(57)【要約】本出願の一部の実施形態は、有効性を維持または改善しながら、かつ効果の期間を延ばす一方で、封入されていないトラネキサム酸の副作用を最小限にする目的のための、トラネキサム酸（ＴＸＡ）を含む多小胞リポソーム処方物に関連する。トラネキサム酸を封入している多小胞リポソーム処方物を作製および投与する方法、ならびに医薬としてのこれらの使用も提供される。上記多小胞リポソームは、トラネキサム酸；少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分；ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含み得る。
2018502870.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トラネキサム酸を封入している多小胞リポソームであって、トラネキサム酸；少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分；ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む多小胞リポソーム；ならびに
封入されていないトラネキサム酸
を含む医薬組成物。
【請求項２】
トラネキサム酸を封入している多小胞リポソームであって、トラネキサム酸；少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分；ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む多小胞リポソーム
を含む医薬組成物。
【請求項３】
前記多小胞リポソームが、１種もしくは複数の浸透圧剤および／または密度調整剤をさらに含む、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記多小胞リポソームが、コレステロールおよび／または植物ステロールをさらに含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記両親媒性脂質が、ホスファチジルコリン、またはホスファチジルグリセロールもしくはそれらの塩、またはこれらの組合せを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記ホスファチジルグリセロールが、ＤＰＰＧである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＥＰＣもしくはＤＯＰＣ、またはこれらの組合せから選択される、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記中性脂質が、トリグリセリド、プロピレングリコールエステル、エチレングリコールエステル、もしくはスクアレン、またはこれらの組合せを含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記中性脂質が、トリグリセリドを含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記トリグリセリドが、トリオレインもしくはトリカプリリン、またはこれらの組合せから選択される、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ｐＨ調整剤が、有機酸、有機塩基、無機酸、もしくは無機塩基、またはこれらの組合せから選択される、請求項１から１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ｐＨ調整剤が、無機酸、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ｐＨ調整剤が、有機酸、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記無機酸が、塩酸またはリン酸から選択される、請求項１１または１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記有機酸が、酒石酸、もしくはグルタミン酸、またはこれらの組合せから選択される、請求項１１または１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記有機塩基が、ヒスチジン、アルギニン、リジン、もしくはトロメタミン、またはこれらの組合せから選択される、請求項１１から１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度が、約１ｍｇ／ｍＬ〜約８０ｍｇ／ｍＬである、請求項１から１６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度が、約２．５ｍｇ／ｍＬ〜約４０ｍｇ／ｍＬである、請求項１から１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度が、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬである、請求項１から１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度が、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬである、請求項１から１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約１％〜約８０％である、請求項１または３から２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約２０％〜約７０％である、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約３０％〜約６０％である、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約５０％である、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中の前記総トラネキサム酸の約１０％未満である、請求項１または３から２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記多小胞リポソームが、約４．０〜約９．０である外側のｐＨ範囲を有する、請求項１から２５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記外側のｐＨ範囲が、約４．５〜約８．５である、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記多小胞リポソームが、約３．０〜約９．０である内側のｐＨ範囲を有する、請求項１から２７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記内側のｐＨ範囲が、約３．５〜約５．５である、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記トラネキサム酸を封入している多小胞リポソームが、３７℃にて少なくとも２日間安定である、請求項１から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
請求項１から３０のいずれか一項に記載の医薬組成物を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む、失血を処置するか、回復させるか、または予防する方法。
【請求項３２】
前記投与が、非経口である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記非経口投与が、皮下注射、組織注射、創傷への浸潤、または創傷への点滴注入から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記非経口投与が、皮下注射である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記非経口投与が、組織注射である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記非経口投与が、創傷への浸潤である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記非経口投与が、創傷への点滴注入である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３８】
前記投与が、局所的である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３９】
前記投与が、局所および非経口の両方である、請求項３１に記載の方法。
【請求項４０】
前記局所投与が、前記医薬組成物と、処置を必要としている前記被験体の身体の腔または表面とを直接接触させるステップを含む、請求項３８または３９に記載の方法。
【請求項４１】
トラネキサム酸を含む多小胞リポソームを調製するプロセスであって、
トラネキサム酸および少なくとも１種のｐＨ調整剤を含む第１の水性成分を調製するステップと；
少なくとも１種の有機溶媒、少なくとも１種の両親媒性脂質、および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分を調製するステップと；
前記第１の水性成分および前記脂質成分を混合して、油中水型エマルジョンを形成するステップであって、少なくとも１種の成分は、トラネキサム酸を含む、ステップと；
前記油中水型エマルジョンと第２の水性成分とを接触させて、溶媒含有小球を形成するステップと；
前記溶媒含有小球から前記有機溶媒を除去して、多小胞リポソームを形成するステップと
を含むプロセス。
【請求項４２】
トラネキサム酸を含む溶液に前記多小胞リポソームを懸濁させるステップであって、封入されているトラネキサム酸および封入されていないトラネキサム酸の両方を含む医薬組成物を形成するステップをさらに含む、請求項４１に記載のプロセス。
【請求項４３】
生理食塩水を含む溶液に前記多小胞リポソームを懸濁させるステップであって、封入されているトラネキサム酸を含む医薬組成物を形成するステップをさらに含む、請求項４１に記載のプロセス。
【請求項４４】
前記脂質成分が、コレステロールおよび／または植物ステロールをさらに含む、請求項４１から４３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４５】
前記両親媒性脂質が、ホスファチジルコリン、またはホスファチジルグリセロールもしくはそれらの塩、またはこれらの組合せを含む、請求項４１から４４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４６】
前記ホスファチジルグリセロールが、ＤＰＰＧである、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４７】
前記ホスファチジルコリンが、ＤＥＰＣもしくはＤＯＰＣ、またはこれらの組合せから選択される、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４８】
前記中性脂質が、トリグリセリド、プロピレングリコールエステル、エチレングリコールエステル、もしくはスクアレン、またはこれらの組合せを含む、請求項４１から４７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４９】
前記中性脂質が、トリグリセリドを含む、請求項４８に記載のプロセス。
【請求項５０】
前記トリグリセリドが、トリオレインもしくはトリカプリリン、またはこれらの組合せから選択される、請求項４８または４９に記載のプロセス。
【請求項５１】
前記第１の水性成分が、少なくとも１種の浸透圧剤および／または密度調整剤をさらに含む、請求項４１から５０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５２】
前記第１の水性成分の前記ｐＨ調整剤が、無機酸、有機酸、無機塩基、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される、請求項４１から５１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５３】
前記ｐＨ調整剤が、塩酸、リン酸、もしくは酒石酸、またはこれらの組合せから選択される、請求項５２に記載のプロセス。
【請求項５４】
前記ｐＨ調整剤が、ヒスチジン、アルギニン、トロメタミン、またはこれらの組合せから選択される、請求項４１に記載のプロセス。
【請求項５５】
前記第１の水性成分のｐＨ範囲が、約２．０〜約９．０である、請求項４１から５４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５６】
前記第１の水性成分のｐＨ範囲が、約３．５〜約５．５である、請求項５５に記載のプロセス。
【請求項５７】
前記第１の水性成分のｐＨ範囲が、約４．３〜約５．５である、請求項５５に記載のプロセス。
【請求項５８】
前記第１の水性成分のｐＨ範囲が、約７．５〜約９．０である、請求項５５に記載のプロセス。
【請求項５９】
前記第１の水性成分のｐＨが、約７．７である、請求項５８に記載のプロセス。
【請求項６０】
前記第２の水性成分が、少なくとも１種の浸透圧剤、および少なくとも１種のｐＨ調整剤を含む、請求項４１から５９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６１】
前記第２の水性成分のｐＨ範囲が、約３．５〜約１０．５である、請求項４１から６０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６２】
前記第２の水性成分のｐＨ範囲が、約７．５〜約１０．５である、請求項６１に記載のプロセス。
【請求項６３】
前記医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度が、約１ｍｇ／ｍＬ〜約８０ｍｇ／ｍＬである、請求項４２から６２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６４】
前記医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度が、約２．５ｍｇ／ｍＬ〜約４０ｍｇ／ｍＬである、請求項４２から６３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６５】
前記医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度が、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬである、請求項４２から６４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６６】
前記医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度が、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬである、請求項４２から６５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６７】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約１％〜約８０％である、請求項４２または４４から６５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６８】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約２０％〜約７０％である、請求項６７に記載のプロセス。
【請求項６９】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約３０％〜約６０％である、請求項６７に記載のプロセス。
【請求項７０】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約５０％である、請求項６７に記載のプロセス。
【請求項７１】
前記封入されていないトラネキサム酸が、前記医薬組成物中の前記総トラネキサム酸の約１０％未満である、請求項４１または４３から６６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７２】
請求項４１から７１に記載のプロセスによって調製された、トラネキサム酸を含有する多小胞リポソームを含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（背景）
本出願は、トラネキサム酸（ＴＸＡ）の有効性を維持または改善しながら、ＴＸＡの治療効果を延長させる一方で、ＴＸＡの副作用を最小限にする、ＴＸＡの多小胞リポソーム（ＭＶＬ）処方物に関連する。特に、本出願の実施形態は、ＴＸＡを封入している多小胞リポソームを含む組成物、これらを作製するプロセス、およびこれらの投与方法に関連する。ＴＸＡを含有する多小胞リポソームを作製する方法、および医薬としてのこれらの使用も提供される。
【背景技術】
【０００２】
トラネキサム酸（ＴＸＡ）は、外傷後、手術の間、または月経の間の過剰な失血を処置または予防するために使用されるアミノ酸リジンの合成類似体である。ＴＸＡは、プラスミノーゲン分子上のリジン結合部位の可逆的遮断を介してその凝固効果を発揮する抗線維素溶解剤である。静脈内に投与されたトラネキサム酸は、心肺バイパス術による心臓手術を受けている患者における手術後の失血において、プラセボに対して２９〜５４％の低減をもたらし、いくつかの研究において輸血の必要性の統計的に有意な低減を伴った。６０回の治験のメタ分析は、イプシロン−アミノカプロン酸およびデスモプレシンとは異なり、ＴＸＡおよびアプロチニンが、ＣＰＢによる心臓手術後に同種血輸血を必要とする患者の数を有意に低減させたことを示した。ＴＸＡはまた、血友病を有する患者における口腔内手術後の平均失血を有意に低減させた。失血の低減はまた、同所性肝移植術または経尿道的前立腺手術を受けている患者におけるこの薬物の使用において得られた。臨床的有用性がまた、遺伝性の血管運動神経性浮腫を有する患者におけるＴＸＡで報告されてきた。例えば、DunnおよびGoa、Drugs、５７巻、６号、１００５〜３２頁（１９９９年）を参照されたい。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】DunnおよびGoa、Drugs、５７巻、６号、１００５〜３２頁（１９９９年）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
しかし、ＴＸＡの経口投与は胃腸の不快感をもたらすことが多く、静脈内投与は浮動性めまいおよび低血圧をもたらし得る。これらの副作用は、必要な凝固効果を実現するのに十分なボーラス用量として投与されたときの、主にＴＸＡの血漿レベルの急速な増加による。しかし、特に、外傷患者について、持続的な静脈内投与は必ずしも実行可能であるとは限らない。さらに、ＴＸＡ血漿レベルの急速な増加に続いて、排泄および代謝によるＴＸＡ濃度の急速な減少が起こる。この急速な減少は、ＴＸＡが治療量未満で存在するレベルに急速に達する。したがって、局所および皮下適用の両方のためのＴＸＡの安定な持続放出処方物が求められている。さらに、局所および様々な非経口適用の両方、例えば、皮下注射、創傷への浸潤または創傷への点滴注入のための、持続放出および即時放出ＴＸＡの両方を含む安定な処方物が求められている。
【図面の簡単な説明】
【０００５】
【図１Ａ】図１Ａは、実施例１の動物試験において記載したような、９６時間にわたる、生理食塩水溶液、ＴＸＡ−ＭＶＬ、およびＤｅｐｏ−ＴＸＡにおける、遊離ＴＸＡの血漿レベルの減少を示す。
【０００６】
【図１Ｂ】図１Ｂは、実施例１の動物試験において記載したような、投与後９６時間までの、生理食塩水溶液、ＴＸＡ−ＭＶＬ、およびＤｅｐｏ−ＴＸＡにおける、遊離ＴＸＡの曲線下総面積（ＡＵＣ）のパーセントを示す。
【０００７】
【図２】図２〜４、５Ａ〜５Ｂ、６Ａ〜６Ｂ、７Ａ〜７Ｂ、および８Ａ〜８Ｂは、実施例３に記載されている動物試験から得た薬物動態データに言及する。図２は、処置１日目の注射後７２時間にわたるＴＸＡの平均血漿濃度を示す。群２は、１２０ｍｇ／ｋｇのＴＸＡを投与され、群３は、４０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏ−ＴＸＡを投与され、群４は、１２０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏ−ＴＸＡを投与された。
【０００８】
【図３】図３は、処置１０日目の投与後７２時間にわたるＴＸＡの平均血漿濃度を示す。群２は１２０ｍｇ／ｋｇのＴＸＡを投与され、群３は４０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏ−ＴＸＡを投与され、群４は１２０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏ−ＴＸＡを投与された。
【０００９】
【図４】図４は、群２、３および４について、処置１日目の投与後１２時間にわたる血漿中のＴＸＡの濃度を示す。
【００１０】
【図５Ａ】図５Ａは、群２、３および４について、処置１日目の投与後７２時間までのＴＸＡの曲線下総面積（ＡＵＣ）のパーセントを示す。
【００１１】
【図５Ｂ】図５Ｂは、群２、３および４について、処置１０日目の投与後７２時間までのＴＸＡの曲線下総面積（ＡＵＣ）のパーセントを示す。
【００１２】
【図６Ａ】図６Ａは、群２、３および４について、処置１日目の投与後７２時間にわたる送達されたＴＸＡの総量を示す。
【００１３】
【図６Ｂ】図６Ｂは、群２、３および４について、処置１０日目の投与後７２時間にわたる送達されたＴＸＡの総量を示す。
【００１４】
【図７Ａ】図７Ａは、群２、３および４について、１日目の投与後７２時間にわたるＴＸＡの血漿レベルにおける減少を示す。
【００１５】
【図７Ｂ】図７Ｂは、群２、３および４について、１０日目の投与後７２時間にわたるＴＸＡの血漿レベルにおける減少を示す。
【００１６】
【図８Ａ】図８Ａは、群２および４について、投与後７２時間にわたる血漿中の総ＴＸＡ用量のパーセントを示す。
【００１７】
【図８Ｂ】図８Ｂは、群２、３、および４について、投与後７２時間にわたる血漿中のＴＸＡ用量の百分率を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
（要旨）
本出願の一部の実施形態は、トラネキサム酸、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分、ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソーム；ならびに封入されていないトラネキサム酸を含む医薬組成物に関連する。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約８０ｍｇ／ｍＬであり、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約１％〜約８０％である。
【００１９】
本出願の一部の実施形態は、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソームであってトラネキサム酸、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分、ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む多小胞リポソーム；ならびに封入されていないトラネキサム酸を含む医薬組成物と投与するステップを含む、失血を処置するか、回復させるか、または予防する方法に関連する。
【００２０】
本出願の一部の他の実施形態は、トラネキサム酸を含む多小胞リポソームを調製するプロセスに関連し、前記プロセスは、トラネキサム酸および少なくとも１種のｐＨ調整剤を含む第１の水性成分を調製するステップと；少なくとも１種の有機溶媒、少なくとも１種の両親媒性脂質、および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分を調製するステップと；前記第１の水性成分および前記脂質成分を混合して、油中水型エマルジョンを形成するステップであって、少なくとも１種の成分は、トラネキサム酸を含む、ステップと；前記油中水型エマルジョンと第２の水性成分とを接触させて、溶媒含有小球を形成するステップと；溶媒含有小球から有機溶媒を除去して、多小胞リポソームを形成するステップとを含む。一部の実施形態では、プロセスは、遊離トラネキサム酸を含む溶液に多小胞リポソームを懸濁させるステップであって、封入されているトラネキサム酸および封入されていないトラネキサム酸の両方を含む医薬組成物を形成するさらなるステップをさらに含む。
【００２１】
本出願の一部の他の実施形態は、本明細書に記載されているプロセスによって調製された、トラネキサム酸を含有する多小胞リポソームを含む、関連する医薬組成物である。
【００２２】
一部の実施形態は、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソームであって、トラネキサム酸；少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分；ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む多小胞リポソーム；ならびに封入されていないトラネキサム酸を含む医薬組成物を提供する。一部の実施形態は、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソームを含む医薬組成物を提供し、前記多小胞リポソームは、トラネキサム酸；少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分；ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む。
【００２３】
一部の実施形態では、多小胞リポソームは、１種もしくは複数の浸透圧剤および／または密度調整剤をさらに含む。一部の実施形態では、多小胞リポソームは、コレステロールおよび／または植物ステロールをさらに含む。一部の実施形態では、両親媒性脂質は、ホスファチジルコリン、またはホスファチジルグリセロールもしくはそれらの塩、またはこれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ホスファチジルグリセロールは、ＤＰＰＧである。一部の実施形態では、ホスファチジルコリンは、ＤＥＰＣもしくはＤＯＰＣ、またはこれらの組合せから選択される。
【００２４】
一部の実施形態では、中性脂質は、トリグリセリド、プロピレングリコールエステル、エチレングリコールエステル、もしくはスクアレン、またはこれらの組合せを含む。一部の実施形態では、中性脂質は、トリグリセリドを含む。一部の実施形態では、トリグリセリドは、トリオレインもしくはトリカプリリン、またはこれらの組合せから選択される。
【００２５】
一部の実施形態では、前記ｐＨ調整剤は、有機酸、有機塩基、無機酸、もしくは無機塩基、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、前記ｐＨ調整剤は、無機酸、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、前記ｐＨ調整剤は、有機酸、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、無機酸は、塩酸またはリン酸から選択される。一部の実施形態では、有機酸は、酒石酸、もしくはグルタミン酸、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、有機塩基は、ヒスチジン、アルギニン、リジン、もしくはトロメタミン、またはこれらの組合せから選択される。
【００２６】
一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約８０ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約２．５ｍｇ／ｍＬ〜約４０ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬである。
【００２７】
一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約１％〜約８０％である。一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約２０％〜約７０％である。一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約３０％〜約６０％である。
【００２８】
一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約５０％である。一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中の総トラネキサム酸の約１０％未満である。
【００２９】
一部の実施形態では、前記多小胞リポソームは、約４．０〜約９．０である外側のｐＨ範囲を有する。一部の実施形態では、前記外側のｐＨ範囲は、約４．５〜約８．５である。一部の実施形態では、前記多小胞リポソームは、約３．０〜約９．０である内側のｐＨ範囲を有する。一部の実施形態では、前記内側のｐＨ範囲は、約３．５〜約５．５である。
【００３０】
一部の実施形態では、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソームは、３７℃にて少なくとも２日間安定である。
【００３１】
一部の実施形態は、本明細書に記載のような医薬組成物を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む、失血を処置するか、回復させるか、または予防する方法を提供する。
【００３２】
一部の実施形態では、投与は、非経口である。一部の実施形態では、非経口投与は、皮下注射、組織注射、創傷への浸潤、または創傷への点滴注入から選択される。一部の実施形態では、非経口投与は、皮下注射である。一部の実施形態では、非経口投与は、組織注射である。一部の実施形態では、非経口投与は、創傷への浸潤である。一部の実施形態では、非経口投与は、創傷への点滴注入である。
【００３３】
一部の実施形態では、投与は、局所的である。一部の実施形態では、投与は、局所および非経口の両方である。一部の実施形態では、局所投与は、前記医薬組成物と、処置を必要としている被験体の腔または表面とを直接接触させるステップを含む。
【００３４】
一部の実施形態は、トラネキサム酸および少なくとも１種のｐＨ調整剤を含む第１の水性成分を調製するステップと；少なくとも１種の有機溶媒、少なくとも１種の両親媒性脂質、および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分を調製するステップと；前記第１の水性成分および前記脂質成分を混合して、油中水型エマルジョンを形成するステップであって、少なくとも１種の成分は、トラネキサム酸を含む、ステップと；前記油中水型エマルジョンと第２の水性成分とを接触させて、溶媒含有小球を形成するステップと；溶媒含有小球から有機溶媒を除去して、多小胞リポソームを形成するステップとを含む、トラネキサム酸を含む多小胞リポソームを調製するプロセスを提供する。一部の実施形態は、生理食塩水を含む溶液に多小胞リポソームを懸濁させて、封入されているトラネキサム酸を含む医薬組成物を形成するステップをさらに含む。
【００３５】
一部の実施形態は、トラネキサム酸を含む溶液に多小胞リポソームを懸濁させるステップであって、封入されているトラネキサム酸および封入されていないトラネキサム酸の両方を含む医薬組成物を形成するステップをさらに含む。
【００３６】
一部の実施形態では、脂質成分は、コレステロールおよび／または植物ステロールをさらに含む。一部の実施形態では、両親媒性脂質は、ホスファチジルコリン、またはホスファチジルグリセロールもしくはそれらの塩、またはこれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ホスファチジルグリセロールは、ＤＰＰＧである。一部の実施形態では、ホスファチジルコリンは、ＤＥＰＣもしくはＤＯＰＣ、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、中性脂質は、トリグリセリド、プロピレングリコールエステル、エチレングリコールエステル、もしくはスクアレン、またはこれらの組合せを含む。一部の実施形態では、中性脂質は、トリグリセリドを含む。一部の実施形態では、トリグリセリドは、トリオレインもしくはトリカプリリン、またはこれらの組合せから選択される。
【００３７】
一部の実施形態では、前記第１の水性成分は、少なくとも１種の浸透圧剤および／または密度調整剤をさらに含む。一部の実施形態では、前記第１の水性成分のｐＨ調整剤は、無機酸、有機酸、無機塩基、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される。
【００３８】
一部の実施形態では、前記ｐＨ調整剤は、塩酸、リン酸、もしくは酒石酸、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、前記ｐＨ調整剤は、ヒスチジン、アルギニン、トロメタミン、またはこれらの組合せから選択される。
【００３９】
一部の実施形態では、前記第１の水性成分のｐＨ範囲は、約２．０〜約９．０である。一部の実施形態では、前記第１の水性成分のｐＨ範囲は、約３．５〜約５．５である。一部の実施形態では、前記第１の水性成分のｐＨ範囲は、約４．３〜約５．５である。一部の実施形態では、前記第１の水性成分のｐＨ範囲は、約７．５〜約９．０である。一部の実施形態では、前記第１の水性成分のｐＨは、約７．７である。
【００４０】
一部の実施形態では、前記第２の水性成分は、少なくとも１種の浸透圧剤、および少なくとも１種のｐＨ調整剤を含む。
【００４１】
一部の実施形態では、前記第２の水性成分のｐＨ範囲は、約３．５〜約１０．５である。一部の実施形態では、前記第２の水性成分のｐＨ範囲は、約７．５〜約１０．５である。
【００４２】
一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約８０ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約２．５ｍｇ／ｍＬ〜約４０ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬである。
【００４３】
一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約１％〜約８０％である。一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約２０％〜約７０％である。一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約３０％〜約６０％である。一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約５０％である。一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中の総トラネキサム酸の約１０％未満である。
【００４４】
一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：１０〜１０：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：１０である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：９である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：８である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：７である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：６である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：５である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：４である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：３である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：２である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１：１である。
【００４５】
一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、２：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、３：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、４：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、５：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、６：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、７：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、８：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、９：１である。一部の実施形態では、封入されていない（遊離）トラネキサム酸と封入されているトラネキサム酸の比は、１０：１である。
【００４６】
一部の実施形態は、本明細書に記載されているプロセスによって調製された、トラネキサム酸を含有する多小胞リポソームを含む医薬組成物を提供する。
【００４７】
一実施形態の特徴のいずれかは、本明細書において同定された全ての実施形態に適用可能である。さらに、一実施形態の特徴のいずれかは独立に、本明細書に記載されている他の実施形態と部分的または全体的に合わせることができ、例えば、１つ、２つ、または３つまたはそれ超の実施形態は、全体的または部分的に合わせてもよい。さらに、一実施形態の特徴のいずれかは、他の実施形態に対して任意選択とし得る。方法の任意の実施形態は、化合物の別の実施形態を含むことができ、化合物の任意の実施形態は、別の実施形態の方法を行うように構成されることができる。
【００４８】
（実施形態の詳細な説明）
本発明の実施形態は、ＴＸＡの有効性を維持または改善しながら、かつ効果の持続期間を延ばす一方で、ＴＸＡの副作用を最小限にする、トラネキサム酸（ＴＸＡ）を含有する多小胞リポソーム（ＭＶＬ）を含む医薬処方物を提供する。本発明の実施形態はまた、ＭＶＬ中に封入されているＴＸＡおよび封入されていないＴＸＡを含む医薬処方物を提供する。用語「封入されていない」は、本明細書中で使用される場合、生物学的活性成分（例えば、トラネキサム酸）が、ＭＶＬ粒子の外側にあり、例えば、懸濁溶液中にあることを意味する。本実施形態におけるＴＸＡを封入しているＭＶＬ処方物の使用は、長期間のＴＸＡの放出をもたらす一方で、封入されていないＴＸＡは、ＴＸＡの即時の有効性を実現する。ＤＥＰＯ−ＴＸＡを調製するプロセス、および失血を処置するか、回復させるか、または予防するためのＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物を使用する方法をまた、本明細書によって開示する。
【００４９】
本明細書中で使用される場合、用語「ＤＥＰＯ−ＴＸＡ」は、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソーム処方物を指す。ＤＥＰＯ−ＴＸＡはまた、ＭＶＬの懸濁水溶液中の遊離トラネキサム酸を含む。好ましくは、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ懸濁水溶液中の遊離ＴＸＡの濃度は、多小胞リポソーム中に封入されているＴＸＡの濃度と概ね等しい。
【００５０】
本明細書中で使用される場合、用語「遊離ＴＸＡ」は、封入されていないトラネキサム酸、例えば、ＴＸＡ、または水性ＴＸＡを含有する食塩溶液を含む医薬処方物を指す。
【００５１】
本明細書中で使用される場合、「ＴＸＡ−ＭＶＬ」は、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソーム処方物を含む医薬処方物を指し、１０％未満、９％未満、８％未満、７％未満、６％未満、５％未満、４％未満、３％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満、０．２％未満または０．１％未満、または２つの前述の値のいずれかによって定義される範囲の遊離ＴＸＡを有する。
【００５２】
他に定義しない限り、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。本明細書において参照する全ての特許、出願、公開された出願および他の公開資料は、他に断りのない限り、その全体が参照により組み込まれている。本明細書においてある用語について複数の定義が存在する場合、他に断りのない限り、このセクションにおける定義が優先する。明細書および添付の特許請求の範囲において使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈によって明らかにそれ以外のことの指示がない限り、複数の参照対象を含む。別段の指定がない限り、質量分析、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、タンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ技術および薬理学の通常の方法が用いられる。「または」または「および」の使用は、他に断りのない限り、「および／または」を意味する。さらに、用語「含まれること（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」ならびに他の形態、例えば、「含まれる」、「含まれ」および「含まれた」の使用は限定的ではない。本明細書において使用するように、移行句中または特許請求の範囲の本文中にあろうと、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ（ｓ））」および「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、オープンエンドな意味を有すると解釈される。すなわち、これらの用語は、「少なくとも有すること」または「少なくとも含まれること（ｎｃｌｕｄｉｎｇ  ａｔ  ｌｅａｓｔ）」というフレーズの同意語として解釈される。プロセスとの関連で使用されるとき、用語「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、プロセスが少なくとも記載したステップを含むが、さらなるステップを含み得ることを意味する。化合物、組成物、またはデバイスとの関連で使用されるとき、用語「含むこと」は、化合物、組成物、またはデバイスが、少なくとも記載した特徴もしくは成分を含むが、またさらなる特徴もしくは成分を含み得ることを意味する。
【００５３】
本明細書において使用されるセクションの見出しは、単に構成的な目的のためであり、記載した主題を限定すると解釈されない。
【００５４】
多小胞リポソーム処方物
本発明の実施形態は、ＴＸＡを含有するＭＶＬを対象とする。Kimら（Biochim.  Biophys.  Acta、７２８巻：３３９〜３４８頁、１９８３年）において報告されているＭＶＬは、他の脂質をベースとする送達システム、例えば、単膜リポソーム（Huang、Biochemistry、８巻：３３４〜３５２頁、１９６９年；Kimら、Biochim.  Biophys.  Acta、６４６巻：１〜１０頁、１９８１年）および多重膜リポソーム（Banghamら、J  Mol.  Bio.、１３巻：２３８〜２５２頁、１９６５年）とは異なる、合成膜小胞の独特の形態の一群である。多小胞リポソームおよび単膜リポソーム（また単膜小胞として公知である）の間の主要な構造的差異は、多小胞リポソームが、粒子毎に複数の水性チャンバーを含有することである。多小胞リポソームおよび多重膜リポソーム（また多重膜小胞として公知である）の間の主要な構造的差異は、多小胞リポソームにおいて、複数の水性チャンバーが同心円状でないことである。多小胞リポソームは一般に、粒子毎に１億〜１００万個のチャンバーを有し、全ての内側のチャンバーは、チャンバーを分離している共通の脂質の二重層壁によって相互接続されている。単膜、多重膜、および多小胞リポソームの間の構造的差異は、Sankaramら、米国特許第５，７６６，６２７号および同第６，１３２，７６６号において例示されている。
【００５５】
多小胞リポソームの構造的および機能的特徴は、単層小胞および多重膜小胞の現在の知識から直接予測できない。多小胞リポソームは、非常に特徴的な内部の形態を有し、それは製造において採用される特別な方法の結果として生じ得る。位相幾何学的に、多小胞リポソームは、各粒子内に複数の非同心円状のチャンバーを有すると定義され、「泡状」または「ハチの巣状」マトリックスに似る；一方多重膜小胞は、各リポソーム内に複数の同心円状のチャンバーを含み、「タマネギの層」に似る。
【００５６】
多小胞リポソーム中のネットワークとして分布する内部膜の存在は、小胞に増大した機械的強度を付与するために役立ち得る。その粒子自体が処方物の容積全体において非常に大きな割合を占め得る。ヘマトクリットと同様の方式で測定される、ＭＶＬの充填粒子容積（ｐａｃｋｅｄ  ｐａｒｔｉｃｌｅ  ｖｏｌｕｍｅ）（ＰＰＶ）は、粒子が構成する処方物の容積を示し、そしてそれは８０％に近づき得る。典型的には、ＰＰＶは約５０％である。５０％のＰＰＶにおいて、多小胞リポソーム処方物は、典型的には５％ｗ／ｗ未満の脂質から成る。従って、比較的低い脂質濃度を有しながら、封入される容積は、約５０％である。多小胞リポソームの多小胞の性質はまた、単層小胞と異なり、多小胞小胞の外部膜の１つの裂け目は、内部の水性内容物の完全な放出をもたらさないことを示す。
【００５７】
したがって、多小胞リポソーム処方物は、送達されるべきＴＸＡを封入している多数の同心円状でない水性チャンバーから構成される、顕微鏡的な球状粒子からなる。個々のチャンバーは、天然に存在する脂質の合成バージョンから構成される脂質二重膜によって分離されており、これにより、生体適合性および生分解性の両方である送達ビヒクルが得られる。本ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物は、局所部位または全身的な持続送達を実現し、局所および様々な非経口適用、例えば、皮下注射、筋肉注射、創傷への浸潤または創傷への点滴注入を含めたいくつかの経路によって投与することができる。
【００５８】
本出願の一部の実施形態は、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソーム（「ＭＶＬ」）を含む医薬組成物に関連し、多小胞リポソームは、トラネキサム酸（「ＴＸＡ」）、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分；ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む。一部の実施形態では、ＭＶＬは、第２の治療剤を任意選択で含むことができる。一部の他の実施形態では、ＴＸＡは、ＭＶＬ中の唯一の治療剤である。
【００５９】
本出願の一部の実施形態は、トラネキサム酸、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分、ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソーム；ならびに封入されていないトラネキサム酸を含む医薬組成物に関連する。
【００６０】
一部の実施形態では、ＭＶＬは、コレステロールおよび／または植物ステロールをさらに含む。
【００６１】
一部の実施形態では、両親媒性脂質は、ホスファチジルコリン、またはホスファチジルグリセロールもしくはその塩、またはこれらの組合せを含む。一部のこのような実施形態では、ホスファチジルグリセロールは、ＤＰＰＧである。一部のこのような実施形態では、ホスファチジルコリンは、ＤＥＰＣもしくはＤＯＰＣ、またはこれらの組合せから選択される。一部の他の実施形態では、ＭＶＬは、ＤＥＰＣを含まない。一部のさらなる実施形態では、ＭＶＬは、ホスファチジルコリンを実質的に含まない。
【００６２】
一部の実施形態では、中性脂質は、トリグリセリド、プロピレングリコールエステル、エチレングリコールエステル、もしくはスクアレン、またはこれらの組合せを含む。一部の実施形態では、中性脂質は、トリグリセリドを含む。一部のこのような実施形態では、トリグリセリドは、トリオレインもしくはトリカプリリン、またはこれらの組合せから選択される。
【００６３】
ｐＨ調整剤
一部の実施形態では、ｐＨ調整剤は、１種または複数の有機酸、有機塩基、無機酸、もしくは無機塩基、またはこれらの組合せから選択される。本出願において使用することができる適切な無機酸（また鉱酸として公知である）には、これらに限定されないが、塩酸（ＨＣｌ）、硫酸（Ｈ２ＳＯ４）、リン酸（Ｈ３ＰＯ４）、硝酸（ＨＮＯ３）等が含まれる。本出願において使用することができる適切な有機酸には、これらに限定されないが、酢酸、アスパラギン酸、クエン酸、ギ酸、グルタミン酸、グルコロン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸等が含まれる。本出願において使用することができる適切な有機塩基には、これらに限定されないが、ヒスチジン、アルギニン、リジン、トロメタミン（トリス）等が含まれる。本出願において使用することができる適切な無機塩基には、これらに限定されないが、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化カリウム等が含まれる。一部の実施形態では、ｐＨ調整剤は、無機酸、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される。一部の他の実施形態では、ｐＨ調整剤は、有機酸、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される。一部のこのような実施形態では、無機酸は、塩酸またはリン酸から選択される。一部のこのような実施形態では、有機酸は、酒石酸、もしくはグルタミン酸、またはこれらの組合せから選択される。一部の実施形態では、有機塩基は、ヒスチジン、アルギニン、トロメタミンもしくはリジン、またはこれらの組合せから選択される。一実施形態では、ＭＶＬのｐＨ調整剤は、塩酸およびリジンである。別の実施形態では、ＭＶＬのｐＨ調整剤は、リン酸およびリジンである。別の実施形態では、ＭＶＬのｐＨ調整剤は、酒石酸およびリジンである。さらに別の実施形態では、ＭＶＬのｐＨ調整剤は、ヒスチジンおよびリジンである。さらに別の実施形態では、ＭＶＬのｐＨ調整剤は、トロメタミンおよびリジンである。
【００６４】
一部の実施形態では、ＭＶＬは、約４．０〜約９．０である外側のｐＨ範囲を有する。一部のこのような実施形態では、外側のｐＨ範囲は、約４．５〜約８．５である。一部の実施形態では、ＭＶＬは、約３．０〜約９．０である内側のｐＨ範囲を有する。一部のこのような実施形態では、内側のｐＨ範囲は、約３．５〜約５．５である。一部のさらなる実施形態では、内側のｐＨは、約５．５である。
浸透圧剤および密度調整剤
【００６５】
一部の実施形態では、ＭＶＬは、１種もしくは複数のｐＨ調整剤および／または密度調整剤をさらに含む。本出願において使用される浸透圧剤は、ＭＶＬの第１の水性成分および第２の水性成分の調製において所望の容量オスモル濃度を提供する。本出願のＭＶＬ処方物に適した非限定的で例示的な浸透圧剤は、単糖類（例えば、グルコース等）、二糖類（例えば、スクロース等）、および多糖類またはポリオール（例えば、ソルビトール、マンニトール、デキストラン等）を含む。一部の他の実施形態では、浸透圧剤は、デキストラン４０、スクロース、ソルビトール、またはこれらの組合せから選択される。
【００６６】
一部の実施形態では、浸透圧剤はまた、密度調整剤として作用することができる。例えば、デキストラン４０は、容量オスモル濃度の最小の変化を伴って、ＭＶＬの密度を最大化させる密度調整剤として作用することができる。本出願に適した密度調整剤の他の非限定的例は、多糖類、ポロキサマー、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリビニルポリピロリドン（ＰＶＰＰ）等を含む。
【００６７】
一部の実施形態では、ｐＨ調整剤はまた、浸透圧剤として作用することができる。特定の一実施形態では、ＴＸＡはまた、浸透圧剤として使用される。
【００６８】
一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約８０ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約２．５ｍｇ／ｍＬ〜約４０ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬである。一部のさらなる実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬである。さらにまた一部の実施形態では、医薬組成物中の総トラネキサム酸の濃度は、約１５ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬである。
【００６９】
一部の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約１０％〜約８０％である。一部のこのような実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約２０％〜約７０％である。一部のこのような実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約３０％〜約６０％である。一部のさらなる実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中のトラネキサム酸の総量の約５０％である。一部の他の実施形態では、封入されていないトラネキサム酸は、医薬組成物中の総トラネキサム酸の約１０％未満である。
【００７０】
一部の実施形態では、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物は、１日当たり１回、２回、３回、４回、またはそれ超の回数、投与される。ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物はまた、１日当たり１回未満、例えば、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、８日毎、９日毎、１０日毎、１１日毎、１２日毎、１３日毎、もしくは１４日毎に１回、または１週間毎もしくは２週間毎、または前述の値の任意の２つによって定義される範囲で投与することができる。一部の実施形態では、１日当たりの投与の数は、一定である（例えば、１日当たり１回）。他の実施形態では、投与の数は、不定である。投与の数は、用量の有効性、観察される副作用、所望の用量まで滴定する要望、外部要因（例えば、別の医薬の変化）、または剤形が投与されてきた期間によって変化し得る。
【００７１】
一部の実施形態では、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物は、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与される。一部のさらなる実施形態では、処方物は、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与される。また一部のさらなる実施形態では、処方物は、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与される。一実施形態では、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物は、約４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態では、処方物は、約１２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００７２】
一部の実施形態では、本明細書に記載されているＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物中のＴＸＡのＣｍａｘは、約１０ｍｇ／Ｌ〜約２００ｍｇ／Ｌ、約２０ｍｇ／Ｌ〜約１５０ｍｇ／Ｌ、約４０ｍｇ／Ｌ〜約１００ｍｇ／Ｌである。一部のさらなる実施形態では、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物中のＴＸＡのＣｍａｘは、約４５ｍｇ／Ｌ〜約１４０ｍｇ／Ｌである。
【００７３】
シクロデキストリン
ある特定の実施形態では、シクロデキストリンはまた、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ中で使用することができる。一部の他の実施形態では、本出願の医薬組成物は、シクロデキストリンを含まない。
【００７４】
シクロデキストリンは、デンプンに対する酵素シクロデキストリントランスグリコシラーゼの作用によって形成される、キラルな、円環状分子である。これらの環状オリゴマーは、α−（１，４）−結合によって結合した、６から１２個のグルコース単位を含む。３つの最も小さい同族体、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリンが市販で入手可能である；より大きな同族体は、個々に産生および単離しなければならない。２級２−および３−ヒドロキシ基が、シクロデキストリンの空洞の口に並び、そして互い違いの方向を有する。１級６−ヒドロキシルが、分子の反対側の端にある。全てのヒドロキシルが分子の外側に向いているので、シクロデキストリンの空洞の内側は、比較的疎水性である。
【００７５】
多くの異なる型のシクロデキストリンが、本実施形態の組成物および方法において有用であり得る。そのようなシクロデキストリンは、（２，６−ジ−Ｏ−）エチル−β−シクロデキストリン、（２−カルボキシエチル）−β−シクロデキストリンナトリウム塩、（２−ヒドロキシエチル）−β−シクロデキストリン、（２−ヒドロキシプロピル）−α−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、（２−ヒドロキシプロピル）−β−シクロデキストリン、６−モノデオキシ−６−モノアミノ−β−シクロデキストリン、６−Ｏ−α−マルトシル−β−シクロデキストリン、ブチル−β−シクロデキストリン、ブチル−γ−シクロデキストリン、カルボキシメチル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、スクシニル−α−シクロデキストリン、スクシニル−β−シクロデキストリン、トリアセチル−β−シクロデキストリン、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、およびγ−シクロデキストリンを含むがこれに限らない。
【００７６】
一部の実施形態では、本出願のＭＶＬ処方物は、薬学的に許容される担体を任意選択で含む。
【００７７】
本出願のＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物は、４℃にて少なくとも１週間、２週間または４カ月安定である。本出願のＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物はまた、３７℃にて少なくとも２日間安定である。用語「安定」は、本明細書中で使用される場合、特定の環境条件下で一定の期間、遊離形態でＭＶＬからの過剰な漏出を伴わない、ＭＶＬ内にある封入されているＴＸＡを指す。一部の実施形態では、本出願のＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物は、４℃にて４カ月間安定であり、６パーセント未満、５パーセント未満、４パーセント未満、３パーセント未満、２パーセント未満または１パーセント未満のＴＸＡが遊離形態である。一部の実施形態では、本出願のＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物は、３７℃にて２日間安定であり、５０パーセント未満、４０パーセント未満、３５パーセント未満、３０パーセント未満、２５パーセント未満、２０パーセント未満、１５パーセント未満、より好ましくは、１０パーセント未満、５パーセント未満のＴＸＡが遊離形態である。
【００７８】
製造方法
本出願の一部の他の実施形態は、トラネキサム酸を含む多小胞リポソームを調製するプロセスに関連し、前記プロセスは、トラネキサム酸および少なくとも１種のｐＨ調整剤を含む第１の水性成分を調製するステップと；少なくとも１種の有機溶媒、少なくとも１種の両親媒性脂質、および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分を調製するステップと；前記第１の水性成分および前記脂質成分を混合して、油中水型エマルジョンを形成するステップであって、少なくとも１種の成分は、トラネキサム酸を含む、ステップと；前記油中水型エマルジョンと第２の水性成分とを接触させて、溶媒含有小球を形成するステップと；溶媒含有小球から有機溶媒を除去して、多小胞リポソームを形成するステップとを含む。一部の実施形態では、プロセスは、遊離トラネキサム酸を含み得る溶液に多小胞リポソームを懸濁させるステップであって、封入されているトラネキサム酸および封入されていないトラネキサム酸の両方を含む医薬組成物を形成するさらなるステップをさらに含む。
【００７９】
任意選択で、他の成分が、脂質相中に含まれる。これらの中には、抗酸化剤、抗微生物保存剤、およびコレステロールまたは植物ステロールがある。一部の実施形態では、脂質成分は、コレステロールおよび／または植物ステロールをさらに含む。
【００８０】
「油中水」型エマルジョンを、２つの混合できない相、脂質相および第１の水相から形成する。その脂質相は、揮発性の有機溶媒中、少なくとも１つの両親媒性脂質および少なくとも１つの中性脂質、および任意でコレステロールおよび／またはコレステロール誘導体から成る。「両親媒性脂質」という用語は、親水性の「頭部」基および疎水性の「尾部」基を有する分子を指し、そして膜形成能力を有し得る。本明細書中で使用される場合、両親媒性脂質は、正味の負電荷を有するもの、正味の正電荷を有するもの、および両性イオン性脂質（その等電点で正味の電荷を有さない）を含む。「中性脂質」という用語は、それ自身で小胞形成能力を有さず、そして荷電したまたは親水性の「頭部」基を欠く油または脂肪を指す。中性脂質の例は、荷電した、または親水性の「頭部」基を欠く、グリセロールエステル、グリコールエステル、トコフェロールエステル、ステロールエステル、ならびにアルカンおよびスクアレンを含むがこれに限らない。
【００８１】
その両親媒性脂質を、同じ分子中に疎水性領域および親水性領域を有する、広い範囲の脂質から選択する。適当な両親媒性脂質としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、スフィンゴミエリン、リゾホスファチジルコリン、およびリゾホスファチジルエタノールアミンを含む、両性イオン性リン脂質；ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸、およびカルジオリピンのような、陰イオン性両親媒性リン脂質；アシルトリメチルアンモニウムプロパン、ジアシルジメチルアンモニウムプロパン、ステアリルアミン等のような、陽イオン性両親媒性脂質が挙げられるが、これらに限定されない。好ましい両親媒性脂質は、ジオレイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジエルコイルホスファチジルコリン、または１，２−ジエルコイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＥＰＣ）、およびジパルミトイルホスファチジルグリセロール、または１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）（ＤＰＰＧ）を含む。ある実施形態において、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物に使用される両親媒性脂質は、ＤＰＰＧと組み合わせたＤＯＰＣおよび／またはＤＥＰＣを含む。
【００８２】
適切な中性脂質には、これらに限定されないが、トリグリセリド、プロピレングリコールエステル、エチレングリコールエステル、およびスクアレンが含まれる。本処方物および方法において有用な非限定的な例示的なトリグリセリドは、トリオレイン（ＴＯ）、トリパルミトレイン、トリミリストレイン（trimyristolein）、トリリノレイン、トリブチリン、トリカプロイン、トリカプリリン、およびトリカプリンである。本出願において有用なトリグリセリド中の脂肪鎖は、全てが同じであるか、または全てが同じであるとは限らない（混合鎖トリグリセリド）か、または全てが異なっていてもよい。プロピレングリコールエステルは、カプリル酸およびカプリン酸の混合ジエステルでよい。
【００８３】
一部の実施形態では、両親媒性脂質は、ホスファチジルコリン、またはホスファチジルグリセロールもしくはそれらの塩、またはこれらの組合せを含む。一部のこのような実施形態では、ホスファチジルグリセロールは、ＤＰＰＧである。一部のこのような実施形態では、ホスファチジルコリンは、ＤＥＰＣもしくはＤＯＰＣ、またはこれらの組合せから選択される。
【００８４】
一部の実施形態では、中性脂質は、トリグリセリド、プロピレングリコールエステル、エチレングリコールエステル、もしくはスクアレン、またはこれらの組合せを含む。一部の実施形態では、中性脂質は、トリグリセリドを含む。一部のこのような実施形態では、トリグリセリドは、トリオレインもしくはトリカプリリン、またはこれらの組合せから選択される。
【００８５】
ＭＶＬを作製するために使用される水非混和性溶媒中に存在する両親媒性脂質、中性脂質、およびコレステロールの濃度は典型的には、それぞれ、１〜４０ｍＭ、２〜４０ｍＭ、および０〜６０ｍＭの範囲である。一部の実施形態では、両親媒性脂質、中性脂質、およびコレステロールの濃度は、それぞれ、約２０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約５ｍＭ〜約４０ｍＭ、および約２５〜約４０ｍＭの範囲であり得る。両性イオン性脂質が存在するとき、荷電した両親媒性脂質が含まれる場合、これは一般に両性イオン性脂質より低い濃度で存在する。
【００８６】
エーテル、エステル、ハロゲン化エーテル、炭化水素、ハロゲン化炭化水素（ｈａｌｏｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ）、またはフレオンを含む、多くの型の揮発性有機溶媒を、本出願において使用し得る。例えば、ジエチルエーテル、クロロホルム、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、およびそれらの任意の組み合わせが、その処方物を産生するのに使用するために適当である。一部の実施形態では、塩化メチレンが使用される。他の一部の実施形態では、クロロホルムが使用される。
【００８７】
ある特定の実施形態では、第１の水性成分は、ＴＸＡおよび少なくとも１種のｐＨ調整剤、任意選択で本明細書に記載されている１種もしくは複数の浸透圧剤、またはシクロデキストリン（単数または複数）を含む。一部の実施形態では、第１の水性成分のｐＨ調整剤は、無機酸、有機酸、無機塩基、もしくは有機塩基、またはこれらの組合せから選択される。一部のこのような実施形態では、ｐＨ調整剤は、塩酸、リン酸、または酒石酸から選択される。一部の他の実施形態では、ｐＨ調整剤は、ヒスチジン、アルギニンまたはトロメタミンから選択される。一部の実施形態では、浸透圧剤は、糖類、例えば、スクロースから選択される。一部の実施形態では、密度調整剤は、デキストラン、例えば、デキストラン４０から選択される。一部の実施形態では、第１の水性成分の容量オスモル濃度は、約１０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約６００ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲である。一部のさらなる実施形態では、第１の水性成分の容量オスモル濃度は、約２８５ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３３５ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲である。
【００８８】
一部の実施形態では、第１の水性成分のｐＨ範囲は、約２．０〜約９．０である。一部のさらなる実施形態では、第１の水性成分のｐＨ範囲は、約３．５〜約５．５である。一実施形態では、第１の水性成分のｐＨ範囲は、約５．５である。一部のさらなる実施形態では、第１の水性成分のｐＨ範囲は、約４．３〜約５．５である。一部のさらなる実施形態では、第１の水性成分のｐＨ範囲は、約７．５〜約９．０である。一部のさらなる実施形態では、第１の水性成分のｐＨは、約７．７である。第１の水性成分のｐＨは、最終のＴＸＡを封入しているＭＶＬの安定性に対して影響を有する。特定の場合では、ｐＨレベルが第１の水性成分中で高いとき、封入されているＴＸＡは、ＭＶＬから漏出する可能性が高かったことが観察された。対照的に、第１の水性成分中のより低いｐＨレベルは、より高い貯蔵温度（例えば、室温または３７℃）にて最終生成物をより安定にする。一部の実施形態では、好ましいｐＨ範囲は、約３．５〜約５．５、より好ましくは、約３．５〜約４．４である。
【００８９】
脂質相および第１の水相を、機械的な乱流によって、例えば、回転もしくは振動ブレードの使用、振とう、バッフル構造もしくは多孔性パイプを通す押出によって、または超音波によって、または３流体ノズル（Schuttら、米国特許出願公開第２０１１／０２５０２６４Ａ１号に記載されている）の使用によって混合し、油中水型エマルジョンを生成させる。次いで、油中水型エマルジョンは、上記の手段によって第２の水相に分散させて、第２の水相に懸濁した溶媒含有小球を形成することができ、水中油中水型エマルジョンが形成される。用語「溶媒含有小球」は、その中で水溶液の複数のより小さな液滴が懸濁している有機溶媒を含有する顕微鏡的な球状液滴を指す。第２の水相は、さらなる成分、例えば、１種もしくは複数のｐＨ調整剤、および１種もしくは複数の浸透圧剤およびこれらの組合せを含有することができる。一部の実施形態では、第２の水性成分は、ｐＨ調整剤としてリジンまたはヒスチジンを含む。一部の実施形態では、第２の水性成分のｐＨ範囲は、約３．５〜約１０．５である。一部の実施形態では、第２の水性成分のｐＨ範囲は、約７．５〜約１０．５である。一部の実施形態では、第２の水性成分は、浸透圧剤としてソルビトールまたはスクロースを含む。特定の一実施形態では、ＴＸＡはまた、浸透圧剤として使用される。一部の実施形態では、第２の水性成分の容量オスモル濃度は、約１０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約６００ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲である。一部のさらなる実施形態では、第２の水性成分の容量オスモル濃度は、約２７０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３５０ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲である。
【００９０】
次いで、揮発性有機溶媒を、例えば、懸濁液からの表面蒸発、ガスによるスパージング、または噴霧チャンバーにおけるガスとの接触によって小球から除去する。溶媒が実質的にまたは完全に蒸発したとき、ＭＶＬが形成される。蒸発のために使用することができるガスは、窒素、アルゴン、ヘリウム、酸素、水素、および二酸化炭素、これらの混合物、または清浄な圧縮空気を含む。あるいは、揮発性溶媒は、スパージング、回転蒸発、ダイアフィルトレーションもしくは溶媒選択膜の使用、または噴霧チャンバーにおけるガスとの接触によって除去することができる。
【００９１】
上記で考察するように、ＴＸＡは、第１の水性成分中に含めることによってＭＶＬ中に組み込むことができる。ＴＸＡはまた、脂質相、または脂質および第１の水性成分の両方に含めることによってＭＶＬ中に組み込むことができる。本ＭＶＬ中に回収されたＴＸＡの量を、ＤＥＰＯ−ＴＸＡの懸濁液を水中の５０％メタノール中で３０倍に希釈し、次いで、得られた混合物を、いくらかの軽微な修正を加えつつ、有機不純物のための米国薬局方３７（ＵＳＰ３７）アッセイにおいて記載されているように、ＨＰＬＣ（Ｃ−１８カラムを有するＨｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄモデル１１００；展開溶媒系：５１％、ＭｅＯＨ；４９％、リン酸二水素ナトリウム（ＮａＨ２ＰＯ４）、Ｈ３ＰＯ４、ＴＥＡおよびドデシル硫酸ナトリウム（「ＳＤＳ」）を含有する水性緩衝液；ｐＨ＝２．５）中に注入することによってアッセイした。一部の実施形態では、ＴＸＡ収率パーセントは、開始のＴＸＡ量の約４０％〜約９０％、より好ましくは、約５０％〜約９０％、より好ましくは、約６０％〜約９０％である。
【００９２】
多小胞リポソームの調製は、これらのそれぞれが参照によりその全体が組み込まれている、Sankaramら、米国特許第５，７６６，６２７号および同第６，１３２，７６６号において例示されている。本ＭＶＬ処方物を作製する方法はまた、本出願に参照によりその全体が組み込まれている、Hartounianら（ＷＯ９９／２５３１９）およびSchuttら（米国特許出願公開第２０１１／０２５０２６４Ａ１号）において見出すことができる。代わりに、ＴＸＡは、空のＭＶＬ粒子に遠隔的に充填することができる。このようなプロセスは、参照により本明細書にその全体が組み込まれているGarciaら、米国特許出願公開第２０１２／０１１４７４０号において記載されている。
【００９３】
投与方法
本出願の一部の実施形態は、トラネキサム酸を封入している多小胞リポソームであって、トラネキサム酸、少なくとも１種の両親媒性脂質および少なくとも１種の中性脂質を含む脂質成分、ならびに１種もしくは複数のｐＨ調整剤を含む多小胞リポソーム；ならびに封入されていないトラネキサム酸を含む医薬組成物を投与するステップを含む、失血を処置するか、回復させるか、または予防する方法に関連する。一部の実施形態では、投与は、非経口である。一部の他の実施形態では、投与は、局所的である。一部の実施形態では、投与は、非経口および局所の両方である。一部のこのような実施形態では、非経口投与は、皮下注射、組織注射、創傷への浸潤、または創傷への点滴注入から選択される。一部のこのような実施形態では、局所投与は、前記医薬組成物と処置を必要としている被験体の腔または表面との直接の接触、例えば、開放創上への医薬組成物を注ぎ込むことを含む。
【００９４】
本明細書中で使用される場合、用語「被験体」は、動物およびヒトを含む。好ましい実施形態では、被験体は、ヒトである。
【００９５】
実施形態のいずれかでは、本医薬組成物は、ボーラス注射、例えば、皮下ボーラス注射、筋内ボーラス注射、皮内ボーラス注射等によって投与することができる。実施形態のいずれかでは、投与は、注入、例えば、皮下注入、筋内注入、皮内注入等によってでもよい。実施形態のいずれかでは、投与は、創傷の縁へのおよび／もしくは創傷の縁の周りへの局所注射による直接の創傷への浸潤、または切開、創傷、もしくは体腔への点滴注入、またはこれらの組合せでよい。ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物はまた、これらに限定されないが、局所、経鼻、および全身的送達、例えば、ＩＶを含めた他の投与経路によって投与することができる。
【００９６】
本ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物の投与は、標準的な方法およびデバイス、例えば、ペン、注射器システム、ニードルおよびシリンジ、皮下注射ポート送達システム、カテーテル等を使用して達成される。
【００９７】
一部の実施形態では、本出願のＭＶＬ処方物は、薬学的に許容される担体を任意選択で含む。用語「薬学的に許容される担体」は、本明細書中で使用される場合、哺乳動物への投与に適した、１種もしくは複数の適合性の固体もしくは液体充填賦形剤または封入物質を意味する。用語「適合性」は、本明細書中で使用される場合、組成物の成分が、通常使用の条件下で組成物の薬学的有効性を実質的に低減させるような相互作用が存在しないような様式で、対象化合物とおよび互いに、混ざり合うことができることを意味する。薬学的に許容される担体は、当然ながら、好ましくは、処置される動物、好ましくは、哺乳動物への投与に適したものとさせる十分に高純度および十分に低毒性のものでなくてはならない。
【００９８】
薬学的に許容される担体またはその成分としての役割を果たすことができる物質のいくつかの例は、糖、例えば、ラクトース、グルコースおよびスクロース；デンプン、例えば、トウモロコシデンプンおよびバレイショデンプン；セルロースおよびその誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、およびメチルセルロース；麦芽；ゼラチン；タルク；硫酸カルシウム；ポリオール、例えば、プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール；アルギン酸；乳化剤、例えば、ＴＷＥＥＮＳ；塩、例えば、塩化ナトリウム；湿潤剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム；着色剤；香味剤；安定剤；抗酸化剤；保存剤；発熱物質を含まない水；等張食塩水；ならびにリン酸緩衝溶液である。
【００９９】
対象化合物と併せて使用される薬学的に許容される担体の選択は基本的に、化合物が投与される方法によって決定される。
【０１００】
これらの化合物を含む、有効な注射用組成物は、懸濁液または溶液形態のどちらかであり得る。溶液形態において、ＴＸＡを、生理学的に受容可能なビヒクル中に溶解する。そのようなビヒクルは、適当な溶媒、スクロースまたは生理食塩水のような張度剤（ｔｏｎｉｃｉｔｙ  ａｇｅｎｔ）、もし必要ならベンジルアルコールのような保存剤、および緩衝液を含む。有用な溶媒は、例えば水および水性アルコール、グリコール、および炭酸ジエチルのような炭酸エステルを含む。
【０１０１】
注射可能な懸濁組成物は、ビヒクルとしてアジュバントを伴うかまたは伴わない液体懸濁媒体を必要とする。懸濁媒体は、例えば、塩化ナトリウム、スクロース、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、または上記の組合せの水溶液でよい。一部の実施形態では、懸濁組成物は、封入されていないトラネキサム酸を溶解または可溶化するのに適した液体懸濁媒体を含む。
【０１０２】
適切な生理学的に許容される貯蔵溶液成分は、懸濁組成物に懸濁させた化合物を保持するために使用される。貯蔵溶液成分は、増粘剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ゼラチンおよびアルギネートから選択することができる。多くの界面活性剤はまた、懸濁化剤として有用である。懸濁媒体はまた、レシチン、アルキルフェノールポリエチレンオキシド付加体、ナフタレンスルホネート、アルキルベンゼンスルホネート、またはポリオキシエチレンソルビタンエステルを含有することができる。ＭＶＬ貯蔵懸濁溶液は、さらなる添加物（単数または複数）を含有することができる。
【０１０３】
液体懸濁媒体の親水性、密度、および表面張力に影響を与える多くの物質が、個々の場合において注射用懸濁液の産生を補助し得る。例えば、シリコーン消泡剤、ソルビトール、および糖は、有用な懸濁剤であり得る。
【０１０４】
一部の実施形態は、１２時間にわたるＴＸＡの持続放出を実現する。一部の実施形態は、２４時間にわたるＴＸＡの持続放出を実現する。一部の実施形態は、３６時間にわたるＴＸＡの持続放出を実現する。一部の実施形態は、４８時間にわたるＴＸＡの持続放出を実現する。一部の実施形態は、６０時間にわたるＴＸＡの持続放出を実現する。一部の実施形態は、７２時間にわたるＴＸＡの持続放出を実現する。例えば、図５Ａおよび５Ｂは、それぞれ、１日目および１０日目の処置後７２時間までの総ＡＵＣのパーセントを示す。遊離ＴＸＡ群において、投与されたＴＸＡの９４％は、１２時間後に除去され、一方では、ＤｅｐｏＴＸＡ群において、用量の２５％は、１２時間の時点で残り、それに続く６０時間にわたって送達される。同様に、図６Ａおよび６Ｂは、それぞれ、処置１日目および１０日目の投与後７２時間にわたる送達されたＴＸＡの総量を示す。ＴＸＡ単独の投与は、２４時間未満でほとんど完全なＴＸＡ用量への曝露をもたらす。対照的に、Ｄｅｐｏ−ＴＸＡは、２４時間において、例えば、１００ｍｇ／ｋｇのＴＸＡの曝露（１２０ｍｇ／ｋｇの用量から）を実現し、Ｄｅｐｏ−ＴＸＡの持続放出プロファイルを示す。
【実施例】
【０１０５】
本発明のある治療剤、組成物、および方法が、ある実施形態によって具体的に記載されたが、以下の実施例は、本発明の組成物および方法を説明するためだけに役立ち、そしてそれを限定することを意図しない。
【０１０６】
（実施例１）
ＤＥＰＯ−ＴＸＡ調製物
ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物を、下記の通り製造した。治療剤（ＴＸＡ）を、１種もしくは複数のｐＨ調整剤および１種もしくは複数の浸透圧剤および／または密度調整剤を含む第１の水溶液に溶解し、次いで、第１の水溶液を、機械的な乱流によって、リン脂質および有機溶媒を含む脂質成分と混合し、油中水型エマルジョンを形成し、次いで、この油中水型エマルジョンを、第２の水溶液に分散させた。窒素ガス流を混合物の上を通過させて、有機溶媒を蒸発させた。次いで、生理食塩水溶液を混合物に加え、次いで、ＭＶＬを遠心分離によって単離し、洗浄した。
【０１０７】
例示的な製造条件およびＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物のアッセイ結果を、下記の表１において要約する。エントリー１〜６５および６８〜１２０において記載されているＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物のベンチスケール調製のためのプロセスおよび器具は、Sankaramら、米国特許第６，１３２，７６６号（例えば、実施例１）において開示されている。第１の水性成分および溶液および溶媒のｐＨについてのバリエーションは、表１において記述された通りである。実験エントリー２８において、ＭＶＬを遠心分離し、４０ｍｇ／ｍＬの遊離ＴＸＡを含有する溶液に再懸濁させ、約６０％遊離ＴＸＡを含有する懸濁液をもたらした。
【０１０８】
エントリー６６および６７において記載されているＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物の噴霧プロセスのためのプロセスおよび器具は、溶液および溶媒が表１において記述した通りであることを除いて、２０１１年４月８日に出願されたSchuttら、ＵＳ２０１１／０２５０２６４Ａ１（例えば、実施例４）において開示されているが、すすぎ溶液の組成は、それらの実験についての表におけるリストした第２の水溶液と同じである。
【０１０９】
本ＭＶＬ中のＴＸＡ収率は、ＤＥＰＯ−ＴＸＡの懸濁液を水中の５０％メタノール中で３０倍に希釈し、次いで、得られた混合物を、いくらかの軽微な修正を加えつつ、有機不純物のためのＵＳＰ３７アッセイにおいて下記のようにＨＰＬＣ（Ｃ−１８カラムを有するＨｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄモデル１１００；移動相溶媒系：５１％、ＭｅＯＨ；４９％、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｈ３ＰＯ４、ＴＥＡおよびＳＤＳを含有する水性緩衝液；ｐＨ＝２．５）中に注入することによってアッセイした。
【表Ａ】
2018502870.tif 000003
【表１−１】
2018502870.tif 000004
【表１−２】
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【表１−３】
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【表１−４】
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【表１−５】
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【表１−６】
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【表１−７】
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【表１−８】
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【表１−９】
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【表１−１０】
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【表１−１１】
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【表１−１２】
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【表１−１３】
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【表１−１４】
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【表１−１５】
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【０１１０】
ＣＦＭは、クロロホルム（ＣＦＭ）である。
【０１１１】
ＤＣＭは、ジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）である。
【０１１２】
Ｌｙｓは、リジンである。
【０１１３】
Ｈｉｓは、ヒスチジンである。
【０１１４】
Ｏｓｍ／Ｄは、浸透圧剤／密度調整剤を指す。
【０１１５】
ＥＸＰは、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル（dierucoyl）−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２０ｍＭ、１７．７８ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（２６．７２ｍＭ、１０．３４ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、９ｍＭ、４．３２ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１１６】
ＥＸＰ−６０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、１２ｍＭ、１０．６７ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、２．１２ｍＭ、１．５８ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（１６．０３ｍＭ、６．２０ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、５．４０ｍＭ、２．５９ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０４％）を含む。
【０１１７】
ＥＸＰ−１５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、３０ｍＭ、２６．６７ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、５．３１ｍＭ、３．９６ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（４０．０８ｍＭ、１５．５１ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、１３．５０ｍＭ、６．４８ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．１１％）を含む。
【０１１８】
ＥＸＰ−Ｃ１５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２０ｍＭ、１７．７８ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（４０．０８ｍＭ、１５．５１ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、９ｍＭ、４．３２ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１１９】
ＥＸＰ−Ｃ７５は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２０ｍＭ、１７．７８ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（２０．０４ｍＭ、７．７６ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、９ｍＭ、４．３２ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１２０】
ＥＸＰ−Ｃ１１３は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２０ｍＭ、１７．７８ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（３０．１９ｍＭ、１１．６８ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、９ｍＭ、４．３２ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１２１】
ＥＸＰ−ＤＥＰＣ５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、１０ｍＭ、８．８９ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（２６．７２ｍＭ、１０．３４ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、９ｍＭ、４．３２ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１２２】
ＥＸＰ−ＤＥＰＣ１５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、３０ｍＭ、２６．６７ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（２６．７２ｍＭ、１０．３４ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、９ｍＭ、４．３２ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１２３】
ＥＸＰ−ＴＣ１５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２０ｍＭ、１７．７８ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（２６．７２ｍＭ、１０．３４ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、１３．５ｍＭ、６．４８ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１２４】
ＥＸＰ−ＴＣ５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２０ｍＭ、１７．７８ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（２６．７２ｍＭ、１０．３４ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、４．５ｍＭ、２．１６ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１２５】
ＥＸＰ−ＤＯＰＣ１００は、ＤＯＰＣ（ジオレオイルホスファチジルコリン、２０ｍＭ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（２６．７２ｍＭ、１０．３４ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、９ｍＭ、４．３２ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１２６】
ＥＸＰ−ＴＯ１００は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２０ｍＭ、１７．７８ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、３．５４ｍＭ、２．６４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（２６．７２ｍＭ、１０．３４ｍｇ／ｍＬ）；ＴＯ（トリオレイン、９ｍＭ）；および水（０．０７％）を含む。
【０１２７】
ＯＢＬＴは、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２６ｍＭ、２３．７１ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、１１ｍＭ、８．３４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（４０ｍＭ、１５．４８ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、４０ｍＭ、１８．８４ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．３９％）を含む。
【０１２８】
ＯＢＬＴ−ＤＰＰＧ５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２６ｍＭ、２３．７１ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、５．５０ｍＭ、４．１７ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（４０ｍＭ、１５．４８ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、４０ｍＭ、１８．８４ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．３９％）を含む。
【０１２９】
ＯＢＬＴ−ＤＥＰＣ５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、１３ｍＭ、１１．８６ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、１１ｍＭ、８．３４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（４０ｍＭ、１５．４８ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、４０ｍＭ、１８．８４ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．３９％）を含む。
【０１３０】
ＯＢＬＴ−ＤＥＰＣ１５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、３９ｍＭ、３５．５７ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、１１ｍＭ、８．３４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（４０ｍＭ、１５．４８ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、４０ｍＭ、１８．８４ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．３９％）を含む。
【０１３１】
ＯＢＬＴ−ＴＣ５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２６ｍＭ、２３．７１ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、１１ｍＭ、８．３４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（４０ｍＭ、１５．４８ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、２０ｍＭ、９．４２ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．３９％）を含む。
【０１３２】
ＯＢＬＴ−ＴＣ１５０は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２６ｍＭ、２３．７１ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、１１ｍＭ、８．３４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（４０ｍＭ、１５．４８ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、６０ｍＭ、２８．２６ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．３９％）を含む。
【０１３３】
ＯＢＬＴ−Ｃ７５は、ＤＥＰＣ（１，２−ジエルコイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホコリン、２６ｍＭ、２３．７１ｍｇ／ｍＬ）；ＤＰＰＧ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）、１１ｍＭ、８．３４ｍｇ／ｍＬ）；コレステロール（３０ｍＭ、１１．６１ｍｇ／ｍＬ）；ＴＣ（トリカプリリン、４０ｍＭ、１８．８４ｍｇ／ｍＬ）；および水（０．３９％）を含む。
【０１３４】
３種のＴＸＡ処方物を、下記の表２において記載するように調製する。多小胞リポソーム中の封入されているＴＸＡを、処方物＃３４に記載されているのと同様の手順に従って調製した。さらに、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物を、遊離ＴＸＡの水溶液をＴＸＡ−ＭＶＬ粒子に加えることによって調製し、最終組成物中の６３％遊離ＴＸＡを達成した。
【表２】
2018502870.tif 000019
【０１３５】
上記のＴＸＡ処方物の皮下投薬の薬物動態研究は、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓによって供給された雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（３００〜３２５グラム）において行った。全部で２４匹のラットを研究において使用し、６群に分けた（群毎にＮ＝４匹のラット）。投薬前の試料収集および足の剪毛は、投薬の日の前に行い得る。ラットの背中に近い左後肢の内側部に、２５ゲージの皮下ニードルを備えた１ｃｃの使い捨て注射器で皮下注射を行った。注入量は、０．５ｍＬである。
【０１３６】
血漿試料は、分析のために異なる時点（投薬前、投薬後０．５時間、１時間、２時間、６時間、２４時間、４８時間、７２時間および９６時間）において集めた。１９ゲージのニードル穿刺を使用して右伏在静脈から、または最終時点について心臓穿刺によって血液試料を集め、適当な抗凝固剤を含有する冷却したチューブ中に入れ、数回反転させて混合し、光から保護し、遠心分離するまで氷上に保持した。遊離ＴＸＡの血漿レベル、および遊離ＴＸＡの曲線下総面積（ＡＵＣ）のパーセントの減少を、図１Ａおよび１Ｂにおいて示した。
【０１３７】
（実施例２）
ＤＥＰＯ−ＴＸＡの噴霧プロセス合成
実施例２は、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物（１２１Ｓ）の大規模合成を記載し、ここで脂質溶液は、１１．８５ｍｇ／ｍＬのＤＥＰＣ、８．３４ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＧ、１５．４８ｍｇ／ｍＬのコレステロール、および１８．８４ｍｇ／ｍＬのトリカプリリンを含む。
【０１３８】
７７．４ｇのコレステロール、４１．７ｇのＤＰＰＧ、９４．２ｇのトリカプリリン、５９．３ｇのＤＥＰＣおよび１９．５ｇの水をクロロホルム溶液に溶解することによって、脂質溶液を調製した。溶液が透明となるまで溶液を混合し、脂質は溶液中に残る。第１の水溶液を調製するために、２００．０ｇのトラネキサム酸、３００．０ｇのデキストラン、および４０００．０ｇの水を一緒に混合した。混合物のｐＨは、概ね７．３０〜７．５０であると測定した。次いで、８５％Ｈ３ＰＯ４を使用して、第１の水溶液のｐＨが概ね５．５０となるまで混合物を滴定した。脂質溶液を第１の水溶液と混合し、油中水型エマルジョンを形成した。第２の水溶液を、風袋計量済の２０Ｌの容器において１００００．０ｇの水中で４００．０ｇのトラネキサム酸を混合することによって調製した。油中水型エマルジョンを第２の水溶液に引き続いて分散させた。４００．０ｇのトラネキサム酸を含有するすすぎ溶液を、第２の水溶液として同様に調製した。クロロホルムを除去した後、ＴＸＡを封入しているＭＶＬを単離し、すすぎ溶液で洗浄し、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物がもたらされた。
【０１３９】
（実施例３）
皮下投与の毒性の評価
この研究の目的は、ビーグル犬に皮下注射によって与えたときのＴＸＡ処方物の潜在的な毒性を決定し、参照対照物であるトラネキサム酸と比較して任意の知見の潜在的な可逆性を評価することであった。さらに、毒物動態プロファイルを決定した。
【０１４０】
試験デザインは、下記のように記載した。
【０１４１】
参照物である、注射用の０．９％塩化ナトリウム、ＵＳＰを、群１の対照動物への投与のために投薬日に分注した。
【０１４２】
参照対照物（トラネキサム酸）投薬処方物を、注射用の滅菌水、ＵＳＰを使用して用量レベルの必要条件に合致する適当な濃度での投薬の前に調製した。処方物は、使用の前に０．２２μｍサイズのフィルターを使用して濾過した。最初の投薬処方物の場合において、ｐＨを決定し（７．４１であった）、１つの試料（６ｍＬ）を適当なサイズの容器（ガラスまたはポリプロピレン）中に集め、容量オスモル濃度の決定（２４５ｍＯｓｍ／ｋｇであった）のために周囲条件下に保持した。群２の動物の投薬のために、投薬処方物を分注した。
【０１４３】
ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物（試験物）は、本明細書に記載のように調製し（例えば、表１、処方物番号３４および段落［００２０］を参照されたい）、さらなる遊離ＴＸＡをＴＸＡ−ＭＶＬ組成物に加えた。２種の異なるＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物（４０ｍｇ／ｍＬおよび１２０ｍｇ／ｍＬの上清濃度）は、下記の表３において例示したように調製した。４０ｍｇ／ｍＬの処方物について、ＰＰＶ％は、約５０．０％であり、推定の間隙容量（ｍＬ）は、約２０％であり、多小胞リポソームの外側で約６２％遊離ＴＸＡとなる。ＤＥＰＯ−ＴＸＡ処方物の１つの目的は、手術の直後、および手術後のそれに続く数日にわたっての両方において出血を低減させることである。遊離画分は血漿中に直ちに出現し、封入されている画分は、３日の期間にわたってよりゆっくりと出現する。ＤＥＰＯ−ＴＸＡの注射の後、ＴＸＡの遊離画分は血漿中に直ちに出現し、まさにボーラスＴＸＡ群におけるように除去される。また注射の直後に、封入されているＴＸＡ画分は、ＭＶＬからゆっくり放出され始める。最初の１２時間の間に、放出されたＴＸＡは、血漿中で測定した最初のＴＸＡピークに寄与する。１２〜２４時間で、遊離ＴＸＡが急速に除去されるにつれ、血漿中にＭＶＬから放出されたＴＸＡの寄与は明らかとなる。封入されているＴＸＡは、それに続く数日にわたって時間間隔毎に５〜１０％の速度で放出され続ける。群３および群４の動物に投薬する前に、処方物を冷蔵庫から取り出し、室温へと少なくとも３０分間温めた。ボトルを手で穏やかに握り、均一な懸濁液の外観が得られるまで手首を回転させることによって２０〜３０回反転させた。試験物は、振とう、ボルテックスまたは撹拌しなかった。
【０１４４】
参照対照物からの投薬処方物の試料を、７日目（雌への投薬のみのための調製物から）および１０日目の調製物について分析のために集めた。試料の複製セット（５ｍＬ）を、調製容器から取り出し、濾過を行った。分析の前に、分析する全ての試料を４℃に維持するように設定した冷蔵庫において直接光に当てずに保持した。
【０１４５】
ＴＸＡ処方物の安定性を、研究と平行で分析し、研究の持続期間について適した時点を、インライフ相の完了において分析した。
【０１４６】
２１匹の雄および２１匹の雌ビーグル犬を、この研究において使用した。投薬の開始において、動物は６〜７カ月齢であり、７．５〜９．８ｋｇ（雄）および６．０〜８．２ｋｇ（雌）の体重であった。
【表３】
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【０１４７】
１日目、４日目、７日目、および１０日目に、試験、参照対照および参照物を、皮下注射によって適当な動物の肩甲骨および背中中央領域に投与した。各動物についての投薬容量は、最近の体重測定をベースとした。各投薬についての容量を、１回の注射についてシリンジ／ニードルを使用して投与した。注射部位を２つの境界を定めた部位の間で交代させた（および所与の日において全ての動物について同じ部位）。投薬領域を必要に応じて剪毛し、注射部位をペンでマークした（５ｃｍ×５ｃｍの標的領域）。第１の投薬部位は、背中の肩甲骨中央領域にあり、第２の投薬部位は、背側中央領域における第１の部位に対して尾側であった。
【０１４８】
血液は頸静脈から集めた。尿は個々に収容した動物から一晩集めた。収集の後、試料を、処理のために適当な実験室に移した。血液採取の前に動物を一晩絶食させた（臨床化学のため）。尿収集手順の間に、動物に食物および水を与えなかった。
【０１４９】
血液は、全ての動物の頸静脈（または橈側皮静脈）からリチウムヘパリン含有チューブ中に集めた。１日目および１０日目に、試料を下記の時点：投薬前、投薬後１５分、３０分、１時間、２時間、６時間、１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、および７２時間において連続的に集めた。
【０１５０】
試料を穏やかに混合し、遠心分離まで砕いた濡れた氷上に置き、これをできるだけ早く行った。試料を冷却遠心機（４℃にて温度を維持するように設定）で２７００ｒｐｍにて１０分間遠心分離した。得られた血漿を分離し、独自にラベルを付けた透明なポリプロピレンチューブに移し、ドライアイス上で直ちに凍結し、−８０℃を維持するように設定したフリーザーに移した。
【０１５１】
血漿試料を、有効な分析手順を使用してトラネキサム酸の濃度について分析した。
【０１５２】
毒物動態パラメーターは、実際的であるときはいつでも、１日目および１０日目の血漿中の試験物（トラネキサム酸）の個々の濃度から得た。
【０１５３】
結果および考察
１４日の期間にわたるビーグル犬への４０および１２０ｍｇ／ｋｇ／用量のＤＥＰＯ−ＴＸＡ（「試験物」）の皮下注射は良好な忍容性を示し、有害な毒性をもたらさなかった。
【０１５４】
用量関連の軽微な臨床的徴候、例えば、わずかな時々の嘔吐が、ＤＥＰＯ−ＴＸＡを投薬された動物において投薬に続いて観察された。これらの臨床的徴候はまた、ＴＸＡを投薬された動物において同様の発生率および重症度で観察された。試験物または参照対照物に関連する臨床的徴候は、投薬の間の日においても、回復期の間においても見られなかった。
【０１５５】
対照群と比較して、体重、体重増加、食物摂取量、眼科学、心電学、血液学、凝固、Ｄダイマー含量、尿検査パラメーター、器官重量または肉眼での所見に対して影響は存在しなかった。
【０１５６】
毒物動態解析は、ＤＥＰＯ−ＴＸＡ投薬材料中に含有される高レベルのＴＸＡが、皮下注射に続いて末梢循環に吸収されたことを明らかに示した。性別の間で差異は存在しなかった。血漿曝露（ＣｍａｘおよびＡＵＣ）は、処置１日目および１０日目において等しかった。
【表４】
2018502870.tif 000021
【０１５７】
ＤｅｐｏＴＸＡ投与に続く１日目に、ＴＸＡの性別を合わせた血漿濃度の平均±標準偏差（ｎ＝１０）は、それぞれ、４０ｍｇ／ｋｇおよび１２０ｍｇ／ｋｇの用量群で、投薬の後、０．６３±０．２７時間および１．０±０．０時間（Ｔｍａｘ）でピークになった。それぞれの平均ピークレベル（Ｃｍａｘ）は、４８．９±１０．８μｇ／ｍＬおよび１０９±１２．７μｇ／ｍＬであった。１０日目に、それぞれの平均ピーク濃度は、０．５５±０．１６時間および０．６８±０．２９時間で到達し、平均ピークレベルは、低用量および高用量の動物について５０．８±９．８μｇ／ｍＬおよび１３８±１５．１μｇ／ｍＬであり、１日目、４日目、７日目および１０日目における投薬の後のピーク曝露における最小の変化を表した。１日目において、４０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏＴＸＡ用量レベルでのＡＵＣ０〜２４、ＡＵＣ０〜４８、ＡＵＣ０〜７２およびＡＵＣ０−ｉｎｆについての性別を合わせた平均±標準偏差（ｎ＝１０）についての値は、それぞれ、１５９±１５．７μｇ・時間／ｍＬ、１７７±１８．０μｇ・時間／ｍＬ、１８８±１８．５μｇ・時間／ｍＬおよび２０１±１７．２μｇ・時間／ｍＬであり、１２０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏＴＸＡ用量レベルについて、４４５±３５．９μｇ・時間／ｍＬ、４９８±３５．３μｇ・時間／ｍＬ、５２６±３４．６μｇ・時間／ｍＬおよび５６１±３５．９μｇ・時間／ｍＬであった。１０日目に、４０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでのＡＵＣ０〜２４、ＡＵＣ０〜４８およびＡＵＣ０〜７２についてのそれぞれの平均値は、１５６±１５．７μｇ・時間／ｍＬ、１７３±１７．５μｇ・時間／ｍＬ、１８２±１８．３μｇ・時間／ｍＬであり、１２０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでは、４５５±４５．０μｇ・時間／ｍＬ、５０３±５０．６μｇ・時間／ｍＬおよび５２４±５２．８μｇ・時間／ｍＬであった。４０ｍｇ／ｋｇおよび１２０ｍｇ／ｋｇの用量レベルについて、１日目に、ＤｅｐｏＴＸＡについての平均末端消失半減期（ｔ１／２ｅｌｉｍ）は、それぞれ、２８．５±７．４時間および２７．９±９．８時間であり、１０日目に、２２．９±６．８時間および２１．７±５．７時間であった。
【０１５８】
遊離ＴＸＡ（群２の動物に与えられた参照対照物）について、１日目に、ＴＸＡの性別を合わせた血漿濃度の平均±標準偏差（ｎ＝１０）は、１２０ｍｇ／ｋｇでの投薬の後に１．２±０．４２時間（Ｔｍａｘ）でピークになり、１４０±１９．２μｇ／ｍＬの平均ピークレベル（Ｃｍａｘ）であった。１０日目に、平均ピーク濃度に１．１±０．３２時間で達し、平均ピークレベルは１１９±１５．４μｇ／ｍＬであった。ＴＸＡに続く１日目における、ＡＵＣ０〜２４、ＡＵＣ０〜４８、ＡＵＣ０〜７２およびＡＵＣ０−ｉｎｆについての性別を合わせた平均±標準偏差（ｎ＝１０）についての値は、それぞれ、４７５±３５．１μｇ・時間／ｍＬ、４８５±３６．１μｇ・時間／ｍＬ、４９０±３６．５μｇ・時間／ｍＬおよび４９５±３６．８μｇ・時間／ｍＬであった。１０日目に、ＡＵＣ０〜２４、ＡＵＣ０〜４８およびＡＵＣ０〜７２についてのそれぞれの平均値は、４６８±４２．５μｇ・時間／ｍＬ、４７９±４４．２μｇ・時間／ｍＬおよび４８４±４５．２μｇ・時間／ｍＬであった。１日目のＴＸＡについての平均末端消失半減期（ｔ１／２ｅｌｉｍ）は、２５．７±２．０時間であり、１０日目に、２８．９±２．９時間であった。
【０１５９】
１２０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのＤｅｐｏＴＸＡを遊離ＴＸＡと比較して、平均ピーク曝露（Ｃｍａｘ）は、１日目に遊離ＴＸＡ群で２８％より高かったが、ピークＴＸＡレベルは、第４および最後の皮下用量に続いて、研究１０日目に１４％より低かった。１日目の平均全体的全身的曝露（ＡＵＣ０〜７２）は、遊離ＴＸＡ群に対してＤｅｐｏＴＸＡ群で７％より大きく、１０日目に、平均曝露は、ＤｅｐｏＴＸＡ群で８％より大きかった。
【０１６０】
研究１日目、４日目、７日目および１０日目に、ＤｅｐｏＴＸＡを、４０ｍｇ／ｋｇ／用量および１２０ｍｇ／ｋｇ／用量でイヌの皮下に投与した。最初および最後の投薬に続いて、投薬後７２時間までの血液試料を集め、毒物動態パラメーター推定値を決定した。ＴＫ分析の結果は、ＤｅｐｏＴＸＡ投薬材料中に含有される高レベルのＴＸＡが、皮下注射に続いて末梢循環に吸収されたことを明らかに示した。Ｄｅｐｏ−ＴＸＡの投与は、有害な毒性を伴わずに良好な忍容性を示した。血漿曝露（ＣｍａｘおよびＡＵＣ）は、１日目および１０日目において等しかった。１２０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏＴＸＡ群および１２０ｍｇ／ｋｇの遊離ＴＸＡ群の間の平均曝露を比較して、平均ピーク（Ｃｍａｘ）曝露は、単回投薬後（１日目）に遊離ＴＸＡ群でより高かったが、複数回投薬の後で（１０日目）、ピーク平均曝露は、ＤｅｐｏＴＸＡ群でより高かった。平均全体的全身的曝露（ＡＵＣ０〜７２）は、ＤｅｐｏＴＸＡ群でわずかに大きかった。
【０１６１】
図２は、処置１日目の投与後７２時間にわたるＴＸＡの平均血漿濃度を例示する。群２は参照対照物を投与され、群３は４０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏ−ＴＸＡを投与され、群４は１２０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏ−ＴＸＡを投与された。
【０１６２】
図３は、処置１０日目の投与後７２時間にわたるＴＸＡの平均血漿濃度を例示する。群２は参照対照物を投与され、群３は４０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏ−ＴＸＡを投与され、群４は１２０ｍｇ／ｋｇのＤｅｐｏ−ＴＸＡを投与された。
【０１６３】
図４は、処置１日目の投与後１２時間にわたる血漿中のＴＸＡの濃度を例示する。
【０１６４】
図５Ａは、処置１日目の注射後７２時間までのＴＸＡの曲線下総面積（ＡＵＣ）のパーセントを例示する。図５Ｂは、処置１０日目の注射後７２時間までのＴＸＡの曲線下総面積（ＡＵＣ）のパーセントを例示する。具体的には、遊離ＴＸＡ群において、投与されたＴＸＡの９４％は１２時間後に除去され、一方では、ＤｅｐｏＴＸＡ群において、用量の２５％は１２時間の時点で残り、それに続く６０時間にわたって送達される。
【０１６５】
図６Ａは、処置１日目の投与後７２時間にわたる送達されたＴＸＡの総量を例示する。図６Ｂは、処置１０日目の投与後７２時間にわたる送達されたＴＸＡの総量を例示する。ＴＸＡ単独の投与は、２４時間未満でほとんど完全なＴＸＡ用量への曝露をもたらす。対照的に、Ｄｅｐｏ−ＴＸＡは、２４時間で例えば、１００ｍｇ／ｋｇのＴＸＡの曝露（１２０ｍｇ／ｋｇの用量から）を実現し、Ｄｅｐｏ−ＴＸＡの持続放出プロファイルを示す。
【０１６６】
図７Ａは、１日目の投与後７２時間にわたるＴＸＡの血漿レベルの減少を例示する。図７Ｂは、１０日目の投与後７２時間にわたるＴＸＡの血漿レベルにおける減少を例示する。
【０１６７】
このように、ＤｅｐｏＴＸＡの注射の後、ＴＸＡの遊離画分は血漿中に直ちに出現し、ボーラスＴＸＡ群におけるように正確に除去される。また注射の直後に、封入されているＴＸＡ画分は、ゆっくりと放出され始める。最初の１２時間の間、放出されたＴＸＡは、血漿中で測定された最初のＴＸＡピークに寄与する。１２〜２４時間で、遊離ＴＸＡが急速に除去されるにつれ、測定された血漿ＴＸＡレベルに対する放出されたＴＸＡの寄与は明らかとなる。封入されているＴＸＡは、図８Ａおよび８Ｂに示すように、それに続く２４〜７２時間にわたって時間間隔毎に５〜１０％の速度で放出され続ける。
【０１６８】
両方の用量のＤＥＰＯ−ＴＸＡでの有害効果の不存在下で、この研究において有害効果が観察されないレベル（ＮＯＡＥＬ）は、１２０ｍｇ／ｋｇ／用量のＤＥＰＯ−ＴＸＡであると考えられた（１０日目に５２４μｇ・時間／ｍＬの性別を合わせた平均血漿ＡＵＣ０〜７２および１３８μｇ／ｍＬのＣｍａｘを伴う）。
【０１６９】
本出願は、その特異的な実施形態に関して記載されたが、本発明の真の意図および範囲から離れることなく、様々な変更を行い得ること、および同等物を置換し得ることが、当業者によって理解されるべきである。それに加えて、特定の状況、材料、問題の組成物、方法、方法工程または工程を、本発明の目的、意図、および範囲に適合させるために、多くの修飾を行い得る。全てのそのような修飾は全て、ここに添付される請求の範囲内であると意図される。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【国際調査報告】
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