(57)【要約】  本発明は、ベータ−グルカン活性を有するポリペプチド、触媒ドメイン、ベータ−グルカン結合ドメイン、およびこのポリペプチド、触媒ドメインまたはベータ−グルカン結合ドメインをコードするポリヌクレオチドに関する。本発明はまた、このポリヌクレオチドを含む核酸構築物、ベクターおよび宿主細胞、ならびにこのポリペプチド、触媒ドメインまたはベータグルカン結合ドメインを生成する方法および使用する方法にも関する。本発明はさらに、ベータ−グルカン活性、１種もしくは複数種のアミラーゼおよび／または１種もしくは複数種のプロテアーゼを示すポリペプチドを含むクリーニング組成物または洗浄組成物、ならびに硬質面のクリーニング、食器洗浄および洗濯等のクリーニングまたは洗剤の用途およびプロセスでのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドであって、以下：
（ａ）配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８９％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号６、配列番号１、配列番号４、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号６、配列番号１、配列番号４、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも８９％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片
からなる群から選択されるポリペプチド。
【請求項２】
配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記成熟型ポリペプチドは、配列番号７のアミノ酸１〜２２２、配列番号２のアミノ酸１〜３５１、配列番号３のアミノ酸１〜３５１、配列番号５のアミノ酸１〜２４５、配列番号９のアミノ酸１〜２１４からなる群から選択される、請求項１または２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記ベータ−グルカナーゼ活性はリケニナーゼＥＣ３．２．１．７３活性である、請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む組成物であって、食器洗浄用組成物ではない組成物。
【請求項６】
ｉ）１種もしくは複数種の洗浄成分；および／または
ｉｉ）１種もしくは複数種の追加の酵素
をさらに含む請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物はｐＨが７．５以上であり、漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１３．５の範囲であり、さらに好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲であり、最も好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲であり、さらに最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲である、請求項５または６に記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物はクリーニング組成物または洗剤組成物であり、前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではない、請求項５〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
洗濯等のクリーニングプロセスでの請求項１〜４のいずれか一項に記載のポリペプチドまたは請求項５〜８のいずれか一項に記載の組成物の使用であって、前記クリーニングプロセスは食器洗浄用のクリーニングプロセスではなく、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【請求項１０】
請求項１〜４のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【請求項１１】
請求項１０に記載のポリヌクレオチドを発現させることが可能な核酸構築物または発現ベクターであって、好ましくは、発現宿主中で前記ポリペプチドを産生させる１つまたは複数の制御配列に作動可能にリンクされた請求項１０に記載のポリヌクレオチドを含む核酸構築物または発現ベクター。
【請求項１２】
請求項１０に記載のポリヌクレオチドを含む組換え宿主細胞であって、好ましくは、前記ポリヌクレオチドは、前記ポリペプチドを産生させる１つまたは複数の制御配列に作動可能にリンクされている、組換え宿主細胞。
【請求項１３】
クリーニング組成物または洗剤組成物であって、前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではなく、前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドであり、
（ａ）配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも７０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号６、配列番号１、配列番号４、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号６、配列番号１、配列番号４、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも７０％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体で、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片
からなる群から選択されるポリペプチドを含み、
前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
をさらに含む、クリーニング組成物または洗剤組成物。
【請求項１４】
前記ポリペプチドは、配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する、請求項１３に記載のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【請求項１５】
前記成熟型ポリペプチドは、配列番号７のアミノ酸１〜２２２、配列番号２のアミノ酸１〜３５１、配列番号３のアミノ酸１〜３５１、配列番号５のアミノ酸１〜２４５、配列番号９のアミノ酸１〜２１４からなる群から選択される、請求項１３または１４に記載のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【請求項１６】
前記ベータ−グルカナーゼ活性はリケニナーゼＥＣ３．２．１．７３活性である、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【請求項１７】
前記アミラーゼはアルファ−アミラーゼである、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【請求項１８】
ｉ）１種もしくは複数種の洗浄成分；および／または
ｉｉ）１種もしくは複数種の追加の酵素
をさらに含む請求項１３〜１７のいずれか一項に記載のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【請求項１９】
前記アルファ−アミラーゼは以下：
（ａ）配列番号１３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）配列番号１３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、１５位、２３位、１０５位、１０６位、１２４位、１２８位、１３３位、１５４位、１５６位、１７８位、１７９位、１８１位、１８８位、１９０位、１９７位、２０１位、２０２位、２０７位、２０８位、２０９位、２１１位、２４３位、２６４位、３０４位、３０５位、３９１位、４０８位および／または４４４位のうちの１つまたは複数で置換を含むポリペプチド；
（ｃ）配列番号１４に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｄ）配列番号１５のハイブリッドポリペプチドに対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｅ）配列番号１５のハイブリッドポリペプチドに対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、前記ハイブリッドポリペプチドは、４８位、４９位、１０７位、１５６位、１８１位、１９０位、１９７位、２０１位、２０９位および／または２６４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含む、ポリペプチド；
（ｆ）配列番号１６に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｇ）配列番号１６に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、１８１位、１８２位、１８３位、１８４位、１９５位、２０６位、２１２位、２１６位および／または２６９位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｈ）配列番号１７、配列番号１８または配列番号１９に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｉ）配列番号１７、配列番号１８または配列番号１９に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、１４０位、１８３位、１８４位１９５位、２０６位、２４３位、２６０位、３０４位および／または４７６位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｊ）配列番号２０に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｋ）配列番号２１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｌ）配列番号２１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、１７６位、１７７位、１７８位、１７９位、１９０位、２０１位、２０７位、２１１位および／または２６４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｍ）配列番号２２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｎ）配列番号２２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、８７位、９８位、１２５位、１２８位、１３１位、１６５位、１７８位、１８０位、１８１位、１８２位、１８３位、２０１位、２０２位、２２５位、２４３位、２７２位、２８２位、３０５位、３０９位、３１９位、３２０位、３５９位、４４４位および／または４７５位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｏ）配列番号２１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、２８位、１１８位、１７４位；１８１位、１８２位、１８３位、１８４位、１８６位、１８９位、１９５位、２０２位、２９８位、２９９位、３０２位、３０３位、３０６位、３１０位、３１４位；３２０位、３２４位、３４５位、３９６位、４００位、４３９位、４４４位、４４５位、４４６位、４４９位、４５８位、４７１位および／または４８４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；ならびに
（ｐ）配列番号１２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド
（ｑ）改変Ｇ１８２＊＋Ｄ１８３＊を有する、配列番号２３の変異体；
（ｒ）改変Ｈ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｉ４０５Ｌ＋Ａ４２１Ｈ＋Ａ４２２Ｐ＋Ａ４２８Ｔを有する、配列番号２４の変異体；
（ｓ）改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する、配列番号２４の変異体；
（ｔ）改変Ｒ１７８＊＋Ｇ１７９＊＋Ｅ１８７Ｐ＋Ｉ２０３Ｙ＋Ｒ４５８Ｎ＋Ｔ４５９Ｓ＋Ｄ４６０Ｔ＋Ｇ４７６Ｋを有する、配列番号２４の変異体
（ｕ）改変Ｍ２０２Ｌを有する、配列番号２７の変異体；
（ｖ）改変Ｒ１８０＊＋Ｓ１８１＊＋Ｓ２４３Ｑ＋Ｇ４７５Ｋを有する、配列番号２８の変異体；
（ｗ）改変Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｗ１４０Ｙ＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｉ２０６Ｙ＋Ｙ２４３Ｆ＋Ｅ２６０Ｇ＋Ｇ３０４Ｒ＋Ｇ４７６Ｋを有する、配列番号２９の変異体；
（ｘ）改変Ｈ１＊＋Ｎ５４Ｓ＋Ｖ５６Ｔ＋Ｋ７２Ｒ＋Ｇ１０９Ａ＋Ｆ１１３Ｑ＋Ｒ１１６Ｑ＋Ｗ１６７Ｆ＋Ｑ１７２Ｇ＋Ａ１７４Ｓ＋Ｇ１８４Ｔ＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｖ２０６Ｌ＋Ｋ３９１Ａ＋Ｐ４７３Ｒ＋Ｇ４７６Ｋを有する、配列番号３０の変異体；
（ｙ）改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｔ２４６Ｖ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する、配列番号３１の変異体
からなる群から選択される、請求項１３〜１８のいずれか一項に記載のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【請求項２０】
前記プロテアーゼは、
ａ）配列番号３４に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、プロテアーゼ活性を有するポリペプチド；
ｂ）配列番号３５に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、プロテアーゼ活性を有するポリペプチド；および
ｃ）配列番号３６に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、プロテアーゼ活性を有するポリペプチド
からなる群から選択される、請求項１３〜１９のいずれか一項に記載のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【請求項２１】
前記ポリペプチドまたは組成物は、アルカリ性条件下での安定性および／または洗浄性能が向上しており、好ましくは、前記アルカリ性条件はｐＨが７．５以上である、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のポリペプチドまたは組成物。
【請求項２２】
クリーニングプロセスでの請求項１３〜２１のいずれか一項に記載のクリーニング組成物または洗剤組成物の使用であって、前記クリーニングプロセスは食器洗浄用のクリーニングプロセスではなく、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【請求項２３】
ベータ−グルカンを分解するプロセスであって、前記ベータ−グルカンに請求項１〜２２のいずれか一項に記載のクリーニング組成物もしくは洗剤組成物またはポリペプチドを適用するステップを含み、前記プロセスは食器洗浄プロセスではなく、好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−Ｄ−グルカンであり、さらに好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−１，３−１，４グルカンであり、最も好ましくは、前記ベータ−グルカンは混合連結ベータ−グルカンであり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカンはオオムギベータ−グルカンまたはオートミールベータ−グルカンであり、任意選択で前記プロセスをｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、プロセス。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載のポリペプチドまたは組成物または洗浄組成物を使用して再汚染を低減するまたは予防する方法であって、食器洗浄方法ではない方法。
【請求項２５】
以下のうちの１つまたは複数のための請求項１〜２４のいずれか一項に記載のポリペプチドまたは組成物または洗剤組成物の使用：
ａ）再汚染の低減または予防であって、前記使用は食器洗浄での使用ではない、低減または予防；
ｂ）穀物含有汚染物、特に乾燥穀物含有汚染物、好ましくはオートムギフレーク含有汚染物、特に乾燥オートムギフレーク含有汚染物、および／または調理済オートムギ含有汚染物、および／または調理済且つ焦げたオートムギ含有汚染物、および／または未調理オートムギ含有汚染物の除去であって、前記使用は食器洗浄での使用ではない、除去；
ｃ）１種もしくは複数種のアミラーゼの存在下でのデンプン含有汚染物の除去の促進および／またはアミラーゼが関連するクリーニング性能の増強であって、前記使用は食器洗浄での使用ではない、促進および／または増強；
ｄ）１種もしくは複数種のプロテアーゼの存在下でのタンパク質含有汚染物の除去の促進および／またはプロテアーゼが関連するクリーニング性能の増強であって、前記使用は食器洗浄での使用ではない、促進および／または増強。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表の参照
本出願は、コンピュータ読み取り可能な形態の配列表を含んでおり、これは本明細書において参照により援用される。
【０００２】
本発明は、ベータ−グルカナーゼ活性を示すポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼおよび／または１種もしくは複数種のプロテアーゼとを含むクリーニング組成物または洗剤組成物、ならびにクリーニングまたは洗剤の用途およびプロセス（例えば、硬質面のクリーニング、食器洗浄および洗濯）でのこれらの組成物の使用に関する。本発明はさらに、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドおよびこのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに関する。本発明はまた、このポリヌクレオチドを含む核酸構築物、ベクターおよび宿主細胞にも関し、このポリペプチドを生成する方法ならびに例えばクリーニングまたは洗剤の用途およびプロセス（例えば、硬質面のクリーニング、食器洗浄および洗濯）でこのポリペプチドを使用する方法にも関する。
【背景技術】
【０００３】
ベータ−グルカンは、ベータ−グリコシド結合により連結されたグルコース単位からなる多糖である。セルロースはベータ−グルカンの一種であり、グルコース単位の全てがベータ−１，４−グルコシド結合により連結されている。この特徴により、不溶性セルロースミクロフィブリルが形成される。セルロースのグルコースへの酵素的加水分解には、エンドベータ−グルカナーゼ（例えばＥＣ３．２．１．４）、セロビオヒドロラーゼ（例えばＥＣ３．２．１．９１）およびベータ−グルコシダーゼ（例えばＥＣ３．２．１．２１）の使用が必要とされる。
【０００４】
ベータ−グルカンをベータ−１，３−グルコシド結合により連結することもでき（例えば、パン酵母サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）の細胞壁中で見出される）、ベータ−１，６−グルコシド結合により連結することもでき、ベータ−１，３−グルコシド結合とベータ−１，４−グルコシド結合とベータ−１，６−グルコシド結合との組み合わせにより連結することもできる。ベータ−１，３−グルコシド結合とベータ−１，４−グルコシド結合との組み合わせを、例えば穀物（例えばオートムギおよびオオムギ）由来の不溶性繊維中で見出すことができる。ベータ−グルカナーゼのサブグループ（リケニナーゼ（またはリケナーゼ）（ＥＣ３．２．１．７３）としても既知である）を使用して、ベータ−１，４−グルコシド結合の加水分解を触媒してベータ−グルカンを得ることができる。リケニナーゼ（またはリケナーゼ）（例えばＥＣ３．２．１．７３）は、（１，３）−結合および（１，４）−結合を含むベータ−Ｄ−グルカン中の（１，４）−ベータ−Ｄ−グルコシド連結を加水分解し、リケニンおよび穀物ベータグルカンに作用し得るが、１，３−結合または１，４−結合のみを含むベータ−Ｄ−グルカンには作用し得ない。他のベータ−グルカナーゼ（例えばＥＣ３．２．１．４）は、例えば、セルロース中の、リケニン中のおよび穀物ベータ−Ｄ−グルカン中の（１，４）−ベータ−Ｄ−グルコシド連結の内部加水分解（ｅｎｄｏｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ）を実施することができ、１，３−連結を含むベータ−Ｄ−グルカン中の１，４−連結も加水分解する。
【０００５】
食器洗浄および洗濯でのオートムギ含有汚れおよびオオムギ含有汚れのような穀物汚れの除去は認識された問題であり、この穀物汚れで見られるベータ−グルカンを分解し得る酵素の発見に相当な関心が持たれている。例えばＢ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）のような様々なバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種はベータ−グルカナーゼを発現するが、この酵素は概して、例えばｐＨ７．５以上のアルカリ性用途にはあまり適してない。
【０００６】
本発明は、ベータ−グルカナーゼ活性を有する（例えば、リケニナーゼ（ＥＣ３．２．１．７３）活性を含むか、これから構成される）グリコシドヒドロリアーゼファミリ１６（ＧＨ１６）のポリペプチドおよび前記ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを提供し、このベータ−グルカナーゼ活性は、例えばアルカリ性条件（例えばｐＨ７．５以上）下において、様々なタイプのベータ−グルカン（例えば、ベータ−Ｄ−グルカン、ベータ−１，３−１，４グルカン、混合連結ベータ−グルカン（ｍｉｘ−ｌｉｎｋａｇｅ  ｂｅｔａ−ｇｌｕｃａｎ）、オオムギベータ−グルカンおよびオートミールベータ−グルカン）の分解で活性がより高く、従って上述した用途で使用され得、例えば、クリーニングまたは洗剤の用途およびプロセス（例えば、硬質面のクリーニング、食器洗浄および洗濯）で使用され得る。ベータ−グルカナーゼを含む既存の製品は、このタイプのベータ−グルカンに対する効果が非常に低く、なぜならば、このベータ−グルカナーゼの主な酵素基質はセルロースだからである。従って、本発明は、特性が向上した新規のベータ−グルカナーゼ（例えば、アルカリ性条件下での性能および／または安定性が顕著に改善されている；セルラーゼ活性を有しない（例えば、Ｄ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性を有しない）ベータグルカナーゼ（例えばＥＣ３．２．１．７３））を提供する。洗濯での生地へのセルラーゼの使用とリケナーゼの使用との差異は、リケナーゼが生地の繊維を分解しないことである。
【０００７】
さらに、いくつかの特定の固形洗剤はｐＨが１０超である。既知のベータ−グルカナーゼは、ｐＨが非常に高い洗剤には適していない。そのため、例えば、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のおよび古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来の既知のベータ−グルカナーゼは、本明細書の実施例８で実証されているように、アルカリ性条件下で急速に失活する。本発明は、特性が向上した（例えば、アルカリ性条件下での性能および／または安定性が顕著に改善された）新規のベータ−グルカナーゼを提供する。
【０００８】
バチルスハロデュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）由来の特徴が不明なタンパク質（ｕｎｉｐｒｏｔ：Ｑ９Ｋ７Ｘ６）は、配列番号７に示すベータ−グルカナーゼと８８．４％同一である。
【０００９】
バチルスセルロシリティカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｉｌｙｔｉｃｕｓ）由来の特徴が不明なタンパク質（ｕｎｉｐｒｏｔ：Ｅ６ＴＲＢ０）は、配列番号３に示すベータ−グルカナーゼと８０．７％同一である。
【００１０】
バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）由来の特徴が不明なタンパク質（ｕｎｉｐｒｏｔ：Ｗ４ＱＶＫ７）は、配列番号５に示すベータ−グルカナーゼと９８．２％同一である。
【００１１】
古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）亜種ニガー（ｎｉｇｅｒ）由来の特徴が不明なタンパク質（ｕｎｉｐｒｏｔ：Ａ０Ａ０８０ＵＶＰ７）は、配列番号９に示すベータ−グルカナーゼと９７．９％同一である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
一態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを含むクリーニング組成物または洗剤組成物であって：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片；
前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
をさらに含み、
好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドならびに前記１種もしくは複数種のアミラーゼ（例えば配列番号１２）（および／または前記１種もしくは複数種のプロテアーゼ）は相乗効果を有し、さらに好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性は、セルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではない、クリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００１３】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを含むクリーニング組成物または洗剤組成物であって：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８１％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも８１％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片；
前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
をさらに含み、
好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドならびに前記１種もしくは複数種のアミラーゼ（例えば配列番号１２）（および／または前記１種もしくは複数種のプロテアーゼ）は相乗効果を有し、さらに好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はセルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではない、クリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００１４】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを含むクリーニング組成物または洗剤組成物であって：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９９％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片；
前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
をさらに含み、
好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドならびに前記１種もしくは複数種のアミラーゼ（例えば配列番号１２）（および／または前記１種もしくは複数種のプロテアーゼ）は相乗効果を有し、さらに好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はセルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではない、クリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００１５】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを含むクリーニング組成物または洗剤組成物であって：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８９％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも８９％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片；
前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
をさらに含み、
好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドならびに前記１種もしくは複数種のアミラーゼ（例えば配列番号１２）（および／または前記１種もしくは複数種のプロテアーゼ）は相乗効果を有し、さらに好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はセルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではない、クリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００１６】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを含むクリーニング組成物または洗剤組成物であって：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９８％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片；
前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
をさらに含み、
好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドならびに前記１種もしくは複数種のアミラーゼ（例えば配列番号１２）（および／または前記１種もしくは複数種のプロテアーゼ）は相乗効果を有し、さらに好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はセルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではない、クリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００１７】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを含むクリーニング組成物または洗剤組成物であって：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して１００％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片；
前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
をさらに含み、
好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドならびに前記１種もしくは複数種のアミラーゼ（例えば配列番号１２）（および／または前記１種もしくは複数種のプロテアーゼ）は相乗効果を有し、さらに好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はセルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではない、クリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００１８】
別の態様では、本発明は、本発明のベータ−グルカナーゼを１種もしくは複数種のアルファ−アミラーゼ（および／または前記１種もしくは複数種のプロテアーゼ）と共に含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。別の態様では、本発明は、ベータ−グルカナーゼを、１種または複数種のアミラーゼと、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、セルラーゼ、エンドグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチンリアーゼ、キサンタナーゼ、ペルオキシダーゼ（ｐｅｒｏｘｉｄａｅｓ）、ハロペルオキシゲナーゼ（ｈａｌｏｐｅｒｏｘｙｇｅｎａｓｅ）、カタラーゼ、マンナナーゼまたはそれらの混合物を含む群から選択される１種または複数種のさらなる酵素と共に含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。別の態様では、本発明は、クリーニング用途または洗剤用途で酵素洗浄力有益性または向上した洗浄性能を有する本発明のクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００１９】
別の態様では、本発明は、食器洗浄または洗濯のための、本発明のベータ−グルカナーゼと、１種または複数種のプロテアーゼと、任意選択で１種または複数種のさらなる酵素（例えば、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、セルラーゼ、エンドグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチンリアーゼ、キサンタナーゼ、ペルオキシダーゼ（ｐｅｒｏｘｉｄａｅｓ）、ハロペルオキシゲナーゼ、カタラーゼ、マンナナーゼまたはそれらの任意の混合物）との使用に関する。
【００２０】
別の態様では、本発明は、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドと、このポリペプチドをコードするポリヌクレオチドとに関する。別の態様では、本発明は、アルカリ性条件（例えばｐＨ７．５以上）で洗浄性能が向上したおよび／または安定性が向上した、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する。別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片。
【００２１】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８１％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも８１％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片。
【００２２】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９９％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも９９％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片。
【００２３】
本発明はさらに、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８９％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも８９％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片。
【００２４】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９８％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも９８％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片。
【００２５】
別の態様では、本発明は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも１００％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片。
【００２６】
別の態様では、本発明は、本発明のポリペプチドを含む組成物と、生地および／または硬質面を洗浄するためのまたはクリーニングするための、流体（例えば掘削流体）の粘度を制御する、ベータ−グルカン（例えば、ベータ−Ｄ−グルカン、ベータ−１，３−１，４グルカン、混合連結ベータ−グルカン、オオムギベータ−グルカン、オートミールベータ−グルカン）の分解での本発明のポリペプチドの使用と、ベータ−グルカンを分解する方法であって、このベータ−グルカンに本発明のポリペプチドを含む組成物を適用するステップを含む方法とに関する。
【００２７】
別の態様では、本発明は、洗濯中での生地へのセルラーゼの使用と本発明のリケナーゼの使用との差異は、本発明のリケナーゼが生地の繊維を分解しないことであることに関する。
【００２８】
別の態様では、本発明は、本発明のポリペプチドまたは組成物（例えば、クリーニング組成物または洗剤組成物）を使用する、布地もしくは生地を洗濯する方法または硬質面クリーニング（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）および手動食器洗浄（ＨＤＷ））の方法に関する。別の態様では、本発明は、前記本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または前記１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００２９】
別の態様では、本発明は、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、このポリヌクレオチドを含む核酸構築物、組換え発現ベクター、組換え宿主細胞、およびこのポリペプチドを生成する方法に関する。
【００３０】
別の態様では、本発明は、本発明のポリペプチドを含む発酵ブロス配合物または細胞培養組成物に関する。
【００３１】
別の態様では、本発明は、物品からのバイオフィルムの予防、低減または除去のための本発明のポリペプチドの使用に関する。
【００３２】
別の態様では、本発明は、再汚染の低減または予防のための本発明のポリペプチドまたは洗剤組成物の使用に関する。
【００３３】
配列表の概要
配列番号１は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）の系統から単離されたベータ−グルカナーゼのＤＮＡ配列である。
配列番号２は、配列番号１から自動的に推定されるベータ−グルカナーゼのアミノ酸配列である。
配列番号３は、配列番号２に示し且つ配列番号１に示すポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドの最初のアミノ酸（−２８位）はＶａｌではなくＭｅｔであるべきであることを考慮して配列番号１から推定されるベータ−グルカナーゼのアミノ酸配列である。最初のコドンがｇｔｇである場合、ｇｔｇは通常はＶをコードするがＭｅｔが挿入される。
配列番号４は、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）の系統から単離されたベータ−グルカナーゼのＤＮＡ配列である。
配列番号５は、配列番号４から推定されるベータ−グルカナーゼのアミノ酸配列である。
配列番号６は、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）の系統から単離されたベータ−グルカナーゼのＤＮＡ配列である。
配列番号７は、配列番号６から推定されるベータ−グルカナーゼのアミノ酸配列である。
配列番号８は、バチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）の系統から単離されたベータ−グルカナーゼのＤＮＡ配列である。
配列番号９は、配列番号８から推定されるベータ−グルカナーゼのアミノ酸配列である。
配列番号１０は、ポリペプチド分泌シグナル  バチルスクラウシイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ）である。
配列番号１１は、人工的なＮ末端ポリヒスチジン親和性精製タグ配列である。
配列番号１２は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）（Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ）由来のアルファ−アミラーゼタンパク質配列である。
配列番号１３は、国際公開第９５／１０６０３号パンフレットの配列番号２に対応するポリペプチドである。
配列番号１４は、国際公開第０２／０１０３５５号パンフレットの配列番号６に対応するポリペプチドである。
配列番号１５は、国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号６の残基１〜３３と国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号４の残基３６〜４８３とを含むハイブリッドポリペプチドに対応するポリペプチドである。
配列番号１６は、国際公開第０２／０１９４６７号パンフレットの配列番号６に対応するポリペプチドである。
配列番号１７、配列番号１８および配列番号１９はそれぞれ、国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号１、配列番号２または配列番号７に対応するポリペプチドである。
配列番号２０は、国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２に対応するポリペプチドである。
配列番号２１は、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０に対応するポリペプチドである。
配列番号２２は、国際公開第０９／０６１３８０号パンフレットの配列番号２に対応するポリペプチドである。
配列番号２３は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）由来のアミラーゼタンパク質配列である。
配列番号２４は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）由来のアミラーゼタンパク質配列である。
配列番号２５は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）由来のアミラーゼタンパク質配列である。
配列番号２６は、サイトファガ属の一種（Ｃｙｔｏｐｈａｇａ  ｓｐ．）由来のアミラーゼタンパク質配列である。
配列番号２７は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）由来のアミラーゼタンパク質配列である。
配列番号２８は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）由来のアミラーゼタンパク質配列である。
配列番号２９は、バチルスハルマパラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｈａｌｍａｐａｌｕｓ）由来のアミラーゼタンパク質配列である。
配列番号３０は人工アミラーゼタンパク質配列である。
配列番号３１は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）由来のアミラーゼタンパク質配列である。
配列番号３２は、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼタンパク質配列である。
配列番号３３は、古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のベータ−グルカナーゼタンパク質配列である。
配列番号３４は、バチルスレンツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｌｅｎｔｕｓ）由来のプロテアーゼタンパク質配列である。
配列番号３５は人工プロテアーゼタンパク質配列である。
配列番号３６は人工プロテアーゼタンパク質配列である。
配列番号３７は、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ）−６２４４９由来のＨｉｓタグ付き組換え成熟型ベータ−グルカナーゼタンパク質である。
配列番号３８は、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）由来のＨｉｓタグ付き組換え成熟型ベータ−グルカナーゼタンパク質である。
配列番号３９は、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）由来のＨｉｓタグ付き組換え成熟型ベータ−グルカナーゼタンパク質である。
配列番頭４０は、バチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）由来のＨｉｓタグ付き組換え成熟型ベータ−グルカナーゼタンパク質である。
【００３４】
定義
再付着防止：「再付着防止」または「再付着防止効果」という用語は、生地上への、布地上へのまたは硬質面上への汚染物の再付着の低減または防止を意味する。再付着防止効果を、本明細書の実施例（例えば実施例１４）で説明するＭｉｎｉ−ＬＯＭ洗浄アッセイまたはＭｉｎｉ−ＴＯＭ洗浄アッセイを使用して決定することができる。
【００３５】
相乗効果：「相乗効果」という用語は、前記ポリペプチドの全てを合わせた効果が前記ポリペプチドの個々の酵素効果の合計と比べて大きくなるようなポリペプチドの協同的作用を意味する。相乗効果の非限定的な例として、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアルファ−アミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とのＲＥＭ相乗効果が挙げられる。
【００３６】
ＲＥＭ相乗効果：本明細書において用いられるところ、ポリペプチドのＲＥＭ相乗効果は、任意の適切な洗浄性能方法論（例えばＷａｓｃａｔｏｒボトル洗浄法）を使用して実行される汚れ除去の分析に基づいて測定され得る。ＲＥＭ相乗効果を決定する好ましい方法は本明細書で開示された実施例（例えば実施例７）で開示されている。
【００３７】
ベータ−グルカナーゼ：本明細書において用いられるところ、「ベータ−グルカナーゼ」という用語は、ベータ−グルカン中において２つのグルコシル残基を連結するベータ−１，４−結合の加水分解を触媒するエンドベータ−１，４−グルカナーゼ活性（例えばエンド−１，４−β−Ｄ−グルカナーゼ）を意味する。本明細書で定義されるベータ−グルカナーゼの非限定的な例として、例えばＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結へのエンドセルラーゼ活性を有するセルラーゼ（例えば、ＥＣ３．２．１．４、ならびに（１，３）−結合および（１，４）−結合を含むベータ−Ｄ−グルカン中の（１，４）−ベータ−Ｄ−グルコシド連結を加水分解するリケニナーゼ（またはリケナーゼ）（例えばＥＣ３．２．１．７３）が挙げられる。ベータ−グルカナーゼ（例えばＥＣ３．２．１．４）は、例えば、セルロース中の、リケニン中のおよび穀物ベータ−Ｄ−グルカン中の（１，４）−ベータ−Ｄ−グルコシド連結の内部加水分解を実施し得、１，３−連結を含むベータ−Ｄ−グルカン中の１，４−連結も加水分解する。本発明の目的のために、ベータ−グルカナーゼ活性は、本実施例で説明する手順に従って決定される。本発明の一態様では、本発明のポリペプチドは、配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列を有するポリペプチドのベータ−グルカナーゼ活性の少なくとも２０％、例えば少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または少なくとも１００％を有する。ベータ−グルカナーゼ活性は、基質としてオオムギベータ−グルカンを使用して適切に測定され得る。ベータ−グルカナーゼ活性を決定するための好ましいアッセイが実施例１で開示されている（ＡＺＣＬ−オオムギベータ−グルカンアッセイ）。本明細書で定義されたベータ−グルカナーゼのさらなるサブグループ（リケニナーゼ（またはリケナーゼ）（例えばＥＣ３．２．１．７３）としても既知である）を使用して、ベータ−１，４−グルコシド結合の加水分解を触媒してベータ−グルカンを得ることもできる。リケニナーゼ（またはリケナーゼ）（例えばＥＣ３．２．１．７３）は、（１，３）−結合および（１，４）−結合を含むベータ−Ｄ−グルカン中の（１，４）−ベータ−Ｄ−グルコシド連結を加水分解し、リケニンおよび穀物ベータ−Ｄ−グルカンに作用し得るが、１，３−結合または１，４−結合のみを含むベータ−Ｄ−グルカンには作用し得ない。本明細書において用いられるところ、「ベータ−グルカナーゼ活性」という用語は、リケニナーゼ（またはリケナーゼ）（例えばＥＣ３．２．１．７３）活性を含む。
【００３８】
ベータ−グルカン：本明細書において用いられるところ、「ベータ−グルカン」という用語は、構成成分としてグルコースのみを含み且つグルコース単位がベータ−グリコシド結合により連結されている多糖を意味する。ベータ−グルカンの非限定的な例として、ベータ−Ｄ−グルカン、ベータ−１，３−１，４グルカン、混合連結ベータグルカン、オオムギベータ−グルカン、オートミールベータ−グルカンが挙げられる。
【００３９】
対立遺伝子変異体：「対立遺伝子変異体」という用語は、同一の染色体座を占有する遺伝子の２つ以上の代替的な形態のいずれかを意味する。対立遺伝子変異は突然変異を介して自然に生じ、個体群中に多型性をもたらし得る。遺伝子突然変異はサイレント（コードされるポリペプチドにおける変化無し）であり得る、または改変アミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする場合もある。ポリペプチドの対立遺伝子変異体は、遺伝子の対立遺伝子変異体によりコードされたポリペプチドである。
【００４０】
バイオフィルム：「バイオフィルム」という用語は、細胞が表面（例えば、生地、食器類または硬質面）上で互いに粘着する微生物の任意の群を意味する。この付着細胞は、細胞外ポリマー物質（ＥＰＳ）の自己生成マトリックス内に埋め込まれていることが多い。バイオフィルムＥＰＳは、細胞外ＤＮＡ、タンパク質および多糖で概して構成されているポリマー凝集体である。バイオフィルムは、生きているまたは生きていない表面上で生じ得る。バイオフィルム中で増殖する微生物細胞は、同一の生物の浮遊細胞（対照的に液体培地中で浮遊し得るまたは泳ぎ得る単一細胞）とは生理的に異なる。
【００４１】
バイオフィルム中で生存する細菌は通常、同一種の自由に浮遊する細菌とは顕著に異なる特性を有し、なぜならば、このフィルムの高密度且つ保護された環境により、このフィルム中の細胞が様々な方法で協力することおよび相互作用することが可能になるからである。この環境の１つ効果は洗剤および抗生物質に対する耐性の増加であり、なぜならば、高密度の細胞外マトリックスおよび細胞の外層が群生の内部を保護するからである。
【００４２】
洗濯時にバイオフィルムを生じる細菌を以下の種の中から見出すことができる：アシネトバクターの一種（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．）、アエロミクロビウムの一種（Ａｅｒｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ  ｓｐ．）、ブレブンジモナスの一種（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、ミクロバクテリウムの一種（Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐ．）、ミクロコッカスルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｕｔｅｕｓ）、シュードモナスの一種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、スタフィロコッカスエピデルミデス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）およびステノトロホモナスの一種（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）。
【００４３】
炭水化物結合モジュール：「炭水化物結合モジュール」という用語は、炭水化物結合活性を生じる炭水化物活性酵素内の領域を意味する（Ｂｏｒａｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３８３：７６９−７８１）。既知の炭水化物結合モジュール（ＣＢＭ）の大部分は、別々の折り畳みを有する連続したアミノ酸配列である。炭水化物結合モジュール（ＣＢＭ）は概して、酵素のＮ末端またはＣ末端のいずれかで見出される。いくつかのＣＢＭは、セルロースに対する特異性を有することが知られている。
【００４４】
触媒ドメイン：「触媒ドメイン」という用語は、酵素においてこの酵素の触媒機構を含む領域を意味する。
【００４５】
ｃＤＮＡ：「ｃＤＮＡ」という用語は、真核細胞または原核細胞から得られるスプライシングされた成熟型ｍＲＮＡ分子からの逆転写により調製され得るＤＮＡ分子を意味する。ｃＤＮＡは、対応するゲノムＤＮＡ中に存在し得るイントロン配列を欠いている。初期の一次ＲＮＡ転写物は、スプライシングされた成熟型ｍＲＮＡとして出現する前にスプライシングを含む一連のステップを介して処理されるｍＲＮＡの前駆体である。
【００４６】
セルロース分解酵素またはセルラーゼ：「セルロース分解酵素」または「セルラーゼ」という用語は、セルロース系材料を加水分解する１種または複数種（例えば数種の）酵素を意味する。そのような酵素として、エンドグルカナーゼ（例えばＥＣ３．２．１．４）、セロビオヒドロラーゼ、ベータ−グルコシダーゼまたはそれらの組み合わせが挙げられる。セルロース分解酵素活性を測定するための２つの基本的なアプローチとして、（１）総セルロース分解酵素活性を測定すること、および（２）Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ２４：４５２−４８１で概説されているように、個々のセルロース分解酵素活性（エンドグルカナーゼ、セロビオヒドロラーゼおよびベータ−グルコシダーゼ）を測定することが挙げられる。総セルロース分解酵素活性を、不溶性基材（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ  Ｎｏ．１ろ紙、微結晶性セルロース、細菌セルロース、藻類セルロース、綿、前処理されたリグノセルロース等）を使用して測定することができる。最も一般的な総セルロース分解活性アッセイは、基材としてＷｈａｔｍａｎ  Ｎｏ．１ろ紙を使用するろ紙アッセイである。このアッセイは、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｕｎｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｕｒｅ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（ＩＵＰＡＣ）により確立された（Ｇｈｏｓｅ，１９８７，Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．５９：２５７−６８）。
【００４７】
セルロース分解酵素活性は、セルロース分解酵素タンパク質が添加されていないコントロール加水分解と比較した、以下の条件下でのセルロース分解酵素によるセルロース系材料の加水分解中での糖の生成／放出の増加の測定により決定され得る：好適な温度（例えば４０〜８０℃、例えば５０℃、５５℃、６０℃、６５℃または７０℃）および好適なｐＨ（例えば４〜９、例えば５．０、５．５、６．０、６．５または７．０）での３〜７日にわたるセルロース分解酵素タンパク質１〜５０ｍｇ／前処理されたトウモロコシ茎葉（ＰＣＳ）（または他の前処理されたセルロース系材料）中のセルロース１ｇ。典型的な条件は以下である：反応物質１ｍｌ、洗浄済みまたは未洗浄のＰＣＳ、５％の不溶性固体（乾燥重量）、５０ｍＭの酢酸ナトリウムｐＨ５、１ｍＭのＭｎＳＯ４、５０℃、５５℃または６０℃、７２時間、ＡＭＩＮＥＸ（登録商標）ＨＰＸ−８７Ｈカラム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）による糖分析。
【００４８】
セルロース系材料：「セルロース系材料」という用語は、セルロースを含むあらゆる材料を意味する。バイオマスの一次細胞壁中の主な多糖はセルロースであり、２番目に豊富なのはヘミセルロースであり、３番目はペクチンである。二次細胞壁（細胞が成長を停止した後に生成される）も多糖を含み、ヘミセルロースに共有結合的に架橋された高分子リグニンにより強化される。セルロースは無水セロビオースのホモポリマーであり、そのため直鎖状のベータ−（１−４）−Ｄ−グルカンであるが、ヘミセルロースは、一連の置換基を有する複雑な分枝構造中に様々な化合物（例えば、キシラン、キシログルカン、アラビノキシランおよびマンナン）を含む。一般に多形性であるが、セルロースは、主に平行なグルカン鎖の不溶性結晶マトリックスとして植物組織中で見出される。ヘミセルロースは通常、細胞壁マトリックスの安定化を促進する他のヘミセルロースと同様にセルロースに水素結合する。
【００４９】
セルロースは概して、例えば、植物の茎、葉、外皮、殻および穂軸、または木の葉、枝および木部で見出される。セルロース系材料は以下であり得るがこれらに限定されない：農業残渣、草本材料（エネルギー作物を含む）、都市固形廃棄物、パルプおよび製紙工場残渣、紙くず、ならびに木材（林業残渣を含む）（例えば、Ｗｉｓｅｌｏｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，ｉｎ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｎ  Ｂｉｏｅｔｈａｎｏｌ（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｅ．Ｗｙｍａｎ，ｅｄｉｔｏｒ），ｐｐ．１０５−１１８，Ｔａｙｌｏｒ  ＆  Ｆｒａｎｃｉｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．；Ｗｙｍａｎ，１９９４，Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ５０：３−１６；Ｌｙｎｄ，１９９０，Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２４／２５：６９５−７１９；Ｍｏｓｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｒｅｃｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｉｇｎｏｃｅｌｌｕｌｏｓｉｃｓ，ｉｎ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ／Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｔ．Ｓｃｈｅｐｅｒ，ｍａｎａｇｉｎｇ  ｅｄｉｔｏｒ，Ｖｏｌｕｍｅ  ６５，ｐｐ．２３−４０，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい）。本明細書では、セルロースは、混合マトリックスでリグニン、セルロースおよびヘミセルロースを含む植物細胞壁材料であるリグノセルロースの形態で存在し得ることが理解される。一態様では、セルロース系材料は任意のバイオマス材料である。別の態様では、セルロース系材料はリグノセルロースであり、このリグノセルロースは、セルロース、ヘミセルロースおよびリグニンを含む。
【００５０】
ある実施形態では、セルロース系材料は、農業残渣、草本材料（エネルギー作物を含む）、都市固形廃棄物、パルプおよび製紙工場残渣、紙くず、または木材（林業残渣を含む）である。
【００５１】
別の実施形態では、セルロース系材料は、アルンド、バガス、竹、トウモロコシ、トウモロコシの穂軸、トウモロコシ繊維、トウモロコシ茎葉、ススキ、稲わら、スイッチグラスまたは麦わらである。
【００５２】
別の実施形態では、セルロース系材料は、アスペン、ユーカリ、モミ、マツ、ポプラ、トウヒまたはヤナギである。
【００５３】
別の実施形態では、セルロース系材料は、藻類セルロース、細菌セルロース、コットンリンター、ろ紙、微結晶性セルロース（例えばＡＶＩＣＥＬ（登録商標））またはリン酸処理セルロースである。
【００５４】
別の実施形態では、セルロース系材料は水生バイオマスである。本明細書において用いられるところ、「水性バイオマス」という用語は、光合成プロセスにより水生環境中で生成されるバイオマスを意味する。この水生バイオマスは、藻類、抽水植物、浮葉植物または沈水植物であり得る。
【００５５】
セルロース系材料を、本明細書で説明されているように、当分野で既知の従来の方法を使用して、そのまま使用してもよいし前処理してもよい。好ましい態様では、セルロース系材料を前処理する。
【００５６】
コード配列：「コード配列」という用語は、ポリペプチドのアミノ酸配列を直接的に特定するポリヌクレオチドを意味する。コード配列の境界は概して、オープンリーディングフレームにより判定され、このオープンリーディングフレームは開始コドン（例えば、ＡＴＧ、ＧＴＧまたはＴＴＧ）で始まり停止コドン（例えば、ＴＡＡ、ＴＡＧまたはＴＧＡ）で終わる。コード配列は、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、合成ＤＮＡまたはこれらの組み合わせであり得る。
【００５７】
制御配列：「制御配列」という用語は、本発明の成熟型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現に必要な核酸配列を意味する。各制御配列は、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに対して在来（即ち、同一遺伝子由来）であってもよいし外来（即ち、別の遺伝子由来）であってもよい、または互いに在来であってもよいし外来であってもよい。そのような制御配列として、リーダー、ポリアデニル化配列、プロペプチド配列、プロモータ、シグナルペプチド配列および転写ターミネータが挙げられるがこれらに限定されない。少なくとも、制御配列はプロモータならびに転写停止シグナルおよび翻訳停止シグナルを含む。制御配列は、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドのコード領域との制御配列のライゲーションを促進する特定の制限部位を導入する目的のためにリンカーを備える場合がある。
【００５８】
洗剤成分：「洗剤成分」という用語は、本明細書では、洗剤組成物で使用され得るタイプの化学物質を意味すると定義される。洗剤成分の例は、界面活性剤、ヒドロトロープ、ビルダー、共ビルダー、キレート剤またはキレート化剤、漂白系または漂白成分、ポリマー、布地色調剤、布地コンディショナ、起泡増進剤、セッケン泡抑制剤、分散剤、移染防止剤、蛍光性白色化剤、芳香剤、光学増白剤、殺菌剤、殺菌・殺カビ剤、汚染物懸濁剤、汚染物遊離ポリマー、再汚染防止剤、酵素の抑制剤または安定化剤、酵素活性化剤、酸化防止剤および溶解剤である。洗剤組成物は、あらゆるタイプの洗剤成分のうちの１種または複数種を含むことができる。
【００５９】
洗剤組成物：「洗剤組成物」という用語は、きれいにすべき物品（例えば、生地、食器および硬質面）からの望ましくない化合物の除去での使用を見出す組成物を指す。洗剤組成物を使用して、例えば、家庭でのクリーニングおよび産業でのクリーニングの両方のために生地、食器および硬質面をきれいにすることができる。この用語は、所望される特定のタイプのクリーニング組成物および製品の形態（例えば、液体、ゲル、粉末、顆粒、ペーストまたはスプレー組成物）のために選択されるあらゆる材料／化合物を包含し、洗剤組成物（例えば、液体および／または固体の洗濯洗剤、および目の細かい布地用洗剤；例えばガラス、木材、プラスチック、セラミックならびに金属製のカウンタートップおよび窓用の、硬質面クリーニング配合物；カーペットクリーナー；オーブンクリーナー；布地フレッシュナー；布地柔軟剤；ならびに生地および洗濯の予備染み抜き、ならびに食器用洗剤）が挙げられるがこれらに限定されない。本発明のＧＨ１６ベータ−グルカナーゼの含有に加えて、洗剤配合物は、１種または複数種の追加の酵素（例えば、アミラーゼ、プロテアーゼ、ペルオキシダーゼ、セルラーゼ、ベータグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ヘミセルラーゼ、キサンタナーゼ、キサンタンリアーゼ、リパーゼ、アシルトランスフェラーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、ラッカーゼ、カタラーゼ、アリールエステラーゼ、アミラーゼ、アルファ−アミラーゼ、グルコアミラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、カラゲナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、キシログルカナーゼ、キシラナーゼ、ペクチンアセチルエステラーゼ、ポリガラクツロナーゼ、ラムノガラクツロナーゼ、他のエンド−ベータ−マンナナーゼ、エキソ−ベータ−マンナナーゼ、ペクチンメチルエステラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、トランスグルタミナーゼおよびそれらの組み合わせもしくはそれらの任意の混合物）、ならびに／または成分、例えば界面活性剤、ビルダー、キレート剤もしくはキレート化剤、漂白系もしくは漂白成分、ポリマー、布地コンディショナ、起泡増進剤、セッケン泡抑制剤、染料、芳香剤、変色防止剤（ｔａｎｎｉｓｈ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）、光学増白剤、殺菌剤、殺菌・殺カビ剤、汚染物懸濁剤、腐食防止剤、酵素の抑制剤もしくは安定化剤、酵素活性化剤、転移酵素、加水分解酵素、酸化還元酵素、青み付け剤および蛍光性染料、酸化防止剤および溶解剤を含むことができる。
【００６０】
食器洗浄：「食器洗浄」という用語は、例えば手動食器洗浄（ＨＤＷ）または自動食器洗浄（ＡＤＷ）による食器洗浄の全ての形態を指す。食器の洗浄として、陶器の全ての形態（例えばプレート、カップ、グラス、ボウル）、カトラリーの全ての形態（例えばスプーン、ナイフ、フォークおよび給仕用具）ならびにセラミック、プラスチック、金属、磁器、ガラスおよびアクリルのクリーニングが挙げられるがこれに限定されない。
【００６１】
食器洗浄用組成物：「食器洗浄用組成物」という用語は、硬質面をクリーニングするための組成物の全ての形態を指す。本発明は、任意の特定のタイプの食器洗浄用組成物または任意の特定の洗剤に限定されない。
【００６２】
発現：「発現」という用語は、転写、転写後修飾、翻訳、翻訳後修飾および分泌が挙げられるがこれらに限定されない、ポリペプチドの産生に関与するあらゆるステップを含む。
【００６３】
発現ベクター：「発現ベクター」という用語は、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み且つこのポリペプチドの発現をもたらす制御配列に作動可能にリンクされている直鎖状または環状のＤＮＡ分子を意味する。
【００６４】
断片：「断片」という用語は、成熟型ポリペプチドまたはドメインのアミノ末端および／またはカルボキシル末端から１つまたは複数の（例えばいくつかの）アミノ酸が欠失しているポリペプチドまたは触媒モジュールもしくは炭水化物結合モジュールを意味し、この断片はベータ−グルカナーゼ活性または炭水化物結合活性を有する。一態様では、断片は、少なくとも３４０個のアミノ酸残基もしくは少なくとも２３０個のアミノ酸残基を含み、または少なくとも２１０個のアミノ酸残基もしくは少なくとも２００個のアミノ酸残基を含み、または少なくとも１８０個のアミノ酸残基を含み、この断片はベータ−グルカナーゼ活性を有する。
【００６５】
硬質面クリーニング：「硬質面クリーニング」という用語は、本明細書では硬質面のクリーニングとして定義され、硬質面として、床、テーブル、壁、屋根等ならびに車等の硬質物体の表面（車洗浄）および食器（食器洗浄）を挙げることができる。食器洗浄として、プレート、カップ、グラス、ボウルおよびカトラリー（例えばスプーン、ナイフ、フォーク、給仕用具）、セラミック、プラスチック、金属、磁器、ガラスおよびアクリルのクリーニングが挙げられるがこれらに限定されない。
【００６６】
ヘミセルロース分解酵素またはヘミセルラーゼ：「ヘミセルロース分解酵素」または「ヘミセルラーゼ」という用語は、ヘミセルロース系材料を加水分解する１種または複数種の（例えば数種の）酵素を意味する。例えばＳｈａｌｌｏｍ  ａｎｄ  Ｓｈｏｈａｍ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，６（３）：２１９−２２８）を参照されたい。ヘミセルラーゼは植物バイオマスの分解で重要な成分である。ヘミセルラーゼの例として、アセチルマンナンエステラーゼ、アセチルキシランエステラーゼ、アラビナナーゼ、アラビノフラノシダーゼ、クマル酸エステラーゼ、フェルロイルエステラーゼ、ガラクトシダーゼ、グルクロニダーゼ、グルクロノイルエステラーゼ、マンナナーゼ、マンノシダーゼ、キシラナーゼおよびキシロシダーゼが挙げられるがこれらに限定されない。これらの酵素の基質であるヘミセルロースは、水素結合を介して植物細胞壁中のセルロースミクロフィブリルに結合して、このセルロースミクロフィブリルを頑強なネットワークに架橋する、分枝したおよび直鎖の多糖の異種群である。ヘミセルロースはまた、リグニンにも共有結合的に付着しており、セルロースと共に非常に複雑な構造を形成する。ヘミセルロースの可変構造および構成により、このヘミセルロースの完全な分解には多くの酵素の協奏的作用が必要である。ヘミセルラーゼの触媒モジュールは、グリコシド結合を加水分解するグリコシドヒドロラーゼ（ＧＨ）またはアセテート側基もしくはフェルラ酸側基のエステル連結を加水分解する炭水化物エステラーゼ（ＣＥ）のいずれかである。この触媒モジュールを、この触媒モジュールの一次配列の相同性に基づいて、ＧＨファミリおよびＣＥファミリに割り当てることができる。全体として同様の折り畳みを有するいくつかのファミリを、アルファベット順に示された一族にさらに分類することができる（例えばＧＨ−Ａ）。これらのおよび他の炭水化物活性酵素の最も有益で最新の分類は、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−Ａｃｔｉｖｅ  Ｅｎｚｙｍｅｓ（ＣＡＺｙ）データベースで利用可能である。ヘミセルロース分解酵素活性を、好適な温度（例えば４０℃〜８０℃、例えば５０℃、５５℃、６０℃、６５℃または７０℃）および好適なｐＨ（例えば４〜９、例えば５．０、５．５、６．０、６．５または７．０）にて、Ｇｈｏｓｅ  ａｎｄ  Ｂｉｓａｒｉａ，１９８７，Ｐｕｒｅ  ＆  ＡｐｐＩ．Ｃｈｅｍ．５９：１７３９−１７５２に従って測定することができる。
【００６７】
宿主細胞：「宿主細胞」という用語は、本発明のポリヌクレオチドを含む核酸構築物または発現ベクターによる形質転換、形質移入、形質導入等を受けやすいあらゆる細胞タイプを意味する。「宿主細胞」という用語は、複製の最中に生じる突然変異に起因して親細胞と同一ではない親細胞のあらゆる子孫、ならびに組換え宿主細胞、単離宿主細胞（例えば、単離された組換え宿主細胞）、ヒト胚性幹細胞ではない単離宿主細胞を包含する。本発明の好ましい実施形態では、組換え宿主細胞は、異種組換え宿主細胞（例えば、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）ｓｐ−６２４４９宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）宿主細胞ではない宿主細胞）である。
【００６８】
単離された：「単離された」という用語は、自然界においては生じない形態または環境にある物質を意味する。単離された物質の非限定的な例としては、（１）いずれかの非天然物質、（２）特にこれらに限定されないが、自然界において関連している天然構成成分の１種または複数種もしくは全てが少なくとも部分的に除去されたいずれかの酵素、変異体、核酸、タンパク質、ペプチドもしくは補助因子を含むいずれかの物質；（３）自然界において見出される物質と相対的に人工的に修飾されたいずれかの物質；または、（４）自然界においては関連している他の成分に対する物質の量を増やすことにより修飾されたいずれかの物質（例えば、宿主中の組換え生成；物質をコードする遺伝子の複数のコピー；および物質をコードする遺伝子と自然界で関連しているプロモータより強力なプロモータの使用）が挙げられる。本発明のポリヌクレオチドを発現する組換え宿主細胞を培養することにより生成される発酵ブロスは、本発明のポリペプチドを単離形態で含む。
【００６９】
洗濯：「洗濯」という用語は、家庭での洗濯および産業での洗濯の両方に関し、本発明のクリーニング組成物または洗剤組成物を含む溶液で生地を処理するプロセスを意味する。この洗濯プロセスを、例えば家庭用もしくは産業用の洗濯機を使用して実行することができる、また手を使って実行することができる。
【００７０】
リケナーゼ活性：「リケナーゼ活性」という用語は、ベータ−１，３−グルカン、ベータ１，４−グルカン（例えばＥＣ３．２．１．７３）を加水分解する酵素を意味する。
【００７１】
成熟型ポリペプチド：「成熟型ポリペプチド」という用語は、翻訳および任意の翻訳後修飾（例えばＮ末端プロセシング、Ｃ末端トランケーション、グリコシル化、リン酸化等）の後の最終形態のポリペプチドを意味する。一態様では、成熟型ポリペプチドは、配列番号７のアミノ酸１〜２２２、配列番号２のアミノ酸１〜３５１、配列番号３のアミノ酸１〜３５１、配列番号５のアミノ酸１〜２４５、配列番号９のアミノ酸１〜２１４からなる群から選択される。配列番号２のアミノ酸−２８〜−１はシグナルペプチドである。配列番号３のアミノ酸−２８〜−１はシグナルペプチドである。配列番号５のアミノ酸−３１〜−１はシグナルペプチドである。配列番号７のアミノ酸−１５〜−１はシグナルペプチドである。配列番号９のアミノ酸−２９〜−１はシグナルペプチドである。
【００７２】
当分野では、同一のポリヌクレオチドにより発現される２種以上の異なる成熟型ポリペプチド（即ち、Ｃ末端および／またはＮ末端のアミノ酸が異なる）の混合物を宿主細胞が産生し得ることが知られている。当分野では、宿主細胞が異なるとポリペプチドのプロセシングも異なり、そのため、ポリヌクレオチドを発現するある宿主細胞が同一のポリヌクレオチドを発現する別の宿主細胞と比較して異なる成熟型ポリペプチド（例えば、Ｃ末端および／またはＮ末端のアミノ酸が異なる）を産生する場合があることも知られている。
【００７３】
成熟型ポリペプチドコード配列：「成熟型ポリペプチドコード配列」という用語は、ベータ−グルカナーゼ活性を有する成熟型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを意味する。一態様では、成熟型ポリペプチドコード配列は、配列番号１のヌクレオチド８５〜１１３７、配列番号４のヌクレオチド９４〜８２８、配列番号６のヌクレオチド４６〜７１１、配列番号８のヌクレオチド８８〜７２９からなる群から選択される。配列番号１のヌクレオチド１〜８４はシグナルペプチドをコードする。配列番号４のヌクレオチド１〜９３はシグナルペプチドをコードする。配列番号６のヌクレオチド１〜４５はシグナルペプチドをコードする。配列番号８のヌクレオチド１〜８７はシグナルペプチドをコードする。
【００７４】
悪臭：「悪臭」という用語は、きれいな物品には望ましくは臭いを意味する。きれいになった物品は、この物品に悪臭が付着することなく新鮮でクリーンな臭いがするはずである。悪臭の一例は不快な匂いを有する化合物であり、この化合物は微生物により産生され得る。別の例は、ヒトまたは動物と接触している物品に付着する汗または体臭である。悪臭の別の例は、香辛料（例えばカレー）からの匂い、または生地のきれ等の物品に付着する他のエキゾチックなスパイスであり得る。物品の悪臭を付着させる能力を測定する１つの方法はＭａｌｏｄｏｒ  Ａｓｓａｙの使用である。
【００７５】
核酸構築物：「核酸構築物」という用語は、自然界に存在する遺伝子から単離されている、または自然界には存在しないであろう様式で核酸のセグメントを含むように修飾されている、または合成である、１つもしくは複数の制御配列を含む核酸分子（一本鎖または二本鎖のいずれか）を意味する。
【００７６】
作動可能にリンク：「作動可能にリンクされた」という用語は、制御配列がポリヌクレオチドのコード配列を発現させるように、このコード配列と相対的に好適な位置に制御配列が位置する構造を意味する。
【００７７】
前処理されたトウモロコシ茎葉：「前処理されたトウモロコシ茎葉」または「ＰＣＳ」という用語は、熱および希硫酸、アルカリ性前処理、中性前処理または当分野で既知の任意の前処理による処理によってトウモロコシ茎葉から得られるセルロース系材料を意味する。
【００７８】
配列同一性：２つのアミノ酸配列間または２つのヌクレオチド配列間の関連性が、「配列同一性」というパラメータによって記載される。本発明の目的のために、２つのアミノ酸配列間の配列同一性は、好ましくはバージョン５．０．０以降のＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ：Ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｏｐｅｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｇｅｎｅｔ．１６：２７６−２７７）のＮｅｅｄｌｅプログラムにおいて実装されている、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ−Ｗｕｎｓｃｈアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３−４５３）を用いて判定される。用いられるパラメータは、１０のギャップオープンペナルティ、０．５のギャップエクステンションペナルティおよびＥＢＬＯＳＵＭ６２（ＢＬＯＳＵＭ６２のＥＭＢＯＳＳボージョン）置換マトリックスである。Ｎｅｅｄｌｅ標識された「最長の同一性」（−ｎｏｂｒｉｅｆオプションを用いて得られる）の出力が同一性割合として用いられ、以下のとおり算出される。
（同等の残基×１００）／（アラインメントの長さ−アラインメント中のギャップの総数）
【００７９】
本発明の目的のために、２つのデオキシリボヌクレオチド配列間の配列同一性は、好ましくはバージョン５．０．０以降のＥＭＢＯＳＳパッケージ（前述のＥＭＢＯＳＳ：Ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｏｐｅｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００）のＮｅｅｄｌｅプログラムにおいて実装されている、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ−Ｗｕｎｓｃｈアルゴリズム（前述のＮｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０）を用いて判定される。用いられるパラメータは、１０のギャップオープンペナルティ、０．５のギャップエクステンションペナルティおよびＥＤＮＡＦＵＬＬ（ＮＣＢＩ  ＮＵＣ４．４のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換マトリックスである。Ｎｅｅｄｌｅ標識された「最長の同一性」（−ｎｏｂｒｉｅｆオプションを用いて得られる）の出力が同一性割合として用いられ、以下のとおり算出される。
（同等のデオキシリボヌクレオチド×１００）／（アラインメントの長さ−アラ
インメント中のギャップの総数）
【００８０】
緊縮条件：様々な緊縮条件を以下のとおりに定義する。
【００８１】
「きわめて低度の緊縮条件」という用語は、少なくとも１００個のヌクレオチドの長さのプローブの場合、１２〜２４時間にわたる標準的なサザンブロッティング法の後での、５×ＳＳＰＥ、０．３％ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの剪断済および変性済のサケ精子ＤＮＡならびに２５％ホルムアミド中における４２℃でのプレハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーションを意味する。最後に、キャリア材料を、６０℃にて１．６×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳを使用して１５分間ずつ３回洗浄する。
【００８２】
「低度の緊縮条件」という用語は、少なくとも１００個のヌクレオチドの長さのプローブの場合、１２〜２４時間にわたる標準的なサザンブロッティング法の後での、５×ＳＳＰＥ、０．３％ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの剪断済および変性済のサケ精子ＤＮＡならびに２５％ホルムアミド中における４２℃でのプレハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーションを意味する。最後に、キャリア材料を、６０℃にて０．８×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳを使用して１５分間ずつ３回洗浄する。
【００８３】
「中度の緊縮条件」という用語は、少なくとも１００個のヌクレオチドの長さのプローブの場合、１２〜２４時間にわたる標準的なサザンブロッティング法の後での、５×ＳＳＰＥ、０．３％ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの剪断済および変性済のサケ精子ＤＮＡならびに３５％ホルムアミド中における４２℃でのプレハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーションを意味する。最後に、キャリア材料を、６５℃にて０．８×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳを使用して１５分間ずつ３回洗浄する。
【００８４】
「中度〜高度の緊縮条件」という用語は、少なくとも１００個のヌクレオチドの長さのプローブの場合、１２〜２４時間にわたる標準的なサザンブロッティング法の後での、５×ＳＳＰＥ、０．３％ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの剪断済および変性済のサケ精子ＤＮＡならびに３５％ホルムアミド中における４２℃でのプレハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーションを意味する。最後に、キャリア材料を、６５℃にて０．４×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳを使用して１５分間ずつ３回洗浄する。
【００８５】
「高度の緊縮条件」という用語は、少なくとも１００個のヌクレオチドの長さのプローブの場合、１２〜２４時間にわたる標準的なサザンブロッティング法の後での、５×ＳＳＰＥ、０．３％ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの剪断済および変性済のサケ精子ＤＮＡならびに５０％ホルムアミド中における４２℃でのプレハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーションを意味する。最後に、キャリア材料を、６５℃にて０．２×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳを使用して１５分間ずつ３回洗浄する。
【００８６】
「きわめて高度の緊縮条件」という用語は、少なくとも１００個のヌクレオチドの長さのプローブの場合、１２〜２４時間にわたる標準的なサザンブロッティング法の後での、５×ＳＳＰＥ、０．３％ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの剪断済および変性済のサケ精子ＤＮＡならびに５０％ホルムアミド中における４２℃でのプレハイブリダイゼーションおよびハイブリダイゼーションを意味する。最後に、キャリア材料を、７０℃にて０．２×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳを使用して１５分間ずつ３回洗浄する。
【００８７】
サブ配列：「サブ配列」という用語は、成熟型ポリペプチドコード配列の５’および／または３’末端から欠失された１つまたは複数（例えば、いくつか）のヌクレオチドを有するポリヌクレオチドを意味し；ここで、サブ配列は、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片をコードする。一態様では、サブ配列は、配列番号１の少なくとも１０５２個のヌクレオチドもしくはそのｃＤＮＡ配列、配列番号１の少なくとも１０３７個のヌクレオチドもしくはそのｃＤＮＡ配列、または配列番号１の１０２２個のヌクレオチドもしくはそのｃＤＮＡ配列）を含む。
【００８８】
生地：「生地」という用語は、あらゆる生地材料（例えば、ヤーン、ヤーン中間物、繊維、不織材料、天然材料、合成材料およびあらゆる他の生地材料）、これらの材料で作られた布地、ならびに布地から作られた製品（例えば衣類および他の物品）を意味する。生地または布地は、ニット、織物、デニム、不織布、フェルト、ヤーンおよびタオルの形態であることができる。生地はセルロースベースであり得、例えば、天然セルロース、例えば綿、亜麻／リネン、ジュート、カラムシ、サイザル麻、またはコイア、または人造セルロース（例えば木材パルプに由来する）、例えばビスコース／レーヨン、カラムシ、酢酸セルロース繊維（トライセル（ｔｒｉｃｅｌｌ））、リヨセルまたはそれらのブレンドであり得る。生地または布地はまた、非セルロースベースでもあり得、例えば、天然ポリアミド、例えばウール、キャメル、カシミヤ、モヘア、ウサギおよび絹、または合成ポリマー、例えばナイロン、アラミド、ポリエステル、アクリル、ポリプロピレンおよびスパンデックス／エラスタン、またはそれらのブレンド、ならびにセルロースベースの繊維と非セルロースベースの繊維とのブレンドであり得る。ブレンドの例は、綿および／またはレーヨン／ビスコースと、１種または複数種の相手の材料、例えばウール、合成繊維（例えば、ポリアミド繊維、アクリル繊維、ポリエステル繊維、ポリビニルアルコール繊維、ポリ塩化ビニル繊維、ポリウレタン繊維、ポリウレア繊維、アラミド繊維）およびセルロース含有繊維（例えば、レーヨン／ビスコース、カラムシ、亜麻／リネン、ジュート、酢酸セルロース繊維、リヨセル）とのブレンドである。布地は従来の洗える洗濯物であり得、例えば家庭での汚れた洗濯物であり得る。布地または衣類という用語が使用される場合、より広い用語である生地を同様に含むことが意図されている。
【００８９】
変異体：「変異体」という用語は、１種または複数種（いくつか）のアミノ酸残基の改変（すなわち、置換、挿入および／または欠失）を１つまたは複数（いくつか）の位置で含むベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを意味する。置換とは、ある位置のアミノ酸の異なるアミノ酸による置き換えを意味し；欠失とは、ある位置のアミノ酸の除去を意味し；および、挿入とは、ある位置のアミノ酸に隣接して１〜３個のアミノ酸を付加することを意味する。本発明の変異体は、配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列のポリペプチドまたは配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドのベータ−グルカナーゼ活性の少なくとも２０％を有し、例えば、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または少なくとも１００％を有する。
【００９０】
野生型ベータ−グルカナーゼ：「野生型」ベータ−グルカナーゼという用語は、自然界に存在する微生物（例えば、自然界で見出される細菌、イースト菌または糸状真菌）により発現されるベータ−グルカナーゼを意味する。
【００９１】
洗浄性能：「洗浄性能」という用語は、本明細書では、１種もしくは複数種の酵素が存在しない場合の洗浄性能と比較して、例えば洗浄または硬質面クリーニングの最中に酵素または酵素のブレンドの、きれいにすべき物体上に存在する汚れを除去する能力として定義される。
【発明を実施するための形態】
【００９２】
ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチド
本発明は、汚れの除去で利点を有し且つクリーニングもしくは洗剤の用途で使用され得るまたはプロセス（例えば、硬質面のクリーニング、食器洗浄および洗濯）に使用され得るクリーニング組成物または洗剤組成物のための新規のベータ−グルカナーゼと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）との使用を提供する。本発明はまた、アミラーゼの存在下で洗剤配合物中において安定な洗剤であるベータ−グルカナーゼの使用も提供する。本発明のベータ−グルカナーゼは、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）との相乗効果を示すことができる（例えば、ＲＥＭ相乗効果を決定する好ましい方法は、本明細書で開示されている実施例（例えば実施例７）で開示されている）。
【００９３】
ある実施形態では、本発明は、クリーニング組成物または洗剤組成物であって、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドであり、ベータ−グルカナーゼ活性を有する配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有するポリペプチドと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）であり、好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドと前記１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とが相乗効果を有する、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含み、さらに好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性は、セルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではない、クリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００９４】
ある実施形態では、本発明は、ベータ−グルカナーゼ活性を有する配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有するポリペプチドに関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【００９５】
一態様では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドと最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なる。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【００９６】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８１％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【００９７】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８１％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【００９８】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８２％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【００９９】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８２％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１００】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８３％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１０１】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８３％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１０２】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８４％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１０３】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８４％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１０４】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８５％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１０５】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８５％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１０６】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８６％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１０７】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８６％の同一性を有するベータグルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１０８】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８７％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１０９】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８７％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１１０】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８８％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１１１】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８８％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１１２】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８９％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１１３】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８９％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１１４】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９０％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１１５】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９０％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１１６】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９１％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１１７】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９１％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１１８】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９２％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１１９】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９２％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１２０】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９３％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１２１】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９３％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１２２】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９４％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１２３】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９４％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１２４】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９５％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１２５】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９５％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１２６】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９６％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１２７】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９６％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１２８】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９７％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１２９】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９７％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１３０】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９８％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１３１】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９８％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１３２】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９９％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１３３】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９９％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１３４】
ある実施形態では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して１００％の同一性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１３５】
一実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して１００％の同一性を有するベータ−グルカナーゼと、１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物に関する。
【０１３６】
別の実施形態では、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドならびに１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくはプロテアーゼ）は相乗効果を有し、好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はセルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではない。
【０１３７】
別の実施形態では、ＲＥＭ相乗効果は、例えば、４０℃、３０分（ｐＨ７．７）でのモデル洗剤Ａ１におけるＷａｓｃａｔｏｒボトル洗浄において、または４０℃、３０分（ｐＨ１０．１）でのモデル洗剤Ｘ１におけるＷａｓｃａｔｏｒボトル洗浄において、または４０℃、３０分（ｐＨ１０．２）でのＡＤＷモデル洗剤Ａ１におけるＷａｓｃａｔｏｒボトル洗浄において（例えば実施例７を参照されたい）、約７．０（または７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５）のｐＨにて約３０分（または１５分、２０分、２５分、３５分、４０分）にわたり約４０℃（または３５℃、４５℃、５０℃、５５℃、６０℃）で１．４超（例えば、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９または９．０）である。
【０１３８】
別の実施形態では、本発明のポリペプチドのｐＨ最適条件は約６〜約９の範囲で選択される。別の実施形態では、本発明のポリペプチドのｐＨ最適条件は、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９からなる群から選択される。別の実施形態では、本発明のポリペプチドのｐＨ最適条件は、少なくとも６（または少なくとも６．５、または少なくとも７、または少なくとも７．５、または少なくとも８、または少なくとも８．５、または少なくとも９）である。別の実施形態では、本発明のポリペプチドのｐＨ最適条件は、６超（または６．５超、または７超、または７．５超、または８超、または８．５超、または９超）である。
【０１３９】
別の実施形態では、本発明のポリペプチドのｐＨ最適条件は約６〜約９の範囲で選択され、前記ポリペプチドは、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｉｔｉｌｉｓ）由来のまたはバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼと比較して２３〜９０％の範囲で顕著に高い、ｐＨ１０での相対活性を有する。別の実施形態では、本発明のポリペプチドのｐＨ最適条件は、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９からなる群から選択され、前記ポリペプチドは、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｉｔｉｌｉｓ）由来のまたはバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼと比較して２３〜９０％の範囲で顕著に高い、ｐＨ１０での相対活性を有する。別の実施形態では、本発明のポリペプチドのｐＨ最適条件は少なくとも６（または少なくとも６．５、または少なくとも７、または少なくとも７．５、または少なくとも８、または少なくとも８．５、または少なくとも９）であり、前記ポリペプチドは、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｉｔｉｌｉｓ）由来のまたはバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼと比較して２３〜９０％の範囲で顕著に高い、ｐＨ１０での相対活性を有する。別の実施形態では、本発明のポリペプチドのｐＨ最適条件は６超（または６．５超、または７超、または７．５超、または８超、または８．５超、または９超）であり、前記ポリペプチドは、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｉｔｉｌｉｓ）由来のまたはバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼと比較して２３〜９０％の範囲で顕著に高い、ｐＨ１０での相対活性を有する。
【０１４０】
一態様では、本ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列のポリペプチドと３０個以下のアミノ酸（例えば、２５個のアミノ酸、２０個のアミノ酸、１５個のアミノ酸、１２個のアミノ酸、１０個のアミノ酸、９個のアミノ酸、８個のアミノ酸、７個のアミノ酸、６個のアミノ酸、５個のアミノ酸、４個のアミノ酸、３個のアミノ酸、２個のアミノ酸および１個のアミノ酸）が異なる。ある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１４１】
ある実施形態では、本ポリペプチドは単離されている。本発明のポリペプチドは好ましくは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９もしくはそれらの対立遺伝子変異体からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、もしくはからなる、またはそれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。別の態様では、このポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドを含む、またはからなる。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１４２】
別の態様では、本ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸アミノ酸１〜３５１、配列番号３のアミノ酸１〜３５１、配列番号５のアミノ酸１〜２４５、配列番号７のアミノ酸１〜２２２、配列番号９のアミノ酸１〜２１４を含む、またはからなる。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１４３】
別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは、セルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結への活性を有するエンドセルラーゼではない。別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは、β−１，３β−１，４グルカンへの活性を有するリケニナーゼ（ＥＣ３．２．１．７３）酵素活性を有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１４４】
別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼはアルカリ性ベータ−グルカナーゼ活性（例えば、ｐＨ７．５以上での水溶液中におけるベータ−グルカナーゼ活性、例えば、７．５、８、９、１０、１１、１２、１３、１３．５からなる群から選択されるｐＨでのベータ−グルカナーゼ活性、例えば、約７．５〜約１３．５の範囲のｐＨでのベータ−グルカナーゼ活性、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲で選択され、さらに好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択される）を含む。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１４５】
別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは、
ｉ）ｐＨが約７．５〜約１３．５の範囲で選択される水溶液中で少なくとも１５分にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することが可能であり、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜１２．５の範囲で選択され、さらに好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択される、および／または
ｉｉ）約２０℃〜約７５℃の範囲で選択される温度にて水溶液中で少なくとも１５分にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することが可能であり、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含む。
【０１４６】
本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１４７】
別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは、約２０℃〜約７５℃の範囲で選択される温度にて水溶液中でベータ−グルカナーゼ活性を有することが可能であり、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記温度は約４０℃〜約６０℃の範囲で選択される。別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは、以下からなる群から選択される温度にて水溶液中でベータ−グルカナーゼ活性を有することが可能である：２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、２４℃、２５℃、２６℃、２７℃、２８℃、２９℃、３０℃、３１℃、３２℃、３３℃、３４℃、３５℃、３６℃、３７℃、３８℃、３９℃、４０℃、４１℃、４２℃、４３℃、４４℃、４５℃、４６℃、４７℃、４８℃、４９℃、５０℃、５１℃、５２℃、５３℃、５４℃、５５℃、５６℃、５７℃、５８℃、５９℃、６０℃、６１℃、６２℃、６３℃、６４℃、６５℃、６６℃、６７℃、６８℃、６９℃、７０℃、７１℃、７２℃、７３℃、７４℃、７５℃、７６℃、７７℃、７８℃、７９℃、８０℃、８１℃、８２℃、８３℃、８４℃、８５℃、８６℃、８７℃、８８℃、８９℃、９０℃、９０℃。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１４８】
別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは少なくとも１５分にわたり（好ましくは少なくとも３０分にわたり）ベータ−グルカナーゼ活性を有することが可能である。別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは、例えば本明細書で開示された任意の単一のまたは複数の実施形態との組み合わせで、以下からなる群から選択される期間にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することが可能である：少なくとも１分、少なくとも２分、少なくとも３分、少なくとも４分、少なくとも５分、少なくとも６分、少なくとも７分、少なくとも８分、少なくとも９分、少なくとも１０分、少なくとも１１分、少なくとも１２分、少なくとも１３分、少なくとも１４分、少なくとも１５分、少なくとも１６分、少なくとも１７分、少なくとも１８分、少なくとも１９分、少なくとも２０分、少なくとも２１分、少なくとも２２分、少なくとも２３分、少なくとも２４分、少なくとも２５分、少なくとも２６分、少なくとも２７分、少なくとも２８分、少なくとも２９分、少なくとも３０分。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１４９】
別の実施形態では、ベータ−グルカナーゼポリペプチドと、１種または複数種のアミラーゼとを含むクリーニング組成物または洗剤組成物であって、前記アミラーゼはアルファ−アミラーゼである、クリーニング組成物または洗剤組成物。
【０１５０】
別の実施形態では、ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種または複数種のアミラーゼとを含む本発明のクリーニング組成物または洗剤組成物であって、前記アルファ−アミラーゼは以下からなる群から選択される、クリーニング組成物または洗剤組成物：
（ａ）配列番号１３（国際公開第９５／１０６０３号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）配列番号１３（国際公開第９５／１０６０３号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであり、１５位、２３位、１０５位、１０６位、１２４位、１２８位、１３３位、１５４位、１５６位、１７８位、１７９位、１８１位、１８８位、１９０位、１９７位、２０１位、２０２位、２０７位、２０８位、２０９位、２１１位、２４３位、２６４位、３０４位、３０５位、３９１位、４０８位および／または４４４位のうちの１つまたは複数で置換を含むポリペプチド；
（ｃ）配列番号１４（国際公開第０２／０１０３５５号パンフレットの配列番号６に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｄ）配列番号１５のハイブリッドポリペプチド（国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号６の残基１〜３３と国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号４の残基３６〜４８３とを含む）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｅ）配列番号１５のハイブリッドポリペプチド（国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号６の残基１〜３３と国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号４の残基３６〜４８３とを含む）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであり、このハイブリッドポリペプチドは、４８位、４９位、１０７位、１５６位、１８１位、１９０位、１９７位、２０１位、２０９位および／または２６４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含む、ポリペプチド；
（ｆ）配列番号１６（国際公開第０２／０１９４６７号パンフレットの配列番号６に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｇ）配列番号１６（国際公開第０２／０１９４６７号パンフレットの配列番号６に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであり、１８１位、１８２位、１８３位、１８４位、１９５位、２０６位、２１２位、２１６位および／または２６９位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｈ）配列番号１７、配列番号１８または配列番号１９（国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号１、配列番号２または配列番号７に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｉ）配列番号１７、配列番号１８または配列番号１９（国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号１、配列番号２または配列番号７に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであり、１４０位、１８３位、１８４位１９５位、２０６位、２４３位、２６０位、３０４位および／または４７６位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｊ）配列番号２０（国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｋ）配列番号２１（国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｌ）配列番号２１（国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであり、１７６位、１７７位、１７８位、１７９位、１９０位、２０１位、２０７位、２１１位および／または２６４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｍ）配列番号２２（国際公開第０９／０６１３８０号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｎ）配列番号２２（国際公開第０９／０６１３８０号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであり、８７位、９８位、１２５位、１２８位、１３１位、１６５位、１７８位、１８０位、１８１位、１８２位、１８３位、２０１位、２０２位、２２５位、２４３位、２７２位、２８２位、３０５位、３０９位、３１９位、３２０位、３５９位、４４４位および／または４７５位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド：
（ｏ）配列番号２１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであり、２８位、１１８位、１７４位；１８１位、１８２位、１８３位、１８４位、１８６位、１８９位、１９５位、２０２位、２９８位、２９９位、３０２位、３０３位、３０６位、３１０位、３１４位；３２０位、３２４位、３４５位、３９６位、４００位、４３９位、４４４位、４４５位、４４６位、４４９位、４５８位、４７１位および／または４８４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｐ）配列番号１２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｑ）改変Ｇ１８２＊＋Ｄ１８３＊を有する配列番号２３の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
（ｒ）改変Ｈ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｉ４０５Ｌ＋Ａ４２１Ｈ＋Ａ４２２Ｐ＋Ａ４２８Ｔを有する配列番号２４の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
（ｓ）改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号２４の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
（ｔ）改変Ｒ１７８＊＋Ｇ１７９＊＋Ｅ１８７Ｐ＋Ｉ２０３Ｙ＋Ｒ４５８Ｎ＋Ｔ４５９Ｓ＋Ｄ４６０Ｔ＋Ｇ４７６Ｋを有する配列番号２４の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド
（ｕ）改変Ｍ２０２Ｌを有する配列番号２７の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
（ｖ）改変Ｒ１８０＊＋Ｓ１８１＊＋Ｓ２４３Ｑ＋Ｇ４７５Ｋを有する配列番号２８の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
（ｗ）改変Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｗ１４０Ｙ＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｉ２０６Ｙ＋Ｙ２４３Ｆ＋Ｅ２６０Ｇ＋Ｇ３０４Ｒ＋Ｇ４７６Ｋを有する配列番号２９の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
（ｘ）改変Ｈ１＊＋Ｎ５４Ｓ＋Ｖ５６Ｔ＋Ｋ７２Ｒ＋Ｇ１０９Ａ＋Ｆ１１３Ｑ＋Ｒ１１６Ｑ＋Ｗ１６７Ｆ＋Ｑ１７２Ｇ＋Ａ１７４Ｓ＋Ｇ１８４Ｔ＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｖ２０６Ｌ＋Ｋ３９１Ａ＋Ｐ４７３Ｒ＋Ｇ４７６Ｋを有する配列番号３０の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
（ｙ）改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｔ２４６Ｖ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号３１の変異体に対して少なくとも９０％の配列同一性（例えば少なくとも９５％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド。
【０１５１】
別の実施形態では、ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種または複数種のプロテアーゼとを含む本発明のクリーニング組成物または洗剤組成物であって、前記プロテアーゼは以下からなる群から選択される、クリーニング組成物または洗剤組成物：
ａ）プロテアーゼ活性を有するポリペプチドであり、配列番号３４に対して少なくとも６０％の配列同一性（例えば、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
ｂ）プロテアーゼ活性を有するポリペプチドであり、配列番号３５に対して少なくとも６０％の配列同一性（例えば、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
ｃ）プロテアーゼ活性を有するポリペプチドであり、配列番号３６に対して少なくとも６０％の配列同一性（例えば、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド。
【０１５２】
別の実施形態では、本発明は、（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される成熟型ポリペプチドコード配列、（ｉｉ）そのｃＤＮＡ配列または（ｉｉｉ）（ｉ）もしくは（ｉｉ）の完全長相補体（Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）と、きわめて低度の緊縮条件下で、低度の緊縮条件下で、中度の緊縮条件下で、中度〜高度の緊縮条件下で、高度の緊縮条件下で、またはきわめて高度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する。ある実施形態では、このポリペプチドは単離されている。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１５３】
配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列のポリヌクレオチドまたはそのサブ配列、ならびに配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列のポリペプチドまたはその断片を使用して、当分野で公知の方法に従って様々な属または種の系統からベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするＤＮＡを同定するためのおよびクローニングするための核酸プローブを設計することができる。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。特に、そのようなプローブを、標準的なサザンブロッティング手順の後に目的の細胞のゲノムＤＮＡまたはｃＤＮＡとのハイブリダイゼーションに使用して、これらのＤＮＡ中の対応する遺伝子を同定することおよび単離することができる。そのようなプローブは、配列全体と比べて大幅に短くあり得るが、少なくとも１５個のヌクレオチドの長さであるべきであり、例えば少なくとも２５個、少なくとも３５個または少なくとも７０個のヌクレオチドの長さであるべきである。好ましくは、この核酸プローブは少なくとも１００個のヌクレオチドの長さであり、例えば、少なくとも２００個のヌクレオチド、少なくとも３００個のヌクレオチド、少なくとも４００個のヌクレオチド、少なくとも５００個のヌクレオチド、少なくとも６００個のヌクレオチド、少なくとも７００個のヌクレオチド、少なくとも８００個のヌクレオチドまたは少なくとも９００個のヌクレオチドの長さである。ＤＮＡプローブおよびＲＮＡプローブの両方を使用することができる。これらのプローブは概して、対応する遺伝子を検出するために（例えば、３２Ｐ、３Ｈ、３５Ｓ、ビオチンまたはアビジンにより）標識化されている。そのようなプローブは本発明に包含される。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１５４】
そのような他の系統から調製したゲノムＤＮＡライブラリまたはｃＤＮＡライブラリを、上記で説明したプローブとハイブリダイズするおよびベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするＤＮＡに関してスクリーニングすることができる。そのような他の系統由来のゲノムＤＮＡまたは他のＤＮＡを、アガロースゲル電気泳動もしくはポリアクリルアミドゲル電気泳動または他の分離技術により分離することができる。これらのライブラリ由来のＤＮＡまたは分離されたＤＮＡを、ニトロセルロース上にまたは他の好適な担体材料上に移して固定化することができる。配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列またはそのサブ配列とハイブリダイズするクローンまたはＤＮＡを同定するために、担体材料をサザンブロットで使用する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１５５】
本発明の目的のために、ハイブリダイゼーションは、ポリヌクレオチドが、きわめて低度〜きわめて高度の緊縮条件下で、（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列；（ｉｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される成熟型ポリペプチドコード配列；（ｉｉｉ）それらのｃＤＮＡ配列；（ｉｖ）それらの完全長相補体；または（ｖ）それらのサブ配列に対応する標識核酸プローブにハイブリダイズすることを示す。これらの条件下で核酸プローブがハイブリダイズする分子を、例えばＸ線フィルムまたは当分野で既知の任意の他の検出手段を使用して検出することができる。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１５６】
一態様では、この核酸プローブは、配列番号１のヌクレオチド８５〜１１３７またはヌクレオチド１〜１１３７である。一態様では、この核酸プローブは、配列番号４のヌクレオチド１〜８２８またはヌクレオチド９４〜８２８である。一態様では、この核酸プローブは、配列番号６のヌクレオチド１〜７１１またはヌクレオチド４６〜７１１である。一態様では、この核酸プローブは、配列番号８のヌクレオチド１〜７２９またはヌクレオチド８８〜７２９である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１５７】
別の態様では、この核酸プローブは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列のポリペプチド；その成熟型ポリペプチド；またはその断片をコードするポリヌクレオチドである。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１５８】
別の態様では、この核酸プローブは、配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１５９】
別の実施形態では、本発明は、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされる、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドに関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。さらなる実施形態では、このポリペプチドは単離されている。
【０１６０】
別の実施形態では、本発明は、１つまたは複数（例えばいくつかの）位置で置換、欠失および／または挿入を含む、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体に関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。ある実施形態では、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに導入されるアミノ酸の置換、欠失および／または挿入の数は最大１０個であり、例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。このアミノ酸の変化は副次的な性質のものであり得、即ち、タンパク質の折り畳みおよび／または活性に顕著な影響を及ぼさないアミノ酸の保存的な置換または挿入；小さい欠失、典型的には１〜３０個のアミノ酸の欠失；小さいアミノ末端またはカルボキシル末端の伸長、例えばアミノ末端メチオニン残基；最大２０〜２５個の残基の小さいリンカーペプチド；または、正味荷電または別の機能（例えばポリヒスチジン管、抗原性エピトープもしくは結合ドメイン）を変化させることにより精製を促進させる小さい伸長であり得る。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１６１】
保存的置換の例は、塩基性アミノ酸（アルギニン、リシンおよびヒスチジン）、酸性アミノ酸（グルタミン酸およびアスパラギン酸）、極性アミノ酸（グルタミンおよびアスパラギン）、疎水性アミノ酸（ロイシン、イソロイシンおよびバリン）、芳香族アミノ酸（フェニルアラニン、トリプトファンおよびチロシン）、および、小さいアミノ酸（グリシン、アラニン、セリン、スレオニンおよびメチオニン）の群の範囲内である。特異活性を一般に改変しないアミノ酸置換は技術分野において公知であり、例えば、Ｈ．Ｎｅｕｒａｔｈ  ａｎｄ  Ｒ．Ｌ．Ｈｉｌｌ，１９７９，Ｉｎ，Ｔｈｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに記載されている。頻繁に生じる置換はＡｌａ／Ｓｅｒ、Ｖａｌ／Ｉｌｅ、Ａｓｐ／Ｇｌｕ、Ｔｈｒ／Ｓｅｒ、Ａｌａ／Ｇｌｙ、Ａｌａ／Ｔｈｒ、Ｓｅｒ／Ａｓｎ、Ａｌａ／Ｖａｌ、Ｓｅｒ／Ｇｌｙ、Ｔｙｒ／Ｐｈｅ、Ａｌａ／Ｐｒｏ、Ｌｙｓ／Ａｒｇ、Ａｓｐ／Ａｓｎ、Ｌｅｕ／Ｉｌｅ、Ｌｅｕ／Ｖａｌ、Ａｌａ／ＧｌｕおよびＡｓｐ／Ｇｌｙである。
【０１６２】
あるいは、アミノ酸変異は、ポリペプチドの物理化学的特性が改変されるような性質のものである。例えば、アミノ酸変異は、ポリペプチドの熱安定性を向上させ、基質特異性を改変し、至適ｐＨを変化させることであり得る。
【０１６３】
ポリペプチドにおける必須アミノ酸は、部位特異的突然変異誘発またはアラニン走査突然変異誘発（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ，１９８９，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：１０８１−１０８５）などの技術分野において公知である手法に従って同定することが可能である。後者の技術においては、単一のアラニン突然変異が分子中の全ての残基に導入され、得られた分子が、分子の活性に重要であるアミノ酸残基を同定するためにベータ−グルカナーゼ活性についてテストされる。また、Ｈｉｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：４６９９−４７０８を参照のこと。酵素の活性部位または他の生物学的相互作用は、推定上の接触部位アミノ酸の突然変異が併用される、核磁気共嗚、結晶構造解析、電子回折または光親和性標識などの技術によって判定される、構造の物理的分析によって判定されることも可能である。例えば、ｄｅ  Ｖｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５５：３０６−３１２；Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：８９９−９０４；Ｗｌｏｄａｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３０９：５９−６４を参照のこと。必須アミノ酸のアイデンティティは、関連するポリペプチドとのアラインメントから推測されることも可能である。
【０１６４】
単一もしくは複数のアミノ酸置換、欠失、および／または挿入は、Ｒｅｉｄｈａａｒ−Ｏｌｓｏｎ  ａｎｄ  Ｓａｕｅｒ，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４１：５３−５７；Ｂｏｗｉｅ  ａｎｄ  Ｓａｕｅｒ，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：２１５２−２１５６；国際公開第９５／１７４１３号パンフレット；または、国際公開第９５／２２６２５号パンフレットにより開示されているものなどの公知の突然変異誘発方法、組換え法、および／または、シャッフリング法、これに続く関連するスクリーニング法を用いて行い、テストすることが可能である。用いられることが可能である他の方法としては、エラープローンＰＣＲ、ファージディスプレイ（例えば、Ｌｏｗｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３０：１０８３２−１０８３７；米国特許第５，２２３，４０９号明細書；国際公開第９２／０６２０４号パンフレット）、および、領域特異的突然変異誘発（Ｄｅｒｂｙｓｈｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｇｅｎｅ  ４６：１４５；Ｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ＤＮＡ  ７：１２７）が挙げられる。
【０１６５】
突然変異誘発／シャッフリング法は、宿主細胞によって発現されたクローン化突然変異誘発ポリペプチドの活性を検出するために、高スループット自動スクリーニング法と組み合わせることが可能である（Ｎｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １７：８９３−８９６）。活性ポリペプチドをコードする突然変異誘発ＤＮＡ分子は、宿主細胞から回収可能であり、技術分野における標準的な方法を用いて直ぐに配列決定されることが可能である。これらの方法では、ポリペプチドにおける個別のアミノ酸残基の重要性を直ぐに判定することが可能である。
【０１６６】
ポリペプチドは、一のポリペプチドの一部分が、他のポリペプチドの一部分のＮ−末端またはＣ−末端で融合したハイブリッドポリペプチドであり得る。
【０１６７】
ポリペプチドは、他のポリペプチドが本発明のポリペプチドのＮ−末端またはＣ−末端で融合した融合ポリペプチドまたは切断可能な融合ポリペプチドであり得る。融合ポリペプチドは、他のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを本発明のポリヌクレオチドに融合させることにより生成される。融合ポリペプチドを生成する技術は、技術分野において公知であると共に、フレーム中に収まり、融合ポリペプチドの発現が同一のプロモータおよびターミネータによる制御下にあるよう、ポリペプチドをコードするコード配列を連結するステップを含む。融合ポリペプチドはまた、翻訳後に融合ポリペプチドが形成されるインテインテクノロジーを用いて構築されてもよい（Ｃｏｏｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，ＥＭＢＯ  Ｊ．１２：２５７５−２５８３；Ｄａｗｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６６：７７６−７７９）。
【０１６８】
融合ポリペプチドは、２つのポリペプチドの間に切断部位をさらに含んでいることが可能である。融合タンパク質が分泌される際に、この部位が切断されて２つのポリペプチドが遊離される。切断部位の例としては、これらに限定されないが、Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｊ．Ｉｎｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３：５６８−５７６；Ｓｖｅｔｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７６：２４５−２５１；Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ−Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６３：３４８８−３４９３；Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １３：４９８−５０３；および、Ｃｏｎｔｒｅｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：３７８−３８１；Ｅａｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２５：５０５−５１２；Ｃｏｌｌｉｎｓ−Ｒａｃｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １３：９８２−９８７；Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ６：２４０−２４８；および、Ｓｔｅｖｅｎｓ，２００３，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｗｏｒｌｄ  ４：３５−４８に開示されている部位が挙げられる。
【０１６９】
ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドのソース
本発明のベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドは、いずれかの属（例えば、バチルス属）の微生物から得られ得る。本発明の目的のために、「〜から得られる」という用語は、本明細書において用いられるところ、所与のソースに関連して、ポリヌクレオチドによってコードされたポリペプチドがソースによって、または、ソースからのポリヌクレオチドが挿入された系統によって生成されることを意味することとする。一態様において、所与のソースから入手されるポリペプチドは細胞外に分泌される。
【０１７０】
ポリペプチドは細菌性ポリペプチドであり得る。例えば、ポリペプチドは、ベータ−グルカナーゼ活性を有する、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ゲオバチルス属（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、オセアノバチルス属（Ｏｃｅａｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）もしくはストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）ポリペプチドなどのグラム陽性細菌性ポリペプチド、または、カムピロバクター属（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、フラボバクテリウム属（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フソバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ヘリコバクター属（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）、イリオバクター属（Ｉｌｙｏｂａｃｔｅｒ）、ネイッセリア属（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）もしくはウレアプラズマ属（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ）ポリペプチドなどのグラム陰性細菌性ポリペプチドであり得る。
【０１７１】
一態様において、ポリペプチドは、バチルスアルカロフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルスブレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ）、バチルスシルクランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、バチルスクラウシイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ）、バチルスコアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、バシラスフィルムス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｉｒｍｕｓ）、バチルスラウツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌａｕｔｕｓ）、バチルスレンツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｎｔｕｓ）、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルスメガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルスプミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ）、バチルスステアロテルモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）バチルス  ｓｐ．（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）、バチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）またはバチルスチューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）ポリペプチドである。
【０１７２】
別の態様では、このポリペプチドは真菌性ポリペプチドではない（例えば、本発明のポリペプチドは真菌性ポリペプチドを除外する）。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１７３】
前述の種について、本発明は、知られている種の名称に関わらず、完全および不完全世代、ならびに、例えば無性世代といった他の分類学上の均等物の両方を含むことが理解されるであろう。当業者は、適切な均等物の同一性を容易に認識するであろう。
【０１７４】
これらの種の系統は、アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ：Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）、ドイツ微生物細胞培養コレクション（ＤＳＭＺ：Ｄｅｕｔｓｃｈｅ  Ｓａｍｍｌｕｎｇ  ｖｏｎ  Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ  ｕｎｄ  Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ  ＧｍｂＨ）、オランダ微生物株保存センター（ＣＢＳ：Ｃｅｎｔｒａａｌｂｕｒｅａｕ  Ｖｏｏｒ  Ｓｃｈｉｍｍｅｌｃｕｌｔｕｒｅｓ）、および、農業研究局特許培養物コレクション（Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、北方リサーチセンター（ＮＲＲＬ：Ｎｏｒｔｈｅｒｎ  Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｅｒ）などの多数の微生物保存機関において公共に容易に利用可能である。
【０１７５】
ポリペプチドは、上記のプローブを用いて自然（例えば、汚染物、コンポスト、水等）から単離された微生物、または天然材料（例えば、汚染物、コンポスト、水等）から直接得られるＤＮＡサンプルを含む他のソースから同定され、また、得られ得る。微生物を自然環境から単離する技術は技術分野において周知である。次いで、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、他の微生物または混合ＤＮＡサンプルのゲノムＤＮＡもしくはｃＤＮＡライブラリを同じようにスクリーニングすることにより得られ得る。一旦、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドがプローブで検出されたら、ポリヌクレオチドは、当業者に周知である技術（例えば、前述のＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９を参照のこと）を利用することにより単離またはクローン化されることが可能である。
【０１７６】
好ましい実施形態では、本発明のポリペプチドは細菌性ポリペプチド（好ましくは、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属由来の細菌から単離された細菌性ポリペプチド）である。さらに好ましい実施形態では、本発明のポリペプチドはグリコシドヒドロラーゼファミリ１６（ＧＨ１６）に属する（例えば、グリコシドヒドロラーゼ（ＥＣ３．２．１．−）活性を有する）。例えば、このポリペプチドは、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属由来の、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドであり得、例えば、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）６２４４９由来の、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）由来の、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）由来の、バチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）由来の、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドであり得る。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１７７】
触媒ドメイン
一実施形態では、本発明はまた、配列番号２のアミノ酸３３〜２４９に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号２のアミノ酸３３〜２４９と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号２のアミノ酸３３〜２４９もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１７８】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号２のアミノ酸６２〜２４５に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号２のアミノ酸６２〜２４５と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号２のアミノ酸６２〜２４５もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１７９】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号３のアミノ酸３３〜２４９に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号３のアミノ酸３３〜２４９と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号３のアミノ酸３３〜２４９もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８０】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号３のアミノ酸６２〜２４５に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号３のアミノ酸６２〜２４５と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号３のアミノ酸６２〜２４５もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８１】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号５のアミノ酸３２〜２５４に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号５のアミノ酸３２〜２５４と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号５のアミノ酸３２〜２５４もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８２】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号５のアミノ酸６０〜２４９に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号５のアミノ酸６０〜２４９と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号５のアミノ酸６０〜２４９もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８３】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号７のアミノ酸２０〜２３６に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号７のアミノ酸２０〜２３６と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号７のアミノ酸２０〜２３６もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８４】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号７のアミノ酸４９〜２３０に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号７のアミノ酸４９〜２３０と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号７のアミノ酸４９〜２３０もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８５】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号９のアミノ酸３０〜２４３に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号９のアミノ酸３０〜２４３と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号９のアミノ酸３０〜２４３もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８６】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号９のアミノ酸５５〜２３９に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する触媒ドメインにも関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。一態様では、この触媒ドメインは、配列番号９のアミノ酸５５〜２３９と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。この触媒ドメインは好ましくは、配列番号９のアミノ酸５５〜２３９もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８７】
結合ドメイン
本発明のＧＨ１６ベータ−グルカナーゼが炭水化物結合モジュール（即ちＣＢＭ）を含む場合がある。一実施形態では、ＣＢＭは配列番号２のアミノ酸２６４〜３７７である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。別の実施形態では、ＣＢＭは配列番号３のアミノ酸２６４〜３７７である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８８】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号２のアミノ酸２６４〜３７７に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する炭水化物結合モジュールにも関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。一態様では、この炭水化物結合モジュールは、配列番号２のアミノ酸２６４〜３７７と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１８９】
一実施形態では、本発明はまた、配列番号３のアミノ酸２６４〜３７７に対して少なくとも６０％の配列同一性を有し、例えば少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する炭水化物結合モジュールにも関する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。一態様では、この炭水化物結合モジュールは、配列番号３のアミノ酸２６４〜３７７と最大１０個のアミノ酸（例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個）が異なるアミノ酸配列を含む。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１９０】
この炭水化物結合モジュールは好ましくは、配列番号２のアミノ酸２６４〜３７７もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、炭水化物結合活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。この炭水化物結合モジュールは好ましくは、配列番号３のアミノ酸２６４〜３７７もしくはその対立遺伝子変異体を含む、もしくはからなる、またはこれらの、炭水化物結合活性を有する断片である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１９１】
別の実施形態では、本発明はまた、１つまたは複数（例えばいくつかの）位置で置換、欠失および／または挿入を含む、配列番号２（または配列番号３）のアミノ酸２６４〜３７７の炭水化物結合モジュール変異体にも関する。一態様では、配列番号２（または配列番号３）のアミノ酸２６４〜３７７の配列に導入されるアミノ酸の置換、欠失および／または挿入の数は最大１０個であり、例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個である。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０１９２】
本発明の炭水化物結合モジュールを、触媒ドメインに作動可能にリンクされた少なくとも１つの炭水化物結合モジュールを含む融合タンパク質に適用することができる。触媒ドメインは、ヒドロラーゼ、イソメラーゼ、リガーゼ、リアーゼ、オキシドレダクターゼ、またはトランスフェラーゼ、アミノペプチダーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、カルボキシペプチダーゼ、カタラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、セルラーゼ、キチナーゼ、クチナーゼ、シクロデキストリングリコシルトランスフェラーゼ、デオキシリボヌクレアーゼ、エンドグルカナーゼ、エステラーゼ、α−ガラクトシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、α−グルコシダーゼ、β−グルコシダーゼ、インベルターゼ、ラッカーゼ、リパーゼ、マンノシダーゼ、ムタナーゼ、オキシダーゼ、ペクチン分解性酵素、ペルオキシダーゼ、フィターゼ、ポリフェノールオキシダーゼ、タンパク質分解性酵素、リボヌクレアーゼ、トランスグルタミナーゼ、キシラナーゼ、またはベータ−キシロシダーゼから得られ得る。触媒ドメインをコードするポリヌクレオチドは、原核生物、真核生物、または、他のソースのいずれかから入手され得る。
【０１９３】
ポリヌクレオチド
本発明はまた、本明細書で説明された本発明のポリペプチド、触媒ドメインまたは炭水化物結合ドメインをコードするポリヌクレオチドにも関する。ある実施形態では、この本発明のポリペプチド、触媒ドメインまたは炭水化物結合ドメインをコードするポリヌクレオチドは単離されている。
【０１９４】
ポリヌクレオチドの単離またはクローン化に用いられる技術は技術分野において公知であり、ゲノムＤＮＡもしくはｃＤＮＡからの単離、または、これらの組み合わせが含まれる。ゲノムＤＮＡからのポリヌクレオチドのクローン化は、例えば、発現ライブラリの周知のポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）または抗体スクリーニングを用いて共有される構造機構を伴うクローン化されたＤＮＡ断片を検出することにより実施されることが可能である。例えば、Ｉｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，ＰＣＲ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照のこと。リガーゼ連鎖反応（ＬＣＲ）、連結活性化転写（ＬＡＴ）およびポリヌクレオチドベース増幅（ＮＡＳＢＡ）などの他の核酸増幅法が用いられ得る。ポリヌクレオチドは、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の系統、または、関連する生体からクローン化され得、それ故、例えば、ポリヌクレオチドの領域をコードするポリペプチドの対立形質もしくは種変異体であり得る。
【０１９５】
本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの修飾は、ポリペプチドに実質的に類似するポリペプチドの合成に必要であり得る。ポリペプチドに「実質的に同様」という用語は、ポリペプチドの非天然形態を指す。これらのポリペプチドは、天然のソースから単離されたポリペプチドとはいくらかの操作法で異なっていてもよく、例えば、特異活性、耐熱性、至適ｐＨ等が異なる変異体である。変異体は、配列番号１、配列番号４、配列番号５６、配列番号８、もしくはそのｃＤＮＡから選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列（例えば、そのサブ配列）として表されるポリヌクレオチドに基づいて構築され得、および／または、ポリペプチドのアミノ酸配列に変化をもたらさないが、酵素の生成のために意図される宿主生体のコドン利用に対応するヌクレオチド置換の導入により、または、異なるアミノ酸配列をもたらし得るヌクレオチド置換の導入により構築され得る。ヌクレオチド置換の概要については、例えば、Ｆｏｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ２：９５−１０７を参照のこと。
【０１９６】
核酸構築物
本発明はまた、制御配列に適合する条件下で好適な宿主細胞中にコード配列を発現させる１つまたは複数の制御配列に作動可能にリンクした本発明のポリヌクレオチドを含む核酸構築物に関する。
【０１９７】
ポリヌクレオチドは、多様な方法で処置されてポリペプチドの発現がもたらされ得る。ベクターへ挿入される前のポリヌクレオチドの処置が、発現ベクターに応じて、望ましいか、または、必要であり得る。組換えＤＮＡ法を利用するポリヌクレオチドを修飾するための技術は技術分野において周知である。
【０１９８】
制御配列は、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現のための宿主細胞によって認識されるポリヌクレオチドであるプロモータであり得る。プロモータは、ポリペプチドの発現を媒介する転写制御配列を含有する。プロモータは、変異体、切断およびハイブリッドプロモータを含む宿主細胞において転写活性を示すいずれかのポリヌクレオチドであり得、ならびに、宿主細胞に対して相同性または非相同性である細胞外または細胞内ポリペプチドをコードする遺伝子から得られ得る。
【０１９９】
細菌宿主細胞において本発明の核酸構築物の転写をもたらす好適なプロモータの例は、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）α−アミラーゼ遺伝子（ａｍｙＱ）、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）α−アミラーゼ遺伝子（ａｍｙＬ）、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ペニシリナーゼ遺伝子（ｐｅｎＰ）、バチルスステアロテルモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）マルトジェニックアミラーゼ遺伝子（ａｍｙＭ）、古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）レバンスクラーゼ遺伝子（ｓａｃＢ）、古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ｘｙｌＡおよびｘｙｌＢ遺伝子、バチルスチューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）ｃｒｙＩＩＩＡ遺伝子（Ａｇａｉｓｓｅ  ａｎｄ  Ｌｅｒｅｃｌｕｓ，１９９４，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  １３：９７−１０７）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ｌａｃオペロン、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ｔｒｃプロモータ、（Ｅｇｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｇｅｎｅ  ６９：３０１−３１５）、ストレプトマイセスコエリコロル（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）アガラーゼ遺伝子（ｄａｇＡ）および原核β−ラクタマーゼ遺伝子（Ｖｉｌｌａ−Ｋａｍａｒｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，１９７８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７５：３７２７−３７３１）、ならびに、ｔａｃプロモータ（ＤｅＢｏｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８０：２１−２５）から得られるプロモータである。さらなるプロモータが、「Ｕｓｅｆｕｌ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｆｒｏｍ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｂａｃｔｅｒｉａ」，Ｇｉｌｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９８０，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  ２４２：７４−９４；および、前述のＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９に記載されている。タンデムプロモータの例が、国際公開第９９／４３８３５号パンフレットに記載されている。
【０２００】
糸状真菌宿主細胞において本発明の核酸構築物の転写をもたらす好適なプロモータの例は、アスペルギルスニズランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）アセトアミダーゼ、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）中性α−アミラーゼ、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）酸安定α−アミラーゼ、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）またはアスペルギルスアワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ａｗａｍｏｒｉ）グルコアミラーゼ（ｇｌａＡ）、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）ＴＡＫＡアミラーゼ、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）アルカリ性タンパク分解酵素、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）トリオースリン酸イソメラーゼ、フザリウムオキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）トリプシン−様タンパク分解酵素（国際公開第９６／００７８７号パンフレット）、フザリウムベネナツム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）アミログルコシダーゼ（国際公開第００／５６９００号パンフレット）、フザリウムベネナツム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍ  Ｄａｒｉａ）（国際公開第００／５６９００号パンフレット）、フザリウムベネナツム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍ  Ｑｕｉｎｎ）（国際公開第００／５６９００号パンフレット）、リゾムコールミエヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ  ｍｉｅｈｅｉ）リパーゼ、リゾムコールミエヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ  ｍｉｅｈｅｉ）アスパラギン酸プロテイナーゼ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）β−グルコシダーゼ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）セロビオヒドロラーゼＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）セロビオヒドロラーゼＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）エンドグルカナーゼＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）エンドグルカナーゼＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）エンドグルカナーゼＩＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）エンドグルカナーゼＶ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）キシラナーゼＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）キシラナーゼＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）キシラナーゼＩＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）β−キシロシダーゼ、およびトリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）翻訳延長因子、ならびに、ＮＡ２−ｔｐｉプロモータ（非翻訳リーダーがアスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）のトリオースリン酸イソメラーゼ遺伝子由来の非翻訳リーダーにより置き換えられた、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）の中性α−アミラーゼ遺伝子を含む修飾プロモータ；非限定的な例としては、非翻訳リーダーがアスペルギルスニズランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）���たはアスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）のトリオースリン酸イソメラーゼ由来の非翻訳リーダーにより置き換えられた、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）の中性α−アミラーゼ遺伝子を含む修飾プロモータが挙げられる）の遺伝子から得られたプロモータ；ならびに、その変異体、切断およびハイブリッドプロモータである。他のプロモータが、米国特許第６，０１１，１４７号明細書に記載されている。
【０２０１】
イースト菌宿主において、有用なプロモータは、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）エノラーゼ（ＥＮＯ−１）、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ガラクトキナーゼ（ＧＡＬ１）、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）アルコール脱水素酵素／グリセルアルデヒド−３−リン酸脱水素酵素（ＡＤＨ１、ＡＤＨ２／ＧＡＰ）、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）トリオースリン酸イソメラーゼ（ＴＰＩ）、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）メタロチオネイン（ＣＵＰ１）およびサッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）３−ホスホグリセリン酸キナーゼの遺伝子から得られる。イースト菌宿主細胞に対する他の有用なプロモータは、Ｒｏｍａｎｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｙｅａｓｔ  ８：４２３−４８８により記載されている。
【０２０２】
制御配列はまた、宿主細胞によって認識されて転写を終結させる転写ターミネータであり得る。ターミネータは、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの３’−末端に作動可能にリンクする。本発明においては、宿主細胞において機能するいずれかのターミネータが用いられ得る。
【０２０３】
細菌宿主細胞用の好ましいターミネータは、バチルスクラウシイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ）アルカリ性プロテアーゼ（ａｐｒＨ）、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）アルファ−アミラーゼ（ａｍｙＬ）および大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）リボソームＲＮＡ（ｒｒｎＢ）の遺伝子から得られる。
【０２０４】
糸状真菌宿主細胞用の好ましいターミネータは以下の遺伝子から得られる：アスペルギルスニズランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）アセトアミダーゼ、アスペルギルスニズランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）アントラニル酸シンターゼ、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）グルコアミラーゼ、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）アルファ−グルコシダーゼ、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）ＴＡＫＡアミラーゼ、フザリウムオキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）トリプシン−様タンパク分解酵素、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）ベータ−グルコシダーゼ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）セロビオヒドロラーゼＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）セロビオヒドロラーゼＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）エンドグルカナーゼＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）エンドグルカナーゼＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）エンドグルカナーゼＩＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）エンドグルカナーゼＶ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）キシラナーゼＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）キシラナーゼＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）キシラナーゼＩＩＩ、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）ベータ−キシロシダーゼおよびトリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）翻訳延長因子。
【０２０５】
イースト菌宿主細胞の好ましいターミネータは、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）エノラーゼ、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）チトクロムＣ（ＣＹＣ１）およびサッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）グリセルアルデヒド−３−リン酸脱水素酵素の遺伝子から得られる。イースト菌宿主細胞の他の有用なターミネータが、前述のＲｏｍａｎｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２に記載されている。
【０２０６】
制御配列はまた、遺伝子の発現を増加させる、プロモータの下流且つ遺伝子のコード配列の上流のｍＲＮＡ安定化領域であってもよい。
【０２０７】
好適なｍＲＮＡ安定化領域の例は、バチルスチューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）ｃｒｙＩＩＩＡ遺伝子（国際公開第９４／２５６１２号パンフレット）および古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＳＰ８２遺伝子（Ｈｕｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ  １７７：３４６５−３４７１）から得られる。
【０２０８】
制御配列はまた、宿主細胞による翻訳に重要であるｍＲＮＡの非翻訳領域であるリーダーであり得る。リーダーは、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの５’−末端に作動可能にリンクする。宿主細胞において機能するいずれかのリーダーが用いられ得る。
【０２０９】
糸状真菌宿主細胞の好ましいリーダーは、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）ＴＡＫＡアミラーゼおよびアスペルギルスニズランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）トリオースリン酸イソメラーゼの遺伝子から得られる。
【０２１０】
イースト菌宿主細胞の好適なリーダーは、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）エノラーゼ（ＥＮＯ−１）、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）３−ホスホグリセリン酸キナーゼ、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）α−因子およびサッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）アルコール脱水素酵素／グリセルアルデヒド−３−リン酸脱水素酵素（ＡＤＨ２／ＧＡＰ）の遺伝子から得られる。
【０２１１】
制御配列はまた、ポリヌクレオチドの３’−末端に作動可能にリンクし、転写された場合に、ポリアデノシン残基を転写ｍＲＮＡに負荷するシグナルとして宿主細胞により認識される配列であるポリアデニル化配列であり得る。宿主細胞において機能するポリアデニル化配列のいずれかが用いられ得る。
【０２１２】
糸状真菌宿主細胞に好ましいポリアデニル化配列は、アスペルギルスニズランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）アントラニル酸シンターゼ、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）グルコアミラーゼ、およびアスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）α−グルコシダーゼ  アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）ＴＡＫＡアミラーゼ、フザリウムオキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）トリプシン−様プロテアーゼの遺伝子から得られる。
【０２１３】
イースト菌宿主細胞の有用なポリアデニル化配列が、Ｇｕｏ  ａｎｄ  Ｓｈｅｒｍａｎ，１９９５，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌ．１５：５９８３−５９９０に記載されている。
【０２１４】
制御配列はまた、ポリペプチドのＮ−末端にリンクしたシグナルペプチドをコードし、および、ポリペプチドを細胞の分泌経路に送るシグナルペプチドコード領域であり得る。ポリヌクレオチドのコード配列の５’−末端は、ポリペプチドをコードするコード配列のセグメントと共に、翻訳読み枠に元々リンクしたシグナルペプチドコード配列を本質的に含有し得る。または、コード配列の５’−末端は、コード配列に対して外来性のシグナルペプチドコード配列を含有し得る。コード配列がシグナルペプチドコード配列を元々含有していない場合には、外来性のシグナルペプチドコード配列が必要とされる場合がある。または、外来性のシグナルペプチドコード配列は単に、ポリペプチドの分泌を増強するために天然シグナルペプチドコード配列を置き換えてもよい。しかしながら、発現ポリペプチドを宿主細胞の分泌経路に送るいずれかのシグナルペプチドコード配列が用いられてもよい。
【０２１５】
細菌宿主細胞の効果的なシグナルペプチドコード配列は、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ＮＣＩＢ１１８３７マルトジェニックアミラーゼ、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）サブチリシン、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）β−ラクタマーゼ、バチルスステアロテルモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）α−アミラーゼ、バチルスステアロテルモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）中性プロテアーゼ（ｎｐｒＴ、ｎｐｒＳ、ｎｐｒＭ）および古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ｐｒｓＡの遺伝子から得られるシグナルペプチドコード配列である。さらなるシグナルペプチドが、Ｓｉｍｏｎｅｎ  ａｎｄ  Ｐａｌｖａ，１９９３，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ５７：１０９−１３７に記載されている。
【０２１６】
糸状真菌宿主細胞の効果的なシグナルペプチドコード配列は、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）中性アミラーゼ、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）グルコアミラーゼ、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）ＴＡＫＡアミラーゼ、フミコラインソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｉｎｓｏｌｅｎｓ）セルラーゼ、フミコラインソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｉｎｓｏｌｅｎｓ）エンドグルカナーゼＶ、フミコララヌギノサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）リパーゼおよびリゾムコールミエヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ  ｍｉｅｈｅｉ）アスパラギン酸プロテイナーゼの遺伝子から得られるシグナルペプチドコード配列である。
【０２１７】
イースト菌宿主細胞の有用なシグナルペプチドは、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）α−因子およびサッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）インベルターゼの遺伝子から得られる。他の有用なシグナルペプチドコード配列が、前述のＲｏｍａｎｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２により記載されている。
【０２１８】
制御配列はまた、ポリペプチドのＮ−末端でプロペプチド位置をコードするプロペプチドコード配列であり得る。得られたポリペプチドは、酵素原またはプロポリペプチド（または、いくつかの場合においてチモーゲン）として公知である。プロポリペプチドは、一般に非活性であり、プロポリペプチドからのプロペプチドの触媒または自己触媒切断によって活性ポリペプチドに転換されることが可能である。プロペプチドコード配列は、古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）アルカリ性タンパク分解酵素（ａｐｒＥ）、古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中性タンパク分解酵素（ｎｐｒＴ）、ミセリオフトラテルモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）ラッカーゼ（国際公開第９５／３３８３６号パンフレット）、リゾムコールミエヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ  ｍｉｅｈｅｉ）アスパラギン酸プロテイナーゼおよびサッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）α−因子の遺伝子から得られ得る。
【０２１９】
シグナルペプチドおよびプロペプチド配列の両方が存在する場合、プロペプチド配列はポリペプチドのＮ−末端に隣接して位置されており、また、シグナルペプチド配列は、プロペプチド配列のＮ−末端に隣接して位置されている。
【０２２０】
宿主細胞の増殖に対したポリペプチドの発現の調節する調節配列を付加することが望ましい場合もあり得る。調節配列の例は、調節化合物の存在を含む化学的または物理的刺激に応じて、遺伝子の発現をオンオフさせるものである。原核系における調節配列としては、ｌａｃ、ｔａｃ、およびｔｒｐオペレータ系が挙げられる。イースト菌においては、ＡＤＨ２系またはＧＡＬ１系が用いられ得る。糸状菌においては、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）グルコアミラーゼプロモータ、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）ＴＡＫＡα−アミラーゼプロモータおよびアスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）グルコアミラーゼプロモータ、トリコデルマレエセイセルビオヒドロラーゼ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ  ｃｅｌｌｏｂｉｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ）Ｉプロモータ、およびトリコデルマレエセイセルビオヒドロラーゼ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ  ｃｅｌｌｏｂｉｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ）ＩＩプロモータが用いられ得る。調節配列の他の例は、遺伝子増幅を可能とするものである。真核系において、これらの調節配列は、メトトレキセートの存在下で増幅されるジヒドロ葉酸レダクターゼ遺伝子、および、重金属を伴って増幅されるメタロチオネイン遺伝子を含む。これらの事例において、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、調節配列と作動可能にリンクしているであろう。
【０２２１】
発現ベクター
本発明はまた、本発明のポリヌクレオチド、プロモータ、ならびに、転写および翻訳終止シグナルを含む組換え発現ベクターに関する。種々のヌクレオチドおよび制御配列が一緒になって、このような部位でポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの挿入または置換を可能とするために１つまたは複数の好都合な制限部位を含み得る組換え発現ベクターが生成される。または、ポリヌクレオチドは、ポリヌクレオチドを含む核酸構築物を発現に適切なベクターに挿入することにより発現され得る。発現ベクターの形成において、コード配列は、コード配列が、発現に適切な制御配列と作動可能にリンクするようベクター中に位置されている。
【０２２２】
組換え発現ベクターは、組換えＤＮＡ法に簡便に供されることが可能であり、ポリヌクレオチドの発現をもたらすことが可能であるいずれかのベクター（例えば、プラスミドまたはウイルス）であり得る。ベクターの選択は、典型的には、ベクターが導入される宿主細胞に対するベクターの親和性に応じることとなる。ベクターは、直鎖または閉鎖された環状プラスミドであり得る。
【０２２３】
ベクターは、例えばプラスミド、染色体外要素、微小染色体または人工染色体といった、自己複製ベクター（すなわち、染色体外のエンティティとして存在し、その複製が染色体複製とは無関係なベクター）であり得る。ベクターは、自己複製を確実とするための何らかの手段を含有し得る。または、ベクターは、宿主細胞に導入された際に、ゲノム中に統合され、および、中に統合された染色体と一緒に複製されるものであり得る。しかも、単一のベクターもしくはプラスミド、または、一緒になって、宿主細胞のゲノムに導入される全ＤＮＡを含有する２つ以上のベクターもしくはプラスミド、または、トランスポゾンが用いられてもよい。
【０２２４】
ベクターは、形質転換、形質移入、形質導入等された細胞の選択を容易とする１つまたは複数の選択マーカーを含有することが好ましい。選択マーカーは、その生成物が、殺生剤またはウイルス耐性、重金属に対する耐性、栄養要求体に対する原栄養性等をもたらす遺伝子である。
【０２２５】
細菌性選択マーカーの例は、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）もしくは古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のｄａｌ遺伝子、または抗生物質耐性（例えば、アンピシリン耐性、クロラムフェニコール耐性、カナマイシン耐性、ネオマイシン耐性、スペクチノマイシン耐性もしくはテトラサイクリン耐性）を付与するマーカーである。イースト菌宿主細胞に好適なマーカーとして、ＡＤＥ２、ＨＩＳ３、ＬＥＵ２、ＬＹＳ２、ＭＥＴ３、ＴＲＰ１およびＵＲＡ３が挙げられるがこれらに限定されない。糸状真菌宿主細胞で使用される選択マーカーとして以下が挙げられるがこれらに限定されない：ａｄｅＡ（ホスホリボシルアミノイミダゾール−スクシノカルボキシアミドシンターゼ）、ａｄｅＢ（ホスホリボシル−アミノイミダゾールシンターゼ）、ａｍｄＳ（アセトアミダーゼ）、ａｒｇＢ（オルニチンカルバモイルトランスフェラーゼ）、ｂａｒ（ホスフィノトリシンアセチルトランスフェラーゼ）、ｈｐｈ（ハイグロマイシンホスホトランスフェラーゼ）、ｎｉａＤ（硝酸レダクターゼ）、ｐｙｒＧ（オロチジン−５’−リン酸デカルボキシラーゼ）、ｓＣ（硫酸アデニルトランスフェラーゼ）およびｔｒｐＣ（アントラニル酸シンターゼ）ならびにこれらの等価物が挙げられる。アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）細胞での使用に好ましいのは、アスペルギルスニズランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）またはアスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）のａｍｄＳ遺伝子およびｐｙｒＧ遺伝子、ならびにストレプトマイセスハイグロスコピクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）のｂａｒ遺伝子である。トリコデルマ属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）細胞での使用に好ましいのは、ａｄｅＡ遺伝子、ａｄｅＢ遺伝子、ａｍｄＳ遺伝子、ｈｐｈ遺伝子およびｐｙｒＧ遺伝子である。
【０２２６】
この選択マーカーは、国際公開第２０１０／０３９８８９号パンフレットで説明されている二重選択マーカーシステムであってもよい。一態様では、この二重選択マーカーはｈｐｈ−ｔｋ二重選択マーカーシステムである。
【０２２７】
ベクターは、宿主細胞のゲノムへのベクターの統合、または、ゲノムとは無関係の細胞中のベクターの自律複製を許容する要素を含有することが好ましい。
【０２２８】
宿主細胞ゲノムへの統合に関して、ベクターは、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの配列、または、相同的もしくは非相同的組換えによるゲノムへの統合に係るベクターのいずれかの他の要素に依存し得る。または、ベクターは、染色体における正確な位置での宿主細胞のゲノムへの相同的組換えによる統合をもたらす追加のポリヌクレオチドを含有していてもよい。正確な位置で統合される可能性を高めるために、統合要素は、相同的組換えの確率を高めるために対応する標的配列に対して高度の配列同一性を有する、１００〜１０，０００塩基対、４００〜１０，０００塩基対および８００〜１０，０００塩基対などの十分な数の核酸を含有しているべきである。統合要素は、宿主細胞のゲノム中の標的配列と相同的であるいずれかの配列であり得る。さらに、統合要素は、非コーディングまたはコーディングポリヌクレオチドであり得る。他方で、ベクターは、非相同的組換えにより宿主細胞のゲノムに統合され得る。
【０２２９】
自律複製に関して、ベクターは、対象の宿主細胞におけるベクターの自律的な複製を可能とする複製起点をさらに含んでいてもよい。複製起点は、細胞において機能する自律複製を媒介するいずれかのプラスミドレプリケータであり得る。「複製起点」または「プラスミドレプリケータ」という用語は、インビボでのプラスミドまたはベクターの複製を可能とするポリヌクレオチドを意味する。
【０２３０】
細菌性複製起点の例は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）における複製を許容するプラスミドｐＢＲ３２２、ｐＵＣ１９、ｐＡＣＹＣ１７７およびｐＡＣＹＣ１８４の複製起点、ならびに、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）における複製を許容するｐＵＢ１１０、ｐＥ１９４、ｐＴＡ１０６０およびｐＡＭβ１の複製起点である。
【０２３１】
イースト菌宿主細胞において用いられる複製起点の例は、２ミクロン複製起点、ＡＲＳ１、ＡＲＳ４、ＡＲＳ１とＣＥＮ３との組み合わせ、および、ＡＲＳ４とＣＥＮ６との組み合わせである。
【０２３２】
糸状真菌細胞において有用な複製起点の例は、ＡＭＡ１およびＡＮＳ１（Ｇｅｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｇｅｎｅ  ９８：６１−６７；Ｃｕｌｌｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１５：９１６３−９１７５；国際公開第００／２４８８３号パンフレット）である。ＡＭＡ１遺伝子の単離およびＡＭＡ１遺伝子を含むプラスミドまたはベクターの構築は、国際公開第００／２４８８３号パンフレットに開示されている方法に従って達成可能である。
【０２３３】
本発明のポリヌクレオチドの２つ以上のコピーが宿主細胞に挿入されて、ポリペプチドの生成が高められてもよい。ポリヌクレオチドのコピーの数は、配列の少なくとも１つの追加のコピーを宿主細胞ゲノムに統合することにより、または、増幅可能な選択マーカー遺伝子をポリヌクレオチドに含めることにより増加させることが可能であり、ここで、選択マーカー遺伝子の増幅されたコピー、従って、ポリヌクレオチドの追加のコピーを含有する細胞は、適切な選択可能な薬剤中で細胞を培養することにより選択可能である。
【０２３４】
上記の要素を連結して本発明の組換え発現ベクターを構築するために用いられる手法は、当業者に周知である（例えば、前述のＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９を参照のこと）。
【０２３５】
宿主細胞
本発明はまた、本発明のポリペプチドの生成をもたらす１つまたは複数の制御配列に作動可能にリンクした本発明のポリヌクレオチドを含む組換え宿主細胞に関する。ポリヌクレオチドを含む構築物もしくはベクターは、構築物もしくはベクターが染色体性組み込み体として、もしくは、既述の自己複製余剰−染色体性ベクターとして維持されるよう宿主細胞に導入される。「宿主細胞」という用語は、複製の最中に生じる突然変異により親細胞と同等ではない親細胞のいずれかの子孫を包含する。宿主細胞の選択は、ポリペプチドをコードする遺伝子およびそのソースに大きく依存することとなる。
【０２３６】
宿主細胞は、例えば、原核生物または真核生物といった、本発明のポリペプチドの組換え生成において有用ないずれかの細胞であり得る。
【０２３７】
原核宿主細胞は、グラム陽性またはグラム陰性バクテリアのいずれかであり得る。グラム陽性バクテリアとしては、これらに限定されないが、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ゲオバチルス属（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、オセアノバチルス属（Ｏｃｅａｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）およびストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）が挙げられる。グラム陰性バクテリアとしては、これらに限定されないが、カムピロバクター属（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、フラボバクテリウム属（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フソバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ヘリコバクター属（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）、イリオバクター属（Ｉｌｙｏｂａｃｔｅｒ）、ネイッセリア属（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）およびウレアプラズマ属（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ）が挙げられる。
【０２３８】
細菌宿主細胞は、特にこれらに限定されないが、バチルスアルカロフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルスブレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ）、バチルスシルクランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、バチルスクラウシイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ）、バチルスコアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、バシラスフィルムス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｉｒｍｕｓ）、バチルスラウツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌａｕｔｕｓ）、バチルスレンツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｎｔｕｓ）、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルスメガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルスプミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ）、バチルスステアロテルモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）６２４４９、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）、バチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）およびバチルスチューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）細胞を含むいずれかのバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）細胞であり得る。
【０２３９】
細菌宿主細胞はまた、特にこれらに限定されないが、ストレプトコッカスエクイシミリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｑｕｉｓｉｍｉｌｉｓ）、化膿レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカスウベリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｕｂｅｒｉｓ）、およびストレプトコッカスズーエピデミカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｑｕｉ  ｓｕｂｓｐ．Ｚｏｏｅｐｉｄｅｍｉｃｕｓ）細胞のいずれかのストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）細胞を含むいずれかのストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）細胞であり得る。
【０２４０】
細菌宿主細胞はまた、特にこれらに限定されないが、ストレプトマイセスアウロモゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ａｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトマイセスアベルミチリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ａｖｅｒｍｉｔｉｌｉｓ）、ストレプトマイセスコエリコロル（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）、ストレプトマイセスグリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｇｒｉｓｅｕｓ）、およびストレプトマイセスリビダンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｖｉｄａｎｓ）細胞を含むいずれかのストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）細胞であり得る。
【０２４１】
バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）細胞へのＤＮＡの導入は、プロトプラスト形質転換により（例えば、Ｃｈａｎｇ  ａｎｄ  Ｃｏｈｅｎ，１９７９，Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．１６８：１１１−１１５を参照のこと）、コンピテント細胞転換を用いることにより（例えば、Ｙｏｕｎｇ  ａｎｄ  Ｓｐｉｚｉｚｅｎ，１９６１，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．８１：８２３−８２９、またはＤｕｂｎａｕ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄｏｆｆ−Ａｂｅｌｓｏｎ，１９７１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．５６：２０９−２２１を参照のこと）、電気穿孔法により（例えば、Ｓｈｉｇｅｋａｗａ  ａｎｄ  Ｄｏｗｅｒ，１９８８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ６：７４２−７５１を参照のこと）、または、接合により（例えば、Ｋｏｅｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｔｈｏｒｎｅ，１９８７，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１６９：５２７１−５２７８を参照のこと）行われ得る。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）細胞へのＤＮＡの導入は、プロトプラスト形質転換により（例えば、Ｈａｎａｈａｎ，１９８３，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１６６：５５７−５８０を参照のこと）または電気穿孔法により（例えば、Ｄｏｗｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１６：６１２７−６１４５を参照のこと）行われ得る。ストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）細胞へのＤＮＡの導入は、プロトプラスト形質転換および電気穿孔法により（例えば、Ｇｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｆｏｌｉａ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．（Ｐｒａｈａ）４９：３９９−４０５を参照のこと）、接合により（例えば、Ｍａｚｏｄｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１７１：３５８３−３５８５を参照のこと）、または、形質導入により（例えば、Ｂｕｒｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９８：６２８９−６２９４を参照のこと）行われ得る。シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）細胞へのＤＮＡの導入は、電気穿孔法により（例えば、Ｃｈｏｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ６４：３９１−３９７を参照のこと）、または、接合により（例えば、Ｐｉｎｅｄｏ  ａｎｄ  Ｓｍｅｔｓ，２００５，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．７１：５１−５７を参照のこと）行われ得る。ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）細胞へのＤＮＡの導入は、例えば、天然コンピテンスにより（例えば、Ｐｅｒｒｙ  ａｎｄ  Ｋｕｒａｍｉｔｓｕ，１９８１，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．３２：１２９５−１２９７を参照のこと）、プロトプラスト形質転換により（例えば、Ｃａｔｔ  ａｎｄ  Ｊｏｌｌｉｃｋ，１９９１，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｓ  ６８：１８９−２０７を参照のこと）、電気穿孔法により（例えば、Ｂｕｃｋｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６５：３８００−３８０４を参照のこと）、または、接合により（例えば、Ｃｌｅｗｅｌｌ，１９８１，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．４５：４０９−４３６を参照のこと）行われ得る。しかしながら、ＤＮＡを宿主細胞に導入するための技術分野において公知である方法のいずれかを用いることが可能である。
【０２４２】
宿主細胞はまた、哺乳類、昆虫、植物または真菌細胞などの真核生物であり得る。
【０２４３】
宿主細胞は真菌細胞であり得る。本明細書において用いられるところ、「真菌」は、子嚢菌門（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）、担子菌門（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔａ）、ツボカビ門（Ｃｈｙｔｒｉｄｉｏｍｙｃｏｔａ）および接合菌門（Ｚｙｇｏｍｙｃｏｔａ）、ならびに、卵菌門（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）および全ての栄養胞子形成真菌（Ｈａｗｋｓｗｏｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎ，Ａｉｎｓｗｏｒｔｈ  ａｎｄ  Ｂｉｓｂｙ’ｓ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｔｈｅ  Ｆｕｎｇｉ，８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９５，ＣＡＢ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫに定義されているとおり）を含む。
【０２４４】
真菌宿主細胞はイースト菌細胞であり得る。本明細書において用いられるところ、「イースト菌」は、子嚢菌酵母（エンドミセス目（Ｅｎｄｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ））、担子菌イースト菌を含み、イースト菌は、不完全菌類（不完全酵母菌類（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｔｅｓ））に属する。イースト菌の分類は将来において変更される可能性があるため、本発明の目的について、イースト菌は、Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｙｅａｓｔ（Ｓｋｉｎｎｅｒ，Ｐａｓｓｍｏｒｅ，ａｎｄ  Ｄａｖｅｎｐｏｒｔ，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｓｏｃ．Ａｐｐ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｎｏ．９，１９８０）に記載されているとおりに定義されるものとする。
【０２４５】
イースト菌宿主細胞は、クルイベロマイセスラクティス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ  ｌａｃｔｉｓ）、サッカロマイセスカルスベルゲンシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、サッカロマイセスジアスタチクス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ）、サッカロマイセスドウグラシイ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｄｏｕｇｌａｓｉｉ）、サッカロマイセスクルイベリ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｋｌｕｙｖｅｒｉ）、サッカロマイセスノルベンシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｎｏｒｂｅｎｓｉｓ）、サッカロマイセスオビホルミス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｏｖｉｆｏｒｍｉｓ）またはヤロウイアリポリチカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ  ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）細胞などのカンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、ハンセヌラ属（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）、クルイベロマイセス属（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）、ピチア属（Ｐｉｃｈｉａ）、サッカロマイセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、シゾサッカロマイセス属（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）またはヤロウイア属（Ｙａｒｒｏｗｉａ）細胞であり得る。
【０２４６】
真菌宿主細胞は糸状真菌細胞であり得る。「糸状菌」は、真菌植物門（Ｅｕｍｙｃｏｔａ）および卵菌門（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）亜門（前述のＨａｗｋｓｗｏｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５で定義されているとおり）の全てのフィラメント形を含む。糸状菌は、一般に、キチン、セルロース、グルカン、キトサン、マンナンおよび他の複雑な多糖類から組成される菌糸体壁によって特徴付けられる。栄養成長は菌糸の伸展によるものであり、および、炭素異化は絶対好気性である。対照的に、サッカロマイセスセレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）などのイースト菌による栄養成長は単細胞葉状体の出芽によるものであり、および、炭素異化は発酵性であり得る。
【０２４７】
糸状真菌宿主細胞は、アクレモニウム属（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、アウレオバシジウム属（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ）、ブエルカンデラ属（Ｂｊｅｒｋａｎｄｅｒａ）、セリポリオプシス属（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ）、クリソスポリウム属（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）、コプリヌス属（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）、コリオルス属（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ）、クリプトコッカス属（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、フィリバシジウム属（Ｆｉｌｉｂａｓｉｄｉｕｍ）、フザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、マグナポルテ属（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ）、ムコール属（Ｍｕｃｏｒ）、ミセリオフトラ属（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ）、ネオカリマスチクス属（Ｎｅｏｃａｌｌｉｍａｓｔｉｘ）、ニューロスポラ属（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）、パエシロマイセス属（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）、ペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、ファネロケーテ属（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ）、フレビア属（Ｐｈｌｅｂｉａ）、ピロマイセス属（Ｐｉｒｏｍｙｃｅｓ）、プレウロツス属（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ）、シゾフィルム属（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ）、タラロマイセス属（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ）、テルモアスクス属（Ｔｈｅｒｍｏａｓｃｕｓ）、チエラビア属（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）、トリポクラジウム属（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ）、トラメテス属（Ｔｒａｍｅｔｅｓ）またはトリコデルマ属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）細胞であり得る。
【０２４８】
例えば、糸状真菌宿主細胞は、アスペルギルスアワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ａｗａｍｏｒｉ）、アスペルギルスフォエティダス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｏｅｔｉｄｕｓ）、アスペルギルスフミガーツス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、アスペルギルスジャポニクス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）、アスペルギルスニズランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ）、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）、ヤケイロタケ（Ｂｊｅｒｋａｎｄｅｒａ  ａｄｕｓｔａ）、セリポリオプシスアネイリナ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ  ａｎｅｉｒｉｎａ）、セリポリオプシスカレギエア（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ  ｃａｒｅｇｉｅａ）、セリポリオプシスギルベスセンス（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ  ｇｉｌｖｅｓｃｅｎｓ）、セリポリオプシスパンノシンタ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ  ｐａｎｎｏｃｉｎｔａ）、セリポリオプシスリブロサ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ  ｒｉｖｕｌｏｓａ）、セリポリオプシススブルファ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ  ｓｕｂｒｕｆａ）、セリポリオプシススブベルミスポラ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ  ｓｕｂｖｅｒｍｉｓｐｏｒａ）、クリソスポリウムイノプス（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｉｎｏｐｓ）、クリソスポリウムケラチノフィルム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｋｅｒａｔｉｎｏｐｈｉｌｕｍ）、クリソスポリウムルクノウェンス（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｌｕｃｋｎｏｗｅｎｓｅ）、クリソスポリウムメルダリウム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｍｅｒｄａｒｉｕｍ）、クリソスポリウムパンニコラ（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｐａｎｎｉｃｏｌａ）、クリソスポリウムクイーンスランジクム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄｉｃｕｍ）、クリソスポリウムトロピクム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｔｒｏｐｉｃｕｍ）、クリソスポリウムゾナツム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｚｏｎａｔｕｍ）、コプリヌスシネレウス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ  ｃｉｎｅｒｅｕｓ）、クリオルスヒルスツス（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ  ｈｉｒｓｕｔｕｓ）、フザリウムバクテリジオイデス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｂａｃｔｒｉｄｉｏｉｄｅｓ）、フザリウムセレアリス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｃｅｒｅａｌｉｓ）、フザリウムクロークウェレンス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｃｒｏｏｋｗｅｌｌｅｎｓｅ）、フザリウムクルモルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｃｕｌｍｏｒｕｍ）、フザリウムグラミネアルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）、フザリウムグラミヌム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｇｒａｍｉｎｕｍ）、フザリウムヘテロスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｈｅｔｅｒｏｓｐｏｒｕｍ）、フザリウムネグンディ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｎｅｇｕｎｄｉ）、フザリウムオキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、フザリウムレチクランツム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｍ）、フザリウムロゼウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｒｏｓｅｕｍ）、フザリウムサムブシヌム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓａｍｂｕｃｉｎｕｍ）、フザリウムサルコクロウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓａｒｃｏｃｈｒｏｕｍ）��フザリウムスポロトリキオイデス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｐｏｒｏｔｒｉｃｈｉｏｉｄｅｓ）、フザリウムスルフレウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｕｌｐｈｕｒｅｕｍ）、フザリウムトルロスム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｔｏｒｕｌｏｓｕｍ）、フザリウムトリコテシオイデス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｔｒｉｃｈｏｔｈｅｃｉｏｉｄｅｓ）、フザリウムベネナツム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）、フミコラインソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、フミコララヌギノサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）、ムコールミエヘイ（Ｍｕｃｏｒ  ｍｉｅｈｅｉ）、ミセリオフトラテルモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）、ニューロスポラクラッサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｓｓａ）、ペニシリウムプルプロゲヌム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｐｕｒｐｕｒｏｇｅｎｕｍ）、ファネロケーテクリソスポリウム（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）、フレビアラジアタ（Ｐｈｌｅｂｉａ  ｒａｄｉａｔａ）、プレウロツスエリンギイ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｅｒｙｎｇｉｉ）、チエラビアテルレストリス（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）、トラメテスビロサ（Ｔｒａｍｅｔｅｓ  ｖｉｌｌｏｓａ）、トラメテスベルシコロル（Ｔｒａｍｅｔｅｓ  ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、トリコデルマハルジアヌム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、トリコデルマコニンギイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｋｏｎｉｎｇｉｉ）、トリコデルマロンギブラキアツム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｌｏｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）、トリコデルマレエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）またはトリコデルマビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｉｄｅ）細胞であり得る。
【０２４９】
真菌細胞は、それ自体公知の様式でのプロトプラスト形成、プロトプラストの形質転換、および、細胞壁の再生を含むプロセスにより形質転換され得る。アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）およびトリコデルマ属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）宿主細胞の形質転換に好適な手法は、欧州特許第２３８０２３号明細書、Ｙｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：１４７０−１４７４、およびＣｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：１４１９−１４２２に記載されている。フザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）種の形質転換に好適な方法は、Ｍａｌａｒｄｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｇｅｎｅ  ７８：１４７−１５６および国際公開第９６／００７８７号パンフレットに記載されている。イースト菌は、Ｂｅｃｋｅｒ  ａｎｄ  Ｇｕａｒｅｎｔｅ，Ｉｎ  Ａｂｅｌｓｏｎ，Ｊ．Ｎ．ａｎｄ  Ｓｉｍｏｎ，Ｍ．Ｉ．，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｙｅａｓｔ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅ  １９４，ｐｐ  １８２−１８７，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｉｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１５３：１６３；および、Ｈｉｎｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９７８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７５：１９２０に記載の手法を用いて形質転換され得る。
【０２５０】
生成方法
本発明はまた：（ａ）ポリペプチドの生成を実施可能な条件下で、野生型形態でポリペプチドを生成する細胞を培養するステップ；および、（ｂ）ポリペプチドを回収するステップを含む本発明のポリペプチドを生成する方法（例えば、インビトロまたはエクスビボ生成方法）に関する。一態様において、細胞はバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）細胞である。他の態様において、細胞はバチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）６２４４９、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）、またはバチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）細胞である。
【０２５１】
本発明はまた：（ａ）ポリペプチドの生成を実施可能な条件下で本発明の組換え宿主細胞を培養するステップ；および、任意選択的に（ｂ）ポリペプチドを回収するステップを含む本発明のポリペプチドを生成する方法（例えば、インビトロまたはエクスビボ生成方法）に関する。
【０２５２】
宿主細胞は、技術分野において周知である方法を用いてポリペプチドの生成に好適な栄養培地中で培養される。例えば、細胞は、好適な培地中ならびにポリペプチドの発現および／または単離が許容される条件下で行われる、振盪フラスコ培養により、または、実験用もしくは産業用発酵槽における小規模もしくは大規模発酵（連続式、バッチ式、フェドバッチ式または固体状発酵を含む）により培養され得る。培養は、炭素および窒素源および無機塩を含む好適な栄養培地において、技術分野において公知である手法を用いて行われる。好適な媒体は、商業的な供給者から入手可能であるか、または、公開された組成に従って調製され得る（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎのカタログ）。ポリペプチドが栄養培地に分泌される場合、ポリペプチドは培地から直接回収可能である。ポリペプチドが分泌されない場合、細胞ライセートから回収可能である。
【０２５３】
ポリペプチドは、ポリペプチドに特異的な技術分野において公知である方法を用いて検出され得る。これらの検出方法は、特定の抗体の使用、酵素産生物の形成、または、酵素基質の消失を含むが、これらに限定されない。例えば、酵素アッセイを用いてポリペプチドの活性を判定してもよい。
【０２５４】
本ポリペプチドを、当分野で既知の方法を使用して回収することができる。例えば、このポリペプチドを、収集、遠心分離、ろ過、抽出、噴霧乾燥、蒸発または沈殿が挙げられるがこれらに限定されない従来の手順により栄養培地から回収することができる。一態様では、このポリペプチドを含む発酵ブロスを回収する。
【０２５５】
ポリペプチドは、実質的に純粋なポリペプチドを得るために、特にこれらに限定されないが、クロマトグラフィ（例えば、イオン交換、親和性、疎水性、クロマトフォーカシングおよびサイズ排除）、電気泳動的手法（例えば、分取等電点電気泳動）、較差溶解度（例えば、硫酸アンモニウム沈殿）、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、または、抽出（例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｊａｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｒｙｄｅｎ，ｅｄｉｔｏｒｓ，ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８９を参照のこと）を含む技術分野において公知である多様な手法によって精製され得る。
【０２５６】
代替的な態様においては、ポリペプチドは回収されず、ポリペプチドを発現する本発明の宿主細胞がポリペプチドのソースとして用いられ得る。
【０２５７】
植物中での産生
本発明はまた、回収可能な量でポリペプチドまたはドメインを発現するためにおよび産生するために本発明のポリヌクレオチドを含む単離植物（例えば、トランスジェニック植物、植物の一部または植物細胞）にも関する。このポリペプチドまたはドメインを、この植物または植物の一部から回収することができる。あるいは、このポリペプチドまたはドメインを含む植物または植物の一部を、食物もしくは飼料の品質を向上させる（例えば、栄養価、嗜好性およびレオロジー特性を向上させる）ために、または非栄養因子を破壊するために、そのまま使用することができる。
【０２５８】
このトランスジェニック植物は、双子葉（ｄｉｃｏｔｙｌｅｄｏｎｏｕｓ）（双子葉（ｄｉｃｏｔ））または単子葉（ｍｏｎｏｃｏｔｙｌｅｄｏｎｏｕｓ）（単子葉（ｍｏｎｏｃｏｔ））であり得る。単子葉植物の例は、イネ科草本（例えば、牧草（ブルーグラス、イチゴツナギ属（Ｐｏａ））、イネ科牧草（例えば、ウシノケグサ属（Ｆｅｓｔｕｃａ）、ドクムギ属（Ｌｏｌｉｕｍ））、寒地型牧草（例えばコヌカグサ属（Ａｇｒｏｓｔｉｓ））、および穀物（例えば、小麦、オートムギ、ライムギ、オオムギ、イネ、モロコシおよびトウモロコシ（ｍａｉｚｅ）（トウモロコシ（ｃｏｒｎ））である。
【０２５９】
双子葉植物の例は、タバコ、マメ科植物（例えば、ルピナス、ジャガイモ、サトウダイコン、エンドウマメ、マメおよびダイズ豆）、ならびにアブラナ科植物（アブラナ（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）科）（例えば、カリフラワー、ナタネ、および密接に関連するモデル生物シロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ  ｔｈａｌｉａｎａ））である。
【０２６０】
植物の一部の例は、茎、カルス、葉、根、果実、種子および塊茎、ならびにこれらの部分を含む個々の組織（例えば、表皮、葉肉、柔組織、維管束組織、分裂組織）である。
【０２６１】
植物細胞および特定の植物細胞コンパートメント（例えば、葉緑体、アポプラスト、ミトコンドリア、空胞、ペルオキシソームおよび細胞質）も植物の一部であると考えられる。
【０２６２】
また、そのような植物、植物の一部および植物細胞の子孫も本発明の範囲に含まれる。
【０２６３】
本ポリペプチドまたは本ドメインを発現するトランスジェニック植物またはトランスジェニック植物細胞を、当分野で既知の方法に従って構築することができる。簡潔に言うと、この植物または植物細胞を、このポリペプチドまたはドメインをコードする１つまたは複数の発現構築物を植物宿主ゲノムまたは葉緑体ゲノムに組み込み、得られた改変植物または改変植物細胞をトランスジェニック植物またはトランスジェニック植物細胞へと増殖させることにより構築する。
【０２６４】
本発明はまた、本発明のポリペプチドまたはドメインを生成する方法であって、（ａ）このポリペプチドまたはドメインの産生に資する条件下で、このポリペプチドまたはドメインをコードするポリヌクレオチドを含むトランスジェニック植物または植物細胞を培養するステップ、および（ｂ）このポリペプチドおよびドメインを回収するステップを含む方法にも関する。
【０２６５】
発酵ブロス配合物
本発明はまた、本発明のポリペプチドを含む発酵ブロス配合物にも関する。この発酵ブロス生成物は発酵プロセスで使用される追加の成分をさらに含み、例えば、細胞（例えば、目的のポリペプチドを産生するのに使用される、本発明のポリペプチドをコードする遺伝子を含む宿主細胞）、細胞残屑、バイオマス、発酵培地および／または発酵産物をさらに含む。いくつかの実施形態では、この組成物は、有機酸、死滅細胞および／または細胞残屑ならびに培養培地を含む細胞死滅発酵ブロスである。
【０２６６】
「発酵ブロス」という用語は、本明細書において用いられるところ、回収および／または精製を受けていないまたは最小限である、細胞発酵により生成された調製物を指す。例えば、発酵ブロスは、微生物培養物を飽和まで増殖させ、炭素制限条件下でインキュベートしてタンパク質の合成（例えば宿主細胞による酵素の発現）および細胞培養培地中への分泌を可能にする場合に生成される。この発酵ブロスは、発酵終了時に得られる発酵材料の未分画内容物または分画内容物を含むことができる。典型的には、この発酵ブロスは未分画であり、微生物細胞（例えば糸状真菌細胞）が例えば遠心分離により除去された後に存在する使用済みの培養培地および細胞残屑を含む。いくつかの実施形態では、この発酵ブロスは、使用済みの細胞培養培地、細胞外酵素、ならびに生存可能なおよび／または生存不能な微生物細胞を含む。
【０２６７】
ある実施形態では、この発酵ブロス配合物および細胞組成物は、少なくとも１種の１〜５個の炭素の有機酸および／またはその塩を含む第１の有機酸成分と、少なくとも１種の６個以上の炭素の有機酸および／またはその塩を含む第２の有機酸成分とを含む。特定の実施形態では、第１の有機酸成分は、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、それらの塩、または上述のうちの２種以上の混合物であり、第２の有機酸成分は、安息香酸、シクロヘキサンカルボン酸、４−メチル吉草酸、フェニル酢酸、それらの塩、または上述のうちの２種以上の混合物である。
【０２６８】
一態様では、この組成物は有機酸を含み、死滅細胞および／または細胞残屑を任意選択でさらに含む。一実施形態では、死滅細胞および／または細胞残屑を細胞死滅発酵ブロスから除去し、これらの成分を含まない組成物を生成する。
【０２６９】
発酵ブロス配合物または細胞組成物は、ソルビトール、塩化ナトリウム、ソルビン酸カリウムおよび当分野で既知の他のものが挙げられるがこれらに限定されない保存料および／または抗菌（例えば静菌）剤をさらに含むことができる。
【０２７０】
細胞死滅発酵ブロスまたは組成物は、発酵終了時に得られる発酵材料の未分画内容物を含むことができる。典型的には、この細胞死滅発酵ブロスまたは組成物は、微生物細胞（例えば糸状真菌細胞）を飽和まで増殖させ、炭素制限条件下でインキュベートしてタンパク質合成を可能にした後に存在する使用済みの培養培地および細胞残屑を含む。いくつかの実施形態では、細胞死滅発酵ブロスまたは組成物は、使用済みの細胞培養培地、細胞外酵素および死滅糸状真菌細胞を含む。いくつかの実施形態では、当分野で既知の方法を使用して、細胞死滅発酵ブロスまたは組成物中に存在する微生物細胞を透過処理し得る、および／または溶解させ得る。
【０２７１】
本明細書で説明された発酵ブロスは概して液体であるが、不溶性成分（例えば、死滅細胞、細胞残屑、培養培地成分および／または不溶性酵素）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、不溶性成分を除去して清澄化液体組成物を生成することができる。
【０２７２】
本発明の発酵ブロス配合物および細胞組成物を、国際公開第９０／１５８６１号パンフレットまたは国際公開第２０１０／０９６６７３号パンフレットで説明されている方法により製造することができる。
【０２７３】
酵素組成物
本発明はまた、本発明のポリペプチドを含む組成物にも関する。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。好ましくは、この組成物は、そのようなポリペプチドが富化されている。「富化」という用語は、この組成物のベータ−グルカナーゼ活性が例えば少なくとも１．１の富化因子で高められていることを示す。
【０２７４】
この組成物は、主要な酵素成分として本発明のポリペプチドを含むことができる（例えば一成分組成物）。あるいは、この組成物は複数の酵素活性を含むことができ、例えば、以下からなる群から選択される１種または複数種の（例えば数種の）酵素を含むことができる：ヒドロラーゼ、イソメラーゼ、リガーゼ、リアーゼ、オキシドレダクターゼ、またはトランスフェラーゼ、例えばアルファ−ガラクトシダーゼ、アルファ−グルコシダーゼ、アミノペプチダーゼ、アミラーゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、ベータ−キシロシダーゼ、カルボヒドラーゼ、カルボキシペプチダーゼ、カタラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、セルラーゼ、キチナーゼ、クチナーゼ、シクロデキストリングリコシルトランスフェラーゼ、デオキシリボヌクレアーゼ、エンドグルカナーゼ、エステラーゼ、グルコアミラーゼ、インベルターゼ、ラッカーゼ、リパーゼ、マンノシダーゼ、ムタナーゼ、オキシダーゼ、ペクチン分解性酵素、ペルオキシダーゼ、フィターゼ、ポリフェノールオキシダーゼ、タンパク質分解性酵素、リボヌクレアーゼ、トランスグルタミナーゼまたはキシラナーゼ。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２７５】
この組成物は当分野で既知の方法に従って調製され得、液体組成物の形態であってもよいし乾燥組成物の形態であってもよい。この組成物を、当分野で既知の方法に従って安定化することができる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２７６】
以下に本発明の組成物の好ましい使用例を示す。この組成物の投与量、およびこの組成物が使用される他の条件を、当分野で既知の方法に基づいて決定することができる。
【０２７７】
使用
本発明のベータ−グルカナーゼを、ベータ−グルカン（例えば、ベータ−Ｄ−グルカン、ベータ−１，３−１，４グルカン、混合連結ベータ−グルカン、オオムギベータ−グルカン、オートミールベータ−グルカン）を（例えばアルカリ性条件下で）分解する必要がある用途で使用することができる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。ベータ−グルカナーゼが使用される可能性がある場合の例として、洗剤用途、紙製品およびパルプ製品が挙げられる。一態様では、本発明のベータ−グルカナーゼを、生地および／もしくは硬質面の洗浄もしくはクリーニング（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）および手動食器洗浄（ＨＤＷ）等の食器洗浄）に使用し得る、ならびに／またはクリーニングプロセス（例えば、洗濯または硬質面クリーニング（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）等の食器洗浄および産業クリーニング）で使用し得る、ならびに／または洗濯および／もしくは硬質面クリーニング（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）等の食器洗浄）に使用し得る、ならびに／または以下のうちの少なくとも１つに使用し得る：物品からのバイオフィルムおよび／もしくは悪臭の予防、低減または除去、ならびに／または再付着防止のために使用し得る。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２７８】
そのようなベータ−グルカナーゼは、配列番号７、配列番号２、配列番号３，配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を好ましくは有する。本発明のある実施形態は、前記ベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物（例えばクリーニング組成物または洗剤組成物）である。
【０２７９】
バイオフィルムは、微生物が物品上に存在し且つこの物品上で互いに固着する場合には生地上で発生する可能性がある。いくつかの微生物は、生地等の物品の表面に付着する傾向がある。いくつかの微生物はそのような表面に付着し、この表面上でバイオフィルムを形成する。このバイオフィルムは粘着性の場合があり、付着した微生物および／またはバイオフィルムを除去するのは困難な場合がある。さらに、このバイオフィルムは、このバイオフィルムの粘着性に起因して汚染物に付着する。市場で入手可能な市販の洗濯用洗剤組成物は、そのような付着した微生物またはバイオフィルムを除去しない。
【０２８０】
本発明は、物品からのバイオフィルムの予防、低減または除去のための、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドの使用であって、このポリペプチドは細菌源から得られ、この物品は生地である、使用に関する。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。本発明の一実施形態では、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを、物品の粘着性の予防、低減または除去のために使用する。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８１】
組成物
本発明はまた、本発明のベータ−グルカナーゼ（例えば本発明のポリペプチド）を含む組成物にも関する。本発明はまた、本発明のベータ−グルカナーゼ（例えば本発明のポリペプチド）と１種または複数種の追加の酵素とを含む組成物にも関する。本発明はまた、本発明のベータ−グルカナーゼ（例えば本発明のポリペプチド）と１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含む組成物にも関し、好ましくは、前記１種または複数種のアミラーゼは１種または複数種のアルファ−アミラーゼである。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８２】
一実施形態では、本発明は、本発明のベータ−グルカナーゼと好適な界面活性剤とを含む組成物（特にクリーニング組成物および／または洗剤組成物）に関する。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８３】
本発明はまた、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有する単離ポリペプチドを含む組成物にも関する：ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも７５％の配列同一性、少なくとも８０％の配列同一性、少なくとも８１％の配列同一性、少なくとも８２％の配列同一性、少なくとも８３％の配列同一性、少なくとも８４％の配列同一性、少なくとも８５％の配列同一性、少なくとも８６％の配列同一性、少なくとも８７％の配列同一性、少なくとも８８％の配列同一性、少なくとも８９％の配列同一性、少なくとも９０％の配列同一性、少なくとも９１％の配列同一性、少なくとも９２％の配列同一性、少なくとも９３％の配列同一性、少なくとも９４％の配列同一性、少なくとも９５％の配列同一性、少なくとも９６％の配列同一性、少なくとも９７％の配列同一性、少なくとも９８％の配列同一性、少なくとも９９％の配列同一性またはさらには１００％の配列同一性を有するポリペプチド；ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補鎖と中度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも７５％の配列同一性、少なくとも８０％の配列同一性、少なくとも８１％の配列同一性、少なくとも８２％の配列同一性、少なくとも８３％の配列同一性、少なくとも８４％の配列同一性、少なくとも８５％の配列同一性、少なくとも８６％の配列同一性、少なくとも８７％の配列同一性、少なくとも８８％の配列同一性、少なくとも８９％の配列同一性、少なくとも９０％の配列同一性、少なくとも９１％の配列同一性、少なくとも９２％の配列同一性、少なくとも９３％の配列同一性、少なくとも９４％の配列同一性、少なくとも９５％の配列同一性、少なくとも９６％の配列同一性、少なくとも９７％の配列同一性、少なくとも９８％の配列同一性、少なくとも９９％の配列同一性またはさらには１００％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；ｅ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの、１つまたは複数の（例えばいくつかの）アミノ酸の置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびにｆ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８４】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８５】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも７５％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８６】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８１％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８７】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８２％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８８】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８３％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２８９】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８４％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９０】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８５％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９１】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８６％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９２】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８７％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９３】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８８％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９４】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８９％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９５】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９０％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９６】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９１％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９７】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９２％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９８】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９３％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０２９９】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９４％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３００】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３０１】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９６％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３０２】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９７％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３０３】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９８％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３０４】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９９％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３０５】
一実施形態では、本発明の組成物は、ベータ−グルカナーゼ活性を有し且つ配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも１００％の配列同一性を有する単離ポリペプチドを含む。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３０６】
一実施形態では、この洗剤組成物を特定の用途（例えば、洗濯（特に家庭での洗濯）、食器洗浄または硬質面クリーニング）に適合させることができる。
【０３０７】
別の実施形態では、本発明の組成物はクリーニング組成物または洗剤組成物である。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３０８】
ｐＨが高いアルカリ性液体洗剤は、洗濯および食器洗浄クリーニング等のクリーニングで広く使用されている。ｐＨが高い液体洗剤は特に、北アメリカの消費者により一般に使用されている。この高ｐＨクリーニング組成物はまた、産業クリーニングプロセスでも使用されている。アルカリ性洗剤は、洗剤特性を有する液体を含む。そのような洗剤のｐＨは通常、ｐＨ９〜１２．５の範囲である。この高ｐＨ洗剤は概して、界面活性剤、ビルダーおよび漂白成分等の成分を含み、さらに、顕著な水の量およびアルカリ（例えば、ＮａＯＨ、ＴＳＰ（リン酸三ナトリウム）、アンモニア、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム（ＫＯＨ））を含む場合もあり、これらのアルカリは通常、０．１〜３０重量パーセント（ｗｔ）に対応する量で添加される。洗剤に酵素を添加することは、この酵素の特定の活性により生地およびカトラリー等の表面から特定の汚れが効果的に除去されることから非常に有利である。しかしながら、高ｐＨ液体洗剤中での許容される酵素安定性を維持することの困難さにより、長年にわたり、この洗剤への酵素の包含は禁止されている。別の実施形態では、本発明は、高ｐＨ液体クリーニング組成物であって、そのような組成物での使用に適した本発明のアルカリ性で安定なベータ−グルカナーゼを含む高ｐＨ液体クリーニング組成物に関する。
【０３０９】
別の実施形態では、本発明の組成物は、ｐＨを少なくとも約７．５、少なくとも約８、少なくとも約９にするために、好ましくはｐＨを１０以上にするために、アルカリ性緩衝系を好ましくは含む。好ましくは、このｐＨは約９〜約１３である。この高いｐＨを達成するために、アルカリ金属水酸化物（特に水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム）が通常はこの組成物の０．１〜約３０重量％（重量パーセント、略して重量％）の量で存在する必要があり、好ましくは１．０〜２．５％の量で存在する必要がある、または、製品の望ましいｐＨに従って、より多い量の好適なアルカリ金属ケイ酸塩（例えば金属ケイ酸塩）が存在する必要がある。
【０３１０】
別の実施形態では、本発明の組成物はｐＨが６．５以上であり、好ましくはｐＨが７．０以上であり、より好ましくはｐＨが７．５以上であり、漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１３．５の範囲で選択され、さらに好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、さらに最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択される。好ましい実施形態では、ｐＨがそのような好ましい範囲の洗剤組成物は固体である。
【０３１１】
別の実施形態では、本発明は、ｐＨが６．５以上であり、好ましくはｐＨが７．５以上である液体クリーニング組成物であって、少なくとも０．００１（例えば少なくとも０．０１）重量％のベータ−グルカナーゼを含み、前記ベータ−グルカナーゼは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８１％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、組成物に関する。さらに関連する実施形態では、ベータ−グルカナーゼは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８２％（または少なくとも８３％または８４％または８５％または８６％または８７％または８８％または８９％または９０％または９１％または９２％または９３％または９４％または９５％または９６％または９７％または９８％または９９％または１００％）の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３１２】
本発明の洗剤組成物は、例えば、汚れた布地の前処理に適した洗濯添加剤組成物およびリンス添加布地柔軟剤組成物を含む手洗い式もしくは機械式の洗濯洗剤組成物として配合され得る、または一般家庭での硬質面クリーニング作業で使用される洗剤組成物として配合され得る、または手洗い式もしくは機械式の食器洗浄作業用に配合され得る。本発明の洗剤組成物は、硬質面クリーニング、自動食器洗浄用途ならびに美容用途（例えば義歯、歯、髪および皮膚）での用途を見出すことができる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。この洗剤組成物を使用して、クリーニングプロセスの最中に食器洗浄機または洗濯機の内部の部品（特に、この機械内部の水パイプラインのような隠れた部品、特に回転式アーム中の隠れた部品、およびふるい／フィルタ）をきれいにすることもできる。
【０３１３】
本発明の洗剤組成物は任意の好都合な形態であり得、例えば、バー、錠剤、粉末、顆粒、ペーストまたは液体であり得る。液体洗剤は、典型的には最大７０％の水と０〜３０％の有機溶媒とを含む水性であってもよいし、非水性であってもよい。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３１４】
別途注記しない限り、本明細書に記載されている全ての成分または組成物のレベルは、その成分または組成物の活性レベルに関してであり、市販の供給源中に存在し得る不純物（例えば残留溶媒または副生成物）を除外している。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３１５】
本発明のベータ−グルカナーゼは通常、洗剤組成物の重量を基準として０．０００００１％〜２％の酵素タンパク質のレベルでこの組成物に組み込まれ、好ましくは、この組成物の重量を基準として０．００００１％〜１％の酵素タンパク質のレベルでこの組成物に組み込まれ、より好ましくは、この組成物の重量を基準として０．０００１％〜０．７５％の酵素タンパク質のレベルでこの組成物に組み込まれ、さらにより好ましくは、この組成物の重量を基準として０．００１％〜０．５％の酵素タンパク質のレベルでこの組成物に組み込まれる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３１６】
さらに、本発明のベータ−グルカナーゼは通常、洗浄水中の濃度が０．００００００１％〜１％の酵素タンパク質のレベルの量で洗剤組成物に組み込まれ、好ましくは、０．０００００５％〜０．０１％の酵素タンパク質のレベルの量で洗剤組成物に組み込まれ、より好ましくは、０．０００００１％〜０．００５％の酵素タンパク質のレベルの量で洗剤組成物に組み込まれ、さらにより好ましくは、洗浄水中に０．００００１％〜０．００１％の酵素タンパク質のレベルの量で洗剤組成物に組み込まれる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３１７】
公知であるように、酵素の量はまた、特定の用途に従っておよび／または組成物に含まれる他の成分の結果として変動するだろう。
【０３１８】
自動食器洗浄（ＡＤＷ）で使用される組成物は、例えば、この組成物の重量を基準として０．０００１％〜５０％（例えば０．００１％〜２５％、例えば０．００２％〜２０％、例えば０．０１〜１５％）の酵素タンパク質を含むことができる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３１９】
自動食器洗浄（ＡＤＷ）で使用される組成物は、例えば、この組成物の重量を基準として０．００１％〜５０％（例えば０．０１％〜２５％、例えば０．０２％〜２０％、例えば０．１〜１５％）の酵素タンパク質を含むことができる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３２０】
洗濯用顆粒で使用される組成物は、例えば、この組成物の重量を基準として０．０００１％〜５０％（例えば０．００１％〜２０％、例えば０．０１％〜１５％、例えば０．０５％〜１０％）の酵素タンパク質を含むことができる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３２１】
洗濯用液体で使用される組成物は、例えば、この組成物の重量を基準として０．０００１％〜１０％（例えば０．００１％〜７％、例えば０．１％〜５％）の酵素タンパク質を含むことができる。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３２２】
好ましい洗剤組成物は、本発明のポリペプチドを酵素タンパク質０．００００１ｍｇ／組成物１ｇ〜酵素タンパク質１００ｍｇ／組成物１ｇの濃度で含み、好ましくは、酵素タンパク質０．０００１ｍｇ／組成物１ｇ〜酵素タンパク質５０ｍｇ／組成物１ｇの濃度で含み、より好ましくは、酵素タンパク質０．００１ｍｇ／組成物１ｇ〜酵素タンパク質２０ｍｇ／組成物１ｇの濃度で含み、特に好ましくは、酵素タンパク質０．０１ｍｇ／組成物１ｇ〜酵素タンパク質１０ｍｇ／組成物１ｇの濃度で含む。
【０３２３】
好ましい洗剤組成物（特に、単位用量製品として製剤化されている組成物）は、本発明のポリペプチドを０．０１ｍｇ／作業〜酵素タンパク質１００ｍｇ／作業の量で含み、好ましくは、酵素タンパク質０．１ｍｇ／作業〜２０ｍｇ／作業の量で含み、より好ましくは、酵素タンパク質０．２〜１０ｍｇ／作業の量で含み、特に好ましくは、酵素タンパク質０．３〜５ｍｇ／作業の量で含む。例えば、酵素タンパク質０．５ｍｇ１ｍｇ、１．５ｍｇ、２ｍｇまたは２．５ｍｇ／作業の量を使用することができる。作業当たりのｍｇの表現（ｍｇ／作業）またはｍｇ／適用は、完全なクリーニングサイクルに使用される組成物の総重量（即ち、洗剤の場合では、洗浄の完全なクリーニングサイクルで使用されるクリーニング剤の総量）に関連して使用される活性物質の量を指す。予め分割されたクリーニング剤の場合、この情報は、予め分割されたクリーニング組成物の総重量に基づく活性物質（単位ｍｇ）の量である。
【０３２４】
前記量はまた、本発明の食器洗浄用組成物で使用される他の個々の酵素タンパク質（例えばアミラーゼまたはプロテアーゼ）のそれぞれにも適用可能である。
【０３２５】
いくつかの好ましい実施形態では、本明細書で提供される洗剤組成物は概して、水性クリーニング作業での使用の最中に洗浄水が約５．０〜約１３．５のｐＨを有するように配合されている、または代替実施形態では、さらに約６．０〜約１０．５（例えば、約５〜約１１、約５〜約１０、約５〜約９、約５〜約８、約５〜約７、約６〜約１１、約６〜約１０、約６〜約９、約６〜約８、約６〜約７、約７〜約１１、約７〜約１０、約７〜約９、または約７〜約８）のｐＨを有するように配合されている。好ましくは、本明細書で提供される洗剤組成物は概して、水性クリーニング作業での使用の最中に洗浄水が約７．５〜約１３．５の範囲で選択されるｐＨを有するように配合されており、さらに好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択され、さらに最も好ましくはｐＨ７．５以上。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３２６】
一実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは、既知のベータ−グルカナーゼと比較して安定性が向上しており、特に、高ｐＨ液体クリーニング組成物中での貯蔵安定性が向上している。好ましい実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは、既知のベータ−グルカナーゼと比較して安定性が向上しており、特に貯蔵安定性が向上しており、且つ洗浄性能が同等または向上している。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３２７】
いくつかの好ましい実施形態では、顆粒または液体の洗濯製品は、洗浄水が約５．５〜約８のｐＨを有するようなに配合されている。他の好ましい実施形態では、顆粒または液体の洗濯製品は、洗浄水が約７．５〜約１３．５の範囲から選択されるｐＨを有するように配合されており、さらに好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択され、さらに最も好ましくはｐＨ７．５以上。ｐＨを推奨される使用レベルで制御する技術として、緩衝液、アルカリ、酸等の使用が挙げられ、この技術は当業者に公知である。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３２８】
酵素成分の重量は全タンパク質を基準にする。全ての百分率および比率は、別途指示しない限り重量で算出される。全ての百分率および比率は、別途指示しない限り組成物全体を基準として算出される。例示された洗剤組成物では、酵素レベルは組成物全体の重量を基準として純粋な酵素で表され、別途明記しない限り、洗剤成分は組成物全体の重量で表される。
【０３２９】
本発明の酵素はまた、洗剤添加剤製品での用途も見出す。本発明のベータ−グルカナーゼを含む洗剤添加剤製品は、例えば、温度が低く（例えば４０℃以下の温度）、ｐＨが６〜８であり且つ洗浄時間が短い（例えば３０分未満）洗浄プロセスへの包含に適している。本発明のベータ−グルカナーゼを含む洗剤添加剤製品は、例えば、約７．５〜約１３．５の範囲で選択されるｐＨ、約２０℃〜約７５℃の範囲で選択される温度および短い洗浄時間（例えば、３０分未満、例えば少なくとも１５分）のアルカリ性洗浄プロセスへの包含にさらに理想的に適している。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。あるいは、本発明のベータ−グルカナーゼを含む洗剤添加剤製品は家庭用の食器洗浄機のクリーニングに適しており、例えば、フィルタ上におよびこの機械の水だめ中に蓄積した残留物（好ましくは、ベータ−グルカン含有繊維を含む残留物）の除去に適している。そのような機械式クリーニング用添加剤製品は、脂肪または石灰スケールのような他の残留物の同時の除去に適し得る。
【０３３０】
この洗剤添加剤製品は本発明のベータ−グルカナーゼであることができ、好ましくは追加の酵素であるこができる。一実施形態では、この添加剤は、クリーニングプロセスへの添加用の剤形で包装されている。単一投与量は、丸剤、錠剤、ジェルキャップ、または粉末および／もしくは液体を含む他の単一投与単位を含むことができる。いくつかの実施形態では、充填材および／またはキャリア材料が含まれており、好適な充填材またはキャリア材料として、硫酸塩、炭酸塩およびケイ酸塩という様々な塩、ならびにタルク、粘土等が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、液体組成物用の充填材および／またはキャリア材料として、水、ならびに／またはポリオールおよびジオール等の低分子量の第１級アルコールおよび第２級アルコールが挙げられる。そのようなアルコールの例として、メタノール、エタノール、プロパノールおよびイソプロパノールが挙げられるがこれらに限定されない。
【０３３１】
特に好ましい一実施形態では、本発明に係るベータ−グルカナーゼは粒状組成物または液体で用いられ、このベータ−グルカナーゼは、カプセル型粒子の形態であり得る。一実施形態では、カプセル化材料は、炭水化物、天然ゴムまたは合成ゴム、キチンおよびキトサン、セルロースおよびセルロース誘導体、ケイ酸塩、リン酸塩、ホウ酸塩、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、パラフィンワックスおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０３３２】
本発明に係る組成物は典型的には、１種または複数種の洗剤成分を含む。洗剤組成物という用語は、物品およびクリーニングおよび処理組成物を含む。クリーニング組成物という用語は、別途指示しない限り以下を含む：錠剤、顆粒または粉末形態の汎用のまたは「重質」の洗浄剤、特に洗濯洗剤；液体、ゲルまたはペースト形態の汎用洗浄剤、特に、いわゆる重質液体タイプ；目の細かい布地用の液体洗剤；手動食器洗浄剤または軽質食器洗浄剤、特に高発泡性タイプのもの；機械式食器洗浄剤、例えば、家庭での使用および産業での使用のための様々な錠剤、顆粒、ゲル形態、液体およびすすぎ助剤タイプ。この組成物はまた、当分野で既知のものおよび水溶性、不水溶性および／または透水性であるもの等の単位用量パッケージであることもできる。これらは、シングルチャンバーパウチおよびマルチチャンバーパウチを包含することができる。
【０３３３】
クリーニング成分および／または洗剤成分が本発明のベータ−グルカナーゼに適合し得ない実施形態では、好適な方法を使用して、クリーニング成分および／または洗剤成分とベータ−グルカナーゼとを、これら２種の成分の組み合わせが適切であるまで別々に保つ（即ち互いに接触させない）ことができる。そのような分離方法として、当分野で既知の任意の好適な方法（例えば、ゲルキャップ、カプセル化、錠剤、および例えば１つまたは複数の区画を有する水溶性ポーチの使用による物理的分離）が挙げられる。
【０３３４】
述べたように、本発明のベータ−グルカナーゼが洗剤組成物（例えば洗濯洗浄洗剤組成物または食器洗浄洗剤組成物）の成分として用いられる場合には、例えば、このベータ−グルカナーゼは、非発塵性粒質物、安定化された液体または保護された酵素の形態で、この洗剤組成物に含まれ得る。非発塵性粒質物は、例えば米国特許第４，１０６，９９１号明細書および米国特許第４，６６１，４５２号明細書（両方ともＮｏｖｏ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉ  Ａ／Ｓに対するもの）で開示されているように生成され得、任意選択で、当分野で既知の方法によりコーティングされ得る。ワックス状コーティング材の例は、平均モル重量が１０００〜２００００であるポリエチレングリコール（ＰＥＧ）生成物；１６〜５０個のエチレンオキシド単位を有するエトキシル化ノニルフェノール；アルコールが１２〜２０個の炭素原子を含み且つ１５〜８０個のエチレンオキシド単位が存在するエトキシル化脂肪族アルコール；脂肪族アルコール；脂肪酸；ならびに脂肪酸のモノグリセリドおよびジグリセリドおよびトリグリセリドである。流動床技術による塗布に好適なフィルム形成性コーティング材の例は英国特許第１４８３５９１号明細書に示されている。
【０３３５】
いくつかの実施形態では、本明細書で用いる酵素は、亜鉛（ＩＩ）イオン、カルシウム（ＩＩ）イオンおよび／またはマグネシウム（ＩＩ）イオンの水溶性供給源であって、そのようなイオンを酵素に提供する最終組成物中における水溶性供給源と、他の金属イオン（例えば、バリウム（ＩＩ）、スカンジウム（ＩＩ）、鉄（ＩＩ）、マグネシウム（ＩＩ）、アルミニウム（ＩＩＩ）、スズ（ＩＩ）、コバルト（ＩＩ）、銅（ＩＩ）、ニッケル（ＩＩ）およびオキソバナジウム（ＩＶ））の水溶性供給源との存在下で安定化される。本発明の洗剤組成物の酵素はまた、従来の安定化剤（例えば、ポリオール（例えばプロピレングリコールまたはグリセロール）、糖または糖アルコール、乳酸）を使用しても安定化され得、この組成物は、例えば国際公開第９２／１９７０９号パンフレットおよび国際公開第９２／１９７０８号パンフレットで説明されているように配合され得る。本発明の酵素はまた、例えばタンパク質型（欧州特許第５４４７７７号明細書で説明されている）またはボロン酸型の可逆的酵素阻害剤の添加によっても安定化され得る。好ましい実施形態では、酵素安定剤はボロン酸型であり、より好ましくは４−ホルミルフェニルボロン酸である。本発明の食器洗浄用組成物は好ましくは、ホウ酸および／またはホウ酸塩を含まず、即ち、具体的には組成物全体を基準としてホウ酸およびホウ酸塩を０．１重量％未満の量で含み、好ましくは０．０１重量％未満の量で含む。
【０３３６】
他の酵素安定剤（例えばペプチドアルデヒドおよびタンパク質加水分解物）は当分野で公知であり、例えば、本発明に係るベータ−グルカナーゼは、例えば国際公開第２００５／１０５８２６号パンフレットおよび国際公開第２００９／１１８３７５号パンフレットで説明されているペプチドアルデヒドまたはケトンを使用して安定化され得る。
【０３３７】
本発明の洗剤組成物中に含まれる保護された酵素は、欧州特許第２３８２１６号明細書で説明されている方法に従って、上述したように調製され得る。
【０３３８】
この組成物を、バイオフィルムの形成の予防または除去のための１種または複数種の薬剤で増強することができる。この薬剤として、分散剤、界面活性剤、洗剤、他の酵素、抗菌剤および殺生物剤を挙げることができるがこれらに限定されない。
【０３３９】
本発明の組成物を、自動投与装置で使用される投与要素に適用することができる。本発明の組成物を含む投与要素を、国際公開第２００７／０５２００４号パンフレットおよび国際公開第２００７／０８３３１４１号パンフレットまたは国際公開第２０１１／０５１４２０号パンフレット、国際公開第２０１１／０５１４１５号パンフレット、国際公開第２０１１／０５１４１６号パンフレット、国際公開第２０１１／０５１４１７号パンフレット、国際公開第２０１１／０５１４１８号パンフレット、国際公開第２０１１／１２０５４６号パンフレットおよび国際公開第２０１１／１３１２６０号パンフレットで説明されているもののような送達カートリッジに入れることができる。この投与要素は細長い形状を有し得、国際公開第２００７／０５１９８９号パンフレットで説明されているような自動投与分配装置用の補充物である送達カートリッジを形成するアレイにセットされる。この送達カートリッジは自動投与送達装置（例えば、国際公開第２００８／０５３１９１号パンフレットで説明されているもの）中に配置される。
【０３４０】
自動投与装置の適切な開示を、国際公開第２００７／０８３１３９号パンフレット、国際公開第２００７／０５１９８９号パンフレット、国際公開第２００７／０８３１４１号パンフレット、国際公開第２００７／０８３１４２号パンフレットおよび欧州特許第２３６１９６４号明細書に見出すことができる。
【０３４１】
他の酵素
一実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼは１種または複数種の酵素（例えば少なくとも２種の酵素）と組み合わされ、より好ましくは少なくとも３種、４種または５種の酵素と組み合わされる。好ましくは、この酵素は異なる基質特異性（例えば、タンパク質分解活性、デンプン分解活性、脂肪分解活性、ヘミセルロース分解（ｈｅｍｉｃｅｌｌｕｌｙｔｉｃ）活性またはペクチン分解活性）を有する。ある実施形態は、本発明のベータ−グルカナーゼポリペプチドと１種もしくは複数種のアミラーゼ（および／または１種もしくは複数種のプロテアーゼ）とを含むクリーニング組成物または洗剤組成物である。
【０３４２】
洗剤添加剤および洗剤組成物は、１種または複数種の酵素（例えば、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、例えばラッカーゼおよび／またはペルオキシダーゼ）を含むことができる。
【０３４３】
一般に、選択された酵素の特性は選択された洗剤に適合すべきであり（即ち、ｐＨ最適条件、他の酵素および非酵素成分との適合性等）、この酵素は有効量で存在すべきである。
【０３４４】
セルラーゼ：好適なセルラーゼとして、動物起源、野菜起源または微生物起源のものが挙げられる。特に好適なセルラーゼとして、細菌起源または真菌起源のものが挙げられる。化学的に修飾された変異体またはタンパク質が操作された変異体が含まれる。好適なセルラーゼとして、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、フザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、チエラビア属（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）、アクレモニウム属（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）に由来するセルラーゼが挙げられ、例えば、米国特許第４，４３５，３０７号明細書、米国特許第５，６４８，２６３号明細書、米国特許第５，６９１，１７８号明細書、米国特許第５，７７６，７５７号明細書および国際公開第８９／０９２５９号パンフレットで開示されている、フミコラインソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、ミセリオフトラテルモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）およびフザリウムオキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）から産生された真菌セルラーゼが挙げられる。
【０３４５】
特に好適なセルラーゼは、色の取り扱いに関する有益性を有するアルカリ性または中性のセルラーゼである。そのようなセルラーゼの例は、欧州特許第０４９５２５７号明細書、欧州特許第０５３１３７２号明細書、国際公開第９６／１１２６２号パンフレット、国際公開第９６／２９３９７号パンフレット、国際公開第９８／０８９４０号パンフレットで説明されているセルラーゼである。他の例はセルラーゼ変異体であり、例えば、国際公開第９４／０７９９８号パンフレット、欧州特許第０５３１３１５号明細書、米国特許第５，４５７，０４６号明細書、米国特許第５，６８６，５９３号明細書、米国特許第５，７６３，２５４号明細書、国際公開第９５／２４４７１号パンフレット、国際公開第９８／１２３０７号パンフレットおよび国際公開第１９９９／００１５４４号パンフレットで説明されているものである。
【０３４６】
市販されているセルラーゼとして、Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ（登録商標）およびＣａｒｅｚｙｍｅ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、Ｃｌａｚｉｎａｓｅ（登録商標）およびＰｕｒａｄａｘ  ＨＡ（登録商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．）およびＫＡＣ−５００（Ｂ）（登録商標）（花王株式会社）が挙げられる。
【０３４７】
プロテアーゼ：好適なプロテアーゼとして、細菌起源、真菌起源、植物起源、ウイルス起源または動物起源のものが挙げられ、例えば微生物起源または野菜起源である。微生物起源が好ましい。化学的に修飾された変異体またはタンパク質が操作された変異体が含まれる。プロテアーゼはアルカリ性プロテアーゼ（例えばセリンプロテアーゼまたはメタロプロテアーゼ）であることができる。セリンプロテアーゼは、例えばＳ１ファミリ（例えばチロシン）またはＳ８ファミリ（例えばサブチリシン）であることができる。メタロプロテアーゼプロテアーゼは例えば、例えばファミリＭ４由来のサーモリシンまたは他のメタロプロテアーゼ（例えば、Ｍ５ファミリ、Ｍ７ファミリもしくはＭ８ファミリに由来するもの）であることができる。
【０３４８】
「サブチラーゼ」という用語は、Ｓｉｅｚｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｎｇ．４（１９９１）７１９−７３７およびＳｉｅｚｅｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ６（１９９７）  ５０１−５２３に従うセリンプロテアーゼのサブグループを指す。セリンプロテアーゼは、基質と共有結合付加物を形成する活性部位にセリンを有することを特徴とするプロテアーゼのサブグループである。サブチラーゼは６種の再分割に分割され得、即ち、スブチリシンファミリ、テルミターゼファミリ、プロテイナーゼＫファミリ、ランチビオテックペプチダーゼファミリ、ケキシンファミリおよびピロリシンファミリに分割され得る。
【０３４９】
サブチラーゼの例は、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）（例えば、米国特許第７２６２０４２号明細書および国際公開第０９／０２１８６７号パンフレットで説明されているバチルスレンツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｎｔｕｓ）、Ｂ．アルカロフィルス（Ｂ．ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、古草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、Ｂ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルスプミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ）およびバチルスギブソニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇｉｂｓｏｎｉｉ）に由来するもの、ならびに国際公開第８９／０６２７９号パンフレットで説明されているスブチリシンレンタス、スブチリシンＮｏｖｏ、スブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇ、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、スブチリシンＢＰＮ’、スブチリシン３０９、スブチリシン１４７およびスブチリシン１６８、ならびに（国際公開第９３／１８１４０号パンフレットで説明されている）プロテアーゼＰＤ１３８である。他の有用なプロテアーゼは、国際公開第９２／１７５１７７号パンフレット、国際公開第０１／０１６２８５号パンフレット、国際公開第０２／０２６０２４号パンフレットおよび国際公開第０２／０１６５４７号パンフレットで説明されているものであり得る。トリプシン様プロテアーゼの例は、トリプシン（例えばブタ起源またはウシ起源）、ならびに国際公開第８９／０６２７０号パンフレット、国際公開第９４／２５５８３号パンフレットおよび国際公開第０５／０４０３７２号パンフレットで説明されているフサリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）プロテアーゼ、ならびに国際公開第０５／０５２１６１号パンフレットおよび国際公開第０５／０５２１４６号パンフレットで説明されているセルロモナス属（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ）に由来するキモトリプシンプロテアーゼである。
【０３５０】
さらに好ましいプロテアーゼは、例えば国際公開第９５／２３２２１号パンフレットで説明されているバチルスレンツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｎｔｕｓ）ＤＳＭ５４８３に由来するアルカリ性プロテアーゼ、ならびに国際公開第９２／２１７６０号パンフレット、国際公開第９５／２３２２１号パンフレット、欧州特許第１９２１１４７号明細書および欧州特許第１９２１１４８号明細書で説明されている、このアルカリ性プロテアーゼの変異体である。
【０３５１】
メタロプロテアーゼの例は、国際公開第０７／０４４９９３号パンフレット（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔ．）で説明されている中性メタロプロテーゼ（例えばバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のもの）である。
【０３５２】
有用なプロテアーゼの例は、国際公開第９２／１９７２９号パンフレット、国際公開第９６／０３４９４６号パンフレット、国際公開第９８／２０１１５号パンフレット、国際公開第９８／２０１１６号パンフレット、国際公開第９９／０１１７６８号パンフレット、国際公開第０１／４４４５２号パンフレット、国際公開第０３／００６６０２号パンフレット、国際公開第０４／０３１８６号パンフレット、国際公開第０４／０４１９７９号パンフレット、国際公開第０７／００６３０５号パンフレット、国際公開第１１／０３６２６３号パンフレット、国際公開第１１／０３６２６４号パンフレットで説明されている変異体であり、特に、以下のうちの１つまたは複数で置換を有する変異体である：３位、４位、９位、１５位、２７位、３６位、５７位、６８位、７６位、８７位、９５位、９６位、９７位、９８位、９９位、１００位、１０１位、１０２位、１０３位、１０４位、１０６位、１１８位、１２０位、１２３位、１２８位、１２９位、１３０位、１６０位、１６７位、１７０位、１９４位、１９５位、１９９位、２０５位、２０６位、２１７位、２１８位、２２２位、２２４位、２３２位、２３５位、２３６位、２４５位、２４８位、２５２位および２７４位（ＢＰＮ’ナンバリングを使用）。より好ましいプロテアーゼ変異体は以下の変異を含むことができる：Ｓ３Ｔ、Ｖ４Ｉ、Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｋ２７Ｒ、＊３６Ｄ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｎ８７Ｓ，Ｒ、＊９７Ｅ、Ａ９８Ｓ、Ｓ９９Ｇ，Ｄ，Ａ、Ｓ９９ＡＤ、Ｓ１０１Ｇ，Ｍ，Ｒ  Ｓ１０３Ａ、Ｖ１０４Ｉ，Ｙ，Ｎ、Ｓ１０６Ａ、Ｇ１１８Ｖ，Ｒ、Ｈ１２０Ｄ，Ｎ、Ｎ１２３Ｓ、Ｓ１２８Ｌ、Ｐ１２９Ｑ、Ｓ１３０Ａ、Ｇ１６０Ｄ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｇ１９５Ｅ、Ｖ１９９Ｍ、Ｖ２０５Ｉ、Ｌ２１７Ｄ、Ｎ２１８Ｄ、Ｍ２２２Ｓ、Ａ２３２Ｖ、Ｋ２３５Ｌ、Ｑ２３６Ｈ、Ｑ２４５Ｒ、Ｎ２５２Ｋ、Ｔ２７４Ａ（ＢＰＮ’ナンバリングを使用）。
【０３５３】
好適な市販のプロテアーゼ酵素として、Ａｌｃａｌａｓｅ（登録商標）、Ｄｕｒａｌａｓｅ（商標）、Ｄｕｒａｚｙｍ（商標）、Ｒｅｌａｓｅ（登録商標）、Ｒｅｌａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｐｒｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｐｏｌａｒｚｙｍｅ（登録商標）、Ｋａｎｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｏｖｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｎｅｕｔｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）およびＥｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）の商品名で販売されているもの、Ｍａｘａｔａｓｅ（登録商標）、Ｍａｘａｃａｌ（登録商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  Ｐｒｉｍｅ（登録商標）、Ｐｒｅｆｅｒｅｎｚ（商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  ＭＡ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  Ｏｘ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  ＯｘＰ（登録商標）、Ｐｕｒａｍａｘ（登録商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｆｆｅｃｔｅｎｚ（商標）、ＦＮ２（登録商標）、ＦＮ３（登録商標）、ＦＮ４（登録商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（登録商標）、Ｏｐｔｉｃｌｅａｎ（登録商標）およびＯｐｔｉｍａｓｅ（登録商標）（Ｄａｎｉｓｃｏ／ＤｕＰｏｎｔ）、Ａｘａｐｅｍ（商標）（Ｇｉｓｔ−Ｂｒｏｃａｓｅｓ  Ｎ．Ｖ．）、ＢＬＡＰ（米国特許第５３５２６０４号明細書の図２９に示す配列）およびこの変異体（Ｈｅｎｋｅｌ  ＡＧ）、ならびに花王株式会社のＫＡＰ（バチルスアルカロフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）スブチリシン）が挙げられる。
【０３５４】
リパーゼ：好適なリパーゼとして、動物起源、野菜起源または微生物起源のものが挙げられる。特に好適なリパーゼとして、細菌起源または真菌起源のものが挙げられる。化学的に修飾された変異体またはタンパク質が操作された変異体が含まれる。有用なリパーゼの例として以下が挙げられる：フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）（同義語テルモマイセス属（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ））由来のリパーゼ、例えば、欧州特許第２５８０６８号明細書および欧州特許第３０５２１６号明細書で説明されているＨ．ラヌギノサ（Ｈ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）（Ｔ．ラヌギノスス（Ｔ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ））由来のまたは国際公開第９６／１３５８０号パンフレットで説明されているＨ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）由来のリパーゼ、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）リパーゼ、例えば、Ｐ．アルカリゲネス（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）またはＰ．シュードアルカリゲネス（Ｐ．ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）（欧州特許第２１８２７２号明細書）、Ｐ．セパシア（Ｐ．ｃｅｐａｃｉａ）（欧州特許第３３１３７６号明細書）、Ｐ．スタッツェリ（Ｐ．ｓｔｕｔｚｅｒｉ）（英国特許第１，３７２，０３４号明細書）、Ｐ．フルオレッセンス（Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、シュードモナス属の一種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）ＳＤ７０５株（国際公開第９５／０６７２０号パンフレットおよび国際公開第９６／２７００２号パンフレット）、Ｐ．ウィスコンシネンシス（Ｐ．ｗｉｓｃｏｎｓｉｎｅｎｓｉｓ）（国際公開第９６／１２０１２号パンフレット）に由来のリパーゼ、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）リパーゼ、例えば、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）（Ｄａｒｔｏｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ，１１３１：２５３−３６０）、Ｂ．ステアロサーモフィルス（Ｂ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）（特開昭６４／７４４９９２号公報）またはＢ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）（国際公開第９１／１６４２２号パンフレット）に由来のリパーゼ。
【０３５５】
他の例はリパーゼ変異体であり、例えば、国際公開第９２／０５２４９号パンフレット、国際公開第９４／０１５４１号パンフレット、欧州特許第４０７２２５号明細書、欧州特許第２６０１０５号明細書、国際公開第９５／３５３８１号パンフレット、国際公開第９６／００２９２号パンフレット、国際公開第９５／３０７４４号パンフレット、国際公開第９４／２５５７８号パンフレット、国際公開第９５／１４７８３号パンフレット、国際公開第９５／２２６１５号パンフレット、国際公開第９７／０４０７９号パンフレットおよび国際公開第９７／０７２０２号パンフレットに記載されたものである。
【０３５６】
好ましい市販のリパーゼ酵素として、Ｌｉｐｏｌａｓｅ（商標）、Ｌｉｐｏｌａｓｅ  Ｕｌｔｒａ（商標）およびＬｉｐｅｘ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）が挙げられる。
【０３５７】
アミラーゼ：本発明のベータ−グルカナーゼと共に使用され得る好適なアミラーゼは、アルファ−アミラーゼまたはグルコアミラーゼであり得、細菌起源または真菌起源であり得る。化学的に修飾された変異体またはタンパク質が操作された変異体が含まれる。アミラーゼとして、例えばバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）から得られるアルファ−アミラーゼが挙げられ、例えば、英国特許第１，２９６，８３９号明細書でより詳細に説明されているバチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）の特別な系統から得られるアルファ−アミラーゼが挙げられる。好適なアミラーゼとして、国際公開第９５／１０６０３号パンフレットにおいて配列番号３を有するアミラーゼまたはその配列番号３に対して９０％の配列同一性を有する変異体が挙げられる。好ましい変異体は、国際公開第９４／０２５９７号パンフレット、国際公開第９４／１８３１４号パンフレット、国際公開第９７／４３４２４号パンフレットおよび国際公開第９９／０１９４６７号パンフレットの配列番号４に記載されており、例えば、以下のうちの１つまたは複数で置換を有する変異体である：１５位、２３位、１０５位、１０６位、１２４位、１２８位、１３３位、１５４位、１５６位、１７８位、１７９位、１８１位、１８８位、１９０位、１９７位、２０１位、２０２位、２０７位、２０８位、２０９位、２１１位、２４３位、２６４位、３０４位、３０５位、３９１位、４０８位および４４４位。別の好適なアミラーゼとして、国際公開第０２／０１０３５５号パンフレットにおいて配列番号６を有するアミラーゼまたは配列番号６に対して９０％の配列同一視を有する変異体が挙げられる。配列番号６の好ましい変異体は、１８１位および１８２位で欠失を有し且つ１９３位で置換を有するものである。好適である他のアミラーゼは、国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号６に示すＢ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）に由来するアルファ−アミラーゼの残基１〜３３と、国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号４に示すＢ．リケニホルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）アルファ−アミラーゼの残基３６〜４８３またはその９０％配列同一性を有する変異体とを含むハイブリッドアルファ−アミラーゼである。このハイブリッドアルファ−アミラーゼの好ましい変異体は、以下のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を有するものである：Ｇ４８位、Ｔ４９位、Ｇ１０７位、Ｈ１５６位、Ａ１８１位、Ｎ１９０位、Ｍ１９７位、Ｉ２０１位、Ａ２０９位およびＱ２６４位。国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号６に示すＢ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）に由来するアルファ−アミラーゼの残基１〜３３と配列４の残基３６〜４８３とを含むハイブリッドアルファ−アミラーゼの最も好ましい変異体は、以下の置換を有するものである：
Ｍ１９７Ｔ；
Ｈ１５６Ｙ＋Ａ１８１Ｔ＋Ｎ１９０Ｆ＋Ａ２０９Ｖ＋Ｑ２６４Ｓ；または
Ｇ４８Ａ＋Ｔ４９Ｉ＋Ｇ１０７Ａ＋Ｈ１５６Ｙ＋Ａ１８１Ｔ＋Ｎ１９０Ｆ＋Ｉ２０１Ｆ＋Ａ２０９Ｖ＋Ｑ２６４Ｓ。
【０３５８】
好適であるさらなるアミラーゼは、国際公開第９９／０１９４６７号パンフレットにおいて配列番号６を有するアミラーゼまたは配列番号６に対して９０％の配列同一性を有する変異体である。配列番号６の好ましい変異体は、以下のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を有するものである：Ｒ１８１位、Ｇ１８２位、Ｈ１８３位、Ｇ１８４位、Ｎ１９５位、Ｉ２０６位、Ｅ２１２位、Ｅ２１６位およびＫ２６９位。特に好ましいアミラーゼは、Ｒ１８１位およびＧ１８２位でまたはＨ１８３位およびＧ１８４で欠失を有するものである。使用され得る追加のアミラーゼは、国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号１、配列番号３、配列番号２もしくは配列番号７を有するものまたは配列番号１、配列番号２、配列番号３もしくは配列番号７に対して９０％の配列同一性を有する変異体である。配列番号１、配列番号２、配列番号３または配列番号７の好ましい変異体は、以下のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を有するものである：１４０位、１８１位、１８２位、１８３位、１８４位、１９５位、２０６位、２１２位、２４３位、２６０位、２６９位、３０４位および４７６位。より好ましい変異体は、１８１位および１８２位でまたは１８３位および１８４位で欠失を有するものである。配列番号１、配列番号２または配列番号７の最も好ましいアミラーゼ変異体は、１８３位および１８４位で欠失を有し且つ１４０位、１９５位、２０６位、２４３位、２６０位、３０４位および４７６位のうちの１つまたは複数で置換を有するものである。使用され得る他のアミラーゼは、国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２を有するアミラーゼ、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットにおける配列番号１０を有するアミラーゼ、または国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２に対して９０％の配列同一性を有するもしくは国際公開第０１／６６７１２号パンフレットにおける配列番号１０に対して９０％の配列同一性を有する変異体である。国際公開第０１／６６７１２号パンフレットにおける配列番号１０の好ましい変異体は、以下のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を有するものである：１７６位、１７７位、１７８位、１７９位、１９０位、２０１位、２０７位、２１１位および２６４位。さらに好適なアミラーゼは、国際公開第０９／０６１３８０号パンフレットの配列番号２を有するアミラーゼまたはその配列番号２に対して９０％の配列同一性を有する変異体である。配列番号２の好ましい変異体は、Ｃ末端のトランケーションを有するおよび／または以下のうちの１つもしくは複数で置換、欠失もしくは挿入を有するものである：Ｑ８７位、Ｑ９８位、Ｓ１２５位、Ｎ１２８位、Ｔ１３１位、Ｔ１６５位、Ｋ１７８位、Ｒ１８０位、Ｓ１８１位、Ｔ１８２位、Ｇ１８３位、Ｍ２０１位、Ｆ２０２位、Ｎ２２５位、Ｓ２４３位、Ｎ２７２位、Ｎ２８２位、Ｙ３０５位、Ｒ３０９位、Ｄ３１９位、Ｑ３２０位、Ｑ３５９位、Ｋ４４４位およびＧ４７５位。配列番号２のより好ましい変異体は、Ｑ８７Ｅ，Ｒ位、Ｑ９８Ｒ位、Ｓ１２５Ａ位、Ｎ１２８Ｃ位、Ｔ１３１Ｉ位、Ｔ１６５Ｉ位、Ｋ１７８Ｌ位、Ｔ１８２Ｇ位、Ｍ２０１Ｌ位、Ｆ２０２Ｙ位、Ｎ２２５Ｅ，Ｒ位、Ｎ２７２Ｅ，Ｒ位、Ｓ２４３Ｑ，Ａ，Ｅ，Ｄ位、Ｙ３０５Ｒ位、Ｒ３０９Ａ位、Ｑ３２０Ｒ位、Ｑ３５９Ｅ位、Ｋ４４４Ｅ位およびＧ４７５Ｋ位のうちの１つもしくは複数で置換を有するもの、ならびに／またはＲ１８０位および／もしくはＳ１８１位でまたはＴ１８２位および／もしくはＧ１８３位で欠失を有するものである。配列番号２の最も好ましいアミラーゼ変異体は以下の置換を有するものであり：
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ；
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｆ２０２Ｙ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｄ３１９Ｔ＋Ｇ４７５Ｋ；
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ；または
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｔ１３１Ｉ＋Ｔ１６５Ｉ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ、
この変異体はＣ末端がトランケートされており、２４３位で置換をならびに／または１８０位および／もしくは１８１位で欠失を任意選択でさらに含む。他の好適なアミラーゼは、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットにおいて配列番号１２を有するアルファ−アミラーゼまたは配列番号１２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する変異体である。好ましいアミラーゼ変異体は、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットにおいて配列番号１２の以下のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を有するものである：Ｒ２８位、Ｒ１１８位、Ｎ１７４位；Ｒ１８１位、Ｇ１８２位、Ｄ１８３位、Ｇ１８４位、Ｇ１８６位、Ｗ１８９位、Ｎ１９５位、Ｍ２０２位、Ｙ２９８位、Ｎ２９９位、Ｋ３０２位、Ｓ３０３位、Ｎ３０６位、Ｒ３１０位、Ｎ３１４位；Ｒ３２０位、Ｈ３２４位、Ｅ３４５位、Ｙ３９６位、Ｒ４００位、Ｗ４３９位、Ｒ４４４位、Ｎ４４５位、Ｋ４４６位、Ｑ４４９位、Ｒ４５８位、Ｎ４７１位、Ｎ４８４位。特に好ましいアミラーゼとして、Ｄ１８３およびＧ１８４の欠失を有し且つ置換Ｒ１１８Ｋ、Ｎ１９５Ｆ、Ｒ３２０ＫおよびＲ４５８Ｋを有する変異体、ならびにＭ９位、Ｇ１４９位、Ｇ１８２位、Ｇ１８６位、Ｍ２０２位、Ｔ２５７位、Ｙ２９５位、Ｎ２９９位、Ｍ３２３位、Ｅ３４５位およびＡ３３９位の群から選択される１つまたは複数で置換をさらに有する変異体が挙げられ、最も好ましくは、変異体はこれら全ての位置で置換をさらに有する。他の例は、国際公開第２０１１／０９８５３１号パンフレット、国際公開第２０１３／００１０７８号パンフレットおよび国際公開第２０１３／００１０８７号パンフレットで説明されているもの等のアミラーゼ変異体である。市販されているアミラーゼは、Ｄｕｒａｍｙｌ（商標）、Ｔｅｒｍａｍｙｌ（商標）、Ｆｕｎｇａｍｙｌ（商標）、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ（商標）、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ  Ｐｌｕｓ（商標）、Ｎａｔａｌａｓｅ（商標）、Ｌｉｑｕｏｚｙｍｅ  ＸおよびＢＡＮＴＭ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、ならびにＲａｐｉｄａｓｅ（商標）、Ｐｕｒａｓｔａｒ（商標）／Ｅｆｆｅｃｔｅｎｚ（商標）、ＰｏｗｅｒａｓｅおよびＰｒｅｆｅｒｅｎｚ  Ｓ１００（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．／ＤｕＰｏｎｔ）である。
【０３５９】
ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ：好適なペルオキシダーゼ／オキシダーゼとして、植物起源、細菌起源または真菌起源のものが挙げられる。化学的に修飾された変異体またはタンパク質が操作された変異体が含まれる。有用なペルオキシダーゼの例として、コプリヌス属（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）（例えばＣ．シネレウス（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅｕｓ））由来のペルオキシダーゼ、ならびに国際公開第９３／２４６１８号パンフレット、国際公開第９５／１０６０２号パンフレットおよび国際公開第９８／１５２５７号パンフレットで説明されているもののようなペルオキシダーゼの変異体が挙げられる。
【０３６０】
市販のペルオキシダーゼとしてＧｕａｒｄｚｙｍｅ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）が挙げられる。
【０３６１】
洗剤酵素は、１種もしくは複数種の酵素を含む個別の添加剤を添加することにより、またはこれらの酵素の全てを含む複合添加剤を添加することにより、洗剤組成物に含まれていてもよい。本発明の洗剤添加剤（即ち、個別の添加剤または複合添加剤）は、例えば、粒質物、液体、スラリー等として配合され得る。好ましい洗剤添加剤配合物は、粒質物（特に、上記で説明した非発塵性粒質物）、液体（特に安定化された液体）またはスラリーである。
【０３６２】
界面活性剤
典型的には、本洗剤組成物は（この組成物の重量を基準として、例えば、この組成物の重量を基準とする界面活性剤の総量で）１種または複数種の界面活性剤を０％〜５０％の範囲で、好ましくは２％〜４０％の範囲で、より好ましくは５％〜３５％の範囲で、より好ましくは７％〜３０％の範囲で、最も好ましくは１０％〜２５％の範囲で、さらに最も好ましくは１５％〜２０％の範囲で含む。好ましい実施形態では、この洗剤は、４０重量％未満の、好ましくは３０重量％未満の、より好ましくは２５重量％未満の、さらにより好ましくは２０重量％未満の界面活性剤を含む液体または粉末の洗剤である。この組成物は、１％〜１５％の、好ましくは２％〜１２％の、３％〜１０％の、最も好ましくは４％〜８％の、さらに最も好ましくは４％〜６％の１種または複数種の界面活性剤を含むことができる。この組成物は、０．１％〜１５％の、好ましくは０．２％〜１２％の、３０．５％〜１０％の、最も好ましくは４１．０％〜８．０％の、さらに最も好ましくは４％〜６％の１種または複数種の界面活性剤（この組成物の重量を基準とする界面活性剤の総量）を含むことができる。好ましい界面活性剤は、アニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性イオン性界面活性剤、両性界面活性剤およびそれらの混合物である。好ましくは、界面活性剤の大部分はアニオン性である。好適なアニオン性界面活性剤は当分野で公知であり、脂肪酸カルボキシレート（石けん）、分枝鎖、直鎖およびランダム鎖のアルキルスルフェートまたは脂肪族アルコールスルフェートまたは第１級アルコールスルフェートまたはアルキルベンゼンスルホネート（例えばＬＡＳおよびＬＡＢ）またはフェニルアルケンスルホネートまたはアルケニルスルホネートまたはアルケニルベンゼンスルホネートまたはアルキルエトキシサルフェートまたは脂肪族アルコールエーテルサルフェートまたはアルファ−オレフィンサルフェートまたはドデセニル／テトラデシニルコハク酸を含むことができる。このアニオン性界面活性剤はアルコキシル化されていてもよい。この洗剤組成物はまた、１重量％〜１０重量％のノニオン性界面活性剤も含み得、好ましくは２重量％〜８重量％の、より好ましくは３重量％〜７重量％の、さらにより好ましくは５重量％未満のノニオン性界面活性剤も含み得る。好適なノニオン性界面活性剤は当分野で公知であり、アルコールエトキシレートおよび／またはアルキルエトキシレートおよび／またはアルキルフェノールエトキシレートおよび／またはグルカミド（例えば脂肪酸Ｎ−グルコシルＮ−メチルアミド）および／またはアルキルポリグルコシドおよび／またはモノエタノールアミドもしくはジエタノールアミドもしくは脂肪酸アミドを含むことができる。この洗剤組成物はまた、０重量％〜１０重量％のカチオン性界面活性剤も含み得、好ましくは０．１重量％〜８重量％の、より好ましくは０．５重量％〜７重量％の、さらにより好ましくは５重量％未満のカチオン性界面活性剤も含み得る。好適なカチオン性界面活性剤は当分野で公知であり、アルキル第４級アンモニウム化合物および／またはアルキルピリジニウム化合物および／またはアルキル第４級ホスホニウム化合物および／またはアルキル第３級スルホニウム化合物を含むことができる。この組成物は好ましくは、洗濯プロセスの最中に洗浄液中に１００ｐｐｍ〜５，０００ｐｐｍの界面活性剤を提供する量で界面活性剤を含む。この組成物は水との接触時に、０．５ｇ／ｌ〜１０ｇ／ｌの洗剤組成物を含む洗浄液を概して形成する。多くの好適な界面活性化合物が入手可能であり、文献で十分に説明されており、例えば”Ｓｕｒｆａｃｅ−Ａｃｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ”，Ｖｏｌｕｍｅｓ  Ｉ  ａｎｄ  １１，ｂｙ  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｐｅｒｒｙ  ａｎｄ  Ｂｅｒｃｈで十分に説明されている。
【０３６３】
当業者に既知の全てのノニオン性界面活性剤をノニオン性界面活性剤として使用することができる。好適なノニオン性界面活性剤は、例えば、一般式ＲＯ（Ｇ）ｘのアルキルグリコシドであり、この一般式中、Ｒは、第１級の直鎖またはメチル分枝（特に２位置でのメチル分枝）の、８〜２２個（好ましくは１２〜１８個）の炭素原子を有する脂肪族基に対応し、Ｇは、５個または６個の炭素原子を有するグリコース単位（好ましくはグルコース）を示す記号である。モノグリコシドおよびオリゴグリコシドの分布を示すオリゴマー化度ｘは１〜１０の任意の数字であり、ｘは好ましくは１．２〜１．４である。
【０３６４】
唯一のノニオン性界面活性剤としてまたは他のノニオン性界面活性剤との組み合わせのいずれかで使用され得る、好ましくは使用され得るノニオン性界面活性剤の別のクラスは、アルコキシル化された（好ましくはエトキシル化された、またはエトキシル化され且つプロポキシル化された）脂肪酸アルキルエステルであり、この脂肪酸アルキルエステルは好ましくは、アルキル鎖中に１〜４個の炭素原子を有する。
【０３６５】
アミンオキシドタイプ（例えば、Ｎ−ココアルキル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミンオキシドおよびＮ−タローアルキル（ｔａｌｌｏｗａｌｋｙｌ）−Ｎ，Ｎ−ジヒドロキシエチルアミンオキシド）ならびに脂肪酸アルカノールアミドタイプのノニオン性界面活性剤も適している場合がある。これらのノニオン性界面活性剤の量は好ましくは、エトキシル化脂肪族アルコールの量以下であり、特にその半分以下である。さらに好適な界面活性剤は、ＰＨＦＡとしても知られているポリヒドロキシ脂肪酸アミドである。
【０３６６】
低発泡ノニオン性界面活性剤を好ましい界面活性剤として使用することができる。特に好ましくは、クリーニング剤（好ましくは食器洗浄剤、特に機械式食器洗浄剤）は、アルコキシル化アルコールの群からのノニオン性界面活性剤を含む。好ましくは８〜１８個の炭素原子とアルコール１ｍｏｌ当たり平均して１〜１２ｍｏｌのエチレンオキシド（ＥＯ）を有する、アルコキシル化された、有利にはエトキシル化された、特に第１級のアルコール（アルコール残基は直鎖であり得る、もしくは好ましくは２位でメチル分枝であり得る、またはオキソアルコール基中に通常存在するもののように直鎖残基とメチル分枝残基とを混合して含み得る）をノニオン性界面活性剤として好ましくは使用する。しかしながら、１２〜１８個の炭素原子を有する天然起源のアルコール（例えば、ココナツアルコール、パームアルコール、獣脂アルコールまたはオレイルアルコール）の直鎖基とアルコール１ｍｏｌ当たり平均して２〜８ｍｏｌのＥＯとを有するアルコールエトキシレートが特に好ましい。好ましいエトキシル化アルコールとして、例えば３ＥＯまたは４ＥＯを有するＣ１２〜１４アルコール、７ＥＯを有するＣ９〜１１アルコール、３ＥＯ、５ＥＯ、７ＥＯまたは８ＥＯを有するＣ１３〜１５アルコール、３ＥＯ、５ＥＯまたは７ＥＯを有するＣ１２〜１８アルコール、およびこれらの混合物（例えば、３ＥＯを有するＣ１２〜１４アルコールと５ＥＯを有するＣ１２〜１８アルコールとの混合物）が挙げられる。示したエトキシル化度は、特定の生成物に関して整数または分数に対応し得る統計的平均を表す。好ましいアルコールエトキシレートは、狭い同族体分布（狭範囲エトキシレート、ＮＲＥ）を示す。これらのノニオン性界面活性剤に加えて、１２超のＥＯを有する脂肪族アルコールも使用することができる。この脂肪族アルコールの例は、１４ＥＯ、２５ＥＯ、３０ＥＯまたは４０ＥＯを有する獣脂脂肪族アルコールである。
【０３６７】
室温を超える融点を有するノニオン性界面活性剤が特に好ましい。２０℃超の、好ましくは２５℃超の、特に好ましくは２５〜６０℃の、特に２６．６〜４３．３℃の融点を有するノニオン性界面活性剤が特に好ましい。
【０３６８】
アルコキシル化ノニオン性界面活性剤（特にエトキシル化第１級アルコール）の群からの界面活性剤を好ましくは使用する。本発明に係るポリペプチドとノニオン性界面活性剤とを組み合わせて含む食器洗浄用組成物は驚くべきことに、食器洗浄機の内部での、特に篩の上での汚染物の蓄積を低減させることができることを発見した。
【０３６９】
ビルダー
ビルダーの主な役割は、界面活性剤系と負に相互作用するであろう洗浄溶液から二価の金属イオン（例えばカルシウムイオンおよびマグネシウムイオン）を隔離することである。ビルダーはまた、布地表面からの金属イオンおよび無機汚染物の除去でも有効であり、微粒子および飲料汚れの除去を向上させる。ビルダーはまた、アルカリ性の供給源でもあり、洗浄水のｐＨを７．５超のレベル（例えば９．５〜１１）に緩衝することができる。緩衝能は予備アルカリ性とも呼ばれ、例えば固形洗剤組成物の場合には好ましくは４を超えているべきである。
【０３７０】
本発明の洗剤組成物は、１種または複数種の洗剤ビルダーまたはビルダー系を含むことができる。多くの好適なビルダー系が文献で説明されており、例えばＰｏｗｄｅｒｅｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ｓｅｒｉｅｓ  ｖｏｌｕｍｅ  ７１，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．で説明されている。ビルダーは、主題の組成物の重量を基準として０％〜６０％を占めることができ、好ましくは５％〜４５％を占めることができ、より好ましくは１０％〜４０％を占めることができ、最も好ましくは１５％〜３５％を占めることができ、さらにより好ましくは２０％〜３０％ビルダーを占めることができる。この組成物は、この主題の組成物の重量を基準として０％〜１５％の、好ましくは１％〜１２％の、２％〜１０％の、最も好ましくは３％〜８％の、さらに最も好ましくは４％〜６％のビルダーを含むことができる。
【０３７１】
ビルダーとして、特にケイ酸塩、炭酸塩および有機コビルダーを挙げることができ、特にポリカルボン酸塩および／またはアミノカルボン酸塩を挙げることができる。
【０３７２】
結晶性層状ケイ酸塩を、本明細書で説明されている薬剤で使用することができる。そのようなクリーニング剤、好ましくは食器洗浄剤、特に機械式食器洗浄剤は、いずれの場合もこれらの薬剤の総重量を基準として、０．１〜２０重量％の、好ましくは０．２〜１５重量％の、特に０．４〜１０重量％の結晶性層状ケイ酸塩の重量分率を好ましくは含む。
【０３７３】
他のビルダーはアルカリ性キャリアである。アルカリ性キャリアの有効な例として、アルカリ金属水酸化物、アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属炭酸水素塩、アルカリ金属セスキ炭酸塩、説明したアルカリケイ酸塩、アルカリ金属ケイ酸塩、および上述した物質の混合物が挙げられ、本発明の目的内では、好ましくは、アルカリ炭酸塩、特に炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウムまたはセスキ炭酸ナトリウムを使用することができる。しかしながら、対応するカリウム類似体も、ナトリウム塩に加えてまたはナトリウム塩を完全に置き換えて有用であることができる。他のビルダー物質と比較して任意選択のアルカリ金属水酸化物のクリーニング剤（特に食器洗浄剤、好ましくは機械式食器洗浄剤）の残りの成分との低い化学的適合性に起因して、アルカリ金属水酸化物は好ましくは少量でのみ使用されか、または全く使用されない。
【０３７４】
ビルダーとして以下が挙げられるがこれらに限定されない：ポリリン酸塩（例えばトリポリリン酸塩ＳＴＰＰ）のアルカリ金属塩、アンモニウム塩およびアルカノールアンモニウム塩、アルカリ金属ケイ酸塩、アルカリ土類金属炭酸塩およびアルカリ金属炭酸塩、アルミノケイ酸塩ビルダー（例えばゼオライト）およびポリカルボキシレート化合物、エーテルヒドロキシポリカルボキシレート、無水マレイン酸と、エチレンまたはビニルメチルエーテルと、１，３，５−トリヒドロキシベンゼン−２，４，６−トリスルホン酸と、カルボキシメチルオキシコハク酸とのコポリマー、ポリ酢酸（例えば、エチレンジアミン四酢酸およびニトリロ三酢酸）の様々なアルカリ金属塩、アンモニウム塩および置換アンモニウム塩、ならびにポリカルボン酸塩、例えばメリト酸、コハク酸、クエン酸、オキシジコハク酸、ポリマレイン酸、ベンゼン１，３，５−トリカルボン酸、カルボキシメチルオキシコハク酸およびそれらの可溶性塩。エタノールアミン（ＭＥＡ、ＤＥＡおよびＴＥＡ）が液体洗剤中での緩衝能に寄与する場合もある。
【０３７５】
本発明の好ましい食器洗浄用組成物は「リン酸塩フリー」である。「リン酸塩フリー」は、本明細書において用いられるところ、問題の組成物がリン酸塩を本質的に含まないことを意味しており、換言すると、具体的には、問題の組成物が全組成物を基準として０．１重量％未満の量でリン酸塩を含み、好ましくは０．０１重量％未満の量でリン酸塩を含むことを意味する。「リン酸塩」という語句は、本文脈において用いられるところ、以下で説明するホスホン酸塩を含まない。
【０３７６】
いずれの場合も薬剤（好ましくは機械式食器洗浄剤）の重量を基準として２〜５０重量％の量での、好ましくは５〜４０重量％の量での、特に７．５〜３０重量％の量での、炭酸塩および／または炭酸水素塩の使用、好ましくはアルカリ炭酸塩の使用、特に好ましくは炭酸ナトリウムの使用が特に好ましい。機械式食器洗浄剤の重量基準として、２０重量％未満の、特に１７重量％未満の、好ましくは１３重量％未満の、特に９重量％未満の炭酸塩および／または炭酸水素塩（好ましくはアルカリ炭酸塩、特に好ましくは炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム）を含む薬剤が特に好ましい。
【０３７７】
特に、有機コビルダーとして、ポリカルボン酸塩／ポリカルボン酸、ポリマーポリカルボン酸塩、アスパラギン酸、ポリアセタール、デキストリン、さらなる有機コビルダーおよびホスホン酸塩を挙げるべきである。これらの物質のクラスを以下で説明する。
【０３７８】
使用可能な有機ビルダー物質は、例えば、遊離酸および／またはそのナトリウム塩の形態で使用され得るポリカルボン酸であり、ここで、ポリカルボン酸は複数の酸官能基を担持するカルボン酸を意味すると理解すべきである。このカルボン酸として、例えば、クエン酸、アジピン酸、コハク酸、グルタル酸、リンゴ酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸、サッカリン酸、ニトリロトリ酢酸（ＮＴＡ）（但し、そのような使用は、環境保護の理由で不都合ではない）およびこれらの混合物が挙げられる。ビルダー効果に加えて、遊離酸は概して、酸性化成分であるという性質も有しており、そのため、より低いおよびより穏やかなｐＨ値を設定するための薬剤としても使用される。特に、クエン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、グルコン酸およびこれらの任意の混合物をここで言及すべきである。
【０３７９】
これらの薬剤におけるクエン酸および／またはクエン酸塩の使用は、本明細書で説明されている薬剤のクリーニング力およびすすぎ力にとって特に有利であることが判明している。従って、好ましいのは、クエン酸またはクエン酸の塩を含み、このクエン酸またはクエン酸の塩の重量分率が特に１０重量％以下であり、好ましくは１５重量％以下であり、特に２０〜４０重量％であることを特徴とするクリーニング剤（好ましくは食器洗浄剤、特に好ましくは機械式食器洗浄剤）である。
【０３８０】
アミノカルボン酸および／またはその塩は、リン酸塩フリービルダーの別の重要なクラスである。このクラスの特に好ましい代表例は、メチルグリシン二酢酸（ＭＤＧＡ）もしくはその塩、およびグルタミン二酢酸（ＧＬＤＡ）もしくはその塩、またはエチレンジアミン二酢酸（ＥＤＤＳ）もしくはその塩である。これらのアミノカルボン酸またはその塩の含有量は、例えば合計で０．１〜１５重量％となり得、好ましくは合計で０．５〜１０重量％となり得、特に合計で０．５〜６重量％となり得る。アミノカルボン酸およびその塩を、上述したビルダーと共に使用することができ、特にリン酸塩フリービルダーと共に使用することができる。
【０３８１】
さらに、好適なビルダーとしてポリマーポリカルボキシレートが挙げられ、例えば、このポリマーポリカルボキシレートは、ポリアクリル酸またはポリメタクリル酸のアルカリ金属塩であり、例えば、５００〜７０，０００ｇ／ｍｏｌの相対モル質量を有するものである。好適なポリマーは特にポリアクリレートであり、このポリアクリレートは２０００〜２０，０００ｇ／ｍｏｌのモル質量を好ましくは有する。優れた溶解性に起因して、２０００〜１０，０００ｇ／ｍｏｌ（特に好ましくは３０００〜５０００ｇ／ｍｏｌ）のモル質量を有する短鎖ポリアクリレートがこの群から順に好ましい場合がある。
【０３８２】
好ましい実施形態では、本発明の食器洗浄用組成物は、この食器洗浄用組成物が使用される国の管轄に従って許容される場合にホスホン酸を含み得、好ましくは１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰＡ）、ジエチレントリアミンエペンタキス（メチレンホスホン酸）（ＤＴＭＰＡまたはＤＴＰＭＰＡ）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰ）、アミノトリス（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）を含み得る。
【０３８３】
代替実施形態では、本発明の食器洗浄用組成物は、上記で定義したようにリン酸塩フリーであり、且つホスホン酸塩を含まない、または少量のホスホン酸塩を含む。好ましい実施形態では、この食器洗浄用組成物は、１回の仕事当たり１５ｍｇ未満のリンを含み、より好ましくは１回の仕事当たり１０ｍｇ未満のリンを含み、最も好ましくは１回の仕事当たり１ｍｇ未満のリンを含む。
【０３８４】
漂白剤
本発明の洗剤組成物は１種または複数種の漂白剤を含むことができる。特に、粉末洗剤は１種または複数種の漂白剤を含むことができる。好適な漂白剤として、他の光退色剤、事前に形成された過酸、過酸化水素の供給源、漂白活性化剤、過酸化水素、漂白触媒およびこれらの混合物が挙げられる。一般に、漂白剤が使用される場合には、本発明の組成物は、主題のクリーニング組成物の重量を基準として約０．１％〜約５０％またはさらには約０．１％〜約２５％の漂白剤を含むことができる。好適な漂白剤の例として以下が挙げられる：
（１）他の光漂白剤、例えばビタミンＫ３；
（２）事前に形成された過酸：好適な事前に形成された過酸として、過カルボン酸および塩、過炭酸および塩、過イミド酸および塩、ペルオキシ一硫酸および塩（例えばＯｘｏｎｅ）およびこれらの混合物からなる群から選択される化合物が挙げられるがこれらに限定されない。好適な過カルボン酸として、式Ｒ−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−Ｏ−Ｍを有する疎水性および親水性の過酸が挙げられ、この式中、Ｒはアルキル基であり、任意選択で分枝しており、この過酸が疎水性である場合には６〜１４個の炭素原子または８〜１２個の炭素原子を有し、この過酸が親水性である場合には６個未満の炭素原子またはさらには４個未満の炭素原子を有し、Ｍは対イオン（例えば、ナトリウム、カリウムまたは水素）である；
（３）過酸化水素の供給源、例えば、無機過水和物の塩、例えばアルカリ金属塩、例えば、過ホウ酸ナトリウム塩（通常は一水和物または四水和物）、過炭酸ナトリウム塩、過硫酸ナトリウム塩、過リン酸ナトリウム塩、過ケイ酸ナトリウム塩およびこれらの混合物。本発明の一態様では、無機過水和物の塩は、過ホウ酸ナトリウム塩、過炭酸ナトリウム塩およびこれらの混合物からなる群から選択される。用いられる場合、無機過水和物の塩は概して、組成物全体の０．０５〜４０重量％または１〜３０重量％の量で存在し、そのような組成物に、コーティングされ得る結晶性固体として概して組み込まれる。好適なコーティングとして、無機塩（例えば、ケイ酸、炭酸もしくはホウ酸のアルカリ金属塩もしくはこれらの混合物）、または有機物質（例えば水溶性もしくは水分散性のポリマー、ワックス、油もしくは脂肪石けん）が挙げられる。有用な漂白組成物が、米国特許第５，５７６，２８２号明細書および米国特許第６，３０６，８１２号明細書で説明されている；
（４）Ｒ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｌを有する漂白活性化剤（Ｒはアルキル基であり、任意選択で分枝しており、この漂白活性化剤が疎水性である場合には６〜１４の炭素原子または８〜１２個の炭素原子を有し、この漂白活性化剤が親水性である場合には６個未満の炭素原子またはさらには４個未満の炭素原子を有し、Ｌは脱離基である）。好適な脱離基の例は、安息香酸およびその誘導体であり、特にベンゼンスルホ酸塩である。好適な漂白活性化剤として、ドデカノイルオキシベンゼンスルホン酸塩、デカノイルオキシベンゼンスルホン酸塩、デカノイルオキシ安息香酸またはその塩、３，５，５−トリメチルヘキサノイルオキシベンゼンスルホン酸塩、テトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）およびノナノイルオキシベンゼンスルホン酸塩（ＮＯＢＳ）が挙げられる。好適な漂白活性化剤はまた、国際公開第９８／１７７６７号パンフレットでも開示されている。任意の好適な漂白活性化剤を用いることができるが、本発明の一態様では、主題のクリーニング組成物は、ＮＯＢＳ、ＴＡＥＤまたはこれらの混合物を含むことができる；ならびに
（５）ペルオキシ酸から酸素原子を受容し、この酸素原子を酸化基質へと移すことが可能である漂白触媒が国際公開第２００８／００７３１９号パンフレットで説明されている。好適な漂白触媒として、イミニウムカチオンおよびポリイオン；イミニウム両性イオン；変性アミン；変性アミンオキシド；Ｎ−スルホニルイミン；Ｎ−ホスホニルイミン；Ｎ−アシルイミン；チアジアゾールジオキシド；ペルフルオロイミン；環状糖ケトンおよびこれらの混合物が挙げられるがこれらに限定されない。この漂白触媒は概して、重量を基準として０．０００５％〜０．２％、０．００１％〜０．１％またはさらには０．００５％〜０．０５％のレベルで本洗剤組成物に含まれる。
【０３８５】
存在する場合、過酸および／または漂白活性化剤は概して、本組成物を基準として約０．１〜約６０重量％、約０．５〜約４０重量％またはさらには約０．６〜約１０重量％の量でこの組成物中に存在する。１種または複数種の疎水性過酸またはその前駆体は、１種または複数種の親水性過酸またはその前駆体と組み合わせて使用され得る。
【０３８６】
過酸化水素の供給源および過酸または漂白活性化剤の量は、利用可能な酸素（過酸化物の供給源由来）と過酸とのモル比が１：１〜３５：１またはさらには２：１〜１０：１であるように選択され得る。
【０３８７】
補助材
分散剤−本発明の洗剤組成物はまた、分散剤も含むことができる。特に、粉末洗剤は分散剤を含む場合がある。好適な水溶性有機材料として、ホモポリマー酸もしくはコポリマー酸またはそれらの塩が挙げられ、ここで、ポリカルボン酸は、２個以下の炭素原子により互いに離れている少なくとも２個のカルボキシルラジカルを含む。
【０３８８】
移染防止剤−本発明の洗剤組成物はまた、１種または複数種の移染防止剤を含むことができる。好適な高分子移染防止剤として、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドンおよびＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドンおよびポリビニルイミダゾールまたはこれらの混合物が挙げられるがこれらに限定されない。主題の組成物中に存在する場合、移染防止剤は、この組成物の重量を基準として約０．０００１％〜約１０％、約０．０１％〜約５％またはさらには約０．１％〜約３％のレベルで存在することができる。
【０３８９】
蛍光性白色化剤−本発明の洗剤組成物はまた、好ましくは、クリーニングされる物品の色合いを変え得る追加の成分（例えば蛍光性白色化剤または光学増白剤）も含むであろう。本発明の組成物では、洗濯洗剤組成物での使用に好適な任意の蛍光性白色化剤を使用することができる。最も一般的に使用される蛍光性白色化剤は、ジアミノスチルベン−スルホン酸誘導体、ジアリールピラゾリン誘導体およびビスフェニル−ジスチリル誘導体のクラスに属するものである。
【０３９０】
好ましい蛍光性白色化剤は、Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ  ＡＧ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄから入手可能なＴｉｎｏｐａｌ  ＤＭＳおよびＴｉｎｏｐａｌ  ＣＢＳである。Ｔｉｎｏｐａｌ  ＤＭＳは、４，４’−ビス−（２−モルホリノ−４アニリノ−ｓ−トリアジン−６−イルアミノ）スチルベンジスルホネートのジナトリウム塩である。Ｔｉｎｏｐａｌ  ＣＢＳは、２，２’−ビス−（フェニル−スチリル）ジスルホネートのジナトリウム塩である。
【０３９１】
また、好ましい蛍光性白色化剤は、Ｐａｒａｍｏｕｎｔ  Ｍｉｎｅｒａｌｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｍｕｍｂａｉ，Ｉｎｄｉａ製の市販のＰａｒａｗｈｉｔｅ  ＫＸである。
【０３９２】
本発明での使用に好適な他の蛍光剤として、１−３−ジアリールピラゾリンおよび７−アルキルアミノクマリンが挙げられる。
【０３９３】
好適な蛍光性増白剤のレベルは、約０．０１、０．０５、約０．１、またはさらには約０．２重量％の下限レベルから、０．５またはさらには０．７５重量％の上限レベルまでを含む。
【０３９４】
布地色調剤−本発明の洗剤組成物はまた、染料または顔料等の布地色調剤も含むことができ、これは、洗剤組成物に配合された場合に、前記布地が前記洗剤組成物を含む洗浄液と接触する際に布地に付着し、これにより、可視光の吸収を介して前記布地の色合いを変えることが可能である。蛍光性白色化剤は少なくともいくらかの可視光を放つ。対照的に、布地色調剤は、可視光スペクトルの少なくとも一部分を吸収することで表面の色合いを変える。好適な布地色調剤として染料および染料−クレイ複合体が挙げられ、顔料もまた挙げられ得る。好適な染料として、微小分子染料および高分子染料が挙げられる。好適な微小分子染料として、例えば国際公開第２００５／０３２７４号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７５号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７６号パンフレットおよび欧州特許第１８７６２２６号明細書で説明されているＤｉｒｅｃｔ  Ｂｌｕｅ、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｒｅｄ、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｖｉｏｌｅｔ、Ａｃｉｄ  Ｂｌｕｅ、Ａｃｉｄ  Ｒｅｄ、Ａｃｉｄ  Ｖｉｏｌｅｔ、Ｂａｓｉｃ  Ｂｌｕｅ、Ｂａｓｉｃ  ＶｉｏｌｅｔおよびＢａｓｉｃ  Ｒｅｄまたはこれらの混合物の染料索引（Ｃ．Ｉ．）分類に属する染料からなる群から選択される微小分子染料が挙げられる。本洗剤組成物は、約０．００００３重量％〜約０．２重量％、約０．００００８重量％〜約０．０５重量％またはさらには約０．０００１重量％〜約０．０４重量％の布地色調剤を好ましくは含む。この組成物は０．０００１重量％〜０．２重量％の布地色調剤を含み得、これは、この組成物が単位用量ポーチの形態である場合に特に好ましい場合がある。
【０３９５】
汚染物遊離ポリマー−本発明の洗剤組成物はまた、布地（例えば綿およびポリエステル系布地）からの汚染物の除去を補助し、特にポリエステル系布地からの疎水性汚染物の除去を補助する１種または複数種の汚染物遊離ポリマーも含むことができる。汚染物遊離ポリマーは、例えば、ノニオン性またはアニオン性のテレフタレート系ポリマー、ポリビニルカプロラクタムおよび関連するコポリマー、ビニルグラフトコポリマー、ポリエステルポリアミドであり得る（例えばＣｈａｐｔｅｒ  ７，Ｐｏｗｄｅｒｅｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ｓｅｒｉｅｓ  ｖｏｌｕｍｅ  ７１，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．を参照されたい）。他のタイプの汚染物遊離ポリマーは、コア構造と、このコア構造に結合した複数のアルコキシレート基とを含む両親媒性アルコキシル化油脂クリーニングポリマーである。このコア構造は、国際公開第２００９／０８７５２３号パンフレットに詳述されているとおり、ポリアルキレンイミン構造またはポリアルカノールアミン構造を含むことができる。さらに、ランダムグラフトコポリマーは、好適な汚染物遊離ポリマーである。好適なグラフトコポリマーは、国際公開第２００７／１３８０５４号パンフレット、国際公開第２００６／１０８８５６号パンフレットおよび国際公開第２００６／１１３３１４号パンフレットでより詳細に説明されている。他の汚染物遊離ポリマーは、置換多糖類構造であり、特に、変性セルロース誘導体（例えば、欧州特許第１８６７８０８号明細書または国際公開第２００３／０４０２７９号パンフレットで説明されているもの）等の置換セルロース系構造である。好適なセルロース系ポリマーとして、セルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、セルロースアミドおよびこれらの混合物が挙げられる。好適なセルロース系ポリマーとして、アニオン性変性セルロース、ノニオン性変性セルロース、カチオン性変性セルロース、両性イオン性変性セルロースおよびこれらの混合物が挙げられる。好適なセルロース系ポリマーとして、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシルエチルセルロース、ヒドロキシルプロピルメチルセルロース、エステルカルボキシメチルセルロースおよびこれらの混合物が挙げられる。
【０３９６】
再汚染防止剤−本発明の洗剤組成物はまた、１種または複数種の再汚染防止剤（例えば、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリオキシエチレンおよび／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アクリル酸のホモポリマー、アクリル酸とマレイン酸とのコポリマー、ならびに、エトキシル化ポリエチレンイミン）も含むことができる。上記の汚染物遊離ポリマーに記載のセルロース系ポリマーは、再汚染防止剤としても機能し得る。
【０３９７】
他の好適な補助材として、収縮防止剤、しわ防止剤、殺菌剤、バインダ、キャリア、染料、酵素安定化剤、布地軟化剤、充填材、起泡調節剤、ヒドロトロープ、香料、顔料、セッケン泡抑制剤、溶剤、液体洗剤用構造化剤および／または構造弾性化剤が挙げられるがこれらに限定されない。
【０３９８】
一態様において、本洗剤は、コンパクト液体洗濯洗剤組成物であって、ａ）この組成物の重量を基準として少なくとも約１０％、好ましくは２０〜８０％の、アニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、石けんおよびこれらの混合物から選択される界面活性剤；ｂ）この組成物の重量を基準として約１％〜約３０％の、好ましくは５〜３０％の水；ｃ）この組成物の重量を基準として約１％〜約１５％の、好ましくは３〜１０％の非アミノ官能性溶媒；ならびにｄ）この組成物の重量を基準として約５％〜約２０％の、キレート剤、汚染物遊離ポリマー、酵素およびこれらの混合物から選択される性能添加剤を含み、以下のうちの少なくとも１つを含むコンパクト液体洗濯洗剤組成物：
（ｉ）界面活性剤は、約１．５：１〜約５：１のアニオン性界面活性剤対ノニオン性界面活性剤の重量比を有し、界面活性剤は、この組成物の重量を基準として約１５％〜約４０％のアニオン性界面活性剤を含み、この組成物の重量を基準として約５％〜約４０％の石けんを含む；（ｉｉ）この組成物の重量を基準として約０．１％〜約１０％の、泡立ち促進ポリマー、カチオン性界面活性剤、両イオン性界面活性剤、アミンオキシド界面活性剤、両性界面活性剤およびこれらの混合物から選択される泡立ち促進剤；ならびに（ｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方。全ての成分が国際公開第２００７／１３０５６２号パンフレットで説明されている。洗剤配合物で有用なさらなるポリマーが国際公開第２００７／１４９８０６号パンフレットで説明されている。
【０３９９】
別の態様では、本洗剤は、以下を含むコンパクト粒状（粉末）洗剤である：ａ）この組成物の重量を基準として少なくとも約１０％の、好ましくは１５〜６０％の、アニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、石けんおよびこれらの混合物から選択される界面活性剤；ｂ）この組成物の重量を基準として約１０〜８０％の、好ましくは２０〜６０％のビルダーであって、以下から選択されるビルダーの混合物であり得るビルダー：ｉ）リン酸塩ビルダーであり、総ビルダーの好ましくは２０％未満が、より好ましくは１０％未満が、さらにより好ましくは５％未満がリン酸塩ビルダーである、リン酸塩ビルダー；ｉｉ）ゼオライトビルダーであり、総ビルダーの好ましくは２０％未満が、より好ましくは１０％未満が、さらにより好ましくは５％未満がゼオライトビルダーである、ゼオライトビルダー；ｉｉｉ）クエン酸塩であり、総ビルダーの好ましくは０〜５％がクエン酸塩ビルダーである、クエン酸塩；ｉｖ）ポリカルボン酸塩であり、総ビルダーの好ましくは０〜５％がポリカルボン酸塩ビルダーである、ポリカルボン酸塩；ｖ）炭酸塩であり、総ビルダーの好ましくは０〜３０％が炭酸塩ビルダーである、炭酸塩；およびｖｉ）ケイ酸ナトリウムであり、総ビルダーの好ましくは０〜２０％がケイ酸ナトリウムビルダーである、ケイ酸ナトリウム；ｃ）この組成物の重量を基準として約０％〜２５％の、好ましくは１％〜１５％の、より好ましくは２％〜１０％の、より好ましくはこの組成物の重量を基準として３％〜５％の充填材（例えば硫酸塩）；ならびにｄ）この組成物の重量を基準として約０．１％〜２０％の酵素であって、この組成物の重量を基準として好ましくは１％〜１５％の、より好ましくは２％〜１０％の酵素。
【０４００】
洗剤配合剤にとって重要な汚染物および汚れは多くの異なる物質から組成されており、全てが異なる基質特異性を有する一連の異なる酵素が、洗濯および硬質面クリーニング（例えば食器洗浄）の両方に関連する洗剤において使用されるように開発されている。酵素を伴わない同一のプロセスと比較して、適用されたクリーニングプロセスにおける汚れ除去性を特異的に改善することから、これらの酵素は酵素洗浄力有益性をもたらすと考えられる。当分野で既知である汚れ除去酵素として、カルボヒドラーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、リパーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、キシラナーゼ、クチナーゼおよびペクチナーゼなどの酵素が挙げられる。
【０４０１】
本発明の好ましい態様では、本発明のベータ−グルカナーゼを少なくとも２種の酵素と組み合わせることができる。これらの追加の酵素を「他の酵素」の項において詳述しており、少なくとも３種、４種または５種の酵素がより好ましい。好ましくは、酵素は異なる基質特異性（例えば、カーボリティック（ｃａｒｂｏｌｙｔｉｃ）活性、タンパク質分解活性、デンプン分解活性、脂肪分解活性、ヘミセルロース分解活性またはペクチン分解活性）を有する。酵素の組み合わせは、例えば本発明のベータ−グルカナーゼと他の汚れ除去酵素とであり得、例えば、本発明のベータ−グルカナーゼおよびプロテアーゼ、本発明のベータ−グルカナーゼおよびセリンプロテアーゼ、本発明のベータ−グルカナーゼおよびアミラーゼ、本発明のベータ−グルカナーゼおよびセルラーゼ、本発明のベータ−グルカナーゼおよびリパーゼ、本発明のベータ−グルカナーゼおよびクチナーゼ、本発明のベータ−グルカナーゼおよびペクチナーゼまたは本発明のベータ−グルカナーゼおよび再付着防止酵素であり得る。より好ましくは、本発明のベータ−グルカナーゼは少なくとも２種の他の汚れ除去酵素と組み合わされ、例えば、本発明のベータ−グルカナーゼ、リパーゼおよびアミラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼおよびアミラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼおよびリパーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼおよびペクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼおよびセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼおよびヘミセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼおよびクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、アミラーゼおよびペクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、アミラーゼおよびクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、アミラーゼおよびセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、アミラーゼおよびヘミセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、リパーゼおよびペクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、リパーゼおよびクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、リパーゼおよびセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、リパーゼおよびヘミセルラーゼである。さらにより好ましくは、本発明のプロテアーゼは少なくとも３種の他の汚れ除去酵素と組み合わされ得、例えば、本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、リパーゼおよびアミラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼおよびペクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼおよびクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼおよびセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、アミラーゼおよびヘミセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、アミラーゼ、リパーゼおよびペクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、アミラーゼ、リパーゼおよびクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、アミラーゼ、リパーゼおよびセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、アミラーゼ、リパーゼおよびヘミセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、リパーゼおよびペクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、リパーゼおよびクチナーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、リパーゼおよびセルラーゼ；または本発明のベータ−グルカナーゼ、プロテアーゼ、リパーゼおよびヘミセルラーゼであり得る。本発明に係るベータ−グルカナーゼを、カルボヒドラーゼ、例えばアミラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペクチナーゼ、セルラーゼ、キサンタナーゼまたはプルラナーゼ、ペプチダーゼ、プロテアーゼまたはリパーゼを含む完全ではない列挙から選択される酵素のいずれかと組み合わせることができる。
【０４０２】
好ましい実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼはセリンプロテアーゼ（例えば、Ｓａｖｉｎａｓ（登録商標）等のＳ８ファミリプロテアーゼ）と組み合わされる。
【０４０３】
本発明の別の実施形態では、本発明のベータ−グルカナーゼを、１種または複数種のメタロプロテアーゼ（例えば、Ｎｅｕｔｒａｓｅ（登録商標）またはＴｈｅｒｍｏｌｙｓｉｎ等のＭ４メタロプロテアーゼ）と組み合わせることができる。そのような組み合わせは、上記で概説した他の洗剤酵素の組み合わせをさらに含むことができる。
【０４０４】
クリーニングプロセスまたは生地取り扱いプロセスは、例えば、洗濯プロセス、食器洗浄プロセス、または硬質面（例えば、浴室タイル、床、テーブル表面、排水管、シンクおよび洗面器）のクリーニングであり得る。洗濯プロセスは例えば家庭用洗濯であり得るが、産業用洗濯であってもよい。さらに、本発明は布地および／または衣服の洗濯プロセスに関し、ここで、このプロセスは、洗剤組成物および本発明の少なくとも１種のベータ−グルカナーゼを含む洗浄溶液で布地を処理するステップを含む。クリーニングプロセスまたは生地取り扱いプロセスは、例えば、機械式洗浄プロセスまたは手動洗浄プロセスにおいて実施可能である。洗浄溶液は、例えば、洗剤組成物を含む水性洗浄溶液であることができる。
【０４０５】
本発明の洗浄、クリーニングまたは生地取り扱いプロセスに供される布地および／または衣服は、例えば家庭の洗濯物といった従来の可洗洗濯物であり得る。好ましくは、洗濯物の主な製品は衣服および布地（例えば、ニット、織布、デニム、不織布、フェルト、ヤーンおよびタオル）である。布地は、綿、亜麻、亜麻、ジュート、カラムシ、サイザルもしくはコイアを含む天然セルロース系材料、またはビスコース／レーヨン、カラムシ、酢酸セルロース繊維（三細胞性）、リオセルもしくはこれらのブレンドを含む人工セルロース系材料（例えば、木材パルプ由来のもの）等のセルロース系材料であり得る。布地はまた、ウール、ラクダ、カシミヤ、モヘア、ウサギおよび絹を含む天然ポリアミド等の非セルロース系材料、またはナイロン、アラミド、ポリエステル、アクリル、ポリプロピレンおよびスパンデックス／エラスタン等の合成ポリマー、またはこれらのブレンド、ならびにセルロース系繊維および非セルロース系繊維のブレンドであり得る。ブレンドの例は、綿および／またはレーヨン／ビスコースと、ウール、合成繊維（例えば、ポリアミド繊維、アクリル繊維、ポリエステル繊維、ポリビニルアルコール繊維、ポリ塩化ビニル繊維、ポリウレタン繊維、ポリウレア繊維、アラミド繊維）およびセルロース含有繊維（例えば、レーヨン／ビスコース、カラムシ、亜麻、リネン、ジュート、酢酸セルロース繊維、リオセル）などの１種または複数種の随伴材料とのブレンドである。
【０４０６】
近年において、洗浄性能を犠牲にすることなく、酵素およびポリペプチド等の再生可能な生物学的成分で石油化学製品に由来する洗剤中の成分を置き換えることに関心がますます集まっている。洗剤組成物の成分が変更されると、プロテアーゼ、リパーゼおよびアミラーゼ等の一般的に使用される洗剤酵素と比較して改変されたおよび／もしくは向上した特性を有する新たな酵素活性または新たな酵素が、従来の洗剤組成物と比較して同様のまたは向上した洗浄性能を達成するために必要とされる。
【０４０７】
典型的な洗剤組成物は酵素に加えて様々な成分を含み、これらの成分は異なる効果を有し、界面活性剤のようないくつかの成分は、洗剤における表面張力を低下させ、これにより、クリーニングされる汚れを浮き上がらせ、分散させ、次いで洗い流すことを可能にし、漂白剤系のような他の成分は、度々酸化により退色させ、多くの漂白剤は強い殺菌特性も有し、消毒および殺菌に使用される。ビルダーおよびキレート剤のようなさらに他の成分は、液体から金属イオンを取り除くことにより例えば洗浄水を軟化させる。
【０４０８】
特定の実施形態では、本発明は本発明のベータ−グルカナーゼを含む組成物の使用に関し、ここで、前記酵素組成物は、少なくとも１種または複数種の以下の界面活性剤、ビルダー、キレート剤またはキレート化剤、洗濯または食器洗浄における漂白剤系または漂白剤成分をさらに含む。
【０４０９】
本発明の好ましい実施形態では、界面活性剤、ビルダー、キレート剤もしくはキレート化剤、漂白剤系および／または漂白剤成分の量は、本発明のベータ−グルカナーゼが添加されることなく使用される界面活性剤、ビルダー、キレート剤もしくはキレート化剤、漂白剤系および／または漂白剤成分の量と比較して低い。好ましくは、界面活性剤、ビルダー、キレート剤もしくはキレート化剤、漂白剤系および／または漂白剤成分である少なくとも１種の成分は、そのような成分の従来の量等の本発明のベータ−グルカナーゼが添加されない系での成分の量と比べて１％少ない量で存在し、例えば２％少ない量、例えば３％少ない量、例えば４％少ない量、例えば５％少ない量、例えば６％少ない量、例えば７％少ない量、例えば８％少ない量、例えば９％少ない量、例えば１０％少ない量、例えば１５％少ない量、例えば２０％少ない量、例えば２５％少ない量、例えば３０％少ない量、例えば３５％少ない量、例えば４０％少ない量、例えば４５％少ない量、例えば５０％少ない量で存在する。一態様では、本発明のベータ−グルカナーゼは洗剤組成物中で使用され、前記組成物は、界面活性剤、ビルダー、キレート剤もしくはキレート化剤、漂白剤系もしくは漂白剤成分および／またはポリマーである少なくとも１種の成分を含まない。
【０４１０】
洗剤組成物
一実施形態において、本発明は、本発明の酵素を１種または複数種の追加のクリーニング組成成分と共に含む洗剤組成物に関する。追加の成分の選択は、当業者の技能の範囲内であり、以下に記載される例示的な非限定的な成分を含む従来の処方成分が含まれる。
【０４１１】
成分の選択には、生地の取り扱いに関して、クリーニングされる生地の種類、汚染物の種類および／または程度、クリーニングを行う温度、ならびに、洗剤生成物の配合物の検討が含まれ得る。以下に記載の成分は特定の官能基に従う一般的なヘッダによって分類されるが、これは限定として解釈されるべきではなく、当業者に認識されるであろうとおり追加の官能基が成分中に含まれていてもよい。
【０４１２】
一実施形態では、本発明は、本発明の酵素と１種または複数種の追加のＡＤＷ（自動食器洗浄）組成物成分との組み合わせを含むＡＤＷ組成物を対象とする。追加の成分の選択は当業者の技術の範囲内であり、以下に示す例示的な非限定的成分等の従来の成分が挙げられる。
【０４１３】
界面活性剤
洗剤組成物は、アニオン性および／またはカチオン性および／またはノニオン性および／または半極性および／または両イオン性またはこれらの混合物であり得る１種または複数種の界面活性剤を含んでいてもよい。特定の実施形態において、洗剤組成物は、１種または複数種のノニオン性界面活性剤および１種または複数種のアニオン性界面活性剤の混合物を含む。界面活性剤は、典型的には、約１％〜約４０％または約３％〜約２０％または約３％〜約１０％などの約０．１％〜６０重量％のレベルで存在する。界面活性剤は所望のクリーニング用途に基づいて選択され、技術分野において公知であるいずれかの従来の界面活性剤を含み得る。
【０４１４】
含まれる場合、洗剤は、通常は、約１％〜約４０重量％のアニオン性界面活性剤を含有し、例えば、約５％〜約１５％、または約１５％〜約２０％、または約２０％〜約２５％を含む約５％〜約３０重量％のアニオン性界面活性剤を含有するであろう。アニオン性界面活性剤の非限定的な例としては、硫酸塩およびスルホン酸塩、特に、直鎖アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳ）、ＬＡＳの異性体、分岐アルキルベンゼンスルホネート（ＢＡＢＳ）、フェニルアルカンスルホネート、α−オレフィンスルホネート（ＡＯＳ）、オレフィンスルホネート、アルケンスルホネート、アルカン−２，３−ジイルビス（硫酸塩）、ヒドロキシアルカンスルホネートおよびジスルホネート、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）などのアルキルスルフェート（ＡＳ）、脂肪族アルコールスルフェート（ＦＡＳ）、第１級アルコールスルフェート（ＰＡＳ）、アルコールエーテルスルフェート（アルコールエトキシスルフェートまたは脂肪族アルコールエーテルスルフェートとしても公知であるＡＥＳまたはＡＥＯＳまたはＦＥＳ）、第２級アルカンスルホネート（ＳＡＳ）、パラフィンスルホネート（ＰＳ）、エステルスルホネート、スルホン化脂肪酸グリセロールエステル、メチルエステルスルホネート（ＭＥＳ）を含むα−スルホ脂肪酸メチルエステル（α−ＳＦＭｅまたはＳＥＳ）、アルキル−またはアルケニルコハク酸、ドデセニル／テトラデセニルコハク酸（ＤＴＳＡ）、アミノ酸の脂肪酸誘導体、スルホコハク酸または脂肪酸の塩（セッケン）のジエステルおよびモノエステル、ならびに、これらの組み合わせが挙げられる。
【０４１５】
含まれる場合、洗剤は、通常、約０％〜約４０重量％のカチオン性界面活性剤を含むであろう。カチオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルジメチルエタノール第４級アミン（ＡＤＭＥＡＱ）、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、ジメチルジステアリル塩化アンモニウム（ＤＳＤＭＡＣ）およびアルキルベンジルジメチルアンモニウム、ならびに、これらの組み合わせ、アルキル第４級アンモニウム化合物、アルコキシル化第４級アンモニウム（ＡＱＡ）が挙げられる。
【０４１６】
含まれる場合、洗剤は通常、約０．２％〜約４０重量％のノニオン性界面活性剤を含み、例えば、約０．５％〜約３０％、特に約１％〜約２０％、約３％〜約１０％、例えば約３％〜約５％、約８％〜約１２％または約１０％〜約１２％のノニオン性界面活性剤を含む。ノニオン性界面活性剤の非限定的な例として以下が挙げられる：アルコールエトキシレート（ＡＥまたはＡＥＯ）、アルコールプロポキシレート、プロポキシル化脂肪族アルコール（ＰＦＡ）、アルコキシル化脂肪酸アルキルエステル、例えばエトキシル化脂肪酸アルキルエステルおよび／またはプロポキシル化脂肪酸アルキルエステル、アルキルフェノールエトキシレート（ＡＰＥ）、ノニルフェノールエトキシレート（ＮＰＥ）、アルキルポリグリコシド（ＡＰＧ）、アルコキシル化アミン、脂肪酸モノエタノールアミド（ＦＡＭ）、脂肪酸ジエタノールアミド（ＦＡＤＡ）、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＥＦＡＭ）、プロポキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＰＦＡＭ）、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、またはグルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（グルコサミドＧＡまたは脂肪酸グルカミドＦＡＧＡ）、ならびに商品名ＳＰＡＮおよびＴＷＥＥＮで入手可能な生成物、ならびにこれらの組み合わせ。
【０４１７】
含まれる場合、洗剤は、通常、約０％〜約４０重量％の半極性界面活性剤を含有するであろう。半極性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルジメチルアミンオキシド、Ｎ−（ココアルキル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミンオキシドおよびＮ−（獣脂−アルキル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミンオキシドなどのアミンオキシド（ＡＯ）、ならびに、これらの組み合わせが挙げられる。
【０４１８】
含まれる場合、洗剤は、通常、約０％〜約４０重量％の両性イオン性界面活性剤を含有するであろう。両性イオン性界面活性剤の非限定的な例としては、ベタイン、例えば、アルキルジメチルベタイン、スルホベタイン、およびこれらの組み合わせが挙げられる。
【０４１９】
ヒドロトロープ
ヒドロトロープは、疎水性化合物を水溶液（または、反対に、極性物質を非極性環境）中に可溶化させる化合物である。典型的には、ヒドロトロープは、親水特性および疎水特性の両方を有する（いわゆる、界面活性剤から公知である両親媒性特性）が；しかしながら、ヒドロトロープの分子構造は、一般に、自発的な自己凝集を好まず、例えば、Ｈｏｄｇｄｏｎ  ａｎｄ  Ｋａｌｅｒ（２００７），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｏｌｌｏｉｄ  ＆  Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １２：１２１−１２８による概説を参照のこと。ヒドロトロープは、ミセル相、層状相または他の良好に画定されたメソ相を形成する界面活性剤および脂質について見出されるような、超えると自己凝集を生じる限界濃度を示さない。代わりに、多くのヒドロトロープは、凝集物の大きさが濃度の増加に伴って大型化する連続タイプの凝集プロセスを示す。しかしながら、多くのヒドロトロープは、水、脂、界面活性剤およびポリマーの混合物を含む、極性および非極性特性の物質を含有する系の相挙動、安定性およびコロイド特性を改変させる。ヒドロトロープは、伝統的に、製薬、パーソナルケア、食品から技術的用途にわたり産業で用いられている。洗剤組成物中においてヒドロトロープを使用することにより、相分離または高粘度などの望ましくない現象を誘起することなく、例えば、界面活性剤のより濃縮された配合物（水を排除することにより液体洗剤をコンパクトにするプロセスのとおり）が可能となる。
【０４２０】
洗剤は、０〜１０重量％、例えば、約０．５〜約５％または約３％〜約５％などの０〜５重量％のヒドロトロープを含有し得る。洗剤において用いられる技術分野において公知であるいずれかのヒドロトロープが利用され得る。ヒドロトロープの非限定的な例としては、ベンゼンスルホン酸ナトリウム、ｐ−トルエンスルホン酸ナトリウム（ＳＴＳ）、キシレンスルホン酸ナトリウム（ＳＸＳ）、クメンスルホン酸ナトリウム（ＳＣＳ）、シメンスルホン酸ナトリウム、アミンオキシド、アルコールおよびポリグリコールエーテル、ヒドロキシナフタレンナトリウム、ヒドロキシナフタレンスルホン酸ナトリウム、エチルヘキシル硫酸ナトリウム、ならびに、これらの組み合わせが挙げられる。
【０４２１】
ビルダーおよびコビルダー
洗剤組成物は、約５％〜約５０％などの約０〜６５重量％の洗剤ビルダーもしくはコビルダー、または、これらの混合物を含有し得る。皿洗浄洗剤において、ビルダーのレベルは、典型的には４０〜６５％、特に５０〜６５％である。ビルダーおよび／またはコビルダーは特に、ＣａおよびＭｇと共に水溶性錯体を形成するキレート化剤であり得る。ランドリー／ＡＤＷ／硬質面洗浄用洗剤に用いられる技術分野において公知であるいずれかのビルダーおよび／またはコビルダーが利用され得る。ビルダーの非限定的な例としては、ゼオライト、二リン酸塩（ピロリン酸塩）、三リン酸ナトリウム（ＳＴＰまたはＳＴＰＰ）などの三リン酸塩、炭酸ナトリウムなどの炭酸塩、メタケイ酸ナトリウムなどの可溶性ケイ酸塩、層状ケイ酸塩（例えば、Ｈｏｅｃｈｓｔ製ＳＫＳ−６）、２−アミノエタン−１−オール（ＭＥＡ）、イミノジエタノール（ＤＥＡ、２，２’−イミノジエタン−１−オールとしても知られている）、トリエタノール（ＴＥＡ、２，２’２”−ニトリロトリエタン−１−オールとしても知られている）などのエタノールアミン、および、（カルボキシメチル）イヌリン（ＣＭＩ）、ならびに、これらの組み合わせが挙げられる。
【０４２２】
洗剤組成物はまた、約５％〜約３０％などの０〜５０重量％の洗剤コビルダーを含有し得る。洗剤組成物は、コビルダーを単独で含んでいても、または、例えばゼオライトビルダーといったビルダーと組み合わせて含んでいてもよい。コビルダーの非限定的な例としては、ポリ（アクリル酸）（ＰＡＡ）またはコポリ（アクリル酸／マレイン酸）（ＰＡＡ／ＰＭＡ）などのポリアクリレートのホモポリマーまたはそのコポリマーが挙げられる。さらに非限定的な例としては、クエン酸塩、アミノカルボン酸塩、アミノポリカルボン酸塩およびホスホン酸塩などのキレート剤、ならびに、アルキル−またはアルケニルコハク酸が挙げられる。追加の特定の例としては、２，２’，２”−ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、イミノジコハク酸（ＩＤＳ）、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジコハク酸（ＥＤＤＳ）、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、グルタミン酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＧＬＤＡ）、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰＡ）、ジエチレントリアミンエペンタキス（メチレンホスホン酸）（ＤＴＭＰＡまたはＤＴＰＭＰＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸（ＥＤＧ）、アスパラギン酸−Ｎ−一酢酸（ＡＳＭＡ）、アスパラギン酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＡＳＤＡ）、アスパラギン酸−Ｎ−モノプロピオン酸（ＡＳＭＰ）、イミノジコハク酸（ＩＤＡ）、Ｎ−（２−スルホメチル）アスパラギン酸（ＳＭＡＳ）、Ｎ−（２−スルホエチル）アスパラギン酸（ＳＥＡＳ）、Ｎ−（２−スルホメチル）グルタミン酸（ＳＭＧＬ）、Ｎ−（２−スルホエチル）グルタミン酸（ＳＥＧＬ）、Ｎ−メチルイミノ二酢酸（ＭＩＤＡ）、α−アラニン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（α−ＡＬＤＡ）、セリン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＳＥＤＡ）、イソセリン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＩＳＤＡ）、フェニルアラニン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＰＨＤＡ）、アントラニル酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＡＮＤＡ）、スルファニル酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＳＬＤＡ）、タウリン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＴＵＤＡ）およびスルホメチル−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＳＭＤＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−エチリデンジアミン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ”−三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、ジエタノールグリシン（ＤＥＧ）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰ）、アミノトリス（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）、ならびに、これらの組み合わせおよび塩が挙げられる。さらなる例示的なビルダーおよび／またはコビルダーは、例えば、国際公開第０９／１０２８５４号パンフレット、米国特許第５９７７０５３号明細書に開示されている。
【０４２３】
漂白系
洗剤は、約１％〜約２０％などの０〜３０重量の漂白系を含有し得る。ランドリー／ＡＤＷ／硬質面洗浄用洗剤において用いられるいずれかの技術分野において公知である漂白系が利用され得る。好適な漂白系成分としては、漂白触媒、光漂白、漂白活性化剤、過炭酸ナトリウム、過ホウ酸ナトリウム、及び過酸化水素−ウレア（１：１）などの過酸化水素の供給源、事前に形成した過酸、ならびに、これらの混合物が挙げられる。好適な事前に形成した過酸としては、これらに限定されないが、ペルオキシカルボン酸および塩、過炭酸および塩、過イミド酸および塩、ペルオキシ一硫酸および塩、例えば、オキソン（Ｒ）、ならびに、これらの混合物が挙げられる。漂白系の非限定的な例としては、例えば、過ホウ酸（通常は一水和物または四水和物）、過炭酸、過硫酸、過リン酸、過ケイ酸のナトリウム塩などのアルカリ金属塩を含む無機塩を、過酸−形成性漂白活性化剤と組み合わせて含み得るペルオキシド系漂白系が挙げられる。本明細書において漂白活性化剤という用語は、過酸化水素と反応して、過加水分解を介して過酸を形成する化合物を意味する。このようにして形成された過酸は、活性化された漂白剤を構成する。本明細書において用いられる好適な漂白活性化剤は、エステルアミド、イミドまたは無水物の分類に属するものを含み、好適な例は、テトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）、ナトリウム４−［（３，５，５トリメチルヘキサノイル）オキシ］ベンゼン−１−スルホネート（ＩＳＯＮＯＢＳ）、４−（ドデカノイルオキシ）ベンゼン−１−スルホネート（ＬＯＢＳ）、４−（デカノイルオキシ）ベンゼン−１−スルホネート、４−（デカノイルオキシ）安息香酸塩（ＤＯＢＳまたはＤＯＢＡ）４−（ノナノイルオキシ）ベンゼン−１−スルホネート（ＮＯＢＳ）、および／または、国際公開第９８／１７７６７号パンフレットに開示されているものである。
【０４２４】
従来の漂白活性化剤の組み合わせを使用することも可能である。この漂白活性化剤は好ましくは、いずれの場合も漂白活性化剤含有剤の総重量を基準として、最大１０重量％の量で使用され、特に０．１重量％〜８重量％、特に２〜８重量％、特に好ましくは２〜６重量％で使用される。
【０４２５】
対象の漂白活性化剤の特定のファミリーは欧州特許第６２４１５４号明細書に開示されており、アセチルトリエチルシトレート（ＡＴＣ）が特に好ましいファミリーである。ＡＴＣまたは短鎖トリグリセリド様トリアシンは、環境にやさしいという利点を有する。さらに、アセチルトリエチルシトレートおよびトリアセチンは、保管に際して生成物中における良好な加水分解安定性を有しており、これは効果的な漂白活性化剤である。最後に、ＡＴＣは、過加水分解反応で放出されるクエン酸はビルダーとして機能し得るため、多機能である。ランドリー添加剤に対して良好な補助能を提供する。または、漂白系は、例えば、アミド、イミドまたはスルホンタイプのペルオキシドを含み得る。漂白系はまた、６−（フタルイミド）ペルオキシヘキサン酸（ＰＡＰ）などの過酸を含み得る。漂白系はまた、漂白触媒を含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、漂白剤成分は、以下の式を有する有機触媒：
【化１】
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（ｉｉｉ）およびこれらの混合物（式中、各Ｒ１は、独立して、９〜２４個の炭素を含有する分岐アルキル基または１１〜２４個の炭素を含有する直鎖アルキル基であり、好ましくは、各Ｒ１は、独立して、９〜１８個の炭素を含有する分岐アルキル基または１１〜１８個の炭素を含有する直鎖アルキル基であり、より好ましくは各Ｒ１は、独立して、２−プロピルヘプチル、２−ブチルオクチル、２−ペンチルノニル、２−ヘキシルデシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イソ−ノニル、イソ−デシル、イソ−トリデシルおよびイソ−ペンタデシルからなる群から選択される）からなる群から選択される有機触媒であり得る。他の例示的な漂白系は、例えば、国際公開第２００７／０８７２５８号パンフレット、国際公開第２００７／０８７２４４号パンフレット、国際公開第２００７／０８７２５９号パンフレット、欧州特許第１８６７７０８号明細書（ビタミンＫ）、および国際公開第２００７／０８７２４２号パンフレットに記載されている。好適な光漂白は、例えばスルホン化亜鉛、またはアルミニウムフタロシアニンであり得る。
【０４２６】
好ましくは、漂白剤成分は、漂白触媒（特に有機漂白触媒）に加えて過酸の供給源を含む。
【０４２７】
好ましい実施形態では、食器洗浄用組成物（特に機械式食器洗剤組成物、特に固体自動食器洗浄用組成物）は漂白触媒をさらに含むことができる。使用可能な漂白触媒として以下が挙げられるがこれらに限定されない：漂白促進性の遷移金属塩および遷移金属錯体の群、好ましくはＭｎ錯体、Ｆｅ錯体、Ｃｏ錯体、Ｒｕ錯体またはＭｏ錯体、特に好ましくはマンガンおよび／またはコバルトの塩および／または錯体の群、特にコバルト（アミン）錯体、コバルト（酢酸塩）錯体、コバルト（カルボニル）錯体、コバルトまたはマンガンの塩化物、硫酸マンガン、ならびにマンガンと１，４，７−トリメチル−１，４，７−トリアザシクロノナン（Ｍｎ３−ＴＡＣＮ）または１，２，４，７−テトラメチル−１，４，７−トリアザシクロノナン（Ｍｎ４−ＴＡＣＮ）との錯体。
【０４２８】
０．００１〜１重量％の、好ましくは０．０１〜０．１重量％の漂白触媒、好ましくはＭｎ錯体、特にマンガンと１，４，７−トリメチル−１，４，７−トリアザシクロノナン（Ｍｎ３−ＴＡＣＮ）または１，２，４，７−テトラメチル−１，４，７−トリアザシクロノナン（Ｍｎ４−ＴＡＣＮ）との錯体を含むクリーニング組成物（好ましくは食器洗浄用組成物、特に機械式食器洗浄用組成物）が好ましい。
【０４２９】
過酸の供給源は以下から選択され得る：（ａ）事前に形成された過酸；（ｂ）好ましくは漂白活性化剤との組み合わせの、過炭酸塩、過ホウ酸塩または過硫酸塩（過酸化水素の供給源）；および（ｃ）生地処置ステップまたは硬質面処置ステップにおいて水の存在下にてｉｎ  ｓｉｔｕで過酸を形成するためのペルヒドロラーゼ酵素およびエステル。
【０４３０】
ポリマー
洗剤は、０．５〜５％、２〜５％、０．５〜２％または０．２〜１％などの０〜１０重量％のポリマーを含有する。洗剤において用いられる技術分野において公知であるいずれかのポリマーが利用され得る。ポリマーは、上記のとおりコビルダーとして機能し得、または、再汚染防止、繊維保護、汚染物遊離、移染防止、油脂クリーニングおよび／または消泡特性をもたらし得る。いくつかのポリマーは、上記の特性を２つ以上および／または下記のモチーフを２つ以上有している場合がある。例示的なポリマーとしては、（カルボキシメチル）セルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）、ポリ（エチレングリコール）またはポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＧ）、エトキシル化ポリ（エチレンイミン）、カルボキシメチルイヌリン（ＣＭＩ）、および、ＰＡＡなどのポリカルボキシレート、ＰＡＡ／ＰＭＡ、ポリ−アスパラギン酸、および、ラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマー、疎水性修飾ＣＭＣ（ＨＭ−ＣＭＣ）およびシリコーン、テレフタル酸とオリゴマー系グリコールとのコポリマー、ポリ（エチレンテレフタレート）とポリ（オキシエテンテレフタレート）とのコポリマー（ＰＥＴ−ＰＯＥＴ）、ＰＶＰ、ポリ（ビニルイミダゾール）（ＰＶＩ）、ポリ（ビニルピリジン−Ｎ−オキシド）（ＰＶＰＯまたはＰＶＰＮＯ）、ならびに、ポリビニルピロリドン−ビニルイミダゾール（ＰＶＰＶＩ）が挙げられる。さらに例示的なポリマーとしては、スルホン化ポリカルボキシレート、ポリエチレンオキシドおよびポリプロピレンオキシド（ＰＥＯ−ＰＰＯ）およびジクアタニウムエトキシスルフェートが挙げられる。他の例示的なポリマーは、例えば、国際公開第２００６／１３０５７５号パンフレットに開示されている。上記のポリマーの塩もまた予期される。
【０４３１】
好ましい実施形態では、本発明の組成物はまた、１種または複数種の共重合ポリカルボン酸塩も含み、特にアクリル酸とメタクリル酸との共重合体およびアクリル酸またはメタクリル酸とマレイン酸との共重合体も含む。
【０４３２】
（共）重合ポリカルボン酸塩を、粉末または水溶液として使用することができる。クリーニング剤（好ましくは食器洗浄剤、特に機械式食器洗浄剤）中の（共）重合ポリカルボン酸塩の含有量は、好ましくは０．５〜２０重量％であり、特に３〜１０重量％である。
【０４３３】
水溶性を向上させるために、ポリマーはまた、単量体としてアリルスルホン酸（例えば、アリルオキシベンゼンスルホン酸およびメタリルスルホン酸）も含むことができる。さらに好ましいコポリマーは、単量体としてアクロレインおよびアクリル酸／アクリル酸塩またはアクロレインおよび酢酸ビニルを含むものである。
【０４３４】
さらに、アルカリ土類イオンと錯体を形成し得る全ての化合物をビルダーとして使用することができる。
【０４３５】
本発明の最も好ましい実施形態では、本発明の食器洗浄洗剤およびクリーニング組成物は、少なくとも１種のスルホン酸含有モノマー（いわゆるスルホポリマー）を含むコポリマーをさらに含む。
【０４３６】
本発明に従って生成された洗剤またはクリーニング剤の総重量中のスルホポリマーの重量は、好ましくは０．１〜２０重量％であり、特に０．５〜１８重量％であり、特に好ましくは１．０〜１５重量％であり、特に４〜１４重量％であり、特に６〜１２重量％である。
【０４３７】
少なくとも１種のスルホポリマーの水溶液は概して２０〜７０重量％のスルホポリマーを含み、特に３０〜５０重量％のスルホポリマーを含み、好ましくは約３５〜４０重量％のスルホポリマーを含む。
【０４３８】
好ましくは、ポリスルホネートコポリマー（任意選択で疎水性に改質されたポリスルホネートコポリマー）がスルホポリマーとして使用される。このコポリマーは、２種、３種、４種またはより多くの異なるモノマー単位を含むことができる。
【０４３９】
好ましいポリスルホネートコポリマーは、スルホン酸基を含むモノマーに加えて、不飽和カルボン酸の群からの少なくとも１種のモノマーを含む。
【０４４０】
特に好ましくは、式Ｒ１（Ｒ２）Ｃ＝Ｃ（Ｒ３）ＣＯＯＨ（この式中、Ｒ１〜Ｒ３は互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、２〜１２個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖の飽和アルキルラジカル、２〜１２個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖のモノ不飽和アルケニルラジカルもしくはポリ不飽和アルケニルラジカル、−ＮＨ２、−ＯＨ、または上記で定義した−ＣＯＯＨ−置換アルキルもしくはアルケニルラジカル、または−ＣＯＯＨもしくはＣＯＯＲ４を表し、Ｒ４は、１〜１２個の炭素原子を有する飽和または不飽和の直鎖または分枝鎖の炭化水素ラジカルである）の不飽和カルボン酸が不飽和カルボン酸として使用される。
【０４４１】
特に好ましい不飽和カルボン酸として、アクリル酸、メタクリル酸、エタクリル酸、α−クロロアクリル酸、α−シアノアクリル酸、クロトン酸、α−フェニルアクリル酸、マレイン酸、無水マレイン酸、フマル酸、イタコン酸、シトラコン酸、メチレンマロン酸、ソルビン酸、桂皮酸またはそれらの混合物が挙げられる。当然のことながら、不飽和カルボン酸も使用することができる。
【０４４２】
スルホン酸基を含む好ましいモノマーは、式
Ｒ５（Ｒ６）Ｃ＝Ｃ（Ｒ７）−Ｘ−ＳＯ３Ｈ
のものであり、この式中、Ｒ５〜Ｒ７は互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３、２〜１２個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖の飽和アルキルラジカル、２〜１２個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖のモノ不飽和アルケニルラジカルもしくはポリ不飽和アルケニルラジカル、−ＮＨ２、−ＯＨ、または−ＣＯＯＨ−置換アルキルもしくはアルケニルラジカル、または−ＣＯＯＨもしくはＣＯＯＲ４を表し、Ｒ４は、１〜１２個の炭素原子を有する飽和または不飽和の直鎖または分枝鎖の炭化水素ラジカルであり、Ｘはスペーサー基を表し、このスペーサー基は任意選択で存在し且つ−（ＣＨ２）ｎ−（ここで、ｎ＝０〜４）、−ＣＯＯ−（ＣＨ２）ｋ−（ここで、ｋ＝１〜６）、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（ＣＨ３）２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（ＣＨ３）２−ＣＨ２−および−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−から選択される。
【０４４３】
これらのモノマーの中で、好ましいものは、式
Ｈ２Ｃ＝ＣＨ−Ｘ−ＳＯ３Ｈ
Ｈ２Ｃ＝Ｃ（ＣＨ３）−Ｘ−ＳＯ３Ｈ
ＨＯ３Ｓ−Ｘ−（Ｒ６）Ｃ＝Ｃ（Ｒ７）−Ｘ−ＳＯ３Ｈ
のものであり、これらの式中、Ｒ６およびＲ７は互いに独立して、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３および−ＣＨ（ＣＨ３）２から選択され、Ｘはスペーサー基を表し、このスペーサー基は任意選択で存在し且つ−（ＣＨ２）ｎ−（ここで、ｎ＝０〜４）、ＣＯＯ−（ＣＨ２）ｋ−（ここで、ｋ＝１〜６）、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（ＣＨ３）２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（ＣＨ３）２−ＣＨ２−およびＣ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−から選択される。
【０４４４】
スルホン酸基を含む特に好ましいモノマーとして、１−アクリルアミド−１−プロパンスルホン酸、２−アクリルアミド−２−プロパンスルホン酸、２−アクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸、２−メタクリルアミド−２−メチル−１−プロパンスルホン酸、３−メタクリルアミド−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸、アリルスルホン酸、メタリルスルホン酸、アリルオキシベンゼンスルホン酸、メタリルオキシベンゼンスルホン酸、２−ヒドロキシ−３−（２−プロペニルオキシ）プロパンスルホン酸、２−メチル−２−プロペン−１−スルホン酸、スチレンスルホン酸、ビニルスルホン酸、３−スルホプロピルアクリレート、３スルホプロピルメタクリレート、スルホメタクリルアミド、スルホメチルメタクリルアミドならびの上述の酸またはその水溶性塩の混合物が挙げられる。
【０４４５】
ポリマー中のスルホン酸基は完全にまたは部分的に中和された形態で存在することができ、即ち、一部または全てのスルホン酸基において、スルホン酸基中の酸性水素原子が金属イオンに置き換えられ得、好ましくはアルカリ金属イオンに置き換えられ得、特にナトリウムイオンに置き換えられ得る。本発明によれば、部分的にまたは完全に中和されたスルホン酸基を含むコポリマーの使用が好ましい。
【０４４６】
本発明に係る使用に好ましいコポリマー中でのモノマー分布は、カルボン酸基を含むモノマーおよびスルホン酸基を含むモノマーのみを含むコポリマーが好ましくは５〜９５重量％であり、特に好ましくは、スルホン酸基を含むモノマーの量は５０％〜９０重量％であり、カルボン酸基を含むモノマーの量は１０％〜５０重量％であり、ここで、これらのモノマーは好ましくは、上記で列挙したものから選択される。
【０４４７】
本発明に係る使用に好ましいスルホコポリマーの分子量を、ポリマーの特性を所望される意図した目的に適合させるために変更することができる。好ましいクリーニング組成物は、分子量が２０００〜２００，０００ｇｍｏｌ−１であり、好ましくは４０００〜２５，０００ｇｍｏｌ−１であり、特に５０００〜１５，０００ｇｍｏｌ−１であるコポリマーを特徴とする。
【０４４８】
別の好ましい実施形態では、コポリマーはまた、カルボキシル基を含むモノマーおよびスルホン酸基を含むモノマーに加えて、少なくとも１種のノニオン性（好ましくは疎水性）モノマーも含む。特にこれらのポリマーを使用することにより、本発明に係る自動食器洗浄洗剤の明白なすすぎ性能が向上している。
【０４４９】
従って、本発明によれば、カルボン酸基を含むモノマー、スルホン酸基を含むモノマーおよびノニオン性（特に疎水性）モノマーを含むアニオン性コポリマーが好ましい。
【０４５０】
好ましくは、一般式Ｒ１（Ｒ２）Ｃ＝Ｃ（Ｒ３）−Ｘ−Ｒ４（この式中、Ｒ１〜Ｒ３は互いに独立して、−Ｈ、−ＣＨ３または−ＣＨ２Ｈ５を表し、Ｘは、任意選択で存在し且つ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−およびＣ（Ｏ）−ＮＨ−から選択されるスペーサー基を表し、Ｒ４は、２〜２２個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖の飽和アルキルラジカルまたは６〜２２個の炭素原子を有する不飽和（好ましくは芳香族）ラジカルを表す）の好ましいモノマーをノニオン性モノマーとして使用する。
【０４５１】
特に好ましいノニオン性モノマーとして以下が挙げられる：ブテン、イソブテン、ペンテン、３−メチルブテン、２−メチルブテン、シクロペンテン、ヘキセン、１−ヘキセン、２−メチル−１−ペンテン、３−メチル−１−ペンテン、シクロヘキセン、メチルシクロペンテン、シクロヘプテン、メチルシクロヘキセン、２，４，４−トリメチル−１−ペンテン、２，４，４−トリメチル−２−ペンテン、２，３−ジメチル−１−ヘキセン、２，４−ジメチル−１−ヘキセン、２，５−ジメチル−１−ヘキセン、３，５−ジメチル−１−ヘキセン、４，４−ジメチル−１−ヘキサン、エチルシクロヘキシン、１−オクテン、１０個以上の炭素原子を有するα−オレフィン、例えば、１−デセン、１−ドデセン、１−ヘキサデセン、１−オクタデセンおよびＣ２２α−オレフィン、２−スチレン、α−メチルスチレン、３−メチルスチレン、４−プロピルスチレン、４−シクロヘキシルスチレン、４−ドデシルスチレン、２−エチル−４−ベンジルスチレン、１−ビニルナフタレン、２−ビニルナフタレン、アクリル酸メチルエステル、アクリル酸エチルエステル、アクリル酸プロピルエステル、アクリル酸ブチルエステル、アクリル酸ペンチルエステル、アクリル酸ヘキシルエステル、メタクリル酸メチルエステル、Ｎ（メチル）アクリルアミド、アクリル酸２−エチルヘキシルエステル、メタクリル酸２−エチルヘキシルエステル、Ｎ（２エチルヘキシル）アクリルアミド、アクリル酸オクチルエステル、メタクリル酸オクチルエステル、Ｎ（オクチル）アクリルアミド、アクリル酸ラウリルエステル、メタクリル酸ラウリルエステル、Ｎ（ラウリル）アクリルアミド、アクリル酸ステアリルエステル、メタクリル酸ステアリルエステル、Ｎ（ステアリル）アクリルアミド、アクリル酸ベヘニルエステル、メタクリル酸ベヘニルエステルおよびＮ（ベヘニル）アクリルアミドまたはそれらの混合物。
【０４５２】
本発明に係る使用に好ましい疎水的に改質されたコポリマーのモノマー分布は、スルホン酸基を含むモノマー、疎水性モノマー、およびカルボン酸基を含むモノマーに関して好ましくは５％〜８０重量％に達し、スルホン酸基を含むモノマーおよび疎水性モノマーの量はそれぞれ、特に好ましくは５％〜３０重量％であり、カルボン酸基を含むモノマーの量は６０％〜８０重量％であり、ここで、これらのモノマーは好ましくは、上記で列挙したものから選択される。
【０４５３】
驚くべきことに、本発明のポリペプチドは食器洗浄用組成物（好ましくは自動食器洗浄用組成物）中にスルホン酸基を含むモノマーを含むコポリマー（スルホポリマー）との組み合わせでいくつかの利点を有することを発見した。
【０４５４】
最初に、この組成物は、食器を驚くほど良好にきれにするだけでなく、ガラス上での膜形成を少なくし、石灰スケールの蓄積を少なくし、すすぎ後に優れた輝きを示し、食器類上での沈着を少なくする。この組成物はまた、食器洗浄機（特にふるい）内部での混合汚れの蓄積も低減する。
【０４５５】
さらに、この組成物は特定の酵素安定化剤を含む。スルホン酸基を含むモノマーを含むコポリマー（スルホポリマー）と組み合わせて本発明のポリペプチドを含むこの組み合わせは、酵素が関連する汚染物に対してより良好なクリーニング性能を示すことを発見した。理論に拘束されないが、このことは、この組成物中の酵素のより良好な安定化に起因する。このことは、液体またゲルの形態である食器洗浄用組成物で特に観察され得る。
【０４５６】
布地色調剤
本発明の洗剤組成物はまた、染料または顔料などの布地色調剤を含んでいてもよく、これは、洗剤組成物に配合された場合に、前記布地が前記洗剤組成物を含む洗浄液と接触させられる際に布地に付着し、これにより、可視光の吸収／反射を介して前記布地の色合いを変えることが可能である。蛍光性白色化剤は少なくともいくらかの可視光を放つ。対照的に、布地色調剤は、可視光スペクトルの少なくとも一部分を吸収することで表面の色合いを変える。好適な布地色調剤としては、染料および染料−クレイ複合体が挙げられ、また、顔料もまた挙げられ得る。好適な染料としては、微小分子染料および高分子染料が挙げられる。好適な微小分子染料としては、例えば国際公開第２００５／０３２７４号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７５号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７６号パンフレットおよび欧州特許第１８７６２２６号明細書（本明細書において参照により援用される）に記載されている、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｂｌｕｅ、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｒｅｄ、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｖｉｏｌｅｔ、Ａｃｉｄ  Ｂｌｕｅ、Ａｃｉｄ  Ｒｅｄ、Ａｃｉｄ  Ｖｉｏｌｅｔ、Ｂａｓｉｃ  Ｂｌｕｅ、Ｂａｓｉｃ  ＶｉｏｌｅｔおよびＢａｓｉｃ  Ｒｅｄ、または、これらの混合物の染料索引（Ｃ．Ｉ．）分類に属する染料からなる群から選択される微小分子染料が挙げられる。洗剤組成物は、約０．００００３重量％〜約０．２重量％、約０．００００８重量％〜約０．０５重量％またはさらには約０．０００１重量％〜約０．０４重量％の布地色調剤を含むことが好ましい。組成物は、０．０００１重量％〜０．２重量％の布地色調剤を含み得、これは、組成物が単位用量ポーチの形態である場合に特に好ましい場合がある。好適な色調剤はまた、例えば、国際公開第２００７／０８７２５７号パンフレット、および国際公開第２００７／０８７２４３号パンフレットに開示されている。
【０４５７】
補助材
ランドリー／ＡＤＷ／硬質面洗浄用洗剤において用いられる技術分野において公知であるいずれかの洗剤成分もまた利用され得る。他の任意の洗剤成分としては、単独もしくは組み合わせで、耐食剤、収縮防止剤、再汚染防止剤、しわ防止剤、殺菌剤、バインダ、腐食抑制剤、崩壊剤／分解剤、染料、酵素安定化剤（ホウ酸、ホウ酸塩、ＣＭＣ、および／または、プロピレングリコールなどのポリオールを含む）、クレイを含む布地コンディショナ、充填材／加工助剤、蛍光性白色化剤／光学増白剤、起泡増進剤、起泡（セッケンの泡）調節剤、香料、汚染物−懸濁剤、軟化剤、セッケン泡抑制剤、色あせ防止剤、および、ウィッキング剤が挙げられる。ランドリー／ＡＤＷ／硬質面洗浄用洗剤において用いられる技術分野において公知であるいずれかの処方成分が利用され得る。このような処方成分の選択は十分に当業者の技能の範囲内である。
【０４５８】
分散剤
本発明の洗剤組成物はまた、分散剤を含有することが可能である。特に粉末洗剤が分散剤を含んでいてもよい。好適な水溶性有機材料としては、ホモ−またはコポリマー酸またはその塩が挙げられ、ここで、ポリカルボン酸は、２個以下の炭素原子によって相互に分離された少なくとも２つのカルボキシルラジカルを含む。好適な分散剤は、例えば、Ｐｏｗｄｅｒｅｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ｓｅｒｉｅｓ  ｖｏｌｕｍｅ  ７１，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．に記載されている。
【０４５９】
移染防止剤
本発明の洗剤組成物はまた、１種または複数種の移染防止剤を含み得る。好適な高分子移染防止剤としては、これらに限定されないが、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドンおよびＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドンおよびポリビニルイミダゾールまたはこれらの混合物が挙げられる。主題の組成物中に存在する場合、移染防止剤は、組成物の約０．０００１％〜約１０％、約０．０１％〜約５％、または、さらには約０．１％〜約３重量％のレベルで存在し得る。
【０４６０】
蛍光性白色化剤
本発明の洗剤組成物はまた、好ましくは、蛍光性白色化剤または光学増白剤などのクリーニングされる物品の色合いを変え得る追加の成分を含有するであろう。存在する場合、増白剤は、約０．０１％〜約０．５％のレベルであることが好ましい。ランドリー洗剤組成物における使用に好適ないずれかの蛍光性白色化剤が、本発明の組成物中に用いられ得る。最も一般的に用いられる蛍光性白色化剤は、ジアミノスチルベン−スルホン酸誘導体、ジアリールピラゾリン誘導体およびビスフェニル−ジスチリル誘導体の分類に属するものである。ジアミノスチルベン−スルホン酸誘導体タイプの蛍光性白色化剤の例としては：４，４’−ビス−（２−ジエタノールアミノ−４−アニリノ−ｓ−トリアジン−６−イルアミノ）スチルベン−２，２’−ジスルホネート；４，４’−ビス−（２，４−ジアニリノ−ｓ−トリアジン−６−イルアミノ）スチルベン−２．２’−ジスルホネート；４，４’−ビス−（２−アニリノ−４（Ｎ−メチル−Ｎ−２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−ｓ−トリアジン−６−イルアミノ）スチルベン−２，２’−ジスルホネート、４，４’−ビス−（４−フェニル−１，２，３−トリアゾール−２−イル）スチルベン−２，２’−ジスルホネートおよび５−（２Ｈ−ナフト［１，２−ｄ］［１，２，３］トリアゾール−２−イル）−２−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンゼンスルホネートナトリウムのナトリウム塩が挙げられる。好ましい蛍光性白色化剤は、Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ  ＡＧ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄから入手可能であるＴｉｎｏｐａｌ  ＤＭＳおよびＴｉｎｏｐａｌ  ＣＢＳである。Ｔｉｎｏｐａｌ  ＤＭＳは、４，４’−ビス−（２−モルホリノ−４アニリノ−ｓ−トリアジン−６−イルアミノ）スチルベン−２，２’−ジスルホネートのジナトリウム塩である。Ｔｉｎｏｐａｌ  ＣＢＳは、２，２’−ビス−（フェニル−スチリル）ジスルホネートのジナトリウム塩である。また、好ましい蛍光性白色化剤は、Ｐａｒａｍｏｕｎｔ  Ｍｉｎｅｒａｌｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｍｕｍｂａｉ，Ｉｎｄｉａ製の市販のＰａｒａｗｈｉｔｅ  ＫＸである。本発明における使用に好適な他の蛍光剤としては、１−３−ジアリールピラゾリンおよび７−アルキルアミノクマリンが挙げられる。
【０４６１】
好適な蛍光性増白剤レベルは、約０．０１、０．０５、約０．１、または、さらには約０．２重量％の下限レベルから、０．５またはさらには０．７５重量％の上限レベルを含む。
【０４６２】
汚染物遊離ポリマー
本発明の洗剤組成物はまた、綿およびポリエステル系布地などの布地からの汚染物の除去、特にポリエステル系布地からの疎水性汚染物の除去を補助する１種または複数種の汚染物遊離ポリマーを含み得る。汚染物遊離ポリマーは、例えば、ノニオン性またはアニオン性テレフタレート系ポリマー、ポリビニルカプロラクタムおよび関連するコポリマー、ビニルグラフトコポリマー、ポリエステルポリアミドであり得る（例えばＣｈａｐｔｅｒ  ７，Ｐｏｗｄｅｒｅｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ｓｅｒｉｅｓ  ｖｏｌｕｍｅ  ７１，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．を参照のこと）。他のタイプの汚染物遊離ポリマーは、コア構造と、このコア構造に結合した複数のアルコキシレート基とを含む両親媒性アルコキシル化油脂クリーニングポリマーである。コア構造は、国際公開第２００９／０８７５２３号パンフレット（本明細書において参照により援用されている）に詳述されているとおり、ポリアルキレンイミン構造またはポリアルカノールアミン構造を含み得る。さらに、ランダムグラフトコポリマーは、好適な汚染物遊離ポリマーである。好適なグラフトコポリマーは、国際公開第２００７／１３８０５４号パンフレット、国際公開第２００６／１０８８５６号パンフレットおよび国際公開第２００６／１１３３１４号パンフレット（本明細書において参照により援用されている）により詳細に記載されている。他の汚染物遊離ポリマーは、欧州特許第１８６７８０８号明細書または国際公開第２００３／０４０２７９号パンフレット（共に本明細書において参照により援用されている）に記載されているものなどの変性セルロース誘導体などの特に置換セルロース系構造といった置換多糖類構造である。好適なセルロース系ポリマーとしては、セルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、セルロースアミドおよびこれらの混合物が挙げられる。好適なセルロース系ポリマーとしては、アニオン性変性セルロース、ノニオン性変性セルロース、カチオン性変性セルロース、両性イオン性変性セルロース、および、これらの混合物が挙げられる。好適なセルロース系ポリマーとしては、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシルエチルセルロース、ヒドロキシルプロピルメチルセルロース、エステルカルボキシメチルセルロースおよびこれらの混合物が挙げられる。
【０４６３】
再汚染防止剤
本発明の洗剤組成物としてはまた、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリオキシエチレンおよび／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アクリル酸のホモポリマー、アクリル酸とマレイン酸とのコポリマー、ならびに、エトキシル化ポリエチレンイミンなどの１種または複数種の再汚染防止剤が挙げられ得る。上記の汚染物遊離ポリマーに記載のセルロース系ポリマーは、再汚染防止剤としても機能し得る。
【０４６４】
レオロジー改質剤
本発明の洗剤組成物は、粘度低下剤とは異なる１種または複数種のレオロジー改質剤、構造化剤（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｎｔ）または増粘剤も含むことができる。レオロジー改質剤は、非ポリマー性結晶質でヒドロキシ官能性の材料、液体洗剤組成物の水性液体マトリックスにずり減粘特性を付与するポリマーレオロジー改質剤からなる群から選択される。この洗剤のレオロジーおよび粘度を、例えば欧州特許第２１６９０４０号明細書で示されるように、当分で既知の方法により変更することができる、および調節することができる。
【０４６５】
他の好適な補助材としては、これらに限定されないが、収縮防止剤、しわ防止剤、殺菌剤、バインダ、キャリア、染料、酵素安定化剤、布地軟化剤、充填材、起泡調節剤、ヒドロトロープ、香料、顔料、セッケン泡抑制剤、溶剤、および液体洗剤用構造化剤、および／または、構造弾性化剤が挙げられる。
【０４６６】
洗浄方法
本発明の洗剤組成物は、理想的には、ランドリー用途における使用に好適である。従って、本発明は布地を洗濯する方法を含む。この方法は、選択される布地に本発明による洗剤組成物を含むクリーニングランドリー溶液を接触させるステップを含む。布地は、通常の消費者が用いる条件において洗濯されることが可能であるいずれかの布地を含み得る。この溶液は好ましくはｐＨが約５．５〜約８であり、さらに好ましくは、ｐＨが約７．５〜約１３．５の範囲で選択され、もしくは約７．５〜約１２．５の範囲で選択され、もしくは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、もしくは約９．５〜約１０．５の範囲で選択され、またはｐＨが７．５以上である。
【０４６７】
好ましい実施形態は、クリーニングの方法であって、対象物のクリーニングに好適な条件下で、対象物と、本発明のベータ−グルカナーゼを含む高ｐＨクリーニング組成物（例えばｐＨ７．５以上）とを接触させるステップを含む方法に関する。好ましい実施形態では、このクリーニング組成物は洗濯プロセスまたは食器洗浄プロセスで使用される。
【０４６８】
さらに別の実施形態は、布地または食器から汚れを除去する方法であって、対象物のクリーニングに好適な条件下で、この布地または食器と、本発明のベータ−グルカナーゼを含む高ｐＨクリーニング組成物（例えばｐＨ７．５以上）とを接触させるステップを含む方法に関する。
【０４６９】
また、企図されるのは、本発明のクリーニング組成物を使用して（例えば生地からのり抜きするために）布地を処理するための組成物および方法でもある。この高ｐＨクリーニング組成物を、当分野で公知のあらゆる布地処理方法で使用することができる。
【０４７０】
別の実施形態では、本発明の高ｐＨクリーニング組成物は、食器洗浄よび洗車等の液体洗濯および液体硬質面用途での使用に適している。従って、本発明は、布地を洗濯するまたは硬質面を洗浄する方法を含む。この方法は、洗浄する布地／食器類と、本発明に係る高ｐＨクリーニング組成物を含む溶液とを接触させるステップを含む。この布地は、消費者が使用する通常の条件で洗濯され得るあらやる布地を含むことができる。この硬質面は、あらゆる食器、例えば陶器、カトラリー、セラミック、メラミン等のプラスチック、金属、磁器、ガラス、アクリル、または他の硬質面、例えば車、床等を含むことができる。この溶液は好ましくは、ｐＨが例えば７．５以上であり、例えば約９〜約１３．５である。
【０４７１】
組成物は、溶液中で約１００ｐｐｍ、好ましくは５００ｐｐｍ〜約１５，０００ｐｐｍの濃度で利用され得る。水温は、典型的には、約１０℃、約１５℃、約２０℃、約２５℃、約３０℃、約３５℃、約４０℃、約４５℃、約５０℃、約５５℃、約６０℃、約６５℃、約７０℃、約７５℃、約８０℃、約８５℃および約９０℃を含む約５℃〜約９０℃の範囲である。水対布地の比は、典型的には約１：１〜約３０：１である。
【０４７２】
特定の実施形態において、洗浄方法は、約５．０〜約１１．５のｐＨ、または、代替的実施形態においては、約５〜約１１、約５〜約１０、約５〜約９、約５〜約８、約５〜約７、約５．５〜約１１、約５．５〜約１０、約５．５〜約９、約５．５〜約８、約５．５〜約７、約６〜約１１、約６〜約１０、約６〜約９、約６〜約８、約６〜約７、約６．５〜約１１、約６．５〜約１０、約６．５〜約９、約６．５〜約８、約６．５〜約７、約７〜約１１、約７〜約１０、約７〜約９もしくは約７〜約８などのさらに約６〜約１０．５、好ましくは約５．５〜約９、および、より好ましくは約６〜約８で実施される。好ましい実施形態では、この洗浄方法を、約７．５〜約１３．５の範囲で、もしくは約７．５〜約１２．５の範囲で、もしくは約８．５〜約１１．５の範囲で、もしくは約９．５〜約１０．５の範囲で選択されるｐＨにて、またはｐＨ７．５以上で行なう。
【０４７３】
いくつかの好ましい実施形態では、本明細書で提供される高ｐＨクリーニング組成物は概して、水性クリーニング作業での使用中に、洗浄水はｐＨが約９〜約１３．５であり、代替実施形態では約１０〜約１３．５であり、さらに約１１〜約１３．５であるように配合される。いくつかの好ましい実施形態では、液体洗濯製品はｐＨが約１２〜約１３．５であるように配合される。推奨される使用レベルでｐＨを制御する技術は、緩衝液、酸、アルカリ等の使用を含み、当業者に公知である。本発明の文脈では、アルカリを使用してｐＨを約９〜約１３．５に調整し、好ましくは１０〜１３．５に調整する。
【０４７４】
特定の実施形態において、洗浄方法は、約１°ｄＨ、約２°ｄＨ、約３°ｄＨ、約４°ｄＨ、約５°ｄＨ、約６°ｄＨ、約７°ｄＨ、約８°ｄＨ、約９°ｄＨ、約１０°ｄＨ、約１１°ｄＨ、約１２°ｄＨ、約１３°ｄＨ、約１４°ｄＨ、約１５°ｄＨ、約１６°ｄＨ、約１７°ｄＨ、約１８°ｄＨ、約１９°ｄＨ、約２０°ｄＨ、約２１°ｄＨ、約２２°ｄＨ、約２３°ｄＨ、約２４°ｄＨ、約２５°ｄＨ、約２６°ｄＨ、約２７°ｄＨ、約２８°ｄＨ、約２９°ｄＨ、約３０°ｄＨなどの約０°ｄＨ〜約３０°ｄＨの硬度で実施される。典型的な欧州洗浄条件下では、硬度は約１５°ｄＨであり、典型的なＵＳ洗浄条件下では約６°ｄＨであり、および、典型的なアジア洗浄条件下では、約３°ｄＨである。
【０４７５】
本発明は、布地、食器類または硬質面を、本発明のベータ−グルカナーゼを含む洗剤組成物でクリーニングする方法に関する。
【０４７６】
好ましい実施形態はクリーニング方法に関し、前記方法は：対象物に本発明のベータ−グルカナーゼを含むクリーニング組成物を前記対象物のクリーニングに好適な条件下で接触させるステップを含む。好ましい実施形態において、クリーニング組成物は洗剤組成物であり、プロセスはランドリーまたは食器洗浄プロセスである。
【０４７７】
さらに他の実施形態は布地から汚れを除去する方法に関し、これは、前記布地に本発明のベータ−グルカナーゼを含む組成物を前記対象物のクリーニングに好適な条件下で接触させるステップを含む。
【０４７８】
低温での使用
本発明の一実施形態は、クリーニングされる表面に本発明のベータ−グルカナーゼを接触させるステップを含むランドリー、食器洗浄または産業用クリーニングを行う方法に関し、ここで、前記ランドリー、食器洗浄、産業用または組織的クリーニングは、約４０℃以下の温度で実施される。本発明の一実施形態は、ランドリー、食器洗浄またはクリーニングプロセスにおけるベータ−グルカナーゼの使用に関し、ここで、ランドリー、食器洗浄、産業用クリーニングにおける温度は約４０℃以下である。
【０４７９】
他の実施形態において、本発明は、ベータ−グルカン除去プロセスにおける本発明のベータ−グルカナーゼの使用に関し、ここで、ベータ−グルカン除去プロセスにおける温度は約４０℃以下である。
【０４８０】
上記で認識された方法および使用の各々において、洗浄温度は、約４０℃以下、約３９℃以下など、約３８℃以下など、約３７℃以下など、約３６℃以下など、約３５℃以下など、約３４℃以下など、約３３℃以下など、約３２℃以下など、約３１℃以下など、約３０℃以下など、約２９℃以下など、約２８℃以下など、約２７℃以下など、約２６℃以下など、約２５℃以下など、約２４℃以下など、約２３℃以下など、約２２℃以下など、約２１℃以下など、約２０℃以下など、約１９℃以下など、約１８℃以下など、約１７℃以下など、約１６℃以下など、約１５℃以下など、約１４℃以下など、約１３℃以下など、約１２℃以下など、約１１℃以下など、約１０℃以下など、約９℃以下など、約８℃以下など、約７℃以下など、約６℃以下など、約５℃以下など、約４℃以下など、約３℃以下など、約２℃以下など、約１℃以下などである。
【０４８１】
他の好ましい実施形態において、洗浄温度は、約５〜３０℃、約５〜２０℃、約５〜１０℃、約１０〜４０℃、約１０〜３０℃、約１０〜２０℃、約１５〜４０℃、約１５〜３０℃、約１５〜２０℃、約２０〜４０℃、約２０〜３０℃、約２５〜４０℃、約２５〜３０℃または約３０〜４０℃などの約５〜４０℃の範囲である。特定の好ましい実施形態において、洗浄温度は約２０℃、約３０℃、または約４０℃である。
【０４８２】
高温用途
本発明の一実施形態は、クリーニングする表面と本発明のベータグルカナーゼとを接触させるステップを含む、洗濯、食器洗浄または産業クリーニングを行なう方法に関し、前記洗濯、食器洗浄、産業または施設クリーニングを約７５℃以下の温度で実施する。本発明の一実施形態は、洗濯プロセス、食器洗浄プロセスまたはクリーニングプロセスでのベータ−グルカナーゼの使用に関し、洗濯、食器洗浄、産業クリーニングでの温度は約７０℃以下である。
【０４８３】
別の実施形態では、本発明は、ベータ−グルカンの除去プロセスにおける本発明に係るベータ−グルカンの使用に関し、このベータ−グルカンの除去プロセスにおける温度は約６５℃以下である。
【０４８４】
上記で明らかにした方法および使用のそれぞれにおいて、洗浄温度は約６０℃以下であり、例えば約５９℃以下であり、例えば約５８℃以下であり、例えば約５７℃以下であり、例えば約５６℃以下であり、例えば約５５℃以下であり、例えば約５４℃以下であり、例えば約５３℃以下であり、例えば約５２℃以下であり、例えば約５１℃以下であり、例えば約５０℃以下であり、例えば約４９℃以下であり、例えば約４８℃以下であり、例えば約４７℃以下であり、例えば約４６℃以下であり、例えば約４５℃以下であり、例えば約４４℃以下であり、例えば約４３℃以下であり、例えば約４２℃以下であり、例えば約４１℃以下である。
【０４８５】
別の好ましい実施形態では、洗浄温度は約４１〜９０℃の範囲であり、例えば、約４１〜８０℃、約４１〜８５℃、約４１〜８０℃、約４１〜７５℃、約４１〜７０℃、約４１〜６５℃、約４１〜６０℃の範囲である。
【０４８６】
本発明のポリペプチドを含むポリペプチドまたは洗剤組成物を使用して再汚染を低減するまたは予防する方法
本発明のある実施形態は、本発明のポリペプチドを含む洗剤組成物を使用して再汚染を低減するまたは予防する方法である。
【０４８７】
一実施形態では、この洗剤組成物は、界面活性剤、ビルダー、ヒドロトロープ、漂白系、ポリマー、布地色調剤、補助材、分散剤、移染防止剤、蛍光性白色化剤および汚染物遊離ポリマーまたはそれらの任意の混合物を含む群から選択される１種または複数種の洗剤成分をさらに含む。この洗剤組成物は、バー、均質な錠剤、２つ以上の層を有する錠剤、単一または複数のコンパートメントを有するポーチ（このコンパートメントは１つもしくは複数の異なる相を含む）、通常のもしくは圧縮された粉末、顆粒、ペースト、ゲル、または通常の、圧縮されたもしくは濃縮された液体、多室型ボトル中の２種以上の液体および／またはゲルの形態であり得、食器洗浄または洗濯に使用され得る。
【０４８８】
別の実施形態では、この洗剤組成物は、プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、セルラーゼ、エンドグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチンリアーゼ、キサンタナーゼ、ペルオキシダーゼ（ｐｅｒｏｘｉｄａｅｓ）、ハロペルオキシゲナーゼ、カタラーゼおよびマンナナーゼまたはこれらの任意の混合物を含む群から選択される１種または複数種の追加の酵素を含む。
【０４８９】
さらなる実施形態では、この洗剤組成物は、界面活性剤、ビルダー、ヒドロトロープ、漂白系、ポリマー、布地色調剤、補助材、分散剤、移染防止剤、蛍光性白色化剤および汚染物遊離ポリマーまたはこれらの任意の混合物を含む群から選択される１種または複数種の洗剤成分と、プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、セルラーゼ、エンドグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチンリアーゼ、キサンタナーゼ、ペルオキシダーゼ（ｐｅｒｏｘｉｄａｅｓ）、ハロペルオキシゲナーゼ、カタラーゼおよびマンナナーゼまたはこれらの任意の混合物を含む群から選択される１種または複数種の追加の酵素とを含む。
【０４９０】
この方法は以下を含み得る：
（ａ）洗剤組成物を水に溶解させる／混合することにより洗浄液を準備するステップ；
（ｂ）この洗浄液で対象物／布地／生地を洗浄するステップ；
（ｃ）この洗浄液を排出し、任意選択で洗浄サイクルを繰り返すステップ；および
（ｄ）すすぎ、任意選択で対象物／布地／生地を乾燥させるステップ。
【０４９１】
好ましい実施形態では、この方法は以下を含み得る：
（１）水を準備し、対象物をすすぐステップ
（２）任意選択でこの水を排出し、新たな水を準備するステップ
（３）この水に洗剤組成物を投与して洗浄水を形成するステップ
（４）この洗浄液を撹拌し、それにより対象物を洗浄し、任意選択でこの液を加熱するステップ
（５）この洗浄液を排出するステップ
（６）任意選択で新たな水を準備し、対象物をすすぎ、液体を排出するステップ
（７）任意選択で新たな水を準備し、対象物をすすぎ、このステップの最中に、この液に任意選択の追加の薬剤（例えば、すすぎ助剤）を投与し、任意選択でこの液を加熱し、その後に液体を排出するステップ。
（８）任意選択で、残存する液を対象物から蒸発させるステップ。
【０４９２】
本発明の好ましい実施形態は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを含む洗剤組成物を使用して再汚染を低減する方法である：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であって、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片
【０４９３】
本発明の好ましい実施形態は、以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチド：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片
を含む洗剤組成物を使用して再汚染を低減する方法であって、
前記クリーニング組成物または洗剤組成物は、
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
をさらに含む、方法である。
【０４９４】
本発明を以下の段落でさらに定義する：
１．ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドであって、以下からなる群から選択されるポリペプチド：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片であり、好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はセルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性でない、断片。
【０４９５】
２．配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する段落１のポリペプチド。
【０４９６】
３．（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下で、低度〜中度の緊縮条件下で、中度の緊縮条件下で、中度〜高度の緊縮条件下で、高度の緊縮条件下でまたはきわめて高度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる段落１または２のポリペプチド。
【０４９７】
４．配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされる段落１〜３のいずれかのポリペプチド。
【０４９８】
５．ｉ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列またはｉｉ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドを含むか、これから構成される段落１〜４のいずれかのポリペプチド。
【０４９９】
６．前記成熟型ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸１〜３５１、配列番号３のアミノ酸１〜３５１、配列番号５のアミノ酸１〜２４５、配列番号７のアミノ酸１〜２２２、配列番号９のアミノ酸１〜２１４からなる群から選択される、段落５のポリペプチド。
【０５００】
７．ｉ）配列番号２、ｉｉ）配列番号３、ｉｉｉ）配列番号５、ｉｖ）配列番号７、ｖ）配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であって、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体である段落１〜４のいずれかのポリペプチド。
【０５０１】
８．配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の断片であって、ベータ−グルカナーゼ活性を有する断片である段落１のポリペプチド。
【０５０２】
９．前記ポリペプチドは、ｐＨが約７．５〜約１３．５の範囲で選択される水溶液中でベータ−グルカナーゼ活性を有することができ、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲で選択され、さらに好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択される、段落１〜８のいずれかのポリペプチド。
【０５０３】
１０．前記ポリペプチドは、約２０℃〜約７５℃の範囲で選択される温度にて水溶液中でベータ−グルカナーゼ活性を有することができ、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記温度は約４０℃〜約６０℃の範囲で選択される、段落１〜９のいずれかのポリペプチド。
【０５０４】
１１．前記ポリペプチドは少なくとも１５分にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することができ、好ましくは３０分にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することができる、段落９または１０のポリペプチド。
【０５０５】
１２．前記ベータ−グルカナーゼ活性はアルカリ性ベータ−グルカナーゼ活性を含み、前記アルカリ性ベータ−グルカナーゼ活性はｐＨ７．５以上でベータ−グルカナーゼ活性である、段落１〜１１のいずれかのポリペプチド。
【０５０６】
１３．前記ベータ−グルカナーゼ活性はリケニナーゼＥＣ３．２．１．７３活性を含み、好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はリケニナーゼＥＣ３．２．１．７３活性である、段落１〜１２のいずれかのポリペプチド。
【０５０７】
１４．段落１〜１３のいずれかの１種または複数種のポリペプチドを含む組成物であって、好ましくは食器洗浄用組成物ではない組成物。
【０５０８】
１５．１種または複数種の洗浄成分をさらに含む段落１４の組成物。
【０５０９】
１６．前記洗浄成分は以下からなる群から選択される、段落１５の組成物：界面活性剤、ヒドロトロープ、ビルダー、コビルダー、キレート剤、漂白剤成分、ポリマー、布地色調剤、布地コンディショナ、起泡増進剤、セッケン泡抑制剤、分散剤、移染防止剤、蛍光性白色化剤、芳香剤、光学増白剤、殺菌剤、殺菌・殺カビ剤、汚染物懸濁剤、汚染物遊離ポリマー、再汚染防止剤、酵素抑制剤、酵素安定化剤、酵素活性化剤、酸化防止剤および溶解剤。
【０５１０】
１７．１種または複数種の追加の酵素をさらに含み、好ましくは、前記１種または複数種の酵素は、
ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼであって、さらに好ましく、１種もしくは複数種のアルファ−アミラーゼである１種もしくは複数種のアミラーゼ；または
ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ；または
ｉｉｉ）（ｉ）中の１種もしくは複数種のアミラーゼおよび１種もしくは複数種のプロテアーゼ
である、段落１４〜１６のいずれかの組成物。
【０５１１】
１８．以下からなる群から選択される酵素をさらに含む段落１４〜１７のいずれかの組成物：ＤＮエース、ペルヒドロラーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、ペルオキシダーゼ、セルラーゼ、ベータグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ヘミセルラーゼ、キサンタナーゼ、キサンタンリアーゼ、リパーゼ、アシルトランスフェラーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、ラッカーゼ、カタラーゼ、アリールエステラーゼ、アミラーゼ、アルファ−アミラーゼ、グルコアミラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、カラギナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、キシログルカナーゼ、キシラナーゼ、ペクチンアセチルエステラーゼ、ポリガラクツロナーゼ、ラムノガラクツロナーゼ、他のエンド−ベータ−マンナナーゼ、エクソ−ベータ−マンナナーゼ、ペクチンメチルエステラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、トランスグルタミナーゼおよびこれらの組み合わせ。
【０５１２】
１９．前記組成物はｐＨが７．５以上であり、漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１３．５の範囲で選択され、さらに好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、さらに最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択される、段落１４〜１８のいずれかの組成物。
【０５１３】
２０．前記組成物は、アルカリ性条件下での安定性および／または性能が向上しており、好ましくは、前記アルカリ性条件はｐＨが７．５以上である、段落１４〜１９のいずれかの組成物。
【０５１４】
２１．前記組成物はクリーニング組成物または洗剤組成物であり、好ましくは、前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではない、段落１４〜２０のいずれかの組成物。
【０５１５】
２２．ベータ−グルカンを分解するための、段落１〜１３のいずれかの１種もしくは複数種のポリペプチドまたは段落１４〜２１のいずれかの組成物の使用であって、好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−Ｄ−グルカンであり、さらに好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−１，３−１，４グルカンであり、最も好ましくは、前記ベータ−グルカンは混合連結ベータ−グルカンであり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカンはオオムギベータ−グルカンまたはオートミールベータ−グルカン（例えば、調理済オートムギ由来および／または調理済且つ焦げたオートムギ由来および／または未調理オートムギ由来）であり、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【０５１６】
２３．生地および／または硬質面を洗浄するまたはクリーニングする（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）等の食器洗浄）ための、段落１〜１３のいずれかの１種もしくは複数種のポリペプチドまたは段落１４〜２１のいずれかの組成物の使用であって、好ましくは、前記洗浄またはクリーニングは、調理済オートムギおよび／または調理済且つ焦げたオートムギおよび／または未調理オートムギの洗浄またはクリーニングであり、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行し、好ましくは前記使用は食器洗浄での使用ではない、使用。
【０５１７】
２４．洗濯または硬質面クリーニング（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）等の食器洗浄および産業用クリーニング）等のクリーニングプロセスでの段落１〜１３のいずれかの１種もしくは複数種のポリペプチドまたは段落１４〜２１のいずれかの組成物の使用であって、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行し、好ましくは前記使用は食器洗浄での使用ではない、使用。
【０５１８】
２５．洗濯および／または硬質面クリーニング（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）等の食器洗浄）のための段落１〜１３のいずれかの１種もしくは複数種のポリペプチドまたは段落１４〜２１のいずれかの組成物の使用であって、前記ポリペプチドまたは前記組成物は酵素洗浄力有益性を有し、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行し、好ましくは前記使用は食器洗浄での使用ではない、使用。
【０５１９】
２６．物品からのバイオフィルムの予防、低減または除去であり、好ましくは、前記物品から悪臭が低減されるまたは除去される、予防、低減または除去のうちの少なくとも１つのための段落１〜１３のいずれかの１種もしくは複数種のポリペプチドまたは段落１４〜２１のいずれかの組成物の使用であって、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行し、好ましくは前記使用は食器洗浄での使用ではない、使用。
【０５２０】
２７．ベータ−グルカンを分解するプロセスであって、前記ベータ−グルカンに段落１〜１３のいずれかの１種もしくは複数種のポリペプチドまたは段落１４〜２１のいずれかの組成物を適用するステップを含み、好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−Ｄ−グルカンであり、さらに好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−１，３−１，４グルカンであり、最も好ましくは、前記ベータ−グルカンは混合連結ベータ−グルカンであり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカンはオオムギベータ−グルカンまたはオートミールベータ−グルカン（例えば、調理済オートムギ由来および／または調理済且つ焦げたオートムギ由来および／または未調理オートムギ由来）であり、任意選択で前記プロセスをｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行し、好ましくは前記プロセスは食器洗浄プロセスではない、プロセス。
【０５２１】
２８．前記ベータ−グルカンは生地の表面上にまたは食器洗浄等の硬質面上に存在し、好ましくは、前記ベータ−グルカンは、調理済オートムギおよび／または調理済且つ焦げたオートムギおよび／または未調理オートムギに由来する、段落２７のプロセス。
【０５２２】
２９．段落１〜１３のいずれかの１種または複数種のポリペプチドを含む発酵ブロス配合物または細胞培養組成物。
【０５２３】
３０．段落１〜１３のいずれかのポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【０５２４】
３１．段落３０のポリヌクレオチドの発現が可能な核酸構築物または発現ベクターであって、好ましくは、発現宿主中で前記ポリペプチドを産生させる１つまたは複数の制御配列に作動可能にリンクされた段落３０のポリヌクレオチドを含む核酸構築物または発現ベクター。
【０５２５】
３２．段落３０のポリヌクレオチドを含む組換え宿主細胞であって、好ましくは、前記ポリヌクレオチドは、前記ポリペプチドを産生させる１つまたは複数の制御配列に作動可能にリンクされており、さらに好ましくは、前記組換え宿主細胞は、単離された組換え宿主細胞であり、さらに最も好ましくは、前記組換え宿主細胞は異種宿主細胞（例えば、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ）−６２４４９宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）宿主細胞ではない宿主細胞）である、組換え宿主細胞。
【０５２６】
３３．以下のうちの少なくとも１つを含む組成物：ｉ）段落３０のポリヌクレオチド、またはｉｉ）段落３１の核酸構築物、またはｉｉｉ）段落３１の発現ベクター。
【０５２７】
３４．段落１〜１３のいずれかのポリペプチドを生成する方法であって、ポリペプチドの生成を実施可能な条件下で、野生型形態でポリペプチドを生成する細胞を培養するステップを含む方法。
【０５２８】
３５．前記ポリペプチドを回収するステップをさらに含む段落３４の方法。
【０５２９】
３６．ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを生成する方法であって、前記ポリペプチドの生成を実施可能な条件下で段落３２の宿主細胞を培養するステップを含む方法。
【０５３０】
３７．前記ポリペプチドを回収するステップをさらに含む段落３６の方法。
【０５３１】
３８．段落１〜１３のいずれかのポリペプチドをコードするポリヌクレオチドで形質転換されたトランスジェニック植物、植物の一部または植物細胞。
【０５３２】
３９．ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドを生成する方法であって、前記ポリペプチドの生成を実施可能な条件下で段落３８のトランスジェニック植物または植物細胞を培養するステップを含む方法。
【０５３３】
４０．前記ポリペプチドを回収するステップをさらに含む段落３９の方法。
【０５３４】
４１．ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドであって、
（ａ）配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも８９％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）配列番号６、配列番号１、配列番号４、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも８９％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド
からなる群から選択されるポリペプチド。
【０５３５】
４２．配列番号７、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する段落４１のポリペプチド。
【０５３６】
４３．前記成熟型ポリペプチドが、配列番号７のアミノ酸１〜２２２、配列番号２のアミノ酸１〜３５１、配列番号３のアミノ酸１〜３５１、配列番号５のアミノ酸１〜２４５、配列番号９のアミノ酸１〜２１４からなる群から選択される、段落４１または４２のポリペプチド。
【０５３７】
４４．前記ポリペプチドは、
ｉ）ｐＨが約７．５〜約１３．５の範囲で選択される水溶液中で少なくとも１５分にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することが可能であり、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜１２．５の範囲で選択され、さらに好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択される、および／または
ｉｉ）約２０℃〜約７５℃の範囲で選択される温度にて水溶液中で少なくとも１５分にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することが可能であり、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含む、
段落４１〜４３のいずれかのポリペプチド。
【０５３８】
４５．前記ベータ−グルカナーゼ活性はリケニナーゼＥＣ３．２．１．７３活性を含む、段落４１〜４４のいずれかのポリペプチド。
【０５３９】
４６．前記ベータ−グルカナーゼ活性はリケニナーゼＥＣ３．２．１．７３活性である、段落４５のポリペプチド。
【０５４０】
４７．段落４１〜４６のいずれかの１種または複数種のポリペプチドを含む組成物であって、好ましくは食器洗浄用組成物ではない組成物。
【０５４１】
４８．以下：
ｉ）１種もしくは複数種の洗剤成分、および／または
ｉｉ）１種もしくは複数種の追加の酵素であって、好ましくは、前記１種または複数種の追加の酵素は、
ａ）１種もしくは複数種のアミラーゼであり、さらに好ましくは、前記１種もしくは複数種のアミラーゼは１種もしくは複数種のアルファ−アミラーゼである、または
ｂ）１種もしくは複数種のプロテアーゼである、または
ｃ）（ａ）の１種もしくは複数種のアミラーゼおよび１種もしくは複数種のプロテアーゼである、追加の酵素
をさらに含む段落４７の組成物。
【０５４２】
４９．前記組成物はｐＨが７．５以上であり、漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１３．５の範囲で選択され、さらに好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、さらに最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択される、段落４７または４８の組成物。
【０５４３】
５０．前記組成物はクリーニング組成物または洗剤組成物であり、好ましくは、前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではない、段落４７〜４９のいずれかの組成物。
【０５４４】
５１．洗濯または食器洗浄等の硬質表面クリーニング等のクリーニングプロセスでの段落４１〜４６のいずれかの１種もしくは複数種のポリペプチドまたは段落４７〜５０のいずれかの組成物の使用であって、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【０５４５】
５２．段落４１〜４６のいずれかの１種または複数種のポリペプチドを含む発酵ブロス配合物または細胞培養組成物。
【０５４６】
５３．段落４１〜４６のいずれかの１種または複数種のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【０５４７】
５４．段落５３のポリヌクレオチドの発現が可能な核酸構築物または発現ベクターであって、好ましくは、発現宿主中で前記ポリペプチドを産生させる１つまたは複数の制御配列に作動可能にリンクされた段落５３のポリヌクレオチドを含む核酸構築物または発現ベクター。
【０５４８】
５５．段落５３の１種または複数種のポリヌクレオチドを含む組換え宿主細胞であって、好ましくは、前記ポリヌクレオチドは、前記ポリペプチドを産生させる１つまたは複数の制御配列に作動可能にリンクされており、さらに好ましくは、前記組換え宿主細胞は、単離された組換え宿主細胞であり、さらに最も好ましくは、前記組換え宿主細胞は異種宿主細胞（例えば、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ）−６２４４９宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）宿主細胞ではない宿主細胞、またはバチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）宿主細胞ではない宿主細胞）である、組換え宿主細胞。
【０５４９】
５６．以下からなる群から選択される、ベータ−グルカナーゼ活性を有する１種または複数種のポリペプチド：
（ａ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｃ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド；
（ｄ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であり、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体；ならびに
（ｅ）ベータ−グルカナーゼ活性を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）または（ｄ）のポリペプチドの断片；
ならびに
（ｉ）１種もしくは複数種のアミラーゼ；および／または
（ｉｉ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ
を含むクリーニング組成物または洗剤組成物であって、
好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性を有するポリペプチドならびに前記１種もしくは複数種のアミラーゼおよび／または１種もしくは複数種のプロテアーゼは相乗効果を有し、さらに好ましくは、前記相乗効果はＲＥＭ相乗効果であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約７．５のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．５超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．１超であり、さらに最も好ましくは、前記ＲＥＭ相乗効果は約１０のｐＨにて約３０分にわたり約４０℃で６．２超であり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性は、セルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対するエンドセルラーゼ活性ではなく、
好ましくは、前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではない、
クリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５０】
５７．前記ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドに対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する、段落５６のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５１】
５８．前記ポリペプチドは、（ｉ）配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列または（ｉｉ）（ｉ）の完全長相補体と低度の緊縮条件下で、低度〜中度の緊縮条件下で、中度の緊縮条件下で、中度〜高度の緊縮条件下で、高度の緊縮条件下でまたはきわめて高度の緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによりコードされる、段落５７または５８のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５２】
５９．前記ポリペプチドは、配列番号１、配列番号４、配列番号６、配列番号８からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドコード配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有するポリヌクレオチドによりコードされる、段落５６〜５８のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５３】
６０．前記ポリペプチドは、ｉ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列またはｉｉ）配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドを含むか、これから構成される、段落５６〜５９のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５４】
６１．前記成熟型ポリペプチドは、ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３５１、ｉｉ）配列番号３のアミノ酸１〜３５１、ｉｉｉ）配列番号５のアミノ酸１〜２４５、ｉｖ）配列番号７のアミノ酸１〜２２２、ｖ）配列番号９のアミノ酸１〜２１４からなる群から選択される、段落６０のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５５】
６２．前記ポリペプチドは、ｉ）配列番号２、ｉｉ）配列番号３、ｉｉｉ）配列番号５、ｉｖ）配列番号７、ｖ）配列番号９からなる群から選択される配列の成熟型ポリペプチドの変異体であって、１つまたは複数の位置で置換、欠失および／または挿入を含む変異体である、段落５６〜５９のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５６】
６３．前記ポリペプチドは、配列番号２、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９からなる群から選択される配列の断片であり、前記断片はベータ−グルカナーゼ活性を有する、段落５６のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５７】
６４．前記ポリペプチドは、ｐＨが約７．５〜約１３．５の範囲の水溶液中でベータ−グルカナーゼ活性を有することができ、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲であり、さらに好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲であり、最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲である、段落５６〜６３のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５８】
６５．前記ポリペプチドは、約２０℃〜約７５℃の範囲でおよび／または約４０℃〜約６０℃の範囲で選択される温度にて水溶液中でベータ−グルカナーゼ活性を示すことができ、前記水溶液は漂白剤を任意選択で含む、段落５６〜６４のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５５９】
６６．前記ポリペプチドは少なくとも１５分にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することができ、好ましくは３０分にわたりベータ−グルカナーゼ活性を有することができる、段落６４または６５のクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５６０】
６７．前記ベータ−グルカナーゼ活性はアルカリ性ベータ−グルカナーゼ活性を含み、前記アルカリ性ベータ−グルカナーゼ活性はｐＨ７．５以上でベータ−グルカナーゼ活性である、段落５６〜６６のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５６１】
６８．前記ベータ−グルカナーゼ活性はリケニナーゼＥＣ３．２．１．７３活性を含み、好ましくは、前記ベータ−グルカナーゼ活性はリケニナーゼＥＣ３．２．１．７３活性である、段落５６〜６７のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５６２】
６９．前記アミラーゼはアルファ−アミラーゼである、段落５６〜６８のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５６３】
７０．１種または複数種の洗剤成分をさらに含む段落５６〜６９のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５６４】
７１．前記洗浄成分は以下からなる群から選択される、段落７０のクリーニング組成物または洗剤組成物：界面活性剤、ヒドロトロープ、ビルダー、コビルダー、キレート剤、漂白剤成分、ポリマー、布地色調剤、布地コンディショナ、起泡増進剤、セッケン泡抑制剤、分散剤、移染防止剤、蛍光性白色化剤、芳香剤、光学増白剤、殺菌剤、殺菌・殺カビ剤、汚染物懸濁剤、汚染物遊離ポリマー、再汚染防止剤、酵素抑制剤、酵素安定化剤、酵素活性化剤、酸化防止剤および溶解剤。
【０５６５】
７２．１種または複数種の追加の酵素をさらに含む段落５６〜７１のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５６６】
７３．以下からなる群から選択される酵素をさらに含む段落５６〜７２のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物：ＤＮエース、ペルヒドロラーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、ペルオキシダーゼ、セルラーゼ、ベータグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ヘミセルラーゼ、キサンタナーゼ、キサンタンリアーゼ、リパーゼ、アシルトランスフェラーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、ラッカーゼ、カタラーゼ、アリールエステラーゼ、アミラーゼ、アルファ−アミラーゼ、グルコアミラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、カラギナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、キシログルカナーゼ、キシラナーゼ、ペクチンアセチルエステラーゼ、ポリガラクツロナーゼ、ラムノガラクツロナーゼ、他のエンド−ベータ−マンナナーゼ、エクソ−ベータ−マンナナーゼ、ペクチンメチルエステラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、トランスグルタミナーゼおよびこれらの組み合わせ。
【０５６７】
７４．前記組成物はｐＨが７．５以上であり、漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１３．５の範囲で選択され、さらに好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲で選択され、最も好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲で選択され、さらに最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲で選択される、段落５６〜７３のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５６８】
７５．前記アルファ−アミラーゼは以下からなる群から選択される、段落６９〜７４のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物：
（ａ）配列番号１３（国際公開第９５／１０６０３号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）配列番号１３（国際公開第９５／１０６０３号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、１５位、２３位、１０５位、１０６位、１２４位、１２８位、１３３位、１５４位、１５６位、１７８位、１７９位、１８１位、１８８位、１９０位、１９７位、２０１位、２０２位、２０７位、２０８位、２０９位、２１１位、２４３位、２６４位、３０４位、３０５位、３９１位、４０８位および／または４４４位のうちの１つまたは複数で置換を含むポリペプチド；
（ｃ）配列番号１４（国際公開第０２／０１０３５５号パンフレットの配列番号６に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｄ）配列番号１５のハイブリッドポリペプチド（国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号６の残基１〜３３と国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号４の残基３６〜４８３とを含む）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｅ）配列番号１５のハイブリッドポリペプチド（国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号６の残基１〜３３と国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号４の残基３６〜４８３とを含む）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、このハイブリッドポリペプチドは、４８位、４９位、１０７位、１５６位、１８１位、１９０位、１９７位、２０１位、２０９位および／または２６４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含む、ポリペプチド；
（ｆ）配列番号１６（国際公開第０２／０１９４６７号パンフレットの配列番号６に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｇ）配列番号１６（国際公開第０２／０１９４６７号パンフレットの配列番号６に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、１８１位、１８２位、１８３位、１８４位、１９５位、２０６位、２１２位、２１６位および／または２６９位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｈ）配列番号１７、配列番号１８または配列番号１９（国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号１、配列番号２または配列番号７に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｉ）配列番号１７、配列番号１８または配列番号１９（国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号１、配列番号２または配列番号７に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、１４０位、１８３位、１８４位１９５位、２０６位、２４３位、２６０位、３０４位および／または４７６位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｊ）配列番号２０（国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｋ）配列番号２１（国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｌ）配列番号２１（国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、１７６位、１７７位、１７８位、１７９位、１９０位、２０１位、２０７位、２１１位および／または２６４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｍ）配列番号２２（国際公開第０９／０６１３８０号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｎ）配列番号２２（国際公開第０９／０６１３８０号パンフレットの配列番号２に対応する）に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、８７位、９８位、１２５位、１２８位、１３１位、１６５位、１７８位、１８０位、１８１位、１８２位、１８３位、２０１位、２０２位、２２５位、２４３位、２７２位、２８２位、３０５位、３０９位、３１９位、３２０位、３５９位、４４４位および／または４７５位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド：
（ｏ）配列番号２１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドであって、２８位、１１８位、１７４位；１８１位、１８２位、１８３位、１８４位、１８６位、１８９位、１９５位、２０２位、２９８位、２９９位、３０２位、３０３位、３０６位、３１０位、３１４位；３２０位、３２４位、３４５位、３９６位、４００位、４３９位、４４４位、４４５位、４４６位、４４９位、４５８位、４７１位および／または４８４位のうちの１つまたは複数で置換、欠失または挿入を含むポリペプチド；
（ｐ）配列番号１２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｑ）改変Ｇ１８２＊＋Ｄ１８３＊を有する配列番号２３の変異体；
（ｒ）改変Ｈ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｉ４０５Ｌ＋Ａ４２１Ｈ＋Ａ４２２Ｐ＋Ａ４２８Ｔを有する配列番号２４の変異体；
（ｓ）改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号２４の変異体；
（ｔ）改変Ｒ１７８＊＋Ｇ１７９＊＋Ｅ１８７Ｐ＋Ｉ２０３Ｙ＋Ｒ４５８Ｎ＋Ｔ４５９Ｓ＋Ｄ４６０Ｔ＋Ｇ４７６Ｋを有する配列番号２４の変異体
（ｕ）改変Ｍ２０２Ｌを有する配列番号２７の変異体；
（ｖ）改変Ｒ１８０＊＋Ｓ１８１＊＋Ｓ２４３Ｑ＋Ｇ４７５Ｋを有する配列番号２８の変異体；
（ｗ）改変Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｗ１４０Ｙ＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｉ２０６Ｙ＋Ｙ２４３Ｆ＋Ｅ２６０Ｇ＋Ｇ３０４Ｒ＋Ｇ４７６Ｋを有する配列番号２９の変異体；
（ｘ）改変Ｈ１＊＋Ｎ５４Ｓ＋Ｖ５６Ｔ＋Ｋ７２Ｒ＋Ｇ１０９Ａ＋Ｆ１１３Ｑ＋Ｒ１１６Ｑ＋Ｗ１６７Ｆ＋Ｑ１７２Ｇ＋Ａ１７４Ｓ＋Ｇ１８４Ｔ＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｖ２０６Ｌ＋Ｋ３９１Ａ＋Ｐ４７３Ｒ＋Ｇ４７６Ｋを有する配列番号３０の変異体；
（ｙ）改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｔ２４６Ｖ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号３１の変異体。
【０５６９】
７６．前記プロテアーゼは以下からなる群から選択される、段落５６〜７５のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物：
１）プロテアーゼ活性を有するポリペプチドであって、配列番号３４に対して少なくとも６０％の配列同一性（例えば、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
２）プロテアーゼ活性を有するポリペプチドであって、配列番号３５に対して少なくとも６０％の配列同一性（例えば、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド；
３）プロテアーゼ活性を有するポリペプチドであって、配列番号３６に対して少なくとも６０％の配列同一性（例えば、少なくとも６１％、少なくとも６２％、少なくとも６３％、少なくとも６４％、少なくとも６５％、少なくとも６６％、少なくとも６７％、少なくとも６８％、少なくとも６９％、少なくとも７０％、少なくとも７１％、少なくとも７２％、少なくとも７３％、少なくとも７４％、少なくとも７５％、少なくとも７６％、少なくとも７７％、少なくとも７８％、少なくとも７９％、少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性）を有するポリペプチド。
【０５７０】
７７．前記組成物は、アルカリ性条件下での安定性および／または性能が向上しており、好ましくは、前記アルカリ性条件はｐＨが７．５以上である、段落５６〜７６のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５７１】
７８．前記組成物は、バー、均質な錠剤、２つ以上の層を有する錠剤、単一または複数のコンパートメントを有するポーチ、通常のもしくは圧縮された粉末、顆粒、ペースト、ゲル、または通常の、圧縮されたもしくは濃縮された液体からなる群から選択される形態である、段落５６〜７７のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５７２】
７９．クリーニング用途または洗剤用途で酵素洗浄力有益性を有する段落５６〜７８のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５７３】
８０．安定性および／または性能が向上しており、好ましくは、前記安定性および／または性能の向上は、ｐＨが７．５以上であるアルカリ性条件下である、段落５６〜７９のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５７４】
８１．表面から汚れを除去する方法であって、前記表面と段落５６〜８０のいずれかに係る組成物とを接触させるステップを含む方法。
【０５７５】
８２．ベータ−グルカンを分解するための段落５６〜８０のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物の使用であって、好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−Ｄ−グルカンであり、さらに好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−１，３−１，４グルカンであり、最も好ましくは、前記ベータ−グルカンは混合連結ベータ−グルカンであり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカンはオオムギベータ−グルカンまたはオートミールベータ−グルカン（例えば、調理済オートムギ由来および／または調理済且つ焦げたオートムギ由来および／または未調理オートムギ由来）であり、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【０５７６】
８３．生地および／または硬質面を洗浄するまたはクリーニングする（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）等の食器洗浄）ための段落５６〜８０のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物の使用であって、好ましくは、前記洗浄またはクリーニングは、調理済オートムギおよび／または調理済且つ焦げたオートムギおよび／または未調理オートムギの洗浄またはクリーニングであり、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【０５７７】
８４．洗濯または硬質面クリーニング（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）等の食器洗浄および産業用クリーニング）等のクリーニングプロセスでの段落５６〜８０のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物の使用であって、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【０５７８】
８５．洗濯および／または硬質面クリーニング（例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）等の食器洗浄）のための段落５６〜８０のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物の使用であって、前記組成物は酵素洗浄力有益性を有し、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【０５７９】
８６．物品からのバイオフィルムの予防、低減または除去であり、好ましくは、前記物品から悪臭が低減されるまたは除去される、予防、低減または除去のうちの少なくとも１つのための段落５６〜８０のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物の使用であって、任意選択で前記使用をｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、使用。
【０５８０】
８７．ベータ−グルカンを分解するプロセスであって、前記ベータ−グルカンに段落５６〜８０のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物を適用するステップを含み、好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−Ｄ−グルカンであり、さらに好ましくは、前記ベータ−グルカンはベータ−１，３−１，４グルカンであり、最も好ましくは、前記ベータ−グルカンは混合連結ベータ−グルカンであり、さらに最も好ましくは、前記ベータ−グルカンはオオムギベータ−グルカンまたはオートミールベータ−グルカン（例えば、調理済オートムギ由来および／または調理済且つ焦げたオートムギ由来および／または未調理オートムギ由来）であり、任意選択で前記プロセスをｐＨが７．５以上のアルカリ性条件下で実行する、プロセス。
【０５８１】
８８．前記ベータ−グルカンは生地の表面上にまたは食器洗浄等の硬質面上に存在する、段落８７のプロセス。
【０５８２】
８９．上述の段落のいずれかの１種または複数種のポリペプチドまたは洗剤組成物を使用して再汚染を低減するまたは予防する方法であって、好ましくは、前記洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではない、方法。
【０５８３】
９０．前記洗剤組成物は１種または複数種のさらなる酵素も含む、段落８９の方法。
【０５８４】
９１．前記さらなる酵素は、プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、セルラーゼ、エンドグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチンリアーゼ、キサンタナーゼ、ペルオキシダーゼ（ｐｅｒｏｘｉｄａｅｓ）、ハロペルオキシゲナーゼ、カタラーゼおよびマンナナーゼまたはそれらの任意の混合物を含む群から選択される、段落８９または９０に記載の方法。
【０５８５】
９２．前記洗剤組成物は１種または複数種の洗剤成分も含む、段落８９〜９１のいずれかの方法。
【０５８６】
９３．前記洗剤成分は、界面活性剤、ビルダー、ヒドロトロープ、漂白系、ポリマー、布地色調剤、補助材、分散剤、移染防止剤、蛍光性白色化剤および汚染物遊離ポリマーまたはそれらの任意の混合物を含む群から選択される、段落８９〜９２のいずれかの方法。
【０５８７】
９４．前記洗剤組成物は、バー、均質な錠剤、２つ以上の層を有する錠剤、単一または複数のコンパートメントを有するポーチ、通常のもしくは圧縮された粉末、顆粒、ペースト、ゲル、または通常の、圧縮されたもしくは濃縮された液体の形態である、段落８９〜９３のいずれかの方法。
【０５８８】
９５．食器洗浄または洗濯のための段落８９〜９４の任意の方法。
【０５８９】
９６．以下のうちの１つまたは複数のための上述の段落のいずれかの１種または複数種のポリペプチドまたはクリーニング組成物もしくは洗剤組成物：
ａ）再汚染の低減または予防であって、好ましくは、前記使用はクリーニングプロセスでのまたはクリーニングプロセスの最中ではなく、さらに好ましくは、前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではなく、さらに好ましくは、前記クリーニングプロセスは食器洗浄プロセスではない、低減または予防；
ｂ）穀物含有汚染物、特に乾燥穀物含有汚染物、好ましくはオートムギフレーク含有汚染物、特に乾燥オートムギフレーク含有汚染物、および／または調理済オートムギ含有汚染物、および／または調理済且つ焦げたオートムギ含有汚染物、および／または未調理オートムギ含有汚染物の除去であって、さらに好ましくは、前記使用はクリーニングプロセスでのまたはクリーニングプロセスの最中ではなく、さらに最も好ましくは、前記クリーニングプロセスは食器洗浄プロセスではない、除去；
ｃ）１種もしくは複数種のアミラーゼ（例えば、上述の段落のいずれかに記載のもの）の存在下でのデンプン含有汚染物の除去の促進および／またはアミラーゼが関連するクリーニング性能の増強であって、好ましくは、前記使用はクリーニングプロセスでのまたはクリーニングプロセスの最中ではなく、さらに好ましくは、前記クリーニングプロセスは食器洗浄プロセスではない、促進および／または増強；
ｄ）１種もしくは複数種のプロテアーゼ（例えば、上述の段落のいずれかに記載のもの）の存在下でのタンパク質含有汚染物の除去の促進および／またはプロテアーゼが関連するクリーニング性能の増強であって、好ましくは、前記使用はクリーニングプロセスでのまたはクリーニングプロセスの最中ではなく、さらに好ましくは、前記クリーニングプロセスは食器洗浄プロセスではない、促進および／または増強。
【０５９０】
９７．前記組成物は、ｐＨが６．５以上であり、好ましくは７．０以上であり、より好ましくは７．５以上であり、漂白剤を任意選択で含み、好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１３．５の範囲であり、さらに好ましくは、前記ｐＨは約７．５〜約１２．５の範囲であり、最も好ましくは、前記ｐＨは約８．５〜約１１．５の範囲であり、さらに最も好ましくは、前記ｐＨは約９．５〜約１０．５の範囲であり、好ましくは、前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではない、上述の段落のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５９１】
９８．少なくとも１種の硫酸含有モノマーを、好ましくは０．１〜２０重量％の量で、特に０．５〜１８重量％の量で、特に好ましくは１．０〜１５重量％の量で、特に４〜１４重量％の量で、特に６〜１２重量％の量で含むコポリマーをさらに含み、好ましくは前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではない、上述の段落のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５９２】
９９．前記組成物は、前記ペプチドを、酵素タンパク質０．００００１ｍｇ／組成物１ｇ〜酵素タンパク質１００ｍｇ／組成物１ｇの濃度で含み、好ましくは、酵素タンパク質０．０００１ｍｇ／組成物１ｇ〜酵素タンパク質５０ｍｇ／組成物１ｇの濃度で含み、より好ましくは、酵素タンパク質０．００１ｍｇ／組成物１ｇ〜酵素タンパク質２０ｍｇ／組成物１ｇの濃度で含み、特に好ましくは、酵素タンパク質０．０１ｍｇ／組成物１ｇ〜酵素タンパク質１０ｍｇ／組成物１ｇの濃度で含み、好ましくは前記クリーニング組成物または洗剤組成物は食器洗浄用組成物ではない、上述の段落のいずれかのクリーニング組成物または洗剤組成物。
【０５９３】
本発明を、本発明の範囲を限定するとは解釈すべきではない以下の実施例によりさらに説明する。
【実施例】
【０５９４】
本明細書で説明する実施例節で使用する洗剤組成物は以下を含んだ。
【０５９５】
【表１】
2018537099.tif 000003
【０５９６】
【表２】
2018537099.tif 000004
【０５９７】
【表３】
2018537099.tif 000005
【０５９８】
【表４】
2018537099.tif 000006
【０５９９】
【表５】
2018537099.tif 000007
【０６００】
実施例１：ベータ−グルカナーゼ（リケナーゼ）活性の決定：
エンドグルカナーゼ活性（リケナーゼ活性）の検出に、ＡＺＣＬ−オオムギベータ−グルカン（アズリン色素が共有結合的に架橋したベータ−グルカン）アッセイを使用した。ＡＺＣＬ−オオムギベータ−グルカン（７５ｍｇ）を、洗剤（モデル洗剤Ａ、Ｘ、漂白剤を含むおよび含まないおよびｐＨを調整したＺ、ＡＤＷモデルＡ）１５ｍＬに懸濁させた。エッペンドルフチューブ中のこの溶液１ｍＬに酵素１０μＬ（酵素タンパク質０．３３ｍｇ／リットル）を添加し、予熱したサーモミキサー中において１２５０ｒｐｍで振盪させつつ４０℃で１５分にわたりインキュベートし、１３２００ｒｐｍで２分にわたり沈降させ、１０μＭのＣａＣｌ２を含む５％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ−１００で５倍に希釈し、この溶液２５０μＬをマイクロタイタープレートに移し、試料の吸光度を５９０ｎｍで測定した。
【０６０１】
実施例２：バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属由来のＧＨ１６エンド−ベータ−１，３−１，４−グルカナーゼのクローニング、発現および精製
このベータ−グルカナーゼを、表１に従って、Ｇｅｒｍａｎ  ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ（ＤＳＭＺ）から得られるまたは古典的な微生物学的技術による環境試料からの単離により得られる細菌系統から得た。
【０６０２】
【表６】
2018537099.tif 000008
【０６０３】
個々の系統の純粋な培養物からの染色体ＤＮＡを精製し、Ｉｌｌｕｍｉｎａ技術を使用する完全ゲノム配列決定に供した。構築したゲノム配列およびその後の１６Ｓリボソームサブユニット遺伝子配列の分析により、系統の同一性を確認した。
【０６０４】
β−１，３−１，４−グルカナーゼをコードする個々の遺伝子をＰＣＲで増幅させ、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ゲノムへの組換え用の調節エレメントおよび相同性領域と融合させた。
【０６０５】
直鎖状の統合構築物は、強力なプロモータおよびクロラムフェニコール耐性マーカーと共に２つの古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）染色体領域の間の遺伝子の融合により作られたＳＯＥ−ＰＣＲ融合産物であった（Ｈｏｒｔｏｎ，Ｒ．Ｍ．，Ｈｕｎｔ，Ｈ．Ｄ．，Ｈｏ，Ｓ．Ｎ．，Ｐｕｌｌｅｎ，Ｊ．Ｋ．ａｎｄ  Ｐｅａｓｅ，Ｌ．Ｒ．（１９８９）Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｈｙｂｒｉｄ  ｇｅｎｅｓ  ｗｉｔｈｏｕｔ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ  ｅｎｚｙｍｅｓ，ｇｅｎｅ  ｓｐｌｉｃｉｎｇ  ｂｙ  ｏｖｅｒｌａｐ  ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ  Ｇｅｎｅ  ７７：６１−６８）。ＳＯＥ  ＰＣＲ法は、特許出願国際公開第２００３０９５６５８号パンフレットでも説明されている。
【０６０６】
この遺伝子を、バチルスリケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）アルファ−アミラーゼ遺伝子（ａｍｙＬ）由来のプロモータ、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）アルファ−アミラーゼ遺伝子（ａｍｙＱ）由来のプロモータ、および安定化配列を含むバチルスチューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）ｃｒｙＩＩＩＡプロモータからなる三重プロモータシステム（国際公開第９９／４３８３５号パンフレットで説明されている）の制御下で発現させた。
【０６０７】
この遺伝子を、天然の分泌シグナルの代わりにバチルスクラウシイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ）分泌シグナル（以下のアミノ酸配列：ＭＫＫＰＬＧＫＩＶＡＳＴＡＬＬＩＳＶＡＦＳＳＳＩＡＳＡ（配列番号１０）をコードする）と共に発現させた。さらに、この発現構築物では、発現された成熟型タンパク質に、配列ＨＨＨＨＨＨＰＲ（配列番号１１）からなるＮ末端ポリヒスチジン親和性精製タグが付加されている。
【０６０８】
ＳＯＥ−ＰＣＲ産物を古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）に形質転換させ、ペクチン酸リアーゼ遺伝子座への相同組み換えにより染色体に組み込んだ。その後、組み込まれた発現構築物を含む組換え古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）クローンを豊富な液体培地中で増殖させた。培養ブロスを遠心分離し（２００００×ｇ、２０分）、上清を沈殿物から注意深くデカントして酵素の精製に使用した。
【０６０９】
ニッケル親和性クロマトグラフィによる組換え酵素の精製
清澄な上清のｐＨをｐＨ８に調整し、０．２μＭフィルタに通してろ過し、この上清を５ｍｌのＨｉｓＴｒａｐ（商標）ｅｘｃｅｌカラムにアプライした。ローディングの前に、このカラムを５０ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ８  ５カラム容積（ＣＶ）で平衡化した。非結合物質を除去するために、このカラムを５０ｍＭのＴｒｉｓ／ＨＣｌ  ｐＨ８  ８ＣＶで洗浄し、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７＋１０ｍＭのイミダゾールで標的を溶出させた。溶出したタンパク質を、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７＋１００ｍＭのＮａＣｌ  ３ＣＶを使用して平衡化したＨｉＰｒｅｐ（商標）２６／１０脱塩カラムで脱塩した。この緩衝液を標的の溶出にも使用し、流速は１０ｍｌ／分であった。クロマトグラムおよびＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析に基づいて、適切な画分を選択してプールした。
【０６１０】
実施例３：ベータ−グルカナーゼ酵素によるＡＺＣＬアッセイ：
この実施例では、酵素活性を、様々な洗濯条件をモデル化する様々なｐＨ、温度および洗剤の下にてＡＺＣＬ−Ｂａｒｅｌｙベータ−グルカン基質で測定した。酵素活性の測定を実施例１で説明したように実行したが、１０μＭのＣａＣｌ２を含む５％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ−１００で５倍希釈しなかった。モデル洗剤Ａ洗剤組成物、モデル洗剤Ｘ洗剤組成物、漂白剤を含むモデル洗剤Ｚ洗剤組成物、漂白剤を含まないモデル洗剤Ｚ洗剤組成物、漂白剤を含みｐＨが調整されたモデル洗剤Ｚ洗剤組成物、および漂白剤を含まないがｐＨが調整されたモデルＺ洗剤組成物において、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼと古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のベータ−グルカナーゼとの比較を行なった。
【０６１１】
【表７】
2018537099.tif 000009
【０６１２】
実施例４：自動食器洗浄用モデル洗剤でのＡＺＣＬ−ベータ−オオムギ基質に対する酵素活性のＡＺＣＬアッセイ：
酵素活性の測定を実施例１で説明したように実行した。この実施例では、自動食器洗浄用洗剤ＡＤＷモデルＡにおいて、新規のベータ−グルカナーゼの酵素活性を、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼおよび古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のベータ−グルカナーゼの酵素活性と比較した。得られたデータを以下の表３に示す。
【０６１３】
【表８】
2018537099.tif 000010
【０６１４】
実施例５：ＴＳＡで測定したベータ−グルカナーゼの安定性：
この実施例では、新規のベータ−グルカナーゼの安定性を、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼおよび古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のベータ−グルカナーゼの安定性と比較した。以下のアッセイ緩衝液で０．３ｍｇ／ｍｌに希釈した酵素試料によりサーマルシフトアッセイ（ＴＳＡ）を実施した：０．１Ｍのコハク酸、０．１ＭのＨＥＰＥＳ、０．１ＭのＣＨＥＳ、０．１ＭのＣＡＰＳ、０．１５ＭのＫＣｌ、１ｍＭのＣａＣｌ２、０．０１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ１００（それぞれｐＨを５、７．５および１０に調整した）。ＳＹＰＲＯ  Ｏｒａｎｇｅ色素（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｓ６６５０）をｍＱ水で１０１倍に希釈した。希釈酵素試料１０μｌ＋アッセイ緩衝液１０μｌ＋色素１０μｌをＴＳＡアッセイプレート（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ  ４８０  Ｍｕｌｔｉｗｅｌｌプレート９６、白色（Ｒｏｃｈｅ）のウェル中で混合し、光学シール（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ  ４８０  Ｓｅａｌｉｎｇ  ｆｏｉｌ，Ｒｏｃｈｅ）で覆った。Ｒｏｃｈｅ  ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ  ４８０ソフトウェア（リリース１．５．０  ＳＰ４）を実行するＲｏｃｈｅ  Ｌｉｇｈｔｃｙｃｌｅｒ  ４８０  ＩＩ装置において２００℃／時間にて２５〜９９℃でタンパク質融解分析を実行した。全ての試料を二重に分析した。報告する読み出しは、タンパク質融解曲線の中点値として定義されるＴｍである。得られたデータを以下の表４に示す。
【０６１５】
【表９】
2018537099.tif 000011
【０６１６】
実施例６：ベータ−グルカナーゼの基質特異性：
Ｍｅｇａｚｙｍｅ（ＡＺＣＬ−オオムギベータ−グルカン、ＡＺＣＬ−ＨＥ−セルロース、ＡＺＣＬ−パキマンおよびＡＺＣＬ−カードラン（アズリン色素が共有結合的に架橋したベータ−グルカン）から、様々なＡＺＣＬアッセイを使用してベータ−グルカナーゼの基質特異性をさらに試験した。ＡＺＣＬ基質（７５ｍｇ）をモデル洗剤Ｘ  １５ｍＬに懸濁させた。エッペンドルフチューブ中のこの溶液１ｍＬに酵素１０μＬ（酵素タンパク質０．３３ｍｇ／リットル）を添加し、予熱したサーモミキサー中において１２５０ｒｐｍで振盪させつつ４０℃で１５分にわたりインキュベートし、１３２００ｒｐｍで２分にわたり沈降させ、１０μＭのＣａＣｌ２を含む５％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ−１００で５倍に希釈し、この溶液２５０μＬをマイクロタイタープレートに移し、試料の吸光度を５９０ｎｍで測定した。
【０６１７】
この実施例では、６種全てのベータ−グルカナーゼ（即ち、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）由来、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）由来、バチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）由来、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）−６２４４９由来、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来、および古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来）の基質特異性を、ＡＺＣＬ−オオムビベータ−グルカン基質、ＡＺＣＬ−ＨＥ−セルロース基質  ＡＺＣＬ−パキマン基質およびＡＺＣＬ−カードラン基質で試験した。得られた結果から、試験した６種全てのベータ−グルカナーゼがＡＺＣＬ−オオムビベータ−グルカン基質のみに対して活性を有する（即ち、基質としてのＡＺＣＬ−オオムビベータグルカンに対する陽性反応、ならびに基質としてのＡＺＣＬ−ＨＥ−セルロース  ＡＺＣＬ−パキマンおよびＡＺＣＬ−カードランに対する陰性反応、以下の表５）ことをさらに確認している。このデータは、試験したベータ−グルカナーゼは、ベータ−１，３連結とベータ−１，４連結との両方を含むベータ−グルカンに対して活性を示すのみであり、純粋なベータ−１，４−グルカンのみまたは純粋なベータ−１，３グルカンのみまたはベータ−１，３連結とベータ−１，６連結との混合物からなるベータ−グルカンに対しては活性を示さなかったことを示す。上記の結果に基づいて、本発明のベータ−グルカナーゼを、本明細書で使用したベータ−グルカナーゼの定義内のエンドセルラーゼとさらに区別し得、前記エンドセルラーゼは、セルロースのＤ−グルコース単位間のβ−１，４連結に対する活性を有する。上記に基づいて、本発明のベータ−グルカナーゼはリケニナーゼ（ＥＣ３．２．１．７３）酵素活性を有すると結論付けられる。
【０６１８】
【表１０】
2018537099.tif 000012
【０６１９】
実施例７：アルファ−アミラーゼと組み合わせた場合の本発明のベータ−グルカナーゼ（リケナーゼ）の相乗効果：
Ｉ．Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法の説明：
Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法を使用して酵素の性能を検出した。Ｗａｓｃａｔｏｒ洗濯機（ＦＯＭ  ７１  Ｌａｂ）に、酵素を含む洗剤溶液２５ｍＬが入ったボトル（６０ｍＬ、ＤＳＥ  ＰＰ  ７０Ｘ３５  Ａｓｅｐｔｉｓｋ、材料番号：２１６−２６２０、ＶＷＲから）と４つの汚れ（Ｅｑｕｅｓｔからの０３５ＫＣチョコレートポリッジオートムギ（０３５ＫＣ  Ｃｈｏｃｏｌａｔｅ  ｐｏｒｒｉｄｇｅ  ｏａｔ）、直径２ｃｍ）とを入れた。この洗濯機にバラスト（布巾、綿）２ｋｇを入れた。洗濯用の液体および粉末のモデル洗剤（それぞれ、モデル洗剤Ａ１およびモデル洗剤Ｘ１）ならびにＡＤＷモデル洗剤（ＡＤＷモデル洗剤Ａ１）において４０℃で３０分にわたり水２５Ｌで洗浄した。洗浄後、汚れを水道水で２回（３Ｌ）すすぎ、乾燥キャビネット（Ｅｌｅｃｔｒｏｌｕｘ、Ｉｎｔｕｉｔｉｏｎ、ＥＤＤ２４００）中でｒｔ（室温）にて乾燥させた。減退を４６０ｎｍにて分光光度計（Ｍａｃｂｅｔｈ  Ｃｏｌｏｒ−Ｅｙｅ  ７０００  Ｒｅｍｉｓｓｉｏｎｓ）で測定した。
【０６２０】
ＩＩ．結果：
この実施例では、個々のリケナーゼとアルファ−アミラーゼ（Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ）（配列番号１２）とを組み合わせた結果を、Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法を使用して、様々なｐＨを有する様々な洗剤における２種の酵素の間の潜在的な相乗効果を調べるために研究した。４０℃にてリケナーゼ１リットル当たり酵素タンパク質０．０１ｍｇおよびＳｔａｉｎｚｙｍｅ１リットル当たり酵素タンパク質０．０５ｍｇを使用して、モデル洗剤Ａ１、モデル洗剤Ｘ１およびＡＤＷモデル洗剤Ａ１におけるバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のリケナーゼおよび古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のリケナーゼとの比較を行なった。この実施例で使用した詳細な条件を表Ｆ〜Ｋに記載し、結果を以下の表６〜８に示す。
【０６２１】
【表１１】
2018537099.tif 000013
【０６２２】
【表１２】
2018537099.tif 000014
【０６２３】
【表１３】
2018537099.tif 000015
【０６２４】
【表１４】
2018537099.tif 000016
【０６２５】
【表１５】
2018537099.tif 000017
【０６２６】
【表１６】
2018537099.tif 000018
【０６２７】
本明細書で使用する略語：
ＲＥＭ＝測定値
ΔＲＥＭ＝ＲＥＭ−ブランク
ＲＥＭ組み合わせ＝測定値
ΔＲＥＭ組み合わせ＝ＲＥＭ組み合わせ−ブランク
ΔＲＥＭ理論＝ΔＲＥＭ（アミラーゼ）＋ΔＲＥＭ（リケナーゼ）
ＲＥＭ相乗効果＝ΔＲＥＭ組み合わせ−ΔＲＥＭ理論
【０６２８】
【表１７】
2018537099.tif 000019
【０６２９】
【表１８】
2018537099.tif 000020
【０６３０】
【表１９】
2018537099.tif 000021
【０６３１】
実施例８：ｐＨ最適条件の決定
続いて、６種全てのベータ−グルカナーゼのｐＨ最適条件を、ＮａＯＨでｐＨ２〜１２に調整したＢｒｉｔｔｏｎ  Ｒｏｂｉｎｓｏｎ緩衝液（１００ｍＭのリン酸、１００ｍＭの酢酸、１００ｍＭのホウ酸、０．０１％Ｔｒｉｎｔｏｎ  Ｘ−１００、１００ｍＭのＫＣｌ、２ｍＭのＣａＣｌ２）中の０．４重量／体積％のＡＺＣＬ−グルカン（オオムギ）基質で決定した。線形アッセイ範囲の上限にあると予想される酵素希釈を、調査中の全てのｐＨ値に関して選択した。ｐＨ最適条件をｐＨ２〜１０の範囲で調べたが、いくつかの試料に関しては、この最適条件を確実に特定するために、より低いｐＨ値とより高いｐＨ値との両方が含まれた。結果をこの表９に示す。
【０６３２】
【表２０】
2018537099.tif 000022
【０６３３】
上記に基づいて、以下の多くの観察を行なった：
バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のベータ−グルカナーゼおよび古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のベータ−グルカナーゼは６．０のｐＨ最適条件を有し、この活性と比較してｐＨ１０．０では１〜１１％の割合の活性だけであることを発見した。これら新規の細菌性ベータ−グルカナーゼはｐＨ６〜９の範囲のｐＨ最適条件を有するが、ｐＨ１０での相対活性は古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｉｔｉｌｉｓ）由来の酵素およびバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来の酵素と比較して２３〜９０％の範囲で有意に高いことを発見した。Ｂ．アキバイ（Ｂ．ａｋｉｂａｉ）由来のＧＨ１６ベータ−グルカナーゼは非常に広いｐＨ最適条件を有した。
【０６３４】
実施例９：アルファ−アミラーゼと組み合わせたリケナーゼの相乗効果：
Ｉ．Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法の説明：
Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法を使用して酵素の性能を検出した。Ｗａｓｃａｔｏｒ洗濯機（ＦＯＭ  ７１  Ｌａｂ）に、酵素を含む洗剤溶液２５ｍＬが入ったボトル（６０ｍＬ、ＤＳＥ  ＰＰ  ７０Ｘ３５  Ａｓｅｐｔｉｓｋ、材料番号：２１６−２６２０、ＶＷＲから）と４つの汚れ（Ｗａｒｗｉｃｋ  Ｅｑｕｅｓｔ  Ｌｔｄ，Ｕｎｉｔ  ５５，Ｃｏｎｓｅｔｔ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｐａｒｋ，Ｃｏｎｓｅｔｔ，Ｃｏｕｎｔｙ  Ｄｕｒｈａｍ，ＤＨ８  ６ＢＮ，  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍからの０３５ＫＣチョコレートポリッジオートムギ、直径２ｃｍ）とを入れた。この洗濯機にバラスト（布巾、綿）２ｋｇを入れた。洗濯用の液体および粉末のモデル洗剤（それぞれ、モデル洗剤Ａおよびモデル洗剤Ｘ）ならびにＡＤＷモデル洗剤（ＡＤＷモデル洗剤Ａ）において４０℃で２０分または３０分にわたり水２５Ｌで洗浄した。洗浄後、汚れを水道水で２回（３Ｌ）すすぎ、乾燥キャビネット（Ｅｌｅｃｔｒｏｌｕｘ、Ｉｎｔｕｉｔｉｏｎ、ＥＤＤ２４００）中で室温にて一晩乾燥させた。減退を４６０ｎｍにて分光光度計（Ｍａｃｂｅｔｈ  Ｃｏｌｏｒ−Ｅｙｅ  ７０００  Ｒｅｍｉｓｓｉｏｎｓ）で測定した。
【０６３５】
ＩＩ．結果：
この実施例では、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）リケナーゼ（配列番号３９、Ｈｉｓ−タグ付、組換え）、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）リケナーゼ（配列番号３８、Ｈｉｓ−タグ付、組換え）、バチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）リケナーゼ（配列番号４０、Ｈｉｓ−タグ付、組換え）、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）−６２４４９リケナーゼ（配列番号３７、Ｈｉｓ−タグ付、組換え）、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）リケナーゼ（配列番号３２）および古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）リケナーゼ（配列番号３３）の個々の成熟型リケナーゼと以下で概説する様々なアミラーゼとを組み合わせた結果を、Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法を使用して、様々なｐＨを有する様々な洗剤における２種の酵素の間の潜在的な相乗効果を調べるために研究した。４０℃にて１リットル当たり酵素タンパク質０．０１ｍｇのリケナーゼ濃度および１リットル当たり酵素タンパク質０．０５ｍｇのアミラーゼ濃度を使用して、モデル洗剤Ａ、モデル洗剤ＸおよびＡＤＷモデル洗剤Ａにおけるバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のリケナーゼおよび古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のリケナーゼとの比較を行なった。詳細な条件を表１０〜１５に記載し、結果を以下の表１６〜４７に示す。
【０６３６】
【表２１】
2018537099.tif 000023
【０６３７】
【表２２】
2018537099.tif 000024
【０６３８】
【表２３】
2018537099.tif 000025
【０６３９】
【表２４】
2018537099.tif 000026
【０６４０】
【表２５】
2018537099.tif 000027
【０６４１】
【表２６】
2018537099.tif 000028
【０６４２】
略語
ＲＥＭ＝測定値
ΔＲＥＭ＝ＲＥＭ−ブランク
ＲＥＭ組み合わせ＝測定値
ΔＲＥＭ組み合わせ＝ＲＥＭ組み合わせ−ブランク
ΔＲＥＭ理論＝ΔＲＥＭ（アミラーゼ）＋ΔＲＥＭ（リケナーゼ）
ＲＥＭ相乗効果＝ΔＲＥＭ組み合わせ−ΔＲＥＭ理論
【０６４３】
【表２７】
2018537099.tif 000029
【０６４４】
【表２８】
2018537099.tif 000030
【０６４５】
【表２９】
2018537099.tif 000031
【０６４６】
【表３０】
2018537099.tif 000032
【０６４７】
【表３１】
2018537099.tif 000033
【０６４８】
【表３２】
2018537099.tif 000034
【０６４９】
【表３３】
2018537099.tif 000035
【０６５０】
【表３４】
2018537099.tif 000036
【０６５１】
【表３５】
2018537099.tif 000037
【０６５２】
【表３６】
2018537099.tif 000038
【０６５３】
【表３７】
2018537099.tif 000039
【０６５４】
【表３８】
2018537099.tif 000040
【０６５５】
【表３９】
2018537099.tif 000041
【０６５６】
【表４０】
2018537099.tif 000042
【０６５７】
【表４１】
2018537099.tif 000043
【０６５８】
【表４２】
2018537099.tif 000044
【０６５９】
【表４３】
2018537099.tif 000045
【０６６０】
【表４４】
2018537099.tif 000046
【０６６１】
【表４５】
2018537099.tif 000047
【０６６２】
【表４６】
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【０６６３】
【表４７】
2018537099.tif 000049
【０６６４】
【表４８】
2018537099.tif 000050
【０６６５】
【表４９】
2018537099.tif 000051
【０６６６】
【表５０】
2018537099.tif 000052
【０６６７】
【表５１】
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【０６６８】
【表５２】
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【０６６９】
【表５３】
2018537099.tif 000055
【０６７０】
【表５４】
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【０６７１】
【表５５】
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【０６７２】
【表５６】
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【０６７３】
【表５７】
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【０６７４】
【表５８】
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【０６７５】
【表５９】
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【０６７６】
【表６０】
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【０６７７】
【表６１】
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【０６７８】
【表６２】
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【０６７９】
【表６３】
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【０６８０】
【表６４】
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【０６８１】
【表６５】
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【０６８２】
【表６６】
2018537099.tif 000068
【０６８３】
実施例１０：プロテアーゼと組み合わせたリケナーゼの相乗効果：
Ｉ．Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法の説明：
Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法を使用して酵素の性能を検出した。Ｗａｓｃａｔｏｒ洗濯機（ＦＯＭ  ７１  Ｌａｂ）に、酵素を含む洗剤溶液２５ｍＬが入ったボトル（６０ｍＬ、ＤＳＥ  ＰＰ  ７０Ｘ３５  Ａｓｅｐｔｉｓｋ、材料番号：２１６−２６２０、ＶＷＲから）と４つの汚れ（Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ  ＢＶ，Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  １２０，３１３３  ＫＴ  Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，ｔｈｅ  ＮｅｔｈｅｒｌａｎｄｓからのＣ−Ｈ０９７−ココア／オートフレーク、直径２ｃｍ）とを入れた。この洗濯機にバラスト（布巾、綿）２ｋｇを入れた。洗濯用のモデル洗剤（モデルＸ）および自動食器洗浄用のＡＤＷモデル洗剤Ａにおいて４０℃で１５分にわたり水２５Ｌで洗浄した。洗浄後、汚れを水道水で２回（３Ｌ）すすぎ、乾燥キャビネット（Ｅｌｅｃｔｒｏｌｕｘ、Ｉｎｔｕｉｔｉｏｎ、ＥＤＤ２４００）中で室温にて一晩乾燥させた。減退を４６０ｎｍにて分光光度計（Ｍａｃｂｅｔｈ  Ｃｏｌｏｒ−Ｅｙｅ  ７０００  Ｒｅｍｉｓｓｉｏｎｓ）で測定した。
【０６８４】
ＩＩ．結果：
この実施例では、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）リケナーゼ（配列番号３９、Ｈｉｓ−タグ付、組換え）、バチルスアキバイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｋｉｂａｉ）リケナーゼ（配列番号３８、Ｈｉｓ−タグ付、組換え）、バチルスモジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）リケナーゼ（配列番号４０、Ｈｉｓ−タグ付、組換え）、バチルス属の一種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）−６２４４９リケナーゼ（配列番号３７、Ｈｉｓ−タグ付、組換え）、バチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）リケナーゼ（配列番号３２）および古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｌｉｓ）リケナーゼ（配列番号３３）の個々の成熟型リケナーゼとプロテアーゼ（Ｓａｖｉｎａｓｅ、配列番号３４）との組み合わせの結果を、Ｗａｓｃａｔｏｒボトル洗浄方法を使用して様々な洗剤における２種の酵素クラスの間の潜在的な相乗効果を調べるために研究した。４０℃にて１リットル当たり酵素タンパク質０．０１ｍｇのリケナーゼ濃度および１リットル当たり酵素タンパク質０．２３ｍｇのプロテアーゼ濃度を使用して、モデル洗剤ＸおよびＡＤＷモデル洗剤Ａにおけるバチルスアミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のリケナーゼおよび古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のリケナーゼとの比較を行なった。詳細な条件を表４８および表４９に記載し、結果を表５０および表５１に示す。
【０６８５】
【表６７】
2018537099.tif 000069
【０６８６】
【表６８】
2018537099.tif 000070
【０６８７】
【表６９】
2018537099.tif 000071
【０６８８】
【表７０】
2018537099.tif 000072
【０６８９】
実施例１１：リケナーゼによる、調理済オートムギの自動食器洗浄クリーニング
Ｉ．自動食器洗浄機
自動食器洗浄機（Ｍｉｅｌｅ、Ｇ１２２３、ＧＳＬ−２）を使用して、調理済オートムギに対するリケナーゼ性能を示した。
【０６９０】
ＩＩ．結果：
表５２に示す実験条件下にて、調理済オートムギに対するフルスケールの食器洗浄性能をＡＤＷモデル洗剤Ａで試験した。
【０６９１】
【表７１】
2018537099.tif 000073
【０６９２】
ビーカー中において、粉砕したオートムギ（浸漬ブレンダー「チョッパー中のＡＸＡ  Ｆｉｎｖａｌｓｅｄｅ  Ｈａｖｒｅｇｒｙｎ  １５０ｇ）、牛乳（３００ｍＬ）および砂糖（５０ｇ）を混合して、汚染物を調製した。この混合物を沸点まで加熱し、２分にわたり調理した。この汚染物を磁器プレート上に加え（３５ｇ）、オーブン（Ｈｅｒａｅｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｔｙｐ  ＵＴ６２００）中において４０℃で一晩乾燥させた。このプレートを室温まで冷却し、秤量し、以下におけるＩＫＷブラストスラリー５０ｇにて４５℃で８分（主要な洗浄）にわたりＭｉｅｌｅ食器洗浄機（Ｇ１２２３、ＧＳＬ−２）中で洗浄した：ＡＤＷモデル洗剤Ａ、アミラーゼ（改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号２４の変異体である；酵素タンパク質０．５ｍｇ／Ｌ）およびプロテアーゼ（配列番号３５；酵素タンパク質３．７ｍｇ／Ｌ、配列番号３６；酵素タンパク質５．９ｍｇ／Ｌ）、またはＡＤＷモデル洗剤Ａ、アミラーゼ（改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号２４の変異体である；酵素タンパク質０．５ｍｇ／Ｌ）、プロテアーゼ（配列番号３５；酵素タンパク質３．７ｍｇ／Ｌ、配列番号３６；酵素タンパク質５．９ｍｇ／Ｌ）およびリケナーゼ（バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）（配列番号３９、Ｈｉｓ−タグ付、組換え；酵素タンパク質０．３ｍｇ／Ｌ）。
【０６９３】
調理済オートムギに対するリケナーゼの効果は、重み付けされているだけでなく、明らかに視覚的に認められる。測定した数値および洗浄後にプレート上に残った汚染物に関して算出した数値を表５３に示す。
【０６９４】
算出：
洗浄前のプレート上に残った汚染物の重量＝洗浄前のプレートおよび汚染物の重量−洗浄前の汚染物なしのプレートの重量。
【０６９５】
洗浄後のプレート上に残った汚染物の重量＝洗浄後のプレートおよび汚染物の重量−洗浄前の汚染物なしのプレートの重量。
【０６９６】
【表７２】
2018537099.tif 000074
【０６９７】
実施例１２：リケナーゼによる、調理済且つ焦げたオートムギの自動食器洗浄クリーニング
Ｉ．自動食器洗浄機
自動食器洗浄機（Ｍｉｅｌｅ、Ｇ１２２３、ＧＳＬ−２）を使用して、調理済且つ焦げたオートムギに対するリケナーゼ性能を示した。
【０６９８】
ＩＩ．結果：
表５４に示す実験条件下にて、調理済且つ焦げたオートムギに対するフルスケールの食器洗浄性能をＡＤＷモデル洗剤Ａで試験した。
【０６９９】
【表７３】
2018537099.tif 000075
【０７００】
ビーカー中において、粉砕したオートムギ（浸漬ブレンダー「チョッパー中のＡＸＡ  Ｆｉｎｖａｌｓｅｄｅ  Ｈａｖｒｅｇｒｙｎ  １５０ｇ）、牛乳（３００ｍＬ）および砂糖（５０ｇ）を混合して、汚染物を調製した。この混合物を沸点まで加熱し、２分にわたり調理した。この汚染物を鋼鉄プレート上に加え（１５ｇ）、オーブン（Ｈｅｒａｅｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｔｙｐ  ＵＴ６２００）中において１４０℃で４０分にわたり乾燥させた。このプレートを冷却し、秤量し、以下におけるＩＫＷブラストスラリー５０ｇにて４５℃で８分（主要な洗浄）にわたりＭｉｅｌｅ食器洗浄機（Ｇ１２２３、ＧＳＬ−２）中で洗浄した：ＡＤＷモデル洗剤Ａ、アミラーゼ（改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号２４の変異体である；酵素タンパク質０．５ｍｇ／Ｌ）およびプロテアーゼ（配列番号３５；酵素タンパク質３．７ｍｇ／Ｌ、配列番号３６；酵素タンパク質５．９ｍｇ／Ｌ）、またはＡＤＷモデル洗剤Ａ、アミラーゼ（改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号２４の変異体である；酵素タンパク質０．５ｍｇ／Ｌ）、プロテアーゼ（配列番号３５；酵素タンパク質３．７ｍｇ／Ｌ、配列番号３６；酵素タンパク質５．９ｍｇ／Ｌ）およびリケナーゼ（バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）（配列番号３９、Ｈｉｓ−タグ付、組換え；酵素タンパク質０．３ｍｇ／Ｌ）。洗浄後、プレートを室温で乾燥させて秤量した。
【０７０１】
算出：
洗浄前のプレート上に残った汚染物の重量＝洗浄前のプレートおよび汚染物の重量−洗浄前の汚染物なしのプレートの重量。
【０７０２】
洗浄後のプレート上に残った汚染物の重量＝洗浄後のプレートおよび汚染物の重量−洗浄前の汚染物なしのプレートの重量。
【０７０３】
調理済且つ焦げたオートムギへのリケナーゼの明確な効果が見られ、測定した数値および洗浄後にプレート上に残った汚染物に関して算出した数値を表５５に示す。
【０７０４】
【表７４】
2018537099.tif 000076
【０７０５】
実施例１３：リケナーゼによる、未調理オートムギの自動食器洗浄クリーニング
Ｉ．自動食器洗浄機
自動食器洗浄機（Ｍｉｅｌｅ、Ｇ１２２３、ＧＳＬ−２）を使用して、未調理オートムギに対するリケナーゼ性能を示した。
【０７０６】
ＩＩ．結果：
表５６に示す実験条件下にて、未調理オートムギに対するフルスケールの食器洗浄性能をＡＤＷモデル洗剤Ａで試験した。
【０７０７】
【表７５】
2018537099.tif 000077
【０７０８】
ビーカー中において、粉砕したオートムギ（浸漬ブレンダー「チョッパー中のＡＸＡ  Ｆｉｎｖａｌｓｅｄｅ  Ｈａｖｒｅｇｒｙｎ  １５０ｇ）、牛乳（３００ｍＬ）および砂糖（５０ｇ）を混合して、汚染物を調製した。この汚染物を磁器プレート上に加え（３５ｇ）、オーブン（Ｈｅｒａｅｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｔｙｐ  ＵＴ６２００）中において４０℃で一晩乾燥させた。このプレートを室温まで冷却し、秤量し、以下におけるＩＫＷブラストスラリー５０ｇにて４５℃で８分（主要な洗浄）にわたりＭｉｅｌｅ食器洗浄機（Ｇ１２２３、ＧＳＬ−２）中で洗浄した：ＡＤＷモデル洗剤Ａ、アミラーゼ（改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号２４の変異体である；酵素タンパク質０．５ｍｇ／Ｌ）およびプロテアーゼ（配列番号３５；酵素タンパク質３．７ｍｇ／Ｌ、配列番号３６；酵素タンパク質５．９ｍｇ／Ｌ）、またはＡＤＷモデル洗剤Ａ、アミラーゼ（改変Ｍ９Ｌ＋Ｒ１１８Ｋ＋Ｇ１４９Ａ＋Ｇ１８２Ｔ＋Ｇ１８６Ａ＋Ｄ１８３＊＋Ｇ１８４＊＋Ｎ１９５Ｆ＋Ｍ２０２Ｌ＋Ｔ２５７Ｉ＋Ｙ２９５Ｆ＋Ｎ２９９Ｙ＋Ｒ３２０Ｋ＋Ｍ３２３Ｔ＋Ａ３３９Ｓ＋Ｅ３４５Ｒ＋Ｒ４５８Ｋを有する配列番号２４の変異体である；酵素タンパク質０．５ｍｇ／Ｌ）、プロテアーゼ（配列番号３５；酵素タンパク質３．７ｍｇ／Ｌ、配列番号３６；酵素タンパク質５．９ｍｇ／Ｌ）およびリケナーゼ（バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）（配列番号３９、Ｈｉｓ−タグ付、組換え；酵素タンパク質０．３ｍｇ／Ｌ）。洗浄後、プレートを室温で乾燥させて秤量した。
【０７０９】
未調理オートムギに対するリケナーゼの効果は、重み付けされているだけでなく、明らかに視覚的に分かる。測定した数値および洗浄後にプレート上に残った汚染物に関して算出した数値を表５７に示す。
【０７１０】
算出：
洗浄前のプレート上に残った汚染物の重量＝洗浄前のプレートおよび汚染物の重量−洗浄前の汚染物なしのプレートの重量。
【０７１１】
洗浄後のプレート上に残った汚染物の重量＝洗浄後のプレートおよび汚染物の重量−洗浄前の汚染物なしのプレートの重量。
【０７１２】
【表７６】
2018537099.tif 000078
【０７１３】
実施例１４：リケナーゼの洗浄性能および再付着防止効果
Ｉ．Ｍｉｎｉ  Ｔｅｒｇ−Ｏ−ｔｏｍｅｔｅｒ（ＭｉｎｉＴＯＭ）洗浄アッセイ
Ｍｉｎｉ  Ｔｅｒｇｏ−Ｔｏ−Ｍｅｔｅｒ（ＭｉｎｉＴＯＭ）は、１６種の異なる洗浄条件を同時に試験するために適用され得る中規模のモデル洗浄システムである。ＭｉｎｉＴＯＭは基本的に、最大１６個のオープンメタルビーカー（ｏｐｅｎ  ｍｅｔａｌ  ｂｅａｋｅｒ）（３００ｍＬ）が浸漬されている大型の温度制御水浴である。各ビーカーは１つの小さいトップローダー型洗濯機を構成し、実験の最中には、これらの洗濯機のそれぞれが、特定の洗剤／酵素系の溶液と、この溶液の性能が試験される汚染されたおよび汚染されていない布地とを含む。機械的応力は、各ビーカー内で液体を撹拌する回転撹拌アームにより達成される。このＭｉｎｉＴＯＭビーカーは蓋を有しないことから、ＭｉｎｉＴＯＭ実験の最中にサンプルを取り出して洗浄の最中にオンラインで情報をアッセイすることが可能である。
【０７１４】
このＭｉｎｉＴＯＭモデル洗浄システムは、米国洗浄条件またはＬＡ／ＡＰ洗浄条件での洗剤および酵素の中規模試験で主に使用される。ＭｉｎｉＴＯＭ実験では、バラスト対汚染物の比および布地対洗浄液の比等の因子が変更され得る。従って、このＭｉｎｉＴＯＭは、ＡＭＳＡおよびミニ洗浄等の小規模実験と、トップローダー洗濯機でのより時間がかかるフルスケール実験との間のつながりを提供する。
【０７１５】
ＩＩ．結果：
リケナーゼ、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）（配列番号７）によるＭｉｎｉＴｅｒｇｏｔｏｍｅｔｅｒ（ＭｉｎｉＴＯＭ）再付着防止を、表５８に示す実験条件下においてモデル洗剤Ａ中で試験した。
【０７１６】
【表７７】
2018537099.tif 000079
【０７１７】
リケナーゼ、バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）（配列番号７）の再付着防止（および洗浄性能）を、以下で説明するように試験した。
【０７１８】
ＣａＣｌ２、ＭｇＣｌ２およびＮＡＨＣＯ３の添加により水硬度を１５°ｄＨ（Ｃａ２＋：Ｍｇ２＋：ＨＣＯ３−＝４：１：７．５）に調整し、所望量の洗剤（３．３３ｇ／モデル洗剤Ａ  １Ｌ）を添加し、バケット中で温度を４０℃に調整することにより、洗浄溶液を調製した。洗剤を１０分にわたり磁石撹拌の最中に溶解させた（洗浄溶液を調製後３０〜６０分以内に使用した）。ＭｉｎｉＴＯＭにおける水浴中の温度および回転をそれぞれ、４０℃および１２０ｒｐｍに設定した。温度を設定（許容誤差は＋／−０．５℃である）に従って調整し、ＭｉｎｉＴＯＭビーカー（３００ｍＬ）に洗浄溶液１００ｍＬを添加した。
【０７１９】
このビーカーに、見本（１個のメリヤス綿見本（円形、直径２ｃｍ）および１２個のＣ−Ｈ０９７（円形、直径２ｃｍ）、リケナーゼ（バチルスアガラドヘレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）（配列番号３９、Ｈｉｓタグ付、組換え）、酵素タンパク質０または０．３ｍｇ／Ｌ）およびアミラーゼ（配列番号１２、酵素タンパク質０．２ｍｇ／Ｌ）を加え、２０分にわたり洗浄した。見本を５分にわたり冷水道水で濯いだ。見本を選別し、一晩にわたり加熱することなく乾燥棚中でろ紙の間にて乾燥させた。
【０７２０】
再付着防止（および洗浄性能）を、レミッション値（ＲＥＭ）で表される洗浄済生地の色の輝度として測定した。Ｍａｃｂｅｔｈ  ７０００  Ｃｏｌｏｒ  Ｅｙｅ分光光度計を使用してレミッション測定を行なった。乾燥見本の各々を測定した。バックグラウンドからの干渉のリスクがあることから、レミッションの測定の最中は見本を２層の布地の上に置いた。レミッションを４６０ｎｍで測定した。ＵＶフィルタを含まなかった。見本のレミッションの平均結果を算出した。
【０７２１】
リケナーゼの存在に起因する再付着防止効果を表５９に示す。リケナーゼが存在しないビーカーでは、汚染された見本（Ｃ−Ｈ０９７）から放出された汚染物が、最初は汚染物がない見本に再付着する。リケナーゼが洗浄液中に存在する場合には、再付着防止効果が明確に認められる。
【０７２２】
【表７８】
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【０７２３】
実施例１５：
オートムギフレークに対するクリーニング性能：
オートムギフレーク５００ｇ、砂糖１６７ｇおよび半脱脂牛乳（脂肪分１．５％）１ｌを激しく混合する。この混合物を、室温で少なくとも２時間にわたり静置する。その後、この調整物１５ｇ（＋／−０．２ｇ）を、金属環（半径１１ｃｍ）を使用して円形のプレートプレート（磁器）上に均一に広げ、４０℃で一晩乾燥させる。
【０７２４】
クリーニング性能を、汚染された食器類／カトラリーが内部に入っており（ＩＫＷ法、Ｓｏｅｆｗｊｏｕｒｎａｌ，１４２，（０６），２０１６，Ｓ．３３−４８に従う）、上記で調製したさらに４枚のプレートが入っている自動食器洗浄機Ｍｉｅｌｅ  ＧＳＬ、２１°ｄＨ、４５℃、８分の保持時間、および５５℃の濯ぎ温度で試験する。パスタおよびデンプンの混合クリーニング性能を、ＩＫＷに従って測定した。この結果（さらにオートムギフレークの場合）を、算術平均、ＩＫＷに従う評価として記述する。より高い値はより良好なクリーニング性能を示し、１．０を超える差異は有意であると考えられる。
【０７２５】
クリーニング性能：
この食器洗浄機の投与チャンバ中に、二成分液体の自動食器洗浄用製品（各組成物ＡおよびＢ  １５ｍｌ、表６０、表６１）を同時に投与した。
【０７２６】
【表７９】
2018537099.tif 000081
【０７２７】
【表８０】
2018537099.tif 000082
【０７２８】
【表８１】
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【０７２９】
【表８２】
2018537099.tif 000084
【０７３０】
【表８３】
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【０７３１】
驚くべきことに、食器洗浄用組成物（好ましくは自動食器洗浄用組成物）のクリーニング性能はパスタ（スパゲティ）および／またはデンプン含有汚染物に対して増強されることを発見した（表６２、表６３）。
【０７３２】
従って、本発明のリケニナーゼは、１種または複数種のアミラーゼの存在下にてデンプン含有汚染物の除去を促進し、アミラーゼが関連するクリーニング性能を増強する。
【０７３３】
オートムギフレークに対する食器洗浄用組成物のクリーニング性能は、様々な温度での４週間の貯蔵後にも有意には変化しない（表６４）。活性酵素タンパク質１．５または２．０ｍｇ／作業リケニナーゼを含む自動食器洗浄用組成物、貯蔵条件：Ｔ＝４０℃で８週間またはＴ＝５０℃で２週間の場合も同等の結果を見出した。
【０７３４】
本明細書で説明されているおよび特許請求されている発明は、本明細書で開示されている特定の態様により範囲が限定されるものではなく、なぜならば、この態様は本発明のいくつかの態様の例示として意図されているからである。あらゆる等価の態様は本発明の範囲内であることが意図されている。実際には、本明細書で示されたものおよび説明されたものに加えて、本発明の様々な改変が上記の説明から当業者に明らかになるだろう。そのような改変も添付の特許請求の範囲に含まれることが意図されている。矛盾する場合には、定義を含む本開示が統制する。
【配列表】
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【国際調査報告】
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