(57)【要約】本発明は、一般に、そのプロテアーゼであるアルギニンジンジパインＡ／Ｂ（Ｒｇｐ）を含め、細菌Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓを標的とする治療薬、およびアルツハイマー病などの脳障害を含めた、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する障害を処置するためのそれらの使用に関する。ある特定の実施形態では、本発明は、本明細書に記載されている式Ｉによる化合物および薬学的に許容されるそれらの塩を提供する。
2018534300.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化４８】
2018534300.tif 000053
による化合物または薬学的に許容されるその塩であって、式中、
Ｚは、アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、チアゾール−２−イル−カルボニル、オキサゾール−２−イル−カルボニル、ベンゾオキサゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、ピリミジン−４−イル−カルボニル、ピリミジン−２−イル−カルボニル、イソオキサゾール−５−イル−カルボニル、イソオキサゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル−カルボニル、シアノ、エチニル、フルオロメチル−カルボニル、アシルオキシメチル−カルボニル、アルキルスルホニル−ビニル、およびアリールスルホニル−ビニルからなる群より選択され、
Ｚは、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４ハロアルキル、Ｃ１〜４ハロアルコキシ、および−Ｎ３からなる群より選択される１つまたは複数の置換基により任意選択で置換されており、
Ｒ１はそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基からなる群から独立して選択され、
Ｒ２は、水素およびＣ１〜４アルキルからなる群より選択され、
Ｒ３は、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８アルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルからなる群より選択され、
Ｒ３は、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＯＨ、Ｒａ、−ＯＲｂ、−Ｎ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−（ＣＨ２）ｋＣＯＮ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、および−Ｏ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃからなる群から独立して選択される１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されており、
Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃはそれぞれ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜４ハロアルキルからなる群から独立して選択され、
Ｒｄはそれぞれ、水素およびＣ１〜８アルキルからなる群から独立して選択され、
下付き文字ｋはそれぞれ、０、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
下付き文字ｕはそれぞれ、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
Ｚがフェノキシメチルカルボニルまたは置換フェノキシメチルカルボニルである場合、Ｒ３およびそれが結合しているカルボニルは、プロリニル、置換プロリニル、アルギニニル、置換アルギニニル、フェニルアラニニル、置換フェニルアラニニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル以外の部分を形成することを条件とし、
Ｚがベンゾチアゾール−２−イル−カルボニルである場合、Ｒ３は、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルからなる群より選択されることを条件とする、
化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
Ｚが、ハロゲン−置換アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、およびチアゾール−２−イル−カルボニルから選択される、請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項３】
Ｒ２が水素である、請求項２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項４】
式Ｉａ：
【化４９】
2018534300.tif 000054
による構造を有する、請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項５】
Ｚが、ハロゲン−置換アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、およびチアゾール−２−イル−カルボニルから選択される、請求項４に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項６】
Ｒ２が水素である、請求項５に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項７】
Ｚが、（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシメチル）カルボニルである、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項８】
式Ｉｂ：
【化５０】
2018534300.tif 000055
による構造を有する、請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項９】
Ｒ３が、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルからなる群より選択され、そのそれぞれが、１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されている、請求項８に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１０】
Ｒ３が、シクロペンチル、フェニル、およびアジドフェニルからなる群より選択される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
以下：
【化５１】
2018534300.tif 000056
および薬学的に許容されるそれらの塩からなる群より選択される、請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
以下：
【化５２】
2018534300.tif 000057
である、請求項１１に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１３】
式Ｉｃ：
【化５３】
2018534300.tif 000058
による構造を有し、式中、
Ｒ３は、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルからなる群より選択される、請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１４】
以下：
【化５４】
2018534300.tif 000059
および薬学的に許容されるそれらの塩からなる群より選択される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ４がメチルである、請求項１もしくは請求項４に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１６】
Ｚが、ハロゲン−置換アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、およびチアゾール−２−イル−カルボニルから選択される、請求項１５に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１７】
Ｚが、（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシメチル）カルボニルである、請求項１６に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１８】
請求項１から１７のいずれか一項に記載の化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１９】
Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態を処置する方法であって、前記方法は、被験体に有効量の式ＩＩ：
【化５５】
2018534300.tif 000060
による化合物または薬学的に許容されるその塩を投与し、これにより前記疾患または前記状態を処置するステップを含み、式中、
Ｚ’は、アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、チアゾール−２−イル−カルボニル、オキサゾール−２−イル−カルボニル、ベンゾオキサゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、ピリミジン−４−イル−カルボニル、ピリミジン−２−イル−カルボニル、イソオキサゾール−５−イル−カルボニル、イソオキサゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル−カルボニル、シアノ、エチニル、フルオロメチル−カルボニル、アシルオキシメチル−カルボニル、アルキルスルホニル−ビニル、およびアリールスルホニル−ビニルからなる群より選択され、
Ｚ’は、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４ハロアルキル、Ｃ１〜４ハロアルコキシ、および−Ｎ３からなる群より選択される１つまたは複数の置換基により任意選択で置換されており、
Ｒ１ａはそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基からなる群から独立して選択され、
Ｒ２ａは、水素およびＣ１〜４アルキルからなる群より選択され、
Ｒ３ａは、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８アルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルからなる群より選択され、
Ｒ３ａは、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＯＨ、Ｒａ、−ＯＲｂ、−Ｎ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−（ＣＨ２）ｋＣＯＮ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、および−Ｏ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃからなる群から独立して選択される１つまたは複数のＲ４ａ置換基により任意選択で置換されており、
Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃはそれぞれ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜４ハロアルキルからなる群から独立して選択され、
Ｒｄはそれぞれ、水素およびＣ１〜８アルキルからなる群から独立して選択され、
下付き文字ｋはそれぞれ、０、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
下付き文字ｕはそれぞれ、１、２、３、４、５、および６から独立して選択される、方法。
【請求項２０】
Ｚ’が、アリールオキシメチル−カルボニルおよびベンゾチアゾール−２−イル−カルボニルからなる群より選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
Ｚ’が、（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシメチル）カルボニルである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記化合物が、以下：
【化５６】
2018534300.tif 000061
および薬学的に許容されるそれらの塩からなる群より選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記化合物が、以下：
【化５７】
2018534300.tif 000062
または薬学的に許容されるその塩である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
前記化合物が、以下：
【化５８】
2018534300.tif 000063
および薬学的に許容されるそれらの塩からなる群より選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２５】
前記疾患または前記状態が、脳障害、歯周病、糖尿病、心血管疾患、関節炎、関節リウマチ、変形性関節症、感染性関節炎、乾癬性関節炎、早産のリスクの上昇、肺炎、がん、腎疾患、肝疾患、網膜障害、および緑内障から選択される、請求項１９から２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記疾患または前記状態が、脳障害である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記脳障害が、アルツハイマー病、ダウン症候群、てんかん、自閉症、パーキンソン病、本態性振戦、前頭側頭型認知症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、多発性硬化症、軽度認知障害、加齢関連性記憶障害、慢性外傷性脳症、脳卒中、脳血管疾患、レビー小体病、多系統萎縮症、統合失調症およびうつ病から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記脳障害が、アルツハイマー病である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
コリンエステラーゼ阻害剤、セロトニンモジュレーター、ＮＭＤＡモジュレーター、Ａβ標的化治療、ＡｐｏＥ標的化治療、ミクログリア標的化治療、血液脳関門標的化治療、タウ標的化治療、補体標的化治療および抗炎症剤からなる群より選択される１つまたは複数の活性薬剤を前記被験体に投与するステップをさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記疾患または前記状態が歯周病である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３１】
前記疾患または前記状態が肝疾患である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３２】
前記肝疾患が非アルコール性脂肪性肝炎である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記疾患または前記状態が網膜障害である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３４】
前記網膜障害が加齢黄斑変性である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記疾患または前記状態ががんである、請求項２５に記載の方法。
【請求項３６】
前記がんが、口腔がん、乳がん、膵臓がんおよび多形性神経膠芽腫からなる群より選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記疾患または前記状態が、早産のリスクの上昇である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３８】
前記疾患または前記状態が関節炎である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３９】
前記関節炎が、関節リウマチまたは変形性関節症である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記疾患または前記状態が心血管疾患である、請求項２５に記載の方法。
【請求項４１】
前記疾患または前記状態が糖尿病である、請求項２５に記載の方法。
【請求項４２】
前記化合物が、少なくとも１カ月間、前記被験体に投与される、請求項１９から４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記化合物が、少なくとも１年間、前記被験体に投与される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記化合物が、少なくとも１０年間、前記被験体に投与される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
前記化合物が、少なくとも６０年間、前記被験体に投与される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４６】
前記被験体が、ヒト、イヌ、またはネコである、請求項１９から４５のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１５年１１月９日に出願された米国仮特許出願第６２／２５３，０３９号、および２０１６年５月１９日に出願された米国仮特許出願第６２／３３８，９２４号の優先権（ｐｒｉｏｒ）を主張し、これらの出願全体は、すべての目的のために参照によって組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
細菌のＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓによる感染は、歯周病、アルツハイマー病および他の脳障害、心血管疾患、糖尿病、がん、肝疾患、腎疾患、早産、関節炎、肺炎および他の障害の発症にリンクしている。Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓは、口腔に感染し、冠状動脈、大動脈、胎盤組織、脳、腎臓および肝臓に全身的に移動することが知られている非糖分解性嫌気性グラム陰性桿菌である。この細菌はまた、がん性組織でも特定されており、ジンジパインが不死化および転移を引き起こすことができる機構が提唱されている。Ｇａｎｄｈｉｍａｄｈｉら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｄｉａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌｏｇｙ、２０１０年；１４巻（２号）：１１４〜１２０頁；Ｌｉａｏら、Ｍｅｄ  Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ、２００９年、７２巻（６号）：７３２〜５頁；Ｂｙｒｎｅら、Ｏｒａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００９年、２４巻（６号）：４６９〜７７頁；Ｍａｈｅｎｄｒａら、Ｊ  Ｍａｘｉｌｌｏｆａｃ  Ｏｒａｌ  Ｓｕｒｇ、２００９年、８巻（２号）：１０８〜１３頁；Ｓｔｅｌｚｅｌら、Ｊ  Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌ、２００２年、７３巻（８号）：８６８〜７０頁；Ｋａｔｚら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｄｅｎｔａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２００９年、８８巻（６号）：５７５〜５７８頁；Ｐｏｏｌｅら、Ｊ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｉｓ、２０１５年、４３巻（１号）：６７〜８０頁；Ｉｓｈｉｋａｗａら、Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ、２０１３年、１８３２巻（１２号）：２０３５〜２０４３頁；Ｉｎａｂａら、Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、２０１４年、１６巻（１号）：１３１〜１４５頁を参照されたい。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｇａｎｄｈｉｍａｄｈｉら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｄｉａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌｏｇｙ（２０１０年）１４巻（２号）：１１４〜１２０頁
【非特許文献２】Ｌｉａｏら、Ｍｅｄ  Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ（２００９年）７２巻（６号）：７３２〜５頁
【非特許文献３】Ｂｙｒｎｅら、Ｏｒａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ（２００９年）２４巻（６号）：４６９〜７７頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓは、アルギニンジンジパインＡ（ＲｇｐＡ）、アルギニンジンジパインＢ（ＲｇｐＢ）およびリシンジンジパイン（Ｋｇｐ）を含めた、ジンジパインと呼ばれるプロテアーゼを産生する。ジンジパインは、その生存および毒性を含めた、生物の多くの機能に寄与している。ジンジパインは、分泌されて、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓの外側膜表面に輸送され得るか、またはこの細菌により、外膜小胞中に放出され得る。ジンジパインは、多くのタイプの細胞中で細胞骨格の崩壊およびアポトーシスをもたらし得る、幅広い範囲のタンパク質（例えば、免疫グロブリン、プロテイナーゼ阻害剤、アクチンおよびコラーゲン）を分解する。最近の研究により、ジンジパインの阻害剤は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ誘導性細胞死を予防することができることが実証された。Ｔｒａｖｉｓら、Ａｄｖ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、２０００年、４７７巻：４５５〜６５頁；Ｓｈｅｅｔｓら、Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ、２００５年、７３巻（３号）：１５４３〜５２頁；Ｓｈｅｅｔｓら、Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ、２００６年、７４巻（１０号）：５６６７〜７８頁；Ｓｔａｔｈｏｐｏｕｌｏｕら、ＢＭＣ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、２００９年、９巻：１０７頁を参照されたい。ジンジパイン活性を阻害するため、ならびにジンジパイン活性およびＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患を処置するための新規化合物が必要とされている。本発明は、この必要性および他の必要性に対処するものである。
【０００５】
一態様では、本発明は、式Ｉ：
【化１】
2018534300.tif 000003
（式中、
Ｚは、アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、チアゾール−２−イル−カルボニル、オキサゾール−２−イル−カルボニル、ベンゾオキサゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、ピリミジン−４−イル−カルボニル、ピリミジン−２−イル−カルボニル、イソオキサゾール−５−イル−カルボニル、イソオキサゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル−カルボニル、シアノ、エチニル、フルオロメチル−カルボニル、アシルオキシメチル−カルボニル、アルキルスルホニル−ビニル、およびアリールスルホニル−ビニルから選択され、
Ｚは、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４ハロアルキル、Ｃ１〜４ハロアルコキシ、および−Ｎ３から選択される１つまたは複数の置換基により任意選択で置換されており、
Ｒ１はそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基から独立して選択され、
Ｒ２は、水素およびＣ１〜４アルキルから選択され、
Ｒ３は、Ｃ３〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、
Ｒ３は、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＯＨ、Ｒａ、−ＯＲｂ、−Ｎ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−（ＣＨ２）ｋＣＯＮ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、および−Ｏ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃから独立して選択される１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されており、
Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃはそれぞれ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜４ハロアルキルから独立して選択され、
Ｒｄはそれぞれ、水素およびＣ１〜８アルキルから独立して選択され、
下付き文字ｋはそれぞれ、０、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
下付き文字ｕはそれぞれ、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
Ｚがフェノキシメチルカルボニル（ｐｈｅｎｙｏｘｙｍｅｔｈｙｌｃａｒｂｏｎｙｌ）または置換フェノキシメチルカルボニルである場合、Ｒ３およびそれが結合しているカルボニルは、プロリニル、置換プロリニル、アルギニニル、置換アルギニニル、フェニルアラニニル、置換フェニルアラニニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル以外の部分を形成することを条件とし、
Ｚがベンゾチアゾール−２−イル−カルボニルである場合、Ｒ３は、フェニル、トリフルオロメチルフェニル（ｔｒｉｆｌｕｒｏｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルから選択されることを条件とする）による化合物または薬学的に許容されるその塩を提供する。
【０００６】
一部の実施形態では、本化合物は、式Ｉｂ：
【化２】
2018534300.tif 000004
による構造または薬学的に許容されるその塩を有する。
【０００７】
一部の実施形態では、本化合物は、式Ｉｃ：
【化３】
2018534300.tif 000005
による構造または薬学的に許容されるその塩を有し、式中、Ｒ３は、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルから選択される。
【０００８】
別の態様では、本発明は、式Ｉによる化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【０００９】
別の態様では、本発明は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態を処置する方法を提供する。本方法は、被験体に有効量の式ＩＩ：
【化４】
2018534300.tif 000006
による化合物または薬学的に許容されるその塩を投与するステップを含み、式中、
Ｚ’は、アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、チアゾール−２−イル−カルボニル、オキサゾール−２−イル−カルボニル、ベンゾオキサゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、ピリミジン−４−イル−カルボニル、ピリミジン−２−イル−カルボニル、イソオキサゾール−５−イル−カルボニル、イソオキサゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル−カルボニル、シアノ、エチニル、フルオロメチル−カルボニル、アシルオキシメチル−カルボニル、アルキルスルホニル−ビニル、およびアリールスルホニル−ビニルから選択され、
Ｚ’は、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４ハロアルキル、Ｃ１〜４ハロアルコキシ、および−Ｎ３から選択される１つまたは複数の置換基により任意選択で置換されており、
Ｒ１ａはそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基から独立して選択され、
Ｒ２ａは、水素およびＣ１〜４アルキルから選択され、
Ｒ３ａは、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８アルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、
Ｒ３ａは、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＯＨ、Ｒａ、−ＯＲｂ、−Ｎ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−（ＣＨ２）ｋＣＯＮ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、および−Ｏ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃから独立して選択される１つまたは複数のＲ４ａ置換基により任意選択で置換されており、
Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃはそれぞれ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜４ハロアルキルから独立して選択され、
Ｒｄはそれぞれ、水素およびＣ１〜８アルキルから独立して選択され、
下付き文字ｋはそれぞれ、０、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
下付き文字ｕはそれぞれ、１、２、３、４、５、および６から独立して選択される。
【００１０】
一部の実施形態では、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態は、アルツハイマー病、ダウン症候群、てんかん、自閉症、パーキンソン病、本態性振戦、前頭側頭型認知症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、多発性硬化症、軽度認知障害、加齢関連性記憶障害、慢性外傷性脳症、脳卒中、脳血管疾患、レビー小体病、多系統萎縮症、統合失調症およびうつ病から選択される脳障害である。一部の実施形態では、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態はアルツハイマー病である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、マウスの脳にジンジパインを海馬内注射すると、７日後に神経変性を引き起こすことを示す。
【００１２】
【図２】図２は、ＲｇｐＢの脳への浸潤が、６週間、経口でＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓに感染したＢａｌｂＣマウスの海馬中の顆粒細胞下帯の神経変性と重なることを示す。
【００１３】
【図３】図３Ａは、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓに感染した野生型マウスが、６週間の時点において、新奇物体認識課題（Ｎｏｖｅｌ  Ｏｂｊｅｃｔ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｔａｓｋ）に関する認知障害を示すことを示す。感染マウスは新奇物体と見慣れた物体の探索に等しい時間を費やすが、正常マウスは新奇物体に対して多くの時間を費やす。図３Ｂは、非感染マウスおよび感染マウスについての識別指数（ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎ  ｉｎｄｅｘ）（ＴＮｏｖｅｌ−Ｔｆａｍｉｌｉａｒ）／Ｔｔｏｔａｌを示す。
【００１４】
【図４】図４は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイまたは診断のための放射性標識されているＰＥＴ／ＳＰＥＣＴ用イメージング剤または捕捉剤を創製するために使用することができる、「クリックケミストリー」化合物の例を示す。図４では、Ｒは、放射性核種または放射性核種により置換されている部分（例えば、Ｒ＝１８Ｆ−アルキレン）を表す。
【００１５】
【図５】図５は、化合物１３がＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ毒性からＳＨＳＹ−５Ｙ細胞をレスキューすることができることを示す。
【００１６】
【図６】図６は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染後にＲｇｐ阻害剤で処置した、および処置しなかった定量的ＰＣＲにより測定した場合の脳組織中のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓのレベルを示す。
【００１７】
【図７】図７は、ジンジパイン阻害剤がＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ（Ｐｇ）によるヒトコラーゲンの分解を予防することを示す。ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）を、ヒトコラーゲン（レーンＡ）；Ｐｇ上清（レーンＢ）；ジンジパイン阻害剤の非存在下でＰｇ上清に曝露したコラーゲン（レーンＣ）；Ｒｇｐ阻害剤（化合物１３）の存在下でＰｇ上清に曝露したコラーゲン（レーンＤ）；Ｋｇｐ阻害剤の存在下でＰｇ上清に曝露したコラーゲン（レーンＥ）；ならびにＲｇｐ阻害剤（化合物１３）およびＫｇｐ阻害剤の存在下でＰｇ上清に曝露したコラーゲンの分析に使用した。
【００１８】
【図８】図８は、２％カルボキシメチルセルロース（黒四角）または２５％  Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７（黒丸）中の化合物１３（１０ｍｇ／ｋｇ）をマウスに皮下投与して得られる血漿中濃度を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
Ｉ．一般
ジンジパインを阻害すると、細胞が保護されること、細菌増殖が予防されること、細菌の免疫システム監視が高められること、および再感染から保護することが示されている。本発明は、アルギニンジンジパインを阻害するための強力かつ選択的な非ペプチド化合物を提供する。本化合物は、アルツハイマー病などの加齢関連の状態を含めた、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する様々な疾患において、細胞死、炎症および他の病理を予防するために使用することができる。
【００２０】
ＩＩ．定義
本明細書で使用する場合、用語「アルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、示される数の炭素原子を有する直鎖状または分枝状の、飽和、脂肪族ラジカルを指す。アルキルは、Ｃ１〜２、Ｃ１〜３、Ｃ１〜４、Ｃ１〜５、Ｃ１〜６、Ｃ１〜７、Ｃ１〜８、Ｃ１〜９、Ｃ１〜１０、Ｃ２〜３、Ｃ２〜４、Ｃ２〜５、Ｃ２〜６、Ｃ３〜４、Ｃ３〜５、Ｃ３〜６、Ｃ４〜５、Ｃ４〜６およびＣ５〜６などの任意の数の炭素を含むことができる。例えば、Ｃ１〜６アルキルには、これらに限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルなどが含まれる。アルキルはまた、これらに限定されないが、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなどの、最大２０個の炭素原子を有するアルキル基を指すことができる。アルキル基は、置換され得る、または無置換であり得る。「置換アルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノおよびアルコキシから選択される１つまたは複数の基により置換され得る。
【００２１】
本明細書で使用する場合、用語「アルコキシ」とは、それ自体または別の置換基の一部として、式−ＯＲを有する基を指し、Ｒはアルキルである。用語「低級アルコキシル」は、１〜７個の炭素を有するアルコキシラジカル、例えば、メトキシル、エトキシル、プロポキシル、ブトキシル、ペントキシル、ヘキソキシルまたはヘプトキシルラジカルを指す。
【００２２】
本明細書で使用する場合、用語「シクロアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、３〜１２個の環原子または示される数の原子を含有する飽和または部分的に不飽和の、単環式、縮合二環式または架橋多環式環アセンブリを指す。シクロアルキルは、Ｃ３〜６、Ｃ４〜６、Ｃ５〜６、Ｃ３〜８、Ｃ４〜８、Ｃ５〜８、Ｃ６〜８、Ｃ３〜９、Ｃ３〜１０、Ｃ３〜１１およびＣ３〜１２などの任意の数の炭素を含むことができる。飽和単環式シクロアルキル環には、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロオクチルが含まれる。飽和二環式および多環式シクロアルキル環には、例えば、ノルボルナン、［２．２．２］ビシクロオクタン、デカヒドロナフタレンおよびアダマンタンが含まれる。シクロアルキル基は、環に１つまたは複数の二重または三重結合を有して部分的に不飽和でもあり得る。部分的に不飽和である代表的なシクロアルキル基には、これらに限定されないが、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘキサジエン（１，３−および１，４−異性体）、シクロヘプテン、シクロペフタジエン、シクロオクテン、シクロオクタジエン（１，３−、１，４−および１，５−異性体）、ノルボルネンおよびノルボルナジエンが含まれる。シクロアルキルが飽和単環式Ｃ３〜８シクロアルキルである場合、例示的な基には、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルが含まれる。シクロアルキルが飽和単環式Ｃ３〜６シクロアルキルである場合、例示的な基には、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが含まれる。シクロアルキル基は、置換され得る、または無置換であり得る。「置換シクロアルキル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノおよびアルコキシから選択される１つまたは複数の基により置換され得る。用語「低級シクロアルキル」とは、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルを含めた、３〜７個の炭素を有するシクロアルキルラジカルを指す。
【００２３】
本明細書で使用する場合、用語「アルキレン」とは、少なくとも２つの他の基を連結する、上で定義されている、アルキル基（すなわち、二価アルキルラジカル）を指す。アルキレン基に連結されている２つの部分は、アルキレン基の同一炭素原子または異なる炭素原子に連結され得る。
【００２４】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、Ｎ、ＯおよびＳなどの、１〜３個のヘテロ原子を有する、任意の適切な長さのアルキル基を指す。例えば、ヘテロアルキルは、エーテル、チオエーテルおよびアルキル−アミンを含むことができる。これらに限定されないが、Ｂ、Ａｌ、ＳｉおよびＰを含めた、追加のヘテロ原子も有用であり得る。ヘテロ原子は、酸化されて、これらに限定されないが、−Ｓ（Ｏ）−および−Ｓ（Ｏ）２−などの部分を形成することができる。ヘテロアルキルのヘテロ原子の部分はアルキル基の水素を置きかえて、ヒドロキシ、チオまたはアミノ基を形成することができる。あるいは、ヘテロ原子の部分は、接続する原子であり得るか、または２個の炭素原子間に挿入され得る。
【００２５】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロアルキレン」とは、少なくとも２つの他の基を連結する、上で定義されている、ヘテロアルキル基（すなわち、二価ヘテロアルキルラジカル）を指す。ヘテロアルキレン基に連結されている２つの部分は、ヘテロアルキレン基の同一原子または異なる原子に連結され得る。
【００２６】
本明細書で使用する場合、用語「ハロ」および「ハロゲン」とは、それら自体または別の置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子を指す。
【００２７】
本明細書で使用する場合、用語「ハロアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、この水素原子の一部またはすべてがハロゲン原子により置きかえられている、アルキル基を指す。アルキル基については、ハロアルキル基は、Ｃ１〜６などの任意の適切な数の炭素原子を有することができる。例えば、ハロアルキルには、トリフルオロメチル、フルオロメチルなどが含まれる。一部の場合、用語「パーフルオロ」とは、すべての水素がフッ素により置きかえられている、化合物またはラジカルを定義するために使用することができる。例えば、パーフルオロメチルとは、１，１，１−トリフルオロメチルを指す。
【００２８】
本明細書で使用する場合、用語「ハロアルコキシ」とは、それ自体または別の置換基の一部として、この水素原子の一部またはすべてがハロゲン原子により置きかえられている、アルコキシ基を指す。
【００２９】
本明細書で使用する場合、用語「ハロシクロアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、この水素原子の一部またはすべてがハロゲン原子により置きかえられている、シクロアルキル基を指す。
【００３０】
本明細書で使用する場合、用語「アリール」とは、それ自体または別の置換基の一部として、任意の適切な数の環原子および任意の適切な数の環を有する芳香族環系を指す。アリール基は、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個または１６個の環原子などの任意の適切な数の環原子および６〜１０個、６〜１２個または６〜１４個の環員を含むことができる。アリール基は単環式でも、縮合されて二環式（例えば、ベンゾシクロヘキシル）もしくは三環式基を形成しても、または結合によって連結されてビアリール基を形成してもよい。代表的なアリール基には、フェニル、ナフチルおよびビフェニルが含まれる。他のアリール基にはメチレン連結基を有するベンジルが含まれる。一部のアリール基は、フェニル、ナフチルまたはビフェニルなど、６〜１２個の環員を有する。他のアリール基は、フェニルまたはナフチルなど、６〜１０個の環員を有する。一部の他のアリール基は、フェニルなど、６個の環員を有する。アリール基は、置換され得る、または無置換であり得る。「置換アリール」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノおよびアルコキシから選択される１つまたは複数の基により置換され得る。
【００３１】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロアリール」とは、それ自体または別の置換基の一部として、環原子の１〜５個がＮ、ＯまたはＳなどのヘテロ原子である、５〜１６個の環原子を含有する単環式または縮合二環式もしくは三環式芳香族環アセンブリを指す。これらに限定されないが、Ｂ、Ａｌ、ＳｉおよびＰを含めた、追加のヘテロ原子も有用であり得る。ヘテロ原子は、酸化されて、これらに限定されないが、−Ｓ（Ｏ）−および−Ｓ（Ｏ）２−などの部分を形成することができる。ヘテロアリール基は、３〜６個、４〜６個、５〜６個、３〜８個、４〜８個、５〜８個、６〜８個、３〜９個、３〜１０個、３〜１１個または３〜１２個の環員などの任意の数の環原子を含むことができる。１個、２個、３個、４個もしくは５個または１〜２個、１〜３個、１〜４個、１〜５個、２〜３個、２〜４個、２〜５個、３〜４個または３〜５個などの任意の適切な数のヘテロ原子は、ヘテロアリール基に含まれ得る。ヘテロアリール基は、５〜８個の環員および１〜４個のヘテロ原子、または５〜８個の環員および１〜３個のヘテロ原子、または５〜６個の環員および１〜４個のヘテロ原子、または５〜６個の環員および１〜３個のヘテロ原子を有し得る。ヘテロアリール基は、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾールおよびイソオキサゾールなどの基を含むことができる。ヘテロアリール基は、フェニル環などの芳香族環系に縮合されて、これらに限定されないが、インドールおよびイソインドールなどのベンゾピロール、キノリンおよびイソキノリンなどのベンゾピリジン、ベンゾピラジン（キノキサリン）、ベンゾピリミジン（キナゾリン）、フタラジンおよびシンノリンなどのベンゾピリダジン、ベンゾチオフェンならびにベンゾフランを含むメンバーを形成することもできる。他のヘテロアリール基は、ビピリジンなど、結合によって連結されたヘテロアリール環を含む。ヘテロアリール基は、置換され得る、または無置換であり得る。「置換ヘテロアリール」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノおよびアルコキシから選択される１つまたは複数の基により置換され得る。
【００３２】
ヘテロアリール基は、環上の任意の位置を介して連結され得る。例えば、ピロールは１−、２−および３−ピロールを含み、ピリジンは２−、３−および４−ピリジンを含み、イミダゾールは１−、２−、４−および５−イミダゾールを含み、ピラゾールは１−、３−、４−および５−ピラゾールを含み、トリアゾールは１−、４−および５−トリアゾールを含み、テトラゾールは１−および５−テトラゾールを含み、ピリミジンは２−、４−、５−および６−ピリミジンを含み、ピリダジンは３−および４−ピリダジンを含み、１，２，３−トリアジンは４−および５−トリアジンを含み、１，２，４−トリアジンは３−、５−および６−トリアジンを含み、１，３，５−トリアジンは２−トリアジンを含み、チオフェンは２−および３−チオフェンを含み、フランは２−および３−フランを含み、チアゾールは２−、４−および５−チアゾールを含み、イソチアゾールは３−、４−および５−イソチアゾールを含み、オキサゾールは２−、４−および５−オキサゾールを含み、イソオキサゾールは３−、４−および５−イソオキサゾールを含み、インドールは１−、２−および３−インドールを含み、イソインドールは１−および２−イソインドールを含み、キノリンは２−、３−および４−キノリンを含み、イソキノリンは１−、３−および４−イソキノリンを含み、キナゾリンは２−および４−キナゾリン（ｑｕｉｎｏａｚｏｌｉｎｅ）を含み、シンノリンは３−および４−シンノリンを含み、ベンゾチオフェンは２−および３−ベンゾチオフェンを含み、ベンゾフランは２−および３−ベンゾフランを含む。
【００３３】
一部のヘテロアリール基は、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、フタラジン、シンノリン、ベンゾチオフェンおよびベンゾフランなどの、５〜１０個の環員および、Ｎ、ＯまたはＳを含む１〜３個の環原子を有するものを含む。他のヘテロアリール基は、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾールおよびイソオキサゾールなどの、５〜８個の環員および１〜３個のヘテロ原子を有するものを含む。一部の他のヘテロアリール基は、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、フタラジン、シンノリン、ベンゾチオフェン、ベンゾフランおよびビピリジンなどの９〜１２個の環員および１から３個のヘテロ原子を有するものを含む。さらに他のヘテロアリール基は、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、およびイソオキサゾールなどの５〜６個の環員および、Ｎ、ＯまたはＳを含む１〜２個の環原子を有するものを含む。
【００３４】
一部のヘテロアリール基は、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、フタラジンおよびシンノリンなどの５〜１０個の環員および窒素だけのヘテロ原子を含む。他のヘテロアリール基は、フランおよびベンゾフランなどの５〜１０個の環員および酸素だけのヘテロ原子を含む。一部の他のヘテロアリール基は、チオフェンおよびベンゾチオフェンなどの５〜１０個の環員および硫黄だけのヘテロ原子を含む。さらに他のヘテロアリール基は、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、キノキサリン、キナゾリン、フタラジンおよびシンノリンなどの５〜１０個の環員および少なくとも２個のヘテロ原子を含む。
【００３５】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロシクリル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、３〜１２個の環員ならびにＮ、ＯおよびＳの１〜４個のヘテロ原子を有する飽和環系を指す。これらに限定されないが、Ｂ、Ａｌ、ＳｉおよびＰを含めた、追加のヘテロ原子も有用であり得る。ヘテロ原子は、酸化されて、これらに限定されないが、−Ｓ（Ｏ）−および−Ｓ（Ｏ）２−などの部分を形成することができる。ヘテロシクリル基は、３〜６個、４〜６個、５〜６個、３〜８個、４〜８個、５〜８個、６〜８個、３〜９個、３〜１０個、３〜１１個または３〜１２個の環員などの任意の数の環原子を含むことができる。１個、２個、３個もしくは４個、または１〜２個、１〜３個、１〜４個、２〜３個、２〜４個もしくは３〜４個などの任意の適切な数のヘテロ原子がヘテロシクリル基に含まれ得る。ヘテロシクリル基には、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、アゼパン、アゾカン、キヌクリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン（１，２−、１，３−および１，４−異性体）、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロフラン、オキサン（テトラヒドロピラン）、オキセパン、チイラン、チエタン、チオラン（テトラヒドロチオフェン）、チアン（テトラヒドロチオピラン）、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、ジオキソラン、ジチオラン、モルホリン、チオモルホリン、ジオキサンまたはジチアンなどの基が含まれ得る。ヘテロシクリル基は、芳香族または非芳香族環系に縮合されて、これに限定されないがインドリンを含むメンバーを形成することもできる。複素環基は、飽和（例えば、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、モルホリン、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、またはテトラヒドロピラニル）、または不飽和（例えば、２，３−ジヒドロフラニル、２，５−ジヒドロフラニル、３，４−ジヒドロピラニル、３，６−ジヒドロピラニル、または１，４−ジヒドロピリジニル）であり得る。ヘテロシクリル基は、置換され得る、または無置換であり得る。「置換ヘテロシクリル」基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノおよびアルコキシから選択される１つまたは複数の基により置換され得る。
【００３６】
ヘテロシクリル基は、環上の任意の位置を介して連結され得る。例えば、アジリジンは１−または２−アジリジンであってよく、アゼチジンは１−または２−アゼチジンであってよく、ピロリジンは１−、２−または３−ピロリジンであってよく、ピペリジンは１−、２−、３−または４−ピペリジンであってよく、ピラゾリジンは１−、２−、３−または４−ピラゾリジンであってよく、イミダゾリジンは１−、２−、３−または４−イミダゾリジンであってよく、ピペラジンは１−、２−、３−または４−ピペラジンであってよく、テトラヒドロフランは１−または２−テトラヒドロフランであってよく、オキサゾリジンは２−、３−、４−または５−オキサゾリジンであってよく、イソオキサゾリジンは２−、３−、４−または５−イソオキサゾリジンであってよく、チアゾリジンは２−、３−、４−または５−チアゾリジンであってよく、イソチアゾリジンは２−、３−、４−または５−イソチアゾリジンであってよく、モルホリンは２−、３−または４−モルホリンであってよい。
【００３７】
ヘテロシクリルが３〜８個の環員および１〜３個のヘテロ原子を含む場合、代表的なメンバーには、これらに限定されないが、ピロリジン、ピペリジン、テトラヒドロフラン、オキサン、テトラヒドロチオフェン、チアン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、モルホリン、チオモルホリン、ジオキサンおよびジチアンが含まれる。ヘテロシクリルは、５〜６個の環員および１〜２個のヘテロ原子を有する環も形成でき、代表的なメンバーには、これらに限定されないが、ピロリジン、ピペリジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジンおよびモルホリンが含まれる。
【００３８】
本明細書で使用する場合、用語「アミン保護基」とは、アミノ基を非反応性にするが、アミノ基を回復するよう除去可能でもある、化学部分を指す。アミン保護基の例には、これらに限定されないが、ベンジルオキシカルボニル；９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）；ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）；アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）；ｐ−トルエンスルホニル（Ｔｏｓ）；２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）；２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル（Ｐｂｆ）；メシチル−２−スルホニル（Ｍｔｓ）；４−メトキシ−２，３，６−トリメチルフェニルスルホニル（Ｍｔｒ）；アセトアミド；フタルイミドなどが含まれる。他のアミン保護基は、例えば、ＧｒｅｅｎおよびＷｕｔｓ（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第４版、２００７年、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）によって記載されているものを含め、当業者に公知である。
【００３９】
本明細書で使用する場合、用語「アミノ酸残基」とは、構造：
【化５】
2018534300.tif 000007
（式中、Ｒは、天然に存在するアミノ酸（例えば、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セレノシステイン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン）、または天然に存在しないアミノ酸（例えば、アジドホモアラニン、プロパルギルグリシン、ｐ−アセチルフェニルアラニンなど）の側鎖を表し、Ｒ’は、水素、Ｃ１〜４アルキル、または本明細書に記載されているアミン保護基であり、波線は、アミノ酸残基からアミノ酸残基を有する分子中の他の基への接続点を表す）を有する部分を指す。当業者は、一緒に連結されている１つを超えるアミノ酸残基を有するペプチド化合物について、アミノ酸残基間の接続点は、アミド（すなわち、ペプチド）結合であることを認識するであろう。「Ｎ末端」アミノ酸残基は、Ｎ末端アミノ酸残基中のカルボニル部分（Ｃ＝Ｏ）で分子に結合され、Ｎ末端アミノ酸残基中のアミノ部分（ＮＲ’）は、水素原子に結合される。同様に、「Ｃ末端」アミノ酸残基は、Ｃ末端アミノ酸残基中のアミノ部分（ＮＲ’）で分子に結合され、Ｃ末端アミノ酸残基中のカルボニル部分（Ｃ＝Ｏ）は、ヒドロキシル基に結合される。
【００４０】
本明細書で使用する場合、用語「カルボニル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、−Ｃ（Ｏ）−、すなわち、酸素に二重結合しており、かつカルボニルを有する部分において２つの他の基に結合している炭素原子を指す。
【００４１】
本明細書で使用する場合、用語「アミノ」とは、−ＮＲ３部分を指し、Ｒ基はそれぞれ、Ｈまたはアルキルである。アミノ部分がイオン化されて、対応するアンモニウム陽イオンを形成することができる。
【００４２】
本明細書で使用する場合、用語「ヒドロキシ」とは、−ＯＨ部分を指す。
【００４３】
本明細書で使用する場合、用語「シアノ」とは、窒素原子に三重結合している炭素原子（すなわち、−Ｃ≡Ｎ部分）を指す。
【００４４】
本明細書で使用する場合、用語「カルボキシ」とは、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ部分を指す。カルボキシ部分がイオン化されて、対応するカルボン酸陰イオンを形成することができる。
【００４５】
本明細書で使用する場合、用語「アミド」とは、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２部分を指し、Ｒ基はそれぞれ、Ｈまたはアルキルである。
【００４６】
本明細書で使用する場合、用語「ニトロ」とは、−ＮＯ２部分を指す。
【００４７】
本明細書で使用する場合、用語「オキソ」とは、化合物に二重結合している酸素原子（すなわち、Ｏ＝）を指す。
【００４８】
本明細書で使用する場合、用語「プロリニル」とは、構造
【化６】
2018534300.tif 000008
を有する部分を指し、式中、Ｒｙは、水素、Ｃ１〜４アルキル、アミド、アシル、アミン保護基、アミノ酸残基、ペプチド残基、またはポリペプチド残基から選択され、波線は、分子の残りへの接続点を示す。「非置換プロリニル」について、Ｒｙは、水素である。「置換プロリニル」について、Ｒｙは、Ｃ１〜４アルキル、アミド、アシル、アミン保護基、アミノ酸残基、ペプチド残基、またはポリペプチド残基であり、プロリニル基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、およびアルコキシから選択される１つまたは複数の基によりさらに置換され得る。
【００４９】
本明細書で使用する場合、用語「アルギニニル」とは、構造
【化７】
2018534300.tif 000009
を有する部分を指し、式中、Ｒｙは、水素、Ｃ１〜４アルキル、アミド、アシル、アミン保護基、アミノ酸残基、ペプチド残基、またはポリペプチド残基から選択され、Ｒｚはそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基から独立して選択され、波線は、分子の残りへの接続点を示す。「非置換アルギニニル」について、Ｒｙは、水素である。「置換アルギニニル」について、Ｒｙは、Ｃ１〜４アルキル、アミド、アシル、アミン保護基、アミノ酸残基、ペプチド残基、またはポリペプチド残基であり、アルギニニル基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、およびアルコキシから選択される１つまたは複数の基によりさらに置換され得る。
【００５０】
本明細書で使用する場合、用語「フェニルアラニニル」とは、構造
【化８】
2018534300.tif 000010
を有する部分を指し、式中、Ｒｙは、水素、Ｃ１〜４アルキル、アミド、アシル、アミン保護基、アミノ酸残基、ペプチド残基、またはポリペプチド残基から選択され、波線は、分子の残りへの接続点を示す。「非置換フェニルアラニニル」について、Ｒｙは、水素である。「置換フェニルアラニニル」について、Ｒｙは、Ｃ１〜４アルキル、アミド、アシル、アミン保護基、アミノ酸残基、ペプチド残基、またはポリペプチド残基であり、フェニルアラニニル基は、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、オキソ（＝Ｏ）、アルキルアミノ、アミド、アシル、ニトロ、シアノ、およびアルコキシから選択される１つまたは複数の基によりさらに置換され得る。
【００５１】
本明細書で使用する場合、用語「薬学的に許容される賦形剤」とは、被験体への活性薬剤の投与を補助する物質を指す。「薬学的に許容される」とは、賦形剤が製剤の他の成分と適合性であり、かつそのレシピエントに有害ではないことを意味する。本発明において有用な薬学的賦形剤には、これらに限定されないが、結合剤、充填剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤（ｇｌｉｄａｎｔ）、コーティング剤、甘味剤、矯味矯臭剤および着色剤が含まれる。
【００５２】
本明細書で使用する場合、用語「塩」とは、本発明の化合物の酸性または塩基性塩を指す。薬学的に許容される塩の例示的例は、鉱酸（塩酸、臭化水素酸、リン酸など）塩、有機酸（酢酸、プロピオン酸、グルタミン酸、クエン酸など）塩、四級アンモニウム（ヨウ化メチル、ヨウ化エチルなど）塩である。薬学的に許容される塩が無毒性であることは理解される。
【００５３】
本発明の酸性化合物の薬学的に許容される塩は、塩基を用いて形成された塩、すなわちナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリおよびアルカリ土類金属塩などのカチオン性塩、ならびにアンモニウム、トリメチル−アンモニウム、ジエチルアンモニウムおよびトリス−（ヒドロキシメチル）−メチル−アンモニウム塩などのアンモニウム塩である。
【００５４】
同様に、ピリジルなどの塩基性基が構造の一部を構成することを条件とし、鉱酸、有機カルボン酸および有機スルホン酸、例えば、塩酸、メタンスルホン酸、マレイン酸などの酸付加塩も可能である。
【００５５】
化合物の中性形態は、塩を塩基または酸と接触させ、従来の様式で親化合物を単離することにより再生することができる。化合物の親形態は、極性溶媒での溶解度などのある種の物理的特性において種々の塩形態と異なるが、他の点では本発明の目的に関して塩は化合物の親形態と等価である。
【００５６】
塩形態に加えて、本発明は、プロドラッグ形態である化合物を提供する。本明細書に記載されている化合物のプロドラッグは、生理学的条件下で化学変化を容易に起こして本発明の化合物をもたらす化合物である。さらに、プロドラッグは、ｅｘ  ｖｉｖｏ環境下で化学的または生化学的方法により本発明の化合物に変換され得る。例えば、プロドラッグは、適切な酵素または化学試薬を含む経皮パッチリザーバー中に配置されたとき、本発明の化合物にゆっくりと変換され得る。
【００５７】
本明細書で使用する場合、用語「Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ」および「Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ」とは、歯周炎および関連状態の病因における、重要な原因微生物と認識される、非糖分解性グラム陰性菌を指す。「Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染」とは、歯肉または脳などの身体組織におけるＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓの侵入および集落形成を指す。Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染は、後の組織傷害および疾患を特徴とすることが多い。
【００５８】
本明細書で使用する場合、用語「ジンジパイン」とは、トリプシン様特異性（すなわち、Ｌｙｓ−ＸａａおよびＡｒｇ−Ｘａａ）を有するＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓによって発現される、システインプロテアーゼを指す。ジンジパインは、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓの主要な毒性因子として認識されており、細菌の付着および集落形成、栄養の獲得、宿主防御回避および組織侵入に寄与する。用語「アルギニンジンジパイン」および「Ｒｇｐ」は、ＥＣ番号ＥＣ３．４．２２．３７の下に分類されているＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓアルギニン特異的ジンジパインＲｇｐＡおよびＲｇｐＢを指すために互換的に使用される。ｒｇｐＡおよびｒｇｐＢ遺伝子翻訳産物、ＲｇｐＡおよびＲｇｐＢは、カスパーゼ様プロテアーゼドメイン（Ａｒｇ−Ｘａａペプチド結合に特異的）および免疫グロブリン様ドメインを共有する。ＲｇｐＡでは、プロテアーゼおよび免疫グロブリン様ドメインの後に、赤血球凝集素−アドヘシンドメインを含有する大きいＣ末端伸長部が続く。
【００５９】
本明細書で使用する場合、用語「処置する」、「処置」、および「処置すること」とは、任意の客観的または主観的パラメータ、例えば、緩和；寛解；症状を減少させ、または症状、傷害、病理、もしく状態を患者により耐容可能にすること；症状進行の速度を低減すること；症状または状態の頻度または継続時間を低下させること；あるいはいくつかの状況では、症状の発生を予防することなどを含めた、傷害、病理、状態、または症状（例えば、認知障害）の処置または改善における成功の任意の指標を指す。症状の処置または改善は、例えば身体検査の結果を含む、任意の客観的または主観的パラメータに基づくことができる。
【００６０】
本明細書で使用する場合、用語「有効量」および「治療有効量」とは、投与されると、治療効果を生じるＲｇｐ阻害剤などの化合物のある用量を指す。正確な用量は、処置目的に依存し、公知技法（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ（１〜３巻、１９９２年）；Ｌｌｏｙｄ、Ｔｈｅ  Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９年）；Ｐｉｃｋａｒ、Ｄｏｓａｇｅ  Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９年）；Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第１１版、２００６年、Ｂｒｕｎｔｏｎ編、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２１版、２００５年、Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ編、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓを参照されたい）を使用して当業者により確認可能であろう。
【００６１】
本明細書で使用する場合、用語「アルツハイマー病」とは、ヒトおよび他の哺乳動物における中枢神経系の進行性疾患を指す。アルツハイマー病は、認知症（とりわけ、高齢者において）、見当識障害、記憶喪失、言語、計算または視覚空間能力の困難さおよび精神医学的徴候によって現れる。アルツハイマー病は、進行性神経変性および特徴的な病理、すなわち、ベータアミロイドプラークおよびタウのもつれに関連している。
【００６２】
本明細書で使用する場合、用語「変形性関節症」とは、関節軟骨、滑膜組織、および下にある骨の破壊から生じる慢性変性関節疾患を指す。
【００６３】
本明細書で使用する場合、用語「被験体」とは、これらに限定されないが、霊長類（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウスなどを含めた、哺乳動物などの動物を指す。
【００６４】
用語「約（ａｂｏｕｔ）」とは、数値を修飾するために本明細書で使用する場合、その明示的な値の周辺の近似範囲を示す。「Ｘ」が値である場合、「約Ｘ」は、０．９Ｘ〜１．１Ｘの値、例えば、０．９５Ｘ〜１．０５Ｘの値または０．９８Ｘ〜１．０２Ｘの値を示す。「約Ｘ」のいかなる言及も、少なくとも値Ｘ、０．９５Ｘ、０．９６Ｘ、０．９７Ｘ、０．９８Ｘ、０．９９Ｘ、１．０１Ｘ、１．０２Ｘ、１．０３Ｘ、１．０４Ｘ、および１．０５Ｘを具体的に示す。したがって、「約Ｘ」は、例えば、「０．９８Ｘ」の特許請求の範囲の限定に対する、書面の記載の裏付けを教示および提供することが意図されている。
【００６５】
ＩＩＩ．アルギニンジンジパインの阻害剤
一態様では、本発明は、式Ｉ：
【化９】
2018534300.tif 000011
（式中、
Ｚは、アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、チアゾール−２−イル−カルボニル、オキサゾール−２−イル−カルボニル、ベンゾオキサゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、ピリミジン−４−イル−カルボニル、ピリミジン−２−イル−カルボニル、イソオキサゾール−５−イル−カルボニル、イソオキサゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル−カルボニル、シアノ、エチニル、フルオロメチル−カルボニル、アシルオキシメチル−カルボニル、アルキルスルホニル−ビニル、およびアリールスルホニル−ビニルから選択され、
Ｚは、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４ハロアルキル、Ｃ１〜４ハロアルコキシ、および−Ｎ３から選択される１つまたは複数の置換基により任意選択で置換されており、
Ｒ１はそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基から独立して選択され、
Ｒ２は、水素およびＣ１〜４アルキルから選択され、
Ｒ３は、Ｃ３〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、
Ｒ３は、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＯＨ、Ｒａ、−ＯＲｂ、−Ｎ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−（ＣＨ２）ｋＣＯＮ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、および−Ｏ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃから独立して選択される１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されており、
Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃはそれぞれ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜４ハロアルキルから独立して選択され、
Ｒｄはそれぞれ、水素およびＣ１〜８アルキルから独立して選択され、
下付き文字ｋはそれぞれ、０、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
下付き文字ｕはそれぞれ、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
Ｚがフェノキシメチルカルボニルまたは置換フェノキシメチルカルボニルである場合、Ｒ３およびそれが結合しているカルボニルは、プロリニル、置換プロリニル、アルギニニル、置換アルギニニル、フェニルアラニニル、置換フェニルアラニニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル以外の部分を形成することを条件とし、
Ｚがベンゾチアゾール−２−イル−カルボニルである場合、Ｒ３は、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルから選択されることを条件とする）による化合物または薬学的に許容されるその塩を提供する。
【００６６】
一部の実施形態では、式Ｉの化合物は、式Ｉａ：
【化１０】
2018534300.tif 000012
による構造または薬学的に許容されるその塩を有する。
【００６７】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉまたは式Ｉａの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｒ２は水素である）を提供する。
【００６８】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉまたは式Ｉａの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｚは、ハロゲン−置換アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、およびチアゾール−２−イル−カルボニルから選択される）を提供する。
【００６９】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉまたは式Ｉａの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｚは、ハロゲン−置換アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、およびチアゾール−２−イル−カルボニルから選択され、Ｒ２は、水素である）を提供する。一部の実施形態では、本発明は、式Ｉまたは式Ｉａの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｚは、ハロゲン−置換アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、およびチアゾール−２−イル−カルボニルから選択され、Ｒ２はメチルである）を提供する。
【００７０】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉまたは式Ｉａの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｚは、（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシメチル）カルボニルである）を提供する。一部のこのような実施形態では、Ｒ２は、水素またはメチルである。一部のこのような実施形態では、Ｒ２は水素である。
【００７１】
一部の実施形態では、式Ｉの化合物は、式Ｉｂ：
【化１１】
2018534300.tif 000013
による構造を有する。
【００７２】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉｂの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｒ３は、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、そのそれぞれは、１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されている）を提供する。一部のこのような実施形態では、Ｒ３は、５〜１２員の飽和ヘテロシクリルである。一部のこのような実施形態では、Ｒ３は、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ６〜１０アリールから選択され、そのそれぞれは、１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されている。一部のこのような実施形態では、Ｒ３は、シクロペンチル、フェニル、およびアジドフェニルから選択される。
【００７３】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉｂの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｒ１はそれぞれ、アミン保護基であり、Ｒ３は、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、Ｒ３は、１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されている）を提供する。一部のこのような実施形態では、Ｒ３は、５〜１２員の飽和ヘテロシクリルである。一部の実施形態では、Ｒ１はそれぞれ、アミン保護基であり、Ｒ３は、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ６〜１０アリールから選択され、Ｒ３は、１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されている。一部の実施形態では、Ｒ１はそれぞれ、アミン保護基であり、Ｒ３は、シクロペンチル、フェニル、およびアジドフェニルから選択される。
【００７４】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉｂの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｒ１はそれぞれ、水素であり、Ｒ３は、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、Ｒ３は、１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されている）を提供する。一部のこのような実施形態では、Ｒ３は、５〜１２員の飽和ヘテロシクリルである。一部の実施形態では、Ｒ１はそれぞれ、水素であり、Ｒ３は、Ｃ３〜８シクロアルキルおよびＣ６〜１０アリールから選択され、Ｒ３は、１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されている。一部の実施形態では、Ｒ１はそれぞれ、水素であり、Ｒ３は、シクロペンチル、フェニル、およびアジドフェニルから選択される。
【００７５】
一部の実施形態では、式Ｉｂの化合物は、
【化１２】
2018534300.tif 000014
および薬学的に許容されるそれらの塩から選択される。
【００７６】
一部の実施形態では、式Ｉｂの化合物は、
【化１３】
2018534300.tif 000015
および薬学的に許容されるそれらの塩から選択される。
【００７７】
一部の実施形態では、式Ｉｂの化合物は、
【化１４】
2018534300.tif 000016
または薬学的に許容されるそれらの塩である。
【００７８】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉまたは式Ｉａの化合物および薬学的に許容されるそれらの塩（式中、Ｚは、チアゾール−２−イル−カルボニル、オキサゾール−２−イル−カルボニル、ベンゾオキサゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、ピリミジン−４−イル−カルボニル、ピリミジン−２−イル−カルボニル、イソオキサゾール−５−イル−カルボニル、イソオキサゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル−カルボニル、マレイミジル、ピリジニルジスルファニル（ピリジン−２−イルジスルファニルを含む）、シアノ、エチニル、フルオロメチル−カルボニル、アシルオキシメチル−カルボニル、アリールオキシメチル−カルボニル、アルキルスルホニル−ビニル、およびアリールスルホニル−ビニルから選択される）を提供する。一部のこのような実施形態では、Ｒ２は、水素またはメチルである。一部のこのような実施形態では、Ｒ２は水素である。
【００７９】
一部の実施形態では、本発明は、式Ｉｃ：
【化１５】
2018534300.tif 000017
（式中、Ｒ３は、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルから選択される）による構造を有する化合物または薬学的に許容されるその塩を提供する。
【００８０】
一部の実施形態では、本発明は、Ｒ１がそれぞれ、アミン保護基であり、Ｒ３が、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルから選択される化合物を提供する。一部の実施形態では、本発明は、Ｒ１がそれぞれ、水素であり、Ｒ３が、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルから選択される化合物を提供する。
【００８１】
一部の実施形態では、式Ｉｃの化合物は、
【化１６】
2018534300.tif 000018
および薬学的に許容されるその塩から選択される。
【００８２】
一部の実施形態では、式Ｉｃの化合物は、
【化１７】
2018534300.tif 000019
および薬学的に許容されるそれらの塩から選択される。
【００８３】
一部の実施形態では、本発明は、式ＩＩＩａ、式ＩＩＩｂ、式ＩＩＩｃ、式ＩＩＩｄ、および式ＩＩＩｅ：
【化１８】
2018534300.tif 000020
による化合物を含めた、式Ｉ、式Ｉａ、または式Ｉｂの化合物（式中、Ｚは、チアゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、シアノ、エチニル、およびフルオロメチルカルボニルから選択される）を提供する。
【００８４】
本明細書に記載されている化合物およびそれらを使用する方法は、記載されている化合物の治療上活性な鏡像異性体またはジアステレオマーの調製および使用を包含する。これらの化合物のこのような鏡像異性体およびジアステレオマーはすべて、本発明の範囲に含まれている。このような化合物は、混合物（例えば、ラセミ混合物）として、または単離された鏡像異性体もしくはジアステレオマーとして使用することができる。立体化学的表現が示されている場合、それは、異性体の１つが存在し、他の異性体を実質的に含まない化合物を指すことを意味する。別の異性体を「実質的に含まない」は、２つの異性体の少なくとも６０／４０の比（例えば、６５／３５、７０／３０、７５／２５、８０／２０、８５／７５、９０／１０、もしく９５／５、またはより大きい比）を示す。一部の実施形態では、異性体の１つは、少なくとも９９％の量で存在する。
【００８５】
本発明の化合物は、陽電子断層撮影法（ＰＥＴ）および単一光子放射コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）などの診断用イメージング適用において使用するための放射性核種を含むよう調製することができる。例えば、本明細書に記載されているＲｇｐ阻害剤は、酸素−１５（１５Ｏ）、窒素−１３（１３Ｎ）、炭素−１１（１１Ｃ）、ヨウ素−１３１（１３１Ｉ）およびフッ素−１８（１８Ｆ）から選択される１種または複数の放射性核種を含むよう調製することができる。このような放射性標識された化合物は、ＰＥＴイメージングに使用することができる。本発明の化合物はまた、重水素化形態（すなわち、１個または複数の水素原子の代わりに、１個または複数の重水素原子、２Ｈを有する）、トリチウム化形態（すなわち、１個または複数の水素原子の代わりに、１個または複数のトリチウム原子、３Ｈを有する）、または１４Ｃ標識形態（すなわち、１個または複数の炭素原子の代わりに、１個または複数の１４Ｃ原子を有する）でも調製することができる。
【００８６】
一般に、Ｚが、式Ｉによる化合物中のフェノキシメチルカルボニルまたは置換フェノキシメチル−カルボニルである場合、Ｒ３およびそれが結合しているカルボニルは、プロリニル、置換プロリニル、アルギニニル、置換アルギニニル、フェニルアラニニル、置換フェニルアラニニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル以外の部分を形成する。したがって、本発明は、式Ｉｐ、Ｉｑ、Ｉｒ、Ｉｓ、またはＩｔ：
【化１９】
2018534300.tif 000021
の化合物でない式Ｉの化合物を提供する。
【００８７】
式Ｉｐ、Ｉｑ、Ｉｒ、Ｉｓ、およびＩｔの化合物では、Ｒ１はそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基から独立して選択され、Ｒｘはそれぞれ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４ハロアルキル、Ｃ１〜４ハロアルコキシ、およびハロゲンから独立して選択され、Ｒｙは、水素、Ｃ１〜４アルキル、アミド、アシル、アミン保護基、およびアミノ酸残基から選択され、Ｒｚはそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基から独立して選択される。
【００８８】
さらなる実施形態では、本発明は、式ＩＩ：
【化２０】
2018534300.tif 000022
（式中、
Ｚ’は、アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、チアゾール−２−イル−カルボニル、オキサゾール−２−イル−カルボニル、ベンゾオキサゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、ピリミジン−４−イル−カルボニル、ピリミジン−２−イル−カルボニル、イソオキサゾール−５−イル−カルボニル、イソオキサゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル−カルボニル、シアノ、エチニル、フルオロメチル−カルボニル、アシルオキシメチル−カルボニル、アルキルスルホニル−ビニル、およびアリールスルホニル−ビニルから選択され、
Ｚ’は、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４ハロアルキル、Ｃ１〜４ハロアルコキシ、および−Ｎ３から選択される１つまたは複数の置換基により任意選択で置換されており、
Ｒ１ａはそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基から独立して選択され、
Ｒ２ａは、水素およびＣ１〜４アルキルから選択され、
Ｒ３ａは、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８アルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、
Ｒ３ａは、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＯＨ、Ｒａ、−ＯＲｂ、−Ｎ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−（ＣＨ２）ｋＣＯＮ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、および−Ｏ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃから独立して選択される１つまたは複数のＲ４ａ置換基により任意選択で置換されており、
Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃはそれぞれ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜４ハロアルキルから独立して選択され、
Ｒｄはそれぞれ、水素およびＣ１〜８アルキルから独立して選択され、
下付き文字ｋはそれぞれ、０、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
下付き文字ｕはそれぞれ、１、２、３、４、５、および６から独立して選択される）による化合物または薬学的に許容されるそれらの塩を提供する。
【００８９】
一部の実施形態では、式ＩＩの化合物は、式ＩＩａ：
【化２１】
2018534300.tif 000023
による構造を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である。一部のこのような実施形態では、Ｒ２ａは、水素およびメチルから選択される。一部のこのような実施形態では、Ｒ２ａは、水素である。
【００９０】
本発明の化合物は、非常に活性なＲｇｐ阻害剤であり、通常、１μＭを十分に下回るＲｇｐ  Ｋｉ値およびＲｇｐ  ＩＣ５０値を示す。
【００９１】
用語「Ｋｉ」は阻害定数を指す。特定の試験化合物のＫｉ値は、以下の通り測定することができる。ＲｇｐＡまたはＲｇｐＢなどの酵素５０マイクロリットル（μＬ）（１％［体積／体積］Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００および５ｍＭ  ２−メルカプトエタノールを含有する、５０ｍＭ  ビス−Ｔｒｉｓプロパン［ｐＨ８．０］中１ｎＭ）を９６ウェルプレートの列１〜１１に加え、１００μＬを列１２に加える。試験化合物（１００％ＤＭＳＯ中の１００μＬ）２μＬを列１２に加え、試料をピペット操作により３回、混合する。次に、隣のウェルに順次移すことにより、プレート全体に２倍の希釈物を調製する。Ｚ−Ａｒｇ−７−アミド−４−メチルクマリン）（「Ｚ−Ａｒｇ−ＡＭＣ」、緩衝液中４０μＭ）５０μＬをすべてのウェルに加え、この内容物を混合する。この反応を２５℃で１５分間、ＡＭＣ蛍光についてモニタリングし、進行曲線（ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｃｕｒｖｅ）をＦｌｕｏｒｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔソフトウェアによって自動的に速度に変換する。
【００９２】
本方法は、Ｋｇｐ、ＲｇｐＢ、ＲｇｐＡ、トリプシンおよびカテプシンＢを含めた酵素をアッセイするのに使用することができる。Ｋｇｐの場合、基質は、スクシニル−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＡＭＣとすることができる。トリプシンの場合、緩衝液は、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓおよび１０ｍＭ  ＣａＣｌ２（ｐＨ８．０）を含有することができ、基質は、Ｚ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣとすることができる。カテプシンＢの場合、緩衝液は、５０ｍＭリン酸ナトリウム、１ｍＭ  ＥＤＴＡおよび１０ｍＭ  ２−メルカプトエタノール（ｐＨ６．２５）を含有することができ、基質は、Ｚ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＡＭＣとすることができる。
【００９３】
次に、この阻害定数は、阻害が完全に競合的であると仮定して、以下の式：
Ｖｉ＝（Ｖｍａｘ［Ｓ］）／（［Ｓ］＋Ｋｍ（１＋［Ｉ］／Ｋｉ）
を使用することにより算出することができ、式中、Ｖｉは、観測された残存活性であり、［Ｓ］は、アッセイにおいて使用した基質濃度であり、Ｖｍａｘは、阻害剤濃度０における最大速度であり、Ｋｉは、阻害剤の解離定数であり、［Ｉ］は、阻害剤濃度である。次に、曲線は、基質濃度の固定値およびミカエリス定数（ｋｍ）の値を使用することによる、非線形回帰分析によってあてはめることができる。データ解析は、Ｐｒｉｓｍ  ｖ２．０１（ＧｒａｐｈＰａｄ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ．）を使用することにより実施することができる。
【００９４】
用語「ＩＣ５０」とは、所与の生物過程（または、過程の構成成分、例えば、酵素、細胞、細胞受容体または微生物）を２分の１（５０％）だけ阻害するのに必要な化合物の量を示す。化合物のＩＣ５０は、用量応答曲線を構築し、酵素の活性の逆転に対する化合物の様々な濃度の作用を検討することにより決定することができる。用量応答曲線から、ＩＣ５０値は、酵素の最大生物応答の半分を阻害するのに必要な濃度を決定することにより、所与の化合物について算出することができる。
【００９５】
一般に、本発明の化合物についてのＲｇｐ  Ｋｉ値は、約０．００１ｎＭ〜約５００ｎＭの範囲である。本発明の化合物についてのＲｇｐ  Ｋｉ値は、例えば、約１ｎＭ〜約２０ｎＭ、または約２０ｎＭ〜約４０ｎＭ、または約４０ｎＭ〜約６０ｎＭ、または約６０ｎＭ〜約８０ｎＭ、または約８０ｎＭ〜約１００ｎＭ、または約１００ｎＭ〜約１５０ｎＭ、または約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、または約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、または約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、または約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、または約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、または約４００ｎＭ〜約４５０ｎＭ、または約４５０ｎＭ〜約５００ｎＭの範囲であり得る。本発明の化合物についてのＲｇｐ  Ｋｉ値は、約０．００１ｎＭ〜約０．０２５ｎＭ、または約０．０２５ｎＭ〜約０．０５０ｎＭ、または約０．０５０ｎＭ〜約０．０７５ｎＭ、または約０．０７５ｎＭ〜約０．１００ｎＭ、または約０．１００ｎＭ〜約０．２５０ｎＭ、または約０．２５０ｎＭ〜約０．５００ｎＭ、または約０．５００ｎＭ〜約０．７５０ｎＭ、または約０．７５０ｎＭ〜約１ｎＭの範囲であり得る。
【００９６】
一般に、本発明の化合物についてのＲｇｐ  ＩＣ５０値は、約０．００１ｎＭ〜約５００ｎＭの範囲である。本発明の化合物についてのＲｇｐ  ＩＣ５０値は、例えば、約１ｎＭ〜約２０ｎＭ、または約２０ｎＭ〜約４０ｎＭ、または約４０ｎＭ〜約６０ｎＭ、または約６０ｎＭ〜約８０ｎＭ、または約８０ｎＭ〜約１００ｎＭ、または約１００ｎＭ〜約１５０ｎＭ、または約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、または約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、または約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、または約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、または約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、または約４００ｎＭ〜約４５０ｎＭ、または約４５０ｎＭ〜約５００ｎＭの範囲であり得る。本発明の化合物についてのＲｇｐ  ＩＣ５０値は、約０．００１ｎＭ〜約０．０２５ｎＭ、または約０．０２５ｎＭ〜約０．０５０ｎＭ、または約０．０５０ｎＭ〜約０．０７５ｎＭ、または約０．０７５ｎＭ〜約０．１００ｎＭ、または約０．１００ｎＭ〜約０．２５０ｎＭ、または約０．２５０ｎＭ〜約０．５００ｎＭ、または約０．５００ｎＭ〜約０．７５０ｎＭ、または約０．７５０ｎＭ〜約１ｎＭの範囲であり得る。
【００９７】
一部の実施形態では、本発明によるＲｇｐ阻害剤は、１００ｎＭまたはそれ未満のＲｇｐＢ  Ｋｉを有する。一部の実施形態では、Ｒｇｐ阻害剤は、５０ｎＭまたはそれ未満のＲｇｐＢ  Ｋｉを有する。
【００９８】
一部の実施形態では、本発明によるＲｇｐ阻害剤は、５０ｎＭまたはそれ未満のＲｇｐＢ  ＩＣ５０を有する。一部の実施形態では、Ｒｇｐ阻害剤は、１５ｎＭまたはそれ未満のＲｇｐＢ  ＩＣ５０を有する。一部の実施形態では、Ｒｇｐ阻害剤は、１００ｐＭまたはそれ未満のＲｇｐＢ  ＩＣ５０を有する。一部の実施形態では、Ｒｇｐ阻害剤は、２０ｐＭまたはそれ未満のＲｇｐＢ  ＩＣ５０を有する。
【００９９】
１５ｎＭまたはそれ未満のＲｇｐ  Ｋｉ値を有する化合物は、全身投与に特に有用であり得る。例えば、このような化合物は、約１ピコモル濃度（ｐＭ）〜約１５ナノモル濃度（ｎＭ）、約１０ｐＭ〜約１２ｎＭ、約１００ｐＭ〜約１１ｎＭまたは約１００ｐＭ〜約１０ｎＭの範囲のＲｇｐ  Ｋｉ値を有することができる。このような化合物は、１０ナノモル濃度（ｎＭ）未満、８ｎＭ未満、６ｎＭ未満または４ｎＭ未満のＲｇｐ  Ｋｉ値を有することができる。
【０１００】
４５ｎＭまたはそれ未満のＲｇｐ  Ｋｉ値を有する化合物は、局所投与に特に有用であり得る。例えば、このような化合物は、約１ピコモル濃度（ｐＭ）〜約４０ナノモル濃度（ｎＭ）、約１０ｐＭ〜約３５ｎＭ、約１００ｐＭ〜約３０ｎＭまたは約１００ｐＭ〜約２５ｎＭの範囲のＲｇｐ  Ｋｉ値を有することができる。
【０１０１】
ある特定の実施形態では、本発明によるＲｇｐ阻害剤は、Ｒｇｐに選択的である。本明細書で使用する場合、「選択的」Ｒｇｐ阻害剤は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態を処置するために治療有効用量で投与された場合、ＲｇｐＡおよびＲｇｐＢ以外のプロテアーゼの活性には実質的に影響を及ぼさない化合物である。通常、特定の化合物によって実質的に影響を受けないプロテアーゼは、生理学的条件下、化合物の存在下で、その正常な酵素活性の少なくとも９０％を示す。選択的Ｒｇｐ阻害剤には、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する脳障害、歯周病、糖尿病、心血管疾患、関節炎、関節リウマチ、変形性関節症、感染性関節炎、乾癬性関節炎、早産、肺炎、がん、腎疾患、肝疾患、網膜障害、または緑内障を処置するために治療有効量で投与された場合、Ｒｇｐ以外のプロテアーゼの活性には影響を及ぼさない化合物が含まれる。好ましくは、治療有効レベルで投与された場合、選択的Ｒｇｐ阻害剤は、凝固カスケードに悪影響を及ぼさない。
【０１０２】
一部の実施形態では、本発明は、５０ｎＭ未満のＲｇｐＢ  Ｋｉを有するＲｇｐ阻害剤を提供する。一部のこのような実施形態では、トリプシンのＫｉは、６０ｎＭより大きい。一部の実施形態では、Ｒｇｐ阻害剤は、ＲｇｐＢに対して１５ｎＭ未満のＫｉ、および１００を超える（トリプシンＫｉ）／（ＲｇｐＢ  Ｋｉ）比を有する。
【０１０３】
一部の実施形態では、本発明は、トリプシンまたはカテプシンＢに対してよりもＲｇｐに対して、少なくとも３０倍選択的な化合物を提供する。一部のこのような化合物の場合、ＲｇｐＢ  Ｋｉは、１ｎＭ未満であり、トリプシンＫｉおよび／またはカテプシンＢ  Ｋｉは、３０ｎＭまたはそれよりも高い。一部の実施形態では、ＲｇｐＢ  Ｋｉは、１ｎＭ未満であり、トリプシンＫｉおよび／またはカテプシンＢ  Ｋｉは、１１５μＭまたはそれよりも高い。一部のこのような化合物の場合、ＲｇｐＢ  ＩＣ５０は、１５ｎＭまたはそれ未満であり、トリプシンのＩＣ５０は、１μＭまたはそれよりも高い。
【０１０４】
ＩＶ．Ｒｇｐ阻害剤を調製するための方法
式Ｉの化合物のある種の例は、ある種のアルギニン誘導体ＩＶａおよびＩＶｂから出発して調製することができ、これらのアルギニン誘導体は、以下に記載されており、市販されているか、または公知の手順により調製することができる。
【化２２】
2018534300.tif 000024
【０１０５】
ＩＶａでは、Ｒ５およびＲ１はそれぞれ、その一方を除去しない化学条件によって除去することができる。例えば、Ｒ５＝ベンジルは、水素およびパラジウム−炭素触媒によって除去することができるが、Ｒ５は、トリフルオロ酢酸によって影響を受けない一方、Ｒ１＝ｔ−ブチルは、トリフルオロ酢酸によって除去することができるが、Ｒ１は、水素およびパラジウム−炭素触媒によって影響を受けない。あるいは、Ｒ５＝Ｂｏｃは、Ｒ１＝Ｐｂｆを除去することなく、塩酸を使用して除去することができる。他の適切な、Ｒ５およびＲ１の推奨される（ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔａｒｙ）組合せが当業者に公知である。同様に、ＩＶｂでは、推奨される除去可能なＲ１およびＲ６基のいくつかの適切な組合せが公知である。
【０１０６】
式ＶＩＩＩによるある種の化合物は、ＩＶａからＶ、ＶからＶＩ、ＶＩからＶＩＩ、ＶＩＩからＶＩＩＩへの一連の変換によって調製することができる。スキーム１を参照されたい。
【化２３】
2018534300.tif 000025
【０１０７】
大半の場合、ＩＶａからＶへの変換は、１つより多くの化学反応を含むであろう。様々な条件を、ＩＶａからＶへの変換に適用することができる。ＩＶａは、有機溶媒（例えば、ＤＭＦ）中、Ｎ−メチル−Ｏ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩、有機塩基（例えば、Ｅｔ３Ｎ）、ラセミ化阻害剤（ｒａｃｅｍｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）（例えば、ＨＯＢｔ）および脱水剤（例えば、ＥＤＡＣ）で処理することによりＶａ−１に変換することができる。スキーム２のステップ（ａ）を参照されたい。Ｖａ−１は、有機溶媒（例えば、ＴＨＦ）中、リチオ化複素環（例えば、２−リチオベンゾチアゾール、２−リチオチアゾールまたは２−リチオピリジン）で処理し、対応するＲ７（２−ベンゾチアゾリル、２−チアゾリルまたは２−ピリジル）を導入することによりＶａに変換することができる。スキーム２のステップ（ｂ）を参照されたい。
【化２４】
2018534300.tif 000026
【０１０８】
ＩＶａは、有機溶媒（例えば、ＤＭＦ）中、アンモニウム塩酸塩、有機塩基（例えば、Ｅｔ３Ｎ）、ラセミ化阻害剤（例えば、ＨＯＢｔ）および脱水剤（例えば、ＥＤＡＣ）で処理することによりＶｂ−１に変換することができる。スキーム２のステップ（ｃ）を参照されたい。Ｖｂ−１は、有機溶媒（例えば、ＣＨ２Ｃｌ２）中、有機塩基（例えば、Ｅｔ３Ｎ）、および強脱水剤（例えば、ピリジン−三酸化硫黄錯体）で処理することにより、Ｖｂに変換することができる。スキーム２のステップ（ｄ）を参照されたい。
【０１０９】
ＩＶａは、有機溶媒（例えば、ＤＭＦ）中、フルオロ酢酸無水物、有機塩基（例えば、Ｅｔ３Ｎ）およびＤＭＡＰで処置することにより、Ｖｃに変換することができる。スキーム２のステップ（ｅ）を参照されたい。
【０１１０】
ＩＶａは、有機溶媒（例えば、ＴＨＦ）中、ボラン−ジメチルスルフィド錯体で処理することにより、Ｖｄ−２に変換することができる。スキーム３のステップ（ａ）を参照されたい。Ｖｄ−２は、有機溶媒（例えば、ＣＨ２Ｃｌ２）中、有機塩基（例えば、Ｅｔ３Ｎ）、および強脱水剤（例えば、塩化オキサリル）およびジメチルスルホキシドで処理することにより、Ｖｄ−１に変換することができる。スキーム３のステップ（ｂ）を参照されたい。Ｖｄ−１は、アルコール溶媒（例えば、メタノール）中、トリメチルジアゾホスホノアセテート（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ  ｄｉａｚｏ  ｐｈｏｓｐｈｏｎａｃｅｔａｔｅ）およびＫ２ＣＯ３で処理することにより、Ｖｄに変換することができる。スキーム３のステップ（ｃ）を参照されたい。
【化２５】
2018534300.tif 000027
【０１１１】
ＩＶａは、有機溶媒（例えば、ジエチルエーテル）中、有機塩基（例えば、Ｅｔ３Ｎ）、クロロホルメート（例えば、ＥｔＯ２ＣＣｌ）およびジアゾメタンで処理することにより、Ｖｅ−２に変換することができる。スキーム４のステップ（ａ）を参照されたい。Ｖｅ−２は、有機溶媒（例えば、ＴＨＦ）中、ＨＢｒおよび酢酸で処理することにより、Ｖｅ−１に変換することができる。スキーム４のステップ（ｂ）を参照されたい。Ｖｅ−１は、有機溶媒（例えば、ＤＭＦ）中、アルコールＨＯＲ８（例えば、２，３，５，６−テトラフルオロフェノール）およびＫＦで処理して、対応する−ＯＲ８（例えば、２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）を導入することにより、Ｖｅに変換することができる。スキーム４のステップ（ｃ）を参照されたい。
【化２６】
2018534300.tif 000028
【０１１２】
ＩＶａからＶ（例えば、Ｖａ、Ｖｂ、Ｖｃ、ＶｄまたはＶｅ）への変換後、Ｒ５は、適切な化学条件によって除去して、自発的な脱炭酸の後にＶＩを生成することができる。ＶＩまたはＶＩの塩（例えば、ＶＩの塩酸塩）を、さらなる合成ステップに使用することができる。ＶＩは、有機溶媒（例えば、ＤＭＦ）中、カルボン酸Ｒ３ＣＯ２Ｈおよびラセミ化阻害剤（例えば、ＨＯＢｔ）および脱水剤（例えば、ＥＤＡＣ）で処理して、ＶＩＩを生成することができる。あるいは、ＶＩは、有機溶媒（例えば、ＣＨ２Ｃｌ２）中、Ｒ３ＣＯＲ’（式中、Ｒ’は脱離基（例えば、塩化物）である）および有機塩基（例えば、Ｅｔ３Ｎ）で処理して、ＶＩＩを生成することができる。適用可能である多様なＲ３ＣＯ２ＨおよびＲ３ＣＯＲ’化合物が市販されているか、または公知の方法によって調製することができる。Ｒ１基は、適切な化学条件によってＶＩＩから除去して、ＶＩＩＩを生成することができる。
【０１１３】
式ＶＩＩＩによる他の化合物は、ＩＶｂからＩＸ、ＩＸからＸ、ＸからＶＩＩ、ＶＩＩからＶＩＩＩへの一連の変換によって調製することができる。スキーム５を参照されたい。
【化２７】
2018534300.tif 000029
【０１１４】
ＩＶｂは、有機溶媒（例えば、ＤＭＦ）中、カルボン酸Ｒ３ＣＯ２Ｈおよびラセミ化阻害剤（例えば、ＨＯＢｔ）および脱水剤（例えば、ＥＤＡＣ）で処理して、ＩＸを生成することができる。スキーム５のステップ（ａ）を参照されたい。あるいは、ＩＶｂは、有機溶媒（例えば、ＣＨ２Ｃｌ２）中、Ｒ３ＣＯＲ’（式中、Ｒ’は脱離基（例えば、塩化物）である）および有機塩基（例えば、Ｅｔ３Ｎ）で処理して、ＩＸを生成することができる。適用可能である多様なＲ３ＣＯ２ＨおよびＲ３ＣＯＲ’化合物が市販されているか、または公知の方法によって調製することができる。Ｒ６は、適切な化学条件によってＩＸから除去して、Ｘを生成することができる。スキーム５のステップ（ｂ）を参照されたい。
【０１１５】
Ｘは、ＩｖａからＶａ、Ｖｂ、Ｖｃ、Ｖｄ、またはＶｅへの変換に関して記載したものと類似の一連の反応によりＶＩＩに変換することができる。スキーム５のステップ（ｃ）を参照されたい。一部の実施形態では、Ｘは、スキーム６のステップ（ａ）〜（ｃ）に示されている通り、ＶＩＩｅに変換される。一部の実施形態では、ＶＩＩｅおよびＶＩＩＩｅ中の−ＯＲ８は、２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシである。
【化２８】
2018534300.tif 000030
【０１１６】
ＶＩＩへの代替的なシーケンスの後、Ｒ１は適切な化学条件によって除去して、ＶＩＩＩを生成することができる。スキーム５およびスキーム６のステップ（ｄ）を参照されたい。
【０１１７】
Ｖ．アルギニンジンジパイン阻害剤の医薬組成物および投与
関連する態様では、本発明は、式Ｉの化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【０１１８】
医薬組成物は、製剤学および薬物送達の分野において周知の方法のいずれかによって調製することができる。一般に、組成物を調製する方法は、活性成分を１つまたは複数の補助成分を含有する担体と一緒にするステップを含む。医薬組成物は、通常、活性成分と、液体担体または微細に分割された固体担体またはそれらの両方とを均一かつ密に一緒にし、次に、必要な場合、この生成物を所望の製剤に成形することにより調製される。本組成物は、単位剤形で都合よく調製および／または包装することができる。
【０１１９】
本発明の化合物を含有する医薬組成物は、経口使用向けに製剤化することができる。経口投与に適した組成物には、これらに限定されないが、錠剤、トローチ剤、ロセンジ剤、水性または油性懸濁剤、分散性散剤または顆粒剤、エマルション剤、硬質または軟質カプセル剤、シロップ剤、エリキシル剤、液剤、口内パッチ剤、経口ゲル剤、咀嚼ガム剤、咀嚼錠剤、起泡性散剤および起泡性錠剤が含まれる。経口投与用組成物は、当業者に公知の任意の方法によって製剤化することができる。このような組成物は、医薬として洗練され、かつ口当たりのよい調製物をもたらすために、甘味剤、矯味矯臭剤（ｆｌａｖｏｒｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、着色剤、抗酸化剤および保存剤から選択される１種または複数の作用物質を含有することができる。
【０１２０】
錠剤は、一般に、セルロース、二酸化ケイ素、酸化アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、グルコース、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、リン酸カルシウムおよびリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤、トウモロコシデンプンおよびアルギン酸などの造粒剤および崩壊剤、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、セルロース、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、デンプン、ゼラチンおよびアカシアなどの結合剤、ならびにステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸およびタルクなどの滑沢剤を含めた、非毒性の薬学的に許容される賦形剤と混合された形で活性成分を含有する。錠剤は、コーティングされていなくてもよく、または胃腸管における崩壊および吸収を遅延させるための公知技法により腸溶性コーティングもしくは他の方法でコーティングされ、これにより、より長い期間にわたる持続作用をもたらすことができる。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延物質を使用することができる。錠剤は、制御放出のための浸透ポンプ組成物を形成するための公知の技法に従い、半透過膜および任意選択のポリマー状オスモジェント（ｏｓｍｏｇｅｎｔ）によりコーティングすることもできる。
【０１２１】
経口投与用の組成物は、活性成分が不活発な固体希釈剤（炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンなど）と混合されている、硬質ゼラチンカプセル剤として、または活性成分が水または油性媒体（ピーナッツ油、流動パラフィンまたはオリーブ油など）と混合されている、軟質ゼラチンカプセル剤として製剤化することができる。
【０１２２】
Ｒｇｐ阻害剤は、液剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤または懸濁剤として、および口腔洗液剤、点眼剤などで局所的に投与することもできる。さらに、Ｒｇｐ阻害剤の経皮送達は、イオン導入パッチ剤などにより実現することができる。
【０１２３】
Ｒｇｐ阻害剤を含有する医薬組成物は、滅菌の注射可能な水性または油性液剤および懸濁剤の形態とすることもできる。滅菌の注射可能な調製物は、水、リンゲル液および等張性塩化ナトリウム溶液、および１，３−ブタンジオールなどの許容可能な溶媒を含めた、非毒性の非経口的に許容可能なビヒクルを使用して製剤化することができる。さらに、滅菌の不揮発性油を、溶媒または懸濁媒体として使用することができる。この目的のため、合成モノグリセリド、ジグリセリドまたはトリグリセリドを含めた、任意の無刺激性の不揮発性油を使用することができる。
【０１２４】
一部の実施形態では、Ｒｇｐ阻害剤は、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７などのポリマーと共に製剤化し、皮下に送達することができる。Ｐｌｕｒｏｎｉｃは、体温で固化するヒドロゲルであり、数日〜数週間続く時間にわたって長期薬物送達をもたらす。図８は、化合物１３のＡＵＣ（０−ｌａｓｔ）は、２％カルボキシメチルセルロース中で送達される場合の６８７ｎｇ・ｈ／ｍＬから２５％  Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７中で送達される場合の２１１９ｎｇ・ｈ／ｍＬまで延びることを示す。
【０１２５】
水性懸濁剤は、これらに限定されないが、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、油性（ｏｌｅａｇｉｎｏ）−プロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、トラガカントガムおよびアカシアガムなどの懸濁化剤、レシチン、ステアリン酸ポリオキシエチレンおよびポリエチレンソルビタンモノオレートなどの分散剤または湿潤剤、およびエチル、ｎ−プロピルおよびｐ−ヒドロキシベンゾエートなどの保存剤を含めた、賦形剤と混合された形で、１つまたは複数のＲｇｐ阻害剤を含有することができる。分散性散剤および顆粒剤（水の添加により水性懸濁剤を調製するのに適している）は、分散剤、湿潤剤、懸濁化剤またはそれらの組合せと混合された形で、１つまたは複数のＲｇｐ阻害剤を含有することができる。油性懸濁剤は、植物性油（例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油またはヤシ油）中、または鉱油（例えば、流動パラフィン）中にＲｇｐ阻害剤を懸濁させることにより製剤化することができる。油性懸濁剤は、１種または複数の増粘剤、例えば蜜ろう、硬質パラフィンまたはセチルアルコールを含有することができる。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の添加によって保存することができる。
【０１２６】
本発明の医薬組成物は、水中油型エマルション剤の形態とすることもできる。油性相は、植物性油、例えばオリーブ油もしくは落花生油、または鉱油、例えば流動パラフィン、またはこれらの混合物とすることができる。適切な乳化剤は、アカシアガムまたはトラガカントガムなどの天然に存在するガム、ダイズレシチンなどの天然に存在するリン脂質、モノオレイン酸ソルビタンなどの脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導されるエステルまたは部分エステル、およびポリオキシエチレンソルビタンモノオレートなどの前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物とすることができる。
【０１２７】
さらに、本発明は、これらに限定されないが、静脈内、鼻内、髄腔内、皮下、頭蓋内および経口を含めた、化合物が送達されてバイオアベイラビリティまたは血液脳関門透過を向上させることができる、様々な投与形式を包含する。持続放出性（ＳＲ）、持続作用性（ＳＡ）、延長放出性（ｅｘｔｅｎｄｅｄ−ｒｅｌｅａｓｅ）（ＥＲ、ＸＲ、ＸＬ）、時限放出性（ＴＲ）、制御放出性（ＣＲ）、改変放出性（ＭＲ）、連続放出性、浸透圧放出性（ｏｓｍｏｔｉｃ  ｒｅｌｅａｓｅ）および遅延放出性インプラント向けの製剤を含めた、時間放出技術を使用して、バイオアベイラビリティを高めることができる。
【０１２８】
能動的な輸送を促進するためのハイブリッド分子またはナノ粒子の使用は、ある特定の実施形態で、血液脳関門への輸送を高めるために使用することができる。脳への透過を向上させるために、血液脳関門を越えてタンパク質を輸送する受容体に結合するＬＰＲ−１受容体、トランスフェリン受容体、ＥＧＦ様増殖因子またはグルタチオントランスポーターを含めた、例えばリポソーム、タンパク質、操作されたペプチド化合物または抗体を使用することができる。浸透圧性開口（ｏｓｍｏｔｉｃ  ｏｐｅｎｉｎｇ）、超音波、レーザー、翼口蓋神経節の刺激、頭蓋内直接、髄腔内、またはポンプによる脳室内送達を含めた、物理的な技法を使用することができる。
【０１２９】
本発明による医薬組成物は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する状態の処置において有用な、１つまたは複数の追加の活性薬剤も含むことができる。ある特定の実施形態では、本発明は、１つまたは複数の本明細書に記載されているＲｇｐ阻害剤を、アルツハイマー病の処置のための１つまたは複数の追加の活性薬剤と組み合わせて含む医薬組成物を提供する。アルツハイマー病の処置のためのいくつかの治療薬が開発中および臨床使用中である。治療戦略には、β−アミロイドおよびタウ（以下により詳細に記載されている）の循環レベルの低下、微小管の安定化、アテローム動脈硬化性プラークの除去、オートファジーのモジュレーション、神経伝達物質レベルのモジュレーションおよびＧＡＢＡ（Ａ）α５受容体の阻害が含まれる。このような治療薬は、アルツハイマー病を有する被験体における認知機能を維持および／または回復することができ、認知機能の後退を遅延させることができ、脳の神経可塑性および回復を促進することができる。
【０１３０】
医薬組成物中のＲｇｐ阻害剤と組み合わすことができる活性薬剤には、これらに限定されないが、抗生物質（すなわち、殺菌性化合物および静菌性化合物）、コリンエステラーゼ阻害剤、アルファ−７ニコチン性受容体モジュレーター、セロトニンモジュレーター、ＮＭＤＡモジュレーター、Ａβ標的化治療、ＡｐｏＥ標的化治療、ミクログリア標的化治療、血液／脳関門標的化治療、タウ標的化治療、補体標的化治療および抗炎症剤（ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ）が含まれる。
【０１３１】
いかなる好適な抗生物質も、本発明の医薬組成物において１つまたは複数のＲｇｐ阻害剤と組み合わすことができる。ある特定の実施形態では、本発明は、１種または複数のＲｇｐ阻害剤、および２５μｇ／ｍｌ未満のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ＭＩＣ５０を有する抗生物質を含有する医薬組成物を提供する。例えば、抗生物質のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ＭＩＣ５０は、２０μｇ／ｍｌ未満、１５μｇ／ｍｌ未満、１０μｇ／ｍｌ未満、８μｇ／ｍｌ未満、６μｇ／ｍｌ未満または５μｇ／ｍｌ未満であり得る。一部の実施形態では、抗生物質のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ＭＩＣ５０は、１μｇ／ｍｌ未満である。一部の実施形態では、抗生物質のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ＭＩＣ５０は、０．２μｇ／ｍｌ未満である。
【０１３２】
殺菌性および静菌性化合物の例には、これらに限定されないが、キノロン系（例えば、モキシフロキサシン、ゲミフロキサシン、シプロフロキサシン、オフラキサシン、トロバフロキサシン、シタフロキサシンなど）、β−ラクタム系（例えば、アモキシシリン、アモキシシリン（ａｍｏｘａｃｉｌｉｎ）−クラブラン酸塩、ピペラシリン−タゾバクタム、ペニシリンＧなどのペニシリン、およびセフトリアキソンなどのセファロスポリン）、マクロライド系（例えば、エリスロマイシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシンなど）、カルバペネム系（例えば、ドリペネム、イミペネム、メロペネム（ｍｅｒｏｐｉｎｅｍ）、エルタペネムなど）、チアゾリド系（例えば、チゾキサニジン（ｔｉｚｏｘａｎｉｄｉｎｅ）、ニタゾキサニド（ｎｉｔａｚｏｘａｎｉｄｉｎｅ）、ＲＭ４８０７、ＲＭ４８０９など）、テトラサイクリン系（例えば、テトラサイクリン、ミノサイクリン、ドキシサイクリン、エラバサイクリン（ｅｒａｖａｃｙｃｌｉｎｅ）など）、クリンダマイシン、メトロニダゾール、およびサトラニダゾール（ｓａｔｒａｎｉｄａｚｏｌｅ）が含まれる。殺菌性および静菌性化合物には、嫌気性グラム陰性菌によるバイオフィルムの形成を阻害するか、または他の方法で妨害する薬剤も含まれる。このような薬剤には、オキサンテル、モランテル、チアベンダゾールなどが含まれる。本発明の組成物は、１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはそれよりも多い）の殺菌性／静菌性化合物を含む、１つまたは複数のＲｇｐ阻害剤を含有することができる。殺菌性／静菌性化合物を含有する組成物は、さらに、クロルヘキシジン（例えば、クロルヘキシジン二グルコン酸塩）を単独で、または亜鉛化合物（例えば、酢酸亜鉛）と組み合わせて含有することができ、投与される抗生物質と組み合わせて使用することもできる。
【０１３３】
一部の実施形態では、ペニシリン（例えば、アモキシシリン）とメトロニダゾールとの組合せ、またはペニシリン（例えば、アモキシシリン）、メトロニダゾールおよびテトラサイクリンの組合せが使用される。一部の実施形態では、抗生物質は、ミノサイクリン、ドキシサイクリン、メトロニダゾール、アモキシシリン、クリンダマイシン、オーグメンチン、サトラニダゾールおよびそれらの組合せから選択される。
【０１３４】
適切なコリンエステラーゼ阻害剤の例には、これらに限定されないが、ドネペジル、ドネペジル／メマンチン、ガランタミン、リバスチグミンおよびタクリン、ならびに薬学的に許容されるそれらの塩が含まれる。適切なセロトニンモジュレーターの例には、これらに限定されないが、イダロピルジン、ＲＶＴ−１０１、シタロプラム、エスシタロプラム、フルロキセチン、フルボキサミン、パロキセチンおよびセルトラリン、ならびに薬学的に許容されるそれらの塩が含まれる。適切なアルファ−７ニコチン性受容体モジュレーターの例には、これらに限定されないが、エンセニクリンおよびＡＰＮ１１２５などのアルファ−７アゴニストが含まれる。適切なＮＭＤＡモジュレーターには、これらに限定されないが、メマンチンおよびその誘導体などのＮＭＤＡ受容体アンタゴニストが含まれる。
【０１３５】
本発明の医薬組成物は、神経疾患に関連する生体分子標的を対象とする活性薬剤も含有することができる。このような標的には、ベータアミロイドペプチド（ベータアミロイド、ａｂｅｔａまたはＡβとも呼ばれる）、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥとも呼ばれる）、および微小管結合タウ（タウタンパク質または単にタウとも呼ばれる）が含まれる。
【０１３６】
Ａβ標的化治療には、とりわけ、Ａβ産生の阻害剤（ベータ−セクレターゼ阻害剤、ガンマ−セクレターゼ阻害剤、アルファ−セクレターゼアクチベーターなど）、Ａβ凝集阻害剤、Ａβオリゴマー化阻害剤、およびＡβクリアランスの上方調節剤が含まれる（例えば、Ｊｉａら、ＢｉｏＭｅｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、２０１４年、論文ＩＤ８３７１５７、ｄｏｉ：１０．１１５５／２０１４／８３７１５７を参照されたい）。Ａβ標的化治療の例には、これらに限定されないが、抗体、ピオグリタゾン、ベガセスタット（ｂｅｇａｃｅｓｔａｔ）、アトルバスタチン、シンバスタチン、エタゾレートおよびトラミプロセート（ｔｒａｍｉｐｒｏｓａｔｅ）、ならびに薬学的に許容されるそれらの塩が含まれる。
【０１３７】
ＡｐｏＥ標的化治療の例には、これらに限定されないが、レチノイドＸ受容体アゴニスト（Ｃｒａｍｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０１２年、３３５巻（６０７５号）、１５０３〜１５０６頁を参照されたい）およびＬｉｕら（Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｎｅｕｒｏｌ．  ２０１３年、９巻（２号）：１０６〜１１８頁）により記載されている他のものが含まれる。タウ標的化治療には、これらに限定されないが、メチルチオニニウム、ロイコ−メチルチオニニウム、抗体、およびＬｅｅら（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  Ｍｅｄ  ２０１１年；１巻：ａ００６４３７）により記載されたものが含まれる。
【０１３８】
本発明の医薬組成物は、補体標的化治療を含有することもできる。このような治療は、生得免疫応答に関与する補体系の構成成分を標的とする。補体標的化治療には、これらに限定されないが、ＲｉｃｋｌｉｎおよびＬａｍｂｒｉｓ（Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２００７年、２５巻（１１号）：１２６５〜１２７５頁）により記載されたものが含まれる。
【０１３９】
適切な抗炎症剤の例には、これらに限定されないが、アパゾン、ジクロフェナク、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ナブメトン、ナプロキセン、ピロキシカムおよびスリンダク、ならびに薬学的に許容されるそれらの塩などのＮＳＡＩＤが含まれる。
【０１４０】
ＶＩ．Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する状態を処置するための方法
上記の通り、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓによる感染およびジンジパイン活性は、歯周病、アルツハイマー病および他の脳障害、心血管疾患、糖尿病、がん、肝疾患、腎疾患、早産、関節炎、肺炎および他の障害の発症にリンクしている。Ｂｏｓｔａｎｃｉら  ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｌｅｔｔ、２０１２年、３３３巻（１号）：１〜９頁；Ｇｈｉｚｏｎｉら  Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｏｒａｌ  Ｓｃｉ、２０１２年、２０巻（１号）：１０４〜１２頁；Ｇａｔｚら、Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｅｍｅｎｔ、２００６年、２巻（２号）：１１０〜７頁；Ｓｔｅｉｎら  Ｊ  Ａｍ  Ｄｅｎｔ  Ａｓｓｏｃ、２００７年、１３８巻（１０号）：１３１４〜２２頁；ｑｕｉｚ  １３８１〜２頁；Ｎｏｂｌｅら  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ、２００９年、８０巻（１１号）：１２０６〜１１頁；Ｓｐａｒｋｓ  Ｓｔｅｉｎら  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｅｍｅｎｔ、２０１２年、８巻（３号）：１９６〜２０３頁；Ｖｅｌｓｋｏら  ＰＬｏＳ  ＯＮＥ、２０１４年、９巻（５号）：ｅ９７８１１；Ｄｅｍｍｅｒら、Ｊ  Ｄｅｎｔ  Ｒｅｓ、２０１５年、９４巻（９Ｓ号）：２０１−Ｓ−１１Ｓ；ＡｔａｎａｓｏｖａおよびＹｉｌｍａｚ．  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｏｒａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、２０１４年、２９巻（２号）：５５〜６６頁；Ｙｏｎｅｄａら  ＢＭＣ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ、２０１２年、１２巻：１６頁を参照されたい。
【０１４１】
アルギニンジンジパインＡ（ＲｇｐＡ）、アルギニンジンジパインＢ（ＲｇｐＢ）、およびリシンジンジパイン（Ｋｇｐ）を含めた、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓにより産生される細胞外プロテアーゼは、結合組織および血漿中の幅広い範囲のタンパク質（例えば、コラーゲン、免疫グロブリン、およびプロテイナーゼ阻害剤など）も分解することができる。ジンジパインは、体循環ならびに／または滑膜細胞（ｓｙｎｏｖｉｏｃｙｔｅ）および軟骨細胞に入ることができ、それらは、カリクレイン−キニンカスケード、血液凝固、および宿主防御システムの混乱を引き起こすこともできる。自己の関節および循環系中にジンジパインを有する患者は、変形性関節症の一因である滑膜細胞（ｓｙｎｏｖｉａｌ  ｃｅｌｌ）および／または軟骨細胞のジンジパイン誘導死を受ける場合がある。
【０１４２】
ＲｇｐＢおよびＫｇｐは、ヒトおよびイヌの関節に浸潤することができ、変形性関節症の発症の一因となっていることが現在では発見されている。Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓおよびジンジパインは、いくつかの経路を介して関節組織に浸潤することができ、これらの新しい観察結果をもたらしていると考えられている。ジンジパインは、分泌されて、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓの外膜表面に輸送され得るか、またはこの細菌により、外膜小胞中に放出され得る。Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓは、歯周組織、冠状動脈、大動脈および肝臓中で以前に同定されており、最近、これらのニッチのいずれかから体循環へのＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓおよび／またはジンジパインの放出により、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓおよび／またはジンジパインの関節への移動をもたらし得ることが同定された。Ｔｒａｖｉｓら、Ａｄｖ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ、２０００年、４７７巻：４５５〜６５頁；Ｂｙｒｎｅら、Ｏｒａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００９年、２４巻（６号）：４６９〜７７頁；Ｍａｈｅｎｄｒａら、Ｊ  Ｍａｘｉｌｌｏｆａｃ  Ｏｒａｌ  Ｓｕｒｇ、２００９年、８巻（２号）：１０８〜１３頁；Ｓｔｅｌｚｅｌ、Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌ、２００２年、７３巻（８号）：８６８〜７０頁；Ｉｓｈｉｋａｗａら、Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ、２０１３年、１８３２巻（１２号）：２０３５〜２０４３頁を参照されたい。
【０１４３】
Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓおよび／またはジンジパインは、血液／関節関門を保護している内皮細胞を破壊することにより、または半月板傷害などの関節への外傷性事象により関節に入ることもでき、それは、関節組織の完全性を永続的または一過性に低減する。外傷性関節傷害におけるこのような混乱は、例えば、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓおよび／またはジンジパインの感染した個体への浸潤、ならびに引き続いて慢性変形性関節症の発症の一因となり得る。フットボールのようなコンタクトスポーツのスポーツ選手を含めた、外傷性関節障害の高いリスクにある人は、外傷関連変形性関節症のリスクを低減するためにジンジパイン阻害剤で予防的に処置することができる。
【０１４４】
Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓおよびジンジパインは、能動的な輸送、受動的な輸送、またはマクロファージ送達を含めた他の機構によっても関節に到達する場合がある。これらの機構のいずれかから生じる変形性関節症は、単一の関節に限定されている、または複数の関節中に存在する場合がある。
【０１４５】
ヒトと同様に、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染および歯周病は、成体のイヌおよびネコに影響を及ぼす、最も一般的な感染症の１つである。成体のビーグル犬を使用して、研究者らは、歯の表面にプラーク形成を増加させる特定の軟らかい食餌を与えられたビーグル犬から採取したプラーク試料中にＲｇｐが存在することを実証した（例えば、ＤａｖｉｓおよびＨｅａｄ、Ｆｒｏｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、２０１４年、５巻：４７号；Ｒｅｉｃｈａｒｔら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１９８４年、１９巻（１号）：６７〜７５頁；Ｋａｔａｏｋａ，Ｓ．ら、ＦＡＳＥＢ  Ｊ、２０１４年、２８巻（８号）：３５６４〜７８頁を参照されたい）。それらの関節および循環系においてＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染およびジンジパインを有するイヌおよびネコは、ジンジパイン誘導性細胞死による歯周病および変形性関節症を経験する可能性があり、これらは、本発明の方法により処置または予防することができる。
【０１４６】
老齢イヌは、前十字靭帯（ＡＣＬ）の変性に関連する一般的な炎症性膝関節炎を含めた変形性関節症の多くの特徴を自発的に発症する。炎症性膝関節炎およびＡＣＬ変性を有するイヌのＭｕｉｒらによる研究により、罹患したイヌからの膝関節の３７％において一連の細菌種からＤＮＡが検出された。Ｍｕｉｒらは、細菌がイヌにおける炎症性関節炎の病因の重要な原因となる因子であり得ると仮定した。Ｍｕｉｒらの研究では、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ由来のＤＮＡは、イヌの関節中に検出されなかった。Ｍｕｉｒら、Ｍｉｃｒｏｂ  Ｐａｔｈｏｇ、２００７年、４２巻（２〜３号）：４７〜５５頁を参照されたい。しかし、ヒトと同様に、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓは、成体のイヌに影響を及ぼす一般的な口腔病原体であり、菌血症の結果として口腔から関節組織に潜在的に移動し得る。成体のビーグル犬を使用して、研究者らは、歯の表面にプラーク形成を増加させる特定の軟らかい食餌を与えられたビーグル犬から採取した口腔内プラーク試料中にＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓのＡｒｇ−ジンジパイン、分泌型システインプロテアーゼ毒性因子が存在することを実証した。アルギニン−ジンジパインは、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓの主なコラゲナーゼ因子として同定されており、イヌの感染関節組織中でコラーゲンを破壊し得る。さらに、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで軟骨細胞に感染し、軟骨細胞アポトーシスを引き起こすことが実証され、イヌおよびヒトの両方の変形性関節症における軟骨組織喪失の経路が示された。Ｒｏｈｎｅｒら、Ｃａｌｃｉｆ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｉｎｔ、２０１０年、８７巻（４号）：３３３〜４０頁；Ｈｏｕｌｅら、ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｌｅｔｔ、２００３年、２２１巻（２号）：１８１〜５頁；Ｋａｔａｏｋａら、ＦＡＳＥＢ  Ｊ、２０１４年、２８巻：３５６４〜３５７８頁；Ｐｉｓｃｈｏｎら、Ａｎｎ  Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ、２００９年、６８巻（１２号）：１９０２〜７頁を参照されたい。
【０１４７】
したがって、Ｒｇｐ阻害剤は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓによって引き起こされるか、または他の点でＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓによって影響を受ける、脳障害などの疾患および状態を処置するために使用することができる。したがって、本発明の別の態様は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態を処置する方法を提供する。本方法は、有効量の式ＩＩ：
【化２９】
2018534300.tif 000031
による化合物または薬学的に許容されるその塩を被験体に投与し、これによって疾患または状態を処置するステップを含み、式中、
Ｚ’は、アリールオキシメチル−カルボニル、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、チアゾール−２−イル−カルボニル、オキサゾール−２−イル−カルボニル、ベンゾオキサゾール−２−イル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、ピリミジン−４−イル−カルボニル、ピリミジン−２−イル−カルボニル、イソオキサゾール−５−イル−カルボニル、イソオキサゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−３−イル−カルボニル、１，２，４−オキサジアゾール−５−イル−カルボニル、シアノ、エチニル、フルオロメチル−カルボニル、アシルオキシメチル−カルボニル、アルキルスルホニル−ビニル、およびアリールスルホニル−ビニルから選択され、
Ｚ’は、ハロゲン、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４ハロアルキル、Ｃ１〜４ハロアルコキシ、および−Ｎ３から選択される１つまたは複数の置換基により任意選択で置換されており、
Ｒ１ａはそれぞれ、水素、Ｃ１〜４アルキル、およびアミン保護基から独立して選択され、
Ｒ２ａは、水素およびＣ１〜４アルキルから選択され、
Ｒ３ａは、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８アルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、
Ｒ３ａは、ハロ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＯＨ、Ｒａ、−ＯＲｂ、−Ｎ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣ（Ｏ）Ｒｃ、−（ＣＨ２）ｋＣＯＮ（Ｒｄ）２、−（ＣＨ２）ｋＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、−ＮＲｄ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃ、−Ｏ（ＣＨ２）ｕＣＯＮ（Ｒｄ）２、および−Ｏ（ＣＨ２）ｕＮＲｄＣ（Ｏ）Ｒｃから独立して選択される１つまたは複数のＲ４ａ置換基により任意選択で置換されており、
Ｒａ、Ｒｂ、およびＲｃはそれぞれ、Ｃ１〜４アルキルおよびＣ１〜４ハロアルキルから独立して選択され、
Ｒｄはそれぞれ、水素およびＣ１〜８アルキルから独立して選択され、
下付き文字ｋはそれぞれ、０、１、２、３、４、５、および６から独立して選択され、
下付き文字ｕはそれぞれ、１、２、３、４、５、および６から独立して選択される。
【０１４８】
一部の実施形態では、本方法は、表１からの１つまたは複数の化合物を被験体に投与するステップを含む。
【表１−１】
2018534300.tif 000032
【表１−２】
2018534300.tif 000033
【表１−３】
2018534300.tif 000034
【０１４９】
一部の実施形態では、本発明は、上記のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態を処置する方法であって、被験体は、ヒトまたはイヌである、方法を提供する。
【０１５０】
一部の実施形態では、本発明は、上記のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態を処置する方法であって、式ＩＩの化合物は、式ＩＩａ：
【化３０】
2018534300.tif 000035
による構造を有する化合物またはその薬学的に許容される塩である、方法を提供する。
【０１５１】
一部の実施形態では、本方法は、式ＩＩの化合物を投与するステップを含み、式中、Ｚ’は、ベンゾチアゾール−２−イル−カルボニル、ハロゲン−置換アリールオキシメチル−カルボニル、ピリジン−２−イル−カルボニル、およびチアゾール−２−イル−カルボニルから選択される。一部のこのような実施形態では、Ｚ’は、アリールオキシメチル−カルボニルおよびベンゾチアゾール−２−イル−カルボニルから選択される。一部のこのような実施形態では、Ｚ’は、（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシメチル（ｔｅｔｒａｆｌｕｒｏｐｈｅｎｏｘｙｍｅｔｈｙｌ））カルボニルである。
【０１５２】
一部の実施形態では、本方法において投与される式ＩＩの化合物は、式ＩＩｂ
【化３１】
2018534300.tif 000036
による構造を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である。
【０１５３】
一部の実施形態では、本方法は、式ＩＩｂの化合物または薬学的に許容されるその塩を投与するステップを含み、式中、Ｒ３は、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、５〜１２員のヘテロアリール、および５〜１２員のヘテロシクリルから選択され、そのそれぞれは、１つまたは複数のＲ４置換基により任意選択で置換されている。一部のこのような実施形態では、Ｒ３は、シクロペンチル、フェニル、およびアジドフェニルから選択される。
【０１５４】
一部の実施形態では、本方法は、
【化３２】
2018534300.tif 000037
および薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物を投与するステップを含む。
【０１５５】
一部の実施形態では、本方法は、
【化３３】
2018534300.tif 000038
または薬学的に許容されるその塩を投与するステップを含む。
【０１５６】
一部の実施形態では、本方法において投与される式ＩＩの化合物は、式ＩＩｃ：
【化３４】
2018534300.tif 000039
による構造を有する化合物または薬学的に許容されるその塩であり、
式中、Ｒ３ａは、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルから選択される。
【０１５７】
一部の実施形態では、本方法は、
【化３５】
2018534300.tif 000040
および薬学的に許容されるそれらの塩から選択される化合物を投与するステップを含む。
【０１５８】
一部の実施形態では、本発明の方法は、上記の式ＩＩによる化合物を投与するステップを含み、ただしＺがフェノキシメチルカルボニルまたは置換フェノキシメチルカルボニルである場合、Ｒ３およびそれが結合しているカルボニルは、プロリニル、置換プロリニル、アルギニニル、置換アルギニニル、フェニルアラニニル、置換フェニルアラニニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、またはｔｅｒｔ−ブチルオキシ−カルボニル以外の部分を形成することを条件とする。
【０１５９】
一部の実施形態では、本発明の方法は、上記の式ＩＩによる化合物を投与するステップを含み、ただしＺがベンゾチアゾール−２−イル−カルボニルである場合、Ｒ３は、フェニル、トリフルオロメチルフェニル、ピペリジン−３−イル、ピロリジン−３−イル、３−アミノシクロペンチル、ｎ−プロピル、３−アミノプロピル、および（１−アセトアミド）プロピルからなる群より選択されることを条件とする。
【０１６０】
ある特定の実施形態では、本発明の化合物は、哺乳動物、例えば、ヒト、または動物（例えば、イヌ）の脳内の活性Ｒｇｐを阻害し、細胞保護性または神経保護性である。「神経保護性」とは、化合物が、ニューロンの異常な変化またはニューロンの死を予防することを意味する。したがって本発明の化合物は、例えば、脳障害（例えば、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、ダウン症候群、てんかん、自閉症、パーキンソン病、本態性振戦、前頭側頭型認知症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、多発性硬化症、軽度認知障害、加齢関連性記憶障害、慢性外傷性脳症、脳卒中、脳血管疾患、レビー小体病、多系統萎縮症、統合失調症、およびうつ病など）、糖尿病、心血管疾患、関節炎、関節リウマチ、変形性関節症、感染性関節炎、乾癬性関節炎、網膜障害（例えば、加齢黄斑変性）、および緑内障の処置に有用である。
【０１６１】
一部の実施形態では、疾患または状態は、脳障害、歯周病、糖尿病、心血管疾患、関節炎、関節リウマチ、変形性関節症、早産、肺炎、がん、腎疾患、肝疾患、網膜障害、および緑内障から選択される。
【０１６２】
一部の実施形態では、疾患または状態は、脳障害である。
【０１６３】
一部の実施形態では、脳障害は、アルツハイマー病、ダウン症候群、てんかん、自閉症、パーキンソン病、本態性振戦、前頭側頭型認知症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、多発性硬化症、軽度認知障害、加齢関連性記憶障害、慢性外傷性脳症、脳卒中、脳血管疾患、レビー小体病、多系統萎縮症、統合失調症およびうつ病から選択される。
【０１６４】
一部の実施形態では、脳障害はアルツハイマー病である。
【０１６５】
一部の実施形態では、本方法は、コリンエステラーゼ阻害剤、セロトニンモジュレーター、ＮＭＤＡモジュレーター、Ａβ標的化治療、ＡｐｏＥ標的化治療、ミクログリア標的化治療、血液脳関門標的化治療、タウ標的化治療、補体標的化治療および抗炎症剤から選択される１つまたは複数の活性薬剤を被験体に投与するステップをさらに含む。
【０１６６】
一部の実施形態では、疾患または状態は、歯周病である。一部の実施形態では、疾患または状態は、肝疾患である。一部の実施形態では、肝疾患は、非アルコール性脂肪性肝炎である。一部の実施形態では、疾患または状態は、網膜障害である。一部の実施形態では、網膜障害は加齢黄斑変性である。
【０１６７】
一部の実施形態では、疾患または状態はがんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん、口腔がん、膵臓がんまたは多形性神経膠芽腫である。
【０１６８】
本明細書に記載されているＲｇｐ阻害剤は、本発明の方法における任意の適切な用量で投与することができる。一般に、Ｒｇｐ阻害剤は、被験体の体重１キログラムあたり、約０．１ミリグラム〜約１０００ミリグラムの範囲の用量（すなわち、約０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ）で投与される。Ｒｇｐ阻害剤の用量は、例えば、約０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、または約１〜５００ｍｇ／ｋｇ、または約２５〜２５０ｍｇ／ｋｇ、または約５０〜１００ｍｇ／ｋｇであり得る。Ｒｇｐ阻害剤の用量は、約１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８５、９０、９５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０または１０００ｍｇ／ｋｇであり得る。投与量は、患者の必要性、処置される障害の重症度および投与される特定の製剤に応じて変えることができる。患者に投与される用量は、患者に有益な治療応答をもたらすために十分あるべきである。用量のサイズは、特定の患者での薬物の投与に付随する任意の有害な副作用の存在、性質および程度によっても決定される。特定の状況のための適切な投与量の決定は、典型的実施者の技量の範囲内である。総投与量は、分割され、発作性障害を処置するために適切である期間にわたって小分けにして投与され得る。
【０１６９】
Ｒｇｐ阻害剤は、特定の障害の性質、その重症度、およびＲｇｐ阻害剤が投与される被験体の全体的な状態に応じて変わることになる期間にわたり、投与することができる。投与は、例えば、１時間毎、２時間毎、３時間毎、４時間毎、６時間毎、８時間毎、もしくは１２時間毎を含め１日２回、または任意のその間の間隔で行われ得る。投与は、１日１回または３６時間もしくは４８時間毎に１回または１カ月毎もしくは数カ月毎に１回行われ得る。処置後、被験体は、被験体の状態の変化についておよび障害の症状の軽減についてモニタリングされ得る。Ｒｇｐ阻害剤の投与量は、被験体が特定の投与量レベルに顕著に応答しない事象では増加でき、または障害の症状の軽減が観察される場合、もしくは障害が治った場合、もしくは許容できない副作用が特定の投与量で見られる場合は、用量は減らすことができる。
【０１７０】
Ｒｇｐ阻害剤の治療有効量は、投薬間に少なくとも１時間、または６時間、または１２時間、または２４時間、または３６時間または４８時間の間隔を含む処置レジメンで被験体に投与され得る。投与は、少なくとも７２、９６、１２０、１４４、１６８、１９２、２１６または２４０時間（すなわち、３、４、５、６、７、８、９または１０日間）の間隔で行われ得る。ある特定の実施形態では、１つまたは複数のＲｇｐ阻害剤の投与は、数カ月から数年の範囲に及ぶ期間にわたり長期的に行われる。したがって、本発明の一部の実施形態は、上記のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態を処置する方法であって、化合物が少なくとも１年間、被験体に投与される、方法を提供する。一部の実施形態では、本化合物は、少なくとも１０年間、被験体に投与される。一部の実施形態では、本化合物は、少なくとも６０年間、被験体に投与される。
【０１７１】
本発明の方法によるＲｇｐ阻害剤の投与により、通常、被験体における活性Ｒｇｐの循環レベルの低下、および／または脳における活性Ｒｇｐの低下がもたらされる。ある特定の実施形態では、本発明の方法によるＲｇｐ阻害剤の投与により、活性Ｒｇｐの循環レベルが少なくとも２０％低下し、かつ／または脳における活性Ｒｇｐが少なくとも２０％低下する。例えば、Ｒｇｐの循環レベルおよび／または脳におけるＲｇｐのレベルは、Ｒｇｐ阻害剤の最初の投与の２４時間前の対応するＲｇｐレベルと比べて、好ましくは約２５％〜約９５％、または約３５％〜約９５％、または約４０％〜約８５％、または約４０％〜約８０％低下する。
【０１７２】
Ｒｇｐ阻害剤は、単独で、または上記の１つもしくは複数の追加の治療活性薬剤と組み合わせて投与することができる。１つまたは複数の追加の治療上有効な薬剤には、例えば、（ｉ）哺乳動物における、ＲｇｐＡ、ＲｇｐＢおよび／もしくはＫｇｐの産生、ＲｇｐＡ、ＲｇｐＢおよび／もしくはＫｇｐの体循環もしくは脳への移動、ならびに／またはＲｇｐＡ、ＲｇｐＢおよび／もしくはＫｇｐの病理学的作用（例えば、神経毒性作用）を阻害する、薬学的に許容される薬剤、（ｉｉ）Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓに関して、静菌性または殺菌性である抗菌剤、（ｉｉｉ）ＲｇｐＡ、ＲｇｐＢおよび／またはＫｇｐに結合する１つまたは複数の抗体（例えば、ＲｇｐＢの免疫グロブリンドメインの最初の半分に結合する１８Ｅ６、Ｋｇｐ触媒ドメイン内のエピトープを認識する、Ｋｇｐ特異的モノクローナル抗体７Ｂ９、上述のいずれかのヒト化バージョンである、ＲｇｐＡ抗体６１Ｂｇ  １．３など）、（ｉｖ）ＲｇｐＡ、ＲｇｐＢおよび／もしくはＫｇｐ、またはＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓにより発現される他のタンパク質に結合する抗体のエピトープ、ならびに（ｖ）上述のいずれかの組合せが含まれる。
【０１７３】
追加の治療活性薬剤には、Ａβペプチドレベル低下剤、病原性レベルタウ低下剤、微小管安定剤、アテローム動脈硬化性プラークを除去することが可能な薬剤、β−アミロイドおよびタウの循環レベルを低下させる薬剤、オートファジーのモジュレーター、神経伝達物質レベル調節剤、ＧＡＢＡ（Ａ）α５受容体阻害剤、ならびにアルツハイマー病の認知機能および機能欠損を維持および／もしくは回復する、ならびに／またはアルツハイマー病における認知機能の低下および機能欠損を遅延させる一助となる追加の薬剤も含まれる。
【０１７４】
本発明の医薬組成物は、バイオアベイラビリティを向上し、血液脳関門の透過を増大させ得るリトナビル（ＲＴＶ）と組み合わせて、本明細書に記載されている１つまたは複数のＲｇｐ阻害剤を含有することができる。例えば、リトナビルは、Ｐ４５０  ３Ａ４酵素を阻害し、こうして初回通過代謝を低下させることにより、血漿中レベルを増加させる経口のペプチドＨＩＶプロテアーゼ阻害剤と一般に組み合わされる（Ｗａｌｍｓｌｅｙら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ、２００２年、３４６巻（２６号）：２０３９〜４６頁を参照されたい）。さらに、ＲＴＶは、血液脳関門を含めた、多くの組織中で見いだされる、膜貫通流出ポンプであるＰ−グリコタンパク質に結合し、これにより、共投与される化合物のより良好な脳への接近が可能になる（Ｍａｒｚｏｌｉｎｉら、Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍ、２０１３年、１０巻（６号）：２３４０〜９頁を参照されたい）。したがって、ジンジパイン阻害剤の血漿中濃度および脳レベルを増加させるために、ＲＴＶおよびＲｇｐ阻害剤の組合せが使用され得る。米国特許出願第１４／８７５，４１６号に記載されているように、Ｋｇｐ阻害剤であるＫｙｔ−３６の１５分前にＲＴＶを経口投与することにより、半減期が増加し、したがって、ＲＴＶがＲｇｐ阻害剤の半減期も増加させることが予期される。
【０１７５】
一部の実施形態では、本発明の化合物は、脳障害の処置または予防のために、ナツメグから単離されるメラバリコン（ｍｅｌａｂａｒｉｃｏｎｅ）Ｃを含めた天然ジンジパイン阻害剤と共に投与され得、またはクランベリー、緑茶、リンゴ、およびホップなどの植物に由来するポリフェノール化合物と一緒に投与され得る。κ−カゼインペプチド（１０９−１３７）３４、ヒスタチン５およびＣＬ（１４−２５）、ＣＬ（Ｋ２５Ａ）およびＣＬ（Ｒ２４Ａ、Ｋ２５Ａ）を含めた、天然に存在するおよび天然に存在しない抗微生物ペプチドも、本発明のＲｇｐ阻害剤と一緒に投与することができる（例えば、Ｔａｎｉｇｕｃｈｉら、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ、２０１４年、１０２巻（５号）：３７９〜８９頁を参照されたい）。
【０１７６】
本明細書に記載されているＲｇｐ阻害剤は、ジンジパインまたは他のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓタンパク質を標的とする抗体と共に投与することができる。抗体は、脳に接近するために血液脳関門の損傷に、またはジンジパインおよびＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓの伝播の末梢妨害に依存し得る。抗体はまた、細菌を排除する際の免疫系の効力を刺激する一助となり得る。１８Ｅ６および７Ｂ９を含む、ＲｇｐＡ、ＲｇｐＢまたはＫｇｐへの新規または既存の抗体を利用することができる。ＲｇｐＡ抗体である６１ＢＧ  １．３は、以前に、歯周処置後のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓによる再集落形成の予防において、局所的な有効性を実証している。Ｂｏｏｔｈら、Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ、１９９６年、６４巻（２号）：４２２〜７頁を参照されたい。抗体は、ヒトにおいて使用するために、好ましくはヒト化される。これらに限定されないが、静脈内送達、皮下送達、鼻腔内送達、髄腔内送達、関節内送達、ベクター輸送および直接的な脳送達を含めた、半減期および脳への透過を改善するための生物製剤の送達のための当業者に公知の方法を使用することができる。
【０１７７】
本発明の方法は、本明細書に記載されているＲｇｐ阻害剤と、以下の追加の治療活性薬剤または薬学的に許容されるそれらの塩：アルギニン誘導体、ヒスタチン５、バキュロウイルスｐ３５、牛痘ウイルスサイトカイン応答修飾剤（ＣｒｍＡ（Ａｓｐ＞Ｌｙｓ））の単一点変異体、フェニルアラニル−ウレイド−シトルリニル−バリル−シクロアルギナル（ＦＡ−７０Ｃ１）、（アシクロキシ）メチルケトン（Ｃｂｚ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＣＨ２ＯＣＯ−２，４，６−Ｍｅ３Ｐｈ）、ペプチジルクロロ−メチルケトン（例えば、アルギニンのクロロメチルケトン誘導体、リシンのクロロメチルケトン誘導体など）、フルオロ−メチルケトン、ブロモ−メチルケトン、ケトペプチド、１−（３−フェニルプロピオニル）ピペリジン−３（Ｒ，Ｓ）−カルボン酸［４−アミノ−１（Ｓ）−（ベンゾチアゾール−２−カルボニル）ブチル］アミド（Ａ７１５６１）、アザペプチドフマルアミド、アザ−ペプチドマイケル受容体、ベンザミジン化合物、アシクロメチルケトン、活性化因子Ｘ阻害剤（例えば、ＤＸ−９０６５ａ）、クランベリー非透析性画分、クランベリーポリフエノール画分、膵臓トリプシン阻害剤、Ｃｂｚ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＣＨ２Ｏ−ＣＯ−２，４，６−Ｍｅ３−Ｐｈ、Ｅ−６４、クロルヘキシジン、亜鉛（例えば、酢酸亜鉛）のうちの１つもしくは複数、または上述のいずれかのうちの２つ、３つもしくはそれよりも多い組合せとの投与も包含する。これらの実施形態の一部では、Ｚｎは、本発明の方法において使用される化合物（例えば、クロルヘキシジン、ベンザミジンなど）の効力および選択性を高めることができる。
【０１７８】
本発明のＲｇｐ阻害剤は、追加の治療活性薬剤と同じ組成物中で投与することができる。あるいは、追加の治療活性薬剤は、Ｒｇｐ阻害剤の投与前、それと同時に、またはその後に個別に投与することができる。
【０１７９】
ヒトと同様に、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染および歯周病は、成体のイヌおよびネコに影響を及ぼす、最も一般的な感染症の１つである。研究により、歯の表面にプラーク形成を増加させる特定の軟らかい食餌を与えられた成体のビーグル犬から採取したプラーク試料中にＲｇｐが存在することが実証された（例えば、ＤａｖｉｓおよびＨｅａｄ、Ｆｒｏｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、２０１４年、５巻：４７号；Ｒｅｉｃｈａｒｔら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１９８４年、１９巻（１号）：６７〜７５頁；Ｋａｔａｏｋａ，Ｓ．ら、ＦＡＳＥＢ  Ｊ、２０１４年、２８巻（８号）：３５６４〜７８頁を参照されたい）。それらの脳および循環系においてＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染およびジンジパインを有するイヌおよびネコは、歯周病、軽度認知障害、加齢関連性記憶障害、糖尿病、ジンジパイン誘導性細胞死による損傷または全身性の老化の加速を経験する可能性があり、これらは、本発明の化合物により処置または予防することができる。
【０１８０】
ＶＩＩ．Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓを検出する方法、およびＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する状態を診断する方法
本発明は、脳障害を診断もしくは予期するため、または本明細書に記載されている化合物による処置のための最良の候補者は誰かを決定するため、脳または患者の試料中のジンジパインまたはＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓの診断試験も提供する。Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する血清プロファイルの変化は、以前に観察されている。本発明によれば、脳障害の発症のリスクは、例えば、一方または両方のジンジパインを検出するために、唾液、脳脊髄液または血液に関するＥＬＩＳＡを行うことによって診断するか、または他の方法で評価することができる。ジンジパインまたは他のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓのマーカーの唾液、血液およびＣＳＦ中レベルは、リスクのある患者および処置の良好な候補者である患者において、より高いことが予想される。ＥＬＩＳＡの展開は、標的を捕捉するための標的に対する１つの抗体および標的上の異なるエピトープに対する第２の標識抗体を利用して定量的な読み取りを得る、当業者に公知のかなり簡単なプロセスである。市販または新しく生成された抗体が、この目的に使用することができた。本明細書に記載されている固定化または標識化合物（例えば、ビオチンまたはＨＲＰにより）は、１つまたは両方の抗体を置きかえるために利用することができた。この目的に、図４に図示されているものなどのクリックケミストリーの化合物を利用することができた。診断は、１つまたは複数のジンジパインの検出を含むことができた。検出抗体のビオチン化は、感度を高めるために使用することができる。
【０１８１】
あるいは、ジンジパインの存在または非存在を検出する代わりに、唾液、ＣＳＦまたは血液中のそれらの活性に対するアッセイを使用することができた。これにより、例えば、処置の存在下または非存在下で、生物的に最も関連性の高い因子（例えば、活性）に対する読み取りが得られるという利点がもたらされる。酵素アッセイを開発する方法は、当業者に公知である。ＢＡＮＡ試験として公知の唾液試験は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓおよび他の口腔細菌に由来するプロテアーゼを試験するため、歯科適用に市販されている。このＢＡＮＡ試験は、カード上のストライプとして見える、２種の個別の試薬マトリクスを取り付けた小型のプラスチック製カードである。下側の白色試薬マトリクスには、Ｎ−ベンゾイル−ＤＬ−アルギニン−Ｂ−ナフチルアミド（ＢＡＮＡ）がしみ込ませてある。歯肉下のプラーク試料をこの下側のマトリクスに適用し、次に、蒸留水を上側のマトリクスに適用する。次に、下側のマトリクスを折り重ね、上側のマトリクスと接触させる。上側のバフ試薬マトリクス（ｂｕｆｆ  ｒｅａｇｅｎｔ  ｍａｔｒｉｘ）は、酵素反応の加水分解生成物の１つと反応して、青色を生成する、色素生成性ジアゾ試薬を含有する。プラスチック製ストライプを３５℃で５分間に設定したインキュベーターに挿入すると、この反応が起こる。ＢＡＮＡ基質は、少なくとも３種の異なる口腔細菌を検出するが、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓに特異的ではない。このＢＡＮＡ試験は、脳障害のリスクにあるヒト、または処置に適格なヒトを特定するために使用することができた。あるいは、ＢＡＮＡ基質は、類似のフォーマットまたは液体アッセイにおいて、ＲｇｐＡ、ＲｇｐＢおよび／またはＫｇｐ特異的基質に置きかえることができる。
【０１８２】
これらに限定されないが、本出願において記載されているものを含めた、活性ジンジパインに結合する試薬を使用して、活性なジンジパインだけを沈殿させて、次いで、例えば、モノクローナルを用いて検出することができる。あるいは、抗体または他の高親和結合剤を使用して、ＣＳＦからジンジパインを沈殿させて、次いで、標識基質を用いたプロテアーゼアッセイを行うことができ、これは、標識基質が消化されるときに、蛍光または比色分析の読み取りを増大させる。
【０１８３】
本発明はまた、ヒトの脳における、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓまたはそのジンジパインのイメージングに基づいた診断も提供する。これらに限定されないが、本発明の化合物およびどこかで記載されている他の化合物を含めた、ジンジパインに結合するいかなる薬剤も、Ｆ１８または他のＸ線撮影用マーカーにより標識することができ、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ走査を使用して視覚化することができる。陽性のシグナルは、本明細書に記載されている化合物による処置を示す。好ましい非限定的な実施形態では、本明細書に記載されている化合物４５は、「クリックケミストリー」により修飾されて、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ（図４）を用いて画像化することができる放射性標識が導入される。
【０１８４】
したがって、本発明の別の態様は、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に関連する疾患または状態を処置する方法であって、患者から生体試料を得るステップと、生体試料中のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ由来のジンジパインの存在または非存在を決定するために試料をアッセイするステップと、ジンジパインが生体試料中に存在する場合、患者に治療剤を投与するステップとを含む方法を提供する。一部の実施形態では、生体試料は、脳脊髄液試料である。一部の実施形態では、アッセイするステップは、患者脳脊髄液に対してジンジパインのＥＬＩＳＡを行うことを含む。一部の実施形態では、活性薬剤は、本明細書に記載されている式ＩＩまたは式Ｉによる化合物である。
【実施例】
【０１８５】
ＶＩＩＩ．実施例
（実施例１）
ジンジパインで処置された動物は、神経変性を示す。
１群あたりｎ＝６の成体の雄マウス（ＣＤ−１、約２５ｇ）に麻酔をかけ、標準定位脳技法を使用して海馬内に片側から注射した。注射前に、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓから精製したジンジパインＲｇｐＢおよびＫｇｐを１０μｇ／ｍｌに希釈した。組織学的分析のために、術後７日目に、これらの動物に麻酔をかけて潅流させ、安楽死させて脳を取り出し、切片にした。次に、海馬の切片にＦｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ染色を行い、神経変性について評価した（Ｓｃｈｍｕｅｄ  ＬＣおよびＨｏｐｋｉｎｓ  ＫＪ、２０００年）。Ｆｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ染色は、変性しているニューロンの細胞本体、樹状突起、軸索および軸索終末を特定するが、健常なニューロン、ミエリンまたは血管要素は染色しない。
【０１８６】
フルオレセインまたはフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）を可視化するのに好適なフィルター系を使用する、落射蛍光顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ  Ｍｉｃｒｏｐｈｏｔ  ＦＸＡ）を用いて脳切片を検査した。画像は、Ｌｅｉｃａ  ＤＣカメラおよび画像解析ソフトウェア（Ｌｅｉｃａ  ＩＭ５０）を用いて取得した。Ｆｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ  Ｃに陽性の変性ニューロンは、暗色のバックグラウンドに対して、明るい黄緑色に見え、ジンジパインにより処置された動物群においてはっきりと特定された。Ｆｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ  Ｃに陽性の細胞は、ビヒクル処置群においては観察されなかった（図１）。
（実施例２）
Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓに感染した動物は、神経変性を示す。
雌のＢａｌｂ／ｃマウスをＨａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（米国）から得て、順応させた。８週齢のマウスに、６週間、１週間あたり２回、２％Ｎａ−ＣＭＣ中の１０９  ＣＦＵのＷ８３  Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓを経口チャレンジした。対照マウスは、２％Ｎａ−ＣＭＣだけのモックチャレンジを受けた。最初の感染の６週間後、マウスを屠殺して潅流し、脳を切り取った。脳を包埋して切片にした。ＲｇｐＢの場合の１８Ｅ６の免疫組織化学により、３／６のマウスにおいて、脳の浸潤が示された。神経変性に対するＤｅ  Ｏｌｍｏｓ銀染色により、浸潤を有する３匹のマウス中２匹に染色が示された（図２）。
（実施例３）
Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓに感染した動物は、認知機能障害を示す。
【０１８７】
雌のＢａｌｂ／ｃＪマウスをＴａｃｏｎｉｃから得て、順応させた。８週齢のマウスに、４回の投与を３日目毎に、１０９  ＣＦＵのＷ８３  Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓを経口チャレンジした。
【０１８８】
認知機能に関する新奇物体認識課題を最初の感染の６週間後に開始した。物体に慣れされる前日に、マウスを試験用ケージに２分間慣れさせた。物体に慣れさせる当日に、マウスに５分間、２つの木製の青い長方形を提示した。２４時間後、マウスに３分間、青い長方形１つ（右側）およびピンク色のハート１つ（左側、物体はどちらも木製）を提示した。マウスが物体から２ｃｍ以内に鼻を向けた時間を記録した。両方の物体に対して平均で等しい時間を費やした（これは認知機能障害を示す）感染マウスに比べると、モック感染マウスは新奇物体の探索に平均でより多くの時間を費やした（図３）。
（実施例４）
１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン（Ｃｏｒｅ  Ｒ）の調製。
【化３６】
2018534300.tif 000041
【０１８９】
ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［メトキシ（メチル）カルバモイル］−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバメート（ｉｉ）。ＴＨＦ（１２０ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（２５．００ｇ、４７．４７ｍｍｏｌ、１．００当量）、Ｎ−メトキシメタンアミン（９．２６ｇ、９４．９４ｍｍｏｌ、２．００当量）、ＤＩＰＥＡ（１８．４１ｇ、１４２．４１ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ＨＡＴＵ（２１．６６ｇ、５６．９６ｍｍｏｌ、１．２０当量）を加えた。この混合物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により、出発物質が完全に消費されたことが示された。次に、水（２００ｍＬ）を加え、ＥＡ（３００ｍＬ×３）により抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると粗生成物が得られ、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［メトキシ（メチル）カルバモイル］−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバメート（２５．４０ｇ、４４．５８ｍｍｏｌ、９３．９％収率）が白色固体として得られた。
【０１９０】
ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバメート（ｉｉｉ）。ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の１，３−ベンゾチアゾール（５．９３ｇ、４３．９０ｍｍｏｌ、５．００当量）の混合物に、ｎ−ＢｕＬｉ（ＴＨＦ中２．５Ｍ、７ｍＬ）をＮ２下、−６５℃で滴下して加えた。この混合物をＮ２下、−６５℃で１時間撹拌した。次に、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［メトキシ（メチル）カルバモイル］−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバメート（５．００ｇ、８．７８ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液を、Ｎ２下、−６５℃で滴下して加え、この反応混合物をＮ２下、−６５℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により、出発物質が完全に消費されたことが示された。飽和ＮＨ４Ｃｌ（水性、８０ｍＬ）を加え、この混合物をＥＡ（１００ｍＬ×２）により抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると粗生成物が得られ、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバメート（１６．２０ｇ、２５．１６ｍｍｏｌ、７１．６％収率；６５．９％ｅｅ）が白色固体として得られた。
【０１９１】
１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン（Ｃｏｒｅ  Ｒ）。ＥＡ（１００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバメート（１６．２０ｇ、２５．１６ｍｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、ＨＣｌ／ＥＡ（４Ｍ、１０ｍＬ）を加えた。この混合物を３０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により、出発物質が完全に消費されたことが示された。この混合物をろ過すると、１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（１１．３０ｇ、１９．４８ｍｍｏｌ、７７．４％収率）が黄色固体として得られた。
（実施例５）
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（１）の調製。
【化３７】
2018534300.tif 000042
【０１９２】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（１ａ）。ＴＨＦ（５ｍＬ）中の１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（５００ｍｇ、８６１．８３μｍｏｌ、１．００当量）、シクロペンタンカルボン酸（１１８ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．２０当量）、ＤＩＰＥＡ（３３４．１５ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ＨＡＴＵ（３９３ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．２０当量）を０℃で加え、この反応物を、０℃で１時間、撹拌した。ＴＬＣにより、反応が完了したことが示され、次にＥＡ（３０ｍＬ）を加え、水（２０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると粗製物が得られ、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（２７０ｍｇ、４２１．９９μｍｏｌ、４８．９％収率）が黄色固体として得られた。
【０１９３】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタン−カルボキサミド（１）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、およびチオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタン−カルボキサミド（２７０ｍｇ、４２１．９９μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この反応物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、反応が完了したことが示された。水（３０ｍＬ）を加え、次にこの混合物を凍結乾燥すると、粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタンカルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（２２ｍｇ、４３．８７μｍｏｌ、１０．４％収率）が白色固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３８８．１（ＭＨ＋）。
（実施例６）
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミド（２）の調製。
【化３８】
2018534300.tif 000043
【０１９４】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド（２ａ）。ＴＨＦ（５ｍＬ）中の１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（４００ｍｇ、６８９．４６μｍｏｌ、１．００当量）、酪酸（７３ｍｇ、８２７．３６μｍｏｌ、１．２０当量）、ＤＩＰＥＡ（２６７ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ＨＡＴＵ（３１５ｍｇ、８２７．３６μｍｏｌ、１．２０当量）を０℃で加えた。次に、この混合物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により、出発物質が完全に消費されたことが示された。ＥＡ（３０ｍＬ）を加え、この混合物を水（１０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると粗生成物が得られ、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド（３００ｍｇ、４８８．７７μｍｏｌ、７０．９％収率）が黄色固体として得られた。1H  NMR  (CD3OD,  400  MHz)  d  8.22  (d,  J  =  7.6,  1H),  8.15  (d,  J  =  7.6,  1H),  7.70  −  7.62  (m,  2H),  5.76  −  5.71  (m,  1H),  3.29  −  3.24  (m,  2H),  2.28  (t,  J  =  7.3,  2H),  2.22  −  2.15  (m,  1H),  1.85  −  1.75  (m,  3H),  1.67  (hex,  J  =  7.3,  2H),  0.95  (t,  J  =  7.3,  3H).
【０１９５】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミド（２）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、チオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド（２５０ｍｇ、４０７．３１μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この反応物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。水（５０ｍＬ）を加え、この混合物を凍結乾燥すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミドトリフルオロ酢酸塩（１７．４９ｍｇ、３６．７８μｍｏｌ、９．０３％収率）が淡黄色固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３６２．１（ＭＨ＋）。
（実施例７）
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（３）の調製。
【化３９】
2018534300.tif 000044
【０１９６】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ベンズアミド（３ａ）。ＤＣＭ（５ｍＬ）中の１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（５００ｍｇ、８６１．８３μｍｏｌ、１．００当量）、ＴＥＡ（２６２ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ＤＣＭ（１ｍＬ）中の塩化ベンゾイル（１２１ｍｇ、８６１．８３μｍｏｌ、１．００当量）の溶液をＮ２下、０℃で滴下して加えた。次に、この混合物を０℃で０．５時間、撹拌した。ＴＬＣにより、反応が完了したことが示された。ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、水（１５ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると粗製物が得られ、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ベンズアミド（３００ｍｇ、４６３．１０μｍｏｌ、５３．７％収率）が黄色固体として得られた。1H  NMR  (CD3OD,  400  MHz)  d  8.25  (d,  J  =  7.6,  1H),  8.26  (d,  J  =  7.6,  1H),  7.91  (d,  J  =  6.8,  2H),  7.66  −  7.46  (m,  5H),  5.92  (dd,  J  =  9.6,  J  =  4.0,  1H),  3.37  −  3.33  (m,  2H),  2.37  −  2.27  (m,  1H),  2.06  −  1.83  (m,  3H).
【０１９７】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（３）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、チオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ベンズアミド（３００ｍｇ、４６３．１０μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この反応物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。水（３０ｍＬ）を加え、この混合物を凍結乾燥すると粗製物が得られ、これを分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ベンズアミドトリフルオロ酢酸塩（３６．４０ｍｇ、７１．４４μｍｏｌ、１５．４％収率）が淡黄色固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３９６．１（ＭＨ＋）。
（実施例８）
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］−２−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（４）の調製。
【化４０】
2018534300.tif 000045
【０１９８】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］−２−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（４ａ）。ＴＨＦ（５ｍＬ）中の１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（４００ｍｇ、６８９．４６μｍｏｌ、１．００当量）、２−（トリフルオロメチル）安息香酸（１５７ｍｇ、８２７．３６μｍｏｌ、１．２０当量）、ＤＩＰＥＡ（２６７ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、０℃でＨＡＴＵ（３１６ｍｇ、８２７．３６μｍｏｌ、１．２０当量）を加えた。次に、この反応物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により、反応が完了したことが示された。ＥＡ（２０ｍＬ）を加え、水（１０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると粗生成物が得られ、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］−２−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（３００ｍｇ、４１９．１１μｍｏｌ、６０．８％収率）が黄色固体として得られた。
【０１９９】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］−２−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（４）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、チオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］−２−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（３００ｍｇ、４１９．１１μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この反応物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。水（５０ｍＬ）を加え、この混合物を凍結乾燥すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］−２−（トリフルオロメチル）ベンズアミドトリフルオロ酢酸塩（３４．６１ｍｇ、５９．９３μｍｏｌ、１４．３％収率）が淡黄色固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝４６４．１（ＭＨ＋）。
（実施例９）
４−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミド（５）の調製。
【化４１】
2018534300.tif 000046
【０２００】
ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［４−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］アミノ］−４−オキソ−ブチル］カルバメート（５ａ）。ＤＭＦ（５ｍＬ）中の１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（４００ｍｇ、６８９．４６μｍｏｌ、１．００当量）、４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタン酸（１５４ｍｇ、７５８．４１μｍｏｌ、１．１０当量）、ＤＩＰＥＡ（２６７ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ＨＡＴＵ（３１５ｍｇ、８２７．３６μｍｏｌ、１．２０当量）を加え、次に、この反応物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により、反応が完了したことが示された。ＥＡ（５０ｍＬ）を加え、この混合物を水（２０ｍＬ×２）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると粗生成物が得られ、これをシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝３：１〜ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［４−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］アミノ］−４−オキソ−ブチル］カルバメート（２００ｍｇ、２７４．３８μｍｏｌ、３９．８％収率）が赤色固体として得られた。
【０２０１】
４−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミド（５）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、チオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［４−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］アミノ］−４−オキソ−ブチル］カルバメート（２００ｍｇ、２７４．３８μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この反応物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。水（５０ｍＬ）を加え、この混合物を凍結乾燥すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、４−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミドトリフルオロ酢酸塩（２０．５５ｍｇ、４１．９０μｍｏｌ、１５．３％収率）が白色固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３７７．１（ＭＨ＋）。
（実施例１０）
（３Ｓ）−Ｎ−［（１Ｒ／Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ピペリジン−３−カルボキサミド（６／７）の調製。
【化４２】
2018534300.tif 000047
【０２０２】
ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］ピペリジン−１−カルボキシレート（６ａ）。ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（３Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−３−カルボン酸（１９０ｍｇ、８２７．３５μｍｏｌ、１．２０当量）、ＤＩＰＥＡ（２６７ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（２６７ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ、３．００当量）を０℃で加え、この混合物を０℃で０．５時間、撹拌した。次に、１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（４００ｍｇ、６８９．４６μｍｏｌ、１．００当量）を加え、この反応混合物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。ＥＡ（５０ｍＬ）を加え、この混合物を水（２０ｍＬ×２）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると、ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］ピペリジン−１−カルボキシレート（３００ｍｇ、３９７．３７μｍｏｌ、５７．６％収率）が黄色固体として得られた。
【０２０３】
（３Ｓ）−Ｎ−［（１Ｒ／Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ピペリジン−３−カルボキサミド（６／７）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、チオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］ピペリジン−１−カルボキシレート（３００ｍｇ、３９７．３７μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この混合物を３０℃で１６時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。水（３０ｍＬ）を加え、この混合物を凍結乾燥すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、（３Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ピペリジン−３−カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（２８．５５ｍｇ、９５．２％純度、化合物６）および（３Ｓ）−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ピペリジン−３−カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（１３．３３ｍｇ、７５．７％純度、化合物７）が淡黄色固体として得られた。化合物６および化合物７についてＭＳ  ｍ／ｚ＝４０３．１（ＭＨ＋）。
（実施例１１）
（３Ｓ）−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ピロリジン−３−カルボキサミド（８）の調製。
【化４３】
2018534300.tif 000048
【０２０４】
ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］ピロリジン−１−カルボキシレート（８ａ）。ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（３Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピロリジン−３−カルボン酸（２６６ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ、１．２０当量）、ＤＩＰＥＡ（４００ｍｇ、３．０９ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ＨＡＴＵ（４７０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ、１．２０当量）を０℃で加え、この混合物を０℃で０．５時間、撹拌した。次に、１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（６００ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．００当量）を加え、この反応混合物を３０℃でさらに２時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。ＥＡ（３０ｍＬ）を加え、この混合物を水（１０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると、ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］ピロリジン−１−カルボキシレート（５００ｍｇ、粗製物）が黄色固体として得られた。
【０２０５】
（３Ｓ）−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ピロリジン−３−カルボキサミド（８）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、チオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］ピロリジン−１−カルボキシレート（５００ｍｇ、６７４．８３μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この混合物を３０℃で４時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。水（５０ｍＬ）を加え、この混合物を凍結乾燥すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、（３Ｓ）−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ピロリジン−３−カルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（３８．９６ｍｇ、７７．５３μｍｏｌ、１１．５％収率）が白色固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３８９．２（ＭＨ＋）。
（実施例１２）
（１Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（９／１０）の調製。
【化４４】
2018534300.tif 000049
【０２０６】
ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］シクロペンチル］カルバメート（９ａ）。ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−アミノシクロペンタンカルボン酸、ＤＩＰＥＡ（４０１ｍｇ、３．１０ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、ＨＡＴＵ（４７２ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ、１．２０当量）を０℃で加え、この混合物を０℃で０．５時間、撹拌した。次に、１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（６００ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．００当量）を加え、この混合物を３０℃で２時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。ＥＡ（５０ｍＬ）を加え、この混合物を水（１０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮するとｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］シクロペンチル］カルバメート（６００ｍｇ、粗製物）が黄色固体として得られた。
【０２０７】
（１Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（９／１０）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、チオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］シクロペンチル］カルバメート（４００ｍｇ、５２９．８３μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この混合物を３０℃で４時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。水（５０ｍＬ）を加え、この混合物を凍結乾燥すると粗生成物が得られた。この粗生成物を分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、（１Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタンカルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（１６５．５３ｍｇ、３２０．４６μｍｏｌ、６０．５％収率、ピーク１、化合物９）および（１Ｓ，３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］シクロペンタンカルボキサミドトリフルオロ酢酸塩（３８．９６ｍｇ、７５．４２μｍｏｌ、１４．２％収率、ピーク２、化合物１０）が淡黄色固体として得られた。化合物９および化合物１０についてＭＳ  ｍ／ｚ＝４０３．１（ＭＨ＋）。
（実施例１３）
（２Ｓ）−２−アセトアミド−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミド（１１／１２）の調製。
【化４５】
2018534300.tif 000050
【０２０８】
ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］プロピル］カルバメート（１１ｃ）。ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタン酸（２５１ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ、１．２０当量）、ＨＡＴＵ（４７０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ、１．２０当量）、ＤＩＰＥＡ（４００ｍｇ、３．０９ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物を０℃で０．５時間、撹拌した。次に、１−［（４Ｓ）−４−アミノ−５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−５−オキソ−ペンチル］−３−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］グアニジン塩酸塩（６００ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１．００当量）を加え、この混合物を３０℃で２時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。ＥＡ（５０ｍＬ）を加え、この混合物を水（２０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると粗生成物が得られ、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］プロピル］カルバメート（５００ｍｇ、６８５．９５μｍｏｌ、６６．６％収率）が黄色固体として得られた。
【０２０９】
（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド（１１ｂ）。ＥＡ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−［［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］カルバモイル］プロピル］カルバメート（５００ｍｇ、６８５．９５μｍｏｌ、１．００当量）の混合物に、ＨＣｌ／ＥＡ（４Ｍ、４ｍＬ）を加えた。この混合物を３０℃で３時間、撹拌した。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝１：２）により、出発物質が完全に消費されたことが示された。この混合物をろ過すると、（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド塩酸塩（４００ｍｇ、粗製物）が黄色固体として得られた。
【０２１０】
（２Ｓ）−２−アセトアミド−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド（１１ａ）。ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド塩酸塩（４００ｍｇ、６０１．２６μｍｏｌ、１．００当量）、ＴＥＡ（１８３ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、３．００当量）の混合物に、塩化アセチル（９５ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ、２．００当量）を、Ｎ２下、０℃で滴下して加えた。この混合物をＮ２下、０℃で０．５時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、この混合物を水（１０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮すると、（２Ｓ）−２−アセトアミド−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド（３００ｍｇ、４４７．２０μｍｏｌ、７４．４％収率）が黄色固体として得られた。
【０２１１】
（２Ｓ）−２−アセトアミド−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミド（１１／１２）。ＴＦＡ（１．９ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．０５ｍＬ）、チオアニソール（０．０５ｍＬ）の混合物に、（２Ｓ）−２−アセトアミド−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ブタンアミド（３００ｍｇ、４４７．２０μｍｏｌ、１．００当量）を０℃で加えた。次に、この混合物を３０℃で４時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示された。水（５０ｍＬ）を加え、この混合物を凍結乾燥すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＴＦＡ）により精製すると、（２Ｓ）−２−アセトアミド−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミドトリフルオロ酢酸塩（２４．１０ｍｇ、４５．２５μｍｏｌ、１０．１％収率、ピーク１、化合物１１）および（２Ｓ）−２−アセトアミド−Ｎ−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−カルボニル）−４−グアニジノ−ブチル］ブタンアミドトリフルオロ酢酸塩（２１．２９ｍｇ、３９．９８μｍｏｌ、８．９％収率、ピーク２、化合物１２）が淡黄色固体として得られた。化合物１１および化合物１２についてＭＳ  ｍ／ｚ＝４１９．１（ＭＨ＋）。
（実施例１４）
Ｎ−［（１Ｓ）−４−グアニジノ−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（１３）の調製。
【化４６】
2018534300.tif 000051
【０２１２】
（２Ｓ）−２−アミノ−５−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（１３ｅ）。ＥＡ（５０ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（３０．００ｇ、５６．９６ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＨＣｌ／ＥＡ（４Ｍ、１００ｍｌ、７．０２当量）を加えた。この反応混合物を１５℃で３時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、出発物質が完全に消費されたことが示され、所望の生成物が検出された。この混合物を濃縮すると残留物が得られ、これをＥＡ（２００ｍＬ）により洗浄した。固体を採集すると、（２Ｓ）−２−アミノ−５−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸塩酸塩（２８．００ｇ）が白色固体として得られた。これをいずれのさらなる精製もすることなく直接使用した。1H  NMR  ((CD3)2SO,  400  MHz)  d  8.41  (d,  J  =  7.2,  1H),  7.88  (t,  J  =  5.6,  1H),  7.62  −  7.56  (m,  1H),  5.25  (d,  J  =  17.6,  1H),  5.18  (d,  J  =  17.6,  1H),  4.34  −  4.30  (m,  1H),  3.13  −  3.09  (m,  2H),  2.71  −  2.66  (m,  1H),  1.77  −  1.65  (m,  3H),  1.62  −  1.45  (m,  9H).
【０２１３】
（２Ｓ）−２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）−５−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（１３ｄ）。Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−アミノ−５−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）−スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸塩酸塩（２５．００ｇ、５４．００ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＮａＯＨ（２．１６ｇ、５４．００ｍｍｏｌ、１．００当量）およびＮａ２ＣＯ３（２３．００ｇ、２１７．０８ｍｍｏｌ、４．０２当量）を加えた。次に、この混合物を０℃に冷却し、ＥＡ（８０．００ｍＬ）中の塩化シクロペンタンカルボニル（８．５９ｇ、６４．８０ｍｍｏｌ、１．２０当量）を上記溶液に滴下して加えた。次に、この混合物を１５℃で１４時間、撹拌した。ＬＣ−ＭＳにより、所望の生成物が検出されたことが示された。この混合物を固体ＫＨＳＯ４によりｐＨ＝４〜５に調整し、得られた溶液をＥＡ（５００ｍＬ×２）により抽出した。有機層を合わせ、飽和ブライン（１０００ｍＬ）により洗浄し、濃縮すると（２Ｓ）−２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）−５−［［Ｎ−［（２，２，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−ベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（２３．３６ｇ、粗製物）が黄色油状物として得られた。これをさらに精製することなく直接使用した。
【０２１４】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ジアゾアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（１３ｃ）。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−（シクロペンタンカルボニルアミノ）−５−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（２．００ｇ、３．８３ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＮＭＭ（３８７ｍｇ、３．８３ｍｍｏｌ、１．００当量）およびカルボノクロリド酸イソブチル（ｉｓｏｂｕｔｙｌ  ｃａｒｂｏｎｏｃｈｌｏｒｉｄａｔｅ）（５２３ｍｇ、３．８３ｍｍｏｌ、１．００当量）を加えた。この混合物を、Ｎ２下、−２０℃で１時間、撹拌した。次に、ジアゾメタン（２４２ｍｇ、５．７５ｍｍｏｌ、１．５０当量）を加えた。この混合物を０℃で４時間、撹拌した。この混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）により希釈し、ＥＡ（３０ｍＬ×２）により抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮すると残留物が得られ、これをシリカゲルクロマトグラフィー（ＥＡ）により精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ジアゾアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（３００ｍｇ、５４８．７７μｍｏｌ、１４．３３％収率）が黄色固体として得られた。
【０２１５】
Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ブロモアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（１３ｂ）。ＥＡ（１０ｍＬ）中のＮ−［（１Ｓ）−１−（２−ジアゾアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（２５０ｍｇ、４５７．３１μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＨＢｒ／ＡｃＯＨ（１５０μＬ、純度：３３％）を加え、−２０℃で１０分間、撹拌した。この混合物をｐＨ＝８まで飽和ＮａＨＣＯ３により塩基性にして、ＥＡ（２０ｍＬ×３）により抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮すると、Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ブロモアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（２００ｍｇ、粗製物）が黄色固体として得られた。
【０２１６】
Ｎ−［（１Ｓ）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（１３ａ）。ＤＭＦ（１０．００ｍＬ）中のＮ−［（１Ｓ）−１−（２−ブロモアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（２００ｍｇ、３３３．５７μｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＫＦ（５８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ、３．００当量）および２，３，５，６−テトラフルオロフェノール（６６ｍｇ、４００．２８μｍｏｌ、１．２０当量）を加えた。この混合物を２０℃で１２時間、撹拌した。この混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）により希釈し、ＥＡ（２０ｍＬ×２）により抽出した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ×５）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。この残留物を分取ＴＬＣ（ＰＥ／ＥＡ＝１／２）により精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（２００ｍｇ、２９２．０８μｍｏｌ、８７．５６％収率）が白色固体として得られた。
【０２１７】
Ｎ−［（１Ｓ）−４−グアニジノ−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（１３）。ＴＦＡ（１９．３８ｇ、１６９．９８ｍｍｏｌ、５８１．９６当量）、チオアニソール（３５０ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ、９．６５当量）、およびＨ２Ｏ（５ｍｇ、２９２μｍｏｌ、１．００当量）中のＮ−［（１Ｓ）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］シクロペンタンカルボキサミド（２００ｍｇ、２９２．０８μｍｏｌ、１．００当量）の混合物。この混合物を０℃で１時間、撹拌した。この混合物を濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＨＣｌ）により精製すると、Ｎ−［（１Ｓ）−４−グアニジノ−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］−シクロペンタンカルボキサミド塩酸塩（３６．７０ｍｇ、７８．２７μｍｏｌ、２６．８％収率）が白色固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝４３３．２（ＭＨ＋）。
（実施例１５）
３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−４−グアニジノ−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］ベンズアミド（１４）の調製。
【化４７】
2018534300.tif 000052
【０２１８】
（２Ｓ）−２−［（３−アジドベンゾイル）アミノ］−５−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈイソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（１４ｄ）。Ｈ２Ｏ／ＥＡ（１／１、１００ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−アミノ−５−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸塩酸塩（５．００ｇ、１１．７２ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＮａＯＨ（４６９ｍｇ、１１．７２ｍｍｏｌ、１．００当量）、Ｎａ２ＣＯ３（１．２４ｇ、１１．７２ｍｍｏｌ、１．００当量）、および塩化３−アジドベンゾイル（２．１３ｇ、１１．７２ｍｍｏｌ、１．００当量）を加えた。この混合物を２０℃で５時間、撹拌した。この混合物をＫＨＳＯ４によりｐＨ＝４まで酸性にし、減圧下で濃縮した。この残留物をＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１により溶出したシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、（２Ｓ）−２−［（３−アジドベンゾイル）アミノ］−５−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈイソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（３．５０ｇ、粗製物）が白色固体として得られた。1H  NMR  ((CD3)2SO,  400  MHz)  d  9.11  (d,  J  =  7.2,  1H),  7.86  (t,  J  =  5.6,  1H),  7.76  (d,  J  =  7.3,  1H),  7.64  (s,  1H),  7.56  −  7.52  (m,  2H),  7.33  (d,  J  =  6.9,  1H),  5.35  (d,  J  =  17.6,  1H),  5.28  (d,  J  =  17.6,  1H),  4.61  −  4.57  (m,  1H),  3.23  −  3.06  (m,  2H),  1.94  −  1.85  (m,  1H),  1.77  −  1.71  (m,  1H),  1.60  −  1.44  (m,  2H).
【０２１９】
３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ジアゾアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ベンズアミド（１４ｃ）。ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−［（３−アジドベンゾイル）アミノ］−５−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ペンタン酸（３．５０ｇ、６．１２ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＮＭＭ（６１９ｍｇ、６．１２ｍｍｏｌ、１．００当量）およびカルボノクロリド酸イソブチル（８３６ｍｇ、６．１２ｍｍｏｌ、１．００当量）を加えた。この混合物を−２０℃で１時間、撹拌した。次に、ジアゾメタン（２５７ｍｇ、６．１２ｍｍｏｌ、１．００当量）を加え、この溶液を−２０℃で３時間、撹拌した。この溶液を精製することなく次のステップで直接使用した。
【０２２０】
３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ブロモアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ベンズアミド（１４ｂ）。３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ジアゾアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ベンズアミド（３．５０ｇ、５．８８ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＨＢｒ／ＡｃＯＨ（１．４４ｇ、５．８８ｍｍｏｌ、１．００当量、純度：３３％）を加えた。この混合物を−２０℃で２０分間、撹拌した。この混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）により希釈し、ＥＡ（５０ｍＬ×３）により抽出した。有機層を合わせ、ブライン（５０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮すると、３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ブロモアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ベンズアミド（４．００ｇ、粗製物）が黄色油状物として得られた。
【０２２１】
３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］ベンズアミド（１４ａ）。ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（２−ブロモアセチル）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］ブチル］ベンズアミド（４．００ｇ、６．１７ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、ＫＦ（１．０７ｇ、１８．５０ｍｍｏｌ、３．００当量）および２，３，５，６−テトラフルオロフェノール（１．２３ｇ、７．４０ｍｍｏｌ、１．２０当量）を加えた。この混合物を２０℃で１２時間、撹拌した。この混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）により希釈し、ＥＡ（１００ｍＬ）により抽出した。有機層をブライン（１００ｍＬ×５）により洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。この残留物をＰＥ：ＥＡ＝１：１により溶出したシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］ベンズアミド（３５０ｍｇ、４７７．０１μｍｏｌ、７．７％収率）が白色固体として得られた。
【０２２２】
３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−４−グアニジノ−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］ベンズアミド（１４）。ＴＦＡ（１０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．２５ｍＬ）、およびチオアニソール（０．２５ｍＬ）中の３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−４−［［Ｎ−［（１，１，４，６，７−ペンタメチル−３Ｈ−イソベンゾフラン−５−イル）スルホニル］カルバムイミドイル］アミノ］−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］ベンズアミド（３４０ｍｇ、４６３．３９μｍｏｌ、１．００当量）の溶液を、０℃で１時間、撹拌した。この混合物を濃縮し、この残留物を分取ＨＰＬＣ（ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＨＣｌ）により精製すると、３−アジド−Ｎ−［（１Ｓ）−４−グアニジノ−１−［２−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）アセチル］ブチル］ベンズアミド塩酸塩（１２０ｍｇ、２４９．２７μｍｏｌ、５３．８％収率）が白色固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝４８２．１（ＭＨ＋）。
（実施例１６）
本発明の化合物によるアルギニンジンジパインの阻害。
【０２２３】
ＲｇｐＢの活性を阻害する本発明の化合物の能力を、Ｂａｒｒｅｔ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ．  １９８０年、１８７巻（３号）、９０９頁に記載されているものと類似の蛍光発生アッセイ（ｆｕｌｕｏｒｏｇｅｎｉｃ  ａｓｓａｙ）で測定した。具体的なアッセイ条件は、以下の通りであった。緩衝液：ｐＨ＝７．５、１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、７５ｍＭ  ＮａＣｌ、２．５ｍＭ  ＣａＣｌ２、１０ｍＭシステイン、すべてを添加した後に１％ＤＭＳＯ。タンパク質：Ｐｉｋｅら  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  １９９４年、２６９巻（１号）、４０６頁ならびにＰｏｔｅｍｐａおよびＮｇｕｙｅｎ．  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃ．  ２００７年、２１．２０．１〜２１．２０．２７に記載されている通り、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓの培養物から単離した０．０２ｎＭ  ＲｇｐＢ。蛍光発生基質：１０ｕＭのＢｏｃ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−ＭＣＡ。時間＝９０分間。温度＝３７℃。各化合物：１００ｕＭまたは１００ｎＭのいずれかで開始し、それより低い濃度は段階的３倍希釈により生成された、１０通りの濃度。各化合物に関する濃度範囲を試験することにより、ＲｇｐＢの活性を５０％阻害するのに必要な濃度（「ＩＣ５０」）を決定した。記載されているアッセイ条件下では、シグナル対ノイズ比は優れており、Ｚファクターは０．７を超えた。
【０２２４】
本明細書に記載されている化合物の阻害活性をＫｇｐ、ＲｇｐＢ、ＲｇｐＡおよびトリプシンに対して試験した。本明細書に記載されている化合物番号４〜８、１０、１１、および１４のそれぞれは、１０ｎＭ未満のＲｇｐＢ  ＩＣ５０値を示した。化合物番号２、３、９、および１２のそれぞれは、２ｎＭ未満のＲｇｐＢ  ＩＣ５０値を示した。化合物番号１および化合物番号１３はそれぞれ、１ｎＭ未満のＲｇｐＢ  ＩＣ５０値を示した。
【０２２５】
本明細書に記載されている化合物番号１、３、１１、および１２のそれぞれは、５ｎＭ未満のＲｇｐＡ  ＩＣ５０値を示した。化合物番号１３および化合物番号１４はそれぞれ、５００ｐＭ未満のＲｇｐＡ  ＩＣ５０値を示した。
【０２２６】
化合物番号１〜１２のそれぞれは、１０μＭを超えるＫｇｐ  ＩＣ５０値を示した。化合物番号１４は、４５０ｎＭを超えるＫｇｐ  ＩＣ５０値を示し、化合物番号１３は、１５０ｎＭを超えるＫｇｐ  ＩＣ５０値を示した。化合物番号１〜３および５〜１０のそれぞれは、１μＭを超えるトリプシンＩＣ５０値を示した。化合物番号４は、３５０ｎＭを超えるトリプシンＩＣ５０値を示し、化合物番号１１および１２はそれぞれ、４０ｎＭを超えるトリプシンＩＣ５０値を示した。
（実施例１７）
本発明の化合物を使用するＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ毒性からの神経芽細胞腫細胞のレスキュー。
【０２２７】
ＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽細胞腫細胞を、確立された方法［Ｓａｂｅｒｉ  Ｓ．ら、Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ、２０１３年、３３巻：５  ７４７〜７５１頁］に基づいて培養した。Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−３０８株をブレインハートインフュージョン寒天（ＢＨＡ）にストリークし、プレートを８０％  Ｎ２、１０％  ＣＯ２、および１０％  Ｈ２の雰囲気を有する嫌気性ワークステーションにおいて３７℃で７２時間、インキュベートした。プレートを試験のために嫌気性ワークステーションから取り出し、周囲雰囲気下で処理した。細菌を回収し、完全培地−ペニシリン／ストレプトマイシン（ペニシリン／ストレプトマイシンを含まない）中に懸濁させた。懸濁物の濁度をＭｉｃｒｏＳｃａｎ（登録商標）濁度計（Ｓｉｅｍｅｎｓ）を使用して測定して、約６×１０８ｃｆｕ／ｍＬ（ＭＯＩ  １：１０００について）に等価である０．５に調整し、細胞と共に４８時間インキュベートした。４μｇ／ｍＬの化合物１３を細菌の導入時に培地に加えた。結果を、デジタル顕微鏡カメラ（図５）を使用して記録した。Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓは、細胞に毒性である一方、化合物１３は、毒性を予防した。本発明の他の化合物も化合物１３について記載したように試験した。
（実施例１８）
Ｒｇｐ阻害剤は、ｉｎ  ｖｉｖｏでＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓによる脳組織の感染を予防する。
【０２２８】
ＢａｌｂＣマウスに歯矯正（ｔｏｏｔｈ  ｌｉｇａｔｕｒｅ）を行い、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  Ｗ８３（２％カルボキシメチルセルロース中１×１０９ＣＦＵ）またはビヒクルでの口腔洗浄により６週間、感染させた。２５％  Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７中の化合物１３を３５〜７０日目に、ＢＩＤ皮下送達した。７０日目に、マウスを屠殺し、ＰＢＳにより潅流した後、解剖した。ＤＮＥａｓｙ  Ｂｌｏｏｄ＆Ｔｉｓｓｕｅ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して脳の４分の１からＤＮＡを単離した。ＲｇｐＢのフォワードプライマーおよびリバースプライマーを、脳組織中のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ＤＮＡを定量化するｑＰＣＲのために使用した。フォワードプライマー配列は、５’−ＡＧＣＡＡＣＣＡＧＣＴＡＣＣＧＴＴＴＡＴ−３’であった。リバースプライマー配列は、５’−ＧＴＡＣＣＴＧＴＣＧＧＴＴＴＡＣＣＡＴＣＴＴ−３’であった。プローブ配列は、５’−６−ＦＡＭ−ＴＡＣＣＡＴＧＴＴＴＣＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＴＧＡ−ＴＡＭＲＡ−３’であった。図６に示されている通り、化合物１３は、脳内のＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ感染に対する効力を実証する。
（実施例１９）
ジンジパイン阻害剤は、ヒトコラーゲンの分解を予防する。
【０２２９】
Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓを、５％水素、１０％二酸化炭素、および９５％窒素下、Ｃｏｙ嫌気性チャンバー中で指数期（ＯＤ  ６００ｎｍ＝０．６）まで増殖させた。細菌を５０００×ｇで４℃にて１０分間、遠心分離し、次に上清を採集した。Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｓｐｉｎ−Ｘ  ＵＦ−２０濃縮管を使用して５０００×ｇで４℃にて６０分間、次にＣｏｒｎｉｎｇ  Ｓｐｉｎ−Ｘ  ＵＦ５００濃縮管を使用して１７，０００×ｇで３０分間、遠心分離することにより上清を濃縮した。コラーゲンＩ型１０μｇをＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ培養上清０．６μｇと共に、５０μＭ  Ｒｇｐ阻害剤（化合物１３、表１）、５０μＭ  Ｋｇｐ阻害剤（（Ｓ）−Ｎ−（６−グアニジノ−２−オキソ−１−（２，３，５，６−テトラフルオロフェノキシ）ヘキサン−３−イル）シクロペンタンカルボキサミド；米国特許出願公開第２０１６／００９６８３０号に記載されている）、または両方の非存在下または存在下で１時間、インキュベートした。反応混合物は、５ｍＭシステイン、２０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ７．５を含有していた。インキュベーション後、プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｓｉｇｍａ）を加えることにより反応を終わらせた。次に、試料をＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動により分析した。分離後、ゲルをＢｉｏｓａｆｅ  Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）により染色した。ゲルデータ（例えば、図７）は、Ｒｇｐ阻害剤およびＫｇｐ阻害剤がジンジパイン含有Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ上清によるコラーゲンの分解を防止することを示した。
（実施例２０）
Ｒｇｐ阻害剤の皮下送達。
【０２３０】
化合物１３を、カルボキシメチルセルロース（２％ｗ／ｗ）またはＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７（２５％ｗ／ｗ）を含有する水中に１ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。溶液を氷上で保持し、１０ｍｇ／ｋｇの溶液それぞれを３匹の雄ＣＤ１マウスに投与した。血漿を７つの時点で採集した。血漿中の濃度をタンデム質量（ＭＳ／ＭＳ）検出と共にＨＰＬＣにより決定した。
【０２３１】
血漿試料を、８０％アセトニトリルを含有する混合物により沈殿させた。試料を、０．１％ギ酸を含有する水によりさらに希釈した。クロマトグラフィ分離を逆相カラム（２．１×５０ｍｍ、粒径：２．５μｍ、Ｘｂｒｉｄｇｅ  Ｃ８、Ｗａｔｅｒｓ、ＵＳＡ）で実施した。０．１％ギ酸を含有する超精製Ｈ２Ｏ中の０．１％ギ酸を含有するアセトニトリルの直線勾配（流量０．２ｍＬ／分）を使用して構成成分を分離した。
【０２３２】
ＭＳ分析は、ＡＰＩ  ５５００  ＱＴＲＡＰ検出器およびＴｕｒｂｏ  Ｉｏｎ  Ｓｐｒａｙインターフェース（両方ともＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ製、ＵＳＡ）を有するＡＰＩ  ５５００  ＱＴＲＡＰシステムを使用して実施した。取得は、分析物のために設定を最適化して陽イオン化モードで実施した。機器を多重反応モニタリング（ＭＲＭ）モードで稼働し、以下の遷移を使用して化合物１３を定量化した；４３３．４−＞１１２．１。Ａｎａｌｙｓｔ（商標）データシステム（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、分析物対濃度の応答を使用してデータを較正および定量化した。カルボキシメチルセルロースまたはＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ１２７中の化合物１３の皮下投与から得られる血漿中濃度データを図８に示す。これは、Ｐｌｕｒｏｎｉｃにおいて投与後長時間にわたる化合物１３の濃度の増大を実証する。
【０２３３】
上述は、明確さおよび理解を目的として、例示および実施例によってある程度詳細に記載されたものであるが、当業者は、添付の特許請求の範囲内で、ある種の変更および修正を行うことができることを認識するであろう。さらに、本明細書において提示されているそれぞれの参考文献は、それが個々に参照により組み込まれているのと同じ程度に、その全体が参照により組み込まれている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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