００５】
更に具体的には、本明細書に記載された発明はポリマーナノ粒子の調製方法を提供し、前述の方法は：（ａ）薬学的に許容されるポリマーを第１の溶媒中に溶解してポリマー溶液を形成すること；（ｂ）ポリマー溶液を第２の溶媒中で乳化させエマルションを形成することであって、ここで第１の溶媒は、第２の溶媒と相溶性ではない又は部分的にのみ相溶性であり；及び（ｃ）第１の溶媒を除去して前述のナノ粒子を形成することであって、前述のナノ粒子は、約１５０ｎｍ以下のＺ平均粒子径を有すること、を含む、単独エマルションプロセスを含む。
【０００６】
一実施形態では、粒子はマイクロ粒子又はナノ粒子である。例えば、粒子はナノ粒子であってよい。所望により、ナノ粒子は、約１ｎｍ〜約１５０ｎｍ、約１０ｎｍ〜約１００ｎｍ、及び約２０ｎｍ〜約９０ｎｍからなる群から選択される平均粒子径を有する。
【０００７】
一実施形態では、上記方法は、乳化（上記工程（ｂ））の前に医薬品有効成分（ＡＰＩ）を第１の溶媒に溶解又は懸濁する工程を更に含む。特定の実施形態にて、ＡＰＩは親水性、両親媒性又は疎水性薬物である。特定の実施形態にて、ＡＰＩは生物学的エンティティである。例えば、生物学的エンティティはタンパク質、ペプチド、成長因子、オリゴヌクレオチド、抗体、多糖質、酵素、アミノ酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、及びリガンドからなる群から選択されてよい。
【０００８】
特定の実施形態にて、上記方法は、乳化の前に治療薬を備えた薬学的に許容されるポリマーを第１の溶媒中に溶解する工程を更に含む。
【０００９】
特定の実施形態にて、本方法は、乳化の前にＡＰＩを第１の溶媒中に溶解又は分散させることを更に含む。
【００１０】
特定の実施形態にて、ＡＰＩは第１の溶媒に可溶性である。
【００１１】
特定の実施形態にて、ポリマー溶液は界面活性剤を更に含む。
【００１２】
特定の実施形態にて、界面活性剤は所望により乳化前に第２の溶媒中に溶解される。
【００１３】
特定の実施形態にて、第２の溶媒は所望により第１の溶媒の分画を含有する。例えば、第２の溶媒は第１の溶媒で飽和してよい。
【００１４】
別の実施形態では、上記方法は、第３の溶媒を追加し、第１の乳化の後に第３の溶媒の存在下で再び乳化させ、第１の溶媒を除去する前に第２のエマルションを形成する工程を更に含む。
【００１５】
したがって、関連する態様において、本発明はポリマーナノ粒子の調製方法であって、（ａ）薬学的に許容されるポリマーを第１の溶媒中に溶解してポリマー溶液を形成すること；（ｂ）少量（例えば０．５％（ｖ／ｖ）、１％（ｖ／ｖ）、５％（ｖ／ｖ））の第２の溶媒をポリマー溶液に添加して混合物を形成することであって、第１の溶媒は、第２の溶媒と相溶性ではない又は部分的にのみ相溶性であり；（ｃ）混合物を乳化して第１のエマルションを形成すること；（ｄ）第１のエマルションを第３の溶媒中で乳化して、第２のエマルションを形成すること；及び（ｅ）第１の溶媒を除去して前述のナノ粒子を形成することであって、前述のナノ粒子は、約１５０ｎｍ以下のＺ平均粒子径を有することを含む複合エマルションプロセスを含む方法もまた提供する。
【００１６】
特定の実施形態にて、第２及び第３の溶媒は同一であり、所望により、前述の同一の溶媒は水である。
【００１７】
特定の実施形態にて、第３の溶媒は所望により第２の溶媒の分画を含有する。例えば、第３の溶媒は第２の溶媒で飽和してよい。
【００１８】
特定の実施形態にて、第３の溶媒は界面活性剤を更に含む。所望により、界面活性剤は、洗剤、湿潤剤、乳化剤、発泡剤、及び分散剤からなる群から選択される。所望により、界面活性剤はポリビニルアルコールである。
【００１９】
特定の実施形態にて、本方法は、乳化前に医薬品有効成分（ＡＰＩ）を第１の溶媒に溶解又は分散させることを更に含む。特定の実施形態にて、ＡＰＩは第１の溶媒に可溶性である。
【００２０】
特定の実施形態にて、本方法は、乳化の前にＡＰＩを第２の溶媒に溶解又は分散させることを更に含む。特定の実施形態にて、ＡＰＩは第２の溶媒に可溶性である。特定の実施形態にて、ＡＰＩは生物学的エンティティである。例えば、生物学的エンティティはタンパク質、ペプチド、成長因子、オリゴヌクレオチド、抗体、多糖質、酵素、アミノ酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、及びリガンドからなる群から選択されてよい。
【００２１】
特定の実施形態にて、本方法は、第１のＡＰＩを第１の溶媒中に溶解又は分散すること、及び第２のＡＰＩを第２の溶媒中に溶解又は分散することを更に含む。特定の実施形態にて、第１のＡＰＩは第１の溶媒に可溶性である。特定の実施形態にて、第２のＡＰＩは第２の溶媒に可溶性である。特定の実施形態にて、第２のＡＰＩは生物学的エンティティである。
【００２２】
特定の実施形態にて、乳化は、超音波処理、撹拌、均質化、マイクロ流動化及びこれらの組み合わせからなる群から選択される方法を使用して実施される。一実施形態では、乳化はマイクロ流動化を使用して実施される。特定の実施形態にて、マイクロ流動化は、１〜１００，０００ｐｓｉ、１，０００〜７０，０００ｐｓｉ、及び５，０００〜３０，０００ｐｓｉからなる群から選択される加圧下で実施される。特定の実施形態にて、マイクロ流動化は、１ｍＬ／分〜１００Ｌ／分、好ましくは１ｍＬ／分〜１Ｌ／分の流速で実施される。特定の実施形態にて、エマルションはマイクロ流動化装置に１〜１００回、好ましくは２〜１０回循環される。
【００２３】
特定の実施形態にて、薬学的に許容されるポリマーは、ＰＬＡ、ＰＬＧＡ、ＰＥＧ−ＰＬＧＡコポリマー、ＰＥＧ−ＰＬＡコポリマー、ＰＥＧ−ＰＧＡコポリマー、ポリ（エチレングリコール）、ポリカプロラクトン、ポリ無水物、ポリ（オルトエステル）、ポリシアノアクリレート、ポリ（ヒドロキシアルカノエート）、ポリ（セバシン酸）、ポリホスファゼン、ポリホスフォエステル、修飾ポリ（サッカライド）、これらの混合物、及びコポリマーからなる群から選択される。
【００２４】
別の実施形態では、薬学的に許容されるポリマーは、ＰＬＧＡ、及びＰＥＧ−ＰＬＧＡなどのＰＬＧＡのコポリマーである。
【００２５】
特定の実施形態にて、薬学的に許容されるポリマーは、所望により官能基を含む。例えば、官能基は、カルボキシル、アミノ、ジアミン、チオール、アルデヒド、ヒドロキシこはく酸イミドエステル、ジヒドラジド、ヒドロキシこはく酸イミド−スルホン酸、マレイミド及びアジドを含有する基から選択されてよい。
【００２６】
特定の実施形態にて、粒子の画像化を促進するために、染料又は色素をナノ粒子中へ組み込むことができる。
【００２７】
特定の実施形態にて、本方法は、生物学的又は化学的エンティティをナノ粒子の表面に吸着又は結合することを更に含む。
【００２８】
別の実施形態では、第１の溶媒は水に可溶性でなく、酢酸エチル、ジクロロメタン及びクロロホルムを含有する群から選択される。所望により、ポリマー若しくはＡＰＩ又はその両方と溶解させるために、共溶媒として水混和性溶媒を水不混和性溶媒と混合することができる。別の実施形態において、第２の溶媒は、エタノール又は水である。本実施形態の一態様では、第２の溶媒は水である。別の実施形態において、第３の溶媒は、エタノール又は水である。本実施形態の一態様では、第３の溶媒は水である。
【００２９】
特定の実施形態にて、第１の溶媒は所望により共溶媒と混合される。共溶媒は水に可溶性である。
【００３０】
別の実施形態では、ポリマー溶液は、１μｇ／ｍＬ〜１ｇ／ｍＬ重量％、１ｍｇ／ｍＬ〜５００ｍｇ／ｍＬ重量％、及び１０ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ重量％からなる群から選択される濃度を有する。
【００３１】
本発明の別の態様は、本発明の方法のいずれかに従って作成されるポリマーナノ粒子を提供する。
【００３２】
本発明の関連する態様は、０〜１００％の薬学的に許容されるポリマー（ＰＬＧＡなど）、０〜１００％のＰＥＧ化したポリマー（ＰＥＧ−ＰＬＧＡなど）、０〜１００％の官能化ポリマー（官能化ＰＬＧＡ又は官能化ＰＥＧ−ＰＬＧＡなど）、及び０〜５０％の蛍光性ポリマー誘導体（蛍光性−ＰＬＧＡ誘導体など）を含むポリマーナノ粒子を提供する。
【００３３】
特定の実施形態にて、ポリマーナノ粒子は０〜７０％の薬学的に許容されるポリマー（ＰＬＧＡなど）、０〜５０％のＰＥＧ化したポリマー（ＰＥＧ−ＰＬＧＡなど）、０〜３０％の官能化ポリマー（官能化ＰＬＧＡ又は官能化ＰＥＧ−ＰＬＧＡなど）、及び０〜３０％の蛍光性ポリマー誘導体（蛍光性−ＰＬＧＡ誘導体など）を含む。
【００３４】
特定の実施形態にて、本発明のポリマーナノ粒子は少なくとも１つのＡＰＩを更に含む。
【００３５】
当業者は、下記具体例を含む本明細書に記載されたいずれかの実施形態を、本発明の趣旨を含む本発明のあらゆる他の実施形態と容易に組み合わせ可能であると理解すべきである。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
ある特定の実施形態の詳細を参照する。列挙した実施形態を説明する一方で、これらの実施形態に対して本発明を制限することを目的としていないと理解されるであろう。これに対して、本発明はすべての代替案、変更、及び等価物をカバーすることを目的としている。当業者は、本発明を実施する際に用いる本明細書に記載された同一又は等価の多くの方法、及び材料を理解するであろう。本発明は、記載された方法及び材料を限定しない。１つ又は複数の援用された文献及び類似の資料が本出願とは異なる、又は矛盾する場合、本出願と対照の定義された用語集、用語、用法、記載した技術などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３７】
定義
本明細書で使用される「約」という用語は、およそ、範囲内、大体、おおよそを意味する。数値の範囲に関連して用語「約」が使用される場合、それは明記される数値の上下の境界を拡大することでその範囲を変更する。一般に、本明細書では用語「約」は、表示される数字の２０％を変動させることで数値を上下に変更させるために使用される。
【００３８】
本明細書で使用される「ナノ粒子」という用語は、おおよそ円形、球体又は球に近い形状であり、通常、例えば約１〜１，０００ｎｍ、約１０〜１，０００ｎｍ、約５０〜１，０００ｎｍ、約１００〜５００ｎｍ、約１〜２００ｎｍの範囲のサイズである。主題のナノ粒子は、生体内でかたまりになりにくい粒子もまた含み得る。
【００３９】
本明細書で使用する場合、「哺乳類」という用語は、モルモット、犬、猫、ラット、ネズミ、ハムスター、非ヒト霊長類を含み、ヒトもまた含み得るが、これに限定されない。特定の実施形態にて、哺乳類は、本明細書に記載された疾患を罹患、又は発生させるリスクを有する。
【００４０】
「薬学的に許容される」という用語は、物質又は組成物が、化学的及び／又は毒物学的に、組成物及びそれを処方されている哺乳類を含む他の成分と適合性であることを示す。
【００４１】
「生分解性」という用語は、材料、より具体的には、実質的な毒性効果を引き起こすことなく哺乳類の体内で分解性を有するポリマー類を意味する。
【００４２】
「極小」という用語は、ナノメートルスケール、好ましくは１００ｎｍより小さいポリマー粒子を意味する。
【００４３】
「ＰＬＧＡ」という用語は、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）若しくはその誘導体、混合物、又はコポリマーを意味する。
【００４４】
マイクロ流体力学
マイクロ流体力学は、マイクロスケールチャンネル、典型的には、１０μｍ〜１００μｍのサイズの範囲で流れを操作する科学及び技術である（Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ，２００６，Ｎａｔｕｒｅ，４４２：３６８、参照することにより本明細書に組み込まれている）。マイクロ流体力学を使用することで、化学及び生物学的分析における手間と時間のかかる工程を、素早いスループット及び結果を得るまでの時間、より少ないサンプル消費、及びより低コストで、小型化したチャンネル及びチャンバーで効率的に実施可能である（Ｍａｎｓら、１９９２、Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｙ、５９３：２５３）。マイクロ流体力学は、粒子の合成のための非常に有用なツールとしての利点、（ｄｅＭｅｌｌｏ  ａｎｄ  ｄｅＭｅｌｌｏ、２００４、Ｌａｂ  ｏｎ  ａ  Ｃｈｉｐ、４：１  ＩＮ）−（ｉ）試薬を迅速に混合し、均質な反応条件を提供する能力、（ｉｉ）反応パラメータの連続的な変化、及び（ｉｉｉ）精密な時間間隔での反応物質の追加、を提供する。
【００４５】
一般に、マイクロ流体装置は混合装置を収束する少なくとも２つのチャンネルを有する。いくつかの実施形態では、チャンネルは０度〜１８０度の範囲の角度で結合する。流体のストリームは各チャンネルを流れ通ることができ、及びこの流れは混合装置に合流及び流れ込む。一般に、少なくとも１つのストリームはポリマー溶液を含み、少なくとも１つのストリームは非溶媒を含む。いくつかの実施形態では、ストリームの流れは層である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、チャンネルは円形断面である。いくつかの実施形態では、混合装置に収束するチャンネルは均一の形状である。いくつかの実施形態では、各チャンネルの幅又は高さは約１μｍ〜約１０００μｍの範囲である。いくつかの実施形態では、各チャンネルの長さは約１００μｍ〜約１０ｃｍの範囲である。チャンネルは、流体の流れをチャンネルに通すために好適なあらゆる材料で構成されてよい。典型的には、材料は、粒子の調製に使用される溶媒及び非溶媒に耐性がある。一般に、材料は溶媒又は非溶媒と溶解又は反応しない。いくつかの実施形態では、チャンネルはガラス、シリコン、金属、合金、ポリマー、プラスチック、光硬化性エポキシ、セラミック、又はこれらの組み合わせで構成される。いくつかの実施形態では、チャンネルはリソグラフィ、エッチング、エンボス加工、又はポリマー表面のモールドにより形成される。一般に、製造プロセスは１つ又は複数の本明細書で記載されるプロセスのいずれかを伴ってよく、及び装置の異なる部分は異なる方法及び組み立て又は貼り合わせを使用して組み立てられてよい。
【００４７】
典型的には、流体の供給源は各チャンネルに結合され、供給源への加圧によりチャンネル内に流体の流れを発生させる。圧力はシリンジ、ポンプ及び／又は重力によって印加されてよい。いくつかの実施形態では、印加された圧力は制御され得る（すなわち、印加された圧力は増加、減少又は一定に保たれてよい）。いくつかの実施形態では、流速は印加された圧力を調整することによって制御され得る。いくつかの実施形態では、流速はチャンネルのサイズ（たとえば、長さ、幅及び／又は高さ）を調整することによって制御され得る。いくつかの実施形態では、流速は０．００１ｍｌ／分〜１００ｌ／分、好ましくは１ｍｌ／分〜１０ｌ／分の範囲であってよい。
【００４８】
いくつかの実施形態では、全てのチャンネル及び／又は流入口ストリームに同量の圧力が印加される。いくつかの実施形態では、異なるチャンネル及び／又は流入口ストリームに異なる量の圧力が印加される。したがって、いくつかの実施形態では、流量は全てのチャンネル及び／又は流入口ストリームで同一であってよく、又は流量は異なるチャンネル及び／又は流入口ストリームで異なっていてもよい。
【００４９】
いくつかの実施形態では、エマルションはマイクロ流動化装置に複数回循環される。好ましくは、エマルションはマイクロ流動化装置に１〜１００回、又は２〜１０回循環される。
【００５０】
合成方法及び組成物
本明細書では極小（例えば１５０ｎｍ以下、又は１００ｎｍ以下）のポリマーナノ粒子、及び前述のナノ粒子の組成物を製造するための合成方法を提供する。より具体的には、本発明は本明細書に記載された単独エマルション技術を利用した、小さいポリマーナノ粒子の合成方法を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された複合エマルション技術を利用した、小さいポリマーナノ粒子の合成方法を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された単独エマルション技術を利用した、治療薬を充填した小さいポリマーナノ粒子の合成方法を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された複合エマルション技術を利用した、治療薬を充填した小さいポリマーナノ粒子の合成方法を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された小さいポリマーナノ粒子組成物を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された治療薬を充填した小さいポリマーナノ粒子組成物を提供する。本発明は更に、本明細書に記載された非治療薬でコーティングした小さいポリマーナノ粒子組成物を提供する。
【００５１】
特定の実施形態にて、ナノ粒子は薬学的に許容される生分解性及び生体吸収性ポリマーを含む。
【００５２】
特定の実施形態で使用される薬学的に許容される生分解性及び生体吸収性ポリマーは、ポリ（アクリル酸）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリアクリルアミド、ポリ（イソプロピルアクリルアミド）及びポリ（シクロプロピルメタクリルアミド）を含む水溶性ポリマー；エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びセルロースアセテートフタレートを含むセルロース系ポリマー；アルギン酸、カラギナン、キトサン、ヒアルロン酸及びペクチン酸を含む親水コロイド；（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）ポリマーを含む非水溶性ポリマー；デンプン及びグリコール酸ナトリウムデンプンを含むデンプン系ポリマー；ポリカプロラクトン、ポリ無水物、ポリ（オルトエステル）、ポリシアノアクリレート、ポリ（ヒドロキシアルカノエート）、ポリホスファゼン、ポリリン酸エステル、変性ポリ（サッカライド）、ポリカーボネートを含むプラスチック、ポリ（ビニルアセテート）、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、アクリル酸及びブチルアクリレートコポリマー、２−エチルヘキシルアクリレート及びブチルアクリレートコポリマー、及びポリエチレン及びポリエチレンテレフタレート、その混合物及びコポリマーを含むが、これに限定されない。
【００５３】
特定の実施形態にて、前述の薬学的に許容される生分解性ポリマーは、ラクチドとグリコリド（Ｌ／Ｇ）の比が１００／０〜０／１００、９５／５〜５／９５、８５／１５〜１５／８５、７５／２５〜２５／７５、６５／３５〜３５／６５又は５０／５０のＰＬＧＡである。
【００５４】
特定の実施形態にて、前述のＰＬＧＡポリマーはＰＬＧＡ−ＰＥＧコポリマーである。
【００５５】
特定の実施形態にて、前述のＰＬＧＡ−ＰＥＧコポリマーはＰＬＧＡ及びＰＥＧのジブロック又はトリブロックコポリマーである。
【００５６】
特定の実施形態にて、更に前述のＰＬＧＡポリマー又はコポリマーは、カルボキシル、アミノ、ジアミン、チオール、アルデヒド、ヒドロキシこはく酸イミドエステル、ジヒドラジド、ヒドロキシこはく酸イミド−スルホン酸、マレイミド、及びアジドを含有する基から選択される基で官能化される。前述の官能基は、ポリマー分子上に官能基を含有するポリマー誘導体をナノ粒子配合物に導入することによって組み込まれてよい。かかるポリマー誘導体の例としてはＡＩ０１６（ＰＬＧＡ−ＮＨ２）、ＡＩ０２５（ＰＬＧＡ−ＳＨ）、ＡＩ０９６（ＰＬＧＡ−ＮＨＳ）、ＡＩ０５２（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−Ｍａｌ）、ＡＩ０７８（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＣＯＯＨ）、ＡＩ０８７（ＰＣＬ−ＮＨ２）、ＡＩ０２１（ＮＨ２−ＰＬＧＡ−ＮＨ２）、ＡＩ０８６（ｍＰＥＧ−ＰＬＧＡ−ＮＨ２）が挙げられ、その全てはインディアナ州ウェストラフィエットのＰｏｌｙｓｃｉｔｅｃｈのウェブサイト（ｈｔｔｐｓ：／／ａｋｉｎａｉｎｃ．ｃｏｍ／ｐｏｌｙｓｃｉｔｅｃｈ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｐｏｌｙｖｉｖｏ／ｃａｔａｌｏｇｕｅ．ｐｈｐ＃ＰｏｌｙｍｅｒＶｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ）で確認され得る。
【００５７】
官能基は、本発明の小さいナノ粒子上である種のリガンドの化学的結合を促進するために利用することができる。前述のリガントは、低分子又は生物学的治療薬、若しくは非治療薬であり得る。
【００５８】
特定の実施形態にて、粒子の画像化を促進するために、染料又は色素をナノ粒子中へ組み込むことができる。前述の染料又は色素は、目視可能に有色、蛍光性、燐光性、又は発光性であってよい。染料又は色素は、単独又は複合エマルションプロセスにおいて初期のポリマー溶液に溶解させることで、ポリマーナノ粒子内に封入されてよい。あるいは、染料又は色素は、複合エマルションプロセスにおいて親水性ＡＰＩを含む水溶液中に溶解させることができる。
【００５９】
前述の染料又は色素は更に、ポリマー上に化学的に結合する染料又は色素を含有するポリマー誘導体を添加することによって組み込まれ得る。かかるポリマー−染料複合体は市販されている。例えば、ＡＶ０１７（ｍＰＥＧ−ＰＬＡ−ＦＫＲ６４８）、ＡＶ１８（ｍＰＥＧ−ＰＬＧＡ−ＦＫＲ５６０）、ＡＶ０１６（ＰＬＡ−Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ）、ＡＶ０１３（ＰＬＡ−ＦＰＲ６４８）、ＡＶ０１５（ＰＬＧＡ−ＦＫＲ６４８）、ＡＶ００１（ＰＬＧＡ−Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ）、ＡＶ００６（ＰＬＧＡ−ＦＰＩ７４９）、及びＡＶ０１１（ＰＬＧＡ−ＲｈｏｄａｍｉｎｅＢ）であり、その全てはインディアナ州ウェストラフィエットのＰｏｌｙｓｃｉｔｅｃｈのウェブサイト（ｈｔｔｐｓ：／／ａｋｉｎａｉｎｃ．ｃｏｍ／ｐｏｌｙｓｃｉｔｅｃｈ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｐｏｌｙｖｉｖｏ／ｃａｔａｌｏｇｕｅ．ｐｈｐ＃ＰｏｌｙｍｅｒＶｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ）で確認され得る。
【００６０】
特定の実施形態にて、前述の薬学的に許容される生分解性ポリマーは誘導体、コポリマー、又は上記のポリマーの混合物であってよい。
【００６１】
特定の実施形態にて、単独又は複合エマルションを形成する乳化工程は、均質化、機械的撹拌、マイクロ流動化、又はその組み合わせを含む。
【００６２】
特定の実施形態にて、エマルションプロセスは単独エマルションプロセスであり、（１）薬学的に許容されるポリマーを第１の溶媒中に溶解してポリマー溶液を形成すること；（２）ポリマー溶液を第２の溶媒中で乳化させエマルションを形成することであって、ここで第１の溶媒は、第２の溶媒と相溶性ではない又は部分的にのみ相溶性であり；及び（３）第１の溶媒を除去して前述のナノ粒子を形成することを含む。
【００６３】
本明細書で使用する場合、部分的に相溶性とは、８０％（ｖ／ｖ）、７０％（ｖ／ｖ）、６０％（ｖ／ｖ）、５０％（ｖ／ｖ）、４０％（ｖ／ｖ）、３０％（ｖ／ｖ）、２０％（ｖ／ｖ）、１０％（ｖ／ｖ）、５％（ｖ／ｖ）、２％（ｖ／ｖ）、又は１％（ｖ／ｖ）以下の第１の溶媒は第２の溶媒に相溶性であることを意味し得る。
【００６４】
特定の実施形態にて、得られたナノ粒子は約１５０ｎｍ以下の平均粒子径を有する。
【００６５】
特定の実施形態にて、平均粒子径は以下のいずれか：Ｚ平均粒子径、体積平均粒子径、及び数平均粒子径によって測定される。特定の実施形態にて、平均粒子径はＺ平均粒子径によって測定される。
【００６６】
特定の実施形態にて、測定は、本明細書の実施例の１つに記載のように、実質的にほぼ同じ条件に基づいている。
【００６７】
特定の実施形態にて、蛍光染料は乳化工程前に所望によりポリマー溶液に添加することができる。
【００６８】
特定の実施形態にて、治療薬は上記のナノ粒子製造プロセスにおける前述の薬学的に許容されるポリマーと共に第１の溶媒に相溶である。
【００６９】
特定の実施形態にて、エマルションプロセスは、（１）薬学的に許容されるポリマー及び所望により医薬品有効成分（ＡＰＩ）を第１の溶媒に溶解させてポリマー溶液を形成すること；（２）少量（例えば約０．０１〜５０％（ｖ／ｖ）、約０．０５〜２５％（ｖ／ｖ）、約０．１〜１０％（ｖ／ｖ））の第２の溶媒の溶液をポリマー溶液に添加して混合物を形成することであって、第１の溶媒は、第２の溶媒と相溶性ではない又は部分的にのみ相溶性であり、ここで第２の溶媒の溶液は所望によりＡＰＩを含み、（３）混合物を乳化して第１のエマルションを形成すること、（４）第１のエマルションを第３の溶媒の溶液中で乳化して、第２のエマルションを形成することであって、ここで第３の溶媒の溶液は所望により界面活性剤又は乳化剤を含み、及び（５）第１の溶媒を除去して前述のナノ粒子を形成することを含む複合エマルションプロセスである。
【００７０】
特定の実施形態にて、得られたナノ粒子は約１５０ｎｍ以下の平均粒子径を有する。
【００７１】
特定の実施形態にて、平均粒子径は以下のＺ平均粒子径、体積平均粒子径、及び数平均粒子径のいずれかによって測定される。特定の実施形態にて、平均粒子径は、Ｚ平均粒子径によって測定される。
【００７２】
特定の実施形態にて、測定は、本明細書の実施例の１つに記載のように、実質的にほぼ同じ条件に基づいている。
【００７３】
特定の実施形態にて、所望により蛍光体を上記の複合エマルションプロセス中でポリマー溶液に添加することができる。
【００７４】
乳化工程は、超音波処理、撹拌、均質化、マイクロ流動化及びこれらの組み合わせを含む各種方法により実施することができる。ただし、マイクロ流動化が本発明において好ましい方法である。
【００７５】
特定の実施形態にて、マイクロ流動化装置において印加される圧力は、１〜１００，０００ｐｓｉ、好ましくは１，０００〜７０，０００ｐｓｉ、及びより好ましくは５，０００〜５０，０００ｐｓｉである。
【００７６】
乳化工程において、（水性）溶液は界面活性剤又は表面安定化剤を含んでよい。界面活性剤は一般に、液体の表面張力、２つの液体間、又は液体と固体間の界面張力を下げる化合物を含む。界面活性剤は、洗剤、湿潤剤、乳化剤、発泡剤、及び分散剤として機能してよい。界面活性剤は通常、疎水基（通常は「尾」として分枝鎖、直鎖、又は芳香族炭化水素鎖、フルオロカーボン鎖、又はシロキサン鎖）、及び親水基（通常は頭）の両方を含む両親媒性の有機化合物である。
【００７７】
一方で、いかなる特定の理論に束縛されるものではないが、界面活性剤はエマルション液滴の形成及び安定化に有用であってよい。界面活性剤は更に、有機又は無機の薬学的賦形剤、種々のポリマー、オリゴマー、天然物質、非イオン性、カチオン性、双性イオン性、又はイオン性界面活性剤、及びこれらの混合物を含み得る。
【００７８】
主題（ＰＬＧＡ）のマイクロ粒子／ナノ粒子の調製に使用可能な界面活性剤は、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、Ｔｗｅｅｎ系、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ系、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ系、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００などである。追加の好適な界面活性剤を以下に記載する。
【００７９】
本発明において２つ以上の界面活性剤の組み合わせを使用できる。本発明で利用可能な有用な界面活性剤又は表面安定化剤としては、周知の有機若しくは無機の薬学的賦形剤が挙げられるが、これに限定されない。かかる賦形剤としては、種々のポリマー、低分子量オリゴマー、天然物質、及び界面活性剤が挙げられる。界面活性剤又は表面安定化剤としては、非イオン性、カチオン性、双性イオン性、及びイオン性界面活性剤が挙げられる。
【００８０】
他の有用な界面活性剤又は表面安定化剤の代表例としては、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ラウリル硫酸ナトリウム、ナトリウムジオクチルスルホサクシネート、ゼラチン、カゼイン、レシチン（リン脂質）、デキストラン、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、グリセロールモノステアレート、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えばセトマクロゴール１０００などのマクロゴールエーテル）、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば市販のＴｗｅｅｎ２０（登録商標）及びＴｗｅｅｎ８０（登録商標）などのＴｗｅｅｎ（登録商標）類（ＩＣＩ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）、ポリエチレングリコール（例えばＣａｒｂｏｗａｘｓ３５５０（登録商標）及び９３４（登録商標）（Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅ））、ポリオキシエチレンステアレート、コロイド状二酸化ケイ素、リン酸塩、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースホスフェート、非晶性セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、エチレンオキシド及びホルムアルデヒドを有する４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェノールポリマー（ｔｙｌｏｘａｐｏｌ、ｓｕｐｅｒｉｏｎｅ、及びｔｒｉｔｏｎとしても知られている）、ポロキサマー（例えば、エチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロックコポリマーであるＰｌｕｒｏｎｉｃｓＦ６８（登録商標）及びＦ１０８（登録商標））；ポロキサミン（例えば、プロピレンオキシドとエチレンオキシドをエチレンジアミンに連続的に添加することで形成される四官能性ブロックコポリマーであって、Ｐｏｌｏｘａｍｉｎｅ９０８としても知られている（登録商標）Ｔｅｔｒｏｎｉｃ９０８（登録商標）（ニュージャージー州パーシッパニーのＢＡＳＦ  Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ））、Ｔｅｔｒｏｎｉｃ１５０８（登録商標）（Ｔ−１５０８）（ＢＡＳＦ  Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、トコフェリルポリエチレングリコールサクシネート（ＴＰＧＳ）、アルキルアリールポリエーテルスルホネートであるＴｒｉｔｏｎｓＸ−２００（登録商標）（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ）；スクロース、ショ糖ステアレートとスクロースジステアレートの混合物であるＣｒｏｄｅｓｔａｓＦ−１１０（登録商標）（Ｃｒｏｄａ  Ｉｎｃ．）；Ｏｌｉｎ−１ＯＧ（登録商標    ）、又はＳｕｒｆａｃｔａｎｔ１０−Ｇ（登録商標）（コネチカット州スタンフォードのＯｌｉｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）としても知られているｐ−イソノニルフェノキシポリ−（グリシドール）；ＣｒｏｄｅｓｔａｓＳＬ−４０（Ｃｒｏｄａ  Ｉｎｃ．）；及びＣ１８Ｈ３７ＣＨ２（ＣＯＮ（ＣＨ３）−ＣＨ２（ＣＨＯＨ）４（ＣＨ２ＯＨ）２であるＳＡ９ＯＨＣＯ（Ｅａｓｔｍａｎ  Ｋｏｄａｋ  Ｃ���．）；デカノニル−Ｎ−メチルグルカミド；ｎ−デシルβ−Ｄ−グルコピラノシド；ｎ−デシルβ−Ｄ−マルトピラノシド；ｎ−ドデシルβ−Ｄ−グルコピラノシド；ｎ−ドデシルβ−Ｄ−マルトシド；ヘプタノイル−Ｎ−メチルグルカミド；ｎ−ヘプチル−ｐ−Ｄ−グルコピラノシド；ｎ−ヘプチルβ−Ｄ−チオグルコシド；ｎ−ヘキシルβ−Ｄ−グルコピラノシド；ノナノイル−Ｎ−メチルグルカミド；ｎ−ノイルβ−Ｄ−グルコピラノシド；オクタノイル−Ｎ−メチルグルカミド；ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド；オクチルルβ−Ｄ−チオグルコピラノシド；ＰＥＧ−誘導体化リン脂質、ＰＥＧ−誘導体化コレステロール、ＰＥＧ−誘導体化コレステロール誘導体、ＰＥＧ−誘導体化ビタミンＡ、ＰＥＧ−誘導体化ビタミンＥ、リゾチーム、ビニルピロリドンとビニルアセテートのランダムコポリマーなどが挙げられる。
【００８１】
有用なカチオン性界面活性剤又は表面安定化剤の例としては、ポリマー、生体ポリマー、多糖類、セルロース類、アルギン酸塩、リン脂質、及び双性イオン性安定化剤、ポリ−ｎ−メチルピリジニウム、アンスリルピリジニウムクロリド、カチオン性リン脂質、キトサン、ポリリジン、ポリビニルイミダゾール、ポリブレン、ポリメチルメタクリレートトリメチルアンモニウムブロミドブロミド（ＰＭＭＴＭＡＢｒ）、ヘキシルデシルトリメチルアンモニウムブロミド（ＨＤＭＡＢ）、ポリビニルピロリドン−２−ジメチルアミノエチルメタクリレートジメチルサルフェート、（ＤＰＰＥ−ＰＥＧ（２０００）−アミンＮａとしても知られている）１，２ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−エタノールアミンリン酸−Ｎ−［アミノ（ポリエチレングリコール）２０００］（ナトリウム塩）（アラバマ州アラバスターのＡｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ）、（Ｓ１００１としても知られている）ポリ（２−メタクリロキシエチルトリメチルアンモミウムブロミド）（ペンシルベニア州ワーリントンのＰｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．）、プロピレンオキシドとエチレンオキシドをエチレンジアミンに連続的に添加することで形成される四官能性ブロックコポリマーであって、ポリオキサミン９０８（登録商標）としても知られているＴｅｔｒｏｎｉｃ９０８（登録商標）などのポリオキサミン（ニュージャージー州パーシッパニーのＢＡＳＦ  Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、リゾチーム、アルギン酸などの長鎖ポリマー、カラギナン（ＦＭＣ  Ｃｏｒｐ．）、及びＰＯＬＹＯＸ（ミシガン州ミッドランドのＤｏｗ）などの非ポリマー性化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８２】
他の有用なカチオン性安定化剤としては、カチオン性脂質、スルホニウム、ホスホニウム及び第四級アンモニウム化合物、例えば塩化ステアリルメチルアンモニウム、臭化ベンジル−ジ（２−クロロエチル）エチルアンモニウム、ココナツ塩化又は臭化トリメチルアンモニウム、ココナツ塩化又は臭化メチルジヒドロキシエチルアンモニウム、塩化デシルトリエチルアンモニウム、塩化又は臭化デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、塩化又は臭化Ｃ１２〜１５ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、ココナツ塩化又は臭化ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、硫酸メチルミリスチルトリメチルアンモニウム、塩化又は臭化ラウリルジメチルベンジルアンモニウム、塩化又は臭化ラウリルジメチル（エテノキシ）４アンモニウム、塩化Ｎ−アルキル（Ｃ１２〜１８）ジメチルベンジルアンモニウム、塩化Ｎ−アルキル（Ｃ１４〜１８）ジメチルベンジルアンモニウム、Ｎ−テトラデシリドメチルベンジルアンモニウム塩化一水和物、塩化ジメチルジデシルアンモニウム、塩化Ｎ−アルキル及び（Ｃ１２−１４）ジメチル１−ナフチルメチルアンモニウム、ハロゲン化トリメチルアンモニウム、アルキル−トリメチルアンモニウム塩及びジアルキル−ジメチルアンモニウム塩、塩化ラウリルトリメチルアンモニウム、エトキシル化アルキルアミドアルキルジアルキルアンモニウム塩及び／又はエトキシル化トリアルキルアンモニウム塩、塩化ジアルキルベンゼンジアルキルアンモニウム、塩化Ｎ−ジデシルジメチルアンモニウム、Ｎ−テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化一水和物、塩化Ｎ−アルキル（Ｃ１２〜１４）ジメチル１−ナフチルメチルアンモニウム及び塩化ドデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ジアルキルベンゼンアルキルアンモニウム、塩化ラウリルトリメチルアンモニウム、塩化アルキルベンジルメチルアンモニウム、臭化アルキルベンジルジメチルアンモニウム、臭化Ｃ１２、Ｃ１５、Ｃ１７トリメチルアンモニウム、塩化ドデシルベンジルトリエチルアンモニウム、塩化ポリ−ジアリルジメチルアンモニウム（ＤＡＤＭＡＣ）、塩化ジメチルアンモニウム、ハロゲン化アルキルジメチルアンモニウム、塩化トリセチルメチルアンモニウム、臭化デシルトリメチルアンモニウム、臭化ドデシルトリエチルアンモニウム、臭化テトラデシルトリメチルアンモニウム、塩化メチルトリオクチルアンモニウム（ＡＬＩＱＵＡＴ３３６ＴＭ）、ＰＯＬＹＱＵＡＴ１０ＴＭ、臭化テトラブチルアンモニウム、臭化ベンジルトリメチルアンモニウム、コリンエステル（例えば、脂肪酸のコリンエステル）、塩化ベンザルコニウム、塩化ステアラルコニウム化合物（例えば、塩化ステアリルトリモニウム及び塩化ジステアリルジモニウム）、臭化セチルピリジニウム又は塩化セチルピリジニウム、四級化ポリオキシエチルアルキルアミンのハロゲン化塩、ＭＩＲＡＰＯＬ（商標）及びＡＬＫＡＱＵＡＴ（商標）（Ａｌｋａｒｉｌ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、アルキルピリジニウム塩；アミン、例えば、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アルカノールアミン、ポリエチレンポリアミン、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノアルキルアクリレート、及びビニルピリジン、アミン塩、例えば、��酸ラウリルアミン、酢酸ステアリルアミン、アルキルピリジニウム塩、及びアルキルイミダゾリウム塩、並びにアミン酸化物；イミドアゾリニウム塩；プロトン化四級アクリルアミド；メチル化四級ポリマー、例えば、ポリ［塩化ジアリルジメチルアンモニウム］及びポリ−［塩化Ｎ−メチルビニルピリジニウム］；並びにカチオン性グアーが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８３】
かかる例示のカチオン性界面活性剤、又は表面安定化剤、及び他の有用なカチオン性界面活性剤、又は表面安定化剤が、Ｊ．ＣｒｏｓｓとＥ．ＳｉｎｇｅｒのＣａｔｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ：Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、１９９４）；Ｐ．ａｎｄ  Ｄ．Ｒｕｂｉｎｇｈ（編集者）、Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ：Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、１９９１）；及びＪ．Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ：Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、１９９０）に記載されており、これらはそれぞれその全体が参照することにより本明細書に組み込まれる。
【００８４】
非ポリマー性界面活性剤又は表面安定化剤はあらゆる非ポリマー性化合物であり、例えば、塩化ベンザルコニウム、カーボニウム化合物、ホスホニウム化合物、オキソニウム化合物、ハロニウム化合物、カチオン性有機金属化合物、四級リン化合物、ピリジニウム化合物、アニリニウム化合物、アンモニウム化合物、ヒドロキシルアンモニウム化合物、一級アンモニウム化合物、二級アンモニウム化合物、三級アンモニウム化合物、及び式ＮＲ１Ｒ２Ｒ３Ｒ４（＋）の四級アンモニウム化合物である。式ＮＲ１Ｒ２Ｒ３Ｒ４（＋）の化合物については、（ｉ）Ｒ１〜Ｒ４のいずれもがＣＨ３でなく；（ｉｉ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの１つがＣＨ３であり；（ｉｉｉ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの３つがＣＨ３であり；（ｉｖ）Ｒ１〜Ｒ４のすべてがＣＨ３であり；（ｖ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１〜Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、及びＲ１〜Ｒ４のうちの１つが７個以下の炭素原子のアルキル鎖であり；（ｖｉ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１〜Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、及びＲ１〜Ｒ４のうちの１つが１９個以下の炭素原子のアルキル鎖であり；（ｖｉｉ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、及びＲ１〜Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５（ＣＨ２）ｎ基、ここで、ｎ＞１であり；（ｖｉｉｉ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１〜Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、及びＲ１〜Ｒ４のうちの１つが少なくとも１つのヘテロ原子を含み；（ｉｘ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１〜Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、及びＲ１〜Ｒ４のうちの１つが少なくとも１つのハロゲンを含み；（ｘ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、Ｒ１〜Ｒ４のうちの１つがＣ６Ｈ５ＣＨ２であり、及びＲ１〜Ｒ４のうちの１つが少なくとも１つの環状フラグメントを含み；（ｘｉ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、及びＲ１〜Ｒ４のうちの１つがフェニル環であり；又は（ｘｉｉ）Ｒ１〜Ｒ４のうちの２つがＣＨ３であり、及びＲ１〜Ｒ４のうちの２つが純粋な脂肪族フラグメントである。
【００８５】
かかる化合物としては、塩化ベヘンアルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベヘントリモニウム、塩化ラウラルコニウム、塩化セタルコニウム、臭化セトリモニウム、塩化セトリモニウム、セチルアミンフッ化水素酸塩、塩化クロルアリルメテンアミン（Ｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ−１５）、塩化ジステアリルジモニウム（Ｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ−５）、塩化ドデシルジメチルエチルベンジルアンモニウム（Ｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ−１４）、Ｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ−２２、Ｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ−２６、Ｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ−１８、ヘクトライト、ジメチルアミノエチルクロリド塩酸塩、システイン塩酸塩、ジエタノールアンモニウムＰＯＥ（１０）リン酸オレイルエーテル、ジエタノールアンモニウムＰＯＥ（３）リン酸オレイルエーテル、塩化タローアルコニウム、ジメチルジオクタデシルアンモニウムベントナイト、塩化ステアラルコニウム、臭化ドミフェン、安息香酸デナトニウム、塩化ミリストアルコニウム、塩化ラウトリモニウム、エチレンジアミン二塩酸塩、塩酸グアニジン、ピリドキシンＨＣｌ、塩酸イオフェタミン、塩酸メグルミン、塩化メチルベンズエトニウム、臭化ミルトリモニウム、塩化オレイルトリモニウム、ポリクアテルニウム−１、塩酸プロカイン、ココベタイン、ステアラルコニウムベントナイト、ステアラルコニウムヘクトナイト、ステアリルトリヒドロキシエチルプロピレンジアミン二フッ化水素酸塩、塩化タロートリモニウム、及び臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウムが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８６】
これらのほとんどの界面活性剤又は表面安定化剤は薬学的賦形剤として知られており、アメリカ薬剤師会とグレートブリテン王立薬剤師会が共同刊行した薬学的賦形剤ハンドブック（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、２０００）に詳細に記載されており、参照することにより本明細書に具体的に組み込まれる。
【００８７】
界面活性剤又は表面安定化剤は、市販及び／又は当該技術分野において既知の技術により調製することができる。
【００８８】
本発明において２つ以上の溶媒の組み合わせを使用できる。本発明に利用可能な有用な溶剤としては、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジエチルエーテル、メチルエチルエーテル、ジメチルエーテル、アセトン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、グリム、酢酸エチル、ジクロロメタン、クロロホルム、ヘキサン、ポリエチレングリコール、グリセリン、酸類、及びアルコール（例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノールなど）が挙げられるが、これらに限定されない。組み合わせた溶媒の使用は、ナノ粒子のサイズの減少に役立ち得る。
【００８９】
特定の実施形態にて、第１の溶媒は揮発性溶媒である。
【００９０】
特定の実施形態にて、ポリマーはＰＬＧＡポリマー、ＰＥＧ−ＰＬＧＡコポリマー、又はその組み合わせである。揮発性溶媒は、メチレンクロリド、酢酸エチル、若しくはクロロホルム、又はその組み合わせである。
【００９１】
特定の実施形態にて、揮発性溶媒を所望により共溶媒と混合してよい。
【００９２】
特定の実施形態にて、前述の共溶媒は水相溶性溶媒である。かかる水相溶性共溶媒の例は、アセトン、メタノール、エタノール、ＴＨＦ、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、ＤＭＡ、アセトニトリル、エチレングリコールなどである。
【００９３】
特定の実施形態にて、第２の溶媒の溶液は界面活性剤を含む。
【００９４】
特定の実施形態にて、前述の第２の溶媒の溶液は第１の溶媒の分画と混合される。混合物中での第１の溶媒と第２の溶媒の容積比は、第２の溶媒中での第１の溶媒の溶解度により決定され、約０．１：９９．９〜５０：５０、好ましくは１：９９〜２０：８０であり得る。好ましくは、前述の第２の溶媒の溶液は、第１の溶媒で飽和している。
【００９５】
特定の実施形態にて、第２の溶媒はアルコール又は水である。
【００９６】
特定の実施形態にて、第２の溶媒は水である。
【００９７】
特定の実施形態にて、溶媒の除去はロータリーエバポレータなどの蒸発装置を使用して蒸発される。蒸発方法は、所望により真空及び熱を加えることにより実施されてよい。溶媒除去はまた、通気フード内で数時間エマルションを単純に撹拌することであってもよい。
【００９８】
特定の実施形態にて、単独エマルション又は複合エマルションプロセスで作成した最終エマルションを、ナノ粒子懸濁液の「クエンチ」のために大量の水溶液と混合し、続いて薬学的に許容されるポリマーの溶解に用いた有機溶媒を蒸発させる。所望により、クエンチした溶液を、ポリマーを溶解するために用いた溶媒と飽和させてよい。
【００９９】
溶媒を除去したのち、ナノ粒子懸濁液は、界面活性剤及び懸濁液中に組み込まれていない治療薬を除去するために、洗浄される必要がある。典型的な洗浄プロセスは、遠心分離、限外濾過、クロスフロー濾過、及び透析を含む。
【０１００】
精製したナノ粒子を、凍結乾燥及びスプレー乾燥などの乾燥プロセスによって収集してよい。
【０１０１】
特定の実施形態にて、精製したナノ粒子は凍結乾燥される。
【０１０２】
特定の実施形態にて、精製したナノ粒子懸濁液はある種の凍結保護剤を含む。かかる凍結保護剤の例としては、マンニトール、グルコース、トレハロース、及びスクロースが挙げられるが、これらに限定されない。ナノ粒子懸濁液中の凍結保護剤の濃度は、０．０１％〜９５％、好ましくは０．１％〜１０％であり得る。
【０１０３】
あるいは、ナノ粒子は乾燥せずに保存されてよい。例えば、精製したナノ粒子懸濁液は凍結状態下で保存されてよい。適切な凍結保護剤は、ナノ粒子懸濁液を凍結状態にする前に添加される。ナノ粒子懸濁液を保存する環境温度は、０℃〜１００℃、好ましくは−２０℃〜８５℃である。
【０１０４】
特定の実施形態にて、ナノ粒子は、約１ｎｍ〜約１０００ｎｍ、好ましくは約１０ｎｍ〜約１００ｎｍ、より好ましくは約２０ｎｍ〜約９０ｎｍからなる群から選択される平均粒子径を有する。
【０１０５】
本明細書で使用する場合、粒径は、当業者に周知のあらゆる通常の粒径測定技術で決定することができる。かかる技術としては、例えば、沈殿フィールドフロー分画、光子相関分光法、光散乱法、動的光散乱法、光回折法、及びディスク遠心分離法が挙げられる。
【０１０６】
特定の実施形態にて、ＡＰＩは親水性薬物である。親水性薬物の例としては、イソニアジド、リファンピシン、ピラジナミド、エタンブトール、ストレプトマイシン、アシクロビル、アセチルシステイン、塩化アセチルコリン、アラトロフロキサシン、アレンドロネート、塩酸アマンタジン、アンベノニウム、アミホスチン、塩酸アミロライド、アミノカプロン酸、アンホテリシンＢ、アテノロール、ベシル酸アトラクリウム、アトロピン、アジスロマイシン、アズトレオナム、バシトラシン、ベカレルミン、ベラドーナ、塩酸ベプリジル、硫酸ブレオマイシン、ヒトカルシトニン、サケカルシトニン、カルボプラチン、カペシタビン、硫酸カプレオマイシン、セファマンドールナファート、セファゾリンナトリウム、塩酸セフェピム、セフィキシム、セフォニシドナトリウム、セフォペラゾン、セフォテタン二ナトリウム、セフォタキシム、セフォキシチンナトリウム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフロキシムアキセチル、セファレキシン、セファピリンナトリウム、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、シドフォビル、シスプラチン、クラドリビン、臭化クリジニウム、クリンダマイシン、シプロフロキサシン、クロドロネート、コリスチンメタナトリウム、デフェロキサミン、デニロイキンジフチトクス、デスモプレシン、ジアトリゾアートメグルミン、ジサイクロミン、ジダノシン、ジリスロマイシン、塩酸ドパミン、デオキシリボヌクレアーゼα、塩化ドキサクリウム、ドキソルビシン、エチドロン酸二ナトリウム、エナラプリラート、エンケファリン、エノキサシン、エノキサパリンナトリウム、エフェドリン、エピネフリン、エリスロマイシン、エスモル塩酸塩、ファムシクロビル、フルダラビン、フルオキセチン、ガンシクロビル、ゲンタマイシン、グルカゴン、グリコピロニウム、ヘパリンナトリウム、硫酸インジナビル、インスリン、ラミブジン、ロイコボリンカルシウム、酢酸ロイプロリド、レボフロキサシン、リンコマイシン、ロブカビル、ロメフロキサシン、ロラカルベフ、マンニトール、メトトレキサート、メトスコポラミン、塩酸メトホルミン、メトプロロール、メゾシリンナトリウム、塩化ミバクリウム、ネドクロミルナトリウム、ネオスチグミン臭化物、ネオスチグミンメチル硫酸塩、ニュートンチン、ノルフロキサシン、酢酸オクトレオチド、オフロキサシン、オルパドロネート、オキシトシン、パミドロン酸二ナトリウム、臭化パンクロニウム、パロキセチン、ペフロキサシン、イセチオン酸ペンタミジン、ペントスタチン、ペントキシフィリン、ペリシクロビル、ペンタガストリン、フェントラミンメシレート、フェニルアラニン、サリチル酸フィゾスチグミン、ピペラシリンナトリウム、硫酸ポリミキシンＢ、塩化プラリドキシム、プラムリンチド、プレガバリン、プロパフェノン、臭化プロパンテリン、臭化ピリドスチグミン、レシドロネート、リババリン、塩酸リマンタジン、サルメテロールキシナホエート、シンカリド、ソラトール、ソマトスタチン、スパルフロキサシン、スペクチノマイシン、スタブジン、ストレプトゾシン、スキサメトニウムクロリド、塩酸タクリン、硫酸テルブタリン、チオペタチカルシリン、チルドロネート、チモロール、トランドラプリル、グルコン���トリメトレキサート、トロスペクチノマイシン、トロバフロキサシン、塩化ツボクラリン、バラシクロビル、バルサルタン、バソプレシン、臭化ベクロニウム、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ワルファリンナトリウム、ザルシタビン、ザナミビル、ゾランドロネート、及びジドブジンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０７】
特定の実施形態にて、ＡＰＩは両親媒性薬物である。両親媒性薬物の例としては、アンフィフィリックＢ、ブピバカイン、ロピバカイン、プリロカイン、メピバカイン、テトラカイン、エチドカイン、モルヒネ、フェンタニール、アルフェンタニル、及びスルフェンタニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０８】
特定の実施形態にて、ＡＰＩは疎水性薬物である。疎水性薬物の例としては、アビエチン酸、アセグラトン、アセナフテン、アセノクマロール、アセトヘキサミド、アセトメロクトール、アセトキソロン、アセチルジギトキシン、アセチレンジブロミド、アセチレンジクロライド、アセチルサリチル酸、アラントラクトン、アルドリン、アレキシトールナトリウム、アレトリン、アリルエストレノール、アリルスルフィド、アルプラゾラム、アルミニウムビス（アセチルサリチル酸塩）、アンブセタミド、アミノクロセノキサジン、アミノグルテチミド、アミルクロリド、アンドロステネジオール、アネトールトリトン、アニラジン、アントラリン、アンチマイシンＡ、アプラスモマイシン、アルセノ酢酸、アシアチコシド、アステミゾール（ａｓｔｅｒｎｉｚｏｌｅ）、オウロドクス、オーロチオグリカニド、８−アザグアニン、アゾベンゼン、バイカレイン、ペルーバルサム、トルーバルサム、バルバン、バキストロビン、ベンダザック、ベンダゾール、ベンドロフルメチアジド、ベノミル、ベンザチン、ベンズエステロール、ベンゾデパ、ベンズオキシキノン、ベンズフェタミン、ベンズチアジド、安息香酸ベンジル、桂皮酸ベンジル、ビブロカソール、ビフェノックス、ビナパクリル、ビオレスメトリン、ビサボロール、ビサコジル、ビス（クロロフェノキシ）メタン、ビスマスヨードサブガレート、ビスマスサブガレート、タンニン酸ビスマス、ビスフェノールＡ、ビチオノール、ボルニル、臭化イソ吉草酸ボルニル、ボルニルクロリド、イソ吉草酸ボルニル、サリチル酸ボルニル、ブロジファカム、ブロメライン、ブロキシキノリン、ブフェキサマク、ブタミレート、ブテタール、ブチオベート、ブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、ヨウ化ステアリン酸カルシウム、サッカリン酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、カポベン酸、カプタン、カルバマゼピン、カルボクロラール、カルボフェノチン、カルボコン、カロテン、カルバクロール、セファエリン、セファリン、カウルモウグル酸、ケノジオール、キチン、クロルデン、クロルフェナク、塩化フェネトール、塩化タロニル、塩化トリアニセン、塩化プロチキセン、塩化キナルドール、クロモナル、シロスタゾール、シンコニジン、シトラール、クリノフィブリン酸、クロファジミン、クロフィブリン酸、クロフルカルバン、シノ硝酸塩、クロピドール、クロリンジオン、クロキサゾラム、コロキソン、コルチコステロン、クマクロル、クマホス、クーミトエート、酢酸クレゾール、クリミジン、クリホメート、カプロバン、シアメマジン、シクランデレート、シクラバメートシマリン、シクロスポリンＡ、シペルメトリル、ダプソン、ジホスファミド、デルタメトリン、酢酸デオキシコルチココステロン、デソキシメタゾン、デキストロモルアミド、ジアセタゾト、ジアリホル、ジアチモスルホン、デカプトン、ジクロフルアニ、ジクロロフェン、ジクロルフェナミド、ジコホル、ジクリル、ジクマロール、ジエネストロール、ジエチルスチルベストロール、ジフェナミゾール、酢酸ジヒドロコデイノン−エノール、ジヒドロエルゴタミン、ジヒドロモルフィリン、ジヒドロタキステロール、ジメストロール、ジメチステロン、ジオキサチオン、ジフェナン、Ｎ−（１，２−ジフェニルエチル）ニコチナミド、３，４−ジ−［ｌ−メチル６−ニトロ−３−インドリル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＭＮＩＰＤ）、ジピロセチル、ジサルファミド、ジチアノン、ドキセニトイン、ドラゾキソロン、ジュラパタイト、エジフェンホス、エモジン、エンフェナミン酸、エルボン、エルゴコルニニン、テトラ硝酸エリトリチル、ステアリン酸エリスロマイシン、エストリオール、エタベリン、エチステロン、ビスコム酢酸エチル、エチルヒドロクプレイン、エチルメンタンカルボキサミド、オイゲノール、ユープロシン、エキサルアミド、フェバルバメート、フェナルアミド、フェンベンダゾール、フェニペントール、フェニトロチオン、フェノフィブリン酸、フェンキゾン、フェンチオン、フェパラゾン、フリルピン、フィリキシン酸、フロクタフェニン、フルアニゾン、フルメキン、フルオコルチンブチル、フルオキシメステロン、フルロチル、フルタゾラム、フマグリン、５−フルフリル−５−イソプロピルバルビフィン酸、フザファンギン；グラフェニン、グルカゴン、グルテチミド、グリブチアゾール、グリセオフルビン、炭酸グアヤコール、リン酸グアヤコール、ハルシノニド、ヘマトプルピリン、ヘキサクロロフェン、へキセストロール、へキセチジン、へキソバルビタール、ヒドロクロロチアジド、ヒドロコドン、イブプロキサム、イデベノン、インドメタシン、ニコチン酸イノシトール、ヨーベンザム酸、ヨーセタム酸、ヨージパミド、ヨーメグラム酸、イポデート、イソメテプテン、イソノキシン、２−イソバレリンダン−１，３−ジオン、ジョサマイシン、１１−ケトプロゲステロン、ラウロカプラム、二酢酸−３−Ｏ−ラウロイルピリドキソール、リドカイン、リンダン、リノレン酸、リオチロニン、ルセンソマイシン、マンコゼブ、マンデル酸、イソアミルエステル、マジンドール、メベンダゾール、メブヒドロリン、メビキン、メラルソプロール、メルファラン、メナジオン、吉草酸メチル、メフェノキサロン、メフェンテルミン、メフェニトイン、メプリルカイン、メスタノロン、メストラノール、メサルフェン、メテルゴリン、メタラタール、メタンドリオール、メタクアロン、メチルクロラントレン、メチルフェニデート、１７−メチルテステロン、メチプラノロール、ミナプリン、ミヨラル、ナフィアロフォス、ナフィオピジル、ナフタレン、２−ナフチルラクテート、２−（２−ナフチルオキシ）エタノール、サリチル酸ナフチル、ナプロキセン、ニールバルビタール、ネマデクチン、ニクロサミド、ニコクロネート、ニコモルフィン、ニフロキン、ニフロキサジン、ニトラクリン、ニトロメルソール、ノガラマイシン、ノルダゼパム、ノレタンドロロン、ノルゲストリエノン、オクタベフィン、オレアンドリン、オレイン酸、オキサゼパム、オキサゾラム、オキセラジン、オキサザイン、オキシコドン、オキシメステロン、酢酸オキシフェニスタン、パクリタキセル、パラヘルクアミド、パラチオン、ペモリン、ペンタエリスリトール、テトラニトレート、ペンチルフェノール、ペルフェナジン、フェンカルバミド、フェニラミン、２−フェニル−６−クロロフェノール、フェントルメチルバルビツール酸、フェニトイン、ホサロン、Ｏ−フタリルサルファチアゾール、フィロキノン、ピカデックス、ピファルミン、ピケトフェン、ピプロゾリン、ピロザジル、ピバロイルオキシメチルブタレート、プラフィブリド、プラウノトール、ポラペレジン、ポリチアジド、プロベネシド、プロゲステロン、プロメゲストン、プロパニジド、プロパルジト、プロファン、プロカゾン、プロチアンアミド、ピリメタミン、ピリミテート、ピルビニウムバモエート、ケルセチン、キンボロン、キザロホエチル、ラホキサミド、ラパマイシン、レシナミン、ロシベリン、ロネル、サレン、スカーレットレッド、シッカニン、シマジン、シメトリド、シムバスタチン、シロリムス、ソブゾキサン、ソラン、スピロノラクトン、スカーレン、スタノロン、スクラルフェート、サルファベンズ、サルファグアノ−ル、サルサホラジン、サルフォキシド、サルピリド、スキシブゾン、タルブタール、テルグリド、テストステロン、テトラブロモクレゾール、テトランドリン、チアセタゾン、チオコルキシン、チオクト酸、チオキノクス、チオリダジン、チラン、チミルＮ−イソアミルカルバメート、チオキシダゾール、チオキソロン、トコフェロール、トルシクレート、トルナフィエート、トリクロサン、トリフルサル、トリパラナール、ウルソル酸、バリノマイシン、ベラパミル、ビンブラスチン、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、キセンブシン、キシラジン、ザルトプロフェン及びザラレノンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０９】
特定の実施形態にて、ＡＰＩは生物学的エンティティである。生物学的エンティティの例としては、タンパク質、ペプチド、成長因子、オリゴヌクレオチド、抗体、多糖質、酵素、アミノ酸、ＤＮＡ、ＲＮＡ、及びリガンドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１０】
特定の実施形態にて、ポリマー溶液の濃度は、１μｇ／ｍＬ〜１ｇ／ｍＬ重量％、好ましくは１ｍｇ／ｍＬ〜５００ｍｇ／ｍＬ重量％、及び最も好ましくは、１０ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ重量％である。
【０１１１】
特定の実施形態にて、ナノ粒子は、性質を強化する目的のために、治療又は非治療剤でコーティングすることができる。非治療剤としては、ターゲットリガンド、造影剤、及び界面活性剤が挙げられるが、これらに限定されない。ナノ粒子は、物理吸着プロセス又は化学結合を介してコーティングすることができる。物理吸着は、当業者に周知の技術により達成可能である。化学結合は、複合体のポリマー構成要素上の少なくとも１つの官能基と、治療又は非治療剤上の少なくとも１つの官能基を共有結合することで達成され、典型的にはエステル、アミド、ウレタン、ヒドラゾン、チオエーテル、カーボネート、アゾ、ミン（シッフ塩基）、炭素−炭素、又はジスルフィド結合である。本発明の１つの実施形態は、ナノ粒子上のある種の官能基を提供する。これらの官能基は化学結合を利用することができる。ポリマーと薬剤との連結は、薬剤が化学的に所望の効果を示すことができるように、必要に応じて、周知の生体不安定性の原理に従って設計されてよい。薬剤とポリマーの化学結合に好適な方法及び反応条件は、Ｒ．Ｄｕｎｃａｎら、Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、２：７８６（Ｅ．Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚ、編集者）；及びＫｏｐｅｃｅｋら、Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９９５（１１２）、５５−１２３にまとめられている。
【０１１２】
実施例
実施例１  単独エマルションプロセスによるＰＬＧＡナノ粒子の調製
約７５ｇの１ｗｔ％ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ−６８水溶液を、約６ｇの酢酸エチルと混合した。かかる混合物を、約２５ｇの１ｗｔ％ＰＬＧＡ（５０：５０）溶液と、酢酸エチルの入ったガラス容器の中で混合した。混合物を、約８，０００ＲＰＭのローターステーターミキサーで１分間均質化した。かかる形成したエマルションを更に、マイクロ流動化プロセッサのＦ１２Ｙ（７５μｍ）相互チャンバノズルに約１５，０００ｐｓｉで３回通して処理した。処理の後、サンプルを冷却するために氷水浴を冷却コイルの周囲に設置した。処理の後、酢酸エチルを蒸発させるために、フード内でサンプルを磁気的に撹拌した。
【０１１３】
溶媒を蒸発させた後、得られたナノ粒子の粒径をマルバーンゼータサイザで測定し、結果は以下のとおりであった。
【０１１４】
Ｚ平均粒子径＝５１．４８±１１．５４ｎｍ
【０１１５】
実施例２  複合エマルションプロセスによるＰＬＧＡナノ粒子の調製
約５０ｍｇのＰＬＧＡ（５０：５０；平均分子量６３，０００）を５０ｍｌの酢酸エチルに溶解した。１ｍｌの脱イオンＨ２Ｏ（内部水相）をＰＬＧＡ溶液に添加し、１０，０００ＲＰＭのローターステーターホモジナイザで１分間均質化した。次いで、６，０００ｐｓｉのマイクロ流動化プロセッサに１回通す処理をし、第１のエマルションを得た。別に、３００ｍｌの０．５％ポリビニルアルコール水溶液を調製した。第１のエマルションをポリビニルアルコール水溶液に添加し、６，０００ｐｓｉのマイクロ流動化プロセッサに３回通す処理をし、第２のエマルションを形成した。
【０１１６】
第２のエマルションを、酢酸エチルを蒸発させるために磁気的に撹拌した。得られたナノ粒子は以下の粒径を有していた。
【０１１７】
Ｚ平均粒子径＝１１１．３±４５．６６ｎｍ
【０１１８】
ナノ粒子懸濁液を孔径０．０５μｍのクロスフロー濾過装置で洗浄し、ポリビニルアルコールを除去し、濃縮及び凍結乾燥した。
【０１１９】
実施例３  複合エマルションプロセスによるＢＳＡ充填ＰＬＧＡナノ粒子の調製
約５０ｍｇのＰＬＧＡ（５０：５０；平均分子量６３，０００）を５０ｍｌの酢酸エチルに溶解した。１ｍｌの１０ｍｇ／ｍｌのＢＳＡを含む脱イオンＨ２Ｏ（内部水相）をＰＬＧＡ溶液に添加し、１０，０００ＲＰＭのローターステーターホモジナイザで１分間均質化した。次いで、６，０００ｐｓｉのマイクロ流動化プロセッサに１回通す処理をし、第１のエマルションを得た。別に、３００ｍｌの０．５％ポリビニルアルコール水溶液を調製した。第１のエマルションをポリビニルアルコール水溶液に添加し、６，０００ｐｓｉのマイクロ流動化プロセッサに３回通す処理をし、第２のエマルションを形成した。
【０１２０】
第２のエマルションを、酢酸エチルを蒸発させるために磁気的に撹拌した。得られたナノ粒子は以下の粒径を有していた。
【０１２１】
Ｚ平均粒子径＝１４４．４±７３．６４ｎｍ
【０１２２】
ナノ粒子懸濁液を孔径０．０５μｍのクロスフロー濾過装置で洗浄し、ポリビニルアルコール及び組み込まれていないＢＳＡを除去した。
【０１２３】
実施例４  複合エマルションプロセスによるＢＳＡ及びパクリタキセル充填ＰＥＧ−ＰＬＧＡナノ粒子の調製
約７５ｍｇのカルボン酸末端ＰＬＧＡ（５０：５０；平均分子量約３３，０００）と約７５ｍｇのｍＰＥＧ−ＰＬＧＡ（Ｍｗ−５，０００：１０，０００）と約３０ｍｇのパクリタキセルとを５０ｍｌの塩化メチレンに溶解した。１ｍｌの１０ｍｇ／ｍｌのＢＳＡを含む脱イオンＨ２Ｏ（内部水相）をポリマー／パクリタキセル溶液に添加し、１０，０００ＲＰＭのローターステーターホモジナイザで１分間均質化した。次いで、１０，０００ｐｓｉのマイクロ流動化プロセッサに５回通す処理をし、第１のエマルションを得た。別に、３００ｍｌの０．５％ポリビニルアルコール水溶液を調製した。第１のエマルションをポリビニルアルコール水溶液に添加し、８，０００ｐｓｉのマイクロ流動化プロセッサに３回通す処理をし、第２のエマルションを形成した。
【０１２４】
第２のエマルションを、溶媒を蒸発させるために磁気的に撹拌した。得られたナノ粒子は以下の粒径を有していた。
【０１２５】
Ｚ平均粒子径＝８９．３±３３．５ｎｍ
【０１２６】
ナノ粒子懸濁液を孔径０．０５μｍのクロスフロー濾過装置で洗浄し、ポリビニルアルコール及び組み込まれていないＢＳＡ及びパクリタキセルを除去した。
【国際調査報告】
2018523702.tif 000002
2018523702.tif 000003
2018523702.tif 000004