(57)【要約】  本発明は、少なくとも２つの単位操作を含む、流体中の生体分子を分離するための液体クロマトグラフィーシステムであって、第１単位操作がマルチカラムクロマトグラフィーのステップであり、第２単位操作が前記生体分子および／または前記流体を改変するステップであり、前記改変が、前記第１単位操作の最後のクロマトグラフィーカラムから得られた流体を、少なくとも２つの容器を含むシステムに供給することを含み、各容器は、ボリュームおよび前記ボリュームを第１のサブボリュームと第２のサブボリュームとに分割するように配置された可動側壁を含み、各容器は、第１のサブボリュームに接続された第１のポートと、第２のサブボリュームに接続された第２のポートとを備えるシステムに関する。本発明はまた、生体分子の連続的または半連続的な処理を可能にする、本発明によるクロマトグラフィーシステムのためのウイルス不活性化装置、およびこのような装置の使用方法に関する。【選択図】図１
2018519498.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも２つの操作を含む流体中の生体分子を分離するための液体クロマトグラフィーシステムであって、前記操作の１つがマルチカラムクロマトグラフィー（ＭＣＣ）配置による前記生体分子の分離を含み、前記操作のもう１つが、前記生体分子および／または前記流体を処理することを含み、前記処理が、前記分離操作の最後のクロマトグラフィーカラムからの出力を少なくとも２つの容器（１０４、１０５、１０６）に供給することを含み、各容器（１０４、１０５、１０６）はボリュームおよび前記ボリュームを対向する第１のサブボリュームと第２のサブボリュームと分割するように配置された可動側壁（１０７）を有し、各容器（１０４、１０５、１０６）は、前記第１のサブボリュームに接続された第１のポートおよび前記第２のサブボリュームに接続された第２のポートを備える、液体クロマトグラフィーシステム。
【請求項２】
前記ＭＣＣ配置が、マルチカラム周期的向流（ｐｃｃ）クロマトグラフィーシステム、好ましくは充填床クロマトグラフィーカラムを含む４カラムのｐｃｃシステムを含む、請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
前記クロマトグラフィーカラムに、プロテインＡ媒体またはプロテインＬ媒体などのアフィニティークロマトグラフィー媒体；カチオンまたはアニオン交換媒体などのイオン交換媒体；疎水性相互作用クロマトグラフィー媒体；逆相クロマトグラフィー（ＲＰＣ）媒体；およびマルチモーダルクロマトグラフィー媒体からなる群から選択される媒体が充填される、請求項１または２に記載のシステム。
【請求項４】
前記処理操作が、所定の期間、前記出力中に存在する生体分子の維持を提供する、請求項１乃至３のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項５】
前記処理操作が、ｐＨ変化またはＵＶ照射などによるウイルス不活性化；１または複数のプロテアーゼおよび／またはエンドグリカナーゼの添加；ポリマー、例えばＰＥＧなどの化学基を付加することによる生体分子の改変；ならびに化学基を除去することによる生体分子の改変のうちの１または複数をさらに含む、請求項１乃至４のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項６】
生体分子が抗体、例えばモノクローナル抗体またはこの融合体または断片であり、前記分離操作が、プロテインＡ媒体を充填した第１クロマトグラフィーカラムを利用し、前記処理操作がウイルス不活性化を提供する、請求項１乃至５のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項７】
液体クロマトグラフィーシステム用のウイルス不活性化装置であって、
入口ポート（１０１）、
出口ポート（１０３）、
所定のウイルス不活性化時間の間にウイルスを不活性化するように構成されたウイルス不活性化手段（１０８）、
容器群（１０４，１０５，１０６）であって、前記群内の各容器（１０４、１０５、１０６）が、ボリュームおよび前記ボリュームを対向する第１のサブボリュームと第２のサブボリュームとに分割するように配置された可動側壁（１０７）を備え、各容器（１０４、１０５、１０６）が前記第１のサブボリュームに接続された第１のポートおよび前記第２のサブボリュームに接続された第２のポートを備えた容器群（１０４，１０５，１０６）、
前記入口ポート（１０１）、前記出口ポート（１０３）、および前記群内の各容器（１０４、１０５、１０６）の前記第１のポートおよび前記第２のポートにそれぞれ接続された流体コントローラ（１０２）、
を備え、
前記流体コントローラ（１０２）が、
空であるか、または前記ウイルス不活性化時間以上の時間の間に充満状態であった容器（１０４、１０５、１０６）を選択し、
流体流を前記入口ポート（１０１）から、前記群内の選択された容器（１０４、１０５、１０６）の空のサブボリュームの第１または第２のポートに誘導し、
前記選択された容器（１０４、１０５、１０６）のサブボリュームが充満されたら、空であるか、または前記ウイルス不活性化時間以上の時間の間に充満状態であった前記群内の別の容器（１０４、１０５、１０６）の別の空のサブボリュームに前記流れを誘導し、それによって前記空のサブボリュームの充満から生じる流体圧力が可動側壁（１０７）に作用し、対向する充満したサブボリュームがその内容物を前記出口ポート（１０３）に流す、ウイルス不活性化装置。
【請求項８】
前記ウイルス不活性化手段（１０８）が、
前記入口ポート（１０１）と前記流体コントローラ（１０２）との間に配置されたｐＨ低下装置（５０１）、および
前記流体コントローラ（１０２）と前記出口ポート（１０３）との間に配置されたｐＨ上昇装置（５０２）、
を含む、請求項７に記載のウイルス不活性化装置。
【請求項９】
前記ウイルス不活性化手段（１０８）が、ＵＶ光源（６０１、６０２、６０３）である、請求項８に記載のウイルス不活性化装置。
【請求項１０】
前記群内の容器（１０４、１０５、１０６）の数（Ｎ）が、Ｎ＝Ｔ×ｆ／Ｖ＋１（式中、Ｔは、場合により容器洗浄およびｐＨを上昇もしくは低下させるための時間またはＵＶ曝露時間を含む前記所定のウイルス不活性化時間であり、ｆは、入口流であり、Ｖは、前記容器群（１０４、１０５、１０６）内の１つの容器（１０４、１０５、１０６）のボリュームである）以上である、請求項７に記載のウイルス不活性化装置。
【請求項１１】
前記容器（１０４、１０５、１０６）がスーパーループである、請求項７に記載のウイルス不活性化装置。
【請求項１２】
ウイルス不活性化装置のための方法であって、前記ウイルス不活性化装置が、
入口ポート（１０１）、
出口ポート（１０３）、
所定のウイルス不活性化時間の間にウイルスを不活性化するように構成されたウイルス不活性化手段（１０８）、
容器群（１０４，１０５，１０６）であって、前記群内の各容器（１０４、１０５、１０６）がボリュームおよび前記ボリュームを対向する第１のサブボリュームと第２のサブボリュームとに分割するように配置された可動側壁（１０７）を備え、各容器（１０４、１０５、１０６）が前記第１のサブボリュームに接続された第１のポートおよび前記第２のサブボリュームに接続された第２のポートを備えた容器群（１０４、１０５、１０６）、
前記入口ポート（１０１）、前記出口ポート（１０３）、および前記群内の各容器（１０４、１０５、１０６）の前記第１のポートおよび前記第２のポートにそれぞれ接続された流体コントローラ（１０２）、
を備え、
空であるか、または前記ウイルス不活性化時間以上の時間の間に充満状態であった容器（１０４、１０５、１０６）を選択すること、流体流を前記入口ポート（１０１）から、前記群内の選択された容器（１０４、１０５、１０６）の空のサブボリュームのポートに誘導すること、
を含み、前記選択された容器（１０４、１０５、１０６）のサブボリュームが充満されたら、空であるか、または前記ウイルス不活性化時間以上の時間の間に充満状態であった前記群内の別の容器（１０４、１０５、１０６）の別の空のサブボリュームに流れを誘導し、それによって前記空のサブボリュームの充満から生じる流体圧力が前記可動側壁（１０７）に作用し、前記対向する充満したサブボリュームが、その内容物をそのそれぞれの第１または第２のポートを介して前記出口ポート（１０３）に流す方法。
【請求項１３】
前記装置が、少なくとも１つのクロマトグラフィーカラム、好ましくは２、３または４つのクロマトグラフィーカラムを含むクロマトグラフィーシステムの下流に接続され、液体の連続的な流れを可能にする、請求項７乃至１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
クロマトグラフィーシステムが周期的向流クロマトグラフィー（ｐｃｃ）システムである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
タンパク質、好ましくは抗体またはその融合体または断片などの生体分子を、前記クロマトグラフィーシステムにおいてプロテインＡ媒体を用いて分離することを提供する、請求項１３または１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は液体クロマトグラフィーに関し、より詳細には、流体中の生体分子の分離システム、前記生体分子および／または流体の処理を可能にする装置、および本発明による装置の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフィーは、タンパク質およびペプチドなどの生体分子の分析および製造において最も一般的に使用される分離原理の１つである。今日のクロマトグラフィーによる生体分子の処理に利用可能な多くの商業的機器があり、それらの大部分は自動処理を可能にする。しかしながら、大部分の液体クロマトグラフィーシステムは、サンプルの適用、操作パラメータの変更など、いくつかの手動介入を必要とし、そのためシステムの使用は所望よりも時間がかかり、労働集約的となる。
【０００３】
生体分子の処理を高速化するために、開発は可能な限り連続的な処理に移行している。発酵液などの複雑な流体から生体分子を迅速に分離するためにますます使用されている１つの方法は、周期的向流クロマトグラフィー（ｐｃｃ）のような多重カラムクロマトグラフィーである。当業者には周知のように、マルチカラムクロマトグラフィーは、流れ方向とは逆の位置に切り替えることができるいくつかのクロマトグラフィーカラムからなる。カラムにはポンプが装備され、流体流は内部で再循環されて性能が最適化される。システムはいくつかのセクションに分割することができ、そこから全てのセクションがバッチ精製の役割作業と類似の役割作業を実行する。
【０００４】
当業者には周知のように、生体分子の分離に加えて、その処理は、通常、クロマトグラフィーカラムの上流および下流のさらなるステップを含む。上流処理の例は、例えば、培養プロセスに由来する細胞の溶解および細胞破片などを除去するための濾過である。上流または下流で起こり得る他の処理には、タンパク質のグリコシル化の改変およびＰＥＧ化などのポリマー修飾のような実際の生体分子の改変；または生体分子が存在する流体の改変のいずれかを含み得る。流体の比較的簡単な改変としては、ｐＨ変化および／または塩添加を含むが、より複雑で現在のところより時間のかかるプロセスはウイルス不活性化である。
【０００５】
生体分子を含む流体のウイルス不活性化は、適切な化学物質の添加によって最も一般的に行われ、十分な不活性化が起こるのに一定の時間を要する。ウイルス不活性化、ならびに連続的プロセスにおける生体分子および／または流体の他の改変を含むことは、適切な装置および方法論の面で課題を提示する。生体分子の自動化された連続処理を可能にする改良されたシステムのための分析的および分取的規模のクロマトグラフィーの必要性が依然として存在する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１４／２５１９１３号明細書
【発明の概要】
【０００７】
上記の目的は、ウイルス不活性化装置、方法、およびシステムによって達成される。
【０００８】
本発明の第１の態様は、請求項１に記載されている。本発明の第２の態様は、請求項７に記載されている。
【０００９】
本発明の第３の態様は、請求項１２に記載されている。
【００１０】
本発明の他の実施形態および利点は、従属請求項および以下の詳細な説明から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明の一実施形態によるウイルス不活性化装置の概略図である。
【図２】２つの容器を有する本発明の一実施形態によるウイルス不活性化装置における流れのプロットである。
【図３】本発明の一実施形態によるウイルス不活性化装置の概略図である。
【図４】本発明の一実施形態によるウイルス不活性化装置の概略図である。
【図５】本発明の一実施形態によるウイルス不活性化装置のための方法を示すフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本開示の例示的実施形態を、さまざまな実施形態を示した添付の図面を参照しながら、以下により完全に説明する。これらの例示的実施形態は、本開示が綿密かつ完全であるが、限定目的ではないように提供される。図面において、同様の参照符号は同様の要素を指す。
【００１３】
本発明の第１の態様は、少なくとも２つの単位操作を含む、流体中の生体分子を分離するための液体クロマトグラフィーシステムである。第１単位操作は、マルチカラムクロマトグラフィーのステップであり、第２単位操作は、前記生体分子および／または流体を改変するステップである。第２単位操作において、改変は、第１単位操作の最後のクロマトグラフィーカラムから得られた流体を、少なくとも２つの容器（１０４、１０５、１０６）を含むシステムに供給することを含み、各容器はボリュームおよび該ボリュームを第１のサブボリュームと第２のサブボリュームとに分割するように配置された可動側壁（１０７）を有し、各容器は、第１のサブボリュームに接続された第１のポートおよび第２のサブボリュームに接続された第２のポートを備える。
【００１４】
本発明によるシステムは、任意の生体分子の処理のための連続プロセスを設計するために使用することができる。有利な実施形態において、このようなシステムは完全に、または大部分が自動化されている。
【００１５】
より詳細には、第１単位操作は、マルチカラムカラムｐｃｃ（周期的向流クロマトグラフィー）システム、好ましくは充填床クロマトグラフィーカラムを含む４ｐｃｃシステムであってもよい。
【００１６】
有利な実施形態において、第１単位操作のクロマトグラフィーカラムには、プロテインＡ媒体またはプロテインＬ媒体などのアフィニティークロマトグラフィー媒体；カチオンまたはアニオン交換媒体などのイオン交換媒体；疎水性相互作用クロマトグラフィー媒体；逆相クロマトグラフィー媒体；およびマルチモーダルクロマトグラフィー媒体からなる群から選択される媒体が充填される。このような媒体および本発明における使用に適した他の媒体は市販されており、この分野の当業者には周知である。
【００１７】
一実施形態において、第２単位操作は、所定の時間、最後のクロマトグラフィーカラムから生じた流体中に存在する生体分子の維持を提供するように構成される。これにより、このような生体分子の分離のためのプロセスに適切であるか、または必要とされているいずれかの方法で、従来の技術を使用して可能な方法よりも手技が少なく、有利により迅速に生体分子および／または流体の改変が可能である。
【００１８】
第２単位操作は、確立されたバイオプロセスの精製ステップ（ｐｏｌｉｓｈｉｎｇ  ｓｔｅｐ）の前に含まれるステップとして、本発明に従って実行されてもよい。代替の実施形態において、第２単位操作は、精製ステップ（ｐｏｌｉｓｈｉｎｇ  ｓｔｅｐ）の後に実行される。特定の実施形態において、第２単位操作は、精製ステップ（ｐｏｌｉｓｈｉｎｇ  ｓｔｅｐ）と一体化して、例えば逆相クロマトグラフィーを用いて実行される。
【００１９】
本発明によるシステムの例示的な実施形態において、第２単位操作は、ウイルス、プロテアーゼおよび／またはエンドグリカナーゼの不活性化；ポリマー、例えばＰＥＧなどの基を付加することによる生体分子の改変；ならびに基を除去することによる生体分子の改変からなる群から選択される改変を提供する。クロマトグラフィーにおけるウイルス不活性化は周知であり、例えば、Ｓｏｆｅｒ  Ｇ（２００３）Ｖｉｒｕｓ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  １９９０ｓ−ａｎｄ  ｉｎｔｏ  ｔｈｅ  ２１ｓｔ  ｃｅｎｔｕｒｙ，Ｂｉｏｐｈａｒｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  １６，５０−５７を参照されたい。
【００２０】
特定の実施形態において、本発明は、生体分子が抗体、例えばモノクローナル抗体またはこの融合体または断片であり、第１単位操作が、プロテインＡ媒体を充填した第１クロマトグラフィーカラムを含み；第２単位操作がウイルス不活性化を提供する、本出願に記載のシステムに関する。ウイルス不活性化は、３〜４などの低ｐＨで行うのが有利である。容器内の維持時間、即ち、低ｐＨにおけるインキュベーションは、正確なｐＨ、温度、予想されるウイルスの存在などに依存して、５〜６０分間続けてよい。特定の実施形態において、ウイルス不活性化のためのパラメータは、生物学的薬物の製造のためのバイオプロセスの規制要件を満たすように設定される。
【００２１】
例示的な実施形態において、本発明は、時には「スーパーループ」と呼ばれる上記の２つの容器の並行使用による連続的なウイルス不活性化に関する。当業者が理解するように、この実施形態は、本発明による２つまたは３つの並行な容器を含み、その直径および高さを変えることによって異なるスケールに適合させることができる。
【００２２】
本発明の第２の態様は、上記のように使用することができる装置に関する。
【００２３】
図１は、概して１００を付した、本発明の一実施形態によるウイルス不活性化装置を示す。ウイルス不活性化装置は、クロマトグラフィーシステムに接続されるように構成された入口ポート１０１を有する。入口ポート１０１は、流体コントローラ１０２に接続されている。流体コントローラ１０２はさらに出口ポート１０３に接続されている。ウイルス不活性化装置はさらに、容器群１０４、１０５、１０６を含む。容器群１０４、１０５、１０６の各容器は、ボリュームと、該ボリュームを第１のサブボリュームと第２のサブボリュームとに分割するように構成された可動側壁１０７を有する。各容器は、第１のサブボリュームに接続された第１のポートと、第２のサブボリュームに接続された第２のポートとを備える。各容器の第１および第２のポートは流体コントローラ１０２に接続されている。
【００２４】
流体コントローラ１０２は、空であるか、またはウイルス不活性化時間以上の時間の間充満状態であった容器群から容器を選択するように構成される。
【００２５】
流体コントローラ１０２はさらに、入口ポート１０１からの流体流を、容器群内の選択された容器の空のサブボリュームのポートに誘導するように構成される。
【００２６】
選択された容器のサブボリュームが充満すると、流れは、空であるか、または、ウイルス不活性化時間以上の時間の間充満状態にあった、群内の別の容器の別の空のサブボリュームに導かれる。
【００２７】
空のサブボリュームの充満から生じる流体圧力は可動側壁１０７に作用し、充満したサブボリュームは、その内容物をそのそれぞれの第１または第２のポートを介して出口ポートに流す。したがって、空のサブボリュームが充満することによって、充満したサブボリュームは、ピストンとして作用する可動側壁１０７によって空にされる。
【００２８】
図２は、装置内の流れのプロットとして本発明によるウイルス不活性化装置の動作を示しており、ウイルス不活性化装置によって受容された流れは曲線２０１として示されており、時間ｔ０においてウイルス不活性化装置の動作が開始され、一定の流入が時間ｔ０の後に受容される。流体コントローラ１０２は、曲線２０２に示す第１の容器に入口流を誘導する。時間ｔ１において、第１の容器が充満され、後続のウイルス不活性化が、ＵＶ光、ｐＨ調節などによって行われる。ｔ１における入口流は、その後曲線２０３で示される第２の容器に誘導される。次第に、第３から第５の容器が、曲線２０４、２０５、２０６に示された時間ｔ２、ｔ３、ｔ４において一度に１つずつ充満される。時間ｔ５において、第１の容器内のウイルス不活性化が準備され、第１のリザーバーの空のサブボリュームに入口流を誘導することによって、第１の容器の充満したサブボリュームは、可動壁によって出口ポートに排出される。この連続は、群内の各容器に対して反復され、ｔ１からｔ５までの最初のウイルス不活性化時間の後、出口ポートから、ｔ５の後の曲線２０７に示されるウイルスが不活性化された一定の流れが提供される。
【００２９】
図３は、ウイルス不活性化が、ｐＨ調整装置５０１によって入口１０１においてｐＨを低下させることによって実施される一実施形態を示す。所定のウイルス不活性化時間の後、第２のｐＨ調整装置５０２によってｐＨを上昇させる。この実施形態は、所定のウイルス不活性化時間の間、流体流の全ての部分が必要なｐＨ低下を受けることを保証する。
【００３０】
別の実施形態が図４に開示される。この実施形態は、所定のウイルス不活性化時間の間、容器１０４、１０５および１０６のそれぞれを照射および放射するように構成された専用ＵＶ光源６０１、６０２、および６０３を使用する。
【００３１】
ウイルス不活性化装置の寸法を決めるために、容器の数Ｎに関する方程式：
Ｎ＝Ｔ×ｆ／Ｖ＋１  方程式１
（式中、Ｔは、容器の洗浄およびｐＨを上昇または低下させるための時間を含む所定のウイルス不活性化時間であり、Ｖは、群内の各容器のボリュームであり、ｆは、ウイルスが不活性化される入口流である）
が導かれた。
【００３２】
本発明の第３の態様は、上記のようなウイルス不活性化装置のための方法に関する。
【００３３】
図５は、本発明によるウイルス不活性化のための方法をフローチャートとして示す。第１ステップ７０１は、空であるか、またはウイルス不活性化時間以上の時間の間充満状態であった容器を選択することを含む。
【００３４】
第２ステップ７０２は、流体流を入口ポートから、群内の選択された容器の空のサブボリュームのポートに誘導することを含む。
【００３５】
第３ステップ７０３は、選択された容器のサブボリュームが充満されたときを決定すること、流れを、空であるか、またはウイルス不活性化時間以上の時間の間充満状態であった群内の別の容器の別の空のサブボリュームに誘導することを含む。
【００３６】
空のサブボリュームの充満により、充満したサブボリュームは可動側壁（１０７）によってその内容物を出口ポートに流す。
【００３７】
本発明の一実施形態において、容器は、米国特許第４，３８９，３１６Ａ号に記載のスーパーループであってもよい。
【実施例】
【００３８】
本実施例は、例示目的のためだけに提供されるものであり、添付される特許請求の範囲によって定義される実施例を限定すると解釈されるべきではない。以下および本明細書の他の箇所で提供される全ての参考文献は、参照により本明細書に含まれる。
【００３９】
実施例１−２つの容器（スーパーループ）を用いたＭａｂ処理におけるウイルスの連続不活性化。
【００４０】
モノクローナル抗体（Ｍａｂ）を含む流体で構成される供給材料を連続細胞培養プロセスから受容し、周知の技術に従ってプロテインＡ媒体（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ（登録商標）、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ｏｎｌｉｎｅから入手可能）を用いたアフィニティークロマトグラフィーによって捕捉する。
【００４１】
ウイルス不活性化は、本明細書に記載されるような２つの容器（スーパーループとして公知）を並行して提供することによって、本発明による連続プロセスに含まれる。各スーパーループには双方向可動シールが装備されており、ループの上部と下部の両方から流体を適用し、溶出することが可能である。クロマトグラフィーカラムから得られた流体のｐＨ調整ＭＡｂ供給材料（ｐＨ３．５）を第１ループ（ループ１）に適用する。ループ１が十分なレベルまで流体で充満されたら、該流体を容器内に３０分間維持し、クロマトグラフィーカラムから得られたＭＡｂ供給材料を移行させ、第２ループ（ループ２）に適用する。ループ２が十分なレベルまで充満されたら、新しいＭＡｂ供給材料が、逆方向の流れを用いてループ１に適用される（ループ２中のＭＡｂは放置されている）。同時に、ループ１中のウイルス不活性化ＭＡｂが溶出され、次の精製カラムに適用することができる。
【００４２】
この例は、２つの並行した「双方向容器／スーパーループ」を、新しいＭＡｂ供給材料の適用−放置−逆方向の新しいＭＡｂ供給材料の適用と、同時にウイルス不活性化ＭＡｂを溶出することとのプロトコルと併せて使用して、Ｍａｂ処理において連続ウイルス不活性化手順を得る方法を示す。
【符号の説明】
【００４３】
１００  ウイルス不活性化装置
１０１  入口、入口ポート
１０２  流体コントローラ
１０３  出口ポート
１０４  容器
１０５  容器
１０６  容器
１０７  可動側壁
１０８  ウイルス不活性化手段
２０１  曲線
２０２  曲線
２０３  曲線
２０４  曲線
２０５  曲線
２０６  曲線
２０７  曲線
５０１  ｐＨ調整装置
５０２  ｐＨ調整装置
６０１  ＵＶ光源
６０２  ＵＶ光源
６０３  ＵＶ光源
７０１  第１ステップ
７０２  第２ステップ
７０３  第３ステップ
【図１】
2018519498.tif 000003
【図２】
2018519498.tif 000004
【図３】
2018519498.tif 000005
【図４】
2018519498.tif 000006
【図５】
2018519498.tif 000007
【国際調査報告】
2018519498.tif 000008
2018519498.tif 000009
2018519498.tif 000010
2018519498.tif 000011