(57)【要約】  本発明は、微細藻類、特にスラウストキトリッド（ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｄ）の培養の分野にある。タンパク質および脂質が豊富で、場合によりカロテノイドを含む、スラウストキトリッドバイオマス、そのバイオマスを得るための方法、および食品におけるその用途に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質および脂肪酸を含むスラウストキトリッドのバイオマスであって、乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも３５％のタンパク質および少なくとも２０％の脂質を含んでなり、当該バイオマスが、添加されたタンパク質または脂肪酸を含まないバイオマスであることを特徴とする、スラウストキトリッドバイオマス。
【請求項２】
少なくとも４５％のタンパク質を含んでなる、請求項１に記載のスラウストキトリッドバイオマス。
【請求項３】
少なくとも３０％の脂質を含んでなる、請求項１または２に記載のスラウストキトリッドバイオマス。
【請求項４】
前記脂質が、２５％〜６０％のＡＡ、ＤＨＡおよびＥＰＡから選択される多価不飽和脂肪酸の含量を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のバイオマス。
【請求項５】
場合により、５〜２５０ｐｐｍ、好ましくは１５０〜２００ｐｐｍのカロテノイドを含んでなる、請求項１〜４のいずれか一項に記載のバイオマス。
【請求項６】
カロテノイドが、脂質に関して、５〜３０％のアスタキサンチン含量、１５％〜３０％のフェニコキサンチン含量、および０〜３０％のβ−カロテン含量を有する、請求項１に記載のバイオマス。
【請求項７】
前記ストラウストキトリッドが、オーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、アプラノキトリウム（Ａｐｌａｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、ボトリオキトリウム（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、ジャポノキトリウム（Ｊａｐｏｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、オブロンギキトリウム（Ｏｂｌｏｎｇｉｃｈｙｔｒｉｕｍ）、パリエティキトリウム（Ｐａｒｉｅｔｉｃｈｙｔｒｉｕｍ）、シゾキトリウム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、シクヨイドキトリウム（Ｓｉｃｙｏｉｄｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、スラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）及びウルケニア（Ｕｌｋｅｎｉａ）からなる群から選択される属であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載のバイオマス。
【請求項８】
前記ストラウストキトリッドが、オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／２；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／３；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／４；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／５；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／６；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）４０８７／３；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／４；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／５の種から選択されることを特徴とする、請求項７に記載のバイオマス。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に定義されるバイオマスの製造方法であって、
ａ．炭素源、窒素源、リン源および塩を含む、所定の培養液中、約２４℃〜３５℃の間の範囲の温度で、従属栄養性または混合栄養性の条件下、かつ乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも３５％のタンパク質のレベルでタンパク質の産生を促進することができる条件下において、スラウストキトリッドを培養する第一工程と、
ｂ．前記工程ａ）より低い約１８℃〜２５℃の間の温度で、従属栄養性または混合栄養性の条件下、少なくとも４０ｇ／Ｌ乾燥物質の培養密度が得られるまで、乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも２０％までの脂質の蓄積を促進することができる条件下での第二の培養工程と、
ｃ．前記第二工程で得られたバイオマスを、培養液から、前記バイオマスを分離することによって回収・採取し、場合により、続いて均質化する第三工程と、そして、必要に応じて、
ｄ．前記第三工程で回収されたバイオマスを乾燥する第四工程と
を含んでなることを特徴とする、方法。
【請求項１０】
前記培養において、４３５ｎｍ〜４７５ｎｍの波長を有する光の照明がなされる、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記培養において、少なくとも培養の最後の１８時間の間、照明がなされる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１２】
前記培養において、培養の約２４〜５０時間の時点、および培養の最後まで、照明がなされる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記第一の培養工程ａ）が、いわゆる「バッチ式」方式、いわゆる「フェッドバッチ式」方式、または連続方式で行われる、請求項９〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記培養が、ａ１）適切な培養液中、培養液中で２０ｇ／Ｌ未満の炭素源の含量が得られるまでの第一の増殖のサブ工程、続いて、ａ２）一つまたは複数の炭素源、窒素源およびリン源の濃縮溶液を、同時にまたは連続して、培養液に添加する、第二の産生のサブ工程の、二つのサブ工程に分けられる第一工程ａ）を含んでなる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記工程ａ２）において、炭素源の含量が０〜５０ｇ／Ｌの間で維持され、窒素源の含量が０．５〜５ｇ／Ｌの間で維持され、リン源の含量が０．５〜５ｇ／Ｌの間で維持される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記照明が、点滅の形態で不連続になされる、請求項９〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
請求項９〜１６のいずれか一項に記載の方法によって得られ得る、バイオマス。
【請求項１８】
ヒトまたは動物の化粧品および食品の分野における、請求項１〜８または１７のいずれか一項に記載のバイオマスの使用。
【請求項１９】
食物摂取指標、体重増加、または飼料要求率の測定によって評価される、動物の能力を向上させるための、請求項１〜８または１７のいずれか一項に記載のスラウストキトリッドバイオマスの使用。
【請求項２０】
請求項１〜８または１７のいずれか一項に記載のバイオマスを含んでなる、ヒトまたは動物のための化粧品または医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１〜８または１７のいずれか一項に記載のバイオマスを含んでなる、食品。
【請求項２２】
ヒトの摂取用とされた、請求項２１に記載の食品。
【請求項２３】
請求項１〜８または１７のいずれか一項に記載のバイオマスを、１％〜６０％含んでなる、家畜類の飼料。
【請求項２４】
治療において用いられる、請求項１〜８または１７のいずれか一項に記載のバイオマス。
【請求項２５】
請求項１〜８または１７のいずれか一項に記載のバイオマスを、１％〜６０％含んでなる、水産養殖用飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、微細藻類、特に、スラウストキトリッド（ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｄ）の培養の分野にある。タンパク質および脂質が豊富で、場合によりカロテノイドを含む、スラウストキトリッドバイオマス、前記バイオマスを得るための方法、および食品におけるその使用を目的とする。
【背景技術】
【０００２】
植物起源のタンパク質の供給源および脂質の供給源のいくつかは、動物およびヒトに、その代謝に必要なアミノ酸を提供するものとして、直接または栄養補助食品として、ヒトまたは動物の食物用食品において公知である。「タンパク質の供給源」という用語は、食品が摂取されたときの、動物またはヒトが利用可能なアミノ酸の供給源を指す。脂質、特に多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）は、エネルギーの供給源として、さらにそれらの治療的な特性ゆえ興味が向けられている。多価不飽和脂肪酸の中で、オメガ３系（ω−３ＰＵＦＡ）、特にエイコサペンタエン酸（ＥＰＡまたはω−３Ｃ２０：５）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡまたはω−３Ｃ２２：６）、ならびにオメガ６系（ω−６ＰＵＦＡ）、特にアラキドン酸（ＡＲＡもしくはＡＡまたはω−６Ｃ２０：４エイコサテトラエン酸）の、特定の高度不飽和脂肪酸（ＨＵＦＡ）は、栄養学的に重要であると認識されており、治療的用途の観点で大きな将来性を有する。したがって、動物およびヒトの栄養摂取における用途のための、タンパク質およびＰＵＦＡの新規な供給源が提供されることは望ましい。タンパク質および脂質、特にＰＵＦＡを含有する供給源は多くの利点を有する。
【０００３】
タンパク質の供給源には漁業の副産物である魚粉が含まれ、これはタンパク質を比較的多く含むが、脂質は少ない（約８％乾燥物質中含有量と言われている）。
【０００４】
動物飼料に使用される植物タンパク質の最もよく知られた供給源は、油の抽出後に残った固体残渣である、通常、ミールの形態のダイズである。しかしながら、ダイズミールの使用には、その起源、とりわけ遺伝子組み換え（ＧＭ）ダイズ品種に関連するいくつかの不利な点がある。さらにまた、ダイズは植物タンパク質の多くの供給源と同様にＰＵＦＡなどの脂質の供給源とはならない。
【０００５】
植物タンパク質の他の供給源としては、とりわけヒト用の栄養補助食品用として、スピルリナおよびクロレラが知られている。
【０００６】
しかしながら、クロレラと同様に、スピルリナにはタンパク質の生産性が低いという不利な点があり、これは、高収率の発酵槽での培養を難しくする。これらの培養は食物タンパク質の供給源の、広範囲かつ経済的に実施可能であり、かつその品質が、動物およびヒトの食物用食品において、ダイズなどの一般的な供給源に置き換わることを可能にするような工業的製造の目的を満たす助けにはならないであろう。さらに、クロレラおよびスピルリナのＰＵＦＡ含量は非常に低い。
【０００７】
タンパク質および脂質と同様に、カロテノイドにはまた、動物およびヒトの栄養素として興味が向けられている。
【０００８】
多くの場合、これらの色素の大規模な製造には、集約的な作業および大きな製造面積を必要とする。
【０００９】
さらにまた、現在において、既述したタンパク質または脂肪酸の供給源は、大量のカロテノイドを含有していない。
【００１０】
したがって、これらの分子の市場における需要の増加に対応するために、カロテノイド、とりわけルテイン、フコキサンチン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチン、エキネノン、β−カロテンおよびフェニコキサンチンの新たな供給源が求められる。
【００１１】
発酵槽中でのそれらの工業的製造能力について公知の原生生物は、ＤＨＡまたはＥＰＡなどの多価不飽和脂肪酸が多い脂質を製造するために、長く利用されてきた。例えば、ＷＯ９７／３７０３２号、ＷＯ２０１５／００４４０２号またはＷＯ２０１２／１７０２７号参照。特定の原生生物は、特定の条件下で、カロテノイドを産生する能力を備える。しかしながら、これまで得られたバイオマスは、脂質の抽出後を含めて、少なくとも高価な追加のタンパク質濃縮工程を必要とすることなく、食品中のタンパク質供給源としてのこれらの使用を可能にするのに十分なタンパク質含量を含有していない。
【００１２】
本発明の目的の一つは、広範囲で、かつ経済的に実施可能な工業的製造の目的を満たす、動物またはヒトの食物用の新規なタンパク質および脂質、特にＰＵＦＡの供給源を提供することである。タンパク質およびＰＵＦＡのこの供給源は、カロテノイド、特にカロテン（α、β、ε、γ、δまたはζ−カロテン、リコピンおよびフィトエン）およびキサントフィル（アスタキサンチン、アンテラキサンチン、シトラナキサンチン、クリプトキサンチン、カンタキサンチン、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチン、フラボキサンチン、フコキサンチン、ルテイン、ネオキサンチン、フェニコキサンチン、ロドキサンチン、ルビキサンチン、シフォナキサンチン、ビオラキサンチン、ゼアキサンチン）も含み得る。
【００１３】
本発明は、特定の培養条件下で、高い多価不飽和脂肪酸の含量（とりわけ、ＤＨＡおよびＥＰＡ）を有する油の製造における用途に、公知のスラウストキトリッドが、動物の飼料およびヒトの栄養摂取用の高品質のタンパク質供給源のために、大量のタンパク質を産生することが可能な微生物であることを示すものである。本発明者らは、２５％〜６０％のＰＵＦＡを含有して、少なくとも２０％（乾燥物質に対して）の脂質含量を維持しながら、高タンパク質含量を得ることを可能にする培養条件を決定することができた。本発明者らは、細胞に、タンパク質およびＰＵＦＡに加えて、カロテノイドを産生させることを直接可能にする培養条件も決定することができた。
【発明の概要】
【００１４】
したがって、本発明は、第一の目的として、乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも２０％のタンパク質、好ましくは少なくとも３０％のタンパク質を含んでいてもよく、乾燥物質の重量に対して、重量で、４０％超までのタンパク質、さらには６０％超までのタンパク質の範囲であってもよい、スラウストキトリッドバイオマスを含む。バイオマスは、通常、乾燥物質の重量に対して、３５％〜６５％のタンパク質、特に４５％〜５５％のタンパク質を含有していてもよい。
【００１５】
タンパク質の重量百分率は、タンパク質それ自体に関して、または前記タンパク質に含有されるアミノ酸に関して表され得る。ここで示される百分率は、総窒素からではなく、バイオマス中に含有される総アミノ酸の総計によって計算される（標準ＩＳＯ１３９０３：２００５）。例えば、アミノ酸分析器を使用して、総アミノ酸を測定してもよい。トリプトファンは、別にアッセイされ、次いで、その値は、総アミノ酸の総計を得るために、他のアミノ酸の総計に加えられる。
【００１６】
さらにまた、前記バイオマスは、乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも２０％の脂質、好ましくは少なくとも３０％の脂質を含んでいてもよい。この脂質は、２５％〜６０％、好ましくは４０％〜６０％のＰＵＦＡ、例えば、ＡＲＡ、ＤＨＡおよび／またはＥＰＡを含有していてもよい。本発明の実施形態によれば、ＤＨＡは、好ましいＰＵＦＡであり得る。
【００１７】
本発明の特定の実施形態によれば、前記バイオマスは、５〜２５０ｐｐｍ（ｎｇ／ｍｇ乾燥物質）、好ましくは１５０〜２００ｐｐｍのカロテノイドも含んでいてもよい。
【００１８】
本発明は、
ａ．適切な培養液中、約２４℃〜３５℃の間の範囲の温度で、従属栄養性または混合栄養性の条件下、かつ乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも３５％のタンパク質のレベルでタンパク質の産生を促進することができる条件下、スラウストキトリッドを培養する第一工程；
ｂ．工程ａ）より低い約１８℃〜２５℃の間の温度で、従属栄養性または混合栄養性の条件下、少なくとも４０ｇ／Ｌ乾燥物質、好ましくは少なくとも６０ｇ／Ｌ、より好ましくは少なくとも８０ｇ／Ｌの培養密度が得られるまで、少なくとも２０％まで、好ましくは少なくとも３０％までの脂質の蓄積を促進することができ、かつ少なくとも２５％まで、好ましくは少なくとも３５％までの脂質内にＤＨＡの蓄積を促進することができる条件下での第二の培養工程；
ｃ．第二工程で得られたバイオマスを、培養液から、前記バイオマスを分離することによって回収する第三工程（採取）；この工程に続いて、均質化してもよく、ならびに、必要により、
ｄ．第三工程で回収されたバイオマスを乾燥する第四工程；
を含むことを特徴とする、上記および下記に定義されるバイオマスを製造するための方法にも関する。
【００１９】
培養時間は、通常、４０〜１００時間、好ましくは６５〜９６時間、例えば、７０、８４または９６時間であってもよい。本発明に関する培養方法は、バイオマスの濃度が、１００ｇ／Ｌ、実際には、１２０ｇ／Ｌ超に達することを、通常、可能にし得る。
【００２０】
第一工程ａ）において、細胞は、約１８〜３０時間、好ましくは２４時間培養されてもよい。この第一の培養工程後、例えば、約２４時間の培養の時点で、温度を、約１８〜２４℃に下げてもよい（工程ｂ）の開始）。この温度低下は、脂肪酸および潜在的にカロテノイドの産生を促進し得る。低温での培養は、通常、約５０〜７０時間の培養まで、任意の場合においては、好ましくは培養の最後まで継続してもよい。
【００２１】
カロテノイドの産生は、場合により、培養中、好ましくは工程ｂ）中に誘導されてもよい。この目的のために、好ましくは約４３５〜４７５ｎｍ、好ましくは４５５ｎｍの青色光を用いる混合栄養性の条件を適用してもよい。アスタキサンチン、カンタキサンチン、β−カロテンおよびフェニコキサンチンなどのカロテノイドは、これらの波長により産生され得る。光は、通常、少なくとも１８時間、好ましくは少なくとも２４時間適用してもよい。
【００２２】
本発明の好ましい実施形態によれば、光は、培養の、２４〜５０時間の時点、より好ましくは４５時間の時点で、および培養の最後まで、培養に適用されてもよい。
【００２３】
本発明は、ヒトまたは動物の食物摂取のための食品、とりわけ、水産養殖の分野における、上記または下記に定義されるバイオマスの使用にも関する。本発明は、動物の能力を改善するための、上記または下記に定義されるバイオマスの使用にも関する。前記能力は、当業者に全て公知の、食物摂取の指標、体重増加または飼料要求率を測定することによって評価してもよい。
【００２４】
本発明は、栄養価およびその密度の両方を増加させることを可能にする、このようなバイオマスを含む食品にも関する。
【００２５】
本発明は、治療、とりわけ、栄養不良の治療及び予防において使用するための、本発明によるバイオマスにも関する。
【００２６】
本発明によるバイオマスを含む、ヒトもしくは動物のための化粧品または医薬組成物、およびヒトもしくは動物の食物摂取のための食品または食品組成物にも関する。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
「突然変異体」という用語は、自然の過程によるか、またはランダム突然変異（ＵＶなど）もしくは遺伝子工学技術によって生じ得る、当業者に公知の物理化学的方法によるかのいずれかにより、その遺伝子プールが改変された、原種に由来する生命体を指す。
【００２８】
「混合栄養性の条件」または「混合栄養性の方式」という用語は、光の供給を伴う培養、および有機炭素含有基質の供給を伴う暗闇での培養を指す。
【００２９】
「従属栄養性−優勢混合栄養性の条件」という用語は、細胞増殖のためのエネルギーの大部分が有機炭素源によってもたらされるが、光が、細胞増殖および/または組成に影響を及ぼす、照明の条件を指す。この光は、前記照明に曝露された細胞の代謝に対して影響がある限りにおいて、強度の変化を伴うか、もしくは伴わずに連続的に、または光の期間の間の暗闇の期間を伴って不連続的に、のいずれかで提供されてもよい。周期的な強度の変化または周期的な不連続は、時間と共に規則的であってもよく、または細胞増殖の様々な段階によって変えてもよい。従属栄養性−優勢混合栄養性は、自家栄養および従属栄養の両方の利点を組み合わせることによって、関係する分子を産生することを可能にする。従属栄養性のようなこれらの条件下、有機基質は、大量のバイオマスを産生するように、微細藻類に栄養を与えるが、細胞の葉緑体および他の光エネルギー捕捉細胞小器官は、活性化される。光は、代謝応答、例えば、色素の合成を誘導することができるシグナルとして働く。
【００３０】
「カロテノイド」という用語は、カロテン（α、β、ε、γ、δまたはζ−カロテン、  リコピンおよびフィトエン）およびキサントフィル（アスタキサンチン、アンテラキサンチン、シトラナキサンチン、クリプトキサンチン、カンタキサンチン、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチン、フラボキサンチン、フコキサンチン、ルテイン、ネオキサンチン、ロドキサンチン、ルビキサンチン、シフォナキサンチン、ビオラキサンチン、ゼアキサンチン）を含む。
【００３１】
本発明によれば、「バイオマス」という用語は、有利には、前述の原生生物を培養することにより製造される、本明細書に記載のタンパク質、脂肪酸、および場合によりカロテノイドのレベルを有する一連のスラウストキトリッド細胞を指し、この細胞は、それらの物理的な完全性を維持してもよく、または維持しなくてもよい。
【００３２】
したがって、前記バイオマスは、０％〜１００％の範囲の量の劣化したスラウストキトリッド細胞を含んでいてもよいことが理解される。「劣化した」という用語は、前記スラウストキトリッド細胞が、改変されたそれらの構造および／または組成を有し得ることを意味する。例えば、これらは、乾燥工程または油採取工程を経ていてもよく、重要なことは、これらの細胞を含むバイオマスが、本明細書に記載の、タンパク質、脂肪酸、および場合によりカロテノイドのレベルを有するという点である。
【００３３】
本発明の好ましい実施形態によれば、バイオマスは、採取中または採取後に、そのアミノ酸組成を改変する処理を経ず、すなわち、採取後に前記バイオマスが付される処理は、そのアミノ酸組成を変更しない。特に、バイオマスは、タンパク質およびアミノ酸の濃縮の工程に付されない。後者は、これらの培養液中の細胞増殖に由来する。これは「タンパク質の添加なし」と呼ばれるバイオマスである。
【００３４】
本発明のより好ましい実施形態によれば、バイオマスは、そのアミノ酸、脂質、および、該当する場合はカロテノイドの組成を改変する処理を経ておらず、すなわち、採取後に前記バイオマスが付される処理は、そのアミノ酸、脂質、および場合によりカロテノイドの組成を変更しない。特に、脂質に対するアミノ酸の相対組成は、実質的に一定のままである。タンパク質と同様に、脂肪酸は、これらの培養液中における細胞の培養にのみ由来する。脂肪酸が豊富でなければ、バイオマスは「脂肪酸の添加なし」とも呼ばれる。
【００３５】
特定の場合において、本発明によるバイオマス中の劣化していないスラウストキトリッドは、劣化したスラウストキトリッドよりも優れた保存特性および消化特性を有し得ることが観察された。本発明の好ましい形態の一つは、実質的に主要量が劣化していないスラウストキトリッドを含むバイオマスである。
【００３６】
本発明によれば、「劣化した」という用語は、例えば、均質化からもたらされる、例えば溶解したスラウストキトリッドなどの、その構造的および／または化学的な完全性が変更され得るスラウストキトリッドを指す。
【００３７】
それにもかかわらず、一度産生されたものに比べて、前記バイオマスは、未加工で使用されてもよく、場合により、乾燥、またはその使用に必要な任意の処理、とりわけ、均質化に付されてもよいことは明らかである。
【００３８】
本発明によれば、前記バイオマスは、乾燥物質の重量に対して、重量で、１％〜９５％の水分含量を有していてもよい。
【００３９】
好ましくは、本発明の実施形態によれば、前記バイオマスは、乾燥物質の重量に対して、重量で、７０％〜９０％、好ましくは８０％〜８５％の水分含量を有していてもよい。
【００４０】
より好ましくは、本発明の第二の実施形態によれば、前記バイオマスは、乾燥物質の重量に対して、重量で、１％〜１０％、好ましくは２％〜７％の水分含量を有していてもよい。
【００４１】
本発明によれば、前記スラウストキトリッドは、スラウストキトリアレス（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉａｌｅｓ）目、好ましくはスラウストキトリアセアエ（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉａｃｅａｅ）科、より好ましくはオーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、アプラノキトリウム（Ａｐｌａｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、ボトリオキトリウム（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、ジャポノキトリウム（Ｊａｐｏｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、オブロンギキトリウム（Ｏｂｌｏｎｇｉｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、パリエティキトリウム（Ｐａｒｉｅｔｉｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、シゾキトリウム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、シクヨイドキトリウム（Ｓｉｃｙｏｉｄｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属、スラウストキトリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属およびウルケニア（Ｕｌｋｅｎｉａ）属を含む群から選択され得る属であってもよい。
【００４２】
スラウストキトリッドは、非遺伝子組み換え微生物であり、または遺伝子組み換え微生物でもある。遺伝子組み換えスラウストキトリッドを使用する場合、これらは、食品としての使用のためにバイオマスを劣化または消化することを可能にする、一つまたは複数の酵素をコードする遺伝子を含有しない。
【００４３】
有利には、前記スラウストキトリッドは、アプラノキトリウム・ケルグエレンセ（Ａｐｌａｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｋｅｒｇｕｅｌｅｎｓｅ）；アプラノキトリウム・ミヌタ（Ａｐｌａｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔａ）；アプラノキトリウム・ストッキノイ（Ａｐｌａｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｔｏｃｃｈｉｎｏｉ）；アプラノキトリウム種（Ａｐｌａｎｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＰＲ２４−１；オーランチオキトリウム・リマシヌム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）；オーランチオキトリウム・リマシヌム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＡＢ０２２１０７；オーランチオキトリウム・リマシヌム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＭ０４２９０９；オーランチオキトリウム・リマシヌム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＪＮ９８６８４２；オーランチオキトリウム・リマシヌム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＳＬ１１０１  ＪＮ９８６８４２；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＤＱ３２３１５７；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＤＱ３５６６５９；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＤＱ３６７０４９；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／２；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／３；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／４；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／５；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／６；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／１；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＢ０５２５５５；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＢ０７３３０８；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ＰＲＡ２７６  ＤＱ８３６６２８；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ１０  ＦＪ８２１４７７；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＬＹ  ２０１２  ＰＫＵ  Ｍｎ５  ＪＸ８４７３６１；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＬＹ２０１２  ＪＸ８４７３７０；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）Ｎ１−２７；オーランチオキト��ウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＤ１１６；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＥＫ２０９  ＡＢ２９０５７４；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＥＫ２１７  ＡＢ２９０５７２；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＥＫ  ２１８  ＡＢ２９０５７３；オーランチオキトリウム種（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）１８Ｗ−１３ａ；ボトリオキトリウム・ラジアツム（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｒａｄｉａｔｕｍ）；ボトリオキトリウム・ラジアツム・ラグークマール（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｒａｄｉａｔｕｍ  Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ）１６；ボトリオキトリウム・ラジアツム（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｒａｄｉａｔｕｍ）ＳＥＫ３５３；ボトリオキトリウム種（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）；ボトリオキトリウム種（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＴＲＢＣ  １４３；ボトリオキトリウム種（Ｂｏｔｒｙｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ラグークマール（Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ）２９；オブロンギキトリウム・ミヌツム（Ｏｂｌｏｎｇｉｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｕｍ）；オブロンギキトリウム・マルチルジメンタリス（Ｏｂｌｏｎｇｉｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｕｌｔｉｒｕｄｉｍｅｎｔａｌｉｓ）；オブロンギキトリウム種（Ｏｂｌｏｎｇｉｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）；オブロンギキトリウム種（Ｏｂｌｏｎｇｉｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＥＫ３４７；パリエティキトリウム・サルカリアヌム（Ｐａｒｉｅｔｉｃｙｔｒｉｕｍ  ｓａｒｋａｒｉａｎｕｍ）；パリエティキトリウム・サルカリアヌム（Ｐａｒｉｅｔｉｃｙｔｒｉｕｍ  ｓａｒｋａｒｉａｎｕｍ）ＳＥＫ３５１；パリエティキトリウム・サルカリアヌム（Ｐａｒｉｅｔｉｃｙｔｒｉｕｍ  ｓａｒｋａｒｉａｎｕｍ）ＳＥＫ３６４；パリエティキトリウム種（Ｐａｒｉｅｔｉｃｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）；パリエティキトリウム種（Ｐａｒｉｅｔｉｃｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）Ｆ３−１；パリエティキトリウム種（Ｐａｒｉｅｔｉｃｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）Ｈ１−１４；パリエティキトリウム種（Ｐａｒｉｅｔｉｃｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＮＢＲＣ１０２９８４；フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）；シゾキトリウム・アグレガタム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ａｇｇｒｅｇａｔｕｍ）ＤＱ３２３１５９；シゾキトリウム・アグレガタム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ａｇｇｒｅｇａｔｕｍ）ＤＱ３５６６６１；シゾキトリウム・アグレガタム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ａｇｇｒｅｇａｔｕｍ）；シゾキトリウム・リマシヌム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）；シゾキトリウム・リマシヌム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＯＵＣ１６６  ＨＭ０４２９０７；シゾキトリウム・マングローヴァイ（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）；シゾキトリウム・マングローヴァイ（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＦＢ１；シゾキトリウム・マングローヴァイ（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）Ｆ���３；シゾキトリウム・マングローヴァイ（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＦＢ５；シゾキトリウム・ミヌツム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｕｍ）；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ２０８８８  ＤＱ３６７０５０；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＫＧＳ２  ＫＣ２９７１３７；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＫＡ１０  ＪＱ２４８００９；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ２０１１１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ２０８８８；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ２０１１１  ＤＱ３２３１５８＊；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ２０８８８  ＤＱ３５６６６０；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ２０８８９；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ２６１８５；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＲ２．１．２；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＣＡＡＡ  ０３２；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＣＡＡＡ  ０９３；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＣＡＣＤ  １５２；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＣＡＲＡ  ０２１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＣＨＡＯ  １１３；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＲＡＢＱ  １３３；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＲＡＲＭ  ８０１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＵＲＡＲＭ  ８０２；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／３；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／４；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／５；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＦＪＵ−５１２；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＫＨ１０５；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＫＫ１７−３；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＫＲ−５；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＰＪ１０．４；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＥＫ  ２１０；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＥＫ  ３４５；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＥＫ  ３４６；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＳＲ２１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＴＩＯ０１；シクヨイドキトリウム・ミヌツム（Ｓｉｃｙｏｉｄｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｕｍ）ＳＥＫ３５４；シクヨイドキトリウム��ミヌツム（Ｓｉｃｙｏｉｄｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｕｍ）ＮＢＲＣ  １０２９７５；シクヨイドキトリウム・ミヌツム（Ｓｉｃｙｏｉｄｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｕｍ）ＮＢＲＣ  １０２９７９；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）ＢＵＲＡＢＧ１６２  ＤＱ１００２９５；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）ＣＧ９；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）ＬＹ２０１２  ＪＸ８４７３７８；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）ＭＢＩＣ１１０９３  ＡＢ１８３６６４；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）ＮＩＯＳ１  ＡＹ７０５７６９；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）＃３２  ＤＱ３２３１６１；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）＃３２  ＤＱ３５６６６３；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）ＲＴ４９  ＤＱ３２３１６７；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）ＲＴ４９  ＤＱ３５６６６９；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）ＲＴ４９；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）Ｔｈｅｌ２  ＤＱ３２３１６２；スラウストキトリダエ種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｉｄａｅ  ｓｐ．）Ｔｈｅｌ２；スラウストキトリウム・アグレガタム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ａｇｇｒｅｇａｔｕｍ）；スラウストキトリウム・アグレガタム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ａｇｇｒｅｇａｔｕｍ）ＤＱ３５６６６２；スラウストキトリウム・アウレウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ａｕｒｅｕｍ）；スラウストキトリウム・アウレウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ａｕｒｅｕｍ）ＤＱ３５６６６６；スラウストキトリウム・ガエルトネリウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｇａｅｒｔｎｅｒｉｕｍ）；スラウストキトリウム・キンネイ（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｋｉｎｎｅｉ）；スラウストキトリウム・キンネイ（Ｔｈ
ｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｋｉｎｎｅｉ）ＤＱ３２３１６５；スラウストキトリウム・モチバム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｏｔｉｖｕｍ）；スラウストキトリウム・マルチルジメンタレ（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍｕｌｔｉｒｕｄｉｍｅｎｔａｌｅ）；スラウストキトリウム・パキデルマム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｐａｃｈｙｄｅｒｍｕｍ）；スラウストキトリウム・ローゼウム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｒｏｓｅｕｍ）；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）１３Ａ４．１；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ２６１８５；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ１３；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ１４；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ２；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ３；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ４；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ５；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ６；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ７；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ８；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＬ９；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＰ３．２．２；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＢＰ３．３．３；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）カウディボラム（ｃａｕｄｉｖｏｒｕｍ）；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＨＮ−１；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＦＪＮ−１０；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＨＫ１；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＨＫ１０；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＨＫ５；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＨＫ８；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＨＫ８ａ；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＫＫ１７−３；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＫＬ１；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＫＬ２；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＫＬ２ａ；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＯＮＣ−Ｔ１８；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＰＪＡ１０．２；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＴＲ１．４；スラウストキトリウム種（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕ��  ｓｐ．）ＴＲＲ２；スラウストキトリウム・ストリアタム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｔｒｉａｔｕｍ）；スラウストキトリウム・ストリアタム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｔｒｉａｔｕｍ）ＡＴＣＣ２４４７３；スラウストキトリウム・ストリアタム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｔｒｉａｔｕｍ）ＤＱ３２３１６３；スラウストキトリウム・ストリアタム（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｔｒｉａｔｕｍ）ＤＱ３５６６６５；スラウストキトリウム・ビスルゲンス（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｖｉｓｕｒｇｅｎｓｅ）；ウルケニア・アモエボイデア（Ｕｌｋｅｎｉａ  ａｍｏｅｂｏｉｄｅａ）ＳＥＫ  ２１４；ウルケニア・プロフンダ（Ｕｌｋｅｎｉａ  ｐｒｏｆｕｎｄａ）；ウルケニア・プロフンダ（Ｕｌｋｅｎｉａ  ｐｒｏｆｕｎｄａ）ＢＵＴＲＢＧ  １１１；ウルケニア種（Ｕｌｋｅｎｉａ  ｓｐ．）；ウルケニア種（Ｕｌｋｅｎｉａ  ｓｐ．）ＡＴＣＣ  ２８２０７；ウルケニア・ビスルゲンシス（Ｕｌｋｅｎｉａ  ｖｉｓｕｒｇｅｎｓｉｓ）；ウルケニア・ビスルゲンシス（Ｕｌｋｅｎｉａ  ｖｉｓｕｒｇｅｎｓｉｓ）ＢＵＲＡＡＡ  １４１；ウルケニア・ビスルゲンシス（Ｕｌｋｅｎｉａ  ｖｉｓｕｒｇｅｎｓｉｓ）ＡＴＣＣ  ２８２０８の種から選択されてもよい。
【００４４】
好ましくは、本発明によれば、スラウストキトリッドは、オーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）属およびシゾキトリウム（Ｓｃｈｙｚｏｃｈｉｔｒｉｕｍ）属から選択されてもよく、好ましくはＣＣＡＰに２０１４年５月２０日に寄託されたオーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／２、
ＣＣＡＰに２０１４年５月２０日に寄託されたオーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／３、
ＣＣＡＰに２０１４年５月２０日に寄託されたオーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／４、
ＣＣＡＰに２０１４年５月２０日に寄託されたオーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／５、
ＣＣＡＰに２０１４年５月２０日に寄託されたオーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／６、
ＣＣＡＰに２０１３年６月２１日に寄託されたオーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）ＣＣＡＰ  ４０６２／１、
ＣＣＡＰに２０１４年５月２０日に寄託されたシゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ）ＣＣＡＰ  ４０８７／３、
ＣＣＡＰに２０１２年２月２８日に寄託されたシゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ）ＣＣＡＰ  ４０８７／１、
ＣＣＡＰに２０１４年５月２０日に寄託されたシゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ）ＣＣＡＰ  ４０８７／４、および
ＣＣＡＰに２０１４年５月２０日に寄託されたシゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ）ＣＣＡＰ  ４０８７／５
の種から選択されてもよい。
【００４５】
全ての寄託は、ブダペスト条約の条項の下、ＣＣＡＰ（ＣＵＬＴＵＲＥ  ＣＯＬＬＥＣＴＩＯＮ  ＯＦ  ＡＬＧＡＥ  ＡＮＤ  ＰＲＯＴＯＺＯＡ（ＣＣＡＰ）、ＳＡＭＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  Ｌｔｄ．、Ｓｃｏｔｔｉｓｈ  Ｍａｒｉｎｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、ＯＢＡＮ、Ａｒｇｙｌ  ＰＡ３７  １ＱＡ、英国）に行った。
【００４６】
本発明の好ましい実施形態によれば、バイオマスは、乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは３５％〜５５％のタンパク質含量を有していてもよい。本発明の好ましい実施形態によれば、バイオマスは、乾燥物質の重量に対して、重量で、３５％〜６５％のタンパク質含量を有していてもよい。
【００４７】
本発明の好ましい実施形態によれば、バイオマスは、乾燥物質の重量に対して、重量で、２５％〜６０％、好ましくは４０％〜６０％のＰＵＦＡを含む、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％の脂質含量を有していてもよい。特に、（乾燥物質の重量に対して、重量で）ＤＨＡ：タンパク質の比率は、１：１．５〜１：９、好ましくは１：２〜１：７、より好ましくは１：５〜１：６であってもよい。
【００４８】
本発明の特定の好ましい実施形態によれば、バイオマスは、場合により、乾燥物質の重量に対して、５ｐｐｍ〜２５０ｐｐｍ、好ましくは１５０ｐｐｍ〜２００ｐｐｍのカロテノイド含量を有していてもよい。カロテノイド含量は、照明の条件だけでなく、培養液および方法の実行にも依存し得る。そのため、同じ微細藻類の株は、培養条件の作用として、異なる量の色素を産生してもよい。
【００４９】
本発明の好ましい実施形態によれば、前記バイオマスは、
−  オーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）およびＳｃｈｙｚｏｃｈｉｔｒｉｕｍ（シゾキトリウム）の属から、好ましくはオーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／２；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／３；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／４；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／５；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／６；オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／３；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／１；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／４；シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０８７／５の種から選択されてもよい、スラウストキトリッド；ならびに、
−  乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、非常に好ましくは３５％〜５５％または４５％〜５５％のタンパク質含量；
−  乾燥物質の重量に対して、重量で、２５％〜６０％、好ましくは４０％〜６０％のＰＵＦＡを含む、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％の脂質含量；
−  場合により、乾燥物質の重量に対して、５ｐｐｍ〜２５０ｐｐｍ、好ましくは１５０〜２００ｐｐｍのカロテノイド含量；および
−  ７０％〜９０％、好ましくは８０％〜８５％の乾燥前の水分含量、または１％〜１０％、好ましくは２％〜７％の乾燥後の水分含量；を有していてもよい、
バイオマスであってもよい。
【００５０】
得られるカロテノイドの含量および種類は、入射光の波長の選択によって、および照明条件によって、制御し得る。ルテイン、フコキサンチン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、カンタキサンチン、エキネノン、β−カロテンおよびフェニコキサンチンなどのカロテノイドは、本発明の実施形態により、産生され得る。アスタキサンチン、カンタキサンチン、β−カロテンおよびフェニコキサンチンから選択されるカロテノイドの産生を誘導するために、培養物は、青色光（約４３５〜４７５ｎｍ、好ましくは４５５ｎｍ）に曝露される。実施形態によれば、カロテノイドは、脂質に関して、５〜３０％のアスタキサンチン含量、１５％〜３０％のフェニコキサンチン含量、および０〜３０％のβ−カロテン含量を有していてもよい。
【００５１】
本発明は、目的として、
ａ．適切な培養液中、約２４℃〜３５℃の間の範囲の温度で、かつ乾燥物質の重量に対して、重量で、少なくとも３５％のタンパク質のレベルでタンパク質の産生を促進することができる条件下での、スラウストキトリッドの従属栄養性または混合栄養性の培養の第一工程；
ｂ．少なくとも４０ｇ／Ｌ乾燥物質、好ましくは少なくとも６０ｇ／Ｌ、より好ましくは少なくとも８０ｇ／Ｌの培養密度が得られるまで、工程ａ）より低い約１８℃〜２５℃の間の温度で、少なくとも２０％まで、好ましくは少なくとも３０％までの脂質の蓄積を促進することができ、かつ少なくとも２５％まで、好ましくは少なくとも３５％までの脂質内に、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）、好ましくはＤＨＡおよび／またはＥＰＡおよび／またはＡＲＡの蓄積を促進することができ、かつ場合により、カロテノイドの産生を促進する条件下での、従属栄養性または混合栄養性の培養の第二工程；
ｃ．第二工程で得られたバイオマスを、培養液から、前記バイオマスを分離することによって回収する第三工程（採取）；ならびに、必要により、
ｄ．第三工程で回収されたバイオマスを乾燥する第四工程；
を含む、前記記載のバイオマスを製造するための方法も含む。
【００５２】
好ましくはスラウストキトリッドを培養する工程ａ）は、培養液中、タンパク質の産生を促進するために適切な条件下、行われ得る。
【００５３】
通常、前記適切な培養液は、スラウストキトリッドを培養するために当業者に公知であるが、工程ａ）中に、に窒素欠乏ではない細胞のためにそれを適応させた、培養液であってもよい。例として、炭素源が補給された海塩に基づく培養液が挙げられる。例えば、改変Ｖｅｒｄｕｙｎ培養液（１５ｇ／Ｌの海塩；３ｇ／Ｌの（ＮＨ４）２ＳＯ４；１ｇ／ＬのＫＨ２ＰＯ４；０．５ｇ／ＬのＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ；２４ｍｇ／ＬのＮａ２ＥＤＴＡ；３ｍｇ／ＬのＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ；３ｍｇ／ＬのＭｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ；０．０４ｍｇ／ＬのＮａ２ＭｏＯ４・２Ｈ２Ｏ；１０ｍｇ／ＬのＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ；３．２ｍｇ／Ｌのパントテン酸塩；９．５ｍｇ／Ｌの塩酸チアミン；０．１５ｍｇ／ＬのビタミンＢ１２）が挙げられる。ＡＴＣＣ７９０  ＭＢ２２１６またはＦ／２タイプの培養液も挙げられる。
【００５４】
本発明の実施形態によれば、前記適切な培養液は、好ましくは炭素源、窒素源、リン源および塩を含んでいてもよい、化学的に定義された培養液であってもよい。
【００５５】
本発明によれば、「化学的に定義された培養液」という用語は、それぞれの要素の内容が公知の培養液を指す。正確には、本発明は、豊富または複雑な有機物を含み得ない培養液を対象とする。「豊富または複雑な有機物」という表現は、未精製の有機物を指し、混合物の種々の成分の正確な組成および濃度が正確に公知ではなく、制御されておらず、かつ一つのバッチから別のバッチへの大きな変動性を有し得る、混合物として表される。豊富または複雑な有機物の例として、それぞれの成分が固定された濃度を有さない、タンパク質の加水分解反応の産物である酵母抽出物もしくはペプトン、または、例えば、海洋無機塩もしくは他の複合成長剤などのミネラルが豊富な物質が挙げられる。
【００５６】
本発明によれば、前記定義の培養液は、カルシウム、コバルト、マンガン、マグネシウム、亜鉛、ニッケル、銅、カリウム、鉄およびナトリウム塩、ならびにこれらの混合物から選択される塩を含んでいてもよい。
【００５７】
有利には、前記塩は、塩化カルシウム、塩化コバルト、塩化マンガン、硫酸マグネシウム、硫酸亜鉛、硫酸ニッケル、硫酸銅、硫酸カリウム、硫酸鉄、モリブデン酸ナトリウム、亜セレン酸ナトリウム、塩化ナトリウムおよびこれらの混合物から選択されてもよい。
【００５８】
本発明の実施形態によれば、および使用される株によれば、培養液はまた、とりわけ、海洋起源の特定の株に対しては、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）を含んでいてもよい。
【００５９】
この実施形態によれば、塩化ナトリウムを含んでいてもよい培養液を考慮し得る海洋株の例として、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）株、特に、シゾキトリウム種（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｓｐ．）ＣＣＡＰ  ４０６２／３株およびＣＣＡＰ  ４０８７／４株が挙げられる。
【００６０】
本発明の別の実施形態によれば、および使用される株によれば、培養液は、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）を含まなくてもよく、３．５ｇ／Ｌ未満、好ましくは１ｇ／Ｌ未満、より好ましくは１０ｍｇ／Ｌ未満のナトリウムイオン、および１ｇ／Ｌ未満、好ましくは５００ｍｇ／Ｌ未満、より好ましくは２００ｍｇ／Ｌ未満の塩化物イオンを有する、非常に少量の塩化ナトリウムを少なくとも含んでいてもよい。
【００６１】
この実施形態によれば、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）を含んでいなくてもよい培養液、非常に少量の塩化ナトリウムを少なくとも含んでいてもよい培養液を考慮し得る株の例として、オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）株、特に、オーランチオキトリウム・マングローヴァイ（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｍａｎｇｒｏｖｅｉ）ＣＣＡＰ  ４０６２／４株およびＣＣＡＰ  ４０６２／１株が挙げられる。
【００６２】
本発明の実施形態によれば、前記定義の培養液の炭素源は、一つもしくは複数の炭水化物、一つもしくは複数のアセテート、一つもしくは複数のアルコール、一つもしくは複数の錯体分子、または少なくとも二つのこれらの供給源の任意の割合の任意の混合物であってもよい。
【００６３】
「少なくとも二つのこれらの供給源の任意の割合の任意の混合物」という表現は、任意の割合の少なくとも一つの以下の混合物を指す：一つもしくは複数の炭水化物および一つもしくは複数のアセテート、一つもしくは複数の炭水化物および一つもしくは複数のアルコール、一つもしくは複数の炭水化物および一つもしくは複数の錯体分子、一つもしくは複数のアセテートおよび一つもしくは複数のアルコール、一つもしくは複数のアセテートおよび一つもしくは複数の錯体分子および一つもしくは複数のアルコールおよび一つもしくは複数の錯体分子、一つもしくは複数の炭水化物および一つもしくは複数のアセテートおよび一つもしくは複数のアルコール、一つもしくは複数の炭水化物および一つもしくは複数のアセテートおよび一つもしくは複数の錯体分子、一つもしくは複数の炭水化物および一つもしくは複数のアセテートおよび一つもしくは複数のアルコールおよび一つもしくは複数の錯体分子。
【００６４】
本発明によれば、前記定義の培養液の前記窒素源は、一つもしくは複数の硝酸塩、一つもしくは複数のグルタミン酸塩、一つもしくは複数のアンモニウム塩、尿素、アンモニア、または少なくとも二つのこれらの供給源の任意の割合の任意の混合物から選択されてもよい。
【００６５】
「少なくとも二つのこれらの供給源の任意の割合の任意の混合物」という表現は、任意の割合の少なくとも一つの以下の混合物を指す：一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のグルタミン酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩および尿素およびアンモニア；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のグルタミン酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩および尿素；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のグルタミン酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩およびアンモニア；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のグルタミン酸塩および尿素およびアンモニア；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩および尿素およびアンモニア；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のグルタミン酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のグルタミン酸塩および尿素；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のグルタミン酸塩およびアンモニア；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩および尿素；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩およびアンモニア；一つもしくは複数の硝酸塩および尿素およびアンモニア；一つもしくは複数のグルタミン酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩および尿素およびアンモニア；一つもしくは複数のグルタミン酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩および尿素；一つもしくは複数のグルタミン酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩およびアンモニア；一つもしくは複数のグルタミン酸塩および尿素およびアンモニア；一つもしくは複数のアンモニウム塩および尿素およびアンモニア；一つおよび複数の硝酸塩および一つもしくは複数のグルタミン酸塩；一つもしくは複数の硝酸塩および一つもしくは複数のアンモニウム塩；一つもしくは複数の硝酸塩および尿素。
【００６６】
本発明の実施形態によれば、前記定義の培養液のリン源は、リン酸、リン酸塩、有利には、リン酸水素ナトリウム（Ｎａ２ＨＰＯ４）もしくはリン酸二水素ナトリウム（ＮａＨ２ＰＯ４）、またはリン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）もしくはリン酸水素カリウム（Ｋ２ＨＰＯ４）、あるいは、少なくとも二つのこれらの供給源の任意の割合の任意の混合物から選択されてもよい。
【００６７】
本発明の実施形態によれば、前記培養液は、塩化マグネシウム、有利には、四水和物の形態（ＭｇＣｌ２・４Ｈ２Ｏ）；塩化カルシウム、有利には、二水和物の形態（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）；塩化コバルト六水和物（ＣｏＣｌ２・６Ｈ２Ｏ）；塩化マンガン（ＩＩ）四水和物（ＭｎＣｌ２・４Ｈ２Ｏ）；硫酸マグネシウム七水和物（ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）；硫酸亜鉛七水和物（ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）；硫酸ニッケル六水和物（ＮｉＳＯ４・６Ｈ２Ｏ）；硫酸銅五水和物（ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ）；硫酸カリウム（Ｋ２ＳＯ４）；硫酸鉄七水和物（ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）；ホウ酸（Ｈ３ＢＯ３）；エチレンジアミン四酢酸の二ナトリウム二水和物の形態（Ｎａ２ＥＤＴＡ・２Ｈ２Ｏ）；モリブデン酸ナトリウム二水和物（Ｎａ２ＭｏＯ４・２Ｈ２Ｏ）；亜セレン酸ナトリウム（Ｎａ２ＳｅＯ３）；ビタミンとして、チアミン、コバラミンもしくはビタミンＢ１２、パントテン酸塩もしくはビタミンＢ５；炭素源；窒素源；リン源を含んでいてもよい。
【００６８】
本発明の好ましい形態によれば、前記培養液中において、塩化マグネシウムは、０．００８〜０．０１２ｇ／Ｌ、有利には、０．００９〜０．０１１ｇ／Ｌの濃度であってよく；塩化カルシウムは、０．４０〜０．７０ｇ／Ｌ、有利には、０．５０〜０．６０ｇ／Ｌの濃度であってよく；塩化コバルト六水和物は、０．００００８〜０．０００１３ｇ／Ｌ、有利には、０．００００９〜０．０００１２ｇ／Ｌの濃度であってよく；塩化マンガン（ＩＩ）四水和物は、０．００８〜０．０１３ｇ／Ｌ、有利には、０．００９〜０．０１２ｇ／Ｌの濃度であってよく；硫酸マグネシウム七水和物は、６〜１０ｇ／Ｌ、有利には、７〜９ｇ／Ｌの濃度であってよく；硫酸亜鉛七水和物は、０．００８〜０．０１３ｇ／Ｌ、有利には、０．００９〜０．０１２ｇ／Ｌの濃度であってよく；硫酸ニッケル六水和物は、０．００４〜０．００７ｇ／Ｌ、有利には、０．００５〜０．００６ｇ／Ｌの濃度であってよく；硫酸銅五水和物は、０．００５〜０．００９ｇ／Ｌ、有利には、０．００６〜０．００８ｇ／Ｌの濃度であってよく；硫酸カリウムは、０．５〜３．５ｇ／Ｌ、有利には、１〜３ｇ／Ｌの濃度であってよく；硫酸鉄七水和物は、０．０３〜０．０５ｇ／Ｌ、有利には、０．０３５〜０．０４５ｇ／Ｌの濃度であってよく；ホウ酸は、０．０１５５〜０．０１９５ｇ／Ｌ、有利には、０．０１６５〜０．０１８５ｇ／Ｌの濃度であってよく；エチレンジアミン四酢酸の二ナトリウム二水和物の形態は、０．１０〜０．１４ｇ／Ｌ、有利には、０．１１〜０．１３ｇ／Ｌの濃度であってよく；モリブデン酸ナトリウム二水和物は、０．００００１〜０．０００３ｇ／Ｌ、有利には、０．００００５〜０．０００２ｇ／Ｌの濃度であってよく；亜セレン酸ナトリウムは、０．００００００１５〜０．００００１９ｇ／Ｌ、有利には、０．００００００１６〜０．００００００１８ｇ／Ｌの濃度であってよく；チアミンは、０．０１５〜０．０５ｇ／Ｌ、有利には、０．０２５〜０．０４ｇ／Ｌの濃度であってよく；コバラミンもしくはビタミンＢ１２は、０．０００４〜０．０００６５ｇ／Ｌ、有利には、０．０００４５〜０．０００６０ｇ／Ｌの濃度であってよく；パントテン酸塩もしくはビタミンＢ５は、０．００８〜０．０１３ｇ／Ｌ、有利には、０．００９〜０．０１２ｇ／Ｌの濃度であってよく；炭素源は、４５〜６５ｇ／Ｌ、有利には、５０〜６０ｇ／Ｌの濃度であってよく；窒素源は、７〜１１ｇ／Ｌ、有利には、８〜１０ｇ／Ｌの濃度であってよく；リン源は、２〜６ｇ／Ｌ、有利には、３〜５ｇ／Ｌの濃度であってよい。
【００６９】
非常に好ましくは、本発明によれば、前記培養液中において、塩化マグネシウムは、０．０１０８ｇ／Ｌの濃度であり；塩化カルシウムは、０．５５ｇ／Ｌの濃度であり；塩化コバルト六水和物（ＣｏＣｌ２・６Ｈ２Ｏ）は、０．０００１０８ｇ／Ｌの濃度であり；塩化マンガン（ＩＩ）四水和物は、０．０１０８ｇ／Ｌの濃度であり；硫酸マグネシウム七水和物は、８．０１ｇ／Ｌの濃度であり；硫酸亜鉛七水和物は、０．０１０８ｇ／Ｌの濃度であり；硫酸ニッケル六水和物は、０．００５６ｇ／Ｌの濃度であり；硫酸銅五水和物は、０．００７２ｇ／Ｌの濃度であり；硫酸カリウムは、２．０９ｇ／Ｌの濃度であり；硫酸鉄七水和物は、０．０４ｇ／Ｌの濃度であり；ホウ酸は、０．０１７５ｇ／Ｌの０．０１５５〜０．０１９５ｇ／Ｌ間で構成される濃度であり；エチレンジアミン四酢酸の二ナトリウム二水和物の形態は、０．１２ｇ／Ｌの濃度であり；モリブデン酸ナトリウム二水和物は、０．０００１０８ｇ／Ｌの濃度であり；亜セレン酸ナトリウムは、０．００００００１７３ｇ／Ｌの濃度であり；チアミンは、０．０３２ｇ／Ｌの濃度であり；コバラミンもしくはビタミンＢ１２は、０．０００５２ｇ／Ｌの濃度であり；パントテン酸塩もしくはビタミンＢ５は、０．０１０８ｇ／Ｌの濃度であり；炭素源は、５５ｇ／Ｌの濃度であり；窒素源は、９ｇ／Ｌの濃度であり；リン源は、４ｇ／Ｌの濃度である。
【００７０】
本発明によれば、方法の第一の培養工程ａ）は、いわゆる「バッチ式」の不連続方式、いわゆる「フェッドバッチ式」の半連続方式、または連続供給方式で行われてもよい。
【００７１】
本発明の具体的な実施形態によれば、第一工程は、ａ１）適切な培養液中での第一の増殖のサブ工程、続いて、ａ２）増殖を制限しない窒素およびリンのレベルを培養液中で維持するように、一つまたは複数の炭素源、窒素源および／またはリン源の濃縮溶液を、同時にまたは連続して、培養液に添加してもよい、第二の産生のサブ工程の、二つのサブ工程に分けられる。
【００７２】
好ましい実施形態によれば、増殖のサブ工程ａ１）は、２０ｇ／Ｌ未満の炭素源、より具体的にはグルコースの濃度が得られるまで行われる。
【００７３】
別の実施形態によれば、増殖のサブ工程ａ１）は、少なくとも２０ｇ／Ｌ、好ましくは少なくとも４０ｇ／Ｌ、より好ましくは少なくとも６０ｇ／Ｌ、さらにより好ましくは少なくとも８０ｇ／Ｌの培養密度が得られるまで行われる。
【００７４】
工程ａ２）における窒素源の非限定的なレベルは、有利には、０．５〜５ｇ／Ｌ、好ましくは０．５〜２ｇ／Ｌであり、リン源の非限定的なレベルは、有利には、０．５〜５ｇ／Ｌ、好ましくは０．５〜２ｇ／Ｌである。この工程ａ２）のために要求される炭素源の含量は、０〜２００ｇ／Ｌ、とりわけ、５または１０〜５０ｇ／Ｌであってもよい。好ましくはサブ工程ａ２）における炭素源の含量は、０〜５０ｇ／Ｌ、より好ましくは０〜１０ｇ／Ｌである。
【００７５】
好ましくは、上記に定義される二つのサブ工程ａ１）およびａ２）に分割される第一工程ａ）の培養は、いわゆる「フェッドバッチ式」の半連続方式で行われる。
【００７６】
通常、サブ工程ａ１）およびａ２）は、２４℃〜３５℃の間、好ましくは２５℃〜３０℃の間の温度で行われる。
【００７７】
方法の第二工程ｂ）は、培養開始後２４時間に、通常、開始する。これは、通常、１８℃〜２５℃の間の温度で行われる。この温度の低下は、タンパク質よりもむしろ、長鎖の多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）、とりわけ、ＤＨＡ、ＡＲＡおよびＥＰＡに産生を向かわせる。産生する脂肪酸のプロファイルは、通常、培養された株に依存する。
【００７８】
通常、工程ｂ）中では、工程ａ２）のために行われたように、培養液中において、炭素源の含量が５〜２００ｇ／Ｌ、好ましくは１０〜５０ｇ／Ｌ、窒素源の含量が０．５〜５ｇ／Ｌ、好ましくは０．５〜２ｇ／Ｌ、リン源の含量が０．５〜５ｇ／Ｌ、好ましくは０．５〜２ｇ／Ｌを維持するように、一つもしくは複数の炭素源および／または窒素源および／またはリン源の濃縮溶液を、同時にまたは連続して、培養液に添加してもよい。
【００７９】
培養は、通常、５０〜７０時間後に、停止される。
【００８０】
培養中のカロテノイドの産生は、場合により、好ましくは工程ｂ）中に誘導されてもよいが、培養中にわたって行われてもよい。カロテノイドの産生を誘導するために、約４３５〜４７５ｎｍ、好ましくは４５５ｎｍの、好ましくは青色光を用いる混合栄養性の条件が適用される。したがって、培養は、混合栄養性の方式である。アスタキサンチン、カンタキサンチン、β−カロテンおよびフェニコキサンチンなどのカロテノイドは、これらの波長を用いて産生される。光は、通常、少なくとも１８時間、好ましくは少なくとも２４時間適用される。本発明の好ましい実施形態によれば、光は、培養の、２４〜５０時間の時点、より好ましくは４５時間の時点で、培養に適用される。この照明は、通常、好ましくは培養の最後まで、継続する。培養の終了直前（例えば、終了の１５分、３０分、４５分または１時間前）に照明を停止することも可能である。
【００８１】
本発明の特定の実施形態によれば、培養物は、通常、培養の終了前の、少なくとも１８時間、好ましくは少なくとも２４時間、光に曝露される。本発明の実施形態によれば、培養物は、開始から、すなわち、培養工程ａ）およびｂ）中に、照明を当てられる。本発明の好ましい実施形態によれば、培養物は、今のところ、工程ｂ）を開始する時点で、照明を当てられる。本発明の好ましい実施形態によれば、培養物は、培養の少なくとも最後の１８時間の間、好ましくは培養の少なくとも最後の２４時間の間、照明を当てられる。
【００８２】
白色光を使用してもよいが、本発明者らは、約４３５〜４７５ｎｍ、好ましくは４５５ｎｍの波長を有する青色光を使用することによる、より高いカロテノイド含量に注目した。一般に、培養物は、培養の４０〜５０時間の時点（すなわち、培養の開始後４０〜５０時間の時点）で、好ましくは培養の４５時間の時点で、かつ培養終了時まで（５０〜７０時間の間）、光に曝露される。これらの条件下、約１５０〜２５０ｐｐｍ（ｎｇ／ｍｇ）、好ましくは１８０〜２００ｐｐｍ（乾燥物質）のカロテノイド含量が得られる。実施形態によれば、カロテノイドは、５％〜３０％のアスタキサンチン含量を有する。実施形態によれば、カロテノイドは、１５％〜３０％のフェニコキサンチン含量を有する。実施形態によれば、カロテノイドは、０％〜３０％のβ−カロテン含量を有する。
【００８３】
通常、方法の工程ａ）およびｂ）は、従属栄養性の条件下および／または混合栄養性の条件下、行ってもよい。カロテノイドを得るために、工程ｂ）において、培養は、混合栄養性の条件下、培養の終了前に少なくとも２４時間行われる。
【００８４】
本発明の実施形態によれば、例えば、カロテノイドが産生しない場合、培養は、完全に、従属栄養性の条件下、行われる。一般に、培養中での混合栄養性の条件の使用は、脂質、特にＰＵＦＡの産生に対して、およびカロテノイドの産生に対して、正の効果を有し、バイオマス、ならびに脂肪酸、特に、ＰＵＦＡ、特に、ＤＨＡおよびカロテノイドの収率を増加させることを可能にする。
【００８５】
工程ａ１）、ａ２）およびｂ）は、従属栄養性の条件下または混合栄養性の条件下、独立して行ってもよい。本発明の実施形態によれば、工程ａ１）およびａ２）は、従属栄養性の条件下で行われ、次いで、工程ｂ）は、全部または一部、混合栄養性の条件下で行われる。本発明の好ましい実施形態によれば、工程ａ１）は、従属栄養性の条件下で、工程ａ２）は、混合栄養性の条件下で行われる。
【００８６】
本発明の別の実施形態によれば、工程ｂ）中、培養物は、混合栄養性の条件下、白色光に曝露される。本発明の別の実施形態によれば、工程ｂ）中、培養物は、混合栄養性の条件下、培養の４０〜５０時間まで、好ましくは４５時間まで、白色光に曝露され、次いで、培養物は、少なくとも２４時間、約４３５〜４７５ｎｍ、好ましくは４５５ｎｍの波長を有する青色光に曝露される。
【００８７】
本発明の実施形態によれば、混合栄養性の方式で培養を行う際、照明は、可変および／または不連続である。点滅の形態の照明は、原生生物の成長に特に好ましく、とりわけ、脂質およびカロテノイドの産生に関して、これらの生産性を向上させることを可能にする。
【００８８】
「不連続の照明」という用語は、暗闇の期間によって中断される照明を指す。暗闇の期間は、藻類が培養される間、時間の２５％超、好ましくは時間の５０％超を構成してもよい。
【００８９】
本発明の好ましい態様によれば、照明は、不連続であり、より好ましくは点滅の形態である。点滅とは、本発明の意味において、短時間、すなわち、３０分未満の照明である。持続時間は、１５分未満、好ましくは５分未満、さらにより好ましくは１分未満であってもよい。本発明の特定の実施形態によれば、点滅の持続時間は、１秒未満であってもよい。例えば、点滅の持続時間は、１／１０秒、または２／１０秒、または３／１０秒、または４／１０秒、または５／１０秒、または６／１０秒、または７／１０秒、または８／１０秒、または９／１０秒であってもよい。照明または点滅は、通常、１５秒超の持続時間である。これは、通常、５秒〜１０分の間、好ましくは１０秒〜２分の間、より好ましくは２０秒〜１分の間である。これらの点滅の持続時間は、「低周波」の光の供給に対して適している。
【００９０】
照明の体制（光の供給）が、「低周波」である、この最後の実施形態によれば、点滅の回数は、１時間あたり約２〜３６００回であってもよい。これは、例えば、１時間あたり１００〜３６００回の点滅であってもよい。これはまた、１時間あたり、１２０〜３０００回、または４００〜２５００回、または６００〜２０００回、または８００〜１５００回の点滅であってもよい。これはまた、１時間あたり、２〜２００回、好ましくは１０〜１５０回、より好ましくは１５〜１００回、さらにより好ましくは２０〜５０回であってもよい。
【００９１】
実施形態によれば、点滅は、１／１５００００秒〜１／１０００秒の持続時間を有していてもよい。これらの点滅の持続時間は、すなわち、それぞれ、１５０ｋＨｚ〜１ｋＨｚの点滅の周波数を有する、「高周波」の照明の体制に対して適している。
【００９２】
照明の体制（光の供給）が、「高周波」である、この実施形態によれば、点滅は、１時間あたり、３．６×１０５〜５．４×１０９回の間で生じてもよい。この場合において、変光は、１ｋＨｚ〜１５０ｋＨｚの周波数、すなわち、１秒あたり、１０００〜１５０，０００回の点滅を有する。本発明のこの最後の実施形態による光の供給は、「高周波」と呼ばれる。
【００９３】
１時間あたりの点滅の回数は、点滅の強度および持続時間の機能として、選択されてもよい（下記参照）。一般に、点滅の形態で供給される光の強度は、５〜１０００μｍｏｌ・ｍ−２・ｓ−１、好ましくは５〜５００μｍｏｌ・ｍ−２・ｓ−１、または５０〜４００μｍｏｌ・ｍ−２・ｓ−１、より好ましくは１５０〜３００μｍｏｌ・ｍ−２・ｓ−１であってもよい。１μｍｏｌ・ｍ−２・ｓ−１は、文献において、しばしば使用される単位である、１μＥｍ−２・ｓ−１（アインシュタイン）に相当する。
【００９４】
本発明の別の実施形態によれば、照明は、可変であってもよく、これは、照明が、暗闇の位相によって中断されないが、代わりに、光の強度が経時的に変化することを意味する。この光の強度の変化は、規則的であってもよく、定期的または周期的であってもよい。本発明によれば、光はまた、連続および不連続の照明の位相を組み合わせて供給されてもよい。
【００９５】
本発明の好ましい実施形態によれば、従属栄養性−優勢混合栄養性の条件が使用される。スラウストキトリッドは、葉緑体を有していない。そのため、増殖のために使用されるエネルギーのほとんどは、培養液の炭素源に由来する。この場合において、光は、細胞における特定の代謝経路を誘導するが、光合成を介して炭素を固定化することを可能にしない。
【００９６】
好ましい実施形態によれば、培養物を明るくすることを、発酵槽への内部の照明装置によって、確実にし得る。したがって、照明の有効性は、光が、外側に配置された光源からの窓によって侵入する構造に対して、良好である。照明装置は、翼を備えた回転部品上に、または処理すべき主要部に浸漬された管状部分上に、またはタンクの底部もしくは上部に配置されてもよい。本発明の好ましい実施形態によれば、照明装置は、発酵槽の内部のバッフル上に位置していてもよい。このような装置は、フランス特許出願番号第１３５３６４１号に記載されている。したがって、発酵槽は、バッフルによって支えられた複数の照明源を備えていてもよく、後者は、回転混合部品の作用の下、バイオマス内の渦の形成を防止する機能を有する。これらの照明源は、好ましくはタンクの内部に前記光を拡散させることが可能な厚さの、バイオマスと適合性の材料で、これらのバッフルの少なくとも一部に、部分的にまたは完全に封入される。
【００９７】
本発明によれば、培養は、任意の公知の培養技術、例えば、フラスコまたは反応器中において行ってもよいだけでなく、発酵槽、または、前記技術を必要な培養条件で行うことを可能にすることを提供する、例えば、「流路」タイプのボウルのような、原生生物、特に、スラウストキトリッドの増殖に適切な任意の容器中で行ってもよい。
【００９８】
好ましくは、培養は、発酵槽中での原生生物の培養のための公知の方法に従って、発酵槽中で行ってもよい。
【００９９】
本発明によれば、前記バイオマスを回収するための方法の第三工程ｃ）は、所望の水分含量を有し得るバイオマスを得るための適切な条件下で行ってもよい。
【０１００】
原生生物の前記回収は、バイオマスの回収が可能な任意の技術、とりわけ、重量（ｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ）ろ過もしくは減圧下でのろ過、遠心分離、デカンテーションの方法、または、さらに、沈殿と続く重量ろ過の方法によって行ってもよい。
【０１０１】
本発明は、目的として、全てのそれらの変形において、上記に記載の本発明による方法によって得ることができるバイオマスも含む。
【０１０２】
本発明は、目的として、化粧品、医薬品または食品（ヒトまたは動物の食物摂取用）の分野における、上記に記載のバイオマスの使用も含む。
【０１０３】
動物の給餌において、家畜類の給餌、特に、集中的な家畜類の作業は、家畜またはペット、あるいは水族館の魚または鳥小屋もしくは飼育された鳥類などの、いわゆる「レジャー（ｌｅｉｓｕｒｅ）」動物とは区別される。
【０１０４】
「家畜類」という用語は、とりわけ、放牧動物（特に、食肉、牛乳、チーズおよび皮革のために飼育されるウシ；食肉、羊毛およびチーズのために飼育されるヒツジ；ヤギ）、ブタ、ウサギ、家禽（ニワトリ、メンドリ、七面鳥、カモ、ガチョウなど）、ウマ科の一員（ポニー、ウマ、コウマ）、ヒトの活動（輸送、レジャー）もしくはその飼育を支援する動物、水生動物（例えば、魚、エビ、カキおよびムール貝）を指す。しかしながら、稚魚までの魚の飼料は、それを意図する飼料および飼料組成物を含む、養殖魚のものとは区別され得る。
【０１０５】
家畜、ペットおよびレジャー動物は区別される。これらはまた、哺乳類、反芻動物を含むが、鳥類および魚を含まない。これらは、特に、イヌおよびネコを含む。
【０１０６】
本発明は、目的として、上記に記載の本発明によるバイオマスを含んでいてもよい、ヒトもしくは動物のための、食品または食品組成物も含む。「食品」という用語は、ヒトもしくは動物、特に、家畜類のための食品として使用され得る、任意の組成物を指す。
【０１０７】
本発明の実施形態によれば、食品は、乾燥されてもよく、形質転換されてもよい、バイオマスで構成されてもよく、あるいは、ヒトまたは動物の食物摂取のための食品の分野において使用される、任意の他の添加剤、担体または補助剤と混合された、乾燥されてもよく、形質転換されてもよいバイオマスで構成されてもよい。添加剤の例としては、食品保存剤、染料、調味料、ｐＨ調節剤、増量剤、増粘剤、テクスチャリング剤または結合剤が挙げられる。ビタミン、プロバイオティクスおよびプレバイオティクス、または例えば成長ホルモン、抗生物質などの医薬添加物も挙げられる。
【０１０８】
本発明の実施形態によれば、乾燥されてもよく、形質転換されてもよいバイオマスは、ヒトまたは動物の食物摂取のための食品を目的とする製品において、それ自身を、媒体、または補助剤、添加剤、食品保存剤、染料、調味料、増量剤、増粘剤、テクスチャリング剤、もしくは結合剤として、使用してもよい。
【０１０９】
本発明は、特に、動物、より具体的には家畜類のための飼料に関係する。この飼料は、典型的には、本発明によるバイオマスが組み込まれてもよい、単純な混合物、粉末、ペレット、残飯または飼葉（新鮮な飼葉、サイレージ、干し草など）の形態であると思われる。飼料は、畜産家自身によって調製されてもよいし、または動物給餌の専門家によって製造されてもよい。「飼料」という用語は、動物に給餌するために使用され得るものを指す。
【０１１０】
集中的な動物の飼育作業のために、飼料は、藻類のバイオマスに加えて、栄養基剤および栄養添加剤を含んでいてもよい。したがって、動物の飼料の割当量の必須部分は、「栄養基剤」および藻類のバイオマスからなっていてもよい。この基剤は、例として、穀類、動物および／または植物起源のタンパク質ならびに脂質の混合物からなっていてもよい。
【０１１１】
動物のための栄養基剤は、これらの動物の給餌に適合し、当業者にとって周知である。本発明の文脈において、これらの栄養基剤は、例えば、魚粉、トウモロコシ、コムギ、エンドウおよびダイズならびに他の穀類の派生物を含んでいてもよい。これらの栄養基剤は、これらが意図する様々な動物種の要求に適合し得る。これらの栄養基剤は、ビタミン、無機塩およびアミノ酸などの栄養添加剤を既に含有していてもよい。
【０１１２】
動物の飼料において使用される添加剤は、栄養基剤または藻類のバイオマスに添加されてもよい。これらの添加剤は、飼料の特定の特徴を改善するために、例えば、その風味を増強するため、動物にとって飼料の原料物質をより消化性にするため、飼料をより効果的に保存するため、または動物を保護するために添加されてもよい。これらは、大規模な集中的な飼育作業において頻繁に使用される。
【０１１３】
動物飼料において使用され得る添加剤は、特に、以下のサブカテゴリーに分けることができる（出典：ＥＦＳＡ）：
−  技術的添加剤：例えば、保存剤、抗酸化剤、乳化剤、安定剤、酸味調整剤およびサイレージ添加剤；
−  知覚的添加剤：例えば、香味剤、染料；
−  栄養添加剤：例えば、ビタミン、アミノ酸および微量元素；
−  畜産学的添加剤：例えば、プロバイオティクスおよびプレバイオティクスなどの、消化性増強剤、腸内フローラ安定剤；
−  抗コクシジウム剤および抗ヒストモナス剤（殺虫剤）。
【０１１４】
実施形態において、本発明は、本発明による方法によって得られる乾燥バイオマスを、１％〜６０％、好ましくは１％〜２０％、非常に好ましくは３％〜８％含んでいてもよい、家畜類の飼料に関する。
【０１１５】
別の実施形態において、本発明は、本発明の方法によって得られる非乾燥バイオマスを、１％〜４０％、好ましくは５％〜１０％含んでいてもよい、家畜類の飼料に関する。
【０１１６】
本発明の具体的な実施形態によれば、飼料は、家畜類、特に、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウサギ、家禽およびウマを対象としてもよい。
【０１１７】
本発明の別の具体的な実施形態によれば、飼料は、特に、少なくとも稚魚段階までの魚、実際には養殖魚を含む、水生動物を対象としてもよい。成長段階の最後でのタンパク質およびＰＵＦＡが高く、色素を含むバイオマスの使用は、（ＰＵＦＡおよび色素の存在の結果）食肉品質の改善を可能にする。
【０１１８】
本発明の別の具体的な実施形態によれば、飼料は、家畜、ペットおよび／またはレジャー動物を対象としてもよい。
【０１１９】
最後に、本発明の別の実施形態によれば、食品組成物は、ヒトを対象としてもよく、特に、小児、青年、成人または高齢者に適合する組成物であってもよい。
【０１２０】
本発明は、目的として、上記に記載の本発明によるバイオマスを含んでいてもよい、ヒトもしくは動物のための、化粧品または医薬組成物も含む。
【０１２１】
本発明によれば、化粧品または医薬組成物は、乾燥されてもよく、形質転換されてもよい、バイオマスのみを含んでいてもよく、あるいは、例えば、保存剤、染料、ｐＨ調節剤などの、化粧品または医薬品の分野において使用される、任意の他の添加剤、担体または補助剤と混合された、乾燥されてもよく、形質転換されてもよいバイオマスを含んでいてもよい。
【０１２２】
本発明は、目的として、治療、例えば、栄養不良の予防および治療における、上記に記載のバイオマスの使用も含む。栄養不良の治療において、タンパク質欠乏症が、最も有害で、治療に費用がかかることが知られている。本発明の実施形態によれば、バイオマスは、とりわけ、小児および高齢者における栄養不良を予防および／または治療するための選択肢について完全な解決策を構成し得る。これは、バランスのとれた消化可能なタンパク質の供給源を構成し得る（タンパク質欠乏症は最も有害で費用がかかる）。このタンパク質の機能は、小児の適切で健全な発達のために必要な、高栄養品質の脂質の供給源と組み合せてもよい。本発明によるバイオマスはまた、栄養不良および他の加齢関連の疾患の予防および／または治療のための高齢者による使用のために適合し得る。この文脈において、本発明によるバイオマスのカロテノイドの供給はまた、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）などの疾患の危険性がある高齢者である、これらの人々の健康のために非常に有益であり得る。
【０１２３】
したがって、バイオマスは、完全食品（ウェット形態または再水和される粉末として）；シリアルバー、トースト、ビスケット、ケーキまたはスイーツなどのスナック；クリームなどの料理用製品；粉末混合物；乳製品；穀類または飲料に組み込まれてもよい。バイオマスは、例えば、日々の食事に添加される、粉末、スプレッドまたはソースの形態で、栄養補助食品中に存在してもよい。
【実施例】
【０１２４】
本発明の他の態様及び特徴は、以下の実施例を解釈することにより明らかにされる。
【０１２５】
実施例１：２５℃での培養方法
オーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）ＣＣＡＰ４０６２／１の培養を、コンピュータ制御の自動システムを使用するための、１〜２Ｌの発酵槽（バイオリアクター）中で、準備した。系のｐＨを、塩基（ＮＨ４ＯＨ）を添加することにより調整した。培養温度を、２５℃に設定し、次いで、培養２４時間で、１８℃に低下させた。溶存酸素圧を、培養中にわたって、振とう速度（２２０〜１２００ｒｐｍ）、空気流速（０．６〜２ｖｖｍ）または酸素流速（０〜２ｖｖｍ）により、培養液中で調整した。制御装置に組み入れられた調整パラメーターは、５％〜３０％の一定ｐＯ２を維持することを可能にした。培養時間は、７２時間であった。
【０１２６】
培養中に使用した培養液の組成を以下の表に示す。
【表１】
2018521652.tif 000002
【表２】
2018521652.tif 000003
【０１２７】
グルコースの添加を、炭素とリン（Ｃ：Ｐ）のモル比が５３０：１で有する濃縮溶液の形態で行った。
【０１２８】
前培養を、２４時間、次いで７０時間の最初に、温度管理された（２６℃）筐体内のシェーカー台（１４０ｒｐｍ）において準備した。
【０１２９】
培養のモニタリング：
総バイオマス濃度を、乾燥質量（ＧＦ／Ｆフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ）上でのろ過、次いで、重量測定の前に少なくとも２４時間１０５℃でオーブン乾燥）を測定することによってモニターした。バイオマスは、明るいベージュ色の外観である。
【０１３０】
総脂質および脂肪酸含量の分析を、慣行的に文献に記載された方法に従って行った［Ｆｏｌｃｈ  Ｊ．ら、Ａ  ｓｉｍｐｌｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｏｔａｌ  ｌｉｐｉｄｓ  ｆｒｏｍ  ａｎｉｍａｌ  ｔｉｓｓｕｅｓ．、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．、１９５７年５月；２２６（１）：４９７−５０９］。
【０１３１】
結果：
【表３】
2018521652.tif 000004
【０１３２】
実施例２：３０℃での工程ａ）を有する培養方法
オーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）ＣＣＡＰ４０６２／４の培養を、コンピュータ制御の自動システムを使用するための、１〜２Ｌの発酵槽（バイオリアクター）中で、準備した。系を、塩基（ＮＨ４ＯＨ）を添加することにより、ｐＨ６に調整した。培養温度を、３０℃に設定し、次いで、培養２４時間で、１８℃に低下させた。溶存酸素圧を、培養中にわたって、振とう速度（２２０〜１２００ｒｐｍ）、空気流速（０．３〜１ｖｖｍ）または酸素流速（０〜１ｖｖｍ）により、培養液中で調整した。制御装置に組み入れられた調整パラメーターは、５％〜３０％の一定ｐＯ２を維持することを可能にした。培養時間は、４０〜１００時間であった（試験Ａ：６９時間、試験Ｂ：５１時間）。
【０１３３】
培養液は、実施例１のものと同様である。
【０１３４】
炭素：窒素：リン（Ｃ：Ｎ：Ｐ）のモル比が１９０．５：７．３：１で有する濃縮溶液の形態でのグルコースの添加を、試験Ａについて行った。試験Ｂについては、濃縮溶液は、Ｃ：Ｎ：Ｐのモル比が９５．３：３．２：１で有していた。
【０１３５】
前培養の連鎖法を、２４時間、次いで７０時間の最初に、温度管理された（２６℃）筐体内のシェーカー台（１４０ｒｐｍ）において行った。
【０１３６】
培養のモニタリング：
総バイオマス濃度を、乾燥質量（ＧＦ／Ｆフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ）上でのろ過、次いで、重量測定の前に少なくとも２４時間１０５℃でオーブン乾燥）を測定することによってモニターした。バイオマスは、明るいベージュ色の外観である。
【０１３７】
総脂質および脂肪酸含量の分析を、慣行的に文献に記載された方法に従って行った［Ｆｏｌｃｈ  Ｊ．ら、Ａ  ｓｉｍｐｌｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｏｔａｌ  ｌｉｐｉｄｓ  ｆｒｏｍ  ａｎｉｍａｌ  ｔｉｓｓｕｅｓ．、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．、１９５７年５月；２２６（１）：４９７−５０９］。
【表４】
2018521652.tif 000005
【０１３８】
実施例３：工程ｂ）の最後２５時間中に青色光照明を用いる培養方法
オーランチオキトリウム（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）ＣＣＡＰ４０６２／４の培養を、コンピュータ制御の自動システムを使用するための、５Ｌの発酵槽（バイオリアクター）中で、準備した。系を、塩基（ＮａＯＨ）を添加することにより、ｐＨ５に調整した。培養温度を、３０℃に設定し、次いで、培養２４時間で、１８℃に低下させた。制御装置に組み入れられた調整パラメーターは、５％〜３０％の一定ｐＯ２を維持することを可能にした。培養時間は、７０時間であった。培養物を、培養の４５時間の時点で、青色光（４５５ｎｍの波長）に曝露した。光源（ＬＥＤ）を、バイオリアクターの内部の二つのバッフル上に取り付けた。
【０１３９】
培養液は、実施例１のものと同様である。
【０１４０】
グルコースの添加を、Ｃ：Ｎ：Ｐのモル比が３７：４：１で有する濃縮溶液の形態で行った。
【０１４１】
前培養の連鎖法を、２４時間、次いで７０時間の最初に、温度管理された（２６℃）筐体内のシェーカー台（１４０ｒｐｍ）において行った。これに続いて、発酵槽中、２４時間前培養した。
【０１４２】
培養のモニタリング：
総バイオマス濃度を、乾燥質量（ＧＦ／Ｆフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ）上でのろ過、次いで、重量測定の前に少なくとも２４時間１０５℃のオーブン乾燥）を測定することによってモニターした。
【０１４３】
総脂質含量の分析を、慣行的に文献に記載された方法に従って行った［Ｆｏｌｃｈ  Ｊ．ら、Ａ  ｓｉｍｐｌｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｏｔａｌ  ｌｉｐｉｄｓ  ｆｒｏｍ  ａｎｉｍａｌ  ｔｉｓｓｕｅｓ．、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．、１９５７年５月；２２６（１）：４９７−５０９］。
【表５】
2018521652.tif 000006
【０１４４】
バイオマスは、黄色／オレンジ色の外観である。白色／明るいクリーム色のバイオマスを産生した、実施例１および２と比較して、色の相違は、左側のフラスコ中のカロテノイド（主に、β−カロテン、カンタキサンチン、フェニコキサンチンおよびアスタキサンチン）の存在に起因する。
【０１４５】
カロテノイドは、試験Ａにおいて測定した：１９９ｐｐｍ。
【表６】
2018521652.tif 000007
【国際調査報告】
2018521652.tif 000008
2018521652.tif 000009
2018521652.tif 000010
2018521652.tif 000011
2018521652.tif 000012
2018521652.tif 000013