(57)【要約】本発明は、淡明細胞型腎細胞癌などの進行した形態のがんを有する患者を処置する方法であって、ＴＫＩ療法で一般的に起こる血管新生逃避を低減するためにＸ４Ｐ−００１が投与される、方法に関する。本方法は、比較的低い毒性で、腫瘍のサイズおよび細胞数の退行を含む驚くべき結果を実証する。本発明は、がんを処置するための方法、特に、腎細胞癌などのがんにおいてＶＥＧＦ−Ｒアンタゴニストによる処置への抵抗性を克服するための方法に関する。
2018537538.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む組成物：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  前記組成物の約３０〜４０重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  前記組成物の約２０〜２５重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  前記組成物の約３０〜３５重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  前記組成物の約５〜１０重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  前記組成物の約０．５〜２重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  前記組成物の約０．１〜１．０重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  前記組成物の約０．１〜１．０重量％。
【請求項２】
以下を含む組成物：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  前記組成物の約８〜２５重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  前記組成物の約６５〜８５重量％；
（ｃ）クロスカルメロースナトリウム  −  前記組成物の約２〜１０重量％；
（ｄ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  前記組成物の約０．１〜３重量％；および
（ｅ）コロイド状二酸化ケイ素  −  前記組成物の約０．０５〜０．７重量％。
【請求項３】
以下を含む組成物：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  前記組成物の約２５〜４５重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  前記組成物の約１０〜３５重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  前記組成物の約１５〜４５重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  前記組成物の約２〜１０重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  前記組成物の約０．３〜２．５重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  前記組成物の約０．０５〜１．２重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  前記組成物の約０．２〜１．２重量％。
【請求項４】
以下を含む組成物：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  前記組成物の約３５〜７５重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  前記組成物の約５〜２８重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  前記組成物の約７〜３０重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  前記組成物の約２〜１０重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  前記組成物の約０．３〜２．５重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  前記組成物の約０．０５〜１．２重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  前記組成物の約０．２〜１．２重量％。
【請求項５】
前記Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩が、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇまたは約１２００ｍｇの量で存在する、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
約３７重量％のＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
約１００ｍｇのＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
以下を含む、請求項１に記載の組成物：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  前記組成物の約３７重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  前記組成物の約２３重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  前記組成物の約３２重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  前記組成物の約６重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  前記組成物の約１重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  前記組成物の約０．３重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  前記組成物の約０．５重量％。
【請求項９】
約１５重量％のＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１０】
約２５ｍｇのＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項１１】
以下を含む、請求項２に記載の組成物：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  前記組成物の約１４．７重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  前記組成物の約７８．１重量％；
（ｃ）クロスカルメロースナトリウム  −  前記組成物の約６．０重量％；
（ｄ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  前記組成物の約１．０重量％；および
（ｅ）コロイド状二酸化ケイ素  −  前記組成物の約０．２重量％。
【請求項１２】
約３８重量％のＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項１３】
約１００ｍｇのＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項１４】
以下を含む、請求項３に記載の組成物：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  前記組成物の約３７．６重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  前記組成物の約２２．９重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  前記組成物の約３１．７重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  前記組成物の約６．０重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  前記組成物の約１．０重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  前記組成物の約０．３重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  前記組成物の約０．５重量％。
【請求項１５】
約６１重量％のＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項１６】
約２００ｍｇのＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項１７】
以下を含む、請求項４に記載の組成物：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  前記組成物の約６１．５重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  前記組成物の約１２．９重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  前記組成物の約１７．８重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  前記組成物の約６．０重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  前記組成物の約１．０重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  前記組成物の約０．３重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  前記組成物の約０．５重量％。
【請求項１８】
請求項１から１７のいずれか一項に記載の組成物を含む単位剤形。
【請求項１９】
カプセル剤の形である、請求項１８に記載の単位剤形。
【請求項２０】
それを必要とする患者においてがんを処置するための方法であって、前記患者に請求項１から１７のいずれか一項に記載の組成物を投与することを含む方法。
【請求項２１】
前記がんが難治性である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記患者がチロシンキナーゼ阻害剤で以前に処置されており、前記患者が血管新生逃避によって前記チロシンキナーゼ阻害剤への抵抗性を示していた、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記がんが、腎細胞癌（ＲＣＣ）、固形腫瘍、膵臓、腎臓、結腸直腸、肺、乳房、甲状腺または胃新生物、神経膠芽腫、肝細胞癌または肝がん、メラノーマ、眼内メラノーマ、前立腺がん、非小細胞肺がん、腎臓腫瘍、腎臓癌（淡明細胞型および乳頭状の腎臓癌を含む）または腎臓がん、結腸直腸がん、進行した胃がん、悪性中皮腫、神経線維腫症、シュワン鞘腫、軟部組織肉腫、頭頸部扁平上皮癌、鼻咽頭癌、腺癌、神経内分泌癌、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、褐色細胞腫、パラガングリオーマ、リンパ腫、マントル細胞がん、消化管間質腫瘍または膵臓腺管癌から選択される、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記がんが、進行した腎細胞癌（ＲＣＣ）、淡明細胞型腎臓癌（ｃｃＲＣＣ）または乳頭状腎臓癌である、請求項２０から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記がんがｃｃＲＣＣである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩の１日に約１００ｍｇから約１２００ｍｇの投薬量が前記患者に投与される、請求項２０から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩の１日に約２００ｍｇから約６００ｍｇの投薬量が前記患者に投与される、請求項２０から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩の１日に約１００ｍｇから約４００ｍｇの投薬量が前記患者に投与される、請求項２０から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
約２５ｍｇ、約１００ｍｇまたは約２００ｍｇのＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む単位剤形が前記患者に投与される、請求項２０から２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記単位剤形が１日２回経口投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記単位剤形が概ね１２時間空けて投与される、請求項３０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、がんを処置するための方法、特に、腎細胞癌などのがんにおいてＶＥＧＦ−Ｒアンタゴニストによる処置への抵抗性を克服するための方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
関連出願への相互参照
本出願は、２０１５年１２月１４日に出願された米国仮特許出願番号第６２／２６７，０５２号、２０１５年１２月２２日に出願された米国仮特許出願番号第６２／２７１，０８７号、２０１６年１月２２日に出願された米国仮特許出願番号第６２／２８１，９６２号、および２０１６年１２月１日に出願された米国仮特許出願番号第６２／４２８，９６４号に基づく優先権の利益を主張しており、これら各々の全体は参考として本明細書中に援用される。
【０００３】
発明の背景
散発性の淡明細胞型腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）を有する患者の約７５％では、一般的に突然変異によるが、高メチル化によるサイレンシングにもよる、ＶＨＬ遺伝子の機能的喪失がある。ＶＨＬはフォンヒッペル・リンダウ腫瘍抑制タンパク質をコードし、それは低酸素誘導因子（ＨＩＦ）−αのタンパク質分解を媒介する［２］。この機能の喪失は、ＨＩＦ−αレベルの増加、ＶＥＧＦの発現の増加、腫瘍血管新生、および究極的にはこれらの悪性腫瘍に特徴的な血管過多をもたらす。ＶＥＧＦシグナル伝達経路をブロックするチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）、例えばスニチニブ、アキシチニブ、ソラフェニブまたはパゾパニブ、および循環するＶＥＧＦに結合し、したがってリガンドがＶＥＧＦ受容体に結合することを阻止するモノクローナル抗体であるベバシズマブを含む、ＶＥＧＦ経路の活性化をブロックする複数の薬剤が、転帰を改善することが示されている。
【０００４】
ｃｃＲＣＣにおけるそのような血管新生阻害剤の有益性が実証されているにもかかわらず、このアプローチは治癒的ではない。多くの患者が最初は応答するが、そのほとんどは再発および進行を経験する。処置抵抗性を阻止または遅延させることによって転帰を改善する薬剤に対する明白な満たされていない必要性がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の特定の実施形態の詳細な説明
ＣＸＣＲ４（Ｃ−Ｘ−Ｃケモカイン受容体４型）は、ＣＸＣＬ１２（Ｃ−Ｘ−Ｃケモカインリガンド１２型；ＳＤＦ−１α、間質由来の因子１αとも呼ばれる）のための受容体である。ＣＸＣＬ１２はリンパ球およびＭＤＳＣ（骨髄由来のサプレッサー細胞）に強い走化活性を有し、骨髄への造血幹細胞のホーミングにおいて重要である。ＣＸＣＲ４は、ｃｃＲＣＣ、卵巣がんおよびメラノーマを含む数種類のヒトがんでも発現されて、活性であり、腫瘍細胞でのＣＸＣＲ４の発現の増加は有意に減少した全体的患者生存と関連付けられている［３，４，５，６］。
【０００６】
ＣＸＣＬ１２／ＣＸＣＲ４軸を、血管新生阻害剤に対する腫瘍応答性の欠如（または喪失）（「血管新生逃避（ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｅｓｃａｐｅ）」とも呼ばれる）への寄与に結びつける複数の知見がある。動物がんモデルでは、ＣＸＣＲ４機能に対する干渉は、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）を破壊すること、ならびに腫瘍血管再生を排除すること［７，８］、およびＣＤ８＋Ｔ細胞対Ｔｒｅｇ細胞の比を増加させること［７，９，１０］を含む、複数の機構による免疫性攻撃に腫瘍を曝露することが実証された。これらの効果は、異種移植、同系ならびにトランスジェニックがんモデルにおいて、有意に減少した腫瘍負荷および全体的生存の増加をもたらす［７，９，８］。
【０００７】
Ｘ４Ｐ−００１は、固体および液体腫瘍モデルで活性を実証し［１２、および未発表のデータ］、以前に（呼称ＡＭＤ０７０およびＡＭＤ１１０７０の下で）、合計７１人の健康なボランティア［１１，１３，１４］およびＨＩＶ感染対象［１５，１６］を含むフェーズ１および２ａ治験に入れられた、強力で経口的に生物が利用可能であるＣＸＣＲ４アンタゴニストである［１１］。これらの研究は、３．５日間に１日２回の最高４００ｍｇ（健康ボランティア）および８〜１０日間に１日２回の２００ｍｇ（健康ボランティアおよびＨＩＶ患者）の経口投与は十分に寛容性があり、有害事象または臨床的に有意な検査変化のパターンがないことを実証した。これらの研究は、循環白血球（ＷＢＣ）の用量および濃度関連の変化；ならびに高い組織浸透度を示唆する高い分布量（ＶＬ）で、薬力学的活性も実証した。
【０００８】
ＶＥＧＦ標的化療法への獲得抵抗性の機構に関する本発明者らの一部による初期の研究は、スニチニブ処置による処置が、ＣＤ１１ｂ＋／Ｇｒ−１＋骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）による腎細胞癌（ＲＣＣ）異種移植の浸潤の顕著な増加をもたらしたことを実証した（１）。これらの細胞は、ＶＥＧＦ標的化薬剤を含む多様な抗がん療法群への抵抗性の発達に繰り返し結びつけられている（２〜５）。本発明者らは、ＭＤＳＣの流入ならびにスニチニブ抵抗性の発達が、ＨＤＭ２アンタゴニストＭＩ−３１９（Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）、その生物学的効果がｐ５３の上方制御を通して主に媒介される薬物の同時投与によって阻止できることをさらに観察した。腫瘍組織へのＭＤＳＣ輸送はケモカインによって調節され、その多く（例えば、ＳＤＦ−１およびＣＸＣＬ−１２）は低酸素に対するＨＩＦ依存性の応答として生成される。ｐ５３はＳＤＦ−１転写を直接的に抑圧することが公知であるが（６）、本発明者らはＭＩ−３１９がＨＩＦ−２発現を抑制することを示し、この薬物がＳＤＦ−１発現に直接的および間接的な効果を及ぼすことができることを示唆する。これらのデータに基づいて、本発明者らは、ＭＩ−３１９がケモカイン（例えばＳＤＦ−１）生成の抑制を通してＭＤＳＣへのその効果を媒介する可能性を考えた。腫瘍溶解物の以降のウェスタンブロット分析は、この仮説を確認した。
【０００９】
これらの知見は、スニチニブ抵抗性を阻止するＭＩ−３１９の能力がＳＤＦ−１生成およびＭＤＳＣ動員の抑制に少なくとも一部よるかもしれないことを示唆した。これが正しい限り、本発明者らは、ＳＤＦ−１／ＣＸＣＲ４シグナル伝達を直接的にブロックする薬剤（例えば、ＡＭＤ１１０７０）が、ＭＤＳＣ輸送に及ぼすＨＤＭ２遮断の効果を繰り返して、スニチニブ抵抗性を阻止するかもしれないと考えた。
【００１０】
さらに、ＨＤＭ２アンタゴニストと異なって、ＣＸＣＲ４標的化薬物は骨髄および他の正常増殖細胞集団において細胞周期静止を誘導しないと予想されるので、そのような結果は比較的小さい毒性で達成されるかもしれないと本発明者らは考えた。したがって、本発明は、ＲＣＣにおけるＭＤＳＣ輸送、分化および腫瘍細胞遺伝子発現に対するＣＸＣＲ４阻害剤ＡＭＤ１１０７０（Ｘ４Ｐ−００１）の低毒性および効果を利用して、処置転帰におけるかなりの利点を提供する。
【００１１】
Ｘ４Ｐ−００１によるＣＸＣＲ４拮抗は、進行したｃｃＲＣＣおよび他のがんの患者において複数の機構によってかなりの処置恩恵を提供することができる、かなりの効果を提供することが今や見出された。Ｘ４Ｐ−００１の投与はＭＤＳＣの動員を減少させ、抗腫瘍免疫性攻撃の増加をもたらした。Ｘ４Ｐ−００１の投与は、新血管形成および腫瘍血管供給の減少をさらに持続し、ＣＸＣＲ４およびその唯一のリガンドＣＸＣＬ１２両方の、ｃｃＲＣＣによる発現増加のオートクリン効果を妨害し、それによってがん細胞転移を潜在的に低減する。Ｘ４Ｐ−００１（ＣＸＣＲ４アンタゴニスト）をアキシチニブなどのＴＫＩ阻害剤と逐次的に（例えば、別個の単位剤形として同時に投与するか、または別個の単位剤形として最高１２時間空けて異なる時間に投与する）または同時並行して（例えば、一緒にとられる）投与することは、腫瘍とＭＤＳＣの間の情報交換をブロックし、ＨＩＦ−２α発現を抑制し、ＭＤＳＣ腫瘍浸潤を低減し、抗腫瘍処置効果を相当に改善する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１Ａおよび１Ｂは、実施例１に記載の、Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブの組合せで処置した腫瘍異種移植の２匹のマウスモデルにおいて観察された腫瘍退行の増加を図示する。図１Ａは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置したマウスにおける、マウス７８６−０異種移植の処置の腫瘍体積に及ぼす相対効果を示す。図１Ｂは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１の単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せによるマウスＡ４９８異種移植の処置の腫瘍体積に及ぼす相対効果を示す。腫瘍小結節が約７ｍｍの平均直径に到達したとき、処置を開始した。
【００１３】
【図２】図２Ａ〜２Ｄは、対照（図２Ａ）、アキシチニブ（図２Ｂ）もしくはＸ４Ｐ−００１（図２Ｃ）で単一の薬剤として、またはＸ４Ｐ−００１およびアキシチニブの組合せ（図２Ｄ）で処置したマウスにおける、実施例１に記載のマウス７８６−０異種移植モデルで観察された腫瘍細胞死の増加を図示する。
【００１４】
【図３ＡＢ】図３Ａ〜３Ｄは、対照（図３Ａ）、アキシチニブ（図３Ｂ）もしくはＸ４Ｐ−００１（図３Ｃ）で単一の薬剤として、またはＸ４Ｐ−００１およびアキシチニブの組合せ（図３Ｄ）で処置したマウスにおける、実施例１に記載のマウス４９８異種移植モデルで観察された腫瘍細胞死の増加を図示する。
【図３ＣＤ】図３Ａ〜３Ｄは、対照（図３Ａ）、アキシチニブ（図３Ｂ）もしくはＸ４Ｐ−００１（図３Ｃ）で単一の薬剤として、またはＸ４Ｐ−００１およびアキシチニブの組合せ（図３Ｄ）で処置したマウスにおける、実施例１に記載のマウス４９８異種移植モデルで観察された腫瘍細胞死の増加を図示する。
【００１５】
【図４】図４Ａ〜４Ｄは、Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブの組合せで処置した、実施例１に記載の腫瘍異種移植の２匹のマウスモデルで観察されたＫｉ−６７＋およびＣＤ３４＋細胞の存在の減少を図示する。図４Ａは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置した後の、マウス７８６−０異種移植モデルにおける腫瘍細胞によるＫｉ−６７の発現の相対的優位を示す。図４Ｂは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置した後の、マウス７８６−０異種移植モデルにおける腫瘍細胞によるＣＤ３４の発現の相対的優位を示す。図４Ｃは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置した後の、マウスＡ４９８異種移植モデルにおける腫瘍細胞によるＫｉ−６７の発現の相対的優位を示す。図４Ｄは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置した後の、マウスＡ４９８異種移植モデルにおける腫瘍細胞によるＣＤ３４の発現の相対的優位を示す。全ての場合で、Ｘ４Ｐ−００１で処置したマウスと比較して、この組合せで処置したマウスにおいて、Ｋｉ−６７およびＣＤ３４の発現の低減は有意に低減された（ｐ＜０．０５）。
【００１６】
【図５】図５Ａ〜５Ｄは、Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブの組合せで処置したマウスにおける、実施例１に記載の腫瘍異種移植の２匹のマウスモデルで観察されたＭＤＳＣ浸潤の有意な低減を図示する。図５Ａは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置した後の、マウス７８６−０異種移植モデルの異種移植におけるＭＤＳＣ浸潤領域の相対的低減を示す。図５Ｂは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置した後の、マウスＡ４９８異種移植モデルの異種移植におけるＭＤＳＣ浸潤領域の相対的低減を示す。図５Ｃは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置した後の、マウス７８６−０異種移植モデルの異種移植に浸潤したＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋ＧＲ−１＋）細胞の相対数を示す。図５Ｄは、対照、アキシチニブまたはＸ４Ｐ−００１で単一の薬剤として、およびＸ４Ｐ−００１とアキシチニブの組合せで処置した後の、マウスＡ４９８異種移植モデルの異種移植に浸潤したＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋ＧＲ−１＋）細胞の相対数を示す。
【００１７】
【図６】図６および図７は、それぞれ低電力（図６）および高電力（図７）の下でアキシチニブ単独で処置した７８６−０異種移植に浸潤したＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋ＧＲ−１＋）を、免疫蛍光法（ＩＦ）によって図示する。
【図７】図６および図７は、それぞれ低電力（図６）および高電力（図７）の下でアキシチニブ単独で処置した７８６−０異種移植に浸潤したＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋ＧＲ−１＋）を、免疫蛍光法（ＩＦ）によって図示する。
【００１８】
【図８】図８は、Ｘ４Ｐ−００１の２００ｍｇカプセルを製造するための工程流れ図を図示する。
【００１９】
【図９】図９は、Ｘ４Ｐ−００１の２００ｍｇカプセル充てん量の測定値対理論的カプセル充てん量を図示する。
【００２０】
【図１０】図１０は、開発したＸ４Ｐ−００１  ２００ｍｇカプセルの溶解プロファイル対Ｘ４Ｐ−００１  １００ｍｇカプセルの溶解プロファイルを図示する。
【００２１】
【図１１】図１１は、Ｘ４Ｐ−００１で処置した７８６異種移植のウェスタンブロットが、アキシチニブ処置によって引き起こされたものに対してＨＩＦ−２αのレベルの低減を示したことを図示する。
【００２２】
【図１２】図１２は、アキシチニブがマイクロＲＮＡ  ｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃを抑制したこと、ならびに、アキシチニブへのＸ４Ｐ−００１の追加が処置の８日後にｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃの増加をもたらしたことを図示する（７８６−０異種移植腫瘍）。アキシチニブ＋／−Ｘ４Ｐ−００１で処置した異種移植の腫瘍からのｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃマイクロＲＮＡおよびＨＩＦ−２α  ｍＲＮＡの発現。データは、平均の対照値（左側）と比較したｍｉｒ−３０ａまたはｍｉｒ−３０ｃ発現および相対的なＨＩＦ−２α  ＲＮＡ発現として提示される。
【００２３】
【図１３】図１３は、７８６異種移植腫瘍において処置の８日後に、アキシチニブおよびＸ４Ｐ−００１が一緒に作用してＨＩＦ−２α発現を低減することを図示する。
【００２４】
【図１４】図１４Ａ〜Ｃは、ｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃ誘導ならびにＨＩＦ−２α低減に及ぼすｉｎ  ｖｉｔｒｏでの７８６低酸素細胞へのＸ４Ｐ−００１処置の効果を図示する。図１４Ａは、正常酸素および低酸素（１％Ｏ２）条件においてＸ４Ｐ−００１で２４時間処置した７８６細胞のウェスタンブロットを示す。図１４Ｂは、図１４Ａの同じ細胞からのｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃマイクロＲＮＡならびに（図１４Ｃ）全体のＨＩＦ−２α  ＲＮＡ発現を図示する。
【００２５】
【図１５】図１５Ａは、Ａ３７５細胞または構成的に活性であるＳｔａｔ３構築物でトランスフェクトしたＡ３７５細胞の溶解物からのウェスタンブロット結果を図示する。細胞は、正常酸素または低酸素条件においてＸ４Ｐ−００１で２４時間処置した。図１５Ｂはｍｉｒ−３０ｃマイクロＲＮＡを示し、図１５Ｃは図１５Ａの同じ細胞からの全体のＲＮＡ発現を示す。したがって、ＨＩＦ−２αの抑制およびｍｉｒ−３０ａおよび３０ｃの誘導は、Ｓｔａｔ３発現に依存する。Ｓｔａｔ３は、ＣＸＣＬ１２によって媒介される腫瘍浸潤の促進において重要であることが公知である。
【００２６】
【図１６】図１６は、１０ｍｇ、２５ｍｇおよび１００ｍｇカプセルの開発で使用されたＸ４Ｐ−００１バッチの粒径分布を図示する。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
本発明では、淡明細胞型腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）などのがんの進行した形態を有する患者は、Ｘ４Ｐ−００１により、単剤（単独療法）として、または、ｃｃＲＣＣを有する患者の第二選択の処置のために承認された小分子チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）であるアキシチニブと組み合わせて処置される。
【００２８】
いかなる特定の理論にも束縛されることを望まないが、２つの医薬を組み合わせることによって、ＴＫＩ療法で一般的に起こる血管新生逃避を低減することによって、患者の処置転帰をさらに改善することができると考えられる。
【００２９】
一部の実施形態では、Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩は、空腹状態の患者に投与される。
【００３０】
一部の実施形態では、本発明は、固形腫瘍として現れるがんの患者を処置するための方法を提供する。一部の実施形態では、患者は、腎臓がん、腎臓腫瘍、腎臓癌（淡明細胞型および乳頭状の腎臓癌を含む）、卵巣がんまたはメラノーマを有する。
【００３１】
一部の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者において難治性がんを処置するための方法であって、Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩および／もしくは組成物を投与することを含む方法を提供する。ある特定の実施形態では、患者はプロテインキナーゼ阻害剤を以前に投与されている。一部の実施形態では、患者はＶＥＧＦ−Ｒアンタゴニストを以前に投与された。一部の実施形態では、患者は、アキシチニブ（Ｉｎｌｙｔａ）（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．、ＮＹ、ＵＳＡ）、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標）Ｂａｙｅｒ  ＡＧおよびＯｎｙｘ）；スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ、Ｐｆｉｚｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＵＳ）；パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐａｒｋ、ＵＳ）；カボザンチニブ（cabozanitib）（Ｃｏｍｅｔｒｉｑ、Ｅｘｅｌｅｘｉｓ、ＵＳ）；レゴラフェニブ（Ｓｔｉｖａｒｇａ、Ｂａｙｅｒ）；レンバチニブ（Ｌｅｎｖｉｍａ、Ｅｉｓａｉ）；ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ、Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆ．のＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、から選択されるＶＥＧＦ−Ｒアンタゴニスト、抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体；および、ＶＥＧＦトラップ（Ｚａｌｔｒａｐ；Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ／Ｓａｎｏｆｉ）としても公知であるアフリベルセプトを以前に投与されている。開発中の、本発明で使用することができる他のキナーゼ阻害剤／ＶＥＧＦ−Ｒアンタゴニストには、チボザニブ（Ａｖｅｏ  Ｐｈａｒｍａｅｃｕｔｉｃａｌｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＭＡ）；バタラニブ（Ｂａｙｅｒ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ、Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）；ルシタニブ（Ｃｌｏｖｉｓ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）；ドビチニブ（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＣＥＰ−１１９８１（Ｃｅｐｈａｌｏｎ、ＵＳ）；リニファニブ（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ａｂｂｏｔｔ  Ｐａｒｋ、ＵＳ）；ＰＴＣ２９９（ＰＴＣ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｓｏｕｔｈ  Ｐｌａｉｎｆｉｅｌｄ、ＵＳ）；ＣＰ−５４７，６３２（Ｐｆｉｚｅｒ）；フォレチニブ（Ｅｘｅｌｅｘｉｓ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）；およびモテサニブ（Ａｍｇｅｎ、Ｔａｋｅｄａ）が含まれる。
【００３２】
ある特定の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者においてがんを処置するための方法であって、前記患者にＸ４Ｐ−００１をチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。ある特定の実施形態では、Ｘ４Ｐ−００１およびチロシンキナーゼ阻害剤は、同時にまたは逐次的に投与される。ある特定の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、アキシチニブ、スニチニブ、ソラフェニブ、パゾパニブ、カボザンチニブまたはレゴラフェニブから選択される。本発明の一部の実施形態では、Ｘ４Ｐ−００１はアキシチニブと組み合わせて投与される。
【００３３】
アキシチニブ（Ｉｎｌｙｔａ（登録商標）Ｐｆｉｚｅｒ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）は、キナーゼ阻害剤である。アキシチニブは、治療的な血漿中濃度で血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）−１、ＶＥＧＦＲ−２およびＶＥＧＦＲ−３を含む受容体チロシンキナーゼを阻害することが示されている。これらの受容体は、病的な血管新生、腫瘍増殖およびがん進行と結びつけられている。ＶＥＧＦ媒介内皮細胞増殖および生存は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびマウスモデルにおいてアキシチニブによって阻害された。腫瘍異種移植マウスモデルにおいて、アキシチニブは腫瘍増殖およびＶＥＧＦＲ−２のリン酸化を阻害することが示された。アキシチニブは、化学名Ｎ−メチル−２−［３−（（Ｅ）−２−ピリジン−２−イル−ビニル）−１Ｈ−インダゾール−６−イルスルファニル］−ベンズアミドを有する。分子式はＣ２２Ｈ１８Ｎ４ＯＳであり、分子量は３８６．４７ダルトンである。化学構造を、下に表す。
【化１】
2018537538.tif 000003
【００３４】
アキシチニブは、４．８のｐＫａを有する白色から淡黄色の粉末である。ｐＨ１．１からｐＨ７．８の範囲の水性媒体におけるアキシチニブの溶解性は、０．２μｇ／ｍＬを上回る。分配係数（ｎ−オクタノール／水）は、３．５である。
【００３５】
アキシチニブは、前の１つの、すなわち、第二選択の療法としての全身療法の失敗の後に、進行した腎細胞癌（ＲＣＣ）の処置のためにＦＤＡの承認を得た。アキシチニブは、他の腫瘍学的適応症における可能な処置として試験されたかまたは指摘された。したがって、本発明の一部の実施形態では、がんは、固形腫瘍（固形線維腫瘍を含む）、新生物（膵臓、腎臓、結腸直腸、肺、乳房、甲状腺および胃新生物を含む）、神経膠芽腫、肝細胞癌または肝がん、メラノーマおよび眼内メラノーマ、前立腺がん（去勢抵抗性前立腺がんを含む）、非小細胞肺がん、腎臓腫瘍、腎臓癌（淡明細胞型および乳頭状の腎臓癌を含む）または腎臓がん、結腸直腸がん、進行した胃がん、悪性中皮腫、神経線維腫症、例えばシュワン鞘腫、軟部組織肉腫、頭頸部扁平上皮癌、鼻咽頭癌、腺癌、神経内分泌癌、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、褐色細胞腫、パラガングリオーマ、リンパ腫、マントル細胞がん、消化管間質腫瘍または膵臓腺管癌からなる群から選択される。
【００３６】
ＲＣＣのために現在処方されるそのラベリングでは、アキシチニブの推奨される出発経口用量は、概ね１２時間空けた１日２回の５ｍｇである。個体の寛容性によって、アキシチニブの処方用量は７ｍｇまたは１０ｍｇまで１日２回増加させるか、または３ｍｇまたは２ｍｇまで１日２回低減することが推奨される。
【００３７】
一部の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者において難治性がんを処置するための方法であって、前記患者にＸ４Ｐ−００１をチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、難治性がんは、ｃｃＲＣＣである。一部の実施形態では、難治性がんはｃｃＲＣＣであり、チロシンキナーゼ阻害剤はアキシチニブである。
【００３８】
一部の実施形態では、提供される方法は、Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を空腹状態の患者に投与すること、およびチロシンキナーゼ阻害剤を空腹または満腹状態の患者に投与することを含む。
【００３９】
ある特定の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者においてがんを処置するための方法であって、前記患者にＸ４Ｐ−００１をチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与することを含み、患者から生体試料を得て、疾患関連バイオマーカーの量を測定するステップをさらに含む方法を提供する。一部の実施形態では、生体試料は血液試料である。ある特定の実施形態では、疾患関連バイオマーカーは、循環ＣＤ３４＋細胞および／または可溶性ＶＥＧＦ−Ｒの血漿中レベルである。
【００４０】
ある特定の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者において難治性がんを処置するための方法であって、前記患者にＸ４Ｐ−００１をチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与することを含み、患者から生体試料を得て、疾患関連バイオマーカーの量を測定するステップをさらに含む方法を提供する。一部の実施形態では、生体試料は血液試料である。ある特定の実施形態では、疾患関連バイオマーカーは、循環ＣＤ３４＋細胞および／または可溶性ＶＥＧＦ−Ｒの血漿中レベルである。
【００４１】
ある特定の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者において難治性がんを処置するための方法であって、前記患者にＸ４Ｐ−００１をアキシチニブと組み合わせて投与することを含み、患者から生体試料を得て、疾患関連バイオマーカーの量を測定するステップをさらに含む方法を提供する。一部の実施形態では、生体試料は血液試料である。ある特定の実施形態では、疾患関連バイオマーカーは、循環ＣＤ３４＋細胞および／または可溶性ＶＥＧＦ−Ｒの血漿中レベルである。
【００４２】
ある特定の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者においてｃｃＲＣＣを処置するための方法であって、前記患者にＸ４Ｐ−００１をアキシチニブと組み合わせて投与することを含み、患者から生体試料を得て、疾患関連バイオマーカーの量を測定するステップをさらに含む方法を提供する。一部の実施形態では、生体試料は血液試料である。ある特定の実施形態では、疾患関連バイオマーカーは、循環ＣＤ３４＋細胞および／または可溶性ＶＥＧＦ−Ｒの血漿中レベルである。
【００４３】
本発明の他の実施形態では、Ｘ４Ｐ−００１はＶＥＧＦアンタゴニストと組み合わせて投与される。ＶＥＧＦアンタゴニストは、ＶＥＧＦに対する抗体またはＶＥＧＦトラップであってよい。ある特定の実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、ベバシズマブまたはアフリベルセプトから選択される。
【００４４】
一部の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者においてがんを処置する方法であって、前記患者にＸ４Ｐ−００１をチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与することを含み、Ｘ４Ｐ−００１およびチロシンキナーゼ阻害剤は相乗的に作用する方法を提供する。当業者は、活性薬剤の組合せが相加効果より高い効果をもたらすとき、活性薬剤（例えば、Ｘ４Ｐ−００１およびチロシンキナーゼ阻害剤）は相乗的に作用するということを認める。一部の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、アキシチニブである。
投薬量および製剤
【００４５】
Ｘ４Ｐ−００１は、分子式Ｃ２１Ｈ２７Ｎ５；分子量３４９．４８ａｍｕ；外観が白色から薄黄色の固体；溶解性：Ｘ４Ｐ−００１は、ｐＨ範囲３．０から８．０で易溶性（＞１００ｍｇ／ｍＬ）、ｐＨ９．０でやや溶けにくく（１０．７ｍｇ／ｍＬ）、ｐＨ１０．０でわずかに可溶性（２．０ｍｇ／ｍＬ）である、ＣＸＣＲ４アンタゴニストである。Ｘ４Ｐ−００１は、水に極めてわずかに可溶性であり；融点は１０８．９°ΔＣである。
【００４６】
Ｘ４Ｐ−００１の化学構造は、下に表す。
【化２】
2018537538.tif 000004
【００４７】
ある特定の実施形態では、Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含有する組成物は、１日に約２００ｍｇから約１２００ｍｇの量で経口投与される。ある特定の実施形態では、投薬組成物は、概ね１２時間空けて１日２回、分割薬量で提供することができる。他の実施形態では、投薬組成物は１日１回提供することができる。Ｘ４Ｐ−００１の終端半減期は、約１２から約２４時間、または概ね１４．５時間であると一般的に判定された。経口投与のための投薬量は、１日１回または２回の約１００ｍｇから約１２００ｍｇであってよい。ある特定の実施形態では、Ｘ４Ｐ−０００１または薬学的に許容されるその塩の本発明で有益な投薬量は、１日に約２００ｍｇから約８００ｍｇである。他の実施形態では、Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩の本発明で有益な投薬量は、１日に約２００ｍｇから約６００ｍｇ、約４００ｍｇから約８００ｍｇ、約６００ｍｇから約１０００ｍｇ、または約８００ｍｇから約１２００ｍｇにわたることができる。
【００４８】
一部の実施形態では、提供される方法は、患者にＸ４Ｐ−００１を含む薬学的に許容される組成物を投与することを含み、ここで、組成物は経口投与のために製剤化される。ある特定の実施形態では、組成物は、錠剤またはカプセル剤の形で経口投与のために製剤化される。一部の実施形態では、Ｘ４Ｐ−００１を含む組成物は、カプセル剤の形で経口投与のために製剤化される。
【００４９】
ある特定の実施形態では、提供される方法は、１０〜１２００ｍｇのＸ４Ｐ−００１有効成分；および１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む１つまたは複数のカプセル剤を患者に投与することを含む。
【００５０】
ある特定の実施形態では、本発明は、Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩、１つまたは複数の希釈剤、崩壊剤、滑沢剤、流動助剤および湿展剤を含む組成物を提供する。一部の実施形態では、本発明は、１０〜１２００ｍｇのＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩、微結晶性セルロース、二塩基性リン酸カルシウム二水和物、クロスカルメロースナトリウム、フマル酸ステアリルナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素およびラウリル硫酸ナトリウムを含む組成物を提供する。一部の実施形態では、本発明は、１０〜２００ｍｇのＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩、微結晶性セルロース、二塩基性リン酸カルシウム二水和物、クロスカルメロースナトリウム、フマル酸ステアリルナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素およびラウリル硫酸ナトリウムを含む組成物を含む単位剤形を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇまたは約１２００ｍｇの量で存在するＸ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩を含む組成物を含む単位剤形を提供する。一部の実施形態では、提供される組成物（または、単位剤形）は、１日１回、１日２回、１日３回または１日４回、患者に投与される。一部の実施形態では、提供される組成物（または、単位剤形）は、１日１回または１日２回、患者に投与される。
【００５１】
一部の実施形態では、本発明は、以下を含む組成物を提供する：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  組成物の約３０〜４０重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  組成物の約２０〜２５重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  組成物の約３０〜３５重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  組成物の約５〜１０重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  組成物の約０．５〜２重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  組成物の約０．１〜１．０重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  組成物の約０．１〜１．０重量％。
【００５２】
一部の実施形態では、本発明は、以下を含む組成物を提供する：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  組成物の約３７重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  組成物の約２３重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  組成物の約３２重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  組成物の約６重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  組成物の約１重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  組成物の約０．３重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  組成物の約０．５重量％。
【００５３】
一部の実施形態では、本発明は、以下を含む組成物を提供する：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  組成物の約８〜２５重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  組成物の約６５〜８５重量％；
（ｃ）クロスカルメロースナトリウム  −  組成物の約２〜１０重量％；
（ｄ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  組成物の約０．１〜３重量％；および
（ｅ）コロイド状二酸化ケイ素  −  組成物の約０．０５〜０．７重量％。
【００５４】
一部の実施形態では、本発明は、以下を含む組成物を提供する：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  組成物の約２５〜４５重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  組成物の約１０〜３５重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  組成物の約１５〜４５重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  組成物の約２〜１０重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  組成物の約０．３〜２．５重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  組成物の約０．０５〜１．２重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  組成物の約０．２〜１．２重量％。
【００５５】
一部の実施形態では、本発明は、以下を含む組成物を提供する：
（ａ）Ｘ４Ｐ−００１または薬学的に許容されるその塩  −  組成物の約３５〜７５重量％；
（ｂ）微結晶性セルロース  −  組成物の約５〜２８重量％；
（ｃ）二塩基性リン酸カルシウム二水和物  −  組成物の約７〜３０重量％；
（ｄ）クロスカルメロースナトリウム  −  組成物の約２〜１０重量％；
（ｅ）フマル酸ステアリルナトリウム  −  組成物の約０．３〜２．５重量％；
（ｆ）コロイド状二酸化ケイ素  −  組成物の約０．０５〜１．２重量％；および
（ｇ）ラウリル硫酸ナトリウム  −  組成物の約０．２〜１．２重量％。
【００５６】
一部の実施形態では、本発明は、下の表１または表２による組成物を提供する：
【表１】
2018537538.tif 000005
【表２】
2018537538.tif 000006
【００５７】
一部の実施形態では、本発明は、上記の組成物を含む単位剤形を提供する。一部の実施形態では、単位剤形はカプセル剤である。
【００５８】
例えば、特定の疾患または状態を処置する目的で活性化合物の組合せを投与することが望ましい限り、その少なくとも１つは本発明による化合物を含有する２つまたはそれより多い医薬組成物は、組成物の同時投与のために適するキットの形で便利に組み合わせることができることは、本発明の範囲内である。したがって、本発明のキットは、その少なくとも１つは本発明の化合物を含有する２つまたはそれより多い別個の医薬組成物、および、前記組成物を別々に保持するための手段、例えば容器、分割されているボトルまたは分割されているホイルパケットを含む。そのようなキットの例は、錠剤、カプセル剤などの包装のために使用されるおなじみのブリスターパックである。
【００５９】
本発明のキットは、異なる投与間隔で別個の組成物を投与するために、またはお互いに対して別個の組成物を滴定するために、異なる剤形、例えば経口および非経口剤形を投与するのに特に適する。コンプライアンスを助けるために、キットは投与のための説明書を一般的に含み、記憶補助と一緒に提供することができる。
【００６０】
下の実施例は、本発明をさらに詳細に説明する。以下の調製物および実施例は、当業者が本発明をより明らかに理解して実施することを可能にするために与えられる。しかし、本発明は、本発明の単一の態様の例示だけであるものとされる、例示される実施形態によって範囲が限定されず、機能的に同等な方法は本発明の範囲内にある。実際、本明細書に記載されるものに加えて、本発明の様々な改変形は、前述の記載および添付図から当業者に明らかになる。そのような改変形は、添付の請求項の範囲内にあるものとする。
【００６１】
本明細書で引用される各文書の内容は、参照により本明細書に完全に組み込まれる。
【実施例】
【００６２】
（実施例１）
ヒト細胞系によるマウスモデル
Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブの単独によるおよび組合せによる処置の、ＭＤＳＣおよび他の免疫抑制細胞集団の輸送に及ぼす効果、ならびにＲＣＣ細胞によるケモカイン生成に及ぼす効果を調べた。
【００６３】
マウスを７８６−０およびＡ４９８ＲＣＣ異種移植で接種し、腫瘍を約３００ｍｍ３まで増殖させ、次に、ＣＸＣＲ４阻害剤Ｘ４Ｐ−００１、アキシチニブの両剤の組合せまたは食塩水（対照）による処置を開始した。
【００６４】
ヒト細胞系の各々で、３６匹のヌード／ベージュマウスのわき腹に１×１０７個の腫瘍細胞を皮下に植え込み、腫瘍を直径だいたい７ｍｍまで増殖させた。マウスを各々マウス９匹の４処置群にランダムに分け、Ｘ４Ｐ−００１（推奨用量で）、アキシチニブ（強制栄養によって１日に３０ｍｇ／ｋｇ）、両薬物またはビヒクル（対照）で処置した。我々は、ＭＤＳＣ腫瘍流入が７日後に最大であることを以前に示した（示さず）。したがって、７日目に、マウスを屠殺し、腫瘍を測定し、直ちに切除して３つの部分に分けた。二色免疫蛍光法のために、各腫瘍の１つの部分をパラフィン包埋した。フローサイトメトリーのために単一細胞懸濁液を生成するために、別の部分を機械的に分解し、コラゲナーゼ／ＤＮアーゼで処理した。第３の部分は、将来の薬物動態学的分析のために凍結させた。パラフィン包埋腫瘍組織から顕微鏡スライドを作製し、それらをＣＤ１１ｂ、Ｇｒ−１およびＦＡＰに対する抗体で染色した。腫瘍組織に存在する浸潤性ＣＤ１１ｂ＋／Ｇｒ−１＋ＭＤＳＣおよびＦＡＰ＋線維芽細胞の数を、前述のとおり（１）免疫蛍光法（ＩＦ）によって次に判定した。
【００６５】
脱凝集した腫瘍検体は、フローサイトメトリーによってＣＤ１１ｂ＋／Ｇｒ−１＋ＭＤＳＣおよびＦＡＰ＋線維芽細胞について分析した。ＣＸＣＲ４を発現する両集団の分画も、判定した。マウスを屠殺したときに、脾臓を取り出して、半分に切った。１つの部分は単一細胞懸濁液に分解し、ＭＤＳＣについて上記のようにフローサイトメトリーによって分析した。第２の半分は、ＰＫ分析などの将来の分析のために凍結させた。最後に、食塩水で満たしたシリンジで切除された大腿骨から髄を押し出すことによって骨髄（ＢＭ）試料を生成し、ＭＤＳＣについてフローサイトメトリーによって分析した。
結果：
【００６６】
いずれの薬物も単独で腫瘍増殖に効果を及ぼさなかった（アキシチニブ）か、軽度の効果を及ぼした（Ｘ４Ｐ−００１）が、Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブの併用は相加的および／または相乗的抗腫瘍効果を及ぼした。具体的には、併用処置は大規模な腫瘍細胞死をもたらし、確立された移植組織は実際にサイズが退行し（図１Ａおよび１Ｂを参照）、これは単一の薬剤として与えられたＶＥＧＦＲ標的化薬物で以前に見られなかった効果である。ＩＨＣ染色は、以前のように、アキシチニブ単独で処置したマウスはＫｉ−６７陽性腫瘍細胞が増加したことを実証した（図４Ａおよび４Ｃを参照）。Ｘ４Ｐ−００１とアキシチニブの両方を受けたマウスでのこの効果は観察されず（図４Ａおよび４Ｃを参照）、この組合せの増殖抑制効果を示唆した。最後に、アキシチニブを単独で受けたマウスからの腫瘍は、広範囲にわたるＭＤＳＣ浸潤を有した（図５Ａ〜５Ｄを参照）が、Ｘ４Ｐ−００１単独またはアキシチニブ／Ｘ４Ｐ−００１の組合せを受けたマウスからの腫瘍は有意により少ないＭＤＳＣ浸潤を有した（図５Ａ〜５Ｄを参照）。
異種移植におけるｍｉＲＮＡ  ｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃの抑制ならびにＨＩＦ−２αへの効果
【００６７】
図１１に示すとおり、Ｘ４Ｐ−００１で処置した７８６異種移植のウェスタンブロットは、アキシチニブ処置によって引き起こされたものに対してＨＩＦ−２αのレベルの低減を示した。さらに、図１２および１３に示すとおり、アキシチニブはマイクロＲＮＡ  ｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃを抑制し、アキシチニブへのＸ４Ｐ−００１の追加は処置の８日後にｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃの増加をもたらした（７８６−０異種移植腫瘍）。アキシチニブ＋／−Ｘ４Ｐ−００１で処置した異種移植の腫瘍からのｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃマイクロＲＮＡおよびＨＩＦ−２α  ｍＲＮＡの発現。データは、平均の対照値（左側）と比較したｍｉｒ−３０ａまたはｍｉｒ−３０ｃ発現および相対的なＨＩＦ−２α  ＲＮＡ発現として提示される。図１３は、７８６異種移植腫瘍において処置の８日後に、アキシチニブおよびＸ４Ｐ−００１が一緒に作用してＨＩＦ−２α発現を低減することを図示する。
【００６８】
図１４Ａ〜Ｃは、ｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃ誘導ならびにＨＩＦ−２α低減に及ぼすｉｎ  ｖｉｔｒｏでの７８６低酸素細胞へのＸ４Ｐ−００１処置の効果を図示する。図１４Ａは、正常酸素および低酸素（１％Ｏ２）条件においてＸ４Ｐ−００１で２４時間処置した７８６細胞のウェスタンブロットを示す。図１４Ｂは、図１４Ａの同じ細胞からのｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃマイクロＲＮＡならびに（図１４Ｃ）全体のＨＩＦ−２α  ＲＮＡ発現を図示する。
【００６９】
図１５Ａは、Ａ３７５細胞または構成的に活性であるＳｔａｔ３構築物でトランスフェクトしたＡ３７５細胞の溶解物からのウェスタンブロット結果を図示する。細胞は、正常酸素または低酸素条件においてＸ４Ｐ−００１で２４時間処置した。図１５Ｂはｍｉｒ−３０ｃマイクロＲＮＡを示し、図１５Ｃは図１５Ａの同じ細胞からの全体のＲＮＡ発現を示す。したがって、ＨＩＦ−２αの抑制およびｍｉｒ−３０ａおよび３０ｃの誘導は、Ｓｔａｔ３発現に依存する。理論に束縛されることを望むことなく、Ｓｔａｔ３は腫瘍のＣＸＣＬ−１２媒介浸潤を促進することにおいて重要であると考えられる。
【００７０】
これらの結果が示すものは、アキシチニブがマイクロＲＮＡ  ｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃを抑制したということであり、それらは、理論に束縛されることを望むことなく、ＨＩＦ−２α翻訳を阻害すると考えられる。ｉｎ  ｖｉｖｏでのおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏの低酸素細胞でのアキシチニブへのＸ４Ｐ−００１の追加は、ｍｉｒ−３０ａおよびｍｉｒ−３０ｃの増加をもたらす。
（実施例２）
さらなる異種移植研究
【００７１】
Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブによる単独または併用処置が、ＭＤＳＣおよび他の免疫抑制ＣＸＣＲ４＋細胞集団（ＴｒｅｇおよびＣＡＦ）の分布にどのように影響するか、ならびに、これらの細胞によるＣＸＣＲ４発現が腫瘍を有するマウスにおけるそれらの輸送にどのように影響するかを判定するために、さらなる研究を実行する。上の実施例１を同系マウスのＲＣＣ  Ｒｅｎｃａモデルおよび７８６−Ｍ１Ａ細胞のさらなる試験で繰り返し、その後者はＣＸＣＲ４を極めて高いレベルで発現することが公知である７８６−０変異体である（７）。ＭＤＳＣおよび線維芽細胞に加えてＣＤ４＋／ＣＤ２５ｂｒｉｇｈｔ／Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇ、ＣＤ３＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞についても腫瘍が分析されること以外は、Ｒｅｎｃａ細胞による研究をヒト細胞系について前記のように実行する。
【００７２】
実施例１の手順に続いて、骨髄、脾臓ならびにＣＤ１１ｂ＋／Ｇｒ−１＋ＭＤＳＣ、ＣＤ４＋／ＣＤ２５ｂｒｉｇｈｔ／Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇ、ＣＤ３＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＦＡＰ＋がん関連線維芽細胞（ＣＡＦ）による腫瘍浸潤に及ぼす、Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブによる処置の効果を調べ、これらの細胞でのＣＸＣＲ４発現のレベルを判定する。
（実施例３）
サイトカインおよびケモカイン研究
【００７３】
ＲＣＣ細胞によるケモカイン生成に及ぼすＸ４Ｐ−００１およびアキシチニブによる処置のｉｎ  ｖｉｖｏ効果を、以下の通りに評価する：
【００７４】
実施例１のＸ４Ｐ−００１およびアキシチニブによる処置を受けたマウスから切除された腫瘍を、Ｍ−ＣＳＦ（ＣＳＦ−１）、ＣＸＣＬ１（ＭＧＳＡ／ｇｒｏ−）、ＣＸＣＬ２（ＭＩＰ−２／ｇｒｏ−）、ＭＩＰ−２／ｇｒｏ−、ＣＸＣＬ５（ＥＮＡ−７８）、ＣＸＣＬ６（ＧＣＰ−２）、ＣＸＣＬ８（ＩＬ−８）、ＧＭ−ＣＳＦ、ＶＥＧＦ、ＴＮＦ、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ２８の発現の薬物誘発性変化について、ＲＴ−ＰＣＲによって分析する。掲載される様々なＥＬＲ含有ＣＸＣＬケモカインは、ＭＤＳＣ動員と最近結びつけられた（９）ケモカイン受容体であるＣＸＣＲ２を活性化することが公知である（８）。サイトカインＶＥＧＦ、ＧＭ−ＣＳＦおよびＴＮＦも、腫瘍組織へのＭＤＳＣ化学走性を媒介すると考えられる。同様に、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ２８は、Ｔｒｅｇの動員と結びつけられている（１０，１１）。
【００７５】
多数のケモカインおよび他の炎症媒介物質が、腫瘍組織へのＭＤＳＣの輸送を調節することが示された（９，１２，１３）。どのケモカイン／サイトカインがＶＥＧＦ標的化療法による処置の間のＲＣＣへのＭＤＳＣの流入の役割を担うかについて判定するために、アキシチニブ処置を受けた腫瘍を有するマウスの脾臓からＣＤ１１ｂ＋／Ｇｒ−１＋ＭＤＳＣを単離する。ＭＤＳＣ輸送を調節することが公知であるＧタンパク質結合型および他の受容体の選ばれた群のために、ＭＤＳＣを小さいプールされたレンチウイルスｓｈＲＮＡライブラリー（ＤｅＣｏｄｅ  ＧＩＰＺ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に次に感染させる。ライブラリーは、ＴＮＦＲ−１および−２、ＩＬ−４ＲならびにＣＸＣＲおよびＣＣＲケモカイン受容体の完全なアレイ（ＣＸＣＲ１〜５、ＣＣＲ１〜９）のためのｓｈＲＮＡを含む。これらのいくつか（例えば、ＣＸＣＲ−１、−２および−４）は、ＭＤＳＣ動員を促進することが公知であるケモカインと会合する（９，１２，１３）。
（実施例４）
薬物動態研究
【００７６】
Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブによる併用療法の薬物動態学的特性を評価するために、血液、腫瘍組織および脾臓におけるＸ４Ｐ−００１およびアキシチニブのレベルを投与の４時間後に測定する。血液、脾臓および腫瘍組織における薬物レベルを測定するために、マウスの屠殺時に、７日目の薬物投与の４時間後に、心室穿刺によって血液を収集する。血液試料ならびに脾臓および腫瘍組織を、次にＰＫ分析に付す。
（実施例５）
臨床治療レジメン
【００７７】
１日２００ｍｇから１２００ｍｇの決定された用量のＸ４Ｐ−００１を、１日１回または分割用量で１日２回経口投与する。患者は、投与スケジュールおよび投与時間近くの食物または飲料に関する必要条件について指示される。
【００７８】
投与スケジュール。以下のガイドラインを使用して、最初の日用量は午前にとり、第２の日用量は概ね１２時間後にとる：
投与は、毎日同じ時間±２時間にあるべきである。
１日２回投与の場合、連続した用量の間の間隔は、９時間未満でも１５時間超でもあるべきでない。間隔が１５時間を超える場合は投与は省略するべきであり、次の投与では通常のスケジュールを再開すべきである。
食物に関する制限。吸収は食物によって影響を受けるので、患者は以下の通りに指示される：
午前の投与については
−  真夜中から投与時間まで食物や飲料（水を除く）をとらない
−  投与から２時間の間は食物や飲料（水を除く）をとらない
第２の日用量については、適用可能な場合
−  投与前の１時間の間は食物や飲料（水を除く）をとらない
−  投与から２時間の間は食物や飲料（水を除く）をとらない。
【００７９】
アキシチニブは、処方されたラベリング情報に合わせて投与する。アキシチニブによる初期の処置は１日２回の経口５ｍｇであり、決定された用量レベルのＸ４Ｐ−００１に加えられる。アキシチニブの投与。アキシチニブは、アキシチニブと同時にとることができる。あるいは、アキシチニブは胃腸の有害事象と関連付けられ、その吸収は食物によって変更されないので（現在の製品ラベルを参照）、臨床医の承認により、患者は、言及した同じ１日２回の投与スケジュールガイドラインに従ってアキシチニブを別々にとることができる。
【００８０】
Ｘ４Ｐ−００１および／またはアキシチニブの投与は、適宜、臨床医が調整することができる。Ｘ４Ｐ−００１および／またはアキシチニブの用量は、臨床医の判断に従って下げることができる。Ｘ４Ｐ−００１をアキシチニブと組み合わせて受ける患者がグレード２を超える有害事象を経験する場合は、Ｘ４Ｐ−００１および／またはアキシチニブの用量は、臨床医の判断に従って下げることができる。患者が最初の４週間の処置を首尾よく完了するならば、すなわち、グレード２を超えるいかなる有害事象も経験しないならば、Ｘ４Ｐ−００１および／またはアキシチニブの日用量は、臨床医の判断に従って上げることができる。
処置への応答および疾患状態の評価
【００８１】
腫瘍応答の分類は、Therasseら（２０００年）、J.  National  Cancer  Institute、９２巻：２０５〜２１６頁に記載されているように、固形腫瘍群における応答評価基準（「ＲＥＣＩＳＴ」）に従って、成文化された腫瘍応答評価によって実行することができる。ｃｃＲＣＣの放射線学的評価は、スライス厚さ≦５ｍｍおよびコントラストによるコンピュータ断層撮影法（ＣＴ）によって達成される。ＣＴは処置前（ベースライン）に実行され、応答を判定するために処置の期間中に間隔をおいて行うことができる。
【００８２】
重要な用語：
測定可能な非結節性病変  −  最大直径≧１０ｍｍ。
測定可能な結節性病変  −  短軸≧１５ｍｍ
測定不可能な病変  −  測定できないものを含む、より小さい病変
測定可能な疾患  −  少なくとも１つの測定可能な病変の存在。
標的病変
【００８３】
ベースライン時、個々の器官につき２つの４つの測定可能な病変を識別し、文書に記録し、各々の該当する直径を記録する。測定可能な腎外性病変が存在するならば、測定可能な腎外性病変も識別し、文書に記録し、該当する直径を記録する。疾患を代表し、再現可能な反復測定に適するように、病変をサイズに基づいて選択する。標的病変は、測定可能なリンパ節を含むことができる。
【００８４】
処置の間、各標的病変を、以下の通りに完全寛解、部分的寛解、安定疾患または進行性疾患について評価する：
完全寛解（ＣＲ）
（ａ）全ての非結節性病変の消失、および
（ｂ）病的なリンパ節ａの不在。
部分寛解（ＰＲ）
（ａ）標的病変のＳＯＤにおけるベースラインからの３０％以上の低下
安定疾患（ＳＤ）
（ａ）ＰＲまたはＰＤのいずれの基準も満たさない持続的疾患
進行性疾患（ＰＤ）
ａ）ベースライン時または処置の間であってもよい最小合計と比較して、標的病変のＳＯＤにおける２０％以上の増加；および
（ｂ）ＳＯＤにおける５ｍｍ以上の絶対増加。
対象外の病変
【００８５】
それらを経過観察のときに存在する、不在または明確な進行として分類することができるように、病的な節（短軸が１０ｍｍを超える節と規定される）を含む、ベースライン時に存在する全ての他の病変は文書に残すべきである（定量的測定は必要とされない）。
完全寛解（ＣＲ）
（ａ）全ての対象外の病変の消失、および
（ｂ）病的なリンパ節ａの不在。
非ＣＲ／非ＰＤ
１つまたは複数の対象外の病変の持続
進行性疾患（ＰＤ）
既存の対象外の病変の明確な進行。
【００８６】
［注：ａ＝指定された標的または対象外の病変か否かを問わず、全リンパ節は１０ｍｍ以下の短軸直径を有する］
新しい病変
【００８７】
新しい病変は明確であるべきである（例えば、技術の変動に起因していない）；ベースライン時にスキャンされなかった位置の病変を含む。
薬物動態学的評価
【００８８】
所望により、Ｘ４Ｐ−００１およびアキシチニブの血漿中レベルのための血液試料の薬物動態学的評価を、実行することができる。血液試料は、予定通りに収集する。ＭＳ／ＭＳ検出による逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を使用して、Ｘ４Ｐ−００１濃度について試料を分析する。この生物分析的方法の検証された範囲は、血漿中で３０から３，０００ｎｇ／ｍＬである。
【００８９】
アキシチニブの薬物動態学的評価は、例えばTortoriciら、（２０１１年）Invest.  New  Drugs  ２９巻：１３７０〜１３８０頁に記載されている技術を使用して達成することができ、その全開示は、ここに具体的に参照により本明細書に組み込まれる。
（実施例６）
Ｘ４Ｐ−００１のための製剤試験結果
【００９０】
この実施例は、Ｘ４Ｐ−００１の３つの用量力価の各々についての選択された製剤に関するパイロット試験結果を要約する。ＡＦＴ、増量剤／希釈剤、崩壊剤、滑走剤および滑沢剤を含有する粉末ブレンドを調製し、自動カプセル充てん機でサイズ１のハードゼラチンカプセルに充てんした。全３つの製剤のために開発したプロセスは、十分な流動性、許容される重量変動および含有量均一性を示した。全３つの製剤は、４５分の溶解試験の後に９０％を超える放出を示した。各々３０個のカプセル、ポリエステルコイルおよび１個の乾燥剤パックを含有するアンバーガラスボトルを個々にアルミ箔バッグに密封し、２つの保存条件（２〜８℃および２５℃／６０％ＲＨ）下での安定性試験に置いた。
序論
【００９１】
合計９つの製剤（Ｘ４Ｐ−００１の３つの用量力価の各々について３つ）を調製し、サイズ１のハードゼラチンカプセルに手動で充てんした。１カ月のＲ＆Ｄ安定性データに基づいて、各用量レベルのＸ４Ｐ−００１の最良のカプセル製剤を３つの製剤候補から選択した（表３）。Ｖブレンダーおよび自動カプセル充てん機をそれぞれ使用して、各用量レベルの選択された製剤をブレンディングおよびカプセル充てんのためにスケールアップした。
【００９２】
パイロット試験の目的は、以下の通りであった：１）Ｘ４Ｐ−００１の新しいロットを使用してＸ４Ｐ−００１の１０ｍｇ、２５ｍｇおよび１００ｍｇカプセル剤のための選択された製剤の安定性を確認すること；ならびに２）スケールアップおよびＸ４Ｐ−００１カプセル剤を作製するために使用される新しいプロセスに関する情報を収集すること。
材料および装置
材料のリスト
【００９３】
Ｘ４Ｐ−００１、ロット番号２８９３−Ａ−３Ｐ
微結晶性セルロース、ＮＦ、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）ＰＨ−１０１、ロット番号１１５５
二塩基性リン酸カルシウム二水和物、ＵＳＰ、Ｅｍｃｏｍｐｒｅｓｓ（登録商標）、ロット番号Ｂ１０Ｅ
クロスカルメロースナトリウム、ＮＦ、Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ（登録商標）、ロット番号Ｔ０５０Ｎ
コロイド状二酸化ケイ素、ＵＳＰ、Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ（登録商標）Ｍ−５Ｐ、ロット番号１Ｊ０２１
フマル酸ステアリルナトリウム、ＮＦ、ＰＲＵＶ（商標）、ロット番号３０００１９０２
ラウリル硫酸ナトリウム、ＮＦ、ロット番号１２８１０
空のハードゼラチンカプセル、サイズ１の白色不透明、ロット番号５８２４１０
６０ｃｃアンバーガラスボトル、緑色のネジ式のキャップ付き
シリカゲル乾燥剤小袋、０．５ｇ
レーヨンコイル１２グラム／ｙ
２×３  ３スポット湿度指示カード、ロット番号１００１８
アルミ箔バッグＭＩＬ−ＰＲＦ−１３１Ｊ
装置のリスト
２−Ｑｔ．Ｖ−ブレンダー
Ｂｏｎａｐａｃｅ  Ｉｎ−Ｃａｐカプセル充てん機
小袋シーラー
タップ密度テスター
粒径分析器（ソニックシフター）
実験および結果
パイロット試験のための製剤の選択
【００９４】
１０ｍｇ、２５ｍｇおよび１００ｍｇ用量レベルの各々でのパイロットＸ４Ｐ−００１試験のために、１つの製剤（１０−Ｅ、２５−Ｅおよび１００−Ｆ）を選択した。製剤の選択は、２つの保存条件（２５℃／６０％ＲＨおよび２〜８℃）の下の各用量のための３つの製剤の１カ月安定性プロファイルに主に基づいた（表３）。製剤のいずれも、４０℃／７５％ＲＨの保存条件下で安定していなかった。
【００９５】
１０ｍｇおよび２５ｍｇ製剤の両方で、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）だけが希釈剤／充てん剤の役目をする。自動カプセル充てん機でのカプセル充てん工程を促進するために、コロイド状二酸化ケイ素（Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ（登録商標））などの滑走剤を製剤への添加について調査した。２つのプラセボバッチでの試験は、Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ（登録商標）がカプセル剤の重量変動の低減を助けることを確認した（表４）。粉末ブレンドの十分な流動を確実にするために、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）およびＥｍｃｏｍｐｒｅｓｓ（登録商標）の両方を含有する１００ｍｇ処方（１００−Ｆ）にもＣａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ（登録商標）を加えた。
工程内試験
【００９６】
合計３つの製剤（Ｘ４Ｐ−００１の３つの用量力価の各々のために１つ）を調製した。粉末ブレンドをＩｎ−Ｃａｐカプセル充てん機でサイズ１のハードゼラチンカプセルに充てんした。充てんされたカプセル剤の重量は、約１％の重量変動性（ＲＳＤ）を示した（表５）。
最終生成物の初期試験
【００９７】
全てのバッチの平均カプセル充てん重量は、十分に目標の１％以内であった。バッチ番号１１９１−１０−ＰＰ、１１９１−２５−ＰＰおよび１１９１−１００−ＰＰの複合アッセイ試験結果は、それぞれ９８．８％、９９．０％および９９．９％であった（表６）。
【００９８】
全てのバッチのブレンド均一性は、ＵＳＰ含有量均一性試験を使用して評価した。粉末ブレンドの含有量均一性は、要求された６％ＲＳＤを満たした（表６）。
【００９９】
ＵＳＰ溶解方法により、各バッチからの６つのカプセルで溶解試験を実行した。４５分後に、全てのバッチは９９％を超える薬物放出を示した（表６）。
安定性試験
【０１００】
各々３０個のカプセル、適当な量のポリエステルコイルおよび１個の乾燥剤パックを含有する２０個のアンバーガラスボトルを個々にアルミ箔バッグに密封し、パイロット安定性プロトコールにより２つの保存条件（２４℃および２５℃／６０％ＲＨ）下での安定性試験に置いた（表８）。各試料の密封を試験するために、各アルミ箔バッグに１枚の湿度指示カードを入れた。
Ｘ４Ｐ−００１および粉末ブレンドの物理的特性
【０１０１】
Ｘ４Ｐ−００１の粒径分布を、表９および図１６に示す。かさ密度、タップ密度およびカー指数の結果は、表７に要約する。１０および２５ｍｇ製剤のための低力価ブレンドの物理的特性は、Ｒ＆Ｄバッチに同等だった。しかし、１００ｍｇバッチの粉末ブレンドは、Ｘ４Ｐ−００１の２つのロットの差のためにより低いかさ密度およびタップ密度を示した。新しいロットは以前のロットよりもかさ高い。
結論
【０１０２】
活性医薬成分（「ＡＰＩ」）、Ｘ４Ｐ−００１のために、３つのパイロット安定性バッチを首尾よく製造した。来るべき臨床バッチの製造を支えるために、全３つの用量レベルのための現在のプロセスが推薦される。本明細書で用いるように、および以下の表において、「ＡＰＩ」はＸ４Ｐ−００１を指す。「ＡＰＩ」は、当技術分野で一般的に使用される「活性医薬成分」の略記号である。
【表３】
2018537538.tif 000007
【表４】
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【表５】
2018537538.tif 000009
【表６】
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【表７】
2018537538.tif 000011
【表８】
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【表９】
2018537538.tif 000013
（実施例７）
２００ｍｇカプセル剤の開発および製剤
【０１０３】
この実施例は、２００ｍｇ力価のＸ４Ｐ−００１カプセル剤の開発およびプロセス開発活動を記載する。
【０１０４】
Ｘ４Ｐ−００１カプセル剤のための製剤１００ｍｇが、提案された２００ｍｇ製剤のためのベースラインとして用いられた。製剤開発活動の目標は、１００ｍｇ力価に類似の溶解プロファイルを有するＡＰＩのより高い剤形を得て、サイズ１のゼラチンカプセルで製品を製造することであった。
【０１０５】
下の表１０に示すように１００ｍｇ  ＣＴＭバッチ製剤で使用される賦形剤に基づくプロトタイプカプセル製剤（Ｍｅｔｒｉｃｓによって開発された）を使用して、実現可能性バッチを製造した。この実現可能性バッチは全ての以前に確立された医薬品規格を満たし、１００ｍｇ力価ＣＴＭバッチ（１５Ｋ２２７）と類似の薬物放出を示した。Ｘ４Ｐ−００１カプセル剤２００ｍｇ製剤開発活動の目標は、対象の製品ラインの現在の力価（２５ｍｇおよび１００ｍｇ）に合わせたサイズ１のゼラチンカプセルを使用したスケーラブルな製剤および製造プロセスを使用して、フェーズ１臨床試験で配置され、適宜以降の臨床試験フェーズに進めることができる、許容されるカプセル製剤を識別することであった。
【表１０】
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【０１０６】
上の表１０に概説した製剤を使用して、１つの実現可能性バッチを調製した。実現可能性バッチ製造装置は、以下を含んだ：Ｖシェルブレンダー（４クォート）、３０メッシュハンドスクリーンおよびＭＦ−３０手動カプセル充てん機。各バッチの製造プロセスは下に記載し、図８に表す。バッチ製造プロセスは、現在の１００ｍｇ力価と同じプロセストレーンを利用した。
１．Ｘ４Ｐ−００１有効成分を４クォートのＶブレンダーに加える。
２．３０メッシュハンドスクリーンを通してＡｖｉｃｅｌ  ＰＨ−１０１および二塩基性リン酸カルシウムをふるいにかけ、４クォートのＶブレンダーに加える。４分間混合する（１００回転）。
３．３０メッシュハンドスクリーンを通してクロスカルメロースナトリウムおよびラウリル硫酸ナトリウムをふるいにかけ、４クォートのＶブレンダーに加える。２分間混合する（５０回転）。
４．３０メッシュハンドスクリーンを通してコロイド状二酸化ケイ素をふるいにかけ、４クォートのＶブレンダーに加える。２分間混合する（５０回転）。
５．４クォートのＶブレンダーから混合された材料を排出し、３０メッシュスクリーンを通してふるいにかける。ふるいにかけた材料を４クォートのＶブレンダーに戻し、２分間混合する（５０回転）。
６．３０メッシュハンドスクリーンを通してフマル酸ステアリルナトリウムをふるいにかけ、４クォートのＶブレンダーに加える。３分間混合する（７５回転）。
７．ＭＦ−３０手動カプセル充てん機を使用して、混合された材料を３２５．０ｍｇ／カプセルの目標重量まで封入する。
【０１０７】
完了した最終ブレンドをＭＦ−３０手動カプセル剤充てん機を使用して封入し、充てんされたカプセル剤の特性を下の表１１に示す。
【表１１】
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【０１０８】
封入作業の完了の後、残りの終了したブレンドを使用してサイズ１のカプセルに充てんすることができる最大充てん重量を判定するために、ＭＦ−３０手動封入を使用して単一のカプセルを充てんした。作業の実行の間に、４２５．０ｍｇの充てん重量を得た。
【０１０９】
封入プロセス開発努力の結論は、封入が製品の加工のための存続可能な操作であることを示した。
【０１１０】
Ｘ４Ｐ−００１カプセル剤２００ｍｇ実現可能性バッチの分析結果。
実現可能性バッチ１５／８５８−０３４を、アッセイ／関連物質、水分、溶解および含有量均一性について試験した。この試験の結果は、図９および１０に示す。アッセイ試験の結果は、表示含有量の９７．４％であり、全不純物０．７５％、および水分値３．９ｗ／ｗ％であった。
【０１１１】
１００ｍｇ製剤ＣＴＭバッチ（１５Ｋ２２７）と比較した２００ｍｇ製剤組成物の溶解プロファイル結果の比較を、図１０に示す。提案された２００ｍｇ製剤は、８３のｆ２類似性係数で現在の１００ｍｇ製剤に匹敵した。
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【図１】
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【図２】
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【図３ＡＢ】
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【図３ＣＤ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【国際調査報告】
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