(57)【要約】  例えば、アルギニン及びリジンなどといった制限アミノ酸並びにリノール酸などといった必須脂肪酸の良好な血中濃度を達成することにより、アミノ酸及び脂肪酸の利用性を向上させる方法及び組成物。ペットフード中のレンダリングした肉粉を新鮮な肉又は冷凍肉のスラリーで置き換えると脂肪消化率が高くなることを観察した。スラリーは、新鮮な肉又は冷凍肉のサイズを減少させ、直接蒸気を噴射して調理し、肉の水分を増大させ、蒸気噴射した肉を乳化することにより作製でき、かかるスラリーを、プレコンディショナ中で、肉粉、穀類、植物性タンパク質、食物繊維、ビタミン、ミネラル又は脂肪のうちの１種以上を含む乾燥ブレンドに加える。スラリーをドライブレンドに加えることにより形成される混合物は、押出調理され、断片に切り出され、乾燥されて乾燥ペットフードキブルを形成し得る。【選択図】  図１Ａ及び図１Ｂ
2018512843.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フード組成物の製造方法であって、
新鮮な肉又は冷凍肉から肉スラリーを形成するステップと、
前記肉スラリーが混合物の約１４％〜約３０％となるよう前記肉スラリーを原料のドライブレンドに加え、前記混合物を形成するステップと、
前記混合物を押出成形調理し、押出成形品を形成するステップと、
前記押出成形品を加工して前記フード組成物を形成するステップとを含む、方法。
【請求項２】
前記肉スラリーを形成するステップが、前記新鮮な肉又は冷凍肉のサイズを減少させるステップと、約７１℃以下の温度で直接蒸気を噴射して、前記サイズを減少させた新鮮な肉又は冷凍肉を調理するステップとを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記肉スラリーを形成するステップが、前記蒸気噴射した肉を乳化させるステップを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記混合物が、約１８％〜約３０％のタンパク質を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ドライブレンドが、全粒穀類を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記ドライブレンドが、食物繊維を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記肉スラリーが、プレコンディショナ内において前記原料のドライブレンドに添加され、前記混合物が、前記プレコンディショナから、前記押出成形調理を行う押出成形機に供給される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記押出成形調理が、前記押出成形機において、２５０〜５００ｐｓｉの圧力下、１０５℃〜１３０℃の温度にて、４０秒未満の期間にわたって実施される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記押出成形品の加工が、前記押出成形品を複数の断片に切り出すステップと、前記断片を乾燥させるステップとを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記断片を乾燥させるステップにより、前記断片の含水量を約６％〜約９％（水分）に減少させる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記押出成形品の加工が、前記乾燥させた断片を動物性脂肪又は動物消化物のうちの少なくとも１種でコーティングするステップを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
肉粉ではない肉を約１４％〜約３０％含む、ドライペットフード組成物。
【請求項１３】
約１８％〜約３０％のタンパク質含量を有する、請求項１２に記載のドライペットフード組成物。
【請求項１４】
前記タンパク質含量が、肉スラリー及びタンパク質源により完全に供給され、前記タンパク質源は、植物性タンパク質、肉粉及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１３に記載のドライペットフード組成物。
【請求項１５】
前記肉粉ではない肉が、新鮮な肉又は冷凍肉のサイズを減少させるステップと、前記サイズを減少させた新鮮な肉又は冷凍肉を直接蒸気噴射により調理するステップと、前記蒸気を噴射した肉を乳化させてスラリーを形成するステップと、前記スラリーを１種以上のその他の原料に添加するステップとを含むプロセスでドライペットフード組成物を作製することにより提供される、請求項１２に記載のドライペットフード組成物。
【請求項１６】
もとのドライペットフード処方のタンパク質含量の少なくとも一部を提供する肉粉を含む前記もとのドライペットフード処方と比較して、必須脂肪酸又は必須アミノ酸のうち少なくとも１種の生体利用性を向上させる方法であって、
前記もとのドライペットフード処方を調整して、肉粉ではない肉によって提供された肉で前記肉粉の少なくとも一部分を置き換えるステップであって、前記調整したドライペットフード処方のタンパク質含量が、前記もとのドライペットフード処方のタンパク質含量とおよそ等しい、ステップと、
前記調整したドライペットフード処方によりキブルを製造するステップとを含む、方法。
【請求項１７】
前記もとのドライペットフード処方が肉以外の原料を含み、前記調整したドライペットフード処方が、前記もとのドライペットフード処方と比較して肉以外の原料を同量含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
犬の発育を生後２年間向上させる方法であって、前記犬の母犬に、肉粉ではない肉を約１４％〜約３０％含むドライフード組成物を、前記母犬が前記犬を妊娠している間に給与するステップを含む、方法。
【請求項１９】
子犬の発育を向上させる方法であって、前記子犬に授乳している母犬に、肉粉ではない肉を約１４％〜約３０％含むドライフード組成物を給与することにより、必須アミノ酸及び必須脂肪酸を前記子犬に給与するステップを含む、方法。
【請求項２０】
妊娠中又は授乳中の犬に、肉粉ではない肉を約１４％〜約３０％含むドライフード組成物を給与するステップを含む、妊娠及び／又は授乳中の犬の体重維持を向上させる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［０００１］
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年３月２３日に出願された、米国特許仮出願第６２／１３６，７０１号に対する優先権を主張するものであり、該開示は参照により本明細書に援用される。
【０００２】
［背景技術］
［０００２］本開示は、概して、ペットフード製品及びペットフード製品の製造方法に関する。より詳細には、本開示は、アミノ酸及び脂肪酸の利用性を向上させる方法及び組成物に関する。
【０００３】
［０００３］非必須アミノ酸、内在性タンパク質、その他の窒素化合物の合成に必須アミノ酸及び窒素を提供し、エネルギーも提供するためには、食餌性タンパク質が必要とされる。イヌ科動物の健康（筋肉の増強、健康な皮膚及び被毛のための除脂肪体重維持の補助、免疫系のサポート並びに全ての重要な臓器機能）には、レベル調整した高品質のタンパク質が必須である。
【０００４】
［０００４］妊娠及び授乳中、雌犬の栄養要求量及びエネルギー要求量は、非常に増加する。実際、雌犬の生涯の他の時期と比べ、授乳中はエネルギー要求量が高くなる。授乳は、一般的に体重減少が生じ、雌犬がボディ・コンディション・スコアを数ポイント低下させ得る時期である。増大した栄養要求量及びエネルギー要求量を充足するためには高品質の食餌が推奨される。
【０００５】
［０００５］生の子羊、牛ひき肉又は鶏ミールなどの動物性の肉並びに畜産副産物は、消化率及び嗜好性が高いことから、ペットフード製造業者により一般的に使用されるタンパク質源である。ペットフード産業では、押出成形によるドライペットフードの製造には、通常、乾燥原料又は乾燥された原料が使用される。生の動物肉、骨及び副産物は、乾燥タンパク質に富んだミールの作製を目的として、ブレンドプロセス、加熱プロセス及び乾燥プロセスによりレンダリングされる。
【０００６】
［０００６］これらのレンダリングしたミールと比較して、生の畜産副産物をペットフードレシピに加えると、易加工性の観点で複雑となり、原価が増大してしまう。例えば、家禽副産物のミールは、供給業者から乾燥材料として提供され、ドライミックスに直接組み込むことができ、押出成形によりペットフードを形成する。一方、生の鶏屠体の調理は、ペットフード製造業者にしてみれば時間がかかり、空間も専有されてしまう。したがって、生の動物性タンパク質源を使用したペットフードの製造は、かかる原料を使用しない場合と比較して費用がかかるため、市販のペットフードは典型的にはレンダリングミールをタンパク質源のベースにしている。
【０００７】
［課題を解決するための手段］
［０００７］本開示は、アミノ酸及び脂肪酸の利用性を向上させ、結果として、アルギニン及びリジンなどといった制限アミノ酸並びにリノール酸などといった必須脂肪酸の血中濃度（ｂｌｏｏｄ  ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ）をより良好にする方法及び組成物に関する。本発明者らは、思いがけず、ペットフード中のレンダリングした肉粉を新鮮な肉又は冷凍肉のスラリーで置き換えると脂肪消化率が高くなることを観察した。本発明者らの知る限り、この効果は既存の出版物では報告されていない。食餌中のレンダリングした肉粉のうち最大で２０％を新鮮な肉又は冷凍肉のスラリーで置き換えたところ、子犬では良好な発育速度が観察され、成犬では良好な体重維持が観察された。
【０００８】
［０００８］本明細書において示す実験的証拠において詳細に記すとおり、本発明者らは、給与試験中に以下の健康効果を測定できた。（ｉ）極寒冷な温度への暴露中、肉スラリーを２０％含む製品又は肉スラリーを１４％含む製品を与えたイヌにおける、同じ総タンパク質を有するものの肉スラリーは含まない製品を与えたイヌと比較して良好に体重維持する傾向；（ｉｉ）肉スラリーを１４％含む妊娠・授乳期の母犬用の食餌を与えた、妊娠中及び授乳中の雌犬における、総タンパク質は同じであるものの肉スラリーは含有しない妊娠・授乳期の母犬用の食餌の場合と比較して良好な体重維持；（ｉｉｉ）肉スラリーを１４％含む食餌を与えた雌犬が授乳している子犬における、総タンパク質は同じであるものの肉スラリーは含有しない食餌の場合と比較して良好な発育速度；（ｉｖ）肉スラリー１４％の食餌を与えた雌犬における、総タンパク質は同じであるものの肉スラリーは含有しない食餌の場合と比較して高い乳タンパク質含量；（ｖ）肉スラリーを１４％含む食餌を与えた雌犬における乳汁中必須及び非必須アミノ酸量の増加；及び（ｖｉ）肉スラリー１４％の食餌における、食餌性（ｄｉｅｔ）必須アミノ酸含量に対し高レベルの必須アミノ酸により示されるとおりの、高質の乳汁の促進における高い食餌効率。理論に束縛されるものではないが、本発明者らは、これらの効果は、肉スラリーを配合された食餌における必須アミノ酸及び必須脂肪酸の良好な利用性によるものであると考えている。
【０００９】
［０００９］したがって、全般的な実施形態において、フード組成物の製造方法が提供される。方法は、新鮮な肉又は冷凍肉から肉スラリーを形成するステップと、肉スラリーが混合物の約１４％〜約３０％となるよう肉スラリーを原料のドライブレンドに加え、混合物を形成するステップと、混合物を押出成形調理し、押出成形品を形成するステップと、押出成形品を加工して、フード組成物を形成するステップとを含む。
【００１０】
［００１０］一実施形態では、肉スラリーを形成するステップは、新鮮な肉又は冷凍肉のサイズを減少させるステップと、約７１℃以下の温度で直接蒸気を噴射して、サイズを減少させた新鮮な肉又は冷凍肉を調理するステップとを含む。肉スラリーを形成するステップは、蒸気を噴射した肉を乳化するステップを含み得る。
【００１１】
［００１１］一実施形態では、混合物は、約１８％〜約３０％のタンパク質を含む。
【００１２】
［００１２］一実施形態では、ドライブレンドは全粒穀類を含む。
【００１３】
［００１３］一実施形態では、ドライブレンドは食物繊維を含む。
【００１４】
［００１４］一実施形態では、肉スラリーは、プレコンディショナ内において原料のドライブレンドに添加され、かかる混合物は、プレコンディショナから、押出成形調理を行う押出成形機に供給される。押出成形調理は、押出成形機において、２５０〜５００ｐｓｉの圧力下、１０５〜１３０℃の温度にて、４０秒未満の期間にわたって実施され得る。
【００１５】
［００１５］一実施形態では、押出成形品の加工は、押出成形品を複数の断片に切り出すステップと、かかる断片を乾燥させるステップとを含む。かかる断片を乾燥させるステップにより、断片の含水量を約６％〜約９％（水分）に減少させることができる。押出成形品の加工は、乾燥させた断片を動物性脂肪又は動物消化物（ａｎｉｍａｌ  ｄｉｇｅｓｔ）のうちの少なくとも１種でコーティングするステップを含む。
【００１６】
［００１６］別の実施形態では、本開示は、ドライペットフード組成物を提供する。組成物は、肉粉ではない肉を約１４％〜約３０％含む。
【００１７】
［００１７］一実施形態では、ドライペットフード組成物のタンパク質含量は約１８％〜約３０％である。タンパク質含量は、肉スラリー及びタンパク質源により完全に供給され、タンパク質源は、植物性タンパク質、肉粉及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００１８】
［００１８］一実施形態では、肉粉ではない肉は、新鮮な肉又は冷凍肉のサイズを減少させるステップと、サイズを減少させた新鮮な肉又は冷凍肉を直接蒸気噴射により調理するステップと、蒸気を噴射した肉を乳化させてスラリーを形成するステップと、スラリーを１種以上のその他の原料に添加するステップとを含むプロセスでドライペットフード組成物を作製することにより提供される。
【００１９】
［００１９］別の実施形態では、本開示はもとのドライペットフード処方と比較して必須脂肪酸又は必須アミノ酸のうち少なくとも１種の生体利用性を向上させる方法を提供し、ここで、もとのドライペットフード処方は、タンパク質含量の少なくとも一部を提供する肉粉を含む。方法は、もとのドライペットフード処方を調整して、肉粉ではない肉によって提供された肉で肉粉の少なくとも一部分を置き換えるステップであって、調整したドライペットフード処方のタンパク質含量が、もとのドライペットフード処方のタンパク質含量とおよそ等しい、ステップと、調整したドライペットフード処方によりキブルを製造するステップとを含む。
【００２０】
［００２０］一実施形態では、もとのドライペットフード処方は肉以外の原料を含み、調整したドライペットフード処方は、もとのドライペットフード処方と比較して肉以外の原料を同量含む。
【００２１】
［００２１］別の実施形態では、本開示は、犬の発育を生後２年間向上させる方法を提供する。方法は、犬の母犬に、肉粉ではない肉を約１４％〜約３０％含むドライフード組成物を、母犬が犬を妊娠している間に給与するステップを含む。
【００２２】
［００２２］別の実施形態では、本開示は、子犬の発育を向上させる方法を提供する。方法は、子犬に授乳している母犬に、肉粉ではない肉を約１４％〜約３０％含むドライフード組成物を給与することにより、必須アミノ酸及び必須脂肪酸を子犬に給与するステップを含む。
【００２３】
［００２３］別の実施形態では、本開示は、妊娠中及び／又は授乳中の犬の体重維持を向上させる方法を提供する。方法は、妊娠中又は授乳中の犬に、肉粉ではない肉を約１４％〜約３０％含むドライフード組成物を給与するステップを含む。
【００２４】
［００２４］本開示の利点は、タンパク質の合成用のアミノ酸の利用性を完全に維持する原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００２５】
［００２５］本開示の利点は、高品質のタンパク質と高レベルの必須脂肪酸を提供する原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００２６】
［００２６］本開示の更に別の利点は、高消化率であることが判明している原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００２７】
［００２７］本開示の別の利点は、大変な環境下での体重減少の予防を助ける原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００２８】
［００２８］本開示の別の利点は、長期的に健康に影響する優れた栄養を送達することが判明している原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００２９】
［００２９］本開示の別の利点は、犬小屋に住む犬のボディ・コンディションの維持を助ける原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００３０】
［００３０］本開示の別の利点は、健康な成犬における体重維持を助ける原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００３１】
［００３１］本開示の別の利点は、高品質のタンパク質源及び脂肪源となり栄養学的に重要な恩恵をもたらす原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００３２】
［００３２］本開示の利点は、強い子犬に発育するよう改良された、必須アミノ酸源及び必須脂肪酸源となる原料を配合されたペットフードを提供するというものである。
【００３３】
［００３３］本開示の別の利点は、同腹子の強く健康的な発育を助けるペットフード製品を提供するというものである。
【００３４】
［００３４］本開示の更に別の利点は、強く健康的な発育のための高品質な動物タンパク質源を提供するというものである。
【００３５】
［００３５］本開示の更に別の利点は、ペットフードにおける必須栄養素の利用性を向上させるというものである。
【００３６】
［００３６］本開示の別の利点は、妊娠／授乳中の雌犬における健康体重の維持の助けになるというものである。
【００３７】
［００３７］本開示の更に別の利点は、強い子犬に発育させるために、妊娠／授乳中の雌犬に必要とされる全ての栄養素を含有するペットフードを提供するというものである。
【００３８】
［００３８］本開示の更に別の利点は、子犬を強い成犬に発育させるのに必要とされる全ての栄養素を含有するペットフードを提供するというものである。
【００３９】
［００３９］本開示の更に別の利点は、授乳中の雌犬の乳汁中の必須アミノ酸の利用性を高くするペットフードを提供するというものである。
【００４０】
［００４０］更なる特徴及び利点を本明細書に記載する。これらは、以下の発明を実施するための形態及び図面から明らかとなろう。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
［００４１］
【図１Ａ】実施例１の試験をもとに、経時的な血漿中リジン濃度を示すグラフである。
【図１Ｂ】実施例１の試験をもとに、経時的な血漿中アルギニン濃度を示すグラフである。
【図２】実施例２の試験において調査した３種類の食餌の脂肪酸プロファイルを示すグラフである。
【図３】実施例２の試験において調査した３種類の食餌のアミノ酸プロファイルを示すグラフである。
【図４】実施例２の試験において調査した３種類の食餌の消化率を示すグラフである。
【図５】実施例２の試験において調査した３種類の食餌に由来する見かけのリノール酸吸収を示すグラフである。
【図６】実施例２の試験において調査した３種類の食餌に由来するリジン量を示すグラフである。
【図７】実施例２の試験において調査した３種類の食餌に由来するアルギニン量を示すグラフである。
【図８】実施例２の試験において調査した３種類の食餌を与えた犬の、過酷な気象条件中での体重減少を示すグラフである。
【図９】実施例３の試験において調査した２種類の食餌の製品消化率を示すグラフである。
【図１０Ａ】実施例３の試験において調査した２種類の食餌による、妊娠後期及び授乳期中の母体の体重増加を示すグラフである。
【図１０Ｂ】実施例３の試験において調査した２種類の食餌による、妊娠後期及び授乳期中の母体の体重増加を示すグラフである。
【図１１】実施例３の試験において調査した食餌Ａを与えた母犬（ボーダーコリー）の妊娠後期及び授乳期中の体重増加を示す写真である。
【図１２Ａ】授乳中に、実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた場合の、子犬の発育を示すグラフである。
【図１２Ｂ】授乳中に、実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた場合の、子犬の発育を示すグラフである。
【図１３】授乳中に実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた場合の、子犬の食餌効率を示すグラフである。
【図１４Ａ】授乳中に実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた場合の、子犬（フレンチ・ブルドッグ）の発育を示すグラフである。
【図１４Ｂ】授乳中に実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた場合の、子犬（フレンチ・ブルドッグ）の発育を示すグラフである。
【図１５Ａ】実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた授乳中の雌犬の乳汁の質をブリーダーにより評価し示すグラフである。
【図１５Ｂ】実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた授乳中の雌犬の乳汁の質をブリーダーにより評価し示すグラフである。
【図１５Ｃ】実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた授乳中の雌犬の乳汁の質をブリーダーにより評価し示すグラフである。
【図１６】実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた授乳中の雌犬の乳汁の質をブリーダーにより評価し示すグラフである。
【図１７】実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた授乳中の雌犬の乳タンパク質含量を示すグラフである。
【図１８】実施例３の試験において調査した２種類の食餌を与えた授乳中の雌のブルドッグの乳タンパク質含量を、ビーグルに関し公開されているデータとともに示すグラフである。
【図１９】食餌Ａ及び食餌Ｂを与えたイヌからの乳汁中のアミノ酸プロファイルを示すグラフである。
【図２０Ａ】授乳初期、中期及び後期にて、食餌Ａ及び食餌Ｂを与えたイヌにおける、乳汁中アミノ酸量と、食餌性アミノ酸レベルとの相関を示すグラフである。
【図２０Ｂ】授乳初期、中期及び後期にて、食餌Ａ及び食餌Ｂを与えたイヌにおける、乳汁中アミノ酸量と、食餌性アミノ酸レベルとの相関を示すグラフである。
【図２０Ｃ】授乳初期、中期及び後期にて、食餌Ａ及び食餌Ｂを与えたイヌにおける、乳汁中アミノ酸量と、食餌性アミノ酸レベルとの相関を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
［００６１］本開示及び添付の「特許請求の範囲」において使用する場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈上明らかに別段の定めがない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「スラリー（ａ  ｓｌｕｒｒｙ）」又は「スラリー（ｔｈｅ  ｓｌｕｒｒｙ）」は、２つ以上のスラリーを含む。「Ｘ及び／又はＹ」の文脈にて使用される用語「及び／又は」は、「Ｘ」又は「Ｙ」あるいは「Ｘ及びＹ」と解釈されるべきである。同様にして、引用「Ｘ又はＹのうち少なくとも１種」は、「Ｘ」又は「Ｙ」あるいは「Ｘ及びＹ」として解釈されるべきである。本明細書で使用するとき、用語「例（ｅｘａｍｐｌｅ）」は、特に、後に用語の掲載が続く場合は、単に例示的なものであり、かつ説明のためのものであり、排他的又は包括的なものであると判断すべきではない。
【００４３】
［００６２］本明細書で使用するとき、「約」は、ある数値範囲の数字、例えば、参照する数字の−１０％〜＋１０％、好ましくは参照する数字の−５％〜＋５％以内、より好ましくは参照する数字の−１％〜＋１％以内、最も好ましくは参照する数字の−０．１％〜＋０．１％以内の範囲の数字を指すものと理解される。更に、本明細書における全ての数値範囲は、その範囲内の全ての整数（ｉｎｔｅｇｅｒｓ，ｗｈｏｌｅ）又は分数を含むと理解されるべきである。更に、これらの数値範囲は、この範囲内の任意の数字又は数字の部分集合を対象とする請求項を支持するために与えられていると解釈すべきである。例えば、範囲「１〜１０」の開示は、１〜８、３〜７、１〜９、３．６〜４．６、３．５〜９．９などの範囲を指示するものとして解釈すべきである。
【００４４】
［００６３］本明細書に記載する全てのパーセンテージは、別途記載のない限り組成物の総重量によるものである。ｐＨについての参照がなされるとき、値は標準的な装置により２５℃にて測定されるｐＨに相当する。
【００４５】
［００６４］用語「食品」、「食品製品」及び「フード組成物」は、人間を含む動物によって摂取されることが意図され、動物に少なくとも１つの栄養素を提供する製品又は組成物を意味する。用語「ペットフード」は、ペットに消費されることが意図された何らかのフード組成物を意味する。用語「ペット」は、本開示により提供される組成物から恩恵を受けることができる、あるいはかかる組成物を楽しむことのできる任意の動物を意味する。例えば、ペットは、トリ、ウシ、イヌ、ウマ、ネコ、ヤギ、オオカミ、マウス、ヒツジ又はブタ動物であり得るが、ペットは任意の好適な動物であってよい。用語「コンパニオンアニマル」は、イヌ又はネコを意味する。幼若犬の成熟速度は犬種により異なるものの、本明細書で使用するとき、用語「子犬」は、生後２年までのイヌを意味し、好ましくは、生後１８ヶ月まで、より好ましくは生後１年までのイヌを意味する。
【００４６】
［００６５］「ドライ」フード組成物の水分は１０％未満であり、及び／又は水分活性は０．６５未満であり、好ましくはこれらの両方を充足する。「キブル」とは、ペレットの形状又は他のいずれかの形状を有し得る、ドライペットフードの断片である。キブルの非限定例としては、粒子；ペレット；ペットフード、脱水肉、肉類似物、野菜の各断片及びこれらの組み合わせ；並びにペットスナック、例えば、肉又は野菜ジャーキー、生皮及びビスケットが挙げられる。本開示は、キブルの特定の形態に限定されない。
【００４７】
［００６６］本明細書で使用するとき、「肉粉」とは、乾燥及び粉砕して、実質的に均一なサイズの粒子に形成した肉である。例えば、米国飼料検査官協会（ＡＡＦＣＯ）は、「肉粉」について、良好な加工実施にやむを得ず生じ得る量を除き、血液、毛、蹄、角、くず皮、糞、胃及び反芻胃の内容物の添加を除外した、哺乳動物の組織に由来するレンダリング製品と定義しており、本定義により規定されない余分な材料を含有してはならない。
【００４８】
［００６７］本明細書に開示される組成物は、本明細書にて具体的に開示されない任意の要素を欠く場合がある。したがって、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語を用いた実施形態の開示は、特定されている構成成分「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」及び「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」実施形態の開示を含む。同様にして、本明細書で開示される方法は、本明細書において具体的に開示されない任意の工程を含まなくてもよい。したがって、用語「を含む」を用いる実施形態の開示は、特定された工程「から本質的になる」及び「からなる」実施形態の開示を含む。本明細書で開示される全ての実施形態は、本明細書で開示される任意の別の実施形態と組み合わせることができる。
【００４９】
［００６８］本開示の一態様では、フード組成物は、肉粉ではない肉を最大で約３０％含む。好ましくは、フード組成物はドライフード組成物である。フード組成物は、例えば、イヌ用に処方されたフード組成物などのペットフードであってよい。一実施形態では、肉粉ではない肉の量は、フード組成物の約１４％〜約３０％であり、例えば、約１６％である。フード組成物のタンパク質含量は、好ましくは、約１８％〜約３０％であり、好ましくは約２５％〜約３０％であり、例えば、約２５％である。一実施形態では、フード組成物の脂肪含量は約１０％〜約２０％であり、好ましくは約１５％〜約１７％である。フード組成物の灰分含量は、好ましくは、約６％〜約８％である。
【００５０】
［００６９］フード組成物は、好ましくは、新鮮な肉又は冷凍肉のスラリーを製造するステップを含むプロセスにより作製される。例えば、新鮮な肉又は冷凍肉は、サイズを減少させ、直接蒸気を噴射し調理して肉の水分を増加させ、乳化してスラリーを形成することができる。好適な肉の非限定例としては、鶏、牛、豚、仔羊、七面鳥、ウサギ、アヒル、ガチョウ並びに例えば、サーモン、マグロ、サバ、タラ、ポロック、オヒョウ、シタビラメ及びモンツキダラなどの魚が挙げられる。新鮮な肉又は冷凍肉は、１種類の肉あるいは２種以上の肉の組み合わせであってもよい。
【００５１】
［００７０］直接蒸気噴射は、好ましくは、肉１００ｋｇあたり５〜１５ｋｇの熱水／蒸気を加えることで肉の水分を増加させる。一実施形態ではスラリーの温度は約７１℃であるものの、いくつかの実施形態では低温を使用することができる。好ましくは得られるスラリーは、インジェクタからの、押し出し前に材料を水和し混合するプレコンディショナへのスラリーの輸送を妨害しない粘度を有する。
【００５２】
［００７１］スラリー調製についての具体的な非限定例を以下に提供する。はじめに、冷凍塊肉のサイズを減少させ、概して５ｃｍ〜１５ｃｍの肉塊にする目的で、冷凍塊肉を予備破砕機（ｐｒｅ−ｂｒｅａｋｅｒ）に送り込むことができる。これらの肉塊を、長辺が６ｍｍ又は８ｍｍの断片になるようにサイズを減少させるためグラインダーに送り込むことができる。冷凍肉に加え、又は代替として、新鮮な肉を使用する場合、かかる新鮮な肉をグラインダーに直接入れることができる。ひき肉を、好ましくは加熱中及び以降の任意の保持中に持続的に撹拌しながら、約７１℃の温度にて５〜１５秒の直接蒸気噴射により調理し、スラリーを形成することもできる。標準的な乳化剤を用い、スラリーの温度を約７１℃以下に維持しながら、スラリーに最終的なサイズ減少及び乳化を行うことができる。最終的なサイズ減少及び乳化により、押出調理の前にプレコンディショナに輸送及び噴射することが可能になる。
【００５３】
［００７２］フード組成物の製造にあたり、スラリーを乾燥原料のブレンドに加えることができる。一実施形態では、プレコンディショナ中で、スラリーを、乾燥原料ブレンドの少なくとも一部に加え、混合物はプレコンディショナから押出成形機に供給される。
【００５４】
［００７３］スラリーの量は、最終的なフード組成物における望ましい量をもとに決定でき、好ましくは、フード組成物中、約１４％〜約２９％である。ドライブレンドにスラリーを加えることにより形成された混合物の原料濃度は、最終組成物における濃度と実質的に同じ（含水量以外）であってよいものの、典型的には、プレコンディショナにおいて水分が加えられて水分の一部が最終組成物に残存することから、原料濃度は最終組成物において僅かに薄くなる。更に、肉の調理中に熱水／蒸気が加えられることから、製品処方に加えられるスラリーの量は、スラリーに由来する肉に所望される量の好ましくは１０５％〜１１５％である。そのため、１４％の鶏を必要とする処方については、１０ｋｇの水を１００ｋｇの鶏に加え、温度を約７１℃に上昇させるとき、約１５．４％の量の鶏スラリーを加える必要がある。
【００５５】
［００７４］ドライブレンドは、肉粉、穀類、植物性タンパク質、食物繊維、ビタミン、ミネラル及び脂肪のうちの１種以上を含有し得る。本明細書で開示される組成物に好適な肉粉の非限定例としては、牛肉粉、家禽肉粉、豚肉粉、七面鳥肉粉、魚肉粉及びこれらの組み合わせが挙げられる。製品において所望される総タンパク質レベルを維持する際、スラリーレベルの増大は、任意の動物性ミールの存在する量の減少に応じたものとなる。一実施形態では、スラリーの量は任意の肉粉の量よりも多いものの、他の実施形態では、肉粉の量はスラリーの量よりも多い。
【００５６】
［００７５］好適な穀類の非限定例としては、トウモロコシ、米、小麦、大麦、オーツ麦、大豆、ソルガム、雑穀、ライコムギ、ライ麦及びこれらの混合物が挙げられ、好ましくは、全粒形態のものが挙げられる。一実施形態では、穀類は、最終的なフード組成物が２０％〜５５％の穀類を含むような量で使用される。
【００５７】
［００７６］好適な植物性タンパク質の非限定例としては、コムギタンパク質（例えば、全粒コムギ又はコムギグルテン、例えば、活性コムギグルテン）、トウモロコシタンパク質（例えば、粉砕トウモロコシ又はトウモロコシグルテン）、大豆タンパク質（例えば、大豆ミール、大豆濃縮物又は大豆単離物）、米タンパク質（例えば、米粉又は米粉グルテン）、綿実、ピーナッツミール、エンドウタンパク質及びこれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの材料は、植物性タンパク質及び穀類の両方である。一実施形態では、植物性タンパク質は、最終的なフード組成物が５％〜２０％の植物性タンパク質を含むような量で使用される。
【００５８】
［００７７］可溶性食物繊維及び／又は不溶性食物繊維も使用できる。好適な食物繊維源の非限定例としては、チコリ、セルロース、ビートパルプ（サトウダイコン由来）、アラビアガム、タルハガム、サイリウム、米ぬか、カロブビーンガム、シトラスパルプ、ペクチン、フラクトオリゴ糖、短鎖フラクトオリゴ糖、マンナンオリゴフラクトース（ｍａｎｎａｎｏｌｉｇｏｆｒｕｃｔｏｓｅ）、ダイズ繊維、アラビノガラクタン、ガラクトオリゴ糖、アラビノキシラン及びこれらの混合物が挙げられる。一実施形態では、食物繊維は、最終的なフード組成物が１％〜１０％の食物繊維を含むような量で使用される。
【００５９】
［００７８］食物繊維源は、発酵性繊維であり得る。発酵性繊維は、コンパニオン動物の免疫系に恩恵をもたらすことが以前から報告されている。腸においてプロバイオティクスの増殖を増強するプレバイオティクを提供することが当該技術分野で知られている、発酵性繊維又はその他の組成物をドライペットフードに組み込むことができる。
【００６０】
［００７９］好適な脂肪の非限定例としては、動物性脂肪及び植物性脂肪が挙げられる。好ましくは、脂肪源は、獣脂又はグリースなどの動物性脂肪源である。植物性脂肪、例えば、トウモロコシ油、ヒマワリ油、菜種油、大豆油、オリーブ油並びに一価不飽和脂肪酸及び多価不飽和脂肪酸に富むその他の脂肪を更に又は代替的に使用できる。いくつかの実施形態では、ω−３脂肪酸源、例えば、魚油、オキアミ油、亜麻仁油、クルミ油又は藻類油のうちの１種以上が含まれる。
【００６１】
［００８０］好適なビタミン類の非限定例としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ類のいずれか、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ及びビタミンＫ（前述のものの各種塩類、エステル類又は他の誘導体を含む）が挙げられる。好適なミネラル類の非限定例としては、カルシウム、リン、カリウム、ナトリウム、鉄、塩化物、ホウ素、銅、亜鉛、マグネシウム、マンガン、ヨウ素及びセレニウムなどが挙げられる。
【００６２】
［００８１］ドライブレンドは、防腐剤、着色剤、又は嗜好性付与剤（ｐａｌａｔａｎｔ）のうちの１種以上などの、その他の追加成分を含み得る。好適な保存料の非限定例としては、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸、パラヒドロキシ安息香酸メチルナトリウム、プロピオン酸カルシウム、プロピオン酸及びこれらの組み合わせが挙げられる。好適な着色剤の非限定例としては、青色１号、青色２号、緑色３号、赤色３号、赤色４０号、黄色５号及び黄色６号などの食用着色料（ＦＤ＆Ｃ）；焙煎麦芽粉、カラメル着色料、アナトー色素、クロロフィリン、コチニール、ベタニン、ターメリック、サフラン、パプリカ、リコペン、エルダーベリー果汁、パンダン及び蝶豆などの天然着色料；二酸化チタン；並びに当業者に既知の任意の好適な食品着色剤が挙げられる。好適な嗜好性付与剤の非限定例としては、酵母、獣脂、レンダリングした動物粉（例えば、家禽、牛、子羊及び豚）、香料抽出物又はブレンド（例えば、グリルした牛）及び動物消化物などが挙げられる。
【００６３】
［００８２］フード組成物の製造にスラリーを使用する方法の非限定例を以下に記載する。鶏、七面鳥、牛、仔羊又は鮭のうちの１種以上のミートスラリーを使用するドライペットフードは、挽いたドライブレンドに約１４％〜約３０％の肉スラリー、例えば、約１６％の肉スラリーを加えることにより作製できる。挽いたドライブレンドは、約１０％〜約３０％の家禽肉粉及び／又は別の動物由来の粉、例えば、約２０％の動物粉；トウモロコシ、コムギ及び精白米を含む約２０％〜約５５％の全粒混合物、例えば、約４６％の全粒混合物；大豆、トウモロコシグルテン及び小麦グルテンを含む約５％〜約３５％の植物性タンパク質混合物、例えば、約１０％の植物性タンパク質混合物；チコリ、セルロース、及びビートパルプを含む約１％〜約１５％の食物繊維混合物、例えば、約６％の食物繊維混合物；約０．５％〜約２．０％のビタミン及びミネラル、例えば、約１．０％のビタミン及びミネラル；並びに約０．１％〜約３．０％の魚油、例えば、約１．０％の魚油；を含み得る。
【００６４】
［００８３］持続的に撹拌しながらプレコンディショナ内で肉スラリーをドライブレンドに加え、蒸気噴射により温度を８０〜８５℃に上昇させることができる。プレコンディショニングしたミックスを押出成形機・クッカーに供給し、１０５〜１３０℃の温度及び２５０〜５００ｐｓｉの圧力で４０秒未満の期間にわたって加工して、膨化した成形ロープを形成する。このロープを適した大きさの複数の断片に切り出すことができる。この断片を水分量６％〜９％に乾燥させてキブルを形成でき、このキブルを約８％の動物性脂肪及び消化物でコーティングすることができる。
【００６５】
［００８４］本開示の別の態様において、ペットに栄養を提供する方法が提供される。ペットはコンパニオンアニマルであってよく、好ましくはイヌ、より好ましくは妊娠中及び／又は授乳中の雌犬であってよい。方法は、本明細書に開示されるペットフード製品の任意の実施形態を給与するステップを含む。好ましい実施形態では、ペットフード製品は、子犬の発育を向上させるため、並びに母犬の体重維持をサポートするため、妊娠期間中に毎日、及び／又は授乳期間中に毎日、妊娠中及び／又は授乳中のイヌに給与される。
【００６６】
［００８５］［実施例］
［００８６］以下の非限定的な実施例は、アミノ酸及び脂肪酸の利用性を向上させるために新鮮な肉又は冷凍肉を使用するという構想の例である。
【００６７】
［００８７］実施例１：
［００８８］原料となる鶏屠体（ＣＣ）及び家禽副産物粉（ＰＢＰＭ）のタンパク質の品質について広範な調査を行った。ＣＣ及びＰＢＰＭは、（ｉ）化学組成について分析し、（ｉｉ）ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのタンパク質の消化率について分析し、（ｉｉｉ）イヌの食餌に加え、食後アミノ酸（ＡＡ）の血漿中への出現と、見かけの全消化管消化率について評価した。後者の結果に基づき、回腸でのＡＡ消化率を評価し、食後のＡＡの血漿中への出現と関連付けた。全ての実験に関し、実験用の原料は同じバッチ由来のものとした。
【００６８】
［００８９］化学的性質
［００９０］ＣＣ及びＰＢＰＭを、水分、粗タンパク質（ＣＰ）、粗脂肪、粗食物繊維、灰分及び総エネルギー（ＧＥ）について分析した。欧州連合規制に準拠し、イオン交換クロマトグラフィー及びニンヒドリン試薬によるポストカラム誘導体化後の比色検出により、被験食及び原料に対し、メチオニンスルホン、メチオニンスルホキシド及びシステイン酸の測定を実施した。更に、ＣＣ、ＰＢＰＭ、ＣＣ食及びＰＢＰＭ食の未反応のリジンを見積もった。
【００６９】
［００９１］硫酸及び水酸化カリウムを用いる方法により、被験原料及び被験食中のコラーゲンを分析した。イヌ用のＣＣ食及びＰＢＰＭ食を、水分、ＣＰ、粗脂肪、粗食物繊維、灰分及び総エネルギー（ＧＥ）について分析した。必須アミノ酸（ＥＡＡ）を同様に分析した。更に、ＣＣ及びＰＢＰＭを、ラレアル／ボイセン（Ｌａｒｅａｌ／Ｂｏｉｓｅｎ）法により、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのタンパク質消化率について評価した。
【００７０】
［００９２］
【表１】
2018512843.tif 000003
【００７１】
［００９３］
【表２】
2018512843.tif 000004
【００７２】
［００９４］
【表３】
2018512843.tif 000005
【００７３】
［００９５］イヌ試験
［００９６］試験には様々な犬種、性別及び不妊手術ステータスの１６頭のイヌ：７頭のビーグル、２頭のケアーン・テリア、２頭のダックスフンド、４頭のフォックス・テリア及び１頭のミニチュア・シュナウツァーを使用した。それぞれのイヌ（４．９２±２．９２歳齢；体重９．０±２．３ｋｇ）を、広い外庭に自由に出られるようにして屋内犬舎に収容した。施設内の室温は１８〜２４℃に維持し、明暗サイクルは１２時間とした。実験中、全てのイヌには食餌を与えて体重を維持した。食餌は午前９時に一度に一食分を与えた。イヌはいつでも水を飲むことができた。
【００７４】
［００９７］欧州ペットフード工業会連合（ＦＥＤＩＡＦ）の定めた成犬の最低要求量に合致するか超過するよう食餌を配合した。２種類の食餌の原料組成を上掲の表１に報告する。値は乾物（ＤＭ）ベースで表す。食餌は、何を唯一の動物性タンパク質源とするかで組成が異なった。ＣＣ及びＰＢＰＭは、それぞれＣＣ食及びＰＢＰＭ食の唯一の動物性タンパク質源とした。ＣＰにおけるＣＣ及びＰＢＰＭの寄与率はいずれの食餌においても約２５％とし同一に処方した。タンパク質の約７３％はトウモロコシ穀類及びグルテントウモロコシミールにより提供した。食餌は、ＤＭベースで同様の割合のＣＰ、脂肪、粗食物繊維、炭水化物（窒素不含有の抽出物、ＮＦＥ）及び灰分（表２）を含有するよう処方した。ＣＣは、肉挽き及び７０／８０℃で１２分の調理前に、冷凍保存した。このプロセスにより得られる製品（スラリーと呼称する）を、次に、他の原料とともに押出成形機に送り込む。押出成形機を通して食餌を押し出し、１１０℃にて約２０／２５分乾燥させて目標の８％  ＤＭにした後、キブル化した。
【００７５】
［００９８］当該施設に勤務している獣医（ｃｏｌｏｎｙ  ｖｅｔｅｒｉｎａｒｉａｎｓ）、動物行動学者及び／又は介護スタッフらにより、イヌの健康状態及び行動を毎日モニターした。必要な場合、薬物療法を行った。健康診断及び臨床検査をもとに、全ての犬は健康だと判断された。
【００７６】
［００９９］試験はクロスオーバーデザインで２６日間実施した。第１の期間中、８頭の犬からなる第１群にはＣＣ食を与えたのに対し、８頭の犬からなる他の群にはＰＢＰＭ食を与えた。第２の期間中、第１群のイヌにＰＢＰＭ食を与え、第２群にはＣＣ食を与えた。期間毎に、イヌに７日間の適応期間を過ごさせた後、６日間全ての糞便を回収し栄養消化率を決定した。摂食量を毎日測定した。回収時に湿っていた便は、７日間の回収が完了するまでの間−２０℃で保管し、期間の終了時に秤量した。食餌及び糞便試料を、水分、ＣＰ、粗脂肪、粗食物繊維、灰分及び総エネルギー（ＧＥ）について分析した。全消化管栄養消化率を次のとおりに算出した。［栄養摂取量（全量ｇ／７日間）−栄養排出量（ｎｕｔｒｉｅｎｔ  ｏｕｔｐｕｔ）（全量ｇ／７日間）］／［栄養摂取量（全量ｇ／７日間）。
【００７７】
［０１００］食前及び食後の期間中の採血日には、消化率試験に供するイヌを使用した。食餌毎に、１６頭のイヌの内１２頭のイヌを短時間で摂食する能力をもとに選択した。各期間の糞便回収中、イヌ毎に１回ずつＡＡ吸収率試験を行った。１”×２０ｇの針を使用して、頭部カテーテルにより、２つの２．５ｍＬのシリンジに血液試料（３ｍＬ）を回収した。３ｍＬの血液試料を採取する直前に、０．５ｍＬの血液を採取及び廃棄し、カテーテル内に残存する抗凝結剤を除去した。給与（０時間）の０．５時間前と、給与から１、２、３、５及び８時間後に血液を採取した。収集後、血液をすぐに５ｍＬのＮａ−ヘパリンチューブに移した。各採取後に、カテーテル内に容量１．０ｍＬのヘパリン処理した生理食塩水（１０Ｕヘパリン／ｍＬ生理食塩水）を流した。８時間の時点のサンプル採取後、カテーテルを取り外し、２４時間の時点のサンプルは頸静脈の静脈穿刺により採取した。合計して、期間あたり２４．５ｍＬの血液を採取した。これはＧＩＲＣＯＲ（Ｉｎｔｅｒｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  ｏｎ  Ｒｅｆｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ  ｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）が推奨する採血量未満である。血液を、臨床用遠心機において、室温下４，０００ｘｇで５分間遠心分離した。得られた上清画分を除去した後、アミノ酸分析までの間−８０℃で保管した。ポストカラムのニンヒドリン誘導体化と光度検出を用い、標準的なイオン交換液体クロマトグラフィーを使用して、Ｂｉｏｃｈｒｏｍアミノ酸分析により血漿ＡＡの濃縮を行った。台形公式：ＡＵＣ＝∫ｂａｆ（ｘ）ｄｘを使用して、２４時間の濃度曲線下面積（ＡＵＣ）を算出した。
【００７８】
［０１０１］変数を正規性について試験したところ、正規分布に従っているように思われた。対応のあるｔ検定を用い、見かけの全消化管消化率を試験した。検定のｐ値が０．０５未満であった場合に、差は統計的に有意なものであるとみなした。統計試験は全て両側で行った。分散分析により曲線下の面積を分析した。結果を平均値±ＳＤとして表す。
【００７９】
［０１０２］結果
［０１０３］ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのタンパク質消化率及びコラーゲン含量についてＣＣ及びＰＢＰＭを分析した。ＣＣ及びＰＢＰＭの相対的な品質についての情報を得るため、製造した食餌に対する試験をイヌについて行った。最終的に、単独のアミノ酸消化率データを含む見かけの全消化管消化率を得るため、イヌに食餌を与えた。ＡＡ吸収の観点で、両方の食餌を質的に比較する目的で、回腸における推定ＡＡ消化率を、ＥＡＡ類における食後血漿濃度と比較した。これらのｉｎ  ｖｉｖｏデータと、原料及び食餌の両方の分析評価とをもって、タンパク質源の質についての結論とすることができ、イヌにおけるそれらのＥＡＡ利用性について良好な推定が与えられる。
【００８０】
［０１０４］化学的性質：被験原料の化学組成を上掲表３に示す。非反応性リジンの割合は、被験原料間で同様であり、被験食の値は１４．８％〜１８％の間で変化した（表４）。ＰＢＰＭのみが、システイン及びメチオニンスルホキシドの量が分析による検出閾値（５０ｍｇ／ｋｇ）よりも高く、それぞれ１３３及び１０５ｍｇ／ｋｇであった。更に、ＰＢＰＭ及びＰＢＰＭ食では、非反応性リジンの量が多いことが判明した。
【００８１】
［０１０５］
【表４】
2018512843.tif 000006
【００８２】
［０１０６］Ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのタンパク質消化率：被験原料の分析により、ＣＣの場合、回腸ｉｎ  ｖｉｔｒｏタンパク質消化率（ｉｌｅａｌ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ）は４．１％高いことが示された（表５）。
【００８３】
［０１０７］
【表５】
2018512843.tif 000007
【００８４】
［０１０８］見かけの全消化管消化率：イヌ試験では、乾物（ＤＭ）、有機物（ＯＭ）、灰分及び総エネルギー（ＧＥ）についての見かけの全消化管消化率における差は観察されなかった。２つの被験食間で、見かけの全消化管消化率は、ＣＰ（ｐ値＝０．０３７）及び脂肪（ｐ値＝０．００１）において有意に異なり、ＰＢＰＭ群と比較してＣＣ群の方が値が高かった（表６）。
【００８５】
［０１０９］アミノ酸の見かけの全消化管消化率に関し、両方の食餌間で差は見られなかった。しかしながら、ロイシン（ｐ値＝０．０８５）及びグリシン（ｐ値＝０．０７０）の血漿濃度は２群のイヌ間で異なる傾向があった。
【００８６】
［０１１０］補正したアミノ酸消化率を算出した（表７）。
【００８７】
［０１１１］ＡＡ吸収試験：システインを除く全てのイヌのＥＥＡをアミノ酸吸収動態について測定した。いずれの食餌を取らせた後でも、食後に素早く上昇し、吸収後の状態のベースラインレベルにはゆっくりと戻るという点でプロファイルはほとんど同一であった。リジンは食後にベースラインレベル未満に減少した唯一のアミノ酸であった。図１Ａ及び１Ｂは、リジン及びアルギニンのそれぞれの血漿濃度を経時的に示すグラフである。値は、１２頭の犬に関し平均＋ＳＤである。
【００８８】
［０１１２］時間は、全ＡＡ及びＬｙｓ／ＴＥＡＡに関し血漿アミノ酸濃度に有意に影響した。ある期間にわたり、２種の食餌間で有意差が見されたとき、相当するｐ値に配慮した。
【００８９】
［０１１３］
【表６】
2018512843.tif 000008
【００９０】
［０１１４］
【表７】
2018512843.tif 000009
１ Hendrik, et al.(2012)により提唱された式を使用し補正したCP回腸消化率
補正した回腸CP/AA消化率＝見かけの全消化管CP/AA消化率−４６．８６９／０．４９１
２  AUCを従属変数とし、食餌、群及び食餌＊群相互作用を独立変数とする、分散分析。  
【００９１】
［０１１５］曲線下面積は、アルギニン及びロイシンの吸収に有意に影響した。群及び食餌は、リジン、チロシン及びＬｙｓ／ＴＥＥＡ比に有意に相互作用した。
【００９２】
［０１１６］議論
［０１１７］化学的性質
［０１１８］原料素材（頭、足、内蔵）はＣＣ及びＰＢＰＭの質に影響する主要な要素である。ヒドロキシプロリンはコラーゲンの主成分であり、トリプシン加水分解に感受性がなく、タンパク質のアンフォールディングを予防し、他の酵素の接近を低減することを特徴とする。この試験において、ＣＣ食ではＣＰ画分の１２．２％がコラーゲンだったのに対し、ＰＢＰＭ食では１０．０％であった。しかしながら、ＣＣのｉｎ  ｖｉｔｒｏでの消化率はＰＢＰＭよりも４．１％高く、ＣＰのｉｎ  ｖｉｔｒｏでの消化率は８９．０％に対して９３．１％であった。したがって、コラーゲンは、タンパク質資源の品質を測定するには正確な要素ではないおそれがある。
【００９３】
［０１１９］被験原料では、酸化した硫黄アミノ酸の量が異なっていた。酸化したアミノ酸は、タンパク質の質を評価するのに重要である。例えば、メチオニンスルホン及びシステイン酸は離乳ラットでは利用不能であるが、メチオニンスルホキシドであればある程度利用可能である。ＰＢＰＭはシステイン酸レベル及びメチオニンスルホキシドレベルが高く、これはレンダリングプロセスにおいて用いられる高温により説明され得る。しかしながら、システイン酸、メチオニンスルホン及びメチオニンスルホキシドはいずれも５０ｍｇ／ｋｇ未満であったことから、この差は食餌では測定されなかった。
【００９４】
［０１２０］非反応性リジンの定量を被験食に対し行い、タンパク質源が品質の点で異なり得るかを確認した。反応性リジンは、モイスト式及びドライ式のキャットフードにおけるリジン消化率を正確に定量するのに重要である。結果として、いずれの原料も、非反応性リジンと割合が等しいことが判明した。これにより、ミールを製造するレンダリングプロセスは予想されていたほど優れているものではない可能性があることが明らかとなった。ＰＢＰＭを挽き、１２０〜１４０℃の温度に約３０〜４０分加熱した。次に製品を乾燥させて、再度目の細かい粒子に挽いてＰＢＰＭを作製した。したがって、このプロセスは温度及び所要時間の点で優れており、メイラード反応によるリジンのε−アミノ基のより容易な反応を誘導し得る。しかしながら、組み入れるタンパク質源中に含有される還元糖の割合（％）が低いと、この反応は制限され得る。
【００９５】
［０１２１］ＣＣプロセスは、最初に冷凍ＣＣを約８０℃で１２分だけ調理するステップである。次に、肉スラリーを７０℃で挽いて押出成形機に導入する。したがって、ＣＣプロセスに必要とされる温度及び時間はＰＢＰＭプロセスよりも低温かつ短時間であるものの、ＣＣ食の非反応性リジン含量は低くなかった。
【００９６】
［０１２２］イヌ試験
［０１２３］第１期間から８頭の異なるイヌからなる２群間で消化率について成績を決定した。
【００９７】
［０１２４］全消化管の見かけの近似消化率：食餌には、対象とする割合のＣＰと、１８％及び９％の脂肪をそれぞれ配合した。ＤＭベースで、いずれの被験食も同量の粗タンパク質を有し、同様に等エネルギーであった。目標どおり、被験原料は最終的な粗タンパク質の２５％を占めていた。この比を達成するため、ＣＰ含量は両方の食餌において約１８％とした。この含量はＦＥＤＩＡＦにより推奨される最小量に近い。食餌性タンパク質の割合が低いと、制限アミノ酸が出てくるおそれがある。
【００９８】
［０１２５］ＣＣのＣＰ及び脂肪の見かけの消化率は、ＰＢＰ粉よりも有意に高かった。
【００９９】
［０１２６］正味摂取量については、１日１０００Ｋｃａｌを摂取し、体重が１５ｋｇであるイヌを例とした。計算は表９に示すとおり、下式に従って行った。
【０１００】
平均摂取量（ＣＰのｇ重量）＝（食餌性ＣＰ量）＊（ＧＥ）＊（１０００Ｋｃａｌを摂食する際に摂取される正味ＣＰ摂取量）＊（補正した回腸Ｎ消化率）
【０１０１】
【数１】
2018512843.tif 000010
【０１０２】
平均酸化数の除去後のＣＰ利用性＝代謝量によるＣＰ摂取量−平均酸化数
【０１０３】
［０１２７］
【表８】
2018512843.tif 000011
【０１０４】
［０１２８］Ｈｕｍｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）は、身体タンパク質の酸化について、１日あたり３．９３ｇ／ｋｇ  ＢＷ＾０，７５の値を報告している。いずれの食餌も、このベースとなるタンパク質酸化を超過しており、ＣＣ及びＰＢＰＭのそれぞれについて５．９８ｇ／ｋｇ  ＢＷ＾０，７５及び５．６３ｇ／ｋｇ  ＢＷ＾０，７５であった。しかしながら、ＣＣ食は、ＰＢＰＭ食の場合と比較して最低必要量を２０％超過するタンパク質を提供した（それぞれ２．０５及び１．７ｇ／ｋｇ  ＢＷ＾０，７５）。僅かな差異は存在し得るものの、いずれの食餌も既に最小必要量を充足していることが判明していた。但し、特に代謝体重当たりの要求量が大きい動物、例えば、発育期の動物、妊娠／授乳中の雌犬又は使役犬などでは長期的には除脂肪体重の維持に関し栄養学的な優位性が出てくる可能性がある。
【０１０５】
［０１２９］アミノ酸吸収試験：ＡＡレベルは食後のサンプリング時間に強く影響を受けた。全てのアミノ酸濃度は、食後に上昇し、食後３〜５時間の間にピークを有した。食後のアミノ酸吸収動態により、食後期の最初の２〜３時間の間、必須アミノ酸の殆どが顕著に増加していたことが示された。これは、両方の食餌において観察された良好なタンパク質消化率を反映する。
【０１０６】
［０１３０］しかしながら、リジンについてはベースラインを超えての上昇は認められなかったことから、リジンがかかる食餌の第１制限アミノ酸であったことが示唆された（図１Ａ）。いずれの被験食もＦＥＤＩＡＦにより推奨されている最小推奨許容量に近くなるよう配合されていることから、この観察結果は驚くには当たらない。リジンは、利用不能なメイラード化合物を形成し利用性を減少させる熱プロセスによる影響を非常に受けやすい。この結果により、リジンの必要量が確実に低タンパク質摂取量を充足するものになるようにするにはタンパク質の質が鍵となるという事実が強調される。有意ではなかったにせよ、ＣＣ食では曲線下面積が大きくなる傾向があり、ＰＢＰＭ食よりもリジンの制限性が低かったことが示唆された。
【０１０７】
［０１３１］文献において「制限する」ことが知られる別のアミノ酸は、２種の食餌間で優位な差を示した：アルギニン量はＰＢＰＭ食の場合と比較してＣＣ食において有意に多かった（図１Ｂ）。ＣＣ食を与えたイヌが食後１時間及び２時間で示した経時的な血漿アルギニン値が高かったことから、ＣＣ食ではアルギニンの利用性が良好であることが示唆された。アルギニンの最終的なＡＵＣも、ＰＢＰＭ食の場合と比較してＣＣ食の方が有意に高かった。この研究結果は、アルギニンは尿素回路及びタンパク質合成経路において鍵となるアミノ酸であると考えられることから、特に関心を引くものである。アルギニンは、尿素回路の中間体成分であり、尿素の解毒に関係するアロステリックな活性化因子として知られる。同様にして、アルギニンは、インスリン及び成長ホルモンなどのホルモンに作用する分泌促進性から、同化作用のあるアミノ酸としてよく知られている。この良好なアルギニンステータスとともに、リジンの回腸消化率により、食後期のタンパク質合成について高い性能が導かれ得た。
【０１０８】
［０１３２］結論
［０１３３］最終的に、試験において実施した分析及び試行の結果により、両方の被験食の相対的な食餌性タンパク質の質について良好な評価を得ることができた。ＣＣ食の見かけの全消化管ＣＰ消化率により、ＰＢＰＭ食と比較して有意に高く、ＣＣのタンパク質の質がＰＢＰＭよりもよいものであり得ることが明らかとなった。ＣＣのｉｎ  ｖｉｔｒｏでのタンパク質消化率は、回腸消化率の高さを示唆し得るものであるため、全消化管ＣＰ消化率において観察された差異を説明し得る。
【０１０９】
［０１３４］アミノ酸吸収試験により、リジンが第１制限アミノ酸であることが示され、ＣＣ食を与えたイヌにおいてリジン曲線下の面積が広くなる傾向があることが明らかとなった。この差は、タンパク質の代謝及び合成において鍵となる別の制限アミノ酸であるアルギニンでは更に大きくなった。有意に高い血漿ステータスにより示されるとおり、アルギニン利用性はＣＣ食の方が高かった。
【０１１０】
［０１３５］したがって、結論として、食餌性ＣＣタンパク質の生体利用性は食餌性ＰＢＰＭタンパク質よりも高かった。
【０１１１】
［０１３６］実施例２
［０１３７］実施例１における試験結果をもとに、高脂肪含量及び高タンパク質含量（最終製品１００グラムにつき２５％タンパク質、１５％脂肪）の製品間で消化率及び血中濃度において差が観察されるかを確認するため第２の試験を実施した。
【０１１２】
［０１３８］レシピ中の本物の肉の量を変えて、３種類の食餌を製造した。第１の食餌には本物の肉を２０％含有させ、第２の食餌には本物の肉を１４％含有させ（１４％は、「本物の肉を多く含む」と主張することが許されるレシピにおける、本物の肉の最小量である）、第３の食餌には本物の肉を含有させなかった。第３の食餌には動物性タンパク質源として肉粉を含有させた。ＦＥＤＩＡＦの定めた成犬の最低要求量に合致するか超過するよう食餌を処方した。食餌は、粗タンパク質（ＣＰ）、脂肪、粗食物繊維、炭水化物（ＣＨＯ）及び灰分を乾物（ＤＭ）ベースで同じ割合で含有するよう配合した。３種類の食餌は、動物性タンパク質源中の本物の肉の量のみを違いとした。
【０１１３】
［０１３９］
【表９】
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【０１１４】
［０１４０］試験には、品種、性別及び不妊手術ステータスが様々な１２頭のイヌを使用した。イヌは、広い外庭に自由に出られるようにして屋内犬舎に収容した。食餌は午前９時に一度に一食分を与えた。イヌはいつでも水を飲むことができた。健康診断及び臨床検査をもとに、全ての犬は健康だと判断された。
【０１１５】
［０１４１］１２頭のイヌを、同じ年齢及び品種分布の４頭のイヌからなる３群に分けた。この試験は、１０日ずつ３つの期間に分割した３０日間のクロスオーバー試験とした。したがって、それぞれのイヌは、試験の終わりに３種類の食餌のそれぞれについて試験を受けた。
【０１１６】
［０１４２］
【表１０】
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【０１１７】
［０１４３］１０日間の期間を２つに分けた。最初の４日間は馴化期間として、１日あたりの摂食量と糞便硬さのみを評価し、残りの６日間は試験期間として、１日あたりの摂食量及び糞便硬さについて評価する他、糞便を回収し、計量し、−２０℃で保管した。食後のアミノ酸血中濃度も評価した。
【０１１８】
［０１４４］完全なＡＡプロファイル及び脂肪酸プロファイルについて食餌を分析した。食餌及び糞便を、水分、ＣＰ、粗脂肪、粗食物繊維、灰分及びＧＥについて分析した。
【０１１９】
全消化管栄養消化率は次のとおりに算出した。
［栄養摂取量（合計ｇ重量／７日間）−栄養排出量（合計ｇ重量／７日間）］／栄養摂取量（合計ｇ重量／７日間）
【０１２０】
リノール脂肪酸の正味摂取量は次のとおりに算出した。
［１日食品摂取量（合計ｇ重量／７日間）＊食餌中の脂肪酸濃度（％）＊脂肪酸消化率（％）＊全脂肪酸プロファイルに対するリノール脂肪酸の濃度（％）］
【０１２１】
［０１４５］１”×２０ｇの針を使用して、頭部カテーテルにより、２つの２．５ｍＬのシリンジに血液試料（５ｍＬ）を回収した。５ｍＬの血液試料を採取する直前に、０．５ｍＬの血液を採取及び廃棄し、カテーテル内に残存する抗凝結剤を除去した。食餌を与える０．５時間前と、食餌を摂食してから１、２、３、５時間後に血液を回収した。回収後、血液の半量を５ｍＬのＮａ−ヘパリンチューブにすぐに移し、残りの半量を３ｍＬドライチューブに移した。合計して、期間あたり２０ｍＬ（全血液量の２．３５％）の血液を回収した。これはＧＩＲＣＯＲの推奨量以内である。
【０１２２】
［０１４６］血液を、臨床用遠心機において、室温下３，０００ｘｇで１０分間遠心分離した。Ｎａ−ヘパリンチューブから血漿及び血清をそれぞれ得て、乾燥チューブを抽出した後、−８０℃にて分析まで保管した。
【０１２３】
［０１４７］ポストカラムのニンヒドリン誘導体化と光度検出を用い、標準的なイオン交換液体クロマトグラフィーを使用して、Ｂｉｏｃｈｒｏｍアミノ酸分析により血漿サンプルに対しＡＡの濃縮（リジン、ロイシン、メチオニン、アルギニン、グルタミン）を行った。台形公式を用い各アミノ酸及び食餌について曲線下面積を算出し、基準値について調整した。
【０１２４】
［０１４８］粗タンパク質、ＣＨＯ、脂肪、灰分、各食餌間のＧＥ消化率について対応のあるｔ検定を行った。インスリン血症及びＡＡ濃度について分散分析（ＡＮＯＶＡ）を実施し、時間、食餌、期間、群及び食餌と群との相互作用がもつ作用について試験した。対応のあるｔ検定を用い、各アミノ酸に関し、曲線下面積を比較した。
【０１２５】
［０１４９］結果及び議論
［０１５０］食餌分析：同じ割合の粗タンパク質及び脂肪を含有するよう、但し、本物の肉（２０％、１４％又は０％）の量は変えて食餌を処方し、３種の食餌間に脂肪酸プロファイルにおける差を導入した（図２）。キブル中の本物の肉の濃度を増大させることで、ＰＵＦＡが総脂肪酸プロファイルに占める割合が高くなり、その分ＳＦＡが減少する。リノール脂肪酸及びステアリン脂肪酸が全脂肪酸プロファイルに占める割合を合計すると、３種の食餌について同じ結果が得られたことがわかる。これにより、レンダリングプロセスがリノール酸をその主要な水素化形態：ステアリン脂肪酸に変換することが明確に証明された。
【０１２６】
［０１５１］図３に示すとおり、各食餌間のアミノ酸プロファイルには、非常に高い類似性があった。この発見は、３種の食餌において、本物の肉が総タンパク質含量に占める割合（それぞれ１５．５％、１０．６％及び０％）により説明される。
【０１２７】
［０１５２］図４に示すとおり、３種の食餌についてＣＰ、脂肪、ＣＨＯ及びＧＥの高い消化率が観察され、３種の食餌の質が高いことが証明された。ＣＰの消化率に関し、３種のそれぞれの食餌間に有意差は観察されなかった。しかしながら、ＣＰ消化率の増加傾向は、食餌中における本物の肉の量の増大に伴って観察された。この増加はＨｅｎｄｒｉｃｋｓの回腸消化率予測式を使用したときに更に大きくなる。
【０１２８】
［０１５３］脂肪の消化率に関し、３種の各食餌間に有意差は観察されなかった。この試験において、本物の肉を含まない食餌において飽和脂肪酸（ステアリン脂肪酸）を増大させても脂肪消化率に負の影響が生じなかったのは、３種の食餌間の脂肪酸プロファイルの差が少なかったことによる可能性が高い。ＣＨＯ、灰分及びＧＥの消化率に関し、３種の各食餌間に有意差は観察されなかった。
【０１２９】
［０１５４］図５に示すとおり、リノール脂肪酸の正味摂取量は、本物の肉を使用していない食餌と比較して、本物の肉を使用して作製した食餌において有意に高かった。本物の肉を使用して作製した食餌は高濃度のリノール脂肪酸を示すことから、この結果は合理的なものである。
【０１３０】
［０１５５］３種の食餌に関し、アミノ酸濃度は、食後期に顕著な増加を示したことから、良好なタンパク質消化率が観察されたことが確認された。それでもなお、食餌は別のアミノ酸の血漿濃度には影響しないことが観察された。
【０１３１】
［０１５６］１８％のタンパク質を含有する食餌を使用する第１の試験（実施例１）の結果と、２５％のタンパク質を含有する食餌を使用するこの試験の結果とを比較したところ、食餌中タンパク質含量を増大させることにより恩恵が得られるという有益な結果が得られた。更に、図６及び７に示すとおり、２つの試験から、食餌間で非常に異なる濃度パターンを観察できる。２５％のタンパク質を含む食餌を与えたイヌは、メチオニン、リジン及びアルギニンの血中濃度が高く、タンパク質摂取量が増えると、ＡＡ吸収が高くなることが確認された。しかしながら、ＡＡの血中濃度は、ＡＡの供給レベルと直接は相関しなかった。更に、１８％のタンパク質を含む食餌を与えたイヌでは、曲線はアルギニン及びメチオニンに関しては極僅かに上昇するにとどまり、リジンに関しては減少したのに対し、２５％のタンパク質を含む食餌を与えたイヌでは、曲線は堅調に上昇した。この発見は、１８％のタンパクを含む食餌を与えたイヌでは、２５％のタンパク質を含む食餌を与えたイヌと比較してＡＡ供給が少ないものの、食後期ではこれらの必須アミノ酸が同様の濃度となり得るという事実により説明できる。したがって、１８％のタンパク質を含む食餌の場合、アミノ酸プールの利用によるタンパク質合成の際のこの要求は、メチオニン及びアルギニンの場合では供給によりかろうじて補償されるか、リジンの場合では供給により補償されないかのいずれかである。
【０１３２】
［０１５７］第２の試験では、この期間は、試験を実施した地域下での極めて寒冷な気象期間と一致した。これらの過酷な気象条件のため、イヌは体重を維持するのが難しかった。１４％及び２０％の鶏を与えたイヌでは、与えた鶏が０％であったイヌと比較して、良好な体重維持が観察された（図８）。
【０１３３】
［０１５８］結論
［０１５９］第１の試験（実施例１）で本物の肉から作製したキブル中のタンパク質及び脂肪の消化率の高さに関係する観察結果はこの試験では有意には現れなかったが、これはおそらく、本物の肉が総脂肪含量及び総タンパク質含量に占める割合が低いことに起因する。しかしながら、この試験では、本物の肉を使用することで、リノール脂肪酸の大量摂取が可能になり、潜在的な健康効果が促進されることが示された。
【０１３４】
［０１６０］最初の２種類の試験で得られた結果の比較により、キブル中のタンパク質含量を増加させることで、食後期においてタンパク質合成用のアミノ酸要求を広範に補償でき、ひいては２５％のタンパク質を含むキブルを与えたイヌでは、食後期の高いタンパク質合成と、長期にわたる筋肉量の良好な維持とが保証され得る。
【０１３５】
［０１６１］実施例３
［０１６２］最初の２種類の試験（実施例１及び２）の結果により、キブル中の本物の肉の含量を増加させるに伴い、最終的なタンパク質及び脂肪の質が向上するという見識が得られた。この質の向上により、消化率が高まり、食後期においてはタンパク質合成の際のアミノ酸利用が高まる。
【０１３６】
［０１６３］３つ目の試験は、本物の肉で作った食餌のタンパク質の消化率が高く、かつ食品脂肪及びリノール脂肪酸含量が高ければ、栄養要求性が非常に高くなる２つの時期、すなわち雌犬の妊娠期及び授乳期に、健康効果を提供可能であるかを評価することを目的とした。
【０１３７】
［０１６４］この試験は、ブリーダーのもと、２種類の食餌を使用して妊娠中及び授乳中の雌犬で実施した。１つ目の食餌は動物性タンパク質源として本物の肉を含み、２つ目の食餌は動物性タンパク質源として肉粉のみを含む。食餌の質を間接的に評価する健康パラメーターを使用した。
【０１３８】
［０１６５］試験では、レシピ中の本物の肉の量を変えて、２種類の食餌を製造した。１つ目の食餌（食餌Ａ）は１００ｇの製品あたり本物の肉を１４％含有し、２つ目の食餌（食餌Ｂ）は本物の肉を全く含まなかった。
【０１３９】
［０１６６］
【表１１】
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【０１４０】
［０１６７］ＦＥＤＩＡＦガイドラインの定めた妊娠期、授乳期、及び発育期の最低要求量に合致するか超過するよう食餌を処方した。食餌は、ＣＰ、脂肪、粗食物繊維、炭水化物（ＣＨＯ）及び灰分をＤＭベースで同量含有するよう配合した。
【０１４１】
［０１６８］試験には、様々な犬種の１２頭の雌犬を含めた（フレンチ・ブルドッグ、パグ、イングリッシュ・ブルドッグ、ラブラドール、フォックス・テリア）。試験に使用した雌犬はブリーダーのもとから来た。これらの被験動物は、１歳齢以上であり、第２発情期にあった。
【０１４２】
［０１６９］試験デザインは、妊娠／授乳状態であるという主張を証明するため、米国飼料検査官協会（ＡＡＦＣＯ）のプロトコルをベースとした。１２頭の雌犬を同様の年齢及び品種分布の２群に割り付けた。各群には妊娠第５週から授乳の最初の月の終わりまで２種類の食餌のうちのいずれかを与え、合計２ヶ月の期間とした。この食餌を、試験期間中の唯一の食物源とした。
【０１４３】
［０１７０］それぞれ酸化的加水分解、及びアミノ酸分析機を使用して、食餌を完全ＡＡプロファイル及び完全脂肪酸プロファイルについて分析した。
【０１４４】
［０１７１］ブリーダーには、試験に供された雌犬の普段の１日あたりの摂食量について聞き取りを行い、エネルギー要求を充足する食餌比を算出した。ブリーダーには、試験に供された雌犬の週ベースの体重増加について聞き取りを行い、かつ４点スケールを与え糞便の硬さについて聞き取りを行った。出産後、ブリーダーには、同腹子の体重増加について週ベースで聞き取りを行った。
【０１４５】
［０１７２］評価した主要なパラメーターは、（ａ）Ｂｗの増大（雌犬及び子犬）、（ｂ）摂食量（雌犬）、（ｃ）授乳中の子犬の発育に対する食餌効率及び（ｄ）乳汁組成（タンパク質、ＡＡ）である。
【０１４６】
［０１７３］
【表１２】
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【０１４７】
［０１７４］図９に示すとおり、食餌間で製品の消化率において優位な差は観察されなかった。
【０１４８】
［０１７５］被験動物：試験は５頭の雌犬で実施した（２頭のフレンチ・ブルドッグ、１頭のボーダーコリー、１頭のラブラドール、１頭のビアデッド犬（Ｂｅａｒｄｅｄ  Ｔｃｈｅｃ  ｄｏｇ））。食餌Ａ群の同腹子の頭数は１１頭とした（フレンチ・ブルドッグ：７頭、ボーダーコリー：４頭）。食餌Ｂ群の同腹子の頭数は１４頭とした（フレンチ・ブルドッグ：４頭、ラブラドール：９頭、ビアデッド（Ｔｃｈｅｃ  Ｂｅａｒｄｅｄ  Ｄｏｇ）犬：１頭）。
【０１４９】
［０１７６］後期妊娠中の母犬の体重（ＢＷ）増加を図１０Ａ及び１０Ｂに示す。同腹子数が少なすぎる（１頭）ことから、品種の大きさ（大型犬）を考慮した体重維持の観点で十分に「困難」なものではないと考えられたため、ビアデッド犬はデータ処理に含めなかった。食餌Ａを与えた雌犬は、体重維持の点で、妊娠後期及び授乳期に良好に機能する傾向があった（例えば、図１１）。
【０１５０】
［０１７７］図１２Ａ及び１２Ｂに示すとおり、授乳中の子犬の発育速度は食餌Ａの方が早かった。図１３に示すとおり、子犬の体重増加を母犬の摂食量により正規化したとき、食餌Ａは特に授乳後期の体重増加の促進に効率的であった。
【０１５１】
［０１７８］食餌Ａは、授乳中の子犬の発育促進において高効率であった。食餌Ａを与えた、妊娠／授乳している雌犬が、良好に体重維持する傾向もあった。この結果は、スラリーに由来する必須脂肪酸レベルの高さによるものであり得るが、アミノ酸利用性もおそらく作用している。
【０１５２】
［０１７９］これらの結果は、限られた頭数の雌犬が組み入れられており、犬種及び体重が様々であることを注意深く考慮する必要がある。しかしながら、同じブリーダーの２頭のフレンチ・ブルドッグのみを考えた場合に、同じ差が観察された（図１４Ａ及び１４Ｂ）。
【０１５３】
［０１８０］ブリーダーに、３種類のパラメーター：半透明性、量及び最終的な質を使用して、授乳中の雌犬由来の乳汁の官能分析を行ってもらった（図１５Ａ〜１５Ｃ及び１６）。乳汁の質は、食餌Ａを与えた授乳雌犬のブリーダーにより良好に評価された。
【０１５４】
［０１８１］授乳雌犬における乳タンパク質を決定するため、３点の異なる時点でブリーダーに乳汁をサンプリングしてもらった（第１週目、授乳中期及び授乳後期）。図１７に示すとおり、食餌Ａを与えた授乳雌犬ではタンパク質含量が高かった。
【０１５５】
［０１８２］同じブリーダーハウスの２頭のフレンチ・ブルドッグのみに焦点を当てたとき、乳タンパク質含量において明らかに差が観察された。図１８にみられるとおり、食餌Ａを与えた授乳中の雌のフレンチ・ブルドッグは高レベルのタンパク質を含む乳を生産したのに対し、食餌Ｂを与えた授乳中の雌のフレンチ・ブルドッグは、公開されているデータ、すなわち授乳中の１０頭のビーグル犬により生産された乳タンパク質の範囲６．７％〜９．６％にタンパク質含量が従う乳を生産した。食餌Ａを与えたフレンチ・ブルドッグではタンパク質含量が高かったことは、子犬の発育速度の早さを説明し得た。
【０１５６】
［０１８３］図１９に示すとおり、食餌Ａを与えた雌犬において平均的な乳アミノ酸プロファイルは、食餌Ｂを与えた雌犬におけるプロファイルとは有意に異なっており、１４％スラリーを与えた雌犬では、複数種のアミノ酸のレベルが高かった。乳汁中のアミノ酸パターンと食餌中のアミノ酸パターンとに相関があることは、食餌アミノ酸の利用性についての間接的なサインである。図２０Ａ〜２０Ｃに示すとおり、様々な授乳期間で乳と食餌Ａとの間の相関が高い（０．９４〜０．９６）ことから、食餌由来のアミノ酸の利用性が高いことが示唆される。食餌性アミノ酸プロファイルが類似していることから、同じ食餌性アミノ酸含量では、乳アミノ酸含量が高くなることにより説明されるとおり、食餌Ａは食餌Ｂよりも高品質な乳汁を促進するにあたって高効率であった。これらの相関により、家禽肉粉と比較してスラリー中のタンパク質が高品質であること、及びアミノ酸利用性が良好であることを示す、第１の試験の結果（実施例１）が支持される。
【０１５７】
［０１８４］結論
［０１８５］この第３の試験により、肉スラリーを配合されたドッグフードは、スラリーを配合していない食餌よりも栄養性能が良好であることが確認された。長期摂食試験の実施中、スラリーベースの食餌は、乳汁生産の量及び質、授乳中の犬における体重維持並びに哺乳している子犬の良好な発育速度の観点で良好な性能の促進を示した。これらの効果は、ほぼ確実にリノール酸及び必須アミノ酸の両方の利用性の高さによるものである。
【０１５８】
［０１８６］本明細書に記載された、本好ましい実施形態に対する様々な変更及び修正が、当業者には明らかであることを理解されたい。このような変更及び修正は、本発明の主題の主旨及び範囲から逸脱することなく、かつ意図される利点を損なうことなく、行うことができる。したがって、このような変更及び修正は、添付の特許請求の範囲に包含されることが意図される。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2018512843.tif 000023
【図８】
2018512843.tif 000024
【図９】
2018512843.tif 000025
【図１０Ａ】
2018512843.tif 000026
【図１０Ｂ】
2018512843.tif 000027
【図１１】
2018512843.tif 000028
【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
2018512843.tif 000030
【図１３】
2018512843.tif 000031
【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５Ａ】
2018512843.tif 000034
【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１６】
2018512843.tif 000037
【図１７】
2018512843.tif 000038
【図１８】
2018512843.tif 000039
【図１９】
2018512843.tif 000040
【図２０Ａ】
2018512843.tif 000041
【図２０Ｂ】
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【図２０Ｃ】
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【国際調査報告】
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2018512843.tif 000045
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