(57)【要約】  本発明は、化合物で補充されたセルロース系繊維を含む、改善された止血組成物、その調製、及び使用に関する。
2018532516.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
止血組成物であって、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有し、前記組成物全体の８３．５％〜９０．０％ｗ／ｗの濃度範囲にある、セルロース系繊維と、前記組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるωアミノカルボン酸と、前記組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるプロタミン塩と、カチオン濃度が前記組成物全体の１．３％〜１．８％ｗ／ｗである二価カチオンと、を含み、前記組成物が、粉体及び／又は凝集体の形態である、止血組成物。
【請求項２】
前記セルロース系繊維が、１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する、請求項１に記載の止血組成物。
【請求項３】
前記セルロース系繊維が、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）繊維である、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ωアミノカルボン酸が、εアミノカプロン酸（εＡＣＡ）である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記プロタミン塩が、プロタミン硫酸塩である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記二価カチオン塩が、塩化カルシウムによって提供される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記εＡＣＡ、プロタミン硫酸塩、及び塩化カルシウムの前記濃度範囲が、それぞれ２．５％〜５．０％、２．５％〜５．０％、５．０％〜６．５％ｗ／ｗであり、残りの重量が、１００％ｗ／ｗの総重量になるように前記セルロース系繊維により寄与される、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
血液との接触時に前記粉体組成物から形成されるゲルが、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）からなる比較粉体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの抵抗の１０倍以上の抵抗を有し、かつ／又は前記凝集体組成物から形成されるゲルが、ＯＲＣからなる比較凝集体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの止血能力の１．５倍以上の止血能力を有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物が、７５μｍ〜４２０μｍの範囲のサイズを有する凝集体の形態である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
止血組成物の作製方法であって、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有し、前記組成物全体の８３．５％〜９０％ｗ／ｗの濃度範囲にある、セルロース系繊維を、以下の粉体化合物、
ｉ−前記組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるωアミノカルボン酸、
ｉｉ−前記組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるプロタミン塩、及び
ｉｉｉ−カチオン濃度が前記組成物全体の１．３％〜１．８％ｗ／ｗである二価カチオンと混合する工程を含む、方法。
【請求項１１】
前記繊維が、１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記止血組成物を圧密化する工程と、任意選択で前記圧密化組成物を乾燥及びサイズ低減に供する工程と、それによって止血凝集体を得る工程と、を更に含む、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
ゲルの形成方法であって、
請求項１〜９のいずれか一項に記載の止血粉体及び／又は凝集体組成物を血液と接触させ、それによってゲルを形成する工程を含む、方法。
【請求項１４】
前記接触が前記粉体組成物で実施されるとき、前記形成されたゲルが、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）からなる比較粉体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの抵抗の１０倍以上の抵抗を有し、
かつ／又は前記接触が前記凝集体組成物で実施されるとき、前記形成されたゲルが、ＯＲＣからなる比較凝集体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの止血能力の１．５倍以上の止血能力を有する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の止血組成物を含む容器と、任意選択でアプリケータ、担体、及び／又は使用説明書と、を含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化合物を補充したセルロース系繊維を含む、改善された止血組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
多種多様な状況において、ヒトを含む動物は、創傷が原因で、あるいは外科的処置の間に出血に見舞われることがある。状況によっては、出血は比較的軽いものであり、通常の血液凝固作用が、簡単な応急処置の実施に加われば、それだけで十分である。他の状況では、相当な出血が起こることがある。これらの局面では通常、専門的な設備及び物資、並びに適切な救助を施すように訓練された人員が必要となる。外科的処置中の出血は、多様な形態で現れ得る。出血は、大きな表面積から離散又は拡散している場合がある。出血は、大小の血管、動脈（高圧）、又は静脈（低圧）からの、大量又は少量の出血であり得る。出血は、容易にアクセス可能であり得るか、又はアクセス困難な部位を起源とし得る。
【０００３】
止血を達成するための従来の方法は、外科的技法、縫合糸、結紮又はクリップ、及びエネルギーに基づく凝固又は焼灼の使用を含む。これらの従来の手段が、無効であるか又は実用的でない場合、典型的には、補助的な止血技法及び製品が利用される。
【０００４】
出血の制御のための適切な方法又は製品の選択は、出血の重症度、起源の解剖学的位置、隣接する重要な構造に対する起源の近接、出血が離散的起源に由来するか又はより広い表面積に由来するか、起源の可視性及び正確な識別、及び起源へのアクセスを含むがこれらに限定されない多くの要因に依存する。
【０００５】
止血の補助として、多くの製品が開発されてきた。これらの製品としては、酸化再生セルロース、トロンビン溶液を伴うか又は伴わない様々な形態のゼラチン、コラーゲン粉体、生物学的に活性な局所止血製品（局所トロンビン溶液、フィブリンシーラントなど）、及び種々の合成局所シーラントなどの局所用吸収性止血剤（topical absorbable hemostat、ＴＡＨ）が挙げられる。
【０００６】
局所用吸収性止血材（ＴＡＨ）は、外科用途で広く使用されている。ＴＡＨは、酸化セルロース（oxidized cellulose、ＯＣ）、酸化再生セルロース（oxidized regenerated cellulose、ＯＲＣ）、ゼラチン、コラーゲン、キチン、キトサンなどをベースとした製品を包含する。止血性能を向上させるために、上記の材料をベースとした足場を、トロンビン及びフィブリノゲンなどの生物由来の凝固因子と組み合わせることができる。
【０００７】
最も一般的に使用される局所止血剤のうちの１つは、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）から作製されたＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）Ｏｒｉｇｉｎａｌ可吸収性止血剤である。ＯＲＣは、多くの外科的処置のための安全かつ有効な止血剤として、１９６０年代に導入された。ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）Ｏｒｉｇｉｎａｌは、そのすぐ周囲に急速に適合する緩い編みのＯＲＣ布帛であり、手術器具に付着せず、そのサイズを容易にトリミングすることができるため、他の吸収性剤よりも管理が容易である。これにより、外科医は、全ての出血が止まるまで、セルロースを所定の位置にしっかりと保持することができる。
【０００８】
出血の制御は、失血を最小限に抑え、術後合併症を低減させ、かつ手術室での手術の時間を短くするために、外科的処置において必須かつ重要である。その生分解性、並びにその殺菌特性及び止血特性により、酸化セルロース並びに酸化再生セルロースは、神経手術、腹部手術、心臓血管手術、胸部手術、頭頸部手術、骨盤手術、並びに皮膚及び皮下組織処置を含む、様々な外科的処置において局所性止血用創傷包帯として長い間使用されてきた。粉体、織布、不織布、編物、及び他の形態で作製されるか否かにかかわらず、酸化セルロース材料をベースとした様々な種類の止血剤を形成するための多くの方法が知られている。現在利用される止血用創傷包帯としては、セルロース繊維の均一性を高めた酸化セルロースである酸化再生セルロース（ＯＲＣ）を含む編物、織布、又は不織布が挙げられる。
【０００９】
ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）可吸収性止血剤は、結紮又は他の従来の制御方法が実用的でないか又は無効である場合に、毛細血管、静脈、及び小動脈出血の制御を補助するために外科的処置において補助的に使用される。ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ファミリーの可吸収性止血剤は、４つの主要製品群からなり、全ての止血用創傷包帯は、Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｉｎｃ．（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，Ｎ．Ｊ．）、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙから市販されている。ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）Ｏｒｉｇｉｎａｌ止血剤は、薄黄色がかった色及び微かなカラメル様の芳香を有する白色布帛である。この材料は丈夫であり、ほつれずに縫合又は切断することができる。
【００１０】
ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＮＵ−ＫＮＩＴ（登録商標）可吸収性止血剤は、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）Ｏｒｉｇｉｎａｌと同様であるが、より緻密な編物、したがってより高い引張強度を有し、この材料は、出血を制御するために所定の位置に巻き付けるか又は縫合することができるため、外傷及び移植手術における使用に特に推奨される。
【００１１】
ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＦＩＢＲＩＬＬＡＲ（商標）可吸収性止血剤製品形態は、外科医が特定の出血部位で止血を達成するために必要な任意の量の材料を鉗子で剥離及び把持することを可能にする層状構造を有しており、これにより、到達しにくいか又は不規則に形成された出血部位について編み形態よりも便利であり得る。これは、整形外科／脊椎及び神経学的手術における使用に特に推奨される。
【００１２】
ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＳＮｏＷ（商標）可吸収性止血剤製品形態は、構造化された不織布により、内視鏡使用形態のための他の形態よりも便利であり得、切開処置及び最小侵襲性処置の両方において高度に適合性であり、推奨される構造化不織布である。
【００１３】
酸化セルロースを含有する市販の吸収性止血剤の他の例は、Ｇｅｌｉｔａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  ＢＶ（Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）からのＧＥＬＩＴＡ−ＣＥＬ（登録商標）吸収性セルロース外科的包帯である。上記の市販の酸化セルロース止血剤は、編物、不織布、又は粉体形態で入手可能である。多孔性多糖類粒子及び植物澱粉系粒子からなる粉体などの追加の止血製品もまた、ＰＥＲＣＬＯＴ（登録商標）及びＡＲＩＳＴＡ（商標）として市販されている。
【００１４】
他の背景関連参照文献としては、以下が挙げられる。
米国特許第８，８１５，８３２号、米国特許第３，３６４，２００号、米国特許出願公開第２００８／００２７３６５号、米国特許出願公開第２００４／０００５３５０号、国際公開第２００７／０７６４１５号、米国特許第６，６２７，７４９号、米国特許第６，３０９，４５４号、米国特許第５，６９６，１９１号、米国特許第６，６２７，７４９号、米国特許第６，２２５，４６１号、国際公開第２００１／０２４８４１（Ａ１）号、欧州特許第１，３２３，４３６号、米国特許出願公開第２００６／０２３３８６９号、米国特許第５６４５８４９（Ａ）号、米国特許第５６４３５９６（Ａ）号、国際公開第１９９６／０４００３３（Ａ１）号、米国特許第５４８４９１３（Ａ）号、米国特許第９１３１９２９（Ｂ２）号、米国特許第８７２２０８１（Ｂ２）号、米国特許第７９２３０３１（Ｂ２）号、米国特許第６０５６９７０（Ａ）号、米国特許第４７４９６８９（Ａ）号、米国特許第４６３７８１５（Ａ）号、米国特許出願公開第２０１５／００１７２２５（Ａ１）号、米国特許出願公開第２０１３／０３１０８７３（Ａ１）号、米国特許出願公開第２０１２／０２５３２９８（Ａ１）号米国特許出願公開第２００９／００６２２３３（Ａ１）号、米国特許出願公開第２００８／０１３８３８７（Ａ１）号、米国特許出願公開第２００２／０１９２２７１（Ａ１）号、欧州特許第１６４１３９９（Ｂ１）号、欧州特許第１７３１１７５（Ｂ１）号、欧州特許第２２３３１５７（Ａ１）号、欧州特許第２２０３０５３（Ａ１）号、国際公開第１９９０／０１３３２０（Ａ１）号、カナダ特許第２６８８１９６（Ｃ）号、オーストラリア特許第２０１３／２１８３６７（Ｂ２）号、中国特許第１０４０１３９９１（Ａ）号、中国特許第１８５０１１１（Ａ）号、ロシア特許第２２３５５３９（Ｃ１）号、米国特許第５４０３２７８（Ａ）号、フィリピン特許第３２０１４（Ａ）号、国際特許出願公開第２００２／０２４２３９（Ａ１）号。
【００１５】
Ｈｏｗｓｍｏｎ，Ｊ．Ａ．，＆  Ｍａｒｃｈｅｓｓａｕｌｔ，Ｒ．Ｈ．（１９５９）。Ｔｈｅ  ｂａｌｌ−ｍｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ｆｉｂｅｒｓ  ａｎｄ  ｒｅｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ  ｅｆｆｅｃｔｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．，１（３），３１３〜３２２．ｄｏｉ：１０．１００２／ａｐｐ．１９５９．０７００１０３０８。
【００１６】
Ｃｕｌｌｅｎ，Ｂ．，Ｗａｔｔ，Ｐ．Ｗ．，Ｌｕｎｄｑｖｉｓｔ，Ｃ．，Ｓｉｌｃｏｃｋ，Ｄ．，Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｒ．Ｊ．，Ｂｏｇａｎ，Ｄ．，＆  Ｌｉｇｈｔ，Ｎ．Ｄ．（２００２）．Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｏｘｉｄｉｓｅｄ  ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ／ｃｏｌｌａｇｅｎ  ｉｎ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｗｏｕｎｄ  ｒｅｐａｉｒ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，３４（１２），１５４４〜１５５６．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｓ１３５７〜２７２５（０２）０００５４−７。
【００１７】
Ｒａｊｋｈｏｗａ，Ｒ．，Ｗａｎｇ，Ｌ．，＆  Ｗａｎｇ，Ｘ．（２００８）．Ｕｌｔｒａ−ｆｉｎｅ  ｓｉｌｋ  ｐｏｗｄｅｒ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｒｏｔａｒｙ  ａｎｄ  ｂａｌｌ  ｍｉｌｌｉｎｇ．Ｐｏｗｄｅｒ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１８５（１），８７〜９５．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｐｏｗｔｅｃ．２００８．０１．００５。
【００１８】
Ｙａｓｎｉｔｓｋｉｉ，Ｂ．Ｇ．，Ｄｏｌ’ｂｅｒｇ，Ｅ．Ｂ．，Ｏｒｉｄｏｒｏｇａ，Ｖ．Ａ．，Ｓｈｕｔｅｅｖａ，Ｌ．Ｎ．，Ｓｕｋｈｉｎｉｎａ，Ｔ．Ｖ．，Ｂｏｇｕｎ，Ｔ．Ａ．（１９８４）．Ｏｘｙｃｅｌｏｄｅｘ，ａ  ｎｅｗ  ｈｅｍｏｓｔａｔｉｃ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ，１８（４），２７９〜２８１．ｄｏｉ：１０．１００７／ｂｆ００７６０７１２。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明は、化合物を補充したセルロース原料物質由来の繊維を含む、改善された止血組成物に関する。
【００２０】
一態様では、本発明は、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有し、組成物全体の８３．５％〜９０．０％ｗ／ｗの濃度範囲にある、セルロース系繊維と、組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるωアミノカルボン酸と、組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるプロタミン塩と、カチオン濃度が組成物全体の１．３％〜１．８％ｗ／ｗである二価カチオンと、を含む、止血組成物を提供し、組成物は、粉体及び／又は凝集体の形態である。
【００２１】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物はまた、サイズ３５０μｍの繊維を含む。
【００２２】
サイズ分布Ｄ５０はまた、粉体／凝集体サイズ分布におけるユニットの中位径又は中央値として知られており、累積分布における５０％でのユニット径の値である。例えば、Ｄ５０がＸμｍである場合、試料中のユニットの５０％がＸμｍよりも大きく、５０％はＸμｍよりも小さい。サイズ分布は、目的の試料中の全ユニットサイズの総数の割合として与えられる様々なサイズ範囲のそれぞれに収まるユニットの数である。したがって、Ｄ９０値は、Ｄ９０値よりも小さいサイズを有する９０％のユニットを指す。本明細書に開示される全ての範囲は、適用可能な場合、上下限を含む。
【００２３】
一実施形態では、セルロース系繊維は、１７７μｍ未満のＤ９０及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する。
【００２４】
更に別の実施形態では、セルロース系繊維は、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）繊維である。
【００２５】
別の更なる実施形態では、ωアミノカルボン酸は、εアミノカプロン酸（εＡＣＡ）である。
【００２６】
いくつかの実施形態では、プロタミンは、プロタミン硫酸塩である。
【００２７】
いくつかの実施形態では、二価カチオン塩は、塩化カルシウムによって提供される。
【００２８】
一部の実施形態では、εＡＣＡ、プロタミン硫酸塩、及び塩化カルシウムの濃度範囲は、それぞれ２．５％〜５．０％、２．５％〜５．０％、５．０％〜６．５％ｗ／ｗであり、残りの重量は、１００％ｗ／ｗの総重量になるようにセルロース系繊維により寄与される。
【００２９】
いくつかの実施形態では、血液との接触時に粉体組成物から形成されるゲルは、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）からなる比較粉体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの抵抗の１０倍以上の抵抗を有し、かつ／又は凝集体組成物から形成されるゲルは、ＯＲＣからなる比較凝集体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの止血能力の１．５倍以上の止血能力を有する。
【００３０】
一部の実施形態では、組成物は、７５μｍ〜４２０μｍの範囲のサイズを有する凝集体の形態である。
【００３１】
別の態様では、本発明は、止血組成物の作製方法であって、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有し、組成物全体の８３．５％〜９０％ｗ／ｗの濃度範囲にある、セルロース系繊維を、以下の粉体化合物、
ｉ−組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるωアミノカルボン酸、
ｉｉ−組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるプロタミン塩、及び
ｉｉｉ−カチオン濃度が組成物全体の１．３％〜１．８％ｗ／ｗである二価カチオンと混合する工程を含む、方法を提供する。
【００３２】
いくつかの実施形態では、繊維は、１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する。
【００３３】
別の態様では、本発明は、本発明の方法に従って得られる止血組成物を提供する。
【００３４】
いくつかの実施形態では、本方法は、止血組成物を圧密化する工程と、任意選択で圧密化組成物を乾燥及びサイズ低減に供する工程と、それによって止血の凝集体を得る工程と、を更に含む。
【００３５】
別の態様では、本発明は、本発明の方法に従って得られる止血凝集体組成物を提供する。
【００３６】
別の態様では、本発明は、ゲルの形成方法であって、
本発明に記載の止血粉体及び／又は凝集体組成物を血液と接触させ、それによってゲルを形成する工程を含む、方法を提供する。
【００３７】
一実施形態では、接触が粉体組成物で実施されるとき、形成されたゲルが、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）からなる比較粉体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの抵抗の１０倍以上の抵抗を有し、
かつ／又は接触が凝集体組成物で実施されるとき、形成されたゲルが、ＯＲＣからなる比較凝集体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの止血能力の１．５倍以上の止血能力を有する。
【００３８】
別の態様では、本発明は、本発明に記載の方法によって得られるゲルを提供する。
【００３９】
別の態様では、本発明は、本発明による止血組成物を含む容器と、任意選択でアプリケータ、担体、及び／又は使用説明書と、を含むキットを提供する。
【００４０】
別の態様では、本発明は、出血創傷、創傷部位における細菌感染症の治療、吻合部位からの漏出の最小化又は防止、必要とする対象における、部位における漏出の封止及び／又は手術部位における癒着の防止方法であって、有効量の本発明に記載の止血組成物を、対象の創傷及び／又は部位の上及び／又は中に適用することを含む、方法を提供する。
【００４１】
対象は、ヒト患者又は動物であり得る。
【００４２】
別の態様では、本発明は、出血創傷、創傷部位における細菌感染症の治療、吻合部位からの漏出の最小化又は防止、部位における漏出の封止及び／又は癒着の防止のための、本発明に記載の止血組成物の使用を提供する。
【００４３】
一実施形態では、この使用は、冠状動脈バイパス移植（ＣＡＢＧ）手術における漏出を最小化又は防止するためである。
【００４４】
一実施形態では、この適用は、創傷及び／又は部位に向かって組成物に圧力を加えることなく実施される。例えば、ガーゼを使用する手動圧縮は不要である。様々な製品において、製品は、少なくとも１分間の適用中に手動圧縮を必要とする。圧縮なしに止血組成物を使用する利点は、止血組成物を、到達しにくい領域の中／上に適用できることである。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】修正されたブルーム試験を使用して、異なる粉体組成物から得られる抵抗力／凝集力を示す棒グラフである。非補充の微細ＯＲＣ繊維から得られる抵抗力を、実験全体のベースラインとした。
【図２】修正されたブルーム試験を使用して、異なる粉体組成物から得られる抵抗力／凝集力を示す棒グラフである。非補充の微細ＯＲＣ繊維から得られる抵抗力を、実験全体のベースラインとした。
【図３】エクスビボ縫合モデルによる、非圧密化及び圧密化粉体組成物（即ち、凝集体の形態の組成物）の止血効果、並びに圧密組成物中のカルシウムイオンの効果を示すバー図である。
【発明を実施するための形態】
【００４６】
本発明は、化合物を補充したセルロース系繊維を含む、粉体及び／又は凝集体の形態の改善された止血組成物（複数可）に関する。
【００４７】
本発明は、ゲル又は凝塊形成時の止血のための驚くべき物理特性及び非常に有益な効果（複数可）を有する粉体及び／又は凝集体組成物（複数可）、それらの調製及びその使用に関する。例えば、粉体及び／又は凝集体組成物は、増加した凝集力及び有益な止血能力などの有益な物理特性を有するゲル又は凝塊形成を誘導する。
【００４８】
止血組成物は、セルロース系材料に由来し、かつ化合物を補充した繊維を含み、この組成物は、粉体及び／又は凝集体の形態である。
【００４９】
用語「セルロース系繊維」は、セルロース骨格を含む繊維に関する。セルロース骨格は修飾されることができ、例えば、カルボキシル化又は酸化レベルの変化を含み得る。セルロース系材料の非限定的な例としては、酸化セルロース又は酸化再生セルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、及びメチルセルロースが挙げられる。
【００５０】
セルロース系繊維の非限定的な例は、ＯＲＣ繊維、綿繊維、レーヨン繊維、及びビスコース繊維である。
【００５１】
セルロース系繊維は、セルロース系材料から作製することができる。セルロース系材料の非限定的な例は、織布、不織布、編物、及び／又は他の形態の布帛である。
【００５２】
用語「繊維」は、細長い糸状形態を有する構造体に関する。
【００５３】
用語「粉体」は、分散した乾燥固体粒子に関する。
【００５４】
一実施形態では、本発明による粉体組成物は、繊維と、粒子形態の補充化合物とを含む。
【００５５】
用語「凝集体」は、目標のサイズ範囲を有する、粉体及び／又は繊維などの圧密化セルロース系材料に関し、例えば、この圧密化材料は、粉砕及び任意選択で篩分けなどのサイズ低減に供される。一実施形態では、凝集体は、粉砕などのサイズ低減に供された圧密化粉体組成物である。
【００５６】
サイズ低減の非限定的な例は、粉砕、研削、細断、及び／又は開裂である。
【００５７】
用語「止血」は、出血強度を低減するか、又は出血を止める能力に関する。
【００５８】
止血組成物は、セルロース系繊維を、ωアミノカルボン酸、プロタミン塩、及び二価カチオンと、本発明による範囲で混合することによって調製することができる。
【００５９】
ωアミノカルボン酸は、可変鎖長を有するωカルボン酸としてであり得、これには、２−アミノ酢酸（グリシン）、３−アミノプロパン酸、４−アミノブタン酸、５−アミノペンタン酸、６−アミノヘキサン酸、７−アミノヘプタン酸、８−アミノオクタン酸、９−アミノノナン酸、１０−アミノデカン酸、及びεアミノカプロン酸が含まれるが、これらに限定されない。
【００６０】
本発明の一実施形態では、組成物中のプロタミン塩は、プロタミン硫酸塩である。プロタミン塩の他の例としては、プロタミンアミンが挙げられるが、これに限定されない。
【００６１】
本発明の一実施形態では、組成物中の二価カチオンは、塩化カルシウムによって提供される。二価のカチオン塩の他の例としては、塩化マグネシウム、酢酸カルシウム、及び塩化鉄（ＩＩ）が挙げられるが、これら限定されない。
【００６２】
本発明の一実施形態では、εＡＣＡ、プロタミン硫酸塩、及び塩化カルシウムの濃度範囲は、それぞれ２．５％〜５．０％、２．５％〜５．０％、５．０％〜６．５％ｗ／ｗであり、組成物の残りの重量は、１００％ｗ／ｗの総重量になるようにセルロース系繊維により寄与される。
【００６３】
止血組成物は、カルボキシメチルセルロース、抗感染剤、別の止血促進剤、ゼラチン、コラーゲン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される添加物を更に含み得る。
【００６４】
本発明のいくつかの実施形態では、止血組成物は、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）又は他の多糖類、抗感染剤、止血促進剤、ゼラチン、コラーゲン、又はそれらの組み合わせを更に含む。
【００６５】
組成物の繊維を作製するための出発物質として使用される繊維の原料物質又はセルロース系物質の非限定的な例としては、酸化再生セルロース布、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）、織布、編物、不織布、細断酸化再生セルロース系材料、又はそれらの組み合わせが挙げられる。
【００６６】
本発明によれば、ＯＲＣ繊維によって誘導されたゲルの凝集力が、修正されたブルーム試験によって測定したとき、化合物の補充によって影響を受けることが見出された。
【００６７】
修正されたブルーム試験の結果は、金属性の棒が、５ｍｍ／分の速度で動きながら、７ｍｍの伸長でゲルを通過するのに必要な力を示す。この力は、ゲルの抵抗のレベルを反映し（力が大きいほど、ゲルの抵抗が大きくなる）、順にゲルの凝集力のレベルを示している。凝集力は、組成物の分子が結合される強度を表す。棒がその定常的な動きを伴って進行するのに必要な力が大きいほど、ゲルの抵抗が大きくなる。
【００６８】
３％又は６％のいずれかの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２）によるＯＲＣ繊維の補充が、抵抗力を用量依存的に増加させたことも見出された。
【００６９】
本発明による所見は、３％塩化第二鉄（ＦｅＣｌ３）によるＯＲＣ繊維の補充が、形成される凝塊の抵抗に対して顕著な正の効果を有していたことを示した。
【００７０】
３％  ＣａＣｌ２補充の効力を、３％  ＰＳ、又は３％  ＰＳ及び３％  εＡＣＡ、又は３％  ＰＳ及び３％キトサンのいずれかを更に補充した、正電荷を有する組成物と比較したとき、結果は、更に補充した組成物の抵抗力に改善があったことを示した。しかしながら、組成物中に正電荷を有する別の化合物である、３％リジン（Ｌｙｓ）を含むことは、負の効果を有し、得られる抵抗力を減少させることが見出された。
【００７１】
機序に拘束されることなく、ＯＲＣ繊維を特定の正に荷電した化合物（例えば、異なるカチオン、例えばＣａＣｌ２によって提供される二価カチオン、プロタミン塩、例えばプロタミン硫酸塩、又は正に荷電した多糖類、例えばキトサン、並びにωアミノカルボン酸、例えばεＡＣＡ）で補充することは、止血粉体組成物によって形成されるゲルの凝集力を増加させ得る。
【００７２】
また、ＯＲＣ繊維の、３％キトサン又は３％  ＰＳのいずれかによる補充、更には６％までのＣａＣｌ２補充が、凝塊の抵抗力の増加を示すことも見出された。
【００７３】
また、６％  ＣａＣｌ２  ＯＲＣ組成物の、３％  εＡＣＡによる更なる補充は、凝塊の抵抗を減少させた。
【００７４】
加えて、６％  ＣａＣｌ２の補充によって形成された凝塊において示された改善された抵抗力は、リジン（Ｌｙｓ）との６％  ＣａＣｌ２混合物の補充によって形成された凝塊において消失したことが見出された。また、６％  ＣａＣｌ２−ＯＲＣの、アルギニン（Ａｒｇ）による補充は、同じ負の効果を有していた。
【００７５】
優れた凝集力の結果は、５．０％  ＣａＣｌ２、２．５％  ＰＳ、及び２．５％  εＡＣＡを補充したＯＲＣにより得られたことが見出された。
【００７６】
これらの意外な所見は、ＯＲＣ繊維を、特定の正の化合物、及び特定の組み合わせを補充すること、並びにそれらの濃度が、ゲルの凝集力特性を改善することを示す。
【００７７】
また、凝集体の形態の（５．０％  ＣａＣｌ２、２．５％  ＰＳ、及び２．５％  εＡＣＡの、優れた凝集力を呈した組み合わせで）補充したＯＲＣ繊維が、優れた止血能力を有していたことが見出された。補充したＯＲＣ凝集体の止血効力に対する塩化カルシウムの正の寄与が観察された。
【００７８】
異なる濃度の化合物による補充を伴うか、又は伴わないＯＲＣ繊維の凝集体は、それらの止血効果についてインビボで探査された。試験された化合物補充凝集体は、１０．０％（最終混合物重量のｗ／ｗ）の長いＯＲＣ繊維及び７７．５〜８０．０％の微細ＯＲＣ繊維の繊維の組み合わせを含んでいた。各実験において、微細ＯＲＣ凝集体（任意の補充なし）を、ＯＲＣ繊維への化合物の補充の止血効果を調べるための比較組成物とした。完全出血停止／完全止血の成功率を測定した。インビボ結果は、３つの化合物（塩化カルシウム、ＰＳ、及びεＡＣＡ）全てが、ＯＲＣ繊維の止血効果を改善するために必要であり、ＰＳ及びεＡＣＡの両方の場合、優れた補充範囲は、２．５％〜５．０％であり、塩化カルシウムの場合、５．０％〜６．５％（１．３６３％〜１．６３６％ｗ／ｗのカチオン濃度範囲）であることを再確認した。
【００７９】
これらの結果は、補充ＯＲＣが、ＯＲＣ比較組成物よりも少なくとも１．５倍効率的であり得ることを示した（補充されたＯＲＣの完全止血率３７．５％に対して、ＯＲＣ単独の完全止血率２５％）。本発明の一態様では、組成物は、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有するセルロース系繊維を含み、この繊維は、組成物全体の８３．５％〜９０．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあり、以下の化合物、組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲のωアミノカルボン酸、組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるプロタミン塩、塩中のカチオン濃度が組成物全体の１．３％〜１．８％ｗ／ｗである二価のカチオン塩で補充されている。この組成物は、粉体及び／又は凝集体の形態であり得る。
【００８０】
ωアミノカルボン酸の非限定的な例としては、可変鎖長を有するωカルボン酸が挙げられ、２−アミノ酢酸（グリシン）、３−アミノプロパン酸、４−アミノブタン酸、５−アミノペンタン酸、６−アミノヘキサン酸、７−アミノヘプタン酸、８−アミノオクタン酸、９−アミノノナン酸、１０−アミノデカン酸、及びεアミノカプロン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８１】
本発明の一実施形態では、ωアミノカルボン酸は、εアミノカプロン酸（εＡＣＡ）である。
【００８２】
本発明の一実施形態では、プロタミン塩は、プロタミン硫酸塩である。
【００８３】
本発明の一実施形態では、二価カチオン塩は、塩化カルシウムにより提供される。
【００８４】
本発明の一実施形態では、εＡＣＡ、プロタミン硫酸塩、及び塩化カルシウムの濃度範囲は、それぞれ２．５％〜５．０％、２．５％〜５．０％、５．０％〜６．５％ｗ／ｗであり、組成物の残りの重量は、１００％ｗ／ｗの総重量になるようにセルロース系繊維により寄与される。
【００８５】
止血組成物は、カルボキシメチルセルロース、抗感染剤、別の止血促進剤、ゼラチン、コラーゲン、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される添加物を更に含み得る。
【００８６】
本発明のいくつかの態様では、止血組成物は、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）又は他の多糖類、抗感染剤、止血促進剤、ゼラチン、コラーゲン、又はそれらの組み合わせを更に含む。
【００８７】
本発明の一実施形態では、化合物は、プロタミン硫酸塩、カルシウムイオン、及びεアミノカプロン酸［５％  ＣａＣｌ２、２．５％  ＰＳ、及び２．５％  εアミノカプロン酸（εＡＣＡ）］を含む。
【００８８】
セルロース系繊維の非限定的な例は、ＯＲＣ繊維、綿繊維、レーヨン繊維、及びビスコース繊維である。
【００８９】
一態様では、本発明は、本発明の組成物の作製方法を提供する。組成物は、有益な止血特性を有し、創傷治癒、及び他の治療的特性を有し得る。
【００９０】
一実施形態では、この方法は、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布、又は１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有し、組成物全体の８３．５％〜９０．０％ｗ／ｗの濃度範囲にある、セルロース系繊維を、以下の粉体化合物、
ｉ−組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるωアミノカルボン酸、
ｉｉ−組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲におけるプロタミン塩、及び
ｉｉｉ−カチオン濃度が組成物全体の１．３〜１．８％ｗ／ｗである二価カチオンと混合する工程を含む。
【００９１】
一実施形態では、本発明による止血用組成物中の繊維は、酸化セルロース系繊維材料及び／又は予め細断された酸化セルロース系材料から作製される。別の実施形態では、本発明による止血組成物中の繊維は、酸化再生セルロース系繊維材料及び／又は予め細断された酸化再生セルロース系材料から作製される。
【００９２】
止血組成物を作製するためのセルロース系繊維出発物質は、セルロース系材料、特に酸化セルロース及びその中和誘導体を含む、吸収性織布又は編み布帛又は不織布材料を含むことができる。例えば、セルロース系材料は、カルボキシル−酸化又はアルデヒド−酸化セルロースであってよい。酸化再生セルロース（ＯＲＣ）が挙げられるが、これに限定されない酸化再生多糖類が使用され得る。酸化再生セルロースは、再生されていないセルロースに対するより高い均等度のために有利である。再生セルロース、及び酸化再生セルロースを作製する方法に関する詳細な説明は、米国特許第３，３６４，２００号、同第５，１８０，３９８号、及び同第４，６２６，２５３号に記載されており、これらの各々の内容は、その全体が記載されたものとして、参照により本明細書に組み込まれる。
【００９３】
組成物の繊維を調製するために利用され得るセルロース系材料の例としては、ＩＮＴＥＲＣＥＥＤ（登録商標）吸収性癒着障壁、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）Ｏｒｉｇｉｎａｌ可吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＮＵ−ＫＮＩＴ（登録商標）可吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＦＩＢＲＩＬＬＡＲ（商標）可吸収性止血剤、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）ＳＮｏＷ（商標）可吸収性止血剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９４】
セルロース系材料、例えばセルロース系布帛を粉砕して、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する繊維を得ることができる。所望により、粉砕工程を繰り返して、１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を得ることができる。
【００９５】
一実施形態では、止血組成物を作製するための繊維は、セルロース系原料物質を粉砕することによって調製される。この粉砕工程は、セルロース系原料物質をスリット及び切断して材料片を形成することによって行う。この実施形態では、粉砕工程は、２部工程であり、第２の部分は空気分級機内で行われ、この第２の部分は３回繰り返すことができる。空気分級機における最初の通過（時間）の後、得られる「長繊維」は、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する。空気分級機における３通過（３回）の後、得られた微細ＯＲＣ繊維は、１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する。
【００９６】
本発明の一実施形態では、組成物中の「微細又は短い」セルロース系繊維は、１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する。
【００９７】
セルロース系材料は、粉砕工程前、工程中、及び／又は工程後に、化合物と混合され得るか、又は化合物で補充され得る。
【００９８】
一実施形態では、繊維及び化合物を含む本発明による止血粉体組成物は、圧密化の工程に更に供されて凝集体を形成し、任意選択で乾燥、粉砕／研削、及び篩分けの工程を更に含む。
【００９９】
本発明はまた、例えば、化合物と、粉砕され、任意選択で加湿、圧密化、及び乾燥されたセルロース系材料とを含む、凝集体の形態の止血組成物に関する。
【０１００】
一実施形態では、本発明は、凝集体形態であり、例えば、その最長軸に沿って約４２０μｍ未満かつ約７５μｍ超の直径を有する、本発明に係る複数の相互接続された個々のセルロース系繊維及び化合物で構成された凝集体の形態の止血組成物に関する。
【０１０１】
別の態様では、本発明は、止血粉体組成物を圧密化し、凝集体を形成する工程を含む、複数の止血凝集体組成物を作製する方法に関する。
【０１０２】
本発明の一実施形態では、本方法は、止血組成物を圧密化する工程と、圧密化組成物を、乾燥、粉砕、及び篩分けに供する工程と、それによって止血凝集体を得る工程と、を更に含む。
【０１０３】
凝集体は、止血粉体組成物を加湿する工程と、例えば、ローラ及び／又はスラッギングによって粉体を圧密化して、止血凝集体を形成する工程と、除湿する工程と、粉砕する工程と、止血凝集体を篩分けする工程と、任意選択で得られた止血凝集体を貯蔵容器内又は送達装置内に投与する工程と、を任意選択で含むことによって作製され得る。
【０１０４】
圧密化前に、粉体を、１１．０重量％〜１６．０重量％の含水率まで加湿することができる。粉体は、転圧又はスラッギング圧密化された後、予備破砕、除湿、次いで最終的に粉砕及び恐らくは篩分けする工程に供され得る。
【０１０５】
一実施形態では、粉体は、少なくとも１３０バールのローラ圧で圧密化される。粉体は、少なくとも２６ｋＮ／ｃｍのローラ力で圧密化され得る。
【０１０６】
得られた凝集体は、例えば篩分けによって、目標の止血凝集画分に選択される。目標の凝集体は、それらの最長軸に沿って７５〜５００μｍ、例えば７５〜４２０μｍの寸法を有し得る。投薬のために意図された止血凝集体は、例えば、約５％未満、より好ましくは２％未満の「乾燥での損失」によって測定されたときの含水量を有し得る。
【０１０７】
粉体圧密化は、本発明による粉体と、手動油圧プレス（Ｓｐｅｃａｃ  Ｌｔｄ．Ａｔｌａｓ  １３６０８キログラム（１５トン）モデルＧＳ１５０１１）と、好適な排気可能なペレットダイとを使用して実施することができる。ペレットダイは、カプセルを得るために１０ｍｍの直径を有し得る（Ｓｐｅｃａｃ  Ｌｔｄ．ＧＳ０３１００）。カプセルを、ペレットダイから解放し、破壊して、次の乾燥工程のための表面積を増加させることができる。破壊したカプセルを、真空オーブン（Ｃｏｌｅ−Ｐａｒｍｅｒ真空オーブンモデル０５０１７−０５）において、３７℃でおよそ１６時間乾燥させて、任意の過剰な湿度を除去する（及び５％ｗ／ｗ未満の湿度に到達させる）ことができる。乾燥させ、破壊したカプセルは、例えば、２０，０００ｒｐｍで３０秒間、ＩＫＡ（登録商標）チューブミルコントロール９７３７７９０を使用して研削／粉砕され得る。次の工程では、粉砕されたカプセルは、ＭＲＣ（製造者）篩加振機（強度レベル２でのモデルＬＳ−２００）を使用して１分間、２つの篩のセット、例えば、孔径４２０μｍのものと、孔径７５μｍのものとを通して勢いよく篩い分けられることができる。２つの篩の間に残った粉砕カプセルを回収することができる。回収された顆粒／凝集体において、繊維及び化合物は均質に分布している。
【０１０８】
本発明による一実施形態では、凝集体の形態の組成物は、圧密化前の粉砕工程なしに、又は本発明による粉体を出発物質として使用せずに、セルロース系布帛から直接作製される。例えば、セルロース系布帛は、圧密化に供され、次いで上記のように乾燥、粉砕／研削、及び篩分けに供される。化合物での補充は、圧密化前、圧密化中、及び／又は圧密化後に実施することができる。
【０１０９】
一実施形態では、止血凝集体組成物を作製することは、８３．５％〜９０．０％ｗ／ｗのセルロース系繊維を、組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるωアミノカルボン酸、組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるプロタミン塩、及びカチオン濃度が１．３％〜１．８％ｗ／ｗである二価カチオンと混合する工程と、この混合物を圧密化に供する工程と、任意選択で混合物を乾燥、粉砕、篩分けする工程と、それにより当該凝集体を得る工程と、を含む。
【０１１０】
正電荷を有する１つ又は２つ以上のペプチドを、本発明による組成物に更に添加することができる。そのようなペプチドの非限定的な例は、アバエシン（abaecin）、アピダエシン（apidaecin）、プロフェニン、インドリシジン、メリトチン、マガイニン、ＬＬ−３７、牛ラクトフェリシン、ヒトラクトフェリシン、セクロピンＡ１、ブフォリンＩＩ、タナチン、ポリフェムシン１、マガイニン２、ヒトβデフェンシン−２、ウサギ腎デフェンシン、ペネトラチン／アンテナペジア、ＴＡＴ、ＳｙｎＢ１、ＳｙｎＢ３、ＰＴＤ−４、ＰＴＤ−５、ＦＨＶコート−（３５−４９）、ＢＭＶ  Ｇａｇ−（７−２５）、ＨＴＬＶ−ＩＩ  Ｒｅｘ−（４−１６）、Ｄ−Ｔａｔ、Ｒ９−Ｔａｔトランスポルタン、ＭＡＰ、ＳＢＰ、ＦＢＰ、ＭＰＧ、ＭＰＧ（ΔＮＬＳ）、Ｐｅｐ−１、Ｐｅｐ−２である。
【０１１１】
正電荷を有する１つ又は２つ以上の多糖類を、本発明による組成物に更に添加することができる。正電荷を有する多糖類の非限定的な例は、キトサン及びカチオン性グアーガムである。
【０１１２】
ＦｅＣｌ３からのカチオンなどの正カチオンを添加することができる。
【０１１３】
一実施形態では、製造プロセスは、布帛をより小さい細片に切断するブレードに材料が供給される前に、２．５４〜５．０８ｃｍ（１〜２インチ）幅の切片に切断されたＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）Ｏｒｉｇｉｎａｌ可吸収性止血剤などのＯＲＣ材料で開始する。次いで、切断されたＯＲＣ布片は、２つの連続した粉砕プロセス（ハンマー粉砕及び空気分級機粉砕）によってＯＲＣ微細繊維に研削される。代替の実施形態では、切断されたＯＲＣ布片は、ボールミルにおいて微細繊維に直接変換される。
【０１１４】
次いで、得られるＯＲＣ微細繊維を、Ｏｈａｕｓハロゲン水分分析器で測定して、約１１％ｗ／ｗ〜約１６％ｗ／ｗまで加湿した後、大きな凝集体に転圧する。圧密化の前に、粉砕前又は粉砕後を問わず、粒子の形態及び好適な濃度の本発明の化合物で繊維を補充する。
【０１１５】
用語「粒子」は、分散した固体材料からなる物質に関する。
【０１１６】
十分な量の吸湿性化合物、例えば塩化カルシウムをＯＲＣ繊維と混合する場合、加湿工程を省略することができる。十分な量の吸湿性化合物は、例えば、Ｏｈａｕｓハロゲン水分分析器で測定して、約１１％〜約１６％のレベルに加湿可能な量である。
【０１１７】
用語「吸湿性材料」は、通常は常温又は室温環境下において、周囲から水分子を吸着保持することができる物質に関する。非限定的な例としては、塩化亜鉛、塩化カルシウム、水酸化カリウム、及び水酸化ナトリウムが挙げられる。
【０１１８】
水分分析器は、熱重量の原理で動作し、水分分析器は、試料の重量を決定する。次いで、一体式ハロゲンドライヤーユニットによって試料を急速に加熱し、水分を気化させる。乾燥運転中、この器具は、試料の重量を連続的に決定し、その結果を表示する。乾燥の終了時に、集計された結果が、含水率、固体率、回復重量又はパーセントとして示され、特に分析器は、０．５ｇｒ〜１．０ｇｒの凝集体を、４分のランプ、９０℃の最大温度、及び以下の設定で試験する。試験ＩＤ−ＬＯＤ、プロファイル−標準、乾燥温度−９０℃、スイッチオフ−Ａ６０、結果−水分％、カスタム−オフ、目標重量−なし。
【０１１９】
典型的には、篩分けを実施して、スクリーン篩分けによって決定される７５μｍ〜４２０μｍのサイズの凝集体／顆粒を分離する。
【０１２０】
一実施形態では、圧密化の目的で導入された過剰な水分は、除湿又は乾燥プロセスによって除去される。圧密化、粉砕、及び篩分け工程の後、組成物をアプリケータ装置に投与する。次いで、装置内の組成物を包装及び滅菌に供する。
【０１２１】
一実施形態では、アプリケータへの投与前の貯蔵水分は、乾燥の終了時に約２％未満であり、好ましくはアプリケータに投与するために、制御された環境（相対湿度に応じて５００グラムの試料水分利得当たり０．３〜０．６％／時、一般的に相対湿度２５〜５５％）において６％未満の含水量を達成する。
【０１２２】
止血凝集体を製造するための１つのプロセスは、例えば、
（ａ）セルロース系（セルロース源）材料を提供する工程と、
任意選択で、セルロース系材料をスリットして切断する工程と、
任意選択で、（ｂ）工程ａ）からの材料のサイズを（例えば、空気分級機での粉砕によって）低減して長繊維を得る工程と、
（ｃ）工程ａ）又はｂ）からの材料のサイズを（例えば、空気分級機での粉砕によって）低減して微細繊維を得る工程と、
任意選択で、（ｄ）長繊維と微細繊維とを混合して混合繊維を得る工程と、
（ｅ）工程ｃ）又はｄ）からの繊維を化合物で補充して、化合物補充繊維を得る工程と、
任意選択で、（ｆ）工程ｅ）で得られた化合物補充した加湿繊維を加湿して、化合物補充した加湿繊維を得る工程と、
（ｇ）脱湿／乾燥を含む工程ｆ）の化合物補充した加湿繊維を（例えば、スラッギング又は転延によって）圧密化し、任意選択でサイズを低減する工程と、
（ｈ）篩分けする工程と、
任意選択で、（ｉ）貯蔵容器内、又は送達装置、一次包装、及び二次包装内に投与する工程と、
任意選択で、（ｊ）滅菌する工程と、を含む。
【０１２３】
一実施形態では、十分な量の吸湿性化合物、例えば塩化カルシウムを繊維に添加する場合、加湿工程を省略することができる。
【０１２４】
好ましくはスリット及び切断を行い、布帛を、およそ２．５４ｃｍ×７．６２ｃｍ又は５．０８ｃｍ×７．６２ｃｍ（１インチ×３インチ又は２インチ×３インチ）の適切なサイズ片にスリットし、切断することができるが、より小さい切片を使用することもできる。スリット及び切断のために行われる主な操作は、布帛のロールを巻き戻し、布帛をストリップにスリットし、ストリップを切断して、切片をサイズ決定して第１の粉砕工程に送達することである。ＡＺＣＯから入手可能なＡＺＣＯモデルＦＴＷ−１０００などの、多数の切断及びスリットマシンが既知であり、商業的に入手可能である。
【０１２５】
構成成分の補充は、布帛をスリット及び切断前又は後に実施され得る。
【０１２６】
一実施形態では、第１の粉砕工程において、処理されたセルロース布帛片は、スリット及び切断工程で生成された粗繊維から、４５２μｍ未満のＤ９０値、及び２１８μｍ未満のＤ５０値を有する材料に変換され、一方で材料の色指数及び水溶性含有量に最小限の影響を与える。４９７μｍの円形スクリーン、及びスクリーンを通過するまで布帛を分解して粗セルロース繊維を生成する一組のブレードを備えたハンマーミル型粉砕マシンである、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋにより製造されたモデルＤＡＳＯ６及びＷＪ−ＲＳ−Ｄ６Ａなどの、粉砕のための多数のマシンが商業的に入手可能である。例示的な処理行程では、ミル速度は、約７０００ＲＰＭであり得、処理温度は８０℃未満であり、ブレード数は８（各々２つのインペラ）であり、ブレード型は２２５ナイフ、衝撃型ブレードであり、ブレード配向は、「衝撃」として設定される。
【０１２７】
この段階において、第１の粉砕工程で生成された粗繊維のサイズを、１７７μｍ未満のＤ９０値、及び９５μｍ未満のＤ５０値に更に低減することができ、一方で材料の色指数及び水溶性含有量に対する最小限の影響を維持する。Ｑｕａｄｒｏからの空気分級機／Ｆ１０  Ｑｕａｄｒｏ  Ｆｉｎｅ  Ｇｒｉｎｄなどの多数のマシンが、第２の粉砕工程に使用可能である。
【０１２８】
第１の粉砕工程からの粗繊維は、制御された速度で第２のミルに供給され、粉砕スクリーンによって分離された２つの粉砕室を通過することができる。材料は、送風機によって粉砕室を通って引き込まれ得る。粗繊維は、微細繊維サイズを得るために、空気分級装置を介して３回処理することができる。第２の粉砕工程の終了時に、微細繊維を回収することができる。
【０１２９】
例示的な処理行程において、Ｑｕａｄｒｏ空気分級機Ｆ１０を、第２の粉砕工程において、８４００ｒｐｍの粉砕速度、１８００ｒｐｍの送風機速度、及び３通過で使用することができる。ＯＲＣ微細繊維はまた、上記のような２つの粉砕工程の代わりに、ボールミルによって１つの工程で生成することもできる。代替ボールミル実施形態では、５０ｇのプレカットされたＯＲＣ布帛の約５．０８ｃｍ×５．０８ｃｍ（２インチ×２インチ）の小片を、１２高密度ジルコニア（二酸化ジルコニウムＺｒＯ２、直径２０ｍｍ、Ｇｌｅｎ  Ｍｉｌｌｓ  Ｉｎｃ．（Ｃｌｉｆｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．，ＵＳＡ））を用いて、ボール及び試料を５００ｍＬ研削槽に入れることによってボールミルされる。この槽は、ラッチブラケットの中へ圧締めされ、次いで遊星ボールミルＰＭ１００、Ｒｅｔｓｃｈ，Ｉｎｃ．（Ｎｅｗｔｏｗｎ，Ｐａ．，ＵＳＡ））上で平衡される。次いで、粉砕を二方向に４５０ｒｐｍで２０分間行う。
【０１３０】
この粉砕プロセスに続いて、得られたセルロース系微細繊維を、例えば、転圧プロセスを含む後の処理のために、約１１％〜約１８％、又は約１１％〜約１６％、又は約１２〜１６％の範囲の含水量まで加湿することができる。加湿工程に適した湿度室は、市販されている、例えば、Ｔｈｅｒｍａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  ＳｏｌｕｔｉｏｎｓによるモデルＣＥＯ−９１６−４−Ｂ−ＷＦ４−ＱＳである。室空気の加湿は、水蒸気噴射により達成される。２５℃の典型的な定常状態温度を利用することができるが、湿度レベルは、７５％〜８５％の間で、好ましい目標の８５％空気湿度で循環させることができる。湿度チャンバ内の材料の加湿時間又は滞留時間は、材料の量及び空気の再循環に応じて数時間から数日の範囲であり得る。典型的な循環において、材料は、数個のトレイに配置され、相対湿度８５％に暴露された約３，０００グラムのセルロース系微細繊維について、１２〜１３時間の滞留時間と、及び加湿後の粉体の目標の１２％含水量とを有する。
【０１３１】
転圧器は、加湿された微細ＯＲＣ繊維の供給を圧密化し、次いでスクリーナにおいて予備破砕、除湿、最終粉砕、篩分けして、所望の止血凝集体サイズを得る。
【０１３２】
典型的には、本発明による化合物での補充は、圧密化前及び／又は凝集体が生成される前に実施される。
【０１３３】
圧密化装置は、既知であり商業的に入手可能である。繊維は、スラッギング機械又は当該技術分野において既知の任意の他の圧密化技法によって圧密化され得る。例示的な圧密化ユニットは、Ｒｅｔｓｃｈ手動篩分けＡＳ２００スクリーナを備えたＦｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ  Ｃｈｉｌｓｏｎａｔｏｒ  ＩＲＲ２２０−Ｌ１Ａ、及びＭ５Ａ下で統合されたスクリーナＳｗｅｃｏ  Ｖｉｂｒｏエネルギーユニットを備えたＦｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ  Ｃｈｉｌｓｏｎａｔｏｒ  ＣＣＳ２２０／Ｍ３Ｂ＆ＲＶ−Ｍ５Ａである。圧密化処理は、共通の電気系によって結合された２つの別個のサブシステムを使用して行うことができる。例えば、第１のサブシステム（転圧器：メインユニット）は、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ  Ｃｈｉｌｓｏｎａｔｏｒ  ＣＣＳ２２０転圧器、及び圧密化材料を予備破砕するためのＭ３Ｂミルであり得、一方で第２のサブシステム（転圧器：二次粉砕ユニット）は、所望のサイズ凝集体を得る分離のためのＳｗｅｃｏ又はＲｅｔｃｈスクリーナを備えた最終粉砕のためのＭ５Ａミルである。
【０１３４】
加湿された微細セルロース系繊維は、転圧器ユニットのホッパー内に供給され得、最初に、メイン粉砕ユニットを通過した後、第２の粉砕ユニットを通って進行する。メイン粉砕ユニットから生じる予備破砕されたセルロース系材料を捕捉する容器を提供することができる。次いで、セルロース系材料の予備破砕片を、二次粉砕ユニット内に供給することができ、スクリーンメッシュを利用して最終的な粉砕及びスクリーニングを行う。得られた粉砕セルロース系材料は、好ましくは、上記のＳｗｅｃｏ又はＲｅｔｃｈスクリーナなどのスクリーンメッシュを使用して、「微細」（＜７５μｍ）、「目標」（７５〜４２０μｍ）、及び「オーバー」（＞４２０μｍ）に分離される。
【０１３５】
除湿又は乾燥工程において、圧密化及び篩分けに続いて得られる止血凝集体から水分を除去する。除湿又は乾燥工程は、好ましくは、色、嵩密度、及びサイズなどの他の製品品質属性に著しく影響を及ぼさない。典型的には、繊維は、従来の流動化空気床を使用してバッチとして乾燥させることができる。得られた乾燥凝集体は、密封箔パウチに充填して保管することができる。除湿装置は、既知であり商業的に入手可能である。例示的なベンチトップ流動空気床は、６Ｌ容量を有するＲｅｔｓｃｈ（ＴＧ−２００）から商業的に入手可能である。あるいは、Ｆｌｕｉｄ  Ａｉｒ（Ａｕｒｏｒａ，ＩＬ）からの流動化床モデルＮｏ．０００２を使用することもできる。
【０１３６】
本発明の更なる態様では、粉体及び／又は凝集体の形態の止血組成物は、止血性、創傷治癒性、及び取扱い性を更に改善するために、ゼラチン、コラーゲン、セルロース、キトサン、多糖類、デンプン、ＣＭＣなどの種々の添加剤と組み合わせることができ、トロンビン、フィブリノゲン、及びフィブリンなどの生物製剤ベースの止血剤、追加の生物製剤の止血剤としては、制限なく、凝血促進酵素、タンパク質、及びペプチドが挙げられ、そのような各剤は、天然に存在するか、組換え、又は合成であり得、フィブロネクチン、ヘパリナーゼ、第Ｘ／Ｘａ因子、第ＶＩＩ／ＶＩＩａ因子、第ＩＸ／ＩＸａ因子、第ＸＩ／ＸＩａ因子、第ＸＩＩ／ＸＩＩａ因子、組織因子、バトロキソビン、アンクロッド、エカリン、フォンビルブランド因子、アルブミン、血小板表面糖タンパク質、バソプレッシン及びバソプレッシン類似体、エピネフリン、セレクチン、凝血促進毒、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤、血小板活性化剤、止血活性を有する合成ペプチド；グルコン酸クロルヘキシジン（ＣＨＧ）、トリクロサン、銀、及び当該技術分野において既知の同様の抗細菌／微生物剤などの抗感染剤；止血剤のべたつきを増加させる添加剤；希釈剤、生理食塩液、及び当該技術分野において既知の同様の添加剤；上記の誘導体、及びそれらのいずれかの組み合わせからなる群から更に選択されてもよい。
【０１３７】
一実施形態では、本発明による止血粉体及び／又は凝集体組成物は、ＯＲＣなどの酸化セルロース系繊維材料から、又は予め細断された酸化セルロース系材料から作製される。
【０１３８】
本発明の一実施形態では、粉体組成物は、血液との接触時にゲルを形成する性質を有する。形成されたゲルは、血液との比較組成物の接触時に形成されるゲルの抵抗値の１０倍以上の抵抗値を有する。
【０１３９】
一実施形態では、比較粉体組成物は、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）単独からなる。
【０１４０】
用語「ゲル」は、軟性かつ脆弱から硬性かつ強靱までの性質を有することができる粘性及び／又は固体様材料に関する。ゲルは、ヒドロゲルであり得る。
【０１４１】
典型的には、ヒドロゲルは、親水性であるポリマー鎖のネットワークである。ヒドロゲルは、９０％以上の水を含み、ポリマーネットワークを含むことができる。
【０１４２】
ゲルは、凝固した液体、特に血液の厚い塊である凝塊であり得る。
【０１４３】
用語「接触する／接触」は、その広義において使用され、例えば、凝塊又はゲルが形成されるように、止血組成物を血液に十分に近接させる任意のタイプの複合作用を指す。
【０１４４】
用語「血液」は、血漿などの血液画分を含む。
【０１４５】
一実施形態では、比較粉体組成物は、３５０μｍ未満のＤ９０値、及び１６７μｍ未満のＤ５０値を有するＯＲＣ繊維からなる。
【０１４６】
本発明の一実施形態では、本発明による凝集体及び／又は粉体組成物は、血液との接触時にゲルを形成する特性を有する。形成されたゲルは、比較凝集体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの止血能力の１．５倍以上の止血能力を有する。
【０１４７】
一実施形態では、比較凝集体組成物は、例えば、３５０μｍ未満のＤ９０値、及び１６７μｍ未満のＤ５０値を有するＯＲＣ繊維で構成される。
【０１４８】
一実施形態では、比較凝集体は、例えば、１７７μｍ未満のＤ９０値、及び９５μｍ未満のＤ５０値を有するＯＲＣ繊維で構成される。
【０１４９】
用語「ゲルの抵抗」は、修正されたブルーム試験（下記で例証される）の結果に関連し、金属性の棒が、５ｍｍ／分の速度で動きながら、７ｍｍの伸長でゲルを通過するのに必要な力を示す。この力は、ゲルの抵抗のレベルを反映し（力が大きいほど、ゲルの抵抗が高い）、順にゲルの凝集力のレベルを示す。棒が定常的な動きで進行するのに必要な力が大きいほど、ゲルの抵抗が大きくなる。
【０１５０】
更なる態様では、本発明は、本発明による止血組成物を血液と接触させ、それによりゲルを形成する工程を含む、ゲルの形成方法を提供する。
【０１５１】
一実施形態では、この方法は、比較組成物と血液との接触時に形成されるゲルの１０倍以上若しくは１２倍以上の抵抗を有するゲルを形成し、かつ／又は比較組成物と血液との接触時に形成されるゲルの止血能力の１．５倍以上の止血能力を有するゲルを形成する。
【０１５２】
一実施形態では、比較組成物は、セルロース系繊維を含み、組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲でωアミノカルボン酸を欠損し、組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲でプロタミン塩を欠損し、かつカチオン濃度が組成物全体の１．３６〜１．７７％ｗ／ｗのカチオン濃度を欠損する。
【０１５３】
更なる態様では、本発明は、本発明の止血組成物を含む容器、並びに任意選択でアプリケータ、担体、及び／又は使用説明書を含むキットを提供する。用語「担体」は、止血組成物を含む、及び／又は保持する物理マトリックスに関する。担体の例としては、セルロース系パッド、コラーゲン系パッドなどの内部及び／又は外部用途のためのパッド；歯科矯正及び整形外科用インプラントなどのインプラント；ＳＵＲＧＩＦＯＡＭ（登録商標）、ＥＶＩＣＥＬ（登録商標）などの流動性シーラント及び／又は止血剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、容器がアプリケータである。
【０１５５】
一実施形態では、５．０％  ＣａＣｌ２、２．５％  ＰＳ、及び２．５％  εＡＣＡを含む凝集体又は粉体組成物は、４０ｍｇ／ｃｍ２  ＣａＣｌ２、２０ｍｇ／ｃｍ２  ＰＳ、２０ｍｇ／ｃｍ２  εＡＣＡと同等である。
【０１５６】
例えば、合計量１００ｍｇの最終組成物が、０．４ｃｍの直径を有する円形のパンチ上に適用される場合、この１００ｍｇの組成物を、π＊（０．２ｃｍ）２＝０．１２６ｃｍ２であるパンチの表面積に適用した。これは、７９３．６５ｍｇ／ｃｍ２（計算の結果：１００ｍｇ／０．１２６ｃｍ２）の最終組成物が使用されたことを意味する。
【０１５７】
ＣａＣｌ２を５％の最終組成物濃度で使用する場合、したがって７９３．６５＊０．０５は、約４０ｍｇ／ｃｍ２に等しい。
【０１５８】
ＰＳを２．５％の最終組成物濃度で使用する場合、したがって７９３．６５＊０．０２５は、約２０ｍｇ／ｃｍ２に等しい。
【０１５９】
εＡＣＡを２．５％の最終組成物濃度で使用する場合、したがって７９３．６５＊０．０２５は、約２０ｍｇ／ｃｍ２に等しい。
【０１６０】
止血組成物は、いくつかの既知の製品にわたって以下の利点のうちの１つ又は２つ以上を有し得る。
１−例えば、大血管縫合線における出血を停止することができ、したがって血管内で止血を達成することにおいて限られた効力を有する、いくつかの既知の製品とは異なり、血管縫合線からの出血を著しく低減し、止めることができる。
２−加圧を必要とせずに止血を達成することができる。いくつかの既知の製品は、止血を達成するために、加圧（例えば、ガーゼによる手動圧縮）を必要とする。
３−血液中で活性化される。水分によって活性化されると、止血繊維及び／又は凝集体は、構造（例えば、凝塊／ゲルの形態）を利得し、止血を達成することができる。いくつかの既知の製品は、予形成された構造完全性を有する。
４−血中で設定可能であり、容易に流れず、止血を達成することができる。いくつかの既知の製品は、湿潤環境において限られた効力を有する。
５−出血部位に癒着することができるが、依然として可逆的であり、すなわち出血部位に癒着し、かつ洗浄に抵抗性であるが、外科矯正が必要な場合には、掻き落として除去し、アクセスを得ることができる。いくつかの既知の製品は、湿潤フィールドにおける癒着が限られているか、又は一旦適用された後に容易に除去できない場合がある。
【０１６１】
抗癒着障壁、止血剤、組織シーラントなどの止血組成物を、様々な外科的及び創傷治癒局所用途に使用することができる。本発明の止血組成物は、止血剤として、乾燥組成物として、又は優れた止血性及び良好な組織なじみ性を有するペースト形態の組成物として機能し得る。
【０１６２】
止血繊維及び／又は凝集体組成物は、様々な外科的及び創傷治癒局所用途、例えば抗殺菌処置、止血、癒着防止、シーリングのため、及び／又は漏出、例えば、冠動脈バイパス移植（ＣＡＢＧ）中に生じる漏出などの吻合部位からの漏出を最小化又は防止するために使用することができる。
【０１６３】
この組成物を使用して、例えば、腹腔鏡手術中に、ＣＡＢＧ及び／又は動静脈吻合などの吻合部位上、脊椎手術又は神経手術などの加圧が是認されない処置中に到達しにくい領域における出血を止めることができる。
【０１６４】
冠動脈バイパス移植（ＣＡＢＧ）手術を受けた患者は、処置中に生じた吻合部位からの漏出を有し得る。これらの漏出の多くは、追加の縫合糸又は様々な止血剤を使用して手術中に対応される。これらの手術中の漏出を止め、漏出が術後に発達するのを防ぐことは、外科医にとって、患者が術後の吻合漏出を有しないことをより確信することを助ける。輸血又は再手術を必要とするＣＡＢＧ処置後の出血は、罹患性及び不死性の有意な増加に関連する。２０％もの症例において、特定の出血部位が、再手術中に特定され得る。手術による出血の典型的な起源としては、カニューレ挿入部位、近位及び遠位吻合部位、並びにＩＴＡ及び静脈移植片の分枝が挙げられる。文献によれば、ＣＡＢＧ患者の２〜３％は、出血について再探査を必要とし、２０％もの患者が、輸血を必要とする過剰な術後出血を有する。
【０１６５】
全ての引用される刊行物の内容は、参照によりそれら全体が本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【０１６６】
材料及び方法
【０１６７】
【表１】
2018532516.tif 000003
＊調製に関する詳細は、下記を参照されたい。
【０１６８】
【表２】
2018532516.tif 000004
【０１６９】
【表３】
2018532516.tif 000005
【０１７０】
酸化再生セルロース（ＯＲＣ）繊維の調製：
ＯＲＣ繊維の製造プロセスは、ＯＲＣ材料ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）Ｏｒｉｇｉｎａｌ可吸収性止血剤で開始する。ＯＲＣ材料を、２．５４〜５．０８ｃｍ（１〜２インチ）幅断片に切断した後、材料をブレードに供給して布帛を小片に切断する。次いで、切断されたＯＲＣ布片を、２つの連続した粉砕プロセス（ハンマー粉砕及び空気分級機粉砕）によって、ＯＲＣ微細繊維に研削した。異なる粉砕工程からの繊維は、最終凝集体に異なる繊維サイズを組み込むために、将来の使用のために取り込まれる。
【０１７１】
より具体的には、繊維を製造するためのプロセスは、ＳＵＲＧＩＣＥＬ（登録商標）Ｏｒｉｇｉｎａｌ布帛をスリット及び切断する工程と、得られる材料を、ハンマー粉砕を使用して粉砕する工程と、長い微細繊維を得るための空気分級機における粉砕工程（複数可）と、任意選択で、異なるサイズの繊維を混合する工程とを含む。異なる繊維サイズは、異なるサイズ分布を有する繊維である。
【０１７２】
スリット及び切断を実施して、布帛を、およそ２．５４ｃｍ×７．６２ｃｍ（１インチ×３インチ）の適切なサイズ片にスリット及び切断した。スリット及び切断するために行われる主な操作は、布帛のロールを巻き戻し、布帛をストリップにスリットし、ストリップを切断して、切断された小片をサイズ決定し、第１の粉砕工程に送達することであった。
【０１７３】
第１の粉砕工程では、セルロース系布帛材料の処理片は、材料の色指数及び水溶性含有量に最小の影響を与えながら、スリット及び切断工程で生成された中間粗繊維から、４５２μｍ未満のＤ９０値及び２１８μｍ未満のＤ５０値を有する材料に変換された。この工程での粉砕に使用されるマシンは、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋにより製造されるハンマーミル型モデルＷＪ−ＲＳ−Ｄ６Ａであった。ハンマーミルは、４９７μｍの円形スクリーンと、スクリーンを通過するまで布帛を分解して中間の粗セルロース系繊維を製造するための一組のブレードとを備えていた。粉砕のパラメータは、約７０００ＲＰＭのミル速度であり、処理温度は８０℃未満であり、ブレード数は８（各々２つのインペラ）であり、ブレード型は２２５ナイフ、衝撃型ブレードであり、ブレード配向は、「衝撃」として設定された。
【０１７４】
第１の粉砕工程からの中間の粗繊維は、第２のミルに制御された速度で供給された。中間の粗繊維は、所望のサイズを得るために、空気分級装置を介して３回処理された。加えて、ある特定の実験では、空気分級機を通る最初の走流から取り込まれた繊維は、最終凝集体の異なる繊維サイズを組み込むために抽出された。
【０１７５】
この工程（複数可）において、Ｑｕａｄｒｏ空気分級機Ｆ１０を、粉砕速度８４００ｒｐｍ、送風機速度１８００ｒｐｍ、及び３通過で使用した。１通過後、得られた長いＯＲＣ繊維は、３５０μｍ未満のＤ９０値、及び１６７μｍ未満のＤ５０値を有していた。３通過後、得られた微細ＯＲＣ繊維は、１７７μｍ未満のＤ９０値、及び９５μｍ未満のＤ５０値を有していた。
【０１７６】
粉体組成物の調製。
全ての粉体は、湿度制御された条件下で化学天秤を使用して計量された。相対湿度は、粉体調製プロセス全体にわたって２０％を超えなかった。全ての粉体は、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０を有するＯＲＣ繊維から構成され、上記のように調製され、異なる正に荷電した化合物（複数可）で補充された。正に荷電した化合物は、その中に正に荷電した基／要素を含有する材料である。実施例１〜３では、粉体又は凝集体組成物のＯＲＣ繊維は、微細ＯＲＣ繊維を含んでいた。例えば、化合物が３％  ＦｅＣｌ３（全体組成物重量からのｗ／ｗ）である場合、ＯＲＣ微細繊維が９７％ｗ／ｗを構成した。（表１Ａのサイズ分布を参照されたい）。実施例４では、補充された凝集体のＯＲＣ繊維は、１０．０％（最終混合物重量のｗ／ｗ）の長いＯＲＣ繊維（表１Ａのサイズ分布を参照されたい）、及び７７．５〜８０．０％（最終混合物重量のｗ／ｗ）の微細ＯＲＣ繊維の組み合わせであった。ＯＲＣ繊維に対する化合物（複数可）の補充は、インビトロ試験において１０．０％（ｗ／ｗ）まで、インビボ試験において１２．５％（ｗ／ｗ）までであった。
【０１７７】
表１Ｂに詳述される全ての化合物は、粉体形態で提供された。
【０１７８】
各繊維化合物（複数可）混合物の組み合わせを杵と臼に移し、粉体粒子が組成物内で均等／均質に分配されるまで完全に混合した。湿気の吸着を最小限にするために、粉体組成物は、バイアル内で保管し、プラスチックパラフィンフィルム（ＰＡＲＡＦＩＬＭ（登録商標））で密封した。
【０１７９】
実施例１〜２の組成物は、粉体形態であった。実施例３では、非圧密化組成物は、粉体形態であったが、圧密化組成物は、凝集体形態であった。実施例４では、全ての組成物は、凝集形態であった（下記の凝集体の調製に関する詳細を参照されたい）。
【０１８０】
凝集体の調製。
より高い体積比率当たりの質量を含む凝集体／顆粒を得るために、２つの工程を実施した。
Ｉ−粉体の圧密化（カプセル化）及び
ＩＩ−カプセルの乾燥、粉砕／研削、及び篩分け
【０１８１】
下記の工程Ｉ及びＩＩの詳細を参照されたい。
【０１８２】
粉体の圧密化。
圧密化は、手動油圧プレス（Ｓｐｅｃａｃ  Ａｔｌａｓ  １３６０８キログラム（１５トン）モデルＧＳ１５０１１）及び好適な排気可能なペレットダイを使用して実施し、このペレットダイは、１０ｍｍの直径を有する（Ｓｐｅｃａｃ  ＧＳ０３１００）。約３００ｍｇの粉体組成物（上記のように調製された）を、およそ１．５ｃｍ〜２．０ｃｍの高さまでペレットダイの中に装填した。次の工程では、金属製の棒（手動油圧プレス機器の一部である）を、粉体の上部に合わせ、それを使用して、手動油圧プレスにより３６２９キログラム（約１１７９トン／ｃｍ２）（４トン（約１．３トン／ｃｍ２）の圧力に到達させた。この工程に続いて、直径１０ｍｍ、高さおよそ０．３ｃｍ〜０．５ｃｍのカプセル（圧密化粉体）を形成した。カプセルをペレットダイから解放し、杵と臼によってより小さい部分に破壊して、次の乾燥工程のための表面積を増加させた。
【０１８３】
カプセルの乾燥、粉砕／研削、及び篩分け。
カプセルの半体を、真空オーブン（Ｃｏｌｅ  Ｐａｒｍｅｒ真空オーブンモデル０５０１７−０５）で、３７℃でおよそ１６時間乾燥させて、任意の過剰な湿度を除去した（及び５％ｗ／ｗ未満の湿度に到達させた）。乾燥したカプセル部分を、ＩＫＡ（登録商標）Ｗｏｒｋｓ，Ｉｎｃ．チューブミルコントロール９７３７７９０を使用し、２０，０００ｒｐｍで３０秒間研削／粉砕した。次の工程では、凝集体を、ＭＲＣ（篩の製造者）篩加振器（モデルＬＳ−２００を強度レベル２で）１分間、２つの篩の組、４２０μｍの孔径を有するものと、７５μｍの孔径を有するものとを通して勢いよく篩分けした。２つの篩の間に残る凝集体を回収し、室温（２０℃〜２７℃）で密閉バイアル内で保管し、使用するまでプラスチックパラフィンフィルムで密封した。この段階の最後に、各々の最終的な顆粒／凝集体組成物中に存在する全ての成分は、その中で均質に分布していた。
【０１８４】
血液調製物。
実施例１〜２で使用された血液は、絶命したブタからＬａｈａｖ契約研究機関（Ｃ．Ｒ．Ｏ．）によって採取され、冷却した容器（４℃）内で送達された。血液採取時に、血液１リットル当たり５０００ＩＵのヘパリンを添加した［ヘパリンナトリウム−Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ  ５０００ＩＵ／１ｍＬ注射液、製造者：ＢＯＤＥＮＥ（ＰＴＹ）ＬＴＤ、Ｉｎｔｒａｍｅｄとして取引、カタログ番号：９２０７９１０ＬＡＢ］。
【０１８５】
凝固を防ぐために、到着時に追加のヘパリンを添加した（血液１リットル当たり５０００ＩＵ）。ヘパリン化した血液を、ボトルを数回反転させることによって緩やかに混合した。次の工程では、残留凝塊を除去するために、ヘパリン化した血液を、２０μｍポリプロピレンシリンジフィルター（ＥｎｔｅｇｒｉｓによるＳＶＬ２５Ｄ２０ＨＱＳＡ２５）で濾過し、ポリプロピレン容器に収集した（ガラスによって誘導される血液凝固を防止するため）。濾過されたヘパリン化血液を、使用まで４℃で保管した。
【０１８６】
ブルーム試験。
ブルームは、ゲル又はゼラチンの凝集力を測定するために用いられる試験である。凝集力は、試験された材料／組成物の分子間の結合を表す。一般に、ブルーム試験は、４ｍｍの陥没を生じさせるために、円筒状ピストン（１２．７ｍｍの直径を有する）によって、６．６７％ゼラチンゲル（７．５ｇｒのゼラチンを１０５ｇｒの水に溶解することによって調製された）の遊離表面に加える必要がある力（グラム）の決定に関する。この試験の場合、ゲルは、典型的には以下の寸法、容量１５０ｍＬ、内径５９ｍｍ、及び高さ８５ｍｍを有するガラス容器内で形成される。下降するピストンの速度は、３０ｍｍ／分に設定される（ＵＳ１５４０９７９に記載されるブルーム試験を参照されたい）。
【０１８７】
下記の実施例では、修正されたブルーム試験を実施して、異なる試験粉体組成物が血液と混合されたときに形成された凝塊の凝集力を試験した。このパラメータを、各試験組成物の潜在的な止血効力の表示として評価した。一般に、より高い抵抗力（ブルーム試験における高い値）は、より高い凝集力と相関し、組成物が高い止血効力を有することを示唆する。低い抵抗力は、低い凝集力に相関し、組成物が低い止血効力を有することを示唆する。各試験粉体組成物によって誘導された凝集力を、非補充ＯＲＣ繊維と比較して評価した。この結果は、非補充ＯＲＣ繊維に対する抵抗力の倍増として提示される。
【０１８８】
修正されたブルーム試験を、以下のように実施した。
１）３００ｍｇの各試験粉体組成物を、７ｍＬの管（内径：１５ｍｍ、高さ５０ｍｍ）に計量した。
２）２．５ｍＬの血液（「血液調製物」で上記のとおり調製した）を、各粉体組成物に添加した。
３）乾燥粉体が視覚的に明らかでなくなるまで、管を３２００ｒｐｍで勢いよく渦動させ、血液粉体組成物混合物を３分間培養して、凝塊形成を可能にした。
４）凝集力を測定するために、バイアルを、「Ｌｌｏｙｄ  ＬＦプラス」装置に置き、金属性の棒［１．２７ｃｍ（０．５インチ）］を一定の事前設定した下降速度：５ｍｍ／分でバイアル内に挿入した。凝塊の中へ７ｍｍ伸長した地点における金属性の棒の移動に対する凝塊の抵抗力は、メガパスカル（ＭＰａ）単位で測定した。試験は、室温で実施した。
【０１８９】
縫合前臨床モデル。
拍動型エクスビボ心肺バイパス（ＣＰＢ）モデルを使用して、生理学的状態をシミュレートした。このモデルは、
Ｓｅｒｇｅａｎｔ，Ｐ．，Ｋｏｃｈａｒｉａｎ，Ｒ．，Ｐａｔｅｌ，Ｂ．，Ｐｆｅｆｆｅｒｋｏｒｎ，Ｍ．，＆  Ｍａｔｏｎｉｃｋ，Ｊ．（２０１６）．Ｎｅｅｄｌｅ−ｔｏ−ｓｕｔｕｒｅ  ｒａｔｉｏ，ａｓ  ｗｅｌｌ  ａｓ  ｓｕｔｕｒｅ  ｍａｔｅｒｉａｌ，ｉｍｐａｃｔｓ  ｎｅｅｄｌｅ−ｈｏｌｅ  ｂｌｅｅｄｉｎｇ  ｉｎ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ａｎａｓｔｏｍｏｓｅｓ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ  ＣａｒｄｉｏＶａｓｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｔｈｏｒａｃｉｃ  Ｓｕｒｇｅｒｙ，２２（６），８１３〜８１６．ｄｏｉ：１０．１０９３／ｉｃｖｔｓ／ｉｖｗ０４２に記載されている。
【０１９０】
簡潔には、拍動型エクスビボ心肺バイパスモデルは、一連のポンプ及びチャンバを用いて、システム全体を通して血圧を生成、制御、及び維持した。このモデルは、ブタ頸動脈に出入りする血液を濾過するリザーバと、コンピュータ統合データ取得システムと、酸素化器と、熱交換器とからなる。流量インピーダンス及び容積区分調整が存在して、血量流及び圧力制御の微調整を可能にする。
【０１９１】
ブタ頸動脈内に配置された縫合からの血液損失を収集し、計量して漏出率を確立した。漏出率は、ある期間にわたって収集された血液の量として計算され、記録された。
【０１９２】
生理学的状態をシミュレートするために、以下のパラメータを使用した。
圧力１２０／８０ｍｍＨｇ
パルス数７２／分
血液温度３３〜３５℃
１０，０００ＩＵのヘパリンを、１Ｌのドナーブタ血液に添加し、１０ｍｇ／ｍＬのプロタミン硫酸塩で滴定して、活性化凝固時間（ＡＣＴ）をおよそ３６９秒に調整した。ＡＣＴは、ＶｅｔＳｃａｎ  ｉ−ＳＴＡＴ可動式携帯型ユニット（Ａｂｂｏｔｔ  Ｐｏｉｎｔ  ｏｆ  Ｃａｒｅ）及びＩ−ＳＴＡＴ  ＡＣＴセライトカートリッジ（Ａｂｂｏｔｔ  Ｐｏｉｎｇ  ｏｆ  Ｃａｒｅ，Ｐａｒｔ＃：６００−９００６−１０）で測定した。
【０１９３】
ブタ頸動脈は、周囲組織から単離され、システムに装着される。管クランプを使用して、組織を取付け具に固定した。頸動脈の両側の血流を制限し、頸動脈を、６−０  ＰＲＯＬＥＮＥ縫合糸（８８０６Ｈ）及びＢＶ−１針を用いて単純な連続パターンで縫合した。２分間にわたる血液損失質量を、ベースラインとして測定した。
【０１９４】
粉体／凝集体を縫合部位にわたって適用し、適用の完了に続いて４分間硬化させた。制限を取り除き、２分間にわたる血液損失質量を測定した。
【０１９５】
インビボモデルの肝臓生検パンチ。
成熟した約６０ｋｇの雌ブタを、外科的処置の前に２４時間絶食させた。動物に、１１５０ｍｇ〜１４００ｍｇのケタミン、１１５ｍｇ〜１４０ｍｇのキシラジン、７．５ｍｇのミダゾラムで麻酔をかけた。麻酔をイソフルランで維持し、腹部を開いて肝臓を露出させた。平均動脈血圧、体温、及び心拍数は、外科的処置の全体にわたって継続的にモニタリングした。平均動脈血圧が６０ｍｍＨｇを下回った場合、実験を終了した。
【０１９６】
直径４ｍｍ×深さ２ｍｍの生検パンチを肝臓ローブに対して実施し、標本を手術用鋏で切除した。パンチ部位を３０秒間にわたって出血させ、出血強度を０〜５のスケールで視覚的に評価した。これにより、出血なしには０のスコアを与え、強度の出血には５のスコアを与えた。次いで、パンチ部位を清潔なガーゼで払拭して過剰な血液を除去し、１００ｍｇの試験凝集体組成物をパンチ空洞に注入した（例えば、５．０％  ＣａＣｌ２、２．５％  ＰＳ、及び２．５％  εＡＣＡを含む凝集体組成物は、４０ｍｇ／ｃｍ２  ＣａＣｌ２、２０ｍｇ／ｃｍ２  ＰＳ、２０ｍｇ／ｃｍ２  εＡＣＡと同等である）。
【０１９７】
合計量１００ｍｇの最終組成物が、０．４ｃｍの直径を有する円形のパンチ上に適用される。したがって、この１００ｍｇの組成物を、π＊（０．２ｃｍ）２が約０．１２６ｃｍ２であるパンチの表面積に適用した。これは、７９３．６５ｍｇ／ｃｍ２（計算の結果：１００ｍｇ／０．１２６ｃｍ２）の最終組成物が使用されたことを意味する。
【０１９８】
ＣａＣｌ２を５％の最終組成物濃度で使用する。したがって７９３．６５＊０．０５は、約４０ｍｇ／ｃｍ２に等しい。
【０１９９】
ＰＳを２．５％の最終組成物濃度で使用する。したがって７９３．６５＊０．０２５は、約２０ｍｇ／ｃｍ２に等しい。
【０２００】
εＡＣＡを２．５％の最終組成物濃度で使用する。したがって７９３．６５＊０．０２５は、約２０ｍｇ／ｃｍ２に等しい。
【０２０１】
清潔なガーゼを使用して１分間、穏やかな圧力を手動で組成物に加えた。出血を４分間にわたってモニタリングし、その後、出血強度を０〜５のスケールで再度評価した。結果は、全ての複製から達成される完全な止血率の割合として提示される。
【０２０２】
実施例１：微細ＯＲＣ繊維で形成された凝塊の凝集力に対する異なる化合物の効果。
この実施例の目的は、異なる化合物を補充したＯＲＣ繊維によって誘導される凝集力を調べることであった。この目的のために、修正されたブルーム試験を上記のように実施した。
【０２０３】
試験粉体組成物は、図１に示される異なる化合物を補充した微細ＯＲＣ繊維からなる。粉体は、「粉体の調製」の材料及び方法の段落に記載のとおりに調製した。上記の表２は、下記の全ての実験において使用されるＣａＣｌ２及びＦｅＣｌ３中のカチオンの割合（全体重量に基づくｗ／ｗ）を示す。図１は、非補充微細ＯＲＣ繊維と比較して、異なる試験粉体組成物に対して得られる抵抗力／凝集力の倍増を示す棒グラフである。
【０２０４】
修正されたブルーム試験の結果は、金属性の棒が、血液との接触時に試験組成物で形成されるゲルを、５ｍｍ／分の速度で動きながら７ｍｍの伸長で通過するのに必要な力を示す。この力は、ゲルの抵抗のレベルを反映し（力が大きいほど、ゲルの抵抗が大きくなる）、順にゲルの凝集力のレベルを示している。凝集力は、組成物の分子が結合される強度を表す。棒がその定常的な動きを伴って進行するのに必要な力が大きいほど、ゲルの抵抗が大きくなる。
【０２０５】
結果は、３％塩化第二鉄（ＦｅＣｌ３）による微細ＯＲＣ繊維の補充が、形成される凝塊の抵抗に対して顕著な正の効果を有していたことを示す。
【０２０６】
３％又は６％の塩化カルシウム（ＣａＣｌ２）のいずれかによる微細ＯＲＣ繊維の補充が、抵抗力を用量依存的に増加させることも示された。
【０２０７】
３％ＰＳ、又は３％  ＰＳ及び３％  εＡＣＡ、又は３％  ＰＳ及び３％キトサンのいずれかで更に補充した組成物による３％  ＣａＣｌ２補充の効力を比較したとき、結果は、更に補充した組成物の抵抗力に改善があったことを示した。組成物中に３％リジン（Ｌｙｓ）を含むことは、負の効果を有し、得られる抵抗力を減少させた（図１において、３％  ＣａＣｌ２及び３％  ＰＳを補充した微細ＯＲＣ繊維と、３％  ＣａＣｌ２、３％  ＰＳ、及び３％  Ｌｙｓを補充した微細ＯＲＣ繊維とを比較する）。
【０２０８】
塩化カルシウム、プロタミン硫酸塩（ＰＳ）、及び／又はキトサンなどの特定の正に荷電した化合物（複数可）をＯＲＣ繊維に添加することは、繊維によって誘導される凝集力を改善すると結論付けることができ、これらの補充組成物が、インビボで有益な止血効果を有し得ることが示唆される。
【０２０９】
機序に拘束されることなく、ＯＲＣ繊維を特定の正に荷電した化合物（例えば、異なるカチオン、例えばＣａＣｌ２によって提供される二価カチオン、プロタミン塩、例えばプロタミン硫酸塩又は正に荷電した多糖類、例えばキトサン、並びにωアミノカルボン酸、例えばεＡＣＡ）で補充することは、止血粉体組成物により形成されたゲルの凝集力を増加させる。
【０２１０】
実施例２：粉体組成物によって誘導される凝集力に対する補充の組み合わせの効果。
前述の実施例は、６％  ＣａＣｌ２によるＯＲＣ繊維の補充が、３％  ＣａＣｌ２と比較して、より高い抵抗力／凝集力をもたらした。前述の実施例は、追加の正に荷電した化合物による３％  ＣａＣｌ２−微細ＯＲＣ繊維組成物の更なる補充が、組成物の凝集力を増加させたことを示した。したがって、この実施例では、高いＣａＣｌ２濃度（５％又は６％）を有する微細ＯＲＣ繊維の組成物の更なる補充の、凝集力に対する寄与を試験した。結果を図２に示す。
【０２１１】
前述の実施例で示される結果と同様に、６％  ＣａＣｌ２−ＯＲＣ混合物は、ＯＲＣ単独と比較して、抵抗力／凝集力の増加をもたらした。６％  ＣａＣｌ２の補充によって形成された凝塊において示された改善された抵抗力は、リジン（Ｌｙｓ）との６％  ＣａＣｌ２混合物の補充によって形成された凝塊において消失したことが見出された。アルギニン（Ａｒｇ）による６％  ＣａＣｌ２−ＯＲＣの追加の補充は、同様の負の効果を有していた。
【０２１２】
３％キトサン又は３％プラタミン硫酸塩（ＰＳ）のいずれかによるＯＲＣ繊維の補充、更には６％までのＣａＣｌ２補充は、凝塊の抵抗力の増加を示した。
【０２１３】
更に、３％  εＡＣＡ単独での６％  ＣａＣｌ２  ＯＲＣ組成物の更なる補充は、凝塊の抵抗を減少させた（図２において、６％  ＣａＣｌ２を補充した微細ＯＲＣ繊維と、６％  ＣａＣｌ２及び３％  εＡＣＡを補充した微細ＯＲＣ繊維とを比較する）。
【０２１４】
５．０％  ＣａＣｌ２、２．５％  ＰＳ、及び２．５％  εアミノカプロン酸（εＡＣＡ）を補充したＯＲＣにより、優れた結果が得られた。
【０２１５】
これらの結果は、特定の化合物及びそれらの特定の組み合わせのみが、ＯＲＣ繊維によって誘導される凝集力特性を改善することを示唆する。
【０２１６】
実施例３：エクスビボモデルにおける異なる組成物の止血効果。
この実施例では、インビトロ試験に従い、高い凝集力を有する例示的な組成物を、縫合（前臨床）エクスビボモデルにおけるその止血能力について（材料及び方法の段落に記載されるように）調べた。組成物の効力は、粉体の形形態で、又は凝集体として試験した。また、止血効力に対する組成物からのカルシウムの不在の影響を評価した。
【０２１７】
粉体圧密化を、「粉体の圧密化」（材料及び方法の段落）で詳述されるように実施した。次いで、圧密化粉体を、「カプセルの乾燥及び粉砕／研削」で詳述されるように、乾燥の工程及び粉砕／研削の工程に供し、それによって粉体顆粒／凝集体を生成した。
【０２１８】
縫合部位における組成物適用の前及び後の血液損失量を、上記の方法で比較した（「縫合前臨床エクスビボモデル」）。
【０２１９】
これらの目的のために、５．０％  ＣａＣｌ２、２．５％  ＰＳ、及び２．５％  εＡＣＡを補充した微細ＯＲＣ繊維の粉体組成を、圧密化及び非圧密化の両方の形態で試験し、５．０％  ＰＳ及び５．０％  εＡＣＡ（カルシウムなし）を補充した微細ＯＲＣ繊維もまた評価した。
【０２２０】
図３に示すように、粉体を圧密化粉砕して凝集体形態に篩分けした場合、止血効果が向上する一般的な傾向がある（血液損失低減率％の増加が観察された）。この結果はまた、ＯＲＣ粉体の効力に対する塩化カルシウムの正の寄与を示す。
【０２２１】
実施例４：インビボ試験によって決定される、止血効力に対する凝集体組成物における化合物濃度範囲の効果。
以下の実施例は、上記の実施例に従って選択された化合物の各々の濃度を変化させるインビボ止血効果を調べる。結果は、上記のような肝臓生検パンチインビボモデルを使用し、雌ブタに対して実施された異なる前臨床実験から収集した。各実験の結果を異なる表（表３、４、及び５）に提示する。この実験において、様々な凝集体組成物を試験した。試験した凝集体組成物は、化合物による補充を伴うか、又は伴わないＯＲＣ繊維であり、化合物の濃度は下記の表で特定される。化合物を補充した凝集体は、１０．０％（最終混合重量のｗ／ｗ）の長いＯＲＣ繊維（表１Ａのサイズ分布を参照されたい）及び７７．５〜８５．０％の微細ＯＲＣ繊維のＯＲＣ繊維の組み合わせを含んでいた。
【０２２２】
表は、完全な出血停止／完全な止血の成功率を一覧表示する。各実験において、微細ＯＲＣ凝集体（任意の補充なし）をベースライン対照として、ＯＲＣ繊維への化合物の補充の止血効力を調べた。
【０２２３】
【表４】
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【０２２４】
表３〜５に提示される結果は、３つの化合物（塩化カルシウム、ＰＳ、及びεＡＣＡ）を全て含有する組成物が、他の凝集体組成物と比較して顕著に優れていたため、各化合物が、ＯＲＣ繊維の止血効力を改善するために必須であることを再確認する。結果は、ＰＳ及びεＡＣＡの両方の場合、優れた補充範囲が２．５％〜５．０％であることを示した。塩化カルシウムが有益な化合物となる範囲は、５．０％〜６．５％である（カチオン濃度範囲１．３６３％〜１．６３６％ｗ／ｗ）。
【０２２５】
結果は、補充したＯＲＣが、ＯＲＣ単独よりも少なくとも１．５倍効率的であることを示す（補充したＯＲＣの完全止血率３７．５％に対して、ＯＲＣ単独の完全止血率２５％）。
【０２２６】
本開示の様々な形態について図示し説明したが、本明細書で説明した方法及びシステムの更なる適応が、当業者による適切な変更により、本発明の範囲を逸脱することなく達成され得る。そのような可能な改変のうちのいくつかについて述べたが、他の改変も当業者には明らかであろう。例えば、上述の実施例、変形形態、幾何学形状、材料、寸法、比率、工程などは例示的なものであって、必須ではない。したがって、本発明の範囲は、以下の特許請求の範囲の観点から考慮されるべきものであり、本明細書及び図面において図示され、説明された構造及び動作の細部に限定されないものとして理解されたい。
【０２２７】
〔実施の態様〕
（１）  止血組成物であって、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有し、前記組成物全体の８３．５％〜９０．０％ｗ／ｗの濃度範囲にある、セルロース系繊維と、前記組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるωアミノカルボン酸と、前記組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるプロタミン塩と、カチオン濃度が前記組成物全体の１．３％〜１．８％ｗ／ｗである二価カチオンと、を含み、前記組成物が、粉体及び／又は凝集体の形態である、止血組成物。
（２）  前記セルロース系繊維が、１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する、実施態様１に記載の止血組成物。
（３）  前記セルロース系繊維が、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）繊維である、実施態様１又は２に記載の組成物。
（４）  前記ωアミノカルボン酸が、εアミノカプロン酸（εＡＣＡ）である、実施態様１〜３のいずれかに記載の組成物。
（５）  前記プロタミン塩が、プロタミン硫酸塩である、実施態様１〜４のいずれかに記載の組成物。
【０２２８】
（６）  前記二価カチオン塩が、塩化カルシウムによって提供される、実施態様１〜５のいずれかに記載の組成物。
（７）  前記εＡＣＡ、プロタミン硫酸塩、及び塩化カルシウムの前記濃度範囲が、それぞれ２．５％〜５．０％、２．５％〜５．０％、５．０％〜６．５％ｗ／ｗであり、残りの重量が、１００％ｗ／ｗの総重量になるように前記セルロース系繊維により寄与される、実施態様６に記載の組成物。
（８）  血液との接触時に前記粉体組成物から形成されるゲルが、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）からなる比較粉体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの抵抗の１０倍以上の抵抗を有し、かつ／又は前記凝集体組成物から形成されるゲルが、ＯＲＣからなる比較凝集体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの止血能力の１．５倍以上の止血能力を有する、実施態様１〜７のいずれかに記載の組成物。
（９）  前記組成物が、７５μｍ〜４２０μｍの範囲のサイズを有する凝集体の形態である、実施態様１〜８のいずれかに記載の組成物。
（１０）  止血組成物の作製方法であって、３５０μｍ未満のＤ９０、及び１６７μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有し、前記組成物全体の８３．５％〜９０％ｗ／ｗの濃度範囲にある、セルロース系繊維を、以下の粉体化合物、
ｉ−前記組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるωアミノカルボン酸、
ｉｉ−前記組成物全体の２．５％〜５．０％ｗ／ｗの濃度範囲にあるプロタミン塩、及び
ｉｉｉ−カチオン濃度が前記組成物全体の１．３％〜１．８％ｗ／ｗである二価カチオンと混合する工程を含む、方法。
【０２２９】
（１１）  前記繊維が、１７７μｍ未満のＤ９０、及び９５μｍ未満のＤ５０のサイズ分布を有する、実施態様１０に記載の方法。
（１２）  実施態様１０又は１１に記載の方法に従って得られる止血組成物。
（１３）  前記止血組成物を圧密化する工程と、任意選択で前記圧密化組成物を乾燥及びサイズ低減に供する工程と、それによって止血凝集体を得る工程と、を更に含む、実施態様１０又は１１に記載の方法。
（１４）  実施態様１３に記載の方法に従って得られる止血凝集体組成物。
（１５）  ゲルの形成方法であって、
実施態様１〜９、１２、及び１４のいずれかに記載の止血粉体及び／又は凝集体組成物を血液と接触させ、それによってゲルを形成する工程を含む、方法。
【０２３０】
（１６）  前記接触が前記粉体組成物で実施されるとき、前記形成されたゲルが、酸化再生セルロース（ＯＲＣ）からなる比較粉体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの抵抗の１０倍以上の抵抗を有し、
かつ／又は前記接触が前記凝集体組成物で実施されるとき、前記形成されたゲルが、ＯＲＣからなる比較凝集体組成物と血液との接触時に形成されるゲルの止血能力の１．５倍以上の止血能力を有する、実施態様１５に記載の方法。
（１７）  実施態様１５又は１６に記載の方法によって得られるゲル。
（１８）  実施態様１〜９、１２、及び１４のいずれかに記載の止血組成物を含む容器と、任意選択でアプリケータ、担体、及び／又は使用説明書と、を含む、キット。
（１９）  出血創傷、創傷部位における細菌感染症の治療、吻合部位からの漏出の最小化又は防止、必要とする対象における、部位における漏出の封止及び／又は手術部位における癒着の防止方法であって、前記方法が、有効量の実施態様１〜９、１２、及び１４のいずれかに記載の止血組成物を、前記対象の前記創傷及び／又は部位の上及び／又は中に適用することを含む、方法。
（２０）  前記適用が、前記創傷及び／又は部位に向かって前記組成物に圧力を加えることなく実施される、実施態様１９に記載の方法。
【０２３１】
（２１）  出血創傷、創傷部位における細菌感染症の治療、吻合部位からの漏出の最小化又は防止、部位における漏出の封止及び／又は癒着の防止のための、実施態様１〜９、１２、及び１４のいずれかに記載の止血組成物の使用。
（２２）  冠状動脈バイパス移植（ＣＡＢＧ）手術における漏出を最小化又は防止するための、実施態様２１に記載の使用。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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2018532516.tif 000011
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