(57)【要約】  カロテノイド（限定されるものではないがフコキサンチンを含む）と脂肪酸とを含む微細藻類抽出物組成物および微細藻類乾燥バイオマス組成物が提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
フコキサンチンと脂肪酸とを含む微細藻類抽出物を含む組成物であって、モノサッカライドおよびジサッカライドが前記微細藻類抽出物の０．７乾燥重量％未満を占める、組成物。
【請求項２】
前記フコキサンチンおよび脂肪酸が、それぞれ前記微細藻類抽出物の２乾燥重量％超および３０乾燥重量％超を占める、請求項１の組成物。
【請求項３】
前記フコキサンチンと前記モノサッカライドおよびジサッカライドとの比が、少なくとも４：１である、請求項１の組成物。
【請求項４】
グルコースが前記微細藻類抽出物の０．１乾燥重量％未満を占める、請求項１の組成物。
【請求項５】
前記フコキサンチンが、前記微細藻類抽出物の３乾燥重量％超を占める、請求項１の組成物。
【請求項６】
前記微細藻類抽出物が、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチンおよびβ−カロテンから選択される１種以上のカロテノイドまたはその異性体をさらに含む、請求項１の組成物。
【請求項７】
前記脂肪酸が、飽和脂肪酸、モノ不飽和脂肪酸、多価不飽和脂肪酸、トランス脂肪酸またはそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される、請求項１の組成物。
【請求項８】
前記飽和脂肪酸が、酪酸、カプロン酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ペンタデセン酸、ヘプタデセン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、リグノセリン酸またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である、請求項７の組成物。
【請求項９】
前記モノ不飽和脂肪酸が、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸、ドコセン酸またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である、請求項７の組成物。
【請求項１０】
前記多価不飽和脂肪酸が、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、リノール酸、αリノレン酸、γリノレン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である、請求項７の組成物。
【請求項１１】
２％超のフコキサンチンと、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチンおよびβ−カロテンから選択される１種以上のカロテノイドまたはその異性体と、パルミトレイン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、アラキドン酸（ＡＡ）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはそれらの異性体と、を含む微細藻類抽出物を含む組成物。
【請求項１２】
前記フコキサンチンが、前記微細藻類抽出物の３乾燥重量％超を占める、請求項１１の組成物。
【請求項１３】
前記フコキサンチンが、前記微細藻類抽出物の９乾燥重量％超を占める、請求項１１の組成物。
【請求項１４】
前記パルミトレイン酸が、前記微細藻類抽出物の１８乾燥重量％超を占める、請求項１１の組成物。
【請求項１５】
前記ＥＰＡが、前記微細藻類抽出物の２０乾燥重量％超を占める、請求項１１の組成物。
【請求項１６】
前記ＡＡが、前記微細藻類抽出物の０．３乾燥重量％超を占める、請求項１１の組成物。
【請求項１７】
前記ＤＨＡが、前記微細藻類抽出物の０．２乾燥重量％超を占める、請求項１１の組成物。
【請求項１８】
ヨウ素が、前記微細藻類抽出物の０．２乾燥重量ｐｐｍ未満を占める、請求項１〜１７のいずれかの組成物。
【請求項１９】
重金属が、前記微細藻類抽出物の１０乾燥重量ｐｐｍ未満を占める、請求項１〜１７のいずれかの組成物。
【請求項２０】
乾燥重量で１．６％超のフコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスを含む組成物。
【請求項２１】
モノサッカライドおよびジサッカライドが前記微細藻類乾燥バイオマスの２．７乾燥重量％未満を占める、請求項１６の組成物。
【請求項２２】
前記微細藻類抽出物が、Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ  ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ、Ｎａｖｉｃｕｌａ  ｐｅｌｌｉｃｕｌｏｓａ、Ａｍｐｈｏｒａ、Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓ  ａｆｆ．  Ｇａｌｂａｎａ、Ｏｄｏｎｔｅｌｌａ  ａｕｒｉｔａ、Ｎｉｔｚｓｃｉａ  ｃｌｏｓｔｅｒｉｕｍ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｔｈｅｃａ  ｃｌｏｓｔｅｒｉｕｍ、Ｃｈａｅｔｏｓｅｒｏｓ  ｓｐ．およびＥｍｉｌｉａｎｉａ  ｈｕｘｌｅｙｉからなる群より選択される微細藻類またはそれらの組み合わせから得られる、請求項１〜２１のいずれか１項の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本出願は、２０１５年４月１３日に出願された米国仮特許出願第６２／１４６，４６９号および２０１６年２月８日に出願された米国仮特許出願第６２／２９２，４２１号の恩典を主張し、これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、限定されるものではないがカロテノイドおよび／または脂肪酸を含む抽出物を含む、微細藻類抽出物組成物および微細藻類乾燥バイオマス組成物を対象とする。
【背景技術】
【０００３】
微細藻類は、海洋系または淡水系のいずれかで生育する。微細藻類は、別個に存在するか鎖状または群で存在する単細胞の種である。微細藻類は光合成を行うことができ、水と二酸化炭素をバイオマスと酸素に変換する、海洋における一次生産者である。微細藻類の種は、カロテノイド、抗酸化物質、脂肪酸、酵素、ポリマー、ペプチド、毒素およびステロールなど、独特の生成物を生産する。
【０００４】
珪藻は、微細藻類であり、主にシリカでできた細胞壁から構成され、主に光合成性である。珪藻の主な色素は、クロロフィルａおよびｃ、β−カロテン、フコキサンチン、ジアトキサンチンならびにジアジノキサンチンである。
【０００５】
微細藻類由来の治療用補助剤は、β−カロテン、アスタキサンチン、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）（ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）など）およびポリサッカライド（β−グルカンなど）などの化合物が優勢である重要な市場を構成する。
【０００６】
フコキサンチンは、抗癌特性、抗酸化特性、抗糖尿病特性、抗肥満特性および抗炎症特性を示すカロテノイドである。高レベルのフコキサンチンを単独で、または栄養補助的価値のある追加的なカロテノイドおよび／または脂肪酸と共に、含む微細藻類バイオマスが必要とされている。
【０００７】
さらに、フコキサンチンはｐＨ、温度および光に対して不安定であるため、フコキサンチンの抽出は課題を伴う。さらに、大型藻類から抽出した場合、得られた抽出物は、大型藻類が得た重金属およびヨウ素を含む。従って、重金属およびヨウ素を本質的に含まず、糖類が低レベルである、相当量のフコキサンチンを含む改善された抽出物が必要とされている。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、低いサッカライドレベルと共に高レベルのカロテノイド（具体的にはフコキサンチン）と必須脂肪酸とを示す微細藻類抽出物組成物を提供する。
【０００９】
一態様によれば、フコキサンチンと脂肪酸とを含む微細藻類抽出物を含む組成物であって、モノサッカライドおよびジサッカライドが微細藻類抽出物の０．７乾燥重量％未満を占める組成物が提供される。一実施形態において、抽出物はグルコースを含み、前記グルコースは、微細藻類抽出物の０．１乾燥重量％未満を占める。一実施形態において、フコキサンチンとモノサッカライドおよびジサッカライドとの比は、少なくとも４：１である。一実施形態において、フコキサンチンおよび脂肪酸は、それぞれ前記微細藻類抽出物の２乾燥重量％超および３０乾燥重量％超を占める。
【００１０】
別の実施形態において、微細藻類抽出物は、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチンおよびβ−カロテンから選択される１種以上のカロテノイドまたはその異性体をさらに含む。
【００１１】
別の実施形態において、前記脂肪酸は、飽和脂肪酸、モノ不飽和脂肪酸、多価不飽和脂肪酸、トランス脂肪酸またはそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される。別の実施形態において、前記飽和脂肪酸は、酪酸、カプロン酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ペンタデセン酸、ヘプタデセン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、リグノセリン酸またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である。別の実施形態において、前記モノ不飽和脂肪酸は、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸、ドコセン酸またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である。別の実施形態において、前記多価不飽和脂肪酸は、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、リノール酸、αリノレン酸、γリノレン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である。
【００１２】
別の態様によれば、フコキサンチンと、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチンおよびβ−カロテンから選択される１種以上のカロテノイドまたはその異性体と、パルミトレイン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、アラキドン酸（archidonic acid）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはそれらの異性体と、を含む微細藻類抽出物を含む組成物が提供される。
【００１３】
別の実施形態において、前記フコキサンチンは、前記微細藻類抽出物の２乾燥重量％超を占める。別の実施形態において、前記フコキサンチンは、前記微細藻類抽出物の３乾燥重量％超を占める。別の実施形態において、前記フコキサンチンは、前記微細藻類抽出物の９乾燥重量％超を占める。
【００１４】
別の実施形態において、前記パルミトレイン酸は、前記微細藻類抽出物の１８乾燥重量％超を占める。別の実施形態において、前記エイコサペンタエン酸は、前記微細藻類抽出物の２０乾燥重量％超を占める。別の実施形態において、前記アラキドン酸は、前記微細藻類抽出物の１乾燥重量％超を占める。アラキドン酸、前記ＤＨＡは、前記微細藻類抽出物の０．２乾燥重量％超を占める。
【００１５】
別の実施形態において、ヨウ素は、前記微細藻類抽出物の０．２乾燥重量ｐｐｍ未満を占める。別の実施形態において、重金属は、前記微細藻類抽出物の１０乾燥重量ｐｐｍ未満を占める。
【００１６】
別の実施形態において、前記微細藻類抽出物は、Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ  ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ、Ｎａｖｉｃｕｌａ  ｐｅｌｌｉｃｕｌｏｓａ、Ａｍｐｈｏｒａ、Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓ  ａｆｆ．  Ｇａｌｂａｎａ、Ｏｄｏｎｔｅｌｌａ  ａｕｒｉｔａ、Ｎｉｔｚｓｃｉａ  ｃｌｏｓｔｅｒｉｕｍ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｔｈｅｃａ  ｃｌｏｓｔｅｒｉｕｍ、Ｃｈａｅｔｏｓｅｒｏｓ  ｓｐ．およびＥｍｉｌｉａｎｉａ  ｈｕｘｌｅｙｉからなる群より選択される微細藻類またはそれらの組み合わせから得られる。
【００１７】
別の態様によれば、乾燥重量で１．６％超のフコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスを含む組成物が提供される。別の実施形態において、モノサッカライドおよびジサッカライドは、微細藻類乾燥バイオマスの２．７乾燥重量％未満を占める。
【００１８】
本発明のさらなる実施形態および適用可能性の全範囲は、以下に提示される詳細な説明から明らかになるであろう。しかし、本発明の趣旨および範囲に含まれる様々な変更および改変が、この詳細な説明から当業者に明らかになるであろうから、詳細な説明および特定の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示してはいるものの、単に実例として提示されているに過ぎないということが理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】４５０ｎｍにて記録されたＰ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類バイオマスについてのダイオードアレイ検出付高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ−ＤＡＤ）のクロマトグラム。
【図２】４５０ｎｍにて記録されたＰ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類抽出物についてのＨＰＬＣ−ＤＡＤのクロマトグラム。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
発明の詳細な説明
一部の実施形態において、本発明は、高レベルの１種以上のカロテノイドおよび／または脂肪酸を含む微細藻類抽出物組成物を提供する。一部の実施形態において本発明は、高レベルの１種以上のカロテノイドおよび／または脂肪酸ならびに低いサッカライドレベルを含む微細藻類抽出物組成物を提供する。
【００２１】
本発明は、本発明の微細藻類抽出物が、様々な分野および用途に関して有利である独特の組成を有するという発見に部分的に基づく。以下で実証されるように、本発明の微細藻類抽出物は、高いフコキサンチンレベルおよび極端に低いサッカライドレベルを示す。
【００２２】
一部の実施形態において、微細藻類抽出物またはその任意の調合物は、栄養補助剤、医薬組成物および／または美容組成物として使用されてよい。非限定的な例では、微細藻類抽出物は、栄養補助剤の乾燥調合物中に組み込まれ、ゲルカプセル、錠剤、サシェ等にパッケージ化されてよい。さらに別の例では、この産物は、化粧品用または軟カプセルへのパッケージ化用の液体の形態で有用である可能性がある。
【００２３】
本明細書で使用される場合、「微細藻類」なる用語は、任意の単細胞光合成微生物を意味する。一実施形態において、微細藻類抽出物は、珪藻微細藻類から抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍから抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ｎａｖｉｃｕｌａ  ｐｅｌｌｉｃｕｌｏｓａから抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ａｍｐｈｏｒａから抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ｉｓｏｃｈｒｙｓｉｓ  ａｆｆ．  Ｇａｌｂａｎａから抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ｏｄｏｎｔｅｌｌａ  ａｕｒｉｔａから抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ｎｉｔｚｓｃｉａ  ｃｌｏｓｔｅｒｉｕｍから抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｔｈｅｃａ  ｃｌｏｓｔｅｒｉｕｍから抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ｃｈａｅｔｏｓｅｒｏｓ  ｓｐから抽出される。一実施形態において、微細藻類抽出物は、Ｅｍｉｌｉａｎｉａ  ｈｕｘｌｅｙｉから抽出される。
【００２４】
一実施形態において、微細藻類は、野生型の微細藻類である。別の実施形態において、微細藻類は、遺伝子改変された微細藻類である。
【００２５】
本明細書で使用される場合、微細藻類抽出物は、微細藻類から抽出された材料を指す。一実施形態において、微細藻類は、限定されるものではないがろ過、エアーフローテーション（air flotation）および遠心分離を含む任意の従来の手段によって抽出の前に収穫されてよい。
【００２６】
抽出方法
一実施形態において、抽出は、当技術分野において公知である任意の手段によって実施される。別の実施形態において、抽出は、機械的抽出である。別の実施形態において、抽出は、有機溶媒を用いることによって実施される。一実施形態において、有機溶媒は、水に少なくとも部分的に混和性である。水に混和性である溶媒の非限定的な例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、４個以下の炭素を含む他のアルコール、アセトン、４個以下の炭素を含むケトン、環状エーテル（ジオキサンおよびテトラヒドロフランなど）、水混和性エーテル（ジエチルエーテルなど）、約４：１以下の炭素原子対酸素原子の比を有する他の酸素含有有機分子、およびアセトニトリル、またはそれらの組み合わせが挙げられる。別の実施形態において、有機溶媒は、水に不混和である。水に不混和である有機溶媒の非限定的な例としては、アルカン（ヘキサン、ペンタン、ヘプタン、オクタンなど）、エステル（酢酸エチル、酢酸ブチルなど）、ケトン（メチルエチルケトン（ＭＥＫ）、メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）など）、芳香族化合物（トルエン、ベンゼンなど）、シクロヘキサン、テトラヒドロフラン、ハロアルカン（クロロホルム、トリクロロエチレンなど）およびエーテル（ジエチルエーテルなど）、またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【００２７】
「極性溶媒」なる用語は、本明細書で使用される場合、酸−塩基相互作用、水素結合、双極子−双極子相互作用を介して、または双極子誘起双極子相互作用によって、他の化合物またはそれ自身と相互作用する傾向がある溶媒を意味する。極性溶媒の非限定的な例としては、エタノール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、メタノール、グリセロール、プロパノール、ブタノール、ジプロピレングリコール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、ギ酸、酢酸およびアセトンが挙げられる。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。さらに別の実施形態によれば、抽出は、少なくとも２種の溶媒の組み合わせを用いて実施される。
【００２８】
一部の実施形態において、カロテノイド含有微細藻類抽出物は、例えば、オレオレジンの形態である。「オレオレジン」なる用語は、微細藻類由来のカロテノイド含有材料の脂質抽出物を指す。
【００２９】
別の実施形態において、抽出は、当技術分野で知られているように超臨界流体ＣＯ２（ＳＣＦ−ＣＯ２）を用いることによって実施される。本明細書で使用される場合、超臨界流体ＣＯ２は、明確な液相および気相が存在しない、その臨界点を超えた温度（例えば、４０〜６０℃）および圧力のＣＯ２を指す。一実施形態において、超臨界流体ＣＯ２は、気体のように固体を通って流れ出すことができ、液体のように物質を溶解することができる。別の実施形態において、抽出は、ＳＣＦ−ＣＯ２および共溶媒を用いることによって実施される。一実施形態において、共溶媒は、エタノール、アセトン、メタノールおよびそれらの任意の組み合わせから選択される。
【００３０】
一実施形態において、溶媒による抽出は、ＳＣＦ−ＣＯ２抽出の後に実施される。一実施形態において、溶媒での抽出は、液液抽出である。一実施形態において、溶媒は極性溶媒である。一実施形態において、溶媒は、エタノール、メタノール、アセトン、ヘキサンおよびヘプタンからなる群より選択される。一部の実施形態では、溶媒による抽出に続いて、第２の溶媒による第２の抽出が行われる。一部の実施形態において、第２の溶媒は極性溶媒である。
【００３１】
溶媒抽出および分配としても知られている「液液抽出」なる用語は、ある液体から別の液相への物質の抽出を指す。液液抽出において、物質は、混ざらない２種の異なる液体（溶媒）（非限定的な例では水と有機溶媒など）における、それらの相対的溶解度に基づいて分離される。
【００３２】
非限定的な例では、超臨界流体ＣＯ２（ＳＣＦ−ＣＯ２）を用いることによって抽出が実施された後、極性溶媒（エタノールで抽出される物質を濃縮するためのエタノールなど）による抽出が行われ、続いて、第２の極性溶媒（例えば、エタノール、ケトン、エステル等）での第２の抽出が行われる。
【００３３】
微細藻類抽出物
一実施形態において、微細藻類抽出物は、乾燥重量で１．７％超、あるいは１．８％超、あるいは１．９％超、あるいは２％超、あるいは３％超、あるいは４％超、あるいは４％超、あるいは５％超、あるいは６％超、あるいは７％超、あるいは８％超、あるいは９％超、あるいは１０％超、あるいは１１％超、あるいは１２％超、あるいは１３％超、あるいは１４％超、の量でフコキサンチンを含む。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、微細藻類抽出物は、乾燥重量で２％超の量でフコキサンチンを含む。別の実施形態において、微細藻類抽出物は、乾燥重量で３％〜１５％の量でフコキサンチンを含む。
【００３４】
本明細書で使用される場合、乾燥重量（ＤＷ）なる用語は、乾燥した材料の重量を指す。
【００３５】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンと他のカロテノイドとを含む。一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンとβ−カロテンまたはその異性体とを含む。一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンとジアジノキサンチンまたはその異性体とを含む。一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンとジアトキサンチンまたはその異性体とを含む。
【００３６】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、脂肪酸をさらに含む。一実施形態において、脂肪酸は、微細藻類抽出物の４０乾燥重量％超、あるいは４５乾燥重量％超、あるいは５０乾燥重量％超、あるいは５５乾燥重量％超、あるいは６０乾燥重量％超、あるいは７０乾燥重量％超、あるいは７５乾燥重量％超、あるいは８０乾燥重量％超、あるいは８５乾燥重量％超、あるいは９０乾燥重量％超、あるいは９５乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００３７】
一実施形態において、脂肪酸は、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、トランス脂肪酸およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される。
【００３８】
一実施形態において、脂肪酸は、飽和脂肪酸、モノ不飽和脂肪酸、多価不飽和脂肪酸、トランス脂肪酸またはそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される。
【００３９】
以下で実証されるように、微細藻類抽出物中の飽和脂肪酸のレベルは、大型藻類抽出物中の飽和脂肪酸のレベルよりも少なくとも５、６、７または８倍低い。
【００４０】
一実施形態において、飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の８乾燥重量％超、あるいは９乾燥重量％超、あるいは１０乾燥重量％超、あるいは１１乾燥重量％超、あるいは１２乾燥重量％超、あるいは１３乾燥重量％超、あるいは１４乾燥重量％超、あるいは１５乾燥重量％超、あるいは１６乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の８乾燥重量％未満、あるいは９乾燥重量％未満、あるいは１０乾燥重量％未満、あるいは１１乾燥重量％未満、あるいは１２乾燥重量％未満、あるいは１３乾燥重量％未満、あるいは１４乾燥重量％未満、あるいは１５乾燥重量％未満、あるいは１６乾燥重量％未満、あるいは２０乾燥重量％未満、あるいは２５乾燥重量％未満、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の１０乾燥重量％未満を占める。一実施形態において、飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の１５乾燥重量％未満を占める。一実施形態において、飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の５〜２０乾燥重量％、あるいは５〜１８乾燥重量％、あるいは６〜１８乾燥重量％、あるいは７〜１８乾燥重量％、あるいは５〜１５乾燥重量％、あるいは５〜１０乾燥重量％、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００４１】
一実施形態において、不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の３０乾燥重量％超、あるいは３５乾燥重量％超、あるいは４０乾燥重量％超、あるいは４５乾燥重量％超、あるいは４６乾燥重量％超、あるいは５０乾燥重量％超、あるいは５４乾燥重量％超、あるいは５５乾燥重量％超、あるいは５６乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の４０〜７０乾燥重量％、あるいは４５〜６０乾燥重量％、あるいは５０〜７０乾燥重量％、あるいは５０〜６５乾燥重量％、あるいは５０〜６０乾燥重量％、あるいは５５〜６５乾燥重量％、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００４２】
一実施形態において、多価不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の１５乾燥重量％超、あるいは１６乾燥重量％超、あるいは１７乾燥重量％超、あるいは１８乾燥重量％超、あるいは１９乾燥重量％超、あるいは２０乾燥重量％超、あるいは２１乾燥重量％超、あるいは２２乾燥重量％超、あるいは２３乾燥重量％超、あるいは２４乾燥重量％超、あるいは２５乾燥重量％超、あるいは２６乾燥重量％超、あるいは２７乾燥重量％超、あるいは２８乾燥重量％超、あるいは２９乾燥重量％超、あるいは３０乾燥重量％超、あるいは３１乾燥重量％超、あるいは３２乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、多価不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の２０乾燥重量％超を占める。一実施形態において、多価不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の２５乾燥重量％超を占める。一実施形態において、多価不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の１５〜５０乾燥重量％、あるいは１５〜４０乾燥重量％、あるいは２０〜４０乾燥重量％、あるいは２５〜４０乾燥重量％、あるいは２０〜３５乾燥重量％、あるいは２５〜３５乾燥重量％、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００４３】
一実施形態において、モノ不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の１０乾燥重量％超、あるいは１１乾燥重量％超、あるいは１２乾燥重量％超、あるいは１３乾燥重量％超、あるいは１４乾燥重量％超、あるいは１５乾燥重量％超、あるいは１６乾燥重量％超、あるいは１７乾燥重量％超、あるいは１８乾燥重量％超、あるいは１９乾燥重量％超、あるいは２０乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、モノ不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の１５乾燥重量％超を占める。一実施形態において、モノ不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の１８乾燥重量％超を占める。一実施形態において、モノ不飽和脂肪酸は、微細藻類抽出物の１０〜３０乾燥重量％、あるいは１２〜３０乾燥重量％、あるいは１５〜３０乾燥重量％、あるいは１０〜２８乾燥重量％、あるいは１０〜２５乾燥重量％、あるいは１５〜２８乾燥重量％、あるいは１５〜２５乾燥重量％、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００４４】
一実施形態において、トランス脂肪酸は、微細藻類抽出物の３乾燥重量％超、あるいは３．５乾燥重量％超、あるいは４乾燥重量％超、あるいは４．５乾燥重量％超、あるいは５乾燥重量％超、あるいは５．５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは６．５乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、トランス脂肪酸は、微細藻類抽出物の５乾燥重量％超を占める。一実施形態において、トランス脂肪酸は、微細藻類抽出物の６乾燥重量％超を占める。一実施形態において、トランス脂肪酸は、微細藻類抽出物の３〜１５乾燥重量％、あるいは４〜１５乾燥重量％、あるいは３〜１０乾燥重量％、あるいは３〜９乾燥重量％、あるいは４〜１０乾燥重量％、あるいは４〜９乾燥重量％、あるいは５〜９乾燥重量％、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００４５】
一実施形態において、飽和脂肪酸は、酪酸、カプロン酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ペンタデセン酸、パルミチン酸（ＰＡ）、ヘプタデセン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、リグノセリン酸またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である。
【００４６】
一実施形態において、モノ不飽和脂肪酸は、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸、ドコセン酸またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である。
【００４７】
一実施形態において、多価不飽和脂肪酸は、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、リノール酸、αリノレン酸、γリノレン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはそれらの異性体からなる群より選択される１種以上の脂肪酸である。
【００４８】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、パルミトレイン酸またはその異性体をさらに含み、ここでパルミトレイン酸は、微細藻類抽出物の５乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは１０乾燥重量％超、あるいは１１乾燥重量％超、あるいは１２乾燥重量％超、あるいは１３乾燥重量％超、あるいは１４乾燥重量％超、あるいは１５乾燥重量％超、あるいは１６乾燥重量％超、あるいは１７乾燥重量％超、あるいは１８乾燥重量％超、あるいは１９乾燥重量％超、あるいは２０乾燥重量％超、あるいは２１乾燥重量％超、あるいは２２乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００４９】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）またはその異性体をさらに含み、ここで前記エイコサペンタエン酸は、微細藻類抽出物の１．５乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、あるいは４乾燥重量％超、あるいは５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％超、あるいは７．５乾燥重量％超、あるいは１０乾燥重量％超、あるいは１１乾燥重量％超、あるいは１２乾燥重量％超、あるいは１３乾燥重量％超、あるいは１４乾燥重量％超、あるいは１５乾燥重量％超、あるいは１６乾燥重量％超、あるいは１７乾燥重量％超、あるいは１８乾燥重量％超、あるいは１９乾燥重量％超、あるいは２０乾燥重量％超、あるいは２１乾燥重量％超、あるいは２２乾燥重量％超、あるいは２３乾燥重量％超、あるいは２４乾燥重量％超、あるいは２５乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００５０】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、アラキドン酸（ＡＡ）またはその異性体をさらに含み、ここで前記ＡＡは、微細藻類抽出物の０．１乾燥重量％超、あるいは０．２乾燥重量％超、あるいは０．５乾燥重量％超、あるいは０．６乾燥重量％超、あるいは０．７乾燥重量％超、あるいは０．９乾燥重量％超、あるいは１乾燥重量％超、あるいは１．５乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは２．５乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００５１】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはその異性体をさらに含み、ここで前記ＤＨＡは、微細藻類抽出物の０．１乾燥重量％超、あるいは０．１５乾燥重量％超、あるいは０．２乾燥重量％超、あるいは０．３乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００５２】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、パルミチン酸（ＰＡ）またはその異性体をさらに含み、ここで前記ＰＡは、微細藻類抽出物の５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは８．５乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００５３】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンと脂肪酸とを含む。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対脂肪酸の重量対重量比は、１：１０〜１：３０の範囲である。一部の実施形態において、フコキサンチン対脂肪酸の重量対重量比は、１：１０〜１：２０の範囲である。
【００５４】
一部の実施形態において、抽出物は、フコキサンチンと不飽和脂肪酸とを含む。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対不飽和脂肪酸の重量対重量比は、１：５〜１：３０、１：５〜１：２０、１：１０〜１：３０または１：１０〜１：２０の範囲である。一部の実施形態において、不飽和脂肪酸は、モノ不飽和脂肪酸および多価不飽和脂肪酸を含む。
【００５５】
一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対モノ不飽和脂肪酸および多価不飽和脂肪酸の重量対重量比は、１：５〜１：３０、１：５〜１：２０、１：１０〜１：３０または１：１０〜１：２０の範囲である。一部の実施形態において、抽出物のフコキサンチン対多価不飽和脂肪酸の重量対重量比は、１：３〜１：３０、１：３〜１：２０、１：３〜１：１５、１：３〜１：１０、１：４〜１：３０、１：４〜１：２０、１：４〜１：１５、１：４〜１：１０、１：５〜１：３０、１：５〜１：２０、１：５〜１：１５または１：５〜１：１０の範囲である。一部の実施形態において、抽出物のフコキサンチン対モノ不飽和脂肪酸の重量対重量比は、１：３〜１：３０、１：３〜１：２０、１：３〜１：１５、１：３〜１：１０、１：４〜１：３０、１：４〜１：２０、１：４〜１：１５、１：４〜１：１０、１：５〜１：３０、１：５〜１：２０、１：５〜１：１５または１：５〜１：１０の範囲である。
【００５６】
一実施形態において、本発明は、フコキサンチンと、パルミトレイン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、アラキドン酸（ＡＡ）、γリノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびパルミチン酸（ＰＡ）またはそれらの異性体と、を含む微細藻類抽出物を含む組成物を提供する。
【００５７】
一実施形態において、本発明は、フコキサンチンと、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチンおよびβ−カロテンから選択される１種以上のカロテノイドまたはその異性体と、パルミトレイン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、アラキドン酸（ＡＡ）、γリノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびパルミチン酸（ＰＡ）またはそれらの異性体と、を含む微細藻類抽出物を含む組成物を提供する。
【００５８】
一実施形態において、フコキサンチンは、前記微細藻類抽出物の１乾燥重量％超、あるいは１．５乾燥重量％超、あるいは１．６乾燥重量％超、あるいは１．７乾燥重量％超、あるいは１．８乾燥重量％超、あるいは１．９乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、あるいは４乾燥重量％超、あるいは５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは９乾燥重量％超、あるいは１０乾燥重量％超、あるいは１１乾燥重量％超、あるいは１２乾燥重量％超、あるいは１３乾燥重量％超、あるいは１４乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００５９】
一実施形態において、パルミトレイン酸および／またはその異性体は、微細藻類抽出物の５乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは１０乾燥重量％超、あるいは１１乾燥重量％超、あるいは１２乾燥重量％超、あるいは１３乾燥重量％超、あるいは１４乾燥重量％超、あるいは１５乾燥重量％超、あるいは１６乾燥重量％超、あるいは１７乾燥重量％超、あるいは１８乾燥重量％超、あるいは１９乾燥重量％超、あるいは２０乾燥重量％超、あるいは２１乾燥重量％超、あるいは２２乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００６０】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンとパルミトレイン酸および／またはその異性体とを含む。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対パルミトレイン酸の重量対重量比は、２：１〜１：１０、２：１〜１：５、２：１〜１：２、１：１〜１：１０、１：１〜１：５、１：１〜１：２、１：２〜１：１０または１：２〜１：５の範囲である。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００６１】
一実施形態において、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）および／またはその異性体は、微細藻類抽出物の１．５乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、あるいは４乾燥重量％超、あるいは５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは１０乾燥重量％超、あるいは１１乾燥重量％超、あるいは１２乾燥重量％超、あるいは１３乾燥重量％超、あるいは１４乾燥重量％超、あるいは１５乾燥重量％超、あるいは１６乾燥重量％超、あるいは１７乾燥重量％超、あるいは１８乾燥重量％超、あるいは１９乾燥重量％超、あるいは２０乾燥重量％超、あるいは２１乾燥重量％超、あるいは２２乾燥重量％超、あるいは２３乾燥重量％超、あるいは２４乾燥重量％超、あるいは２５乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００６２】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンとＥＰＡとを含む。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＥＰＡの重量対重量比は、２：１〜１：１０、２：１〜１：５、２：１〜１：２、１：１〜１：１０、１：１〜１：５、１：１〜１：２、１：２〜１：１０、１：２〜１：８、１：２〜１：７または１：２〜１：６の範囲である。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＥＰＡの重量対重量比は、１：２〜１：８の範囲である。
【００６３】
一実施形態において、アラキドン酸（ＡＡ）および／またはその異性体は、微細藻類抽出物の０．１乾燥重量％超、あるいは０．２乾燥重量％超、あるいは０．５乾燥重量％超、あるいは０．６乾燥重量％超、あるいは０．７乾燥重量％超、あるいは０．９乾燥重量％超、あるいは１乾燥重量％超、あるいは１．５乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは２．５乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００６４】
一部の実施形態において、抽出物は、フコキサンチンとアラキドン酸（ＡＡ）および／またはその異性体とを含む。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＡＡの重量対重量比は、４：１〜１：２、３：１〜１：２、２：１〜１：２、１：１〜１：２、１．５：１〜１：１．５、４：１〜１：１、３：１〜１：１、２：１〜１：１または１．５：１〜１：１の範囲である。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＡＡの重量対重量比は、２：１〜１：１の範囲である。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＡＡの重量対重量比は、１．５：１〜１：１の範囲である。
【００６５】
一実施形態において、ＤＨＡおよび／またはその異性体は、微細藻類抽出物の０．１乾燥重量％超、あるいは０．１５乾燥重量％超、あるいは０．２乾燥重量％超、あるいは０．２４乾燥重量％超、あるいは０．３乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００６６】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンとＤＨＡとを含む。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＤＨＡの重量対重量比は、１０：１〜１：１、８：１〜１：１、７：１〜１：１、６：１〜１：１、５：１〜１：１、４：１〜１：１、１０：１〜２：１、８：１〜２：１、７：１〜２：１、６：１〜２：１、５：１〜２：１、４：１〜２：１、１０：１〜３：１、８：１〜３：１、７：１〜３：１、６：１〜３：１、５：１〜３：１または４：１〜３：１の範囲である。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＤＨＡの重量対重量比は、６：１〜２：１の範囲である。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＤＨＡの重量対重量比は、５：１〜３：１の範囲である。
【００６７】
一実施形態において、ＰＡおよび／またはその異性体は、微細藻類抽出物の５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは８．５乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００６８】
一実施形態において、微細藻類抽出物は、フコキサンチンとＰＡとを含む。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＰＡの重量対重量比は、２：１〜１：１０、２：１〜１：８、２：１〜１：７、２：１〜１：６、２：１〜１：５、２：１〜１：４、１：１〜１：１０、１：１〜１：８、１：１〜１：７、１：１〜１：６、１：１〜１：５、１：１〜１：４、１：２〜１：１０、１：２〜１：８、１：２〜１：７、１：２〜１：６、１：２〜１：５、１：２〜１：４、１：３〜１：１０、１：３〜１：８、１：３〜１：７、１：３〜１：６または１：３〜１：５の範囲である。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＰＡの重量対重量比は、１：３〜１：５の範囲である。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対ＰＡの重量対重量比は、１：２〜１：６の範囲である。
【００６９】
本発明の一実施形態において、ヨウ素は、微細藻類抽出物の０．２乾燥重量パーツ・パー・ミリオン（ｐｐｍ）未満を占める。本発明の一実施形態において、ヨウ素は、微細藻類抽出物の０．５乾燥重量パーツ・パー・ミリオン（ｐｐｍ）未満を占める。
【００７０】
本発明の一実施形態において、重金属（例えば、水銀、鉛、カドミウム、ヒ素等）は、微細藻類抽出物の１０乾燥重量ｐｐｍ未満または５乾燥重量ｐｐｍ未満を占める。
【００７１】
本発明の一部の実施形態において、モノサッカライドおよびジサッカライドは、微細藻類抽出物の１％未満、０．９％未満、０．８％未満、０．７％未満、０．６％未満、０．５％未満、０．４％未満、０．３％未満、０．２％未満、０．１％未満、０．０５％未満を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。本発明の一部の実施形態において、モノサッカライドおよびジサッカライドは、微細藻類抽出物の０．１％未満を占める。一実施形態において、微細藻類抽出物は、モノサッカライドおよびジサッカライドを実質的に含まない。一部の実施形態において、モノサッカライドおよびジサッカライドを実質的に含まない微細藻類抽出物は、乾燥重量で０．７％以下、０．６％以下、０．５％以下、０．４％以下、０．３％以下、０．２％以下、０．１％以下のモノサッカライドおよびジサッカライドを含む。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、モノサッカライドおよびジサッカライドを実質的に含まない微細藻類抽出物は、乾燥重量で０．７％以下のモノサッカライドおよびジサッカライドを含む。一部の実施形態において、モノサッカライドおよびジサッカライドを実質的に含まない微細藻類抽出物は、乾燥重量で０．１％以下のモノサッカライドおよびジサッカライドを含む。一部の実施形態において、フコキサンチン対モノサッカライドおよびジサッカライドの重量対重量比は、少なくとも４：１、少なくとも５：１、少なくとも７：１、少なくとも１０：１または少なくとも２０：１である。
【００７２】
一部の実施形態において、グルコースは、微細藻類抽出物の１％未満、０．９％未満、０．８％未満、０．７％未満、０．６％未満、０．５％未満、０．４％未満、０．３％未満、０．２％未満、０．１％未満、０．０５％未満を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、グルコースは、微細藻類抽出物の０．１％未満を占める。一実施形態において、微細藻類抽出物は、グルコースを実質的に含まない。一部の実施形態において、グルコースを実質的に含まない微細藻類抽出物は、乾燥重量で０．５％以下、０．４％以下、０．３％以下、０．２％以下、０．１％以下のグルコースを含む。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、グルコースを実質的に含まない微細藻類抽出物は、乾燥重量で０．１％以下のグルコースを含む。
【００７３】
一部の実施形態において、フコキサンチン対グルコースの重量対重量比は、少なくとも５：１、少なくとも７：１、少なくとも１０：１、少なくとも２０：１、少なくとも３０：１、少なくとも４０：１または少なくとも５０：１である。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対グルコースの重量対重量比は、１０：１〜１００：１、１０：１〜５０：１、１０：１〜４０：１、１０：１〜３０：１、２０：１〜１００：１、２０：１〜５０：１、２０：１〜４０：１または２０：１〜３０：１の範囲である。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対グルコースの重量対重量比は、２０：１〜４０：１の範囲である。一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対グルコースの重量対重量比は、少なくとも２０：１である。
【００７４】
一部の実施形態において、糖は、微細藻類抽出物の１％未満、０．９％未満、０．８％未満、０．７％未満、０．６％未満、０．５％未満、０．４％未満、０．３％未満、０．２％未満、０．１％未満、０．０５％未満を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一部の実施形態において、フコキサンチン対糖の重量対重量比は、２：１〜１０：１、２．５：１〜１０：１、３：１〜１０：１、４：１〜１０：１または５：１〜１０：１の範囲である。一部の実施形態において、フコキサンチン対糖の重量対重量比は、少なくとも２：１、２．５：１、３：１、４：１、５：１または１０：１である。
【００７５】
一部の実施形態において、サッカライドは、微細藻類抽出物の２％未満、１．５％未満、１％未満、０．９％未満、０．８％未満、０．７％未満、０．６％未満、０．５％未満、０．４％未満、０．３％未満、０．２％未満、０．１％未満、０．０５％未満を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００７６】
一部の実施形態において、抽出物中のフコキサンチン対サッカライドの重量対重量比は、２：１〜１０：１、２．５：１〜１０：１、３：１〜１０：１、４：１〜１０：１または５：１〜１０：１の範囲である。一部の実施形態において、フコキサンチン対サッカライドの重量対重量比は、少なくとも２：１、２．５：１、３：１、４：１、５：１または１０：１である。
【００７７】
「サッカライド」なる用語は、ポリヒドロキシアルデヒドもしくはポリヒドロキシケトンまたはそれらの誘導体である炭水化物を指す。本明細書で使用される場合、「サッカライド」なる用語は、モノサッカライド、ジサッカライド、オリゴサッカライドおよびポリサッカライドまたはそれらの誘導体を包含する。モノサッカライドまたは単糖は、単一のポリヒドロキシアルデヒドまたはポリヒドロキシケトンの単位からなる。本明細書で使用される場合、「モノサッカライド」なる用語は、炭水化物の基本単位を指す。モノサッカライドの非限定的な例としては、マンノース、グルコース（デキストロース）、フルクトース、ガラクトース、キシロースおよびリボースが挙げられる。「グルコース」なる用語は、化学式Ｃ６Ｈ１２Ｏ６を有するモノサッカライドを指し、これは、Ｄ−グルコースまたはデキストロースとしても知られている。本明細書で使用される場合、「ジサッカライド」なる用語は、２つのモノサッカライドから構成される炭水化物を指す。ジサッカライドの非限定的な例としては、スクロース、ラクトースおよびマルトースが挙げられる。オリゴサッカライドは通常、グリコシド結合で連結した２〜１０個のモノサッカライド単位を含む。ポリサッカライド（グリカン）は通常、このような単位を１１個以上含む。「糖」なる用語は一般に、モノサッカライド、ジサッカライドまたはオリゴサッカライドを指す。
【００７８】
一実施形態において、本発明は、フコキサンチンを含む微細藻類抽出物を含む組成物であって、抽出物がモノサッカライドおよびジサッカライドを実質的に含まない組成物を提供する。一実施形態において、本発明は、フコキサンチンと脂肪酸とを含む微細藻類抽出物を含む組成物であって、抽出物がモノサッカライドおよびジサッカライドを実質的に含まない組成物を提供する。一実施形態において、本発明は、フコキサンチンと脂肪酸とを含む微細藻類抽出物を含む組成物であって、モノサッカライドおよびジサッカライドが微細藻類抽出物の０．１乾燥重量％未満を占める組成物を提供する。一実施形態において、本発明は、フコキサンチンと、パルミトレイン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、アラキドン酸（ＡＡ）、γリノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびパルミチン酸（ＰＡ）またはそれらの異性体と、を含む微細藻類抽出物を含む組成物であって、抽出物がモノサッカライドおよびジサッカライドを実質的に含まない組成物を提供する。一実施形態において、本発明は、フコキサンチンと、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチンおよびβ−カロテンから選択される１種以上のカロテノイドまたはその異性体と、パルミトレイン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、アラキドン酸（ＡＡ）、γリノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびパルミチン酸（ＰＡ）またはそれらの異性体と、を含む微細藻類抽出物を含む組成物であって、抽出物がモノサッカライドおよびジサッカライドを実質的に含まない組成物を提供する。
【００７９】
微細藻類の生産
一実施形態において、微細藻類は、合成培地中で生育させる。好適な培地は、微細藻類の生存および生育を支える当技術分野で公知の任意の培地である。一実施形態において、培地は、硝酸（ＮＯ３）、アンモニウム（ＮＨ４＋）および尿素（ＣＨ４Ｎ２Ｏ）からなる群より選択される窒素源またはそれらの組み合わせを含む。一実施形態において、培地は尿素を含む。一実施形態において、培地は、約０．５グラム／リットル未満の尿素を含む。一実施形態において、培地は、０．３グラム／リットル〜０．８グラム／リットルの尿素を含む。一実施形態において、培地は、０．５グラム／リットル〜１グラム／リットルの尿素を含む。一実施形態において、培地は、１グラム／リットル〜２グラム／リットルの尿素を含む。一実施形態において、培地は、０．５グラム／リットル〜３グラム／リットルの尿素を含む。一実施形態において、微細藻類は、尿素を窒素源として利用する。一実施形態において、微細藻類は、尿素を唯一の窒素源として利用する。
【００８０】
一実施形態において、培地はリン酸を含む。一実施形態において、培地は、０．１グラム／リットル未満のリン酸を含む。一実施形態において、培地は、０．０５〜０．５グラム／リットルのリン酸を含む。一実施形態において、培地は、０．５〜２グラム／リットルのリン酸を含む。一実施形態において、培地は、２グラム／リットル超のリン酸を含む。
【００８１】
一実施形態において、培地は、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２）、塩化カルシウム（ＣａＣｌ２）またはそれらの組み合わせからなる群より選択される塩を含む。一実施形態において、培地は、５〜３０グラム／リットル未満のＮａＣｌを含む。一実施形態において、培地は、８〜２７グラム／リットルのＮａＣｌを含む。一実施形態において、培地は、１〜５グラム／リットルのＮａＣｌを含む。一実施形態において、培地は、５〜１０グラム／リットルのＮａＣｌを含む。一実施形態において、培地は、２７グラム／リットル未満のＮａＣｌを含む。
【００８２】
一実施形態において、培地は、シリカを実質的に含まない。本明細書で使用される場合、シリカを実質的に含まない培地は、０．０１グラム／リットル未満のシリカ、あるいは０．０５グラム／リットル未満のシリカ、あるいは０．１グラム／リットル未満のシリカ、あるいは０．５グラム／リットル未満のシリカ、を含む。
【００８３】
微細藻類バイオマス
別の態様では、微細藻類バイオマスが提供される。「バイオマス」なる用語は、微細藻類に由来する、生きているか死んだばかりの任意の生物細胞材料を指す。一実施形態において、微細藻類バイオマスは、微細藻類細胞培養物から得られる。一実施形態において、微細藻類バイオマスは、収穫されたバイオマスである。一実施形態において、微細藻類バイオマスは、微細藻類細胞の乾燥産物である。
【００８４】
当業者であれば、バイオマスは、限定されるものではないがろ過、エアーフローテーションおよび遠心分離を含む任意の従来の手段によって収穫されてよいということを理解するであろう。さらに、乾燥バイオマスは、当技術分野で知られている様々なプロセスによって生産されてよい。一般に使用される乾燥技術の非限定的な例としては、ドラム乾燥、回転乾燥、凍結乾燥、天日乾燥および噴霧乾燥が挙げられる。
【００８５】
本明細書で使用される場合、「ドラム乾燥」は、ゆっくりと熱を加える大きな回転式ドラムを用いて微細藻類を乾燥してフィルムまたはペーストにするために使用される方法を指す。「回転乾燥」は、水を蒸発させるために空気ポンプを使用して圧力を変えることを除いてはドラム乾燥に非常に似ている。「凍結乾燥」は、対象材料を凍結した後、周囲の圧力を低下させ、材料中の凍結水を固相から気相に直接昇華させるのに十分な熱を加えることによって機能する脱水プロセスを指す。「天日乾燥」は、ガラスとレンズを用いて太陽からの熱を集めて捕捉する方法を指す。「噴霧乾燥」は、高温ガスを用いて急速に乾燥させることによって液体またはスラリーから乾燥粉末を生産する方法を指す。
【００８６】
一部の実施形態において、バイオマスのフコキサンチン含有量を安定させるために、乾燥バイオマスを得る前に１種以上の安定剤がバイオマスに添加される。一部の実施形態において、安定剤は抗酸化物質である。一部の実施形態において、安定剤は、親油性の抗酸化物質である。抗酸化物質の非限定的な例としては、ビタミンＣ、パルミチン酸アスコルビル、ビタミンＥおよびローズマリー油が挙げられる。
【００８７】
一部の実施形態において、安定剤は、乾燥の前に安定剤がバイオマスの０．１乾燥重量％〜５乾燥重量％を占めるようにバイオマスに添加される。
【００８８】
一部の実施形態において、安定剤は、抽出プロセスの後に添加される。一部の実施形態において、安定剤は、安定剤が微細藻類抽出物の０．１重量％〜５重量％を占めるように微細藻類抽出物に添加される。非限定的な例では、ビタミンＥおよび／またはパルミチン酸アスコルビル（これらは両方とも、親油性物質である）が微細藻類抽出物に添加されてよい。
【００８９】
Ｃｈｅｏｌ−Ｈｏ  Ｐａｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ａｐｐｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  （２０１２）  １６６：１８４３−１８５５）は、フコキサンチンが乾燥重量で１．５３３％であるＰ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ抽出物を開示した。注目すべきことに、これは、３０リットルのプラスチック製の円筒中で微細藻類を培養することによって達成された。バイオマス生産技術を使用して（例えば、光バイオリアクターを使用して）高フコキサンチン含有量に到達させようとする試みは、フコキサンチン含有量をかなり低下させた。そのため、Ｇｕｉｌ−Ｇｕｅｒｒｅｒｏ（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｆｏｏｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｂｙ  ２５，  ２００１，  ５７−７６）は、約５０％のフコキサンチン含有量を有する０．４５％未満のカロテノイドに至る微細藻類バイオマス生産を報告した。
【００９０】
従って、本発明は、一部の実施形態において、乾燥重量で０．５％超、０．６％超、０．７％超、０．８％超、０．９％超、１％超、１．１％超、１．２％超、１．３％超、１．５％超、１．６％超、１．７％超、１．８％超、１．９％超、２％超、２．１％超、２．２％超、２．３％超、２．４％超または２．５％超のフコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスを含む組成物であって、前記微細藻類が光バイオリアクター中で培養される組成物を提供する。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００９１】
本明細書で使用される場合、「光バイオリアクター」なる用語は、微細藻類などの光合成を行うことができる微生物の大規模な（例えば、１００リットル超の）培養および/または生産のための生物学的に有効な環境を支えるために使用される装置または系を指す。光バイオリアクターは、特別に制御された環境を提供し、微生物の独立栄養増殖のための光源（例えば、太陽光）の利用を可能にする。独立栄養増殖は、生物が光または化学エネルギーを利用して無機物質から自身の食物を合成できることを指す。
【００９２】
一実施形態において、本発明は、乾燥重量で１％超のフコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスを含む組成物を提供する。一実施形態において、本発明は、乾燥重量で１．１％超、あるいは１．２％超、あるいは１．３％超、あるいは１．４％超、あるいは１．５％超、あるいは１．６％超、あるいは１．７％超、あるいは１．８％超、あるいは１．９％超、あるいは２％超、のフコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスを含む組成物を提供する。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００９３】
一実施形態において、フコキサンチンは、微細藻類乾燥バイオマスの少なくとも１乾燥重量％、あるいは少なくとも１．２乾燥重量％、少なくとも１．３乾燥重量％、少なくとも１．４乾燥重量％、少なくとも１．５乾燥重量％、少なくとも１．６乾燥重量％、少なくとも１．７乾燥重量％、少なくとも１．８乾燥重量％、少なくとも１．９乾燥重量％、少なくとも２乾燥重量％、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００９４】
一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、フコキサンチンと他のカロテノイドとを含む。一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、フコキサンチンとβ−カロテンまたはその異性体とを含む。一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、フコキサンチンとジアジノキサンチンまたはその異性体とを含む。一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、フコキサンチンとジアトキサンチンまたはその異性体とを含む。
【００９５】
一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、脂肪酸をさらに含む。
【００９６】
一実施形態において、脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは９乾燥重量％超、あるいは１０乾燥重量％超、あるいは１１乾燥重量％超、あるいは１２乾燥重量％超、あるいは１３乾燥重量％超、あるいは１４乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００９７】
一実施形態において、飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの４乾燥重量％超、あるいは５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは９乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの４乾燥重量％未満、あるいは５乾燥重量％未満、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％未満、あるいは８乾燥重量％未満、あるいは９乾燥重量％未満、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの２〜１０乾燥重量％、３〜１０乾燥重量％、４〜１０乾燥重量％、５〜１０乾燥重量％、２〜８乾燥重量％、３〜８乾燥重量％、２〜６乾燥重量％または３〜６乾燥重量％を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００９８】
一実施形態において、不飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの４乾燥重量％超、あるいは５乾燥重量％超、あるいは６乾燥重量％超、あるいは７乾燥重量％超、あるいは８乾燥重量％超、あるいは９乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、不飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの４乾燥重量％〜２０乾燥重量％、４乾燥重量％〜１５乾燥重量％、４乾燥重量％〜１０乾燥重量％、５乾燥重量％〜２０乾燥重量％、５乾燥重量％〜１５乾燥重量％、５乾燥重量％〜１０乾燥重量％、６乾燥重量％〜２０乾燥重量％、６乾燥重量％〜１５乾燥重量％、６乾燥重量％〜１０乾燥重量％、７乾燥重量％〜２０乾燥重量％、７乾燥重量％〜１５乾燥重量％または７乾燥重量％〜１０乾燥重量％を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【００９９】
一実施形態において、多価不飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの１乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、あるいは３．５乾燥重量％超、あるいは４乾燥重量％超、あるいは４．５乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、多価不飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの１乾燥重量％〜１０乾燥重量％、１乾燥重量％〜７乾燥重量％、１乾燥重量％〜６乾燥重量％、１乾燥重量％〜５乾燥重量％、２乾燥重量％〜１０乾燥重量％、２乾燥重量％〜７乾燥重量％、２乾燥重量％〜６乾燥重量％、２乾燥重量％〜５乾燥重量％、３乾燥重量％〜１０乾燥重量％、３乾燥重量％〜７乾燥重量％、３乾燥重量％〜６乾燥重量％、３乾燥重量％〜５乾燥重量％を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、多価不飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの３乾燥重量％〜５乾燥重量％を占める。
一実施形態において、モノ不飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの０．５乾燥重量％超、あるいは１乾燥重量％超、あるいは１．５乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、あるいは３．５乾燥重量％超、あるいは４乾燥重量％超、あるいは４．５乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、モノ不飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの１乾燥重量％〜１０乾燥重量％、１乾燥重量％〜７乾燥重量％、１乾燥重量％〜６乾燥重量％、１乾燥重量％〜５乾燥重量％、２乾燥重量％〜１０乾燥重量％、２乾燥重量％〜７乾燥重量％、２乾燥重量％〜６乾燥重量％、２乾燥重量％〜５乾燥重量％、３乾燥重量％〜１０乾燥重量％、３乾燥重量％〜７乾燥重量％、３乾燥重量％〜６乾燥重量％または３乾燥重量％〜５乾燥重量％を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、モノ不飽和脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの３乾燥重量％〜５乾燥重量％を占める。
【０１００】
一実施形態において、トランス脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの０．４乾燥重量％超、あるいは０．５乾燥重量％超、あるいは０．６乾燥重量％超、あるいは０．７乾燥重量％超、あるいは１乾燥重量％超、あるいは１．５乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは２．５乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、トランス脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの０．４乾燥重量％〜３乾燥重量％、０．４乾燥重量％〜２乾燥重量％、０．４乾燥重量％〜１．５乾燥重量％、０．４乾燥重量％〜１乾燥重量％、０．５乾燥重量％〜３乾燥重量％、０．５乾燥重量％〜２乾燥重量％、０．５乾燥重量％〜１．５乾燥重量％または０．５乾燥重量％〜１乾燥重量％を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、トランス脂肪酸は、微細藻類乾燥バイオマスの０．５乾燥重量％〜１乾燥重量％を占める。
【０１０１】
一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチンおよびβ−カロテンから選択される１種以上のカロテノイドまたはその異性体をさらに含む。
【０１０２】
一実施形態において、フコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスは、パルミトレイン酸および／またはその異性体をさらに含む。一実施形態において、パルミトレイン酸および／またはその異性体は、微細藻類乾燥バイオマスの１．５乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは２．５乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、を占める。
【０１０３】
一実施形態において、フコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスは、エイコサペンタエン酸および／またはその異性体をさらに含む。一実施形態において、エイコサペンタエン酸および／またはその異性体は、微細藻類乾燥バイオマスの１乾燥重量％超、あるいは１．５乾燥重量％超、あるいは２乾燥重量％超、あるいは３乾燥重量％超、あるいは３．５乾燥重量％超、あるいは３．６乾燥重量％超、あるいは３．７乾燥重量％超、あるいは４乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【０１０４】
一実施形態において、フコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスは、アラキドン酸（archionic acid）および／またはその異性体をさらに含む。一実施形態において、ＡＡおよび／またはその異性体は、微細藻類乾燥バイオマスの０．１乾燥重量％超、あるいは０．０１乾燥重量％超、あるいは０．０２乾燥重量％超、あるいは０．０３乾燥重量％超、あるいは０．０４乾燥重量％超、あるいは０．０５乾燥重量％超、あるいは少なくとも０．０６乾燥重量％、を占める。
【０１０５】
一実施形態において、フコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスは、アラキドン酸（ＡＡ）および／またはその異性体をさらに含む。一実施形態において、アラキドン酸および／またはその異性体は、微細藻類乾燥バイオマスの約０．２乾燥重量％〜０．５乾燥重量％、あるいは０．２乾燥重量％超〜０．４乾燥重量％、あるいは約０．３乾燥重量％、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【０１０６】
一実施形態において、フコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスは、ＤＨＡおよび／またはその異性体をさらに含む。一実施形態において、ＤＨＡおよび／またはその異性体は、微細藻類乾燥バイオマスの０．０５乾燥重量％超、あるいは０．９乾燥重量％超、あるいは０．１０乾燥重量％超、あるいは０．１１乾燥重量％超、あるいは０．１２乾燥重量％超、あるいは０．１３乾燥重量％超、あるいは０．１４乾燥重量％超、あるいは０．１５乾燥重量％超、あるいは０．１６乾燥重量％超、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【０１０７】
一実施形態において、フコキサンチンを含む微細藻類乾燥バイオマスは、ＰＡおよび／またはその異性体をさらに含む。一実施形態において、ＰＡおよび／またはその異性体は、微細藻類乾燥バイオマスの１乾燥重量％超、あるいは１．１乾燥重量％超、あるいは１．２乾燥重量％超、あるいは１．３乾燥重量％超、あるいは１．４乾燥重量％超、あるいは少なくとも１．５乾燥重量％、あるいは少なくとも２乾燥重量％、あるいは少なくとも３乾燥重量％、を占める。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【０１０８】
別の実施形態において、本発明は、フコキサンチンと、ジアジノキサンチン、ジアトキサンチンおよびβ−カロテンから選択される１種以上のカロテノイドまたはその異性体と、パルミトレイン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、アラキドン酸（ＡＡ）、γリノレン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびパルミチン酸（ＰＡ）またはそれらの異性体と、を含む微細藻類乾燥バイオマスを含む組成物を提供する。
【０１０９】
一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、５％未満、４．５％未満、４％未満、３．５％未満、３％未満、２．９％未満、２．８％未満、２．７％未満、２．６％未満のモノサッカライドおよびジサッカライドを含む。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【０１１０】
一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、５％未満、４．５％未満、４％未満、３．５％未満、３％未満、２．９％未満、２．８％未満、２．７％未満、２．６％未満のグルコースを含む。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、２．７％未満のグルコースを含む。
【０１１１】
一実施形態において、微細藻類乾燥バイオマスは、５％未満、４．５％未満、４％未満、３．５％未満、３％未満、２．９％未満、２．８％未満、２．７％未満、２．６％未満の糖を含む。それぞれの可能性が本発明の別個の実施形態を表す。
【０１１２】
本発明の一実施形態において、ヨウ素は、微細藻類乾燥バイオマスの０．３乾燥重量ｐｐｍ未満を占める。本発明の一実施形態において、重金属（例えば、水銀、鉛、カドミウム、ヒ素等）は、微細藻類乾燥バイオマスの０．５乾燥重量ｐｐｍ未満を占める。
【０１１３】
説明において、別段の記載が無い限り、本発明の実施形態の１つまたは複数の特徴の条件または関係特性を修飾する「実質的に」および「約」などの形容詞は、その条件または特性が、それが意図されている用途のための実施形態の実施に許容される許容範囲内となるように画定されるということを意味すると理解される。別段の指示が無い限り、明細書および特許請求の範囲における「または」なる語は、排他的な「または」ではなく、包括的な「または」であるとみなされ、それが結合させる項目のうちの少なくとも１つ、またはそれらの任意の組み合わせ、を示す。
【０１１４】
本出願の記載および特許請求の範囲において、動詞「含む（comprise）」、「包含する（include）」および「有する（have）」ならびにそれらの活用形のそれぞれは、その動詞の１つまたは複数の目的語が必ずしも、その動詞の１つまたは複数の主語の成分、要素または部分の完全なリストであるわけではないということを示すために使用される。
【０１１５】
明確にするために別々の実施形態に関連して説明されている本発明の特定の特徴は１つの実施形態において組み合わせて提供されてもよいということが理解される。逆に、簡潔にするために１つの実施形態に関連して説明されている本発明の様々な特徴は、別々に、または任意の好適なサブコンビネーションで、または本発明の任意の他の説明された実施形態に好適なように、提供されてもよい。様々な実施形態に関連して説明される特定の特徴は、それらの要素が無ければその実施形態が実施不可能であるということがない限り、それらの実施形態の必須の特徴とみなされるべきではない。
【０１１６】
上述された、および添付の特許請求の範囲で請求される、本発明の様々な実施形態および態様の実験による裏付けは、以下の実施例に見出される。
【実施例】
【０１１７】
材料および方法
微細藻類の生育と培養
Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ微細藻類は、紅藻Ｐｏｒｐｈｙｒｉｄｉｕｍ  ｃｒｕｅｎｔｕｍの培養に使用される生育培地（ＪＯＮＥＳ，Ｒ．Ｆ．，  Ｈ．Ｌ．ＳＰＥＥＲ，  ＡＮＤ  Ｗ．ＫＵＲＹ．  １９６３）から開発された合成人工海水培地において維持した。この改変塩水培地（ＳＷと命名）は、Ｈ２Ｏ  １リットルあたりに２７グラム（ｇ）のＮａＣｌ、６．６ｇのＭｇＳＯ４−７Ｈ２Ｏ、５．６ｇのＭｇＣｌ２＊６Ｈ２Ｏ、１．５ｇのＣａＣｌ２−２Ｈ２Ｏ、１．０ｇのＫＮＯ３、０．０７ｇのＫＨ２ＰＯ４、０．０４ｇのＮａＨＣＯ３、１ｍｌの「鉄ストック溶液」（１リットルあたり１８．６ｇのＮａ２ＥＤＴＡおよび２．４ｇのＦｅＣｌ３ ６Ｈ２Ｏ、ｐＨ７）および１ｍｌの「微量元素」ストック溶液（１リットルあたり４０ｍｇのＺｎＣｌ２、６００ｍｇのＨ３ＢＯ３、１５ｍｇのＣｏＣｌ２−６Ｈ２Ｏ、４０ｍｇのＣｕＣｌ２−２Ｈ２Ｏ、４８８ｍｇのＭｎＣｌ２Ａ４Ｈ２Ｏおよび３７ｍｇの（ＮＨ４）６ＭｏＯ２４−４Ｈ２Ｏ）を含む。
【０１１８】
Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ微細藻類は、２０℃で培養した。２％ＣＯ２を追加した空気を通気して培養ｐＨを７．５±０．５に維持した。３．５グラム／リットルという最小バイオマスに達したら培養物を収穫した。
【０１１９】
バイオマスおよびオレオレジンにおけるフコキサンチン含有量の決定
２５ｍｌのメスフラスコ中で５分間超音波処理することによって２０ｍｌのメタノールで７０〜８０ｍｇのバイオマスサンプルまたは２０〜２５ｍｇの５％フコキサンチンのオレオレジンサンプルを希釈した。超音波処理して周囲温度まで冷却した後、体積をメタノールで最終体積（２５ｍｌ）に調整した。０．２２μｍのＰＶＤＦシリンジフィルターで溶液をろ過した後、ＨＰＬＣ（３回に分けて注入）で分析した。さらに、フコキサンチンの参照標準（フコキサンチン、ロット：ＣＤＸ−００００６２９６−０１０、Ｃｈｒｏｍａｄｅｘ，  ＵＳＡから入手、９８．９％（ＨＰＬＣ）という標準純度を有する）の溶液を、メタノールで５０ｐｐｍという濃度に希釈することによって調製した。この溶液を十分に混合し、０．２２μｍのＰＶＤＦシリンジフィルターでろ過した後、ＨＰＬＣ（３回に分けて注入）で分析した。この分析において、フコキサンチン、フコキサンチンの異性体、および他のカロテノイドを、クロマトグラムにおけるこれらの化合物の保持時間および対応する吸光度スペクトルに基づいて同定した。
【０１２０】
実施例１
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類におけるフコキサンチンの蓄積に対する窒素源の影響
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類を３日間培養し、３日目にＫＮＯ３あるいは尿素（ＣＨ４Ｎ２Ｏ）の形で窒素を添加した。３つの時点においてＨＰＬＣでフコキサンチンの含有量を決定した。結果は、０．５グラム／リットルの尿素の存在下で細胞を生育させるとバイオマスのフコキサンチンの乾燥重量パーセント（乾燥重量％／ＤＷとも呼称される）が増加するということを示す。
【０１２１】
【表１】
2018512432.tif 000002
【０１２２】
実施例２
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類における脂肪酸の蓄積に対する塩濃度の影響
異なる濃度の塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）の存在下でＰ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類を培養した。結果は、培地中の塩化ナトリウム濃度を２７ｇ／リットルから９ｇ／リットルに減らすと全脂肪酸由来のＰＡ、ＡＡ、ＤＰＡ、ＤＨＡおよびＥＰＡの割合が増加したということを示す（表２を参照のこと）。
【０１２３】
【表２】
2018512432.tif 000003
【０１２４】
実施例３
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類のバイオマスの内容物
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類を培養し、収穫した。バイオマスの内容物をＨＰＬＣで調べた。４５０ｎｍにて記録した抽出物のＨＰＬＣスペクトルを図１に示す。
【０１２５】
バイオマスの内容物を分析した。算出された乾燥バイオマス中の含有量を表３にまとめる。
【０１２６】
【表３】
2018512432.tif 000004
【０１２７】
実施例４
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類の抽出物
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類を培養し、収穫した。４つの別々の方法によってバイオマスを抽出した：エタノール抽出、ＳＣＦ−ＣＯ２抽出、ＳＣＦ−ＣＯ２と２％エタノールによる抽出、およびＳＣＦ−ＣＯ２に続くエタノール抽出（２段階抽出）。得られた抽出物の内容物を対照の大型藻類と比較した（表４を参照のこと）。
【０１２８】
【表４】
2018512432.tif 000005
2018512432.tif 000006
【０１２９】
実施例５
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類のバイオマスおよび抽出物のフコキサンチン含有量
Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ  ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍの５つのサンプルにおいてフコキサンチンの含有量を決定した。フコキサンチン、その異性体および他のカロテノイドをＨＰＬＣで定量化した。分析されたサンプルには、バイオマスサンプル、および１０％フコキサンチンのオレオレジン：ＮＸ２６７７が包含される。
【０１３０】
この分析において、フコキサンチン、フコキサンチンの異性体、および他のカロテノイドを、クロマトグラムにおけるこれらの化合物の保持時間および対応する吸光度スペクトルに基づいて同定した。
【０１３１】
表５にまとめられているように、Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍのバイオマスサンプルは全て、１％重量／重量（％ｗ／ｗ）超のフコキサンチン濃度を示した。
【０１３２】
クロマトグラム中に示されるフコキサンチンの微量な異性体は暫定的に１３−シスまたは１３’−シスと同定される。この確認は、保持時間およびＵＶ−ｖｉｓ吸収スペクトルに基づいて行われる。科学文献によれば、カロテノイドのシス異性体は、３３０ｎｍ付近に追加的なλピークを示す（Ｃｒｕｐｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０１３）。このピークは、表６にまとめられているように、サンプル中の全フコキサンチンの約５％を表す。
【０１３３】
サンプル中に他のカロテノイドの存在も観察されたが、これらはジアジノキサンチンまたはジアトキサンチンのいずれか、およびβ−カロテンと同定されている（図１および図２を参照のこと）。この観察は、保持時間、吸収スペクトルおよび科学文献（Ｌａｖａｕｄ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２）で裏付けられる。
【０１３４】
【表５】
2018512432.tif 000007
【０１３５】
実施例６
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類のバイオマスおよび抽出物の内容物
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類を培養し、収穫した。表７ａは、Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類の乾燥バイオマスの内容物、Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類から得られたオレオレジンの内容物、および大型藻類から得られたオレオレジンの内容物をまとめたものである。
【０１３６】
表７ａで示されるように、Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍから得られたオレオレジンは、１９．０６％のエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、２．３８％のアラキドン酸（ＡＡ）、および１３．４％のパルミチン酸（ＰＡ）を含む。さらに、カプリル酸およびカプリン酸は、Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍから得られたオレオレジンの内容物の０．０２未満および０．０５を占める。
【０１３７】
さらに表７ａで示されるように、飽和脂肪酸は、大型藻類抽出物の９０．８５％を占めるが、微細藻類抽出物のわずか８．６４％を占めるに過ぎない。大型藻類から得られたオレオレジンの脂肪内容物は、主にカプリル酸（乾燥重量で４８．１７％）およびカプリン酸（乾燥重量で４２．３２％）を含み、不飽和脂肪酸は、乾燥重量のわずか０．５５％を占めるに過ぎない。
【０１３８】
注目すべきことに、表７ｂで示されるように、Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍから得られたオレオレジンにおけるグルコース含有量は、使用された測定装置の検出限界よりも低かった（表中では０．１未満と表示）。さらに、モノサッカライドおよびジサッカライドの含有量も検出不能であった（表中では０．７未満と表示）。
【０１３９】
【表６】
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【０１４０】
実施例７
フコキサンチンの安定性に対するビタミンＣおよびローズマリー油の影響
Ｐ．ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ微細藻類を培養し、収穫した。得られたバイオマスにビタミンＣを、バイオマスの１重量％を占めるように添加した。あるいは、得られたバイオマスにローズマリー油を、バイオマスの０．３重量％を占めるように添加した。バイオマスの乾燥の前に、乾燥バイオマスにおいて、およびバイオマスの乾燥から７日後に、フコキサンチンの割合を決定した。表８は、ビタミンＣ、ローズマリー油で処理したバイオマスまたは処理しなかったバイオマスのフコキサンチン含有量の比較を示す。結果は、ビタミンＣまたはローズマリー油のいずれかをバイオマスに添加するとフコキサンチンが安定化されるということを実証する。注目すべきことに、ビタミンＣの存在下およびローズマリー油の存在下の両方において、やがてフコキサンチンの減少（最後の欄を参照のこと）。
【０１４１】
【表７】
2018512432.tif 000009
【０１４２】
本発明は、その特定の実施形態と関連して説明されているが、多くの代替手段、改変および変形が当業者には明らかであろうということは明白である。従って、添付の特許請求の範囲の趣旨および広い範囲の範囲内に属するそのような代替手段、改変および変形を全て包含することが意図される。
【図１】
2018512432.tif 000010
【図２】
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【国際調査報告】
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