(57)【要約】  本発明は、Ｚｅｓｔｅホモログ２エンハンサー（ＥＺＨ２）の阻害剤である式（Ｉ）の新規な化合物、それらを含有する医薬組成物、それらの製造のための方法、および癌治療のための療法におけるそれらの使用に関する。2018522874.tif 000095
2018522874.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2018522874.tif 000087
［式中、
【化２】
2018522874.tif 000088
は、単結合または二重結合を表し；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ水素であるか、あるいは、Ｒ３およびＲ４は一緒になって−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を表し；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ７は、酸素、窒素および硫黄から独立して選択される１、２または３個のヘテロ原子を含んでいてもよい飽和または不飽和６員環であり、前記環は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、-ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、オキソ、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される１、２または３個の基によって置換されていてもよい。］
の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
式（ＩＩ）：
【化３】
2018522874.tif 000089
［式中、
【化４】
2018522874.tif 000090
は、単結合または二重結合を表し；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ水素であるか、あるいは、Ｒ３およびＲ４は一緒になって−ＣＨ２ＣＨ２−またはＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を表し；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］
で表される、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
式（ＩＩＩ）：
【化５】
2018522874.tif 000091
［式中、
【化６】
2018522874.tif 000092
は、単結合または二重結合を表し；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、おおよびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
ｎは、１または２であり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］
で表される、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
式（ＩＶ）：
【化７】
2018522874.tif 000093
［式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
ｎは、１または２であり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］
で表される、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
式（Ｖ）：
【化８】
2018522874.tif 000094
［式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
ｎは、１または２であり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］
で表される、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
Ｒ７が、フェニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、およびトリアジニルからなる群から選択され，前記群のそれぞれが、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、オキソ、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
Ｒ７が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される１または２個の基で置換されていてもよい、フェニルである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項８】
Ｒ７が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される１または２個の基で置換されていてもよい、ピリジニルである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項９】
Ｒ３およびＲ４が、それぞれ水素である、請求項１、２、６、７および８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１０】
ｎが１である、請求項３〜５のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１１】
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の１個以下がＮであり、かつ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも３個がＣＨである、請求項２〜５および１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１２】
それぞれのＲ８が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される、請求項２〜５、１０および１１のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１３】
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ独立して、メチル、エチル、ｎ−プロピル、またはｎ−ブチルである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１４】
Ｒ５が、メチルまたはクロロである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１５】
Ｒ６が、水素、メチル、またはエチルである、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１６】
以下の化合物：
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−ベンジルピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−（（５−クロロピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−（（５−クロロピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（（６−メチルピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−ベンジルピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（６−メトキシピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−（シクロヘキシルメチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；もしくは
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（（１−メチルシクロヘキシル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
または、その薬学的に許容可能な塩である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物。
【請求項１８】
癌を治療する方法であって、癌患者に治療上有効な量の請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容可能な塩または請求項１７に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる、方法。
【請求項１９】
前記癌が、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−ダクロス病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、脳室上衣細胞腫、髄芽細胞腫、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨の巨細胞腫瘍、および甲状腺癌からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ＥＺＨ２により媒介される障害の治療に使用するための医薬の製造における、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｚｅｓｔｅホモログ２エンハンサー（ＥＺＨ２）を阻害し、従って、癌細胞の増殖の阻害および／またはアポトーシスの誘導に有用である化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
エピジェネティック修飾は、細胞増殖、分化、および細胞生存を含む多くの細胞プロセスの調節に重要な役割を果たす。グローバルなエピジェネティック修飾は癌に共通しており、ＤＮＡおよび／またはヒストンのメチル化のグローバルな変化、ノンコーディングＲＮＡの調節不全、ならびにヌクレオソームリモデリングを含み、癌遺伝子、腫瘍抑制因子およびシグナル伝達経路の異常な活性化または不活性化をもたらす。しかしながら、癌において起こる遺伝子突然変異とは異なり、これらのエピジェネティック変異は、関与する酵素の選択的阻害によって逆転させることができる。ヒストンまたはＤＮＡのメチル化に関与する数種のメチル化酵素が、癌において調節不全となっていることが知られている。従って、特定のメチル化酵素の選択的阻害剤は、癌などの増殖性疾患の治療に有用であると思われる。
【０００３】
ＥＺＨ２（ヒトＥＺＨ２遺伝子：Cardoso, C, et al; European J of Human Genetics, Vol. 8, No. 3 Pages 174-180, 2000）は、ヒストンＨ３のリシン２７をトリメチル化することによって（Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３）標的遺伝子をサイレンシングする働きをするポリコームリプレッサー複合体２（ＰＲＣ２）の触媒サブユニットである。ヒストンＨ３は、真核細胞のクロマチン構造に含まれる５つの主要なヒストンタンパク質のうちの１つである。ヒストンは、主要な球状ドメインと長いＮ末端テールを特徴とし、「糸を通したビーズ」構造のようなヌクレオソームの構造に関わっている。ヒストンタンパク質は、高度に翻訳後修飾を受けるが、５つのヒストンのうちヒストンＨ３が最も大規模な修飾を受ける。用語「ヒストンＨ３」は、単独では、配列変異体間または修飾状態間を区別しないという点で意図的にあいまいな用語である。ヒストンＨ３は、新たに浮上したエピジェネティック分野で重要なタンパク質であり、その配列変異体および様々な修飾状態は動的かつ長期的な遺伝子調節に役割を果たすと考えられる。
【０００４】
ＥＺＨ２発現の増強は、前立腺、乳房、皮膚、膀胱、肝臓、膵臓、頭頸部の腫瘍を含む多くの固形腫瘍で見られており、癌の侵襲性、転移および不良な転帰と相関がある（Varambally et al. Nature 419:624-629, 2002; Kleer et al. Proc Natl Acad Sci USA 100: 11606-11611, 2003; Breuer et al. Neoplasia 6: 736-743, 2004; Bachmann et al. Prostate 65: 252-259, 2005; Weikert et al. Int. J. Mol. Med. 16: 349-353, 2005; Sudo et al. British Journal of Cancer 92:1754-1758, 2005; Bachmann et al. Journal of Clinical Oncology 24: 268-273, 2006）。例えば、高レベルのＥＺＨ２を発現する腫瘍では前立腺切除後の再発リスクの増大が見られ、高ＥＺＨ２レベルを有する乳癌患者では、転移の増大、無病生存期間の短縮および死亡の増加が見られる（Varambally et al. Nature 419: 624-629, 2002; Kleer et al. Proc Natl Acad Sci USA 100: 11606-11611, 2003）。より最近では、ＥＺＨ２と反対の働きをするＨ３Ｋ２７デメチラーゼのＵＴＸ（遍在転写テトラトリコペプチド反復配列Ｘ(ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeats X)）における不活性化突然変異が、多くの固形腫瘍種および血液腫瘍種（腎臓腫瘍、膠芽腫、食道腫瘍、乳房腫瘍、結腸腫瘍、非小細胞肺腫瘍、小細胞肺腫瘍、膀胱腫瘍、多発性骨髄腫、および慢性骨髄性白血病を含む）で確認されており、低いＵＴＸレベルが乳癌の低い生存率と相関し、ＵＴＸ機能の低下がＨ３Ｋ２７ｍｅ３の増大および標的遺伝子の抑制をもたらすことが示唆される(Wang et al. Genes & Development 24: 327-332, 2010)。これらのデータを考え合わせると、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３レベルの増大が多くの腫瘍種で癌の侵襲性に寄与すること、およびＥＺＨ２活性の阻害が治療利益を提供し得ることが示唆される。
【０００５】
多くの研究が、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡによるＥＺＨ２の直接的ノックダウンまたはＳＡＨヒドロラーゼ阻害剤３−デアザネプラノシンＡ（ＤＺＮｅｐ）治療によるＥＺＨ２の間接的低下がｉｎ  ｖｉｔｒｏで癌細胞株の増殖および浸潤を、そしてｉｎ  ｖｉｖｏで腫瘍の成長を低下させることを報告している（Gonzalez et al., 2008, GBM 2009）。異常なＥＺＨ２活性が癌の進行をもたらす厳密な機構は知られていないが、多くのＥＺＨ２標的遺伝子が腫瘍抑制因子であり、このことは腫瘍抑制因子機能の低下が重要な機構であることを示唆する。さらに、不死化または初代上皮細胞におけるＥＺＨ２過剰発現は足場非依存性の増殖および浸潤を促進し、ＥＺＨ２の触媒活性を必要とする（Kleer et al. Proc Natl Acad Sci USA 100:11606-11611, 2003; Cao et al. Oncogene 27: 7274-7284, 2008）。
【０００６】
従って、ＥＺＨ２活性の阻害が細胞増殖および浸潤を低下させることを示唆する強い証拠が存在する。よって、ＥＺＨ２活性を阻害する化合物は、癌の治療に有用であると思われる。
【０００７】
潜伏ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）プロウイルスは、ウイルスの長い末端反復（ＬＴＲ）に位置するヒストンの脱アセチル化およびメチル化の結果として発現抑制される。潜伏感染したＪｕｒｋａｔ  Ｔ細胞系統を使用したクロマチン免疫沈降試験により、ＥＺＨ２が発現抑制されたＨＩＶプロウイルスのＬＴＲに高レベルで存在し、プロウイルスの再活性化の後に速やかに変位（displaced）することが示された。ＥＺＨ２のノックダウンは、最大４０％の潜伏ＨＩＶプロウイルスを誘導した。また、ＥＺＨ２のノックダウンは、潜伏プロウイルスの、外部刺激、例えば、Ｔ細胞受容体刺激に対する感受性を増加させ、再活性化したプロウイルスの潜伏状態への逆戻りを遅延化した。同様に、外部刺激への応答性が乏しかった細胞集団は、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３では豊富に存在し、Ｈ３Ｋ９ｍｅ３では比較的少ないＨＩＶプロウイルスを有していた。これらの知見は、ＰＲＣ２が媒介する発現抑制は、ＨＩＶ潜伏性の重要な特徴であり、ヒストンメチル化の阻害は、潜伏ＨＩＶプールを根絶するためにデザインされた誘導戦略で有用な役割を果たすかもしれないことを示唆する（Friedman et al. J. Virol. 85: 9078-9089, 2011）。さらなる研究により、プロウイルスのプロモーターでのＨ３Ｋ２７脱メチル化が、潜伏ＨＩＶの、休止ＣＤ４＋Ｔ細胞のｅｘ  ｖｉｖｏ培養物におけるボリノスタットの効果に対する感受性を増加させることが示された（Tripathy et al. J. Virol. 89: 8392-8405, 2015）。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2018522874.tif 000003
【化２】
2018522874.tif 000004
は、単結合または二重結合を表し；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ水素であるか、あるいは、Ｒ３およびＲ４は一緒になって−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を表し；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ７は、酸素、窒素および硫黄から独立して選択される１、２または３個のヘテロ原子を含んでいてもよい飽和または不飽和６員環であり、該環は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、-ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、オキソ、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される１、２または３個の基によって置換されていてもよい。］
の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【０００９】
本発明の別の側面は、固形腫瘍の癌細胞にアポトーシスを誘導する方法、固形腫瘍を治療する方法に関する。
【００１０】
本発明の別の側面は、式（Ｉ）の化合物と薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬組成物に関する。
【００１１】
別の側面では、例えば癌細胞においてアポトーシスを誘導することにより、ＥＺＨ２により媒介される障害の治療(treatment)に使用するための医薬（medicament）の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物の使用が提供される。
【００１２】
別の側面において、本発明は、ＥＺＨ２により媒介される疾患の治療のための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明はさらに、ＥＺＨ２により媒介される疾患の治療における有効治療物質としての式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００１３】
別の側面において、本発明は、療法(therapy)に使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００１４】
別の側面では、ＥＺＨ２により媒介される障害の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００１５】
別の側面では、細胞増殖疾患の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００１６】
別の側面では、固形腫瘍、例えば、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−ダクロス病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、脳室上衣細胞腫、髄芽細胞腫、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎臓(kidney)癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎(renal)癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨の巨細胞腫瘍、および甲状腺癌の治療を含む、癌の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００１７】
別の側面では、本発明の式（Ｉ）の化合物を他の有効成分と共投与する方法が提供される。
【００１８】
別の側面では、ＥＺＨ２により媒介される障害の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と少なくとも１種の抗新生物薬との組合せが提供される。
【００１９】
別の側面では、細胞増殖疾患の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と少なくとも１種の抗新生物薬との組合せが提供される。
【００２０】
別の側面では、固形腫瘍、例えば、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−ダクロス病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、脳室上衣細胞腫、髄芽細胞腫、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨の巨細胞腫瘍、および甲状腺癌の治療を含む、癌の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と少なくとも１種の抗新生物薬との組合せが提供される。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、上記した式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。
【００２２】
別の態様において、本発明はまた、式（ＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化３】
2018522874.tif 000005
［式中、
【化４】
2018522874.tif 000006
は、単結合または二重結合を表し；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ水素であるか、あるいは、Ｒ３およびＲ４は一緒になって−ＣＨ２ＣＨ２−またはＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を表し；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１-Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］。
【００２３】
別の態様において、本発明はまた、式（ＩＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化５】
2018522874.tif 000007
［式中、
【化６】
2018522874.tif 000008
は、単結合または二重結合を表し；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、おおよびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
ｎは、１または２であり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］。
【００２４】
別の態様において、本発明はまた、式（ＩＶ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化７】
2018522874.tif 000009
［式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
ｎは、１または２であり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］。
【００２５】
別の態様において、本発明はまた、式（ＩＶ）（ａ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化８】
2018522874.tif 000010
［式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
ｎは、１または２であり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］。
【００２６】
別の態様において、本発明はまた、式（Ｖ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する：
【化９】
2018522874.tif 000011
［式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５は、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも２個は、ＣＨであり；
ｎは、１または２であり；
Ｒ１は、−ＮＨ２、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ２は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり；
Ｒ５は、水素、ハロゲン、または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
Ｒ６は、水素または（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり；
それぞれのＲ８は、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される。］。
【００２７】
一態様において、本発明は、
【化１０】
2018522874.tif 000012
が、単結合を表す、式（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）の化合物に関する。
【００２８】
別の態様において、本発明は、
【化１１】
2018522874.tif 000013
が、二重結合を表す、式（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）の化合物に関する。
【００２９】
別の態様において、本発明は、Ｒ１が（Ｃ１−Ｃ４）アルキルである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。特定の態様において、本発明は、Ｒ１が−ＮＨ２である、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。別の態様において、本発明は、Ｒ１およびＲ２が、それぞれ独立して、メチル、エチル、ｎ−プロピル、またはｎ−ブチルである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。特定の態様において、本発明は、Ｒ１およびＲ２がそれぞれメチルである、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３０】
別の特定の態様において、本発明は、Ｒ３およびＲ４がそれぞれ水素である、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物に関する。別の態様において、本発明は、Ｒ３およびＲ４が一緒になって−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を表す、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物に関する。特定の態様において、本発明は、Ｒ３およびＲ４が一緒になって−ＣＨ２ＣＨ２−を表す、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物に関する。別の特定の態様において、本発明は、Ｒ３およびＲ４が一緒になって−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を表す、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物に関する。
【００３１】
別の態様において、本発明は、Ｒ５が水素、フルオロ、クロロ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、またはイソプロピルである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。別の態様において、本発明は、Ｒ５がメチル、エチル、ｎ−プロピル、またはイソプロピルである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。別の態様において、本発明は、Ｒ５がメチルまたはクロロである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。特定の態様において、本発明は、Ｒ５がメチルである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。別の特定の態様において、本発明は、Ｒ５であるクロロである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００３２】
別の態様において、本発明は、Ｒ６が水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、またはイソプロピルである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。他の態様において、本発明は、Ｒ６が水素、メチル、またはエチルである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。特定の態様において、本発明は、Ｒ６がエチルである、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００３３】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、シクロヘキシル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、１，４−ジオキサニル、１，４−ジチアニル、フェニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、およびトリアジニルからなる群から選択され、該記群のそれぞれが、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、オキソ、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３４】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、フェニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、およびトリアジニルからなる群から選択され、該群のそれぞれが、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、オキソ、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３５】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、オキソ、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい、フェニルである、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３６】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される１または２個の基で置換されていてもよい、フェニルである、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３７】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、オキソ、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい、ピリジニルである、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３８】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される１または２個の基で置換されていてもよい、ピリジニルである、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００３９】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、ピリダジニル、ピリミジニル、またはピラジニルであり、それそれが、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される１または２個の基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４０】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、シクロヘキシル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、１，４−ジオキサニル、および１，４−ジチアニルからなる群から選択され、該群のそれぞれが、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、シアノ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＮ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、オキソ、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−から独立して選択される１、２または３個の基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４１】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、シクロヘキシル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペラジニル、モルホリニル、およびチオモルホリニルからなる群から選択され、該群のそれぞれが、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される１または２個の基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４２】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される１または２個の基で置換されていてもよい、シクロヘキシルである、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４３】
別の態様において、本発明は、Ｒ７が、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペラジニル、およびモルホリニルからなる群から選択され、該群のそれぞれが、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される１または２個の基で置換されていてもよい、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００４４】
別の態様において、本発明は、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも３個がＣＨである、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００４５】
別の態様において、本発明は、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が、それぞれ独立して、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の１個以下がＮであり、かつ、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも３個がＣＨである、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００４６】
別の態様において、本発明は、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が、それぞれ独立して、ＮまたはＣＨであり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも３個がＣＨである、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００４７】
別の態様において、本発明は、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５が、それぞれ独立して、ＣＨまたはＣＲ８であり、但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５の少なくとも３個がＣＨである、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００４８】
別の態様において、本発明は、それぞれのＲ８が、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、ヒドロキシル、および（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシから独立して選択される、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００４９】
別の態様において、本発明は、それぞれのＲ８が、フルオロ、クロロ、メチル、トリフルオロメチル、およびメトキシから独立して選択される、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００５０】
特定の態様において、本発明は、ｎが１である、式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００５１】
別の特定の態様において、本発明は、ｎが２である、式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（ＩＶ）（ａ）、または（Ｖ）の化合物に関する。
【００５２】
本発明の具体的な化合物には、
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−ベンジルピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−（（５−クロロピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−（（５−クロロピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（（６−メチルピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−ベンジルピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（６−メトキシピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
（Ｒ）−２−（１−（１−（シクロヘキシルメチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；または
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（（１−メチルシクロヘキシル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン；
あるいは、その薬学的に許容可能な塩が含まれる。
【００５３】
絶対的ではないが一般に、本発明の塩は薬学的に許容可能な塩である。塩基性アミンまたは他の塩基性官能基を含有する開示の化合物の塩は、遊離塩基を塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、または酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシジル酸（グルクロン酸またはガラクツロン酸など）、α−ヒドロキシ酸（クエン酸または酒石酸など）、アミノ酸（アスパラギン酸またはグルタミン酸など）、芳香族酸（安息香酸または桂皮酸など）、スルホン酸（ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸など）などの有機酸で処理することを含む、当技術分野で公知の任意の好適な方法によって作製することができる。薬学的に許容可能な塩の例としては、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニルブトレート(フェニルbutrates)、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、マンデル酸塩、およびスルホン酸塩（キシレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩およびナフタレン−２−スルホン酸塩が含まれる。
【００５４】
カルボン酸または他の酸性官能基を含有する開示の化合物の塩は、好適な塩基と反応させることにより作製することができる。このような薬学的に許容可能な塩は、薬学的に許容可能な陽イオンを与える塩基を伴って形成される得るものであり、アルカリ金属塩（特に、ナトリウムおよびカリウム）、アルカリ土類金属塩（特に、カルシウムおよびマグネシウム）、アルミニウム塩およびアンモニウム塩、ならびにトリメチルアミン、トリエチルアミン、モルホリン、ピリジン、ピペリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、ビス−（２−ヒドロキシエチル）アミン、トリ−（２−ヒドロキシエチル）アミン、プロカイン、ジベンジルピペリジン、デヒドロアビエチルアミン、Ｎ，Ｎ’−ビスデヒドロアビエチルアミン、グルカミン、Ｎ−メチルグルカミン、コリジン、キニーネ、キノリン、ならびにリシンおよびアルギニンなどの塩基性アミノ酸といった生理学的に許容可能な有機塩基から作製される塩が含まれる。
【００５５】
薬学的に許容可能でない他の塩も本発明の化合物の製造に有用である場合があり、これらは本発明のさらなる側面をなすと考えられるべきである。シュウ酸塩またはトリフルオロ酢酸塩などのこれらの塩は、それら自体は薬学的に許容可能なものではないが、本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容可能な塩を得る際の中間体として有用な塩の製造に有用であり得る。
【００５６】
式（Ｉ）の化合物またはその塩は、立体異性体の形態（例えば、それは１以上の不斉炭素原子を含有する）で存在し得る。個々の立体異性体（鏡像異性体およびジアステレオマー）およびこれらの混合物は、本発明の範囲内に含まれる。同様に、式（Ｉ）の化合物または塩は、式で示される以外の互変異性形で存在してもよく、これらも本発明の範囲内に含まれると理解される。本発明は、本明細書の上記で定義される特定の基のあらゆる組合せおよびサブセットを含むと理解されるべきである。本発明の範囲は、立体異性体の混合物、ならびに精製された鏡像異性体または鏡像異性体的／ジアステレオマー的に富化された混合物を含む。本発明は以上に定義される特定の基のあらゆる組合せおよびサブセットを含むと理解されるべきである。
【００５７】
本発明はまた、１以上の原子が、自然界で通常見られる原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子に置き換わっているということ以外は、式（Ｉ）および下記に挙げられたものと同一である同位体標識化合物も含む。本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容可能な塩に組み込むことのできる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、およびヨウ素の同位体、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、１２３Ｉ、および１２５Ｉが挙げられる。
【００５８】
上記の同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する本発明の化合物および前記化合物の薬学的に許容可能な塩は、本発明の範囲内である。同位体で標識された本発明の化合物、例えば、３Ｈまたは１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれた化合物は、薬剤および／または基質の組織分布アッセイにおいて有用である。トリチウム化、すなわち、３Ｈ同位体および炭素−１４、すなわち、１４Ｃ同位体は、それらの調製の容易さおよび検出性のために特に好ましい。１１Ｃおよび１８Ｆ同位体は、ＰＥＴ（陽電子放出断層撮影）において特に有用であり、１２５Ｉ同位体は、ＳＰＥＣＴ（単一光子放射型コンピューター断層撮影）において特に有用であり、総て脳撮像において有用である。さらに、重水素、すなわち、２Ｈなどのより重い同位体による置換により、より大きい代謝安定性、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増大または用量要求の低減から生じる特定の治療利益を得ることができ、それ故、状況によっては好ましいことがある。本発明の式（Ｉ）および下記の同位体標識化合物は一般に、以下のスキームおよび／または実施例で開示された手順を実施することにより、非同位体標識試薬の代わりに、容易に入手し得る同位体標識試薬を用いることによって製造可能である。
【００５９】
本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と１以上の賦形剤（薬学分野において担体および／または希釈剤とも呼ばれる）とを含んでなる医薬組成物（医薬処方物とも呼ばれる）を提供する。賦形剤は、その処方物の他の成分と適合し、かつ、そのレシピエント（すなわち、患者）に有害でないという意味で薬学的に許容可能である。
【００６０】
好適な薬学的に許容可能な賦形剤は、選択される特定の投与形によって異なる。さらに、好適な薬学的に許容可能な賦形剤は、その組成物中で役立ち得る特定の機能に関して選択されてもよい。例えば、ある特定の薬学的に許容可能な賦形剤は、均一な投与形の製造を助けるそれらの能力に関して選択されてよい。ある特定の薬学的に許容可能な賦形剤は、安定な投与形の製造を助けるそれらの能力に関して選択されてよい。ある特定の薬学的に許容可能な賦形剤は、ひと度患者に投与された本発明の１または複数の化合物の、ある器官または身体部分から別の器官または身体部分への運搬または輸送を助けるそれらの能力に関して選択されてよい。ある特定の薬学的に許容可能な賦形剤は、患者のコンプライアンスを向上させるそれらの能力に関して選択されてよい。
【００６１】
好適な薬学的に許容可能な賦形剤には、下記の種類の賦形剤：希釈剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、造粒剤、被覆剤、湿潤剤、溶媒、補助溶媒、沈殿防止剤、乳化剤、甘味剤、香味剤、矯味剤、着色剤、固化防止剤、湿潤剤(hemectants)、キレート剤、可塑剤、増粘剤、酸化防止剤、保存剤、安定剤、界面活性剤、および緩衝剤が含まれる。当業者ならば、ある種の薬学的に許容可能な賦形剤は２つ以上の機能を果たす場合があり、どれくらいの量の賦形剤がその処方物中に存在するか、他のどんな成分がその処方物中に存在するかによって選択的機能を果たし得ることを認識するであろう。
【００６２】
当業者ならば、本発明において使用するための適当な量の好適な薬学的に許容可能な賦形剤を選択できるだけの当技術分野の知識および技能を持っている。さらに、薬学的に許容可能な賦形剤を記載し、好適な薬学的に許容可能な賦形剤を選択する上で有用となり得る、当業者に利用可能な多くの情報源が存在する。例としては、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)、およびThe Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)が挙げられる。
【００６３】
本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術および方法を用いて調製される。当技術分野で慣用される方法のいくつかは、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)に記載されている。
【００６４】
医薬組成物は、単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位投与形であり得る。このような単位は、式（Ｉ）の化合物もしくはその塩の治療上有効な量、または所望の治療上有効な量を達成するために所与の時点で複数の単位投与形が投与され得るような治療上有効な量の画分を含有してよい。好ましい単位用量処方物は、本明細書の上記に挙げたように、有効成分の一日用量もしくは分割用量、またはその適切な画分を含有するものである。さらに、このような医薬組成物は、製薬技術分野で周知のいずれの方法によって調製してもよい。
【００６５】
医薬組成物は、例えば、経口（頬側または舌下を含む）、直腸内、経鼻、局所（頬側、舌下、または経皮を含む）、膣内、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、または皮内を含む）経路などの適切ないずれの経路による投与にも適合可能である。このような組成物は、例えば有効成分を１または複数の賦形剤と会合させることにより、製薬分野で公知のいずれの方法によって調製してもよい。
【００６６】
経口投与に適合される場合、医薬組成物は、錠剤またはカプセル剤などの離散単位；散剤または顆粒剤；水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液；可食フォームまたはホイップ；水中油型液体エマルションまたは油中水型液体エマルションであり得る。本発明の化合物もしくはその塩、または本発明の医薬組成物はまた、「速溶性」医薬として投与するために、キャンディ、ウエハース、および／または舌テープ(tongue tape)処方物中に配合してもよい。
【００６７】
例えば、錠剤またはカプセル剤の形態での経口投与の場合、有効薬物成分は、エタノール、グリセロール、水などの経口用非毒性の薬学的に許容可能な不活性担体と組み合わせてもよい。散剤または顆粒剤は、化合物を適切な微細サイズに粉砕し、例えばデンプンまたはマンニトールのような可食炭水化物などの医薬担体を同様に粉砕したものと混合することによって調製される。香味剤、保存剤、分散剤、および着色剤も存在してよい。
【００６８】
カプセル剤は、上記のように粉末混合物を作製し、成形されたゼラチンまたは非ゼラチン系の剤皮に充填することによって作製される。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、固体ポリエチレングリコールなどの流動促進剤および滑沢剤を、充填操作の前に粉末混合物に添加することができる。寒天、炭酸カルシウム、または炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセル剤が摂取された際の医薬の利用度を向上するために添加することができる。
【００６９】
さらに、所望される場合または必要な場合には、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色剤もまた本混合物に配合することができる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖類（例えば、グルコースもしくはβ−ラクトース）、トウモロコシ甘味剤、天然および合成ガム、例えば、アラビアガム、トラガカントガム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの投与形に使用される滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、限定されるものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。
【００７０】
錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒またはスラッグを形成し、滑沢剤および崩壊剤を加え、打錠することにより調剤される。粉末混合物は、適宜粉砕された化合物を、上記の希釈剤または基剤、ならびに場合によりカルボキシメチルセルロース、およびアルギン酸塩、ゼラチン、もしくはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶解遅延剤、第四級塩などの再吸収促進剤、ならびに／またはベントナイト、カオリン、もしくはリン酸二カルシウムなどの吸収剤とともに混合することによって調製される。粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アカディア糊、またはセルロース系もしくはポリマー材料の溶液などの結合剤を湿らせ、スクリーンに通すことによって造粒することができる。造粒の別法として、粉末混合物を打錠機にかけることができるが、その結果、形成の不完全なスラッグが崩壊して顆粒となる。顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱油の添加により、錠剤成形鋳型への粘着を防ぐように滑沢化することができる。次に、滑沢化された混合物が打錠される。本発明の化合物または塩は、自由流動性の不活性担体と組み合わせて、造粒またはスラッグ化工程を経ずに、直接打錠することもできる。セラックの封止コート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスのつや出しコーティングからなる半透明の保護コーティングを提供することができる。異なった用量を識別するために、これらコーティングに色素を添加することができる。
【００７１】
溶液、シロップ、およびエリキシルなどの経口液は、所与量が所定量の有効成分を含有するように、単位投与形で調製することができる。シロップ剤は、本発明の化合物またはその塩を、適宜着香した水溶液に溶かすことにより調製することができ、一方、エリキシル剤は、非毒性のアルコール性ビヒクルの使用により調製される。懸濁液は、本発明の化合物または塩を非毒性ビヒクルに分散させることにより処方することができる。エトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存剤、ペパーミントオイルなどの着香添加剤、天然甘味剤、サッカリン、または他の人工甘味剤なども添加することができる。
【００７２】
必要に応じて、経口投与のための単位投与処方物をマイクロカプセル化することができる。処方物はまた、放出を延長または持続させるために、例えば、粒子状材料をポリマーまたはワックスなどでコーティングまたは包埋することにより調製することもできる。
【００７３】
本発明においては、錠剤およびカプセル剤が医薬組成物の送達のために好ましい。
【００７４】
本発明の別の側面によれば、式（Ｉ）の化合物またはその塩と少なくとも１種類の賦形剤とを混合（または混入）することを含んでなる、医薬組成物の調製方法が提供される。
【００７５】
本発明はまた、哺乳動物、特にヒトにおける治療の方法を提供する。本発明の化合物および組成物は、細胞増殖性疾患を治療するために使用される。本明細書で提供される方法および組成物により治療され得る病的状態には、限定されるものではないが、癌（以下にさらに述べる）、自己免疫疾患、真菌性障害、関節炎、移植片拒絶、炎症性腸疾患、限定されるものではないが、手術、血管形成術などを含む医療行為後に誘発される増殖などが含まれる。細胞は過増殖状態でも低増殖状態（異常な状態）でないと考えられてもなお治療が必要な場合があると認識される。例えば、創傷治癒中、細胞は「正常に」増殖しているといえるが、増殖の促進が望ましいと考えられる。よって、一態様では、本発明は、これらの障害または状態のいずれか１つに罹患したまたは罹患しようとしている細胞または患者への適用を含む。
【００７６】
本明細書で提供される組成物および方法は、特に、前立腺癌、乳癌、脳腫瘍、皮膚癌、子宮頸癌、精巣癌などの腫瘍を含む癌の治療に有用であると思われる。それらは特に転移性または悪性腫瘍の治療に特に有用である。より詳しくは、本発明の組成物および方法により治療可能な癌としては、限定されるものではないが、星状細胞癌、乳癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、肝細胞癌、喉頭癌、肺癌、経口癌、卵巣癌、前立腺癌および甲状腺癌および肉腫などの腫瘍種が含まれる。より具体的には、これらの化合物は、心臓：肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液腫、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫および奇形腫；肺：気管支原生癌（扁平上皮細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌）、肺胞（細気管支）癌、気管支腺腫、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫；消化管：食道（扁平上皮癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌腫、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（膵管腺癌、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）；尿生殖路：腎臓（腺癌、ウィルムス腫瘍（腎芽細胞腫）、リンパ腫、白血病）、膀胱および尿道（扁平上皮癌、移行上皮癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、精巣（精上皮腫、奇形腫、胚性癌腫、奇形癌、絨毛癌、肉腫、間質性細胞癌、線維腫、線維腺腫、腺腫様腫瘍、脂肪腫）；肝臓：肝細胞腫（肝細胞癌）、胆管癌、肝芽細胞腫、血管肉腫、肝細胞性腺腫、血管腫；胆道：胆嚢癌、乳頭部癌、胆管癌；骨：骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫瘍、脊索腫、オステオクロンフローマ(osteochronfroma)（骨軟骨性外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨腫および巨細胞腫；神経系：頭骨（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、脳室上衣細胞腫、胚細胞腫（松果体腫）、多形性膠芽腫、乏突起膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）；婦人科：子宮（子宮内膜癌）、子宮頸（子宮頸癌、腫瘍前子宮頚部異形成）、卵巣（卵巣癌（漿液性嚢胞腺癌、粘液性嚢胞腺癌、未分類癌）、顆粒膜卵胞膜細胞腫、セルトリライディッヒ細胞腫、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、陰門（扁平上皮癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、扁平上皮癌、ブドウ状肉腫（胎児性横紋筋肉腫）、卵管（癌）；血液系：血液（骨髄性白血病（急性および慢性）、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（悪性リンパ腫）；皮膚：悪性黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮癌、カポジ肉腫、黒子(moles)異形成母斑、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬；および副腎：神経芽細胞腫を治療するために使用することができる。よって、本明細書に示される「癌性細胞」という用語は、上記で特定された病態のいずれか１つの侵された、または関連する細胞を含む。
【００７７】
本発明の化合物および組成物は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染の治療（treat）又は治癒（cure）に使用することができる。一態様において、患者に治療有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、ＨＩＶ感染を治療する方法が提供される。別の態様において、ＨＩＶ患者に治療有効量の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、ＨＩＶ感染を治癒する方法が提供される。別の態様において、ＨＩＶ感染の治療に使用するための医薬（medicament）の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物の使用が提供される。別の態様において、ＨＩＶ感染の治癒に使用するための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物の使用が提供される。別の態様において、ＨＩＶ感染の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。別の態様において、ＨＩＶ感染の治癒に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００７８】
本化合物は、他の治療薬、特に、本化合物の活性を増強するまたは消失時間を延長する薬剤と組み合わせるか、または共投与することができる。本発明による組合せ療法は、少なくとも１つの本発明の化合物の投与と少なくとも１つの他の治療方法の使用を含んでなる。一態様では、本発明による組合せ療法は、少なくとも１つの本発明の化合物の投与と外科的療法を含んでなる。一態様では、本発明による組合せ療法は、少なくとも１つの本発明の化合物の投与と放射線療法を含んでなる。一態様では、組合せ療法は、本発明によれば、少なくとも１つの本発明の化合物と少なくとも１つの支持療法剤（例えば、少なくとも１つの制吐薬）の投与を含んでなる。一態様では、本発明による組合せ療法は、少なくとも１つの本発明の化合物と少なくとも１つの他の化学療法薬の投与を含んでなる。ある特定の態様では、本発明は、少なくとも１つの本発明の化合物と少なくとも１つの抗新生物薬の投与を含んでなる。さらに別の態様では、本発明は、本開示のＥＺＨ２阻害剤はそれら自体、活性または有意に活性はないが、単独療法として活性があってもなくてもよい別の療法と組み合わせた際に、その組合せが有用な治療転帰を与える療法計画を含んでなる。
【００７９】
用語「共投与する」およびその派生語は、本明細書で使用する場合、本明細書に記載のＥＺＨ２阻害化合物と、化学療法および放射線療法を含む癌治療において有用であることが知られているさらなる１または複数の有効成分との同時投与またはいずれかの個別逐次投与様式を意味する。さらなる１または複数の有効成分という用語は、本明細書で使用する場合、癌治療を必要とする患者に投与した際に有利な特性を示すことが知られる、または示す任意の化合物または治療薬を含む。好ましくは、投与が同時でない場合、これらの化合物は互い近接した時間に投与される。さらに、化合物が同じ投与形で投与されるかどうかは問われず、例えば、ある化合物を局所投与し、別の化合物を経口投与してもよい。
【００８０】
一般に、治療される感受性腫瘍に対して活性を有する抗新生物薬が、本発明において特定の癌の治療に共投与され得る。このような薬剤の例は、Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T. Devita and S. Hellman (編), 第6版（2001年2月15日）, Lippincott Williams & Wilkins Publishersに見出せる。当業者は、関与する薬物および癌の特定の特性に基づいて、薬剤のどの組合せが有用であるかを識別することができる。本発明において有用である典型的な抗新生物薬としては、限定されるものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドなどの微小管阻害剤；白金配位錯体；ナイトロジェンマスタード、オキサアザホスホリン、アルキルスルホネート、ニトロソ尿素、およびトリアゼンなどのアルキル化剤；アントラサイクリン、アクチノマイシン、およびブレオマイシンなどの抗生物質；エピポドフィロトキシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤；プリンおよびピリミジン類似体および抗葉酸化合物などの代謝拮抗剤；カンプトテシンなどのトポイソメラーゼＩ阻害剤；ホルモンおよびホルモン類似体；アザシチジンおよびデシタビンなどのＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤；シグナル伝達経路阻害剤；非受容体チロシンキナーゼ血管新生阻害剤；免疫治療薬；アポトーシス促進剤；ならびに細胞周期シグナル伝達阻害剤が挙げられる。
【００８１】
一般に、治療される感受性新生物に対して活性を有する任意の化学療法薬は、特定の薬剤が本発明の化合物を使用する療法に臨床上適合する限り、本発明の化合物と組み合わせて使用してよい。本発明において有用な典型的な抗新生物薬としては、限定されるものではないが、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、細胞分裂抑制薬、ヌクレオシド類似体、トポイソメラーゼＩおよびＩＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似体；レチノイド、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤；細胞増殖または増殖因子機能の阻害剤、血管新生阻害剤、およびセリン／トレオニンまたは他のキナーゼ阻害剤を含むシグナル伝達経路阻害剤；サイクリン依存性キナーゼ阻害剤；モノクローナル、ワクチンまたは他の生物薬剤を含む、アンチセンス療法および免疫治療薬が挙げられる。
【００８２】
式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と組み合わせて使用することができる優良な（select）抗腫瘍剤（oncology agent）としては、これらに限定されるわけではないが、５−フルオロウラシル、アバレリクス、アビラテロン、トラスツズマブ  エムタンシン（ado-trastuzumab emtansine）、アファチニブ、アフリベルセプト、アレクチニブ、アナストロゾール、アテゾリズマブ、アキシチニブ、ベリノスタット、ベンダムスチン、ベバシズマブ、ブリナツモマブ、ボルテゾミブ、ボスチニブ、ブレンツキシマブ  ベドチン、カバジタキセル、カボザンチニブ、カルフィルゾミブ、セリチニブ、セツキシマブ、クロファラビン、コビメチニブ、クリゾチニブ、ダブラフェニブ、ダラツムマブ、ダサチニブ、デガレリクス、デノスマブ、ジヌツキシマブ、ドセタキセル、ドキソルビシン、エロツズマブ、エンザルタミド、エピルビシン、エリブリン、エルロチニブ、エベロリムス、フィルグラスチム、フルタミド、フルベストラント、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ  オゾガマイシン、ゴセレリン、イブリツモマブ、イブルチニブ、イデラリシブ、イマチニブ、イピリムマブ、イリノテカン、イキサベピロン、イキサゾミブ、ラパチニブ、レナリドミド、レンバチニブ、レトロゾール、ロイコボリン、リュープロリド、メクロレタミン、ネシツムマブ、ネララビン、ネツピタント、ニロチニブ、ニボルマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、オラパリブ、オマセタキシン、オシメルチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パルボシクリブ、パロノセトロン、パニツムマブ、パノビノスタット、パゾパニブ、ペンブロリズマブ、ペメトレキセド、ペルツズマブ、プレリキサフォル、ポマリドミド、ポナチニブ、プララトレキサート、ラムシルマブ、レゴラフェニブ、リツキシマブ、ロラピタント、ロミデプシン、シプリューセル−Ｔ、ソニデジブ、ソラフェニブ、スニチニブ、テムシロリムス、チピラシル、トポテカン、トラベクテジン、トラメチニブ、トラスツズマブ、トリフルリジン、トリプトレリン、ウリジン、バンデタニブ、ベムラフェニブ、ベネトクラクス、ビンクリスチン、ビスモデギブ、およびボリノスタットが挙げられる。
【００８３】
ヌクレオシド類似体は、デオキシヌクレオチド三リン酸に変換され、複製中のＤＮＡにシトシンの代わりに組み込まれる化合物である。ＤＮＡメチルトランスフェラーゼは、修飾された塩基に共有結合して、不活性な酵素およびＤＮＡメチル化の低下をもたらす。ヌクレオシド類似体の例としては、骨髄異形成障害の治療に使用されるアザシチジンおよびデシタビンが挙げられる。ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤としては、皮膚Ｔ細胞リンパ腫の治療のためのボリノスタットが含まれる。ＨＤＡＣは、ヒストンの脱アセチル化を介してクロマチンを修飾する。さらに、ＨＤＡＣは、多くの転写因子およびシグナル達分子を含む多様な基質を有する。他のＨＤＡＣ阻害剤も開発中である。
【００８４】
シグナル伝達経路阻害剤は、細胞内変化を引き起こす化学プロセスを遮断または阻害する阻害剤である。本明細書で使用する場合、この変化は細胞増殖または分化または生存である。本発明において有用なシグナル伝達阻害剤としては、限定されるものではないが、受容体チロシンキナーゼ、非受容体型チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断剤、セリン／トレオニンキナーゼ、ホスファチジルイノシトール−３−ＯＨキナーゼ、ミオイノシトールシグナル伝達およびＲａｓ癌遺伝子の阻害剤が含まれる。シグナル伝達経路阻害剤は、上記の組成物および方法において本発明の化合物と組み合わせて使用され得る。
【００８５】
受容体キナーゼ血管新生阻害剤はまた、本発明において使用が見出せる。ＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ−２に関連する血管新生の阻害剤は、シグナル伝達阻害剤に関して上記で述べられている（両方とも受容体チロシンキナーゼ）。他の阻害剤も本発明の化合物と組み合わせて使用可能である。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体チロシンキナーゼ）を認識しないが、そのリガンドと結合する抗ＶＥＧＦ抗体；血管新生を阻害するインテグリン（αｖβ３）の小分子阻害剤；エンドスタチンおよびアンギオスタチン（非ＲＴＫ）も本発明の化合物と組み合わせた場合に有用であるといえる。ＶＥＧＦＲ抗体の一例は、ベバシズマブ（アバスチン(AVASTIN)（商標））である。
【００８６】
増殖因子受容体のいくつかの阻害剤が開発中であり、リガンドアンタゴニスト、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤、アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびアプタマーが含まれる。これらの増殖因子受容体阻害剤はいずれも、本明細書に記載の組成物および方法／使用のいずれにおいても本発明の化合物と組み合わせて使用可能である。トラスツズマブ（ハーセプチン(Herceptin)（商標））は、増殖因子機能の抗ｅｒｂＢ２抗体阻害剤の一例である。増殖因子機能の抗ｅｒｂＢ１抗体阻害剤の一例は、セツキシマブ（エルビタックス(Erbitux)（商標）、Ｃ２２５）である。ベバシズマブ（アバスチン(Avastin)（商標））は、ＶＥＧＦＲに対するモノクローナル抗体の一例である。上皮細胞増殖因子受容体の小分子阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ラパチニブ（Tykerb（商標））およびエルロチニブ（タルセバ(TARCEVA)（商標））が挙げられる。メシル酸イマチニブ（グリベック(GLEEVEC)（商標））は、ＰＤＧＦＲ阻害剤の一例である。ＶＥＧＦＲ阻害剤の例としては、パゾパニブ（ボトリエント(Votrient)（商標））、ＺＤ６４７４、ＡＺＤ２１７１、ＰＴＫ７８７、スニチニブおよびソラフェニブが挙げられる。
【００８７】
微小管阻害剤または有糸分裂阻害剤は、細胞周期のＭ期、すなわち有糸分裂期の間に腫瘍細胞の微小管に対して活性である細胞周期特異的薬剤である。微小管阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドが挙げられる。
【００８８】
ジテルペノイドは、天然源に由来し、細胞周期のＧ２／Ｍ期に作用する細胞周期特異的抗癌剤である。ジテルペノイドは、微小管のβ−チューブリンサブユニットと結合することによりこのタンパク質を安定化させると考えられている。その後タンパク質の分解が阻害され、有糸分裂が停止し、細胞死をたどると思われる。ジテルペノイドの例としては、限定されるものではないが、パクリタキセルおよびその類似体であるドセタキセルが挙げられる。
【００８９】
パクリタキセル、５β，２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサ−ヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４，１０−ジアセテート２−ベンゾエートの（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとの１３−エステルは、タイヘイヨウイチイ(Taxus brevifolia)から単離された天然ジテルペン生成物であり、注射液タキソール(TAXOL)（商標）として市販されている。パクリタキセルは、テルペンのタキサンファミリーのメンバーである。パクリタキセルは、１９７１年にWaniら(J. Am. Chem, Soc., 93:2325. 1971)によって初めて単離され、化学法およびＸ線結晶学的方法によってその構造が同定された。その活性の１つの機構は、パクリタキセルの、チューブリンと結合し、それにより癌細胞増殖を阻害する能力に関連している。Schiff et al., Proc. Natl, Acad, Sci. USA, 77:1561-1565 (1980); Schiff et al., Nature, 277:665-667 (1979); Kumar, J. Biol, Chem, 256: 10435-10441 (1981)。いくつかのパクリタキセル誘導体の合成および抗癌活性に関する総説としては、D. G. I. Kingston et al., Studies in Organic Chemistry vol. 26, “New trends in Natural Products Chemistry 1986”, Attaur-Rahman, P.W. Le Quesne編(Elsevier, Amsterdam, 1986) pp 219-235を参照。
【００９０】
パクリタキセルは、米国における難治性卵巣癌の治療における臨床使用(Markman et al., Yale Journal of Biology and Medicine, 64:583, 1991; McGuire et al., Ann. lnt, Med., 111:273,1989)および乳癌の治療(Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83:1797,1991)に承認されている。パクリタキセルは、皮膚における新生物(Einzig et. al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46)および頭頸部癌(Forastire et. al., Sem. Oncol., 20:56, 1990)の治療のための潜在的候補である。またこの化合物は、多発性嚢胞腎疾患(Woo et. al., Nature, 368:750. 1994)、肺癌、およびマラリアの治療にも可能性を示している。パクリタキセルで患者を治療すると、閾値濃度（５０ｎＭ）を超える投与期間に関連して(Kearns, C.M. et. al., Seminars in Oncology, 3(6) p.16-23, 1995)、骨髄抑制が起こる（複数の細胞系譜、Ignoff, R.J. et. al, Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998）。
【００９１】
ドセタキセル、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルの５β−２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４−アセテート２−ベンゾエートとの１３−エステルの三水和物は、注射液としてタキソテール(TAXOTERE)（商標）として市販されている。ドセタキセルは、乳癌の治療に指示される。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの針葉から抽出した天然の前駆物質１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを使用して製造された、パクリタキセル（前項参照）の半合成誘導体である。ドセタキセルの用量制限毒性は好中球減少である。
【００９２】
ビンカアルカロイドは、ニチニチソウ由来の細胞周期特異的抗新生物薬である。ビンカアルカロイドは、チューブリンと特異的に結合することによって細胞周期のＭ期（有糸分裂）に作用する。その結果、結合されたチューブリン分子は、重合して微小管になることができない。有糸分裂は中期で停止し、細胞死をたどると考えられている。ビンカアルカロイドの例としては、限定されるものではないが、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビノレルビンが挙げられる。
【００９３】
ビンブラスチン、硫酸ビンカロイコブラスチンは、注射液としてベルバン(VELBAN)（商標）として市販されている。ビンブラスチンは、種々の固形腫瘍の第二選択療法として指示される可能性があるが、精巣癌、ならびにホジキン病、リンパ球性および組織球性リンパ腫を含む種々のリンパ腫の治療に主として指示される。骨髄抑制がビンブラスチンの用量制限副作用である。
【００９４】
ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチンの２２−オキソ−硫酸塩は、注射液としてオンコビン(ONCOVIN)（商標）として市販されている。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に指示されており、ホジキンおよび非ホジキン悪性リンパ腫の治療計画の中でも使用されている。脱毛および神経学的作用がビンクリスチンの最も一般的な副作用であり、程度は低いが、骨髄抑制および胃腸粘膜炎作用が生じる。
【００９５】
酒石酸ビノレルビンの注射液（ナベルビン(NAVELBINE)（商標））として市販されているビノレルビン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−Ｃ’−ノルビンカロイコブラスチン［Ｒ−（Ｒ＊，Ｒ＊）−２，３−ジヒドロキシブタン二酸（１：２）（塩）］は、半合成ビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、単剤として、またはシスプラチンなどの他の化学療法薬と組み合わせて、種々の固形腫瘍、特に、非小細胞肺癌、進行性乳癌、およびホルモン不応性前立腺癌の治療に指示される。骨髄抑制がビノレルビンの最も一般的な用量制限副作用である。
【００９６】
白金配位錯体は、非細胞周期特異的抗癌剤であり、ＤＮＡと相互作用する。白金錯体は、腫瘍細胞に侵入し、アクア化を受け、ＤＮＡとの鎖内架橋および鎖間架橋を形成し、腫瘍に対して有害な生物学的作用を引き起こす。白金配位錯体の例としては、限定されるものではないが、シスプラチンおよびカルボプラチンが挙げられる。
【００９７】
シスプラチン、シス−ジアンミンジクロロ白金は、注射液としてプラチノール(PLATINOL)（商標）として市販されている。シスプラチンは、主として転移性の精巣癌および卵巣癌ならびに進行性膀胱癌の治療に指示される。シスプラチンの主な用量制限副作用は、腎毒性（水分補給と利尿により管理可能）、および耳毒性である。
【００９８】
カルボプラチン、ジアンミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシレート（２−）−Ｏ，Ｏ’］白金は、注射液としてパラプラチン(PARAPLATIN)（商標）として市販されている。カルボプラチンは、主として進行性卵巣癌の第一選択および第二選択治療に指示される。骨髄抑制がカルボプラチンの用量制限毒性である。
【００９９】
アルキル化剤は、非細胞周期特異的抗癌剤 (non-phase anti-cancer specific agents)であり、かつ、強力な求電子試薬である。一般に、アルキル化剤は、アルキル化によって、リン酸基、アミノ基、スルフヒドリル基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、およびイミダゾール基などのＤＮＡ分子の求核部分を介してＤＮＡと共有結合を形成する。このようなアルキル化によって核酸機能が破壊され細胞死に至る。アルキル化剤の例としては、限定されるものではないが、シクロホスファミド、メルファラン、およびクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタード；ブスルファンなどのスルホン酸アルキル；カルムスチンなどのニトロ尿素；ならびにダカルバジンなどのトリアゼンが挙げられる。
【０１００】
シクロホスファミド、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキシアザホスホリン２−オキシド一水和物は、注射液または錠剤としてシトキサン(CYTOXAN)（商標）として市販されている。シクロホスファミドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、および白血病の治療に指示される。脱毛、悪心、嘔吐および白血球減少がシクロホスファミドの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０１】
メルファラン、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニンは、注射液または錠剤としてアルケラン(ALKERAN)（商標）として市販されている。メルファランは、多発性骨髄腫および切除不能な卵巣上皮癌の待期療法に指示される。骨髄抑制がメルファランの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０２】
クロラムブシル、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸は、ロイケラン(LEUKERAN)（商標）錠剤として市販されている。クロラムブシルは、慢性リンパ性白血病、ならびにリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫、およびホジキン病などの悪性リンパ腫の待期療法に指示される。骨髄抑制がクロラムブシルの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０３】
ブスルファン、ジメタンスルホン酸１，４−ブタンジオールは、マイレラン(MYLERAN)（商標）錠剤として市販されている。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の待期療法に指示される。骨髄抑制がブスルファンの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０４】
カルムスチン、１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソ尿素は、ＢｉＣＮＵ（商標）として凍結乾燥物質の単一バイアルとして市販されている。カルムスチンは、脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、および非ホジキンリンパ腫用に、単剤として、または他の薬剤と組み合わせて、待期療法に指示される。遅発性骨髄抑制がカルムスチンの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０５】
ダカルバジン、５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドは、材料の単一バイアルとしてＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（商標）として市販されている。ダカルバジンは、転移性悪性黒色腫の治療、および他の薬剤と組み合わせてホジキン病の第二選択治療に指示される。悪心、嘔吐、および食欲不振がダカルバジンの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０６】
抗生物質系抗新生物薬は、非細胞周期特異的薬剤であり、ＤＮＡと結合するかまたはＤＮＡにインターカレートする。一般に、このような作用によって安定なＤＮＡ複合体かまたは鎖の切断が生じ、それにより核酸の通常機能が乱れ、細胞死に至る。抗生物質系抗新生物薬の例としては、限定されるものではないが、ダクチノマイシンなどのアクチノマイシン；ダウノルビシンおよびドキソルビシンなどのアントロサイクリン；ならびにブレオマイシンが挙げられる。
【０１０７】
ダクチノマイシンは、アクチノマイシンＤとしても知られ、注射液の形態でコスメゲン(COSMEGEN)（商標）として市販されている。ダクチノマイシンは、ウィルムス腫瘍および横紋筋肉腫の治療に指示される。悪心、嘔吐および食欲不振がダクチノマイシンの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０８】
ダウノルビシン、（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リクソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、リポソーム注射形態としてダウノキソーム(DAUNOXOME)（商標）として、または注射液としてセルビジン(CERUBIDINE)（商標）として市販されている。ダウノルビシンは、急性非リンパ球性白血病および進行性ＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療における寛解導入に指示される。骨髄抑制がダウノルビシンの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１０９】
ドキソルビシン、（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リクソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル，７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、注射可能な形態としてルベックス(RUBEX)（商標）またはアドリアマイシンＲＤＦ(ADRIAMYCIN RDF)（商標）として市販されている。ドキソルビシンは、主として急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄芽球性白血病の治療に指示されるが、いくつかの固形腫瘍およびリンパ腫の治療における有用成分でもある。骨髄抑制がドキソルビシンの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１１０】
ブレオマイシン、ストレプトミセス・ヴェルチシルス(Streptomyces verticillus)の株から単離された細胞傷害性グリコペプチド系抗生物質の混合物は、ベレノキサン(BLENOXANE)（商標）として市販されている。ブレオマイシンは、単剤として、または他の薬剤と組み合わせて、扁平上皮癌、リンパ腫、および精巣癌の待期療法に指示される。肺毒性および皮膚毒性がブレオマイシンの最も一般的な用量制限副作用である。
【０１１１】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤としては、限定されるものではないが、エピポドフィロトキシンが挙げられる。
【０１１２】
エピポドフィロトキシンは、マンドレイク植物由来の細胞周期特異的抗新生物薬である。エピポドフィロトキシンは、一般に、トポイソメラーゼＩＩとＤＮＡとの三元複合体を形成してＤＮＡ鎖の切断を引き起こすことによって、細胞周期のＳ期およびＧ２期において細胞に影響を及ぼす。この鎖切断が蓄積し、細胞死をたどる。エピポドフィロトキシンの例としては、限定されるものではないが、エトポシドおよびテニポシドが挙げられる。
【０１１３】
エトポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射液またはカプセル剤としてベプシド(VePESID)（商標）として市販されており、一般にＶＰ−１６として知られている。エトポシドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、精巣癌および非小細胞肺癌の治療に指示される。骨髄抑制がエトポシドの最も一般的な副作用である。白血球減少の発生率の方が、血小板減少(leukopenialeukopenia)よりも重大となる傾向がある。
【０１１４】
テニポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射液としてブモン(VUMON)（商標）として市販されており、一般にＶＭ−２６として知られている。テニポシドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、小児における急性白血病の治療に指示される。骨髄抑制がテニポシドの最も一般的な用量制限副作用である。テニポシドは、白血球減少(leukopenialeukopenia)および血小板減少の両方を誘発し得る。
【０１１５】
代謝拮抗性抗新生物薬は、ＤＮＡ合成を阻害すること、またはプリンもしくはピリミジン塩基の合成を阻害し、それによりＤＮＡ合成を制限することによって細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）に作用する、細胞周期特異的抗新生物薬である。その結果、Ｓ期は進行せず、細胞死をたどる。代謝拮抗性抗新生物薬の例としては、限定されるものではないが、フルオロウラシル、メトトレキサート、シタラビン、メルカプトプリン(mecaptopurine)、チオグアニン、およびゲムシタビンが挙げられる。
【０１１６】
５−フルオロウラシル、５−フルオロ−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）ピリミジンジオンは、フルオロウラシルとして市販されている。５−フルオロウラシルを投与すると、チミジル酸合成が阻害され、またＲＮＡおよびＤＮＡの両方に組み込まれる。その結果は一般に細胞死である。５−フルオロウラシルは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、乳癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、および膵癌の治療に指示される。骨髄抑制および粘膜炎が５−フルオロウラシルの用量制限副作用である。他のフルオロピリミジン類似体としては、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジン一リン酸が挙げられる。
【０１１７】
シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノンは、シトサール−Ｕ(CYTOSAR-U)（商標）として市販されており、一般にＡｒａ−Ｃとして知られている。シタラビンは、成長中のＤＮＡ鎖へのシタラビンの末端組み込みによってＤＮＡ鎖の伸長を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示すと考えられている。シタラビンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。他のシチジン類似体としては、５−アザシチジンおよび２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）が挙げられる。シタラビンは、白血球減少(leukopenialeukopenia)、血小板減少、および粘膜炎を誘発する。
【０１１８】
メルカプトプリン、１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物は、プリントール(PURINETHOL)（商標）として市販されている。メルカプトプリンは、現時点でまだ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示す。メルカプトプリンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。骨髄抑制および胃腸粘膜炎が、高用量のメルカプトプリンの副作用と予想される。有用なメルカプトプリン類似体はアザチオプリンである。
【０１１９】
チオグアニン、２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、タブロイド(TABLOID)（商標）として市販されている。チオグアニンは、現時点でまだ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示す。チオグアニンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。白血球減少(leukopenialeukopenia)、血小板減少、および貧血を含む骨髄抑制がチオグアニン投与の最も一般的な用量制限副作用である。しかしながら、消化管副作用も起こり、用量制限となり得る。他のプリン類似体としては、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、リン酸フルダラビン、およびクラドリビンが挙げられる。
【０１２０】
ゲムシタビン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン一塩酸塩（β−異性体）は、ジェムザール(GEMZAR)（商標）として市販されている。ゲムシタビンは、Ｓ期にて、またＧ１／Ｓ境界を通る細胞の進行を遮断することによって、細胞期特異性を示す。ゲムシタビンは、シスプラチンと組み合わせて局所進行性非小細胞肺癌の治療に指示され、また単独で局所進行性膵癌の治療に指示される。白血球減少(leukopenialeukopenia)、血小板減少、および貧血を含む骨髄抑制が、ゲムシタビン投与の最も一般的な用量制限副作用である。
【０１２１】
メトトレキサート、Ｎ−［４［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸は、メトトレキサートナトリウムとして市販されている。メトトレキサートは、プリンヌクレオチドおよびチミジル酸の合成に必要とされるジヒドロ葉酸レダクターゼの阻害を介して、ＤＮＡの合成、修復、および／または複製を阻害することによって、特にＳ期に細胞周期作用を示す。メトトレキサートは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫、ならびに乳癌、頭部癌、頸部癌、卵巣癌、および膀胱癌の治療に指示される。骨髄抑制（白血球減少、血小板減少、および貧血）および粘膜炎が、メトトレキサート投与の予想される副作用である。
【０１２２】
カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を含むカンプトテシン類は、トポイソメラーゼＩ阻害剤として入手可能または開発中である。カンプトテシン細胞傷害活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害活性に関連すると考えられている。カンプトテシンの例としては、限定されるものではないが、イリノテカン、トポテカン、および下記の７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学形態が挙げられる。
【０１２３】
イリノテカンＨＣｌ、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩は、注射液カンプトサール(CAMPTOSAR)（商標）として市販されている。
【０１２４】
イリノテカンは、その活性代謝物ＳＮ−３８とともにトポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体と結合する、カンプトテシンの誘導体である。細胞傷害性は、トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリンテカンまたはＳＮ−３８の三元複合体と複製酵素との相互作用により引き起こされる回復不能な二本鎖切断の結果として生じると考えられている。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療に指示される。イリノテカンＨＣｌの用量制限副作用は、好中球減少を含む骨髄抑制、および下痢を含むＧＩ作用である。
【０１２５】
トポテカンＨＣｌ、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩は、注射液ハイカムチン(HYCAMTIN)（商標）として市販されている。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体と結合して、ＤＮＡ分子のねじれ歪みに応答してトポイソメラーゼＩにより引き起こされる一本鎖切断の再連結を妨げるカンプトテシンの誘導体である。トポテカンは、転移性の卵巣癌および小細胞肺癌の第二選択治療に指示される。トポテカンＨＣｌの用量規制副作用は、骨髄抑制、主に好中球減少である。
【０１２６】
さらに、式（Ｉ）の化合物は、ＨＩＶの治療または治癒に有用であり得る１種以上のその他の薬剤と組み合わせて使用することができる。
【０１２７】
そのような薬剤の具体例としては、これらに限定されるわけではないが：
ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、例えば、ジドブジン、ジダノシン、ラミブジン、ザルシタビン、アバカビル、スタブジン、アデホビル、アデホビル  ジピボキシル、ホジブジン（fozivudine）、トドキシル、エムトリシタビン、アロブジン、アムドキソビル、エルブシタビン、及び類似の薬剤；
非ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤（イムノカル、オルチプラズなどの抗酸化活性を有する薬剤を含む）、例えば、ネビラピン、デラビルジン、エファビレンツ（efavirenz）、ロビリデ、イムノカル、オルチプラズ、カプラビリン、レルシビリン、ＧＳＫ２２４８７６１，ＴＭＣ−２７８，ＴＭＣ−１２５，エトラビリン、及び類似の薬剤；
プロテアーゼ阻害剤、例えば、サキナビル、リトナビル、インジナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、ブレカナビル、ダルナビル、アタザナビル、チプラナビル、パリナビル、ラシナビル、及び類似の薬剤；
侵入、結合及び融合阻害剤、例えば、エンフュービルタイド（enfuvirtide）（T-20）、Ｔ−１２４９、ＰＲＯ−５４２、ＰＲＯ−１４０、ＴＮＸ−３５５、ＢＭＳ−８０６、ＢＭＳ−６６３０６８、及びＢＭＳ−６２６５２９、５−Ｈｅｌｉｘ、並びに類似の薬剤；
インテグラーゼ阻害剤、例えば、ラルテグラビル、エルビテグラビル、ドルテグラビル、カボテグラビル、及び類似の薬剤；
成熟阻害剤、例えば、ＰＡ−３４４及びＰＡ−４５７、並びに類似の薬剤；
ＣＸＣＲ４及び／又はＣＣＲ５阻害剤、例えば、ビクリビロク（Ｓｃｈ−Ｃ）、Ｓｃｈ−Ｄ、ＴＡＫ７７９、マラビロク（ＵＫ４２７、８５７）、ＴＡＫ４４９、並びに、ＷＯ０２／７４７６９、ＰＣＴ／ＵＳ０３／３９６４４、ＰＣＴ／ＵＳ０３／３９９７５、ＰＣＴ／ＵＳ０３／３９６１９、ＰＣＴ／ＵＳ０３／３９６１８、ＰＣＴ／ＵＳ０３／３９７４０、及びＰＣＴ／ＵＳ０３／３９７３２に開示されたもの、並びに類似の薬剤
が挙げられる。
【０１２８】
本発明の化合物を、ＨＩＶの予防または治療に有用な１種以上の薬剤と組み合わせて使用することができるさらなる具体例は、表１に記載されている。
【０１２９】
【表１】
2018522874.tif 000014
2018522874.tif 000015
【０１３０】
本発明の化合物とＨＩＶ剤との組み合わせの範囲は、上記の組み合わせに限定されず、原理上、ＨＩＶの治療または治癒に有用な、いかなる医薬組成物との組み合わせも含まれる。注意すべき点は、本発明の化合物とその他のＨＩＶ剤とのそのような組み合わせにおいて、別々に投与されてもよいし、一緒に投与されてもよいことである、さらに、１種の薬剤は、他の薬剤（単数または複数）の投与の前、該投与と同時、または該投与の後であってもよい。
【０１３１】
本発明の化合物は、ＨＩＶの予防又は治療のためのさらなる化合物の有無にかかわらず、加えて薬理学的エンハンサーとして有用な１種以上の薬剤と併用して使用されてもよい。このような薬理学的エンハンサー（又は薬物動態的ブースター（pharmakinetic booster））の例には、限定されるものではないが、リトナビル、ＧＳ−９３５０及びＳＰＩ−４５２が含まれる。リトナビルは、１０−ヒドロキシ−２−メチル−５−（１−メチルエチル）−１−１［２−（１−メチルエチル）−４−チアゾリル］−３，６−ジオキソ−８，１１−ビス（フェニルメチル）−２，４，７，１２−テトラアザトリデカン−１３−酸，５−チアゾリルメチルエステル，［５Ｓ−（５Ｓ＊，８Ｒ＊，１０Ｒ＊，１１Ｒ＊）］であり、ノルビルとしてAbbott park, IllinoisのAbbott Laboratoriesから入手できる。リトナビルは、ＨＩＶ感染の治療のための他の抗レトロウイルス剤と適応されるＨＩＶプロテアーゼ阻害剤である。リトナビルは、Ｐ−グリコプロテイン（Ｐｇｐ）細胞輸送系に加えてＰ４５０仲介薬剤代謝も阻害し、それにより、生体内の活性化合物の濃度増加をもたらす。ＧＳ−９３５０は、薬理学的エンハンサーとして、Foster City CaliforniaのGilead Sciencesにより開発されている化合物である。ＳＰＩ−４５２は、薬理学的エンハンサーとして、Gaithersburg, MarylandのSequoia Pharmaceuticalsにより開発されている化合物である。
【０１３２】
本明細書には、ＥＺＨ１および／またはＥＺＨ２を阻害することによって改善することができ、それによって、例えば、メチル化により活性化される標的遺伝子およびメチル化により抑制される標的遺伝子の発現のレベルを調節したり、シグナル伝達タンパク質の活性を調節したりする、自己免疫および炎症性の病態および疾患の治療または予防法が提供される。方法は、本明細書に記載された薬剤の治療的有効量を、ヒト（例えば、それを必要とするヒト）に投与することを含んでなりうる。       
【０１３３】
炎症は、外傷に対する、一群の血管性、細胞性、および神経性の応答を意味する。炎症は、単球、好中球、および顆粒球などの炎症細胞組織への移動として特徴付けられることができる。これは通常、内皮バリアー機能の減少および組織への浮腫を伴う。炎症は、急性または慢性のいずれかとして分類されることができる。急性炎症は、有害な刺激に対する体の初期応答であり、血液から傷害組織への血漿および白血球の移動の増加によって達成される。生化学的な事象のカスケードが伝播し、傷害組織内の局所血管系、免疫系、およびさまざまな細胞を巻き込んで、炎症反応を成熟させる。長期の炎症は、慢性炎症として知られ、炎症の部位に存在する細胞の種類の漸進的な変化を導き、炎症プロセスから同時に起こる組織の破壊および治癒を特徴とする。
【０１３４】
炎症は、感染症に対する免疫応答の一部として、または外傷に対する急性の応答として起こる場合、有益であり、通常は自己限定的である。しかし、炎症はさまざまな病態の下で有害な可能性がある。これには、感染体に応えて過剰な炎症が生じることが含まれ、臓器障害および死（例えば、敗血症の場合）につながる可能性がある。そのうえ、慢性炎症は、一般に有害であり、組織への重篤で不可逆的な障害を引き起して、数多くの慢性疾患の根源にある。そのような場合では、外来物質に対する慢性の応答はまた、自己組織に対するバイスタンダー（bystander）障害につながる可能性があるが、免疫応答はしばしば、自己組織（自己免疫）に向けられる。
【０１３５】
従って、抗炎症治療の目的は、この炎症を減じること、存在する場合、自己免疫を阻害すること、および生理的プロセスまたは治癒および組織修復の進行を可能にすることである。
【０１３６】
下記に例示されるように、薬剤は、筋骨格系炎症、血管炎症、神経炎症、消化器系炎症、眼炎症、生殖系の炎症、他の炎症を含む、体のいかなる組織および臓器の炎症を治療するのに使用されうる。
【０１３７】
筋骨格系炎症は、筋骨格系のいかなる炎症病態、特に手、手首、ひじ、肩、あご、脊椎、首、臀部、膝（knew）、足首、および足の関節を含む骨格関節を冒す炎症病態、ならびに腱などの筋肉を骨に結合させる組織を冒す病態を指す。本発明の化合物で治療されうる筋骨格系炎症の例としては、関節炎（例えば、変形性関節症、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、急性および慢性感染性関節炎、痛風および偽痛風に伴う感染性関節炎、ならびに若年性特発性関節炎）、腱炎、滑膜炎、腱鞘炎、滑液包炎、結合織炎（線維筋痛症）、上顆炎、筋炎、ならびに骨炎（例えば、ページェット病、恥骨骨炎、および嚢胞性線維性骨炎（osteitis fibrosa cystic）を含む）が挙げられる。
【０１３８】
眼炎症は、眼瞼を含む眼のいかなる構造体の炎症を指す。本発明において治療されうる眼炎症としては、例えば、眼瞼炎、眼瞼皮膚弛緩症、結膜炎、涙腺炎、角膜炎、乾性角結膜炎（ドライアイ）、強膜炎、睫毛乱生、およびブドウ膜炎が挙げられる。
【０１３９】
本発明において治療されうる神経系の炎症としては、例えば、脳炎、ギラン・バレー症候群、髄膜炎、神経性筋強直症、ナルコレプシー、多発性硬化症、脊髄炎、および統合失調症が挙げられる。
【０１４０】
本発明において治療されうる血管系またはリンパ系の炎症としては、例えば、動脈硬化（arthrosclerosis）、関節炎、静脈炎、血管炎、およびリンパ管炎が挙げられる。
【０１４１】
本発明において治療されうる消化器系の炎症病態としては、例えば、胆管炎、胆嚢炎、腸炎、小腸結腸炎、胃炎、胃腸炎、回腸炎、および直腸炎が挙げられる。
【０１４２】
本発明において治療されうる生殖系の炎症病態としては、例えば、子宮頸管炎、絨毛羊膜炎、子宮内膜炎、副睾丸炎、臍炎、卵巣炎、睾丸炎、卵管炎、卵管卵巣膿瘍、尿道炎、腟炎、外陰炎、および外陰部痛が挙げられる。
【０１４３】
薬剤を使用して、炎症性の構成要素を有する自己免疫の病態を治療しうる。そのような病態としては、急性汎発性全身性脱毛症（alopecia universalise）、ベーチェット病、シャーガス病、慢性疲労症候群、自律神経失調症、脳脊髄炎、強直性脊椎炎、再生不良性貧血、化膿性汗腺炎、自己免疫性肝炎、自己免疫性卵巣炎、セリアック病、クローン病、１型糖尿病、巨細胞性動脈炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本病、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、川崎病、エリテマトーデス、顕微鏡的大腸炎、顕微鏡的多発動脈炎、混合結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力症、オプソクローヌスミオクローヌス症候群（opsocionus myoclonus syndrome）、視神経炎、オード甲状腺炎（ord's thyroiditis）、天疱瘡、結節性多発動脈炎、多発筋痛症、ライター症候群、シェーグレン症候群、側頭動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、温式自己免疫性溶血性貧血、間質性膀胱炎、ライム病、斑状強皮症、サルコイドーシス、硬皮症、潰瘍性大腸炎、および白斑が挙げられる。
【０１４４】
薬剤を使用して、炎症性の構成要素を有するＴ細胞媒介性過敏性疾患を治療しうる。そのような病態としては、接触過敏症、接触皮膚炎（例えばツタウルシによるもの）、蕁麻疹（uticaria）、皮膚アレルギー、呼吸器アレルギー（花粉症、アレルギー性鼻炎）、およびグルテン過敏性腸症（セリアック病（Celliac disease））が挙げられる。
【０１４５】
本発明において処理治療されうる他の炎症病態としては、例えば、虫垂炎、皮膚炎、皮膚筋炎、心内膜炎、結合織炎、歯肉炎、舌炎、肝炎、化膿性汗腺炎、虹彩炎、喉頭炎、乳腺炎、心筋炎、腎炎、耳炎、膵炎、耳下腺炎、心膜炎（percarditis）、腹膜炎（peritonoitis）、咽頭炎、胸膜炎、肺臓炎、前立腺炎（prostatistis）、腎盂腎炎、および口内炎（stomatisi）、移植による拒否反応（腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓（例えば島細胞）、骨髄、角膜、小腸などの臓器、皮膚同種異系移植片、皮膚同種同系移植片、および心臓弁異種移植片（xengraft）、血清病（sewrum sickness）、ならびに移植片対宿主病を含む）、急性膵炎、慢性膵炎、急性呼吸窮迫症候群、セクザリー症候群（Sexary’s syndrome）、先天性副腎過形成症、非化濃性甲状腺炎、がんに伴う高カルシウム血症、天疱瘡、水疱性疱疹状皮膚炎、重症多形性紅斑、剥脱性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、季節性または通年性アレルギー性鼻炎、気管支ぜんそく、接触皮膚炎、アトピー性（astopic）皮膚炎、薬物過敏（hypersensistivity）反応、アレルギー性結膜炎、角膜炎、眼部帯状疱疹、虹彩炎および虹彩毛様体炎（oiridocyclitis）、網脈絡膜炎、視神経炎、症候性サルコイドーシス、劇症または播種性肺結核化学療法、成人における特発性血小板減少性紫斑病、成人における続発性血小板減少症、後天性（自己免疫性）溶血性貧血、成人における白血病およびリンパ腫、小児の急性白血病、限局性腸炎、自己免疫性血管炎、多発性硬化症、慢性閉塞性肺疾患、固形臓器移植拒絶、敗血症が挙げられる。
【０１４６】
好ましい治療は、移植による拒否反応、乾癬性関節炎、多発性硬化症、１型糖尿病、ぜんそく、全身性エリテマトーデス（lupus erythematosis）、慢性肺疾患、および感染性の病態（例えば敗血症）に伴う炎症の治療にいずれか１つを含む。
【０１４７】
医薬組成物は、単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供され得る。このような単位は、治療される病態、投与経路、ならびに患者の年齢、体重および状態によって、例えば、０．５ｍｇ〜１ｇ、好ましくは１ｍｇ〜７００ｍｇ、より好ましくは５ｍｇ〜１００ｍｇの式（Ｉ）の化合物を含有してよく、または医薬組成物は、単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供してもよい。好ましい単位用量組成物は、本明細書の上記に挙げたように、有効成分の一日用量もしくは分割用量、またはその適切な画分を含有するものである。さらに、このような医薬組成物は、製薬技術分野で周知のいずれの方法によって調製してもよい。
【０１４８】
医薬組成物は、例えば、経口（頬側または舌下を含む）、直腸内、経鼻、局所（頬側、舌下、または経皮を含む）、膣内、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、または皮内を含む）経路などの適切ないずれの経路による投与にも適合可能である。このような組成物は、例えば式（Ｉ）の化合物を１または複数の担体または賦形剤と会合させることにより、製薬分野で公知のいずれの方法によって調製してもよい。
【０１４９】
経口投与に適合した医薬組成物は、カプセル剤または錠剤などの離散単位；散剤または顆粒剤；水性または非水性液体中の溶液または懸濁液；可食フォームまたはホイップ；水中油型液体エマルションまたは油中水型液体エマルションとして提供され得る。
【０１５０】
カプセル剤は、上記のように粉末混合物を作製し、成形されたゼラチン剤皮に充填することによって作製される。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレングリコールなどの流動促進剤および滑沢剤を、充填操作の前に粉末混合物に添加することができる。寒天、炭酸カルシウム、または炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセル剤が摂取された際の医薬の利用度を向上するために添加することができる。
【０１５１】
さらに、所望される場合または必要な場合には、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色剤もまた本混合物に配合することができる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖類（例えば、グルコースもしくはβ−ラクトース）、トウモロコシ甘味剤、天然および合成ガム、例えば、アラビアガム、トラガカントガムまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの投与形に使用される滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、限定されるものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒またはスラッグを形成し、滑沢剤および崩壊剤を加え、打錠することにより調剤される。粉末混合物は、適宜粉砕された化合物を、上記の希釈剤または基剤、ならびに場合によりカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、もしくはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶解遅延剤、第四級塩などの再吸収促進剤、ならびに／またはベントナイト、カオリン、もしくはリン酸二カルシウムなどの吸収剤とともに混合することによって調製される。粉末混合物は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱油の添加により造粒することができる。次に、滑沢化された混合物が打錠される。本発明の化合物は、自由流動性の不活性担体と組み合わせて、造粒またはスラッグ化工程を経ずに、直接打錠することもできる。セラックの封止コート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスのつや出しコーティングからなる透明または不透明の保護コーティングを提供することができる。異なった単位用量を識別するために、これらコーティングに色素を添加することができる。
【０１５２】
溶液、シロップ、およびエリキシルなどの経口液は、所与量が所定量の式（Ｉ）の化合物を含有するように、単位投与形で調製することができる。シロップ剤は、本化合物を、適宜着香した水溶液に溶かすことにより調製することができ、一方、エリキシル剤は、非毒性のアルコール性ビヒクルの使用により調製される。懸濁液は、本化合物を非毒性ビヒクルに分散させることにより処方することができる。エトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存剤、ペパーミントオイルなどの着香添加剤、または天然甘味剤、またはサッカリン、または他の人工甘味剤なども添加することができる。
【０１５３】
必要に応じて、経口投与のための単位投与医薬組成物をマイクロカプセル化することができる。処方物はまた、放出を延長または持続させるために、例えば、粒子状材料をポリマーまたはワックスなどでコーティングまたは包埋することにより調製することもできる。
【０１５４】
直腸投与に適合した医薬組成物は、坐剤または浣腸として提供してよい。
【０１５５】
膣投与に適合した医薬組成物は、膣坐剤、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー処方物として提供してよい。
【０１５６】
非経口投与に適合した医薬処方物としては、抗酸化剤、バッファー、静菌剤および組成物を意図するレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性および非水性無菌注射液、ならびに沈殿防止剤および増粘剤を含み得る水性および非水性無菌懸濁液が含まれる。これらの医薬組成物は単位用量または複数用量容器、例えば、密閉アンプルおよびバイアルで提供されてよく、使用直前に無菌液体担体、例えば、注射水を加えるだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存してよい。即時調合注射溶液および懸濁液は、無菌の粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。
【０１５７】
医薬組成物は、特に上述した成分の他、対象とする処方物のタイプに関して当技術分野で慣例の他の薬剤を含んでよく、例えば、経口投与に好適なものは香味剤を含んでよいと理解されるべきである。
【０１５８】
本発明の化合物の治療上有効な量は、例えば、意図するレシピエントの年齢および体重、治療を必要とする厳密な病態およびその重篤度、処方物の性質、および投与経路を含むいくつかの因子によって異なり、最終的には投薬を支持する担当者の裁量にある。しかしながら、貧血治療のための有効量の式（Ｉ）の化合物は一般に、０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇレシピエント体重／日の範囲、好適には０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。７０ｋｇの成体哺乳動物では、１日当たりの実際の量は好適には７〜７００ｍｇであり、この量は１日当たり単回用量で与えられてよく、合計一日用量が同じとなるように１日当たり数回（例えば、２回、３回、４回、５回または６回）の分割用量で与えられてよい。有効量の塩または溶媒和物などは、式（Ｉ）の化合物自体の有効量の割合として決定され得る。上記に挙げられた他の症状の治療にも同様の用量が適当であることが想定される。
【０１５９】
定義
用語はそれらの許容される意味の範囲内で使用される。以下の定義は、定義された用語を限定するのではなく、明らかにすることを意味する。
【０１６０】
本明細書において使用する場合、用語「アルキル」は、明示された数の炭素原子を有する飽和、直鎖または分岐型炭化水素部分を表す。用語「（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」は、１〜４個の炭素原子を含有するアルキル部分を意味する。例示的アルキルとしては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、およびｔ−ブチルが挙げられる。
【０１６１】
「アルコキシ」は、酸素連結原子を通じて結合する上記アルキル基を含有する基を表す。用語「（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ」は、酸素連結原子を通じて結合する少なくとも１個かつ最大４個までの炭素原子を有する直鎖または分岐鎖炭化水素基を表す。本発明において有用な「（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ」基の例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、イソブトキシ、およびｔ−ブトキシが挙げられる。
【０１６２】
「ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」、「ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」、または「（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」など、用語「アルキル」が、他の置換基と組み合わせて使用される場合、用語「アルキル」は、二価の直鎖または分岐鎖炭化水素基を包含することが意図され、その結合点はアルキル部分を介する。用語「ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」は、直鎖または分岐鎖炭素基である１〜４個の炭素原子を含有するアルキル部分の１以上の炭素原子において、同じであっても異なっていてもよい１以上のハロゲン原子を有する基を有する基を意味することを意図する。本発明において有用な「ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」基の例としては、限定されるものではないが、−ＣＦ３（トリフルオロメチル）、−ＣＣｌ３（トリクロロメチル）、１，１−ジフルオロエチル、２−フルオロ−２−メチルプロピル、２，２−ジフルオロプロピル、２，２，２−トリフルオロエチルおよびヘキサフルオロイソプロピルが挙げられる。本発明において有用な「ヒドロキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」基の例としては、限定されるものではないが、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびヒドロキシイソプロピルが挙げられる。本発明において有用な「（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」基の例としては、限定されるものではないが、メトキシメチル、メトキシエチル、メトキシイソプロピル、エトキシメチル、エトキシエチル、エトキシイソプロピル、イソプロポキシメチル、イソプロポキシエチル、イソプロポキシイソプロピル、ｔ−ブトキシメチル、ｔ−ブトキシエチル、およびｔ−ブトキシイソプロピルが挙げられる。
【０１６３】
「ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−」または「（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−」など、用語「アルコキシ」が、他の置換基と組み合わせて使用される場合、用語「アルコキシ−」は、酸素結合原子を通じて結合する二価の直鎖または分岐鎖炭化水素基を包含することが意図され、その他の置換基は、アルコキシ基のアルキル部分に結合する。本発明において有用な「ヒドロキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−」基としては、限定されるものではないが、ヒドロキシエトキシ、ヒドロキシプロポキシ、およびヒドロキシブトキシが挙げられる。本発明において有用な「（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ（Ｃ２−Ｃ４）アルコキシ−」基としては、限定されるものではないが、メトキシエトキシ、メトキシプロポキシ、メトキシブトキシ、エトキシエトキシ、エトキシプロポキシ、エトキシブトキシ、イソプロポキシエトキシ、イソプロポキシプロポキシ、イソプロポキシブトキシ、ｔ−ブトキシエトキシ、ｔ−ブトキシプロポキシ、およびｔ−ブトキシブトキシが挙げられる。
【０１６４】
本明細書において使用する場合、用語「シクロアルキル」は、特定の数の炭素原子を含有する非芳香族の飽和環式炭化水素環を表す。用語「（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル」は、３〜６個の環炭素原子を有する非芳香族の環式炭化水素環を表す。本発明において有用な「（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル」基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルが挙げられる。
【０１６５】
用語「ハロゲン」および「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨード置換基を表す。「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、基−ＯＨを意味することが意図される。「シアノ」は、基−ＣＮを意味することが意図される。「オキソ」は、二重結合酸素部分を表し、例えば、炭素原子に直接結合する場合には、カルボニル部分（Ｃ＝Ｏ）を形成する。
【０１６６】
本明細書において使用する場合、用語「てもよい(optionally)」は、次に記載される１または複数の事象が、発生しても、または発生しなくてもよいことを意味し、発生する１または複数の事象、および発生しない１または複数の事象の両方を含む。
【０１６７】
本明細書において使用する場合、用語「治療」は、特定の病態を緩和すること、病態の１以上の症状を排除または軽減すること、病態の進行を緩徐化また排除すること、および過去に罹患したまたは診断された患者または対象者における病態の再発を遅延させることを意味する。
【０１６８】
患者の疾患の「治癒」または患者の疾患を「治癒する」は、所定期間、ヒト免疫不全ウイルスもしくは症状、または、該ウイルスもしくは症状の進行の根絶、停止、休止または終了を表すために使用される。例えば、一態様において、「治癒」または「治癒する」は、単独でまたは１種以上の他の化合物と組み合わせて持続的ウイルス制御（例えば、その他の治療介入なしで、最小限２年後の、ヒト免疫不全ウイルスのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）テスト、ｂＤＮＡ（分岐鎖ＤＮＡ）テストまたはＮＡＳＢＡ（nucleic acid sequence based amplification）テストにより検出できないレベルの血漿ウイルス血症）を誘導又は維持する、治療的投与または投与の組み合わせを意味する。上記ＰＣＲ、ｂＤＮＡおよびＮＡＳＢＡテストは、当業者に公知および周知の技術を使用して実施される。例えば、ヒト免疫不全ウイルスもしくは症状、または、該ウイルスもしくは症状の進行の根絶、停止、休止または終了は、最小限２年間、持続され得る。
【０１６９】
本明細書において使用する場合、用語「有効量」は、例えば、研究者または臨床医により求められる、組織、系、動物、またはヒトの生物学的または医学的応答を惹起する薬物また医薬剤の量を意味する。
【０１７０】
用語「治療的有効な量」は、そのような量を受容していない対応する対象者と比較して、疾患、障害、もしくは副作用の治療の改善、治癒、もしくは改善、または疾患もしくは障害の進行速度の減少をもたらす任意の量を意味する。この用語はまた、正常な生理学的機能を増進するのに有効な量もその範囲内に含む。療法において使用するために、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物ならびにその塩は、粗化学物質として投与してもよい。加えて、前記有効成分は医薬組成物として提供してもよい。
【０１７１】
化合物の製造
略号
ＡｃＯＨ    酢酸
Ａｇ２Ｏ    酸化銀
Ａｒ    Ａｒガス
ＢｎＣｌ    ベンジルクロリド
Ｂｏｃ    ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｂｏｃ２Ｏ    二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｕ４ＮＣｌ    テトラブチルアンモニウムクロリド
ＣＨＣｌ３    クロロホルム
ＣＨ３ＣＮ    アセトニトリル
ＣＨ３ＮＯ２    ニトロメタン
ＤＣＥ    １，２−ジクロロエタン
ＤＣＭ    ジクロロメタン
ＤＩＢＡＬ−Ｈ    ジイソブチルアルミニウム水素化物
ＤＩＰＥＡ    ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ    Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ    １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥＳ    エレクトロスプレー
Ｅｔ３Ｎ    トリエチルアミン
Ｅｔ２Ｏ    ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ    エチルアセテート
ＥｔＯＨ    エタノール
ｈ    時間（単数または複数）
Ｈ２    水素ガス
ＨＡＴＵ    １−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＣｌ    塩酸
Ｈ２Ｏ    水
ＨＯＡｔ    １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
Ｈ２ＳＯ４    硫酸
ＨＰＬＣ    高速液体クロマトグラフィー
Ｉｎ（ＯＴｆ）３    インジウム（ＩＩＩ）トリフルオロメタンスルホネート
ｉ−ＰｒＯＨ    イソプロパノール
［Ｉｒ（ＯＭｅ）（１，５−ｃｏｄ）］２    （１，５−シクロオクタジエン）（メトキシ）イリジウム（Ｉ）ダイマー
ＫＦ    フッ化カリウム
ＫＯｔＢｕ    ｔｅｒｔ−ブトキシドカリウム
ＬＣＭＳ    液体クロマトグラフィー質量分析
ＬｉＡｌＨ４    水素化アルミニウムリチウム
ＬｉＢＨ４    ホウ化水素リチウム
ＬｉＣｌＯ４      過塩素酸リチウム
ＭｅＯＨ    メタノール
ＭｇＳＯ４    硫酸マグネシウム
ｍｉｎ    分（単数または複数）
Ｍ    モル濃度（molar）
ＭＳ    質量分析
Ｎ    規定濃度（normal）
Ｎ２    窒素ガス
ＮａＢＨ４    ホウ化水素ナトリウム
ＮａＢＨ３ＣＮ    シアノホウ化水素ナトリウム
ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３    トリアセトキシホウ化水素ナトリウム
Ｎａ２ＣＯ３    炭酸ナトリウム
ＮａＨＣＯ３    重炭酸ナトリウム
ＮａＨＭＤＳ    ビス（トリメチルシリル）アミドナトリウム
ＮａＯＨ    水酸化ナトリウム
Ｎａ２ＳＯ４    硫酸ナトリウム
ＮＢＳ    Ｎ−ブロモコハク酸イミド
ＮＨ４Ｃｌ    塩化アンモニウム
ＮＨ４ＯＡｃ    酢酸アンモニウム
ＮＨ４ＯＨ    水酸化アンモニウム
ＮＭＭ    Ｎ−メチルモルホリン
Ｐｄ／Ｃ    炭素上のパラジウム
Ｐ２Ｏ５    五酸化二リン
Ｐｄ（ＯＡｃ）２    酢酸パラジウム（ＩＩ）
Ｐｄ（ＰＰｈ３）４    テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）
ＰＯＣｌ３    塩化ホスホリル
（Ｒ，Ｒ）−［ＣＯＤ］Ｉｒ［ｃｙ２ＰＴｈｒｅＰＨＯＸ］    （（４Ｒ，５Ｒ）−（＋）−Ｏ−［１−ベンジル−１−（５−メチル−２−フェニル−４，５−ジヒドロオキサゾール−４−イル）−２−フェニルエチル］（ジシクロヘキシルホスフィナイト）（１，５−シクロオクタジエン）イリジウム（Ｉ）テトラキス（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニルボレート
ｒ．ｔ．    室温
ｓａｔ．    飽和
ＳＯＣｌ２    塩化チオニル
ＴＢＭＥ    ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ＴＦＡ    トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ    テトラヒドロフラン
ＴｉＣｌ４    塩化チタン（ＩＶ）
ＴＭＳＣｌ    塩化トリメチルシリル
【０１７２】
一般合成スキーム
本発明の化合物は、周知の標準的な合成法を含む様々な方法によって作製することができる。例示的な一般合成法を以下に示し、その後、本発明の具体的化合物を実施例において製造する。当業者ならば、本明細書に記載の置換基が本明細書に記載の合成法に適合しなければ、その置換基は反応条件に適した好適な保護基で保護されてもよい。保護基は、所望の中間体または目的化合物を提供するために、一連の反応の適切な時点で除去することができる。下記のスキームの総てにおいて、有機合成の一般原則に従い、要すれば、感受性または反応性の基に対する保護基が使用される。保護基は有機合成の標準的方法(T.W. Green and P.G.M. Wuts, (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons,保護基に関して引用することより本明細書の一部とされる)に従って操作される。これらの基は、化合物合成の都合のよい段階で、当業者に容易に明らかとなる方法を用いて除去される。方法の選択、ならびに反応条件およびそれらの実行順序は、本発明の化合物の製法と一致するものとする。出発材料は市販されているか、または市販の出発材料から、当業者に公知の方法を用いて製造される。
【０１７３】
式（Ｉ）の特定の化合物は、スキーム１または類似の方法に従って調製することができる。適切に置換されたチオフェンカルバルデヒドとニトロメタンとの縮合によって対応するニトロビニルチオフェンが得られる。ニトロビニルの還元、次いで、生じたアミンの捕捉によって対応するウレタンが産出される。ウレタンをＰＯＣｌ３／ＰＯＣｌ５で処理することによってラクタムが得られる。イリジウムを媒介したホウ素化、次いで、適切に置換されたトリフレートとのスズキ結合によって、対応する結合したオレフィンが得られる。オレフィンの還元、それに続く、適切に置換されたハロゲン化アルキルを用いたラクタム窒素のアルキル化によって修飾された（elaborated）チオフェンラクタムが得られる。ベンジルおよびｔｅｒｔ−ブチルカルボニル保護基の除去によりピリドンが得られる。適切に置換されたアルデヒドを用いた還元的アミノ化により式（Ｉ）の化合物が得られる。
【０１７４】
スキーム１：式（Ｉ）の化合物の合成
【化１２】
2018522874.tif 000016
【０１７５】
式（Ｉ）のさらなる化合物は、スキーム２または類似の方法に従って調製することができる。適切に置換されたチオフェン−３−カルボン酸のエステル化によって対応するエステルがもたらされる。インジウムを媒介した、適切に置換された無水物（または塩化アシル）とのアシル化反応によって５−アシルチオフェンが得られる。適切に置換されたケトンとのマクマリー結合によって四置換オレフィンが得られる。エステルの鹸化、それに続く、生じたカルボン酸の、適切に置換されたアミンとの結合によって、ピリドンが得られる。適切に置換されたアルデヒドを用いた還元的アルキル化により式（Ｉ）の化合物が得られる。
【０１７６】
スキーム２：式（Ｉ）の化合物の合成
【化１３】
2018522874.tif 000017
【０１７７】
同様に、式（Ｉ）の化合物は、スキーム３または類似の方法に従って調製することができる。適切に置換されたチオフェン−３−カルボン酸のエステル化によって対応するエステルがもたらされる。インジウムを媒介した、適切に置換された無水物（または塩化アシル）とのアシル化反応によって５−アシルチオフェンが得られる。適切に置換されたケトンとのマクマリー結合によって四置換オレフィンが得られる。適切に置換されたハロゲン化アルキルとのアルキル化または適切に置換されたアルデヒドとの還元的アミノ化によって、置換された誘導体が得られる。エステルの鹸化、それに続く、生じたカルボン酸の、適切に置換されたアミンとの結合によって、式（Ｉ）の化合物が得られる。
【０１７８】
スキーム３：式（Ｉ）の化合物の合成
【化１４】
2018522874.tif 000018
【０１７９】
式（Ｉ）のさらなる化合物は、スキーム４または類似の方法に従って調製することができる。適切に置換されたケトンの、それに対応するワインレブアミド(Weinreb amide)からの生成は、適切なグリニャール（またはアルキルリチウム）試薬で成し得る。対応するビニルトリフラートの生成、それに続く、適切に置換されたブロモチオフェンへのパラジウムを媒介した結合によって三置換オレフィンが得られる。オレフィンの還元、それに続く、適切に置換されたハロゲン化アルキルとのアルキル化または適切に置換されたアルデヒドとの還元的アミノ化によって、置換された誘導体が得られる。エステルの鹸化、それに続く、生じたカルボン酸の適切に置換されたアミンとの結合によって、式（Ｉ）の化合物が得られる。
【０１８０】
スキーム４：式（Ｉ）の化合物の合成
【化１５】
2018522874.tif 000019
【０１８１】
スキーム１における六員環ラクタム中間体は、スキーム５または類似の方法に従って調製することもできる。イリジウムを媒介したホウ素化、それに続く、適切に置換されたトリフレートとのスズキ結合によって、対応する結合したオレフィンが得られる。オレフィンのイリジウムを媒介した不斉還元、それに続く臭素化によって、ブロモチオフェンが得られる。パラジウムを媒介した、ブロモチオフェンのイソオキサゾール−ボロナートとのスズキ結合、それに続く、開環により、ニトリルが得られる。ニトリルの還元および分子内アミド形成により修飾された（elaborated）チオフェンラクタム中間体が得られる。
【０１８２】
スキーム５：ラクタム中間体の合成
【化１６】
2018522874.tif 000020
【０１８３】
式（Ｉ）のさらなる化合物は、スキーム６または類似の方法に従って調製することができる。パラジウムを媒介した、上記スキーム５で調製されたブロモチオフェンのアリルアルコールとのＨｅｃｋ結合、それに続く、生じたアルデヒドの、適切に置換されたアミンを用いた還元的アミノ化により第２級アミンが得られる。エステルの鹸化および分子内アミド形成により修飾された（elaborated）チオフェンラクタムが得られる。メチルおよびｔｅｒｔ−ブチルカルボニル保護基の除去によりピリドンが得られる。適切に置換されたアルデヒドを用いた還元的アルキル化により式（Ｉ）の化合物が得られる。
【０１８４】
スキーム６：式（Ｉ）の化合物の合成
【化１７】
2018522874.tif 000021
【実施例】
【０１８５】
実験
以下の指針は、本明細書に記載の総ての実験手順に当てはまる。反応は総て、特に断りのない限り、炉で乾燥させたガラス器具を用い、陽圧窒素下で行った。示されている温度は外部温度（すなわち、槽温）であり、およその数値である。空気および水分感受性の液体は、シリンジを介して移した。試薬は受け取ったものをそのまま使用した。使用溶媒は、販売者により「無水」として挙げられているものである。溶液中の試薬に関して挙げられているモル濃度はおよその数値であり、対応する標品に対して事前に滴定を行うことなく用いた。反応は総て、特に断りのない限り撹拌子により撹拌した。加熱は、特に断りのない限り、シリコーン油(silicon oil)を含有する加熱浴を用いて行った。マイクロ波照射（２．４５ＧＨｚで０〜４００Ｗ）により行う反応は、Biotageイニシエーター（商標）２．０装置をBiotage（商標）マイクロ波ＥＸＰバイアル（０．２〜２０ｍＬ）およびセプタムおよびキャップとともに用いて行った。溶媒およびイオン電荷に基づいて使用した照射レベル（すなわち、高、通常、低）は、販売者の仕様書に基づいた。−７０℃より低い温度への冷却は、ドライアイス／アセトンまたはドライアイス／２−プロパノールを用いて行った。乾燥剤として用いた硫酸マグネシウムおよび硫酸ナトリウムは無水級であり、互換的に使用された。「真空」または「減圧下」で除去されると記載されている溶媒は、回転蒸発によりこれを行った。
【０１８６】
分取順相シリカゲルクロマトグラフィーは、RediSepもしくはISCO（商標）Goldシリカゲルカートリッジ（４ｇ〜３３０ｇ）を備えたTeledyne ISCO（商標） CombiFlash Companion装置、またはＳＦ２５シリカゲルカートリッジ（４ｇ〜３００ｇ）を備えたAnalogix（商標） IF280装置、またはＨＰ（商標）シリカゲルカートリッジ（１０ｇ〜１００ｇ）を備えたBiotage（商標） SP1装置を使用して行った。逆相ＨＰＬＣによる精製は、特に断りのない限り、固相としてYMC-packカラム（ＯＤＳ−Ａ  ７５×３０ｍｍ）を用いて行った。特に断りのない限り、２５ｍＬ／分  Ａ（ＣＨ３ＣＮ−０．１％ＴＦＡ）：Ｂ（水−０．１％ＴＦＡ）、１０〜８０％勾配Ａ（１０分）の移動相を、２１４ｎＭでのＵＶ検出とともに用いた。
【０１８７】
PE Sciex（商標） API 150シングル四重極質量分析計（カナダ、オンタリオ州、ソーンヒル、PE Sciex）を、エレクトロスプレーイオン化法を陽イオン検出モードで用いて作動させた。ゼロエア発生器（アメリカ合衆国、マサチューセッツ州、へーバリル、Balston Inc.）から霧化ガスを生成し、６５ｐｓｉで送達し、カーテンガスは、Dewar液体窒素容器から５０ｐｓｉで送達される高純度窒素であった。エレクトロスプレーニードルにかけられる電圧は４．８ｋＶであった。オリフィスは２５Ｖに設定し、質量分析計は、０．２ａｍｕのステップマスを用い、プロファイルデータを回収しながら、０．５スキャン／秒の速度でスキャンを行った。
【０１８８】
方法Ａ  ＬＣＭＳ。  サンプルを、Hamilton（商標）１０μＬシリンジを備えたＣＴＣ（商標）  ＰＡＬ  オートサンプラー（ノースカロライナ州、キャルボロ、LEAP Technologies）を用いて質量分析計に導入し、Valco 10ポートインジェクションバルブに注入を行った。ＨＰＬＣポンプはShimadzu LC-10ADvp（メリーランド州、コロンビア、Shimadzu（商標） Scientific Instruments）であり、０．３ｍＬ／分、および３．２分で４．５％Ａから９０％Ｂへの直線勾配、０．４分の保持で作動させた。移動相は容器Ａの１００％（Ｈ２Ｏ  ０．０２％ＴＦＡ）および容器Ｂの１００％（ＣＨ３ＣＮ  ０．０１８％ＴＦＡ）から構成された。固定相はAquasil（商標）（Ｃ１８）であり、カラム寸法は１ｍｍ×４０ｍｍであった。検出は２１４ｎｍでのＵＶ、蒸発光散乱（ＥＬＳＤ）およびＭＳによった。
【０１８９】
方法Ｂ、ＬＣＭＳ。  あるいは、ＬＣ／ＭＳを備えたAgilent（商標） 1100分析ＨＰＬＣシステムを用い、１ｍＬ／分、および２．２分で５％Ａから１００％Ｂへの直線勾配、０．４分保持で作動させた。移動相は、容器Ａの１００％（Ｈ２Ｏ  ０．０２％ＴＦＡ）および容器Ｂの１００％（ＣＨ３ＣＮ  ０．０１８％ＴＦＡ）から構成された。固定相は粒径３．５μｍのZobax（商標）（Ｃ８）であり、カラム寸法は２．１ｍｍ×５０ｍｍであった。検出は２１４ｎｍでのＵＶ、蒸発光散乱（ＥＬＳＤ）およびＭＳによった。
【０１９０】
方法Ｃ、ＬＣＭＳ。  あるいは、キャピラリーカラム（５０×４．６ｍｍ、５μｍ）を備えたMDSSCIEX（商標） API 2000を用いた。ＨＰＬＣは、ＣＨ３ＣＮ：ＮＨ４ＯＡｃバッファーで溶出するZorbax（商標） SB-C18（５０×４．６ｍｍ、１．８μｍ）カラムを備えたAgilent（商標）-1200シリーズＵＰＬＣシステムにて行った。
【０１９１】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、Bruker（商標） AVANCE 400MHz装置を、再処理のために使用されるACD Spect manager v.10とともに用いて、４００ＭＨｚで記録した。示されている多重度は、ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝ｔ三重線、ｑ＝四重線、ｑｕｉｎｔ＝五重線、ｓｘｔ＝六重線、ｍ＝多重線、ｄｄ＝二重の二重線、ｄｔ＝二重の三重線などであり、ｂｒは幅広のシグナルを示す。そうではないことが示されない限り、ＮＭＲはＤＭＳＯ−ｄ６中のものである。
【０１９２】
分析的ＨＰＬＣ：生成物は、Agilent（商標） 1100 Analyticalクロマトグラフィーシステムにより、４．５×７５ｍｍ  Zorbax（商標） XDB-C18カラム（３．５μｍ）を、２ｍＬ／分、Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）中、５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）から９５％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）への４分勾配、１分保持で用いて分析した。
【０１９３】
中間体
中間体１
ａ）２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチノニトリル
【化１８】
2018522874.tif 000022
【０１９４】
トルエン（５０ｍＬ）中、２−ヒドロキシ−４，６−ジメチルニコチノニトリル（５ｇ，３３．７ｍｍｏｌ）の溶液を、ＢｎＣｌ（４．７０ｍＬ，４０．５ｍｍｏｌ）およびＡｇ２Ｏ（８．６０ｇ，３７．１ｍｍｏｌ）で処理し、次いで一晩１１０℃で撹拌した。反応物を、セライト（商標）を介して濾過し、固体物をＤＣＭ（２ｘ１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を介して濾過し、真空内濃縮し、残渣を得た。残渣を石油エーテル中２０−３０％  ＤＣＭを用いて、真空でシリカのプラグを介して精製した。所望の画分を合わせ、濃縮し、２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチノニトリル（９ｇ，３５．９ｍｍｏｌ，収率＞１００％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４７−７．５６（ｍ，２Ｈ），７．３１−７．４３（ｍ，３Ｈ），６．７２（ｓ，１Ｈ），５．５１（ｓ，２Ｈ），２．４８（ｄ，Ｊ＝３．０３Ｈｚ，６Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２３９．０．
【０１９５】
ｂ）２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチンアルデヒド
【化１９】
2018522874.tif 000023
【０１９６】
不活性雰囲気下で、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中、２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチノニトリル（９ｇ，３５．９ｍｍｏｌ）の冷却した（氷浴）溶液に、ゆっくりとトルエン（４３．１ｍＬ，４３．１ｍｍｏｌ）中、１Ｍ  ＤＩＢＡＬ−Ｈの溶液をシリンジで添加した。反応物を２０分間０℃で撹拌し、その時に氷浴を取り除き、反応物を一晩ＲＴで撹拌した。ＬＣＭＳは〜１４％の出発材が残留していることを示した。追加の分量のトルエン（１０．７６ｍＬ，１０．７６ｍｍｏｌ）中、１Ｍ  ＤＩＢＡＬ−Ｈを添加し、反応物をＲＴで撹拌し続けた。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。反応物を冷却（氷浴）し、１Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）で急冷した。＊＊注意−発熱性。反応物をアルミニウム塩が自由に流動するまで３０分撹拌した。反応物を２．５Ｎ  ＮａＯＨ（〜１５ｍＬ，〜ｐＨ７．５）で中性化した。二相混合物を濾過し、濾液をＤＣＭ（１００ｍＬ２Ｘ）で洗浄した。層を分離し、水性層をＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（brine）（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を介して濾過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（カラム：８０グラムシリカ、溶出：０−５％ヘプタン中ＥｔＯＡｃ、勾配：１５分）によって精製した。所望の画分を合わせ、真空濃縮し、２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチンアルデヒド（３．５ｇ，１４．３６ｍｍｏｌ，収率４０．０％）をふわふわとした白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１０．５８（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ），７．３１−７．４４（ｍ，３Ｈ），６．６７（ｓ，１Ｈ），５．５４（ｓ，２Ｈ），２．５９（ｓ，３Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２４２．１，［Ｍ＋Ｎａ］＋２６４．０．
【０１９７】
ｃ）（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタノール
【化２０】
2018522874.tif 000024
【０１９８】
ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中、２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチンアルデヒド（３．４６ｇ，１４．３４ｍｍｏｌ）の懸濁液を不活性雰囲気下で保存し、氷浴中で０℃に冷却した。撹拌した懸濁液にＮａＢＨ４（０．６５１ｇ，１７．２１ｍｍｏｌ）を２分割にして添加した。第一回分のホウ化水素が添加された後、懸濁液は溶液になった。反応物を０℃で１０分間撹拌し、その時に氷浴を取り除き、反応物をＲＴで一晩撹拌した。反応溶液を真空除去し、残った白色固体残渣を飽和ＮａＨＣＯ３（６０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（１２５ｍＬ）とに分けた。水性層をＥｔＯＡｃ（１２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を介して濾過し、真空濃縮し、（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタノール（３．５ｇ，１４．３９ｍｍｏｌ，１００％収率）を無色半透明の油状物として得、これをさらに精製することなく次工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４４−７．５３（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．４３（ｍ，３Ｈ），６．６３（ｓ，１Ｈ），５．４６（ｓ，２Ｈ），４．７２（ｓ，２Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．２５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２４４．１．
【０１９９】
ｄ）２−（ベンジルオキシ）−３−（クロロメチル）−４，６−ジメチルピリジン
【化２１】
2018522874.tif 000025
【０２００】
ＤＣＭ（７０ｍＬ）中、（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタノール（３．５ｇ，１４．３９ｍｍｏｌ）の懸濁液を不活性雰囲気下で保存し、３０分間ドライアイス／ＣＨ３ＣＮ浴中で−４０℃に冷却した。冷却した溶液にＤＣＭ（１０．７９ｍＬ，２１．５８ｍｍｏｌ）中、２Ｍ  ＳＯＣｌ２を１回で添加し、反応物を−４０℃で撹拌し続けた。１時間後、ＬＣＭＳは５％の出発材料が残っていることを示した。追加のＤＣＭ（１．４３９ｍＬ，２．８８ｍｍｏｌ）中、２Ｍ  ＳＯＣｌ２を添加し、反応を継続させた。２０分後、反応物を氷水に注ぎ、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）でｐＨを７−８に調節した。水性層をＤＣＭ（１２５ｍＬ，２Ｘ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４を介して濾過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（カラム：８０グラムシリカ。溶出：０−１０％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン。勾配：１４分）によって精製し、２−（ベンジルオキシ）−３−（クロロメチル）−４，６−ジメチルピリジン（２．８４ｇ，１０．７４ｍｍｏｌ，７４．７％収率）を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４８−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．４５（ｍ，３Ｈ），６．６４（ｓ，１Ｈ），５．４７（ｓ，２Ｈ），４．７４（ｓ，２Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２６２．１．
【０２０１】
中間体２
（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）プロパ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化２２】
2018522874.tif 000026
【０２０２】
ａ）ｔｅｒｔ−ブチル  ４−プロピオニルピペリジン−１−カルボキシレート
【化２３】
2018522874.tif 000027
【０２０３】
窒素下で、０℃（氷浴）にて、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（メトキシ（メチル）カルバモイル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１０．０ｇ，３６．７ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、ＴＨＦ（２８ｍＬ，５６．０ｍｍｏｌ）中、２Ｎ塩化エチルマグネシウムを添加した。反応物を０℃で４時間撹拌し、次いで飽和ＮＨ４Ｃｌで急冷し、ＥｔＯＡｃで抽出し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空下で蒸発させて乾燥させた。粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco（商標）RediSep Rf Gold  ２２０ｇ，０〜４０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した（ＵＶ陰性、ＥｔＯＨ中Ｈ２ＳＯ４で炭化させることによって視認された）。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−プロピオニルピペリジン−１−カルボキシレート（８．１０ｇ，３３．６ｍｍｏｌ，収率９１％）を無色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ）  ［Ｍ＋Ｈ］＋−イソブチレン−１８  １６７．９，［Ｍ＋Ｈ］＋−イソブチレン  １８６．０，  Ｍ＋Ｎａ＋２６４．１．
【０２０４】
ｂ）（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）プロパ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化２４】
2018522874.tif 000028
【０２０５】
窒素下で、−７８℃で、ＴＨＦ（８０ｍＬ）中、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−プロピオニルピペリジン−１−カルボキシレート（６．９ｇ，２８．６ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、ＴＨＦ（３１ｍＬ，３１．０ｍｍｏｌ）中、１Ｎ  ＮａＨＭＤＳを滴状添加した。反応物を１時間−７８℃で撹拌した。次に、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中、１，１，１−トリフルオロ−Ｎ−（ピリジン−２−イル）−Ｎ−（（トリフルオロメチル）スルホニル）−メタンスルホンアミド（１１．４ｇ，３１．８ｍｍｏｌ）の溶液を５分間にわたり滴状添加した。反応物を−７８℃で１時間、次いで３０分間０℃で撹拌した。反応物を水（１５０ｍＬ）で急冷し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ１５０ｍＬ）で抽出し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空下で濃縮した。粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco（商標）RediSepRf Gold  ２２０ｇ，０〜２０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した（ＵＶ陰性、ＥｔＯＨ中Ｈ２ＳＯ４で炭化させることによって視認された）。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）プロパ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（９．１５ｇ，２４．５１ｍｍｏｌ，収率８６％）を無色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ）  ［Ｍ＋Ｈ］＋  −イソブチレン３１８．１．
【０２０６】
中間体３
ａ）４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル
【化２５】
2018522874.tif 000029
【０２０７】
ＲＴにて、窒素下で、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、３−ブロモ−４−メチルチオフェン（２０．０ｇ，１１３ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液にＴＨＦ中、イソプロピル塩化マグネシウム塩化リチウム錯体１．３Ｎ（９０ｍＬ，１１７ｍｍｏｌ）を滴状添加した。反応物を一晩撹拌した。反応物を−７８℃に冷却し、クロロギ酸メチル（１２ｍＬ，１５５ｍｍｏｌ）で処理した。反応物をＲＴに温め、１時間撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、３０分撹拌し、（水相にとどまった白色懸濁液を形成した）、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を真空下（４〜２ｍｍＨｇ）で４４〜５０℃（５０〜７５℃の油浴）にて短行程蒸留した。主画分および後の画分を合わせ、生成物４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１３．２ｇ，８５ｍｍｏｌ，収率７４．８％）を透明液体として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋１５６．８．
【０２０８】
ｂ）４−メチル−５−プロピオニルチオフェン−３−カルボン酸メチル
【化２６】
2018522874.tif 000030
【０２０９】
ＣＨ３ＮＯ２（５０ｍＬ）中、４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（５．０ｇ，３２．０ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、ＬｉＣｌＯ４（４．０ｇ，３７．６ｍｍｏｌ）、プロピオン酸無水物（５．８７ｍＬ，３８．４ｍｍｏｌ）およびＩｎ（ＯＴｆ）３（０．９ｇ，１．６０１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を５０℃にて２時間撹拌した。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。反応物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２ｘ５０ｍＬ）で抽出し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、濾過し、真空下で乾燥するまで蒸発させた。残留褐色固体をシリカゲルクロマトグラフィー（Isco（商標） RediSepRf Gold  １２０ｇ，０〜２５％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）（ＤＣＭでロード）によって精製した。純粋画分を合わせ、乾燥するまで蒸発させた。残留黄色固体をヘキサンで粉末化し、濾過し、真空下で乾燥させ、生成物４−メチル−５−プロピオニルチオフェン−３−カルボン酸メチル（４．６０ｇ，２１．６７ｍｍｏｌ，収率６７．７％）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２１２．９．
【０２１０】
中間体４
（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタンアミン
【化２７】
2018522874.tif 000031
【０２１１】
冷却（氷水浴）された２−メトキシ−４，６−ジメチルニコチノニトリル（１０ｇ，６１．７ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ溶液（２００ｍＬ）に、１Ｍ  ＬｉＡｌＨ４のＥｔ２Ｏ溶液（１２３ｍＬ，１２３ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。氷水浴を取り除き、反応混合物を室温で１６時間攪拌した。反応混合物を氷水浴で冷却し最小限量の水（さらなる水素が生じない程度まで）で反応停止させた。反応物を濾過し、不溶性物質を１０：１  ＤＣＭ／ＭｅＯＨで洗浄した。有機濾液を合わせて濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して（０−３０％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭ；１００ｇ−ＨＰ−シリカゲルカラム）、（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタンアミン（８．９ｇ）を黄色半固体として得た。
【０２１２】
実施例
実施例１
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化２８】
2018522874.tif 000032
【０２１３】
ａ）（Ｚ）−４−メチル−２−（２−ニトロビニル）チオフェン
【化２９】
2018522874.tif 000033
【０２１４】
４−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド（１０．０ｇ，７９．３ｍｍｏｌ）、ニトロメタン（１００ｍＬ）およびＮＨ４ＯＡｃ（１．１ｇ，１４．２７ｍｍｏｌ）の溶液を１００℃で４時間加熱した。反応物をＲＴに冷却し、真空下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ中で取り出し、１Ｎ  ＨＣｌ、水性（aq.）ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させて乾燥させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Isco（商標）RediSepRf Gold  １２０ｇ，０〜１５％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、（Ｚ）−４−メチル−２−（２−ニトロビニル）チオフェン（９．６３ｇ，５６．９１ｍｍｏｌ，収率７１．８％）を黄色油状物（真空下で固体化した）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．１０（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），７．１７（ｓ，１Ｈ），２．３１（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋１７０．０．
【０２１５】
ｂ）（２−（４−メチルチオフェン−２−イル）エチル）カルバミン酸エチル
【化３０】
2018522874.tif 000034
【０２１６】
窒素下で、２Ｎ  ＬｉＢＨ４（１２０ｍＬ，２４０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＭＳＣｌ（６０ｍＬ，４７３ｍｍｏｌ）を１０分にわたり滴状添加した。反応物は白色懸濁液になった。１５分撹拌した後、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中、（Ｚ）−４−メチル−２−（２−ニトロビニル）チオフェン（９．６０ｇ，５６．７４ｍｍｏｌ）の溶液を約２０分にわたりゆっくりと滴状添加した。活発なガス発生が見られた。反応物は触れたところ若干温まっていて、定期的に氷を加えながら水浴内で冷却した。反応物を４時間ＲＴで撹拌し、次いで５０℃まで温めて一晩撹拌した。反応物を氷浴内で冷却し、ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）で慎重に急冷した。１時間撹拌した後、反応物を真空下で濃縮し、粗製２−アミノエチル−４−メチルチオフェンを得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋１４２．１．
【０２１７】
ＤＣＭ（２００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）中、粗製２−アミノエチル−４−メチルチオフェンの冷却した（０℃）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（２５ｇ，２３５．９ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸エチル（０．７１０ｍＬ，７．３９ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴状添加した。結果として得られた混合物をＲＴに温め、１時間撹拌した。反応物をセライト（商標）のパッドに濾過し通し、透明な濾液を分液漏斗に移した。下方有機相を除去し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco（商標） RediSep Rf Gold  １２０ｇ，１０〜３０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、（２−（４−メチルチオフェン−２−イル）エチル）カルバミン酸エチル（９．２９ｇ，４３．５５ｍｍｏｌ，収率７６．７％）を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．７４（ｓ，１Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），４．８０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．１４（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），３．４６（ｑ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），２．９８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．２４（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，３Ｈ），１．２６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２１４．１．
【０２１８】
ｃ）３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化３１】
2018522874.tif 000035
【０２１９】
（２−（４−メチルチオフェン−２−イル）エチル）カルバミン酸エチル（９．２０ｇ，４３．１３ｍｍｏｌ）にＰＯＣｌ３（１００ｍＬ，１０７ｍｍｏｌ）およびＰ２Ｏ５（１４ｇ，９８．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を還流下で３時間加熱した（混合物は一時的にガム状ｐｐｔ．を生成し、それは加熱することで次第に溶解した）。濃い反応混合物をＲＴに冷却し、真空下で蒸発させて乾燥させた。残渣を慎重に氷で急冷し、水性（aq.）Ｎａ２ＣＯ３で塩基性化し、ＤＣＭで抽出し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(Isco（商標）RediSep Rf Gold  ８０ｇ，３０〜８０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、ヘキサンで粉末化し、濾過し、真空下で乾燥させ３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（２．２２ｇ，１３．２７ｍｍｏｌ，収率３０．７８％）をオフホワイトの固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．７２（ｍ，１Ｈ），５．７５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），３．０５（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），２．５０（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋１６８．０．
【０２２０】
ｄ）３−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化３２】
2018522874.tif 000036
【０２２１】
Ａｒ下、［Ｉｒ（ＯＭｅ）（１，５−ｃｏｄ）］２（１０６．４ｍｇ，０．１６１ｍｍｏｌ）を含有する５０ｍＬ丸底フラスコに、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（２．８ｍＬ，１９．３０ｍｍｏｌ）を加え、次いで、４，４’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２’−ビピリジン（８５．６ｍｇ，０．３１９ｍｍｏｌ）のｎ−ヘキサン（１６ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を１分間攪拌し、その時点で、３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１．７８５ｇ，１０．６７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍＬ）溶液を滴下して加えた。2時間攪拌して反応させた。反応をモニタリングし、ＬＣＭＳによって完了を確認した（産物は、ボロン酸およびボロン酸ピナコールの混合物であることを示す）。反応が進行した結果、異質（heterogeneous）となった。同量の［Ｉｒ（ＯＭｅ）（１，５−ｃｏｄ）］２、４，４’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２’−ビピリジン、および４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランの追加が、反応を完了するために必要であった。混合物を減圧下で蒸発させて乾燥させた。残渣を少量の冷ヘキサンで砕き、濾過し、少量のヘキサンでリンスし、減圧下で乾燥させ、３−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（２．２８６ｇ，７．８０ｍｍｏｌ，７３％  収率）を褐色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２１２（ボロン酸），２９４．２（ボロン酸エステル）．
【０２２２】
ｅ）（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロパ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化３３】
2018522874.tif 000037
【０２２３】
３−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１．８８３ｇ，６．４２ｍｍｏｌ）、（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）プロパ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．５２４ｇ，６．７６ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ３（１．８０２ｇ，２１．４５ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（７３５ｍｇ，０．６３６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１８ｍＬ）および水（４．５０ｍＬ）溶液をＡｒでフラッシュ（flush）し、キャップし、油浴中、７０℃で２時間加熱した。反応混合物をＣＨＣｌ３及びＨ２Ｏで分画し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、シリカで吸収させた。カラムクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ（商標）ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ，３０−９０％  ８０：２０：２  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；４０ｇ  カラム）で精製し、（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロパ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．０７ｇ，５．３０ｍｍｏｌ，８３％  収率）を淡黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋３９１．
【０２２４】
ｆ）ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化３４】
2018522874.tif 000038
【０２２５】
２００ｍＬ丸底フラスコをＰｄ／Ｃ（４．２５ｇ，３９．９ｍｍｏｌ）でチャージし、Ａｒでチャージした。ｉ−ＰｒＯＨ（１４ｍＬ）を加え、次いで、（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロパ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．０７ｇ，５．３０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（７０ｍＬ）溶液を加えた。混合物を脱ガスし、Ｈ２雰囲気下で２４時間維持した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（商標）で濾過し、次いで、０．２μＭ  ナイロンディスクで濾過した。溶液をシリカで吸収させ、カラムクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ（商標）ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ；２０−７５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンｓ；４０ｇ  カラム）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１．４０ｇ，３．５７ｍｍｏｌ，６７．３％  収率）を白色固体として得た。
【０２２６】
ラセミ産物をキラルＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（商標），５ミクロン，３０ｍｍ×２５０ｍｍ，２３０ｎｍ  ＵＶ，１００％  ＭｅＯＨ）で決定した。決定した産物をＴＢＭＥで二回希釈し、濃縮し、次いで、真空オーブン（５０℃）で乾燥し、以下の化合物を得た。
【０２２７】
Ｓ−（＋）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６７０ｍｇ）：９６．６％ｅｅ，［α］Ｄ＝＋４０°（ｃ＝０．２５，ＭｅＯＨ，２４℃）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋４１５．２．
【０２２８】
Ｒ−（−）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６９０ｍｇ）：９９．７４％ｅｅ；［α］Ｄ＝−３９°（ｃ＝０．２５，ＭｅＯＨ，２１℃）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋４１５．２．
（注意：エチル基の絶対立体化学は、ＥＺＨ２阻害に関するＲ−異性体の既知の選択性（preference）に基づいて割り当てられた。）
【０２２９】
ｇ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化３５】
2018522874.tif 000039
【０２３０】
冷却された（０℃）、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６９０ｍｇ，１．７５８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍＬ）溶液に、ＫＯｔＢｕ（２．１ｍＬ，２．１００ｍｍｏｌ）を加えた。１５分間攪拌して反応させ、その時点で２−（ベンジルオキシ）−３−（クロロメチル）−４，６−ジメチルピリジン（５５６ｍｇ，２．１２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．４ｍＬ）溶液を加えた。室温で４０分間加温して反応させた。出発物質の消費の後、飽和ＮＨ４Ｃｌ（４ｍＬ）で反応を停止させ、蒸発させて乾燥させた。残渣をＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）及び飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液で分画し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、シリカで吸収させ、そして、カラムクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ（商標）Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ；０−２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；４０ｇカラム）で精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボキシレート（９３４ｍｇ，１．５１２ｍｍｏｌ，８６％  収率）を無色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋６１８．
【０２３１】
ｈ）（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化３６】
2018522874.tif 000040
【０２３２】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボキシレート（９３４ｍｇ，１．５１２ｍｍｏｌ）とＴＦＡ（１５ｍＬ，１９５ｍｍｏｌ）との混合物を４５℃で１時間加熱した。反応混合物を濃縮して乾燥させ、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中に取り（take up）、シリカで吸収し、カラムクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ（商標）ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ；０−４０％  ８０：２０：２［ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ］／ＣＨＣｌ３  ｗ／０．５％  イソプロピルアミン；４０ｇ  カラム，５カラム容量  ８０：２０：２  ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨでプレフラッシュし、酸性部位を中和し、次いで、３カラム容量  ＣＨＣｌ３  ｗ／０．５％  イソプロピルアミンでプレフラッシュ）で精製した。フラクションを濃縮し、ＣＨＣｌ３に溶解し、Ｈ２Ｏ（２×１００ｍＬ）で洗浄し、余剰のイソプロピルアミンを除去した。有機層を濃縮し、（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（６９１ｍｇ，１．６１６ｍｍｏｌ，＞１００％  収率）を淡黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋４２８．
【０２３３】
ｉ）（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化３７】
2018522874.tif 000041
【０２３４】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１００．１ｍｇ，０．２３４ｍｍｏｌ）およびピコリンアルデヒド（６４．７ｍｇ，０．６０４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．５ｍＬ）溶液に、ＡｃＯＨ（６０μＬ，１．０４８ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１０９ｍｇ，０．５１４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間攪拌して反応させ、その時点でＮａＨＣＯ３を塩基性になるまでゆっくりと加えた。混合物をＣＨＣｌ３で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。残渣をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、シリカで吸収させ、カラムクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ（商標）ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆ；０−３０％  ８０：２０：２［ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ］；１２ｇ  カラム）で精製した。無色油状物をヘキサン（１５ｍＬ）中に取り、超音波処理し、白色粉末が形成された。溶媒をデキャントし、固体を乾燥させ、（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（６６ｍｇ，０．１２１ｍｍｏｌ，５１．６％  収率）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １１．５３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）  ８．３９−８．５０（ｍ，１Ｈ）  ７．７３（ｔｄ，Ｊ＝７．５８，１．７７Ｈｚ，１Ｈ）  ７．３８（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ）  ７．１８−７．２７（ｍ，１Ｈ）５．８７（ｓ，１Ｈ）  ４．４８（ｓ，２Ｈ）  ３．４５−３．５７（ｍ，４Ｈ）  ２．８４（ｔ，Ｊ＝６．６９Ｈｚ，３Ｈ）  ２．６６−２．７９（ｍ，２Ｈ）  ２．３０（ｓ，３Ｈ）  ２．１６（ｓ，３Ｈ）  ２．１２（ｓ，３Ｈ）  １．９１−２．００（ｍ，１Ｈ）  １．７７−１．９１（ｍ，３Ｈ）  １．２９−１．４３（ｍ，３Ｈ）  １．１１−１．２６（ｍ，２Ｈ）  ０．７１（ｔ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５１９．
【０２３５】
実施例２
（Ｒ）−２−（１−（１−ベンジルピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化３８】
2018522874.tif 000042
【０２３６】
実施例１（ｉ）の手順の後、（Ｒ）−２−（１−（１−ベンジルピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１．１ｇ，２ｍｍｏｌ，６３％  収率）を白色固体として調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １１．５４（ｓ，１Ｈ）  ７．１０−７．４０（ｍ，５Ｈ）  ５．８７（ｓ，１Ｈ）  ４．４８（ｓ，２Ｈ）  ３．５０（ｔ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，２Ｈ）  ３．３８（ｄ，Ｊ＝２．５３Ｈｚ，２Ｈ）  ２．６５−２．８９（ｍ，５Ｈ）  ２．３０（ｓ，３Ｈ）  ２．１２（ｓ，３Ｈ）  ２．１５（ｓ，３Ｈ）  １．６７−１．９４（ｍ，４Ｈ）  １．２５−１．４２（ｍ，３Ｈ）  １．０４−１．２５（ｍ，２Ｈ）  ０．７０（ｔ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５１８．
【０２３７】
実施例３
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化３９】
2018522874.tif 000043
【０２３８】
実施例１（ｉ）の手順の後、（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−４−イルメチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（６９ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ，５１％  収率）を白色固体として調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １１．５３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）  ８．４０−８．５４（ｍ，２Ｈ）  ７．２７（ｄ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，２Ｈ）  ５．８７（ｓ，１Ｈ）  ４．４８（ｓ，２Ｈ）  ３．５１（ｔ，Ｊ＝６．６９Ｈｚ，２Ｈ）  ３．４３（ｓ，２Ｈ）  ２．６３−２．９１（ｍ，５Ｈ）  ２．３０（ｓ，３Ｈ）  ２．１６（ｓ，３Ｈ）  ２．０９−２．１４（ｓ，３Ｈ）  １．７４−１．９７（ｍ，４Ｈ）  １．２８−１．４２（ｍ，３Ｈ）  １．１０−１．２８（ｍ，２Ｈ）  ０．７１（ｔ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５１９．
【０２３９】
実施例４
（Ｒ）−２−（１−（１−（（５−クロロピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化４０】
2018522874.tif 000044
【０２４０】
実施例１（ｉ）の手順の後、（Ｒ）−２−（１−（１−（（５−クロロピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（６４ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ，４６％  収率）を白色固体として調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １１．５３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）  ８．５１（ｄ，Ｊ＝２．０２Ｈｚ，１Ｈ）  ７．８６（ｄｄ，Ｊ＝８．４６，２．６５Ｈｚ，１Ｈ）  ７．４３（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，１Ｈ）  ５．８７（ｓ，１Ｈ）  ４．４８（ｓ，２Ｈ）  ３．４４−３．５７（ｍ，４Ｈ）  ２．６４−２．９３（ｍ，５Ｈ）  ２．３０（ｓ，３Ｈ）  ２．１６（ｓ，３Ｈ）  ２．１２（ｓ，３Ｈ）  １．７５−２．０２（ｍ，４Ｈ）  １．２５−１．４７（ｍ，３Ｈ）  １．１２−１．２５（ｍ，２Ｈ）  ０．７１（ｔ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５５３．
【０２４１】
実施例５
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド
【化４１】
2018522874.tif 000045
【０２４２】
ａ）メチル４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキシレート塩酸塩
【化４２】
2018522874.tif 000046
【０２４３】
不活性雰囲気下、冷却された（０℃）、亜鉛（１６．７６ｇ，２５６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）懸濁液に、ＴｉＣｌ４（１３．７２ｍＬ，１２４ｍｍｏｌ）を、シリンジを通じてフラスコの壁を安定して滴り落とすことによりゆっくり加えた。黄色粉末が垂直に（plumbs of yellow powder）攪拌した反応物から噴出した（ＴｉＣｌ４をゆっくり加えるように注意しなければならない）。フラスコの壁をＴＨＦ（６０ｍＬ）で洗浄した。０℃で１０分間攪拌して反応させた。氷浴を除去し、フラスコにコンデンサーを取り付け、反応物を７０℃で１時間加熱した。コンデンサーを追加の漏斗（funnel）に置換し、メチル４−メチル−５−プロピオニルチオフェン−３−カルボキシレート（４ｇ，１８．８４ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（１２．０１ｇ，６０．３ｍｍｏｌ）、およびピリジン（１６．００ｍＬ，１９８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５１．０ｍＬ，６２２ｍｍｏｌ）溶液を３０分かけて安定して滴り落とすことにより加えた。７０℃で４日間攪拌して反応させた。反応物を冷却し、珪藻土、飽和ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍＬ）、およびＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）の混合物に注ぎいれた。混合物を激しく攪拌し、次いで、デキャントし、珪藻土の層（bed）で濾過した。残留するスラッジをＥｔＯＡｃ（３×４００ｍＬ）で抽出した。固形物（cake）を濾過し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で洗浄した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をＤＣＭ（３０ｍＬ）中に取り、不溶の塩を濾別した。ＤＣＭを真空で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍＬ）中に取り、シリカにかけ、カラムクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（商標）Ｒｅｄｉｓｅｐ８０ｇｒａｍ  カラムを使用，０−２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘプタンで１２分間，６０ｍＬ／分、次いで、２０−６０％  ＥｔＯＡｃ／ヘプタンで１２分間）で精製した。産物は溶出しなかった。グラジエントを増加させて６０−９０％で５分間とし、次いで、９０％で８分間維持した。所望のフラクションを合わせ、濃縮し、減圧下で乾燥させ、メチル４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキシレート塩酸塩（４．０８ｇ，１２．７９ｍｍｏｌ，６７．９％  収率）を黄褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δｐｐｍ  ８．８４−９．００（ｍ，２Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．４６−３．６８（ｍ，２Ｈ），２．８４（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．４０（ｔ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），１．６０−１．８６（ｍ，２Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，３Ｈ）．
【０２４４】
ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）カルバモイル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化４３】
2018522874.tif 000047
【０２４５】
メチル４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキシレート塩酸塩（４ｇ，１２．６６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０．３７ｍＬ，３１７ｍｍｏｌ）溶液に、Ｅｔ３Ｎ（２．２９５ｍＬ，１６．４６ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（５．００ｍＬ，２１．５３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で反応を維持した。１５分後、ＬＣＭＳが反応の完了を示した。ＤＣＭを真空で除去し、残留する残渣をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３（３５ｍＬ）で分画した。白色固体の塩を水性層から取り出した（cash out）。固形物を濾別し、層を分離した。有機層を水（２０ｍＬ）、１Ｎ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）、および食塩水（１０ｍＬ）で洗浄した。ＥｔＯＡｃ層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、Ｂｏｃ−保護された中間体（４．６３ｇ）を得た。
【０２４６】
上記残渣、ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）およびＴＨＦ（７５ｍＬ）の混合物に、８Ｍ  ＮａＯＨ（４．１２ｍＬ，３２．９ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を５０℃で一晩加熱した。反応をＬＣＭＳでモニタリングした。追加量の８Ｍ  ＮａＯＨ（４．１２ｍＬ，３２．９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を５０℃で４時間加熱した。追加の８Ｍ  ＮａＯＨ（０．９９７ｍＬ，７．９８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を５０℃で０．５時間加熱した。有機溶媒を真空で除去し、残留する水性残渣を水（３０ｍＬ）で希釈した。水性溶液を冷却し（氷浴）、ｐＨを６Ｎ  ＨＣｌ（８．４４ｍＬ，５０．７ｍｍｏｌ）で〜５−６に調整した。水を真空で除去し、残留する残渣を高減圧下で３日間乾燥し、カルボン酸中間体を得た。
【０２４７】
上記残渣、ＤＭＦ（３４．３ｍＬ，４４３ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（４０．７ｍＬ，６３３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＮＭＭ（５．５７ｍＬ，５０．７ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ＨＡＴＵ（４．８２ｇ，１２．６６ｍｍｏｌ）および３−（アミノメチル）−４，６−ジメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（２．５０９ｇ，１３．３０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１６時間攪拌して反応させ、その時点で、固形物を濾過し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）で分画した。有機層を分離し、取っておいた。上記からの母液を濃厚な油状物が残るまで濃縮した（〜１５−２０ｍＬ）。油状の残渣を０．２Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）の攪拌溶液に滴下して加えた。固形物を回収し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）で分画した。有機層を分離し、予め取っておいたＥｔＯＡｃ層と合わせた。合わせた溶液を食塩水（１２ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）カルバモイル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボキシレート（４．６３ｇ，９．２７ｍｍｏｌ，７３．２％  収率）を黄褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １１．４３−１１．５９（ｍ，１Ｈ），８．０４（ｔ，Ｊ＝５．１８Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｓ，１Ｈ），５．８８（ｓ，１Ｈ），４．２４（ｄ，Ｊ＝４．８０Ｈｚ，２Ｈ），３．４０（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），３．２３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．３６（ｔ，Ｊ＝５．５６Ｈｚ，２Ｈ），２．２８（ｄ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，２Ｈ），２．１６−２．２１（ｍ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｔ，Ｊ＝５．４３Ｈｚ，２Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５００．２．
【０２４８】
ｃ）５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド
【化４４】
2018522874.tif 000048
【０２４９】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）カルバモイル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボキシレート（４ｇ，８．０１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４５ｍＬ）溶液に、４Ｎ  ＨＣｌの１，４−ジオキサン（１０．０１ｍＬ，４０．０ｍｍｏｌ）溶液を加えた。室温で一晩攪拌して反応させ、その時点で溶媒をデキャントして取り除いた。残留する残渣をＭｅＯＨ（２５ｍＬ）に溶解し、混合物を濃縮した。さらに３回ＭｅＯＨからの精製（put and takes）を行い、中間体産物であるＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド塩酸塩（３．４５ｇ，５．７８ｍｍｏｌ，７２．２％  収率）を泡状物として得た。泡状物をひいて粉末し、さらなる精製なしで使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １１．５６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．９１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．０３−８．１２（ｍ，１Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），５．８９（ｓ，１Ｈ），４．２４（ｄ，Ｊ＝４．２９Ｈｚ，２Ｈ），３．０８−３．２１（ｍ，３Ｈ），２．９６（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ＝５．９４Ｈｚ，２Ｈ），２．２４−２．３７（ｍ，２Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．１０−２．１５（ｍ，５Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋４００．１．
【０２５０】
ｄ）Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド
【化４５】
2018522874.tif 000049
【０２５１】
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド塩酸塩（３．６ｇ，６．０３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（８０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（３．１６ｍＬ，１８．０８ｍｍｏｌ）およびＭｇＳＯ４（１．８１４ｇ，１５．０７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で５分間攪拌して反応させ、その時点で、２−メトキシイソニコチンアルデヒド（１．６５３ｇ，１２．０５ｍｍｏｌ）を加えた。１５分間攪拌して反応させ、その時点で、ＡｃＯＨ（０．６９０ｍＬ，１２．０５ｍｍｏｌ）を加えた。３０分間攪拌して反応させ、その時点で、ＮａＢＨ３ＣＮ（２．２７３ｇ，３６．２ｍｍｏｌ）を加えた。一晩攪拌して反応させ、その時点で、反応物を濾過し、固形物をＭｅＯＨ（４０ｍＬ）で洗浄し、次いで、ＤＣＭ（４０ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮し、残渣をＤＣＭ（１００ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）および水（１５ｍＬ）で分画した。相を分離し、有機相を食塩水（６ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をシリカにチャージし、順相系フラッシュクロマトグラフィーで精製した。固形物をＤＣＭ（７５ｍＬ）および飽和ＮＨ４Ｃｌ（２５ｍＬ）で分画した。有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ（４×１０ｍＬ）および食塩水（６ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（１．２ｇ，２．２８２ｍｍｏｌ，３７．９％  収率）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  １１．４７（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝５．３１Ｈｚ，１Ｈ），８．００（ｔ，Ｊ＝５．０５Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝５．３１Ｈｚ，１Ｈ），６．７３（ｓ，１Ｈ），５．８６（ｓ，１Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝５．０５Ｈｚ，２Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．４５（ｓ，２Ｈ），２．３９−２．４５（ｍ，４Ｈ），２．２３−２．３４（ｍ，Ｊ＝５．０５Ｈｚ，４Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），１．９１−１．９９（ｍ，Ｊ＝４．２９Ｈｚ，２Ｈ），０．８６（ｔ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５２１．３．
【０２５２】
実施例６
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化４６】
2018522874.tif 000050
【０２５３】
ａ）４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボン酸メチル
【化４７】
2018522874.tif 000051
【０２５４】
（１，５−シクロオクタジエン）（メトキシ）イリジウム（iridinum）（ｌ）二量体（３２５ｍｇ，０．４９０ｍｍｏｌ）が充填された１００ｍＬ丸底フラスコに、撹拌しながら４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（７．１０ｇ，５５．５ｍｍｏｌ）を添加し、続けてｎ−ヘキサン（３５ｍＬ）中、４，４’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２’−ジピリジン（２６０ｍｇ，０．９６９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２分室温で撹拌し、４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（５ｇ，３２ｍｍｏｌ）を滴状添加した。混合物を１８時間室温で撹拌した。次いで反応混合物を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜１００％ＤＣＭ／ヘキサン）を用いて精製し、５．８ｇの生成物を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．３６（ｓ，１２Ｈ），２．７０（ｓ，３Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），８．３２（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２８３．１．
【０２５５】
ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）ビニルピペリジン−１−カルボキシレート
【化４８】
2018522874.tif 000052
【０２５６】
１，４−ジオキサン（７２ｍＬ）中、４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボン酸メチル（２．６５ｇ，９．３９ｍｍｏｌ）溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ビニル）ピペリジン−１−カルボンキシレート（３．３８ｇ，９．３９ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（２．４８９ｇ，２３．４８ｍｍｏｌ）および水（２４ｍＬ）を添加した。混合物を、Ｎ２をバブリング（bubbling）することによって１０分脱気した。Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．５４３ｇ，０．４７０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１時間７０℃で加熱した。反応混合物をＲＴに冷却し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて抽出し、２．８ｇの生成物を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．２７−１．５５（ｍ，１１Ｈ），１．７８（ｍ，２Ｈ），２．２６−２．４６（ｍ，４Ｈ），２．７１（ｔ，Ｊ＝１１．４９Ｈｚ，２Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），４．１８（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．１３（ｓ，１Ｈ），５．２９−５．３９（ｍ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋３８８．１．
【０２５７】
ｃ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化４９】
2018522874.tif 000053
【０２５８】
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）ビニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１．２ｇ，３．２８ｍｍｏｌ）および（（４Ｒ，５Ｒ）−（＋）−Ｏ−［１−ベンジル−１−（５−メチル−２−フェニル−４，５−ジヒドロオキサゾ−ル−４−イル）−２−フェニルエチル］（ジシクロヘキシルホスフィナイト）（１，５−ＣＯＤ）イリジウム（Ｉ）テトラキス（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニルホウ酸塩（６３ｍｇ，０．０３６ｍｍｏｌ）の溶液を、Parr shakerで、３０分間、５０ｐｓｉ水素圧で水素化した。混合物を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、１．１ｇの産物を無色油状物として得た。生成物の光学的純度を、キラルＨＰＬＣ（キラルパック（Chiralpak） ＡＹ−Ｈ，５ミクロン，４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ；２４５，２５０ｎｍＵＶ；９０：１０：０．１ｎ−ヘプタン：ＥｔＯＨ：イソプロピルアミン，等張性，１．０ｍｌ／分）によって９８％ｅｅに決定した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．０３−１．３３（ｍ，５Ｈ），１．３８−１．５８（ｍ，１１Ｈ），１．８８（ｄ，Ｊ＝１２．３８Ｈｚ，１Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），２．４８−２．７７（ｍ，２Ｈ），２．９４（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．２６Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），４．０５−４．１５（ｍ，１Ｈ），７．９７（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋３９０．２．
【０２５９】
ｄ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−ブロモ−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５０】
2018522874.tif 000054
【０２６０】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．１ｇ，５．７１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に、ＮＢＳ（１．３２２ｇ，７．４３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で５時間攪拌した。混合物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０−５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、１．９８ｇの産物を薄茶色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．０３−１．６５（ｍ，１６Ｈ），１．８６（ｄ，Ｊ＝１２．８８Ｈｚ，１Ｈ），２．２１−２．３０（ｍ，３Ｈ），２．５４−２．７２（ｍ，２Ｈ），２．８５−２．９８（ｍ，１Ｈ），３．８８−３．９５（ｍ，３Ｈ），４．０８（ｄ，Ｊ＝１３．６４Ｈｚ，１Ｈ），４．１７（ｄ，Ｊ＝１３．６４Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋４６８．１，４７０．１．
【０２６１】
ｅ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチル−５−（３−オキソプロピル）チオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５１】
2018522874.tif 000055
【０２６２】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−ブロモ−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（９５０ｍｇ，２．１２８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１４ｍＬ）溶液に、プロパ−２−エン−１−オール（０．５７９ｍＬ，８．５１ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ３（４６８ｍｇ，５．５８ｍｍｏｌ）、Ｂｕ４ＮＣｌ（５９１ｍｇ，２．１２８ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（２３．８９ｍｇ，０．１０６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＡｒのバブリング（bubbling）により１０分間脱ガスした。反応混合物を６５℃で３時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、水（２０ｍＬ）で反応停止させ、濾過した。濾液をＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０−４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、６８０ｍｇの産物を薄茶色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．０４−１．６９（ｍ，１６Ｈ），１．８６（ｄ，Ｊ＝１２．８８Ｈｚ，１Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ），２．５５−２．７７（ｍ，２Ｈ），２．８１−２．９４（ｍ，３Ｈ），３．２６−３．４６（ｍ，２Ｈ），３．８２−３．９２（ｍ，３Ｈ），４．０５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），４．１５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），９．８４（ｔ，Ｊ＝１．２６Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋４４６．３．
【０２６３】
ｆ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（３−（（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）アミノ）プロピル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５２】
2018522874.tif 000056
【０２６４】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチル−５−（３−オキソプロピル）チオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６７５ｍｇ，１．５９４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１４ｍＬ）溶液に、（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタンアミン（３７１ｍｇ，２．２３１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間攪拌した。反応物を冷却し（０℃氷浴）、ＮａＢＨ４（１０９ｍｇ，２．８７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２０分間攪拌した。反応を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で停止させ、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０−１００％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，次いで、０−１５％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）を用いて精製し、５５０ｍｇの産物を薄茶色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．１７−１．７６（ｍ，１６Ｈ），１．８６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，３Ｈ），２．１９−２．９５（ｍ，１４Ｈ），３．０６（ｄｑ，Ｊ＝１５．５１，７．４６Ｈｚ，２Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），４．０５−４．２９（ｍ，２Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５７４．１．
【０２６５】
ｇ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５３】
2018522874.tif 000057
【０２６６】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（３−（（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）アミノ）プロピル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５３０ｍｇ，０．９２４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６ｍＬ）溶液に、８Ｎ  ＮａＯＨ（１．４ｍＬ，１１．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５０℃で２０時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、６Ｎ  ＨＣｌ水溶液（１．８７８ｍＬ，１１．２７ｍｍｏｌ）で反応停止させ、濃縮した。残渣を減圧下で乾燥させ、ＤＭＳＯ（６ｍＬ）で処理した。この混合物に、ＥＤＣ（３５４ｍｇ，１．８４７ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２５１ｍｇ，１．８４７ｍｍｏｌ）、およびＮＭＭ（０．６０９ｍＬ，５．５４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で５時間攪拌した。次いで、反応を水（２０ｍＬ）で停止させた。生じた沈殿物を濾過により回収し、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０−８０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、４５０ｍｇの産物を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １．００−１．６８（ｍ，１８Ｈ），１．８６（ｄ，Ｊ＝１２．３８Ｈｚ，１Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．５３−２．７９（ｍ，４Ｈ），２．７９−２．９６（ｍ，１Ｈ），３．２９（ｔ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），４．１４（ｍ，１Ｈ），４．８０（ｄ，Ｊ＝１４．１５Ｈｚ，１Ｈ），４．８９（ｄ，Ｊ＝１４．１５Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５４２．１．
【０２６７】
ｈ）（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化５４】
2018522874.tif 000058
【０２６８】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３５０ｍｇ，０．６４６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（３ｍＬ）溶液に、６Ｎ  ＨＣｌ（０．５ｍＬ，３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を７０℃で２０時間加熱した。混合物を濃縮し、残渣を減圧下で乾燥し、３４０ｍｇの産物をオフホワイトの固体として得た（ビス−ＨＣｌ塩）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １．１０−２．０２（ｍ，１０Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．６１−２．８７（ｍ，４Ｈ），２．９３（ｔ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，１Ｈ），３．１３−３．３４（ｍ，４Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ＝１３．６４Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝１３．６４Ｈｚ，１Ｈ），５．９２（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋４２８．５．
【０２６９】
ｉ）（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化５５】
2018522874.tif 000059
【０２７０】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン、ビス−ＨＣｌ（１００ｍｇ，０．２００ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０８０ｍＬ，０．４６０ｍｍｏｌ）、ピコリンアルデヒド（０．０３８ｍＬ，０．４００ｍｍｏｌ）、およびＡｃＯＨ（０．０３８ｍＬ，０．６５９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（５０．２ｍｇ，０．７９９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を、逆相ＨＰＬＣを用いて精製した。産物を含有するフラクションを１Ｎ  ＨＣｌで処理し、濃縮し、５２ｍｇの産物を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）δ  １．３３（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，３Ｈ），１．５６−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．８０（ｄ，Ｊ＝１１．８７Ｈｚ，２Ｈ），２．１６−２．３７（ｍ，６Ｈ），２．５２（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｓ，３Ｈ），２．９３−３．００（ｍ，２Ｈ），３．０３−３．２４（ｍ，３Ｈ），３．３５−３．４５（ｍ，２Ｈ），３．５５（ｄ，Ｊ＝１１．６２Ｈｚ，１Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝１２．３８Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），４．８６（ｓ，２Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄｄ，Ｊ＝７．０７，５．５６Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｔｄ，Ｊ＝７．８３，１．５２Ｈｚ，１Ｈ），８．７３−８．８６（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５１９．４．
【０２７１】
実施例７
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化５６】
2018522874.tif 000060
【０２７２】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン、ビス−ＨＣｌ（１００ｍｇ，０．２００ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０８０ｍＬ，０．４６０ｍｍｏｌ）、２−メトキシイソニコチンアルデヒド（５４．８ｍｇ，０．４００ｍｍｏｌ）、およびＡｃＯＨ（０．０３８ｍＬ，０．６５９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（５０．２ｍｇ，０．７９９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を、逆相ＨＰＬＣを用いて精製した。産物を含有するフラクションを１Ｎ  ＨＣｌで処理し、濃縮し、５４ｍｇの産物を白色固体として得た（ＨＣｌ塩）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）δ  １．３２（ｄ，Ｊ＝７．１０Ｈｚ，３Ｈ），１．６０−１．８７（ｍ，４Ｈ），２．１３−２．３１（ｍ，６Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），２．６３（ｓ，３Ｈ），２．９０−３．１８（ｍ，５Ｈ），３．３５−３．４３（ｍ，２Ｈ），３．４５−３．５４（ｍ，１Ｈ），３．５８（ｄ，Ｊ＝１１．６６Ｈｚ，１Ｈ），４．１７（ｓ，３Ｈ），４．４６（ｓ，２Ｈ），４．８５（ｓ，２Ｈ），６．９３（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｄｄ，Ｊ＝５．８３，１．２７Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝５．８３Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５４９．７．
【０２７３】
あるいは、実施例７の化合物は、以下の手順に従って調製してもよい。
【０２７４】
ａ）メチル４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボキシレート
【化５７】
2018522874.tif 000061
【０２７５】
Ａｒ下、５００ｍＬ丸底フラスコに、（１，５−シクロオクタジエン）（メトキシ）イリジウム（Ｉ）ダイマー（１．３ｇ，１．９６１ｍｍｏｌ）を加えた。攪拌しながら、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（３２ｍＬ，２２２ｍｍｏｌ）を、シリンジを通じて加え、次いで、４，４’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２’−ジピリジル（１．０４ｇ，３．８７ｍｍｏｌ）のｎ−ヘキサン（７５ｍＬ）溶液を加えた（反応は、氷浴で５−１０℃の冷却状態に維持した）。１分間攪拌した後、メチル４−メチルチオフェン−３−カルボキシレート（２０．０ｇ，１２８ｍｍｏｌ）を加えた（ガス発生が観察された）。室温で一晩攪拌して反応させた。反応物を減圧下で蒸発させて乾燥させ、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ（商標）ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｒｆ  Ｇｏｌｄ  ３３０ｇ，０−１０％  ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）で精製した。精製フラクションを合わせ、蒸発させて乾燥させ、メチル４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボキシレート（３３．１ｇ，１１７ｍｍｏｌ，９２％  収率）を無色油状物として得、減圧下でろう質の白色固形物に固化させた。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２００．９（ボロン酸），２８３．１（ボロン酸エステル）．
【０２７６】
ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ビニル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５８】
2018522874.tif 000062
【０２７７】
窒素下、−７８℃で、ｔｅｒｔ−ブチル４−アセチルピペリジン−１−カルボキシレート（２５ｇ，１１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５０ｍＬ）溶液に、攪拌しながら、１Ｎ  ＮａＨＭＤＳのＴＨＦ（１３０ｍＬ，１３０ｍｍｏｌ）溶液を滴下して加えた。−７８℃で１時間攪拌して反応させた。次いで、１，１，１−トリフルオロ−Ｎ−（ピリジン−２−イル）−Ｎ−（（トリフルオロメチル）スルホニル）メタンスルホンアミド（４５ｇ，１２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液を１５分かけて滴下して加えた。−７８℃で１時間攪拌して反応させ、次いで、０℃で３０分間攪拌して反応させた。反応を冷水（５００ｍＬ）で停止させ、ＥｔＯＡｃ（２×２５０ｍＬ）で抽出し、食塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ（商標）ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｒｆ  Ｇｏｌｄ  ３３０ｇ，０−２０％  ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）で精製した（ＵＶネガティブ、Ｈ２ＳＯ４のＥｔＯＨ溶液を用いたチャーリング（charring）により可視化）。産物を含有するフラクションを合わせ、蒸発させて乾燥し、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ビニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２９．１ｇ，８１ｍｍｏｌ，７３．６％  収率）を無色油状物として得た（ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲは、〜１６％のＮ−Ｂｏｃ−４−エチニルピペリジンを示した）。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋３０４．０（−ｉｓｏブチレン），２８３．１（−Ｂｏｃ）．
【０２７８】
ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）ビニル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５９】
2018522874.tif 000063
【０２７９】
メチル  ４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボキシレート（５０ｇ，１７７ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ビニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（７６ｇ，２１１ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（４５ｇ，５３６ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（４５０ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）溶液に、攪拌しながら、５分間のバブリングによりＮ２をパージした。反応物にＰｄ（ＰＰｈ３）４（８ｇ，６．９２ｍｍｏｌ）をチャージし、Ｎ２下、７０℃で、１時間加熱した（激しくガス発生）。反応物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈し、水（５００ｍＬ）および食塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ（商標）ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｒｆ  Ｇｏｌｄ  ３３０ｇ，０−２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）ビニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５８．８ｇ，１６１ｍｍｏｌ，９１％  収率）を淡黄色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋２６６．１（−Ｂｏｃ），［Ｍ＋Ｈ］＋２７８．０（−イソブチレン，−ＭｅＯＨ），［Ｍ＋Ｈ］＋３１０．１（−イソブチレン），［Ｍ＋Ｎａ］＋３８８．１．
【０２８０】
ｄ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６０】
2018522874.tif 000064
【０２８１】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）ビニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３１．０ｇ，８５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５００ｍＬ）溶液に、Ｎ２流を１０分間パージした。パージした溶液に、（Ｒ，Ｒ）−［ＣＯＤ］Ｉｒ［ｃｙ２ＰＴｈｒｅＰＨＯＸ］（２．６４ｇ，１．５２７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物にＨ２（５０ｐｓｉ）をチャージし、２２時間振盪し（Ｐａｒｒ  ｒｅａｃｔｏｒ）、その時点で、Ｃｅｌｉｔｅ（商標）で濾過し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。残渣の精製（３３０ｇ  Ｉｓｃｏ（商標）シリカカラム；グラジエントＢ：３−３０％；Ａ＝ヘプタン；Ｂ＝ＥｔＯＡｃ）により、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３０．９ｇ，８０ｍｍｏｌ，９４％  収率）を濃厚油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋３９０．２．産物の光学純度をキラルＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＹ−Ｈ，５ミクロン，４．６ｍｍ×１５０ｍｍ；２４５，２５０ｎｍ  ＵＶ；９０：１０：０．１  ｎ−ヘプタン：ＥｔＯＨ：イソプロピルアミン，アイソクラチック（ｉｓｏｃｒａｔｉｃ），１．０ｍＬ／分）により決定したところ、９７．６％ｅｅであった。
【０２８２】
ｅ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−ブロモ−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６１】
2018522874.tif 000065
【０２８３】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３３．２ｇ，９０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５００ｍＬ）溶液に、ＮＢＳ（２０．９ｇ，１１７ｍｍｏｌ）を加えた。反応を約４時間維持し、その時点で、水で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（１．５Ｌ）で抽出した。有機層を水、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣の精製をカラムクロマトグラフィー（５−２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により行い、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−ブロモ−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３４ｇ，７２．４ｍｍｏｌ，８０％  収率）を得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋４６８．２，４７０．２（Ｍ＋Ｎａ）．
【０２８４】
ｆ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチル−５−（３−オキソプロピル）チオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６２】
2018522874.tif 000066
【０２８５】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−ブロモ−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５０ｇ，１１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１Ｌ）溶液に、プロパ−２−エン−１−オール（０．０２３Ｌ，５６０ｍｍｏｌ）、Ｂｕ４ＮＣｌ（３７．４ｇ，１３４ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（３７．６ｇ，４４８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＮ２で脱ガスし、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（３．７７ｇ，１６．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６５℃で２時間加熱し、その時点で、室温まで冷却した。混合物を水（１．３Ｌ）で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（２ｘ）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，１０−４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチル−５−（３−オキソプロピル）チオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４２ｇ，９４ｍｍｏｌ，８４％  収率）を淡黄色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋４４６．２（Ｍ＋Ｎａ）  ４６４．３（Ｍ＋ＭｅＣＮ）．
【０２８６】
ｇ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（３−（（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）アミノ）プロピル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６３】
2018522874.tif 000067
【０２８７】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチル−５−（３−オキソプロピル）チオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３６．３ｇ，８６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６００ｍＬ）溶液に、（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタンアミン（１６．３８ｇ，９９ｍｍｏｌ）を凍った固体として加えた。反応を室温で１．５時間維持した。次いで、反応物を氷浴で１０分間冷却し、その時点で、ＮａＢＨ４（８．１１ｇ，２１４ｍｍｏｌ）を固体として加えた（ある程度の泡立ち／ガス発生）。混合物を１５分間攪拌した。氷浴を除去し、反応物を室温で２時間攪拌した。反応物を氷浴で再度冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２００ｍＬ）で反応を停止させた。氷浴を除去し、反応物を真空で〜１／４体積まで濃縮した。混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ（１５分間攪拌）、Ｃｅｌｉｔｅ（商標）で濾過し、濃縮し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（３−（（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）アミノ）プロピル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５５．５ｇ，８７ｍｍｏｌ（ＨＰＬＣによる９０％純度に基づく），１００％  収率）を油状物として得た。物質を真空で３０分間乾燥させた。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５７４．５．
【０２８８】
ｈ）（Ｒ）−５−（１−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）エチル）−２−（３−（（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）アミノ）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸
【化６４】
2018522874.tif 000068
【０２８９】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（３−（（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）アミノ）プロピル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５５ｇ，９６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（６００ｍＬ）およびＴＨＦ（１３０ｍＬ）溶液に、５Ｎ  ＮａＯＨ（１９２ｍＬ，９５９ｍｍｏｌ）を加えた。６３℃で２２時間攪拌して反応させ、その時点で、真空で濃縮した。残渣を水（４００ｍＬ）およびＤＣＭ（４００ｍＬ）で希釈し、氷浴で冷却した。混合物に、６Ｎ  ＨＣｌ（１５８ｍＬ，９４９ｍｍｏｌ）を加えてｐＨを５−６（紙）に調整した。混合物を十分に攪拌し、層を分離した。水性層をＤＣＭ（２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ（３０分間攪拌）、Ｃｅｌｉｔｅ（商標）で濾過し、濃縮し、（Ｒ）−５−（１−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）エチル）−２−（３−（（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）アミノ）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸（５２．５ｇ，８７ｍｍｏｌ，９１％  収率）を得た。残渣を真空で２時間乾燥させた。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５６０．４．
【０２９０】
ｉ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６５】
2018522874.tif 000069
【０２９１】
（Ｒ）−５−（１−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）エチル）−２−（３−（（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）アミノ）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸（５２．５ｇ，９４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２１．５８ｇ，１１３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１５．３２ｇ，１１３ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（４００ｍＬ）溶液に、ＮＭＭ（２５．８ｍＬ，２３４ｍｍｏｌ）を加えた。反応を１８時間維持し、その時点で、氷水（１５００ｍＬ）にゆっくりと注ぎいれた。混合物を４０分間激しく攪拌した（オーバーヘッドスターラー）。混合物を濾過し、固形物を水で洗浄し、〜１時間空気乾燥した。依然として湿潤している固形物をＤＣＭで溶解し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｍｇ２ＳＯ４）、Ｃｅｌｉｔｅ（商標）で濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（３３０ｇ  Ｉｓｃｏ（商標）シリカカラム；グラジエントＢ：４−４０％；Ａ＝ヘプタン．Ｂ＝３：１  ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ）により精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３４．３ｇ，６０ｍｍｏｌ，６４％  収率）をガラス質の黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５４２．４．
【０２９２】
ｊ）（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化６６】
2018522874.tif 000070
【０２９３】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（（２−メトキシ−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３４．３ｇ，６３．３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４５０ｍＬ）溶液に、４Ｎ  ＨＣｌの１，４−ジオキサン（２２２ｍＬ，８８６ｍｍｏｌ）溶液を加えた。反応を室温で１５分間維持し、次いで、７０℃で２４時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、能出した。残渣をＤＣＭ（５００ｍＬ）および水（３００ｍＬ）で希釈し、ｐＨを濃ＮＨ４ＯＨで約１１に調整した。混合物を１５分間攪拌し、その時点で、層を分離した。水性層をＤＣＭで抽出し、合わせた有機層を乾燥させ（Ｍｇ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。残渣を真空で１８時間乾燥させ、（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン（２９．３ｇ，６５．１ｍｍｏｌ，１００％  収率）を得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋４２８．３．
【０２９４】
ｋ）（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化６７】
2018522874.tif 000071
【０２９５】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン（２０ｇ，４６．８ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（４００ｍＬ）溶液に、２−メトキシイソニコチンアルデヒド（７．３８ｇ，５３．８ｍｍｏｌ）を加えた。５分間攪拌して反応させ、その時点で、ＡｃＯＨ（５．３６ｍＬ，９４ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２９．７ｇ，１４０ｍｍｏｌ）を固体として加え、室温で１８時間攪拌して反応させた。反応物をＤＣＭ（１００ｍＬ）および水で希釈した。ｐＨを飽和ＮａＨＣＯ３および飽和Ｎａ２ＣＯ３の組み合わせで１０に調整した。混合物を３０分間攪拌し、層を分離した。水性層をＤＣＭで抽出し、合わせた有機層をＭｇ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を精製し（３３０ｇ  Ｉｓｃｏ（商標）ＧＯＬＤシリカカラム；グラジエントＢ：１０−９０％；Ａ＝ヘプタン；Ｂ＝３：１  ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ＋１％  ＮＨ４ＯＨ）、白色固体を得た。固体を１０％  ＥｔＯＨ／ヘプタンで処理し、濃縮した。次いで、残渣を１００％  ヘプタンで処理し、濃縮した。固体を真空オーブン中５０℃で３５時間乾燥させ、（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン（１９．９ｇ，３５．６ｍｍｏｌ，７６％  収率）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １１．５６（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．６９（ｓ，１Ｈ），５．９０（ｓ，１Ｈ），４．５８−４．６３（ｍ，１Ｈ），４．４９−４．５４（ｍ，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．３９（ｓ，２Ｈ），３．２１−３．２６（ｍ，２Ｈ），２．８５−２．９１（ｍ，１Ｈ），２．７３−２．７９（ｍ，１Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．１２  ２．１５（ｍ，３Ｈ），１．８５−１．９２（ｍ，１Ｈ），１．７５−１．８１（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．６９（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），１．２３−１．３１（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），１．１４−１．２７（ｍ，２Ｈ），０．８２−０．８９（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５４９．４．
【０２９６】
実施例８
（Ｒ）−２−（１−（１−（（５−クロロピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化６８】
2018522874.tif 000072
【０２９７】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン、ビス−ＨＣｌ（８０ｍｇ，０．１６０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０６４ｍＬ，０．３６８ｍｍｏｌ）、５−クロロピコリンアルデヒド（４５．３ｍｇ，０．３２０ｍｍｏｌ）、およびＡｃＯＨ（０．０３０ｍＬ，０．５２７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（４０．２ｍｇ，０．６３９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を、逆相ＨＰＬＣを用いて精製した。産物を含有するフラクションを１Ｎ  ＨＣｌで処理し、濃縮し、４５ｍｇの産物を白色固体として得た（ＨＣｌ塩）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）δ  １．３３（ｄ，Ｊ＝６．８４Ｈｚ，３Ｈ），１．５０−１．７２（ｍ，２Ｈ），１．７２−１．８９（ｍ，２Ｈ），２．１６−２．３８（ｍ，６Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．６６（ｓ，３Ｈ），２．９１−３．１９（ｍ，５Ｈ），３．３５−３．４５（ｍ，２Ｈ）  ３．４８−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝１２．４２Ｈｚ，１Ｈ），４．４６（ｓ，２Ｈ），４．８６（ｓ，２Ｈ），７．０１（ｓ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．１１Ｈｚ，１Ｈ），７．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．２４，２．４１Ｈｚ，１Ｈ），８．７０（ｄ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５５３．６．
【０２９８】
実施例９
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（（６−メチルピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化６９】
2018522874.tif 000073
【０２９９】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン、ビス−ＨＣｌ（８０ｍｇ，０．１６４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０６６ｍＬ，０．３７８ｍｍｏｌ）、６−メチルピコリンアルデヒド（３９．８ｍｇ，０．３２９ｍｍｏｌ）、およびＡｃＯＨ（０．０３１ｍＬ，０．５４３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（３６．２ｍｇ，０．５７６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を、逆相ＨＰＬＣを用いて精製した。産物を含有するフラクションを１Ｎ  ＨＣｌで処理し、濃縮し、４３ｍｇの産物を白色固体として得た（ＨＣｌ塩）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）δ  １．３３（ｄ，Ｊ＝７．１０Ｈｚ，３Ｈ），１．５８−１．７７（ｍ，２Ｈ），１．８１（ｍ，２Ｈ），２．１５−２．３４（ｍ，６Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），２．６３（ｓ，３Ｈ），２．８３（ｓ，３Ｈ），２．８９−３．０１（ｍ，２Ｈ），３．０１−３．２９（ｍ，３Ｈ），３．３５−３．４５（ｍ，２Ｈ），３．５７（ｄ，Ｊ＝１１．６６Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｄ，Ｊ＝１２．１７Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（ｓ，２Ｈ），４．８５（ｓ，２Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝７．８６Ｈｚ，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝７．６０Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｔ，Ｊ＝７．８６Ｈｚ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５３３．６．
【０３００】
実施例１０
（Ｒ）−２−（１−（１−ベンジルピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化７０】
2018522874.tif 000074
【０３０１】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン、ビス−ＨＣｌ（８０ｍｇ，０．１６４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．０６６ｍＬ，０．３７８ｍｍｏｌ）、６−メチルピコリンアルデヒド（３９．８ｍｇ，０．３２９ｍｍｏｌ）、およびＡｃＯＨ（０．０３１ｍＬ，０．５４３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間攪拌した。ＮａＢＨ３ＣＮ（３６．２ｍｇ，０．５７６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を、逆相ＨＰＬＣを用いて精製した。産物を含有するフラクションを１Ｎ  ＨＣｌで処理し、濃縮し、４６ｍｇの産物を白色固体として得た（ＨＣｌ塩）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＨ−ｄ４）δ  １．２４−１．３９（ｍ，３Ｈ），１．４３−１．６３（ｍ，２Ｈ），１．６７−１．８６（ｍ，２Ｈ），２．１２−２．３０（ｍ，６Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），２．６２（ｓ，３Ｈ），２．８８−３．１０（ｍ，５Ｈ），３．３６−３．４９（ｍ，３Ｈ），３．５３（ｄ，Ｊ＝１２．６７Ｈｚ，１Ｈ），４．３０（ｓ，２Ｈ），４．８１−４．８８（ｍ，２Ｈ），６．９１（ｓ，１Ｈ），７．４４−７．６０（ｍ，５Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５３３．６．
【０３０２】
実施例１１
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化７１】
2018522874.tif 000075
【０３０３】
ａ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−ブロモ−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化７２】
2018522874.tif 000076
【０３０４】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１２ｇ，３２．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７０ｍＬ）溶液に、ＮＢＳ（８．１４ｇ，４５．７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を水に注ぎいれ、ＣＨＣｌ３（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０−５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−ブロモ−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１３．６２ｇ，３０．５ｍｍｏｌ，９３％  収率）を無色油状物として得た。
【０３０５】
ｂ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（イソオキサゾール−４−イル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化７３】
2018522874.tif 000077
【０３０６】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−ブロモ−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１２．２４ｇ，２７．４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（７２ｍＬ）溶液に、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）イソオキサゾール（６．４２ｇ，３２．９ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（７．２７ｇ，６８．５ｍｍｏｌ）、および水（２４ｍＬ）を加えた。混合物を、溶液を通じた窒素のバブリングにより１０分間脱ガスした。Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１．５８４ｇ，１．３７１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃で５時間加熱した。次いで、混合物を水（１００ｍＬ）で反応停止させ、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０−５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（イソオキサゾール−４−イル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（７．１ｇ，１６．３４ｍｍｏｌ，５９．６％  収率）を淡褐色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ−ｄ４）δ  ８．９４（ｓ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），４．９１（ｓ，１Ｈ），４．１８−４．１１（ｍ，１Ｈ），４．０４（ｄｄ，Ｊ＝１．８，１３．１Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｓ，２Ｈ），３．３３（ｔｄ，Ｊ＝１．５，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．０２（ｄｄ，Ｊ＝６．９，８．５Ｈｚ，１Ｈ），２．２８（ｓ，２Ｈ），１．９３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１．４７−１．４４（ｍ，９Ｈ），１．３５−１．２８（ｍ，５Ｈ），１．２１−１．０８（ｍ，２Ｈ），０．９５−０．８７（ｍ，２Ｈ）．
【０３０７】
ｃ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（シアノメチル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化７４】
2018522874.tif 000078
【０３０８】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（イソオキサゾール−４−イル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（７．５ｇ，１７．２６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、ＫＦ（３．０１ｇ，５１．８ｍｍｏｌ）の水溶液（２０ｍＬ）を加えた。混合物を攪拌しながら１００℃で６０時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、濃縮した。残渣を水（５０ｍＬ）で処理し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。これらの抽出物を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。次いで。残渣をさらに減圧下で乾燥させ、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（シアノメチル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６．０６ｇ，１４．９１ｍｍｏｌ，８６％  収率）を淡褐色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋４２９．６．
【０３０９】
ｄ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化７５】
2018522874.tif 000079
【０３１０】
冷却した（０℃）、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（シアノメチル）−４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６．００ｇ，１４．７６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２００ｍＬ）溶液に、塩化コバルト（ＩＩ）六水和物（２．６３ｇ，１１．０７ｍｍｏｌ）を加えた。１５分間攪拌して反応させ、その時点で、ＮａＢＨ４（２．６２ｇ，６９．４ｍｍｏｌ）を１５分かけて少しずつ加えた（ガス発生が観察された）。１時間攪拌して反応させ、その時点で、氷浴を取り除き、室温で１８時間攪拌して反応させた。暗色の反応物をＬＣＭＳでモニタリングした。１８時間後、大部分の産物、ある程度の不純物、および少量の非環状アミン中間体が存在していた。さらに２時間攪拌して反応させた。溶媒を真空で除去した。残渣を飽和ＮＨ４Ｃｌで処理し、ｐＨを１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ〜７に調整した。混合物をＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をＭｇ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。暗褐色残渣を真空で１時間乾燥させ、ＤＣＭに溶解し、フラッシュカラム（２００ｇ  Ｉｓｃｏ（商標）ＧＯＬＤ  シリカカラム；グラジエントＢ：５−７５％，Ａ：ヘプタン，Ｂ：３−１  ＥｔＯＡｃ〜ＥｔＯＨ）で精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３．３２ｇ，８．３３ｍｍｏｌ，５６．５％  収率）を得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋４０１．７．
【０３１１】
ｅ）（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化７６】
2018522874.tif 000080
【０３１２】
冷却した（氷浴）、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．４０ｇ，６．３４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液に、ＫＯｔＢｕ（７．６１ｍＬ，７．６１ｍｍｏｌ）を、シリンジを通じて１分かけて加えた。反応混合物を１０分間攪拌し、その時点で、２−（ベンジルオキシ）−３−（クロロメチル）−４，６−ジメチルピリジン（１．８２６ｇ，６．９７ｍｍｏｌ）を固体として加えた。混合物を３０分間攪拌し、ＬＣＭＳでモニタリングした。反応物を氷および飽和ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍＬ）の混合物に注ぎいれ、１０分間攪拌した。Ｅｔ２Ｏ（２００ｍＬ）を加え、混合物を１５分間攪拌した。層を分離し、水性層をＥｔ２Ｏで抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、Ｍｇ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を真空で１時間さらに乾燥させ、フラッシュクロマトグラフィー（１２０ｇ  Ｉｓｃｏ（商標）ＧＯＬＤ  シリカカラム．グラジエントＢ：５−４０％．Ａ：ヘプタン．Ｂ：ＥｔＯＡｃ）で精製し、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３．３０ｇ，５．１９ｍｍｏｌ，８２％  収率）をガラス質の固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋６０４．９．
【０３１３】
ｆ）５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（（Ｒ）−１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化７７】
2018522874.tif 000081
【０３１４】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３．３ｇ，５．４７ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ３（４０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（２１．０５ｍＬ，２７３ｍｍｏｌ）を、シリンジを通じて１分かけて加えた。反応を１０分間維持し、次いで、３５℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、揮発分を真空で除去した。反応物をトルエンで希釈し、濃縮した（２ｘ）。残渣を水で希釈し、ＮＨ４ＯＨでｐＨ〜１１までゆっくりと塩基性に変化させた。白色懸濁液をＤＣＭ（１００ｍＬ）で処理し、１５分間攪拌した。層を分離し、水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をＴＢＭＥで処理し、真空で濃縮し、５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（（Ｒ）−１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（２．６０ｇ，５．６６ｍｍｏｌ，１０４％  収率）を白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋４１４．３．
【０３１５】
ｇ）（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン
【化７８】
2018522874.tif 000082
【０３１６】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１．３ｇ，３．１４ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（４０ｍＬ）溶液に、２−メトキシイソニコチンアルデヒド（０．４７４ｇ，３．４６ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、ＡｃＯＨ（０．５４０ｍＬ，９．４３ｍｍｏｌ）を加え、１５分間攪拌して反応させた。混合物に、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２．６６ｇ，１２．５７ｍｍｏｌ）を固体として加えた。室温で２時間攪拌して反応させた。反応物をＤＣＭ（１２５ｍＬ）および水で希釈した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３および飽和Ｎａ２ＣＯ３の混合物でｐＨ〜１０まで塩基性に変化させた。混合物を１５分間攪拌し、層を分離し、水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュカラム（８０ｇ  Ｉｓｃｏ（商標）ＧＯＬＤシリカカラム．グラジエントＢ：８−７５％．Ａ：ＤＣＭ．Ｂ：９０：１０：１  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ）で精製した。残渣をＴＢＭＥで処理し、濃縮し、真空オーブン中４０℃で１８時間乾燥させ、（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１．１９ｇ，２．１５９ｍｍｏｌ，６８．７％  収率）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １．１２−１．３２（ｍ，６Ｈ）  １．３８（ｄ，Ｊ＝１２．１７Ｈｚ，１Ｈ）  １．７４−１．９３（ｍ，３Ｈ）  ２．１３（ｄ，Ｊ＝８．６２Ｈｚ，６Ｈ）  ２．２６−２．３６（ｍ，３Ｈ）  ２．７１（ｄ，Ｊ＝１１．１５Ｈｚ，１Ｈ）  ２．７６−２．９６（ｍ，４Ｈ）  ３．３９（ｓ，２Ｈ）  ３．４３−３．５５（ｍ，２Ｈ）  ３．８２（ｓ，３Ｈ）  ４．４８（ｓ，２Ｈ）  ５．８７（ｓ，１Ｈ）  ６．６５−６．７１（ｍ，１Ｈ），６．８９（ｄｄ，Ｊ＝５．３２，１．２７Ｈｚ，１Ｈ）  ８．０６（ｄ，Ｊ＝５．５８Ｈｚ，１Ｈ）  １１．５５（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｎａ］＋５３５．４．
【０３１７】
実施例１２
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（６−メトキシピリジン−２−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化７９】
2018522874.tif 000083
【０３１８】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン（８．６ｇ，２０．１ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（２００ｍＬ）溶液に、６−メトキシピコリンアルデヒド（３．３１ｇ，２４．１３ｍｍｏｌ）を加えた。５分間攪拌して反応させ、その時点で、ＡｃＯＨ（２．３ｍＬ，４０ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１２．８ｇ，６０ｍｍｏｌ）を固体として加え、室温で１８時間攪拌して反応させた。反応物をＤＣＭ（２００ｍＬ）および水で希釈した。ｐＨを飽和ＮａＨＣＯ３および飽和Ｎａ２ＣＯ３の組み合わせで１０に調整した。混合物を３０分間攪拌し、層を分離した。水性層をＤＣＭで抽出し、合わせた有機層をＭｇ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣の精製により（２００ｇ  Ｉｓｃｏ（商標）ＧＯＬＤシリカカラム；グラジエントＢ：１０−９０％；Ａ＝ヘプタン；Ｂ＝３：１  ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ＋１％  ＮＨ４ＯＨ）、白色固体を得た。
【０３１９】
上記固体のＥｔＯＨ（２２０ｍＬ）溶液に、Ｓｉｌｉｃｙｃｌｅチオール樹脂（６ｇ）を加え、混合物を５０℃で４８時間加熱し、その時点で、Ｃｅｌｉｔｅ（商標）のパッド（pad）を通じて濾過し、ＥｔＯＨ（２×１５ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮し、残渣を１０％  ＥｔＯＨ／ヘプタン（１００ｍＬ）で処理し、濃縮し、５％  ＥｔＯＨ／ヘプタン（１００ｍＬ）で処理し、濃縮し、１００％  ヘプタン（１００ｍＬ）で処理し、濃縮した。産物を真空オーブン中４５℃で６０時間乾燥させ、（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（（２−メトキシピリジン−４−イル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン（９．３ｇ，１６．５ｍｍｏｌ，８２％  収率）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １１．５９（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１．３Ｈｚ，１Ｈ），６．６９（ｓ，１Ｈ），５．９０（ｓ，１Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．３９（ｓ，２Ｈ），３．１５−３．３２（ｍ，２Ｈ），２．６２−２．９２（ｍ，５Ｈ），２．０５−２．２６（ｍ，９Ｈ），１．７４−１．９３（ｍ，３Ｈ），１．６５（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４０（ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，１Ｈ），１．０９−１．３１（ｍ，６Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５４９．４．
【０３２０】
実施例１３
（Ｒ）−２−（１−（１−（シクロヘキシルメチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化８０】
2018522874.tif 000084
【０３２１】
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン（１００ｍｇ，０．２３４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）溶液に、シクロヘキサンカルバルデヒド（０．０５７ｍＬ，０．４６８ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（０．０２０ｍＬ，０．３５１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２．５時間攪拌して反応させ、その時点でＮａＢＨ３ＣＮ（５８．８ｍｇ，０．９３５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間攪拌した。混合物を逆相ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８（２）１００Ａ，ＡＸＩＡ，５ミクロン，３０ｍｍ×１００ｍｍ；２５４ｎｍ  ＵＶ；３８％  ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ，０．１％  ギ酸〜８０％  ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ，０．１％  ギ酸，３０．０ｍＬ／分）で精製し、（Ｒ）−２−（１−（１−（シクロヘキシルメチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン、ギ酸塩（４７ｍｇ，０．０７９ｍｍｏｌ，３４％  収率）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δ  ０．９８−１．１４（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．４４（ｍ，６Ｈ），１．４６−１．６７（ｍ，２Ｈ），１．６７−１．９０（ｍ，１１Ｈ），２．１２−２．２５（ｍ，４Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），２．７１−２．９０（ｍ，３Ｈ），２．９０−３．０９（ｍ，４Ｈ），３．３５−３．４６（ｍ，３Ｈ），３．４６−３．６７（ｍ，２Ｈ），４．７３（ｄ，Ｊ＝１３．９４Ｈｚ，１Ｈ），４．８２（ｄ，Ｊ＝１３．９４Ｈｚ，１Ｈ），６．１５（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５２４．４．
【０３２２】
実施例１４
（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（（１−メチルシクロヘキシル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オン
【化８１】
2018522874.tif 000085
【０３２３】
実施例１３の一般的手順の後、（Ｒ）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（１−（（１−メチルシクロヘキシル）メチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］アゼピン−４−オンを調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １１．５８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）  ５．９１（ｓ，１Ｈ）  ４．４６−４．６７（ｍ，２Ｈ）  ３．２０−３．２７（ｍ，２Ｈ）  ２．６２−２．９０（ｍ，６Ｈ）  ２．１２−２．１９（ｍ，９Ｈ）  １．９８−２．０８（ｍ，３Ｈ）  １．６１−１．７７（ｍ，３Ｈ）  １．３０−１．４８（ｍ，６Ｈ）  １．１１−１．２７（ｍ，１１Ｈ）  ０．８１（ｓ，３Ｈ）．ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋Ｈ］＋５３８．４．
【０３２４】
アッセイプロトコール
本明細書に含まれる化合物を、ＰＲＣ２複合体内のＥＺＨ２のメチルトランスフェラーゼ活性を阻害するそれらの能力に関して評価した。ヒトＰＲＣ２複合体は、Ｓｆ９細胞で５メンバーのタンパク質（ＦＬＡＧ−ＥＺＨ２、ＥＥＤ、ＳＵＺ１２、ＲｂＡｐ４８、ＡＥＢＰ２）のそれぞれを共発現させた後、共精製することにより作製した。酵素活性を、トリチウム化メチル基が３Ｈ−ＳＡＭから、ヒストンＨ３に由来するビオチニル化非メチル化ペプチド基質上のリシン残基へ転移される、シンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）で測定した。ペプチドはストレプトアビジンコーティングＳＰＡビーズに捕捉され、得られたシグナルはViewLuxプレートリーダーで読まれた。
【０３２５】
パートＡ  化合物の調製
１．１００％ＤＭＳＯ中に、固体からの化合物の１０ｍＭ原液を調製する。
２．３８４ウェルプレートに、ＤＭＳＯ対照用の第６列と第１８列を残し、各試験化合物に関して１００％ＤＭＳＯで１１点連続希釈系（１：４希釈、最高濃度１０ｍＭ）を設定した。
３．希釈系プレートから反応プレート（Corning、３８４ウェル  ポリスチレンＮＢＳカタログ番号３６７３）に１０ｎＬの化合物を分注する。
【０３２６】
パートＢ  試薬の調製
以下の溶液を調製する。
１．１×基本バッファー、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２：基本バッファー１Ｌ当たり、１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８（５０ｍＬ）、１Ｍ  ＭｇＣｌ２（２ｍＬ）および蒸留水（９４８ｍＬ）を合わせる。
２．１×アッセイバッファー：１×アッセイバッファー１０ｍＬ当たり、１ｘ基本バッファー（９．９６ｍＬ）、１Ｍ  ＤＴＴ（４０μＬ）、および１０％Ｔｗｅｅｎ−２０（１μＬ）を合わせ、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２、４ｍＭ  ＤＴＴ、０．００１％Ｔｗｅｅｎ−２０の終濃度とする。
３．２×酵素溶液：２×酵素溶液１０ｍＬ当たり、１×アッセイバッファー（９．９９ｍＬ）および３．２４μＭ  ＥＺＨ２  ５メンバー複合体（６．１７μＬ）を合わせ、１ｎＭの最終酵素濃度とする。
４．ＳＰＡビーズ溶液：ＳＰＡビーズ溶液１ｍＬ当たり、ストレプトアビジンコーティングＳＰＡビーズ（PerkinElmer、カタログ番号ＲＰＮＱ０２６１、４０ｍｇ）および１ｘアッセイバッファー（１ｍＬ）を合わせ、途中（working）濃度４０ｍｇ／ｍＬとする。
５．２×基質溶液：２×基質溶液１０ｍＬ当たり、４０ｍｇ／ｍＬＳＰＡビーズ溶液（３７５μＬ）、１ｍＭビオチニル化ヒストンＨ３Ｋ２７ペプチド（２００μＬ）、１２．５μＭ  ３Ｈ−ＳＡＭ（２４０μＬ；１ｍＣｉ／ｍＬ）、１μＭ冷ＳＡＭ（５７μＬ）および１×アッセイバッファー（９．１３ｍＬ）を合わせ、０．７５ｍｇ／ｍＬＳＰＡビーズ溶液、１０μＭビオチニル化ヒストンＨ３Ｋ２７ペプチド、０．１５μＭ３Ｈ−ＳＡＭ（〜１２  ｕＣｉ／ｍＬ  ３Ｈ−ＳＡＭ）および２．８５μＭ冷ＳＡＭの終濃度とする。
６．２．６７×クエンチ溶液：２．６７×クエンチ溶液１０ｍＬ当たり、１ｘアッセイバッファー（９．７３ｍＬ）および１０ｍＭ冷ＳＡＭ（２６７μＬ）を合わせ、１００μＭ冷ＳＡＭの終濃度とする。
【０３２７】
パートＣ  ３８４ウェルＧｒｅｎｉｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅプレートでのアッセイ反応
化合物の添加
１．１０ｎＬ／ウェルの１０００×化合物を試験ウェル（上記の通り）に区分する。
２．第６列および第８列（それぞれ高対照および低対照用）には１０ｎＬ／ウェルの１００％ＤＭＳＯを区分する。
【０３２８】
アッセイ
１．第１８列に５μＬ／ウェルの１×アッセイバッファーを分注する（低対照反応）。
２．第１〜２４列に５μＬ／ウェルの２×基質溶液を分注する。（注記：基質溶液は、マトリックス貯蓄槽（reservoir）に分注する前に、均一なビーズ懸濁液を確保するために混合されるべきである。）
３．第１〜１７、１９〜２４列に５μＬ／ウェルの２×酵素溶液を分注する。
４．反応物を室温で６０分間インキュベートする。
【０３２９】
クエンチ
１．第１〜２４列に６μＬ／ウェルの２．６７×クエンチ溶液を分注する。
２．アッセイプレートを封止し、約１分間５００ｒｐｍで回転させる。
３．暗順応プレートを約１５〜６０分ＶｉｅｗＬｕｘ装置に入れる。
【０３３０】
プレートの読み取り
１．Ｖｉｅｗｌｕｘプレートリーダーにて、６１３ｎｍの発光用フィルターまたは透明フィルター（３００秒暴露）を用いてアッセイプレートを読み取る。
【０３３１】
試薬の添加は手作業で行うこともできるし、または自動液体ハンドラーで行うこともできる。
【０３３２】
結果
阻害パーセントは、各化合物濃度についてＤＭＳＯ対照に対して計算し、得られた値は、ＡＢＡＳＥデータフィッティングソフトウエアパッケージ内の標準的なＩＣ５０フィッティングパラメーターを用いて当てはめを行った。
【０３３３】
例示的化合物は一般に、上記または類似のアッセイに従って試験し、ＥＺＨ２の阻害剤であることが判明した。そのようなアッセイに従って試験された特定の生物活性を下表に挙げる。≦１０ｎＭのＩＣ５０値は、化合物の活性がアッセイにおける検出の限界に近づいていたことを示している。アッセイの実行を繰り返すと、若干異なるＩＣ５０値となる場合がある。
【０３３４】
【表２】
2018522874.tif 000086
【国際調査報告】
2018522874.tif 000096
2018522874.tif 000097
2018522874.tif 000098