(57)【要約】本発明は、がんのための放射線イメージングおよび放射線療法を提供するための組成物および方法に関する。特に、腫瘍イメージングおよび免疫療法のための放射性標識抗ＨＡＡＨ抗体を作製および使用するための方法が提供される。がん細胞を殺傷するための方法であって、ヒトアスパルチル（アスパラギニル）β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）に結合する抗体にラジオアイソトープをコンジュゲートさせて放射性標識抗体を形成すること、およびがん細胞をＨＡＡＨに結合する該放射性標識抗体と接触させることにより、該がん細胞を殺傷することを包含する、方法。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
がん細胞を殺傷するための方法であって、
ヒトアスパルチル（アスパラギニル）β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）に結合する抗体にラジオアイソトープをコンジュゲートさせて放射性標識抗体を形成すること、および
がん細胞をＨＡＡＨに結合する該放射性標識抗体と接触させることにより、該がん細胞を殺傷すること
を包含する、方法。
【請求項２】
前記ラジオアイソトープが２１３Ｂｉ、９０Ｙおよび１１１Ｉｎからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記がん細胞が白血病細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ラジオアイソトープが２１３Ｂｉである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ＨＡＡＨに結合する前記抗体がＰＡＮ−６２２である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
哺乳動物におけるがん組織を処置するための方法であって、
ヒトアスパルチル（アスパラギニル）β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）に結合する抗体にラジオアイソトープをコンジュゲートさせて放射性標識抗体を形成すること、および
該哺乳動物のがん組織を、ＨＡＡＨに結合する該放射性標識抗体と接触させること
を包含する、方法。
【請求項７】
前記ラジオアイソトープが２１３Ｂｉである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記ラジオアイソトープが１１１Ｉｎである、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記ラジオアイソトープが９０Ｙである、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
ＨＡＡＨに結合する前記抗体がＰＡＮ−６２２である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
ＨＡＡＨに結合する前記抗体がＰＡＮ−６２２である、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
キレート剤、ラジオアイソトープ、および完全ヒト抗ＨＡＡＨ抗体を含むラジオイムノコンジュゲート。
【請求項１３】
前記ラジオアイソトープが２１３Ｂｉである、請求項１２に記載のラジオイムノコンジュゲート。
【請求項１４】
前記ラジオアイソトープが１１１Ｉｎである、請求項１２に記載のラジオイムノコンジュゲート。
【請求項１５】
前記ラジオアイソトープが９０Ｙである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記完全ヒト抗ＨＡＡＨ抗体がＰＡＮ−６２２である、請求項１２に記載のラジオイムノコンジュゲート。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
様々な形態のがんの早期診断および処置に有用なツールを開発するためのかなりの努力がなされてきた。それにもかかわらず、確定的な診断は、しばしば、診査手術に依存し、この診査手術は、早期処置を行うことが可能な時点を過ぎて疾患が進行した後にやむを得ず行われる。さらに、多くの処置方法が全身的であり、標的がん細胞を特異的に標的化することができない。種々の形態のがんの早期診断および処置のための有望な一つの方法は、がん細胞の表面に存在する、抗原と称される特異的生化学部分の同定である。がん細胞の表面上に存在する抗原を特異的に認識し、結合する抗体は、特定の悪性疾患の診断および処置のための強力なツールを潜在的に提供する。腫瘍特異的細胞表面抗原は、特定の黒色腫、リンパ腫、結腸および生殖器官系の悪性疾患について以前に同定されている。従って、細胞表面マーカーおよびこのような細胞表面マーカーを特異的に認識する抗体は、がんの早期検出および処置において価値がある。
【０００２】
腫瘍特異的抗原はまた、腫瘍イメージング技術において有用であり得る。イメージング技術は、多くのがんの早期検出の重要な要素となっている。しかし、イメージングは単に検出に使用されるわけではない。イメージングはまた、ステージを決定するために（がんがどれくらい進行しているかを示すために）、ならびに手術および他のがん処置を指示するのを助けるかまたはがんが戻ったかどうかをチェックするために、がんの正確な位置を決定するために重要である。
【０００３】
腫瘍特異的抗原はまた、放射免疫療法の方法において有用であり得る。放射免疫療法によるがんの処置は、標的とする腫瘍細胞を選択的に破壊することを目的として、特定のがん細胞ベクター（例えば、モノクローナル抗体）に結合させた放射性アイソトープ（すなわち、ラジオイムノコンジュゲート）を患者に注射することを含む。放射性崩壊中、光子、電子またはより重い粒子でさえも放出され、それらの経路に沿って細胞を損傷または殺傷させる。
【０００４】
アスパルテートβ−ヒドロキシラーゼ（ＡＳＰＨ）としても知られるヒトアスパルチル（アスパラギニル）β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）は、通常は小胞体に局在しているが、細胞形質転換時には、細胞表面に転移する。肺、肝臓、結腸、膵臓、前立腺、卵巣、胆管、および乳房を含め、試験した多くのがんでは、酵素ＨＡＡＨの過剰発現が検出されている。ＨＡＡＨはがんに対して高度に特異的であり、隣接する非罹患組織にも正常個体からの組織試料中にも有意には存在しない。ＨＡＡＨは、特定のタンパク質のＥＧＦ様ドメイン内のアスパルチルまたはアスパラギニル残基をヒドロキシル化する機能を有する。ＨＡＡＨの天然の基質は未知のままであるが、ＥＧＦ様ドメインを含む潜在的な標的タンパク質は、細胞シグナル伝達に関与するもの（例えば、ｎｏｔｃｈ）および／または細胞／細胞外マトリックス相互作用に関与するもの（例えば、テネイシン）を含む。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、アスパルチル−（アスパラギニル）−β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）を標的とする放射性標識抗体を含む、腫瘍イメージングおよび免疫療法のための組成物および方法を包含する。
【０００６】
本発明はさらに、抗原−抗体複合体を形成するのに十分な条件下で、ＨＡＡＨポリペプチドに結合する放射性標識抗体と、哺乳動物からの組織または体液を接触させることにより、哺乳動物におけるがんを検出する、診断する、および／または評価するための組成物および方法を包含する。
【０００７】
本発明の抗体としては、モノクローナル抗体、合成抗体、組換え的に産生された抗体、細胞内抗体（intrabody）、多重特異性抗体（二重特異性抗体を含む）、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）（二重特異性ｓｃＦｖを含む）、単鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ジスルフィド連結Ｆｖ（ｓｄＦｖ）および前記のいずれかのエピトープ結合フラグメントが挙げられるが、これらに限定されない。
【０００８】
本発明の方法で使用される抗体は、鳥類および哺乳動物（例えば、ヒト、マウス、ロバ、ヒツジ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、またはニワトリ）を含む任意の動物起源から誘導することができる。
【０００９】
本発明の方法で使用される抗体は、単一特異性、二重特異性、三重特異性、またはより多重の多重特異性であってよい。多重特異性抗体は、ＨＡＡＨポリペプチドの異なるエピトープに免疫特異的に結合してもよいし、または、ＨＡＡＨポリペプチドおよび異種エピトープ（例えば、異種ポリペプチドまたは固体支持体材料）の両方に免疫特異的に結合してもよい。
【００１０】
本発明は、キレート化剤、ラジオアイソトープ、および完全にヒトの抗ＨＡＡＨ抗体を含むラジオイムノコンジュゲートを包含する。
【００１１】
本発明は、完全にヒトの抗ＨＡＡＨ抗体に結合されたα放出性ラジオアイソトープを含むラジオイムノコンジュゲートを包含する。
【００１２】
本発明は、完全にヒトの抗ＨＡＡＨ抗体に結合されたβ放出性ラジオアイソトープを含むラジオイムノコンジュゲートも包含する。
【００１３】
本発明は、完全にヒトの抗ＨＡＡＨ抗体に結合されたγ放出性ラジオアイソトープを含むラジオイムノコンジュゲートも包含する。
【００１４】
本発明は、完全にヒトの抗ＨＡＡＨ抗体に結合した２１３Ｂｉ、９０Ｙまたは１１１Ｉｎを含むラジオイムノコンジュゲートをさらに包含する。
【００１５】
本発明の一実施形態は、がん細胞を殺傷するための方法であって、ヒトアスパルチル（アスパラギニル）β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）に結合する抗体に放射性アイソトープをコンジュゲートさせる工程、およびＨＡＡＨに結合する放射性標識抗体とがん細胞を接触させる工程を含む、方法を包含する。
【００１６】
本発明の一実施形態は、哺乳動物におけるがん細胞を殺傷するための方法であって、ヒトアスパルチル（アスパラギニル）β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）に結合する抗体に放射性アイソトープをコンジュゲートさせる工程、およびＨＡＡＨに結合する放射性標識抗体とがん細胞を接触させることを含む、方法を包含する。
【００１７】
本発明の別の実施形態は、哺乳動物におけるがん組織を処置するための方法であって、ヒトアスパルチル（アスパラギニル）β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）に結合する抗体にラジオアイソトープをコンジュゲートさせる工程を含む）を含み、前記哺乳動物のがん組織と、ＨＡＡＨに結合する放射性標識抗体とを接触させることを含む、方法を包含する。
【００１８】
本発明のさらなる実施形態は、哺乳動物における腫瘍を放射線イメージングする方法であって、前記哺乳動物の組織を、ＨＡＡＨに結合する放射性標識抗体と接触させること、次いで、得られた組織−抗体−放射性標識を、イメージング装置および関連するソフトウェア（例えば、単光子放出コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）または陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ））を用いて可視化することを含む、方法を企図する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、４時間（上のパネルは処理済み、下は未処理）における４Ｔ１腫瘍保有マウスのＳＰＥＣＴ／ＣＴを示す。
【００２０】
【図２】図２は、２４時間（上のパネルは処理済み、下は未処理）における４Ｔ１腫瘍保有マウスのＳＰＥＣＴ／ＣＴを示す。
【００２１】
【図３】図３は、４８時間（上のパネルは処理済み、下は未処理）における４Ｔ１腫瘍保有マウスのＳＰＥＣＴ／ＣＴを示す。
【００２２】
【図４】図４は、４Ｔ１腫瘍保有マウスからの原発性腫瘍の重量を示す。
【００２３】
【図５】図５は、４Ｔ１腫瘍保有マウスの肺における転移物のｈｅ数（he  number）と、未処理のマウスからの墨汁灌流肺の写真（挿入図）とを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
発明の詳細な説明
簡単化および例示の目的のために、本発明の原理は、その様々な例示的な実施形態を参照することによって説明される。本発明の好ましい実施形態は、本明細書において特に開示されるが、当業者は、同じ原理が均しく適用可能であり、他のシステムで実施することができること、ならびに任意のそのようなバリエーションは、本発明の範囲から逸脱しないような変更の範囲内にあることを理解すべきであることを容易に認識するであろう。本発明は他の実施形態でも可能であるので、本発明の開示された実施形態を詳細に説明する前に、本発明は、その適用が、示された任意の特定の取り合わせの詳細に限定されないことを理解すべきである。本明細書で使用される用語は、説明の目的のためであり、限定するものではない。さらに、特定の方法は、多くの例では、特定の順序で本明細書に提示される特定の工程を参照して説明されるが、これらのステップは、当業者には理解されるように、任意の順序で実行することができ、そしてこれらの方法は、本明細書に開示された工程の特定の取り合わせに限定されない。
【００２５】
がん腫瘍マーカーである、ヒトアスパルチル（アスパラギニル）β−ヒドロキシラーゼ（ＨＡＡＨ）（アスパルテートβ−ヒドロキシラーゼ（ＡＳＰＨ）としても知られている）は、がん細胞の細胞表面に見いだされるが、正常細胞の表面には存在しないことを特徴とする。それゆえ、ＨＡＡＨは、腫瘍イメージングおよび免疫療法のための抗ＨＡＡＨ抗体のためのがん特異的標的を提供する。ＨＡＡＨに対する抗体は、米国特許第７，４１３，７３７号に記載されており、Ｐａｎａｃｅａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から市販されている。特にＰａｎａｃｅａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．は、完全にヒトの抗ＨＡＡＨ抗体であるＰＡＮ−６２２を開発した。ＨＡＡＨに対する抗体は、標的細胞に結合するとインターナライズされる。抗体は、直接化学的コンジュゲーション（例えば、１２４ヨウ素または１３１ヨウ素で）によって放射性標識されてもよく、または多数の異なるラジオアイソトープ（例えば、１１１インジウムまたは６４銅）に結合するキレート剤にコンジュゲーションされてもよい。次いで、放射性標識された抗体は、患者の血流中に注射され、存在する場合には腫瘍細胞に特異的に結合し、そして得られた組織−抗体−放射性標識複合体を、イメージング装置および関連するソフトウェア（例えば、単光子放出コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）または陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ））を用いて可視化することができる。
【００２６】
治療上の使用法において、放射性標識された抗体は、患者の血流中に注射され、存在している場合には腫瘍細胞に特異的に結合し、そして、（例えば、強力なβ放出体（beta  emitter）である９０イットリウムを用いた）放射線放出によって細胞が殺傷される。
【００２７】
抗体が標識される特定のラジオアイソトープの選択は、処置される腫瘍の大きさおよび身体内のその局在によって決定され得る。組織中の放出範囲および半減期は、ラジオアイソトープを選択する際に考慮すべき重要な特性である。
【００２８】
α放出体は、β放出体と比較して短い放出範囲を有し、身体に散在する小さな腫瘍または黒色腫の処置に好適であり得る。α放出体の例としては、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２２３Ｒａ、２２４Ｒａ、２２５ＡＣ、２１２Ｐｂおよび２２７Ｔｈを含む。
【００２９】
β放出体は、より長い放出範囲を有し、より大きな腫瘍または黒色腫の処置に好適であり得る。β放出体の例としては、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、３２、４７Ｓｃ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、７７Ａｓ、８９Ｓｒ、１０５Ｒｈ、１０９Ｐｄ、１１１Ａｇ、１３１Ｉ、１７７Ｌｕ、１５３Ｓｍ、１５９Ｇｄ、１８６Ｒｅ、１６６Ｈｏ、１６６Ｄｙ、１４０Ｌａ、１９４Ｉｒ、１９８Ａｕおよび１９９Ａｕが挙げられる。
【００３０】
γ放出体としては、６７Ｇａ、１１１Ｉｎ、１３４Ｃｅおよび１２９Ｉが挙げられる。
【００３１】
陽電子放出体を使用することもでき、これとしては、５２ｍＭｎ、６２Ｃｕ、６８Ｇａ、１１Ｃ、８２Ｒｂ、１１０Ｉｎ、１１８Ｓｂ、１２２Ｉ、１８Ｆ、３８Ｋ、５１Ｍｎ、５２Ｍｎ、５２Ｆｅ、５５Ｃｏ、６１Ｃｕ、６４Ｃｕ、７２Ａｓ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、８３Ｓｒ、８６Ｙ、８９Ｚｒ、１２０Ｉおよび１２４Ｉが挙げられる。
【００３２】
α放出体以外のラジオアイソトープのうちの任意のラジオアイソトープであって、放射免疫療法に使用されるラジオアイソトープ（例えば、β放出体、陽電子放出体またはβ放出体と陽電子放出体との混合物）はまた、より低用量で使用することができる。
【００３３】
参照によりその全体が本明細書に援用されている米国特許第５，６４１，４７１号は、治療用途の２１３Ｂｉを調製する方法であって、モノクローナル抗体を標的化部分として使用する方法を開示する。ＣＨＸ−ＤＴＰＡ（シクロヘキシルジエチレントリアミン五酢酸）のようなキレート化剤を抗体に結合させ、ラジオアイソトープをキレート化するように機能させることができる。次いで、ラジオアイソトープは標的細胞に送達され得、そこでラジオアイソトープは標的細胞を殺傷させることができる。
【実施例】
【００３４】
（実施例１）
特定の例として、完全にヒトのモノクローナル抗ＨＡＡＨ抗体であるＰＡＮ−６２２を、キレート剤（例えば、（Ｒ）−１−アミノ−３（４−イソチオシアナトフェニル）プロピル］−トランス−（Ｓ，Ｓ）−シクロヘキサン−１，２−ジアミン−五酢酸（ＣＨＸ−Ａ”−ＤＴＰＡ）または１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ））に結合する。腫瘍イメージング目的のために、γ放出体（例えば、インジウム−１１１）をＰＡＮ−６２２キレートコンジュゲートと混合し、この混合物を患者に注入し、腫瘍細胞をＳＰＥＣＴでイメージングする。代替法として、ＰＡＮ−６２２を、キレート剤（例えば、１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）にコンジュゲートする。腫瘍イメージング目的で、銅−６４のような陽電子放出体を、ＰＡＮ−６２２キレートコンジュゲートと混合し、この混合物を患者に注入し、そして腫瘍細胞をＰＥＴでイメージングする。
【００３５】
（実施例２）
放射免疫療法のために、完全にヒトのモノクローナル抗ＨＡＡＨ抗体であるＰＡＮ−６２２を、キレート剤（例えば、（Ｒ）−１−アミノ−３（４−イソチオシアナトフェニル）プロピル］−トランス−（Ｓ，Ｓ）−シクロヘキサン−１，２−ジアミン−五酢酸（ＣＨＸ−Ａ”−ＤＴＰＡ））または１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ））にコンジュゲートする。治療目的のために、強力なβ放出体（例えば、イットリウム−９０）をＰＡＮ−６２２キレートコンジュゲートと混合し、この混合物を患者に注入して腫瘍細胞を殺傷させる。
【００３６】
（実施例３）
高い比活性の２１３Ｂｉ−ＰＡＮ−６２２抗体を用いたＫ５６２白血病細胞およびＣＣＲＦ−ＣＥＭ白血病細胞の殺傷
【００３７】
細胞は、ファルコンチューブ中の５０ｍＬの培地に入って到着した。ＣＣＲＦ−ＣＥＭの濃度は４×１０５細胞／ｍＬ（計１３ｍＬ）であった；Ｋ５６２の濃度は１．０×１０６細胞／ｍＬ（４５ｍＬ）であった。細胞を２，０００ｒｐｍで１０分間スピンダウンし、それぞれ、２．６ｍＬおよび２２．５ｍＬのＰＢＳ中に溶解し、細胞濃度が２×１０６細胞／ｍｌに到達するようにした。０．５ｍＬの各細胞懸濁液を、０．５ｍＬのＰＢＳを含む１．５ｍＬの金属非含有低タンパク質結合エッペンドルフチューブに移し、最終的な細胞濃度が１０６細胞／ｍＬとなるようにした。Ｋ５６２については、２１３Ｂｉ−ＤＴＰＡ−ＰＡＮ−６２２を用いた特異的殺傷および２１３Ｂｉ−２５５６アイソタイプマッチングｍＡｂを用いた非特異的殺傷の両方を行った。ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞については、少数の細胞しか利用可能でなかったため、特異的な殺傷のみを調査した。
【００３８】
１０μｇ（２．３μＬ）のＤＴＰＡ−ＰＡＮ−６２２  ｍＡｂを、２００μＬの酢酸アンモニウム溶液中の１ｍＣｉ２１３ＢｉＩ３（最終比活性は１００ｍＣｉ／ｍｇであった）で放射性標識した。反応混合物を１０００μＬに希釈し、２１３Ｂｉ−ＤＴＰＡ−ＰＡＮ−６２２濃度が０．０１ｍｇ／ｍＬ＝６６ｎＭとなるようにした。０．１μＬ（０．１μＣｉ）、１μＬ（１μＣｉ）および１０μＬ（１０μＣｉ）の２１３Ｂｉ−ＤＴＰＡ−ＰＡＮ−６２２を、Ｋ５６２細胞については二連で（duplicate）、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞については単一検体で（singlicate）、細胞懸濁液に添加した。同じ濃度の、ＨＩＶ−１  ｇｐ４１に対する対照標識ＤＴＰＡ−２５５６  ｍＡｂを、Ｋ５６２懸濁液の対照試料に添加した。細胞を放射性標識ｍＡｂと共に３７℃で１時間にわたって１００ｒｐｍで穏やかに攪拌しながらインキュベートし、スピンダウンし、未結合の放射性標識されたｍＡｂを有する上清を廃棄し、そして細胞をそれらのそれぞれの培地中に溶解し、各サンプルについて９ウェルで（各時点について３連で（triplicate））９６ウェルプレート中にプレーティングし、ＣＯ２インキュベーター中に３７℃で７２時間配置した。２４、４８時間および７２時間の回復期間において、死細胞はトリパンブルーアッセイを用いて計算できなかった（innumerated）。この殺傷結果を以下の表１に示す。
【表１】
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【００３９】
同じ活性の２１３Ｂｉ−２５５６アイソタイプマッチング対照ｍＡｂを用いてのＫ５６２細胞の殺傷は検出されなかった。
【００４０】
２１３Ｂｉ−ＤＴＰＡ−ＰＡＮ−６２２を用いたインビトロでの白血病細胞の殺傷は、時間依存性であり、両方の細胞系について最小の活性で２４時間では殺傷は見られず、最大の殺傷は、両方の細胞系について処理の７２時間後に観察された。２１３Ｂｉ−ＤＴＰＡ−ＰＡＮ−６２２の全ての用量についての殺傷の合計は、１０ｍＣｉ／ｍｇの比活性を有する２１３Ｂｉ−ＤＴＰＡ−ＰＡＮ−６２２を使用した場合の、先の実験においてよりも高かった。
【００４１】
（実施例４）
マウスモデルにおける２１３Ｂｉ−ｐａｎ６２２を用いた４Ｔ１腫瘍処置および１１１Ｉｄ−ｐａｎ６２２抗体を用いたＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング研究
【００４２】
８匹の６〜８週齢の雌性ＢＡＬＢ／ｃマウスに、１０５個の４Ｔ１細胞を乳房脂肪パッドに皮内注射した。乳房脂肪パッドにおける原発性腫瘍は、注射後１０日目に全てのマウスにおいて触知可能となった。このモデルにおいて、肺転移物は、細胞注射後約１４日目に出現し始める。４匹のマウスを、細胞注射後５日目および８日目に各時点で１５０μＣｉ  ２１３Ｂｉ−ＰＡＮ−６２２でＩＰ注射を介して処置し、一方、他方の４匹は未処置のままとした。細胞注射後２１日目に、全ての腫瘍保有マウスにＩＰで２００μＣｉ  １１１Ｉｎ−ＰＡＮ−６２２を与え、１１１Ｉｎ−ＰＡＮ−６２２の投与の４時間後、２４時間後および４８時間後にｍｉｃｒｏＳＰＥＣＴ／ＣＴでイメージングした。最後のイメージング時点の１週間後に、マウスを屠殺し、それらの原発性腫瘍を取り出し、計量し、そしてそれらの肺を墨汁で灌流し、転移物を定量した。
【００４３】
すべての時点で、未処置マウスの腹膜内に有意な取り込みがあったが、２１３Ｂｉ−ＰＡＮ−６２２処置マウスにおいては実用的に存在しなかった（図１〜３）。これは、腹膜内の腫瘍細胞の微小転移の広がりによって説明することができる。処置マウスにおいて、抗体が代謝される肝臓に活性の大部分が濃縮された。頭部および頸部のＨＡＡＨ発現に関して調査すべき全てのマウスの頭部にいくらかの取り込みがあった。未処置マウスの肺において１１１Ｉｎ−ＰＡＮ−６２２のいくらかの拡散した取り込みがあり、そして２１３Ｂｉ−ＰＡＮ−６２２処置マウスの肺において視認可能な取り込みはなかった。病理学的調査は、未処置マウスよりも２１３Ｂｉ−ＰＡＮ−６２２処置マウスにおいて、原発性腫瘍の重量が有意に（Ｐ＝０．４）少ないことを明らかにした（図４）。両方の群の肺における転移物の数は、実用的には同じであった（図５）が、２１３Ｂｉ−ＰＡＮ−６２２処置された群におけるこれらの転移物の一部が、ＨＡＡＨの発現を残した細胞を有さない可能性があり、それゆえ、ｍｉｃｒｏＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージにおいて取り込みがない可能性がある。また、マウスの最後のイメージングセッションとオープニングとの間の１週間は、追加の肺転移物の出現に寄与した可能性がある。
【００４４】
本発明を、その特定の例示的な実施形態を参照して説明してきたが、当業者は、本発明の範囲から逸脱することなく、本発明の記載された実施形態に対して様々な修正を行うことができる。本明細書で使用される用語および説明は、例示のために示されており、限定を意図するものではない。特に、本発明を例により説明したが、様々な組成物およびプロセスが、本明細書に記載された本発明の概念を実行するであろう。本発明は様々な用語および特定の実施形態において説明および開示されてきたが、本発明の範囲は、それによって限定されることを意図しておらず、そのようにみなされるべきでもなく、そのような他の修正または実施形態は、本明細書の教示によって示唆され得る場合、とりわけ、ここに添付した特許請求の範囲の広がりおよび範囲内にある場合は、特に留保される。当業者は、これらおよび他のバリエーションが、以下の特許請求の範囲に定義されるとおりの本発明およびそれらの均等物の範囲内で可能であることを認識するであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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2018518476.tif 000010
2018518476.tif 000011