(57)【要約】  水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択されるアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液と、哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量のワクチンと、糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせと、増粘剤と、を含む、アルミニウムアジュバント化ワクチンでマイクロニードルをコーティングするための組成物が提供される。組成物のいくつかの実施形態は、１００ｓ−１及び２５℃の温度で測定したとき、５００〜３００００ｃｐｓの粘度を有する。組成物でコーティングされたマイクロニードルデバイス、並びに組成物を形成してマイクロニードルをコーティングする方法、及びワクチンコーティングされたマイクロニードルアレイのアルミニウム含有量を最大化する方法もまた、提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択されるアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液と、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量のワクチンと、
糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせと、
増粘剤と、を含み、
１００ｓ−１及び２５℃の温度で測定したとき、５００〜３００００ｃｐｓの粘度を有する、組成物。
【請求項２】
糖を含み、前記糖は、ラフィノース、スタキオース、スクロース、トレハロース、アピオース、アラビノース、ジギトキソース、フコース、フルクトース、ガラクトース、グルコース、グロース、ハマメロース、イドース、リキソース、マンノース、リボース、タガトース、キシロース、セロビオース、ゲンチオビオース、ラクトース、ラクツロース、マルトース、メリビオース、プリメベロース、ルチノース、シラビオース、ソホロース、ツラノース、及びビシアノースから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記糖は、非還元糖である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記糖は、ラフィノース、スタキオース、スクロース、及びトレハロースから選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
糖アルコールを含み、前記糖アルコールは、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリトリトール、リビトール、及びイノシトールから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記増粘剤は、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、デキストラン、ポリビニルピロリドン、及びそれらの混合物から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記ワクチンは、ＤＮＡワクチン、細胞性ワクチン、組み換えタンパクワクチン、治療用癌ワクチン、炭疽病ワクチン、インフルエンザワクチン、ライム病ワクチン、狂犬病ワクチン、麻疹ワクチン、おたふく風邪ワクチン、水痘ワクチン、天然痘ワクチン、Ａ型肝炎ワクチン、Ｂ型肝炎ワクチン、Ｃ型肝炎ワクチン、百日咳ワクチン、風疹ワクチン、ジフテリアワクチン、脳炎ワクチン、日本脳炎ワクチン、呼吸器合胞体ウイルスワクチン、黄熱病ワクチン、エボラウイルスワクチン、ポリオワクチン、ヘルペスワクチン、ヒトパピローマウイルスワクチン、ロタウイルスワクチン、肺炎球菌ワクチン、髄膜炎ワクチン、百日咳ワクチン、破傷風ワクチン、腸チフスワクチン、コレラワクチン、結核ワクチン、重症急性呼吸器症候群ワクチン、ＨＳＶ−１ワクチン、ＨＳＶ−２ワクチン、ＨＩＶワクチン、及びそれらの組み合わせから選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記ワクチンは、前記コーティング製剤の０．５重量％〜５０重量％の量で存在する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、前記コーティング製剤の１０重量％〜７０重量％の量で存在する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせは、前記コーティング製剤の０．０１重量％〜６０重量％の量で存在する、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記増粘剤は、前記コーティング製剤の０．０１重量％〜６０重量％の量で存在する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
少なくとも１つの緩衝剤を更に含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記緩衝剤は、前記コーティング製剤の１重量％〜２０重量％の量で存在する、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記少なくとも１つの緩衝剤は、ヒスチジン、リン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、グリシン緩衝剤、酢酸アンモニウム緩衝剤、コハク酸塩緩衝剤、ピロリン酸塩緩衝剤、トリス酢酸緩衝剤、トリス緩衝剤、リン酸緩衝生理食塩水、トリス緩衝生理食塩水、生理食塩水酢酸ナトリウム緩衝液、及び生理食塩水クエン酸ナトリウム緩衝液から選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
前記少なくとも１つの緩衝剤は、リン酸緩衝生理食塩水である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、０．０１重量％〜５重量％のアルミニウムを含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、０．１重量％〜２重量％のアルミニウムを含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、５ｍｇ／ｍＬ〜２２ｍｇ／ｍＬのアルミニウムを含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
０．０１〜１０重量％のアルミニウムを含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
０．５〜３重量％のアルミニウムを含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択されるアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液と、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量のワクチンと、
糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせと、
増粘剤と、から本質的になり、
１００ｓ−１及び２５℃の温度で測定したとき、５００〜３００００ｃｐｓの粘度を有する、組成物。
【請求項２２】
基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイと、
前記マイクロニードルのうちの１つ以上の少なくとも一部分にコーティングされた請求項１〜１９のいずれか一項に記載の前記組成物と、を備える、デバイス。
【請求項２３】
前記デバイスは、表面積を有し、前記表面積の１ｃｍ２当たり少なくとも０．０３マイクログラムのアルミニウムを含む、請求項２２に記載のデバイス。
【請求項２４】
前記デバイスは、表面積を有し、前記表面積の１ｃｍ２当たり０．０３〜１８マイクログラムのアルミニウムを含む、請求項２２に記載のデバイス。
【請求項２５】
アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成する方法であって、
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択される第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を用意することと、
前記アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することと、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量の少なくとも１つのワクチンを前記第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合して、前記アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、を含む、方法。
【請求項２６】
前記第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１のアルミニウム濃度を有し、前記第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第２のアルミニウム濃度を有し、前記第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より少なくとも１．２倍大きい、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１のアルミニウム濃度を有し、前記第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第２のアルミニウム濃度を有し、前記第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より１．２〜２倍大きい、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１のアルミニウム濃度を有し、前記第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第２のアルミニウム濃度を有し、前記第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より１．５〜２倍大きい、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１の体積を有し、前記アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することにより前記第１の体積は減少し、前記第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液が前記第１の体積より小さい第２の体積を有する、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】
前記第２の体積は、前記第１の体積より少なくとも２０％小さい、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記第２の体積は、前記第１の体積より２０％〜８０％小さい、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
少なくとも１つの賦形剤を前記アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤内に混合することを更に含む、請求項２５〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記少なくとも１つの賦形剤は、糖、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせを含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
ワクチンコーティングされたマイクロニードルアレイのアルミニウム含有量を最大化するための方法であって、
マイクロニードル基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイを用意することと、
アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を、
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択される第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を用意することと、
前記アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することと、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量の少なくとも１つのワクチンを前記第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合して、前記アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、により形成することと、
前記複数のマイクロニードルの少なくとも一部分を前記アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤と接触させて、それにより、前記アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤の少なくとも一部分を前記マイクロニードルアレイに転写して、湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを形成することと、を含む、方法。
【請求項３５】
アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することは、少なくとも１つの賦形剤を前記アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤内に混合することを更に含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記少なくとも１つの賦形剤は、糖、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせを含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記複数のマイクロニードルの少なくとも一部分を前記アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤に接触させることは、前記マイクロニードルアレイを浸漬コーティングすることを含む、請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを乾燥してコーティングされたマイクロニードルアレイを形成することを更に含む、請求項３４〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
乾燥することは、前記アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤の少なくとも一部分を蒸発させることを含む、請求項３８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
マイクロニードル又はマイクロピンと呼ばれる場合もある、比較的小さな構造体のアレイを含むデバイスが、皮膚及び他の表面を通してのワクチンなどの治療薬の送達に関連した使用のために開示されてきている。デバイスは通常、治療薬及びその他の薬物が角質層を通過してその下の組織内に至ることができるようにその層を貫通させるべく、皮膚に対して押し付けられる。
【０００２】
流体収容容器及び治療剤を皮膚に送達することができる導管を有するマイクロニードルデバイスが提案されてきたが、マイクロニードルアレイの表面上に乾燥したコーティングを有するマイクロニードルデバイスは、流体収容容器のデバイスと比較して、一般的により簡易であり、マイクロニードルデバイス内の非常に細い流路を通る流体流動の信頼性の高い制御を提供する必要なしに治療剤を皮膚内に直接注入することができるため、望ましい特徴を有する。
【０００３】
免疫学の分野では、そうでなければ弱い免疫原性である特定の抗原に対する免疫反応をワクチンアジュバントの使用により高めることができることが、長年の間周知であった。そのようなアジュバントは、特定の抗原に対する免疫反応を増強し、したがって、医学界内の少なからぬ関心と研究の題材である。ミョウバン又はアルミニウム化合物は、ワクチンに広く使用される唯一のアジュバントであり、場合によっては、唯一の認可されたワクチンアジュバントである。
【０００４】
したがって、マイクロニードルをアルミニウムアジュバントを含有するコーティング製剤でコーティングするための組成物及び方法に対する要求がある。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、マイクロニードル及びマイクロニードルアレイをアルミニウムアジュバント化ワクチンでコーティングするための組成物及び方法を提供する。
【０００６】
本発明の一態様では、本開示は、水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択されるアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液と、哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量のワクチンと、糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせと、増粘剤と、を含む組成物を提供し、組成物は、１００ｓ−１及び２５℃の温度で測定したとき、５００〜３００００ｃｐｓの粘度を有する。
【０００７】
別の態様では、本開示は、基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイと、マイクロニードルの１つ以上の少なくとも一部分上にコーティングされた本明細書で提供される組成物のいずれかとを備えるデバイスを提供する。
【０００８】
別の態様では、本開示は、水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択される第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を用意することと、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することと、哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量の少なくとも１つのワクチンを第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合して、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、を含む、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成する方法を提供する。
【０００９】
別の態様では、本開示は、マイクロニードル基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイを用意することと、水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択される第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を用意することにより、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することと、哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量の少なくとも１つのワクチンを第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合して、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、
複数のマイクロニードルの少なくとも一部分をアルミニウムアジュバント化ワクチン製剤と接触させて、それにより、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤の少なくとも一部分をマイクロニードルアレイに転写して、湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを形成することと、を含む、ワクチンコーティングされたマイクロニードルアレイのアルミニウム含有量を最大化するための方法を提供する。
【００１０】
本明細書で使用される場合、特定の用語は、以下に説明する意味を有するものと理解される。
【００１１】
「アレイ」は、治療薬の経皮的送達又は流体の皮膚を通した若しくは皮膚へのサンプリングを促進するために角質層を貫通することができる１つ以上（いくつかの実施形態では、複数）の構造体を含む、本明細書で説明する医療デバイスを指す。
【００１２】
「微細構造」、「マイクロニードル」又は「マイクロアレイ」は、治療薬の経皮的送達を促進するために、又は皮膚を通して流体をサンプリングするために、角質層を貫通できるアレイと関連する特定の微視的構造をいう。例として、微細構造としては、針又は針状の構造、並びに角質層に穴をあける能力がある他の構造を挙げることができる。
【００１３】
「アルミニウム」は、元素のアルミニウムを指す。「アルミニウム塩」は、例えば、水酸化アルミニウム又はリン酸アルミニウムなどのアルミニウムの塩を指し、「ミョウバン」と互換的に使用される。
【００１４】
本発明の特徴及び利点は、発明を実施するための形態、及び添付の特許請求の範囲を考慮することで理解される。本発明のこれら並びに他の特徴及び利点は、本発明の様々な例示的な実施形態に関連して以下で説明され得る。前述の本発明の概要は、本発明の開示される各実施形態又は全ての実装形態を記載するものではない。以下の図面及び発明を実施するための形態は、実例となる実施形態をより具体的に例示するものである。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明によるミョウバンアジュバント化ワクチン製剤を形成する方法の一実施形態を示す流れ図である。
【図２】実施例３の組成物でコーティングされた、コーティングされたマイクロニードルアレイの一部分の顕微鏡写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下の説明では、説明の一部を形成し、いくつかの特定の実施形態が例示として示される、添付の図面を参照する。本開示の範囲及び趣旨から逸脱することなく、他の実施形態が、企図され、行われうると理解すべきである。したがって、以下の詳細な説明は、限定的な意味で理解されるべきではない。
【００１７】
本明細書において使用される全ての科学的用語及び技術的用語は、別段の指定がない限り、当該技術分野において一般的に使用されている意味を有する。本明細書において与えられる定義は、本明細書中で頻繁に使用される特定の用語の理解を助けるためのものであり、本開示の範囲を限定するためのものではない。
【００１８】
別途記載のない限り、本明細書及び特許請求の範囲で使用される特徴部の寸法、量、及び物理的特性を表す全ての数字は、いずれの場合においても「約」なる語によって修飾されているものとして理解されたい。したがって、そうでない旨が示されない限り、上記の明細書及び添付の「特許請求の範囲」において示される数値パラメータは、本明細書に開示される教示を利用して当業者が得ようとする所望の特性に応じて変わり得る近似値である。
【００１９】
端点による数値範囲の列挙には、その範囲内に含まれる全ての数（例えば１〜５は、１、１．５、２、２．７５、３、３．８０、４、及び５を含む）、並びにその範囲内のあらゆる範囲が含まれる。
【００２０】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、その内容物が特に明確な指示をしない限り、複数の指示物を有する実施形態を包含する。本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用する場合、用語「又は」は、一般に、その内容物が特に明確な指示をしない限り、「及び／又は」を含む意味で使用される。マイクロニードルデバイスによるワクチン製剤の送達は、成長分野である。ワクチン製剤の送達は、多くの場合、特定のワクチンに対する免疫反応を高めるために、アジュバントの添加を必要とする、又はアジュバントの添加の恩恵を受ける。ミョウバン又はアルミニウム化合物は、ワクチンに広く使用される唯一のアジュバントであり、場合によっては、唯一の認可されたワクチンアジュバントである。最も一般的に使用される水酸化アルミニウム及びリン酸アルミニウムなどのアルミニウム化合物は、マイクロニードルデバイス上にコーティングするためのコーティング製剤内への含有に対して何らかの問題を呈する場合がある。マイクロニードルデバイスは、一般的に、水溶液でコーティングされ、水酸化アルミニウム及びリン酸アルミニウムなどの不溶性塩類は、そのような水溶液製剤を製造するために使用することができない。加えて、製造される全て又は大部分のデバイスにわたって正確で均一な投与量を確実にするためにマイクロニードルデバイス用に均一なコーティングを製造することが望ましいため、マイクロニードルデバイスをコーティングするために、安定した均一な溶液が一般的に使用される。不溶性化合物を含有するものなどの、沈殿して結果として構成成分の分布がばらつく場合がある懸濁液は、したがって、コーティングの均一性を実現するのに問題を呈する。加えて、一般的な注射可能なワクチン製剤は、注入される大量の製剤のために、大量のミョウバンアジュバントを含有することがある。しかし、マイクロニードルデバイス、特にコーティングされたマイクロニードルデバイスは、その小さなサイズのために、限定された量のワクチン製剤、したがって、アジュバントを利用する。適切な量のワクチンに加えて、ワクチンに対する免疫反応を高めるために、適切な量のアジュバントが存在することが重要である。したがって、マイクロニードルデバイスによりワクチンを送達するために、マイクロニードルアレイ上の１つ以上の所望の位置にコーティングするための最大のアルミニウムアジュバント含有量を有する安定した均一なコーティング組成物を提供する能力が重要である。浸漬コーティングなどの方法によりマイクロニードルデバイス上に容易にコーティングすることができる、アルミニウムアジュバント化ワクチンコーティング製剤を提供できることが更に望ましい。含まれたワクチンの増大した免疫原性のための最大限のアルミニウム含有量を提供する安定した均一な組成物及び製剤は、マイクロニードルデバイスをコーティングするために実現することができることが、現時点で見出されている。そのような組成物並びにそのような組成物を形成して使用するための方法を、以下に更に詳細に説明する。
【００２１】
マイクロニードルアレイをコーティングするために利用することができる組成物が本明細書で開示される。いくつかの実施形態では、組成物は、ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤である。組成物は、製剤、コーティング、又はコーティング製剤と呼ぶ場合がある。組成物を備えるデバイス、並びに組成物又は製剤を形成する方法、ワクチンコーティングされたマイクロニードルアレイのミョウバン含有量を最大化するための方法、及びミョウバンアジュバント化ワクチンを哺乳動物に送達するための方法もまた、本明細書で開示される。
【００２２】
本明細書で開示する組成物は、通常、水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液又はリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液などのアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を含む。そのような懸濁液は、通常、水及び不溶性アルミニウム塩を含む。例示的なアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液としては、水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液、例えば、Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒから入手可能な（カタログ番号８４３２６１）ＡＬＨＹＤＲＯＧＥＬ（登録商標）（２％重量比）を挙げることができる。他の例示的なアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液としては、リン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液、例えば、Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒから入手可能なＡＤＪＵ−ＰＨＯＳ（登録商標）を挙げることができる。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、９ｍｇ／ｍＬ〜１１ｍｇ／ｍＬのアルミニウム、９．５ｍｇ／ｍＬ〜２２ｍｇ／ｍＬのアルミニウム、又は１４ｍｇ／ｍＬ〜２２ｍｇ／ｍＬのアルミニウムを含む水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液を含むことができる。例えば、いくつかの実施形態は、９ｍｇ／ｍＬ〜１１ｍｇ／ｍＬのアルミニウムを含有するＡＬＨＹＤＲＯＧＥＬ（登録商標）を含むことができる。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、濃縮した水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液を含むことができる。例えば、ＡＬＨＹＤＲＯＧＥＬ（登録商標）は、以下に更に説明する方法を使用して濃縮して、本明細書で説明する組成物及び方法に使用するための９．５ｍｇ／ｍＬ〜２２ｍｇ／ｍＬ、又は１４ｍｇ／ｍＬ〜２２ｍｇ／ｍＬの範囲のアルミニウムの濃度を実現することができる。いくつかの実施形態では、水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液などのアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、希釈して、０．１０ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬの範囲のアルミニウム濃度を提供することができる。
【００２３】
いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、４．５ｍｇ／ｍＬ〜５．５ｍｇ／ｍＬのアルミニウム、５ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬのアルミニウム、６ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬのアルミニウム、又は７ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬのアルミニウムを含むリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液を含むことができる。例えば、いくつかの実施形態は、４．５ｍｇ／ｍＬ〜５．５ｍｇ／ｍＬのアルミニウムを含有するＡＤＪＵ−ＰＨＯＳ（登録商標）を含むことができる。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、濃縮したリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液を含むことができる。例えば、ＡＤＪＵ−ＰＨＯＳ（登録商標）は、以下に更に説明する方法を使用して濃縮して、本明細書で説明する組成物及び方法に使用するための５ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬのアルミニウム、又は７ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬのアルミニウムの範囲のアルミニウムの濃度を実現することができる。
【００２４】
いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、濃縮することができる。例えば、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、遠心分離機にかけることができ、上澄みの部分は、除去することができ、したがって、懸濁液の体積当たりアルミニウム含有量を増大させることができる。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、蒸発又は他の既知の濃縮方法により、濃縮することができる。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、水、緩衝剤、又は他の溶媒の添加などにより、希釈することができる。
【００２５】
いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、０．０１重量％〜５重量％のアルミニウムを含む。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、０．１重量％〜２重量％のアルミニウムを含む。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、５ｍｇ／ｍＬ〜２２ｍｇ／ｍＬのアルミニウムを含む。
【００２６】
アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液として提供されるミョウバンは、組成物に含まれるワクチンのためのアジュバントとして作用することができる。アジュバントは、別の薬剤（この場合、ワクチン）の作用を変更する薬剤である。アジュバントは、多くの場合、受容者のワクチンに対する免疫反応を高めるために利用される。
【００２７】
いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に存在する水は、水が任意の原薬及び賦形剤を溶解又は分散することができるように、溶媒として作用することができる。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する組成物はまた、水に加えて、共溶媒も含むことができる。いくつかの実施形態では、組成物は、任意選択的に、エタノール、イソプロパノール、メタノール、プロパノール、ブタノール、プロピレングリコール、ジメチルスルホキシド、グリセリン、１−メチル−２−ピロリジノン、又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの、追加の溶媒（共溶媒とも呼ばれる）を含むことができる。
【００２８】
本明細書で開示する組成物は、通常、少なくとも１つのワクチンを含む。好適なワクチンの例としては、ＤＮＡワクチン、樹状細胞ワクチンなどの細胞性ワクチン、組み換えタンパクワクチン、治療用癌ワクチン、炭疽病ワクチン、インフルエンザワクチン、ライム病ワクチン、狂犬病ワクチン、麻疹ワクチン、おたふく風邪ワクチン、水痘ワクチン、天然痘ワクチン、肝炎ワクチン、Ａ型肝炎ワクチン、Ｂ型肝炎ワクチン、Ｃ型肝炎ワクチン、百日咳ワクチン、風疹ワクチン、ジフテリアワクチン、脳炎ワクチン、日本脳炎ワクチン、呼吸器合胞体ウイルスワクチン、黄熱病ワクチン、エボラウイルスワクチン、ポリオワクチン、ヘルペスワクチン、ヒトパピローマウイルスワクチン、ロタウイルスワクチン、肺炎球菌ワクチン、髄膜炎ワクチン、百日咳ワクチン、破傷風ワクチン、腸チフスワクチン、コレラワクチン、結核ワクチン、重症急性呼吸器症候群（severe acute respiratory syndrome）（ＳＡＲＳ）ワクチン、ＨＳＶ−１ワクチン、ＨＳＶ−２ワクチン、ＨＩＶワクチン、及びそれらの組み合わせが挙げられる。したがって、用語「ワクチン」は、タンパク質、ペプチド、リポタンパク質、糖タンパク質、多糖、リポ多糖類、オリゴ糖、糖脂質、ポリヌクレオチド配列、弱毒化又は死滅ウイルス、ウイルス粒子、ウイルス様粒子、弱毒化又は死滅細菌、細菌細胞壁、トキソイド、及びネコアレルゲン、塵アレルゲン、又は花粉アレルゲンなどの減感剤の形態の抗原を含む。好適なワクチンの追加の例は、米国特許出願公開第２００４／００４９１５０号、同第２００４／０２６５３５４号、及び同第２００６／０１９５０６７号に記載されており、それらの開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００２９】
いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１つの糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせを含むことができる。例示的な糖としては、例えば、ラフィノース、スタキオース、スクロース、及びトレハロースなどの非還元糖、並びに単糖類、及び二糖類などの還元糖を挙げることができる。例示的な単糖類としては、アピオース、アラビノース、ジギトキソース、フコース、フルクトース、ガラクトース、グルコース、グロース、ハマメロース、イドース、リキソース、マンノース、リボース、タガトース、及びキシロースを挙げることができる。例示的な二糖類としては、例えば、セロビオース、ゲンチオビオース、ラクトース、ラクツロース、マルトース、メリビオース、プリメベロース、ルチノース、シラビオース、ソホロース、ツラノース、及びビシアノースを挙げることができる。実施形態では、ショ糖、トレハロース、フルクトース、マルトース、又はそれらの組み合わせを利用することができる。例示された糖類の全ての光学異性体は、（Ｄ、Ｌ、及びラセミ混合物）も本明細書に含まれる。例示的な糖アルコールとしては、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリトリトール、リビトール、及びイノシトールを挙げることができる。
【００３０】
いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１つの増粘剤を含むことができる。好適な増粘剤としては、例えば、ヒドロキシエチルセルロース（hydroxyethyl cellulose）（ＨＥＣ）、メチルセルロース（methyl cellulose）（ＭＣ）、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（hydroxypropyl methyl cellulose）（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシエチルメチルセルロース（hydroxyethylmethyl cellulose）（ＨＥＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（hydroxypropyl cellulose）（ＨＰＣ）、デキストラン、ポリビニルピロリドン、及びそれらの混合物を挙げることができる。
【００３１】
実施形態では、開示した組成物又は製剤は、少なくとも１つの緩衝剤を含むことができる。緩衝剤は、通常、組成物のｐＨを安定化するために機能することができる。利用される特定の緩衝剤は、組成物に含まれる特定のワクチン（単数又は複数）に少なくとも部分的に依存し得る。組成物のｐＨは、例えば、ワクチンの溶解度を所望のレベルに維持するために重要である場合がある。一般的に、任意の通常利用される緩衝剤を開示した組成物に使用することができる。
【００３２】
例示的な緩衝剤としては、例えば、ヒスチジン、リン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、グリシン緩衝剤、酢酸アンモニウム緩衝剤、コハク酸塩緩衝剤、ピロリン酸塩緩衝剤、トリス酢酸（ＴＡ）緩衝剤、及びトリス緩衝剤を挙げることができる。緩衝生理食塩溶液は、緩衝剤として利用することができる。例示的な緩衝生理食塩溶液としては、例えば、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、トリス緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）、生理食塩水酢酸ナトリウム緩衝液（ＳＳＡ）、生理食塩水クエン酸ナトリウム緩衝液（ＳＳＣ）が挙げられる。実施形態では、ＰＢＳを緩衝剤として利用することができる。
【００３３】
いくつかの実施形態では、緩衝剤は、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に存在する水の一部又は全てを置換するために使用することができる。これは、例えば、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を連続的に遠心分離機にかけて、上澄みを除去し、所望の量の水が緩衝剤により置換されるまで緩衝剤を添加することにより、実現することができる。所望の量の緩衝剤及び／又は水は、使用されるワクチン（単数又は複数）、使用される賦形剤、所望のコーティング特性、及び最終的な組成物内に存在する所望の量のアルミニウムに依存するであろう。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の追加の賦形剤を含むことができる。賦形剤は、ワクチンの有効特性を維持するために、製剤又はそれらの組み合わせのコーティング性能を促進するために機能することができる。利用される特定の賦形剤は、製剤に含まれる特定のワクチン（単数又は複数）に少なくとも部分的に依存し得る。
【００３４】
例示的な任意選択の追加の賦形剤としては、例えば、共アジュバント、炭水化物、ポリマー、アミノ酸、ポリアミノ酸、界面活性剤、タンパク質、非水性溶媒、無機塩類、酸、塩基、抗酸化剤、及びサッカリンを挙げることができる。
【００３５】
組成物はまた、第２の（又は、二次の）ワクチン若しくは他の医薬品有効成分（active pharmaceutical ingredient）（ＡＰＩ）、第２の（又は、二次の）糖（若しくは糖アルコール、又はそれらの組み合わせ）、増粘剤、緩衝剤、若しくは他の賦形剤、本明細書に記載しない構成成分、又はそれらの何らかの組み合わせなどの追加成分を含むことができる。
【００３６】
開示される組成物内の各種構成成分の量は、水性製剤内の構成成分の由来（identity）、マイクロニードルアレイ上に所望されるワクチン及び／又はアルミニウムの量、コーティングされるマイクロニードルアレイの種類、本明細書で説明しない他の考慮事項、又はそれらの何らかの組み合わせに依存して変化し得る。いくつかの実施形態では、開示される組成物は、１０〜７０重量％、２０〜６０重量％、又は３０〜５５重量％の全固体含有量を有することができる。
【００３７】
組成物はまた、製剤内のワクチンの量に基づいて特徴付けることができる。いくつかの実施形態では、開示される製剤は、０．０１〜８０重量％の少なくとも１つのワクチン、０．５〜７０重量％の少なくとも１つのワクチン、又は０．５〜５０重量％の少なくとも１つのワクチンを有することができる。
【００３８】
組成物はまた、製剤内の糖（いくつかの実施形態では、糖アルコール、又は糖、糖アルコールの組み合わせ、又は糖（単数又は複数）及び糖アルコール（単数又は複数）の両方）の量に基づいて特徴付けることができる。いくつかの実施形態では、開示される製剤は、０〜６０重量％の少なくとも１つの糖、糖アルコール、若しくはそれらの組み合わせ、又は５〜６０重量％の少なくとも１つの糖、糖アルコール、若しくはそれらの組み合わせを有することができる。
【００３９】
組成物はまた、製剤内の増粘剤の量に基づいて特徴付けることができる。いくつかの実施形態では、開示される製剤は、０〜６０重量％の少なくとも１つの増粘剤、又は５〜６０重量％の少なくとも１つの増粘剤を有することができる。増粘剤は、利用される場合、製剤の粘度を増大させるために使用することができる。
【００４０】
組成物はまた、製剤内のアルミニウムの量に基づいて特徴付けることができる。いくつかの実施形態では、開示される製剤は、０．０１〜１０重量％のアルミニウム、０．０１〜５重量％のアルミニウム、１〜５重量％のアルミニウム、３〜５重量％のアルミニウム、０．０１〜３重量％のアルミニウム、０．５〜２．５重量％のアルミニウム、又は１〜２重量％のアルミニウムを有することができる。
【００４１】
組成物はまた、組成物を製造するために賦形剤に添加されるアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液の量に基づいて特徴付けることができる。いくつかの実施形態では、開示される組成物は、１０〜７０重量％のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液、又は４０〜６０重量％のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を含むことができる。いくつかの実施形態では、開示される組成物は、５０重量％のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を含むことができる。
【００４２】
組成物はまた、製剤内の緩衝剤の量に基づいて特徴付けることができる。いくつかの実施形態では、開示される製剤は、１〜２０重量％の緩衝剤を有することができる。
【００４３】
いくつかの実施形態では、本明細書で説明する組成物は、その粘度により更に特徴付けることができる。概して、粘度は、剪断応力又は引張り応力のいずれかによって変形される流体の、抵抗の測定値である。いくつかの実施形態では、開示される組成物は、製剤の剪断粘度とも呼ばれる場合がある、剪断応力により変形されるそれらの抵抗により特徴付けることができる。粘度試験のために、レオメータを含む様々な測定器を使用することができる。いくつかの実施形態では、製剤の粘度は、レオメータ、例えば、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）製のレオメータを使用して測定することができる。
【００４４】
一般的に、組成物の粘性があまりに高い場合、製剤は、製造方法に利用することは困難であろうし、再現可能でないコーティング（したがって、使用時にマイクロニードルアレイにより投与されるであろう再現可能でない量のワクチン及びミョウバン）を製造する場合があり、結果としてコーティング重量全体の低下となる場合がある。組成物が充分に粘性でない場合、製剤は、マイクロニードルの表面を効果的にコーティングすることができないであろう（したがって、製剤内へのマイクロニードルの浸漬をより多く必要として、それにより、製造コストが増大する場合がある）し、場合により、毛細管力が、製剤にマイクロニードル及びマイクロニードル基板をコーティングさせる。これは、「毛細管ジャンプ」と呼ばれることもある。組成物の所望の粘度は、少なくとも部分的に、マイクロニードルの形状、利用される特定のコーティング方法、コーティング工程の所望の数、本明細書で説明しないその他の考慮事項、又はそれらの何らかの組み合わせに依存し得る。
【００４５】
いくつかの実施形態では、本明細書で開示される組成物は、２５℃の温度で１００ｓ−１の剪断速度で測定した場合に５００〜３００００センチポアズ（ｃｐｓ）の粘度（又は剪断粘度）を有することができる。実施形態では、本明細書で開示される組成物は、２５℃の温度で１００ｓ−１の剪断速度で測定した場合に５００〜１００００ｃｐｓの粘度（又は剪断粘度）を有することができる。実施形態では、本明細書で開示される組成物は、２５℃の温度で１００ｓ−１の剪断速度で測定した場合に５００〜８０００ｃｐｓの粘度（又は剪断粘度）を有することができる。
【００４６】
いくつかの実施形態では、組成物は、均一に懸濁される、又は、少なくとも８時間、少なくとも１０時間、若しくはより長時間の間、均一に懸濁された状態であることができる。均一に懸濁された状態であるとは、少なくとも８時間、少なくとも１０時間、又はより長時間の間、攪拌されない場合に、組成物が安定して沈殿に対して抵抗性があることを意味している。組成物の性質及びその均一安定性により、より少ないコーティングを使用して最大限度量のワクチン、アジュバント化ワクチン、及び／又はアルミニウムを有するマイクロニードル又はマイクロニードルアレイのより簡易なコーティングが可能になる。
【００４７】
マイクロニードルデバイスもまた、本明細書で開示される。いくつかの実施形態では、デバイスは、マイクロニードルアレイを備える。通常、マイクロニードルアレイは、基板及び基板上に配置された複数のマイクロニードルを含むことができる。
【００４８】
本開示を実施するために有用なマイクロニードルアレイは、以下の特許及び特許出願に記述されているような様々な構成及び特徴を有することができ、その開示内容は、参照によって本明細書に組み込まれる。マイクロニードルアレイのための１つの実施形態は、米国特許出願公開第２００５／０２６１６３１号（Ｃｌａｒｋｅら）に開示されている構造を含み、それは、切頭のテーパー形状及び制御されたアスペクト比を有するマイクロニードルを記述している。マイクロニードルアレイのための別の実施形態は、米国特許第６，０９１，９７５号（Ｄａｄｄｏｎａら）に開示されている構造を含み、それは、皮膚を貫通するためのブレード状の微小突起を記述している。マイクロニードルアレイのための更に別の実施形態は、米国特許第６，３１２，６１２号（Ｓｈｅｒｍａｎら）に開示されている構造を含み、それは、中空の中央溝を有するテーパー状構造を記述している。マイクロニードルアレイのためのなお更なる別の実施形態は、米国特許第６，３７９，３２４号（Ｇａｒｓｔｅｉｎら）に開示されている構造を含み、それは、マイクロニードルの先端の上面に少なくとも１つの縦方向ブレードを有する中空のマイクロニードルを記述している。マイクロニードルアレイのための更なる実施形態は、米国特許出願公開第２０１２／０１２３３８７号（Ｇｏｎｚａｌｅｚら）及び同第２０１１／０２１３３３５号（Ｂｕｒｔｏｎら）に開示されている構造を含み、それらは、共に中空のマイクロニードルを記述している。マイクロニードルアレイについてのなお更なる実施形態は、米国特許第６，５５８，３６１（Ｙｅｓｈｕｒｕｎ）号及び同第７，６４８，４８４号（Ｙｅｓｈｕｒｕｎら）に開示されている構造を含み、それらは両方とも中空のマイクロニードルアレイ及びその製造の方法を記述している。
【００４９】
本開示のマイクロニードルアレイにおいて使用することができるマイクロニードルの様々な実施形態は、液晶高分子（ＬＣＰ）マイクロニードルを記述するＰＣＴ出願国際公開第２０１２／０７４５７６（Ｄｕａｎら）、及び本開示のマイクロニードルにおいて使用することができるマイクロニードルの様々な異なる型式及び組成を記述するＰＣＴ出願国際公開第２０１２／１２２１６２号（Ｚｈａｎｇら）に記述されている。
【００５０】
いくつかの実施形態において、マイクロニードル材料は、シリコン、ガラス、又はステンレス鋼、チタン若しくはニッケル・チタン合金のような金属であり得る（又はそれを含む）。いくつかの実施形態において、マイクロニードル材料は、高分子材料、好ましくは医療用グレードの高分子材料であり得る（又はそれを含む）。例示的な種類の医療用グレード高分子材料は、ポリカーボネート、液晶高分子（ＬＣＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、環式オレフィンコポリマー（ＣＯＣ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）を含む。好ましい種類の医療用グレード高分子材料は、ポリカーボネート及びＬＣＰを含む。
【００５１】
いくつかの実施形態において、マイクロニードル材料は、生体分解性高分子材料、好ましくは医療用グレード生体分解性高分子材料であり得る（又はそれを含む）。例示的な種類の医療用グレード生体分解性材料は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ＰＧＡ及びＰＬＡコポリマー、ポリエステルアミドポリマー（ＰＥＡ）を含む。
【００５２】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルは溶解可能、分解可能、又は崩壊可能な材料から調製することができ、本明細書では「溶解性マイクロニードル」と称される。溶解可能、分解可能、又は崩壊可能材料は、使用時に溶解、分解、又は崩壊する任意の固形材料である。とりわけ、「溶解可能マイクロニードル」は、治療薬が組織に放出されることを可能にするため、角質層の下にある組織内で十分に溶解、分解、又は崩壊する。治療薬は、溶解可能マイクロニードル上にコーティングされているか、又は中に組み込まれていてもよい。いくつかの実施形態では、溶解可能材料は、炭水化物又は糖から選択される。いくつかの実施形態では、溶解可能材料はポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）である。いくつかの実施形態では、溶解可能材料は、ヒアルロン酸、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニールアルコール、スクロース、グルコース、デキストラン、トレハロース、マルトデキストリン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００５３】
いくつかの実施形態では、マイクロニードルは、上記材料のいずれのうち、２つ以上の組み合わせから作製され得る（又はそれを含む）。例えば、マイクロニードルアレイの先端は、溶解可能材料であり得る一方、マイクロニードルの残部は医療用グレードの高分子材料である。
【００５４】
本開示の実施に有用なマイクロニードルアレイのマイクロニードル又は複数のマイクロニードルは、角質層を貫通することができる様々な形状を有することができる。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのうちの一つ以上は、正方形のピラミッド形状、三角形のピラミッド形状、階段状のピラミッド形状、円錐形状、マイクロブレード（microblade）形状、又は、皮下注射針の形状を有することができる。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのうちの一つ以上は、正方形のピラミッド形状を有することができる。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのうちの一つ以上は、三角形のピラミッド形状を有することができる。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのうちの一つ以上は、階段状のピラミッド形状を有することができる。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのうちの一つ以上は、円錐形状を有することができる。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのうちの一つ以上は、マイクロブレード形状を有することができる。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのうちの一つ以上は、皮下注射針の形状を有することができる。形状は、対称、又は非対称であり得る。形状は、切頭であり得る（例えば、複数のマイクロニードルが角錐台形状又は円錐台形状を有することができる）。好ましい実施形態において、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルは、それぞれ正方形のピラミッド形状を有する。
【００５５】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルは、中実のマイクロニードル（つまり、マイクロニードルは全体にわたって中実である）である。好ましい実施形態において、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルは、中実のマイクロニードルである。いくつかの実施形態において、マイクロニードルアレイの複数の中実のマイクロニードルは、正方形のピラミッド形状、三角形のピラミッド形状、階段状のピラミッド形状、円錐形状、又はマイクロブレード形状を有することができる。好ましい実施形態において、マイクロニードルアレイの複数の中実のマイクロニードルは、それぞれ正方形のピラミッド形状を有する。
【００５６】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルは、中空のマイクロニードル（つまり、マイクロニードルはマイクロニードルを通る中空の孔を含む）である。中空の孔は、マイクロニードルの基部からマイクロニードルの先端まで、又は、その孔は、マイクロニードルの基部からマイクロニードルの先端から外れた位置まで存在することができる。いくつかの実施形態において、マイクロニードルアレイの複数の中空のマイクロニードルのうちの１つ以上は、円錐形状、円筒形状、正方形のピラミッド形状、三角形のピラミッド形状、又は皮下注射針の形状を有することができる。
【００５７】
いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、約１５００マイクロメートル未満の高さを有する。他の実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、約１２００マイクロメートル未満の高さを有する。更に他の実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、約１２００マイクロメートル未満の高さを有する。なお更に他の実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、約１０００マイクロメートル未満の高さを有する。更なる実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、約７５０マイクロメートル未満の高さを有する。なお更なる実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、約６００マイクロメートル未満の高さを有する。
【００５８】
いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、少なくとも約１００マイクロメートルの高さを有する。他の実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、少なくとも約２００マイクロメートルの高さを有する。更に他の実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、少なくとも約２５０マイクロメートルの高さを有する。更なる実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、少なくとも約５００マイクロメートルの高さを有する。なお更なる実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全てについての平均）は、少なくとも約８００マイクロメートルの高さを有する。
【００５９】
いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は複数のマイクロニードルの全ての平均）は、約１００〜約１５００マイクロメートル、約２００〜約１２００マイクロメートル、約２００〜約１０００マイクロメートル、約２００〜約７５０マイクロメートル、約２００〜約６００マイクロメートル、又は約５００マイクロメートルの高さを有する。
【００６０】
マイクロニードルアレイ中の単一のマイクロニードル又は複数のマイクロニードルは、そのアスペクト比によって特徴付けることもできる。マイクロニードルのアスペクト比は、マイクロニードルの高さｈの、幅（マイクロニードルの基部での）ｗに対する比である。アスペクト比は、ｈ：ｗとして表すことができる。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は全ての複数のマイクロニードルの平均）は、２：１〜５：１の範囲のアスペクト比を有する。いくつかの実施形態において、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は全ての複数のマイクロニードルの平均）は、少なくとも３：１のアスペクト比を有する。
【００６１】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルのアレイは、マイクロニードルのアレイの１ｃｍ２当たり約１００〜約１２００のマイクロニードルを含む。
【００６２】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルのアレイは、マイクロニードルのアレイの１ｃｍ２当たり約２００〜約５００のマイクロニードルを含む。
【００６３】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルのアレイは、マイクロニードルのアレイの１ｃｍ２当たり約３００〜約４００のマイクロニードルを含む。
【００６４】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は複数のマイクロニードルの全ての平均）は、皮膚の中に約５０〜約１２００マイクロメートル、約５０〜約４００マイクロメートル、又は約５０〜約２５０マイクロメートルの深さまで貫入することができる。
【００６５】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は複数のマイクロニードルの全ての平均）は、皮膚の中に約１００〜約４００マイクロメートル、又は約１００〜約３００マイクロメートルの深さまで貫入することができる。
【００６６】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は複数のマイクロニードルの全ての平均）は、皮膚の中に約１２０〜約１２００マイクロメートル、又は約８００〜約１２００マイクロメートルの深さまで貫入することができる。
【００６７】
いくつかの実施形態において、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は複数のマイクロニードルの全ての平均）は、皮膚の中に約４００〜約８００マイクロメートルの深さまで貫入することができる。
【００６８】
上記の実施形態の全てに関して、マイクロニードルアレイの複数のマイクロニードルそれぞれ（又は、複数のマイクロニードルの全ての平均）の貫通深さ（ＤＯＰ）は、マイクロニードル自体の全長ではあり得ないことが理解されよう。
【００６９】
マイクロニードルアレイのいくつかの実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間（マイクロニードル先端からマイクロニードル先端までを測定したとき）の平均間隔は、約２００マイクロメートル〜約２０００マイクロメートルである。マイクロニードルアレイの他の実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間の平均間隔は、約２００マイクロメートル〜約６００マイクロメートルである。マイクロニードルアレイの更に他の実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間の平均間隔は、約２００マイクロメートル〜約３００マイクロメートルである。マイクロニードルアレイのなお更に他の実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間の平均間隔は、約５００マイクロメートル〜約６００マイクロメートルである。
【００７０】
マイクロニードルアレイのいくつかの実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間（マイクロニードル先端からマイクロニードル先端までを測定したとき）の平均間隔は、約２００マイクロメートルよりも大きい。マイクロニードルアレイの他の実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間の平均間隔は、約５００マイクロメートルよりも大きい。
【００７１】
マイクロニードルアレイのいくつかの実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間の平均間隔は、約２０００マイクロメートル未満である。マイクロニードルアレイの他の実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間の平均間隔は、約１０００マイクロメートル未満である。マイクロニードルアレイの更に他の実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間の平均間隔は、約６００マイクロメートル未満である。マイクロニードルアレイのなお更に他の実施形態において、隣接したマイクロニードル同士の間の平均間隔は、約３００マイクロメートル未満である。
【００７２】
マイクロニードルアレイは、射出成形、圧縮成形、金属射出成形、打抜き加工、フォトリソグラフィー法、又は押出成形など、任意の好適な方法で製造することができる。
【００７３】
マイクロニードルの表面は、表面の官能性を変更することができるプラズマ処理などの表面一次処理により変更することができる。例えば、ポリカーボネートは、窒素プラズマを用いてプラズマ処理してアミド官能化するか、又は酸素プラズマを用いてプラズマ処理してカルボキシレート官能化することができる。窒素及び酸素プラズマ処理の組み合わせは、混合表面官能性を与えるために使用することができる。あるいは、マイクロニードルの表面は、表面特性を変更するコーティングを用いて処理することができる。そのようなコーティングは、熱又はプラズマ堆積の使用などにより固形材料として直接付加することができる。アレイ上に硬化される材料の薄層の例としては、米国特許第６，８８１，５３８号（その開示内容は、その参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているものなどのプラズマ堆積ダイヤモンド状ガラスフィルム、米国特許第５，４４０，４４６号（その開示内容は、その参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているものなどの紫外線重合アクリレート、プラズマ堆積フルオロポリマー、又はスプレーコーティング若しくはロールコーティング及びその後に任意の好適な放射を使用して架橋結合されるなどの従来のコーティング方法により塗布することができる任意の他の薄層が挙げられる。一実施形態では、ダイヤモンド状ガラスフィルムは、マイクロニードル上に堆積して、その後、表面を親水性にするために酸素プラズマを用いて処理することができる。
【００７４】
本発明の組成物及び製剤は、マイクロニードルデバイス、アレイ、及びマイクロニードル上にコーティングすることができる。
【００７５】
上述したように、コーティング組成物は、通常、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液（いくつかの実施形態では、濃縮したアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液）及びワクチンを含む。いくつかの実施形態では、コーティング組成物は、糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせを更に含む。いくつかの実施形態では、組成物は、増粘剤を更に含む。いくつかの実施形態では、組成物は、緩衝剤を含む。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液の一部である。いくつかの実施形態では、組成物は、追加の任意選択の賦形剤を更に含む。マイクロニードルに塗布されるコーティング組成物の量は、所望の用途に依存して調節することができる。
【００７６】
通常、組成物内に存在する水（いくつかの実施形態では、存在する水は、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液及び／又は緩衝剤の一部である）は、マイクロニードルアレイ上に乾燥したコート剤を残すように、マイクロニードルアレイへの塗布の後で蒸発させられる。蒸発は、周囲条件で起こることができるようにすることができる、又はマイクロニードルアレイを取り囲む雰囲気の温度若しくは圧力を変更することにより調節することができる。蒸発条件は、コート剤の劣化を回避するように望ましく選択される。
【００７７】
移されたコーティング溶液が蒸発すると、乾燥したコート剤が、マイクロニードルアレイ上に堆積される。一実施形態では、乾燥したコート剤は、マイクロニードル上に優先的に堆積される。優先的に堆積されるとは、単位表面積当たりの乾燥したコーティングの量が、基板上よりマイクロニードル上でより多くなるという意味である。より好ましくは、乾燥したコート剤は、マイクロニードルの先端上又は先端付近に優先的に堆積される。場合により、重量比で乾燥したコート剤の半分より多くが、マイクロニードル上に堆積される。場合により、乾燥したコーティングは、マイクロニードルの上半分、すなわち、基板から遠い側のマイクロニードルの部分上に優先的にある。一実施形態では、実質的に乾燥したコート剤は、基板上に堆積されない、すなわち、実質的に乾燥したコート剤の全てが、マイクロニードル上に堆積される。一実施形態では、実質的に乾燥したコート剤の全ては、マイクロニードルの上半分上に堆積される。乾燥したコート剤の厚さは、マイクロニードルアレイの位置、及びコーティングされたマイクロニードルアレイに対する意図された使用用途に依存して変化する場合がある。典型的な乾燥したコーティング厚さは、５０マイクロメートル未満、多くの場合２０マイクロメートル未満、及び場合により１０マイクロメートル未満である。効果的に皮膚の中に貫入するためのマイクロニードルの能力の障害にならないように、コーティング厚さがマイクロニードルの先端付近でより薄いことが望ましいことがある。
【００７８】
一実施形態では、乾燥したコート剤は、ワクチンを含み、ワクチンは、マイクロニードル上に優先的に堆積される。優先的に堆積されるとは、単位表面積当たりのワクチンの量が、基板上よりマイクロニードル上でより多くなるという意味である。より好ましくは、ワクチンは、マイクロニードルの先端上又は先端付近に優先的に堆積される。場合により、重量比でワクチンの半分より多くが、マイクロニードル上に堆積される。場合により、ワクチンは、マイクロニードルの上半分、すなわち、基板から遠い側のマイクロニードルの部分上に優先的にある。一実施形態では、実質的にワクチンは、基板上に堆積されない、すなわち、実質的にワクチンの全てが、マイクロニードル上に堆積される。一実施形態では、実質的にワクチンの全ては、マイクロニードルの上半分上に堆積される。
【００７９】
一実施形態では、乾燥したコート剤は、アルミニウムを含み（いくつかの実施形態では、アルミニウムは、水酸化アルミニウム又はリン酸アルミニウムなどのアルミニウム塩の形態であり、いくつかの実施形態では、アルミニウムは、ワクチンにアジュバント化される）、アルミニウムは、マイクロニードル上に優先的に堆積される。優先的に堆積されるとは、単位表面積当たりのアルミニウムの量が、基板上よりマイクロニードル上でより多くなるという意味である。より好ましくは、アルミニウムは、マイクロニードルの先端上又は先端付近に優先的に堆積される。場合により、重量比でアルミニウムの半分より多くが、マイクロニードル上に堆積される。場合により、アルミニウムは、マイクロニードルの上半分、すなわち、基板から遠い側のマイクロニードルの部分上に優先的にある。一実施形態では、実質的にアルミニウムは、基板上に堆積されない、すなわち、実質的にアルミニウムの全てが、マイクロニードル上に堆積される。一実施形態では、実質的にアルミニウムの全ては、マイクロニードルの上半分上に堆積される。
【００８０】
一実施形態では、本明細書で説明するマイクロニードルアレイは、例えば、アレイ、感圧性接着剤、及びバッキングを含むパッチなどの、パッチの形態で皮膚表面に貼り付けることができる。アレイのマイクロニードルは、任意の所望のパターンに配置する、又はマイクロニードル基板表面にわたってランダムに分布させることができる。一実施形態では、本発明のアレイは、約０．１ｃｍ２より大きく、かつ約２０ｃｍ２未満、好ましくは約０．５ｃｍ２より大きく、かつ約５ｃｍ２未満の遠位面の表面積を有する。一実施形態では、パッチの基板表面の一部は、パターンを有しない。一実施形態において、パターンを有しない表面は、患者の皮膚表面に面するデバイス表面の総面積の約１％よりも大きく、かつ約７５％よりも小さい面積を有する。一実施形態では、パターンを有しない表面は、約０．１０平方インチ（０．６５ｃｍ２）より大きく、約１平方インチ（６．５ｃｍ２）未満の面積を有する。別の実施形態では、マイクロニードルは、実質的にアレイの表面積全体にわたって配置される。
【００８１】
図２は、複数のマイクロニードル２１を有するマイクロニードルアレイ２０の一部分の顕微鏡写真を示す。マイクロニードル２１は、本明細書で説明する組成物の一実施形態から形成されたコーティング２２（実施例３のコーティング）でコーティングされている。それぞれのマイクロニードル２１は、マイクロニードルの先端２３からマイクロニードル基板２５のマイクロニードルの底部２４までの長さである、高さｈを有することができる。単一のマイクロニードルの高さ又はマイクロニードルアレイ上の全てのマイクロニードルの平均高さのいずれかを、マイクロニードルの高さｈと呼ぶことができる。実施形態では、複数のマイクロニードルのそれぞれ（又は複数のマイクロニードルの全ての平均）は、約１〜１２００マイクロメートル（μｍ）の高さを有すことができる。実施形態では、複数のマイクロニードルのそれぞれは、約１〜１０００μｍの高さを有することができる。実施形態では、複数のマイクロニードルのそれぞれは、約２００〜７５０μｍの高さを有することができる。
【００８２】
図２で、コーティングされた材料は、マイクロニードル２１の先端２３付近で「涙滴」形状を形成している。この形状は、マイクロニードルの先端付近の材料を集中するが先端形状を顕著に変更せず、したがって、皮膚への効果的な貫入及びコーティングされた材料の皮膚内への送達を可能にすることから、特に望ましいことがある。涙滴形状は、一般的に、上方から観察した（すなわち、マイクロニードルアレイ基板２５に向かってニードル２１の軸を見下ろす）場合の乾燥したコーティングの最大寸法、及び乾燥したコーティングの最大寸法が生じるところの基板２５からの高さにより特徴付けることができる。
【００８３】
いくつかの実施形態では、コーティングされたマイクロニードルデバイスは、表面積を有する。いくつかの実施形態では、コーティングされたマイクロニードルデバイスは、マイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり少なくとも０．０３マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり少なくとも１マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり少なくとも３マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり少なくとも８マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり少なくとも１０マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり少なくとも１２マイクログラムのアルミニウム、又はマイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり少なくとも１５マイクログラムのアルミニウムを含む。いくつかの実施形態では、コーティングされたマイクロニードルデバイスは、マイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり０．０３〜１８マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり３〜１５マイクログラムのアルミニウム、又はマイクロニードルアレイの表面積１ｃｍ２当たり６〜１２マイクログラムのアルミニウムを含む。
【００８４】
いくつかの実施形態では、コーティングされたマイクロニードルデバイスは、マイクロニードルアレイ当たり少なくとも０．０３マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイ当たり少なくとも１マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイ当たり少なくとも３マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイ当たり少なくとも８マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイ当たり少なくとも１０マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイ当たり少なくとも１２マイクログラム、又はマイクロニードルアレイ当たり少なくとも１５マイクログラムのアルミニウムを含む。いくつかの実施形態では、コーティングされたマイクロニードルデバイスは、マイクロニードルアレイ当たり０．０３〜１８マイクログラムのアルミニウム、マイクロニードルアレイ当たり３〜１５マイクログラムのアルミニウム、又はマイクロニードルアレイ当たり６〜１２マイクログラムのアルミニウムを含む。
【００８５】
コーティングされたマイクロニードルアレイを形成する方法もまた、本明細書で開示される。そのような方法は、通常、マイクロニードルアレイを用意する工程を含む。マイクロニードルアレイを用意する工程は、マイクロニードルアレイを加工すること、マイクロニードルアレイを得ること（例えばマイクロニードルアレイを購入することによって）、又はこれらの何らかの組み合わせによって達成することができる。
【００８６】
マイクロニードルアレイをコーティングする方法を使用して、コーティングされたマイクロニードルアレイを形成することができる。コーティングされたマイクロニードルアレイは、複数のマイクロニードル、及び複数のマイクロニードルの少なくとも一部分上のコーティング組成物を含むことができる。
【００８７】
ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤を形成する方法もまた、本明細書で開示される。本発明のミョウバンアジュバント化ワクチン製剤を形成する方法の一実施形態を、図１の流れ図に示す。通常、そのような方法は、水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択される第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を用意すること１０と、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して第２の濃縮したアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造すること１１と、哺乳動物に免疫反応を刺激するのに有効な量の少なくとも１つのワクチンを第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に添加して混合して、ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤を形成すること１２と、を含む。いくつかの実施形態では、方法は、糖（いくつかの実施形態では、糖アルコール、糖の組み合わせ、糖アルコールの組み合わせ、又は糖（単数又は複数）及び糖アルコール（単数又は複数）の組み合わせ）を添加１３及び増粘剤を添加１４して、糖又は糖アルコール及び増粘剤をミョウバンアジュバント化ワクチン製剤内に混合する、任意選択の工程（単数又は複数）を更に含む。上述したものなどの他の任意選択の賦形剤もまた、添加することができる（図示せず）。いくつかの実施形態では、他の任意選択の賦形剤は、糖又は糖アルコールを添加する工程の直前に、間に、又は直後に添加することができる。いくつかの実施形態では、全ての他の任意選択の賦形剤は、増粘剤を添加する前に添加される。いくつかの実施形態では、１つの任意選択の賦形剤、緩衝剤は、糖を製剤内に添加して混合する工程の前に、間に、後に添加することができる。本明細書の他の所で説明したように、緩衝剤はまた、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮する工程の間に添加することができる。糖又は糖アルコール、増粘剤、緩衝剤、及び他の任意選択の賦形剤は、先に説明している。製剤が形成されたら、製剤は、マイクロニードル上にコーティングされる１５か、後のコーティング若しくは配送のために貯蔵されるか、又はコーティングサイトに配送されることができる。いくつかの実施形態では、糖若しくは糖アルコール、増粘剤、緩衝剤、又は任意選択の他の賦形剤を添加する工程は、単一の工程（図示せず）、又は、例えば、同じ工程内で糖若しくは糖アルコール及び任意選択の賦形剤を添加して、次に別個の工程で増粘剤を添加することなどの、一連の組み合わせた工程（図示せず）に組み合わせることができる。
【００８８】
通常、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、水、及び水酸化アルミニウム又はリン酸アルミニウムなどのアルミニウム塩を含む。アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して第２の濃縮したアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造する工程は、当該技術分野で一般的に既知の任意の濃縮方法を含むことができる。例えば、いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液から水の一部を蒸発させることにより濃縮することができる。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮する工程は、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を遠心分離機にかけて、水の少なくとも一部分を懸濁液（例えば、上澄み）から分離し、次に、上澄みの少なくとも一部分を除去することにより、実現することができる。
【００８９】
いくつかの実施形態では、第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１のアルミニウム濃度を有し、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第２のアルミニウム濃度を有し、第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より少なくとも１．２倍大きい。いくつかの実施形態では、第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より１．２〜２倍大きい。いくつかの実施形態では、第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より１．５〜２倍大きい。例えば、第１及び第２のアルミニウム濃度は、ｍｇ／ｍＬにより表現することができる。本明細書で使用される場合、アルミニウム濃度は、アルミニウムの元素濃度を意味する。
【００９０】
いくつかの実施形態では、第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１の体積を有し、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することにより、第１の体積は減少し、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液が第１の体積より小さい第２の体積を有する。いくつかの実施形態では、第２の体積は、第１の体積より少なくとも２０％小さい、第１の体積より少なくとも３５％小さい、第１の体積より少なくとも５０％小さい、第１の体積より少なくとも６０％小さい、第１の体積より少なくとも７０％小さい、第１の体積より少なくとも８０％小さい。いくつかの実施形態では、第２の体積は、第１の体積より約２０％〜約８０％小さい、第１の体積より約２０％〜約７０％小さい、第１の体積より約３０％〜約６０％小さい。いくつかの実施形態では、第２の体積は、第１の体積より約５０％小さい。
【００９１】
通常、少なくとも１つのワクチンを第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合する工程は、例えば、ワクチンを懸濁液内に配置して手動でワクチンを懸濁液内に混合することなどの、当該技術分野で既知の任意の混合方法を含む。いくつかの実施形態では、混合することは、ワクチンを懸濁液内に配置したら、懸濁液をボルテックスすること、振動させること、渦を巻かせること、又は別の方法で攪拌することを含む。いくつかの実施形態では、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液と少なくとも１つのワクチンとの混合物は、１時間、２時間、１〜８時間、１〜１０時間、又はより長時間などの所望の時間期間の間、静置させることができ得る。そのような静置時間は、使用されるワクチンの種類及び所望の用途に依存するであろう。
【００９２】
通常、少なくとも１つのワクチンを第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合する工程は、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮することの後で、かつ使用される任意の糖、糖アルコール、増粘剤、又は他の賦形剤を混合する前に、行われる。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、第１又は第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合する、又はワクチンの添加の前にアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液の水を置換するために使用することができる。
【００９３】
通常、糖若しくは糖アルコール、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせをミョウバンアジュバント化ワクチン製剤内に混合する工程（単数又は複数）は、ワクチンをアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合するための上述した同じ方法を含む。いくつかの実施形態では、糖若しくは糖アルコール、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせは、糖若しくは糖アルコール、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせが完全に溶解するまで、ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤内に混合される。いくつかの実施形態では、糖若しくは糖アルコール、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせは、糖若しくは糖アルコール、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせが部分的に溶解するまで、ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤内に混合される。
【００９４】
ワクチンコーティングされたマイクロニードルアレイのミョウバン含有量を最大化する方法、並びにワクチン及びアジュバントコーティングされたマイクロニードルアレイを形成するための方法もまた、本明細書で開示される。通常、方法は、マイクロニードル基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイを用意することと、本明細書に説明する方法によりミョウバンアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、複数のマイクロニードルの少なくとも一部分をミョウバンアジュバント化ワクチン製剤に接触させて、それにより、湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを形成するためにミョウバンアジュバント化ワクチン製剤の少なくとも一部分をマイクロニードルアレイに転写することと、を含む。
【００９５】
複数のマイクロニードルの少なくとも一部分をミョウバンアジュバント化ワクチン製剤に接触させる工程は、当該技術分野で既知の任意のマイクロニードルコーティング方法を含むことができる。例えば、製剤は、例えば、米国特許第８，４１４，９５９号（Ｃｈｏｉら）、米国特許出願公開第２０１４／００６８４２号（Ｚｈａｎｇら）、及び米国特許出願公開第２０１３／０１２３７０７号（Ｄｅｔｅｒｍａｎら）に記載されているような浸漬コーティングによりマイクロニードルに塗布することができ、それら特許及び特許出願の開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００９６】
マイクロニードルを製剤に接触させる工程は、１回より多く行うことができる。例えば、マイクロニードルと製剤との間の接触を一旦終了した後、マイクロニードル及び製剤は、再び接触させることができる。マイクロニードル及び製剤を接触させる任意選択の第２の（及び任意選択のその後の）工程は、直ちに行うことができる、又は接触工程の間に遅延があってもよい。
【００９７】
方法は、コーティングされたマイクロニードルアレイを形成するために湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを乾燥することを追加して含むことができる。例えば、蒸発させることなどの利用可能な乾燥方法が、上述されている。
【００９８】
マイクロニードル基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイを用意することと、本明細書で説明するようなミョウバンアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、複数のマイクロニードルの少なくとも一部分をミョウバンアジュバント化ワクチン製剤に接触させて、それにより、ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤の少なくとも一部分をマイクロニードルアレイに転写して湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを形成することと、湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを乾燥してコーティングされたマイクロニードルアレイを形成することと、哺乳動物の皮膚の少なくとも一部分をマイクロニードルアレイの少なくとも一部分に接触させることと、複数のマイクロニードルを哺乳動物の皮膚にミョウバンアジュバント化ワクチンを哺乳動物に送達するために充分な深さに貫入させるためにマイクロニードルアレイに充分な圧力を印加することと、を含む、ミョウバンアジュバント化ワクチンを哺乳動物に送達する方法もまた、本明細書に開示される。
【００９９】
マイクロニードルデバイスは、例えば、適用して該適用箇所からデバイスを即時除去する、というように即時送達のために使用することができる、又は数分から１週間の間までの範囲でありうる延長された時間だけ、所定位置に留めることができる。一態様では、延長された送達時間は、適用して即時除去する場合に得られるものより完全な薬剤の送達を可能にするために、１〜３０分とすることができる。他の態様において、延長された送達時間は、薬の持続放出性を提供するために４時間〜１週間であってよい。
実施形態
【０１００】
実施形態１は、
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択されるアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液と、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量のワクチンと、
糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせと、
増粘剤と、を含む組成物であり、
組成物は、１００ｓ−１及び２５℃の温度で測定したとき、５００〜３００００ｃｐｓの粘度を有する。
【０１０１】
実施形態２は、実施形態１による組成物であって、糖を含み、糖は、ラフィノース、スタキオース、スクロース、トレハロース、アピオース、アラビノース、ジギトキソース、フコース、フルクトース、ガラクトース、グルコース、グロース、ハマメロース、イドース、リキソース、マンノース、リボース、タガトース、キシロース、セロビオース、ゲンチオビオース、ラクトース、ラクツロース、マルトース、メリビオース、プリメベロース、ルチノース、シラビオース、ソホロース、ツラノース、及びビシアノースから選択される。
【０１０２】
実施形態３は、実施形態２による組成物であって、糖は、非還元糖である。
【０１０３】
実施形態４は、実施形態３による組成物であって、糖は、ラフィノース、スタキオース、スクロース、及びトレハロースから選択される。
【０１０４】
実施形態５は、実施形態１による組成物であって、糖アルコールを含み、糖アルコールは、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリトリトール、リビトール、及びイノシトールから選択される。
【０１０５】
実施形態６は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、増粘剤は、ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロース、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、デキストラン、ポリビニルピロリドン、及びそれらの混合物から選択される。
【０１０６】
実施形態７は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、ワクチンは、ＤＮＡワクチン、細胞性ワクチン、組み換えタンパクワクチン、治療用癌ワクチン、炭疽病ワクチン、インフルエンザワクチン、ライム病ワクチン、狂犬病ワクチン、麻疹ワクチン、おたふく風邪ワクチン、水痘ワクチン、天然痘ワクチン、Ａ型肝炎ワクチン、Ｂ型肝炎ワクチン、Ｃ型肝炎ワクチン、百日咳ワクチン、風疹ワクチン、ジフテリアワクチン、脳炎ワクチン、日本脳炎ワクチン、呼吸器合胞体ウイルスワクチン、黄熱病ワクチン、エボラウイルスワクチン、ポリオワクチン、ヘルペスワクチン、ヒトパピローマウイルスワクチン、ロタウイルスワクチン、肺炎球菌ワクチン、髄膜炎ワクチン、百日咳ワクチン、破傷風ワクチン、腸チフスワクチン、コレラワクチン、結核ワクチン、重症急性呼吸器症候群ワクチン、ＨＳＶ−１ワクチン、ＨＳＶ−２ワクチン、ＨＩＶワクチン、及びそれらの組み合わせから選択される。
【０１０７】
実施形態８は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、ワクチンは、コーティング製剤の０．５重量％〜５０重量％の量で存在する。
【０１０８】
実施形態９は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、コーティング製剤の１０重量％〜７０重量％の量で存在する。
【０１０９】
実施形態１０は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせは、コーティング製剤の０．０１重量％〜６０重量％の量で存在する。
【０１１０】
実施形態１１は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、増粘剤は、コーティング製剤の０．０１重量％〜６０重量％の量で存在する。
【０１１１】
実施形態１２は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、少なくとも１つの緩衝剤を更に含む。
【０１１２】
実施形態１３は、実施形態１２による組成物であって、緩衝剤は、コーティング製剤の１重量％〜２０重量％の量で存在する。
【０１１３】
実施形態１４は、実施形態１２による組成物であって、少なくとも１つの緩衝剤は、ヒスチジン、リン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、クエン酸塩緩衝剤、グリシン緩衝剤、酢酸アンモニウム緩衝剤、コハク酸塩緩衝剤、ピロリン酸塩緩衝剤、トリス酢酸緩衝剤、トリス緩衝剤、リン酸緩衝生理食塩水、トリス緩衝生理食塩水、生理食塩水酢酸ナトリウム緩衝液、及び生理食塩水クエン酸ナトリウム緩衝液から選択される。
【０１１４】
実施形態１５は、実施形態１４による組成物であって、少なくとも１つの緩衝剤は、リン酸緩衝生理食塩水である。
【０１１５】
実施形態１６は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、０．０１重量％〜５重量％のアルミニウムを含む。
【０１１６】
実施形態１７は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、０．１重量％〜２重量％のアルミニウムを含む。
【０１１７】
実施形態１８は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、５ｍｇ／ｍＬ〜２２ｍｇ／ｍＬのアルミニウムを含む。
【０１１８】
実施形態１９は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、０．０１〜１０重量％のアルミニウムを含む。
【０１１９】
実施形態２０は、前述の実施形態のいずれか１つによる組成物であって、０．５〜３重量％のアルミニウムを含む。
【０１２０】
実施形態２１は、
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択されるアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液と、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量のワクチンと、
糖、糖アルコール、又はそれらの組み合わせと、
増粘剤と、から本質的になる組成物であって、
組成物は、１００ｓ−１及び２５℃の温度で測定したとき、５００〜３００００ｃｐｓの粘度を有する。
【０１２１】
実施形態２２は、
基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイと、
マイクロニードルのうちの１つ以上の少なくとも一部分にコーティングされた請求項１〜１９のいずれか１つの組成物と、を備えるデバイスである。
【０１２２】
実施形態２３は、実施形態２２によるデバイスであって、デバイスは、表面積を有し、表面積の１ｃｍ２当たり少なくとも０．０３マイクログラムのアルミニウムを含む。
【０１２３】
実施形態２４は、実施形態２２によるデバイスであって、デバイスは、表面積を有し、表面積の１ｃｍ２当たり０．０３〜１８マイクログラムのアルミニウムを含む。
【０１２４】
実施形態２５は、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成する方法であって、
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択される第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を用意することと、
アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することと、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量の少なくとも１つのワクチンを第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合して、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、を含む方法である。
【０１２５】
実施形態２６は、実施形態２５による方法であって、第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１のアルミニウム濃度を有し、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第２のアルミニウム濃度を有し、第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より少なくとも１．２倍大きい。
【０１２６】
実施形態２７は、実施形態２５による方法であって、第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１のアルミニウム濃度を有し、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第２のアルミニウム濃度を有し、第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より１．２〜２倍大きい。
【０１２７】
実施形態２８は、実施形態２６による方法であって、第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１のアルミニウム濃度を有し、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第２のアルミニウム濃度を有し、第２のアルミニウム濃度は、第１のアルミニウム濃度より１．５〜２倍大きい。
【０１２８】
実施形態２９は、実施形態２５による方法であって、第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液は、第１の体積を有し、アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することにより第１の体積は減少し、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液が第１の体積より小さい第２の体積を有する。
【０１２９】
実施形態３０は、実施形態２９による方法であって、第２の体積は、第１の体積より少なくとも２０％小さい。
【０１３０】
実施形態３１は、実施形態２９による方法であって、第２の体積は、第１の体積より２０％〜８０％小さい。
【０１３１】
実施形態３２は、実施形態２５〜３１のいずれか１つによる方法であって、少なくとも１つの賦形剤をアルミニウムアジュバント化ワクチン製剤内に混合することを更に含む方法である。
【０１３２】
実施形態３３は、実施形態３２による方法であって、少なくとも１つの賦形剤は、糖、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせを含む。
【０１３３】
実施形態３４は、ワクチンコーティングされたマイクロニードルアレイのアルミニウム含有量を最大化するための方法であって、
マイクロニードル基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイを用意することと、
アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を、
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択される第１のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を用意することと、
アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して、第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することと、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量の少なくとも１つのワクチンを第２のアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合して、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、により形成することと、
複数のマイクロニードルの少なくとも一部分をアルミニウムアジュバント化ワクチン製剤と接触させて、それにより、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤の少なくとも一部分をマイクロニードルアレイに転写して、湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを形成することと、を含む方法である。
【０１３４】
実施形態３５は、実施形態３４による方法であって、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤を形成することは、少なくとも１つの賦形剤をアルミニウムアジュバント化ワクチン製剤内に混合することを更に含む。
【０１３５】
実施形態３６は、実施形態３５による方法であって、少なくとも１つの賦形剤は、糖、増粘剤、緩衝剤、又はそれらの組み合わせを含む。
【０１３６】
実施形態３７は、実施形態３４〜３６のいずれか１つによる方法であって、複数のマイクロニードルの少なくとも一部分をアルミニウムアジュバント化ワクチン製剤に接触させることは、マイクロニードルアレイを浸漬コーティングすることを含む。
【０１３７】
実施形態３８は、実施形態３４〜３７のいずれか１つによる方法であって、コーティングされたマイクロニードルアレイを形成するために湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを乾燥することを更に含む方法である。
【０１３８】
実施形態３９は、実施形態３８による方法であって、乾燥することは、アルミニウムアジュバント化ワクチン製剤の少なくとも一部分が蒸発することを可能にすることを含む。
【０１３９】
実施形態４０は、アルミニウムアジュバント化ワクチンを哺乳動物に送達する方法であって、
マイクロニードル基板及び複数のマイクロニードルを含むマイクロニードルアレイを用意することと、ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤を、
水酸化アルミニウム湿潤ゲル懸濁液及びリン酸アルミニウム湿潤ゲル懸濁液から選択されるアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を用意することと、
アルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を濃縮して、濃縮したアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液を製造することと、
哺乳動物の免疫反応を刺激するために有効な量の少なくとも１つのワクチンを濃縮したアルミニウム含有湿潤ゲル懸濁液内に混合して、ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤を形成することと、により形成することと、
複数のマイクロニードルの少なくとも一部分をミョウバンアジュバント化ワクチン製剤と接触させて、それにより、ミョウバンアジュバント化ワクチン製剤の少なくとも一部分をマイクロニードルアレイに転写して、湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを形成することと、
湿潤コーティングされたマイクロニードルアレイを乾燥して、コーティングされたマイクロニードルアレイを形成することと、
哺乳動物の皮膚の少なくとも一部分をマイクロニードルアレイの少なくとも一部分に接触させることと、
複数のマイクロニードルを哺乳動物の皮膚にミョウバンアジュバント化ワクチンを哺乳動物に送達するために充分な深さに貫入させるためにマイクロニードルアレイに充分な圧力を印加することと、を含む方法である。
実施例
【０１４０】
マイクロニードルアレイの作製
マイクロニードルアレイは、Ｃｌａｓｓ  ＶＩの医療用グレードの液晶ポリマー（ＬＣＰ、Ｔｉｃｏｎａ  Ｐｌａｓｔｉｃｓ（Ａｕｂｕｒｎ  Ｈｉｌｌｓ，Ｍｉｃｈｉｇａｎ）のＶｅｃｔｒａ（登録商標）ＭＴ１３００）から射出成形された。アレイは、概略１．２７ｃｍ２の表面積を有した。それぞれのマイクロニードルアレイは、マイクロニードルの約５００マイクロメートルの高さ、概略３：１のアスペクト比、及び約５５０マイクロメートルの隣接するマイクロニードル間の先端間距離を有する、八角形パターンに配置された３１６個の四角錐形状のマイクロニードルを備えていた。アレイは、１５１３両面医療用接着剤（３Ｍ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｐａｕｌ，ＭＮ））を有する、５ｃｍ２の粘着性パッチに取り付けられた。
【０１４１】
オボアルブミン含有量に対する分析手順
コーティングされたマイクロニードルアレイのオボアルブミン含有量は、高速液体クロマトグラフィ（high performance liquid chromatography）（ＨＰＬＣ）により判定された。コーティングされたアレイをポリプロピレン製の試料カップ内に配置して、１ｍＬの抽出溶液（リン酸緩衝生理食塩水内に２００ｍｃｇ／ｍＬのポリソルベート８０）を添加し、キャップを試料カップにスナップ閉めして、次に、３０分間試料を揺り動かすことにより、コーティングされたアレイからコーティング製剤を抽出した。抽出溶液の一部分（２０μＬ）が、６０℃に温度自動調節された、５０×２．１ｍｍ、３．５マイクロメートルの粒子サイズのＺＯＲＢＡＸ  ＳＢ３００−Ｃ８カラム（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ））を含むＨＰＬＣ測定器内に注入された。移動相は、２つの溶離液からなった。溶離液Ａは、水、アセトニトリル、及びリン酸（９００：１００：３）であって、溶離液Ｂは、水、アセトニトリル、及びリン酸（１００：９００：３）であった。移動相の流動率は、０．４ｍＬ／分であった。オボアルブミンは、１０％の溶離液Ｂから９０％の溶離液Ｂに５分の勾配を使用してカラムから溶離された。
【０１４２】
アルミニウム含有量に対する分析手順
コーティングされたマイクロニードルアレイのアルミニウム含有量は、誘導結合プラズマ原子発光分光法（Inductively Coupled Plasma-Atomic Emission Spectroscopy）（ＩＣＰ−ＡＥＳ）により判定された。コーティングされたアレイをポリプロピレン製の試料カップ内に配置して、１ｍＬの抽出溶液（リン酸緩衝生理食塩水内に２００ｍｃｇ／ｍＬのポリソルベート８０）を添加し、キャップを試料カップにスナップ閉めして、次に、３０分間揺り動かすことにより、コーティングされたアレイからコーティング製剤を抽出した。抽出溶液の試料（０．５ｍＬ）は、ＩＣＰ−ＡＥＳによる分析の前に、１０ｍＬの４％硝酸溶液に添加して、反転により混合された。
【０１４３】
生体内免疫調査のための手順
コーティングされたマイクロニードルアレイにより送達されたワクチンに対する免疫反応を従来のニードル付き注射器による方法により皮下に送達されたワクチンに対する免疫反応と比較するために、生体内免疫調査が行われた。オスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓからのＣＤ−ＩＧＳ血統、公称４００ｇ）が使用された（コーティングされたマイクロニードルアレイの群に３匹、比較対象群（ニードル付き注射器による投与）に３匹）。それぞれの動物は、最初に、酸素中に５％のイソフルレンを使用してチャンバ内で麻酔をかけられ、次に、作業の継続時間の間、その鼻及び口が麻酔用フェイスマスクの内側に配置された状態で温度自動調節制御された表面上に横向きで寝る姿勢で置かれた。イソフルレンは、作業中、１．５〜３．０％に維持された。
【０１４４】
マイクロニードル処置の群に対して、肩上の適用領域を、Ｏｓｔｅｒ製電気バリカン（＃５０ブレード）を用いて刈り込んだ。刈り込まれた区域を、次に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ製電気かみそりを用いて剃毛した。
【０１４５】
ニードル付き注射器による皮下（subcutaneous）（ＳＣ）投与を受けた比較対象群に対して、肩上の注入領域を、Ｏｓｔｅｒ製電気バリカンを用いて刈り込んだ。剃毛した皮膚を、７０％のイソプロピルアルコール（isopropyl alcohol）（ＩＰＡ）に浸漬したガーゼパッドを用いて拭くことにより洗浄した。ＩＰＡは、投薬の前に少なくとも３０秒間、蒸発させた。
【０１４６】
コーティングされたマイクロニードルアレイを含む粘着性パッチは、米国特許出願第２００８／００３９８０５号に記載されているような機械式アプリケータを使用して準備された適用箇所に貼り付けられた。それぞれの塗布の後で、パッチは、１５分間、適用箇所に維持されて、その後、除去された。パッチは、調査の０日目（投与−１）、１４日目（投与−２）、及び２８日目（投与−３）に貼り付けられた。
【０１４７】
比較対象群は、オボアルブミン（１回の投与当たり３０ｍｃｇ）及びＡｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）（１回の投与当たり１６０ｍｃｇ−アルミニウム）を含有する製剤を用いて、ニードル付き注射器（１ｍＬのルアーロック注射器（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ））に取り付けられた２０ゲージ−１インチのＭｏｎｏｊｅｃｔニードルを用いて１回の投与当たり０．５ｍＬのボーラス注入法）を使用して同じ時点で皮下に投与された。
【０１４８】
比較対象群に対する注射可能な製剤は、ＥｎｄｏＦｉｔオボアルブミン（ピロゲンなし、ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ））、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）２％（Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒ（Ｄｅｎｍａｒｋ））、ポリソルベート８０（ＮＦグレード、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ））、エチルアルコール（２００プルーフ、ＵＳＰグレード、Ａａｐｅｒ（Ｓｈｅｌｂｙｖｉｌｌｅ，ＫＹ））、及びリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、１０Ｘ、ＨｙＣｌｏｎｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｌｏｇａｎ，ＵＴ））から調製された。注射可能な製剤は、以下の７工程の手順により調製された。工程−１）１ＸＰＢＳは、５０ｍＬの１０ＸＰＢＳを４５０ｍＬの高純度水（Ｍｉｌｌｉ−Ｑ５０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ））と混合することにより調製された。工程−２）エチルアルコール（１ｍＬ）が、１５ｍＬのバイアル瓶に入ったポリソルベート８０（０．１ｇ）に添加された。バイアル瓶は、蓋をされて、試料は、ポリソルベート８０を溶解するように揺り動かすことにより混合された。工程−３）ポリソルベート８０の溶液は、５００ｍＬのＰＢＳ内に移されて、揺り動かすことにより混合された。工程−４）ＰＢＳ／ポリソルベート８０の溶液（５０ｍＬ）は、細菌濾過されて、無菌のねじ蓋式バイアル瓶に入れられた（無菌のＭｉｌｌｅｘ−ＧＶ  ０．２２マイクロメートル注射器フィルタ（直径３３ｍｍフィルタ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｌｔｄ（Ｔｕｌｌａｇｒｅｅｎ，ＩＲＬ））及び無菌注射器（６０ｍＬ、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を使用して）。工程−５）Ｅｎｄｏｆｉｔオボアルブミンの１ｍｇ／ｍＬ貯蔵液は、０．００１４ｇのオボアルブミンを計量して２ｍＬのねじ蓋式バイアル瓶に入れて、１．４ｍＬの細菌濾過したＰＢＳ／ポリソルベート８０溶液を添加し、１０分間揺り動かすことによって混合することにより調製された。工程−６）Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）懸濁液（０．４ｍＬ）及び０．６ｍＬのオボアルブミン貯蔵液（１ｍｇ／ｍＬ）は、２ｍＬのねじ蓋式バイアル瓶に添加され、１０分間揺り動かすことにより混合された。工程−７）オボアルブミン−Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ混合物は、１５ｍＬのねじ蓋式バイアル瓶に移されて、９ｍＬのＰＢＳ／ポリソルベート８０溶液が添加された。バイアル瓶を、蓋をして、４５分間揺り動かして、オボアルブミン−Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌの注射可能な製剤を得た。
【０１４９】
血液試料（０．８ｍＬ）は、０日目、１４日目、２８日目、及び４２日目に動物から得られた。それぞれのサンプリング日において、血液試料は、次の投与量が投与される前に、採取された。血液試料は、ニードル付き注射器（１ｍＬのルアーロック注射器（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に取り付けられた２０ゲージ−１インチＭｏｎｏｊｅｃｔニードル）により前部大動脈から採取され、次に、クロットチューブ（添加剤を有さない２ｍＬのＭｏｎｏｊｅｃｔ管（Ｃｏｖｉｄｉｅｎ（Ｍａｎｎｓｆｉｅｌｄ，ＭＡ））に移された。室温で３０分後に、セラムチューブは、血清を凝固した赤血球から分離するために、遠心分離機にかけられた（ＧＬＳ遠心分離機、ＧＨ３−７ローター、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ（Ｓｃｈａｕｍｂｕｒｇ，ＩＬ））。血清は、ねじ蓋の付いたＢｉｏＳｔｏｒバイアル瓶（２ｍＬ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｃｌａｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ））に移されて、次に、ドライアイス上で凍結された。血清試料は、その後ＥＬＩＳＡにより抗体力価に関して試験されるまで−８０℃で貯蔵された。血清試料内の抗オボアルブミンＩｇＧ含有量を判定するために、Ａｌｐｈａ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ，ＴＸ）製のＥＬＩＳＡキット及び手順（６１０−１００−ＯＧＧ）が使用された。ＳＰＥＣＴＲＡＭＡＸｐｌｕｓプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ））を使用して、ＥＬＩＳＡプレートの窪み内の色の強さを定量化した。
【０１５０】
実施例１．
マイクロニードルアレイをコーティングするための製剤は、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）（水酸化アルミニウムゲル剤、１０ｍｇ−アルミニウム／ｍＬ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒにより製造された）、Ｅｎｄｏｆｉｔオボアルブミン（ピロゲンなし、ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ））、スクロース（ＡＣＳグレード、Ｓｉｇｍａ）、及びヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ、１００ｃＰ、ＮＦグレード、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて調製された。Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（１ｍＬ）は、２ｍＬのマイクロチューブに移されて、チューブは、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機（Ｍｉｎｉｓｐｉｎ  Ｐｌｕｓ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ（Ｗｅｓｔｂｕｒｙ，ＮＹ））にかけられた。上澄み（０．３３ｍＬ）が、チューブから除去された。オボアルブミン（４５ｍｇ）が、チューブに添加された。チューブは、蓋をされて、揺り動かされて、オボアルブミン及びＡｌｈｙｄｒｏｇｅｌが混合された。スクロース（１８５ｍｇ）及びＨＥＣ（１００ｍｇ）がチューブに添加され、チューブは、濃く均一な製剤を得るために混合された（Ｔｕｒｂｕｌａ混合機（９６回転／分）、Ｇｌｅｎｎ  Ｍｉｌｌｓ  Ｉｎｃ．（Ｃｌｉｆｔｏｎ，ＮＪ））。混合された製剤は、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機にかけることにより、チューブの底部に集められた。
【０１５１】
マイクロニードルの先端上にオボアルブミン：Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ製剤をコーティングするために、米国特許第８４１４９５９号（実施例１６）に記載されているような周囲室内条件（２０℃、相対湿度４０％）での浸漬コーティングプロセスが使用された。マイクロニードルをコーティングするために、それぞれのアレイに対して、３回の浸漬が、それぞれの浸漬の間に１．５秒休止して、行われた。アレイは、室温で光及び湿気を防ぐホイルポーチ（Ｏｌｉｖｅｒ−Ｔｏｌａｓ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｉｎｇ（Ｆｅａｓｔｅｒｖｉｌｌｅ，ＰＡ））内に貯蔵される前に、周囲条件で約３０分間、乾燥できるようにされた。
【０１５２】
アレイ当たり平均オボアルブミン含有量（ｎ＝３）及びアレイ当たり平均アルミニウム含有量（ｎ＝３）が、表１に報告されている。
【表１】
2018502927.tif 000002
【０１５３】
実施例２
実施例１に説明したように調製されたコーティングされたマイクロニードルアレイが、調製されて、上述した生体内免疫調査（ニードル付き注射器の比較対象を含む）を使用して評価された。マイクロニードルアレイを用いてラットに投薬した後で、アレイ上のオボアルブミンの残留量が、上述した手順を使用してＨＰＬＣにより定量化された。送達されたオボアルブミンの投与量を判定するために、オボアルブミンの残留量は、初期のオボアルブミン含有量から差し引かれた。残留するオボアルブミン及びアルミニウムの両方を定量化するには充分でない試料があったため、送達されたアルミニウムの量を計算するために、送達されたオボアルブミンのパーセント値が使用された。抗オボアルブミンＩｇＧに対する抗体力価を定量化するために、血清試料は、上述した方法によりＥＬＩＳＡにより試験された。表２ａ及び表２ｂは、ニードル付き注射器による投与（比較対象）により送達されたオボアルブミン及びアルミニウムの投与量及びコーティングされたマイクロニードルアレイによる投与により送達されたオボアルブミン及びアルミニウムの投与量を集計している。それぞれの試料に対する対応する抗体力価もまた、報告されている。
【表２】
2018502927.tif 000003
【表３】
2018502927.tif 000004
【０１５４】
実施例３．
マイクロニードルアレイをコーティングするための製剤は、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）（水酸化アルミニウムゲル剤、１０ｍｇ−アルミニウム／ｍＬ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒにより製造された）、Ｅｎｄｏｆｉｔオボアルブミン（ピロゲンなし、ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）、スクロース（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、及びヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ、１００ｃＰ、ＮＦグレード、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて調製された。Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（１ｍＬ）は、２ｍＬのマイクロチューブに移されて、チューブは、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機（Ｍｉｎｉｓｐｉｎ  Ｐｌｕｓ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）にかけられた。上澄み（０．３３ｍＬ）が、チューブから除去された。オボアルブミン（６ｍｇ）が、チューブに添加された。チューブは、蓋をされて、揺り動かされて、オボアルブミン及びＡｌｈｙｄｒｏｇｅｌが混合された。スクロース（２１４ｍｇ）及びＨＥＣ（１１０ｍｇ）がチューブに添加され、チューブは、濃く均一な製剤を得るために混合された（Ｔｕｒｂｕｌａ混合機（９６回転／分）、Ｇｌｅｎｎ  Ｍｉｌｌｓ  Ｉｎｃ．）。混合された製剤は、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機にかけることにより、チューブの底部に集められた。
【０１５５】
マイクロニードルの先端上にオボアルブミン：Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ製剤をコーティングするために、米国特許第８４１４９５９号（実施例１６）に記載されているような周囲室内条件（２０℃、相対湿度４０％）での浸漬コーティングプロセスが使用された。マイクロニードルをコーティングするために、それぞれのアレイに対して、３回の浸漬が、それぞれの浸漬の間に１．５秒休止して、行われた。アレイは、室温で光及び湿気を防ぐホイルポーチ（Ｏｌｉｖｅｒ−Ｔｏｌａｓ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｉｎｇ）内に貯蔵される前に、周囲条件で約３０分間、乾燥できるようにされた。
【０１５６】
アレイ当たり平均オボアルブミン含有量（ｎ＝３）及びアレイ当たり平均アルミニウム含有量（ｎ＝３）が、表３に報告されている。
【表４】
2018502927.tif 000005
【０１５７】
実施例４．
マイクロニードルアレイをコーティングするための製剤は、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（登録商標）（水酸化アルミニウムゲル剤、１０ｍｇ−アルミニウム／ｍＬ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒにより製造された）、オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ））、Ｄ−ソルビトール（９９＋％、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、及びヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ、１００ｃＰ、ＮＦグレード、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて調製された。Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（１ｍＬ）は、２ｍＬのマイクロチューブに移されて、チューブは、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機（Ｍｉｎｉｓｐｉｎ  Ｐｌｕｓ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）にかけられた。上澄み（０．３３ｍＬ）が、チューブから除去された。オボアルブミン（４５ｍｇ）が、チューブに添加された。チューブは、蓋をされて、揺り動かされて、オボアルブミン及びＡｌｈｙｄｒｏｇｅｌが混合された。ソルビトール（１８５ｍｇ）及びＨＥＣ（１００ｍｇ）がチューブに添加され、チューブは、濃く均一な製剤を得るために混合された（Ｔｕｒｂｕｌａ混合機（９６回転／分）、Ｇｌｅｎｎ  Ｍｉｌｌｓ  Ｉｎｃ．）。混合された製剤は、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機にかけることにより、チューブの底部に集められた。
【０１５８】
実施例５．
マイクロニードルアレイをコーティングするための製剤は、ＡｄｊｕＰｈｏｓ（登録商標）（リン酸アルミニウムゲル剤、５ｍｇ−アルミニウム／ｍＬ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒにより製造された）、オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ））、スクロース（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、及びヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ、１００ｃＰ、ＮＦグレード、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて調製された。ＡｄｊｕＰｈｏｓ（１ｍＬ）は、２ｍＬのマイクロチューブに移されて、チューブは、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機（Ｍｉｎｉｓｐｉｎ  Ｐｌｕｓ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）にかけられた。上澄み（０．４０ｍＬ）が、チューブから除去された。オボアルブミン（４０ｍｇ）が、チューブに添加された。チューブは、蓋をされて、揺り動かされて、オボアルブミン及びＡｄｊｕＰｈｏｓが混合された。スクロース（１２０ｍｇ）及びＨＥＣ（８５ｍｇ）がチューブに添加され、チューブは、濃く均一な製剤を得るために混合された（Ｔｕｒｂｕｌａ混合機（９６回転／分）、Ｇｌｅｎｎ  Ｍｉｌｌｓ  Ｉｎｃ．）。混合された製剤は、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機にかけることにより、チューブの底部に集められた。
【０１５９】
実施例６．
マイクロニードルアレイをコーティングするための製剤は、ＡｄｊｕＰｈｏｓ（登録商標）（リン酸アルミニウムゲル剤、５ｍｇ−アルミニウム／ｍＬ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒにより製造された）、オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ））、Ｄ−ソルビトール（９９＋％、Ａｌｄｒｉｃｈ）、及びヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ、１００ｃＰ、ＮＦグレード、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて調製された。ＡｄｊｕＰｈｏｓ（１ｍＬ）は、２ｍＬのマイクロチューブに移されて、チューブは、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機（Ｍｉｎｉｓｐｉｎ  Ｐｌｕｓ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）にかけられた。上澄み（０．４０ｍＬ）が、チューブから除去された。オボアルブミン（４０ｍｇ）が、チューブに添加された。チューブは、蓋をされて、揺り動かされて、オボアルブミン及びＡｄｊｕＰｈｏｓが混合された。ソルビトール（１２０ｍｇ）及びＨＥＣ（８５ｍｇ）がチューブに添加され、チューブは、濃く均一な製剤を得るために混合された（Ｔｕｒｂｕｌａ混合機（９６回転／分）、Ｇｌｅｎｎ  Ｍｉｌｌｓ  Ｉｎｃ．）。混合された製剤は、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機にかけることにより、チューブの底部に集められた。
【０１６０】
実施例７．
マイクロニードルアレイをコーティングするための製剤は、ＡｄｊｕＰｈｏｓ（登録商標）（リン酸アルミニウムゲル剤、５ｍｇ−アルミニウム／ｍＬ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ  Ｂｉｏｓｅｃｔｏｒにより製造された）、オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ））、キシリトール（９９％、Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ（Ｗａｒｄ  Ｈｉｌｌ，ＭＡ））、及びヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ、１００ｃＰ、ＮＦグレード、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて調製された。ＡｄｊｕＰｈｏｓ（１ｍＬ）は、２ｍＬのマイクロチューブに移されて、チューブは、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機（Ｍｉｎｉｓｐｉｎ  Ｐｌｕｓ）にかけられた。上澄み（０．５０ｍＬ）が、チューブから除去された。オボアルブミン（４５ｍｇ）が、チューブに添加された。チューブは、蓋をされて、揺り動かされて、オボアルブミン及びＡｄｊｕＰｈｏｓが混合された。キシリトール（１００ｍｇ）及びＨＥＣ（７０ｍｇ）がチューブに添加され、チューブは、濃く均一な製剤を得るために混合された（Ｔｕｒｂｕｌａ混合機（９６回転／分）、Ｇｌｅｎｎ  Ｍｉｌｌｓ  Ｉｎｃ．）。混合された製剤は、４５００ｒｐｍで３分間、遠心分離機にかけることにより、チューブの底部に集められた。
【図１】
2018502927.tif 000006
【図２】
2018502927.tif 000007
【手続補正書】
【提出日】平成29年10月12日(2017.10.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９５】
複数のマイクロニードルの少なくとも一部分をミョウバンアジュバント化ワクチン製剤に接触させる工程は、当該技術分野で既知の任意のマイクロニードルコーティング方法を含むことができる。例えば、製剤は、例えば、米国特許第８，４１４，９５９号（Ｃｈｏｉら）、米国特許出願公開第２０１４／００６６８４２号（Ｚｈａｎｇら）、及び米国特許出願公開第２０１３／０１２３７０７号（Ｄｅｔｅｒｍａｎら）に記載されているような浸漬コーティングによりマイクロニードルに塗布することができ、それら特許及び特許出願の開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【国際調査報告】
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