(57)【要約】  式(I)の化合物及び当該化合物を含む組成物でウイルス感染症を治療する方法を開示する。【化１】2018527379.tif 000046【選択図】なし
2018527379.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式I：
【化１】
2018527379.tif 000044
(式中、
R1は、C1〜6アルキルであり；
R2は、C5〜14アリール、C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリールであり、各R2基は、ハロ、C1〜6アルキル、C1〜6ヘテロアルキル、又はC1〜6アルキレン若しくはC1〜6ヘテロアルキレンから選択される1〜4個の置換基により置換されていてもよく、前記C1〜6アルキレン又はC1〜6ヘテロアルキレンは、前記C5〜14アリール、C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリール上で隣接する炭素原子に結合して縮合環を形成しており；
Lは、結合、-CH2(CO)-、-C1〜3アルキレン-、-SO2-、-C(O)-、-C(S)-、-C(NH)-、-C(O)NH-、-C(O)NHCH2-、-C(O)N-、-C(O)OCH2-、-C(O)O-、-C(O)C(O)-、-SO2-NH-、又は-CH2C(O)-であり；
R3は、H、CN、C1〜6アルキル、C5〜14アリール、CH2C5〜14アリール、CH2C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルキル、C3〜7スピロシクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリールであり、各R3基は、ハロ、C1〜6アルキル、C2〜8架橋ヘテロ環、C3〜7シクロアルキル、C1〜3フルオロアルキル、-OC1〜6アルキル、-C(O)R4、-C(O)NR4、-C(O)NHR4、C5〜14アリール、C1〜6ヘテロアルキル、-B(OH)2、C3〜9ヘテロ環、C5〜6ヘテロアリール、-C(O)OC1〜6アルキルから選択される1〜4個の置換基により置換されていてもよく、又は隣接する原子に結合した2個の置換基は互いに結合して縮合環を形成してもよく、前記縮合環はR4で置換されていてもよく、ここでR4は、CN、ハロ、-OC1〜6アルキル、C1〜6アルキル、C3〜7シクロアルキル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜14アリールであり；
各R5は、独立して、H、ハロゲン、C1〜6アルキル、又はC3〜7シクロアルキルであり、各C1〜6アルキル及びC3〜7シクロアルキルは、1〜3個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
各ヘテロ環、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、及びヘテロアルキレンは、S、N、B又はOから選択される1〜3個のヘテロ原子を含む)
で表される化合物。
【請求項２】
R1がC1〜6アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
R1がt-ブチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
R2が置換されていてもよいフェニルである、請求項１〜３のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項５】
R2が、フッ素、メチル、-CH2CH2CH2O-(前記-CH2CH2CH2O-は、フェニル上で隣接する炭素原子と結合して二環式環を形成する)、又は-NHCH2CH2O-(前記-NHCH2CH2O-は、フェニル上で隣接する炭素原子と結合して二環式環を形成する)から選択される1〜4個の置換基により置換されたフェニルである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Lが-C(O)-である、請求項１〜５のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項７】
R3が、C1〜6アルキル、フェニル、ナフチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピリジル又はテトラヒドロピラニルであり、これらはそれぞれ、ハロゲン、C1〜6アルキル、-OC1〜6アルキル、C1〜3フルオロアルキル又はフェニルから選択される1〜3個の置換基により置換されていてもよい、請求項１〜６のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項８】
各R4がメチルである、請求項１〜７のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項９】
OR1が結合している炭素の立体化学が、
【化２】
2018527379.tif 000045
によって示される通りである、請求項１〜８のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか1項に記載の化合物の薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか1項に記載の化合物又は塩を含む医薬組成物。
【請求項１２】
ウイルスのレトロウイルス科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された、患者のウイルス感染症を治療する方法であって、前記患者に請求項１１に記載の組成物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１３】
前記ウイルス感染症がHIVウイルスによって媒介される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
薬物療法に使用するための、請求項１〜１０のいずれか1項に定義される化合物又は塩。
【請求項１５】
ヒトにおけるウイルス感染症の治療に使用するための、請求項１〜１０のいずれか1項に定義される化合物又は塩。
【請求項１６】
ヒトにおけるウイルス感染症の治療に使用するための医薬品の製造における、請求項１〜１０のいずれか1項に定義される化合物又は塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ベンゾアゼピン誘導体、医薬組成物、及びこのような化合物を投与することにより、(i)HIVに感染した対象におけるHIV複製を阻害する、又は(ii)HIVに感染した対象を治療するための、それらの使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒト免疫不全ウイルス1型(HIV-1)は、後天性免疫不全疾患(AIDS)の罹患をもたらす。HIVの症例数は増加し続け、現在、世界で2500万人以上が当該ウイルスに罹患している。今日、抗レトロウイルス薬によるウイルス複製の長期的な抑制が、HIV-1感染症の治療のための唯一の選択肢である。確かに、米国食品医薬品局は、6つの異なる阻害剤クラスに亘る25種類の薬物を承認し、この承認によって患者の生存及びQOLをかなり向上させた。しかし、望ましくない薬物間相互作用、薬物-食物相互作用、治療に対するノンアドヒアランス、及び酵素標的の変異による薬剤耐性により、追加の治療が依然として必要とされている。
【０００３】
現在、ほとんど全てのHIV陽性患者が高活性抗レトロウイルス剤療法(HAART)と呼ばれる抗レトロウイルス薬の併用の治療方式で治療を受けている。しかし、HAART療法は、薬物耐性HIV-1変異株の急速な出現を避けるために、異なる薬物の組み合わせを患者に毎日投与することが多いため、複雑になることが多い。HAARTが患者の生存に良い影響を与えるにもかかわらず、薬物耐性が依然として発生する可能性がある。多剤耐性HIV-1分離株の出現は、深刻な臨床結果を示し、サルベージ療法として知られている薬物による新治療方式で抑制しなければならない。
【０００４】
現在のガイドラインでは、サルベージ療法に少なくとも2つ、好ましくは3つの十分に活性な薬物を含めることを推奨している。典型的には、第一選択治療は、ウイルス逆転写酵素及びプロテアーゼを標的とする3〜4つの薬物を組み合わせる。サルベージ療法の1つの選択肢は、耐性分離株に対して活性を維持している、同じ機序的クラスからの異なる組み合わせの薬物を投与することである。しかし、耐性変異が同じクラスの異なる薬物に広範な交差耐性を頻繁に与えるために、サルベージ療法のアプローチの選択肢が限定的であることが多い。最近、代替治療戦略が融合、侵入及びインテグラーゼ阻害剤の開発で利用可能になってきている。しかし、3つの新薬クラス全てに対する耐性が、検査室と患者の両方で、既に報告されている。したがって、抗レトロウイルス薬によるHIV-1感染患者の持続的な好成績の治療には、新しい標的及び作用機序を有する新しい改良された薬物の継続的な開発が必要となろう。
【０００５】
例えば、過去10年間のHIV阻害剤は、HIV-1インテグラーゼと水晶体上皮細胞由来増殖因子/p75(「LEDGF」)とのタンパク質間相互作用を標的とすることが報告されている。LEDGFは、組込み前複合体をクロマチンに繋ぎ止めることによって、逆転写ウイルスcDNAを宿主細胞のゲノムにウイルスで組み込むことを促進する、HIV-1インテグラーゼの細胞転写補助因子である。HIV複製の初期段階における決定的に重要な役割のために、LEDGFとインテグラーゼとの相互作用はHIV薬物治療の別の魅力的な標的でもある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
発明の要約
手短に言えば、一態様において、本発明は、式I：
【０００７】
【化１】
2018527379.tif 000003
(式中、
R1は、C1〜6アルキルであり；
R2は、C5〜14アリール、C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリールであり、各R2基は、ハロ、C1〜6アルキル、C1〜6ヘテロアルキル、又はC1〜6アルキレン若しくはC1〜6ヘテロアルキレンから選択される1〜4個の置換基により任意選択で置換されており、前記C1〜6アルキレン又はC1〜6ヘテロアルキレンは、前記C5〜14アリール、C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリール上で隣接する炭素原子に結合して縮合環を形成しており；
Lは、結合、-CH2(CO)-、-C1〜3アルキレン-、-SO2-、-C(O)-、-C(S)-、-C(NH)-、-C(O)NH-、-C(O)NHCH2-、-C(O)N-、-C(O)OCH2-、-C(O)O-、-C(O)C(O)-、-SO2-NH-、又は-CH2C(O)-であり；
R3は、H、CN、C1〜6アルキル、C5〜14アリール、CH2C5〜14アリール、CH2C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルキル、C3〜7スピロシクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリールであり、各R3基は、ハロ、C1〜6アルキル、C2〜8架橋ヘテロ環、C3〜7シクロアルキル、C1〜3フルオロアルキル、-OC1〜6アルキル、-C(O)R4、-C(O)NR4、-C(O)NHR4、C5〜14アリール、C1〜6ヘテロアルキル、-B(OH)2、C3〜9ヘテロ環、C5〜6ヘテロアリール、-C(O)OC1〜6アルキルから選択される1〜4個の置換基により任意選択で置換されており、又は隣接する原子に結合した2個の置換基は互いに結合して縮合環を形成してもよく、前記縮合環は任意選択でR4で置換されていてもよく、ここでR4は、CN、ハロ、-OC1〜6アルキル、C1〜6アルキル、C3〜7シクロアルキル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜14アリールであり；
各R5は、独立して、H、ハロゲン、C1〜6アルキル又はC3〜7シクロアルキルであり、各C1〜6アルキル及びC3〜7シクロアルキルは、任意選択で1〜3個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
各ヘテロ環、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、及びヘテロアルキレンは、S、N、B又はOから選択される1〜3個のヘテロ原子を含む)
で表される化合物について開示している。
【０００８】
別の態様では、本発明は式Iの化合物の薬学的に許容される塩を開示する。
【０００９】
別の態様では、本発明は式Iの化合物又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を開示する。
【００１０】
別の態様では、本発明は、ウイルスのレトロウイルス科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された、患者のウイルス感染症を治療する方法を開示し、式Iの化合物又はその薬学的に許容される塩を含む組成物を当該患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ウイルス感染症はHIVウイルスによって媒介される。
【００１１】
別の態様では、本発明の特定の実施形態は、HIVに感染した対象を治療する方法を提供し、治療有効量の式Iの化合物又はその薬学的に許容される塩を当該対象に投与することを含む。
【００１２】
さらに別の態様では、本発明の特定の実施形態はHIVに感染するリスクのある対象のHIV感染の進行を阻害する方法を提供し、治療有効量の式Iの化合物又はその薬学的に許容される塩を当該対象に投与することを含む。これら及びその他の実施形態は以下にさらに記述する。
【００１３】
本発明の別の実施形態に従って、ウイルスのレトロウイルス科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された、哺乳動物のウイルス感染症を予防又は治療する方法を提供し、当該方法は、前記ウイルス感染症と診断された、又は前記ウイルス感染症を発現するリスクのある哺乳動物に、式Iに記載の化合物を投与することを含み、前記ウイルスはHIVウイルスであり、さらに、HIVウイルスに対して活性の治療有効量の1つ以上の薬剤を投与することを含み、HIVウイルスに対して活性の前記薬剤はヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、非ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、侵入、結合及び融合阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、成熟阻害剤、CXCR4阻害剤、及びCCR5阻害剤から成る群から選択される。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
好ましくは、R1は、C1〜6アルキルである。最も好ましくは、R1はt-ブチルである。
【００１５】
好ましくは、R2は、任意選択で置換されたフェニルである。最も好ましくは、R2は、フッ素、メチル、-CH2CH2CH2O-(前記-CH2CH2CH2O-は、フェニル上で隣接する炭素原子と結合して二環式環を形成する)、又は-NHCH2CH2O-(前記-NHCH2CH2O-は、フェニル上で隣接する炭素原子と結合して二環式環を形成する)から選択される1〜4個の置換基により置換されたフェニルである。
【００１６】
好ましくは、Lは、-C(O)-である。
【００１７】
好ましくは、R3は、C1〜6アルキル、フェニル、ナフチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピリジル、又はテトラヒドロピラニルであり、これらはそれぞれハロゲン、C1〜6アルキル、-OC1〜6アルキル、C1〜3フルオロアルキル又はフェニルから選択される1〜3個の置換基により任意選択で置換されている。
【００１８】
好ましくは、各R5は、メチルである。
【００１９】
好ましくは、OR1が結合している炭素の立体化学は、以下に示す通りである。
【００２０】
【化２】
2018527379.tif 000004
【００２１】
「薬学的に許容される塩」は、当該技術分野で周知の様々な有機及び無機対イオンから生じる薬学的に許容される塩を指し、例に過ぎないが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、及びテトラアルキルアンモニウムを含み、分子が塩基性官能基を有する場合は、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、及びシュウ酸塩等の有機酸又は無機酸の塩を含む。適切な塩として、P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (Eds.), Handbook of Pharmaceutical Salts Properties, Selection, and Use; 2002に記載の塩が挙げられる。
【００２２】
本発明の方法の一実施形態において、ウイルス感染症は、ヒトにおけるウイルス感染症である。一実施形態において、ウイルス感染症は、HIVウイルスによって媒介されるウイルス感染症である。
【実施例】
【００２３】
本発明の化合物は、周知の標準的な合成方法を含む様々な方法によって作製することができる。例示的な一般合成方法を以下に示し、次いで本発明の特定の化合物を実施例で調製する。
【００２４】
以下の実施例は、上記の本発明の製造及び使用方法をより完全に説明するものである。これらの実施例は、本発明の真の範囲を限定するものでは決してなく、例証の目的のために提示されたものであることが理解される。以下の実施例及び上記の合成スキームにおいて、下記の略語は下記の意味を有する。略語が定義されていない場合は、略語はその一般に容認されている意味を有する。
【００２５】
aq.=水溶液
μL=マイクロリットル
μM=マイクロモル
NMR=核磁気共鳴
boc=tert-ブトキシカルボニル
br=広域
Cbz=ベンジルオキシカルボニル
d=二重項
δ=化学シフト
℃=摂氏度
DCM=ジクロロメタン
dd=二重項の二重項
DMEM=ダルベッコ変法イーグル培地
DMF=N,N-ジメチルホルムアミド
DMSO=ジメチルスルホキシド
EtOAc=酢酸エチル
g=グラム
h又はhr=時間
HCV=C型肝炎ウイルス
HPLC=高速液体クロマトグラフィー
Hz=ヘルツ
IU=国際単位
IC50=50%阻害の阻害濃度
J=結合定数(別段の定めがない限り、Hzで示される)
m=多重項
M=モーラー
M+H+=親マススペクトルピーク+H+
mg=ミリグラム
min=分
mL=ミリリットル
mM=ミリモーラー
mmol=ミリモル
MS=マススペクトル
nm=ナノモーラー
ppm=百万分率
q.s.=十分量
s=一重項
RT=室温
sat.=飽和
t=三重項
TFA=トリフルオロ酢酸
Z=ベンジルオキシカルボニル
【００２６】
【化３】
2018527379.tif 000005
【００２７】
実施例1：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-クロロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００２８】
【化４】
2018527379.tif 000006
【００２９】
2-ニトロ-N,N-ジ(ペンタ-3-イン-1-イル)ベンゼンスルホンアミド
【００３０】
【化５】
2018527379.tif 000007
【００３１】
ペンタ-3-イン-1-オール(60g、710mmol)、2-ニトロベンゼンスルホンアミド(15g、74mmol)、及びトリフェニルホスフィン(97g、370mmol)のテトラヒドロフラン(THF)(300mL)中混合物を、DIAD(57.7mL、297mmol)で滴下処理した。18時間後、反応混合物を真空中で濃縮した。得られた油をEtOAc：ヘキサンの1：4混合物で処理し、濾過により固体を回収した。濾液を真空中で濃縮し、シリカクロマトグラフィー(0〜50％DCM：ヘキサン)により精製した。残渣を1：1のエチルエーテル/ヘキサン中で懸濁して0℃に冷却し、真空濾過により固体を回収して標題化合物(18g、51mmol、69％収率)を白色粉末として得た。1H NMR (400MHz、クロロホルム-d) δ ppm 8.0-8.2 (m、1H)、7.6-7.8 (m、3H)、3.5(t、J=7.33Hz、4H)、2.4 (ddd、J=9.66、4.99、2.56Hz、4H)、1.7 (t、J=2.56Hz、6H)。LCMS(ES+)(m/z)：335.3(M+H)。
【００３２】
工程1
エチル2-ヒドロキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート。
【００３３】
【化６】
2018527379.tif 000008
N2雰囲気下にて、無水THF(2.5L)中のTMS-アセチレン(250g、2.55mol)の溶液に0℃で内温を5℃以下に保ちながら、3M EtMgBr/エーテル(933mL、2.80mol)を滴下添加した。0℃で30分間撹拌後、懸濁液をカニューレを介して無水THF(5L)中の50%グリオキシル酸エチル/トルエン(624g、3.05mol)の氷冷溶液に添加した。0℃で1時間撹拌後、混合物を飽和NH4Cl水溶液(3L)でクエンチし、EtOAc(2×1L)で抽出した。合わせたEtOAc溶液を減圧下で濃縮した。残渣をEtOAc(3L)で希釈した。溶液を水(2×1L)及びブライン(2×1L)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。粗製物質をフラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、0〜10% EtOAc/石油エーテル)で精製して、標題化合物(285g、56%)を黄色油状物として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d)δ= 4.83 (d, J=7.3 Hz, 1H), 4.34 (qq, J=7.2, 10.8 Hz, 2H), 3.02 (d, J=7.3 Hz, 1H), 1.34 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.22 - 0.16 (m, 9H).
【００３４】
工程2
エチル2-アセトキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート
【００３５】
【化７】
2018527379.tif 000009
10LフラスコにEtOAc(7.5L)を添加し、続いてAc2O(400mL)を添加した。室温で30分間撹拌後、混合物を0℃まで冷却し、Ac2Oのさらなる部分(2.1L)で処理した。0℃で1時間後、溶液を室温まで加温した。溶液に、エチル2-ヒドロキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート(520g、2.60mol)を添加した。室温で1時間撹拌後、溶液を1N NaOH水溶液(3×、総量20L)で洗浄した。次いで、溶液をブライン(5L)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、減圧下で濃縮乾固した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、0〜5%EtOAc/石油エーテル)で精製して、標題化合物(590g、94%)を黄色油状物として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d)δ= 5.69 (s, 1H), 4.36 - 4.21 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.32 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.25 - 0.15 (m, 9H).
【００３６】
工程3
(S)-エチル2-ヒドロキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート
【００３７】
【化８】
2018527379.tif 000010
アセトン(1.88L)及びリン酸緩衝液(pH7.2、7.5L)中のエチル2-アセトキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート(150g、0.620mol)の溶液にAmano Lipase PS(75g)を添加した。20℃で終夜撹拌後、反応混合物を水(2.5L)で希釈し、EtOAc(3L)で抽出した。層を分配し、有機層をブライン(3×、総量10L)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、0〜10%EtOAc/石油エーテル)で精製して、標題化合物(55g、44%)を黄色油状物として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d)δ= 4.83 (d, J=7.3 Hz, 1H), 4.34 (qq, J=7.2, 10.8 Hz, 2H), 3.02 (d, J=7.3 Hz, 1H), 1.34 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.22 - 0.16 (m, 9H).
【００３８】
工程4
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート
【００３９】
【化９】
2018527379.tif 000011
t-BuOAc(2.5L)中の(S)-エチル2-ヒドロキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート(100g、0.500mol)の溶液に、HclO4(41mL、0.500mol)を室温で滴下添加した。40分間撹拌後、混合物をNaHCO3粉末でクエンチし、水(2L)で希釈し、EtOAc(2L)で抽出した。EtOAc溶液をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、0〜5%EtOAc/石油エーテル)で精製して、標題化合物(103g、81%)を黄色油状物として得た。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d)δ= 4.72 (s, 1H), 4.33 - 4.20 (m, 2H), 1.31 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.28 (s, 9H), 0.17 (s, 9H).
【００４０】
ステップ5
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(6,9-ジメチル-3-((2-ニトロフェニル)スルホニル)-8-(トリメチルシリル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート
【００４１】
【化１０】
2018527379.tif 000012
【００４２】
BINAP(3.39g、5.44mmol)及び[Rh(cod)2]BF4(2.21g、5.44mmol)のジクロロメタン(DCM)(100mL)中懸濁液をH2で5分間泡立て、その後H2雰囲気下で維持した。1時間後、H2バルーンを除去し、反応混合物をN2で15分間泡立てた。(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート(4.65g、18.1mmol)のジクロロメタン(10mL)中溶液を添加し、反応フラスコを45℃に予め加熱された油浴中に降ろした。次いで、2-ニトロ-N,N-ジ(ペンタ-3-イン-1-イル)ベンゼンスルホンアミド(15.2g、45.3mmol)のジクロロメタン(DCM)(100mL)中溶液を120分間かけて滴下添加した。1時間後、反応混合物を周囲温度に冷却し、真空中で濃縮した。残渣をシリカクロマトグラフィー(0〜50％のEtOAc-ヘキサン)により精製し、標題化合物(5.3g、8.8mmol、49％収率)を白色泡状物として得た。1H NMR (400MHz、クロロホルム-d) δ ppm 7.9-8.0(m、1H)、7.6-7.7 (m、2H)、7.6-7.6 (m、1H)、5.5(br. s.、1H)、4.1-4.3(m、2H)、3.4-3.6 (m、4H)、3.1 (t、J=5.04Hz、4H)、2.4 (s、3H)、2.2 (s、3H)、1.2-1.3(m、3H)、1.1 (s、9H)、0.5(s、9H)。LCMS(ES+)(m/z)：591.48 (M+H)、613.46 (M+Na)。
【００４３】
ステップ6
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(8-ヨード-6,9-ジメチル-3-((2-ニトロフェニル)スルホニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート
【００４４】
【化１１】
2018527379.tif 000013
【００４５】
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(6,9-ジメチル-3-((2-ニトロフェニル)スルホニル)-8-(トリメチルシリル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(6.1g、10mmol)のアセトニトリル(100mL)中溶液をN-ヨードスクシンイミド(2.56g、11.4mmol)及びTMS-Cl(0.132mL、1.03mmol)で処理した。2時間後、反応混合物をNaHCO3及びNa2S2O3の水溶液に注ぎ入れた。混合物を酢酸エチル(3x)で抽出し、合わせた有機層を飽和Na2S2O3で洗浄し、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して標題化合物(6.85g、10.3mmol、99％収率)を得た。1H NMR (400MHz、クロロホルム-d) δ ppm 7.8-8.0(m、1H)、7.7 (ddd、J=7.33、5.40、1.74Hz、2H)、7.6-7.6 (m、1H)、5.9 (s、1H)、4.2 (dd、J=11.72、6.96Hz、2H)、3.5 (br. s.、2H)、3.4-3.5 (m、2H)、2.9-3.3 (m、4H)、2.5 (s、3H)、2.3 (s、3H)、1.2-1.2 (m、12H)。LCMS(ES+)(m/z)：667.34 (M+Na)。
【００４６】
ステップ7
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(8-ヨード-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート
【００４７】
【化１２】
2018527379.tif 000014
【００４８】
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(8-ヨード-6,9-ジメチル-3-((2-ニトロフェニル)スルホニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(3.2g、5.0mmol)及び炭酸セシウム(6.47g、19.9mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(25mL)中溶液をチオフェノール(2.05mL、19.9mmol)で処理した。2時間後、反応混合物を2-メチルテトラヒドロフランで希釈し、1M NaOHで洗浄し、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。有機層を真空中で濃縮し、残渣をシリカクロマトグラフィー(0〜20％のMeOH-DCM)により精製して標題化合物(1.65g、3.52mmol、70.9％収率)を油状物として得た。1H NMR (400MHz、クロロホルム-d) δ ppm 5.9 (s、1H)、4.2 (dd、J=10.53、7.05 Hz、2H)、3.0-3.2 (m、2H)、2.8-3.0(m、6H)、2.6 (s、3H)、2.3(s、3H)、1.9 (s、1H)、1.2-1.4 (m、12H)。LCMS(ES+)(m/z)：460.29 (M+H)。
【００４９】
ステップ8
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(3-(3-フルオロベンゾイル)-8-ヨード-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート
【００５０】
【化１３】
2018527379.tif 000015
【００５１】
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(8-ヨード-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(1.63g、3.55mmol)、3-フルオロ安息香酸(0.589g、4.08mmol)、及び Hunig塩基(2.48mL、14.2mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(30mL)中氷冷混合物に、1-プロパンホスホン酸環式無水物(2.43mL、4.08mmol、酢酸エチル中50重量％溶液)を、温度が3℃超に上昇しないような速度で滴下添加した。混合物を30分間撹拌し、その後周囲温度に温めた。2時間後、反応混合物をブラインでクエンチし、2-メチルテトラヒドロフラン(2x)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカクロマトグラフィー(0〜20％の酢酸エチル/ジクロロメタン)により精製し、(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(3-(3-フルオロベンゾイル)-8-ヨード-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(1.8g、3.1mmol、86％収率)を白色泡状物として得た。1H NMR (400MHz、80℃、DMSO-d6) δ ppm 7.4 (d、J=6.04Hz、1H)、7.2 (br. s.、1H)、6.7 (d、J=7.33Hz、1H)、6.5-6.7 (m、1H)、5.9 (s、1H)、4.0-4.3(m、2H)、3.3-3.9 (m、4H)、3.1 (br. s.、4H)、2.5(br. s.、3H)、2.3(br. s.、3H)、1.2-1.3(m、9H)、1.1 (t、J=7.05 Hz、3H)。LCMS(ES+)(m/z)：582.41 (M+H)、604.35(M+Na)。
【００５２】
ステップ9
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-クロロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート
【００５３】
【化１４】
2018527379.tif 000016
【００５４】
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(3-(3-フルオロベンゾイル)-8-ヨード-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(108mg、0.186mmol)、2-(8-クロロ-5-メチルクロマン-6-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(92mg、0.30mmol)、三塩基性リン酸カリウム(118mg、0.557mmol)、及びMePhos(20mg、0.056mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(DMF)(2mL)中溶液を窒素で5分間脱気した。Pd2(dba)3(51mg、0.056mmol)を添加し、反応バイアルを90℃に予め加熱された加熱ブロック中に置いた。2時間後、反応混合物を周囲温度に冷却し、水と酢酸エチルの1：1混合物に注ぎ入れた。綿プラグを通して混合物を濾過し、層を分離した。水相をEtOAc(2x)で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をシリカクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物(40mg、0.060mmol、33％収率)を得た。1H NMR (400MHz、クロロホルム-d)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.4 (d、J=5.31Hz、1H)、7.0-7.1 (m、1H)、6.8-7.0(m、3H)、5.0(d、J=8.79 Hz、1H)、4.3(t、J=5.13Hz、2H)、4.0(dd、J=14.38、7.05 Hz、3H)、3.7-3.8 (m、1H)、3.4-3.6 (m、2H)、3.1-3.2 (m、2H)、3.0(d、J=5.86Hz、2H)、2.7 (t、J=6.13Hz、2H)、2.5(br. s.、1.5H)、2.4 (br. s.、1.5H)、2.1 (dd、J=5.86、3.11Hz、2H)、1.8-1.9 (m、6H)、1.1-1.2 (m、12H)。LCMS(ES+)(m/z)：658.54、660.51 (M+Na)。
【００５５】
ステップ10
(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-クロロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００５６】
【化１５】
2018527379.tif 000017
【００５７】
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-クロロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(38mg、0.060mmol)及びトリメチル(ポタシオオキシ)シラン(30.7mg、0.239mmol)の1,4-ジオキサン(2mL)中溶液を100℃で加熱した。1時間後、反応混合物を周囲温度に冷却し、真空中で濃縮した。残渣をシリカクロマトグラフィー(0〜10％のMeOH/DCM)により精製し、標題化合物(18mg、0.027mmol、45％収率)を白色固体として得た。1H NMR (400MHz、80℃、DMSO-d6) δ ppm 11.7-12.0(m、1H)、7.3-7.5(m、1H)、7.1-7.3(m、1H)、6.8 (br. s.、3H)、4.9 (s、1H)、4.2 (t、J=4.94Hz、2H)、3.4-3.9 (m、4H)、2.9-3.1 (m、4H)、2.7 (t、J=5.95 Hz、2H)、2.3(br. s.、3H)、2.0-2.1 (m、2H)、1.8 (s、6H)、1.0-1.2 (m、9H)。LCMS(ES+)(m/z)：630.48、632.49 (M+Na)。
【００５８】
実施例2〜4を、実施例1と同様の方法で作成した。
【００５９】
実施例2：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-(3-(3-フルオロベンゾイル)-8-(4-メトキシフェニル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００６０】
【化１６】
2018527379.tif 000018
1H NMR (400MHz、クロロホルム-d)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.4 (br. s.、1H)、7.4 (d、J=7.14Hz、1H)、7.0-7.2 (m、2H)、6.9-7.0(m、3H)、6.8 (d、J=7.33Hz、1H)、5.2 (s、1H)、3.9-4.0(m、0.5 H)、3.8-3.9 (m、3H)、3.8-3.8 (m、0.5 H)、3.4-3.7 (m、3H)、3.0-3.3(m、2H)、3.0(d、J=5.68Hz、2H)、2.4 (br. s.、1.5H)、2.2 (br. s.、1.5H)、2.0(br. s.、1.5H)、1.9 (br. s.、1.5H)、1.0(s、9H)。LCMS(ES+)(m/z)：534.45(M+H)、556.45(M+Na)。
【００６１】
実施例3：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-(3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-8-フェニル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００６２】
【化１７】
2018527379.tif 000019
1H NMR (400MHz、80℃、DMSO-d6) δ ppm 7.6-7.9 (m、1H)、7.3-7.5(m、5 H)、7.2 (d、J=7.14Hz、2H)、6.7-6.9 (m、2H)、4.9 (s、1H)、3.3-3.9 (m、4H)、3.1 (s、4H)、2.3(br. s.、3H)、1.8 (br. s.、3H)、0.9 (s、9H)。 LCMS(ES+)(m/z)：504.41 (M+H)、526.40(M+Na)。
【００６３】
実施例4：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-(3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-8-(p-トリル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００６４】
【化１８】
2018527379.tif 000020
1H NMR (400MHz、メタノール-d4)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.49-7.21 (m、4H)、7.19-7.03(m、2H)、6.88-6.75(m、1H)、6.69-6.51 (m、1H)、5.13-5.04 (m、1H)、4.10-3.92 (m、1H)、3.86-3.67 (m、1H)、3.60-3.38 (m、2H)、3.27-3.07 (m、2H)、3.05-2.89 (m、2H)、2.49-2.18 (m、6H)、2.06-1.66 (m、3H)、0.93(br. s、9H)；LCMS(m/z) ES+=518.48 (M+1)。
【００６５】
【化１９】
2018527379.tif 000021
【００６６】
実施例5：(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００６７】
【化２０】
2018527379.tif 000022
【００６８】
ステップ1
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-((2-ニトロフェニル)スルホニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート
【００６９】
【化２１】
2018527379.tif 000023
【００７０】
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(8-ヨード-6,9-ジメチル-3-((2-ニトロフェニル)スルホニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(1g、1.552mmol)、2-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(0.725g、2.482mmol)、K3PO4(0.988g、4.65mmol)、及びMePhos(0.170g、0.465mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(15mL)中溶液を、N2で5分間脱気し、Pd2(dba)3(0.426g、0.465mmol)で処理し、80℃の油浴中に浸した。50分後、反応混合物を周囲温度に冷却し、水で希釈し、セライトのパッドを通して濾過した。濾液をEtOAcで抽出し、水、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0〜60％のEtOAc/ヘキサン)により精製し、標題化合物を茶色の固体として得た。LCMS(m/z) ES+=705.70(M+Na)。
【００７１】
ステップ2
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート
【００７２】
【化２２】
2018527379.tif 000024
【００７３】
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-(8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-((2-ニトロフェニル)スルホニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(580mg、0.849mmol)及びCs2CO3(1107mg、3.40mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド(10mL)中溶液をチオフェノール(0.350mL、3.40mmol)で処理した。1.5時間後、混合物を水で希釈し、EtOAcで抽出し、水、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0〜20％のMeOH/DCM)により精製し、標題化合物を得た。1H NMR (400MHz、クロロホルム-d) δ ppm 6.70(d、J=11.5Hz、1H)、4.94 (s、1H)、4.28 (t、J=5.1Hz、2H)、4.11-3.98 (m、2H)、3.08-2.87 (m、8H)、2.78-2.64 (m、2H)、2.42 (s、3H)、2.21-2.06 (m、2H)、1.84-1.79 (m、6H)、1.14 (t、J=7.1Hz、3H)、1.10(s、9H)；LCMS(m/z) ES+=498.58 (M+1)。
【００７４】
ステップ3
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート
【００７５】
【化２３】
2018527379.tif 000025
【００７６】
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(40mg、0.080mmol)の酢酸エチル(1.6mL)中溶液を、3-フルオロ安息香酸(16.89mg、0.121mmol)、Et3N(0.034mL、0.241mmol)、1-プロパンホスホン酸環式無水物(0.120mL、0.201mmol、酢酸エチル中50重量％溶液)で処理し、周囲温度で撹拌した。70分後、反応を飽和NaHCO3で希釈し、EtOAcで抽出し、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して標題化合物(47.6mg、0.077mmol、96％収率)を淡黄色の油状物として得た。LCMS(m/z) ES+=642.71 (M+Na)。
【００７７】
ステップ4
(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸。(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(47.6mg、0.077mmol、96％収率)の1,4-ジオキサン(1.5mL)中溶液をKOTMS(41.2mg、0.322mmol)で処理し、100℃に加熱した。4時間後、反応混合物をさらなるKOTMS(20mg)で処理し、100℃で撹拌を続けた。30分後、反応混合物を周囲温度に冷却し、1N HClとEtOAcに分配した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣を逆相HPLC(30〜100％のMeCN/H2O-0.1％TFA)により精製し、標題化合物(24.1mg、0.037mmol、45.6％収率)を白色固体として得た。1H NMR(400MHz、メタノール-d4)(回転異性体とアトロプ異性体との混合物) δ ppm 7.50-7.27 (m、1H)、7.22-7.04 (m、1H)、6.94-6.52 (m、3H)、5.13-4.97 (m、1H)、4.23(t、J=4.9 Hz、2H)、4.12-3.62 (m、2H)、3.59-3.40(m、2H)、3.25-3.07 (m、2H)、3.01 (t、J=6.2Hz、2H)、2.73(t、J=6.3Hz、2H)、2.52-2.21 (m、3H)、2.19-2.05(m、2H)、1.99-1.65(m、6H)、1.18-0.94 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+=614.45(M+23)、ES-= 590.39 (M-1)。
【００７８】
実施例6〜14を、実施例5と同様の方法で作成した。
実施例6：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(3,3-ジメチルブタノイル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００７９】
【化２４】
2018527379.tif 000026
1H NMR (400MHz、メタノール-d4)(回転異性体の混合物) δ ppm 6.95(d、J=12.2Hz、0.1H)、6.57 (d、J=11.1Hz、0.9H)、5.04-4.92 (m、1H)、4.22 (t、J=4.7 Hz、2H)、3.89-3.60(m、4H)、3.18-2.97 (m、4H)、2.72 (t、J=6.0 Hz、2H)、2.50-2.35(m、3H)、2.27-1.98 (m、4H)、1.93-1.71 (m、6H)、1.15-0.84 (m、18H)；LCMS(m/z) ES+=568.69 (M+1)、ES-= 566.69 (M-1)。
【００８０】
実施例7：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(5-フルオロ-2-メトキシベンゾイル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００８１】
【化２５】
2018527379.tif 000027
1H NMR (400MHz、クロロホルム-d)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.11-6.95(m、1H)、6.93-6.37 (m、3H)、5.26-4.96 (m、1H)、4.37-3.93(m、3H)、3.91-3.58 (m、4H)、3.52-2.87 (m、6H)、2.79-2.59 (m、2H)、2.44-2.19 (m、3H)、2.18-2.05(m、2H)、1.93-1.73(m、6H)、1.20-0.97 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+=622.75(M+1)、ES-= 620.67 M+1)。
【００８２】
実施例8：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(2-メトキシ-5-メチルベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００８３】
【化２６】
2018527379.tif 000028
1H NMR (400MHz、クロロホルム-d)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.20-7.07 (m、1H)、7.03-6.64 (m、3H)、5.15-5.03(m、1H)、4.34-4.19 (m、2H)、4.15-3.69 (m、5H)、3.57-2.84 (m、6H)、2.80-2.53(m、2H)、2.43-2.18 (m、6H)、2.16-2.04 (m、2H)、1.94-1.73(m、6H)、1.21-0.97 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+= 618.75(M+1)、ES-= 616.71 (M+1)。
【００８４】
実施例9：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(4-メトキシ-3-メチルベンゾイル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００８５】
【化２７】
2018527379.tif 000029
1H NMR (400MHz、メタノール-d4)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.13-6.54 (m、4H)、5.11-4.97 (m、1H)、4.30-4.14 (m、2H)、4.08-3.78 (m、4H)、3.74-3.44 (m、3H)、3.25-2.89 (m、4H)、2.79-2.62 (m、2H)、2.55-2.24 (m、3H)、2.23-2.01 (m、5H)、1.99-1.64 (m、6H)、1.16-0.91 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+= 618.64 (M+1)、ES-= 616.68 (M-1)。
【００８６】
実施例10：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(3-フルオロ-2-メトキシベンゾイル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００８７】
【化２８】
2018527379.tif 000030
1H NMR (400MHz、メタノール-d4) δ ppm 7.32-6.89 (m、2H)、6.73-6.50(m、1H)、6.42-6.06 (m、1H)、5.17-4.97 (m、1H)、4.57-4.13(m、3H)、3.86 (s、3H)、3.72-3.19 (m、4H)、3.15-2.85(m、3H)、2.79-2.63(m、2H)、2.55-2.20(m、3H)、2.17-2.02 (m、2H)、2.00-1.62 (m、6H)、1.17-0.92 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+= 622.65(M+1)、ES-= 620.69 (M-1)。
【００８８】
実施例11：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(2,3-ジヒドロベンゾフラン-7-カルボニル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００８９】
【化２９】
2018527379.tif 000031
1H NMR (400MHz、クロロホルム-d)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.21 (d、J=7.0 Hz、1H)、6.95-6.63(m、3H)、5.09 (br. s.、1H)、4.61 (t、J=8.7 Hz、2H)、4.32-4.20(m、2H)、4.15-3.69 (m、2H)、3.60-3.41 (m、2H)、3.23(t、J=8.6Hz、2H)、3.19-3.03(m、2H)、3.02-2.92 (m、2H)、2.79-2.57 (m、2H)、2.41-2.17 (m、3H)、2.16-2.06 (m、2H)、1.96-1.73(m、6H)、1.19-0.98 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+= 616.72 (M+1)、ES-= 614.67 (M+1)。
【００９０】
実施例12：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(シクロヘキサンカルボニル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００９１】
【化３０】
2018527379.tif 000032
1H NMR (400MHz、メタノール-d4)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.00-6.39 (m、1H)、5.03-4.92 (m、1H)、4.32-4.11 (m、2H)、3.83-3.57 (m、4H)、3.20-2.95(m、4H)、2.79-2.63(m、2H)、2.52-2.32 (m、4H)、2.10(br. s.、2H)、1.93-1.76 (m、6H)、1.75-1.59 (m、3H)、1.50-1.11 (m、7H)、1.10-0.90(m、9H)；LCMS(m/z) ES+=580.46 (M+1)、ES-= 578.40(M-1)。
【００９２】
実施例13：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(4-フルオロ-3-メトキシベンゾイル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００９３】
【化３１】
2018527379.tif 000033
1H NMR (400MHz、メタノール-d4)(回転異性体の混合物) δ ppm 7.18-7.00(m、1H)、6.97-6.78 (m、1H)、6.71-6.18 (m、2H)、5.14-4.97 (m、1H)、4.23(t、J=4.6Hz、2H)、4.17-4.02 (m、1H)、3.97-3.45(m、6H)、3.25-2.89 (m、4H)、2.72 (t、J=5.9 Hz、2H)、2.58-2.23(m、3H)、2.18-2.02 (m、2H)、1.99-1.63(m、6H)、1.19-0.91 (m、9H)；LCMS(m/z) ES-= 620.67 (M-1)。
【００９４】
実施例14：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-(2-オキソ-2-(ピペリジン-1-イル)アセチル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００９５】
【化３２】
2018527379.tif 000034
1H NMR (400MHz、メタノール-d4)(回転異性体の混合物) δ ppm 6.62-6.41 (m、1H)、5.02-4.94 (m、1H)、4.23(t、J=5.0 Hz、2H)、3.95-3.68 (m、2H)、3.67-3.39 (m、4H)、3.25-2.97 (m、5H)、2.88-2.62 (m、3H)、2.51-2.37 (m、3H)、2.19-2.03(m、2H)、1.93-1.75(m、6H)、1.74-1.37 (m、6H)、1.16-0.91 (m、9H)；LCMS(m/z) ES-= 607.73(M-1)。
【００９６】
実施例15：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンジル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【００９７】
【化３３】
2018527379.tif 000035
【００９８】
ステップ1
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンジル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート。(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(30mg、0.060mmol)の1,2-ジクロロエタン(1mL)中溶液を、3-フルオロベンズアルデヒド(9.59μl、0.090mmol)で処理した。10分後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(20.44mg、0.096mmol)を添加し、反応を周囲温度で撹拌した。1.5時間後、反応混合物に、さらなる3-フルオロベンズアルデヒド(9.59μl、0.090mmol)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(20.44mg、0.096mmol)を充填した。1時間後、反応混合物を飽和NaHCO3で希釈し、DCMで抽出し、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンジル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(44mg、0.073mmol、120％収率)を淡黄色の油状物として得た。LCMS(m/z) ES+=606.73(M+1)。
【００９９】
ステップ2
(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-3-(3-フルオロベンジル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸。標題化合物を、実施例5、ステップ4と同様の方法で作成した。1H NMR (400MHz、メタノール-d4) δ ppm 7.60-7.49 (m、1H)、7.41-7.22 (m、3H)、6.97-6.48 (m、1H)、5.05-4.95(m、1H)、4.38 (s、2H)、4.23(t、J=5.1Hz、2H)、3.84-3.62 (m、2H)、3.56-3.36 (m、2H)、3.21-2.94 (m、4H)、2.73(t、J=6.1Hz、2H)、2.50-2.37 (m、3H)、2.20-2.02 (m、2H)、1.95-1.85(m、3H)、1.84-1.70(m、3H)、1.07 (s、8H)、0.95(s、1H)；LCMS(m/z) ES+=578.78 (M+1)、ES-= 576.66 (M-1)。
【０１００】
実施例16：(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(2-シクロヘキシルエチル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【０１０１】
【化３４】
2018527379.tif 000036
【０１０２】
1H NMR (400MHz、メタノール-d4) δ ppm 6.67-6.42 (m、1H)、4.99 (s、1H)、4.23(t、J=5.1Hz、2H)、3.86-3.70(m、2H)、3.56-3.37 (m、2H)、3.26-2.93(m、6H)、2.73(t、J=6.5 Hz、2H)、2.49-2.40(m、3H)、2.18-2.05(m、2H)、1.95-1.85(m、3H)、1.85-1.16 (m、14H)、1.11-0.92 (m、11H)；LCMS(m/z) ES+= 580.48 (M+1)、ES-= 578.77 (M-1)。
【０１０３】
実施例17：(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(シクロヘキシルメチル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【０１０４】
【化３５】
2018527379.tif 000037
1H NMR (400MHz、メタノール-d4) δ ppm 7.00-6.38 (m、1H)、5.07-4.95(m、1H)、4.23(t、J=4.9 Hz、2H)、3.87-3.63(m、2H)、3.54-3.37 (m、2H)、3.21-3.08 (m、2H)、3.07-2.91 (m、4H)、2.73(t、J=5.5 Hz、2H)、2.50-2.37 (m、3H)、2.21-2.04 (m、2H)、2.00-1.67 (m、12H)、1.49-1.18 (m、3H)、1.17-0.89 (m、11H)；LCMS(m/z) ES+=566.50(M+1)。
【０１０５】
実施例18：(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-シクロヘキシル-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【０１０６】
【化３６】
2018527379.tif 000038
1H NMR (400MHz、メタノール-d4) δ ppm 6.99-6.38 (m、1H)、5.12-4.96 (m、1H)、4.41-4.06 (m、2H)、3.89-3.62 (m、2H)、3.61-3.39 (m、2H)、3.23-2.95(m、4H)、2.84-2.59 (m、2H)、2.55-2.32 (m、3H)、2.23-2.01 (m、4H)、2.00-1.63(m、9H)、1.63-1.48 (m、2H)、1.47-1.28 (m、3H)、1.27-1.15(m、1H)、1.14-0.87 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+=552.47 (M+1)、ES-= 550.46 (M+1)。
【０１０７】
実施例19：(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-フェニル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【０１０８】
【化３７】
2018527379.tif 000039
【０１０９】
ステップ1
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-フェニル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート。(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(35mg、0.070mmol)のテトラヒドロフラン(2mL)中溶液を、ヨードベンゼン(0.024mL、0.211mmol)及びルホスPd G1メチル-t-ブチルエーテル付加物(5.74mg、7.03μmol)で処理した。10分後、反応混合物をLiHMDS(0.176mL、0.176mmol)で滴下処理した。3時間後、反応混合物に、さらなるヨードベンゼン(25μL)、ルホスパラダサイクル(6mg)、及びLiHMDS(180μL)を充填した。18時間後、反応混合物を0℃に冷却し、飽和水性NH4Clでクエンチし、EtOAcで抽出し、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0〜40％のEtOAc/ヘキサン)により精製し、標題化合物(31.2mg、0.054mmol、77％収率)を黄色の油状物として得た。LCMS(m/z) ES+=574.73(M+1)。
【０１１０】
ステップ2
(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-フェニル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸。標題化合物を、実施例5、ステップ4と同様の方法で作成した。1H NMR (400MHz、メタノール-d4) δ ppm 7.67-7.38 (m、5H)、7.03-6.47 (m、1H)、5.06-4.97 (m、1H)、4.32-4.15(m、2H)、3.89-3.68 (m、4H)、3.50-3.36 (m、4H)、2.80-2.67 (m、2H)、2.55-2.41 (m、3H)、2.20-2.05(m、2H)、1.98-1.75(m、6H)、1.09 (br. s.、8.2H)、0.96 (br. s.、0.8H)；LCMS(m/z) ES+=546.48 (M+1)、ES-= 544.65(M-1)。
【０１１１】
実施例20：(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(シクロヘキシルスルホニル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【０１１２】
【化３８】
2018527379.tif 000040
【０１１３】
ステップ1
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(シクロヘキシルスルホニル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート。(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(35mg、0.070mmol)のジクロロメタン(1.4mL)中溶液を、Et3N(0.029mL、0.211mmol)、シクロヘキサンスルホニルクロリド(0.015mL、0.105mmol)で処理した。2時間後、反応混合物をさらなるEt3N(50μL)、及びシクロヘキサンスルホニルクロリド(30μL)で処理した。18時間後、反応混合物を飽和NaHCO3で希釈し、DCMで抽出し、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0〜70％のEtOAc/ヘキサン)により精製し、標題化合物(14.6mg、0.023mmol、32.2％収率)を無色の油状物として得た。LCMS(m/z) ES+=666.72 (M+23)。
【０１１４】
ステップ2
(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-3-(シクロヘキシルスルホニル)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸。標題化合物を、実施例5、ステップ4と同様の方法で作成した。1H NMR (400MHz、メタノール-d4) δ ppm 7.10-6.49 (m、1H)、5.02-4.94 (m、1H)、4.22 (t、J=5.1Hz、2H)、3.60-3.38 (m、4H)、3.22-3.02 (m、4H)、2.99-2.87 (m、1H)、2.72 (t、J=6.2Hz、2H)、2.47-2.36 (m、3H)、2.18-2.05(m、2H)、2.04-1.91 (m、2H)、1.87-1.76 (m、7H)、1.71-1.60(m、1H)、1.45-1.13(m、6H)、1.12-0.90(m、9H)；LCMS(m/z) ES-= 614.69 (M-1)。
【０１１５】
実施例21：(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-(ピペリジン-1-イルスルホニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【０１１６】
【化３９】
2018527379.tif 000041
【０１１７】
ステップ1
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-(ピペリジン-1-イルスルホニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート。(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(45mg、0.090mmol)のジクロロメタン(1.8mL)中溶液を、Et3N(0.038mL、0.271mmol)、及びピペリジン-1-スルホニルクロリド(0.019mL、0.136mmol)で処理した。1.5時間後、反応混合物をさらなるEt3N(20μL)、ピペリジン-1-スルホニルクロリド(10μL)で処理した。2時間後、反応混合物を飽和NaHCO3で希釈し、DCMで抽出し、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、標題化合物(137.1mg、0.213mmol)を淡黄色の油状物として得た。LCMS(m/z) ES+=667.52 (M+Na)。
【０１１８】
ステップ2
(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-(ピペリジン-1-イルスルホニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸。標題化合物を、実施例5、ステップ4と同様の方法で作成した。1H NMR (400MHz、クロロホルム-d) δ ppm 6.70(d、J=11.1Hz、1H)、5.09 (br. s.、1H)、4.27 (t、J=5.0 Hz、2H)、3.46 (br. s.、4H)、3.10(br. s.、8H)、2.81-2.56 (m、2H)、2.31 (s、3H)、2.19-2.06 (m、2H)、1.93-1.79 (m、6H)、1.66-1.43(m、6H)、1.21-0.98 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+=617.47 (M+1)、ES-= 615.38 (M-1)。
【０１１９】
実施例22：(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-(ピペリジン-1-カルボニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸
【０１２０】
【化４０】
2018527379.tif 000042
【０１２１】
ステップ1
(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-(ピペリジン-1-カルボニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート。ホスゲン(トルエン中20％)(0.120mL、0.226mmol)のテトラヒドロフラン(0.5mL)中氷冷溶液を、(2S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)アセテート(45mg、0.090mmol)のテトラヒドロフラン(1mL)中溶液に滴下処理した。40分後、反応混合物をさらなるホスゲン(100μL)で処理した。1.5時間後、反応混合物を真空中で濃縮し、残渣をTHF(1mL)に溶解させた。反応混合物を0℃に冷却し、ピリジン(8.04μl、0.099mmol)及びピペリジン(0.045mL、0.452mmol)で処理した。1時間後、反応混合物を氷水で希釈し、EtOAcで抽出し、1N HCl、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、標題化合物(53.9mg、0.089mmol、98％収率)を無色の油状物として得た。LCMS(m/z) ES+=631.5(M+1)。
【０１２２】
ステップ2
(2S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((M)-8-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-6,9-ジメチル-3-(ピペリジン-1-カルボニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[d]アゼピン-7-イル)酢酸。標題化合物を、実施例5、ステップ4と同様の方法で作成した。1H NMR (400MHz、クロロホルム-d) δ ppm 6.71 (d、J=11.3Hz、1H)、5.07 (br. s.、1H)、4.27 (t、J=5.0 Hz、2H)、3.56-3.33(m、4H)、3.16-2.96 (m、8H)、2.79-2.58 (m、2H)、2.31 (s、3H)、2.18-2.06 (m、2H)、1.92-1.80(m、6H)、1.53(br. s.、6H)、1.18-0.97 (m、9H)；LCMS(m/z) ES+=581.49 (M+1)、ES-= 579.43(M+1)。
【０１２３】
抗HIV活性
MT4アッセイ
表1の本発明の化合物についての抗ウイルスHIV活性及び細胞毒性の値は、既述された方法に基づいて、HTLV-1形質転換細胞株MT-4において並行して測定した(Hazenら、2007、他の抗レトロウイルスと組み合わせた、一団のプロテアーゼ阻害耐性HIV剤に対する、新規のチロシル系ヒト免疫不全ウイルス(HIV)1型プロテアーゼ阻害剤ブレカナビル(GW640385)のin vitro抗ウイルス活性(Hazenら、“In vitro antiviral activity of the novel, tyrosyl-based human immunodeficiency virus (HIV) type 1 protease inhibitor brecanavir (GW640385) in combination with other antiretrovirals and against a panel of protease inhibitor-resistant HIV", Antimicrob. Agents Chemother. 2007, 51: 3147-3154;及びPauwelsら、“Sensitive and rapid assay on MT-4 cells for the detection of antiviral compounds against the AIDS virus", J. of Virological Methods 1987, 16: 171-185)。
【０１２４】
ルシフェラーゼ活性は、cell titer glo(Promega、Madison、Wis.)を添加することにより、96時間後に測定した。細胞保護阻害率(%)のデータを化合物なしの対照に対してプロットした。同じ条件で、化合物の細胞毒性は、cell titer Glo(商標)(Promega、Madison、Wis)を用いて決定した。IC50は、各化合物について3〜4倍の連続希釈を用いて10点用量反応曲線から決定し、濃度範囲は1000倍超である。
【０１２５】
これらの値は、標準的な4パラメータロジスティック方程式を用いて化合物のモル濃度に対してプロットした。
y=((Vmax*x^n)/(K^n+x^n))+Y2
ここで、
Y2=最小のy、n=傾斜因子
Vmax=最大のy、x=化合物濃度 [M]
K=EC50
【０１２６】
MT4アッセイで試験したとき、化合物は、表1に示したIC50の値を有することが分かった。
【０１２７】
【表１】
2018527379.tif 000043
【国際調査報告】
2018527379.tif 000047
2018527379.tif 000048