(57)【要約】  蛍光顕微鏡撮像方法および装置であって、実験的要求事項にしたがって、複数の単色蛍光励起光源（１０１）のうち同じ色の少なくとも１つの単色蛍光励起光源（１０１）を標的光源として照明することであって、各々の単色蛍光励起光源（１０１）によって発せられた単色蛍光励起光源は、検出される対象の試料プレートの予め設定された検出領域上に斜めに発せられる、照明することと、検出される対象の試料プレートの、標的光源から最も遠い側に、標的光源によって発せられた単色蛍光励起光の照射によって励起された予め設定された検出領域内の粒子の蛍光を収集し、予め設定された複数回まで、予め設定された検出領域を増幅することと、予め設定された検出領域内の粒子の励起された蛍光の光フィルタリング処理を実施することと、予め設定された検出領域の蛍光画像を取得することとを含む、蛍光顕微鏡撮像方法および装置。２色ミラーは不要であり、したがって蛍光顕微鏡装置の構造は簡単で低コストとなり、光エネルギー損失を防止する。単色蛍光励起光が、検出される対象の試料プレート上に斜めに発せられるとき、少量の単色蛍光励起光が、検出される対象の試料プレートを通過した後、対物レンズ内に発せられる。
2018519550.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
蛍光顕微鏡画像形成方法であって、被検出試料プレートが置かれた後、
実験的要求事項にしたがって、複数の単色蛍光励起光源のうち同じ色を有する少なくとも１つの単色蛍光励起光源を標的光源として点灯させることであって、前記複数の単色蛍光励起光源の各々によって発せられた単色蛍光励起光源は、前記被検出試料プレートの事前に設定された検出領域に斜めに入る、点灯させることと、
前記被検出試料プレートの、前記標的光源から反対を向く側に、前記標的光源によって発せられた単色蛍光励起光の照射によって励起された前記予め設定された検出領域内の粒子の蛍光を収集し、予め設定された回数だけ、前記予め設定された検出領域を拡大することと、
前記予め設定された検出領域内の前記粒子の前記励起された蛍光をフィルタリングすることと、
前記予め設定された検出領域の蛍光画像を取得することとを含む、蛍光顕微鏡撮像方法。
【請求項２】
前記標的光源が点灯された後、かつ前記標的光源によって発せられた前記単色蛍光励起光が前記被検出試料プレートに入る前に、
前記標的光源のうち各単色蛍光励起光源によって発せられた前記単色蛍光励起光を集束させることをさらに含む、請求項１に記載の蛍光顕微鏡撮像方法。
【請求項３】
蛍光顕微鏡撮像装置であって、
複数の単色蛍光励起光源と、前記複数の単色蛍光励起光源に電気的に接続された制御システムとを備える光源装置であって、前記複数の単色蛍光励起光源は、対物レンズと画像取得装置とからなる撮像光路の中心軸の周りに配置され、前記複数の単色蛍光励起光源の各々によって発せられた単色蛍光励起光と前記撮像光路の前記中心軸は、試料載置台上の予め設定された位置で交差し、前記制御システムは、実験的要求事項にしたがって、前記複数の単色蛍光励起光源のうち同じ色を有する少なくとも１つの単色蛍光励起光源を標的光源として点灯させ、
前記試料載置台は、前記複数の単色蛍光励起光源によって発せられた単色蛍光励起光が交差する位置に配置され、被検出試料プレートを置くように構成され、前記被検出試料プレートの予め設定された検出領域は、前記試料載置台上の予め設定された位置に配置され、
前記対物レンズは、前記試料載置台の、前記光源装置から反対を向く側に配置される、光源装置と、
前記試料載置台の、前記対物レンズから反対を向く側に配置された発光フィルタリングモジュールであって、
前記画像取得装置が、前記対物レンズの、前記発光フィルタリングモジュールから反対を向く側に配置される、発光フィルタリングモジュールとを備える、蛍光顕微鏡撮像装置。
【請求項４】
前記光源装置が、
明視野光源であって、前記明視野光源によって発せられた全帯域白色光が、前記試料載置台の方に向いており、前記撮像光路の前記中心軸と一致する、明視野光源をさらに備える、請求項３に記載の多蛍光チャンネル同期顕微鏡撮像装置。
【請求項５】
前記単色蛍光励起光源が、単色ＬＥＤ蛍光励起光源である、請求項３に記載の蛍光顕微鏡撮像装置。
【請求項６】
前記光源装置が、
前記単色ＬＥＤ蛍光励起光源の照射方向に配置され、前記単色ＬＥＤ蛍光励起光源と前記試料載置台との間に配置された、励起光フィルタをさらに備える、請求項５に記載の蛍光顕微鏡撮像装置。
【請求項７】
前記単色蛍光励起光源が、
白色光励起光源と、
前記白色光励起光源の照射方向に配置され、前記白色光励起光源と前記試料載置台との間に配置された、励起光フィルタとを備える、請求項３に記載の蛍光顕微鏡撮像装置。
【請求項８】
前記発光フィルタリングモジュールが、発光フィルタリングターンテーブルであり、前記発光フィルタリングターンテーブルの周囲には、複数の発光フィルタリング領域が設けられ、前記複数の発光フィルタリング領域の各々の通過帯域は、前記被検出試料プレート内の粒子によって発せられ、特定の色を有する前記単色蛍光励起光源によって励起される蛍光の帯域である、請求項３に記載の蛍光顕微鏡撮像装置。
【請求項９】
前記光源装置が、
前記単色蛍光励起光源の照射方向に配置され、前記単色蛍光励起光源と前記試料載置台との間に配置された光集束モジュールをさらに備える、請求項３に記載の蛍光顕微鏡撮像装置。
【請求項１０】
前記光集束モジュールが、複数のレンズまたは光集束レンズを備える光集束レンズセットである、請求項９に記載の蛍光顕微鏡撮像装置。
【請求項１１】
前記画像取得装置が、接眼レンズまたはカメラである、請求項３に記載の蛍光顕微鏡撮像装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年７月１日に中華人民共和国の知的財産局に出願された「集積蛍光励起光源装置」と題した中国特許出願第２０１５１０３７６５３０．０号の優先権を主張するものであり、本文献は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。本出願はさらに、２０１５年７月２８日に中国国家知的所有権局に出願された「蛍光顕微鏡撮像方法および装置」と題した中国特許出願第２０１５１０４５２５９３．Ｘ号の優先権を主張するものであり、本文献は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、蛍光顕微鏡撮像の技術分野に関し、特に、蛍光顕微鏡撮像方法および蛍光顕微鏡撮像装置に関する。
【背景技術】
【０００３】
従来技術による蛍光顕微鏡撮像装置を示す図１を参照する。この蛍光顕微鏡撮像装置は、蛍光励起光源１と、単色蛍光励起光源１の照射方向と４５度の角度を形成するように配置されたダイクロイックミラー２と、対物レンズ３と、試料載置台４と、発光フィルタ５と、カメラ６とを備える。単色蛍光励起光源１から励起光が発せられ、ダイクロイックミラー２を介して対物レンズ３に反射された後、試料載置台４上の被検出試料プレートに照射される。被検出試料プレート内の粒子は、励起により蛍光を発し、蛍光は、ダイクロイックミラー２および発光フィルタ５を通過した後とカメラ６に入り、画像を生成する。従来の蛍光顕微鏡撮像装置では、ダイクロイックミラーを用いて光を分離する必要があり、それによって蛍光顕微鏡撮像装置の構造が複雑で高コストとなっている。
【発明の概要】
【０００４】
上記を鑑みて、蛍光顕微鏡撮像方法および蛍光顕微鏡撮像装置が、本開示によって提供される。光を分離するためにダイクロイックミラーを設ける必要がないため、蛍光顕微鏡撮像装置の構造は簡単で低コストとなり、対物レンズに入る単色蛍光励起光が低減され、それによってより正確な蛍光画像を取得する。
【０００５】
上記の目的を達成するために、本開示が提供する技術的解決策は次の通りである。
【０００６】
蛍光顕微鏡撮像方法であって、被検出試料プレートが置かれた後、実験的要求事項にしたがって、複数の単色蛍光励起光源のうち同じ色を有する少なくとも１つの単色蛍光励起光源を標的光源として点灯させることであって、複数の単色蛍光励起光源の各々によって発せられた単色蛍光励起光源は、被検出試料プレートの予め設定された検出領域に斜めに入る、点灯させることと、被検出試料プレートの、標的光源から反対を向く側に、標的光源によって発せられた単色蛍光励起光の照射によって励起された予め設定された検出領域内の粒子の蛍光を収集し、予め設定された回数だけ、予め設定された検出領域を拡大することと、予め設定された検出領域内の粒子の励起された蛍光をフィルタリングすることと、予め設定された検出領域の蛍光画像を取得することとを含む方法が、提供される。
【０００７】
好ましくは、標的光源が点灯された後、かつ標的光源によって発せられた単色蛍光励起光が被検出試料プレートに入る前、方法は、標的光源のうち各単色蛍光励起光源によって発せられた単色蛍光励起光を集束させることをさらに含む。
【０００８】
光源装置と、試料載置台と、対物レンズと、発光フィルタリングモジュールと、画像取得装置とを含む、蛍光顕微鏡撮像装置が、本開示によってさらに提供される。光源装置は、複数の単色蛍光励起光源と、複数の単色蛍光励起光源に電気的に接続された制御システムとを含む。複数の単色蛍光励起光源は、対物レンズと画像取得装置とからなる撮像光路の中心軸の周りに配置され、複数の単色蛍光励起光源の各々によって発せられた単色蛍光励起光と撮像光路の中心軸は、試料載置台上の予め設定された位置で交差する。制御システムは、実験的要求事項にしたがって、複数の単色蛍光励起光源のうち同じ色を有する少なくとも１つの単色蛍光励起光源を標的光源として点灯させる。試料載置台は、複数の単色蛍光励起光源によって発せられた単色蛍光励起光が交差する位置に配置され、被検出試料プレートを置くように構成され、被検出試料プレートの予め設定された検出領域は、試料載置台上の予め設定された位置に配置される。対物レンズは、試料載置台の、光源装置から反対を向く側に配置される。発光フィルタリングモジュールは、対物レンズの、試料載置台から反対を向く側に配置される。画像取得装置は、発光フィルタリングモジュールの、対物レンズから反対を向く側に配置される。
【０００９】
好ましくは、光源装置は、明視野光源をさらに含み、明視野光源によって発せられた全帯域白色光は、試料載置台の方に向いており、撮像光路の中心軸と一致する。
【００１０】
好ましくは、単色蛍光励起光源は、単色ＬＥＤ蛍光励起光源である。
【００１１】
好ましくは、光源装置は、単色ＬＥＤ蛍光励起光源の照射方向に配置され、単色ＬＥＤ蛍光励起光源と試料載置台との間に配置された励起光フィルタをさらに含む。
【００１２】
好ましくは、単色蛍光励起光源は、白色光励起光源と、白色光励起光源の照射方向に配置され、白色光励起光源と試料載置台との間に配置された励起光フィルタとを含む。
【００１３】
好ましくは、発光フィルタリングモジュールは、発光フィルタリングターンテーブルであり、発光フィルタリングターンテーブルの周辺に複数の発光フィルタリング領域が設けられ、複数の発光フィルタリング領域の各々の通過帯域は、被検出試料プレート内の粒子によって発せられ、特定の色の単色蛍光励起光源によって励起される蛍光帯域である。
【００１４】
好ましくは、光源装置は、単色蛍光励起光源の照射方向に配置され、単色蛍光励起光源と試料載置台との間に配置された光集束モジュールをさらに含む。
【００１５】
好ましくは、光集束モジュールは、複数のレンズまたは光集束レンズを含む光集束レンズセットである。
【００１６】
好ましくは、画像取得装置は、接眼レンズまたはカメラである。
【００１７】
本開示が提供する技術的解決策は、従来技術と比較して、少なくとも以下の利点を有する。
【００１８】
蛍光顕微鏡撮像方法および蛍光顕微鏡撮像装置が、本開示によって提供される。本方法は、実験的要求事項にしたがって、複数の単色蛍光励起光源のうち同じ色を有する少なくとも１つの単色蛍光励起光源を標的光源として点灯させることであって、複数の単色蛍光励起光源の各々によって発せられた単色蛍光励起光が、被検出試料プレートの予め設定された検出領域に斜めに入る、点灯させることと、被検出試料プレートの、標的光源から反対を向く側に、標的光源によって発せられた単色蛍光励起光の照射によって励起された予め設定された検出領域内の粒子の蛍光を収集し、予め設定された回数だけ、予め設定された検出領域を拡大することと、予め設定された検出領域内の粒子の励起された蛍光をフィルタリングすることと、予め設定された検出領域の蛍光画像を取得することとを含む。
上記の内容によれば、本開示が提供する技術的解決策では、単色蛍光励起光を蛍光から分離するためにダイクロイックミラーを設ける必要がないため、蛍光顕微鏡装置の構造は簡単で低コストとなり、ダイクロイックミラーを通過した蛍光による光エネルギー損失を回避し、それによってより明るく鮮明な蛍光画像を取得する。加えて、単色蛍光励起光源は、被検出試料プレートを斜めに照射するため、少量の単色蛍光励起光が、被検出試料プレートを通過した後に対物レンズに入り、それによってその後の撮像中、単色蛍光励起光からの影響を低減し、より正確な蛍光画像を取得する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
本開示の実施形態における技術的解決策または従来技術をより明確に示すために、これ以後、実施形態または従来技術の説明において使用される図面を簡単に紹介する。明らかに、以下に説明する図面は、本開示の実施形態のみを記載しており、他の図面を、当業者によって創造的な作業を有することなく、提供された図面に基づいて得ることができる。
【００２０】
【図１】従来技術による蛍光顕微鏡撮像装置の概略構成図である。
【図２】本開示の一実施形態による蛍光顕微鏡撮像方法のフローチャートである。
【図３】本開示の一実施形態による蛍光顕微鏡撮像装置の概略構成図である。
【図４】本開示の一実施形態による他の蛍光顕微鏡撮像装置の概略構成図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
以下、本開示の実施形態における技術的解決策が、本開示の実施形態における図面を併用して明確に完全に説明される。明らかに、説明する実施形態は、本開示の実施形態の全てではなく一部のみである。創造的な作業を有することなく当業者によって本開示の実施形態に基づいて得られるその他の実施形態は、本開示の保護の範囲内に入る。
【００２２】
背景技術で説明したように、従来の蛍光顕微鏡撮像装置では、ダイクロイックミラーを用いて光を分離する必要があるため、蛍光顕微鏡撮像装置の構造が複雑で高価であった。
【００２３】
上記の内容に基づき、蛍光顕微鏡撮像方法および蛍光顕微鏡撮像装置が、本開示によって提供され、ダイクロイックミラーを用いて光を分離する必要がないため、装置の構造は簡単で低コストとなる。また、対物レンズに入る単色蛍光励起光が低減され、それによってより正確な蛍光画像を取得する。
【００２４】
具体的には、本開示の一実施形態による蛍光顕微鏡撮像方法のフローチャートである図２を参照する。この方法は、被検出試料プレートが置かれた後、以下のステップＳ１〜ステップＳ４を含む。
【００２５】
ステップＳ１では、複数の単色蛍光励起光源のうち同じ色を有する少なくとも１つの単色蛍光励起光源が、実験的要求事項にしたがって標的光源として点灯され、複数の単色蛍光励起光源の各々によって発せられた単色蛍光励起光は、被検出試料プレートの予め設定された検出領域に斜めに入る。
【００２６】
ステップＳ２では、被検出試料プレートの、標的光源から反対を向く側に、標的光源によって発せられた単色蛍光励起光の照射によって励起された予め設定された検出領域内の粒子の蛍光が、収集され、予め設定された検出領域は、予め設定された回数だけ拡大される。
【００２７】
ステップＳ３では、予め設定された検出領域内の粒子の励起された蛍光が、フィルタリングされる。
【００２８】
ステップＳ４では、予め設定された検出領域の蛍光画像が取得される。
【００２９】
本開示の実施形態によって提供される複数の単色蛍光励起光源は、異なる色（または帯域）を有する単色蛍光励起光源を含むことができ、または同じ色（または帯域）を有する単色蛍光励起光源を含むことができる。異なる色を有する単色蛍光励起光源である複数の単色蛍光励起光源は、以下のような複数の場合を含むことができる。すなわち、本開示の実施形態によって提供される全ての単色蛍光励起光源は、異なる色を有する。あるいは、全ての単色蛍光励起光源は複数のグループとしてグループ化され、各グループの単色蛍光励起光源は同じ色を有し、異なるグループの単色蛍光励起光源は異なる色を有し、それにより、同じ色を有する複数の単色蛍光励起光源が点灯されて各色の蛍光励起光の輝度を向上させるが、本開示ではこれに限定されない。
【００３０】
上記の内容によれば、本開示の実施形態が提供する技術的解決手段では、単色蛍光励起光を蛍光から分離するためにダイクロイックミラーを設ける必要がないため、蛍光顕微鏡装置の構造は簡単で低コストとなり、ダイクロイックミラーを通過した蛍光による光エネルギー損失を回避し、それによってより明るく鮮明な蛍光画像を取得する。加えて、単色蛍光励起光源は、被検出試料プレートを斜めに照射するため、少量の単色蛍光励起光が、被検出試料プレートを通過した後に対物レンズに入り、それによってその後の撮像中、単色蛍光励起光からの影響を低減し、より正確な蛍光画像を取得する。
【００３１】
また、単色蛍光励起光源によって発せられた蛍光励起光の輝度を向上させ、したがって標的光源によって発せられた単色蛍光励起光の輝度を向上させるために、標的光源が点灯された後、かつ標的光源によって発せられた単色蛍光励起光が被検出試料プレートに入る前に、方法は、標的光源のうち各単色蛍光励起光源によって発せられた単色蛍光励起光を集束させることをさらに含む。
【００３２】
本開示の一実施形態による蛍光顕微鏡撮像装置の概略構成図である図３を参照する。蛍光顕微鏡撮像装置は、光源装置１００と、試料載置台２００と、対物レンズ３００と、発光フィルタリングモジュール４００と、画像取得装置５００とを備えている。
【００３３】
光源装置１００は、複数の単色蛍光励起光源１０１と、複数の単色蛍光励起光源１０１に電気的に接続された制御システム（図示せず）とを備えている。複数の単色蛍光励起光源１０１は、対物レンズ３００と画像取得装置５００とからなる撮像光路の中心軸Ｘの周りに配置されている。各単色蛍光励起光源１０１によって発せられた単色蛍光励起光と撮像光路の中心軸Ｘは、試料載置台２００上の予め設定された位置で交差する。この制御システムは、実験的要求事項にしたがって、複数の単色蛍光励起光源１０１のうち同じ色を有する少なくとも１つの単色蛍光励起光源を標的光源として点灯させる。
【００３４】
試料載置台２００は、複数の単色蛍光励起光源１０１によって発せられる単色蛍光励起光が交差する位置に配置され、被検出試料プレートを載置するように構成される。試料載置台２００上の予め設定された位置には、被検出試料プレートの予め設定された検出領域が配置されている。
【００３５】
対物レンズ３００は、試料載置台２００の、光源装置１００から反対を向く側に配置され、標的光源によって発せられた単色蛍光励起光の照射によって励起された予め設定された検出領域内の粒子の蛍光を収集し、予め設定された回数だけ、予め設定された検出領域を拡大するように構成される。
【００３６】
発光フィルタリングモジュール４００は、対物レンズ３００の、試料柵プラットフォーム２００から反対を向く側に配置され、予め設定された検出領域内の粒子の励起された蛍光をフィルタリングするように構成される。
【００３７】
画像取得装置５００は、発光フィルタリングモジュール４００の、対物レンズ３００から反対を向く側に配置され、予め設定された検出領域の蛍光画像を取得するように構成される。画像取得装置は、接眼レンズまたはカメラ等であってもよく、本開示において限定されない。
【００３８】
上記の内容によれば、本開示の実施形態によって提供される複数の単色蛍光励起光源は、対物レンズと画像取得装置からなる撮像光路の中心軸の周りに配置され、各々の単色蛍光励起光源によって発せられた単色蛍光励起光と撮像光路の中心軸は、試料載置台上の予め設定された位置で交差する。すなわち、単色蛍光励起光源によって発せられた単色蛍光励起光は、試料載置台上の現在位置に斜めに入射する。すなわち、単色蛍光励起光源によって発せられた単色蛍光励起光は、被検出試料プレートの予め設定された検出領域に斜めに入るため、少量の単色蛍光励起光が、被検出試料プレートを通過した後に対物レンズに入り、それによってその後の撮像中、単色蛍光励起光からの影響を低減し、より正確な蛍光画像を取得する。
【００３９】
また、図３に示すように、本発明の実施形態による多蛍光チャンネル同期顕微鏡撮像装置において、光源装置１００は、明視野光源１０２を含み、明視野光源１０２によって発せられる全帯域白色光は、試料載置台２００の方に向いており、撮像光路の中心軸Ｘと一致する。
【００４０】
具体的には、本開示の実施形態によって提供される単色蛍光励起光源は、単色ＬＥＤ（発光ダイオード）蛍光励起光源であってもよい。さらに、単色ＬＥＤ蛍光励起光源によって発せられた単色蛍光励起光の単一性を向上させるために、本開示の実施形態によって提供される光源装置は、単色ＬＥＤ蛍光励起光源の照射方向に配置され、単色ＬＥＤ蛍光励起光源と試料載置台との間に配置された励起光フィルタをさらに含む。単色蛍光励起光の帯域のない光は、励起光フィルタによって吸収され、単色蛍光励起光のみが励起光フィルタを通過し、それによって単色ＬＥＤ蛍光励起光源から発せられた単色蛍光励起光の単一性を向上させる。
【００４１】
あるいは、本開示の実施形態では、単色蛍光励起光源は、白色光励起光源と、白色光励起光源の照射方向に配置され、白色光励起光源と試料載置台との間に配置された励起光フィルタとをさらに含むことができる。白色光励起光源は全帯域白色光を発し、不要な帯域の光は励起光フィルタによって吸収され、予め設定された帯域内の単色蛍光励起光は、励起光フィルタを通過する。本開示の実施形態によって提供される白色光励起光源は、水銀ランプまたはキセノンランプであってもよいが、これらは本開示において限定されないことに留意されたい。
【００４２】
ＬＥＤは、応答時間が短く、エネルギー消費量が少なく、コストが低く、寿命が長く、体積が小さいという利点を有するため、本開示の実施形態では、単色蛍光励起光源は、好ましくは、単色ＬＥＤ蛍光励起光源であることに留意されたい。加えて、本開示の実施形態によって提供される制御システムは、単一チップマイクロプロセッサなどであってもよく、これらは本開示において限定されない。
【００４３】
本開示の実施形態によって提供される発光フィルタリングモジュールは、単色蛍光励起光によって励起される予め設定された検出領域内の粒子の蛍光をフィルタリングする。発光フィルタリングモジュールは、発光フィルタリングターンテーブルであり、複数の発光フィルタリング領域は、発光フィルタリングターンテーブルの周辺に設けられる。各発光フィルタリング領域の通過帯域は、被検出試料プレート内の粒子によって発せられ、特定の色を有する単色蛍光励起光源によって励起される蛍光の帯域である。
【００４４】
たとえば、標的光源が青色蛍光励起光源である場合、標的光源は青色蛍光励起光を発する。青色蛍光励起光は、被検出試料プレートの予め設定された検出領域を照射した後、予め設定された検出領域内の粒子を励起して緑蛍光を発し、次いで、緑蛍光および青色迷光からなる発光は、対物レンズを通過した後、発光フィルタリングターンテーブルに入る。この場合、緑色蛍光が通過する発光フィルタリングターンテーブル内の発光フィルタリング領域は、発光の迷光が吸収され、緑色蛍光のみが発光フィルタリングターンテーブルを通過するように対物レンズを整列させる。
【００４５】
加えて、光源装置が明視野光源をさらに含む場合、明視野光源は全帯域の白色光を発するため、発光フィルタリングモジュールは透明領域をさらに含む。すなわち、標的光源が明視野光源である場合、発光フィルタリングターンテーブル内の透明領域が、対物レンズに相当する。
【００４６】
さらに、単色蛍光励起光源によって発せられる単色蛍光励起光の輝度を向上させるために、本開示の実施形態による別の蛍光顕微鏡撮像装置の概略構造図である図４を参照する。光源装置１００は、単色蛍光励起光源１０１の照射方向に配置され、単色蛍光励起光源１０１と試料載置台２００との間に配置された光集束モジュール６００をさらに含む。光集束モジュールは、複数のレンズまたは単一の集光レンズを含む光集束レンズセットであってもよく、これは、本開示では限定されない。
【００４７】
光源装置、試料載置台、対物レンズ、発光フィルタリングモジュール、および画像取得装置等などを固定するために、全ての構造は、本開示の実施形態によって提供される蛍光顕微鏡撮像装置内に固定ブラケットによって固定されてよい。
【００４８】
蛍光顕微鏡撮像方法および蛍光顕微鏡撮像装置が、本開示によって提供される。本方法は、実験的要求事項にしたがって、複数の単色蛍光励起光源のうち同じ色を有する少なくとも１つの単色蛍光励起光源を標的光源として点灯させることであって、複数の単色蛍光励起光源の各々によって発せられた単色蛍光励起光が、被検出試料プレートの予め設定された検出領域に斜めに入る、点灯させることと、被検出試料プレートの、標的光源から反対を向く側に、標的光源によって発せられた単色蛍光励起光の照射によって励起された予め設定された検出領域内の粒子の蛍光を収集し、予め設定された回数だけ、予め設定された検出領域を拡大することと、予め設定された検出領域内の粒子の励起された蛍光をフィルタリングすることと、予め設定された検出領域の蛍光画像を取得することとを含む。
【００４９】
上記の内容によれば、本開示の実施形態が提供する技術的解決手段では、単色蛍光励起光を蛍光から分離するためにダイクロイックミラーを設ける必要がないため、蛍光顕微鏡装置の構造は簡単で低コストとなり、ダイクロイックミラーを通過した蛍光による光エネルギー損失を回避し、それによってより明るく鮮明な蛍光画像を取得する。加えて、単色蛍光励起光源は、被検出試料プレートを斜めに照射するため、少量の単色蛍光励起光が、被検出試料プレートを通過した後に対物レンズに入り、それによってその後の撮像中、単色蛍光励起光からの影響を低減し、より正確な蛍光画像を取得する。
【００５０】
開示する実施形態の上記説明は、当業者が本開示を実施または実行することを可能にすることができる。これらの実施形態に対する多くの変更は、当業者にとって明らかであり、本明細書で定義する一般原則は、本開示の趣旨または範囲から逸脱することなく、他の実施形態において実施され得る。したがって、本開示は、本明細書に開示する実施形態に限定されず、本明細書に開示する原理および新規の特徴に従う最も広い範囲に従うものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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