(57)【要約】  本発明は、新規抗線維素溶解化合物、それらの調製方法、それらの医薬組成物および獣医用組成物、ならびに医療、特に出血の処置のためのそれらの使用を提供する。
2018502144.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩＩＩ：
Ｒ１−ＣＨ２−Ｘ１−Ｒ５  （ＩＩＩ）
［式中、
Ｒ１は、−ＮＨ２、−ＮＨＲ６、−ＮＲ６Ｒ７、−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７Ｒ８または−Ｓ＋Ｒ９Ｒ１０であり、
Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、−ＳＯ２Ｒ１３、−Ｐ（Ｏ）Ｒ１４Ｒ１５、ニトロまたはニトロソであり、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルもしくはハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成し、
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、独立に、ヒドロキシル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、ならびに
Ｘ１は、ｔｒａｎｓシクロヘキサン−１，４−ジイルであり、
但し、Ｒ２がＣＯＯＨである場合、Ｒ１はＮＨ２ではない］
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
式ＩＩＩａ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−Ｘ−Ｒ５  （ＩＩＩａ）
の請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
式ＩＩＩｂ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−Ｘ１−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２  （ＩＩＩｂ）
の請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ１２が、ヒドロキシルまたは−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ１２が、ヒドロキシルである、請求項４に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ９およびＲ１０が、独立に、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルもしくはハロ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルである、請求項１から４のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ９およびＲ１０が、両方ともメチルである、請求項６に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規抗線維素溶解化合物、それらの調製方法、それらの医薬組成物、および医療、特に出血の処置のためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
手術および主要な組織損傷の処置における主要な目標は、出血を回避するかまたは最小限にして、線維素溶解酵素によって容易に溶解されない安定かつ安全な止血栓の形成を確保することである。このような栓または血栓が迅速かつ効果的に形成されることを確保することが重要であり、これを止血の結果が望ましくないものとなることを回避する程度に制限すべきである。大手術において、および月経過多症などの病理に伴う出血に応じて、線維素溶解を防ぎ、外傷に伴う失血を低減させるために、抗線維素溶解剤が広く使用されている。
【０００３】
現在、２種の合成リジン類似体である、イプシロン−アミノカプロン酸（ＥＡＣＡ）およびトラネキサム酸（ＴＸＡ）は、出血を制御するために広く商業使用されている唯一の抗線維素溶解薬である。これらの薬剤は、プラスミノーゲンの、安定な止血血栓の形成に寄与する血漿タンパク質であるフィブリンおよびフィブリノーゲンを迅速に分解するために作用するタンパク質分解酵素である、プラスミンへの活性化を競合的に阻害するものである。プラスミノーゲンおよびプラスミンはまた、他の因子の関与を伴ってまたは伴わずに、創傷治癒、組織再生（ｔｉｓｓｕｅ  ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）および組織再生（ｔｉｓｓｕｅ  ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ）とは異なる、さらなる特異的な生理学的機能を有する。
【０００４】
ＥＡＣＡおよびＴＸＡは、プラスミノーゲン、プラスミンに、およびある特定の共通の構造的特徴を共有する多数の血漿タンパク質に結合することが知られている。これら全てのタンパク質に共通の構造的特徴は、「クリングル」として知られている。クリングルは、非常に相同な配列のおよそ８０から１００個のアミノ酸からなるタンパク質鎖であり、３つのジスルフィド結合により一緒に維持されており、全体として、これらを含有する任意の未変性のタンパク質のこれらの構成成分に特徴的な３次元構造を与える。典型的には、クリングルを含有するタンパク質は、フィブリン（フィブリノーゲン）ならびにフィブリン形成系および分解系といくつかの機能的な関連性を有する。さらに、通常の代謝で生じ、２種以上のクリングルを含有するプラスミン（プラスミノーゲン）の生理学的に適切なタンパク質分解フラグメントは、それらが、血管成長の阻害剤として機能するため、アンギオスタチンとして知られている。
【０００５】
その構造が解明されるかなり前に、プラスミノーゲンとプラスミンは共に単鎖オメガアミノカルボン酸に結合し、５、６もしくは７アミノペンタン酸、ヘキサン酸またはヘプタン酸は、プラスミン（プラスミノーゲン）に結合するまたはプラスミン（プラスミノーゲン）の機能に影響を与えるこれらの能力において最適であることが知られていた。次いで、詳細な構造−活性研究により、最初にＥＡＣＡ、その後にＴＸＡが、プラスミン介在性線維素溶解を緩和させるために最適な医薬品として同定された。
【０００６】
アミノカプロン酸（６−アミノヘキサン酸）は、特定の残基に結合する酵素に対する有効な阻害剤またはリガンドとなる、アミノ酸リジンの誘導体かつ類似体である。このような酵素には、線維素溶解を担う酵素である、プラスミンのようなタンパク質分解酵素が含まれる。この理由のために、アミノカプロン酸は、ある特定の出血障害の処置に有効であり、経口的にまたは静脈内に与えることができる。抗線維素溶解剤として、アミノカプロン酸は、血栓の破壊を阻止することによって働く。アミノカプロン酸は、通常より速く血栓を溶解させ、血友病、再生不良性貧血、肺がん、前立腺がん、胃がんおよび子宮頸がん、肝硬変、ならびに手術のある特定の合併症を含む重篤な出血を引き起こす医学的状態を伴う患者において、重篤な出血を予防し処置するために有用である。
【０００７】
アミノカプロン酸は、線維素溶解が出血に寄与する場合に、止血を増強することに関してＦＤＡが承認している。生命が脅かされる状況では、適切な血液製剤の輸血および他の応急処置が必要とされる場合がある。線維素溶解性出血は、心臓手術（心臓バイパス処置を伴うまたは伴わない）および門脈大静脈シャント術後の術後合併症、無巨核球性血小板減少症（再生不良性貧血に付随する）などの血液障害、急性かつ生命を脅かす胎盤早期剥離、肝硬変、ならびに前立腺、肺、胃、および子宮頸部の癌などの新生物疾患に頻繁に関連する可能性がある。通常、正常な生理現象である尿の線維素溶解作用は、術後の血尿（前立腺切除術および腎摘出術後）または非外科的な血尿（泌尿生殖器系の多発生嚢胞疾患または新生物疾患に付随する）を伴う過剰な尿路の線維素溶解性出血に寄与し得る。局所ゲル（ＣＡＰＲＯＧＥＬ）は、目の外傷性前房出血の処置に関してＦＤＡに承認されている。
【０００８】
トラネキサム酸［ｔｒａｎｓ−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸］は、アミノ酸リジンの別の合成類似体である。トラネキサム酸は、手術中および種々の医学的状態または障害において過剰な失血を処置または予防するために使用される（止血を助ける）。トラネキサム酸は、血栓のフレームワークを形成するタンパク質である、フィブリンの分解を担う分子である、プラスミノーゲンとプラスミンの両方の特異的部位に結合することによって、プラスミノーゲンのプラスミンへの活性化を阻害する抗線維素溶解薬である。トラネキサム酸は、アミノカプロン酸のおよそ８倍の抗線維素溶解活性を有し、心臓、肝臓、血管および大規模な整形外科的処置などの失血の高いリスクを伴う手術で頻繁に使用される。
【０００９】
トラネキサム酸５００ｍｇ錠は、線維素溶解または線維素原溶解が増大したものにおいて、出血または出血のリスクに対しての短期使用がＦＤＡに承認されている。局所的線維素溶解は、前立腺切除術および膀胱の手術、月経過多症、鼻血、子宮膣部円錐切除術、外傷性前房出血、血友病患者の抜歯の管理、ならびに遺伝性血管神経性浮腫の条件で生じる。ＣＹＫＬＯＫＡＰＲＯＮ注射は、短期使用（２から８日）で血友病の患者に必要とされ、出血を低減させまたは予防し、抜歯中および抜歯後の補充療法に対する必要性を低減させる。
【００１０】
他の抗線維素溶解化合物は、以下の特許および特許出願に記載されている。
【００１１】
Ｍｅｒｃｋの米国特許第３，５２６，６５７号には、「抗線維素溶解特性を有し、患者の病的な線維素溶解状態から生じる特定の出血状態および他の障害を軽減することができる化合物、４−アミノメチルビシクロ［２．２．２］オクタ−２−エン−１−カルボン酸」が開示されている。
【００１２】
Ｍｅｒｃｋの米国特許第３，６３４，４９９号には、「化合物４−アミノメチルビシクロ−［２．２．１］−ヘプタン  １−カルボン酸、４−アミノメチルビシクロ−［２．２．２］−オクタン−１−カルボン酸、５−アミノメチルビシクロ−［３．３．２］−ノナン−１−カルボン酸ならびに対応する２，５および６，８−ジケト化合物は、それぞれ、抗線維素溶解化合物において有用である」ことが開示されている。
【００１３】
Ｍｅｒｃｋの米国特許第３，６４１，１２８号には、「化合物４−（ａ−アミノ低級アルキル）ビシクロ−［２．２．２］−オクタン−１−カルボン酸および薬学的に許容されるその塩は、抗線維素溶解化合物として有用である」ことが開示されている。
【００１４】
Ｍｅｒｃｋの米国特許第３，６４１，１２９号には、「化合物４−アミノメチルビシクロ−［２．２．２］−オクタン−１−酢酸およびその薬学的に許容される塩は、抗線維素溶解化合物として有用である」ことが開示されている。
【００１５】
米国特許第３，７５４，０８５号には、「新規の置換または無置換のベンゼンおよびシクロヘキサンホスホン酸。ここで開示されたホスホン酸は、有効な抗線維素溶解剤である。有効成分として前記ホスホン酸化合物を含有する医薬組成物、および前記化合物を投与することによって患者の線維素溶解状態を処置する方法もここに含まれる。新規の抗線維素溶解活性を有する当技術分野で公知の置換されたベンゼンホスホン酸が、さらに包含される」ことが開示されている。
【００１６】
Ｓｔａｎｌｅｙ  Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓの米国特許第３，９２０，８３３号には、「新規クラスの合成抗線維素溶解剤が明細書に提供される。ある特定のオメガ−アミノアルカンスルホン酸は、有効な抗線維素溶解活性を示すことが見出された」ことが開示されている。
【００１７】
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｏ  Ｆｉｄｅｓの米国特許第４，６８９，３４６号には、「止血作用および抗線維素溶解作用をもたらす化合物、すなわち、このような作用を達成するための１−アシルアミノナフタレン−４スルホン酸誘導体および組成物ならびに方法」が開示されている。
【００１８】
Ｐｒｏｙｅｃｔｏ  Ｄｅ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎａ  Ｃｉｍａの国際公開第２０１４／０１２９６４号には、「式（Ｉ）のスピロ環化合物、これらを調製するための方法、およびこの方法において使用される中間体。また、これらを含有する医薬組成物または獣医用組成物、および医学における、特に抗線維素溶解剤および止血薬としてのこれらの使用に関する」ことが開示されている。
【００１９】
出血エピソードが、手術、外傷、または他の形態の組織損傷による対象、および過剰な線維素溶解により特徴付けられる臨床シナリオにおける対象を含む、出血エピソードを経験する対象を処置するために、より良い生物活性を有するおよび／または副作用（血栓溶解の併発など）に対する可能性が低減した、改良された抗線維素溶解化合物に対する必要性が依然として存在する。
【発明の概要】
【００２０】
本出願は、プラスミノーゲン、および／またはプラスミン、および／またはプラスミノーゲン活性剤、および／またはトロンビンの構造において、特異的なタンパク質部分構造内の特異的な結合部位に結合する、アミノ酸リジンの全体的もしくは部分的模倣体または類似体である化学構造の多数の実施形態に関する。これまで、抗線維素溶解リジン類似体には、全て正電荷を有するプロトン化アミンまたは置換されたアミン官能性を含有させていた。本明細書で提案されるリジン類似体の実施形態のいくつかは、初めて、組み込まれた三価の硫黄を含有する、正電荷を有するスルホニウム基を有する。この特許出願は、上記タンパク質においてリジン結合部位（ＬＢＳ）を標的とする、スルホニウム基含有抗線維素溶解化合物についてのこの出願の発明において優先権を主張する。
【００２１】
スルホニウム基の化学、特に生化学は、ＬＢＳの機能を破壊することを目的とする構造を設計することに携わる全ての化学者および生化学者に周知であり、スルホニウム基のアルキル化反応の可能性に関する化学の専門家にとって、このような基によって、アミン官能基を単独で含有する化合物より、ＬＢＳの官能性を破壊するはるかに優れた可能性が付与されることが明らかである。しかしながら、これまで、抗線維素溶解薬の開発において、スルホニウム塩含有化合物の適用は提案されなかった。
【００２２】
第１の態様において、本発明は、式Ｉ
Ｒ１−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｘ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉ）
［式中、
Ｒ１は、−ＮＨ２、−ＮＨＲ６、−ＮＲ６Ｒ７、−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７Ｒ８または−Ｓ＋Ｒ９Ｒ１０であり、
Ｒ２は、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、メチオニン、トリプトファン、アラニン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、バリン、プロリンおよびグリシン、これらの天然および非天然光学異性体などから選択されるアミノ酸の側鎖であり、各側鎖は、リン酸化、ヒドロキシル化、カルボキシル化、またはメチル化などの代謝性の翻訳後修飾によって変更されることが知られており、
Ｘは、−ＮＲ−、−Ｏ−または−Ｓ−であり、
Ｒは、水素、ＯＲ’、ＮＲ’Ｒ”、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、または（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアリール（アリールは、フェニル、ピリジル、インドリル、チオフェン、フェニルアクロリル、インドールアクロリル、ピリジルアクロリル、フルリアクロリル（ｆｕｒｌｙａｃｒｏｌｙｌ）、プリニルまたはピリミジニルであり、Ｒ’およびＲ”は、独立に、水素、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、またはそれらが結合するＮ原子と一緒にアジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成する）であり、
Ｒ３は、水素、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、フェニル、もしくは（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキルであり、またはＲ３およびＲ４は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル基を形成し、
Ｒ４は、水素または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１であり、
Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、−ＳＯ２Ｒ１３、−Ｐ（Ｏ）Ｒ１４Ｒ１５、ニトロまたはニトロソであり、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルもしくはハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成し、
Ｒ１１は、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、フェニル、ベンジル、ニコチニルまたはトシルであり、ならびに
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、独立に、ヒドロキシル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである］
の新規化合物、ならびにその薬学的に許容される塩を提供する。
【００２３】
第１の実施形態では、化合物は、式（Ｉａ）
Ｒ１−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉａ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００２４】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｂ
Ｈ２Ｎ−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−ＣＯＯＨ  （Ｉｂ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００２５】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｃ
Ｈ２Ｎ−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ  （Ｉｃ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００２６】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｄ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉｄ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００２７】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｅ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−ＣＯＯＨ  （Ｉｅ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００２８】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｆ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ  （Ｉｆ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００２９】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルである。
【００３０】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、両方ともメチルである。
【００３１】
第２の実施形態では、化合物は、式Ｉｇ
Ｒ１−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉｇ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００３２】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｈ
Ｈ２Ｎ−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−ＣＯＯＨ  （Ｉｈ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００３３】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｉ
Ｈ２Ｎ−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ  （Ｉｉ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００３４】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｊ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉｊ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００３５】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｋ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−ＣＯＯＨ  （Ｉｋ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００３６】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｍ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ  （Ｉｍ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００３７】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルである。
【００３８】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、両方ともメチルである。
【００３９】
第３の実施形態では、化合物は、式Ｉｎ
Ｒ１−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｓ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉｎ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００４０】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｏ
Ｈ２Ｎ−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｓ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−ＣＯＯＨ  （Ｉｏ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００４１】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｐ
Ｈ２Ｎ−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨＲ４−ＣＯＯＨ  （Ｉｐ）
（式中、Ｒ４は−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１である）の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００４２】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｑ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｓ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉｑ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００４３】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｒ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｓ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−ＣＯＯＨ  （Ｉｒ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００４４】
好ましい実施形態では、化合物は、式Ｉｓ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨＲ４−ＣＯＯＨ  （Ｉｓ）
（式中、Ｒ４は−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１である）の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００４５】
第４の実施形態では、化合物は、式Ｉｔ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｘ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉｔ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００４６】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルである。
【００４７】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、両方ともメチルである。
【００４８】
第５の実施形態では、化合物は、式Ｉｕ
Ｒ６Ｒ７Ｒ８Ｎ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｘ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉｕ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００４９】
第２の態様では、本発明は、式ＩＩ
Ｒ１−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （ＩＩ）
［式中、
Ｒ１は、−ＮＨ２、−ＮＨＲ６、−ＮＲ６Ｒ７、−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７Ｒ８または−Ｓ＋Ｒ９Ｒ１０であり、
Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、−ＳＯ２Ｒ１３、−Ｐ（Ｏ）Ｒ１４Ｒ１５、ニトロまたはニトロソであり、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルもしくはハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成し、ならびに
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、独立に、ヒドロキシル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、
但し、Ｒ２がＣＯＯＨである場合、Ｒ１はＮＨ２ではない］
の新規化合物、ならびにその薬学的に許容される塩を提供する。
【００５０】
第１の実施形態では、化合物は、式ＩＩａ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （ＩＩａ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００５１】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルである。
【００５２】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、両方ともメチルである。
【００５３】
好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩｂ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２  （ＩＩｂ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００５４】
好ましい実施形態では、Ｒ１２は、ヒドロキシル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである。
【００５５】
好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩｃ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＳＯ２Ｒ１３  （ＩＩｃ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００５６】
好ましい実施形態では、Ｒ１３は、ヒドロキシルまたは−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである。
【００５７】
好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩｄ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｐ（Ｏ）Ｒ１４Ｒ１５  （ＩＩｄ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００５８】
好ましい実施形態では、Ｒ１４およびＲ１５は、独立に、ヒドロキシルまたは−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである。
【００５９】
第２の実施形態では、化合物は、式ＩＩｅ
Ｒ６Ｒ７Ｒ８Ｎ＋−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （ＩＩｅ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００６０】
第３の態様では、本発明は、式ＩＩＩ
Ｒ１−ＣＨ２−Ｘ１−Ｒ５  （ＩＩＩ）
［式中、
Ｒ１は、−ＮＨ２、−ＮＨＲ６、−ＮＲ６Ｒ７、−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７Ｒ８または−Ｓ＋Ｒ９Ｒ１０であり、
Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、−ＳＯ２Ｒ１３、−Ｐ（Ｏ）Ｒ１４Ｒ１５、ニトロまたはニトロソであり、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルもしくはハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成し、
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、独立に、ヒドロキシル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、ならびに
Ｘ１は、ｔｒａｎｓシクロヘキサン−１，４−ジイルであり、
但し、Ｒ２がＣＯＯＨである場合、Ｒ１はＮＨ２ではない］
の新規化合物、ならびにその薬学的に許容される塩を提供する。
【００６１】
第１の実施形態では、化合物は、式ＩＩＩａ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−Ｘ−Ｒ５  （ＩＩＩａ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００６２】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルである。
【００６３】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、両方ともメチルである。
【００６４】
好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩＩｂ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−Ｘ１−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２  （ＩＩＩｂ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００６５】
好ましい実施形態では、Ｒ１２は、ヒドロキシルまたは−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである。
【００６６】
好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩＩｃ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−Ｘ１−ＳＯ２Ｒ１３  （ＩＩＩｃ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００６７】
好ましい実施形態では、Ｒ１３は、ヒドロキシルまたは−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである。
【００６８】
好ましい実施形態では、化合物は、式ＩＩＩｄ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−Ｘ１−Ｐ（Ｏ）Ｒ１４Ｒ１５  （ＩＩＩｄ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００６９】
好ましい実施形態では、Ｒ１４およびＲ１５は、独立に、ヒドロキシルまたは−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである。
【００７０】
第２の実施形態では、化合物は、式ＩＩＩｅ
Ｒ６Ｒ７Ｒ８Ｎ＋−ＣＨ２−Ｘ１−Ｒ５  （ＩＩＩｅ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００７１】
第４の態様では、本発明は、式ＩＶ
Ｒ１−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１６  （ＩＶ）
［式中、
Ｒ１は、−ＮＨ２、−ＮＨＲ６、−ＮＲ６Ｒ７、−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７Ｒ８または−Ｓ＋Ｒ９Ｒ１０であり、
Ｒ２は、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、メチオニン、トリプトファン、アラニン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、バリン、プロリンおよびグリシン、これらの天然および非天然光学異性体などから選択されるアミノ酸の側鎖であり、各側鎖は、リン酸化、ヒドロキシル化、カルボキシル化、またはメチル化などの代謝性の翻訳後修飾によって変更されることが知られており、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルもしくはハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成しならびに、
Ｒ１６は、２−ヒドロキシ安息香酸、またはヒドロキシル基を介して結合してエステル結合を形成したその（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルエステルである］
の新規化合物、ならびにその薬学的に許容される塩を提供する。
【００７２】
第１の実施形態では、化合物は、式ＩＶａ
Ｈ２Ｎ−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１６  （ＩＶａ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００７３】
第２の実施形態では、化合物は、ＩＶｂ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１６  （ＩＶｂ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００７４】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルである。
【００７５】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、両方ともメチルである。
【００７６】
第３の実施形態では、化合物は、式ＩＶｃ
Ｒ６Ｒ７Ｒ８Ｎ＋−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１６  （ＩＶｃ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００７７】
第５の態様では、本発明は、式Ｖ
Ｒ１−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ１７−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （Ｖ）
［式中、
Ｒ１は、−ＮＨ２、−ＮＨＲ６、−ＮＲ６Ｒ７、−Ｎ＋Ｒ６Ｒ７Ｒ８または−Ｓ＋Ｒ９Ｒ１０であり、
Ｒ５は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、−ＳＯ２Ｒ１３、−Ｐ（Ｏ）Ｒ１４Ｒ１５、ニトロまたはニトロソであり、
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルもしくはハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルであり、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成し、
Ｒ１７は−Ｌ−Ｒ１８であり、
Ｌは、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−であり、ならびに
Ｒ１８は、アミノ基を介して結合してアミド結合を形成した７−アミノアクチノマイシンＤまたはアミノ末端ペプチジル残基のα−アミノ基を介したアミド結合におけるペプチジル部分でもある］
の新規化合物、ならびにその薬学的に許容される塩を提供する。
【００７８】
第１の実施形態では、化合物は、式Ｖａ
Ｒ９Ｒ１０Ｓ＋−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ１７−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （Ｖａ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００７９】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルまたはハロ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルである。
【００８０】
好ましい実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は、両方ともメチルである。
【００８１】
第２の実施形態では、化合物は、式Ｖｂ
Ｒ６Ｒ７Ｒ８Ｎ＋−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ１７−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （Ｖｂ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００８２】
第３の実施形態では、化合物は、式Ｖｃ
Ｈ２Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ１７−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （Ｖｃ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００８３】
第６の態様では、本発明は、式ＶＩ
Ｘ１−Ｘ２−Ｒ３  （ＶＩ）
［式中、
Ｘ１は、天然アミノ酸であり、その天然に存在する翻訳後修飾体およびその全ての光学異性体を含み、アミノ酸Ｘ２のαアミノ基とのペプチド結合においてそのαカルボン酸基を有し、
Ｘ２は、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホスホセリンまたはホスホトレオニンから選択されるアミノ酸であり、その種々の光学異性体を含み、そのαカルボキシ基はＲ３とのアミド結合におけるものであり、
Ｒ３は、ＮＲ１Ｒ２または−Ｘ３Ｒ４であり、Ｘ３は、天然アミノ酸であり、その天然に存在する翻訳後修飾体およびその全ての光学異性体を含み、アミノ酸Ｒ４のαアミノ基と、またはアミン、ＮＨＲ１Ｒ２とのペプチド結合におけるそのαカルボン酸基を有し、
Ｒ４は、ＮＲ１Ｒ２または−Ｘ４Ｒ５であり、Ｘ４は、天然アミノ酸であり、その天然に存在する翻訳後修飾体およびその全ての光学異性体を含み、アミノ酸Ｒ５のαアミノ基と、またはアミン、ＮＨＲ１Ｒ２とのペプチド結合におけるそのαカルボン酸基を有し、
Ｒ５は、ＮＲ１Ｒ２または−Ｘ５Ｒ６であり、Ｘ５は、天然アミノ酸であり、その天然に存在する翻訳後修飾体およびその全ての光学異性体を含み、アミノ酸Ｒ６のαアミノ基と、またはアミン、ＮＨＲ１Ｒ２とのペプチド結合におけるそのαカルボン酸基を有し、
Ｒ６は、ＮＲ１Ｒ２または−Ｘ６Ｒ７であり、Ｘ６は、天然アミノ酸であり、その天然に存在する翻訳後修飾体およびその全ての光学異性体を含み、アミン、ＮＨＲ１Ｒ２とのペプチド結合におけるそのαカルボン酸基を有し、
Ｒ１は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、ベンジル、またはそれが結合するＲ２および窒素と一緒になって、モルホリニル、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成し、ならびに
Ｒ２は、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、フェニル、ベンジル、またはそれが結合するＲ１および窒素と一緒になって、モルホリニル、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、もしくはピロリル基を形成する］
のペプチド化合物、ならびにその薬学的に許容される塩を提供する。
【００８４】
第１の実施形態では、化合物は、式ＶＩａ
グリシル−（アスパルチル／グルタミル）−Ｒ３  （ＶＩａ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００８５】
特に、アミノ酸Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６の配列は、天然にみられるように、トリペプチド配列アルギニルグリシル（アスパルチル／グルタミル）（ＲＧＤ／Ｅ）またはリシルグリシル（アスパルチル／グルタミル）（ＫＧＤ／Ｅ）におけるグリシル残基から始まるヒトの生理的タンパク質の構成要素におけるものである。
【００８６】
第２の実施形態では、化合物は、式ＶＩｂ
α−ジュウテロＤグリシルアスパルチル−ＮＲ１Ｒ２  （ＶＩｂ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００８７】
第３の実施形態では、化合物は、式Ｖｃ
α−ジュウテロＤグリシルアスパルチルトリプトファニル−ＮＲ１Ｒ２  （Ｖｃ）
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００８８】
第７の態様では、本発明は、本明細書に記載されている式のいずれかによる抗線維素溶解化合物、またはその薬学的に許容される塩を、薬学的に許容される希釈剤、担体または賦形剤と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【００８９】
第８の態様では、本発明は、医薬品として使用するための、本明細書に記載されている式のいずれかによる抗線維素溶解化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００９０】
第９の態様では、本発明は、抗線維素溶解薬または止血剤として使用するための、本明細書に記載されている式のいずれかによる抗線維素溶解化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００９１】
第１０の態様では、本発明は、病的なおよび／もしくは先天的な過剰出血障害の処置、外傷による出血の制限、手術中および手術後の出血の制限、組織の成長の制限、脳卒中および心臓発作に付随する出来事（incident）に寄与するアポリポタンパク質Ａの減少、またはこれらのタンパク質の機能を改変もしくは制限するためのクリングル含有タンパク質構造の調製もしくは選択的に改変された調製のための、本明細書に記載されている式のいずれかによる抗線維素溶解化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００９２】
第１１の態様では、本発明は、獣医医学の医療行為における出血性外傷または病理を処置するための方法であって、本明細書に記載されている式のいずれかによる抗線維素溶解化合物、またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を、このような処置を必要としている哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。
【００９３】
本発明が、上記および本明細書の他の箇所に列挙した実施形態の全ての許容可能な組合せも企図していることが理解され、認識される。
【図面の簡単な説明】
【００９４】
【図１】（記載なし）
【発明を実施するための形態】
【００９５】
この出願において、本明細書で使用される全ての用語は、他に述べられていない限り、当技術分野で知られている通常の意味で理解されるべきである。本出願において使用される特定の用語に対する他のより具体的な定義は、以下に示し、本明細書全体を通して均一に適用し、他に明示的に示されていなければ、定義はより広い定義を提供することを主張することが意図される。
【００９６】
用語「ハロゲン」および「ハロ」は、単独でまたは他の基と組み合わせて、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を指す。好ましいハロゲンには、塩素およびフッ素が含まれる。
【００９７】
用語「Ｃ１〜４アルキル」および「（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル」は、単独でまたは他の基と組み合わせて、１〜４個の炭素原子を含有する分枝または直鎖の一価アルキルを意味する。例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、およびｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。
【００９８】
用語「ハロＣ１〜４アルキル」および「ハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル」は、本明細書に定義するように、１つまたは複数の水素が、独立に、ハロゲンで置き換えられているＣ１〜４アルキル基を指す。例として、−ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＨＣｌＣＦ３、−ＣＨ２ＣＣｌ３、およびパーフルオロアルキル（例えば、−ＣＦ３）が挙げられる。
【００９９】
用語「Ｃ３〜７シクロアルキル」および「（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル」は、単独でまたは他の基と組み合わせて、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルなどの、３〜７個の環炭素を有する、飽和した一価の環状炭化水素基を指す。
【０１００】
用語「Ｃ１〜４アルコキシ」は、単独でまたは他の基と組み合わせて、Ｒ’がＣ１〜４アルキルであるＲ’−Ｏ−を指す。
【０１０１】
用語「ヘテロシクリル」は、単独でまたは他の基と組み合わせて、１個または２個の環原子がＮ、Ｏ、またはＳ（Ｏ）ｎ（ｎは、０から２までの整数である）から選択され、残りの環原子はＣである、非芳香族単環式基の４〜６個の環原子を指す。例として、ピペリジニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、アゼピニル、ジオキソラニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、オキサゾリジニル、イソキサゾリル、モルホリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、キヌクリジニル、チアジアゾリル、ジヒドロフリル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルスルホキシド、およびチオモルホリニルスルホンが挙げられる。
【０１０２】
用語「ヘテロアリール」は、窒素、酸素および硫黄から独立に選択される１、２または３個の環原子を含有する、芳香族５から６員の単環式または９から１０員の二環式を指す。例として、フリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、チアゾリル、チエニル、イソキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、イミダゾリル、ピロリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−チアジアゾリル、ベンズイミダゾリル、インドリル、インダゾリル、イソインドリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリルオキサゾリル、およびキノリルが挙げられる。
【０１０３】
本発明の化合物は、いくつかの無機および有機酸と反応して、薬学的に許容される酸付加塩を形成することが可能であることが当業者に理解される。このような薬学的に許容される酸付加塩およびこれらを調製するための通常の方法論は、当技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌ，ｅｔ  ａｌ．，ＨＡＮＤＢＯＯＫ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＡＬＴＳ：ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，ＳＥＬＥＣＴＩＯＮ  ＡＮＤ  ＵＳＥ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２）；およびＳ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ＾Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，Ｊａｎｕａｒｙ  １９７７を参照のこと。
【０１０４】
用語「薬学的に許容される塩」は、健全な医学的判断の範囲内で、過度な毒性、刺激、アレルギー反応などを伴わず、ヒトおよび下等動物の組織に接触する使用に適しているそれらの塩を指す。その塩は、本発明の化合物の有機または無機塩であり、その生物学的活性を維持する。塩は、適切な、非毒性の有機もしくは無機酸を遊離の塩基と反応させて、または有機および無機塩基を本発明の化合物の酸基と反応させて調製することができる。酸付加塩の例として、無機酸および有機酸に由来するそれらの塩が挙げられる。無機酸の例として、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルホン酸、リン酸、硝酸が挙げられるがこれらに限定されず、有機酸の例として、パラ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、マレイン酸、乳酸、フマル酸などが挙げられるがこれらに限定されない。塩基付加塩の例として、水酸化アンモニウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、テトラメチルアンモニウムヒドロキシドなどの第四級水酸化アンモニウムに由来するものが挙げられる。酸性または塩基性化合物の塩への変換は、その物理化学的特性、化学的安定性、吸湿性、流動性および溶解度を改良するために、当技術分野で周知である。
【０１０５】
本発明の化合物は、遊離の溶媒和化合物としてまたは溶媒和物（例えば、水和物）としてのいずれかの結晶形態であってもよく、両方の形態が本発明の範囲内であることが意図される。溶媒和の方法も、当技術分野で一般的に知られている。一般に、水、エタノールなどの薬学的にまたは獣医学的に許容される溶媒との溶媒和形態は、本発明の目的として、非溶媒和形態と同等である。
【０１０６】
「薬学的に許容される」希釈剤、担体、または賦形剤は、対象への化合物の投与に適合し、非毒性であるそれらの担体および賦形剤を指す。
【０１０７】
この発明の化合物の「治療有効量」は、疾患の進行を有効に予防しもしくは遅延させ、または疾患の症状の一部を減弱させ、寛解し、または患者の寿命を延ばす化合物の量を意味する。治療有効量の決定は、医術において周知の種々の要因に依存する。
【０１０８】
治療有効量または用量は、幅広い範囲で変わり得、この分野の公知技術によって決定され得る。任意の特定の患者に対する具体的な治療有効用量レベルは、採用される具体的化合物の活性、投与経路、処置期間、ならびに患者の年齢、体重、全身的健康、性別および食事などの種々の要因に依存する。一般に、経口的にまたは非経口的に投与される場合の化合物の１日総用量は、単回用量または複数回用量で投与されるこの発明の化合物の、１０ｍｇから１０，０００ｍｇの範囲の１日総用量であってよい。本発明の化合物は、ＥＡＣＡおよびＴＸＡより強い生物学的活性を有するので、有効用量は、一般に、同一の意図された投与経路および使用経路に対してより低い。
【０１０９】
本発明の化合物は、好ましくは、種々の経路で投与される医薬組成物として製剤化される。このような医薬組成物およびこれらを調製するための方法は、当技術分野で周知である。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ（Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ，１９ｔｈ  ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，１９９５）を参照のこと。
【０１１０】
本発明の化合物は、止血剤および抗線維素溶解剤として有用であり、広範な範囲の治療適用において使用することができる。手術において、抗線維素溶解剤は（術後の出血を低減させることに加えて）、例えば、心臓、肝臓および整形外科の手術において、また線溶賦活剤の豊富な器官（前立腺、子宮、悪性の器官および組織）における腫瘍外科手術の設定において、輸血および他のヘモデリバティブの選択肢となり得る。外傷の患者では、抗線維素溶解剤は、総死亡率および出血による死を低減させることができる。さらに、本発明の抗線維素溶解剤は、例えば、急性心臓発作および虚血性脳卒中、ならびに大出血または頭蓋内出血の場合には、血栓溶解療法における出血を制御するために使用することもできる。さらに、本発明の抗線維素溶解剤は、特に、血友病などの先天的凝固障害を有する患者、または糖尿病の患者における、例えば抜歯後の局所出血の処置、先天的または後天的凝固障害を伴う女性の月経過多症および産後出血の処置、ならびに前立腺切除術を含む、胃腸および泌尿器起源の出血の処置において有用である。最後に、本発明の化合物は、アミノカプロン酸およびトラネキサム酸と同じＦＤＡに承認された適応症に使用することができることが理解される。
【０１１１】
上述したように、ＥＡＣＡおよびＴＸＡはともに、プラスミノーゲンのプラスミンへの活性化を妨害することによって、線維素溶解に対してそれらの効果を発揮する。しかしながら、これらの経験的に決定された効果は、これらの薬物が１つまたは複数のプラスミノーゲンのクリングル構造への結合を含む、間接的な手法で生じる。いくつかのクリングル構造は、塩化物イオンが約８ｍＭのＫｄ（ａｐｐ）で結合するアニオン結合部位（プロトン化カチオン性のリジンおよび／またはアルギニン側鎖からなる）を有し、その結果、プラスミノーゲンは、１００ｍＭの塩化物イオンのその生理学的環境において、ほとんど完全に塩化物イオンに結合する。溶液中で塩素を含まないプラスミノーゲンは、その塩素と結合した形態の活性化速度と比較して約８倍速い速度で活性化する。ＥＡＣＡとＴＸＡの両方のアニオン性カルボキシル基が、プラスミノーゲンに結合した塩化物イオンを置換する一方で、それらのカチオン性プロトン化アミノ基は、Ａｓｐ−Ｘ−Ａｓｐ配列の負電荷を有するアスパラギン酸残基を含有するカチオン性結合ポケットを同時に占める。
【０１１２】
ＴＸＡとＥＡＣＡは両方、Ｘ線結晶学によって明らかにされたプラスミン（プラスミノーゲン）クリングルの同じ部位に結合する。結合部位は、一方の末端の正電荷を有するポケット、他方の末端の負電荷を有するポケット、およびその間の疎水性結合領域からなる。ＴＸＡおよびＥＡＣＡは、それぞれ約４０μＭおよび２００μＭのみかけのＫｄで、これらの部位でプラスミン（プラスミノーゲン）と結合する。プラスミン（プラスミノーゲン）が、サブナノモル（フィブリノーゲンに対してはマイクロモル）範囲のＫｄ値で、プラスミン（プラスミノーゲン）のクリングル構造を介して、フィブリン血栓に密接に（フィブリノーゲンに対するほど密接ではない）結合することも知られている。フィブリン（フィブリノーゲン）が、プラスミン（プラスミノーゲン）のクリングルのＴＸＡ／ＥＡＣＡ結合部位以外の、およびそれに加えて、プラスミン（プラスミノーゲン）の部位に結合してもよいが、プラスミン（プラスミノーゲン）のフィブリン（フィブリノーゲン）への結合は、ＴＸＡ／ＥＡＣＡによっても占められたクリングル部位を介して生じることも可能である。
【０１１３】
ＴＸＡ／ＥＡＣＡの薬理学に重要な事実は、プラスミノーゲンがプラスミンに活性化する速度、および一旦形成されたプラスミンの触媒効率、ＴＸＡ／ＥＡＣＡ処置に対する結果に関するものである。本発明者らが、溶液中、および生理学レベルの塩化物イオンおよび１００％のフィブリノーゲンの存在下で、プラスミノーゲンの活性化の相対速度を設定した場合、次いで、治療レベルのＴＸＡ／ＥＡＣＡの非存在下でまたは（存在下で）得られた活性化速度は、フィブリンの非存在下で１００（２５０〜３００）、フィブリンの存在下で５，０００〜８，０００（２００〜６００）である。したがって、プラスミノーゲンは、フィブリン血栓の表面で、溶液中のプラスミノーゲンよりも５０〜８０倍の速度で、プラスミンに活性化する。ＴＸＡ／ＥＡＣＡおよびフィブリンの存在下で、活性化速度は、フィブリンの非存在下およびＴＸＡ／ＥＡＣＡの存在下の溶液中のプラスミノーゲンより（溶液中のプラスミノーゲンに対する速度１．０と比較して）２〜６倍速い。全体として、効果は、５０〜８０から２〜６までの相対的な線維素溶解速度の低下、または８０％以上の阻害に対するものである。機構的に、ＴＸＡ／ＥＡＣＡは、フィブリンのプラスミン（プラスミノーゲン）への結合に関するのと同じ部位に結合し、またはそうでなければ（立体構造の変化など）、フィブリン−プラスミン（プラスミノーゲン）結合を競合的に阻害する。２つの最終的な事実が強調されるべきである。（１）クリングルにおけるＴＸＡ／ＥＡＣＡ結合部位に対する天然リガンドは知られていない、および（２）実際の密接な結合（サブナノモルからピコモルの解離定数）と比較して、ＴＸＡとＥＡＣＡは両方、非常に弱い結合である（ミリモルからマイクロモルの範囲の解離定数）。幸いにも、これら２種の薬物は、通常使用される相対的に高い用量でも、重大な副作用がほとんど報告されていない。しかしながら、これら２つの本質的な事実により、この出願で網羅される医薬品候補の発見が導かれた。
【０１１４】
この出願の発明は、６つの個々の態様に広く分類される。これら全ての態様において、化合物は、線維素溶解を制御すること、調整することまたは制限することを必要とする病理を対象とする。この目的のために、いくつかは他のものより有効であり、いくつかは他のものより長期の効果を有する。現在の薬理学が１種の実際に有効な化合物にのみを提供していること（種々の製剤におけるトラネキサム酸、大差をつけて二番手にイプシロンアミノカプロン酸）、また半世紀超の間当技術分野に大きな変化はなかったことに留意すると、広い範囲の革新の機会がこの薬理学の領域に存在する。一例として、この出願における化合物のいくつかは、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）を制御するために他のアプローチと合わせて使用する場合、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）感染により引き起こされるような出血性疾患に関連する非常に高い死亡率を低減させるために良好に作用する。これらの化合物の具体的な利益は以下に記述される。
【０１１５】
この発明の６つの態様の中で、第１には、式Ｉ：
Ｒ１−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｘ−ＣＨＲ３−ＣＨＲ４−Ｒ５  （Ｉ）
の化合物である。
【０１１６】
ＥＡＣＡに最も近く同等の構造を表して、これは、
Ｈ２Ｎ−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ  （Ｉｃ）
を提供し、これは、Ｎ−（α−アミノアシル）Ｎ−置換β−アラニンジペプチドのファミリーを表し、その最も簡単な代表例はＮ−グリシルβ−アラニン、（ＩＡ）であり、その好ましい実施形態はＮ−（α−ジュウテロＤグリシル）β−アラニン：
Ｈ２Ｎ−ｄＣＨＤ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＯＨ
である。
【０１１７】
このファミリーの化合物は、官能基の幾何学に関して、ＥＡＣＡとＴＸＡの両方に対するこれらの近い構造類似性のため、さらに、出願人によって決定されるように、ＥＡＣＡ／ＴＸＡを置換するカルノシンおよびアンセリン（β−アラニルヒスチジンおよびそのメチル化イミダゾール誘導体）の能力により、クリングルに結合する優れた候補を含む。これらのジペプチドをペプチダーゼから保護するために、末端アミノ酸ではＤ配置が好ましい。これらのジペプチドは、受容体タンパク質由来などのタンパク質由来構造により構造的に関連するＥＡＣＡとＴＸＡの両方に対してさらなる利点を有し、したがって、ＥＡＣＡ／ＴＸＡによって得られたよりもより生理学的応答を誘発し得る。
【０１１８】
この出願におけるα−重水素化Ｄグリシンの調製および使用は、ペプチダーゼによるこの末端アミノ酸の代謝を遅延させるための発明である。（Ｉｂ）の下での化合物のさらなる利点は、このようなスルホニウム化合物が、カルボキシル対イオンにメチル基を供与し、そのエステル化および中和を可能とすることである。したがって、ＥＡＣＡ／ＴＸＡ結合クリングルは、アスパラギン酸残基のカルボキシル基がＥＡＣＡ／ＴＸＡのアンモニウム基と塩結合を形成する、Ａｓｐ−Ｘ−Ａｓｐ配列との結合部位を有することが知られているので、（Ｉｂ）などの化合物は、これらのアスパルチルカルボキシルをメチルエステルに変換することによって、プラスミン（プラスミノーゲン）などの親タンパク質のＴＸＡ／ＥＡＣＡとフィブリン結合の両方を消失させる。このことにより、ＥＡＣＡ／ＴＸＡに存在しないこれらの化合物に抗線維素溶解機能を標識する非常に効果的で新規な親和性が加わる。この機能は、患者のプラスミノーゲンを、例えば、これらのスルホニウムリガンドで処置すること、および線維素溶解のより長期制御のために、処置したプラスミノーゲンを患者に戻すことによってさらに活用され得る。
【０１１９】
第２の態様では、本発明は、式ＩＩ：
Ｒ１−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （ＩＩ）
の化合物を提供する。
【０１２０】
これらの中で注目すべきは、ＥＡＣＡのスルホニウム類似体（ＩＩｂ）である。これは、上述したように、プラスミノーゲンなどの親タンパク質のカルボキシル残基をエステル化し、フィブリン結合能を消失させる、ＥＡＣＡ結合部位の親和性−標識リガンドとしても作用する。さらに、これらの化合物は、硫酸エステル（Ｒ５＝ＳＯ３Ｒ’）として、アルキル化（Ｒ’基での）によってクリングル結合部位を改変することもできる。したがって、これらの実施形態について、両末端でクリングル結合部位を改変することが可能である。ＥＡＣＡもＴＸＡも、線維素溶解を改変するためにこのような能力を提供することはできない。
【０１２１】
第３の態様では、本発明は、式ＩＩＩ：
Ｒ１−ＣＨ２−Ｘ１−Ｒ５  （ＩＩＩ）
の新規化合物を提供する。
【０１２２】
この一連の化合物はＴＸＡの類似体であり、少なくとも改変したものは、ジメチルスルホニウム塩（ＩＩＩｂ）である。これは、プラスミノーゲンのフィブリン結合能を消失させることによるより長期持続する効果というさらなる利点と共に、線維素溶解の阻害において、ＴＸＡと同じように機能する。結合部位は、硫酸エステルを含有する化合物によってもアルキル化され得る。これらの理由のため、これらは、線維素溶解に関連する出血を制御するために、ＴＸＡよりも良い候補である。
【０１２３】
第４の態様では、本発明は、式ＩＶ：
Ｒ１−ＣＨＲ２−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１６  （ＩＶ）
の新規化合物を提供する。
【０１２４】
この一連の化合物は、アミノアシルサリチル酸であり、ここで、サリチル酸のカルボキシル基およびアミノ酸のα−アミノ基は、構造的にＥＡＣＡ／ＴＸＡを模倣するために配置される。したがって、これらの化合物は、そのクリングルを介してプラスミノーゲンに結合する。これらの化合物のさらなる利点は、それらがサリチル酸、したがって可能な抗炎症剤であることに由来する。アスピリン（アセチルサリチル酸）と類似して、これらの化合物は、血小板をアシル化するためにも作用する場合、アミノアシル血小板は、アセチル化と異なり、それらの電荷を保持し、したがって、それらの使用の合併症としての出血を回避する。
【０１２５】
第５の態様では、本発明は、式Ｖ：
Ｒ１−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ１７−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｒ５  （Ｖ）
の新規化合物を提供する。
【０１２６】
本発明のこれらの実施形態は、本明細書に記載されているリガンドのクリングル結合能を活用し、この場合、悪性腫瘍に広範囲に関連するアクチノマイシンＣ（がんに対する、線維素溶解の部位への化学療法剤）などの薬物を送達する。この利点は、公知の特異性または治療効果の特異的リガンドを結合させることによって、他の標的に拡大される。この点で、本発明のこの実施形態における表題化合物は、治療目的として、ＥＡＣＡ／ＴＸＡよりはるかに良好である。
【０１２７】
第６の態様では、本発明は、式ＶＩ：
Ｘ１−Ｘ２−Ｒ３  （ＶＩ）
のペプチド化合物を提供する。
【０１２８】
本発明のこの第６の態様は、例えばフィブロネクチンにおける、公知の認識ペプチド配列リシルグリシルアスパルチル（ＫＧＤ）およびアルギニルグリシルアスパルチル（ＲＧＤ）、および組織修復および組織成長におけるそれらの役割に基づく。これらの２つの配列のリシルまたはアルギニル残基のいずれかの切断後に、グリシルアスパルチルなどで始まる新しい配列を放出し、この末端配列は、適当なクリングル構造を結合することができるＥＡＣＡ構造を十分に模倣することを発明者は認識した。この実現に基づき、本発明のこの態様は、アミノ末端から２番目の位置に、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、ホスホセリン、またはホスホトレオニンの１つを有する６個までのアミノ酸残基のペプチドを網羅する。次のペプチドのアミノ酸構成は、配列データベースからのＫＧＤ／ＥおよびＲＧＤ／Ｅ配列におけるアルパラギン（グルタミン）酸残基の後の下流配列に関する配列情報から得られる。
【０１２９】
［合成手順］
この出願によって網羅される化合物は、当技術分野で周知の通常の有機合成方法によって調製することができる。これらには、簡単なペプチドの合成、エステルおよびチオエステル、スルホン酸アルキル／アリールおよびリン酸アルキル／アリール、ならびにアルキル化アミンおよびアルキル化スルフィドの合成が含まれる。例を、式Ｉ〜ＶＩの化合物の調製において通常使用される代表的方法として、以下に提供する。
【０１３０】
［調製および実施例］
この出願と関連して調製される具体的化合物の代表的合成を以下に提供する。
【化１】
2018502144.tif 000003
【０１３１】
１．ｔ−ＢＯＣ  Ｄ−α−ジュウテログリシン
第１の例では、Ｄ−α−ジュウテログリシンは以下のように調製する。２−オキソ酢酸（７．６ｍｇ、０．１ｍｏｌ）をホウ酸塩緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ９．０）に溶解する。アンモニア水を２倍モル過剰まで加える。アンモニアのアルデヒドの攪拌混合物に、（２Ｘｍｏｌ）の水素化ホウ素ナトリウムを１０分かけて少しずつ加え、全ての反応が終了するまで、次の２時間混合物を攪拌する。後処理後、Ｄ，Ｌα−ジュウテログリシンが９０％の収率で得られる。ジュウテログリシンのラセミ混合物を、公開された手順に従って、Ｌアミノ酸オキシダーゼで処理し、後処理後に、酸化されていないＤ異性体が、銅塩として、６０％の収率で得られる（Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｇｒｅｅｎｓｔｅｉｎ＆Ｗｉｎｉｔｚ，Ｖｏｌ．２で詳述された方法）。次のステップでは、重水素化Ｄグリシンを、市販のｔ−ＢＯＣ無水物で、製造業者（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）によって提供された方法に従って処理し、２１ｍｍｏｌのｔ−ＢＯＣ  Ｄ−α−ジュウテログリシンを得る。
【化２】
2018502144.tif 000004
【０１３２】
２．Ｄ−α−ジュウテログリシルβ−アラニン（１Ａａ）
［Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｇｒｅｅｎｓｔｅｉｎ＆Ｗｉｎｉｔｚから採用した］アセトニトリル中のβ−アラニンｔｅｒｔブチルエステル（１０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル中のジシクロヘキシルカルボジイミド（１０ｍｍｏｌ）およびｔ−ＢＯＣ  Ｄ−α−ジュウテログリシン（１０ｍｍｏｌ）で連続して処理し、反応を室温で２時間進める。沈殿したジシクロヘキシル尿素を濾過によって除去し、さらに後処理して８０％の収率でジペプチドを得る。保護基を除去し（ポリスチレンスルホン酸樹脂）、９０％の収率でジペプチドを得る。
【化３】
2018502144.tif 000005
【０１３３】
３．ヨードアセチルβ−アラニン
上記手順を使用して、ヨード酢酸およびベータアラニンｔ−ブチルエステルから、優れた収率で、ヨードアセチルβ−アラニンを調製し、上述のように保護エステルを除去する。
【化４】
2018502144.tif 000006
【０１３４】
４．Ｓ，Ｓジメチルチオグリコリルβ−アラニンスルタン（Ｉｂ）
トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中でヨードアセチルβ−アラニンをジメチルスルフィドで処理することによって、標的化合物を得て、生成物はエーテルから沈殿し、混合物から分離される。
【化５】
2018502144.tif 000007
【０１３５】
５．６−（Ｓ，Ｓジメチルチオ）ヘキサン酸スルタン（ＩＩｂ）
これは、ＥＡＣＡのスルホニウム類似体であり、６−ブロモヘキサン酸およびジメチルスルフィドから容易に調製される。反応物（それぞれ１０ｍｍｏｌ）を、穏やかに加熱して終夜攪拌しながら、溶媒としてのＴＦＡ中で一緒に混合する。生成物を、エーテルから沈殿させることによって、９０％超の収率で得る。対応するスルホン酸およびリン酸は、４−チオメチルブチル−１−１ニトレートからスルホニウム塩のように、同様に得られる。６−（Ｓ，Ｓジメチルチオ）ヘキサン酸スルタンのエステルを、最初に、例えば、還流下で塩酸メタノールを用いて、６−ブロモヘキサン酸をエステル化し、その後、上述のようにＴＦＡ中でジアルキルスルフィドと反応させることによって調製する。スルホン酸およびリン酸のエステルは、モル等量のメチルトリフレートで処理することによって得られる（それぞれ、スルホン酸メチルおよびリン酸メチルとして）。
【０１３６】
６．４−（Ｓ，Ｓジメチルチオ）メチルシクロヘキサン−１−カルボン酸スルタン：（ＩＩＩｂ）
これは、ＴＸＡのスルホニウム類似体である。これは、市販の４−ｔｒａｎｓブロモメチルシクロヘキサンカルボン酸メチルエステルから容易に調製される。等量の水酸化ナトリウムを用いるエステルの鹸化、続いて、酢酸エチルへの抽出と乾燥により遊離酸を得る。遊離酸は、上述のように、ＴＦＡ中でジメチルスルフィドでさらに処理して、エーテルから沈殿した所望のスルタンを得る。
【化６】
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【０１３７】
ａ）ｔｒａｓ−（４−アミノメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸メチルエステル塩酸塩の合成［ＴＸＡ−ＯＭｅ．ＨＣｌ］
トラネキサム酸（ＴＸＡ）のスルホニウム類似体の合成は、２つの経路によって例示される。両者に共通なのは、ＴＸＡをそのメチルエステルに変換し、続いて、サンドマイヤー反応によって対応する４−ヒドロキシメチル化合物に変換することである。これは、最初に、ＴＸＡのメタノール溶液（２０ｍＭｏｌｅ）を触媒として過剰量（１０＋ｍＭｏｌｅ）の塩化チオニルで処理し（メタノールＨＣｌを生成し）、溶液を還流下で１時間維持することによって達成される。溶媒を蒸発させて除去し、ＴＸＡメチルエステル塩酸塩を得る。
【０１３８】
ｂ）ｔｒａｎｓ−（４−ヒドロキシメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸メチルエステルの合成［ＴＨＭＸ−ＯＭｅ］
上記で得られた生成物ＴＸＡメチルエステル塩酸塩（１２ｍＭｏｌｅ）を硝酸ナトリウム冷水溶液に溶解させ、続いて、冷却した溶液を酸性化し、窒素発生が終了したら室温に温める。生成物を酢酸エチルに抽出し、通常の後処理により、生成物ヒドロキシメチルカルボン酸メチルエステルを７０％の収率で得る。
【０１３９】
ｃ）ｔｒａｎｓ−（４−クロロメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸メチルエステルの合成［ＣＭＸ−ＯＭｅ］
上記で得られたヒドロキシメチルメチルエステル（４ｍＭｏｌｅ）をクロロホルムに溶解させ、−１０°に冷やす。アルコールの冷却溶液に、アリコートのチオニルクロリド（１０ｍＭｏｌｅ）を３０分かけて加え、その後に、攪拌した反応混合物を室温にさせて、終夜放置する。反応混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、クロロホルムで抽出し、硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を蒸発して除去して、クロロメチルエステルを得る。
【０１４０】
ｄ）ｔｒａｎｓ−（４−ジメチルチオメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸メチルエステルスルホニウムヨージドの合成［ＴＸＡ］
上記６で得られたクロロメチルエステルをトリフルオロ酢酸に溶解させ、攪拌溶液を過剰のヨウ化カリウムで終夜処理する。ＴＦＡ溶液を不溶性塩から濾過し、そこに２倍のモル過剰のジメチルスルフィドを加え、温めて還流する。２時間の反応後、溶液を冷ジエチルエーテルで処理し、そこで、沈殿した生成物スルホニウムヨージドをオフホワイトの粉末として得て、濾過後、エーテルで洗浄し、空気乾燥する。
【０１４１】
ＴＸＡ−Ｓの合成への代替経路として、以下のように概説し、説明する。この例では、上記で得られた４−ｔｒａｎｓヒドロキシメチルシクロヘキサンカルボン酸メチルエステルを、そのＯ−メシルスルフェートエステルに変換し、続いて、鹸化および酸性化後、ジメチルスルフィドを用いるアルキル化によって、所望のスルテイン塩生成物を得る。
【化７】
2018502144.tif 000009
【０１４２】
ｅ）ｔｒａｎｓ−（４−Ｏ−メシルヒドロキシメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸メチルエステルの合成［ＭＨＭＸ−ＯＭｅ］
上記で得られたヒドロキシメチルメチルエステル（４ｍＭｏｌｅ）をピリジンに溶解させ、−１０°に冷却する。アルコールの冷却溶液に、アリコートでメタンスルホニルクロリド（１０ｍＭｏｌｅ）を３０分かけて加え、続いて、攪拌した反応混合物を室温にさせて、終夜放置する。反応混合物を冷水（１００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチルで抽出して、有機層を洗浄して水から繰り返し抽出して、最後に硫酸マグネシウムで脱水し、生成物（２ｍＭｏｌｅ）を得る。代替として、同様のプロトコールにより、メシルクロリドをトシルクロリドで置換してもよい。
【０１４３】
ｆ）ｔｒａｎｓ−（４−ジメチルチオメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸メチルエステルスルホニウムヨージドの合成［ＤＭＴＸＯＭｅ］
上記６で得られたクロロメチルエステルをトリフルオロ酢酸に溶解させ、攪拌溶液を過剰のヨウ化カリウムで処理する。ＴＦＡ溶液を不溶性塩から濾過し、そこに２倍のモル過剰のジメチルスルフィドを加え、温めて還流する。２時間の反応後、溶液を冷ジエチルエーテルで処理し、そこで、沈殿した生成物スルホニウムヨージドをオフホワイトの粉末として得て、濾過後、エーテルで洗浄し、空気乾燥する。
【０１４４】
ｇ）ｔｒａｎｓ−（４−ジメチルチオメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸スルホニウムクロリドの合成［ＴＸＡ−Ｓ］
上記２つの手順から得られた生成物スルホニウム塩を合わせて、一部（約４ｍＭｏｌｅ）をエタノールに溶解させた。溶液を氷浴において冷却し、モル等量の水酸化ナトリウムエタノール溶液を、アリコートで、３０分かけて加える。攪拌しながら、混合物を室温にさせ、過剰の塩酸エタノール溶液で処理し、ナトリウム塩を沈殿させ、これを濾過により除去する。濾過したエタノール溶液に、冷エーテルを加えて、生成物スルホニウムクロリドを沈殿させ、これを濾過し、冷エーテルで洗浄し、空気乾燥させる。
【０１４５】
上記２つの方法に加えて、ＴＸＡ−Ｓは、多数の他の経路、文献に記載されているいくつかにより調製することもでき、一方他のものは、確立された化学合成方法に従うことができる。前者の中には、テレフタル酸モノニトリルから出発するもの、および対応するパラ置換ベンゼンの水素添加に基づく方法がある。例えば、高圧下での、４−メチルチオメチル安息香酸の水素添加により、対応するシクロヘキサン化合物が得られ、ヨードメタン、または他のヨウ化アルキル、またはトシル、メシルもしくはトリフリルエステルを用いるアルキル化後、所望のスルタンを得ることもできる。
【化８】
2018502144.tif 000010
【０１４６】
Ｂ．サリチル酸リシル（ＩＶｂ）：
他のアミノ酸についても同様に、リジンのサリチル酸エステルは、他のアミノ酸サリチル酸エステルがそうであるように、ペプチド合成のためにｔＢＯＣ保護されたアミノ酸（酸に不安定な側鎖保護基を有する）を、サリチル酸ｔ−ブチルエステルのフェノール基を用いてエステル化することによって調製する。第１の例では、アセトニトリルに溶解させた、ジｔＢＯＣリジン、１０ｍｍｏｌと、市販のサリチル酸ｔ−ブチル（そうでなければ、ｔ−臭化ブチルとサリチル酸銀から調製する）、１０ｍｍｏｌを、ジクロロメタン中で等量のジヂクロヘキシルカルボジイミドで処理する。攪拌しながら、室温で、２〜４時間、反応を進めさせ、その後、沈殿したジシクロヘキシル尿素を濾過により除去して、減圧下で保護されたエステルを溶媒から乾燥させる。５％の重炭酸ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水後、生成物を、冷却したエーテル中の５０％トリフルオロ酢酸で処理し、沈殿した生成物サリチル酸リシルを、ジトリフルオロ酢酸塩として濾過により得る。
【化９】
2018502144.tif 000011
【０１４７】
Ｃ．Ｎ−（２−Ｎ’，Ｎ’ジメチルアミノエチル）β−アラニンｔ−ブチルエステル：
この中間体を以下のように調製する。ベータアラニンｔ−ブチルエステル、１０ｍｍｏｌを炭酸ナトリウムのアルコール溶液（０．１Ｍ）に溶解させ、室温で攪拌しながら、１０ｍｍｏｌの２−Ｎ’，Ｎ’ジエチルアミノエチルブロミドヒドロブロミドをそこに加え、ｐＨをモニターし、必要であれば水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ）を加えて、８．５から９．０の間に維持する。続く塩基の取り込みを中止して、反応混合物を凍結乾燥させ、生成物を、無機塩を含まないプロパノールに溶解する。
【化１０】
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【０１４８】
Ｎ−（２−Ｎ’，Ｎ’ジメチルアミノエチル），Ｎ−スクシン−（２’−Ｎ’’ヒドロキシスクシミデート）アミドβ−アラニンｔ−ブチルエステルを以下のように調製する。Ｎ−（２−Ｎ’，Ｎ’ジメチルアミノエチル）β−アラニンｔ−ブチルエステル、４ｍｍｏｌをアセトニトリルに溶解させ、コハク酸，ジＮヒドロキシルスクシンイミドエステル、４ｍｍｏｌをアセトニトリルに加える。攪拌しながら、室温で２時間、反応を進めさせる。
【化１１】
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【０１４９】
Ｄ．Ｎ−（２−Ｎ’，Ｎ’ジメチルアミノエチル），Ｎ−スクシン−（２’−７−アミノアクチノマイシンアミド）アミドβアラニン（Ｖｂ）：
上記反応混合物の４分の１のアリコートを取り出し、絶えず攪拌しながら、７−アミノアクチノマイシンＣ、１ｍｍｏｌをそこに加え、さらなる反応を終夜進めさせる。反応混合物を冷水に注ぎ入れ、生成物ｔ−ブチルエステルを酢酸エチルへの抽出により得て、硫酸マグネシウムで脱水し、減圧下で乾燥させる。ｔ−ブチルエステル基を、ポリスチレンスルホン酸樹脂を用いるアセトニトリル中のエステル溶液の処理によって除去し、樹脂からの濾過後に溶媒を除去することによって最終生成物を得る。
【化１２】
2018502144.tif 000014
【０１５０】
Ｅ．Ｎ−（２−Ｎ’，Ｎ’ジメチルアミノエチル），Ｎ−スクシン−（２’−アルギニルグリシルアルパルチルアミド）アミドβアラニン（Ｖｃ）：
上記＃９からの残留反応混合物をトリペプチドアルギニルグリシルアルパルチルアミド（ＲＧＤアミド、３ｍｍｏｌ）で処理し、反応をさらに終夜進めさせる。上記＃１０のように後処理して、生成物トリペプチド誘導体を６０％の収率で得る。
【化１３】
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【０１５１】
Ｆ．Ｄ−α−ジュウテログリシルアスパルチルアミド（ＶＩｂ）：
β−アラニンに代えてアルパラギン酸β−ｔ−ブチルエステルアミドを使用する以外は、上記＃２におけるＤ−α−ジュウテログリシルβ−アラニン（１Ａａ）に対して記載したようにして、この標的ジペプチドアミドを得る。前のように、保護エステル基を除去して、ジペプチドアミドを７０％の収率で得る。
【０１５２】
［生化学アッセイ：インビトロ線維素溶解アッセイ］
アミノカプロン酸（ＡＣＡ）およびトラネキサム酸（ＴＸＡ）に基づく抗線維素溶解療法の代替として調製された合成化合物のいくつかの相対的阻害効果を決定するために、以下の実験を試みる。これらのアッセイの原理および手順は以下の通りである。
ａ）これらの線維素溶解アッセイにおける共役酵素反応
アッセイは、４つの主反応から構成される。
（ａ）フィブリノーゲンの不溶性フィブリン血栓へのトロンビンの触媒作用による変換。可溶性ヒトフィブリノーゲンは、これらのアッセイの構成要素である。このアッセイは、公知のフィブリノーゲンの部分的タンパク質分解を引き起こし、重合して不溶性、不透明の「血栓」を得るフィブリンを生成する、ヒトトロンビンを加えることによって開始する。これは、生理学的血栓の多数の属性（attribute）を欠くため、生理学的に得られたフィブリン血栓とは同じではない。しかしながら、不溶性フィブリンポリマーである血栓の必須の構成成分は有する。
（ｂ）プラスミノーゲンの重合フィブリンへの結合。ヒトプラスミノーゲンは、これらのアッセイ混合物の構成要素である。ヒトプラスミノーゲンは、不溶性重合フィブリンに非常に高い親和性で結合することが知られているが、フィブリノーゲンに対しては非常に弱い親和性を有する。溶液中のプラスミノーゲンは、その活性剤によって酵素プラスミンに活性化されるが、フィブリンに結合したプラスミノーゲンは、溶液中のプラスミノーゲンよりも高い速度の程度で、同じ活性剤により活性化されることがよく認識されている。
（ｃ）フィブリンに結合したプラスミノーゲンをプラスミンに触媒作用により変換したウロキナーゼ（ＵＫ）または組織プラスミノーゲン活性剤（ＴＰＡ）。ＵＫまたはＴＰＡのいずれかは、完全なアッセイインキュベーション混合物の一部であり、その結果、プラスミノーゲンは、線維素溶解酵素プラスミンへと活性化され、および不溶性フィブリンへのその作用により、これらのアッセイの過程で形成されたフィブリン血栓を溶解することができる。
（ｄ）生じたプラスミンの、これらのアッセイの過程で形成されたフィブリン血栓への作用  アッセイインキュベーションにおいて存在するプラスミノーゲン活性剤（ＵＫまたはＴＰＡ）は、このアッセイに含まれるプラスミノーゲンを活性化し、アッセイの過程で形成されるフィブリンに結合したプラスミノーゲンを選択的に活性化する
【０１５３】
ｂ）アッセイ混合物の構成とその構成要素
これらの線維素溶解アッセイは、以下の構成要素を有する；全ては、１００ｍＭｏｌａｒのＮａＣｌ、１０ｍＭｏｌａｒのＣａＣｌ２、５０ｍＭｏｌａｒのＨｅｐｅｓ−ＮａＯＨからなる緩衝液（３７°でｐＨ７．４）中で調製する。全ての構成要素は、適当なより高いストック濃度で調製され、そこからアリコートを取り、最終容量４００μｌｉｔｅｒまで混合する。含まれる成分およびそれらの最終（アッセイ）濃度は、フィブリノーゲン（８μＭｏｌａｒ）、プラスミノーゲン（０．２μＭｏｌａｒ）、ＵＫ（１０ｎＭｏｌａｒ）またはＴＰＡ（５ｎＭｏｌａｒ）、トロンビン（５００ＮＩＨ単位）および線維素溶解阻害剤、含まれる場合（５０μＭｏｌａｒ、または５μＭｏｌａｒから５ｍＭｏｌａｒの間の濃度変動）である。
【０１５４】
ｃ）アッセイプロトコール
アッセイを、９６ウェルマイクロタイタープレートで行う。プレートを３７°に維持したプレートリーダーサンプルコンパートメントに置く。線維素溶解阻害剤のプレインキュベーションを伴ってまたは伴わずに、アッセイを目的のタンパク質について、終夜行う。これらの２つのプロトコールは以下の通りである。
（ａ）プレインキュベーションを伴わない実験。これらのアッセイは以下のように構成される。フィブリノーゲンとプラスミノーゲンのアリコートをアッセイウェルに加え、続いて目的の線維素溶解阻害剤化合物、および十分な緩衝液を加えて、容量３８０μｌｉｔｅｒとする。アッセイ溶液を混合および攪拌し、マイクロタイタープレートをプレートリーダーに置く。トロンビンとウロキナーゼまたはＴＰＡのいずれかを含有する溶液（２０μｌｉｔｅｒ）を送達することにより、アッセイを開始する。アッセイウェルの吸光度を４０５ｎｍで測定し（白色のゲル様フィブリン血栓の形成によるウェルの不透明性によって引き起こされる）、３０秒間隔で記録する。
（ｂ）抗線維素溶解化合物を用いてプレインキュベーションしたタンパク質に関する実験  これらの実験は、上記のように構成され、容量３８０μｌｉｔｅｒのアッセイ溶液に関して行い、アッセイ溶液は、室温で終夜（１６時間）、密封して保持する。プレインキュベーションの後に、アッセイ溶液をプレートリーダー中で３７°に温め、アッセイを、上述の（ａ）のように、トロンビンとＴＰＡまたはウロキナーゼを加えて開始して、実行する。
【０１５５】
血栓の溶解を緩やかにする抗線維素溶解薬の役割を図１に示すが、これは、上記プロトコール３（ａ）および３（ｂ）に記載した共役線維素溶解アッセイから得られたデータのタイプを示す。いずれの線維素溶解阻害剤も存在しない場合（対照、赤で示される）、アッセイ混合物の光学密度に急速な増加がみられ、５〜１０分でピークに到達する。これは、アッセイにおいてフィブリンが形成することを表す。フィブリンがアッセイ混合物中に増加するので、プラスミノーゲンに対する結合部位の量が増大し、したがって、増大した量のフィブリンに結合したプラスミノーゲンをその活性化酵素に与え、プラスミンの形成の加速とその結果の線維素溶解が引き起こされる。結果として、アッセイに存在するフィブリンの量の指数関数的崩壊が観察される。このプロセスは、抗線維素溶解化合物の非存在下で、対照アッセイにおいて１０から３０分間にわたって上記で示される。概算として、これらは、２つの連続した指数関数的プロセス、第１には、先行するフィブリン、または血栓の形成、第２には、血栓の分解または線維素溶解プロセスと考えることができる。これらの共役アッセイで決定されるように、線維素溶解阻害剤の有効性のおおよその尺度は、反応の第２の部分におけるアッセイ混合物の光学密度における、擬指数関数的減少の半減期である。線維素溶解の阻害、および推測して、生理学的血栓溶解プロセスへの化合物の有効性についてのより正確な尺度は、観察された線維素溶解の半減期を線維素溶解阻害剤濃度の関数として記録することによって得ることができる。これらの研究の目的として、単一の濃度において相対的阻害指数を決定し、これを同じ濃度においてＡＣＡおよびＴＸＡの阻害効果と比較することで十分である。
【０１５６】
合成線維素溶解阻害剤候補に関する阻害データを得ることに加えて、これらのアッセイにおける阻害化合物（ならびにＡＣＡおよびＴＸＡ）とタンパク質のプレインキュベーション後にも、同じアッセイを行う。トロンビン、ウロキナーゼ、ＴＰＡ、およびプラスミノーゲンは、それらの構造に関連する少なくとも１つのクリングル構造を有することが知られている。ＡＣＡとＴＸＡは両方、クリングル構造を結合することが示され、それらが共通の結合部位で結合することが知られているため（Ｘ線データ）、ＡＣＡおよびＴＸＡと比較した合成阻害剤の阻害有効性について、プレインキュベーションの効果を決定することは重要である。これは、これらの確立した抗血栓溶解剤とは異なり、候補化合物が、ＡＣＡおよびＴＸＡにおけるプロトン化アンモニウム基を置き換えるジメチルスルホニウム基を有するために、これらが結合するタンパク質をメチル化し、結果として、このような化合物、またフィブリンに対する結合部位を消失させることができるためである。これは、抗血栓溶解治療剤としてのＡＣＡおよびＴＸＡを置き換えるために、抗血栓溶解薬としてのこれらの候補化合物を設計および合成することにおいて主要な理論的解釈であった。得られた結果を表１に示す。
【０１５７】
【表１】
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【０１５８】
これらの結果の大まかな調査は、これらの予備実験が、ＡＣＡまたはＴＸＡのいずれかを使用することにより生じ得るよりも、これらのスルホニウム塩を使用して得られた抗線維素溶解効果の方がはるかに有効であることを指摘することを明確に示す。これらの観察は、次世代の抗線維素溶解医薬品を構築するための、非常に強力で注目すべき基礎となる。
【図１】
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【国際調査報告】
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