(57)【要約】  本発明は、色不安定性または色褪せの防止に関する。天然由来の染料安定剤であるフロレチンの使用、並びに、有色の飲料または食品製品の色不安定性または色褪せを防止する方法であって、前記製品中に前記安定剤を含むことによる方法を対象とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
有色の飲料または食品製品の色を安定化するための、式（Ｉ）
【化１】
2018501793.tif 000015
の化合物またはその誘導体もしくはその塩の使用。
【請求項２】
有色飲料または食品製品の色不安定性または色褪せを防ぐための、式（Ｉ）
【化２】
2018501793.tif 000016
の化合物またはその誘導体もしくはその塩の使用。
【請求項３】
前記化合物（Ｉ）をアスコルビン酸と組み合わせて用いる、請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
前記有色の製品が、天然由来の染料もしくはその合成された等価物または合成染料を含む、前述の請求項のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
前記天然由来の染料が、アナットー抽出物、アスタキサンチン、脱水ビート、カンタキサンチン、カラメル、ベータ−アポ−８’−カロテナール、ベータ−カロテン、コチニール抽出物、カルミン、銅クロルフィリン（ｃｈｌｏｒｐｈｙｌｌｉｎ）ナトリウム、グルコン酸第１鉄、乳酸第１鉄、ブドウ色素抽出物、エノシアニナ、ヘマトコッカス藻粗粉、果汁、野菜汁、キャロット種子油、トウモロコシ胚乳油、パプリカ、パプリカ含油樹脂、ファフィア属酵母、リボフラビン、サフラン、二酸化チタン、ターメリック含油樹脂、ビキシンおよびこれらの組み合わせから成る群から選択される、前述の請求項に記載の使用。
【請求項６】
前記合成染料が、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｎｏ．１、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｎｏ．２、ＦＤ＆Ｃ  Ｇｒｅｅｎ  Ｎｏ．３、Ｏｒａｎｇｅ  Ｂ、Ｃｉｔｒｕｓ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２、ＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．３、ＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．４０、ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．５、ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．６、Ｃｉｔｒｕｓ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２８、Ｄ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．１０、合成酸化鉄、グルコン酸第１鉄、ウルトラマリンブルー、ウルトラマリングリーン、ウルトラマリンバイオレット、ウルトラマリンレッドおよびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項４に記載の使用。
【請求項７】
前記化合物（Ｉ）が、約０．１ｐｐｍから約５００ｐｐｍの範囲で存在している、前述の請求項のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記化合物（Ｉ）が、約１ｐｐｍから約１００ｐｐｍの範囲で存在している、前述の請求項のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記化合物（Ｉ）が、約１０ｐｐｍから約５０ｐｐｍの範囲で存在している、前述の請求項のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
アスコルビン酸が、約０．１ｐｐｍから約５００ｐｐｍの範囲で存在している請求項３から９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１１】
アスコルビン酸が、約１ｐｐｍから約３００ｐｐｍの範囲で存在している、前述の請求項に記載の使用。
【請求項１２】
アスコルビン酸が、約５０ｐｐｍから約２００ｐｐｍの範囲で存在している、前述の請求項に記載の使用。
【請求項１３】
有色の飲料または食品製品の色を安定化し、色不安定性または色褪せを防ぐ方法であって、有効量の式（Ｉ）
【化３】
2018501793.tif 000017
の化合物またはその誘導体もしくはその塩、または有効量の式（Ｉ）化合物またはその誘導体もしくはその塩を含む着色組成物と、最終製品またはその前の形とを組み合わせることを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、有色の飲料または食品製品の色不安定性または色褪せの防止に関する。天然由来の色安定剤、および前記安定剤を製品中に含むことにより有色の製品の色不安定性または色褪せを防ぐ方法を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
消費者は、食品もしくは飲料製品または任意の消費者製品の色により、該製品を受け入れるか拒絶するかをしばしば決定する。光、空気、極端な温度、湿気への曝露および／または保管状態により引き起こされる退色を、食品に色を付与することによって相殺することにより、受け入れを促すこともできる。
【０００３】
酸化および／または還元は、色不安定性または色褪せの主要な原因であると信じられている。酸化および／または還元は、化学的に、光により、または微生物もしくは酵素によって生物学的に誘導することができ、しかしながら、一般に光が支配的なイニシエータである。天然および合成（または人工）染料のいずれも、最も典型的には、ＵＶ光への曝露時に劣化し、または色褪せることが知られている。アスコルビン酸、ヒドロキシメチルフルフラール（ＨＦＣＳ中で形成されるＨＭＦ）および金属などの二次的な化学的還元イニシエータが、特定の飲料中に存在するかもしれない。さらに、これらのイニシエータは、光とともに働いて、染料を色褪せさせる。従って、飲料製品中にアスコルビン酸などの抗酸化剤が存在すると、色褪せが促進され得る。
【０００４】
染料は、ＨＭＦおよび他の糖分解産物と反応して、褐色化化合物を形成し得る。果汁中で非常に顕著である該反応の機構は既知であり、極めて温度依存的であって、酸素の存在により早まる。ガラスまたはポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）容器中に飲料を包装する場合、よりいっそう色不安定性または色褪せが問題になりやすい。
【０００５】
退色を防ぐための多くの解決策が、これまでに記載されてきた。文献ＷＯ９７１４３１９Ａ１には、アントシアニンの輝度を深め、改善し、その安定性を増加させるため、アントシアニンと、フラボノイドグルクロニド類および硫酸塩、ガラクツロニド並びにコーヒー酸誘導体から選択される色素改善剤とを組み合わせることが記載されている。
【０００６】
文献ＪＰ６−９３１９９には、天然のガーデニアイエロー染料の抗色褪せ剤として、クロロゲン酸、コーヒー酸またはフェルラ酸を使用することが開示されている。文献ＵＳ５，３１４，６８６は、ローズマリー、セージおよびタイムが、アナットー、ビキシン、パプリカおよびカロテノイド類などの天然の染料に対して色温存特性を有することを開示している。
【０００７】
文献ＵＳ５，３３６，５１０には、ビタミンＣ強化されたアゾ着色飲料の色安定剤としてリボフラビン（ビタミンＢ２）を使用することが開示されている。文献ＵＳ６，３７９，７２９には、アントシアニンで着色された食品または飲料の色安定化効果を得るため、亜硫酸およびソルビン酸を組み合わせて使用することが開示されている。文献ＷＯ２０１３０１３０１４には、天然源に由来する染料の保護物質として、酵素的に修飾されたイソクエルシトリン（ＥＭＩＱ）、ルチンおよびミリシトリン、並びにフマル酸を使用することが記載されている。
【０００８】
文献ＵＳ８，４２０，１４１（ＵＳ２００４／００９１５８９）には、合成着色飲料の色褪せを、炭素原子に不飽和および酸化のいずれも含有するＣ６−Ｃ３フェニルプロペンカルボニル化合物である、植物由来の色安定剤を用いて防止することが記載されている。植物由来の色安定剤の一群として、カルコン類について、具体的に言及されたカルコン類の一つであるフロレチンとともに言及されている。しかしながら、カルコンは、不飽和の共役ケトンである一方で、フロレチンは、ジヒドロカルコンであり、従ってケト基と結合する二重結合を持たない。フロレチンは、従って誤って言及されており、特にスチリル不飽和の除去により色褪せ保護の消失がもたらされることについて述べることにより、前記二重結合の重要性が、３から６段においてよりいっそう強調されている。同じことは、さらに、天然起源の高強度甘味料であるモナチンの劣化を減少させるためにＣ６−Ｃ３フェニルプロペンカルボニル化合物を用いるＵＳ２０１０／００７５００５に対しても適用される。
【０００９】
Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １４１（２０１３）３４５１〜３４５８は、カラメルの褐色化強度および抗酸化能力を増加させるための、フロレチンのようなポリフェノール類の使用に関する。糖およびポリフェノールの系において、褐色色素の産生は、ポリフェノール類（またはその熱変化物）と糖カラメル化中間体および生成物との間での化学反応の過程であろうことが述べられている。ＵＳ２０１０／０２０２９９６は、カール、ウェア、および色褪せについて改善された特性を有する、髪のウェーブ組成物における、フロレチンのようなフェノール化合物の使用に関する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
天然または人工の着色料を用いて着色された有色の飲料または食品製品の、色不安定性、色褪せまたは退色を効率的に減少させまたは防止する、天然由来の染料安定化剤の開発に対する当技術分野のニーズがある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明に付随する実施例に示すように、本発明の発明者は、例えば飲料などの消費者製品に、式（Ｉ）の化合物を添加したときに、前記化合物（Ｉ）が、前記製品に対して、合成または天然由来の染料により授けられた色の不安定性、色褪せまたは退色を、驚いたことに減少させまたは防止することができることを見出した。
【００１２】
従って、一つの態様において、本発明は、有色の飲料または食品製品の色を安定化し、色不安定性または色褪せを防止するための、式（Ｉ）
【化１】
2018501793.tif 000002
の化合物またはその誘導体もしくはその塩の使用について言及する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、時間が経つにつれての、フロレチン（５０ｐｐｍ）を有するおよびフロレチンを含まない飲料の吸光度（４６５ｎｍ）を表す。
【図２】図２は、希釈体積（上パネル）またはＡｌｔｒａｔｅｎｅ重量（下パネル）のいずれかを変化させることにより、異なるβ−カロテン濃度での試料の吸光度（４６６ｎｍ）を表す。
【図３】図３は、時間が経つにつれての、非炭酸飲料（試料Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ）の吸光度（４６６ｎｍ）を表す。
【図４】図４は、時間が経つにつれての、炭酸飲料（試料Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ）の吸光度（４６６ｎｍ）を表す。
【図５】図５は、試料ＡおよびＣの値を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
上記のとおり、本発明の発明者らは、式（Ｉ）の化合物が、驚いたことに、合成または天然由来の染料により前記製品に対して授けられた色の、色不安定性または色褪せまたは退色を、実質的に減少させることができ、または防止することができることを見出した。
【００１５】
従って、第一の態様において、本発明は、有色の飲料または食品製品の色を安定化し、色不安定性または色褪せを防ぐための、式（Ｉ）
【化２】
2018501793.tif 000003
の化合物またはその誘導体もしくはその塩の使用について言及する。
【００１６】
一般に、フロレチンとして知られている式（Ｉ）
【化３】
2018501793.tif 000004
の化合物は、天然フェノール類の一種であるジヒドロカルコンである。天然には、リンゴの木の葉およびマンシュウアンズ中に見出すことができる。フロレチンは、リンゴ、リンゴジュースおよびアップルサイダーから得ることができる。また、この化合物は、市販されている。さらに、該式（Ｉ）化合物は、当業者に知られた手順に従い合成することができる。従って、本明細書中で用いる式（Ｉ）の化合物は、任意の合成等価物をも意味する。上述したように、本発明による式（Ｉ）の化合物の使用は、その誘導体またはその塩の使用をも含む。
【００１７】
本明細書で使用する用語「合成等価物」とは、合成的に作製したフロレチンを意味する。
【００１８】
本明細書で使用する用語「誘導体」は、フロレチンエステル、具体的には、酸が１つまたは複数のヒドロキシル基で置換されていてもよい、Ｃ２からＣ６アルカンモノ酸または二酸とのエステルを意味する。かかる酸の例としては、酢酸、リンゴ酸、乳酸または酒石酸が挙げられる。フロレチンの１、２、３または４つのヒドロキシル基は、同一または異なるアルカン酸でエステル化されていてもよい。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物の塩は、アルカリ金属水酸化物およびアルカリ土類金属水酸化物などの無機塩基と形成されてもよい。かかる塩の例としては、ナトリウムおよびカリウム塩が挙げられる。
【００２０】
本明細書で使用する用語「色褪せ」は、色の色相または強度が失われることを意味する。上述のとおり、式（Ｉ）の化合物は、色褪せだけでなく、色不安定性または退色を防止することができる。従って、本明細書で使用する用語「色安定剤」は、色不安定性、色褪せまたは退色を防止するまたは減少させることのできる化合物を意味する。同様に、本明細書中で用いる用語「色安定化量」は、合成または天然由来の染料によって製品に授けられた色の色不安定性、色褪せまたは退色を実質的に減少しまたは防止するのに十分な量を意味する。
【００２１】
本発明による化合物（Ｉ）の有効量は、本発明による飲料もしくは食品製品または他の消費者製品に添加され、または組み合わせられる。その結果、処理される製品の種類および色保護が望まれる時間の長さに応じて、有効量を変更することができる。
【００２２】
好ましい実施形態において、前記色安定剤化合物は、少なくとも１月の期間、より好ましくは少なくとも２月の期間、よりいっそう好ましくは少なくとも３月の期間、よりいっそう好ましくは少なくとも６月の期間、色を安定化し、色不安定性、色褪せまたは退色を防止することができる。
【００２３】
典型的には、該製品が任意の温度への曝露される長さは限定されず、保管、輸送および展示される間に経験する温度の最大幅（例えば、０℃から４０℃、１０℃から３０℃、２０℃から２５℃）を含む周囲条件の下で保存される。
【００２４】
本明細書で使用する用語「飲料」は、ガラスまたはプラスチック（ＰＥＴなど）容器に含有されているかもしれない完成した飲料を意味し、しかしながら、飲料製造における任意の時点、すなわち、シロップ、濃縮物または完成された飲料に天然由来の色安定剤が添加してもよい。本明細書中で用いる、かかる飲料には、炭酸飲料、非炭酸飲料、ソフトドリンク、果汁、果汁風味ドリンク、果物風味ドリンク、栄養ドリンク、ハイドレーションドリンク、スポーツドリンク、健康およびウェルネスドリンク、清涼飲料、冷凍レディ・トゥ・ドリンク飲料、冷凍炭酸飲料、液状濃縮物、コーヒー飲料、茶飲料、乳製品飲料、大豆飲料、野菜ドリンク、フレーバーウォーター、エンハンスドウォーターまたはアルコール飲料が含まれるがこれらに限定されない。
【００２５】
従って、本発明による飲料製品は、無発泡および炭酸飲料のいずれも含む。本明細書中、用語「炭酸飲料」は、アルコールを含まない液体として消費されることを意味し、また、０．２ＣＯ２体積以上の二酸化炭素濃度を持つように作られる、水、ジュース、風味および甘味料のいかなる組み合わせも含む。用語「ＣＯ２体積」とは、液体に吸収される二酸化炭素の量であって、１ＣＯ２体積が、２５℃において製品１リットルに対し１．９６グラムの二酸化炭素（ＣＯ２）（０．０４５５Ｍ）と等しい量を意味するよう理解される。炭酸飲料の非限定的な例は、ビタミン類、アミノ酸、タンパク質、炭水化物、脂質またはそれらのポリマーなどの代謝的に活性な物質の存在により健康またはウェルネス上の利益を提供する飲料と同様に、ソフトドリンクの方式によって炭酸ガスを入れられた、風味付けされたセルツァー炭酸水、ジュース、コーラ、レモンライム、ジンジャーエールおよびルートビア飲料を含む。かかる製品は、牛乳、コーヒーまたは茶もしくは他の植物由来の固体を含有するよう作製されてもよい。かかる飲料は、１つまたは複数の機能性食品を含有するよう作製することもできる。本明細書中、「機能性食品」は、最低限、専門誌またはテキストにおいて書かれているような、一般的もしくは特定の健康上の利益またはウェルネス感覚のいずれかを持つことが明らかになっている物質である。機能性食品は、しかしながら、必ずしも特定の種類の病状を治す、または予防するよう作用しない。
【００２６】
本明細書中、用語「無発泡飲料」は、アルコールを含まない液体飲料として消費されることを意味し、０．２体積以下の二酸化炭素を持つ、水および成分の任意の組み合わせである。無発泡飲料の非限定的な例は、フレーバーウォーター、茶、コーヒー、ネクター、ミネラルドリンク、スポーツ飲料、ビタミンウォーター、ジュースを含む飲料、パンチまたはこれらの飲料の濃縮物並びに少なくとも約４５重量パーセントのジュースを含有する飲料濃縮物を含む。かかる飲料は、ビタミン類、アミノ酸、タンパク質系、炭水化物系、または脂質系物質が追加されていてもよい。述べたように、本発明は、炭酸または無発泡のジュースを含む製品を含む。「ジュースを含む飲料」または「ジュース飲料」は、無発泡か炭酸かにかかわらず、該果物の天然の液体画分に懸濁または溶解させることができる、果物、野菜もしくはナッツまたはこれらの混合物の、いくつかまたはすべての成分を含む製品である。
【００２７】
例として、ジュース製品およびジュースドリンクは、リンゴ、クランベリー、セイヨウナシ、モモ、プラム、アンズ、ネクタリン、ブドウ、サクランボ、カラント、ラズベリー、グーズベリー、ブラックベリー、ブルーベリー、イチゴ、レモン、オレンジ、グレープフルーツ、パッションフルーツ、マンダリン、ミラベルプラム、トマト、レタス、セロリ、ホウレンソウ、キャベツ、ウォータークレス、タンポポ、ダイオウ、ニンジン、ビート、キュウリ、パイナップル、ギュウシンリ、ココナツ、ザクロ、グアバ、キウイ、マンゴー、パパイヤ、スイカ、ラカンカ、カンタループ、パイナップル、バナナもしくはバナナピューレ、レモン、マンゴー、パパイヤ、ライム、タンジェリンの果実およびこれらの混合物から得ることができる。
【００２８】
飲料のｐＨまたは特定のｐＨもしくはｐＨ範囲に対する緩衝能力を管理するため、さまざまな酸および同一または異なる酸の塩と酸との組み合わせを用いてもよい。ｐＨは、一般に、２．５から６の範囲のｐＨに調整される。食用であり異風味が提供されない限り実質的にいかなる有機酸塩も用いることができる。塩または塩の混合物の選択は、溶解性および味により決定されるであろう。クエン酸塩、リンゴ酸塩およびアスコルビン酸塩は、特に果汁飲料において、その風味がきわめて受け入れられやすいと判断される、摂取可能な複合体を生じる。酒石酸は、乳酸と同様に、特にブドウジュース飲料において受け入れられ、風味および水溶性に影響し得るがより長鎖の脂肪酸が用いられるかもしれない。
【００２９】
本発明に付随する実施例に示すように、本発明の発明者らはさらに、アスコルビン酸と組み合わせてフロレチンを添加した場合、認められる色安定化効果が驚くほど増加し、すなわち、時間が経つにつれ、単独で添加したフロレチンまたはアスコルビン酸と比較した場合よりも、飲料が安定的に色を維持することを見出した。従って、本発明の特定の一実施形態において、もう一つの安定剤と組み合わせて、製品にフロレチンを添加する。好ましい実施形態において、前記安定剤はアスコルビン酸である。
【００３０】
本発明のもう一つの特定の実施形態において、前記有色の飲料または食品製品は、天然由来の染料またはその合成等価物または合成染料を含む。
【００３１】
本発明による前記天然由来の染料の非限定的な例は、アナットー抽出物、アスタキサンチン、脱水ビート、カンタキサンチン、カラメル、ベータ−アポ−８’−カロテナール、ベータ−カロテン、コチニール抽出物、カルミン、銅クロルフィリン（ｃｈｌｏｒｐｈｙｌｌｉｎ）ナトリウム、グルコン酸第１鉄、乳酸第１鉄、ブドウ色素抽出物、エノシアニナ、ヘマトコッカス藻粗粉、果汁、野菜汁、キャロット種子油、トウモロコシ胚乳油、パプリカ、パプリカ含油樹脂、ファフィア属酵母、リボフラビン、サフラン、二酸化チタン、ターメリック含油樹脂、ビキシンおよびこれらの組み合わせである。
【００３２】
もう一つの実施形態において、有色の製品は、合成着色産物を含有する。前記合成染料の非限定的な例は、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｎｏ．１、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｎｏ．２、ＦＤ＆Ｃ  Ｇｒｅｅｎ  Ｎｏ．３、ＯｒａｎｇｅＢ、ＣｉｔｒｕｓＲｅｄ  Ｎｏ．２、ＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．３、ＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．４０、ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．５、ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．６、Ｃｉｔｒｕｓ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２８、Ｄ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．１０、合成酸化鉄、グルコン酸第１鉄、ウルトラマリンブルー、ウルトラマリングリーン、ウルトラマリンバイオレット、ウルトラマリンレッドおよびこれらの組み合わせである。
【００３３】
かかる天然または合成染料は、市販されており、あるいは、かかる染料は、当業者により知られた手順に従い合成することができる。当業者は、所望の製品中に存在する染料の最適な量が、全体として所望される染料、溶解性、規制上の承認などの因子により決定されることを認識するであろう。当業者は、それらの因子に基づいて、所望の製品に対する、染料の最適な量を容易に決定することができる。
【００３４】
有色の飲料は、１つまたは複数の上述の染料の存在の効力によって有色であってもよい。
【００３５】
本発明の特定の実施形態において、前記化合物（Ｉ）は、前記飲料または食品製品中に、約０．１ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの範囲で存在している。好ましい実施形態において、前記化合物（Ｉ）は、約１ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの範囲で存在している。本発明のより好ましい実施形態において、前記化合物（Ｉ）は、約１０ｐｐｍ〜約５０ｐｐｍの範囲で存在している。
【００３６】
本発明のもう一つの特定の実施形態において、アスコルビン酸は、約０．１ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの範囲で存在している。好ましい実施形態において、アスコルビン酸は、約１〜約３００ｐｐｍの範囲で存在している。より好ましい実施形態において、アスコルビン酸は、約２０〜約２００ｐｐｍの範囲で存在している。
【００３７】
本発明による天然由来の色安定剤は、着色組成物の形で消費者製品に対して提供されてもよい。前記着色組成物は、製品の製造のいかなる段階で含められてもよい。例として、前記製品が飲料の場合、前記着色組成物は、シロップ、濃縮物または完成された飲料に対し添加することができる。
【００３８】
ここで、本発明は以下の実施例を参照してより詳細に記載されるが、これらの実施例は、いかなる場合も本発明の範囲を限定するものとされてはならない。
【００３９】
実施例
材料および方法
材料および試薬
フロレチン（ロット番号０３Ｋ０８０）は、ベニエル（ムルシア、スペイン）のインテルキム、ソシエダッド  アノニマにより提供された。β−カロテン（Ａｌｔｒａｔｅｎｅ１０％ＷＳＣ  ロット番号ＦＥＸ１０１１００４−５）は、アライド・バイオテック社（台北、中華民国台湾省）により提供された。Ｌ−アスコルビン酸（ロット番号００００２２４３９８）およびクエン酸（ロット番号００００１２８０７９）は、Ｐａｎｒｅａｃ  Ｑｕｉｍｉｃａ  Ｓ．Ｌ．Ｕ（カステリ・デル・バレス、バルセロナ、スペイン）からである。カラメル染料Ｅ１５０Ｄ粉末（参照番号ＭＤＣ／２８９２／１５）および赤ビートジュース粉末（参照番号ＭＤＣ／２８９３／１５）は、Ｍａｇｎｉｌ  Ｄｙｅ  Ｃｈｅｍ（ムンバイ、インド）により提供された。飲料の調製のために、ミネラルウォーター（無発泡および発泡性）を用いた。解析目的のため、水は、二回蒸留し、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅシステム（Ｍｉｌｌｉ−Ｑ）を介して精製した。
【００４０】
β−カロテンを用いた初期段階研究における飲料の作製
飲料は、ｐＨ３．３のクエン酸を用いて媒体（浸透水）を酸性化し、原液からβ−カロテンを添加することにより調製した。本研究は、光存在下、室温で行った。
【００４１】
試料の組成は、下記の表により明らかにする。
【表１】
2018501793.tif 000005
【００４２】
試料は、最初と、保管の２５および３１日後に解析した。
【００４３】
β−カロテンを用いた研究における、飲料の作製
飲料は、媒体（非炭酸飲料には無発泡ミネラルウォーター、および炭酸飲料には発泡性の水）をｐＨ３．３のクエン酸を用いて酸性化し、β−カロテンを原液から添加することにより調製した。フロレチン原液は、フロレチン４００ｍｇをプロピレングリコール１０ｍＬに溶解させることにより調製した。所望のフロレチン濃度に応じて、８７．５μＬまたは２５μＬの該溶液を酸性化された水で１００ｍＬに希釈した。
【００４４】
Ａｌｔｒａｔｅｎｅ原液は、Ａｌｔｒａｔｅｎｅ１０％ＷＳＣ  １００ｍｇを、水２０ｍＬに溶解させることにより調製した。１ｍＬの該原液を酸性化された水で１００ｍＬに希釈した。
【００４５】
該研究は、光存在下、室温で行った。
【００４６】
試料の組成を下記の表に示す。
【表２】
2018501793.tif 000006
【００４７】
試料（５本の非炭酸瓶および５本の炭酸瓶）を調製し、瓶に詰め、低温殺菌し、閉じた。非炭酸試料を、最初と、保管の７、２８、４７、６０および９０日後に解析した。炭酸試料は、最初と、保管の７、２８、６０、７５および１１４日後に解析した。
【００４８】
天然着色料を用いた飲料の作製研究
一連の実験において、飲料は、媒体（脱イオン水）をｐＨ３．３のクエン酸を用いて酸性化し、原液からカラメルのみを添加することにより調製した。
【００４９】
フロレチン原液は、フロレチン４００ｍｇをプロピレングリコール１０ｍＬに溶解させることにより調製した。所望のフロレチン濃度に応じて、１２５または２５０μＬの該原液を、酸性化された水を用いて１００ｍＬに希釈した。
【００５０】
カラメル原液は、カラメル２５０ｍｇを水５０ｍＬに溶解させることにより調製した。１８ｍＬの該原液を、酸性化された水を用いて５００ｍＬに希釈した。試験溶液は、前の溶液９０ｍＬに微生物の混入を避けるため１０ｍＬメタノールを足したものであった（対照）。従って、試験溶液中のカラメルの濃度は、１６２ｐｐｍであった。
【００５１】
もう一つの一連の実験において、赤ビートジュース粉末溶液は、赤ビートジュース粉末１２５０ｍｇを酸性化された水５００ｍＬに溶解させることにより調製した。試験溶液は、前の溶液９０ｍＬに、微生物の混入を避けるためメタノール１０ｍＬを足したもの（対照）を用いて調製した。従って、試験溶液中の赤ビートの濃度は２２５０ｐｐｍであった。
【００５２】
本研究は、光存在下、室温で行った。
【００５３】
試料の組成は下記表において見ることができる。
【表３】
2018501793.tif 000007
【００５４】
試料は、インテルキム、ソシエダッド  アノニマ、ベニエル（ムルシア）において、低温殺菌法を用いずに調製した。
【００５５】
試料は、最初と、保管の２８日後に解析した。赤ビート研究の場合、明らかな退色のため、解析は、保管の１５日後に行った。
【００５６】
解析
島津製作所ＵＶＰｒｏｂｅ２．２１がロードされたコンピューターと接続された、２ｎｍ未満のスペクトル帯域幅を有する島津製作所１６５０ＰＣダブルビーム分光光度計を、すべての吸光光度測定に用いた。
【００５７】
試料スペクトルは、２００ｎｍおよび６００ｎｍの間で行い、吸収極大を決定し、吸収極大での吸光度を記録した。吸光度は、色を表示するパラメーターとして用いた。
【００５８】
各極大において、異なるＡｌｔｒａｔｅｎｅ重量またはＡｌｔｒａｔｅｎｅ原液の異なる希釈のいずれかにより得たβ−カロテン濃度（１〜１０ｐｐｍの４点）に対する吸光度の直線性研究を行った。
【００５９】
その上、該方法の再現性の研究のため、原液から５つの試料を調製し、吸光度を記録した。
【００６０】
色の変化は、２つの異なる波長における吸光度を測定することにより研究した。炭酸試料は、超音波バスを用いてビーカー中で５分脱気し解析した。非炭酸試料はさらなる処理は行わず、直接解析した。各試料は、３回解析した。
【００６１】
ｐＨ測定は、ＧＬＰ２１（Ｃｒｉｓｏｎ）ｐＨメーターを用いて行った。
【００６２】
天然着色料の場合も、同じ測定装置を用いた。試料のスペクトルは、吸収極大を決定するため、２００ｎｍおよび６００ｎｍ間で行い、吸収極大における吸光度を記録した。赤ビートの場合、最大５３２ｎｍを、測定する波長として選んだ。カラメルの場合、極大（２７０ｎｍ）は、アスコルビン酸によってだけでなく、フロレチンによってもまた干渉された。このためおよび文献データに基づいて、測定目的のため、３９０ｎｍを選択した。
【００６３】
結果
β−カロテン
初期段階の研究
異なるサンプリング時間での、４６５ｎｍにおける、試料の吸光度結果を下記表に示す。
【表４】
2018501793.tif 000008
【００６４】
表中、１は、対照飲料、２は５０ｐｐｍのフロレチンで安定化された飲料
【００６５】
表４および図１から理解できるとおり、フロレチンを持たない飲料の吸光度は、保管の２５日後に、劇的に下落した。一方、フロレチン５０ｐｐｍを添加した試料は、吸光度の減衰が減少し、すなわち、試料の色がより長い期間、維持された。
【００６６】
直線性の研究
希釈体積またはＡｌｔｒａｔｅｎｅ重量のいずれかを変化させることにより、異なるβ−カロテン濃度について、４６６ｎｍでの、試料の吸光度結果を下記表に示す。
【表５】
2018501793.tif 000009
【００６７】
表５および図２からわかるように、飲料中のβ−カロテン濃度と線形応答があり、０．９９９９のｒ２パラメーターを得た。
【００６８】
再現性研究
同一試料からの５つの希釈物の、４６６ｎｍでの吸光度結果を、下記表に示す。
【表６】
2018501793.tif 000010
【００６９】
ＲＳＤの低い値は、該方法の再現性が良好であることを示す。
【００７０】
非炭酸飲料研究
異なるサンプリング時間における試料の４６６ｎｍでの吸光度結果を下記表に示す。
【表７】
2018501793.tif 000011
【００７１】
表７に示すように（試料ＢおよびＣを参照）、フロレチンを含む飲料は、何も添加していない飲料の場合と比較してより長い時間保護されていた（初期段階研究から推定されたデータ）。試料ＡおよびＤの場合は、さらにいっそう興味深く、試料Ｄにおいて、時間が経つにつれて、より高い吸光度、すなわち、より安定的な色が提供されることから、フロレチンがアスコルビン酸と相乗的にふるまうことが理解され得る（図３）。
【００７２】
炭酸飲料研究
異なるサンプリング時間における試料の、４６６ｎｍでの吸光度結果を下記表に示す。
【表８】
2018501793.tif 000012
【００７３】
表８において、炭酸飲料の色は、媒体中での酸素の還元のため、時間がたつにつれて、非炭酸よりも安定的であることを示す。
【００７４】
以前の場合のように、試料ＢおよびＣから理解され得るように、飲料の色は、何も添加していない飲料よりも長い時間保護されていた（初期段階研究から推定されるデータ）。試料ＡおよびＤの場合は、さらにいっそう興味深く、試料Ｄにおいて、時間が経つにつれて、より高い吸光度、すなわち、より安定的な色が提供されることから、フロレチンがアスコルビン酸と相乗的にふるまう（図４）。
【００７５】
天然の着色料
赤ビートジュース粉末
異なるサンプリング時間における試料の５３２ｎｍでの吸光度の結果を下記表に示す。
【表９】
2018501793.tif 000013
【００７６】
図５に、試料ＡおよびＣの値を示す。
【００７７】
上述したとおり、赤ビートジュース粉末の場合、退色が極めて明白であり早かったため、保管の１５日後に吸光度を測定した。
【００７８】
かかる結果は、フロレチンが退色から保護し、これが濃度依存的であることを示す。
【００７９】
カラメル
異なるサンプリング時間における試料の３９０ｎｍでの吸光度の結果を下記表に示す。
【表１０】
2018501793.tif 000014
【００８０】
吸光度データは、フロレチンがこの天然着色料を退色から保護することを示す（表１０）。  
【図１】
2018501793.tif 000018
【図２】
2018501793.tif 000019
【図３】
2018501793.tif 000020
【図４】
2018501793.tif 000021
【図５】
2018501793.tif 000022
【手続補正書】
【提出日】平成29年12月6日(2017.12.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
有色の飲料又は食品製品の色を安定化するための、式（Ｉ）
【化１】
2018501793.tif 000023
の化合物又は１つ又は複数のヒドロキシル基で置換されていてもよい、Ｃ２からＣ６アルカンモノ酸又は二酸とのそのエステルもしくはその塩を含む組成物であって、該有色の飲料又は食品製品が染料を含み、該染料がアナットー抽出物、アスタキサンチン、脱水ビート、カンタキサンチン、ベータ−アポ−８’−カロテナール、ベータ−カロテン、コチニール抽出物、カルミン、銅クロルフィリン（ｃｈｌｏｒｐｈｙｌｌｉｎ）ナトリウム、グルコン酸第１鉄、乳酸第１鉄、エノシアニナ、ヘマトコッカス藻粗粉、キャロット種子油、トウモロコシ胚乳油、パプリカ、パプリカ含油樹脂、ファフィア属酵母、リボフラビン、サフラン、二酸化チタン、ターメリック含油樹脂、ビキシン、及びこれらの組み合わせから成る群から選択される天然由来の染料、又はその合成された等価物、或いは合成染料である、
上記組成物。
【請求項２】
有色飲料又は食品製品の色不安定性又は色褪せを防ぐための、式（Ｉ）
【化２】
2018501793.tif 000024
の化合物又は１つ又は複数のヒドロキシル基で置換されていてもよい、Ｃ２からＣ６アルカンモノ酸又は二酸とのそのエステルもしくはその塩を含む組成物であって、該有色の飲料又は食品製品が染料を含み、該染料がアナットー抽出物、アスタキサンチン、脱水ビート、カンタキサンチン、ベータ−アポ−８’−カロテナール、ベータ−カロテン、コチニール抽出物、カルミン、銅クロルフィリン（ｃｈｌｏｒｐｈｙｌｌｉｎ）ナトリウム、グルコン酸第１鉄、乳酸第１鉄、エノシアニナ、ヘマトコッカス藻粗粉、キャロット種子油、トウモロコシ胚乳油、パプリカ、パプリカ含油樹脂、ファフィア属酵母、リボフラビン、サフラン、二酸化チタン、ターメリック含油樹脂、ビキシン、及びこれらの組み合わせから成る群から選択される天然由来の染料、又はその合成された等価物、或いは合成染料である、
上記組成物。。
【請求項３】
前記化合物（Ｉ）をアスコルビン酸と組み合わせて用いる、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記合成染料が、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｎｏ．１、ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｎｏ．２、ＦＤ＆Ｃ  Ｇｒｅｅｎ  Ｎｏ．３、Ｏｒａｎｇｅ  Ｂ、Ｃｉｔｒｕｓ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２、ＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．３、ＦＤ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．４０、ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．５、ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．６、Ｃｉｔｒｕｓ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２、Ｄ＆Ｃ  Ｒｅｄ  Ｎｏ．２８、Ｄ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｎｏ．１０、合成酸化鉄、グルコン酸第１鉄、ウルトラマリンブルー、ウルトラマリングリーン、ウルトラマリンバイオレット、ウルトラマリンレッド及びこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記化合物（Ｉ）が、約０．１ｐｐｍから約５００ｐｐｍの範囲で存在している、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記化合物（Ｉ）が、約１ｐｐｍから約１００ｐｐｍの範囲で存在している、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記化合物（Ｉ）が、約１０ｐｐｍから約５０ｐｐｍの範囲で存在している、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
アスコルビン酸が、約０．１ｐｐｍから約５００ｐｐｍの範囲で存在している請求項３から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
アスコルビン酸が、約１ｐｐｍから約３００ｐｐｍの範囲で存在している、請求項３から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
アスコルビン酸が、約５０ｐｐｍから約２００ｐｐｍの範囲で存在している、請求項３から７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
アナットー抽出物、アスタキサンチン、脱水ビート、カンタキサンチン、ベータ−アポ−８’−カロテナール、ベータ−カロテン、コチニール抽出物、カルミン、銅クロルフィリン（ｃｈｌｏｒｐｈｙｌｌｉｎ）ナトリウム、グルコン酸第１鉄、乳酸第１鉄、エノシアニナ、ヘマトコッカス藻粗粉、キャロット種子油、トウモロコシ胚乳油、パプリカ、パプリカ含油樹脂、ファフィア属酵母、リボフラビン、サフラン、二酸化チタン、ターメリック含油樹脂、ビキシン、及びこれらの組み合わせから成る群から選択される天然由来の染料、又はその合成された等価物、或いは合成染料で、有色の飲料又は食品製品の色を安定化し、色不安定性又は色褪せを防ぐ方法であって、該方法が有効量の式（Ｉ）
【化３】
2018501793.tif 000025
の化合物又は１つ又は複数のヒドロキシル基で置換されていてもよいＣ２からＣ６アルカンモノ酸又は二酸とのそのエステルもしくはその塩或いは有効量の式（Ｉ）化合物又は１つ又は複数のヒドロキシル基で置換されていてもよいＣ２からＣ６アルカンモノ酸又は二酸とのそのエステルもしくはその塩を含む着色組成物と、最終製品又は最終製品の前駆体とを組み合わせることを含む、上記方法。
【国際調査報告】
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