(57)【要約】本発明は，デオキシコール酸（DCA）またはそのエステルまたはその薬学的に許容される塩を作製する方法を開示する。前記化合物は，脂肪沈着を除去するために適用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（DCA）またはそのエステルまたはその薬学的に許容される塩を作製する方法であって：
【化１】
2018512066.tif 000021
前記方法は，
c）式1.3の化合物を水素化条件下でH2と反応させて，式1.4の化合物を形成すること
【化２】
2018512066.tif 000022
；
d）式1.4の化合物をカルボニル還元および脱保護に付して，式1.5の化合物を得ること
【化３】
2018512066.tif 000023
；
e）式1.5の化合物を塩化ベンゾイルと反応させて，式1.6の化合物を形成すること
【化４】
2018512066.tif 000024
；
f）式1.6の化合物をオレフィン生成条件の下でジカルベン移動試薬と反応させて式1の化合物を形成すること
【化５】
2018512066.tif 000025
；
g）式1の化合物をルイス酸の存在下でメチルアクリレートと反応させて式2の化合物を形成すること
【化６】
2018512066.tif 000026
；
h）式2の化合物を水素化条件下でH2と反応させて，式3の化合物を形成すること
【化７】
2018512066.tif 000027
；
i）式3の化合物を酸化剤と反応させて式4の化合物を形成すること
【化８】
2018512066.tif 000028
；
j）式4の化合物を水素化条件下でH2と反応させて式5の化合物を形成すること
【化９】
2018512066.tif 000029
；
k）式5の化合物を還元剤と反応させて，式6の化合物を形成すること
【化１０】
2018512066.tif 000030
；および
l）式6の化合物を脱保護条件に暴露してエステルを形成し，そして場合により適切な加水分解条件に暴露してデオキシコール酸またはその薬学的に許容される塩を形成すること、
を含む方法。
【請求項２】
c）における水素化条件が，触媒としてのPd/Cおよび溶媒としてのN-メチルピロリドンである，請求項1に記載の方法。  
【請求項３】
d）におけるカルボニル還元および脱保護の条件が，化合物1.5をテトラヒドロフランに溶解し，-5〜5℃でLiAl(OtBu)3Hを滴下し，室温で撹拌し，次いでp-トルエンスルホン酸を滴下して添加することである，請求項1に記載の方法。
【請求項４】
f）におけるジカルベン移動試薬がPh3PCH2CH3Br，KOtBuであり；g）におけるルイス酸はEtAlCl2であり；h）における水素添加条件は触媒としてPd/CまたはPtO2を含み；i）における水素化条件はtert-ブチルヒドロペルオキシドおよびクロロクロム酸ピリジニウムを含み；j）における水素添加条件は触媒としてPd/CまたはPtO2を含み； k）における還元剤はLiAl（OtBu）3Hである、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
1）の脱保護および加水分解条件が，化合物6をアルカリ金属水酸化物，アルカリ金属アルコラート，アルカリ土類金属水酸化物，アルカリ土類金属アルコラートまたはそれらの混合物と反応させることを含む，請求項1に記載の方法。
【請求項６】
前記アルカリ金属水酸化物がNaOHである，請求項5に記載の方法。  
【請求項７】
式1.4の化合物を作製する方法であって，溶媒としてN-メチルピロリドンを，触媒として10％Pd/Cを用いて式1.3の化合物をH2と反応させて式1.4の化合物を形成する方法。
【化１１】
2018512066.tif 000031
【請求項８】
（Z）-3α-ベンゾキシ-5β-プレグナ-9（11），17（20）-ジエン（1）；
（E）-3α-ベンゾキシ-5β-コロ-9（11），16-ジエン-24-酸メチルエステル（2）；
3α-ベンゾキシ-5β-コロ-9（11）-アルケン-24-酸メチルエステル（3）；
3α-ベンゾキシ-5β-コロ-9（11）-エン-12-ケトン-24-カルボキシラート（4）；
3α-ベンゾキシ-5β-コラン-12-ケトン-24-酸メチルエステル（5）；
3α-ベンゾキシ-5β-コロ-9（11）-エン-12-ヒドロキシ-24-酸メチルエステル（5a）；
3α-ベンゾキシ-5β-コラン-12β-ヒドロキシ-24-酸メチルエステル（5b）；
3α-ベンゾキシ-5β-コラン-12α-ヒドロキシ-24-酸メチルエステル（6）；および
5β-アンドロスタン-9（11）-アルケン-17-（1,3-ジオキソラニル）-3-ケトン（1.4）
からなる群から選択される中間化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医薬有機合成の分野に関し，特にデオキシコール酸またはそのエステルまたはその医薬上許容される塩の新規な作製方法およびその中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂肪の迅速な除去は古代からの理想である。デオキシコール酸は，身体の脂肪沈着部位に注入されると脂肪除去特性を有することが報告されている。現在，デオキシコール酸は，主に動物の体に由来する。コストは比較的低いものの，動物の病原体やその他の有害な要素が含まれている可能性がある。
【０００３】
脂肪を除去する際のデオキシコール酸の可能性を最大限に発揮させ，動物由来製品の問題を解決するために，本発明は，デオキシコール酸を化学合成する方法を提供する。得られた生成物は，高収率，高純度を有するだけでなく，品質管理の適用が可能であり，工業生産に有用である。
【発明の概要】
【０００４】
本発明は，デオキシコール酸（DCA）またはそのエステルまたはその薬学的に許容される塩の作製方法を提供する。
【化１】
2018512066.tif 000002
前記方法は，
g）式1の化合物をルイス酸の存在下でメチルアクリレートと反応させて，式2の化合物を形成すること
【化２】
2018512066.tif 000003
；
h）式2の化合物を水素化条件下でH2と反応させて，式3の化合物を生成させること
【化３】
2018512066.tif 000004
；
i）式3の化合物を酸化剤と反応させて，式4の化合物を生成させること
【化４】
2018512066.tif 000005
；
j）式4の化合物を水素化条件下でH2と反応させて，式5の化合物を形成すること
【化５】
2018512066.tif 000006
；
k）式5の化合物を還元剤と反応させて，式6の化合物を形成すること
【化６】
2018512066.tif 000007
； および
l）式6の化合物を脱保護条件に暴露してそのエステルを形成し，そして場合により適切な加水分解条件に暴露してデオキシコール酸またはその薬学的に許容される塩を形成すること，を含む。 
【０００５】
一実施形態において，g）におけるルイス酸はEtAlCl2である。
【０００６】
一実施形態において，h）における水素化条件は，触媒としてPd/CまたはPtO2を含む。
【０００７】
一実施形態において，i）における水素化条件は，tert-ブチルヒドロペルオキシドおよびクロロクロム酸ピリジニウムを含む。
【０００８】
一実施形態において，j）における水素化条件は，触媒としてのPd/CまたはPtO2を含む。
【０００９】
一実施形態において，k）における還元剤はLiAl(OtBu)3Hである。
【００１０】
一実施形態において，l）における脱保護および加水分解条件は，式6の化合物をアルカリ金属水酸化物，アルカリ金属アルコラート，アルカリ土類金属水酸化物，アルカリ土類金属アルコラートまたはそれらの混合物と反応させることを含む。いくつかの態様において，加水分解条件は，デオキシコール酸を得るための酸処理を含む。他の態様において，対応する塩を得るために，酸処理は省略される。
【００１１】
一実施形態では，アルカリ金属水酸化物はNaOHである。
【００１２】
一実施形態では，デオキシコール酸の塩は，アルカリ土類金属アルコラートまたは水酸化物と反応させることによって作製することができる。デオキシコール酸の塩には，ナトリウム塩，カリウム塩またはリチウム塩が含まれる。
【００１３】
一実施形態では，
（Z）-3α-ベンゾキシ-5β-プレグナ-9（11），17（20）-ジエン（1）；
（E）-3α-ベンゾキシ-5β-コロ-9（11），16-ジエン-24-酸メチルエステル（2）；
3α-ベンジル-5β-コロ-9（11） - アルケン-24-酸メチルエステル（3）；
3β-ベンジル-5β-コロ-9（11） - エン-12-ケトン-24-カルボキシラート（4）；
3α-ベンゾキシ-5β-コラン-12-ケトン-24-酸メチルエステル（5）；
3α-ベンゾキシ-5β-コロ-9（11） - エン-12-ヒドロキシ-24-アシッドメチルエステル（5a）；
3α-ベンゾキシ-5β-コラン-12β-ヒドロキシ-24-酸メチルエステル（5b）； および
3α-ベンゾキシ-5β-コラン-12α-ヒドロキシ-24-酸メチルエステル（6）からなる群から選択される中間化合物が提供される。
【００１４】
好ましい一実施形態では，本発明のデオキシコール酸またはそのエステルまたはその薬学的に許容される塩は以下の方法によって作製される：
この方法は：
g）式1の化合物をルイス酸の存在下でメチルアクリレートと反応させて，式2の化合物を形成すること
【化７】
2018512066.tif 000008
；
h）式2の化合物を水素化条件下でH2と反応させて，式3の化合物を形成すること
【化８】
2018512066.tif 000009
；
i）式3の化合物を酸化剤と反応させて式4の化合物を形成すること（式3の化合物（1.2％）<2％をHPLC（面積正規化法）によりモニターし，反応を止め，クエンチし、反応を処理し；その後、ピリジニウムクロロクロメートを添加し，酸化反応で式4aの化合物を形成させて式4の化合物を得る）
【化９】
2018512066.tif 000010
；
j）式4の化合物を水素化条件下でH2と反応させて式5の化合物を形成すること（反応を停止し，ピリジニウムクロロクロメートを添加して反応工程で形成した化合物5aおよび化合物5bをそれぞれ酸化し、かつ、得られた化合物4を水素化条件下でH2と反応を続けて化合物5を得る；このように操作を繰り返して化合物5の収率を増加させる）
【化１０】
2018512066.tif 000011
；
k）式5の化合物を還元剤と反応させて，式6の化合物を得ること
【化１１】
2018512066.tif 000012
； および
l）式6の化合物を脱保護条件に暴露してエステルを形成し，そして場合により適切な加水分解条件に暴露してデオキシコール酸またはその薬学的に許容される塩を形成すること、を含む。前記の適切な加水分解条件はNaOH溶液である。  
【００１５】
一実施形態では，本発明の化合物1は，以下の方法によって作製される。
【化１２】
2018512066.tif 000013
【００１６】
一実施形態では，本発明の化合物1.4は，以下の方法：
式1.3の化合物を室温でH2と反応させて，溶媒としてのN-メチルピロリドンおよび触媒としての10％Pd/Cを用いて，式1.4の化合物を形成すること、によって作製される。
【化１３】
2018512066.tif 000014
【００１７】
本明細書で使用される用語「ルイス酸」は，EtAlCl2，塩化アルミニウム，塩化第二鉄，三フッ化ホウ素，五塩化ニオブおよびランタニドのトリフラートを含む電子対受容体を指す。 
【００１８】
「水素化剤」という用語は，分子に水素を提供することができる試薬を指す。
【００１９】
本発明を非限定的な実施例によって以下に説明する。本明細書に記載された好ましい実施形態は，限定ではなく説明のために提供されることが理解されるべきである。
【００２０】
実施例1：化合物1.2の合成
ジクロロメタン（2.0L，8V）および化合物1.1（250.0g，826.5mmol）を5L三つ口フラスコに加え，撹拌し，溶解するまで加熱した。反応溶液に濃硫酸（124.0g，1240.0mmol，98％）を滴下した。反応溶液を加熱還流し，4時間撹拌し，反応を停止した。 
【００２１】
反応液を冷却後，氷冷した水1Lにゆっくりと注ぎ，5分間攪拌した後，飽和炭酸ナトリウム溶液を滴下してpHを7〜8に調整した後，分液ロートに移し， CH2Cl2（200mL，0.8V）で2回抽出し，有機相を合わせた。 有機相を水（500mL，2V）および飽和ブライン（500mL，2V）で洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。 乾燥後，濾過により有機相を得た。 有機相をロータリーエバポレーターで除去し，粗生成物を得た。室温で，粗生成物を酢酸エチル（375mL，1.5V）で12時間煮沸し，濾過した。 濾過ケーキを酢酸エチル（50mL，0.2V）で洗浄し，排液し，20〜40℃で真空乾燥して，化合物1.2（211.0g，収率：89.7％）を得た。
【００２２】
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.76（s，1H），5.64-5.45（m，1H），2.70-2.33（m，6H），2.23-2.02（m，7H），1.72-1.56 1H），1.57-1.45（m，1H），1.36（s，3H），1.27-1.08（m，1H），0.89（s，3H）。
【００２３】
実施例2：化合物1.3の合成
化合物1.2（200.0g，703.3mmol），エチレングリコール（261.9g，4.22mol），p-トルエンスルホン酸一水和物（6.7g，35.2mmol）およびトルエン（2.0L，10V） を水セパレーター，コンデンサーチューブを取り付けた３Ｌ一口ボトルに入れ，撹拌し、2時間加熱還流反応させた。  
【００２４】
冷却後，反応液を水（800mL，4V）に注ぎ，分液ロートにかけた。水相を酢酸エチル：テトラヒドロフラン= 5：1（200mL，1V）で抽出し，有機相を合わせた。 有機相を水（300mL，1.5V）および飽和ブライン（300mL，1.5V）で洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。 乾燥後，有機相を濾別し，溶媒をロータリーエバポレーターで除去して粗生成物を得た。粗生成物を加熱下で酢酸エチル（1.0L，5V）に溶解し，続いてn-ヘプタン（400mL，2V）を添加し，室温まで冷却し，撹拌し，1時間結晶化させた。濾過ケーキを酢酸エチル：n-ヘプタン= 2.5：1（150mL，0.75V）で洗浄し，排液し，20〜30℃で真空乾燥して化合物1.3（196.2g，収率85.0％）を得た。
【００２５】
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.75（s，1H），5.54（d，J = 5.8Hz，1H），3.93（m，2H），3.88（m，2H），
2.76-2.30（m，6H），2.26-1.97（m，7H），1.87（m，1H），1.73-1.65（m，1H），1.35（s，3H），1.11（m，1H），0.86 s，3H）。
【００２６】
実施例3：化合物1.4の合成
水素置換した加圧反応器に化合物1.3（150.0g，456.8mmol），Pd/C（15.0g，10％），N-メチルピロリドン（1.5L，10V）を入れ，室温，40〜60psi，150rpmの条件で6時間撹拌した。
【００２７】
酢酸エチル（750mL，5V）を添加し，Pd/Cを濾過により除去した。水（750mL，5V）を加え，水相を酢酸エチル（300mL，2V）で2回抽出し，有機相を合わせた。有機相を水（450mL，3V）および飽和ブライン（450mL，3V）で洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥させ，濾過して有機相を得た。 ロータリーエバポレーターで溶媒を除去して，化合物1.4（135.8g，収率90.0％）を得た。  
【００２８】
TLCおよびELSD検査の後，化合物1.4は完全に5β配置であり，5α配置の構造は見出されなかった。  
【００２９】
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.44（d，J = 5.6Hz，1H），3.94-3.92（m，4H），2.50-2.40（m，2H），2.17（m，2H），2.14-1.95 （m，4H），1.49（m，4H），1.10（s，3H），0.99-0.87（m，1H），0.81（s，3H）。
【００３０】
実施例4：化合物1.5の合成
化合物1.4（130.0g，393.4mmol）およびテトラヒドロフラン（1.3L，10V）を2Lの3つ口フラスコに入れ，撹拌して窒素保護下で溶解させた。-5〜5℃に冷却し，LiAl（OtBu）3H（786.8mL，786.8mmol，1.0M）を滴下して加え，室温で30分間撹拌する。7％p-トルエンスルホン酸（260mL，2V）を滴下し，室温で6時間撹拌した。水（520mL，4V）を加え，酢酸エチル（520mL，4V）を用いて抽出し，有機相を合わせた。有機相を水（520mL，4V）および飽和ブライン（390mL，3V）で洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥させ，濾過して有機相を得た。ロータリーエバポレーターで溶媒を除去して粗生成物を得る。粗生成物を叩解し，室温下，アセトン：n-ヘプタン= 1：8（390mL，3V）で1時間洗浄し，20℃で排出して，化合物1.5（107.8g，収率95.0％）を得た。 
【００３１】
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：5.42（d，J = 5.6Hz，1H），3.73-3.60（m，1H），2.46（m，1H），2.23-1.98（m，7H），1.80-1.70 （m，2H），1.57-1.36（m，7H），1.33-1.13（m，3H），1.09（s，3H），0.82（s，3H）。
【００３２】
実施例5：化合物1.6の合成
化合物1.5（30.0g，104mmol），DMAP（1.22g，10mmol）およびトリエチルアミン（30.4g，300mmol）を300mLのジクロロメタンに溶解した。室温下，塩化ベンゾイル（28.1g，200mmol）を滴下した。 滴下終了後，還流するまで昇温し，10時間反応させる。 TLCが完全な反応を示すとき，反応を停止した。 反応液を室温まで冷却し，さらにジクロロメタン200mLを加えた。 反応溶液を100mLの水で1回洗浄し，有機相を2N HCl（150mL）で1回，飽和ブライン（100mL）で1回洗浄した。 減圧下で溶媒を除去して油状物を得，油状物を300mLのアセトンに溶解した。 これに50mLの水をゆっくり加え，固体を徐々に沈殿させた。0〜5℃で2〜4時間冷却し，濾過して，白色粉末固体化合物1.6（38.2g，収率95％）を得た。  
【００３３】
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：8.05（dd，J = 8.2,1.0Hz，2H），7.55（m，1H），7.45（m，2H），5.49（d，J = 5.6Hz，1H）， 2H），2.49（m，1H），2.32-1.99（m，7H），1.95-1.85（m，1H），1.84-1.51（m，7H），1.48-1.20（m，3H ），1.15（s，3H），0.85（s，3H）。
【００３４】
実施例6：化合物1の合成
窒素保護下で，臭化トリフェニルエチルホスホニウム（41.6g，112mmol）を150mLのテトラヒドロフランに溶解した。混合物懸濁液にカリウムtert-ブトキシド（12.6g，112mmol）を20〜30℃で添加し（反応溶液は橙色になった），室温で1時間攪拌した。化合物1.6（20g，51mmol）を溶解したテトラヒドロフラン溶液100mlを20分かけて滴下した。室温で2時間反応させる。 TLCは，出発物質の完全な変換を示した。反応液を氷水400mLに注いだ。メチルtert-ブチルエーテル（50mL）×2を加えて分液抽出した。有機層を飽和ブライン（40mL）で洗浄した。溶媒を減圧下で除去し，約40mLの容量を残した。 200mLのイソプロピルアルコールを添加した。テトラヒドロフランを減圧下で除去した。 100mLの溶媒が残っている段階で，すでに多量の固体が沈殿しており，それに20mLの水を滴下した。結晶化溶液を0〜5℃に冷却し，攪拌し，1時間結晶化させ，濾過して白色の針状結晶を得た。化合物1（17.5g，収率85％）をブロアーにより40〜50℃で乾燥させた。 
【００３５】
1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：8.06（m，2H），7.55（t，J = 8.0,8.0Hz，1H），7.44（t，J = 8.0,8.0Hz，2H），5.46 ），5.22（m，1H），5.03（m，1H），2.48-2.37（m，3H），2.33-2.20（m，1H），2.20-2.00（m，3H），1.94-1.84（m，1H ），1.81-1.60（m，9H），1.51-1.16（m，5H），1.13（s，3H），0.84（s，3H）。
【００３６】
実施例7：化合物2の合成
【化１４】
2018512066.tif 000015
化合物1（220g，544mmol）およびジクロロメタン（2200mL，10V）を5,000mL三つ口丸底フラスコに加え，攪拌して溶解させ，窒素置換した。 反応系を-5〜5℃に冷却した。 メチルアクリレート（117g，1360mmol）を約15分で滴下し，30分間撹拌し続けた。反応系の温度は-5〜5℃に制御した。続いて塩化ジエチルアルミニウム（25％ヘキサン溶液，829mL，1631mmol）の溶液を滴下し，30分間攪拌を続けた後，反応系を25〜30℃に昇温し，48時間撹拌して反応させた。HPLC（面積正規化法）によりモニターして，化合物1 <3％で反応を停止した。
【００３７】
撹拌した状態で，反応液を氷水混合液（4,400g，20V）にゆっくり加え，分液抽出し，有機相を合わせた。有機相を1mol / Lの塩酸（2,200mL，10V）および10％塩化ナトリウム溶液（2,200mL，10V）で連続的に洗浄した。減圧下で有機相の溶媒を除去した後，イソプロパノール（1320ml，6V）を加え，蒸留した液体の密度がイソプロパノールの密度と一致するまで減圧下で蒸留を続けた。イソプロピルアルコール（1,320ml，6V）をさらに加えた後，水（275ml，1.25V）を滴下した。大量の固体が沈殿した。20〜30℃で2時間撹拌した後，0〜5℃に冷却し，2時間攪拌する。攪拌を止め，フィルターをかける。濾過ケーキを少量の低温イソプロパノール/水（4/1）で洗浄し，排液し，水分が1％未満になるまで50℃で送風機で乾燥して化合物2を得た（238g，収率：89％）を得た。
【００３８】
1H-NMR（400M，DMSO-d 6）d：7.93-7.95（d，2H），7.63-7.67（t，1H），7.49-7.53（t，3H），5.43（s，1H），5.34 1H），4.92（s，1H），3.58（s，3H），2.21-2.26（m，2H），2.10-2.14（m，4H），1.95-2.03（m，2H），1.81-1.87（m， 2H），1.16-1.19（q，1H），1.10（1H，2H），1.71-1.72（m，1H），1.54-1.70（m，5H），1.47-1.53（q，1H），1.33-1.35（d，2H） s，3H），1.02-1.03（d，1H），1.01-1.02（d，3H），0.65（s，3H）。
【００３９】
融点= 109-109.7℃。
【００４０】
[α] 20 D = + 68.8（c = 1，クロロホルム）。
【００４１】
HPLC（UV，エリア）：98.4％。
【００４２】
実施例8：化合物3の合成
【化１５】
2018512066.tif 000016
1.0Lクリーンオートクレーブに化合物2（1,000g，2.04mol），テトラヒドロフラン（5000mL，5V），および10％Pd/C（50質量％，120g，12質量％）を添加した後， 窒素置換後，水素置換を行った。水素圧力を1.2MPaに維持して24時間反応させる。 HPLC（面積正規化法）でモニターし，化合物2 <2％で反応を停止した。窒素置換後，反応スラリーを取り出し，濾過した。溶媒を減圧下で濾液から除去した。アセトニトリル（2,000mL，2V）を加えた後，減圧蒸留して溶媒を除去した後，アセトニトリル（12L，12V）を加え，加熱してよく溶解させる。次の反応は，精製することなく直接行った。 
【００４３】
実施例9：化合物4の合成
【化１６】
2018512066.tif 000017
実施例8で得られた化合物3とアセトニトリルの反応溶液の温度を45〜50℃に制御した。ヨウ化銅（309g，1624mmol）を加えた後，TBHP（70％）（783g，6089mmol）を加え，24時間撹拌した。HPLC（面積正規化法）でモニターして，化合物3 <2％で反応を停止した。反応系の温度を15〜25℃に下げ，酢酸エチル（5.0L，5V）を加えた。亜硫酸ナトリウムの飽和溶液（5.0L，5V）を滴下し，攪拌し，濾過した。濾液に飽和塩化ナトリウム溶液（3.0L，3V）を加えて攪拌し，分液した。 有機相を合わせ，溶媒を減圧下で除去して系の体積を約13Lに保った。
【００４４】
上記有機相の系温度を20〜30℃で溶媒を除去した。クロロクロム酸ピリジニウム（481g，2233mmol）をバッチで添加した。HPLC（面積正規化法）でモニターし，化合物4a <2％で，反応を停止した。酢酸エチル（5.0L，5V）を加え，不溶物を濾過により除去した。濾液に飽和亜硫酸ナトリウム溶液（5.0L，5V）および飽和塩化ナトリウム溶液（3.0L，3V）を加え，攪拌し，分液し，有機相を合わせた。有機相を塩化ナトリウム溶液（3.0L，3V）で1回洗浄し，有機相の溶媒を減圧下で除去した。有機相を塩化メチレン（3000ml，3V）に加え，溶解し，シリカゲルカラム（100-200メッシュ，10.0kg，10wt）に通した。生成物を回収するために，ジクロロメタンを溶離剤として使用した。ジクロロメタン溶媒の一部を減圧下で除去した。 n-ヘプタン（15.0L，15v）を加え，減圧下に維持してジクロロメタンを除去した。系から多量の固体を析出させ，濾過して化合物4（713g，収率71％）を得た。  
【００４５】
1H-NMR（400M，DMSO-d6）δ：7.93-7.95（d，2H），7.62-7.64（t，1H），7.48-7.52（t，3H），5.64（s，1H），4.93 1H），3.58（s，3H），2.41-2.49（m，1H），2.34-2.36（m，1H），2.22-2.26（m，1H），2.10-2.13（m，2H），1.86-1.88 （m，2H），1.64-1.75（m，6H），1.32-1.55（m，7H），1.20（s，3H），1.24-1.26（m，2H），0.91-0.93（d，3H），0.86 (s，3H）。
【００４６】
m.p.=124.6-126.4℃。
【００４７】
[α]20 D =+124.8（c = 1，クロロホルム）。
【００４８】
HPLC（UV，エリア）：96.9％。
【００４９】
実施例10：化合物5の合成
【化１７】
2018512066.tif 000018
10Lの清浄で乾燥したオートクレーブに化合物4（600g，1184mmol），テトラヒドロフラン溶液（6.0L，10V）および10％Pd/C（乾燥物，150g，25重量％）を添加し，続いて窒素置換および水素置換を行った。システム圧力は1.2Mpaに保たれた。反応系を55〜65℃に加熱し，24時間攪拌した。HPLC（面積正規化法）でモニターしたて，化合物5が67％，アルケン化合物（5a）およびヒドロキシ化合物（5b）が31％，未知不純物が2％となったとき，反応を停止した。
【００５０】
Pd/Cを濾過により回収した。濾液の溶媒を減圧下で除去し，酢酸エチル（6.0L，10V）に溶解した。 システム温度は20〜30℃に制御した。 クロロクロム酸ピリジニウム（76.4g，355mmol）をバッチで添加し，12時間撹拌し続けた。 HPLCは，エノール化合物およびヒドロキシル化合物が1％未満であることを示した。 セライト床で濾過し，濾液を水で洗浄し，有機相を合わせた。 有機相の溶媒を減圧下で除去し，テトラヒドロフラン（6.0L，10V）に溶解して溶液を得た。
【００５１】
この溶液を10Lの清浄で乾燥したオートクレーブに加えた。先に回収したPd/Cを添加した。水素圧を1.5MPaに保ちながら，55〜65℃の温度下で24時間反応させた。HPLCでモニターしたところ，化合物4は<1％であり，化合物5は92％であった。
【００５２】
反応系を0.22ミクロンの有機フィルターで濾過してPd/Cを除去した。活性炭（60g，10％wt）を加え，30分間加熱還流した。 反応系を0.22ミクロンの有機フィルターで濾過して活性炭を除去した。 濾液の溶媒を減圧下で除去し，ジクロロメタン（1800ml，3V）およびメタノール（4800ml，8V）を添加した。 ジクロロメタンを減圧下で除去し，操作中に白色固体を沈殿させた。結晶化のために冷却した。系の温度を-5〜0℃に維持し，2時間攪拌した。撹拌を止め，ろ過した。
【００５３】
濾過ケーキを冷メタノール（600mL，1V）で洗浄し，排液し，一定重量になるまで50℃で強制風乾して化合物5（510g，収率85％）を得た。
【００５４】
1H-NMR（400M，DMSO-d 6）δ：7.95-7.96（d，2H），7.62-7.66（m，1H），7.49-7.52（t，2H），4.84-4.89（m，1H），3.57 3H），2.44-2.54（m，1H），2.30-2.37（m，1H），2.17-2.25（m，1H），1.58-1.92（m，13H），1.22-1.49（m，8H）， 1.05-1.17（m，2H），1.02（s，3H），0.97（s，3H），0.75-0.77（m，3H）。
【００５５】
融点= 123.2-125.2℃。
【００５６】
[α] 20 D = + 107.3（c = 1，クロロホルム）。
【００５７】
HPLC（UV，エリア）：97.2％。  
【００５８】
実施例11：化合物6の合成
【化１８】
2018512066.tif 000019
化合物5（170g，334mmol）およびテトラヒドロフラン（1020ml，6V）を窒素保護下で3,000mlの三つ口丸底フラスコに添加し，撹拌して溶解させた。系の温度は-5〜5℃に制御した。リチウムトリ-t-ブトキシアルミニウムヒドリドテトラヒドロフラン（501mL，501mmol）の溶液を滴下した。滴下終了後，-5〜5℃で24時間攪拌を続ける。HPLC（エリア）でモニターして，化合物5が1％未満であるとき，反応を停止した。系を冷却し，系の温度を10℃以下に維持した。 2mol / L塩酸（600ml）を滴下し，分液し，有機相を合わせた。飽和食塩水（170ml，1V）と2mol / l塩酸（170ml，1V）を一緒に撹拌して洗浄し，分液して有機相を得る。飽和塩化ナトリウム（340ml，2V）で洗浄し，分液して有機相を得る。有機相の溶媒の一部を減圧下で除去した。残った溶媒量が約300mlのとき，N-ヘプタン（1700ml，10V）を加えて攪拌し，分液して有機相を得た。テトラヒドロフランを減圧蒸留（蒸留した液体とn-ヘプタンとの濃度の間の稠度によって決定）により除去し，同時に系の容積を約1700mlの溶液とし，10〜25℃で2時間加熱し，ろ過する。フィルターケーキを少量のn-ヘプタンで洗浄し，排液して化合物6（145g，収率85％）を得た。 
【００５９】
1H-NMR（400M，DMSO-d 6）δ：7.96-7.98（d，2H），7.63-7.67（t，1H），7.50-7.54（t，2H），4.88（m，1H），4.27-4.28 （m，1H），4.27-4.28（d，1H），3.80-3.81（d，1H），3.60（s，3H），2.28-2.35（m，1H），2.16-2.24（m，1H） 1.97（m，2H），1.68-1.82（m，6H），1.55-1.66（m，4H），1.48-1.51（m，2H），1.32-1.48（m，4H），1.14-1.28（m，3H ），0.96-1.14（m，3H），0.93（s，3H），0.91（s，3H），0.61（s，3H）。
【００６０】
融点=107.7-112.3℃。
【００６１】
[α] 20 D = + 50.9（c=1，クロロホルム）。
【００６２】
HPLC（UV，エリア）：98.81％。
【００６３】
実施例12：粗デオキシコール酸の合成
【化１９】
2018512066.tif 000020
2,000mlの3つ首丸底フラスコに，化合物6（100g，196mmol），テトラヒドロフラン（600g，6V）およびメタノール（600mL，6V）を加え，攪拌して溶解させた。システム温度は25℃未満に維持した。 4 mol/L水酸化ナトリウム溶液（196 ml，784 mmol）を滴下し，20-30℃の温度で24時間攪拌した。反応の完了をHPLCでモニターした。水（800ml，8V）を加えて系の温度を10〜15℃に下げた後，1mol / Lの塩酸を滴下してpHを9〜10に調整した。次いで，有機溶媒を減圧下で除去し，10〜25℃に冷却し，ジクロロメタン（500ml×2）で2回洗浄した。 pHを1mol / Lの塩酸で1〜2に調整し，2時間撹拌し，濾過した。濾液を水（500ml，5V）で洗浄し，排液し，強制風乾して101gの固体を得た。15〜25℃で生成物をメチルtert-ブチルエーテル（1000ml，10V）に溶解し，12時間以上攪拌し，濾過した。濾過ケーキをメチルtert-ブチルエーテル（400ml，4V）で洗浄した後，強制乾燥してデオキシコール酸の粗生成物（73.1g，95％）を得た。 
【００６４】
実施例13：デオキシコール酸の精製
粗デオキシコール酸（100g，196mmol）および10％メタノールを含むジクロロメタン溶液（1500ml，15V）を2000mlの3つ口丸底フラスコに加え，加熱撹拌して溶解させた。不溶物をろ別し，同時にジクロロメタン（2000ml）を滴下しながら加熱して蒸留を進め，滴下速度と液体蒸留速度との一致性を確保した。気相測定システムを通過するメタノール含量は2.5％〜3％であった。温度を5〜10℃に下げ，2時間撹拌し，次いで濾過した。フィルターケーキをジクロロメタン（200ml，2V）で洗浄し，強制乾燥させた。HPLC（ELSD）で測定した最大単一不純物は0.1％未満であった。得られた生成物（ジクロロメタン）を水（1000ml）に加え，水酸化ナトリウム溶液を加えてpHを9-10に調整した。次に，1mol / Lの塩酸を加えてpHを1-2に調整した。10〜25℃で2時間攪拌した後，濾過を行い，フィルターケーキを水（500ml）で洗浄した。次いで，フィルターケーキを60-80℃で4-8時間純水（2,000ml，20V）でパルプ化し，次いで濾過して排液した。乾燥後，純度の高いデオキシコール酸が得られた（92g，収率92％）。
【００６５】
1H-NMR（400M，DMSO-d6）δ：11.99（s，1H），4.38-4.58（m，1H），4.21-4.30（m，1H），3.71-3.79（m，1H），3.30-3.51 （m，2H），2.12-2.31（m，1H），2.05-2.12（m，1H），1.71-1.91（m，4H），1.42-1.71（m，5H），1.28-1.38（m，9H） 1.15-1.25（m，3H），1.11（s，3H），0.95-1.08（m，2H），0.91（d，3H），0.86（s，3H）。
【００６６】
融点= 173.2−174.1℃。
【００６７】
[α]20 D=+68.8（c=1，クロロホルム）；[α]20 D = + 55.4（c = 1，エタノール）。
【００６８】
HPLC（ELSD）純度：99.9％。
【国際調査報告】
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