(57)【要約】本発明は、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の使用であって、被験体における創傷の治癒を促進するための少なくとも１用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の局所投与のための医薬の調製のための前記使用に関する。用量は、約２ｍｇ〜約３０ｍｇである。投与の頻度は、１日１回から週１回まで変化し得る。本発明は更に、関連する医薬及び治療方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体における創傷の治癒を促進するための医薬の調製における、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の使用であって、前記医薬は局所投与に適合され、且つ少なくとも１回の用量として約２ｍｇ〜約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む前記使用。
【請求項２】
請求項１に記載の使用であって、前記局所投与が皮内投与、皮下投与、筋肉内投与または局部投与である前記使用。
【請求項３】
請求項２に記載の使用であって、前記局部投与が、創傷の周囲、創傷の近傍または創傷内で行われる前記使用。
【請求項４】
請求項２に記載の使用であって、前記局所投与が、創傷の周囲においてその約０．５ｃｍで実施される数回の注射からなる前記使用。
【請求項５】
請求項１に記載の使用であって、前記創傷が開放創である前記使用。
【請求項６】
請求項１に記載の使用であって、前記創傷が慢性創傷または急性創傷である前記使用。
【請求項７】
請求項１〜６の何れか１項に記載の使用であって、前記用量が約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、または約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む前記使用。
【請求項８】
請求項１に記載の使用であって、前記局所投与が、少なくとも週に１回、少なくとも週に２回、少なくとも３日毎、少なくとも２日毎、少なくとも１日に１回、または少なくとも１日に２回の頻度で投与される前記使用。
【請求項９】
請求項１または８に記載の使用であって、前記医薬は、前記創傷のサイズが少なくとも５０％減少するまで複数回の投与を行うための、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の複数の用量を含む前記使用。
【請求項１０】
請求項１または８に記載の使用であって、前記医薬は、前記創傷のサイズが少なくとも９０％減少するまで複数回の投与を行うための、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の複数の用量を含む前記使用。
【請求項１１】
請求項１に記載の使用であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する前記使用。
【請求項１２】
請求項１１に記載の使用であって、前記濃度が約１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬまたは約２０ｍｇ／ｍＬである前記使用。
【請求項１３】
請求項１に記載の使用であって、前記創傷がある面積を有し、且つ前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量が前記面積に比例する前記使用。
【請求項１４】
請求項１３に記載の使用であって、前記用量がｍｇで表され、ｃｍ２で表される前記創傷面積の約２．５倍に相当する前記使用。
【請求項１５】
請求項１に記載の使用であって、前記創傷はある面積を有し、前記創傷面積が４ｃｍ２未満であるときに前記用量は約１０ｍｇであり、前記創傷面積が４ｃｍ２〜８ｃｍ２であるときに前記用量は約２０ｍｇであり、または前記創傷面積が８ｃｍ２を超えるときに前記用量は約３０ｍｇである前記使用。
【請求項１６】
請求項１に記載の使用であって、前記創傷が周囲を有し、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は前記創傷の周囲に比例する前記使用。
【請求項１７】
請求項１６に記載の使用であって、前記用量がｍｇで表され、且つｃｍで表される前記創傷の周囲の約１．５倍に相当する前記使用。
【請求項１８】
請求項４に記載の使用であって、前記数回の注射が２〜３０回の注射からなる前記使用。
【請求項１９】
請求項１に記載の使用であって、前記被験体が哺乳動物、好ましくはヒトである前記使用。
【請求項２０】
請求項１に記載の使用であって、前記創傷が、糖尿病性足潰瘍、糖尿病性創傷、褥瘡、圧迫性潰瘍、鼓膜穿孔、熱傷創、切開創、静脈脚潰瘍、動脈脚潰瘍、血管創傷または病変の群から選択される慢性創傷である前記使用。
【請求項２１】
被験体における創傷の治癒を促進するための医薬であって、該医薬は局所投与に適合され、且つ約２ｍｇ〜約３０ｍｇの少なくとも１用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む前記医薬。
【請求項２２】
請求項２１に記載の医薬であって、前記医薬が更に、皮内、皮下、筋肉内または局所投与のための装置を備える前記医薬。
【請求項２３】
請求項２１に記載の医薬であって、前記用量が約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇまたは約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体である前記医薬。
【請求項２４】
請求項２１に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、再構成の準備ができた粉末の形態である前記医薬。
【請求項２５】
請求項２１に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する前記医薬。
【請求項２６】
請求項２５に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、約１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬまたは約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中にある前記医薬。
【請求項２７】
請求項２２に記載の医薬であって、前記装置が数回の注射を行うように適合されている前記医薬。
【請求項２８】
請求項２７に記載の医薬であって、前記数回の注射が、前記創傷の周囲、前記創傷の近傍または前記創傷内において行われる前記医薬。
【請求項２９】
請求項２１に記載の医薬であって、前記局所投与が創傷の回りの約０．５ｃｍにおいて実施される数回の注射からなる前記医薬。
【請求項３０】
請求項２１に記載の医薬であって、前記創傷が開放創である前記医薬。
【請求項３１】
請求項２１に記載の医薬であって、前記創傷が慢性創傷または急性創傷である前記医薬。
【請求項３２】
請求項２１〜３１の何れか1項に記載の医薬であって、前記用量が、約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、または約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変種を含む前記医薬。
【請求項３３】
請求項２１に記載の医薬であって、前記局所投与は、少なくとも週に１回、少なくとも週に２回、少なくとも３日毎、少なくとも２日毎、少なくとも１日に１回、または少なくとも１日に２回投与される前記医薬。
【請求項３４】
請求項２１または２７に記載の医薬であって、前記創傷のサイズが少なくとも５０％減少するまで複数回の投与を行うための、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の複数の用量を含む前記医薬。
【請求項３５】
請求項２１または２７に記載の医薬であって、前記創傷のサイズが少なくとも９０％減少するまで複数回の投与を行うための、複数の用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む前記医薬。
【請求項３６】
請求項２１に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する前記医薬。
【請求項３７】
請求項３６に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体は、約１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬまたは約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する前記医薬。
【請求項３８】
請求項２１に記載の医薬であって、前記創傷はある面積を有し、且つ前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量が前記面積に比例する前記医薬。
【請求項３９】
請求項３８に記載の医薬であって、前記用量がｍｇで表され、ｃｍ２で表される前記創傷面積の約２．５倍に相当する前記医薬。
【請求項４０】
請求項２１に記載の医薬であって、前記創傷が面積を有し、前記創傷面積が４ｃｍ２未満であるときに前記用量は約１０ｍｇであり、前記創傷領域が４ｃｍ２〜８ｃｍ２のときに前記用量は約２０ｍｇであり、または前記創傷面積が８ｃｍ２を超えるときに前記用量は約３０ｍｇである前記医薬。
【請求項４１】
請求項２１に記載の医薬であって、前記創傷が周囲長を有し、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は前記創傷の周囲長に比例する前記医薬。
【請求項４２】
請求項４１に記載の医薬であって、前記用量がｍｇで表され、且つｃｍで表される前記創傷の周囲長の約１．５倍に相当する前記医薬。
【請求項４３】
請求項２７に記載の医薬であって、前記数回の注射が２〜３０回の注射からなる前記医薬。
【請求項４４】
請求項２１に記載の医薬であって、前記被験体が哺乳動物、好ましくはヒトである前記医薬。
【請求項４５】
請求項２１に記載の医薬であって、前記創傷が、糖尿病性足潰瘍、糖尿病性創傷、褥瘡、圧迫性潰瘍、鼓膜穿孔、熱傷創、切開創、静脈脚潰瘍、動脈脚潰瘍、血管創傷または病変の群から選択される慢性創傷である前記医薬。
【請求項４６】
請求項２１に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、再構成の準備ができた粉末の形態である前記医薬。
【請求項４７】
被験体において創傷の治癒を促進する方法であって、少なくとも約２ｍｇ〜約３０ｍｇの１用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の、前記被験体への局所投与を含む前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医学の分野に関し、より詳細には、例えば急性創傷または慢性創傷の治療を含む創傷治癒に関する。
【背景技術】
【０００２】
創傷治癒または創傷修復は、炎症、新しい組織形成及びリモデリングの３つの段階を含む複雑な機構である（Ｇｕｒｔｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  ２００８  Ｎａｔｕｒｅ．Ｖｏｌ．４５３，Ｎｏ．１５，ｐｐ．３１４−３２１）。幾つかの症例においては、修復のメカニズムが損なわれ、創傷が治癒することはない。例えば、これはしばしば腎障害、血管収縮障害、及び創傷治癒を困難にする免疫系の弱化に罹患している糖尿病患者において生じる。糖尿病患者の場合、治癒能力が低下しているため、小さな損傷がより大きな創傷へと進行することがあり得る。創傷は、予測可能な時間内に治癒しない場合には慢性になる可能性がある。３月以内に治癒しない創傷は、典型的には慢性と考えられる。糖尿病患者の一般的な創傷は、糖尿病性足部潰瘍であり、これは非常に不具的で、しばしば脚の切断につながり、死亡リスクが高くなる（Ｊｅｆｆｃｏａｔｅ  ａｎｄ  Ｈａｒｄｉｎｇ．  Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ．  Ｒｅｖｉｅｗ：Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｆｏｏｔ  Ｕｌｃｅｒｓ，  ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｏｎｌｉｎｅ  Ｆｅｂ  ２５，２００３）。糖尿病性足部潰瘍のための唯一の既知の治療法には、感染症の管理、除荷技術、種々のタイプの包帯及び手術が含まれる。
【０００３】
別のタイプの慢性創傷が、長期間にわたり寝たきりの入院した人々で観察され、これは通常４段階で特徴付けられた褥瘡または加圧傷または圧迫性潰瘍と呼ばれる。ステージ１では、傷口は開いた創傷ではないが、皮膚は赤くて暖かく、痛いこともある。ステージ２では、皮膚が開いたり、磨耗したり、通常、柔らかく、痛みを伴った潰瘍を形成したりする。ステージ３では痛みが悪化し、皮膚の下の組織に広がり、小さなクレータを形成する。ステージ４では、褥瘡は非常に深く、筋肉や骨に到達して大きな損傷を引き起こす。ステージ３及び４では、有意な組織損傷のために痛みが殆どまたは全くないことがある。長年にわたり褥瘡の治療によく使用されている治療法には、革新的なマットレス、軟膏、クリーム、溶液、包帯、超音波診断、紫外線加熱ランプ、砂糖、手術等が含まれる。治療戦略を選択する際には、創傷の段階及び治療の目的（例えば、保護、湿気、または壊死組織の除去）を考慮する必要がある。ステージ３及び４の病変では、外科的介入（例えば、フラップ再建）が必要であるが、これらの病変の幾つかは、共存する医学的問題により保存的に（手術なしで）治療しなければならないため、患者はこの処置を受けることができない。
【０００４】
別のタイプの慢性創傷は血管創傷であり、これは静脈または動脈であり得る。典型的な血管創傷は、静脈脚潰瘍及び静脈脚潰瘍である。脚の潰瘍はしばしば、治癒まで４〜６週間以上続く慢性創傷である。脚の潰瘍は、通常は足首のすぐ上の脚の内側に発生する。静脈脚潰瘍の症状には、罹患した脚の痛み、痒み及び腫脹が含まれる。潰瘍の周囲には変色した皮膚や硬化した皮膚もあり、痛みは悪臭を放つことがある。糖尿病性足潰瘍と同様に、足潰瘍は、動脈の血行不良により生じる動脈脚潰瘍、糖尿病に関連した高血糖により生じる脚潰瘍、関節リウマチ及び狼瘡などの慢性炎症性障害により生じる脈管炎脚潰瘍、脚への傷により生じる外傷性脚潰瘍、及び脚の皮膚の腫瘍により生じる悪性脚潰瘍の何れかで／またはそれらとの組み合わせで現れる可能性がある。
【０００５】
急性創傷及び／または慢性創傷は、典型的には、糖尿病性足潰瘍のような動脈性（虚血性）潰瘍、静脈傷性（静脈瘤、脚、うっ血）潰瘍、リンパ浮腫性（慢性皮膚破壊）潰瘍、外傷の遅効性による圧迫性（褥瘡）潰瘍、制御されない感染症及び／または自己免疫性潰瘍（例えば乾癬及び狼瘡であるが、これらに限定されない）として分類される。典型的には、これらの創傷または潰瘍は血管損傷（動脈、静脈、微小血管）を有する。加えて、それらは組織の酸素濃度を低下させ、また代謝的障害を有する。
【０００６】
単一病因の潰瘍は稀であり、この出願により治療されることが意図された創傷または潰瘍は、糖尿病／圧迫性潰瘍、圧迫／静脈性潰瘍、静脈／動脈性潰瘍、または圧迫／静脈／動脈性潰瘍のような混合病因を有し得るであろう。
【０００７】
別のタイプの慢性創傷が、鼓膜穿孔において観察される。一部の患者では、鼓膜穿孔は正常に治癒するが、他の患者では該穿孔は閉じることがない。感染は、鼓膜穿孔（ＴＭＰ）の主要な結果（または副作用）である。中耳の急性感染は、中耳空間内の圧力の上昇と同時に鼓膜内の相対的な虚血を引き起こし得る。これは、鼓膜の裂傷または破裂をもたらし、通常は激しい痛みが先行する。穿孔が治癒しない場合、残存鼓膜穿孔が残る。外耳道感染は鼓膜穿孔をめったに引き起こさない。これが生じるとき、それはアスペルギルス・ニガーによる感染と関連していることが多い。外傷性の穿孔はまた、耳への打撃の結果でもあり得る（例えば、平手打ち、水上スキーからの落下で頭が耳を下にして水面にぶつかる）。爆発による重大な大気過剰圧力に曝されると鼓膜が裂ける可能性がある。水圧からの鼓膜穿孔は通常、スキューバダイバーにおいて、以前の疾患による萎縮を伴った鼓膜で生じる。外耳道を清掃するために使用される物品により、鼓膜が穿孔される可能性がある。このような穿孔は自然に治癒する可能性は低いという証拠が存在する。鼓膜の穿孔は、外科医が鼓膜を切開するとき（鼓膜切開術）に意図的に作成される。均圧管（換気チューブ）が配置されると、鼓膜の穿孔は意図的に開いたまま保持される。この管が押し出されたときに外科的に形成された開口部が治癒しないと、慢性鼓膜穿孔が生じる。穿孔の症状には、クシャミ及び鼻をかむ際の耳鳴り、並びに聴力の低下、風邪の際及び水が外耳道に入るときに感染を生じる傾向が含まれる。多くの人々は、完全に症状がない鼓膜穿孔を伴って生活している。しかし、穿孔は水に曝されたときの再発感染と関連する可能性がある。
【０００８】
木質性結膜炎は、稀な形態の慢性結膜炎であり、主に眼瞼の下側（足根結膜）に発生する木質コンシステンシーのフィブリンに富んだ再発性の偽膜性病変（創傷）を特徴とする。これは一般に、歯周組織、上気道及び下気道、腎臓、中耳、並びに女性生殖器が関与する全身性疾患である。それは視力を脅かす可能性があり、また肺関与により死亡することがある。この病状は、急性創傷または慢性創傷の何れか／両方として現れる可能性がある。
【０００９】
現在、外科手術（切断または再建）以外に、糖尿病性足潰瘍または深圧迫傷のような慢性創傷に対する有効な治療はない。鼓膜穿孔のような慢性創傷の治療はない。
【００１０】
従って、急性及び慢性創傷の非侵襲的処置を含む、創傷治癒を改善または促進するための新規な方法が必要とされている。
【００１１】
本明細書は多数の文献を参照しており、その内容の全体を本明細書の一部として援用する。
【発明の概要】
【００１２】
本発明は、創傷治癒を促進するための、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の使用に関する。
【００１３】
本発明は、以下の請求項１〜６６に関する。
【００１４】
１．被験体における創傷の治癒を促進するための医薬の調製における、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の使用であって、前記医薬は局所投与に適合され、且つ少なくとも１回の用量として約２ｍｇ〜約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む使用。
【００１５】
２．項目１に記載の使用であって、前記局所投与が皮内投与、皮下投与、筋肉内投与または局部投与である使用。
【００１６】
３．項目２に記載の使用であって、前記局所投与が、創傷の周囲、創傷の近傍または創傷内で行われる使用。
【００１７】
４．項目２に記載の使用であって、前記局所投与が、創傷の周囲約０．５ｃｍで実施される数回の注射からなる使用。
【００１８】
５．項目１に記載の使用であって、前記創傷が開放創である使用。
【００１９】
６．項目１に記載の使用であって、前記創傷が慢性創傷または急性創傷である使用。
【００２０】
７．項目１〜６の何れか１項に記載の使用であって、前記用量が約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、または約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む使用。
【００２１】
８．項目１に記載の使用であって、前記局所投与が、少なくとも週に１回、少なくとも週に２回、少なくとも３日毎、少なくとも２日毎、少なくとも１日に１回、または少なくとも１日に２回の頻度で投与される使用。
【００２２】
９．項目１または８に記載の使用であって、前記医薬は、前記創傷のサイズが少なくとも５０％減少するまで複数回の投与を行うための、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の複数の用量を含む使用。
【００２３】
１０．項目１または８に記載の使用であって、前記医薬は、前記創傷のサイズが少なくとも９０％減少するまで複数回の投与を行うための、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の複数の用量を含む使用。
【００２４】
１１．項目１に記載の使用であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する使用。
【００２５】
１２．項目１１に記載の使用であって、前記濃度が約１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬまたは約２０ｍｇ／ｍＬである使用。
【００２６】
１３．項目１に記載の使用であって、前記創傷がある面積を有し、且つ前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量が前記面積に比例する使用。
【００２７】
１４．項目１３に記載の使用であって、前記用量がｍｇで表され、ｃｍ２で表される前記創傷面積の約２．５倍に相当する使用。
【００２８】
１５．項目１に記載の使用であって、前記創傷はある面積を有し、前記創傷面積が４ｃｍ２未満であるときに前記用量は約１０ｍｇであり、前記創傷面積が４ｃｍ２〜８ｃｍ２であるときに前記用量は約２０ｍｇであり、または前記創傷面積が８ｃｍ２を超えるときに前記用量は約３０ｍｇである使用。
【００２９】
１６．項目１に記載の使用であって、前記創傷が周囲長を有し、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は前記創傷の周囲長に比例する使用。
【００３０】
１７．項目１６に記載の使用であって、前記用量がｍｇで表され、且つｃｍで表される前記創傷の周囲長の約１．５倍に相当する使用。
【００３１】
１８．項目４に記載の使用であって、前記数回の注射が２〜３０回の注射からなる使用。
【００３２】
１９．項目１に記載の使用であって、前記被験体が哺乳動物、好ましくはヒトである使用。
【００３３】
２０．項目１に記載の使用であって、前記創傷が、糖尿病性足潰瘍、糖尿病性創傷、褥瘡、圧迫性潰瘍、鼓膜穿孔、熱傷創、切開創、静脈脚潰瘍、動脈脚潰瘍、血管創傷または病変の群から選択される慢性創傷である使用。
【００３４】
２１．被験体における創傷の治癒を促進するための医薬であって、該医薬は局所投与に適合され、且つ約２ｍｇ〜約３０ｍｇの少なくとも１用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む医薬。
【００３５】
２２．項目２１に記載の医薬であって、前記医薬が更に、皮内、皮下、筋肉内または局所投与のための装置を備える医薬。
【００３６】
２３．項目２１に記載の医薬であって、前記用量が約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇまたは約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体である医薬。
【００３７】
２４．項目２１に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、再構成の準備ができた粉末の形態である医薬。
【００３８】
２５．項目２１に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する医薬。
【００３９】
２６．項目２５に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、約１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬまたは約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中にある医薬。
【００４０】
２７．項目２２に記載の医薬であって、前記装置が数回の注射を行うように適合されている医薬。
【００４１】
２８．項目２７に記載の医薬であって、前記数回の注射が、前記創傷の周囲、前記創傷の近傍または前記創傷内において行われる医薬。
【００４２】
２９．項目２１に記載の医薬であって、前記局所投与が創傷の回りの約０．５ｃｍにおいて実施される数回の注射からなる医薬。
【００４３】
３０．項目２１に記載の医薬であって、前記創傷が開放創である医薬。
【００４４】
３１．項目２１に記載の医薬であって、前記創傷が慢性創傷または急性創傷である医薬。
【００４５】
３２．項目２１〜３１の何れか1項に記載の医薬であって、前記用量が、約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、または約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変種を含む医薬。
【００４６】
３３．項目２１に記載の医薬であって、前記局所投与は、少なくとも週に１回、少なくとも週に２回、少なくとも３日毎、少なくとも２日毎、少なくとも１日に１回、または少なくとも１日に２回投与される医薬。
【００４７】
３４．項目２１または２７に記載の医薬であって、前記創傷のサイズが少なくとも５０％減少するまで複数回の投与を行うための、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の複数の用量を含む医薬。
【００４８】
３５．項目２１または２７に記載の医薬であって、前記創傷のサイズが少なくとも９０％減少するまで複数回の投与を行うための、複数の用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む医薬。
【００４９】
３６．項目２１に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する医薬。
【００５０】
３７．項目３６に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体は、約１ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬまたは約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する医薬。
【００５１】
３８．項目２１に記載の医薬であって、前記創傷はある面積を有し、且つ前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量が前記面積に比例する医薬。
【００５２】
３９．項目３８に記載の医薬であって、前記用量がｍｇで表され、ｃｍ２で表される前記創傷面積の約２．５倍に相当する医薬。
【００５３】
４０．項目２１に記載の医薬であって、前記創傷が面積を有し、前記創傷面積が４ｃｍ２未満であるときに前記用量は約１０ｍｇであり、前記創傷領域４ｃｍ２〜８ｃｍ２のときに前記用量は約２０ｍｇであり、または前記創傷面積が８ｃｍ２を超えるときに前記用量は約３０ｍｇである医薬。
【００５４】
４１．項目２１に記載の医薬であって、前記創傷が周囲長を有し、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は前記創傷の周囲長に比例する医薬。
【００５５】
４２．項目４１に記載の医薬であって、前記用量がｍｇで表され、且つｃｍで表される前記創傷の周囲長の約１．５倍に相当する医薬。
【００５６】
４３．項目２７に記載の医薬であって、前記数回の注射が２〜３０回の注射からなる医薬。
【００５７】
４４．項目２１に記載の医薬であって、前記被験体が哺乳動物、好ましくはヒトである医薬。
【００５８】
４５．項目２１に記載の医薬であって、前記創傷が、糖尿病性足潰瘍、糖尿病性創傷、褥瘡、圧迫性潰瘍、鼓膜穿孔、熱傷創、切開創、静脈脚潰瘍、動脈脚潰瘍、血管創傷または病変の群から選択される慢性創傷である医薬。
【００５９】
４６．項目２１に記載の医薬であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、再構成の準備ができた粉末の形態である医薬。
【００６０】
４７．被験体において創傷の治癒を促進する方法であって、少なくとも約２ｍｇ〜約３０ｍｇの約１用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の、前記被験体への局所投与を含む方法。
【００６１】
４８．項目４１に記載の方法であって、前記局所投与が、皮内投与、皮下投与、筋肉内投与または局部投与である方法。
【００６２】
４９．項目４１に記載の方法であって、前記局所投与が数回の注射からなる方法。
【００６３】
５０．項目４９に記載の方法であって、前記複数回の注射が、前記創傷の周囲、前記創傷の近傍または前記創傷内で行われる方法。
【００６４】
５１．項目４７に記載の方法であって、前記局所投与が創傷の周囲約０．５ｃｍで実施される数回の注射からなる方法。
【００６５】
５２．項目４７に記載の方法であって、前記創傷が開放創である方法。
【００６６】
５３．項目４７に記載の方法であって、前記創傷が慢性創傷または急性創傷である方法。
【００６７】
５４．項目４７〜５３の何れか１項に記載の方法であって、前記用量が約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、または約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変種を含む方法。
【００６８】
５５．項目４７に記載の方法であって、前記局所投与が、少なくとも週に１回、少なくとも週に２回、少なくとも３日毎、少なくとも２日毎、少なくとも１日に１回、または少なくとも１日に２回の頻度で行われる方法。
【００６９】
５６．項目４７または４９に記載の方法であって、前記医薬は、前記創傷のサイズが少なくとも５０％減少するまで複数回の投与を行うための、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の複数の用量を含む方法。
【００７０】
５７．項目４７に記載の方法であって、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体が、約２ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶液中に存在する方法。
【００７１】
５８．項目５７に記載の方法であって、前記濃度が約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬまたは約２０ｍｇ／ｍＬである方法。
【００７２】
５９．項目４７に記載の方法であって、前記創傷がある面積を有し、且つ前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は前記面積に比例する方法。
【００７３】
６０．項目５９に記載の方法であって、前記用量がｍｇで表され、ｃｍ２で表される前記創傷面積の約２．５倍に相当する方法。
【００７４】
６１．項目４７に記載の方法であって、前記創傷はある面積を有し、前記創傷面積が４ｃｍ２未満であるときに前記用量は約１０ｍｇであり、前記創傷面積が４ｃｍ２〜８ｃｍ２であるときに前記用量は約２０ｍｇであり、または前記創傷面積が８ｃｍ２を超えるときに前記用量は約３０ｍｇである方法。
【００７５】
６２．項目４７に記載の方法であって、前記創傷が周囲長を有し、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は前記創傷の周囲長に比例する方法。
【００７６】
６３．項目６２に記載の方法であって、前記用量がｍｇで表され、且つｃｍで表される前記創傷の周囲長の約１．５倍に相当する方法。
【００７７】
６４．項目４７〜４９の何れか1項に記載の方法であって、前記数回の注射が２〜３０回の注射からなる方法。
【００７８】
６５．項目４７に記載の方法であって、前記被験体が哺乳動物、好ましくはヒトである方法。
【００７９】
６６．項目４７に記載の方法であって、前記創傷が、糖尿病性足潰瘍、糖尿病性創傷、褥瘡、圧迫性潰瘍、鼓膜穿孔、熱傷創、切開創、静脈脚潰瘍、動脈脚潰瘍、血管創傷または病変の群から選択される慢性創傷である方法。
【００８０】
本発明の更なる態様は、以下の説明、特許請求の範囲及びここでの概括明から当業者に明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００８１】
【図１】ヒトプラスミノーゲンの模式図であり、その内部の内部架橋及びプラスミン、ｕ−ＰＡ及びｔ−ＰＡ切断部位を示す。
【図２】ＵｎｉＰｒｏｔ  ａｃｃｅｓｓｉｏｎ＃Ｐ００７４７に記載されるヒトプラスミノーゲン前駆体のアミノ酸配列を表す。
【図３】図３Ａは及び図３Ｂは、それぞれプラスミノーゲン治療の前後の実施例１に記載された被験体の創傷の写真を示す。
【図４】図４Ａは及び図４Ｂは、それぞれプラスミノーゲン治療の前後の実施例２に記載された被験体の創傷の写真を示す。
【図５−１】図５Ａ及び図５Ｂは、それぞれプラスミノーゲン治療の前後の実施例３に記載された被験体の足部潰瘍の写真を示す。図５Ｃは、プラスミノーゲン治療２月後の、足で立ち上がった実施例３に記載した被験体の写真を示す。
【図５−２】図５Ｄ〜図５Ｇは、治療前、並びに治療第８日、第３０日、第５７日、第８４日及び第９４日において、実施例３に記載された被験体の左足潰瘍の写真をそれぞれ示す。
【図６−１】図６Ａ、図６Ｂ及び図６Ｃは、プラスミノーゲン治療の前、並びに治療第３３日及び第５６日において、実施例４に記載された被験体右脚創傷の写真をそれぞれ示す。図６Ｄ〜図６Ｈは、プラスミノーゲン治療の前、及び治療第３３日、第６２日目、第９３日目及び第１２９日の、実施例４に記載された被験体左脚創傷の写真をそれぞれ示す。
【図６−２】図６Ｉは、実施例４の被験体において、第０日〜第１２９日において観察された左脚の創傷サイズのパーセンテージを示すグラフを表す。
【図７】図７Ａ〜図７Ｄは、プラスミノーゲン治療の前、及び治療第３０日、第５４日及び第５９日における実施例５に記載した被験体の創傷の写真をそれぞれ示す。
【図８】図８Ａ、図８Ｂ及び図８Ｃは、プラスミノーゲン治療の前、並びに治療第９週及び第２８週における、実施例６に記載された被験体創傷の写真をそれぞれ示す。図８Ｄは、実施例６の被験体において、第０日〜第２８週に観察された創傷サイズのパーセンテージを示すグラフを表す。
【図９】図９Ａ〜図９Ｅは、プラスミノーゲン治療の前、並びに治療第２９週、第４５週、第６４週及び第８８週における、実施例７に記載された被験体創傷の写真をそれぞれ示す。図９Ｆは、創傷の開始（プラスミノーゲン治療の１２０ヶ月前）からプラスミノーゲン治療の終了（プラスミノーゲン治療の開始後２０ヶ月）までにおける、実施例７に記載された被験体の創傷サイズのパーセンテージを示すグラフを表す。
【図１０】図１０Ａ〜図１０Ｉは、プラスミノーゲン治療の前、並びに治療第１日、第１０日、第３月、第５．５月、第１１月、第１２月、第１４月、及び第１５月における、実施例８に記載された被験体創傷の写真をそれぞれ示す。図１０Ｋは、実施例８の被験体における第０日〜第１５月に観察された創傷サイズのパーセンテージを示すグラフであり、プラスミノーゲン治療の一時的中断に起因する創傷サイズの増加を示す。
【発明を実施するための形態】
【００８２】
本明細では、創傷（急性創傷または慢性創傷）を患う被験体において、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体での治療を介して、創傷治癒を促進するための治療または投与計画、及びそのための医薬が開示される。
【００８３】
プラスミノーゲンは、図１に示すプラスミンのチモーゲンである。ヒトプラスミノーゲン前駆体のアミノ酸配列を図２に示す。ヒトプラスミノーゲンは、約９０ｋＤの分子量及び約７．０のｐＩを有する７９１アミノ酸（前駆体＝８１０アミノ酸）を含むが、Ｎ末端活性化ペプチドの異なるグリコシル化及び／または除去により６．２〜８．０の範囲の等電点をもたらすことができる。これは、２４の鎖内ジスルフィド架橋、５つのクリングルドメイン（フィブリンへの結合及びインヒビターα２−抗プラスミンへの結合に関与する）、セリンプロテアーゼドメイン（Ｐ）、及び最初の７７アミノ酸からなる活性化ペプチド（ＡＰ）を含む一本鎖タンパク質である。１つのＮ結合グリコシル化部位及び１つのＯ−結合部位が存在するが、第２のＯ−結合部位が同定されている（Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，２００６）。循環系におけるプラスミノーゲンの約７０％は、唯一のＯ−結合グリコシル化を含んでいるが、残りはＮ−結合及びＯ−結合した糖の両方を含んでいる。
【００８４】
天然のプラスミノーゲンは、２つの主要な形態であるＧｌｕ−プラスミノーゲン（Ｇｌｕ−Ｐｇ）及びＬｙｓ−プラスミノーゲン（Ｌｙｓ−Ｐｇ）形態で産生され、それぞれＮ末端アミノ酸であるグルタミン酸またはリジンについて命名されている。Ｇｌｕ−Ｐｇは、遺伝子配列により指定される全体のアミノ酸配列（活性化ペプチドを除く）で構成されるが、Ｌｙｓ−Ｐｇは、Ｌｙｓ−７７とＬｙｓ−７８との間のＧｌｕ−Ｐｇの切断の結果である（図２中の下線部）。Ｌｙｓ−Ｐｇの循環半減期は、Ｇｌｕ−Ｐｇよりもかなり短い（Ｇｌｕ−Ｐｇについては２〜２．５日、Ｌｙｓ−Ｐｇについては０．８日）。Ｇｌｕ−Ｐｇは、血漿中に存在するＰｇの優勢な形態であり、循環系において検出されるＬｙｓ−Ｐｇは極めて僅かである（Ｖｉｏｌａｎｄ，Ｂ．Ｎ．，Ｂｙｒｎｅ，Ｒ．，Ｃａｓｔｅｌｌｉｎｏ  Ｆ．Ｊ．（１９７８）、Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  α−，  ω−Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ  ｏｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２５３（１０）：５３９５−５４０１；Ｃｏｌｌｅｎ  Ｄ，Ｏｎｇ  ＥＢ，Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＡＪ．（１９７５）Ｈｕｍａｎ  Ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ：Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  Ｉｎ  Ｖｉｖｏ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ  ｏｆ  ＮＨ２−Ｔｅｒｍｉｎａｌ  Ｇｌｕｔａｍｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ．  Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．７：５１５−５２９）。
【００８５】
プラスミノーゲンは肝臓で合成され、血漿中に分泌される。プラスミノーゲンは身体全体に分布し、活性化のための条件が存在する場合に、プラスミノーゲンプロ酵素は組織型プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）またはウロキナーゼプラスミノーゲン活性化因子（ｕ−ＰＡ）によって活性な酵素であるプラスミンに変換される。次いで、プラスミンはフィブリンを分解して潜在的マトリックスメタロプロテイナーゼ（ｐｒｏ−ＭＭＰ）を活性ＭＭＰに変換し、これは組織の治癒／リモデリングプロセスの一部として細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を更に分解する。ｔ−ＰＡによって媒介されるプラスミノーゲン活性化は、主にフィブリン・ホメオスタシスに関与するのに対して、ｕ−ＰＡを介したプラスミン生成は、その受容体ｕ−ＰＡＲと複合体を形成し、組織リモデリングにおいて役割を果たす。
【００８６】
糖尿病に罹患している被験体において、プラスミノーゲンは血液循環中でグリコシル化される。グリコシル化されたプラスミノーゲンは、機能しないか、または機能不良である。その結果として、糖尿病被験体の創傷は、単独で治癒するのがより困難であり、治癒しないで慢性創傷になり易い。糖尿病被験体においては、静脈内投与されたプラスミノーゲンが創傷に達する前にグリコシル化され得ることを考慮すると、創傷を治療するためのプラスミノーゲン局所投与は有利である。このことは、血糖値が制御されていないか、または部分的に制御されている糖尿病被験体において特に問題である。
【００８７】
創傷領域の周辺領域では、組織が損傷される可能性がある。低酸素症、虚血、感染及び／または腫脹がしばしば存在する。これらの状態は、創傷にアクセスする正常な血液循環を妨害し、静脈内に投与された化合物が創傷に到達するための障害となり得る。従って、創傷への薬物の局所投与は、化合物がより迅速かつ効率的に、破壊された組織の創傷及び細胞へとアクセスできるようにするために有利である。
【００８８】
本発明の一態様において、局所投与は、皮内（または真皮内）、皮下（または真皮下）、筋肉内または局部的である。本発明の一態様において、前記投与は、創傷内、創傷近傍または創傷周囲で実施される。好ましくは、投与は創傷の外側で行われるが、それに近接して行われる。投与が皮内（または真皮内）、皮下（または真皮下）または筋肉内である場合、用量は１回の注射（単回注射）または数回の注射（複数回の注射）で投与することができる。好ましくは、局所投与は２回以上の注射からなる。注射の回数は創傷の大きさ、即ち、創傷の周囲長に関連して変化し得る。好ましい実施形態において、注射の回数は２〜３０回の注射、または３〜１２回の注射である。本発明の一実施形態において、注射は創傷から約０．１ｃｍ〜約２ｃｍの距離で、好ましくは約０．１ｃｍ〜約１ｃｍの距離で行われる。一実施形態において、注射は、創傷から約０．５ｃｍまたは約１ｃｍの距離で行われる。開放創でない創傷（例えば、ステージ１の褥瘡、または真皮が連続したままの状態の熱傷創、または病変）がある状態において、局所投与は好ましくは創傷領域で行われる。開放創（切開、潰瘍など）の創傷がある状態では、当該創傷領域の回りに局所投与することが好ましい。投与が局所的である場合、プラスミノーゲンの用量は、滴剤、クリーム剤、ゲル剤等によって投与することができる。創傷が鼓膜穿孔である場合、または眼瞼の中の木質結膜炎のように創傷が眼にある場合には、滴下を介しての局所投与が好ましい。しかし、鼓膜穿孔及び木質結膜炎は、鼓膜穿孔の回りにおいて皮内または皮下に、または木質結膜炎の場合には眼瞼内に、プラスミノーゲンを投与することによって治療することもできる。木質結膜炎は、通常、病変と呼ばれる。プラスミノーゲンが液滴溶液、クリーム剤、ゲル剤などに含有される実施形態において、局所投与は、創傷上、創傷周囲、またはその両方に適用され得る。
【００８９】
一態様において、本明細書に記載の治療は、約０．４ｍｇ〜約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量の反復投与を含む。本発明の実施形態によれば、投与は１日２回、毎日またはより頻繁に、２日毎またはより頻繁に、３日毎またはより頻繁に、１週間に２回またはより頻繁に、４日毎またはより頻繁に、５日毎またはより頻繁に、または週１回またはより頻繁に行われる。
【００９０】
本明細書で使用される「プラスミノーゲン」の用語は、任意の動物、例えば哺乳動物（例えばヒト）由来の任意の形態の天然プラスミノーゲンポリペプチド（例えば、Ｇｌｕ−プラスミノーゲンまたはＬｙｓ−プラスミノーゲン）を指す。プラスミノーゲンは、組織型プラスミノーゲンアクチベーター（ｔ−ＰＡ）またはウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーター（ｕ−ＰＡ）によって、活性酵素であるプラスミンに変換されるプロ酵素である。プラスミンはフィブリンを分解し、潜在的マトリックスメタロプロテイナーゼ（ｐｒｏ−ＭＭＰ）を活性ＭＭＰに変換し、これは次いで組織の治癒／リモデリングプロセスの一部として細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を更に分解する。本明細書で使用する「生物学的に活性な変異体」の用語は、天然プラスミノーゲンの生物学的活性を保持する変異したプラスミノーゲンポリペプチド、即ち、フィブリンを分解することができ、潜在的マトリックスメタロプロテイナーゼ（ｐｒｏ−ＭＭＰ）を活性ＭＭＰに変換できるプラスミンポリペプチド（ｔ−ＰＡ及び／またはｕ−ＰＡによる）に変換され得る変異したプラスミノーゲンポリペプチドを言う。変異体は、１以上のアミノ酸の置換、欠失／短縮（Ｎ末端、Ｃ末端及び／または内部アミノ酸の欠失／短縮）、付加（Ｎ末端、Ｃ末端及び／または内部アミノ酸の追加）を含み得る。該生物学的に活性な変異体は、天然のプラスミノーゲンポリペプチドの生物活性よりも低いか、高いか、または同様の生物学的活性（例えば、得られるプラスミンの酵素活性）を示すことができる。実施形態において、前記変異体は、天然のプラスミノーゲンポリペプチドと少なくとも６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％のアミノ酸配列同一性を有する。生物学的に活性なプラスミノーゲン変異体は、例えばＷＯ２０１２／０９３１３２、ＷＯ２０１３／０２４０７４及びＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ４、１７５８−１７６７）に記載されており、また「ミディプラスミノーゲン」、「ミニプラスミノーゲン」、「ミクロプラスミノーゲン」及び「デルタプラスミノーゲン」と一般的に称される１以上のクリングルドメイン及び／またはその一部を欠失したプラスミノーゲンの短縮変異体が含まれる。一実施形態において、前記プラスミノーゲンはヒトプラスミノーゲンである。更なる実施形態において、前記組成物は天然のヒトプラスミノーゲンを含んでいる。該プラスミノーゲンは、幾つかの供給源から得ることができる。それは組換え合成によって得ることができ、または血液、血漿または血液由来の溶液から抽出／精製することができる。プラスミノーゲンは、例えば、コーン分別または沈殿により、血液または血漿から抽出することができる。プラスミノーゲンは、例えば、ＷＯ２００６／１２０４２３に記載された方法のように、結合親和性クロマトグラフィーにより血漿または血液由来の溶液から精製することができ、または組換え的に製造することができる。
【００９１】
「医薬組成物」及び「医薬」の用語は、本明細書中において交換可能に使用される。医薬は、必然的に、プラスミノーゲンまたはその変異体の医薬組成物を含む。本発明の特定の態様において、前記医薬は更に、医薬組成物を投与するための装置を含む。前記組成物は、粉末の形態であっても溶液の形態であってもよい。組成物が粉末形態である実施形態では、好ましくは、注射または局所投与の前に再構成する準備ができている。
【００９２】
本発明の一実施形態において、前記医薬組成物に含まれる前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体は、約７０％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、または約９８％以上の純度を有する。本発明の別の実施形態において、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体は、プラスミノーゲンまたはその変異体以外のタンパク質の総量が、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、または約２％未満である医薬組成物中に含まれている。
【００９３】
本発明の一実施形態において、前記プラスミノーゲンまたはその変異体を含む医薬は、追加のタンパク質（即ち、プラスミノーゲンまたはその変異体に加えて）を含まないかまたは実質的に含まない。本発明の一実施形態において、前記組成物はアルブミンを含まないか、または実質的に含まない。本発明の一実施形態において、前記組成物または医薬は、アプロチニンを含まないか、または実質的に含まないか、または１０ＫＩＵ／ｍＬ以下のアプロチニンしか含まない。本発明の一実施形態では、前記組成物または医薬は、ウシアプロチニンを含まないか、または実質的に含まないか、またはウシアプロチニンを１０ＫＩＵ／ｍＬ以下しか含まない。本発明の一実施形態において、前記組成物または医薬は、合成アプロチニンを含まないか、または実質的に含まないか、または１０ＫＩＵ／ｍＬ以下の合成アプロチニンしか含まない。本発明の一実施形態において、前記組成物は、トリプシンインヒビターを含まないか、または実質的に含まない。本発明の一実施形態において、前記組成物は、セリンプロテアーゼ阻害剤を含まないか、または実質的に含まない。本発明の一実施形態において、前記組成物はプラスミンを含まず、または実質的にプラスミンを含まない。本発明の一実施形態において、前記組成物は界面活性剤を実質的に含まない、または含まない、即ち、界面活性剤の濃度は０．０１ｍＭ未満である。
【００９４】
本明細書で使用する「皮下」の用語は、皮膚の下または皮下組織への投与または送達を意味し、「真皮下」の用語と均等である。本明細書で使用される「皮内」という用語は、皮膚内の投与または送達を指し、「真皮内」の用語と均等である。本明細書で使用される「筋肉内」の用語は、筋肉組織内の投与または送達を言う。本明細書で使用される「局部的」の用語は、皮膚または創傷への投与または送達を言う。
【００９５】
本明細書で使用する「毎日」の用語は、１日１回、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量の投与を指す。好ましくは、この投与は、必要ではないが、１日のほぼ同じ時間に実施される。時折は、毎日投与の意図された意味から逸脱することなく、投与期間中１〜２日間投与を省略することができる。この文脈において、「時折」との用語は、週に１〜２回を意味する。
【００９６】
本明細書で使用される「促進する」との用語は、刺激、加速、及び／または改善を言う。本明細書で使用される「治癒」の用語は、復調、修復、治療、または回復を言う。本明細書で使用する「創傷」の用語は、開放創及び非開放創を含むものである。解放創とは、限定するものではないが、病変、切開、裂傷、切開、潰瘍、損傷、または皮膚の完全性の崩壊を含む皮膚の開口部をいう。非開放創とは、皮膚は開口していないが、皮膚組織が異常な色、高温及び／または異常な硬度（周囲よりも硬くまたは柔らかい）を有し、皮膚下の組織は炎症、正常よりも高い感度、及び／または腫脹によって特徴付けられる創傷をいう。
【００９７】
創傷治癒を促進するには、１日当たり２ｍｇの低反復用量で十分であることが見出されている。用量を３ｍｇ〜３０ｍｇ、好ましくは４ｍｇ、５ｍｇまたは１０ｍｇに増加させることにより、創傷治癒の促進を増加させることができる。実施例では種々の用量のプラスミノーゲンが投与されており、一定量を超えると修復機序が飽和して見え、創傷は更に速くは治癒しないことが指摘されている。従って、一実施形態において、用量当たりに投与されるプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の範囲は、約２ｍｇ〜約３０ｍｇである。別の実施形態において、用量当たり投与されるプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量の範囲は、約２ｍｇ〜約２０ｍｇである。更なる実施形態において、前記用量は約２ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇまたは約３０ｍｇである。別の実施形態において、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は、約１０ｍｇである。
【００９８】
前記投与の頻度は、１日２回〜１週間に１回、好ましくは１日１回〜１週間に１回で変化し、より好ましくは１日に１回、２日に１回、３日毎、２または３日毎、週２回、または週に１回である。一実施形態において、投与の頻度は２日毎または３日毎である。一実施形態において、投与頻度は１日１回である。
【００９９】
一実施形態において、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は、以下の等式を用いて、創傷サイズ（面積）との関係で決定される：
Ｘ＝（ｍ）Ｙ
ここで、
Ｘ＝プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量（ｍｇ）；
Ｙ＝創傷面積（ｃｍ２）：及び
ｍ＝２．０〜３．０、一実施形態では２．２〜２．８、更なる実施形態では２．４〜２．６である。
【０１００】
一実施形態において、ｍ＝２．５であり、前記等式は、
Ｘ＝（２．５）Ｙ
である。
【０１０１】
別の態様において、本発明は、被験体において創傷を治療するための方法であって、（ｉ）創傷のサイズを決定することと、（ｉｉ）上記式の１つを用いて被験体に投与すべきプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量を決定し、前記用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を１日２回〜週１回の頻度で局所投与することを含む方法を提供する。
【０１０２】
一実施形態において、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量の決定は、最初の創傷領域、即ち、治療前に測定された創傷領域に基づく。「治療」とは、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量の投与（例えば、複数回投与または反復投与）を示す。一実施形態において、投与されるプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は、治療期間の全体を通して、即ち、全ての反復投与について同じままである。別の実施形態において、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は、治療の過程で、「治療における創傷面積」の関数において再決定される。創傷面積の大きさが治療中に減少すると予想されるので、投与されるプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は創傷面積の減少に関連して治療過程の間に低下し、該用量が上記式を使用して決定され得る実施形態が存在する。用量の再評価は、治療中に１回または治療中に数回行うことができる。創傷治癒を促進するために、治療過程中に投与されるプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量を増加させる別の実施形態がある。
【０１０３】
別の実施形態において、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は、以下のチャートを用いて、創傷サイズ（面積）との関係で決定することができる：
2018534306.tif 000002
【０１０４】
一実施形態において、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は、以下の等式を用いて創傷周囲長との関係で決定することができる：
Ｘ＝（ｎ）Ｚ
ここで、
Ｘ＝プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体（ｍｇ）の用量、
Ｚ＝創傷周囲長（ｃｍ）、及び
ｎ＝１．０〜２．０、一実施形態では１．２〜１．８、更なる実施形態では１．４〜１．６である。
【０１０５】
一実施形態において、ｎ＝１．５であり、また前記等式は
Ｘ＝（１．５）Ｚ
である。
【０１０６】
一実施形態において、前記プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量（各用量）の投与頻度は、創傷サイズ（面積）に関連して変化し得る。例えば、創傷サイズが５０％を超えて減少した場合、用量はより少ない頻度で投与され得る。例えば、最初の投与頻度が毎日であり、創傷サイズがその初期サイズの５０％よりも小さくなると、頻度は２日毎へと減少させることができる。頻度を更に週１回に減らすことができる。この頻度は、治療中に１回または数回再評価することができる。
【０１０７】
最適には、「治療の持続時間」は、被験体が創傷治癒を促進する治療を受ける必要があると同定されたときに開始し、創傷が閉鎖されるときに終了する。しかし、様々な理由から、治療を必要とする被験体が同定されたときに直ちに治療が開始されないことがある。種々の理由により、創傷が閉鎖される前に治療が停止されることがある。しかし、一部の症例（修復機構が損なわれている患者やプラスミノーゲン欠乏の患者など）では、創傷が閉鎖されるまでは治療を行うことが望ましい場合がある。本発明の一実施形態によれば、創傷がそれ自身で治癒し始め、開口部のサイズが縮小し始めると、治療は停止される。場合によっては、決定的な治癒を保証するために、創傷閉鎖を超えて治療期間を延長することが望ましい場合がある。好ましくは、治療期間は少なくとも３日間、少なくとも１１日間、少なくとも１４日間、少なくとも１８日間、少なくとも２１日間、少なくとも２２日間、少なくとも２８日間、少なくとも３０日間、少なくとも３２日間、または少なくとも５２日間である。好ましい実施形態において、治療期間は少なくとも２１日間である。別の好ましい実施形態では、発赤状態の低下及び／または有意な創傷サイズの減少のように、創傷状態の有意な改善が観察されたときに治療期間は終了する。有意な創傷サイズの減少は、初期創傷サイズ（治療前）と比較して、７５％、５０％、４０％、３０％、２０％、または１０％の創傷サイズとして定義される。一実施形態において、治療期間は、創傷サイズが少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも９０％または１００％減少したときに終了する。１００％の創傷サイズの減少は、創傷が完全に治癒したことを意味する。完全な治癒とは、創傷が解放創の場合には閉鎖されるか、または非開放創（例えばそのような病巣）の場合には消失することを意味する。
【０１０８】
一実施形態において、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量は、医薬組成物中に存在する。前記組成物は、粉末または液体溶液の形態であり得る。前記溶液に含まれるプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体は、好ましくは約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの濃度、より好ましくは約１ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬまたは約２０ｍｇ／ｍＬの濃度である。好ましい実施形態において、前記溶液中に含まれるプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の量は、約１０ｍｇ／ｍＬの濃度である。
【０１０９】
本発明の方法、使用及び医薬を用いて治療される創傷は、急性創傷または慢性創傷であり得る。慢性創傷とは、治癒していない状態で長時間放置されている、少なくとも３ヶ月間治癒していないように見える、または少なくとも３ヶ月間放置されたままである、または治癒の特徴を示さない、または膿、腐敗または壊疽の存在を示す創傷を定義することを意図している。急性創傷とは、慢性創傷ではない創傷を定義することを意図している。本発明の方法、使用及び医薬で治療されることが意図される創傷の例には、限定するものではないが、糖尿病性足潰瘍、糖尿病性創傷、褥瘡、圧迫性潰瘍、血管創傷、静脈脚潰瘍、動脈脚部潰瘍、鼓膜穿孔、熱傷創、切開創、病変、木質結膜炎創傷が含まれる。
【０１１０】
好ましい実施形態において、前記創傷は、局所もしくは粘膜創傷、または被験体の表皮、真皮または粘膜の創傷である。一実施形態において、前記被験体は哺乳動物である。哺乳動物との用語には、動物またはヒトが含まれる。
【０１１１】
一実施形態において、本発明の医薬は、治療の全期間に亘って必要な、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の全ての用量を含む。別の実施形態では、前記医薬の投与形態は１回投与用であり、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の１用量を含む。この実施形態において、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を注射するための装置は、使い捨て可能であり得る。前記医薬の剤形が１回使用のためのものである実施形態において、１回の投与のためのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量が、好ましくは、前記装置に既に挿入されている。例えば、前記医薬は、単回投与量（即ち、約２ｍｇ〜約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体）を含有する使い捨て注射器の形態であることができる。別の例において、前記医薬は、それぞれが単回用量（すなわち、約２ｍｇ〜約３０ｍｇのプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体）を含む幾つかの予め充填された使い捨て注射器の形態であり得る。本発明の一実施形態によれば、前記医薬は、好ましくは、治療の全期間または治療期間の一部をカバーするように、幾つかの予め充填された使い捨て注射器を含み、好ましくは、少なくとも２１個の予め充填された使い捨て注射器、または少なくとも２８個の予め充填された使い捨て注射器を含む。前記医薬が、治療期間の一部をカバーするのに必要な用量をカバーする医薬を含むとき、前記医薬は、創傷が完全に治癒するまで、または創傷サイズがその初期サイズの５０％を超えて縮小するまで更新することができる。別の実施形態によれば、前記医薬は、その中に複数の用量を含む１つの容器の形態である。更なる実施形態によれば、前記医薬は更に、治療の全期間または治療の全期間の一部について、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を投与することができるように、少なくとも２１個の使い捨て注射器を含む。別の実施形態において、注射器（使い捨て可能または使い捨て不可）は、医者、看護師によって提供されるか、または薬剤とは別個に購入される。一実施形態において、前記装置は複数回の注射に適合したペンである。別の実施形態において、前記装置は複数回の注射に適合された無針ペンである。前記注射器（使い捨て可能または使い捨て不可）、前記針、前記ペン、及び前記無針ペンは、皮内、皮下または筋肉内での送達のために適合される。
【０１１２】
別の実施形態によれば、前記医薬は、複数用量のプラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体を含む１つの容器の形態であり、前記用量は、溶液の形態であるか、または溶液への再構成の準備ができた粉末の形態である。この粉末は、凍結乾燥プロセスの結果であることができ、または他の手段によって得ることができる。
【０１１３】
「医薬組成物」の用語は、医薬的、医学的または治療的目的のための組成物を言う。医薬組成物は、一般に、１以上の薬学的に許容可能な担体または賦形剤を含み、所望の純度を有する活性成分を１以上の任意の薬学的に許容可能な担体、賦形剤及び／または安定剤と混合することにより、医薬技術において周知の方法で調製すればよい。補足の活性化合物もまた、この組成物に組み込むことができる。担体／賦形剤は、例えば皮下投与または皮内投与のために適することができる（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ｂｙ  Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，２００３，２１ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ参照）。
【０１１４】
本明細書中で使用される場合、「賦形剤」は当該分野において通常の意味を有し、有効成分（薬物）自体ではない皮内、皮下、真皮内または局所投与形態の任意の成分である。賦形剤には、例えば、張性調整剤、安定化剤、増量剤、防腐剤などが含まれる。安定化剤は、（ｉ）アミノ酸、（ｉｉ）アミノ酸塩、（ｉｉ）アミノ酸類似体、または（ｉｖ）それらの任意の混合物を含むことができる。本明細書で使用される「薬学的に許容可能な賦形剤」は、活性成分の生物学的活性の有効性を妨害せず、且つ被験体に対して毒性でない何れかの賦形剤、即ち、ある種の賦形剤、及び／または被験体に有害でない量で使用されるための何れかの賦形剤を言う。賦形剤は当該分野で周知であり、本システムはこれらの点において限定されない。
【０１１５】
本発明の組成物中に処方されるプラスミノーゲンは、幾つかの供給源から得ることができる。これは、例えば組換え合成によって得ることができ、または血液、血漿または血液由来の溶液から抽出／精製することができる。プラスミノーゲンは、コーン分画または沈殿によって血液または血漿から抽出することができる。プラスミノーゲンは、血漿または血液由来の溶液から、国際公開第２００６／１２０４２３号に記載された方法のような結合親和性クロマトグラフィーによって精製することができる。プラスミノーゲンの変異体には、アミノ酸配列の任意の修飾またはそれに対する基の任意の付加、或いはアミノ酸またはアミノ酸配列の任意の付加が含まれるが、これらに限定されない。プラスミノーゲンの断片には、限定されるものではないが、プラスミノーゲン活性が維持されるか、または部分的に維持される限り、それに対するアミノ酸またはアミノ酸配列の任意の欠失が含まれる。
【０１１６】
本明細書で使用する「約」の用語は、その通常の意味を有する。「約」の用語は、ある値が、その値を決定するために使用される装置または方法についての誤差の固有の変動を含むこと、または記載された値に近い値（例えば記載された値（または値の範囲）の１０％または５％）を含むことを示すために使用される。
【０１１７】
「被験体」の用語には、プラスミノーゲン、その変異体またはその断片の投与から利益を得ることができる生物体が含まれる。「被験体」の用語には、哺乳動物、ペットまたは鳥などの動物が含まれる。好ましくは、被験体は哺乳動物またはヒトである。より好ましくは、被験体はヒトである。最も好ましくは、被験体は、急性創傷または慢性創傷を含む創傷を有するヒト患者である。また、最も好ましくは、被験体は、慢性創傷を有するヒト患者である。一実施形態において、哺乳動物は高等哺乳動物である。高等哺乳類の例には、非ヒト霊長類、ウマ、ウシ、ゾウが含まれるが、これらに限定されない。ペットの例としては、限定されるものではないが、イヌ、ネコ、ウサギ、ウマ、ポニーが含まれる。
【０１１８】
本明細書中で使用される場合、「予防する」または「予防」とは、疾患または障害を得るリスクの可能性（またはそれに対する感受性）を少なくとも低減すること（即ち、疾患に曝露される可能性があるか、または疾患の素因があるかもしれないが、まだその疾患の症状を経験または表していない患者において、前記疾患の少なくとも１つの臨床症状を発症させないこと）を言う。そのような患者を同定するための生物学的及び生理学的パラメータは、本明細書において提供され、また医師には周知である。
【０１１９】
被験体の「治療」または「治療する」の用語は、被験体に対する本発明の組成物の適用または投与（または被験体の組織または器官への本発明の組成物の適用または投与）を含み、疾患または状態、疾患または状態の症状、または疾患または状態のリスク（または感受性）を遅延させ、安定化し、治癒させ、回復させ、緩和し、軽減し、改変し、改善し、悪化を軽減し、緩和し、改善し、または影響を与えることを目的とする。「治療する」の用語は、傷害、病理または状態の治療または改善における成功の任意の指標を意味し、改善、寛解、悪化の速度の低下、疾患の重症度軽減、症状の安定化、減衰、または傷害、病理もしくは状態を被験体が許容し易くすること、退化または衰弱の速度を遅くすること、退化の最終点を低衰弱性にすること、または被験体の身体的または精神的健康を改善することのような、客観的または主観的パラメータが含まれる。幾つかの実施形態において、「治療する」の用語は、追加の治療が必要とされる前に、被験体の余命を増大及び／または遅延させることを含むことができる。
【０１２０】
本明細書中で使用する「治療的有効量」の用語は、特定の障害、疾患または状態を治療または予防するために被験体に投与するときに、そのような障害、疾患または状態の治療または予防を行うのに十分である化合物の量を意味する。本明細書で使用される場合、用語「治療的有効量」は更に、創傷を治癒するのに有効なプラスミノーゲン、その変異体またはその断片の量を意味する。
【０１２１】
本発明によれば、プラスミノーゲンまたはその生物学的に活性な変異体の用量（または量）は、皮下、皮内または筋肉内に投与される。一実施形態において、前記用量または量は皮下投与される。別の実施形態において、前記用量または量は皮内に投与される。本明細書中で使用される場合、「皮内」及び「真皮内」の用語は同じ意味であり、互換可能に使用される。別の実施形態において、前記用量または量は筋肉内に投与される。
【０１２２】
「製剤」及び「組成物」及び「調製物」の用語は、本明細書中で代替的に使用され得るものであり、同じものを指定することを意図することに留意されたい。
【０１２３】
本明細書中における値の範囲の記載は、本明細書中に別段の指示がない限り、範囲内の各々別々の値を個別に記載する簡略な方法として役立つことを意図するにすぎず、各々別々の値は、ここに個別に列挙されているかの如く本明細書に組み込まれる。当該範囲内の値の全てのサブセットもまた、ここに個別に列挙されているかの如く本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【０１２４】
以下の実施例は、本発明の実施を更に説明するものであるが、本発明を限定することを意図するものではない。以下の全ての実施例において、注射は、皮内投与または皮下投与用の０．３ｍｍの針を有する１ｍＬの注射器を用いて実施した。プラスミノーゲン用量は、幾つかの注射において、創傷周囲において創傷から約０．５ｃｍに配分された。
【０１２５】
実施例１：熱傷創の治癒
両脚に火傷を負った３４歳の健康な女性は、１０年間に亘って７回の皮膚組織拡張を受けた。既知の従来の治療では治癒がなんら進行せず、右膝の遠位領域における創傷は慢性創傷と看做される。
【０１２６】
プラスミノーゲン治療は、９ヶ月の期間中、２２用量の４ｍｇプラスミノーゲンからなっていた。９ヶ月の治療後、創傷サイズは初期サイズの８８％減少した。プラスミノーゲン治療前後の写真を図３Ａ及び３Ｂにそれぞれ示す。
【０１２７】
実施例２：切開創傷の治癒
６２歳の男性は、右手の外側に鋸により生じた創傷を有していた。創傷は修正手術及び縫合で治療されたが、それにもかかわらず深部感染が生じた。創傷郭清の後に創傷を伝統的な局所治療で２ヶ月間治療したが、何ら改善はなかった。
【０１２８】
プラスミノーゲン治療は、毎日４ｍｇのプラスミノーゲンによる３日間の治療からなっていた。治療開始から１０日後に創傷は完全に治癒し、男性は仕事に復帰した。プラスミノーゲン治療の前、及び治療開始の１０日後における創傷の写真を図４Ａ及び４Ｂにそれぞれ示す。
【０１２９】
実施例３：足の潰瘍の治癒
アテローム性動脈硬化症及び重度の足神経障害を有する非糖尿病の７７歳の男性は、３年間、各足に慢性足潰瘍を患っていた。左足の最初のつま先で、プラスミノーゲン治療の１．５年前に遠位の部分的切断を行った。抗生物質治療を施したが、創傷は開いたままであった。患者は、両側の膝下切断が、その痛みを取り除くための解決策として評価されるまでに至った。
【０１３０】
左足潰瘍のプラスミノーゲン治療は、５６日の期間中の２１のプラスミノーゲン用量からなっていた。右足潰瘍のプラスミノーゲン治療は、８４日間の３２のプラスミノーゲン用量からなっていた。最初の第８回の用量は２ｍｇのプラスミノーゲンを含み、１日１回または２日に１回注射した。その後の用量は５ｍｇのプラスミノーゲンを含み、２日毎または３日毎に注射した。プラスミノーゲン治療の後、足潰瘍は完全に治癒し、患者は彼の足前部で歩行及びバランスをとることができた。プラスミノーゲン治療の副作用は、患者によって観察または報告されなかった。
【０１３１】
プラスミノーゲン治療の前、及び治療後の足潰瘍の写真を、図５Ａ及び５Ｂにそれぞれ示す。図５Ｃは、治療終了の約２ヶ月後に起立したときの患者の足を示す。図５Ｄ、５Ｅ、５Ｆ、及び５Ｇは、それぞれプラスミノーゲン治療の第０日（前処置）、第8日（２ｍｇ）、第３０日（５ｍｇ）及び第５６日（５ｍｇ）のプラスミノーゲン治療における左足を示している。図５Ｈ、５Ｉ、５Ｊ、５Ｋ、５Ｌ及び５Ｍは、それぞれプラスミノーゲン治療の第０日（前処置）、第8日（２ｍｇ）、第３０日（５ｍｇ）、第５７日（５ｍｇ）、第８４日（５ｍｇ）、及び第９４日（治療無し）における右足を示している。
【０１３２】
実施例４：術後創傷の治癒
動脈硬化症に罹患している８０歳の女性は、冠状動脈バイパスを行うために、脚から切取られた静脈グラフトを有していた。バイパス術の３ヵ月後、左右の脚に未治癒の術後創傷が残った。この創傷は、痛みを伴う創傷郭清術で治療されたが、改善しなかった。患者は両脚に両側神経障害を抱えていた。
【０１３３】
右脚部創傷のプラスミノーゲン治療は、５６日の期間に５ｍｇのプラスミノーゲンを２０回投与することからなり、最初の１３回の用量は、治療の最初の３３日以内に注射された。プラスミノーゲンの投与は２日毎または３日毎に実施した。右脚の創傷の完全治癒は、５６日間の治療後に観察された。プラスミノーゲン治療の第０日（前処置）、第３３日及び第５６日の右脚創傷の写真をそれぞれ図６Ａ、６Ｂ及び６Ｃに示す。
【０１３４】
左脚創傷のプラスミノーゲン治療は、１２９日の期間中の４６用量の５ｍｇプラスミノーゲンから成り、最初の１３用量は最初の３３日の治療の間に注射され、続く１３回の投与は２９日の期間の間に注射され、その後の１１回の投与は、３１日間の別の期間に注射され、その後の９回の投与は３６日の最後の期間内に注射された。プラスミノーゲンの投与頻度は、最初は２日毎または３日毎であり、４日毎にまで延長された。治療の１２９日後に左脚創傷の完全な治癒が観察された。プラスミノーゲン治療の第０日（前処置）、第３３日、第６２日、第９３日及び第１２９日における左脚の創傷写真を、図６Ｄ、６Ｅ、６Ｆ、６Ｇ及び６Ｈにそれぞれ示す。第０日〜第１２９日までの左脚創傷のサイズのパーセンテージを、図６Iに示したグラフにおいて報告する。
【０１３５】
実施例５：外傷創傷の治療
インスリン依存性１型真性糖尿病を有する４０歳の男性は、彼の右足を踏んだ牛によって負傷させられた。２年間に亘り、傷口は固定靴、つま先の部分的な遠位切断、深部感染排液、静脈内抗生物質治療及び固定化を含む様々なプロセスで治療されていた。
【０１３６】
プラスミノーゲン治療は、５２日の期間で２３用量の５ｍｇプラスミノーゲンからなり、最初の１０用量は治療の最初の２４日間に注射された。プラスミノーゲンの投与は２〜３日毎に実施した。治療の開始時に、創傷に付随する悪臭の減少が観察された。第２４日に、患者は再び働き始めた。第５９日に、創傷は図７Ｄに示すように完全に閉鎖した。
【０１３７】
プラスミノーゲン治療の第０日（前処置）、第３０日、第５４日及び第５９日の創傷の写真を図７Ａ、７Ｂ、７Ｃ及び７Ｄにそれぞれ示す。
【０１３８】
実施例６：慢性創傷の治療
５８歳の男性は左足の下に慢性創傷を有し、これは１５年前にガラスの上を歩くことによって生じたものである。多くの抗生物質治療が施されたが、これは創傷治癒には効果的でなかった。この１５年間、彼は足を使うのが難しかった。
【０１３９】
プラスミノーゲン治療は、２８週の期間に亘り、週に１回の５ｍｇ用量のプラスミノーゲン投与からなっていた。２８週間後、組織の腫脹が減少し、創傷サイズはその初期サイズの３２％減少した。各用量の投与中及び投与後に負の副作用は観察されなかった。
【０１４０】
プラスミノーゲン治療の第０日（前処置）、第９週及び第２８週における創傷の写真を、それぞれ図８Ａ、８Ｂ及び８Ｃに示す。図８Ｄに示すグラフにおいて、第０日（１００％）、第９週（７４％）及び第２８週（６２％）における創傷サイズのパーセンテージを報告する。
【０１４１】
実施例７：慢性創傷の治癒
６６歳の女性は、９年間に亘り、左足横の柔軟な領域上に慢性創傷を有していた。この患者は、複数の既知の慣用的な創傷治療を受けたが改善しなかった。
【０１４２】
プラスミノーゲン治療は、１０ｍｇのプラスミノーゲンの反復投与からなっていた。最初の２週間は毎日投与し、次に週に３回、その後は週に１回投与した。治療の２０カ月後に、創傷サイズは初期サイズの９１％縮小し、患者の活力及び社会的生活は大幅に改善された。
【０１４３】
プラスミノーゲン治療の第０日（前処置）、第２９週、第４５週、第６４週及び第８８週における創傷の写真を、それぞれ図９Ａ、９Ｂ、９Ｃ、９Ｄ及び９Ｅに示す。従来の創傷治療及びプラスミノーゲン治療の際の創傷サイズのパーセンテージを報告するグラフを、図９Ｆに示す。
【０１４４】
実施例８：慢性創傷の治癒
７１歳の男性は、アキレス腱の領域に３年間に亘って創傷を有していた。腱には脈管炎があった。この患者はまた、ｇｏｉｔ、動脈硬化、緊張亢進及び肥満のような幾つかの慢性疾患の影響を受けたが、糖尿病ではなかった。創傷は、Ｅｎｉｂｒｅｌ（商標）による静脈内抗生物質治療を含む、複数の既知の慣用的介入で治療されていた。Ｅｎｉｂｒｅｌ（商標）治療は、改善の欠如のために３サイクル後に停止された。創傷は重度に感染していた。創傷の原因が血管起源であることが疑われたので、免疫抑制治療を更に施行した。
【０１４５】
プラスミノーゲン治療は、１４日の期間に亘る１日用量１０ｍｇのプラスミノーゲンからなっていた。その期間の後、創傷の状態は改善し、プラスミノーゲン治療は１４日間で停止された。このプラスミノーゲン治療の中断は創傷を悪化させ、創傷は初期状態に戻った。従って、プラスミノーゲン治療は同じ用法、即ち、１０ｍｇの１日用量で再開された。数ヶ月のプラスミノーゲン治療の後、創傷状態は有意に改善され、免疫抑制薬は停止された。１５ヶ月の治療後、創傷サイズは６０％減少した。
【０１４６】
プラスミノーゲン治療の第０日（前処置）、第１０日、第３月、第５．５月、第１１月、第１２月、第１４月及び第１５月の創傷の写真を、それぞれ図１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃ、１０Ｄ、１０Ｅ、１０Ｆ、１０Ｇ、１０Ｈ及び１０Iに示す。プラスミノーゲン治療（第１４日と第２８日の間での中断を含む）の際の創傷サイズのパーセンテージを報告するグラフを、図１０Ｊに示す。
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【０１４７】
見出しは参照のため、及び特定のセクションの場所を見付ける補助をするために本明細書に含まれている。これらの見出しは、そこに記載された概念の範囲を限定することを意図したものではなく、またこれらの概念は、明細書全体を通じて他の部分にも適用可能である。従って、本発明は、ここに示された実施形態に限定されることを意図するものではなく、本明細書で開示された原理及び新規な特徴と矛盾しない最も広い範囲と一致すべきである。
【０１４８】
単数形の「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈上他に明確に指示されない限り、対応する複数の参照を含むものである。
【０１４９】
別途指示されない限り、明細書及び特許請求の範囲で使用される成分の量、反応条件、濃度、特性などを表す全ての数字は、全ての場合において「約」の用語で修飾されるものとして理解されるべきである。各数値パラメータは、最低限、報告された有効数字の数及び通常の丸め技法を適用することによって少なくとも解釈されるべきである。従って、反対に指示されない限り、本明細書及び添付の特許請求の範囲に記載される数値パラメータは、得ようとする特性に応じて変化し得る近似値である。実施形態の広い範囲を示す数値範囲及びパラメータが近似値であるにもかかわらず、特定の実施例に示される数値は可能な限り正確に報告される。しかしながら、本質的に、数値は実験の変動、試験測定、統計分析等から生じる一定の誤差を含んでいる。
【０１５０】
本明細書に記載された実施例及び実施形態は説明目的のみのためであり、その観点において、当業者には種々の修正または変更が示唆され、それらは本発明及び添付の特許請求の範囲に含まれることが理解される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５−１】
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【図５−２】
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【図６−１】
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【図６−２】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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