(57)【要約】  いくつかの実施形態は、自閉スペクトラム症（ＡＳＤ）及びてんかんのうちの１つ以上の治療を必要とする対象におけるＡＳＤ及びてんかんのうちの１つ以上の治療において使用するためのプロバイオティクスを含む。前記プロバイオティクスはバクテロイデス属細菌（例えば、Ｂ．フラジリス）を含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、行動症状と任意で使用される遺伝子マーカーとの組み合わせに基づいて、前記対象がＡＳＤ又はてんかんの治療を必要としていることを特定する。治療後、前記対象において１つ以上のＡＳＤ関連行動が改善される。
2018502056.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
自閉スペクトラム症（ＡＳＤ）、てんかん、又は皮質形成異常による焦点性てんかんを有する対象における行動機能を改善する方法であって、１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項２】
前記対象の試料において、contactin associated protein-like 2（ＣＮＴＮＡＰ２）及びdisrupted in schizophrenia 1（Ｄｉｓｃ１）のうちの少なくとも１つの機能喪失の有無を検出すること；並びに
前記対象がＣＮＴＮＡＰ２及びＤｉｓｃ１のうちの少なくとも１つの機能喪失を有している場合に、１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量を前記対象に投与すること
をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量がＢ．フラジリス（B.fragilis）を含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量が、Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン（B.thetaiotaomicron）、Ｂ．ブルガタス（B.vulgatus）又はこれらの２種若しくは３種の混合物を含む、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記改善される行動機能が、言語理解、発語、社交性、コミュニケーション、感覚運動ゲーティング、不安、及び反復行動の少なくとも１つを含む、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記改善される行動機能が、不安、感覚運動ゲーティング、及び社交性の少なくとも１つを含む、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記対象に投与される単一の有効成分が、実質的に、１種以上のバクテロイデス属細菌からなる、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量が組成物中に含まれており、該組成物が前記１種以上のバクテロイデス属細菌以外の細菌を実質的に含んでいない、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出が、ＣＮＴＮＡＰ２タンパク質又はＤｉｓｃ１タンパク質をコードする遺伝子のアレルを検出することを含む、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出が、ＣＮＴＮＡＰ２ポリペプチド又はＤｉｓｃ１ポリペプチドの有無を検出することを含む、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出を、前記対象の試料に対して行う、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出を、前記対象に対してインビボで行う、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出が、ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１をコードする遺伝子の少なくとも一部の欠失を検出することを含む、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記対象が、不安、自閉スペクトラム症（ＡＳＤ）、又は１つ以上のＡＳＤの症状を伴う病的状態を有している、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記１種以上バクテロイデス属細菌の有効量が前記対象に経口投与される、請求項１〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
キットであって、
組成物と、核酸及び抗体の少なくとも１つとを含み、
前記組成物が、１種以上のバクテロイデス属細菌を含み、ヒト対象への投与に適していること；
前記核酸が、contactin associated protein-like 2（ＣＮＴＮＡＰ２）をコードする遺伝子又はdisrupted in schizophrenia 1（Ｄｉｓｃ１）をコードする遺伝子に実質的に相補的であること；及び
前記抗体が、ＣＮＴＮＡＰ２ポリペプチド又はＤｉｓｃ１ポリペプチドに特異的に結合すること
を特徴とするキット。
【請求項１７】
前記組成物が経口投与に適している、請求項１６に記載のキット。
【請求項１８】
前記１種以上のバクテロイデス属細菌がＢ．フラジリスを含む、請求項１６又は１７に記載のキット。
【請求項１９】
前記組成物が実質的に、１種以上のバクテロイデス属細菌からなる、請求項１６〜１８のいずれかに記載のキット。
【請求項２０】
前記組成物がＢ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン、及びＢ．ブルガタス以外の細菌を実質的に含んでいない、請求項１６〜１９のいずれかに記載のキット。
【請求項２１】
前記組成物がＢ．フラジリス以外の細菌を実質的に含んでいない、請求項１６〜２０のいずれかに記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照 
本出願は２０１４年１０月３０日に出願された米国仮出願第６２／０７２，９１７号の利益を主張するものであり、その内容全体が参照により本明細書に援用される。
【０００２】
連邦政府資金による研究開発の記載
本発明は、米陸軍によって供与された助成金番号Ｗ８１ＸＷＨ−１１−１−０５１５並びに米国国立衛生研究所によって供与された助成金番号ＧＭ０９９５３５、ＮＳ０７４３７４及びＭＨ０９０７４９に基づく政府の支援を得てなされたものである。米国政府は、本発明に対して一定の権利を有する。
【０００３】
配列表の参照
本出願は、CALTE113WOSEQUENCE.TXTのファイル名で２０１５年１０月２７日に作成された556,368バイトのサイズの電子形式の配列表とともに出願されたものである。この電子形式の配列表に記載された情報は、参照によりその全体が本明細書に援用される。
【背景技術】
【０００４】
自閉スペクトル症（ＡＳＤ）は、反復行動、社会性障害及びコミュニケーション障害を伴う重篤な疾患となりうる。米国のＡＳＤ患者数は推定１００万人である。ここ数十年にわたってＡＳＤの確定診断件数は憂慮されるほど増加しており、公衆衛生上の大きな懸念として認められている。遺伝的危険因子及び環境的危険因子がいずれもＡＳＤの一因であることを支持する意見が増えてきている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
分野
本明細書の実施形態のいくつかは、概してプロバイオティクス組成物に関し、このプロバイオティクス組成物は、自閉スペクトラム症（ＡＳＤ）の症状及び／又はてんかんの症状を治療するために使用することができる。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本明細書の実施形態のいくつかによると、自閉症、てんかん、又は皮質形成異常による焦点性てんかんを有する対象において行動機能を改善する方法が提供される。前記方法は、自閉スペクトラム症（ＡＳＤ）、てんかん、又は皮質形成異常による焦点性てんかんを有する前記対象に１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量を投与することを含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象の試料において、contactin associated protein-like 2（ＣＮＴＮＡＰ２）及びdisrupted in schizophrenia 1（Ｄｉｓｃ１）のうちの少なくとも１つの機能喪失の有無を検出することをさらに含む。前記方法は、前記対象がＣＮＴＮＡＰ２及びＤｉｓｃ１のうちの少なくとも１つの機能喪失を有している場合に、１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量を前記対象に投与することをさらに含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量はＢ．フラジリス（B.fragilis）を含む。いくつかの実施形態において、１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量は、Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン（B.thetaiotaomicron）、Ｂ．ブルガタス（B.vulgatus）又はこれらの２種若しくは３種の混合物を含む。いくつかの実施形態において、改善される前記行動機能は、言語理解、発語、社交性、コミュニケーション、感覚運動ゲーティング、不安、及び反復行動の少なくとも１つを含む。いくつかの実施形態において、改善される前記行動機能は、不安、感覚運動ゲーティング、及び社交性の少なくとも１つを含む。いくつかの実施形態において、前記方法において前記対象に投与される単一の有効成分は、実質的に、１種以上のバクテロイデス属細菌からなる。いくつかの実施形態において、前記１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量は組成物中に含まれており、該組成物は前記１種以上のバクテロイデス属細菌以外の細菌を実質的に含んでいない。いくつかの実施形態において、ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出は、ＣＮＴＮＡＰ２タンパク質又はＤｉｓｃ１タンパク質をコードする遺伝子のアレルを検出することを含む。いくつかの実施形態において、ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出は、ＣＮＴＮＡＰ２ポリペプチド又はＤｉｓｃ１ポリペプチドの有無を検出することを含む。いくつかの実施形態において、ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出は前記対象の試料に対して行われる。いくつかの実施形態において、ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出は前記対象に対してインビボで行われる。いくつかの実施形態において、ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１の機能喪失の有無の検出は、ＣＮＴＮＡＰ２又はＤｉｓｃ１をコードする遺伝子の少なくとも一部の欠失を検出することを含む。いくつかの実施形態において、前記対象は、不安、自閉スペクトラム症（ＡＳＤ）、又は１つ以上のＡＳＤの症状を伴う病的状態を有している。いくつかの実施形態において、前記１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量は、前記対象に経口投与される。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がＡＳＤ、てんかん、又は皮質形成異常による焦点性てんかんの少なくとも１つを有していると特定することをさらに���む。いくつかの実施形態において、前記１種以上のバクテロイデス属細菌の有効量は、少なくとも約１０７コロニー形成単位（ｃｆｕ）を含み、例えば、少なくとも約１０７ｃｆｕ、少なくとも約１０８ｃｆｕ、少なくとも約１０９ｃｆｕ、少なくとも約１０１０ｃｆｕ、少なくとも約１０１１ｃｆｕ、又は少なくとも約１０１２ｃｆｕを含む。
【０００７】
本明細書の実施形態のいくつかによると、キットが提供される。前記キットは、１種以上のバクテロイデス属細菌を含む組成物を含んでいてもよく、該組成物はヒト対象への投与に適している。前記キットは、核酸及び抗体の少なくとも１つを含んでいてもよく、該核酸は、contactin associated protein-like 2（ＣＮＴＮＡＰ２）をコードする遺伝子又はdisrupted in schizophrenia 1（Ｄｉｓｃ１）をコードする遺伝子に実質的に相補的な核酸であり、該抗体は、ＣＮＴＮＡＰ２ポリペプチド又はＤｉｓｃ１ポリペプチドに特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態において、前記組成物は経口投与に適している。いくつかの実施形態において、前記１種以上のバクテロイデス属細菌はＢ．フラジリスを含む。いくつかの実施形態において、前記組成物は実質的に、１種以上のバクテロイデス属細菌からなる。いくつかの実施形態において、前記組成物は、Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン、及びＢ．ブルガタス以外の細菌を実質的に含んでいない。いくつかの実施形態において、前記組成物はＢ．フラジリス以外の細菌を実質的に含んでいない。いくつかの実施形態において、前記組成物は、少なくとも約１０７コロニー形成単位（ｃｆｕ）のバクテロイデス属細菌を含み、例えば、少なくとも約１０７ｃｆｕのバクテロイデス属細菌、少なくとも約１０８ｃｆｕのバクテロイデス属細菌、少なくとも約１０９ｃｆｕのバクテロイデス属細菌、少なくとも約１０１０ｃｆｕのバクテロイデス属細菌、少なくとも約１０１１ｃｆｕのバクテロイデス属細菌、又は少なくとも約１０１２ｃｆｕのバクテロイデス属細菌を含む。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１Ａ〜Ｆは、本明細書の実施形態のいくつかに記載されているように、ＢＴＢＲマウス及びＣＮＴＮＡＰ２マウスにおけるＡＳＤ関連行動のいくつかがＢ．フラジリスにより改善されることを示した一連のグラフである。本明細書の実施形態のいくつかに記載されているように、オープンフィールドへの侵入回数（図１Ａ）、ビー玉隠し（図１Ｂ）、プレパルス・インヒビション（ＰＰＩ）（図１Ｃ）、オープンフィールドにおける移動距離（ｃｍ）（図１Ｄ）、オープンフィールドにおける移動速度（ｃｍ／ｓ）（図１Ｅ）、及びグルーミングテスト（図１Ｆ）について、Ｂ．フラジリスで処置されたマウス及び対照群マウスを評価したデータを示したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下の詳細な説明では、本明細書の一部を構成する添付の図面を参照する。図面では、本明細書中で特に記載しない限り、通常、類似の記号は類似の要素を示す。詳細な説明、図面及び請求項において説明される例示的な実施形態は本発明を限定するものではない。本明細書に記載の主題の思想又は範囲を逸脱しない限り、他の実施形態を使用し、他の変更を加えてもよい。本明細書において概説され、図面において例示されている本発明による開示の態様を、様々な構成で配置し、置換し、組み合わせ、分離し、かつ設計してもよいことは容易に理解され、これらはいずれも本明細書中に明示的に包含される。
【００１０】
本明細書において、遺伝的危険因子及び環境的危険因子はいずれも、自閉スペクトラム症（ＡＳＤ）の一因となりうると考えられる。本明細書の様々な実施形態によると、特定の危険因子又は複数の症状の併発を有する対象におけるＡＳＤの症状を治療又は予防するために、方法、使用、比較及びキットが提供される。さらに、特定の遺伝子マーカーを有し、かつ／又は複数の症状を併発している対象は、ＡＳＤの症状及び／又はてんかんの症状の治療を必要としていると特定することができ、さらに、本明細書の実施形態のいくつかによるプロバイオティクスによる治療を受ける候補者として特定することができると考えられる。contactin associated protein-like 2（ＣＮＴＮＡＰ２）及びdisrupted in schizophrenia 1（ＤＩＳＣ１）のうちの１つ以上に変異を有していると特定された対象は、例えばＡＳＤ又はてんかん等の神経発達症群のリスクを有しうる。バクテロイデス属細菌を含むプロバイオティクスの有効量を前記対象に投与することによって、ＡＳＤの症状及び／又はてんかんの症状を治療又は予防することができる。
【００１１】
大規模疫学調査において、妊娠中に重篤な感染症に罹患した母体から生まれた子供ではＡＳＤの発症率が高いことが実証されたことから、母体における感染症はＡＳＤの重要な環境的危険因子である。また、妊娠中の母体におけるサイトカイン及びケモカインの血清中濃度及び羊水中濃度の上昇においても、類似の関連性が認められた。自閉症を有する対象から得られた髄液及び脳の分析においては、対照群と比較して、小膠細胞の活性化及び炎症促進性サイトカインの上昇が見られ、さらに、脳及び末梢における免疫関連遺伝子の調節異常が見られる。さらに、ＡＳＤを有する対象集団の大部分は、便秘、腹痛、免疫活性化及び消化管バリアの機能不全（「腸管壁浸漏症候群」）等の消化管（ＧＩ）異常を有する。これらの非神経学的特徴と一致して、近年の研究では、ＡＳＤを有する子供の腸内細菌（腸内マイクロバイオーム）の組成が対照群と比較して変化しており、消化管合併症を有するＡＳＤ対象において増悪するという特徴が示されている。以上のように、様々な証拠から、ＡＳＤにおいて腸と免疫系と脳との間に相関が存在しうることが示唆されている。
【００１２】
本明細書においては、マウス又は非ヒト霊長類の母体の免疫系を活性化することによって、ＡＳＤにおいて見られる主要な行動障害及び神経異常を示す仔が得られることが示されている。特定の理論に縛られるものではないが、母体の免疫活性化（ＭＩＡ）によって、仔マウスのマイクロバイオームが変化すると考えられる。本明細書の実施形態のいくつかによると、ヒトのマイクロバイオーム由来のプロバイオティクスであるバクテロイデス・フラジリス（Bacteroides fragilis）によって、マウスモデルにおける免疫活性化、ＡＳＤ関連行動障害、及び／又は皮質形成異常による焦点性てんかんを改善することができる。特定の理論に縛られるものではないが、腸内細菌は、ＡＳＤに関連した、遺伝子と環境との相互作用の調節に重要な役割を果たしていると考えられる。
【００１３】
ヒトの候補遺伝子に基づいたＡＳＤマウスモデルがいくつか知られているが、ＡＳＤにおけるcontactin associated protein-like 2（ＣＮＴＮＡＰ２）遺伝子の一般的なバリアント及びまれなバリアントの役割が、連関解析、連鎖解析、遺伝子発現解析、及び画像データによって明らかとなっていることから、ＣＮＴＮＡＰ２ノックアウトマウスは特に注目されている。ＡＳＤにおいて言語障害のリスクを上昇させるＣＮＴＮＡＰ２バリアントは、ヒト対象の脳内における機能的結合性の異常を引き起こすことに注目されたい。さらに、ＣＮＴＮＡＰ２ノックアウトマウスは、皮質形成異常による焦点性てんかんに特徴的な行動も示す。ＢＴＢＲ  Ｔ＋  ｔｆｌ  Ｊモデルは、ＡＳＤに見られる主要な３つの行動を示す近交系であるため、このモデルを使用することによって、ＣＮＴＮＡＰ２−／−マウスによる実験を補完することができる。さらに、ＢＴＢＲマウスは自然免疫応答が増強されていることが示されている。ＢＴＢＲモデルでは、ＤＩＳＣ１遺伝子の機能が喪失している。
【００１４】
ＣＮＴＮＡＰ２マウス及びＢＴＢＲマウスにおいて、Ｂ．フラジリスを用いた処置を試験した。Ｂ．フラジリスを用いた処置によって、ＣＮＴＮＡＰ２−／−マウスにおける過活動及びセルフグルーミング（反復行動）の増加が改善されることを示す（図１Ｄ〜Ｆ）。さらに、Ｂ．フラジリスは、ＢＴＢＲマウスにおける不安、反復行動及び驚愕反応を改善する（図１Ａ〜Ｃ）。
【００１５】
図１Ａ〜Ｃに示すように、ＢＴＢＲ自閉症モデルマウスにバクテロイデス属細菌であるＢ．フラジリスを投与することによって、不安様行動が改善され（フィールドの中心への侵入回数により測定；図１Ａ参照）、反復行動が改善され（ビー玉隠しにより測定；図１Ｂ参照）、感覚運動ゲーティング障害が改善される（プレパルス・インヒビションテストにより測定；図１Ｃ参照）。したがって、本明細書の実施形態のいくつかにおいて、ＢＴＢＲモデルに一致する症状及び／又は遺伝的背景を有するヒト対象にバクテロイデス属細菌を投与することを含む方法及び使用によって、ＡＳＤの症状を治療及び／又は予防することができる。ＢＴＢＲモデルにおける行動の改善と同様に、いくつかの実施形態において、対象は感覚運動ゲーティング障害、社交性障害、及び／又は不安を有していると特定され、バクテロイデス属細菌を含むプロバイオティクスの有効量、バクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスの有効量、又は実質的にバクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスの有効量を投与することによって前記行動が治療又は改善される。いくつかの実施形態において、対象は、ＢＴＢＲの遺伝的背景に一致する変異、例えば、ＤＩＳＣ１の変異を有していると特定され、バクテロイデス属細菌を含むプロバイオティクスの有効量、バクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスの有効量、又は実質的にバクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスの有効量を投与することによって、ＡＳＤ行動が治療又は改善される。
【００１６】
図１Ｄ〜Ｆに示すように、ＣＮＴＮＡＰ２自閉症モデルマウスにバクテロイデス属細菌であるＢ．フラジリスを投与することによって、オープンフィールドにおける移動距離（図１Ｄ）及びオープンフィールドにおける移動速度（図１Ｅ）で測定されたように、過活動行動が改善され、セルフグルーミングテスト（図１Ｆ参照）で測定されたように、反復行動が改善される。したがって、本明細書の実施形態のいくつかにおいて、バクテロイデス属細菌を含むプロバイオティクス、バクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクス、又は実質的にバクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスを、ＣＮＴＮＡＰ２モデルと一致する症状及び／又は遺伝的背景を有するヒト対象に投与することを含む方法及び使用によって、ＡＳＤの症状及び／又はてんかんの症状（例えば、皮質形成異常による焦点性てんかんの症状）を治療及び／又は予防することができる。いくつかの実施形態において、ＣＮＴＮＡＰ２モデルにおける行動の改善と同様に、対象は、コミュニケーション行動障害（例えば、発語障害及び／又は言語理解障害、社交性障害、及び／又はコミュニケーション障害）、感覚運動ゲーティング機能障害、不安行動の増加、過活動行動及び／又は反復行動のうちの少なくとも１つの行動障害を有していると特定される。バクテロイデス属細菌を含むプロバイオティクスの有効量、バクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスの有効量、又は実質的にバクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスの有効量を前記対象に投与することによって、前記行動を治療又は改善することができる。いくつかの実施形態において、対象はＣＮＴＮＡＰ２に変異を有していると特定され、バクテロイデス属細菌を含むプロバイオティクスの有効量、バクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスの有効量、又は実質的にバクテロイデス属細菌からなるプロバイオティクスの有効量を投与することによって、ＣＮＴＮＡＰ２を危険因子とする少なくとも１つの行動が改善又は予防される。前記対象は、ＣＮＴＮＡＰにホモ接合型の機能喪失変異を有していると特定されてもよい。前記対象は、ＣＮＴＮＡＰにヘテロ接合型の機能喪失変異を有していると特定されてもよい。前記プロバイオティクスはエンテロコッカス属細菌をさらに含んでいてもよい。
【００１７】
ホモ・サピエンスのcontactin-associated protein-like 2（ＣＮＴＮＡＰ２）遺伝子は、脊椎動物の神経系において細胞接着分子及び受容体として機能するニューレキシンファミリーのメンバーとして同定される産物をコードする。ホモ・サピエンスのＣＮＴＮＡＰ２遺伝子は、第７染色体上の７ｑ３５に位置する２Ｍｂに及ぶＤＮＡとして同定される。ホモ・サピエンスのＣＮＴＮＡＰ２遺伝子のコード配列（ＣＤＳ）の一部は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号：ＡＨ０１０７２３において利用可能であり、これに対応する参照配列を配列番号１で示す。いくつかの実施形態において、対象は、ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子に機能喪失変異を有していると特定される。本明細書において、「機能喪失」変異という用語は広い意味で使用され、ハイポモルフ変異、ヌル変異、及びドミナントネガティブ変異を包含する。本明細書の実施形態のいくつかによると、ＣＮＴＮＡＰ２における「機能喪失変異」としては、ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子産物の機能を阻害する点変異、ＣＮＴＮＡＰ２の発現を低減又は喪失させるプロモーター又はエンハンサー等の制御エレメントの変異、ＣＮＴＮＡＰ２全体若しくはその一部の欠失、又はこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１８】
ホモ・サピエンスの「disrupted in schizophrenia 1」（ＤＩＳＣ１）遺伝子は、細胞核、細胞質及びミトコンドリア内に存在し、かつ複数のコイルドコイル構造を有するタンパク質をコードする遺伝子として同定された。ＤＩＳＣ１によってコードされる前記タンパク質は、他のタンパク質との相互作用を介した神経突起伸長及び大脳皮質形成に関与する。ＤＩＳＣ１は、統合失調症、うつ病及び双極性障害等の家族性行動障害に関連しており、ニューロンの機能を含む数多くの細胞機能に関与するタンパク質をコードし、ＢＴＢＲモデルにおいて変異している。ホモ・サピエンスのＤＩＳＣ１遺伝子は、第１染色体上の１ｑ４２．１に位置する遺伝子として同定される。ＤＩＳＣ１の配列は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号：ＮＧ＿０１１６８１において利用可能である。ＤＩＳＣ１の参照配列は、配列番号２で示す。本明細書の実施形態によると、ＤＩＳＣ１における「機能喪失変異」としては、ＤＩＳＣ１遺伝子産物の機能を阻害する点変異、ＤＩＳＣ１の発現を低減又は喪失させるプロモーター又はエンハンサー等の制御エレメントの変異、ＤＩＳＣ１全体若しくはその一部の欠失、ＤＩＳＣ１の遺伝子座を阻害する染色体転座（例えばｔ（１；１１）（ｑ４２．１；ｑ１４．３）等）、又はこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１９】
本明細書に記載した前記遺伝子のいずれかが様々な配列を有すること、すなわち遺伝子多型が存在することは、当業者に公知の方法、例えば、ポリメラーゼ連鎖反応、核酸シークエンシング、マイクロアレイ分析、核酸プローブに対する親和性、インサイチュハイブリダイゼーション等を用いて確認することができる。いくつかの実施形態において、前記遺伝子のいずれかにおける遺伝子多型の有無は、例えば、野生型の遺伝子産物に特異的な抗体、又は野生型の遺伝子産物の変異アイソフォームに特異的な抗体等を用いて、野生型の遺伝子産物の有無を特定することによって確認することができる。
【００２０】
用語の定義
特に定義されない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、本発明の開示が属する分野の当業者によって通常理解される意味を有する。例えば、Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 2nd ed., J. Wiley & Sons (New York, NY 1994); Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Springs Harbor Press (Cold Springs Harbor, NY 1989)を参照されたい。本発明を開示することを目的として、以下の用語は以下の定義を有する。
【００２１】
本明細書において、「対象」は、哺乳動物等の脊椎動物である。「哺乳動物」は哺乳綱に属する個体と定義され、ヒト、家畜及び農場動物、動物園の飼育動物、競技用動物並びに愛玩動物、例えばヒツジ、イヌ、ウマ、ネコ又はウシが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、前記対象はヒトである。いくつかの実施形態において、前記対象は非ヒト霊長類である。
【００２２】
本明細書において、「状態／障害／症状」又は「行動異常」は、対象が呈する症状を指す。「状態／障害／症状」又は「行動異常」としては、不安、脆弱Ｘ症候群、Ｒｅｔｔ症候群、結節硬化、強迫性障害、注意欠陥障害、統合失調症、てんかん（例えば、皮質形成異常による焦点性てんかん）、自閉症（古典的自閉症）、アスペルガー障害（アスペルガー症候群）、特定不能の広汎性発達障害（ＰＤＤ−ＮＯＳ）、小児期崩壊性障害（ＣＤＤ）、又は１つ以上のＡＳＤの症状を伴う病的状態が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
本明細書において、「治療を必要とする対象」は、上述した行動障害／症状の１つ以上を呈する対象、又は上述した行動障害／症状の１つ以上を有している対象を指す。いくつかの実施形態において、治療を必要とする対象は、統合失調症、ＡＳＤ、てんかん（例えば、皮質形成異常による焦点性てんかん）又はＡＳＤ若しくはてんかんに伴う消化管病態又は免疫学的病態（例えば、腸管壁浸漏症候群）のうちの少なくとも１つを有している。適切な資格を有する者であれば、標準的な行動試験プロトコル／ガイドラインを使用して、治療を必要とする上述したような個体を特定することができる。同じ行動試験プロトコル／ガイドラインを使用して、前記個体の障害及び／又は症状に改善がみられるどうかを判定することもできる。本明細書において、「感覚運動ゲーティング」は、無関係かつ／又は侵入してくる感覚刺激を排除する能力を指す。そのため、感覚運動ゲーティング機能に障害を有する対象は、刺激を排除する能力が損なわれている可能性があり、かつ／又は刺激が多い環境に対処することが難しい可能性がある。感覚運動ゲーティング機能は、例えば、プレパルス・インヒビション（ＰＰＩ）テストで評価できる。本明細書の実施形態のいくつかによると、対象は、感覚運動ゲーティングの改善を必要としていると特定され、例えば、周囲の音や光等の無関係な感覚刺激の排除の改善を必要としていると特定される。本明細書において「コミュニケーション行動」は、音声又は非音声の社会的コミュニケーションを含む、コミュニケーション、言語理解及び発語、並びに社交性を指す。いくつかの実施形態において、対象は、社交性障害に基づいて、コミュニケーション行動障害を有していると特定される。いくつかの実施形態において、対象は、言語理解障害及び／又は発語障害に基づいて、コミュニケーション行動障害を有していると特定される。
【００２４】
本明細書において、「行動機能の改善」は、ＡＳＤ、統合失調症、又は１つ以上のＡＳＤの症状若しくは統合失調症の症状を伴う病的状態を有する個体に認められる１つ以上の行動障害、行動症状及び／又は行動異常を予防すること、又はそれらの重症度若しくは頻度を任意の程度まで低減することを指す。行動症状としては、コミュニケーション障害、社交性障害、言語理解障害及び／又は発語障害、感覚運動ゲーティング機能障害、反復行動、並びに不安の増加が挙げられるが、これらに限定されない。行動機能の改善は、処置を受けている個体自身、又は別の者（医療従事者等）によって観察される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の、バクテロイデス属細菌及び／又はエンテロコッカス属細菌を有効量で含むプロバイオティクスは、前記対象に投与される。いくつかの実施形態において、前記プロバイオティクスの投与により、前記対象における感覚運動ゲーティング機能が改善される。いくつかの実施形態において、前記プロバイオティクスの投与により、前記対象におけるコミュニケーション行動が改善される。改善できるコミュニケーション行動としては、コミュニケーション、社交性、並びに言語理解及び／又は発語が挙げられる。いくつかの実施形態において、前記対象における不安行動は、前記プロバイオティクスを投与することによって改善される。いくつかの実施形態において、前記対象における反復行動は、前記プロバイオティクスを投与することによって改善される。いくつかの実施形態において、前記対象における感覚運動ゲーティング機能及びコミュニケーション行動は、前記プロバイオティクスを投与することによって改善される。
【００２５】
本明細書において、「治療」又は「処置」は、対象、特にＡＳＤ、統合失調症、又は１つ以上のＡＳＤの症状若しくは統合失調症の症状を伴う病的状態を有している対象に認められる疾患、障害又は生理学的状態に応じて行われる臨床的介入を指す。治療の目的には、症状の軽減又は予防、疾患、障害若しくは状態の進行又は悪化の遅延又は停止、及び疾患、障害又は状態の寛解の１つ以上が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、「治療」又は「処置」は、治療的処置及び予防的措置を指す。治療を必要とする対象には、疾患、障害又は望ましくない生理学的状態に既に罹患している対象、及び疾患、障害又は望ましくない生理学的状態を予防する必要がある対象が含まれる。例えば、いくつかの実施形態において、治療によって前記対象の行動機能を改善することができ、改善される行動機能としては、感覚運動ゲーティング機能障害及び／又はコミュニケーション行動障害等のＡＳＤ関連行動が挙げられる。本明細書において、「予防」は、このような行動症状を将来的に発症しうる個体の負担を低減する任意の作用を指す。「予防」は、一次予防レベル、二次予防レベル及び三次予防レベルで行われ、ａ）一次予防では、症状／障害／状態の発生を避け；ｂ）二次予防活動は、状態／障害／症状の早期治療を目標として、状態／障害／症状の進行及び症状の発生を予防するための介入の機会を増やし；ｃ）三次予防では、例えば機能を回復させることによって、かつ／又は任意の状態／障害／症状若しくは関連する合併症を低減させることによって、既に確立された状態／障害／症状による悪影響を低減する。
【００２６】
「薬学的に許容される」担体は、用いられる用量及び濃度において、該担体の曝露を受ける細胞又は哺乳動物に無毒な担体である。本発明の方法、使用、組成物及びキットにおける「薬学的に許容される」担体としては、例えば経口適用又は注射等の選択された適用方法に適しており、かつ従来の医薬用製剤の形態（例えば錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の固形製剤、及び溶剤、乳剤、懸濁剤等の液体製剤）で投与される、有機又は無機の固体賦形剤又は液体賦形剤が挙げられるが、これらに限定されない。生理学的に許容される担体は、リン酸緩衝液又はクエン酸緩衝液等のｐＨ緩衝水溶液であることが多い。前記生理学的に許容される担体は、抗酸化剤（アスコルビン酸等）、低分子量ポリペプチド（約１０残基未満）、タンパク質（血清アルブミン、ゼラチン、免疫グロブリン等）、親水性ポリマー（ポリビニルピロリドン等）、アミノ酸、炭水化物（グルコース、マンノース又はデキストリン等）、キレート剤（ＥＤＴＡ等）、糖アルコール（マンニトール又はソルビトール等）、塩形成対イオン（ナトリウム等）、非イオン性界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ（商標）界面活性剤、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びＰｌｕｒｏｎｉｃ（商標）界面活性剤等）の１つ以上を含んでいてもよい。補助剤、安定剤、乳化剤、滑沢剤、結合剤、ｐＨ調整剤、等張剤及び他の従来の添加剤を、前記担体に加えてもよい。
【００２７】
本発明の方法、使用、組成物及びキットにおける薬学的に許容される担体又は薬学的に適切な担体としては、障害を起こした消化管に有益であることが知られているその他の化合物（例えばビタミンＣ、ビタミンＥ、セレン又は亜鉛等の抗酸化剤）；又は食品組成物が挙げられる。食品組成物としては、ミルク、ヨーグルト、凝乳（カード）、チーズ、発酵乳、ミルクベースの発酵製品、アイスクリーム、発酵させた穀類ベースの製品、粉ミルク、乳児用調合乳、錠剤、細菌懸濁液、乾燥状態の経口補助食品又は湿潤状態の経口補助食品が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２８】
本明細書において、「プロバイオティクス」は、生きている微生物を指し、適量で投与することによって宿主に健康上の利益がもたらされるものである。本発明の方法、使用、組成物及びキットにおけるプロバイオティクスは、食品及び栄養補助食品（例えば、カプセル剤、錠剤、散剤及び液剤が挙げられるが、これらに限定されない）の形態で利用可能である。プロバイオティクスを含む食品としては、例えばヨーグルト、発酵乳及び未発酵乳等の乳製品、スムージー、バター、クリーム、ホムス、紅茶キノコ、サラダドレッシング、味噌、テンペ、栄養バー、並びに一部のジュース及び大豆飲料が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは単一の微生物を含む。いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは微生物の組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは単一の組成物を含む。いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは２種以上の組成物を含み、これらの組成物は共に使用してもよく、例えば、同時に投与してもよく、又は連続して投与してもよい。プロバイオティクスは「有効成分」として機能してもよく、又は対象への投与に使用される単一の組成物又は複数の組成物として機能してもよいことには注目すべきである。すなわち、本発明の方法、使用及び／又は単一の組成物若しくは（別々又は同時に用いられる）複数の組成物は、対象における少なくとも１つの行動を改善するためのプロバイオティクスの有効量を含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、前記プロバイオティクスは前記対象へ投与するための単一の有効成分である。いくつかの実施形態において、前記対象へ投与するための「単一の有効成分」であるプロバイオティクスは、該プロバイオティクス以外の細菌、抗生物質、及び薬物を実質的に含まないか、又は含まない組成物、方法又は使用として提供されてもよい。前記プロバイオティクスが「単一の」有効成分であっても、前記プロバイオティクスを含む単一の組成物又は複数の組成物は、前記対象の行動には実質的に影響を与えないが前記プロバイオティクスの機能又はその投与にとって有用でありうるさらなる物質（例えば緩衝液、細菌の栄養源、賦形剤、香料及び／又は食品等）を含んでいてもよい。
【００２９】
いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは、（前記プロバイオティクス以外の）細菌、及び／又は薬物若しくは抗生物質を実質的に含まない単一の組成物又は複数の組成物に含まれる。「実質的に含んでいない」又は「実質的に存在しない」は、本発明のプロバイオティクス以外の細菌、薬物、及び／又は抗生物質が微量に存在していてもよいが、これらの細菌、薬物、及び／又は抗生物質は、前記対象に対して目に見える効果を及ぼさないことを指すと解される。
【００３０】
本明細書において、プロバイオティクスの「有効量」は、対象の行動において臨床的に有意な変化を起こすのに十分な量を指す。
【００３１】
本明細書において、「機能性食品」は、（強化食品又は栄養補助食品として）健康に有益な食品を指す。機能性食品は、医療薬物と同じ試験及び規制の対象ではない。
【００３２】
ＡＳＤ及び／又はてんかんの治療のためのプロバイオティクス
特定の理論に縛られるものではないが、ＢＴＢＲマウスモデルは、ＡＳＤの神経病理学的特徴及び行動特徴、例えば、感覚運動ゲーティング障害、不安の増長、及び社交性障害等を示すと考えられる。特定の理論に縛られるものではないが、ＣＮＴＮＡＰ２マウスモデルは、ＡＳＤの神経病理学的特徴及び行動特徴、並びに皮質形成異常によるてんかんを示すと考えられ、例えば、コミュニケーション行動（例えば、社交性、言語理解及び／又は発語、並びにコミュニケーション）の障害、感覚運動ゲーティング障害、及び不安等を示すと考えられる。本明細書において、ヒトの共生細菌であるバクテロイデス・フラジリスを用いてＢＴＢＲマウス及びＣＮＴＮＡＰ２仔マウスを処置することによって、特定の行動障害が改善されることが実証された。したがって、いくつかの実施形態は、プロバイオティクスを用いた、ＡＳＤの症状及び／又はてんかんの症状の治療を含む。さらに、本明細書の実施形態のいくつかによると、バクテロイデス属細菌、及びバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせ（この細菌及び細菌の組み合わせは、ＡＳＤを有するＭＩＡマウスモデルに見られる行動症状に影響を及ぼすことが示されている）は、ＡＳＤの症状及び／又はてんかんの症状（例えば、皮質形成異常による焦点性てんかん）の治療又は予防に有用であると考えられる。
【００３３】
いくつかの実施形態において、前記対象は、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び社交性行動の改善を必要とする（これらの行動は、ＢＴＢＲマウスモデルの行動と一致する点に注目されたい）。プロバイオティクスの有効量は、前記対象への投与を目的として（又は前記対象の治療における使用を目的として）提供され、該プロバイオティクスの有効量は、少なくとも以下の１種を含むか、少なくとも以下の１種からなるか、又は実質的に少なくとも以下の１種からなる：（ａ）バクテロイデス属細菌（例えばＢ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン又はＢ．ブルガタス）；（ｂ）バクテロイデス属細菌（例えばＢ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン又はＢ．ブルガタス）及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス（E. faecilis）、Ｅ．フェシウム（E. faecium）、Ｅ．ヒラエ（E. hirae）、Ｅ．アビウム（E. avium）、Ｅ．デュランス（E. durans）、Ｅ．ガリナラム（E. gallinarum）又はＥ．カセリフラバス（E. casseliflavus））；（ｃ）Ｂ．フラジリス；（ｄ）Ｂ．テタイオタオミクロン；（ｅ）Ｂ．ブルガタス；（ｇ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン；（ｈ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス；（ｉ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス；（ｊ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス；（ｋ）Ｂ．フラジリス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｌ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｍ）Ｂ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｎ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｏ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｐ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｑ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｒ）Ｂ．フラジリス及びＥ．フェカリス；（ｓ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＥ．フェカリス；（ｔ）Ｂ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；（ｕ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン及びＥ．フェカリス；（ｖ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；（ｗ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；又は（ｘ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン、Ｂ．ブルガタス及びＥ．フェカリス。これらの細菌を投与することによって、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び社交性行動を改善することができる。前記対象から得られた試料から、ＢＴＢＲモデルに関連する遺伝子における機能喪失変異、例えば、ＤＩＳＣ１における機能喪失変異等を有することが特定されてもよい。ＤＩＳＣ１における機能喪失変異は、対象が感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び社交性行動の少なくとも１つを発症するリスクがあること、又は対象がこれらの治療を必要としていることを示していると判定されてもよい。前記プロバイオティクスに含まれる細菌以外の細菌を前記対象に投与しなくてもよく、前記プロバイオティクスに含まれる細菌以外の細菌を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象の治療において使用するためのプロバイオティクスは、他の細菌を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。抗生物質を前記対象に投与しなくてもよく、又は抗生物質を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、抗生物質を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。薬物を前記対象に投与しなくてもよく、又は薬物を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、薬物を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。医薬有効成分を前記対象に投与しなくてもよく、又は医薬有効成分を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、医薬有効成分を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。Ｂ．フラジリスは、野生型Ｂ．フラジリス、ポリサッカライドＡを欠損している（ｄＰＳＡ）変異型Ｂ．フラジリス、又は野生型Ｂ．フラジリスとｄＰＳＡのＢ．フラジリスの組み合わせを含んでいてもよい。Ｂ．フラジリスは、野生型Ｂ．フラジリス、ポリサッカライドＡを欠損している（ｄＰＳＡ）変異型Ｂ．フラジリス、又は野生型Ｂ．フラジリスとｄＰＳＡのＢ．フラジリスの組み合わせを含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び社交性行動の改善を必要とする前記対象は、ＡＳＤを有する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるように、前記方法は、前記対象がＡＳＤを有するかどうかを判定することをさらに含む。
【００３４】
いくつかの実施形態において、前記対象は、コミュニケーション行動（言語理解及び／又は発語、社交性、及びコミュニケーションを含む）、感覚運動ゲーティング、不安、及び／又は反復行動の改善を必要とする（これらの行動は、ＣＮＴＮＡＰ２マウスモデルの行動と一致する点に注目されたい）。プロバイオティクスの有効量は、前記対象への投与を目的として（又は前記対象の治療における使用を目的として）提供され、該プロバイオティクスの有効量は、少なくとも以下の１種を含むか、少なくとも以下の１種からなるか、又は実質的に少なくとも以下の１種からなる：（ａ）バクテロイデス属細菌（例えばＢ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン又はＢ．ブルガタス）；（ｂ）バクテロイデス属細菌（例えばＢ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン又はＢ．ブルガタス）及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｃ）Ｂ．フラジリス；（ｄ）Ｂ．テタイオタオミクロン；（ｅ）Ｂ．ブルガタス；（ｇ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン；（ｈ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス；（ｉ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス；（ｊ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス；（ｋ）Ｂ．フラジリス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｌ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｍ）Ｂ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｎ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｏ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｐ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｑ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｒ）Ｂ．フラジリス及びＥ．フェカリス；（ｓ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＥ．フェカリス；（ｔ）Ｂ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；（ｕ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン及びＥ．フェカリス；（ｖ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；（ｗ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；又は（ｘ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン、Ｂ．ブルガタス及びＥ．フェカリス。これらの細菌を投与することによって、コミュニケーション行動、感覚運動ゲーティング障害、不安、及び／又は反復行動を改善することができる。前記対象から得られた試料から、ＣＮＴＮＡＰ２モデルに関連する遺伝子における機能喪失変異、例えば、ＣＮＴＮＡＰ２における機能喪失変異等を有することが特定されてもよい。ＣＮＴＮＡＰ２における機能喪失変異は、対象が感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び社交性行動の少なくとも１つを発症するリスクがあること、又は対象がこれらの治療を必要としていることを示していると判定されてもよい。前記プロバイオティクスに含まれる細菌以外の細菌を前記対象に投与しなくてもよく、前記プロバイオティクスに含まれる細菌以外の細菌を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象の治療において使用するためのプロバイオティクスは、他の細菌を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。抗生物質を前記対象に投与しなくてもよく、又は抗生物質を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、抗生物質を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。薬物を前記対象に投与しなくてもよく、又は薬物を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、薬物を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。医薬有効成分を前記対象に投与しなくてもよく、又は医薬有効成分を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、医薬有効成分を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。Ｂ．フラジリスは、野生型Ｂ．フラジリス、ポリサッカライドＡを欠損している（ｄＰＳＡ）変異型Ｂ．フラジリス、又は野生型Ｂ．フラジリスとｄＰＳＡのＢ．フラジリスの組み合わせを含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、改善の対象となる（かつ前記プロバイオティクスを投与することによって改善される）前記コミュニケーション行動は、言語理解及び／又は発語、社交性、コミュニケーション並びに感覚運動ゲーティングの少なくとも１つを含む。いくつかの実施形態において、コミュニケーション行動、感覚運動ゲーティング、不安、及び／又は反復行動の改善を必要とする前記対象は、ＡＳＤ又はてんかんを有する。いくつかの実施形態において、コミュニケーション行動、感覚運動ゲーティング、不安、及び／又は反復行動の改善を必要とする前記対象は、ＡＳＤを有する。いくつかの実施形態において、コミュニケーション行動、感覚運動ゲーティング、不安、及び／又は反復行動の改善を必要とする前記対象は、てんかんを有する。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がＡＳＤ又はてんかん（例えば、皮質形成異常による焦点性てんかん）を有するかどうかを判定することをさらに含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がＡＳＤを有するかどうかを判定することをさらに含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がてんかん（例えば、皮質形成異常による焦点性てんかん）を有するかどうかを判定することをさらに含む。
【００３５】
いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは、前記の細菌種のいずれか又は前記の細菌種の組み合わせのいずれかを含み、単一のプロバイオティクス組成物の形態で対象に投与するために提供される（又は単一のプロバイオティクス組成物の形態で対象に投与することを目的とする）。いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは、前記の細菌種のいずれか又は前記の細菌種の組み合わせのいずれかを含み、２種以上のプロバイオティクス組成物の形態で対象に投与される（又は２種以上のプロバイオティクス組成物の形態で対象に投与することを目的とする）。例えば、「細菌Ａ及び細菌Ｂ」のプロバイオティクスは、細菌Ａ及び細菌Ｂを含む単一の組成物の形態で投与してもよく、あるいは細菌Ａを含む第１の組成物と細菌Ｂを含む第２の組成物の組み合わせとして投与してもよい。いくつかの実施形態において、第１の組成物及び第２の組成物は同時に投与される。いくつかの実施形態において、第１の組成物及び第２の組成物は別々に投与される。
【００３６】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のバクテロイデス属細菌の組み合わせを含むプロバイオティクスは、第１のバクテロイデス属細菌又は第１のバクテロイデス属細菌の組み合わせを含む第１の組成物、及び本明細書に記載の第２のバクテロイデス属細菌又は第２のバクテロイデス属細菌の組み合わせを含む第２の組成物として提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のエンテロコッカス属細菌とバクテロイデス属細菌の組み合わせを含むプロバイオティクスは、エンテロコッカス属細菌を含む第１の組成物、及び本明細書に記載のバクテロイデス属細菌又はバクテロイデス属細菌の組み合わせを含む第２の組成物として提供される。いくつかの実施形態において、エンテロコッカス属細菌及び第１のバクテロイデス属細菌（又はバクテロイデス属細菌の組み合わせ）を第１の組成物として投与し、第１のバクテロイデス属細菌とは異なる第２のバクテロイデス属細菌（又はバクテロイデス属細菌の組み合わせ）及びエンテロコッカス属細菌を第２の組成物として投与する。いくつかの実施形態において、エンテロコッカス属細菌及び第１のバクテロイデス属細菌（又はバクテロイデス属細菌の組み合わせ）を第１の組成物として投与し、第１のバクテロイデス属細菌とは異なる第２のバクテロイデス属細菌（又はバクテロイデス属細菌の組み合わせ）を第２の組成物として投与する。
【００３７】
前記実施形態のいずれかによれば、本発明の組成物、使用、又は方法はいずれも、本発明のプロバイオティクスに含まれる細菌以外の細菌を含んでいなくてもよく、このような細菌を実質的に含んでいなくてもよい。前記実施形態のいずれかによれば、本発明の組成物はいずれも抗生物質を含んでいなくてもよく、抗生物質を実質的に含んでいなくてもよい。前記実施形態のいずれかによれば、本発明の組成物はいずれも前記プロバイオティクス以外の細菌及び抗生物質を含んでいなくてもよく、前記プロバイオティクス以外の細菌及び抗生物質を実質的に含んでいなくてもよい。
【００３８】
本明細書に記載の実施形態によれば、本明細書に記載の方法、使用、及び組成物における前記プロバイオティクスは、任意の適切な経路で投与してもよい。例えば、前記プロバイオティクスは、経口投与、経直腸投与、経皮投与、経鼻投与、又は吸入により対象に投与してもよい。いくつかの実施形態において、前記プロバイオティクスは、対象に経口投与される。
【００３９】
いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクス組成物、使用又は方法における細菌の有効量としては、少なくとも約１０４コロニー形成単位（ｃｆｕ）、例えば少なくとも約１０４ｃｆｕ、少なくとも約１０５ｃｆｕ、少なくとも約１０６ｃｆｕ、少なくとも約１０７ｃｆｕ、少なくとも約１０８ｃｆｕ、少なくとも約１０９ｃｆｕ、少なくとも約１０１０ｃｆｕ、少なくとも約１０１１ｃｆｕ、少なくとも約１０１２ｃｆｕ、若しくは少なくとも約１０１３ｃｆｕ、又はこれらの値のいずれか２つの間の範囲が挙げられ、例えば１０４〜１０８ｃｆｕ、１０４〜１０９ｃｆｕ、１０４〜１０１０ｃｆｕ、１０４〜１０１１ｃｆｕ、１０４〜１０１２ｃｆｕ、１０４〜１０１２ｃｆｕ、１０５〜１０８ｃｆｕ、１０５〜１０９ｃｆｕ、１０５〜１０１０ｃｆｕ、１０５〜１０１１ｃｆｕ、１０５〜１０１２ｃｆｕ、１０５〜１０１２ｃｆｕ、１０６〜１０８ｃｆｕ、１０６〜１０９ｃｆｕ、１０６〜１０１０ｃｆｕ、１０６〜１０１１ｃｆｕ、１０６〜１０１２ｃｆｕ、１０６〜１０１２ｃｆｕ、１０７〜１０８ｃｆｕ、１０７〜１０９ｃｆｕ、１０７〜１０１０ｃｆｕ、１０７〜１０１１ｃｆｕ、１０７〜１０１２ｃｆｕ、１０７〜１０１２ｃｆｕ、〜１０９ｃｆｕ、１０８〜１０１０ｃｆｕ、１０８〜１０１１ｃｆｕ、１０８〜１０１２ｃｆｕ又は１０８〜１０１２ｃｆｕが挙げられる。いくつかの実施形態において、細菌の有効量は、対象に投与するための組成物中に（３７℃において）対数増殖期にある細菌を含む。いくつかの実施形態において、細菌の有効量は、対象に投与するための組成物中に（３７℃において）静止期にある細菌を含む。
【００４０】
ＡＳＤの症状及び／又はてんかんの症状を治療及び／又は予防する方法
いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状及び／又はてんかんの症状を治療する方法が提供される。対象は、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動（言語理解及び／若しくは発語、社交性、並びに／又はコミュニケーションを含む）及び／又は反復行動の改善を必要としていると特定されうる。前記対象（又は前記対象から得られた試料）は、ＤＩＳＣ１遺伝子及び／又はＣＮＴＮＡＰ２遺伝子に機能喪失変異を有すると判定されてもよい。ＤＩＳＣ１遺伝子及び／又はＣＮＴＮＡＰ２遺伝子における機能喪失変異は、前記対象が感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動、及び／又は反復行動の改善を必要とすることを示していると判定されてもよい。本明細書に記載のバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせの有効量を含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるプロバイオティクスを前記対象に投与してもよい。これによって、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動及び／又は反復行動を改善することができる。いくつかの実施形態において、改善される前記コミュニケーション行動は、言語理解及び／又は発語、社交性、並びにコミュニケーションの少なくとも１つを含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がＡＳＤを有するかどうかを判定することをさらに含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がてんかん（例えば、皮質形成異常による焦点性てんかん）を有するかどうかを判定することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状が治療される。いくつかの実施形態において、てんかんの症状が治療される。いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状及びてんかんの症状が治療される。いくつかの実施形態において、前記てんかんは、皮質形成異常による焦点性てんかんを含む。
【００４１】
いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状を治療する方法が提供される。対象は、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び社交性行動の改善を必要としていると特定されうる。これらの行動は、ＢＴＢＲモデルの行動と一致している点に注目されたい。前記対象（又は前記対象から得られた試料）は、ＤＩＳＣ１遺伝子に機能喪失変異を有すると判定されてもよい。ＤＩＳＣ１遺伝子における機能喪失変異は、前記対象が感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動、及び／又は反復行動の改善を必要とすることを示していると判定されてもよい。本明細書に記載のバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせの有効量を含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるプロバイオティクスを前記対象に投与してもよい。これによって、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び社交性行動を改善することができる。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がＡＳＤを有するかどうかを判定することをさらに含む。いくつかの実施形態において、てんかんの症状が治療される。
【００４２】
いくつかの実施形態において、てんかんの症状を治療する方法が提供される。対象は、コミュニケーション行動（言語理解及び／若しくは発語、社交性、並びに／又はコミュニケーションを含む）、感覚運動ゲーティング、不安、及び／又は反復行動の改善を必要としていると特定されうる（これらの行動は、ＣＮＴＮＡＰ２モデルの行動と一致している点に注目されたい）。前記対象（又は前記対象から得られた試料）は、ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子に機能喪失変異を有すると判定されてもよい。ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子における機能喪失変異は、前記対象がコミュニケーション行動、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び／又は反復行動の改善を必要とすることを示していると判定されてもよい。本明細書に記載のバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせの有効量を含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるプロバイオティクスを前記対象に投与してもよい。これによって、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動及び／又は反復行動を改善することができる。いくつかの実施形態において、改善される前記コミュニケーション行動は、言語理解及び／又は発語、社交性、並びにコミュニケーションの少なくとも１つを含む。いくつかの実施形態において、前記てんかんは、皮質形成異常による焦点性てんかんを含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がてんかん（例えば、皮質形成異常による焦点性てんかん）を有するかどうかを判定することをさらに含む。
【００４３】
いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状を治療する方法が提供される。対象は、コミュニケーション行動（言語理解及び／若しくは発語、社交性、並びに／又はコミュニケーションを含む）、感覚運動ゲーティング、不安、及び／又は反復行動の改善を必要としていると特定されうる（これらの行動は、ＣＮＴＮＡＰ２モデルの行動と一致している点に注目されたい）。前記対象（又は前記対象から得られた試料）は、ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子に機能喪失変異を有すると判定されてもよい。ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子における機能喪失変異は、前記対象がコミュニケーション行動、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び／又は反復行動の改善を必要とすることを示していると判定されてもよい。本明細書に記載のバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせの有効量を含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるプロバイオティクスを前記対象に投与してもよい。これによって、感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動及び／又は反復行動を改善することができる。いくつかの実施形態において、改善される前記コミュニケーション行動は、言語理解及び／又は発語、社交性、並びにコミュニケーションの少なくとも１つを含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、前記対象がＡＳＤを有するかどうかを判定することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状が治療される。
【００４４】
いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状及び／又はてんかんの症状を発症するリスクのある対象において該症状を予防する方法が提供される。対象は、感覚運動ゲーティング機能障害、不安行動障害、コミュニケーション行動（言語理解及び／若しくは発語、社交性、並びに／又はコミュニケーションを含む）の障害及び／又は反復行動障害を発症するリスクを有していると特定されうる。前記対象（又は前記対象から得られた試料）は、ＤＩＳＣ１遺伝子及び／又はＣＮＴＮＡＰ２遺伝子に機能喪失変異を有すると判定されてもよい。ＤＩＳＣ１遺伝子及び／又はＣＮＴＮＡＰ２遺伝子における機能喪失変異は、前記対象が感覚運動ゲーティング機能障害、不安行動障害、コミュニケーション行動障害、及び／又は反復行動障害を発症するリスクがあることを示していると判定されてもよい。本明細書に記載のバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせの有効量を含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるプロバイオティクスを前記対象に投与してもよい。これによって、前記対象の感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動及び／又は反復行動における障害の程度が最小限まで低減されうるか、あるいはこれらの機能及び／又は行動において識別可能な障害が見られなくなる。いくつかの実施形態において、識別可能な障害を伴わずに発症するコミュニケーション行動としては、言語理解及び／又は発語、社交性、並びにコミュニケーションの少なくとも１つが含まれる。いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状が治療される。いくつかの実施形態において、てんかんの症状が治療される。いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状及びてんかんの症状が治療される。いくつかの実施形態において、前記てんかんは、皮質形成異常による焦点性てんかんを含む。前記リスクがある対象は幼児又は小児であってもよい。
【００４５】
いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状を発症するリスクのある対象において該症状を予防する方法が提供される。対象は、感覚運動ゲーティング機能障害、不安行動障害、及び社交性行動障害を発症するリスクを有していると特定されうる。これらの行動は、ＢＴＢＲモデルの行動と一致している点に注目されたい。前記対象（又は前記対象から得られた試料）は、ＤＩＳＣ１遺伝子及び／又はＣＮＴＮＡＰ２遺伝子に機能喪失変異を有すると判定されてもよい。ＤＩＳＣ１遺伝子及び／又はＣＮＴＮＡＰ２遺伝子における機能喪失変異は、前記対象が感覚運動ゲーティング機能障害、不安行動障害、コミュニケーション行動障害、及び／又は反復行動障害を発症するリスクがあることを示していると判定されてもよい。本明細書に記載のバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせの有効量を含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるプロバイオティクスを前記対象に投与してもよい。これによって、前記対象の感覚運動ゲーティング機能、不安行動、及び社交性行動における障害の程度が最小限まで低減されうるか、あるいはこれらの機能及び行動において識別可能な障害が見られなくなる。前記リスクがある対象は幼児又は小児であってもよい。
【００４６】
いくつかの実施形態において、てんかんの症状を予防する方法が提供される。対象は、コミュニケーション行動（言語理解及び／若しくは発語、社交性、並びに／又はコミュニケーションを含む）の障害、感覚運動ゲーティング障害、不安行動障害、及び／又は反復行動障害を発症するリスクを有していると特定されうる（これらの行動は、ＣＮＴＮＡＰ２モデルの行動と一致している点に注目されたい）。前記対象（又は前記対象から得られた試料）は、ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子に機能喪失変異を有すると判定されてもよい。ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子における機能喪失変異は、前記対象がコミュニケーション行動障害、感覚運動ゲーティング機能障害、不安行動障害、及び／又は反復行動障害を発症するリスクがあることを示していると判定されてもよい。本明細書に記載のバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせの有効量を含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるプロバイオティクスを前記対象に投与してもよい。これによって、前記対象の感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動及び／又は反復行動における障害の程度が最小限まで低減されうるか、あるいはこれらの機能及び／又は行動において識別可能な障害が見られなくなる。いくつかの実施形態において、前記コミュニケーション行動としては、言語理解及び／又は発語、社交性、並びにコミュニケーションの少なくとも１つが含まれる。いくつかの実施形態において、前記てんかんは、皮質形成異常による焦点性てんかんを含む。前記リスクがある対象は幼児又は小児であってもよい。
【００４７】
いくつかの実施形態において、ＡＳＤの症状を予防する方法が提供される。対象は、コミュニケーション行動（言語理解及び／若しくは発語、社交性、並びに／又はコミュニケーションを含む）の障害、感覚運動ゲーティング障害、不安障害、及び／又は反復行動障害を発症するリスクを有していると特定されうる（これらの行動は、ＣＮＴＮＡＰ２モデルの行動と一致している点に注目されたい）。前記対象（又は前記対象から得られた試料）は、ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子に機能喪失変異を有すると判定されてもよい。ＣＮＴＮＡＰ２遺伝子における機能喪失変異は、前記対象がコミュニケーション行動障害、感覚運動ゲーティング機能障害、不安行動障害、及び／又は反復行動障害を発症するリスクがあることを示していると判定されてもよい。本明細書に記載のバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせの有効量を含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせの有効量からなるプロバイオティクスを前記対象に投与してもよい。これによって、前記対象の感覚運動ゲーティング機能、不安行動、コミュニケーション行動及び／又は反復行動における障害の程度が最小限まで低減されうるか、あるいはこれらの機能及び／又は行動において識別可能な障害が見られなくなる。いくつかの実施形態において、改善される前記コミュニケーション行動としては、言語理解及び／又は発語、社交性、並びにコミュニケーションの少なくとも１つが含まれる。
【００４８】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の前記方法のいずれかのバクテロイデス属細菌若しくはバクテロイデス属細菌とエンテロコッカス属細菌の組み合わせを含むか、実質的にこの細菌若しくは細菌の組み合わせからなるか、又はこの細菌若しくは細菌の組み合わせからなるプロバイオティクスは、（ａ）バクテロイデス属細菌（例えばＢ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン又はＢ．ブルガタス）；（ｂ）バクテロイデス属細菌（例えばＢ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン又はＢ．ブルガタス）及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｃ）Ｂ．フラジリス；（ｄ）Ｂ．テタイオタオミクロン；（ｅ）Ｂ．ブルガタス；（ｇ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン；（ｈ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス；（ｉ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス；（ｊ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス；（ｋ）Ｂ．フラジリス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｌ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｍ）Ｂ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｎ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｏ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｐ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｑ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びエンテロコッカス属細菌（例えばＥ．フェカリス、Ｅ．フェシウム、Ｅ．ヒラエ、Ｅ．アビウム、Ｅ．デュランス、Ｅ．ガリナラム又はＥ．カセリフラバス）；（ｒ）Ｂ．フラジリス及びＥ．フェカリス；（ｓ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＥ．フェカリス；（ｔ）Ｂ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；（ｕ）Ｂ．フラジリス及びＢ．テタイオタオミクロン及びＥ．フェカリス；（ｖ）Ｂ．フラジリス及びＢ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；（ｗ）Ｂ．テタイオタオミクロン及びＢ．ブルガタス及びＥ．フェカリス；並びに（ｘ）Ｂ．フラジリス、Ｂ．テタイオタオミクロン、Ｂ．ブルガタス及びＥ．フェカリスからなる群から選択される。前記プロバイオティクスに含まれる細菌以外の細菌を前記対象に投与しなくてもよく、前記プロバイオティクスに含まれる細菌以外の細菌を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象の治療において使用するためのプロバイオティクスは、他の細菌を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。抗生物質を前記対象に投与しなくてもよく、又は抗生物質を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、抗生物質を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。薬物を前記対象に投与しなくてもよく、又は薬物を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、薬物を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。医薬有効成分を前記対象に投与しなくてもよく、又は医薬有効成分を実質的に前記対象に投与しなくてもよく、したがって、前記対象に投与するためのプロバイオティクスは、医薬有効成分を含まない又は実質的に含まない単一又は複数の組成物に含まれていてもよい。
【００４９】
本明細書の実施形態のいくつかにおいて、前記方法は、前記対象が行動の改善を必要としていると判定することをさらに含む。いくつかの実施形態において、例えば、幼児及び／又は小児に対する使用、方法、及び／又は組成物においては、母体の免疫活性化及び／又はその他の危険因子に基づいてＡＳＤ行動のリスクを有する対象を特定する。いくつかの実施形態においては、消化管、体液（例えば、血液及び尿）、又はこれらの任意の組み合わせにおけるＡＳＤ関連代謝産物又は代謝産物の組み合わせの濃度に基づいて、対象がＡＳＤを有していると診断する。対象における代謝産物の濃度に基づいてＡＳＤを診断する方法は、米国特許公開第2014/0065132号に詳細に記載されており、その内容全体は参照により本明細に援用される。いくつかの実施形態において、対象は、発語、会話の理解、衝動の抑制、及び／又は社交性に関連した脳の領域、例えば大脳皮質、脳梁、ブローカ野及び／又はウェルニッケ野等に損傷又は発達障害を有していると判定される。いくつかの実施形態において、ＡＳＤ行動、例えばコミュニケーション障害、発語障害、感覚運動障害、不安障害、及び／若しくは反復行動障害、又はこれらの２つ以上の組み合わせは、通常の診断基準、例えば、精神障害の診断と統計の手引き第４版（ＤＳＭ−４）又は第５版（ＤＳＭ−５）に記載の診断基準を用いて特定される。いくつかの実施形態において、対象におけるＡＳＤの有無は、行動試験を用いて判定され、例えば自閉症行動チェックリスト（ＡＢＣ）、自閉症診断面接改訂版（ＡＤＩ−Ｒ）、小児自閉症評価尺度（ＣＡＲＳ）及び／又は前言語期自閉症診断観察スケジュール（ＰＬ−ＡＤＯＳ）等の少なくとも１つを用いて判定される。行動試験としては、１）集中度又は焦点づけが異常に強く、限定的で固定された１つ以上の興味への没頭、２）特定の非機能的な常同行動又は儀式的行動に対する融通の効かない執着、ｃ）常同的で反復的な運動動作への固執（例えば、手や指をひらひらさせる等）、及び／又はｄ）物体の一部分に対する持続的なこだわりの有無を検出し、かつ／又はその程度を評価することが挙げられるが、これに限定されない。また、行動試験に含めることができ、かつ行動試験を受けた対象の行動機能の改善の必要性を示唆することができる行動としては、ａ）感覚行動、ｂ）対人行動、ｃ）運動動作及び物体の使用に関する行動、ｄ）言語行動が挙げられるが、これらに限定されない。ａ）感覚行動としては、学習時に視覚的識別をあまり用いないこと、音が聞こえないように見えることから難聴を疑うこと、大きな音に対して時折「驚愕反応」を示さないこと、あざ、切り傷及び注射等の痛みを伴う刺激に対して時折反応を示さないこと、明るい光が目に直接入っても滅多に瞬きをしないこと、様々な音で耳を塞ぐこと、太陽光に目を細めたり、顔をしかめたり、目を覆ったりすること、「見知らぬ」人に対して滅多に視覚的反応を示さないこと、並びに何もない空間を長時間じっと見つめることが挙げられる。ｂ）対人行動としては、社会的刺激／環境刺激に滅多に反応しないこと、社交的微笑を示さないこと、手を差し出されたときに手を伸ばさないこと、他者の表情／感情に無反応であること、自発的にアイコンタクトを避けること、触られたり、掴まれたりすると抵抗すること、抱っこしたときに体に力が入らないこと、筋緊張により抱っこすることが難しいこと、一緒に遊んでいる他の子供のまねをしないこと、交友関係を築いたことがないこと、恐怖や強い不安を頻繁に感じること、及び人を「凝視」することが挙げられる。ｃ）運動動作及び物体の使用に関する行動としては、長時間にわたって体を回転させること、玩具を適切に使用できないこと、特定の物体を持ったまま離そうとしないこと、長時間にわたって体を揺らすこと、突進や疾走を何度も繰り返すこと、手をバタバタさせること、つま先で歩くこと、頭をぶつけることによって自傷行為を行うこと、手を噛むこと、物体をクルクル回したり、回転させたり、ぶつけたりすることを繰り返すこと、周囲の物に触れたり、においを嗅いたり、かつ／又は味を確認したりすること、物を並べる等の複雑な「儀式」を行うこと、及び非常に破壊的な行動をとることが挙げられる。ｄ）言葉行動としては、一度だけ与えられた簡単な指示を実行できないこと、代名詞を逆に使用すること、会話が単調であること、他者が２名いるときに名前を呼ばれても反応しないこと、「はい」又は「私」と滅多に言わないこと、前置詞を含む簡単な指示を実行できないこと、自分のほしい物を身振りで伝えようとすること、同じ語句を何度も繰り返すこと、名前の付いた物の指差しが５つ以下に留まること、欲しい物や必要な物を伝えるために１日当たり０〜５個の単語を自発的に使用すること、特定の音や単語を何度も繰り返すこと、相手の質問又は発言をオウム返しすること、コミュニケーションを取るために１日当たり１５個以上３０個未満の語句を自発的に使用すること、簡単な作業を学習するが、すぐに「忘れる」こと、常同動作／環境における変化に対して強い反応を示すこと、発達の一領域において、精神遅滞とは思えない「特殊な能力」を有すること、重度の癇癪及び／又は軽度の頻繁な癇癪を起こすこと、噛んだり、たたいたり、かつ／又は蹴ったりすることによって他人を傷つけること、要求が満たされるまで待てないこと、トイレでの排泄が困難であること、頻繁に介助しないと一人で着衣できないこと、周囲に無関心であり、危険な状況に置かれても気がつかないことがあること、無生物を操作することを好み、それに没頭することを好むこと、及び／又は３０月齢又はそれ以前に特定された発達遅延を有することが挙げられる。当業者であれば、主治医は、本明細書に開示した治療を必要とする対象を特定する方法を熟知していることを容易に理解するであろう。
【００５０】
本明細書の実施形態のいくつかにおいて、本発明の方法は、１つ以上の組成物を単回投与することによって、プロバイオティクスの有効量を投与することを含む。前記実施形態のいくつかにおいて、本発明の方法は、本明細書に記載の単一の組成物を２回以上投与することによって、プロバイオティクスの有効量を投与することを含む。例えば、前記複数の組成物は、約１分、約２分、約３分、約４分、約５分、約６分、約７分、約８分、約９分、約１０分、約１５分、約２０分、約２５分、約３０分、約３５分、約４０分、約４５分、約５０分、約５５分、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間、約７時間、約８時間、約９時間、約１０時間、約１１時間、約１２時間、約１３時間、約１４時間、約１５時間、約１６時間、約１７時間、約１８時間、約１９時間、約２０時間、約２１時間、約２２時間、約２３時間、約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、又は約１０日の間隔を空けて投与することができ、前記複数の組成物の投与間隔は、これらの値のいずれか２つの間の範囲を含んでおり、例えば、１分〜１０分、１分〜３０分、１分〜１時間、１分〜２時間、１分〜４時間、１分〜１２時間、１分〜１８時間、１分〜１日、１０分〜３０分、１０分〜１時間、１０分〜２時間、１０分〜４時間、１０分〜１２時間、１０分〜１８時間、１０分〜１日、３０分〜１時間、３０分〜２時間、３０分〜４時間、３０分〜１２時間、３０分〜１８時間、３０分〜１日、３０分〜２日、１時間〜２時間、１時間〜４時間、１時間〜１２時間、１時間〜１８時間、１時間〜１日、４時間〜１２時間、４時間〜１８時間、４時間〜１日、１日〜２日、１日〜３日、１日〜４日、１日〜５日、１日〜７日、１日〜１０日、２日〜３日、２日〜４日、２日〜５日、２日〜７日、２日〜１０日、又は５日〜１０日の間隔を空けて投与することができる。前記実施形態のいくつかにおいて、本発明の方法は、単一の組成物の２回以上の投与によって、本明細書に記載の２種以上の組成物の有効量を投与することを含む。例えば、第２の組成物は、第１の組成物を投与した約１分後、約２分後、約３分後、約４分後、約５分後、約６分後、約７分後、約８分後、約９分後、約１０分後、約１５分後、約２０分後、約２５分後、約３０分後、約３５分後、約４０分後、約４５分後、約５０分後、約５５分後、約１時間後、約２時間後、約３時間後、約４時間後、約５時間後、約６時間後、約７時間後、約８時間後、約９時間後、約１０時間後、約１１時間後、約１２時間後、約１３時間後、約１４時間後、約１５時間後、約１６時間後、約１７時間後、約１８時間後、約１９時間後、約２０時間後、約２１時間後、約２２時間後、約２３時間後、約１日後、約２日後、約３日後、約４日後、約５日後、約６日後、約７日後、約８日後、約９日後、又は約１０日後に投与することができ、第１の組成物を投与した後に第２の組成物を投与する時間は、これらの値のいずれか２つの間の範囲を含んでおり、例えば、第１の組成物を投与してから、１分〜１０分、１分〜３０分、１分〜１時間、１分〜２時間、１分〜４時間、１分〜１２時間、１分〜１８時間、１分〜１日、１０分〜３０分、１０分〜１時間、１０分〜２時間、１０分〜４時間、１０分〜１２時間、１０分〜１８時間、１０分〜１日、３０分〜１時間、３０分〜２時間、３０分〜４時間、３０分〜１２時間、３０分〜１８時間、３０分〜１日、３０分〜２日、１時間〜２時間、１時間〜４時間、１時間〜１２時間、１時間〜１８時間、１時間〜１日、４時間〜１２時間、４時間〜１８時間、４時間〜１日、１日〜２日、１日〜３日、１日〜４日、１日〜５日、１日〜７日、１日〜１０日、２日〜３日、２日〜４日、２日〜５日、２日〜７日、２日〜１０日、又は５日〜１０日が経過した後に第２の組成物を投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは、前記期間のいずれかにわたる徐放製剤（例えば徐放性カプセル、又はインプラント等）として投与される。
【００５１】
いくつかの実施形態において、本発明のプロバイオティクスは、対象の行動機能に改善が見られるまで投与が継続される。本発明のプロバイオティクスは、例えば行動機能の改善を確実なものとするため、あるいは改善した行動機能を維持するため、対象の行動機能に改善が見られた後に投与してもよい。
【実施例】
【００５２】
以下の実施例において、前記実施形態の態様のいくつかをさらに詳細に開示するが、これらの実施例は本発明の開示の範囲を何ら限定するものではない。
【００５３】
実施例１：ＢＴＢＲマウスにおけるＡＳＤ関連行動のＢ．フラジリスによる改善
成体ＢＴＢＲマウスに、Ｂ．フラジリスを加えたアップルソース又はアップルソースのみを離乳後１週間にわたって与えた。マウスを１匹ずつオープンフィールドに入れ、最初の１０分間に正方形の中心エリアに侵入した回数を記録した（図１Ａ）。図１Ａと同様の結果が、オープンフィールドの中心における滞在時間でも得られた（データ示さず）。総移動距離については、各群間の差は認められなかった。Ｂ．フラジリスを用いた処置によって、この異常が予防又は治療される。＊ｐ＜０．０５；１試験当たりに使用したマウス：ｎ＝３０〜３５、２回の反復実験を行った。
【００５４】
床敷きの上に複数のビー玉を置いたケージにマウスを入れると、対照群であるＢＴＢＲ雄性マウスはビー玉を埋めようとする強迫的行動を示すがＢ．フラジリスで処置されたＢＴＢＲマウスではこの反復／常同的行動が低減する（図１Ｂ）。
【００５５】
背景音よりも５デシベル又は１５デシベル大きい音をＢＴＢＲマウスに聞かせて測定したプレパルス・インヒビション（ＰＰＩ）を観察した（図１Ｃ）。Ｂ．フラジリスを用いた処置によって、感覚運動ゲーティングの測定値が正常化した。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、１試験当たりに使用したマウス：ｎ＝１５〜２０。
【００５６】
したがって、本明細書の実施形態のいくつかに従って、バクテロイデス属細菌を用いてＢＴＢＲ自閉症成体モデルマウスを処置することによって、ＡＳＤに伴う行動障害が改善される。
【００５７】
実施例２：ＣＮＴＮＡＰ２マウスにおけるＡＳＤ関連行動のＢ．フラジリスによる改善
野生型マウス（Ｃ５７ＢＵ６）、ヘテロ接合体（Ｈｅｒ）マウス（ＣＮＴＮＡＰ２＋／−）及びノックアウトマウス（ＫＯ）（ＣＮＴＮＡＰ２−／−）について、ＡＳＤ関連行動の違いを試験した。アップルソースのみを離乳後３週間にわたって与えた成体対照群と、Ｂ．フラジリスを加えたアップルソースを離乳後３週間にわたって与えた成体マウスとを試験した。Penagarikanoら（２０１１）によって報告されているように、変異マウスは過活動を示す。オープンフィールドにおける過活動を測定した（図１Ｄ及び図１Ｅ）。移動距離（図１Ｄ）及び平均移動速度（図１Ｅ）の測定から示されたように、アップルソースに加えたＢ．フラジリスを摂取させることによって、過活動を顕著に予防することができた。同様に、ＣＮＴＮＡＰ２−／−マウスは、Penagarikanoら（２０１１）によって評価されたように、反復行動を示す。この反復行動は、セルフグルーミングによって測定することができる。セルフグルーミングの測定から示されたように（図１Ｆ）、このＡＳＤ様セルフグルーミング行動は、Ｂ．フラジリスを用いた処置によって改善される。＊ｐ＜０．０５、ＮＳ＝有意差なし、Ｎ＝４〜１１匹のマウス、２回の反復実験を行った。
【００５８】
したがって、本明細書の実施形態のいくつかに従って、バクテロイデス属細菌でＣＮＴＮＡＰ２自閉症成体モデルマウスを処置することによって、ＡＳＤに伴う行動障害が改善される。
【００５９】
実施例３：ＡＳＤ関連行動のＢ．フラジリスによる改善
ヒト成体対象が、感覚運動ゲーティング機能と不安行動と社交性行動に障害を併発していると特定する。実質的にＢ．フラジリスからなるプロバイオティクスの有効量を含むシリアルバーを週に１回、３週間にわたって前記対象に摂取させる。シリアルバーを約３週間にわたって摂取させた後、前記対象の聴覚刺激に対する応答が増加し、不安が減少し、より頻繁に社会的相互作用を行うことが期待される。
【００６０】
実施例４：ＡＳＤ関連行動のバクテロイデス属細菌による予防
ＤＩＳＣ１遺伝子にヘテロ接合型の機能喪失変異を有していると判定されたヒト小児対象は、コミュニケーション行動（言語理解及び／若しくは発語、社交性、並びに／又はコミュニケーション）の障害、感覚運動ゲーティング障害、不安、及び反復行動等のＡＳＤ行動のリスクを有していると判定される。実質的にＢ．テタイオタオミクロンからなるプロバイオティクスの有効量を含むヨーグルト飲料を４日に１回、６ヶ月間にわたって前記対象に摂取させる。前記対象のコミュニケーション行動、感覚運動ゲーティング機能、不安、及び反復行動の障害の程度が最小限まで低減されることが期待される。
【００６１】
実施例５：てんかん関連行動のＢ．フラジリス及びＥ．フェカリスによる改善
ヒト青年対象が、感覚運動ゲーティング障害、言語理解障害、及び発語障害、並びに皮質形成異常による焦点性てんかんに特徴的なてんかん性発作を有していると特定する。前記対象がてんかんの治療を必要としていると判定する。実質的にＢ．フラジリス及びＥ．フェカリスからなるプロバイオティクスを含むゲルカプセルを、症状が改善すると期待されるまで前記対象に毎日摂取させる。
【００６２】
前述の実施形態の少なくともいくつかにおいて、一実施形態において使用される１以上の要素は、別の一実施形態の別の要素との交換が技術的に不可能でない場合を除いて、該別の要素と交換してもよい。当業者であれば、特許請求の範囲に記載の主題の範囲を逸脱しない限り、前記方法及び構成においてその他の様々な省略、付加及び改変を実施できることを理解するであろう。添付の請求項で定義されているように、そのような改変及び変更はいずれも本発明の主題の範囲に含まれる。
【００６３】
本明細書における実質的に複数形及び／又は単数形の用語の使用に関して、当業者であれば、本明細書の文脈及び／又は本明細書に記載の用途を踏まえて、複数のものを単数のものであると解釈することができ、かつ／又は単数のものを複数のものであると解釈することができる。本発明を明確なものとするため、単数から複数又は複数から単数への様々な置き換えが本明細書において記載されている。
【００６４】
当業者であれば、通常、本明細書に記載の用語、特に、添付の請求項（たとえば、添付の請求項の本体部）において使用されている用語は「オープンエンドな」用語であることを理解するであろう（たとえば、「含んでいる（including）」という用語は、「含んでいるが、これらに限定されない」と解釈されるべきであり、「有する（having）」という用語は、「少なくとも有する」と解釈されるべきであり、「含む（includes）」という用語は「含むが、これらに限定されない」と解釈されるべきである）。さらに、当業者であれば、特定の数について請求項に記載する場合、その記載の意図も請求項に明確に記載すべきであり、特定の数が記載されない場合はその意図を記載する必要はないことを理解するであろう。分かりやすく説明をすれば、たとえば、後述の特許請求の範囲では、請求項を記載するために、「少なくとも１つ」や「１つ以上」といった前置きが記載されている場合がある。しかしながら、このような前置きが使用されているからといって、不定冠詞「１つ（ａ又はａｎ）」で記載された特定の請求項を、１つのみの要素を含む実施形態に限定すべきではなく、たとえ同じ請求項内に「１つ以上」又は「少なくとも１つ」といった前置きと「１つ（ａ又はａｎ）」といった不定冠詞とが含まれていたとしても、１つのみの要素を含む実施形態に限定すべきではない（たとえば、「１つ（ａ及び／又はａｎ）」は、通常、「少なくとも１つ」又は「１つ以上」を意味すると解釈されるべきである）。これは、請求項の記載において定冠詞が使用された場合でも同じである。さらに、請求項に特定の数が明確に記載されていたとしても、当業者であれば、通常、「少なくとも」記載されたその数であるということを理解するであろう（たとえば、修飾語を伴わない「２つ」という記載は、「少なくとも」２つ又は「２つ以上」を意味する）。さらに、たとえば「Ａ、Ｂ及びＣのうち少なくとも１つ」等の頻用される語句が使用される場合、通常、そのような文構造は、当業者がその語句を通常理解する意味で記載されている（たとえば、「Ａ、Ｂ及びＣのうち少なくとも１つを有するシステム」は、Ａのみを有するシステム、Ｂのみを有するシステム、Ｃのみを有するシステム、ＡとＢの両方を有するシステム、ＡとＣの両方を有するシステム、ＢとＣの両方を有するシステム、並びに／又はＡ、Ｂ及びＣのすべてを有するシステム等を含むが、これらに限定されない）。「Ａ、Ｂ又はＣのうち少なくとも１つ」等の頻用される語句が使用される場合、通常、そのような文構造は、当業者がその語句を通常理解する意味で記載されている（たとえば、「Ａ、Ｂ又はＣのうち少なくとも１つを有するシステム」は、Ａのみを有するシステム、Ｂのみを有するシステム、Ｃのみを有するシステム、ＡとＢの両方を有するシステム、ＡとＣの両方を有するシステム、ＢとＣの両方を有するシステム、並びに／又はＡ、Ｂ及びＣのすべてを有するシステム等を含むが、これらに限定されない）。さらに、当業者であれば、２つ以上の選択肢を表すための選言的用語及び／又は選言的語句は、明細書、特許請求の範囲又は図面のいずれにおいても、列記された用語のうちの１つ、列記された用語のいずれか、又は列記された用語の両���を含む場合があると理解すべきであると解釈するであろう。たとえば、「Ａ又はＢ」という表現は、「Ａ又はＢ」又は「Ａ及びＢ」を示す場合を含む。
【００６５】
さらに、本開示の構成要素又は態様がマーカッシュ形式で記載されている場合、当業者であれば、マーカッシュ形式で記載された個々のメンバー又はメンバーのサブグループについても記載されていると理解するであろう。
【００６６】
当業者であれば、詳細な説明を提供すること等に関するあらゆる目的において、本明細書に記載の数値範囲はいずれも、あらゆる部分範囲及びこれらの部分範囲の組み合わせを包含することを理解するであろう。本明細書に記載の数値範囲はいずれも、十分に記載がなされていると容易に認識することができ、これらの数値範囲は、少なくとも２等分、３等分、４等分、５等分、１０等分などに分割することができる。例えば、本明細書に記載の各範囲は、３等分することによって、低い範囲、中程度の範囲、及び高い範囲等に容易に分割することができるが、これらに限定されない。当業者であれば、「以下（up to）」、「以上（at least）」、「よりも大きい（greater than）」、「よりも小さい（less than）」等の用語はいずれも、言及されているすべての数値を含むとともに、上述のような部分範囲に実質的に分割することができる数値範囲を指すことを理解するであろう。さらに、当業者であれば、各範囲は、その範囲内に含まれる各数値を含むことを理解するであろう。よって、例えば、１〜３つのメンバーを有する群は、１つ、２つ又は３つのメンバーを有する群を指す。同様に、例えば、１〜５つのメンバーを有する群は、１つ、２つ、３つ、４つ、又は５つのメンバーを有する群を指す。
【００６７】
様々な態様及び実施形態を本明細書において開示したが、当業者であれば、本明細書において開示したもの以外の他の態様及び実施形態を容易に理解するであろう。本明細書において開示した様々な態様や実施形態は、例示のみを目的としたものであり、本発明をなんら限定するものではなく、本発明の真の範囲及び基本的思想は以下の請求項により示される。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図１Ｅ】
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【図１Ｆ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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