(57)【要約】  本発明は、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープ、詳細には神経疾患に関連する抗グリカン抗体により結合されるセレブロシド、グロボシド型、ガングリオ型およびスルホグルクロニルパラグロボシド型のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣する、炭水化物リガンドおよび部分のそれぞれに関する。本発明はさらに、抗グリカン抗体に関連する神経疾患の診断において、そしてその処置のための、これらの炭水化物リガンド／部分の使用に関する。特に、本発明は、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物に関し、ならびに式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の１つの化合物、または式（Ｉ）および／もしくは（ＩＩ）の複数の化合物の組み合わせを担持するポリマーを含む、これらの化合物の複数を含む治療的に許容し得るポリマーに関する。式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）（式中、ＲＩ１は、Ｚまたは（ＡＡ）または（ＢＢ）または（ＣＣ）または（ＤＤ）であり、ＲＩ２は、Ｈ、ＳＯ３Ｈ、または（ＥＥ）または（ＦＦ）または（ＧＧ）または（ＨＨ）または（ＪＪ）または（ＫＫ）または（ＬＬ）であり、ＲＩ３は、Ｈまたは（ＭＭ）であり、ＲＩ４は、Ｈまたは（ＮＮ）または（ＯＯ）であり、ＲＩ５およびＲＩ６は、Ｈまたは（ＥＥ）であり、ＲＩ７は、Ｈまたは（ＥＥ）または（ＦＦ）である）として定義され、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ）（式中、ＲＩＩ１は、Ｚまたは（ＰＰ）であり、ＲＩＩ２は、Ｚまたは（ＱＱ）または（ＲＲ）または（ＳＳ）または（ＴＴ）である）として定義され、ここでＺは、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、Ｒａは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａは、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂは、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐは、０〜６であり、好ましくはｐは、１、２または３であり、さらに好ましくはｐは、１であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；ｑは、０〜６であり、好ましくはｑは、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑは、１または２である。2018534246.tif 000111【選択図】なし
2018534246.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炭水化物部分およびリンカーＺを含む化合物であって、前記炭水化物部分が、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣しており、
前記リンカーＺが、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここで
Ｒａが、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；
Ａが、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂが、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐが、０〜６であり、好ましくはｐが、１、２または３であり、さらに好ましくはｐが、１であり；
Ｂが、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；
ｑが、０〜６であり、好ましくはｑが、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑが、１または２であり；
前記リンカーＺが、前記炭水化物部分の還元末端に−Ｎ（Ｒａ）−基を介して共有結合している、化合物。
【請求項２】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物であって、
式（Ｉ）が、
【化１】
2018534246.tif 000092
（式中、ＲＩ１は、Ｚまたは
【化２】
2018534246.tif 000093
であり；
ＲＩ２は、Ｈ、ＳＯ３Ｈ、または
【化３】
2018534246.tif 000094
であり；
ＲＩ３は、Ｈまたは
【化４】
2018534246.tif 000095
であり；
ＲＩ４は、Ｈまたは
【化５】
2018534246.tif 000096
であり；
ＲＩ５およびＲＩ６は、独立して、Ｈまたは
【化６】
2018534246.tif 000097
であり；
ＲＩ７は、Ｈまたは
【化７】
2018534246.tif 000098
である）であり；
式（ＩＩ）が、
【化８】
2018534246.tif 000099
（式中、ＲＩＩ１は、Ｚまたは
【化９】
2018534246.tif 000100
であり；
ＲＩＩ２は、Ｚまたは
【化１０】
2018534246.tif 000101
である）であり；
Ｚが、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここで
Ｒａが、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；
Ａが、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂが、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐが、０〜６であり、好ましくはｐが、１、２または３であり、さらに好ましくはｐが、１であり；
Ｂが、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；
ｑが、０〜６であり、好ましくはｑが、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑが、１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式（Ｉ）の化合物である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
式（ＩＩ）の化合物である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項５】
式４＊、９＊、１３＊、１７＊、２１＊、２５＊、２９＊、３３＊、または４６＊〜６０＊ のいずれか１つ：
【化１１】
2018534246.tif 000102
2018534246.tif 000103
2018534246.tif 000104
2018534246.tif 000105
2018534246.tif 000106
（式中、Ｚは、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここで
Ｒａは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；
Ａは、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂは、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐは、０〜６であり、好ましくはｐは、１、２または３であり、さらに好ましくはｐは、１であり；
Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；
ｑは、０〜６であり、好ましくはｑは、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑは、１または２である）の化合物である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒａが、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；
Ａが、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；
Ｂが、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
前記リンカーＺが、式（ａ）〜（ｇ）：
【化１２】
2018534246.tif 000107
（式中、ｐは、０〜６の間、好ましくは１〜３、特に１であり、ｑは、０〜６の間、好ましくは１〜４の間、特に１または２である）のいずれか１つから選択される式のリンカーである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
式４、９、１３、１７、２１、２５、２９、３３、３７、４１、４４、５６、５８または７７
【化１３】
2018534246.tif 000108
2018534246.tif 000109
2018534246.tif 000110
の化合物である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物の複数を含むポリマーであって、前記化合物が、前記リンカーＺによってポリマー骨格に連結されており、前記連結が、前記リンカーＺのＳＨ−基を介してもたらされ、前記化合物の複数が、（ｉ）複数の式（Ｉ）の化合物、（ｉｉ）複数の式（ＩＩ）の化合物、または（ｉｉｉ）複数の式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物であり、前記化合物（Ｉ）および（ＩＩ）が、請求項２〜８のいずれか１項に定義される、ポリマー。
【請求項１０】
前記ポリマー骨格が、α−アミノ酸ポリマー、アクリル酸もしくはメタクリル酸ポリマーもしくはコポリマー、Ｎ−ビニル−２−ピロリドン−ビニルアルコールコポリマー、キトサンポリマー、またはポリホスファゼンポリマーであり、好ましくは前記ポリマー骨格が、α−アミノ酸ポリマーであり、さらに好ましくは前記ポリマー骨格が、α−アミノ酸ポリマーであり、前記α−アミノ酸ポリマーの前記α−アミノ酸が、リジン、オルニチン、グルタミン酸、またはアスパラギン酸である、請求項９に記載のポリマー。
【請求項１１】
前記ポリマー骨格が、ポリリジンであり、好ましくは前記ポリマー骨格の分子量が、１，０００Ｄａ〜３００，０００Ｄａである、請求項９または１０に記載のポリマー。
【請求項１２】
ポリマー骨格上への前記化合物の炭水化物部分の担持（ｌｏａｄｉｎｇ）の割合％が、１０〜９０％の間、好ましくは２０〜７０％の間、特に３０〜６０％の間である、請求項９〜１１のいずれか１項に記載のポリマー。
【請求項１３】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、好ましくは請求項２〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物、または請求項９〜１２のいずれか１項に記載のポリマー、を含む医薬組成物。
【請求項１４】
神経疾患を処置する方法において使用するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、好ましくは請求項２〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物、または請求項９〜１２のいずれか１項に記載のポリマー、または請求項１３に記載の医薬組成物であって、好ましくは前記神経疾患が、多発性硬化症、パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症および免疫介在性ニューロパチーから選択され、好ましくは前記免疫介在性ニューロパチーが、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、ミラー・フィッシャー症候群、ビッカースタッフ脳幹脳炎、多巣性運動ニューロパチーまたは抗ＭＡＧニューロパチーから選択される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、好ましくは請求項２〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物、または請求項９〜１２のいずれか１項に記載のポリマー、または請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
好ましくは免疫介在性ニューロパチーである、神経疾患の診断の方法において使用するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物、好ましくは請求項２〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物、または請求項９〜１２のいずれか１項に記載のポリマー、または請求項１３に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、神経系のスフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープに対する抗体に結合する、炭水化物リガンドおよび部分のそれぞれ、これらの炭水化物リガンドを含むポリマー、ならびに神経疾患の診断および治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
様々な神経疾患が、抗グリカン抗体の存在、またはレベル上昇に関連している。抗糖脂質抗体、詳細には抗ガングリオシド抗体は、種々の神経病理状態、例えば多発性硬化症、パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）（亜型の急性運動性軸索型ニューロパチー（ＡＭＡＮ）、急性運動感覚性軸索型ニューロパチー（ＡＭＳＡＮ）、および急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＡＩＤＰ）を含む）、ミラー・フィッシャー症候群（ＭＦＳ）および多巣性運動ニューロパチー（ＭＭＮ）を含む自己免疫介在性ニューロパチーにおいて検出されている（Ｋ．  Ｋｏｌｌｅｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｌｏｓ  Ｏｎｅ  ２０１５，  １０）。
【０００３】
抗グリカン抗体が神経系に対する免疫介在性の攻撃に関与するという、細胞培養物、組織培養物および動物モデルからのエビデンスがある。抗グリカン抗体は、神経細胞またはミエリン細胞上で関連する抗原を標的とし、神経線維機能の崩壊、伝導不全、軸索変性、および脱髄を引き起こし得る（Ｈ．  Ｊ．  Ｗｉｌｌｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｎ．  Ｙｕｋｉ，  Ｂｒａｉｎ，  ２００２，  １２５，  ２５９１−２６２５；Ｋ．  Ａ．  Ｓｈｅｉｋｈ  ａｎｄ  Ｇ．  Ｚｈａｎｇ，  Ｆ１０００  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｒｅｐｏｒｔｓ，  ２０１０，  ２，  ２１）。
【０００４】
補体結合および膜侵襲複合体の形成、例えばナトリウムチャネル遮断を通した、シグナル伝達の崩壊（Ｈ．  Ｊ．  Ｗｉｌｌｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｎ．  Ｙｕｋｉ，  Ｂｒａｉｎ，  ２００２，  ｌｏｃ．  ｃｉｔ)、または脂質ラフトの崩壊およびその中のシグナル伝達経路の妨害（Ａ  Ｕｅｄａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，  ２０１０，  ４５（４），  ３５５−６２）、を含む抗グリカン抗体の病原性を説明し得る複数のメカニズムが存在する。抗ガングリオシド抗体もまた、血液脳関門の機能障害に関与し、それにより神経変性疾患の進行に寄与する（Ｔ．  Ａｒｉｇａ，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｒｅｓ，  ２０１４，  ９２，  １２２７−１２４２）。興味深いこととして、免疫介在性ニューロパチーに関与する一部の抗グリカン抗体は、単一のグリカンを認識しないが、グリカンの集合体、詳細には糖脂質複合体（パターン認識抗体）を認識する。したがってパターン認識特性を有する抗糖脂質抗体は、過去にどの抗体も同定されなかった免疫介在性ニューロパチーにおいて、近年になり記載されている。そのような抗体は、ＧＢＳで、例えばＧＢＳの亜型ＡＩＤＰにおいて同定されている（Ｈ．  Ｊ．  Ｗｉｌｌｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｃ．  Ｓ．  Ｇｏｏｄｙｅａｒ，  Ｃｅｌｌ，  ２０１３，  ３４，  ４５３−４５９）。
【０００５】
抗グリカン抗体の病理学的役割は、急性および慢性型の免疫介在性ニューロパチーにおいて確立されているが、必ずしも明確ではない。この疾患群において、特異的抗糖脂質抗体および特異的臨床血清学的パターンが、特定の臨床表現型に関連している（Ｈ．  Ｊ．  Ｗｉｌｌｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｎ．  Ｙｕｋｉ，  Ｂｒａｉｎ，  ２００２，  １２５，  ２５９１−２６２５）。抗グリカン抗体は通常、ＩｇＭ、ＩｇＧまたはＩｇＡ型の抗体である。
【０００６】
免疫介在性ニューロパチーに関連する炭水化物エピトープは主に、ほとんどがＧＭ１（ＧＭ１ａ）、ＧＭ１ｂ、ＧａｌＮＡｃ−ＧＭ１ｂ、フコシル−ＧＭ１、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ２、ＧＤ３、ＧＤ１ａ、ＧａｌＮＡｃ−ＧＤ１ａ、ＧＤ１ｂ、ＧＴ１ａ、ＧＴ１ｂ、ＧＴ１ａα、ＧＱ１ｂ、ＧＱ１ｂα、ＬＭ１、Ｈｅｘ−ＬＭ１を伴うガングリオシド型の、糖脂質、さらにスルファチドまたはアシアロ−ＧＭ１／アシアロ−ＧＭ２、ガラクトセレブロシド、ＳＧＰＧおよびＳＧＬＰＧ（ＨＮＫ−１エピトープ）などの非シアリル化糖脂質の群の炭水化物抗原である（Ｈ．  Ｊ．  Ｗｉｌｌｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｎ．  Ｙｕｋｉ，  Ｂｒａｉｎ，  ２００２，  １２５，  ２５９１−２６２５）。
【０００７】
急性免疫介在性ニューロパチーの群において、ＧＢＳは、神経糖鎖エピトープに対する自己抗体をしばしば伴う複数の疾患状態を包含する。ＧＢＳのうちの大部分の亜群は、ＡＭＡＮ、ＡＭＳＡＮおよびＡＩＤＰであり、ＡＭＡＮは、他の亜型と比較して主に運動神経に影響を及ぼす。ＧＢＳは、ＧＭ１、ＧＤ１ａ、ならびに構造的に類似したＧＭ１ｂおよびＧａｌＮＡｃ−ＧＤ１ａなどのガングリオシドに対する自己抗体だけでなく、ガングリオシド複合体、例えばＧＭ１およびＧＤ１ａに対する自己抗体に関連する。ＧＢＳの咽頭−頸部−上腕（ＰＣＢ）型は、ＧＴ１ａ単独に対する自己抗体、または追加的にＧＱ１ｂに対する自己抗体と相関する。ＧＢＳの別の臨床的に異なる亜群は、ＧＱ１ｂおよびＧＴ１ａエピトープに対する抗体に主に関連するミラー・フィッシャー症候群である。急性ニューロパチーの群における病原性自己抗体は、大部分がＩｇＧアイソタイプの抗体である（Ｅ．  Ｄｅｌｍｏｎｔ，  Ｈ．  Ｊ．  Ｗｉｌｌｉｓｏｎ，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｍ  Ｄｉｓ．，  ２０１５，  ２，  １０７−１１２）。
【０００８】
急性ニューロパチーと対照的に、慢性免疫介在性ニューロパチーは、ほとんどがＩｇＭ自己抗体に関連する。慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）は、慢性脱髄性多発ニューロパチーの最も一般的な形態である。ＣＩＤＰの亜型は、病原性の抗グリカン抗体を伴う（Ｅ．  Ｄｅｌｍｏｎｔ，  Ｈ．  Ｊ．  Ｗｉｌｌｉｓｏｎ，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｍ  Ｄｉｓ．，  ２０１５，  ２，  １０７−１１２）。
【０００９】
慢性炎症性ニューロパチーのうちの他の２つの主要疾患群は、抗ＭＡＧニューロパチーおよび多巣性運動ニューロパチー（ＭＭＮ）である。抗ＭＡＧニューロパチーは主に、ＭＡＧ、ＳＧＰＧ、ＳＧＬＰＧ、Ｐ０およびＰＭＰ２２などの複数のミエリン抗原上に存在するＨＮＫ−１エピトープに対する自己抗体を伴う。ＭＭＮ患者はしばしば、ガングリオシドＧＭ１（またはＧＭ１：Ｇａ１Ｃ複合体）に対する自己抗体を示す。その他の、より症例数が少ない慢性ニューロパチーとしては、抗スルファチド抗体を有する慢性感覚性軸索型ニューロパチー、ＧＤ１ａまたはＧＤ１ｂ抗体を有する慢性運動ニューロパチー、ならびにＧＱ１ｂおよびＧＤ１ｂなどのジシアロシルガングリオシドに対する抗体を有するＣＡＮＯＭＡＤが挙げられる（慢性失調性ニューロパチー、眼筋麻痺、Ｍ−タンパク質、膠着、ジシアロシル抗体）（Ｅ．  Ｎｏｂｉｌｅ−Ｏｒａｚｉｏ，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ  ＆  Ｍｙｅｌｏｍａ，  ２００９，  ９，  １０７−１０９）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
発明の概要
本発明は、神経系のスフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープに対する抗体に結合する、炭水化物リガンドおよび部分のそれぞれ、これらの炭水化物リガンドを含むポリマー、ならびに神経疾患の診断および治療におけるそれらの使用に関する。特に本発明は、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープ、詳細には神経疾患に関連する抗グリカン抗体が結合するセレブロシド、（ネオ）ラクト型、ガングリオ型およびスルホグルクロニルパラグロボシド型のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣する、炭水化物リガンドおよび部分のそれぞれに関する。本発明は、抗グリカン抗体に関連する神経疾患の診断における、ならびに処置のための、これらの炭水化物リガンドおよび部分のそれぞれの使用に関する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
第一の態様において、本発明は、炭水化物部分およびリンカーＺを含む化合物であって、前記炭水化物部分が、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣するか、またはあるいはそして好ましくは該糖鎖エピトープであり、前記リンカーＺが、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここでＲａが、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａが、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂが、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐが、０〜６であり、好ましくはｐが、１、２または３であり、さらに好ましくはｐが、１であり；Ｂが、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；ｑが、０〜６であり、好ましくはｑが、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑが、１または２であり；前記リンカーＺが、前記炭水化物部分の還元末端に−Ｎ（Ｒａ）−基を介して共有結合している、化合物を提供する。
【００１２】
第二の態様において、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物であって、式（Ｉ）が、
【化１】
2018534246.tif 000003
（式中、ＲＩ１は、Ｚまたは
【化２】
2018534246.tif 000004
であり；
ＲＩ２は、Ｈ、ＳＯ３Ｈ、または
【化３】
2018534246.tif 000005
であり；
ＲＩ３は、Ｈまたは
【化４】
2018534246.tif 000006
であり；
ＲＩ４は、Ｈまたは
【化５】
2018534246.tif 000007
であり；
ＲＩ５およびＲＩ６は、独立して、Ｈまたは
【化６】
2018534246.tif 000008
であり；
ＲＩ７は、Ｈまたは
【化７】
2018534246.tif 000009
である）であり；
式（ＩＩ）が、
【化８】
2018534246.tif 000010
（式中、ＲＩＩ１は、Ｚまたは
【化９】
2018534246.tif 000011
であり；
ＲＩＩ２は、Ｚまたは
【化１０】
2018534246.tif 000012
である）であり；
前記リンカーＺが、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここでＲａが、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａが、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂが、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐが、０〜６であり、好ましくはｐが、１、２または３であり、さらに好ましくはｐが、１であり；Ｂが、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；ｑが、０〜６であり、好ましくはｑが、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑが、１または２であり；前記リンカーＺが、前記炭水化物部分の還元末端に−Ｎ（Ｒａ）−基を介して共有結合している、化合物を提供する。
【００１３】
さらに本発明は、本発明の化合物に由来する複数の置換基を含む医薬的に許容し得るポリマーであって、該化合物がリンカーＺによってポリマー骨格に連結されており、該連結がリンカーＺのＳＨ−部分を介してもたらされる、医薬的に許容し得るポリマーを提供する。
【００１４】
したがって別の態様において、本発明は、複数の本発明の化合物を含むポリマーであって、該化合物がリンカーＺによってポリマー骨格に連結されており、該連結がリンカーＺのＳＨ−部分を介してもたらされる、ポリマーを提供する。
【００１５】
さらなる態様において、本発明は、（ｉ）複数の式（Ｉ）の化合物、（ｉｉ）複数の式（ＩＩ）の化合物、または（ｉｉｉ）複数の式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物、を含むポリマーであって、前記化合物が前記リンカーＺによってポリマー骨格に連結されており、該連結が前記リンカーＺのＳＨ−基を介して実行される、ポリマーを提供する。好ましくは前記複数の式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物は、式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物と同一の化合物、または式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物から選択される異なる化合物、のいずれかである。
【００１６】
本発明はまた、これらの化合物を含む医薬組成物、これらを含有する診断キット、ならびに抗グリカン抗体に関連する神経疾患の診断および治療のためのこれらの化合物の使用に関する。
【００１７】
したがって別の態様において、本発明は、前記本発明の化合物を含む、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の本発明の化合物を含む、または前記本発明を含む、医薬組成物を提供する。
【００１８】
別の態様において、本発明は、神経疾患を処置する方法において使用するための、前記本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の前記本発明の化合物、または前記本発明のポリマー、または前記本発明の医薬組成物であって、好ましくは前記神経疾患が、多発性硬化症、パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症および免疫介在性ニューロパチーから選択され、好ましくは前記免疫介在性ニューロパチーが、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、ミラー・フィッシャー症候群、ビッカースタッフ脳幹脳炎、多巣性運動ニューロパチーまたは抗ＭＡＧニューロパチーから選択され、さらに好ましくは前記免疫介在性ニューロパチーが、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、ミラー・フィッシャー症候群（ＭＦＳ）、ビッカースタッフ脳幹脳炎または多巣性運動ニューロパチーから選択される、前記本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の前記本発明の化合物、または前記本発明のポリマー、または前記本発明の医薬組成物を提供する。
【００１９】
別の態様において、本発明は、好ましくは免疫介在性ニューロパチーである神経疾患の診断の方法において使用するための、前記本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の前記本発明の化合物、または前記本発明のポリマー、または前記本発明の医薬組成物を提供する。
【００２０】
別の態様において、本発明は、前記本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の前記本発明の化合物、または前記本発明のポリマーを含む診断キットを提供する。
【００２１】
別の態様において、本発明は、好ましくは免疫介在性ニューロパチーである神経疾患の診断のための、前記本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の前記本発明の化合物、または前記本発明のポリマーの使用を提供する。
【００２２】
別の態様において、本発明は、神経疾患の処置のための医薬を製造するための、前記本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の前記本発明の化合物、または前記本発明のポリマーの使用であって、好ましくは前記神経疾患が、多発性硬化症、パーキンソン病、アルツハイマー病、認知症および免疫介在性ニューロパチーから選択され、好ましくは前記免疫介在性ニューロパチーが、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、ミラー・フィッシャー症候群、ビッカースタッフ脳幹脳炎、多巣性運動ニューロパチーまたは抗ＭＡＧニューロパチーから選択され、さらに好ましくは前記免疫介在性ニューロパチーが、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、ミラー・フィッシャー症候群（ＭＦＳ）、ビッカースタッフ脳幹脳炎または多巣性運動ニューロパチーから選択される、前記本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の前記本発明の化合物、または前記本発明のポリマーの使用を提供する。
【００２３】
別の態様において、本発明は、神経疾患の処置の方法であって、好ましくは前記神経疾患が、免疫介在性ニューロパチーであり、前記方法が、前記本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の前記本発明の化合物、または前記本発明のポリマーを前記疾患に対して有効な量で、そのような処置を必要とする温血動物、好ましくはヒトへ投与することを含む、方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】競合結合アッセイの略図。（ａ）糖脂質コーティングプレートと、ＩｇＧ（および／またはＩｇＭ）アイソタイプの抗糖脂質抗体を含むニューロパチー患者の血清、および糖鎖ポリマーとのコインキュベーション。この詳細な代表的実施例において、ＧＭ１ａガングリオシドコーティングプレートを、抗ＧＭａ  ＩｇＧ含有血清および糖鎖ポリマー６とコインキュベートする。（ｂ）洗浄ステップ。（ｃ）西洋ワサビペルオキシダーゼにカップリングされた抗ヒトＩｇＧ（またはＩｇＭ）抗体とのインキュベーション。（ｄ）洗浄ステップ。（ｅ）テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）基質の添加。（ｆ）酸性停止溶液の添加および光学密度の測定。
【図２】化合物６、２６、３４および８６の結合曲線。
【図２Ａ】ＧＭ１ａ−ガングリオシドコーティングウェルを、化合物６（最高濃度１ｍＭ）および患者２名の血清ＰＰ  ＩｇＧ  Ｐｏｓ．（ＩｇＧ）、Ｐ２１（ＩｇＧ）と共にコインキュベートした。化合物６は、ＧＭ１ａ糖鎖エピトープにカップリングされた既定の割合のリジン残基を有するポリリジンポリマー（平均２５０の反復リジン単位）である（４）。用いた一般的略語は、以下の通りである：ＰＬ（糖鎖エピトープ）ｘ、ｘは糖鎖エピトープの担持（ｌｏａｄｉｎｇ）の割合を％で定義している。この場合、ポリマーは、ＰＬ（ＧＭ１ａ）２８である。結果を、平均値±ＳＤとして示す。
【図２Ｂ】ＧＭ１ａコーティングウェルとＰＬ（ＧＭ１ａ）２８ポリマー６（最高濃度３ｍＭ）と患者血清Ｐ３（ＩｇＭ）およびＰ４（ＩｇＭ）とのコインキュベーション。結果を、平均値±ＳＤとして示す。
【図２Ｃ】ＧＤ１ｂコーティングウェルとＰＬ（ＧＤ１ｂ）２０ポリマー２６（最高濃度３ｍＭ）と患者血清Ｐ２２（ＩｇＧ）とのコインキュベーション。結果を、平均±ＳＤとして示す。
【図２Ｄ】ＧＱ１ｂコーティングウェルとＰＬ（ＧＴ１ａ）５８ポリマー３４（最高濃度３ｍＭ）と患者血清ＥＫ−ＧＣＯ  １８０３（ＩｇＧ）、Ｐ２３（ＩｇＧ）とのコインキュベーション。結果を、平均値±ＳＤとして示す。
【図２Ｅ】ＭＡＧコーティングウェル（ＭＡＧは８までのＨＮＫ−１糖鎖エピトープを含有）およびＰＬ（ＨＮＫ−１模倣体（５８））４０ポリマー８６（最高濃度１００μＭ）とマウスモノクローナル抗ＨＮＫ−１  ＩｇＭ抗体とのコインキュベーション。結果を、平均値±ＳＤとして示す。
【図３】ＢＡＬＢ／ｃ野生型マウスを、いずれもＨＮＫ−１糖鎖エピトープを担う２種のスフィンゴ糖脂質ＳＧＰＧおよびＳＧＬＰＧに対して免疫化した。免疫化マウスは、免疫化（０時間目、処置前）後１５４日目に高レベルの抗ＨＮＫ−１（抗ＭＡＧ）ＩｇＭ抗体を示した。これらにより誘導されたマウス抗体は、抗ＭＡＧニューロパチー患者のヒト抗ＭＡＧ  ＩｇＭのモデルである。免疫化ＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝６）へのＰＬ（ＨＮＫ−１模倣体（５８））４０ポリマー８６（１０ｍｇ／ｋｇ）の静脈内投与により、投与後１週間（１６８時間）までに抗ＨＮＫ−１（抗ＭＡＧ）ＩｇＭ抗体は有意に減少した。結果を、平均値±９５％ＣＩ（上）および平均値±ＳＤ（下）として示す。結果を、一元配置分散分析の後に統計学的有意性に関して許容される０．０５信頼水準でダネットの多重比較事後検定により解析した（＊ｐ≦０．０５、＊＊ｐ≦０．０１、＊＊＊ｐ≦０．００１）。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
発明の詳細な説明
本発明の化合物、特に式（Ｉ）または（ＩＩ）の本発明の化合物は、神経系のスフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープ、詳細にはセレブロシド型、（ネオ）ラクト型、およびガングリオ型などのスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープに対する抗グリカン抗体を認識する。炭水化物リガンドは、多価で提示するためにポリマー骨格へのカップリングを可能にするリンカーを含有する。カップリングから得られた糖鎖ポリマーは、各グリカンモノマーと比較して、抗炭水化物抗体の分離という点において優れている。該糖鎖ポリマーは、特に神経疾患に関連する抗グリカン抗体を検出する、およびそれに結合する適切な診断または治療薬である。
【００２６】
本発明は、炭水化物部分およびリンカーＺを含む化合物であって、前記炭水化物部分が、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣するか、またはあるいはそして好ましくは該糖鎖エピトープであり、前記リンカーＺが、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここでＲａが、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａが、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂが、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐが、０〜６であり、好ましくはｐが、１、２または３であり、さらに好ましくはｐが、１であり；Ｂが、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；ｑが、０〜６であり、好ましくはｑが、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑが、１または２であり；前記リンカーＺが、前記炭水化物部分の還元末端に−Ｎ（Ｒａ）−基を介して共有結合している、化合物を提供する。
【００２７】
好ましい実施形態において、神経系の前記スフィンゴ糖脂質は、セレブロシド型、（ネオ）ラクト型、ガングリオ型またはスルホグルクロニルパラグロボシド型から選択される。さらに好ましい実施形態において、神経系の前記スフィンゴ糖脂質は、ガングリオシドであり、好ましい前記ガングリオシドは、ＧＭ１（ＧＭ１ａ）、ＧＭ１ｂ、ＧａｌＮＡｃ−ＧＭ１ｂ、フコシル−ＧＭ１、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ２、ＧＤ３、ＧＤ１ａ、ＧａｌＮＡｃ−ＧＤ１ａ、ＧＤ１ｂ、ＧＴ１ａ、ＧＴ１ｂ、ＧＴ１ａα、ＧＱ１ｂ、ＧＱ１ｂα、ＬＭ１、またはＨｅｘ−ＬＭ１から選択される。
【００２８】
特に、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物であって、式（Ｉ）が、
【化１１】
2018534246.tif 000013
（式中、ＲＩ１は、Ｚまたは
【化１２】
2018534246.tif 000014
であり；ＲＩ２は、Ｈ、ＳＯ３Ｈ、または
【化１３】
2018534246.tif 000015
であり；
ＲＩ３は、Ｈまたは
【化１４】
2018534246.tif 000016
であり；
ＲＩ４は、Ｈまたは
【化１５】
2018534246.tif 000017
であり；
ＲＩ５およびＲＩ６は、独立して、Ｈまたは
【化１６】
2018534246.tif 000018
であり；
ＲＩ７は、Ｈまたは
【化１７】
2018534246.tif 000019
である）であり；
そして式（ＩＩ）が、
【化１８】
2018534246.tif 000020
（式中、ＲＩＩ１は、Ｚまたは
【化１９】
2018534246.tif 000021
であり；
ＲＩＩ２は、Ｚまたは
【化２０】
2018534246.tif 000022
である）であり；
前記リンカーＺが、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここでＲａが、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａが、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂが、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐが、０〜６であり、好ましくはｐが、１、２または３であり、さらに好ましくはｐが、１であり；Ｂが、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；ｑが、０〜６であり、好ましくはｑが、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑが、１または２であり；前記リンカーＺが、前記炭水化物部分の還元末端に−Ｎ（Ｒａ）−基を介して共有結合している、化合物を提供する。
【００２９】
さらに好ましい実施形態において、前記化合物は、式（Ｉ）の化合物である。
【００３０】
本発明の範囲は、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣する炭水化物部分を含む。本発明による神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣する好ましい化合物は、シアリル酸部分の少なくとも１つが、式（Ｉａ）または式（Ｉｂ）：
【化２１】
2018534246.tif 000023
に図示および定義された置換部分によって置換されており、式（Ｉｂ）の前記置換部分に関して、ＲＩ８が、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル−シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８−アルケニル、Ｃ１〜Ｃ８−アルキニル、アリール、置換アリールであり、好ましくは前記アリールの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールとの置換であり、好ましくは前記ヘテロアリールの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、アリールアルキル、置換アリールアルキルとの置換であり、好ましくは前記アリールアルキルの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキルとの置換であり、好ましくは前記ヘテロアリールアルキルの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ｔ−ブチル、アダマンチル、トリアゾリルとの置換であり、それらの全てが独立して、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲンで置換されている、本明細書に定義された式（Ｉ）の化合物である。
【００３１】
別の好ましい実施形態において、前記化合物は、以下に示される式４＊、９＊、１３＊、１７＊、２１＊、２５＊、２９＊、３３＊、または４６＊〜６０＊ ：
【化２２】
2018534246.tif 000024
2018534246.tif 000025
2018534246.tif 000026
2018534246.tif 000027
の化合物であり； 
前記リンカーＺは、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここでＲａは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａは、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂは、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐは、０〜６であり、好ましくはｐは、１、２または３であり、さらに好ましくはｐは、１であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；ｑは、０〜６であり、好ましくはｑは、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑは、１または２であり；前記リンカーＺは、前記炭水化物部分の還元末端に−Ｎ（Ｒａ）−基を介して共有結合している。
【００３２】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記化合物は、シアリル酸部分の少なくとも１つが、式（Ｉａ）または式（Ｉｂ）：
【化２３】
2018534246.tif 000028
に図示および定義された置換部分によって置換されており、式（Ｉｂ）の前記置換部分に関して、ＲＩ８が、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル−シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８−アルケニル、Ｃ１〜Ｃ８−アルキニル、アリール、置換アリールであり、好ましくは前記アリールの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールとの置換であり、好ましくは前記ヘテロアリールの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、アリールアルキル、置換アリールアルキルとの置換であり、好ましくは前記アリールアルキルの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキルとの置換であり、好ましくは前記ヘテロアリールアルキルの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ｔ−ブチル、アダマンチル、トリアゾリルとの置換であり、それらの全てが独立して、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲンで置換されている、式４＊、９＊、１３＊、１７＊、２１＊、２５＊、２９＊、３３＊、または４６＊〜６０＊の化合物である。
【００３３】
前記リンカーＺの好ましい実施形態は、以下の通りである。したがって一実施形態において、Ｒａは、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２である。好ましい実施形態において、Ｒａは、ＣＨ３またはＯＣＨ３であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）またはＳである。好ましくは、Ｂが、Ｓであり、Ａが、（ＣＨ２）ｐＣＨ２である場合、ｑは、１〜５、好ましくは１、２または３である。
【００３４】
さらに好ましい実施形態において、Ｒａは、ＣＨ３またはＯＣＨ３であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）である。
【００３５】
さらに好ましい実施形態において、Ｒａは、ＣＨ３であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）またはＳである。好ましくは、Ｂが、Ｓであり、Ａが、（ＣＨ２）ｐＣＨ２である場合、ｑは、１〜５、好ましくは１、２または３である。
【００３６】
さらに好ましい実施形態において、Ｒａは、ＣＨ３またはＯＣＨ３であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）またはＳであり；ｑは、１〜５、好ましくは１、２または３、好ましくは２である。
【００３７】
さらに好ましい実施形態において、前記リンカーＺは、式（ａ）〜（ｇ）：
【化２４】
2018534246.tif 000029
（式中、ｐは、０〜６の間、好ましくは１〜３、特に１であり、ｑは、０〜６の間、好ましくは１〜４の間、特に１または２である）のいずれか１つから選択される式のリンカーである。一実施形態において、前記リンカーＺが、式（ｅ）のリンカーである場合、ｐおよびｑは、独立して１〜６、好ましくは１、２または３であり；ｐが、２である場合、ｑは、１〜６、好ましくは１または３〜６であり；ｑが、２である場合、ｐは、３〜６である。別の実施形態において、前記リンカーＺが、式（ｅ）のリンカーである場合、ｐおよびｑは、両者とも２でない。
【００３８】
前記さらに好ましい実施形態において、そして本発明の一般式に照らして、前記リンカーＺは、式（ａ）〜（ｇ）：
【化２５】
2018534246.tif 000030
（式中、ｐは、０〜６の間、好ましくは１〜３、特に１であり；ｑは、０〜６の間、好ましくは１〜４の間、特に１または２である）のいずれか１つから選択される式のリンカーである。一実施形態において、前記リンカーＺが、式（ｅ）のリンカーである場合、ｐおよびｑは、独立して１〜６、好ましくは１、２または３であり；ｐが、２である場合、ｑは、１〜６、好ましくは１または３〜６であり；ｑが、２である場合、ｐは、３〜６である。別の実施形態において、前記リンカーＺが、式（ｅ）のリンカーである場合、ｐおよびｑは、両者とも２でない。
【００３９】
非常に好ましい実施形態において、前記リンカーＺは、−Ｎ（ＣＨ３）−Ｏ（ＣＨ２）２−ＮＨＣ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−ＳＨである。
【００４０】
さらに好ましい実施形態において、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣するか、またはあるいはそして好ましくは該糖鎖エピトープである、前記炭水化物部分は、式（Ｉ）の化合物で構成される炭水化物部分であり、前記糖鎖エピトープは、セレブロシド型、（ネオ）ラクト型、またはガングリオ型の糖鎖エピトープ、さらに好ましくはガングリオシドの糖鎖エピトープである。
【００４１】
さらに好ましい実施形態において、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣する、またはあるいはそして好ましくは該糖鎖エピトープである前記炭水化物部分は、式（ＩＩ）の化合物で構成される炭水化物部分であり、前記糖鎖エピトープは、スルホグルクロニルパラグロボシドの糖鎖エピトープであり、これによって特に抗原性ＨＮＫ−１炭水化物エピトープなどの糖鎖エピトープである。
【００４２】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記化合物は、式４、９、１３、１７、２１、２５、２９、３３、３７、４１、４４、５６、５８または７７の化合物である。該式を、実施例に示す。
【００４３】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記化合物は、式４、２１、２５、３３、３７、４１または４４の化合物である。該式を、実施例に示す。
【００４４】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記化合物は、シアリル酸部分の少なくとも１つが、式（Ｉａ）または式（Ｉｂ）：
【化２６】
2018534246.tif 000031
に図示および定義された置換部分によって置換されており、式（Ｉｂ）の前記置換部分に関して、ＲＩ８が、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル−シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８−アルケニル、Ｃ１〜Ｃ８−アルキニル、アリール、置換アリールであり、好ましくは前記アリールの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールとの置換であり、好ましくは前記ヘテロアリールの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、アリールアルキル、置換アリールアルキルとの置換であり、好ましくは前記アリールアルキルの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキルとの置換であり、好ましくは前記ヘテロアリールアルキルの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ｔ−ブチル、アダマンチル、トリアゾリルとの置換であり、それらの全てが独立して、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲンで置換されている、式４、９、１３、１７、２１、２５、２９、３３、３７、４１、４４、５６、５８または７７の化合物である。
【００４５】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記化合物は、シアリル酸部分の少なくとも１つが、式（Ｉａ）または式（Ｉｂ）：
【化２７】
2018534246.tif 000032
に図示および定義された置換部分によって置換されており、式（Ｉｂ）の前記置換部分に関して、ＲＩ８が、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル−シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８−アルケニル、Ｃ１〜Ｃ８−アルキニル、アリール、置換アリールであり、好ましくは前記アリールの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールとの置換であり、好ましくは前記ヘテロアリールの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、アリールアルキル、置換アリールアルキルとの置換であり、好ましくは前記アリールアルキルの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキルとの置換であり、好ましくは前記ヘテロアリールアルキルの前記置換が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ８−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、ｔ−ブチル、アダマンチル、トリアゾリルとの置換であり、それらの全てが独立して、Ｃ１〜Ｃ８−アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲンで置換されている、式４、２１、２５、３３、３７、４１または４４の化合物である。
【００４６】
さらに本発明は、本発明の化合物に由来する複数の置換基を含む医薬的に許容し得るポリマーであって、該化合物がリンカーＺによってポリマー骨格に連結されており、該連結がリンカーＺのＳＨ−部分を介してもたらされる、医薬的に許容し得るポリマーに関する。典型的には前記本発明のポリマーは、ポリマー骨格上の反応性部分へのリンカーＺの前記ＳＨ−部分のカップリングのためのスペーサ部分をさらに含む。そのようなスペーサ部分は、当業者に公知であり、好ましい実施例を、本明細書に記載する。
【００４７】
したがって別の態様において、本発明は、複数の本発明の化合物を含むポリマーであって、該化合物がリンカーＺによってポリマー骨格に連結されており、該連結がリンカーＺのＳＨ−部分を介してもたらされる、ポリマーを提供する。典型的には前記本発明のポリマーは、ポリマー骨格上の反応性部分へのリンカーＺの前記ＳＨ−部分のカップリングのためのスペーサ部分をさらに含む。好ましい実施例を、本明細書に記載する。
【００４８】
さらなる態様において、本発明は、（ｉ）複数の式（Ｉ）の化合物、（ｉｉ）複数の式（ＩＩ）の化合物、または（ｉｉｉ）複数の式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物を含むポリマーであって、前記化合物が、前記リンカーＺによってポリマー骨格に連結されており、該連結が、前記リンカーＺのＳＨ−基を介してもたらされる、ポリマーを提供する。好ましくは前記複数の式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物は、式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物と同一の化合物、または式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物から選択される異なる化合物のいずれかである。典型的には前記本発明のポリマーは、ポリマー骨格上の反応性部分へのリンカーＺの前記ＳＨ−部分のカップリングのためのスペーサ部分をさらに含む。好ましい実施例を、本明細書に記載する。
【００４９】
さらに好ましい実施形態において、前記ポリマーは、（ｉ）複数の式（Ｉ）の化合物、（ｉｉ）複数の式（ＩＩ）の化合物、または（ｉｉｉ）複数の式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物を含み、前記化合物は、前記リンカーＺによってポリマー骨格に連結されており、該連結は、前記リンカーＺのＳＨ−基を介してもたらされ、前記リンカーＺは、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨであり、ここでＲａは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａは、Ｃ１〜Ｃ７−アルキレン、Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、またはＣ１〜Ｃ７−アルコキシ−Ｒｂであり、Ｒｂは、任意選択で置換されたアリールまたは任意選択で置換されたヘテロアリールであり、ｐは、０〜６であり、好ましくはｐは、１、２または３であり、さらに好ましくはｐは、１であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２であり；ｑは、０〜６であり、好ましくはｑは、１、２、３または４であり、さらに好ましくはｑは、１または２であり；前記リンカーＺは、前記炭水化物部分の還元末端に−Ｎ（Ｒａ）−基を介して共有結合している。好ましくは前記複数の式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物は、式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物と同一の化合物、または式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物から選択される異なる化合物のいずれかである。典型的には前記本発明のポリマーは、ポリマー骨格上の反応性部分へのリンカーＺの前記ＳＨ−部分のカップリングのためのスペーサ部分をさらに含む。好ましい実施例を、本明細書に記載する。
【００５０】
前記リンカーＺの好ましい実施形態は、以下の通りである。したがって一実施形態において、Ｒａは、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２  たはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）、ＳまたはＣＨ２である。好ましい実施形態において、Ｒａは、ＣＨ３またはＯＣＨ３であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）またはＳである。好ましくは、Ｂが、Ｓであり、Ａが、（ＣＨ２）ｐＣＨ２である場合、ｑは、１〜６、好ましくは１、２または３である。
【００５１】
前記本発明のポリマーで構成される前記リンカーのさらに好ましい実施形態において、Ｒａは、ＣＨ３またはＯＣＨ３であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）である。前記本発明のポリマーで構成される前記リンカーの別の好ましい実施形態において、Ｒａは、ＣＨ３であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）またはＳである。好ましくはＢが、Ｓであり、Ａが、（ＣＨ２）ｐＣＨ２である場合、ｑは、１〜６、好ましくは１、２または３である。前記本発明のポリマーで構成される前記リンカーのさらに好ましい実施形態において、Ｒａは、ＣＨ３またはＯＣＨ３であり；Ａは、Ｏ（ＣＨ２）ｐＣＨ２、（ＣＨ２）ｐＣＨ２、ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２、（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＨ２またはＯ（ＣＨ２）ｐＣ６Ｈ５であり；Ｂは、ＮＨＣ（Ｏ）またはＳであり；ｑは、１〜６、好ましくは１、２、３、４または５、好ましくは２または４、さらに好ましくは２である。
【００５２】
好ましい実施形態において、前記リンカーＺは、式（ａ）〜（ｇ）：
【化２８】
2018534246.tif 000033
（式中、ｐは、０〜６の間、好ましくは１〜３、特に１であり、ｑは、０〜６の間、好ましくは１〜４の間、特に１または２である）のいずれか１つから選択される式のリンカーである。一実施形態において、前記リンカーＺが、式（ｅ）のリンカーである場合、ｐおよびｑは、独立して１〜６、好ましくは１、２または３であり；ｐが、２である場合、ｑは、１〜６、好ましくは１または３〜６であり；ｑが、２である場合、ｐは、３〜６である。別の実施形態において、前記リンカーＺが、式（ｅ）のリンカーである場合、ｐおよびｑは、両者とも２でない。
【００５３】
好ましくは、そして本発明の一般式に照らして、前記リンカーＺは、式（ａ）〜（ｇ）：
【化２９】
2018534246.tif 000034
（式中、ｐは、０〜６の間、好ましくは１〜３、特に１であり、ｑは、０〜６の間、好ましくは２〜４の間、特に２である）のいずれか１つから選択される式のリンカーである。一実施形態において、前記リンカーＺが、式（ｅ）リンカーである場合、ｐおよびｑは、独立して２〜６、好ましくは２、３または４であり；ｐが、２である場合、ｑは、１〜６、好ましくは１または３〜６であり、ｑが、２である場合、ｐは、３〜６である。別の実施形態において、前記リンカーＺが、式（ｅ）のリンカーである場合、ｐおよびｑは、両者とも２でない。
【００５４】
非常に好ましい実施形態において、前記リンカーＺは、−Ｎ（ＣＨ３）−Ｏ（ＣＨ２）２−ＮＨＣ（Ｏ）−（ＣＨ２）３−ＳＨである。
【００５５】
本発明は、さらに詳細には、式（Ｉ）および（ＩＩＩ）の化合物、ならびに式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の１つの同一化合物の複数または式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の複数の異なる化合物の組み合わせを担持させたポリマーなど、これらの化合物の複数を含む医薬的に許容し得るポリマーに関する。前記文脈における好ましいポリマーは、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物の１つまたは複数を担持させたポリマーであり、式（Ｉ）または（ＩＩ）の前記化合物は、好ましくは４＊、９＊、１３＊、１７＊、２１＊、２５＊、２９＊または３３＊、および４６＊〜６０＊から選択される。
【００５６】
前記リンカーＺのＳＨ−基が前記化合物をポリマー骨格に連結する、式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の同一または異なる化合物の複数を含む本発明のポリマーは、好ましくはα−アミノ酸ポリマーであり、本明細書では典型的には、そして好ましくはホモマーもしくはヘテロマーα−アミノ酸ポリマー、アクリル酸もしくはメタクリル酸ポリマーもしくはコポリマー、またはＮ−ビニル−２−ピロリドン−ビニルアルコールコポリマー、キトサンポリマー、またはポリホスファゼンポリマーである。
【００５７】
好ましい実施形態において、該ポリマー骨格は、α−アミノ酸ポリマー、アクリル酸もしくはメタクリル酸ポリマーもしくはコポリマー、またはＮ−ビニル−２−ピロリドン−ビニルアルコールコポリマー、キトサンポリマー、またはポリホスファゼンポリマーである。
【００５８】
別の好ましい実施形態において、該ポリマー骨格は、α−アミノ酸ポリマーである。
【００５９】
別の好ましい実施形態において、該ポリマー骨格は、α−アミノ酸ポリマーであり、前記α−アミノ酸ポリマーの前記α−アミノ酸は、リジン、オルニチン、グルタミン酸、アスパラギン酸またはセリンである。
【００６０】
非常に好ましい実施形態において、該ポリマー骨格は、ポリリジンであり、好ましくは前記ポリリジンの分子量は、１，０００Ｄａ〜３００，０００Ｄａである。
【００６１】
さらに好ましい実施形態において、ポリマー骨格上への前記化合物の炭水化物部分の担持の割合は、１０〜９０％の間、好ましくは２０〜７０％の間、特に３０〜６０％の間である。後者は、反応性ポリマー側鎖、そして適宜、スペーサ部分の３０〜６０％が、前記リンカーＺの−ＳＨ基と反応することを意味する。ポリマー骨格上への前記化合物の炭水化物部分の担持の割合は、典型的にそして好ましくはＮＭＲ分光法により決定され、％モル／モルで表される。
【００６２】
本発明のポリマーのさらに詳細な実施例は、
（Ａ）アミノ酸が、ポリリジン、特にポリ−Ｌ−リジンまたはポリ−Ｄ−リジンなどのように側鎖アミノアルキル官能基を含み、アミノ基が、スペーサ部分を介して前記リンカーＺのＳＨ−基に連結している、ポリ−α−アミノ酸。典型的なそして好ましいスペーサ部分は、末端ＣＨ２基を含み、前記スペーサ部分の前記末端ＣＨ２基は、前記リンカーＺのＳ−に連結している。好ましいスペーサ部分は、アセチル基である；
（Ｂ）アミノ酸が、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン、またはポリグルタミンなどのように側鎖カルボニルアルキル官能基を含み、カルボニル基（それぞれアスパラギン酸およびグルタミン酸中の本来のカルボキシ基に対応する）が、スペーサ部分を介して前記リンカーＺのＳＨ−基に連結している、ポリ−α−アミノ酸（Ｄ−およびＬ−型）。典型的なそして好ましいスペーサ部分は、末端ＣＨ２基を含み、前記スペーサ部分の前記末端ＣＨ２基は、前記リンカーＺのＳ−に連結している；
（Ｃ）アミノ酸が、ポリセリン、ポリトレオニン、ポリチロシン、またはポリヒドロキシプロリンなどのように側鎖ヒドロキシアルキルまたはヒドロキシアリール官能基を含み、ヒドロキシ基が、スペーサ部分を介して前記リンカーＺのＳＨ−基に連結している、ポリ−α−アミノ酸（Ｄ−およびＬ−型）。典型的なそして好ましいスペーサ部分は、末端ＣＨ２基を含み、前記スペーサ部分の前記末端ＣＨ２基は、前記リンカーＺのＳ−に連結している；
（Ｄ）アミノ酸が、ポリシステインなどのように側鎖チオアルキル官能基を含み、アミノ酸側鎖の末端ＣＨ２基（チオールの次）が、典型的にそして好ましくはチオエーテルとして、リンカーＺの末端ＳＨ基に連結している、ポリ−α−アミノ酸；
（Ｅ）（Ａ）〜（Ｄ）に記載される通り、スペーサ部分を介して前記リンカーＺのＳＨ−基に連結された２種以上の異なるα−アミノ酸のコポリマー；
（Ｆ）カルボキシ基が、スペーサ部分を介して前記リンカーＺのＳＨ−基に連結している、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、またはアクリル酸とメタクリル酸のコポリマー。典型的なそして好ましいスペーサ部分は、末端ＣＨ２基を含み、前記スペーサ部分の前記末端ＣＨ２基は、前記リンカーＺのＳ−に連結している；
（Ｇ）コポリマーのビニルアルコール部分のヒドロキシ基が、スペーサ部分を介して前記リンカーＺのＳＨ−基に連結している、Ｎ−ビニル−２−ピロリドンとビニルアルコールのコポリマー。典型的なそして好ましいスペーサ部分は、末端ＣＨ２基を含み、前記スペーサ部分の前記末端ＣＨ２基は、前記リンカーＺのＳ−に連結している；
（Ｈ）アミノ基が、スペーサ部分を介して前記リンカーＺのＳＨ−基に連結している、キトサン。典型的なそして好ましいスペーサ部分は、末端ＣＨ２基を含み、前記スペーサ部分の前記末端ＣＨ２基は、前記リンカーＺのＳ−に連結している；
（Ｉ）末端エステル基が、スペーサ部分を介して前記リンカーＺのＳＨ−基に連結している、ポリホスファゼンポリマー。典型的なそして好ましいスペーサ部分は、末端ＣＨ２基を含み、前記スペーサ部分の前記末端ＣＨ２基は、前記リンカーＺのＳ−に連結している。好ましいスペーサ部分は、アセチル基である。
【００６３】
特定の実施形態において、ポリマー（Ａ）は、部分式（ＩＩＩ）
【化３０】
2018534246.tif 000035
（式中、
Ｒ１は、前記リンカーＺのＳＨ−基が、スペーサ部分を介してＲ１の末端アミノ基に連結しており、典型的にそして好ましくは、前記スペーサ部分が、アセチル基である、前記リンカーＺに連結されたアミノアルキル置換基であり；
Ｒ２は、可溶性置換基を有するキャップされたアミノ官能基である、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチルアミノアルキルであり；
ポリマー内の、それぞれＲ１およびＲ２を有する２つの括弧内の式の間の関係は、キャップされたアミノ官能基に対する炭水化物担持の関係を示す）
を含む。
【００６４】
例えばＲ１は、式（ＩＩＩａ）
【化３１】
2018534246.tif 000036
のＲ１であり、Ｒ２は、式（ＩＩＩｂ）
【化３２】
2018534246.tif 000037
のＲ2であり、式中、ｏは、１〜６の間、好ましくは３または４であり、ｍは、１〜６の間、好ましくは１〜２の間、特に１である。
【００６５】
ｏが、３である場合、置換基Ｒ１は、ポリオルニチンの側鎖を表し、ｏが、４である場合、置換基Ｒ１は、ポリリジンの側鎖を表し、これらの側鎖は、本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）または（ＩＩ）の本発明の化合物で構成される前記リンカーＺの前記ＳＨ−基に連結されている。
【００６６】
ポリアミノ酸は、以下の通りポリリジンに関してＺ．  Ｋａｄｌｅｃｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ２０１２，  １３：３１２７−３１３７に記載される直鎖状、高分岐、または樹状であり得る。
【化３３】
2018534246.tif 000038
【００６７】
式（ＩＩＩ）のポリマー（Ａ）を調製するのに用いられるポリリジンは、好ましくは１，０００〜３００，０００Ｄａの間、特に３０，０００〜７０，０００Ｄａの分子量を有し、リンカーＺのＳＨ−基を介して式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物にさらに連結されていてキャッピング２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチリルアミノアルキル残基を有するポリマーが、好ましい。例えば該ポリリジンポリマーを最初に、クロロアセチル化によって官能基化する。末端チオール官能基を含む前記リンカーＺとクロロアセチル化ポリマーとの求核置換反応により、所望のポリマーに近づくことができる。
【００６８】
特定の実施形態において、ポリマー（Ｂ）は、部分式（ＩＩＩ）
【化３４】
2018534246.tif 000039
（式中、
Ｒ１は、前記リンカーＺに連結されたカルボニルアルキル置換基であり、前記リンカーＺのＳＨ−基は、Ｒ１の−ＣＨ２−基に連結されており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオカルボニルアルキルであり、
ポリマー内の、それぞれＲ１およびＲ２を有する２つの括弧内の式の間の関係は、キャップされたカルボニルまたはカルボキシ官能基に対する炭水化物担持の関係を示す）
を含む。
【００６９】
例えば、Ｒ１は、式（ＩＩＩｃ）
【化３５】
2018534246.tif 000040
のＲ１であり、Ｒ２は、式（ＩＩＩｄ）
【化３６】
2018534246.tif 000041
のＲ2であり、式中、Ｘは、酸素または窒素のいずれかであり、ｏは、１〜６の間、好ましくは１または２であり、ｍは、１〜６の間、好ましくは１〜２の間、特に１である。
【００７０】
ｏが、１であり、Ｘが、Ｏである場合、置換基Ｒ１は、ポリアスパラギン酸の側鎖を表し、ｏが、２であり、Ｘが、Ｏである場合、置換基Ｒ１は、ポリグルタミン酸の側鎖を表し、ｏが、１であり、Ｘが、Ｎである場合、置換基Ｒ１は、ポリアスパラギンの側鎖を表し、ｏが、２であり、Ｘが、Ｎである場合、置換基Ｒ１は、ポリグルタミンの側鎖を表し、これらの側鎖は、本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）または（ＩＩ）の本発明の化合物で構成される前記リンカーＺの前記ＳＨ−基に連結されており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロプロピルチオカルボニルアルキル、即ち、可溶性置換基を有するキャップされたカルボキシまたはアミド官能基である。
【００７１】
式（ＩＶ）のポリマー（Ｂ）を調製するのに用いられるポリアスパラギン酸は、好ましくは１，０００〜３００，０００Ｄａの間、特に３０，０００〜７０，０００Ｄａの分子量を有し、リンカーＺのＳＨ−基を介して式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物にさらに連結されていてキャッピング２，３−ジヒドロキシプロピルチオカルボニルアルキル残基を有するポリマーが、好ましい。例えばポリアスパラギン酸を最初に、エステル化によって官能基化する。末端チオール官能基を含む前記リンカーＺとクロロアセチル化ポリマーとの求核置換反応により、所望のポリマーに近づくことができる。
【００７２】
ポリアスパラギン酸またはポリグルタミン酸の場合、該ポリマーは、直鎖状、高分岐、または樹状であり得る。
【００７３】
特定の実施形態において、ポリマー（Ｃ）は、部分式（ＩＩＩ）
【化３７】
2018534246.tif 000042
（式中、
Ｒ１は、前記リンカーＺに連結されたヒドロキシアルキルまたはヒドロキシアリール置換基であり、前記リンカーＺのＳＨ−基は、Ｒ１の−ＣＨ２−基に連結されており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチル−ヒドロキシアルキル（または−ヒドロキシアリール）であり、
ポリマー内の、それぞれＲ１およびＲ２を有する２つの括弧内の式の間の関係は、キャップされたヒドロキシ官能基に対する炭水化物担持の関係を示す）
を含む。
【００７４】
例えば、ポリセリンおよび類似体の場合、Ｒ１は、式（ＩＩＩｅ）
【化３８】
2018534246.tif 000043
のＲ１であり、Ｒ２は、式（ＩＩＩｆ）
【化３９】
2018534246.tif 000044
のＲ2であり、式中、ｏは、１〜６の間、好ましくは１または２、特に１であり、ｍは、１〜６の間、好ましくは１〜２の間、特に１である。
【００７５】
ｏが、１である場合、置換基Ｒ１は、本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）または（ＩＩ）の本発明の化合物で構成される前記リンカーＺの前記ＳＨ−基に連結されたポリセリンの側鎖を表し、、Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオヒドロキシアルキル、即ち、可溶性置換基を有するキャップされたヒドロキシ官能基である。
【００７６】
式（ＩＩＩ）のポリマー（Ｃ）を調製するのに用いられるポリセリン（および他のヒドロキシ官能基化α−アミノ酸側鎖）は、好ましくは１，０００〜３００，０００Ｄａの間、特に３０，０００〜７０，０００Ｄａの分子量を有し、前記リンカーＺのＳＨ−基を介して式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物にさらに連結されていてキャッピング２，３−ジヒドロキシプロピルチオヒドロキシアルキル残基を有するポリマーが、好ましい。例えばポリセリンを最初に、エステル化によって官能基化する。末端チオール官能基を含む前記リンカーＺとクロロアセチル化されたポリマーとの求核置換反応により、所望のポリマーに近づくことができる。
【００７７】
特定の実施形態において、ポリマー（Ｄ）は、部分式（ＩＶ）
【化４０】
2018534246.tif 000045
（式中、
Ｒ１は、前記リンカーＺに連結されたチオアルキル置換基であり、前記リンカーＺのＳＨ−基は、Ｒ１の−ＣＨ２−基に連結されており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアルキルであり、
ポリマー内の、それぞれＲ１およびＲ２を有する２つの括弧内の式の間の関係は、キャップされたチオール官能基に対する炭水化物担持の関係を示す）
を含む。
【００７８】
例えば、Ｒ１は、式（ＩＩＩｇ）
【化４１】
2018534246.tif 000046
のＲ１であり、Ｒ２は、式（ＩＩＩｈ）
【化４２】
2018534246.tif 000047
のＲ2であり、式中、ｏは、１〜６の間、好ましくは１または２、特に１である。
【００７９】
ｏが、１である場合、置換基Ｒ１は、本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）または（ＩＩ）の本発明の化合物で構成される前記リンカーＺの前記ＳＨ−基に連結されたポリシステインの側鎖を表し、、これによってＲ１の−ＣＨ２−基に連結され、Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアルキル、即ち、可溶性置換基を有するキャップされたチオール官能基である。
【００８０】
式（ＩＩＩ）のポリマー（Ｄ）を調製するのに用いられるポリシステインは、好ましくは１，０００〜３００，０００Ｄａの間、特に３０，０００〜７０，０００Ｄａの分子量を有し、前記リンカーＺのＳＨ−基を介して式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物にさらに連結されていてキャッピング２，３−ジヒドロキシプロピルチオチオアルキル残基を有するポリマーが、好ましい。例えばポリシステインポリマーは、末端アルケン基を含む化合物とラジカル反応により反応する。
【００８１】
特定の実施形態において、ポリマー（Ｆ）は、部分式（ＩＶ）
【化４３】
2018534246.tif 000048
（式中、
Ｒ１は、前記リンカーＺに連結されたアミノアルキル置換基であり、前記リンカーＺのＳＨ−基は、Ｒ１の−ＣＨ２−基に連結されており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチルアミノアルキルアミノまたは関連のアミノ置換基であり、
Ｒ３は、水素またはメチルであり、
ポリマー内の、それぞれＲ１およびＲ２を有する２つの括弧内の式の間の関係は、キャップされたアミド官能基に対する炭水化物担持の関係を示す）
を含む。
【００８２】
例えば、Ｒ１は、式（ＩＶａ）
【化４４】
2018534246.tif 000049
のＲ1であり、Ｒ２は、式（ＩＶｂ）のＲ2であり、Ｒ３は、式（ＩＶｃ）
【化４５】
2018534246.tif 000050
のＲ3である。
【００８３】
別の実施形態において、Ｒ１は、式（ＩＶｄ）
【化４６】
2018534246.tif 000051
のＲ1であり、Ｒ２は、式（ＩＶｅ）
【化４７】
2018534246.tif 000052
のＲ2であり、式中、ｍは、１〜１０、好ましくは１〜４の間である。
【００８４】
別の実施形態において、Ｒ１は、式（ＩＶｆ）
【化４８】
2018534246.tif 000053
のＲ1であり、式中、ｒは、１〜６、好ましくは１〜４の間、特に２である）で示され、Ｒ２は、式（ＩＶｃ）（上記）のＲ2である。
【００８５】
式（ＩＶ）のポリマー（Ｆ）を調製するのに用いられるポリアクリル酸は、好ましくは１，０００〜４００，０００Ｄａの間、特に３０，０００〜１６０，０００Ｄａの分子量を有し、前記リンカーＺのＳＨ−基を介して式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物にさらに連結されていてキャッピング２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチルアミノアルキルアミノ残基を有するポリマーが、好ましい。
【００８６】
特定の実施形態において、ポリマー（Ｇ）は、部分式（Ｖ）
【化４９】
2018534246.tif 000054
（式中、
Ｒ１は、前記リンカーＺに連結されたアミノアルキル置換基であり、前記リンカーＺのＳＨ−基は、Ｒ１（Ｖａ）の−ＣＨ２−基に連結されており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチルアミノアルキルアミノカルボニルまたは関連のアミノカルボニル置換基であり、  ポリマー内の、それぞれＲ１およびＲ２を有する２つの括弧内の式の間の関係は、キャップされたヒドロキシ官能基に対する炭水化物担持の関係を示す）
を含む。
【００８７】
例えば、Ｒ１は、式（Ｖａ）
【化５０】
2018534246.tif 000055
のＲ1であり、Ｒ２は、式（Ｖｂ）
【化５１】
2018534246.tif 000056
のＲ2である。
【００８８】
別の実施形態において、Ｒ１は、式（Ｖｃ）
【化５２】
2018534246.tif 000057
のＲ1であり、Ｒ２は、式（Ｖｄ）
【化５３】
2018534246.tif 000058
のＲ2であり、式中、ｍは、１〜１０、好ましくは１〜４の間である。
【００８９】
別の実施形態において、Ｒ１は、式（Ｖｅ）
【化５４】
2018534246.tif 000059
のＲ1であり、Ｒ２は、式（Ｖｆ）
【化５５】
2018534246.tif 000060
のＲ2であり、式中、ｒは、１〜６、好ましくは１〜４の間、特に２である。
【００９０】
式（ＶＩ）のポリマー（Ｇ）を調製するのに用いられるコポリマーは、好ましくは１，０００〜４００，０００Ｄａの間、特に３０，０００〜１６０，０００Ｄａの分子量を有し、前記リンカーＺのＳＨ−基を介して式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物にさらに連結されていてキャッピング２，３−ジヒドロキシプロピルチオカルボニルアミノアルキルアミノカルボニル残基を有するポリマーが、好ましい。
【００９１】
特定の実施形態において、ポリマー（Ｈ）は、部分式（ＶＩ）
【化５６】
2018534246.tif 000061
（式中、
Ｒ１は、前記リンカーＺに連結されたアミノアルキル置換基であり、前記リンカーＺのＳＨ−基は、Ｒ１の−ＣＨ２−基に連結されており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチルアミンであり、
ポリマー内の、それぞれＲ１およびＲ２を有する２つの括弧内の式の間の関係は、キャップされたアミノ官能基に対する炭水化物担持の関係を示す）
を含む。
【００９２】
例えば、Ｒ１は、式（ＶＩａ）
【化５７】
2018534246.tif 000062
のＲ1であり、Ｒ２は、式（ＶＩｂ）
【化５８】
2018534246.tif 000063
のＲ2であり、式中、ｏは、１〜６の間、好ましくは３または４であり、ｍは、１〜６、好ましくは１〜２の間、特に１である。
【００９３】
式（ＶＩ）のポリマー（Ｈ）を調製するのに用いられるキトサンは、好ましくは１，０００〜３００，０００Ｄａの間、特に３０，０００〜７０，０００Ｄａの分子量を有し、前記リンカーＺのＳＨ−基を介して式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物に連結されていてキャッピング２，３−ジヒドロキシプロピルチオアセチルアミン残基を有するポリマーが、好ましい。例えばキトサンを最初に、アミノ基のクロロアセチル化により官能基化する。末端チオール官能基を含む前記リンカーＺとクロロアセチル化ポリマーとの求核置換反応により、所望のポリマーに近づくことができる。
【００９４】
特定の実施形態において、ポリマー（Ｉ）は、部分式（ＶＩＩ）
【化５９】
2018534246.tif 000064
（式中、
Ｒ１は、前記リンカーＺに連結されたカルボニルアルキルまたはカルボニルアリール置換基であり、前記リンカーＺのＳＨ−基は、Ｒ１の−ＣＨ２−基に連結されており、
Ｒ２は、２，３−ジヒドロキシプロピルチオカルボニルアルキルまたはカルボニルアリールであり、
ポリマー内の、それぞれＲ１およびＲ２を有する２つの括弧内の式の間の関係は、キャップされたカルボキシ官能基に対する炭水化物担持の関係を示す）
を含む。
【００９５】
例えば、Ｒ１は、式（ＶＩＩａ）
【化６０】
2018534246.tif 000065
のＲ1であり、Ｒ２は、式（ＶＩＩｂ）
【化６１】
2018534246.tif 000066
のＲ2であり、式中、ｍは、１〜６、好ましくは１〜２の間、特に１である。
【００９６】
式（ＶＩＩ）のポリマー（Ｉ）を調製するのに用いられるポリホスファゼンは、好ましくは１，０００〜３００，０００Ｄａの間、特に３０，０００〜７０，０００Ｄａの分子量を有し、前記リンカーＺのＳＨ−基を介して式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物にさらに連結されていてキャッピング２，３−ジヒドロキシプロピルチオカルボニルアルキルまたはカルボニルアリール残基を有するポリマーが、好ましい。例えばポリホスファゼンを最初に、エステル化により官能基化する。末端チオール官能基を含む前記リンカーＺとクロロアセチル化ポリマーとの求核置換反応により、所望のポリマーに近づくことができる。
【００９７】
ポリマー（Ａ）〜（Ｉ）の群のうち、好ましいポリマーは、α−アミノ酸ポリマー（Ｄ−およびＬ−型）または異なるα−アミノ酸（Ａ）〜（Ｄ）の組み合わせ（コポリマー）である。より好ましいのは、ポリリジン、ポリオルニチン、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸からなるα−アミノ酸ポリマーである。これらのα−アミノ酸ポリマーのうちで特に好ましいのは、ポリ−Ｌ−リジンである。
【００９８】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記ポリマーは、実験の節で示される式６、１０、１４、１８、２２、２６、３０、３４、３８、４２、４５、７８、８６、８９、９３、１００または１０２のポリマーであり、前記ポリマーのそれぞれについて、ｎは、独立して２０〜１２００、好ましくは１００〜１１００、さらに好ましくは２００〜５００であり、前記ポリマーのそれぞれについて、ｘは、独立して１０〜９０、好ましくは３０〜６０、さらに好ましくは４０〜５０である。
【００９９】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記ポリマーは、実験の節で示される式６、１０、１４、１８、２２、２６、３０、３４、３８、４２、４５、７８、８６、８９、９３、１００または１０２のポリマーであり、前記ポリマーのそれぞれについて、ｎは、独立して１００〜１１００、好ましくは２００〜５００であり、前記ポリマーのそれぞれについて、ｘは、独立して３０〜６０、さらに好ましくは４０〜５０である。
【０１００】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記ポリマーは、実験の節で示される式６、２２、２６、３４、３８、４２、４５のポリマーであり、前記ポリマーのそれぞれについて、ｎは、独立して２０〜１２０、好ましくは１００〜１１００、さらに好ましくは２００〜５００であり、前記ポリマーのそれぞれについて、ｘは、独立して１０〜９０、好ましくは３０〜６０、さらに好ましくは４０〜５０である。
【０１０１】
さらに非常に好ましい実施形態において、前記ポリマーは、実験の節で示される式６、２２、２６、３４、３８、４２、４５のポリマーであり、前記ポリマーのそれぞれについて、ｎは、独立して１００〜１１００、好ましくは２００〜５００であり、前記ポリマーのそれぞれについて、ｘは、独立して３０〜６０、さらに好ましくは４０〜５０である。
【０１０２】
本明細書に既出のおよび後述で用いられる一般的用語は、好ましくは他に断りがなければ、本開示の文脈において以下の意味を有する。
【０１０３】
化合物などに関して複数形が用いられる場合、これは、単一化合物なども意味すると解釈される。
【０１０４】
本明細書で用いられる用語「糖鎖エピトープ」は、抗体により、またはレクチン様グリカン結合タンパク質により認識される炭水化物部分を指す。好ましくは本明細書で用いられる用語「糖鎖エピトープ」は、神経系において発現されるスフィンゴ糖脂質で構成される炭水化物部分を指す。スフィンゴ糖脂質は、当業者に公知であり、スフィンゴシンの含有量により定義される糖脂質のサブセットであり、神経系に特に関連する。スフィンゴ糖脂質のサブタイプは、セレブロシド（脂質部分に結合した単一の炭水化物）、（ネオ）ラクト型、ガングリオ型、またはスルホグルクロニルパラグロボシド型（脂質部分に結合したシアリル化または非シアリル化オリゴ糖）である。好ましくは本明細書で用いられる用語「糖鎖エピトープ」は、抗体により、またはレクチン様グリカン結合タンパク質により認識され、前記糖鎖エピトープが神経系において発現されるスフィンゴ糖脂質で構成され、前記スフィンゴ糖脂質がセレブロシド、（ネオ）ラクトシド、ガングリオシド、スルホグルクロニルパラグロボシドまたは式Ｉもしくは式ＩＩの化合物で構成される炭水化物部分から選択される、炭水化物部分を指す。
【０１０５】
したがって好ましい実施形態において、神経系の前記スフィンゴ糖脂質で構成される前記糖鎖エピトープは、セレブロシド型、（ネオ）ラクト型、ガングリオ型、もしくはスルホグルクロニルパラグロボシド型、または式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物で構成される炭水化物部分から選択される。
【０１０６】
さらに好ましい実施形態において、神経系の前記スフィンゴ糖脂質で構成される前記糖鎖エピトープは、セレブロシド型、（ネオ）ラクト型、またはガングリオシド型から選択される。別の好ましい実施形態において、神経系の前記スフィンゴ糖脂質で構成される前記糖鎖エピトープは、式（Ｉ）の化合物で構成される炭水化物部分から選択される。別の好ましい実施形態において、神経系の前記スフィンゴ糖脂質で構成される前記糖鎖エピトープは、式（ＩＩ）の化合物で構成される炭水化物部分から選択される。
【０１０７】
本発明の糖鎖エピトープ、および特定の本発明の化合物の文脈において本明細書で用いられる用語「還元末端」は、グリコシド結合に関与せず、ヘミアセタール基を担う、遊離のアノマー炭素を有する糖鎖エピトープの末端単糖を指す。
【０１０８】
本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ４−アルキル」は、炭素原子１〜４個の直鎖または分枝鎖を指し、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどのブチル、ｎ−プロピルもしくはイソプロピルなどのプロピル、エチルまたはメチルが挙げられる。好ましくは用語「Ｃ１〜Ｃ４−アルキル」は、メチルまたはエチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルを指す。さらに好ましくは用語「Ｃ１〜Ｃ４−アルキル」は、メチルを指す。相応に、本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ８−アルキル」は、炭素原子１〜８個の直鎖または分枝鎖を指す。本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル」は、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨとして定義されるリンカーＺを指す場合、および前記リンカー内のＡを指す場合、説明および本明細書内の実施例から明らかな通り、ｎが１〜４である（ｒｅｑｕａｌ）−（ＣＨ２）ｎ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−（ＣＨ２）ｎ−などの基を含む二価「Ｃ１〜Ｃ４−アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル」基を指すであろう。
【０１０９】
本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ４−アルキレン」は、直鎖または分枝鎖二価アルキル鎖、好ましくは炭素原子１〜７個の直鎖または分枝鎖二価アルキル鎖を指し、例えば−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、または−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）−が挙げられる。
【０１１０】
本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ」は、炭素原子１〜７個の直鎖または分枝鎖のアルコキシを指す。本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ」は、炭素原子１〜４個の直鎖または分枝鎖のアルコキシを指し、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、およびｔｅｒｔ−ブトキシが挙げられる。好ましくは本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、プロポキシを指す。さらに好ましくは本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ」は、メトキシを指す。本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ」は、−Ｎ（Ｒａ）−Ａ−Ｂ−ＣＨ２−（ＣＨ２）ｑ−ＳＨとして定義されるリンカーＺを指す場合、そして前記リンカーＺ内のＡを指す場合、説明および本明細書内の実施例から明白な通り、ｎが１〜７の−（ＣＨ２）ｎＯ−または−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−などの基を含む二価Ｃ１〜Ｃ７−アルコキシ基、典型的にそして非常に好ましくはリンカーＺのＮ（Ｒａ）と共に好ましい結合Ｎ（Ｒａ）−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を形成する−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−などの基を指すであろう。
【０１１１】
本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ８−アルケニル」は、１つまたは複数、例えば２つまたは３つの二重結合を含む直鎖または分枝鎖を指し、好ましくは１−もしくは２−ブテニル、１−プロペニル、アリルまたはビニルなどのＣ１〜Ｃ４−アルケニルである。
【０１１２】
基本的に二重結合は、Ｅ−またはＺ−型を有し得る。それゆえ本発明の化合物は、異性体混合物または単一の異性体として存在し得る。明記されない限り、両方の異性体型が、意図される。
【０１１３】
本明細書で用いられる用語「Ｃ１〜Ｃ８−アルキニル」は、１つまたは複数、好ましくは１つの三重結合を含む直鎖または分枝鎖を指す。好ましいのは、プロパルギルまたはアセチレニルなどのＣ１〜Ｃ４−アルキニルである。
【０１１４】
任意の非対称炭素原子は、（Ｒ）−、（Ｓ）−または（Ｒ，Ｓ）−型で、好ましくは（Ｒ）−または（Ｓ）−型で存在し得る。したがって該化合物は、異性体混合物として、または純粋な異性体として、好ましくは鏡像異性体−純粋なジアステレオマーとして存在し得る。
【０１１５】
本明細書で用いられる用語「アリール」は、フェニル、１−ナフチルもしくは２−ナフチルなどの置換基を任意選択で有する炭素原子５〜１０個の単環式もしくは二環式縮合環式芳香族基、または任意選択で置換された、インダニル、インドリニル、ジヒドロもしくはテトラヒドロナフチルなどのフェニル基を含む部分飽和二環式縮合環も指す。好ましくはアリールは、フェニル、インダニル、インドリニルまたはテトラヒドロナフチル、特にフェニルである。
【０１１６】
本明細書で用いられる用語「ヘテロアリール」は、窒素、酸素および硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは３個までのヘテロ原子を、環員として含む芳香族単環式または二環式環系を指す。ヘテロアリール環は、環内に隣接する酸素原子、隣接する硫黄原子、または隣接する酸素および硫黄原子を含まない。単環式ヘテロアリールは、好ましくは５または６員ヘテロアリール基を指し、二環式ヘテロアリールは、好ましくは９または１０員縮合環ヘテロアリール基を指す。ヘテロアリールの例としては、全て任意選択で置換された、ピロリル、チエニル、フリル、ピラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、およびそのような単環式ヘテロアリール基のベンゾまたはピリダゾ縮合誘導体、例えばインドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフリル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、ピロロピリジン、イミダゾピリジン、またはプリニルが挙げられる。
【０１１７】
好ましくは用語「ヘテロアリール」は、窒素、酸素および硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは３個までのヘテロ原子を、環員として含む５または６員芳香族単環式環系を指す。好ましくはヘテロアリールは、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、インドリル、ピロロピリジンまたはイミダゾピリジン、特にピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、インドリル、ピロロピリジンまたはイミダゾピリジンである。
【０１１８】
本明細書で用いられる用語「任意選択で置換されたアリール」は、４つまでの置換基、好ましくは２つまでの置換基により置換されたアリールを指す。任意選択で置換されたアリール、好ましくは任意選択で置換されたフェニルにおいて、置換基は、好ましくはそして独立して、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、アミノ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、アシルアミノ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、アリール−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルヒドロキシ、カルボキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、テトラゾリル、ヒドロキシスルホニル、アミノスルホニル、ハロ、またはニトロ、特にＣ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、アミノ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、アシルアミノ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、カルボキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、テトラゾリル、またはアミノスルホニルから選択される。
【０１１９】
本明細書で用いられる用語「任意選択で置換されたヘテロアリール」は、３つまでの置換基、好ましくは２つまでの置換基により置換されたヘテロアリールを指す。任意選択で置換されたヘテロアリールにおいて、置換基は、好ましくはそして独立して、Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ、ハロ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、ヒドロキシルアミノカルボニル、テトラゾリル、アミノスルホニル、ハロ、アリール−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルまたはニトロから選択される。
【０１２０】
シクロアルキルは、好ましくは３〜７個の環炭素原子を有し、非置換であるか、または例えばＣ１〜Ｃ４−アルキルもしくはＣ１〜Ｃ４−アルコキシによって、置換され得る。シクロアルキルは、例えばそして好ましくは、シクロヘキシル、シクロペンチル、メチルシクロペンチル、またはシクロプロピル、特にシクリプロピルである。
【０１２１】
アシルは、例えばアルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アリールカルボニル、アリール−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルカルボニル、またはヘテロアリールカルボニルを示す。Ｃ１〜Ｃ４−アシルは、好ましくは低級アルキルカルボニル、特にプロピオニルまたはアセチルである。Ａｃは、アセチルを表す。
【０１２２】
ヒドロキシアルキルは、特にヒドロキシ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル、好ましくはヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチルまたは２−ヒドロキシ−２−プロピルである。
【０１２３】
ハロアルキルは、好ましくはフルオロアルキル、特にトリフルオロメチル、３，３，３−トリフルオロエチルまたはペンタフルオロエチルである。
【０１２４】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素である。
【０１２５】
アリールアルキルとしては、本明細書において既に定義されたアリールおよびアルキルが挙げられ、それは例えばベンジル、１−フェネチルまたは２−フェネチルである。
【０１２６】
ヘテロアリールアルキルとしては、本明細書において既に定義されたヘテロアリールおよびアルキルが挙げられ、それは、例えば２−、３−もしくは４−ピリジルメチル、１−もしくは２−ピロリルメチル、１−ピラゾリルメチル、１−イミダゾリルメチル、２−（１−イミダゾリル）エチルまたは３−（１−イミダゾリル）プロピルである。
【０１２７】
置換されたアミノにおいて、置換基は、好ましくは本明細書において既に置換基として列挙された置換基である。特に置換アミノは、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、任意選択で置換されたアリールアミノ、任意選択で置換されたアリールアルキルアミノ、低級アルキルカルボニルアミノ、ベンゾイルアミノ、ピリジルカルボニルアミノ、低級アルコキシカルボニルアミノ、または任意選択で置換されたアミノカルボニルアミノである。
【０１２８】
考慮される特定の塩は、水素原子を硫酸基およびカルボン酸官能基と置換する塩である。適切なカチオンは、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムもしくはアンモニウムカチオン、または例えばＣ１〜Ｃ４−アルキル、ヒドロキシ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルもしくはヒドロキシ−Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキル基、例えば２−ヒドロキシエチルアンモニウム、２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）エチル−ジメチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム、ジ（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム、トリメチルアンモニウム、トリエチルアンモニウム、２−ヒドロキシエチルジメチルアンモニウム、もしくはジ（２−ヒドロキシエチル）メチルアンモニウムを含む第一級、第二級もしくは第三級アミンから、そして対応する置換された環状第二級および第三級アミン、例えばＮ−メチルピロリジニウム、Ｎ−メチルピペリジニウム、Ｎ−メチルモルホリニウム、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピロリジニウム、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペリジニウムもしくはＮ−２−ヒドロキシエチルモルホリニウムなどからのプロトン化により誘導されたカチオンである。
【０１２９】
遊離型の新規化合物と、例えば新規化合物の精製および同定において中間体として用いられ得る塩を含む塩型の新規化合物との密接な関連性を考慮して、本明細書に既出のまたは後述の遊離化合物に対する任意の言及は、対応する塩も言及すると理解すべきであり、必要に応じて便宜上、その逆もまた同様である。
【０１３０】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物の複数を含む本発明のポリマーの好ましいポリマー骨格は、ポリリジン、特にポリ−Ｌ−リジンである。
【０１３１】
好ましくはポリリジンの分子量は、１，０００〜３００，００ｋＤ、好ましくは１０，０００〜２００，００ｋＤである。特に好ましいのは、およそ５０，０００ｋＤ、８５，０００ｋＤ、１２５，０００ｋＤ、または２００，０００ｋＤの分子量である。最も好ましいのは、およそ５０，０００ｋＤの分子量である。
【０１３２】
特に本発明は、ポリマー骨格の、式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の前記化合物の炭水化物部分の相対的担持量が１０〜９０％であるポリマーに関し、このことは、ポリマー内の全てのリジン側鎖の１０〜９０％が、本発明の化合物、好ましくは式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の本発明の化合物で構成される前記リンカーＺの前記ＳＨ−基に連結されており、、残りのアミノ酸官能基がキャップされていることを意味する。好ましくはポリマーの担持量は、２０〜７０％、より好ましくは３０〜６０％である。前記文脈においてさらに好ましいポリマーは、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物の１つまたは複数を担持させたポリマーであり、式（Ｉ）または（ＩＩ）の前記化合物は、４＊、９＊、１３＊、１７＊、２１＊、２５＊、２９＊または３３＊、および４６＊〜６０＊から選択される。
【０１３３】
炭水化物部分とリンカーＺとを含む本発明の化合物を含み、前記炭水化物部分が神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣する、本発明のポリマーは、その還元末端で炭水化物部分の完全性を失うことなく、ガングリオシド糖鎖エピトープなどの前記炭水化物部分の、生分解性ポリ−Ｌ−リジンおよび他の官能基化生分解性ポリマーへの直接のカップリングを可能にする。炭水化物部分に含まれる還元末端を有する単糖が抗体または他の標的に対する結合親和性にも寄与し得ることから、このことは特に重要であり、そのためこの炭水化物環をインタクトのままにする化学的結合方法が好ましい。したがって、生分解性ポリマー骨格に基づく、得られた本発明の化学的に定義されたグリココンジュゲート／糖鎖ポリマーは、治療的および診断的のいずれかの臨床の状況で、病原性抗グリカン抗体を検出または中和するために用いることができる。その上、好ましくはポリ−Ｌ−リジン上の、神経系のスフィンゴ糖脂質で構成される糖鎖エピトープを模倣する炭水化物部分が多価で提示されることは、結合パートナーに対する結合親和性を実質的に増強し得る。
【０１３４】
特に好ましい実施形態において、本発明は、複数の式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物を含むポリマーであって、ポリ−Ｌ−リジンであり、前記化合物をポリマー骨格に連結させる前記リンカーＺをさらに含む、ポリマーに関する。ポリ−Ｌ−リジンは、生分解性であり、それゆえ治療適用に特に適する。
【０１３５】
本発明の化合物は、貴重な薬理学的特性を有する。本発明はまた、医薬として使用するための本明細書において既に定義された化合物にも関する。本発明による化合物は、特に抗グリカン抗体に関連する神経疾患、特に免疫介在性ニューロパチーに対して、予防上および治療上の有効性を示す。
【０１３６】
式（Ｉ）および／もしくは（ＩＩ）の１つもしくは複数の化合物、またはこれらを含むポリマーは、単独で、または１種もしくは複数の他の治療剤との併用で、固定された組み合わせの形態をとる可能な併用療法、または時差投与されるもしくは互いに独立して与えられる、本発明の化合物と１種もしくは複数の他の治療薬の投与、または固定された組み合わせと１種もしくは複数の他の治療薬との併用投与で投与され得る。
【０１３７】
可能な組み合わせの治療薬は、特に免疫抑制剤／治療である。例は、フルダラビンおよび／またはクラドリビンなどのプリン類似体、プラスマフェレーシス、静脈内免疫グロブリン、さらにキメラモノクローナル抗体リツキシマブである (Ｍ．Ｃ．  Ｄａｌａｋａｓ，  Ｃｕｒｒ  Ｔｒｅａｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎｓ  Ｎｅｕｒｏｌ，  ２０１０，  １２，  ７１−８３）。
【０１３８】
別の特定の実施形態において、本発明は、神経疾患、特に免疫介在性ニューロパチーのための診断アッセイにおける本発明の化合物の使用に関する。特に本発明は、既に定義された式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物を含むキット、ならびにそのような化合物を置換基として含む本発明のポリマーに関する。
【０１３９】
本発明は、神経疾患、特に免疫介在性ニューロパチーの診断の方法であって、神経系のグリカン、詳細には糖脂質に対する抗体（例えば、ＩｇＭ／ＩｇＧ）のレベルが、体液試料、例えば血清中で決定され、高レベルが特定の神経状態の発症および重症度の指標となる、方法に関する。
【０１４０】
血清以外の他の体液は、スフィンゴ糖脂質に対する抗体の決定に有用であり、例えば全血、脳脊髄液、または固形組織からの抽出物である。
【０１４１】
体液中のスフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープに対する抗体レベルの決定に、任意の公知の方法が用いられ得る。考慮される方法は、例えばＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、ＥＩＡ、またはマイクロアレイ分析である。
【０１４２】
ヒト体液中、例えば血清中のスフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープに対する抗体の決定に好ましい方法は、ＥＬＩＳＡである。そのような実施形態において、マイクロタイタープレートを、式（Ｉ）および／もしくは（ＩＩ）の化合物、または好ましくはそのような化合物を置換基として含む本発明のポリマーでコーティングする。次いで、該プレートをブロックして、試料または標準液を適用する。インキュベーションの後、抗ＩｇＭ／ＩｇＧ抗体、例えば適切な標識に、例えば発色検出用の酵素に直接コンジュゲートされた抗ＩｇＭまたは抗ＩｇＧ抗体を適用する。あるいは、ポリクローナルウサギ（またはマウス）抗ＩｇＭ／ＩｇＧ抗体を、添加する。適切な標識、例えば上記の発色検出用の酵素をコンジュゲートした抗ＩｇＭ／ＩｇＧ抗体、例えば抗ウサギ（または抗マウス）抗体の特定のタイプを検出する二次抗体を、添加する。最後に、神経系のスフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープに対する抗体の存在および量の尺度である標識を検出および定量するために、標識の基質を用いて、プレートを発色させる。標識が、発色検出用の酵素である場合、基質は、コンジュゲートされた酵素の色素生産性基質である。発色反応を、その後、マイクロプレートリーダーで検出し、標準と比較する。
【０１４３】
抗体断片を使用することも可能である。適切な標識は、発色性標識、即ち基質を検出可能な有色もしくは蛍光化合物に変換するために用いることができる酵素、分光分析用標識、例えば蛍光標識、または可視色を提示する標識、標識に特異性があり容易な検出および定量を可能にするさらなる化合物により発色され得る親和性標識、または標準のＥＬＩＳＡで用いられる任意の他の標識である。
【０１４４】
スフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープに対する抗体の他の好ましい検出方法は、市販の自動分析ロボットでの放射線免疫アッセイまたは競合免疫アッセイ、および化学発光検出である。微粒子増強蛍光法、蛍光偏光法、または質量分析法もまた、用いられ得る。検出装置、例えばマイクロアレイは、スフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープに対する抗体の読み取りシステムとして有用な構成要素である。
【０１４５】
さらなる実施形態において、本発明は、式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物、またはそれらの化合物を置換基として含む含むポリマーを含む、上記のアッセイ、詳細にはＥＬＩＳＡに適したキットに関する。該キットは、適切な標識を有する抗ＩｇＭ／抗ＩｇＧ抗体（または抗ＩｇＭ／ＩｇＧ抗体断片）、または抗ＩｇＭ／抗ＩｇＧ抗体および適切な標識を含む二次抗体、ならびに標識を検出する試薬または機器、例えば標識として用いられる酵素と反応して色の形成もしくは蛍光によりそのような標識の存在を示す試薬、標準機器、例えばマイクロタイタープレート、ピペットなど、標準溶液および洗浄溶液をさらに含む。
【０１４６】
ＥＬＩＳＡをまた、患者の血液または血清試料をマイクロタイタープレートのコーティングに用いて、次に標識された式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物、またはそのような化合物を置換基として含む標識されたポリマーにより抗グリカン抗体が検出されるように、設計することもできる。標識は、直接検出可能であるか、または抗体を介して間接的に検出可能のいずれかである。
【０１４７】
本発明の式（Ｉ）および／または式（ＩＩ）の化合物を含むポリマーは、病原性の抗グリカン抗体に結合して、抗グリカンＩｇＭまたはＩｇＧ抗体産生を潜在的にダウンレギュレートする。それによって、スフィンゴ糖脂質の糖鎖エピトープに対する抗グリカン抗体を含む神経疾患の抗原特異性処置が可能となる。
【０１４８】
さらに本発明は、式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物、または式（Ｉ）および／もしくは式（ＩＩ）の化合物を有するポリマーを含む医薬組成物に関する。
【０１４９】
温血動物、特にヒトへの皮下、静脈内、肝臓内または筋肉内投与などの非経口投与用の医薬組成物が、考慮される。該組成物は、有効成分を単独で、または好ましくは医薬的に許容し得る担体と共に含む。有効成分の投薬量は、患者の年齢、体重および個々の状態、個々の薬物動態データ、ならびに投与様式に依存する。
【０１５０】
非経口投与の場合、本発明の炭水化物ポリマーの懸濁液または分散液、特に、例えば使用の直前に構成され得る、等張性水性分散液または懸濁液の使用が優先される。該医薬組成物は、滅菌してもよく、および／あるいは賦形剤、例えば防腐剤、安定化剤、湿潤剤および／もしくは乳化剤、可溶化剤、増粘剤、浸透圧を調節する塩、ならびに／または緩衝剤を含んでもよく、それ自体が公知の手法、例えば従来の溶解および凍結乾燥工程により調製される。
【０１５１】
鼻内、口腔、直腸または経口投与などの腸内投与に適した担体は、特に糖、例えばラクトース、サッカロース、マンニトールもしくはソルビトール、セルロース調製物、および／またはリン酸カルシウム、例えばリン酸三カルシウムもしくはリン酸水素カルシウムなどの充填剤、ならびにデンプン、例えばコーンスターチ、小麦デンプン、米デンプンもしくはジャガイモデンプン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドンなどの結合剤、ならびに／あるいは望ましければ、上述のデンプン、同じくカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、アルギン酸、またはアルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤である。追加の賦形剤は、特に流動調整剤および滑沢剤、例えばケイ酸、タルク、ステアリン酸またはステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸カルシウムなどのその塩、および／もしくはポリエチレングリコール、またはその誘導体である。
【０１５２】
錠剤コア（ｔａｂｌｅｔ  ｃｏｒｅ）に、特にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、および／もしくは二酸化チタンを含み得る濃縮糖溶液の使用により、または適切な有機溶媒もしくは溶媒混合物中のコーティング溶液の使用により、または腸溶性コーティングの調製の場合には、アセチルセルロースフタラートもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラートなどの適切なセルロース調製物の溶液の使用により、適切なコーティング、任意選択で腸溶性のコーティングを提供することができる。例えば同定目的で、または有効成分の異なる用量を示すために、染色剤または色素を、錠剤または錠剤コーティングに添加してもよい。
【０１５３】
経口投与のための医薬組成物はまた、ゼラチンからなるハードカプセル、ならびにゼラチンおよび可塑化剤、例えばグリセロールまたはソルビトールからなる密封されたソフトカプセルを含む。ハードカプセルは、例えばコーンスターチなどの充填剤、結合剤および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムなどの滑剤、そして任意選択で安定化剤と混和された、顆粒形態の有効成分を含有し得る。ソフトカプセルでは、有効成分を、好ましくは、脂肪酸、パラフィン油、液体ポリエチレングリコール、またはエチレンもしくはプロピレングリコールの脂肪酸エステルなどの適切な液体賦形剤に溶解または懸濁し、それに、例えばポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル型の、安定化剤および洗剤を添加してもよい。
【０１５４】
直腸投与に適した医薬組成物は、例えば有効成分と坐剤基剤の組み合わせからなる坐剤である。適切な坐剤基剤は、例えば天然または合成トリグリセリド、パラフィン炭化水素、ポリエチレングリコールまたは高級アルカノールである。
【０１５５】
本発明による上述の医薬組成物は、有効成分の経口で許容し得る製剤の個別の錠剤、顆粒、もしくは他の剤形を含有してもよく、または上記の通り、有効成分の混合物を１つの適切な医薬投与剤形に含有してもよい。特に、個別の経口で許容し得る製剤または１つの適切な医薬投与剤形での混合物は、徐放性および制御放出性の医薬組成物であり得る。
【０１５６】
該医薬組成物は、およそ１％〜およそ９５％の有効成分または有効成分混合物、好ましい実施形態においておよそ２０％〜およそ９０％の有効成分を含む単回投与剤形、および好ましい実施形態においておよそ５％〜およそ２０％の有効成分を含む単回投与型ではない剤形を含む。
【０１５７】
本発明はまた、抗グリカン抗体に関連する神経疾患、特に免疫介在性ニューロパチーの処置における医薬としての上述の医薬組成物に関する。
【０１５８】
本発明はさらに、抗グリカン抗体に関連する神経疾患、特に免疫介在性ニューロパチーの処置の方法であって、本発明による組成物を前記疾患に対して有効な量で、そのような処置を必要とする温血動物へ投与することを含む、方法に関する。該医薬組成物は、前記疾患に対して有効な量で、そのような処置を必要とする温血動物、例えばヒトへ予防的または治療的に投与することができる。約７０ｋｇの体重を有する個体の場合、投与される１日あたり、１週間あたり、または１ヶ月あたりの用量は、本発明の組成物中におよそ０．０１ｇ〜およそ５ｇ、好ましくはおよそ０．１ｇ〜およそ１．５ｇの有効成分である。
【０１５９】
以下の実施例は、本発明を例示しており、本発明をその範囲に限定するものではない。
【０１６０】
実施例
一般的方法
ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＭＸ−５００（５００ＭＨｚ）分光計で得た。１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルの割り付けは、２Ｄ法（ＣＯＳＹ、ＨＳＱＣおよびＨＭＢＣ）を用いて実現した。化学シフトは、残留するＣＨＣｌ３、ＣＨＤ２ＯＤ、ＤＭＳＯ−ｄ６またはＨＤＯを参照として用いてｐｐｍで表している。ＩＲスペクトルは、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｏｎｅ  ＦＴ−ＩＲ分光計を用いて記録した。エレクトロスプレーイオン化−質量分析法（ＥＳＩ−ＭＳ）は、Ｗａｔｅｒｓ  ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱで得た。ＨＲＭＳ分析は、フォトダイオードアレイ検出器を具備したＡｇｉｌｅｎｔ  １１００ＬＣおよび４ＧＨｚ時間・デジタルコンバータを具備したＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＱＴＯＦ  Ｉを用いて実施した。反応を、シリカゲル６０  Ｆ２５４（Ｍｅｒｃｋ）でコーティングしたガラスプレートを用いてＥＳＩ−ＭＳおよびＴＬＣによりモニタリングし、ＵＶ光を用いること、および／またはモスタイン（ｍｏｓｔａｉｎ）（１０％Ｈ２ＳＯ４水溶液中の硫酸セリウムアンモニウムとモリブデン酸アンモニウム四水和物の０．０２Ｍ溶液）で炭化させることにより可視化した。カラムクロマトグラフィーを、シリカゲル（Ｒｅｄｉｓｅｐ順相シリカゲルカラム３５／７０）またはＲＰ−１８（Ｍｅｒｃｋ  ＬｉＣｈｒｏｐｒｅｐ（登録商標）ＲＰ−１８  ４０／６３）で実施した。ジクロロメタン（ＤＣＭ）およびＭｅＯＨを、Ａｌ２Ｏ３（Ｆｌｕｋａ、５０１６Ａ  ｂａｓｉｃ型）でのろ過により乾燥させた。ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）は、Ａｃｒｏｓ（９９．８％、エクストラドライ、分子ふるい上）から購入した。分子ふるい（ＭＳ、４Å）を、使用の直前に、真空にて４００℃で３０分間活性化させた。サイズ排除クロマトグラフィーは、ポリアクリルアミドゲル（Ｂｉｏｇｅｌ  Ｐ−２  Ｆｉｎｅ）で実施した。透析は、Ｂｉｏｔｅｃｈセルロースエステル（ＣＥ）膜（ＳｐｅｃｔｒｕｍＬａｂｓ、分子量カットオフ：１００〜５００Ｄａ）で実施した。遠心分離は、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ  ５８０４Ｒで実施した。ｒｔ＝室温。
【０１６１】
生物学的評価のために、１７種の糖鎖ポリマーを合成した（６、スキーム１；１０、スキーム２；１４、スキーム３；１８、スキーム４；２２、スキーム５；２６、スキーム６；３０、スキーム７；３４、スキーム８；３８、スキーム９；４２、スキーム１０；４５、スキーム１１；７８、スキーム１６；８６、スキーム１８；８９、スキーム１９；９３、スキーム２０；１００、スキーム２２；１０２、スキーム２３）。ポリリジングリココンジュゲート６、１０、１４、１８、２２、２６、３０、３４は全て、同じリンカーを担持するが、それらの炭水化物部分は異なる（それぞれＧＭ１ａ、ＧＭ１ｂ、アシアロＧＭ１、ＧＭ２、ＧＤ１ａ、ＧＤ１ｂ、ＧＤ３およびＧＴ１ａ)。ポリリジングリココンジュゲート６、３８、４２および４５は、同じ炭水化物（ＧＭ１ａ）を担持するが、リンカー部分が異なる。ポリリジングリココンジュゲート７８は、ＧＭ４模倣体を担持する。ポリリジングリココンジュゲート８６は、ＨＯ３Ｓ−β−Ｄ−ＧｌｃρＡ−（１→３）−β−Ｄ−Ｇａｌｐ（ＨＮＫ−１）二糖を担持する。上述のグリココンジュゲート（６、１０、１４、１８、２２、２６、３０、３４、３８、４５、７８、８６）は全て、ポリ−Ｌ−リジンコンジュゲートである。コンジュゲート８９および９３は、同じＨＮＫ−１二糖を担持するが、ポリマー骨格が異なる（それぞれポリ−Ｌ−リジンデンドリマーおよびポリ−Ｌ−オルニチン）。コンジュゲート１００および１０２は、同じラクトース二糖を担持するが、ポリマー骨格が異なる（それぞれキトサンおよびポリ−Ｌ−グルタミン酸）。リンカー５  ７２によって官能基化されたＨＮＫ−１二糖５８の合成を、スキーム１７に記載する。リンカー５  ７２によって官能基化されたラクトース二糖５６の合成を、スキーム１２１に記載する。リンカー３５、３９、４３および７２の合成を、それぞれスキーム１２、１３、１４および１５に記載する。
【０１６２】
試薬は全て、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、Ａｃｒｏｓ、Ａｌｆａ−Ａｅｓａｒ、ＥｌｉｃｉｔｙｌまたはＡｌａｍａｎｄａ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓから購入した。リンカー２および化合物６６は、公表された手順に従って合成した（Ｏ．  Ｂｏｈｏｒｏｖ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，  ２００６，  １６，  ２１Ｃ-２７Ｃ）。クロロアセチル化ポリ−Ｌ−リジン５（２５０のリジン反復単位）は、公表された手順に従って市販のポリ−Ｌ−リジンポリマーから合成した（Ｇ．  Ｔｈｏｍａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ａｍ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  １９９９，  １２１，  ５９１９−５９２９）。誘導体６８、７３、７４、８０、８７および９８は、公表された手順に従って合成した（それぞれＩ．  Ｕｅｄａ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ  （Ｔｏｋｙｏ），  １９９０，  ３８， ３０３５−３０４１；Ｍ．  Ｎｕｍａｔａ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ  Ｒｅｓ，  １９８７，  １６３，  ２０９−２２５；  Ｊ．  Ｌ．  Ｍａｇｎａｎｉ，  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｇｌｙｃｏｍｉｍｅｔｉｃ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｓ  Ｅ−  ａｎｄ  Ｐ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ，ＷＯ２００５０５４２６４Ａ２号，Ｊｕｎｅ  １６，  ２００５；Ｔ．  Ｆｕｒｕｋａｗａ，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ，  ２０１１，  ５２，  ５５６７−５５７０；Ｋ．  Ｔ．  Ａｌ−Ｊａｍａｌ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ，  ２００６，  １４，  ４０５−４１２；Ｔ．  Ｋｏｊｉｍａ，  Ｃｈｉｔｏｓａｎ  ｏｒ  ｃｈｉｔｉｎ  ｄｅｒｉｖａｔｉｅ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ｓｉｌｖｅｒ  ｈａｌｉｄｅ  ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｉｃ  ｍａｔｅｒｉａｌ  ｂｙ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓａｍｅ，ＵＳ００５１５５００４Ａ号，Ｏｃｔ  １３，  １９９２）。
【０１６３】
スキーム１：ＧＭ１ａポリマー６の合成
【化６２】
2018534246.tif 000067
【０１６４】
試薬および条件：ａ）２、酢酸ナトリウム緩衝液、９１％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、５４％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、８４％
【０１６５】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−アミノエチル］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（３）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、５０μＬ）中のヘミアセタール１（５．０ｍｇ、４．９０μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン２（４．４ｍｇ、４９μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物３（４．９７ｍｇ、４．５５μｍｏｌ、９１％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．８０（ｄ，１Ｈ），４．５７（ｄ，１Ｈ），４．５７（ｄ，１Ｈ），４．２４（ｄ，１Ｈ），４．２２−４．１１（ｍ，２Ｈ），４．０６（ｄｄ，１Ｈ），４．０４−３．９６（ｍ，３Ｈ），３．９４（ｄ，１Ｈ），３．８９（ｄｄ，１Ｈ），３．８６−３．７４（ｍ，１２Ｈ），３．７３−３．５７（ｍ，１０Ｈ），３．５４（ｄｄ，１Ｈ），３．５２（ｄｄ，１Ｈ），３．３９（ｄｄ，１Ｈ），３．２８−３．２６（ｍ，２Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），２．６８（ｄｄ，１Ｈ），２．０５，２．０３（２ｓ，６Ｈ），１．９４（ｔ，１Ｈ）。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ１０７１．４１３２（Ｃ４０Ｈ７１Ｎ４Ｏ２９＋［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：ｍ／ｚ１０７１．４１９８）。
【０１６６】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］β−Ｄ−ガラクト−ピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（４）：
無水ＤＭＦ（９０μＬ）中のアミン３（４．９７ｍｇ、４．５５μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（１．２ｍｇ、８．２μｍｏｌ、１．８当量）、γ−チオブチロラクトン（３．９μＬ、４６μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（６．３μＬ、４６μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物４（２．８ｍｇ、２．３３μｍｏｌ、５４％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７９（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｍ，２Ｈ），４．２２−３．３１（ｍ，３２Ｈ），２．７５（ｓ，３Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｔ，２Ｈ），２．４１（ｔ，２Ｈ），２．０５，２．０３（２ｓ，６Ｈ），１．９１（ｍ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ１１７１．５９（Ｃ４４Ｈ７５Ｎ４Ｏ３０Ｓ−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：ｍ／ｚ１１７１．４２）。
【０１６７】
ＧＭ１ａポリマー（６）：
ＤＭＦ（６０μＬ）中の５（１．２ｍｇ、５．８３μｍｏｌ）の溶液に、化合物４（２．８ｍｇ、２．３３μｍｏｌ、０．４当量）、水（３μＬ）およびＤＭＦ（１０μＬ）中のＤＢＵ（１．３μＬ、８．７４μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（１．５μＬ、１７．５μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（２．４μＬ、１７．５μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＭ１ａポリマー６（２．８８ｍｇ、８４％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ４に置換されたリジン側鎖のおよそ２８％を含有した。
【０１６８】
この特定の実施形態において、末端スルフヒドリル官能基を有するリンカーＺを有するＧＭ１ａエピトープ４を合成して、活性化（クロロアセチル化）リジンポリマー５と準化学量論的量で反応させた。得られた糖鎖ポリマー６の炭水化物担持量（２８％）を、１Ｈ  ＮＭＲにより決定した。出発物質のポリリジン臭化水素酸塩は、平均分子量（ＭＷ）５２ｋＤａ（２５０の反復リジン単位）を有したが、２８％のＧＭ１ａエピトープ担持量を有する最終的なポリマー６は、計算平均ＭＷ１４５ｋＤａを有した。
【０１６９】
スキーム２：ＧＭ１ｂポリマー１０の合成
【化６３】
2018534246.tif 000068
【０１７０】
試薬および条件：ａ）２、酢酸ナトリウム緩衝液、７１％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、６５％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、６１％
【０１７１】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−アミノエチル］ヒドロキシルアミノ）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（８）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、９８μＬ）中のヘミアセタール７（１０ｍｇ、９．８０μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン２（８．８ｍｇ、９８μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物８（７．６ｍｇ、６．９５μｍｏｌ、７１％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７２（ｄ，１Ｈ），４．５４（ｄ，１Ｈ），４．４６（ｄ，１Ｈ），４．２４（ｄ，１Ｈ），４．１７（ｄ，１Ｈ），４．１３（ｄ，１Ｈ），４．０９（ｄｄ，１Ｈ），４．０６−３．９７（ｍ，４Ｈ），３．９５（ｄ，１Ｈ），３．９１（ｄｄ，１Ｈ），３．８９−３．８１（ｍ，７Ｈ），３．８１−３．６０（ｍ，１２Ｈ），３．７８（ｄｄ，１Ｈ），３．６２−３．５７（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｄｄ，１Ｈ），３．５７（ｄｄ，１Ｈ），３．４４（ｄｄ，１Ｈ），３．２９−３．２７（ｍ，２Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），２．７７（ｄｄ，１Ｈ），２．０６，２．０５（２ｓ，６Ｈ），１．８１（ｄｄ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ１０６９．６２（Ｃ４０Ｈ６９Ｎ４Ｏ２９−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：ｍ／ｚ１０６９．４１）．
【０１７２】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシルアミノ）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（９）：
無水ＤＭＦ（１４０μＬ）中のアミン８（７．６ｍｇ、６．９５μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（スパチュラの先端量）、γ−チオブチロラクトン（６．０μＬ、６９．５μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（９．７μＬ、６９．５μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物９（５．４ｍｇ、４．５２μｍｏｌ、６５％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７２（ｄ，１Ｈ），４．５４（ｄ，１Ｈ），４．４７（ｄ，１Ｈ），４．１９（ｄ，１Ｈ），４．１７（ｄ，１Ｈ），４．１３（ｄ，１Ｈ），４．０９（ｄｄ，１Ｈ），４．０４（ｄｄ，１Ｈ），４．００（ｄｄ，１Ｈ），３．９６（ｄ，１Ｈ），３．９３−３．８０（ｍ，１０Ｈ），３．８０−３．５８（ｍ，１３Ｈ），３．５８−３．５２（ｍ，１Ｈ），３．５６（ｄｄ，１Ｈ），３．５５（ｄｄ，１Ｈ），３．４７−３．４０（ｍ，１Ｈ），３．４４（ｄｄ，１Ｈ），２．８１−２．７４（ｍ，５Ｈ），２．５７（ｔ，２Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），２．０６，２．０５（２ｓ，６Ｈ），１．９４−１．８９（ｍ，２Ｈ），１．８１（ｄｄ，１Ｈ）。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ１１７１．０１（Ｃ４４Ｈ７５Ｎ４Ｏ３０Ｓ−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：ｍ／ｚ１１７１．４２）。
【０１７３】
ＧＭ１ｂポリマー（１０）：
ＤＭＦ（６０μＬ）中の５（１．８６ｍｇ、９．０４μｍｏｌ）の溶液に、化合物９（５．４ｍｇ、４．５２μｍｏｌ、０．５当量）、水（４０μＬ）およびＤＭＦ（１５μＬ）中のＤＢＵ（２．０μＬ，１３．６μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（２．３μＬ、２７．１μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（３．８μＬ、２７．１μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＭ１ｂポリマー１０（４．２ｍｇ、６１％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ９に置換されたリジン側鎖のおよそ４５％を含有した。
【０１７４】
スキーム３：アシアロＧＭ１ポリマー１４の合成
【化６４】
2018534246.tif 000069
【０１７５】
試薬および条件：ａ）２、酢酸ナトリウム緩衝液、定量的量；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、８０％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、７１％
【０１７６】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−アミノエチル］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１２）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、１４１μＬ）中のヘミアセタール１１（１０．０ｍｇ、１４．１μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン２（１２．７ｍｇ、１４１μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物１２（１０．９ｍｇ、１４．０μｍｏｌ、定量的量）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７１（ｄ，１Ｈ），４．４７（ｄ，１Ｈ），４．４６（ｄ，１Ｈ），４．２４（ｄ，１Ｈ），４．１８（ｄ，１Ｈ），４．１３（ｄ，１Ｈ），４．０６−４．００（ｍ，３Ｈ），４．０４（ｄｄ，１Ｈ），３．９３（ｄ，１Ｈ），３．９０（ｄｄ，１Ｈ），３．８７−３．７５（ｍ，８Ｈ），３．７６−３．６５（ｍ，４Ｈ），３．６４（ｄｄ，１Ｈ），３．６１−３．５８（ｍ，２Ｈ），３．６０（ｄｄ，１Ｈ），３．５５（ｄｄ，１Ｈ），３．４３（ｄｄ，１Ｈ），３．２８（ｔ，２Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ７８０．４６（Ｃ２９Ｈ５４Ｎ３Ｏ２１＋［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：ｍ／ｚ７８０．３２）。
【０１７７】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１３）：
無水ＤＭＦ（２８２μＬ）中のアミン１２（１１ｍｇ、１４．１μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（スパチュラの先端量）、γ−チオブチロラクトン（１２．２μＬ、４６μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（１９．７μＬ、１４１μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物１３（１０．０ｍｇ、１１．３μｍｏｌ、８０％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７２（ｄ，１Ｈ），４．４７（ｄ，  ２Ｈ），４．１９（ｄ，１Ｈ），４．１９−４．１６（ｍ，１Ｈ），４．１４−４．１１（ｍ，１Ｈ），４．０４（ｄｄ，１Ｈ），４．０１−３．９７（ｍ，１Ｈ），３．９４−３．９１（ｍ，１Ｈ），３．９２−３．８５（ｍ，３Ｈ），３．８５−３．７１（ｍ，８Ｈ），３．７６−３．６３（ｍ，４Ｈ），３．６４（ｄｄ，１Ｈ），３．６０（ｄｄ，１Ｈ），３．５７−３．５２（ｍ，３Ｈ），３．４６−３．３８（ｍ，３Ｈ），２．７８−２．７５（ｍ，２Ｈ），２．７６（ｓ，３Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．０３−２．００（ｍ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ９０４．０５（Ｃ３３Ｈ５９Ｎ３Ｏ２２ＳＮａ＋［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：ｍ／ｚ９０４．３２）。
【０１７８】
アシアロＧＭ１ポリマー（１４）：
ＤＭＦ（６０μＬ）中の５（１．３ｍｇ、６．２５μｍｏｌ）の溶液に、化合物１３（３．７ｍｇ、４．１９μｍｏｌ、０．４当量）、水（５μＬ）およびＤＭＦ（１０５μＬ）中のＤＢＵ（２．３μＬ、１５．７μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（２．７μＬ、３１．４μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（４．４μＬ、３１．４μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、アシアロＧＭ１ポリマー１４（４．６ｍｇ、７１％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ１３に置換されたリジン側鎖のおよそ４４％を含有した。
【０１７９】
スキーム４：ＧＭ２ポリマー１８の合成
【化６５】
2018534246.tif 000070
【０１８０】
試薬および条件：ａ）２、酢酸ナトリウム緩衝液、７６％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、５２％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、５６％
【０１８１】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−アミノエチル］ヒドロキシルアミノ）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−（５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１６）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５，１４０μＬ）中のヘミアセタール１５（１２．０ｍｇ、１４．０μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン２（１２．６ｍｇ、１１４μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物１６（９．９ｍｇ、１０．６μｍｏｌ、７６％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．７９（ｄ，１Ｈ），４．５５（ｄ，１Ｈ），４．２４（ｄ，１Ｈ），４．２０−４．０９（ｍ，２Ｈ），４．０４−４．００（ｄｄ  ２Ｈ），３．９７−３．８７（ｍ，３Ｈ），３．９１−３．６８（ｍ，１４Ｈ），３．６６−３．５６（ｍ，５Ｈ），３．５０（ｄｄ，１Ｈ），３．４１−３．３４（ｔ，１Ｈ），３．３１−３．２６（ｔ，２Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），２．７２−２．６３（ｍ，１Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．００−１．８８（ｍ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ９０７．５６（Ｃ３４Ｈ５９Ｎ４Ｏ２４−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：ｍ／ｚ９０７．３５）。
【０１８２】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシルアミノ）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクト−ピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１７）：
無水ＤＭＦ（２５０μＬ）中のアミン１６（９．９ｍｇ、１０．６μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（スパチュラの先端量）、γ−チオブチロラクトン（９．２μＬ、１０６μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（１４．８μＬ、１０６μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物１７（５．７ｍｇ、５．５２μｍｏｌ、５２％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７６（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｄ，１Ｈ），４．１９（ｄ，１Ｈ），４．１７（ｄｄ，１Ｈ），４．１５（ｄ，１Ｈ），４．０１（ｄｄ，１Ｈ），３．９４（ｄ，１Ｈ），３．９４（ｄｄ，１Ｈ），３．９０−３．７５（ｍ，１１Ｈ），３．７５−３．６０（ｍ，５Ｈ），３．６２（ｄｄ，１Ｈ），３．５８−３．５３（ｍ，１Ｈ），３．５６（ｄｄ，１Ｈ），３．５０（ｄｄ，１Ｈ），３．４５−３．４０（ｍ，２Ｈ），３．３８（ｄｄ，１Ｈ，  Ｈ−２Ｇａｌ），２．７７（ｓ，３Ｈ），２．６８（ｄｄ，１Ｈ），２．５７（ｔ，２Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），２．０５，２．０４（２ｓ，６Ｈ），１．９７−１．８９（ｍ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ１００９．５４（Ｃ３８Ｈ６５Ｎ４Ｏ２５Ｓ−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：ｍ／ｚ１００９．３７）。
【０１８３】
ＧＭ２ポリマー（１８）：
ＤＭＦ（１１０μＬ）中の５（２．２７ｍｇ、１１．０４μｍｏｌ）の溶液に、化合物１７（５．７ｍｇ、５．５２μｍｏｌ、０．５当量）、水（２５μＬ）およびＤＭＦ（２２μＬ）中のＤＢＵ（２．５μＬ、１６．５５μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（２．９μＬ、３３．１１μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（４．６μＬ、３３．１１μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＭ２ポリマー１８（４．５ｍｇ、５６％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ１７に置換されたリジン側鎖のおよそ４９％を含有した。
【０１８４】
スキーム５：ＧＤ１ａポリマー２２の合成
【化６６】
2018534246.tif 000071
【０１８５】
試薬および条件：ａ）２、酢酸ナトリウム緩衝液、８７％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、７８％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、５９％
【０１８６】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−アミノエチル］ヒドロキシルアミノ）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２０）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、３５μＬ）中のヘミアセタール１９（５．０ｍｇ、３．７５μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン２（３．４ｍｇ、３８μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物２０（５．０ｍｇ、１．２当量のオキシム２と混和、３．２７μｍｏｌ、回収された収率８７％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７９（ｍ，１Ｈ），４．６３（ｄ，１Ｈ），４．５５（ｄ，１Ｈ），４．２４（ｄ，１Ｈ），４．１８（ｄ，１Ｈ），４．１８−４．１４（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．１０（ｍ，１Ｈ），４．１１（ｄｄ，１Ｈ），４．０９−４．０５（ｍ，２Ｈ），４．０６−４．０２（ｍ，１Ｈ），４．０４−３．９６（ｍ，１Ｈ），３．９９−３．９５（ｍ，１Ｈ），３．９３−３．８７（ｍ，１Ｈ），３．９２−３．８５（ｍ，２Ｈ），３．８９−３．８０（ｍ，２Ｈ），３．８７−３．８０（ｍ，１Ｈ），３．８６−３．７０（ｍ，７Ｈ），３．８２−３．５２（ｍ，１２Ｈ），３．６７−３．６０（ｍ，３Ｈ），３．５８（ｄｄ，１Ｈ），３．５４（ｄｄ，１Ｈ），３．４１（ｄｄ，１Ｈ），３．３０−３．２６（ｍ，２Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），２．７７（ｄｄ，１Ｈ），２．７０（ｄｄ，１Ｈ），２．０５（ｓ，６Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），１．９３（ｔ，１Ｈ），１．８２（ｔ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ６７９．８３（Ｃ５１Ｈ８５Ｎ５Ｏ３７２−［Ｍ−２Ｎａ］２−の計算値：ｍ／ｚ６７９．７５）。
【０１８７】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシルアミノ）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２１）：
無水ＤＭＦ（６５μＬ）中のアミン２０（５．０ｍｇ、３．２７μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（スパチュラの先端量）、γ−チオブチロラクトン（２．８μＬ、３２．７μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（４．６μＬ、３２．７μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物２１（３．８ｍｇ、２．５２μｍｏｌ、７８％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７９（ｍ，１Ｈ），４．６３（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｄ，１Ｈ），４．１９（ｄ，１Ｈ），４．１８−４．１３（ｍ，３Ｈ），４．１１（ｄｄ，１Ｈ），４．０６（ｍ，１Ｈ），４．０２−３．９６（ｍ，１Ｈ），３．９７（ｄ，１Ｈ），３．９４−３．８５（ｍ，３Ｈ），３．９４−３．５１（ｍ，１２Ｈ），３．９３−３．８４（ｍ，２Ｈ），３．８８−３．８０（ｍ，２Ｈ），３．８７−３．６８（ｍ，７Ｈ），３．８６−３．８１（ｍ，１Ｈ），３．６８−３．６１（ｍ，２Ｈ），３．６６−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．５８−３．５４（ｍ，１Ｈ），３．５６−３．５０（ｍ，１Ｈ），３．４５−３．３８（ｍ，３Ｈ），２．８０−２．７５（ｍ，１Ｈ），２．７７（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｄｄ，１Ｈ），２．５７（ｔ，２Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），２．０５（ｓ，６Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），１．９６−１．８９（ｍ，３Ｈ），１．８２（ｔ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ７３０．９７（Ｃ５５Ｈ９１Ｎ５Ｏ３８Ｓ２−［Ｍ−２Ｎａ］２−の計算値：ｍ／ｚ７３０．７５）。
【０１８８】
ＧＤ１ａポリマー（２２）：
ＤＭＦ（６７μＬ）中の５（１．４ｍｇ、６．６３μｍｏｌ）の溶液に、化合物２１（２．４ｍｇ、１．５９μｍｏｌ、０．４当量）、水（１５μＬ）およびＤＭＦ（１３μＬ）中のＤＢＵ（１．５μＬ、９．９μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（１．７μＬ、１９．９μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（２．８μＬ、１９．９μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＤ１ａポリマー２２（３．６ｍｇ、５９％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ２１に置換されたリジン側鎖のおよそ４６％を含有した。
【０１８９】
スキーム６：ＧＤ１ｂポリマー２６の合成
【化６７】
2018534246.tif 000072
【０１９０】
試薬および条件：ａ）２、酢酸ナトリウム緩衝液、７０％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、７７％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、４０％
【０１９１】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−アミノエチル］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→８）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２４）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、１５０μＬ）中のヘミアセタール２３（１９．３ｍｇ、１５．０μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン２（３１３．５ｍｇ、１５０μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物２４（１４．２ｍｇ、１０．１μｍｏｌ、７０％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．８０（ｄ，１Ｈ），４．５５−４．５３（ｔ，２Ｈ），４．２３（ｄ，１Ｈ），４．２１−３．４０（ｍ，３８Ｈ），３．２９−３．２７（ｍ，２Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），２．７８−２．６９（ｍ，２Ｈ），２．０９，２．０６，２．０５  （３ｓ，９Ｈ），１．８２−１．７３（ｍ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ１３８２．６７（Ｃ５１Ｈ８５Ｎ５Ｏ３７−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：ｍ／ｚ１３８２．４８）。
【０１９２】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→８）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２５）：
無水ＤＭＦ（７０μＬ）中のアミン２４（４．９ｍｇ、３．５１μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（１．０ｍｇ、６．３１μｍｏｌ、１．８当量）、γ−チオブチロラクトン（３．０μＬ、３５．０μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（４．９μＬ、３２．０μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物２５（４．１ｍｇ、２．７２μｍｏｌ、７７％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７９（ｄ，１Ｈ），４．５５−４．５３（ｍ，２Ｈ），４．２１−３．４０（ｍ，４１Ｈ），２．７７（ｓ，３Ｈ），２．８０−２．６７（ｍ，４Ｈ），２．４１（ｔ，２Ｈ），２．０９，２．０５（２ｓ，１１Ｈ），１．８４−１．７３（ｍ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ１４８４．８６（Ｃ５５Ｈ９１Ｎ５Ｏ３８ＮａＳ−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：ｍ／ｚ１４８４．５０）。
【０１９３】
ＧＤ１ｂポリマー（２６）：
ＤＭＦ（３０μＬ）中の５（０．５９ｍｇ、２．８９μｍｏｌ）の溶液に、化合物２５（２．１ｍｇ、１．４５μｍｏｌ、０．５当量）、水（３μＬ）およびＤＭＦ（６μＬ）中のＤＢＵ（０．６μＬ、４．３４μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（０．７５μＬ、８．７μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（１．２１μＬ、８．７μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＤ１ｂポリマー２６（０．６８ｍｇ、４０％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ２５に置換されたリジン側鎖のおよそ２０％を含有した。
【０１９４】
スキーム７：ＧＤ３ポリマー３０の合成
【化６８】
2018534246.tif 000073
【０１９５】
試薬および条件：ａ）２、酢酸ナトリウム緩衝液、５０％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、６６％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、１８％
【０１９６】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−アミノエチル］ヒドロキシルアミノ）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→８）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２８）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、１０３μＬ）中のヘミアセタール２７（１０ｍｇ、１０．３μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン２（９．３ｍｇ、１０３μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物２８（５．４ｍｇ、５．１８μｍｏｌ、５０％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．５５（ｄ，１Ｈ），４．２４−３．５７（ｍ，２８  Ｈ），４．２３（ｄ，１Ｈ），３．２７（ｍ，２Ｈ），２．８４−２．７７（ｍ，１Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｄｄ，１Ｈ），２．０９，２．０５（２ｓ，６Ｈ），１．７６（ｔ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ４９７．３６（Ｃ３７Ｈ６２Ｎ４Ｏ２７２−［Ｍ−２Ｎａ］２−の計算値：ｍ／ｚ４９７．１８）。
【０１９７】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシルアミノ）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→８）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２９）：
無水ＤＭＦ（６１μＬ）中のアミン２８（３．２ｍｇ、３．０７μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（スパチュラの先端量）、γ−チオブチロラクトン（２．７μＬ、３０．７μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（４．３μＬ、３０．７μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物２９（２．３ｍｇ、２．０１μｍｏｌ、６６％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．５５（ｄ，１Ｈ），４．２１−３．５５（ｍ，２８Ｈ），４．２０（ｄ，１Ｈ），３．４３（ｍ，２Ｈ），２．８０−２．７５（ｍ，１Ｈ），２．７７（ｓ，３Ｈ），２．７１−２．６８（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｔ，２Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），２．０９，２．０５（２ｓ，６Ｈ），１．９２−１．８９（ｍ，２Ｈ），１．７６（ｔ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ５４８．２６（Ｃ４１Ｈ６８Ｎ４Ｏ２８Ｓ２−［Ｍ−２Ｎａ］２−の計算値：ｍ／ｚ５４８．１９）。
【０１９８】
ＧＤ３ポリマー（３０）：
ＤＭＦ（３７μＬ）中の５（０．７５ｍｇ、３．６７μｍｏｌ）の溶液に、化合物２９（２．１ｍｇ、１．８３μｍｏｌ、０．５当量）、水（１０μＬ）およびＤＭＦ（７μＬ）中のＤＢＵ（０．８μＬ、５．５μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（１．０μＬ、１１．０μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（１．５μＬ、１１．０μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＤ３ポリマー３０（０．３ｍｇ、１８％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ２９に置換されたリジン側鎖のおよそ１７％を含有した。
【０１９９】
スキーム８：ＧＴ１ａポリマー３４の合成
【化６９】
2018534246.tif 000074
【０２００】
試薬および条件：ａ）２、酢酸ナトリウム緩衝液、８４％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、２４％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、２５％
【０２０１】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−アミノエチル］ヒドロキシルアミノ）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→８）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（３２）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、３０μＬ）中のヘミアセタール３１（５．０ｍｇ、３．０４μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン２（２．７ｍｇ、３０μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物３２（４．３８ｍｇ、２．５５μｍｏｌ、８４％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．８０（ｄ，１Ｈ），４．６４，４．５５  （２ｄ，２Ｈ），４．２４（ｄ，１Ｈ），４．２０−３．４０（ｍ，４５Ｈ），３．２９−３．２７（ｍ，２Ｈ），２．８１（ｓ，３Ｈ），２．７８−２．６９（ｍ，３Ｈ），２．０８，２．０５（２ｓ，１２Ｈ），１．８５−１．６５（ｍ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ８３６．３３（Ｃ６２Ｈ１０１Ｎ６Ｏ４５Ｎａ２−［Ｍ−２Ｎａ］２−の計算値：ｍ／ｚ８３６．２９）。
【０２０２】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシルアミノ）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→８）−５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（３３）：
無水ＤＭＦ（３７μＬ）中のアミン３２（３．２ｍｇ、１．８６μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（０．５ｍｇ、３．３５μｍｏｌ、１．８当量）、γ−チオブチロラクトン（１．６μＬ、１８．６μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（２．６μＬ、１８．６μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物３３（０．８２ｍｇ、０．４５μｍｏｌ、２４％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７９（ｄ，１Ｈ），４．６４，４．５５  （２ｄ，２Ｈ），４．２０−３．４０（ｍ，３９Ｈ），２．７７（ｓ，３Ｈ），２．７９−２．６６（ｍ，３Ｈ），２．５７（ｔ，２Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），２．０８，２．０５（２ｓ，１４Ｈ），１．９４−１．７４（ｍ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ５８３．８０（Ｃ６６Ｈ１０７Ｎ６Ｏ４６ＳＮａ３−［Ｍ−３Ｎａ］３−の計算値：ｍ／ｚ５８３．８７）。
【０２０３】
ＧＴ１ａポリマー（３４）：
ＤＭＦ（９μＬ）中の５（０．１９ｍｇ、０．９０μｍｏｌ）の溶液に、化合物３３（０．８２ｍｇ、０．４５μｍｏｌ、０．５当量）、水（１μＬ）およびＤＭＦ（２μＬ）中のＤＢＵ（０．２μＬ、１．３６μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜３時間撹拌した後、チオグリセロール（０．２μＬ、２．７μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（０．４μＬ、２．７μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＴ１ａポリマー３４（０．２８ｍｇ、２５％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ３３に置換されたリジン側鎖のおよそ５７％を含有した。
【０２０４】
スキーム９：ＧＭ１ａ−リンカー２ポリマー３８の合成
【化７０】
2018534246.tif 000075
【０２０５】
試薬および条件：ａ）３５、酢酸ナトリウム緩衝液、５８％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、７４％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、４１％
【０２０６】
Ｎ−［Ｏ−メチル−Ｎ−（２−アミノエチル）ヒドロキシルアミノ］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（３６）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、９８μＬ）中のヘミアセタール１（１０．０ｍｇ、９．８０μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン３５（８．８ｍｇ、９８μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物３６（６．２ｍｇ、５．６３μｍｏｌ、５８％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７８（ｄ，１Ｈ），４．５７−４．５４（ｍ，２Ｈ），４．３１（ｄ，１Ｈ），４．１８−３．５１（ｍ，３３Ｈ），３．３８（ｔ，１Ｈ），３．３２（ｍ，２Ｈ），３．２７（ｍ，２Ｈ），２．６８（ｄｄ，１Ｈ），２．０５，２．０３（２ｓ，６Ｈ），１．９５（ｔ，１Ｈ）。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ１０７１．４１７７（Ｃ４０Ｈ７１Ｎ４Ｏ２９＋［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１０７１．４１９８）。
【０２０７】
Ｎ−（Ｎ−［２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］−Ｏ−メチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（３７）：
無水ＤＭＦ（１１２μＬ）中のアミン３６（６．１ｍｇ、５．６μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（スパチュラの先端量）、γ−チオブチロラクトン（４．９μＬ、５６μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（７．８μＬ、５６μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物３７（５．０ｍｇ、４．２μｍｏｌ、７４％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７８（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｍ，２Ｈ），４．２５（ｄ，１Ｈ），４．１８−３．３７（ｍ，３４Ｈ），３．４６（ｍ，２Ｈ，Ｈｂ），  ３．２３（ｍ，１Ｈ），３．０７（ｍ，１Ｈ），２．７７（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｄｄ，１Ｈ），２．４１（ｔ，２Ｈ），２．０５，２．０３（２ｓ，６Ｈ），１．９７−１．９３（ｍ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ１１７１．６５（Ｃ４４Ｈ７５Ｎ４Ｏ３０Ｓ−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：１１７１．４２）。
【０２０８】
ＧＭ１ａ−リンカー２−ポリマー（３８）：
ＤＭＦ（８４μＬ）中の５（１．７ｍｇ、８．４μｍｏｌ）の溶液に、化合物３７（５．０ｍｇ、４．２μｍｏｌ、０．５当量）、水（８．４μＬ）およびＤＭＦ（１７μＬ）中のＤＢＵ（１．９μＬ、１２．５μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（２．２μＬ、２５μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（３．５μＬ、２５μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＭ１ａ−リンカー２−ポリマー３８（２．５ｍｇ、４１％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ３７に置換されたリジン側鎖のおよそ４１％を含有した。
【０２０９】
スキーム１０：ＧＭ１ａ−リンカー３−ポリマー４２の合成
【化７１】
2018534246.tif 000076
【０２１０】
試薬および条件：ａ）３９、酢酸ナトリウム緩衝液、５１％；ｂ）ＤＬ−ジチオトレイトール、γ−チオブチロラクトン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、６４％；ｃ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、３２％
【０２１１】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−Ｏ−（２−アミノエチル）ヒドロキシエチル）］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（４０）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、９８μＬ）中のヘミアセタール１（１０．０ｍｇ、９．８０μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン３９（１３．１ｍｇ、９８μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。透析による精製により、化合物４０（７．４８ｍｇ、６．５０μｍｏｌ、５１％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７８（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｄ，２Ｈ），４．１９（ｄ，１Ｈ），４．１８−４．１４（ｍ，３Ｈ），４．１３−３．４８（ｍ，３２Ｈ），３．３８（ｄｄ，１Ｈ），３．２３（ｍ，２Ｈ），２．７９（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｍ，１Ｈ），２．０５，２．０２（２ｓ，６Ｈ），１．９４（ｍ，１Ｈ）。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ１１１５．４４４７（Ｃ４２Ｈ７５Ｎ４Ｏ３０＋［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１１１５．４４６１）。
【０２１２】
Ｎ−（Ｎ−メチル−Ｏ−［２−Ｏ−（２−（２−メルカプトブタンアミド）エチル］ヒドロキシエチル］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（４１）：
無水ＤＭＦ（１３０μＬ）中のアミン４０（７．４８ｍｇ、６．５０μｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＬ−ジチオトレイトール（スパチュラの先端量）、γ−チオブチロラクトン（５．６μＬ、６５μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔ３Ｎ（９．１μＬ、６５μｍｏｌ、１０当量）を逐次添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で１２〜２４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーによる精製により、化合物４１（５．２１ｍｇ、４．１６μｍｏｌ、６４％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７８（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｄ，２Ｈ），４．１９（ｄ，１Ｈ），４．１８−３．５２（ｍ，３６Ｈ），３．４１（ｔ，２Ｈ），３．３７（ｄｄ，１Ｈ），２．７９（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｔ，２Ｈ），２．３９（ｔ，２Ｈ），２．０５，２．０２（２ｓ，６Ｈ），１．９８−１．８８（ｍ，３Ｈ）。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ１２３９．４４１２（Ｃ４６Ｈ８０Ｎ４Ｏ３１ＮａＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１２３９．４４１９の計算値）。
【０２１３】
ＧＭ１ａ−リンカー３−ポリマー（４２）：
ＤＭＦ（８４μＬ）中の５（１．７２ｍｇ、８．４１μｍｏｌ）の溶液に、化合物４１（５．２１ｍｇ、４．２１μｍｏｌ、０．５当量）、水（８．４μＬ）およびＤＭＦ（１７μＬ）中のＤＢＵ（１．９μＬ、１３μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜２４時間撹拌した後、チオグリセロール（２．２μＬ、２５μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（３．５μＬ、２５μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＭ１ａ−リンカー３−ポリマー４２（２．６４ｍｇ、３２％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ４１に置換されたリジン側鎖のおよそ６１％を含有した。
【０２１４】
スキーム１１：ＧＭ１ａ−リンカー４−ポリマー４５の合成
【化７２】
2018534246.tif 000077
【０２１５】
試薬および条件：ａ）４３、酢酸ナトリウム緩衝液、４８％；ｂ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、９０％
【０２１６】
Ｎ−（Ｏ−メチル−Ｎ−［２−（２−エチルチオ）エチルチオ］ヒドロキシルアミノ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→３）−２−アセトアミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−［５−アセチル−α−ノイラミン酸−（２→３）］−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（４４）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ４．５、９８μＬ）中のヘミアセタール１（１０．０ｍｇ、９．８μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン４３（１６ｍｇ、９８μｍｏｌ、１０当量）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。逆相クロマトグラフィー（０→１００％、Ｈ２Ｏ中のＭｅＯＨ）による精製により、化合物４４（５．５ｍｇ、４．７μｍｏｌ、４８％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ４．７８（ｄ，１Ｈ），４．５６，４．５５（２ｄ，  ２Ｈ），４．２６（ｄ，１Ｈ），４．２１−３．４８（ｍ，３６Ｈ），３．３８（ｔ，１Ｈ），３．３５−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．１６（ｍ，１Ｈ），３．０４−３．０１（ｍ，２Ｈ），３．０１−２．９９（ｍ，２Ｈ），２．８９（ｔ，２Ｈ），２．６８（ｄｄ，１Ｈ），２．０５  ２．０２（２ｓ，６Ｈ），１．９５（ｔ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ１１４６．５９（Ｃ４２Ｈ７２Ｎ３Ｏ２９Ｓ２−［Ｍ−Ｎａ］−１１４６．３７の計算値）。
【０２１７】
ＧＭ１ａ−リンカー４−ポリマー（４５）：
ＤＭＦ（５７μＬ）中の５（１．１７ｍｇ、５．１３μｍｏｌ）の溶液に、化合物４４（３．３５ｍｇ、２．８６μｍｏｌ、０．５当量）、水（５．８μＬ）およびＤＭＦ（１２μＬ）中のＤＢＵ（１．３μＬ、８．６μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜３時間撹拌した後、チオグリセロール（１．５μＬ、１７μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（２．４μＬ、１７μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＭ１ａ−リンカー４−ポリマー４５（３．０８ｍｇ、９０％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ４４に置換されたリジン側鎖のおよそ３０％を含有した。
【０２１８】
スキーム１２：リンカー２  ３５の合成
【化７３】
2018534246.tif 000078
【０２１９】
試薬および条件：ａ）ｉ．ＭｅＯＮＨ２・ＨＣｌ、ＡｃＯＮａ、ＥｔＯＨ；ｉｉＮａＢＨ３ＣＮ、ＡｃＣｌ、３９％；ｂ）ＴＦＡ、ＤＣＭ、定量的量
【０２２０】
(２−（メトキシアミノ）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６２）：
ＥｔＯＨ（３．５ｍＬ）中のアルデヒド６１（３４０ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）の溶液に、メトキシアミン塩酸塩（２１４ｍｇ、３．７７ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＡｃＯＮａ（３５０ｍｇ、４．２７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔで一晩撹拌した。この時間の後、ＮａＢＨ３ＣＮ（２０１ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加して、新たに調製した１Ｍエタノール性ＨＣｌ溶液(７．０ｍＬ、ＡｃＣｌおよびＥｔＯＨから新たに調製した）を滴加した。ｒｔで１時間撹拌した後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の添加により反応物を中和した。反応混合物をＨ２Ｏで希釈して、ＤＣＭで抽出した（３回）。有機相をプールしてブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。懸濁液をろ過して、減圧濃縮した。ＰＥ／アセトン（８５：１５）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、アミノアルコール６２（１５８ｍｇ、０．８３２ｍｍｏｌ、３９％） を無色油状物として生成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５．６９（ｓ，１Ｈ），４．９１（ｓ，１Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．３０（ｍ，２Ｈ），３．００（ｔ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）。  
【０２２１】
２−（メトキシアミノ）エタン−１−アミン（３５）：
アミノアルコール６２（１６０ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ） を、ＤＣＭ（１．１ｍＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、３２０μＬ、４．２ｍｍｏｌ、５．０当量）を反応混合物に滴加した。０℃で１時間撹拌した後、ｒｔで３時間撹拌し、反応混合物をＭｅＯＨで希釈して、遊離塩基Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ樹脂で中和した。懸濁液を綿でろ過し、ろ液を真空濃縮した。ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（９：１→７：３）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、アミン６２ （１００ｍｇ） を部分的にＴＦＡ塩として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ３．４７（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｍ，２Ｈ），３．１０（ｍ，２Ｈ）。
【０２２２】
スキーム１３：リンカー３  ３９の合成
【化７４】
2018534246.tif 000079
【０２２３】
試薬および条件：ａ）Ｂｏｃ２Ｏ、Ｅｔ３Ｎ、ＤＣＭ、８４％；ｂ）ｉ．ＭｓＣｌ、ＤＣＭ；ｉｉ．ＬｉＢｒ、アセトン、９８％；ｃ）６６、ＮａＨ，ＤＭＦ、９０％；ｄ）ＴＦＡ、ＤＣＭ、９６％
【０２２４】
（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６４）：
アミン６３（１．０ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（Ｂｏｃ２Ｏ、１．７４ｇ、８．９ｍｍｏｌ、０．８当量）を溶液に添加し、その後、Ｅｔ３Ｎ（１．４ｍＬ、１０ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。０℃で１時間撹拌した後、ｒｔで２時間撹拌し、反応混合物をＤＣＭで希釈して、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。懸濁液を綿でろ過し、ろ液を真空濃縮した。ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１：０→９：１）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、アルコール６４ （１．３７ｇ、６．６７ｍｍｏｌ、８４％）を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４．８８（ｓ，１Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），３．５８（ｔ，２Ｈ），３．５６（ｔ，２Ｈ），３．３４（ｍ，２Ｈ），２．０５（ｓ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
【０２２５】
（２−（２−ブロモエトキシ）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６５）：
アルコール６４（１．２５ｇ、６．０９ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（３４ｍＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却して、メタンスルホニルクロリド（ＭｓＣｌ、０．８０ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ、１．７当量）をこの溶液に添加した後、Ｅｔ３Ｎ（１．９ｍＬ、１３．４ｍｍｏｌ、２．２当量）を添加した。ｒｔで３時間撹拌した後、反応混合物をアセトン（３３ｍＬ）およびＬｉＢｒ（８．９ｇ、１０３ｍｍｏｌ、１７当量）で希釈した。反応混合物をｒｔで一晩撹拌した。この時間の後、溶媒を減圧濃縮した。粗製の残渣を、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏおよびブラインで洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。懸濁液を綿でろ過し、ろ液を真空濃縮した。ＰＥ／アセトン（８５：１５→８：２）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、臭化物６５（１．６０ｇ、５．９５ｍｍｏｌ、９８％）を無色油状物として得た。 
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ４．９１（ｓ，１Ｈ），３．７８（ｔ，２Ｈ），３．５６（ｔ，２Ｈ），３．４７（ｔ，２Ｈ），３．３３（ｄ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
【０２２６】
（２−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６７）：
ＮａＨ（鉱物油中の６０％、８２ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ、０．９６当量）を、無水ＤＭＦ（１．４ｍＬ）中のアミノアルコール６６（３１３ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に０℃で添加した。その温度で３０分間撹拌した後、臭化物６５（４５６ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ、０．８当量）の溶液を、反応混合物に添加した。反応混合物を０℃で１時間、その後、ｒｔで２時間撹拌した。この時間の後、反応混合物をＭｅＯＨの添加によりクエンチし、真空濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。ＰＥ／アセトン（８：２→７５：２５）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、アミノアルコール６７（５１０ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ、９０％）を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ５．０４（ｓ，１Ｈ），４．０４−３．９３（ｍ，２Ｈ），３．６９−３．６２（ｍ，２Ｈ），３．５５（ｔ，２Ｈ），３．３３（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。
【０２２７】
２−（２−（（メチルアミノ）オキシ）エトキシ）エタン−１−アミン（３９）
アミノアルコール６７（４２１ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１．６ｍＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却して、ＴＦＡ（４８０μＬ、６．２９ｍｍｏｌ、５．０当量）を反応混合物に滴加した。０℃で１時間、その後ｒｔで５時間撹拌した後、反応混合物をＭｅＯＨで希釈して、遊離塩基Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ樹脂で中和した。懸濁液を綿でろ過し、ろ液を真空濃縮した。ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（９５：５→７：３）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、アミン３９（１６２ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ、９６％）を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ３．９４（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｔ，２Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），３．２４（ｔ，２Ｈ），２．６９（ｓ，３Ｈ）。
【０２２８】
スキーム１４：リンカー４  ４３の合成
【化７５】
2018534246.tif 000080
【０２２９】
試薬および条件：ａ）ＤＩＢＡＬ−Ｈ、ＤＣＭ、６１％；ｂ）ｉ．ＭｅＯＮＨ２・ＨＣｌ、  ＡｃＯＮａ、ＥｔＯＨ；ｉｉ．ＮａＢＨ３ＣＮ、ＡｃＣｌ、ＥｔＯＨ、１７％  
【０２３０】
１，４−ジチアン−２−オール（６９）
エステル６８（１００ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（１．２ｍＬ）に溶解した。この溶液を−７８℃に冷却して、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（トルエン中に１Ｍ、０．６０ｍＬ、０．６０ｍｍｏｌ、１当量）を反応混合物に滴加した。−７８℃で２時間撹拌した後、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（０．３ｍＬ、０．３ｍｍｏｌ、０．５当量） を反応混合物に滴加した。−７８℃でさらに３０分間撹拌した後、酒石酸カリウムナトリウム四水和物（１．７ｇ）およびＨ２Ｏ（２．０ｍＬ）を、反応混合物に添加した。ｒｔで１時間激しく撹拌した後、水相をＤＣＭで抽出した（３回）。有機相をプールしてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。懸濁液を綿でろ過して、ろ液を真空濃縮した。ＰＥ／アセトン（８５：１５→８：２）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより、誘導体６９（５０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、６１％）白色固体として生成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ４．９３（ｄｄ，１Ｈ），３．６５（ｄ，１Ｈ），３．４６（ｄｄ，１Ｈ），３．３４（ｍ，１Ｈ），３．１１−２．９９（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ  １Ｈ），２．７１（ｍ，１Ｈ），２．６１（ｍ，１Ｈ）。
【０２３１】
２−（（２−（メトキシアミノ）エチル）チオ）エタン−１−チオール（４３）
ＥｔＯＨ（２．８ｍＬ）中の化合物６９（２３２ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、メトキシアミン塩酸塩（１７１ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＡｃＯＮａ（２７９ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔで一晩撹拌した。この時間の後、ＮａＢＨ３ＣＮ（１６０ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加して、新たに調製した１Ｍエタノール性ＨＣｌ溶液(５．６ｍＬ、ＡｃＣｌおよびＥｔＯＨから新たに調製した）を滴加した。ｒｔで１時間撹拌した後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の添加により反応物を中和した。反応混合物をＨ２Ｏで希釈して、ＤＣＭで抽出した（３回）。有機相をプールしてブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。懸濁液をろ過して、減圧濃縮した。Ｔｏｌ／アセトン（８５：１５）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、アミノアルコール４３（４９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、１７％）を無色油状物として生成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ５．９０（ｓ，１Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．０８（ｔ，２Ｈ），２．７８−２．６８（ｍ，６Ｈ），１．７２（ｔ，１Ｈ）。
【０２３２】
スキーム１５：リンカー５  ７２の合成
【化７６】
2018534246.tif 000081
試薬および条件：ａ）ｉ．７１；ｉｉ．ＭｅＯＮＨ２・ＨＣｌ、ＡｃＯＮａ、ＥｔＯＨ；ｉｉｉ．ＮａＢＨ３ＣＮ、ＡｃＣｌ、ＥｔＯＨ、２９％ 
【０２３３】
３−（３−（メトキシアミノ）プロピルチオ）プロパン−１−チオール（７２）：
アクロレイン７０（０．２０ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を、１，２−エタンジチオール７１（１．３ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ、５．０当量）に滴加して、反応混合物をｒｔで３時間撹拌した。この時間の後、反応混合物をＥｔＯＨ（５．０ｍＬ）およびメトキシアミン塩酸塩（３００ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）およびＮａＯＡｃ（４９２ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をｒｔで一晩撹拌した。この時間の後、ＮａＢＨ３ＣＮ（２８２ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ、１．５当量）を反応混合物に添加して、１Ｍエタノール性ＨＣｌ(１０ｍＬ、ＡｃＣｌおよびＥｔＯＨから新たに調製した）を滴加した。ｒｔで１時間撹拌した後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の添加により反応物を中和した。反応混合物をＨ２Ｏで希釈して、ＤＣＭで抽出した（３回）。有機相をプールしてブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。懸濁液をろ過して、減圧濃縮した。Ｔｏｌ／アセトン（８：２）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、アミノアルコール７２（１５９ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ、２９％） を無色油状物として生成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ  ＣＤＣｌ３）：δ５．６０（ｓ，１Ｈ），３．５３（ｓ，３Ｈ），３．０１（ｔ，２Ｈ），２．７６（ｍ，２Ｈ），２．７３（ｍ，２Ｈ），２．６２（ｔ，２Ｈ），１．８２（ｍ，２Ｈ），１．７２（ｄｄ，１Ｈ）。
【０２３４】
スキーム１６：ＧＭ４模倣体コンジュゲート７８の合成
【化７７】
2018534246.tif 000082
【０２３５】
試薬および条件：ａ）ｉ．Ｂｕ２ＳｎＯ、ＭｅＯＨ；ｉｉ．７４、ＣｓＦ、ＤＭＥ、２３％；ｂ）Ｐｄ（ＯＨ）２、Ｈ２、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ、４０％；ｃ）７２、ＡｃＯＨ／ＡｃＯＨ緩衝液、ＥｔＯＨ、４０℃、６４％；ｄ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、６７％
【０２３６】
ベンジル２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（（１Ｓ）−１−ベンジルオキシカルボニル−２−シクロヘキシル−エチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（７５）：
ジオール７３（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を、無水ＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶解した。Ｂｕ２ＳｎＯ（５８ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、１．０５当量）を添加して、反応混合物を８０℃で４時間還流した。この時間の後、溶媒を減圧蒸発させて、粗製の残渣を高真空下で５時間乾燥させた。該粗製の残渣を、Ａｒの下で無水１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ、２．５ｍＬ）に溶解した。無水ＣｓＦ（６７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、２．０当量）およびトリフラート７４（１７５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。Ａｒの下、ｒｔで一晩撹拌した後、溶媒を減圧蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（Ｔｏｌ／ＥｔＯＡｃ  ８：２）により、アルコール７５（３５ｍｇ、５０μｍｏｌ、２３％）を生成した。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３６−７．２３（ｍ，２０Ｈ），５．１９（ｄ，１Ｈ），５．１０（ｄ，１Ｈ），４．９５（ｄ，１Ｈ），４．９４（ｄ，１Ｈ），４．６７（ｄ，１Ｈ），４．６４（ｄ，１Ｈ），４．６３（ｄ，１Ｈ），４．５８（１ｄ，１Ｈ），４．４４（ｄ，１Ｈ），４．１６（ｄｄ，１Ｈ），３．７９（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｄ，２Ｈ），３．７３（ｄｄ，１Ｈ），３．５３（ｍ，１Ｈ），３．３９（ｔ，１Ｈ），３．３０（ｄｄ，１Ｈ），１．７０−１．４５（ｍ，８Ｈ），１．０６−０．９７（ｍ，３Ｈ），０．８６−０．７６（ｍ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ７１７．６０（Ｃ４３Ｈ５０Ｏ８Ｎａ＋［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：ｍ／ｚ７１７．３４）。
【０２３７】
３−Ｏ−（（１Ｓ）−１−カルボキシ−２−シクロヘキシル−エチル）−α，β−Ｄ−ガラクトピラノース（７６）：
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（４：１、１．０ｍＬ）中のベンジル７５（２５ｍｇ、４０μｍｏｌ）の脱気した（ｄｅｇａｚｅｄ）溶液に、Ａｒ下でＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１０ｍｇ）を添加した。反応混合物をＨ２雰囲気下で一晩撹拌した。この時間の後、反応混合物をＰＴＦＥ  Ａｃｒｏｄｉｓｃ  ０．４５μｍ膜でろ過して、減圧濃縮した。Ｈ２Ｏ中のＭｅＯＨ（０→１００％）で溶出する逆相クロマトグラフィーにより、対応するウロナート７６（８．５ｍｇ、２５μｍｏｌ、６３％)を綿状の白色固体として得た。
【０２３８】
α−アノマーは、１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ５．１７（ｄ，１Ｈ），４．２０（ｄｄ，１Ｈ），４．０１−３．９７（ｍ，２Ｈ），３．８３（ｄｄ，１Ｈ），３．６９−３．６２（ｍ，２Ｈ），３．６１−３．５８（ｍ，１Ｈ），１．７４−１．５１（ｍ，８Ｈ），１．１９−１．０７（ｍ，３Ｈ），０．９３−０．８１（ｍ，２Ｈ）、を有した。
【０２３９】
β−アノマーは、１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．５０（ｄ，１Ｈ），４．１８（ｄｄ，１Ｈ），３．９４（ｄ，１Ｈ），３．６９−３．６２（ｍ，２Ｈ），３．６１−３．５８（ｍ，１Ｈ），３．５１（ｄｄ，１Ｈ），３．４０（ｄｄ，１Ｈ），１．７４−１．５１（ｍ，８Ｈ），１．１９−１．０７（ｍ，３Ｈ），０．９３−０．８１（ｍ，２Ｈ）、を有した。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ３５７．３２（Ｃ１５Ｈ２６Ｏ８Ｎａ＋［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：ｍ／ｚ３５７．１６）。
【０２４０】
Ｎ−（Ｏ−メチル−Ｎ−［２−（２−エチルチオ）プロピルチオ］ヒドロキシルアミノ）−３−Ｏ−（（１Ｓ）−１−カルボキシ−２−シクロヘキシル−エチル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（７７）：
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（２Ｍ、ｐＨ４．５、２６０μＬ）中のヘミアセタール７６（８．８ｍｇ、２６μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン７２（２５ｍｇ、１３８μｍｏｌ、５．２当量）およびＥｔＯＨ（５２０μＬ）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で４８〜７２時間撹拌した。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーと、その後の、逆相クロマトグラフィー（０％→１００％  Ｈ２Ｏ中のＭｅＯＨ）による精製により、化合物７７（８．３ｍｇ、１６．７μｍｏｌ、６４％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．１７（ｄ，１Ｈ），４．００（ｄｄ，１Ｈ），３．９４（ｄｄ，１Ｈ），３．８８（ｔ，１Ｈ），３．８０（ｄｄ，１Ｈ），３．７４（ｄｄ，１Ｈ），３．６６−３．６３（ｍ，４Ｈ），３．４６（ｄｄ，１Ｈ），３．１５（ｍ，１Ｈ），３．０５−２．９６（ｍ，２Ｈ），２．８２−２．６９（ｍ，５Ｈ），１．９５−１．８８（ｍ，２Ｈ），１．８１（ｍ，１Ｈ），１．７３−１．５４（ｍ，７Ｈ），１．２１（ｍ，３Ｈ），１．０２−０．９０（ｍ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ４９６．３７（Ｃ２１Ｈ３８Ｏ８ＮＳ２−［Ｍ−Ｈ］−の計算値：ｍ／ｚ４９６．２０）。
【０２４１】
ＧＭ４模倣体ポリマー（７８）：
ＤＭＦ（１１６μＬ）中の５（２．３８ｍｇ、１１．６μｍｏｌ）の溶液に、化合物７７（１．６０ｍｇ、３．２２μｍｏｌ、０．２８当量）、水（１０μＬ）およびＤＭＦ（２４μＬ）中のＤＢＵ（２．６μＬ、１７．４μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜３時間撹拌した後、チオグリセロール（３．０μＬ、３４．８μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（４．９μＬ、３４．８μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＧＭ４模倣体ポリマー７８（３．８４ｍｇ、６７％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ７７に置換されたリジン側鎖のおよそ５６％を含有した。
【０２４２】
スキーム１７：リンカーが具備されたＨＭＫ−１二糖５８の合成
【化７８】
2018534246.tif 000083
【０２４３】
試薬および条件：ａ）ＢｚＣＮ、ＤＭＡＰ、４ÅＭＳ、ＤＣＭ、−７８℃、７４％；ｂ）８０、ＮＩＳ、ＴｆＯＨ、ＤＣＭ、−２０℃、５７％；ｃ）ＮａＯＡｃ、ＭｅＯＨ、６４％；ｄ）ＳＯ３・Ｐｙｒ、ＤＭＦ、８２％；ｅ）ＬｉＯＨ、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ、８３％；ｆ）Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ、Ｈ２、Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨ、定量的量；ｇ）７２、ＡｃＯＨ／ＡｃＯＨ緩衝液、ＥｔＯＨ、４０℃、３３％；  
【０２４４】
ベンジル４−Ｏ−ベンゾイル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（７９）：
無水ＤＣＭ（２６ｍＬ）中のジオール７３（２８５ｍｇ、０．６３４ｍｍｏｌ）の溶液を、Ａｒ雰囲気下、新たに活性化した４Å  ＭＳ上でｒｔで３０分間撹拌した。混合物を−７８℃に冷却し、ＢｚＣＮ（８７ｍｇ、０．６６５ｍｍｏｌ、１．０５当量）およびＤＭＡＰ（７．７ｍｇ、６３μｍｏｌ、０．１当量）を添加した。反応混合物をＡｒ雰囲気下、−７８℃で４時間撹拌した。反応物をＭｅＯＨでクエンチして、得られた懸濁液をろ過した。ろ液を１０％ＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶液をろ過して、減圧濃縮した。トルエン／ＥｔＯＡｃ（９５：５→９：１）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、アルコール７９（２６０ｍｇ、０．４６９ｍｍｏｌ、７４％）を白色泡状物として生成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．１２−７．１０（ｍ，２０Ｈ），５．６５（ｄ，１Ｈ），５．０２（ｄ，１Ｈ），５．００（ｄ，１Ｈ），４．７１（ｄ，１Ｈ），４．６９（ｄ，１Ｈ），４．５７（ｄ，１Ｈ），４．５３（ｄ，１Ｈ），４．４６（ｄ，１Ｈ），３．９０−３．８６（ｍ，１Ｈ），３．８７−３．８４（ｍ，１Ｈ），３．６９−３．６５（ｄｄ，１Ｈ），３．６６−３．６１（ｍ，２Ｈ），２．４２（ｄ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ５７７．２３（Ｃ３４Ｈ３４Ｏ７Ｎａ＋［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：ｍ／ｚ５７７．２２）。
【０２４５】
ベンジル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシドウロノ−３，６−ラクトン−（１→３）−４−Ｏ−ベンゾイル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（８１）：
無水ＤＣＭ（１．０ｍＬ）中のアクセプター７９（１００ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ）およびドナー８０（１２７ｍｇ、０．３６０ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液に、ＮＩＳ（１６４ｍｇ、０．７２８ｍｍｏｌ、２．４当量）を添加した。反応混合物を−２０℃に冷却して、ＴｆＯＨ（１．６μＬ、０．０１８ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。反応混合物を−２０℃で１時間撹拌した。反応混合物をＥｔ３Ｎで中和して、ＤＣＭで希釈し、１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液およびブラインで洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。懸濁液をろ過して、減圧濃縮した。トルエン／ＥｔＯＡｃ（８５：１５→８：２）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、二糖８１（８２ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ、５７％）を白色泡状物として生成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０９−８．０６，７．５６，７．４６，７．３７−７．２２（ｍ，２０Ｈ），５．５４（ｄ，１Ｈ），５．３７（ｓ，１Ｈ），５．０７（ｄ，１Ｈ），５．０３（ｄ，１Ｈ），４．９９（ｄ，１Ｈ），４．９２（ｔ，１Ｈ），４．７７（ｔ，１Ｈ），４．７０（ｄ，１Ｈ），４．６８（ｄ，１Ｈ），４．５１（ｄ，１Ｈ），４．５４（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｄ，１Ｈ），４．１９（ｄ，１Ｈ），４．０３（ｄｄ，１Ｈ），３．９２（ｄｄ，１Ｈ），３．８４（ｄｄ，１Ｈ），３．７５（ｄｄ，１Ｈ），３．５８（ｄｄ，１Ｈ），２．１１，１．８２（２ｓ，６Ｈ）
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ８１９．３９（Ｃ４４Ｈ４４Ｏ１４Ｎａ＋［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：ｍ／ｚ８１９．２６）。
【０２４６】
ベンジル（メチル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシドウロナート）−（１→３）−４−Ｏ−ベンゾイル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（８２）：
ラクトン８１（１０９ｍｇ、１３８μｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１：４、２．５ｍＬ）に０℃で溶解した。無水ＮａＯＡｃ（１０ｍｇ、１２４μｍｏｌ、０．９当量）を添加して、反応混合物を４℃で一晩撹拌した。この時間の後、混合物をＡｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ｈ＋樹脂の添加により中和した。この懸濁液をろ過して、ろ液を減圧濃縮した。ＰＥ／Ａｃｅｔ（７５：２５→７：３）を用いたフラッシュクロマトグラフィーにより、所望のアルコール８２（７３ｇ、８８．２μｍｏｌ、６４％）を白色泡状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０７−８．０３，７．６０−７．５５，  ７．４５，７．４０−７．２２（ｍ，２０Ｈ），５．６７（ｄ，１Ｈ），５．１３（ｄｄ，１Ｈ），５．００（ｄ，１Ｈ），４．９８（ｄ，１Ｈ），４．９７（ｄ，１Ｈ），４．７４（ｄｄ，１Ｈ），４．７１（ｄ，１Ｈ），４．６４（ｄ，１Ｈ），４．５６（ｄ，１Ｈ），４．５２（ｄ，１Ｈ），４．４８（ｄ，１Ｈ），４．０５（ｄｄ，１Ｈ），３．８５（ｍ，１Ｈ），３．８４（ｄ，１Ｈ），３．８２（ｄｄ，１Ｈ），３．６９（ｓ，３Ｈ），３．６５−３．６２（ｍ，２Ｈ），３．５９（ｍ，１Ｈ），２．７０（ｄ，１Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），１．７９（ｓ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ８５１．４７（Ｃ４５Ｈ４８Ｏ１５Ｎａ＋［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：ｍ／ｚ８５１．２９）．
【０２４７】
ベンジル（メチル２，４−ジ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシドウロナート）−（１→３）−４−Ｏ−ベンゾイル−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（８３）：
無水ＤＭＦ（０．４ｍＬ）中のアルコール８２（７２ｍｇ、８７μｍｏｌ）の溶液に、Ａｒの下、０℃でＳＯ３・Ｐｙ（４１ｍｇ、２６ｍｍｏｌ、３．０当量）を添加した。ｒｔで２時間撹拌した後、反応混合物をＮａＨＣＯ３（１４６ｍｇ）の添加によりクエンチして、反応混合物をｒｔで３０分間撹拌した。懸濁液をろ過し、ろ液を濃縮して、溶媒をキシレンと共蒸発させた。ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（９５：５→９：１）を用いたフラッシュクロマトグラフィーにより、スルファート８３（６７ｍｇ、７２μｍｏｌ、８２％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９８，７．５２−７．４５，７．４０−７．２０（ｍ，２０Ｈ），５．６１（ｄ，１Ｈ），５．１９（ｔ，１Ｈ），４．９９（ｄ，１Ｈ），４．９８（ｄ，１Ｈ），４．９２（ｄ，１Ｈ），４．８３（ｔ，１Ｈ），４．６９（ｄ，１Ｈ），４．６３（ｄ，１Ｈ），４．５５（ｄ，１Ｈ），４．５０（ｄ，１Ｈ），４．４６（ｍ，１Ｈ），４．４５（ｄ，１Ｈ），３．９８（ｄｄ，１Ｈ），３．８８（ｄ，１Ｈ），３．８３（ｔ，１Ｈ），３．７９（ｄｄ，１Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），３．６３−３．５２（ｍ，２Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），１．７５（ｓ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ９０７．４５（Ｃ４５Ｈ４７Ｏ１８Ｓ−［Ｍ−Ｎａ］−の計算値：ｍ／ｚ９０７．２５）。
【０２４８】
ベンジル（３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸ナトリウム）−（１→３）−２，６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（８４）：
アセタート８３（７０ｍｇ、７５μｍｏｌ)を、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１０：１、１．８ｍＬ）の溶液に溶解した。反応混合物を０℃に冷却して、２．０ＭＬｉＯＨ水溶液（０．４ｍＬ、１１５ｍｍｏｌ、９．５当量）を緩徐に添加した。反応混合物を一晩撹拌して、緩徐にｒｔに到達させた。翌朝、反応物を、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ｈ＋樹脂の添加により中和した。反応混合物をろ過して、減圧濃縮した。Ｈ２Ｏ中のＭｅＯＨで溶出する逆相クロマトグラフィー（０％→５０％）により、対応するウロナート８４（４７ｍｇ、６２μｍｏｌ、８３％）を白色泡状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ７．４３−７．２０（ｍ，１５Ｈ），４．９２（ｄ，１Ｈ），４．７８（ｄ，１Ｈ），４．７７（ｄ，１Ｈ），４．６７（ｄ，１Ｈ），４．６２（ｄ，１Ｈ），４．５１（ｄ，１Ｈ），４．５９（ｄ，１Ｈ），４．３２（ｔ，１Ｈ），４．１２（ｄ，１Ｈ），３．８３（ｄｄ，１Ｈ），３．７９−３．７１（ｍ，４Ｈ），３．６８−３．６４（ｍ，２Ｈ），３．５８（ｄｄ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ７０５．４３（Ｃ３３Ｈ３７Ｏ１５Ｓ−［Ｍ−２Ｎａ＋Ｈ］−の計算値：ｍ／ｚ７０５．１９）。
【０２４９】
３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸ナトリウム−（１→３）−α，β−Ｄ−ガラクトピラノース（８５）：
Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨ（１０：１、５．２ｍＬ）中のベンジル８４（４６ｍｇ、６１μｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２０ｍｇ）を添加した。反応混合物をＨ２雰囲気下で６時間撹拌した。この時間の後、反応混合物をＰＴＦＥ  Ａｃｒｏｄｉｓｃ  ０．４５μｍ膜でろ過して、減圧濃縮した。Ｈ２Ｏで溶出する逆相クロマトグラフィーにより、ウロナート８５（２９ｍｇ、６０μｍｏｌ、定量的量）を綿毛状の白色固体として得た。
【０２５０】
α−アノマーは、１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ５．３０（ｄ，１Ｈ），４．７８（ｄ，１Ｈ），４．３５（ｔ，１Ｈ），４．２６（ｄｄ，１Ｈ），４．１２（ｄｄｄ，１Ｈ），４．００（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｍ，１Ｈ），３．７７−３．７０（ｍ，３Ｈ），３．６２（ｄｄ，１Ｈ）、を有した。
【０２５１】
β−アノマーは、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．７８（ｄ，１Ｈ），４．６５（ｄ，１Ｈ），４．３５（ｔ，１Ｈ），４．２０（ｄ，１Ｈ），３．８２（ｄｄ，１Ｈ），３．７７−３．７０（ｍ，５Ｈ），３．６６（ｄｄ，１Ｈ），３．６２（ｄｄ，１Ｈ）、を有した。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ４３４．９６（Ｃ１２Ｈ１９Ｏ１５Ｓ−［Ｍ−２Ｎａ＋Ｈ］−の計算値：ｍ／ｚ４３５．０５）。
【０２５２】
Ｎ−（Ｏ−メチル−Ｎ−（２−（（２−エチルチオ）プロピルチオ］ヒドロキシルアミン）−（３−Ｏ−スルホ−β−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸ナトリウム）−（１→３）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（５８）
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（２Ｍ、ｐＨ４．５、２３５μＬ）中のヘミアセタール８５（１１．３ｍｇ、２３．５μｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン７２（２１ｍｇ、１１７μｍｏｌ、１０当量）およびＥｔＯＨ（４５０μＬ）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。Ｐ２サイズ排除クロマトグラフィーと、その後の逆相クロマトグラフィー（１００％Ｈ２Ｏ）による精製により、化合物５８（５．０７ｍｇ、７．８８μｍｏｌ、３３％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．８０（ｄ，１Ｈ），４．３６（ｔ，１Ｈ），４．２４−４．１７（ｍ，２Ｈ），３．９３（ｄｄ，１Ｈ），３．８４（ｄｄ，１Ｈ），３．８２（ｄ，１Ｈ），３．８０−３．７４（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｄｄ，１Ｈ），３．６７（ｍ，１Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），３．６４（ｄｄ，１Ｈ），３．１８（ｍ，１Ｈ），３．０３−２．９６（ｍ，５Ｈ），２．７４（ｔ，２Ｈ），１．９４（ｔ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ−）：ｍ／ｚ５９８．１９（Ｃ１８Ｈ３２Ｏ１５Ｓ３−［Ｍ−２Ｎａ＋Ｈ］−の計算値：ｍ／ｚ５９８．０４）。
【０２５３】
スキーム１８：ＨＮＫ−１直鎖状ポリリジングリココンジュゲート８６の合成
【化７９】
2018534246.tif 000084
【０２５４】
試薬および条件：ａ）ｉ．５、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、８７％
【０２５５】
ＨＮＫ−１ポリマー（８６）：
ＤＭＦ（１７５μＬ）中の５（３．５９ｍｇ、１７．５μｍｏｌ）の溶液に、化合物５８（５．０７ｍｇ、７．８８μｍｏｌ、０．４５当量）、水（２８μＬ）およびＤＭＦ（３６μＬ）中のＤＢＵ（３．９μＬ、２６μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜３時間撹拌した後、チオグリセロール（４．５μＬ、５３μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（７．３μＬ、５３μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、１ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＨＮＫ−１ポリマー８６（７．４ｍｇ、８７％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ５８に置換されたリジン側鎖のおよそ４０％を含有した。
【０２５６】
スキーム１９：ＨＮＫ−１ポリリジンデンドリマーグリココンジュゲート８６の合成
【化８０】
2018534246.tif 000085
【０２５７】
試薬および条件：ａ）（ＣｌＡｃ）２Ｏ、ＤＭＦ／２，６−ルチジン、８９％；ｂ）ｉ．５８、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ；ｉｉ．チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、５８％
【０２５８】
クロロアセチル化デンドリマー（８８）：
ポリ−Ｌ−リジンデンドリマー（生成６、６４の外部アミン基、ＴＦＡ塩、１０ｍｇ、４１．８μｍｏｌ）を、Ａｒ下で無水ＤＭＦ／２．６−ルチジン（４：１、１３０μＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却して、無水ＤＭＦ（１７μＬ）中の（ＣｌＡｃ）２Ｏ（７．０ｍｇ、５２μｍｏｌ、１．２５当量）の溶液を滴加した。反応混合物を４℃で一晩撹拌した。この時間の後、反応混合物をＥｔ２Ｏ／ＥｔＯＨ（１：１、２ｍＬ）の撹拌溶液に緩徐に添加することにより、デンドリマーを沈殿させた。沈殿物をろ別して、Ｅｔ２Ｏ／ＥｔＯＨ（１：１）で洗浄して乾燥させ、クロロアセチル化デンドリマー８８（７．２ｍｇ、８９％）を灰白色の固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ８．２７（ｓ，１Ｈ），８．１７（ｓ，１Ｈ），７．９９（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｓ，１Ｈ），４．２６（ｓ，１Ｈ），４．１９（ｓ，１Ｈ），４．１０（ｓ，２Ｈ），４．０２（ｓ，２Ｈ），３．０８−２．９６（ｓ，４Ｈ），１．６６−１．１７（ｍ，１２Ｈ）。
【０２５９】
ＨＮＫ−１／デンドリマー性（ｄｅｎｔｒｉｍｅｒｉｃ）ポリリジンコンジュゲート（８９）：
ＤＭＦ（１０９μＬ）中の８８（２．１２ｍｇ、１０．９μｍｏｌ）の溶液に、化合物５８（３．５ｍｇ、５．４４μｍｏｌ、０．５当量）、水（２０μＬ）およびＤＭＦ（２２μＬ）中のＤＢＵ（２．４μＬ、１６μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜３時間撹拌した後、チオグリセロール（２．８μＬ、３３μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（４．６μＬ、３３μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、２ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＨＮＫ−１／デンドリマー性ポリリジンコンジュゲート８９（３．５４ｍｇ、５８％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ５８に置換されたリジン側鎖のおよそ４８％を含有した。
【０２６０】
スキーム２０：ＨＮＫ−１−オルチニンコンジュゲート９３の合成
【化８１】
2018534246.tif 000086
【０２６１】
試薬および条件：ａ）ｉ．樹脂ＯＨ−、Ｈ２Ｏ；ｉｉ．１０％ＰＴＳＡ水溶液、９１％；ｂ）（ＣｌＡｃ）２Ｏ、ＤＭＦ／２，６−ルチジン、６３％；ｃ）５８、ＤＢＵ、その後、チオグリセロール、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ、６１％
【０２６２】
ポリ−Ｌ−オルニチンのトシル酸塩（９１）
ポリ−Ｌ−オルニチン臭化水素酸塩（水０．２５ｍｌに溶解した２５ｍｇ）を、陰イオン交換カラム（Ａｍｂｅｒｓｅｐ  ９００水酸化物型、５×０．５ｃｍ）に通した。溶離液を１０％ｐ−トルエンスルホン酸（ＰＴＳＡ）水溶液で中和した。凍結乾燥により、ポリ−Ｌ−オルニチンのトシル酸塩（３３．５ｍｇ、９１％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ７．８６（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｔ，２Ｈ），７．１１（ｔ，２Ｈ），４．１５（ｓ，１Ｈ），２．７６（ｓ，２Ｈ），１．７５−１．４６（ｍ，４Ｈ）。
【０２６３】
クロロアセチル化ポリ−Ｌ−オルニチン（９２）
ポリ−Ｌ−オルニチン（３３ｍｇ、１１６μｍｏｌ）のトシル酸塩を、Ａｒの下、無水ＤＭＦ／２，６−ルチジン（４：１、３６０μＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却して、ＤＭＦ（４８μＬ）中の（ＣｌＡｃ）２Ｏ（２５ｍｇ、１４５μｍｏｌ、１．２５当量）の溶液を滴加した。反応混合物を４℃で一晩撹拌した。この時間の後、反応混合物をＥｔ２Ｏ／ＥｔＯＨ（１：１、４ｍＬ）の撹拌溶液に緩徐に添加することにより、ポリマーを沈殿させた。沈殿物をろ別して、Ｅｔ２Ｏ／ＥｔＯＨ（１：１）で洗浄して乾燥させ、クロロアセチル化ポリ−Ｌ−オルニチン９２（１４ｍｇ、７３μｍｏｌ、６３％）を灰白色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ８．２４（ｓ，１Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｍ，１Ｈ），３．１３（ｓ，２Ｈ），２−０４−１．３８（ｍ，６Ｈ）。
【０２６４】
ＨＮＫ−１ポリオルニチンコンジュゲート（９３）：
ＤＭＦ（１３７μＬ）中の９２（２．６ｍｇ、１３．７μｍｏｌ）の溶液に、化合物５８（４．０ｍｇ、６．１７μｍｏｌ、０．４５当量）、水（２４μＬ）およびＤＭＦ（２８μＬ）中のＤＢＵ（３．１μＬ、２１μｍｏｌ、１．５当量）の溶液を逐次添加した。ｒｔで１〜３時間撹拌した後、チオグリセロール（３．６μＬ、４１μｍｏｌ、３．０当量）およびＥｔ３Ｎ（５．７μＬ、４１μｍｏｌ、３．０当量）を添加した。反応混合物をｒｔでさらに１２〜２４時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、２ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄し、乾燥させた。限外濾過（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ、５５００ｒｐｍ）により、さらなる精製を行った。凍結乾燥により、ＨＮＫ−１ポリオルニチンコンジュゲート９３（４．９ｍｇ、６１％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ５８に置換されたオルニチン側鎖のおよそ６０％を含有した。
【０２６５】
スキーム２１：ラクトース−リンカー５コンジュゲート５６およびコンジュゲート９７の合成
【化８２】
2018534246.tif 000087
【０２６６】
試薬および条件：ａ）７２、ＡｃＯＨ／ＡｃＯＨ緩衝液、ＥｔＯＨ、４０℃、７８％；ｂ）９５、Ｃｓ２ＣＯ３、ＤＭＦ、７５％；ｃ）２０％ＤＭＦ中ピペリジン、６４％
【０２６７】
Ｎ−（Ｏ−メチル  Ｎ−［２−［（２−エチルチオ］プロピルチオ］ヒドロキシルアミン）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（５６）
ＮａＯＡｃ／ＡｃＯＨ緩衝液（２Ｍ、ｐＨ４．５、１．５ｍＬ）中のヘミアセタール９４（１０７ｍｇ、０．２９７ｍｍｏｌ）の溶液に、オキシアミン７２（２７０ｍｇ、１．５０μｍｏｌ、５．０当量）およびＥｔＯＨ（３．０ｍＬ）を添加した。反応混合物を、２５〜４０℃で２４〜４８時間撹拌した。この時間の後、溶媒を減圧蒸発させた。粗製の残渣を、Ａｒ下でＨ２Ｏ（５．０ｍＬ）に懸濁させた。ＤＬ−ジチオトレイトール（４６０ｍｇ、２．９８ｍｍｏｌ、１０当量）を反応混合物に添加し、その後、１ＭＮａＯＨ水溶液を添加した（ｐＨが一定して９になるまで）。ｒｔで２時間撹拌した後、反応混合物をＣ１８カラムへ直接ロードした。逆相クロマトグラフィー（０→１００％、Ｈ２Ｏ中ＭｅＯＨ）による精製により、化合物５６（１１７ｍｇ、０．２３１ｍｍｏｌ、７８％）を綿毛状の白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．４７（ｄ，１Ｈ），４．２３（ｄ，１Ｈ），３．９８（ｄｄ，１Ｈ），３．９５（ｄ，１Ｈ），３．８６−３．７７（ｍ，３Ｈ），３．７５（ｍ，１Ｈ），３．７１−３．６０（ｍ，４Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｄｄ，１Ｈ），３．５５（ｍ，１Ｈ），３．１９（ｍ，１Ｈ），３．０１（ｍ，１Ｈ），２．８３（ｍ，２Ｈ），２．７９（ｍ，２Ｈ），２．７２（ｍ，２Ｈ），１．９２（ｍ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ５２８．２９（Ｃ１８Ｈ３５Ｏ１１ＮＳ２Ｎａ＋［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：ｍ／ｚ５２８．１５）。
【０２６８】
Ｎ−（Ｏ−メチル  Ｎ−［２−［（２−［２−フルオレニルメチルオキシカルバマート）エチル］エチルチオ］プロピルチオ］ヒドロキシルアミン）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（９６）
チオール５６（２８ｍｇ、４９μｍｏｌ）を、無水ＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解した。その後、溶液を脱気した後、Ａｒを流した。臭化物９５（５６ｍｇ、０．１６３ｍｍｏｌ、３．３当量）およびＣｓ２ＣＯ３（３２ｍｇ、９９μｍｏｌ、２．０当量）を、反応混合物に添加した。Ａｒ下、ｒｔで２時間撹拌した後、反応混合物をＣ１８カラムへ直接ロードした。Ｈ２Ｏ中のＭｅＯＨ（０％→９５％）で溶出する逆相クロマトグラフィーにより、対応するＦｍｏｃ保護アミン９６（２８ｍｇ、３７μｍｏｌ、７５％）を白色泡状物として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ７．８１−７．７７（ｍ，２Ｈ），７．７３−７．６５（ｍ，２Ｈ），７．４１−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．３３−７．２９（ｍ，２Ｈ），４．３６（ｄ，１Ｈ），４．０５（ｄ，１Ｈ），３．８６−３．８３（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｄ，１Ｈ），３．７８（ｄｄ，１Ｈ），３．７０（ｄｄ，１Ｈ），３．６３（ｄ，１Ｈ），３．６１（ｓ，３Ｈ），３．５８（ｍ，１Ｈ），３．５７−３．５０（ｍ，５Ｈ），３．４８（ｄｄ，１Ｈ），３．３３（ｍ，１Ｈ），３．１２（ｍ，１Ｈ），３．００−２．９９（ｍ，２Ｈ），２．９４（ｄｔ，１Ｈ），２．７５−２．６２（ｍ，６Ｈ），１．８９−１．８０（ｍ，１Ｈ），１．７２−１．６３（ｍ，１Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ７９３．４１（Ｃ３５Ｈ５０Ｏ１３Ｎ２Ｓ２Ｎａ＋［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：ｍ／ｚ７９３．２６）。
【０２６９】
Ｎ−（Ｏ−メチル  Ｎ−［２−［２−［２−アミノエチル］エチルチオ］プロピルチオ］ヒドロキシルアミン）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−β−Ｄ−グルコピラノシド（９７）
誘導体９６（２８ｍｇ、３７μｍｏｌ）を、Ａｒの下で無水ＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解した。ピペリジン（０．２ｍＬ）を、Ａｒの下でこの溶液に添加した。Ａｒの下、ｒｔで４時間撹拌した後、溶媒をトルエンと共蒸発させた（３回）。０．１％ＴＦＡ水溶液中のＭｅＯＨ（０％→６０％）で溶出する逆相クロマトグラフィーにより、対応するアミン９７（１３ｍｇ、２３．７μｍｏｌ、６４％）を白色泡状物として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ４．４７（ｄ，１Ｈ），４．２３（ｄ，１Ｈ），３．９９（ｄｄ，１Ｈ），３．９５（ｄ，１Ｈ），３．８５−３．７６（ｍ，３Ｈ），３．７５（ｍ，１Ｈ），３．７１−３．５９（ｍ，４Ｈ），３．６４（ｓ，３Ｈ），３．５６（ｄｄ，１Ｈ），３．５５（ｍ，１Ｈ），３．２６（ｔ，２Ｈ），３．１８（ｍ，１Ｈ），３．０１（ｍ，１Ｈ），２．９２（ｔ，２Ｈ），２．８８−２．８６（ｍ，５Ｈ），２．７３（ｔ，１Ｈ），１．９５−１．８９（ｍ，２Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ５４９．３１（Ｃ２０Ｈ４１Ｏ１１Ｎ２Ｓ２＋［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：ｍ／ｚ５４９．２１）。
【０２７０】
スキーム２２：ラクトース−キトサンコンジュゲート１００の合成
【化８３】
2018534246.tif 000088
試薬および条件：ａ）５６、ＤＢＵ、ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ、５８％；ｂ）０．１ＭＮａＯＨ水溶液、４０℃、５９％
【０２７１】
キトサン誘導体（９９）
ＤＭＦ（０．４ｍＬ）中のクロロアセチル化キトサン９８（５．０ｍｇ、１２．２μｍｏｌ）の溶液に、化合物５６（２４．０  ｍｇ、３９．１μｍｏｌ、３．２当量）およびＤＢＵ（７．０μＬ、４８．８μｍｏｌ、４．０当量）を逐次添加した。ｒｔで２時間撹拌した後、反応混合物を５０℃で１時間加熱した。この時間の後、Ｈ２Ｏ（２μＬ）を添加して、反応混合物を５０℃でさらに１時間撹拌した。生成物を、ＥｔＯＨ／Ｅｔ２Ｏ（１：１、４ｍＬ）の撹拌溶液への緩徐な添加により沈殿させた。沈殿物をろ別して、ＥｔＯＨで洗浄して、乾燥させ、キトサンコンジュゲート９９（１２．８ｍｇ、５８％）を白色固体として得た。 
ＩＲ（ＫＢｒ）ν３４００（ｖｓ，ｂ，ＯＨ），２９２６，２０６７，１７３４（ＣＯｅｓｔｅｒ），１６５１（ＣＯａｍｉｄｅ），１４１９，１３８２，１２７４，１２０７，１１１９，１０７６，１０３４，８９４，７８４，７０２，６２２，６００
【０２７２】
ラクトース−キトサンコンジュゲート（１００）
キトサン誘導体９９（１６ｍｇ、８．９μｍｏｌ）を、０．１ＭＮａＯＨ水溶液（０．３２ｍＬ）に懸濁させた。懸濁液を４０℃で９０分間撹拌した。固体をろ別して、Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨおよびＥｔ２Ｏで洗浄して乾燥させ、 ラクトース−キトサンコンジュゲート１００（３．７ｍｇ、５９％）を白色固体として得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ν３４３６（ｖｓ，ｂ，ＯＨ），２９２１，１６４８（ＣＯａｍｉｄｅ），１５５３，１３７７，１０７５，１０３４，８９４
【０２７３】
スキーム２３：ラクトース−ポリグルタミン酸コンジュゲート１０２の合成
【化８４】
2018534246.tif 000089
【０２７４】
試薬および条件：ａ）スルホ−ＮＨＳ、ＥＤＣ・ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３、リン酸緩衝液、４５％
【０２７５】
ラクトース−ポリグルタミン酸コンジュゲート（１０２）
リン酸緩衝液（１００ｍＭ、ｐＨ５．０、８１μＬ）中のポリ−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム塩（Ａｌａｍａｎｄａ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ社製、ｎ＝２５０、２．５０ｍｇ、１６．５μｍｏｌ）の溶液に、リン酸緩衝液（１００ｍＭ、ｐＨ５．０、４１７μＬ）中のＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミドナトリウム塩（スルホ−ＮＨＳ、６０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、１５．６当量）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ、３７ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ、１１．５当量）の溶液を添加した。ｒｔで１５分間撹拌した後、アミン９７（１３ｍｇ、２３．７μｍｏｌ、１．４当量）を添加し、その後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を、ｐＨが一定して７になるまで添加した。ｒｔで２時間撹拌した後、エタノールアミンを、最終濃度１０ｍＭに達するように反応混合物に添加した。ｒｔで１０分間撹拌した後、反応混合物を限外濾過チューブ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ  Ｓｔｅｄｉｍ  Ｖｉｖａｓｐｉｎチューブ、６ｍＬ、分子量カットオフ１０ｋＤａ）に移した。限外濾過（５５００ｒｐｍ）による精製および凍結乾燥により、ラクトース−ポリグルタミン酸コンジュゲート１０２（４．９ｍｇ、４５％）を綿毛状の白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲによれば、生成物は、炭水化物エピトープ５６に置換されたグルタミン酸側鎖のおよそ１００％を含有した。
【０２７６】
患者の血清
ニューロパチー患者７名の血清を調べた。血清は全て、病院で抗ガングリオシド抗体に関して試験陽性であった。血清の抗ガングリオシド抗体力価を、Ｂuｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｓｃｈoｎｅｎｂｕｃｈ、スイス所在）のＥＬＩＳＡアッセイにより決定した。血清は、Ｂuｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｓｃｈoｎｅｎｂｕｃｈ、スイス所在）またはＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｂａｓｅｌの臨床検査室（Ｂａｓｅｌ、スイス所在）のいずれかから得た。神経免疫学的評価を行って抗ガングリオシド反応性陰性の個体の血清を、対照とした。本発明者らの研究での血清使用は、北西部および中部スイス倫理委員会により認可されている（ＥＫＮＺ  ＵＢＥ−１５／４６）。
【０２７７】
競合結合アッセイ
合成された炭水化物ポリマー６（ＧＭ１ａエピトープ）、２６（ＧＤ１ｂエピトープ）、および３４（ＧＴ１ａエピトープ）を、ＧａｎｇｌｉｏＣｏｍｂｉ（−Ｌｉｇｈｔ）  ＥＬＩＳＡおよび／または化合物６の場合には抗ＧＭ１  ＥＬＩＳＡ（全てＢuｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｓｃｈoｎｅｎｂｕｃｈ、スイス所在）のキット）で試験した。ウシ馬尾由来の精製ガングリオシドでコーティングした９６ウェルマイクロタイタープレートを、洗浄緩衝液（３００μｌ／ウェル）で２回洗浄した後、８種の異なる濃度の炭水化物ポリマーを添加した（２５μｌ／ウェル）。抗ガングリオシドＩｇＧまたはＩｇＭ抗体を含有する患者血清を、適当な希釈率で添加して（２５μｌ／ウェル）（２倍濃縮）、総容量５０μｌ／ウェルを得た。プレートをプレートシーラーで覆い、４〜８℃で２時間インキュベートした。ウェルを洗浄緩衝液（３００μｌ／ウェル）で３回洗浄した後、抗ヒトＩｇＭ抗体−西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲートまたは抗ヒトＩｇＧ抗体−西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲートのいずれかを添加した（１００μｌ／ウェル）。プレートを４〜８℃で２時間インキュベートした。ウェルを洗浄した後（３００μｌ／ウェルで３回）、テトラメチルベンジジンの基質溶液（過酸化水素を含むクエン酸緩衝液中のＴＭＢ）を添加して（１００μｌ／ウェル）、プレートを遮光して、６００ｒｐｍおよび室温でさらに３０分間インキュベートした。最後に、停止溶液（０．２５Ｍ硫酸）を添加して（１００μｌ／ウェル）、発色反応の度合いを、マイクロプレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ  １９０、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、米国カリフォルニア州所在）を用いた４５０ｎｍでの吸収測定により決定した。
【０２７８】
合成された炭水化物ポリマー８６（ＨＮＫ−１エピトープ模倣体５８）を、抗ＭＡＧ  ＥＬＩＳＡ（Ｂuｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｓｃｈoｎｅｎｂｕｃｈ、スイス所在）のキット）で試験した。アッセイプロトコルは、上記のＧａｎｇｌｉｏＣｏｍｂｉ（−Ｌｉｇｈｔ）  ＥＬＩＳＡのプロトコルに従って実施した。ポリマー８６のインビトロＩＣ５０を決定するために、ポリマー（２５μｌ／ウェル）と、最終希釈率１：１０００のマウスモノクローナル抗ＨＮＫ−１（抗ＭＡＧ）ＩｇＭ抗体（２５μｌ／ウェル）とのコインキュベーションによりアッセイを実施した。ポリマー８６のインビボ有効性を決定するために、１：１００希釈のマウス血漿のインキュベーションによりアッセイを実施した（５０μｌ／ウェル）。免疫化ＢＡＬＢ／ｃマウスの血漿中のマウスモノクローナル抗ＨＮＫ−１（抗ＭＡＧ）ＩｇＭおよび抗ＨＮＫ−１（抗ＭＡＧ）ＩｇＭ（処置前および処置後）の両者を、１：１０，０００希釈したヤギ抗マウスＩｇＭ  ＨＲＰコンジュゲート（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、Ａ８７８６）で検出した。
【０２７９】
抗ＭＡＧニューロパチーの免疫学的マウスモデル
６週齢の性別を一致させた野生型ＢＡＬＢ／ｃマウスの背下部の複数の部位に、ウシ馬尾由来から精製したスフィンゴ糖脂質ＳＧＰＧおよびＳＧＬＰＧ（いずれの糖脂質もＨＮＫ−１炭水化物エピトープを含有する）の全量１００μｇを皮下注射した。糖脂質の単離を、Ｂｕｒｇｅｒら（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １９９１，  １４０，  ３１−３６）によって記載されたプロトコルに従って実施した。これらの糖脂質をＰＢＳに溶解し、ＫＬＨ (最終濃度１．４ｍｇ／ｍｌ) と混合して、同容量のＴｉｔｅｒＭａｘ（登録商標）Ｇｏｌｄで乳化した。２回の追加免疫注射を、ＫＬＨおよびＴｉｔｅｒＭａｘ（登録商標）Ｇｏｌｄと混合した精製ＳＧＰＧ／ＳＧＬＰＧ  ２０μｇにより、２および４週間後に実施した。血液試料を尾静脈穿刺により採取して、０．５Ｍ  ＥＤＴＡ  １μｌを含有する試験管に移して、１，８００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。上清（血漿）を新しい試験管に移して、−５５℃で貯蔵した。ＰＢＳに溶解した糖鎖ポリマー８６を、尾静脈のｉ．ｖ．注射により投与した。マウス血漿試料を、上記の抗ＭＡＧ  ＥＬＩＳＡにより分析した。
【０２８０】
示された通り、合成された炭水化物ポリマー６（ＧＭ１ａエピトープ）、２６（ＧＤ１ｂエピトープ）、および３４（ＧＴ１ａエピトープ）を、ＧａｎｇｌｉｏＣｏｍｂｉ（−Ｌｉｇｈｔ）  ＥＬＩＳＡおよび／または化合物６の場合には抗ＧＭ１  ＥＬＩＳＡ（全てＢuｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｓｃｈoｎｅｎｂｕｃｈ、スイス所在）のキット）で試験した。これらのＥＬＩＳＡは、免疫介在性ニューロパチーの臨床診断を裏づけるために用いられる。該アッセイは、患者の血清試料中の抗ガングリオシドＩｇＭ／ＩｇＧ抗体力価（例えば、ガングリオシドＧＭ１、ＧＤ１ａ、およびＧＱ１ｂ)の決定を可能にする。本発明者らは、これらのＥＬＩＳＡを競合結合アッセイとして用いた。合成された化合物および患者の血清試料（抗ガングリオシド抗体を含有）を、ウシ馬尾由来の精製ガングリオシドでコーティングした９６ウェルプレートに入れた。固定されたガングリオシドおよび該合成化合物が、抗ガングリオシド抗体への結合に関して競合した。洗浄ステップの後、ガングリオシド結合抗体（ＩｇＭ／ＩｇＧ）を、西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＭまたは抗ヒトＩｇＧ抗体と、その後の発色反応により検出した。該化合物は、抗ガングリオシド抗体の結合部位を遮断して、固定されたガングリオシドへの結合を防止するため、該化合物とガングリオシドとの競合が成功すれば、測定されるＯＤ４５０ｎｍ（光学密度）が減少した。このアッセイの原理を、図１に示す。この化合物の評価のために、臨床検査室のルーチン分析の際に抗ガングリオシド反応に関して試験陽性であった患者７名（抗ＧＭ１ａ：ＰＰ  ＩｇＧ  Ｐｏｓ．、Ｐ２１、Ｐ３、Ｐ４；抗ＧＤ１ｂ：Ｐ２２；抗ＧＱ１ｂ：ＥＫ−ＧＣＯ  １８０３、Ｐ２３）の血清を選択した。ＩｇＧおよびＩｇＭ抗体力価を、予備実験で各血清について決定した。抗体濃度依存性であるＩＣ５０測定値（半数阻害濃度）を比較できるように、およそ１．０（０．７〜１．３）のＯＤ４５０ｎｍ測定値の血清希釈物を、アッセイ用に選択した。血清希釈物：ＰＰ  ＩｇＧ  Ｐｏｓ．  １：１，２００、Ｐ２１  １：１，３００、Ｐ３  １：５０、Ｐ４  １：４００、Ｐ２２  １：５０、ＥＫ−ＧＣＯ  １８０３  １：３００、Ｐ２３  １：５０。陰性対照とされた血清（希釈率１：５０）は、ガングリオシドに結合する抗体を示さなかった。
【０２８１】
化合物６のＩＣ５０値を、血清ＰＰ  ＩｇＧ  Ｐｏｓ．（ＩｇＧ）、Ｐ２１（ＩｇＧ）、Ｐ３（ＩｇＭ）およびＰ４（ＩｇＭ）について測定した。化合物２６は、血清Ｐ２２（ＩｇＧ）で評価した。化合物３４のＩＣ５０値は、血清ＥＫ−ＧＣＯ  １８０３（ＩｇＧ）およびＰ２３（ＩｇＧ）で決定した。結果を以下の表に示す。阻害曲線は、図２に示す。
【表１】
2018534246.tif 000090
【０２８２】
本発明のポリマー６、２６、３４は、ＧＭ１ａ−、ＧＤ１ｂ−、およびＧＴ１ａ−ガングリオシドの天然糖鎖エピトープを模造した糖鎖ポリマーである。これらおよび他の糖鎖エピトープは、自己免疫性神経疾患に関与し、つまりそれらは、脱髄および神経変性を惹起する抗体の標的である（Ｈ．  Ｊ．  Ｗｉｌｌｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｎ．  Ｙｕｋｉ，  Ｂｒａｉｎ，  ２００２，  １２５，  ２５９１−２６２５）。調製された糖鎖ポリマーは、生分解性ポリ−Ｌ−リジン骨格に基づいており、これらのポリマーにより病原性抗グリカン抗体を選択的に中和および除去することができる、患者の治療適用に向けて設計される。
【０２８３】
調製された糖鎖ポリマーの生物学的評価のために、患者血清を用いた。これらの血清は、抗ガングリオシド抗体に関して病院で試験陽性であった。合成糖鎖ポリマーは、コンジュゲートにより示されるガングリオシドエピトープに対して抗体反応を示す血清（例えば、ＰＬ（ＧＭ１ａ）２８ポリマー６の評価に関して、抗ＧＭ１ａ  ＩｇＧまたはＩｇＭ抗体を有する血清）で試験した。競合結合ＥＬＩＳＡアッセイにおける生物学的特徴づけの際に得られたＩＣ５０値から、同じ糖鎖エピトープに対する反応性を有する異なる患者からの抗ガングリオシド抗体が、糖鎖ポリマーの中和効果が異なることが示された。これはおそらく、異なる患者間の抗体特性（アイソタイプ、親和性、特異性、血清濃度、モノクローナル／ポリクローナルなど）の個体間の差によるものである。しかし糖鎖ポリマーの阻害効果は、異なるガングリオシドに対する抗体反応性で与えられる。さらに、化合物６で示されたデータから、特異的糖鎖エピトープを模倣する糖鎖ポリマーが、異なるアイソタイプの抗体、例えばＩｇＧおよび／またはＩｇＭ型の抗体を中和し得ることが示される。部分的な糖鎖エピトープ構造が、抗ガングリオシド抗体への親和性を保持するのに十分であり得ることが認められたことも、興味深い。これは、抗体がＧＱ１ｂエピトープを標的とする（例えばミラー・フィッシャー症候群およびビッカースタッフ脳幹脳炎の特徴）、ＧＴ１ａ−グリココンジュゲート３４と血清ＥＫ−ＧＣＯ  １８０３（ＩｇＧ）およびＰ２３（ＩｇＧ）との競合結合アッセイにあてはまる。コンジュゲート３４により示されたＧＴ１ａエピトープが、ＧＱ１ｂガングリオシドと比較して１つのシアリル酸を欠く場合でも、ＧＱ１ｂに対する抗体を示した患者血清は、糖鎖ポリマー３４により中和された。
【０２８４】
化合物８６のＩＣ５０値を、マウスモノクローナル抗ＨＮＫ−１  ＩｇＭ抗体について決定した。この抗体は、抗ＭＡＧニューロパチー患者のモノクローナル抗ＭＡＧ  ＩｇＧ抗体と同等の、ＨＮＫ−１糖鎖エピトープとの反応性を示す。結果を以下の表２に示す。阻害曲線は、図２Ｅに示す。
【表２】
2018534246.tif 000091
【０２８５】
本発明のポリマー８６は、スフィンゴ糖脂質ＳＧＰＧおよびＳＧＬＰＧの一部として末梢神経系に存在する天然の三糖糖鎖エピトープＨＮＫ−１だけでなく、糖タンパク質ＭＡＧを模造する糖鎖ポリマーである。このＨＮＫ−１糖鎖エピトープは、神経障害抗ＭＡＧニューロパチーにおける自己免疫攻撃の標的である。調製された糖鎖ポリマーは、平均４００のリジンからなり、リジン側鎖の４０％にＨＮＫ−１模倣体５８が担持されている、生分解性ポリ−Ｌ−リジン骨格に基づいている。側鎖の残り６０％は、ポリマーの水溶性を改善するためにチオグリセロールでキャップされている。該ポリマーは、病原性抗ＨＮＫ−１（ＭＡＧ／ＳＧＰＧ／ＳＧＬＰＧ）抗体がこのポリマーによって選択的に中和および除去され得るように、抗ＭＡＧニューロパチー患者（または同一もしくは類似の抗体を有する他の神経疾患の患者）における治療適用に向けて設計されている。ポリマー８６は、マウスモノクローナル抗ＨＮＫ−１  ＩｇＭの、ＭＡＧ上のＨＮＫ−１エピトープへの結合をナノモル濃度で阻害する（表２）。ポリマー８６の治療的有用性は、インビボデータによりさらに裏づけられている（図３）。化合物ＰＬ（ＨＮＫ−１模倣体（５８））４０を、誘導された高レベルの抗ＨＮＫ−１（抗ＭＡＧ）ＩｇＧ抗体で免疫化されたＢＡＬＢ／ｃマウス（ｎ＝６）へ静脈内投与した。これらのマウス抗体は、抗ＭＡＧニューロパチー患者の病原性ヒト抗ＨＮＫ−１（抗ＭＡＧ）ＩｇＭ抗体のモデルである。１０ｍｇ／ｋｇ用量またはポリマー８６は、投与後７日までに、マウス抗ＨＮＫ−１（抗ＭＡＧ）ＩｇＭ抗体のレベルを有意に低下させた。
【図１】
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【図２Ａ】
2018534246.tif 000113
【図２Ｂ】
2018534246.tif 000114
【図２Ｃ】
2018534246.tif 000115
【図２Ｄ】
2018534246.tif 000116
【図２Ｅ】
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【図３】
2018534246.tif 000118
【国際調査報告】
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