(57)【要約】シクロスポリン／シクロデキストリン複合体のナノ粒子およびマイクロ粒子を形成するための方法、ならびに形成されたナノ懸濁物およびマイクロ懸濁物を、涙液形成を誘発または増強するために、ならびに眼およびその周辺領域の疾患の処置のために適した水性点眼剤の形態でヒトまたは動物の眼へと投与する方法。上記水性点眼剤組成物は、シクロスポリン、およびα−シクロデキストリンとγ−シクロデキストリンの混合物、ならびに１種もしくはこれより多くの安定化ポリマーを含む。α−シクロデキストリンは、シクロスポリンを可溶化する一方で、γ−シクロデキストリンは、シクロスポリン／シクロデキストリン複合体凝集物の形成を促進する。上記ポリマーは、水性のナノ懸濁物およびマイクロ懸濁物を安定化する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
水性の眼用組成物であって、該組成物は、
（ａ）眼科学的に有効である量のシクロスポリンＡ；
（ｂ）該シクロスポリンＡと水溶性複合体を形成するために有効な量のα−シクロデキストリン；
（ｃ）シクロスポリンＡ／α−シクロデキストリン複合体凝集物の形成を生じるために有効な量のγ−シクロデキストリン；
（ｄ）約１００ｎｍ〜約１００μｍの直径を有し、該α−シクロデキストリンおよび該γ−シクロデキストリンの両方を含むシクロスポリンＡ／シクロデキストリン粒子；
（ｅ）水；ならびに
（ｆ）必要に応じて、ポリマー性安定化剤；
を含み、該組成物中の該シクロスポリンＡの総濃度は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）であり、該組成物中の該α−シクロデキストリンの総濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、該組成物中の総γ−シクロデキストリン濃度は、１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、そして約３００ｎｍより大きな直径を有する粒子におけるシクロスポリンの総画分は、少なくとも約１０％である、組成物。
【請求項２】
前記安定化剤は、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、およびポリオキシエチレンアルキルエーテルからなる群より選択される、請求項１に記載の眼用組成物。
【請求項３】
前記安定化剤は、水溶性セルロース誘導体、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルポリマー、ポリビニルアルコールおよびポリビニルピロリドンからなる群より選択されるポリマーである、請求項１に記載の眼用組成物。
【請求項４】
（ａ）シクロスポリンＡは、約０．０５％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）の量で存在し；
（ｂ）α−シクロデキストリンは、約４％（ｗ／ｖ）〜約２０％（ｗ／ｖ）の量で存在し；
（ｃ）γ−シクロデキストリンは、約４％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）の量で存在し；そして
（ｄ）固体薬物画分は、約２００ｎｍ〜約５０μｍの直径を有するシクロスポリン／シクロデキストリン粒子を含む、
請求項１に記載の眼用組成物。
【請求項５】
涙液形成の必要性のある被験体において涙液形成を誘導するかまたは増強するための方法であって、該方法は、涙液形成を誘導するために有効な量の請求項１に記載の組成物を該被験体の片眼もしくは両眼に局所投与する工程を包含する方法。
【請求項６】
前記被験体は、ドライアイに罹患している、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
シクロスポリンＡの凝集体を形成するための方法であって、該方法は、治療上有効な量のシクロスポリンＡを水中で、該シクロスポリンＡを本質的に完全に溶解するために十分なα−シクロデキストリンの量において、およびシクロスポリンＡ／α−シクロデキストリン複合体凝集物を形成するために十分なγ−シクロデキストリンの量において、必要に応じてポリマー性安定化剤とともに可溶化して、約１００ｎｍ〜約１００μｍの直径を有し、該α−シクロデキストリンおよび該γ−シクロデキストリンの両方を含むシクロスポリンＡ／シクロデキストリン粒子を生成する工程を包含する方法。
【請求項８】
水性眼用組成物であって、該組成物は、
（ａ）眼科学的に治療上有効である量のシクロスポリンＡ；
（ｂ）該シクロスポリンＡと水溶性複合体を形成するために有効な量のα−シクロデキストリン；
（ｃ）シクロスポリンＡ／α−シクロデキストリン複合体凝集物の形成を生じるために有効な量のγ−シクロデキストリン；
（ｄ）約１００ｎｍ〜約１００μｍの直径を有し、該α−シクロデキストリンおよび該γ−シクロデキストリンの両方を含むシクロスポリンＡ／シクロデキストリン粒子；
（ｅ）水；ならびに
（ｆ）必要に応じて、ポリマー性安定化剤；
を含み、涙液形成の必要性のある被験体の片眼または両眼に該組成物の有効な量を局所投与することによって涙液の形成を誘発するにあたって使用するために、該組成物中の該シクロスポリンＡの総濃度は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）であり、該組成物中の該α−シクロデキストリンの総濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、該組成物中の総γ−シクロデキストリン濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、約３００ｎｍより大きな直径を有する粒子におけるシクロスポリンＡの総画分は、少なくとも約１０％である、組成物。
【請求項９】
前記被験体は、ドライアイに罹患している、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
水性眼用組成物の製造におけるシクロスポリンＡの使用であって、該組成物は、
（ａ）眼科学的に治療上有効である量のシクロスポリンＡ；
（ｂ）該シクロスポリンＡと水溶性複合体を形成するために有効な量のα−シクロデキストリン；
（ｃ）シクロスポリンＡ／α−シクロデキストリン複合体凝集物の形成を生じるために有効な量のγ−シクロデキストリン；
（ｄ）約１００ｎｍ〜約１００μｍの直径を有し、該α−シクロデキストリンおよび該γ−シクロデキストリンの両方を含む、シクロスポリンＡ／シクロデキストリン粒子；
（ｅ）水；ならびに
（ｆ）必要に応じて、ポリマー性安定化剤；
を含み、涙液形成の必要性のある被験体の片眼または両眼に該組成物の有効な量を局所投与することによって涙液形成を誘発するために、該組成物中のシクロスポリンＡの総濃度は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）であり、該組成物中の該α−シクロデキストリンの総濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、該組成物中の総γ−シクロデキストリン濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、約３００ｎｍより大きな直径を有する粒子におけるシクロスポリンＡの総画分は、少なくとも約１０％である、使用。
【請求項１１】
前記被験体は、ドライアイに罹患している、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記安定化剤は、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、およびポリオキシエチレンアルキルエーテルからなる群より選択される、請求項８に記載の水性眼用組成物。
【請求項１３】
前記安定化剤は、水溶性セルロース誘導体、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルポリマー、ポリビニルアルコールおよびポリビニルピロリドンからなる群より選択されるポリマーである、請求項８に記載の水性眼用組成物。
【請求項１４】
（ａ）シクロスポリンＡは、約０．０５％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）の量で存在し；
（ｂ）α−シクロデキストリンは、約４％（ｗ／ｖ）〜約２０％（ｗ／ｖ）の量で存在し；
（ｃ）γ−シクロデキストリンは、約４％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）の量で存在し；そして
（ｄ）固体薬物画分は、約２００ｎｍ〜約５０μｍｍの直径を有するシクロスポリン／シクロデキストリン粒子を含む、
請求項８に記載の水性眼用組成物。
【請求項１５】
前記安定化剤は、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、およびポリオキシエチレンアルキルエーテルからなる群より選択される、請求項１０に記載の使用。
【請求項１６】
前記安定化剤は、水溶性セルロース誘導体、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルポリマー、ポリビニルアルコールおよびポリビニルピロリドンからなる群より選択されるポリマーである、請求項１０に記載の使用。
【請求項１７】
（ａ）シクロスポリンＡは、約０．０５％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）の量で存在し；
（ｂ）α−シクロデキストリンは、約４％（ｗ／ｖ）〜約２０％（ｗ／ｖ）の量で存在し；
（ｃ）γ−シクロデキストリンは、約４％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）の量で存在し；そして
（ｄ）固体薬物画分は、約２００ｎｍ〜約５０μｍｍの直径を有するシクロスポリン／シクロデキストリン粒子を含む、
請求項１０に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
（背景）
本発明は、活性成分がシクロスポリンＡである、新規な水性点眼剤組成物に関する。
【０００２】
点眼剤の局所投与は、点眼剤の便利さおよび安全性に起因して、眼用薬物投与の他の経路（例えば、硝子体内注射および移植物）と比較して、眼への薬物投与の好ましい手段である（Ｌｅ  Ｂｏｕｒｌａｉｓ，  Ｃ．，  Ａｃａｒ，  Ｌ．，  Ｚｉａ，  Ｈ．，  Ｓａｄｏ，  Ｐ．Ａ．，  Ｎｅｅｄｈａｍ，  Ｔ．，  Ｌｅｖｅｒｇｅ，  Ｒ．，  １９９８．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ−Ｒｅｃｅｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｓ．  Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １７，  ３３−５８）。薬物は、眼の表面から眼およびその周辺組織の中へと受動拡散によって主に輸送され、その周辺組織では、フィックの法則に従って、上記薬物は、溶解される薬物分子の勾配によって眼の中へと押しやられる。眼の中への受動的な薬物拡散は、３つの主な障害によって妨げられる（Ｇａｎ，  Ｌ．，  Ｗａｎｇ，  Ｊ．，  Ｊｉａｎｇ，  Ｍ．，  Ｂａｒｔｌｅｔｔ，  Ｈ．，  Ｏｕｙａｎｇ，  Ｄ．，  Ｅｐｅｒｊｅｓｉ，  Ｆ．，  Ｌｉｕ，  Ｊ．，  Ｇａｎ，  Ｙ．，  ２０１３．  Ｒｅｃｅｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｏｐｉｃａｌ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｗｉｔｈ  ｌｉｐｉｄ−ｂａｓｅｄ  ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｔｏｄａｙ  １８，  ２９０−２９７；  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｓｉｇｕｒｄｓｓｏｎ，  Ｈ．Ｈ．，  Ｋｏｎｒａｄｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｆ．，  Ｇｉｓｌａｄｏｔｔｉｒ，  Ｓ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２００８．  Ｔｏｐｉｃａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ  ｓｅｇｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｙｅ：  ａｎａｔｏｍｉｃａｌ  ａｎｄ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓ．  Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ６３，  １７１−１７９；  Ｕｒｔｔｉ，  Ａ．，  ２００６．  Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ａｎｄ  ｏｂｓｔａｃｌｅｓ  ｏｆ  ｏｃｕｌａｒ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ．  Ｒｅｖ．  ５８，  １１３１−１１３５）。
【０００３】
第１は、薬物の水溶解度である。溶解した薬物分子のみが眼の中へと拡散し得るので、薬物は、眼の中へと拡散するには、水性の涙液中で十分な溶解度を有しなければならない。溶解度に乏しい薬物の溶解度が、例えば、シクロデキストリン複合体化を通じて増大すると、それらの濃度勾配およびそれらの眼への結果的な受動拡散が増大する（Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｊaｒｖｉｎｅｎ，  Ｔ．，  １９９９．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ  ｉｎ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ３６，  ５９−７９）。
【０００４】
第２の障害は、涙液の急速なターンオーバー速度および溶解した薬物分子の濃度の結果的な低下である。点眼剤（２５〜５０μｌ）を眼の前角膜領域へ滴下した後に、薬物溶液のより多くの部分が、眼の表面から急速に排出され、涙液容積が、約７μｌという通常の常在容積へと戻る。その後、涙液容積は一定のままであるが、薬物濃度は、涙液ターンオーバーならびに角膜吸収および非角膜吸収による希釈に起因して低下する。表面積からの点眼剤の排水に関する一次速度定数の値は、代表的には、ヒトにおいて約１．５分−１である。正常な涙液ターンオーバーは、ヒトにおいて約１．２μｌ／分であり、局所適用される薬物の前角膜半減期は、１〜３分の間である（Ｓｕｇｒｕｅ，  Ｍ．Ｆ．，  １９８９．  Ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ａｎｔｉｇｌａｕｃｏｍａ  ｄｒｕｇｓ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ４３，  ９１−１３８）。局所適用される薬物の前角膜半減期は、それらのバイオアベイラビリティーを増強するために、例えば、低分子薬物／シクロデキストリンマイクロ粒子の形成によって増大される必要がある（Ｊｏｈａｎｎｅｓｓｏｎ，  Ｇ．，  Ｍｏｙａ−Ｏｒｔｅｇａ，  Ｍ．Ｄ．，  Ａｓｇｒｉｍｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｇ．Ｍ．，  Ｌｕｎｄ，  Ｓ．Ｈ．，  Ｔｈｏｒｓｔｅｉｎｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｍ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２０１４．  Ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  γ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ  ｅｙｅ  ｄｒｏｐｓ  ｉｎ  ｔｅａｒ  ｆｌｕｉｄ．  Ａｃｔａ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃａ  ９２，  ５５０−５５６；  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２０１２．  Ｔｏｐｉｃａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｅｙｅ：  ｄｏｒｚｏｌａｍｉｄｅ．  Ａｃｔａ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃａ  ９０，  ６０３−６０８）。
【０００５】
第３の障害は、膜バリア、すなわち、角膜および／または結膜／強膜を通過するゆっくりとした薬物透過である。薬物分子は、それらが上記膜バリアを受動的に透過し得る前に、水性の外側から膜へと分配しなければならない。その結果は、一般に、適用される薬物用量のわずか数パーセントが眼の組織へと送達されることである。投与される用量の大部分（５０〜１００％）は、鼻腔から全身薬物循環へと吸収され、種々の副作用を引き起こし得る。
【０００６】
ドライアイ症候群は、不快感および視覚障害を生じる、低下した涙液生成によって引き起こされる一般的な眼の障害である。ドライアイ症候群は、眼の表面への潜在的な損傷とともに、涙膜不安定性、涙膜の増大した重量オスモル濃度および眼の表面の炎症が関わる多くの要素からなる原因を有する。この疾患に利用可能な治療はほとんどない。
【０００７】
シクロスポリンは、真菌から単離されたペプチドの群である。そのうち、シクロスポリンＡは、最もよく知られている。多くの他の天然のおよび半合成のシクロスポリンが存在し、それらとしては、シクロスポリンＢ、シクロスポリンＣ、シクロスポリンＤ、シクロスポリンＥ、シクロスポリンＦ、シクロスポリンＧおよびシクロスポリンＨが挙げられる（Ｌａｗｅｎ，  Ａ．，  ２０１５．  Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｓ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｎａｔｕｒａｌ  ｐｅｐｔｉｄｙｌ  ｐｒｏｌｙｌ  ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ  ｉｓｏｍｅｒａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．  Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ  １８５０，  ２１１１−２１２０；  Ｐｅｅｌ，  Ｍ．，  Ｓｃｔｉｂｅｒ，  Ａ．，  ２０１５．  Ｓｅｍｉ−ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｓ．  Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ  １８５０，  ２１２１−２１４４）。
【０００８】
シクロスポリンＡは、２種の真菌、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｐｏｌｙｓｐｏｒｕｍおよびＣｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎ  ｌｕｃｉｄｕｍの発酵ブロスから得られる環状ポリペプチド薬物である（Ｌａｕｐａｃｉｓ，  Ａ．，  Ｋｅｏｗｎ，  Ｐ．Ａ．，  Ｕｌａｎ，  Ｒ．Ａ．，  ＭｃＫｅｎｚｉｅ，  Ｎ．，  Ｓｔｉｌｌｅｒ，  Ｃ．Ｒ．，  １９８２．  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ：  ａ  ｐｏｗｅｒｆｕｌ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓａｎｔ．  Ｃａｎａｄｉａｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １２６，  １０４１−１０４６）。シクロスポリンＡは、分子量１２０２．６Ｄａ、周囲温度において０．００８ｍｇ／ｍｌという水溶解度および２１℃においてＬｏｇＰオクタノール／水＝２．９２を有する（Ｅｌ  Ｔａｙａｒ，  Ｎ．，  Ｍａｒｋ，  Ａ．Ｅ．，  Ｖａｌｌａｔ，  Ｐ．，  Ｂｒｕｎｎｅ，  Ｒ．Ｍ．，  Ｔｅｓｔａ，  Ｂ．，  Ｇｕｎｓｔｅｒｅｎ，  Ｗ．Ｆ．ｖ．，  １９９３．  Ｓｏｌｖｅｎｔ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｈｙｄｒｏｇｅｎ−ｂｏｎｄｉｎｇ  ｃａｐａｃｉｔｙ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ：  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｒｏｍ  ｐａｒｔｉｔｉｏｎ  ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｙｎａｍｉｃｓ  ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ３６，  ３７５３−３７６４；  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｈｒｅｉｎｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｄ．，  ２００６．  Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｑｕｅｏｕｓ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｂｙ  ｈｅａｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｅｑｕｉｌｉｂｒａｔｉｏｎ：  Ａ  ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  ｎｏｔｅ．  Ａａｐｓ  Ｐｈａｒｍｓｃｉｔｅｃｈ  ７，  ａｒｔｉｃｌｅ  ｎｕｍｂｅｒ  ４）。
【０００９】
シクロスポリンＡは、種々の生物学的活性（免疫抑制特性、抗炎症特性および抗真菌特性が挙げられる）を有する（他のシクロスポリンは類似の特性を有する）。眼科学において、シクロスポリンＡは主に、種々の炎症性の眼の表面の障害（ドライアイが挙げられる）を有する患者にとって有用であることが立証されてきたが、眼内部の炎症性疾患および自己免疫疾患（例えば、ぶどう膜炎）を処置するためには全身的にも使用されてきた。２００３年に、０．０５％（ｗ／ｖ）  シクロスポリンＡの油ベースの点眼剤（レスタシス（登録商標）；  Ａｌｃｏｎ，  Ｔｅｘａｓ）が、ドライアイ症候群の局所的処置のために市販されるようになった（Ｕｔｉｎｅ，  Ｃ．Ａ．，  Ｓｔｅｒｎ，  Ｍ．，  Ａｋｐｅｋ，  Ｅ．Ｋ．，  ２０１０．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ：  Ｔｏｐｉｃａｌ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ．  Ｏｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ＆  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  １８，  ３５２−３６１）。しかし、シクロスポリンＡを局所送達するために油および界面活性剤を使用しているので、低い薬物バイオアベイラビリティーをもたらし、ぼんやりした視野、灼熱感、結膜の痒みおよび刺激を引き起こし得る。これらの副作用は、水性の点眼剤の形態にあるシクロスポリンＡを送達することによって回避され得る。
【００１０】
シクロスポリンＡの水溶解度は、シクロデキストリン複合体化の形成を通じて増大され得、シクロスポリンＡと眼表面との接触時間は、マイクロ粒子およびナノ粒子の形成を通じて増大され得る。α−シクロデキストリン、メチル化α−シクロデキストリンおよびメチル化β−シクロデキストリンは、シクロスポリンＡの水溶解度を改善することは報告されている（Ｍｉｙａｋｅ，  Ｋ．，  Ａｒｉｍａ，  Ｈ．，  Ｉｒｉｅ，  Ｔ．，  Ｈｉｒａｙａｍａ，  Ｆ．，  Ｕｅｋａｍａ，  Ｋ．，  １９９９．  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ  ｂｙ  ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｄｉｍｅｔｈｙｌ−ｂｅｔａ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｉｎ  ｂｉｌｅ  ｄｕｃｔ−ｃａｎｎｕｌａｔｅｄ  ａｎｄ  −ｎｏｎｃａｎｎｕｌａｔｅｄ  ｒａｔｓ．  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ＆  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ２２，  ６６−７２）。
【００１１】
シクロデキストリンは、α−１，４−グリコシド結合を介して結合された６個（α−シクロデキストリン）、７個（β−シクロデキストリン）および８個（γ−シクロデキストリン）のグルコピラノースモノマーを含む環状オリゴサッカリドである。α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリンは、デンプンの微生物分解によって形成される天然の生成物である。ドーナッツ形のシクロデキストリン分子の外側表面は、親水性であり、多くのヒドロキシル基を有するが、それらの中心腔は、いくぶん親油性である（Ｋｕｒｋｏｖ，  Ｓ．Ｖ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  ２０１３．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ４５３，  １６７−１８０；  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｂｒｅｗｓｔｅｒ，  Ｍ．Ｅ．，  １９９６．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ．  １．  Ｄｒｕｇ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ８５，  １０１７−１０２５）。その３種の天然シクロデキストリンに加えて、多くの水溶性シクロデキストリン誘導体が合成されており、薬物キャリアとして試験されている（シクロデキストリンポリマーが挙げられる）（Ｓｔｅｌｌａ，  Ｖ．Ｊ．，  Ｈｅ，  Ｑ．，  ２００８．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ．  Ｔｏｘ．  Ｐａｔｈｏｌ．  ３６，  ３０−４２）。
【００１２】
水性溶液において、シクロデキストリンは、中心腔の中に、薬物分子を、またはより頻繁にはその分子のいくつかの親油性部分を取り込むことによって、多くの薬物との包接複合体を形成し得る。この特性は薬物製剤化および薬物送達目的で利用されてきた。薬物／シクロデキストリン包接複合体の形成、薬物の物理化学的特性に対するそれらの効果、薬物が生体膜を透過する能力および薬学的生成物中でのシクロデキストリンの使用は、総説されている（Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｂｒｅｗｓｔｅｒ，  Ｍ．Ｅ．，  ２０１０．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ：  ｂａｓｉｃ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｄｕｃｔ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ６２，  １６０７−１６２１；  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｂｒｅｗｓｔｅｒ，  Ｍ．Ｅ．，  ２０１１．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ：  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｎ  ｄｒｕｇ  ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅｓ”  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ６３，  １１１９−１１３５；  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｊａｕｒｖｉｎｅｎ，  Ｔ．，  １９９９．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ  ｉｎ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ３６，  ５９−７９）。
シクロデキストリンは、水性溶液中のタンパク質およびペプチドの化学的および物理的安定性の両方を増大させることが公知である。さらに、シクロデキストリンは、可溶性の不十分なタンパク質およびペプチド薬物の水溶解度を増大させることが公知である（Ｊ．  Ｈｏｒｓｋｙ’  ａｎｄ  Ｊ．  Ｐｉｔｈａ，  Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ：  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ  ｗｉｔｈ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｒｏｍａｔｉｃ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｂｙ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ．  Ｊ．  Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  Ｐｈｅｎｏｍ．  Ｍｏｌ．  Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．  Ｃｈｅｍ．，  １８，  ２９１−３００，  １９９４）。シクロデキストリンおよびシクロデキストリン複合体は、自己会合して凝集物を形成し、そしてこの薬物／シクロデキストリン複合体凝集物は、薬物キャリアとして製剤化されている（Ｂｏｎｉｎｉ，  Ｍ．，  Ｒｏｓｓｉ，  Ｓ．，  Ｋａｒｌｓｓｏｎ，  Ｇ．，  Ａｌｍｇｒｅｎ，  Ｍ．，  Ｌｏ  Ｎｏｓｔｒｏ，  Ｐ．，  Ｂａｇｌｉｏｎｉ，  Ｐ．，  ２００６．  Ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｙ  ｏｆ  ｂｅｔａ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｉｎ  ｗａｔｅｒ．  Ｐａｒｔ  １：  Ｃｒｙｏ−ＴＥＭ  ａｎｄ  ｄｙｎａｍｉｃ  ａｎｄ  ｓｔａｔｉｃ  ｌｉｇｈｔ  ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ．  Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ２２，  １４７８−１４８４；  Ｈｅ，  Ｙ．，  Ｆｕ，  Ｐ．，  Ｓｈｅｎ，  Ｘ．，  Ｇａｏ，  Ｈ．，  ２００８．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ−ｂａｓｅｄ  ａｇｇｒｅｇａｔｅｓ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．  Ｍｉｃｒｏｎ  ３９，  ４９５−５１６；  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  ２０１４．  Ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｅｄ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ｊ  Ｉｎｃｌ  Ｐｈｅｎｏｍ  Ｍａｃｒｏ  ８０，  １−７；  Ｍｅｓｓｎｅｒ，  Ｍ．，  Ｋｕｒｋｏｖ，  Ｓ．Ｖ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  ２０１０．  Ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｅｄ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ａｇｇｒｅｇａｔｅｓ  ａｎｄ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ３８７，  １９９−２０８）。以前に、薬物／シクロデキストリン凝集物は、眼への局所的薬物送達を増強し得ることが示されている（Ｔｈｏｒｓｔｅｉｎｎ  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ  ａｎｄ  Ｅｉｎａｒ  Ｓｔｅｆａ’ｎｓｓｏｎ，  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ，米国特許第７，８９３，０４０号（２０１１年２月２２日）；  Ｔｈｏｒｓｔｅｉｎｎ  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ  ａｎｄ  Ｅｉｎａｒ  Ｓｔｅｆａ’ｎｓｓｏｎ，  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ，米国特許第８，６３３，１７２号（２０１４年１月２１日）；  Ｔｈｏｒｓｔｅｉｎｎ  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ  ａｎｄ  Ｅｉｎａｒ  Ｓｔｅｆａ’ｎｓｓｏｎ，  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  ｏｐ���ｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  米国特許第８，９９９，９５３号（２０１５年４月７日））。全ての薬物が、特に全てのペプチドおよびタンパク質が、局所投与後に眼の表面に保持されるために十分なサイズの薬物／シクロデキストリン凝集物を形成し得るわけではない。
今や驚くべきことに、α−シクロデキストリンがシクロスポリンの優れた可溶化因子であると同時に、水性のシクロスポリン／α−シクロデキストリン溶液にγ−シクロデキストリンを添加すると、シクロスポリン／シクロデキストリン複合体を含むナノ粒子およびマイクロ粒子の形成が促進されることが発見された。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】米国特許第７，８９３，０４０号明細書
【特許文献２】米国特許第８，６３３，１７２号明細書
【特許文献３】米国特許第８，９９９，９５３号明細書
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Ｌｅ  Ｂｏｕｒｌａｉｓ，  Ｃ．，  Ａｃａｒ，  Ｌ．，  Ｚｉａ，  Ｈ．，  Ｓａｄｏ，  Ｐ．Ａ．，  Ｎｅｅｄｈａｍ，  Ｔ．，  Ｌｅｖｅｒｇｅ，  Ｒ．，  １９９８．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ−Ｒｅｃｅｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｓ．  Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １７，  ３３−５８
【非特許文献２】Ｇａｎ，  Ｌ．，  Ｗａｎｇ，  Ｊ．，  Ｊｉａｎｇ，  Ｍ．，  Ｂａｒｔｌｅｔｔ，  Ｈ．，  Ｏｕｙａｎｇ，  Ｄ．，  Ｅｐｅｒｊｅｓｉ，  Ｆ．，  Ｌｉｕ，  Ｊ．，  Ｇａｎ，  Ｙ．，  ２０１３．  Ｒｅｃｅｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｏｐｉｃａｌ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｗｉｔｈ  ｌｉｐｉｄ−ｂａｓｅｄ  ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｔｏｄａｙ  １８，  ２９０−２９７
【非特許文献３】Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｓｉｇｕｒｄｓｓｏｎ，  Ｈ．Ｈ．，  Ｋｏｎｒａｄｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｆ．，  Ｇｉｓｌａｄｏｔｔｉｒ，  Ｓ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２００８．  Ｔｏｐｉｃａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ  ｓｅｇｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｙｅ：  ａｎａｔｏｍｉｃａｌ  ａｎｄ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓ．  Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ６３，  １７１−１７９
【非特許文献４】Ｕｒｔｔｉ，  Ａ．，  ２００６．  Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ａｎｄ  ｏｂｓｔａｃｌｅｓ  ｏｆ  ｏｃｕｌａｒ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ．  Ｒｅｖ．  ５８，  １１３１−１１３５
【非特許文献５】Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｊａｕｒｖｉｎｅｎ，  Ｔ．，  １９９９．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ  ｉｎ  ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ３６，  ５９−７９
【非特許文献６】Ｓｕｇｒｕｅ，  Ｍ．Ｆ．，  １９８９．  Ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ａｎｔｉｇｌａｕｃｏｍａ  ｄｒｕｇｓ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ４３，  ９１−１３８
【非特許文献７】Ｊｏｈａｎｎｅｓｓｏｎ，  Ｇ．，  Ｍｏｙａ−Ｏｒｔｅｇａ，  Ｍ．Ｄ．，  Ａｓｇｒｉｍｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｇ．Ｍ．，  Ｌｕｎｄ，  Ｓ．Ｈ．，  Ｔｈｏｒｓｔｅｉｎｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｍ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２０１４．  Ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  γ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ  ｅｙｅ  ｄｒｏｐｓ  ｉｎ  ｔｅａｒ  ｆｌｕｉｄ．  Ａｃｔａ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃａ  ９２，  ５５０−５５６；  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２０１２．  Ｔｏｐｉｃａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｅｙｅ：  ｄｏｒｚｏｌａｍｉｄｅ．  Ａｃｔａ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃａ  ９０，  ６０３−６０８
【非特許文献８】Ｌａｗｅｎ，  Ａ．，  ２０１５．  Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｓ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｎａｔｕｒａｌ  ｐｅｐｔｉｄｙｌ  ｐｒｏｌｙｌ  ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ  ｉｓｏｍｅｒａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．  Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ  １８５０，  ２１１１−２１２０；  Ｐｅｅｌ，  Ｍ．，  Ｓｃｔｉｂｅｒ，  Ａ．，  ２０１５．  Ｓｅｍｉ−ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｓ．  Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ  １８５０，  ２１２１−２１４４
【非特許文献９】Ｌａｕｐａｃｉｓ，  Ａ．，  Ｋｅｏｗｎ，  Ｐ．Ａ．，  Ｕｌａｎ，  Ｒ．Ａ．，  ＭｃＫｅｎｚｉｅ，  Ｎ．，  Ｓｔｉｌｌｅｒ，  Ｃ．Ｒ．，  １９８２．  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ：  ａ  ｐｏｗｅｒｆｕｌ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓａｎｔ．  Ｃａｎａｄｉａｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １２６，  １０４１−１０４６
【非特許文献１０】Ｅｌ  Ｔａｙａｒ，  Ｎ．，  Ｍａｒｋ，  Ａ．Ｅ．，  Ｖａｌｌａｔ，  Ｐ．，  Ｂｒｕｎｎｅ，  Ｒ．Ｍ．，  Ｔｅｓｔａ，  Ｂ．，  Ｇｕｎｓｔｅｒｅｎ，  Ｗ．Ｆ．ｖ．，  １９９３．  Ｓｏｌｖｅｎｔ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｈｙｄｒｏｇｅｎ−ｂｏｎｄｉｎｇ  ｃａｐａｃｉｔｙ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ：  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｒｏｍ  ｐａｒｔｉｔｉｏｎ  ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｙｎａｍｉｃｓ  ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ３６，  ３７５３−３７６４
【非特許文献１１】Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｈｒｅｉｎｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｄ．，  ２００６．  Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｑｕｅｏｕｓ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｂｙ  ｈｅａｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｅｑｕｉｌｉｂｒａｔｉｏｎ：  Ａ  ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  ｎｏｔｅ．  Ａａｐｓ  Ｐｈａｒｍｓｃｉｔｅｃｈ  ７，  ａｒｔｉｃｌｅ  ｎｕｍｂｅｒ  ４
【非特許文献１２】Ｕｔｉｎｅ，  Ｃ．Ａ．，  Ｓｔｅｒｎ，  Ｍ．，  Ａｋｐｅｋ，  Ｅ．Ｋ．，  ２０１０．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ：  Ｔｏｐｉｃａｌ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ．  Ｏｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ＆  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  １８，  ３５２−３６１
【非特許文献１３】Ｍｉｙａｋｅ，  Ｋ．，  Ａｒｉｍａ，  Ｈ．，  Ｉｒｉｅ，  Ｔ．，  Ｈｉｒａｙａｍａ，  Ｆ．，  Ｕｅｋａｍａ，  Ｋ．，  １９９９．  Ｅｎｈａｎｃｅｄ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ  ｂｙ  ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｄｉｍｅｔｈｙｌ−ｂｅｔａ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｉｎ  ｂｉｌｅ  ｄｕｃｔ−ｃａｎｎｕｌａｔｅｄ  ａｎｄ  −ｎｏｎｃａｎｎｕｌａｔｅｄ  ｒａｔｓ．  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ＆  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ２２，  ６６−７２
【非特許文献１４】Ｋｕｒｋｏｖ，  Ｓ．Ｖ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  ２０１３．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ４５３，  １６７−１８０
【非特許文献１５】Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｂｒｅｗｓｔｅｒ，  Ｍ．Ｅ．，  １９９６．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ．  １．  Ｄｒｕｇ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ８５，  １０１７−１０２５
【非特許文献１６】Ｓｔｅｌｌａ，  Ｖ．Ｊ．，  Ｈｅ，  Ｑ．，  ２００８．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ．  Ｔｏｘ．  Ｐａｔｈｏｌ．  ３６，  ３０−４２
【非特許文献１７】Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｂｒｅｗｓｔｅｒ，  Ｍ．Ｅ．，  ２０１０．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ：  ｂａｓｉｃ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｄｕｃｔ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ６２，  １６０７−１６２１
【非特許文献１８】Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｂｒｅｗｓｔｅｒ，  Ｍ．Ｅ．，  ２０１１．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ：  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｎ  ｄｒｕｇ  ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅｓ”  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ６３，  １１１９−１１３５
【非特許文献１９】Ｊ．  Ｈｏｒｓｋｙ’  ａｎｄ  Ｊ．  Ｐｉｔｈａ，  Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ：  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ  ｗｉｔｈ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｒｏｍａｔｉｃ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｂｙ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ．  Ｊ．  Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ  Ｐｈｅｎｏｍ．  Ｍｏｌ．  Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．  Ｃｈｅｍ．，  １８，  ２９１−３００，  １９９４
【非特許文献２０】Ｂｏｎｉｎｉ，  Ｍ．，  Ｒｏｓｓｉ，  Ｓ．，  Ｋａｒｌｓｓｏｎ，  Ｇ．，  Ａｌｍｇｒｅｎ，  Ｍ．，  Ｌｏ  Ｎｏｓｔｒｏ，  Ｐ．，  Ｂａｇｌｉｏｎｉ，  Ｐ．，  ２００６．  Ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｙ  ｏｆ  ｂｅｔａ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｉｎ  ｗａｔｅｒ．  Ｐａｒｔ  １：  Ｃｒｙｏ−ＴＥＭ  ａｎｄ  ｄｙｎａｍｉｃ  ａｎｄ  ｓｔａｔｉｃ  ｌｉｇｈｔ  ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ．  Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ２２，  １４７８−１４８４
【非特許文献２１】Ｈｅ，  Ｙ．，  Ｆｕ，  Ｐ．，  Ｓｈｅｎ，  Ｘ．，  Ｇａｏ，  Ｈ．，  ２００８．  Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ−ｂａｓｅｄ  ａｇｇｒｅｇａｔｅｓ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．  Ｍｉｃｒｏｎ  ３９，  ４９５−５１６
【非特許文献２２】Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  ２０１４．  Ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｅｄ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ．  Ｊ  Ｉｎｃｌ  Ｐｈｅｎｏｍ  Ｍａｃｒｏ  ８０，  １−７
【非特許文献２３】Ｍｅｓｓｎｅｒ，  Ｍ．，  Ｋｕｒｋｏｖ，  Ｓ．Ｖ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  ２０１０．  Ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｅｄ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ａｇｇｒｅｇａｔｅｓ  ａｎｄ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ３８７，  １９９−２０８
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
（要旨）
第１の局面において、水性眼用組成物が本明細書で提供され、上記組成物は、
（ａ）眼科学的に有効であるシクロスポリン；
（ｂ）上記シクロスポリンと水溶性複合体を形成するために有効な量のα−シクロデキストリン；
（ｃ）シクロスポリン／α−シクロデキストリン複合体凝集物の形成を生じるために有効な量のγ−シクロデキストリン；
（ｄ）約１００ｎｍ〜約１００μｍｍの直径を有し、上記α−シクロデキストリンおよび上記γ−シクロデキストリンの両方を含むシクロスポリン／シクロデキストリン粒子；
（ｅ）水；ならびに
（ｆ）必要に応じて、ポリマー性安定化剤；
を含み、上記組成物中のシクロスポリンの総濃度は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）であり、上記組成物中のα−シクロデキストリンの総濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、上記組成物中の総γ−シクロデキストリン濃度は、１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、そして約３００ｎｍより大きな直径を有する粒子におけるシクロスポリンの総画分は、少なくとも約１０％である。
【００１６】
第２の局面において、涙液形成の必要性のある被験体において涙液形成を誘発するかまたは誘導するかまたは増強するための方法が本明細書で提供され、上記方法は、涙液形成を誘発するかまたは誘導するために有効な、前段に定義されるとおりの組成物の量を上記被験体の片眼または両眼に局所投与する工程を包含する。
【００１７】
さらに第３の局面において、水性眼用組成物が本明細書で提供され、上記組成物は、
（ａ）眼科学的に有効である量のシクロスポリンＡ；
（ｂ）シクロスポリンＡと水溶性複合体を形成するために有効な量のα−シクロデキストリン；
（ｃ）シクロスポリンＡ／α−シクロデキストリン複合体凝集物の形成を生じるために有効な量のγ−シクロデキストリン；
（ｄ）約１００ｎｍ〜約１００μｍｍの直径を有し、上記γ−シクロデキストリンおよび上記γ−シクロデキストリンの両方を含むシクロスポリン／シクロデキストリン粒子；
（ｅ）水；ならびに
（ｆ）必要に応じて、ポリマー性安定化剤
を含み、上記組成物中のシクロスポリンＡの総濃度は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）であり、上記組成物中のα−シクロデキストリンの総濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、上記組成物中の総γ−シクロデキストリン濃度は、約１（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、そして約３００ｎｍより大きな直径を有する粒子におけるシクロスポリンＡの総画分は、少なくとも約１０％である。
【００１８】
さらに第４の局面において、シクロスポリン（特に、シクロスポリンＡ）の凝集体を形成するための方法が本明細書で提供され、上記方法は、治療上有効なシクロスポリン（特に、シクロスポリンＡ）を水中で、上記シクロスポリンを本質的に完全に溶解するために十分なα−シクロデキストリンの量において溶解する工程、および十分なγ−シクロデキストリンを添加して、シクロスポリン（特に、シクロスポリンＡ）／α−シクロデキストリン複合体凝集物を、必要に応じて、ポリマー性安定化剤とともに形成して、約１００ｎｍ〜約１００μｍの直径を有し、上記α−シクロデキストリンおよび上記γ−シクロデキストリンの両方を含むシクロスポリン（特に、シクロスポリンＡ）／シクロデキストリン粒子を生成する工程を包含する。用語「本質的に完全に」とは、本明細書においておよび本願全体を通じて、少なくとも７５％〜約１００％が溶解されることを意味する。例示的実施形態において、これは、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％を意味し得、そして好ましい実施形態において、少なくとも約９０％である。
【００１９】
さらに第５の局面において、水性眼用組成物が提供され、上記組成物は、
（ａ）眼科学的に治療上有効である量のシクロスポリン（好ましくは、シクロスポリンＡ）；
（ｂ）上記シクロスポリンと水溶性複合体を形成するために有効な量のα−シクロデキストリン；
（ｃ）シクロスポリン／α−シクロデキストリン複合体凝集物の形成を生じるために有効な量のγ−シクロデキストリン；
（ｄ）約１００ｎｍ〜約１００μｍの直径を有し、上記α−シクロデキストリンおよび上記γ−シクロデキストリンの両方を含むシクロスポリン／シクロデキストリン粒子；
（ｅ）水；ならびに
（ｆ）必要に応じて、ポリマー性安定化剤；
を含み、涙液形成の必要性のある被験体の片眼または両眼に上記組成物の有効量を局所投与することによって、涙液形成を誘発するかまたは増強するにあたって使用するために、上記組成物中のシクロスポリンの総濃度は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）であり、上記組成物中のα−シクロデキストリンの総濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、上記組成物中の総γ−シクロデキストリン濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、約３００ｎｍより大きな直径を有する粒子におけるシクロスポリンの総画分は、少なくとも約１０％である。
【００２０】
なおさらに、第６の局面において、水性眼用組成物の製造におけるシクロスポリンの使用が本明細書で提供され、上記組成物は、
（ａ）眼科学的に治療上有効である量のシクロスポリン（好ましくは、シクロスポリンＡ）；
（ｂ）上記シクロスポリンと水溶性複合体を形成するために有効な量のα−シクロデキストリン；
（ｃ）シクロスポリン／α−シクロデキストリン複合体凝集物の形成を生じるために有効な量のγ−シクロデキストリン；
（ｄ）約１００ｎｍ〜約１００μｍの直径を有し、上記α−シクロデキストリンおよび上記γ−シクロデキストリンの両方を含むシクロスポリン／シクロデキストリン粒子；
（ｅ）水；ならびに
（ｆ）必要に応じて、ポリマー性安定化剤；
を含み、涙液形成の必要性のある被験体の片眼または両眼に上記組成物の有効な量を局所投与することによって涙液形成を誘発するために、上記組成物中のシクロスポリンの総濃度は、約０．０１％（ｗ／ｖ）〜約１．０％（ｗ／ｖ）であり、上記組成物中のα−シクロデキストリンの総濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、上記組成物中の総γ−シクロデキストリン濃度は、約１％（ｗ／ｖ）〜約２５％（ｗ／ｖ）であり、約３００ｎｍより大きな直径を有する粒子におけるシクロスポリンの総画分は、少なくとも約１０％である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
（詳細な説明）
本明細書で言及される特許、公開された出願および科学文献は、当業者の知識を明らかにし、各々が具体的にかつ個々に参考として援用されることを示されるのと同程度まで、それらの全体において参考として援用される。本明細書で引用される何らかの参考文献と本願の具体的教示との間に何らかの矛盾があれば、後者の具体的教示を選んで決められるものとする。同様に、ある文言または語句の当該分野で理解されている定義と、本願で具体的に教示されるとおりのその文言または語句の定義との間に何らかの矛盾があれば、後者の本願で具体的に教示されるとおりのその文言または語句の定義を選んで決められるものとする。
【００２２】
本明細書で使用される場合、移行句の中であろうと請求項の本体部分の中であろうと、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ（ｓ））」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」とは、開放系の意味を有すると解釈されるべきである。すなわち、この用語は、語句「少なくとも〜を有する（ｈａｖｉｎｇ  ａｔ  ｌｅａｓｔ）」または「少なくとも〜を含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  ａｔ  ｌｅａｓｔ）」と同義として解釈されるべきである。方法の状況において使用される場合、用語「含む、包含する（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、その方法が、少なくともその記載される工程を包含するが、さらなる工程を包含してもよいことを意味する。組成物の状況において使用される場合、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、その組成物が、少なくともその記載される特徴または成分を含むが、同様にさらなる特徴または成分を含んでいてもよいことを意味する。
【００２３】
用語「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」は、部分的に閉鎖された意味を有する。すなわち、それらは、方法または組成物の本質的特徴を実質的に変化させる工程または特徴または成分；例えば、本明細書で記載される化合物または組成物の所望の特性に顕著に干渉する工程または特徴または成分の包含を許容しない。すなわち、上記方法または組成物は、その特定された工程または材料、および上記方法または組成物の基本的かつ新規な特徴に本質的に影響を及ぼさないものに限定される。
【００２４】
用語「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｏｆ）」および「なる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ）」は、閉鎖系の用語法であり、その記載される工程または特徴または成分の包含のみを許容する。
【００２５】
本明細書で使用される場合、単数形「１つの、ある（ａ）」、「１つの、ある（ａｎ）」および「上記、この、その（ｔｈｅ）」とは、その内容が別段明確に規定しなければ、これらが指し示すその用語の複数形態も具体的に包含する。
【００２６】
用語「約」とは、およそ、〜の辺り、おおよそ、または〜頃を意味するために本明細書で使用される。用語「約」が数値範囲とともに使用される場合、それは、その示される数値より上およびその数値より下の境界を拡げることによってその範囲を修飾する。一般に、用語「約」または「およそ」は、２０％の分散によって述べられた値より上およびその値より下の数値を修飾するために本明細書で使用される。
【００２７】
本明細書で使用される場合、変数に関する数値範囲の記載は、その変数が、その範囲内の任意の値に等価であり得ることを意味することが意図される。従って、本質的に不連続である変数に関しては、その変数は、数値範囲の端点を含め、その範囲の任意の整数値に等価であり得る。同様に、本質的に連続である変数に関しては、その変数は、数値範囲の端点を含め、その範囲の任意の実際の値と等価であり得る。例として、０〜２の間の値を有すると記載される変数は、本質的に不連続である変数に関しては０、１または２であり得、そして本質的に連続である変数に関しては、０．０、０．１、０．０１、０．００１、または任意の他の実際の値であり得る。
【００２８】
明細書および請求項において、単数系は、状況が別段明確に規定しなければ、複数形を包含する。本明細書で使用される場合、別段具体的に示されなければ、文言「または」は、「および／または（ａｎｄ／ｏｒ）」の「包括的」な意味において使用されるのであって、「どちらか／または（ｅｉｔｈｅｒ／ｏｒ）」の排他的な意味で使用されるのではない。
【００２９】
本明細書で使用される技術用語および科学用語は、別段定義されなければ、本件説明が属する分野の当業者によって一般に理解される意味を有する。本明細書では、当業者に公知の種々の方法論および材料に言及がなされる。標準的な参考文献は、薬理学の一般原理を示すために機能し、以下が挙げられる：Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  １０ｔｈ  Ｅｄ．，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ  Ｃｏｍｐａｎｉｅｓ  Ｉｎｃ．，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  （２００１）。
【００３０】
本明細書で使用される場合、「処置する」とは、本明細書で記載されるとおりの組成物が投与されている個体における１もしくはこれより多くの症状を、その組成物を投与されていない個体の症状と比較して、低減するか、上記症状の発生を妨げるかもしくは阻害するか、または制御するか、阻害するか、緩和するか、そして／もしくは改善することを意味する。医師は、本明細書で記載される組成物および方法が、その後の治療を決定するために、訓練された医師（臨床医もしくは獣医師）による連続的な臨床評価に付随して使用されるべきあることを認識する。このような評価は、特定の処置用量を増大するのか、低下するのかもしくは継続するのか、および／または投与様式を変更するのかを評価する補助となり、情報を与える。
【００３１】
本明細書で記載される方法は、それらの利益を経験し得る任意の被験体／患者とともに使用することが意図される。従って、用語「被験体」ならびに「患者」、「個体」および「温血動物」および「哺乳動物」は、ヒトおよび非ヒト被験体（例えば、同じもしくは類似の眼の障害を経験し得る非ヒト動物、特に、イヌ、ウマおよびネコ）を含む。特に、これらの動物は、ヒトのように、涙液生成が少なすぎる状態に罹患し得、涙液形成を誘発または誘導する本発明の方法から利益を受け得る。
【００３２】
以下の定義および説明はまた、本願に直接関連する。
【００３３】
眼の状態は、眼、眼の部分もしくは領域のうちの一方、またはその周辺組織（例えば、涙腺）に罹患するかまたはこれらが関わる疾患、病気または他の状態である。大まかに言えば、眼は、眼球および眼球を構成する組織および流体、眼球周囲の筋肉（例えば、斜筋および直筋）、眼球および周辺組織（例えば、涙腺および眼瞼）内のまたはこれらに隣接する眼神経の一部を含む。
【００３４】
前眼部の状態は、前方（すなわち、眼の前側）の眼の領域もしくは部位（例えば、眼球周囲の筋肉、眼瞼、涙腺もしくは眼球組織、または水晶体嚢もしくは毛様筋の前壁から後壁に位置する流体）に罹患するかまたはこれらが関わる疾患、病気または状態である。
【００３５】
従って、前眼部の状態は、主に、以下のうちの１もしくはこれより多くに罹患するかまたはそれらが関わる：結膜、角膜、前眼房、虹彩、後眼房（網膜の後ろ側にあるが、水晶体嚢の後壁の前方にある）、水晶体、または水晶体嚢、ならびに前眼部の領域または部位に血管形成するまたは神経支配する血管および神経。前眼部の状態はまた、涙器、特に、涙液を分泌する涙腺、および眼の表面に涙液を運ぶそれらの排出管に拡がると本明細書では考えられる。
【００３６】
後眼部の状態は、後眼部の領域もしくは部位（例えば、脈絡膜または強膜（水晶体嚢の後壁を通る平面に対して後方の位置にある）、硝子体、硝子体眼房、網膜、視神経（すなわち、視神経乳頭）、ならびに後眼部の領域もしくは部位に血管形成するかまたは神経支配する血管および神経）に主に罹患するかまたはこれらが関わる疾患、病気または状態である。
【００３７】
従って、後眼部の状態としては、例えば、黄斑変性（例えば、非滲出型加齢黄斑変性および滲出型加齢黄斑変性）；脈絡膜血管新生；急性黄斑神経網膜症；黄斑浮腫（例えば、嚢胞様黄斑浮腫および糖尿病性黄斑浮腫）；ベーチェット病、網膜障害、糖尿病性網膜症（増殖性糖尿病性網膜症が挙げられる）；網膜動脈閉塞性疾患；中心網膜静脈閉塞症；ぶどう膜炎性網膜疾患（ｕｖｅｉｔｉｃ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｄｉｓｅａｓｅ）；網膜剥離；後眼部の部位もしくは位置に影響を及ぼす眼の外傷；眼のレーザー処置によって引き起こされるかもしくはこれによって影響を及ぼされる後眼部の状態；光線力学療法によって引き起こされるかもしくはこれによって影響を及ぼされる後眼部の状態；光凝固；放射線網膜症；網膜前膜障害；網膜静脈分枝閉塞症；前部虚血性視神経症；非網膜症糖尿病性網膜機能障害（ｎｏｎ−ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ）、網膜色素変性症および緑内障のような疾患、病気または状態が挙げられ得る。緑内障は、後眼部の状態と考えられ得る。なぜなら治療目標は、網膜細胞または視神経細胞の損傷または喪失に起因する視力の喪失を防止するかまたは視力の喪失の発生を低下させる（すなわち、神経保護）ことだからである。
【００３８】
前眼部の状態としては、例えば、無水晶体眼；偽水晶体眼；乱視；眼瞼痙攣；白内障；結膜疾患；結膜炎；角膜疾患；角膜潰瘍；ドライアイ症候群；眼瞼疾患；涙器疾患；涙小管閉塞症症；近視；老眼；瞳孔の障害；屈折障害および斜視のような疾患、病気または状態が挙げられ得る。緑内障はまた、前眼部の状態であると考えられ得る。なぜなら緑内障処置の臨床目標は、前眼房中の水性流体の圧力亢進を低下（すなわち、眼内圧を低下）することであり得るからである。
【００３９】
本件説明は、眼への局所的薬物送達のための眼用組成物および前眼部の状態または後眼部の状態のような眼の状態、または前眼部の状態および後眼部の状態の両方として特徴付けられ得る眼の状態の処置のための方法に関係し、これらに関する。
【００４０】
ドライアイ症候群（ＤＥＳ）（ドライアイ病（ＤＥＤ）、乾性角結膜炎（ＫＣＳ）、および乾性角膜炎としても公知）は、不快感および視覚障害を生じる低下した涙液生成によって引き起こされる一般的な眼の状態である。ドライアイ症候群は、眼の表面に対して潜在的な損傷を伴って、涙膜不安定性、涙膜の増大した重量オスモル濃度および眼の表面の炎症が関わる多くの要素からなる原因を有する。ドライアイの治療は、その重篤度に依存する。人工涙液は、眼の刺激およびかすみ目症状（ｂｌｕｒｒｅｄ  ｖｉｓｉｏｎ  ｓｙｍｐｔｏｍ）の一時的な改善を提供し得る。コルチコステロイドは、眼の表面の炎症を低下させるために使用され得る。しかし、ドライアイ症候群に対する最も有望な処置は、局所投与されるシクロスポリンＡであり、これは、涙液生成を増大させ、従って、炎症を軽減する。臨床試験において、市販の０．０５％  シクロスポリンＡ／油性ビヒクルは、プラセボにおける５％と比較して、６ヶ月後の患者のうちの１５％において有効であった。
【００４１】
シクロスポリンＡは、Ｔ細胞活性化を阻害し、結果として炎症性サイトカイン生成を阻害する（ＩＬ−Ｉの選択的阻害）ペプチドである。さらに、シクロスポリンＡは、ミトコンドリア膜透過性遷移孔の開口を遮断することによって、および結膜杯細胞の密度を増大させることによって、アポトーシスを阻害する（Ｋｕｎｅｒｔ，  Ｋ．Ｓ．，  Ｔｉｓｄａｌｅ，  Ａ．Ｓ．，  Ｇｉｐｓｏｎ，  Ｉ．Ｋ．，  ２００２．  Ｇｏｂｌｅｔ  ｃｅｌｌ  ｎｕｍｂｅｒｓ  ａｎｄ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖａ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｄｒｙ  ｅｙｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ．  Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  １２０，  ３３０−３３７）。ドライアイと関連する状態はまた、シクロスポリンＡの局所投与から利益を受け得る。例えば、角膜の屈折矯正手術は、ドライアイを有する患者においてほぼ禁忌を示す。手術前後のシクロスポリンＡ処置は、これらの患者が、ドライアイのリスクなしに彼らの屈折異常の手術的矯正を得る助けとなり得る。市場に出ている点眼剤は、０．０５％（ｗ／ｖ）  シクロスポリンＡ眼用エマルジョン（レスタシス（登録商標）；  Ａｌｃｏｎ，  Ｔｅｘａｓ）を含む。上記点眼剤は、１日に２回投与される。しかし、シクロスポリンＡを局所的に送達するために油および界面活性剤を使用すると、低い薬物バイオアベイラビリティーが提供され、ぼんやりした視野、灼熱感、結膜の痒みおよび刺激を引き起こし得る。これら副作用は、シクロスポリンＡを水性点眼剤の形態で送達することによって回避され得る。さらに、シクロスポリンＡ点眼剤の治療効力は、点眼剤中のシクロスポリンＡ濃度が０．０５％から０．５％（ｗ／ｖ）へと１０倍増大され得る場合に、増大する。シクロスポリンＡはまた、シクロスポリン（ｃｉｃｌｏｓｐｏｒｉｎ）またはシクロスポリン（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ）としても公知である。
【００４２】
（眼の送達のためのマイクロ粒子）  
この説明は、増強された局所的ペプチドおよびタンパク質薬物送達（特に、シクロスポリン（特に、シクロスポリンＡ））、増強された持続時間にわたって薬物で飽和した水性の涙液流体を維持することによって得られる眼およびその周辺組織への送達に関する。涙液流体が薬物で飽和される場合、その薬物分子は、流体から、角膜、結膜／強膜および涙液流体と接触した状態にある他の組織へと分配する最大傾向を有する。これらの組織は、親油性膜によって覆われる。これらの膜を通過する受動的薬物拡散は、膜内の化学ポテンシャルの勾配によって駆動され、従って、膜表面での高い薬物濃度は、膜を通過するおよびその周辺組織への薬物送達を増強する。通常の条件下では、水性の点眼剤溶液として眼に投与される薬物は、急速に希釈され、涙液流体の一定の流れによって眼の表面から洗い流される。眼の表面上での薬物希釈は、表面から眼およびその周辺組織への薬物の流れを低下させる。多くの眼用薬物は、水性涙液流体中で十分な溶解度を示さない、溶解度が不十分な化合物である。このような薬物は、水性の点眼剤懸濁物としてときおり投与され、これは、眼の表面で幾分持続した薬物濃度を生じる。しかし、その薬物の低い水溶解度に起因して、それらの眼の表面からの吸収は、溶解速度で制限される。すなわち、眼への薬物吸収は、固体薬物の遅い溶解によって妨げられる。このような親油性薬物の、より高い水溶性の薬物／シクロデキストリン複合体としての投与は、涙液流体中の固体薬物の溶解速度を増大させ、溶解速度で薬物吸収が制限されるのを防止する。眼用点眼剤懸濁物中の粒子は、周辺組織への粒子の吸着に一部起因して、溶解した薬物分子よりも眼の表面からよりゆっくりと洗い流される。増強された吸収は、受動的薬物拡散のためにより都合の良い物理化学的条件の導入を通じて得られる。固体薬物／シクロデキストリン複合体を含むその水性薬物／シクロデキストリン点眼剤懸濁物の投与は、長期間にわたって水性涙液流体中の溶解した薬物の一定の高濃度を担保する。
【００４３】
本明細書中上記の背景で特に言及されるように、種々の前角膜因子が、適用される薬物の角膜接触時間を短縮することによって、眼の吸収を制限する。最も重要な因子は、滴下溶液の排水、非角膜吸収および誘導される流涙である。これらの因子、および膜バリア自体は、局所投与される眼用薬物の浸透を制限する。結果として、適用される用量の数パーセンテージが、眼内組織へと送達されるに過ぎない。その投与される用量のうちの大部分（５０〜１００％）は、全身血液循環へと吸収され、このことから、種々の副作用が引き起こされ得る。眼の前角膜領域に適用される点眼剤（２５〜５０μｌ）を滴下した後に、薬物溶液のより大きな部分が、眼の表面から急速に排水され、その溶液の容積は、約７μｌという通常の固有涙液容積へと戻る。その後、眼前部（ｐｒｅ−ｏｃｕｌａｒ）溶液の容積は一定のままであるが、薬物濃度は、涙液ターンオーバーならびに角膜吸収および非角膜吸収による希釈に起因して低下する。前角膜領域からの点眼剤の排水の一次速度定数の値は、代表的には、涙液ターンオーバー速度約１．２μｌ／分を有するヒトにおいて約１．５分−１である。そして結果として、局所投与される薬物の前角膜半減期は、眼の表面からの最初の点眼剤排水後わずか１〜３分間である。
【００４４】
（薬物／シクロデキストリン粒子の形成）
シクロデキストリンおよび薬物／シクロデキストリン複合体は、水性溶液中で自己アセンブリして、非包接複合体化およびミセル様可溶化を通じて溶解度が不十分な薬物をも溶解し得る、ナノサイズの凝集物およびミセル様構造を形成し得る。（Ｍｅｓｓｎｅｒ，  Ｍ．，  Ｋｕｒｋｏｖ，  Ｓ．Ｖ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  ２０１０．  Ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｅｄ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ａｇｇｒｅｇａｔｅｓ  ａｎｄ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ３８７，  １９９−２０８）。シクロデキストリンは、水性溶液中でシクロスポリンＡを可溶化することが公知であり、水性のシクロスポリンＡ点眼剤溶液は、記載されている（Ｋａｎａｉ，  Ａ．，  Ａｌｂａ，  Ｒ．Ｍ．，  Ｔａｋａｎｏ，  Ｔ．，  Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，  Ｃ．，  Ｎａｋａｊｉｍａ，  Ａ．，  Ｋｕｒｉｈａｒａ，  Ｋ．，  Ｙｏｋｏｙａｍａ，  Ｔ．，  Ｆｕｋａｍｉ，  Ｍ．，  １９８９．  Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｃｏｒｎｅａ  ｏｆ  ａｌｐｈａ  ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｖｅｈｉｃｌｅ  ｆｏｒ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  ｅｙｅ  ｄｒｏｐｓ．  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．  Ｐｒｏｃ．  ２１，  ３１５０−３１５２）。以前に、本発明者らは、シクロデキストリンナノ粒子中に、デキサメタゾン（Ｊｏｈａｎｎｅｓｓｏｎ，  Ｇ．，  Ｍｏｙａ−Ｏｒｔｅｇａ，  Ｍ．Ｄ．，  Ａｓｇｒｉｍｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｇ．Ｍ．，  Ｌｕｎｄ，  Ｓ．Ｈ．，  Ｔｈｏｒｓｔｅｉｎｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｍ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２０１４．  Ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  γ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ  ｅｙｅ  ｄｒｏｐｓ  ｉｎ  ｔｅａｒ  ｆｌｕｉｄ．  Ａｃｔａ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃａ  ９２，  ５５０−５５６；  Ｔａｎｉｔｏ，  Ｍ．，  Ｈａｒａ，  Ｋ．，  Ｔａｋａｉ，  Ｙ．，  Ｍａｔｓｕｏｋａ，  Ｙ．，  Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，  Ｎ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  Ｏｈｉｒａ，  Ａ．，  ２０１１．  Ｔｏｐｉｃａｌ  ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｅｙｅ  ｄｒｏｐｓ  ｆｏｒ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｍａｃｕｌａｒ  ｅｄｅｍａ．  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｈｔｈ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ  ５２，  ７９４４−７９４８）およびトルゾラミド（Ｊｏｈａｎｎｅｓｓｏｎ，  Ｇ．，  Ｍｏｙａ−Ｏｒｔｅｇａ，  Ｍ．Ｄ．，  Ａｓｇｒｉｍｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｇ．Ｍ．，  Ｌｕｎｄ，  Ｓ．Ｈ．，  Ｔｈｏｒｓｔｅｉｎｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｍ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２０１４．  Ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  γ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ  ｅｙｅ  ｄｒｏｐｓ  ｉｎ  ｔｅａｒ  ｆｌｕｉｄ．  Ａｃｔａ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃａ  ９２，  ５５０−５５６；  Ｇｕｄｍｕｎｄｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｂ．Ｓ．，  Ｐｅｔｕｒｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｄ．，  Ａｓｇｒｉｍｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｇ．Ｍ．，  Ｇｏｔｔｆｒｅｄｓｄｏｔｔｉｒ，  Ｍ．Ｓ．，  Ｈａｒｄａｒｓｏｎ，  Ｓ．Ｈ．，  Ｊｏｈａｎｎｅ���ｓｏｎ，  Ｇ．，  Ｋｕｒｋｏｖ，  Ｓ．Ｖ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  ２０１４．  γ−Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｅｙｅ  ｄｒｏｐｓ  ｗｉｔｈ  ｄｏｒｚｏｌａｍｉｄｅ：  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｎ  ｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｉｎ  ｍａｎ．  Ｊ．  Ｏｃｕｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｔｈｅｒ．  ３０，  ３５−４１）およびイルベサルタン（Ｍｕａｎｋａｅｗ，  Ｃ．，  Ｊａｎｓｏｏｋ，  Ｐ．，  Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ，  Ｅ．，  Ｌｏｆｔｓｓｏｎ，  Ｔ．，  ２０１４．  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  γ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｏｎ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｒｂｅｓａｒｔａｎ：  ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｐＨ  ａｎｄ  ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ．  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  ４７４，  ８０−９０）を含むシクロデキストリンベースの点眼剤を開発および試験した。上記研究は、そのナノ粒子が眼の表面との薬物接触時間およびその薬物の眼のバイオアベイラビリティーを増大させることを示す。
【００４５】
本願は、α−シクロデキストリンがシクロスポリンＡの水溶解度を増大させるために使用され、かつγ−シクロデキストリンが薬物／シクロデキストリンナノ粒子およびマイクロ粒子を形成するために使用される水ベースのシクロスポリン点眼剤の製剤化に関する。α−シクロデキストリンは、水溶性シクロスポリンＡ／α−シクロデキストリン複合体の形成を通じて、シクロスポリンＡを可溶化し得るが、その形成される複合体は、ナノ粒子およびマイクロ粒子を形成する傾向をほとんど有しない。γ−シクロデキストリンは、シクロスポリンＡとの複合体を形成する傾向が遙かに小さい。しかし、γ−シクロデキストリンを水性シクロスポリンＡ／α−シクロデキストリン複合体溶液に添加することで、シクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体凝集物の形成が促進されるということが、予測外にも観察された。
【００４６】
シクロスポリンＡ点眼剤は、本願の主な焦点であるが、他の脂溶性および水溶性が不十分なペプチド薬物は、その記載されるシクロデキストリンベースの薬物送達系に含まれ得る（例えば、他のシクロスポリン、ソマトスタチンおよびソマトスタチンアナログ、ならびに脂溶性ペプチドプロドラッグ）。
【００４７】
本明細書中の水性点眼剤組成物は、α−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリン、ならびに１種もしくはこれより多くの選択肢的な安定化ポリマーの混合物を含むシクロデキストリン複合体中に、シクロスポリンを含む。α−シクロデキストリンは、シクロスポリンを可溶化する一方で、γ−シクロデキストリンは、シクロスポリン／シクロデキストリン複合体凝集物の形成を促進する。少なくとも１種のポリマーは、この水性のナノ懸濁物およびマイクロ懸濁物を安定化する。
【００４８】
上記ポリマー性安定化剤は、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、セルロース誘導体（アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロースおよびヒドロキシアルキルアルキルセルロース）、カルボキシビニルポリマー（すなわち、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９７１およびＣａｒｂｏｐｏｌ  ９７４のようなカルボマー）、ポリビニルポリマー、ポリビニルアルコール、およびポリビニルピロリドンならびに以下で示される関連したポリマー性安定化剤からなる群より選択される。
【００４９】
有用なポリマー性安定化剤としては、以下が挙げられる：ポリエチレングリコールモノステアレート、ポリエチレングリコールモノステアレート、ポリエチレングリコールジステアレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリオキシエチレンオクチルドデシルエーテル、ポリオキシエチレンステアリルエーテル、ポリオキシエチレンミリスチルエーテル、ポリオキシエチレンオレイルエーテル、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えば、マクロゴールエーテル（例えば、セトマクロゴール１０００））、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ２０およびＴｗｅｅｎ  ８０（ＩＣＩ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ））；ポリエチレングリコール（例えば、Ｃａｒｂｏｗａｘ  ３５５０および９３４（Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅ））、ポリオキシエチレンステアレート、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、セルロース、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ  Ｆ６８およびＦＩ０８（これらは、エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロックコポリマーである））；ポロキサミン（例えば、Ｔｅｔｒｏｎｉｃ  ９０８（Ｐｏｌｏｘａｍｉｎｅ  ９０８としても公知であり、これは、プロピレンオキシドおよびエチレンオキシドをエチレンジアミンに逐次付加することから得られる四官能性ブロックコポリマーである（ＢＡＳＦ  Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，  Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，  Ｎ．Ｊ．）））；Ｔｅｔｒｏｎｉｃ  １５０８（Ｔ−１５０８）（ＢＡＳＦ  Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、Ｔｒｉｔｏｎｓ  Ｘ−２００（これは、アルキルアリールポリエーテルスルホネートである（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ））；ＰＥＧ誘導体化リン脂質、ＰＥＧ誘導体化コレステロール、ＰＥＧ誘導体化コレステロール誘導体、ＰＥＧ誘導体化ビタミンＡ、ＰＥＧ誘導体化ビタミンＥ、ビニルピロリドンとビニルアセテートとのランダムコポリマーなど。
【００５０】
特に有用な安定化剤は、ポロキサマーである。ポロキサマーとしては、当該分野で公知のポロキサマーの任意のタイプが挙げられ得る。ポロキサマーとしては、以下が挙げられる：ポロキサマー１０１、ポロキサマー１０５、ポロキサマー１０８、ポロキサマー１２２、ポロキサマー１２３、ポロキサマー１２４、ポロキサマー１８１、ポロキサマー１８２、ポロキサマー１８３、ポロキサマー１８４、ポロキサマー１８５、ポロキサマー１８８、ポロキサマー２１２、ポロキサマー２１５、ポロキサマー２１７、ポロキサマー２３１、ポロキサマー２３４、ポロキサマー２３５、ポロキサマー２３７、ポロキサマー２３８、ポロキサマー２８２、ポロキサマー２８４、ポロキサマー２８８、ポロキサマー３３１、ポロキサマー３３３、ポロキサマー３３４、ポロキサマー３３５、ポロキサマー３３８、ポロキサマー４０１、ポロキサマー４０２、ポロキサマー４０３、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１０５ベンゾエートおよびポロキサマー１８２ジベンゾエート。ポロキサマーはまた、それらの商品名Ｐｌｕｒｏｎｉｃによっても言及される（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  １０Ｒ５、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  １７Ｒ２、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  １７Ｒ４、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  ２５Ｒ２、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  ２５Ｒ４、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  ３１Ｒ１、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  １０８  Ｃａｓｔ  Ｓｏｌｉｄ  Ｓｕｒｆａｃｔａ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  １０８  ＮＦ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  １０８  Ｐａｓｔｉｌｌｅ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  １０８ＮＦ  Ｐｒｉｌｌ  Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ３３８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  １２７、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  １２７  ＮＦ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  １２７  ＮＦ  ５００  ＢＨＴ  Ｐｒｉｌｌ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  １２７  ＮＦ  Ｐｒｉｌｌ  Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ３８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ３８  Ｐａｓｔｉｌｌｅ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ６８  Ｐａｓｔｉｌｌｅ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ６８  ＬＦ  Ｐａｓｔｉｌｌｅ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ６８  ＮＦ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ６８  ＮＦ  Ｐｒｉｌｌ  Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ７７、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ７７  Ｍｉｃｒｏｐａｓｔｉｌｌｅ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ８７、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ８７  ＮＦ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ８７  ＮＦ  Ｐｒｉｌｌ  Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ２３７、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ８８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ８８  Ｐａｓｔｉｌｌｅ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ  ９８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  １０、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  １０１、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  １２１、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ３１、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ３５、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ４３、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ４４  ＮＦ  Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １２４、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ６１、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ６２、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ６２  ＬＦ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ６２Ｄ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ６４、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ８１、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ  ９２、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｌ４４  ＮＦ  ＩＮＨ  ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １２４  Ｖｉｅｗ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｎ  ３、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｐ  １０３、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｐ  １０４、Ｐｌｕｒ���ｎｉｃ  Ｐ  １０５、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｐ  １２３  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｐ  ６５、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｐ  ８４  ａｎｄ  Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｐ  ８５）。
【００５１】
以下の実施例は、例証によってのみ詳述され、趣旨または範囲を限定すると解釈されるべきではなく、材料および方法の両方において多くの改変が当業者に明らかである。
【実施例】
【００５２】
実施例１
水中でのシクロスポリンＡの溶解度に対するシクロデキストリンの効果を調査した。過剰量の薬物を、２０％（ｗ／ｖ）までのシクロデキストリンを含む水性溶液に添加した。その溶液を、４０〜５０℃で４５〜６０分間、密封ガラスバイアル中で超音波処理し、次いで、室温（２２〜２３℃）へと冷却させた。次いで、少量の固体薬物を各バイアルに添加し、そのバイアルを再度密封し、一定の撹拌の下で平衡化させ、室温で７日間遮光した。その溶液が平衡に達したときに、それらを、０．４５μｍ膜フィルタを通して濾過し、高速液体クラマトグラフィーによって分析した。シクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体の見かけの複合体化定数（Ｋ１：１）を、Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｃｏｎｎｏｒｓによって開発された相−溶解度法（Ｈｉｇｕｃｈｉ，  Ｔ．，  Ｃｏｎｎｏｒｓ，  Ｋ．Ａ．，  １９６５．    Ｐｈａｓｅ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．    Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ４，  １１７−２１２．）を使用して決定した。複合体化効率（ＣＥ）を、相−溶解度ダイアグラム（総ＣＤ濃度（ｍｏｌ／ｌ単位）に対する薬物の総溶解度のプロット）の傾きから決定した（ここでＳ０は、薬物の固有の溶解度である）：
【数１】
2018521117.tif 000002
【００５３】
【表１】
2018521117.tif 000003
【００５４】
表１の結果は、シクロデキストリンがシクロスポリンＡに対する可溶化効果を有し、その溶解度が、水性媒体中のシクロデキストリン濃度が増大するにつれて増大することを示す。α−シクロデキストリンは、シクロスポリンＡに対してより大きな可溶化効果を有し、試験した他のシクロデキストリンより高いＣＥを示す。シクロスポリンＡの溶解度は、１５％（ｗ／ｖ）  α−シクロデキストリンを含む純水性溶液中で４．２ｍｇ／ｍｌであることが示された。相−溶解度ダイアグラムは、タイプＢＳであった（Ｈｉｇｕｃｈｉ，  Ｔ．，  Ｃｏｎｎｏｒｓ，  Ｋ．Ａ．，  １９６５．  Ｐｈａｓｅ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．    Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ４，  １１７−２１２）。室温における純水中での天然β−シクロデキストリンの溶解度は、わずか２％（ｗ／ｖ）であり、水性２％（ｗ／ｖ）  β−シクロデキストリン溶液中のシクロスポリンＡの最大溶解度は、０．０９４ｍｇ／ｍｌである。γ−シクロデキストリンおよび２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンに関しては、最高の溶解度は、γ−シクロデキストリンに関しては２０％（ｗ／ｖ）で０．１４ｍｇ／ｍｌであり、および２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンに関しては２０％で０．０６６ｍｇ／ｍｌであると概算された。試験した２−ヒドロキシプロピル−α−シクロデキストリンおよび無作為にメチル化したβ−シクロデキストリンの最高濃度は、１５％（ｗ／ｖ）であり、そのシクロデキストリン濃度では、シクロスポリンＡ溶解度は、それぞれ、０．４６ｍｇ／ｍｌおよび０．７２ｍｇ／ｍｌであると決定された。α−シクロデキストリンをさらなる開発のために選択した。なぜならそれは、試験した他のシクロデキストリンよりもシクロスポリンＡに対して遙かに大きな可溶化効果を示したからである。γ−シクロデキストリンはまた、ナノ粒子を形成するその優れた能力に起因して、さらに試験した。
【００５５】
シクロスポリンＡの定量的分析を、Ｄｉｏｎｅｘ  Ｓｏｆｔｒｏｎ  ＧｍｂＨ（Ｇｅｒｍｅｒｉｎｇ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）の逆相高速液体クロマトグラフィーコンポーネントシステムＵｌｔｉｍａｔｅ  ３０００シリーズ（ＤＧＰ−３６００Ａポンプ、ＳＲＤ−３６００溶媒ラックおよび脱気装置、ＷＰＳ−３０００ＴＬＳウェルプレートサンプラー、ＴＣＣ−３１００カラム区画、フォトダイオードアレイ検出器および適合するガードカラムを備えたＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ−１８  １５０ｍｍ×４．６０ｍｍおよび５ミクロンカラムとからなる）で行った。移動相は、アセトニトリル、メタノールおよび水（６０：２０：２０）からなり、流速は、１ｍｌ／分であり、カラムオーブン温度は、８０℃であり、検出波長は、２０５ｎｍであった。
【００５６】
実施例２
水性点眼剤媒体中のシクロスポリンＡ／シクロデキストリン凝集物に存在するシクロスポリンＡ画分を、決定した。水性０．０５％（ｗ／ｖ）  シクロスポリンＡ点眼剤マイクロ懸濁物を、塩化ベンザルコニウム（２０ｍｇ）およびエデト酸二ナトリウムデヒドレート（ｄｉｓｏｄｉｕｍ  ｅｄｅｔａｔｅ  ｄｅｈｙｄｒａｔｅ）（１００ｍｇ）を７０ｍｌ  水性１．４％（ｗ／ｖ）  ポリビニルアルコール溶液の中に溶解することによって調製した。次いで、５０ｍｇのシクロスポリンＡおよび測定した量の種々のシクロデキストリン（すなわち、純粋α−シクロデキストリン、純粋γ−シクロデキストリンまたはα−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリンの混合物）をその溶液に添加し、それを均質な懸濁物が得られるまで振盪した。次いで、その容積を１００．０ｍｌへと水性１．４％（ｗ／ｖ）  ポリビニルアルコール溶液で調節し、密閉容器の中に入れて１２１℃で２０分間、オートクレーブ中で加熱した。その懸濁物を、超音波処理下で室温へと冷却した。次いで、その懸濁物を、超音波処理器から外し、室温において一定の撹拌下で7日間、遮光して平衡化した。試験した種々の水性シクロスポリンＡ点眼剤懸濁物の組成（Ｆ１〜Ｆ７）を、表２に列挙する。点眼剤製剤番号５（Ｆ５）はまた、シクロスポリンＡのシクロデキストリン可溶化およびシクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体の凝集に対する賦形剤の効果を評価しようと試みて、その賦形剤のうちのいくつかを含まずに調製した。これら点眼剤（Ｆ８〜Ｆ１０）の組成を、表３に示す。
【００５７】
【表２】
2018521117.tif 000004
【００５８】
【表３】
2018521117.tif 000005
【００５９】
試験されている製剤（４ｍｌ）を、６０００ｒｐｍにおいて室温（２２〜２３℃）で２０〜３０分間遠心分離した。製剤が２層に分離した場合、その上側の層を高速液体クラマトグラフィーによって分析した（実施例１を参照のこと）。固相中の薬物含有量を、以下として計算した：
【数２】
2018521117.tif 000006
上記固体薬物画分を、７種の製剤の各々において決定した（表４）。さらに、製剤Ｆ５（これは、１０％  ｗ／ｖ  γ−シクロデキストリンおよび４％  ｗ／ｖ  α−シクロデキストリンを含む）を、他の賦形剤（すなわち、ポリビニルアルコール、塩化ベンザルコニウムおよびエデト酸二ナトリウムデヒドレート）ありおよびなしでも試験して、凝集に対する賦形剤の効果を評価した。
【００６０】
【表４】
2018521117.tif 000007
【００６１】
製剤Ｆ７（これは、α−シクロデキストリンのみを含む）に関して、その固体薬物画分は低く、薬物の大部分は、液相中にあった。製剤がγ−シクロデキストリンおよびα−シクロデキストリンの混合物を含む場合、その固体薬物画分は増大し、製剤がγ−シクロデキストリンのみを含む場合、その薬物の大部分は、固相にあった。製剤Ｆ１、Ｆ２およびＦ３（これらは、最低量のα−シクロデキストリンおよび最高量のγ−シクロデキストリンを含む）は、遠心分離した場合に３層へと分離し、ここで最上層は、シクロスポリンＡのみを含む。これは、その薬物のうちのいくらかがシクロデキストリンと複合体を形成せず、従って、水性媒体中に溶解しなかったことを示す。他の製剤は、遠心分離の間に２層に分離し、これは、製剤が、シクロスポリンＡを完全に溶解するためには、少なくとも３％  α−シクロデキストリンを含まなければならないことを示す。製剤Ｆ４、Ｆ５およびＦ６において、より多くの薬物が製剤Ｆ７中より固相の中にあったが、全てのシクロスポリンＡは、溶解したようであった。このことは、いくらかのシクロスポリンＡは、シクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体中にあること、およびその形成された複合体は、粒子へと凝集し、遠心分離の間に沈殿したことを意味する。これはまた、γ−シクロデキストリンが凝集を増大させることを示す。
【００６２】
凝集に対する賦形剤の効果をまた、調査した。製剤Ｆ５（これは、１０％（ｗ／ｖ）  γ−シクロデキストリンおよび４％（ｗ／ｖ）  α−シクロデキストリンを含む）を、これらの研究のために選択した。これらの研究の中では、全てのシクロスポリンＡは溶解し、その固体薬物画分は、適切な範囲内にあった。製剤Ｆ８（これは、シクロデキストリンを含んだが、賦形剤は含まなかった）に関して、その固体薬物画分は、Ｆ５のような全ての賦形剤を含む製剤に類似であった。製剤Ｆ９（これは、シクロデキストリンおよびポリビニルアルコールを含んだ）において、凝集は、僅かに増大した。最大の固体薬物画分は、製剤Ｆ１０（これは、シクロデキストリン、ならびに塩化ベンザルコニウムおよびエデト酸二ナトリウムデヒドレートの両方を含んだが、ポリビニルアルコールを含まなかった）において見出された。このことは、賦形剤が凝集に対していくらかの効果を有することを示す。
【００６３】
Ｆ１、Ｆ５およびＦ７の物理化学特性を決定した。上記製剤のｐＨ値を、室温（２２〜２３℃）において決定した。点眼剤製剤の粘性測定を、ＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄモデルＤＶ−Ｉ＋（ＵＳＡ）粘度計で２５±２℃において行い、上記製剤の重量オスモル濃度を、２５℃において作動させた蒸気圧浸透圧計で決定した（表５）。
【００６４】
【表５】
2018521117.tif 000008
【００６５】
実施例３
点眼剤製剤の粒度特徴付けを、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって行った。各製剤を、測定前に（０．４５μｍより大きい粒子を排除するために）０．４５μｍ膜フィルタを通して濾過し、測定を２５℃、１８０°散乱角および７８０ｎｍレーザー光において行い、そして各測定を三連で行った。粒度をまた、サンプル濾過なしで光学顕微鏡を使用して視覚的に決定した。これは、どの程度多くの粒子が懸濁物中に存在するのか、および粒子がどの程度の大きさであるのかというよりよい認識を与える。表６は、ＤＬＳ測定からのサイズ分布データを示す。
【００６６】
【表６】
2018521117.tif 000009
【００６７】
製剤Ｆ１、Ｆ２およびＦ３のＤＬＳ測定は、２つまたは３つのサイズ集団を与え、平均直径は、強度分布に基づいて２００〜４００ｎｍであった。顕微鏡によって観察した場合、これら３種の製剤は、他の製剤より多量の比較的大きな粒子を含んだ。これは、固体薬物粒子の存在に主に起因し、薬物／シクロデキストリン複合体の凝集に起因するのではなかった。
【００６８】
製剤Ｆ４、Ｆ５およびＦ６では、シクロスポリンＡは、本質的に完全に溶解される。そのサイズ分布は、他の製剤におけるより大きく、いくつかのサイズ集団が検出され、そして主要な粒度は、４．９〜５．３ｎｍおよび１５０〜２５０ｎｍであると決定された。製剤Ｆ７（これは、α−シクロデキストリンのみを含む）では、２つのサイズ集団が存在し、ここでは主要な粒度は、６ｎｍおよび１５５ｎｍであった。この製剤が光学顕微鏡によって測定された場合、上記製剤は、透明に見えた。これらの結果は、製剤がα−シクロデキストリンのみを含む場合、シクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体は、より多くの凝集物を形成する強い傾向を有しないことを示す。製剤がα−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリンの両方を含む場合、複合体は、凝集物を形成するより強い傾向を有し、その形成される凝集物もまた大きい。
【００６９】
凝集に対する賦形剤の効果を、製剤Ｆ８、Ｆ９およびＦ１０で試験した。光学顕微鏡によって測定した場合、これら製剤のうちの全てが、非常に少ない大きな１〜５μｍ粒子を伴って、大部分は透明に見えるようであった。ＤＬＳによって観察した場合にのみ、いくらかの差異が検出できた。製剤Ｆ８（ここではシクロデキストリンを除いて賦形剤は含まれなかった）では、３３．１ｎｍおよび１５６ｎｍの主要な粒度の２つのサイズ集団が検出された。製剤が塩化ベンザルコニウムおよびエデト酸二ナトリウムデヒドレートを含んだ場合（Ｆ１０）、４つのサイズ集団が存在し、主要な粒度は、１．５３ｎｍ、２４６ｎｍ、３６２ｎｍおよび６１１ｎｍであることが決定された。製剤がポリビニルアルコールのみを含んだ場合（Ｆ９）、５つのサイズ集団が検出され、主要な粒度は、１．２２ｎｍ、５．３７ｎｍ、２０１ｎｍ、４３４ｎｍおよび８５０ｎｍであった。これらの結果は、上記賦形剤が水性点眼剤媒体中で凝集物形成を増大させることを示す。
【００７０】
実施例４
透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）は、薬物／シクロデキストリン複合体の凝集物を含めて、この複合体の形態およびサイズを検出するための選り抜きの分析法である。選択されたシクロスポリンＡ水性点眼剤懸濁物（すなわち、Ｆ１、Ｆ５およびＦ７）における凝集物の形態およびサイズを分析した。最初に、そのサンプルを、４０００ｒｐｍ、２０℃において３０分間遠心分離し（Ｍｏｄｅｌ  Ｒｏｔｉｎａ  ３５Ｒ，  Ｈｅｔｔｕｃｈ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）、次いで、その上清をピペットで除き、フォルムバール被覆グリッド（ｆｏｒｍｖａｒ−ｃｏａｔｅｄ  ｇｒｉｄｓ）を、Ｐａｒａｆｉｌｍ（登録商標）上の調製物の液滴の上に浮かせて、ナノ粒子がそのグリッド上に吸収されることを可能にした。そのグリッドを濾紙でブロットした後、そのグリッドを、水性酢酸ウラシル溶液（１％）を一定の減圧下で使用することによって陰性染色の滴の上に移した。最後に、そのサンプルを、Ｍｏｄｅｌ  ＪＥＭ−２１００透過型電子顕微鏡（ＪＥＯＬ，  Ｔｏｋｙｏ，  Ｊａｐａｎ）で検鏡した。上記選択したシクロスポリンＡ点眼剤懸濁物のＴＥＭ顕微鏡写真は、Ｆ１およびＦ５において、それぞれ直径４０〜１４０ｎｍおよび２０〜１００ｎｍを有するシクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体の球状凝集物を示す。Ｆ７におけるシクロスポリンＡ／シクロデキストリン凝集ナノ粒子の主なサイズは、１０ｎｍ未満であった。しかし、少量のより大きな粒子（１２０〜１４０ｎｍ）も検出された。ＴＥＭ顕微鏡写真の凝集物サイズは、ＤＬＳ技術に従っていた。球状凝集物の観察は、シクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体の凝集物が、非包接複合体および／またはミセル様構造を通じて薬物溶解度を増強し得ることを示す。Ｆ５におけるアセンブリされたナノ粒子の直径は、１００〜４００ｎｍの範囲に及んだ。ＴＥＭによって観察された粒度は、ＤＬＳによって得られた粒度と一致している。
【００７１】
Ｆ５の形態を、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）を使用してさらに分析した。穏やかに撹拌した後、その水性点眼剤懸濁物の固体物質を、スライド上に重層し、そのサンプルを、一晩、デシケーター中で室温において乾燥させた。その後、この層を、室温においてアルゴン雰囲気下で、金で被覆した。次いで、サンプルを、ＳＥＭ（Ｍｏｄｅｌ  ＪＳＭ−５４１０ＬＶ，  ＪＥＯＬ，  Ｔｏｋｙｏ，  Ｊａｐａｎ）でそれらの表面形態について観察した。ＳＥＭは、ＤＬＳおよびＴＥＭの結果と一致する、１００〜４００ｎｍの直径を有するナノ粒子を示した。
【００７２】
実施例５
Ｆ１、Ｆ５およびＦ７から一連の半透膜を通過するシクロスポリンＡの透過を、ドナーおよびレセプター区画からなるＦｒａｎｚ拡散セル装置中で測定した。このドナーおよびレセプターチャンバを、２０ｋＤａ、５０ｋＤａまたは１００ｋＤａのＭＷＣＯおよび拡散面積１．７７ｃｍ２を有する単一層の半透膜によって分離した。この膜を、透過研究の前にＭｉｌｌｉ−Ｑ水中に一晩浸漬した。ドナー相は、２ｍｌの試験されるべき製剤（すなわち、Ｆ１、Ｆ５またはＦ７）からなる。製剤Ｆ７のレセプター相（１２ｍｌ）は、シクロスポリンＡおよびポリビニルアルコールなしの製剤Ｆ７からなり、そして製剤Ｆ１およびＦ５のレセプター相は、シクロスポリンＡおよびポリビニルアルコールなしの製剤Ｆ５からなった。これは、少なくとも３％（ｗ／ｖ）のα−シクロデキストリンが、０．５ｍｇ／ｍｌのシクロスポリンＡを溶解するために必要とされ、そして製剤Ｆ１およびＦ５が、類似の重量オスモル濃度を有するという事実に起因する。ポリビニルアルコールを、ポリビニルアルコールがフローセルに貼り付き、低ＵＶ光密度および不十分なＨＰＬＣ測定を生じるという事実に起因して、レセプター相から排除した。レセプター相を脱気して、溶存空気を除去し、その後、レセプター相をレセプター区画に置いた。この研究を、３００ｒｐｍで回転する磁性式撹拌子によるレセプター相の連続撹拌の下で、室温において行った。レセプター媒体のうちの１００μｌサンプルを、５時間、６時間、７時間、８時間および９時間で引抜き、新鮮なレセプター相と直ぐ交換した。レセプターサンプル中のシクロスポリンＡ濃度を、ＨＰＬＣによって測定した（実施例１を参照のこと）。フラックス（Ｊ）を、透過プロフィールの線形部分の傾き（ｄｑ／ｄｔ）、すなわち、時間（ｔ）プロフィールに対するレセプターチャンバ中のシクロスポリンＡの量（ｑ）から計算し、透過係数（ＰＣ）を、フラックスから計算した：
【数３】
2018521117.tif 000010
ここでＡは、膜の表面積（１．７７ｃｍ２）であり、Ｃｄは、ドナー相中に溶解したシクロスポリンＡの初期濃度である。
【００７３】
シクロスポリンＡの分子量は、１２０２．６Ｄａであり、α−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリンの分子量は、それぞれ、９７２．８４Ｄａおよび１２９７．１２Ｄａである。モノマーのシクロスポリンＡ分子およびシクロスポリンＡ／シクロデキストリン（１：１）複合体は、これらの膜を容易に通過して透過できる。上記研究は、シクロスポリンＡが、２０ｋＤａより大きい直径を有する粒子へと凝集したシクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体として主に存在し、従って、ＭＷＣＯ  ２０ｋＤａ膜を透過できなかったことを示す。製剤Ｆ１（これは、γ−シクロデキストリンのみを含む）に関して、そのドナー媒体中に溶解される薬物の制限された量はまた、レセプター相中の検出がないという理由でもあり得る。なぜなら薬物は、膜に透過するには溶解されなければならないからである。全３種の製剤中のシクロスポリンＡは、ＭＷＣＯ  ５０ｋＤａおよび１００  ｋＤａを有する膜に透過し、それら凝集物のうちの大部分は、５０ｋＤａより小さいことを示した。各製剤に関するフラックスおよび透過係数を計算した（表７）。製剤Ｆ５およびＦ７は、類似のフラックス値を与えたが、製剤Ｆ１は、より低いフラックス値を与えた。繰り返すと、これは、ドナー媒体中に溶解したシクロスポリンＡのより低い濃度および溶解したシクロスポリンＡ（遊離またはシクロデキストリン複合体中の）のみが、膜を通って透過し得るという事実に主に起因している。
【００７４】
【表７】
2018521117.tif 000011
【００７５】
実施例６
シクロスポリンＡ／薬物凝集物挙動をさらに研究した。Ｆ５の小さなサンプルを、０．４５μｍ膜フィルタを通して濾過し−等容積の移動相で希釈するかまたは６０００ｒｐｍで室温において２０〜３０分間、単に遠心分離した。次いで、得られた溶液のシクロスポリンＡ濃度を、ＨＰＬＣによって決定した（実施例１を参照のこと）。濾過した製剤をまた、１日間静置させておき、次いで、室温において２０〜３０分間遠心分離し、そしてそのシクロスポリンＡ濃度を、ＨＰＬＣによって決定した。サンプルを希釈する場合、凝集物の全ては溶解され、そしてシクロスポリンＡ濃度は、懸濁物中の薬物の総量を表す。懸濁物が濾過される場合、濾液中のシクロスポリンＡの濃度は、懸濁物が遠心分離される場合に近いかまたは同じはずである。なぜなら凝集物のうちの大部分は、遠心分離の間のように、溶液から濾過されるはずだからである。これはそうではなかったが、濾過された懸濁物のシクロスポリンＡ濃度は、希釈されたものに近く、遠心分離されたものに近いのではなかった（表８）。また、懸濁物が希釈される場合、それは透明になるが、興味深いことに、濾過された懸濁物が１日間静置された場合には、いくらかの凝集が起こり、その溶液は、再び不透明になった。従って、その濾過された製剤を、室温において１日間静置した後に遠心分離し、次いで、溶解したシクロスポリンＡの濃度を測定した。すると、シクロスポリンＡ濃度は、遠心分離したものに近く、希釈したものに近いのではなかった。このことは、シクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体が凝集しつつあるが、これら複合体を凝集物の中で一緒に保持する力は非常に弱く、濾過の間に壊れるが、その後濾液中で再度形成されることを示す。
【００７６】
【表８】
2018521117.tif 000012
【００７７】
実施例７
３種の点眼剤製剤を調製し、それらの物理化学的特性を、実施例２に記載されるように決定した（表９）。点眼剤に存在するα−シクロデキストリンの量、すなわち、４％、１２．５％および１５％は、点眼剤製剤に存在する全シクロスポリンＡを可溶化するには十分、すなわち、それぞれ、０．０５％、０．２％および０．４％より多かった。α−シクロデキストリンおよびγ−シクロデキストリンの水溶解度は、それぞれ、１３％および２５％（ｗ／ｖ）である。小さなナノ粒子が形成され、その水性点眼剤は、γ−シクロデキストリンを添加するとオパールのような色彩になった。上記点眼剤を、点眼剤懸濁物からより大きな粒子（低マイクロ粒子範囲において）を除くのみの比較的低速で遠心分離したが、ナノ粒子は、溶液中に残った（実施例３）。固体画分（これは、シクロスポリンＡ／シクロデキストリン複合体マイクロ粒子からなった）は、２３％〜２９％の間であった。
【００７８】
【表９】
2018521117.tif 000013
２名の健康な志願者（男性および女性、ともに３０歳）は、左眼に１滴の製剤Ｂを受けた。灼熱感、かすみ目、痒み、または他の副作用は全く観察されなかった。この点眼剤は十分に許容された。製剤Ｂは、レスタシス（登録商標）点眼剤として市販されている０．０５％  濃度のシクロスポリンＡの４倍を含んだ。さらなる試験は、さらに高い濃度（例えば、０．５０％）もまた十分に許容されることを決定すると予期される。
【００７９】
いかなる特定の理論にも機構にも束縛されることを望まないが、本明細書で記載される水性点眼剤は、通常の投与レジメンでは、例えば、１日に２回、１用量あたり、より低用量の油ベースの市販の製品を用いて可能な他の方法より早くかつより有効に、涙液の生成をより迅速にかつより完全に達成し得る、より多くかつより有効な量のシクロスポリン（特に、シクロスポリンＡ）を提供する。これは、涙液を分泌する涙器（涙腺を含む）および涙液流体を眼の表面に運んで、結膜および角膜を覆うそれらの排出管へのよりよい透過に起因し得る。それはまた、本発明の点眼剤がシクロスポリンを提供する徐放性、ならびにその凝集体が眼の表面に提供する保護および鎮静効果に起因し得る。
【００８０】
この説明は、理解を明瞭にする目的で、幾分詳細に、例証、実施例および好ましい実施形態によって言い表されてきたが、それらの趣旨から逸脱することなく、種々の改変、置換、省略および変更が行われ得ることは、当業者によって理解される。よって、その範囲は、以下の請求項の範囲、およびその均等物に限定されるのみであることが意図される。
【国際調査報告】
2018521117.tif 000014
2018521117.tif 000015
2018521117.tif 000016