(57)【要約】本明細書に開示されている主題は、一般に、がん治療法、ならびに抗がん化合物およびイメージング剤に関する。より具体的には、本明細書に開示されている主題は、がんの処置における、ＭＣ１Ｒを標的とする作用物質およびそれらの使用に関する。ＭＣ１Ｒ標的剤をスクリーニングする方法も開示される。被験体におけるがんを処置する方法であって、前記被験体に、有効量の本願組成物を投与するステップを含む方法もまた、提供される。
2018522818.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉを有する化合物
【化６】
2018522818.tif 000010
またはそのイオン化誘導体であって、式中、
Ｐ１およびＰ２は、独立して、Ｈ、アミン保護基、またはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、ヒスチジン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、セリン、トレオニン、フェニルグリシン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファ−アミノ酪酸、Ｏ−メチルセリン、Ｏ−エチルセリン、Ｓ−メチルシステイン、Ｓ−エチルシステイン、Ｓ−ベンジルシステイン、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨＥｔ２）−ＣＯＯＨ、アルファ−アミノヘプタン酸、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロペンチル）−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロブチル）−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、５，５，５−トリフルオロロイシン、α−アミノヘキサン酸、チアプロリンおよびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択される１つまたは複数の追加のアミノ酸であり、
Ｌは、長さが１〜３０個の炭素原子の必要に応じた連結部分であり、
Ａ１は、放射性核種キレート部分である、化合物またはそのイオン化誘導体。
【請求項２】
Ｐ１およびＰ２が、独立して、Ｈ、またはトリチル、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、ベンジル、アセテート、４−フェニルブチリルおよびＡｃ−ホモフェニルアラニンからなる群から選択されるアミン保護基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｐ１が４−フェニルブチリルであり、Ｐ２がＨである、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４】
Ｌが存在しない、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｌが、Ｒ１４、Ｃ（Ｏ）Ｒ１４Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４ＯＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｒ１４Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４ＮＨ、ＮＨＲ１４ＮＨまたはＣ（Ｏ）ＮＨＲ１４ＮＨＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）ＯＲ１４ＯＣ（Ｓ）であり；Ｒ１４は、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、Ｃ１〜Ｃ２０ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ２０アルキルアミン、Ｃ１〜Ｃ２０アルコキシル、Ｃ１〜Ｃ２０アルカノイルオキシルまたはＣ１〜Ｃ２０アルキルアミドであり、それらのいずれも、ハロゲン、アルコキシル、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボニル、アシル、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、−ＣＯＯ−、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１２Ｒ１３、−ＮＲ１２Ｒ１３、−ＮＲ１２Ｓ（Ｏ）２Ｒ１３、−ＮＲ１２Ｃ（Ｏ）Ｒ１３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１２、−ＳＲ１２および−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１２Ｒ１３、−ＳＯＲ１２）および−ＳＯＯＲ１２を含めた、１つまたは複数の置換基により必要に応じて置換され得、Ｒ１２およびＲ１３は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、カルボニル、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシル、アリールオキシル、シクロアルキル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニルまたはジアルキルアミノカルボニルであり得る、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
ＬがＣ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−であり、ｎは１〜２０であるか、またはＬがＣ（Ｏ）（ＣＨ２Ｏ）ｎであり、ｎは１〜１０である、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ａ１が、ＤＯＴＡ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸）である、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ａ１が、ＤＴＰＡ（ジエチレントリアミン五酢酸）、ＤＯＴＰ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メチレンホスホン）酸）、ＤＯＴＭＡ（１Ｒ，４Ｒ，７Ｒ，１０Ｒ）−α’α”α’’’−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸）四ナトリウム塩、ＴＥＴＡ（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸）、ＤＯＴＡＭ（１，４，７，１０−テトラキス（カルバモイルメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン）、ＣＢ−ＴＥ２Ａ（１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン−４，１１−二酢酸）およびＮＯＴＡ（（１，４，７−トリアザシクロノナン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ”−三酢酸）からなる群から選択される、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
式ＩＡ
【化７】
2018522818.tif 000011
を有する、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
【化８】
2018522818.tif 000012
【化９】
2018522818.tif 000013
から選択される式を有する、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
放射性核種をさらに含む、前記請求項のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
前記放射性核種が、アルファ粒子またはベータ粒子放射体である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１３】
前記放射性核種が、９０Ｙ、１７７Ｌｕ、１８Ｆ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｚｒ、１２４Ｉ、１２３Ｉ、１５２Ｅｕおよび９９ｍＴｃからなる群から選択される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１４】
前記放射性核種が、２２５Ａｃ、６８Ｇａおよび１１１Ｉｎからなる群から選択される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１５】
１１１Ｉｎ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬおよび薬学的に許容され得る担体を含む組成物。
【請求項１６】
６８Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬおよび薬学的に許容され得る担体を含む組成物。
【請求項１７】
２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬおよび薬学的に許容され得る担体を含む組成物。
【請求項１８】
被験体におけるがんを処置する方法であって、前記被験体に、有効量の請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項１９】
前記がんが転移性黒色腫である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記がんがブドウ膜黒色腫である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記がんが皮膚黒色腫である、請求項１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の引用
本願は、その全体が本明細書中で参考として援用される、２０１５年５月６日に出願された米国仮出願第６２／１５７，７８４号に対する優先権の利益を主張する。
【０００２】
分野
本明細書に開示されている主題は、一般に、がん治療法、ならびに抗がん化合物およびイメージング作用物質に焦点をあてた標的化放射線療法に関する。より具体的には、本明細書に開示されている主題は、ＭＣ１Ｒを標的とする作用物質およびがんの処置におけるそれらの使用に関する。ＭＣ１Ｒ標的化作用物質をスクリーニングする方法も開示される。
【背景技術】
【０００３】
背景
すべてのがんの中で、黒色腫の発生率は、世界的に、最も急速に増加している。黒色腫は、早期に発見された場合、外科的切除によって治癒し得るが、播種性疾患を有する患者の１０年生存率は、依然として、１０〜１５％と低いままである。進行した疾患を有する患者を処置するにあたり、新規治療法、例えば、免疫抑制体であるＣＴＬＡ−４を遮断する免疫療法剤であるイピリムマブ、および変異したドライバー遺伝子ＢＲＡＦを阻害するベムラフェニブなどの新規標的化治療法によって近年、成功を収めている。しかし、これらの心躍る治療法は、患者のごく一部にしか有効ではなく、標的化阻害剤は、急速な耐性の発達という欠点を有する。最近の研究により、疾患のない間隔は、標的化治療法を組み合わせることにより長くすることができること、および一部の組合せは、治癒可能でさえあり得ることが示唆されている。
【０００４】
最も一般的な眼の悪性腫瘍であるブドウ膜黒色腫は、転移性疾患を発症した場合、生存率中央値が１年未満であるという、非常に不良な予後を有する（Pereira  PR、Odashiro  ANら、Current  and  emerging  treatment  options  for  uveal  melanoma.  Clinical  ophthalmology.  ２０１３年、７巻：１６６９〜８２頁；Singh  ADら、Uveal  melanoma:trends  in  incidence,  treatment,  and  survival.  Ophthalmology.２０１１年、１１８巻（９号）：１８８１〜５頁；Augsburger  JJら、Effectiveness  of  treatments  for  metastatic  uveal  melanoma.  Am  J  Ophthalmol.、２００９年、１４８巻（１号）：１１９〜２７頁）。肝臓は、最も一般的な転移部位であり、肝臓を対象とするかまたは全身性の処置は、ささやかな成功率を有した（Bishop  KDら、Epidemiology  and  survival  outcomes  of  ocular  and  mucosal  melanomas:  a  population-based  analysis.  Int  J  Cancer.  ２０１４年、１３４巻（１２号）：２９６１〜７１頁）。転移性ブドウ膜黒色腫のための、全身毒性が低い新規標的化治療法が必要とされている。
【０００５】
メラノコルチン−１受容体（ＭＣ１Ｒ）が、真の黒色腫の標的である。ＭＣ１Ｒは、５つのＧタンパク質共役型メラノコルチン受容体のファミリーメンバーであり、このうちの４つが、メラニン形成細胞刺激ホルモン（ＭＳＨ）および関連リガンド（ＭＣ１Ｒ、３Ｒ、４Ｒおよび５Ｒ）に結合する（Yang  Y.  Structure,  function  and  regulation  of  the  melanocortin  receptors.  Eur  J  Pharmacol.  ２０１１年、６６０巻（１号）：１２５〜３０頁）。ＭＣ３Ｒ、４Ｒおよび５Ｒは、懸念のある組織（例えば、腎臓）に発現する（Chhajlani  V.  Distribution  of  cDNA  for  melanocortin  receptor  subtypes  in  human  tissues.  Biochem  Mol  Biol  Int.  １９９６年；３８巻（１号）：７３〜８０頁）。ＭＣ１Ｒは、ブドウ膜黒色腫の９４％に発現し、ヒトにおいて、関心の持たれる正常組織には発現しないが（Tafreshi  NKら、In  Vivo  and  in  Silico  Pharmacokinetics  and  Biodistribution  of  a  Melanocortin  Receptor  1  Targeted  Agent  in  Preclinical  Models  of  Melanoma.  Mol  Pharm.  ２０１３年）、中枢神経系および免疫細胞には発現するので、理想的な標的のように思われる（Kiessling  Rら、Melanocortin  1  receptor  is  expressed  by  uveal  malignant  melanoma  and  can  be  considered  a  new  target  for  diagnosis  and  immunotherapy.  Investigative  ophthalmology  &  visual  science.  ２００７年、４８巻（３号）：１２１９〜２７頁）。しかし、血液脳関門（ＢＢＢ）を通過しない作用物質を容易に生成することができ、免疫細胞枯渇は、臨床的に扱いやすい。したがって、ＭＣ１Ｒを特異的に標的とするリガンドは、耐容可能な毒性を有する可能性が高い。
【０００６】
ＭＣ１ＲＬの特異性および親和力（０．２４ｎＭ  Ｋｉ）が検討され、バイオコンジュゲーション後に高い親和力および生体安定性を保持していることが示された（Barkey  NMら、Development  of  melanoma-targeted  polymer  micelles  by  conjugation  of  a  melanocortin  1  receptor(MC1R)  specific  ligand.  J  Med  Chem.  ２０１１年；５４巻（２３号）：８０７８〜８４頁）。具体的には、近赤外蛍光（ＮＩＲＦ）色素がコンジュゲートされている類似体（ＭＣ１ＲＬ−８００）は、高い結合親和力（０．４±０．１ｎＭ  Ｋｉ）および、ＭＣ１Ｒを発現する腫瘍に対してインビボで特異性を有する（Tafreshi  NKら、Synthesis  and  characterization  of  a  melanoma-targeted  fluorescence  imaging  probe  by  conjugation  of  a  melanocortin  1  receptor(MC1R)  specific  ligand.  Bioconjug  Chem.  ２０１２年、２３巻（１２号）：２４５１〜９頁）。さらに、インビボでの蛍光断層撮影、硝子体内の共焦点蛍光顕微鏡法および新規数理モデルを使用する、ＭＣ１ＲＬ−８００のＰＫ、ＢＤおよび腫瘍細胞の取り込みにより、ＭＣ１ＲＬ−８００はＢＢＢを通過せず、迅速な腎臓クリアランスを受けることが示されている。
【０００７】
したがって、個々に、または組み合わせて使用することができる、副作用が限定される、新規な標的治療剤がかなり必要とされている。本明細書において開示されている組成物および方法は、これらの必要性および他の必要性に対処する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Pereira  PR、Odashiro  ANら、Current  and  emerging  treatment  options  for  uveal  melanoma.  Clinical  ophthalmology.  ２０１３年、７巻：１６６９〜８２頁
【非特許文献２】Singh  ADら、Uveal  melanoma:trends  in  incidence,  treatment,  and  survival.  Ophthalmology.２０１１年、１１８巻（９号）：１８８１〜５頁
【非特許文献３】Augsburger  JJら、Effectiveness  of  treatments  for  metastatic  uveal  melanoma.  Am  J  Ophthalmol.、２００９年、１４８巻（１号）：１１９〜２７頁
【非特許文献４】Bishop  KDら、Epidemiology  and  survival  outcomes  of  ocular  and  mucosal  melanomas:  a  population-based  analysis.  Int  J  Cancer.  ２０１４年、１３４巻（１２号）：２９６１〜７１頁
【非特許文献５】Yang  Y.  Structure,function  and  regulation  of  the  melanocortin  receptors.  Eur  J  Pharmacol.  ２０１１年、６６０巻（１号）：１２５〜３０頁
【非特許文献６】Chhajlani  V.  Distribution  of  cDNA  for  melanocortin  receptor  subtypes  in  human  tissues.  Biochem  Mol  Biol  Int.  １９９６年；３８巻（１号）：７３〜８０頁
【非特許文献７】Tafreshi  NKら、In  Vivo  and  in  Silico  Pharmacokinetics  and  Biodistribution  of  a  Melanocortin  Receptor  1  Targeted  Agent  in  Preclinical  Models  of  Melanoma.  Mol  Pharm.  ２０１３年
【非特許文献８】Kiessling  Rら、Melanocortin  1  receptor  is  expressed  by  uveal  malignant  melanoma  and  can  be  considered  a  new  target  for  diagnosis  and  immunotherapy.  Investigative  ophthalmology  &  visual  science.  ２００７年、４８巻（３号）：１２１９〜２７頁
【非特許文献９】Barkey  NMら、Development  of  melanoma-targeted  polymer  micelles  by  conjugation  of  a  melanocortin  1  receptor(MC1R)  specific  ligand.  J  Med  Chem.  ２０１１年；５４巻（２３号）：８０７８〜８４頁
【非特許文献１０】Tafreshi  NKら、Synthesis  and  characterization  of  a  melanoma-targeted  fluorescence  imaging  probe  by  conjugation  of  a  melanocortin  1  receptor(MC1R)  specific  ligand.  Bioconjug  Chem.  ２０１２年、２３巻（１２号）：２４５１〜９頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
概要
本明細書において具現化されており、かつ幅広く記載されている、開示された材料および方法の目的によれば、開示されている主題は、一態様では、化合物、組成物、ならびに化合物および組成物を作製および使用する方法に関する。特定の態様では、開示されている主題は、がん治療法、ならびに抗がん化合物およびイメージング作用物質に関する。より具体的には、本明細書に開示されている主題は、ＭＣ１Ｒを標的とする放射性医薬作用物質および核医薬作用物質、ならびにがんの処置におけるそれらの使用に関する。ＭＣ１Ｒを標的とする新規作用物質のスクリーニング方法も開示される。ＰＥＴコンパニオン作用物質（companion  agent）、および開示化合物とのそれらの使用も開示される。
【００１０】
追加の利点は、以下に続く説明において一部が説明されているか、または以下に記載されている態様を実施することにより知ることができる。以下に記載されている利点が認識され、特に添付の特許請求の範囲において指定されている要素および組合せによって得ることができよう。上述の一般的な説明と以下の詳細な説明の両方が、例示的および説明的なものに過ぎず、限定するものではないことを理解すべきである。
【００１１】
本明細書の一部に組み込まれている、およびそれを構成する添付の図面が、以下に記載されているいくつかの態様を例示している。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１Ａ】図１の上のパネルＡは、ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬ２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬの合成スキームを示している。下のパネルＢは、２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬの放射化学合成スキームを示している。
【図１Ｂ】図１の上のパネルＡは、ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬ２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬの合成スキームを示している。下のパネルＢは、２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬの放射化学合成スキームを示している。
【図２】図２は、１３９Ｌａ−および６９Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬペプチドの代表的な競合的結合アッセイからのグラフである。それぞれ、０．２４、０．３４および０．２３ｎＭ  Ｋｉとして定量された、非標識ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬ、６７／６９Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬおよび１３９Ｌａ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬの結合親和力。
【図３】図３は、ＭＣ１Ｒ特異的プローブのインビボでの標的化からのデータを含有している。左のマウス：異種移植片腫瘍を有するマウスに重ね合わせた、正規化した蛍光強度マップの代表的な画像。対照画像（左のマウス）により、３ｎｍｏｌ／ｋｇのＭＣ１ＲＬ−８００プローブを静脈内注射した４時間後に、右脇腹の腫瘍に比べて、左脇腹の腫瘍における蛍光シグナルがより低いことが示されている。ブロッキング実験（右側のマウス）は、０．２５μｇの非標識ＮＤＰ−α−ＭＳＨと３ｎｍｏｌ／ｋｇのＭＣ１ＲＬ−８００プローブとを共注射（coinjection）することにより行った。一番右側のグラフのはめ込み図は、低発現腫瘍および高発現腫瘍のうちで、ならびにブロッキング実験と比較した対照実験における腫瘍のうちで、有意に変わる蛍光計数を正規化した。右側のマウス：ＦＭＴ２５００ＬＸによる定量的蛍光断層撮影法インビボイメージングシステム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用する、３ｎｍｏｌ／ｋｇのＭＣ１ＲＬ−８００メージングプローブを注射した４時間後におけるＢ１６Ｆ１０異種移植片腫瘍を有するマウスの代表的な断層撮影画像。
【図４】図４は、本明細書において開示されている化合物の調製の概略図である。
【図５】図５は、本明細書において開示されている化合物の調製の概略図である。
【図６】図６は、２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬ放射線治療剤のＭＴＤ研究からのグラフを含んでいる。グラフＡは、平均体重増加％を、グラフＢは、血中尿素窒素（ＢＵＮ）レベルを、グラフＣは、血中クレアチニンレベルを、一定の範囲のＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−２２５Ａｃ放射活性により処置された動物の群により示している。
【図７】図７は、ブドウ膜細胞および皮膚細胞に播種された９６ウェルプレート全体にＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−２２５ＡｃおよびＰＢＳ（対照）を一定範囲のＭＣ１Ｒ発現値で加えたものに由来するグラフである。この作用物質と一緒に５分間にわたってインキュベートした後、このプレートを３回洗浄し、培地を添加した後、４８時間インキュベートした。この後、ＭＴＴアッセイを行った。
【図８】図８は、腫瘍を有さないＢＡＬＢ／ｃマウスにおける、ＢＤデータ、ならびに推定される用量およびクリアランス動態パラメータを指数関数線にあてはめたグラフである。マウスには、２．３〜３．１μＣｉのＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−２２５Ａｃを投与した。２４、４８および９６時間において、ＢＤおよび線量測定情報のために、６匹の動物の群を安楽死させて、臓器を取り出して秤量し、ガンマ線を計数してガンマスペクトルを生成した。
【図９】図９は、腫瘍を有するＳＣＩＤマウスにおけるＢＤ研究からのグラフである。マウスは、右脇腹にＡ３７５／ＭＣ１Ｒ（表面に７５，０００ＭＣ１Ｒ）細胞を注射し、左脇腹に親Ａ３７５細胞（表面に４００ＭＣ１Ｒ）を注射した。マウスには、２〜３．７μＣｉのＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−２２５Ａｃを投与した。活性の投与後２４時間、９６時間、１４４時間および２８８時間において、ＢＤおよび線量測定情報のために、５匹の動物の群を安楽死させて、臓器を取り出して秤量し、ガンマ線を計数してガンマスペクトルを生成した。
【図１０】図１０の上のパネルＡは、１．９〜３．３μＣｉのＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−２２５Ａｃ、１．８〜２．７μＣｉのスクランブル化ペプチドＤＯＴＡ−２２５Ａｃ、過剰の非放射性作用物質（ＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−１３９Ｌａ）、および食塩水（saline）を、Ａ３７５／ＭＣ１Ｒ腫瘍の注射を有するＳＣＩＤマウスに注射した（群あたりｎ＝１０、腫瘍の体積：５７〜２６６ｍｍ３）場合に由来するデータを示している。マウスが健康かどうかを毎日観察し、１週あたり２回秤量し、そしてカリパスにより腫瘍体積を測定した。腫瘍が２０００ｍｍ３（実験のエンドポイント）に到達すると、動物を安楽死させた。２０００ｍｍ３になるよりも前の安楽死は、臨床的エンドポイントによるもの、すなわち、主として腫瘍潰瘍化によるものであった。下のパネルＢは、投与後２２日目における、対照マウスおよび作用物質により処置されたマウスの代表的な画像である。
【図１１】図１１は、本明細書において開示されている化合物の調製の概略図である。
【図１２】図１２は、本明細書において開示されている化合物の調製の概略図である。
【図１３】図１３は、本明細書において開示されている化合物の調製の概略図である。
【図１４】図１４は、放射性−ＴＬＣおよびチェレンコフ発光イメージング（ＣＬＩ）およびガンマ−カウンターによる、放射化学的純度からの結果を示している。純度は、９９．８％超である。
【図１５】図１５は、放射性−ＨＰＬＣによって、本明細書において開示されている化合物の放射化学収率および純度を示す一対のグラフである。
【図１６】図１６は、ガンマスペクトルを使用し、投与量を算出して、放射線線量測定（radiodosimetry）を決定することを示している。２２５Ａｃの崩壊生成物が、上のパネルに示されている。下のパネルは、組織試験片における２２５Ａｃのガンマスペクトルおよびその崩壊生成物を示している。データは、ＢｉｏＤｅｘ  Ａｔｏｍ  Ｌａｂ  ５００  Ｗｉｐｅ  Ｔｅｓｔ  Ｃｏｕｎｔｅｒにより生成した。
【図１７】図１７の上のパネルは、アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）を介して、ＤＯＴＡ：１５２Ｅｕに連結したＭＣ１ＲＬを示している。結合配列は、１−フェニル酪酸−Ｈｉｓ（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ａｈｘ−ＤＯＴＡ）−ＣＯＮＨ２である。Ｅｕは、ランタニドをベースとする結合アッセイを行うために、コンジュゲートされているＤＯＴＡにキレートされているが、２２５Ａｃ、６８Ｇａまたは１１１Ｉｎもキレートされ得る。真ん中のパネルは、全結合および非特異的な飽和結合を示している。２０×ＭＣ１Ｒｌ−ＤＯＴＡをブロッキングに使用した。下のパネルは特異的結合を示しており、この結合は、全結合から非特異的結合を減算した結果である。データは、２回の反復の結果である。Ｋｄ＝０．８８ｎＭ；Ｒ２＝０．４２。
【図１８】図１８の上のパネルは、ＤＯＴＡ：１５２Ｅｕに連結されているＭＣ１ＲＬを示している。結合配列は、１−フェニル酪酸−Ｈｉｓ（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（ＤＯＴＡ）−ＣＯＮＨ２である。Ｅｕは、ランタニドをベースとする結合アッセイを行うために、コンジュゲートされているＤＯＴＡにキレートされているが、２２５Ａｃ、６８Ｇａまたは１１１Ｉｎもキレートされ得る。真ん中のパネルは、全結合および非特異的な飽和結合を示している。２０×ＭＣ１Ｒｌ−ＤＯＴＡをブロッキングに使用した。下のパネルは特異的結合を示しており、この結合は、全結合から非特異的結合を減算した結果である。データは、２回の反復の結果である。Ｋｄ＝０．６９ｎＭ；Ｒ２＝０．７２。
【図１９】図１９の上のパネルは、Ｄ−ジ−Ｇｌｕを介して、ＤＯＴＡ：１５２Ｅｕに連結されているＭＣ１ＲＬを示している。結合配列は、１−フェニル酪酸−Ｈｉｓ（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｄ−ジ−Ｇｌｕ−ＤＯＴＡ）−ＣＯＮＨ２である。Ｅｕは、ランタニドをベースとする結合アッセイを行うために、コンジュゲートされているＤＯＴＡにキレートされているが、２２５Ａｃ、６８Ｇａまたは１１１Ｉｎもキレートされ得る。真ん中のパネルは、全結合および非特異的な飽和結合を示している。２０×ＭＣ１Ｒｌ−ＤＯＴＡをブロッキングに使用した。下のパネルは特異的結合を示しており、この結合は、全結合から非特異的結合を減算した結果である。データは、２回の反復の結果である。Ｋｄ＝０．１９ｎＭ；Ｒ２＝０．７８。
【図２０】図２０の上のパネルは、Ａｈｘを介して、ＤＯＴＡに連結されているスクランブル化ＭＣ１ＲＬを示している。結合配列は、１−フェニル酪酸−Ｈｉｓ（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ａｈｘ−ＤＯＴＡ）−ＣＯＮＨ２である。Ｅｕは、ランタニドをベースとする結合アッセイを行うために、コンジュゲートされているＤＯＴＡにキレートされているが、２２５Ａｃ、６８Ｇａまたは１１１Ｉｎもキレートされ得る。真ん中のパネルは、全結合および非特異的な飽和結合を示している。２０×ＭＣ１Ｒｌ−ＤＯＴＡをブロッキングに使用した。下のパネルは特異的結合を示しており、この結合は、全結合から非特異的結合を減算した結果である。データは、２回の反復の結果である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
詳細な説明
本明細書に記載されている材料、化合物、組成物および方法は、開示されている主題の具体的な態様の以下の詳細な説明およびその中に含まれている実施例を参照することにより、一層容易に理解することができる。
【００１４】
本材料、化合物、組成物および方法を開示および記載する前に、以下に記載されている態様が具体的な合成方法または具体的な試薬に限定されず、したがって、当然ながら、変化し得ることを理解すべきである。本明細書において使用される用語は、特定の態様を記載するためだけのものであり、限定することを意図するものではないこともやはり理解すべきである。
【００１５】
また、本明細書を通じて、様々な刊行物が参照される。開示されている主題が関係する技術水準を一層完全に記載するために、これらの刊行物の開示の全体が、本出願への参照により本明細書に援用されている。開示されている参照文献はまた、該参照文献に依拠している文章において議論されている、それらの参照文献中に含まれている材料に関して、本明細書における参照により個々にかつ具体的に援用されている。
【００１６】
本明細書において、および後続する特許請求の範囲において、以下の意味を有するものと定義されることになる、いくつかの用語が参照される。
【００１７】
本明細書および特許請求の範囲の全体にわたり、語「含む（comprise）」、ならびに「含んでいる（comprising）」および「含む（comprises）」などの、上記の語の他の形態は、あるものを含むがそれに限定されないことを意味し、例えば、他の添加物、構成成分、整数またはステップを排除することを意図するものではない。
【００１８】
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈がそうでないことを明白に示さない限り、複数の参照物を含む。したがって、例えば、「組成物」との言及は、２つまたはそれ超のこのような組成物の混合物を包含し、「阻害剤」との言及は、２つまたはそれ超のこのような阻害剤の混合物を包含し、「キナーゼ」との言及は、２つまたはそれ超のこのような「キナーゼ」の混合物を包含する、などである。
【００１９】
「必要に応じた」または「必要に応じて」は、続いて記載されている事象または状況が起こっても起こらなくてもよいこと、およびこの記載が、事象または状況が起こる場合およびこれらが起こらない場合を包含することを意味する。
【００２０】
本開示の幅広い範囲を説明する数値範囲およびパラメータが概数である場合にかかわらず、具体例中に説明されている数値は、できる限り正確に報告されている。しかし、いかなる数値も、それぞれの試験測定値において見られる標準偏差に必然的に起因するある誤差を本質的に含有している。さらに、様々な範囲の数値範囲が本明細書において説明されている場合、引用されている値を含め、これらの値の任意の組合せが使用されてもよいことが企図される。さらに、範囲は、本明細書において、「約」１つの具体的な値から、および／または「約」別の具体的な値までとして表現することができる。このような範囲を表現する場合、別の態様には、１つの具体的な値から、および／または他の具体的な値までが含まれる。また、前に置かれる「約」を使用することにより、値を概数として表す場合、具体的な値が別の態様を形成すると理解されよう。範囲のそれぞれの両端点は、別の端点に関連して、および他の端点と独立して、どちらも有意であることがさらに理解される。特に明記されていない限り、用語「約」は、用語「約」によって修飾される具体的な値の５％以内（例えば、２％または１％以内）であることを意味する。
【００２１】
「低減する（reduce）」、または「低減する（reducing）」もしくは「低減（reduction）」などの語である他の形態は、事象または特徴（例えば、腫瘍成長、転移）が少なくなることを意味する。これは通常、ある標準値または予想値に関してのことであること、言い換えると、それは相対的であるが、必ずしも、標準値または相対値を参照する必要はないことが理解される。例えば、「腫瘍成長を低下させる」とは、標準または対照と比べて腫瘍細胞の量が低下することを意味する。
【００２２】
「予防する（prevent）」、または「予防すること（preventing）」もしくは「予防（prevention）」などのその語の他の形態は、特定の事象または特徴を停止させること、特定の事象もしくは特徴の発症または進行を安定化または遅延させること、あるいは特定の事象または特徴が起こる機会を最小化させることを意味する。予防は、通常、例えば、低減することよりも絶対的であるので、対照との比較を必要としない。本明細書で使用する場合、何かのものは低減され得るが予防され得ないが、低減される何かのものはまた、予防され得る。同様に、何かのものは予防され得るが低減され得ないが、予防される何かのものはまた、低減され得る。低減または予防が使用される場合、そうでないことが具体的に示されていない限り、他方の語の使用もやはり明確に開示されていることが理解される。
【００２３】
本明細書で使用する場合、「処置」とは、有益なまたは所望の臨床的結果を得ることを指す。有益なまたは所望の臨床的結果は、以下のうちの１つまたはそれ超を包含するがそれらに限定されない：１つまたは複数の症状（腫瘍成長または転移など）の緩和、がんの程度の軽減、がんの安定化（すなわち、悪化しない）状態、がんの拡散（例えば、転移）の予防または遅延、がんの発生もしくは再発の予防または遅延、がんの進行の遅延または減速、がん状態の改善、および寛解（一部または全体のいずれか）のうちのいずれか１つまたは複数を含む。
【００２４】
用語「患者」は、好ましくは、抗がん剤による処置、または任意の目的のための処置を必要としているヒト、より好ましくは、がん、または前がん状態もしくは病変を処置するためのこのような処置を必要としているヒトを指す。しかし、用語「患者」は、とりわけ、抗がん剤による処置または処置を必要としている、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジおよび非ヒト霊長類などの、非ヒト動物、好ましくは哺乳動物も指すことができる。
【００２５】
本明細書の全体にわたり、識別用語（identifier）である「第１の」および「第２の」は、開示されている主題の様々な構成成分およびステップの区別を補助するために、単に使用されているに過ぎないことが理解される。識別用語「第１の」および「第２の」は、これらの用語によって修飾されている構成成分またはステップに対して、任意の特定の順序、量、優先度または重要度を暗示することを意図するものではない。
【００２６】
本明細書で使用する場合、用語「組成物」は、指定量で指定成分を含む生成物、および指定量の指定成分の組合せから直接的にまたは間接的もたらされる任意の生成物を包含することが意図されている。
【００２７】
本明細書および結びの特許請求の範囲において、組成物中の具体的な要素または構成成分の重量部を言う場合、重量部が表現されている組成物または物品における、要素または構成成分、および他の任意の要素もしくは構成成分の間の重量関係を表している。したがって、構成成分Ｘを２重量部、および構成成分Ｙを５重量部含有する混合物中では、ＸおよびＹは、２：５の重量比で存在し、追加の構成成分が該混合物中に含有されているかどうかに関わらず、このような比で存在している。
【００２８】
構成成分の重量％（ｗｔ．％）は、特に具体的に反対の記載がない限り、構成成分が含まれている製剤または組成物の総重量を基準としている。
【００２９】
本明細書で使用する場合、用語「置換されている」は、有機化合物のすべての許容可能な置換基を包含することが企図されている。広い態様では、許容可能な置換基は、有機化合物の、非環式および環式、分岐状および非分岐状の炭素環式および複素環式、ならびに芳香族および非芳香族の置換基を包含する。例示的な置換基としては、例えば、以下に記載されているものが挙げられる。許容可能な置換基は、適切な有機化合物にとって１つまたは複数であってよく、かつ同一であってもまたは異なっていてもよい。本開示の目的として、窒素などのヘテロ原子は、水素置換基、および／またはヘテロ原子の価数を満足させる、本明細書に記載されている有機化合物の任意の許容可能な置換基を有することができる。本開示は、有機化合物の許容可能な置換基によって、限定されることを決して意図するものではない。また、用語「置換」または「により置換されている」は、このような置換が、置換されている原子および置換基の許容される価数に従うこと、およびこの置換により、安定な化合物、例えば、転位、環化、脱離などによる変換を自発的に経ることがない化合物が得られるという暗黙の前提を包含する。
【００３０】
化合物
メラニン形成細胞刺激ホルモン受容体（ＭＣＲ）は、メラニン形成細胞の表面に発現する。ＭＣＲは、５つのＧ−タンパク質共役型受容体のファミリーである。ＭＣＲは、様々な組織タイプ：脳／毛／皮膚（ＭＣ１Ｒ）、腎臓／肺（ＭＣ５Ｒ）、副腎（ＭＣ２Ｒ）、視床下部／心臓（ＭＣ３Ｒ／ＭＣ４Ｒ）中で発現する。アイソフォーム１（ＭＣ１Ｒ）は、悪性、ブドウ膜および転移性の黒色腫の良好なバイオマーカーとして働く。ＭＣ１Ｒは、悪性黒色腫のうちの８０％およびブドウ膜黒色腫のうちの９４％において、ｍＲＮＡとして発現する。ＭＣ１Ｒは、黒色腫転移物のうちの９７％（５０％においては、かなり過剰発現される）にタンパク質として発現され、ＭＣ１Ｒは、現在の黒色腫の標的化治療にとっての候補ではない、転移物のうちの４０％において発現される。ＭＣ１Ｒの高い細胞表面発現は、それをイメージングと放射線治療剤の両方にとっての標的とする。
【００３１】
ブドウ膜黒色腫は、現在の利用可能な治療による治療をほとんど受けてこなかったサブタイプである。メラノコルチン１受容体（ＭＣ１Ｒ）は、ブドウ膜黒色腫の９４％に高度に発現するが、一般に、毒性が懸念される正常な組織中には発現しない。例えば、ＭＣ１Ｒは、正常な中枢神経系（ＣＮＳ）中で発現するが、血液脳関門（ＢＢＢ）を通過しない標的化剤が構築され得、ＭＣ１Ｒは、深刻な副作用なしに、一時的に枯渇され得る一部の免疫細胞中に発現する。患者の試料の免疫組織化学（ＩＨＣ）により、ＭＣ１Ｒはまた、すべての黒色腫転移物のほぼ半分に、高度に発現することが示された。したがって、ＭＣ１Ｒを特異的に標的とする新規な治療剤は、後期段階およびブドウ膜黒色腫の処置において、大きな影響を及ぼす可能性を有する。大部分の標的治療が、がんの表現型を推進する経路の阻害に焦点を合わせてきたが、固形腫瘍の標的化放射線療法、すなわち「スマート爆弾」手法が近年成功を収めてきた。実際に、標的化足場としてのアルファ−メラニン形成細胞刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）を使用する、アルファ粒子放出性放射線治療剤である２１２Ｐｂ／２１２Ｂｉ合金は、メラノコルチンファミリーの受容体を非特異的に標的とする黒色腫のために開発された。しかし、この作用物質に関する問題は、この作用物質はＭＣ１Ｒアイソフォームに特異的ではないこと、およびこの作用物質は毒性の懸念される臓器、例えば、心臓および腎臓において発現する他のファミリーメンバーも標的とすることである。
【００３２】
ＭＣ１Ｒに特異的な標的化足場であって、イメージング造影剤が足場にコンジュゲートされており、毒性の懸念のある組織に留まることなく、インビボにおいて、ＭＣ１Ｒを発現する腫瘍に対する高い選択性および迅速な全身性クリアランスを実証する、標的化足場が、本明細書において開示されている。開示化合物は、ペプチドＨＦＲＷＧＫ（配列番号１）を含むＭＣ１Ｒについての標的化配列（ＭＣ１Ｒ結合配列）を含む。このペプチドは、当技術分野において公知の保護基、例えば、トリチル、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、ベンジル、アセテート、４−フェニルブチリル、Ａｃ−ホモフェニルアラニンなどにより、Ｎ末端および／またはＣ末端で保護することができる。開示化合物はまた、ＭＣ１Ｒ結合配列にコンジュゲートされている放射性核種またはイメージング部分を含む。放射性核種またはイメージング部分は、リジン側鎖の使用により、標的化足場にコンジュゲートすることができる。すなわち、リジン残基中のアミノ基は、放射性核種もしくはイメージング部分に直接結合することができ、または放射性核種もしくはイメージング部分に結合しているリンカーに結合することができる。
【００３３】
本明細書において使用され得るさらなる標的化配列は、本明細書において開示されている通りに保護されてもよく、または保護されなくてもよい、ＷＧＨＲＦＫ（配列番号２）である。
【００３４】
１，４，７，１０−テトラアザシクロ−ドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）は、ＭＣ１Ｒ特異的配列（ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬ）にコンジュゲートされており、アルファ線放出性放射性核種２２５Ａｃおよび非放射性代替物１３９Ｌａ（２２５Ａｃの代替物）および６７／６９Ｇａ（６８Ｇａ陽電子断層撮影法での放射性核種の代替物）とキレートしており、それは、３７℃において血漿中で１０日後に、高い結合親和力（０．３ｎＭ  Ｋｉ）、９７％の放射合成収率、９８％の純度、および９０％超の生体安定性があることを実証した。
【００３５】
転移性黒色腫の標的化処置は、コンパニオンＰＥＴイメージング作用物質（agent）の使用によって情報がもたらされ得、そしてＰＥＴ剤を必要としている患者は、対応する標的治療により首尾よく処置することができる。コンパニオンの標的化されたＰＥＴイメージング作用物質によるＭＣ１ＲＬ標的化放射線治療剤が開示されている。
【００３６】
特定の態様では、式Ｉを有する化合物
【化１】
2018522818.tif 000003
（式中、
Ｐ１およびＰ２は、独立して、Ｈもしくはアミン保護基、またはアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、ヒスチジン、メチオニン、メチオニンスルホキシド、フェニルアラニン、セリン、トレオニン、フェニルグリシン、ノルロイシン、ノルバリン、アルファ−アミノ酪酸、Ｏ−メチルセリン、Ｏ−エチルセリン、Ｓ−メチルシステイン、Ｓ−エチルシステイン、Ｓ−ベンジルシステイン、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨＥｔ２）−ＣＯＯＨ、アルファ−アミノヘプタン酸、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロヘキシル）−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロペンチル）−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロブチル）−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−ＣＨ（ＣＨ２−シクロプロピル）−ＣＯＯＨ、５，５，５−トリフルオロロイシン、α−アミノヘキサン酸、チアプロリンおよびヘキサフルオロロイシンからなる群から選択される１つまたは複数の追加のアミノ酸であり、
Ｌは、長さが１〜３０個の炭素原子の必要に応じた連結部分であり、
Ａ１は、放射性核種キレート部分である）またはそのイオン化誘導体が開示される。
【００３７】
保護基の追加例は、トリチル、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、ベンジル、アセテート、４−フェニルブチリル、Ａｃ−ホモフェニルアラニンなどである。具体例では、Ｐ１は、４−フェニルブチリルである。他の例では、Ｐ２はＨである。
【００３８】
本明細書に記載されている化合物は、放射性核種キレート部分をＭＣ１Ｒ結合配列のリジン残基に連結するリンカー（Ｌ）を含むことができる。あるいは、リンカーは存在しなくてもよく、放射性核種キレート部分は、ＭＣ１Ｒ結合配列のリジン残基に直接結合している。用語「リンカー」とは、本明細書で使用する場合、ＭＣ１Ｒ結合配列にキレート部分を共有結合により結合させるために使用することができる１つまたは複数の多官能性分子、例えば、二官能分子または三官能性分子を指す。このリンカーは、結合点が本明細書に記載されている化合物の生物活性、例えば、抗腫瘍活性を妨げない限り、ＭＣ１Ｒ結合配列の任意の部分に結合させることができる。
【００３９】
リンカーは、ヘテロ原子（例えば、Ｏ、ＮまたはＳ）などの単一原子、官能基（例えば、アミン、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＨ２−）などの原子団、またはアルキレン鎖などの複数原子団（multiple  groups  of  atoms）であり得る。適切なリンカーとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：酸素、硫黄、炭素、窒素、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、エーテル、アミン、ジアミン、アミド、アルキルアミン、チオエーテル、カルボキシレート、ポリマー、それらの誘導体または組合せ。
【００４０】
リンカーは、Ｒ１４、Ｃ（Ｏ）Ｒ１４Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４ＯＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｒ１４Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１４ＮＨ、ＮＨＲ１４ＮＨまたはＣ（Ｏ）ＮＨＲ１４ＮＨＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）ＯＲ１４ＯＣ（Ｓ）であり得、Ｒ１４は、Ｏ、Ｓ、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、Ｃ１〜Ｃ２０ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ２０アルキルアミン、Ｃ１〜Ｃ２０アルコキシル、Ｃ１〜Ｃ２０アルカノイルオキシルまたはＣ１〜Ｃ２０アルキルアミドであり、それらのいずれも、ハロゲン、アルコキシル、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボニル、アシル、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１２、カルボキシレート（−ＣＯＯ−）、第一級アミド（例えば、−ＣＯＮＨ２）、第二級アミド（例えば、−ＣＯＮＨＲ１２）、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１２Ｒ１３、−ＮＲ１２Ｒ１３、−ＮＲ１２Ｓ（Ｏ）２Ｒ１３、−ＮＲ１２Ｃ（Ｏ）Ｒ１３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１２、−ＳＲ１２および−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１２Ｒ１３、スルフィニル基（例えば、−ＳＯＲ１２）およびスルホニル基（例えば、−ＳＯＯＲ１２）を含めた、１つまたは複数の置換基により必要に応じて置換され得、Ｒ１２およびＲ１３は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、ハロアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、カルボニル、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシル、アリールオキシル、シクロアルキル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニルまたはジアルキルアミノカルボニルであり得る。
【００４１】
一部の実施形態では、リンカーは、ＮＲ１４Ｒ１５Ｒ１６または（ＣＨ）Ｒ１４Ｒ１５Ｒ１６であり、ＭＣ１Ｒ結合部分または検出可能部分は、Ｒ１４Ｒ１５Ｒ１６の少なくとも１つに結合しており、Ｒ１４、Ｒ１５およびＲ１６は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、Ｃ１〜Ｃ２０ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ２０アルキルアミン、Ｃ１〜Ｃ２０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ２０アルカノイルオキシ、またはＣ１〜Ｃ２０アルキルアミドであり、これらのいずれも、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミド、アルキルアミド、＝Ｏ、−Ｓ（Ｏ）２、−ＳＯ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ−、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニルおよびジアルキルアミノカルボニルからなる群から独立して選択される１つまたは複数の置換基により必要に応じて置換され得る。例えば、リンカーは、−（Ｃ（Ｏ）Ｒ１４）３Ｎ、−（Ｒ１４）３Ｎ、−（Ｓ（Ｏ）２Ｒ１４）３Ｎ、−（Ｃ（Ｏ）Ｒ１４）３ＣＨ、−（Ｒ１４）３ＣＨ、または−（Ｓ（Ｏ）２Ｒ１４）３ＣＨである。一部の実施形態では、Ｃ１〜２０は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０個の炭素を含有するアルキル基を指す。一部の実施形態では、リンカーは、−（ＣＯ−Ｒ１４）２ＮＨ、−（Ｒ１４）２ＮＨ、−（ＳＯ２Ｒ１４）２ＮＨ、−（ＳＯＲ１４）２ＮＨ、−（ＯＲ１４）２ＮＨ、−（Ｏ−ＣＯ−Ｒ１４）２ＮＨ、−（ＣＯ−Ｏ−Ｒ１４）２ＮＨ、−（ＣＯ−Ｒ１４）２ＣＨ２、−（Ｒ１４）２ＣＨ２、−（ＳＯ２Ｒ１４）２ＣＨ２、−（ＳＯＲ１４）２ＣＨ２、−（Ｏ−ＣＯ−Ｒ１４）２ＣＨ２または−（ＯＲ１４）２ＣＨ２である。リンカーの適切な例は、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−（ｎは１〜２０である）またはＣ（Ｏ）（ＣＨ２Ｏ）ｎ（ｎは１〜１０である）である。
【００４２】
放射性核種結合部分Ａ１は、放射性核種とキレートする任意の環式または非環式部分であり得る。適切な放射性核種結合部分の具体例は、キレート部分として、ＤＯＴＡ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸）であり、ＤＴＰＡ（ジエチレントリアミン五酢酸）、ＤＯＴＰ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メチレンホスホン）酸）、ＤＯＴＭＡ（１Ｒ，４Ｒ，７Ｒ，１０Ｒ）−α’α”α’’’−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸）四ナトリウム塩（(1R,  4R,  7R,  10R)-α'α''α'''-Tetramethyl-1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic  acid)  tetrasodium  salt））、ＴＥＴＡ（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸）、ＤＯＴＡＭ（１，４，７，１０−テトラキス（カルバモイルメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン）、ＣＢ−ＴＥ２Ａ（１，４，８，１１−テトラアザビシクロ［６．６．２］ヘキサデカン−４，１１−二酢酸（1,4,8,11-tetraazabicyclo[6.6.2]hexadecane-4,  11-dicetic  acid））およびＮＯＴＡ（（１，４，７−トリアザシクロノナン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ”−三酢酸）などの他のキレート部分は、ＭＣ１Ｒ結合配列のリジン側鎖に結合することができる。
【００４３】
具体例では、式ＩＡを有する化合物
【化２】
2018522818.tif 000004
（式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｌは、本明細書において定義されている通りである）が開示される。
【００４４】
本明細書において開示されている化合物の追加例は、
【化３】
2018522818.tif 000005
【化４】
2018522818.tif 000006
である。
【００４５】
開示化合物のイオン化誘導体も開示される。イオン化誘導体は、プロトン化されているか、または脱プロトン化されている化合物、およびそれらの塩である。
【００４６】
放射性核種にキレートしている、本明細書において開示されているいずれの化合物も開示される。放射性核種は、アルファ粒子放射体またはベータ粒子放射体であり得る。β粒子に比べて、α粒子は、二次的な損傷を最小化し、放射線耐性にそれほど感受性は高くはない。α粒子は、非常に高い線エネルギー付与を有する（周囲細胞に高いエネルギーを蓄積する）、すなわち、固形腫瘍をより効率的に細胞殺傷する（細胞殺傷のために、細胞１個あたり数千個のβ粒子が必要なのに対して細胞１個あたりわずか１〜１０個のα粒子の衝突しか必要としない）。α粒子はまた、非常に短い経路（細胞径のほんの数倍）を移動し、その結果、それらは、周囲の近傍正常組織への損傷が低減される。しかし、これは、標的発現の腫瘍内不均質性に対する潜在的な解決策であり、すなわち隣接細胞は、標的発現に関わらず、殺傷され得る。例えば、本明細書において開示されている式Ｉの化合物または具体的な化合物は、９０Ｙ、１７７Ｌｕ、１８Ｆ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８９Ｚｒ、１２４Ｉ、１２３Ｉ、１５２Ｅｕおよび９９ｍＴｃとキレートすることができる。具体例では、開示化合物とキレートする放射性核種は、２２５Ａｃ、６８Ｇａまたは１１１Ｉｎである。
【００４７】
式ＩＩの化合物
【化５】
2018522818.tif 000007
（式中、Ｐ１およびＰ２は、上で定義されている通りであり、Ｌ１は、反応性連結部分である）も開示される。そこに結合している、さらなるＯＨ、ＮＨ２、ＳＨ、Ｎ３またはアルキルを有する、上で開示されている連結部分のいずれも使用することができる。これらの化合物は、様々なキレート部分を反応させるための前駆体として使用することができる。
【００４８】
方法
さらに、被験体における、がんを処置または予防する方法であって、該被験体に、有効量の本明細書において開示されている化合物または組成物を投与することを含む方法が、本明細書において提供される。本方法は、例えば、抗がん剤または抗炎症剤などの、第２の化合物または組成物を投与することをさらに含むことができる。
【００４９】
さらに、本方法は、被験体に有効量の電離放射線を投与することをさらに含むことができる。
【００５０】
腫瘍細胞を殺傷させる方法も、本明細書において提供される。本方法は、腫瘍細胞に、有効量の本明細書において開示されている化合物または組成物を接触させることを含む。本方法は、被験体に、第２の化合物もしくは組成物（例えば、抗がん剤または抗炎症剤）を投与すること、および／または有効量の電離放射線を投与することをさらに含むことができる。
【００５１】
腫瘍の放射線療法であって、被験体に、腫瘍に電離放射線を送達する本明細書において開示されている組成物を投与することを含む方法も本明細書において提供される。
【００５２】
患者において、腫瘍学的障害を処置する方法も開示されている。一実施形態では、有効量の本明細書において開示されている１つまたは複数の化合物または組成物が、腫瘍学的障害を有しており、かつその処置を必要としている患者に投与される。本開示方法は、腫瘍学的障害の処置を必要としているかまたは必要とし得る患者を特定することを必要に応じて含むことができる。患者は、腫瘍学的障害を有する、ヒト、あるいは霊長類（サル、チンパンジー、類人猿など）、イヌ、ネコ、ウシ、ブタもしくはウマ、または他の動物などの他の哺乳動物であり得る。開示化合物により具体的に処置可能な腫瘍学的障害は、ＭＣ１Ｒを発現するもの、黒色腫などである。さらに他の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：肛門、胆管、膀胱、骨、骨髄、腸（結腸および直腸を含む）、胸部、眼、胆嚢、腎臓、口腔、喉頭、食道、胃、睾丸、子宮頸部、頭部、頸部、卵巣、肺、中皮腫、神経内分泌（neuroendocrine）、陰茎、皮膚、脊髄、甲状腺、膣、外陰部、子宮、肝臓、筋肉、膵臓、前立腺、血液細胞（リンパ球および他の免疫系細胞を含む）および脳のがんならびに／または腫瘍。処置が企図されている具体的ながんとしては、癌腫、カポジ肉腫、黒色腫、中皮腫、軟組織肉腫、膵臓がん、肺がん、白血病（急性リンパ芽球性、急性骨髄性、慢性リンパ球性、慢性骨髄性および他のもの）およびリンパ腫（ホジキンおよび非ホジキン）および多発性骨髄腫が挙げられる。
【００５３】
本明細書において開示されている方法により処置することができるがんの他の例は、副腎皮質癌、副腎皮質癌、小脳星状細胞腫、基底細胞癌、胆管がん、膀胱がん、骨がん、脳腫瘍、乳がん、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、中枢神経系リンパ腫、子宮頸がん、慢性骨髄増殖性障害、結腸がん、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、子宮内膜がん、上衣腫、食道がん、胆嚢がん、胃（gastric）（胃（stomach））がん、消化管カルチノイド腫瘍、胚細胞腫瘍、神経膠腫、有毛細胞白血病、頭頸部がん、肝細胞（肝臓）がん、下咽頭がん、視床下部および視覚路神経膠腫、眼内黒色腫、網膜芽細胞腫、膵島細胞癌腫（内分泌膵臓）、喉頭がん、口唇がんおよび口腔がん、肝臓がん、髄芽腫、メルケル細胞癌、潜在性菌状息肉腫（occult  mycosis  fungoides）を有する扁平上皮頸部がん、骨髄形成異常症候群、骨髄性白血病、鼻腔および副鼻腔がん、上咽頭がん、神経芽細胞腫、非小細胞肺がん、口腔がん、中咽頭がん、骨肉腫、卵巣がん、膵臓がん、副鼻腔および鼻腔がん、副甲状腺がん、陰茎がん、褐色細胞腫、松果体芽腫およびテント上原始神経外胚葉性腫瘍、下垂体腫瘍、形質細胞新生物／多発性骨髄腫、胸膜肺芽腫、前立腺がん、直腸がん、腎細胞（腎臓）がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺がん、ユーイング肉腫、軟組織肉腫、セザリー症候群、皮膚がん、小細胞肺がん、小腸がん、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、精巣がん、胸腺癌、胸腺腫、甲状腺がん、腎盂および尿管の移行上皮がん、トロホブラスト腫瘍、尿道がん、子宮がん、膣がん、外陰部がん、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症およびウィルムス腫瘍である。
【００５４】
一部の態様では、本明細書において開示されている少なくとも１つの化合物または組成物と、少なくとも１つのがん免疫療法剤との組合せ物を被験体に投与することによる、被験体における、腫瘍または腫瘍転移物を処置する方法が開示される。開示化合物は、単独で、またはがん免疫療法剤と組み合わせて投与され得る。被験体は、腫瘍のすべてまたは一部を除去するための外科的介入の前、その最中、またはその後に、治療組成物の投与を受けることができる。投与は、直接浸漬により、全身的または局所的に静脈内（ｉ．ｖ．）、腹腔内（ｉ．ｐ．）、皮下（ｓ．ｃ．）、筋肉内（ｉ．ｍ．）に、または腫瘍塊への直接注射、および／または適切な製剤の経口投与により達成することができる。
【００５５】
本明細書において開示されている方法に使用するのに好適ながん免疫療法剤は、腫瘍関連抗原を標的とする構成成分に連結している細胞エフェクター構成成分を含む、免疫療法剤である。適切な細胞エフェクター構成成分は、細胞毒性化学物質、細胞毒性放射性同位体、およびサイトカインなどの細胞シグナル伝達剤を含むことができる。適切な腫瘍を標的とする構成成分は、受容体タンパク質鎖または免疫グロブリン鎖などの腫瘍細胞の周辺組織マトリックス上またはその中に存在している腫瘍関連抗原に結合する、ポリペプチド鎖である。
【００５６】
免疫療法剤の標的として使用することができる腫瘍関連抗原としては、ＡＦＰ、ＣＡ１２５、ＣＥＡ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＥＧＦ受容体、ＧＤ［２］、ＧＤ［３］、ＧＭ１、ＧＭ２、Ｈｅｒ−２／Ｎｅｕ、Ｅｐ−ＣＡＭ（ＫＳＡ）、ＩＬ−２受容体、Ｌｅｗｉｓ−Ｙ、Ｌｅｗｉｓ−Ｘ（ＣＤ１５）、黒色腫関連プロテオグリカンＭＣＳＰ、ＰＳＡおよびトランスフェリン受容体からなる群から選択される腫瘍関連抗原が挙げられる。
【００５７】
免疫療法剤の例は、免疫グロブリン（Ｉｇ）ポリペプチド鎖である、標的化構成成分に連結しているサイトカインポリペプチドである、エフェクター構成成分を有する。Ｉｇポリペプチド鎖は、腫瘍関連抗原に結合する可変領域を含む。前記免疫グロブリン鎖は、適切な相補鎖（すなわち、重鎖が軽鎖を相補する）と組み合わせた場合に、腫瘍関連抗原に特異的な抗体活性部位を画定することが好ましい。
【００５８】
免疫療法剤の腫瘍標的化Ｉｇ部分は、免疫グロブリン鎖アミノ酸配列全体、または少なくとも、タンパク質の抗原結合特異性部分を含むその断片を含むことができる。したがって、適切なＩｇポリペプチド鎖は、少なくとも、腫瘍関連抗原に特異的なＩｇ可変領域を有することになろう。
【００５９】
本開示方法において使用するのに適切な、抗体およびそれに由来するポリペプチド鎖は、任意の哺乳動物起源のものであり得る、アミノ酸配列を有する。このような抗体タンパク質は、見込まれる患者と同じ起源のものではなく、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖまたは操作されたＦｖ一本鎖抗体タンパク質などの抗体タンパク質の断片を使用することができる。抗体タンパク質の抗原性をさらに低減させるために、抗体アミノ酸配列の改変を行い、タンパク質を患者の正常な抗体構成成分のように一層見えるようにすることによって、このような抗原性を低減することができる。例えば、抗体をヒト化するための様々なプロセスによって、モノクローナルネズミ（murine）抗体アミノ酸配列を改変して、ヒト患者に投与するために、一層ヒト抗体らしくすることができる。
【００６０】
がん免疫療法剤の具体例としては、イピリムマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、抗ＰＤ−１および抗ＰＤＬ１などのＣＬＴＡ−４に特異的に結合する抗体が挙げられる。他の免疫療法剤としては、ＴＮＦαアンタゴニスト（例えば、エタネルセプト）、Ｂ細胞枯渇剤リツキシマブ、抗ＩＬ−６受容体トシリズマブが挙げられ、共刺激遮断薬であるアバタセプトが、本明細書において開示されている化合物または組成物と一緒に投与され得る。
【００６１】
開示化合物はまた、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストと一緒に投与することができる。ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４およびＴＬＲ９からなる群から選択されるＴＬＲのリガンドである。例えば、ＴＬＲアゴニストは、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、ポリＩ：Ｃ、リボムニルおよびＣｐＧ  ＯＤＮからなる群から選択されるリガンドであり得る。
【００６２】
開示化合物はまた、新しい血管の形成（新血管形成）または腫瘍細胞の近傍の組織への既存の毛細血管ネットワークの拡張を阻害することができるものである、血管新生阻害剤と一緒に投与することができる。適切な血管新生阻害剤は、腫瘍関連抗原ＰＳＡなどの血管新生阻害活性を有するペプチドであり得る。他の適切な血管新生阻害剤は、ＶＥＧＦ関連血管新生のアンタゴニスト、例えば、細胞の表面にあるＶＥＧＦ受容体のアンタゴニストであり得る。使用することができるモノクローナル抗体の１つは、ＬＭ６０９（ＡＴＣＣ  ＨＢ９５３７）である。
【００６３】
投与
開示化合物は、別個の医薬製剤または組合せた医薬製剤で、逐次または同時のどちらかで投与することができる。開示化合物の１つまたは複数が第２の治療剤と組み合わせて使用される場合、各化合物の用量は、該化合物が単独で使用される場合と同じかまたは異なるかのどちらであってもよい。適切な用量は、当業者によって容易に認識されよう。
【００６４】
本明細書に記載されている化合物に関連して、用語「投与」およびその変形形態（例えば、化合物を「投与する」）は、処置を必要とする動物の系に化合物またはその化合物のプロドラッグを導入することを意味する。本明細書に記載されている化合物またはそのプロドラッグが、１つまたは複数の他の活性剤（例えば、細胞毒性剤など）と組み合わせて提供される場合、「投与」およびその変形形態は、該化合物またはそのプロドラッグ、および他の作用物質の同時および逐次の導入を含むことが、それぞれ理解される。
【００６５】
開示化合物、およびそれを含有する組成物のインビボ施用は、当業者に現在または今後に公知の任意の適切な方法および技法によって達成することができる。例えば、開示化合物は、生理学的または薬学的に許容される形態で製剤化することができ、例えば、経口、経鼻、直腸、局所および非経口投与経路を含めた、当技術分野において公知の任意の適切な経路によって投与することができる。本明細書で使用する場合、非経口という用語は、注射などによる、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、腹腔内および胸骨内の投与を含む。開示化合物または組成物の投与は、単回投与、または当業者により容易に決定することができる、連続間隔もしくは別個間隔での投与とすることができる。
【００６６】
本明細書において開示されている化合物、およびそれを含む組成物はまた、リポソーム技術、徐放性カプセル、埋め込み可能なポンプおよび生分解性容器を利用して投与することもできる。これらの送達方法は、有利なことには、長期間にわたる均一投与量をもたらすことができる。本化合物はまた、その塩誘導体の形態または結晶形態で投与され得る。
【００６７】
本明細書において開示されている化合物は、薬学的に許容される組成物を調製するための公知の方法に従って製剤化することができる。製剤は、当業者に周知かつ当業者が容易に入手することができる、いくつかの情報源に詳述されている。例えば、E.W.  MartinによるRemington's  Pharmaceutical  Science（１９９５年）は、本開示方法に関連して使用することができる製剤を記載している。一般に、本明細書において開示されている化合物は、この化合物の有効な投与を促進するために、有効量のこの化合物が好適な担体と組み合わせられるよう、製剤化することができる。使用される組成物は、様々な形態にあることもできる。これらには、例えば、錠剤、丸剤、散剤、液状の液剤または懸濁剤、坐剤、注射可能および注入可能な液剤、ならびにスプレー剤などの、固体剤形、半固体剤形および液状剤形が含まれる。好ましい形態は、意図した投与形式および治療的施用に依存する。本組成物はまた、当業者に公知の従来の薬学的に許容され得る担体および賦形剤を好ましくは含む。本化合物と使用するための担体または賦形剤の例には、エタノール、ジメチルスルホキシド、グリセロール、アルミナ、デンプン、食塩水、ならびに等価な担体および賦形剤が含まれる。所望の治療的処置のこのような投与量の投与を実現するために、本明細書において開示されている組成物は、有利には、担体または賦形剤を含めた組成物全体の重量を基準として、１つまたは複数の対象化合物を全体で約０．１重量％〜９９重量％の間、とりわけ１〜１５重量％含むことができる。
【００６８】
投与に適切な製剤としては、例えば、無菌の水性注射用液剤（抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および製剤を意図したレシピエントの血液と等張にする溶質を含有することができる）、ならびに水性および非水性の滅菌懸濁剤（懸濁化剤および増粘剤を含むことができる）が挙げられる。製剤は、単回用量用容器または多回用量用容器、例えば密封アンプルおよびバイアル中で提供されることができ、使用前に、滅菌液体担体、例えば注射用水の状態しか必要としない、冷凍乾燥（凍結乾燥）状態で保管することができる。即時使用可能な注射用液剤および懸濁剤は、滅菌散剤、顆粒剤、錠剤などから調製することができる。特に上記した成分に加えて、本明細書において開示されている組成物は、問題の製剤のタイプを考慮すると、当技術分野において慣用的な他の作用物質を含むことができることを理解すべきである。
【００６９】
本明細書において開示されている化合物、およびそれを含む組成物は、細胞への直接的な接触により、またはキャリア手段を介してのどちらかにより、細胞に送達することができる。細胞に化合物および組成物を送達するためのキャリア手段は、当技術分野において公知であり、例えば、リポソーム部分に該組成物をカプセル化することを含む。細胞に本明細書において開示されている化合物および組成物を送達するための別の手段は、標的細胞への送達に標的化されたタンパク質または核酸に化合物を結合させることを含む。米国特許第６，９６０，６４８号、ならびに米国特許出願公開第２００３／００３２５９４号および同第２００２／０１２０１００号は、別の組成物に結合することができ、かつ組成物が生物学的膜を通過して転座することを可能にする、アミノ酸配列を開示している。米国特許出願公開第２００２／００３５２４３号はまた、細胞内送達のための、細胞膜を通過する生物学的部分を輸送するための組成物も記載している。化合物はまた、ポリマーに取り込ませることもでき、その例には、頭蓋内腫瘍のためのポリ（Ｄ−Ｌラクチド−ｃｏ−グリコリド）ポリマー、２０：８０モル比のポリ［ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン：セバシン酸］（ＧＬＩＡＤＥＬ中に使用されている通り）、コンドロイチン、キチンおよびキトサンが含まれる。
【００７０】
腫瘍学的障害の処置の場合、本明細書において開示されている化合物は、処置を必要としている患者に、他の抗腫瘍物質もしくは抗がん物質、および／もしくは放射線療法および／もしくは光線力学療法と組み合わせて、ならびに／または腫瘍を除去するための外科的処置と共に投与することができる。これらの他の物質または処置は、本明細書において開示されている化合物と同時に、または異なる時間に投与され得る。例えば、本明細書において開示されている化合物は、タキソールまたはビンブラスチンなどの有糸分裂阻害剤、シクロホスファミド（cyclophosamide）またはイホスファミドなどのアルキル化剤、５−フルオロウラシルまたはヒドロキシ尿素などの代謝拮抗薬、アドリアマイシンまたはブレオマイシンなどのＤＮＡインターカレーター、エトポシドまたはカンプトテシンなどのトポイソメラーゼ阻害剤、アンギオスタチンなどの抗血管新生剤、タモキシフェンなどの抗エストロゲン、および／または例えば、それぞれ、ＧＬＥＥＶＥＣ（Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）およびＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）などの他の抗がん薬もしくは抗体と組み合わせて使用することができる。
【００７１】
多数の腫瘍およびがんは、腫瘍またはがん細胞中に存在するウイルスゲノムを有する。例えば、エプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）は、いくつかの哺乳動物の悪性腫瘍に関連している。本明細書において開示されている化合物はまた、単独で、または細胞形質転換を引き起こし得るウイルスに感染している患者を処置するため、および／または細胞中にウイルスゲノムの存在に関連する腫瘍もしくはがんを有する患者を処置するために、ガンシクロビル、アジドチミジン（ＡＺＴ）、ラミブジン（３ＴＣ）などの抗がん剤または抗ウイルス剤と組み合わせて使用することもできる。本明細書において開示されている化合物はまた、腫瘍学的疾患のウイルスに基づく処置と組み合わせて使用することもできる。例えば、本化合物は、非小細胞肺がんの処置において、変異体の単純ヘルペスウイルスと一緒に使用することができる（Toyoizumiら、「Combined  therapy  with  chemotherapeutic  agents  and  herpes  simplex  virus  type  IICP34.5  mutant  (HSV-1716)  in  human  non-small  cell  lung  cancer」、Human  Gene  Therapy、１９９９年、１０巻（１８号）：１７頁）。
【００７２】
化合物および／またはそれを含有する組成物の治療的施用は、当業者に現在または今後に公知の任意の適切な治療的方法および技法によって達成することができる。さらに、本明細書において開示されている化合物および組成物は、他の有用な化合物および組成物を調製するための出発材料または中間体としての使用を有する。
【００７３】
本明細書において開示されている化合物および組成物は、望ましくない細胞成長の部位などの１つまたは複数の解剖学的部位（腫瘍部位、または良性皮膚成長などであり、例えば、腫瘍成長もしくは皮膚成長に注射される、または局所施用される）に、必要に応じて、不活性な賦形剤などの薬学的に許容され得る担体と組み合わせて、局所投与することができる。本明細書において開示されている化合物および組成物は、必要に応じて、不活性な賦形剤または経口送達用の同化可能な可食担体などの薬学的に許容され得る担体と組み合わせて、静脈内または経口など、全身的に投与することができる。それらは、硬質または軟質シェルゼラチンカプセル中に封入することができ、圧縮して錠剤にすることができ、または患者の食事の食物に直接、取り込ませることができる。経口治療的投与の場合、活性化合物は、１つまたは複数の添加剤（excipient）と組み合わせて、摂取可能錠剤、口腔錠剤、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウェハ剤、エアゾールスプレー剤などの形態で使用することができる。
【００７４】
錠剤、トローチ剤、丸剤、カプセル剤などは、以下を含有することもできる：トラガカントガム、アカシア、トウモロコシデンプンまたはゼラチンなどの結合剤、リン酸二カルシウムなどの添加剤、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、アルギン酸などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、およびスクロース、フルクトース、ラクトースまたはアスパルテームなどの甘味剤、またはペパーミント、ウインターグリーンオイルもしくはチェリー着香剤などの着香剤が添加され得る。単位剤形がカプセル剤である場合、それは、上記のタイプの材料に加えて、植物油またはポリエチレングリコールなどの液状担体を含有することができる。様々な他の材料が、コーティング剤として、または固体単位剤形の物理形態を他の状態に改変するために、存在していてよい。例えば、錠剤、丸剤またはカプセル剤は、ゼラチン、ワックス、シェラックまたは糖などによりコーティングすることができる。シロップ剤またはエリキシル剤は、活性化合物、甘味剤としてのスクロースまたはフルクトース、保存剤としてメチルパラベンおよびプロピルパラベン、色素、およびチェリーフレーバーまたはオレンジフレーバーなどの着香剤を含有することができる。当然ながら、任意の単位剤形の調製に使用されるいかなる材料も、用いられる量で、薬学的に許容され得、かつ実質的に非毒性であるべきである。さらに、活性化合物は、徐放性の調製物およびデバイスに組み込むことができる。
【００７５】
本明細書において開示されている化合物および組成物は、薬学的に許容される塩、それらの水和物または類似体を含め、静脈内、筋肉内または腹腔内に注入または注射により投与することができる。活性作用物質またはその塩の溶液は、必要に応じて非毒性界面活性剤と混合して、水中で調製することができる。分散剤はまた、グリセロール、液状ポリエチレングリコール、トリアセチンおよびそれらの混合物中、ならびに油中で調製することもできる。保管および使用の通常の条件下では、これらの調製物は、微生物増殖を防止するために保存剤を含有することができる。
【００７６】
注射または注入に適切な医薬品剤形としては、活性成分を含む無菌の水性液剤または分散剤または無菌の注射可能または注入可能な液剤または分散剤の即時使用可能な調製物となるように適合されている無菌散剤であって、必要に応じて、リポソーム中にカプセル化されているものを挙げることができる。最終的な剤形は、製造および保管の条件下で、無菌で、流体でかつ安定しているべきである。液体担体またはビヒクルは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液状ポリエチレングリコールなど）、植物油、非毒性のグリセリルエステル、および好適なそれらの混合物を含む溶媒または液状分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、リポソームの形成により、分散液の場合、必要な粒子サイズを維持することにより、または界面活性剤の使用により、維持することができる。必要に応じて、微生物の作用の予防は、様々な抗細菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによってもたらすことができる。多くの場合、等張剤、例えば、糖、緩衝剤または塩化ナトリウムを含むことが好ましい。注射可能な組成物の延長された吸収は、吸収を遅延させる作用物質、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを含ませることによってもたらすことができる。
【００７７】
無菌注射液剤は、適切な溶媒中、上で列挙されている様々な他の成分と一緒に、本明細書において開示されている化合物および／または作用物質を必要な量で取り込ませ、必要に応じて、ろ過滅菌することにより調製される。無菌注射液剤の調製用の無菌散剤の場合、調製の好ましい方法は、真空乾燥技法および凍結乾燥技法であり、これにより、活性成分に既に滅菌ろ過されている溶液中に存在する任意の追加的な所望の成分を加えたものの粉末がもたらされる。
【００７８】
局所（topical）投与の場合、本明細書において開示されている化合物および作用物質は、固体または液体として施用することができる。しかし、固体または液体とすることができる皮膚化学的に許容され得る担体と組み合わせて、上記の化合物および作用物質を組成物として、皮膚に局所的に投与することが一般に望ましい。本明細書において開示されている化合物および作用物質および組成物は、被験体の皮膚に局所的に施用されて、悪性成長または良性成長のサイズを低減する（および完全な除去を含むことができる）、または感染部位を処置することができる。本明細書において開示されている化合物および作用物質は、成長部位または感染部位に直接、施用することができる。好ましくは、化合物および作用物質は、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、液剤、チンキ剤などの製剤で、成長部位または感染部位に施用される。米国特許第５，１６７，６４９号に記載されているものなどの、皮膚病変への薬学的物質を送達するための薬物送達系も使用することができる。
【００７９】
有用な固体担体としては、タルク、クレイ、微結晶セルロース、シリカ、アルミナなどの微粉砕状固体が挙げられる。有用な液体担体としては、水、アルコールもしくはグリコール、または水−アルコール／グリコールブレンドが挙げられ、この場合、本化合物は、必要に応じて非毒性界面活性剤を用いて、有効レベルで溶解または分散され得る。香料および追加的な抗微生物剤などのアジュバントを、所与の使用のための特性を最適化するために添加することができる。得られた液体組成物は、例えば、吸収性パッドから適用することができる、包帯および他のドレッシングにしみ込ませるために使用することができる、またはポンプ型もしくはエアゾール噴霧器を使用する罹患場所に噴霧することができる。
【００８０】
使用者の皮膚に直接施用するため、合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸塩およびエステル、脂肪アルコール、修飾セルロースまたは修飾無機材料などの増粘剤もまた、液体担体と一緒に用いられて、塗布可能なペースト剤、ゲル剤、軟膏剤、石鹸剤などを形成することができる。皮膚に化合物を送達するために使用することができる有用な皮膚化学的組成物の例は、米国特許第４，６０８，３９２号、米国特許第４，９９２，４７８号、米国特許第４，５５９，１５７号、および米国特許第４，８２０，５０８号に開示されている。
【００８１】
本明細書において開示されている化合物および作用物質および医薬組成物の有用な投与量は、それらのインビトロ活性と動物モデルにおけるインビボ活性とを比較することにより決定することができる。マウスおよび他の動物における有効な投与量のヒトへの外挿方法は、当技術分野に公知であり、例えば米国特許第４，９３８，９４９号を参照されたい。
【００８２】
薬学的に許容され得る担体と組み合わせた、本明細書において開示されている化合物を含む、医薬組成物も開示される。ある量の化合物を含む、経口、局所または非経口投与に適合させた医薬組成物が、好ましい態様を構成する。患者、特にヒトに投与される用量は、妥当な時間枠にわたり、致死性の毒性なく、および好ましくは、副作用も罹患率も許容可能なレベル以下しか引き起こさずに、患者における治療的応答を実現するのに十分であるべきである。当業者は、被験体の状態（健康）、被験体の体重、存在する場合には併用処置の種類、処置の頻度、治療比、ならびに病理学的状態の重症度および段階を含めた、様々な因子に依存することを認識しているであろう。
【００８３】
腫瘍学的障害の処置の場合、本明細書において開示されている化合物および作用物質および組成物は、処置を必要としている患者に、他の抗腫瘍性または抗がん性の作用物質または物質（例えば、化学療法剤、免疫療法剤、放射線治療剤、細胞毒性剤など）、および／または放射線療法、および／または腫瘍を除去するための外科的処置の前に、それらに続いて、またはそれらと組み合わせて、投与することができる。例えば、本明細書において開示されている化合物および作用物質および組成物は、がんを処置する方法において使用することができ、患者は、タキソールまたはビンブラスチンなどの有糸分裂阻害剤、シクロホスファミド（cyclophosamide）またはイホスファミドなどのアルキル化剤、５−フルオロウラシルまたはヒドロキシ尿素などの代謝拮抗薬、アドリアマイシンまたはブレオマイシンなどのＤＮＡインターカレーター、エトポシドまたはカンプトテシンなどのトポイソメラーゼ阻害剤、アンギオスタチンなどの抗血管新生剤、タモキシフェンなどの抗エストロゲン、および／または例えば、それぞれ、ＧＬＥＥＶＥＣ（Ｎｏｖａｒｔｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｅａｓｔ  Ｈａｎｏｖｅｒ、ＮＪ）およびＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．；Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）などの他の抗がん薬もしくは抗体により処置されることになる、これらにより処置されている、または処置された。これらの他の物質または放射線処置は、本明細書において開示されている化合物と同時にまたは異なる時間に投与することができる。他の適切な化学療法剤の例としては、以下が挙げられるがそれらに限定されない：アルトレタミン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ）、ブスルファン、フォリン酸カルシウム、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クリサンタスパーゼ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エトポシド、フルダラビン、フルオロウラシル、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ）、ゲムシタビン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ）、イリノテカン、リポソームドキソルビシン、ロムスチン、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、マイトマイシン、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペントスタチン、プロカルバジン、ラルチトレキセド、ストレプトゾシン、テガフール−ウラシル、テモゾロミド、チオテパ、チオグアニン（tioguanine）／チオグアニン（thioguanine）、トポテカン、トレオスルファン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンが含まれる。例示されている実施形態では、化学療法剤は、メルファランである。適切な免疫療法剤の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：アレムツズマブ、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ）、ゲムツズマブ、ヨウ素１３１トシツモマブ、リツキシマブ、トラスツズマブ（trastuzamab）（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ）が含まれる。細胞毒性剤としては、例えば、放射性同位体（例えば、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ���０、Ｐ３２など）、および細菌、真菌、植物または動物を起源とする毒素（例えば、リシン（ricin）、ボツリヌストキシン、炭疽菌毒素、アフラトキシン、クラゲ毒（例えば、ハコクラゲなど）が挙げられる。化学療法剤、免疫療法剤、放射線治療剤または放射線療法の投与の前に、それらの後に、および／またはこれらと組み合わせて、本明細書において開示されている、有効量の化合物および／または作用物質を投与することを含む、腫瘍学的障害を処置する方法も開示される。
【００８４】
キット
本明細書に記載されている方法を実施するためのキットが、さらに提供される。「キット」とは、少なくとも１つの試薬（例えば、本明細書において記載されている化合物のいずれか）を含む任意の製造品（例えば、パッケージまたは容器）が意図される。キットは、本明細書に記載されている方法を実施するためのユニットとして、販売促進する、流通する、または販売することができる。さらに、本キットは、その使用のためのキットおよび方法を記載する添付文書を含有することができる。キット試薬のうちのいずれかまたはすべては、密封した容器またはパウチ中などの、外部環境からキット試薬を保護する容器に入れて提供することができる。
【００８５】
所望の治療的処置のこのような投与量の投与を提供するために、一部の実施形態では、本明細書において開示されている医薬組成物は、担体または賦形剤を含めた組成物全体の重量を基準として、１つまたは複数の化合物を合計で約０．１重量％〜４５重量％の間、とりわけ１〜１５重量％含むことができる。例示的には、投与される活性成分の投与量レベルは、動物の重量（体重）の、静脈内に０．０１〜約２０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内に０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、皮下に０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、筋肉内に０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、経口では０．０１〜約２００ｍｇ／ｋｇ、および好ましくは約１〜１００ｍｇ／ｋｇ、点鼻では０．０１〜約２０ｍｇ／ｋｇおよびエアゾールでは０．０１〜約２０ｍｇ／ｋｇであり得る。
【００８６】
本明細書において開示されている化合物を１つまたは複数の容器中に含む組成物を含むキットも開示される。開示されているキットは、薬学的に許容され得る担体および／または賦形剤を必要に応じて含むことができる。一実施形態では、キットは、本明細書に記載されている、１つまたは複数の他の構成成分、補助物またはアジュバントを含む。別の実施形態では、キットは、本明細書に記載されている作用物質などの、１つまたは複数の抗がん剤を含む。一実施形態では、キットは、キットの化合物または組成物を投与する方法を記載している指示書または包装用材料を含む。キットの容器は、任意の適切な材料、例えば、ガラス、プラスチック、金属などのものであり得、任意の適切なサイズ、形状または立体構造のものであり得る。一実施形態では、本明細書において開示されている化合物および／または作用物質は、錠剤、丸剤または散剤の形態などの固体としてキット中で提供される。別の実施形態では、本明細書において開示されている化合物および／または作用物質は、液体（liquid）または溶液（solution）としてキット中で提供される。一実施形態では、本キットは、本明細書において開示されている化合物および／または作用物質を、液体または溶液の形態で含有する、アンプルまたはシリンジを含む。
【００８７】
スクリーニングの方法
ＭＣ１Ｒを発現する細胞と、標的化合物を接触させること、および本化合物がＭＣ１Ｒに結合するかどうかを決定することを含む、推定上の抗がん化合物を特定する方法であって、ＭＣ１Ｒに結合する化合物が推定上の抗がん化合物として特定される、方法も本明細書において開示されている。
【実施例】
【００８８】
以下の実施例は、開示されている主題による本方法および結果を例示するために以下に説明されている。これらの実施例は、本明細書に開示されている主題のすべての態様を含むことが意図されているわけではなく、むしろ、代表的な方法、組成物および結果を例示することが意図されている。これらの実施例は、当業者に明白な本発明の均等物およびバリエーションを排除することを意図するものではない。
【００８９】
数字（例えば、量、温度など）に関して正確性を確実にする努力はなされているが、ある程度の誤差および偏差が、考慮されるべきである。そうでないことを示さない限り、部は重量部であり、温度は℃であるか、または周囲温度であり、圧力は大気圧またはその付近である。記載のプロセスから得られる生成物純度および収率を最適化するために使用することができる反応条件、例えば、構成成分の濃度、温度、圧力、ならびに他の反応の範囲および条件のバリエーションならびに組合せが多数、存在する。妥当かつ慣用的な実験しか、このようなプロセス条件を最適化するために必要としないであろう。
【００９０】
（実施例１）
リガンドの２２５Ａｃバージョンを、高い放射化学的純度を伴って合成した。図１のパネルＢに記載されている通り、より多数の化合物を合成することができる。類似の方法が、図１１、１２および１３に示されている。
【００９１】
１３９Ｌａ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬのＭＣ１Ｒへの高い結合親和力（０．２ｎＭ  Ｋｉ）が観察された（図２）。放射性コンジュゲートは、同等の親和力を有することが期待される。放射性−ＴＬＣ、放射性−ＨＰＬＣおよびガンマ−カウンター定量（表１）により判定すると、９５％超の放射化学収率および９９．８％の放射化学的純度であることが分かった。
【表１】
2018522818.tif 000008
【００９２】
さらに、２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬは、３７℃におけるヒト血清中で、１０日後でさえも、優れたインビトロ安定性を示した（表３）。ＭＴＤ研究により、群の中で挙動が変化した兆候は示されなかった。マウスはすべて体重が増加し、健康に思われたが、体重増加は、投与した活性の増量に伴い、低下した（図６Ａ）。血中尿素窒素（ＢＵＮ）（図６Ｂ）および血中クレアチニン（図６Ｃ）レベル、および心臓、肺、脳、腎臓および肝臓を含めたある範囲の組織の病理はすべて、顕著なものはなかった。これらの結果は、２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬが、かなり良好に耐容されることを示唆している。
【００９３】
（実施例２）
ある範囲のＭＣ１Ｒ発現値で、ブドウ細胞および皮膚細胞に播種した９６ウェルプレート全体に、ＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−２２５ＡｃおよびＰＢＳ（対照）を加えた。作用物質と一緒に５分間にわたってインキュベートした後、このプレートを３回洗浄し、培地を添加した後、３７℃で４８時間インキュベートした。この後、ＭＴＴアッセイを行った（図７）。
【００９４】
（実施例３）
ＰＫおよびＢＤに関しては、腫瘍を有していないＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝５／群）に、２．３〜３．１μＣｉの２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬを静脈内（ｉ．ｖ．）投与した。血液、組織および臓器を、０、２４、４８および９６時間の時間経過で採取した。
【００９５】
（実施例４）
前もって、リガンドの赤外線コンジュゲートの腫瘍標的化をインビボで検討するために、両側への皮下異種移植片腫瘍（Ａ３７５／ＭＣ１Ｒ操作細胞をヌードマウスの右脇腹に、そして比較的低いＭＣ１Ｒ発現を有するＡ３７５親細胞をヌードマウスの左脇腹に）およびＭＣ１ＲＬ−８００プローブを静脈内注射し、蛍光蓄積を経時的にモニタリングした。低いＭＣ１Ｒ発現を有するＡ３７５腫瘍は、注射の４時間後のＡ３７５／ＭＣ１Ｒ腫瘍と比較して、かなり低い正規化蛍光シグナルを有した（Ｐ≦０．０５、ｎ＝３）。インビボでのブロッキング研究を行い、腫瘍中でのプローブ保持が特異的結合によるものであることが決定された（図３、左のマウス）。ＭＣ１Ｒの内因性発現を有するマウスＢ１６Ｆ１０腫瘍異種移植片モデルにおけるプローブの蓄積が、図３の右側のマウスに示されている。
【００９６】
（実施例５）
１．９〜３．３μＣｉのＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−２２５Ａｃ、１．８〜２．７μＣｉのスクランブル化ペプチド−ＤＯＴＡ−２２５Ａｃ、過剰の非放射性作用物質（ＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−１３９Ｌａ）、および食塩水を、Ａ３７５／ＭＣ１Ｒ腫瘍の注射を受けたＳＣＩＤマウスに注射した（１群あたりｎ＝１０、腫瘍の体積：５７〜２６６ｍｍ３）。マウスを健康について毎日観察し、１週間あたり２回秤量し、そしてカリパスにより腫瘍体積を測定した。腫瘍が２０００ｍｍ３（実験のエンドポイント）に到達すると、動物を安楽死させた。２０００ｍｍ３前の安楽死は、臨床的エンドポイントによるもの、すなわち、主として腫瘍潰瘍化によるものであった。
【００９７】
投与後２２日目における、対照マウスおよび作用物質により処置されたマウスの代表的な画像。３匹の対照マウスは、進行した腫瘍を有することに留意されたい。処置したマウスは、もはや、脇腹の剃毛場所に腫瘍を有していない。各場合において、赤い棒は、脇腹の剃毛場所を指している（図１０）。
【００９８】
考察
ＲＡＦキナーゼ阻害剤は、ＢＲＡＦ−変異体黒色腫を有する患者における実質的な治療効果を有するが、これらの作用物質は、一部の黒色腫患者に有効であり、腫瘍が完全に縮退するのは極めて希であり、治療効果は、耐性集団の発現のためにしばしば一時的なものである。しかし、標的化治療法を組み合わせると、無病期間の延長、または治癒さえももたらし得るということが、計算研究において最近、推定された。したがって、新規の標的化治療剤は、転移性黒色腫の処置に必要とされる。特定のシグナル伝達経路に対する標的化作用物質の代替として、腫瘍細胞は、「スマート爆弾」によって標的とされ得る。スマート爆弾は、腫瘍細胞の表面に過剰発現される標的に、局部的に毒性作用物質を送達することにより作用して、標的を発現する腫瘍およびストローマならびに隣接する発現しない腫瘍およびストローマの両方を特異的に殺傷させる。このような作用物質は、迅速なクリアランスを有さなければならず、腫瘍保持に対して高い特異性を有し、治療ウインドウを効果的に増大して標的外への毒性を低下させなければならない。これは、放射性免疫療法が有望であるということであり、この療法は、特に、血液がんに有効であり、固形腫瘍に対して徐々に開発されてきたものである。α放射体は、二次的な損傷を低減しながら、標的における損傷を最大化し、放射線耐性に対してそれほど感受性が高くないので、β放射体と比べて、α放射体の使用への関心が高まっている。アルファ粒子は、非常に短い経路に沿って移動し（細胞直径で数個分程度）、非常に高い線エネルギー付与を有し、周辺に多量のエネルギーが蓄積する。特に、固形腫瘍の場合、これにより、細胞殺傷がずっと一層有効となる（ベータの場合、数千個であるのに対して、１つの細胞を殺傷するために１〜１０個の粒子の衝突）。多数のα粒子放出性放射性核種が存在するが、適合不可能な半減期、製造コストおよび利用可能性の制限のために、臨床的に使用されるものがほとんどない。最も一般的に使用されているα放出性放射性核種は、２１３Ｂｉ、２１１Ａｔ、２２３Ｒａおよび２２５Ａｃである（１１）。Ｏａｋ  Ｒｉｄｇｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから市販されている２２５Ａｃ（ｔ１／２＝１０ｄ；Ｅαｍａｘ＝６〜８ＭｅＶ）は、標的化放射線療法に十分適している。現在、標的化２２５Ａｃ治療が、様々な悪性腫瘍に対して、多数の前臨床研究および臨床研究において、有望な結果を伴って評価されている。Ｃｏｎｇｒｅｓｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｓ（ＥＣＣＯ）において最近、発表された第ＩＩ相臨床結果により、標的化アルファ放射体であるアルファラジンは、生存率を向上させることができ、かつ乳がんの骨への転移に関連する疼痛を低減することができることが示された。
【００９９】
転移性黒色腫を有する患者は、治療法の開始前に、コンパニオン診断剤を使用するＰＥＴイメージングにより階層化することができる。したがって、対応する標的化放射線療法に正に応答する可能性が一層高い患者が特定される。このコンパニオンイメージング作用物質により、医師は、その後に生検することなく、治療法に対する腫瘍応答を経時的に非侵襲的にアセスメントすることも可能となる。
【０１００】
悪性黒色腫の８０％が、高レベルのＭＣ１Ｒを発現することが推定されてきた。ｍＲＮＡ発現マイクロアレイおよび免疫組織化学（ＩＨＣ）分析によるＭＣ１Ｒの発現は、黒色腫患者の試料で既に検討され、黒色腫患者においてＭＣ１Ｒの発現が高いことが示された。さらに、ＭＣ１Ｒは、有効な処置が不足しているサブタイプの黒色腫であるブドウ膜黒色腫の９４％に発現されると報告された。ＭＣ１Ｒは、メラニン形成細胞刺激ホルモン（ＭＳＨ）および関連リガンドに結合する、５つのＧタンパク質共役型メラノコルチン受容体（ＭＣ１Ｒ−ＭＣ５Ｒ）のファミリーメンバーである。アルファ−ＭＳＨに結合している２１２Ｐｂ／２１２Ｂｉは、黒色腫を処置するために使用されてきたが、α−ＭＳＨはまた、腎臓および肺（ＭＣ５Ｒ）、副腎（ＭＣ２Ｒ）および視床下部（ＭＣ３Ｒ／ＭＣ４Ｒ）の範囲にわたる、身体全体にわたる幅広い範囲の組織および臓器において発現されるＭＳＨ受容体ファミリーメンバーも標的とする。したがって、この非特異的な作用物質の場合、正常な組織への毒性が懸念される。
【０１０１】
ＭＣ４ＲおよびＭＣ５Ｒに対する親和力がより低い、高い親和力（０．２４ｎＭ  Ｋｉ）のＭＣ１Ｒ選択的リガンドが記載されており、結合を促進するための部分によりこのリガンドを改変した。近赤外蛍光（ＮＩＲＦ）色素もまた、このリガンドにコンジュゲートされており、ＭＣ１Ｒ発現の内因性レベルを有する腫瘍に対して、高い結合親和力（０．４±０．１ｎＭ  Ｋｉ）およびインビボ特異性があることを実証した。インビボでの蛍光断層撮影および硝子体内の共焦点蛍光顕微鏡法を使用して、ＰＫ、ＢＤ、およびこれらのＭＣ１Ｒ標的化ＮＩＲＦコンジュゲートの腫瘍細胞への取り込みを特徴付けた。さらに、コンパートメント数理モデルを開発して、実験データを解釈し、全動物のＰＫパラメータを見積もった。
【０１０２】
これらの研究により、開示されているＭＣ１Ｒ特異的標的化足場は、転移性黒色腫およびブドウ膜黒色腫を処置するための、コンパニオンＰＥＴイメージング作用物質による新規な放射線治療剤の開発についての優れた可能性を有することが実証された。１３９Ｌａ（アルファ粒子放射体２２５Ａｃの非放射性代替物として）および６７／６９Ｇａ（ＰＥＴ放射性核種６８Ｇａの非放射性代替物として）を有する、ＭＣ１Ｒ特異的リガンドのＤＯＴＡ標識コンジュゲート（ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬ）を、図１のパネルＡに示されている通りに合成した。このスキームでは、ａｌｌｏｃ直交保護による標準ＳＰＰＳ：ステップ１〜７、Ｆｍｏｃ脱保護：ＮＭＰ中、２０％ピペリジン、２％ＤＢＵ；ＮＭＰ中、１時間にわたってＦｍｏｃ−ａａ−ＯＨ（５当量）、ＨＣＴＵ（５当量）、ＮＭＭ（１５当量）；ステップ８、ａｌｌｏｃ脱保護：ＮＭＭ、ＡｃＯＨ、ＣＨＣｌ３（１：２：３７）中、５ｍｏｌ％  Ｐｄ（ＰＰｈ３）４；Ｆｍｏｃ−Ａｈｘ−ＯＨおよびＤＯＴＡは、上と同じように結合した。ステップ１０ａ、開裂カクテル（Cleavage  cocktail）（２．５％Ｈ２Ｏ、２．５％ＴＩＳ、９５％ＴＦＡ）処理を３時間、ステップ１０ｂ  ３×ジエチルエーテル洗浄、凍結乾燥およびＲＰ−ＨＰＬＣ精製（０．１％ＴＦＡの調節剤）。ステップ１１  ０．１Ｍ酢酸アンモニウム中での金属のキレート形成（ＧａＣｌ３またはＬａＣｌ３・７Ｈ２Ｏ、３当量）、ｐＨ８、室温で２〜４時間、インキュベートした。キレート形成は、ＨＰＬＣ、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、ＬＣ−ＱＴＯＦによりモニタリングした。ＲＰ−ＨＰＬＣ（０．１％ＴＥＡ／ＡｃＯＨ、ｐＨ６）またはＣ１８  ＳＰＥカートリッジのどちらかによって脱塩した。使用した４種の同位体はすべて化学的に類似しているので、これら４種の異なるキレートは、類似したインビボＰＫおよびＢＤプロファイルを有するであろう。
【０１０３】
時間分解蛍光（ＴＲＦ）競合結合アッセイを行い、これらのＤＯＴＡコンジュゲートの結合親和力を決定した（図２）。ＴＲＦ方法は、ランタノイドであるユーロピウムの長い蛍光寿命を活用するものであり、マルチウェルプレート試料において、１アトモル未満を検出することができる。Ｈｅｋ２９３／ＭＣ１Ｒ細胞（ＭＣ１Ｒを過剰発現させるように操作されたＨｅｋ２９３細胞）を、結合アッセイに使用した。キレートしているユーロピウムを有するバージョンのこの化合物を使用して飽和ＴＲＦ結合アッセイを実施し、特異的および非特異的結合を決定した（図１７〜２０）。
【０１０４】
その後、ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬを２２５Ａｃ（２２５Ａｃ−ＤＯＴＡ−ＭＣ１ＲＬ）により標識し（図１、パネルＢ）、ＣＬＩおよび放射性−ＴＬＣにより決定し、ガンマ−カウンターおよび放射性−ＨＰＬＣにより定量化すると、高い放射標識収率（≧９５％）、高い純度（９９．８％）であることが実証された（表１）。
【０１０５】
さらに、コンジュゲートの高いインビトロ血清安定性は、５０μＬの２２５Ａｃ−ＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ（５６μＣｉ）を１ｍＬのヒト血清に添加することにより観察された（表２）。この溶液を３７℃で１０日間インキュベートし、ＴＬＣスキャナー（Ｂｉｏｓｃａｎ）により分析して、ガンマ−カウンターにより定量した。
【０１０６】
【表２】
2018522818.tif 000009
【０１０７】
腫瘍の完全な喪失が、ＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−２２５Ａｃ処置マウスの２２％において観察され、これらのマウスは、単回静脈内投与後でも依然として生存している（合計９匹中２匹）（図１０）。これら２匹のマウスは、注射１５０日後の現在も腫瘍がない。他の７匹の処置マウスを、進行のない腫瘍潰瘍化により、平均８６日で安楽死させた。一方、食塩水により処置された対照マウス、ＭＣ１ＲＬ−ＤＯＴＡ−１３９Ｌａ（非放射性代替物）により処置された対照マウスおよびスクランブル化ペプチド−ＤＯＴＡ−２２５Ａｃにより処置された対照マウスのエンドポイント（腫瘍＞２０００ｍｍ３）までの時間の中央値は、それぞれ、注射２２日後、２４日後および３２日後であった。
【０１０８】
添付の特許請求の範囲の方法および組成物は、本明細書に記載されている特定の方法および組成物によって範囲が限定されず、これらの方法および組成物は、特許請求の範囲のいくつかの態様の例示として意図されており、そして機能的に等価な任意の方法および組成物は本開示の範囲内にある。本明細書に示されている、および記載されているものに加えて、本方法および組成物の様々な修正が、添付の特許請求の範囲内に入ることが意図されている。さらに、これらの方法および組成物のうちの、ある種の代表的な方法、組成物および態様しか具体的に記載されていないが、他の方法および組成物、ならびに本方法および組成物の様々な特色の組合せが、具体的に列挙されていない場合でさえも、添付の特許請求の範囲内に収まることが意図されている。したがって、ステップ、要素、構成成分または構成要素の組合せが、本明細書において明確に明記され得るが、ステップ、要素、構成成分および構成要素の他の組合せのすべてが、明確に明記されていない場合でさえも含まれる。
【図１Ａ】
2018522818.tif 000014
【図１Ｂ】
2018522818.tif 000015
【図２】
2018522818.tif 000016
【図３】
2018522818.tif 000017
【図４】
2018522818.tif 000018
【図５】
2018522818.tif 000019
【図６】
2018522818.tif 000020
【図７】
2018522818.tif 000021
【図８】
2018522818.tif 000022
【図９】
2018522818.tif 000023
【図１０】
2018522818.tif 000024
【図１１】
2018522818.tif 000025
【図１２】
2018522818.tif 000026
【図１３】
2018522818.tif 000027
【図１４】
2018522818.tif 000028
【図１５】
2018522818.tif 000029
【図１６】
2018522818.tif 000030
【図１７】
2018522818.tif 000031
【図１８】
2018522818.tif 000032
【図１９】
2018522818.tif 000033
【図２０】
2018522818.tif 000034
【配列表】
2018522818000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成30年1月10日(2018.1.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2018522818000001.app
【国際調査報告】
2018522818.tif 000035
2018522818.tif 000036
2018522818.tif 000037
2018522818.tif 000038
2018522818.tif 000039