(57)【要約】  プライマーコーティングおよびミネラルコーティングでコーティングされたスキャフォールドのための組成物および方法が提供される。また、骨に類似したミネラルコーティングを有するスキャフォールドのための組成物が提供される。また、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト相を有するスキャフォールドのミネラルコーティングを促進するような、スキャフォールドをミネラルコーティングするための方法が提供される。
2018510743.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミネラルコーティングされたスキャフォールドを生成するための方法であって、
（ｉ）プライマーコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間および条件下で、プライマーコーティング組成物およびスキャフォールドを接触させる、またはプライマーコーティング組成物およびスキャフォールドをインキュベートするステップと；
（ｉｉ）プライマーコーティングされたスキャフォールドを、改質された擬似体液と接触させるステップと；
（ｉｉｉ）ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間および条件下で、プライマーコーティングされたスキャフォールドおよび改質された擬似体液をインキュベートするステップと
を含み、
スキャフォールドは、マトリックス材料を含み；
プライマーコーティング組成物は、ポリマー、またはポリマーおよび溶媒を含み；
スキャフォールドのプライマーコーティングは、連続または不連続コーティングを含み；
プライマーコーティングは、スキャフォールドのミネラルコーティングを促進する方法。
【請求項２】
ミネラルコーティングされたスキャフォールドを生成するための方法であって、
（ｉ）スキャフォールドを改質された擬似体液と接触させるステップと；
（ｉｉ）ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間および条件下で、スキャフォールドおよび改質された擬似体液をインキュベートするステップと
を含み、
スキャフォールドは、マトリックス材料を含み；
ミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む方法。
【請求項３】
マトリックス材料またはプライマーコーティングが、生分解性材料を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
マトリックス材料が、整形外科用インプラント材料、心臓用インプラント材料、平滑材料、金属、ポリエチレン、機械加工された表面、または平滑金属表面を含む、請求項１から３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
マトリックス材料が、金属、カルシウムセラミック、ポリマー、または生物学的材料を含む、請求項１から４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
マトリックス材料が、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、チタン（Ｔｉ）、ステンレススチール、バイタリウム（コバルト−クロム）、チタン、金、ヒドロキシアパタイト、リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイトセメント、生体活性ガラス、シリコーン、炭素繊維、炭素繊維強化ＰＥＥＫ、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＲＲＫ）、ポリメチルメタクリレート、硬質組織置換（ＨＴＲ）ポリマー、ポリエステル、Ｄａｃｒｏｎ、Ｍｅｒｓｉｌｅｎｅ、生分解性ポリエステル、ポリグリコール酸、ポリ−ｌ−乳酸）、ポリアミド、Ｓｕｐｒａｍｉｄ、Ｎｙｌａｍｉｄ、ポリオレフィン、ポリエチレン、Ｍｅｄｐｏｒ、ポリプロピレン、Ｐｒｏｌｅｎｅ、Ｍａｒｌｅｘ、シアノアクリレート、ポリテトラフルオロエチレン、Ｔｅｆｌｏｎ、Ｇｏｒｅ−Ｔｅｘ、コラーゲン、もしくはＡｌｌｏＤｅｒｍ、またはそれらの組合せを含む、請求項１から５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
ポリマーが、アクリル樹脂、アルギネート、カプロラクトン、コラーゲン、キトサン、ヒアルロン酸、ヒドロゲル、ヒドロキシ酪酸、ポリ無水物、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリ（ジメチルグリコール酸）、ポリジオキサノン（ＰＤＯ）、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（グリコリド）（ＰＧＡ）、ポリ（グリコール酸）、ポリヒドロキシブチレート、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、ポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、ポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）、ポリ（メチルエチルグリコール酸）、ポリメチルメタクリレート、ポリホスファゼン、ポリリン酸エステル、ポリプロピレン、ポリ（プロピレンフマレート）、ポリウレタン（ＰＵ）、もしくはシリコーンゴム、またはそれらの組合せもしくはコポリマーを含む、請求項１から６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
プライマーコーティング組成物が、ポリマーを含み、ポリマーが、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、およびポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）からなる群の１つまたは複数から選択される生体吸収性ポリエステルまたはコポリマーを含む、請求項１または３から７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
ポリマー含有プライマーコーティング組成物が、約１：１の比の２種のポリマー、またはポリマーおよびそのコポリマーを含む、請求項１または３から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
プライマーコーティング組成物が、ポリマーを含む粉末を含む、請求項１または３から９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
プライマーコーティング組成物が、約１０μｍ〜約５００μｍの粒径、または約１０μｍ〜約５００μｍの平均粒径のポリマーを含む、請求項１または３から１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
溶媒が、酢酸、アルコール、脂肪族エーテル、アニリン、芳香族炭化水素、塩素化炭化水素、芳香族炭化水素、アルカリ水溶液、銅エチレンジアミンの水溶液、ベンゼン、ビフェニル、塩素化脂肪族炭化水素、塩素化炭化水素、クロロホルム、クロロフェノール、クロロベンゼン、シクロヘキサノン、塩素化炭化水素、塩化金酸、ＤＣＭ、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ＤＭＳＯ、ジクロロビフェニル、ジオキサン、希水酸化ナトリウム水溶液、１，２−ジクロロベンゼン、ジクロロメタン、ＤＣＭ、エタノール、酢酸エチル、エチレンカーボネート、エステル、ギ酸、グリコール、ハロゲン化炭化水素、ＨＦＩＰ、高級脂肪族エステル、高級脂肪族ケトン、ハロゲン化炭化水素、高級脂肪族エステル、高級脂肪族ケトン、ケトン、高級ケトン、炭化水素、イソプロピルアミン、メチルエチルケトン、モルホリン、塩化メチレン、メタノール、メチルエチルケトン、ｍ−クレゾール、ＮＭＰ、フェノール、フェニレンジアミン、硫酸、テトラメチル尿素、トルエン、トリフルオロ酢酸、ＴＨＤ、テトラメチル尿素、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリフルオロ酢酸、トリクロロエタノール、トルエン、トリクロロエタン、トリクロロアセトアルデヒド水和物、パーフルオロケロセン、ピリジン、フェニルエーテル、ピペラジン、ピリジン、水、もしくはキシレン、またはそれらの組合せを含む、請求項１または３から１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
溶媒が、クロロホルム、酢酸、ギ酸、ならびにギ酸および酢酸の組合せからなる群から選択される２種の溶媒から選択される、請求項１または３から１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
２種の溶媒の比が、４：１、３：１、２：１、または１：１である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
溶媒の体積に対するポリマーの質量のパーセントが、
（ｉ）約１％ｗ／ｖ〜約１０％ｗ／ｖ；または
（ｉｉ）約１％ｗ／ｖ、約２％ｗ／ｖ、約３％ｗ／ｖ、約４％ｗ／ｖ、約５％ｗ／ｖ、約６％ｗ／ｖ、約７％ｗ／ｖ、約８％ｗ／ｖ、約９％ｗ／ｖ、もしくは約１０％ｗ／ｖである、請求項１または３から１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
スキャフォールドへのプライマーコーティングの塗布が、溶媒キャスティング、空気乾燥、真空乾燥、または等温乾燥を含む、請求項１または３から１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
プライマーコーティングされたスキャフォールドが、約１０分間〜約２４時間乾燥される、請求項１または３から１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
プライマーコーティングが、薄膜を備える、請求項１または３から１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
プライマーコーティングが、約１μｍ〜約５０μｍの厚さを有する、請求項１または３から１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ2、ＭｇＳＯ4、ＮａＨＣＯ3、ＣａＣｌ2、およびＫＨ2ＰＯ4を組み合わせて、改質された擬似体液を形成するステップをさらに含む、請求項１から１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
（ｉ）ＮａＣｌが、約１００ｍＭ〜約２００ｍＭの濃度を有し；
（ｉｉ）ＫＣｌが、約１ｍＭ〜約８ｍＭの濃度を有し；
（ｉｉｉ）ＭｇＣｌ2が、約０．２ｍＭ〜約５ｍＭの濃度を有し；
（ｉｖ）ＭｇＳＯ4が、約０．２ｍＭ〜約５ｍＭの濃度を有し；
（ｖ）ＮａＨＣＯ3が、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの濃度を有し；
（ｖｉ）ＣａＣｌ2が、約２ｍＭ〜約２０ｍＭの濃度を有し；
（ｖｉｉ）ＫＨ2ＰＯ4が、約０．５ｍＭ〜約１０ｍＭの濃度を有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
（ｉ）ＮａＣｌが、約１４１ｍＭの濃度を有し；
（ｉｉ）ＫＣｌが、約４．０ｍＭの濃度を有し；
（ｉｉｉ）ＭｇＣｌ2が、約１．０ｍＭの濃度を有し；
（ｉｖ）ＭｇＳＯ4が、約０．５ｍＭの濃度を有し；
（ｖ）ＮａＨＣＯ3が、約４．２ｍＭの濃度を有し；
（ｖｉ）ＣａＣｌ2が、約５ｍＭの濃度を有し；
（ｖｉｉ）ＫＨ2ＰＯ4が、約２．０ｍＭの濃度を有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
改質された擬似体液が、緩衝剤を含む、請求項１から２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
改質された擬似体液が、約２０ｍＭの濃度の緩衝剤を含む、請求項１から２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
改質された擬似体液が、ＤＰＢＳ、トリス、トリス−ＨＣｌ、トリス緩衝食塩水、またはＰＢＳからなる群から選択される緩衝剤を含む、請求項１から２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
プライマーコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間が、約１日〜約４日である、請求項１または３から２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
プライマーコーティング組成物およびスキャフォールドを接触させるステップが、粉末コーティングを含む、請求項１または３から２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
プライマーコーティング組成物およびスキャフォールドを接触させるステップが、ディップコーティングを含む、請求項１または３から２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
プライマーコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間、プライマーコーティング組成物およびスキャフォールドをインキュベートするステップが、少なくとも約１日；少なくとも約２日；少なくとも約３日；または少なくとも約４日である、請求項１または３から２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間、改質された擬似体液およびスキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドをインキュベートするステップが、約１日〜約２１日である、請求項１から２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間、改質された擬似体液およびスキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドをインキュベートするステップが、少なくとも約５日；少なくとも約６日；少なくとも約７日；少なくとも約８日；少なくとも約９日；少なくとも約１０日；少なくとも約１１日；少なくとも約１２日；少なくとも約１３日；または少なくとも約１４日である、請求項１から３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間、改質された擬似体液およびスキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドをインキュベートするステップが、約５日〜約１４日である、請求項１から３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
プライマーコーティングされたスキャフォールドまたはミネラルコーティングされたスキャフォールドを乾燥させるステップをさらに含む、請求項１から３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
連続または不連続コーティングを形成するのに十分な条件下で、プライマーコーティングされたスキャフォールドを加熱するステップをさらに含む、請求項１または３から３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
プライマーコーティングを乾燥させる、軟化させる、溶融する、または硬化させるのに十分な条件下で、プライマーコーティングされたスキャフォールドを加熱するステップをさらに含む、請求項１または３から３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
プライマーコーティングを軟化させる、溶融する、または硬化させるのに十分である約５０℃〜約２００℃で、プライマーコーティングされたスキャフォールドを加熱するステップをさらに含む、請求項１または３から３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
プライマーコーティングを軟化させる、溶融する、または硬化させるのに十分である約１時間〜約６時間、プライマーコーティングされたスキャフォールドを加熱するステップをさらに含む、請求項１または３から３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
スキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドを加水分解させるステップをさらに含む、請求項１から３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
スキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドを粗面化するステップをさらに含む、請求項１から３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
スキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドおよび改質された擬似体液のインキュベーションが、改質された擬似体液を生理的温度に加熱する、または生理的ｐＨに調節することを含む、請求項１から３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
生理的温度が約３７℃である、または生理的ｐＨが約６．８である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
（ｉ）スキャフォールドをプライマーコーティング組成物中でインキュベートするステップが、プライマーコーティング組成物を交換すること、プライマーコーティング組成物を補充すること、プライマーコーティング組成物を除去すること、もしくはプライマーコーティング組成物を添加することを含む；または
（ｉｉ）スキャフォールドをプライマーコーティング組成物中でインキュベートするステップが、プライマーコーティング組成物の濃度を維持することを含む、請求項１または３から４１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
（ｉ）プライマーコーティングされたスキャフォールドまたはスキャフォールドを改質された擬似体液中でインキュベートするステップが、改質された擬似体液を交換すること、改質された擬似体液を補充すること、改質された擬似体液を除去すること、もしくは改質された擬似体液を添加することを含む；または
（ｉｉ）プライマーコーティングされたスキャフォールドまたはスキャフォールドを改質された擬似体液中でインキュベートするステップが、改質された擬似体液の濃度を維持することを含む、請求項１から４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
プライマーコーティング組成物の濃度を維持することが、ポリマー、溶媒、またはそれらの組合せを交換、補充、除去、または添加することを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
改質された擬似体液の濃度を維持することが、改質された擬似体液、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ2、ＭｇＳＯ4、ＮａＨＣＯ3、ＣａＣｌ2、もしくはＫＨ2ＰＯ4、またはそれらの組合せを交換、補充、除去、または添加することを含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
ミネラルコーティングが、（ｉ）約９％〜約１００％のヒドロキシアパタイト；（ｉｉ）約９０％〜約１００％のヒドロキシアパタイト；または（ｉｉｉ）約９７％のヒドロキシアパタイトを含む、請求項１から４５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
ミネラルコーティングが、（ｉ）約０％〜約３０％のリン酸八カルシウム；（ｉｉ）約０％〜約３％のリン酸八カルシウム；または（ｉｉｉ）約３％のリン酸八カルシウムを含む、請求項１から４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
ミネラルコーティングが、（ｉ）約２％から約１００％の間；または（ｉｉ）約２０％から約２８％の間の空隙率を備える、請求項１から４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
ミネラルコーティングが、（ｉ）約１ｎｍから約３５００ｎｍの間の細孔の孔径；または（ｉｉ）約１００ｎｍから約３５０ｎｍの間の孔径を備える、請求項１から４８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
プライマーコーティングが、約２０μｍ超の孔径を備える、請求項１または３から４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
スキャフォールドが、（ｉ）約２００μｍから約５２５μｍの間；（ｉｉ）約２５μｍから約６５μｍの間；または（ｉｉｉ）約５０μｍ超の孔径を備える、請求項１から５０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
スキャフォールドが、約１００μｍ超のマクロチャネル（ｍａｃｒｏｃｈａｎｎｅｌ）長を備える、請求項１から５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
ミネラルコーティングが、（ｉ）約０．１〜約１８のＣａ／Ｐ；または（ｉｉ）約１．１〜約１．７６のＣａ／Ｐ（カルシウム対ホスフェート比）を備える、請求項１から５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
ミネラルコーティングが、（ｉ）約１．６７〜約１．７６のＣａ／Ｐ；（ｉｉ）約１．１〜約１．３のＣａ／Ｐ；または（ｉｉｉ）約１．３７〜約１．６１のＣａ／Ｐを備える、請求項１から５３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５５】
ミネラルコーティングが、（ｉ）約９％〜約１００％；（ｉｉ）約９０％〜約１００％；または（ｉｉｉ）約９６．５％の結晶化度を備える、請求項１から５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
プライマーコーティングされたスキャフォールドまたはミネラルコーティングされたスキャフォールドを凍結乾燥するステップをさらに含む、請求項１から５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
補助成分をスキャフォールドと合わせるステップをさらに含み、補助成分は、銀粒子または脱灰骨基質（ＤＢＭ）を含む、請求項１から５６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５８】
（ｉ）マトリックス材料およびプライマーコーティングを含むスキャフォールドであって、
スキャフォールドのプライマーコーティングは、ポリマーを含み；
スキャフォールドのプライマーコーティングは、連続もしくは不連続コーティングを含み；
スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールド；または
（ｉｉ）マトリックス材料を含むスキャフォールドであって、
スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールド
を備える、請求項１から５７のいずれか１項に従って生成されるミネラルコーティングされたスキャフォールド。
【請求項５９】
（Ａ）マトリックス材料およびプライマーコーティングを含むミネラルコーティングされたスキャフォールドであって、
（ｉ）スキャフォールドのプライマーコーティングは、ポリマーを含み；
（ｉｉ）スキャフォールドのプライマーコーティングは、連続もしくは不連続コーティングを含み；
（ｉｉｉ）スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールド；または
（Ｂ）マトリックス材料を含むミネラルコーティングされたスキャフォールドであって、
（ｉ）スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールド。
【請求項６０】
マトリックス材料を含むミネラルコーティングされたスキャフォールドであって、スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールド。
【請求項６１】
プライマーコーティングが、吸収性薄膜を備える、請求項５８または５９に記載のミネラルコーティングされたスキャフォールド。
【請求項６２】
ミネラルコーティングが、
（ｉ）約９％〜約１００％のヒドロキシアパタイト；約９０％〜約１００％のヒドロキシアパタイト；もしくは約９７％のヒドロキシアパタイト；
（ｉｉ）約０％〜約３０％のリン酸八カルシウム；約０％〜約３％のリン酸八カルシウム；もしくは約３％のリン酸八カルシウム；
（ｉｉｉ）約２％から約１００％の間の空隙率；もしくは約２０％から約２８％の間の空隙率；
（ｉｖ）約１ｎｍから約３５００ｎｍの間の孔径；もしくは約１００ｎｍから約３５０ｎｍの間の孔径；
（ｖ）約０．１〜約１８のＣａ／Ｐ；約１．１〜約１．７６のＣａ／Ｐ；約１．６７〜約１．７６のＣａ／Ｐ；約１．１〜約１．３のＣａ／Ｐ；もしくは約１．３７〜約１．６１のＣａ／Ｐ；または
（ｖｉ）約９％〜約１００％の結晶化度；約９０％〜約１００％の結晶化度；もしくは約９６．５％の結晶化度
を備える、請求項５８から６０のいずれか１項に記載のミネラルコーティングされたスキャフォールド。
【請求項６３】
補助成分をさらに含み、補助成分は、銀粒子または脱灰骨基質（ＤＢＭ）を含む、請求項５８から６２のいずれか１項に記載のミネラルコーティングされたスキャフォールド。
【請求項６４】
補助成分が、脱灰骨基質（ＤＢＭ）を含み、スキャフォールドが、ＤＢＭを含まないミネラルコーティングされたスキャフォールドと比較して、改善された骨誘導特性を示す、請求項６３に記載のミネラルコーティングされたスキャフォールド。
【請求項６５】
スキャフォールドが、抗微生物、抗菌、生物抑制、または抗感染症特性を提供するのに効果的な量の銀粒子を含む、請求項６３に記載のミネラルコーティングされたスキャフォールド。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年７月２７日に出願された米国仮特許出願第６２／１９７，２１２号、および３月３日に出願された米国仮特許出願第６２／１２７，７６２号の優先権を主張し、これらはそれぞれ、参照することにより全体が本明細書に組み込まれる。
連邦政府資金による研究開発に関する記述
本発明は、国立衛生研究所により授与された助成金番号Ｒ０３ＡＲ０５２８９３の下で政府援助によりなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
参照により組み込まれる資料
該当なし
本開示は、概して、ミネラルコーティングおよびプライマーコーティングされたスキャフォールドのための組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＥＥＫをコーティングすることは、その高い耐薬品性、低い吸水性、平滑な表面および熱分解に対する高い耐性に起因して、困難であることが明らかとなっている。現行のＰＥＥＫコーティング法には、高エネルギー、高温、および／または極めて有害な化学薬品が関与する。
無機ミネラルでコーティングされた有機ポリマーで構成されたハイブリッド材料は、その有利な特性の組合せにより、生物学および医学において大きく注目されている。ポリマー材料は、様々なサイズおよび幾何構造に加工され得、制御可能な時間枠で生体吸収されるように設計され得ることから、生物医学的用途の望ましいベース材料となり得る。したがって、ポリマー生体材料は、医療デバイス、組織工学スキャフォールド、および薬物送達システムを含む様々な用途において取り上げられている。
【０００３】
リン酸カルシウム系ミネラルコーティングは、組成の点で骨組織に類似し得ることから、生物医学的用途における望ましい表面であり、「生体活性」と呼ばれる特性である、自然骨との有利な相互作用を促進することが示されている。例えば、骨ミネラルの主要な無機成分であるヒドロキシアパタイトは、骨誘発性であり（Ducheyne et al., 1999）、またｉｎ  ｖｉｖｏで新骨形成を誘導することが可能となり得る（Habibovic et al., 2006）。
【０００４】
生体材料表面上にヒドロキシアパタイトコーティングを成長させるために使用されるアプローチの特定のサブセットは、自然のバイオミネラル化プロセスのいくつかの態様を模倣したものであり、したがって、「生体模倣」または「バイオインスパイアード」と呼ばれている（Hong et al., 2006；Gao and Koumoto, 2005；Leveque et al., 2004；Green et al., 2006）。この種のアプローチは、プラズマ溶射（Gledhill et al., 2001）、スパッタコーティング（Yamashita et al., 1994）、およびレーザ堆積（Fernandez-Pradas et al., 1998）等の高温の商業的処理方法の、実際的および経済的に魅力的な代替法である。Ｋｏｋｕｂｏらは、ヒト血漿のイオン濃度とほぼ等しいイオン濃度を有し、生理学的温度およびｐＨに保持された擬似体液（ＳＢＦ）中での、生体活性ＣａＯ−ＳｉＯ2ガラス上のアパタイトコーティングのバイオインスパイアード成長を初めて報告した（Kokubo et al., 1990）。その後の一連の研究において、ＳＢＦの新規製剤を使用したミネラル成長（Oyane et al., 2003）、ミネラル成長プロセスのバリエーション（Miyaji et al., 1999）、またはベース材料のバリエーション（Yogogawa et al., 1997）が報告された。これらの研究におけるミネラル核形成の基礎は、溶液中のミネラルイオンと材料表面上の極性官能基との相互作用、例えばＳｉ−ＯＨ（Li et al., 1992）、Ｔｉ−ＯＨ（Barrere et al., 2004）、およびＺｒ−ＯＨ（Uchida et al., 2001）が関与していた。最近の一連の研究によって、バイオインスパイアードミネラル化プロセスは、生分解性ポリマーフィルム上（Murphy and Mooney, 2002）または多孔質スキャフォールド（Murphy et al., 2000;Zhang and Ma, 2004;Bajpai and Singh, 2007）上の骨状ヒドロキシアパタイトコーティングの形成を含むほどに拡張した。これらの材料上でのミネラル核形成および成長のメカニズムは、不均一核形成およびミネラル成長のための駆動力を形成する、加水分解した表面上のカルボキシレートおよびヒドロキシル基と溶液中のカルシウムおよびホスフェートに富む核との相互作用に基づいている（Murphy and Mooney, 2002）。このコーティングプロセスは、生理的温度およびｐＨで行うことができる（Tanahashi et al., 1994）ため、生体適合性インプラントおよび生分解性ポリマーに特に好適であり、また、穏やかな処理条件は、コーティングプロセス中にポリペプチドおよびポリヌクレオチド等の生物活性分子を組み込むことが可能であることも示唆している。
【０００５】
以前の研究では、脱灰骨基質（ＤＢＭ）が骨形成性材料であることが示されているが、Ozturk et al. 2006 Int Orth. 30, 147-152は、ＤＢＭ単独が、ＤＢＭ／ヒドロキシアパタイト（ＨＡ）混合物よりも良好な骨誘発特性を示すことを示している。
【発明の概要】
【０００６】
本開示の様々な態様には、ミネラルコーティングされたスキャフォールドの組成物およびそれを調製する方法の提供が含まれる。
一実施形態は、ミネラルコーティングされたスキャフォールドを生成するための方法であって、（ｉ）プライマーコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間および条件下で、プライマーコーティング組成物およびスキャフォールドを接触させる、またはプライマーコーティング組成物およびスキャフォールドをインキュベートするステップと；（ｉｉ）プライマーコーティングされたスキャフォールドを、改質された擬似体液と接触させるステップと；（ｉｉｉ）ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間および条件下で、プライマーコーティングされたスキャフォールドおよび改質された擬似体液をインキュベートするステップとを含み、スキャフォールドは、マトリックス材料を含み；プライマーコーティング組成物は、ポリマー、またはポリマーおよび溶媒を含み；スキャフォールドのプライマーコーティングは、連続もしくは不連続コーティングを含み；プライマーコーティングは、スキャフォールドのミネラルコーティングを促進する方法を提供する。
【０００７】
別の実施形態は、ミネラルコーティングされたスキャフォールドを生成するための方法であって、（ｉ）スキャフォールドを改質された擬似体液と接触させるステップと；（ｉｉ）ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間および条件下で、スキャフォールドおよび改質された擬似体液をインキュベートするステップとを含み、スキャフォールドは、マトリックス材料を含み；ミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む方法を提供する。
【０００８】
方法のいくつかの実施形態において、マトリックス材料またはプライマーコーティングは、生分解性材料である。
方法のいくつかの実施形態において、マトリックス材料は、整形外科用インプラント材料、心臓用インプラント材料、平滑材料、金属、ポリエチレン、機械加工された表面、または平滑金属表面を含む。
方法のいくつかの実施形態において、マトリックス材料は、金属、カルシウムセラミック、ポリマー、または生物学的材料を含む。方法のいくつかの実施形態において、マトリックス材料は、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、チタン（Ｔｉ）、ステンレススチール、バイタリウム（コバルト−クロム）、チタン、金、ヒドロキシアパタイト、リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイトセメント、生体活性ガラス、シリコーン、炭素繊維、炭素繊維強化ＰＥＥＫ、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＲＲＫ）、ポリメチルメタクリレート、硬質組織置換（ＨＴＲ）ポリマー、ポリエステル、Ｄａｃｒｏｎ、Ｍｅｒｓｉｌｅｎｅ、生分解性ポリエステル、ポリグリコール酸、ポリ−ｌ−乳酸）、ポリアミド、Ｓｕｐｒａｍｉｄ、Ｎｙｌａｍｉｄ、ポリオレフィン、ポリエチレン、Ｍｅｄｐｏｒ、ポリプロピレン、Ｐｒｏｌｅｎｅ、Ｍａｒｌｅｘ、シアノアクリレート、ポリテトラフルオロエチレン、Ｔｅｆｌｏｎ、Ｇｏｒｅ−Ｔｅｘ、コラーゲン、もしくはＡｌｌｏＤｅｒｍ、またはそれらの組合せを含む。
【０００９】
方法のいくつかの実施形態において、ポリマーは、アクリル樹脂、アルギネート、カプロラクトン、コラーゲン、キトサン、ヒアルロン酸、ヒドロゲル、ヒドロキシ酪酸、ポリ無水物、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリ（ジメチルグリコール酸）、ポリジオキサノン（ＰＤＯ）、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（グリコリド）（ＰＧＡ）、ポリ（グリコール酸）、ポリヒドロキシブチレート（ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｏｂｕｔｙｒａｔｅ）、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、ポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、ポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）、ポリ（メチルエチルグリコール酸）、ポリメチルメタクリレート、ポリホスファゼン、ポリリン酸エステル、ポリプロピレン、ポリ（プロピレンフマレート）、ポリウレタン（ＰＵ）、もしくはシリコーンゴム、またはそれらの組合せもしくはコポリマーを含む。方法のいくつかの実施形態において、ポリマーは、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、およびポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）からなる群の１つまたは複数から選択される生体吸収性ポリエステルまたはコポリマーを含む。
【００１０】
方法のいくつかの実施形態において、ポリマー含有プライマーコーティング組成物は、約１：１の比の２種のポリマー、またはポリマーおよびそのコポリマーを含む。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティング組成物は、ポリマーを含む粉末を含む。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティング組成物は、約１０μｍ〜約５００μｍの粒径、または約１０μｍ〜約５００μｍの平均粒径のポリマーを含む。
【００１１】
方法のいくつかの実施形態において、溶媒は、酢酸、アルコール、脂肪族エーテル、アニリン、芳香族炭化水素、塩素化炭化水素、芳香族炭化水素、アルカリ水溶液、銅エチレンジアミンの水溶液、ベンゼン、ビフェニル、塩素化脂肪族炭化水素、塩素化炭化水素、クロロホルム、クロロフェノール、クロロベンゼン、シクロヘキサノン、塩素化炭化水素、塩化金酸、ＤＣＭ、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ＤＭＳＯ、ジクロロビフェニル、ジオキサン、希水酸化ナトリウム水溶液、１，２−ジクロロベンゼン、ジクロロメタン、ＤＣＭ、エタノール、酢酸エチル、エチレンカーボネート、エステル、ギ酸、グリコール、ハロゲン化炭化水素、ＨＦＩＰ、高級脂肪族エステル、高級脂肪族ケトン、ハロゲン化炭化水素、高級脂肪族エステル、高級脂肪族ケトン、ケトン、高級ケトン、炭化水素、イソプロピルアミン、メチルエチルケトン、モルホリン、塩化メチレン、メタノール、メチルエチルケトン、ｍ−クレゾール、ＮＭＰ、フェノール、フェニレンジアミン、硫酸、テトラメチル尿素、トルエン、トリフルオロ酢酸、ＴＨＤ、テトラメチル尿素、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリフルオロ酢酸、トリクロロエタノール、トルエン、トリクロロエタン、トリクロロアセトアルデヒド水和物、パーフルオロケロセン、ピリジン、フェニルエーテル、ピペラジン、ピリジン、水、もしくはキシレン、またはそれらの組合せを含む。
方法のいくつかの実施形態において、溶媒は、クロロホルム、酢酸、ギ酸、またはギ酸および酢酸の組合せの２つ以上から選択される。方法のいくつかの実施形態において、２種の溶媒の比は、４：１、３：１、２：１、または１：１である。
【００１２】
方法のいくつかの実施形態において、溶媒の体積に対するポリマーの質量のパーセントは、約１％ｗ／ｖから約１０％ｗ／ｖ；または約１％ｗ／ｖ、約２％ｗ／ｖ、約３％ｗ／ｖ、約４％ｗ／ｖ、約５％ｗ／ｖ、約６％ｗ／ｖ、約７％ｗ／ｖ、約８％ｗ／ｖ、約９％ｗ／ｖ、もしくは約１０％ｗ／ｖである。
方法のいくつかの実施形態において、スキャフォールドへのプライマーコーティングの塗布は、溶媒キャスティング、空気乾燥、真空乾燥、または等温（ｉｓｏ−ｔｅｍｐ）乾燥を含む。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、約１０分間〜約２４時間乾燥される。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティングは、薄膜を含む。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティングは、約１μｍ〜約５０μｍの厚さを有する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、方法は、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ2、ＭｇＳＯ4、ＮａＨＣＯ3、ＣａＣｌ2、およびＫＨ2ＰＯ4をさらに組み合わせて、改質された擬似体液を形成するステップを含む。方法のいくつかの実施形態において、（ｉ）ＮａＣｌは、約１００ｍＭ〜約２００ｍＭの濃度を有し；（ｉｉ）ＫＣｌは、約１ｍＭ〜約８ｍＭの濃度を有し；（ｉｉｉ）ＭｇＣｌ2は、約０．２ｍＭ〜約５ｍＭの濃度を有し；（ｉｖ）ＭｇＳＯ4は、約０．２ｍＭ〜約５ｍＭの濃度を有し；（ｖ）ＮａＨＣＯ3は、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの濃度を有し；（ｖｉ）ＣａＣｌ2は、約２ｍＭ〜約２０ｍＭの濃度を有し；（ｖｉｉ）ＫＨ2ＰＯ4は、約０．５ｍＭ〜約１０ｍＭの濃度を有する。方法のいくつかの実施形態において、（ｉ）ＮａＣｌは、約１４１ｍＭの濃度を有し；（ｉｉ）ＫＣｌは、約４．０ｍＭの濃度を有し；（ｉｉｉ）ＭｇＣｌ2は、約１．０ｍＭの濃度を有し；（ｉｖ）ＭｇＳＯ4は、約０．５ｍＭの濃度を有し；（ｖ）ＮａＨＣＯ3は、約４．２ｍＭの濃度を有し；（ｖｉ）ＣａＣｌ2は、約５ｍＭの濃度を有し；（ｖｉｉ）ＫＨ2ＰＯ4は、約２．０ｍＭの濃度を有する。
【００１４】
方法のいくつかの実施形態において、改質された擬似体液は、緩衝剤を含む。方法のいくつかの実施形態において、改質された擬似体液は、約２０ｍＭの濃度の緩衝剤を含む。方法のいくつかの実施形態において、改質された擬似体液は、ＤＰＢＳ、トリス、トリス−ＨＣｌ、トリス緩衝食塩水、またはＰＢＳからなる群から選択される緩衝剤を含む。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間は、約１日〜約４日である。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティング組成物およびスキャフォールドを接触させるステップは、粉末コーティングを含む。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティング組成物およびスキャフォールドを接触させるステップは、ディップコーティングを含む。
【００１５】
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間、プライマーコーティング組成物およびスキャフォールドをインキュベートするステップは、少なくとも約１日；少なくとも約２日；少なくとも約３日；または少なくとも約４日である。
方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間は、約１日〜約２１日である。方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間は、少なくとも約５日；少なくとも約６日；少なくとも約７日；少なくとも約８日；少なくとも約９日；少なくとも約１０日；少なくとも約１１日；少なくとも約１２日；少なくとも約１３日；または少なくとも約１４日である。方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングされたスキャフォールドを形成するのに十分な期間は、約５日〜約１４日である。
【００１６】
いくつかの実施形態において、方法は、ミネラルコーティングされたスキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドを乾燥させるステップをさらに含む。
いくつかの実施形態において、方法は、連続または不連続コーティングを形成するのに十分な条件下で、プライマーコーティングされたスキャフォールドを加熱するステップをさらに含む。
いくつかの実施形態において、方法は、プライマーコーティングを乾燥させる、軟化させる、溶融する、または硬化させるのに十分な条件下で、プライマーコーティングされたスキャフォールドを加熱するステップをさらに含む。
【００１７】
いくつかの実施形態において、方法は、プライマーコーティングを軟化させる、溶融する、または硬化させるのに十分である約５０℃〜約２００℃で、プライマーコーティングされたスキャフォールドを加熱するステップをさらに含む。
いくつかの実施形態において、方法は、プライマーコーティングを軟化させる、溶融する、または硬化させるのに十分である約１時間〜約６時間、プライマーコーティングされたスキャフォールドを加熱するステップをさらに含む。
いくつかの実施形態において、方法は、スキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドを加水分解させるステップをさらに含む。
いくつかの実施形態において、方法は、スキャフォールドまたはプライマーコーティングされたスキャフォールドを粗面化するステップをさらに含む。
【００１８】
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティングされたスキャフォールドおよび改質された擬似体液のインキュベーションは、改質された擬似体液を生理的温度に加熱する、または生理的ｐＨに調節することを含む。
方法のいくつかの実施形態において、生理的温度は約３７℃である、または生理的ｐＨは約６．８である。
いくつかの実施形態において、方法は、（ｉ）スキャフォールドをプライマーコーティング組成物中でインキュベートするステップが、プライマーコーティング組成物を交換すること、プライマーコーティング組成物を補充すること、プライマーコーティング組成物を除去すること、もしくはプライマーコーティング組成物を添加することを含むこと；または（ｉｉ）スキャフォールドをプライマーコーティング組成物中でインキュベートするステップが、プライマーコーティング組成物の濃度を維持することを含むことを含む。
【００１９】
いくつかの実施形態において、方法は、（ｉ）プライマーコーティングされたスキャフォールドを改質された擬似体液中でインキュベートするステップが、改質された擬似体液を交換すること、改質された擬似体液を補充すること、改質された擬似体液を除去すること、もしくは改質された擬似体液を添加することを含むこと；または（ｉｉ）プライマーコーティングされたスキャフォールドを改質された擬似体液中でインキュベートするステップが、改質された擬似体液の濃度を維持することを含むことを含む。
いくつかの実施形態において、方法は、プライマーコーティング組成物の濃度を維持することが、ポリマー、溶媒、またはそれらの組合せを交換、補充、除去、または添加することを含むことを含む。
方法のいくつかの実施形態において、改質された擬似体液の濃度を維持することは、改質された擬似体液、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ2、ＭｇＳＯ4、ＮａＨＣＯ3、ＣａＣｌ2、もしくはＫＨ2ＰＯ4、またはそれらの組合せを交換、補充、除去、または添加することを含む。
方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングは、（ｉ）約９％〜約１００％のヒドロキシアパタイト；（ｉｉ）約９０％〜約１００％のヒドロキシアパタイト；または（ｉｉｉ）約９７％のヒドロキシアパタイトを含む。
【００２０】
方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングは、（ｉ）約０％〜約３０％のリン酸八カルシウム；（ｉｉ）約０％〜約３％のリン酸八カルシウム；または（ｉｉｉ）約３％のリン酸八カルシウムを含む。
方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングは、（ｉ）約２％から約１００％の間；または（ｉｉ）約２０％から約２８％の間の空隙率を含む。
方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングは、（ｉ）約１ｎｍから約３５００ｎｍの間の細孔の孔径；または（ｉｉ）約１００ｎｍから約３５０ｎｍの間の孔径を含む。
方法のいくつかの実施形態において、プライマーコーティングは、約２０μｍ超の孔径を含む。
【００２１】
方法のいくつかの実施形態において、スキャフォールドは、（ｉ）約２００μｍから約５２５μｍの間；（ｉｉ）約２５μｍから約６５μｍの間；または（ｉｉｉ）約５０μｍ超の孔径を含む。
方法のいくつかの実施形態において、スキャフォールドは、約１００μｍ超のマクロチャネル長を含む。
方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングは、（ｉ）約０．１〜約１８のＣａ／Ｐ；または（ｉｉ）約１．１〜約１．７６のＣａ／Ｐ（カルシウム対ホスフェート比）を含む。
方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングは、（ｉ）約１．６７〜約１．７６のＣａ／Ｐ；（ｉｉ）約１．１〜約１．３のＣａ／Ｐ；または（ｉｉｉ）約１．３７〜約１．６１のＣａ／Ｐを含む。
【００２２】
方法のいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングは、（ｉ）約９％〜約１００％；（ｉｉ）約９０％〜約１００％；または（ｉｉｉ）約９６．５％の結晶化度を含む。
いくつかの実施形態において、方法は、プライマーコーティングされたスキャフォールドまたはミネラルコーティングされたスキャフォールドを凍結乾燥するステップをさらに含む。
いくつかの実施形態において、方法は、補助成分をスキャフォールドと合わせるステップをさらに含み、補助成分は、銀粒子または脱灰骨基質（ＤＢＭ）を含む。
【００２３】
別の態様は、（ｉ）マトリックス材料およびプライマーコーティングを含むミネラルコーティングされたスキャフォールドであって、スキャフォールドのプライマーコーティングは、ポリマーを含み；スキャフォールドのプライマーコーティングは、連続もしくは不連続コーティングを含み；スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールド；または（ｉｉ）マトリックス材料を含むミネラルコーティングされたスキャフォールドであって、スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールドを提供する。
別の態様は、（Ａ）マトリックス材料およびプライマーコーティングを含むミネラルコーティングされたスキャフォールドであって、（ｉ）スキャフォールドのプライマーコーティングは、ポリマーを含み；（ｉｉ）スキャフォールドのプライマーコーティングは、連続もしくは不連続コーティングを含み；（ｉｉｉ）スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールド；または（Ｂ）マトリックス材料を含むミネラルコーティングされたスキャフォールドであって、（ｉ）スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含む、スキャフォールドを提供する。いくつかの実施形態において、ミネラルミネラルコーティングされたスキャフォールドは、生体吸収性薄膜プライマーコーティングを含む。
【００２４】
別の態様は、マトリックス材料を含むミネラルコーティングされたスキャフォールドであって、スキャフォールドのミネラルコーティングは、板状ナノ構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト成分を含むスキャフォールドを提供する。
ミネラルコーティングされたスキャフォールドのいくつかの実施形態において、ミネラルコーティングは、（ｉ）約９％〜約１００％のヒドロキシアパタイト；約９０％〜約１００％のヒドロキシアパタイト；もしくは約９７％のヒドロキシアパタイト；（ｉｉ）約０％〜約３０％のリン酸八カルシウム；約０％〜約３％のリン酸八カルシウム；もしくは約３％のリン酸八カルシウム；（ｉｉｉ）約２％から約１００％の間の空隙率；もしくは約２０％から約２８％の間の空隙率；（ｉｖ）約１ｎｍから約３５００ｎｍの間の孔径；もしくは約１００ｎｍから約３５０ｎｍの間の孔径；（ｖ）約０．１〜約１８のＣａ／Ｐ；約１．１〜約１．７６のＣａ／Ｐ；約１．６７〜約１．７６のＣａ／Ｐ；約１．１〜約１．３のＣａ／Ｐ；もしくは約１．３７〜約１．６１のＣａ／Ｐ；または（ｖｉ）約９％〜約１００％の結晶化度；約９０％〜約１００％の結晶化度；もしくは約９６．５％の結晶化度を含む。
【００２５】
いくつかの実施形態において、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、補助成分を含み、補助成分は、銀粒子または脱灰骨基質（ＤＢＭ）を含む。
ミネラルコーティングされたスキャフォールドのいくつかの実施形態において、補助成分は、脱灰骨基質（ＤＢＭ）を含み、スキャフォールドは、ＤＢＭを含まないミネラルコーティングされたスキャフォールドと比較して、改善された骨誘導特性を示す。
いくつかの実施形態において、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、抗微生物、抗菌、生物抑制（ｂｉｏｓｔａｔｉｃ）、または抗感染症特性を提供するのに効果的な量の銀粒子を含む。
【００２６】
他の目的および特徴の一部は明らかであり、一部は本明細書の以下において指摘される。
以下で説明される図面は、例示のみを目的とすることが当業者に理解される。図面は、決して本教示の範囲を限定することを意図しない。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１Ａ】低倍でのＰＣＬスキャフォールド上のコーティング表面の代表的ＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図１Ｂ】高倍でのＰＣＬスキャフォールド上のコーティング表面の代表的ＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図２Ａ】３日目のＤＰＢＳ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図２Ｂ】７日目のＤＰＢＳ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図２Ｃ】１４日目のＤＰＢＳ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図２Ｄ】３日目のトリス−ＨＣｌ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図２Ｅ】７日目のトリス−ＨＣｌ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図２Ｆ】１４日目のトリス−ＨＣｌ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図３Ａ】トリス−ＨＣｌ中の累積ホスフェート放出の量を示す図である。
【図３Ｂ】トリス−ＨＣｌおよびＤＰＢＳ中の累積カルシウム放出の量を示す図である。
【図４Ａ】コーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図４Ｂ】コーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
【図５Ａ】コーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝１ｍｍ）。
【図５Ｂ】コーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝５００μｍ）。
【図５Ｃ】コーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝２００μｍ）。
【図５Ｄ】コーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝５０μｍ）。
【図６Ａ】コーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝１ｍｍ）。
【図６Ｂ】コーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝５００μｍ）。
【図６Ｃ】コーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝２００μｍ）。
【図６Ｄ】コーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝５０μｍ）。
【図７Ａ】コーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝２０μｍ）。
【図７Ｂ】コーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝１０μｍ）。
【図８】ＰＣＬ表面上のコーティングと一致するＴｉ上のコーティング組成物を示す図である。
【図９】Ｔｉ上のコーティング厚が５〜１５μｍの範囲内であることを示す図である。
【図１０】ＰＥＥＫメッシュの１ｃｍ×１ｃｍ片の画像である。
【図１１Ａ】コーティングのないＰＥＥＫメッシュを示す、一連のＳＥＭ画像であり、より低倍（２５×）でのＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１１Ｂ】コーティングのないＰＥＥＫメッシュを示す、一連のＳＥＭ画像であり、より高倍（９８×）でのＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１２Ａ】より低倍（２５×）でのクロロホルム中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１２Ｂ】より高倍（１０１×）でのクロロホルム中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１３Ａ】より低倍（２５×）での酢酸中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１３Ｂ】より高倍（１０１×）での酢酸中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１４Ａ】１０６×の倍率での、コーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１４Ｂ】２１２×の倍率での、コーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１４Ｃ】４２４×の倍率での、コーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１４Ｄ】１６９７×の倍率での、コーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１５Ａ】１０１×の倍率での、コーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１５Ｂ】２０２×の倍率での、コーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１５Ｃ】４０５×の倍率での、コーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１５Ｄ】８０９×の倍率での、コーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１６Ａ】８８×の倍率での、コーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１６Ｂ】１７６×の倍率での、コーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１６Ｃ】３５２×の倍率での、コーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【図１６Ｄ】３４２５×の倍率での、コーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【００２８】
[図面の簡単な説明]
図１Ａ〜図１ＢはＰＣＬスキャフォールド上のコーティング表面を示す、一連の顕微鏡写真である。
図１Ａは低倍でのＰＣＬスキャフォールド上のコーティング表面の代表的ＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図１Ｂは高倍でのＰＣＬスキャフォールド上のコーティング表面の代表的ＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図２Ａ〜図２ＦはＤＰＢＳとのインキュベーション後のＰＣＬスキャフォールド上のコーティング表面を示す、一連の顕微鏡写真である。
図２Ａは３日目のＤＰＢＳ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図２Ｂは７日目のＤＰＢＳ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図２Ｃは１４日目のＤＰＢＳ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図２Ｄは３日目のトリス−ＨＣｌ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図２Ｅは７日目のトリス−ＨＣｌ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図２Ｆは１４日目のトリス−ＨＣｌ中でのインキュベーション後のコーティング表面のＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図３Ａ〜図３Ｂはホスフェートまたはカルシウムの累積放出の量を示す一連の棒グラフである。
図３Ａはトリス−ＨＣｌ中の累積ホスフェート放出の量を示す図である。
図３Ｂはトリス−ＨＣｌおよびＤＰＢＳ中の累積カルシウム放出の量を示す図である。
図４Ａ〜図４Ｂはチタン（Ｔｉ）スキャフォールド上の表面を示す、一連の顕微鏡写真である。
図４ＡはコーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図４ＢはコーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である。
図５Ａ〜図５ＤはＴｉスキャフォールド上のコーティングされていない表面を示す、一連の顕微鏡写真である。
図５ＡはコーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝１ｍｍ）。
図５ＢはコーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝５００μｍ）。
図５ＣはコーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝２００μｍ）。
図５ＤはコーティングされていないＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝５０μｍ）。
図６Ａ〜図６ＤはＴｉスキャフォールド上のコーティングされた表面を示す、一連の顕微鏡写真である。
図６ＡはコーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝１ｍｍ）。
図６ＢはコーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝５００μｍ）。
図６ＣはコーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝２００μｍ）。
図６ＤはコーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝５０μｍ）。
図７ＡはコーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝２０μｍ）。
図７ＢはコーティングされたＴｉのＳＥＭ顕微鏡写真を示す図である（スケールバー＝１０μｍ）。
図８はＰＣＬ表面上のコーティングと一致するＴｉ上のコーティング組成物を示す図である。
図９はＴｉ上のコーティング厚が５〜１５μｍの範囲内であることを示す図である。
図１０はＰＥＥＫメッシュの１ｃｍ×１ｃｍ片の画像である。
図１１Ａ〜図１１ＢはコーティングのないＰＥＥＫメッシュを示す、一連のＳＥＭ画像である。図１１Ａは、より低倍（２５×）でのＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１１Ｂは、より高倍（９８×）でのＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
図１２Ａ〜図１２Ｂはクロロホルム中２．５質量％のＰＣＬ中のＰＥＥＫメッシュを示す、一連のＳＥＭ画像である。図１２Ａは、より低倍（２５×）でのクロロホルム中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１２Ｂは、より高倍（１０１×）でのクロロホルム中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
図１３Ａ〜図１３Ｂは酢酸中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュを示す、一連のＳＥＭ画像である。図１３Ａは、より低倍（２５×）での酢酸中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１３Ｂは、より高倍（１０１×）での酢酸中２．５質量％のＰＣＬに浸漬されたＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
図１４Ａ〜図１４Ｄはコーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュを示す、一連のＳＥＭ画像である。図１４Ａは、１０６×の倍率での、コーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１４Ｂは、２１２×の倍率での、コーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１４Ｃは、４２４×の倍率での、コーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１４Ｄは、１６９７×の倍率での、コーティング条件ＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
図１５Ａ〜図１５Ｄはコーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュを示す、一連のＳＥＭ画像である。図１５Ａは、１０１×の倍率での、コーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１５Ｂは、２０２×の倍率での、コーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１５Ｃは、４０５×の倍率での、コーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１５Ｄは、８０９×の倍率での、コーティング条件ＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
図１６Ａ〜図１６Ｄはコーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュを示す、一連のＳＥＭ画像である。図１６Ａは、８８×の倍率での、コーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１６Ｂは、１７６×の倍率での、コーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１６Ｃは、３５２×の倍率での、コーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。図１６Ｄは、３４２５×の倍率での、コーティング条件ＩＩＩにおけるＰＥＥＫメッシュのＳＥＭ画像である。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本開示は、少なくとも部分的に、ポリマー（例えばＰＣＬ）の「ディップ」または「プライマー」コーティングによる前処理が、ミネラルコーティングするのが困難であることが知られている材料（例えば、平滑材料、ＰＥＥＫ）のミネラルコーティングを容易化するという発見に基づく。さらに、本開示は、少なくとも部分的に、構造または組成が骨に類似したコーティングを形成するために、ミネラルコーティングされたスキャフォールドを生成する方法の有利な特性の発見に基づく。本明細書において示されるように、コーティングされたスキャフォールドは、有利な特性を提供するように生成され、特性決定されている。
【００３０】
プライマーコーティング
本明細書に記載のスキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、表面改質またはコーティングを含み得る。本明細書に記載のようなスキャフォールドのプライマーコーティングは、任意の従来の様式により行うことができる。
例は、スキャフォールド材料をコーティングするための従来の過酷な前処理条件の使用を必要としない、例示的方法を説明する。例えば、本明細書に記載のような方法および組成物は、材料（例えば、材料またはスキャフォールドの表面）を損傷し得る従来の有害な前処理条件なしに、スキャフォールド（例えば、ＰＥＥＫ、金属、平滑表面）をプライマーコーティングでコーティングすることができる。本明細書に記載の組成物および方法は、過酷な前処理条件を必要としないため、ＦＤＡは、本明細書に記載のような組成物を生成するために使用され得る多くの材料を認可している。本明細書に記載の方法は、従来の方法よりも、材料をコーティングするのに迅速となり得る、または少ない時間を要し得る。
【００３１】
プライマーコーティング組成物。
例は、ポリマーを含むプライマーコーティング組成物を使用してプライマーコーティングされたスキャフォールドを生成するための例示的方法を説明する。例えば、プライマーコーティング組成物は、ポリマーおよび溶媒を含む溶液であってもよい。別の例として、プライマーコーティング組成物は、ポリマーを含む任意の組成物であってもよい。プライマーコーティング組成物は、溶液状態、固体状態、液体状態、気体状態、プラズマ状態、または気相であってもよい。別の例として、プライマーコーティング組成物は、粉末であってもよい。
本明細書に記載のように、スキャフォールド上のポリマー層の組成は、プライマーコーティング組成、例えばプライマーコーティング組成物中のポリマー組成（例えば、種類、濃度）、添加剤、または溶媒組成（例えば、種類、濃度）を調節することにより操作され得る。
【００３２】
（ｉ）ポリマー。
例は、溶液中のポリマー含有コーティング組成物を使用してプライマーコーティングされたスキャフォールドを生成するための例示的方法を説明する。例えば、ポリマー含有プライマーコーティング組成物は、任意の従来のポリマーを含んでもよい（例えば、Nair et al. Prog. Poly. Sci 2007 32(8-9) 762-798；Miller Chou et al. Prog. Poly. Sci 2003 28 1223-1270を参照されたい）。別の例として、ポリマー含有プライマーコーティング組成物中のポリマーは、アクリル樹脂、アルギネート、カプロラクトン、コラーゲン、キトサン、ヒアルロン酸、ヒドロゲル、ヒドロキシ酪酸、ポリ無水物、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリ（ジメチルグリコール酸）、ポリジオキサノン（ＰＤＯ）、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（グリコリド）（ＰＧＡ）、ポリ（グリコール酸）、ポリヒドロキシブチレート（ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｏｂｕｔｙｒａｔｅ）、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、ポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、ポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）、ポリ（メチルエチルグリコール酸）、ポリメチルメタクリレート、ポリホスファゼン、ポリリン酸エステル、ポリプロピレン、ポリ（プロピレンフマレート）、ポリウレタン（ＰＵ）、シリコーンゴム、またはそれらの組合せもしくはコポリマーの１つまたは複数を含んでもよい。
【００３３】
別の例として、ポリマー含有プライマーコーティング中のポリマーは、生体吸収性ポリエステルまたはそのコポリマーの１つまたは複数を含んでもよい。生分解性ポリエステルまたはそのコポリマーは、例えば、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、またはポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）の１つまたは複数であってもよい。
【００３４】
本明細書に記載のようなプライマーコーティング組成物は、２種のポリマーを含んでもよい。例えば、本明細書に記載のようなポリマー含有プライマーコーティング組成物は、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、約１：１０、約１：１１、約１：１２、約１：１３、約１：１４、約１：１５、約１：１６、約１：１７、約１：１８、約１：１９、約１：２０、約１：２１、約１：２２、約１：２３、約１：２４、約１：２５、約１：２６、約１：２７、約１：２８、約１：２９、約１：３０、約１：３１、約１：３２、約１：３３、約１：３４、約１：３５、約１：３６、約１：３７、約１：３８、約１：３９、または約１：４０の比の２種のポリマーを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００３５】
プライマーコーティング組成物は、本明細書に記載のような１種または複数種のポリマーを含む粉末を含んでもよい。粉末は、ある範囲の粒子粒径を備えてもよい。粉末は、平均粒径を備えてもよい。例えば、粉末は、約１μｍ〜約５，０００μｍの粒径または平均粒径を含んでもよい。別の例として、粉末は、約１０μｍ〜約５００μｍの粒径または平均粒径を含んでもよい。別の例として、粉末は、約１μｍ；約２μｍ；約３μｍ；約４μｍ；約５μｍ；約６μｍ；約７μｍ；約８μｍ；約９μｍ；約１０μｍ；約１１μｍ；約１２μｍ；約１３μｍ；約１４μｍ；約１５μｍ；約１６μｍ；約１７μｍ；約１８μｍ；約１９μｍ；約２０μｍ；約２１μｍ；約２２μｍ；約２３μｍ；約２４μｍ；約２５μｍ；約２６μｍ；約２７μｍ；約２８μｍ；約２９μｍ；約３０μｍ；約３１μｍ；約３２μｍ；約３３μｍ；約３４μｍ；約３５μｍ；約３６μｍ；約３７μｍ；約３８μｍ；約３９μｍ；約４０μｍ；約４１μｍ；約４２μｍ；約４３μｍ；約４４μｍ；約４５μｍ；約４６μｍ；約４７μｍ；約４８μｍ；約４９μｍ；約５０μｍ；約６０μｍ；約７０μｍ；約８０μｍ；約９０μｍ；約１００μｍ；約１１０μｍ；約１２０μｍ；約１３０μｍ；約１４０μｍ；約１５０μｍ；約１６０μｍ；約１７０μｍ；約１８０μｍ；約１９０μｍ；約２００μｍ；約２１０μｍ；約２２０μｍ；約２３０μｍ；約２４０μｍ；約２５０μｍ；約２６０μｍ；約２７０μｍ；約２８０μｍ；約２９０μｍ；約３００μｍ；約３１０μｍ；約３２０μｍ；約３３０μｍ；約３４０μｍ；約３５０μｍ；約３６０μｍ；約３７０μｍ；約３８０μｍ；約３９０μｍ；約４００μｍ；約４１０μｍ；約４２０μｍ；約４３０μｍ；約４４０μｍ；約４５０μｍ；約４６０μｍ；約４７０μｍ；約４８０μｍ；約４９０μｍ；または約５００μｍの粒径または平均粒径を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００３６】
（ｉｉ）溶媒。
例は、溶液（例えばプライマーコーティング溶液）中のポリマー含有コーティング組成物を使用してプライマーコーティングされたスキャフォールドを生成するための例示的方法を説明する。例えば、ポリマー含有プライマーコーティング溶液は、任意の従来の溶媒を含んでもよい（例えば、Nair et al. Prog. Poly. Sci 2007 32(8-9) 762-798；Miller Chou et al. Prog. Poly. Sci 2003 28 1223-1270を参照されたい）。別の例として、溶媒は、ポリマーの溶解に十分であってもよい（例えば、Miller-Chou et al. 2003 Prog. Polym. Sci. (28) 1223-1270を参照されたい）。別の例として、ポリマー含有プライマーコーティング溶液中の溶媒は、酢酸、アルコール、脂肪族エーテル、アニリン、芳香族炭化水素、塩素化炭化水素、芳香族炭化水素、アルカリ水溶液、銅エチレンジアミンの水溶液、ベンゼン、ビフェニル、塩素化脂肪族炭化水素、塩素化炭化水素、クロロホルム、クロロフェノール、クロロベンゼン、シクロヘキサノン、塩素化炭化水素、塩化金酸、ＤＣＭ、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ＤＭＳＯ、ジクロロビフェニル、ジオキサン、希水酸化ナトリウム水溶液、１，２−ジクロロベンゼン、ジクロロメタン、ＤＣＭ、エタノール、酢酸エチル、エチレンカーボネート、エステル、ギ酸、グリコール、ハロゲン化炭化水素、ＨＦＩＰ、高級脂肪族エステルもしくはケトン、ハロゲン化炭化水素、高級脂肪族エステル、高級脂肪族ケトン、ケトン、高級ケトン、炭化水素、イソプロピルアミン、メチルエチルケトン、モルホリン、塩化メチレン、メタノール、メチルエチルケトン、ｍ−クレゾール、ＮＭＰ、フェノール、フェニレンジアミン、硫酸、テトラメチル尿素、トルエン、トリフルオロ酢酸、ＴＨＤ、テトラメチル尿素、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリフルオロ酢酸、トリクロロエタノール、トルエン、トリクロロエタン、トリクロロアセトアルデヒド水和物、パーフルオロケロセン、ピリジン、フェニルエーテル、ピペラジン、ピリジン、水、もしくはキシレン、またはそれらの組合せのうちの１つまたは複数を含んでもよい。
【００３７】
本明細書に記載のようなポリマー含有プライマーコーティング溶液は、２種の溶媒を含んでもよい。例えば、本明細書に記載のようなポリマー含有プライマーコーティング溶液は、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：６、約１：７、約１：８、約１：９、約１：１０、約１：１１、約１：１２、約１：１３、約１：１４、約１：１５、約１：１６、約１：１７、約１：１８、約１：１９、約１：２０、約１：２１、約１：２２、約１：２３、約１：２４、約１：２５、約１：２６、約１：２７、約１：２８、約１：２９、約１：３０、約１：３１、約１：３２、約１：３３、約１：３４、約１：３５、約１：３６、約１：３７、約１：３８、約１：３９、または約１：４０の比の２種の溶媒を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００３８】
本明細書に記載のようなポリマー含有プライマーコーティング溶液は、ポリマーの質量／溶媒の体積の％（％ｗ／ｖ）を有し得る。例えば、本明細書に記載のようなポリマー含有プライマーコーティング溶液は、約０．１％のポリマーの質量／溶媒の体積；約０．２％のポリマーの質量／溶媒の体積；約０．３％のポリマーの質量／溶媒の体積；約０．４％のポリマーの質量／溶媒の体積；約０．５％のポリマーの質量／溶媒の体積；約０．６％のポリマーの質量／溶媒の体積；約０．７％のポリマーの質量／溶媒の体積；約０．８％のポリマーの質量／溶媒の体積；約０．９％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４％のポリマーの質量／溶媒の体積；約５％のポリマーの質量／溶媒の体積；約６％のポリマーの質量／溶媒の体積；約７％のポリマーの質量／溶媒の体積；約８％のポリマーの質量／溶媒の体積；約９％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１０％のポリマーの質量／溶媒の体積；１１％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１２％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１３％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１４％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１５％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１６％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１７％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１８％のポリマーの質量／溶媒の体積；約１９％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２０％のポリマーの質量／溶媒の体積；２１％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２２％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２３％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２４％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２５％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２６％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２７％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２８％のポリマーの質量／溶媒の体積；約２９％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３０％のポリマーの質量／溶媒の体積；３１％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３２％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３３％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３４％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３５％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３６％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３７％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３８％のポリマーの質量／溶媒の体積；約３９％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４０％のポリマーの質量／溶媒の体積；４１％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４２％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４３％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４４％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４５％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４６％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４７％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４８％のポリマーの質量／溶媒の体積；約４９％のポリマーの質量／溶媒の体積；約５０％のポリマーの質量／溶媒の体積；約６０％のポリマーの質量／溶媒の体積；約７０％のポリマーの質量／溶媒の体積；約８０％のポリマーの質量／溶媒の体積；約９０％のポリマーの質量／溶媒の体積；または約１００％のポリマーの質量／溶媒の体積を有してもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００３９】
プライマーコーティング堆積技術。
本明細書において提供されるように、プライマーコーティングは、当技術分野において知られている任意の方法により塗布され得る（例えば、Hans-Ulrich Krebs, GK: Polymer thin films -1-Vorlesung/Lectureを参照されたい）。例えば、プライマーコーティングは、ディップコーティング、溶媒キャスティング、塗装、スプレーコーティング、スピンコーティング、熱溶射処理（例えばガン）、焼結自立ポリマー膜、複数層またはジブロックコポリマー薄膜、単分子層の表面吸収（ＳＡＭ）により生成されるポリマー、浮遊技術、ラングミュア−ブロジェット膜、気相からの薄膜堆積等の薄膜堆積技術（例えば、蒸発、スパッタリング、パルスレーザ堆積（ＰＬＤ）、プラズマ重合）により塗布され得る。別の例として、プライマーコーティング組成物は粉末であってもよく、スキャフォールドに塗布され、プライマーコーティングを形成するのに十分な条件下で加熱されてもよい。
【００４０】
（ｉ）プライマーコーティング溶液中でのスキャフォールドのインキュベーション。
本明細書に記載のように、プライマーコーティングは、プライマーコーティング組成物を使用してスキャフォールドに塗布され得る。プライマーコーティング組成物は、ポリマーと、ポリマー含有プライマーコーティング溶液を形成する溶媒とを含んでもよい。
【００４１】
例は、ポリマー含有コーティング溶液を使用してプライマーコーティングされたスキャフォールドを生成するための例示的方法を説明する（例えばディップコーティング）。スキャフォールドは、スキャフォールドをプライマーコーティングでコーティングするのに十分な期間、プライマーコーティング溶液中でインキュベートされ得る（例えば、プライマーコーティングは、連続または不連続であってもよい）。プライマーコーティング溶液中でのスキャフォールドのインキュベーションは、プライマーコーティングされたスキャフォールド上のミネラルコーティングの形成を促進するのに十分な量のプライマーコーティングを堆積させるのに十分な期間であってもよい。例えば、スキャフォールドは、約０．１日〜約４０日間コーティング溶液中でインキュベートされてもよい。別の例として、スキャフォールドは、約１日〜約４日間コーティング溶液中でインキュベートされてもよい。
【００４２】
別の例として、スキャフォールドは、少なくとも約０．１日から少なくとも約４０日の間の期間、プライマーコーティング溶液中でインキュベートされてもよい。別の例として、スキャフォールドは、少なくとも約０．１日間；少なくとも約０．２日間；少なくとも約０．３日間；少なくとも約０．４日間；少なくとも約０．５日間；少なくとも約０．６日間；少なくとも約０．７日間；少なくとも約０．８日間；少なくとも約０．９日間；少なくとも約１日間；少なくとも約２日間；少なくとも約３日間；少なくとも約４日間；少なくとも約５日間；少なくとも約６日間；少なくとも約７日間；少なくとも約８日間；少なくとも約９日間；少なくとも約１０日間；少なくとも約１１日間；少なくとも約１２日間；少なくとも約１３日間；少なくとも約１４日間；少なくとも約１５日間；少なくとも約１６日間；少なくとも約１７日間；少なくとも約１８日間；少なくとも約１９日間；少なくとも約２０日間；少なくとも約２１日間；少なくとも約２２日間；少なくとも約２３日間；少なくとも約２４日間；少なくとも約２５日間；少なくとも約２６日間；少なくとも約２７日間；少なくとも約２８日間；少なくとも約２９日間；少なくとも約３０日間；少なくとも約３１日間；少なくとも約３２日間；少なくとも約３３日間；少なくとも約３４日間；少なくとも約３５日間；少なくとも約３６日間；少なくとも約３７日間；少なくとも約３８日間；少なくとも約３９日間；または少なくとも約４０日間、コーティング溶液中でインキュベートされてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００４３】
別の例として、スキャフォールドは、約０．１日から約４０日の間の期間、コーティング溶液中でインキュベートされてもよい。別の例として、スキャフォールドは、約０．１日間；約０．２日間；約０．３日間；約０．４日間；約０．５日間；約０．６日間；約０．７日間；約０．８日間；約０．９日間；約１日間；約２日間；約３日間；約４日間；約５日間；約６日間；約７日間；約８日間；約９日間；約１０日間；約１１日間；約１２日間；約１３日間；約１４日間；約１５日間；約１６日間；約１７日間；約１８日間；約１９日間；約２０日間；約２１日間；約２２日間；約２３日間；約２４日間；約２５日間；約２６日間；約２７日間；約２８日間；約２９日間；約３０日間；約３１日間；約３２日間；約３３日間；約３４日間；約３５日間；約３６日間；約３７日間；約３８日間；約３９日間；または約４０日間、コーティング溶液中でインキュベートされてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００４４】
（ｉｉ）プライマーコーティングの乾燥または溶媒除去。
本明細書に記載のように、プライマーコーティングは、当技術分野において知られている任意の方法により調製され得る。例えば、スキャフォールドは、スキャフォールドをコーティングするのに十分な期間、スキャフォールドおよびコーティング溶液を導入することによりコーティングされてもよく、コーティングされたスキャフォールドは乾燥される。
プライマーコーティングされたスキャフォールドは、当技術分野において知られている任意の方法により溶液から除去され、乾燥されてもよい。例えば、プライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、空気乾燥、真空乾燥、または等温乾燥により行われてもよい。
【００４５】
本明細書に記載のように、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、少なくとも約１分間から少なくとも約１００時間乾燥させることにより行われてもよい。別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、少なくとも約１０分間から少なくとも約２４時間乾燥させることにより行われてもよい。
【００４６】
別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、少なくとも約１分間から少なくとも少なくとも約１００分間乾燥させることにより行われてもよい。別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、少なくとも約１分間；少なくとも約２分間；少なくとも約３分間；少なくとも約４分間；少なくとも約５分間；少なくとも約６分間；少なくとも約７分間；少なくとも約８分間；少なくとも約９分間；少なくとも約１０分間；少なくとも約１１分間；少なくとも約１２分間；少なくとも約１３分間；少なくとも約１４分間；少なくとも約１５分間；少なくとも約１６分間；少なくとも約１７分間；少なくとも約１８分間；少なくとも約１９分間；少なくとも約２０分間；少なくとも約２１分間；少なくとも約２２分間；少なくとも約２３分間；少なくとも約２４分間；少なくとも約２５分間；少なくとも約２６分間；少なくとも約２７分間；少なくとも約２８分間；少なくとも約２９分間；少なくとも約３０分間；少なくとも約３１分間；少なくとも約３２分間；少なくとも約３３分間；少なくとも約３４分間；少なくとも約３５分間；少なくとも約３６分間；少なくとも約３７分間；少なくとも約３８分間；少なくとも約３９分間；少なくとも約４０分間；少なくとも約４１分間；少なくとも約４２分間；少なくとも約４３分間；少なくとも約４４分間；少なくとも約４５分間；少なくとも約４６分間；少なくとも約４７分間；少なくとも約４８分間；少なくとも約４９分間；少なくとも約５０分間；少なくとも約５１分間；少なくとも約５２分間；少なくとも約５３分間；少なくとも約５４分間；少なくとも約５５分間；少なくとも約５６分間；少なくとも約５７分間；少なくとも約５８分間；少なくとも約５９分間；少なくとも約６０分間；少なくとも約６１分間；少なくとも約６２分間；少なくとも約６３分間；少なくとも約６４分間；少なくとも約６５分間；少なくとも約６６分間；少なくとも約６７分間；少なくとも約６８分間；少なくとも約６９分間；少なくとも約７０分間；少なくとも約７１分間；少なくとも約７２分間；少なくとも約７３分間；少なくとも約７４分間；少なくとも約７５分間；少なくとも約７６分間；少なくとも約７７分間；少なくとも約７８分間；少なくとも約７９分間；少なくとも約８０分間；少なくとも約８１分間；少なくとも約８２分間；少なくとも約８３分間；少なくとも約８４分間；少なくとも約８５分間；少なくとも約８６分間；少なくとも約８７分間；少なくとも約８８分間；少なくとも約８９分間；少なくとも約９０分間；少なくとも約９１分間；少なくとも約９２分間；少なくとも約９３分間；少なくとも約９４分間；少なくとも約９５分間；少なくとも約９６分間；少なくとも約９７分間；少なくとも約９８分間；少なくとも約９９分間；または少なくとも約１００分間乾燥させることにより行われてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００４７】
別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、約１分間から約１００分間乾燥させることにより行われてもよい。別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、約１分間；約２分間；約３分間；約４分間；約５分間；約６分間；約７分間；約８分間；約９分間；約１０分間；約１１分間；約１２分間；約１３分間；約１４分間；約１５分間；約１６分間；約１７分間；約１８分間；約１９分間；約２０分間；約２１分間；約２２分間；約２３分間；約２４分間；約２５分間；約２６分間；約２７分間；約２８分間；約２９分間；約３０分間；約３１分間；約３２分間；約３３分間；約３４分間；約３５分間；約３６分間；約３７分間；約３８分間；約３９分間；約４０分間；約４１分間；約４２分間；約４３分間；約４４分間；約４５分間；約４６分間；約４７分間；約４８分間；約４９分間；約５０分間；約５１分間；約５２分間；約５３分間；約５４分間；約５５分間；約５６分間；約５７分間；約５８分間；約５９分間；約６０分間；約６１分間；約６２分間；約６３分間；約６４分間；約６５分間；約６６分間；約６７分間；約６８分間；約６９分間；約７０分間；約７１分間；約７２分間；約７３分間；約７４分間；約７５分間；約７６分間；約７７分間；約７８分間；約７９分間；約８０分間；約８１分間；約８２分間；約８３分間；約８４分間；約８５分間；約８６分間；約８７分間；約８８分間；約８９分間；約９０分間；約９１分間；約９２分間；約９３分間；約９４分間；約９５分間；約９６分間；約９７分間；約９８分間；約９９分間；または約１００分間乾燥させることにより行われてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００４８】
別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、少なくとも約１時間から少なくとも少なくとも約１００時間乾燥させることにより行われてもよい。別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、少なくとも約１時間；少なくとも約２時間；少なくとも約３時間；少なくとも約４時間；少なくとも約５時間；少なくとも約６時間；少なくとも約７時間；少なくとも約８時間；少なくとも約９時間；少なくとも約１０時間；少なくとも約１１時間；少なくとも約１２時間；少なくとも約１３時間；少なくとも約１４時間；少なくとも約１５時間；少なくとも約１６時間；少なくとも約１７時間；少なくとも約１８時間；少なくとも約１９時間；少なくとも約２０時間；少なくとも約２１時間；少なくとも約２２時間；少なくとも約２３時間；少なくとも約２４時間；少なくとも約２５時間；少なくとも約２６時間；少なくとも約２７時間；少なくとも約２８時間；少なくとも約２９時間；少なくとも約３０時間；少なくとも約３１時間；少なくとも約３２時間；少なくとも約３３時間；少なくとも約３４時間；少なくとも約３５時間；少なくとも約３６時間；少なくとも約３７時間；少なくとも約３８時間；少なくとも約３９時間；少なくとも約４０時間；少なくとも約４１時間；少なくとも約４２時間；少なくとも約４３時間；少なくとも約４４時間；少なくとも約４５時間；少なくとも約４６時間；少なくとも約４７時間；少なくとも約４８時間；少なくとも約４９時間；少なくとも約５０時間；少なくとも約５１時間；少なくとも約５２時間；少なくとも約５３時間；少なくとも約５４時間；少なくとも約５５時間；少なくとも約５６時間；少なくとも約５７時間；少なくとも約５８時間；少なくとも約５９時間；少なくとも約６０時間；少なくとも約６１時間；少なくとも約６２時間；少なくとも約６３時間；少なくとも約６４時間；少なくとも約６５時間；少なくとも約６６時間；少なくとも約６７時間；少なくとも約６８時間；少なくとも約６９時間；少なくとも約７０時間；少なくとも約７１時間；少なくとも約７２時間；少なくとも約７３時間；少なくとも約７４時間；少なくとも約７５時間；少なくとも約７６時間；少なくとも約７７時間；少なくとも約７８時間；少なくとも約７９時間；少なくとも約８０時間；少なくとも約８１時間；少なくとも約８２時間；少なくとも約８３時間；少なくとも約８４時間；少なくとも約８５時間；少なくとも約８６時間；少なくとも約８７時間；少なくとも約８８時間；少なくとも約８９時間；少なくとも約９０時間；少なくとも約９１時間；少なくとも約９２時間；少なくとも約９３時間；少なくとも約９４時間；少なくとも約９５時間；少なくとも約９６時間；少なくとも約９７時間；少なくとも約９８時間；少なくとも約９９時間；または少なくとも約１００時間乾燥させることにより行われてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００４９】
別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、約１時間から約１００時間乾燥させることにより行われてもよい。別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティング溶液およびスキャフォールドからの溶媒の除去は、約１時間；約２時間；約３時間；約４時間；約５時間；約６時間；約７時間；約８時間；約９時間；約１０時間；約１１時間；約１２時間；約１３時間；約１４時間；約１５時間；約１６時間；約１７時間；約１８時間；約１９時間；約２０時間；約２１時間；約２２時間；約２３時間；約２４時間；約２５時間；約２６時間；約２７時間；約２８時間；約２９時間；約３０時間；約３１時間；約３２時間；約３３時間；約３４時間；約３５時間；約３６時間；約３７時間；約３８時間；約３９時間；約４０時間；約４１時間；約４２時間；約４３時間；約４４時間；約４５時間；約４６時間；約４７時間；約４８時間；約４９時間；約５０時間；約５１時間；約５２時間；約５３時間；約５４時間；約５５時間；約５６時間；約５７時間；約５８時間；約５９時間；約６０時間；約６１時間；約６２時間；約６３時間；約６４時間；約６５時間；約６６時間；約６７時間；約６８時間；約６９時間；約７０時間；約７１時間；約７２時間；約７３時間；約７４時間；約７５時間；約７６時間；約７７時間；約７８時間；約７９時間；約８０時間；約８１時間；約８２時間；約８３時間；約８４時間；約８５時間；約８６時間；約８７時間；約８８時間；約８９時間；約９０時間；約９１時間；約９２時間；約９３時間；約９４時間；約９５時間；約９６時間；約９７時間；約９８時間；約９９時間；または約１００時間乾燥させることにより行われてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００５０】
（ｉｉｉ）粉末コーティングによるプライマーコーティングの堆積
本明細書に記載のように、プライマーコーティングは、プライマーコーティング組成物を使用してスキャフォールドに塗布され得る。プライマーコーティング組成物は、ポリマーを含んでもよく、スキャフォールド上にコーティングを形成するために加熱されてもよい。例えば、プライマーコーティング組成物は、粉末であってもよい。
粉末コーティングは、自由流動性の乾燥粉末として塗布されてもよい。粉末コーティングは、静電気的に塗布されてもよい。粉末は、スプレープロセスにより塗布されてもよい。粉末は、粉末が水中に分散され、表面上にコーティングされる粉末スラリープロセスにより塗布されてもよい。粉末は、粉末が水中に分散され、表面上にコーティングされる粉末スラリープロセスにより塗布されてもよい。
【００５１】
粉末は、当技術分野において知られている、または本明細書に記載の任意のポリマーを含んでもよい。例えば、ポリマーは、熱可塑性または熱硬化性ポリマーであってもよい。例えば、熱可塑性または熱硬化性ポリマーは、ポリエステル、ポリウレタン、ポリエステル−エポキシ（例えばハイブリッド）、直鎖エポキシ（例えば融着エポキシ）およびアクリルを含んでもよい。粉末は、硬化剤等の添加剤を含んでもよい。
【００５２】
（ｉｖ）プライマーコーティングの加熱。
プライマーコーティングされたスキャフォールドは、プライマーコーティングを乾燥させる、軟化させる、溶融するまたは硬化させるために加熱されてもよい。例えば、プライマーコーティングは、当技術分野において知られている任意の方法により加熱（例えば、乾燥、軟化、溶融、硬化）されてもよい。別の例として、粉末コーティングは、当技術分野において知られている任意の方法により加熱（例えば、乾燥、軟化、溶融、硬化）され、コーティングを形成してもよい。
【００５３】
本明細書において提供されるように、プライマーコーティング（例えば、粉末コーティング、ディップコーティング）は、コーティングを形成するのに十分な、またはプライマーコーティング（例えば、粉末コーティング、ディップコーティング）を乾燥させる、軟化させる、溶融する、もしくは硬化させるのに十分な温度で加熱されてもよい。例えば、コーティングを形成するのに十分な温度、またはプライマーコーティングを乾燥させる、軟化させる、硬化させる、または溶融するのに十分な温度は、約２５℃から約３００℃の間であってもよい。例えば、コーティングを形成するのに十分な温度、またはプライマーコーティングを乾燥させる、軟化させる、硬化させる、または溶融するのに十分な温度は、約５０℃から約２００℃の間であってもよい。
【００５４】
別の例として、コーティングを形成するのに十分な温度、またはプライマーコーティングを乾燥させる、軟化させる、硬化させる、または溶融するのに十分な温度は、少なくとも約２５℃；少なくとも約２６℃；少なくとも約２７℃；少なくとも約２８℃；少なくとも約２９℃；少なくとも約３０℃；少なくとも約３１℃；少なくとも約３２℃；少なくとも約３３℃；少なくとも約３４℃；少なくとも約３５℃；少なくとも約３６℃；少なくとも約３７℃；少なくとも約３８℃；少なくとも約３９℃；少なくとも約４０℃；少なくとも約４１℃；少なくとも約４２℃；少なくとも約４３℃；少なくとも約４４℃；少なくとも約４５℃；少なくとも約４６℃；少なくとも約４７℃；少なくとも約４８℃；少なくとも約４９℃；少なくとも約５０℃；少なくとも約５１℃；少なくとも約５２℃；少なくとも約５３℃；少なくとも約５４℃；少なくとも約５５℃；少なくとも約５６℃；少なくとも約５７℃；少なくとも約５８℃；少なくとも約５９℃；少なくとも約６０℃；少なくとも約６１℃；少なくとも約６２℃；少なくとも約６３℃；少なくとも約６４℃；少なくとも約６５℃；少なくとも約６６℃；少なくとも約６７℃；少なくとも約６８℃；少なくとも約６９℃；少なくとも約７０℃；少なくとも約７１℃；少なくとも約７２℃；少なくとも約７３℃；少なくとも約７４℃；少なくとも約７５℃；少なくとも約７６℃；少なくとも約７７℃；少なくとも約７８℃；少なくとも約７９℃；少なくとも約８０℃；少なくとも約８１℃；少なくとも約８２℃；少なくとも約８３℃；少なくとも約８４℃；少なくとも約８５℃；少なくとも約８６℃；少なくとも約８７℃；少なくとも約８８℃；少なくとも約８９℃；少なくとも約９０℃；少なくとも約９１℃；少なくとも約９２℃；少なくとも約９３℃；少なくとも約９４℃；少なくとも約９５℃；少なくとも約９６℃；少なくとも約９７℃；少なくとも約９８℃；少なくとも約９９℃；少なくとも約１００℃；少なくとも約１０１℃；少なくとも約１０２℃；少なくとも約１０３℃；少なくとも約１０４℃；少なくとも約１０５℃；少なくとも約１０６℃；少なくとも約１０７℃；少なくとも約１０８℃；少なくとも約１０９℃；少なくとも約１１０℃；少なくとも約１１１℃；少なくとも約１１２℃；少なくとも約１１３℃；少なくとも約１１４℃；少なくとも約１１５℃；少なくとも約１１６℃；少なくとも約１１７℃；少なくとも約１１８℃；少なくとも約１１９℃；少なくとも約１２０℃；少なくとも約１２１℃；少なくとも約１２２℃；少なくとも約１２３℃；少なくとも約１２４℃；少なくとも約１２５℃；少なくとも約１２６℃；少なくとも約１２７℃；少なくとも約１２８℃；少なくとも約１２９℃；少なくとも約１３０℃；少なくとも約１３１℃；少なくとも約１３２℃；少なくとも約１３３℃；少なくとも約１３４℃；少なくとも約１３５℃；少なくとも約１３６℃；少なくとも約１３７℃；少なくとも約１３８℃；少なくとも約１３９℃；少なくとも約１４０℃；少なくとも約１４１℃；少なくとも約１４２℃；少なくとも約１４３℃；少なくとも約１４４℃；少なくとも約１４５℃；少なくとも約１４６℃；少なくとも約１４７℃；少なくとも約１４８℃；少なくとも約１４９℃；少なくとも約１５０℃；少なくとも約１５１℃；少なくとも約１５２℃；少なくとも約１５３℃；少なくとも約１５４℃；少なくとも約１５５℃；少なくとも約１５６℃；少なくとも約１５７℃；少なくとも約１５８℃；少なくとも約１５９℃；少なくとも約１６０℃；少なくとも約１６１℃；少なくとも約１６２℃；少なくとも約１６３℃；少なくとも約１６４℃；少なくとも約１６５℃；少なくとも約１６６℃；少なくとも約１６７℃；少なくとも約１６８℃；少なくとも約１６９℃；少なくとも約１７０℃；少なくとも約１７１℃；少なくとも約１７２℃；少なくとも約１７３℃；少なくとも約１７４℃；少なくとも約１７５℃；少なくとも約１７６℃；少なくとも約１７７℃；少なくとも約１７８℃；少なくとも約１７９℃；少なくとも約１８０℃；少なくとも約１８１℃；少なくとも約１８２℃；少なくとも約１８３℃；少なくとも約１８４℃；少なくとも約１８５℃；少なくとも約１８６℃；少なくとも約１８７℃；少なくとも約１８８℃；少なくとも約１８９℃；少なくとも約１９０℃；少なくとも約１９１℃；少なくとも約１９２℃；少なくとも約１９３℃；少なくとも約１９４℃；少なくとも約１９５℃；少なくとも約１９６℃；少なくとも約１９７℃；少なくとも約１９８℃；少なくとも約１９９℃；少なくとも約２００℃；少なくとも約２０１℃；少なくとも約２０２℃；少なくとも約２０３℃；少なくとも約２０４℃；少なくとも約２０５℃；少なくとも約２０６℃；少なくとも約２０７℃；少なくとも約２０８℃；少なくとも約２０９℃；少なくとも約２１０℃；少なくとも約２１１℃；少なくとも約２１２℃；少なくとも約２１３℃；少なくとも約２１４℃；少なくとも約２１５℃；少なくとも約２１６℃；少なくとも約２１７℃；少なくとも約２１８℃；少なくとも約２１９℃；少なくとも約２２０℃；少なくとも約２２１℃；少なくとも約２２２℃；少なくとも約２２３℃；少なくとも約２２４℃；少なくとも約２２５℃；少なくとも約２２６℃；少なくとも約２２７℃；少なくとも約２２８℃；少なくとも約２２９℃；少なくとも約２３０℃；少なくとも約２３１℃；少なくとも約２３２℃；少なくとも約２３３℃；少なくとも約２３４℃；少なくとも約２３５℃；少なくとも約２３６℃；少なくとも約２３７℃；少なくとも約２３８℃；少なくとも約２３９℃；少なくとも約２４０℃；少なくとも約２４１℃；少なくとも約２４２℃；少なくとも約２４３℃；少なくとも約２４４℃；少なくとも約２４５℃；少なくとも約２４６℃；少なくとも約２４７℃；少なくとも約２４８℃；少なくとも約２４９℃；少なくとも約２５０℃；少なくとも約２５１℃；少なくとも約２５２℃；少なくとも約２５３℃；少なくとも約２５４℃；少なくとも約２５５℃；少なくとも約２５６℃；少なくとも約２５７℃；少なくとも約２５８℃；少なくとも約２５９℃；少なくとも約２６０℃；少なくとも約２６１℃；少なくとも約２６２℃；少なくとも約２６３℃；少なくとも約２６４℃；少なくとも約２６５℃；少なくとも約２６６℃；少なくとも約２６７℃；少なくとも約２６８℃；少なくとも約２６９℃；少なくとも約２７０℃；少なくとも約２７１℃；少なくとも約２７２℃；少なくとも約２７３℃；少なくとも約２７４℃；少なくとも約２７５℃；少なくとも約２７６℃；少なくとも約２７７℃；少なくとも約２７８℃；少なくとも約２７９℃；少なくとも約２８０℃；少なくとも約２８１℃；少なくとも約２８２℃；少なくとも約２８３℃；少なくとも約２８４℃；少なくとも約２８５℃；少なくとも約２８６℃；少なくとも約２８７℃；少なくとも約２８８℃；少なくとも約２８９℃；少なくとも約２９０℃；少なくとも約２９１℃；少なくとも約２９２℃；少なくとも約２９３℃；少なくとも約２９４℃；少なくとも約２９５℃；少なくとも約２９６℃；少なくとも約２９７℃；少なくとも約２９８℃；少なくとも約２９９℃；または少なくとも約３００℃であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００５５】
別の例として、コーティングを形成するのに十分な温度、またはプライマーコーティングを乾燥させる、軟化させる、硬化させる、または溶融するのに十分な温度は、約２５℃；約２６℃；約２７℃；約２８℃；約２９℃；約３０℃；約３１℃；約３２℃；約３３℃；約３４℃；約３５℃；約３６℃；約３７℃；約３８℃；約３９℃；約４０℃；約４１℃；約４２℃；約４３℃；約４４℃；約４５℃；約４６℃；約４７℃；約４８℃；約４９℃；約５０℃；約５１℃；約５２℃；約５３℃；約５４℃；約５５℃；約５６℃；約５７℃；約５８℃；約５９℃；約６０℃；約６１℃；約６２℃；約６３℃；約６４℃；約６５℃；約６６℃；約６７℃；約６８℃；約６９℃；約７０℃；約７１℃；約７２℃；約７３℃；約７４℃；約７５℃；約７６℃；約７７℃；約７８℃；約７９℃；約８０℃；約８１℃；約８２℃；約８３℃；約８４℃；約８５℃；約８６℃；約８７℃；約８８℃；約８９℃；約９０℃；約９１℃；約９２℃；約９３℃；約９４℃；約９５℃；約９６℃；約９７℃；約９８℃；約９９℃；約１００℃；約１０１℃；約１０２℃；約１０３℃；約１０４℃；約１０５℃；約１０６℃；約１０７℃；約１０８℃；約１０９℃；約１１０℃；約１１１℃；約１１２℃；約１１３℃；約１１４℃；約１１５℃；約１１６℃；約１１７℃；約１１８℃；約１１９℃；約１２０℃；約１２１℃；約１２２℃；約１２３℃；約１２４℃；約１２５℃；約１２６℃；約１２７℃；約１２８℃；約１２９℃；約１３０℃；約１３１℃；約１３２℃；約１３３℃；約１３４℃；約１３５℃；約１３６℃；約１３７℃；約１３８℃；約１３９℃；約１４０℃；約１４１℃；約１４２℃；約１４３℃；約１４４℃；約１４５℃；約１４６℃；約１４７℃；約１４８℃；約１４９℃；約１５０℃；約１５１℃；約１５２℃；約１５３℃；約１５４℃；約１５５℃；約１５６℃；約１５７℃；約１５８℃；約１５９℃；約１６０℃；約１６１℃；約１６２℃；約１６３℃；約１６４℃；約１６５℃；約１６６℃；約１６７℃；約１６８℃；約１６９℃；約１７０℃；約１７１℃；約１７２℃；約１７３℃；約１７４℃；約１７５℃；約１７６℃；約１７７℃；約１７８℃；約１７９℃；約１８０℃；約１８１℃；約１８２℃；約１８３℃；約１８４℃；約１８５℃；約１８６℃；約１８７℃；約１８８℃；約１８９℃；約１９０℃；約１９１℃；約１９２℃；約１９３℃；約１９４℃；約１９５℃；約１９６℃；約１９７℃；約１９８℃；約１９９℃；約２００℃；約２０１℃；約２０２℃；約２０３℃；約２０４℃；約２０５℃；約２０６℃；約２０７℃；約２０８℃；約２０９℃；約２１０℃；約２１１℃；約２１２℃；約２１３℃；約２１４℃；約２１５℃；約２１６℃；約２１７℃；約２１８℃；約２１９℃；約２２０℃；約２２１℃；約２２２℃；約２２３℃；約２２４℃；約２２５℃；約２２６℃；約２２７℃；約２２８℃；約２２９℃；約２３０℃；約２３１℃；約２３２℃；約２３３℃；約２３４℃；約２３５℃；約２３６℃；約２３７℃；約２３８℃；約２３９℃；約２４０℃；約２４１℃；約２４２℃；約２４３℃；約２４４℃；約２４５℃；約２４６℃；約２４７℃；約２４８℃；約２４９℃；約２５０℃；約２５１℃；約２５２℃；約２５３℃；約２５４℃；約２５５℃；約２５６℃；約２５７℃；約２５８℃；約２５９℃；約２６０℃；約２６１℃；約２６２℃；約２６３℃；約２６４℃；約２６５℃；約２６６℃；約２６７℃；約２６８℃；約２６９℃；約２７０℃；約２７１℃；約２７２℃；約２７３℃；約２７４℃；約２７５℃；約２７６℃；約２７７℃；約２７８℃；約２７９℃；約２８０℃；約２８１℃；約２８２℃；約２８３℃；約２８４℃；約２８５℃；約２８６℃；約２８７℃；約２８８℃；約２８９℃；約２９０℃；約２９１℃；約２９２℃；約２９３℃；約２９４℃；約２９５℃；約２９６℃；約２９７℃；約２９８℃；約２９９℃；または約３００℃であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００５６】
本明細書において提供されるように、プライマーコーティング（例えば、粉末コーティング、ディップコーティング）は、コーティングを形成するのに十分な、またはプライマーコーティング（例えば、粉末コーティング、ディップコーティング）を乾燥させる、軟化させる、硬化させる、もしくは溶融するのに十分な期間加熱されてもよい。例えば、プライマーコーティングは、少なくとも約１分から少なくとも約１００時間の間の期間加熱されてもよい。別の例として、プライマーコーティングの加熱は、約１分から少なくとも少なくとも約６時間の間の期間加熱されてもよい。
【００５７】
別の例として、プライマーコーティングの加熱は、少なくとも約１分；少なくとも約２分；少なくとも約３分；少なくとも約４分；少なくとも約５分；少なくとも約６分；少なくとも約７分；少なくとも約８分；少なくとも約９分；少なくとも約１０分；少なくとも約１１分；少なくとも約１２分；少なくとも約１３分；少なくとも約１４分；少なくとも約１５分；少なくとも約１６分；少なくとも約１７分；少なくとも約１８分；少なくとも約１９分；少なくとも約２０分；少なくとも約２１分；少なくとも約２２分；少なくとも約２３分；少なくとも約２４分；少なくとも約２５分；少なくとも約２６分；少なくとも約２７分；少なくとも約２８分；少なくとも約２９分；少なくとも約３０分；少なくとも約３１分；少なくとも約３２分；少なくとも約３３分；少なくとも約３４分；少なくとも約３５分；少なくとも約３６分；少なくとも約３７分；少なくとも約３８分；少なくとも約３９分；少なくとも約４０分；少なくとも約４１分；少なくとも約４２分；少なくとも約４３分；少なくとも約４４分；少なくとも約４５分；少なくとも約４６分；少なくとも約４７分；少なくとも約４８分；少なくとも約４９分；少なくとも約５０分；少なくとも約５１分；少なくとも約５２分；少なくとも約５３分；少なくとも約５４分；少なくとも約５５分；少なくとも約５６分；少なくとも約５７分；少なくとも約５８分；少なくとも約５９分；少なくとも約６０分；少なくとも約６１分；少なくとも約６２分；少なくとも約６３分；少なくとも約６４分；少なくとも約６５分；少なくとも約６６分；少なくとも約６７分；少なくとも約６８分；少なくとも約６９分；少なくとも約７０分；少なくとも約７１分；少なくとも約７２分；少なくとも約７３分；少なくとも約７４分；少なくとも約７５分；少なくとも約７６分；少なくとも約７７分；少なくとも約７８分；少なくとも約７９分；少なくとも約８０分；少なくとも約８１分；少なくとも約８２分；少なくとも約８３分；少なくとも約８４分；少なくとも約８５分；少なくとも約８６分；少なくとも約８７分；少なくとも約８８分；少なくとも約８９分；少なくとも約９０分；少なくとも約９１分；少なくとも約９２分；少なくとも約９３分；少なくとも約９４分；少なくとも約９５分；少なくとも約９６分；少なくとも約９７分；少なくとも約９８分；少なくとも約９９分；または少なくとも約１００分であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００５８】
別の例として、プライマーコーティングの加熱は、約１分；約２分；約３分；約４分；約５分；約６分；約７分；約８分；約９分；約１０分；約１１分；約１２分；約１３分；約１４分；約１５分；約１６分；約１７分；約１８分；約１９分；約２０分；約２１分；約２２分；約２３分；約２４分；約２５分；約２６分；約２７分；約２８分；約２９分；約３０分；約３１分；約３２分；約３３分；約３４分；約３５分；約３６分；約３７分；約３８分；約３９分；約４０分；約４１分；約４２分；約４３分；約４４分；約４５分；約４６分；約４７分；約４８分；約４９分；約５０分；約５１分；約５２分；約５３分；約５４分；約５５分；約５６分；約５７分；約５８分；約５９分；約６０分；約６１分；約６２分；約６３分；約６４分；約６５分；約６６分；約６７分；約６８分；約６９分；約７０分；約７１分；約７２分；約７３分；約７４分；約７５分；約７６分；約７７分；約７８分；約７９分；約８０分；約８１分；約８２分；約８３分；約８４分；約８５分；約８６分；約８７分；約８８分；約８９分；約９０分；約９１分；約９２分；約９３分；約９４分；約９５分；約９６分；約９７分；約９８分；約９９分；または約１００分であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００５９】
別の例として、プライマーコーティングの加熱は、少なくとも約１時間；少なくとも約２時間；少なくとも約３時間；少なくとも約４時間；少なくとも約５時間；少なくとも約６時間；少なくとも約７時間；少なくとも約８時間；少なくとも約９時間；少なくとも約１０時間；少なくとも約１１時間；少なくとも約１２時間；少なくとも約１３時間；少なくとも約１４時間；少なくとも約１５時間；少なくとも約１６時間；少なくとも約１７時間；少なくとも約１８時間；少なくとも約１９時間；少なくとも約２０時間；少なくとも約２１時間；少なくとも約２２時間；少なくとも約２３時間；少なくとも約２４時間；少なくとも約２５時間；少なくとも約２６時間；少なくとも約２７時間；少なくとも約２８時間；少なくとも約２９時間；少なくとも約３０時間；少なくとも約３１時間；少なくとも約３２時間；少なくとも約３３時間；少なくとも約３４時間；少なくとも約３５時間；少なくとも約３６時間；少なくとも約３７時間；少なくとも約３８時間；少なくとも約３９時間；少なくとも約４０時間；少なくとも約４１時間；少なくとも約４２時間；少なくとも約４３時間；少なくとも約４４時間；少なくとも約４５時間；少なくとも約４６時間；少なくとも約４７時間；少なくとも約４８時間；少なくとも約４９時間；少なくとも約５０時間；少なくとも約５１時間；少なくとも約５２時間；少なくとも約５３時間；少なくとも約５４時間；少なくとも約５５時間；少なくとも約５６時間；少なくとも約５７時間；少なくとも約５８時間；少なくとも約５９時間；少なくとも約６０時間；少なくとも約６１時間；少なくとも約６２時間；少なくとも約６３時間；少なくとも約６４時間；少なくとも約６５時間；少なくとも約６６時間；少なくとも約６７時間；少なくとも約６８時間；少なくとも約６９時間；少なくとも約７０時間；少なくとも約７１時間；少なくとも約７２時間；少なくとも約７３時間；少なくとも約７４時間；少なくとも約７５時間；少なくとも約７６時間；少なくとも約７７時間；少なくとも約７８時間；少なくとも約７９時間；少なくとも約８０時間；少なくとも約８１時間；少なくとも約８２時間；少なくとも約８３時間；少なくとも約８４時間；少なくとも約８５時間；少なくとも約８６時間；少なくとも約８７時間；少なくとも約８８時間；少なくとも約８９時間；少なくとも約９０時間；少なくとも約９１時間；少なくとも約９２時間；少なくとも約９３時間；少なくとも約９４時間；少なくとも約９５時間；少なくとも約９６時間；少なくとも約９７時間；少なくとも約９８時間；少なくとも約９９時間；または少なくとも約１００時間であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００６０】
別の例として、プライマーコーティングの加熱は、約１時間；約２時間；約３時間；約４時間；約５時間；約６時間；約７時間；約８時間；約９時間；約１０時間；約１１時間；約１２時間；約１３時間；約１４時間；約１５時間；約１６時間；約１７時間；約１８時間；約１９時間；約２０時間；約２１時間；約２２時間；約２３時間；約２４時間；約２５時間；約２６時間；約２７時間；約２８時間；約２９時間；約３０時間；約３１時間；約３２時間；約３３時間；約３４時間；約３５時間；約３６時間；約３７時間；約３８時間；約３９時間；約４０時間；約４１時間；約４２時間；約４３時間；約４４時間；約４５時間；約４６時間；約４７時間；約４８時間；約４９時間；約５０時間；約５１時間；約５２時間；約５３時間；約５４時間；約５５時間；約５６時間；約５７時間；約５８時間；約５９時間；約６０時間；約６１時間；約６２時間；約６３時間；約６４時間；約６５時間；約６６時間；約６７時間；約６８時間；約６９時間；約７０時間；約７１時間；約７２時間；約７３時間；約７４時間；約７５時間；約７６時間；約７７時間；約７８時間；約７９時間；約８０時間；約８１時間；約８２時間；約８３時間；約８４時間；約８５時間；約８６時間；約８７時間；約８８時間；約８９時間；約９０時間；約９１時間；約９２時間；約９３時間；約９４時間；約９５時間；約９６時間；約９７時間；約９８時間；約９９時間；または約１００時間であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００６１】
プライマーコーティングの特徴。
本明細書に記載のように、プライマーコーティング（例えばポリマー薄膜）の厚さまたは表面形態は、ポリマーの種類、プライマーコーティング堆積技術、２種以上のポリマーの比、質量％、コーティング時間、溶媒の種類、または乾燥技術を変更することにより調整され得る。
【００６２】
（ｉ）ポリマー。
例は、ポリマーを含むプライマーコーティング組成物を使用してプライマーコーティングされたスキャフォールドを生成するための例示的方法を説明する。例えば、プライマーコーティング中のポリマーは、任意の従来のポリマーを含んでもよい（例えば、Nair et al. Prog. Poly. Sci 2007 32(8-9) 762-798；Miller Chou et al. Prog. Poly. Sci 2003 28 1223-1270を参照されたい）。例えば、ポリマー含有プライマーコーティングは、アクリル樹脂、アルギネート、カプロラクトン、コラーゲン、キトサン、ヒアルロン酸、ヒドロゲル、ヒドロキシ酪酸、ポリ無水物、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリ（ジメチルグリコール酸）、ポリジオキサノン（ＰＤＯ）、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（グリコリド）（ＰＧＡ）、ポリ（グリコール酸）、ポリヒドロキシブチレート、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、ポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、ポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）、ポリ（メチルエチルグリコール酸）、ポリメチルメタクリレート、ポリホスファゼン、ポリリン酸エステル、ポリプロピレン、ポリ（プロピレンフマレート）、ポリウレタン（ＰＵ）、シリコーンゴム、またはそれらの組合せもしくはコポリマーの１つまたは複数の１つまたは複数を含んでもよい。
【００６３】
別の例として、ポリマー含有プライマーコーティング組成物中のポリマーは、生体吸収性ポリエステルまたはそのコポリマーの１つまたは複数を含んでもよい。生分解性ポリエステルまたはそのコポリマーは、例えば、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、またはポリ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＣＧ）の１つまたは複数であってもよい。
【００６４】
（ｉｉ）吸収性薄膜。
本明細書に記載のように、ポリマー含有プライマーコーティングは、吸収性または生体吸収性であってもよい。例えば、ポリマー含有プライマーコーティングは、吸収性または生体吸収性薄膜であってもよい。
本明細書に記載のように、材料を吸収性薄膜で下塗りすることにより、特定の課題に対応するように、または所望の特性を生成するように、吸収性生体材料の種類を変更することができる。例えば、ポリマー含有プライマーコーティングは、ポリマー薄膜であってもよい。別の例として、ポリマー含有プライマーコーティングは、吸収性薄膜（例えば生体吸収性薄膜）であってもよい。
【００６５】
本明細書に記載のように、吸収性または分解性プライマーコーティングまたは薄膜は、所望通りにより速く、またはより遅く分解するように調整され得る。例えば、吸収性または分解性プライマーコーティングまたは薄膜は、当技術分野において知られている任意の生体吸収性ポリマーを含んでもよい（例えば、Nair et al. Prog. Poly. Sci 2007 32(8-9) 762-798を参照されたい）。別の例として、吸収性または分解性プライマーコーティングまたは薄膜は、生体吸収性ポリマー（例えばポリエステル）またはそのコポリマーを含んでもよい。例えば、生体吸収性ポリマーまたはそのコポリマーは、ポリエステル（例えばＰＣＬ）、コポリマーＰＬＣＧ、ポリ（ラクチド）のコポリマー、ポリ（グリコリド）、ポリ（ジオキサノン）、アルギネート、コラーゲン、ポリ（エチレングリコール）、またはヒアルロン酸を含んでもよい。
【００６６】
（ｉｉｉ）プライマーコーティングの被覆率。
本明細書において提供されるのは、プライマーコーティングされたスキャフォールドの提供である。プライマーコーティングは、連続または不連続であってもよい。例えば、連続または不連続プライマーコーティングは、スキャフォールド全体、スキャフォールドの一部を被覆してもよく、スキャフォールドのある％を被覆してもよく、またはそれらの組合せであってもよい。例えば、本明細書に記載のようなプライマーコーティングは、少なくとも約１％被覆率；少なくとも約２％被覆率；少なくとも約３％被覆率；少なくとも約４％被覆率；少なくとも約５％被覆率；少なくとも約６％被覆率；少なくとも約７％被覆率；少なくとも約８％被覆率；少なくとも約９％被覆率；少なくとも約１０％被覆率；少なくとも約１１％被覆率；少なくとも約１２％被覆率；少なくとも約１３％被覆率；少なくとも約１４％被覆率；少なくとも約１５％被覆率；少なくとも約１６％被覆率；少なくとも約１７％被覆率；少なくとも約１８％被覆率；少なくとも約１９％被覆率；少なくとも約２０％被覆率；少なくとも約２１％被覆率；少なくとも約２２％被覆率；少なくとも約２３％被覆率；少なくとも約２４％被覆率；少なくとも約２５％被覆率；少なくとも約２６％被覆率；少なくとも約２７％被覆率；少なくとも約２８％被覆率；少なくとも約２９％被覆率；少なくとも約３０％被覆率；少なくとも約３１％被覆率；少なくとも約３２％被覆率；少なくとも約３３％被覆率；少なくとも約３４％被覆率；少なくとも約３５％被覆率；少なくとも約３６％被覆率；少なくとも約３７％被覆率；少なくとも約３８％被覆率；少なくとも約３９％被覆率；少なくとも約４０％被覆率；少なくとも約４１％被覆率；少なくとも約４２％被覆率；少なくとも約４３％被覆率；少なくとも約４４％被覆率；少なくとも約４５％被覆率；少なくとも約４６％被覆率；少なくとも約４７％被覆率；少なくとも約４８％被覆率；少なくとも約４９％被覆率；少なくとも約５０％被覆率；少なくとも約５１％被覆率；少なくとも約５２％被覆率；少なくとも約５３％被覆率；少なくとも約５４％被覆率；少なくとも約５５％被覆率；少なくとも約５６％被覆率；少なくとも約５７％被覆率；少なくとも約５８％被覆率；少なくとも約５９％被覆率；少なくとも約６０％被覆率；少なくとも約６１％被覆率；少なくとも約６２％被覆率；少なくとも約６３％被覆率；少なくとも約６４％被覆率；少なくとも約６５％被覆率；少なくとも約６６％被覆率；少なくとも約６７％被覆率；少なくとも約６８％被覆率；少なくとも約６９％被覆率；少なくとも約７０％被覆率；少なくとも約７１％被覆率；少なくとも約７２％被覆率；少なくとも約７３％被覆率；少なくとも約７４％被覆率；少なくとも約７５％被覆率；少なくとも約７６％被覆率；少なくとも約７７％被覆率；少なくとも約７８％被覆率；少なくとも約７９％被覆率；少なくとも約８０％被覆率；少なくとも約８１％被覆率；少なくとも約８２％被覆率；少なくとも約８３％被覆率；少なくとも約８４％被覆率；少なくとも約８５％被覆率；少なくとも約８６％被覆率；少なくとも約８７％被覆率；少なくとも約８８％被覆率；少なくとも約８９％被覆率；少なくとも約９０％被覆率；少なくとも約９１％被覆率；少なくとも約９２％被覆率；少なくとも約９３％被覆率；少なくとも約９４％被覆率；少なくとも約９５％被覆率；少なくとも約９６％被覆率；少なくとも約９７％被覆率；少なくとも約９８％被覆率；少なくとも約９９％被覆率；または少なくとも約１００％被覆率のスキャフォールド被覆率を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００６７】
別の例として、本明細書に記載のようなプライマーコーティングは、約１％被覆率；約２％被覆率；約３％被覆率；約４％被覆率；約５％被覆率；約６％被覆率；約７％被覆率；約８％被覆率；約９％被覆率；約１０％被覆率；約１１％被覆率；約１２％被覆率；約１３％被覆率；約１４％被覆率；約１５％被覆率；約１６％被覆率；約１７％被覆率；約１８％被覆率；約１９％被覆率；約２０％被覆率；約２１％被覆率；約２２％被覆率；約２３％被覆率；約２４％被覆率；約２５％被覆率；約２６％被覆率；約２７％被覆率；約２８％被覆率；約２９％被覆率；約３０％被覆率；約３１％被覆率；約３２％被覆率；約３３％被覆率；約３４％被覆率；約３５％被覆率；約３６％被覆率；約３７％被覆率；約３８％被覆率；約３９％被覆率；約４０％被覆率；約４１％被覆率；約４２％被覆率；約４３％被覆率；約４４％被覆率；約４５％被覆率；約４６％被覆率；約４７％被覆率；約４８％被覆率；約４９％被覆率；約５０％被覆率；約５１％被覆率；約５２％被覆率；約５３％被覆率；約５４％被覆率；約５５％被覆率；約５６％被覆率；約５７％被覆率；約５８％被覆率；約５９％被覆率；約６０％被覆率；約６１％被覆率；約６２％被覆率；約６３％被覆率；約６４％被覆率；約６５％被覆率；約６６％被覆率；約６７％被覆率；約６８％被覆率；約６９％被覆率；約７０％被覆率；約７１％被覆率；約７２％被覆率；約７３％被覆率；約７４％被覆率；約７５％被覆率；約７６％被覆率；約７７％被覆率；約７８％被覆率；約７９％被覆率；約８０％被覆率；約８１％被覆率；約８２％被覆率；約８３％被覆率；約８４％被覆率；約８５％被覆率；約８６％被覆率；約８７％被覆率；約８８％被覆率；約８９％被覆率；約９０％被覆率；約９１％被覆率；約９２％被覆率；約９３％被覆率；約９４％被覆率；約９５％被覆率；約９６％被覆率；約９７％被覆率；約９８％被覆率；約９９％被覆率；または約１００％被覆率のスキャフォールド被覆率を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００６８】
（ｉｖ）プライマーコーティング厚。
本明細書に記載のように、プライマーコーティングの厚さは、ミネラルコーティングの形成を開始させるのに十分な厚さであってもよい。例えば、ミネラルコーティングの形成に十分な条件は、約０．１μｍから５００μｍの間のプライマーコーティング厚を含んでもよい。別の例として、ミネラルコーティング形成に十分な条件は、約１〜５０μｍの間のプライマーコーティング厚を含んでもよい。別の例として、ミネラルコーティングの形成に十分なプライマーコーティング厚は、約０．１μｍ；約０．２μｍ；約０．３μｍ；約０．４μｍ；約０．５μｍ；約０．６μｍ；約０．７μｍ；約０．８μｍ；約０．９μｍ；約１μｍ；約２μｍ；約３μｍ；約４μｍ；約５μｍ；約６μｍ；約７μｍ；約８μｍ；約９μｍ；約１０μｍ；約１１μｍ；約１２μｍ；約１３μｍ；約１４μｍ；約１５μｍ；約１６μｍ；約１７μｍ；約１８μｍ；約１９μｍ；約２０μｍ；約２１μｍ；約２２μｍ；約２３μｍ；約２４μｍ；約２５μｍ；約２６μｍ；約２７μｍ；約２８μｍ；約２９μｍ；約３０μｍ；約３１μｍ；約３２μｍ；約３３μｍ；約３４μｍ；約３５μｍ；約３６μｍ；約３７μｍ；約３８μｍ；約３９μｍ；約４０μｍ；約４１μｍ；約４２μｍ；約４３μｍ；約４４μｍ；約４５μｍ；約４６μｍ；約４７μｍ；約４８μｍ；約４９μｍ；約５０μｍ；約６０μｍ；約７０μｍ；約８０μｍ；約９０μｍ；約１００μｍ；約１１０μｍ；約１２０μｍ；約１３０μｍ；約１４０μｍ；約１５０μｍ；約１６０μｍ；約１７０μｍ；約１８０μｍ；約１９０μｍ；約２００μｍ；約２１０μｍ；約２２０μｍ；約２３０μｍ；約２４０μｍ；約２５０μｍ；約２６０μｍ；約２７０μｍ；約２８０μｍ；約２９０μｍ；約３００μｍ；約３１０μｍ；約３２０μｍ；約３３０μｍ；約３４０μｍ；約３５０μｍ；約３６０μｍ；約３７０μｍ；約３８０μｍ；約３９０μｍ；約４００μｍ；約４１０μｍ；約４２０μｍ；約４３０μｍ；約４４０μｍ；約４５０μｍ；約４６０μｍ；約４７０μｍ；約４８０μｍ；約４９０μｍ；または約５００μｍであってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００６９】
（ｖ）コーティング後のマクロチャネルサイズ。
本明細書に記載のように、プライマーコーティングは、マクロチャネルを備えるスキャフォールド上に形成されてもよい。例えば、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、少なくとも約２０μｍから１０００μｍの間のマクロチャネルを有してもよい。別の例として、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、少なくとも約１００μｍのマクロチャネルを有してもよい。
【００７０】
別の例として、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、少なくとも約２０μｍ；少なくとも約３０μｍ；少なくとも約４０μｍ；少なくとも約５０μｍ；少なくとも約６０μｍ；少なくとも約７０μｍ；少なくとも約８０μｍ；少なくとも約９０μｍ；少なくとも約１００μｍ；少なくとも約１１０μｍ；少なくとも約１２０μｍ；少なくとも約１３０μｍ；少なくとも約１４０μｍ；少なくとも約１５０；少なくとも約１６０μｍ；少なくとも約１７０μｍ；少なくとも約１８０μｍ；少なくとも約１９０μｍ；少なくとも約２００μｍ；少なくとも約２１０μｍ；少なくとも約２２０μｍ；少なくとも約２３０μｍ；少なくとも約２４０μｍ；少なくとも約２５０；少なくとも約２６０μｍ；少なくとも約２７０μｍ；少なくとも約２８０μｍ；少なくとも約２９０μｍ；少なくとも約３００μｍ；少なくとも約３１０μｍ；少なくとも約３２０μｍ；少なくとも約３３０μｍ；少なくとも約３４０μｍ；少なくとも約３５０；少なくとも約３６０μｍ；少なくとも約３７０μｍ；少なくとも約３８０μｍ；少なくとも約３９０μｍ；少なくとも約４００μｍ；少なくとも約４１０μｍ；少なくとも約４２０μｍ；少なくとも約４３０μｍ；少なくとも約４４０μｍ；少なくとも約４５０；少なくとも約４６０μｍ；少なくとも約４７０μｍ；少なくとも約４８０μｍ；少なくとも約４９０μｍ；少なくとも約５００μｍ；少なくとも約５１０μｍ；少なくとも約５２０μｍ；少なくとも約５３０μｍ；少なくとも約５４０μｍ；少なくとも約５５０；少なくとも約５６０μｍ；少なくとも約５７０μｍ；少なくとも約５８０μｍ；少なくとも約５９０μｍ；少なくとも約６００μｍ；少なくとも約６１０μｍ；少なくとも約６２０μｍ；少なくとも約６３０μｍ；少なくとも約６４０μｍ；少なくとも約６５０；少なくとも約６６０μｍ；少なくとも約６７０μｍ；少なくとも約６８０μｍ；少なくとも約６９０μｍ；少なくとも約７００μｍ；少なくとも約７１０μｍ；少なくとも約７２０μｍ；少なくとも約７３０μｍ；少なくとも約７４０μｍ；少なくとも約７５０；少なくとも約７６０μｍ；少なくとも約７７０μｍ；少なくとも約７８０μｍ；少なくとも約７９０μｍ；少なくとも約８００μｍ；少なくとも約８１０μｍ；少なくとも約８２０μｍ；少なくとも約８３０μｍ；少なくとも約８４０μｍ；少なくとも約８５０；少なくとも約８６０μｍ；少なくとも約８７０μｍ；少なくとも約８８０μｍ；少なくとも約８９０μｍ；少なくとも約９００μｍ；少なくとも約９１０μｍ；少なくとも約９２０μｍ；少なくとも約９３０μｍ；少なくとも約９４０μｍ；少なくとも約９５０；少なくとも約９６０μｍ；少なくとも約９７０μｍ；少なくとも約９８０μｍ；少なくとも約９９０μｍ；または少なくとも約１０００μｍのマクロチャネルを有してもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００７１】
別の例として、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、約２０μｍ；約３０μｍ；約４０μｍ；約５０μｍ；約６０μｍ；約７０μｍ；約８０μｍ；約９０μｍ；約１００μｍ；約１１０μｍ；約１２０μｍ；約１３０μｍ；約１４０μｍ；約１５０；約１６０μｍ；約１７０μｍ；約１８０μｍ；約１９０μｍ；約２００μｍ；約２１０μｍ；約２２０μｍ；約２３０μｍ；約２４０μｍ；約２５０；約２６０μｍ；約２７０μｍ；約２８０μｍ；約２９０μｍ；約３００μｍ；約３１０μｍ；約３２０μｍ；約３３０μｍ；約３４０μｍ；約３５０；約３６０μｍ；約３７０μｍ；約３８０μｍ；約３９０μｍ；約４００μｍ；約４１０μｍ；約４２０μｍ；約４３０μｍ；約４４０μｍ；約４５０；約４６０μｍ；約４７０μｍ；約４８０μｍ；約４９０μｍ；約５００μｍ；約５１０μｍ；約５２０μｍ；約５３０μｍ；約５４０μｍ；約５５０；約５６０μｍ；約５７０μｍ；約５８０μｍ；約５９０μｍ；約６００μｍ；約６１０μｍ；約６２０μｍ；約６３０μｍ；約６４０μｍ；約６５０；約６６０μｍ；約６７０μｍ；約６８０μｍ；約６９０μｍ；約７００μｍ；約７１０μｍ；約７２０μｍ；約７３０μｍ；約７４０μｍ；約７５０；約７６０μｍ；約７７０μｍ；約７８０μｍ；約７９０μｍ；約８００μｍ；約８１０μｍ；約８２０μｍ；約８３０μｍ；約８４０μｍ；約８５０；約８６０μｍ；約８７０μｍ；約８８０μｍ；約８９０μｍ；約９００μｍ；約９１０μｍ；約９２０μｍ；約９３０μｍ；約９４０μｍ；約９５０；約９６０μｍ；約９７０μｍ；約９８０μｍ；約９９０μｍ；または約１０００μｍのマクロチャネルを有してもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００７２】
（ｖｉ）コーティング後の細孔サイズ。
本明細書に記載のように、プライマーコーティングは、細孔を備えるスキャフォールド上に形成されてもよい。例えば、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、少なくとも約２μｍから２００μｍの間の細孔を有してもよい。別の例として、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、少なくとも約２０μｍの細孔を有してもよい。
【００７３】
別の例として、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、少なくとも約２μｍ；少なくとも約３μｍ；少なくとも約４μｍ；少なくとも約５μｍ；少なくとも約６μｍ；少なくとも約７μｍ；少なくとも約８μｍ；少なくとも約９μｍ；少なくとも約１０μｍ；少なくとも約１１μｍ；少なくとも約１２μｍ；少なくとも約１３μｍ；少なくとも約１４μｍ；少なくとも約１５；少なくとも約１６μｍ；少なくとも約１７μｍ；少なくとも約１８μｍ；少なくとも約１９μｍ；少なくとも約２０μｍ；少なくとも約２１μｍ；少なくとも約２２μｍ；少なくとも約２３μｍ；少なくとも約２４μｍ；少なくとも約２５μｍ；少なくとも約２６μｍ；少なくとも約２７μｍ；少なくとも約２８μｍ；少なくとも約２９μｍ；少なくとも約３０μｍ；少なくとも約３１μｍ；少なくとも約３２μｍ；少なくとも約３３μｍ；少なくとも約３４μｍ；少なくとも約３５μｍ；少なくとも約３６μｍ；少なくとも約３７μｍ；少なくとも約３８μｍ；少なくとも約３９μｍ；少なくとも約４０μｍ；少なくとも約４１μｍ；少なくとも約４２μｍ；少なくとも約４３μｍ；少なくとも約４４μｍ；少なくとも約４５μｍ；少なくとも約４６μｍ；少なくとも約４７μｍ；少なくとも約４８μｍ；少なくとも約４９μｍ；少なくとも約５０μｍ；少なくとも約５１μｍ；少なくとも約５２μｍ；少なくとも約５３μｍ；少なくとも約５４μｍ；少なくとも約５５μｍ；少なくとも約５６μｍ；少なくとも約５７μｍ；少なくとも約５８μｍ；少なくとも約５９μｍ；少なくとも約６０μｍ；少なくとも約６１μｍ；少なくとも約６２μｍ；少なくとも約６３μｍ；少なくとも約６４μｍ；少なくとも約６５μｍ；少なくとも約６６μｍ；少なくとも約６７μｍ；少なくとも約６８μｍ；少なくとも約６９μｍ；少なくとも約７０μｍ；少なくとも約７１μｍ；少なくとも約７２μｍ；少なくとも約７３μｍ；少なくとも約７４μｍ；少なくとも約７５μｍ；少なくとも約７６μｍ；少なくとも約７７μｍ；少なくとも約７８μｍ；少なくとも約７９μｍ；少なくとも約８０μｍ；少なくとも約８１μｍ；少なくとも約８２μｍ；少なくとも約８３μｍ；少なくとも約８４μｍ；少なくとも約８５μｍ；少なくとも約８６μｍ；少なくとも約８７μｍ；少なくとも約８８μｍ；少なくとも約８９μｍ；少なくとも約９０μｍ；少なくとも約９１μｍ；少なくとも約９２μｍ；少なくとも約９３μｍ；少なくとも約９４μｍ；少なくとも約９５μｍ；少なくとも約９６μｍ；少なくとも約９７μｍ；少なくとも約９８μｍ；少なくとも約９９μｍ；少なくとも約１００μｍ；少なくとも約１１０μｍ；少なくとも約１１１μｍ；少なくとも約１１２μｍ；少なくとも約１１３μｍ；少なくとも約１１４μｍ；少なくとも約１１５；少なくとも約１１６μｍ；少なくとも約１１７μｍ；少なくとも約１１８μｍ；少なくとも約１１９μｍ；少なくとも約１２０μｍ；少なくとも約１２１μｍ；少なくとも約１２２μｍ；少なくとも約１２３μｍ；少なくとも約１２４μｍ；少なくとも約１２５μｍ；少なくとも約１２６μｍ；少なくとも約１２７μｍ；少なくとも約１２８μｍ；少なくとも約１２９μｍ；少なくとも約１３０μｍ；少なくとも約１３１μｍ；少なくとも約１３２μｍ；少なくとも約１３３μｍ；少なくとも約１３���μｍ；少なくとも約１３５μｍ；少なくとも約１３６μｍ；少なくとも約１３７μｍ；少なくとも約１３８μｍ；少なくとも約１３９μｍ；少なくとも約１４０μｍ；少なくとも約１４１μｍ；少なくとも約１４２μｍ；少なくとも約１４３μｍ；少なくとも約１４４μｍ；少なくとも約１４５μｍ；少なくとも約１４６μｍ；少なくとも約１４７μｍ；少なくとも約１４８μｍ；少なくとも約１４９μｍ；少なくとも約１５０μｍ；少なくとも約１５１μｍ；少なくとも約１５２μｍ；少なくとも約１５３μｍ；少なくとも約１５４μｍ；少なくとも約１５５μｍ；少なくとも約１５６μｍ；少なくとも約１５７μｍ；少なくとも約１５８μｍ；少なくとも約１５９μｍ；少なくとも約１６０μｍ；少なくとも約１６１μｍ；少なくとも約１６２μｍ；少なくとも約１６３μｍ；少なくとも約１６４μｍ；少なくとも約１６５μｍ；少なくとも約１６６μｍ；少なくとも約１６７μｍ；少なくとも約１６８μｍ；少なくとも約１６９μｍ；少なくとも約１７０μｍ；少なくとも約１７１μｍ；少なくとも約１７２μｍ；少なくとも約１７３μｍ；少なくとも約１７４μｍ；少なくとも約１７５μｍ；少なくとも約１７６μｍ；少なくとも約１７７μｍ；少なくとも約１７８μｍ；少なくとも約１７９μｍ；少なくとも約１８０μｍ；少なくとも約１８１μｍ；少なくとも約１８２μｍ；少なくとも約１８３μｍ；少なくとも約１８４μｍ；少なくとも約１８５μｍ；少なくとも約１８６μｍ；少なくとも約１８７μｍ；少なくとも約１８８μｍ；少なくとも約１８９μｍ；少なくとも約１９０μｍ；少なくとも約１９１μｍ；少なくとも約１９２μｍ；少なくとも約１９３μｍ；少なくとも約１９４μｍ；少なくとも約１９５μｍ；少なくとも約１９６μｍ；少なくとも約１９７μｍ；少なくとも約１９８μｍ；少なくとも約１９９μｍ；または少なくとも約２００μｍの細孔を有してもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００７４】
別の例として、プライマーコーティングされたスキャフォールドは、約２μｍ；約３μｍ；約４μｍ；約５μｍ；約６μｍ；約７μｍ；約８μｍ；約９μｍ；約１０μｍ；約１１μｍ；約１２μｍ；約１３μｍ；約１４μｍ；約１５；約１６μｍ；約１７μｍ；約１８μｍ；約１９μｍ；約２０μｍ；約２１μｍ；約２２μｍ；約２３μｍ；約２４μｍ；約２５μｍ；約２６μｍ；約２７μｍ；約２８μｍ；約２９μｍ；約３０μｍ；約３１μｍ；約３２μｍ；約３３μｍ；約３４μｍ；約３５μｍ；約３６μｍ；約３７μｍ；約３８μｍ；約３９μｍ；約４０μｍ；約４１μｍ；約４２μｍ；約４３μｍ；約４４μｍ；約４５μｍ；約４６μｍ；約４７μｍ；約４８μｍ；約４９μｍ；約５０μｍ；約５１μｍ；約５２μｍ；約５３μｍ；約５４μｍ；約５５μｍ；約５６μｍ；約５７μｍ；約５８μｍ；約５９μｍ；約６０μｍ；約６１μｍ；約６２μｍ；約６３μｍ；約６４μｍ；約６５μｍ；約６６μｍ；約６７μｍ；約６８μｍ；約６９μｍ；約７０μｍ；約７１μｍ；約７２μｍ；約７３μｍ；約７４μｍ；約７５μｍ；約７６μｍ；約７７μｍ；約７８μｍ；約７９μｍ；約８０μｍ；約８１μｍ；約８２μｍ；約８３μｍ；約８４μｍ；約８５μｍ；約８６μｍ；約８７μｍ；約８８μｍ；約８９μｍ；約９０μｍ；約９１μｍ；約９２μｍ；約９３μｍ；約９４μｍ；約９５μｍ；約９６μｍ；約９７μｍ；約９８μｍ；約９９μｍ；約１００μｍ；約１１０μｍ；約１１１μｍ；約１１２μｍ；約１１３μｍ；約１１４μｍ；約１１５；約１１６μｍ；約１１７μｍ；約１１８μｍ；約１１９μｍ；約１２０μｍ；約１２１μｍ；約１２２μｍ；約１２３μｍ；約１２４μｍ；約１２５μｍ；約１２６μｍ；約１２７μｍ；約１２８μｍ；約１２９μｍ；約１３０μｍ；約１３１μｍ；約１３２μｍ；約１３３μｍ；約１３４μｍ；約１３５μｍ；約１３６μｍ；約１３７μｍ；約１３８μｍ；約１３９μｍ；約１４０μｍ；約１４１μｍ；約１４２μｍ；約１４３μｍ；約１４４μｍ；約１４５μｍ；約１４６μｍ；約１４７μｍ；約１４８μｍ；約１４９μｍ；約１５０μｍ；約１５１μｍ；約１５２μｍ；約１５３μｍ；約１５４μｍ；約１５５μｍ；約１５６μｍ；約１５７μｍ；約１５８μｍ；約１５９μｍ；約１６０μｍ；約１６１μｍ；約１６２μｍ；約１６３μｍ；約１６４μｍ；約１６５μｍ；約１６６μｍ；約１６７μｍ；約１６８μｍ；約１６９μｍ；約１７０μｍ；約１７１μｍ；約１７２μｍ；約１７３μｍ；約１７４μｍ；約１７５μｍ；約１７６μｍ；約１７７μｍ；約１７８μｍ；約１７９μｍ；約１８０μｍ；約１８１μｍ；約１８２μｍ；約１８３μｍ；約１８４μｍ；約１８５μｍ；約１８６μｍ；約１８７μｍ；約１８８μｍ；約１８９μｍ；約１９０μｍ；約１９１μｍ；約１９２μｍ；約１９３μｍ；約１９４μｍ；約１９５μｍ；約１９６μｍ；約１９７μｍ；約１９８μｍ；約１９９μｍ；または約２００μｍの細孔を有してもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００７５】
本明細書に記載のように、平均細孔容積は、約１０％；約２０％；約３０％；約４０％；約５０％；約６０％；約７０％；約８０％；または約９０％であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００７６】
スキャフォールド
本開示の一態様は、プライマーコーティングまたはミネラルコーティングに好適なスキャフォールド材料を提供する。
本明細書に記載のように、スキャフォールドは、プライマーコーティングのための基板を提供し得る。プライマーコーティングは、ミネラルコーティングのための基板を提供し得る。プライマーコーティングおよび擬似体液を含むスキャフォールドは、板状ナノ構造またはカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト相によるスキャフォールドのミネラルコーティングを促進し得る。
本明細書に記載のように、スキャフォールドは、ミネラルコーティングに好適となり得る。スキャフォールドは、骨ミネラルの成長のための基板を提供し得る。擬似体液を含むスキャフォールドは、板状ナノ構造またはカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト相によるスキャフォールドのミネラルコーティングを促進し得る。
【００７７】
スキャフォールドは、米国特許出願公開第１３／４０７，４４１号；米国特許出願公開第１３／８７９，１７８号；および米国特許出願公開第１３／０３６，４７０号に記載される通りであってもよく、これらは参照により本明細書に組み込まれる。
材料は、当技術分野において知られている任意の好適なスキャフォールド材料で形成されてもよい。任意の特定用途のためのスキャフォールド材料は、必要以上の実験を行うことなく選択され得る。例えば、スキャフォールドの用途は、医療デバイスまたはインプラントであってもよい。
スキャフォールドは、ビーズ、ミクロスフェア、ケージ、またはモジュール式スキャフォールドを含み得る。ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、米国特許出願公開第１３／４０７，４４１号；米国特許出願公開第１３／８７９，１７８号；および米国特許出願公開第１３／０３６，４７０号に記載される方法により調製されてもよく、これらは参照により本明細書に組み込まれる。
【００７８】
スキャフォールド材料。
スキャフォールドは、マトリックス材料を含んでもよい。本明細書において使用される場合、「マトリックス」は、材料（例えば、１つまたは複数の構成成分が懸濁され得るポリマー）であってもよい。「スキャフォールド」は、二次または三次構造（例えば、１つまたは複数の構成成分が浸透し得る柱状構造または多孔質構造）を有することが理解される。本開示は、いかなる特定のマトリックスまたはスキャフォールドにも限定されない。
本明細書に記載のようなスキャフォールドまたはマトリックス材料は、デバイスまたはインプラントとしての使用に好適ないかなる材料であってもよい。本明細書に記載のようなスキャフォールドは、ミネラルコーティングまたはミネラル複合材に好適ないかなる材料であってもよい。
【００７９】
スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、タンパク質（例えば、フィブリン、コラーゲン、もしくはフィブロネクチン等の細胞外基質タンパク質）、ポリマー（例えばポリビニルピロリドン）、ポリサッカリド（例えばアルギネート）、ヒアルロン酸、または上記の類似体、混合物、組合せもしくは誘導体から生成されてもよい。
本明細書に記載のように、スキャフォールドは、加水分解性スキャフォールドであってもよい。例えば、スキャフォールドは、生分解性であってもよい。別の例として、スキャフォールドは、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）スキャフォールドまたはポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）スキャフォールドであってもよい。別の例として、ＰＣＬまたはＰＥＥＫスキャフォールドは、ＮａＯＨを使用して加水分解されてもよい。
【００８０】
本明細書に記載のように、スキャフォールドは、コーティングされてもよい。例えば、コーティングは、プライマーコーティングであってもよい。別の例として、コーティングは、ミネラルコーティングであってもよい。別の例として、コーティングは、プライマーコーティングおよびミネラルコーティングであってもよい。
【００８１】
ポリマー。
スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、合成ポリマーまたは天然ポリマー等のポリマーから形成されてもよい。
本明細書に記載のようなスキャフォールドまたはマトリックスは、全体的または部分的に分解性ポリマー材料、多孔質ポリマー材料、または分解性多孔質ポリマー材料等のポリマー材料から製造された、１つまたは複数の成分を含んでもよい。好適なスキャフォールド材料は、例えば、Ma and Elisseeff, ed. (2005) Scaffolding in Tissue Engineering, CRC, ISBN 1574445219；Saltzman (2004) Tissue Engineering: Engineering Principles for the Design of Replacement Organs and Tissues, Oxford ISBN 019514130Xにおいて議論されている。
全体的または部分的にポリマー材料から作製されたスキャフォールドは、標的組織（例えば骨）の構造的もしくは機能的特徴を提供する；細胞の付着および移動を可能にする；細胞および生化学的因子を送達および保持する；細胞栄養物および発現産物の拡散を可能にする；またはある特定の機械的および生物学的影響を及ぼして、細胞相の挙動を改変することができる。
【００８２】
例えば、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、合成ポリマーから形成されてもよい。例えば、合成ポリマーは、ポリ（エチレン）グリコール、生体内分解性ポリマー（例えば、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（カプロラクトン）、ポリエステル（例えば、ポリ−（Ｌ−乳酸）、ポリ無水物、ポリグラクチン、ポリグリコール酸）、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリ無水物、ポリアミノ酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリシアノアクリレート）、ポリホスファゼン、分解性ポリウレタン、非分解性ポリマー（例えば、ポリアクリレート、エチレン−酢酸ビニルポリマーもしくは他のアシル置換酢酸セルロースまたはそれらの誘導体）、非分解性ポリウレタン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニル、ポリビニルピロリドン、ポリ（ビニルイミダゾール）、クロロスルホン化ポリオレフィン（ｐｏｌｙｏｌｉｆｉｎ）、ポリエチレンオキシド、ポリビニルアルコール（例えばポリビニルアルコールスポンジ）、合成海洋性接着タンパク質（ｍａｒｉｎｅ  ａｄｈｅｓｉｖｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ）、ｔｅｆｌｏｎ（登録商標）、ナイロン、もしくは類似体、混合物、組合せ（例えば、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレングリコールブロックコポリマー、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）繊維マトリックス）、または上記のいずれかの類似体、混合物、組合せもしくは誘導体を含んでもよい。
【００８３】
別の例として、好適なスキャフォールド材料は、コラーゲンゲル、ポリビニルアルコール、海洋性接着タンパク質、ＰＬＧ繊維マトリックス、ポリグラクチン繊維、アルギン酸カルシウムゲル、ポリグリコール酸、ポリエステル（例えば、ポリ−（Ｌ−乳酸）もしくはポリ無水物）、ポリサッカリド（例えばアルギネート）、キトサン、ポリホスファゼン、ポリアクリレート、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレングリコールブロックコポリマー、フィブリン、コラーゲン、フィブロネクチン、ポリビニルピロリドン、ヒアルロン酸、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（カプロラクトン）、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリ無水物、ポリアミノ酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリシアノアクリレート）、ポリウレタン、ポリアクリレート、エチレン−酢酸ビニルポリマーもしくは他のアシル置換酢酸セルロースまたはそれらの誘導体）、ポリウレタン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニル、ポリ（ビニルイミダゾール）、クロロスルホン化ポリオレフィン、ポリエチレンオキシド、ポリビニルアルコール、ｔｅｆｌｏｎ（登録商標）、ナイロン、または上記のいずれかの類似体、混合物、組合せもしくは誘導体を含んでもよい。
【００８４】
別の例として、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、天然で生じるポリマーまたは自然に誘導されたポリマーで形成されてもよい。例えば、天然で生じるポリマーまたは自然に誘導されたポリマーは、アガロース、アルギネート（例えばアルギン酸カルシウムゲル）、フィブリン、フィブリノゲン、フィブロネクチン、コラーゲン（例えばコラーゲンゲル）、ゼラチン、ヒアルロン酸、キチン、または他の好適なポリマーもしくはバイオポリマー、あるいは上記の類似体、混合物、組合せまたは誘導体を含み得る。また、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、天然で生じるバイオポリマーまたは合成ポリマーの混合物から形成されてもよい。
別の例として、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、ポリカルボキシレート、ポリ無水物、ポリ（α−ヒドロキシエステル）、ポリ（エチレンテレフタレート）、ポリ（カーボネート）、ポリ（アミド）、ポリ（ラクトン）、ポリ（サッカリド）、ポリ（アクリレート）、または上記のいずれかの類似体、混合物、組合せもしくは誘導体を含んでもよい。
いくつかの実施形態において、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−グリコリド）、ポリ（プロピレンフマレート）、ポリ（カプロラクトンフマレート）、ポリエチレングリコール、ポリ（グリコリド−ｃｏ−カプロラクトン）、または上記のいずれかの類似体、混合物、組合せもしくは誘導体を含んでもよい。
【００８５】
結晶性またはミネラル成分。
スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、結晶性またはミネラル成分を含んでもよい。例えば、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、無機ミネラルヒドロキシアパタイト（ヒドロキシルアパタイトとしても知られる）を含んでもよい。自然骨の約７０パーセントは、ヒドロキシアパタイトで構成され得る。いくつかの実施形態において、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、骨等のヒドロキシアパタイトを含有する粉砕された天然物質を含む。いくつかの実施形態において、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、実質的に純粋なヒドロキシアパタイトを含む。
【００８６】
複合材。
スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、上述の少なくとも２種の成分を含む複合材料を含んでもよい。例として、複合スキャフォールド材料は、少なくとも３種、少なくとも４種、少なくとも５種、少なくとも６種、少なくとも７種、少なくとも８種、少なくとも９種、少なくとも１０種、またはそれ以上の成分を含んでもよい。複数の成分は、スキャフォールド全体にわたり均一に混合されてもよく、スキャフォールド全体にわたり不均一に混合されてもよく、もしくはスキャフォールドの異なる層内に分離されてもよく、またはそれらの組合せであってもよい。
【００８７】
例えば、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、全体的または部分的にポリカプロラクトンまたはその混合物、複合材、もしくは誘導体で形成されてもよい。ポリカプロラクトンは、特に有用な材料となり得、スキャフォールドは、米国特許出願公開第２００３／００６９７１８号、米国特許出願公開第２００６／０２７６９２５号、米国特許出願公開第２００８／０１９５２１１号、米国特許出願公開第２００８／０２１５０９３号、または米国特許出願公開第１３／０３６，４７０号に記載の方法により調製することができ、これらは全て参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００８８】
金属。
本明細書に記載のように、スキャフォールドは、金属スキャフォールドであってもよく、または金属材料（例えばＴｉ）を含んでもよい。別の例として、金属スキャフォールドは、生体適合性金属スキャフォールドであってもよい。別の例として、金属スキャフォールドは、チタン（Ｔｉ）スキャフォールドであってもよい。別の例として、Ｔｉスキャフォールドは、Ｔｉ合金スキャフォールドであってもよい。別の例として、Ｔｉ合金は、Ｔｉ−３５Ｎｂ−５Ｔａ−７Ｚｒ、またはＴＮＺＴであってもよい。
本明細書に記載のようなスキャフォールドまたはマトリックスは、全体的または部分的にチタンまたはステンレススチール等の金属材料から製造された１つまたは複数の成分を含んでもよい。好適な金属スキャフォールド材料は、例えば、Alvarez et al. 2009 Materials 2, 790-832において議論されている。
【００８９】
本明細書に記載のように、金属スキャフォールドは、表面に粗度を付与するために物理的または化学的方法を用いて処理されてもよい。別の例として、処理は、金属表面にサブミクロンまたはナノ粗度を付与してもよい。別の例として、金属スキャフォールドは、アルカリ溶液で処理されてもよい。別の例として、アルカリ溶液は、ＮａＯＨまたはＫＯＨであってもよい。金属スキャフォールド材料の好適な処理は、例えば、Alvarez et al. 2009 Materials 2, 790-832において議論されている。
【００９０】
生体適合性。
スキャフォールド材料は、製造、培養、またはｉｎ  ｖｉｖｏ移植の間生体活性剤または細胞を導入するための物理的支持または接着基板を提供し得る多孔質微小セルマトリックスを一般に形成する、生体適合性材料であってもよい。
マトリックス材料を含むスキャフォールドは、生体適合性であってもよい。一般に、生体適合性材料は、重篤で増大する反応とは対照的に、せいぜい軽微で多くは一時的である移植反応を刺激するだけの材料であってもよい。生分解性または分解性材料は、一般に、通常のｉｎ  ｖｉｖｏ生理学的条件下で、代謝または排出され得る成分に分解するものとして理解され得る。
マトリックス材料を含むスキャフォールドは、生分解性であってもよい。材料の生分解性は、周囲組織によるマトリックスの吸収を提供し得る、または外科的除去の必要性を排除し得る。分解が生じる速度は、ミネラル形成の速度と可能な限り一致し得る。したがって、ミネラルコーティングがその周囲の自らの自然構造を形作る間、スキャフォールドまたはその成分は、構造的完全性を提供することができ、最終的には崩壊して、機械的負荷を負担し得るミネラルが残される。１つまたは複数のスキャフォールド材料が、生分解性を増加させるために改質されてもよい。例えば、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）は、生理学的条件下でそのエステル連結の加水分解による生分解性ポリエステルであり、その生分解性を増加させるために、開環重合によりさらに改質されてもよい。
いくつかの実施形態において、スキャフォールドまたはマトリックス材料は、カルシウム含有材料の堆積を促進し得る負電荷を備える。負電荷は、スキャフォールド上に存在する任意の部分、例えば、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧ）において存在するようなカルボキシレート基により提供され得る。
【００９１】
いくつかの実施形態において、本明細書において提供されるスキャフォールドまたはマトリックス材料は、生体適合性および生分解性ポリマーであるポリカプロラクトンから形成されてもよい。しかしながら、他のポリマーも生体適合性であることが知られており、本明細書に記載のスキャフォールドに使用され得る。好適な生分解性材料の限定されない例は、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−グリコリド）、ポリ（プロピレンフマレート）、ポリ（カプロラクトンフマレート）、ポリエチレングリコール、ポリ（グリコリド−ｃｏ−カプロラクトン）、ポリサッカリド（例えばアルギネート）、キトサン、ポリホスファゼン、ポリアクリレート、ポリエチレンオキシド−ポリプロピレングリコールブロックコポリマー、フィブリン、コラーゲン、フィブロネクチン、ポリビニルピロリドン、ヒアルロン酸、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリ無水物、ポリアミノ酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリシアノアクリレート、ポリウレタン、ポリアクリレート、エチレン−酢酸ビニルポリマーまたは他のアシル置換酢酸セルロースもしくはその誘導体、あるいは上記のいずれかの類似体、混合物、組合せまたは誘導体を含み得る。
【００９２】
細孔。
いくつかの実施形態において、スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、多孔質微細構造を有する材料を含む。スキャフォールド、またはその一部もしくは成分の細孔は、内部骨構造を模倣する、細胞の接着を可能にする、細胞の播種のための開放容積を提供する、成長因子もしくは他の添加剤のための開放容積を提供する、別のマトリックス層の接着を可能にする、血管形成のための導管として機能する、内部の骨の特徴を提供する、またはかん流を容易化することができる。ミネラル化、細胞導入、または細胞および栄養物の両方の構造全体にわたる拡散を容易化するために、高い空隙率および適切な細孔サイズを有するスキャフォールド材料が好ましい。スキャフォールド材料の細孔は、スキャフォールドの異なる成分または部分の間で、同じ、ほぼ同じ、または異なる平均直径を有してもよいことが理解される。
【００９３】
スキャフォールド材料の細孔は、様々な直径となるように操作されてもよい。例えば、スキャフォールド材料の細孔は、マイクロメートルからミリメートルの直径範囲を有してもよい。別の例として、マトリックス材料の細孔は、約２μｍ〜約６００μｍの直径を有してもよい。別の例として、マトリックス材料の細孔は、約１５０μｍ、約２００μｍ、約２５０μｍ、約３００μｍ、約３５０μｍ、約４００μｍ、約４５０μｍ、約５００μｍ、約５５０μｍ、または約６００μｍの直径を有してもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００９４】
本明細書に記載のように、スキャフォールドまたはマトリックス材料は、より大きい細孔構造およびより小さい細孔構造を有してもよい。
本明細書に記載のように、より大きい細孔構造は、少なくとも約２００μｍであってもよい。例えば、より大きい細孔構造は、少なくとも約２００μｍ；少なくとも約２２５μｍ；少なくとも約２５０μｍ；少なくとも約２７５μｍ；少なくとも約３００μｍ；少なくとも約３２５μｍ；少なくとも約３５０μｍ；少なくとも約３７５μｍ；少なくとも約４００μｍ；少なくとも約４２５μｍ；少なくとも約４５０μｍ；少なくとも約４７５μｍ；少なくとも約５００μｍ；少なくとも約５２５μｍ；少なくとも約５５０μｍ；少なくとも約５７５μｍ；または少なくとも約６００μｍであってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００９５】
本明細書に記載のように、より大きい細孔構造は、約２００μｍ；約２２５μｍ；約２５０μｍ；約２７５μｍ；約３００μｍ；約３２５μｍ；約３５０μｍ；約３７５μｍ；約４００μｍ；約４２５μｍ；約４５０μｍ；約４７５μｍ；約５００μｍ；約５２５μｍ；約５５０μｍ；約５７５μｍ；または約６００μｍであってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００９６】
本明細書に記載のように、より小さい細孔構造は、少なくとも約２μｍであってもよい。例えば、より小さい細孔構造は、少なくとも約２μｍ；少なくとも約３μｍ；少なくとも約４μｍ；少なくとも約５μｍ；少なくとも約６μｍ；少なくとも約７μｍ；少なくとも約８μｍ；少なくとも約９μｍ；少なくとも約１０μｍ；少なくとも約１１μｍ；少なくとも約１２μｍ；少なくとも約１３μｍ；少なくとも約１４μｍ；少なくとも約１５；少なくとも約１６μｍ；少なくとも約１７μｍ；少なくとも約１８μｍ；少なくとも約１９μｍ；少なくとも約２０μｍ；少なくとも約２１μｍ；少なくとも約２２μｍ；少なくとも約２３μｍ；少なくとも約２４μｍ；少なくとも約２５μｍ；少なくとも約２６μｍ；少なくとも約２７μｍ；少なくとも約２８μｍ；少なくとも約２９μｍ；少なくとも約３０μｍ；少なくとも約３１μｍ；少なくとも約３２μｍ；少なくとも約３３μｍ；少なくとも約３４μｍ；少なくとも約３５μｍ；少なくとも約３６μｍ；少なくとも約３７μｍ；少なくとも約３８μｍ；少なくとも約３９μｍ；少なくとも約４０μｍ；少なくとも約４１μｍ；少なくとも約４２μｍ；少なくとも約４３μｍ；少なくとも約４４μｍ；少なくとも約４５μｍ；少なくとも約４６μｍ；少なくとも約４７μｍ；少なくとも約４８μｍ；少なくとも約４９μｍ；少なくとも約５０μｍ；少なくとも約５１μｍ；少なくとも約５２μｍ；少なくとも約５３μｍ；少なくとも約５４μｍ；少なくとも約５５μｍ；少なくとも約５６μｍ；少なくとも約５７μｍ；少なくとも約５８μｍ；少なくとも約５９μｍ；少なくとも約６０μｍ；少なくとも約６１μｍ；少なくとも約６２μｍ；少なくとも約６３μｍ；少なくとも約６４μｍ；少なくとも約６５μｍ；少なくとも約６６μｍ；少なくとも約６７μｍ；少なくとも約６８μｍ；少なくとも約６９μｍ；少なくとも約７０μｍ；少なくとも約７１μｍ；少なくとも約７２μｍ；少なくとも約７３μｍ；少なくとも約７４μｍ；少なくとも約７５μｍ；少なくとも約７６μｍ；少なくとも約７７μｍ；少なくとも約７８μｍ；少なくとも約７９μｍ；少なくとも約８０μｍ；少なくとも約８１μｍ；少なくとも約８２μｍ；少なくとも約８３μｍ；少なくとも約８４μｍ；少なくとも約８５μｍ；少なくとも約８６μｍ；少なくとも約８７μｍ；少なくとも約８８μｍ；少なくとも約８９μｍ；少なくとも約９０μｍ；少なくとも約９１μｍ；少なくとも約９２μｍ；少なくとも約９３μｍ；少なくとも約９４μｍ；少なくとも約９５μｍ；少なくとも約９６μｍ；少なくとも約９７μｍ；少なくとも約９８μｍ；少なくとも約９９μｍ；少なくとも約１００μｍ；少なくとも約１０１μｍ；少なくとも約１０２μｍ；少なくとも約１０３μｍ；少なくとも約１０４μｍ；少なくとも約１０５μｍ；少なくとも約１０６μｍ；少なくとも約１０７μｍ；少なくとも約１０８μｍ；少なくとも約１０９μｍ；少なくとも約１１０μｍ；少なくとも約１１１μｍ；少なくとも約１１２μｍ；少なくとも約１１３μｍ；少なくとも約１１４μｍ；少なくとも約１１５；少なくとも約１１６μｍ；少なくとも約１１７μｍ；少なくとも約１１８μｍ；少なくとも約１１９μｍ；少なくとも約１２０μｍ；少なくとも約１２１μｍ；少なくとも約１２２μｍ；少なくとも約１２３μｍ；少なくとも約１２４μｍ；少なくとも約１２５μｍ；少なくとも約１２６μｍ；少なくとも約１２７μｍ；少なくとも約１２８μｍ；少なくとも約１２９μｍ；少なくとも約１３０μｍ；少なくとも約１３１μｍ；少なくとも約１３２μｍ；少なくとも約１３３μｍ；少なくとも約１３４μｍ；少なくとも約１３５μｍ；少なくとも約１３６μｍ；少なくとも約１３７μｍ；少なくとも約１３８μｍ；少なくとも約１３９μｍ；少なくとも約１４０μｍ；少なくとも約１４１μｍ；少なくとも約１４２μｍ；少なくとも約１４３μｍ；少なくとも約１４４μｍ；少なくとも約１４５μｍ；少なくとも約１４６μｍ；少なくとも約１４７μｍ；少なくとも約１４８μｍ；少なくとも約１４９μｍ；少なくとも約１５０μｍ；少なくとも約１５１μｍ；少なくとも約１５２μｍ；少なくとも約１５３μｍ；少なくとも約１５４μｍ；少なくとも約１５５μｍ；少なくとも約１５６μｍ；少なくとも約１５７μｍ；少なくとも約１５８μｍ；少なくとも約１５９μｍ；少なくとも約１６０μｍ；少なくとも約１６１μｍ；少なくとも約１６２μｍ；少なくとも約１６３μｍ；少なくとも約１６４μｍ；少なくとも約１６５μｍ；少なくとも約１６６μｍ；少なくとも約１６７μｍ；少なくとも約１６８μｍ；少なくとも約１６９μｍ；少なくとも約１７０μｍ；少なくとも約１７１μｍ；少なくとも約１７２μｍ；少なくとも約１７３μｍ；少なくとも約１７４μｍ；少なくとも約１７５μｍ；少なくとも約１７６μｍ；少なくとも約１７７μｍ；少なくとも約１７８μｍ；少なくとも約１７９μｍ；少なくとも約１８０μｍ；少なくとも約１８１μｍ；少なくとも約１８２μｍ；少なくとも約１８３μｍ；少なくとも約１８４μｍ；少なくとも約１８５μｍ；少なくとも約１８６μｍ；少なくとも約１８７μｍ；少なくとも約１８８μｍ；少なくとも約１８９μｍ；少なくとも約１９０μｍ；少なくとも約１９１μｍ；少なくとも約１９２μｍ；少なくとも約１９３μｍ；少なくとも約１９４μｍ；少なくとも約１９５μｍ；少なくとも約１９６μｍ；少なくとも約１９７μｍ；少なくとも約１９８μｍ；少なくとも約１９９μｍ；または少なくとも約２００μｍであってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００９７】
本明細書に記載のように、より小さい細孔構造は、約２μｍ；約３μｍ；約４μｍ；約５μｍ；約６μｍ；約７μｍ；約８μｍ；約９μｍ；約１０μｍ；約１１μｍ；約１２μｍ；約１３μｍ；約１４μｍ；約１５；約１６μｍ；約１７μｍ；約１８μｍ；約１９μｍ；約２０μｍ；約２１μｍ；約２２μｍ；約２３μｍ；約２４μｍ；約２５μｍ；約２６μｍ；約２７μｍ；約２８μｍ；約２９μｍ；約３０μｍ；約３１μｍ；約３２μｍ；約３３μｍ；約３４μｍ；約３５μｍ；約３６μｍ；約３７μｍ；約３８μｍ；約３９μｍ；約４０μｍ；約４１μｍ；約４２μｍ；約４３μｍ；約４４μｍ；約４５μｍ；約４６μｍ；約４７μｍ；約４８μｍ；約４９μｍ；約５０μｍ；約５１μｍ；約５２μｍ；約５３μｍ；約５４μｍ；約５５μｍ；約５６μｍ；約５７μｍ；約５８μｍ；約５９μｍ；約６０μｍ；約６１μｍ；約６２μｍ；約６３μｍ；約６４μｍ；約６５μｍ；約６６μｍ；約６７μｍ；約６８μｍ；約６９μｍ；約７０μｍ；約７１μｍ；約７２μｍ；約７３μｍ；約７４μｍ；約７５μｍ；約７６μｍ；約７７μｍ；約７８μｍ；約７９μｍ；約８０μｍ；約８１μｍ；約８２μｍ；約８３μｍ；約８４μｍ；約８５μｍ；約８６μｍ；約８７μｍ；約８８μｍ；約８９μｍ；約９０μｍ；約９１μｍ；約９２μｍ；約９３μｍ；約９４μｍ；約９５μｍ；約９６μｍ；約９７μｍ；約９８μｍ；約９９μｍ；約１００μｍ；約１０１μｍ；約１０２μｍ；約１０３μｍ；約１０４μｍ；約１０５μｍ；約１０６μｍ；約１０７μｍ；約１０８μｍ；約１０９μｍ；約１１０μｍ；約１１１μｍ；約１１２μｍ；約１１３μｍ；約１１４μｍ；約１１５；約１１６μｍ；約１１７μｍ；約１１８μｍ；約１１９μｍ；約１２０μｍ；約１２１μｍ；約１２２μｍ；約１２３μｍ；約１２４μｍ；約１２５μｍ；約１２６μｍ；約１２７μｍ；約１２８μｍ；約１２９μｍ；約１３０μｍ；約１３１μｍ；約１３２μｍ；約１３３μｍ；約１３４μｍ；約１３５μｍ；約１３６μｍ；約１３７μｍ；約１３８μｍ；約１３９μｍ；約１４０μｍ；約１４１μｍ；約１４２μｍ；約１４３μｍ；約１４４μｍ；約１４５μｍ；約１４６μｍ；約１４７μｍ；約１４８μｍ；約１４９μｍ；約１５０μｍ；約１５１μｍ；約１５２μｍ；約１５３μｍ；約１５４μｍ；約１５５μｍ；約１５６μｍ；約１５７μｍ；約１５８μｍ；約１５９μｍ；約１６０μｍ；約１６１μｍ；約１６２μｍ；約１６３μｍ；約１６４μｍ；約１６５μｍ；約１６６μｍ；約１６７μｍ；約１６８μｍ；約１６９μｍ；約１７０μｍ；約１７１μｍ；約１７２μｍ；約１７３μｍ；約１７４μｍ；約１７５μｍ；約１７６μｍ；約１７７μｍ；約１７８μｍ；約１７９μｍ；約１８０μｍ；約１８１μｍ；約１８２μｍ；約１８３μｍ；約１８４μｍ；約１８５μｍ；約１８６μｍ；約１８７μｍ；約１８８μｍ；約１８９μｍ；約１９０μｍ；約１９１μｍ；約１９２μｍ；約１９３μｍ；約１９４μｍ；約１９５μｍ；約１９６μｍ；約１９７μｍ；約１９８μｍ；約１９９μｍ；または約２００μｍであってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
本明細書に記載のように、平均細孔容積は、約１０％；約２０％；約３０％；約４０％；約５０％；約６０％；約７０％；約８０％；または約９０％であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【００９８】
コーティングするのが困難な材料。
本明細書に記載のようなスキャフォールドは、ミネラルコーティングでコーティングするのが困難であることが知られている材料を含んでもよい。
コーティングするのが困難であることが知られている材料は、整形外科用インプラント材料、心臓用インプラント材料、平滑材料、金属、ポリエチレン、機械加工された表面、または平滑金属表面であってもよい。コーティングを困難なものとし得る特性は、増加した耐薬品性、平滑表面、低い吸水性、または熱分解に対する高い耐性を含む。コーティングするのが困難な材料に対する従来のコーティング法は、高エネルギー、高温、または極めて毒性の化学薬品を含み得る。
【００９９】
例は、プライマーコーティングを生成するためにポリマー（例えばＰＣＬ）含有コーティング溶液を使用してプライマーコーティングされたＰＥＥＫスキャフォールド上に高品質のミネラルコーティングを生成するための例示的方法を説明する。本明細書に記載のように、ＰＥＥＫをコーティングすることは、その高い耐薬品性、低い吸水性、平滑な表面および熱分解に対する高い耐性に起因して、コーティングするのが困難であることが知られている。従来のＰＥＥＫコーティング法には、高エネルギー、高温、または極めて有害な化学薬品が関与する。
【０１００】
コーティングするのが困難な材料は、金属、カルシウムセラミック、ポリマー、または生物学的材料を含み得る。例えば、金属材料は、ステンレススチール、バイタリウム（例えばコバルト−クロム）、チタン、または金を含み得る。別の例として、カルシウムセラミック材料は、ヒドロキシアパタイト、リン酸三カルシウム、ヒドロキシアパタイトセメント、または生体活性ガラスを含み得る。別の例として、ポリマー材料は、シリコーン、炭素繊維、炭素繊維強化ＰＥＥＫ、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＲＲＫ）、ポリメチルメタクリレート、硬質組織置換（ＨＴＲ）ポリマー、ポリエステル（例えば、Ｄａｃｒｏｎ、Ｍｅｒｓｉｌｅｎｅ）、生分解性ポリエステル（例えば、ポリグリコール酸、ポリ−ｌ−乳酸）、ポリアミド（例えば、Ｓｕｐｒａｍｉｄ、Ｎｙｌａｍｉｄ）、ポリオレフィン、ポリエチレン（例えばＭｅｄｐｏｒ）、ポリプロピレン（例えば、Ｐｒｏｌｅｎｅ、Ｍａｒｌｅｘ）、シアノアクリレート、またはポリテトラフルオロエチレン（例えば、Ｔｅｆｌｏｎ、Ｇｏｒｅ−Ｔｅｘ）を含み得る。別の例として、生物学的材料は、コラーゲンまたはＡｌｌｏＤｅｒｍを含み得る。
【０１０１】
表面粗度。
本明細書に記載のように、材料の平滑性または粗度は、材料の固有特性であってもよい。
本明細書に記載のように、材料の平滑性または粗度は、原材料そのものの性質よりも、その製造方法によって決定付けられてもよい。例えば、製造プロセスは、ガス切断、バリ取り、平削り、形削り、穿孔、ケミカルミリング、放電加工、ミリング、ブローチ削り、リーミング、電子ビーム、レーザ、電気化学、ボーリング、旋削、バレル仕上げ、電解研削、ローラバニシング、研削、ホーミング、電解研磨、研磨、超仕上げ、砂型鋳造、熱間圧延、永久鋳型鋳造、インベストメント鋳造、押出、冷間圧延、延伸、またはダイカストを含み得る。
粗度は、粗度平均（Ｒa）として知られる単位で測定され得る。Ｒaの単位は、例えば、μｍまたはμｉｎであってもよい。
【０１０２】
材料を平滑化するためのプロセスは、約０．０１２μｍから約５０μｍ（約０．５μｉｎから約２０００μｉｎ）の間の粗度値（Ｒa）を有する表面仕上げをもたらし得る。材料を平滑化するためのプロセスは、約０．０１２μｍから約２００μｍの間の粗度値（Ｒa）を有する表面仕上げをもたらし得る。例えば、表面仕上げは、約０．０１μｍ；約０．０１２μｍ；約０．０１４μｍ；約０．０１６μｍ；約０．０１８μｍ；約０．０２μｍ；約０．０２５μｍ；約０．０５μｍ；約０．０７５μｍ；約０．１μｍ；約０．２μｍ；約０．４μｍ；約０．６μｍ；約０．８μｍ；約１μｍ；約２μｍ；約３μｍ；約４μｍ；約５μｍ；約６μｍ；約７μｍ；約８μｍ；約９μｍ；約１０μｍ；約１１μｍ；約１２μｍ；約１３μｍ；約１４μｍ；約１５；約１６μｍ；約１７μｍ；約１８μｍ；約１９μｍ；約２０μｍ；約２１μｍ；約２２μｍ；約２３μｍ；約２４μｍ；約２５μｍ；約２６μｍ；約２７μｍ；約２８μｍ；約２９μｍ；約３０μｍ；約３１μｍ；約３２μｍ；約３３μｍ；約３４μｍ；約３５μｍ；約３６μｍ；約３７μｍ；約３８μｍ；約３９μｍ；約４０μｍ；約４１μｍ；約４２μｍ；約４３μｍ；約４４μｍ；約４５μｍ；約４６μｍ；約４７μｍ；約４８μｍ；約４９μｍ；約５０μｍ；約５１μｍ；約５２μｍ；約５３μｍ；約５４μｍ；約５５μｍ；約５６μｍ；約５７μｍ；約５８μｍ；約５９μｍ；約６０μｍ；約６１μｍ；約６２μｍ；約６３μｍ；約６４μｍ；約６５μｍ；約６６μｍ；約６７μｍ；約６８μｍ；約６９μｍ；約７０μｍ；約７１μｍ；約７２μｍ；約７３μｍ；約７４μｍ；約７５μｍ；約７６μｍ；約７７μｍ；約７８μｍ；約７９μｍ；約８０μｍ；約８１μｍ；約８２μｍ；約８３μｍ；約８４μｍ；約８５μｍ；約８６μｍ；約８７μｍ；約８８μｍ；約８９μｍ；約９０μｍ；約９１μｍ；約９２μｍ；約９３μｍ；約９４μｍ；約９５μｍ；約９６μｍ；約９７μｍ；約９８μｍ；約９９μｍ；約１００μｍ；約１０１μｍ；約１０２μｍ；約１０３μｍ；約１０４μｍ；約１０５μｍ；約１０６μｍ；約１０７μｍ；約１０８μｍ；約１０９μｍ；約１１０μｍ；約１１１μｍ；約１１２μｍ；約１１３μｍ；約１１４μｍ；約１１５；約１１６μｍ；約１１７μｍ；約１１８μｍ；約１１９μｍ；約１２０μｍ；約１２１μｍ；約１２２μｍ；約１２３μｍ；約１２４μｍ；約１２５μｍ；約１２６μｍ；約１２７μｍ；約１２８μｍ；約１２９μｍ；約１３０μｍ；約１３１μｍ；約１３２μｍ；約１３３μｍ；約１３４μｍ；約１３５μｍ；約１３６μｍ；約１３７μｍ；約１３８μｍ；約１３９μｍ；約１４０μｍ；約１４１μｍ；約１４２μｍ；約１４３μｍ；約１４４μｍ；約１４５μｍ；約１４６μｍ；約１４７μｍ；約１４８μｍ；約１４９μｍ；約１５０μｍ；約１５１μｍ；約１５２μｍ；約１５３μｍ；約１５４μｍ；約１５５μｍ；約１５６μｍ；約１５７μｍ；約１５８μｍ；約１５９μｍ；約１６０μｍ；約１６１μｍ；約１６２μｍ；約１６３μｍ；約１６４μｍ；約１６５μｍ；約１６６μｍ；約１６７μｍ；約１６８μｍ；約１６９μｍ；約１７０μｍ；約１７１μｍ；約１７２μｍ；約１７３μｍ；約１７４μｍ；約１７５μｍ；約１７６μｍ；約１７７μｍ；約１７８μｍ；約１７９μｍ；約１８０μｍ；約１８１μｍ；約１８２μｍ；約１８３μｍ；約１���４μｍ；約１８５μｍ；約１８６μｍ；約１８７μｍ；約１８８μｍ；約１８９μｍ；約１９０μｍ；約１９１μｍ；約１９２μｍ；約１９３μｍ；約１９４μｍ；約１９５μｍ；約１９６μｍ；約１９７μｍ；約１９８μｍ；約１９９μｍ；または約２００μｍのＲ値を有し得る。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１０３】
スキャフォールド、マトリックス材料、またはその一部は、平均表面粗度値を有し得る。本明細書に記載のように、平均表面粗度（Ｒa）は、約０．０１μｍ；約０．０１２μｍ；約０．０１４μｍ；約０．０１６μｍ；約０．０１８μｍ；約０．０２μｍ；約０．０２５μｍ；約０．０５μｍ；約０．０７５μｍ；約０．１μｍ；約０．２μｍ；約０．４μｍ；約０．６μｍ；約０．８μｍ；約１μｍ；約２μｍ；約３μｍ；約４μｍ；約５μｍ；約６μｍ；約７μｍ；約８μｍ；約９μｍ；約１０μｍ；約１１μｍ；約１２μｍ；約１３μｍ；約１４μｍ；約１５；約１６μｍ；約１７μｍ；約１８μｍ；約１９μｍ；約２０μｍ；約２１μｍ；約２２μｍ；約２３μｍ；約２４μｍ；約２５μｍ；約２６μｍ；約２７μｍ；約２８μｍ；約２９μｍ；約３０μｍ；約３１μｍ；約３２μｍ；約３３μｍ；約３４μｍ；約３５μｍ；約３６μｍ；約３７μｍ；約３８μｍ；約３９μｍ；約４０μｍ；約４１μｍ；約４２μｍ；約４３μｍ；約４４μｍ；約４５μｍ；約４６μｍ；約４７μｍ；約４８μｍ；約４９μｍ；約５０μｍ；約５１μｍ；約５２μｍ；約５３μｍ；約５４μｍ；約５５μｍ；約５６μｍ；約５７μｍ；約５８μｍ；約５９μｍ；約６０μｍ；約６１μｍ；約６２μｍ；約６３μｍ；約６４μｍ；約６５μｍ；約６６μｍ；約６７μｍ；約６８μｍ；約６９μｍ；約７０μｍ；約７１μｍ；約７２μｍ；約７３μｍ；約７４μｍ；約７５μｍ；約７６μｍ；約７７μｍ；約７８μｍ；約７９μｍ；約８０μｍ；約８１μｍ；約８２μｍ；約８３μｍ；約８４μｍ；約８５μｍ；約８６μｍ；約８７μｍ；約８８μｍ；約８９μｍ；約９０μｍ；約９１μｍ；約９２μｍ；約９３μｍ；約９４μｍ；約９５μｍ；約９６μｍ；約９７μｍ；約９８μｍ；約９９μｍ；約１００μｍ；約１０１μｍ；約１０２μｍ；約１０３μｍ；約１０４μｍ；約１０５μｍ；約１０６μｍ；約１０７μｍ；約１０８μｍ；約１０９μｍ；約１１０μｍ；約１１１μｍ；約１１２μｍ；約１１３μｍ；約１１４μｍ；約１１５；約１１６μｍ；約１１７μｍ；約１１８μｍ；約１１９μｍ；約１２０μｍ；約１２１μｍ；約１２２μｍ；約１２３μｍ；約１２４μｍ；約１２５μｍ；約１２６μｍ；約１２７μｍ；約１２８μｍ；約１２９μｍ；約１３０μｍ；約１３１μｍ；約１３２μｍ；約１３３μｍ；約１３４μｍ；約１３５μｍ；約１３６μｍ；約１３７μｍ；約１３８μｍ；約１３９μｍ；約１４０μｍ；約１４１μｍ；約１４２μｍ；約１４３μｍ；約１４４μｍ；約１４５μｍ；約１４６μｍ；約１４７μｍ；約１４８μｍ；約１４９μｍ；約１５０μｍ；約１５１μｍ；約１５２μｍ；約１５３μｍ；約１５４μｍ；約１５５μｍ；約１５６μｍ；約１５７μｍ；約１５８μｍ；約１５９μｍ；約１６０μｍ；約１６１μｍ；約１６２μｍ；約１６３μｍ；約１６４μｍ；約１６５μｍ；約１６６μｍ；約１６７μｍ；約１６８μｍ；約１６９μｍ；約１７０μｍ；約１７１μｍ；約１７２μｍ；約１７３μｍ；約１７４μｍ；約１７５μｍ；約１７６μｍ；約１７７μｍ；約１７８μｍ；約１７９μｍ；約１８０μｍ；約１８１μｍ；約１８２μｍ；約１８３μｍ；約１８４μｍ；約１８５μｍ；約１８６μｍ；約１８７μｍ；約１８８μｍ；約１８９μｍ；約１９０μｍ；約１９１μｍ；約１９２μｍ；約１９３μｍ；約１９４μｍ；約１９５μｍ；約１９６μｍ；約１９７μｍ；約１９８μｍ；約１９９μｍ；または約２００μｍであってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１０４】
マクロチャネル。
本明細書に記載のように、スキャフォールドまたはマトリックス材料は、マクロチャネル構造を有してもよい。例えば、マクロチャネル構造は、少なくとも約１０μｍであってもよい。別の例として、マクロチャネル構造は、少なくとも約１００μｍであってもよい。
【０１０５】
別の例として、マクロチャネル構造は、少なくとも約１０μｍ；少なくとも約２０μｍ；少なくとも約３０μｍ；少なくとも約４０μｍ；少なくとも約５０μｍ；少なくとも約６０μｍ；少なくとも約７０μｍ；少なくとも約８０μｍ；少なくとも約９０μｍ；少なくとも約１００μｍ；少なくとも約１１０μｍ；少なくとも約１２０μｍ；少なくとも約１３０μｍ；少なくとも約１４０μｍ；少なくとも約１５０；少なくとも約１６０μｍ；少なくとも約１７０μｍ；少なくとも約１８０μｍ；少なくとも約１９０μｍ；少なくとも約２００μｍ；少なくとも約２１０μｍ；少なくとも約２２０μｍ；少なくとも約２３０μｍ；少なくとも約２４０μｍ；少なくとも約２５０；少なくとも約２６０μｍ；少なくとも約２７０μｍ；少なくとも約２８０μｍ；少なくとも約２９０μｍ；少なくとも約３００μｍ；少なくとも約３１０μｍ；少なくとも約３２０μｍ；少なくとも約３３０μｍ；少なくとも約３４０μｍ；少なくとも約３５０；少なくとも約３６０μｍ；少なくとも約３７０μｍ；少なくとも約３８０μｍ；少なくとも約３９０μｍ；少なくとも約４００μｍ；少なくとも約４１０μｍ；少なくとも約４２０μｍ；少なくとも約４３０μｍ；少なくとも約４４０μｍ；少なくとも約４５０；少なくとも約４６０μｍ；少なくとも約４７０μｍ；少なくとも約４８０μｍ；少なくとも約４９０μｍ；少なくとも約５００μｍ；少なくとも約５１０μｍ；少なくとも約５２０μｍ；少なくとも約５３０μｍ；少なくとも約５４０μｍ；少なくとも約５５０；少なくとも約５６０μｍ；少なくとも約５７０μｍ；少なくとも約５８０μｍ；少なくとも約５９０μｍ；少なくとも約６００μｍ；少なくとも約６１０μｍ；少なくとも約６２０μｍ；少なくとも約６３０μｍ；少なくとも約６４０μｍ；少なくとも約６５０；少なくとも約６６０μｍ；少なくとも約６７０μｍ；少なくとも約６８０μｍ；少なくとも約６９０μｍ；少なくとも約７００μｍ；少なくとも約７１０μｍ；少なくとも約７２０μｍ；少なくとも約７３０μｍ；少なくとも約７４０μｍ；少なくとも約７５０；少なくとも約７６０μｍ；少なくとも約７７０μｍ；少なくとも約７８０μｍ；少なくとも約７９０μｍ；少なくとも約８００μｍ；少なくとも約８１０μｍ；少なくとも約８２０μｍ；少なくとも約８３０μｍ；少なくとも約８４０μｍ；少なくとも約８５０；少なくとも約８６０μｍ；少なくとも約８７０μｍ；少なくとも約８８０μｍ；少なくとも約８９０μｍ；少なくとも約９００μｍ；少なくとも約９１０μｍ；少なくとも約９２０μｍ；少なくとも約９３０μｍ；少なくとも約９４０μｍ；少なくとも約９５０；少なくとも約９６０μｍ；少なくとも約９７０μｍ；少なくとも約９８０μｍ；少なくとも約９９０μｍ；または少なくとも約１０００μｍであってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１０６】
別の例として、マクロチャネル構造は、約１０μｍ；約２０μｍ；約３０μｍ；約４０μｍ；約５０μｍ；約６０μｍ；約７０μｍ；約８０μｍ；約９０μｍ；約１００μｍ；約１１０μｍ；約１２０μｍ；約１３０μｍ；約１４０μｍ；約１５０；約１６０μｍ；約１７０μｍ；約１８０μｍ；約１９０μｍ；約２００μｍ；約２１０μｍ；約２２０μｍ；約２３０μｍ；約２４０μｍ；約２５０；約２６０μｍ；約２７０μｍ；約２８０μｍ；約２９０μｍ；約３００μｍ；約３１０μｍ；約３２０μｍ；約３３０μｍ；約３４０μｍ；約３５０；約３６０μｍ；約３７０μｍ；約３８０μｍ；約３９０μｍ；約４００μｍ；約４１０μｍ；約４２０μｍ；約４３０μｍ；約４４０μｍ；約４５０；約４６０μｍ；約４７０μｍ；約４８０μｍ；約４９０μｍ；約５００μｍ；約５１０μｍ；約５２０μｍ；約５３０μｍ；約５４０μｍ；約５５０；約５６０μｍ；約５７０μｍ；約５８０μｍ；約５９０μｍ；約６００μｍ；約６１０μｍ；約６２０μｍ；約６３０μｍ；約６４０μｍ；約６５０；約６６０μｍ；約６７０μｍ；約６８０μｍ；約６９０μｍ；約７００μｍ；約７１０μｍ；約７２０μｍ；約７３０μｍ；約７４０μｍ；約７５０；約７６０μｍ；約７７０μｍ；約７８０μｍ；約７９０μｍ；約８００μｍ；約８１０μｍ；約８２０μｍ；約８３０μｍ；約８４０μｍ；約８５０；約８６０μｍ；約８７０μｍ；約８８０μｍ；約８９０μｍ；約９００μｍ；約９１０μｍ；約９２０μｍ；約９３０μｍ；約９４０μｍ；約９５０；約９６０μｍ；約９７０μｍ；約９８０μｍ；約９９０μｍ；または約１０００μｍであってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１０７】
改質された擬似体液
本明細書に記載のような改質された擬似体液は、血漿のイオン構成物質を含む溶液であってもよい。いくつかの実施形態において、改質された擬似体液は、有機成分を含まない。カルシウム含有ミネラルコーティングを生成するのに好適な無機ミネラルは、様々な骨ミネラルイオン、例えば、これらに限定されないが、カルシウムおよびホスフェート、ならびに骨ミネラルイオンの組合せ、例えばカルシウム−ホスフェートを含む。改質された擬似体液は、米国特許出願公開第１３／４０７，４４１号；米国特許出願公開第１３／８７９，１７８号；および米国特許出願公開第１３／０３６，４７０号に記載される通りであってもよく、これらは参照により組み込まれる。
【０１０８】
本明細書に記載のような改質された擬似体液は、スキャフォールドをミネラルコーティングするために使用され得る。例えば、スキャフォールドは、改質された擬似体液中に含浸され、インキュベートされてもよい。別の例として、改質された擬似体液は、１日当たり少なくとも約１回；１日当たり少なくとも約２回；または１日当たり少なくとも約３回交換、補充、または除去および添加されてもよい。別の例として、改質された擬似体液は、毎日少なくとも約１回；２日毎に少なくとも約１回；３日毎に少なくとも１回；４日毎に少なくとも１回；５日毎に少なくとも１回；６日毎に少なくとも１回；または７日毎に少なくとも１回交換されてもよい。
【０１０９】
本明細書に記載のように、改質された擬似体液は、カルシウムおよびホスフェートイオンの濃度が２倍の血漿のイオン性構成物質の溶液であってもよい。
本明細書に記載のように、改質された擬似体液は、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ2、ＭｇＳＯ4、ＮａＨＣＯ3、ＣａＣｌ2、およびＫＨ2ＰＯ4を含む溶液であってもよい。
【０１１０】
改質された擬似体液は、少なくとも約１ｍＭのＮａＣｌを含んでもよい。例えば、改質された擬似体液は、少なくとも約１ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約２０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約３０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約４０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約５０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約６０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約７０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約８０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約９０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１１０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１２０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１３０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１４０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１５０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１６０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１７０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１８０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１９０ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約２００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約３００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約４００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約５００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約６００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約７００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約８００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約９００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１０００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１１００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１２００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１３００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１４００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１５００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１６００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１７００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１８００ｍＭのＮａＣｌ；少なくとも約１９００ｍＭのＮａＣｌ；または少なくとも約２０００ｍＭのＮａＣｌを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１１】
別の例として、改質された擬似体液は、約１ｍＭのＮａＣｌ、約１０ｍＭのＮａＣｌ；約２０ｍＭのＮａＣｌ；約３０ｍＭのＮａＣｌ；約４０ｍＭのＮａＣｌ；約５０ｍＭのＮａＣｌ；約６０ｍＭのＮａＣｌ；約７０ｍＭのＮａＣｌ；約８０ｍＭのＮａＣｌ；約９０ｍＭのＮａＣｌ；約１００ｍＭのＮａＣｌ；約１１０ｍＭのＮａＣｌ；約１２０ｍＭのＮａＣｌ；約１３０ｍＭのＮａＣｌ；約１４０ｍＭのＮａＣｌ；約１５０ｍＭのＮａＣｌ；約１６０ｍＭのＮａＣｌ；約１７０ｍＭのＮａＣｌ；約１８０ｍＭのＮａＣｌ；約１９０ｍＭのＮａＣｌ；約２００ｍＭのＮａＣｌ；約３００ｍＭのＮａＣｌ；約４００ｍＭのＮａＣｌ；約５００ｍＭのＮａＣｌ；約６００ｍＭのＮａＣｌ；約７００ｍＭのＮａＣｌ；約８００ｍＭのＮａＣｌ；約９００ｍＭのＮａＣｌ；約１０００ｍＭのＮａＣｌ；約１１００ｍＭのＮａＣｌ；約１２００ｍＭのＮａＣｌ；約１３００ｍＭのＮａＣｌ；約１４００ｍＭのＮａＣｌ；約１５００ｍＭのＮａＣｌ；約１６００ｍＭのＮａＣｌ；約１７００ｍＭのＮａＣｌ；約１８００ｍＭのＮａＣｌ；約１９００ｍＭのＮａＣｌ；または約２０００ｍＭのＮａＣｌを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１２】
改質された擬似体液は、少なくとも約０．４ｍＭのＫＣｌを含んでもよい。例えば、改質された擬似体液は、少なくとも約０．４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約８ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約９ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１０ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１１ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１２ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１３ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１５ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１６ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１７ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１８ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約１９ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２０ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２１ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２２ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２３ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２５ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２６ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２７ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２８ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約２９ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３０ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３１ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３２ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３３ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３５ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３６ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３７ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３８ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約３９ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４０ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４１ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４２ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４３ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４５ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４６ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４７ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４８ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約４９ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５０ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５１ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５２ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５３ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５５ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５６ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５７ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５８ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約５９ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６０ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６１ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６２ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６３ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６５ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６６ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６７ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６８ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約６９ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７０ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７１ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７２ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７３ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７４ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７５ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７６ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７７ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７８ｍＭのＫＣｌ；少なくとも約７９ｍＭのＫＣｌ；または少なくとも約８０ｍＭのＫＣｌを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１３】
別の例として、改質された擬似体液は、約０．４ｍＭのＫＣｌ；  約１ｍＭのＫＣｌ；  約２ｍＭのＫＣｌ；約３ｍＭのＫＣｌ；約４ｍＭのＫＣｌ；約５ｍＭのＫＣｌ；約６ｍＭのＫＣｌ；約７ｍＭのＫＣｌ；約８ｍＭのＫＣｌ；約９ｍＭのＫＣｌ；約１０ｍＭのＫＣｌ；約１１ｍＭのＫＣｌ；約１２ｍＭのＫＣｌ；約１３ｍＭのＫＣｌ；約１４ｍＭのＫＣｌ；約１５ｍＭのＫＣｌ；約１６ｍＭのＫＣｌ；約１７ｍＭのＫＣｌ；約１８ｍＭのＫＣｌ；約１９ｍＭのＫＣｌ；約２０ｍＭのＫＣｌ；約２１ｍＭのＫＣｌ；約２２ｍＭのＫＣｌ；約２３ｍＭのＫＣｌ；約２４ｍＭのＫＣｌ；約２５ｍＭのＫＣｌ；約２６ｍＭのＫＣｌ；約２７ｍＭのＫＣｌ；約２８ｍＭのＫＣｌ；約２９ｍＭのＫＣｌ；約３０ｍＭのＫＣｌ；約３１ｍＭのＫＣｌ；約３２ｍＭのＫＣｌ；約３３ｍＭのＫＣｌ；約３４ｍＭのＫＣｌ；約３５ｍＭのＫＣｌ；約３６ｍＭのＫＣｌ；約３７ｍＭのＫＣｌ；約３８ｍＭのＫＣｌ；約３９ｍＭのＫＣｌ；約４０ｍＭ；約４１ｍＭのＫＣｌ；約４２ｍＭのＫＣｌ；約４３ｍＭのＫＣｌ；約４４ｍＭのＫＣｌ；約４５ｍＭのＫＣｌ；約４６ｍＭのＫＣｌ；約４７ｍＭのＫＣｌ；約４８ｍＭのＫＣｌ；約４９ｍＭのＫＣｌ；約５０ｍＭのＫＣｌ；約５１ｍＭのＫＣｌ；約５２ｍＭのＫＣｌ；約５３ｍＭのＫＣｌ；約５４ｍＭのＫＣｌ；約５５ｍＭのＫＣｌ；約５６ｍＭのＫＣｌ；約５７ｍＭのＫＣｌ；約５８ｍＭのＫＣｌ；約５９ｍＭのＫＣｌ；約６０ｍＭのＫＣｌ；約６１ｍＭのＫＣｌ；約６２ｍＭのＫＣｌ；約６３ｍＭのＫＣｌ；約６４ｍＭのＫＣｌ；約６５ｍＭのＫＣｌ；約６６ｍＭのＫＣｌ；約６７ｍＭのＫＣｌ；約６８ｍＭのＫＣｌ；約６９ｍＭのＫＣｌ；約７０ｍＭのＫＣｌ；約７１ｍＭのＫＣｌ；約７２ｍＭのＫＣｌ；約７３ｍＭのＫＣｌ；約７４ｍＭのＫＣｌ；約７５ｍＭのＫＣｌ；約７６ｍＭのＫＣｌ；約７７ｍＭのＫＣｌ；約７８ｍＭのＫＣｌ；約７９ｍＭのＫＣｌ；または約８０ｍＭのＫＣｌを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１４】
改質された擬似体液は、少なくとも約０．１ｍＭのＭｇＣｌ2を含んでもよい。例えば、改質された擬似体液は、少なくとも約０．１ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約０．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約０．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約５．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約５．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約５．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約６ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約６．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約６．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約６．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約７ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約７．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約７．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約７．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約８ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約８．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約８．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約８．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約９ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約９．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約９．５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約９．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１０ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１１ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１２ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１３ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１４ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１６ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１７ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１８ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約１９ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２０ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２１ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２２ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２３ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２４ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２６ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２７ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２８ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約２９ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３０ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３１ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３２ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３３ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３４ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３６ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３７ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３８ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約３９ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４０ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４１ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４２ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４３ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４４ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４５ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４６ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４７ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約４８ｍＭのＭｇＣｌ2；��なくとも約４９ｍＭのＭｇＣｌ2；または少なくとも約５０ｍＭのＭｇＣｌ2を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１５】
別の例として、改質された擬似体液は、約０．１ｍＭのＭｇＣｌ2；少なくとも約０．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約０．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約１ｍＭのＭｇＣｌ2；約１．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約１．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約１．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約２ｍＭのＭｇＣｌ2；約２．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約２．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約２．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約３ｍＭのＭｇＣｌ2；約３．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約３．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約３．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約４ｍＭのＭｇＣｌ2；約４．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約４．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約４．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約５ｍＭのＭｇＣｌ2；約５．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約５．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約５．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約６ｍＭのＭｇＣｌ2；約６．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約６．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約６．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約７ｍＭのＭｇＣｌ2；約７．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約７．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約７．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約８ｍＭのＭｇＣｌ2；約８．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約８．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約８．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約９ｍＭのＭｇＣｌ2；約９．２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約９．５ｍＭのＭｇＣｌ2；約９．７５ｍＭのＭｇＣｌ2；約１０ｍＭのＭｇＣｌ2；約１１ｍＭのＭｇＣｌ2；約１２ｍＭのＭｇＣｌ2；約１３ｍＭのＭｇＣｌ2；約１４ｍＭのＭｇＣｌ2；約１５ｍＭのＭｇＣｌ2；約１６ｍＭのＭｇＣｌ2；約１７ｍＭのＭｇＣｌ2；約１８ｍＭのＭｇＣｌ2；約１９ｍＭのＭｇＣｌ2；約２０ｍＭのＭｇＣｌ2；約２１ｍＭのＭｇＣｌ2；約２２ｍＭのＭｇＣｌ2；約２３ｍＭのＭｇＣｌ2；約２４ｍＭのＭｇＣｌ2；約２５ｍＭのＭｇＣｌ2；約２６ｍＭのＭｇＣｌ2；約２７ｍＭのＭｇＣｌ2；約２８ｍＭのＭｇＣｌ2；約２９ｍＭのＭｇＣｌ2；約３０ｍＭのＭｇＣｌ2；約３１ｍＭのＭｇＣｌ2；約３２ｍＭのＭｇＣｌ2；約３３ｍＭのＭｇＣｌ2；約３４ｍＭのＭｇＣｌ2；約３５ｍＭのＭｇＣｌ2；約３６ｍＭのＭｇＣｌ2；約３７ｍＭのＭｇＣｌ2；約３８ｍＭのＭｇＣｌ2；約３９ｍＭのＭｇＣｌ2；約４０ｍＭのＭｇＣｌ2；約４１ｍＭのＭｇＣｌ2；約４２ｍＭのＭｇＣｌ2；約４３ｍＭのＭｇＣｌ2；約４４ｍＭのＭｇＣｌ2；約４５ｍＭのＭｇＣｌ2；約４６ｍＭのＭｇＣｌ2；約４７ｍＭのＭｇＣｌ2；約４８ｍＭのＭｇＣｌ2；約４９ｍＭのＭｇＣｌ2；または約５０ｍＭのＭｇＣｌ2を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１６】
改質された擬似体液は、少なくとも約０．０５ｍＭのＭｇＳＯ4を含んでもよい。例えば、改質された擬似体液は、少なくとも約０．０５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約０．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約０．５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約０．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１．５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２．５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３．５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４．５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約６ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約７ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約８ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約９ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１０ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１１ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１２ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１３ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１４ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１６ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１７ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１８ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約１９ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２０ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２１ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２２ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２３ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２４ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２６ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２７ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２８ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約２９ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３０ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３１ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３２ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３３ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３４ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３６ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３７ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３８ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約３９ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４０ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４１ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４２ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４３ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４４ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４５ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４６ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４７ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４８ｍＭのＭｇＳＯ4；少なくとも約４９ｍＭのＭｇＳＯ4；または少なくとも約５０ｍＭのＭｇＳＯ4を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１７】
別の例として、改質された擬似体液は、約０．０５ｍＭのＭｇＳＯ4；約０．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；約０．５ｍＭのＭｇＳＯ4；約０．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；約１ｍＭのＭｇＳＯ4；約１．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；約１．５ｍＭのＭｇＳＯ4；約１．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；約２ｍＭのＭｇＳＯ4；約２．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；約２．５ｍＭのＭｇＳＯ4；約２．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；約３ｍＭのＭｇＳＯ4；約３．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；約３．５ｍＭのＭｇＳＯ4；約３．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；約４ｍＭのＭｇＳＯ4；約４．２５ｍＭのＭｇＳＯ4；約４．５ｍＭのＭｇＳＯ4；約４．７５ｍＭのＭｇＳＯ4；約５ｍＭのＭｇＳＯ4；約６ｍＭのＭｇＳＯ4；約７ｍＭのＭｇＳＯ4；約８ｍＭのＭｇＳＯ4；約９ｍＭのＭｇＳＯ4；約１０ｍＭのＭｇＳＯ4；約１１ｍＭのＭｇＳＯ4；約１２ｍＭのＭｇＳＯ4；約１３ｍＭのＭｇＳＯ4；約１４ｍＭのＭｇＳＯ4；約１５ｍＭのＭｇＳＯ4；約１６ｍＭのＭｇＳＯ4；約１７ｍＭのＭｇＳＯ4；約１８ｍＭのＭｇＳＯ4；約１９ｍＭのＭｇＳＯ4；約２０ｍＭのＭｇＳＯ4；約２１ｍＭのＭｇＳＯ4；約２２ｍＭのＭｇＳＯ4；約２３ｍＭのＭｇＳＯ4；約２４ｍＭのＭｇＳＯ4；約２５ｍＭのＭｇＳＯ4；約２６ｍＭのＭｇＳＯ4；約２７ｍＭのＭｇＳＯ4；約２８ｍＭのＭｇＳＯ4；約２９ｍＭのＭｇＳＯ4；約３０ｍＭのＭｇＳＯ4；約３１ｍＭのＭｇＳＯ4；約３２ｍＭのＭｇＳＯ4；約３３ｍＭのＭｇＳＯ4；約３４ｍＭのＭｇＳＯ4；約３５ｍＭのＭｇＳＯ4；約３６ｍＭのＭｇＳＯ4；約３７ｍＭのＭｇＳＯ4；約３８ｍＭのＭｇＳＯ4；約３９ｍＭのＭｇＳＯ4；約４０ｍＭのＭｇＳＯ4；約４１ｍＭのＭｇＳＯ4；約４２ｍＭのＭｇＳＯ4；約４３ｍＭのＭｇＳＯ4；約４４ｍＭのＭｇＳＯ4；約４５ｍＭのＭｇＳＯ4；約４６ｍＭのＭｇＳＯ4；約４７ｍＭのＭｇＳＯ4；約４８ｍＭのＭｇＳＯ4；約４９ｍＭのＭｇＳＯ4；または約５０ｍＭのＭｇＳＯ4を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１８】
改質された擬似体液は、少なくとも約０．４ｍＭのＮａＨＣＯ3を含んでもよい。例えば、改質された擬似体液は、少なくとも約０．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約０．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約０．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約１．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約１．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約１．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約１．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約１．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約２．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約２．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約２．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約２．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約２．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約３．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約３．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約３．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約３．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約３．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約４．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約４．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約４．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約４．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約４．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約５．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約５．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約５．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約５．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約５．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約６．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約６．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約６．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約６．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約６．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約７．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約７．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約７．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約７．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約７．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約８．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約８．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約８．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約８．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約８．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約９．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約１０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約２０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約３０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約４０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約５０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約６０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約７０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約８０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約９０ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約１００ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約２００ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約３００ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約４００ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約５００ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約６００ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約７００ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約８００ｍＭのＮａＨＣＯ3；少なくとも約９００ｍＭのＮａＨＣＯ3；または少なくとも約１０００ｍＭのＮａＨＣＯ3を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１１９】
別の例として、改質された擬似体液は、約０．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約０．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約０．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約１．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約１．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；約１．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約１．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約１．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約２．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約２．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；約２．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約２．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約２．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約３．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約３．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；約３．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約３．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約３．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約４．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約４．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；約４．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約４．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約４．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約５．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約５．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；約５．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約５．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約５．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約６．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約６．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；約６．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約６．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約６．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約７．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約７．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；約７．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約７．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約７．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約８．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約８．２ｍＭのＮａＨＣＯ3；約８．４ｍＭのＮａＨＣＯ3；約８．６ｍＭのＮａＨＣＯ3；約８．８ｍＭのＮａＨＣＯ3；約９．０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約１０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約２０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約３０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約４０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約５０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約６０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約７０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約８０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約９０ｍＭのＮａＨＣＯ3；約１００ｍＭのＮａＨＣＯ3；約２００ｍＭのＮａＨＣＯ3；約３００ｍＭのＮａＨＣＯ3；約４００ｍＭのＮａＨＣＯ3；約５００ｍＭのＮａＨＣＯ3；約６００ｍＭのＮａＨＣＯ3；約７００ｍＭのＮａＨＣＯ3；約８００ｍＭのＮａＨＣＯ3；約９００ｍＭのＮａＨＣＯ3；または約１０００ｍＭのＮａＨＣＯ3を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１２０】
改質された擬似体液は、少なくとも約０．５ｍＭのＣａＣｌ2を含んでもよい。例えば、改質された擬似体液は、少なくとも約０．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約２．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約２．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約３．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約３．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約４．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約４．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約５．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約５．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約６．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約６．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約７．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約７．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約８．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約８．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約９．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約９．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１０．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１０．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１１．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１１．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１２．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１２．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１３．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１３．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１４．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１４．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１５．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１５．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１６．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１６．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１７．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１７．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１８．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１８．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１９．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約１９．５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約２０．０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約２５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約３０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約３５ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約４０ｍＭのＣａＣｌ2；少なくとも約４５ｍＭのＣａＣｌ2；または少なくとも約５０ｍＭのＣａＣｌ2を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１２１】
別の例として、改質された擬似体液は、約０．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１．５ｍＭのＣａＣｌ2；約２．０ｍＭのＣａＣｌ2；約２．５ｍＭのＣａＣｌ2；約３．０ｍＭのＣａＣｌ2；約３．５ｍＭのＣａＣｌ2；約４．０ｍＭのＣａＣｌ2；約４．５ｍＭのＣａＣｌ2；約５．０ｍＭのＣａＣｌ2；約５．５ｍＭのＣａＣｌ2；約６．０ｍＭのＣａＣｌ2；約６．５ｍＭのＣａＣｌ2；約７．０ｍＭのＣａＣｌ2；約７．５ｍＭのＣａＣｌ2；約８．０ｍＭのＣａＣｌ2；約８．５ｍＭのＣａＣｌ2；約９．０ｍＭのＣａＣｌ2；約９．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１０．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１０．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１１．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１１．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１２．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１２．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１３．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１３．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１４．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１４．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１５．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１５．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１６．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１６．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１７．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１７．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１８．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１８．５ｍＭのＣａＣｌ2；約１９．０ｍＭのＣａＣｌ2；約１９．５ｍＭのＣａＣｌ2；約２０．０ｍＭのＣａＣｌ2；約２５ｍＭのＣａＣｌ2；約３０ｍＭのＣａＣｌ2；約３５ｍＭのＣａＣｌ2；約４０ｍＭのＣａＣｌ2；約４５ｍＭのＣａＣｌ2；または約５０ｍＭのＣａＣｌ2を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１２２】
改質された擬似体液は、少なくとも約０．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4を含んでもよい。例えば、改質された擬似体液は、少なくとも約０．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約０．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約０．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約０．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約２．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約２．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約２．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約２．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約２．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約３．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約３．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約３．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約３．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約３．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約４．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約４．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約４．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約４．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約４．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約５．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約５．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約５．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約５．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約５．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約６．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約６．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約６．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約６．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約６．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約７．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約７．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約７．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約７．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約７．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約８．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約８．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約８．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約８．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約８．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約９．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約９．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約９．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約９．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約９．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１０．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約２０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約３０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約４０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約５０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約６０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約７０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約８０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約９０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１００ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１１０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１２０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１３０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１４０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１５０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１６０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１７０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１８０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；少なくとも約１９０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；または少なくとも約２００ｍＭのＫＨ2ＰＯ4を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１２３】
別の例として、改質された擬似体液は、約０．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約０．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約０．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約０．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約２．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約２．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約２．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約２．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約２．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約３．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約３．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約３．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約３．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約３．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約４．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約４．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約４．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約４．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約４．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約５．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約５．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約５．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約５．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約５．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約６．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約６．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約６．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約６．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約７．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約７．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約７．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約７．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約７．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約８．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約８．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約８．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約８．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約８．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約９．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約９．２ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約９．４ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約９．６ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約９．８ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１０．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約２０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約３０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約４０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約５０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約６０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約７０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約８０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約９０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１００ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１１０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１２０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１３０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１４０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１５０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１６０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１７０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１８０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；約１９０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4；または約２００ｍＭのＫＨ2ＰＯ4を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、溶液は、カルシウム含有ミネラル層の形態を変化させることができる界面活性剤を含んでもよい。ここで、現在知られている、または後に発見される任意の界面活性剤が使用され得る。いくつかの実施形態において、界面活性剤は、Ｔｗｅｅｎ  ２０（商標）であってもよい。
【０１２５】
ミネラルコーティング
本明細書に記載のスキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、表面改質またはコーティングを含み得る。本明細書に記載のようなスキャフォールドのミネラルコーティングは、任意の従来の様式により行うことができる。ミネラルコーティングは、米国特許出願公開第１３／４０７，４４１号；米国特許出願公開第１３／８７９，１７８号；および米国特許出願公開第１３／０３６，４７０号に記載される通りであってもよく、これらは参照により組み込まれる。
例は、ミネラルコーティング溶液を使用してコーティングされたスキャフォールドを生成するための例示的方法を説明する。例えば、ミネラルコーティング溶液は、改質された擬似体液（ｍＳＢＦ）であってもよい。ミネラル組成および／またはｍＳＢＦの濃度を調節することにより、スキャフォールド上に析出されるミネラルの組成が操作され得る。米国特許出願公開第２００８／００９５８１７号；米国特許第６，７６７，９２８号；米国特許第６，５４１，０２２号；ＰＣＴ出願公開ＷＯ２００８／０７０３５５；ＰＣＴ出願公開ＷＯ２００８／０８２７６６；Murphy and Mooney, 2001；Murphy and Messersmith, 2000もまた参照されたい。
【０１２６】
本明細書に記載のように、ミネラルコーティングは、カルシウム含有であってもよい。例えば、カルシウム含有ミネラルコーティングは、ヒドロキシアパタイト（ＨＡＰ）、α−リン酸三カルシウム（α−ＴＣＰ）、β−リン酸三カルシウム（β−ＴＣＰ）、非晶質リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、リン酸八カルシウム、リン酸カルシウム（ＣａＰ）、または炭酸カルシウムを含み得る。カルシウム含有ミネラルコーティングは、複数の層、例えば異なる溶解プロファイルを有する別個の層を備えてもよい。生理学的条件下で、リン酸カルシウム種の溶解度は、以下の傾向に従い得る：非晶質リン酸カルシウム＞リン酸二カルシウム＞リン酸八カルシウム＞β−ＴＣＰ＞ＨＡＰ。リン酸二カルシウムミネラルは、ＨＡＰの溶解速度より５０倍超高い溶解速度を有し得る。したがって、異なるリン酸カルシウム層を有するマトリックスの形成は、広範囲の溶解パターンを可能にする。
【０１２７】
例えば、ミネラルコーティングは、ＩＳＯ２３３７「Implants for surgery-In vitro evaluation for apatite-forming ability of implant materials」に従い得る。別の例として、ミネラルコーティングは、ＩＳＯ２３３７「Implants for surgery-In vitro evaluation for apatite-forming ability of implant materials」に従う適合されたプロトコルであってもよい。別の例として、ミネラルコーティングは、生理学的条件下および連続回転において、スキャフォールドを改質された擬似体液中に含浸することにより行われてもよい。連続回転は、改質された擬似体液を補充、改質された擬似体液を交換、または改質された擬似体液を除去および添加することであってもよい。
【０１２８】
本明細書に記載のように、スキャフォールドは、ミネラル核形成および成長のためのリン酸カルシウム系ミネラル層の形成を誘導するために、改質された擬似体液（ｍＳＢＦ）溶液中でインキュベートされてもよい。ｍＳＢＦ溶液は、カルシウムおよびホスフェートイオンの濃度が２倍で、生理的温度およびｐＨに保持された血漿のイオン性構成物質を含有してもよい。ｍＳＢＦインキュベーションを使用した生体吸収性ポリマーマトリックス上での、リン酸カルシウム系ミネラル、具体的には骨様ミネラルの成長が示されている（Lin et al., 2004;Murphy et al., 2002, 2005）。
本明細書に記載のように、本明細書に記載のようなスキャフォールドのミネラルコーティングは、スキャフォールドをインキュベートすることにより行うことができる。例えば、本明細書に記載のミネラルコーティングは、改質された擬似体液（ｍＳＢＦ）中の構成物質を、約６．８〜約７．４のｐＨ、および約３７℃の温度で５日間以上インキュベートすることにより発達させることができる。ＳＢＦまたはｍＳＢＦは、毎日新しくしてもよい。例に記載の化学組成物を使用して、手順は、アルギネートおよびポリ−（α−ヒドロキシエステル）上にカルシウム欠乏カーボネート含有アパタイト材料を生成する。参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第６，７６７，９２８号を参照されたい。ｍＳＢＦは、増加されたカルシウムおよびホスフェートを含んでもよい。一般に、ｐＨの増加は、ヒドロキシアパタイト成長に有利となり得、一方ｐＨの減少は、リン酸八カルシウムミネラル成長に有利となり得る。
【０１２９】
別の例として、ヒドロキシアパタイト形成に有利な条件は、約５．０から約８．０の間のｐＨ、および約１０−５から約１０−８Ｍの間のカルシウム濃度とホスフェート濃度との積を含み得る。同様に、リン酸八カルシウム形成に有利な条件は、約６．０から約８．０の間のｐＨ、および約１０−５から約１０−７．５Ｍの間のカルシウム濃度とホスフェート濃度との積を含む。さらに、脱水リン酸二カルシウム形成に有利な条件は、約６．０から約８．０の間のｐＨ、および約１０−４から約１０−６Ｍの間のカルシウム濃度とホスフェート濃度との積を含み得る。
別の例として、ヒドロキシアパタイト形成を促進するために、ｍＳＢＦのｐＨを、約５．０から約６．０の間で変更することができる。同様に、リン酸八カルシウムおよびヒドロキシアパタイト形成を促進するために、ｍＳＢＦのｐＨを約６．０から約６．５の間で変更することができる。同様に、リン酸二カルシウム、リン酸八カルシウムおよびヒドロキシアパタイト形成を促進するために、ｍＳＢＦのｐＨを約６．５から約８．０の間で変更することができる。
【０１３０】
別の例として、スキャフォールドは、少なくとも約１日間；少なくとも約２日間；少なくとも約３日間；少なくとも約４日間；少なくとも約５日間；少なくとも約６日間；少なくとも約７日間；少なくとも約８日間；少なくとも約９日間；少なくとも約１０日間；少なくとも約１１日間；少なくとも約１２日間；少なくとも約１３日間；少なくとも約１４日間；少なくとも約１５日間；少なくとも約１６日間；少なくとも約１７日間；少なくとも約１８日間；少なくとも約１９日間；少なくとも約２０日間；少なくとも約２１日間；少なくとも約２２日間；少なくとも約２３日間；少なくとも約２４日間；少なくとも約２５日間；少なくとも約２６日間；少なくとも約２７日間；少なくとも約２８日間；少なくとも約２９日間；または少なくとも約３０日間インキュベートされてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１３１】
例えば、スキャフォールドは、約１日間；約２日間；約３日間；約４日間；約５日間；約６日間；約７日間；約８日間；約９日間；約１０日間；約１１日間；約１２日間；約１３日間；約１４日間；約１５日間；約１６日間；約１７日間；約１８日間；約１９日間；約２０日間；約２１日間；約２２日間；約２３日間；約２４日間；約２５日間；約２６日間；約２７日間；約２８日間；約２９日間；または約３０日間インキュベートされてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１３２】
本明細書に記載のようなスキャフォールドのミネラルコーティングは、スキャフォールドをある温度でインキュベートすることにより行うことができる。例えば、スキャフォールドは、生理的に適切な温度でインキュベートされてもよい。別の例として、スキャフォールドは、約１℃；約２℃；約３℃；約４℃；約５℃；約６℃；約７℃；約８℃；約９℃；約１０℃；約１１℃；約１２℃；約１３℃；約１４℃；約１５℃；約１６℃；約１７℃；約１８℃；約１９℃；約２０℃；約２１℃；約２２℃；約２３℃；約２４℃；約２５℃；約２６℃；約２７℃；約２８℃；約２９℃；約３０℃；約３１℃；約３２℃；約３３℃；約３４℃；約３５℃；約３６℃；約３７℃；約３８℃；約３９℃；約４０℃；約４１℃；約４２℃；約４３℃；約４４℃；約４５℃；約４６℃；約４７℃；約４８℃；約４９℃；約５０℃；約５１℃；約５２℃；約５３℃；約５４℃；約５５℃；約５６℃；約５７℃；約５８℃；約５９℃；約６０℃；約６１℃；約６２℃；約６３℃；約６４℃；約６５℃；約６６℃；約６７℃；約６８℃；約６９℃；約７０℃；約７１℃；約７２℃；約７３℃；約７４℃；約７５℃；約７６℃；約７７℃；約７８℃；約７９℃；約８０℃；約８１℃；約８２℃；約８３℃；約８４℃；約８５℃；約８６℃；約８７℃；約８８℃；約８９℃；約９０℃；約９１℃；約９２℃；約９３℃；約９４℃；約９５℃；約９６℃；約９７℃；約９８℃；約９９℃；または約１００℃の温度でインキュベートされてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１３３】
スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、例えばＣａＰコーティング技術を使用して、個々に、またはまとめてコーティングされてもよい。スキャフォールド、またはその一部もしくは成分は、ＲＧＤ付着のためのアミノ分解、化学的結合、層毎の堆積、または化学気相堆積等の技術を使用して、個々に、またはまとめて改質されてもよい。
第１のカルシウム含有ミネラルの堆積の前に、スキャフォールドは、（例えばＮａＯＨ溶液を使用した）表面加水分解を達成するための化学的前処理を利用することにより、増加したミネラル堆積を可能にするべく表面官能化されてもよい。この技術による表面分解は、材料表面上の極性酸素官能基の量の増加をもたらすことができる。
【０１３４】
次いで、官能化表面は、ミネラル含有溶液（例えば改質された擬似体液）中でインキュベートされてもよい。本明細書に記載のようなミネラルコーティングプロセスは、自然のバイオミネラル化プロセスを模倣し得る。
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、構造および組成が人間の骨ミネラルに類似し得る。例えば、ミネラルコーティングは、板状構造、または板状構造およびカーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト相組成を有する、球状クラスタを含んでもよい。別の例として、コーティングは、骨誘発性ミネラルコーティングであってもよい。
別の例として、ミネラルコーティングは、アパタイトを含んでもよい。アパタイトは、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、フッ化カルシウム、水酸化カルシウムまたはシトレートを含んでもよい。
【０１３５】
別の例として、ミネラルコーティングは、スキャフォールド上の複数の個別のミネラルアイランド（ｍｉｎｅｒａｌ  ｉｓｌａｎｄ）を備えてもよく、または、ミネラルコーティングは、スキャフォールドの表面全体に形成されてもよい。別の例として、ミネラルコーティングは、実質的に均一なミネラルコーティングを含んでもよい。他の実施形態において、ミネラルコーティングは、カルシウムおよびホスフェートを含有する任意の好適なコーティング材料、例えばヒドロキシアパタイト、カルシウム欠乏カーボネート含有ヒドロキシアパタイト、リン酸三カルシウム、非晶質リン酸カルシウム、リン酸八カルシウム、リン酸二カルシウム、リン酸カルシウム、またはそれらの混合物であってもよい。例えば、骨誘発性ミネラルコーティングは、カルシウム欠乏カーボネート含有ヒドロキシアパタイトであってもよい。
【０１３６】
別の例として、ミネラルコーティングは、ヒドロキシアパタイトを含んでもよい。カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイトは、Ｃａ10-x（ＰＯ4）6-x（ＨＰＯ4）x（ＯＨ）2-xの式を有し得る。化学量論的ヒドロキシアパタイトは、Ｃａ10（ＰＯ4）6（ＯＨ）2の化学式を有し得、またはＣａ5（ＰＯ4）3（ＯＨ）としても記述され得る。ヒドロキシアパタイトは、主に結晶性となり得るが、非晶質形態で存在してもよい。
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、少なくとも約１％のヒドロキシアパタイトを含んでもよい。例えば、ミネラルコーティングは、少なくとも約１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約１９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約２９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約３９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約４９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約５９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約６９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約７９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約８９％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９０％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９１％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９２％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９３％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９４％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９５％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９６％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９７％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９８％のヒドロキシアパタイト；少なくとも約９９％のヒドロキシアパタイト；または少なくとも約１００％のヒドロキシアパタイトを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１３７】
別の例として、ミネラルコーティングは、約１％のヒドロキシアパタイト；約２％のヒドロキシアパタイト；約３％のヒドロキシアパタイト；約４％のヒドロキシアパタイト；約５％のヒドロキシアパタイト；約６％のヒドロキシアパタイト；約７％のヒドロキシアパタイト；約８％のヒドロキシアパタイト；約９％のヒドロキシアパタイト；約１０％のヒドロキシアパタイト；約１１％のヒドロキシアパタイト；約１２％のヒドロキシアパタイト；約１３％のヒドロキシアパタイト；約１４％のヒドロキシアパタイト；約１５％のヒドロキシアパタイト；約１６％のヒドロキシアパタイト；約１７％のヒドロキシアパタイト；約１８％のヒドロキシアパタイト；約１９％のヒドロキシアパタイト；約２０％のヒドロキシアパタイト；約２１％のヒドロキシアパタイト；約２２％のヒドロキシアパタイト；約２３％のヒドロキシアパタイト；約２４％のヒドロキシアパタイト；約２５％のヒドロキシアパタイト；約２６％のヒドロキシアパタイト；約２７％のヒドロキシアパタイト；約２８％のヒドロキシアパタイト；約２９％のヒドロキシアパタイト；約３０％のヒドロキシアパタイト；約３１％のヒドロキシアパタイト；約３２％のヒドロキシアパタイト；約３３％のヒドロキシアパタイト；約３４％のヒドロキシアパタイト；約３５％のヒドロキシアパタイト；約３６％のヒドロキシアパタイト；約３７％のヒドロキシアパタイト；約３８％のヒドロキシアパタイト；約３９％のヒドロキシアパタイト；約４０％のヒドロキシアパタイト；約４１％のヒドロキシアパタイト；約４２％のヒドロキシアパタイト；約４３％のヒドロキシアパタイト；約４４％のヒドロキシアパタイト；約４５％のヒドロキシアパタイト；約４６％のヒドロキシアパタイト；約４７％のヒドロキシアパタイト；約４８％のヒドロキシアパタイト；約４９％のヒドロキシアパタイト；約５０％のヒドロキシアパタイト；約５１％のヒドロキシアパタイト；約５２％のヒドロキシアパタイト；約５３％のヒドロキシアパタイト；約５４％のヒドロキシアパタイト；約５５％のヒドロキシアパタイト；約５６％のヒドロキシアパタイト；約５７％のヒドロキシアパタイト；約５８％のヒドロキシアパタイト；約５９％のヒドロキシアパタイト；約６０％のヒドロキシアパタイト；約６１％のヒドロキシアパタイト；約６２％のヒドロキシアパタイト；約６３％のヒドロキシアパタイト；約６４％のヒドロキシアパタイト；約６５％のヒドロキシアパタイト；約６６％のヒドロキシアパタイト；約６７％のヒドロキシアパタイト；約６８％のヒドロキシアパタイト；約６９％のヒドロキシアパタイト；約７０％のヒドロキシアパタイト；約７１％のヒドロキシアパタイト；約７２％のヒドロキシアパタイト；約７３％のヒドロキシアパタイト；約７４％のヒドロキシアパタイト；約７５％のヒドロキシアパタイト；約７６％のヒドロキシアパタイト；約７７％のヒドロキシアパタイト；約７８％のヒドロキシアパタイト；約７９％のヒドロキシアパタイト；約８０％のヒドロキシアパタイト；約８１％のヒドロキシアパタイト；約８２％のヒドロキシアパタイト；約８３％のヒドロキシアパタイト；約８４％のヒドロキシアパタイト；約８５％のヒドロキシアパタイト；約８６％のヒドロキシアパタイト；約８７％のヒドロキシアパタイト；約８８％のヒドロキシアパタイト；約８９％のヒドロキシアパタイト；約９０％のヒドロキシアパタイト；約９１％のヒドロキシアパタイト；約９２％のヒドロキシアパタイト；約９３％のヒドロキシアパタイト；約９４％のヒドロキシアパタイト；約９５％のヒドロキシアパタイト；約９６％のヒドロキシアパタイト；約９７％のヒドロキシアパタイト；約９８％のヒドロキシアパタイト；約９９％のヒドロキシアパタイト；または約１００％のヒドロキシアパタイトを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１３８】
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、リン酸八カルシウムを含んでもよい。リン酸八カルシウムは、Ｃａ8Ｈ2（ＰＯ4）6・５Ｈ2Ｏの化学式を有し、または、Ｃａ4ＨＯ12Ｐ3としても記述され得る。リン酸八カルシウムは、ヒドロキシアパタイトの前駆体であることが示されている。リン酸八カルシウムの加水分解は、ヒドロキシアパタイトを形成し得る。リン酸八カルシウムは、主に結晶性となり得るが、非晶質形態で存在してもよい。
【０１３９】
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、少なくとも約１％のリン酸八カルシウムを含んでもよい。例えば、ミネラルコーティングは、少なくとも約１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約１９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約２９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約３９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約４９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約５９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約６９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約７９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約８９％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９０％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９１％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９２％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９３％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９４％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９５％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９６％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９７％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９８％のリン酸八カルシウム；少なくとも約９９％のリン酸八カルシウム；または少なくとも約１００％のリン酸八カルシウムを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１４０】
別の例として、ミネラルコーティングは、約１％のリン酸八カルシウム；約２％のリン酸八カルシウム；約３％のリン酸八カルシウム；約４％のリン酸八カルシウム；約５％のリン酸八カルシウム；約６％のリン酸八カルシウム；約７％のリン酸八カルシウム；約８％のリン酸八カルシウム；約９％のリン酸八カルシウム；約１０％のリン酸八カルシウム；約１１％のリン酸八カルシウム；約１２％のリン酸八カルシウム；約１３％のリン酸八カルシウム；約１４％のリン酸八カルシウム；約１５％のリン酸八カルシウム；約１６％のリン酸八カルシウム；約１７％のリン酸八カルシウム；約１８％のリン酸八カルシウム；約１９％のリン酸八カルシウム；約２０％のリン酸八カルシウム；約２１％のリン酸八カルシウム；約２２％のリン酸八カルシウム；約２３％のリン酸八カルシウム；約２４％のリン酸八カルシウム；約２５％のリン酸八カルシウム；約２６％のリン酸八カルシウム；約２７％のリン酸八カルシウム；約２８％のリン酸八カルシウム；約２９％のリン酸八カルシウム；約３０％のリン酸八カルシウム；約３１％のリン酸八カルシウム；約３２％のリン酸八カルシウム；約３３％のリン酸八カルシウム；約３４％のリン酸八カルシウム；約３５％のリン酸八カルシウム；約３６％のリン酸八カルシウム；約３７％のリン酸八カルシウム；約３８％のリン酸八カルシウム；約３９％のリン酸八カルシウム；約４０％のリン酸八カルシウム；約４１％のリン酸八カルシウム；約４２％のリン酸八カルシウム；約４３％のリン酸八カルシウム；約４４％のリン酸八カルシウム；約４５％のリン酸八カルシウム；約４６％のリン酸八カルシウム；約４７％のリン酸八カルシウム；約４８％のリン酸八カルシウム；約４９％のリン酸八カルシウム；約５０％のリン酸八カルシウム；約５１％のリン酸八カルシウム；約５２％のリン酸八カルシウム；約５３％のリン酸八カルシウム；約５４％のリン酸八カルシウム；約５５％のリン酸八カルシウム；約５６％のリン酸八カルシウム；約５７％のリン酸八カルシウム；約５８％のリン酸八カルシウム；約５９％のリン酸八カルシウム；約６０％のリン酸八カルシウム；約６１％のリン酸八カルシウム；約６２％のリン酸八カルシウム；約６３％のリン酸八カルシウム；約６４％のリン酸八カルシウム；約６５％のリン酸八カルシウム；約６６％のリン酸八カルシウム；約６７％のリン酸八カルシウム；約６８％のリン酸八カルシウム；約６９％のリン酸八カルシウム；約７０％のリン酸八カルシウム；約７１％のリン酸八カルシウム；約７２％のリン酸八カルシウム；約７３％のリン酸八カルシウム；約７４％のリン酸八カルシウム；約７５％のリン酸八カルシウム；約７６％のリン酸八カルシウム；約７７％のリン酸八カルシウム；約７８％のリン酸八カルシウム；約７９％のリン酸八カルシウム；約８０％のリン酸八カルシウム；約８１％のリン酸八カルシウム；約８２％のリン酸八カルシウム；約８３％のリン酸八カルシウム；約８４％のリン酸八カルシウム；約８５％のリン酸八カルシウム；約８６％のリン酸八カルシウム；約８７％のリン酸八カルシウム；約８８％のリン酸八カルシウム；約８９％のリン酸八カルシウム；約９０％のリン酸八カルシウム；約９１％のリン酸八カルシウム；約９２％のリン酸八カルシウム；約９３％のリン酸八カルシウム；約９４％のリン酸八カルシウム；約９５％のリン酸八カルシウム；約９６％のリン酸八カルシウム；約９７％のリン酸八カルシウム；約９８％のリン酸八カルシウム；約９９％のリン酸八カルシウム；または約１００％のリン酸八カルシウムを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１４１】
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、少なくとも約１％の空隙率を含んでもよい。例えば、本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、少なくとも約１％空隙率；少なくとも約２％空隙率；少なくとも約３％空隙率；少なくとも約４％空隙率；少なくとも約５％空隙率；少なくとも約６％空隙率；少なくとも約７％空隙率；少なくとも約８％空隙率；少なくとも約９％空隙率；少なくとも約１０％空隙率；少なくとも約１１％空隙率；少なくとも約１２％空隙率；少なくとも約１３％空隙率；少なくとも約１４％空隙率；少なくとも約１５％空隙率；少なくとも約１６％空隙率；少なくとも約１７％空隙率；少なくとも約１８％空隙率；少なくとも約１９％空隙率；少なくとも約２０％空隙率；少なくとも約２１％空隙率；少なくとも約２２％空隙率；少なくとも約２３％空隙率；少なくとも約２４％空隙率；少なくとも約２５％空隙率；少なくとも約２６％空隙率；少なくとも約２７％空隙率；少なくとも約２８％空隙率；少なくとも約２９％空隙率；少なくとも約３０％空隙率；少なくとも約３１％空隙率；少なくとも約３２％空隙率；少なくとも約３３％空隙率；少なくとも約３４％空隙率；少なくとも約３５％空隙率；少なくとも約３６％空隙率；少なくとも約３７％空隙率；少なくとも約３８％空隙率；少なくとも約３９％空隙率；少なくとも約４０％空隙率；少なくとも約４１％空隙率；少なくとも約４２％空隙率；少なくとも約４３％空隙率；少なくとも約４４％空隙率；少なくとも約４５％空隙率；少なくとも約４６％空隙率；少なくとも約４７％空隙率；少なくとも約４８％空隙率；少なくとも約４９％空隙率；少なくとも約５０％空隙率；少なくとも約５１％空隙率；少なくとも約５２％空隙率；少なくとも約５３％空隙率；少なくとも約５４％空隙率；少なくとも約５５％空隙率；少なくとも約５６％空隙率；少なくとも約５７％空隙率；少なくとも約５８％空隙率；少なくとも約５９％空隙率；少なくとも約６０％空隙率；少なくとも約６１％空隙率；少なくとも約６２％空隙率；少なくとも約６３％空隙率；少なくとも約６４％空隙率；少なくとも約６５％空隙率；少なくとも約６６％空隙率；少なくとも約６７％空隙率；少なくとも約６８％空隙率；少なくとも約６９％空隙率；少なくとも約７０％空隙率；少なくとも約７１％空隙率；少なくとも約７２％空隙率；少なくとも約７３％空隙率；少なくとも約７４％空隙率；少なくとも約７５％空隙率；少なくとも約７６％空隙率；少なくとも約７７％空隙率；少なくとも約７８％空隙率；少なくとも約７９％空隙率；少なくとも約８０％空隙率；少なくとも約８１％空隙率；少なくとも約８２％空隙率；少なくとも約８３％空隙率；少なくとも約８４％空隙率；少なくとも約８５％空隙率；少なくとも約８６％空隙率；少なくとも約８７％空隙率；少なくとも約８８％空隙率；少なくとも約８９％空隙率；少なくとも約９０％空隙率；少なくとも約９１％空隙率；少なくとも約９２％空隙率；少なくとも約９３％空隙率；少なくとも約９４％空隙率；少なくとも約９５％空隙率；少なくとも約９６％空隙率；少なくとも約９７％空隙率；少なくとも約９８％空隙率；少なくとも約９９％空隙率；または少なくとも約１００％空隙率の空隙率を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１４２】
別の例として、ミネラルコーティングは、約１％空隙率；約２％空隙率；約３％空隙率；約４％空隙率；約５％空隙率；約６％空隙率；約７％空隙率；約８％空隙率；約９％空隙率；約１０％空隙率；約１１％空隙率；約１２％空隙率；約１３％空隙率；約１４％空隙率；約１５％空隙率；約１６％空隙率；約１７％空隙率；約１８％空隙率；約１９％空隙率；約２０％空隙率；約２１％空隙率；約２２％空隙率；約２３％空隙率；約２４％空隙率；約２５％空隙率；約２６％空隙率；約２７％空隙率；約２８％空隙率；約２９％空隙率；約３０％空隙率；約３１％空隙率；約３２％空隙率；約３３％空隙率；約３４％空隙率；約３５％空隙率；約３６％空隙率；約３７％空隙率；約３８％空隙率；約３９％空隙率；約４０％空隙率；約４１％空隙率；約４２％空隙率；約４３％空隙率；約４４％空隙率；約４５％空隙率；約４６％空隙率；約４７％空隙率；約４８％空隙率；約４９％空隙率；約５０％空隙率；約５１％空隙率；約５２％空隙率；約５３％空隙率；約５４％空隙率；約５５％空隙率；約５６％空隙率；約５７％空隙率；約５８％空隙率；約５９％空隙率；約６０％空隙率；約６１％空隙率；約６２％空隙率；約６３％空隙率；約６４％空隙率；約６５％空隙率；約６６％空隙率；約６７％空隙率；約６８％空隙率；約６９％空隙率；約７０％空隙率；約７１％空隙率；約７２％空隙率；約７３％空隙率；約７４％空隙率；約７５％空隙率；約７６％空隙率；約７７％空隙率；約７８％空隙率；約７９％空隙率；約８０％空隙率；約８１％空隙率；約８２％空隙率；約８３％空隙率；約８４％空隙率；約８５％空隙率；約８６％空隙率；約８７％空隙率；約８８％空隙率；約８９％空隙率；約９０％空隙率；約９１％空隙率；約９２％空隙率；約９３％空隙率；約９４％空隙率；約９５％空隙率；約９６％空隙率；約９７％空隙率；約９８％空隙率；約９９％空隙率；または約１００％空隙率を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１４３】
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、約１ｎｍから約３５００ｎｍの間の孔径を含んでもよい。別の例として、本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、約１００から約３５０ｎｍの間の孔径を含んでもよい。別の例として、本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、少なくとも約１ｎｍの孔径；少なくとも約１０ｎｍの孔径；少なくとも約１５ｎｍの孔径；少なくとも約２０ｎｍの孔径；少なくとも約２５ｎｍの孔径；少なくとも約３０ｎｍの孔径；少なくとも約３５ｎｍの孔径；少なくとも約４０ｎｍの孔径；少なくとも約４５ｎｍの孔径；少なくとも約５０ｎｍの孔径；少なくとも約５５ｎｍの孔径；少なくとも約６０ｎｍの孔径；少なくとも約６５ｎｍの孔径；少なくとも約７０ｎｍの孔径；少なくとも約７５ｎｍの孔径；少なくとも約８０ｎｍの孔径；少なくとも約８５ｎｍの孔径；少なくとも約９０ｎｍの孔径；少なくとも約９５ｎｍの孔径；少なくとも約１００ｎｍの孔径；少なくとも約１０５ｎｍの孔径；少なくとも約１１０ｎｍの孔径；少なくとも約１１５ｎｍの孔径；少なくとも約１２０ｎｍの孔径；少なくとも約１２５ｎｍの孔径；少なくとも約１３０ｎｍの孔径；少なくとも約１３５ｎｍの孔径；少なくとも約１４０ｎｍの孔径；少なくとも約１４５ｎｍの孔径；少なくとも約１５０ｎｍの孔径；少なくとも約１５５ｎｍの孔径；少なくとも約１６０ｎｍの孔径；少なくとも約１６５ｎｍの孔径；少なくとも約１７０ｎｍの孔径；少なくとも約１７５ｎｍの孔径；少なくとも約１８０ｎｍの孔径；少なくとも約１８５ｎｍの孔径；少なくとも約１９０ｎｍの孔径；少なくとも約１９５ｎｍの孔径；少なくとも約２００ｎｍの孔径；少なくとも約２０５ｎｍの孔径；少なくとも約２１０ｎｍの孔径；少なくとも約２１５ｎｍの孔径；少なくとも約２２０ｎｍの孔径；少なくとも約２２５ｎｍの孔径；少なくとも約２３０ｎｍの孔径；少なくとも約２３５ｎｍの孔径；少なくとも約２４０ｎｍの孔径；少なくとも約２４５ｎｍの孔径；少なくとも約２５０ｎｍの孔径；少なくとも約２５５ｎｍの孔径；少なくとも約２６０ｎｍの孔径；少なくとも約２６５ｎｍの孔径；少なくとも約２７０ｎｍの孔径；少なくとも約２７５ｎｍの孔径；少なくとも約２８０ｎｍの孔径；少なくとも約２８５ｎｍの孔径；少なくとも約２９０ｎｍの孔径；少なくとも約２９５ｎｍの孔径；少なくとも約３００ｎｍの孔径；少なくとも約３０５ｎｍの孔径；少なくとも約３１０ｎｍの孔径；少なくとも約３１５ｎｍの孔径；少なくとも約３２０ｎｍの孔径；少なくとも約３２５ｎｍの孔径；少なくとも約３３０ｎｍの孔径；少なくとも約３３５ｎｍの孔径；少なくとも約３４０ｎｍの孔径；少なくとも約３４５ｎｍの孔径；少なくとも約３５０ｎｍの孔径；少なくとも約３５５ｎｍの孔径；少なくとも約３６０ｎｍの孔径；少なくとも約３６５ｎｍの孔径；少なくとも約３７０ｎｍの孔径；少なくとも約３７５ｎｍの孔径；少なくとも約４００ｎｍの孔径；少なくとも約４１０ｎｍの孔径；少なくとも約４２０ｎｍの孔径；少なくとも約４３０ｎｍの孔径；少なくとも約４４０ｎｍの孔径；少なくとも約４５０ｎｍの孔径；少なくとも約４６０ｎｍの孔径；少なくとも約４７０ｎｍの孔径；少なくとも約４８０ｎｍの孔径；少なくとも約４９０ｎｍの孔径；少なくとも約５００ｎｍの孔径；少なくとも約６００ｎｍの孔径；少なくとも約７００ｎｍの孔径；少なくとも約８００ｎｍの孔径；少なくとも約９００ｎｍの孔径；少なくとも約１０００ｎｍの孔径；少なくとも約１１００ｎｍの孔径；少なくとも約１２００ｎｍの孔径；少なくとも約１３００ｎｍの孔径；少なくとも約１４００ｎｍの孔径；少なくとも約１５００ｎｍの孔径；少なくとも約１６００ｎｍの孔径；少なくとも約１７００ｎｍの孔径；少なくとも約１８００ｎｍの孔径；少なくとも約１９００ｎｍの孔径；少なくとも約２０００ｎｍの孔径；少なくとも約２１００ｎｍの孔径；少なくとも約２２００ｎｍの孔径；少なくとも約２３００ｎｍの孔径；少なくとも約２４００ｎｍの孔径；少なくとも約２５００ｎｍの孔径；少なくとも約２６００ｎｍの孔径；少なくとも約２７００ｎｍの孔径；少なくとも約２８００ｎｍの孔径；少なくとも約２９００ｎｍの孔径；少なくとも約３０００ｎｍの孔径；少なくとも約３１００ｎｍの孔径；少なくとも約３２００ｎｍの孔径；少なくとも約３３００ｎｍの孔径；少なくとも約３４００ｎｍの孔径；または少なくとも約３５００ｎｍの孔径を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１４４】
別の例として、本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、約１ｎｍの孔径；約１０ｎｍの孔径；約２０ｎｍの孔径；約３０ｎｍの孔径；約４０ｎｍの孔径；約５０ｎｍの孔径；約５５ｎｍの孔径；約６０ｎｍの孔径；約６５ｎｍの孔径；約７０ｎｍの孔径；約７５ｎｍの孔径；約８０ｎｍの孔径；約８５ｎｍの孔径；約９０ｎｍの孔径；約９５ｎｍの孔径；約１００ｎｍの孔径；約１０５ｎｍの孔径；約１１０ｎｍの孔径；約１１５ｎｍの孔径；約１２０ｎｍの孔径；約１２５ｎｍの孔径；約１３０ｎｍの孔径；約１３５ｎｍの孔径；約１４０ｎｍの孔径；約１４５ｎｍの孔径；約１５０ｎｍの孔径；約１５５ｎｍの孔径；約１６０ｎｍの孔径；約１６５ｎｍの孔径；約１７０ｎｍの孔径；約１７５ｎｍの孔径；約１８０ｎｍの孔径；約１８５ｎｍの孔径；約１９０ｎｍの孔径；約１９５ｎｍの孔径；約２００ｎｍの孔径；約２０５ｎｍの孔径；約２１０ｎｍの孔径；約２１５ｎｍの孔径；約２２０ｎｍの孔径；約２２５ｎｍの孔径；約２３０ｎｍの孔径；約２３５ｎｍの孔径；約２４０ｎｍの孔径；約２４５ｎｍの孔径；約２５０ｎｍの孔径；約２５５ｎｍの孔径；約２６０ｎｍの孔径；約２６５ｎｍの孔径；約２７０ｎｍの孔径；約２７５ｎｍの孔径；約２８０ｎｍの孔径；約２８５ｎｍの孔径；約２９０ｎｍの孔径；約２９５ｎｍの孔径；約３００ｎｍの孔径；約３０５ｎｍの孔径；約３１０ｎｍの孔径；約３１５ｎｍの孔径；約３２０ｎｍの孔径；約３２０ｎｍの孔径；約３３０ｎｍの孔径；約３３５ｎｍの孔径；約３４０ｎｍの孔径；約３４５ｎｍの孔径；約３５０ｎｍの孔径；約３５５ｎｍの孔径；約３６０ｎｍの孔径；約３６５ｎｍの孔径；約３７０ｎｍの孔径；約３７５ｎｍの孔径；約３８０ｎｍの孔径；約３９０ｎｍの孔径；約４００ｎｍの孔径；約４１０ｎｍの孔径；約４２０ｎｍの孔径；約４３０ｎｍの孔径；約４４０ｎｍの孔径；約４５０ｎｍの孔径；約４６０ｎｍの孔径；約４７０ｎｍの孔径；約４８０ｎｍの孔径；約４９０ｎｍの孔径；約５００ｎｍの孔径；約６００ｎｍの孔径；約７００ｎｍの孔径；約８００ｎｍの孔径；約９００ｎｍの孔径；約１０００ｎｍの孔径；約１１００ｎｍの孔径；約１２００ｎｍの孔径；約１３００ｎｍの孔径；約１４００ｎｍの孔径；約１５００ｎｍの孔径；約１６００ｎｍの孔径；約１７００ｎｍの孔径；約１８００ｎｍの孔径；約１９００ｎｍの孔径；約２０００ｎｍの孔径；約２１００ｎｍの孔径；約２２００ｎｍの孔径；約２３００ｎｍの孔径；約２４００ｎｍの孔径；約２５００ｎｍの孔径；約２６００ｎｍの孔径；約２７００ｎｍの孔径；約２８００ｎｍの孔径；約２９００ｎｍの孔径；約３０００ｎｍの孔径；約３１００ｎｍの孔径；約３２００ｎｍの孔径；約３３００ｎｍの孔径；約３４００ｎｍの孔径；または約３５００ｎｍの孔径を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１４５】
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、少なくとも約０．１のＣａ／Ｐの比を含んでもよい。例えば、ミネラルコーティングは、少なくとも約０．１のＣａ／Ｐ；少なくとも約０．２のＣａ／Ｐ；少なくとも約０．３のＣａ／Ｐ；少なくとも約０．４のＣａ／Ｐ；少なくとも約０．５のＣａ／Ｐ；少なくとも約０．６のＣａ／Ｐ；少なくとも約０．７のＣａ／Ｐ；少なくとも約０．８のＣａ／Ｐ；少なくとも約０．９のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．０のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．１のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．２のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．３のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．４のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．５のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．６のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．７のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．８のＣａ／Ｐ；少なくとも約１．９のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．０のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．１のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．２のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．３のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．４のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．５のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．６のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．７のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．８のＣａ／Ｐ；少なくとも約２．９のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．０のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．１のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．２のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．３のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．４のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．５のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．６のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．７のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．８のＣａ／Ｐ；少なくとも約３．９のＣａ／Ｐ；少なくとも約４のＣａ／Ｐ；少なくとも約５のＣａ／Ｐ；少なくとも約６のＣａ／Ｐ；少なくとも約７のＣａ／Ｐ；少なくとも約８のＣａ／Ｐ；少なくとも約９のＣａ／Ｐ；少なくとも約１０のＣａ／Ｐ；少なくとも約１１のＣａ／Ｐ；少なくとも約１２のＣａ／Ｐ；少なくとも約１３のＣａ／Ｐ；少なくとも約１４のＣａ／Ｐ；少なくとも約１５のＣａ／Ｐ；少なくとも約１６のＣａ／Ｐ；少なくとも約１７のＣａ／Ｐ；少なくとも約１８のＣａ／Ｐ；少なくとも約１９のＣａ／Ｐ；または少なくとも約２０のＣａ／Ｐの比を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１４６】
別の例として、ミネラルコーティングは、約０．１のＣａ／Ｐ；約０．２のＣａ／Ｐ；約０．３のＣａ／Ｐ；約０．４のＣａ／Ｐ；約０．５のＣａ／Ｐ；約０．６のＣａ／Ｐ；約０．７のＣａ／Ｐ；約０．８のＣａ／Ｐ；約０．９のＣａ／Ｐ；約１．０のＣａ／Ｐ；約１．１のＣａ／Ｐ；約１．２のＣａ／Ｐ；約１．３のＣａ／Ｐ；約１．４のＣａ／Ｐ；約１．５のＣａ／Ｐ；約１．６のＣａ／Ｐ；約１．７のＣａ／Ｐ；約１．８のＣａ／Ｐ；約１．９のＣａ／Ｐ；約２．０のＣａ／Ｐ；約２．１のＣａ／Ｐ；約２．２のＣａ／Ｐ；約２．３のＣａ／Ｐ；約２．４のＣａ／Ｐ；約２．５のＣａ／Ｐ；約２．６のＣａ／Ｐ；約２．７のＣａ／Ｐ；約２．８のＣａ／Ｐ；約２．９のＣａ／Ｐ；約３．０のＣａ／Ｐ；約３．１のＣａ／Ｐ；約３．２のＣａ／Ｐ；約３．３のＣａ／Ｐ；約３．４のＣａ／Ｐ；約３．５のＣａ／Ｐ；約３．６のＣａ／Ｐ；約３．７のＣａ／Ｐ；約３．８のＣａ／Ｐ；約３．９のＣａ／Ｐ；約４のＣａ／Ｐ；約５のＣａ／Ｐ；約６のＣａ／Ｐ；約７のＣａ／Ｐ；約８のＣａ／Ｐ；約９のＣａ／Ｐ；約１０のＣａ／Ｐ；約１１のＣａ／Ｐ；約１２のＣａ／Ｐ；約１３のＣａ／Ｐ；約１４のＣａ／Ｐ；約１５のＣａ／Ｐ；約１６のＣａ／Ｐ；約１７のＣａ／Ｐ；約１８のＣａ／Ｐ；約１９のＣａ／Ｐ；または約２０のＣａ／Ｐの比を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１４７】
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、従来の方法により特性決定され得る。例えば、ｍＳＢＦ中のミネラル形成は、カルシウム感受性電極（Ｄｅｎｖｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ、Ｄｅｎｖｅｒ、ＣＯ）を使用して、溶液カルシウム濃度の変化を分析することにより追跡され得る。その成長後、ミネラルマトリックスを溶解し、カルシウムおよびホスフェートイオン含量に関して分析してミネラル形成を定量化することができ、また、例えば元素分析用のＮｏｒａｎ  ＳｉＬｉ検出器を有する走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）を使用して、ミネラル結晶を形態学的および組成的に分析することができる。
例えば、結晶相は、Ｘ線回折により特性決定されてもよく、２θは、１５〜３５°の範囲内、または２５．８°、２８．１°、２８．９°、３１．８°もしくは３２．１°である。
【０１４８】
別の例として、本明細書に記載のように、化学組成または結晶相は、フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）により特性決定されてもよく、カーボネートのピークは、１４００〜１５００ｃｍ-1領域内にあり得、ホスフェートのピークは、９００〜１１００ｃｍ-1領域内、または約５７０ｃｍ-1、９６２ｃｍ-1もしくは１０５０ｃｍ-1にあり得る。
別の例として、本明細書に記載のように、ミネラル層の溶解はまた、生理的に適切な条件（例えば、３７℃、ｐＨ７．４）におけるトリス緩衝食塩水中でのインキュベーション中のカルシウムおよびホスフェートイオンの放出を測定することにより、特性決定されてもよい。
【０１４９】
別の例として、本明細書に記載のように、カルシウムおよびホスフェート濃度は、以前に説明された比色分析を使用して測定されてもよい（Murphy et al., 「Bioinspired growth of crystalline carbonate apatite on biodegradable polymer substrata」, J Am Chem Soc 124:1910-7, 2002を参照されたい）。本明細書に記載の特性決定法はそれぞれ、無機材料の分析において習慣的であり、リン酸カルシウムコーティングの設計および試験のためのＦＤＡのガイダンス作成基準（ｇｏｏｄ  ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｐｒａｃｔｉｃｅｓ）に従っている（Devices FDoGaR. Calcium phosphate coating draft guidance for preparation of FDA submissions for orthopedic and dental endosseous implants. 1997を参照されたい）。
【０１５０】
別の例として、本明細書に記載のように、ミネラルコーティングは主に結晶性となり得るが、非晶質形態で存在してもよい。例えば、ミネラルコーティングは、少なくとも約５％の結晶化度を有してもよい。例えば、ミネラルコーティングは、少なくとも約５％の結晶化度；少なくとも約１０％の結晶化度；少なくとも約１５％の結晶化度；少なくとも約２０％の結晶化度；少なくとも約２５％の結晶化度；少なくとも約３０％の結晶化度；少なくとも約３５％の結晶化度；少なくとも約４０％の結晶化度；少なくとも約４５％の結晶化度；少なくとも約４６％の結晶化度；少なくとも約４７％の結晶化度；少なくとも約４８％の結晶化度；少なくとも約４９％の結晶化度；少なくとも約５０％の結晶化度；少なくとも約５１％の結晶化度；少なくとも約５２％の結晶化度；少なくとも約５３％の結晶化度；少なくとも約５４％の結晶化度；少なくとも約５５％の結晶化度；少なくとも約５６％の結晶化度；少なくとも約５７％の結晶化度；少なくとも約５８％の結晶化度；少なくとも約５９％の結晶化度；少なくとも約６０％の結晶化度；少なくとも約６１％の結晶化度；少なくとも約６２％の結晶化度；少なくとも約６３％の結晶化度；少なくとも約６４％の結晶化度；少なくとも約６５％の結晶化度；少なくとも約６６％の結晶化度；少なくとも約６７％の結晶化度；少なくとも約６８％の結晶化度；少なくとも約６９％の結晶化度；少なくとも約７０％の結晶化度；少なくとも約７１％の結晶化度；少なくとも約７２％の結晶化度；少なくとも約７３％の結晶化度；少なくとも約７４％の結晶化度；少なくとも約７５％の結晶化度；少なくとも約７６％の結晶化度；少なくとも約７７％の結晶化度；少なくとも約７８％の結晶化度；少なくとも約７９％の結晶化度；少なくとも約８０％の結晶化度；少なくとも約８１％の結晶化度；少なくとも約８２％の結晶化度；少なくとも約８３％の結晶化度；少なくとも約８４％の結晶化度；少なくとも約８５％の結晶化度；少なくとも約８６％の結晶化度；少なくとも約８７％の結晶化度；少なくとも約８８％の結晶化度；少なくとも約８９％の結晶化度；少なくとも約９０％の結晶化度；少なくとも約９１％の結晶化度；少なくとも約９２％の結晶化度；少なくとも約９３％の結晶化度；少なくとも約９４％の結晶化度；少なくとも約９５％の結晶化度；少なくとも約９６％の結晶化度；少なくとも約９７％の結晶化度；少なくとも約９８％の結晶化度；少なくとも約９９％の結晶化度；または少なくとも約１００％の結晶化度を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１５１】
別の例として、ミネラルコーティングは、約５％の結晶化度；１０％の結晶化度；約１５％の結晶化度；約２０％の結晶化度；約２５％の結晶化度；約３０％の結晶化度；約３５％の結晶化度；約４０％の結晶化度；約４５％の結晶化度；約４６％の結晶化度；約４７％の結晶化度；約４８％の結晶化度；約４９％の結晶化度；約５０％の結晶化度；約５１％の結晶化度；約５２％の結晶化度；約５３％の結晶化度；約５４％の結晶化度；約５５％の結晶化度；約５６％の結晶化度；約５７％の結晶化度；約５８％の結晶化度；約５９％の結晶化度；約６０％の結晶化度；約６１％の結晶化度；約６２％の結晶化度；約６３％の結晶化度；約６４％の結晶化度；約６５％の結晶化度；約６６％の結晶化度；約６７％の結晶化度；約６８％の結晶化度；約６９％の結晶化度；約７０％の結晶化度；約７１％の結晶化度；約７２％の結晶化度；約７３％の結晶化度；約７４％の結晶化度；約７５％の結晶化度；約７６％の結晶化度；約７７％の結晶化度；約７８％の結晶化度；約７９％の結晶化度；約８０％の結晶化度；約８１％の結晶化度；約８２％の結晶化度；約８３％の結晶化度；約８４％の結晶化度；約８５％の結晶化度；約８６％の結晶化度；約８７％の結晶化度；約８８％の結晶化度；約８９％の結晶化度；約９０％の結晶化度；約９１％の結晶化度；約９２％の結晶化度；約９３％の結晶化度；約９４％の結晶化度；約９５％の結晶化度；約９６％の結晶化度；約９７％の結晶化度；約９８％の結晶化度；約９９％の結晶化度；または約１００％の結晶化度を含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１５２】
本明細書に記載のように、骨誘発性（ｏｓｔｅｏｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ）および骨誘導性（ｏｓｔｅｏｉｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ）は、リン酸カルシウムコーティングを使用してスキャフォールド（例えば整形外科用インプラント材料）に付与され得る。リン酸カルシウム系ミネラルコーティングの明確な骨誘発性および潜在的な骨誘導性に基づいて、リン酸カルシウムミネラル成長は、スキャフォールドをコーティングするために有利に利用され得る。
【０１５３】
補助成分
本明細書に記載のようなミネラルコーティングは、補助成分を含んでもよい。例えば、補助成分は、スキャフォールド上、コーティングの表面上、またはスキャフォールドのコーティング内に組み込まれてもよい。
例えば、補助成分は、改善された骨誘発性、骨誘導性、骨促進（ｏｓｔｅｏｐｒｏｍｏｔｉｏｎ）、骨形成、強度、抗菌、抗微生物特性、生物抑制、または抗感染症特性等の望ましい特性を、ミネラルコーティングに提供し得る。
本明細書に記載のように、補助成分は、有機またはコラーゲンマトリックス、例えば脱灰骨基質（ＤＢＭ）であってもよい。本明細書に記載のように、ＤＢＭは、当技術分野において知られている任意の形態であってもよい。例えば、ＤＢＭは、脱灰骨粉末、脱灰骨抽出物、脱灰骨ゼラチン、顆粒、断片、ペレット、スライス、削りくず、パテ、ペースト、ミックスまたはストリップであってもよい。
【０１５４】
本明細書に記載のように、ＤＢＭは、当技術分野において知られている任意の方法により、コーティングまたはスキャフォールド内またはその上に組み込まれてもよい。別の例として、ＤＢＭは、多孔質材料、例えば多孔質スキャフォールド内に充填、または統合されてもよい。別の例として、ＤＢＭは、医療デバイス、例えば、３Ｄ印刷により形成された多孔質のコーティングされた生体吸収性インプラント内に充填されてもよい。別の例として、ＤＢＭは、ミネラルコーティングされたデバイスと組み合わされてもよい。別の例として、ＤＢＭは、混合、コーティング、または充填により、ミネラルコーティング、スキャフォールド、またはマトリックス材料と合わせられてもよい。
本明細書に記載のように、ＤＢＭは、当技術分野において知られている任意の方法により、スキャフォールドまたはミネラルコーティングされたスキャフォールドと統合されてもよい。ミネラルコーティング内へのＤＢＭの組込みは、Ozturk et al. 2006 Int Orth 30, 147-152または米国特許出願公開第２００８／０２３３２０３号に記載される通りであってもよい。
【０１５５】
本明細書に記載のように、ＤＢＭをスキャフォールドと統合されるように調製することは、ＤＢＭを水溶液と混合することを含んでもよい。例えば、水溶液は、本明細書に記載のようなミネラルコーティング溶液であってもよい。別の例として、水溶液は、弱酸または塩酸グアニジンであってもよい。混合物は、水性脱灰骨抽出物を生成するために、設定された時間だけ持続的にかき混ぜられてもよい。次いで、抽出物は、任意の残留固体を除去するために濾過され、酸中和または除去されてもよく、抽出物は、多孔質スキャフォールドをコーティングするために使用されてもよい。
【０１５６】
本明細書に記載のように、溶液中のＤＢＭの量は、水溶液１００ｇ当たり約１ｇ〜約９９ｇのＤＢＭ、または約２ｇ〜約１０ｇのＤＢＭであってもよい。ＤＢＭの量は、水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１ｇのＤＢＭを含んでもよい。例えば、溶液中のＤＢＭの量は、水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約１９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約２９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約３９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約４９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約５９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約６９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約７９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約８９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９８ｇのＤＢＭ；または水溶液１００ｇ当たり水溶液１００ｇ当たり少なくとも約９９ｇのＤＢＭを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１５７】
別の例として、ＤＢＭの量は、水溶液１００ｇ当たり約１ｇのＤＢＭを含んでもよい。ＤＢＭの量は、水溶液１００ｇ当たり約１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約１９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約２９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約３９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約４９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約５９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約６９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約７９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８８ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約８９ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９０ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９１ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９２ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９３ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９４ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９５ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９６ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９７ｇのＤＢＭ；水溶液１００ｇ当たり約９８ｇのＤＢＭ；または水溶液１００ｇ当たり約９９ｇのＤＢＭを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１５８】
水溶液は、本明細書に記載のようなミネラルコーティング溶液を含んでもよい。水溶液は、任意の生物学的に適合する水溶液、特に、ミネラルコーティング組成物、成長因子、またはタンパク質がその中で安定となり得る水溶液を含んでもよい。そのような溶液の例は、これらに限定されないが、上述のようなミネラルコーティング溶液、トリス緩衝液、トリス緩衝食塩水、リン酸緩衝液、またはリン酸緩衝食塩水であってもよい。例えば、溶液は、弱酸溶液であってもよく、弱酸は、これらに限定されないが、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、アスコルビン酸またはそれらの組合せであってもよい。当技術分野において知られている任意の弱酸が使用され得る。弱酸溶液の濃度は、約２Ｍ〜約３Ｍであってもよい。第２の例示的実施形態において、溶液は、塩酸グアニジン溶液であってもよく、塩酸グアニジン溶液の濃度は、約３Ｍ〜約６Ｍであってもよい。
【０１５９】
ＤＢＭおよび水溶液が混合され得る時間は、約８時間〜約９６時間であってもよい。例えば、ＤＢＭおよび水溶液は、約２４時間〜約９６時間互いに混合されてもよい。ＤＢＭおよび水溶液は、その期間、持続的なかき混ぜにより互いに混合されてもよい。持続的なかき混ぜは、これらに限定されないが、撹拌、振盪、超音波またはそれらの任意の組合せ、および混合物をかき混ぜる任意の他の方法により得ることができる。
混合は、スキャフォールドのコーティング、ならびにＤＢＭからの成長因子および／またはタンパク質の抽出を促し得るが、成長因子および／またはタンパク質が安定となり得る温度で行われてもよい。温度は、５０℃未満であってもよい。別の例として、温度は、室温であってもよい。
【０１６０】
適切な時間だけ混合した後、得られた脱灰骨抽出物は、溶液中に残留する任意の不溶性ＤＢＭから分離されてもよい。この分離は、これらに限定されないが、デカンテーション、濾過、または遠心分離等の任意の数のプロセスにより行われてもよい。例えば、溶液は、残留する任意の可溶性ＤＢＭを除去するために濾過されてもよい。篩またはフィルタのサイズは、残留するＤＢＭ粒子のサイズに依存し、これはさらに、ＤＢＭの初期形態に依存し得る。例えば、フィルタは、約５０μｍ〜約３００μｍであってもよい。別の例として、フィルタは、篩、紙、焼結ガラス、織布もしくは不織布、または当技術分野において知られている任意の他の濾過手段であってもよい。
【０１６１】
脱灰骨抽出物は、希釈され、中和され、または弱酸もしくは塩酸グアニジンが除去されてもよい。方法は、これらに限定されないが、滴定、透析、液液抽出、中空繊維濾過、限外濾過、クロスフロー濾過または沈殿を含み得る。例えば、水溶液は、適切な対イオンでの滴定により、約６．５〜約７．５のｐＨに中和されてもよい。そのような方法は、当技術分野において周知である。別の例として、弱酸または塩酸グアニジンは、これらに限定されないが、トリス、ＴＢＳ、ホスフェート、ＰＢＳまたは水等の生物学的に適合性の緩衝液に対して、透析、中空繊維濾過、限外濾過またはクロスフロー濾過により除去され得、緩衝液のｐＨは、約６．５〜約７．５であってもよい。透析膜の分画分子量は、溶液中での望ましいタンパク質および／または成長因子のサイズに依存する。透析、中空繊維濾過、限外濾過またはクロスフロー濾過膜は、例えば、１２Ｋｄ以下、または約１０Ｋｄ〜約１２Ｋｄの分画分子量を有してもよい。試料中の所望の分子を保持するように透析配管の分画分子量を選択する方法は、当技術分野において周知である。
【０１６２】
脱灰骨抽出物は、ミネラルコーティング溶液を含んでもよく、または、本明細書に記載のようにミネラルコーティング溶液と混合されてもよい。例えば、骨抽出物は、実施例４に記載のようなミネラルコーティング手順におけるスキャフォールドインキュベーションステップ中に導入されてもよい。
本明細書に記載のように、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、脱灰骨材料と同時にコーティングされてもよく、または、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、脱灰骨材料でコーティングされてもよい。
【０１６３】
脱灰骨抽出物は、脱灰骨抽出物がスキャフォールドの細孔および通路に浸潤するようにスキャフォールドに塗布されてもよい。例えば、脱灰骨抽出物は、真空下でスキャフォールドに塗布されてもよい。別の例として、脱灰骨抽出物は、構造を抽出物中に浸漬し、毛管作用により抽出物を細孔および通路に浸潤させることにより、スキャフォールドに塗布されてもよい。脱灰骨抽出物は、スキャフォールドに塗布された後、スキャフォールド上で乾燥されてもよい。脱灰骨抽出物は、凍結乾燥、真空、加熱、またはそれらの組合せにより、構造上で乾燥されてもよい。１つ以上の実施形態において、加熱は、５０℃未満の温度であってもよい。
【０１６４】
本明細書に記載のように、本発明の方法は、脱灰骨ゼラチンを作製するステップをさらに含んでもよい。脱灰骨ゼラチンは、脱灰骨抽出物もしくはミネラルコーティングの上にコーティングされてもよく、または、コーティングする前に抽出物と混合されて単一のコーティングが形成されてもよく、または、ミネラルコーティングと混合されて単一コーティングが形成されてもよい。脱灰骨ゼラチンは、ＤＢＭを、水性生理食塩水、例えば、これらに限定されないが、ＰＢＳ、ＴＢＳ、または塩化ナトリウム溶液と混合して、懸濁液を形成することにより形成されてもよい。懸濁液は、増加した温度および圧力まで、例えば、これに限定されないが、オートクレーブで処理されてもよい。１つの例示的実施形態において、溶液は、少なくとも約１５ｐｓｉｇの圧力で約８５℃〜約１３０℃の温度まで加熱されてもよい。ＤＢＭは、溶解されて、脱灰骨ゼラチンを生成し得る。脱灰骨ゼラチンを形成するための方法は、当技術分野において知られている。ＤＢＭは、脱灰骨抽出物を形成する一方で濾過ステップの間に除去された固体であってもよく、または、新鮮なＤＢＭであってもよい。代替として、脱灰骨ゼラチンは主にコラーゲンを含むため、任意の純度のコラーゲンがＤＢＭと置き換えられてもよいことが理解される。
【０１６５】
脱灰骨ゼラチンは、ゼラチンが細孔および通路をコーティングするように、スキャフォールド上の乾燥した脱灰骨抽出物コーティング上にコーティングされてもよい。代替として、脱灰骨ゼラチンは、脱灰骨抽出物がスキャフォールド上にコーティングされる前に抽出物と混合されて、単一のコーティングを形成してもよい。スキャフォールドは、ミネラルコーティングで事前にコーティングされてもよく、または、ミネラルコーティング溶液がＤＢＭコーティング中に組み込まれてもよい。脱灰骨抽出物およびゼラチンを含むコーティングは、次いで、細孔および通路がコーティングされるようにスキャフォールドに塗布されてもよい。脱灰骨ゼラチンは、より高い温度で粘稠性がより低く、スキャフォールドに塗布するのがより容易となり得ることが理解される。脱灰骨ゼラチンは、溶液等のより粘稠性の低い形態で、スキャフォールドに塗布されてもよい。脱灰骨ゼラチンは、任意の他のステップが行われる前に、ゲル化されてもよい。脱灰骨ゼラチンコーティングは、脱灰骨抽出物コーティングの任意の成長因子および／またはタンパク質を不活性化しないために十分低い温度で維持されてもよい。
【０１６６】
塗布されたら、単独の、または脱灰骨抽出物もしくはミネラルコーティングと混合された脱灰骨ゼラチンは、スキャフォールド上で乾燥されてもよい。スキャフォールドは、ミネラルコーティングで事前にコーティングされてもよい。脱灰骨ゼラチンは、凍結乾燥、真空、加熱、またはそれらの組合せにより、構造上で乾燥されてもよい。１つ以上の実施形態において、加熱は、５０℃以下の温度であってもよい。
【０１６７】
本明細書に記載のように、ＤＢＭは、ミネラルコーティングまたはスキャフォールド内に統合されてもよい。例えば、ＤＢＭは、質量％（ｗ／ｗ）または体積％（ｖ／ｖ）だけミネラルコーティングまたはスキャフォールド内に統合されてもよい。ミネラルコーティングまたはスキャフォールドは、少なくとも約１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭを含んでもよい。例えば、ミネラルコーティングまたはスキャフォールドは、少なくとも約１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約１９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約２９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約３９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約４９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約５９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約６９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約７９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約８９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；少なくとも約９８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；または少なくとも約９９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１６８】
別の例として、ミネラルコーティングまたはスキャフォールドは、約１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約１９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約２９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約３９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約４９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約５９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約６９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約７９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約８９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９０％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９１％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９２％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９３％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９４％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９５％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９６％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９７％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；約９８％（ｗ／ｗ）のＤＢＭ；または約９９％（ｗ／ｗ）のＤＢＭを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１６９】
ミネラルコーティングまたはスキャフォールドは、少なくとも約１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭを含んでもよい。別の例として、ミネラルコーティングまたはスキャフォールドは、少なくとも約１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約１９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約２９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約３９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約４９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約５９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約６９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約７９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約８９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；少なくとも約９８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；または少なくとも約９９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１７０】
別の例として、ミネラルコーティングまたはスキャフォールドは、約１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約１９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約２９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約３９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約４９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約５９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約６９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約７９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約８９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９０％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９１％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９２％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９３％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９４％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９５％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９６％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９７％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；約９８％（ｖ／ｖ）のＤＢＭ；または約９９％（ｖ／ｖ）のＤＢＭを含んでもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
本明細書に記載のように、補助成分は、抗微生物剤であってもよい。例えば、抗微生物剤は、銀粒子であってもよい。別の例として、銀粒子は、銀マイクロ粒子または銀ナノ粒子であってもよい。スキャフォールドと統合された銀粒子は、現在、スキャフォールドに生物抑制、抗感染症特性を提供すると考えられている。
本明細書に記載のように、銀粒子は、ミネラルコーティングまたはスキャフォールド上に統合されてもよい。例えば、銀粒子は、ＤＢＭ統合の前、その間、またはその後に、スキャフォールドまたはコーティング内に統合されてもよい。
【０１７１】
本明細書に記載のように、銀粒子は、ミネラルコーティングされたスキャフォールドの表面上に組み込まれてもよい。例えば、銀粒子は、当技術分野において知られている任意の方法により、ミネラルコーティング内、またはその上に組み込まれてもよい。別の例として、銀粒子の組込みは、Lee et al. 2013 Mat. Views 25, 1173-1179；ＷＯ２０１４／１１０２８４；米国特許第８，６７３，０１８号；米国特許第出願公開第２０１３／０１４２８８５号；Ciobanu (2014)；Jadalannagari (2014)；米国特許出願公開第２００９／０１９８３４４号に記載される通りであってもよい。
本明細書に記載のように、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、クエン酸溶液および硝酸銀溶液中でインキュベートされて、ミネラルコーティング上に銀ナノ粒子またはマイクロ粒子を生成してもよい。
【０１７２】
本明細書に記載のように、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、クエン酸溶液中でインキュベートされてもよい。例えば、クエン酸溶液は、約０．１ｍＭ〜１００ｍＭのクエン酸溶液であってもよい。別の例として、クエン酸溶液の濃度は、少なくとも約０．１ｍＭのクエン酸であってもよい。別の例として、クエン酸溶液の濃度は、少なくとも約０．１ｍＭのクエン酸；少なくとも約０．２ｍＭのクエン酸；少なくとも約０．３ｍＭのクエン酸；少なくとも約０．４ｍＭのクエン酸；少なくとも約０．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約０．６ｍＭのクエン酸；少なくとも約０．７ｍＭのクエン酸；少なくとも約０．８ｍＭのクエン酸；少なくとも約  ０．９ｍＭのクエン酸；少なくとも約１ｍＭのクエン酸；少なくとも約１．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約２ｍＭのクエン酸；少なくとも約２．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約３．０ｍＭのクエン酸；少なくとも約３．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約４．０ｍＭのクエン酸；少なくとも約４．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約５．０ｍＭのクエン酸；少なくとも約５．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約６．０ｍＭのクエン酸；少なくとも約６．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約７．０ｍＭのクエン酸；少なくとも約７．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約８．０ｍＭのクエン酸；少なくとも約８．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約９．０ｍＭのクエン酸；少なくとも約９．５ｍＭのクエン酸；少なくとも約１０ｍＭのクエン酸；少なくとも約１５ｍＭのクエン酸；少なくとも約２０ｍＭのクエン酸；少なくとも約２５ｍＭのクエン酸；少なくとも約３０ｍＭのクエン酸；少なくとも約３５ｍＭのクエン酸；少なくとも約４０ｍＭのクエン酸；少なくとも約４５ｍＭのクエン酸；少なくとも約５０ｍＭのクエン酸；少なくとも約５５ｍＭのクエン酸；少なくとも約６０ｍＭのクエン酸；少なくとも約６５ｍＭのクエン酸；少なくとも約７０ｍＭのクエン酸；少なくとも約７５ｍＭのクエン酸；少なくとも約８０ｍＭのクエン酸；少なくとも約８５ｍＭのクエン酸；少なくとも約９０ｍＭのクエン酸；少なくとも約９５ｍＭのクエン酸；少なくとも約；または１００ｍＭのクエン酸であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１７３】
本明細書に記載のように、クエン酸溶液の濃度は、約０．１ｍＭのクエン酸；少なくとも約０．２ｍＭのクエン酸；約０．３ｍＭのクエン酸；約０．４ｍＭのクエン酸；約０．５ｍＭのクエン酸；約０．６ｍＭのクエン酸；約０．７ｍＭのクエン酸；約０．８ｍＭのクエン酸；約０．９ｍＭのクエン酸；約１ｍＭのクエン酸；約１．５ｍＭのクエン酸；約２ｍＭのクエン酸；約２．５ｍＭのクエン酸；約３．０ｍＭのクエン酸；約３．５ｍＭのクエン酸；約４．０ｍＭのクエン酸；約４．５ｍＭのクエン酸；約５．０ｍＭのクエン酸；約５．５ｍＭのクエン酸；約６．０ｍＭのクエン酸；約６．５ｍＭのクエン酸；約７．０ｍＭのクエン酸；約７．５ｍＭのクエン酸；約８．０ｍＭのクエン酸；約８．５ｍＭのクエン酸；約９．０ｍＭのクエン酸；約９．５ｍＭのクエン酸；約１０ｍＭのクエン酸；約１５ｍＭのクエン酸；約２０ｍＭのクエン酸；約２５ｍＭのクエン酸；約３０ｍＭのクエン酸；約３５ｍＭのクエン酸；約４０ｍＭのクエン酸；約４５ｍＭのクエン酸；約５０ｍＭのクエン酸；約５５ｍＭのクエン酸；約６０ｍＭのクエン酸；約６５ｍＭのクエン酸；約７０ｍＭのクエン酸；約７５ｍＭのクエン酸；約８０ｍＭのクエン酸；約８５ｍＭのクエン酸；約９０ｍＭのクエン酸；約９５ｍＭのクエン酸；ａｂｏｕｔ；または１００ｍＭのクエン酸であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１７４】
本明細書に記載のように、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、クエン酸溶液中で約０．１時間〜約４０時間インキュベートされてもよい。例えば、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、約０．５時間〜約４時間インキュベートされてもよい。上記の範囲の列挙は、それぞれの列挙された範囲内の個別の値を含むことが理解される。
【０１７５】
本明細書に記載のように、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、クエン酸溶液中で少なくとも約０．１時間インキュベートされてもよい。例えば、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、クエン酸溶液中で少なくとも約０．１時間；少なくとも約０．２時間；少なくとも約０．３時間；少なくとも約０．４時間；少なくとも約０．５時間；少なくとも約０．６時間；少なくとも約０．７時間；少なくとも約０．８時間；少なくとも約０．９時間；少なくとも約１時間；少なくとも約１．１時間；少なくとも約１．２時間；少なくとも約１．３時間；少なくとも約１．４時間；少なくとも約１．５時間；少なくとも約１．６時間；少なくとも約１．７時間；少なくとも約１．８時間；少なくとも約１．９時間；少なくとも約２時間；少なくとも約２．１時間；少なくとも約２．２時間；少なくとも約２．３時間；少なくとも約２．４時間；少なくとも約２．５時間；少なくとも約２．６時間；少なくとも約２．７時間；少なくとも約２．８時間；少なくとも約２．９時間；少なくとも約３．０時間；少なくとも約３．１時間；少なくとも約３．２時間；少なくとも約３．３時間；少なくとも約３．４時間；少なくとも約３．５時間；少なくとも約３．６時間；少なくとも約３．７時間；少なくとも約３．８時間；少なくとも約３．９時間；少なくとも約４．０時間；少なくとも約４．５時間；少なくとも約５時間；少なくとも約５．５時間；少なくとも約６．０時間；少なくとも約６．５時間；少なくとも約７．０時間；少なくとも約７．５時間；少なくとも約８．０時間；少なくとも約８．５時間；少なくとも約９．０時間；少なくとも約９．５時間；少なくとも約１０時間；少なくとも約１１時間；少なくとも約１２時間；少なくとも約１３時間；少なくとも約１４時間；少なくとも約１５時間；少なくとも約１６時間；少なくとも約１７時間；少なくとも約１８時間；少なくとも約１９時間；少なくとも約２０時間；少なくとも約２１時間；少なくとも約２２時間；少なくとも約２３時間；少なくとも約２４時間；少なくとも約２５時間；少なくとも約２６時間；少なくとも約２７時間；少なくとも約２８時間；少なくとも約２９時間；少なくとも約３０時間；少なくとも約３１時間；少なくとも約３２時間；少なくとも約３３時間；少なくとも約３４時間；少なくとも約３５時間；少なくとも約３６時間；少なくとも約３７時間；少なくとも約３８時間；少なくとも約３９時間；または少なくとも約４０時間インキュベートされてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１７６】
別の例として、ミネラルコーティングされたスキャフォールドは、クエン酸溶液中で約０．１時間；約０．２時間；約０．３時間；約０．４時間；約０．５時間；約０．６時間；約０．７時間；約０．８時間；約０．９時間；約１時間；約１．１時間；約１．２時間；約１．３時間；約１．４時間；約１．５時間；約１．６時間；約１．７時間；約１．８時間；約１．９時間；約２．０時間；約２．１時間；約２．２時間；約２．３時間；約２．４時間；約２．５時間；約２．６時間；約２．７時間；約２．８時間；約２．９時間；約３．０時間；約３．１時間；約３．２時間；約３．３時間；約３．４時間；約３．５時間；約３．６時間；約３．７時間；約３．８時間；約３．９時間；約４．０時間；約４．５時間；約５時間；約５．５時間；約６．０時間；約６．５時間；約７．０時間；約７．５時間；約８．０時間；約８．５時間；約９．０時間；約９．５時間；約１０時間；約１１時間；約１２時間；約１３時間；約１４時間；約１５時間；約１６時間；約１７時間；約１８時間；約１９時間；約２０時間；約２１時間；約２２時間；約２３時間；約２４時間；約２５時間；約２６時間；約２７時間；約２８時間；約２９時間；約３０時間；約３１時間；約３２時間；約３３時間；約３４時間；約３５時間；約３６時間；約３７時間；約３８時間；約３９時間；または約４０時間インキュベートされてもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１７７】
クエン酸処理後のミネラルコーティングされたスキャフォールドは、次いで、銀粒子を成長させるために硝酸銀溶液に移されてもよい。銀粒子は、コーティングされたスキャフォールド全体を被覆してもよい。銀粒子のサイズは、より長い硝酸銀インキュベーション時間、およびより高い硝酸銀濃度により増加され得るが、クエン酸インキュベーション時間および濃度は、銀粒子サイズに影響することは示されていない。
【０１７８】
本明細書に記載のように、銀粒子は、クエン酸処理された、およびクエン酸処理されていないミネラルコーティングされたスキャフォールドの両方に合成され得るが、これは、銀粒子のサイズおよび形態が、これらの２つの群の間で同じとなり得るためである。銀イオンと、ミネラルコーティング中のＣａＰから溶解したカーボネートまたはホスフェートイオンとの反応により、炭酸銀およびリン酸銀粒子が、ミネラルコーティングされたスキャフォールド上に局所的に形成され得る。
【０１７９】
本明細書に記載のように、異なるインキュベート条件から調製された銀の経時的放出が測定され得る。ミネラルコーティングからの銀の放出は、３日〜３０日超の範囲の期間継続し得、放出された銀種の総量は、試料表面のｃｍ2当たり０．７μｇ〜７５．４μｇの範囲となり得る。銀放出は、クエン酸で処理された群においてほぼ線形の放出反応速度で生じ得、一方、クエン酸で処理されていない群は、最初の２日間で初期バースト放出を示し得る。これらの放出反応速度は、吸着したクエン酸分子の存在下でのＣａＰコーティングの異なる溶解速度によって決定付けられ得る。バースト放出は、予測できない様式で生じ得、放出された薬物の過剰摂取に起因する有害な副作用を引き起こし得るため、薬物送達システムの応用において実用上の問題をもたらし得る。クエン酸処理は、銀種のバースト放出の回避に役立ち、それにより銀過剰摂取に関連し得る合併症を防止し得る。クエン酸溶液中での４時間のインキュベーションは、０．５時間および１時間のインキュベーションと比較して、より急速な放出反応速度をもたらし得る。銀放出反応速度は、クエン酸濃度により影響を受けることは示されていない。この傾向は、放出された銀の量が、吸着したクエン酸により、ひいてはミネラルコーティングの溶解により決定付けられ得ることを示唆している。硝酸銀溶液中でのインキュベーション時間の増加（例えば、０．５時間から４時間）は、より大量の銀の放出をもたらし得る。
【０１８０】
同様に、銀粒子の成長の間の硝酸銀溶液のより高い濃度は、より長い放出期間にわたり放出されるより大量の銀をもたらし得る。総合すると、これらの結果は、銀放出の用量または時間枠が、ミネラルコーティングされたスキャフォールド上の銀塩粒子の成長中の条件を変更することによって容易に制御され得ることを示し得る。
【０１８１】
放出された銀の抗菌活性は、細菌培養物に対して評価され得る。例えば、放出された銀の抗菌活性は、ブドウ球菌およびグラム陰性大腸菌に対して評価され得る。銀を放出するＣａＰコーティングからの培地を、指数増殖期にある細菌懸濁液に添加することができ、６００ｎｍで光学密度を測定することにより、細菌増殖を監視することができる。
【０１８２】
培地中に放出される銀は、黄色ブドウ球菌または大腸菌に対して同様の抗菌活性を有し得る。後の時点で放出された銀は、抗微生物活性を維持し得る。以前の研究では、クエン酸が、微生物のコロニー形成を防止することにより、慢性傷口感染を処置するために効果的となり得ることが報告されているため、クエン酸はまた、銀ナノ粒子が組み込まれたミネラルコーティングされたスキャフォールドの抗菌特性に有益となり得る。
【０１８３】
本明細書に記載のように、銀粒子は、少なくとも約１％の被覆率でミネラルコーティングまたはスキャフォールドの表面を被覆し得る。例えば、銀粒子は、少なくとも約１％の被覆率；少なくとも約２％被覆率；少なくとも約３％被覆率；少なくとも約４％被覆率；少なくとも約５％被覆率；少なくとも約６％被覆率；少なくとも約７％被覆率；少なくとも約８％被覆率；少なくとも約９％被覆率；少なくとも約１０％被覆率；少なくとも約１１％被覆率；少なくとも約１２％被覆率；少なくとも約１３％被覆率；少なくとも約１４％被覆率；少なくとも約１５％被覆率；少なくとも約１６％被覆率；少なくとも約１７％被覆率；少なくとも約１８％被覆率；少なくとも約１９％被覆率；少なくとも約２０％被覆率；少なくとも約２１％被覆率；少なくとも約２２％被覆率；少なくとも約２３％被覆率；少なくとも約２４％被覆率；少なくとも約２５％被覆率；少なくとも約２６％被覆率；少なくとも約２７％被覆率；少なくとも約２８％被覆率；少なくとも約２９％被覆率；少なくとも約３０％被覆率；少なくとも約３１％被覆率；少なくとも約３２％被覆率；少なくとも約３３％被覆率；少なくとも約３４％被覆率；少なくとも約３５％被覆率；少なくとも約３６％被覆率；少なくとも約３７％被覆率；少なくとも約３８％被覆率；少なくとも約３９％被覆率；少なくとも約４０％被覆率；少なくとも約４１％被覆率；少なくとも約４２％被覆率；少なくとも約４３％被覆率；少なくとも約４４％被覆率；少なくとも約４５％被覆率；少なくとも約４６％被覆率；少なくとも約４７％被覆率；少なくとも約４８％被覆率；少なくとも約４９％被覆率；少なくとも約５０％被覆率；少なくとも約５１％被覆率；少なくとも約５２％被覆率；少なくとも約５３％被覆率；少なくとも約５４％被覆率；少なくとも約５５％被覆率；少なくとも約５６％被覆率；少なくとも約５７％被覆率；少なくとも約５８％被覆率；少なくとも約５９％被覆率；少なくとも約６０％被覆率；少なくとも約６１％被覆率；少なくとも約６２％被覆率；少なくとも約６３％被覆率；少なくとも約６４％被覆率；少なくとも約６５％被覆率；少なくとも約６６％被覆率；少なくとも約６７％被覆率；少なくとも約６８％被覆率；少なくとも約６９％被覆率；少なくとも約７０％被覆率；少なくとも約７１％被覆率；少なくとも約７２％被覆率；少なくとも約７３％被覆率；少なくとも約７４％被覆率；少なくとも約７５％被覆率；少なくとも約７６％被覆率；少なくとも約７７％被覆率；少なくとも約７８％被覆率；少なくとも約７９％被覆率；少なくとも約８０％被覆率；少なくとも約８１％被覆率；少なくとも約８２％被覆率；少なくとも約８３％被覆率；少なくとも約８４％被覆率；少なくとも約８５％被覆率；少なくとも約８６％被覆率；少なくとも約８７％被覆率；少なくとも約８８％被覆率；少なくとも約８９％被覆率；少なくとも約９０％被覆率；少なくとも約９１％被覆率；少なくとも約９２％被覆率；少なくとも約９３％被覆率；少なくとも約９４％被覆率；少なくとも約９５％被覆率；少なくとも約９６％被覆率；少なくとも約９７％被覆率；少なくとも約９８％被覆率；または少なくとも約９９％の被覆率でミネラルコーティングまたはスキャフォールドの表面を被覆し得る。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１８４】
本明細書に記載のように、銀粒子は、少なくとも約１％被覆率；約２％被覆率；約３％被覆率；約４％被覆率；約５％被覆率；約６％被覆率；約７％被覆率；約８％被覆率；約９％被覆率；約１０％被覆率；約１１％被覆率；約１２％被覆率；約１３％被覆率；約１４％被覆率；約１５％被覆率；約１６％被覆率；約１７％被覆率；約１８％被覆率；約１９％被覆率；約２０％被覆率；約２１％被覆率；約２２％被覆率；約２３％被覆率；約２４％被覆率；約２５％被覆率；約２６％被覆率；約２７％被覆率；約２８％被覆率；約２９％被覆率；約３０％被覆率；約３１％被覆率；約３２％被覆率；約３３％被覆率；約３４％被覆率；約３５％被覆率；約３６％被覆率；約３７％被覆率；約３８％被覆率；約３９％被覆率；約４０％被覆率；約４１％被覆率；約４２％被覆率；約４３％被覆率；約４４％被覆率；約４５％被覆率；約４６％被覆率；約４７％被覆率；約４８％被覆率；約４９％被覆率；約５０％被覆率；約５１％被覆率；約５２％被覆率；約５３％被覆率；約５４％被覆率；約５５％被覆率；約５６％被覆率；約５７％被覆率；約５８％被覆率；約５９％被覆率；約６０％被覆率；約６１％被覆率；約６２％被覆率；約６３％被覆率；約６４％被覆率；約６５％被覆率；約６６％被覆率；約６７％被覆率；約６８％被覆率；約６９％被覆率；約７０％被覆率；約７１％被覆率；約７２％被覆率；約７３％被覆率；約７４％被覆率；約７５％被覆率；約７６％被覆率；約７７％被覆率；約７８％被覆率；約７９％被覆率；約８０％被覆率；約８１％被覆率；約８２％被覆率；約８３％被覆率；約８４％被覆率；約８５％被覆率；約８６％被覆率；約８７％被覆率；約８８％被覆率；約８９％被覆率；約９０％被覆率；約９１％被覆率；約９２％被覆率；約９３％被覆率；約９４％被覆率；約９５％被覆率；約９６％被覆率；約９７％被覆率；約９８％被覆率；または約９９％被覆率でミネラルコーティングまたはスキャフォールドの表面を被覆し得る。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１８５】
本明細書に記載の実施形態は、単一層のコーティングを説明しているが、ミネラルコーティング、ＤＢＭ、または銀粒子の２つ以上のコーティングまたは塗膜が塗布されてもよい。
【０１８６】
緩衝剤
本明細書に記載のような緩衝剤は、改質された擬似体液中で使用されてもよい。本明細書に記載のような緩衝剤は、任意の従来の緩衝剤であってもよい。緩衝剤は、米国特許出願公開第１３／４０７，４４１号；米国特許出願公開第１３／８７９，１７８号；および米国特許出願公開第１３／０３６，４７０号に記載される通りであってもよく、これらは参照により組み込まれる。
例えば、緩衝剤は、食塩水緩衝液であってもよい。別の例として、緩衝剤は、トリスであってもよい。トリスは、トリス緩衝食塩水（ＴＢＳ）であってもよい。トリスは、トリスＨＣｌであってもよい。別の例として、緩衝剤は、ＰＢＳであってもよい。ＰＢＳはＤＰＢＳであってもよい。別の例として、緩衝剤は、クエン酸、リン酸一カリウム、ホウ酸、またはジエチルバルビツール酸を含む混合物であってもよい。別の例として、緩衝剤は、ＴＡＰＳ、ビシン、トリシン、ＴＡＰＳＯ、ＨＥＥＳ、ＴＥＳ、ＭＯＰＳ、ＰＩＰＥＳ、カコジル酸塩、ＳＳＣ、ＭＥＳ、またはコハク酸であってもよい。
【０１８７】
本明細書に記載のような緩衝剤は、任意の従来の濃度であってもよい。例えば、擬似体液中の緩衝剤の濃度は、少なくとも約１ｍＭの緩衝剤であってもよい。別の例として、擬似体液中の緩衝剤の濃度は、少なくとも約２ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３ｍＭの緩衝剤；少なくとも約４ｍＭの緩衝剤；少なくとも約５ｍＭの緩衝剤；少なくとも約６ｍＭの緩衝剤；少なくとも約７ｍＭの緩衝剤；少なくとも約８ｍＭの緩衝剤；少なくとも約９ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１１ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１２ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１３ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１４ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１５ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１６ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１７ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１８ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１９ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２１ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２２ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２３ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２４ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２５ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２６ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２７ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２８ｍＭの緩衝剤；少なくとも約２９ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３１ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３２ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３３ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３４ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３５ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３６ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３７ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３８ｍＭの緩衝剤；少なくとも約３９ｍＭの緩衝剤；少なくとも約４０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約５０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約６０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約７０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約８０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約９０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１００ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１１０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１２０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１３０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１４０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１５０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１６０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１７０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１８０ｍＭの緩衝剤；少なくとも約１９０ｍＭの緩衝剤；または少なくとも約２００ｍＭの緩衝剤であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１８８】
別の例として、擬似体液中の緩衝剤の濃度は、約１ｍＭの緩衝剤；約２ｍＭの緩衝剤；約３ｍＭの緩衝剤；約４ｍＭの緩衝剤；約５ｍＭの緩衝剤；約６ｍＭの緩衝剤；約７ｍＭの緩衝剤；約８ｍＭの緩衝剤；約９ｍＭの緩衝剤；約１０ｍＭの緩衝剤；約１１ｍＭの緩衝剤；約１２ｍＭの緩衝剤；約１３ｍＭの緩衝剤；約１４ｍＭの緩衝剤；約１５ｍＭの緩衝剤；約１６ｍＭの緩衝剤；約１７ｍＭの緩衝剤；約１８ｍＭの緩衝剤；約１９ｍＭの緩衝剤；約２０ｍＭの緩衝剤；約２１ｍＭの緩衝剤；約２２ｍＭの緩衝剤；約２３ｍＭの緩衝剤；約２４ｍＭの緩衝剤；約２５ｍＭの緩衝剤；約２６ｍＭの緩衝剤；約２７ｍＭの緩衝剤；約２８ｍＭの緩衝剤；約２９ｍＭの緩衝剤；約３０ｍＭの緩衝剤；約３１ｍＭの緩衝剤；約３２ｍＭの緩衝剤；約３３ｍＭの緩衝剤；約３４ｍＭの緩衝剤；約３５ｍＭの緩衝剤；約３６ｍＭの緩衝剤；約３７ｍＭの緩衝剤；約３８ｍＭの緩衝剤；約３９ｍＭの緩衝剤；約４０ｍＭの緩衝剤；約５０ｍＭの緩衝剤；約６０ｍＭの緩衝剤；約７０ｍＭの緩衝剤；約８０ｍＭの緩衝剤；約９０ｍＭの緩衝剤；約１００ｍＭの緩衝剤；約１１０ｍＭの緩衝剤；約１２０ｍＭの緩衝剤；約１３０ｍＭの緩衝剤；約１４０ｍＭの緩衝剤；約１５０ｍＭの緩衝剤；約１６０ｍＭの緩衝剤；約１７０ｍＭの緩衝剤；約１８０ｍＭの緩衝剤；約１９０ｍＭの緩衝剤；または約２００ｍＭの緩衝剤であってもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１８９】
緩衝剤は、当技術分野における従来の任意のｐＨに保持されてもよい。例えば、緩衝剤は、２〜１１の範囲内のｐＨを有してもよい。別の例として、緩衝剤は、少なくとも約２のｐＨ値を有してもよい。別の例として、緩衝剤は、少なくとも約２のｐＨ値；少なくとも約２．５のｐＨ値；少なくとも約３のｐＨ値；少なくとも約３．５のｐＨ値；少なくとも約４のｐＨ値；少なくとも約４．５のｐＨ値；少なくとも約５のｐＨ値；少なくとも約５．５のｐＨ値；少なくとも約６のｐＨ値；少なくとも約６．１のｐＨ値；少なくとも約６．２のｐＨ値；少なくとも約６．３のｐＨ値；少なくとも約６．４のｐＨ値；少なくとも約６．５のｐＨ値；少なくとも約６．６のｐＨ値；少なくとも約６．７のｐＨ値；少なくとも約６．８のｐＨ値；少なくとも約６．９のｐＨ値；少なくとも約７のｐＨ値；少なくとも約７．１のｐＨ値；少なくとも約７．２のｐＨ値；少なくとも約７．３のｐＨ値；少なくとも約７．４のｐＨ値；少なくとも約７．５のｐＨ値；少なくとも約７．６のｐＨ値；少なくとも約７．７のｐＨ値；少なくとも約７．８のｐＨ値；少なくとも約７．９のｐＨ値；少なくとも約８のｐＨ値；少なくとも約８．５のｐＨ値；少なくとも約９のｐＨ値；少なくとも約９．５のｐＨ値；少なくとも約１０のｐＨ値；少なくとも約１１のｐＨ値を有してもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
【０１９０】
別の例として、緩衝剤は、約２のｐＨ値；約２．５のｐＨ値；約３のｐＨ値；約３．５のｐＨ値；約４のｐＨ値；約４．５のｐＨ値；約５のｐＨ値；約５．５のｐＨ値；約６のｐＨ値；約６．１のｐＨ値；約６．２のｐＨ値；約６．３のｐＨ値；約６．４のｐＨ値；約６．５のｐＨ値；約６．６のｐＨ値；約６．７のｐＨ値；約６．８のｐＨ値；約６．９のｐＨ値；約７のｐＨ値；約７．１のｐＨ値；約７．２のｐＨ値；約７．３のｐＨ値；約７．４のｐＨ値；約７．５のｐＨ値；約７．６のｐＨ値；約７．７のｐＨ値；約７．８のｐＨ値；約７．９のｐＨ値；約８のｐＨ値；約８．５のｐＨ値；約９のｐＨ値；約９．５のｐＨ値；約１０のｐＨ値；約１１のｐＨ値を有してもよい。上記の個別の値の列挙は、それぞれの列挙された値の間の範囲を含むことが理解される。
別の例として、緩衝剤は、生理的に適切なｐＨ値を有してもよい。緩衝剤は、約６〜約８のｐＨ値を有してもよい。
【０１９１】
キット
キットもまた提供される。そのようなキットは、本明細書に記載の薬剤または組成物と、ある特定の実施形態においては投与のための指示とを含んでもよい。そのようなキットは、本明細書に記載の方法の実行を容易化し得る。キットとして供給された場合、組成物の異なる成分が別個の容器内に包装され、使用直前に混合されてもよい。成分は、これらに限定されないが、スキャフォールド、改質された擬似体液の溶液、プライマー溶液、ポリマー、溶媒、または上述のような任意の他の薬剤を含む。成分のそのような別個の包装は、所望により、組成物を含有する１つまたは複数の単位剤形を含有し得る、パックまたは分配デバイス内に提供されてもよい。パックは、例えば、ブリスターパック等の金属またはプラスチック箔を含み得る。また、成分のそのような別個の包装は、ある特定の場合において、成分の活性を失うことなく長期保存を可能にし得る。
【０１９２】
キットはまた、例えば、別個に包装された凍結乾燥活性成分に添加される無菌水または食塩水等の、別個の容器内の試薬を含んでもよい。例えば、封止されたガラスアンプルが、凍結乾燥された成分を含有してもよく、また別個のアンプル内に、無菌水、無菌食塩水または無菌を含有してもよく、これらはそれぞれ、窒素等の中性非反応性ガス下で包装されている。アンプルは、任意の好適な材料、例えば、ガラス、有機ポリマー、例えばポリカーボネート、ポリスチレン、セラミック、金属、または試薬を保持するのに典型的に使用される任意の他の材料からなってもよい。好適な容器の他の例は、アンプルと同様の物質から製造され得る瓶、およびアルミニウムまたは合金等の箔で裏打ちされた内部からなってもよい封筒を含む。他の容器は、試験管、バイアル、フラスコ、瓶、シリンジ等を含む。容器は、皮下注射針で穿刺され得る栓を有する瓶等、無菌アクセスポートを有してもよい。他の容器は、除去後に成分が混合され得る、容易に除去可能な膜により分離された２つの区画を有してもよい。除去可能な膜は、ガラス、プラスチック、ゴム等であってもよい。
【０１９３】
ある特定の実施形態において、キットは指示資料とともに供給されてもよい。指示は、紙もしくは他の基板上に印刷されてもよく、および／または、電子的に読取可能な媒体、例えばフロッピーディスク、ミニＣＤ−ＲＯＭ、ＣＤ−ＲＯＭ、ＤＶＤ−ＲＯＭ、Ｚｉｐディスク、ビデオテープ、オーディオテープ等として供給されてもよい。詳細な指示は、キットに物理的に関連付けられなくてもよく、代わりに、使用者は、キットの製造者または販売業者により指定されたインターネットウェブサイトに誘導されてもよい。
【０１９４】
分子生物学プロトコルを利用した本明細書に記載の組成物および方法は、当技術分野において知られている様々な標準的技術に従ってもよい（例えば、Sambrook and Russel (2006) Condensed Protocols from Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, ISBN-10: 0879697717；Ausubel et al. (2002) Short Protocols in Molecular Biology, 5th ed., Current Protocols, ISBN-10: 0471250929；Sambrook and Russel (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, ISBN-10: 0879695773；Elhai, J. and Wolk, C. P. 1988. Methods in Enzymology 167, 747-754；Studier (2005) Protein Expr Purif. 41(1), 207-234；Gellissen, ed. (2005) Production of Recombinant Proteins: Novel Microbial and Eukaryotic Expression Systems, Wiley-VCH, ISBN-10: 3527310363；Baneyx (2004) Protein Expression Technologies, Taylor & Francis, ISBN-10: 0954523253を参照されたい）。
本明細書に記載の定義および方法は、本開示をより良く定義し、本開示の実践において当業者をガイドするために提供される。別段に指定されない限り、用語は、関連する技術の当業者による従来の使用法に従って理解されたい。
【０１９５】
いくつかの実施形態において、本開示のある特定の実施形態を説明および請求するために使用される、成分の量、分子量等の特性、反応条件等を表現する数字は、いくつかの場合において「約」という用語により修飾されるものとして理解されたい。いくつかの実施形態において、「約」という用語は、ある値が、その値を決定するために使用されているデバイスまたは方法の平均標準偏差を含むことを示すために使用される。いくつかの実施形態において、記述された説明および添付の特許請求の範囲において示される数値パラメータは、特定の実施形態により得られることが求められる所望の特性に依存して変動し得る概数である。いくつかの実施形態において、数値パラメータは、報告される有効桁数を考慮して、および通常の丸め技法を適用することにより解釈されるべきである。本開示のいくつかの実施形態の広い範囲を示す数値範囲および変数は概数ではあるが、特定の例において示される数値は、実行可能な限り正確に報告される。本開示のいくつかの実施形態において示される数値は、それぞれの試験測定において見られる標準偏差から必然的に生じるある特定の誤差を含有し得る。本明細書における値の範囲の列挙は、単に、その範囲内に含まれるそれぞれの別個の値を個々に示す簡単な方法として機能することを意図する。本明細書において別段に指定されない限り、それぞれの個々の値は、それが個々に本明細書において列挙されているのと同等に本明細書に組み込まれる。
【０１９６】
いくつかの実施形態において、特定の実施形態を説明する文脈において（特に続く特許請求の範囲のいくつかの文脈において）使用される用語「ａ」および「ａｎ」および「ｔｈｅ」ならびに同様の言及は、別段に具体的に指定されない限り、単数形および複数形の両方を包含するものと解釈され得る。いくつかの実施形態において、「または」という用語は、特許請求の範囲を含む本明細書において使用される場合、代替物のみを示すこと、または代替物が相互排他的であることが明示的に示されていない限り、「および／または」を意味するように使用される。
【０１９７】
「備える（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「有する（ｈａｖｅ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」という用語は、非制限的な連結動詞である。これらの動詞の１つまたは複数のいかなる形態または時制、例えば「備える（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「備えている（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｓ）」、「有している（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」および「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」等もまた、非制限的である。例えば、１つまたは複数のステップを「備える」、「有する」または「含む」いかなる方法も、それらの１つまたは複数のステップのみを保有することに限定されず、他の列挙されていないステップもまた包含し得る。同様に、１つまたは複数の特徴を「備える」、「有する」または「含む」いかなる組成物またはデバイスも、それらの１つまたは複数の特徴のみを保有することに限定されず、他の列挙されていない特徴もまた包含し得る。
【０１９８】
本明細書に記載の方法は全て、本明細書において別段に指定されない限り、または文脈により明らかに矛盾しない限り、任意の好適な順番で実行され得る。本明細書においてある特定の実施形態に関して提供されるありとあらゆる例または例示的言語（例えば「等」）の使用は、単に本開示をより良く明確化することを意図し、別段に請求される本開示の範囲に対する制限をもたらさない。明細書におけるいかなる言語も、本開示の実践に必須であるいかなる請求されていない要素も示すものとして解釈されるべきではない。
本明細書において開示される本開示の代替の要素または実施形態の群分けは、限定として解釈されるべきではない。それぞれの群のメンバーは、個々に、または群の他のメンバーもしくは本明細書において見出される他の要素との任意の組合せとして言及および請求され得る。群の１つまたは複数のメンバーは、利便性または特許性の理由から、群に含まれ得る、または群から削除され得る。任意のそのような包含または削除が生じる場合、本明細書はここに、添付の特許請求の範囲において使用される全てのマルクーシュ群の記述された説明を満足させるように修正された群を含有するものとしてみなされる。
【０１９９】
本明細書における参考文献の引用は、そのような文献が本開示に対する先行技術であることを認めるものとして解釈されるべきではない。
本開示を詳細に説明したが、添付の特許請求の範囲において定義される本開示の範囲から逸脱せずに、修正、変形例、および同等の実施形態が可能であることは明らかである。さらに、本開示における全ての例は、限定されない例として提供されることが理解されるべきである。
【実施例】
【０２００】
以下の限定されない例は、本開示をさらに例示するために提供される。続く例において開示される技術は、本発明者が本開示の実践において良好に機能することを見出した手法を示し、その実践のための様式の例を構成するとみなすことができることが、当業者に理解されるべきである。しかしながら、本開示を考慮して、開示される特定の実施形態において多くの変更が行われてもよく、それでも本開示の精神および範囲から逸脱せずに同様または類似した結果を得ることができることが、当業者に理解されるべきである。
【０２０１】
（実施例１）
ミネラルコーティング
以下の例は、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）スキャフォールドのミネラル化を説明する。
ＰＣＬスキャフォールドを、１．０ＭのＮａＯＨ溶液中で６０分間加水分解させ、加水分解したカルボン酸に富む表面を生成した。ＰＣＬスキャフォールドの加水分解後、ＰＣＬスキャフォールドを改質された擬似体液（ｍＳＢＦ）中に含浸し、インキュベートすることにより、骨ミネラルコーティングを形成させた。
この例におけるｍＳＢＦは、ヒト血漿と類似した組成を有する無機溶液であったが、ミネラル成長を向上させるために倍の濃度のカルシウムおよびホスフェートを含み、有機成分は含まず、生理学的条件および連続回転下であった。ｍＳＢＦ溶液は、以下に従って調製した。以下の試薬を、示された順番でｄｄＨ2Ｏに添加した：１４１ｍＭのＮａＣｌ、４．０ｍＭのＫＣｌ、１．０ｍＭのＭｇＣｌ2、０．５ｍＭのＭｇＳＯ4、４．２ｍＭのＮａＨＣＯ3、２０ｍＭのトリス、５ｍＭのＣａＣｌ2、および２．０ｍＭのＫＨ2ＰＯ4。溶液を徐々に３７℃に加熱し、ＨＣｌおよび／またはＮａＯＨ緩衝溶液を使用して６．８の最終ｐＨに調節した。
【０２０２】
インキュベーション期間は、５〜１４日間で変動させた。ｍＳＢＦ溶液は、コーティングプロセスを通して一定のイオン強度を維持するために、２日毎に新しくした。アパタイト（骨ミネラル、ならびにヒドロキシアパタイトに類似した骨および歯の主要無機構成物質を含むリン酸カルシウムの群）を、ＰＣＬスキャフォールドの表面上で核形成および成長させ、コーティングされたＰＣＬスキャフォールドの不可欠な部分を形成させた（例えば図１Ａ〜Ｂを参照されたい）。ＰＣＬ上でのミネラル核形成および成長のメカニズムは、ｍＳＢＦ溶液における、カルボキシレートイオンと、カルシウムおよびホスフェートに富む核を有する加水分解したＰＣＬ表面上のヒドロキシル基との相互作用に基づくと考えられる。このミネラル成長プロセスは、自然のバイオミネラル化プロセスを模倣すると考えられ、構造（板状ナノ構造）および組成（カーボネート置換カルシウム欠乏ヒドロキシアパタイト相）が人間の骨ミネラルに類似したミネラルコーティングをもたらす。Ｃａ欠乏ＨＡは、Ｃａ／Ｐ比により測定した。ｍＳＢＦ調製のための化学薬品は、粉末試薬グレード化学薬品であった。使用した水は、ＩＳＯ３６９６：１９８７、グレード２に準拠した。
ミネラルコーティング後、スキャフォールドをｄｄＨ2Ｏ中で１５分間濯いで残留塩を除去し、凍結乾燥機内で、真空下、−４０℃の温度で一晩フリーズドライした。
【０２０３】
（実施例２）
ミネラルコーティング仕様
以下の例は、コーティング仕様を説明する。
ミネラル形成の評価は、初期質量（コーティング前）と比較したコーティング後の質量の変化を決定することにより行った。
条件は、インプラント上の所望の骨ミネラルコーティングを達成することが判明した（例えば、表１を参照されたい）。
【０２０４】
【表１】
2018510743.tif 000003
【０２０５】
（実施例３）
ミネラルコーティング溶解
以下の例は、様々な媒体条件におけるコーティング溶解速度を説明する。リン酸緩衝液が、トリスと比較して低下したコーティング溶解を提供することが示された。
擬似生理学的条件において、環境がカルシウムおよびホスフェートイオン不飽和となった時に、コーティングの溶解が生じた。これは、トリス−ＨＣｌの場合であった。しかしながら、食塩水緩衝液の場合、ＤＰＢＳは、コーティングからのホスフェートイオンの溶解を遮断する、または再析出に関して互いに競合し合うと考えられるホスフェートイオンを溶液中に有し、より遅い溶解速度をもたらした。異なる時点で撮影された一連のＳＥＭ顕微鏡写真（例えば図２を参照されたい）、および放出媒体中のカルシウムの量（例えば図３を参照されたい）は、上記の仮説を裏付けている。
【０２０６】
（実施例４）
ミネラルコーティングＰＣＬデバイス
以下の例は、改質された擬似体液（ｍＳＢＦ）インキュベーションによるポリカプロラクトン（ＰＣＬ）医療デバイスのコーティングのための詳細、適切な指示および安全上の注意事項を説明するが、コーティング手順は、任意のサイズのＰＣＬ医療デバイスに適用される。
この例における改質された擬似体液（ｍＳＢＦ）は、ヒト血漿と類似した組成を有する溶液であるが、倍の濃度のカルシウムおよびホスフェートを含む。この例に記載のｍＳＢＦ溶液は、材料のインキュベーションおよびアパタイト様ミネラルの核形成に使用される。
【０２０７】
材料。
試薬および最終溶液中でのそのそれぞれの所望の濃度は、以下の通りである。加水分解試薬：ＮａＯＨ（１．０Ｍ）。コーティング試薬：ＮａＣｌ（１４１．０ｍＭ）；ＫＣｌ（４．０ｍＭ）；ＭｇＳＯ4（０．５ｍＭ）；ＭｇＣｌ2（１．０ｍＭ）；ＮａＨＣＯ3（４．２ｍＭ）；トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（２０．２ｍＭ）；ＣａＣｌ2（５．０ｍＭ）；ＫＨ2ＰＯ4（２．０ｍＭ）。脱イオン限外濾過（ＤＩＵＦ）水。緩衝剤：２Ｎ  ＨＣｌ；２Ｎ  ＮａＯＨ。ホットプレート／撹拌器；磁気撹拌棒；スパチュラ；薬包紙または秤量皿；化学質量天秤；ｐＨ計；所望体積のｍＳＢＦを保持することができるガラスビーカー；ならびに３７℃および５％ＣＯ2のインキュベータ。回転システム：Ｌａｂｑｕａｋｅ振盪機システム（１７５ｍＬまでの任意の容器サイズ）；大型コーティングシステム（大型デバイスのコーティング用、例えば表２を参照されたい）。
【０２０８】
【表２】
2018510743.tif 000004
【０２０９】
加水分解の準備。
加水分解の準備は、１Ｍ  ＮａＯＨの所望体積を決定することを含む。デバイスのサイズおよび質量に基づく所望体積に関して、表３を参照されたい。
【表３】
2018510743.tif 000005
【０２１０】
１Ｍ  ＮａＯＨ溶液を調製するには、固体状態のＮａＯＨの質量の決定が必要である。試料計算：
１Ｍ  ＮａＯＨの所望体積：４００ｍＬ
固体状態のＮａＯＨの所要質量：
【数１】
2018510743.tif 000006
【数２】
2018510743.tif 000007
ホットプレート／撹拌器および化学天秤を、固定された水平表面上に設置する。
【０２１１】
コーティング調製。
ｍＳＢＦの所望体積を決定する。デバイスのサイズおよび質量に基づく所望体積に関しては、表２および表４を参照されたい。より大型のＰＣＬデバイスに対しては、ｍＳＢＦをいくつかのバッチで調製することが必要となり得ることに留意されたいが、その場合、バッチの所望の体積を決定する。バッチ体積中の各試薬（上で列挙された通り）の所望濃度に到達するために必要な、各試薬の質量を決定する。
【０２１２】
【表４】
2018510743.tif 000008
【０２１３】
試料計算：
ｍＳＢＦの所望体積：５００ｍＬのｍＳＢＦ
試薬＃１（例えばＮａＣｌ、１４１ｍＭ）の所望質量
【数３】
2018510743.tif 000009
【数４】
2018510743.tif 000010
ホットプレート／撹拌器および化学天秤を、固定された水平表面上に設置する。インキュベータが３７℃の温度および５％ＣＯ2レベルを維持していることをチェックする。ｐＨ計が最近較正されたことをチェックする。ｐＨ計が過去２週間以内に較正されていない場合、製造者の指示に従って較正する。
【０２１４】
加水分解。
適切なサイズのビーカー内で、ＤＩＵＦ水の所望体積を測定する。ビーカーをホットプレート／撹拌器上に設置する。磁気撹拌棒をＤＩＵＦ水に入れる。ＤＩＵＦ水の体積に依存して、撹拌器を設定５と１０との間に設定する。スパチュラおよび薬包紙または秤量皿を使用して、所要量のＮａＯＨを化学質量天秤で秤量する。ＤＩＵＦ水を有するビーカーに試薬を入れる。完全に溶解するまで継続的に撹拌する。１Ｍ  ＮａＯＨをＰＣＬデバイスに加える。ＰＣＬデバイスを１Ｍ  ＮａＯＨ中で１時間加水分解させ、加水分解中は容器を円を描くように回転させる。加水分解中、１Ｍ  ＮａＯＨが確実にＰＣＬデバイスの表面全体を覆うようにする。加水分解が完了した後、ＰＣＬデバイスを有する容器から１Ｍ  ＮａＯＨを除去する。ＤＩＵＦ水中で１５分間ＰＣＬデバイスを濯ぐ。ＰＣＬデバイスは、コーティングの準備が整う。
【０２１５】
コーティング。
適切なサイズのビーカー内で、ＤＩＵＦ水の所望体積を測定する。ビーカーをホットプレート／撹拌器上に設置する。磁気撹拌棒をＤＩＵＦ水に入れる。ＤＩＵＦ水の体積に依存して、撹拌器を設定５と１０との間に設定する。ホットプレートを約４０℃（または設定２〜４）に設定することにより、ＤＩＵＦ水を予熱する。［注：試薬が添加された際に水を室温から徐々に加熱し、３７℃に達したら、加熱設定を低くして水の温度を維持する。］スパチュラおよび薬包紙または秤量皿を使用して、所要量の試薬＃１（ＮａＣｌ）を化学質量天秤で秤量する。予熱されたＤＩＵＦ水を有するビーカーに試薬を入れる。溶液を調製している間、継続的に撹拌する。スパチュラは、それぞれの使用後、エタノールまたはメタノールで拭き取る。試薬の全てに対して順番に（「試薬」に列挙された通り）繰り返す。各試薬が次の試薬を添加する前に完全に溶解したことを確かめながら、試薬を１つずつ添加する。ＤＩＵＦ水の温度は、試薬が添加されている間２４〜２６℃の間となるべきであり、全ての試薬が添加される時点までには、ＤＩＵＦ水は２８〜３２℃の間の温度まで徐々に加熱される。注：トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンの添加後にｍＳＢＦ溶液が塩基性（約ｐＨ９）となること、およびＣａＣｌ2の添加後に濁ることは普通である。
【０２１６】
ｐＨ計を使用して溶液のｐＨを測定する。２Ｎ  ＨＣｌおよび２Ｎ  ＮａＯＨを使用して、溶液をｐＨ＝６．８±０．１に緩衝する。得られる溶液は塩基性（ｐＨ８〜９）であるため、２Ｎ  ＨＣｌで緩衝を開始する。ｐＨが約７．５に降下したら、溶液は透明になり始める。ＨＣｌが過剰に添加され、ｐＨが６．８±０．１を下回ったら、ＮａＯＨを使用してｐＨを６．８±０．１に調節する。ｍＳＢＦ溶液を緩衝している間、溶液を継続的に撹拌し、温度を３７℃に維持する。溶液を徐々に３７℃に加熱する（緩衝プロセスの終わりに溶液がまだ３７℃に達していない場合）。安定性に関してｐＨおよび温度のチェックを継続する。所望体積に達するまで繰り返す。ｍＳＢＦは、使用まで３７℃インキュベータ内で保存されるべきである。最終バルク体積のｐＨを、６．８±０．１に調節する。コーティングのために、ｍＳＢＦ溶液をＰＣＬデバイスに加える。ＰＣＬデバイスを３７℃インキュベータ内でインキュベートし、インキュベーション中は容器を円を描くように回転させる。インキュベーション中、ｍＳＢＦが確実にＰＣＬデバイスの表面全体を覆うようにする。コーティング期間、ｍＳＢＦ溶液の交換頻度、およびｐＨ調節（必要な場合）に関しては、表２および表４を参照されたい。
インキュベーションが完了した後、ＰＣＬデバイスを有する容器からｍＳＢＦを除去する。ＤＩＵＦ水中で１５分間ＰＣＬデバイスを濯ぐ。ＰＣＬデバイスを有する容器からＤＩＵＦ水を除去する。−２０℃の冷凍庫内でＰＣＬデバイスを凍結する。凍結したＰＣＬデバイスを凍結乾燥する。ＰＣＬデバイスは、滅菌の準備が整う。
【０２１７】
特別な注意事項。
全ての化学薬品、溶液、および／または器具を取り扱う間、ラテックス手袋を着用する。
ｍＳＢＦ溶液がインキュベーション中２日（または大型コーティングシステム構成の場合３日）経過する前に濁る場合、溶液を可能な限り早く交換する。
【０２１８】
機器の取扱いおよび保守
毎日：秤量される試薬の正確性を確保するために、化学質量天秤を較正する。毎週：インキュベータ内のＣＯ2レベルの状態をチェックする。必要に応じて、製造者の指示に従いＣＯ2タンクを交換する。隔週：製造者の指示に従い、ｐＨ計を較正する。
【０２１９】
（実施例５）
コーティング前のチタン試料の表面前処理
以下の例は、チタン試料の前処理のための詳細、適切な指示、および安全上の注意事項を説明する。
５Ｍ  ＮａＯＨの使用。（ａ）以下の各ステップは、保証されたドラフト内で行われる必要があり、（ｂ）前処理溶液の体積は、チタン試料のサイズおよび形状に依存し、同じ容器内で複数の試料が前処理されてもよい。
ガラスビーカー内の撹拌下の脱イオン限外濾過（ＤＩＵＦ）水（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｌｏｔ＃１４０３００）に、ＮａＯＨペレット（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｌｏｔ＃１１５７８６）を非常にゆっくりと添加し、５Ｍ  ＮａＯＨ溶液を作製する。ビーカーをドラフト内の撹拌器上に維持し、撹拌器は「低」に設定する。煙および温度上昇に留意し、過度の発熱が生じた場合はさらに抑える。溶液を数分間静置して冷ます。透明ガラスビーカー内にＴｉ試料を設置し、ＮａＯＨ溶液を注ぎ込み、ビーカーをパラフィルムでカバーする。ビーカーを超音波処理器内に１時間設置する。超音波処理器プロセス中は試料を監視し続け、発生する気泡の体積を記録する。Ｔｉ試料を取り出し、ＤＩＵＦを有する別のビーカー内に設置し、振盪機上に１５分間置いておく。ペーパータオルで拭き取って乾燥させると、試料はコーティングプロセスの準備が整う。
【０２２０】
ピラニア溶液（濃Ｈ2ＳＯ4＋３０％Ｈ2Ｏ2）の使用。以下の各ステップは、保証されたドラフト内で行う。前処理溶液の体積は、チタン試料のサイズおよび形状に依存し、同じ容器内で複数の試料が前処理されてもよい。ドラフト内で透明ガラスビーカーにＨ2ＳＯ4（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｌｏｔ＃ＳＨＢＢ３３３９Ｖ）を入れる。３０％Ｈ2Ｏ2（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｌｏｔ＃１０２７２７）をＨ2ＳＯ4に非常にゆっくりと添加する。反応は爆発性となり得、また極めて発熱性であるため、非常にゆっくりと、注意して進める。透明ガラスビーカー内にＴｉ試料を設置し、ピラニア溶液を慎重に注ぎ込む。５〜２０分間試料を監視し、発生する気泡の体積を観察する。試料／溶液のいかなる褐色化が認められた場合でも即時に反応を停止させ、試料を取り出す。
鉗子を用いてＴｉ試料を素早く取り出し、多量のＤＩＵＦで濯ぎ、次いでＤＩＵＦ中で振盪機上に１５分間設置する。ペーパータオルで拭き取って乾燥させると、試料はコーティングプロセスの準備が整う。
【０２２１】
コーティングプロセス。
前処理後、各試料をコーティング溶液（１×ｍＳＢＦ）中で３７℃で４〜６日間コーティングし、溶液は毎日新しくした。
【０２２２】
（実施例６）
コーティングは金属表面の骨結合を向上させる
コーティングの独特のナノスケールアーキテクチャは、事実上任意の下層インプラント表面（例えばプラズマ溶射されたチタン）に塗布され、複雑なスキャフォールドの全ての細孔に到達し、微細構造化インプラントへの骨結合の程度を改善し得る。
図４Ａおよび図４Ｂは、コーティングされていない粗面化チタンおよびコーティングされた粗面化チタンを示す。粗面化チタンの特性は、２００〜５２５μｍの間のより大きい細孔サイズおよび２５〜６５μｍの範囲内のより小さい細孔サイズを有する、「溶岩」表面構造である。平均細孔容積＝６０％であり、平均表面粗度＝１３２μｍである。
チタン上のコーティング形態および組成は、ＰＣＬ上の同じコーティングと一致することが示された（例えば図８を参照されたい）。
【０２２３】
（実施例７）
ミネラルコーティングされたスキャフォールド内に統合された脱灰骨基質（ＤＢＭ）および銀ナノ粒子
以下の例は、スキャフォールドのミネラルコーティングへの脱灰骨基質（ＤＢＭ）の組込み、およびスキャフォールドのミネラルコーティング上に統合された銀ナノ粒子を説明する。
ミネラルコーティングと統合されたＤＢＭは、現在、骨誘導特性等のミネラルコーティングされたスキャフォールドの特性を改善すると考えられている。ＤＢＭは、スキャフォールドのミネラルコーティング内またはその上に統合され得る。脱灰骨抽出物またはゲル等のＤＢＭは、実施例４においてミネラルコーティング水溶液と合わせられ、単一コーティングステップにおいてスキャフォールドをコーティングするためのＤＢＭおよびミネラルコーティング溶液の混合物を形成し得る。
ＤＢＭは、ミネラルコーティングで事前にコーティングされたスキャフォールド上にコーティングされてもよい。スキャフォールドは、本明細書に記載の方法を使用して、ミネラルコーティングの前、その間、またはその後に、ＤＢＭでコーティングされてもよい。
スキャフォールドまたはミネラルコーティングと統合された銀ナノ粒子は、現在、ミネラルコーティングされたスキャフォールドに生物抑制、抗感染症特性を提供すると考えられている。銀ナノ粒子は、以下に記載のようにミネラルコーティング上に統合されてもよい。ナノ粒子はまた、本明細書に記載の方法を使用して、ＤＢＭコーティングの前、その間、またはその後に、スキャフォールドまたはコーティング内に統合されてもよい。
【０２２４】
以下は、ＣａＰコーティングされたスキャフォールド上への銀ナノ粒子の組込みを説明する。ＣａＰでコーティングされたスキャフォールドを、脱イオン水（ｐＨ７．０、５ｍＬ）中の硝酸銀溶液中でインキュベートし、表面またはコーティング上に銀粒子を合成する。１組の実験において、硝酸銀インキュベーションの前に脱イオン水（ｐＨ７．０、５ｍＬ）中のクエン酸溶液中でインキュベートすることにより、ＣａＰコーティングを前処理する。
【０２２５】
両方の溶液の濃度を変化させる（例えば、１、５、および１０ｍＭ）。インキュベーション時間もまた変化させる（例えば、０．５、１、および４時間）。クエン酸前処理後、得られたＣａＰコーティングをＦＴ−ＩＲを使用して特性決定することができ、結晶化度指数をＳｈｅｍｅｓｈの方法から計算することができる。ＰＢＳ中３７℃でクエン酸処理されたＣａＰコーティングから放出されたカルシウムを、Ａｒｓｅｎａｚｏ  ＩＩＩ（ＭＰ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ＵＳＡ）を使用した比色アッセイにより定量することができる。カルシウムイオンを定量するために、放出媒体を異なる時点で収集することができる。さらなるインキュベーションのために新鮮なＰＢＳを追加することができる。ＣａＰコーティング上の銀粒子を、ＦＥ−ＳＥＭを使用して画像化し、ＥＤＳを使用して元素分析することができる。ＣａＰコーティングから擦り取った銀粒子を、ＸＲＤを使用して特性決定することができる。
【０２２６】
銀ナノ粒子が統合された、ミネラルコーティングされたスキャフォールドを、上述のようにさらにＤＢＭと合わせることができる。代替として、ミネラルコーティングを、銀ナノ粒子の添加前にＤＢＭと合わせることができる。
ＤＢＭを水溶液と混合することにより、ＤＢＭをスキャフォールドと統合する。水溶液は、ミネラルコーティング溶液であってもよい。水溶液は、弱酸または塩酸グアニジンであってもよい。混合物は、水性脱灰骨抽出物を生成するために、設定された時間だけ持続的にかき混ぜられる。次いで、抽出物は、任意の残留固体を除去するために濾過され、酸中和または除去されてもよく、抽出物は、多孔質スキャフォールドをコーティングするために使用されてもよい。
ＤＢＭおよび水溶液またはコーティング溶液を、約８〜９６時間混合する。ＤＢＭおよび水溶液は、その期間、持続的なかき混ぜにより互いに混合される。適切な時間だけ混合した後、得られた脱灰骨抽出物を、溶液中に残留する任意の不溶性ＤＢＭから分離することができる。ＤＢＭを含む水溶液またはコーティング溶液を、適切な対イオンでの滴定により、約６．５〜約７．５のｐＨに中和する。次いで、スキャフォールドを、実施例４に従ってインキュベートする。
【０２２７】
（実施例８）
実験条件Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ
この例は、以下の例において説明される実験の概要を説明する。実験条件Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの試料として、ＰＥＥＫメッシュを使用した（例えば、実施例１３、１４、および１５を参照されたい）。ＰＥＥＫメッシュは、コーティングするのが最も困難な材料および幾何構造の１つであることから選択された（例えば、図１０、図１１Ａを参照されたい）。したがって、ＰＥＥＫメッシュを使用した以下の例において使用される手順は、任意の材料、特にコーティングするのが困難であることが知られている材料、例えば平滑表面を有する材料に置き換えることができる。
【０２２８】
【表５】
2018510743.tif 000011
【０２２９】
（実施例９）
ディップコーティングプロセス
以下の例は、溶媒キャスティングによる実験条件ＩＩＩ（例えば、表１、実施例１５を参照されたい）のディップコーティングプロセス（ポリマー下塗り、前処理としても知られる）を説明する。ディップコーティングプロセスは、ＰＣＬの薄層を塗布する。
【０２３０】
溶液調製。
ＰＣＬ溶媒キャスティングに使用される好適な溶媒は、クロロホルムおよび酢酸を含んでいた。ＰＥＥＫメッシュの微小細孔に起因して、低粘度溶液を維持するために、３％（ｗ／ｖ）以下のＰＣＬ濃度を使用した。
２０ｍｌのガラスバイアルに、２ｍｌの所望の溶媒を入れた。
所望の質量（２０ｍｇ／所望の％濃度）のミリングされたＰＣＬを秤量し、バイアルに添加し、バイアルを閉じた。
ポリマーの全てが溶媒に完全に溶解するまで、バイアルを激しく回転、またはロテータ上に設置した。
ＰＥＥＫメッシュを１ｃｍの正方形に切り出したが（例えば、図１０を参照されたい）、これらはそれぞれ、４８ウェルプレートの単一ウェル内に直立して収容され得るはずである。
ピンセットを使用して、しっかりと把持を維持しつつ可能な限り材料の僅かな部分を覆うように、単一のＰＥＥＫメッシュの正方形の角部をつまんだ。
【０２３１】
調製した溶液中に正方形全体を浸し、ＰＥＥＫに気泡が付着していないことを確認するために観察し、気泡が存在する場合は、浸したまま静かに振り、気泡を取り除いた。
液体からＰＥＥＫを取り出したが、まだバイアル内に保持した。メッシュ上に溶液の大きな滴が存在する場合、バイアル壁の内側に静かに接触させて表面張力を破り、この余分な溶液を取り除いた。
ＰＥＥＫの正方形を、４８ウェルプレートのウェル内に直立させて設置した。
全ての試料が浸漬された、またはウェルプレートが充填されたら、プレートを真空乾燥チャンバ内に（カバーせずに）設置し、ポンプを約１０分間作動させて溶媒を蒸発させた。
圧力が平衡化したら、プレートをチャンバから取り出し、カバーをした。いくつかのコーティングされたＰＥＥＫ試料は、ウェルの底部に部分的に付着し、準備が整った際取り出すのにいくらかの力を必要とした。
【０２３２】
（実施例１０）
ＰＣＬ／クロロホルムまたはＰＣＬ／酢酸でディップコーティングされたＰＥＥＫ
以下の例は、クロロホルム溶媒または酢酸溶媒中のＰＣＬを使用したＰＥＥＫメッシュ上のＰＣＬディップコーティングの形成を説明する（例えば、図１０、図１１、図１２、図１３を参照されたい）。
ディップコーティングは、クロロホルム中２．５質量％のＰＣＬ（例えば、図１２Ａ〜１２Ｂを参照されたい）または酢酸中２．５質量％のＰＣＬ（例えば、図１３Ａ〜図１３Ｂを参照されたい）を使用して、実施例９に従って行った。クロロホルム（例えば、図１２Ａ〜図１２Ｂを参照されたい）または酢酸（例えば、図１３Ａ〜図１３Ｂを参照されたい）溶媒中のＰＣＬは、ＰＥＥＫを均一にコーティングすることが観察された。表面上にＰＣＬの非常に薄い層が観察され、細孔全体または空隙率に影響を与えなかった。
【０２３３】
（実施例１１）
加水分解プロセス
以下の例は、３つの実験条件Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩの加水分解プロセスを説明する（例えば、実施例１３、１４、および１５を参照されたい）。
試料の加水分解。
１．試料のサイズおよび質量に基づいて、ＮａＯＨの所望の体積および濃度を決定する。
２．ＮａＯＨ溶液を調製するために必要な固体状態のＮａＯＨの質量を決定する。
試料計算。
１Ｍ  ＮａＯＨの所望体積：４００ｍＬ
固体状態のＮａＯＨの所要質量：
【数５】
2018510743.tif 000012
【数６】
2018510743.tif 000013
【０２３４】
３．ホットプレート／撹拌器および化学天秤を、固定された水平表面上に設置する。
４．適切なサイズのビーカー内で、ＤＩＵＦ水の所望体積を測定する。ビーカーをホットプレート／撹拌器上に設置する。
５．磁気撹拌棒をＤＩＵＦ水に入れる。ＤＩＵＦ水を適切に撹拌するように撹拌器を設定する。
６．スパチュラおよび薬包紙または秤量皿を使用して、所要量のＮａＯＨを化学質量天秤で秤量する。ＤＩＵＦ水を有するビーカーに試薬を入れる。完全に溶解するまで継続的に撹拌する。
７．試料にＮａＯＨ溶液を添加する。１５分〜１時間加水分解させ、加水分解中は容器を円を描くように回転させる。加水分解中、ＮａＯＨ溶液が確実に試料の表面全体を覆うようにする。
８．加水分解が完了した後、試料を取り出す。試料をＤＩＵＦ水で１５分間濯ぐ。これで試料はコーティングの準備が整う。
【０２３５】
（実施例１２）
ミネラルコーティングプロセス
以下の例は、３つの実験条件Ｉ、ＩＩ、およびＩＩＩのミネラルコーティングプロセスを説明する（例えば、実施例１３、１４、および１５を参照されたい）。
【０２３６】
コーティングプロセス。
１．デバイス／試料サイズおよび質量に基づいて、改質された擬似体液（ｍＳＢＦ）の所望体積を決定する。
２．以下に列挙されるような各試薬の所望濃度に到達するために必要な、各試薬の質量を決定する。
コーティング試薬。
ＮａＣｌ（１４１．０ｍＭ）
ＫＣｌ（４．０ｍＭ）
ＭｇＳＯ4（０．５ｍＭ）
ＭｇＣｌ2（１．０ｍＭ）
ＮａＨＣＯ3（４．２ｍＭ）
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（２０．２ｍＭ）
ＣａＣｌ2（５．０ｍＭ）
ＫＨ2ＰＯ4（２．０ｍＭ）
試料計算。
ｍＳＢＦの所望体積：５００ｍＬのｍＳＢＦ
試薬＃１（例えばＮａＣｌ、１４１ｍＭ）の所要質量
【０２３７】
３．ホットプレート／撹拌器および化学天秤を、固定された水平表面上に設置する。
４．適切なサイズのビーカー内で、ＤＩＵＦ水の所望体積を測定する。ビーカーをホットプレート／撹拌器上に設置する。
５．磁気撹拌棒をＤＩＵＦ水に入れる。ＤＩＵＦ水を適切に撹拌するように撹拌器を設定する。
６．ホットプレートを約４０℃（または設定２〜４）に設定することにより、ＤＩＵＦ水を予熱する。
７．スパチュラおよび薬包紙または秤量皿を使用して、所要量の試薬＃１（ＮａＣｌ）を化学質量天秤で秤量する。予熱されたＤＩＵＦ水を有するビーカーに試薬を入れる。溶液を調製している間、継続的に撹拌する。
【０２３８】
８．スパチュラは、それぞれの使用後、キムワイプで拭き取る。
９．＃７〜８を、試薬の全てに対して順番に（「コーティング試薬」の項に列挙された通り）繰り返す。各試薬が次の試薬を添加する前に完全に溶解したことを確かめながら、試薬を１つずつ添加する。試薬が添加されている間、ＤＩＵＦ水の温度は、２４〜３０℃の間となるべきである。トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンの添加後にｍＳＢＦ溶液が塩基性（約ｐＨ９）となること、およびＣａＣｌ2の添加後に濁ることは普通である。
１０．ｐＨ計を使用して溶液のｐＨを測定する。
１１．２Ｎ  ＨＣｌおよび２Ｎ  ＮａＯＨを使用して、溶液をｐＨ＝６．８±０．１に緩衝する。得られる溶液は塩基性（ｐＨ８〜９）であるため、２Ｎ  ＨＣｌで緩衝を開始する。ｐＨが約７．５に降下したら、溶液は透明になり始める。ＨＣｌが過剰に添加され、ｐＨが６．８±０．１を下回ったら、ＮａＯＨを使用してｐＨを６．８±０．１に調節する。ｍＳＢＦ溶液を緩衝している間、溶液を継続的に撹拌し、温度を３７℃に維持する。
【０２３９】
１２．実施例１１に従い、加水分解した試料にｍＳＢＦ溶液を添加する。インキュベーション中円を描くように回転する容器内で溶液をインキュベートする。インキュベーション中、ｍＳＢＦが確実に試料の表面全体を覆うようにする。
１３．ｍＳＢＦを、最大４日間、２４時間または４８時間毎に新しくした。
１４．インキュベーションが完了した後、ｍＳＢＦからコーティングされた試料を取り出す。ＤＩＵＦ水中で１５分間試料を濯ぐ。
１５．−２０℃の冷凍庫内でコーティングされた試料を凍結する。
１６．凍結後のコーティングされた試料を凍結乾燥する。
【０２４０】
（実施例１３）
条件Ｉ−加水分解（１Ｍ  ＮＡＯＨ）および４日間コーティング
以下の例は、実験条件Ｉの加水分解プロセスを説明する。
ディップコーティングなし、１Ｍ  ＮａＯＨで１時間の実施例１１に記載のような加水分解法、および４日間コーティングする実施例１２に記載のようなミネラルコーティング法を使用して、ＰＥＥＫメッシュスキャフォールドのミネラルコーティングを行った。
条件Ｉ（加水分解（１Ｍ  ＮａＯＨ）およびコーティングプロセス（４日間のコーティング））は、条件ＩＩおよび条件ＩＩＩと比較して最少量のコーティングをもたらした。
この条件下では、コーティングが散発的に形成されることが観察された（例えば、図１２Ａ〜図１２Ｄを参照されたい）。
【０２４１】
（実施例１４）
条件ＩＩ−加水分解（３Ｍ  ＮＡＯＨ）および４日間コーティング
以下の例は、実験条件ＩＩの加水分解プロセスを説明する。
ディップコーティングなし、３Ｍ  ＮａＯＨで１時間の実施例１１に記載のような加水分解法、および４日間コーティングする実施例１２に記載のようなミネラルコーティング法を使用して、ＰＥＥＫメッシュスキャフォールドのミネラルコーティングを行った。
従来の金属コーティング技術と同様に、条件ＩＩにおける前処理は過酷であり、下層基板を損傷し得る可能性がある。Ｐ２損傷試料（過酷条件）において観察されたように、ＰＥＥＫ表面の粗面化を試みている間、メッシュチャネルが歪んだ。
条件Ｉよりもこの条件下においてより多くのコーティングが形成されるが、この条件はＰＥＥＫメッシュにより多くの損傷をもたらすことが観察された（例えば、図１３Ａ〜図１３Ｄを参照されたい）。
【０２４２】
（実施例１５）
条件ＩＩＩ−ディップコーティング、加水分解およびコーティング
以下の例は、加水分解および２日間のミネラルコーティングによるＰＥＥＫメッシュのポリマー下塗りを説明する。
以下に記載の方法は、ＰＥＥＫ基板をＰＣＬ溶液で下塗りした（ＰＣＬでのディップコーティング）。次いで、ＰＣＬコーティングされたＰＥＥＫメッシュを、ｍＳＢＦを使用してミネラル層でコーティングした。換言すれば、ＰＥＥＫの表面上に非常に薄いＰＣＬの層を塗布し、そのＰＣＬ層上に親和性コーティングを形成した。ＰＣＬ層は薄いことが観察され、ＰＥＥＫ材料の細孔全体および空隙率に影響を与えなかった。ＰＣＬ下塗りおよびｍＳＢＦミネラルコーティング溶液中での２日後に、メッシュが十分にコーティングされたことが観察された。
条件ＩＩＩは、過酷な前処理条件なしで、ＰＥＥＫ、金属、または従来のコーティングプロセスによって容易にはコーティングされ得ない任意の基板をコーティングする別の様式である。以下の例は、ＦＤＡに適合する資源、方法および材料を使用する。
【０２４３】
条件ＩＩＩにおけるポリマー下塗りプロセスは、以前に使用された従来の前処理条件と比較して、より穏やかでより迅速である。条件ＩＩＩはまた、ミネラルコーティングするにもより迅速であることが示されている（４日の代わりに２日）。現在、この技術は、任意の困難な基板（例えば、ＰＥＥＫ、金属、平滑基板）をコーティングするための解決策となり得る可能性があると考えられている。さらに、特定の時点で分解するようにポリマープライマーを特別設計することが可能である（例えば、ＰＣＬの代わりに、より速い分解時間を有する（およびＦＤＡにより認可された）ＰＬＧＡが使用されてもよい）。
【０２４４】
条件ＩＩＩは、条件Ｉまたは条件ＩＩと比較した場合、コーティングの形態および均一性の点で最も良好なコーティングをもたらすことが観察された（例えば、図１４Ａ〜図１４Ｄを参照されたい）。さらに、条件ＩＩＩのミネラルコーティングは、より迅速でより均一なコーティングを形成し、メッシュのマクロチャネルに干渉しないことが観察された（例えば、図１４Ａ〜図１４Ｄを参照されたい）。条件Ｉ（１Ｍ  ＮａＯＨでの加水分解および４日間のコーティングプロセス）は、最少量のコーティングをもたらした。条件ＩＩ（３Ｍ加水分解および４日間のコーティング）は、それより僅かに多い（ただしＩＩＩほど良好ではない）コーティングをもたらした。
この実施例は、ミネラルコーティングプロセスを一時的に支援する吸収性薄膜を用いた「下塗り」によって、ＰＥＥＫがコーティングされ得ることを実証した。溶媒キャスティングおよび乾燥技術の組合せにより、ＰＥＥＫを封入する独特の表面形態を有する生体吸収性ポリマーの薄膜が形成された。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４Ａ−１４Ｂ】
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【図１４Ｃ−１４Ｄ】
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【図１５Ａ−１５Ｂ】
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【図１５Ｃ−１５Ｄ】
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【図１６Ａ−１６Ｂ】
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【図１６Ｃ−１６Ｄ】
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【国際調査報告】
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