(57)【要約】  本明細書では、使いやすい、サンプルを収集するためのサンプル獲得構成要素（ＳＡＣ）と、任意により血漿を分離するための分離構成要素と、分析物を安定化するための１つ以上の安定化構成要素と、を含むシステムおよび方法が開示される。特定の実施形態では、システムおよび方法は、サンプル収集および安定化ならびに任意のサンプル分離を対象とする。他の実施形態は、収集、分離、安定化または検出の任意の組み合わせを実施することができる。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）タグ付きのサンプル獲得および安定化システムを対象に配置するステップであって、前記システムが、（ｉ）前記対象からの構成要素を含む血液サンプルを収集するために構成された血液収集ユニットと、（ｉｉ）前記収集された血液サンプルから前記構成要素を安定化させるために構成された安定化マトリックスと、を含み、前記タグがアッセイに関連するラベルを含む、ステップと、
（ｂ）前記配置されたタグ付きサンプル獲得および安定化システムを収集するステップと、
（ｃ）前記タグに基づいて前記安定化された構成要素についてアッセイを実施するステップと、
（ｄ）前記実施されたアッセイに関するレポートを提供するステップと、を含む、方法。
【請求項２】
ステップ（ｃ）の前に前記安定化マトリックスを前記システムから分離するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記タグが、前記安定化マトリックス上にある、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記サンプル獲得および安定化システムが、前記収集された血液サンプルから前記構成要素を分離するための分離モジュールをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記タグが、前記分離モジュール上にある、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記安定化マトリックスが、複数のアッセイを実施するように構成されている、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記配置されたサンプル獲得および安定化システムに存在する前記タグに基づいて前記血液サンプル内の安定化された生物学的構成要素を同定すること、ならびに前記同定から、実施すべき安定化構成要素特異的アッセイを決定することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記サンプル獲得および安定化システムが、ＲＦＩＤトランスミッタ、カラーラベル、バーコード、または前記サンプルタグとは異なる第２のラベルでラベル付けされる、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
対象の生物学的サンプル由来の１つ以上の生物学的構成要素の分析を実施するための方法であって、
（ａ）（ｉ）サンプル獲得構成要素、ならびに（ｉｉ）ＲＮＡ、ＤＮＡ、およびタンパク質からなる群から選択される少なくとも１つの生物学的構成要素を選択的に安定化させるように構成された１種以上の安定化試薬を含む安定化マトリックスを含む、サンプリングデバイスを得るステップと、
（ｂ）ステップ（ａ）から離れた場所で、前記サンプリングデバイス内または前記サンプリングデバイス上の前記少なくとも１つの安定化された生物学的構成要素についてアッセイを実施するステップと、を含む、方法。
【請求項１０】
前記１種以上の安定化試薬が、固体マトリックス上に配置されるか、または固体マトリックスと一体化され、実質的に乾燥状態にある、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記固体マトリックスが、３７℃で少なくとも１１日間ＲＮＡを実質的に安定化するように構成されている、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記デバイス内または前記デバイス上で実施される前記アッセイが、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、ＤＮＡシーケンシング、ＲＮＡ発現分析、または逆転写ＲＴ−ＰＣＲのうちの１つ以上を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
対象の生物学的サンプル由来の１つ以上の生物学的構成要素の分析を実施するための方法であって、
（ａ）（ｉ）サンプル獲得構成要素、ならびに（ｉｉ）ＲＮＡ、ＤＮＡ、およびタンパク質からなる群から選択される１つ以上の生物学的構成要素を選択的に安定化させるように構成された１種以上の安定化試薬を含む安定化マトリックスを含む、サンプリングデバイスを得るステップと、
（ｂ）前記１つ以上の生物学的構成要素を有する前記安定化マトリックスを前記サンプリングデバイスから取り出すステップと、
（ｃ）前記安定化マトリックスについて１つ以上のアッセイを実施するステップと、を含む、方法。
【請求項１４】
前記安定化マトリックスが、ステップ（ａ）から離れた位置で前記サンプリングデバイスから取り出される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
（ａ）ＤＮＡ、ＲＮＡおよびタンパク質からなる群から選択される１つ以上の生物学的構成要素を選択的に安定化させる１種以上の安定化試薬を含む、実質的に乾燥した固体マトリックスを周囲条件下で受け取ることと、
（ｂ）前記１つ以上の選択的に安定化された生物学的構成要素を分析するために、前記乾燥固体マトリックスから直接的に１つ以上のアッセイを実施することと、を含む、方法。
【請求項１６】
前記安定化試薬が、２％未満の含水量を有する実質的に乾燥状態のメレジトースを含有する固体基板を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記安定化試薬が、前記生物学的サンプルから核酸を抽出および保存するための固体マトリックスを含むサンプル獲得構成要素に結合し、前記固体マトリックスから得られたＲＮＡは、少なくとも４のＲＮＡ  Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ  ｎｕｍｂｅｒ（ＲＩＮ）を有する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
生物学的サンプルを収集し、安定化させるためのデバイスであって、
（ａ）本体およびプランジャを含むサンプル獲得構成要素であって、前記本体ga、近位端と、遠位端と、前記近位端と前記遠位端との間に延在する外側本体表面と、少なくとも１つの孔を含み、前記遠位端に取り付けられている基部と、前記本体h表面内で画定された内腔と、を含み、前記プランジャが前記内腔内に配置され、前記プランジャが、近位端、遠位端、およびいずれかの端部に接続された少なくとも１つのニードルを備え、前記少なくとも１つのニードルが、前記プランジャが作動されたときに前記基部内の前記少なくとも１つの孔を貫通するように構成されている、サンプル獲得構成要素と、
試薬および基板を含むサンプル安定化構成要素であって、生物学的サンプルの構成要素が収集点から前記マトリックスを通って移動するときに、前記生物学的サンプルの構成要素が抽出され、安定化させるように構成され、前記サンプル安定化構成要素が、前記本体の前記内腔内に配置され、前記プランジャを作動させることにより、前記生物学的サンプルが、前記マトリックスの中に入り、前記生物学的サンプルの分離がさらに容易となるサンプル安定化構成要素と、を含む、デバイス。
【請求項１９】
サンプルを収集し、安定化させるためのシステムであって、
（ａ）皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿刺要素を有するサンプル獲得構成要素と、
（ｂ）実質的に乾燥状態のメレジトースを含有する固体基板を含む、サンプル安定化構成要素と、を含む、システム。
【請求項２０】
前記固体基板が、溶解試薬または生体分子安定化試薬をさらに含む、請求項１９に記載のシステム。
【請求項２１】
前記固体基板が、メレジトースを含有する液体溶液に浸漬され、メレジトースを含有する前記液体溶液が、１０〜３０％の範囲の濃度で存在する、請求項１９に記載のシステム。
【請求項２２】
前記固体基板が、酵素活性を保存するために構成されている、請求項１９に記載のシステム。
【請求項２３】
前記キットが、血漿分離構成要素をさらに含む、請求項１９に記載のシステム。
【請求項２４】
生物学的サンプルを収集し、安定化させるためのシステムであって、
（ａ）皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿刺要素を有するサンプル獲得構成要素と、
（ｂ）ＲＮＡ、ＤＮＡまたはタンパク質を選択的に安定化させるための固体マトリックスを含むサンプル安定化構成要素と、を含む、システム。
【請求項２５】
前記固体マトリックスが、ＲＮＡを選択的に安定化し、前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、４より大きいＲＩＮ値を有する、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２６】
血漿分離構成要素をさらに含む、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２７】
前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、少なくとも５のＲＩＮを有する、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２８】
前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、少なくとも６のＲＩＮを有する、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２９】
前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、少なくとも７のＲＩＮを有する、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３０】
前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、７を超えるＲＩＮを有する、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３１】
前記固体マトリックスが、乾燥状態で前記固体マトリックス中に存在する少なくとも１種のタンパク質変性剤をさらに含む、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３２】
前記固体マトリックスは、乾燥状態で前記固体マトリックス中に少なくとも１種の還元剤をさらに含む、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３３】
前記固体マトリックスは、乾燥状態で前記固体マトリックス中に少なくとも１種のＵＶ保護剤をさらに含む、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３４】
前記固体マトリックスは、乾燥状態で前記固体マトリックス中に存在する少なくとも１種の緩衝液をさらに含む、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３５】
前記緩衝液が、約３〜約６の範囲のｐＨを生じる酸滴定緩衝液試薬である、請求項３４に記載のシステム。
【請求項３６】
前記固体マトリックスが、セルロース、酢酸セルロース、ガラス繊維、またはそれらの組み合わせを含む多孔質マトリックスである、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３７】
前記固体マトリックスが、不溶性乾燥固体材料である、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３８】
前記固体マトリックスが、水和時に酸性ｐＨをもたらすように構成される、請求項２４に記載のシステム。
【請求項３９】
前記固体マトリックスが、サンプルから核酸を抽出し、周囲温度で実質的に乾燥した状態で前記核酸を保存するように構成されている、請求項２４に記載のシステム。
【請求項４０】
前記サンプル獲得構成要素が、前記サンプル安定化構成要素に接続されている、請求項２４に記載のシステム。
【請求項４１】
サンプルを収集し、安定化させるためのシステムであって、
（ａ）皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿刺要素を有するサンプル獲得構成要素と、
（ｂ）２％未満の含水量を有する実質的に乾燥した状態のメレジトースを含有する固体基板を含む、前記サンプル獲得構成要素に結合されたサンプル安定化構成要素と、を含む、システム。
【請求項４２】
前記固体基板が、溶解試薬、１つ以上の生体分子安定化試薬、またはそれらの組み合わせを含む、請求項４１に記載のシステム。
【請求項４３】
前記固体基板が、メレジトースを含有する液体溶液に浸漬され、メレジトースが、約１０％〜約３０％の範囲の濃度で前記液体溶液中に存在する、請求項４１に記載のシステム。
【請求項４４】
前記固体基板が、酵素活性を保存するために構成されている、請求項４１に記載のシステム。
【請求項４５】
生物学的サンプルを収集し、安定化させるためのシステムであって、
（ａ）皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿刺要素を有するサンプル獲得構成要素と、
（ｂ）前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、少なくとも４のＲＩＮを有する、前記生物学的サンプルから核酸を抽出および保存するための固体マトリックスを含む、サンプル獲得構成要素に結合したサンプル安定化構成要素と、を含む、システム。
【請求項４６】
前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、少なくとも５のＲＩＮを有する、請求項４５に記載のシステム。
【請求項４７】
前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、少なくとも６のＲＩＮを有する、請求項４５に記載のシステム。
【請求項４８】
前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、少なくとも７のＲＩＮを有する、請求項４５に記載のシステム。
【請求項４９】
前記固体マトリックスから得られたＲＮＡが、７を超えるＲＩＮを有する、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５０】
前記固体マトリックスが、乾燥状態で前記固体マトリックス中に存在する少なくとも１種のタンパク質変性剤をさらに含む、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５１】
前記固体マトリックスが、乾燥状態で前記固体マトリックス中に少なくとも１種の還元剤をさらに含む、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５２】
前記固体マトリックスが、乾燥状態で前記固体マトリックス中に少なくとも１種のＵＶ保護剤をさらに含む、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５３】
前記固体マトリックスが、前記固体マトリックス上に配置されるか、または前記固体マトリックス内に含浸される少なくとも１種の緩衝液をさらに含み、前記固体マトリックスが、実質的に乾燥しており、含水量が２％未満である、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５４】
前記少なくとも１種の緩衝液が、約３〜約６の範囲のｐＨを生じる酸滴定緩衝液試薬である、請求項５３に記載のシステム。
【請求項５５】
前記固体マトリックスが、セルロース、酢酸セルロース、ガラス繊維、またはそれらの組み合わせを含む多孔質マトリックスである、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５６】
前記固体マトリックスが、不溶性乾燥固体材料である、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５７】
前記固体マトリックスが、水和時に酸性ｐＨをもたらすように構成される、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５８】
前記固体マトリックスが、サンプルから核酸を抽出し、周囲温度で実質的に乾燥状態で前記核酸を保存するように構成されている、請求項４５に記載のシステム。
【請求項５９】
前記サンプル獲得構成要素が、前記サンプル安定化構成要素に接続されている、請求項４５に記載のシステム。
【請求項６０】
生物学的サンプルを収集し、安定化させるためのシステムであって、
（ａ）皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿刺要素を有するサンプル獲得構成要素と、
（ｂ）前記膜が、前記生物学的サンプルの１つの構成要素が第１の膜上に収集され、前記サンプルの前記残部が第２の膜上に収集されるように構成されている、２つ以上の部分的に重なる膜を含む前記サンプル獲得構成要素に結合されたサンプル分離構成要素と、を含む、システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
［0001］  本出願は、２０１５年９月９日出願の米国仮特許出願第６２／２１６，３１２号の優先権を主張するものとし、２０１５年１１月２５日出願の米国仮特許出願第６２／２６０，１７２号の優先権を主張するものとし、２０１６年７月２６日出願の米国仮特許出願第６２／３６７，０５６号の優先権を主張するものとし、２０１６年７月２９日出願の米国仮特許出願第６２／３６８，８１７号の優先権を主張するものとし、その全体の開示は参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
［0002］  医療診断検査により命が救われる可能性があるが、残念ながら、誰もがすぐに利用できるわけではない。医療費の高騰と治療の利用可能性により、世界中の人々にとって適切な治療を受けることが困難になり得る。簡単な血液パネル検査を受けるのに、複数回医師を訪問する必要がある。最初は採血を行うためであり、その後フォローアップの相談または追加テストを行うためである。実質的な医療費の上昇が、追加的な抑止力となり得て、多くの患者は複数回医師を訪問するための時間および費用を払う余裕がなく、治療が必要な症状を経験するまで検査を延期することになり得る。新しい治療パラダイムは、時間、費用、および利用可能性の負担を軽減することによって、患者のニーズに対応することができる。患者が診断を受けることを改善することで、症状が現れる前に検査が実施される可能性を高めることができ、患者がこれまで可能であったよりもはるかに早期に治療を受けることができる。早期発見により、早期治療が容易になり得て、患者の予後が確実に良好になり、治療費を全体的に削減することができる。
【０００３】
［0003］  本明細書において、医療従事者の補助または医療施設の利用なく、患者が自分自身の血液サンプルを収集し、調製し、保管し、検出し、分析することを可能にする改善された解決法が提供される。
【発明の概要】
【０００４】
［0004］  本発明は、概して、医療システム、デバイスおよび方法に関し、より具体的には、血液サンプルのユーザによる収集、分離、および安定化のためのシステムならびに方法に関する。具体的には、本明細書に開示されたシステム、デバイスおよび方法は、作動時に対象から血液を収集し、デバイスの内部または外部でさらに処理するために血液を安定化するように構成された一体型デバイス内に組み込まれたサンプル獲得構成要素、サンプル分離構成要素および血液安定化構成要素を含む一体型デバイスを提供する。
【０００５】
［0005］  これらおよび他の実施形態は、添付の図面に関連する以下の説明においてさらに詳細に説明される。
【０００６】
［0006］  一態様では、方法が開示される。この方法は、タグを用いてサンプル獲得および安定化システムを対象に配置することを含み、システムは、対象から血液サンプルを収集するために構成された血液収集ユニットと、収集された血液サンプルから１つ以上の構成要素を分離するための任意の分離モジュールと、収集された血液サンプルから１つ以上の構成要素を安定化させるために構成された安定化マトリックスと、を含み、タグは、アッセイに関連するラベルを含む。この方法はさらに、配置されたタグ付きサンプル獲得および安定化システムを収集すること、タグに基づいて１つ以上の安定化構成要素に対して１つ以上のアッセイを実施すること、および実施された１つ以上のアッセイに関するレポートを提供すること、を含む。この方法はさらに、前述の方法ステップのうちの１つの前にシステムから安定化マトリックスを分離することを含んでもよい。タグは安定化マトリックス上に存在し得る。任意により、分離モジュールが存在する場合、タグは、任意の分離モジュール上に存在し得る。安定化マトリックスは、複数のアッセイを行うように構成することができる。この方法はさらに、配置されたサンプル獲得および安定化システムに存在するタグに基づいて、血液サンプル内の安定化された生物学的構成要素を同定すること、ならびにその同定から、実施すべき安定化された構成要素特異的アッセイを決定することを含み得る。サンプル獲得および安定化システムは、ＲＦＩＤトランスミッタ、カラーラベル、バーコード、またはサンプルタグとは異なる第２のラベルでラベル付けされ得る。
【０００７】
［0007］  別の態様では、対象の生物学的サンプル由来の１つ以上の生物学的構成要素について分析を実施するための方法が開示される。この方法は、サンプル獲得構成要素ならびにＲＮＡ、ＤＮＡおよびタンパク質からなる群から選択される少なくとも１つの生物学的構成要素を選択的に安定化させるように構成された１種以上の安定化試薬を含む安定化マトリックスを含む、サンプリングデバイスを得ることを含む。この方法は、上記の方法ステップのうちの１つから離れた場所で、サンプリングデバイスの中またはその上の少なくとも１つの安定化された生物学的構成要素について１つ以上のアッセイを実施することをさらに含む。１種以上の安定化試薬は、固体マトリックス上に配置され得るか、または固体マトリックスと一体化することができ、実質的に乾燥状態にある。固体マトリックスは、３７℃で少なくとも１１日間ＲＮＡを実質的に安定化させるように構成することができる。アッセイは、デバイスの中またはデバイス上で実施され、ＰＣＲ、ＤＮＡシーケンシング、ＲＮＡ発現分析、およびＲＴ−ＰＣＲのうちの１つ以上を含み得る。
【０００８】
［0008］  別の態様では、対象の生物学的サンプル由来の１つ以上の生物学的構成要素について分析を実施するための方法が開示される。この方法は、サンプル獲得構成要素ならびにＲＮＡ、ＤＮＡおよびタンパク質からなる群から選択された１つ以上の生物学的構成要素を選択的に安定化させるように構成された１種以上の安定化試薬を含む安定化マトリックスを含む、サンプリングデバイスを得ることを含む。この方法は、１つ以上の生物学的構成要素を有する安定化マトリックスをサンプリングデバイスから取り出すこと、および安定化マトリックスに対して１つ以上のアッセイを実施することをさらに含む。安定化マトリックスは、上記方法ステップのうちの１つを実施するところから離れた場所でサンプリングデバイスから取り出すことができる。
【０００９】
［0009］  別の態様では、ＤＮＡ、ＲＮＡおよびタンパク質からなる群から選択される１つ以上の生物学的構成要素を選択的に安定化させる１種以上の安定化試薬を含む、実質的に乾燥した固体マトリックスを周囲条件下で受け取ることと、１つ以上の選択的に安定化された生物学的構成要素を分析するために、乾燥固体マトリックスから直接的に１つ以上のアッセイを実施することと、を含む方法を開示する。安定化試薬は、２％未満の含水量を有する実質的に乾燥状態のメレジトースを含む固体基板を含むことができる。安定化試薬は、生物学的サンプルから核酸を抽出および保存するための固体マトリックスを含むサンプル獲得構成要素に結合することができ、固体マトリックスは、少なくとも４のＲＮＡ  Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ  ｎｕｍｂｅｒ（ＲＩＮ）を有する。
【００１０】
［0010］  別の態様では、ポイント・オブ・ケアまたは自己投与により生物学的サンプルを収集し、安定化させるためのデバイスが開示され、実施形態が本明細書において例解される。このデバイスは、本体およびプランジャを含むサンプル獲得構成要素を含み、本体は、近位端と、遠位端と、近位端と遠位端との間に延在する外側本体表面と、少なくとも１つの孔を含み、遠位端に取り付けられた基部と、本体表面内で画定され内腔と、を含み、プランジャが内腔内に配置され、プランジャは、近位端、遠位端、およびいずれかの端部に接続された少なくとも１つのニードルを備え、少なくとも１つのニードルは、プランジャが作動されたときに基部内の少なくとも１つの孔を貫通するように構成されている。このデバイスは、試薬および基板を含むサンプル安定化構成要素を含み、これらは、生物学的サンプルが収集点からマトリックスを通って移動するにときに、生物学的サンプルの構成要素が抽出され、安定化させるように構成され、サンプル安定化構成要素は、本体の内腔内に配置され、プランジャを作動させることにより、生物学的サンプルがマトリックスの中に入り、生物学的サンプルの分離がさらに容易となる。
【００１１】
［0011］  別の態様では、サンプルを収集し、安定化させるためのキットが開示される。このキットは、皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿刺要素を有するサンプル獲得構成要素と、サンプル安定化構成要素と、を含み、サンプル安定化構成要素が実質的に乾燥した状態のメレジトースを含む固体基板を含む。固体基板は、溶解試薬および生体分子安定化試薬のうちの１つ以上を含むことができる。任意により、メレジトースは、１０〜３０％の範囲の濃度で存在し得る。固体基板は、酵素活性を保存するために構成され得る。このキットは、血漿分離構成要素をさらに含むことができる。
【００１２】
［0012］  別の態様では、生物学的サンプルを収集し、安定化させるためのキットが開示される。このキットは、皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿刺要素を有するサンプル獲得構成要素と、ＲＮＡ、ＤＮＡおよびタンパク質の生物学的構成要素のうちの１つ以上を選択的に安定化させるための固体マトリックスを含む、サンプル安定化構成要素と、を含む。固体マトリックスは、ＲＮＡを選択的に安定化させることができ、固体マトリックスから得られたＲＮＡは、４より大きいＲＩＮ値を有し得る。このキットは、血漿分離構成要素をさらに含むことができる。固体マトリックスから得られたＲＮＡは、少なくとも５または少なくとも６、または少なくとも７のＲＩＮを有し得るか、または７を超えるＲＩＮを有し得る。固体マトリックスは、乾燥状態で固体マトリックス中に存在する少なくとも１種のタンパク質変性剤をさらに含むことができる。固体マトリックスは、乾燥状態で固体マトリックス中に少なくとも１種の還元剤をさらに含むことができる。固体マトリックスは、乾燥状態で固体マトリックス中に少なくとも１種のＵＶ保護剤をさらに含むことができる。固体マトリックスは、乾燥状態で固体マトリックス中に存在する少なくとも１つの緩衝剤をさらに含むことができる。緩衝液は、３〜６の範囲のｐＨを生じる酸滴定緩衝液試薬であってもよい。固体マトリックスは、セルロース、セルロースアセテート、ガラス繊維、またはそれらの組み合わせで構成され得る。固体マトリックスは、多孔質マトリックスであり得る。固体マトリックスは、不溶性乾燥固体材料であってもよい。固体マトリックスは、水和時に酸性ｐＨを提供するように構成され得る。固体マトリックスは、サンプルから核酸を抽出し、周囲温度で実質的な乾燥状態で核酸を保存するように構成され得る。サンプル獲得構成要素は、サンプル安定化構成要素に接続することができる。
【００１３】
［0013］  別の態様では、サンプルを収集し、安定化させるためのシステムが開示される。システムは、皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿孔要素を有するサンプル獲得構成要素と、サンプル獲得構成要素に結合されたサンプル安定化構成要素と、を含み、サンプル安定化構成要素が、２％未満の含水量を有する実質的な乾燥状態でメレジトースを含む固体基板を含む。固体基板は、溶解試薬、１つ以上の生体分子安定化試薬、またはそれらの組み合わせを含み得る。メレジトースの濃度は、１０〜３０％の範囲で存在し得る。固体基板は、酵素活性を保存するために構成され得る。
【００１４】
［0014］  別の態様では、生物学的サンプルを収集し、安定化させるためのシステムが開示される。このシステムは、皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿孔要素を有するサンプル獲得構成要素と、サンプル獲得構成要素に結合されたサンプル安定化構成要素と、を含み、サンプル安定化構成要素は、生物学的サンプルから核酸を抽出し、保存するための固体マトリックスを含み、固体マトリックスから得られたＲＮＡは、少なくとも４のＲＩＮを有する。固体マトリックスから得られたＲＮＡは、少なくとも５、または少なくとも６、または少なくとも７、のＲＩＮを有し得るか、または７を超える場合もある。固体マトリックスは、乾燥状態で固体マトリックス中に存在する少なくとも１種のタンパク質変性剤をさらに含むことができる。固体マトリックスは、乾燥状態で固体マトリックス中に少なくとも１種の還元剤をさらに含むことができる。固体マトリックスは、乾燥状態で固体マトリックス中に少なくとも１種のＵＶ保護剤をさらに含むことができる。固体マトリックスは、固体マトリックス上に配置されるか、または固体マトリックス内に含浸される少なくとも１種の緩衝液をさらに含むことができ、固体マトリックスは実質的に乾燥しており、含水量は２％未満である。緩衝液は、３〜６の範囲のｐＨを生じる酸滴定緩衝液試薬であってもよい。固体マトリックスは、セルロース、セルロースアセテート、ガラス繊維、またはそれらの組み合わせで構成され得る。固体マトリックスは、多孔質マトリックスでもあり得る。固体マトリックスは、不溶性乾燥固体材料であってもよい。固体マトリックスは、水和時に酸性ｐＨとなるように構成され得る。固体マトリックスは、サンプルから核酸を抽出し、周囲温度で実質的に乾燥状態で核酸を保存するように構成され得る。サンプル獲得構成要素は、サンプル安定化構成要素に接続することができる。
【００１５】
［0015］  別の態様では、生物学的サンプルを収集し、安定化させるためのシステムが開示される。このシステムは、皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿孔要素を有するサンプル獲得構成要素と、サンプル獲得構成要素に結合されたサンプル分離構成要素とを含み、サンプル獲得構成要素は、生物学的サンプルの１つの構成要素が第１の膜上に収集され、サンプルの残部が第２の膜上に収集されるように構成されている、２つ以上の部分的に重なる膜を含む。
【００１６】
［0016］  別の態様では、タグ付きサンプル獲得および安定化システムを対象に配置することを含む方法が開示されており、システムは、対象から血液サンプルを収集するために構成された血液収集ユニットと、収集された血液サンプルから１つ以上の構成要素を分離するための任意の分離モジュールと、血液サンプルから１つ以上の構成要素を安定化させるために構成された安定化マトリックスと、を含み、タグ付きサンプル獲得および安定化システムは、アッセイに関連するラベルを含む。この方法はさらに、配置されたタグ付きサンプル獲得および安定化システムを収集すること、タグに基づいて１つ以上の安定化構成要素に対して１つ以上のアッセイを実施すること、および実施された１つ以上のアッセイに関するレポートを提供すること、をさらに含む。この方法はさらに、前述の方法ステップのうちの１つの前にシステムから安定化マトリックスを分離することを含んでもよい。任意により、タグは安定化マトリックス上に存在し得る。任意により、分離モジュールが存在する場合、タグは、任意の分離モジュール上に存在し得る。安定化マトリックスは、複数のアッセイを行うように構成することができる。この方法はさらに、配置されたサンプル獲得および安定化システムに存在するタグに基づいて血液サンプル中の安定化された生物学的構成要素を同定すること、ならびにその同定から実施すべき安定化された構成要素特異的アッセイを決定することを含み得る。サンプル安定化システムは、ＲＦＩＤトランスミッタ、カラーラベル、バーコード、またはサンプルタグとは異なる第２のラベルでラベル付けされ得る。
【００１７】
［0017］  別の態様では、対象の生物学的サンプル由来の１つ以上の生物学的構成要素の分析を実施するための方法が開示される。この方法は、サンプル獲得構成要素ならびにＲＮＡ、ＤＮＡおよびタンパク質からなる群から選択される少なくとも１つの生物学的構成要素を選択的に安定化させるように構成された１種以上の安定化試薬を含む安定化マトリックスを含む、サンプリングデバイスを得ることを含む。この方法は、上記の最初のステップが実行されたところから離れた場所で、サンプリングデバイスの中またはサンプリングデバイス上の安定化された生物学的構成要素について１つ以上のアッセイを実施することをさらに含む。１種以上の安定化試薬は、固体マトリックス上に配置されるか、または固体マトリックスと一体化され、実質的に乾燥状態にあってもよい。固体マトリックスは、３７℃で少なくとも１１日間ＲＮＡを実質的に安定化させるように構成することができる。アッセイは、デバイスの中またはデバイス上で実施することができ、ＰＣＲ、ＤＮＡシーケンシング、ＲＮＡ発現分析、およびＲＴ−ＰＣＲの１つ以上を含み得る。
【００１８】
［0018］  別の態様では、対象の生物学的サンプル由来の１つ以上の生物学的構成要素の分析を実施するための方法が開示される。この方法は、サンプル獲得構成要素ならびにＲＮＡ、ＤＮＡおよびタンパク質からなる群から選択される１つ以上の生物学的構成要素を選択的に安定化させるように構成された１種以上の安定化試薬を含む安定化マトリックスを含む、サンプリングデバイスを得ることを含む。この方法は、１つ以上の生物学的構成要素を有する安定化マトリックスをサンプリングデバイスから取り出すこと、および安定化マトリックスに対して、または安定化マトリックスから直接的に１つ以上のアッセイを実施すること、をさらに含む。安定化マトリックスは、上記方法ステップのうちの１つから離れた場所でサンプリングデバイスから取り出すことができる。
【００１９】
［0019］  別の態様では、ＤＮＡ、ＲＮＡおよびタンパク質からなる群から選択される１つ以上の生物学的構成要素を選択的に安定化させる１種以上の安定化試薬を含む、実質的に乾燥した固体マトリックスを周囲条件下で受け取ることと、選択的に安定化された生物学的構成要素を分析するために、乾燥固体マトリックスから直接的に１つ以上のアッセイを実施することと、を含む方法を開示する。安定化試薬は、２％未満の含水量を有する実質的に乾燥状態のメレジトースを含む固体基板を含むことができる。安定化試薬は、生物学的サンプルから核酸を抽出および保存するための固体マトリックスを含むサンプル獲得構成要素に結合することができ、固体マトリックスから得られたＲＮＡは、少なくとも４のＲＮＡ  Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ  ｎｕｍｂｅｒ（ＲＩＮ）を有する。
【００２０】
［0020］  別の態様では、ポイント・オブ・ケアまたは自己投与によりサンプルを収集し、安定化させるためのデバイスが開示され、実施形態が本明細書に例解される。このデバイスは、本体およびプランジャを含むサンプル獲得構成要素を含み、本体は、近位端と、遠位端と、近位端と遠位端との間に延在する外側本体表面と、少なくとも１つの孔を含み、遠位端に取り付けられた基部と、本体内で画定された内面と、を含み、プランジャが内腔内に配置され、プランジャは、近位端、遠位端、およびいずれかの端部に接続された少なくとも１つのニードルを備え、少なくとも１つのニードルは、プランジャが作動されたときに基部内の少なくとも１つの孔を貫通するように構成されている。このデバイスは、試薬および基板を含むサンプル安定化構成要素を含み、これらは、生物学的サンプルが収集点からマトリックスを通って移動するときに、生物学的サンプルの構成要素が抽出され、安定化させるように構成され、サンプル安定化構成要素は、本体の内腔内に配置され、プランジャを作動させることにより、生物学的サンプルが、マトリックスの中に入り、生物学的サンプルの分離がさらに容易となる。
【００２１】
［0021］  別の態様では、サンプルを収集し、安定化させるためのキットが開示される。このキットは、皮膚に貫入して血液を露出させるために構成された１つ以上の穿刺要素を有するサンプル獲得構成要素と、サンプル安定化構成要素と、を含み、サンプル安定化構成要素が実質的に乾燥状態のメレジトースを含有する固体基板を含む。固体基板は、溶解試薬および生体分子安定化試薬のうちの１種以上をさらに含むことができる。メレジトースは、１０〜３０％の範囲の濃度で存在し得る。固体基板は、酵素活性を保存するために構成され得る。このキットは、血漿分離構成要素をさらに含むことができる。
参照による援用
【００２２】
［0022］  個々の刊行物、特許、または特許出願が、具体的かつ個別に参照により組み入れられることが示されているのと同程度に、本明細書中で言及されるすべての刊行物、特許および特許出願は参照により本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
［0023］  本発明の特徴は、添付の特許請求の範囲に詳細に記載されている。本発明の特徴および利点のより良い理解は、本発明の原理が利用される例示的な実施形態を示す以下の詳細な説明および添付の図面を参照することによって得られるであろう。
【００２４】
【図１Ａ】［0024］異なるサンプル獲得構成要素および穿刺要素を例解する図である。
【図１Ｂ】異なるサンプル獲得構成要素および穿刺要素を例解する図である。
【図１Ｃ】異なるサンプル獲得構成要素および穿刺要素を例解する図である。
【図２】［0025］サンプル獲得構成要素の実施形態を例解する図である。
【図３】［0026］止血帯を使用して血液サンプルを採取するための方法を描写するフローチャートである。
【図４Ａ】［0027］分離構成要素の実施形態を例解する図である。
【図４Ｂ】分離構成要素の実施形態を例解する図である。
【図５】［0028］サンプル分離構成要素の別の実施形態を例解する図である。
【図６】［0029］安定化マトリックスを有するサンプル安定化構成要素を例解する図である。
【図７−１】［0030］サンプルについて実施可能な検査の非限定的リストである。
【図７−２】サンプルについて実施可能な検査の非限定的リストである。
【図７−３】サンプルについて実施可能な検査の非限定的リストである。
【図７−４】サンプルについて実施可能な検査の非限定的リストである。
【図７−５】サンプルについて実施可能な検査の非限定的リストである。
【図７−６】サンプルについて実施可能な検査の非限定的リストである。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
［0031］諸言
【００２６】
［0032］  生物学的サンプル検査および診断検査の利用可能性の改善に向けての第１のステップは、ＤＮＡ、ＲＮＡおよび／またはタンパク質などの生物学的構成要素の迅速なサンプル収集、安定化および保存を可能にするシステムおよび方法の開発を含み得る。一旦安定化させると、このような生物学的構成要素は、生物学的構成要素に対して１つ以上の生物学的アッセイを行うことができる検査室に移され得る。より容易なサンプル収集は、臨床状態を診断するために特に有益であり得る。対象が医師の補助および医療施設を利用することなく、自分自身の血液サンプルを収集し、調製し、任意により分析すること、または訓練を受けていない個人が対象から生物学的サンプルを収集し、安定化させること、が有益であり得る。この分野における技術開発は、少なくとも３つの構成要素、第一に、血液などの生物学的サンプルを収集するための簡単なツールを提供するための新しい開発、第二に、収集されたサンプルまたはサンプル構成要素を分離、安定化および／または保存するための簡単で使いやすい機構を提供するための新しいシステム、デバイスおよび方法、ならびにこれらの新しい方法を介して提供されたサンプルを分析するための新しい互換性のあるアプローチを利用することができる。
【００２７】
［0033］  新技術は、訓練を受けたエンドユーザおよび訓練を受けていないエンドユーザによってサンプルの獲得、収集、任意による分離および安定化を実施できるために充分に使いやすく、効果的であり得る。前述の問題の一部に対処することによって現在の制限を克服するデバイス、システムおよび方法が開示される。
【００２８】
［0034］  本明細書に開示されたデバイス、システムおよび方法は、サンプルの収集、任意による分離、安定化およびサンプルの保存が使いやすい、より容易なサンプル収集システムを提供することができる。さらに、デバイス、システムおよび方法は、検査室がサンプルをより容易に受け取り、調製し、分析するためのアプローチおよびツールを提供することができる。使用者、患者またはサンプル提供者に代わって、サンプルの検出を少ない労力で簡単に遂行できるように、サンプルを容易に収集すること、保存すること、分析のための前処置および準備することを可能にする方法、ツールおよびシステムの互換性のあるセットが本明細書に提供される。本明細書に開示されたデバイス、システムおよび方法は、生物学的サンプルの収集、任意による分離、および安定化のプロセスを単純化することによって診断検査の負担を軽減することができる。
【００２９】
［0035］  血液サンプルの収集のためのプロセスを単純化することは、サンプル構成要素を分離するデバイス、システムおよび方法を含むことができる。いくつかの実施形態では、静脈血を収集するための方法は、血液収集プロセスのあらゆるステップ、すなわちサンプルの収集から、遠心分離を含む分離ステップ、その後のラベル付けおよびサンプルが検査用に検査室に移送されるまで安定化させるための冷蔵保存を含む分離ステップを含み得る収集後手順までのステップの監督を、１人以上の専用の医療専門家に依存し得る。代替的実施形態では、本明細書に開示されたシステムおよび方法は、エンドユーザが血液サンプルの収集を自己管理し、分析のために検出施設に安定化したサンプルを提供できるように構成することができる。
【００３０】
［0036］  本明細書に提示されたシステム、デバイスおよび方法は、（ｉ）１つ以上の生物学的サンプル（例えば、血液、尿、または水もしくは土壌などの環境サンプル）の単純な収集のためのサンプル獲得構成要素（ＳＡＣ）、（ｉｉ）１つ以上の生物学的サンプル（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質）から生物学的分析物を安定化させるための１つ以上の安定化構成要素、および（ｉｉｉ）１つ以上のサンプル構成要素を分離するための任意の分離構成要素（例えば、血漿または細胞）を含む、複数の構成要素を含み得る。本明細書で開示されるシステムまたは方法のさらなる構成要素は、サンプルを処理し、ユーザ提供のサンプルを分析するための１つ以上のキット、デバイス、方法およびシステムを含むことができる。
【００３１】
［0037］  デバイス、システム、方法およびキットは、サンプルを獲得するためのサンプル獲得構成要素（ＳＡＣ）、ならびにサンプルを移送し、収集し、および安定化させるためのサンプル安定化構成要素（ＳＳＣ）を含むことができる。場合によっては、サンプルを安定化させるために固体基板に移送する前に、サンプルの１つ以上の構成要素を分離するために、サンプル安定化構成要素をさらに備えることができる。ＳＡＣは使い易く、訓練されていない専門家が診療所から患者の自宅やオフィスにいたるまでさまざまな場所でサンプルを収集することができる。ＳＡＣは、供与者が診療所を訪問する必要がなく、自宅で自らのサンプルを収集することを可能にするか、またはサンプルの収集をトレーナーもしくは訓練を受けていない専門家が行うことができる専用収集場所で収集することを可能にする。
【００３２】
［0038］  非限定的な実施形態は、サンプルの獲得、サンプルの分離およびサンプルの安定化を行うための構成要素の一体型および非一体型の組み合わせを含み得る。実施形態は、サンプルの構成要素を安定化させるための別個の内部構成要素を有する単一の一体型デバイスを含むことができる。追加の一体型デバイスは、サンプル構成要素を選択的に安定化させる前に、サンプルの構成要素を分離するための単一ユニットまたは２つ以上のユニットを含むことができる。他の実施形態は、システムまたはキット内で非一体型構成要素を提供することができ、構成要素は、サンプルを獲得するためのサンプル獲得構成要素と、サンプルを安定化し、任意に分離するための別個のサンプル収集構成要素と、を含むことができる。サンプル安定化構成要素は、サンプルの構成要素を選択的に安定化および保存するための固体安定化マトリックスを含むことができ、安定化前にサンプルを分離するための構成要素を有することもできる。さらに追加の非一体型システムまたはキットでは、サンプル安定化構成要素をサンプル分離ユニットから分離することができる。さらなる実施形態は、サンプルが獲得され、分離され、サンプルの構成要素が選択的に安定化された後に安定化されたサンプルを受け取り、調製し、および／または処置するための方法、デバイス、システムおよびキットを提供することができる。
【００３３】
［0039］  用語「生物学的サンプル」および「生物学的サンプル」は、本明細書において、明細書全体にわたって互換的に使用され得る。生物学的サンプルは、血液または任意の排出液体であり得る。生物学的サンプルの非限定的例としては、唾液、血液、血清、脳脊髄液、精液、糞便、血漿、尿、細胞懸濁液、または細胞およびウイルスの懸濁液が挙げられ得る。非限定的例において、生物学的サンプルは、植物または真菌サンプルを含むことができる。システムおよび方法は、ヒトを含む任意の生物由来の任意の生物学的サンプルに適用することができる。生物から得られる生物学的サンプルは、血液、血清、血漿、滑液、尿、組織またはリンパ液であり得る。生物学的サンプルは、全細胞、溶解細胞、血漿、赤血球、皮膚細胞、非核酸（例えばタンパク質）、循環中の腫瘍ＤＮＡ（ｃｔＤＮＡ）および無細胞ＤＮＡ（ｃｆＤＮＡ）などの核酸（例えば、ＤＮＡ／ＲＮＡ）を含み得る。いくつかの実施形態は、血液サンプルを収集するための方法、デバイス、およびシステムを開示することができる。しかし、本明細書に開示されるシステムおよび方法は、生物から生物学的サンプルを得ることに限定されることを意図するものではない。例えば、開示された実施形態は、環境から得られたサンプルに使用することができる。環境サンプルの非限定的例としては、水、土壌および空気サンプルが挙げられる。場合によっては、本明細書で提供される方法、組成物、キット、デバイスまたはシステムで使用されるサンプルは、生物学的サンプルではない。
【００３４】
［0040］  本明細書で開示されるデバイス、方法、システム、およびキットを説明する目的で、サンプルを収集するためのデバイス、方法、システム、またはキットを使用する任意の個人は、「エンドユーザ」と称することができる。サンプルが由来する個体、生物または環境は、「供与体」と称し得る。一旦サンプルが収集されると、検査のためにそのサンプルを別の施設に配置することができる。施設では、サンプルは、使用されたデバイス、システム、方法またはキットに基づいて選択された処置ステップを受けることができる。
【００３５】
［0041］サンプル獲得構成要素（ＳＡＣ）
【００３６】
［0042］  本明細書に記載のデバイス、システム、方法およびキットは、１つ以上のサンプル獲得構成要素（ＳＡＣ）を含むことができる。本明細書で提供されるシステムによって獲得されるサンプルは、例えば、血液、血清、尿、唾液、組織、毛髪、皮膚細胞、精液など、生物由来の生物学的サンプル、または例えば水サンプル、井戸からの油、もしくはミルクなどの食物からの油分などの、環境から得られたサンプル、などであってもよい。サンプルは、液体、固体、または１つ以上の液体と１つ以上の固体の組み合わせであってもよい。
【００３７】
［0043］  サンプル容積は、デバイス収集チャンバ、収集システムの材料特性、ユーザによって予め決定されたサンプル設定、デバイス製造時に確立された仕様、またはこれらの任意の組み合わせを含むがこれらに限定されないユニットの構成要素によって固定することができる。
【００３８】
［0044］  ＳＡＣは、静脈採血または毛細管採血のための１つ以上のデバイスを含むことができる。静脈血液採取または毛細管採血を達成するために、ＳＡＣは１つ以上の穿孔要素を含むことができる。１つ以上の穿刺要素は、中空または中実であり得て、また、１つ以上の穿刺要素は、無痛で効率的なサンプルを移送するために構成され得る。適応としては、特定の組成、表面微細構造、機械的性質、構造的形状またはそれらの組み合わせを有する材料の使用を含むことができる。１つ以上の穿刺要素としては、１つ以上のニードル、マイクロニードル、またはランセット（圧力作動ニードルまたはランセットを含む）を挙げることができる。ＳＡＣは、任意によりユーザに物理的な痛みまたは不快感を最小限に抑えるように設計することができる。ＳＡＣは、図１Ａに示すマイクロニードル技術を含むことができる。これは、血流を生成するために皮膚を浅く貫通させることができる。本明細書で企図されるサンプル、例えば血液の収集の例には、米国特許明細書第９０３３８９８号に記載されているものが含まれる。ＳＡＣは単回使用であってもよい。場合によっては、ＳＡＣは再利用可能である。
【００３９】
［0045］  ＳＡＣは、例えば１ｍＬ未満の容積を収集することができる。例えば、ＳＡＣは、血液容積１ｍｌ、５００μｌ、４００μｌ、３００μｌ、２００μｌ、１００μｌ、９０μｌ、８０μｌ、７０μｌ、６０μｌ、５０μｌ、４０μｌ、３０μｌ、２０μｌまたは１０μｌを収集するように構成することができる。
【００４０】
［0046］  ＳＡＣは、約１ｍＬ〜約１０ｍＬまたは約１ｍＬ〜約１００ｍＬのサンプル容積を収集するように設計することができる。ＳＡＣの例には、尿カップ、指スティック、または例えば米国特許出願公開第２０１３／０２１１２８９号および同第２０１５／０２１１９６７号に記載されているものなどのデバイスが含まれる。
【００４１】
［0047］  ＳＡＣは、サンプルの収集、安定化および保存を行うために設計された一体型デバイスの構成要素となり得る。ＳＡＣは、キットまたはシステムの一部である別個の構成要素であってもよい。ＳＡＣは、サンプルを収集するためのバイアルを含むことができる。
【００４２】
［0048］  キットは、以下のうちの１つ以上を含むことができる（例えば、ＳＡＣは非一体型であるが、キットの一部である場合）。（ｉ）１つ以上のサンプル分離ユニット、（ｉｉ）１つ以上のサンプル安定化ユニット、（ｉｉｉ））１つ以上の生物学的サンプル分離および／または安定化構成要素。血液サンプルのために使用されるキットは、穿刺または切開された指から血液滴を収集し、引き続き、安定化させるため、または安定化されたサンプル構成要素を分離するために血液をデバイス、または別個のユニットに分配するためのキャピラリーまたは移送チューブを備えることができる。
【００４３】
［0049］  サンプル獲得構成要素のいくつかの実施形態は、図１Ｂ、図１Ｃ、および図２に例解する。図１Ｂに示すように、ＳＡＣは機械的手段を介して作動させ得る。手動起動は、供与体またはエンドユーザにより実施され得る。図１Ｃは、電気的手段で作動され得るＳＡＣを例解する。図示されているように、ＳＡＣは、血液流を誘発するために振動を使用することができる。
【００４４】
［0050］  ＳＡＣは、プランジャを使用して真空を生成し、それによってサンプルをデバイス内の１つ以上のチャンバに入れることができる。図２に示すように、サンプル獲得構成要素（ＳＡＣ）は、本体２１５で画定される、近位端、遠位端、外面、および内腔を有することができる。本体の遠位端に取り付けられた基部は、外面、内面を含むことができ、１つ以上の孔２４０を含むことができる。さらに、デバイスは、近位端および遠位端を含むプランジャ２２０を有することができ、プランジャは、ユーザが作動するように構成されている。１つ以上の穿孔要素２５０をプランジャの面に固定することができ、ユーザがデバイス本体の近位端から遠位端にＳＡＣを作動させるとき、１つ以上の穿刺要素が皮膚を穿刺し得る。穿孔要素の引き抜き時に真空が生成され得る。血液は、１つ以上の孔２４０を通ってプールすることができ、１つ以上の孔は、サンプルを内腔に引き込むように構成することができる。サンプルは、例えば、自然発生の毛細管力によって、内腔内およびデバイス内に移動することができる。自然発生の毛細管力を同様に使用して、プールもしくはヒトの皮膚などの表面上の液滴から、または別の開口したマイクロ流体チャネルから、流体をリザーバに抽出することもできる。自然発生の毛細管力は、切開部位からサンプルを収集するために使用することができ、同様に、デバイス内のリザーバから、または複雑な開口マイクロ流体チャネルを使用してサンプルの収集ステップと準備ステップの間で、流体を操作するために使用することもできる。代替的実施形態では、自発的な毛細管駆動流を、デバイスを通ってサンプルを移動させる他の手段と組み合わせることができる。孔は、穿刺された皮膚からサンプルをデバイスに引き込むのに適した材料または構造に任意で適合させるか、または任意で含むことができる。例えば、一実施形態では、１つ以上の穿孔要素を、１つ以上の孔に部分的に格納することができ、１つ以上の穿刺要素自体の特性により、１つ以上の穿刺要素が中空である場合には１つ以上の穿刺要素を通って、または１つ以上の穿刺要素が中空でない場合には、１つ以上の穿刺要素の側部の上のいずれかで、孔を介してサンプルチャンバ内にサンプルを引き込む。これらの構成要素の実施形態は、米国特許公開出願第２０１３／０２１１２８９号に見出すことができる。
【００４５】
［0051］  サンプル収集は、皮膚表面またはその上方でプールされたサンプルから行うことができ、任意により、皮膚の下の１つ以上のリザーバから収集することもできる。ＳＡＣは、表皮下の表在血管叢における小さいが豊富にある毛細血管を、例えば、皮膚表面から０．３〜０．６ｍｍの深さで切断する穿刺運動をもたらすことができる。本開示は、いくつかの異なるアプローチによって、他の身体場所での切開部位を機械的にマッサージするためのシステムを提供し、これには、ニードルもしくはキャピラリーチューブもしくは振動パドル、または所望の血流を達成するために創傷に隣接する他の部材によって採取するために、創傷を包囲する環状リングを振動させて、創傷を包囲する血液を創傷内にポンプで送ることなどを含む。さらに、他の身体領域、例えば大腿部の皮膚からの血液滴を検査デバイス上の小領域まで運ぶことは困難であり得る。本明細書に記載の代替的実施形態は、創傷内に残っているニードルを使用することができ、ニードルを機械的に操作して、創傷内の体液サンプルの形成を促進することができる。
【００４６】
［0052］  液体サンプルは、収集チャンバに収集またはプールすることができ、収集チャンバの後、または収集チャンバの代わりに、サンプルを、サンプルをデバイス内に引き込むために多孔性および吸収性が最適化されている１つ以上の粒子、材料、構造またはフィルタを介して任意に吸収させることができる。本明細書のデバイスにサンプルを引き込むための材料は、あらゆる吸収性もしくは吸着性の表面、または改質された表面を有する材料からなり得、任意の材料としては、これらに限定されないが、紙ベース媒体、ゲル、ビーズ、膜、ポリマー系マトリックス、またはこれらの任意の組み合わせなどが挙げられる。例えば、一実施形態では、ＳＡＣは、入口開口部からの流体流路を画定する本体を備えることができ、流路は、入口開口部およびベッドを通って引き出されるかまたは分配されるマトリックスから生物学的粒子または分析物を吸着するように選択された多孔質ポリマーモノリスのベッドを含む。多孔質ポリマーモノリスは、後の調製工程のために生物学的粒子または分析物を吸収することができる。多孔質モノリス上のサンプル収集の例は、米国特許出願公開第２０１５／０２１１９６７号に見出され得る。
【００４７】
［0053］  サンプル獲得構成要素（ＳＡＣ）を使用するための方法は、血液サンプルを採取するために指をミルキングまたは圧搾した後にＳＡＣで皮膚を穿孔することを含み得る。ＳＡＣは、サンプルの獲得を容易にするために止血帯または他の構成要素と共に使用することができる。止血帯、ゴムバンド、または弾性材料は、対象の手の第１指、第２指または第３指の周りに配置することができる。サンプルの品質を改善する方法を構築することができる。図３に描写するように、ステップは、供与体の指のうちの１本に止血帯を配置して圧力を加えるステップ３０５、及び指を切開して切開部を形成するステップ３１０を含み得る。この方法はまた、圧力をかけた状態で穿刺直後に第１の血液を任意で採取することも含み得る。切開部位から形成された血液滴に対して毛細管を保持することによって、切開部から血液を収集すること３１５ができる。キャピラリーチューブに収集された血液は、システムの別個の構成要素上に分配することができ３２０、構成要素の別個の部分は、分析のために異なる場所または設備に配置され得る３２５。特定の実施形態では、キットは、血液の収集および効率を促進するための構成要素および指示書を含み得る。方法は、温度および位置を含む、適切な血流を確保するために手および指を準備するステップ、指に止血帯を適用する方法、滅菌方法、穿刺方法、および実際の血液収集方法をさらに含むことができる。血液サンプルを収集する方法は、例えば、米国特許出願第１４／４５０５８５号に開示されている。
【００４８】
［0054］サンプル安定化構成要素
【００４９】
［0055］  サンプル獲得構成要素、例えば、本明細書に記載のＳＡＣを使用して獲得されたサンプルは、サンプル安定化構成要素（ＳＳＣ）に移送することができる。ＳＳＣは、その上でサンプルが収集されるか、または安定化および保存のために移送される任意のデバイスまたはシステムである。デバイスまたはシステムは、サンプルを収集および移送するためのチャネルおよびコンパートメント、ならびにサンプルを分離および安定化させるための１つ以上のユニットを含むことができる。
【００５０】
［0056］  非一体型システムでは、サンプル獲得構成要素を、サンプル安定化構成要素から物理的に分離することができる。これらの実施形態では、サンプル獲得構成要素からサンプル安定化構成要素への移送は、１つ以上のニードル、キャピラリーチューブなどの様々な手段を介して、または供与部位からサンプル安定化構成要素へのサンプルの直接的移送を介して、行うことができる。サンプル獲得構成要素がサンプル安定化構成要素とは別個の構成要素である場合、基板へのサンプルの適用は、サンプル獲得構成要素から収集するために、自己充填キャピラリーを使用して、その後サンプルが基板に移ることによって達成することができる。
【００５１】
［0057］  サンプル安定化構成要素は、ＳＡＣと一体化させることができる。サンプル安定化構成要素とＳＡＣとの間の一体化は、共有の組み立てられたインターフェースを通じて行うことができる。サンプルは、マイクロチャネルを含むチャネル、自然発生の毛細管力、吸収材料を介するウィッキング、またはエンドユーザに代わって最小限の労力で、サンプルを、サンプル安定化構成要素を通って基板に向けてまたは基板の中に流入させることができる他の手段などを介してサンプル獲得構成要素から移動させることができる。マイクロチャネルは、表面微細構造を有する適合させた形状を含む特性、および毛細管作用を促進するように適合させた材料特性、またはデバイスを通ってサンプルを移送する他の手段を有する様々な材料から構築することができる。マイクロチャネルは、自然発生の毛細管力を用いてサンプルを移動させるために最適化された開口マイクロ流体チャネルなどの、チャンバ間でサンプルを移送する任意の手段を含むことができる。マイクロチャネルおよびマイクロチャネルを含むデバイスの例は、米国特許出願公開第２０１４／００３８３０６号などの多くの援用された参考文献に見出すことができる。
【００５２】
［0058］  サンプル安定化構成要素は、複数の層を有する構造を含むことができる。また、１つ以上の層または基板への移送を認めるためのインターフェースを有することもできる。サンプル安定化構成要素は、１つ以上のサンプルを収集する、サンプルの構成要素を分離する、１つ以上のサンプルを安定化させる、またはこれらの任意の組み合わせを行うために構成することができる。ＳＳＣは、例えば、米国特許出願第１４／３４０６９３号および同第１４／３４１０７４号に記載されているように、複数の層の間で基板の中にサンプルを移送するために構成された層および毛細管チャネルのネットワークをさらに含むことができる。
【００５３】
［0059］  ＳＳＣは、さまざまな方法で基板に結合することができる。ＳＳＣは、サンプル流体を一体型デバイスから基板に移送するための層との接触を可能にする方法で基板に結合することができる。ＳＳＣは、デバイスを基板から容易に取り出せるように構成され得る。システムは、基板上にサンプルを受け取るように構成された領域を有する基板フレームをさらに含むことができる。基板は、基板をシステムから容易に取り出すことができるように基板フレームに取り付けることができ、また基板フレームは、自動または半自動処理を可能にするためにバーコードを用いて設計することができる。システムはさらに、流体デバイス、分析機器、またはその両方を備える、外部デバイスに結合することができる。１つ以上の実施形態において、サンプル安定化構成要素は、基板に結合することができ、ＳＳＣは、サンプル流体を基板に移送するように構成されている。基板は、基板またはサンプル分離構成要素を含むことができる。ＳＳＣは、基板または基板を保持する基板フレームのいずれかに直接取り付けることができる。いくつかの実施形態では、ＳＳＣは、基板フレームおよび基板カバーにさらに結合することができる。基板フレームおよび基板カバーは、対象の領域、例えば基板の中心での、基板への効率的な流体の移送を容易にする特徴を含むことができる。いくつかの実施形態では、ＳＳＣは、サンプル安定化構成要素が予め取り付けられている、サンプル保存基板と共にパッケージングされる基板。いくつかの他の実施形態では、ＳＳＣおよび基板は別々にパッケージングされ、ユーザはサンプルの収集、移送、安定化および保存を行うために基板およびＳＳＣを組み立てることができる。ＳＳＣは、サンプル獲得構成要素（ＳＡＣ）と共にさらにパッケージングすることができる。
【００５４】
［0060］  ＳＳＣは、使い捨て可能であるか、または再使用可能である。例えば、ＳＳＣは、サンプルを収集し、サンプル流体を基板に移送し、基板の所望の領域を通しての流体サンプルの装填を容易にするように構成された単回使用用の使い捨てデバイスであってもよい。ＳＳＣは、収集したサンプルを介した夾雑物または感染拡大を減少させるかまたは防ぐために、１回の使用用に構成することができる。ＳＳＣは、生物学的サンプルの信頼できる再現性のある収集、移送および保存を行うために構成することができる。
【００５５】
［0061］  生物学的サンプルの収集および移送後、保存を行うために安定化マトリックスに移送する前に、基板は、生物学的サンプル構成要素を分離するように構成することができる。
【００５６】
［0062］サンプル分離
【００５７】
［0063］  ＳＳＣは、サンプル構成要素を分離するための１つ以上の基板、膜、またはフィルタを含むサンプル分離ユニットを含むことができる。サンプル分離ユニットは、サンプル安定化構成要素内に一体化させることができ、またはサンプル安定化構成要素に取り付けることができ、もしくはサンプル安定化構成要素から分離することができる。
【００５８】
［0064］  サンプルの分離は、サンプル収集プロセスの異なる時点で行うことができる。例えば、一体型デバイスでは、ＳＳＣ内でサンプルの分離を行ってもよく、非一体型デバイスでは、サンプル安定化構成要素に移送する前に、ＳＳＣの外側でサンプルの分離を行ってもよい。他の例では、サンプルを、ＳＡＣを通ってサンプル分離ユニットに移動させた後に、分離されたサンプルを安定化および保存を行うために１つ以上の基板に移送することができるＳＳＣに移送させることができる。
【００５９】
［0065］  サンプルの分離は、サンプルの獲得とサンプル安定化マトリックスへの移送との間の中間ステップとして行うことができる。場合によっては、サンプルの分離および安定化は、ユーザの介入を必要とせずに１ステップで行うことができる。サンプルの分離はさらに、サンプルの安定化と逐次的または同時に行うことができる。
【００６０】
［0066］  サンプルの獲得および安定化は、サンプル収集、任意での分離、および安定化プロセスの１つ以上の段階間に進むためのユーザの行為を必要とし得る。一体型デバイスでは、サンプルの獲得を有効にし、分離、安定化、および保管の間にサンプルを移動させるために、ユーザの行為を必要とし得る。あるいは、サンプルの獲得、ならびにサンプルの収集、分離または安定化プロセスの１つ以上の追加のステップを開始するために、ユーザの行為が必要となり得る。ユーザの行為としては、ボタンの押し込み、タッピング、振とう、内部部品の破裂、デバイスの構成要素をひねるまたは回す、サンプルを１つ以上のチャンバおよび任意の数の他の機構の中に押し込むことなど、任意の数の行為を挙げることができる。これらの段階への移動は、サンプル収集と平衡して行ってもよく、またはサンプル収集後に行ってもよい。処理段階の間または前のいつでも、サンプル全体またはサンプルの構成要素を、サンプルの生物学的構成要素の細胞の前処理のための任意の数の技術または処置戦略に供することができ、考えられる処置としては、これらに限定されないが、試薬、洗浄剤、蒸発技術、機械的ストレスまたはこれらの任意の組み合わせによる処置が挙げられる。
【００６１】
［0067］  本明細書で開示されるデバイス、方法、システムおよびキットは、１つ以上のサンプル分離ユニットを含むことができる。サンプル分離ユニットは、例えば、血液から血漿、水サンプルから細胞、または無細胞構成要素から細胞を分離するために使用することができる。血液サンプルの場合、血漿または特定の細胞を血液サンプルの他の構成要素から分離するために、１つ以上の構成要素を使用することができる。あるいは、分離デバイス、方法およびシステムは、細胞、血漿、血小板、特定の細胞型、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、無機材料、薬物、または他の構成要素などの、任意の数のサンプル構成要素を選択的に分離することができる。
【００６２】
［0068］  サンプル安定化ユニットの非限定的実施形態は、他の非血漿構成要素を分離するためにもサンプル分離構成要素を用いることができる。サンプル分離構成要素は、例えば、１つ以上のマイクロチャネルを含む１つ以上のチャネル、吸収材料のウィッキング、またはサンプルがデバイスの中を流れることができる他の手段などを介してサンプル獲得構成要素に接続することができる。サンプルを分離するためのシステムおよび方法は、例示的で非限定的なものである。
【００６３】
［0069］  分離を行うための多くの方法があり得て、そのうちのいくつかは、サイズ、変形可能性、形状またはこれらの任意の組み合わせを使用する。分離は、１つ以上の膜、チャンバ、フィルタ、ポリマー、または他の材料を介して行うことができる。膜、基板、フィルタおよびデバイスの他の構成要素は、構成要素を選択的に安定化させ、サンプルの流れを容易にし、サンプルを乾燥させるか、またはこれらの任意の組み合わせを行うために化学的に処置することができる。代替的分離機構は、液−液抽出、固−液抽出、および標的もしくは非標的要素の選択的沈殿、電荷分離、結合親和性、またはこれらの任意の組み合わせを含み得る。分離段階は１つ以上のステップを含み得て、各ステップは異なる機構に依存してサンプルを分離する。そのような機構の１つは、より大きな構成要素をより小さな構成要素から分離するために、サイズ、形状または変形を利用することができる。細胞分離は、例えば、１つ以上のフィルタまたは他のサイズ排除法に依存してサンプルの構成要素を分離することができる選別装置を介して行うことができる。分離は、特定の構成要素が結合事象によって分離され、未結合溶出物は代替的チャンバに、または代替的チャンバを介して移動する、選択的結合を介して行うこともできる。
【００６４】
［0070］  いくつかの方法では、バルクサンプルから１つ以上のサンプル構成要素を分離および収集するために、単一の膜を使用することができる。単一膜法は、サンプルを膜の一端に適用することができるデバイスを使用することができ、サンプルがサンプルの第１の構成要素を介して流れる際、例えば細胞を、膜細孔のサイズに基づいて、サンプルの第２の構成要素、例えば血漿から分離することができる。デバイスの操作後、サンプルの第１の構成要素、この実施例では細胞を含む膜を、サンプルの第２の構成要素、この例では血漿を含む部分から切断することができ、膜を切断する追加の工程を必要とする。別の方法では、２つの別個の膜、具体的には、例えば血液細胞などの１つの構成要素を分離するための第１の膜、および例えば血漿などの他の構成要素を収集するための第２の膜を、サンプル構成要素の分離および収集のために使用することができる。これらの膜は、第１の膜の遠位端が第２の膜の近位端と接触して、第１の膜を介して、例えば細胞などの大きな構成要素の分離、および第２の膜を介して、例えば血漿などのより小さい第２の構成要素の収集が容易になるように配置され得る。
【００６５】
［0071］  図４Ａ〜Ｂは、安定化前または安定化と平行してサンプルを分離するために使用できるサンプル分離ユニットを例解する。サンプル分離ユニットは、フレーム４００と、分離膜４５２と、収集膜４５４と、を備えることができる。フレームは、フレームの第１の周辺部分に近接して配置された内側を含むことができる。内側４０２は、フレーム４１６内の複数の第１のスロットから形成される。フレームは、複数の第１のスロット４１６の少なくとも一部分を取り囲むように配置された外側４０４をさらに含む。外側４０４は、フレーム４３２内の複数の第２のスロットから形成される。分離膜４２０の遠位端は外側に配置され、収集膜の近位端は外側と内側の少なくとも一方の下に配置されており、これにより、収集膜の近位端が分離膜の遠位端との重なり接触領域４２８を有する。さらに、外側は、重なり接触領域の周りで分離膜および収集膜に圧力を加えるように構成される。フレーム４００、分離膜４５２、および収集膜４５４は、異なる材料で構成することができる。フレーム４００は、ポリプロピレン、ナイロン（ポリアミド）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）、およびポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）などのポリマー材料で構成することができ、このフレームは、射出成形技術を用いて製造することができ、均一な厚さを有する。分離膜４５２は、セルロース、ガラス繊維、酢酸セルロース、ポリビニルピロリドン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリエステルまたはこれらの材料の組み合わせなどの好適な材料を含むことができ、分離膜は、フレーム４００の幾何学的形状、具体的には、フレーム４００の内側４０２の幾何学的形状に適合する幾何学的形状を有するように設計することができる。収集膜４５４は、セルロース、ガラス繊維、酢酸セルロース、ポリビニルピロリドン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリエステル、またはこれらの材料の組み合わせなどの好適な材料を含むことができ、収集膜は化学的に処置され得る。他の実施形態および方法は、内側４０２の第１の中央スロット４１６ｂを介して、フレーム４０４の外側の第２の遠位端部分４３６の下に分離膜４５２の遠位端４５８を挿入するために、フレームの内側４０２を下方４６０に押すことなどによって変位させるステップを含むことができる。この方法は、例えば、上方４６６に押すことにより圧力を加えることによって、外側４０４および内側４０２を変位させるステップをさらに含み、外側４３２ｂの第２の中間スロットを介して、収集膜４５４の近位端４６２を外側および内側の少なくとも１つの下側に挿入することができ、これにより、収集膜の近位端が、分離膜４５２の遠位端４５８との重なり接触領域４６８を有するようにする。
【００６６】
［0072］  分離機構は任意であってもよく、例えば、ユーザまたは製造業者がサンプルの経路内にカートリッジを挿入することができるモジュラーシステムの一部であってもよい。１つの可能な実施形態では、サンプルは、前述の収集デバイスのいずれかから、二次チャンバに移送することができる。移送は、ユーザの行為によって容易にすることができるか、またはユーザの操作なく自発的に行うことができる。
【００６７】
［0073］  サンプル分離ユニットは、ろ過膜を用いてサンプル構成要素を分離することができる。図５は、生物学的サンプルの非細胞画分を分離するろ過膜を有するサンプル分離ユニットを例解する。ろ過膜５０２は、サンプル適用ゾーン５１０および移送ゾーン５１２を有することができる。ろ過膜は、移送ゾーン５１２を介して固体マトリックス５０４と直接接触することができる。生物学的サンプルは、ろ過膜のサンプル適用ゾーン５１０に適用することができ、それがろ過膜を通って移動するときにろ過することができる。ろ過膜は、複数の細孔を有することができる。一旦生物学的サンプルがろ過膜を通過すると、生物学的サンプル内の常在の無傷の細胞は、例えば、ほとんどがサンプル適用ゾーン５１０でろ過膜によって保持することができ、非細胞画分は、孔を通って移送ゾーン５１２に到達するまでろ過され、乾燥した固体マトリックス上に移送され収集され得る。ろ過膜は、約０．０１ミクロン〜約５ミクロンの範囲であり得る孔径を有することができる。ろ過膜は、例えば約１ミクロン〜約２ミクロンの範囲の孔径を有することができる。孔径は、約０．２２ミクロン〜約２ミクロンの間で変化し得る。孔径１ミクロンのろ過膜を使用する場合、１ミクロンより大きい直径を有する任意の他の循環真核細胞および／または病原細胞はろ過膜内に保持することができ、このためろ過時に乾燥固体マトリックスに到達することはない。追加の分離構成要素は、米国特許出願公開第２０１５／００３１０３５号に記載されている。
【００６８】
［0074］  ろ過は、サンプル収集プロセス内の様々な時点で行うことができる。サンプルの非細胞画分は、例えば、それ自体の収集地点で生物学的サンプルからろ過され得る。ろ過は、生物学的サンプルのいかなる事前の前処置もなく行うことができる。さらにろ過は、いかなる安定化試薬も不在下で行うことができる。
【００６９】
［0075］  ろ過膜は様々な材料から作製され得る。ろ過膜を形成するために使用される材料は、天然材料、合成材料、または合成により修飾された天然起源材料であり得る。ろ過膜を作製するために使用され得る好適な材料としては、これらに限定されないが、ガラス繊維、ポリビニルアルコール結合ガラス繊維、ポリエーテルスルホン、ポリプロピレン、ポリフッ化ビニリデン、ポリカーボネート、酢酸セルロース、ニトロセルロース、親水性発泡ポリ（テトラフルオロエチレン）、陽極酸化アルミニウム、トラックエッチングされたポリカーボネート、エレクトロスピニングされたナノファイバーまたはポリビニルピロリドンが挙げられる。一例では、ろ過膜は、ポリビニルアルコール結合ガラス繊維フィルタ（ＭＦ１（商標）膜、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）から形成される。別の例では、ろ過膜は、非対称ポリエーテルスルホン（Ｖｉｖｉｄ（商標）、Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）から形成される。いくつかの実施形態では、ろ過膜は、２種以上の異なるポリマーの組み合わせによって形成することができる。例えば、ろ過膜は、ポリエーテルスルホンとポリビニルピロリドンとの組み合わせ（Ｐｒｉｍｅｃａｒｅ（商標）、ｉＰＯＣ）によって形成することができる。
【００７０】
［0076］  ろ過後、分離した非細胞画分を、物理的相互作用によって乾燥固体マトリックス上に収集することができる。非細胞画分は、吸着または吸収によって乾燥固体マトリックス上に収集することができる。
【００７１】
［0077］安定化マトリックス
【００７２】
［0078］  ＳＳＣは、核酸、タンパク質、およびそれらのそれぞれの断片などの標的構成要素を含み得る生物学的サンプルの標的構成要素を移送、安定化および保存するために使用することができる。ＳＳＣは、これらの分析物のうちの１つ以上を、サンプル安定化構成要素に結合させるかまたはそれら内に収容することができる基板上で受け取り、抽出し、および安定化することができる。図６は、サンプルを保存または安定化させるためのサンプル基板またはマトリックス６１５を有するサンプル安定化構成要素６１０の例を例解する。基板６１５は、フレーム６２０を使用してデバイスの一方の側で定位置に保持することができる。サンプルは、収集され、チャネル６２５をと通って、取り付けられたサンプル基板に移送され得る。
【００７３】
［0079］  本明細書で使用される用語「標的構成要素」は、所定の診断検査において、検出または検査することができる、例えば、生体分子などの１つ以上の分子を指すことができる。特定の検査のための標的構成要素は、良好な品質の診断結果のために、適切に保存され、安定化させる必要があり得る。
【００７４】
［0080］  サンプルの性質は、例えば材料の供給源、例えば生物学的材料に依存し得る。例えば、供給源は、これに限定されるものではないが、ウイルス、細菌、植物および動物などの生物の範囲由来のものであり得る。供給源は、哺乳動物またはヒト対象であり得る。哺乳動物およびヒトが供給源である場合、サンプルは、組織、細胞、血液、血漿、唾液および尿からなる群から選択することができる。別の態様では、生物学的サンプルは、生体分子、合成由来生体分子、細胞構成要素および生物製剤からなる群から選択される。
【００７５】
［0081］  標的構成要素の組成、安定性および品質は、それらの供給源に応じて変化し得るため、サンプルの異なる構成要素を安定化させ、検査のためにサンプルを調製するために、様々な異なる基板を使用することができる。標的構成要素の化学的性質および特性は、サンプルの起源に依存して変化し得て、必要なサンプル安定化度は、意図されるサンプルの診断パネルに依存し得る。例えば、一部のパネルは高濃度および低品質のサンプルを必要とし得るが、他のパネルは低濃度および高品質のサンプルを必要とし得る。高品質の再現可能な検査結果は、高品質サンプルを必要とし得る。基板の組成ならびにサンプルを安定化させるための基板および方法は、アッセイ間および標的構成要素または分析物間で異なり得る。
【００７６】
［0082］  標的構成要素の性質は異なり得ることから、基板またはマトリックス組成物を特定の標的構成要素のために選択または構成することもできる。特定のサンプルに関して意図されるサンプル源および／または診断検査は、基板またはマトリックスの組成を決定する変数であり得る。例えば、質の高い診断検査結果は、標的構成要素の質の高いまたは有効な安定化を必要とし得る。場合によっては、基板または安定化マトリックスの組成は、特定の標的構成要素（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質）を特異的に安定化するように設計することができる。マトリックスは、特定の診断検査に使用するためにさらに構成することができ、例えば、検査が特定の型の標的構成要素のより高濃度を必要とする場合、マトリックスはその標的構成要素を選択的に放出するように設計することができる。
【００７７】
［0083］  検査および基板組成物の型が異なることを念頭に置いて、サンプル処理を行うことができる。例えば、特定の標的構成要素または診断検査のために設計された基板またはマトリックスを、それが使用され得るまたはそれらと共に使用され得るアッセイの型を示す色またはコードで示すことができる。基板はまた、基板から誘導したサンプルまたは結果を特定のエンドユーザまたは供与体と結びつけることができる、バーコード、ＲＦＩＤ、または他の識別子などの、１つ以上のタグまたはラベルを組み込むことができる。
【００７８】
［0084］  用語「基板」または「安定化マトリックス」は、基板または本明細書に記載のサンプル分離構成要素などの、あらゆる固体マトリックスを指すことができる。基板は、血液などの流体サンプルを吸収することができる１つ以上の吸収材料を含むいかなる固体材料であってもよい。
【００７９】
［0085］  基板または安定化マトリックスは、１つ以上の異なる固体構成要素を含むことができる。固体構成要素は、水和が１０重量％未満である実質的に乾燥した状態に保つことができる。固体マトリックス基板の例としては、これらに限定されないが、天然材料、合成材料、または合成により修飾された天然起源材料が挙げられる。基板は、セルロース、ニトロセルロース、修飾多孔質ニトロセルロースまたはセルロース系基板、ポリエチレングリコール修飾ニトロセルロース、酢酸セルロース膜、ニトロセルロース混合エステル膜、ガラス繊維、ポリエーテルスルホン膜、ナイロン膜、ポリオレフィン膜、ポリエステル膜、ポリカーボネート膜、ポリプロピレン膜、ポリフッ化ビニリデン膜、ポリエチレン膜、ポリスチレン膜、ポリウレタン膜、ポリフェニレンオキシド膜、ポリ（テトラフルオロエチレン−コ−ヘキサフルオロプロピレン）膜、ガラス繊維膜、石英繊維膜またはそれらの組み合わせを含むことができる。乾燥固体マトリックスとして作用し得る好適な材料としては、これらに限定されないが、セルロース、酢酸セルロース、ニトロセルロース、カルボキシメチルセルロース、石英繊維、親水性ポリマー、ポリテトラフルオロエチレン、ガラス繊維および多孔質セラミックが挙げられる。親水性ポリマーは、ポリエステル、ポリアミドまたは炭水化物ポリマーであってもよい。
【００８０】
［0086］  基板またはマトリックスは、その中に含浸された１種以上の乾燥試薬を含むことができる。１種以上の乾燥試薬は、タンパク質安定化試薬、核酸安定化試薬、細胞溶解試薬またはそれらの組み合わせを含み得る。一実施形態では、基板は基板フレーム上に配置される。サンプル基板の非限定的例としては、多孔質サンプル基板、Ｗｈａｔｍａｎ  ＦＴＡ（商標）カード、セルロースカード、またはそれらの組み合わせを挙げることができる。いくつかの実施形態では、基板は、輸送または貯蔵のための少なくとも１つの生物学的サンプル分析物を保存する少なくとも１つの安定化試薬を含むことができる。貯蔵媒体用の好適な試薬の非限定的例としては、弱塩基、キレート剤、および任意により尿酸もしくは尿酸塩のうちの１種以上またはカオトロピック塩の単独または界面活性剤との組み合わせの添加物を挙げることができる。
【００８１】
［0087］  ある場合には、基板は、セルロースを含む乾燥固体マトリックスを含むことができる。セルロース系乾燥固体マトリックスは、いかなる洗浄剤も含まない。セルロース系乾燥固体マトリックスには、いかなる試薬も含浸することができない。セルロース系乾燥固体マトリックスには、カオトロピック塩を含浸させることができる。カオトロピック塩の例としては、これらに限定されないが、グアニジンチオシアネート、塩化グアニジン、塩酸グアニジン、イソチオシアネートグアニジン、チオシアン酸ナトリウム、およびヨウ化ナトリウムが挙げられる。いくつかの実施形態では、セルロース系乾燥固体マトリックスは、ＦＴＡ（商標）Ｅｌｕｔｅ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）である。サンプル安定化構成要素の例は、例えば、米国特許出願公開２０１３／０２８９２６５号および同第２０１３／０２８９２５７号に見出すことができる。
【００８２】
［0088］  基板は、１つ以上の材料の層で構成され得る。基板は固体マトリックス内に整列させることができる。層は、特定の生物学的サンプル構成要素を選択的に抽出するように整列させることができる。固体マトリックスは、単一の材料であってもよく、または複数の材料を含んでもよい。
【００８３】
［0089］  単一のサンプル安定化構成要素に複数のサンプル安定化ユニットを保存するか、または取り付けることができる。単一のサンプル安定化ユニットをサンプル安定化構成要素に保存することができる。あるいは、２つ以上のサンプル安定化ユニットを一緒に連結することができ、これにより、生物学的サンプルのうちの１つ以上の構成要素が異なるユニットを通って移動できるようにする。上記の実施形態のいずれかにおけるサンプル安定化マトリックスまたは基板は、均一または可変の組成を有することができる。基板、サンプル安定化ユニット、または基板もしくはサンプル安定化ユニットのいずれかの構成要素は、それらが意図される標的構成要素（複数可）の型および／またはサンプルが意図される診断検査（複数可）を示すためにタグ付けすることができる。
【００８４】
［0090］  基板は、サンプル処理がサンプル安定化構成要素の内部または近傍で行われるように構築され得る。いくつかの実施形態では、サンプルは、１つ以上のサンプル安定化マトリックスに供される前に、サンプル分離ステップを通って移動することができる。いくつかの実施形態では、獲得ステップ、任意の分離ステップおよび安定化ステップは平行して行われる。
【００８５】
［0091］  低濃度で存在する標的構成要素について、回収を向上するように基板を構成することができる。これらの場合、固体基板は、表面からの生物学的材料の回収を向上する化学的混合物で被覆された少なくとも１つの表面を含むことができる。化学的混合物は、ビニルポリマーおよび非イオン性洗浄剤、ビニルポリマーおよびタンパク質、非イオン性合成ポリマーおよび非イオン性洗浄剤、非イオン性合成ポリマーおよびタンパク質、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）および非イオン性洗浄剤、非イオン性洗浄剤およびタンパク質、ならびにポリエチレンミン（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｍｉｎｅ、ＰＥＩ）およびタンパク質からなる群から選択される構成要素を含み得る。固体支持体は、紙、ガラス微小繊維および膜からなる群から選択され得る。支持体は、例えば、９０３  Ｎｅｏｎａｔａｌ  ＳＴＤカードなどのセルロース紙などの紙であり得る。固体支持体は、ポリエステル、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）、ポリアミド（ナイロン）、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、ポリカーボネート、硝酸セルロース、酢酸セルロースおよび酸化アルミニウムからなる群から選択される膜を含み得る。ビニルポリマーは、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）であり得る。非イオン性洗浄剤は、Ｔｗｅｅｎ２０であり得る。タンパク質は、アルブミンおよびカゼインからなる群から選択することができる。非イオン性合成ポリマーは、ポリ−２−エチル−２−オキサゾリン（ＰＥＯＸ）であり得る。化学的混合物は、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、Ｔｗｅｅｎ２０、アルブミン、ポリ−２−エチル−２−オキサゾリン（ＰＥＯＸ）、ポリエチレンエミン（ＰＥＩ）、ポリエチレンエミン（ＰＥＩ）またはカゼインの任意の組み合わせを含むことができる。また、本明細書では、ｉ）生物学的材料を含むサンプルに、例えば本明細書に記載の固体支持体の表面を接触させるステップ、ｉｉ）固体支持体の表面上でサンプルを乾燥させるステップ、ｉｉｉ）固体支持体を貯蔵するステップ、およびｉｖ）材料、例えば、生物学的材料を表面から抽出するステップ、を含む、固体支持体から材料、例えば生物学的材料を回収するための方法も提供される。他の態様では、ステップｉｉｉ）は、約１５℃〜約４０℃の範囲の温度で紙支持体を貯蔵するステップを含む。紙支持体は、生物学的材料の熱安定性に依存してより低い温度で貯蔵することができる。基板を作製する方法は、支持体の少なくとも１つの表面を、表面からの生物学的材料の回収を向上する化学混合物溶液で被覆することを含むことができ、化学混合物は、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）とＴｗｅｅｎ２０、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）とアルブミン、Ｔｗｅｅｎ２０とアルブミン、ポリ−２−エチル−２−オキサゾリン（ＰＥＯＸ）とＴｗｅｅｎ２０、ポリ−２−エチル−２−オキサゾリンＰＥＯＸとアルブミン、ポリエチレンエミン（ＰＥＩ）とＴｗｅｅｎ２０、およびポリエチレンエミン（ＰＥＩ）とアルブミンからなる群から選択される混合物である。サンプル安定化構成要素は、その表面からの例えば生物学的材料などの材料の回収を向上するために、本明細書に記載の固体支持体の使用を提供することができ、開示された安��化構成要素および方法は、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許公開出願第２０１３／０３２３７２３号および同第２０１３／３３０７５０号に記載されている。
【００８６】
［0092］  基板または固体マトリックスは、ＲＮＡ、ＤＮＡおよびそれらの断片などの核酸を選択的に保存するように構成することができる。核酸を選択的に安定化させるための固体マトリックスは、少なくとも１つのタンパク質変性剤と、乾燥状態で含浸され貯蔵された少なくとも１つの酸または酸滴定緩衝剤試薬を含み得る。マトリックスは、水和時に酸性ｐＨをもたらし、サンプルから核酸を抽出し、かつ／または周囲温度で実質的に乾燥した状態で核酸を保存するように構成され得る。
【００８７】
［0093］  核酸を抽出および安定化させるための安定化マトリックスは、固体マトリックス中、乾燥様式でタンパク質変性剤、還元剤、緩衝剤、フリーラジカルトラップ、カオトロピック剤、洗浄剤、またはＲＮａｓｅ阻害剤などの試薬の任意の組合せを含むことができる。ＲＮａｓｅ阻害剤は、三リン酸塩、ピロリン酸塩、酸、または酸滴定緩衝液を含むことができる。安定化マトリックスは、酵素阻害剤、フリーラジカルスカベンジャー、またはキレート剤などの１種以上の試薬を、またはそれらの存在下でさらに含浸させることができる。固体マトリックスは、タンパク質変性剤、還元剤、緩衝剤、および任意によりフリーラジカルトラップまたはＲＮａｓｅ阻害剤を含むことができる。
【００８８】
［0094］  １種以上の試薬を含浸させ、乾燥状態で貯蔵することができる。１種以上の乾燥した試薬は、任意により、緩衝液、水またはサンプルの添加によって再水和することができる。マトリックスは、弱いまたは強いタンパク質変性剤をさらに含むことができる。特定の態様において、固体マトリックスは、市販の９０３、３１−ＥＴＦ、またはＦＴＡ  Ｅｌｕｔｅ（商標）などの多孔質セルロース系紙である。この方法の性能により、核酸、例えば不安定な生体分子であり得るＲＮＡを周囲温度下にて乾燥様式で（例えば固体マトリックス上）貯蔵することが可能となる。固体マトリックスは、マトリックスの水和により酸性ｐＨがもたらされるように構成され得る。上記のように、１つ以上の実施形態において、ＲＮＡの質は、生物学的アナライザーを介して抽出されたＲＮＡのキャピラリー電気泳動によって決定することができる。乾燥した固体マトリックスは、周囲条件下にて乾燥様式で核酸（例えば、ＲＮＡ、ＤＮＡ）を含む１つ以上の生物学的構成要素を長期貯蔵することを可能にし得る。他の態様では、サンプルからの核酸（例えば、ＲＮＡ、ＤＮＡ）の周囲抽出および貯蔵のための乾燥固体マトリックスは、乾燥様式で固体マトリックス中に存在するチオシアネート塩、還元剤、緩衝液、および任意によりフリーラジカルトラップまたはＲＮａｓｅ阻害剤を含む。サンプルからの核酸（例えば、ＲＮＡ、ＤＮＡ）の抽出および貯蔵のための乾燥固体マトリックスは、少なくとも１種の金属チオシアン酸塩を含み、少なくとも１種の金属チオシアン酸塩は、チオシアン酸グアニジニウム（ＧｕＳＣＮ）、還元剤、緩衝剤、および任意によりフリーラジカルトラップまたはＲＮａｓｅ阻害剤ではない。固体マトリックスは、乾燥様式の核酸（例えば、ＲＮＡ、ＤＮＡ）を含み得て、収集された核酸サンプルのさらなる分析に適した無処置の様式で核酸を固体マトリックスから放出するためのプロセスに供され得る。
【００８９】
［0095］  ＲＮＡの質は、ＲＩＮ値として定量することができ、ＲＩＮは、抽出されたＲＮＡ内に存在する種々のＲＮＡの量のアルゴリズム評価によって計算することができる。質の高い細胞性ＲＮＡは、１０に近いＲＩＮ値を呈し得る。１つ以上の実施形態において、乾燥マトリックスから抽出されたＲＮＡは、少なくとも４のＲＩＮ値を有する。いくつかの実施形態では、マトリックスは、生物学的サンプルの周囲抽出および安定化をもたらし、約４〜約１０の範囲のＲＩＮ値を有する無傷の質の高いＲＮＡを生成するか、またはいくつかの実施形態では、ＲＩＮ値は、約５〜約８の範囲である。マトリックスは、ＲＮＡを抽出するための水和の際に約２〜約７のｐＨをもたらすように構成された多孔質の不溶解性乾燥材料であってもよい。このマトリックスは、抽出されたＲＮＡを安定化させることができ、ＲＮＡ  Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ  ｎｕｍｂｅｒ（ＲＩＮ）は少なくとも４である。
【００９０】
［0096］  サンプルから核酸を抽出および保存するための方法は、タンパク質変性剤および酸または酸滴定緩衝液試薬を含む乾燥固体マトリックスにサンプルを提供するステップと、サンプルから核酸を抽出するための水和時に酸性ｐＨを生じるステップと、抽出された核酸を含むマトリックスを乾燥するステップと、マトリックス上に抽出された核酸を周囲温度で実質的に乾燥状態で保存するステップと、を含み得る。前述のサンプル安定化構成要素の例は、米国特許出願公開第２０１３／０３３８３５１号に見出すことができる。
【００９１】
［0097］  サンプル安定化ユニットは、非核酸構成要素、例えばタンパク質を収集し、安定化させるための固体マトリックスを含むことができる。これらの例において、基板は、生物学的サンプルからタンパク質またはペプチドを抽出し、周囲温度で保存するために安定化させるように構成することができる。そのような実施形態の１つでは、生体分子の収集、安定化および溶出のための固体基板は、実質的に乾燥状態の三糖類を含むことができる。三糖類は、メレジトース、ラフィノース、マルトトリウロース、イソマルトトリオース、ニゲロトリオース、マルトトリオース、ケトースまたはそれらの組み合わせから選択することができる。固体基板の１つ以上の実施形態は、実質的に乾燥状態でメレジトースをさらに含むことができる。メレジトースは、分子量が５０４．４４ｇ／ｍｏｌを有する非還元性三糖類の糖であり得る。１つ以上の実施形態では、固体基板は、メレジトースを含んでもよく、メレジトースの濃度は３０％未満の量である。メレジトースは基板内に含浸させることができる。基板はまた、メレジトースで受動的に被覆されても共有結合的に修飾されてもよい。１種以上の例において、基板は、１種以上の溶解試薬、１種以上の緩衝試薬または１種以上の還元剤などの、１種以上の試薬でさらに含浸される。いくつかの実施形態では、１つ以上の含浸試薬は、細胞溶解試薬、実質的に乾燥状態でその中に含浸されるタンパク質安定化試薬、タンパク質貯蔵化学物質、およびそれらの組み合わせなどの生体分子安定化試薬を含む。上述のシステムおよび他の実施形態の例は、米国特許出願公開第２０１４／０２９４９４２号に開示されており、その全体が参照により組み込まれる。
【００９２】
［0098］  タンパク質を安定化させるための他の基板は、セルロース繊維および／またはガラス繊維ならびに親水性または水溶性分枝鎖炭水化物ポリマーを含む固体紙系マトリックスを含むことができる。固体系マトリックスの表面重量は、４０〜８００ｇ／ｍ２であり得る。親水性または水溶性分枝鎖炭水化物ポリマーは、マトリックスの４〜３０重量％であり得る。親水性または水溶性分枝鎖炭水化物ポリマーは、１５〜８００ｋＤａ、例えば２０〜５００ｋＤａの平均分子量を有し得る。分枝鎖炭水化物ポリマーはデキストランを含んでもよい。デキストランは、分岐（１６）連結グルカンであってもよい。分枝鎖炭水化物ポリマーは、単糖類または二糖類と二官能性エポキシド試薬とのコポリマーを含むことができる。このようなポリマーは、各単糖類／二糖類上の多数の反応性ヒドロキシル基のために高度に分枝され得る。使用される反応条件に依存して、分岐の程度は約０．２からほぼ１までであり得る。紙中で水抽出物の含量は、０〜２５重量％、例えば、０．１〜５重量％または３〜２０重量％であり得る。炭水化物ポリマーが紙繊維に共有結合している場合、および／またはそれ自体が架橋されている場合、非常に少量の抽出物を得ることができる。いくつかの実施形態では、紙は５〜３００マイクロモル／ｇ、例えば５〜５０、５〜１００または５０〜３００マイクロモル／ｇの負または正に荷電した基を含む。負に荷電した基は、例えばカルボキシレート基、スルホネート基または硫酸基であり得て、正に帯電した基は例えばアミンまたは第４級アンモニウム基であり得る。これらの基が存在することにより、分岐鎖炭水化物ポリマーの保護効果を改善することができる。
【００９３】
［0099］  サンプルを取り出すための方法は、サンプル、例えば生物学的サンプルを有する乾燥した紙を少なくとも１週間、例えば少なくとも１ヶ月または少なくとも１年間保存するステップを含むことができる。いくつかの実施形態では、この方法は、タンパク質を貯蔵し、分析した後に、紙から少なくとも１つのタンパク質を抽出するステップを含む。抽出は、例えば、乾燥したサンプルを有する紙の小さな部分を打ち抜き、これらを水性液体に浸漬することによって行うことができる。いくつかの実施形態では、タンパク質は、免疫アッセイ、質量分析または酵素活性アッセイによるステップにおいて分析される。上に開示された基板の例は、例えば、米国特許出願公開第２０１４／０３０２５２１号に開示される。
【００９４】
［0100］  サンプル安定化構成要素は、少なくとも１つの乾燥サンプル、例えば、乾燥血液サンプルなどの少なくとも１つの乾燥生物学的サンプルを含むことができる。血液および他の生物学的材料、例えば血清、血漿、尿、脳脊髄液、骨髄、生検などをサンプル安定化構成要素に適用し、保存およびその後の分析または他の使用のために乾燥させることができる。乾燥サンプル、例えば、生物学的サンプルは、少なくとも１つのタンパク質または他の感受性生体分子を含む医薬製剤または診断試薬であり得る。別の態様では、サンプル安定化構成要素は、１つ以上のサンプル適用領域が印刷されているか、または他の方法でカード上に示されている紙カードを含むことができる。非着色サンプルが適用されているかどうかを示すために、これらの領域にインジケーター色素が存在してもよい。デバイスは、例えば、ラック内などでの自動化された取り扱いを容易にするために、カードホルダーを含むことができ、また、サンプルの収集を容易にするための様々な形態のサンプリング特徴を含むことができる。
【００９５】
［0101］  本明細書のデバイスで使用することができる安定化マトリックスまたは安定化構成要素の他の例としては、これらに限定するものではないが、米国特許明細書第８，９５１，７１９号にさらに例解されるＧｅｎｔｅｇｒａ−ＲＮＡ、Ｇｅｎｔｅｇｒａ−ＤＮＡ（Ｇｅｎｔｅｇｒａ、Ｐｌｅａｓａｎｔｏｎ  ＣＡ）、米国特許明細書第８，５１９，１２５号にさらに例解されるようなＤＮＡ  Ｓｔａｂｌｅ  Ｐｌｕｓ；ＲＮＡｇａｒｄ  Ｂｌｏｏｄ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏｍａｔｒｉａ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）が挙げられる。
【００９６】
［0102］  いくつかの実施形態では、固体マトリックスは、血漿構成要素を選択的に安定化させることができる。血漿構成要素は、無細胞ＤＮＡ、無細胞ＲＮＡ、タンパク質、ホルモン、および他の代謝産物を含むことができ、これらは、固体マトリックス上で選択的に安定化され得る。血漿構成要素は、全血から単離され、固体マトリックス上で安定化され得る。固体マトリックスは、様々な異なるデバイスおよび技術と重なり得るか、またはそれらの構成要素であり得る。血漿構成要素は、様々な異なるデバイスおよび技術を用いて全血サンプルから分離することができる。技術としては、ラテラルフローアッセイ、バーチカルフローアッセイ、および遠心分離を挙げることができる。
【００９７】
［0103］  固体マトリックスは、様々な血漿分離デバイスまたは技術と一体化することができるか、またはその構成要素とすることができる。固体マトリックスは、血漿分離膜、例えばＶｉｖｉｄ（商標）血漿分離膜などの様々な異なるデバイスと重なり得るか、または、その構成要素であり得る。固体マトリックスは、血漿分離膜などの血漿分離デバイスと部分的に重なり得る。血漿分離のためのデバイスおよび技術の例は、米国特許明細書第６，０４５，８９９号、同第５，９０６，７４２号、同第６，５６５，７８２号、同第７，１２５，４９３号、同第６，９３９，４６８号、欧州特許明細書第０，９４６，３５４号、同第０，８４６，０２４号、米国特許明細書第６，４４０，３０６号、同第６，１１０，３６９号、同第５，９７９，６７０号、同第５，８４６，４２２号、同第６，２７７，２８１号、欧州特許明細書第１，１１８，３７７号、同第０，６９６，９３５号、同第１，０８９，０７７号、米国特許明細書第２０１３／０２１００７８号、同第２０１５／００３１０３５号などの、参照により本明細書に組み込まれる特許または特許刊行物に開示されている。
【００９８】
［0104］  様々なデバイスおよび技術において、分離膜を使用することができる。分離膜は、ポリカーボネート、ガラス繊維、または当業者によって認識された他のものから構成することができる。膜は、固体マトリックスを含むことができる。膜は可変性孔径を有し得る。分離膜は、約１μｍ、約２μｍ、約４μｍ、約６μｍ、約８μｍ、約１０μｍ、約１２μｍ、約１４μｍ、約１６μｍ、約１８μｍ、約２０μｍの孔直径を有し得る。分離膜は、約２μｍ〜約４μｍの直径を有する孔を有し得る。分離膜は、直径約２μｍの孔を有し得る。
【００９９】
［0105］  血漿分離は、広く多様なサンプル容積に対して実施することができる。血漿サンプルの容積は、固体マトリックスが使用される用途に依存する変数であり得る。サンプル量は、約１００μＬ、約１５０μＬ、約２００μＬ、約２５０μＬ、約３００μＬ、約３５０μＬ、約４００μＬ、約４５０μＬ、約５００μＬ、約５５０μＬ、約６００μＬ、約６５０μＬ、約７００μＬ、約７５０μＬ、約８００μＬ、約８５０μＬ、約９００μＬ、約９５０μＬ、または約１０００μＬであり得る。サンプル容積は、約２５０μＬ〜約５００μＬの範囲であり得る。
【０１００】
［0106］生物学的構成要素の調製
【０１０１】
［0107］  いくつかの実施形態では、ユーザまたはオペレータは、分析のためのシステムの構成要素を取り出した後、例えば、分析のためにサンプルを施設に送ることができる。施設は、ＣＬＩＡ施設、検査室、診療所、または外部の専用施設であってもよい。施設では、サンプルは、これらに限定されないが、共通パネル、甲状腺検査、癌診断検査、心血管疾患の検査およびスクリーニング、遺伝病／出生前検査および感染症などの任意の診断検査に使用され得る。適用可能な検査の非限定的なリストが、本明細書中に図７として含まれ、共に出願される。
【０１０２】
［0108］  サンプルを獲得、収集、分離および安定化するためのデバイスおよびシステムは、モジュール式であってもよく、別個のコンパートメントまたは構成要素を含む。別個の構成要素は容易に取り出すもしくは分離することができるか、または取り出すもしくは分離することができない。分離可能または取り出し可能な構成要素は、サンプル基板またはサンプル分離構成要素を含み得る。
【０１０３】
［0109］  本明細書のデバイス（例えば、サンプル獲得構成要素およびサンプル安定化構成要素）は、例えば生物学的構成要素のさらなる分析のために検査室に一緒に輸送することができる。あるいは、安定化構成要素（例えば、基板または基板）は、生物学的構成要素のさらなる分析のために、サンプル獲得構成要素を含まずに検査室に輸送することができる。いくつかの例では、配置されたデバイス、システムまたは基板上で処置および分析を実施することができ、安定化構成要素またはデバイスもしくはシステムの構成要素のいずれかを、医療提供者または検査結果に関心を持つ他の当業者に輸送することができる。生物学的サンプルが分析のための場所で受領されると、基板、またはサンプル分離構成要素の構成要素は取り出すことができる。これらの構成要素は、マトリックス上で安定化された組成物または標的構成要素を示すためにタグ付けおよび／またはラベル付けされ得る。タグを識別子として使用して、膜または基板を選別し、標的検査のために調製することができる。
【０１０４】
［0110］  サンプルを受け取って処理するためのシステムおよびプロセスは、配置されたサンプルの同一性、安定性、供給源または他の特徴部に応じて変化し得る。生物学的サンプル構成要素の品質は、診断検査結果の品質、再現性および信頼性に直接影響を及ぼし得る。サンプルの獲得、収集、安定化、および任意の分離のための前述のシステム、デバイスおよび方法は、サンプルの組成、安定性、濃度および処理に影響を与え得る。例えば、生物学的サンプルの容積、サイズ、量、安定性および純度は、サンプル供給源およびサンプルを収集するために使用される構成要素に依存して変化し得る。サンプルの品質およびさらには診断結果の質は、サンプルを獲得するためのキット、システム、デバイスおよび方法に特異的であり得る。したがって、分析の前に生物学的サンプルの構成要素の受け取り、処理、処置、および／または調製を行うための方法、キットおよびシステムも開示される。
【０１０５】
［0111］  サンプルから処理される構成要素は、これらに限定されないが、無細胞ＤＮＡおよび循環中の腫瘍ＤＮＡなどのＤＮＡ／ＲＮＡ、タンパク質、抗原、抗体、ＨＤＬ／ＬＤＬなどの脂質、およびこれらの任意の組み合わせなど、を挙げることができる。生物学的サンプルまたは標的構成要素は、従来の核酸抽出方法のいずれかを用いて抽出することができる。抽出方法の非限定的例としては、これらに限定されないが、電気溶出、ゼラチン抽出、シリカまたはガラスビーズ抽出、グアニジン−チオシアネート−フェノール溶液抽出、チオシアン酸グアニジン酸系抽出、ヨウ化ナトリウムまたは類似の勾配による遠心分離、緩衝液による遠心分離、またはフェノール−クロロホルム系抽出が挙げられる。核酸分析のために、抽出ステップは、タンパク質などの不純物を除去すること、循環する核酸を濃縮することを補助し得る。抽出された循環核酸は、アガロースゲル電気泳動、分光光度法、蛍光測定、または液体クロマトグラフィなどの方法を用いて検査することができる。
【０１０６】
［0112］  サンプルから抽出されたＤＮＡまたはヌクレオチドは、エラーを低減し、限定されたサンプルサイズで有意なシグナルを生成するための様々な方法を用いて、検査施設で調製することができる。核酸サンプルは、所望の標的核酸（例えば、「ＤＮＡ鋳型」または「核酸鋳型」）を効率的に増幅するための種々の方法で処置するか、または種々の方法に供することができる。修飾プライマーは、他の核酸増幅法およびキットで観察される望ましくないプライマー二量体およびキメラ生成物の生成を最小限に抑えるか、または防ぐように設計することができる。新規のプライマー設計法により、偽の核酸増幅産物の生成を回避することができる。サンプルを分析するために使用される記載された方法およびキットは、「ＡＴ  ＧｅｎｏｍｉＰｈｉ」を含み得る。ＡＴＧｅｎｏｍｉＰｈｉは、一般式：＋Ｎ＋Ｎ（ａｔＮ）（ａｔＮ）（ａｔＮ）＊Ｎの修飾六量体を使用することができ、式中、「＋」は、上述のように、ＬＮＡ塩基の前にあり、（ａｔＮ）は、２−アミノ−ｄＡ、ｄＣ、ｄＧおよび２−チオ−ｄＴのランダム混合物を表す。他の六量体は、式（ａｔＮ）（ａｔＮ）（ａｔＮ）（ａｔＮ）（ａｔＮ）＊Ｎを含むことができ、表記法はこれらの２つの六量体設計の間で一貫している。核酸増幅技術におけるこれらの六量体の使用は、ランダム六量体が相互にアニールする能力を阻止することによって、プライマーの融解Ｔｍを上昇させることによって、プライマーへのＬＮＡおよび２−アミノ−ｄＡの添加を介して標的核酸への六量体の結合効率を改善することによって、およびランダム六量体への２−チオ−ｄＴの取り込みを介して標的ＤＮＡをそれ自体にアニーリングすることを防ぐことによって、従来の方法で観察されるプライマー二量体の形成およびキメラ核酸の産生に関連する問題に対処し、最小限に抑え、消失させることができる。さらに、プライマー修飾は、標的核酸に対するそれらの結合強度を高めることができ、プライマー二量体およびキメラ核酸産物の産生の可能性をさらに最小限に抑える、よりストリンジェントなハイブリダイゼーション緩衝液の利用が可能になる。ＤＮＡ増幅法のこれらおよび他の方法は、例えば、米国特許明出願公開第２０１３／０２１００７８号に見出され得る。
【０１０７】
［0113］  サンプル由来のＤＮＡは、生物学的サンプルから一本鎖ＤＮＡ環を生成するための１つ以上の方法を用いて分析することができる。サンプルを分析する検査室は、生物学的サンプルを抽出剤で処置して核酸を放出し、それによってサンプル混合物を形成するステップと、抽出剤を中和するステップと、放出された核酸を変性させて一本鎖核酸を生成するステップと、一本鎖核酸を一本鎖ＤＮＡ配列の鋳型非依存的分子内ライゲーションを行うことができるリガーゼと接触させて、一本鎖ＤＮＡ環を生成するステップと、を含む方法を用いることができる。この方法のステップは、いかなる中間の核酸の単離または核酸の精製も行うことなく実施することができる。特定の実施形態において、ステップは、単一の反応容器内で逐次的様式で実施され得る。特定の実施形態では、一本鎖ＤＮＡ環を増幅して、その後の生物学的サンプルの分析を可能にすることができる。特定の実施形態において、サンプル混合物は、中和ステップの前に固体マトリックス上で乾燥させることができる。特定の実施形態において、ＤＮＡに対する損傷は、変性ステップの前に酵素的に修復することができる。他の態様では、サンプル、例えば生物学的サンプルを分析するための方法が提供される。したがって、この方法の特定の実施形態に従って生成された一本鎖ＤＮＡ環を増幅し、増幅産物を分析する。分析は、例えば、増幅産物の標的シーケンシングによって行うことができる。別の態様では、生物学的サンプルから染色体再配列の切断点を検出するための方法が提供される。したがって、本明細書中に記載される特定の実施形態に従って生成された一本鎖ＤＮＡ環を増幅し、増幅産物を、例えばシーケンシングによって分析する。任意の染色体再配列の切断点は、配列を既知の参照配列と比較することによって同定することができる。さらに別の態様では、生物学的サンプルを処置して核酸を放出させるための抽出剤と、抽出剤を中和するための試薬と、一本鎖ＤＮＡ配列の鋳型に依存しない分子内ライゲーションが可能なリガーゼと、を含む、キットを提供することができる。ＤＮＡ増幅法のこれらおよび他の方法は、例えば、国際特許出願第ＵＳ２０１５／５０７６０号に見出され得る。
【０１０８】
［0114］  線状ＤＮＡから一本鎖ＤＮＡ環を生成するための方法を、収集したサンプルに用いることができる。この方法は、線状ＤＮＡを提供するステップと、線状ＤＮＡをリン酸供与体の存在下でポリヌクレオチドキナーゼと一緒にインキュベートすることによって末端修復して、５’末端にリン酸基および３’末端にヒドロキシル基を有するライゲーション可能なＤＮＡ配列を生成するステップと、１本鎖ＤＮＡ環を生成するために、リガーゼを用いて、修復されたライゲーション可能なＤＮＡ配列の分子内ライゲーションを実施するステップと、を含むことができる。これらのステップは、介在する単離ステップまたは精製ステップを一切行わずに、単一の反応容器内で行うことができる。リン酸供与体は、グアノシン三リン酸（ＧＴＰ）、シチジン三リン酸（ＣＴＰ）、ウリジン三リン酸（ＵＴＰ）、デオキシチミジン三リン酸（ｄＴＴＰ）またはそれらの組み合わせであり得る。線状ＤＮＡは、二本鎖または一本鎖ＤＮＡのいずれかであり得る。ＤＮＡは、循環ＤＮＡなどの断片化されたＤＮＡの区画であり得る。ライゲーション可能なＤＮＡは、二本鎖形態であれば、分子内ライゲーション反応の前に変性させる必要があり得る。ライゲーション反応には、鋳型に依存しない、一本鎖ＤＮＡ配列の分子内ライゲーションが可能なプレアデニル化リガーゼを用いることができる。他の実施形態では、線状ＤＮＡから一本鎖ＤＮＡ環を生成するための方法は、分子内ライゲーションステップの前にＤＮＡプレアデニル化ステップを用いることができる。線状ＤＮＡを、任意により、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の存在下でポリヌクレオチドキナーゼと一緒にインキュベートして、５’末端にリン酸基を、３’末端にヒドロキシル基を含むライゲーション可能なＤＮＡ配列を生成することができる。線状ＤＮＡが高度に断片化された形態である場合、線状ＤＮＡからライゲーション可能なＤＮＡ配列を生成することが好ましい。次いで、線状ＤＮＡまたはライゲーション可能なＤＮＡ配列を、ＡＴＰの存在下でアデニル化酵素とインキュベートして、５’アデニル化ＤＮＡ配列を生成することができる。５’−アデニル化ＤＮＡ配列は、非アデニル化リガーゼとインキュベートすることができ、これは、鋳型に依存しない５’−アデニル化ＤＮＡ配列の分子内ライゲーションが可能であり、一本鎖ＤＮＡ環を生成することができる。この方法のすべてのステップは、介在する単離ステップまたは精製ステップを一切行わずに、単一の反応容器内で行うことができる。非アデニル化リガーゼがＡＴＰ依存性リガーゼである場合、分子内ライゲーション反応の前に、ＡＴＰは、（例えば、反応混合物をホスファターゼで処置することによって）反応混合物から取り出され得る。５’−アデニル化ＤＮＡが二本鎖形態である場合、分子内ライゲーション反応の前に変性させる必要があり得る。ＤＮＡ環状化のこれらの方法および他の方法、ならびに増幅方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１５／００３１０８６号に見出され得る。
【０１０９】
［0115］  サンプル処置は、分析のためにＲＮＡを調製するステップを含むことができる。この方法は、核酸構造の産生ならびにそれに続く核酸の精製および増幅における使用を含み得る。この方法は、二本鎖領域および一本鎖領域を含むＤＮＡ配列を必要とし得る。一本鎖領域は、目的のＲＮＡ配列に相補的であり得る。次いで、ＲＮＡ配列をＤＮＡ配列の一本鎖領域にハイブリダイズさせ、次いで２つの配列をライゲートしてＲＮＡ−ＤＮＡ分子を生成することができる。方法は、これによってＲＮＡの３’末端がプロモーター配列を含む二本鎖ＤＮＡオリゴヌクレオチドにライゲートされるステップを含むことができる。この二本鎖ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、二本鎖領域内のＲＮＡポリメラーゼのためのプロモーターを含むことができ、その後に３’オーバーハングを形成する一本鎖ＤＮＡのセグメントが続く。３’オーバーハングがチミジン残基のストリングを含む場合、二本鎖ＤＮＡの一本鎖部分はメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）ポリ（Ａ）尾部の３’末端にハイブリダイズすることができる。リガーゼの添加後、ｍＲＮＡは３’末端にライゲートされた二本鎖ＤＮＡ配列のうちの１つの鎖を有し得る。ＲＮＡポリメラーゼを添加すると、ＲＮＡ−ＤＮＡハイブリッド分子が効率よく転写され、ｃＲＮＡを合成することができる。ＲＮＡポリメラーゼを用いた転写反応は各鋳型を複数回転写することができるため、この方法では効果的なＲＮＡ増幅が可能になる。上記と同様の別の方法は、上記のようにＤＮＡオリゴヌクレオチドをＲＮＡにライゲートすることを含み得る。しかし、ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、固体支持体に付着すること、または親和性タグを含有することのいずれか一方が可能である。これは、ＲＮＡ分子の非常に効率的な共有結合および／または捕捉を可能にし、様々なあらゆる目的に使用され得る。さらなる方法では、ライゲーションおよびその後の転写を利用して、ｃＲＮＡの５’末端にユーザ定義の配列を含む相補的ＲＮＡを作製することができる。この配列「タグ」は、ＲＮＡポリメラーゼプロモーターとライゲートされたＲＮＡ分子の３’末端との間に配置することができる。ユーザ定義の配列は、ｃＲＮＡの精製もしくは同定または他の配列特異的操作に使用することができる。続いて、記載された方法に従ってｃＲＮＡ産物が実質的にライゲートされ、再増幅された場合、その結果得られた二本鎖増幅産物は、元のセンス鋳型に関して、センスであり得て、この新規産物は、５’末端に位置する２つの別個のユーザ定義の配列を有し得る。これらの配列は、ｃＤＮＡの合成に使用することができ、全長合成および方向性クローニングを可能にする。当業者であれば、ユーザ定義配列の有無にかかわらず、この二重増幅法がＲＮＡ量の有意な増加をもたらすことができ、これまで小さすぎて考慮に入れることができなかったサンプルの分析が可能になることを理解するであろう。ＤＮＡ断片の増幅のためのこれらの方法および他の方法は、例えば、米国特許出願公開第２００８／０００３６０２号に見出され得る。
【０１１０】
［0116］  生物学的サンプルを分析するためのさらなる方法では、生物学的サンプル中の関心領域に存在する核酸に焦点を当て、多くのタンパク質のタンパク質発現情報を提供し、かつＤＮＡ配列情報を増加することができる。サンプル分析のための追加の方法は、異種サンプルの均質なサブセクションに焦点を当てることができる。混合集団内の細胞の特定の亜集団は、所定の選択基準から正確に同定され、分析され得る。診断および／もしくは予後、または薬物標的のさらなる研究に有用であり得る突然変異を同定することができる。ＤＮＡ増幅のためのこれらの方法および他の方法は、例えば、国際出願第ＵＳ２０１５／５０７６０号に見出される。
核酸の溶出
【０１１１】
［0117］  場合によっては、サンプル（例えば、生物学的サンプル）中の核酸、例えばＤＮＡまたはＲＮＡを安定化マトリックス（例えば、核酸安定化マトリックス）に適用し、サンプルを安定化マトリックス上で任意に乾燥させ、安定化マトリックス上の核酸、例えばＤＮＡまたはＲＮＡを、安定化マトリックスから溶出させる。いくつかの例では、乾燥した生物学的サンプルは、例えば本明細書に記載のように、核酸を安定化させることができる安定化マトリックス上で安定化される。いくつかの例では、方法は、（ａ）核酸、例えばＤＮＡまたはＲＮＡを含むサンプル、例えば生物学的サンプルを核酸安定化マトリックス上で接触させる、例えばスポッティングするステップと、（ｂ）任意により、サンプル、例えば、生物学的サンプルを、核酸安定化マトリックス上で乾燥させるステップと、（ｃ）任意により、核酸を含む核酸安定化マトリックスを溶解緩衝液と接触させるステップと、（ｄ）任意により、例えば、核酸を含む核酸安定化マトリックスを結合緩衝液に浸漬することによって、核酸を含む核酸安定化マトリックスを核酸結合緩衝液（任意で有機溶媒を含む）と接触させるステップと、（ｅ）任意により、例えば、核酸安定化マトリックスを洗浄緩衝液に浸漬することによって、核酸を含む核酸安定化マトリックスを洗浄緩衝液に接触させるステップと、（ｆ）例えば溶出緩衝液中に核酸を含む核酸安定化マトリックスを浸漬することによって、核酸を含む核酸安定化マトリックスを溶出緩衝液に接触させて、安定化マトリックスから核酸を溶出させるステップと、を含む。
【０１１２】
［0118］  いくつかの場合において、核酸、例えばＲＮＡまたはＤＮＡは、例えば抽出緩衝液を用いて、安定化マトリックス、例えば紙安定化マトリックスから抽出することができる。抽出された核酸、例えばＲＮＡまたはＤＮＡを、第２のマトリックス、例えば第２の固体支持体、例えばビーズ、例えば磁気ビーズに結合させることができる。第２のマトリックス、例えば第２の固体支持体、例えばビーズ、例えば磁気ビーズへの結合は、結合緩衝液中で起こり得る。第２のマトリックス上の核酸、例えばＲＮＡまたはＤＮＡは、１つ以上の洗浄緩衝液で洗浄することができる。第２のマトリックス上の核酸は、特定の種類の分子（例えば、ＲＮＡ、ＤＮＡ、またはタンパク質）を分解するために、例えばＤＮａｓｅ、ＲＮａｓｅ、またはプロテアーゼを含む酵素溶液で処置することができる。固体マトリックス上の核酸は、例えば溶出緩衝液を用いて固体マトリックスから溶出することができる。
【０１１３】
［0119］  溶出は、サンプル（例えば、乾燥した生物学的サンプル）を含む安定化マトリックスの少なくとも一部分について実施することができる。場合によっては、安定化マトリックスの一部分を安定化マトリックスの残部から分離することができ、例えば、安定化マトリックスの一部分を安定化マトリックスから打ち抜くことができ、分離された部分の核酸を溶出させることができる。打ち抜き部分は、直径約０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、または６０ｍｍであってもよい。打ち抜き部分は、直径約１０〜約６０、約１０〜約５０、約１０〜約４０、約１０〜約３０、約１０〜約２０、約１〜約１０、約２〜約９、約３〜約８、約４〜約７、約５〜約６、約３〜約６、約１〜約４、約１〜約３、または約１〜約２ｍｍである。場合によっては、核酸を含む安定化マトリックスを、部分に分離した後に、安定化マトリックスから核酸を溶出させる。
【０１１４】
［0120］  場合によっては、核酸を含む核酸安定化マトリックスを溶解緩衝液と接触させることができる。いくつかの場合において、安定化マトリックスへの核酸の結合および保持は、安定化マトリックスを結合緩衝液と接触させることによって増強することができる。場合によっては、安定化マトリックスの一部分を核酸結合緩衝液と接触させる。場合によっては、核酸結合緩衝液はビーズを含むことができる。ある場合には、例えば不純物を除去するために、安定化マトリックスを洗浄緩衝液と接触させる。場合によっては、核酸は、安定化マトリックスを溶出緩衝液と接触させることによって溶出させることができる。
【０１１５】
［0121］  場合によっては、核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、市販の緩衝液を含むことができる。例えば緩衝液は、ＴＲＩｚｏｌ（登録商標）（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ（登録商標）製）、Ｂｕｆｆｅｒ  ＲＬＴ（Ｑｉａｇｅｎ（登録商標）製）、Ｂｕｆｆｅｒ  ＲＬＮ（Ｑｉａｇｅｎ（登録商標）製）、ＲＮＡ溶解緩衝液（ＲＬＡ）（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）、ＰｕｒｅＹｉｅｌｄ（商標）細胞溶解溶液（ＣＬＡ）（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）、ＰｕｒｅＹｉｅｌｄ（商標）エンドトキシン除去洗浄液（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）、ＰｕｒｅＺＯＬ（商標）ＲＮＡ単離試薬（Ｂｉｏ−Ｒａｄ（商標））、ＲＮＡ溶解緩衝液またはＤＮＡ／ＲＮＡ結合緩衝液（Ｚｙｍｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｒｐ製）、またはＲＮＡ獲得緩衝液（Ｐｉｅｒｃｅ（商標）製）を含むことができる。
【０１１６】
［0122］  場合によっては、核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上の緩衝剤（またはｐＨ緩衝剤）、１種以上の塩、１種以上の還元剤、１種以上のキレート剤、１種以上の界面活性剤、１種以上の酵素、１種以上のタンパク質変性剤、１種以上のブロッキング試薬、１種以上の有機溶媒、またはそれらの任意の組み合わせを含んでもよい。例えば、核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上のタンパク質変性剤および１種以上の還元剤を含むことができる。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上のタンパク質変性剤、１種以上の還元剤、および１種以上の酵素を含むことができる。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上の緩衝剤、１種以上のタンパク質変性剤、１種以上の還元剤、および１種以上の酵素を含むことができる。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上の塩、および１種以上の緩衝液を含むことができる。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上の塩、１種以上の緩衝液および１種以上の有機溶媒を含むことができる。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液および１種以上の酵素を含むことができる。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液、および１種以上のキレート剤を含むことができる。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液、１種以上のキレート剤および１種以上の有機溶媒を含むことができる。
【０１１７】
［0123］  １種以上の緩衝剤は、例えば、生理食塩水、クエン酸塩、リン酸塩、リン酸緩衝食塩水、酢酸塩、グリシン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）塩酸塩、トリス緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）、３−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］プロパン−１−スルホン酸（ＴＡＰＳ）、ビシン、トリシン、３−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］−２−ヒドロキシプロパン−１−スルホン酸（ＴＡＰＳＯ）、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、ピペラジン−Ｎ、Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、２−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］エタンスルホン酸（ＴＥＳ）、カコジル酸塩、グリシン、炭酸塩、またはそれらの任意の組み合わせであり得る。１種以上の緩衝剤は、約０．１ｍＭ〜約５００ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約４００ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約３００ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約２００ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約１００ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約２５ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約２０ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約１５ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約１０ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約５ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約４ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約３ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約２ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約１ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約０．９ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約０．８ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約０．７ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約０．６ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約０．５ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約０．４ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約０．３ｍＭ、または約０．１ｍＭ〜約０．２ｍＭの濃度で存在してもよい。緩衝剤は、５００ｍＭ未満、４００ｍＭ未満、３００ｍＭ未満、２００ｍＭ未満、１００ｍＭ未満、５０ｍＭ未満、２５ｍＭ未満、２０ｍＭ未満、１５ｍＭ未満、１０ｍＭ未満、５ｍＭ未満、４ｍＭ未満、３ｍＭ未満、２ｍＭ未満、１ｍＭ未満、０．９ｍＭ未満、０．８ｍＭ未満、０．７ｍＭ未満、０．６ｍＭ未満、０．５ｍＭ未満、０．４ｍＭ未満、０．３ｍＭ未満、０．２ｍＭ未満、または０．１ｍＭ未満の濃度で存在してもよい。緩衝剤は、５００ｍＭ超、４００ｍＭ超、３００ｍＭ超、２００ｍＭ超、１００ｍＭ超、５０ｍＭ超、２５ｍＭ超、２０ｍＭ超、１５ｍＭ超、１０ｍＭ超、５ｍＭ超、４ｍＭ超、３ｍＭ超、２ｍＭ超、１ｍＭ超、０．９ｍＭ超、０．８ｍＭ超、０．７ｍＭ超、０．６ｍＭ超、０．５ｍＭ超、０．４ｍＭ超、０．３ｍＭ超、０．２ｍＭ超、または０．１ｍＭ超の濃度で存在し得る。
【０１１８】
［0124］  １種以上の塩は、例えば、塩化ナトリウム、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、臭化ナトリウム、塩化カリウム、酢酸カリウム、重炭酸カリウム、重硫酸カリウム、臭素酸カリウム、臭化カリウム、または炭酸カリウムであり得る。１種以上の塩は、緩衝液中で約０．１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２５ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭ、５００ｍＭ、７５０ｍＭまたは１０００ｍＭの濃度であり得る。１種以上の塩は、緩衝液中０．１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２５ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭ、５００ｍＭ、７５０ｍＭまたは１０００ｍＭ未満の濃度であり得る。１種以上の塩は、少なくとも０．１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２５ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭ、５００ｍＭ、７５０ｍＭまたは１０００ｍＭの濃度であり得る。
【０１１９】
［0125］  １種以上の還元剤は、例えば、β−メルカプトエタノール（ＢＭＥ）、２−アミノエタンチオール（２ＭＥＡ−ＨＣｌ（システアミン−ＨＣｌ））、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、グルタチオン（ＧＳＨ）、トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＥＣＰ）、またはそれらの任意の組合せであり得る。１種以上の還元剤の濃度は、約０．１ｍＭ、０．５ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭまたは５００ｍＭであり得る。１種以上の還元剤の濃度は、０．５ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭ、または５００ｍＭ未満であり得る。例えば、ＤＴＴの濃度は、約０．０５ｍＭ〜約１００ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約５０ｍＭ、または約５ｍＭ〜約１０ｍＭであり得る。ＴＣＥＰの濃度は、約０．０５ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約５０ｍＭ、または約０．５ｍＭ〜約５ｍＭであり得る。ＢＭＥの濃度は、約０．０５％〜約１０％、約０．５％〜約５％、または約１％〜約１０％であり得る。ＧＳＨの濃度は、約０．０５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約０．５ｍＭ〜約１０ｍＭ、または約５ｍＭ〜約１０ｍＭであり得る。１種以上の還元剤の濃度は、約１ｍＭ、１０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭ、または５００ｍＭである。
【０１２０】
［0126］  １種以上のキレート剤は、例えば、炭水化物、脂質、ステロイド、アミノ酸もしくは関連化合物、リン酸塩、ヌクレオチド、テトラピロール、フェリオキサミン、イオノフォア、フェノール系キレート剤、または合成キレート剤、例えば２，２’−ビピリジル、ジメルカプトプロパノール、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレンジオキシ−ジエチレン−ジニトリロ−四酢酸、エチレングリコール−ビス−（２−アミノエチル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラ酢酸（ＥＧＴＡ）、金属ニトリロトリ酢酸（ＮＴＡ）、サリチル酸、もしくはトリエタノールアミン（ＴＥＡ）であり得る。緩衝液中の１種以上のキレート剤の濃度は、約０．１ｍＭ、１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭまたは２５ｍＭであり得る。緩衝液中の１種以上のキレート剤の濃度は、０．１ｍＭ、１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭまたは２５ｍＭ未満であり得る。緩衝液中の１種以上のキレート剤の濃度は、０．１ｍＭ、１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭまたは２５ｍＭ超であり得る。
【０１２１】
［0127］  １種以上の界面活性剤は、例えば、アニオン性、カチオン性、非イオン性または両性であり得る。１種以上の界面活性剤は、ポリエトキシル化アルコール、ポリオキシエチレンソルビタン、ＴｒｉｔｏｎＸ１００（商標）（ポリエチレングリコールｐ−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェニルエーテル）などのオクトキシノール、Ｔｗｅｅｎ（商標）２０（例えば、ポリソルベート２０）またはＴｗｅｅｎ（商標）８０（ポリソルベート８０）などのポリソルベート、ドデシル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、Ｔｅｒｇｉｔｏｌ（商標）などのノニルフェノールエトキシレート、シクロデキストリン、またはこれらの任意の組み合わせであり得る。１種以上の界面活性剤は、溶出緩衝液の全容積に対して、０．００１容積％未満、０．００５容積％未満、０．０１容積％未満、０．０１５容積％未満、０．０２容積％未満、０．０２５容積％未満、０．０３容積％未満、０．０３５容積％未満、０．０４容積％未満、０．０４５容積％未満、０．０５容積％未満、０．０５５容積％未満、０．０６容積％未満、０．０６５容積％未満、０．０７容積％未満、０．０７５容積％未満、０．０８容積％未満、０．０８５容積％未満、０．０９容積％未満、０．０９５容積％未満、０．１容積％未満、０．１５容積％未満、０．２容積％未満、０．２５容積％未満、０．３容積％未満、０．３５容積％未満、０．４容積％未満、０．４５容積％未満、０．５容積％未満、０．５５容積％未満、０．６容積％未満、０．６５容積％未満、０．７容積％未満、０．７５容積％未満、０．８容積％未満、０．８５容積％未満、０．９容積％未満、または０．１容積％未満の濃度で存在し得る。１種以上の界面活性剤は、約０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、１％、５％または１０％の濃度であり得る。１つ以上の界面活性剤は、０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、１％、５％または１０％未満の濃度であり得る。１つ以上の界面活性剤は、０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、１％、５％または１０％超の濃度であり得る。
【０１２２】
［0128］  １種以上のタンパク質変性剤は、例えば、カオトロピック剤、例えば、カオトロピック塩であり得る。カオトロピック剤は、ブタノール、エタノール、塩化グアニジン、塩酸グアニジン、グアニジンイソチオシアネート、過塩素酸リチウム、酢酸リチウム、塩化マグネシウム、フェノール、プロパノール、ヨウ化ナトリウム、チオシアン酸ナトリウム、チオ尿素、尿素またはそれらの任意の組み合わせであり得る。緩衝液中のカオトロピック剤の濃度は、約０．１ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭ、１００ｍＭ、１Ｍ、６Ｍまたは８Ｍであり得る。緩衝液中のカオトロピック剤の濃度は、少なくとも０．１ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭ、１００ｍＭ、１Ｍ、６Ｍまたは８Ｍであり得る。緩衝液中のカオトロピック剤の濃度は、０．１ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭ、１００ｍＭ、１Ｍ、６Ｍまたは８Ｍ未満であり得る。
【０１２３】
［0129］  核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液または溶出緩衝液は、１種以上の酵素をさらに含むことができる。溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液または溶出緩衝液は、互いから、それぞれＤＮＡまたはＲＮＡ不純物を除去するのに十分な量のＤＮａｓｅまたはＲＮａｓｅを含むことができる。溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液または溶出緩衝液は、ニワトリ卵白リゾチーム、Ｔ４リゾチームなどの溶解酵素、ならびにカルボヒドラーゼ、フィターゼおよびトリプシン、プロテイナーゼＫ、ペプシン、キモトリプシン、パパイン、ブロメライン、ズブチリシン、またはエラスターゼなどのプロテアーゼなどの酵素を含み得る。プロテアーゼは、セリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、スレオニンプロテアーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ、グルタミン酸プロテアーゼ、またはメタロプロテアーゼ、またはアスパラギンペプチドリアーゼであり得る。
【０１２４】
［0130］  核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液または溶出緩衝液は、約２〜約１０、約２〜約９、約２〜約８、約２〜約７、約２〜約６、約２〜約５、約２〜約４、または約２〜約３のｐＨを有する水溶液であり得る。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液または溶出緩衝液は、約６〜約８、約６〜約７．９、約６〜約７．８、約６〜約７．７、約６〜約７．６、約６〜約７．５、約６〜約７．４、約６〜約７．３、約６〜約７．２、約６〜約７．１、約６〜約７、約６〜約６．９、約６〜約６．８、約６〜約６．７、約６〜約６．６、約６〜約６．５、約６〜約６．４、約６〜約６．３、約６〜約６．２、または約６〜約６．１のｐＨを有する水溶液であり得る。核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液または溶出緩衝液は、少なくとも約３、少なくとも約４、少なくとも約５、少なくとも約６、少なくとも約７、少なくとも約５、少なくとも約８、少なくとも約９、または少なくとも約１０のｐＨを有する水溶液であり得る。
【０１２５】
［0131］  核酸溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、追加の成分をさらに含むことができる。例えば、溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、ウシ血清アルブミン、ウシ胎児血清などの非特異的結合を最小限に抑えるタンパク質ブロッキング剤を含むことができる。溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、細菌ＤＮＡ、細菌ＤＮＡ、酵母ＤＮＡ、酵母ＲＮＡ、ヒトもしくはチンパンジーＤＮＡなどの霊長類核酸を含む哺乳動物核酸、、またはニシン、サバ、オキアミ、もしくはサケＤＮＡなどの魚由来の核酸を含む非哺乳類核酸などの、対象とは異なる生物由来の追加の核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡを含む）を含むことができる。
【０１２６】
［0132］  溶解緩衝液、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液は、例えば安定化マトリックスへの核酸の結合を高めるために、ある量の１つ以上の有機溶媒を含むことができる。１つ以上の有機溶媒は、メタノール、エタノール、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、ジオキサン、テトラヒドロフラン、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｔ−ブタノールまたはペンタノール、アセトンなどであり得る。場合によっては、結合緩衝液は、溶液の全容積に対して、０．０１容積％未満、０．０５容積％未満、０．１容積％未満、０．１５容積％未満、０．２容積％未満、０．２５容積％未満、０．３容積％未満、０．３５容積％未満、０．４容積％未満、０．４５容積％未満、０．５容積％未満、０．５５容積％未満、０．６容積％未満、０．６５容積％未満、０．７容積％未満、０．７５容積％未満、０．８容積％未満、０．８５容積％未満、０．９容積％未満、０．９５容積％未満、１容積％未満、１．５容積％未満、２容積％未満、２．５容積％未満、３容積％未満、３．５容積％未満、４容積％未満、４．５容積％未満、５容積％未満、５．５容積％未満、６容積％未満、６．５容積％未満、７容積％未満、７．５容積％未満、８容積％未満、８．５容積％未満、９容積％未満、９．５容積％未満、１０容積％未満、１１容積％未満、１２容積％未満、１３容積％未満、１４容積％未満、１５容積％未満、１６容積％未満、１７容積％未満、１８容積％未満、１９容積％未満、２０容積％未満、２５容積％未満、３０容積％未満、３５容積％未満、４０容積％未満、４５容積％未満、５０容積％未満、５５容積％未満、６０容積％未満、６５容積％未満、７０容積％未満、７５容積％未満、８０容積％未満、８５容積％未満、９０容積％未満、９５容積％未満、９９容積％未満、または１００容積％未満の有機溶媒を含み得る。有機溶媒は、少なくとも０．１％、１％、１０％、５０％、７５％または１００％の濃度であり得る。有機溶媒は、約０．１％、１％、１０％、５０％、７５％または１００％の濃度であり得る。
【０１２７】
［0133］  安定化マトリックスまたは安定化マトリックスの一部分は、５μＬ未満、１０μＬ未満、１５μＬ未満、２０μＬ未満、２５μＬ未満、３０μＬ未満、３５μＬ未満、４０μＬ未満、４５μＬ未満、５０μＬ未満、５５μＬ未満、６０μＬ未満、６５μＬ未満、７０μＬ未満、７５μＬ未満、８０μＬ未満、８５μＬ未満、９０μＬ未満、９５μＬ未満、１００μＬ未満、１１０μＬ未満、１２０μＬ未満、１３０μＬ未満、１４０μＬ未満、１５０μＬ未満、１６０μＬ未満、１７０μＬ未満、１８０μＬ未満、１９０μＬ未満、２００μＬ未満、２５０μＬ未満、３００μＬ未満、３５０μＬ未満、４００μＬ未満、４５０μＬ未満、５００μＬ未満、５５０μＬ未満、６００μＬ未満、６５０μＬ未満、７００μＬ未満、７５０μＬ未満、８００μＬ未満、８５０μＬ未満、９００μＬ未満、９５０μＬ未満、１，０００μＬ未満、１．５ｍＬ未満、２ｍＬ未満、２．５ｍＬ未満、３ｍＬ未満、３．５ｍＬ未満、４ｍＬ未満、４．５ｍＬ未満、５ｍＬ未満、５．５ｍＬ未満、６ｍＬ未満、６．５ｍＬ未満、７ｍＬ未満、７．５ｍＬ未満、８ｍＬ未満、８．５ｍＬ未満、９ｍＬ未満、９．５ｍＬ未満、または１０ｍＬ未満の容積の核酸結合緩衝液、洗浄緩衝液または溶出緩衝液と接触させることができる。安定化マトリックスまたは安定化マトリックスの一部分は、約０．１ｍＬ、０．２ｍＬ、０．５ｍＬ、０．７ｍＬ、１ｍＬ、２ｍＬ、５ｍＬ、７ｍＬまたは１０ｍＬの緩衝液と接触させることができる。安定化マトリックスまたは安定化マトリックスの一部分は、少なくとも０．１ｍＬ、０．２ｍＬ、０．５ｍＬ、０．７ｍＬ、１ｍＬ、２ｍＬ、５ｍＬ、７ｍＬまたは１０ｍＬの緩衝液と接触させることができる。
【０１２８】
［0134］  安定化マトリックスと接触する結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液の容積は、安定化マトリックスの表面積に依存し得る。結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液の量は、１μＬ／ｍｍ２未満、２μＬ／ｍｍ２未満、３μＬ／ｍｍ２未満、４μＬ／ｍｍ２未満、５μＬ／ｍｍ２未満、６μＬ／ｍｍ２未満、７μＬ／ｍｍ２未満、８μＬ／ｍｍ２未満、９μＬ／ｍｍ２未満、１０μＬ／ｍｍ２未満、１２μＬ／ｍｍ２未満、１４μＬ／ｍｍ２未満、１６μＬ／ｍｍ２未満、１８μＬ／ｍｍ２未満、２０μＬ／ｍｍ２未満、２５μＬ／ｍｍ２未満、３０μＬ／ｍｍ２未満、３５μＬ／ｍｍ２未満、４０μＬ／ｍｍ２未満、４５μＬ／ｍｍ２未満、５０μＬ／ｍｍ２未満、５５μＬ／ｍｍ２未満、６０μＬ／ｍｍ２未満、６５μＬ／ｍｍ２未満、７０μＬ／ｍｍ２未満、７５μＬ／ｍｍ２未満、８０μＬ／ｍｍ２未満、８５μＬ／ｍｍ２未満、９０μＬ／ｍｍ２未満、９５μＬ／ｍｍ２未満、１００μＬ／ｍｍ２未満、１５０μＬ／ｍｍ２未満、２００μＬ／ｍｍ２未満、２５０μＬ／ｍｍ２未満、３００μＬ／ｍｍ２未満、３５０μＬ／ｍｍ２未満、４００μＬ／ｍｍ２未満、４５０μＬ／ｍｍ２未満、５００μＬ／ｍｍ２未満、５５０μＬ／ｍｍ２未満、６００μＬ／ｍｍ２未満、６５０μＬ／ｍｍ２未満、７００μＬ／ｍｍ２未満、７５０μＬ／ｍｍ２未満、８００μＬ／ｍｍ２未満、８５０μＬ／ｍｍ２未満、９００μＬ／ｍｍ２未満、９５０μＬ／ｍｍ２未満、または１，０００μＬ／ｍｍ２未満であり得る。場合によっては、結合緩衝液、洗浄緩衝液、または溶出緩衝液の量は、約１０μＬ／ｍｍ２〜約１，０００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約９００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約８００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約７００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約６００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約５００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約４００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約３００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約２００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約１００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約９０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約８０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約７０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約６０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約５０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約４０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約３０μＬ／ｍｍ２、または約１０μＬ／ｍｍ２〜約２０μＬ／ｍｍ２であり得る。
【０１２９】
［0135］  核酸の溶解、結合、洗浄または溶出は、攪拌源からの攪拌の存在下または非存在下で行うことができる。撹拌源は、ロッカー、ボルテックスミキサー、ミキサー、シェーカーなどであり得る。場合によっては、攪拌源を一定の速度に設定することができる。速度は、１回転／分（ｒｐｍ）未満、５ｒｐｍ未満、１０ｒｐｍ未満、１５ｒｐｍ未満、２０ｒｐｍ未満、２５ｒｐｍ未満、３０ｒｐｍ未満、３５ｒｐｍ未満、４０ｒｐｍ未満、４５ｒｐｍ未満、５０ｒｐｍ未満、５５ｒｐｍ未満、６０ｒｐｍ未満、６５ｒｐｍ未満、７０ｒｐｍ未満、７５ｒｐｍ未満、８０ｒｐｍ未満、８５ｒｐｍ未満、９０ｒｐｍ未満、９５ｒｐｍ未満、１００ｒｐｍ未満、１５０ｒｐｍ未満、２００ｒｐｍ未満、２５０ｒｐｍ未満、３００ｒｐｍ未満、３５０ｒｐｍ未満、４００ｒｐｍ未満、４５０ｒｐｍ未満、５００ｒｐｍ未満、５５０ｒｐｍ未満、６００ｒｐｍ未満、６５０ｒｐｍ未満、７００ｒｐｍ未満、７５０ｒｐｍ未満、８００ｒｐｍ未満、８５０ｒｐｍ未満、９００ｒｐｍ未満、９５０ｒｐｍ未満、１，０００ｒｐｍ未満、１，５００ｒｐｍ未満、２，０００ｒｐｍ未満、２，５００ｒｐｍ未満、３，０００ｒｐｍ未満、３，５００ｒｐｍ未満、４，０００ｒｐｍ未満、４，５００ｒｐｍ未満、５，０００ｒｐｍ未満、５，５００ｒｐｍ未満、６，０００ｒｐｍ未満、６，５００ｒｐｍ未満、７，０００ｒｐｍ未満、７，５００ｒｐｍ未満、８，０００ｒｐｍ未満、８，５００ｒｐｍ未満、９，０００ｒｐｍ未満、９，５００ｒｐｍ未満、または１０，０００ｒｐｍ未満であり得る。速度は、約５０ｒｐｍ、１００ｒｐｍ、２００ｒｐｍ、３００ｒｐｍ、４００ｒｐｍ、５００ｒｐｍ、６００ｒｐｍ、７００ｒｐｍ、８００ｒｐｍ、９００ｒｐｍ、１０００ｒｐｍ、１５００ｒｐｍまたは５０００ｒｐｍであり得る。速度は、少なくとも５０ｒｐｍ、１００ｒｐｍ、２００ｒｐｍ、３００ｒｐｍ、４００ｒｐｍ、５００ｒｐｍ、６００ｒｐｍ、７００ｒｐｍ、８００ｒｐｍ、９００ｒｐｍ、１０００ｒｐｍ、１５００ｒｐｍまたは５０００ｒｐｍであり得る。
【０１３０】
［0136］  結合、洗浄または溶出は、約０°Ｃ未満、１°Ｃ未満、２°Ｃ未満、３°Ｃ未満、４°Ｃ未満、５°Ｃ未満、６°Ｃ未満、７°Ｃ未満、８°Ｃ未満、９°Ｃ未満、１０°Ｃ未満、１１°Ｃ未満、１２°Ｃ未満、１３°Ｃ未満、１４°Ｃ未満、１５°Ｃ未満、１６°Ｃ未満、１７°Ｃ未満、１８°Ｃ未満、１９°Ｃ未満、２０°Ｃ未満、２１°Ｃ未満、２２°Ｃ未満、２３°Ｃ未満、２４°Ｃ未満、２５°Ｃ未満、２６°Ｃ未満、２７°Ｃ未満、２８°Ｃ未満、２９°Ｃ未満、３０°Ｃ未満、３１°Ｃ未満、３２°Ｃ未満、３３°Ｃ未満、３４°Ｃ未満、３５°Ｃ未満、３６°Ｃ未満、３７°Ｃ未満、３８°Ｃ未満、３９°Ｃ未満、４０°Ｃ未満、４５°Ｃ未満、５０°Ｃ未満、５５°Ｃ未満、６０°Ｃ未満、６５°Ｃ未満、７０°Ｃ未満、７５°Ｃ未満、８０°Ｃ未満、８５°Ｃ未満、９０°Ｃ未満、９５°Ｃ未満、または約１００°Ｃの温度で実施することができる。場合によっては、結合、洗浄または溶出は、約１０°Ｃ〜約１００°Ｃ、約１０°Ｃ〜約９５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約９０°Ｃ、約１０°Ｃ〜約８５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約８０°Ｃ、約１０°Ｃ〜約７５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約７０°Ｃ、約１０°Ｃ〜約６５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約６０°Ｃ、約１０°Ｃ〜約５５°Ｃ、または約１０°Ｃ〜約５０°Ｃの範囲の温度で実施することができる。場合によっては、結合、洗浄または溶出は、約２０°Ｃ〜約５０°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４８°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４６°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４４°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４２°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４０°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３８°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３６°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３４°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３２°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３０°Ｃ、約２０°Ｃ〜約２８°Ｃ、約２０°Ｃ〜約２６°Ｃ、約２０°Ｃ〜約２４°Ｃ、または、約２０°Ｃ〜約２２°Ｃの温度で実施することができる。温度は、約１０°Ｃ、２０°Ｃ、２５°Ｃ、３０°Ｃ、３７°Ｃ、５０°Ｃ、または６５°Ｃであり得る。
【０１３１】
［0137］  溶解、結合、洗浄または溶出は、１分未満、５分未満、１０分未満、１５分未満、２０分未満、２５分未満、３０分未満、３５分未満、４０分未満、４５分未満、５０分未満、５５分未満、または６０分未満実施することができる。結合、洗浄または溶出は、０．５時間未満、１時間未満、１．５時間未満、２時間未満、２．５時間未満、３時間未満、３．５時間未満、４時間未満、４．５時間未満、５時間未満、５．５時間未満、６時間未満、６．５時間未満、７時間未満、７．５時間未満、８時間未満、８．５時間未満、９時間未満、９．５時間未満、１０時間未満、１０．５時間未満、１１時間未満、１１．５時間未満、または１２時間未満、１８時間未満、１日未満、１．５日未満、２日未満、２．５日未満、３日未満、３．５日未満、４日未満、４．５日未満、５日未満、５．５日未満、６日未満、６．５日未満、または７日未満、実施することができる。溶解、結合、洗浄、または溶出は、約０．２５時間、０．５時間、１時間、２時間、５時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３日間もしくは１週間、またはそれより長く実施することができる。溶解、結合、洗浄または溶出は、少なくとも０．２５時間、０．５時間、１時間、２時間、５時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３日間、または１週間実施することができる。
【０１３２】
［0138］  溶出した核酸は、保存またはさらなる処理のために容器に移送することができるか、または特性決定のためにアッセイ容器に移送することができる。
タンパク質の溶出
【０１３３】
［0139］  タンパク質は、マトリックス、例えば本明細書に記載のマトリックスから溶出させることができる。サンプル、例えば生物学的サンプルは、溶出前に、例えば本明細書に記載のようにタンパク質を安定化させることができる安定化マトリックス上で安定化させることができる。溶出は、安定化マトリックスを溶出緩衝液と接触させることを含むことができる。接触させることは、安定化マトリックスからタンパク質を溶出させるために、溶出緩衝液中で安定化マトリックスをインキュベートする（例えば、攪拌しながら）ことを含み得る。溶出の前に、安定化マトリックスを結合緩衝液または洗浄緩衝液と接触させることができる。
【０１３４】
［0140］  溶出は、サンプル（例えば、乾燥した生物学的サンプル）を含む安定化マトリックスの少なくとも一部分について実施することができる。場合によっては、安定化マトリックスの一部分を安定化マトリックスの残部から分離し、さらなる処理に使用することができる。いくつかの場合において、その部分は、安定化マトリックスの５％、１５％、２５％、３５％、４５％、５５％、６５％、７５％、８５％、または９５％超である。場合によっては、その部分は、安定化マトリックスの５％、１５％、２５％、３５％、４５％、５５％、６５％、７５％、８５％、または９５％未満である。安定化マトリックスの一部分を安定化マトリックスから打ち抜くことができ、分離された部分のタンパク質を溶出することができる。さらなる処理のために分離された部分は、マトリックスに適用されたサンプルの１００％、または約９０％、８０％、７０％、６０％、５０％またはそれ未満を含み得る。打ち抜き部分は、直径約０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、または６０ｍｍであり得る。打ち抜き部分は、最大で直径約０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、または６０ｍｍであり得る。打ち抜き部分は、直径約１０〜約６０、約１０〜約６０、約１０〜約６０、約１０〜約３０、約１０〜約２０、約１〜約１０、約２〜約９、約３〜約８、約４〜約７、約３〜約６、約４〜約５、約１〜約４、約１〜約３、または約１〜約２ｍｍであり得る。場合によっては、タンパク質を含む安定化マトリックスを部分に分離した後に、安定化マトリックスから核酸を溶出させる。
【０１３５】
［0141］  タンパク質は、安定化マトリックスまたは安定化マトリックスの一部分を適切な溶出緩衝液と接触させることによって、安定化マトリックスまたは安定化マトリックスの一部分から溶出させることができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝剤、１種以上の界面活性剤、１種以上のポリオール、１種以上の塩、１種以上のブロッキング剤、１種以上の還元剤、１種以上の有機溶媒、１種以上のキレート剤、例えば本明細書に記載の１種以上の塩、またはそれらの任意の組み合わせを含む。例えば、溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液および１種以上のポリオールを含むことができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液および１種以上の界面活性剤を含むことができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液および１種以上の塩を含むことができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液および１種以上の還元剤を含むことができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液、１種以上の界面活性剤、および１種以上のポリオールを含むことができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液、１種以上の界面活性剤、および１種以上の塩を含むことができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液、１種以上の塩、および１種以上の還元剤を含むことができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液、１種以上の界面活性剤、および１種以上のキレート剤を含むことができる。溶出緩衝液は、１種以上の緩衝液、１種以上の塩、１種以上の還元剤、１種以上のキレート剤、１種以上の界面活性剤、および１種以上のポリオールを含むことができる。
【０１３６】
［0142］  １つ以上の緩衝剤は、例えば、生理食塩水、クエン酸塩、リン酸塩、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、酢酸塩、グリシン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）塩酸塩、トリス緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）、３−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］プロパン−１−スルホン酸（ＴＡＰＳ）、ビシン、トリシン、３−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］−２−ヒドロキシプロパン−１−スルホン酸（ＴＡＰＳＯ）、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、ピペラジン−Ｎ、Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、２−［［１，３−ジヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−２−イル］アミノ］エタンスルホン酸（ＴＥＳ）、カコジル酸塩、グリシン、炭酸塩、またはそれらの任意の組み合わせであり得る。緩衝剤は、０．１ｍＭ〜約５００、０．１ｍＭ〜約４００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約３００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約２００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約１００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約５０ｍＭ、０．１ｍＭ〜約２５ｍＭ、０．１ｍＭ〜約２０ｍＭ、０．１ｍＭ〜約１５ｍＭ、０．１ｍＭ〜約１０ｍＭ、０．１ｍＭ〜約５ｍＭ、０．１ｍＭ〜約４ｍＭ、０．１ｍＭ〜約３ｍＭ、０．１ｍＭ〜約２ｍＭ、０．１ｍＭ〜約１ｍＭ、０．１ｍＭ〜約０．９ｍＭ、０．１ｍＭ〜約０．８ｍＭ、０．１ｍＭ〜約０．７ｍＭ、０．１ｍＭ〜約０．６ｍＭ、０．１ｍＭ〜約０．５ｍＭ、０．１ｍＭ〜約０．４ｍＭ、０．１ｍＭ〜約０．３ｍＭ、または０．１ｍＭ〜約０．２ｍＭの濃度で存在し得る。緩衝液は、５００ｍＭ未満、４００ｍＭ未満、３００ｍＭ未満、２００ｍＭ未満、１００ｍＭ未満、５０ｍＭ未満、２５ｍＭ未満、２０ｍＭ未満、１５ｍＭ未満、１０ｍＭ未満、５ｍＭ未満、４ｍＭ未満、３ｍＭ未満、２ｍＭ未満、１ｍＭ未満、０．９ｍＭ未満、０．８ｍＭ未満、０．７ｍＭ未満、０．６ｍＭ未満、０．５ｍＭ未満、０．４ｍＭ未満、０．３ｍＭ未満、０．２ｍＭ未満、または０．１ｍＭの濃度で存在し得る。緩衝剤は、約０．１ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭ、２５ｍＭまたは５０ｍＭで存在し得る。緩衝剤は、少なくとも０．１ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭ、２５ｍＭ、または５０ｍＭで存在し得る。
【０１３７】
［0143］  １種以上の界面活性剤は、例えば、アニオン性、カチオン性、非イオン性または両性であり得る。１種以上の界面活性剤は、例えば、ポリエトキシル化アルコール、ポリオキシエチレンソルビタン、ＴｒｉｔｏｎＸ１００（商標）などのオクトキシノール（ポリエチレングリコールｐ−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェニルエーテル）、Ｔｗｅｅｎ（商標）２０（例えば、ポリソルベート２０）またはＴｗｅｅｎ（商標）８０（ポリソルベート８０）などのポリソルベート、ドデシル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、Ｔｅｒｇｉｔｏｌ（商標）などのノニルフェノールエトキシレート、シクロデキストリン、またはこれらの任意の組み合わせであり得る。１種以上の界面活性剤の各々は、溶出緩衝液の全容積に対して、０．００１容積％未満、０．００５容積％未満、０．０１容積％未満、０．０１５容積％未満、０．０２容積％未満、０．０２５容積％未満、０．０３容積％未満、０．０３５容積％未満、０．０４容積％未満、０．０４５容積％未満、０．０５容積％未満、０．０５５容積％未満、０．０６容積％未満、０．０６５容積％未満、０．０７容積％未満、０．０７５容積％未満、０．０８容積％未満、０．０８５未満、０．０９容積％未満、０．０９５容積％未満、０．１容積％未満、０．１５容積％未満、０．２容積％未満、０．２５容積％未満、０．３容積％未満、０．３５容積％未満、０．４容積％未満、０．４５容積％未満、０．５容積％未満、０．５５容積％未満、０．６容積％未満、０．６５容積％未満、０．７容積％未満、０．７５容積％未満、０．８容積％未満、０．８５容積％未満、０．９容積％未満、０．９５容積％未満、０．１容積％未満、１容積％未満、２容積％未満、または３容積％未満の濃度で存在し得る。１種以上の界面活性剤は、約０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、１％、５％または１０％の濃度で存在してもよい。１種以上の界面活性剤は、少なくとも約０．０１％、０．０５％、０．１％、０．５％、１％、５％または１０％の濃度で存在し得る。１種以上の界面活性剤は、約０．０１％〜１％、約０．０５％〜１％、約０．１％〜１％、約０．１５％〜１％、約０．２％〜１％、約０．２５％〜１％、約０．３％〜１％、約０．３５％〜１％、約０．４％〜１％、約０．４５％〜１％、約０．５％〜１％、約０．５５％〜１％、約０．６％〜１％、約０．６５％〜１％、約０．７％〜１％、約０．７５％〜１％、約０．８％〜１％、約０．８５％〜１％、約０．９％〜１％、または約０．９５％〜１％の濃度で存在し得る。
【０１３８】
［0144］  溶出緩衝液は、約２〜約１０、約２〜約９、約２〜約８、約２〜約７、約２〜約６、約２〜約５、約２〜約４、または約２〜約３のｐＨを有する水溶液であり得る。溶出緩衝液は、約６〜約８、約６〜約７．９、約６〜約７．８、約６〜約７．７、約６〜約７．６、約６〜約７．５、約６〜約７．４、約６〜約７．３、約６〜約７．２、約６〜約７．１、約６〜約７、約６〜約６．９、約６〜約６．８、約６〜約６．７、約６〜約６．６、約６〜約６．５、約６〜約６．４、約６〜約６．３、約６〜約６．２、または約６〜約６．１のｐＨを有する水溶液であり得る。溶出緩衝液は、少なくとも約３、少なくとも約４、少なくとも約５、少なくとも約６、少なくとも約７、少なくとも約５、少なくとも約８、少なくとも約９、または少なくとも約１０のｐＨを有する水溶液であり得る。ｐＨは約６、６．５、７、７．５、８または８．５であり得る。
【０１３９】
［0145］  場合によっては、１種以上のポリオールは、エチレングリコールまたはプロピレングリコールなどのグリコール、またはＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ１０００、ＰＥＧ３０００およびＰＥＧ６０００などの様々な分子量のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などのグリコールポリマーであり得る。ある場合には、１種以上のポリオールは糖であり得る。いくつかの場合において、糖は、スクロース、グルコース、フルクトース、トレハロース、マルトース、ガラクトース、ラクトースまたはそれらの任意の組み合わせであり得る。場合によっては、１種以上のポリオールは、糖アルコールであり得る。場合によっては、糖アルコールはグリセロール、エリスリトール、スレイトール、キシリトール、ソルビトールなどであり得る。
【０１４０】
［0146］  １種以上の塩は、塩化ナトリウム、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、臭化ナトリウム、塩化カリウム、酢酸カリウム、重炭酸カリウム、重硫酸カリウム、臭素酸カリウム、臭化カリウム、または炭酸カリウムであり得る。１種以上の塩は、約０．１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２５ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭ、５００ｍＭ、または７５０ｍＭの濃度であり得る。１種以上の塩は、０．１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２５ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭ、５００ｍＭ、または７５０ｍＭ未満の濃度であり得る。１種以上の塩は、少なくとも０．１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２５ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２５０ｍＭ、５００ｍＭ、７５０ｍＭまたは１０００ｍＭの濃度であり得る。
【０１４１】
［0147］  １種以上のブロッキング剤は、ウシ血清アルブミン、ウシ胎児血清などであり得る。
【０１４２】
［0148］  １種以上の有機溶媒は、例えば、メタノール、エタノール、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、ジオキサン、テトラヒドロフラン、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｔ−ブタノールまたはペンタノール、アセトンなどであり得る。溶出緩衝液は、溶液の全容積に対して、０．０１容積％未満、０．０５容積％未満、０．１容積％未満、０．１５容積％未満、０．２容積％未満、０．２５容積％未満、０．３容積％未満、０．３５容積％未満、０．４容積％未満、０．４５容積％未満、０．５容積％未満、０．５５容積％未満、０．６容積％未満、０．６５容積％未満、０．７容積％未満、０．７５容積％未満、０．８容積％未満、０．８５容積％未満、０．９容積％未満、０．９５容積％未満、１容積％未満、１．５容積％未満、２容積％未満、２．５容積％未満、３容積％未満、３．５容積％未満、４容積％未満、４．５容積％未満、５容積％未満、５．５容積％未満、６容積％未満、６．５容積％未満、７容積％未満、７．５容積％未満、８容積％未満、８．５容積％未満、９容積％未満、９．５容積％未満、１０容積％未満、１１容積％未満、１２容積％未満、１３容積％未満、１４容積％未満、１５容積％未満、１６容積％未満、１７容積％未満、１８容積％未満、１９容積％未満、２０容積％未満、２５容積％未満、３０容積％未満、３５容積％未満、４０容積％未満、４５容積％未満、５０容積％未満、５５容積％未満、６０容積％未満、６５容積％未満、７０容積％未満、７５容積％未満、８０容積％未満、８５容積％未満、９０容積％未満、９５容積％未満、９９容積％未満、または１００容積％未満の有機溶媒を含み得る。溶出緩衝液中の１種以上の有機溶媒の濃度は、少なくとも１％、５％、１０％、５０％、７５％、または１００％であり得る。溶出緩衝液中の１種以上の有機溶媒の濃度は、約１％、５％、１０％、５０％、７５％、または１００％であり得る。
【０１４３】
［0149］  安定化マトリックスまたは安定化マトリックスの一部分は、約、または５μＬ未満、１０μＬ未満、１５μＬ未満、２０μＬ未満、２５μＬ未満、３０μＬ未満、３５μＬ未満、４０μＬ未満、４５μＬ未満、５０μＬ未満、５５μＬ未満、６０μＬ未満、６５μＬ未満、７０μＬ未満、７５μＬ未満、８０μＬ未満、８５μＬ未満、９０μＬ未満、９５μＬ未満、１００μＬ未満、１１０μＬ未満、１２０μＬ未満、１３０μＬ未満、１４０μＬ未満、１５０μＬ未満、１６０μＬ未満、１７０μＬ未満、１８０μＬ未満、１９０μＬ未満、２００μＬ未満、２５０μＬ未満、３００μＬ未満、３５０μＬ未満、４００μＬ未満、４５０μＬ未満、５００μＬ未満、５５０μＬ未満、６００μＬ未満、６５０μＬ未満、７００μＬ未満、７５０μＬ未満、８００μＬ未満、８５０μＬ未満、９００μＬ未満、９５０μＬ未満、１，０００μＬ未満、１．５ｍＬ未満、２ｍＬ未満、２．５ｍＬ未満、３ｍＬ未満、３．５ｍＬ未満、４ｍＬ未満、４．５ｍＬ未満、５ｍＬ未満、５．５ｍＬ未満、６ｍＬ未満、６．５ｍＬ未満、７ｍＬ未満、７．５ｍＬ未満、８ｍＬ未満、８．５ｍＬ未満、９ｍＬ未満、９．５ｍＬ未満、または１０ｍＬ未満の溶出緩衝液の容積と接触させることができる。安定化マトリックスまたは安定化マトリックスの一部分は、約０．１ｍＬ、０．２ｍＬ、０．５ｍＬ、０．７ｍＬ、１ｍＬ、２ｍＬ、５ｍＬ、７ｍＬまたは１０ｍＬ、またはそれ超の溶出緩衝液と接触させることができる。安定化マトリックスまたは安定化マトリックスの一部分は、少なくとも０．１ｍＬ、０．２ｍＬ、０．５ｍＬ、０．７ｍＬ、１ｍＬ、２ｍＬ、５ｍＬ、７ｍＬまたは１０ｍＬの溶出緩衝液と接触させることができる。
【０１４４】
［0150］  安定化マトリックスと接触する溶出緩衝液の容積は、安定化マトリックスの表面積に依存し得る。溶出緩衝液の量は、１μＬ／ｍｍ２未満、２μＬ／ｍｍ２未満、３μＬ／ｍｍ２未満、４μＬ／ｍｍ２未満、５μＬ／ｍｍ２未満、６μＬ／ｍｍ２未満、７μＬ／ｍｍ２未満、８μＬ／ｍｍ２未満、９μＬ／ｍｍ２未満、１０μＬ／ｍｍ２未満、１２μＬ／ｍｍ２未満、１４μＬ／ｍｍ２未満、１６μＬ／ｍｍ２未満、１８μＬ／ｍｍ２未満、２０μＬ／ｍｍ２未満、２５μＬ／ｍｍ２未満、３０μＬ／ｍｍ２未満、３５μＬ／ｍｍ２未満、４０μＬ／ｍｍ２未満、４５μＬ／ｍｍ２未満、５０μＬ／ｍｍ２未満、５５μＬ／ｍｍ２未満、６０μＬ／ｍｍ２未満、６５μＬ／ｍｍ２未満、７０μＬ／ｍｍ２未満、７５μＬ／ｍｍ２未満、８０μＬ／ｍｍ２未満、８５μＬ／ｍｍ２未満、９０μＬ／ｍｍ２未満、９５μＬ／ｍｍ２未満、１００μＬ／ｍｍ２未満、１５０μＬ／ｍｍ２未満、２００μＬ／ｍｍ２未満、２５０μＬ／ｍｍ２未満、３００μＬ／ｍｍ２未満、３５０μＬ／ｍｍ２未満、４００μＬ／ｍｍ２未満、４５０μＬ／ｍｍ２未満、５００μＬ／ｍｍ２未満、５５０μＬ／ｍｍ２未満、６００μＬ／ｍｍ２未満、６５０μＬ／ｍｍ２未満、７００μＬ／ｍｍ２未満、７５０μＬ／ｍｍ２未満、８００μＬ／ｍｍ２未満、８５０μＬ／ｍｍ２未満、９００μＬ／ｍｍ２未満、９５０μＬ／ｍｍ２未満、または１，０００μＬ／ｍｍ２未満であり得る。溶出緩衝液の量は、約１０μＬ／ｍｍ２〜約１，０００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約９００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約８００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約７００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約６００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約５００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約４００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約３００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約２００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約１００μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約９０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約８０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約７０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約６０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約５０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約４０μＬ／ｍｍ２、約１０μＬ／ｍｍ２〜約３０μＬ／ｍｍ２、または約１０μＬ／ｍｍ２〜約２０μＬ／ｍｍ２であり得る。
【０１４５】
［0151］  タンパク質は、撹拌源からの攪拌の存在下または非存在下で、溶出緩衝液中で安定化マトリックスをインキュベートすることによって、安定化マトリックスから溶出させることができる。撹拌源は、ロッカー、ボルテックスミキサー、ミキサー、シェーカーなどであり得る。場合によっては、攪拌源を一定の速度に設定することができる。速度は、１回転／分（ｒｐｍ）未満、５ｒｐｍ未満、１０ｒｐｍ未満、１５ｒｐｍ未満、２０ｒｐｍ未満、２５ｒｐｍ未満、３０ｒｐｍ未満、３５ｒｐｍ未満、４０ｒｐｍ未満、４５ｒｐｍ未満、５０ｒｐｍ未満、５５ｒｐｍ未満、６０ｒｐｍ未満、６５ｒｐｍ未満、７０ｒｐｍ未満、７５ｒｐｍ未満、８０ｒｐｍ未満、８５ｒｐｍ未満、９０ｒｐｍ未満、９５ｒｐｍ未満、１００ｒｐｍ未満、１５０ｒｐｍ未満、２００ｒｐｍ未満、２５０ｒｐｍ未満、３００ｒｐｍ未満、３５０ｒｐｍ未満、４００ｒｐｍ未満、４５０ｒｐｍ未満、５００ｒｐｍ未満、５５０ｒｐｍ未満、６００ｒｐｍ未満、６５０ｒｐｍ未満、７００ｒｐｍ未満、７５０ｒｐｍ未満、８００ｒｐｍ未満、８５０ｒｐｍ未満、９００ｒｐｍ未満、９５０ｒｐｍ未満、１，０００ｒｐｍ未満、１，５００ｒｐｍ未満、２，０００ｒｐｍ未満、２，５００ｒｐｍ未満、３，０００ｒｐｍ未満、３，５００ｒｐｍ未満、４，０００ｒｐｍ未満、４，５００ｒｐｍ未満、５，０００ｒｐｍ未満、５，５００ｒｐｍ未満、６，０００ｒｐｍ未満、６，５００ｒｐｍ未満、７，０００ｒｐｍ未満、７，５００ｒｐｍ未満、８，０００ｒｐｍ未満、８，５００ｒｐｍ未満、９，０００ｒｐｍ未満、９，５００ｒｐｍ未満、または１０，０００ｒｐｍ未満であり得る。速度は、約５０ｒｐｍ、１００ｒｐｍ、２００ｒｐｍ、３００ｒｐｍ、４００ｒｐｍ、５００ｒｐｍ、６００ｒｐｍ、７００ｒｐｍ、８００ｒｐｍ、９００ｒｐｍ、１０００ｒｐｍ、１５００ｒｐｍまたは５０００ｒｐｍであり得る。速度は、少なくとも５０ｒｐｍ、１００ｒｐｍ、２００ｒｐｍ、３００ｒｐｍ、４００ｒｐｍ、５００ｒｐｍ、６００ｒｐｍ、７００ｒｐｍ、８００ｒｐｍ、９００ｒｐｍ、１０００ｒｐｍ、１５００ｒｐｍまたは５０００ｒｐｍであり得る。
【０１４６】
［0152］  溶出は、約０°Ｃ未満、１°Ｃ未満、２°Ｃ未満、３°Ｃ未満、４°Ｃ未満、５°Ｃ未満、６°Ｃ未満、７°Ｃ未満、８°Ｃ未満、９°Ｃ未満、１０°Ｃ未満、１１°Ｃ未満、１２°Ｃ未満、１３°Ｃ未満、１４°Ｃ未満、１５°Ｃ未満、１６°Ｃ未満、１７°Ｃ未満、１８°Ｃ未満、１９°Ｃ未満、２０°Ｃ未満、２１°Ｃ未満、２２°Ｃ未満、２３°Ｃ未満、２４°Ｃ未満、２５°Ｃ未満、２６°Ｃ未満、２７°Ｃ未満、２８°Ｃ未満、２９°Ｃ未満、３０°Ｃ未満、３１°Ｃ未満、３２°Ｃ未満、３３°Ｃ未満、３４°Ｃ未満、３５°Ｃ未満、３６°Ｃ未満、３７°Ｃ未満、３８°Ｃ未満、３９°Ｃ未満、４０°Ｃ未満、４５°Ｃ未満、５０°Ｃ未満、５５°Ｃ未満、６０°Ｃ未満、６５°Ｃ未満、７０°Ｃ未満、７５°Ｃ未満、８０°Ｃ未満、８５°Ｃ未満、９０°Ｃ未満、９５°Ｃ未満、または約１００°Ｃの温度で実施することができる。溶出は、約１０°Ｃ〜約１００°Ｃ、約１０°Ｃ〜約９５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約９０°Ｃ、約１０°Ｃ〜約８５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約８０°Ｃ、約１０°Ｃ〜約７５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約７０°Ｃ、約１０°Ｃ〜約６５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約６０°Ｃ、約１０°Ｃ〜約５５°Ｃ、約１０°Ｃ〜約５０°Ｃ、約２０°Ｃ〜約５０°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４８°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４６°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４４°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４２°Ｃ、約２０°Ｃ〜約４０°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３８°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３６°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３４°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３２°Ｃ、約２０°Ｃ〜約３０°Ｃ、約２０°Ｃ〜約２８°Ｃ、約２０°Ｃ〜約２６°Ｃ、約２０°Ｃ〜約２４°Ｃ、または約２０°Ｃ〜約２２°Ｃの温度で実施することができる。溶出は、約１０°Ｃ、２０°Ｃ、２５°Ｃ、３０°Ｃ、３７°Ｃ、５０°Ｃ、または６５°Ｃで実施することができる。
【０１４７】
［0153］  溶出（例えば、撹拌）は、１分未満、５分未満、１０分未満、１５分未満、２０分未満、２５分未満、３０分未満、３５分未満、４０分未満、４５分未満、５０分未満、５５分未満、または６０分未満である。溶出は、０．５時間未満、１時間未満、１．５時間未満、２時間未満、２．５時間未満、３時間未満、３．５時間未満、４時間未満、４．５時間未満、５時間未満、５．５時間未満、６時間未満、６．５時間未満、７時間未満、７．５時間未満、８時間未満、８．５時間未満、９時間未満、９．５時間未満、１０時間未満、１０．５時間未満、１１時間未満、１１．５時間未満、または１２時間未満の間、実施することができる。溶出は、０．１日未満、０．２日未満、０．３日未満、０．４日未満、０．５日未満、０．６日未満、０．７日未満、０．８日未満、０．９日未満、１日未満、１．５日未満、２日未満、２．５日未満、３日未満、３．５日未満、４日未満、４．５日未満、５日未満、５．５日未満、６日未満、６．５日未満または７日未満の間、実施することができる。溶出（例えば、撹拌）は、約０．２５時間、０．５時間、１時間、２時間、５時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３日間、または１週間の間、実施することができる。溶出（例えば、撹拌）は、少なくとも０．２５時間、０．５時間、１時間、２時間、５時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間、３日間、または１週間の間、実施することができる。表１には、タンパク質溶出緩衝液の例を列挙する。
【０１４８】
［0154］
【表１】
2018534541.tif 000003
【０１４９】
［0155］  溶出したタンパク質は、保存またはさらなる処理のために容器に移送することができるか、または特性決定のためにアッセイ容器に移送することができる。
【０１５０】
［0156］マトリックスの使用
【０１５１】
［0157］  サンプルは、１つのマトリックス（例えば、１つの層）に適用することができる。サンプルを最上部マトリックスに適用することができ、サンプルの少なくとも一部分は第２のマトリックス、例えば最上部マトリックスの下にある第２のマトリックスと接触することができる。マトリックスは、例えば、約または少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、５０または１００の層で積み重ねることができる。スタックは同じマトリックスを含むことができ、例えば、スタック内の各マトリックスは同じ組成を有し得る。スタックは、異なる組成を有するマトリックスを含むことができ、例えば、核酸を安定化するために構成されたマトリックスを、タンパク質を安定化するために構成されたマトリックスの最上部上に位置することができ、逆もまた同様である。スタック内のマトリックスの種類は、交互であり、例えば、タンパク質を安定化するように構成されたマトリックス、核酸を安定化するように構成されたマトリックス、その後にタンパク質を安定化するように構成されたマトリックスが続く。最上部のマトリックスに適用される容積は、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９または１０層のマトリックスの中を通過することができる。複数のマトリックスを使用することにより、所望の生体分子、例えば核酸またはポリペプチドの回収率を高めることができる。
【０１５２】
［0158］  サンプルは複数のマトリックスの中を通過することができるが、マトリックスが互いに接触することはない。例えば、サンプルを、核酸を安定化するように構成されたマトリックスに適用することができ、核酸を安定化するように構成されたマトリックスから核酸を溶出させ、タンパク質を安定化するように構成されたマトリックスに適用することができる。タンパク質を安定化するように構成されたマトリックスは、例えば、核酸からタンパク質夾雑物などの夾雑物を除去するために使用することができる。サンプルは、タンパク質を安定化するように構成されたマトリックスに適用することができ、タンパク質を安定化するように構成されたマトリックスからタンパク質を溶出させ、核酸を安定化するように構成されたマトリックスに適用することができる。核酸を安定化するように構成されたマトリックスは、例えばタンパク質から夾雑物、例えば核酸夾雑物を除去するために使用することができる。
【０１５３】
［0159］実施例
【０１５４】
［0160］実施例１：タグ付きサンプル収集および調製のための方法およびキット
【０１５５】
［0161］  サンプルの獲得および安定化構成要素を、エンドユーザに配置する。サンプル安定化構成要素は、指定された診断検査セット用に特別に構成され、特に、特定の標的構成要素用に構成される。例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡおよびタンパク質標的構成要素はそれぞれ、異なる基板組成および識別色を有する。ＲＮＡ標的構成要素用に構成された検査は、赤色の安定化マトリックスを有し、ＤＮＡ用に構成された検査は緑色の安定化マトリックスを有し、タンパク質標的構成要素用に構成された検査は、青色の安定化マトリックスを有する。さらに、配置された各システムは固有のバーコードを有し、このバーコードは、サンプルをバッチ処理するために、ならびにそれらのサンプル結果をサンプルの元となる供与体に対応する識別情報と結びつけるために、種類（ＲＮＡ／ＤＮＡ／タンパク質）毎にサンプルを選別および分離するために使用される。サンプル安定化構成要素は、複数のバーコードラベルを有し、そのうちの１つは、サンプル安定化構成要素に恒久的に固定されたままであるラベルであり、そのうちのいくつかは、処理が容易なように取り外し可能な接着ラベルである。ラベルは、配置されたシステムに関連する固有のバーコードを表示する。サンプル獲得および安定化システムを用いてサンプルを獲得後、システムは収集された施設に戻される。固定バーコードは、受け取ったシステムを基板の種類によって機械的に分離するために使用される。例えば、赤色の安定化マトリックスを有する全てのサンプル安定化構成要素を一緒に収集し、９６のバッチにアセンブルする。アッセイはサンプルのカラータグに基づいて実施する。９６本の赤色サンプルのバッチを一緒に収集し、サンプルの各々からの２つのラベルを、走査される順序に基づいてそれぞれ順番に組み立てられている、９６本のＲＮＡｓｅフリーチューブ２セットに移す。９６本のラベル付きサンプルチューブの各ラックは、同一に設定され、構造化される。９６本のサンプルの各々のサンプル安定化構成要素を、走査順に開き、赤色の基板を取り出し、対応するサンプルバーコードラベルを有するＲＮＡｓｅフリーサンプルチューブ内に配置されたリム上に、フィルタのように配置する。これを、９６個のサンプルの各々の基板が正確にラベル付けされ、対応する９６本のサンプルチューブに入るまで行う。赤色基板からの標的構成要素のために設計された「赤色キット」を開くと、ＲＮａｓｅフリーのＰＣＲ緩衝液、試薬および他の分子構成要素を含む赤色のキャップの容器が現れる。ボトルはその上にもステップ番号を有し、これにより、それらは赤色サンプルの異なる処置ステップを実施するために簡単かつ迅速に使用することができる。「ステップ１赤色試薬」のアリコートを９６本のラベル付きチューブの各々の赤色基板の最上部に加え、チューブを閉じ、試薬を数分間静置して基板を浸す。試薬および緩衝液の浸漬後、サンプルを遠心分離して、基板の内容物をサンプル管の底部に形成された液体溶液に入れる。「ステップ１赤色試薬」の別のアリコートを基板の最上部に再度添加し、遠心分離を繰り返し行う。チューブを開き、固体基板を各サンプルから取り出し、次に、標的構成要素ＲＮＡに相補的な一本鎖領域を有する部分的に二本鎖であるＤＮＡ分子を含有する緩衝溶液を含む「ステップ２赤色試薬」のアリコートを液体溶液に添加する。チューブを閉じ、二本鎖ＤＮＡ分子の変性を誘導することなくブラウン運動を促進する温度でＰＣＲ装置に置く。この温度で、基板からのＲＮＡは、ＤＮＡ分子の一本鎖領域とハイブリダイズする。ＤＮＡ分子は、二本鎖領域内でＲＮＡポリメラーゼのためのプロモーターを有し、一本鎖領域の３’オーバーハングはチミジン残基鎖を有する。赤色基板からのメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の３’末端のポリ（Ａ）尾部は、ＤＮＡ分子のチミン残基オーバーハングとハイブリダイズする。次いで、チューブを開き、リガーゼ酵素および緩衝液を含む「ステップ３赤色試薬」のアリコートをチューブに添加する。サンプルを加熱すると、ｍＲＮＡと二本鎖ＤＮＡ分子との間でライゲーションが起こり、二本鎖ＲＮＡ−ＤＮＡ分子を形成し、ｍＲＮＡ全体が分子の１つの鎖として組み込まれる。チューブを開き、ＲＮＡポリメラーゼを含む「ステップ４赤色試薬」のアリコートを９６本のチューブの各々に添加し、これらのチューブを閉じ、繰り返し変性させ、アニーリングを行う３２サイクルのＰＣＲをサンプルについて実施し、ＲＮＡ鋳型を増幅してアンチセンスｃＲＮＡのライブラリーを生成する。増幅されたｃＲＮＡ  ＰＣＲ産物のアリコートを、対応する９６本の空のラベル付きサンプルチューブの各々に移送し、「ステップ１赤色試薬」のアリコートを、９６本の空のラベル付きチューブの第２のラックに加える。ステップ２〜４を繰り返して、ライゲーションおよび重合が行われ、ここではｍＲＮＡのセンス鎖が得られる。次いで、これらのセンス鎖を標準的なシーケンシングプロトコルを用いてシーケンシングを行い、それらの結果を標準的な遺伝子発現プロファイル法を用いて分析し、識別子としてバーコード番号を使用し、得られた結果に関連する供与体を決定する。
【０１５６】
［0162］  類似のバッチの分析を実行するための他のキットも利用可能である。緑色キットは、ＤＮＡを選択的に安定化させる緑色基板構成要素のためであり、青色キットは、タンパク質を選択的に安定化させる青色基板構成要素のためである。これらの異なる基板の各々からのサンプルを処置するために、異なる方法が使用される。
【０１５７】
［0163］実施例２：サンプル分離構成要素と共にランセットおよび止血帯を備えたキット
【０１５８】
［0164］  キットをエンドユーザまたは供与体に配置する。このキットは、手を暖めるための結晶活性化カイロ、ランセット、止血帯、アルコールパッド、ガーゼ、圧力作動式ランセット、自己充填キャピラリー、ならびに一体型のサンプル分離ユニットおよびサンプル安定化マトリックスを備えたサンプル安定化構成要素を含む。エンドユーザは、穿刺する前に血流の刺激を促すために供与体の手を暖める。これは結晶活性化されたハンドウォーマーカイロを活性化し、それを手指の間に保持することによって達成される。供与体が手と腕を椅子のアームに緩やかに置いて椅子に快適に座っている間、供与体の手はリラックスして心臓および筋肉の下に位置する。止血帯を供与体の利き手でないほうの手に配置して、供与体の中指上の部位を選択する。ゴムバンドの止血帯を指の最後の指に巻き付け、次に指の周りでループになるまで引き続き数回捻って、止血帯を形成する。簡単に取り出すことができるようにループを残しておく。指先に圧力がかけられ、指先がわずかに赤くなって盛り上がる。サンプル部位の滅菌を行う。最初に指先の側面が選択され、その領域が乾燥する前にその領域を通って、一枚の滅菌ガーゼで、アルコールパッドで拭き取りを行う。供与体は、穿刺中に止血帯の縛られていないループを保持し、引っ張る。穿刺プロセスは、提供されるランセットの型および供給源に依存し得る。ランセットの保護キャップを取り外し、ランセットを滅菌した指の側に向かって配置する。指先の中央は硬化しており、より高い密度の神経終末が含まれていることから、ランセットは、指先の中心を避けるように配置する。ランセット内のばねがかみ合ってクリック音が聞こえ、皮膚が穿刺されたことを示すまで、ランセットを押し下げる。穿刺後の最初の血液を直ちに除去し、軽く、しかし一定の圧力を指に加える。自己充填キャピラリーを、切開部位に対して水平に保持し、自己充填キャピラリー（例えば、Ｍｉｃｒｏｓａｆｅ（登録商標）、Ｓａｆｅ−Ｔｅｃ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、ＬＬＣ、Ｉｖｙｌａｎｄ  ＰＡ）を使用して、形成される血液滴に接触させる。キャピラリーはプラスチックシャフトに印刷された黒線まで自己充填し、自己停止する。プラスチック球が存在するため、充填ステップ中にこのプラスチック球が落下することはない。収集した血液が黒い線に達して充填が終了すると、指先から圧力を抜き、ゴムバンドの縛られていないループを解放して指の止血帯の圧力を低下させる。血液はサンプル安定化構成要素に分注される。サンプル安定化構成要素を平らな表面上に置き、キャピラリーの外側の血液を滅菌ガーゼできれいに拭き取る。充填されたキャピラリーを、サンプル安定化構成要素の底部の上に直立して保持し、収集されたサンプルを、充填されたキャピラリーのプラスチック球をゆっくりと均等に押圧して分配する。キャピラリーは、分配中にサンプル安定化構成要素の底部で所定の位置に固定される。キャピラリーは、すべての血液がサンプル安定化構成要素上に分配されると廃棄される。手技後、血液サンプリング構成要素は、指の止血帯が完全に取り外され、切開部位が清浄されている間、静置する。出血を止めるために滅菌ガーゼを用いて切開部に圧力をかけ、凝固を助けるために手を心臓の上に上げる。サンプル安定化構成要素を、手技後約５〜１０分間静置し、血液滴が依然としてフィルタ上で盛り上がっているか、かつフィルタがまだ「濡れている」ように見えるかを判断するために観察する。この場合では、分離構成要素を使用しており、血液の盛り上がった「濡れている」液滴が観察され、次いで、麦色の血漿がサンプル分離構成要素の最上部に現れ始める。サンプル分離の外観は、サンプルを貯蔵容器に戻すことができることを示すために使用される。血液サンプリング構成要素を、バーコードラベルを用いてラベル付けし、室温で静置する。貯蔵容器を密閉して、郵便物として投函する。
【０１５９】
［0165］  本発明の好ましい実施形態が本明細書に示され説明されたが、そのような実施形態が単なる例示として提供されることは、当業者には明らかであろう。本発明から逸脱することなく、当業者には数多くの変形、変更、および置き換えが可能である。本明細書に記載の本発明の実施形態に対する様々な代替形態を本発明の実施に用いることができることを理解されたい。以下の特許請求の範囲は本発明の範囲を定義し、これらの特許請求の範囲内の方法および構造およびそれらの均等物が本発明に含まれることが意図される。
【図１Ａ】
2018534541.tif 000004
【図１Ｂ】
2018534541.tif 000005
【図１Ｃ】
2018534541.tif 000006
【図２】
2018534541.tif 000007
【図３】
2018534541.tif 000008
【図４Ａ】
2018534541.tif 000009
【図４Ｂ】
2018534541.tif 000010
【図５】
2018534541.tif 000011
【図６】
2018534541.tif 000012
【図７−１】
2018534541.tif 000013
【図７−２】
2018534541.tif 000014
【図７−３】
2018534541.tif 000015
【図７−４】
2018534541.tif 000016
【図７−５】
2018534541.tif 000017
【図７−６】
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【国際調査報告】
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