(57)【要約】リンカーを介して標的化部分（例えば、ソマトスタチン受容体結合部分など）に結合された活性剤（例えば、マイタンシノイドなど）のコンジュゲートを含有するナノ粒子およびマイクロ粒子、ならびにその医薬製剤が設計された。このようなナノ粒子およびマイクロ粒子は、活性剤の改善された時間空間的送達および／または改善された体内分布を提供することができる。コンジュゲート、粒子、およびその製剤の製造方法が提供される。それを必要としている対象に製剤を投与する方法が提供される。
2018519283.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リンカーによってソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）標的化部分に連結された活性剤を含むコンジュゲートであって、前記活性剤がマイタンシノイドであるコンジュゲート。
【請求項２】
Ｘ−Ｙ−Ｚ、Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｙ−Ｘ、Ｘ−（Ｙ−Ｚ）ｎ、（Ｘ−Ｙ）ｎ−Ｚ、Ｘ−Ｙ−Ｚｎ、Ｘｎ−Ｙ−Ｚ、および（Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｙ）ｎ−Ｚの群から選択される式を含み、
式中、Ｘは、ＳＳＴＲ標的化部分であり、
Ｙは、リンカーであり、
Ｚは、活性剤であり、
ｎは、２〜１，０００の間の整数である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
式Ｘ−Ｙ−Ｚを含み、
式中、Ｘは、ＳＳＴＲ標的化部分であり、
Ｙは、リンカーであり、
Ｚは、活性剤である、請求項２に記載のコンジュゲート。
【請求項４】
前記ＳＳＴＲ標的化部分が、ペプチド、ポリペプチド、抗体模倣物、核酸、糖タンパク質、小分子、炭水化物、および脂質からなる群から選択される、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
前記ＳＳＴＲ標的化部分がペプチドである、請求項４に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
前記ＳＳＴＲ標的化部分が、ソマトスタチン、オクトレオチド、オクトレオテート、パシレオチド、バプレオチド、セグリチド、ランレオチド、およびこれらの誘導体からなる群から選択される、請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項７】
前記ＳＳＴＲ標的化部分が、シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）であり、式中、ＡＡはα−Ｎ−ＭｅリジンまたはＮ−Ｍｅグルタミン酸である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項８】
前記リンカーが共有結合によってシクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）に結合される、請求項７に記載のコンジュゲート。
【請求項９】
前記共有結合がアミド結合である、請求項８に記載のコンジュゲート。
【請求項１０】
前記ＳＳＴＲ標的化部分がＴｙｒ３−オクトレオテート（ＴＡＴＥ）またはその誘導体である、請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項１１】
前記ＳＳＴＲ標的化部分が切断型ＴＡＴＥである、請求項１０に記載のコンジュゲート。
【請求項１２】
前記リンカーが共有結合によって前記ペプチドのＮ末端に結合する、請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項１３】
前記共有結合がアミン結合である、請求項１２に記載のコンジュゲート。
【請求項１４】
前記共有結合がアミド結合である、請求項１２に記載のコンジュゲート。
【請求項１５】
前記共有結合が尿素結合である、請求項１２に記載のコンジュゲート。
【請求項１６】
前記リンカーが共有結合によって前記ペプチドのＣ末端に結合する、請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項１７】
前記共有結合がアミド結合である、請求項１６に記載のコンジュゲート。
【請求項１８】
前記ペプチドが少なくとも１つのＤ−Ｐｈｅ残基を含む、請求項５に記載のコンジュゲート。
【請求項１９】
前記リンカーが、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールを含み、前記アルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリール基のそれぞれが、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択される１つまたは複数の基によって任意選択的に置換されており、前記カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルのそれぞれが、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択される１つまたは複数の基によって任意選択的に置換されている、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項２０】
前記リンカーが切断可能なリンカーではない、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項２１】
前記リンカーが切断可能なリンカーである、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項２２】
前記リンカーが、エステル結合、ジスルフィド、アミド、アシルヒドラゾン、エーテル、カルバメート、カーボネート、または尿素を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
【請求項２３】
前記マイタンシノイドがＤＭ１である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項２４】
前記マイタンシノイドがＤＭ４である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項２５】
前記コンジュゲートが５０，０００Ｄａ未満の分子量を有する、請求項１〜２４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２６】
前記コンジュゲートが約１０００Ｄａ〜約５０００Ｄａの間の分子量を有する、請求項２５に記載の粒子。
【請求項２７】
前記コンジュゲートが、
【化１】
2018519283.tif 000116
【化２】
2018519283.tif 000117
【化３】
2018519283.tif 000118
または
【化４】
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のいずれかの構造を有する、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項２８】
前記コンジュゲートが、テーブル１およびテーブル２から選択される、請求項２７に記載のコンジュゲート。
【請求項２９】
請求項１〜２８のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む粒子。
【請求項３０】
前記コンジュゲートと共に疎水性イオン対合（ＨＩＰ）複合体を形成する、逆帯電した少なくとも１つの前記コンジュゲートの対イオンをさらに含む、請求項２９に記載の粒子。
【請求項３１】
前記逆帯電した対イオンがイオン性界面活性剤によって提供されている、請求項３０に記載の粒子。
【請求項３２】
前記イオン性界面活性剤が、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム（ＡＯＴ）、オレイン酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、ステアリン酸ナトリウム、ヒト血清アルブミン（ＨＡＳ）、デキストラン硫酸、デオキシコール酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、アニオン性脂質、アミノ酸、ポリアミノ酸、ペプチド、１，２−ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウム−プロパン（塩化物塩）（ＤＯＴＡＰ）、臭化セトリモニウム（ＣＴＡＢ）、第４級アンモニウム塩の臭化ジドデシルジメチルアンモニウム（ＤＭＡＢ）または臭化ジドデシルジメチルアンモニウム（ＤＤＡＢ）から選択される、請求項３１に記載の粒子。
【請求項３３】
前記粒子が少なくとも１つの高分子マトリックスを含む、請求項２９〜３２のいずれか一項に記載の粒子。
【請求項３４】
前記高分子マトリックスが、疎水性ポリマー、親水性ポリマー、およびこれらのコポリマーからなる群から選択される１つまたは複数のポリマーを含む、３３に記載の粒子。
【請求項３５】
前記疎水性ポリマーが、ポリヒドロキシ酸、ポリヒドロキシアルカン酸、ポリカプロラクトン、ポリ（オルトエステル）、ポリ無水物、ポリ（ホスファゼン）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリエステル、およびこれらのコポリマーからなる群から選択される、請求項３４に記載の粒子。
【請求項３６】
前記親水性ポリマーが、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリ（オキシエチル化ポリオール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、多糖、ポリ（ヒドロキシ酸）、ポリ（ビニルアルコール）、およびこれらのコポリマーからなる群から選択される、請求項３４に記載の粒子。
【請求項３７】
前記高分子マトリックスが、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）、およびこれらのコポリマーからなる群から選択される１つまたは複数のポリマーを含む、請求項３３に記載の粒子。
【請求項３８】
前記粒子が１０ｎｍ〜５０００ｎｍの間の直径を有する、請求項２９〜３７のいずれか一項に記載の粒子。
【請求項３９】
前記粒子が、３０〜７０ｎｍの間、７０ｎｍ〜１２０ｎｍの間、１２０〜２００ｎｍの間、２００〜５０００ｎｍの間、または５００〜１０００ｎｍの間の直径を有する、請求項３８に記載の粒子。
【請求項４０】
前記粒子がナノ粒子である、請求項２９に記載の粒子。
【請求項４１】
前記ナノ粒子が１マイクロメートル未満の直径を有する、請求項４０に記載の粒子。
【請求項４２】
前記ナノ粒子が約１０ｎｍ〜約５００ｎｍの間の直径を有する、請求項４１に記載の粒子。
【請求項４３】
前記コンジュゲートが前記粒子内に完全または部分的にカプセル化されている、請求項２９に記載の粒子。
【請求項４４】
前記コンジュゲートが、前記粒子の重量を基準として０．０５％〜５０％（ｗ／ｗ）の間の量で存在する、請求項２９〜４３のいずれか一項に記載の粒子。
【請求項４５】
前記コンジュゲートが５０，０００Ｄａ未満の分子量を有する、請求項２９〜４４のいずれか一項に記載の粒子。
【請求項４６】
前記コンジュゲートが約１０００Ｄａ〜約５０００Ｄａの間の分子量を有する、請求項４５に記載の粒子。
【請求項４７】
前記粒子が制御放出粒子である、請求項２９に記載の粒子。
【請求項４８】
請求項２９〜４７のいずれか一項に記載の粒子を含む複数の粒子。
【請求項４９】
平均粒径が１マイクロメートル未満である、請求項４８に記載の複数の粒子。
【請求項５０】
平均粒径が約１０ｎｍ〜約５００ｎｍの間である、請求項４９に記載の複数の粒子。
【請求項５１】
前記粒子の多分散指数（ＰＤＩ）が約０．５以下、約０．２以下、または約０．１以下である、請求項４８に記載の複数の粒子。
【請求項５２】
前記粒子のζ電位が０ｍＶ以下または約−３０〜０ｍＶである、請求項４８に記載の複数の粒子。
【請求項５３】
前記粒子の毒性が前記活性剤よりも低い、請求項４８に記載の複数の粒子。
【請求項５４】
請求項１〜２８のいずれか一項に記載のコンジュゲートと、少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬製剤。
【請求項５５】
請求項２９〜４７のいずれか一項に記載の粒子と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬製剤。
【請求項５６】
治療的に有効な量の請求項５４または５５に記載の製剤を投与することを含む、それを必要としている対象の治療方法。
【請求項５７】
前記対象が癌を有する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記対象が炎症を有する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５９】
腫瘍の成長速度、腫瘍の大きさ、または腫瘍の体積を抑制する方法であって、前記腫瘍を有効量の請求項５４または請求項５５に記載の製剤と接触させることを含む方法。
【請求項６０】
マイタンシノイドを対象の腫瘍に送達する方法であって、請求項５４または請求項５５に記載の製剤を前記対象に投与することを含み、前記マイタンシノイドがＤＭ１またはＤＭ４である方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、標的化リガンド、そのコンジュゲート、およびコンジュゲートを含む粒子の分野に関する。より詳細には、本発明は、例えば癌を治療するための、ソマトスタチン受容体を標的とする分子の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ナノ医療における開発は、一般に、薬物の薬学的特性の改善に関し、より細胞特異的な形での標的化送達の向上に関する場合もある。モノクローナル抗体、アプタマー、ペプチド、および小分子を含む、いくつかの細胞特異的な薬物が記載されている。このような薬物のいくつかの潜在的な利点にもかかわらず、いくつかの問題によりその臨床適用は制限されており、サイズ、安定性、製造コスト、免疫原性、不十分な薬物動態および他の因子を含む。
【０００３】
ナノ粒子薬物送達系は、例えば、透過性および滞留性の亢進（ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ）（ＥＰＲ）効果により、循環中の薬物の半減期を延長し、薬物の非特異的な取込みを低減し、腫瘍における薬物の蓄積を改善することができ得るので、全身の薬物送達にとって魅力的である。ナノ粒子として送達のために製剤化された治療薬の限られた例があり、ドキシル（ＤＯＸＩＬ）（登録商標）（リポソームカプセル化ドキシルビシン（ｄｏｘｙｒｕｂｉｃｉｎ））およびアブラキサン（ＡＢＲＡＸＡＮＥ）（登録商標）（アルブミン結合パクリタキセルナノ粒子）を含む。
【０００４】
特定の器官または組織の特定の疾患細胞および組織、例えば癌細胞へ、薬物または薬物候補を時間空間的に制御された形で有効に送達するためのナノテクノロジーの開発は、潜在的に、全身毒性などの治療上の課題を克服または改善することができる。しかしながら、送達系の標的化は治療が必要とされる部位に薬物を優先的に送達し得るものの、ナノ粒子から放出される薬物は、例えば、治療効果をなお達成しながら治療の頻度を低減するかまたはより少量の薬物の投与を可能にするために十分な時間、標的化細胞の領域に効果的な量で留まることができないか、あるいは比較的無毒性の状態で循環中に留まることができない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、粒子に取り込むことができ、その存在が薬物の効力を実質的に妨害しない標的化分子の同定を含む、薬物の標的化および送達の改善が当該技術分野において必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本出願人らは、ソマトスタチン受容体結合部分と、活性剤、例えば、白金含有薬剤などの癌治療薬とのコンジュゲートである分子を作成した。さらに、このようなコンジュゲートは、粒子内にカプセル化することができる。コンジュゲートおよび粒子は、ソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）を発現する細胞に、腫瘍細胞毒性薬などの活性剤を送達するために有用である。
【０００７】
本出願人らは、新規のコンジュゲートおよび粒子（高分子ナノ粒子を含む）、ならびにその医薬製剤を開発した。治療薬、予防薬、または診断薬などの活性剤のコンジュゲートは、リンカーを介して、ソマトスタチン受容体に結合することができる標的化部分に結合される。コンジュゲートおよび粒子は、活性剤単独の送達と比較して、活性剤の改善された時間空間的送達および／または改善された体内分布を提供することができる。場合によっては、標的化部分は、治療薬の機能を果たすこともできる。いくつかの実施形態では、標的化剤は、インビボでの治療薬の効力を実質的に妨害しない。コンジュゲート、粒子、およびこのような粒子を含む製剤の製造方法は本明細書に記載される。このような粒子は、活性剤に対して感受性の疾患の治療または予防、例えば、癌または感染症の治療または予防のために有用である。
【０００８】
コンジュゲートはリンカーによって結合された標的化リガンドおよび活性剤を含み、いくつかの実施形態では、コンジュゲートは式：（Ｘ−Ｙ−Ｚ）
を有し、式中、Ｘはソマトスタチン受容体標的化部分であり、Ｙはリンカーであり、Ｚは活性剤である。
【０００９】
１つのリガンドが２つ以上の活性剤に結合されることも可能であり、この場合、コンジュゲートは式：Ｘ−（Ｙ−Ｚ）ｎを有する。他の実施形態では、１つの活性剤分子が２つ以上のリガンドに結合されることが可能であり、この場合、コンジュゲートは式：（Ｘ−Ｙ）ｎ−Ｚを有する。ｎは１以上の整数である。
【００１０】
標的化部分Ｘは任意のソマトスタチン受容体結合部分でよく、例えば、ソマトスタチン、オクトレオチド、オクトレオテート、バプレオチド、パシレオチド、ランレオチド、セグリチド（ｓｅｇｌｉｔｉｄｅ）、または任意の他のソマトスタチン受容体結合リガンドの例などであるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、標的化部分は、ソマトスタチン受容体２および／または５に結合するソマトスタチン受容体結合部分である。
【００１１】
リンカーＹは１つまたは複数の活性剤および１つまたは複数の標的化リガンドに結合されて、コンジュゲートを形成する。リンカーＹは、エステル結合、ジスルフィド、アミド、アシルヒドラゾン、エーテル、カルバメート、カーボネート、および尿素から独立して選択される官能基によって、標的化部分Ｘおよび活性剤Ｚに結合される。あるいは、リンカーは、チオールおよびマレイミド間、アジドおよびアルキン間の共役により提供されるような切断不能な基によって、標的化リガンドまたは活性薬のいずれかに結合され得る。リンカーはアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリール基のそれぞれは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択される１つまたは複数の基によって任意選択的に置換されており、ここで、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルのそれぞれは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択される１つまたは複数の基によって任意選択的に置換されている。
【００１２】
いくつかの実施形態では、リンカーは、切断可能な官能基を含む。切断可能な官能基はインビボで加水分解されてもよいし、あるいは例えばカテプシンＢによって酵素的に加水分解されるように設計されてもよい。
【００１３】
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式Ｉａ：
【００１４】
【化１】
2018519283.tif 000003
【００１５】
（式中、Ｘは、上記で定義されたソマトスタチン受容体標的化部分であり、Ｚは活性剤であり、Ｘ’、Ｒ１、Ｙ’、Ｒ２およびＺ’は本明細書において定義される通りである）
に従う化合物であり得る。
【００１６】
Ｘ’は存在しないか、あるいは、カルボニル、アミド、尿素、アミノ、エステル、アリール、アリールカルボニル、アリールオキシ、アリールアミノ、１つまたは複数の天然または非天然アミノ酸、チオまたはスクシンイミドから独立して選択され；Ｒ１およびＲ２は存在しないか、あるいは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ポリエチレングリコール（２〜３０単位）から構成され；Ｙ’は存在しないか、置換または非置換１，２−ジアミノエタン、ポリエチレングリコール（２〜３０単位）またはアミドであり；Ｚ’は存在しないか、あるいは、カルボニル、アミド、尿素、アミノ、エステル、アリール、アリールカルボニル、アリールオキシ、アリールアミノ、チオまたはスクシンイミドから独立して選択される。いくつかの実施形態では、リンカーは１つの活性剤分子を２つ以上の標的化リガンドに連結させることもでき、あるいは１つの標的化リガンドを２つ以上の活性剤に連結させることもできる。
【００１７】
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、リンカーＹが式Ｉｂ：
【００１８】
【化２】
2018519283.tif 000004
【００１９】
（式中、Ａは本明細書で定義され、ｍ＝０〜２０である）
に従うＡｍである化合物であり得る。
式Ｉａ中のＡはスペーサ単位であり、存在しないか、あるいは以下の置換基
【００２０】
【化３】
2018519283.tif 000005
【００２１】
（式中、ｚ＝０〜４０、ＲはＨまたは任意選択的に置換されたアルキル基であり、Ｒ’は天然または非天然アミノ酸のいずれかにおいて見出される任意の側鎖である）
から独立して選択される。各置換基について、破線は、Ｘ、Ｚまたは独立して選択される別のＡの単位による置換部位を表し、Ｘ、Ｚ、またはＡは、置換基のいずれかの側に結合され得る。
【００２２】
いくつかの実施形態では、リンカーは、式Ｉｃ：
【００２３】
【化４】
2018519283.tif 000006
【００２４】
（式中、Ａは上記で定義され、ｍ＝０〜４０、ｎ＝０〜４０、ｘ＝１〜５、ｙ＝１〜５であり、Ｃは、本明細書で定義される分枝要素である）
に従う化合物であり得る。
【００２５】
式Ｉｃ中のＣは、アミン、カルボン酸、チオール、またはスクシンイミド（リジン、２，３−ジアミノプロパン酸、２，４−ジアミノ酪酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、およびシステインなどのアミノ酸を含む）から選択される、スペーサ単位、リガンド、または活性薬に共有結合するための３〜６個の官能基を含有する分枝単位である。
【００２６】
ペイロードとも称される活性剤Ｚは、治療薬、予防薬、診断薬、または栄養剤であり得る。いくつかの実施形態では、活性剤Ｚは、抗癌剤、化学療法剤、抗菌薬、抗炎症剤、またはこれらの組み合わせであり得る。
【００２７】
いくつかの実施形態では、活性剤Ｚは、マイタンシノイド（ｍａｙｔａｎｓｉｎｏｉｄ）、例えばＤＭ１またはＤＭ４である。マイタンシノイドは、本明細書で使用される場合、マイタンシンの化学誘導体を指す。これは、微小管機能を破壊するその能力のために抗癌特性を有する。いくつかの実施形態では、ソマトスタチン受容体標的化部分Ｘは、ソマトスタチン、セグリチド、Ｔｙｒ３−オクトレオテート（ＴＡＴＥ）、シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）、またはこれらの類似体もしくは誘導体から選択される。Ｘは、そのＣ末端またはＮ末端においてリンカーＹに共有結合し得る。いくつかの実施形態では、標的化部分Ｘは少なくとも１つのＤ−Ｐｈｅ残基を含み、標的化部分ＸのＤ−Ｐｈｅ残基のフェニル環は、リンカー含有部分によって置換されている。いくつかの実施形態では、リンカーＹは、ペニシラミンおよび／またはその誘導体／類似体／残基を含む。
【００２８】
１つの態様では、本発明のコンジュゲートおよび対イオンを含有する疎水性イオン対合複合体が提供される。いくつかの実施形態では、対イオンは負に帯電している。別の態様では、本発明のコンジュゲートを含有する粒子または本発明のコンジュゲートの疎水性イオン対合複合体が提供される。別の態様では、本明細書に記載されるコンジュゲートもしくはコンジュゲートを含有する粒子、またはこれらの薬学的に許容可能な塩を薬学的に許容可能な媒体中に含有する医薬製剤が提供される。
【００２９】
１つの態様では、本発明のコンジュゲートを含有する粒子が提供される。いくつかの実施形態では、粒子は、１０ｎｍ〜５０００ｎｍの間の直径を有する。いくつかの実施形態では、粒子は、３０ｎｍ〜７０ｎｍの間、１２０ｎｍ〜２００ｎｍの間、２００ｎｍ〜５０００ｎｍの間、または５００ｎｍ〜１０００ｎｍの間の直径を有する。
【００３０】
コンジュゲートおよびコンジュゲートを含有する粒子の製造方法が提供される。疾患または状態を治療するための方法も提供され、本方法は、それを必要としている対象に、コンジュゲートを含有する治療的に有効な量の粒子を投与することを含む。一実施形態では、コンジュゲートは、癌または過剰増殖性疾患、例えば、リンパ腫、腎細胞癌、白血病、前立腺癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）および非ＳＣＬＣ）、膵癌（例えば、膵管）、メラノーマ、結腸直腸癌、卵巣癌（例えば、卵巣上皮癌）、乳癌、神経膠芽腫（例えば、星状細胞腫および多形神経膠芽腫）、胃癌、肝癌、肉腫、膀胱癌、精巣癌、食道癌、頭頸部癌、子宮内膜癌および軟膜癌腫症を標的とする。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】バーで表される種々のコンジュゲートのグラフであり、オクトレオチドによる競合がある場合およびない場合の、Ｈ５２４増殖アッセイにおけるその活性をＹ軸に示す。Ｙ軸は、オクトレオチドが添加された場合のＩＣ５０の、オクトレオチドが添加されない場合のＩＣ５０に対する比を示す。このアッセイは、コンジュゲートの活性がソマトスタチン受容体に依存する程度を実証する。マイタンシノイドコンジュゲートのみが１を有意に超える比を示す。これは、マイタンシノイドコンジュゲートのみが受容体に依存する活性を示すという驚くべき知見を説明する。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
少なくとも５つのソマトスタチン受容体サブタイプの特徴付けが行われており、腫瘍は、種々の受容体サブタイプを発現することができる（例えば、シャエル（Ｓｈａｅｒ）ら著、Ｉｎｔ．３．Ｃａｎｃｅｒ、第７０巻、ｐ．５３０〜５３７，１９９７年を参照）。天然に存在するソマトスタチンおよびその類似体は、受容体サブタイプに対して異なる結合を示す。本出願人らは、活性剤を含むコンジュゲートの疾患組織標的への標的化を改善するために、この特性を利用して新規の粒子を作製した。このような標的化は、例えば、部位における活性剤の量を改善し、対象に対する活性剤毒性を減少させることができる。本明細書で使用される場合、「毒性」は、細胞、組織生物体または細胞環境に対して有害または有毒である、物質または組成物の能力を指す。低毒性は、細胞、組織生物体または細胞環境に対して有害または有毒である、物質または組成物の低減した能力を指す。このような低減した毒性または低い毒性は、標準的な基準に対する、治療に対する、または治療しないことに対するものであり得る。
【００３３】
毒性はさらに、対象の体重減少に対して測定されてもよく、体重の１５％を超える、２０％を超える、または３０％を超える体重減少は毒性を示す。倦怠感および一般的な不安（ｍａｌａｉａｓｅ）を含む、患者が提示する測定基準などの毒性の他の測定基準が測定されてもよい。好中球減少または血小板減少も毒性の測定基準であり得る。
【００３４】
毒性の薬理学的指標は、ＡＳＴ／ＡＬＴレベルの上昇、神経毒性、腎臓損傷、ＧＩ損傷などを含む。
コンジュゲートは、粒子の投与後に放出される。標的化薬物コンジュゲートは、標的化粒子またはカプセル化された非標的化薬物の投与と比較して、より大きい効力および忍容性を提供するために、透過性および滞留性の亢進効果（ＥＰＲ）ならびに粒子の全体的な体内分布の改善と組み合わせて活性分子の標的化を利用する。
【００３５】
加えて、活性剤に連結されたソマトスタチン標的化部分を含有するコンジュゲートの、ＳＳＴＲを発現しない細胞に対する毒性は、活性剤単独の毒性と比較して低減されることが予測される。どの特定の理論にも関与することなく、本出願人らにより、この特徴は、結合された活性剤が細胞に入る能力が、活性剤単独が細胞に入る能力と比べて低減されることが原因であると考えられる。従って、本明細書に記載されるような活性剤を含むコンジュゲートおよびコンジュゲートを含有する粒子は、一般的に、活性剤単独と比較して、非ＳＳＴＲ発現細胞に対する毒性が低減され、ＳＳＴＲ発現細胞に対する毒性が少なくとも同じであるか増大されている。
【００３６】
本発明の目的は、時間空間的な薬物送達のための改善された化合物、組成物、および製剤を提供することである。
本発明のさらなる目的は、時間空間的な薬物送達のための改善された化合物、組成物、および製剤の製造方法を提供することである。
【００３７】
また本発明の目的は、改善された化合物、組成物、および製剤を、それを必要としている個体に投与する方法を提供することでもある。
Ｉ．定義
「化合物」という用語は、本明細書で使用される場合、示された構造の立体異性体、幾何異性体、互変異性体、および同位体を全て含むことを意味する。本出願において、化合物はコンジュゲートと互換的に使用される。従って、コンジュゲートも、本明細書で使用される場合、示された構造の立体異性体、幾何異性体、互変異性体、および同位体を全て含むことを意味する。
【００３８】
本明細書に記載される化合物は、非対称（例えば、１つまたは複数の立体中心を有する）であり得る。他に記載されない限り、エナンチオマーおよびジアステレオマーなどの全ての立体異性体が意図される。非対称に置換された炭素原子を含有する本開示の化合物は、光学活性体またはラセミ体において単離することができる。光学活性な出発材料からどのようにして光学活性体を調製するかに関する方法は当該技術分野において知られており、例えば、ラセミ混合物の分割または立体選択的な合成によるものである。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体も本明細書に記載される化合物中に存在することができ、このような安定な異性体は全て本開示において企図される。本開示の化合物のシスおよびトランス幾何異性体が記載されており、異性体の混合物として、または分離された異性体として単離され得る。
【００３９】
本開示の化合物は互変異性体も含む。互変異性体は、単結合と隣接する二重結合との交換、および同時に起こるプロトンの移動の結果として生じる。互変異性体は、同じ実験式および全電荷を有する異性体プロトン化状態であるプロトトロピック（ｐｒｏｔｏｔｒｏｐｉｃ）互変異性体を含む。プロトトロピック互変異性体の例には、ケトン−エノール対、アミド−イミド酸対、ラクタム−ラクチム対、アミド−イミド酸対、エナミン−イミン対、および環状形態が含まれ、プロトンは、１Ｈ−および３Ｈ−イミダゾール、１Ｈ−、２Ｈ−および４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−および２Ｈ−イソインドール、ならびに１Ｈ−および２Ｈ−ピラゾールなどの複素環系の２つ以上の位置を占めることができる。互変異性体は平衡状態であることもあるし、あるいは適切な置換によって１つの形態に立体的に固定されることもある。
【００４０】
本開示の化合物は、中間体または最終化合物中に存在する原子の全ての同位体も含む。「同位体」は、同じ原子数を有するが、核内の異なる数の中性子に起因する異なる質量数を有する原子を指す。例えば、水素の同位体は、三重水素および重水素を含む。
【００４１】
本開示の化合物および塩は、所定の方法によって、溶媒または水分子と組み合わせて調製されて、溶媒和物および水和物を形成することができる。
「対象」または「患者」という用語は、本明細書で使用される場合、例えば、実験的、治療的、診断的、および／または予防的な目的のために粒子が投与され得る任意の生物体を指す。典型的な対象には、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、イヌ、ネコ、ハムスター、ラマ、非ヒト霊長類、およびヒトなどの哺乳類）が含まれる。
【００４２】
「治療する」または「予防する」という用語は、本明細書で使用される場合、疾患、障害および／または状態になりやすい素因を有し得るが、まだ疾患、障害または状態があると診断されていない動物において、疾患、障害または状態が起こることを防止すること；疾患、障害または状態を抑制する、例えば、その進行を妨げること；ならびに疾患、障害、または状態を軽減する、例えば、疾患、障害および／または状態の後退を引き起すことを含むことができる。疾患、障害、または状態の治療は、根底にある病態生理に影響を与えなくても、特定の疾患、障害、または状態の少なくとも１つの症状を改善すること、例えば、鎮痛薬の投与によって対象の痛みを治療する（このような薬剤は痛みの原因を治療することはないが）ことを含むことができる。
【００４３】
「標的」は、本明細書で使用される場合、標的化される構築物が結合する部位を意味するものとする。標的は、インビボまたはインビトロのいずれかであり得る。特定の実施形態では、標的は、白血病または腫瘍（例えば、脳、肺（小細胞および非小細胞）、卵巣、前立腺、乳房および結腸の腫瘍、ならびに他の癌腫および肉腫）において見出される癌細胞であり得る。さらに他の実施形態では、標的は、ハプテン、エピトープ、受容体、ｄｓＤＮＡ断片、炭水化物または酵素などの、標的化部分またはリガンドが結合する分子構造を指すことができる。標的は、ある種の組織、例えば、神経組織、腸組織、膵臓組織、肝臓、腎臓、前立腺、卵巣、肺、骨髄、または乳房組織であってもよい。
【００４４】
方法またはコンジュゲートまたは粒子のための標的としての役割を果たし得る「標的細胞」は、一般的に、動物細胞、例えば、哺乳類細胞である。本方法は、インビトロ（すなわち、細胞培養物中）またはインビボ（細胞が動物組織の一部を形成するか、あるいは他の形で動物組織中に存在する）において生細胞の細胞機能を変更するために使用され得る。従って、標的細胞は、例えば、血液、リンパ組織、口腔および咽頭粘膜などの消化管の内側を覆う細胞、小腸の絨毛を形成する細胞、大腸の内側を覆う細胞、動物（本発明の吸入により接触され得る）の呼吸器系（鼻腔／肺）の内側を覆う細胞、真皮／上皮細胞、膣および直腸の細胞、胎盤およびいわゆる血液／脳関門の細胞を含む内部器官の細胞などを含み得る。一般に、標的細胞は少なくとも１種類のＳＳＴＲを発現する。いくつかの実施形態では、標的細胞はＳＳＴＲを発現する細胞でよく、本明細書に記載されるコンジュゲートにより標的化され、コンジュゲートの活性剤の放出により影響を受ける細胞の近くにある。例えば、腫瘍に近接するＳＳＴＲを発現する血管は標的であり得るが、その部位で放出される活性剤は腫瘍に影響を与えるであろう。
【００４５】
「治療効果」という用語は当該技術分野において認識されており、薬理学的に活性な物質によって引き起こされる、動物、特に哺乳類、より詳細にはヒトにおける局所的または全身的な効果を指す。従って、この用語は、動物、例えばヒトの望ましい身体的または精神的な発達および状態の向上において、疾患、障害または状態の診断、治癒、緩和、治療または予防での使用が意図される任意の物質を意味する。
【００４６】
「調節」という用語は当該技術分野において認識されており、応答の上方制御（すなわち、活性化または刺激）、下方制御（すなわち、阻害または抑制）、または組み合わせもしくは別々のこれらの２つを指す。調節は、一般に、治療される実体の内部または外部にあり得るベースラインまたは基準と比較される。
【００４７】
「非経口投与」は、本明細書で使用される場合、消化管（経腸）または非侵襲的な局所経路を介する以外の任意の方法による投与を意味する。例えば、非経口投与は、静脈内、皮内、腹腔内、胸膜内、気管内、骨内、脳内、髄腔内、筋肉内、皮下、結膜下（ｓｕｂｊｕｎｃｔｉｖａｌｌｙ）、注射、および点滴による患者への投与を含み得る。
【００４８】
「局所投与」は、本明細書で使用される場合、皮膚、開口部、または粘膜への非侵襲的な投与を意味する。局所投与は局所的に送達することができ、すなわち、治療薬は、全身曝露なしに、または最小限の全身曝露で、送達領域において局所効果を提供することができる。いくつかの局所製剤は、例えば、血流内への吸着を介して全身的効果を提供することができる。局所投与は、皮膚および経皮投与、頬側投与、鼻腔内投与、膣内投与、膀胱内投与、眼内投与、ならびに直腸投与を含むことができるが、これらに限定されない。
【００４９】
「腸内投与」は、本明細書で使用される場合、胃腸管を介する吸収による投与を意味する。腸内投与は、経口および舌下投与、胃内投与、または直腸投与を含むことができる。
「肺内投与」は、本明細書で使用される場合、吸入または気管内投与による肺への投与を意味する。本明細書で使用される場合、「吸入」という用語は、空気の肺胞への取り込みを指す。空気の取り込みは、口または鼻を介して起こり得る。
【００５０】
「十分な」および「有効な」という用語は、本明細書において互換的に使用される場合、１つまたは複数の所望の結果を達成するために必要とされる量（例えば、質量、体積、投薬量、濃度、および／または時間）を指す。「治療的に有効な量」は、少なくとも１つの症状または特定の状態または障害の測定可能な改善または予防をもたらすため、平均余命の測定可能な向上をもたらすため、あるいは患者の生活の質を一般的に改善するために必要とされる、少なくとも最小濃度である。従って、治療的に有効な量は、特定の生物学的に活性な分子および治療される特定の状態または障害に依存する。抗体などの多数の活性剤の治療的に有効な量は、当該技術分野において知られている。例えば、特定の障害を治療するための、本明細書に記載される化合物および組成物の治療的に有効な量は、医師などの当業者の技能の範囲内に十分に入っている技術によって決定され得る。
【００５１】
「生物活性剤」および「活性剤」という用語は、本明細書において互換的に使用される場合、体内で局所的または全身的に作用する生理学的または薬理学的に活性な物質を含むがこれらに限定されない。生物活性剤は、疾患もしくは病気の治療のため（例えば、治療薬）、予防のため（例えば、予防薬）、診断のため（例えば、診断薬）、治癒のためもしくは緩和のために使用される物質、身体の構造もしくは機能に影響を与える物質、またはこれらが所定の生理学的環境に置かれた後に生物学的に活性もしくはより活性になるプロドラッグである。
【００５２】
「プロドラッグ」という用語は、インビトロおよび／またはインビボで生物学的に活性な形態に転換される、小さい有機分子、ペプチド、核酸またはタンパク質を含む薬剤を指す。プロドラッグは、場合により、親化合物（活性化合物）よりも投与することがより容易であり得るので有用なことがある。例えば、プロドラッグは経口投与により生体利用可能であり得るが、親化合物はそうではない。またプロドラッグは親薬物と比較して医薬組成物中で改善された溶解度を有し得る。またプロドラッグは親よりも毒性が少ないこともある。プロドラッグは、酵素プロセスおよび代謝加水分解を含む種々のメカニズムにより親薬物に転換され得る。ハーパー，Ｎ．Ｊ．（Ｈａｒｐｅｒ，Ｎ．Ｊ．）著（１９６２年）、「薬物潜在化（Ｄｒｕｇ  Ｌａｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ）」、ジュッカー（Ｊｕｃｋｅｒ）編、プログレス・イン・ドラッグ・リサーチ（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第４巻、ｐ．２２１〜２９４；モロゾウィッチ（Ｍｏｒｏｚｏｗｉｃｈ）ら著（１９７７年）、「物理有機原理のプロドラッグ設計への適用（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｔｏ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ）」、Ｅ．Ｂ．ロシュ（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ）編、「プロドラッグおよび類似体によるバイオ医薬品特性の設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｓ）」、ＡＰｈＡ；アカデミー・オブ・ファーマシューティカル・サイエンス（Ａｃａｄ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）；Ｅ．Ｂ．ロシュ（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ）編（１９７７年）、「薬物設計、理論および適用における薬物中の生体可逆性担体（Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）」、ＡＰｈＡ；Ｈ．バンドガード（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ）編（１９８５年）、「プロドラッグの設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）」、エルゼビア（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）；ワン（Ｗａｎｇ）ら著（１９９９年）、「ペプチド薬の改善された送達へのプロドラッグアプローチ（Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇ）」、カレント・ファーマシューティカル・デザイン（Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ）、第５（４）巻、ｐ．２６５〜２８７；パウレッチ（Ｐａｕｌｅｔｔｉ）ら著（１９９７年）、「ペプチドの生物学的利用能における改善：ペプチド模倣薬およびプロドラッグ戦略（Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ：Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ）」、アドバンスド・ドラッグ・デリバリー・レビューズ（Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．）、第２７巻、ｐ．２３５〜２５６；ミゼン（Ｍｉｚｅｎ）ら著（１９９８年）、「βラクタム抗生物質の経口送達のためのプロドラッグとしてのエステルの使用（Ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｅｓｔｅｒｓ  ａｓ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｏｒａｌ  ��ｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  β−Ｌａｃｔａｍ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）」、ファーマ・アンド・バイオテクノロジー（Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．）、第１１巻、ｐ．３４５〜３６５；ガイニュー（Ｇａｉｇｎａｕｌｔ）ら著（１９９６年）、「プロドラッグおよびバイオ前駆体Ｉ．担体プロドラッグの設計（Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  Ｉ．Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）」、プラクティス・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｐｒａｃｔ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、ｐ．６７１〜６９６；Ｍ．アスガルネジャド（Ｍ．Ａｓｇｈａｒｎｅｊａｄ）著（２０００年）、「プロドラッグによる改善された経口薬物の輸送（Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  Ｏｒａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｖｉａ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）」、Ｇ．Ｌ．アミドン（Ｇ．Ｌ．Ａｍｉｄｏｎ）、Ｐ．Ｉ．リー（Ｐ．Ｉ．Ｌｅｅ）およびＥ．Ｍ．トップ（Ｅ．Ｍ．Ｔｏｐｐ）編、「製剤系における輸送プロセス（Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）」、マーセル・デッカー（Ｍａｒｃｅｌｌ  Ｄｅｋｋｅｒ）、ｐ．１８５〜２１８；バラント（Ｂａｌａｎｔ）ら著（１９９０年）、「種々の投与経路による薬物吸収の改善のためのプロドラッグ（Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｖｉａ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｒｏｕｔｅｓ  ｏｆ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・ドラッグ・メタボリズム・アンド・ファーマコキネティクス（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．）、第１５（２）巻、ｐ．１４３〜５３；バリマン（Ｂａｌｉｍａｎｅ）およびシンコ（Ｓｉｎｋｏ）著（１９９９年）、「ヌクレオシド類似体の経口吸収における複数のトランスポータの関与（Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｒａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ）」、アドバンスド・ドラッグ・デリバリー・レビューズ（Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．）、第３９（１−３）巻、ｐ．１８３〜２０９；ブラウン（Ｂｒｏｗｎｅ）著（１９９７年）、ホスフェニトイン（Ｆｏｓｐｈｅｎｙｔｏｉｎ）（セレビックス（Ｃｅｒｅｂｙｘ））、クリニカル・ニューロファーマコロジー（Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．）、第２０（１）巻、ｐ．１〜１２；バンドガード（Ｂｕｎｄｇａａｒｄ）著（１９７９年）、「薬物の生体可逆性誘導体化−薬物の治療効果を改善するための原理および適用性（Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ−−ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ）」、Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｃｈｅｍｉ．、第８６（１）巻、ｐ．１〜３９；Ｈ．バンドガード（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ）編（１９８５年）、「プロドラッグの設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）」、ニューヨーク、エルゼビア（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）；フライシャー��Ｆｌｅｉｓｈｅｒ）ら著（１９９６年）、「改善された経口薬物送達：プロドラッグの使用による溶解度制限の克服（Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ：ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ）」、アドバンスド・ドラッグ・デリバリー・レビューズ（Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．）、第１９（２）巻、ｐ．１１５〜１３０；フライシャー（Ｆｌｅｉｓｈｅｒ）ら著（１９８５年）、「腸内酵素標的化による改善された消化管吸収のためのプロドラッグの設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｅｎｚｙｍｅ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ）」、メソッズ・イン・エンザイモロジー（Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．）、第１１２巻、ｐ．３６０〜８１；ファークワー  Ｄ（Ｆａｒｑｕｈａｒ  Ｄ）ら著（１９８３年）、「生物学的に可逆的なリン酸保護基（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ）」、ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシーズ（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第７２（３）巻、ｐ．３２４〜３２５；ハン，Ｈ．Ｋ．（Ｈａｎ，Ｈ．Ｋ．）ら著（２０００年）、「薬物送達を最適化するための標的化プロドラッグ設計（Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｄｅｓｉｇｎ  ｔｏ  ｏｐｔｉｍｉｚｅ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ）」、ＡＡＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉ．、第２（１）巻、Ｅ６；サドズカ  Ｙ．（Ｓａｄｚｕｋａ  Ｙ．）著（２０００年）、「有効なプロドラッグリポソームおよび活性代謝産物への転換（Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ  ａｎｄ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｔｏ  ａｃｔｉｖｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ）」、カレント・ドラッグ・メタボリズム（Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．）、第１（１）巻、ｐ３１〜４８；Ｄ．Ｍ．ランベルト（Ｄ．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ）著（２０００年）、「プロドラッグ担体としての脂質の理論的根拠および適用（Ｒａｔｉｏｎａｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｌｉｐｉｄｓ  ａｓ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｃａｒｒｉｅｒｓ）」、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシーズ（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第１１巻、追補２、Ｓ１５〜２７；ワン，Ｗ．（Ｗａｎｇ，Ｗ．）ら著（１９９９年）、「ペプチド薬の改善された送達へのプロドラッグアプローチ（Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇｓ）」、カレント・ファーマシューティカル・デザイン（Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．）、第５（４）巻、ｐ２６５〜８７。
【００５３】
「生体適合性」という用語は、本明細書で使用される場合、その任意の代謝産物または分解生成物と共に、一般的にレシピエントに対して非毒性であり、レシピエントに対して任意の重大な悪影響を引き起さない材料を指す。一般的に言えば、生体適合性材料は、患者に投与したときに重大な炎症または免疫応答を誘発しない材料である。
【００５４】
「生分解性」という用語は、本明細書で使用される場合、一般的に、生理的条件下で分解または浸食されて、対象により代謝、排除、または排泄されることが可能なより小さい単位または化学種になり得る材料を指す。分解時間は、組成およびモルホロジーの関数である。分解時間は数時間から数週間であり得る。
【００５５】
「薬学的に許容可能」という用語は、本明細書で使用される場合、米国食品医薬品局（Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）などの機関のガイドラインに従い、健全な医学的判断の範囲内で、合理的な利益／リスク比に相応して過度の毒性、過敏、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症を起こすことなく、ヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに適した化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。「薬学的に許容可能な担体」は、本明細書で使用される場合、インビボで組成物の送達を促進する、医薬製剤の全ての構成成分を指す。薬学的に許容可能な担体には、希釈剤、防腐剤、結合剤、潤滑剤、崩壊材、膨潤剤、充填剤、安定剤、およびこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【００５６】
「分子量」という用語は、本明細書で使用される場合、一般的に、材料の質量または平均質量を指す。分子量は、化合物の化学式から計算することができる。ポリマーまたはオリゴマーの場合、分子量は、バルクポリマーの相対的な平均鎖長または相対的な鎖質量を指すことができる。特に、ポリマーおよびオリゴマーの分子量は、ゲル浸透クロマトグラフィ（ＧＰＣ）または毛管粘度測定を含む種々の方法で推定または特徴付けすることができる。ＧＰＣ分子量は、数平均分子量（Ｍｎ）とは対照的に、重量平均分子量（Ｍｗ）として報告される。毛管粘度測定は、濃度、温度、および溶媒条件の特定のセットを用いて希釈ポリマー溶液から決定される固有粘度としての分子量の推定値を提供する。
【００５７】
「小分子」という用語は、本明細書で使用される場合、一般的に、分子量が２０００ｇ／ｍｏｌ未満、１５００ｇ／ｍｏｌ未満、１０００ｇ／ｍｏｌ未満、８００ｇ／ｍｏｌ未満、または５００ｇ／ｍｏｌ未満である有機分子を指す。小分子は、非高分子および／または非オリゴマーである。
【００５８】
「親水性」という用語は、本明細書で使用される場合、水と容易に相互作用をする強い極性基を有する物質を指す。
「疎水性」という用語は、本明細書で使用される場合、水に対する親和性がなく、水を撥いて吸収せず、そして水に溶解しないか水と混合しない傾向のある物質を指す。
【００５９】
「親油性」という用語は、本明細書で使用される場合、脂質に対する親和性を有する化合物を指す。
「両親媒性」という用語は、本明細書で使用される場合、親水性および親油性（疎水性）特性を兼ね備えた分子を指す。「両親媒性材料」は、本明細書で使用される場合、疎水性またはより疎水性のオリゴマーまたはポリマー（例えば、生分解性オリゴマーまたはポリマー）と、親水性またはより親水性のオリゴマーまたはポリマーとを含有する材料を指す。
【００６０】
「標的化部分」という用語は、本明細書で使用される場合、特定の場所に結合または局部集中する部分を指す。部分は、例えば、タンパク質、核酸、核酸類似体、炭水化物、または小分子であり得る。場所は、組織、特定の細胞型、または細胞内区画であり得る。いくつかの実施形態では、標的化部分は、選択された分子に特異的に結合することができる。
【００６１】
「反応性カップリング基」という用語は、本明細書で使用される場合、第２の官能基と反応して共有結合を形成することができる任意の化学官能基を指す。反応性カップリング基の選択は、当業者の能力の範囲内である。反応性カップリング基の例は、イソチオシアネート、イソシアネート、アシルアジド、ＮＨＳエステル、塩化スルホニル、アルデヒド、グリオキサール、エポキシド、オキシラン、カーボネート、ハロゲン化アリール、イミドエステル、カルボジイミド、酸無水物、およびフルオロフェニルエステルなどの第１級アミン（−ＮＨ２）およびアミン反応性連結基を含むことができる。これらの大部分は、アシル化またはアルキル化のいずれかによってアミンに結合する。反応性カップリング基の例は、ヒドラジド、アルコキシアミン、および第１級アミンなどのアルデヒド（−ＣＯＨ）およびアルデヒド反応性連結基を含むことができる。反応性カップリング基の例は、マレイミド、ハロアセチル、およびピリジルジスルフィドなどのチオール基（−ＳＨ）およびスルフヒドリル反応性基を含むことができる。反応性カップリング基の例は、アリールアジドまたはジアジリンなどの光反応性カップリング基を含むことができる。カップリング反応は、触媒、熱、ｐＨ緩衝剤、光、またはこれらの組み合わせの使用を含み得る。
【００６２】
「保護基」という用語は、本明細書で使用される場合、別の所望の官能基に付加され、および／またはそれを置換して、特定の反応条件から所望の官能基を保護することができ、そして選択的に除去および／または置換されて、所望の官能基を脱保護する、または露出させることができる官能基を指す。保護基は、当業者に知られている。適切な保護基には、グリーン（Ｇｒｅｅｎｅ）およびウッツ（Ｗｕｔｓ）著、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」（１９９１年）に記載されるものが含まれる。酸感受性保護基には、ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）、ｔｅｒｔ−ブチルカルバメート（ｔＢｏｃ）およびトリフルオロアセチル（ｔＦＡ）が含まれる。塩基感受性保護基には、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、イソブチル（ｉｓｏｂｕｔｙｒｌ）（ｉＢｕ）、ベンゾイル（Ｂｚ）およびフェノキシアセチル（ｐａｃ）が含まれる。他の保護基には、アセトアミドメチル、アセチル、ｔｅｒｔ−アミルオキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、２−（４−ビフェニリル（ｂｉｐｈεｎｙｌｙｌ））−２−プロピルオキシカルボニル（ｐｒｏｐｙ！ｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチル７ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、ｌ−カルボベンゾオキサミド−２，２．２−トリフルオロエチル、２，６−ジクロロベンジル、２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−プロピルオキシカルボニル、２，４−ジニトロフェニル、ジチアスクシニル、ホルミル、４−メトキシベンゼンスルホニル、４−メトキシベンジル、４−メチルベンジル、ｏ−ニトロフェニルスルフェニル、２−フェニル−２−プロピルオキシカルボニル、α−２，４，５−テトラメチルベンジルオキシカルボニル、ｐ−トルエンスルホニル、キサンテニル、ベンジルエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、ｐ−ニトロベンジルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、フェニルエステル、ｐ−ニトロカーボネート、ｐ−ニトロベンジルカーボネート、トリメチルシリルおよびペンタクロロフェニルエステルが含まれる。
【００６３】
「活性化エステル」という用語は、本明細書で使用される場合、カルボン酸のアルキルエステルを指し、ここでアルキルは、アミノ基を有する分子による求核攻撃に対してカルボニルを感受性にする良好な脱離基である。従って、活性化エステルはアミノリシスを受けやすく、アミンと反応してアミドを形成する。活性化エステルは、カルボン酸エステル基−ＣＯ２Ｒ（式中、Ｒは脱離基である）を含有する。
【００６４】
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、およびシクロアルキル置換アルキル基を含む、飽和脂肪族基のラジカルを指す。
【００６５】
いくつかの実施形態では、直鎖または分枝鎖アルキルは、３０個以下（例えば、直鎖の場合はＣ１〜Ｃ３０、分枝鎖の場合はＣ３〜Ｃ３０）、２０個以下、１２個以下、または７個以下の炭素原子をその骨格中に有する。同様に、いくつかの実施形態では、シクロアルキルは、３〜１０個の炭素原子をその環構造内に有し、例えば、５、６または７個の炭素を環構造内に有する。明細書、実施例、および特許請求の範囲を通して使用される「アルキル」（または「低級アルキル」）という用語は、「非置換アルキル」および「置換アルキル」の両方を含むことが意図され、後者は、炭化水素骨格の１つまたは複数の炭素上の水素を置き換える１つまたは複数の置換基を有するアルキル部分を指す。このような置換基には、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（例えば、カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミル、またはアシルなど）、チオカルボニル（例えば、チオエステル、チオアセタート、またはチオホルマートなど）、アルコキシル、ホスホリル、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分が含まれるが、これらに限定されない。
【００６６】
炭素の数が他に特定されない限り、「低級アルキル」は、本明細書で使用される場合、上記で定義される通りであるが、その骨格構造内に１〜１０個の炭素、または１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。同様に、「低級アルケニル」および「低級アルキニル」は、同様の鎖長を有する。いくつかの実施形態では、アルキル基は低級アルキルである。いくつかの実施形態では、本明細書でアルキルとして指定される置換基は低級アルキルである。
【００６７】
炭化水素鎖上の置換された部分は、適切であれば、それ自体が置換され得ることは、当業者により理解されるであろう。例えば、置換アルキルの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、チオール、アミノ、アジド、イミノ、アミド、ホスホリル（ホスホネートおよびホスフィネートを含む）、スルホニル（スルフェート、スルホンアミド、スルファモイルおよびスルホネートを含む）、およびシリル基、ならびにエーテル、アルキルチオ、カルボニル（ケトン、アルデヒド、カルボキシレート、およびエステルを含む）、−ＣＦ３、−ＣＮなどを含み得る。シクロアルキルは、同様にして置換され得る。
【００６８】
「ヘテロアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、少なくとも１つのヘテロ原子を含有する、直鎖または分枝鎖、または環状の炭素含有ラジカル、またはこれらの組み合わせを指す。適切なヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、Ｓｉ、Ｐ、Ｓｅ、Ｂ、およびＳを含むがこれらに限定されず、リンおよび硫黄原子は任意選択的に酸化され、窒素ヘテロ原子は任意選択的に４級化される。ヘテロアルキルは、アルキル基について上記で定義されるように置換され得る。
【００６９】
「アルキルチオ」という用語は、硫黄ラジカルが結合された、上記で定義されるようなアルキル基を指す。いくつかの実施形態では、「アルキルチオ」部分は、−Ｓ−アルキル、−Ｓ−アルケニル、および−Ｓ−アルキニルのうちの１つで表される。代表的なアルキルチオ基は、メチルチオおよびエチルチオを含む。「アルキルチオ」という用語は、シクロアルキル基、アルケンおよびシクロアルケン基、ならびにアルキン基も包含する。「アリールチオ」は、アリールまたはヘテロアリール基を指す。アルキルチオ基は、アルキル基について上記で定義されるように置換され得る。
【００７０】
「アルケニル」および「アルキニル」という用語は、長さおよび可能な置換が上記のアルキルと類似しているが、それぞれ、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含有する不飽和脂肪族基を指す。
【００７１】
「アルコキシル」または「アルコキシ」という用語は、本明細書で使用される場合、酸素ラジカルが結合された、上記で定義されるようなアルキル基を指す。代表的なアルコキシル基は、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、およびｔｅｒｔ−ブトキシを含む。「エーテル」は、酸素によって共有結合された２つの炭化水素である。従って、アルキルをエーテルにするアルキルの置換基はアルコキシルであるか、あるいはアルコキシルに似ており、例えば、−Ｏ−アルキル、−Ｏ−アルケニル、および−Ｏ−アルキニルのうちの１つによって表すことができる。アロキシは−Ｏ−アリールまたはＯ−ヘテロアリールで表すことができ、アリールおよびヘテロアリールは以下で定義される通りである。アルコキシおよびアロキシ基は、アルキルについて上記で記載されるように置換することができる。
【００７２】
「アミン」および「アミノ」という用語は当該技術分野において認識されており、非置換および置換アミンの両方、例えば、一般式：
【００７３】
【化５】
2018519283.tif 000007
【００７４】
（式中、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ’１０はそれぞれ独立して、水素、アルキル、アルケニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８を表すか、あるいはＲ９およびＲ１０は、これらが結合されるＮ原子と一緒に、４〜８個の原子を環構造内に有する複素環を完成させ；Ｒ８は、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、複素環または多環を表し；ｍは、ゼロまたは１〜８の範囲の整数である）
で表すことができる部分を指す。いくつかの実施形態では、Ｒ９またはＲ１０のうちの１つだけがカルボニルであることが可能であり、例えば、Ｒ９、Ｒ１０および窒素は一緒にイミドを形成しない。さらに他の実施形態では、「アミン」という用語はアミドを包含せず、例えば、Ｒ９およびＲ１０のうちの１つはカルボニルを表す。付加的な実施形態では、Ｒ９およびＲ１０（およびＲ’１０）はそれぞれ独立して、水素、アルキルもしくはシクロアルキル、アルケニルもしくはシクロアルケニル、またはアルキニルを表す。従って、「アルキルアミン」という用語は、本明細書で使用される場合、置換（アルキルについて上記に記載したように）または非置換アルキルが結合された、上記で定義されるようなアミン基を意味し、すなわち、Ｒ９およびＲ１０の少なくとも１つはアルキル基である。
【００７５】
「アミド」という用語は当該技術分野においてアミノ置換カルボニルと認識されており、一般式：
【００７６】
【化６】
2018519283.tif 000008
【００７７】
（式中、Ｒ９およびＲ１０は、上記で定義される通りである）
で表すことができる部分を含む。
「アリール」は、本明細書で使用される場合、Ｃ５〜Ｃ１０員芳香族、複素環式、縮合芳香族、縮合複素環式、二芳香族、または二複素環式環系を指す。広範に定義すると、「アリール」は、本明細書で使用される場合、０〜４個のへテロ原子を含み得る５員、６員、７員、８員、９員、および１０員単環芳香族基、例えば、ベンゼン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、トリアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジンおよびピリミジンなどを含む。へテロ原子を環構造内に有するアリール基は、「アリール複素環」または「ヘテロ芳香族」と呼ぶこともできる。芳香族環は、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ（または４級化アミノ）、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホネート、ホスフィネート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮ、ならびにおよびこれらの組み合わせを含むがこれらに限定されない１つまたは複数の置換基によって、１つまたは複数の環位置で置換され得る。
【００７８】
「アリール」という用語は、２つ以上の炭素が２つの隣接する環に共通している２つ以上の環式環（すなわち、「縮合環」）を有する多環式環系も含み、環の少なくとも１つは芳香族であり、例えば、他の環式環（単数または複数）は、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリールおよび／または複素環であり得る。複素環式環の例としては、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾテトラゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイミダゾリニル、カルバゾリル、４ａＨカルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、２Ｈ，６Ｈ−１，５，２−ジチアジニル、ジヒドロフロ［２，３ｂ］テトラヒドロフラン、フラニル、フラザニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、３Ｈ−インドリル、イサチノイル（ｉｓａｔｉｎｏｙｌ）、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドリニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、メチレンジオキシフェニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリル、オキシンドリル、ピリミジニル、フェナントリジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、４−ピペリドニル、ピペロニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドオキサゾール、ピリドイミダゾール、ピリドチアゾール、ピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、４Ｈ−キノリジニル、キノキサリニル、キヌクリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、６Ｈ−１，２，５−チアジアジニル、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、チアントレニル（ｔｈｉａｎｔｈｒｅｎｙｌ）、チアゾリル、チエニル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チオフェニルおよびキサンテニルが挙げられるが、これらに限定されない。環のうちの１つまたは複数は、「アリール」について上記で定義されたように置換され得る。
【００７９】
「アラルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、アリール基（例えば、芳香族またはヘテロ芳香族基）によって置換されたアルキル基を指す。
「炭素環」という用語は、本明細書で使用される場合、環の各原子が炭素である芳香族または非芳香族環を指す。
【００８０】
「複素環」または「複素環式」は、本明細書で使用される場合、炭素と、非過酸化物の酸素、硫黄、およびＮ（Ｙ）（式中、Ｙは存在しないか、あるいはＨ、Ｏ、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、フェニルまたはベンジルである）からなる群からそれぞれ選択される１〜４個のへテロ原子とからなり、１〜３個の二重結合を任意選択的に含有し、１つまたは複数の置換基によって任意選択的に置換された、３〜１０個の環原子、例えば、５〜６個の環原子を含有する単環式または二環式環の環炭素または環窒素によって結合された環状ラジカルを指す。複素環式環の例としては、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾテトラゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイミダゾリニル、カルバゾリル、４ａＨ−カルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、２Ｈ，６Ｈ−１，５，２−ジチアジニル、ジヒドロフロ［２，３−ｂ］テトラヒドロフラン、フラニル、フラザニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、３Ｈ−インドリル、イサチノイル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドリニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、メチレンジオキシフェニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリル、オキセパニル（ｏｘｅｐａｎｙｌ）、オキセタニル、オキシンドリル、ピリミジニル、フェナントリジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、４−ピペリドニル、ピペロニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドオキサゾール、ピリドイミダゾール、ピリドチアゾール、ピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、４Ｈ−キノリジニル、キノキサリニル、キヌクリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、６Ｈ−１，２，５−チアジアジニル、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、チアントレニル、チアゾリル、チエニル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チオフェニルおよびキサンテニルが挙げられるが、これらに限定されない。複素環式基は、任意選択的に、アルキルおよびアリールについて上記で定義されるように１つまたは複数の位置において１つまたは複数の置換基、例えば、ハロゲン、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、および−ＣＮによって置換され得る。
【００８１】
「カルボニル」という用語は当該技術分野において認識されており、一般式：
【００８２】
【化７】
2018519283.tif 000009
【００８３】
（式中、Ｘは結合であるか、あるいは酸素または硫黄を表し、Ｒ１１は、水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、またはアルキニルを表し、Ｒ’１１は、水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、またはアルキニルを表す）
で表すことができるような部分を含む。Ｘが酸素であり、かつＲ１１またはＲ’１１が水素でない場合、式は「エステル」を表す。Ｘが酸素であり、かつＲ１１が上記で定義される通りである場合、この部分は本明細書ではカルボキシル基と呼ばれ、特に、Ｒ１１が水素である場合、式は「カルボン酸」を表す。Ｘが酸素であり、かつＲ’１１が水素である場合、式は「ホルマート」を表す。一般に、上記の式の酸素原子が硫黄によって置換される場合、式は「チオカルボニル」基を表す。Ｘが硫黄であり、かつＲ１１またはＲ’１１が水素でない場合、式は「チオエステル」を表す。Ｘが硫黄であり、かつＲ１１が水素である場合、式は「チオカルボン酸」を表す。Ｘが硫黄であり、かつＲ’１１が水素である場合、式は「チオホルマート」を表す。他方で、Ｘが結合であり、かつＲ１１が水素でない場合、上記の式は「ケトン」基を表す。Ｘが結合であり、かつＲ１１が水素である場合、上記の式は「アルデヒド」基を表す。
【００８４】
「モノエステル」という用語は、本明細書で使用される場合、カルボン酸の一方がエステルとして官能基化されており、他方のカルボン酸が遊離カルボン酸またはカルボン酸の塩であるジカルボン酸の類似体を指す。モノエステルの例としては、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、スベリン酸、セバシン酸、アゼライン酸、シュウ酸およびマレイン酸のモノエステルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８５】
「ヘテロ原子」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素または水素以外の任意の元素の原子を意味する。へテロ原子の例は、ホウ素、窒素、酸素、リン、硫黄およびセレンである。他の有用なヘテロ原子には、ケイ素およびヒ素が含まれる。
【００８６】
本明細書で使用される場合、「ニトロ」という用語は−ＮＯ２を意味し、「ハロゲン」という用語は−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉを示し、「スルフヒドリル」という用語は−ＳＨを意味し、「ヒドロキシル」という用語は−ＯＨを意味し、そして「スルホニル」という用語は、−ＳＯ２−を意味する。
【００８７】
「置換された」という用語は、本明細書で使用される場合、本明細書に記載される化合物の許容可能な全ての置換基を指す。最も広い意味では、許容可能な置換基は、非環式および環式、分枝状および非分枝状、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族の有機化合物の置換基を含む。実例となる置換基は、ハロゲン、ヒドロキシル基、または任意の数の炭素原子、例えば、１〜１４個の炭素原子を含有する任意の他の有機群を含むがこれらに限定されず、任意選択的に、線状、分枝状、または環状の構造型式における酸素、硫黄、または窒素群などの１つまたは複数のへテロ原子を含む。代表的な置換基としては、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ、置換アロキシ、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ３〜Ｃ２０環式、置換Ｃ３〜Ｃ２０環式、複素環式、置換複素環式、アミノ酸、ペプチド、およびポリペプチド基が挙げられる。
【００８８】
窒素などのへテロ原子は、水素置換基、および／またはヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載される有機化合物の任意の許容可能な置換基を有し得る。「置換」または「置換された」は、このような置換が、置換された原子および置換基の許容可能な原子価に従うものであり、そして置換が、安定な化合物、すなわち、例えば転位、環化、または脱離による転換を自然発症的に受けない化合物をもたらすという暗黙の条件を含むことが理解される。
【００８９】
広範な態様では、許容可能な置換基は、非環式および環式、分枝状および非分枝状、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族の有機化合物の置換基を含む。実例となる置換基には、例えば、本明細書に記載されるものが含まれる。許容可能な置換基は、適切な有機化合物に対して１つまたは複数でよく、同一でも異なっていてもよい。窒素などのへテロ原子は、水素置換基、および／またはヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載される有機化合物の任意の許容可能な置換基を有し得る。
【００９０】
種々の実施形態では、置換基は、アルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバメート、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシル、ケトン、ニトロ、ホスフェート、スルフィド、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、およびチオケトンから選択され、これらはそれぞれ、１つまたは複数の適切な置換基によって任意選択的に置換される。いくつかの実施形態では、置換基は、アルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバメート、カルボキシ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ケトン、ホスフェート、スルフィド、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、およびチオケトンから選択され、ここで、アルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバメート、カルボキシ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ケトン、ホスフェート、スルフィド、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、およびチオケトンのそれぞれは、１つまたは複数の適切な置換基によってさらに置換され得る。
【００９１】
置換基の例としては、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホネート、ホスフィナート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、チオケトン、エステル、ヘテロシクリル、−ＣＮ、アリール、アリールオキシ、ペルハロアルコキシ、アラルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアラルコキシ、アジド、アルキルチオ、オキソ、アシルアルキル、カルボキシエステル、カルボキサミド、アシルオキシ、アミノアルキル、アルキルアミノアリール、アルキルアリール、アルキルアミノアルキル、アルコキシアリール、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アルキルスルホニル、カルボキサミドアルキルアリール、カルボキサミドアリール、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アルキルアミノアルキルカルボキシ、アミノカルボキサミドアルキル、シアノ、アルコキシアルキル、ペルハロアルキル、アリールアルキルオキシアルキルなどが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、置換基は、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、およびニトロから選択される。
【００９２】
「コポリマー」という用語は、本明細書で使用される場合、一般的に、２つ以上の異なるモノマーで構成された単一の高分子材料を指す。コポリマーは、任意の形態（例えば、ランダム、ブロック、またはグラフト）を有することができる。コポリマーは、キャップされた末端基または酸末端基を含む任意の末端基を有することができる。
【００９３】
「ナノ粒子」という用語は、本明細書で使用される場合、１マイクロメートル未満の平均直径または粒径を有する粒子を指す。
「平均粒径」という用語は、本明細書で使用される場合、一般的に、組成物中の粒子の統計的平均粒径（直径）を指す。本質的に球形の粒子の直径は、物理的または流体力学的直径と称され得る。非球形粒子の直径は、流体力学的直径を指すこともある。本明細書で使用される場合、非球形粒子の直径は、粒子の表面上の２つの点の間の最大直線距離を指すこともある。平均粒径または直径は、動的光散乱などの技術分野において知られている方法を用いて測定することができる。粒子の第１の集団の統計的平均粒径が粒子の第２の集団の統計的平均粒径の２０％以内、例えば、１５％以内、または１０％以内である場合に、２つの集団は「実質的に同等の平均粒径」を有すると言うことができる。
【００９４】
「単分散」および「均一なサイズ分布」という用語は、本明細書において互換的に使用される場合、全てが同じまたはほぼ同じサイズを有する、粒子、マイクロ粒子、またはナノ粒子の集団を表す。本明細書で使用される場合、単分散分布は、分布の９０％が平均粒径の５％以内に入る粒子分布を指す。
【００９５】
「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」という用語は、一般的に、アミノ酸残基のポリマーを指す。本明細書で使用される場合、この用語は、１つまたは複数のアミノ酸が、対応する天然に存在するアミノ酸の化学的な類似体または修飾された誘導体であるか、あるいは非天然アミノ酸であるアミノ酸ポリマーにも適用される。「タンパク質」という用語は、本明細書において一般的に使用される場合、ペプチド結合によって互いに連結されてポリペプチドが形成されたアミノ酸のポリマーを指し、その鎖長は３次および／または４次構造を生じるのに十分である。小ペプチドはタンパク質と考えるために必要とされる不可欠な高次構造が欠けているので、「タンパク質」という用語は、定義により小ペプチドを除外する。
【００９６】
「抗体」という用語はＹ形状のタンパク質である免疫グロブリンを指し、これは、抗原または標的を特定してそれに結合する役割を果たす。全ての異なる抗体は、特定の抗原を認識する。「抗体模倣物」という用語は、抗体のように抗原に特異的に結合する役割を果たすが抗体ではない任意の分子を指す。これらは、人工の（ａｒｔｉｃｉｆｉａｌ）ペプチドまたはタンパク質（例えば、抗体断片、融合タンパク質）、核酸、または小分子であり得る。
【００９７】
「糖タンパク質」または「糖ペプチド」という用語は、一般的に、ポリペプチド鎖に共有結合した炭水化物基（グリカン）を含有するタンパク質を指す。
「炭水化物」という用語は、単糖、二糖、オリゴ糖、多糖、またはこれらの混合物を指す。単糖は、テトロース、ペントース、ヘキソース、およびケトヘキソースを含む。
【００９８】
「脂質」という用語は、脂肪、ワックス、ステロール、脂溶性ビタミン、脂肪酸、例えば、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、およびリン脂質などを含む、天然に存在する分子または合成分子の群を指す。これらは、疎水性または両親媒性であり得る。
【００９９】
「核酸」、「ポリヌクレオチド」、および「オリゴヌクレオチド」という用語は、互換的に使用されて、線状または環状構造で、かつ一本鎖または二本鎖のいずれかの形態のデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチドポリマーを指す。これらの用語は、ポリマーの長さに関する限定であると解釈されてはならない。これらの用語は、天然ヌクレオチドの既知の類似体、ならびに塩基、糖および／またはリン酸部分（例えば、ホスホロチオエート骨格）が修飾されたヌクレオチドを包含することができる。一般に、そして他に規定されない限り、特定のヌクレオチドの類似体は、同じ塩基対形成特異性を有し、すなわち、Ａの類似体は、Ｔと塩基対を形成するであろう。「核酸」という用語は、少なくとも２つの塩基−糖−リン酸モノマー単位のストリングを指す専門用語である。ヌクレオチドは、核酸ポリマーのモノマー単位である。この用語は、メッセンジャーＲＮＡ、アンチセンス、プラスミドＤＮＡ、プラスミドＤＮＡの部分、またはウィルス由来の遺伝子材料の形態のデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）およびリボ核酸（ＲＮＡ）を含む。アンチセンス核酸は、ＤＮＡおよび／またはＲＮＡ配列の発現に干渉するポリヌクレオチドである。核酸という用語は、少なくとも２つの塩基−糖−リン酸の組み合わせのストリングを指す。天然核酸はリン酸骨格を有する。人工核酸は他のタイプの骨格を含有し得るが、天然核酸と同じ塩基を含有する。この用語は、ＰＮＡ（ペプチド核酸）、ホスホロチオエート、および天然核酸のリン酸骨格の他の変異体も含む。
【０１００】
タンパク質、ポリペプチドまたは核酸の「機能性断片」は、その配列が全長タンパク質、ポリペプチドまたは核酸と同一ではないが、全長タンパク質、ポリペプチドまたは核酸としての少なくとも１つの機能を保持するタンパク質、ポリペプチドまたは核酸である。機能性断片は、対応する天然分子よりも多い、それよりも少ない、あるいはそれと同じ数の残基を有することができ、そして／あるいは、１つまたは複数のアミノ酸またはヌクレオチド置換を含有することができる。核酸の機能（例えば、コーディング機能、別の核酸とハイブリッド形成す能力）を決定するための方法は、当該技術分野において周知である。同様に、タンパク質の機能を決定するための方法もよく知られている。例えば、ポリペプチドのＤＮＡ結合機能は、例えば、フィルタ結合アッセイ、電気泳動移動度シフトアッセイ、または免疫沈降アッセイによって決定することができる。ＤＮＡ切断は、ゲル電気泳動によってアッセイすることができる。タンパク質が別のタンパク質と相互作用する能力は、例えば、共免疫沈降、ツーハイブリッドアッセイまたは相補性（例えば、遺伝的または生化学的）によって決定することができる。例えば、フィールズ（Ｆｉｅｌｄｓ）ら著（１９８９年）、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、第３４０巻、ｐ２４５〜２４６；米国特許第５，５８５，２４５号明細書およびＰＣＴ国際公開第９８／４４３５０号を参照されたい。
【０１０１】
本明細書で使用される場合、「リンカー」という用語は、へテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄など）を含有することができる炭素鎖を指し、これは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０個の原子の長さであり得る。リンカーは、水素原子、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、ハロゲン、アリール、複素環式、芳香族複素環式、シアノ、アミド、カルバモイル、カルボン酸、エステル、チオエーテル、アルキルチオエーテル、チオール、およびウレイド基を含むがこれらに限定されない種々の置換基によって置換され得る。当業者は、これらの基のそれぞれが順次置換され得ることを認識するであろう。リンカーの例としては、ｐＨ感受性リンカー、プロテアーゼ切断可能なペプチドリンカー、ヌクレアーゼ感受性核酸リンカー、リパーゼ感受性脂質リンカー、グリコシダーゼ感受性炭水化物リンカー、低酸素感受性リンカー、光切断可能なリンカー、熱不安定な性リンカー、酵素切断可能なリンカー（例えば、エステラーゼ切断可能なリンカー）、超音波感受性リンカー、およびＸ線切断可能なリンカーが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０２】
「薬学的に許容可能な対イオン」という用語は、薬学的に許容可能なアニオンまたはカチオンを指す。種々の実施形態では、薬学的に許容可能な対イオンは、薬学的に許容可能なイオンである。例えば、薬学的に許容可能な対イオンは、クエン酸イオン、リンゴ酸イオン、酢酸イオン、シュウ酸イオン、塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、硝酸イオン、硫酸イオン、重硫酸イオン、リン酸イオン、酸性リン酸イオン（ａｃｉｄ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、イソニコチン酸イオン、酢酸イオン、乳酸イオン、サリチル酸イオン、酒石酸イオン、オレイン酸イオン、タンニン酸イオン、パントテン酸イオン、重酒石酸イオン、アスコルビン酸イオン、コハク酸イオン、マレイン酸イオン、ゲンチジン酸イオン、フマル酸イオン、グルコン酸イオン、グルカロン酸イオン（ｇｌｕｃａｒｏｎａｔｅ）、糖酸イオン、ギ酸イオン、安息香酸イオン、グルタミン酸イオン、メタンスルホン酸イオン、エタンスルホン酸イオン、ベンゼンスルホン酸イオン、ｐ−トルエンスルホン酸イオンおよびパモ酸イオン（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸）イオン）から選択される。いくつかの実施形態では、薬学的に許容可能な対イオンは、塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、硝酸イオン、硫酸イオン、重硫酸イオン、リン酸イオン、酸性リン酸イオン、クエン酸イオン、リンゴ酸イオン、酢酸イオン、シュウ酸イオン、酢酸イオン、および乳酸イオンから選択される。特定の実施形態では、薬学的に許容可能な対イオンは、塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、硝酸イオン、硫酸イオン、重硫酸イオン、およびリン酸イオンから選択される。
【０１０３】
「薬学的に許容可能な塩」という用語は、本組成物において使用される化合物中に存在し得る酸性または塩基性基の塩を指す。本来塩基性である、本組成物中に含まれる化合物は、種々の無機酸および有機酸と共に様々な塩を形成することができる。このような塩基性化合物の薬学的に許容可能な酸付加塩を調製するために使用され得る酸は、硫酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩（ａｃｉｄ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩（ｇｌｕｃａｒｏｎａｔｅ）、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸）塩）を含むがこれらに限定されない、非毒性の酸付加塩、すなわち薬理学的に許容可能なアニオンを含有する塩を形成するものである。アミノ部分を含む、本組成物中に含まれる化合物は、上述の酸に加えて、種々のアミノ酸と共に薬学的に許容可能な塩を形成し得る。本来酸性である、本組成物中に含まれる化合物は、種々の薬理学的に許容可能なカチオンと共に塩基塩を形成することができる。このような塩の例としては、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、特に、カルシウム塩、マグネシウム塩、ナトリウム塩、リチウム塩、亜鉛塩、カリウム塩、および鉄塩が挙げられる。
【０１０４】
本明細書に記載される化合物が酸付加塩として得られる場合、遊離塩基は、酸性塩の溶液を塩基性にすることによって得ることができる。逆に、生成物が遊離塩基である場合、付加塩、特に薬学的に許容可能な付加塩は、塩基化合物から酸付加塩を調製するための従来の手順に従って、遊離塩基を適切な有機溶媒中に溶解させ、溶液を酸で処理することによって生成され得る。当業者は、非毒性の薬学的に許容可能な付加塩を調製するために使用され得る種々の合成方法論を認識するであろう。
【０１０５】
薬学的に許容可能な塩は、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、２，２−ジクロロ酢酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、２−オキソグルタル酸、４−アセトアミド安息香酸、４−アミノサリチル酸、酢酸、アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウ酸、カンファー−１０−スルホン酸、カプリン酸（デカン酸）、カプロン酸（ヘキサン酸）、カプリル酸（オクタン酸）、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、プロプリオン酸（ｐｒｏｐｒｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、ピログルタミン酸、サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、およびウンデシレン酸から選択される酸から誘導することができる。
【０１０６】
「生体利用可能」という用語は当該技術分野において認識されており、主題の発明、または投与された量の一部が、それを投与する対象または患者により吸収され、取り込まれ、あるいは他の形で生理学的に利用可能であることを可能にする主題の発明の形態を指す。
【０１０７】
ＩＩ．コンジュゲート
コンジュゲートは、本明細書で使用される場合、リンカーによって標的化部分に結合された活性剤またはそのプロドラッグを含む化合物を指す。コンジュゲートは、単一の活性剤と単一の標的化部分との間のコンジュゲート、例えば、構造Ｘ−Ｙ−Ｚ（式中、Ｘは標的化部分であり、Ｙはリンカーであり、Ｚは活性剤である）を有するコンジュゲートであり得る。標的化部分は、ＳＳＴＲに結合することができる分子、すなわちＳＳＴＲ標的化部分であり得る。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、２つ以上の標的化部分、２つ以上のリンカー、２つ以上の活性剤、またはこれらの任意の組み合わせを含有する。コンジュゲートは、任意の数の標的化部分、リンカー、および活性剤を有することができる。コンジュゲートは、構造Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｙ−Ｘ、（Ｘ−Ｙ）ｎ−Ｚ、Ｘ−（Ｙ−Ｚ）ｎ、Ｘ−Ｙ−Ｚｎ、（Ｘ−Ｙ−Ｚ）ｎ、（Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｙ）ｎ−Ｚを有することができ、ここで、Ｘは標的化部分であり、Ｙはリンカーであり、Ｚは活性剤であり、ｎは、１〜５０の間、２〜２０の間、例えば１〜５の間の整数である。Ｘ、Ｙ、およびＺの各出現は同じであっても異なっていてもよく、例えば、コンジュゲートは、２つ以上のタイプの標的化部分、２つ以上のタイプのリンカー、および／または２つ以上のタイプの活性剤を含有することができる。
【０１０９】
コンジュゲートは、単一の活性剤に結合された２つ以上の標的化部分を含有することができる。例えば、コンジュゲートは、それぞれ異なるリンカーによって結合された複数の標的化部分を有する活性剤を含むことができる。コンジュゲートは構造Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｙ−Ｘを有することができ、ここで、各Ｘは、同じであっても異なっていてもよい標的化部分であり、各Ｙは、同じであっても異なっていてもよいリンカーであり、Ｚは活性剤である。
【０１１０】
コンジュゲートは、単一の標的化部分に結合された２つ以上の活性剤を含有することができる。例えば、コンジュゲートは、それぞれ異なるリンカーによって結合された複数の活性剤を有する標的化部分を含むことができる。コンジュゲートは構造Ｚ−Ｙ−Ｘ−Ｙ−Ｚを有することができ、ここで、Ｘは標的化部分であり、各Ｙは、同じであっても異なっていてもよいリンカーであり、各Ｚは、同じであっても異なっていてもよい活性剤である。
【０１１１】
Ａ．活性剤
本明細書に記載されるコンジュゲートは、少なくとも１つの活性剤（第１の活性剤）を含有する。コンジュゲートは、第１の活性剤と同じまたは異なり得る２つ以上の活性剤、を含有することができる。活性剤は、治療薬、予防薬、診断薬、または栄養剤であり得る。様々な活性剤が当該技術分野において知られており、本明細書に記載されるコンジュゲートにおいて使用され得る。活性剤は、タンパク質もしくはペプチド、小分子、核酸もしくは核酸分子、脂質、糖、糖脂質、糖タンパク質、リポタンパク質、またはこれらの組み合わせであり得る。いくつかの実施形態では、活性剤は、抗原、アジュバント、放射性薬剤、造影剤（例えば、蛍光部分）、またはポリヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、活性剤は有機金属化合物である。
【０１１２】
抗癌剤
活性剤は癌治療薬であり得る。癌治療薬には、例えば、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）、またはＦａｓリガンド、または細胞死受容体に結合するかこれを活性化する、あるいは他の形でアポトーシスを誘導する任意のリガンドもしくは抗体などの細胞死受容体アゴニストが含まれる。適切な細胞死受容体は、ＴＮＦＲ１、Ｆａｓ、ＤＲ３、ＤＲ４、ＤＲ５、ＤＲ６、ＬＴβＲ、およびこれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない。
【０１１３】
化学療法剤、サイトカイン、ケモカイン、および放射線療法剤などの癌治療薬を活性剤として使用することができる。化学療法剤には、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗薬、アントラサイクリン、植物性アルカロイド、トポイソメラーゼ阻害薬、および他の抗腫瘍薬が含まれる。このような薬剤は、通常、細胞分裂またはＤＮＡ合成および機能に影響を及ぼす。活性剤として使用することができる治療薬の付加的な例としては、特定のタイプの癌（例えば、慢性骨髄性白血病、消化管間質腫瘍）における分子異常を直接標的とするモノクローナル抗体およびチロシンキナーゼ阻害薬、例えば、メシル酸イマチニブが挙げられる。
【０１１４】
化学療法剤には、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロランブシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、タキソールおよびその誘導体、イリノテカン、トポテカン、アムサクリン、エトポシド、リン酸エトポシド、テニポシド、エピポドフィロトキシン、トラスツズマブ、セツキシマブ、およびリツキシマブ、ベバシズマブ、ならびにこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。これらはいずれも、コンジュゲートにおける活性剤として使用され得る。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、活性剤は、２０−ｅｐｉ−１，２５ジヒドロキシビタミンＤ３、４−イポメアノール、５−エチニルウラシル、９−ジヒドロタキソール、アビラテロン、アシビシン、アクラルビシン、アコダゾール塩酸塩、アクロニン、アシルフルベン、アデシペノール、アドゼレシン、アルデスロイキン、ａｌｌ−ｔｋアンタゴニスト、アルトレタミン、アンバムスチン、アンボマイシン、酢酸アメタントロン、アミドックス、アミホスチン、アミノグルテチミド、アミノレブリン酸、アムルビシン、アムサクリン、アナグレリド、アナストロゾール、アンドログラホリド、血管新生阻害薬、アンタゴニストＤ、アンタゴニストＧ、アンタレリックス、アントラマイシン、抗背側化形態形成タンパク質（ａｎｔｉ−ｄｏｒｓａｌｉｚｉｎｇ）形態形成タンパク質−１、抗エストロゲン剤、アンチネオプラストン、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アフィジコリングリシナート、アポトーシス遺伝子モジュレータ、アポトーシスレギュレータ、アプリン酸、ＡＲＡ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ、アルギニンデアミナーゼ、アスパラギナーゼ、アスペルリン、アスラクリン、アタメスタン、アトリムスチン、アキシナスタチン１、アキシナスタチン２、アキシナスタチン３、アザシチジン、アザセトロン、アザトキシン、アザチロシン、アゼテパ、アゾトマイシン、バッカチンＩＩＩ誘導体、バラノール、バチマスタット、ベンゾクロリン、ベンゾデパ、ベンゾイルスタウロスポリン、ベータラクタム誘導体、ベータ−アレチン、ベタクラマイシンＢ、ベツリン酸、ＢＦＧＦ阻害薬、ビカルタミド、ビサントレン、ビサントレン塩酸塩、ビスアジリジニルスペルミン（ｂｉｓａｚｉｒｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）、ビスナフィド、ビスナフィドジメシラート、ビストラテンＡ、ビゼレシン、ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、ＢＲＣ／ＡＢＬアンタゴニスト、ブレフレート（ｂｒｅｆｌａｔｅ）、ブレキナルナトリウム、ブロピリミン、ブドチタン、ブスルファン、ブチオニンスルホキシミン、カバジタキセル、カクチノマイシン、カルシポトリオール、カルホスチンＣ、カルステロン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体、カナリアポックスＩＬ−２、カペシタビン、カラセミド、カルベチマー、カルボプラチン、カルボキサミド−アミノ−トリアゾール、カルボキシアミドトリアゾール、カレスト（ｃａｒｅｓｔ）Ｍ３、カルムスチン、アーン（ｅａｒｎ）７００、軟骨由来阻害薬、カルビシン塩酸塩、カルゼレシン、カゼインキナーゼ阻害薬、カスタノスペルミン、セクロピンＢ、セデフィンゴール、セトロレリクス、クロラムブシル、クロリン、クロロキノキサリンスルホンアミド、シカプロスト、シロレマイシン、シスプラチン、シス−ポルフィリン、クラドリビン、クロミフェン類似体、クロトリマゾール、コリスマイシンＡ、コリスマイシンＢ、コンブレタスタチンＡ４、コンブレタスタチン類似体、コナゲニン、クランベスシジン（ｃｒａｍｂｅｓｃｉｄｉｎ）８１６、クリスナトール、メシル酸クリスナトール、クリプトフィシン８、クリプトフィシンＡ誘導体、クラシンＡ、シクロペンタアントラキノン、シクロホスファミド、シクロプラタム、シペマイシン、シタラビン、シタラビンオクホスフェート、細胞溶解因子、シトスタチン、ダカルバジン、ダクリキシマブ（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン塩酸塩、デシタビン、デヒドロジデムニンＢ、デスロレリン、デキシホスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、デキソルマプラチン、デクスラゾキサン、デクスベラパミル、デザグアニン、デザグアニンメシレート、ジアジコン、ジデムニンＢ、ジドックス、ジエチルノルスペルミン、ジヒドロ−５−アザシチジン、ジオキサマイシン、ジフェニルスピロムスチン、ドセタキセル、ドコサノール、ドラセトロン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、ドキソルビシン塩酸塩、ドロロキシフェン、ドロロキシフェンシトラート、ドロモスタノロンプロピオナート、ドロナビノール、デュアゾマイシン（ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）、デュオカルマイシンＳＡ、エブセレン、エコムスチン、エダトレキサート、エデルホシン、エドレコロマブ、エフロルニチン、エフロルニチン塩酸塩、エレメン、エルサミトルシン、エミテフル、エンロプラチン、エンプロマート、エピプロピジン、エピルビシン、エピルビシン塩酸塩、エプリステリド、エルブロゾール、赤血球遺伝子治療ベクター系、エソルビシン塩酸塩、エストラムスチン、エストラムスチン類似体、エストラムスチンリン酸ナトリウム、エストロゲンアゴニスト、エストロゲンアンタゴニスト、エタニダゾール、エトポシド、リン酸エトポシド、エトプリン、エキセメスタン、ファドロゾール、ファドロゾール塩酸塩、ファザラビン、フェンレチニド、フィルグラスチム、フィナステリド、フラボピリドール、フレゼラスチン、フロクスウリジン、フルアステロン、フルダラビン、リン酸フルダラビン、フルオロダウノルビシン塩酸塩、フルオロウラシル、フルロシタビン、ホルフェニメクス、ホルメスタン、ホスキドン、ホストリエシン、ホストリエシンナトリウム、ホテムスチン、ガドリニウムテキサフィリン、硝酸ガリウム、ガロシタビン、ガニレリクス、ゼラチナーゼ阻害薬、ゲムシタビン、ゲムシタビン塩酸塩、グルタチオン阻害薬、ヘプスルファム、ヘレグリン、ヘキサメチレンビスアセトアミド、ヒドロキシ尿素、ヒペリシン、イバンドロン酸、イダルビシン、イダルビシン塩酸塩、イドキシフェン、イドラマントン、イホスファミド、イルモホシン、イロマスタット、イミダゾアクリドン、イミキモド、免疫賦活薬ペプチド、インスリン様成長因子−１受容体阻害薬、インターフェロンアゴニスト、インターフェロンアルファ−２Ａ、インターフェロンアルファ−２Ｂ、インターフェロンアルファ−Ｎｌ、インターフェロンアルファ−Ｎ３、インターフェロンベータ−ＩＡ、インターフェロンガンマ−ＩＢ、インターフェロン、インターロイキン、イオベングアン、ヨードドキソルビシン、イプロプラチン、イリノテカン、イリノテカン塩酸塩、イロプラクト、イルソグラジン、イソベンガゾール、イソホモハリコンドリンＢ、イタセトロン、ジャスプラキノリド、カハラリドＦ、ラメラリン−Ｎトリアセテート、ランレオチド、ラロタキセル、ランレオチドアセテート、レイナマイシン、レノグラスチム、硫酸レンチナン、レプトルスタチン、レトロゾール、白血病抑制因子、白血球アルファインターフェロン、ロイプロリドアセテート、ロイプロリド／エストロゲン／プロゲステロン、リュープロレリン、レバミゾール、リアロゾール、リアロゾール塩酸塩、線状ポリアミン類似体、親油性二糖ペプチド、親油性白金化合物、リッソクリナミド７、ロバプラチン、ロンブリシン、ロメトレキソール、ロメトレキソールナトリウム、ロムスチン、ロニダミン、ロソキサントロン、ロソキサントロン塩酸塩、ロバスタチン、ロキソリビン、ルルトテカン、ルテチウムテキサフィリン、リソフィリン、溶解性ペプチド、メイタンシン、マンノスタチンＡ、マリマスタット、マソプロコール、マスピン、マトリリシン阻害薬、基質メタロプロテイナーゼ阻害薬、マイタンシン、マイタンシノイド、メルタンシン（ＤＭ１）、ＤＭ４、メクロレタミン塩酸塩、酢酸メゲストロール、酢酸メレンゲステロール、メルファラン、メノガリル、メルバロン、メルカプトプリン、メテレリン、メチオニナーゼ、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、メトクロプラミド、メトプリン、メツレデパ、微細藻類タンパク質キナーゼＣ阻害薬、ＭＩＦ阻害薬、ミフェプリストン、ミルテホシン、ミリモスチム、不適正二本鎖ＲＮＡ、ミチンドミド、ミトカルシン、ミトクロミン、ミトギリン、ミトグアゾン、ミトラクトール、マイトマルシン（ｍｉｔｏｍａｌｃｉｎ）、マイトマイシン、マイトマイシン類似体、ミトナフィド、マイトスペル（ｍｉｔｏｓｐｅｒ）、ミトタン、マイトトキシン線維芽細胞成長因子−サポリン、ミトキサントロン、ミトキサントロン塩酸塩、モファロテン、モルグラモスチム、モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、モノホスホリル脂質ａ／マイコバクテリア（ｍｙｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）細胞壁ＳＫ、モピダモール、多剤耐性遺伝子阻害薬、多発性腫瘍抑制因子１に基づく治療、マスタード抗癌剤、ミカペルオキシドＢ、マイコバクテリア細胞壁抽出物、ミコフェノール酸、ミリアポロン、ｎ−アセチルジナリン、ナファレリン、ナグレスチップ、ナロキソン／ペンタゾシン、ナパビン、ナフテルピン、ナルトグラスチム、ネダプラチン、ネモルビシン、ネリドロン酸、中性エンドペプチダーゼ、ニルタミド、ニサマイシン、一酸化窒素モジュレータ、ニトロキシド抗酸化剤、ニトルリン（ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ）、ノコダゾール、ノガラマイシン、ｎ−置換ベンズアミド、０６−ベンジルグアニン、オクトレオチド、オキセノン、オリゴヌクレオチド、オナプリストン、オンダンセトロン、オラシン（ｏｒａｃｉｎ）、経口サイトカイン誘導物質、オルマプラチン、オサテロン、オキサリプラチン、オキサウノマイシン、オキシスラン、パクリタキセル、パクリタキセル類似体、パクリタキセル誘導体、パラウアミン、パルミトイルリゾキシン、パミドロン酸、パナキシトリオール、パノミフェン、パラバクチン、パゼリプチン、ペグアスパラガーゼ、ペルデシン、ペリオマイシン（ｐｅｌｉｏｍｙｃｉｎ）、ペンタムスチン、ポリ硫酸ペントサンナトリウム、ペントスタチン、ペントロゾール、硫酸ペプロマイシン、ペルフルブロン、ペルホスファミド、ペリリルアルコール、フェナジノマイシン、フェニルアセテート、ホスファターゼ阻害薬、ピシバニール、ピロカルピン塩酸塩、ピポブロマン、ピポスルファン、ピラルビシン、ピリトレキシム、ピロキサントロン塩酸塩、プラセチン（ｐｌａｃｅｔｉｎ）Ａ、プラセチンＢ、プラスミノーゲン活性化因子阻害薬、白金（ＩＶ）錯体、白金化合物、白金−トリアミン錯体、プリカマイシン、プロメスタン、ポリフィマーナトリウム、ポルフィロマイシン、プレドニムスチン、プロカルバジン塩酸塩、プロピルビス−アクリドン、プロスタグランジンＪ２、前立腺癌抗アンドロゲン薬、プロテアソーム阻害薬、プロテインＡに基づくモジュレータ、タンパク質キナーゼＣ阻害薬、タンパク質チロシンホスファターゼ阻害薬、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害薬、ピューロマイシン、ピューロマイシン塩酸塩、プルプリン、ピラゾフリン、ピラゾロアクリジン、ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレンコンジュゲート、ＲＡＦアンタゴニスト、ラルチトレキセド、ラモセトロン、ＲＡＳファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害薬、ＲＡＳ阻害薬、ＲＡＳ−ＧＡＰ阻害薬、脱メチル化レテリプチン、レニウムＲＥ１８６エチドロナート、リゾキシン、リボプリン、リボザイム、ＲＩＩレチンアミド、ＲＮＡｉ、ログレチミド、ロヒツキン、ロムルチド、ロキニメックス、ルビギノンＢｌ、ルボキシル、サフィンゴール、サフィンゴール塩酸塩、サイントピン、ＳａｒＣＮＵ、サルコフィトールＡ、サルグラモスチム、ＳＤＩ１模倣物、セムスチン、老化由来阻害薬１、センスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、シグナル伝達阻害薬、シグナル伝達モジュレータ、シムトラゼン、単鎖抗原結合タンパク質、シゾフィラン、ソブゾキサン、ナトリウムボロカプタート（ｓｏｄｉｕｍ  ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）、フェニル酢酸ナトリウム、ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）、ソマトメジン結合タンパク質、ソネルミン、スパルホサートナトリウム、スパルホス酸、スパルソマイシン、スピカマイシンＤ、スピロゲルマニウム塩酸塩、スピロムスチン、スピロプラチン、スプレノペンチン、スポンギスタチン１、スクアラミン、幹細胞阻害薬、幹細胞分裂阻害薬、スチピアミド、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ストロメリシン阻害薬、スルフィノシン、スロフェヌル、超活性血管作動性腸ペプチドアンタゴニスト、スラジスタ、スラミン、スワインソニン、合成グリコサミノグリカン、タリソマイシン、タリムスチン、タモキシフェンメチオジド、タウロムスチン、タザロテン、テコガランナトリウム、テガフール、
テルラピリリウム、テロメラーゼ阻害薬、テロキサントロン塩酸塩、テモポルフィン、テモゾロミド、テニポシド、テロキシロン、テストラクトン、テトラクロロデカオキシド、テトラゾミン、タリブラスチン、サリドマイド、チアミプリン、チオコラリン、チオグアニン、チオテパ、トロンボポエチン、トロンボポエチン模倣物、チマルファシン、チモポエチン受容体アゴニスト、チモトリナン、甲状腺刺激ホルモン、チアゾフリン、エチルエチオプルプリンスズ、チラパザミン、二塩化チタノセン、トポテカン塩酸塩、トプセンチン、トレミフェン、クエン酸トレミフェン、全能性幹細胞因子、翻訳阻害薬、酢酸トレストロン、トレチノイン、トリアセチルウリジン、トリシリビン、リン酸トリシリビン、トリメトレキサート、グルクロン酸トリメトレキサート、トリプトレリン、トロピセトロン、ツブロゾール塩酸塩、ツロステリド、チロシンキナーゼ阻害薬、チルホスチン、ＵＢＣ阻害薬、ウベニメクス、ウラシルマスタード、ウレデパ、尿生殖洞由来の成長阻害因子、ウロキナーゼ受容体アンタゴニスト、バプレオチド、バリオリンＢ、ベラレソール、ベラミン、ベルジン、ベルテポルフィン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、ビンデシン、硫酸ビンデシン、硫酸ビンエピジン、硫酸ビングリシナート、硫酸ビンロイロシン、ビノレルビン、酒石酸ビノレルビン、硫酸ビンロシジン、ビンキサルチン、硫酸ビンゾリジン、ビタキシン、ボロゾール、ザノテロン、ゼニプラチン、ジラスコルブ、ジノスタチン、ジノスタチンスチマラマー、またはゾルビシン塩酸塩であり得る。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、活性剤は、マイタンシノイド、またはその類似体、誘導体、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容可能な塩である。いくつかの実施形態では、活性剤はＤＭ１である。いくつかの実施形態では、活性剤はＤＭ４である。
【０１１７】
【化８】
2018519283.tif 000010
【０１１８】
活性剤は、１つまたは複数の金属中心を含有する無機または有機金属化合物であり得る。いくつかの例では、化合物は、１つの金属中心を含有する。活性剤は、例えば、白金化合物、ルテニウム化合物（例えば、トランス−［ＲｕＣｌ２（ＤＭＳＯ）４］、またはトランス−［ＲｕＣｌ４（イミダゾール）２など）、コバルト化合物、銅化合物、または鉄化合物であり得る。
【０１１９】
特定の実施形態では、コンジュゲートの活性剤は、コンジュゲートの構成成分のモル重量百分率の合計が１００％になるように、約１％〜約１０％、または約１０％〜約２０％、または約２０％〜約３０％、または約３０％〜約４０％、または約４０％〜約５０％、または約５０％〜約６０％、または約６０％〜約７０％、または約７０％〜約８０％、または約８０％〜約９０％、または約９０％〜約９９％の所定のモル重量百分率を含む。コンジュゲートの活性剤（単数または複数）の量は、標的化リガンド（単数または複数）に対する割合に関して表すこともできる。例えば、本教示は、約１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４；１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、または１：１０である、活性剤のリガンドに対する比を提供する。
【０１２０】
Ｂ．標的化部分
本明細書に記載される標的化リガンド（標的化部分とも称される）は、１つまたは複数のＳＳＴＲ、例えば、ヒトＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ２、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、またはＳＳＴＲ５に結合することができる任意の分子を含む。このような標的化リガンドは、ペプチド、抗体模倣物、核酸（例えば、アプタマー）、ポリペプチド（例えば、抗体）、糖タンパク質、小分子、炭水化物、または脂質であり得る。いくつかの実施形態では、標的化部分は、ソマトスタチンまたはソマトスタチン類似体である。
【０１２１】
本発明の細胞毒性または治療用のコンジュゲートは、ソマトスタチン受容体に結合する任意のソマトスタチン類似体を用いることができる。いくつかの実施形態では、コンジュゲートのソマトスタチン類似体部分は８〜１８のアミノ酸を含有し、コア配列：シクロ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ］（配列番号１）またはシクロ［Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ］（配列番号２）を含む。例えば、類似体のＣ末端はＴｈｒ−ＮＨ２である。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、標的化部分Ｘは、ソマトスタチン、オクトレオチド、Ｔｙｒ３−オクトレオテート（ＴＡＴＥ）、バプレオチド、シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）（式中、ＡＡはα−Ｎ−ＭｅリジンまたはＮ−Ｍｅグルタミン酸である）、パシレオチド、ランレオチド、セグリチド、またはソマトスタチン受容体結合リガンドの他の任意の例から選択され得る。Ｔｙｒは、アミノ酸チロシンを表す。Ｔｒｐは、アミノ酸トリプトファンを表す。ＤＴｒｐまたはＤ−Ｔｒｐは、ＴｒｐのＤアイソフォームを表す。Ｌｙｓは、アミノ酸リジンを表す。Ｔｈｒは、アミノ酸スレオニンを表す。Ｐｈｅは、アミノ酸フェニルアラニンを表す。オクトレオチドは、Ｈ２Ｎ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−オール（ジスルフィド架橋Ｃｙｓ２−Ｃｙｓ７）の配列を有する天然ソマトスタチンを模倣する環状オクタペプチドである。オクトレオテートまたはオクトレオチド酸は、Ｈ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−ＯＨ（ジスルフィド架橋Ｃｙｓ２−Ｃｙｓ７）のアミノ酸配列を有するソマトスタチン類似体であるが、オクトレオチドは、末端スレオニンが対応するアミノアルコールに還元されている。Ｔｙｒ３−オクトレオテートは、オクトレオテートの３番目のアミノ酸（Ｐｈｅ）をＴｙｒで置換することを意味する。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、標的化部分は、ソマトスタチン受容体２および／または５に結合するソマトスタチン受容体結合部分である。いくつかの実施形態では、Ｘは、Ｃ末端でリンカー部分Ｙに結合する。いくつかの実施形態では、Ｘは、Ｎ末端でリンカー部分Ｙに結合する。いくつかの実施形態では、標的化部分Ｘは少なくとも１つのＤ−Ｐｈｅ残基を含み、標的化部分ＸのＤ−Ｐｈｅ残基のフェニル環は、リンカー含有部分によって置換されている。
【０１２４】
本発明において有用なペプチドであるソマトスタチン類似体の例は、本明細書に記載されている。有用なソマトスタチン類似体のさらなる例は、以下に記載される刊行物に開示されており、これらのそれぞれは、参照によってその全体が本明細書に援用される。
ＰＣＴ出願国際公開第０３／０５７２１４号（２００３）
米国出願第２００３０１９１１３４号明細書（２００３）
米国出願第２００３００８３２４１号明細書（２００３）
米国特許第６，３１６，４１４号明細書（２００１）
ＰＣＴ出願国際公開第０２／１０２１５号（２００２）
ＰＣＴ出願国際公開第９９／２２７３５号（１９９９）
ＰＣＴ出願国際公開第９８／０８１００号（１９９８）
ＰＣＴ出願国際公開第９８／４４９２１号（１９９８）
ＰＣＴ出願国際公開第９８／４５２８５号（１９９８）
ＰＣＴ出願国際公開第９８／４４９２２号明細書（１９９８）
欧州出願第Ｐ５１６４  ＥＵ号明細書（発明者：Ｇ．ケリ（Ｇ．Ｋｅｒｉ））；
ヴァン  ビンスト，Ｇ（Ｖａｎ  Ｂｉｎｓｔ，Ｇ．）ら，ペプチド・リサーチ（Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ），１９９２，５：８；
ホルバートＡ．（Ｈｏｒｖａｔｈ，Ａ．）ら，要約，“抗腫瘍活性を有するソマトスタチン類似体の構造（Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ  Ａｎａｌｏｇｓ  Ｈａｖｉｎｇ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ”，第２２回欧州ペプチドシンポジウム（２２ｎｄ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ），９月  １３−１９，１９９２，インターライケン（Ｉｎｔｅｒｌａｋｅｎ），スイス国；
ＰＣＴ出願国際公開第９１／０９０５６号（１９９１）；
欧州出願第０  ３６３  ５８９  Ａ２号明細書（１９９０）；
米国特許第４，９０４，６４２号明細書（１９９０）；
米国特許第４，８７１，７１７号明細書（１９８９）；
米国特許第４，８５３，３７１号明細書（１９８９）；
米国特許第４，７２５，５７７号明細書（１９８８）；
米国特許第４，６８４，６２０号明細書（１９８７）；
米国特許第４，６５０，７８７号明細書（１９８７）；
米国特許第４，６０３，１２０号明細書（１９８６）；
米国特許第４，５８５，７５５号明細書（１９８６）；
欧州出願第０  ２０３  ０３１  Ａ２号明細書（１９８６）；
米国特許第４，５２２，８１３号明細書（１９８５）；
米国特許第４，４８６，４１５号明細書（１９８４）；
米国特許第４，４８５，１０１号明細書（１９８４）；
米国特許第４，４３５，３８５号明細書（１９８４）；
米国特許第４，３９５，４０３号明細書（１９８３）；
米国特許第４，３６９，１７９号明細書（１９８３）；
米国特許第４，３６０，５１６号明細書（１９８２）；
米国特許第４，３５８，４３９号明細書（１９８２）；
米国特許第４，３２８，２１４号明細書（１９８２）；
米国特許第４，３１６，８９０号明細書（１９８２）；
米国特許第４，３１０，５１８号明細書（１９８２）；
米国特許第４，２９１，０２２号明細書（１９８１）；
米国特許第４，２３８，４８１号明細書（１９８０）；
米国特許第４，２３５，８８６号明細書（１９８０）；
米国特許第４，２２４，１９９号明細書（１９８０）；
米国特許第４，２１１，６９３号明細書（１９８０）；
米国特許第４，１９０，６４８号明細書（１９８０）；
米国特許第４，１４６，６１２号明細書（１９７９）；
米国特許第４，１３３，７８２号明細書（１９７９）；
米国特許第５，５０６，３３９号明細書（１９９６）；
米国特許第４，２６１，８８５号明細書（１９８１）；
米国特許第４，７２８，６３８号明細書（１９８８）；
米国特許第４，２８２，１４３号明細書（１９８１）；
米国特許第４，２１５，０３９号明細書（１９８０）；
米国特許第４，２０９，４２６号明細書（１９８０）；
米国特許第４，１９０，５７５号明細書（１９８０）；
欧州特許第０  ３８９  １８０号明細書（１９９０）；
欧州出願第０  ５０５  ６８０号明細書（１９８２）；
欧州出願第０  ０８３  ３０５号明細書（１９８２）；
欧州出願第０  ０３０  ９２０号明細書（１９８０）；
ＰＣＴ出願国際公開第８８／０５０５２号（１９８８）；
ＰＣＴ出願国際公開第９０／１２８１１号（１９９０）；
ＰＣＴ出願国際公開第９７／０１５７９号（１９９７）；
ＰＣＴ出願国際公開第９１／１８０１６号（１９９１）；
英国出願第ＧＢ  ２，０９５，２６１号明細書（１９８１）；
仏国出願第ＦＲ  ２，５２２，６５５号明細書（１９８３）；および
ＰＣＴ出願国際公開第０４／０９３８０７号（２００４）。
米国特許第５，６２０，９５５号明細書（１９９７）
米国特許第５，７２３，５７８号明細書（１９９８）
米国特許第５，８４３，９０３号明細書（１９９８）
米国特許第５，８７７，２７７号明細書（１９９９）
米国特許第６，１５６，７２５号明細書（２０００）
米国特許第６，３０７，０１７号明細書（２００１）
ＰＣＴ出願国際公開第９０／０３９８０号（１９９０）
ＰＣＴ出願国際公開第９１／０６５６３号（１９９１）
ＰＣＴ出願国際公開第９１／１７１８１号（１９９１）
ＰＣＴ出願国際公開第９４／０２０１８号（１９９４）
ＰＣＴ出願国際公開第９４／２１６７４号（１９９４）
ＰＣＴ出願国際公開第０４／０９３８０７号（２００４）；
ソマトスタチンペプチドおよび類似体を合成するための方法は、上記の参考文献に例示されるように、十分に文書化されており、当業者の技能の範囲内である。さらなる合成手順は、以下の実施例において提供される。以下の実施例は、本発明の標的とされる細胞毒性化合物の合成方法も説明する。治療薬または細胞毒性薬の特異的な標的化は、生物学的に活性なペプチドに特異的な受容体を発現する腫瘍の選択的破壊を可能にする。例えば、ソマトスタチン受容体を発現する腫瘍は、肺、乳房、前立腺、結腸、脳、胃腸管、神経内分泌軸、肝臓、または腎臓の新生物を含む（シェール（Ｓｃｈａｅｒ）ら著、インターナショナル・ジャーナル・オブ・カンサー（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ）、第７０巻、ｐ．５３０〜５３７、１９９７年；シャーブ（Ｃｈａｖｅ）ら著、ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・カンサー（Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ）、第８２（１）巻、ｐ．１２４〜１３０、２０００年；エバンス（Ｅｖａｎｓ）ら著、ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・カンサー（Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ）、第７５（６）巻、ｐ．７９８〜８０３、１９９７年を参照）。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、標的化部分は治療的特徴を有し、例えば、標的化部分は細胞毒性または抗血管新生である。いくつかの実施形態では、標的化部分は、腫瘍血管系、または血管新生血管、例えば、ソマトスタチン受容体を過剰発現するものに対していくらか増大した親和性を有する（デンツラー（Ｄｅｎｚｌｅｒ）およびルービ（Ｒｅｕｂｉ）著、カンサー（Ｃａｎｃｅｒ）、第８５巻、ｐ．１８８〜１９８、１９９９年；グレック（Ｇｕｌｅｃ）ら著、ジャーナル・オブ・サージカル・リサーチ（Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．）、第９７（２）巻、ｐ．１３１〜１３７、２００１年；ヴォルテリング（Ｗｏｌｔｅｒｉｎｇ）ら著、ジャーナル・オブ・サージカル・リサーチ（Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．）、第５０巻、ｐ．２４５、１９９１年を参照）。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、本明細書で使用される標的化部分、例えば、ソマトスタチン類似体は親水性であり、従って水溶性である。いくつかの実施形態では、このようなコンジュゲートおよびこのようなコンジュゲートを含有する粒子は、この特徴が、例えば疎水性類似体を含むコンジュゲートと比較して有用である治療パラダイムにおいて使用される。本明細書に記載される親水性類似体は、血液、脳脊髄液、および他の体液、ならびに尿中に可溶性であることができ、これにより、腎臓による排泄が促進され得る。この特徴は、例えば、排泄されなければ望ましくない肝臓毒性を示し得る組成物の場合に有用であり得る。また本発明は、種々の結合された細胞毒性薬（例えば、以下のコンジュゲート６）の化学的および構造的性質を調整するために類似体の親水性の調節を可能にする、ペプチド類似体への取込みのための特定の親水性要素（例えば、ＰＥＧリンカーの取込み、および当該技術分野における他の例）を開示する。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、標的化部分は、モノボディ、例えば、アドネクチン（ＡＤＮＥＣＴＩＮ）（商標）（ブリストル−マイヤーズ・スクイブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ニューヨーク州ニューヨーク）、アフィボディ（Ａｆｆｉｂｏｄｙ）（登録商標）（アフィボディＡＢ（Ａｆｆｉｂｏｄｙ  ＡＢ）、スウェーデン、ストックホルム）、アフィリン（Ａｆｆｉｌｉｎ）、ナノフィチン（ｎａｎｏｆｉｔｉｎ）（アフィチン（ａｆｆｉｔｉｎ）、例えば、国際公開第２０１２／０８５８６１号に記載されるものなど）、アンチカリン（Ａｎｔｉｃａｌｉｎ）（商標）、アビマー（ａｖｉｍｅｒ）（アビディティーマルチマー）、ダーピン（ＤＡＲＰｉｎ）（商標）、フィノマー（Ｆｙｎｏｍｅｒ）（商標）、センチリン（Ｃｅｎｔｙｒｉｎ）（商標）およびクニッツ（Ｋｕｎｉｔｚ）ドメインペプチドなどの抗体模倣物である。特定の場合には、このような模倣物は、約３〜２０ｋＤａのモル質量を有する人工ペプチドまたはタンパク質である。核酸および小分子は抗体模倣物であり得る。
【０１２８】
別の例では、標的化部分は、一般的に、ポリペプチドなどの特定の標的に結合するオリゴヌクレオチド（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、またはその類似体または誘導体）であるアプタマーであり得る。いくつかの実施形態では、標的化部分は、ポリペプチド（例えば、腫瘍マーカーに特異的に結合することができる抗体）である。特定の実施形態では、標的化部分は、抗体またはその断片である。特定の実施形態では、標的化部分は、抗体のＦｃ断片である。
【０１２９】
特定の実施形態では、コンジュゲートの標的化部分または複数の部分は、コンジュゲートの構成成分のモル重量百分率の合計が１００％になるように、約０．１％〜約１０％、または約１％〜約１０％、または約１０％〜約２０％、または約２０％〜約３０％、または約３０％〜約４０％、または約４０％〜約５０％、または約５０％〜約６０％、または約６０％〜約７０％、または約７０％〜約８０％、または約８０％〜約９０％、または約９０％〜約９９％の所定のモル重量百分率で存在する。コンジュゲートの標的化部分の量は、活性剤（単数または複数）に対する割合に関して表すこともでき、例えば、リガンドの活性剤に対する比は約１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４；１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、または１：１０である。
【０１３０】
Ｃ．リンカー
コンジュゲートは、活性剤および標的化部分を結合させる１つまたは複数のリンカーを含有する。リンカーＹは１つまたは複数の活性剤および１つまたは複数の標的化リガンドに結合されて、コンジュゲートを形成する。リンカーＹは、エステル結合、ジスルフィド、アミド、アシルヒドラゾン、エーテル、カルバメート、カーボネート、および尿素から独立して選択される官能基によって、標的化部分Ｘおよび活性剤Ｚに結合される。あるいは、リンカーは、チオールおよびマレイミド間、アジドおよびアルキン間の共役により提供されるような切断不能な基によって、標的化リガンドまたは活性薬のいずれかに結合され得る。リンカーはアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリール基のそれぞれは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択される１つまたは複数の基によって任意選択的に置換されており、ここで、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルのそれぞれは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択される１つまたは複数の基によって任意選択的に置換されている。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、リンカーは、切断可能である切断可能な官能基を含む。切断可能な官能基はインビボで加水分解されてもよいし、あるいは例えばカテプシンＢによって酵素的に加水分解されるように設計されてもよい。「切断可能な」リンカーは、本明細書で使用される場合、物理的または化学的に切断することができる任意のリンカーを指す。物理的な切断の例は、光、放射性放出または熱による切断であり得るが、化学的な切断は、酸化還元反応、加水分解、ｐＨ依存性切断、または酵素による切断を含む。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、リンカーＹはＸ’−Ｒ１−Ｙ’−Ｒ２−Ｚ’でよく、コンジュゲートは、式Ｉａ：
【０１３３】
【化９】
2018519283.tif 000011
【０１３４】
（式中、Ｘは、上記で定義される標的化部分であり；Ｚは活性剤であり；Ｘ’、Ｒ１、Ｙ’、Ｒ２およびＺ’は本明細書において定義される通りである）
に従う化合物であり得る。
【０１３５】
Ｘ’は存在しないか、あるいは、カルボニル、アミド、尿素、アミノ、エステル、アリール、アリールカルボニル、アリールオキシ、アリールアミノ、１つまたは複数の天然または非天然アミノ酸、チオまたはスクシンイミドから独立して選択され；Ｒ１およびＲ２は存在しないか、あるいは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ポリエチレングリコール（２〜３０単位）から構成され；Ｙ’は存在しないか、置換または非置換１，２−ジアミノエタン、ポリエチレングリコール（２〜３０単位）またはアミドであり；Ｚ’は存在しないか、あるいは、カルボニル、アミド、尿素、アミノ、エステル、アリール、アリールカルボニル、アリールオキシ、アリールアミノ、チオまたはスクシンイミドから独立して選択される。いくつかの実施形態では、リンカーは１つの活性剤分子を２つ以上のリガンドに連結させることもできるし、あるいは１つのリガンドを２つ以上の活性剤分子に連結させることもできる。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、リンカーＹはＡｍでよく、コンジュゲートは、式Ｉｂ：
【０１３７】
【化１０】
2018519283.tif 000012
【０１３８】
（式中、Ａは本明細書において定義され、ｍ＝０〜２０である）
に従う化合物であり得る。
式Ｉａ中のＡはスペーサ単位であり、存在しないか、あるいは以下の置換基
【０１３９】
【化１１】
2018519283.tif 000013
【０１４０】
（式中、ｚ＝０〜４０、ＲはＨまたは任意選択的に置換されたアルキル基であり、Ｒ’は天然または非天然アミノ酸のいずれかにおいて見出される任意の側鎖である）
から独立して選択される。各置換基について、破線は、Ｘ、Ｚまたは独立して選択される別のＡの単位による置換部位を表し、Ｘ、Ｚ、またはＡは、置換基のいずれかの側に結合され得る。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、式Ｉｃ：
【０１４２】
【化１２】
2018519283.tif 000014
【０１４３】
（式中、Ａは上記で定義され、ｍ＝０〜４０、ｎ＝０〜４０、ｘ＝１〜５、ｙ＝１〜５であり、Ｃは、本明細書で定義される分枝要素である）
に従う化合物であり得る。
【０１４４】
式Ｉｃ中のＣは、アミン、カルボン酸、チオール、またはスクシンイミド（リジン、２，３−ジアミノプロパン酸、２，４−ジアミノ酪酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、およびシステインなどのアミノ酸を含む）から選択される、スペーサ単位、リガンド、または活性薬に共有結合するための３〜６個の官能基を含有する分枝単位である。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、リンカーのアルキル鎖は、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−から選択される１つまたは複数の原子または基によって任意選択的に中断されてもよい。リンカーは、コハク酸のジカルボン酸誘導体から選択され得る。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、活性剤Ｚは、マイタンシノイド、例えばＤＭ１またはＤＭ４である。ソマトスタチン受容体結合剤Ｘは、ソマトスタチン、シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）、バプレオチドまたはＴＡＴＥから選択され得る。いくつかの実施形態では、マイタンシノイドは、リンカーＹによってＸのＣ末端に結合される。いくつかの実施形態では、マイタンシノイドは、リンカーＹによってＸのＮ末端に結合される。いくつかの実施形態では、マイタンシノイドはリンカーＹによってＸに結合されており、ここで、標的化部分Ｘは少なくとも１つのＤ−Ｐｈｅ残基を含み、Ｄ−Ｐｈｅ残基のフェニル環は、リンカーＹを含有する基によって置換されている。いくつかの実施形態では、マイタンシノイドはリンカーＹによってＸに結合されており、ここで、Ｙはペニシラミンおよび／またはその誘導体／類似体／残基を含む。どの理論にも束縛されるつもりはないが、ペニシラミンおよび／またはその誘導体／類似体／残基のｇｅｍ−ジメチル基は、血漿中でリンカーをより安定にし得る。
【０１４７】
本発明のマイタンシノイドコンジュゲートと称される、マイタンシノイドを含むコンジュゲートの非限定的な例は、以下の化合物を含む：
１）シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）ベースのマイタンシノイドコンジュゲート
いくつかの実施形態では、シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）はソマトスタチン受容体標的化部分として使用され、コンジュゲートは、
【０１４８】
【化１３】
2018519283.tif 000015
【０１４９】
の一般構造を有する。
いくつかの実施形態では、標的化部分は、アミド結合を作ることができるアミノ酸を含有する。いくつかの実施形態では、リンカーは、アミド結合、すなわち−ＮＨ−ＣＯ−、または−ＣＯ−ＮＨ−（窒素上の水素は置換され得る）を介して標的化部分に結合される。いくつかの実施形態では、リンカーは、アミド結合を介して標的化部分に結合されない。いくつかの実施形態では、リンカーは、アミド結合、すなわち、−ＮＨ−ＣＯ−、または−ＣＯ−ＮＨ−（窒素上の水素は置換され得る）を含む。
【０１５０】
２）Ｃ末端マイタンシノイドコンジュゲート：
いくつかの実施形態では、ソマトスタチン受容体標的化部分はペプチドであり、リンカーは、ソマトスタチン受容体標的化部分のＣ末端に結合する。いくつかの実施形態では、ソマトスタチン受容体標的化部分は、ＴＡＴＥまたはＴＡＴＥ誘導体／類似体／残基であり、リンカーは、ＴＡＴＥまたはＴＡＴＥ誘導体／類似体／残基のＣ末端に結合する。いくつかの実施形態では、ソマトスタチン受容体標的化部分は切断型ＴＡＴＥである。切断型ＴＡＴＥは、本明細書で使用される場合、ＴＡＴＥよりも少ないアミノ酸を有するＴＡＴＥ誘導体を指す。Ｃ末端マイタンシノイドコンジュゲートは、
【０１５１】
【化１４】
2018519283.tif 000016
【０１５２】
（式中、Ｒは、１つまたは複数の基により任意選択的に置換される、Ｈ、アルキル、アリール、カルボニル、アミド、アルコール、またはアミンから選択され；
Ａｒ１およびＡｒ２は、１つまたは複数の基により任意選択的に置換される、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリール基から独立して選択される）
の一般構造を有する。マイタンシノイドは、ＤＭ１またはＤＭ４でよい。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、リンカーと、ソマトスタチン受容体標的化部分のＣ末端とを結びつける共有結合はアミド結合である。
いくつかの実施形態では、リンカーは、ペニシラミンおよび／またはその誘導体／類似体／残基を含む。
【０１５４】
リンカーがソマトスタチン受容体標的化部分のＣ末端に結合するマイタンシノイドコンジュゲートの非限定的な例はテーブル１に示される。化合物３〜５は、活性剤としてＤＭ４を含む。化合物６〜４８は、活性剤としてＤＭ１を含む。化合物６〜１８は、ペニシラミン残基であるリンカーを含む。
【０１５５】
【表１−１】
2018519283.tif 000017
【０１５６】
【表１−２】
2018519283.tif 000018
【０１５７】
【表１−３】
2018519283.tif 000019
【０１５８】
【表１−４】
2018519283.tif 000020
【０１５９】
【表１−５】
2018519283.tif 000021
【０１６０】
【表１−６】
2018519283.tif 000022
【０１６１】
【表１−７】
2018519283.tif 000023
【０１６２】
【表１−８】
2018519283.tif 000024
【０１６３】
【表１−９】
2018519283.tif 000025
【０１６４】
【表１−１０】
2018519283.tif 000026
【０１６５】
【表１−１１】
2018519283.tif 000027
【０１６６】
【表１−１２】
2018519283.tif 000028
【０１６７】
【表１−１３】
2018519283.tif 000029
【０１６８】
【表１−１４】
2018519283.tif 000030
【０１６９】
【表１−１５】
2018519283.tif 000031
【０１７０】
【表１−１６】
2018519283.tif 000032
【０１７１】
【表１−１７】
2018519283.tif 000033
【０１７２】
【表１−１８】
2018519283.tif 000034
【０１７３】
【表１−１９】
2018519283.tif 000035
【０１７４】
【表１−２０】
2018519283.tif 000036
【０１７５】
【表１−２１】
2018519283.tif 000037
【０１７６】
【表１−２２】
2018519283.tif 000038
【０１７７】
３）Ｎ末端マイタンシノイドコンジュゲート
いくつかの実施形態では、ソマトスタチン受容体標的化部分はペプチドであり、リンカーは、ソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端に結合する。いくつかの実施形態では、標的部分は、オクトレオチド、バプレオチド、およびＴＡＴＥから選択される。いくつかの実施形態では、リンカーと、ソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端とを結びつける共有結合はアミド結合、すなわち−ＮＨ−ＣＯ−である。いくつかの実施形態では、リンカーは、アミン結合、すなわち−ＮＨ−ＣＨ２−（炭素上の水素は置換され得る）を介してソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端に結合する。いくつかの実施形態では、リンカーは、尿素結合、すなわち−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−を介してソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端に結合する。Ｎ末端マイタンシノイドコンジュゲートは、
【０１７８】
【化１５】
2018519283.tif 000039
【０１７９】
（式中、Ｒ１およびＲ２は、１つまたは複数の基により任意選択的に置換される、Ｈ、ＯＨ、アルキル、アリール、カルボニル、エステル、アミド、エーテル、アルコール、またはアミンから独立して選択され；Ａｒ１は、１つまたは複数の基により任意選択的に置換されるヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリール基から選択される）
の一般構造を有する。いくつかの実施形態では、Ｒ１またはＲ２のうちの少なくとも１つはマイタンシノイドを含む。マイタンシノイドは、ＤＭ１またはＤＭ４でよい。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、リンカーは、ペニシラミンおよび／またはその誘導体／類似体／残基を含む。
リンカーがソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端に結合するマイタンシノイドコンジュゲートの非限定的な例はテーブル２に示される。
【０１８１】
【表２−１】
2018519283.tif 000040
【０１８２】
【表２−２】
2018519283.tif 000041
【０１８３】
４）Ｄ−Ｐｈｅ置換マイタンシノイドコンジュゲート
いくつかの実施形態では、ソマトスタチン受容体標的化部分は、オクトレオチドまたはＴＡＴＥなどの標的化リガンドであり、標的化リガンドのＤ−Ｐｈｅ残基のフェニル環は、リンカー含有部分によって置換されている。Ｄ−Ｐｈｅ置換マイタンシノイドコンジュゲートは、
【０１８４】
【化１６】
2018519283.tif 000042
【０１８５】
（式中、Ｒは、１つまたは複数の基により任意選択的に置換される、Ｈ、ＯＨ、アルキル、アリール、カルボニル、エステル、アミド、エーテル、アルコール、またはアミンから選択される）
の一般構造を有する。いくつかの実施形態では、Ｒはマイタンシノイドを含む。マイタンシノイドは、ＤＭ１またはＤＭ４でよい。
【０１８６】
ＩＩＩ．粒子
１つまたは複数のコンジュゲートを含有する粒子は、高分子粒子、脂質粒子、固体脂質粒子、無機粒子、またはこれらの組み合わせ（例えば、脂質安定化高分子粒子）であり得る。いくつかの実施形態では、コンジュゲートは粒子内に実質的にカプセル化されるか、あるいは部分的にカプセル化される。いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、粒子の表面に配置される。コンジュゲートは、共有結合、または非共有相互作用により粒子の表面に結合され得る。いくつかの実施形態では、本発明のコンジュゲートは粒子内に自己組織化する。いくつかの実施形態では、粒子は高分子粒子であるか、あるいは高分子マトリックスを含有する。粒子は、本明細書に記載されるポリマーまたはその誘導体もしくはコポリマーのいずれかを含有することができる。粒子は、一般的に、１つまたは複数の生体適合性ポリマーを含有する。ポリマーは生分解性ポリマーであり得る。ポリマーは、疎水性ポリマー、親水性ポリマー、または両親媒性ポリマーであり得る。いくつかの実施形態では、粒子は、付加的な標的化部分が結合された１つまたは複数のポリマーを含有する。
【０１８７】
本明細書で使用される場合、「カプセル化する」という用語は、封入する、包囲する、または包み込むことを意味する。本発明のコンジュゲートの製剤に関する場合、カプセル化は、実質的、完全、または部分的であり得る。「実質的にカプセル化」という用語は、少なくとも、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．９、９９．９％を超える、または９９．９９９％を超える本発明のコンジュゲートが、粒子内に封入され得る、包囲され得る、または包み込まれ得ることを意味する。「部分的にカプセル化」は、１０、１０、２０、３０、４０  ５０未満の本発明のコンジュゲートが、粒子内に封入され得る、包囲され得る、または包み込まれ得ることを意味する。例えば、少なくとも１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．９、９９．９９、または９９．９９％を超える本発明の医薬組成物または化合物が粒子内にカプセル化される。カプセル化は、任意の既知の方法によって決定され得る。
【０１８８】
いくつかの実施形態では、粒子は高分子粒子であるか、あるいは高分子マトリックスを含有する。粒子は、本明細書に記載されるポリマーまたはその誘導体もしくはコポリマーのいずれかを含有することができる。粒子は、一般的に、１つまたは複数の生体適合性ポリマーを含有するであろう。ポリマーは生分解性ポリマーであり得る。ポリマーは、疎水性ポリマー、親水性ポリマー、または両親媒性ポリマーであり得る。いくつかの実施形態では、粒子は、付加的な標的化部分が結合された１つまたは複数のポリマーを含有する。いくつかの実施形態では、粒子は無機粒子であり、例えば、金ナノ粒子および酸化鉄ナノ粒子であるが、これらに限定されない。
【０１８９】
粒子のサイズは、意図される目的に対して調整することができる。粒子は、ナノ粒子またはマイクロ粒子であり得る。粒子は、約１０ｎｍ〜約１０ミクロン、約１０ｎｍ〜約１ミクロン、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、約２０ｎｍ〜約５００ｎｍ、または約２５ｎｍ〜約２５０ｎｍの直径を有することができる。いくつかの実施形態では、粒子は、約２５ｎｍ〜約２５０ｎｍの直径を有するナノ粒子である。いくつかの実施形態では、粒子は、約５０ｎｍ〜約１５０ｎｍの直径を有するナノ粒子である。いくつかの実施形態では、粒子は、約７０ｎｍ〜約１３０ｎｍの直径を有するナノ粒子である。いくつかの実施形態では、粒子は、約１００ｎｍの直径を有するナノ粒子である。複数の粒子がある範囲のサイズを有し得ることは当業者により理解されており、直径は、粒径分布の平均直径であると理解される。
【０１９０】
粒子の多分散指数（ＰＤＩ）は、約０．５以下、約０．２以下、または約０．１以下であり得る。「多分散指数」という用語は、本明細書において、粒子、例えばナノ粒子のアンサンブルのサイズ分布の尺度として使用される。粒子のＰＤＩは、動的光散乱によって特徴付けされ得る。
【０１９１】
薬物負荷は、約０．１％以上、約１％以上、約５％以上、約１０％以上、または、約２０％以上であり得る。薬物負荷（ｄｒｕｇ  ｌｏａｄｉｎｇ）、または薬物負荷（ｄｒｕｇ  ｌｏａｄ）は、本明細書で使用される場合、コンジュゲートの粒子に対する重量比を指し、ここで、コンジュゲートは薬物である。理論的な薬物負荷を計算することができる。実際の薬物負荷は、送達系組成、薬物濃度、処理条件、選択または有機相および水相、凍結乾燥重量、ならびに再構成薬物の濃度に依存し得る。乾燥組成物の重量を測定することができ、薬物濃度を測定することができ、続いて実際の薬物負荷を得るために薬物の重量％による重量を計算することができる。いくつかの実施形態では、実際の薬物負荷は、ＨＰＬＣおよびＵＶ−可視吸光度を用いて決定され得る。これは、既知の体積のナノ粒子溶液から水を蒸発させ、ＤＭＦなどの適切な溶媒中に固形分を溶解させることによって達成される。薬物濃度は、蒸発後に回収された全固形分に対して基準化される。カプセル化効率は、実際の薬物負荷と理論的な薬物負荷との間の比として定義される。
【０１９２】
粒子のζ電位またはゼータ電位は、ナノ粒子表面上の有効電荷の尺度である。ζ電位の大きさは粒子の安定性についての情報を提供し、ζ電位の大きさがより高い粒子は、粒子間の静電反発力がより大きいために増大した安定性を示す。粒子のζ電位（例えば、１／１０ｔｈＰＢＳ中）は、０ｍＶ以下、または約−３０〜０ｍＶであり得る。それは、０ｍＶ以上、または約０〜＋３０ｍＶでもあることもある。
【０１９３】
薬物動態（ＰＫ）に関して、本発明の粒子中にある場合のコンジュゲートの血漿薬物濃度−時間曲線下の面積（ＡＵＣ）は、遊離薬物コンジュゲートの少なくとも２倍、遊離薬物コンジュゲートの少なくとも４倍、遊離コンジュゲートの少なくとも５倍、遊離コンジュゲートの少なくとも８倍、遊離コンジュゲートの少なくとも１０倍、遊離コンジュゲートの少なくとも２５倍、遊離コンジュゲートの少なくとも５０倍、遊離コンジュゲートの少なくとも１００倍、または遊離コンジュゲートの少なくとも１５０倍であり得る。遊離コンジュゲートの血漿クリアランス速度（ＣＬ）の、本発明の粒子中にある場合のコンジュゲートのＣＬに対する比は、少なくとも約２、少なくとも約４、少なくとも約５、少なくとも約８、少なくとも約１０、少なくとも約２５、少なくとも約５０、少なくとも約１００、少なくとも約１５０、または少なくとも約２００であり得る。本発明の粒子中にある場合のコンジュゲートの血漿半減期（ｔ１／２）の、コンジュゲートのｔ１／２に対する比は、少なくとも約２、少なくとも約４、または少なくとも約５である。ＡＵＣ、ＣＬまたはｔ１／２は、血漿中の粒子またはコンジュゲートの濃度の時間に対するプロットから計算することができる。ＡＵＣは、ゼロ時間（薬物の投与の時間）から特定の時間までのＡＵＣであり得る。ゼロ時間から測定の最後までのＡＵＣは、ＡＵＣ０−ｔと称される。ゼロ時間から無限時間までのＡＵＣは、ＡＵＣｉｎｆと称される。粒子の腫瘍ＰＫ／ＰＤは、遊離薬物コンジュゲートの少なくとも１．５〜２倍、または少なくとも５倍、遊離薬物コンジュゲートの少なくとも８倍、遊離薬物コンジュゲートの少なくとも１０倍、または遊離薬物コンジュゲートの少なくとも１５倍であり得る。本発明の粒子中にある場合のコンジュゲートのＣｍａｘの、遊離コンジュゲートＣｍａｘに対する比は、少なくとも約２、少なくとも約４、少なくとも約５、または少なくとも約１０であり得る。Ｃｍａｘは、本明細書で使用される場合、薬物が投与された後かつ２回目の用量が投与される前に、身体の特定の区画または試験領域において薬物が達成する最大またはピーク血清濃度を指す。コンジュゲートを含む粒子の最大耐性用量（ＭＴＤ）の、遊離コンジュゲートのＭＴＤに対する比は、少なくとも約０．２５、少なくとも約０．５、少なくとも約１、少なくとも約２、または少なくとも約５であり得る。コンジュゲートを含む粒子の腫瘍モデルにおける効力、例えばＴＧＩ％は、遊離コンジュゲートよりも良い。コンジュゲートを含む粒子の毒性は、遊離コンジュゲートよりも低い。２時間でインビトロにおいて粒子から放出される薬物は、約６０％未満、約４０％未満、または約２０％未満であり得る。
【０１９４】
種々の実施形態では、粒子はナノ粒子でよく、すなわち、粒子は約１マイクロメートル未満の特徴的寸法を有し、ここで、粒子の特徴的寸法は粒子の直径である。複数の粒子は、平均または中間の直径（例えば、複数の粒子の平均直径）によって特徴付けることができる。いくつかの実施形態では、粒子の直径はガウス型分布を有し得る。いくつかの実施形態では、複数の粒子は、約３００ｎｍ未満、約２５０ｎｍ未満、約２００ｎｍ未満、約１５０ｎｍ未満、約１００ｎｍ未満、約５０ｎｍ未満、約３０ｎｍ未満、約１０ｎｍ未満、約３ｎｍ未満、または約１ｎｍ未満の平均直径を有する。いくつかの実施形態では、粒子は、少なくとも約５ｎｍ、少なくとも約１０ｎｍ、少なくとも約３０ｎｍ、少なくとも約５０ｎｍ、少なくとも約１００ｎｍ、少なくとも約１５０ｎｍ、またはそれ以上の平均直径を有する。特定の実施形態では、複数の粒子は、約１０ｎｍ、約２５ｎｍ、約５０ｎｍ、約１００ｎｍ、約１５０ｎｍ、約２００ｎｍ、約２５０ｎｍ、約３００ｎｍ、約５００ｎｍなどの平均直径を有する。いくつかの実施形態では、複数の粒子は、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍの間、約５０ｎｍ〜約４００ｎｍの間、約１００ｎｍ〜約３００ｎｍの間、約１５０ｎｍ〜約２５０ｎｍの間、約１７５ｎｍ〜約２２５ｎｍの間などの平均直径を有する。いくつかの実施形態では、複数の粒子は、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍの間、約２０ｎｍ〜約４００ｎｍの間、約３０ｎｍ〜約３００ｎｍの間、約４０ｎｍ〜約２００ｎｍの間、約５０ｎｍ〜約１７５ｎｍの間、約６０ｎｍ〜約１５０ｎｍの間、約７０ｎｍ〜約１３０ｎｍの間などの平均直径を有する。例えば、平均直径は、約７０ｎｍ〜１３０ｎｍの間であり得る。いくつかの実施形態では、複数の粒子は、約２０ｎｍ〜約２２０ｎｍの間、約３０ｎｍ〜約２００ｎｍの間、約４０ｎｍ〜約１８０ｎｍの間、約５０ｎｍ〜約１７０ｎｍの間、約６０ｎｍ〜約１５０ｎｍの間、または約７０ｎｍ〜約１３０ｎｍの間の平均直径を有する。一実施形態では、粒子は４０〜１２０ｎｍのサイズを有し、低〜ゼロのイオン強度（１〜１０ｍＭ）において０ｍＶに近いゼータ電位を有し、＋５〜−５ｍＶの間のゼータ電位値、およびゼロ／中性または小さい−ｖｅ表面電荷を有する。
【０１９５】
Ａ．コンジュゲート
粒子は、上記のような１つまたは複数のコンジュゲートを含有する。コンジュゲートは、粒子の内部、粒子の外部、またはその両方に存在することができる。粒子は、上記の１つまたは複数のコンジュゲートと、対イオンとにより形成される疎水性イオン対合複合体または疎水性イオン対を含み得る。
【０１９６】
疎水性イオン対合（ＨＩＰ）は、クーロン引力により結合された、一対の逆帯電したイオン間の相互作用である。ＨＩＰは、本明細書で使用される場合、本発明のコンジュゲートと、その対イオンとの間の相互作用を指し、ここで、対イオンは、Ｈ＋またはＨＯ−イオンではない。疎水性イオン対合複合体または疎水性イオン対は、本明細書で使用される場合、本発明のコンジュゲートおよびその対イオンにより形成される複合体を指す。いくつかの実施形態では、対イオンは疎水性である。いくつかの実施形態では、対イオンは、疎水性酸または疎水性酸の塩によって提供される。いくつかの実施形態では、対イオンは、胆汁酸もしくは塩、脂肪酸もしくは塩、脂質、またはアミノ酸によって提供される。いくつかの実施形態では、対イオンは負に帯電している（アニオン性である）。負に帯電した対イオンの非限定的な例としては、対イオンのスルホコハク酸ナトリウム（ＡＯＴ）、オレイン酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、デキストラン硫酸、デオキシコール酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、アニオン性脂質、アミノ酸、またはこれらの任意の組み合わせが挙げられる。どの理論にも束縛されることは望まないが、いくつかの実施形態では、ＨＩＰは、本発明のコンジュゲートの疎水性および／または親油性を増大させ得る。いくつかの実施形態では、本発明のコンジュゲートの疎水性および／または親油性を増大させることは、粒子製剤のために有益であり、本発明のコンジュゲートの有機溶媒中でのより高い溶解度を提供し得る。どの理論にも束縛されることは望まないが、ＨＩＰ対を含む粒子製剤は、薬物負荷および／または放出プロファイルなどの改善された製剤特性を有すると考えられる。どの理論にも束縛されることは望まないが、いくつかの実施形態では、水溶液中でのコンジュゲートの溶解度の低下により本発明のコンジュゲートの粒子からの持続放出が起こり得る。加えて、どの理論にも束縛されることは望まないが、コンジュゲートと大きい疎水性の対イオンとを複合体化すると、高分子マトリックス内でのコンジュゲートの拡散が遅くなり得る。いくつかの実施形態では、ＨＩＰは、対イオンが本発明のコンジュゲートへ共有結合することなく生じる。
【０１９７】
どの理論にも束縛されることは望まないが、ＨＩＰの強度は、本発明の粒子の薬物負荷および放出速度に影響を与え得る。いくつかの実施形態では、ＨＩＰの強度は、本発明のコンジュゲートのｐＫａと対イオンを提供する薬剤のｐＫａとの間の差の大きさを増大させることによって増大され得る。同様にどの理論にも束縛されることは望まないが、イオン対形成のための条件は、発明の粒子の薬物負荷および放出速度に影響を与え得る。
【０１９８】
いくつかの実施形態では、任意の適切な疎水性酸またはその組み合わせは、本発明のコンジュゲートとＨＩＰ対を形成し得る。いくつかの実施形態では、疎水性酸は、カルボン酸（例えば、モノカルボン酸、ジカルボン酸、トリカルボン酸などであるが、これらに限定されない）、スルフィン酸、スルフェン酸、またはスルホン酸であり得る。いくつかの実施形態では、適切な疎水性酸またはその組み合わせの塩は、本発明のコンジュゲートと共にＨＩＰ対を形成するために使用され得る。疎水性酸、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、芳香族酸、胆汁酸、高分子電解質、これらの水中の解離定数（ｐＫａ）およびｌｏｇＰ値の例は、国際公開第２０１４／０４３，６２５号（その内容は、参照によってその全体が本明細書中に援用される）に開示された。疎水性酸の強度、疎水性酸のｐＫａと本発明のコンジュゲートのｐＫａとの間の差、疎水性酸のｌｏｇＰ、疎水性酸の相転移温度、疎水性酸の本発明のコンジュゲートに対するモル比、および疎水性酸の濃度も、国際公開第２０１４／０４３，６２５号（その内容は、参照によってその全体が本明細書中に援用される）に開示された。
【０１９９】
いくつかの実施形態では、ＨＩＰ複合体を含み、および／またはコンジュゲートと共にＨＩＰ複合体を形成するための対イオンを提供するプロセスにより調製された本発明の粒子は、ＨＩＰ複合体を含まない粒子、またはコンジュゲートと共にＨＩＰ複合体を形成するための対イオンを全く提供しないプロセスにより調製された粒子よりも高い薬物負荷を有し得る。いくつかの実施形態では、薬物負荷は、５０％、１００％、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または１０倍増大し得る。
【０２００】
いくつかの実施形態では、本発明の粒子は、３７℃でリン酸緩衝液中に置かれたときに少なくとも約１分間、少なくとも約１５分間、少なくとも約１時間、コンジュゲートを保持し得る。
【０２０１】
いくつかの実施形態では、粒子中のコンジュゲートの重量百分率は、粒子の構成要素の重量百分率の合計が１００％になるように、少なくとも約０．０５％、０．１％、０．５％、１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％である。いくつかの実施形態では、粒子中のコンジュゲートの重量百分率は、粒子の構成要素の重量百分率の合計が１００％になるように、約０．５％〜約１０％、または約１０％〜約２０％、または約２０％〜約３０％、または約３０％〜約４０％、または約４０％〜約５０％、または約５０％〜約６０％、または約６０％〜約７０％、または約７０％〜約８０％、または約８０％〜約９０％、または約９０％〜約９９％である。
【０２０２】
場合により、コンジュゲートの分子量は、約５０，０００Ｄａ未満、約４０，０００Ｄａ未満、約３０，０００Ｄａ未満、約２０，０００Ｄａ未満、約１５，０００Ｄａ未満、約１０，０００Ｄａ未満、約８，０００Ｄａ未満、約５，０００Ｄａ未満、または約３，０００Ｄａ未満である。場合により、コンジュゲートは、約１，０００Ｄａ〜約５０，０００Ｄａの間の分子量、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約４０，０００Ｄａの間、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約３０，０００Ｄａの間、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約５０，０００Ｄａの間、約１，０００Ｄａ〜約２０，０００Ｄａの間、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約１５，０００Ｄａの間、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約１０，０００Ｄａの間、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約８，０００Ｄａの間、いくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約５，０００Ｄａの間、そしていくつかの実施形態では約１，０００Ｄａ〜約３，０００Ｄａの間の分子量を有し得る。コンジュゲートの分子量は、コンジュゲートの化学式中の各原子の原子量に各原子の数をかけたものの合計として計算され得る。また、質量分析、ＮＭＲ、クロマトグラフィ、光散乱、粘度、および／または当該技術分野において知られている任意の他の方法によって計算することもできる。分子量の単位が、ｇ／ｍｏｌ、ダルトン、または原子質量単位（ａｍｕ）であり得る（ここで、１ｇ／ｍｏｌ＝１ダルトン＝１ａｍｕである）ことは、当該技術分野において知られている。
【０２０３】
Ｂ．ポリマー
粒子は、１つまたは複数のポリマーを含有し得る。ポリマーは、以下のポリエステル：本明細書では「ＰＧＡ」と称されるグリコール酸単位と、本明細書では集合的に「ＰＬＡ」と称される、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−Ｄ−ラクチド、およびポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチドなどの乳酸単位と、本明細書では集合的に「ＰＣＬ」と称される、ポリ（ε−カプロラクトン）などのカプロラクトン単位とを含むホモポリマー；ならびに本明細書では集合的に「ＰＬＧＡ」と称される、乳酸：グリコール酸の比により特徴付けられる種々の形態のポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）およびポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）などの乳酸およびグリコール酸単位を含むコポリマー；ならびにポリアクリレート、ならびにこれらの誘導体のうちのもう１つを含有し得る。例示的なポリマーには、本明細書では集合的に「ＰＥＧ化ポリマー」と称される、種々の形態のＰＬＧＡ−ＰＥＧまたはＰＬＡ−ＰＥＧコポリマーなどの、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と上述のポリエステルとのコポリマーも含まれる。特定の実施形態では、切断可能なリンカーによってＰＥＧ領域をポリマーと共有結合させて「ＰＥＧ化ポリマー」を得ることができる。
【０２０４】
粒子は、１つまたは複数の親水性ポリマーを含有してもよい。親水性ポリマーは、デンプンおよび多糖などのセルロース系ポリマー；親水性ポリペプチド；ポリ−Ｌ−グルタミン酸（ＰＧＳ）、ガンマ−ポリグルタミン酸、ポリ−Ｌ−アスパラギン酸、ポリ−Ｌ−セリン、またはポリ−Ｌ−リジンなどのポリ（アミノ酸）；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、およびポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）などのポリアルキレングリコールおよびポリアルキレンオキシド；ポリ（オキシエチル化ポリオール）；ポリ（オレフィンアルコール）；ポリビニルピロリドン）；ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）；ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）；多糖；ポリ（ヒドロキシ酸）；ポリ（ビニルアルコール）；ポリオキサゾリン；ならびにこれらのコポリマーを含む。
【０２０５】
粒子は、１つまたは複数の疎水性ポリマーを含有してもよい。適切な疎水性ポリマーの例としては、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）などのポリヒドロキシ酸；ポリ３−ヒドロキシブチレートまたはポリ４−ヒドロキシブチレートなどのポリヒドロキシアルカン酸；ポリカプロラクトン；ポリ（オルトエステル）；ポリ無水物；ポリ（ホスファゼン）；ポリ（ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）；チロシンポリカーボネートなどのポリカーボネート；ポリアミド（合成および天然ポリアミドを含む）、ポリペプチド、およびポリ（アミノ酸）；ポリエステルアミド；ポリエステル；ポリ（ジオキサノン）；ポリ（アルキレンアルキレート）；疎水性ポリエーテル；ポリウレタン；ポリエーテルエステル；ポリアセタール；ポリシアノアクリレート；ポリアクリレート；ポリメチルメタクリレート；ポリシロキサン；ポリ（オキシエチレン）／ポリ（オキシプロピレン）コポリマー；ポリケタール；ポリリン酸；ポリヒドロキシバレラート；ポリアルキレンオキサラート；ポリアルキレンスクシネート；ポリ（マレイン酸）、ならびにこれらのコポリマーが挙げられる。
【０２０６】
特定の実施形態では、疎水性ポリマーは脂肪族ポリエステルである。いくつかの実施形態では、疎水性ポリマーはポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、またはポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）である。
【０２０７】
粒子は、１つまたは複数の生分解性ポリマーを含有することができる。生分解性ポリマーは、水に不溶性または難溶性であるが、体内で化学的または酵素的に水溶性材料に転換されるポリマーを含むことができる。生分解性ポリマーは、架橋されたポリマーが水に不溶性または難溶性になるように加水分解性架橋基により架橋された可溶性ポリマーを含むことができる。
【０２０８】
粒子中の生分解性ポリマーは、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタレート、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ハロゲン化ポリビニル、ポリビニルピロリドン、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリウレタンおよびこれらのコポリマー、アルキルセルロース、例えば、メチルセルロースおよびエチルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシ−プロピルメチルセルロース、およびヒドロキシブチルメチルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、カルボキシルエチルセルロース、三酢酸セルロース、セルロース硫酸ナトリウム塩、アクリル酸およびメタクリル酸エステルのポリマー、例えば、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（エチルメタクリレート）、ポリ（ブチルメタクリレート）、ポリ（イソブチルメタクリレート）、ポリ（ヘキシルメタクリレート）、ポリ（イソデシルメタクリレート）、ポリ（ラウリルメタクリレート）、ポリ（フェニルメタクリレート）、ポリ（メチルアクリレート）、ポリ（イソプロピルアクリレート）、ポリ（イソブチルアクリレート）、ポリ（オクタデシルアクリレート）、ポリエチレン、ポリプロピレンポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレンテレフタレート）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（酢酸ビニル、ポリ塩化ビニルポリスチレンおよびポリビニルピロリドン、これらの誘導体、これらの線状および分枝状コポリマーおよびブロックコポリマー、ならびにこれらのブレンドを含むことができる。例示的な生分解性ポリマーには、ポリエステル、ポリ（オルトエステル）、ポリ（エチレンイミン）、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（ヒドロキシアルカノアート）、ポリ（ヒドロキシバレラート）、ポリ無水物、ポリ（アクリル酸）、ポリグリコリド、ポリ（ウレタン）、ポリカーボネート、ポリリン酸エステル、ポリホスファゼン、これらの誘導体、これらの線状および分枝状コポリマーおよびブロックコポリマー、ならびにこれらのブレンドが含まれる。いくつかの実施形態では、粒子は、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、およびポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）などの生分解性ポリエステルまたはポリ無水物を含有する。
【０２０９】
粒子は、１つまたは複数の両親媒性ポリマーを含有することができる。両親媒性ポリマーは、疎水性ポリマーブロックおよび親水性ポリマーブロックを含有するポリマーであり得る。疎水性ポリマーブロックは、上記の疎水性ポリマーまたはその誘導体もしくはコポリマーのうちの１つまたは複数を含有することができる。親水性ポリマーブロックは、上記の親水性ポリマーまたはその誘導体もしくはコポリマーのうちの１つまたは複数を含有することができる。いくつかの実施形態では、両親媒性ポリマーは、疎水性ポリマーから形成される疎水性末端と、親水性ポリマーから形成される親水性末端とを含有するジブロックポリマーである。いくつかの実施形態では、部分は、疎水性末端、親水性末端、またはその両方に結合され得る。粒子は、２つ以上の両親媒性ポリマーを含有することができる。
【０２１０】
Ｃ．脂質
粒子は、１つまたは複数の脂質または両親媒性化合物を含有してもよい。例えば、粒子は、リポソーム、脂質ミセル、固体脂質粒子、または脂質安定化高分子粒子であり得る。脂質粒子は、異なる脂質の１つまたは混合物から作ることができる。脂質粒子は、生理学的ｐＨにおいて中性、アニオン性、またはカチオン性であり得る１つまたは複数の脂質から形成される。脂質粒子は、いくつかの実施形態では、１つまたは複数の生体適合性脂質を取り込む。脂質粒子は、２つ以上の脂質の組み合わせを用いて形成され得る。例えば、荷電脂質は、生理学的ｐＨにおいて非イオン性または非荷電の脂質と組み合わせられてもよい。
【０２１１】
粒子は、脂質ミセルであり得る。薬物送達のための脂質ミセルは、当該技術分野において知られている。脂質ミセルは、例えば、脂質界面活性剤を含む油中水型エマルションとして形成することができる。エマルションは２つの非混和性相のブレンドであり、分散された液滴を安定化するために界面活性剤が添加される。いくつかの実施形態では、脂質ミセルはマイクロエマルションである。マイクロエマルションは、少なくとも、水と、油と、透明で熱力学的に安定な系を生じる脂質界面活性剤とで構成された熱力学的に安定な系であり、その液滴サイズは、１ミクロン未満、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、または約１０ｎｍ〜約２５０ｎｍである。脂質ミセルは、一般的に、疎水性治療薬、疎水性予防薬、または疎水性診断薬を含む疎水性活性剤をカプセル化するために有用である。
【０２１２】
粒子は、リポソームであり得る。リポソームは、球形の二重層に配置された脂質に包囲された水性媒体で構成された小さいベシクルである。リポソームは、球状の二重層に配置された、脂質に取り囲まれた水性媒体からなる小さいベシクルである。リポソームは、小さい単層ベシクル、大きい単層ベシクル、または多重層ベシクルに分類することができる。多重層リポソームは、複数の同心円状の脂質二重層を含有する。リポソームは、親水性薬剤を水性の内部または二重層の間に捕捉することによって、あるいは疎水性薬剤を二重層内に捕捉することによって、薬剤をカプセル化するために使用することができる。
【０２１３】
脂質ミセルおよびリポソームは、通常、水性中心を有する。水性中心は、水または水およびアルコールの混合物を含有することができる。適切なアルコールには、メタノール、エタノール、プロパノール（例えば、イソプロパノールなど）、ブタノール（例えば、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノールなど）、ペンタノール（例えば、アミルアルコール、イソブチルカルビノールなど）、ヘキサノール（例えば、１−ヘキサノール、２−ヘキサノール、３−ヘキサノールなど）、ヘプタノール（例えば、１−ヘプタノール、２−ヘプタノール、３−ヘプタノールおよび４−ヘプタノールなど）もしくはオクタノール（例えば、１−オクタノールなど）、またはこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【０２１４】
粒子は、固体脂質粒子であり得る。固体脂質粒子は、コロイドミセルおよびリポソームの代替案を提示する。固体脂質粒子は、通常、サブミクロンのサイズであり、すなわち、約１０ｎｍ〜約１ミクロン、１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、または１０ｎｍ〜約２５０ｎｍである。固体脂質粒子は、室温で固体である脂質から形成される。これらは、液体油を固体脂質に置き換えることによって、水中油型エマルションから得られる。
【０２１５】
適切な中性およびアニオン性脂質には、コレステロール、リン脂質、リゾ脂質、リゾリン脂質、スフィンゴ脂質またはペグ化脂質などのステロールおよび脂質が含まれるが、これらに限定されない。中性およびアニオン性脂質には、１，２−ジアシル−グリセロ−３−ホスホコリンを含むホスファチジルコリン（ＰＣ）（例えば、卵ＰＣ、大豆ＰＣなど）；ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）；糖脂質；スフィンゴリン脂質（例えば、スフィンゴミエリンなど）、およびスフィンゴ糖脂質（１−セラミジルグルコシドとしても知られている）（例えば、セラミドガラクトピラノシド、ガングリオシドおよびセレブロシドなど）；脂肪酸、カルボン酸基を含有するステロール、例えばコレステロール；１，２−ジオレイルホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２−ジヘキサデシルホスホエタノールアミン（ＤＨＰＥ）、１，２−ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、１，２−ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、および１，２−ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）を含むがこれらに限定されない１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンが含まれるが、これらに限定されない。脂質は、種々の天然脂質誘導体（例えば、組織由来のＬ−α−ホスファチジル：卵黄、心臓、脳、肝臓、大豆）、および／または合成脂質誘導体（例えば、飽和および不飽和１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１−アシル−２−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジヘプタノイル−ＳＮ−グリセロ−３−ホスホコリン）を含むこともできる。
【０２１６】
適切なカチオン性脂質には、ＴＡＰ脂質とも呼ばれるＮ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム塩、例えばメチル硫酸塩が含まれるが、これらに限定されない。適切なＴＡＰ脂質には、ＤＯＴＡＰ（ジオレオイル−）、ＤＭＴＡＰ（ジミリストイル−）、ＤＰＴＡＰ（ジパルミトイル−）、およびＤＳＴＡＰ（ジステアロイル−）が含まれるが、これらに限定されない。リポソーム中の適切なカチオン性脂質には、ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）、１，２−ジアシルオキシ−３−トリメチルアンモニウムプロパン、Ｎ−［１−（２，３−ジオロイルオキシ（ｄｉｏｌｏｙｌｏｘｙ））プロピル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン（ＤＯＤＡＰ）、１，２−ジアシルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン、Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、１，２−ジアルキルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）、３−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノ−エタン）カルバモイル］コレステロール（ＤＣ−Ｃｈｏｌ）；２，３−ジオレオイルオキシ−Ｎ−（２−（スペルミンカルボキサミド）−エチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパンアミニウムトリフルオロ−アセテート（ＤＯＳＰＡ）、β−アラニルコレステロール、セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢ）、ジＣ１４−アミジン、Ｎ−ｆｅｒｆ−ブチル−Ｎ’−テトラデシル−３−テトラデシルアミノ−プロピオンアミジン、Ｎ−（アルファ−トリメチルアンモニオアセチル）ジドデシル−Ｄ−グルタメートクロリド（ＴＭＡＧ）、ジテトラデカノイル−Ｎ−（トリメチルアンモニオ−アセチル）ジエタノールアミンクロリド、１，３−ジオレオイルオキシ−２−（６−カルボキシ−スペルミル（ｓｐｅｒｍｙｌ）−プロピルアミド（ＤＯＳＰＥＲ）、およびＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシルエチル）−２，３−ジオレオイルオキシ−１，４−ブタンジアンモニウムヨージドが含まれるが、これらに限定されない。一実施形態では、カチオン性脂質は、１−［２−（アシルオキシ）エチル］２−アルキル（アルケニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリド誘導体、例えば、１−［２−（９（Ｚ）−オクタデセノイルオキシ）エチル］−２−（８（Ｚ）−ヘプタデセニル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウムクロリド（ＤＯＴＩＭ）、および１−［２−（ヘキサデカノイルオキシ）エチル］−２−ペンタデシル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウムクロリド（ＤＰＴＩＭ）であり得る。一実施形態では、カチオン性脂質は、第４級アミンにおいてヒドロキシアルキル部分を含有する２，３−ジアルキルオキシプロピル第４級アンモニウム化合物誘導体、例えば、１，２−ジオレオイル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシプロピルアンモニウム���ロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＰ）、１，２−ジオレイル−オキシ−プロピル−３−ジメチル−ヒドロキシブチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＢ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシペンチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−Ｈｐｅ）、１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシルエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）、１，２−ジパルミチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＰＲＩＥ）、および１，２−ジステリルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＳＲＩＥ）であり得る。
【０２１７】
適切な固体脂質には、高級飽和アルコール、高級脂肪酸、スフィンゴ脂質、合成エステル、ならびに高級飽和脂肪酸のモノ−、ジ−、およびトリグリセリドが含まれるが、これらに限定されない。固体脂質は、１０〜４０個、例えば１２〜３０個の炭素原子を有する脂肪族アルコール、例えばセトステアリルアルコールなどを含むことができる。固体脂質は、１０〜４０個、例えば１２〜３０個の炭素原子の高級脂肪酸、例えば、ステアリン酸、パルミチン酸、デカン酸、およびベヘン酸などを含むことができる。固体脂質は、１０〜４０個、例えば１２〜３０個の炭素原子を有する高級飽和脂肪酸のモノグリセリド、ジグリセリド、およびトリグリセリドを含むグリセリド、例えば、モノステアリン酸グリセリル、グリセロールベヘネート、グリセロールパルミトステアレート、グリセロールトリラウレート、トリカプリン、トリラウリン、トリミリスチン、トリパルミチン、トリステアリン、および水素化ヒマシ油を含むことができる。適切な固体脂質は、パルミチン酸セチル、蜜ろう、またはシクロデキストリンを含むことができる。
【０２１８】
両親媒性化合物には、０．０１〜６０の間（脂質重量／ポリマー重量）、例えば０．１〜３０の間（脂質重量／ポリマー重量）の比で取り込まれるリン脂質、例えば、１，２ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジアラキドイルホスファチジルコリン（ＤＡＰＣ）、ジベヘノイルホスファチジルコリン（ＤＢＰＣ）、ジトリコサノイルホスファチジルコリン（ＤＴＰＣ）、およびジリグノセロイルファチジルコリン（ＤＬＰＣ）が含まれるが、これらに限定されない。使用され得るリン脂質には、ホスファチジン酸、飽和および不飽和脂質の両方を有するホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、リゾホスファチジル誘導体、カルジオリピン、ならびにβ−アシル−ｙ−アルキルリン脂質が含まれるが、これらに限定されない。リン脂質の例としては、ホスファチジルコリン、例えば、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルコリン、ジペンタデカノイルホスファチジルコリン  ジラウロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジアラキドイルホスファチジルコリン（ＤＡＰＣ）、ジベヘノイルホスファチジルコリン（ＤＢＰＣ）、ジトリコサノイルホスファチジルコリン（ＤＴＰＣ）、ジリグノセロイルファチジルコリン（ＤＬＰＣ）；およびホスファチジルエタノールアミン、例えば、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミンまたは１−ヘキサデシル−２−パルミトイルグリセロホスホエタノールアミンが挙げられるが、これらに限定されない。非対称アシル鎖（例えば、６個の炭素の１つのアシル鎖および１２個の炭素の別のアシル鎖）を有する合成リン脂質も使用され得る。
【０２１９】
Ｄ．付加的な活性剤
粒子は、コンジュゲート中の活性剤に加えて、１つまたは複数の付加的な活性剤を含有することができる。付加的な活性剤は、上記のような治療薬、予防薬、診断薬、または栄養剤であり得る。付加的な活性剤は、粒子の重量を基準として、例えば、約０．５％〜約９０％、約０．５％〜約５０％、約０．５％〜約２５％、約０．５％〜約２０％、約０．５％〜約１０％、または約５％〜約１０％（ｗ／ｗ）の任意の量で存在することができる。一実施形態では、薬剤は、約０．５％〜約１０％ｗ／ｗの負荷で取り込まれる。
【０２２０】
Ｅ．付加的な標的化部分
粒子は、コンジュゲートの標的化部分に加えて、粒子を特定の器官、組織、細胞型または細胞内区画に標的化する１つまたは複数の標的化部分を含有することができる。付加的な標的化部分は、粒子の表面、粒子の内部、またはその両方に存在することができる。付加的な標的化部分は、粒子の表面に固定化することができ、例えば、粒子内のポリマーまたは脂質に共有結合させることができる。いくつかの実施形態では、付加的な標的化部分は、標的化部分が粒子の表面に向けられるように、両親媒性ポリマーまたは脂質に共有結合される。
【０２２１】
ＩＶ．製剤
いくつかの実施形態では、組成物は、ヒト、ヒト患者または対象に投与される。本開示の目的のために、「活性成分」という語句は、一般的に、本明細書に記載されるように送達されるコンジュゲートまたはコンジュゲートを含む粒子を指す。
【０２２２】
本明細書で提供される医薬組成物の説明は、主に、ヒトへの投与に適した医薬組成物に関するが、このような組成物が一般的に、任意の他の動物、例えば非ヒト動物、例えば非ヒト哺乳類への投与に適していることは当業者に理解されるであろう。組成物が種々の動物への投与に適するようにするための、ヒトへの投与に適した医薬組成物の修正は十分に理解されており、通常の熟練した獣医薬理学者は、あるとしても単なる通常の実験により、このような修正を設計および／または実施することができる。医薬組成物の投与が企図される対象には、ヒトおよび／または他の霊長類；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、マウス、および／またはラットなどの商業的に関連する哺乳類を含む哺乳類；ならびに／または家禽、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、および／またはシチメンチョウなどの商業的に関連する鳥類を含む鳥類が含まれるが、これらに限定されない。
【０２２３】
本明細書に記載される医薬組成物の製剤は、薬理学の分野で知られているか今後開発される任意の方法によって調製され得る。一般に、このような調製方法は、活性成分を賦形剤および／または１つまたは複数の他の補助成分と関連させ、その後、必要な場合および／または望ましい場合には、生成物を分割、成形および／またはパッケージングして、所望の単回または複数回投与単位にするステップを含む。
【０２２４】
本発明に従う医薬組成物は、バルクで、単回単位用量として、および／または複数の単回単位用量として、調製、パッケージング、および／または販売され得る。本明細書で使用される場合、「単位用量」は、所定量の活性成分を含む医薬組成物の別個の量である。活性成分の量は、一般的に、対象に投与され得る活性成分の投薬量、および／またはこのような投薬量の便利な画分、例えば、このような投薬量の半分もしくは３分の１などに等しい。
【０２２５】
本発明に従う医薬組成物中の活性成分、薬学的に許容可能な賦形剤、および／または任意の付加的な成分の相対的な量は、治療される対象の同一性、サイズ、および／または状態に応じて、さらに組成物が投与される経路に応じて異なるであろう。例として、組成物は、０．１％〜１００％の間、例えば、．５〜５０％の間、１〜３０％の間、５〜８０％の間、少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
【０２２６】
本発明のコンジュゲートまたは粒子は、（１）安定性を増大させるため、（２）持続放出または遅延放出（例えば、モノマレイミドのデポー製剤から）を可能にするため、（３）体内分布（例えば、モノマレイミド化合物を特定の組織または細胞型に標的化する）を変更するため、（４）インビボでのモノマレイミド化合物の放出プロファイルを変更するために、１つまたは複数の賦形剤を用いて製剤化することができる。賦形剤の非限定的な例としては、任意および全ての溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体媒体、分散助剤または懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、および防腐剤が挙げられる。また本発明の賦形剤は、リピドイド（ｌｉｐｉｄｏｉｄ）、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、リポプレックス、コア−シェルナノ粒子、ペプチド、タンパク質、ヒアルロニダーゼ、ナノ粒子模倣物、およびこれらの組み合わせも含み得るが、これらに限定されない。従って、本発明の製剤は、１つまたは複数の賦形剤を、それぞれがモノマレイミド化合物の安定性を一緒に増大させる量で含んでいてもよい。
【０２２７】
賦形剤
医薬製剤はさらに、薬学的に許容可能な賦形剤を含んでいてもよく、これは、本明細書で使用される場合、所望の特定の剤形に適するように、任意および全ての溶媒、分散媒、希釈剤、または他の液体媒体、分散助剤または懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、防腐剤、固体結合剤、潤滑剤などを含む。「レミントンの調剤の科学と実践（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ）」、第２１版、Ａ．Ｒ．ジェンナロ（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ）、（リッピンコット・ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ）、メリーランド州ボルチモア、２００６年；参照によってその全体が本明細書中に援用される）には、医薬組成物の製剤化において使用される種々の賦形剤およびその調製のための既知の技術が開示されている。任意の従来の賦形剤媒体が、任意の望ましくない生物学的効果を生じるか、あるいは別の形で医薬組成物の任意の他の成分と有害に相互作用をするなどによって、物質またはその誘導体と適合しない場合を除いて、その使用は本発明の範囲内であると考えられる。
【０２２８】
いくつかの実施形態では、薬学的に許容可能な賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％純粋である。いくつかの実施形態では、賦形剤は、ヒトにおける使用および獣医学的使用のために承認される。いくつかの実施形態では、賦形剤は、米国食品医薬品局（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）により承認される。いくつかの実施形態では、賦形剤は医薬品グレードである。いくつかの実施形態では、賦形剤は、米国薬局方（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）（ＵＳＰ）、欧州薬局方（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）（ＥＰ）、英国薬局方（Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）、および／または国際薬局方（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）の基準を満たす。
【０２２９】
医薬組成物の製造において使用される薬学的に許容可能な賦形剤には、不活性希釈剤、分散剤および／または造粒剤、界面活性剤および／または乳化剤、崩壊剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、潤滑剤、および／または油が含まれるが、これらに限定されない。このような賦形剤は、医薬組成物中に任意選択的に含まれ得る。
【０２３０】
例示的な希釈剤には、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム  ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉糖など、および／またはこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【０２３１】
例示的な造粒剤および／または分散剤には、ジャガイモデンプン、コーンスターチ、タピオカデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、クレイ、アルギン酸、グァーガム、シトラスパルプ、寒天、ベントナイト、セルロースおよび木製品、天然スポンジ、カチオン交換樹脂、炭酸カルシウム、シリケート、炭酸ナトリウム、架橋ポリ（ビニル−ピロリドン）（クロスポビドン）、カルボキシメチルデンプンナトリウム（デンプングリコール酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロース）、メチルセルロース、アルファ化デンプン（デンプン１５００）、微結晶性デンプン、水不溶性デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ケイ酸マグネシウムアルミニウム（ビーガム（ＶＥＥＧＵＭ）（登録商標））、ラウリル硫酸ナトリウム、第４級アンモニウム化合物など、および／またはこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【０２３２】
例示的な界面活性剤および／または乳化剤には、天然乳化剤（例えば、アカシア、寒天、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、コンドラックス（ｃｈｏｎｄｒｕｘ）、コレステロール、キサンタン、ペクチン、ゼラチン、卵黄、カゼイン、羊毛脂、コレステロール、ワックス、およびレシチン）、コロイドクレイ（例えば、ベントナイト［ケイ酸アルミニウム］およびビーガム（ＶＥＥＧＵＭ）（登録商標）［ケイ酸マグネシウムアルミニウム］）、長鎖アミノ酸誘導体、高分子量アルコール（例えば、ステアリルアルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、トリアセチンモノステアレート、エチレングリコールジステアレート、モノステアリン酸グリセリル、およびプロピレングリコールモノステアレート、ポリビニルアルコール）、カルボマー（例えば、カルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸ポリマー、およびカルボキシビニルポリマー）、カラギナン、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、粉末セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース）、ソルビタン脂肪酸エステル（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート［トゥイーン（ＴＷＥＥＮ）（登録商標）２０］、ポリオキシエチレンソルビタン［トゥイーン（ＴＷＥＥＮｎ）（登録商標）６０］、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート［トゥイーン（ＴＷＥＥＮ）（登録商標）８０］、ソルビタンモノパルミテート［スパン（ＳＰＡＮ）（登録商標）４０］、ソルビタンモノステアレート［スパン（ＳＰＡＮ）（登録商標）６０］、ソルビタントリステアレート［スパン（ＳＰＡＮ）（登録商標）６５］、モノオレイン酸グリセリル、ソルビタンモノオレエート［スパン（ＳＰＡＮ）（登録商標）８０］）、ポリオキシエチレンエステル（例えば、ポリオキシエチレンモノステアレート［ミルジ（ＭＹＲＪ）（登録商標）４５］、ポリオキシエチレン水素化ヒマシ油、ポリエトキシ化ヒマシ油、ポリオキシメチレンステアレート、およびソルトール（ＳＯＬＵＴＯＬ）（登録商標））、スクロース脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル（例えば、クレモフォール（ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ）（登録商標））、ポリオキシエチレンエーテル、（例えば、ポリオキシエチレンラウリルエーテル［ブリジ（ＢＲＩＪ）（登録商標）３０］）、ポリ（ビニル−ピロリドン）、ジエチレングリコールモノラウレート、トリエタノールアミンオレエート、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリン酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、プルオリンク（ＰＬＵＯＲＩＮＣ）（登録商標）Ｆ６８、ポロキサマー（ＰＯＬＯＸＡＭＥＲ）（登録商標）１８８、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドクサートナトリウムなど、ならびに／またはこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【０２３３】
例示的な結合剤には、デンプン（例えば、コーンスターチおよびデンプンペースト）；ゼラチン；糖（例えば、スクロース、グルコース、デキストロース、デキストリン、糖蜜、ラクトース、ラクチトール、マンニトール）；天然および合成ガム（例えば、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アイリッシュ・モスの抽出物、パンワール（ｐａｎｗａｒ）ガム、ガティガム、イサポール皮（ｉｓａｐｏｌ  ｈｕｓｋ）の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、酢酸セルロース、ポリ（ビニル−ピロリドン）、ケイ酸マグネシウムアルミニウム（ビーガム（Ｖｅｅｇｕｍ）（登録商標））、およびラーチ・アラボガラクタン（ｌａｒｃｈ  ａｒａｂｏｇａｌａｃｔａｎ））；アルギネート；ポリエチレンオキシド；ポリエチレングリコール；無機カルシウム塩；ケイ酸；ポリメタクリレート；ワックス；水；アルコールなど；ならびにこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【０２３４】
例示的な防腐剤には、酸化防止剤、キレート剤、抗菌防腐剤、抗真菌防腐剤、アルコール防腐剤、酸性防腐剤、および／または他の防腐剤が含まれ得るが、これらに限定されない。例示的な酸化防止剤には、アルファトコフェロール、アスコルビン酸、パルミチン酸アコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、モノチオグリセロール、メタ重亜硫酸カリウム、プロピオン酸、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、および／または亜硫酸ナトリウムが含まれるが、これらに限定されない。例示的なキレート剤には、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸一水和物、エデト酸二ナトリウム、エデト酸二カリウム、エデト酸、フマル酸、リンゴ酸、リン酸、エデト酸ナトリウム、酒石酸、および／またはエデト酸三ナトリウムが含まれる。例示的な抗菌防腐剤には、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミド尿素、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル第二水銀、プロピレングリコール、および／またはチメロサールが含まれるが、これらに限定されない。例示的な抗真菌防腐剤には、ブチルパラベン、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、および／またはソルビン酸が含まれるが、これらに限定されない。例示的なアルコール防腐剤には、エタノール、ポリエチレングリコール、フェノール、フェノール化合物、ビスフェノール、クロロブタノール、ヒドロキシベンゾエート、および／またはフェニルエチルアルコールが含まれるが、これらに限定されない。例示的な酸性防腐剤には、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ベータ−カロテン、クエン酸、酢酸、デヒドロ酢酸、アスコルビン酸、ソルビン酸、および／またはフィチン酸が含まれるが、これらに限定されない。その他の防腐剤には、トコフェロール、酢酸トコフェロール、デテルオキシムメシレート（ｄｅｔｅｒｏｘｉｍｅ  ｍｅｓｙｌａｔｅ）、セトリミド、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ｈｙｄｒｏｘｙｔｏｌｕｅｎｅｄ）（ＢＨＴ）、エチレンジアミン、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、メタ重亜硫酸カリウム、グリダント・プラス（ＧＬＹＤＡＮＴ  ＰＬＵＳ）（登録商標）、フェノニップ（ＰＨＥＮＯＮＩＰ）（登録商標）、メチルパラベン、ゲルマール（ＧＥＲＭＡＬＬ）（登録商標）１１５、ゲルマベン（ＧＥＲＭＡＢＥＮ）（登録商標）ＩＩ、ネオロン（ＮＥＯＬＯＮＥ）（商標）、カトン（ＫＡＴＨＯＮ）（商標）、および／またはユーキシル（ＥＵＸＹＬ）（登録商標）が含まれるが、これらに限定されない。
【０２３５】
例示的な緩衝剤には、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸緩衝液、塩化アンモニウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルビオン酸カルシウム、グルセプト酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、Ｄ−グルコン酸、グリセロリン酸カルシウム、乳酸カルシウム、プロパン酸、レブリン酸カルシウム、ペンタン酸、二塩基性リン酸カルシウム、リン酸、三塩基性リン酸カルシウム、水酸化リン酸カルシウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、カリウム混合物、二塩基性リン酸カリウム、一塩基性リン酸カリウム、リン酸カリウム混合物、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム混合物、トロメタミン、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、発熱物質を含まない水、等張食塩水、リンゲル溶液、エチルアルコールなど、および／またはこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【０２３６】
例示的な潤滑剤には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、シリカ、タルク、麦芽、グリセリルベハナート（ｇｌｙｃｅｒｙｌ  ｂｅｈａｎａｔｅ）、水素化植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、ラウリル硫酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムなど、およびこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【０２３７】
例示的な油には、アーモンド油、アプリコットカーネル油、アボカド油、ババス油、ベルガモット油、ブラックカラント種子油、ルリヂサ油、ケード油、カモミール油、キャノーラ油、キャラウェー油、カルナウバ油、ヒマシ油、シナモン油、ココアバター油、ココナッツ油、タラ肝油、コーヒー油、コーン油、綿実油、エミュー油、ユーカリ油、月見草油、魚油、アマニ油、ゲラニオール油、ヒョウタン油、ブドウ種子油、ヘーゼルナッツ油、ヒソップ油、ミリスチン酸イソプロピル油、ホホバ油、ククイナッツ油、ラバンディン油、ラベンダー油、レモン油、リツェアクベバ油、マカダミアナッツ油、マロー油、マンゴー種子油、メドウフォーム種子油、ミンク油、ナツメグ油、オリーブ油、オレンジ油、オレンジラフィー油、パーム油、パームカーネル油、ピーチカーネル油、ピーナッツ油、ケシ種子油、カボチャ種子油、菜種油、米ぬか油、ローズマリー油、ベニバナ油、ビャクダン油、サスクアナ（ｓａｓｑｕａｎａ）油、セイボリー油、シーバックソーン油、ゴマ油、シアバター油、シリコーン油、大豆油、ヒマワリ油、ティーツリー油、アザミ油、ツバキ油、ベチバー油、クル油ミ、および小麦胚芽油が含まれるが、これらに限定されない。例示的な油には、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油、および／またはこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【０２３８】
ココアバターおよび坐薬ワックスなどの賦形剤、着色剤、コーティング剤、甘味料、風味料、および／または香料は、製剤化者の判断に従って、組成物中に存在することができる。
【０２３９】
いくつかの実施形態では、本発明のコンジュゲートを含む医薬組成物は、約４．０〜約５．０の間、好ましくは約４．０〜約４．５の間のｐＨを有する。例えば、酢酸緩衝液が使用され得る。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、本発明のコンジュゲートを含む医薬組成物はさらに、ソルトール（ｓｏｌｕｔｏｌ）ＨＳ１５および／またはマンニトールを含む。
１つの非限定的な例では、本発明のコンジュゲートを含む医薬組成物はさらに、１０ｍＭ酢酸緩衝液／５％マンニトール／注射用水（ＷＦＩ）中に２％のソルトール（Ｓｏｌｕｔｏｌ）ＨＳ１５を含み、ｐＨ４．０〜４．５に保持される。
【０２４１】
本発明のコンジュゲートを含む注射組成物のための溶液は、ガラスバイアル中−２０℃以下で冷凍保存され得る。本発明のコンジュゲートの濃度は、１．５ｍｇ／ｍＬ〜３．５ｍｇ／ｍＬの間、２ｍｇ／ｍＬ〜３ｍｇ／ｍＬの間、または約２．５ｍｇ／ｍＬであり得る。注射用の溶液は、本発明のコンジュゲートの濃度が約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約０．５ｍｇ／ｍＬの間、好ましくは約０．１０ｍｇ／ｍＬ〜約０．３ｍｇ／ｍＬの間である注入用の溶液に希釈され得る。
【０２４２】
投与
本発明のコンジュゲートまたは粒子は、治療的に有効な結果をもたらす任意の経路によって投与され得る。これらには、経腸、胃腸内、硬膜外、経口、経皮、硬膜外（硬膜上）、脳内（大脳の中へ）、脳室内（脳室の中へ）、皮膚上（皮膚上への適用）、皮内（皮膚自体の中へ）、皮下（皮膚の下）、経鼻投与（鼻を通して）、静脈内（静脈の中へ）、動脈内（動脈の中へ）、筋肉内（筋肉の中へ）、心臓内（心臓の中へ）、骨内注入（骨髄の中へ）、くも膜下腔内（脊柱管の中へ）、腹腔内（腹膜への注入または注射）、膀胱内注入、硝子体内（眼を通して）、空洞内注射、（陰茎基部の中へ）、膣内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮（全身分布のために無傷の皮膚を通して拡散）、経粘膜（粘膜を通して拡散）、吹送（鼻から吸引）、舌下、唇の下（ｓｕｂｌａｂｉａｌ）、浣腸、点眼（結膜の上へ）、または点耳が含まれるが、これらに限定されない。具体的な実施形態では、組成物は、血液脳関門、血管関門、または他の上皮性関門を通過できるようにする手段で投与され得る。
【０２４３】
本明細書に記載される製剤は、それを必要としている個体に投与するのに適した医薬品担体中に、有効量のコンジュゲートまたは粒子を含有する。製剤は、非経口的に（例えば、注射または注入によって）投与され得る。製剤またはそのバリエーションは、経腸的、局所的（例えば、眼に）、または肺経由による投与を含む任意の方法で投与され得る。いくつかの実施形態では、製剤は局所的に投与される。
【０２４４】
Ａ．非経口製剤
粒子は、注射または注入などの非経口送達のために、溶液、懸濁液またはエマルションの形態で製剤化することができる。製剤は、全身的、局所的、または治療される器官または組織に直接的に投与することができる。
【０２４５】
非経口製剤は、当該技術分野で知られている技術を用いて、水性組成物として調製することができる。通常、このような組成物は、注射用の製剤、例えば、溶液または懸濁液として；注射前に再構成媒体の添加において溶液または懸濁液を調製するために使用するのに適した固体形態として；エマルション、例えば、油中水（ｗ／ｏ）型エマルション、水中油（ｏ／ｗ）型エマルション、およびこれらのマイクロエマルション、リポソーム、またはエマルソーム（ｅｍｕｌｓｏｍｅ）として調製することができる。
【０２４６】
担体は、例えば、水、エタノール、１つまたは複数のポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコール）、油、例えば、植物油（例えば、ピーナッツ油、コーン油、ゴマ油など）、およびこれらの組み合わせを含有する溶媒または分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散の場合に必要とされる粒径の保持、および／または界面活性剤の使用によって保持することができる。場合によっては、例えば、１つまたは複数の糖、塩化ナトリウム、または当該技術分野で既知の他の適切な薬剤などの等張剤が含まれる。
【０２４７】
粒子の溶液および分散系は、界面活性剤、分散剤、乳化剤、ｐＨ調整剤、およびこれらの組み合わせを含むがこれらに限定されない１つまたは複数の薬学的に許容可能な賦形剤と適切に混合される水または別の溶媒または分散媒中で調製することができる。
【０２４８】
適切な界面活性剤は、アニオン性、カチオン性、両性または非イオン性の界面活性剤であり得る。適切なアニオン性界面活性剤には、カルボン酸イオン、スルホン酸イオンおよび硫酸イオンを含有するものが含まれるが、これらに限定されない。アニオン性界面活性剤の例としては、長鎖アルキルスルホン酸およびアルキルアリールスルホン酸のナトリウム、カリウム、アンモニウム塩、例えば、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム；ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウムなどのジアルキルスルホコハク酸ナトリウム；ビス−（２−エチルチオキシル（ｅｔｈｙｌｔｈｉｏｘｙｌ））スルホコハク酸ナトリウムなどのジアルキルスルホコハク酸ナトリウム；およびラウリル硫酸ナトリウムなどのアルキル硫酸塩が挙げられる。カチオン性界面活性剤には、第４級アンモニウム化合物、例えば、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、臭化セトリモニウム、ステアリルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、ポリオキシエチレンおよびココナッツアミンが含まれるが、これらに限定されない。非イオン性界面活性剤の例としては、エチレングリコールモノステアレート、プロピレングリコールミリステート、モノステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル、ポリグリセリル−４−オレエート、ソルビタンアシレート、スクロースアシレート、ＰＥＧ−１５０ラウレート、ＰＥＧ−４００モノラウレート、ポリオキシエチレンモノラウレート、ポリソルベート、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル、ＰＥＧ−１０００セチルエーテル、ポリオキシエチレントリデシルエーテル、ポリプロピレングリコールブチルエーテル、ポロキサマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）（登録商標）４０１、ステアロイルモノイソプロパノールアミド、およびポリオキシエチレン水素化獣脂アミドが挙げられる。両性界面活性剤の例としては、Ｎ−ドデシル−β−アラニンナトリウム、Ｎ−ラウリル−β−イミノジプロピオン酸ナトリウム、ミリストアンホアセテート（ｍｙｒｉｓｔｏａｍｐｈｏａｃｅｔａｔｅ）、ラウリルベタインおよびラウリルスルホベタインが挙げられる。
【０２４９】
製剤は、微生物の成長を防止するために防腐剤を含有することができる。適切な防腐剤には、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、およびチメロサールが含まれるが、これらに限定されない。製剤は、活性剤または粒子の分解を防止するために酸化防止剤を含み得る。
【０２５０】
製剤は、通常、再構成の際に非経口投与のために３〜８のｐＨに緩衝される。適切な緩衝剤には、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、およびクエン酸緩衝液が含まれるが、これらに限定されない。１０％スクロースまたは５％デキストロースを使用すれば、緩衝液は必要とされないこともある。
【０２５１】
水溶性ポリマーは、多くの場合、非経口投与のための製剤において使用される。適切な水溶性ポリマーには、ポリビニルピロリドン、デキストラン、カルボキシメチルセルロース、およびポリエチレングリコールが含まれるが、これらに限定されない。
【０２５２】
滅菌注射用溶液は、上記の賦形剤の１つまたは複数を含む適切な溶媒または分散媒中に、必要とされる量の粒子を取り込んだ後、必要に応じてろ過滅菌を行なうことによって調製することができる。一般に、分散系は、塩基性分散媒および上記のものからの必要な他の成分を含有する滅菌媒体に、種々の滅菌粒子を取り込むことによって調製される。滅菌注射用溶液の調製のための滅菌粉末の場合、調製方法の例としては、予め滅菌ろ過されたその溶液から、任意の付加的な所望の成分を加えた粒子の粉末をもたらす真空乾燥および凍結乾燥技術が挙げられる。粉末は、粒子が事実上多孔質であり、粒子の溶解を増大させることができるような形で調製することができる。多孔質粒子を製造するための方法は、当該技術分野において知られている。
【０２５３】
非経口投与のための医薬製剤は、１つまたは複数のポリマー−薬物コンジュゲートから形成される粒子の滅菌水溶液または懸濁液の形態であり得る。許容可能な溶媒には、例えば、水、リンゲル溶液、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、および等張性塩化ナトリウム溶液が含まれる。また製剤は、１，３−ブタンジオールなどの非経口的に許容可能な非毒性の希釈剤または溶媒中の滅菌溶液、懸濁液、またはエマルションであってもよい。
【０２５４】
場合により、製剤は、液体形態で分配またはパッケージングされる。あるいは、非経口投与のための製剤は、例えば適切な液体製剤の凍結乾燥によって得られる固体として、パッケージングすることができる。固体は、投与前に、適切な担体または希釈剤で再構成することができる。
【０２５５】
非経口投与のための溶液、懸濁液、またはエマルションは、眼球投与に適したｐＨを保持するために必要な有効量の緩衝液によって緩衝され得る。適切な緩衝液は当業者により十分に知られており、有用な緩衝液のいくつかの例は、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液、クエン酸緩衝液、およびリン酸緩衝液である。
【０２５６】
非経口投与のための溶液、懸濁液、またはエマルションは、製剤の等張範囲を調整するために１つまたは複数の等張化剤も含有し得る。適切な等張化剤は当該技術分野で十分に知られており、いくつかの例として、グリセリン、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウム、および他の電解質が挙げられる。
【０２５７】
非経口投与のための溶液、懸濁液、またはエマルションは、点眼薬の細菌汚染を防止するために１つまたは複数の防腐剤も含有し得る。適切な防腐剤は当該技術分野において知られており、ポリヘキサメチレンビグアニジン（ＰＨＭＢ）、塩化ベンザルコニウム（ＢＡＫ）、安定化オキシクロロ錯体（他に、プライト（Ｐｕｒｉｔｅ）（登録商標）として知られている）、酢酸フェニル第二水銀、クロロブタノール、ソルビン酸、クロルヘキシジン、ベンジルアルコール、パラベン、チメロサール、およびこれらの混合物を含む。
【０２５８】
非経口投与のための溶液、懸濁液、またはエマルションは、分散剤、湿潤剤、および懸濁化剤などの、当該技術分野で既知の１つまたは複数の賦形剤も含有し得る。
Ｂ．粘膜局所製剤
粒子は、粘膜表面への局所投与ために製剤化することができる。局所投与に適した剤形には、クリーム、軟膏、膏薬、スプレー、ジェル、ローション、エマルション、液体、および経皮パッチが含まれる。製剤は、経粘膜、経上皮、または経内皮投与のために製剤化され得る。組成物は、１つまたは複数の化学的浸透促進剤、膜透過剤、膜輸送剤、皮膚軟化薬、界面活性剤、安定剤、およびこれらの組み合わせを含有する。いくつかの実施形態では、粒子は、溶液または懸濁液などの液体製剤、ローションまたは軟膏などの半固体製剤、あるいは固体製剤として投与することができる。いくつかの実施形態では、粒子は、点眼薬などの溶液および懸濁液を含む液体として、あるいは眼などの粘膜または膣または直腸に対する半固体製剤として製剤化される。
【０２５９】
「界面活性剤」は、表面張力を低下させ、それにより生成物の乳化、発泡、分散、拡散および湿潤特性を増大させる表面活性薬剤である。適切な非イオン性界面活性剤は、乳化ワックス、モノオレイン酸グリセリル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリソルベート、ソルビタンエステル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、シクロデキストリン、モノステアリン酸グリセリン、ポロキサマー、ポビドン、およびこれらの組み合わせを含む。一実施形態では、非イオン性界面活性剤はステアリルアルコールである。
【０２６０】
「乳化剤」は、１つの液体の別の液体中での懸濁を促進し、油および水の安定な混合物またはエマルションの形成を促進する表面活性物質である。一般的な乳化剤は、金属セッケン、特定の動物および植物油、ならびに種々の極性化合物である。適切な乳化剤には、アカシア、アニオン性乳化ワックス、ステアリン酸カルシウム、カルボマー、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、コレステロール、ジエタノールアミン、パルミトステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリン、モノオレイン酸グリセリル、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒプロメロース、ラノリン、含水物、ラノリンアルコール、レシチン、中鎖トリグリセリド、メチルセルロース、鉱油およびラノリンアルコール、一塩基性リン酸ナトリウム、モノエタノールアミン、非イオン性乳化ワックス、オレイン酸、ポロキサマー、ポロキサマー類、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、アルギン酸プロピレングリコール、自己乳化モノステアリン酸グリセリル、クエン酸ナトリウム脱水物、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンエステル、ステアリン酸、ヒマワリ油、トラガカント、トリエタノールアミン、キサンタンガム、およびこれらの組み合わせが含まれる。一実施形態では、乳化剤は、ステアリン酸グリセロールである。
【０２６１】
適切な浸透促進剤の種類は当該技術分野において知られており、脂肪アルコール、脂肪酸エステル、脂肪酸、脂肪アルコールエーテル、アミノ酸、リン脂質、レシチン、コール酸塩、酵素、アミンおよびアミド、錯化剤（リポソーム、シクロデキストリン、変性セルロース、およびジイミド）、大環状物質、例えば、大環状ラクトン、ケトン、および無水物および環状尿素、界面活性剤、Ｎ−メチルピロリドンおよびその誘導体、ＤＭＳＯおよび関連化合物、イオン性化合物、アゾン（ａｚｏｎｅ）および関連化合物、ならびにアルコール、ケトン、アミド、ポリオール（例えば、グリコール）などの溶媒が含まれるが、これらに限定されない。これらの種類の例は当該技術分野において知られている。
【０２６２】
投薬
本発明は、本明細書に記載されるコンジュゲートまたはコンジュゲートを含有する粒子を、それを必要としている対象に投与することを含む方法を提供する。本明細書に記載されるコンジュゲートまたはコンジュゲートを含有する粒子は、疾患、障害、および／または状態（例えば、作業記憶障害に関する疾患、障害、および／または状態）を予防または治療またはイメージングするために有効な任意の投与量および任意の投与経路を用いて、対象に投与され得る。必要とされる正確な量は、対象の種属、年齢、および全身状態、疾患の重症度、特定の組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて、対象間で異なるであろう。
【０２６３】
本発明に従う組成物は、通常、投与の容易さおよび投薬量の均一性のために単位剤形で製剤化される。しかしながら、本発明の組成物１日の総使用量が、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定され得ることは理解されるであろう。任意の特定の患者に対する特定の治療的に有効な用量レベル、予防的に有効な用量レベル、または適切なイメージングの用量レベルは、治療される障害および障害の重症度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別および食生活；使用される特定の化合物の投与時期、投与経路、および排泄速度；治療期間；使用される特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物；ならびに医学分野で周知の同様の因子を含む様々な因子に依存するであろう。
【０２６４】
いくつかの実施形態では、本発明に従う組成物は、所望の治療効果、診断効果、予防効果、またはイメージング効果を得るために、１日１回または複数回、１日当たり、対象の体重の約０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇを送達するのに十分な投薬量レベルで投与され得る。所望の投薬量は、１日３回、１日２回、１日１回、１日おき、３日ごと、毎週、２週ごと、３週ごと、または４週ごとに送達され得る。いくつかの実施形態では、所望の投薬量は、複数の投与（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４またはそれ以上の投与）を用いて送達され得る。複数の投与が用いられる場合、本明細書に記載されるような分割投与計画が使用され得る。
【０２６５】
本明細書で使用される場合、「分割用量」は、単回単位用量または１日の総用量を２つ以上の用量に分割することであり、例えば、単回単位用量の２回以上の投与である。本明細書で使用される場合、「単回単位用量」は、１回の用量で／一度に／単一経路で／単一の接触点、すなわち単一の投与イベントで投与される任意の治療薬の用量である。本明細書で使用される場合、「１日の総用量」は、２４時間の間に与えられるまたは処方される量である。それは、単回単位用量として投与されてもよい。一実施形態では、本発明のモノマレイミド化合物は、分割用量で対象に投与される。モノマレイミド化合物は緩衝液だけの中に製剤化されてもよいし、本明細書に記載される製剤中に製剤化されてもよい。
【０２６６】
剤形
本明細書に記載される医薬組成物は、本明細書に記載される剤形、例えば、局所、鼻腔内、気管内、または注射（例えば、静脈内、眼内、硝子体内、筋肉内、心臓内、腹腔内、皮下）用剤形に製剤化することができる。
【０２６７】
液体剤形
非経口投与のための液体剤形には、薬学的に許容可能なエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップ、および／またはエリキシル剤が含まれるが、これらに限定されない。活性成分に加えて、液体剤形は、水または他の溶媒、可溶化剤、および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカーボネート、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物を含むがこれらに限定されない、当該技術分野において一般的に使用される不活性希釈剤を含み得る。非経口投与のための特定の実施形態では、組成物は、クレモフォール（ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ）（登録商標）、アルコール、油、変性油、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマー、および／またはこれらの組み合わせなどの可溶化剤と混合され得る。
【０２６８】
注射用
注射用調製物、例えば、滅菌注射用水性または油性懸濁液は既知の技術に従って製剤化することができ、適切な分散剤、湿潤剤、および／または懸濁化剤を含み得る。滅菌注射用調製物は、非経口的に許容可能な非毒性の希釈剤および／または溶媒中の滅菌注射用溶液、懸濁液、および／またはエマルション、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液であり得る。使用され得る許容可能な媒体および溶媒の中には、水、リンゲル溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、および等張性塩化ナトリウム溶液が含まれるが、これらに限定されない。滅菌固定油は、溶媒または懸濁媒体として従来通りに用いられる。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む、刺激のない任意のブレンド固定油を使用することができる。オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製において使用することができる。
【０２６９】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルタによるろ過によって、および／または使用前に滅菌水または他の滅菌注射用媒体中に溶解または分散可能な滅菌固体組成物の形態の滅菌剤を取り込むことによって滅菌することができる。
【０２７０】
活性成分の効果を長くするために、皮下または筋肉内注射から活性成分の吸収を遅くするのが望ましいこともある。これは、水溶性が不十分な結晶性材料または非晶質材料の液体懸濁液の使用によって達成され得る。次に、モノマレイミド化合物の吸収速度はその溶解速度に依存し、これは次に、結晶サイズおよび結晶形態に依存し得るあるいは、非経口投与されたモノマレイミド化合物の遅延吸収は、モノマレイミドを油媒体中に溶解または懸濁させることによって達成され得る。注射用デポー形態は、ポリ乳酸−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中のモノマレイミド化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成することによって製造される。モノマレイミド化合物のポリマーに対する比、および使用される特定のポリマーの性質に応じて、モノマレイミド化合物の放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられるが、これらに限定されない。注射用デポー製剤は、身体組織に適合するリポソームまたはマイクロエマルション内にモノマレイミド化合物を捕捉することによって調製され得る。
【０２７１】
肺内
肺内送達のために有用であるような本明細書に記載される製剤は、医薬組成物の鼻腔内送達のためにも使用され得る。鼻腔内投与に適した別の製剤は、約０．２ｕｍ〜５００ｕｍの平均粒子を有する、活性成分を含む粗粉末であり得る。このような製剤は、嗅ぎタバコを摂取するような方法で、すなわち、鼻の近くに保持される粉末の容器から鼻腔を介して急速に吸入することによって投与され得る。
【０２７２】
経鼻投与に適した製剤は、例えば、わずか約０．１％（ｗ／ｗ）から１００％（ｗ／ｗ）もの活性成分を含むことができ、本明細書に記載される付加的な成分のうちの１つまたは複数を含んでいてもよい。医薬組成物は、頬側投与に適した製剤において調製、パッケージング、および／または販売されてもよい。このような製剤は、例えば、従来の方法を用いて製造される錠剤および／またはロゼンジの形態でよく、例えば、約０．１％〜２０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含有することができ、ここで残りは、経口溶解可能および／または分解可能な組成物と、任意選択的に、本明細書に記載される付加的な成分の１つまたは複数とを含有し得る。あるいは、頬側投与に適した製剤は、活性成分を含む、粉末ならびに／またはエアロゾル化および／もしくは霧化された溶液および／もしくは懸濁液を含み得る。このような粉末化製剤、エアロゾル化製剤、および／またはエアロゾル化製剤は、分散される場合、約０．１ｎｍ〜約２００ｎｍの範囲の平均粒子および／または液滴サイズを有することができ、本明細書に記載される任意の付加的な成分の１つまたは複数をさらに含んでいてもよい。
【０２７３】
医薬品の製剤および／または製造における一般的な考察は、例えば、「レミントン：調剤の科学と実践（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ）」、第２１版、リッピンコット・ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ）、２００５年（参照によってその全体が本明細書中に援用される）において見出すことができる。
【０２７４】
コーティングまたはシェル
錠剤、糖衣錠、カプセル、丸剤、および顆粒の固体剤形は、製剤処方分野で周知の腸溶コーティングおよび他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。これらは任意選択的に乳白剤を含んでいてもよく、腸管の特定の部分において、任意選択的に遅延した形で、これらが活性成分のみを放出または優先的に放出する組成を有し得る。使用可能な包理組成物の例としては、高分子物質およびワックスが挙げられる。類似タイプの固体組成物は、ラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を用いる軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤として使用され得る。
【０２７５】
Ｖ．粒子の製造方法
種々の実施形態では、粒子の製造方法は、コンジュゲートを提供し；粒子を形成するためのＰＬＡ−ＰＥＧまたはＰＬＧＡ−ＰＥＧなどの基本成分を提供し；有機溶液中でコンジュゲートおよび基本成分を混ぜ合わせて第１の有機相を形成し；そして第１の有機相を第１の水溶液と混ぜ合わせて第２の相を形成し；第２の相を乳化させてエマルション相を形成し；そして粒子を回収することを含む。種々の実施形態では、エマルション相はさらに均質化される。いくつかの実施形態では、第１の相は、コンジュゲートおよび基本成分の約５〜約５０％の重量、例えば、約１〜約４０％の固体、または約５〜約３０％の固体、例えば、約５％、１０％、１５％、および２０％を含む。特定の実施形態では、第１の相は、コンジュゲートおよび基本成分の約５％の重量を含む。種々の実施形態では、有機相は、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、イソプロピルアルコール、酢酸イソプロピル、ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、ジクロロメタン、クロロホルム、アセトン、ベンジルアルコール、トゥイーン（ＴＷＥＥＮ）（登録商標）８０、スパン（ＳＰＡＮ）（登録商標）８０、またはこれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、有機相は、ベンジルアルコール、酢酸エチル、またはこれらの組み合わせを含む。
【０２７６】
種々の実施形態では、水溶液は、水、コール酸ナトリウム、酢酸エチル、またはベンジルアルコールを含む。種々の実施形態では、界面活性剤は、第１の相、第２の相、またはその両方に添加される。界面活性剤は、場合により、本明細書で開示される組成物のための乳化剤または安定剤の機能を果たすこともできる。適切な界面活性剤は、カチオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、または非イオン性界面活性剤であり得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組成物を製造するのに適した界面活性剤は、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルおよびステアリン酸ポリオキシエチレンを含む。このような脂肪酸エステル非イオン性界面活性剤の例は、ＩＣＩからのトゥイーン（ＴＷＥＥＮ）（登録商標）８０、スパン（ＳＰＡＮ）（登録商標）８０、およびＭＹＪ（登録商標）界面活性剤である。スパン（ＳＰＡＮ）（登録商標）界面活性剤は、Ｃ１２〜Ｃ１８ソルビタンモノエステルを含む。トゥイーン（ＴＷＥＥＮ）（登録商標）界面活性剤は、ポリ（エチレンオキシド）Ｃ１２〜Ｃ１８ソルビタンモノエステルを含む。ＭＹＪ（登録商標）界面活性剤は、ステアリン酸ポリ（エチレンオキシド）を含む。特定の実施形態では、水溶液は、ポリソルベートを含む界面活性剤（例えば、乳化剤）も含む。例えば、水溶液はポリソルベート８０を含むことができる。いくつかの実施形態では、適切な界面活性剤は、脂質ベースの界面活性剤を含む。例えば、組成物は、１，２−ジヘキサノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジヘプタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、ＰＥＧ化１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＰＥＧ５０００−ＤＳＰＥを含む）、ＰＥＧ化１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−５０００］（アンモニウム塩）を含む）を含むことができる。
【０２７７】
第２の相の乳化によるエマルション相の形成は、１段階または２段階の乳化工程で実施され得る。例えば、一次エマルションが調製され、次に、乳化されて微細エマルションが形成されてもよい。一次エマルションは、例えば、単純混合、高圧ホモジナイザー、プローブソニケータ、攪拌子、またはロータ・ステータホモジナイザーを用いて形成することができる。一次エマルションは、例えば、プローブソニケータまたは高圧ホモジナイザーの使用により、例えば、ホモジナイザーを通過させることによって、微細エマルションに形成され得る。例えば、高圧ホモジナイザーが使用される場合、使用される圧力は、約２７．６〜約５５．１ＭＰａ（約４０００〜約８０００ｐｓｉ）、約２７．６〜約３４．５ＭＰａ（約４０００〜約５０００ｐｓｉ）、または２７．６ＭＰａ（４０００ｐｓｉ）もしくは３４．５ＭＰａ（５０００ｐｓｉ）であり得る。
【０２７８】
溶媒の抽出を完了させ、粒子を凝固させるために、溶媒蒸発または希釈のいずれかが必要とされ得る。抽出の動態学のより良い制御およびよりスケーラブルなプロセスのために、水性クエンチによる溶媒希釈が使用され得る。例えば、エマルションは、有機溶媒の全てを溶解させるのに十分な濃度まで冷水中に希釈され、クエンチ相を形成することができる。クエンチングは、約５℃以下の温度で少なくとも部分的に実施され得る。例えば、クエンチングに使用される水は、室温よりも低い温度（例えば、約０〜約１０℃、または約０〜約５℃）であり得る。
【０２７９】
種々の実施形態では、粒子はろ過により回収される。例えば、限外ろ過膜を使用することができる。例示的なろ過は、接線流ろ過システムを用いて実施され得る。例えば、溶質、ミセル、および有機溶媒を通過させながら粒子を保持するのに適した細孔サイズを有する膜を使用することにより、粒子を選択的に分離することができる。約３００〜５００ｋＤａ（−５〜２５ｎｍ）の分子量カットオフを有する例示的な膜が使用されてもよい。
【０２８０】
種々の実施形態では、粒子は、場合によりその貯蔵期間を延長するために、フリーズドライまたは凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、組成物は凍結乾燥保護剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）も含む。特定の実施形態では、凍結乾燥保護剤は、糖、多価アルコール、またはこれらの誘導体から選択される。いくつかの実施形態では、凍結乾燥保護剤は、単糖、二糖、またはこれらの混合物から選択される。例えば、凍結乾燥保護剤は、スクロース、ラクツロース、トレハロース、ラクトース、グルコース、マルトース、マンニトール、セロビオース、またはこれらの混合物であり得る。
【０２８１】
１つまたは複数のコンジュゲートを含有する粒子の製造方法が提供される。粒子は、高分子粒子、脂質粒子、またはこれらの組み合わせであり得る。本明細書に記載される種々の方法は、粒子のサイズおよび組成を制御するように調整することができ、例えば、いくつかの方法はマイクロ粒子を調製するのに最も適しているが、他の方法は粒子の調製により適している。記載される特徴を有する粒子の調製方法の選択は、過度の実験を行うことなく当業者により実施され得る。
【０２８２】
ｉ．高分子粒子
高分子粒子の製造方法は当該技術分野において知られている。高分子粒子は、当該技術分野で既知の任意の適切な方法を用いて調製することができる。一般的なマイクロカプセル化技術には、スプレー乾燥、界面重合、ホットメルトカプセル化、相分離カプセル化（自発的乳化マイクロカプセル化、溶媒蒸発マイクロカプセル化、および溶媒除去マイクロカプセル化）、コアセルベーション、低温ミクロスフェア形成、および転相ナノカプセル化（ＰＩＮ）が含まれるが、これらに限定されない。これらの方法の簡単な概要は以下に提示される。
【０２８３】
１．スプレー乾燥
スプレー乾燥技術を用いた高分子粒子の形成方法は、米国特許第６，６２０，６１７号明細書に記載されている。この方法では、ポリマーは、塩化メチレンなどの有機溶媒または水中に溶解される。粒子中に取り込まれる既知の量の１つまたは複数のコンジュゲートまたは付加的な活性剤は、ポリマー溶液中に懸濁（不溶性活性剤の場合）または共溶解（可溶性活性剤の場合）される。溶液または分散系は、圧縮ガスの流れにより駆動される微粉化ノズルを通して送り出され、得られたエアロゾルは、加熱された空気のサイクロンにおいて懸濁されて、溶媒が微小液滴から蒸発して粒子を形成することを可能にする。０．１〜１０ミクロンの間の範囲のミクロスフェア／ナノスフェアは、この方法を用いて得ることができる。
【０２８４】
２．界面重合
また界面重合も、１つまたは複数のコンジュゲートおよび／または活性剤をカプセル化するために使用することができる。この方法を用いて、モノマーおよびコンジュゲートまたは活性剤は溶媒中に溶解される。第２のモノマーは、第１の溶媒と非混和性である第２の溶媒（通常、水性）中に溶解される。エマルションは、第１の溶液を第２の溶液中に撹拌しながら懸濁させることによって形成される。エマルションが安定化したら、開始剤が水相に添加され、エマルションの各液滴の界面で界面重合が起こる。
【０２８５】
３．ホットメルトマイクロカプセル化
ミクロスフェアは、マシオウィッツ（Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚ）ら著、「反応性ポリマー（Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ）」、第６巻、ｐ．２７５（１９８７年）に記載されるようなホットメルトマイクロカプセル化法を用いて、ポリエステルおよびポリ無水物などのポリマーから形成することができる。この方法を用いるいくつかの実施形態では、３，０００〜７５，０００ダルトンの間の分子量を有するポリマーが使用される。この方法では、ポリマーはまず溶融され、次に、５０ミクロン未満までふるい分けられた、取り込まれる１つまたは複数の活性剤の固体粒子と混合される。混合物は非混和性溶媒（シリコンオイルなど）中に懸濁され、継続して攪拌しながら、ポリマーの融点よりも５℃高い温度まで加熱される。エマルションが安定化したら、ポリマー粒子が凝固するまで冷却される。得られるミクロスフェアは石油エーテルによるデカントによって洗浄され、自由流動粉末を生成する。
【０２８６】
４．相分離マイクロカプセル化
相分離マイクロカプセル化技術において、ポリマー溶液は、任意選択的に、カプセル化される１つまたは複数の活性剤の存在下で攪拌される。攪拌により材料の均一な懸濁を継続しながら、ポリマーのための非溶媒が溶液にゆっくりと添加され、ポリマーの溶解度が低下される。溶媒および非溶媒中のポリマーの溶解性に応じて、ポリマーは沈殿するか、あるいはポリマーが豊富な相と、ポリマーが不十分な相とに相分離する。適切な条件下で、ポリマー豊富相中のポリマーは連続相との界面に移動して、外側ポリマーシェルを有する液滴内に活性剤をカプセル化することになる。
【０２８７】
ａ．自発的乳化マイクロカプセル化
自発的乳化は、温度を変化させ、溶媒を蒸発させ、あるいは化学架橋剤を添加することによって、上記で形成された乳化液体ポリマー液滴を凝固させることを含む。カプセル材料の物理的および化学的特性、ならびに任意選択的に初期の粒子に取り込まれる１つまたは複数の活性剤の特性により、適切なカプセル化方法が決定される。疎水性、分子量、化学的安定性、および熱安定性などの因子は、カプセル化に影響を及ぼす。
【０２８８】
ｂ．溶媒蒸発マイクロカプセル化
溶媒蒸発技術を用いるミクロスフェアの形成方法は、マシオウィッツ（Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚ）ら著、ジャーナル・オブ・スキャニング・マイクロスコピー（Ｊ．Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）、第４巻、ｐ．３２９（１９９０年）；ベック（Ｂｅｃｋ）ら著、ファーティリティ・アンド・ステリリティ（Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．）、第３１巻、ｐ．５４５（１９７９年）；ベック（Ｂｅｃｋ）ら著、アメリカン・ジャーナル・オブ・オブステトリクス・アンド・ジネコロジー（Ａｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．）、第１３５（３）巻（１９７９年）；ベニータ（Ｂｅｎｉｔａ）ら著、ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシーズ（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第７３巻、ｐ．１７２１（１９８４年）；および米国特許第３，９６０，７５７号明細書に記載されている。ポリマーは、塩化メチレンなどの揮発性有機溶媒中に溶解される取り込まれる１つまたは複数の活性剤は任意選択的に溶液に添加され、混合物は、ポリ（ビニルアルコール）などの界面活性剤を含有する水溶液中に懸濁される。得られるエマルションは、有機溶媒の大部分が蒸発するまで撹拌され、固体マイクロ粒子／ナノ粒子が残る。この方法は、ポリエステルおよびポリスチレンのような比較的安定なポリマーのために有用である。
【０２８９】
ｃ．溶媒除去マイクロカプセル化
溶媒除去マイクロカプセル化技術は主にポリ無水物のために設計され、例えば、国際公開第９３／２１９０６号に記載されている。この方法では、取り込まれる物質は、塩化メチレンなどの揮発性有機溶媒中の選択されたポリマーの溶液に分散または溶解される。この混合物はシリコンオイルなどの有機油中で撹拌することによって懸濁され、エマルションを形成する。１〜３００ミクロンの間の範囲のミクロスフェアは、この手順により得ることができる。ミクロスフェアに取り込むことができる物質は、医薬品、殺虫剤、栄養物、造影剤、および金属化合物を含む。
【０２９０】
５．コアセルベーション
コアセルベーション技術を用いた種々の物質のためのカプセル化手順は、当該技術分野において、例えば、英国特許第９２９４０６号明細書；英国特許第９２９４０１号明細書；ならびに米国特許第３，２６６，９８７号明細書、同第４，７９４，０００号明細書、および同第４，４６０，５６３号明細書において知られている。コアセルベーションは、巨大分子溶液を２つの非混和性液体相に分離することを含む。１つの相は、高濃度のポリマーカプセル材料（および任意選択的に１つまたは複数の活性剤）を含有する高密度コアセルベート相であり、第２の相は、低濃度のポリマーを含有する。高密度コアセルベート相内で、ポリマーカプセル材料は、ナノスケールまたはマイクロスケールの液滴を形成する。コアセルベーションは、温度変化、非溶媒の添加、また微小塩の添加によって誘導されてもよいし（単純コアセルベーション）、あるいは別のポリマーの添加により誘導され、それによりポリマー間複合体が形成されてもよい（複合コアセルベーション）。
【０２９１】
６．ミクロスフェアの低温キャスティング
制御放出粒子の極低温キャスティングのための方法は、米国特許第５，０１９，４００号明細書に記載されている。この方法では、ポリマーは、１つまたは複数の溶解または分散された活性剤を任意選択的に含む溶媒中に溶解される。次に、混合物は、ポリマー液滴を凍結させるポリマー物質溶液の凝固点よりも低い温度で、液体非溶媒を含有する容器内に霧化される。ポリマーの液滴および非溶媒が温められるにつれて、液滴中の溶媒は解凍され、非溶媒中に抽出されて、ミクロスフェアの硬化が生じる。
【０２９２】
７．転相ナノカプセル化（ＰＩＮ）
また粒子は転相ナノカプセル化（ＰＩＮ）法を用いて形成することもでき、ポリマーは「良」溶媒中に溶解され、薬物などの取り込まれる物質の微粒子はポリマー溶液中に混合または溶解され、そして混合物はポリマーのための強力な非溶媒中に注がれて、有利な条件下で高分子ミクロスフェアが自発的に生成される。ここで、ポリマーは粒子でコーティングされるか、あるいは粒子はポリマー中に分散される。例えば、米国特許第６，１４３，２１１号明細書を参照されたい。方法は、例えば、約１００ナノメートル〜約１０ミクロンを含む幅広いサイズのナノ粒子およびマイクロ粒子の単分散集団を製造するために使用することができる。有利に、エマルションが沈殿前に形成される必要はない。プロセスは、熱可塑性ポリマーからミクロスフェアを形成するために使用することができる。
【０２９３】
８．エマルション法
いくつかの実施形態では、粒子は、エマルション溶媒蒸発法を用いて調製される。例えば、高分子材料は水と非混和性の有機溶媒中に溶解され、薬物溶液または薬物溶液の組み合わせと混合される。いくつかの実施形態では、カプセル化される治療薬、予防薬、または診断薬の溶液はポリマー溶液と混合される。ポリマーは、以下の：ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＣＬ、これらのコポリマー、ポリアクリレート、上記のＰＥＧ化ポリマーのうちの１つまたは複数であり得るが、これらに限定されない。薬物分子は、上記のような１つまたは複数のコンジュゲートおよび１つまたは複数の付加的な活性剤を含むことができる。水と非混和性の有機溶媒は、以下の：クロロホルム、ジクロロメタン、および酢酸アシルのうちの１つまたは複数であり得るが、これらに限定されない。薬物は、以下の：アセトン、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール、アセトニトリルおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のうちの１つまたは複数に溶解させることができるが、これらに限定されない。
【０２９４】
得られるポリマー溶液に水溶液が添加されて、乳化によりエマルション溶液が得られる。乳化技術は、ホモジナイザーによるプローブ超音波処理または均質化であり得るが、これらに限定されない。
【０２９５】
９．ナノ沈殿
別の実施形態では、ナノ粒子を含有するコンジュゲートは、ナノ沈殿法またはマイクロ流体デバイスを用いて調製される。高分子材料を含有するコンジュゲートは、任意選択的に付加的なポリマーを含有する水混和性の有機溶媒中で、薬物または薬物の組み合わせと混合される。付加的なポリマーは、以下の：ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＣＬ、これらのコポリマー、ポリアクリレート、上記のＰＥＧ化ポリマーのうちの１つまたは複数であり得るが、これらに限定されない。水混和性の有機溶媒は、以下の：アセトン、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール、アセトニトリルおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のうちの１つまたは複数であり得るが、これらに限定されない。次に、水溶液などのポリマー非溶媒に、得られた混合物溶液を添加して、ナノ粒子溶液が得られる。
【０２９６】
１０．マイクロ流体工学
マイクロ流体工学を用いる粒子の製造方法は、当該技術分野において知られている。適切な方法には、米国特許出願公開第２０１０／００２２６８０Ａ１号明細書に記載されるものが含まれる。一般に、マイクロ流体デバイスは、混合装置に合流する少なくとも２つのチャネルを含む。チャネルは、通常、高分子表面のリソグラフィー、エッチング、エンボス加工、または成形によって形成される。流体の供給源は各チャネルに接続されており、供給源に圧力を加えることにより、チャネル内に流体の流れが生じる。圧力は、シリンジ、ポンプ、および／または重力によって適用され得る。ポリマー、標的化部分、脂質、薬物、ペイロードなどを含む溶液の入口流れは合流および混合し、得られた混合物は、ポリマー非溶媒溶液と混ぜ合わされて、表面上の部分において所望のサイズおよび密度を有する粒子を形成する。入口チャネルにおける圧力および流速、ならびに流体供給源の性質および組成を変化させることにより、再現可能なサイズおよび構造を有する粒子を製造することができる。
【０２９７】
ｉｉ．脂質粒子
脂質粒子の製造方法は、当該技術分野において知られている。脂質粒子は、当該技術分野で既知の任意の適切な方法を用いて調製される脂質ミセル、リポソーム、または固体脂質粒子であり得る。活性剤をカプセル化する脂質粒子の形成のための一般的な技術には、高圧均質化技術、超臨界流体法、エマルション法、溶媒拡散法、およびスプレー乾燥が含まれるが、これらに限定されない。これらの方法の簡単な概要は以下に提示される。
【０２９８】
１．高圧均質化（ＨＰＨ）法
高圧均質化は信頼できる強力な技術であり、脂質ミセル、リポソーム、および固体脂質粒子を含む、狭いサイズ分布を有するより小さい脂質粒子を製造するために使用される。高圧ホモジナイザーは、狭い隙間（数ミクロンの範囲）を通して高圧（１００〜２０００バール）で液体を押し出す。流体は、室温で液体である脂質、または室温で固体である脂質の融解物を含有することができる。流体は、非常に短い距離で非常に高い速度（１０００Ｋｍ／時を超える）まで加速する。これにより、粒子を通常サブミクロン範囲まで破壊する高いせん断応力およびキャビテーション力が生じる。一般的に、５〜１０％の脂質含量が使用されるが、最大４０％までの脂質含量も研究されている。
【０２９９】
ＨＰＨの２つのアプローチは、高温均質化および低温均質化であり、脂質溶液または溶融物のバルク中で薬物を混合するという同じ概念で作用する。
ａ．高温均質化：
高温均質化は脂質の融点よりも高い温度で実行され、従って、エマルションの均質化とみなすことができる。薬物が負荷された脂質溶融物および水性乳化剤相のプレエマルションは、高剪断混合により得られる。プレエマルションのＨＰＨは、脂質の融点よりも高い温度で実行される。温度、圧力、およびサイクル数を含むいくつかのパラメータは、所望のサイズを有する脂質粒子を生成するように調整することができる。一般に、より高い温度は、内相の粘度の低下のためにより小さい粒径をもたらす。しかしながら、高温により、薬物および担体の分解速度が増大される。均質化圧力またはサイクル数の増大は、多くの場合、粒子の高い運動エネルギーのために粒径の増大をもたらす。
【０３００】
ｂ．低温均質化
低温均質化は、高温均質化の代替として開発された。低温均質化は、温度に誘導される薬物分解、または均質化中の水相内への薬物分布などの問題を抱えていない。低温均質化は固体脂質粒子のために特に有用であるが、リポソームおよび脂質ミセルを生成するためにわずかな修正により適用することができる。この技術では、薬物含有脂質溶融物は冷却され、固体脂質は脂質マイクロ粒子に粉砕され、これらの脂質マイクロ粒子は低温の界面活性剤溶液中に分散されて、プレ懸濁液を生じる。プレ懸濁液は室温以下で均質化され、ここで、重力は、脂質マイクロ粒子を破壊して直接固体脂質ナノ粒子にするのに十分な強さである。
【０３０１】
２．超音波処理／高速均質化法
脂質ミセル、リポソーム、および固体脂質粒子を含む脂質粒子は、超音波処理／高速均質化によって調製することができる。超音波処理および高速均質化の両方の組み合わせは、より小さい脂質粒子の製造のために特に有用である。このプロセスによって、リポソームは、１０ｎｍ〜２００ｎｍ、例えば５０ｎｍ〜１００ｎｍの範囲のサイズで形成される。
【０３０２】
３．溶媒蒸発法
脂質粒子は、溶媒蒸発アプローチによって調製することができる。親油性材料は、水相中で乳化される、水と非混和性の有機溶媒（例えば、シクロヘキサン）中に溶解される。溶媒の蒸発の際、水性媒体中での脂質の沈殿によって粒子分散系が形成される。圧力、溶媒の選択などのパラメータは、を制御するために使用することができる。溶媒蒸発速度は、圧力の増大／減少または温度の上昇／低下により調整することができる。
【０３０３】
４．溶媒乳化−拡散法
脂質粒子は、溶媒乳化−拡散法によって調製することができる。脂質はまずエタノールおよびアセトンなどの有機相に溶解される。酸性水相は、ゼータ電位を調整して脂質コアセルベーションを誘導するために使用される。連続フローモードにより、脂溶性を低下させる水およびアルコールの連続的な拡散が可能になり、熱力学的不安定性が引き起こされ、リポソームが生成される。
【０３０４】
５．超臨界流体法
リポソームおよび固体脂質粒子を含む脂質粒子は、超臨界流体法から調製することができる。超臨界流体アプローチは、他の調製物方法で使用される有機溶媒の置換またはその量の低減という利点を有する。脂質、カプセル化される活性剤、および賦形剤は、高圧において超臨界溶媒中で溶媒和させることができる。超臨界溶媒は最も一般的にはＣＯ２であるが、他の超臨界溶媒は当該技術分野において知られている。脂質の溶解度を高めるために、少量の共溶媒を使用することができる。エタノールは一般的な共溶媒であるが、製剤のために安全であると一般的に考えられる他の少しの有機溶媒を使用することができる。脂質粒子、脂質ミセル、リポソーム、または固体脂質粒子は、超臨界溶液の膨張によって、あるいは非溶媒水相への注入によって得ることができる。粒子の形成およびサイズ分布は、超臨界溶媒、共溶媒、非溶媒、温度、圧力などを調整することによって制御することができる。
【０３０５】
６．マイクロエマルションベースの方法
脂質粒子を製造するためのマイクロエマルションベースの方法は当該技術分野において知られている。これらの方法は、多相系、通常は２相系の希釈に基づく。脂質粒子の製造のためのエマルション法は、一般的に、脂質を含有する大量の非混和性有機溶液に少量の水性媒体を添加することによる、油中水型エマルションの形成を含む。混合物は、水性媒体を小さな液滴として有機溶媒全体に分散させるために撹拌され、脂質は、有機相と水相の間の境界にそれ自体を単層に並べる。液滴のサイズは、圧力、温度、適用される撹拌、および存在する脂質の量によって制御される。
【０３０６】
油中水型エマルションは、ダブルエマルションの形成によって、リポソーム懸濁液に転換することができる。ダブルエマルションでは、水滴を含有する有機溶液が大量の水性媒体に添加され、撹拌されて、水中油中水型エマルションが生成される。形成される脂質粒子のサイズおよびタイプは、脂質の選択および量、温度、圧力、共界面活性剤、溶媒などによって制御することができる。
【０３０７】
７．スプレー乾燥法
高分子粒子の製造のための上記方法と同様のスプレー乾燥法は、固体脂質粒子を作るために使用することができる。通常、この方法は、７０℃を超える融点を有する脂質と共に使用される。
【０３０８】
いくつかの実施形態では、本発明のコンジュゲートは、単一の水中油型エマルション法を用いて高分子粒子内にカプセル化され得る。非限定的な例として、コンジュゲートおよび適切なポリマーまたはブロックコポリマーまたはポリマー／ブロックコポリマーの混合物は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、酢酸エチル（ＥｔＡｃ）またはクロロホルムなどであるがこれらに限定されない有機溶媒中に溶解されて、油相を形成する。粒子のサイズを制御するため、および／またはコンジュゲートを可溶化するために、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル（ＣＡＮ）またはベンジルアルコール（ＢＡ）などであるがこれらに限定されない共溶媒が使用されてもよい。製剤中で使用されるポリマーは、ＰＬＡ９７−ｂ−ＰＥＧ５、ＰＬＡ３５−ｂ−ＰＥＧ５およびＰＬＡ１６−ｂ−ＰＥＧ５コポリマーを含むことができるが、これらに限定されない。
【０３０９】
いくつかの実施形態では、粒子製剤は、本発明のコンジュゲートの親油性を変化させることによって調製され得る。親油性は、異なる対イオンとのコンジュゲートの疎水性イオン対または疎水性イオン対合（ＨＩＰ）を用いることにより変化され得る。ＨＩＰは、本発明のコンジュゲートの溶解度を変更する。水溶性が低下し、有機相中の溶解度が増大し得る。
【０３１０】
任意の適切な薬剤は、本発明のコンジュゲートと共にＨＩＰ複合体を形成するための対イオンを提供するために使用され得る。いくつかの実施形態では、ＨＩＰ複合体は、粒子の製剤化の前に形成され得る。
【０３１１】
ＶＩ．コンジュゲートおよび粒子の使用方法
本明細書に記載されるコンジュゲートまたは粒子は、必要に応じて、任意の過剰増殖性疾患、代謝疾患、感染症、または癌を治療するために投与することができる。製剤は、免疫化のために使用することができる。製剤は、注射により、経口的に、または局所的に、通常は、粘膜表面（経肺、経鼻、経口、頬側、舌下、経膣、経直腸）または眼（眼内または経眼球）に投与され得る。
【０３１２】
種々の実施形態では、癌を有する対象の治療方法が提供され、本方法は、癌を有する対象、癌の疑いがある対象、または癌の素因を有する対象に、治療的に有効な量の本明細書に記載されるコンジュゲートまたは粒子を投与することを含む。本発明によると、癌は、制御不能な細胞増殖、例えば過剰増殖を特徴とする任意の疾患または病気を包含する。癌は、腫瘍、例えば固形腫瘍、または任意の新生物を特徴とし得る。
【０３１３】
いくつかの実施形態では、対象は、他の点では、コンジュゲートまたは粒子による治療の適応症がなくてもよい。いくつかの実施形態では、本方法は、哺乳類癌細胞を含むがそれに限定されない癌細胞の使用を含む。場合により、哺乳類癌細胞は、ヒト癌細胞である。
【０３１４】
いくつかの実施形態では、本教示のコンジュゲートまたは粒子は、癌および／または腫瘍成長を抑制することが見出されている。またこれらは、細胞増殖、侵襲性、および／または転移を含めて低減することができ、それにより、癌の治療に有用とされる。
【０３１５】
いくつかの実施形態では、本教示のコンジュゲートまたは粒子は、腫瘍または癌の成長を防止し、そして／あるいは腫瘍または癌の転移を防止するために使用され得る。いくつかの実施形態では、本教示の組成物は、癌を縮小または破壊するために使用され得る。
【０３１６】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるコンジュゲートまたは粒子は、癌細胞の増殖を抑制するために有用である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるコンジュゲートまたは粒子は、細胞増殖を抑制する、例えば、細胞増殖の速度を抑制する、細胞増殖を防止する、および／または細胞死を誘導するために有用である。一般に、本明細書に記載されるコンジュゲートまたは粒子は、癌細胞の細胞増殖を抑制することができ、あるいは癌細胞の増殖を抑制し、および／または癌細胞の細胞死を誘導する。
【０３１７】
本教示の方法によって治療可能な癌は、一般的に、哺乳類で発生する。哺乳類は、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウサギ、フェレット、モルモット  ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、およびウシを含む。種々の実施形態では、癌は、肺癌、乳癌、例えば、突然変異体ＢＲＣＡ１および／または突然変異体ＢＲＣＡ２乳癌、非ＢＲＣＡ関連乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、膵癌、結腸直腸癌、膀胱癌、前立腺癌、子宮頸癌、腎癌、白血病、中枢神経系癌、骨髄腫、およびメラノーマである。いくつかの実施形態では、癌は肺癌である。特定の実施形態では、癌は、ヒト肺癌腫、卵巣癌、膵癌または結腸直腸癌である。
【０３１８】
本明細書に記載されるコンジュゲートもしくは粒子、または本明細書に記載されるコンジュゲートもしくは粒子を含有する製剤は、それを必要としている個体または患者に対する治療薬、予防薬、または診断薬の選択的組織送達のために使用することができる。投与計画は、最適な所望の応答（例えば、治療的または予防的応答）を提供するように調整され得る。例えば、単回ボーラスが投与されてもよいし、いくつかの分割用量が経時的に投与されてもよいし、あるいは、治療状況の緊急性により示されるように用量が比例的に減少もしくは増大されてもよい。本明細書で使用される単位剤形は、治療される哺乳類対象に対する単位投薬量として適している物理的に別個の単位を指し、各単位は、所望の治療を生じるために計算される所定量の活性化合物を含有する。
【０３１９】
種々の実施形態では、粒子内に含有されるコンジュゲートは、制御された形で放出される。放出は、インビトロまたはインビボであり得る。例えば、粒子は、米国薬局方（Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ）およびそのバリエーションに明記されるものを含む特定の条件下で、放出試験を受けることができる。
【０３２０】
本明細書で使用される場合、「制御放出」は、治療結果をもたらすための特定の放出パターンに一致する、医薬組成物または化合物の放出プロファイルを指す。
種々の実施形態では、粒子内に含有されるコンジュゲートの約９０％未満、約８０％未満、約７０％未満、約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満は、粒子が放出試験の条件にさらされた後の最初の１時間で放出される。いくつかの実施形態では、粒子内に含有されるコンジュゲートの約９０％未満、約８０％未満、約７０％未満、約６０％未満、または約５０％未満は、粒子が放出試験の条件にさらされた後の最初の１時間で放出される。特定の実施形態では、粒子内に含有されるコンジュゲートの約５０％未満は、粒子が放出試験の条件にさらされた後の最初の１時間で放出される。
【０３２１】
インビボで放出されるコンジュゲートに関して、例えば、対象に投与される粒子内に含有されるコンジュゲートは対象の身体から保護されることができ、またコンジュゲートが粒子から放出されるまで身体はコンジュゲートから隔離され得る。
【０３２２】
従って、いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、粒子が対象の身体内に送達されるまで実質的に粒子内に含有され得る。例えば、全コンジュゲートの約９０％未満、約８０％未満、約７０％未満、約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、または約１％未満は、粒子が対象の身体内、例えば治療部位に送達される前に、粒子から放出される。いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、長期間にわたって、または一気に（例えば、コンジュゲートの量は短期間で放出され、その後の期間は、実質的にコンジュゲートが放出されない）放出され得る。例えば、コンジュゲートは、６時間、１２時間、２４時間、または４８時間にわたって放出させることができる。特定の実施形態では、コンジュゲートは、１週間または１ヶ月にわたって放出される。
【０３２３】
ＶＩＩ．キットおよびデバイス
本発明は、本発明の方法を都合よくおよび／または効果的に実行する様々なキットおよびデバイスを提供する。通常、キットは、ユーザが対象の複数の治療を実施する、および／または複数の実験を実施することを可能にするのに十分な量および／または数のコンポーネントを含むであろう。
【０３２４】
一実施形態では、本発明は、本発明のコンジュゲートおよび／もしくは粒子、または本発明コンジュゲートおよび／もしくは粒子の組み合わせを、任意選択的に任意の他の活性剤と組み合わせて含む、インビトロまたはインビボで腫瘍細胞の成長を抑制するためのキットを提供する。
【０３２５】
キットは、パッケージングおよび使用説明書および／または製剤組成物を形成するための送達剤をさらに含み得る。送達剤は、生理食塩水、緩衝液、または本明細書に開示される任意の送達剤を含み得る。各コンポーネントの量は、一貫した再現可能なより高濃度の生理食塩水または単純な緩衝液製剤を可能にするように変更され得る。またコンポーネントも、一定時間にわたって、そして／あるいは様々な条件下で、コンジュゲートおよび／または粒子の緩衝液中での安定性を高めるために変更され得る。
【０３２６】
本発明は、本発明のコンジュゲートおよび／または粒子を組み込むことができるデバイスを提供する。これらのデバイスは、ヒト患者などのそれを必要としている対象に、即時に送達することが可能な安定した製剤を含有する。いくつかの実施形態では、対象は癌を有する。
【０３２７】
デバイスの非限定的な例としては、ポンプ、カテーテル、ニードル、経皮パッチ、加圧嗅覚送達（ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ  ｏｌｆａｃｔｏｒｙ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ）デバイス、イオントフォレーシスデバイス、多層マイクロ流体デバイスが挙げられる。デバイスは、本発明のコンジュゲートおよび／または粒子を単回、複数回または分割投与計画に従って送達するために使用され得る。デバイスは、生物組織を横切って、皮内に、皮下に、または筋肉内に本発明のコンジュゲートおよび／または粒子を送達するために使用され得る。
【０３２８】
以下の実施例は本発明を説明することが意図され、限定を意図するものではないことは認識されるであろう。種々の他の実施例ならびに上記の説明および実施例の変更は、発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、本開示を読んだ後に当業者には明らかであろう。そして、このような実施例または変更は全て特許請求の範囲内に含まれることが意図される。本明細書中で参照される全ての刊行物および特許は、参照によってその全体が本明細書に援用される。
【０３２９】
（実施例）
実施例Ａ：ＨＰＬＣ分析法：Ｃ１８逆相ＨＰＬＣによる生成物の分析（方法１）
本明細書に記載される化合物のＨＰＬＣ分析は、ゾルバックス・エクリプス（Ｚｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ）ＸＤＢ−Ｃ１８逆相カラム（４．６×１００ｍｍ、３．５μｍ、アジレント（Ａｇｉｌｅｎｔ）ＰＮ：９６１９６７−９０２）において、１．５ｍＬ／分の流速および３５℃のカラム温度で、水＋０．１％ＴＦＡ（溶媒Ａ）およびアセトニトリル＋０．１％ＴＦＡ（溶媒Ｂ）からなる移動相を用いて実行した。注入容積は１０μＬであり、分析物は、２２０ｎｍおよび２５４ｎｍのＵＶを用いて検出した。グラジエントはテーブル３に示される。
【０３３０】
【表３】
2018519283.tif 000043
【０３３１】
実施例Ｂ：対照化合物
ソマトスタチン受容体結合を著しく損なう不活性化化合物を設計した。対照化合物がソマトスタチン受容体への強力な結合を有さないように、対照化合物のＴｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−ＴｈｒモチーフのＬｙｓ残基をキャップした。対照化合物の例としては、以下のものが挙げられる。
【０３３２】
【表４−１】
2018519283.tif 000044
【０３３３】
【表４−２】
2018519283.tif 000045
【０３３４】
実施例１：マイタンシノイドコンジュゲートの合成
【０３３５】
【化１７】
2018519283.tif 000046
【０３３６】
Ｆｍｏｃ−スレオニン（ｔＢｕ）−ＯＨを２−クロロトリチル樹脂（３．０ｇの樹脂、１．５ｍｍｏｌ／ｇの負荷）上に負荷した。標準的なＳＰＰＳ条件を用い、４：１のＤＭＦ：ピペリジンによる繰り返しの脱保護と、それに続く、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−Ｂｏｃ−リジン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎｉｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン、Ｆｍｏｃ−チロシン（ｔＢｕ）、Ｎα−Ｍｅ−グルタミン酸γ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、およびＦｍｏｃ−フェニルアラニンとのカップリングにより、樹脂に結合した線状ペプチドが得られた。ジクロロメタン中１％のＴＦＡによる樹脂の切断の後、ＤＭＦ（４５ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（３．０ｍＬ）中のＨＡＴＵ（１．７１ｇ、４．５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（０．６Ｍ溶液、７．５ｍＬ、４．５ｍｍｏｌ）を含むフラスコに、１０ｍＬのＤＭＦ中の線状ペプチドの溶液を滴下することによって環化を行なった。室温で３時間攪拌した後、全てのＤＭＦを真空で除去し、残った材料を９５：２．５：２．５のＴＦＡ：ＥＤＴ：水で３０分間処理し、溶媒を真空で除去し、残った材料を逆相クロマトグラフィにより精製して、シクロ［Ｐｈｅ−Ｎα−Ｍｅ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ］（５９、１．３７ｇ、１．５７ｍｍｏｌ、全収率３５％）が提供された。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ：８６９．５［Ｍ＋１］。
【０３３７】
【化１８】
2018519283.tif 000047
【０３３８】
Ｆｍｏｃ−シスチン（Ｔｒｔ）−ＯＨを２−クロロトリチル樹脂（３．６ｇ、１ｍｍｏｌ／ｇ）上に負荷した。４：１のＤＭＦ：ピペリジンによる繰り返しの脱保護と、それに続く、Ｆｍｏｃ−スレオニン（ｔＢｕ）、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−Ｂｏｃ−リジン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎｉｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン、Ｆｍｏｃ−チロシン（ｔＢｕ）、Ｆｍｏｃ−システイン（Ｔｒｔ）、およびＦｍｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンとのカップリングと、最終のＤＭＦ：ピペリジン脱保護とにより、保護された線状ペプチドが樹脂上に提供された。樹脂をジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄し、次にトリフルオロ酢酸（４０ｍＬ）、水（２ｍＬ）、およびトリイソプロピルシラン（２ｍＬ）により切断した。樹脂を脱保護カクテル中で３０分間攪拌し、ドレインし、樹脂をジクロロメタン（４０ｍＬ）で洗浄し、脱保護／洗浄シーケンスをもう一度繰り返した。捕集した洗液を真空で濃縮し、残った残渣をＴＨＦ（７０ｍＬ）中に溶解させた。３０％の過酸化水素（０．６５ｍＬ）を添加した後、反応ｐＨが７．０になるまで飽和炭酸ナトリウムを添加した（２５ｍＬの飽和重炭酸ナトリウム）。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２．５０ｇ、１１．４６ｍｍｏｌ）を添加し、反応を室温で１６時間攪拌した。酢酸（２５ｍＬ）を添加し、全ての溶媒を真空で除去した。残った残渣を３：１のＤＭＦ：水中に溶解させ、これを１００ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜８０％のアセトニトリルで溶出させて、６０（２．２０ｇ、１．９２ｍｍｏｌ、収率５４％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ：１０４８．５［Ｍ−Ｂｏｃ＋１］。
【０３３９】
化合物６１は、類似の方法で製造した。
【０３４０】
【化１９】
2018519283.tif 000048
【０３４１】
【化２０】
2018519283.tif 000049
【０３４２】
Ｆｍｏｃ−シスチン（Ｔｒｔ）−ＯＨを２−クロロトリチル樹脂（８７５ｍｇ、１ｍｍｏｌ／ｇ）上に負荷した。４：１のＤＭＦ：ピペリジンによる繰り返しの脱保護と、それに続く、Ｆｍｏｃ−スレオニン（ｔＢｕ）、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−Ｂｏｃ−リジン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎｉｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン、Ｆｍｏｃ−チロシン（ｔＢｕ）、Ｆｍｏｃ−システイン（Ｔｒｔ）、およびＦｍｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンとのカップリングと、脱保護と、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のイソシアン酸エチル（０．６９ｍＬ、８．８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３．０ｍＬ）によるそれぞれ２時間の２回の処理とにより、保護された線状ペプチドを得た。樹脂をジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄し、次に、トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）、水（１ｍＬ）、およびトリイソプロピルシラン（１ｍＬ）により切断した。樹脂を脱保護カクテル中で３０分間攪拌し、ドレインし、樹脂をジクロロメタン（２０ｍＬ）で洗浄し、脱保護／洗浄シーケンスをもう一度繰り返した。捕集した洗液を真空で濃縮し、残った残渣をＴＨＦ（５０ｍＬ）中に溶解させた。３０％の過酸化水素（０．３２ｍＬ）を添加した後、反応ｐＨが８．０になるまで飽和炭酸ナトリウムを添加した（１２ｍＬの飽和重炭酸ナトリウム）。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１．９４ｇ、８．９１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を室温で１６時間攪拌した。酢酸（２５ｍＬ）を添加し、全ての溶媒を真空で除去した。残った残渣を３：１のＤＭＦ：水中に溶解させ、これを１００ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜８０％のアセトニトリルで溶出させて、６２（４３１ｍｇ、０．３８５ｍｍｏｌ、収率４４％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ：１０１９．６［Ｍ−Ｂｏｃ＋１］。
化合物６３〜８０は、類似の方法で製造した。
【０３４３】
【化２１−１】
2018519283.tif 000050
【０３４４】
【化２１−２】
2018519283.tif 000051
【０３４５】
【化２１−３】
2018519283.tif 000052
【０３４６】
【化２２】
2018519283.tif 000053
【０３４７】
Ｆｍｏｃ−スレオニン（ｔＢｕ）を２−クロロトリチル樹脂上に負荷した。４：１のＤＭＦ：ピペリジンによる繰り返しの脱保護と、それに続く、Ｆｍｏｃ−システイン（Ｔｒｔ）、Ｆｍｏｃ−スレオニン（ｔＢｕ）、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−Ｂｏｃ−リジン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎｉｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン、Ｆｍｏｃ−チロシン（ｔＢｕ）、Ｆｍｏｃ−システイン（Ｔｒｔ）、およびＦｍｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンとのカップリングと、脱保護と、ＤＭＦ中のイソシアン酸エチルおよびトリエチルアミンによるそれぞれ２時間の２回の処理とにより、保護された線状ペプチドを得た。樹脂をジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄し、次に９０：５：５のトリフルオロ酢酸、水、およびトリイソプロピルシランにより切断した。樹脂を脱保護カクテル中で３０分間攪拌し、ドレインし、樹脂をジクロロメタンで洗浄し、脱保護／洗浄シーケンスをもう一度繰り返した。捕集した洗液を真空で濃縮し、残った残渣をＴＨＦ中に溶解させた。３０％の過酸化水素を添加した後、反応ｐＨが８．０になるまで飽和炭酸ナトリウムを添加した。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを添加し、反応を室温で１６時間攪拌した。酢酸を添加し、全ての溶媒を真空で除去した。残った残渣を３：１のＤＭＦ：水中に溶解させ、これを１００ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜８０％のアセトニトリルで溶出させて、７７を得た。
【０３４８】
化合物７８〜８０は、類似の方法で製造した。
【０３４９】
【化２３】
2018519283.tif 000054
【０３５０】
【化２４】
2018519283.tif 000055
【０３５１】
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の６０（１．１５ｇ、１．００ｍｍｏｌ）、Ｓ−トリチルＬ−システインアミド（１．０９ｇ、３．００ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（１．１４ｇ、３．００ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（１．００ｍｍｏｌ、５．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で一晩攪拌し、次に反応混合物を１００ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５０％〜９５％のアセトニトリルで溶出させて、８１（１．２４ｇ、０．８３１ｍｏｌ、収率８３％）を得た。
【０３５２】
化合物８２〜１０１は、類似の方法で調製した。
【０３５３】
【化２５−１】
2018519283.tif 000056
【０３５４】
【化２５−２】
2018519283.tif 000057
【０３５５】
【化２５−３】
2018519283.tif 000058
【０３５６】
【化２５−４】
2018519283.tif 000059
【０３５７】
【化２５−５】
2018519283.tif 000060
【０３５８】
【化２６】
2018519283.tif 000061
【０３５９】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の６２（４０．０ｍｇ、３５．７μｍｏｌ）の溶液に、（Ｓ）−システインアミド−Ｓ−（ピリジン−２−イルスルファニル）（１８．４ｍｇ、７１．５μｍｏｌ）、ＤＩＣ（９．０２ｍｇ、７１．５μｍｏｌ）、およびＨＯＢｔ（１４．５ｍｇ、１０７μｍｏｌ）を添加した。リン酸緩衝液（ｐＨ７．４、５００μＬ）を添加し、反応を室温で１６時間攪拌した。得られた溶液をＣ１８クロマトグラフィにより精製して、１０２（２４．６ｍｇ、１７．９μｍｏｌ、収率５０％）を得た。
【０３６０】
化合物１０３〜１１０は、類似の方法で製造した。
【０３６１】
【化２７−１】
2018519283.tif 000062
【０３６２】
【化２７−２】
2018519283.tif 000063
【０３６３】
【化２８】
2018519283.tif 000064
【０３６４】
Ｎ−Ｂｏｃ−３−アミノプロピルマレイミド（３７０ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）をバイアルに入れ、これをトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）中に溶解させた。この溶液を室温で１０分間攪拌し、次に全ての溶媒を真空で除去した。第２のバイアルにおいて、ＨＡＴＵ（４２３ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−グルタミン酸α−アミド（１８４ｍｇ、０．７４７ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（５ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（２ｍＬ）を混合し、室温で１０分間攪拌し、次にこの溶液を残りの３−アミノプロピルマレイミドＴＦＡ塩に添加した。反応を室温で１６時間攪拌した。酢酸（２ｍＬ）を反応に添加し、溶液を水（３ｍＬ）で希釈し、溶液を５０ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜７５％のアセトニトリルで溶出させて、１１１（２５８ｍｇ、０．６７５ｍｍｏｌ、収率９０％）を得た。
【０３６５】
【化２９】
2018519283.tif 000065
【０３６６】
１１１（１２２ｍｇ、０．３１９ｍｍｏｌ）をバイアルに入れ、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加した。反応を室温で１０分間攪拌し、次に全ての溶媒を真空で除去した。第２のバイアルにおいて、６０（７４ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１７４ｍｇ、０．３８７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．２５ｍＬ）中に溶解させた。この溶液を脱保護した１１１に添加し、反応を室温で１６時間攪拌した。反応混合物を酢酸（１ｍＬ）により酸性化し、水（３ｍＬ）で希釈し、３０ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中２５％〜８５％のアセトニトリルで溶出させて、１１２（９１ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ、収率５４％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝６２８．８［（Ｍ＋２−Ｂｏｃ−ｔＢｕ）／２］。
【０３６７】
【化３０】
2018519283.tif 000066
【０３６８】
Ｆｍｏｃ−シスチン（Ｔｒｔ）−ＯＨを２−クロロトリチル樹脂（３０．０ｇ、１ｍｍｏｌ／ｇ理論的負荷）上に負荷した。４：１のＤＭＦ：ピペリジンによる繰り返しの脱保護と、それに続く、Ｆｍｏｃ−スレオニン（ｔＢｕ）、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−Ｂｏｃ−リジン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎｉｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン、Ｆｍｏｃ−チロシン（ｔＢｕ）、Ｆｍｏｃ−システイン（Ｔｒｔ）、およびＢｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンとのカップリングとにより、９０．２ｇの保護された線状ペプチド（６０．２ｇの全ペプチド負荷、０．３６９ｍｍｏｌ／ｇの最終保護樹脂の負荷）が得られた。この線状ペプチドの一部（１０．０ｇ、３．６９ｍｍｏｌ）を取り、ＤＭＦ（２５ｍＬ）およびピリジン（１．１６ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）を添加した。ＤＭＦ（２５ｍＬ）中のヨウ素（１．８７ｇ、７．３６ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、樹脂を室温で２０分間攪拌した。樹脂をドレインし、ＤＭＦ（２５ｍＬ）で洗浄し、付加的なＤＭＦ（２５ｍＬ）およびピリジン（１．１６ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）を添加した。ＤＭＦ（２５ｍＬ）中のヨウ素（１．８７ｇ、７．３６ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、樹脂を室温で２０分間攪拌した。樹脂をドレインし、ＤＭＦ（２×２５ｍＬ）およびジクロロメタン（４×２０ｍＬ）で洗浄した。次に樹脂を４：１のジクロロメタン：ヘキサフルオロイソプロパノール（６０ｍＬ）で１時間処理した。ジクロロメタン：ヘキサフルオロイソプロパノール溶液を捕集し、樹脂をジクロロメタン（２５ｍＬ）で洗浄し、４：１のジクロロメタン：ヘキサフルオロイソプロパノール（６０ｍＬ）で再度１時間処理した。ジクロロメタン：ヘキサフルオロイソプロパノール溶液を捕集し、樹脂をジクロロメタン（２５ｍＬ）で洗浄し、合わせたジクロロメタン：ＨＦＩＰ溶液、およびジクロロメタン洗液を真空乾燥させた。残った固体を８０ｇのシリカゲルカラム上に負荷した。ジクロロメタン中０％〜１０％のメタノールで溶出させて、１１３（２．９７ｇ、２．１８ｍｍｏｌ、収率５９％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝１３６０［Ｍ＋１］。
【０３６９】
【化３１】
2018519283.tif 000067
【０３７０】
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の１１３（９０．０ｍｇ、０．０６６１ｍｍｏｌ）およびＧｌｕ−ＮＨ２−γ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＮＨ２（９７．３ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＯＡｔ（１８．０ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（２２．２ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を室温で一晩攪拌し、ＤＭＦ溶液を水（１５ｍＬ）に添加した。得られた懸濁液を遠心分離し、上澄みをデカントし、残った白色ペーストを酢酸エチル中に溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。水相を分離し、酢酸エチルで４回抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空で濃縮した。ジクロロメタン中０％〜１０％のメタノールで溶出させるシリカゲルにおいて、残った残渣を精製して、１１４（４６．０ｍｇ、０．０２５１ｍｍｏｌ、収率３８％）を得た。
【０３７１】
化合物１１５〜１１６は、類似の方法で製造した。
【０３７２】
【化３２】
2018519283.tif 000068
【０３７３】
【化３３】
2018519283.tif 000069
【０３７４】
Ｆｍｏｃ−シスチン（Ｔｒｔ）−ＯＨを２−クロロトリチル樹脂上に負荷した。４：１のＤＭＦ：ピペリジンによる繰り返しの脱保護と、それに続く、Ｆｍｏｃ−スレオニン（ｔＢｕ）、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−Ｂｏｃ−リジン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎｉｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン、Ｆｍｏｃ−チロシン（ｔＢｕ）、およびＦｍｏｃ−システイン（Ｔｒｔ）とのカップリングとにより、Ｆｍｏｃでキャップされた線状ペプチドを得た。樹脂をジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄し、次に、９０：５：５のトリフルオロ酢酸、水、およびトリイソプロピルシランにより切断した。樹脂を脱保護カクテル中で３０分間攪拌し、ドレインし、樹脂をジクロロメタンで洗浄し、脱保護／洗浄シーケンスをもう一度繰り返した。捕集した洗液を真空で濃縮し、残った残渣をＴＨＦ中に溶解させた。３０％の過酸化水素を添加した後、反応ｐＨが８．０になるまで飽和炭酸ナトリウムを添加した。二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを添加し、反応を室温で１６時間攪拌した。混合物を酢酸エチルで４回抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を真空で除去した。残った残渣を４：１のＤＭＦ：ジエチルアミン中に溶解させ、室温で３０分間攪拌し、次に、ジエチルアミンの大部分を真空で除去した。残った溶液を逆相クロマトグラフィにより精製して、１１７を得た。
【０３７５】
化合物１１８は、類似の方法で製造した。
【０３７６】
【化３４】
2018519283.tif 000070
【０３７７】
【化３５】
2018519283.tif 000071
【０３７８】
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のＮ−ベンジル−Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−フェニルアラニン（１００ｍｇ、０．２８１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３８．９ｍｇ、０．３３７ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６９．７ｍｇ、０．３３８ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で２時間攪拌し、ろ過した。ろ液を真空で濃縮し、ジクロロメタン（５ｍＬ）中に再溶解させ、再度ろ過し、溶媒を真空で除去して、粗ＮＨＳエステルを得た。このエステルをＤＭＦ（２ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン中の１１７（１４０ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応を室温で１６時間攪拌し、次に逆相クロマトグラフィにより精製して、１１９（５１．０ｍｇ、０．０４１２ｍｍｏｌ、収率２７％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝１１３８．４［Ｍ＋１−Ｂｏｃ］。
【０３７９】
【化３６】
2018519283.tif 000072
【０３８０】
ＤＭＦ（２０ｍｌ）中のＳ−トリチル−Ｌ−ペニシラミンアミド（１．２０ｇ、３．０７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＯＢｔ（８２９ｍｇ、６．１４ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（７７５ｍｇ、６．１４ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）（１．２８ｇ、３．２２ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（１．０７ｍＬ、６．１４ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で１６時間攪拌し、次に逆相クロマトグラフィ（１０ｍＭ重炭酸アンモニウム緩衝液を含む、水／アセトニトリル）により精製して、ＤＴｈｒ（ｔＢｕ）−Ｐｅｎ（ＳＴｒｔ）−ＮＨ２（１．９４ｇ、２．５２ｍｍｏｌ、収率８２％）を得た。この材料をＤＭＦ（２０ｍＬ）およびトリエチルアミン（２ｍＬ）中に溶解させた。反応を室温で１６時間攪拌し、次に逆相クロマトグラフィ（１０ｍＭの重炭酸アンモニウム緩衝液を含む、水／アセトニトリル）により精製して、１２０（８７０ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ、収率６３％）を得た。
【０３８１】
【化３７】
2018519283.tif 000073
【０３８２】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の６２（３０．０ｍｇ、０．０２６８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＣ（６．７ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７．２ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）、１２０（１６．２ｍｇ、０．０２９５ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（１４μＬ、０．０８０ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で１６時間攪拌し、次に逆相クロマトグラフィ（０．０５％のＴＦＡ調節剤を含む、水／アセトニトリル）により精製して、１２１（２９．８ｍｇ、０．０１８０ｍｍｏｌ、収率６７％）を得た。
【０３８３】
化合物１２２は、類似の方法で製造した。
【０３８４】
【化３８】
2018519283.tif 000074
【０３８５】
【化３９】
2018519283.tif 000075
【０３８６】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の１１９（２５．０ｍｇ、０．０２０２ｍｍｏｌ）の溶液に、（Ｓ）−システインアミド−Ｓ−（ピリジン−２−イルスルファニル）（９．３ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（５．１ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８．２ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）を添加した。ｐＨ７．４リン酸緩衝液（０．５０ｍＬ）を添加し、溶液を室温で１６時間攪拌した。得られた反応混合物を逆相クロマトグラフィ（０．０５％のＴＦＡ調節剤を含む、水／アセトニトリル）により精製して、１２３（１１．５ｍｇ、０．００７６１ｍｍｏｌ、収率３８％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝１４４９．４［Ｍ＋１］。
【０３８７】
【化４０】
2018519283.tif 000076
【０３８８】
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の７７（９６．０ｍｇ、０．０７８７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（３０．２ｍｇ、０．０９４４ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１０．７ｍｇ、０．０７８７ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（４８μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を添加した。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の（Ｓ）−システインアミド−Ｓ−（ピリジン−２−イルスルファニル）（３１．４ｍｇ、０．１１８ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応を室温で７２時間攪拌した。ＤＭＦを真空で除去し、残渣をＤＭＳＯ（１ｍＬ）中に再溶解させ、得られた溶液を逆相クロマトグラフィにより精製して、１２４（１７．０ｍｇ、０．０１１９ｍｍｏｌ、収率１５％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝６６６．４［（Ｍ＋２−Ｂｏｃ）／２］。
【０３８９】
化合物１２５〜１２８は、類似の方法で製造した。
【０３９０】
【化４１】
2018519283.tif 000077
【０３９１】
【化４２】
2018519283.tif 000078
【０３９２】
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中に溶解させた１１８（５２．４ｍｇ、０．０５００ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（１９．５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、３．０当量）、２−ピリジルチオシステアミン塩酸塩（２２．３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＴＢＴＵ（３２．１ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。溶液を室温で２時間攪拌し、次に０．１％の酢酸を含有する５〜９５％のアセトニトリル／水グラジエントを用いるＣ１８カラムにおいて、反応溶液を精製して、１２９（３０．０ｍｇ、０．０２４７ｍｍｏｌ、収率４９％）を得た。
【０３９３】
【化４３】
2018519283.tif 000079
【０３９４】
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の１２９（３０．０ｍｇ、０．０２４７ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（９．４ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）、オクタン酸（７．１ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（１５．７ｍｇ、０．０４９０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を室温で２時間攪拌し、０．１％の酢酸を含有する５〜９５％のアセトニトリル／水グラジエントを用いるＣ１８カラムにおいて、反応溶液を精製して、１３０（２０．５ｍｇ、０．０１５３ｍｍｏｌ、収率６２％）を得た。
【０３９５】
【化４４】
2018519283.tif 000080
【０３９６】
８１（１７３ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）をバイアルに入れた。水（１００μＬ）、トリフルオロ酢酸（４ｍＬ）およびトリイソプロピルシラン（１００μＬ）を添加し、反応を室温で５分間攪拌した。全ての溶媒を真空で除去し、残った残渣に、ＤＭＦ（４ｍＬ）中の２，２’−ジチオジピリジン（２０４ｍｇ、０．９２７ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この溶液に、急速に攪拌しながら、ｐＨ７．４リン酸緩衝液（２．０ｍＬ）を５分にわたって液滴で添加した。さらに５分間攪拌した後、２５％酢酸水（５ｍＬ）の添加により反応混合物を酸性化した。反応混合物を５０ｇのＣ１８カラム上に負荷し、５％〜４０％のアセトニトリル水で溶出させて、１３１をビス酢酸塩として得た（１３３ｍｇ、０．１０４ｍｍｏｌ、収率９０％）。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝５８０．３［（Ｍ＋２）／２］。
【０３９７】
化合物１３２は、類似の方法で製造した。
【０３９８】
【化４５】
2018519283.tif 000081
【０３９９】
【化４６】
2018519283.tif 000082
【０４００】
Ｆｍｏｃ−シスチン（Ｔｒｔ）−ＯＨを２−クロロトリチル樹脂上に負荷した。４：１のＤＭＦ：ピペリジンによる繰り返しの脱保護と、それに続く、Ｆｍｏｃ−スレオニン（ｔＢｕ）、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−Ｂｏｃ−リジン、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎｉｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−トリプトファン、Ｆｍｏｃ−チロシン（ｔＢｕ）、Ｆｍｏｃ−システイン（Ｔｒｔ）、およびＦｍｏｃ−Ｄ−フェニルアラニンとのカップリングとにより、保護された線状ペプチドを得た。２．００ｇのこの樹脂（０．３３８ｍｍｏｌ／ｇの負荷、０．６７２ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（２０ｍｌ）、水（０．５０ｍＬ）およびトリイソプロピルシラン（０．５０ｍＬ）で２０分間処理した。脱保護カクテルをフラスコ内にドレインし、トリフルオロ酢酸（２０ｍｌ）、水（０．５０ｍＬ）およびトリイソプロピルシラン（０．５０ｍＬ）により残った樹脂を再度１時間処理した。脱保護カクテルをフラスコ内にドレインし、樹脂をジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄し、ジクロロメタン洗液をフラスコ内ドレインした。捕集した溶媒を真空で濃縮し、残った残渣をＴＨＦ（３０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中に溶解させた。３０％の過酸化水素（０．３０ｍＬ）を添加し、ｐＨが８．０に到達するまで飽和重炭酸ナトリウムを添加した（７．０ｍＬを添加）。反応を室温で１時間攪拌し、溶媒を真空で除去し、残った残渣を３：１のＤＭＦ：水中に溶解させ、１００ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜８５％のアセトニトリルで溶出させて、１３３を酢酸塩として得た（３７５ｍｇ、０．３０５ｍｍｏｌ、収率４５％）。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝１１７０．５（Ｍ＋１）。
【０４０１】
【化４７】
2018519283.tif 000083
【０４０２】
ジクロロメタン（５ｍＬ）中のパラ−ニトロフェニルクロロホルマート（２００ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）の溶液に、ジクロロメタン（３ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．２０ｍＬ）中のモノ−Ｂｏｃ−１，６−ヘキサンジアミン（１１３ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応を室温で２時間攪拌し、次に、全反応容積＝２ｍＬになるまでジクロロメタンの大部分を真空で除去した。この溶液を２４ｇのシリカゲルカラム上に負荷した。ヘプタン中０％〜７０％の酢酸エチルで溶出させて、１３４（１０２ｍｇ、０．２６８ｍｍｏｌ、収率５４％）を得た。
【０４０３】
【化４８】
2018519283.tif 000084
【０４０４】
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の１３３（９３．２ｍｇ、０．０７９６ｍｍｏｌ）、１３４（９１．１ｍｇ、０．２３９ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２９．２ｍｇ、０．２３９ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．３０ｍＬ）を添加した。反応を５０℃で２時間攪拌した。メタノール（１ｍＬ）中１Ｍのアンモニアの溶液を添加し、反応を５０℃でさらに５分間攪拌し、全ての溶媒を真空で除去した。残った材料をＤＭＦ（２ｍＬ）およびＡｃＯＨ（１ｍＬ）中に溶解させ、５０ｇのＣ１８カラム上に負荷し、０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜８０％のアセトニトリルで溶出して、１３５（６１．２ｍｇ、０．０４３３ｍｍｏｌ、収率５４％）を得た。
【０４０５】
【化４９】
2018519283.tif 000085
【０４０６】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の１３５（６１．２ｍｇ、０．０４３３ｍｍｏｌ）、Ｓ−トリチルシステインアミド（４７．１ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（４９．２ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．２０ｍＬ）を添加した。反応を室温で１８時間攪拌し、次にピペリジン（１ｍＬ）を添加した。反応を室温で１時間攪拌し、次にピペリジンの大部分を真空で除去した。水（１ｍＬ）および酢酸（１ｍＬ）を添加し、反応混合物を５０ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜７０％のアセトニトリルで溶出させて、１３６を酢酸塩として得た（２６．２ｍｇ、０．０１６４ｍｍｏｌ、収率３８％）。
【０４０７】
化合物１３７は、類似の方法で製造した。
【０４０８】
【化５０】
2018519283.tif 000086
【０４０９】
【化５１】
2018519283.tif 000087
【０４１０】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の５９（１７．７ｍｇ、０．０２０４ｍｍｏｌ）の溶液に、１３４（１９．６ｍｇ、０．０５１０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１２．２ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．２０ｍＬ）を添加した。反応を室温で２０分間攪拌し、反応を３０ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜６５％のアセトニトリルで溶出させて、１３８（６．９ｍｇ、０．００６２ｍｍｏｌ、収率３０％）を得た。
【０４１１】
【化５２】
2018519283.tif 000088
【０４１２】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の１３８（６．９ｍｇ、０．００６２ｍｍｏｌ）、Ｓ−トリチルシステアミン（６．０ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）およびＴＢＴＵ（６．１ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ）を添加した。反応を室温で７２時間攪拌した。分取ＨＰＬＣ（０．２％のＡｃＯＨを含む水中２５％〜９５％のアセトニトリル）により反応混合物を精製して、１３９（７．５ｍｇ、０．００５３ｍｍｏｌ、収率８６％）を得た。
【０４１３】
【化５３】
2018519283.tif 000089
【０４１４】
トリフェニルメタンチオール（１．２３ｇ、４．４５ｍｍｏｌ）をフラスコに入れ、ジクロロメタン（７ｍＬ）、ジイソプロピルエチルアミン（１．０ｍＬ）およびアクロレイン（０．６０ｍＬ、８．９８ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で１時間攪拌し、全ての溶媒を真空で除去し、トリチル−３−メルカプトプロピオンアルデヒド（１４０、１．４８ｇ、４．４５ｍｍｏｌ）が得られ、これを未精製のまま次のステップで使用した。
【０４１５】
【化５４】
2018519283.tif 000090
【０４１６】
４：１のＤＭＦ：ピペリジン中の７９の溶液を室温で２時間攪拌した。次に、反応混合物を１０体積の冷ＭＴＢＥ中に添加し、遠心分離し、上澄みをデカントした。脱保護した粗材料をジクロロエタン中に溶解させ、１４０およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリドを添加した。反応を室温で２時間攪拌し、全ての溶媒を真空で除去した。残った材料を逆相クロマトグラフィにより精製して、１４１を得た。
【０４１７】
【化５５】
2018519283.tif 000091
【０４１８】
ＤＭＦ中の１４１、ＨＡＴＵおよびＨＯＡｔの溶液に、エチルアミンを添加した。反応を室温で６時間攪拌し、次に、分取ＨＰＬＣにより反応混合物を精製して、１４２を得た。
【０４１９】
化合物１４３は、類似の方法で製造した。
【０４２０】
【化５６】
2018519283.tif 000092
【０４２１】
【化５７】
2018519283.tif 000093
【０４２２】
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の７９（１３７ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（５７．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（ＤＭＦ中０．６Ｍ、０．２５ｍＬ、０．１５ｍＬ）の溶液に、ヘキシルアミン（０．３ｍＬ）を添加し、反応を室温で１８時間攪拌した。次に、この粗反応混合物に、ピペリジン（１．５ｍＬ）を添加し、反応を一晩攪拌した。全ての溶媒を真空で除去し、残った材料を、ジクロロメタン（８ｍＬ）中５％のメタノール中に溶解させ、これをＭＴＢＥ（８０ｍＬ）中に注いだ。得られた懸濁液を遠心分離し、上澄みをデカントし、得られた沈殿物をＤＭＳＯ／水／メタノール中に溶解させ、分取ＨＰＬＣにより精製して、１４４（７６ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ、収率６１％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝１２３３［Ｍ＋１］。
【０４２３】
化合物１４５は、類似の方法で製造した。
【０４２４】
【化５８】
2018519283.tif 000094
【０４２５】
【化５９】
2018519283.tif 000095
【０４２６】
ＴＨＦ中の１４５および２−ピリジルチオシステアミンパラ−ニトロフェニルカルバメートの溶液に、ＤＭＡＰを添加した。反応を５０℃で２時間攪拌し、全ての溶媒を真空で除去した。残った残渣をＤＭＳＯ中に溶解させ、逆相クロマトグラフィにより精製して、１４６を得た。
【０４２７】
化合物１４７は、類似の方法で製造した。
【０４２８】
【化６０】
2018519283.tif 000096
【０４２９】
【化６１】
2018519283.tif 000097
【０４３０】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の１１９（３５．０ｍｇ、０．０２８３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＣ（７．１ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７．６ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）、およびＳ−トリチルペニシラミンアミド（１６．６ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を添加した。ジイソプロピルエチルアミン（１４．８μＬ、０．０８４８ｍｍｏｌ）を添加し、反応を室温で１６時間攪拌し、分取ＨＰＬＣ（０．０５％のトリフルオロ酢酸調節剤を含む、水／アセトニトリル）により反応混合物を精製して、１４８（２５．６ｍｇ、０．０１５９ｍｍｏｌ、収率５６％）を得た。
【０４３１】
【化６２】
2018519283.tif 000098
【０４３２】
ジクロロメタン（５ｍＬ）中のＢｏｃ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−ＯＨ（６９．６ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＣＣ（４９．５ｍｇ、０．２４０ｍｍｏｌ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（２７．６ｍｇ、０．２４０ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で３時間攪拌し、次に、全ての溶媒を真空で除去した。残った残渣に、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の１３３（２３４ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応を室温で１６時間攪拌し、次に分取ＨＰＬＣ（０．０５％のＴＦＡ調節剤を含む、アセトニトリル／水）により精製して、１４９（２００ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ、収率６８％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝１４６８．５［Ｍ＋１］。
【０４３３】
【化６３】
2018519283.tif 000099
【０４３４】
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の１４９（１２０ｍｇ、０．０８１７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｓ−トリチル−Ｌ−ペニシラミンアミド（４１．５ｍｇ、０．１０６ｍｍｏｌ）、ＤＩＣ（２０．６ｍｇ、０．１６３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２２．１ｍｇ、０．１６３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４３μＬ、０．２４５ｍｍｏｌ）を添加した。反応を室温で１６時間攪拌し、次に分取ＨＰＬＣ（０．０２５％のＴＦＡを含む、アセトニトリル／水グラジエント）により精製して、１５０（６０．０ｍｇ、０．０３２６ｍｍｏｌ、収率４０％）を得た。
【０４３５】
【化６４】
2018519283.tif 000100
【０４３６】
ＤＭＦ（３．０ｍＬ）中の１５０（６０．０ｍｇ、０．０３２６ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（０．３０ｍＬ）を添加した。反応を室温で１６時間攪拌し、次に逆相クロマトグラフィ（０．０５％のＴＦＡを含む、アセトニトリル／水グラジエント）により精製して、１５１（２５．７ｍｇ、０．０１５９ｍｍｏｌ、収率４９％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝１６１８．５［Ｍ＋１］。
【０４３７】
【化６５】
2018519283.tif 000101
【０４３８】
ＤＭＦ（８ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（１ｍＬ）中の２，２’−ジチオジピリジン（１．２４ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）の溶液に、２ｍＬのＤＭＦ中のＤＭ１（４１７ｍｇ、０．５６５ｍｍｏｌ）の溶液を５分にわたって液滴で添加した。反応を室温でさらに３０分間攪拌し、反応混合物をＣ１８イスコ（Ｉｓｃｏ）ゴールドカラム上に負荷した。２５％〜８５％のアセトニトリル水で溶出させて、ＤＭ１−ＳＳＰｙ（２８７ｍｇ、０．３３９ｍｍｏｌ、収率６０％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ：８４７．３［Ｍ＋１］。
【０４３９】
マイタンシノイドのコンジュゲ―ション方法Ａ：
【０４４０】
【化６６】
2018519283.tif 000102
【０４４１】
１２８（１２．６ｍｇ、０．００９０８ｍｍｏｌ）をバイアルに入れ、これをトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）中に溶解させた。反応を５分間攪拌し、完全な脱保護をＬＣＭＳにより検証した。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝６４４．３、［（Ｍ＋２）／２］。ＴＦＡを全て真空で除去し、残った残渣に、ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中のＤＭ４（１５．５ｍｇ、０．０１９９ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この溶液に０．２ＭのＮａＨ２ＰＯ４（０．１０ｍＬ）を添加した後、０．２ＭのＮａ２ＨＰＯ４（０．９０ｍＬ）を滴下した。反応を室温で１５分間攪拌し、ＬＣＭＳにより転化をチェックした。この場合、ＬＣＭＳは不完全な転化を示すので、付加的な０．２ＭのＮａ２ＨＰＯ４（０．９０ｍＬ）を添加し、反応をさらに１時間攪拌した。ＬＣＭＳは完全な転化を示し、分取ＨＰＬＣ（０．２％のＡｃＯＨを含む５％〜６５％のアセトニトリル水）により反応混合物を精製して、３を酢酸塩として得た（１４．１ｍｇ、０．００６９９ｍｍｏｌ、収率７７％）。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝９７８．８［（Ｍ＋２）／２］。
【０４４２】
【化６７】
2018519283.tif 000103
【０４４３】
マイタンシノイドのコンジュゲ―ション方法Ｂ：
８２（５４．２ｍｇ、０．０３５６ｍｍｏｌ）を含むバイアルに、水（５０μＬ）、トリフルオロ酢酸（２．０ｍＬ）およびトリイソプロピルシラン（５０μＬ）を添加した。反応を室温で５分間攪拌し、その間に、反応は黄色から無色に変化した。ＬＣＭＳは、５分後に完全な脱保護を示した。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝１０７８．７（Ｍ＋１）。全ての溶媒を真空で除去し、残った残渣に、ＤＭＦ（４．０ｍＬ）中のＤＭ１−ＳＳＰｙ（５５．０ｍｇ、０．０６４８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。ｐＨ７．４リン酸緩衝液（４．０ｍＬ）を添加した後、０．２ＭのＮａ２ＨＰＯ４（０．６ｍＬ）を１０分にわたって滴下した。反応を室温で１時間攪拌し、ＬＣＭＳは、脱保護した８２の完全な転化を示す。反応をＡｃＯＨ（３ｍＬ）により酸性化し、反応を３０ｇのＣ１８カラム上に負荷した。０．１％のＡｃＯＨを含む水中５％〜５５％のアセトニトリルで溶出させて、６をビス酢酸塩として得た（２５．３ｍｇ、０．０１３５ｍｍｏｌ、収率３８％）。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝９０７．７［（Ｍ＋２）／２］。
【０４４４】
【化６８】
2018519283.tif 000104
【０４４５】
マイタンシノイドのコンジュゲ―ション方法Ｃ：
１２５（１２．６ｍｇ、０．００８７６ｍｍｏｌ）をバイアルに入れた。トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加し、反応を室温で５分間攪拌した。ＬＣＭＳは、５分後に完全な脱保護を示した。ＬＣＭＳ  Ｍ／Ｚ＝６６９．９［（Ｍ＋２）／２］。全ての溶媒を真空で除去し、残った残渣に、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＤＭ１（１１．８ｍｇ、０．０１６０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ）を添加し、反応を室温で１０分間攪拌した。ＬＣＭＳは、脱保護した１２５の完全な転化を示した。反応をＡｃＯＨ（０．５ｍＬ）により酸性化し、分取ＨＰＬＣ（０．２％のＡｃＯＨを含む水中１５％〜８５％のアセトニトリル）により反応混合物を精製して、２２を酢酸塩として得た（１２．７ｍｇ、０．００５９４ｍｍｏｌ、収率６８％）。ＬＣＭＳ＝１０３８．７［（Ｍ＋２）／２］。
【０４４６】
【表５−１】
2018519283.tif 000105
【０４４７】
【表５−２】
2018519283.tif 000106
【０４４８】
実施例２：マイタンシノイドコンジュゲートのナノ粒子製剤
本発明の任意のマイタンシノイドコンジュゲートであり得る典型的なコンジュゲートＸのナノ粒子製剤。コンジュゲートＸは、単一の水中油型エマルション法を用いて、高分子ナノ粒子内にうまくカプセル化される。通常の水−エマルション法において、薬物コンジュゲートおよび適切なポリマーもしくはブロックコポリマーまたはポリマー／ブロックコポリマーの混合物を、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、酢酸エチル（ＥｔＡｃ）またはクロロホルムなどの有機溶媒中に溶解させて、油相を形成した。ナノ粒子のサイズを制御するため、および／または薬物コンジュゲートを可溶化するために、時折、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）またはアセトニトリル（ＡＣＮ）またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはベンジルアルコール（ＢＡ）などの共溶媒を使用した。ＰＬＡ９７−ｂ−ＰＥＧ５、ＰＬＡ３５−ｂ−ＰＥＧ５およびＰＬＡ１６−ｂ−ＰＥＧ５コポリマーを含む様々なポリマーが製剤中で使用される。トゥイーン（ＴＷＥＥＮ）（登録商標）８０、コール酸ナトリウム、ソルトール（Ｓｏｌｕｔｏｌ）（登録商標）ＨＳまたはリン脂質などの界面活性剤は、微細エマルションの形成を助けるために、水相中で使用される。乳化剤（例えば、トゥイーン（ＴＷＥＥＮ）８０など）を含有する、連続的に攪拌される水相に、通常１０％／９０％ｖ／ｖの油／水比で、油相がゆっくり添加され、ロータ・ステータホモジナイザーまたは超音波浴を用いて粗エマルションが調製される。次に、高圧ホモジナイザー（６８．９ＭＰａ（１０，０００ｐｓｉ）で動作）により粗エマルションをＮ＝４のパスで処理して、ナノエマルションを形成する。続いて、注射用水品質の冷（０〜５℃）水による１０倍希釈によってナノエマルションをクエンチして、ナノ粒子液滴中の酢酸エチル溶媒の大部分を除去して、エマルション液滴の硬化およびナノ粒子懸濁液の形成が起こる。場合によっては、ジクロロメタンなどの揮発性有機溶媒は、回転蒸発によって除去することができる。接線流ろ過（５００ｋＤａのＭＷＣＯ、ｍＰＥＳ膜）を使用して、注射用水品質の水（界面活性剤／塩を含むまたは含まない）によりナノ粒子懸濁液を濃縮および洗浄する。遊離薬物コンジュゲートは、様々な技術を用いてナノ懸濁液から除去される。等張化剤としての役割も果たす抗凍結剤（例えば、１０％のスクロース）がナノ粒子懸濁液に添加され、製剤は、０．２２μｍフィルタを通して滅菌ろ過される。製剤は、−２０℃以下で凍結貯蔵される。ナノ粒子の動的光散乱により決定される粒径（Ｚ平均）および多分散指数（ＰＤＩ）は、動的光散乱によって特徴付けられる。実際の薬物負荷は、ＨＰＬＣおよびＵＶ−可視吸光度を用いて決定される。これは、既知の容積のナノ粒子溶液から水を蒸発させ、固形分をＤＭＦなどの適切な溶媒中に溶解させることによって達成される。薬物濃度は、蒸発後に回収された全固形分に対して正規化される。カプセル化効率は、実際の薬物負荷と理論的な薬物負荷との間の比として計算される。
【０４４９】
コンジュゲートＸの疎水性イオン対合（ＨＩＰ）を用いる製剤
場合により、ＨＩＰ技術を使用して、コンジュゲートＸの親油性を高める。コンジュゲートＸは、１つまたは複数の正に帯電した部分を有する。ＨＩＰを形成するために、コンジュゲートの各分子に対してスルホコハク酸ジオクチルナトリウム（ＡＯＴ）分子などの負に帯電した対イオンが使用される。コンジュゲートＸおよびＡＯＴをメタノール、ジクロロメタンおよび水の混合物に添加し、１時間振とうさせる。さらにジクロロメタンおよび水をこの混合物に添加した後、Ｘ／ＡＯＴ  ＨＩＰをジクロロメタン相から抽出して乾燥させる。いくつかの実施形態では、ＨＩＰ複合体を可溶化するためにＤＭＦが使用される。
【０４５０】
ナノ粒子におけるコンジュゲートＸの効率的なカプセル化のための条件を発明可能であることが実証される。
実施例３：マイタンシノイドコンジュゲートのインビトロ特性−コンジュゲートのＬｏｇＰおよびソマトスタチン受容体に対するコンジュゲートのＫｉ
テーブル４に示されるように、３つのコンジュゲート（６、１０、および４４）のｌｏｇＰ値を測定した。ＬｏｇＰおよびリガンド電荷は、コンジュゲートがナノ粒子中にどのようにカプセル化／分散されるかに影響を与える。またこれらのコンジュゲートは、ソマトスタチン受容体２（ＳＳＴＲ２）への結合を評価するインビトロアッセイにおいても評価した。放射性リガンド−受容体結合アッセイをユーロフィンズ・パンラブス（Ｅｕｒｏｆｉｎｓ  Ｐａｎｌａｂｓ）（台湾）で実行して、本明細書に記載されるコンジュゲートのＳＳＴＲ２に対する親和性を決定した。アッセイは、ＳＳＴＲ２発現ＣＨＯ−Ｋ１細胞由来の膜調製物を用いて、放射標識化リガンドの［１２５Ｉ］標識化ソマトスタチンの、ヒトＳＳＴＲ２に対する結合を測定する。６ｘ連続希釈を用いて１０ｕＭの用量で始まるコンジュゲート／化合物の存在下、膜を放射標識化ソマトスタチン（０．０３ｎＭ）と共にインキュベートして、１０点曲線を得た。４時間のインキュベーションの後、膜をろ過し、３回洗浄し、残存した、受容体に結合した［１２５Ｉ］ソマトスタチンを決定するためにカウントした。ＩＣ５０値は、ＭａｔｈＩＱＴＭ（ＩＤビジネス・ソリューションズ社（ＩＤ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  Ｌｔｄ．）、英国）を用いる非線形最小二乗回帰分析によって決定した。Ｋｉ値は、チェン（Ｃｈｅｎｇ）およびプルソフ（Ｐｒｕｓｏｆｆ）の式（チェン（Ｃｈｅｎｇ）およびプルソフ（Ｐｒｕｓｏｆｆ）著、バイオケミカル・ファーマコロジー（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）、第２２巻、ｐ．３０９９〜３１０８、１９７３年）を使用し、試験コンジュゲート／化合物の観察されたＩＣ５０、アッセイで使用した放射性リガンドの濃度、およびユーロフィンズ（Ｅｕｒｏｆｉｎｓ）で得られたリガンドのＫＤの歴史的な値を用いて計算した。
【０４５１】
【表６−１】
2018519283.tif 000107
【０４５２】
【表６−２】
2018519283.tif 000108
【０４５３】
これらのデータは、リンカーおよび薬物をペプチドへ添加した後に、ペプチドの受容体に対する高親和性が保持されること、そしてＳＳＴＲ２結合ポケットのリジンがキャップされた化合物（化合物５５〜５８）が受容体に対して著しく悪い親和性を有することを実証する。
【０４５４】
実施例４：マイタンシノイドコンジュゲートのインビトロ特性−コンジュゲートによる細胞増殖の抑制
細胞増殖の抑制を評価するインビトロアッセイにおいてコンジュゲートを評価した。ＮＣＩ−Ｈ５２４（ＡＴＣＣ）ヒト肺癌細胞を５，０００細胞／ウェルの濃度で９６ウェルＶ底プレート（コスタ―（Ｃｏｓｔａｒ））にプレーティングし、２４時間後に、化合物で６時間処理し、さらに６６時間インキュベートした。化合物の開始用量は２０μＭであり、全部で１０点について３倍連続希釈を行なった。処理の６時間後に、細胞を遠沈し、薬物含有培地を除去し、細胞を再懸濁させるために新しい完全培地を添加および使用し、これを再度回転させた。洗浄培地を除去した後、細胞を完全培地中に再懸濁させ、次に白色壁の平底９６ウェルプレートに移した。細胞増殖の抑制を測定するためにさらに６６時間、細胞をさらにインキュベートした。オクトレオチド単独では、細胞増殖に対する有意な効果はなかった。増殖は、標準プロトコール（プロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ））およびＧｌｏｍａｘ  ｍｕｌｔｉ＋検出システム（プロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ））を使用し、セルタイター−グロ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ）試薬を用いて測定した。増殖抑制パーセントは、以下の式：抑制％＝（対照−処理）／対照＊１００を用いて計算した。対照は、媒体単独であると定義される。グラフパッド・プリズム（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ）６と共に非線形回帰分析（４つのパラメータ）を用いてＩＣ５０曲線を作成した。化合物のデータをテーブル５に示した。オクトレオチド競合を有する代表的な化合物のＩＣ５０値も測定し、テーブル５に示した。
【０４５５】
【表７−１】
2018519283.tif 000109
【０４５６】
【表７−２】
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【０４５７】
これらのデータは、コンジュゲートがソマトスタチンに結合し、受容体を取り込む能力を保持することを実証する。場合により、これは、リンカーが切断されて、細胞毒性ペイロードを効果的に活性化し、腫瘍細胞を死滅させることも示す。
【０４５８】
実施例５：マイタンシノイドコンジュゲートのインビトロ特性−インビトロ安定性および腫瘍ＰＫ
ラット血漿およびラット肝臓ミクロソーム（ＬＭ）においてマイタンシノイドコンジュゲートの半減期（ｔ１／２）を測定した。ＮＣＩ−Ｈ６９  ＳＣＬＣ（小細胞肺癌）腫瘍細胞におけるマイタンシノイドコンジュゲートのＰＫ値を測定した。
【０４５９】
【表８】
2018519283.tif 000111
【０４６０】
実施例６：腫瘍成長および薬物動態研究におけるマイタンシノイドコンジュゲートの効果
本出願人らは、インビボでのマイタンシノイドコンジュゲートの活性を評価した。これらの実験では、コンジュゲートがヒトＮＣＩ−Ｈ６９  ＳＣＬＣの成長に影響を与える能力を試験した。インビボ研究のために、８週齢メスＮＣＲヌードマウスの右側腹部に、１：１のＲＰＭＩ１６４０（インビトロゲン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールスバッド）／マトリゲル（Ｍａｔｒｉｇｅｌ）（登録商標）（ＢＤバイオサイエンシーズ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、カリフォルニア州サンノゼ）中の２００万細胞を皮下接種した。ノギスを用いて腫瘍測定を週に２回行った。式：Ｖ＝０．５×幅×幅×長さを用いて、腫瘍体積を計算した。
【０４６１】
腫瘍が２００ｍｍ３の体積に達したら、１０匹の動物からなる４つのグループにマウスを無作為に分けた。媒体対照（注射用水中１０％のプロピレングリコール）およびマイタンシノイドコンジュゲート（注射用水中１０％のプロピレングリコール）でマウスを治療した。一元配置分散分析およびテューキー（Ｔｕｋｅｙ）多重比較試験を用いて最終腫瘍体積を分析した。
【０４６２】
マウスに週１回、０．７ｍｇ／ｋｇの３回用量のコンジュゲート６を投与した場合、コンジュゲート６について、３３日目のＴＧＩ％は３１．９％であった。
別の研究では、マウスに週１回、０．７ｍｇ／ｋｇの２回用量のコンジュゲート６またはコンジュゲート１０を投与した。ＴＧＩ％値はテーブル７に示した。
【０４６３】
【表９】
2018519283.tif 000112
【０４６４】
さらに別の研究では、マウスに週１回、２回用量の１．３ｍｇ／ｋｇまたは２ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート６、１．５ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート１０、または０．７ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート４４を投与した。ＴＧＩ％値をテーブル８に示した。
【０４６５】
【表１０】
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【０４６６】
さらに別の研究では、マウスに週１回、２回用量または３回用量のコンジュゲート６、１０、または４４を投与した。２２日目のＴＧＩ％値をテーブル９に示した。
【０４６７】
【表１１】
2018519283.tif 000114
【０４６８】
マウスにおける薬物動態研究も実行した。コンジュゲート６の半減期、ＣｍａｘおよびＡＵＣ値をテーブル１０に示した。
【０４６９】
【表１２】
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【０４７０】
ＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍におけるホスホ−ヒストンＨ３応答を測定した。コンジュゲート６による治療の後、腫瘍中のホスホ−ヒストンＨ３の増大が観察された。２４時間で、コンジュゲート６に対して調整されたホスホ−ヒストンＨ３応答は約５００（蛍光シグナル）であり、４８時間では、約２３００（蛍光シグナル）であった。薬物動態研究により、コンジュゲート６の応答の延長が示唆された。
【０４７１】
従って、マイタンシノイドコンジュゲートは、腫瘍成長を抑制するのに有効である。
実施例７：受容体に対する活性依存性
ソマトスタチン受容体に対するその活性依存性についてコンジュゲートを試験した。コンジュゲート中の活性剤Ｚは、アウリスタチン、カルバゼタキセル（ｃａｒｂａｚｉｔａｘｅｌ）、ＤＭ１、ドキソルビシン、白金、ＳＮ−３８およびビンブラスチンから選択した。活性剤Ｚは、種々のリンカーを用いてオクトレオチドに結合される。コンジュゲートの増殖ＩＣ５０値を測定した。オクトレオチド競合のないコンジュゲートの増殖ＩＣ５０値も測定した。オクトレオチド競合のあるＩＣ５０と、オクトレオチド競合のないＩＣ５０との比は、図１に示した。オクトレオチド競合のあるＩＣ５０と、オクトレオチド競合のないＩＣ５０との比は、活性がソマトスタチン受容体への結合に少なくとも部分的に依存するかどうかの指標である。ＤＭ１を含むコンジュゲートは１よりも大きい比を示した。これは、オクトレオチド競合のある場合よりもオクトレオチド競合のない場合の方がＩＣ５０が低い、すなわち効力が優れていることを示す。従って、ＤＭ１を含むコンジュゲートの活性は、ソマトスタチン受容体への結合に依存する。
【０４７２】
本発明の範囲は上記の説明に限定されることは意図されず、特許請求の範囲に明記される通りである。
特許請求の範囲において、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」などの冠詞は、文脈から反対である、あるいは他に明らかであると示されない限り、１つまたは２つ以上を意味し得る。グループの１つまたは複数のメンバーの間に「または」を含む特許請求の範囲または説明は、文脈から反対である、あるいは他に明らかであると示されない限り、グループメンバーの１つ、２つ以上、または全てが所与の生成物またはプロセス中に存在する、所与の生成物またはプロセスにおいて使用される、あるいは所与の生成物またはプロセスと他に関連する場合に満たされると考えられる。本発明は、グループの正確に１つのメンバーが所与の生成物またはプロセス中に存在する、所与の生成物またはプロセスにおいて使用される、あるいは所与の生成物またはプロセスと関連する実施形態を含む。本発明は、グループメンバーの２つ以上、または全てが所与の生成物またはプロセス中に存在する、所与の生成物またはプロセスにおいて使用される、あるいは所与の生成物またはプロセスと関連する実施形態を含む。
【０４７３】
また、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、オープンであることが意図され、付加的な要素またはステップの包含を許可するが必要としないことも留意される。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語が本明細書で使用される場合、従って、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」という用語も包含および開示される。
【０４７４】
範囲が与えられる場合、端点が含まれる。さらに、他に記載されない限りまたは文脈および当業者の理解から他に明らかでない限り、範囲として表される値は、文脈が明白に他に指示しない限り本発明の異なる実施形態で規定された範囲内で、範囲の下限の単位の１０分の１までの任意の特定の値または部分範囲をとることができることは理解されるべきである。
【０４７５】
さらに、従来技術の範囲内に入る本発明の任意の特定の実施形態は、請求項のうちの任意の１つまたは複数から明確に排除され得ると理解されるべきである。このような実施形態は当業者に既知であると見なされるので、たとえその排除が本明細書中に明確に示されなくても、それらは排除され得る。本発明の組成物の任意の特定の実施形態は、従来技術の存在に関係するか否かに関わらず、何らかの理由で任意の１つまたは複数の請求項から排除することができる。
【０４７６】
全ての引用されたソース、例えば、本明細書において引用された参考文献、刊行物、データベース、データベースエントリ、および技術は、引用において明確に記載されていなくても参照によって本出願に援用される。引用されたソースと本出願との記述が矛盾する場合、本出願の記述が支配するものとする。
【０４７７】
セクションおよび表の見出しは限定を意図するものではない。
【図１】
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【国際調査報告】
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