(57)【要約】  微生物（５０）を免疫学的に検出するためのバイオセンサが予定されている。該バイオセンサは、ラテラルフローテストストリップ（１０）の形態で仕上げられており、該ラテラルフローテストストリップ（１０）は、微生物特異的抗体（４０）を有する。該抗体（４０）と検出すべき微生物（５０）とが複合体を形成すると、該抗体（４０）の移動度特性が変化し、この移動度特性の変化を微生物（５０）の検出に利用する。
2018533002.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
微生物（５０）を免疫学的に検出するためのバイオセンサであって、前記バイオセンサは、ラテラルフローテストストリップ（１０）の形態で仕上げられているとともに微生物特異的抗体（４０）を有し、前記抗体（４０）と前記検出すべき微生物（５０）とが複合体を形成すると、前記抗体（４０）の移動度特性が変化することを特徴とするバイオセンサ。
【請求項２】
前記微生物特異的抗体（４０）に少なくとも１種の検出試薬（４１）が結合していることを特徴とする、請求項１記載のバイオセンサ。
【請求項３】
前記検出試薬（４１）には、金属粒子または色素分子が含まれることを特徴とする、請求項１または２記載のバイオセンサ。
【請求項４】
糸状菌および／または糸状菌の胞子および／または細菌の検出に用いることが予定されていることを特徴とする、請求項１から３までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項５】
前記微生物特異的抗体（４０）は、前記検出すべき微生物（５０）の表面分子に対応していることを特徴とする、請求項１から４までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項６】
前記抗体（４０）は、糸状菌の胞子のβ−グルカンに対応していることを特徴とする、請求項１から５までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項７】
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）は、使い捨て物品であることを特徴とする、請求項１から６までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項８】
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）は、サンプリングパッド（１１）および／またはキャピラリー（１２）および／または少なくとも１つの検出領域（１３）を備えることを特徴とする、請求項１から７までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項９】
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）は、確認領域（１４）を備えることを特徴とする、請求項１から８までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項１０】
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）に、少なくとも１つのバッファー用カートリッジ（３０）が組み込まれていることを特徴とする、請求項１から９までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項１１】
家電機器における、特に洗濯機またはコーヒーメーカーにおける微生物（５０）を免疫学的に検出できるように適合されていることを特徴とする、請求項１から１０までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項１２】
家電機器における、特に洗濯機またはコーヒーメーカーにおける微生物（５０）を免疫学的に検出するための、請求項１から１１までのいずれか１項記載のラテラルフローテストストリップ（１０）の形態のバイオセンサの使用。
【請求項１３】
家電機器における、特に洗濯機またはコーヒーメーカーにおける微生物を検出するための方法であって、
請求項１から１１までのいずれか１項記載のラテラルフローテストストリップ（１０）の形態のバイオセンサを準備するステップと、
前記家電機器から採取した液状のサンプルまたはかす状のサンプルと、前記ラテラルフローテストストリップ（１０）とを接触させるステップと、
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）を読取るステップと
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ラテラルフローテストストリップの形態のバイオセンサおよび微生物を検出するための方法に関する。
【０００２】
従来技術
人間の生活環境の様々な領域で、著しい微生物汚染負荷が生じることがある。特にカビによる被害は珍しくなく、これは健康上の重大な問題を引き起こしうる。糸状菌、特に糸状菌の胞子や糸状菌から分泌された有毒物は、感染症や例えば炎症性の肺疾患などの慢性疾患の病原体として見過ごすべきものではない。さらに、糸状菌や糸状菌の胞子は、アレルギー症状を引き起しうる潜在的なアレルゲンである。糸状菌による被害または一般に微生物汚染負荷は、特に例えば洗濯機やコーヒーメーカーといった様々な家電機器の内部で発生することがある。近年の洗濯機には、エネルギー削減の理由からも高温を用いない複雑なプログラムが備わっている。長期間湿っている箇所があることや、洗濯運転中の温度が低いことや、さらには食品の残りかすがあることが微生物に良好な増殖条件を与えており、その結果、例えば洗濯槽やホースや洗濯洗剤投入口において微生物による被害が生じうる。最新式のコーヒーメーカー、特に全自動式コーヒーメーカーも微生物汚染負荷に曝されていることが多い。なぜなら、構造が複雑であるゆえに、従来のフィルター式コーヒーメーカーよりもクリーニングが困難で手の届きにくい様々な範囲が存在するためである。最新式のコーヒーメーカーにおける様々な湿った箇所（例えば給水タンク、チューブ、抽出かす、ミル）は、細菌や糸状菌に対して、場合によっては極めて良好な増殖条件を与えている。
【０００３】
コーヒーメーカーや洗濯機については、すでに複数の洗浄措置が提案されているが、その際、特殊なクリーニング剤（タブレットやクリーニング溶液）を用いて所定の洗浄プログラムやクリーニングプログラムが行われ、こうしたプログラムによって微生物汚染負荷を低減することが望ましい。しかし実際には、こうした洗浄措置は恐らく定期的に講じられてはおらず、微生物汚染負荷の発生に気づかれないため、こうした気づかれていない微生物汚染負荷によって、使用者に健康上の問題が生じうる。
【０００４】
国際公開第２０１２／０８９４１７号（ＷＯ  ２０１２／０８９４１７  Ａ１）の記載から、明らかにされていないカビ被害を検出するための手動式測定器材が知られている。これにより、例えば壁などの室内空間におけるカビによる被害を検知できるようになる。この器材は、特に室内サンプルを採取するための収集ユニットと免疫学的試験ユニットとを含む。
【０００５】
独国特許出願公開第１９６０４１９５号明細書（ＤＥ  １９６  ０４  １９５  Ａ１）には、抗体または抗原を室内空気から吸い込み、次いでこれを免疫反応により検出する分析方法が開示されている。
【０００６】
発明の開示
発明の利点
本発明は、微生物を免疫学的に検出するためのバイオセンサであって、本発明により微生物特異的抗体を有するラテラルフローテストストリップとして仕上げられたバイオセンサに関する。この抗体と検出すべき微生物とが複合体を形成すると、この抗体の移動度特性が変化する。本発明によれば、この移動度特性の変化を利用することで、このラテラルフローテストストリップを用いて、特に簡便かつ使用し易い様式で微生物を検出することができる。
【０００７】
前記バイオセンサの好ましい実施形態は、従属請求項の主題である。
【０００８】
本発明による免疫学的な検出をベースとするバイオセンサは非常に高感度であるため、比較的低濃度で発生する場合もある微生物の検出も可能である。さらに、高特異的抗体を使用するため選択性が極めて高い。こうしたことから、本発明によるバイオセンサを使用して、場合によっては生じて間もない微生物による被害をすでに早期の段階で検知することができ、そうすることで、健康に影響を及ぼす重大な微生物汚染負荷が生じる前に、例えば微生物汚染負荷が生じている家電機器のクリーニングなどの相応する措置を講じることができる。
【０００９】
本発明によれば、前記バイオセンサは、ラテラルフローテストストリップの形態で仕上げられている。ラテラルフローテストとは、薄層クロマトグラフィーと免疫染色との組み合わせをベースとする検出方法と理解されるべきである。この場合、毛管力（薄層クロマトグラフィー）に基づいてこのテストストリップの長さ全体にわたってサンプルが移動するが、このサンプルは、結合した抗体を伴っている場合もある。本発明によれば、抗体と検出すべき微生物とが複合体を形成すると該抗体の移動度特性が変化するため、このように、検出すべき微生物の存在に移動度特性が依存することに基づいて検出を行うことができる。
【００１０】
前記ラテラルフローテストストリップの特に好ましい一実施形態では、微生物特異的抗体には、少なくとも１種の検出試薬が結合されている。この検出試薬が、微生物特異的抗体に直にまたは直接的に結合されていることが好ましい。これらの検出試薬を、例えば共有結合によりアミノ酸残基を介して固定化（結合）させることができる。例えばＣＯＯＨ／ＮＨ２を介した結合が可能である。さらに、抗体のその他の反応性基、例えばシステイン／ＳＨ基は、リンカーシステムを使用すれば検出試薬との化学結合に適する。
【００１１】
好ましくは、検出試薬は、金属粒子または色素分子である。これによって、例えば肉眼で判読しうる呈色反応をもとに微生物汚染負荷の存在の有無を検知できる光学式読取システムを、非常に使用し易い様式で実現することができる。特に定量的検出については、総じて、目視では不正確にしか確認することができないか、または目視では全く確認することができない。したがって他の実施形態では、光学式の読取または判読に、例えばカメラなどの、特に色の階調または輝度の階調の測定をもとに定量的または半定量的な評価も行える光学機器を使用することもできる。この判読を、ソフトウェアによる支援によって行うことができ、その際、例えば登録された参照値（校正用ソフトウェア）との比較を行うことができる。好ましい実施形態では、光学機器として例えば携帯電話のカメラを使用することができる。
【００１２】
バイオセンサの好ましい実施形態では、糸状菌および／または糸状菌の胞子および／または細菌を検出するためのバイオセンサが予定されている。前述の微生物は、家電機器において起こりうる微生物汚染負荷との関連性が最も高い。細菌による被害または糸状菌による被害または糸状菌の胞子による被害は特に、家電機器において長期間湿っている例えば給水タンクやチューブのような箇所や、湿った材料が比較的長時間たまっている例えば抽出かす容器のような箇所に生じる。本発明によるバイオセンサに相応する微生物特異的抗体を選択することにより、該バイオセンサを所定の微生物の検出に適合させることができる。この際、機器や使用事例に応じて、負荷の主要因の可能性がある微生物を予め調べておくことが好ましい。こうした微生物は、例えばコーヒーメーカーに関しては場所によって異なりうる（例えばタンクでは細菌であり、ミルではカビである）。適切な抗体が数多く市販されている。ポリクローナル抗体よりもモノクローナル抗体の方が好ましい場合がある。なぜなら、一般にはモノクローナル抗体の方が選択性が高いためである。一方で、特にコストの観点からポリクローナル抗体を有利に使用することもできる。
【００１３】
特に好ましくは、微生物特異的抗体は、検出すべき微生物の表面分子に対応する。その際、抗体は、好ましくは微生物の表面上のエピトープに対応しうる。このことには、例えば細胞の破壊などのサンプルのさらなる処理を一切行わずに済むという利点がある。微生物特異的抗体は、検出すべき微生物に直接結合しうるため、免疫学的検出を非常に容易に行うことができる。
【００１４】
バイオセンサの特に好ましい一実施形態では、糸状菌の胞子のβ−グルカンに対応する抗体を使用する。しかし、本発明により使用できる抗体に対するエピトープとしては、表面に常在する他の抗原も適している。したがって、適切な抗体と適切な検出システムとを相応して選択することで、バイオセンサを所定の微生物の検知に適合させることができる。したがって例えば、糸状菌が検知できるように適合されたテストストリップと、所定の細菌が検知できるように適合されたテストストリップとを準備することができる。さらに、所定の微生物の検出に、異なる複数のテストストリップを並行してまたは順に使用することもできる。さらに、１つのテストストリップ自体で様々な微生物を並列的に検出できるように適合されているという状態に仕上げられていてもよい。
【００１５】
バイオセンサの特に好ましい一実施形態では、ラテラルフローテストストリップは、使い捨て物品として考案されている。バイオセンサを使用して微生物汚染負荷試験を行った後にこのテストストリップを廃棄することができ、このテストストリップ上に集めて分析した微生物を、このテストストリップと共に一般廃棄物として直接廃棄することができる。その際、このテストストリップ上にためられた微生物は、通常は有害物質ではない。ラテラルフローテストストリップが使い捨て物品として仕上げられている場合、そうした物品には、総じて極めて低コストで製造可能であるというさらなる特別な利点がある。
【００１６】
バイオセンサの好ましい一実施形態では、ラテラルフローテストストリップは、サンプリングパッドおよび／またはキャピラリーおよび／または少なくとも１つの検出領域を含む。サンプリングパッドは、サンプリングにだけではなくアッセイ成分（抗体）との結合にも利用され、孔径およびサンプルへの結合特性に関して適合されることが好ましい。このサンプリングパッドは、例えばニトロセルロースから形成されていてよく、また例えば膜の形態で実現されていてよい。さらに、例えばセルロールやガラス繊維が適している。このテストストリップ自体は、例えば支持体としてのプラスチック製のストリップをベースとすることができる。「キャピラリー」という表現は、テストストリップのうちの、液体の毛管力に基づく通り抜けが可能な範囲を意味する。総じてこれには、例えばニトロセルロース、ポリフッ化ビニリデン、（帯電性を変更した）ナイロンまたはポリエーテルスルホンといった液体透過性材料が適している。さらに、ラテラルフローテストストリップは、好ましくは確認領域を含む。そのため使用者は、例えば確認領域と検出領域とを直接比較することにより、試験結果が陽性であるか陰性であるかを調べることができる。微生物特異的抗体は、例えば乾燥された形態でテストストリップに施与されていてもよいし、別個の溶液から加えられてもよい。キャピラリーは、抗体と場合により存在する微生物との複合体が形成された後に薄層クロマトグラフィーによる分離を行うことができるように仕上げられている。さらにテストストリップは、１種または複数種のバッファーを含むことができ、例えば取込み用バッファーおよび／または検出用バッファーおよび／またはランニングバッファーを含むことができる。あるいは、ラテラルフローテストストリップにバッファー用カートリッジが組み込まれており、このカートリッジから適宜必要なバッファーを放出させてもよい。このテストストリップの実施形態では、サンプルをサンプリングパッドに液体または固体の形態で施与する。次いで、必要なバッファー、例えばランニングバッファーをバッファー用カートリッジから放出させて、このバッファーを例えばサンプリングパッドの範囲で載置することで、サンプルを毛管力により輸送できるようになる。液体の形態のサンプル（例えば給水タンクから採取した水サンプル）を載置する場合には、このサンプル由来の液体のみを用いてこのサンプルを薄層クロマトグラフィーにより分離すれば十分でありうる。この場合、別個のランニングバッファーは不要である。
【００１７】
乾燥した形態のサンプル（例えばミルから採取したコーヒー残滓）を調べる場合には、バッファーを手動によりまたは自動的に加えることが必要である。例えば、バッファー用カートリッジ内に予め溜めておいたバッファーを手動によりまたは自動的に放出させて、直接、または流路を通じて例えば毛管力により、サンプリングパッドに施与することができる。バッファー用カートリッジ（例えばプラスチック容器）は例えば、折って割ることによってバッファーを放出させることができるように仕上げられていてもよい。
【００１８】
抗体や検出システムに依っては、微生物を分析するために細胞を完全にまたは部分的に分解させる（微生物を破壊する）ことが必要となる場合がある。この場合、細胞分解試薬、例えば界面活性剤を、好ましくはバッファー溶液を通じてサンプリングパッドに載置する。そうすることで、場合によっては、サンプルが液状であればバッファーの載置を行うこともできる。
【００１９】
薄層クロマトグラフィーによる分離によって、抗体は、場合によっては検出すべき微生物と一緒に複合体の形態で、ラテラルフローテストストリップの検出領域および／または確認領域に達する。呈色反応あるいは変色により使用者が試験結果を視認できることが好ましい。このためには有色の読取システムが特に好ましく、それによって、テストストリップを判読するためのさらなる補助的手段が不要となる。他の実施形態では、例えば携帯電話のカメラなどの光学機器を判読に利用することができる。
【００２０】
特に好ましい一実施形態では、本発明によるバイオセンサは、家電機器における微生物を免疫学的に検出できるように適合されているかあるいはそのように予定されており、例えば洗濯機やコーヒーメーカーにおける微生物を検出できるように適合されているかあるいはそのように予定されている。特に、一般的に長期間湿っている箇所を有するような機器の場合、有害な微生物汚染負荷が非常に速やかに生じる可能性がある。本発明によるバイオセンサを用いた場合、使用者は、これに関する特殊な知識や能力を有していなくても、こうした微生物汚染負荷を迅速かつ簡便に検出することができる。したがって、本発明によるバイオセンサによって、例えば洗濯機やコーヒーメーカーにおいて被害が生じている可能性のある箇所を使用者自身で調べることができる。その際、使用者は、試験の実施後に定性的または半定量的または場合により定量的な結果を取得し、試験結果が陽性であれば、適切なクリーニング措置を適宜講じることができる。
【００２１】
その際、バイオセンサあるいはラテラルフローテストストリップの形態および実施形態は、家電機器内の予定されたサンプリング箇所に適合されていてよい。最も単純なケースでは、ラテラルフローテストストリップは、通常のスティック状に仕上げられていてよい。しかし特に、例えば洗濯機やコーヒーメーカーにおける手の届きにくい箇所に届くようにするためには、テストストリップが、例えば柄部の延長などによって相応して適合されていることが予定されていてもよく、そうすることで、テストストリップを例えばチューブなどに挿入することができる。さらに、サンプリング用スティックなどが予定されていてもよく、こうしたスティックを用いて例えば機器内のかす状のサンプルを採取して、これを引き続きテストストリップに載置することができる。
【００２２】
本発明はさらに、家電機器における、特に洗濯機またはコーヒーメーカーにおける微生物を免疫学的に検出するための、ラテラルフローテストストリップの形態のバイオセンサの使用に関する。このラテラルフローテストストリップの他の特徴に関しては、そしてさらに特に家電機器における微生物を検出するための使用に関しても、上記に示されている。
【００２３】
最後に、本発明は、家電機器における、特に洗濯機やコーヒーメーカーにおける微生物を検出するための方法を含む。本方法は、まず上記の実施形態におけるラテラルフローテストストリップの形態のバイオセンサを準備することを含む。家電機器から液状のサンプルまたはかす状のサンプルを採取し、該サンプルをラテラルフローテストストリップと接触させる。あるいは、このラテラルフローテストストリップを例えば、家電機器の例えば給水容器内の液体に直接浸漬することもできる。次いでラテラルフローテストを行い、サンプル内に場合により存在する微生物を、上記の免疫学的な試験原理にしたがって毛管力に基づいて検出する。この検出には、このテストストリップの微生物特異的抗体の移動度特性を利用する。この移動度特性は、検出すべき微生物との複合体形成に依存して変化する。最後に、このラテラルフローテストストリップを読取る。その際、特に好ましい一実施形態では、使用者によって光学的な読取りが行われるが、このテストストリップには有色の検出システムが予定されていることが好ましい。
【００２４】
本発明によるバイオセンサによって、ラテラルフローテストストリップの形態である統一的かつ簡便な技術プラットフォームが提供される。この技術プラットフォームは、様々な免疫学的検出試薬を使用し、特に微生物特異的抗体を使用することにより様々な微生物に向けた検出方法として設計可能である。このラテラルフローテストストリップは、使い捨て物品として考案されていることが好ましく、ラテラルフローテストストリップとして仕上げることによって、極めて低コストでかつ日常に役立つ実施形態が実現可能となる。
【００２５】
手動の試験方法における使い捨てセンサに関する上記の使用事例以外に、サンプリング箇所あるいは挿入可能なカートリッジによりこの器材を拡張することによって、自動化可能な試験を実現することができる。例えば、サンプリングを例えば自動化して定期的な間隔で行い、このサンプルをテストストリップに載置して微生物の分析を行うことができるように、コーヒーメーカーのミルを適合させることができる。テストストリップの判読および評価も適宜自動化して行い、結果を例えば表示装置に表示させることができ、そうすることで、必要かつ適切なクリーニング措置などを講じることができる。
【００２６】
本発明のさらなる特徴および利点について、図面を参照して以下の実施例の記載により示す。個々の特徴は、それぞれ単独でも互いに組み合わせても実現可能である。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図１に、本発明によるバイオセンサとしてのラテラルフローテストストリップの好ましい実施形態の概略図を示す。
【図２】図２に、前記テストストリップの判読について説明するための該テストストリップの概略図（Ａ、Ｂ、Ｃ）を示す。
【００２８】
実施例の説明
図１に、ラテラルフローテストストリップ１０の形態のバイオセンサを概略図で示す。テストストリップ１０は、微生物５０の免疫学的検出が予定されており、検出すべき微生物に応じて微生物特異的抗体４０が存在している。各抗体４０には、それぞれ検出試薬４１が好ましくは直接結合されており、この検出試薬４１は、例えば金属粒子または色素分子である。特に有利には、ラテラルフローテストストリップ１０を、例えば洗濯機やコーヒーメーカーといった家電機器における、特に糸状菌や糸状菌の胞子や細菌といった微生物の検出に使用することができる。さらに、本発明によるバイオセンサを総じて、例えば長期間湿っている箇所や微生物の被害が生じたその他の箇所を有するあらゆる機器や装置での微生物汚染負荷を調べるために使用することができる。さらに、本発明によるバイオセンサは、原則的に総じて液状または固形のサンプルにおける微生物試験にも使用可能である。
【００２９】
テストストリップ１０は、サンプリングパッド１１、キャピラリー１２ならびに検出領域１３および確認領域１４を含む。微生物特異的抗体４０とこれに結合させた検出試薬４１とを一緒に、例えば乾燥させた形態で、サンプリングパッド１１の範囲で準備することができる。他の実施形態では、テストストリップ１０にサンプルを載置する前かまたはその後に、例えばサンプリングパッド１１の範囲でバッファーを施与し、このバッファーとともに抗体４０をテストストリップに移すことができる。
【００３０】
微生物による被害に関する試験を行う際、使用者はまず、例えば洗濯機から（例えば洗濯槽もしくは洗濯洗剤投入口から）、またはコーヒーメーカーから、例えば給水タンクから、抽出かすから、もしくはミルもしくは抽出部（Ｂｒｕｅｈｇｒｕｐｐｅ）の範囲からサンプリングを行う。その際、サンプルは、液状のサンプルであってもかす状のサンプルであってもよい。かす状のサンプルの採取を容易にするために、例えば綿棒を使用することができる。次いで、このサンプルをサンプリングパッド１１に載置する。あるいは、サンプルが液状の場合には、テストストリップ１０を、サンプリングパッド１１の範囲でこの液状のサンプルに直接浸漬することが予定されていてもよい。この浸漬を、特に手の届きにくい箇所について容易にするために、例えばテストストリップ１０は、付属のスティックなどの形態の延長部を備えることができる。特に、サンプルがかす状である場合には、さらにサンプリングパッド１１の範囲でのランニングバッファーの載置が必要となりうる。このために、バッファー用カートリッジ３０が予定されていてよく、このカートリッジ３０からバッファーを必要に応じて手動でまたは適宜自動化された形態で放出させることができる。サンプルが液状の場合には、バッファーの載置は総じて必須ではない。サンプリングパッド１１の範囲では、場合により存在する微生物５０（例えば糸状菌の胞子）が抗体４０と接触する。これらの微生物５０と抗体４０とが特異的に結合すると（抗原・抗体結合）、その結果、複合体が形成される。これらの複合体は、遊離抗体４０とは異なる流れ特性を示し、それによってキャピラリー１２内で分離が生じる。遊離抗体４０は、抗体４０と微生物５０との複合体と比べて、ある程度より広範囲にまたはより迅速に流れる。その際、遊離抗体４０は、より遠くにある確認領域１４に達する。抗体４０と糸状菌の胞子５０との複合体は、検出領域１３に「しか」達しない。この流れ挙動を、それぞれの領域１３あるいは１４において、検出試薬４１により生じる呈色反応によって視認することができる。検出試薬４１として金属粒子を使用する場合には、例えば、検出領域１３および／または確認領域１４においてこの金属粒子により変色が生じうる。検出試薬４１として例えば色素を使用する場合には、直接的または間接的な呈色反応が検出領域１３および／または確認領域１４において生じうるが、この呈色反応を、テストストリップ１０の簡便な光学的検査によって判読することができる。いずれの領域で呈色反応が検知可能であるかに応じて、使用者は、サンプル内の微生物の存在の有無を読取ることができる。その際、使用者は、定性的検出または半定量的もしくは定量的な結果を取得するが、その際に、テストストリップ１０の装備および特に試薬濃度、特に抗体４０の濃度については、検出すべき微生物の問題のある濃度の閾値が考慮されるように設計されていることが好ましい。場合により、判読に、例えばカメラのような光学機器を使用することができる。
【００３１】
特に好ましい一実施形態では、抗体は、直にまたは直接的に色素または金属粒子に結合されており、その結果、それぞれの読取領域（検出領域および／または確認領域）における抗体の存在を、呈色反応として直接検知することができる。他の実施形態では、さらなる検出試薬を併用して例えば自体公知の酵素的検出反応によって初めて呈色反応が生じることも同様に考えられる。この場合、テストストリップには、相応する検出試薬が、特に検出領域の範囲内で、そして場合によってはさらに確認領域の範囲でも組み込まれていなければならない。さらに、例えば蛍光色素などを使用することができる。
【００３２】
確認領域１４は特に、テストストリップ１０が正しく使用されれば、必ず反応をこの確認領域内で検出できるように仕上げられており、その際、この確認領域内で、テストストリップ上に過剰に存在する遊離抗体と該遊離抗体に結合された検出試薬とによって生じる呈色反応が、例えば上記の様式で視認可能となる。
【００３３】
図２に、本発明によるテストストリップ２００の図Ａ、ＢおよびＣをもとに、微生物汚染負荷試験を実施した際に起こりうる結果を示す。範囲２１０、２２０、２３０における線状の呈色反応の位置および数に応じて、結果を読取ることができる。Ａの場合、有色の単独の線が範囲２１０において認められる。この線は、テストストリップ２００の確認領域内に現れている。この確認領域は、サンプリングパッド（図２では詳細には図示せず）から最も遠くに位置する。この場合、相応する微生物を検出することができなかった（結果は陰性である）。Ｂの場合、範囲２２０において、確認領域内だけではなく、よりサンプリングパッド（図示せず）に近い場所にある検出領域内にもそれぞれ有色の線が認められる。この場合、試験結果は陽性であり、したがって微生物を検出することができた。Ｃの場合、範囲２３０において、検出領域内でしか有色の線を認めることができない。確認領域内に線が現れていないため、この結果は無効である。
【００３４】
こうした本発明によるラテラルフローテストストリップの形態のバイオセンサを用いることにより、例えば洗濯機やコーヒーメーカーにおける微生物汚染負荷の存在の有無を、使用者自身で容易に調べることができる。
【００３５】
定期的に講じるべきクリーニング措置の前に、使用者は例えば、実際に微生物汚染負荷が存在していてクリーニングが必要であるのか否かを調べることができる。このようにして例えば、攻撃性のあるクリーニング用物質の使用を伴うことの多いクリーニング措置の実施を、実際に必要な程度に抑えることができる。
【図１】
2018533002.tif 000003
【図２Ａ】
2018533002.tif 000004
【図２Ｂ】
2018533002.tif 000005
【図２Ｃ】
2018533002.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】平成30年6月11日(2018.6.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
微生物（５０）を免疫学的に検出するためのバイオセンサであって、前記バイオセンサは、ラテラルフローテストストリップ（１０）の形態で仕上げられているとともに微生物特異的抗体（４０）を有し、前記抗体（４０）と前記検出すべき微生物（５０）とが複合体を形成すると、前記抗体（４０）の移動度特性が変化することを特徴とするバイオセンサ。
【請求項２】
前記微生物特異的抗体（４０）に少なくとも１種の検出試薬（４１）が結合していることを特徴とする、請求項１記載のバイオセンサ。
【請求項３】
前記検出試薬（４１）には、金属粒子または色素分子が含まれることを特徴とする、請求項１または２記載のバイオセンサ。
【請求項４】
糸状菌および／または糸状菌の胞子および／または細菌の検出に用いることが予定されていることを特徴とする、請求項１から３までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項５】
前記微生物特異的抗体（４０）は、前記検出すべき微生物（５０）の表面分子に対応していることを特徴とする、請求項１から４までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項６】
前記抗体（４０）は、糸状菌の胞子のβ−グルカンに対応していることを特徴とする、請求項１から５までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項７】
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）は、使い捨て物品であることを特徴とする、請求項１から６までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項８】
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）は、サンプリングパッド（１１）および／またはキャピラリー（１２）および／または少なくとも１つの検出領域（１３）を備えることを特徴とする、請求項１から７までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項９】
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）は、確認領域（１４）を備えることを特徴とする、請求項１から８までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項１０】
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）に、少なくとも１つのバッファー用カートリッジ（３０）が組み込まれていることを特徴とする、請求項１から９までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項１１】
家電機器における微生物（５０）を免疫学的に検出できるように適合されていることを特徴とする、請求項１から１０までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項１２】
家電機器における微生物（５０）を免疫学的に検出するための、請求項１から１１までのいずれか１項記載のラテラルフローテストストリップ（１０）の形態のバイオセンサの使用。
【請求項１３】
家電機器における微生物を検出するための方法であって、
請求項１から１１までのいずれか１項記載のラテラルフローテストストリップ（１０）の形態のバイオセンサを準備するステップと、
前記家電機器から採取した液状のサンプルまたはかす状のサンプルと、前記ラテラルフローテストストリップ（１０）とを接触させるステップと、
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）を読取るステップと
を含む方法。
【請求項１４】
洗濯機またはコーヒーメーカーにおける微生物（５０）を免疫学的に検出できるように適合されていることを特徴とする、請求項１から１０までのいずれか１項記載のバイオセンサ。
【請求項１５】
洗濯機またはコーヒーメーカーにおける微生物（５０）を免疫学的に検出するための、請求項１から１１までのいずれか１項記載のラテラルフローテストストリップ（１０）の形態のバイオセンサの使用。
【請求項１６】
洗濯機またはコーヒーメーカーにおける微生物を検出するための方法であって、
請求項１から１１までのいずれか１項記載のラテラルフローテストストリップ（１０）の形態のバイオセンサを準備するステップと、
前記家電機器から採取した液状のサンプルまたはかす状のサンプルと、前記ラテラルフローテストストリップ（１０）とを接触させるステップと、
前記ラテラルフローテストストリップ（１０）を読取るステップと
を含む方法。
【国際調査報告】
2018533002.tif 000007
2018533002.tif 000008
2018533002.tif 000009
2018533002.tif 000010
2018533002.tif 000011
2018533002.tif 000012