(57)【要約】  免疫または免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が増大した免疫細胞およびその使用が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を増大する方法であって、
(ａ)Ｔ細胞または自然免疫細胞を提供し、そして
(ｂ)該Ｔ細胞または自然免疫細胞を、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を増大させるのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養する
ことを含む、方法。
【請求項２】
培養培地がさらにＴ細胞または自然免疫細胞を活性化させる１以上の薬剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｔ細胞または自然免疫細胞を活性化させる１以上の薬剤が単離された腫瘍抗原、腫瘍ライセート、壊死性腫瘍細胞、腫瘍アポトーシス小体、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ステップ(ｂ)におけるＴ細胞または自然免疫細胞の培養がＴ細胞または自然免疫細胞におけるＮＬＲＰ３下流シグナル伝達の増大をもたらす、請求項１〜３の何れかに記載の方法。
【請求項５】
ステップ(ｂ)におけるＴ細胞または自然免疫細胞の培養がＴ細胞または自然免疫細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質レベルの増加をもたらす、請求項１〜３の何れかに記載の方法。
【請求項６】
自然免疫細胞が樹状細胞、マクロファージまたは単球である、請求項１〜５の何れかに記載の方法。
【請求項７】
方法が自然免疫細胞を提供し、該自然免疫細胞を少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する自然免疫細胞の抵抗性を増大させるのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む、請求項１〜６の何れかに記載の方法。
【請求項８】
方法がＴ細胞を提供し、該Ｔ細胞を少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性を増大させるのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む、請求項１〜５の何れかに記載の方法。
【請求項９】
Ｔ細胞がＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋細胞である、請求項１〜５および８の何れかに記載の方法。
【請求項１０】
Ｔ細胞がリンパ球系前駆細胞、未成熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性ＴＨ細胞前駆体、Ｔｒｅｇ細胞、記憶Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ２２細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ１細胞、ＴＨ３細胞、γδ  Ｔ細胞、αβＴ細胞および腫瘍浸潤性Ｔ細胞からなる群から選択される、請求項１〜５および８の何れかに記載の方法。
【請求項１１】
Ｔ細胞がキメラ抗原受容体(ＣＡＲ)−Ｔ細胞である、請求項１〜５および８〜１０の何れかに記載の方法。
【請求項１２】
ＣＡＲ−Ｔ細胞が
抗原結合ドメイン、
膜貫通ドメインおよび
細胞質シグナル伝達ドメイン
を含むＣＡＲタンパク質をコードする核酸を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
抗原結合ドメインが抗体、抗体の抗原結合フラグメント、ＦａｂフラグメントおよびｓｃＦｖである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
抗体がヒトもしくはヒト化抗体であるかまたは抗体の抗原結合フラグメントまたはＦａｂはヒトもしくはヒト化抗体のフラグメントである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
細胞質シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ細胞質配列を含む、請求項１２〜１４の何れかに記載の方法。
【請求項１６】
細胞質シグナル伝達ドメインがさらに次のタンパク質ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
膜貫通ドメインがＣＤ３ζ、ＣＤ８またはＣＤ２８からの膜貫通配列を含む、請求項１２〜１６の何れかに記載の方法。
【請求項１８】
ＣＡＲタンパク質がさらに抗原結合ドメインと膜貫通ドメインの間のリンカー配列を含む、請求項１２〜１７の何れかに記載の方法。
【請求項１９】
Ｔ細胞が哺乳動物から採取される、請求項１〜１０の何れかに記載の方法。
【請求項２０】
自然免疫細胞が哺乳動物から採取される、請求項１〜７の何れかに記載の方法。
【請求項２１】
哺乳動物が癌または感染性疾患を有するとして同定されている、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
哺乳動物が急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌からなる群から選択される癌を有するとして同定されている、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
哺乳動物がアシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシスによる食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症からなる群から選択される感染性疾患を有するとして同定されている、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２４】
さらに哺乳動物からのＴ細胞の採取を含む、請求項１９および２１〜２３の何れかに記載の方法。
【請求項２５】
さらに哺乳動物からの自然免疫細胞の採取を含む、請求項２０〜２３の何れかに記載の方法。
【請求項２６】
少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインがＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＩＬ−１Ｒａ、ＩＬ−１８Ｒａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３４、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、ＩＬ−３７、ＰＧＥ２、ＳＣＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＣＳＦ−１Ｒ、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−λ、ｂＦＧＦ、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ１２、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＸＣＲ４およびＶＥＧＦからなる群から選択される、請求項１〜２５の何れかに記載の方法。
【請求項２７】
少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインがＴＧＦ−βである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ＮＬＲＰ３活性化因子がＩＬ−１αまたはＩＬ−１βである、請求項１〜２７の何れかに記載の方法。
【請求項２９】
ＮＬＲＰ３活性化因子が５kDa未満の分子量を有する分子である、請求項１〜２７の何れかに記載の方法。
【請求項３０】
ＮＬＲＰ３活性化因子がイミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
ＮＬＲＰ３活性化因子が
【化１】
2018526013.tif 000007
〔式中、
(ａ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか；
(ｂ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか；
(ｃ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか；または
(ｄ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
ＮＬＲＰ３活性化因が
イミダゾキノリン；
イミダゾナフチリジン；
ピラゾロピリジン；
アリール置換イミダゾキノリン；
１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物；
オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
イミダゾナフチリジン；
イミダゾキノリンアミン；
１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；
縮合シクロアルキルイミダゾピリジン；
１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
イミダゾ−[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；
２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
置換ナフト[ｉｊ]キノリジン；
置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体；
置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン；および
テトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネート
からなる群から選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
請求項１〜５、８〜１９、２１〜２４および２６〜３２の何れかに記載の方法により産生される、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が増大された、Ｔ細胞。
【請求項３４】
請求項３３に記載のＴ細胞を含む、医薬組成物。
【請求項３５】
請求項３４に記載の医薬組成物を含む、キット。
【請求項３６】
請求項１〜７、２０〜２３および２６〜３２の何れかに記載の方法により産生される、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が増大された、自然免疫細胞。
【請求項３７】
請求項３６に記載の自然免疫細胞を含む、医薬組成物。
【請求項３８】
請求項３７に記載の医薬組成物を含む、キット。
【請求項３９】
Ｔ細胞の抗腫瘍活性を改善する方法であって、
(ａ)Ｔ細胞を提供し、そして
(ｂ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらす
ことを含む、方法。
【請求項４０】
方法がアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地中でＴ細胞を培養することを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
方法がＴ細胞の抗腫瘍活性改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中でＴ細胞を培養することを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
方法がアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分でありかつＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中でＴ細胞を培養することを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
方法がさらにＴ細胞アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下でＴ細胞を培養することを含む、請求項４０〜４２の何れかに記載の方法。
【請求項４４】
方法がＴ細胞アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下でＴ細胞を培養することを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４５】
培養培地がさらにＴ細胞を活性化する１以上の薬剤を含む、請求項３９〜４４の何れかに記載の方法。
【請求項４６】
Ｔ細胞を活性化する１以上の薬剤が単離された腫瘍抗原、腫瘍ライセート、壊死性腫瘍細胞、腫瘍アポトーシス小体、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地が：
(ｉ)グルコース・サプリメントを含まないガラクトース；
(ii)対照細胞における速度を超えるアナプレロティック反応の誘発および／または増大を阻止しない任意の量で添加されたガラクトースおよびグルコースを含む培養培地；および／または
(iii)３−ブロモピルビン酸、２−デオキシグルコース、五価ヒ素(Ｈ３ＡｓＯ４)、ロニダミン、イマチニブ、オキシチアミン、ピルビン酸、奇数鎖長脂肪酸、５炭素ケトン体およびトリヘプタノインの１以上
の１以上を含む、請求項３９、４０、４２、４３、４５および４６の何れかに記載の方法。
【請求項４８】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件がＴ細胞に次の
解糖による乳酸産生速度の減少、
酸化的リン酸化速度に対する解糖による乳酸産生速度の減少、
Ｔ細胞によるグルタミン取り込みの速度の増加、
基質としてグルタミンを使用して合成される脂質および／またはアミノ酸のフラクションの増加、
ピルビン酸カルボキシラーゼによるピルビン酸がオキサロ酢酸に変換される速度の増加、
アデニロコハク酸シンテターゼがフマル酸を産生する速度の増加、
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼがオキサロ酢酸を産生する速度の増加および
プロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼがスクシニル−ＣｏＡを産生する速度の増加
の１以上をもたらす条件である、請求項３９および４３〜４６の何れかに記載の方法。
【請求項４９】
ＮＬＲＰ３活性化因子がＴ細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質のレベルを増加させる、請求項３９、４１、４２、４３、４５および４６の何れかに記載の方法。
【請求項５０】
ＮＬＲＰ３活性化因子がＴ細胞におけるＮＬＲＰ３下流シグナル伝達を増加させる、請求項３９、４１、４２、４３、４５および４６の何れかに記載の方法。
【請求項５１】
ＮＬＲＰ３活性化因子がインターロイキン−１αまたはインターロイキン−１βである、請求項３９、４１、４２、４３、４５、４６、４９および５０の何れかに記載の方法。
【請求項５２】
ＮＬＲＰ３活性化因子が５kDa未満の分子量を有する分子である、請求項３９、４１、４２、４３、４５、４６、４９および５０の何れかに記載の方法。
【請求項５３】
ＮＬＲＰ３活性化因子がイミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
ＮＬＲＰ３活性化因子が
【化２】
2018526013.tif 000008
〔式中、
(ａ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか；
(ｂ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか；
(ｃ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか；または
(ｄ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５５】
ＮＬＲＰ３活性化因子が
イミダゾキノリン；
イミダゾナフチリジン；
ピラゾロピリジン；
アリール置換イミダゾキノリン；
１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物；
オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
イミダゾナフチリジン、
イミダゾキノリンアミン；
１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；
縮合シクロアルキルイミダゾピリジン；
１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
イミダゾ−[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；
２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
置換ナフト[ｉｊ]キノリジン；
置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体；
置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン；および
テトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネート
からなる群から選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５６】
Ｔ細胞がＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋細胞である、請求項３９〜５５の何れかに記載の方法。
【請求項５７】
Ｔ細胞がリンパ球系前駆細胞、未成熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性ＴＨ細胞前駆体、Ｔｒｅｇ細胞、記憶Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ２２細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ１細胞、ＴＨ３細胞、γδ  Ｔ細胞、αβＴ細胞および腫瘍浸潤性Ｔ細胞からなる群から選択される、請求項３９〜５５の何れかに記載の方法。
【請求項５８】
Ｔ細胞がキメラ抗原受容体(ＣＡＲ)−Ｔ細胞である、請求項１〜５７の何れかに記載の方法。
【請求項５９】
ＣＡＲ−Ｔ細胞が
抗原結合ドメイン、
膜貫通ドメインおよび
細胞質シグナル伝達ドメイン
を含むＣＡＲタンパク質をコードする核酸を含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
抗原結合ドメインが抗体、抗体の抗原結合フラグメント、ＦａｂフラグメントおよびｓｃＦｖである、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
抗体がヒトもしくはヒト化抗体であるかまたは抗体の抗原結合フラグメントまたはＦａｂはヒトもしくはヒト化抗体のフラグメントである、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
細胞質シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ細胞質配列を含む、請求項５９〜６１の何れかに記載の方法。
【請求項６３】
細胞質シグナル伝達ドメインがさらに次のタンパク質ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列を含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
膜貫通ドメインがＣＤ３ζ、ＣＤ８またはＣＤ２８からの膜貫通配列を含む、請求項５９〜６３の何れかに記載の方法。
【請求項６５】
ＣＡＲタンパク質がさらに抗原結合ドメインと膜貫通ドメインの間のリンカー配列を含む、請求項５９〜６４の何れかに記載の方法。
【請求項６６】
Ｔ細胞が哺乳動物から採取される、請求項３９〜５７の何れかに記載の方法。
【請求項６７】
哺乳動物が癌または感染性疾患を有するとして同定されている、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
哺乳動物が急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌からなる群から選択される癌を有するとして同定されている、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
哺乳動物がアシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシスによる食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症からなる群から選択される感染性疾患を有するとして同定されている、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
さらに哺乳動物からのＴ細胞の採取を含む、請求項６６〜６９の何れかに記載の方法。
【請求項７１】
請求項３９〜７０の何れかに記載の方法により産生される、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が改善された、Ｔ細胞。
【請求項７２】
請求項７１に記載のＴ細胞を含む、医薬組成物。
【請求項７３】
請求項３４に記載の医薬組成物を含む、キット。
【請求項７４】
癌を有する哺乳動物における抗腫瘍免疫を増強する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして
(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与し、それにより該哺乳動物における抗腫瘍免疫の増大をもたらす
ことを含む、方法。
【請求項７５】
哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして
(ｃ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与し、それにより該哺乳動物における癌の寛解期間の延長をもたらす
ことを含む、方法。
【請求項７６】
癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法であって、
(ａ)癌または感染性疾患を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍または抗感染性疾患活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍または抗感染性疾患活性の改善をもたらし、そして
(ｅ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与する
ことを含む、方法。
【請求項７７】
癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして
(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与する
ことを含む、方法。
【請求項７８】
癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法であって、
(ａ)癌および固形腫瘍を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして
(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与する
ことを含む、方法。
【請求項７９】
癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして
(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与する
ことを含む、方法。
【請求項８０】
癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして
(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与する
ことを含む、方法。
【請求項８１】
癌を有する哺乳動物における少なくとも一つの抗腫瘍リンホカインおよび／または少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして
(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与する
ことを含む、方法。
【請求項８２】
哺乳動物に組み換えＴ細胞投与後、少なくとも１ヶ月、哺乳動物において組み換えＴ細胞の集団を維持する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、
(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞を採取し、
(ｃ)組み換え核酸を該Ｔ細胞に導入して、組み換えＴ細胞を産生し；
(ｄ)該組み換えＴ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それにより組み換えＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして
(ｄ)該組み換えＴ細胞を該哺乳動物に投与することを含み、ここで、該組み換えＴ細胞の集団は、組み換えＴ細胞の該哺乳動物への投与後少なくとも１ヶ月、該哺乳動物中に維持される、方法。
【請求項８３】
方法がアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地中でＴ細胞を培養することを含む、請求項７４〜８１の何れかに記載の方法。
【請求項８４】
方法がアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地で組み換えＴ細胞を培養することを含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項８５】
方法がＴ細胞の抗腫瘍活性改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中でＴ細胞を培養することを含む、請求項７４〜８１の何れかに記載の方法。
【請求項８６】
Ｔ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中で組み換えＴ細胞を培養することを含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項８７】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分でありかつＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中でＴ細胞を培養することを含む、請求項７４〜８１の何れかに記載の方法。
【請求項８８】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分でありかつＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中で組み換えＴ細胞を培養することを含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項８９】
Ｔ細胞アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下でＴ細胞を培養することをさらに含む、請求項８３、８５および８７の何れかに記載の方法。
【請求項９０】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下で組み換えＴ細胞を培養することをさらに含む、請求項８４、８６および８８の何れかに記載の方法。
【請求項９１】
Ｔ細胞アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下でＴ細胞を培養することを含む、請求項７４〜８１の何れかに記載の方法。
【請求項９２】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下で組み換えＴ細胞を培養することを含む、請求項８２に記載の方法。
【請求項９３】
培養培地がさらにＴ細胞を活性化する１以上の薬剤を含む、請求項７４〜８１、８３、８５、８７、８９および９１の何れかに記載の方法。
【請求項９４】
培養培地が組み換えＴ細胞を活性化する１以上の薬剤を含む、請求項８２、８４、８６、８８、９０および９２の何れかに記載の方法。
【請求項９５】
Ｔ細胞を活性化する１以上の薬剤が単離された腫瘍抗原、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含む、請求項９３に記載の方法。
【請求項９６】
組み換えＴ細胞を活性化する１以上の薬剤が単離された腫瘍抗原、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含む、請求項９４に記載の方法。
【請求項９７】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地が
(ｉ)グルコース・サプリメントを含まないガラクトース；
(ii)対照細胞における速度を超えるアナプレロティック反応の増大を阻止しない任意の量で添加されたガラクトースおよびグルコースを含む培養培地；および／または
(iii)３−ブロモピルビン酸、２−デオキシグルコース、五価ヒ素(Ｈ３ＡｓＯ４)、ロニダミン、イマチニブ、オキシチアミン、ピルビン酸、奇数鎖長脂肪酸、５炭素ケトン体およびトリヘプタノインの１以上
の１以上を含む、請求項７４〜８４、８７〜９０および９３〜９６の何れかに記載の方法。
【請求項９８】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件がＴ細胞に次の
解糖による乳酸産生速度の減少、
酸化的リン酸化速度に対する解糖による乳酸産生速度の減少、
Ｔ細胞によるグルタミン取り込みの速度の増加、
基質としてグルタミンを使用して合成される脂質および／またはアミノ酸のフラクションの増加、
ピルビン酸カルボキシラーゼによるピルビン酸がオキサロ酢酸に変換される速度の増加、
アデニロコハク酸シンテターゼがフマル酸を産生する速度の増加、
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼがオキサロ酢酸を産生する速度の増加および
プロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼがスクシニル−ＣｏＡを産生する速度の増加
の１以上をもたらす条件である、請求項７４〜８２および８９〜９６の何れかに記載の方法。
【請求項９９】
ＮＬＲＰ３活性化因子がＴ細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質のレベルを増加させる、請求項７２〜８１、８５、８７、８９、９３および９５の何れかに記載の方法。
【請求項１００】
ＮＬＲＰ３活性化因子が組み換えＴ細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質のレベルを増加させる、請求項８２、８６、８８、９０、９４および９６の何れかに記載の方法。
【請求項１０１】
ＮＬＲＰ３活性化因子がＴ細胞におけるＮＬＲＰ３下流シグナル伝達を増加させる、請求項７２〜８１、８５、８７、８９、９３および９５の何れかに記載の方法。
【請求項１０２】
ＮＬＲＰ３活性化因子が組み換えＴ細胞におけるＮＬＲＰ３下流シグナル伝達を増加させる、請求項８２、８６、８８、９０、９４および９６の何れかに記載の方法。
【請求項１０３】
ＮＬＲＰ３活性化因子がインターロイキン−１αまたはインターロイキン−１βである、請求項７２〜８２、８５〜９０および９３〜９６の何れかに記載の方法。
【請求項１０４】
ＮＬＲＰ３活性化因子が５kDa未満の分子量を有する分子である、請求項７２〜８２、８５〜９０および９３〜９６の何れかに記載の方法。
【請求項１０５】
ＮＬＲＰ３活性化因子がイミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩である、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
ＮＬＲＰ３活性化因子が
【化３】
2018526013.tif 000009
〔式中、
(ａ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか；
(ｂ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか；
(ｃ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか；または
(ｄ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０７】
ＮＬＲＰ３活性化因子が
イミダゾキノリン；
イミダゾナフチリジン；
ピラゾロピリジン；
アリール置換イミダゾキノリン；
１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物；
オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
イミダゾナフチリジン、
イミダゾキノリンアミン、
１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；
縮合シクロアルキルイミダゾピリジン；
１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
イミダゾ−[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；
２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
置換ナフト[ｉｊ]キノリジン；
置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体；
置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン；および
テトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネート
からなる群から選択される、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０８】
Ｔ細胞がＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋細胞である、請求項７４〜１０７の何れかに記載の方法。
【請求項１０９】
Ｔ細胞がリンパ球系前駆細胞、未成熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性ＴＨ細胞前駆体、Ｔｒｅｇ細胞、記憶Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ２２細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ１細胞、ＴＨ３細胞、γδ  Ｔ細胞、αβＴ細胞および腫瘍浸潤性Ｔ細胞からなる群から選択される、請求項７４〜１０７の何れかに記載の方法。
【請求項１１０】
Ｔ細胞がキメラ抗原受容体(ＣＡＲ)−Ｔ細胞である、請求項７４〜８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７〜９９、１０１および１０３〜１０７の何れかに記載の方法。
【請求項１１１】
組み換えＴ細胞がＣＡＲ−Ｔ細胞である、請求項８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６〜９８、１００および１０２〜１０９の何れかに記載の方法。
【請求項１１２】
ＣＡＲ−Ｔ細胞が
抗原結合ドメイン、
膜貫通ドメインおよび
細胞質シグナル伝達ドメイン
を含むＣＡＲタンパク質をコードする核酸を含む、請求項１１０または１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
抗原結合ドメインが抗体、抗体の抗原結合フラグメント、ＦａｂフラグメントおよびｓｃＦｖである、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
抗体がヒトもしくはヒト化抗体であるかまたは抗体の抗原結合フラグメントまたはＦａｂはヒトもしくはヒト化抗体のフラグメントである、請求項１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
細胞質シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ細胞質配列を含む、請求項１１２〜１１４の何れかに記載の方法。
【請求項１１６】
細胞質シグナル伝達ドメインがさらに次のタンパク質ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列を含む、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
膜貫通ドメインがＣＤ３ζ、ＣＤ８またはＣＤ２８からの膜貫通配列を含む、請求項１１２〜１１６の何れかに記載の方法。
【請求項１１８】
ＣＡＲタンパク質がさらに抗原結合ドメインと膜貫通ドメインの間のリンカー配列を含む、請求項１１２〜１１７の何れかに記載の方法。
【請求項１１９】
哺乳動物が癌を有するとして同定されている、請求項７４〜１１８の何れかに記載の方法。
【請求項１２０】
哺乳動物が感染性疾患を有するとして同定されている、請求項７６、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７〜９９、１０１、１０３〜１１０および１１２〜１１８の何れかに記載の方法。
【請求項１２１】
哺乳動物が急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌からなる群から選択される癌を有するとして同定されている、請求項１１９に記載の方法。
【請求項１２２】
哺乳動物がアシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシスによる食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症からなる群から選択される感染性疾患を有するとして同定されている、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２３】
Ｔ細胞が静脈内、動脈内または腫瘍内投与により投与される、請求項７４〜８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７〜９９、１０１、１０３〜１０９、１１０および１１２〜１１８の何れかに記載の方法。
【請求項１２４】
組み換えＴ細胞が静脈内、動脈内または腫瘍内投与により投与される、請求項８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６〜９８、１００、１０２〜１０９および１１１〜１１８の何れかに記載の方法。
【請求項１２５】
癌を有する哺乳動物における抗腫瘍免疫を増強する方法であって、
(ａ)哺乳動物を癌を有するとして同定し、そして
(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与する
ことを含む、方法。
【請求項１２６】
哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法であって、
(ａ)哺乳動物を癌を有するとして同定し、そして
(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与する
ことを含む、方法。
【請求項１２７】
癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法であって、
(ａ)癌または感染性疾患を有する哺乳動物を同定し、そして
(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与する
ことを含む、方法。
【請求項１２８】
癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして
(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与する
ことを含む、方法。
【請求項１２９】
癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法であって、
(ａ)癌および固形腫瘍を有する哺乳動物を同定し、そして
(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与する
ことを含む、方法。
【請求項１３０】
癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして
(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与する
ことを含む、方法。
【請求項１３１】
癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして
(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与する
ことを含む、方法。
【請求項１３２】
癌を有する哺乳動物における少なくとも一つの抗腫瘍リンホカインおよび／または少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法であって、
(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして
(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与する
ことを含む、方法。
【請求項１３３】
哺乳動物が感染性疾患を有するとして同定される、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３４】
哺乳動物が癌を有するとして同定される、請求項１２７に記載の方法。
【請求項１３５】
哺乳動物が急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌からなる群から選択される癌を有するとして同定される、請求項１２５、１２６、１２９〜１３２および１３４の何れかに記載の方法。
【請求項１３６】
哺乳動物がアシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシスによる食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症からなる群から選択される感染性疾患を有するとして同定される、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３７】
ＮＬＲＰ３活性化因子がインターロイキン−１αまたはインターロイキン−１βである、請求項１２５〜１３６の何れかに記載の方法。
【請求項１３８】
ＮＬＲＰ３活性化因子が５kDa未満の分子量を有する分子である、請求項１２５〜１３６の何れかに記載の方法。
【請求項１３９】
ＮＬＲＰ３活性化因子がイミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩である、請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４０】
ＮＬＲＰ３活性化因子が
【化４】
2018526013.tif 000010
〔式中、
(ａ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか；
(ｂ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか；
(ｃ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか；または
(ｄ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である、請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４１】
ＮＬＲＰ３活性化因子が
イミダゾキノリン；
イミダゾナフチリジン；
ピラゾロピリジン；
アリール置換イミダゾキノリン；
１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物；
オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；
イミダゾナフチリジン、
イミダゾキノリンアミン；
１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；
縮合シクロアルキルイミダゾピリジン；
１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
イミダゾ−[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；
２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]−４−アミン；
オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
置換ナフト[ｉｊ]キノリジン；
置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体；
置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；
置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン；および
テトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネート
からなる群から選択される、請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４２】
ＮＬＲＰ３活性化因子が静脈内、動脈内または腫瘍内投与により投与される、請求項１２５〜１４１の何れかに記載の方法。
【請求項１４３】
少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性の増大のための候補薬物を同定する方法であって、
(ａ)ＮＬＲＰ３タンパク質を発現する哺乳動物細胞を提供し、
(ｂ)該哺乳動物細胞と薬物を接触させ、
(ｃ)ステップ(ｂ)における細胞のＮＬＲＰ３のレベル活性を検出し、そして、
(ｄ)ＮＬＲＰ３活性の対照レベルと比較して、細胞におけるＮＬＲＰ３活性の増加したレベルを増加させる薬物を、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性の増大のための候補薬物として同定する
ことを含む、方法。
【請求項１４４】
ＮＬＲＰ３活性の対照レベルが該薬物非存在下の細胞におけるＮＬＲＰ３活性のレベルである、請求項１４３に記載の方法。
【請求項１４５】
ＮＬＲＰ３活性がＮＬＲＰ３下流シグナル伝達活性である、請求項１４３または１４４に記載の方法。
【請求項１４６】
哺乳動物細胞はＴ細胞である、請求項１４３〜１４５の何れかに記載の方法。
【請求項１４７】
さらに
(ｅ)Ｔ細胞と少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインおよび候補薬物を接触させ、そして
(ｆ)該候補薬物がＴ細胞における少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインの免疫抑制性活性を遮断する能力を決定する
ことを含む、請求項１４３〜１４６の何れかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年９月１日出願の米国仮特許出願６２／２１２,７４７号に基づく優先権を主張し、その内容全体を、引用により本明細書に包含させる。
【０００２】
技術分野
本発明は、免疫および養子細胞療法の方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
免疫系のＴ細胞は、１以上の受容体(例えば、ＣＤ３二量体と複合体化したＴ細胞受容体)を介して特定の分子を認識し、相互作用することが知られ、これらの分子の認識または相互作用により、種々の免疫活性を実行するためのＴ細胞の活性化が引き起こされる。自然免疫細胞は、自然免疫細胞における下流シグナル伝達経路を活性化し、自然免疫細胞の１以上の免疫活性の活性化をもたらす、１以上の因子(例えば、アレルゲン、傷害により産生される化学物質(例えば、オピオイドおよびアルコール)、ポリミキシン、架橋ＩｇＥ、架橋補体タンパク質、Ｔ細胞または他の免疫細胞により産生されるサイトカイン(例えば、インターフェロン−γ)、ＤＡＭＰまたはＰＡＭＰ)により活性化されることが知られる、免疫系の細胞である。
【０００４】
Ｔ細胞および自然免疫細胞の両方が、哺乳動物の免疫防御に役割を有する。例えば、自然免疫細胞の免疫活性は、多種多様な感染性疾患に対する保護を提供する。Ｔ細胞の免疫活性は、哺乳動物を、例えば、種々の癌および種々の感染性疾患から守る。
【０００５】
養子細胞療法は、１以上の異なるタイプの免疫細胞を哺乳動物から採取し、培養しおよび／または採取した免疫細胞をエクスビボで操作し、培養したおよび／または操作した免疫細胞を該哺乳動物に投与して戻すことを含む、処置方法である。採取した免疫細胞のエクスビボでの操作は、組み換え核酸の免疫細胞への導入を含み得る。
【発明の概要】
【０００６】
要約
本発明は、少なくとも一部、Ｔ細胞とＮＬＲＰ３活性化因子の接触が、Ｔ細胞の免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性を増大させ、また、Ｔ細胞の抗腫瘍活性も増大させるとの発見に基づく。この発見の観点から、ここでは、少なくとも一つの免疫抑制因子に対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を誘発するのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地においてＴ細胞または自然免疫細胞を培養することを含む、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を増大させる方法が提供される。また、Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地でＴ細胞を培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の増大をもたらすことを含む、Ｔ細胞の抗腫瘍活性を増大させる方法が提供される。また、これらの方法により産生されたＴ細胞または自然免疫細胞、これらＴ細胞または自然免疫細胞を含む医薬組成物またはこれら医薬組成物を含むキットが提供される。また、癌を有する哺乳動物における抗腫瘍活性を増大する方法、哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法、癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法、癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法、癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法、癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法、癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法および癌を有する哺乳動物における少なくとも一つの抗腫瘍リンホカインおよび／または少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法であって、(ｉ)該哺乳動物からＴ細胞を採取し、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に該Ｔ細胞を培養し、該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与するまたは(ii)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を該哺乳動物に投与することを(一部)含む、方法が提供される。また、該哺乳動物に組み換えＴ細胞投与後、少なくとも１ヶ月(例えば、少なくとも２ヶ月)、該哺乳動物において該組み換えＴ細胞の集団を維持する方法であって、哺乳動物からＴ細胞を採取し、組み換え核酸を該Ｔ細胞に導入して、組み換えＴ細胞を産生し、該組み換えＴ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養し、該組み換えＴ細胞を該哺乳動物に投与することを含む、方法が提供される。また、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性の増大のための候補薬物を同定する方法が提供される。
【０００７】
ある態様において、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を増大する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)Ｔ細胞または自然免疫細胞を提供し、(ｂ)Ｔ細胞または自然免疫細胞を、Ｔ細胞または自然免疫細胞が少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性を増大させるのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。
【０００８】
ある実施態様において、培養培地は、Ｔ細胞または自然免疫細胞を活性化させる１以上の薬剤をさらに含む。Ｔ細胞または自然免疫細胞を活性化させる代表的薬剤は、単離された腫瘍抗原、腫瘍ライセート、壊死性腫瘍細胞、腫瘍アポトーシス小体、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、自然免疫細胞は、樹状細胞、マクロファージまたは単球である。
【０００９】
ある実施態様において、ステップ(ｂ)におけるＴ細胞または自然免疫細胞の培養は、Ｔ細胞または自然免疫細胞におけるＮＬＲＰ３下流シグナル伝達の増大をもたらす。ある実施態様において、ステップ(ｂ)におけるＴ細胞または自然免疫細胞の培養は、Ｔ細胞または自然免疫細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質レベルの増加をもたらす。
【００１０】
ある実施態様において、方法は、自然免疫細胞を提供し、該自然免疫細胞を自然免疫細胞が少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性を増大させるのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、方法は、Ｔ細胞を提供し、該Ｔ細胞をＴ細胞が少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性を増大させるのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。
【００１１】
ある実施態様において、Ｔ細胞はＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋細胞である。代表的Ｔ細胞は、リンパ球系前駆細胞、未成熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性ＴＨ細胞前駆体、Ｔｒｅｇ細胞、記憶Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ２２細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ１細胞、ＴＨ３細胞、γδ  Ｔ細胞、αβ  Ｔ細胞および腫瘍浸潤性Ｔ細胞を含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、Ｔ細胞は、キメラ抗原受容体(ＣＡＲ)−Ｔ細胞である。ある実施態様において、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞質シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲタンパク質をコードする核酸を含む。代表的抗原結合ドメインは、抗体、抗体の抗原結合フラグメント、ＦａｂフラグメントおよびｓｃＦｖを含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、抗体はヒトもしくはヒト化抗体であるかまたは抗体の抗原結合フラグメントもしくはＦａｂはヒトまたはヒト化抗体のフラグメントである。ある実施態様において、細胞質シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ細胞質配列を含む。ある実施態様において、細胞質シグナル伝達ドメインは、さらに、次のタンパク質ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列を含む。ある実施態様において、膜貫通ドメインは、ＣＤ３ζ、ＣＤ８またはＣＤ２８からの膜貫通配列を含む。ある実施態様において、ＣＡＲタンパク質は、さらに、抗原結合ドメインと膜貫通ドメインの間のリンカー配列を含む。ある実施態様において、Ｔ細胞は、哺乳動物から採取される。ある実施態様において、自然免疫細胞は、哺乳動物から採取される。
【００１２】
ある実施態様において、哺乳動物は、癌または感染性疾患を有するとして同定されている。代表的癌は、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌を含むが、これらに限定されない。
【００１３】
代表的感染性疾患は、アシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシス食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症を含むが、これらに限定さえない。
【００１４】
ある実施態様において、ここに記載する方法は、さらに、哺乳動物からのＴ細胞の採取を含む。ある実施態様において、ここに記載する方法は、さらに、哺乳動物からの自然免疫細胞の採取を含む。代表的免疫抑制性サイトカインは、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＩＬ−１Ｒａ、ＩＬ−１８Ｒａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３４、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、ＩＬ−３７、ＰＧＥ２、ＳＣＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＣＳＦ−１Ｒ、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−λ、ｂＦＧＦ、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ１２、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＸＣＲ４およびＶＥＧＦを含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインはＴＧＦ−βである。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子はＩＬ−１αまたはＩＬ−１βである。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、５kDa未満の分子量を有する分子である。５kDa未満の分子量を有する代表的分子は、例えば、イミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩である。
【００１５】
ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、
【化１】
2018526013.tif 000002
〔式中、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか；Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか；Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか、またはＲ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である。代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、イミダゾキノリン；イミダゾナフチリジン；ピラゾロピリジン；アリール置換イミダゾキノリン；１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物；オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；イミダゾナフチリジン；イミダゾキノリンアミン；１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；縮合シクロアルキルイミダゾピリジン；１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；イミダゾ−[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；置換ナフト[ｉｊ]キノリジン；置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体；置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン；およびテトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネートを含むが、これらに限定されない。
【００１６】
また提供されるのは、ここに記載された方法の何れかにより産生された少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が増大したＴ細胞である。さらに提供されるのは、このようなＴ細胞を含む医薬組成物である。また提供されるのは、このような医薬組成物を含むキットである。
【００１７】
さらに提供されるのは、ここに記載された方法の何れかにより産生された少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が増大した自然免疫細胞である。また提供されるのは、このような自然免疫細胞を含む医薬組成物である。さらに提供されるのは、このような医薬組成物を含むキットである。
【００１８】
他の態様において、Ｔ細胞の抗腫瘍活性を改善する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)Ｔ細胞を提供し、(ｂ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養することを含む。このような方法は、一般に、Ｔ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらす。
【００１９】
ある実施態様において、このような方法は、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、このような方法は、Ｔ細胞をＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、このような方法は、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、方法は、さらに、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養することを含む。ある実施態様において、方法は、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養することを含む。
【００２０】
ある実施態様において、培養培地は、さらに、Ｔ細胞を活性化する１以上の薬剤を含む。Ｔ細胞を活性化する代表的薬剤は、単離された腫瘍抗原、腫瘍ライセート、壊死性腫瘍細胞、腫瘍アポトーシス小体、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地は、(ｉ)グルコース・サプリメントを含まないガラクトース、(ii)対照細胞における速度を超えるアナプレロティック反応の誘発および／または増大を阻止しない任意の量で添加されたガラクトースおよびグルコースを含む培養培地および／または(iii)３−ブロモピルビン酸、２−デオキシグルコース、五価ヒ素(Ｈ３ＡｓＯ４)、ロニダミン、イマチニブ、オキシチアミン、ピルビン酸、奇数鎖長脂肪酸、５炭素ケトン体およびトリヘプタノインの１以上からの１以上を含む。
【００２１】
ある実施態様において、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件は、Ｔ細胞において、次の解糖による乳酸産生速度の減少、酸化的リン酸化の速度に比して解糖による乳酸産生速度の減少、Ｔ細胞によるグルタミン取り込みの速度の増加、基質としてグルタミンを使用して合成される脂質および／またはアミノ酸のフラクションの増加、ピルビン酸カルボキシラーゼによるピルビン酸がオキサロ酢酸に変換される速度の増加、アデニロコハク酸シンテターゼがフマル酸を産生する速度の増加、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼがオキサロ酢酸を産生する速度の増加およびプロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼがスクシニル−ＣｏＡを産生する速度の増加の１以上がもたらされる条件である。
【００２２】
ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、Ｔ細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質のレベルを増加させる。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、Ｔ細胞におけるＮＬＲＰ３下流シグナル伝達を増加させる。代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、インターロイキン−１αまたはインターロイキン−１βを含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、５kDa未満の分子量を有する分子である。５kDa未満の分子量を有する代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、イミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩である。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、
【化２】
2018526013.tif 000003
〔式中、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか；Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか；Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか、またはＲ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である。
【００２３】
代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、イミダゾキノリン；イミダゾナフチリジン；ピラゾロピリジン；アリール置換イミダゾキノリン；１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物；オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；イミダゾナフチリジン、イミダゾキノリンアミン；１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；縮合シクロアルキルイミダゾピリジン；１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；イミダゾ−[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；置換ナフト[ｉｊ]キノリジン；置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体；置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン；およびテトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネートを含むが、これらに限定されない。
【００２４】
ある実施態様において、Ｔ細胞はＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋細胞である。代表的Ｔ細胞は、リンパ球系前駆細胞、未成熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性ＴＨ細胞前駆体、Ｔｒｅｇ細胞、記憶Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ２２細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ１細胞、ＴＨ３細胞、γδ  Ｔ細胞、αβ  Ｔ細胞および腫瘍浸潤性Ｔ細胞を含むが、これらに限定されない。
【００２５】
ある実施態様において、Ｔ細胞はキメラ抗原受容体(ＣＡＲ)−Ｔ細胞である。ある実施態様において、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞質シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲタンパク質をコードする核酸を含む。代表的抗原結合ドメインは、抗体、抗体の抗原結合フラグメント、ＦａｂフラグメントおよびｓｃＦｖを含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、抗体はヒトもしくはヒト化抗体であるかまたは抗体の抗原結合フラグメントまたはＦａｂはヒトもしくはヒト化抗体のフラグメントである。代表的細胞質シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ細胞質配列を含む。ある実施態様において、細胞質シグナル伝達ドメインは、さらに、次のタンパク質ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列を含む。ある実施態様において、膜貫通ドメインは、ＣＤ３ζ、ＣＤ８またはＣＤ２８からの膜貫通配列を含む。ある実施態様において、ＣＡＲタンパク質は、さらに、抗原結合ドメインと膜貫通ドメインの間のリンカー配列を含む。
【００２６】
ある実施態様において、Ｔ細胞は、哺乳動物から採取される。ある実施態様において、哺乳動物は、癌または感染性疾患を有するとして同定されている。代表的癌は、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌を含むが、これらに限定されない。
【００２７】
代表的感染性疾患は、アシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシス食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症を含むが、これらに限定されない。
【００２８】
ある実施態様において、ここに記載する方法は、さらに、哺乳動物からのＴ細胞の採取を含む。
【００２９】
また提供されるのは、ここに記載された方法の何れかにより産生される、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が改善されたＴ細胞である。さらに提供されるのは、このようなＴ細胞を含む医薬組成物である。また提供されるのは、このような医薬組成物を含むキットである。
【００３０】
さらに他の態様において、癌を有する哺乳動物における抗腫瘍免疫を増強する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む。このような方法は、一般に、該哺乳動物における抗腫瘍免疫の増大をもたらす。
【００３１】
さらに他の態様において、哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｃ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む。このような方法は、一般に、該哺乳動物における癌の寛解期間の延長をもたらす。
【００３２】
他の態様において、癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌または感染性疾患を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍または抗感染性疾患活性を改善するのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それにより、Ｔ細胞の抗腫瘍または抗感染性疾患活性の改善をもたらし、そして該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む。
【００３３】
さらに他の態様において、癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それにより、Ｔ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む。
【００３４】
他の態様において、癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌および固形腫瘍を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む。
【００３５】
ある態様において、癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む。
【００３６】
さらに他の態様において、癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む。
【００３７】
さらに他の態様において、癌を有する哺乳動物における少なくとも一つの抗腫瘍リンホカインおよび／または少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それにより、Ｔ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む。
【００３８】
他の態様において、哺乳動物に組み換えＴ細胞投与後、少なくとも１ヶ月、哺乳動物において組み換えＴ細胞の集団を維持する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、(ｂ)該同定した動物からＴ細胞を採取し、(ｃ)組み換え核酸を該Ｔ細胞に導入して、組み換えＴ細胞を産生し、(ｄ)該組み換えＴ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下培養し、それにより該組み換えＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして、(ｄ)該組み換えＴ細胞を該哺乳動物に投与することを含み、ここで、該組み換えＴ細胞の集団は、組み換えＴ細胞の該哺乳動物への投与後少なくとも１ヶ月、該哺乳動物中に維持される。
【００３９】
ある実施態様において、方法は、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、方法は、組み換えＴ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、方法は、Ｔ細胞をＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、方法は、組み換えＴ細胞をＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、方法は、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。
【００４０】
ある実施態様において、方法は、組み換えＴ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養することを含む。ある実施態様において、方法は、さらに、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養することを含む。ある実施態様において、方法は、さらに、組み換えＴ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養することを含む。ある実施態様において、方法は、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養することを含む。ある実施態様において、方法は、組み換えＴ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養することを含む。
【００４１】
ある実施態様において、培養培地は、さらに、Ｔ細胞を活性化する１以上の薬剤を含む。ある実施態様において、培養培地は、組み換えＴ細胞を活性化する１以上の薬剤を含む。Ｔ細胞を活性化する代表的薬剤は、単離された腫瘍抗原、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含むが、これらに限定されない。組み換えＴ細胞を活性化する代表的薬剤は、単離された腫瘍抗原、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含むが、これらに限定されない。
【００４２】
ある実施態様において、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地は、(ｉ)グルコース・サプリメントを含まないガラクトース、(ii)対照細胞における速度を超えるアナプレロティック反応の増大を阻止しない任意の量で添加されたガラクトースおよびグルコースを含む培養培地および／または(iii)３−ブロモピルビン酸、２−デオキシグルコース、五価ヒ素(Ｈ３ＡｓＯ４)、ロニダミン、イマチニブ、オキシチアミン、ピルビン酸、奇数鎖長脂肪酸、５炭素ケトン体およびトリヘプタノインの１以上からの１以上を含む。
【００４３】
ある実施態様において、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件は、Ｔ細胞において次の解糖による乳酸産生速度の減少、酸化的リン酸化の速度に比して解糖による乳酸産生速度の減少、Ｔ細胞によるグルタミン取り込みの速度の増加、基質としてグルタミンを使用して合成される脂質および／またはアミノ酸のフラクションの増加、ピルビン酸カルボキシラーゼによるピルビン酸がオキサロ酢酸に変換される速度の増加、アデニロコハク酸シンテターゼがフマル酸を産生する速度の増加、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼがオキサロ酢酸を産生する速度の増加およびプロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼがスクシニル−ＣｏＡを産生する速度の増加の１以上がもたらされる条件である。
【００４４】
ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、Ｔ細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質のレベルを増加させる。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、組み換えＴ細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質のレベルを増加させる。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、Ｔ細胞におけるＮＬＲＰ３下流シグナル伝達を増加させる。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、組み換えＴ細胞におけるＮＬＲＰ３下流シグナル伝達を増加させる。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子はインターロイキン−１αまたはインターロイキン−１βである。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、５kDa未満の分子量を有する分子である。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子はイミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩である。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、
【化３】
2018526013.tif 000004
〔式中、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか；Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか；Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか、またはＲ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である。
【００４５】
代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、イミダゾキノリン；イミダゾナフチリジン；ピラゾロピリジン；アリール置換イミダゾキノリン；１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物；オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；イミダゾナフチリジン、イミダゾキノリンアミン、１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；縮合シクロアルキルイミダゾピリジン；１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；イミダゾ−[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；置換ナフト[ｉｊ]キノリジン；置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体；置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン；およびテトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネートを含むが、これらに限定されない。
【００４６】
ある実施態様において、Ｔ細胞はＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋細胞である。代表的Ｔ細胞は、リンパ球系前駆細胞、未成熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性ＴＨ細胞前駆体、Ｔｒｅｇ細胞、記憶Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ２２細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ１細胞、ＴＨ３細胞、γδ  Ｔ細胞、αβ  Ｔ細胞および腫瘍浸潤性Ｔ細胞を含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、Ｔ細胞はキメラ抗原受容体(ＣＡＲ)−Ｔ細胞である。ある実施態様において、組み換えＴ細胞はＣＡＲ−Ｔ細胞である。ある実施態様において、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび細胞質シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲタンパク質をコードする核酸を含む。代表的抗原結合ドメインは、抗体、抗体の抗原結合フラグメント、ＦａｂフラグメントおよびｓｃＦｖを含むが、これらに限定されない。ある実施態様において、抗体はヒトもしくはヒト化抗体であるかまたは抗体の抗原結合フラグメントまたはＦａｂはヒトもしくはヒト化抗体のフラグメントである。ある実施態様において、細胞質シグナル伝達ドメインはＣＤ３ζ細胞質配列を含む。ある実施態様において、細胞質シグナル伝達ドメインは、さらに、次のタンパク質ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列を含む。ある実施態様において、膜貫通ドメインは、ＣＤ３ζ、ＣＤ８またはＣＤ２８からの膜貫通配列を含む。ある実施態様において、ＣＡＲタンパク質は、さらに、抗原結合ドメインと膜貫通ドメインの間のリンカー配列を含む。
【００４７】
ある実施態様において、哺乳動物は、癌を有するとして同定されている。代表的癌は、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌を含むが、これらに限定されない。
【００４８】
ある実施態様において、哺乳動物は、感染性疾患を有するとして同定されている。代表的感染性疾患は、アシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシスによる食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症を含むが、これらに限定されない。
【００４９】
ある実施態様において、Ｔ細胞は、静脈内、動脈内または腫瘍内投与により投与される。ある実施態様において、組み換えＴ細胞は、静脈内、動脈内または腫瘍内投与により投与される。
【００５０】
さらに他の態様において、癌を有する哺乳動物における抗腫瘍免疫を増強する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与することを含む。
【００５１】
さらに他の態様において、哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与することを含む。
【００５２】
他の態様において、癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌または感染性疾患を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与することを含む。
【００５３】
ある態様において、癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与することを含む。
【００５４】
他の態様において、癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌および固形腫瘍を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与することを含む。
【００５５】
さらに他の態様において、癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与することを含む。
【００５６】
他の態様において、癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与することを含む。
【００５７】
さらに他の態様において、癌を有する哺乳動物における少なくとも一つの抗腫瘍リンホカインおよび／または少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)癌を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)該同定された動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を投与することを含む。
【００５８】
ある実施態様において、哺乳動物は、癌を有するとして同定される。代表的癌は、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌を含むが、これらに限定されない。
【００５９】
ある実施態様において、哺乳動物は、感染性疾患を有するとして同定される。代表的感染性疾患は、アシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシスによる食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症を含むが、これらに限定されない。
【００６０】
代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、インターロイキン−１αまたはインターロイキン−１βを含むが、これらに限定されない。代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、例えば、５kDa未満の分子量を有する分子を含む。代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、例えば、イミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩を含む。代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、
【化４】
2018526013.tif 000005
〔式中、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか；Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか；Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか、またはＲ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である。
【００６１】
代表的ＮＬＲＰ３活性化因子は、イミダゾキノリン；イミダゾナフチリジン；ピラゾロピリジン；アリール置換イミダゾキノリン；１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物；オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン；イミダゾナフチリジン、イミダゾキノリンアミン；１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；縮合シクロアルキルイミダゾピリジン；１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；イミダゾ−[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン；２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン；６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；置換ナフト[ｉｊ]キノリジン；置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸；７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体；置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸；置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン；およびテトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネートを含むが、これらに限定されない。
【００６２】
ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、静脈内、動脈内または腫瘍内投与により投与される。
【００６３】
ある態様において、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性の増大のための候補薬物を同定する方法が提供される。このような方法は、典型的に、(ａ)ＮＬＲＰ３タンパク質を発現する哺乳動物細胞を提供し、(ｂ)該哺乳動物細胞と薬剤を接触させ、(ｃ)ステップ(ｂ)における該細胞のＮＬＲＰ３活性を検出し、そして(ｄ)ＮＬＲＰ３活性の対照レベルと比較して、細胞におけるＮＬＲＰ３活性の増加したレベルを増加させる薬剤を、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性の増大のための候補薬物として同定することを含む。
【００６４】
ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性の対照レベルは、該薬剤非存在下の細胞におけるＮＬＲＰ３活性のレベルである。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性はＮＬＲＰ３下流シグナル伝達活性である。ある実施態様において、哺乳動物細胞はＴ細胞である。ある実施態様において、このような方法は、さらに、(ｅ)Ｔ細胞と少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインおよび候補薬物を接触させ、そして(ｆ)該候補薬物がＴ細胞における少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインの免疫抑制性活性を遮断する能力を決定することを含む。
【００６５】
ここで使用する名詞の単数表現は、その特定の名詞が１以上であることを示す。例えば、用語“Ｔ細胞”は“１以上のＴ細胞”を表す。
【００６６】
用語“Ｔ細胞”は当分野で知られ、細胞表面にＴ細胞受容体(ＴＣＲ)タンパク質を発現するタイプの免疫細胞を意味する。多種多様なＴＣＲが当分野で知られ、例えば、αおよびβ鎖を含むＴＣＲ、γおよびδ鎖を含むＴＣＲを含む。Ｔ細胞の非限定的例はここに記載される。Ｔ細胞のさらなる例は当分野で知られる。
【００６７】
用語“組み換えＴ細胞”は、外因的に導入された配列(例えば、哺乳動物Ｔ細胞に通常存在しないまたは天然状態では哺乳動物Ｔ細胞に見られない配列)を含む核酸を含む、哺乳動物Ｔ細胞を意味する。
【００６８】
用語“自然免疫細胞”は当分野で知られ、細胞表面に抗体またはＴＣＲを発現することにより病原体(例えば、癌細胞、細菌、ウイルスおよび酵母)を認識せずに、病原体および／または病原体と関連する病原体関連分子パターン(ＰＡＭＰ)および／または傷害されたまたはトランスフォームされた細胞と関連する損傷関連分子パターン(ＤＡＭＰ)と結合する受容体に結合する他の抗体のＦｃ領域に結合する受容体(例えば、その細胞表面上に受容体)またはタンパク質を発現する、細胞である。自然免疫細胞の非限定的例は、肥満細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球およびナチュラルキラー細胞を含む。自然免疫細胞のさらなる例は当分野で知られる。
【００６９】
用語“哺乳動物細胞”は、任意の哺乳動物(例えば、ヒト、ハムスター、マウス、ミドリザル、ラット、ブタ、ウシまたはウサギ)からのまたはそれに由来するあらゆる細胞を意味する。例えば、哺乳動物細胞は、不死化細胞であり得る。ある実施態様において、哺乳動物細胞は、分化細胞である。哺乳動物細胞の非限定的例はここに記載される。哺乳動物細胞のさらなる例は当分野で知られる。
【００７０】
用語“培養”または“細胞培養”は、管理された一連の物理的条件下の、哺乳動物細胞の維持または増殖を意味する。
【００７１】
用語“液体培養培地”は、細胞(例えば、哺乳動物細胞)を、インビトロで成長または増殖させるのに十分な栄養素を含む流体を意味する。例えば、液体培養培地は、アミノ酸(例えば、２０アミノ酸)、プリン(例えば、ヒポキサンチン)、ピリミジン(例えば、チミジン)、コリン、イノシトール、チアミン、葉酸、ビオチン、カルシウム、ナイアシンアミド、ピリドキシン、リボフラビン、チミジン、シアノコバラミン、ピルビン酸、リポ酸、マグネシウム、グルコース、ナトリウム、カリウム、鉄、銅、亜鉛および炭酸水素ナトリウムの１以上を含み得る。ある実施態様において、液体培養培地は哺乳動物からの血清を含み得る。ある実施態様において、液体培養培地は血清または哺乳動物からの他の抽出物を含まない(限定液体培養培地)。ある実施態様において、液体培養培地は微量金属、哺乳動物成長ホルモンおよび／または哺乳動物成長因子を含み得る。液体培養培地の他の例は、最少培地である(例えば、無機塩類、炭素源および水しか含まない培地)。液体培養培地の非限定的例はここに記載される。液体培養培地のさらなる例は当分野で知られ、業者から購入できる。液体培養培地は、哺乳動物細胞を任意の密度で含み得る。例えば、ここに使用するとおり、バイオリアクターから採られたある体積の液体培養培地は、哺乳動物細胞が実質的になくてよい。
【００７２】
用語“無動物由来成分液体培養培地”は、哺乳動物由来のいかなる成分(例えば、タンパク質または血清)も含まない液体培養培地を意味する。
用語“無血清液体培養培地”は、哺乳動物血清を含まない液体培養培地を意味する。
用語“血清含有液体培養培地”は、哺乳動物血清を含む液体培養培地を意味する。
【００７３】
用語“化学成分限定液体培養培地”は専門用語であり、化学成分の全てが既知である液体培養培地を意味する。例えば、化学成分限定液体培養培地は、ウシ胎児血清、ウシ血清アルブミンまたはヒト血清アルブミンが典型的にアルブミン類と脂質の複合体を含むため、これらを含まない。
【００７４】
用語“無タンパク質液体培養培地”は、あらゆるタンパク質(例えば、あらゆる検出可能なタンパク質)を含まない、液体培養培地を意味する。
【００７５】
用語“免疫抑制性サイトカイン”は、リンパ球(例えば、Ｔｒｅｇおよび自然免疫細胞を含むが、これらに限定されない)、骨髄系サプレッサー細胞、好中球、好酸球、好塩基球、癌関連線維芽細胞、内皮細胞、癌細胞および上皮細胞(例えば、固形腫瘍に近位の上皮細胞)の１以上の少なくとも一つの免疫機能の抑制を起こす、サイトカインまたはリンホカインを意味する。リンパ球、骨髄系サプレッサー細胞、好中球、好酸球、好塩基球、癌関連線維芽細胞、内皮細胞、癌細胞および上皮細胞(例えば、固形腫瘍に近位の上皮細胞)に関する免疫機能の非限定的例はここに記載される。リンパ球、骨髄系サプレッサー細胞、好中球、好酸球、好塩基球、癌関連線維芽細胞、内皮細胞、癌細胞および上皮細胞(例えば、固形腫瘍に近位の上皮細胞)に関する免疫機能のさらなる例は当分野で知られる。
【００７６】
例えば、少なくとも一つの免疫機能の抑制は、ＬＡＧ３、ＣＴＬＡ４、ＰＤＬ１、ＰＤＬ２、ＰＤ１、ＣＤ８０、ＣＤ２４４、ＴＩＭ３、ＢＴＬＡ４、ＣＤ１６０、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＮＬ２、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ４８、ＨＶＥＭ、ガレクチン、ＦＡＳおよびＦＡＳＬの少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または１９)の発現および／または機能増加および／またはＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＴＬ１Ａ、ＴＮＦＳＦ２５、ＧＩＴＲＬ、ＧＩＴＲ、４１ＢＢＬ、４−１ＢＢ、ＯＸ４０Ｌ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ７０、ＨＨＬＡ２、ＴＭＩＧＤ２、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、ＳＩＧＬＥＣファミリー、ＣＤ２８およびＬＩＧＨＴの少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または１９)の発現および／または機能低減を含み得る。
【００７７】
例えば、少なくとも一つの免疫機能の抑制は、ＩＤＯ、ＴＤＯ、ＡＲＧ１、ＡＲＧ２、ｉＮＯＳおよびＰＤＥＳの少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５または６)の発現および／または機能増加および／またはＰ２Ｘ７Ｒの発現および／または機能減少および／またはＰ２Ｙ１１、Ａ２Ａ受容体、ＣＤ３９、ＣＤ７３、ＣＯＸ２、ＥＰ２受容体、ＥＰ４受容体、ＴＬＲ４、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＲＩＧ−Ｉ、ＭＤＡ−５、ＣＧＡＳおよびＳＴＩＮＧの少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５)の発現増加を含み得る。
【００７８】
例えば、少なくとも一つの免疫機能の抑制は、ＡＬＫ５、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ、ＲＯＮ、ＣＦＳ１、ＰＩ３ＫδおよびＰＩ３Ｋγの少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５または６)の発現および／または機能増加を含み得る。
【００７９】
例えば、少なくとも一つの免疫機能の抑制は、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＣＳＦ−１Ｒ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＣＲ２、ＣＣＲ５を含み、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＩＬ−１Ｒａ、ＩＬ−１８Ｒａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３４、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、ＩＬ−３７、ＰＧＥ２、ＳＣＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＣＳＦ−１Ｒ、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−λ、ｂＦＧＦ、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ１２、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＸＣＲ４およびＶＥＧＦの少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０)の産生および／または機能増強および／またはＴＮＦ、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγおよびＩＦＮλの少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４)の産生および／または機能低減を含み得る。
【００８０】
免疫抑制性サイトカインの非限定的例は、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＩＬ−１Ｒａ、ＩＬ−１８Ｒａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３４、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、ＩＬ−３７、ＰＧＥ２、ＳＣＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＣＳＦ−１Ｒ、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−λ、ｂＦＧＦ、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ１２、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＸＣＲ４およびＶＥＧＦを含む。免疫抑制性サイトカインのさらなる例は当分野で知られる。
【００８１】
用語“少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性”は、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインにより誘発される、Ｔ細胞または自然免疫細胞における少なくとも一つの免疫機能(例えば、ここに記載する免疫機能の何れかの少なくとも一つ)の抑制の検出可能なレベルの減少を意味する。例えば、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性は、薬剤非存在下の少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインにより誘発される少なくとも一つの免疫機能の抑制のレベルと比較した、薬物(例えば、候補薬物またはＮＬＲＰ３活性化因子)存在下の少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインにより誘発されるＴ細胞または自然免疫細胞における少なくとも一つの免疫機能(例えば、ここに記載する免疫機能の何れかの少なくとも一つ)の抑制のレベルの減少であり得る。
【００８２】
用語“Ｔ細胞の抗腫瘍活性”は、哺乳動物における癌細胞死に寄与するＴ細胞の活性を意味する。哺乳動物における癌細胞死に寄与するＴ細胞活性の非限定的例は、Ｔ細胞への分化、Ｔ細胞の分裂および増殖、Ｔ細胞の血液から組織への血管外遊走、Ｔ細胞が固形腫瘍に浸潤する能力、Ｔ細胞の活性化、Ｔ細胞が腫瘍細胞を死滅させる能力、Ｔ細胞が腫瘍細胞を死滅させるために免疫系の他の細胞を動員する能力、Ｔ細胞が腫瘍細胞を死滅させる因子を活性化する能力を含む。
【００８３】
用語“Ｔ細胞の抗感染性疾患活性”は、微生物または微生物を含む哺乳動物細胞の死滅に寄与する、Ｔ細胞の活性を意味する。哺乳動物における微生物または微生物を含む哺乳動物細胞の死滅に寄与するＴ細胞の活性の非限定的例は、Ｔ細胞への分化、Ｔ細胞の分裂および増殖、Ｔ細胞の血液から組織への血管外遊走、Ｔ細胞の活性化、Ｔ細胞が微生物または微生物を含む哺乳動物細胞を死滅させるために免疫系の他の細胞を動員する能力およびＴ細胞が微生物または微生物を含む哺乳動物細胞を死滅させる因子を活性化する能力を含む。
【００８４】
用語“抗腫瘍サイトカイン”は、哺乳動物における癌細胞の死滅に寄与する、哺乳動物サイトカインを意味する。抗腫瘍サイトカインの非限定的例はここに記載される。抗腫瘍サイトカインのさらなる例は当分野で知られる。
【００８５】
用語“抗腫瘍リンホカイン”は、哺乳動物における癌細胞の死滅に寄与する、哺乳動物リンホカインを意味する。抗腫瘍リンホカインの非限定的例はここに記載される。抗腫瘍リンホカインのさらなる例は当分野で知られる。
【００８６】
用語“Ｔ細胞を活性化”は、当分野で知られる用語であり、Ｔ細胞の表面の１以上の受容体(例えば、所望によりＣＤ３二量体と結合したＴＣＲ)と、抗原提示細胞の表面の１以上の同族受容体の結合を意味する。用語Ｔ細胞を活性化は、Ｔ細胞の表面の１以上のインテグリンと、その各リガンド(例えば、細胞間接着分子(ＩＣＡＭ)、血管細胞接着分子(ＶＣＡＭ)またはフィブロネクチン)の結合またはリガンドへの結合によるＴ細胞の共刺激性受容体(例えば、ＣＤ２８、ＩＣＳＯ、ＣＤ４０)の活性化を含み得る。例えばＣＤ２８はＣＤ８０またはＣＤ８６により活性化され、ＩＣＯＳはＩＣＯＳ−Ｌにより活性化される。Ｔ細胞の活性化は、例えば、単離された腫瘍抗原、腫瘍ライセート、壊死性腫瘍細胞、腫瘍アポトーシス小体、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを使用して、実施され得る。Ｔ細胞の活性化は、一部、Ｔ細胞を活性化する１以上の薬剤を使用して実施され得る。Ｔ細胞を活性化する方法の非限定的例はここに記載される。さらなるＴ細胞を活性化する方法は当分野で知られる。
【００８７】
用語“自然免疫細胞を活性化”は当分野で知られ、自然免疫細胞と、自然免疫細胞の下流シグナル伝達経路を活性化し、自然免疫細胞の１以上の免疫活性の活性化をもたらす１以上の薬剤(例えば、アレルゲン、傷害により産生される化学物質(例えば、オピオイドおよびアルコール)、ポリミキシン、架橋ＩｇＥ、架橋補体タンパク質、Ｔ細胞または他の免疫細胞により産生されるサイトカイン(例えば、インターフェロン−γ)、ＤＡＭＰまたはＰＡＭＰ)との接触を意味する。いくつかの例において、１以上の薬剤は自然免疫細胞の表面の１以上の受容体(例えば、ＦｃεＲ１、パターン認識受容体(例えば、Ｔｏｌｌ様受容体))に結合し、それにより、これらは自然免疫細胞における下流シグナル伝達経路を活性化する。ＤＡＭＰの非限定的例は、核または細胞質タンパク質(例えば、ＨＭＧＢ１タンパク質またはＳ１００タンパク質)、ＤＮＡまたはＲＮＡ、プリン代謝物(例えば、ＡＴＰ、アデノシンまたは尿酸)およびグリカンまたは複合糖質(例えば、ヒアルロナンフラグメント)を含む。ＰＡＭＰの非限定的例は、細菌性リポ多糖、フラゲリン、リポテイコ酸、ペプチドグリカン、二本鎖ＲＮＡおよび非メチル化ＣｐＧモチーフを含む。
【００８８】
用語“抗原結合ドメイン”は、抗原に特異的に結合できるあらゆる抗原結合分子である。抗原結合ドメインの非限定的例は、モノクローナル抗体(例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＥおよびＩｇＤ)(例えば、完全ヒトまたはキメラ(例えば、ヒト化)抗体)、抗体の抗原結合フラグメント(例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’またはＦ(ａｂ’)２フラグメント)(例えば、完全ヒトまたはキメラ(例えば、ヒト化)抗体のフラグメント)、ダイアボディ、直線状抗体、抗体フラグメントから形成された多特異的抗体および直線状抗体を含む。
【００８９】
抗原結合ドメインは、特定の抗原に結合するが、サンプル中の他の分子を低い程度でしか認識および結合しない(例えば、認識および結合しない)とき、その抗原に“特異的に結合する”。ある実施態様において、抗原結合ドメインは、リン酸緩衝食塩水中、１×１０−７Ｍ以下(例えば、１×１０−８Ｍ以下、５×１０−９Ｍ以下、２×１０−９Ｍ以下または１×１０−９Ｍ以下)の親和性(ＫＤ)で抗原に選択的に結合する。
【００９０】
用語“膜貫通ドメイン”は、哺乳動物細胞の形質膜を横断する分子である。ここに使用するとおり、膜貫通ドメインは、例えば、一端で(１)リンカーおよび抗原結合ドメインまたは(２)抗原結合ドメインで連結されてよく、膜貫通ドメインの他端で、例えば、細胞質シグナル伝達ドメイン(例えば、抗原が抗原結合ドメインに結合したとき共刺激活性を提供するのに十分なＣＤ３ζの細胞質配列を含む細胞質シグナル伝達ドメイン)、および所望により抗原結合ドメインが抗原に結合したとき共刺激活性を提供する共刺激性タンパク質の１以上の細胞質配列(例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列)と連結されてよい。膜貫通ドメインの非限定的例および態様はここに記載される。膜貫通ドメインのさらなる例および態様は当分野で知られる。
【００９１】
用語“細胞質シグナル伝達ドメイン”は、ＣＡＲの抗原結合ドメインが抗原に結合したときＴ細胞を刺激する一次細胞質シグナル伝達配列(例えば抗原結合ドメインが抗原に結合したときＴ細胞を刺激するのに十分なＣＤ３ζ配列の配列)および、所望により、Ｔ細胞の共刺激を提供する共刺激性タンパク質の１以上の細胞質配列(例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列)を含む分子である。
【００９２】
用語“リンカー配列”は、膜貫通ドメインと抗原結合ドメインの間および／または膜貫通ドメインと細胞質シグナル伝達ドメインの間に配置され得る分子である。リンカーの非限定的例および態様はここに記載される。リンカーのさらなる例および態様は当分野で知られる。
【００９３】
用語“ＮＬＲＰ３活性化因子”は、哺乳動物細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｍＲＮＡのレベルを増加させる能力、哺乳動物細胞におけるＮＬＲＰ３タンパク質レベルを増加させる能力および哺乳動物細胞におけるＮＬＲＰ３の下流シグナル伝達を促進する能力の１以上を有する薬剤を意味する。
【００９４】
用語“アナプレロティック反応”は当分野で知られ、生合成のために抜き取られたクエン酸回路中間体を補充する代謝活性を意味する。
【００９５】
アナプレロティック反応を使用する哺乳動物細胞は、解糖からの検出可能な乳酸産生、酸化的リン酸化、グルタミン取り込み、基質としてグルタミンを使用して細胞により合成される脂質および／またはアミノ酸のフラクション、オキサロ酢酸を形成するためのピルビン酸カルボキシル化、フマル酸を産生するアデニロコハク酸シンテターゼ活性、オキサロ酢酸を産生するアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ活性およびスクシニル−ＣｏＡを産生するプロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ活性の１以上を示すかまたは有することができる。
【００９６】
用語“生存期間”は、医療従事者による哺乳動物における癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)の同定または診断から、哺乳動物死亡時(癌が原因)までの期間の長さを意味する。癌を有する哺乳動物における生存期間を延長する方法はここに記載される。
【００９７】
用語“腫瘍のサイズ減少”は、一定期間における固形腫瘍のサイズの減少を意味する。固形腫瘍のサイズを決定する方法の例はここに記載される。固形腫瘍のサイズを決定するさらなる方法は当分野で知られる。癌を有する哺乳動物における腫瘍のサイズを減少させる方法はここに記載される。
【００９８】
用語“癌を有する哺乳動物の予後改善”は当分野で知られ、将来の一定期間にわたる哺乳動物における癌の重症度の検出可能な低減を意味する。例えば、癌を有する哺乳動物の改善された予後は、哺乳動物における生存期間が伸びる可能性の増加、転移を発症する可能性の減少、さらなる転移を発症する可能性の減少、少なくとも一つの固形腫瘍が経時的にサイズが減少する可能性の増加および癌の寛解期間が延長する可能性の増加の１以上を含み得る。癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法の例はここに記載される。
【００９９】
用語“転移”は、当分野で知られる用語であり、哺乳動物における原発腫瘍から離れた部位におけるさらなる腫瘍(例えば、固形腫瘍)の形成を意味し、ここで、該さらなる腫瘍は、原発腫瘍と同じまたは類似する癌細胞を含む。
【０１００】
用語“転移を発症するリスク”は、原発腫瘍を有する哺乳動物が、一定期間にわたり哺乳動物における原発腫瘍から離れた部位にさらなる腫瘍(例えば、固形腫瘍)を発症するリスクを意味し、ここで、該さらなる腫瘍は、原発腫瘍と同じまたは類似する癌細胞を含む。癌を有する哺乳動物における転移を発症するリスクを低減する方法はここに記載される。
【０１０１】
用語“さらなる転移を発症するリスク”は、哺乳動物における原発腫瘍および原発腫瘍から離れた部位に１以上のさらなる腫瘍(ここで、該さらなる腫瘍は、原発腫瘍と同じまたは類似する癌細胞を含む)を有する哺乳動物が、原発腫瘍から離れた部位に１以上のさらなる腫瘍を発症するリスクを意味し、ここで、該さらなる腫瘍は、原発腫瘍と同じまたは類似する癌細胞を含む。さらなる転移を発症するリスクを低減する方法はここに記載される。
【０１０２】
用語“癌の処置”は、哺乳動物における癌の１以上の重症度の低減または哺乳動物における癌の１以上の症状の数および／または頻度の低減を意味する。例えば、癌の重症度の低減は、哺乳動物における１以上の固形腫瘍のサイズの減少(例えば、処置前の１以上の腫瘍のサイズと比較して)を含み得る。哺乳動物における癌の重症度の低減は哺乳動物における１以上の腫瘍の経時的な増殖速度の減少(例えば、処置前の１以上の腫瘍の増殖速度と比較して)を含み得る。癌の重症度の低減はまた、哺乳動物における癌の寛解期間の延長(例えば、類似する癌を有するが、異なる処置を受けている哺乳動物における平均寛解期間と比較して)によっても示され得る。癌の重症度の低減はまた、例えば、癌を有する哺乳動物における転移を発症する割合またはさらなる転移を発症する割合の減少(例えば、類似の癌を有する哺乳動物の集団と比較して)も意味し得る。癌の重症度の低減は、例えば、癌を有する哺乳動物の生存期間の延長(例えば、類似の癌を有する哺乳動物の集団と比較して)であり得る。癌の重症度の低減は、例えば、癌を有する哺乳動物の予後の改善をもたらし得る。哺乳動物における癌を処置する方法はここに記載される。
【０１０３】
特に定義しない限り、ここで使用する全ての技術的および科学的用語は、本発明が属する分野の当業者により一般に理解されているのと同じ意味を有する。方法および材料は、本発明において使用するためにここに記載し、当分野で知られる他の、適切な方法および材料も使用することができる。材料、方法および例は説明のためのみであり、限定を意図するものではない。ここに記載する全ての刊行物、特許出願、特許、配列、データベースエントリーおよび他の引用文献は、その全体を引用により本明細書に包含させる。矛盾がある場合、定義を含む本明細書が優先する。
本発明の他の特性および利点は、次の詳細な記載および図面ならびに特許請求の範囲から明らかである。
【図面の簡単な説明】
【０１０４】
【図１】ＩＬ−１βが確立された癌に対するＣＤ８＋抗腫瘍活性を促進することを示すデータを提供する。腫瘍を誘発するために、ＯＶＡ抗原を発現した１×１０６  ＥＧ.７腫瘍細胞を、Ｂｌａｃｋ／６マウスの脇腹に皮下注射した。この条件で、７日後ＥＧ.７細胞は触知可能な腫瘍を形成する。抗腫瘍Ｔ細胞を産生するために、ＯＶＡ抗原を認識するトランスジェニックＴＣＲを有するＯＴ−１マウスからの脾臓細胞を、ＴＧＦ−β存在下またはＴＧＦ−βおよびＩＬ−１β存在下、ＯＶＡ抗原(１μg／mL)で活性化した。５日後ＣＤ８＋細胞を精製した。ＣＤ８＋抗腫瘍活性を決定するために、種々の実験群(対照、ＴＧＦ−β、ＴＧＦ−β＋ＩＬ−１β)の５×１０６  ＣＤ８＋細胞を２００μLのＰＢＳ(リン酸緩衝食塩水)に再懸濁し、確立されたＥＧ.７腫瘍を有するマウスに腹腔内投与した。媒体のみを注射された対照群のマウスを、処置非存在下の腫瘍成長推定に使用した。腫瘍体積を、試験終了まで週に３回記録した。
【発明を実施するための形態】
【０１０５】
詳細な記載
ここに提供されるのは、少なくとも一つの免疫抑制因子に対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を誘発するのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地においてＴ細胞または自然免疫細胞を培養することを含む、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を増大させる方法である。また提供されるのは、Ｔ細胞をアナプレロティック反応の増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の誘発および／または増大に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の増大をもたらすことを含む、Ｔ細胞の抗腫瘍活性を増大させる方法である。また提供されるのは、これらの方法により産生されたＴ細胞または自然免疫細胞、これらＴ細胞または自然免疫細胞を含む医薬組成物またはこれら医薬組成物を含むキットである。
【０１０６】
また提供されるのは、癌を有する哺乳動物における抗腫瘍活性を増大する方法、哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法、癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法、癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法、癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法、癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法、癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法および癌を有する哺乳動物における少なくとも一つの抗腫瘍リンホカインおよび／または少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法であって、(ｉ)哺乳動物からＴ細胞を採取し、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に該Ｔ細胞を培養し、該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与するまたは(ii)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子を該哺乳動物に投与することを、(一部)含む、方法である。また提供されるのは、哺乳動物からＴ細胞を採取し、組み換え核酸を該Ｔ細胞に導入して、組み換えＴ細胞を産生し、該組み換えＴ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分であるおよび／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子を含む培養培地で培養し、該組み換えＴ細胞を該哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物に組み換えＴ細胞投与後、少なくとも１ヶ月、該哺乳動物において該組み換えＴ細胞の集団を維持する方法である。また提供されるのは、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性の増大のための候補薬物を同定する方法である。
【０１０７】
これらの方法、細胞、医薬組成物およびキットの各々の非限定的態様を下に記載する。当業者には認識され得るとおり、下記の種々の態様を、例えば、当分野で知られる態様との、任意の組み合わせで使用できる。
【０１０８】
Ｔ細胞
Ｔ細胞は、細胞表面にＴＣＲタンパク質を発現するタイプの免疫細胞である。多種多様なＴＣＲが当分野で知られ、例えば、αおよびβ鎖を含むＴＣＲまたはγおよびδ鎖を含むＴＣＲを含む。Ｔ細胞の非限定的例は、リンパ球系前駆細胞、未成熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性ＴＨ細胞前駆体、Ｔｒｅｇ細胞、記憶Ｔ細胞、細胞毒性Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ２２細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ１細胞、ＴＨ３細胞、γδ  Ｔ細胞、αβ  Ｔ細胞および腫瘍浸潤性Ｔ細胞を含む。Ｔ細胞はまたキメラ抗原受容体(ＣＡＲ)Ｔ細胞であり得る。ＣＡＲ−Ｔ細胞の例示的態様は下に記載される。種々のタイプのＴ細胞のさらなる記載は、例えば、Kuby Immunology (Kindt, Kuby Immunology), Janeway's Immunobiology or Cellular and Molecular Immunology, Abbasに提供される。
【０１０９】
ここに記載する方法の何れかのある実施態様において、Ｔ細胞を、哺乳動物(例えば、癌を有する哺乳動物または感染性疾患を有する哺乳動物)から得る。Ｔ細胞は、末梢血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位からの組織、固形腫瘍、腹水、胸水および脾臓組織を含む、多数の起源から得ることができる。ある実施態様において、当分野で利用可能なあらゆる数のＴ細胞株が使用され得る。ある実施態様において、Ｔ細胞を、FicollTM分離のような、当業者に知られるあらゆる数の技術を使用して、哺乳動物から集めた一単位の血液から得てよい。例えば、個体の循環血からの細胞は、アフェレーシスにより得る。アフェレーシス産物は、典型的に、例えば、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血球を含むリンパ球、赤血球および血小板を含む。いくつかの例において、アフェレーシスにより採取した細胞を洗浄して血漿フラクションを除き、続く処理ステップまたはＴ細胞単離ステップのために、細胞を適当な緩衝液または培養培地に入れてよい。例えば、細胞をリン酸緩衝食塩水(ＰＢＳ)または任意の他のここに記載するもしくは当分野で知られる等張液で洗浄できる。ある実施態様において、洗浄溶液は、カルシウムおよび／またはマグネシウムを欠いてよくまたは大部分の(全てではないにしても)二価カチオンを欠いてよい。カルシウム非存在下で実施したＴ細胞の活性化は、活性化の増強をもたらし得る。洗浄ステップは、例えば、製造業者の指示に従い半自動“フロースルー”遠心分離機(例えば、Cobe 2991 ceil processor、Baxter CytoMateまたはHaemonetics Cell Saver 5)を使用するような、当業者に知られる任意の方法を使用して実施できる。洗浄後、細胞を、例えば、無Ｃａ２＋、無Ｍｇ２＋ＰＢＳ、PlasmaLyte Aまたは他の緩衝剤を含むもしくは含まない食塩溶液のような、多様な生体適合性緩衝液に再懸濁し得る。いくつかの例において、アフェレーシス産物の望ましくない成分を除去し、細胞を直接適当な培養培地に再懸濁してよい。
【０１１０】
いくつかの例において、Ｔ細胞は、赤血球を溶解させ、単球を、例えば、PERCOLLTM勾配による遠心分離または対向流遠心溶出法により枯渇させることにより、末梢血リンパ球(例えば、哺乳動物から得た)から単離された。ＣＤ３＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋およびＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞のようなＴ細胞の特定の亜集団は、正または負の選択技術によりさらに単離され得る。ある実施態様において、Ｔ細胞は、所望のＴ細胞の正の選択に十分な時間、DYNABEADS(登録商標)M-450 CD3／CD28 Tのような抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８(３×２８)コンジュゲートビーズとインキュベーションすることにより単離される。例えば、時間は、例えば、約３０分、約３０分〜３６時間または３６時間以上であり得る。例えば、時間は、例えば、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間または６時間であり得る。いくつかの例において、時間は約１０〜約２４時間または約２４時間であり得る。白血病を有する、有するとして同定されたまたは有するとして診断された哺乳動物からのＴ細胞の単離のために、例えば、２４時間または２４時間より長い時間が、細胞収率を上げ得る。長いインキュベーション時間は、他の細胞型と比較してＴ細胞が少ない何らかのサンプルにおけるＴ細胞を単離するため、例えば、腫瘍浸潤性リンパ球(ＴＩＬ)を固形腫瘍または免疫不全哺乳動物から単離するために使用できる。長いインキュベーション時間は、例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞捕捉効率を高め得る。当分野で知られるとおり、Ｔ細胞をＣＤ３／ＣＤ２８ビーズと結合させる時間の短縮または延長および／またはビーズ対Ｔ細胞の比率の増加または減少を、培養物接種時または単離中の他の時点でＴ細胞の特定の亜集団に対して優先的に選択するために使用できる。いくつかの例において、ビーズまたは他の表面上の抗ＣＤ３および／または抗ＣＤ２８抗体の比率の増減を、培養物接種時または単離中の他の時点でＴ細胞の特定の亜集団に対して優先的に選択するために使用できる。当分野で認識され得るとおり、複数回の選択もＴ細胞または特定のタイプのＴ細胞の単離に使用できる。いくつかの例において、選択法を使用し、活性化および増大過程において非選択細胞を使用することが望ましいこともある。非選択細胞を、例えば、さらなる選択に付してよい。
【０１１１】
負の選択によるＴ細胞集団富化は、例えば、負に選択された細胞に特有の表面マーカーに対する抗体と組み合わせて達成できる。負の選択によりＴ細胞集団を富化するためのある例示的方法は、負に選択された１以上の細胞に存在する１以上の細胞表面マーカーに対する１以上のモノクローナル抗体のカクテルを使用する、負の磁気免疫付着またはフローサイトメトリーによる細胞選別および／または選択を含む。例えば、負の選択によりＣＤ４＋細胞を富化するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的に、例えば、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ−ＤＲおよびＣＤ８に対する抗体を含む。ある実施態様において、典型的にＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ６２Ｌ１＋、ＧＩＴＲ＋およびＦｏｘＰ３＋を発現する制御性Ｔ細胞について富化するまたは正に選択することが望ましい場合がある。いくつかの例において、Ｔ制御性細胞を、抗Ｃ２５コンジュゲートビーズまたは選択の他の類似方法により枯渇される。
【０１１２】
Ｔ細胞の所望の集団の正または負の選択による単離のための、細胞および表面の濃度(例えば、ビーズのような粒子)は変わり得る。いくつかの例において、細胞とビーズの最大接触を確実にするために、ビーズと細胞を一緒に混合する体積を有意に減少させる(すなわち、細胞濃度を増加させる)ことが望ましいことがあり得る。例えば、約２０億細胞／mL、約１０億細胞／mL、約１億５０００万細胞／mL、約１億２５００万細胞／mL、約１億細胞／mL、約９５００万細胞／mL、約９０００万細胞／mL、約８５００万細胞／mL、約８０００万細胞／mL、約７５００万細胞／mL、約７０００万細胞／mL、約６５００万細胞／mL、約６０００万細胞／mL、約５５００万細胞／mL、約５０００万細胞／mL、約４５００万細胞／mL、約４０００万細胞／mL、約３５００万細胞／mL、約３０００万細胞／mL、約２５００万細胞／mL、約２０００万細胞／mL、約１５００万細胞／mL、約１０００万細胞／mLまたは約５００万細胞／mLの濃度が使用される。高濃度の使用は、例えば、細胞収率増加、細胞活性化および細胞増大をもたらし得る。加えて、高細胞濃度の使用は、例えば、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞のような、目的の標的抗原の発現が弱い可能性のある細胞のまたは多くの腫瘍細胞が存在するサンプル(例えば、白血病血、固形組織等)からのより効率的な捕捉を可能とし得る。細胞のこのような集団は治療的価値を有し得て、得ることが望まれる。例えば、高濃度の細胞の使用は、通常弱いＣＤ２８発現を有するＣＤ８＋Ｔ細胞のより効率的な選択を可能とする。
【０１１３】
いくつかの例において、低濃度の細胞を使用することが望ましいこともある。Ｔ細胞および表面(例えば、ビーズのような粒子)を希釈することにより、粒子と細胞の相互作用が最小化される。Ｔ細胞と表面(例えば、ビーズのような粒子)の混合物の希釈は、粒子に結合する高量の所望の抗原を発現するＴ細胞について選択する。例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞は、高レベルのＣＤ２８を発現し、希釈濃度でＣＤ８＋Ｔ細胞より効率的に捕捉される。いくつかの例において、使用する細胞濃度は、５×１０６／mLまたは約１×１０５／mL〜１×１０６／mLおよびその間の任意の整数値であり得る。
【０１１４】
ある実施態様において、細胞を、例えば、ローターで、種々の時間、種々の速度で、例えば、２〜１０℃または室温でインキュベートし得る。いくつかの例は、さらなに洗浄ステップ後かつ活性化前に細胞を凍結することを含む。理論に縛られないが、凍結および続く解凍ステップは、例えば、細胞集団から顆粒球およびある程度単球を除去することにより、より均一な産物を提供できる。血漿および血小板を除く洗浄ステップ後、細胞を、例えば、凍結溶液に懸濁できる。多種多様な凍結溶液およびパラメータは当分野で知られる。使用できる凍結溶液の例は、(１)２０％ＤＭＳＯおよび８％ヒト血清アルブミン含有ＰＢＳ、(２)１０％デキストラン４０、５％デキストロース、２０％ヒト血清アルブミンおよび７.５％ＤＭＳＯ含有培養培地；または(３)３１.２５％Plasmaiyte-A、３１.２５％デキストロース５％、０.４５％ＮａＣｌ、１０％デキストラン４０、５％デキストロース、２０％ヒト血清アルブミンおよび７.５％ＤＭＳＯ含有培養培地または(４)例えば、ＨｅｓｐａｎおよびPlasmaLyte Aを含む、他の適当な細胞凍結媒体である。いくつかの例において、その後、細胞を、−８０℃まで約１°／分の速度で凍結させ、液体窒素貯蔵タンクの気相に保存する。使用できるさらなる制御凍結の方法は当分野で知られる。いくつかの例において、細胞を、−２０℃または液体窒素で直ぐに(非制御方式で)凍結させてよい。
【０１１５】
いくつかの例において、ここに記載のとおり凍結保存細胞を解凍し、洗浄し、ここに記載された方法の何れかを使用する活性化前に、約１時間、室温で休息させる。
【０１１６】
ある実施態様において、哺乳動物(例えば、癌を有する哺乳動物または感染性疾患を有する哺乳動物)からの血液サンプルまたはアフェレーシス産物の採取を、ここに提供する医薬組成物または細胞の何れかの投与前の時点で実施できる。例えば、エクスビボで処理および操作すべき細胞の源を必要な任意の時点で哺乳動物から採取してよく、Ｔ細胞のような所望の細胞を単離し、哺乳動物に投与して戻す前に、エクスビボでの後の処理および操作のために凍結してよい。
【０１１７】
いくつかの例において、血液サンプルまたはアフェレーシス産物を、一般に健康な哺乳動物(例えば、癌または感染性疾患の症状の１以上を示さない哺乳動物)から得る。ある実施態様において、血液サンプルまたはアフェレーシス産物を疾患を発症するリスク(例えば、癌または感染性疾患を発症するリスク)にあるが、疾患(例えば、癌または感染性疾患)をまだ発症していない一般に健康な哺乳動物から得て、目的の細胞を後の使用(例えば、後のエクスビボでの培養、活性化および／または操作)のために単離および凍結する。いくつかの例において、Ｔ細胞を、後の時点で増殖、凍結および使用してよい。いくつかの例において、サンプルを、ここに記載する特定の疾患の診断(例えば、癌の診断または感染性疾患の診断)の直後であるが、該特定の疾患の何らかの処置剤の投与前に哺乳動物から採取する。ある実施態様において、細胞を、ナタリズマブ、エファリズマブ、抗ウイルス剤、化学療法剤、放射線、免疫抑制性薬剤(例えば、シクロスポリン、アザチオプリン、メトトレキサート、ミコフェノレートおよびＦＫ５０６)、組み換え抗体および他の免疫除去剤(例えば、キャンパス、抗ＣＤ３抗体、シトキサン、フルダラビン、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸、ステロイド、ＦＲ９０１２２８および照射)のような１以上の薬剤での処置を含むが、これらに限定されない、あらゆる数の適切な処置モダリティ前に、哺乳動物からの血液サンプルまたはアフェレーシス産物から単離する。免疫除去剤は、カルシウム依存性ホスファターゼカルシニューリン(例えば、シクロスポリンおよびＦＫ５０６)を阻害するかまたは成長因子誘導シグナル伝達に重要なｐ７０Ｓ６キナーゼを阻害する(例えば、ラパマイシン)(Liu et al., Cell 66:807-815, 1991); Henderson et al., Immunology 73:316-321, 1991; Bterer et al., Curr. Opin. Immun. 5:763-773, 1993)。いくつかの例において、細胞を哺乳動物から得て、骨髄または幹細胞移植、フルダラビンのような化学療法剤、体外照射療法(ＸＲＴ)、シクロホスファミドまたはＯＴ３またはキャンパスのような抗体を使用するＴ細胞除去療法と共に(例えば、前、同時または後)後に使用するために凍結する。いくつかの例において、細胞をＣＤ２０と反応する薬剤、例えば、リツキサンのようなＢ細胞除去療法後の処置のための後の使用のために、その前に単離し、凍結できる。
【０１１８】
いくつかの例において、Ｔ細胞を、処置剤投与後、直接哺乳動物から得る。これに関して、ある癌処置剤、例えば、処置直後免疫系を損傷させる薬剤投与後に、通常患者が処置から回復する期間に、得られるＴ細胞の品質がエクスビボ増殖の能力について最適であるか、改善される可能性が観察されている。同様に、ここに記載された方法を使用するエクスビボ操作後、これらの細胞は、生着およびインビボ増殖の増強のために好ましい状態であり得る。それ故に、ある実施態様は、Ｔ細胞または自然免疫細胞を含む血液細胞を、この回復期に採取することを含む。さらに、いくつかの例において、動員(例えば、ＧＭ−ＣＳＦ投与による動員)およびコンディショニングレジメンを、特に、ここに提供する医薬組成物または細胞の何れかの投与後の規定された時間枠に、哺乳動物において、特定の細胞型の再増殖、再循環、再生および／または増殖に好ましい状態を作るために使用できる。
【０１１９】
ＣＡＲ−Ｔ細胞
キメラ抗原受容体(ＣＡＲ)を伴う遺伝子修飾したＴ細胞は、腫瘍特異的Ｔ細胞産生のために最も一般的に使用される手法である(Sadelain et al., Cancer Discov. 3:388-398, 2013)。例えば、Ｔ細胞を提供し、キメラ抗原受容体をコードする組み換え核酸をＴ細胞に導入して、ＣＡＲ  Ｔ細胞を産生する。Ｔ細胞に組み換え核酸を導入する方法は当分野で知られる。Ｔ細胞に核酸を導入する非限定的例は、リン酸カルシウムトランスフェクション、高度に分岐した有機化合物を使用するトランスフェクション、カチオン性ポリマーを使用するトランスフェクション、リポソーム(例えば、カチオン性リポソーム)を使用するトランスフェクション、電気穿孔、セルスクイージング、ソノポレーション、光学的トランスフェクション、原形質融合、インペールフェクション、水力学的送達、遺伝子銃、マグネトフェクション、粒子ベースのトランスフェクション、ウイルストランスフェクションおよびヌクレオフェクションを含む。
【０１２０】
キメラ抗原受容体は、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメインおよび抗原に結合したときＴ細胞を刺激するのに十分なＣＤ３ζ配列の細胞質配列を含む細胞質シグナル伝達ドメインおよび、所望により、抗原結合ドメインが抗原に結合したとき、Ｔ細胞の共刺激を提供する１以上(例えば、２、３または４)の共刺激性タンパク質の細胞質配列(例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列)を含む。ＣＡＲの非限定的態様および特性を下に記載する。抗原結合ドメイン、リンカー、膜貫通ドメインおよび細胞質シグナル伝達ドメイン例を含む、ＣＡＲおよびＣＡＲ  Ｔ細胞のさらなる態様は、例えば、Kakarla et al., Cancer J. 20:151-155, 2014; Srivastava et al., Trends Immunol. 36:494-502, 2015; Nishio et al., Oncoimmunology 4(2):e988098, 2015; Ghorashian et al., Br. J. Haematol. 169:463-478, 2015; Levine, Cancer Gene Ther. 22:79-84, 2015; Jensen et al., Curr. Opin. Immunol. 33:9-15, 2015; Singh et al., Cancer Gene Ther. 22:95-100, 2015; Li et al., Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi 22:1753-1756, 2014; Gill et al., Immunol. Rev. 263:68-89, 2015; Magee et al., Discov. Med. 18:265-271, 2014; Gargett et al., Front. Pharmacol. 5:235, 2014; Yuan et al., Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi 22:1137-1141, 2014; Pedgram et al., Cancer J. 20:127-133, 2014; Eshhar et al., Cancer J. 20:123-126, 2014; Ramos et al., Cancer J. 20:112-118, 2014; Maus et al., Blood 123:2625-2635, 2014; Jena et al., Curr. Hematol. Malig. Rep. 9:50-56, 2014; Maher et al., Curr. Gene Ther. 14:35-43, 2014; Riches et al., Discov. Med. 16:295-302, 2013; Cheadle et al., Immunol. Rev. 257:83-90, 2014; Davila et al., Int. J. Hematol. 99:361-371, 2014; Xu et al., Cancer Lett. 343:172-178, 2014; Kochenderfer et al., Nat. Rev. Clin. Oncol. 10:267-276, 2013; Hosing et al., Curr. Hematol. Malig. Rep. 8:60-70, 2013; Hombach et al., Curr. Mol. Med. 13:1079-1088, 2013; Xu et al., Leuk. Lymphoma 54:255-260, 2013; Gilham et al., Trends Mol. Med. 18:377-384, 2012; Lipowska-Bhalla et al., Cancer Immunol. Immunother. 61:953-962, 2012; Chmielewski et al., Cancer Immunol. Immunother. 61:1269-1277, 2013; Jena et al., Blood 116:1035-1044, 2010；米国特許出願公開２０１５／０２３２８８０号、２０１５／０２２５４８０号、２０１５／０２２４１４３号、２０１５／０２２４１４２号、２０１５／０１９６５９９号、２０１５／０１５２１８１号、２０１５／０１４００２３号、２０１５／０１１８２０２号、２０１５／０１１０７６０号、２０１５／００９９２９９号、２０１５／００９３８２２号、２０１５／００９３４０１号、２０１５／００５１２６６号、２０１５／００５０７２９号、２０１５／００２４４８２号、２０１５／００２３９３７号、２０１５／００１７１４１号、２０１５／００１７１３６号、２０１５／００１７１２０号、２０１４／０３７００４５号、２０１４／０３７００１７号、２０１４／０３６９９７７号、２０１４／０３４９４０２号、２０１４／０３２８８１２号、２０１４／０３２２２７５号、２０１４／０３２２２１６号、２０１４／０３２２２１２号、２０１４／０３２２１８３号、２０１４／０３１４７９５号、２０１４／０３０８２５９号、２０１４／０３０１９９３号、２０１４／０２９６４９２号、２０１４／０２９���７８４号、２０１４／０２８６９７３号、２０１４／０２７４９０９号、２０１４／０２７４８０１号、２０１４／０２７１６３５号、２０１４／０２７１５８２号、２０１４／０２７１５８１号、２０１４／０２７１５７９号、２０１４／０２５５３６３号、２０１４／０２４２７０１号、２０１４／０２４２０４９号、２０１４／０２２７２７２号、２０１４／０２１９９７５号、２０１４／０１７０１１４号、２０１４／０１３４７２０号、２０１４／０１３４１４２号、２０１４／０１２０６２２号、２０１４／０１２０１３６号、２０１４／０１０６４４９号、２０１４／０１０６４４９号、２０１４／００９９３４０号、２０１４／００８６８２８号、２０１４／００６５６２９号、２０１４／００５０７０８号、２０１４／００２４８０９号、２０１３／０３４４０３９号、２０１３／０３２３２１４号、２０１３／０３１５８８４号、２０１３／０３０９２５８号、２０１３／０２８８３６８号、２０１３／０２８７７５２号、２０１３／０２８７７４８号、２０１３／０２８０２２１号、２０１３／０２８０２２０号、２０１３／０２６６５５１号、２０１３／０２１６５２８号、２０１３／０２０２６２２号、２０１３／００７１４１４号、２０１２／０３２１６６７号、２０１２／０３０２４６６号、２０１２／０３０１４４８号、２０１２／０３０１４４７号、２０１２／００６０２３０号、２０１１／０２１３２８８号、２０１１／０１５８９５７号、２０１１／０１０４１２８号、２０１１／００３８８３６号および２００７／００３６７７３号に記載されている。抗原結合ドメイン、リンカー、膜貫通ドメインおよび細胞質シグナル伝達ドメインの例を含むＣＡＲおよびＣＡＲ  Ｔ細胞のさらなる態様は、ＷＯ１２／０７９０００号、２０１５／０１４１３４７号、２０１５／００３１６２４号、２０１５／００３０５９７号、２０１４／０３７８３８９号、２０１４／０２１９９７８号、２０１４／０２０６６２０号、２０１４／００３７６２８号、２０１３／０２７４２０３号、２０１３／０２２５６６８号、２０１３／０１１６１６７号、２０１２／０２３０９６２号、２０１２／０２１３７８３号、２０１２／００９３８４２号、２０１２／００７１４２０号、２０１２／００１５８８８号、２０１１／０２６８７５４号、２０１０／０２９７０９３号、２０１０／０１５８８８１号、２０１０／００３４８３４号、２０１０／００１５１１３号、２００９／０３０４６５７号、２００４／００４３４０１号、２０１４／０３２２２５３号、２０１５／０１１８２０８号、２０１５／００３８６８４号、２０１４／００２４６０１号、２０１２／０１４８５５２号、２０１１／０２２３１２９号、２００９／０２５７９９４号、２００８／０１６０６０７号、２００８／０００３６８３号、２０１３／０１２１９６０号、２０１１／００５２５５４号および２０１０／０１７８２７６号に記載されている。
【０１２１】
抗原結合ドメイン
キメラ抗原受容体に含まれる抗原結合ドメインは、抗原(例えば、癌細胞の抗原または寄生生物または寄生生物感染細胞の抗原)に特異的に結合できる。抗原結合ドメインの非限定的例は、モノクローナル抗体(例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＥおよびＩｇＤ)(例えば、完全ヒトまたはキメラ(例えば、ヒト化)抗体)、抗体の抗原結合フラグメント(例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’またはＦ(ａｂ’)２フラグメント)(例えば、完全ヒトまたはキメラ(例えば、ヒト化)抗体のフラグメント)、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ−Ｆｃ、ｓｃＦａｂ、ビス−ｓｃＦｖ、ｈｃ−ＩｇＧ、単一ドメイン抗体(例えば、Ｖ−ＮＡＲドメインまたはＶｈＨドメイン)、ＩｇＮＡＲおよび多特異的(例えば、二特異的抗体)抗体を含む。これらの抗原結合ドメインを製造する方法は当分野で知られる。
【０１２２】
抗原結合ドメインは、免疫グロブリン分子(例えば、軽または重鎖免疫グロブリン分子)および免疫グロブリン分子の免疫活性(抗原結合)フラグメントのような、標的抗原に特異的に結合できる抗体の少なくとも一つ(例えば、１、２、３、４、５または６)のＣＤＲ(例えば、免疫グロブリン軽鎖可変ドメインからの３ＣＤＲの何れかまたは免疫グロブリン重鎖可変ドメインからの３ＣＤＲの何れか)を含み得る。
【０１２３】
抗原結合ドメインはまた一本鎖抗体(例えば、ここに記載)であり得る。抗原結合ドメインは抗体分子全体(例えば、ヒト、ヒト化またはキメラ抗体)または多量体抗体(例えば、二特異性抗体)であり得る。
【０１２４】
抗原結合ドメインはまた抗体フラグメントおよび多特異性(例えば、二特異性)抗体または抗体フラグメントも含む。抗体およびその抗原結合フラグメントの例は、一本鎖Ｆｖｓ(ｓｃＦｖｓ)、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ(ａｂ’)２、ジスルフィド架橋Ｆｖｓ(ｓｄＦｖｓ)、ＦｖｓおよびＶＬまたはＶＨドメインを含むフラグメントを含むが、これらに限定されない。ここに使用する用語“一本鎖Ｆｖ”または“ｓｃＦｖ”は、抗体の少なくとも一つのＶＨドメインに架橋した、抗体の少なくとも一つのＶＬドメインを含むポリペプチドをいう。
【０１２５】
ここに提供されるさらなる抗原結合ドメインは、ポリクローナル、モノクローナル、多特異的(多量体、例えば、二特異性)、ヒト抗体、キメラ抗体(例えば、ヒト−マウスキメラ)、一本鎖抗体、細胞内産生抗体(すなわち、イントラボディ)およびその抗原結合フラグメントである。抗体またはその抗原結合フラグメントは何れの(例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ)、クラス(例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２)またはサブクラスでもよい。ある実施態様において、抗原結合ドメインはＩｇＧ１抗体またはその抗原結合フラグメントである。いくつかの例において、抗原結合ドメインはＩｇＧ４抗体またはその抗原結合フラグメントである。抗原結合ドメインは、重鎖および軽鎖を有する免疫グロブリンであり得る。
【０１２６】
単離された抗原を免疫原として使用して、モノクローナル抗体調製の標準技術を使用して、抗体を産生できる。ポリクローナル抗体は、抗原の複数回注射注射(例えば、皮下または腹腔内注射)により、動物において生じさせ得る。ある実施態様において、抗原を少なくとも一つのアジュバントと共に注射する。ある実施態様において、抗原は、免疫化する動物において免疫原性であるタンパク質、例えば、キーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシサイログロブリンまたは大豆トリプシンインヒビターと、二機能性または誘導体化剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル(システイン残基を介して結合)、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド(リシン残基を介する)、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、ＳＯＣｌ２またはＲ１Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ(式中、ＲおよびＲ１は異なるアルキル基である)を使用してコンジュゲートし得る。動物に抗原を１回を超えて注射できる(例えば、２回、３回または４回)。
【０１２７】
抗原は、典型的に、適切な哺乳動物(例えば、ヒトまたは少なくとも一つのヒト免疫グロブリン座位を発現するトランスジェニック動物)の免疫化による抗体の産生に使用される。哺乳動物の免疫化に使用される調製物は、さらにフロイント完全もしくは不完全アジュバントまたは類似の免疫刺激剤のようなアジュバントを含み得る。
【０１２８】
ポリクローナル抗体は、適切な哺乳動物を抗原で免疫化することにより、上記のとおり製造できる。免疫化哺乳動物における抗体力価を、抗原を使用する酵素結合免疫吸着検定法(ＥＬＩＳＡ)のような標準技術により、経時的にモニターできる。免疫化後の適当な時点、例えば、特定の抗体力価が最高であるとき、抗体産生細胞を哺乳動物から得て、Kohler et al., Nature 256:495-497, 1975により元々記載されたハイブリドーマ技術、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術(Kozbor et al., Immunol. Today 4:72, 1983)、ＥＢＶ−ハイブリドーマ技術(Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96, 1985)またはトリオーマ技術のような標準技術によりモノクローナル抗体を調製するのに使用できる。ハイブリドーマ産生のためのテクノロジーは周知である(一般に、Current Protocols in Immunology, 1994, Coligan et al. (Eds.), John Wiley & Sons, Inc., New York, NY参照)。モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞を、例えば、標準ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、目的の抗原に結合する抗体について、ハイブリドーマ培養上清をスクリーニングすることにより検出される。
【０１２９】
モノクローナル抗体分泌ハイブリドーマの製造の代わりに、ある抗原に対するモノクローナル抗体を、目的の抗原での組み換えコンビナトリアル免疫グロブリンライブラリー(例えば、抗体ファージディスプレイライブラリー)のスクリーニングにより、同定し、単離できる。ファージディスプレイライブラリー作製用およびスクリーニング用キットは業者から購入できる(例えば、Pharmacia Recombinant Phage Antibody System, Catalog No. 27-9400-01;およびthe Stratagene SurfZAP* Phage Display Kit, Catalog No. 240612)。さらに、抗体ディスプレイライブラリー作製およびスクリーニングに特に適用可能な方法および薬剤の例が、例えば、米国特許５,２２３,４０９号、ＷＯ９２／１８６１９号、ＷＯ９１／１７２７１号、ＷＯ９２／２０７９号、ＷＯ９２／１５６７９号、ＷＯ９３／０１２８８号、ＷＯ９２／０１０４７号、ＷＯ９２／０９６９０号、ＷＯ９０／０２８０９号、Fuchs et al., Bio/Technology 9:1370-1372, 1991; Hay et al., Hum. Antibod. Hybridomas 3:81-85, 1992; Huse et al., Science 246:1275-1281, 1989;およびGriffiths et al., EMBO J. 12:725-734, 1993に見ることができる。
【０１３０】
ここに記載する方法の何れかのある実施態様において、抗体または抗原結合フラグメントは、ヒト抗体からの配列(例えば、ヒト免疫グロブリン定常ドメインまたはヒト免疫グロブリン可変ドメインフレームワーク領域)を含む、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体である。ヒト化抗体は、非ヒト(例えば、マウス)免疫グロブリン由来の最小配列を含むキメラ抗体である。ある実施態様において、ヒト化抗体は、非ヒト抗体(例えば、マウス、ラット、ウサギまたはヤギ抗体)に存在する少なくとも一つの相補性決定領域(ＣＤＲ)を含むように操作されているヒト抗体である。ある実施態様において、ヒト化抗体またはそのフラグメントは、実質的に同じ抗原に特異的に結合する非ヒト抗体またはヒト抗体の軽鎖の全３ＣＤＲを含み得る。ある実施態様において、ヒト化抗体またはそのフラグメントは、同じ抗原に特異的に結合する非ヒトモノクローナル抗体またはヒト抗体の重鎖の全３ＣＤＲを含み得る。ある実施態様において、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域残基は、対応する非ヒト(例えば、マウス)抗体残基に置き換えられ得る。ある実施態様において、ヒト化抗体は、ヒト抗体または非ヒト(例えば、マウス)抗体に見られない残基を含み得る。非ヒト(例えば、マウス)モノクローナル抗体からヒト化抗体を産生する方法は当分野で知られる。キメラ(例えば、ヒト化)抗体製造のさらなる非限定的例はここに記載される。
【０１３１】
ある実施態様において、抗体は、非ヒト抗体(例えば、マウス抗体)の軽鎖可変ドメインまたは非ヒト抗体(例えば、マウス抗体)の軽鎖可変ドメインの少なくとも一つのＣＤＲを含む軽鎖免疫グロブリンおよびヒト免疫グロブリン軽鎖の定常ドメイン(例えば、ヒトκ鎖定常ドメイン)を含むキメラ抗体である。ある実施態様において、抗体は、非ヒト(例えば、マウス抗体)の重鎖可変ドメインまたは非ヒト(例えば、マウス抗体)の重鎖可変ドメインの少なくとも一つのＣＤＲおよびヒト免疫グロブリン重鎖の定常ドメイン(例えば、ヒトＩｇＧ重鎖定常ドメイン)を含む重鎖免疫グロブリンを含む、キメラ抗体である。ある実施態様において、キメラ抗体は、ヒト免疫グロブリンの定常部分(Ｆｃドメイン)を含む。
【０１３２】
ある実施態様において、抗体またはその抗原結合フラグメントは多特異性(例えば、多量体)であり得る。例えば、抗体は、単量体免疫グロブリン分子の抗体二量体、三量体または高次多量体の形をとり得る。免疫グロブリン分子全体またはＦ(ａｂ’)２フラグメントの二量体は四価であり、一方ＦａｂフラグメントまたはｓｃＦｖ分子の二量体は二価である。抗体多量体内の個々の単量体は同一でも異なってもよく、すなわち、ヘテロマーでもホモマー抗体多量体でもよい。例えば、多量体内の個々の抗体は同一または異なる結合特異性を有し得る。
【０１３３】
抗体の多量体化は、抗体の自然凝集または当分野で知られる化学的もしくは組み換え結合技術により達成され得る。例えば、精製抗体調製物(例えば、精製ＩｇＧ１分子)は、ある比率で抗体ホモ二量体および他の高次抗体多量体を含むタンパク質凝集体を形成する。あるいは、抗体ホモ二量体を、当分野で知られる化学結合技術を介して形成してよい。例えば、ＳＭＣＣ(スクシンイミジル４−(マレイミドメチル)シクロヘキサン−１−カルボキシレート)およびＳＡＴＡ(Ｎ−スクシンイミジルＳ−アセチルチオ−アセテート)(例えば、Pierce Biotechnology, Inc., Rockford, ILから入手可能)を含むが、これらに限定されないヘテロ二機能性架橋剤を使用して、抗体多量体を形成できる。抗体ホモ二量体形成のプロトコール例は、Ghetie et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94: 7509-7514, 1997)に記載される。抗体ホモ二量体を形成する他の方法は、Zhao et al. (J. Immunol. 25:396-404, 2002)に記載の自己親和Ｔ１５ペプチドの使用を介する。
【０１３４】
ある実施態様において、多特異的抗体は二特異性抗体である。二特異性抗体を、抗体分子対間の界面を操作することにより製造できる。例えば、界面は、抗体定常ドメインのＣＨ３ドメインの少なくとも一部を含み得る。この方法で、第一抗体分子の界面を形成する１以上の小アミノ酸側鎖が、大型側鎖(例えば、チロシンまたはトリプトファン)に置き換わる。大型側鎖と同一または類似サイズの代償性“空洞”が、大型アミノ酸側鎖を小型のもの(例えば、アラニンまたはスレオニン)に置き換えることにより、第二抗体分子の界面に形成される。これが、ホモ二量体のような他の望ましくない最終産物を超えてヘテロ二量体の収率を増加させる機構を提供する(例えば、ＷＯ９６／２７０１１号参照)。
【０１３５】
二特異性抗体は、架橋または“ヘテロコンジュゲート”抗体を含む。適切な架橋剤は当分野で周知であり、米国特許４,６７６,９８０号に、多様な架橋技術と共に記載される。
【０１３６】
抗体フラグメントから二特異性抗体を産生する方法も当分野で知られる。例えば、二特異性抗体は、化学的結合を使用して製造できる。Shalaby et al. (J. Exp. Med.175:217-225, 1992)は、完全ヒト化二特異性抗体Ｆ(ａｂ’)２分子の産生を記載する。組み換え細胞培養から直接二特異性抗体フラグメントを製造および単離するさらなる技術も記載されている。例えば、二特異性抗体は、ロイシンジッパーを使用して産生されている(Kostelny et al., J. Immunol. 148:1547-1553, 1992)。この方法はまた抗体ホモ二量体産生に利用できる。
【０１３７】
Hollinger et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:6444-6448, 1993)に記載のダイアボディテクノロジーは、二特異性抗体フラグメントを製造するさらなる方法である。フラグメントは、同一鎖上の２ドメイン間の対形成を可能にするには短すぎるリンカーにより、軽鎖可変ドメイン(ＶＬ)に接続された重鎖可変ドメイン(ＶＨ)を含む。従って、１フラグメントのＶＨおよびＶＬドメインが、他のフラグメントの相補的ＶＬおよびＶＨドメインと対形成することを強いられ、それにより２抗原結合部位が形成される。一本鎖Ｆｖ(ｓＦｖ)二量体の使用により二特異性抗体フラグメントを産生する他の方法は、Gruber et al. (J. Immunol. 153:5368, 1994)に記載される。あるいは、二特異性抗体は、例えば、Zapata et al. (Protein Eng. 8:1057-1062, 1995)に記載の方法を使用して産生された、“直線状”または“一本鎖抗体”であり得る。ある実施態様において、抗体は、２を超える抗原結合部位を有する。例えば、三特異的抗体が、Tutt et al. (J. Immunol. 147:60, 1991)に記載のとおり製造され得る。
【０１３８】
あるいは、抗体を、組み換えＤＮＡ技術により多量体化させ得る。ＩｇＭおよびＩｇＡは、成熟Ｊ鎖ポリペプチドとの相互作用により自然に抗体多量体を形成する。ＩｇＧ分子のような非ＩｇＡまたは非ＩｇＭ分子は、ＩｇＡまたはＩｇＭのＪ鎖相互作用ドメインを含むように操作し、それにより非ＩｇＡまたは非ＩｇＭ分子に高次多量体を形成する能力を与えることができる(例えば、Chintalacharuvu et al., Clin. Immunol. 101:21-31, 2001およびFrigerio et al., Plant Physiol. 123:1483-1494, 2000参照)。ＩｇＡ二量体は、粘膜が裏打ちする臓器の管腔に自然に分泌される。この分泌は、Ｊ鎖と、上皮細胞上の重合体ＩｇＡ受容体(ｐＩｇＲ)の相互作用により介在される。ＩｇＡ(またはＪ鎖相互作用ドメインを含むように操作した抗体の)形態の抗体の分泌が望まれないならば、ｐＩｇＲと十分に相互作用しない変異Ｊ鎖と共に抗体分子を発現させることにより、分泌を大きく低減できる(Johansen et al., J. Immunol., 167:5185-192, 2001)。ＳｃＦｖ二量体はまた当分野で知られる組み換え技術によっても形成され得る。ｓｃＦｖ二量体の構築物の例は、Goel et al. (Cancer Res. 60:6964-71, 2000)に記載される。
【０１３９】
抗原結合ドメインは、特定物に、リン酸緩衝食塩水中１×１０−７Ｍ以下(例えば、１×１０−８Ｍ以下、５×１０−９Ｍ以下、２×１０−９Ｍ以下または１×１０−９Ｍ以下)の親和性(ＫＤ)で結合できる。
【０１４０】
当業者には認識され得るとおり、ＣＡＲに包含させる抗原結合ドメインの選択は、標的癌細胞、標的病原体または病原体に感染した標的細胞の表面を規定する、リガンドのタイプおよび数による。例えば、抗原結合ドメインを、癌細胞、病原体または病原体に感染した細胞上の細胞表面マーカーとして作用するリガンドを認識するよう選択し得る。それ故にＣＡＲにおける抗原結合ドメインのためのリガンドとして作用し得る細胞表面マーカーの例は、ウイルス、細菌および寄生虫感染症および癌細胞と関連するものを含む。
【０１４１】
抗原結合ドメインは、腫瘍抗原または病原体抗原に特異的に結合できる。腫瘍抗原は、免疫応答、特にＴ細胞介在免疫応答を生じる癌細胞により産生されるタンパク質または分子(例えば、多糖および／または脂質)である。病原体抗原は、病原体により産生されるタンパク質または他の分子(例えば、多糖および／または脂質)である。
【０１４２】
抗原結合部分の選択は、処置する特定のタイプの癌または病原体による。腫瘍抗原は当分野で周知であり、例えば、グリオーマ関連抗原、癌胎児性抗原(ＣＥＡ)、β−ヒト絨毛性ゴナドトロピン、アルファフェトプロテイン(ＡＦＰ)、レクチン反応性ＡＦＰ、サイログロブリン、ＲＡＧＥ−１、ＭＮ−ＣＡ  IX、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＲＵ１、ＲＵ２(ＡＳ)、腸管カルボキシルエステラーゼ、ｍｕｔ  ｈｓｐ７０−２、Ｍ−ＣＳＦ、プロスターゼ、前立腺特異的抗原(ＰＳＡ)、ＰＡＰ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＬＡＧＥ−ｌａ、ｐ５３、プロステイン、ＰＳＭＡ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、サバイビン、テロメラーゼ、前立腺癌腫瘍抗原−１(ＰＣＴＡ−１)、ＭＡＧＥ、ＥＬＦ２Ｍ、好中球エラスターゼ、エフリンＢ２、ＣＤ２２、インスリン成長因子(ＩＧＦ)−１、ＩＧＦ−２、ＩＧＦ−１受容体およびメソテリンを含む。
【０１４３】
い  くつかの例において、腫瘍抗原は、悪性腫瘍と関係する１以上の抗原性癌エピトープを含む。悪性腫瘍は、標的抗原として役立ち得る多数のタンパク質を発現する。これらの分子は、メラノーマにおけるＭＡＲＴ−１、チロシナーゼおよびＧＰ  １００ならびに前立腺癌における前立腺酸性ホスファターゼ(ＰＡＰ)および前立腺特異的抗原(ＰＳＡ)のような、組織特異的抗原を含むが、これらに限定されない。他の標的抗原は、癌遺伝子ＨＥＲ−２／Ｎｅｕ  ＥｒｂＢ−２のような形質転換関連分子の群に属する。標的抗原のさらに他の群は、癌胎児性抗原(ＣＥＡ)のような癌胎児性抗原である。Ｂ細胞リンパ腫において、腫瘍特異的イディオタイプ免疫グロブリンは、個々の腫瘍に独特な腫瘍特異的免疫グロブリン抗原を構成する。ＣＤ１９、ＣＤ２０およびＣＤ３７のようなＢ細胞分化抗原は、Ｂ細胞リンパ腫における標的抗原のための他の候補である。これらの抗原のいくつか(ＣＥＡ、ＨＥＲ−２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、イディオタイプ)は、モノクローナル抗体での受動免疫療法の標的として使用されているが、成功は限定的である。
【０１４４】
抗原結合ドメインにより認識される腫瘍抗原は、腫瘍特異的抗原(ＴＳＡ)または腫瘍関連抗原(ＴＡＡ)でもあり得る。ＴＳＡは腫瘍細胞に特有であり、体内の他の細胞には発生しない。ＴＡＡは腫瘍細胞に特有ではなく、むしろ、抗原に対する免疫寛容の状態を誘発できない条件下に正常細胞でも発現される。腫瘍上のＴＡＡ抗原の発現は、免疫系が抗原に応答可能となる条件下で発生し得る。ＴＡＡは、免疫系が未成熟であり、応答不可能であるとき、胚胎児発生中に正常細胞に発現される抗原であるかまたは、通常正常細胞に極低レベルで存在するが、腫瘍細胞に遙かに高いレベルで発現される抗原であり得る。
【０１４５】
ＴＳＡまたはＴＡＡの非限定的例は、次の、ＭＡＲＴ−ｌ／メランＡ(ＭＡＲＴ−１)、ｇ１００(Ｐｍｅｌ  １７)、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２のような分化抗原、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２およびｐｉ５のような腫瘍特異的多系列抗原、ＣＥＡのような過発現胚性抗原、ｐ５３、ＲａｓおよびＨＥＲ−２／ｎｅｕのような過発現癌遺伝子および変異腫瘍サプレッサー遺伝子、ＢＣＲ−ＡＢＬ、Ｅ２Ａ−ＰＲＬ、Ｈ４−ＲＥＴ、１ＧＨ−ＩＧＫおよびＭＹＬ−ＲＡＲのような染色体転座に起因する特有の腫瘍抗原を含む。他の大きな抗原は、例えば、ＴＳＰ−１８０、ＭＡＧＥ−４、ＭＡＧＥ−５、ＭＡＧＥ−６、ＲＡＧＥ、ＮＹ−ＥＳＯ、ｐｌ  ８５ｅｒｂＢ２、ｐｌ  ８０ｅｒｂＢ−３、ｃ−ｍｅｔ、ｎｍ−２３Ｈ  ｌ、ＰＳＡ、ＴＡＧ−７２、ＣＡ  １９−９、ＣＡ  ７２−４、ＣＡＭ  １７.１、ＮｕＭａ、Ｋ−ｒａｓ、ベータ−カテニン、ＣＤＫ４、Ｍｕｍ−１、ｐ１５、ｐ１６、４３−９Ｆ、５Ｔ４、７９１Ｔｇｐ７２、アルファ−フェトプロテイン、ベータ−ＨＣＧ、ＢＣＡ２２５、ＢＴＡＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ１５−３／ＣＡ  ２７.２９／ＢＣＡＡ、ＣＡ１９５、ＣＡ２４２、ＣＡ−５０、ＣＡＭ４３、ＣＤ６８／Ｉ、ＣＯ−０２９、ＦＧＦ−５、Ｇ２５０、Ｇａ７３３ＶＥｐＣＡＭ、ＨＴｇｐ−１７５、Ｍ３４４、ＭＡ−５０、ＭＧ７−Ａｇ、ＭＯＶ１８、ＮＢ／７０Ｋ、ＮＹ−ＣＯ−１、ＲＣＡＳ１、ＳＤＣＣＡＧ１６、ＴＡ−９０／Ｍａｃ−２結合タンパク質ＡシクロフィリンＣ関連タンパク質、ＴＡＡＬ６、ＴＡＧ７２、ＴＬＰ、ＴＰＳ、ｈＴＥＲＴ、ガングリオシドＧＤ３、Ｈｕ、ＹｏおよびＧＡＰを含む。
【０１４６】
いくつかの例において、抗原結合ドメインは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＲＯＲｌ、メソテリン、ＣＤ３３／ＩＬ３Ｒａ、ｃ−Ｍｅｔ、ＰＳＭＡ、糖脂質Ｆ７７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＧＤ−２、ＭＹ−ＥＳＯ−１  ＴＣＲ、ＭＡＧＥ  Ａ３  ＴＣＲなどを含むが、これらに限定されない抗原に特異的に結合する。標的とする所望の抗原によって、ＣＡＲを、所望の抗原に特異的に結合する、適当な抗原結合ドメインを含むように操作できる。例えば、ＣＤ１９が、標的とする所望の抗原であるならば、ＣＤ１９に特異的に結合する抗体または抗体の抗原結合フラグメントを、ＣＡＲにおける抗原結合ドメインとして使用できる。いくつかの例において、ＣＡＲの抗原結合部分は、ＣＤ１９を標的とする。例えば、ＣＡＲにおける抗原結合ドメインは抗ＣＤ１９  ｓｃＦＶである。
【０１４７】
いくつかの例において、抗原結合ドメインは、ヒトパピローマウイルス(ＨＰＶ)抗原およびエプスタイン・バーウイルス抗原、ポリオーマウイルス抗原、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス(ＫＳＨＶ)ＨＨＶ−８、Ｂ型肝炎(ＨＢＶ)およびＣ型肝炎(ＨＣＶ)ウイルス抗原、ヘルペスウイルス抗原、ＨＩＶ抗原、インフルエンザ(オルトミクソウイルス科)抗原、ヘリコバクター・ピロリ抗原、スタフィロコッカス・アウレウス抗原を含むが、これらに限定されないウイルスまたは細菌起源のものである。例は、ＨＰＶ  Ｅ６／Ｅ７抗原、ＥＢＶウイルス核抗原１、ポリオーマウイルスラージＴ抗原、ＨＢＶコア抗原、ＨＣＶ非構造(ＮＳ)５Ａ、ＨＩＶ  ｇｐ１２０抗原、ＨＩＶ  ｇｐ４１、スタフィロコッカス・アウレウス表面抗原Ｂ、インフルエンザヘマグルチニンおよびインフルエンザノイラミニダーゼを含むが、これらに限定されない。抗原結合ドメインおよび抗原のさらなる例は、ここに引用する参考文献記載されている(例えば、Van der Bruggen et al., Cancer Immunity 2013 (www.cancerimmunity.org/peptide/), and Vigneron, BioMed Res. Int. Vol. 2015 Article ID 948501, 17 pp, 2015参照)。
【０１４８】
いくつかの例において、腫瘍抗原の存在は、溶解腫瘍細胞、壊死性腫瘍細胞、腫瘍タンパク質、腫瘍アポトーシス小体を含む腫瘍材料が、抗原のさらなる特徴付けをせずに、自己Ｔ細胞集団の活性化を誘発する能力により定義される。
【０１４９】
リンカー
ここに記載するＣＡＲは、所望により、(１)抗原結合ドメインと膜貫通ドメインの間および／または(２)膜貫通ドメインと細胞質シグナル伝達ドメインの間にリンカーを含み得る。リンカーは、オリゴヌクレオチドまたはポリペプチドリンカーであり得る。例えば、リンカーがオリゴヌクレオチドであるとき、リンカーは、約１ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチド、約９０ヌクレオチド、約８０ヌクレオチド、約７０ヌクレオチド、約６０ヌクレオチド、約５０ヌクレオチド、約４０ヌクレオチド、約３０ヌクレオチド、約２０ヌクレオチドまたは約１０ヌクレオチド；約１０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチド、約９０ヌクレオチド、約８０ヌクレオチド、約７０ヌクレオチド、約６０ヌクレオチド、約５０ヌクレオチド、約４０ヌクレオチド、約３０ヌクレオチドまたは約２０ヌクレオチド；約２０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチド、約９０ヌクレオチド、約８０ヌクレオチド、約７０ヌクレオチド、約６０ヌクレオチド、約５０ヌクレオチド、約４０ヌクレオチドまたは約３０ヌクレオチド；約３０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチド、約９０ヌクレオチド、約８０ヌクレオチド、約７０ヌクレオチド、約６０ヌクレオチド、約５０ヌクレオチドまたは約４０ヌクレオチド；約４０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチド、約９０ヌクレオチド、約８０ヌクレオチド、約７０ヌクレオチド、約６０ヌクレオチドまたは約５０ヌクレオチド；約５０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチド、約９０ヌクレオチド��約８０ヌクレオチド、約７０ヌクレオチドまたは約６０ヌクレオチド；約６０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチド、約９０ヌクレオチド、約８０ヌクレオチドまたは約７０ヌクレオチド；約７０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチド、約９０ヌクレオチドまたは約８０ヌクレオチド；約８０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチド、約１００ヌクレオチドまたは約９０ヌクレオチド；約９０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチド、約１２０ヌクレオチドまたは約１００ヌクレオチド；約１００ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチド、約１４０ヌクレオチドまたは約１２０ヌクレオチド；約１２０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチド、約１６０ヌクレオチドまたは約１４０ヌクレオチド；約１４０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチド、約１８０ヌクレオチドまたは約１６０ヌクレオチド；約１６０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチド、約２００ヌクレオチドまたは約１８０ヌクレオチド；約１８０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチド、約２５０ヌクレオチドまたは約２００ヌクレオチド；約２００ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチド、約３００ヌクレオチドまたは約２５０ヌクレオチド；約２５０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチド、約３５０ヌクレオチドまたは��３００ヌクレオチド；約３００ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチド、約４００ヌクレオチドまたは約３５０ヌクレオチド；約３５０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチド、約４５０ヌクレオチドまたは約４００ヌクレオチド；約４００ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチドまたは約４５０ヌクレオチド；または約４５０ヌクレオチド〜約５００ヌクレオチドであり得る。
【０１５０】
例えば、リンカーがポリペプチドであるとき、リンカーは約１アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、約６アミノ酸、約４アミノ酸または約２アミノ酸；約２アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸、約６アミノ酸または約４アミノ酸；約４アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸、約８アミノ酸または約６アミノ酸；約６アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸、約１０アミノ酸または約８アミノ酸；約８アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸、約１２アミノ酸または約１０アミノ酸；約１０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸、約１４アミノ酸または約１２アミノ酸；約１２アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸、約１６アミノ酸または約１４アミノ酸；約１４アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸、約１８アミノ酸または約１６アミノ酸；約１６アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸、約２０アミノ酸または約１８アミノ酸；約１８アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸、約２５アミノ酸または約２０アミノ酸；約２０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸、約３０アミノ酸または約２５アミノ酸；約２５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸、約３５アミノ酸または約３０アミノ酸；約３０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸、約４０アミノ酸または約３５アミノ酸；約３５アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸、約５０アミノ酸または約４０アミノ酸；約４０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸、約６０アミノ酸または約５０アミノ酸；約５０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸、約７０アミノ酸または約６０アミノ酸；約６０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸、約８０アミノ酸または約７０アミノ酸；約７０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸、約９０アミノ酸または約８０アミノ酸；約８０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸または約９０アミノ酸；約９０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸または約１００アミノ酸；約１００アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸、約２００アミノ酸または約１５０アミノ酸；約１５０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸、約２５０アミノ酸または約２００アミノ酸；約２００アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸、約３００アミノ酸または約２５０アミノ酸；約２５０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸、約３５０アミノ酸または約３００アミノ酸；約３００アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸、約４００アミノ酸または約３５０アミノ酸；約３５０アミノ酸〜約５００アミノ酸、約４５０アミノ酸または約４００アミノ酸；約３５０アミノ酸〜約５００アミノ酸または約４５０アミノ酸；約４５０アミノ酸〜約５００アミノ酸であり得る。
【０１５１】
いくつかの例において、ポリペプチドリンカーは、グリシン−セリンダブレットを含む。いくつかの例において、ポリペプチドリンカーは、二次アルファヘリックス構造を有する。いくつかの例において、ポリペプチドリンカーは、二次ベータシート構造を有する。リンカーのさらなる例は、ここに引用する参考文献に記載されている。
【０１５２】
膜貫通ドメイン
ここに記載するＣＡＲは膜貫通ドメインも含む。いくつかの例において、膜貫通ドメインは、自然に細胞質ドメインにおける配列と結合する。いくつかの例において、膜貫通ドメインは、１以上の(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０)アミノ酸置換により修飾して、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小化するために、該ドメインと他の膜貫通ドメイン(例えば、同一または異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメイン)の結合を避けることができる。
【０１５３】
膜貫通ドメインは、天然源由来でも合成源由来でもよい。供給源が天然であるとき、ドメインは任意の膜結合または膜貫通タンパク質に由来し得る。本発明における特定の使用の膜貫通ドメインの非限定的例は、Ｔ細胞受容体のアルファ、ベータまたはゼータ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤＳ、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７またはＣＤ１５４に由来し得る(例えば、少なくとも該膜貫通配列または該膜貫通配列の一部を含む)。
【０１５４】
いくつかの例において、膜貫通ドメインは合成であってよく、この場合、主にロイシンおよびバリンのような疎水性残基を含む。いくつかの例において、合成膜貫通ドメインは、合成膜貫通ドメインの各端にフェニルアラニン、トリプトファンおよびバリンのトリプレットを含む。いくつかの例において、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ヒンジドメインを含む。
【０１５５】
膜貫通ドメインのさらなる具体例は、ここに引用する参考文献に記載されている。
【０１５６】
細胞質ドメイン
ここに記載するＣＡＲは、例えば、結合ドメインが抗原に結合したときＴ細胞を刺激するのに十分なＣＤ３ζ配列の細胞質配列および、所望により、Ｔ細胞の共刺激を提供する共刺激性タンパク質の１以上の細胞質配列(例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＣＯＳ、ＬＦＡ−１、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１６０、ＬＩＧＨＴ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ３、ＣＤ２４４、ＣＤ８０、ＬＡＧ３、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３に特異的に結合するリガンドの１以上の細胞質配列)を含む、一次細胞質シグナル伝達ドメインを含み得る。ＣＡＲ  Ｔ細胞の刺激は、ＣＡＲ  Ｔ細胞の抗腫瘍または抗感染性疾患活性の１以上の活性化をもたらし得る。例えば、ＣＡＲ  Ｔ細胞の刺激は、サイトカインの分泌を含む、ＣＡＲ  Ｔ細胞の細胞溶解活性またはヘルパー活性を増加させ得る。いくつかの例において、共刺激性タンパク質の細胞内シグナル伝達ドメイン全体が細胞質シグナル伝達ドメインに含まれる。ある実施態様において、細胞質シグナル伝達ドメインは、共刺激性タンパク質の細胞内シグナル伝達ドメインの切断部分がＣＡＲ  Ｔ細胞におけるエフェクター機能シグナルを伝達する限り、該細胞内シグナル伝達ドメインの切断部分を含む。細胞質シグナル伝達ドメインに包含させ得る細胞内シグナル伝達ドメインの非限定的例は、抗原受容体結合後、シグナル伝達開始に協調して働くＴ細胞受容体(ＴＣＲ)および共受容体の細胞質配列、ならびに少なくとも一つ(例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０)の置換を含み、同じ機能的能力を有する、これらの配列の任意のバリアントを含む。
【０１５７】
いくつかの例において、細胞質シグナル伝達ドメインは、ＴＣＲにより抗原依存性一次活性化を開始するシグナル伝達配列(一次細胞質シグナル伝達配列)(例えば、ＣＤ３ζ細胞質シグナル伝達配列)および二次または共刺激性シグナルを提供するために抗原非依存的様式で作用する共刺激性タンパク質の１以上の細胞質配列(二次細胞質シグナル伝達配列)の、二つの独立した細胞質シグナル伝達配列のクラスを含み得る。
【０１５８】
一次細胞質シグナル伝達配列は、ＴＣＲ複合体の一次活性化を刺激性方向または阻害性方向で制御する。刺激性様式で作用する一次細胞質シグナル伝達配列は、免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフまたはＩＴＡＭとして知られるシグナル伝達モチーフを含み得る。
【０１５９】
細胞質シグナル伝達ドメインに包含され得るＩＴＡＭ含有一次細胞質シグナル伝達配列の例は、ＴＣＲゼータ、ＦｃＲガンマ、ＦｃＲベータ、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＣＤＳ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂおよびＣＤ６６ｄを含む。ある実施態様において、ＣＡＲにおける一次細胞質シグナル伝達配列は、ＣＤ３ζ由来の細胞質シグナル伝達配列を含む。
【０１６０】
いくつかの例において、ＣＡＲの細胞質ドメインは、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを単独でまたはＣＡＲで有用な任意の他の所望の細胞質シグナル伝達配列と組み合わせて含むように設計できる。例えば、ＣＡＲの細胞質ドメインは、ＣＤ３ζ鎖部分および共刺激性細胞質シグナル伝達配列を含み得る。共刺激性細胞質シグナル伝達配列は、ＣＡＲの共刺激性タンパク質の細胞質シグナル伝達配列を含む部分をいう。共刺激性タンパク質は、リンパ球の抗原への効率的な応答に必要な、抗原受容体またはそのリガンド以外の細胞表面分子である。このような共刺激性タンパク質の非限定的例は、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−ＩＢＢ(ＣＤ１３７)、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原−１(ＬＦＡ−１)、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３およびＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む。
【０１６１】
ＣＡＲの細胞質シグナル伝達ドメイン内の細胞質シグナル伝達配列は、互いに、無作為にまたは特定の順番で連結してよい。所望により、リンカー(例えば、ここに記載するリンカーの何れか)は結合を形成し得る。
【０１６２】
ある実施態様において、細胞質シグナル伝達ドメイは、ＣＤ３ζの細胞質シグナル伝達配列および共刺激性タンパク質ＣＤ２８の細胞質シグナル伝達配列を含むように、設計される。いくつかの例において、細胞質シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζの細胞質シグナル伝達配列および共刺激性タンパク質４−ＩＢＢの細胞質シグナル伝達配列を含むように、設計される。いくつかの例において、細胞質シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζの細胞質シグナル伝達配列および共刺激性タンパク質ＣＤ２８および４−１ＢＢの細胞質シグナル伝達配列を含むように設計される。
【０１６３】
いくつかの例において、ＣＡＲにおける細胞質シグナル伝達ドメインは、４−ＩＢＢの細胞質シグナル伝達配列およびＣＤ３ζの細胞質シグナル伝達ドメインを含んでよく、ここで、４−１ＢＢの細胞質シグナル伝達配列は配列番号１の核酸配列によりコードされ、ＣＤ３ζの細胞質シグナル伝達配列は配列番号２の核酸配列によりコードされる。
【０１６４】
いくつかの例において、ＣＡＲにおける細胞質シグナル伝達ドメインは、４−ＩＢＢの細胞質シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ζの細胞質シグナル伝達ドメインを含んでよく、ここで、４−ＩＢＢの細胞質シグナル伝達ドメインは配列番号３のアミノ酸配列を含み、ＣＤ３ζの細胞質シグナル伝達ドメインは配列番号４のアミノ酸配列を含む。
【０１６５】
Ｔ細胞を活性化する薬剤
ここに記載された方法の一部は、Ｔ細胞を活性化するステップをさらに含む。Ｔ細胞が遺伝子修飾Ｔ細胞(例えば、ＣＡＲ  Ｔ細胞)である、ある実施態様において、Ｔ細胞の活性化は、組み換え核酸のＴ細胞への導入の前または後に起こり得る。Ｔ細胞の活性化および培養の方法は、例えば、米国特許６,３５２,６９４号、６,５３４,０５５号、６,９０５,６８０号、６,６９２,９６４号、５,８５８,３５８号、６,８８７,４６６号、６,９０５,６８１号、７,１４４,５７５号、７,０６７,３１８号、７,１７２,８６９号、７,２３２,５６６号、７,１７５,８４３号、５,８８３,２２３号、６,９０５,８７４号、６,７９７,５１４号、６,８６７,０４１号および米国特許出願公開２００６０１２１００５号に記載されている。
【０１６６】
一般に、Ｔ細胞は、該細胞におけるＣＤ３  ＴＣＲ複合体関連シグナルを刺激する薬剤を結合させた表面と、Ｔ細胞の表面上の共刺激性タンパク質を刺激するリガンドを接触させることにより、活性化される。いくつかの例において、Ｔ細胞は、Ｔ細胞と、抗ＣＤ３抗体もしくはその抗原結合フラグメントまたは表面に固定化された抗ＣＤ２抗体の接触によりまたはＴ細胞と、カルシウムイオノフォアと組み合わせた、タンパク質キナーゼＣ活性化因子(例えば、ブリオスタチン)の接触により、活性化され得る。Ｔ細胞の表面上の共刺激性タンパク質に結合するリガンドを使用して、Ｔ細胞の表面上の共刺激性タンパク質を活性化できる。例えば、Ｔ細胞の集団を、Ｔ細胞の活性化に適する条件下に抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体と接触させ得る。抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体を刺激して、ＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を刺激し得る。抗ＣＤ２８抗体の非限定的例は、９.３、Ｂ−Ｔ３、ＸＲ−ＣＤ２８(Diacione, Besancon, France)を含む。Ｔ細胞を活性化するさらなる方法は、当分野で知られる(Berg et al., Transplant Proc. 30(8):3975-3977, 1998; Haanen et al., J. Exp. Med. 190(9):1319-1328, 1999;およびGarland et al., J. Immunol. Meth. 227(1-2):53-63, 1999)。
【０１６７】
いくつかの例において、Ｔ細胞における一次細胞質シグナル伝達配列および共刺激性細胞質シグナル伝達配列シグナルの活性化は、異なるプロトコールにより達成され得る。例えば、各シグナルを活性化する薬剤は溶液中にあっても、表面に結合していてもよい。表面に結合しているとき、薬剤は同じ表面に結合していても(すなわち、“ｃｉｓ”形態)、別々の表面(すなわち、“ｔｒａｎｓ”形態)に結合していてもよい。いくつかの例において、ある薬剤は表面に結合し、他の薬剤は溶液に存在し得る。いくつかの例において、共刺激性細胞質シグナル伝達配列の活性化を提供する薬剤は細胞表面に結合し、一次細胞質シグナル伝達配列の活性化を提供する薬剤は溶液中にあるかまたは表面に結合している。ある実施態様において、両方の薬剤は溶液にあってよい。いくつかの例において、薬剤は可溶性形態であり、次いでＦｃ受容体または抗体を発現する細胞または該薬剤に結合する他の結合剤のような表面に架橋していてよい。例えば、本方法におけるＴ細胞活性化に使用できる人工抗原提示細胞(ａＡＰＣｓ)について、米国特許出願公開２００４／０１０１５１９号および２００６／００３４８１０号参照。
【０１６８】
いくつかの例において、２剤は、ビーズに、同じビーズに、すなわち、“ｃｉｓ”でまたは別々のビーズに、すなわち、“ｔｒａｎｓ”で固定化される。一例として、一次細胞質シグナル伝達配列を活性化する薬剤は抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントであり、共刺激性細胞質シグナル伝達配列を活性化する薬剤は抗ＣＤ２８抗体またはその抗原結合フラグメントであり、両剤は、同じビーズに等モル量で共固定化される。いくつかの例において、１：１比の各抗体が、Ｔ細胞活性化のためにビーズに結合される。他の例において、１：１比を使用して観察される増大と比較して、Ｔ細胞増大の増加が観察されるような比の抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８抗体がビーズに結合する。いくつかの例において、ビーズに結合する抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８抗体の比は１００：１〜１：１００の範囲およびその間のすべての整数値である。いくつかの例において、抗ＣＤ３抗体より多い抗ＣＤ２８抗体が粒子に結合する(抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８抗体の比１未満)。いくつかの例において、ビーズに結合する抗ＣＤ２８抗体：抗ＣＤ３抗体の比は、２：１より大きい。いくつかの例において、１：１００抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８比での抗体がビーズに結合される。いくつかの例において、１：７５抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８比での抗体がビーズに結合される。いくつかの例において、１：５０抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８比での抗体がビーズに結合される。他の実施態様において、１：３０抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８比での抗体がビーズに結合される。いくつかの例において、１：１０抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８比での抗体がビーズに結合される。ある実施態様において、１：３抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８比での抗体がビーズに結合される。いくつかの例において、３：１抗ＣＤ３：抗ＣＤ２８比での抗体がビーズに結合される。
【０１６９】
粒子数対Ｔ細胞数の比は、例えば、約１：５００〜約５００：１およびその間にある任意の整数値であり得る。当業者には容易に認識され得るとおり、粒子対細胞比は、標的細胞サイズに対する粒子サイズに依存し得る。例えば、小型ビーズは数細胞しか結合できず、一方大型ビーズは多数の細胞を結合できる。いくつかの例において、Ｔ細胞対粒子の比は、約１：１００〜約１００：１およびその間にある任意の整数値であり得る。いくつかの例において、Ｔ細胞対粒子の比は約１：９〜約９：１およびその間にある任意の整数値であり得る。Ｔ細胞活性化をもたらす抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８結合粒子数対Ｔ細胞数の比は、約１：１００、約１：５０、約１：４０、約１：３０、約１：２０、約１：１０、約１：９、約１：８、約１：７、約１：６、約１：５、約１：４、約１：３、約１：２、約１：１、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約６：１、約７：１、約８：１、約９：１、約１０：１または約１５：１であり得る。いくつかの例において、１：１以下の粒子数対Ｔ細胞数比が使用される。いくつかの例において、約１：５の粒子数対Ｔ細胞数比が使用される。いくつかの例において、粒子数対Ｔ細胞数比は、活性化の日により変わり得る。例えば、約１：１〜約１０：１の粒子数対Ｔ細胞数比を活性化の１日目に使用し、さらなる粒子をその後連日または隔日でＴ細胞に１０日まで添加し、最終粒子対Ｔ細胞比約１：１〜約１：１０となる(添加した各日の細胞数に基づく)。いくつかの例において、粒子対Ｔ細胞比は活性化１日目約１：１であり、活性化の３日目および５日目に約１：５に調節する。いくつかの例において、粒子を、活性化の１日目の約１：１および３日目および５日目の約１：５に基づき、連日または隔日で投与する。いくつかの例において、粒子対細胞比は活性化１日目約２：１であり、活性化の３日目および５日目に１：１０に調節する。ある実施態様において、粒子を、活性化の１日目の約２：１および３日目および５日目の１：１０に基づき、連日または隔日で投与する。多様な他の比が、これらのＴ細胞を活性化する方法における使用に適することを,当業者は認識する。特に、比率は、粒子サイズならびに細胞サイズおよびタイプにより変わる。
【０１７０】
いくつかの例において、Ｔ細胞を薬剤被覆ビーズと組み合わせ、ビーズおよび細胞をその後分離し、次いで細胞を培養する。別法において、培養前に、薬剤被覆ビーズおよび細胞を分離せず、一緒に培養する。いくつかの例において、ビーズおよび細胞を、まず、磁力のような力の適用により濃縮し、Ｔ細胞表面上のタンパク質のビーズ上の抗体へのライゲーションを増加させ、それによりＴ細胞活性化を誘発する。
【０１７１】
一例として、細胞表面タンパク質を、抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８抗体が結合した常磁性ビーズ(３×２８ビーズ)をＴ細胞と接触させることにより、ライゲートさせ得る。いくつかの例において、Ｔ細胞(例えば、１０４〜１０９  Ｔ細胞)およびビーズ(例えば、DYNABEADS(登録商標)M-450 CD3／CD28 T常磁性ビーズ)を、例えば、約１：１の比で、緩衝液、好ましくはＰＢＳ(カルシウムおよびマグネシウムのような二価カチオン不含)中で合わせる。同様に、あらゆるＴ細胞濃度が使用され得ることは当業者には明らかである。例えば、標的Ｔ細胞はサンプル中に極めて稀であり、サンプルのわずか約０.０１％しか構成しないかもしれず、または標的Ｔ細胞はサンプル全体(約１００％)を構成することもある。従って、任意のＴ細胞数または濃度が、活性化ステップにおいて使用され得る。いくつかの例において、Ｔ細胞と粒子の最大接触を確実にするために、粒子およびＴ細胞を混合する体積を顕著に減らす(例えば、Ｔ細胞の濃度を増加させる)ことが望ましいこともある。例えば、約２０億細胞／mLのＴ細胞濃度が使用され得る。他の例において、１億細胞／mLを超えるＴ細胞濃度が使用され得る。他の例において、約１０００万細胞／mL、約１５００万細胞／mL、約２０００万細胞／mL、２５００万細胞／mL、３０００万細胞／mL、３５００万細胞／mL、４０００万細胞／mL、４５００万細胞／mLまたは５０００万細胞／mlのＴ細胞濃度が使用され得る。他の実施態様において、約７５００万細胞／mL、８０００万細胞／mL、８５００万細胞／mL、９０００万細胞／mL、９５００万細胞／mLまたは１億細胞／mLのＴ細胞濃度が使用され得る。いくつかの例において、１億２５００万細胞／mLまたは１億５０００万細胞／mLのＴ細胞濃度が使用され得る。高Ｔ細胞濃度の使用は細胞収率増加、Ｔ細胞活性化増加およびＴ細胞増殖増加をもたらし得る。加えて、高Ｔ細胞濃度の使用は、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞のような目的の標的抗原の発現が低いＴ細胞のより効率的な捕捉を可能とする。Ｔ細胞のこのような集団は、治療的価値を有し、ある例においては得ることが望ましい。例えば、高濃度のＴ細胞使用は、通常ＣＤ２８発現が低いＣＤ８＋Ｔ細胞のより効率的な選択を可能とする。
【０１７２】
いくつかの例において、Ｔ細胞と粒子の混合物を、約数時間(約３時間)〜約１４日間またはその間の任意の時間単位の整数値、培養し得る。いくつかの例において、混合物を、２１日間培養し得る。ある実施態様において、ビーズおよびＴ細胞を、約８日間一緒に培養し得る。他の例において、ビーズおよびＴ細胞を、約２〜約３日間一緒に培養し得る。Ｔ細胞および粒子が約６０日間以上培養され得るように、数サイクルの活性化を使用し得る。Ｔ細胞および粒子混合物を、ここに記載する培養方法および培養培地の何れかを使用して、培養できる。
【０１７３】
種々の活性化時間曝されているＴ細胞は、異なる特徴を示し得る。例えば、典型的血液またはアフェレーシス末梢血単核細胞産物は、細胞毒性またはサプレッサーＴ細胞集団(Ｔｃ、ＣＤ８＋)より多いヘルパーＴ細胞集団(ＴＨ、ＣＤ４＋)を有する。ＣＤ３およびＣＤ２８受容体刺激によるＴ細胞のエクスビボ増大は、培養の約８〜９日目の前、主にＴＨ細胞を含むＴ細胞の集団であるが、約８〜９日目の後、Ｔｃ細胞の集団が漸増するＴ細胞の集団を産生する。従って、ＴＨ細胞が望ましいとき、細胞は最大８〜９日間しか活性化してはならず、細胞毒性Ｔ細胞が望ましいとき、Ｔ細胞を９日または１０日間を超えて活性化すべきである。
【０１７４】
Ｔ細胞の活性化はまた単離された腫瘍抗原、腫瘍ライセート、病原性生物もしくはウイルスから単離された抗原または腫瘍ワクチンを含むまたはさらに含む培養培地でのＴ細胞の培養によっても達成され得る。
【０１７５】
自然免疫細胞
自然免疫細胞は、その細胞表面に抗体またはＴＣＲを発現することにより、病原体(例えば、癌細胞、細菌、ウイルスおよび酵母)を認識しない哺乳動物細胞をいう。自然免疫細胞は、病原体および／または病原体と関連するＰＡＭＰおよび／または傷害またはトランスフォームされた細胞と関連するＤＡＭＰと結合する受容体に結合された、他の抗体のＦｃ領域に結合する受容体(例えば、その細胞表面上の受容体)またはタンパク質を発現する。ＤＡＭＰの非限定的例は、核または細胞質タンパク質(例えば、ＨＭＧＢ１タンパク質またはＳ１００タンパク質)、ＤＮＡまたはＲＮＡ、プリン代謝物(例えば、ＡＴＰ、アデノシンまたは尿酸)およびグリカンまたは複合糖質(例えば、ヒアルロナンフラグメント)を含む。ＰＡＭＰの非限定的例は、細菌性リポ多糖、フラゲリン、リポテイコ酸、ペプチドグリカン、二本鎖ＲＮＡおよび非メチル化ＣｐＧモチーフを含む。ＰＡＭＰおよびＤＡＭＰのさらなる例は当分野で知られる。
【０１７６】
自然免疫細胞の非限定的例は肥満細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球およびナチュラルキラー細胞を含む。自然免疫細胞のさらなる例は当分野で知られる。
【０１７７】
哺乳動物からの末梢血または組織から自然免疫細胞を精製する方法は当分野で知られる。例えば、肥満細胞を精製する方法は、Kulka et al., Curr. Protoc. Immunol., Chapter Unit 7.25, 2010; Radinger et al., Current Protoc. Immunol. Chapter Unit 7.37, 2010; Saito et al., Nature Protocols 1:2178-2183, 2006; Davies et al., Methods in Molecular Biology 290:105-116, 2005; Rezapour et al., J. Animal Vet. Sci. 8:11-15, 2009; Roth et al., J. Immunol. Methods 45:153-164, 1981; Thomas et al., J. Immunol. 150:1821-1834, 1993; McLellan et al., J. Immunological Methods 184:81-89, 1995; Akuthota et al., Curr. Protoc. Immunol. Chapter Unit 7.31, 2001; Fairhurst et al., FASEB J. 22:1075, 2008; Munoz et al., Nature Protocols 1:2613-2620, 2007; Falcone et al., Methods Molecular Biology 1192:35-47, 2014; Cooper et al., Current Protocols Immunology, Unit 7.34, 2004;およびPak-Wittel et al., Current Protocols Immunology, Unit 3.22, 2014に記載されている。
【０１７８】
Ｔ細胞または自然免疫細胞の培養
Ｔ細胞または自然免疫細胞を培養する方法は、当分野で周知である。Ｔ細胞および自然免疫細胞培養に使用できる非限定的培養培地、温度、Ｏ２レベルおよびＣＯ２レベルを下に提供する。Ｔ細胞および自然免疫細胞培養に使用できる、培養培地、温度、ＣＯ２レベルおよび湿度レベルのさらなる例は当分野で知られる。
【０１７９】
Ｔ細胞または自然免疫細胞培養に使用できる培養培地の非限定的例は、当分野で知られる(例えば、最小必須培地またはRPM1 1640培地またはX-vivo 15(Lonza))。Ｔ細胞または自然免疫細胞培養に使用する培養培地は、例えば、血清(例えば、ウシ胎児またはヒト血清)、インターロイキン−２(ＩＬ−２)、インスリン、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＴＧＦおよびＴＮＦまたは当業者に知られる細胞の成長のための任意の他の添加物の１以上を含む、例えば、増殖および生存能に必要な因子を含み得る。Ｔ細胞または自然免疫細胞の培養に使用する培養培地は、例えば、界面活性剤、プラスマネートおよび還元剤、例えば、Ｎ−アセチル−システインおよび２−メルカプトエタノールを含み得る。培養培地のさらなる例は、例えば、RPMI 1640培地、AIM-V(登録商標)、ＤＭＥＭ培地、ＭＥＭ培地、ＭＥＭアルファ培地、Ｆ１２培地、X-VIVOTM 15培地、X-VIVOTM 20培地およびOpTmizerTM CTSTM T細胞増大組織培養培地を含む。ここに記載する例示した培地の何れも、例えば、Ｔ細胞または自然免疫細胞の成長および増大に十分な量のアミノ酸、ピルビン酸ナトリウム、ビタミン、血清または血漿、１以上のホルモンおよび１以上のサイトカインの１以上を含み得る。培養培地は、さらに１以上の抗生物質(例えば、ここに記載する抗生物質の何れか)および／または１以上の抗真菌剤(例えば、ここに記載する抗真菌剤の何れか)を含み得る。哺乳動物への投与前に、Ｔ細胞または自然免疫細胞を、成長を支持するのに必要な条件下に例えば、適当な温度(例えば、例示温度の何れか)および雰囲気(例えば、ここに記載するＣＯ２レベルおよび／または湿度レベルの何れか)に置く。
【０１８０】
いくつかの例において、培養を、湿度制御雰囲気(例えば、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％または９５％を超える湿度または１００％の湿度)で実施し得る。
【０１８１】
いくつかの例において、培養ステップを、約３１℃〜約４０℃の温度で実施できる。当業者は、温度を、培養ステップ中の特定の時点で、例えば、時間または日ベースで変え得ることを認識する。例えば、温度を、培養ステップ開始後、約１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日または１４日で
変更またはシフト(例えば、上昇または下降)させてよい。例えば、温度は上方にシフトさせ得る(例えば、最大もしくは約０.１℃、０.２℃、０.３℃、０.４℃、０.５℃、０.６℃、０.７℃、０.８℃、０.９℃、１.０℃、１.５℃、２.０℃、２.５℃、３.０℃、３.５℃、４.０℃、４.５℃、５.０℃、５.５℃、６.０℃、６.５℃、７.０℃、７.５℃、８.０℃、８.５℃、９.０℃、９.５℃、１０℃、１１℃、１２℃、１３℃、１４℃、１５℃、１６℃、１７℃、１８℃、１９または最大もしくは約２０℃の変化)。例えば、温度は下方にシフトさせ得る(例えば、最大もしくは約０.１℃、０.２℃、０.３℃、０.４℃、０.５℃、０.６℃、０.７℃、０.８℃、０.９℃、１.０℃、１.５℃、２.０℃、２.５℃、３.０℃、３.５℃、４.０℃、４.５℃、５.０℃、５.５℃、６.０℃、６.５℃、７.０℃、７.５℃、８.０℃、８.５℃、９.０℃、９.５℃、１０℃、１１℃、１２℃、１３℃、１４℃、１５℃、１６℃、１７℃、１８℃、１９または最大もしくは約２０℃の変化)。
【０１８２】
いくつかの例において、記載する培養ステップは、さらに細胞を含む液体培養培地を、最大または約１５％ＣＯ２(例えば、最大または約１４％ＣＯ２、１２％ＣＯ２、１０％ＣＯ２、８％ＣＯ２、６％ＣＯ２、５％ＣＯ２、４％ＣＯ２、３％ＣＯ２、２％ＣＯ２または最大または約１％ＣＯ２)を含む雰囲気に曝すことを含み得る。
【０１８３】
ここに記載された方法の何れかにおける培養ステップを、約１時間〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日、約８日、約７日、約６日、約５日、約４日、約３日、約２日、約１日または約１２時間；約１２時間〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日、約８日、約７日、約６日、約５日、約４日、約３日、約２日または約１日；約１日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日、約８日、約７日、約６日、約５日、約４日、約３日または約２日；約２日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日、約８日、約７日、約６日、約５日、約４日または約３日；約３日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日、約８日、約７日、約６日、約５日または約４日；約４日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日、約８日、約７日、約６日または約５日；約５日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日、約８日、約７日または約６日；約６日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日、約８日または約７日；約７日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日、約９日または約８日；約８日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日、約１０日または約９日；約９日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日、約１１日または約１０日；約１０日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日、約１２日または約１１日；約１１日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週、約１３日または約１２日；約１２日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週、約２週または約１３日；約１３日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週、約３週または約２週；約１４日〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週、約４週または約３週；約３週〜約２ヶ月、約７週、約６週、約５週または約４週；約４週〜約２ヶ月、約７週、約６週または約５週；約５週〜約２ヶ月、約７週または約６週；約６週〜約２ヶ月または約７週；または約７週〜約２ヶ月実施できる。
【０１８４】
Ｔ細胞を培養する方法の例は、Jackson et al., J. Immunol. Methods 291:51-62, 2004；米国特許５,４４３,９８３号、米国特許７,８１６,１３４号、米国特許出願公開２００８／０２６１３０７号、ＷＯ０２／０１４４８１号、Barrett et al., Cytotherapy pp. 1-12, 2014; Keever-Taylor et al., Biol. Blood Marrow Transplantation 11:44, 2004; Monica Raulf-Heimsoth, Method Mol. Med. 138:17-30, 2008; Janas et al., Perfusion’s Role in Maintenance of High-Density T-Cell Cultures,” BioProcess International website, dated January 13, 2015; Fabricius et al., Immunobiology 156:364-371, 1980;およびWatkins et al., J. Vis. Exp. (64):e3952, 2012に記載される。
【０１８５】
自然免疫細胞を培養する方法の例は、Saito et al., Nat. Protoc. 1(4):2178-2183, 2006; Levi-Schaffer et al., Pharmacological Res. 24:307-317, 1991; Davies et al., Methods in Mol. Biology 290:105-116, 2005; Weischenfeldt et al., Cold Spring Harbor Protocols Vol 12, 2008; Zemans et al., J. Immunol. Methods 340:102-115, 2009; Celluzzi et al., J. Hematother. Stem Cell Res. 12:575-585, 2003; Morseet al., Human Cell Culture 4:171-191, 2002; Magee et al., Natural Killer Cells, Basic Science and Clinical Application, Chapter 9- Isolation, Culture and Propagation of Natural Killer Cells, Academic Press, pp. 125-135, 2010および米国特許出願公開２００８／０２９９６６０号に記載される。
【０１８６】
ある実施態様において、Ｔ細胞活性化は、Ｔ細胞を活性化する薬剤(例えば、ここに記載するＴ細胞を活性化する薬剤の何れか)を含む培養培地の使用を含み得る、Ｔ細胞(例えば、ここに記載する培養培地、培養条件または総培養時間の何れかを使用)の培養を含み得る。
【０１８７】
ＮＬＲＰ３およびＮＬＲＰ３下流シグナル伝達
ＮＬＲファミリー、パイリン領域含有３(ＮＬＲＰ３)は、哺乳動物細胞におけるインフラマソーム複合体の一部を形成するタンパク質である。ヒトＮＬＰＲ３タンパク質のアミノ酸配列は、例えば、配列番号５であり得る。ヒトＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号６である。ウシＮＬＲＰ３タンパク質のアミノ酸配列は、例えば、配列番号７であり得る。ウシＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号８である。マウスＮＬＲＰ３タンパク質のアミノ酸配列は、例えば、配列番号９であり得る。マウスＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号１０である。ラットＮＬＲＰ３タンパク質のアミノ酸配列は、例えば、配列番号１１であり得る。ラットＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号１２である。
【０１８８】
ＮＬＲＰ３タンパク質のレベルまたはＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｃＤＮＡのレベルは、当分野で知られる方法を使用して、検出され得る。例えば、ＮＬＲＰ３タンパク質(例えば、ヒトＮＬＲＰ３タンパク質)に特異的に結合する抗体を使用して、細胞(例えば、Ｔ細胞または自然免疫細胞)におけるＮＬＲＰ３タンパク質のレベルを決定できる。ヒトＮＬＲＰ３タンパク質に特異的に結合する抗体の非限定的例EMD Millipore、AdipoGen(登録商標)Life Sciences、Sigma Aldrich、R&D Systems、OriGeneおよびThermo Fisher Scientificから購入できる。
【０１８９】
ＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｃＤＮＡのレベルを決定する方法は、例えば、定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(ｑＲＴ−ＰＣＲ)、ノーザンブロット、リボヌクレアーゼプロテクションアッセイ、ＤＮＡマイクロアレイ、ディファレンシャルディスプレイ、Taqman RT-PCRおよび遺伝子発現の連続分析(ＳＡＧＥ)を含む。ｑＲＴ−ＰＣＲについて、標的ｃＤＮＡ配列に基づく(例えば、ＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｃＤＮＡ配列に基づく)適切なプライマーの設計方法は当分野で知られる。
【０１９０】
例えば、ＮＬＲＰ３の下流シグナル伝達は、哺乳動物細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞または自然免疫細胞の何れか)における、ＮＬＲＰ３インフラマソーム複合体(例えば、ＮＬＲＰ３タンパク質、カスパーゼ動員ドメインタンパク質を含むアポトーシス関連Ｓｐｅｃｋ様タンパク質(ＡＳＣ)およびカスパーゼ−１の複合体)形成増加、カスパーゼ−１活性増加およびＩＬ−１βおよび／またはＩＬ−１８の前駆体形態プロセシングの増加の１以上であり得る。ＮＬＲＰ３インフラマソーム複合体の形成を検出する方法の例は、Jhang et al., J. Agric. Food Chem. 63:7343-7352, 2015; Zhao et al., Exp. Neurol. 273:23-35, 2015およびXiong et al., Kidney Blood Press Res. 40:344-354, 2015に記載される。ＮＬＲＰ３インフラマソーム複合体の形成を検出する方法の例は、蛍光顕微鏡および免疫沈降または共免疫沈降方法を含む。カスパーゼ−１活性増加を検出するためのキットは、abcam(登録商標)、GeneTex、Enzo Life Sciences、MD Systems、Thermo Fisher Scientific、AbnovaおよびRay Biotechから購入できる。ＩＬ−１βの前駆体形態のプロセシングは、免疫ブロット法、ＩＬ−１βタンパク質に特異的に結合する抗体(例えば、前駆体形態および成熟形態のＩＬ−１βタンパク質に特異的に結合する抗体および／または前駆体形態のＩＬ−１βタンパク質にしか結合しない抗体)を使用して検出できる。ＩＬ−１βタンパク質に結合する抗体の非限定的例は、Santa Cruz Biotech、Abcam、Novus Bio、AbD SerotecおよびCell Signaling Technologyから市販のものを含む。ＩＬ−１８タンパク質の前駆体形態のプロセシングは、免疫ブロット法、ＩＬ−１８に特異的に結合する抗体(例えば、前駆体形態および成熟形態のＩＬ−１８タンパク質に特異的に結合する抗体および／または前駆体形態のＩＬ−１８タンパク質にしか結合しない抗体)を使用して検出できる。ＩＬ−１８タンパク質に結合する抗体の非限定的例は、Santa Cruz Biotech、Abcam、AbD Serotec、Abbiotec、EMD Millipore、R&D SystemsおよびThermo Fisher Scientificから市販のものを含む。
【０１９１】
ＮＬＲＰ３活性化因子
ここに記載する方法または組成物の何れかのいくつかの例において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、哺乳動物細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞または自然免疫細胞の何れか)におけるＮＬＲＰ３タンパク質レベルを増加させるおよび／または哺乳動物細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞または自然免疫細胞の何れか)におけるＮＬＲＰ３タンパク質をコードするｍＲＮＡのレベルを増加させる薬剤であり得る。他の例において、ＮＬＲＰ３活性化因子はＮＬＲＰ３の下流シグナル伝達を増加させる。例えば、ＮＬＲＰ３の下流シグナル伝達は、哺乳動物細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞または自然免疫細胞の何れか)におけるＮＬＲＰ３インフラマソーム複合体(例えば、ＮＬＲＰ３タンパク質、カスパーゼ動員ドメインタンパク質を含むアポトーシス関連Ｓｐｅｃｋ様タンパク質(ＡＳＣ)およびカスパーゼ−１の複合体)の形成増加、カスパーゼ−１活性増加およびＩＬ−１βおよび／またはＩＬ−１８の前駆体形態プロセシングの増加の１以上であり得る。
【０１９２】
いくつかの例において、ＮＬＲＰ３活性化因子はインターロイキン−１αまたはインターロイキン−１βである。ヒトインターロイキン−１βは、例えば、ProSpec(East Brunswick, NJ)、Thermo Fischer Scientific Inc. (Rockford, IL)およびImmunoTools(Friesoythe, Germany)を含む、多数の業者から購入できる。ヒトインターロイキン−１αは、例えば、R&D Systems、Life TechnologiesおよびSigma Aldrichを含む、多数の業者から購入できる。
【０１９３】
例えば、ヒトＩＬ−１αタンパク質の配列は配列番号１３であり得る。ヒトＩＬ−１αタンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号１４である。マウスＩＬ−１αタンパク質の配列は、例えば、配列番号１５であり得る。マウスＩＬ−１αタンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号１６である。ラットＩＬ−１αタンパク質の酸配列は、例えば、配列番号１７であり得る。ラットＩＬ−１αタンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号１８である。
【０１９４】
例えば、ヒトＩＬ−１βタンパク質の配列は配列番号１９であり得る。ヒトＩＬ−１βタンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号２０である。マウスＩＬ−１βタンパク質の配列は、例えば、配列番号２１であり得る。マウスＩＬ−１βタンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号２２である。ラットＩＬ−１βタンパク質の配列は、例えば、配列番号２３であり得る。ラットＩＬ−１βタンパク質をコードするｃＤＮＡ配列の例は、配列番号２４である。
【０１９５】
いくつかの例において、ＮＬＲＰ３は、１０kDa未満、９kDa未満、８kDa未満、７kDa未満、６kDa未満、５kDa未満、４kDa未満、３kDa未満、２kDa未満または１kDa未満の分子量を有する分子である。いくつかの例において、ＮＬＲＰ３活性化因子はイミキモドまたはレシキモドまたはそれらの薬学的に許容される塩である。
【０１９６】
いくつかの例において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、
【化５】
2018526013.tif 000006
〔式中、(ａ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２はＨであるか、(ｂ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はＨであるか、(ｃ)Ｒ１はＨであり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３であるか、または(ｄ)Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２は−ＣＯ２ＣＨ３である。〕
である。これらのＮＬＲＰ３活性化因子を合成する方法は、例えば、Shi et al., ACS Med. Chem. Lett. 3:501-504, 2012に記載される。
【０１９７】
いくつかの例において、ＮＬＲＰ３活性化因子は、
イミダゾキノリン(例えば、米国特許８,６５８,６６６号に記載のイミダゾキノリン参照)；
イミダゾナフチリジン(例えば、米国特許８,６５８,６６６号および７,３３５,７７３号に記載のイミダゾナフチリジン参照)；
ピラゾロピリジン(例えば、米国特許７,６７８,９１８号および７,５５４,６９７号に記載のピラゾロピリジン参照)；
アリール置換イミダゾキノリン(例えば、米国特許７,５９８,３８２号および７,０９１,２１４号に記載のアリール置換イミダゾキノリン参照)；
１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物(例えば、米国特許７,５７９,３５９号に記載の１−アルコキシ１Ｈ−イミダゾ環系を有する化合物参照)；
オキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン(例えば、米国特許７,１４８,２３２号、６,８０９,２０３号、６,７０３,４０２号、６,６７７,３３４号、６,６２７,６４０号、６,６２７,６３８号、６,４４０,９９２号、６,３２３,２００号および６,１１０,９２９号に記載のオキサゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン参照)；
チアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン(例えば、米国特許７,１４８,２３２号、６,８０９,２０３号、６,７０３,４０２号、６,６７７,３３４号、６,６２７,６４０号、６,６２７,６３８号、６,４４０,９９２号、６,３２３,２００号および６,１１０,９２９号に記載のチアゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン参照)；
セレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン(例えば、セ米国特許７,１４８,２３２号、６,８０９,２０３号、６,７０３,４０２号、６,６７７,３３４号、６,６２７,６４０号、６,６２７,６３８号、６,４４０,９９２号、６,３２３,２００号および６,１１０,９２９号に記載のレナゾロ[４,５−ｃ]−キノリン−４−アミン参照)；
イミダゾナフチリジン(例えば、米国特許７,０３８,０５１号、６,９４９,６４６号、６,８９４,１６５号、６,７９７,７１６号、６,７９７,７１６号、６,５１８,２８０号、６,５１４,９８５号および６,１９４,４２５号に記載のイミダゾナフチリジン参照)；
イミダゾキノリンアミン(例えば、米国特許７,０２６,４８２号、６,８９７,３１４号、６,６２４,３０５号、６,６１３,９０２号、６,５３４,６５４号、６,４３７,１３１号、６,１５０,５２３号、５,９９８,６１９号および５,７４１,９０８号に記載のイミダゾキノリンアミン参照)；
１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン(例えば、米国特許６,７９０,９６１号、６,６８６,４７２号、６,６０８,２０１号、６,４６５,６５４号、６,３４８,４６２号、５,９７７,３６６号、５,７４１,９０９号、５,５２５,６１２号および５,３８９,６４０号に記載の１−置換、２−置換１Ｈ−イミダゾ[４,５−Ｃ]キノリン−４−アミン参照)；
縮合シクロアルキルイミダゾピリジン(例えば、米国特許５,８８６,００６号、５,４６８,５１６号、５,６２７,２８１号、５,４４４,０６５号および５,３５２,７８４号に記載の縮合シクロアルキルイミダゾピリジン参照)；
１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン(例えば、米国特許５,７５６,７４７号に記載の１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン参照)；
１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン(例えば、米国特許５,７１４,６０８および５,３４６,９０５号に記載の１−置換１Ｈ−イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン参照)；
イミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン(例えば、米国特許５,３６７,０７６号、５,１７５,２９６号および４,６８９,３３８号に記載のイミダゾ−[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン参照)；
２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン(例えば、米国特許５,２６６,５７５号に記載の２−エチル１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン参照)；
オレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン(例えば、米国特許５,０３７,９８６および４,９２９,６２４号に記載のオレフィン性１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン−４−アミン参照)；
１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン(例えば、米国特許４,６９８,３４８号に記載の１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]キノリン参照)；
ピリドキノキサリン−６−カルボン酸(例えば、米国特許４,４４９,２７０号に記載のピリドキノキサリン−６−カルボン酸参照)；
６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸(例えば、米国特許４,５６７,２６９および４,４７２,４０６号に記載の６,７−ジヒドロ−８−(イミダゾール−１−イル)−５−メチル−１−オキソ−１Ｈ,５Ｈベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸参照)；
置換ナフト[ｉｊ]キノリジン(例えば、米国特許４,４５６,６０６号に記載の置換ナフト[ｉｊ]キノリジン参照)；
置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸(例えば、米国特許４,３４８,５２１号に記載の置換ピリドキノキサリン−６−カルボン酸参照)；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体(例えば、米国特許４,０５１,２４７号に記載の７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸誘導体参照)；
置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸(例えば、米国特許４,０１４,８７７号、４,００１,２４３号および３,９８５,８８２号に記載の置換ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸参照)；
７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸(例えば、米国特許３,９８５,７５３および３,９７６,６５１号に記載の７−ヒドロキシ−ベンゾ[ｉｊ]キノリジン−２−カルボン酸参照)；
置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン(例えば、米国特許３,９８４,５４８号に記載の置換ピリド[１,２,３,−ｄｅ]−１,４−ベンズオキサジン参照)および
テトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネート(例えば、米国特許３,９６９,４６３号に記載のテトラヒドロキノリンのＮ−メチレンマロネート参照)
からなる群から選択される。
【０１９８】
ＮＬＲＰ３活性化因子のさらなる例は、米国特許８,６５８,６６６号、７,８７９,８４９号、７,６７８,９１８号、７,５９８,３８２号、７,５７９,３５９号、７,５４４,６９７号、７,３３５,７７３号、７,１４８,２３２号、７,０９１,２１４号、７,０３８,０５１号、７,０２６,４８２号、６,９４９,６４６号、６,８９７,３１４号、６,８９４,１６５号、６,８０９,２０３号、６,７９７,７１６号、６,７９０,９６１号、６,７０３,４０２号、６,６８６,４７２号、６,６７７,３３４号、６,６２７,６４０号、６,６２７,６３８号、６,６２４,３０５号、６,６１３,９０２号、６,６０８,２０１号、６,５３４,６５４号、６,５１８,２８０号、６,５１４,９８５号、６,４６５,６５４号、６,４３７,１３１号、６,３４８,４６２号、６,３２３,２００号、６,１９４,４２５号、６,１５０,５２３号、６,１１０,９２９号、５,９９８,６１９号、５,９７７,３６６号、５,９０７,０８３号、５,８８６,００６号、５,７５６,７４７号、５,７４１,９０９号、５,７４１,９０８号、５,７１４,６０８号、５,４６８,５１６号、５,６２７,２８１号、５,６０５,８９９号、５,５２５,６１２号、５,４４４,０６５号、５,３８９,６４０号、５,３６７,０７６号、５,３５２,７８４号、５,３４６,９０５号、５,２６６,５７５号、５,１７５,２９６号、５,０３７,９８６号、４,９２９,６２４号、４,６９８,３４８号、４,６８９,３３８号、４,６０３,１９９号、４,５６７,２６９号、４,４４９,２７０号、４,４７２,４０６号、４,４５６,６０６号、４,４４３,４４７号、４,３４８,５２１号、４,０５１,２４７号、４,０１４,８７７号、４,００１,２４３号、３,９８５,８８２号、３,９８５,７５３号、３,９８４,５４８号、３,９７６,６５１号および３,９６９,４６３に記載される。ＮＬＲＰ３活性化因子のさらなる例は当分野で知られる。
【０１９９】
ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)は、哺乳動物に投与され得る。熟練した健康専門家(例えば、医師および医師助手)は、既知因子の１以上(例えば、哺乳動物の健康、哺乳動物の年齢、哺乳動物の体格および哺乳動物の性別の１以上)に基づき、哺乳動物に投与するＮＬＲＰ３活性化因子の用量を決定できる。
【０２００】
例えば、ＮＬＲＰ３活性化因子の一用量は、約１mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mg、約８０mg、約７０mg、約６０mg、約５０mg、約４０mg、約３０mg、約２０mg、約１０mgまたは約５mg；約５mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mg、約８０mg、約７０mg、約６０mg、約５０mg、約４０mg、約３０mg、約２０mgまたは約１０mg；約１０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mg、約８０mg、約７０mg、約６０mg、約５０mg、約４０mg、約３０mgまたは約２０mg；約２０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mg、約８０mg、約７０mg、約６０mg、約５０mg、約４０mgまたは約３０mg；約３０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mg、約８０mg、約７０mg、約６０mg、約５０mgまたは約４０mg；約４０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mg、約８０mg、約７０mg、約６０mgまたは約５０mg；約５０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mg、約８０mg、約７０mgまたは約６０mg；約６０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mg、約８０mgまたは約７０mg；約７０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mg、約９０mgまたは約８０mg；約８０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mg、約１００mgまたは約９０mg；約９０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mg、約１２０mgまたは約１００mg；約１００mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mg、約１４０mgまたは約１２０mg；約１２０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mg、約１６０mgまたは約１４０mg；約１４０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mg、約１８０mgまたは約１６０mg；約１６０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mg、約２００mgまたは約１８０mg；約１８０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mg、約２５０mgまたは約２００mg；約２００mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mg、約３００mgまたは約２５０mg；約２５０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mg、約３５０mgまたは約３００mg；約３００mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mg、約４００mgまたは約３５０mg；約３５０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mg、約４５０mgまたは約４００mg；約４００mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mg、約５００mgまたは約４５０mg；約４５０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mg、約５５０mgまたは約５００mg；約５００mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mg、約６００mgまたは約５５０mg；約５５０mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mg、約６５０mgまたは約６００mg；約６００mg〜約８００mg、約７５０mg、約７００mgまたは約６５０mg；約６５０mg〜約８００mg、約７５０mgまたは約７００mg；約７００mg〜約８００mgまたは約７５０mg；または約７５０mg〜約８００mgのＮＬＲＰ３活性化因子を含み得る。
【０２０１】
アナプレロティック反応およびアナプレロティック反応を誘発および／または増大させる条件
アナプレロティック反応は、生合成のために抜き取られたクエン酸回路中間体を補充する代謝活性である。対照細胞と比較して、アナプレロティック反応が誘発および／または増大されている哺乳動物細胞は、解糖による乳酸産生速度の減少、酸化的リン酸化の速度に比して解糖による乳酸産生速度の減少、グルタミン取り込み速度の増加、基質としてグルタミンを使用して合成される脂質および／またはアミノ酸のフラクションの増加、ピルビン酸カルボキシラーゼによるピルビン酸がオキサロ酢酸に変換される速度の増加、アデニロコハク酸シンテターゼがフマル酸を産生する速度の増加、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼがオキサロ酢酸を産生する速度の増加およびプロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼがスクシニル−ＣｏＡを産生する速度の増加(例えば、対照細胞と比較して、十分なＯ２、エネルギー源および必須ビタミンを提供する)の１以上を有し得る。
【０２０２】
解糖からの乳酸産生速度は、当分野におけるあらゆる数の方法を使用して測定できる(例えば、Glycolysis Assay(Abcam)；Lactate Assay Kit(Sigma-Aldrich)およびGlycolysis Cell-Based Assay Kit(Caymen Chemical)参照)。酸化的リン酸化速度は、当分野におけるあらゆる数の方法を使用して測定できる(例えば、MitoToxTM Complete OXPHOS Activity Assay Kit(Abcam)；MitoToxTM Complete OXPHOS Activity Assay Panel(MitoSciences)参照)。グルタミン取り込み速度は、当分野におけるあらゆる数の方法を使用して測定できる。グルタミンを使用して合成される脂質および／またはアミノ酸のフラクションは、当分野で知られる方法の何れかを使用して測定できる(例えば、基質として、Carr et al., Cell. Immunol. Immune Recog. 185:1037-1044, 2010;およびMcDermott et al., J. Cell. Sci. 104;51-58, 1993参照)。ピルビン酸カルボキシラーゼによりピルビン酸がオキサロ酢酸に変換される速度は、当分野で知られる方法の何れかを使用して測定できる(例えば、Berndt et al., Anal. Biochem. 86:154=158, 1978;およびKerr et al., Mitochondrial Disorders 837:93-119, 2011参照)。アデニロコハク酸シンテターゼがフマル酸を産生する速度は、当分野で知られる方法の何れかを使用して測定できる(例えば、Van Der Weyden et al., J. Biol. Chem. 249:7282-7289, 1974; Boitz et al., J. Biol. Chem. 288:8977-8990, 2013参照)。アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼがオキサロ酢酸を産生する速度は、当分野で知られる方法の何れかを使用して測定できる(例えば、Aspartate Aminotransferase (AST) Activity Assay Kit(Sigma-Aldrich)；Aspartate Transaminase Assay Kit(Abnova)；Alanine Transaminase Colorimetric Activity Assay Kit(Cayman Chemical)参照)。プロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼがスクシニル−ＣｏＡを産生する速度は、当分野で知られる方法の何れかを使用して測定できる(例えば、Gravel et al., Biochem. Med. 20:1-6, 1978;およびSansaricq et al., Pediatric Res. 18:299A, 1984参照)。
【０２０３】
アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地は、例えば、グルコース添加を含まないガラクトース、３−ブロモピルビン酸、２−デオキシグルコース、五価ヒ素(Ｈ３ＡｓＯ４)、ロニダミン、イマチニブ、オキシチアミン、ピルビン酸、奇数鎖長脂肪酸、５炭素ケトン体およびトリヘプタノインの１以上を含み得る。アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分なさらなる培養培地は当分野で知られる。
【０２０４】
Ｃアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件は、例えば、対照細胞と比較して、Ｔ細胞または自然免疫細胞において、次の解糖による乳酸産生速度の減少、酸化的リン酸化の速度に比して解糖による乳酸産生速度の減少、細胞によるグルタミン取り込み速度の増加、基質としてグルタミンを使用して合成される脂質および／またはアミノ酸のフラクションの増加、ピルビン酸カルボキシラーゼによるピルビン酸がオキサロ酢酸に変換される速度の増加、アデニロコハク酸シンテターゼがフマル酸を産生する速度の増加、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼがオキサロ酢酸を産生する速度の増加およびプロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼがスクシニル−ＣｏＡを産生する速度の増加(例えば、対照細胞、例えば、検出可能なアナプレロティック反応を何も有しない類似細胞またはアナプレロティック反応を誘発および／または増大するであろう条件下に培養していない類似細胞と比較して)１以上をもたらす条件であり得る。
【０２０５】
癌
ここに記載する方法の何れにおいても、哺乳動物は癌を有し得る。ここに記載する方法の何れかのいくつかの例において、哺乳動物は、癌を有するとして同定されているかまたは癌を有するとして診断されている。ここに記載する方法の何れかのある実施態様は、癌を有する哺乳動物、癌を有するとして同定された哺乳動物または癌を有するとして診断された哺乳動物から、Ｔ細胞または自然免疫細胞を得ることを含む。
【０２０６】
癌の非限定的例は、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、胃癌、胃腸管カルチノイド腫瘍、胃腸管間質腫瘍、生殖細胞腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、口唇および口腔癌、肺癌、メラノーマ、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔新生物、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部肉腫、胃癌、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、腟癌および外陰癌を含む。
【０２０７】
哺乳動物を、癌を有するとして診断するまたは哺乳動物を、癌を有するとして同定する方法は、当分野で周知である。例えば、医療従事者(例えば、医師、医師助手または技術者)は、哺乳動物における癌の１以上の症状の観察により、哺乳動物における癌を診断できる。癌の症状の非限定的例は、疲労、皮膚の下に感じられる塊または肥厚領域、体重変化、黄疸、皮膚の黒ずみまたは赤味、治癒されないヒリヒリ感、既存の黒子の変化、腸または膀胱習慣の変化、持続的な咳または呼吸障害、嚥下困難、嗄声、持続性消化不良または食後の不快感、持続性の、説明不能な筋肉または関節痛、持続性の、説明不能な発熱または寝汗および説明不能な出血または内出血を含む。哺乳動物を、癌を有するとして診断するまたは哺乳動物を、癌を有するとして同定する方法は、さらに１以上の診断検査の実施を含み得る(例えば、生検または血液サンプルでの１以上の診断検査の実施)。
【０２０８】
ここに記載する方法の何れかのいくつかの例において、哺乳動物は、癌の処置のために先に投与された処置剤に非応答性である癌を有する哺乳動物、癌を有するとして診断された哺乳動物または癌を有するとして同定された哺乳動物であり得る。ここに記載する方法の何れかのいくつかの例において、Ｔ細胞または自然免疫細胞は、癌の処置のために先に投与された処置剤に非応答性である癌を有する哺乳動物、癌を有するとして診断された哺乳動物または癌を有するとして同定された哺乳動物から得る。哺乳動物を、癌を有するとして診断するまたは哺乳動物を癌を有するとして同定する診断検査は当分野で知られる。
【０２０９】
感染性疾患
ここに記載する方法の何れにおいても、哺乳動物は感染性疾患を有し得る。ここに記載する方法の何れかのいくつかの例において、哺乳動物は、感染性疾患を有するとして同定されているまたは感染性疾患を有するとして診断されている。例えば、感染性疾患は細菌、ウイルス、真菌、寄生生物またはマイコバクテリウムが原因であり得る。ここに記載する方法の何れかのある実施態様は、感染性疾患を有する哺乳動物、感染性疾患を有するとして同定された哺乳動物または感染性疾患を有するとして診断された哺乳動物から、Ｔ細胞または自然免疫細胞を得ることを含む。
【０２１０】
感染性疾患の非限定的例は、アシネトバクター感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病、後天性免疫不全症候群、アメーバ症、アナプラズマ症、炭疽病、溶血性アルカノバクテリア感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、バチルス・セレウス感染症、細菌性肺炎、細菌性腟症、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、クマカイチュウ属感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスチス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス症、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症、カンピロバクター病、カンジダ症、猫ひっかき病、蜂巣織炎、シャーガス病、軟性下疳、水痘、チクングニア、クラミジア、肺炎クラミジア感染症、コレラ、黒色分芽菌症、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシル感染症、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱、感冒、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリミア・コンゴ出血熱、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、イカダモ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、腸蟯虫症、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症、フィラリア症、クロストリジウム・ミオネクロシス食中毒、自由生活アメーバ感染症、フソバクテリウム感染症、ガス壊疽、ゲオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径部肉芽腫、Ａ群レンサ球菌感染症、Ｂ群レンサ球菌感染症、ヘモフィルス・インフルエンザエ感染症、手足口病、ハンタウイルス肺症候群、ハートランドウイルス病、ヘリコバクター・ピロリ感染症、溶血性尿毒症症候群、腎症候性出血熱、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギ・エーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球性エーリキア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス感染性単核球症、インフルエンザ、イソスポラ症、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンゲ感染症、クールー、ラッサ熱、在郷軍人病、ポンティアック熱、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱、麻疹、中東呼吸器症候群、類鼻疽、髄膜炎、髄膜炎菌感染症、横川吸虫症、微胞子虫病、伝染性軟属腫、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱、マイコプラズマ肺炎、菌腫、ハエ幼虫症、新生児結膜炎、異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ノカルジア症、オンコセルカ症、パラコクシジオイデス症、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症、コロモジラミ寄生症、ケジラミ寄生症、骨盤内炎症性疾患、百日咳、ペスト、肺炎、急性灰白髄炎、プレボテーラ感染症、原発性アメーバ性髄膜脳炎、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、呼吸系発疹ウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱、ロッキー山紅斑熱、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、重症急性呼吸器症候群、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢、帯状疱疹、天然痘、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性汎脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス、白癬性毛瘡、頭部白癬、体部白癬、股部白癬、手白癬、黒色輪癬、足部白癬、爪白癬、癜風、トキソカラ症、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、渓谷熱、ベネズエラ出血熱、ウイルス肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛症、エルシニア・シュードツベルクローシス感染症、エルシニア感染症、黄熱および接合菌症を含む。
【０２１１】
哺乳動物を、感染性疾患を有するとして診断するまたは哺乳動物を、癌を有するとして同定する方法は、当分野で周知である。例えば、医療従事者(例えば、医師、医師助手または技術者)は、哺乳動物における感染性疾患の１以上の症状の観察により、哺乳動物における感染性疾患を診断できる。感染性疾患の症状の非限定的例は、発熱、下痢、疲労および筋肉痛を含む。哺乳動物を感染性疾患を有するとして診断するまたは哺乳動物を感染性疾患を有するとして同定する方法は、さらに、１以上の診断検査の実施(例えば、生検または血液サンプルでの１以上の診断検査の実施)を含み得る。哺乳動物を、感染性疾患を有するとして診断するまたは哺乳動物を、感染性疾患を有するとして同定するための診断検査は当分野で知られる。
【０２１２】
免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞または免疫細胞の抵抗性を増大させる方法
またここに提供されるのは、(ａ)Ｔ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)または自然免疫細胞(例えば、ここに記載する自然免疫細胞の何れか)を提供し、そして、(ｂ)(例えば、ＮＬＲＰ３活性化因子と接触させていないＴ細胞または自然免疫細胞と比較して)少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を増大させるのに十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地でＴ細胞または自然免疫細胞を培養する(例えば、ここに記載する培養培地の何れかまたはここに記載する培養方法の何れかの使用)ことを含む、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞または自然免疫細胞の抵抗性を増大させる方法(例えば、ここに記載する免疫抑制性サイトカインの任意の１以上)である。免疫抑制性サイトカインの非限定的例は、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＩＬ−１Ｒａ、ＩＬ−１８Ｒａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３４、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、ＩＬ−３７、ＰＧＥ２、ＳＣＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＣＳＦ−１Ｒ、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−λ、ｂＦＧＦ、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ１２、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＸＣＲ４およびＶＥＧＦを含む。
【０２１３】
哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)または自然免疫細胞(例えば、ここに記載する自然免疫細胞の何れか)を得る方法の例はここに記載される。哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)または自然免疫細胞(例えば、ここに記載する自然免疫細胞の何れか)を得るさらなる方法は当分野で知られる。Ｔ細胞または自然免疫細胞の培養は、ここに記載する培養方法、培養条件および培養時間の何れかを使用して、実施できる。ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れかを、これらの方法において使用できる。
【０２１４】
これらの方法のいくつかの例は、さらに、Ｔ細胞または自然免疫細胞を、哺乳動物に投与して戻すことを含む(例えば、Ｔ細胞または自然免疫細胞を哺乳動物から得たとき)。いくつかの例において、哺乳動物は癌を有する、癌を有するとして同定されるまたは癌を有するとして診断されている。Ｔ細胞または自然免疫細胞を、動脈内注射、静脈内注射または腫瘍内注射を使用して、該哺乳動物に投与して戻し得る。ここに記載するＴ細胞または自然免疫細胞の総数の何れかまたはＴ細胞または自然免疫細胞の投与パラメータの何れかを、これらの方法において使用できる。Ｔ細胞または自然免疫細胞を、該哺乳動物に複数用量投与してよい(例えば、ここに記載する投与頻度の何れかを使用して)。Ｔ細胞または自然免疫細胞を、投与前にここに記載する例示的組成物の何れかに製剤できる。
【０２１５】
Ｔ細胞の抗腫瘍活性を改善する方法
またここに提供されるのは、(ａ)Ｔ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)を提供し、そして
(ｂ)Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性(例えば、ここに記載するＴ細胞の抗腫瘍活性の何れか)の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む、培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れか)、培養し(例えば、ここに記載する培養方法、培養培地、培養条件または培養時間の何れかを使用)、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらすことを含む、Ｔ細胞の抗腫瘍活性を改善する方法である。
【０２１６】
ここに記載する培養方法、培養培地、培養条件および／または培養時間の長さの何れかを、これらの方法において使用できる。ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れかおよび／またはここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れかを、これらの方法において使用できる。
【０２１７】
Ｔ細胞の抗腫瘍活性の非限定的例は、未成熟細胞からＴ細胞への分化の増加、Ｔ細胞の分裂および増殖の増加、Ｔ細胞の血液から組織への血管外遊走の増加、Ｔ細胞が固形腫瘍に浸潤する能力の増大、Ｔ細胞の活性化の増加、Ｔ細胞が腫瘍細胞を死滅させる能力の増大、Ｔ細胞が腫瘍細胞を死滅させるために免疫系の他の細胞を動員させる能力の増大およびＴ細胞が腫瘍細胞を死滅させるために因子を活性化させる能力の増大を含む。インビトロでＴ細胞の抗腫瘍活性を検出する方法は当分野で知られる。例えば、未成熟細胞のＴ細胞への分化は、細胞における細胞がＴ細胞へ分化していることを示すタンパク質(例えば、ＴＣＲおよびＣＤ３)の発現レベルの検出により検出できる。Ｔ細胞の血管外遊走のレベルを検出するためのアッセイの例は、例えば、Transwell培養系の使用を含む。Ｔ細胞が固形腫瘍に浸潤するレベルを検出するアッセイの例は、Ye et al., J. Clin. Immunol. 26:447-456, 2006に記載される。抗腫瘍免疫活性を低減させるまたは抗腫瘍免疫活性を促進するＴ細胞により産生されるサイトカインおよび／またはリンホカインのレベルを検出するためのアッセイの例は、例えば、例えば、イムノアッセイ(例えば、ＥＬＩＳＡ)における、抗腫瘍免疫活性を低減させるまたは抗腫瘍免疫活性を促進するＴ細胞により産生されるサイトカインまたはリンホカインと特異的に結合する抗体の使用を含む。これらの抗体は、多数の業者から購入できる。Ｔ細胞活性化のレベルを検出する方法は当分野で知られる。Ｔ細胞活性化は、Ｔ細胞の表面上の１以上の受容体(例えば、所望によりＣＤ３二量体と結合したＴＣＲ)と抗原提示細胞の表面上の１以上の同族受容体の結合を意味する。用語Ｔ細胞を活性化は、Ｔ細胞の表面上の１以上のインテグリンとその各リガンド(例えば、細胞間接着分子(ＩＣＡＭ)、血管細胞接着分子(ＶＣＡＭ)またはフィブロネクチン)の結合またはＴ細胞の共刺激性受容体(例えば、ＣＤ２８、ＩＣＳＯ、ＣＤ４０)のそのリガンドへの結合による活性化を含み得る。例えばＣＤ２８はＣＤ８０またはＣＤ８６により活性化され、ＩＣＯＳはＩＣＯＳ−Ｌにより活性化される。Ｔ細胞の活性化を検出する方法の例は、Ｔ細胞増殖測定、Ｔ細胞表面上の活性化マーカーの上方制御、Ｔ細胞のエフェクター細胞への分化、細胞毒性またはサイトカイン分泌の誘発およびアポトーシスの誘発を含む。Ｔ細胞増殖を検出するアッセイは、業者から購入できる。Ｔ細胞表面上の活性化マーカー、Ｔ細胞からエフェクター細胞への分化のマーカー、細胞毒性誘発のマーカー、活性化Ｔ細胞による分泌されたサイトカインおよびアポトーシスのマーカーを検出するこのような方法の例は、例えば、Ｔ細胞表面上の活性化マーカー、Ｔ細胞からエフェクター細胞への分化のマーカー、活性化Ｔ細胞による分泌されたサイトカインまたはアポトーシスのマーカーに結合する１以上の抗体を使用して、実施できる。このような抗体は、多種多様な業者から購入できる。
【０２１８】
これらの方法のいくつかの例は、さらにＴ細胞を該哺乳動物に投与して戻すことを含む(例えば、Ｔ細胞を哺乳動物から得たとき)。いくつかの例において、該哺乳動物は癌を有する、癌を有するとして同定されるまたは癌を有するとして診断されている。Ｔ細胞を、動脈内注射、静脈内注射または腫瘍内注射を使用して、該哺乳動物に投与して戻し得る。ここに記載するＴ細胞の総数の何れかまたはＴ細胞の投与パラメータの何れかを、これらの方法において使用できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に複数用量投与してよい(例えば、ここに記載する投与頻度の何れかを使用して)。Ｔ細胞を、投与前にここに記載する例示的組成物の何れかに製剤できる。
【０２１９】
Ｔ細胞および自然免疫細胞
またここに提供されるのは、ここに記載する方法の何れかにより産生された、Ｔ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)および自然免疫細胞(例えば、ここに記載する自然免疫細胞の何れか)である。例えば、ここに提供されるのは、ここに記載する方法の何れかにより産生された、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が増大したＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)である。また提供されるのは、ここに記載する方法の何れかにより産生された、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性が増大した自然免疫細胞(例えば、ここに記載する自然免疫細胞の何れか)である。また提供されるのは、ここに記載する方法の何れかにより産生された抗腫瘍活性が改善した(例えば、ここに記載する抗腫瘍活性改善の例示タイプの何れか)、Ｔ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)である。
【０２２０】
医薬組成物
またここに提供されるのは、上のセクションに記載したＴ細胞および／または自然免疫細胞の何れかを含む、医薬組成物である。医薬組成物は、総細胞密度約１×１０５細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mL、約１２×１０６細胞／mL、約１０×１０６細胞／mL、約８×１０６細胞／mL、約６×１０６細胞／mL、約４×１０６細胞／mL、約２×１０６細胞／mL、約１×１０６細胞／mL、約０.５×１０６細胞／mLまたは約０.２５×１０６細胞／mL；約０.２５×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mL、約１２×１０６細胞／mL、約１０×１０６細胞／mL、約８×１０６細胞／mL、約６×１０６細胞／mL、約４×１０６細胞／mL、約２×１０６細胞／mL、約１×１０６細胞／mLまたは約０.５×１０６細胞／mL；約０.５×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mL、約１２×１０６細胞／mL、約１０×１０６細胞／mL、約８×１０６細胞／mL、約６×１０６細胞／mL、約４×１０６細胞／mL、約２×１０６細胞／mLまたは約１×１０６細胞／mL；約１×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mL、約１２×１０６細胞／mL、約１０×１０６細胞／mL、約８×１０６細胞／mL、約６×１０６細胞／mL、約４×１０６細胞／mLまたは約２×１０６細胞／mL；約２×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mL、約１２×１０６細胞／mL、約１０×１０６細胞／mL、約８×１０６細胞／mL、約６×１０６細胞／mLまたは約４×１０６細胞／mL；約４×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mL、約１２×１０６細胞／mL、約１０×１０６細胞／mL、約８×１０６細胞／mLまたは約６×１０６細胞／mL；約６×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mL、約１２×１０６細胞／mL、約１０×１０６細胞／mLまたは約８×１０６細胞／mL；約８×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１���６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mL、約１２×１０６細胞／mLまたは約１０×１０６細胞／mL；約１０×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mL、約１４×１０６細胞／mLまたは約１２×１０６細胞／mL；約１２×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mL、約１６×１０６細胞／mLまたは約１４×１０６細胞／mL；約１４×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mL、約１８×１０６細胞／mLまたは約１６×１０６細胞／mL；約１６×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mL、約２０×１０６細胞／mLまたは約１８×１０６細胞／mL；約１８×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mL、約２２×１０６細胞／mLまたは約２０×１０６細胞／mL；約２０×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mL、約２４×１０６細胞／mLまたは約２２×１０６細胞／mL；約２２×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mL、約２６×１０６細胞／mLまたは約２４×１０６細胞／mL；約２４×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mL、約２８×１０６細胞／mLまたは約２６×１０６細胞／mL；約２６×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mLまたは約２８×１０６細胞／mL；または約２８×１０６細胞／mL〜約３０×１０６細胞／mLを有し得る。
【０２２１】
医薬組成物の各用量は、約０.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kg、約５×１０６細胞／kg、約４.５×１０６細胞／kg、約４×１０６細胞／kg、約３.５×１０６細胞／kg、約３×１０６細胞／kg、約２.５×１０６細胞／kg、約２×１０６細胞／kg、約１.５×１０６細胞／kgまたは約１×１０６細胞／kg；約１×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kg、約５×１０６細胞／kg、約４.５×１０６細胞／kg、約４×１０６細胞／kg、約３.５×１０６細胞／kg、約３×１０６細胞／kg、約２.５×１０６細胞／kg、約２×１０６細胞／kgまたは約１.５×１０６細胞／kg；１.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kg、約５×１０６細胞／kg、約４.５×１０６細胞／kg、約４×１０６細胞／kg、約３.５×１０６細胞／kg、約３×１０６細胞／kg、約２.５×１０６細胞／kgまたは約２×１０６細胞／kg；約２×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kg、約５×１０６細胞／kg、約４.５×１０６細胞／kg、約４×１０６細胞／kg、約３.５×１０６細胞／kg、約３×１０６細胞／kgまたは約２.５×１０６細胞／kg；２.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kg、約５×１０６細胞／kg、約４.５×１０６細胞／kg、約４×１０６細胞／kg、約３.５×１０６細胞／kgまたは約３×１０６細胞／kg；約３×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kg、約５×１０６細胞／kg、約４.５×１０６細胞／kg、約４×１０６細胞／kgまたは約３.５×１０６細胞／kg；  ３.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kg、約５×１０６細胞／kg、約４.５×１０６細胞／kgまたは約４×１０６細胞／kg；約４×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kg、約５×１０６細胞／kgまたは約４.５×１０６細胞／kg；  ４.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kg、約５.５×１０６細胞／kgまたは約５×１０６細胞／kg；約５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kg、約６×１０６細胞／kgまたは約５.５×１０６細胞／kg；約５.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kg、約６.５×１０６細胞／kgまたは約６×１０６細胞／kg；約６×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６
細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kg、約７×１０６細胞／kgまたは約６.５×１０６細胞／kg；約６.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kg、約７.５×１０６細胞／kgまたは約７×１０６細胞／kg；約７×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kg、約８×１０６細胞／kgまたは約７.５×１０６細胞／kg；約７.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kg、約８.５×１０６細胞／kgまたは約８×１０６細胞／kg；約８×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kg、約９×１０６細胞／kgまたは約８.５×１０６細胞／kg；約８.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kg、約９.５×１０６細胞／kgまたは約９×１０６細胞／kg；約９×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kg、約１０×１０６細胞／kgまたは約９.５×１０６細胞／kg；約９.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kg、約１０.５×１０６細胞／kgまたは約１０×１０６細胞／kg；約１０×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kg、約１１×１０６細胞／kgまたは約１０.５×１０６細胞／kg；約１０.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kg、約１１.５×１０６細胞／kgまたは約１１×１０６細胞／kg；約１１×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kg、約１２×１０６細胞／kgまたは約１１.５×１０６細胞／kg；約１１.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kg、約１２.５×１０６細胞／kgまたは約１２×１０６細胞／kg；約１２×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kg、約１３.０×１０６細胞／kgまたは約１２.５×１０６細胞／kg；約１２.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kg、約１３.５×１０６細胞／kgまたは約１３.０×１０６細胞／kg；約１３×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kg、約１４.０×１０６細胞／kgまたは約１３.５×１０６細胞／kg；約１３.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kg、約１４.５×１０６細胞／kgまたは約１４.０×１０６細胞／kg；約１４×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kgまたは約１４.５×１０６細胞／kg；または約１４.５×１０６細胞／kg〜約１５×１０６細胞／kgであり得る。
【０２２２】
医薬組成物の各用量は、約５００万細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞、約１.８億細胞、約１.６億細胞、約１.４億細胞、約１.２億細胞、約１億細胞、約８０００万細胞、約６０００万細胞、約４０００万細胞または約２０００万細胞；約２０００万細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約２０００万細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞、約１.８億細胞、約１.６億細胞、約１.４億細胞、約１.２億細胞、約１億細胞、約８０００万細胞、約６０００万細胞または約４０００万細胞；約４０００万細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞、約１.８億細胞、約１.６億細胞、約１.４億細胞、約１.２億細胞、約１億細胞、約８０００万細胞または約６０００万細胞；約６０００万細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞、約１.８億細胞、約１.６億細胞、約１.４億細胞、約１.２億細胞、約１億細胞または約８０００万細胞；約８０００万細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞、約１.８億細胞、約１.６億細胞、約１.４億細胞、約１.２億細胞または約１億細胞；約１億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞、約１.８億細胞、約１.６億細胞、約１.４億細胞または約１.２億細胞；約１.２億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億���胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞、約１.８億細胞、約１.６億細胞または約１.４億細胞；約１.４億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞、約１.８億細胞または約１.６億細胞；約１.６億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞、約２億細胞または約１.８億細胞；約１.８億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞、約２.５億細胞または約２億細胞；約２億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞、約３億細胞または約２.５億細胞；約２.５億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞、約３.５億細胞または約３億細胞；約３億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞、約４億細胞または約３.５億細胞；約３.５億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞、約４.５億細胞または約４億細胞；約４億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞、約６億細胞、約５億細胞または約４.５億細胞；約５億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞、約７億細胞または約６億細胞；約６億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞、約８億細胞または約７億細胞；約７億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞、約９億細胞または約８億細胞；約８億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞、約１０億細胞または約９億細胞；約９億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞、約１１億細胞または約１０億細胞；約１０億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞、約１２億細胞または約１１億細胞；約１１億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞、約１３億細胞または約１２億細胞；約１２億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞、約１４億細胞または約１３億細胞；約１３億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞、約１５億細胞または約１４億細胞；約１４億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞、約１６億細胞または約１５億細胞；約１５億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞、約１７億細胞または約１６億細胞；約１６億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞、約１８億細胞または約１７億細胞；約１７億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞、約１９億細胞または約１８億細胞；約１８億細胞〜約２２.５億細胞、約２０億細胞または約１９億細胞；約１９億細胞〜約２２.５億細胞または約２０億細胞；または約２０億細胞〜約２２.５億細胞であり得る。
【０２２３】
ここに記載する医薬組成物の何れかの一用量は、約２.５mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mL、約６０mL、約５０mL、約４０mL、約３０mL、約２５mL、約２０mL、約１５mL、約１０mLまたは約５mL；約５.０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mL、約６０mL、約５０mL、約４０mL、約３０mL、約２５mL、約２０mL、約１５mLまたは約１０mL；約１０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mL、約６０mL、約５０mL、約４０mL、約３０mL、約２５mL、約２０mLまたは約１５mL；約１５mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mL、約６０mL、約５０mL、約４０mL、約３０mL、約２５mLまたは約２０mL；約２０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mL、約６０mL、約５０mL、約４０mL、約３０mLまたは約２５mL；約２５mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mL、約６０mL、約５０mL、約４０mLまたは約３０mL；約３０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約��３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mL、約６０mL、約５０mLまたは約４０mL；約４０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mL、約６０mLまたは約５０mL；約５０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mL、約７０mLまたは約６０mL；約６０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mL、約８０mLまたは約７０mL；約７０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mL、約９０mLまたは約８０mL；約８０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mL、約１００mLまたは約９０mL；約９０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mL、約１１０mLまたは約１００mL；約１００mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mL、約１２０mLまたは約１１０mL；約１１０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mL、約１３０mLまたは��１２０mL；約１２０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mL、約１４０mLまたは約１３０mL；約１３０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mL、約１５０mLまたは約１４０mL；約１４０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mL、約１６０mLまたは約１５０mL；約１５０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mL、約１７０mLまたは約１６０mL；約１６０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mL、約１８０mLまたは約１７０mL；約１７０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mL、約１９０mLまたは約１８０mL；約１８０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mL、約２００mLまたは約１９０mL；約１９０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mL、約２５０mLまたは約２００mL；約２００mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mL、約３００mLまたは約２５０mL；約２５０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mL、約３５０mLまたは約３００mL；約３００mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mL、約４００mLまたは約３５０mL；約３５０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mL、約４５０mLまたは約４００mL；約４００mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８０���mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mL、約５００mLまたは約４５０mL；約４５０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mL、約５５０mLまたは約５００mL；約５００mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mL、約６００mLまたは約５５０mL；約５５０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mL、約６５０mLまたは約６００mL；約６００mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mL、約７００mLまたは約６５０mL；約６５０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mL、約７５０mLまたは約７００mL；約７００mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mL、約８００mLまたは約７５０mL；約７５０mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mL、約８５０mLまたは約８００mL；約８００mL〜約１Ｌ、約９５０mL、約９００mLまたは約８５０mL；約８５０mL〜約１Ｌ、約９５０mLまたは約９００mL；約９００mL〜約１Ｌまたは約９５０mL；または約９５０mL〜約１Ｌの体積を有し得る。
【０２２４】
ここに記載する医薬組成物のある態様は、さらに滅菌等張溶液(例えば、当分野で知られる等張液の何れか、例えば、滅菌食塩水、滅菌リン酸緩衝溶液、滅菌乳酸リンゲル、滅菌５％アルブミン溶液、滅菌Ｄ５Ｗ溶液、滅菌Ｄ５Ｗ／１／４  ＮＳ溶液、滅菌1/2  ＮＳ溶液、滅菌２５％アルブミン溶液、滅菌５％ＮａＨＣＯ３、滅菌８.４％ＮａＨＣＯ３溶液、滅菌３％ＮａＣｌ溶液および滅菌５％ＮａＣｌ溶液)を含む。医薬組成物の一部の例は、さらに哺乳動物血清アルブミン(例えば、ヒト、マウス、ウサギ、サル、チンパンジーまたは類人猿血清アルブミン)を、最終濃度約１mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mL、約４５mg／mL、約４０mg／mL、約３５mg／mL、約３０mg／mL、約２５mg／mL、約２０mg／mL、約１５mg／mL、約１０mg／mLまたは約５mg／mL；約５mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mL、約４５mg／mL、約４０mg／mL、約３５mg／mL、約３０mg／mL、約２５mg／mL、約２０mg／mL、約１５mg／mLまたは約１０mg／mL；約１０mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mL、約４５mg／mL、約４０mg／mL、約３５mg／mL、約３０mg／mL、約２５mg／mL、約２０mg／mLまたは約１５mg／mL；約１５mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mL、約４５mg／mL、約４０mg／mL、約３５mg／mL、約３０mg／mL、約２５mg／mLまたは約２０mg／mL；約２０mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mL、約４５mg／mL、約４０mg／mL、約３５mg／mL、約３０mg／mLまたは約２５mg／mL；約２５mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mL、約４５mg／mL、約４０mg／mL、約３５mg／mL、約３０mg／mL；約３０mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mL、約４５mg／mL、約４０mg／mLまたは約３５mg／mL；約３５mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mL、約４５mg／mLまたは約４０mg／mL；約４０mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mL、約５０mg／mLまたは約４５mg／mL；約４５mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mL、約５５mg／mLまたは約５０mg／mL；約５０mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mL、約６０mg／mLまたは約５５mg／mL；約５５mg／mL〜約７０mg／mL、約６５mg／mLまたは約６０mg／mL；約６０mg／mL〜約７０mg／mLまたは約６５mg／mL；または約６５ng／mL〜約７０mg／mLで含む。当業者には認識され得るとおり、血清アルブミンは、薬剤を投与する該哺乳動物に対応して、選択しなければならない(例えば、ヒトは、ヒト血清アルブミンを含む医薬組成物を投与されるべきである)。
【０２２５】
医薬組成物のある実施態様は、さらに、(ｉ)１以上の抗真菌剤(例えば、ビホナゾール、ブトコナゾール、クロトリマゾール、エコナゾール、ケトコナゾール、ルリコナゾール、ミコナゾール、オモコナゾール、オキシコナゾール、セルタコナゾール、スルコナゾール、チオコナゾール、アルバコナゾール、エフィナコナゾール、エポキシコナゾール、フルコナゾール、イサブコナゾール、イトラコナゾール、ポサコナゾール、プロピコナゾール、ラブコナゾール、テルコナゾール、ボリコナゾール、アバファンギン、アモロルフィン、ブテナフィン、ナフチフィン、テルビナフィン、アニデュラファンギン、カスポファンギン、ミカファンギン、安息香酸、シクロピロクス、フルシトシン、５−フルオロシトシン、グリセオフルビン、ハロプロジン、トルナフタート、ウンデシレン酸およびペルーバルサムからなる群から選択される)および(ii)１以上の抗生物質(例えば、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、トブラマイシン、パロモマイシン、ストレプトマイシン、スペクチノマイシン、ゲルダナマイシン、ハービマイシン、リファキシミン、ロラカルベフ、エルタペネム、ドリペネム、イミペネム、シラスタチン、メロペネム、セファドロキシル、セファゾリン、セファロチン、セファロチン、セファレキシン、セファクロル、セファマンドール、セフォキシチン、セフプロジル、セフロキシム、セフィキシム、セフジニル、セフジトレン、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフポドキシム、セフタジジム、セフチブテン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフェピム、セフタロリンフォサミル、セフトビプロール、テイコプラニン、バンコマイシン、テラバンシン、ダルババンシン、オリタバンシン、クリンダマイシン、リンコマイシン、ダプトマイシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、ロキシスロマイシン、トロレアンドマイシン、テリスロマイシン、スピラマイシン、アズトレオナム、フラゾリドン、ニトロフラントイン、リネゾリド、ポシゾリド、ラデゾリド、トレゾリド、アモキシシリン、アンピシリン、アズロシリン、カルベニシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、メズロシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、ペニシリンＧ、ペニシリンＶ、ピペラシリン、ペニシリンＧ、テモシリン、チカルシリン、アモキシシリン、クラブラン酸、アンピシリン、スルバクタム、ピペラシリン、タゾバクタム、チカルシリン、クラブラン酸、バシトラシン、コリスチン、ポリミキシンＢ、シプロフロキサシン、エノキサシン、ガチフロキサシン、ゲミフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、モキシフロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、マフェニド、スルファセタミド、スルファジアジン、スルファジアジン銀、スルファジメトキシン、スルファメトキサゾール、スルファニルアミド、スルファサラジン、スルフイソキサゾール、トリメトプリム−スルファメトキサゾール、スルホンアミドクリソイジン、デメクロサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサイクリン、クロファジミン、ダプソン、カプレオマイシン、シクロセリン、エタンブトール、エチオナミド、イソニアジド、ピラジナミド、リファンピシン、リファブチン、リファペンチン、ストレプトマイシン、アルスフェナミン、クロラムフェニコール、ホスホマイシン、フシジン酸、メトロニダゾール、ムピロシン、プラテンシマイシン、キヌプリスチン、ダルホプリスチン、チアンフェニコール、チゲサイクリン、チニダゾール、トリメトプリムおよびテイクソバクチンからなる群から選択される)の一方または両方を、各抗真菌剤および／または各抗生物質の最終濃度約１.０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９０μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mL、約４５μg／mL、約４０μg／mL、約３５μg／mL、約３０μg／mL、約２５μg／mL、約２０μg／mL、約１５μg／mL、約１０μg／mLまたは約５.０μg／mL；約５.０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mL、約４５μg／mL、約４０μg／mL、約３５μg／mL、約３０μg／mL、約２５μg／mL、約２０μg／mL、約１５μg／mLまたは約１０μg／mL；約１０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mL、約４５μg／mL、約４０μg／mL、約３５μg／mL、約３０μg／mL、約２５μg／mL、約２０μg／mLまたは約１５μg／mL；約１５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mL、約４５μg／mL、約４０μg／mL、約３５μg／mL、約３０μg／mL、約２５μg／mLまたは約２０μg／mL；約２０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mL、約４５μg／mL、約４０μg／mL、約３５μg／mL、約３０μg／mLまたは約２５μg／mL；約２５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mL、約４５μg／mL、約４０μg／mL、約３５μg／mLまたは約３０μg／mL；約３０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mL、約４５μg／mL、約４０μg／mLまたは約３５μg／mL；約３５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mL、約４５μg／mLまたは約４０μg／mL；約４０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mL、約５０μg／mLまたは約４５μg／mL；約４５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mL、約５５μg／mLまたは約５０μg／mL、約５０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mL、約６０μg／mLまたは約５５μg／mL；約５５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mL、約６５μg／mLまたは約６０μg／mL；約６０μg／mL〜約２０
０μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mL、約７０μg／mLまたは約６５μg／mL；約６５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mL、約７５μg／mLまたは約７０μg／mL；約７０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mL、約８０μg／mLまたは約７５μg／mL；約７５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mL、約８５μg／mLまたは約８０μg／mL；約８０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mL、約９０μg／mLまたは約８５μg／mL；約８５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mL、約９５μg／mLまたは約９０μg／mL；約９０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mL、約１００μg／mLまたは約９５μg／mL；���９５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mL、約１０５μg／mLまたは約１００μg／mL；約１００μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mL、約１１０μg／mLまたは約１０５μg／mL；約１０５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mL、約１１５μg／mLまたは約１１０μg／mL；約１１０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mL、約１２０μg／mLまたは約１１５μg／mL；約１１５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mL、約１２５μg／mLまたは約１２０μg／mL；約１２０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mL、約１３０μg／mLまたは約１２５μg／mL；約１２５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mL、約１３５μg／mLまたは約１３０μg／mL；約１３０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mL、約１４０μg／mLまたは約１３５μg／mL；約１３５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mL、約１４５μg／mLまたは約１４０μg／mL；約１４０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mL、約１５０μg／mLまたは約１４５μg／mL；約１４５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mL、約１５５μg／mLまたは約１５０μg／mL；約１５０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mL、約１６０μg／mLまたは約１５５μg／mL；約１５５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mL、約１６５μg／mLまたは約１６０μg／mL；約１６０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mL、約１７０μg／mLまたは約１６５μg／mL；約１６５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mL、約１７５μg／mLまたは約１７０μg／mL；約１７０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mL、約１８０μg／mLまたは約１７５μg／mL；約１７５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mL、約１８５μg／mLまたは約１８０μg／mL；約１８０μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mL、約１９０μg／mLまたは約１８５μg／mL；約１８５μg／mL〜約２００μg／mL、約１９５μg／mLまたは約１９０μg／mL；または約１９５μg／mL〜約２００μg／Ｌの範囲で含む。
【０２２６】
ある実施態様において、医薬組成物は静脈内、動脈内または腫瘍内投与用に製剤される。
【０２２７】
キット
またここに提供されるのは、１用量以上のここに記載する医薬組成物の何れかを含む、キットである。ある実施態様において、医薬組成物は、予め充填された、滅菌かつ生体適合性のバッグに提供される。ある実施態様において、医薬組成物は、注射針を通過する細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞または自然免疫細胞の何れか)に対して相当量の剪断応力を引き起こさないゲージを有する注射針を有する、予め充填された滅菌シリンジに提供される。ある実施態様において、医薬組成物は、滅菌かつ生体適合性のバイアルに提供される。
【０２２８】
キットはまた、ここに記載する方法の何れかを実施するための指示書も提供する。
【０２２９】
癌を有する哺乳動物における抗腫瘍免疫を増大させる方法
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか)を同定し、(ｂ)同定した該哺乳動物からＴ細胞を採取し(例えば、ここに記載する技術の何れかを使用して実施)、(ｃ)該Ｔ細胞(例えば、ここに記載する培養方法、培養培地、培養条件または培養時間の何れかを使用)を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れか)に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善(例えば、ここに記載する１以上のＴ細胞の抗腫瘍活性の何れかの改善)をもたらし、(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与し、それにより該哺乳動物における抗腫瘍免疫の増大をもたらすことを含む、癌を有する哺乳動物における抗腫瘍免疫を増大させる方法である。ここに記載するＴ細胞を培養するまたは哺乳動物から採取(単離)する方法の何れかを、これらの方法において使用できる。哺乳動物からのＴ細胞の採取は、例えば、哺乳動物から血液サンプルまたはアフェレーシス産物を得ることを含み得る。ＮＬＲＰ３活性化因子、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れかおよび／またはここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れかを、これらの方法において使用できる。Ｔ細胞を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与して戻してよい。Ｔ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に静脈内投与、動脈内投与または腫瘍内注射により投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２３０】
また提供されるのは、(ａ)哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか)を、癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有するとして同定し、そして(ｂ)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を、該同定した哺乳動物に投与することを含む、癌を有する哺乳動物における抗腫瘍免疫を増大させる方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子の何れかを、これらの方法において使用できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ＮＬＲＰ３活性化因子についてここに記載する投与経路の何れかを使用して、投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２３１】
これらの方法の何れかのいくつかの例において、該哺乳動物は、癌を有するとして診断される。これらの方法のある実施態様は、さらに、哺乳動物を、癌を有するとして診断することを含む(例えば、ここに記載する方法例の何れかを使用)。
【０２３２】
これらの方法の何れかのいくつかの例において、抗腫瘍免疫増加は、例えば、哺乳動物における未成熟細胞からＴ細胞への分化の増加、哺乳動物におけるＴ細胞の分裂および増殖の増加、哺乳動物におけるＴ細胞の血液から組織への血管外遊走の増加、哺乳動物におけるＴ細胞が固形腫瘍に浸潤する能力の増大、哺乳動物におけるＴ細胞の活性化の増加、哺乳動物におけるエフェクターＴ細胞誘発および／または増殖を減少させるためのＴｒｅｇ細胞の能力の低減、哺乳動物における抗腫瘍免疫活性を促進するＴ細胞によるサイトカインおよび／またはリンホカイン(例えば、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２１)の産生増加および哺乳動物における抗腫瘍活性を低減させるＴ細胞によるサイトカインおよび／またはリンホカイン(例えば、ＩＬ−１０およびＴＧＦ−β)の産生減少の１以上であり得る。哺乳動物におけるＴ細胞の抗腫瘍活性を検出する方法は当分野で知られる。例えば、未成熟細胞のＴ細胞への分化は、哺乳動物における経時的な未成熟細胞対Ｔ細胞比の検出により、検出できる(例えば、ＦＡＣＳ分析による、例えば、哺乳動物からの血液サンプルにおける細胞の分析による)。哺乳動物におけるＴ細胞の血管外遊走のレベルを検出するためのアッセイの例は、例えば、哺乳動物からの組織サンプルにおけるＴ細胞のレベルの検出またはＴ細胞の表面上の血流から組織に出る回転および血管外遊走を可能にするタンパク質の発現の検出による。Ｔ細胞が固形腫瘍に浸潤するレベルを検出するアッセイの例は、Ye et al., J. Clin. Immunol. 26:447-456, 2006に記載される。哺乳動物におけるＴ細胞の固形腫瘍への浸潤レベルは、処置前の哺乳動物からの腫瘍生検サンプルおよび処置後の哺乳動物からの腫瘍生検サンプルの試験により決定できる。このような方法は、腫瘍生検サンプルにおけるＴ細胞の存在を決定するための顕微鏡技術を含み得る。抗腫瘍免疫活性を低減させるまたは抗腫瘍免疫活性を促進するＴ細胞により産生されるサイトカインおよび／またはリンホカインのレベルを検出するためのアッセイの例は、例えば、哺乳動物からの血液または血清サンプルをサンプルとして使用して実施する、例えば、イムノアッセイ(例えば、ＥＬＩＳＡ)における、抗腫瘍免疫活性を低減させるまたは抗腫瘍免疫活性を促進するＴ細胞により産生されるサイトカインまたはリンホカインと特異的に結合する抗体の使用を含み得る。これらの抗体は、多数の業者から購入できる。Ｔ細胞活性化のレベルを検出する方法は当分野で知られる。Ｔ細胞活性化は、Ｔ細胞の表面上の１以上の受容体(例えば、所望によりＣＤ３二量体と結合したＴＣＲ)と抗原提示細胞の表面上の１以上の同族受容体の結合を意味する。用語Ｔ細胞を活性化は、Ｔ細胞の表面上の１以上のインテグリンとその各リガンド(例えば、細胞間接着分子(ＩＣＡＭ)、血管細胞接着分子(ＶＣＡＭ)またはフィブロネクチン)の結合またはＴ細胞の共刺激性受容体(例えば、ＣＤ２８、ＩＣＳＯ、ＣＤ４０)のそのリガンドへの結合による活性化を含み得る。例えばＣＤ２８はＣＤ８０またはＣＤ８６により活性化され、ＩＣＯＳはＩＣＯＳ−Ｌにより活性化され、ＩＣＯＳはＩＣＯＳ−Ｌにより活性化される。Ｔ細胞の活性化を検出する���法の例は、Ｔ細胞増殖測定、Ｔ細胞表面上の活性化マーカーの上方制御、Ｔ細胞のエフェクター細胞への分化、細胞毒性またはサイトカイン分泌の誘発およびアポトーシスの誘発を含む。哺乳動物からのＴ細胞を含むサンプルにおいてＴ細胞増殖を検出するためのアッセイは、業者から購入できる。Ｔ細胞表面上の活性化マーカー、Ｔ細胞からエフェクター細胞への分化のマーカー、細胞毒性誘発のマーカー、活性化Ｔ細胞による分泌されたサイトカインおよびアポトーシスのマーカーを検出するためのこのような方法の例は、例えば、Ｔ細胞表面上の活性化マーカー、Ｔ細胞からエフェクター細胞への分化のマーカー、活性化Ｔ細胞による分泌されたサイトカインまたはアポトーシスのマーカーに結合する１以上の抗体を使用して実施できる。このような抗体は、多種多様な業者から購入できる。
【０２３３】
いくつかの例において、哺乳動物における抗腫瘍活性の増大は、固形腫瘍のサイズの縮小、哺乳動物における癌の症状の重症度または数の低減、哺乳動物における癌の寛解期間の延長、癌を有する哺乳動物の生存期間の延長および転移を発症するまたはさらなる転移を発症するリスクの減少の１以上により、間接的に観察され得る。
【０２３４】
哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法
ここに提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか、例えば、ヒト)を同定し、(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性(例えば、ここに記載するＴ細胞の抗腫瘍活性の１以上の何れか)改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｃ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与し、それにより該哺乳動物における癌の寛解期間の延長をもたらすことを含む、哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法である。Ｔ細胞を、ここに記載する培養方法の何れかを使用して培養できる。ここに記載するＴ細胞の何れの用量も、これらの方法において該哺乳動物に投与できる。Ｔ細胞は、例えば、動脈内投与、静脈内投与または腫瘍内注射により投与され得る。Ｔ細胞を、週１回、週２回、週３回、２週に１回、３週に１回、月に１回、月に２回、２ヶ月に１回、３ヶ月に１回、４ヶ月に１回、５ヶ月に１回、６ヶ月に１回、７ヶ月に１回、８ヶ月に１回、９ヶ月に１回、１０ヶ月に１回、１１ヶ月に１回または１２ヶ月に１回投与し得る。Ｔ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。
【０２３５】
また提供されるのは、(ａ)哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか、例えば、ヒト)を、癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有するとして同定し、そして(ｂ)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を、該同定した哺乳動物に投与する(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の用量の何れかで)ことを含む該哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法である。ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の用量の何れも、これらの方法において該哺乳動物に投与できる。いくつかの例において、ＮＬＲＰ３活性化因子を経口投与、腹腔内投与、筋肉内投与、動脈内投与または静脈内投与により投与する。ＮＬＲＰ３活性化因子を、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、週１回、週２回、週３回、２週に１回、３週に１回、月に１回、月に２回、２ヶ月に１回、３ヶ月に１回、４ヶ月に１回、５ヶ月に１回、６ヶ月に１回、７ヶ月に１回、８ヶ月に１回、９ヶ月に１回、１０ヶ月に１回、１１ヶ月に１回または１２ヶ月に１回投与し得る。いくつかの例において、該哺乳動物は、癌を有するとして診断されている。ある実施態様は、さらに、該哺乳動物における癌を診断するステップを含む。
【０２３６】
哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法の何れかのある実施態様において、寛解期間の延長は、対照哺乳動物(例えば、同じまたは類似するタイプの癌を有する哺乳動物または哺乳動物集団)と比較する。ある実施態様において、哺乳動物はまた寛解していない。いくつかの例において、哺乳動物は既に寛解している。いくつかの例において、寛解期間の延長は、統計学的に有意な延長である。いくつかの例において、寛解期間の延長は、約１日〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月、約２ヶ月、約１ヶ月または約２週；約２週〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月、約２ヶ月または約１ヶ月；約１ヶ月〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月または約２ヶ月；約２ヶ月〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月または約４ヶ月；約４ヶ月〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月または約６ヶ月；約６ヶ月〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月または約８ヶ月；約８ヶ月〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年または約１０ヶ月；約１０ヶ月〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年または約１年；約１年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年または約１.５年；約１.５年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年〜約２年；約２年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年または約２.５年；約２.５年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年または約３年；約３年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年または約３.５年；約３.５年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年または約４年；約４年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年または約４.５年；約４.５年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年または約５年；約５年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年または約５.５年；約５.５年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年または約６年；約６年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年または約６.５年；約６.５年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年または約７年；約７年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年または約７.５年；約７.５年〜約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年または約８年；約８年〜約１０年、約９.５年、約９年または約８.５年；約８.５年〜約１０年、約９.５年または約９年；約９年〜約１０年または約９.５年；または約９.５年〜約１０年(例えば、対照哺乳動物、例えば、同じまたは類似するタイプの癌を有する哺乳動物または哺乳動物集団と比較して)である。
【０２３７】
哺乳動物が寛解しているか否かを決定する方法は、当業者に知られる。例えば、哺乳動物身体のＰＥＴスキャン、ＭＲＩ、ＣＴスキャン、超音波およびＸ線を得てよく、これらのデータを、哺乳動物が寛解しているか否かの決定に使用できる。いくつかの例において、診断検査を、哺乳動物からのサンプル(例えば、血液サンプルまたは生検)で実施して、哺乳動物がなお寛解しているか否か決定できる。
【０２３８】
癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)または感染性疾患(例えば、ここに記載する感染性疾患の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか)を同定し、(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞(例えば、ここに記載する培養方法、培養培地、培養条件または培養時間の何れかを使用)を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／または抗腫瘍またはＴ細胞の抗感染性疾患活性(例えば、ここに記載する抗腫瘍活性またはＴ細胞の抗感染性疾患活性の何れか)の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れか)に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍または抗感染性疾患活性の改善をもたらし、そして(ｅ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む、癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法である。ここに記載するＴ細胞を培養するまたは哺乳動物から採取(単離)する方法の何れかを、これらの方法において使用できる。哺乳動物からのＴ細胞の採取は、例えば、哺乳動物から血液サンプルまたはアフェレーシス産物を得ることを含み得る。ＮＬＲＰ３活性化因子、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れかおよび／またはここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れかを、これらの方法において使用できる。該Ｔ細胞を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与して戻してよい。該Ｔ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。該Ｔ細胞を、哺乳動物に静脈内投与、動脈内投与または腫瘍内注射により投与できる。該Ｔ細胞を、哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２３９】
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)または感染性疾患(例えば、ここに記載する感染性疾患の何れか)を有する哺乳動物を同定し、そして(ｂ)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を、該同定した哺乳動物に投与することを含む、癌または感染性疾患を有する哺乳動物を処置する方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子の何れかを、これらの方法において使用できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ＮＬＲＰ３活性化因子についてここに記載する投与経路の何れかを使用して、投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２４０】
これらの方法の何れかのいくつかの例において、該哺乳動物は、癌または感染性疾患を有するとして診断される。これらの方法のある実施態様は、さらに、哺乳動物を、癌または感染性疾患を有するとして診断することを含む(例えば、ここに記載する方法例の何れかを使用)。
【０２４１】
ある実施態様において、癌の処置は、哺乳動物における癌の重症度の低減および／または哺乳動物における癌の１以上の症状の数および／または頻度の低減の１以上をもたらす。例えば、癌の重症度の低減は、哺乳動物における１以上の固形腫瘍のサイズの減少(例えば、処置前の１以上の腫瘍のサイズと比較して)を含み得る。哺乳動物における癌の重症度の低減は、経時的な哺乳動物における１以上の固形腫瘍の増殖速度の減少(例えば、処置前の１以上の固形腫瘍の増殖速度と比較して)を含み得る。癌の重症度の低減はまた、該哺乳動物における癌の寛解期間の延長(例えば、類似する癌を有するが、異なる処置を受けている哺乳動物における平均寛解期間と比較して)によっても示され得る。癌の重症度の低減はまた、例えば、癌を有する哺乳動物における転移を発症する割合またはさらなる転移を発症する割合の減少(例えば、類似の癌を有する哺乳動物の集団と比較して)も意味し得る。癌の重症度の低減は、例えば、癌を有する哺乳動物の生存期間の延長(例えば、類似の癌を有する哺乳動物の集団と比較して)であり得る。癌の重症度の低減は、例えば、癌を有する哺乳動物の予後の改善をもたらし得る。
【０２４２】
ある実施態様において、感染性疾患の処置は、哺乳動物における感染性疾患の重症度の低減および／または哺乳動物における感染性疾患の１以上の症状の数および／または頻度の低減(例えば、ここに記載する感染性疾患の症状の何れか)の１以上をもたらす。例えば、感染性疾患の重症度の低減は、哺乳動物または哺乳動物からのサンプルにおける病原体の力価の減少を含み得る(例えば、処置前の哺乳動物におけるまたは処置前の哺乳動物から得た該哺乳動物からのサンプルにおける病原体の力価と比較して)。哺乳動物における感染性疾患の重症度の低減は、経時的な哺乳動物における病原体の増殖速度減少を含み得る(例えば、処置前の病原体の増殖速度と比較して)。
【０２４３】
癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法
ここに提供されるのは、(ａ)哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか、例えば、ヒト)を、癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有するとして同定し、(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性(例えば、ここに記載するＴ細胞の抗腫瘍活性の１以上の何れか)改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｃ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与する(それにより、癌を有する哺乳動物の生存期間の延長をもたらす)ことを含む、癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法である。Ｔ細胞を、ここに記載する培養方法の何れかを使用して培養できる。ここに記載するＴ細胞の何れの用量も、これらの方法において該哺乳動物に投与できる。Ｔ細胞は、例えば、動脈内投与、静脈内投与または腫瘍内注射により投与され得る。Ｔ細胞を、週１回、週２回、週３回、２週に１回、３週に１回、月に１回、月に２回、２ヶ月に１回、３ヶ月に１回、４ヶ月に１回、５ヶ月に１回、６ヶ月に１回、７ヶ月に１回、８ヶ月に１回、９ヶ月に１回、１０ヶ月に１回、１１ヶ月に１回または１２ヶ月に１回投与し得る。Ｔ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。
【０２４４】
また提供されるのは、(ａ)哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか、例えば、ヒト)を、癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有するとして同定し、そして(ｂ)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を、該同定した哺乳動物に投与する(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の用量の何れかで)ことを含む、癌を有する哺乳動物の生存期間を延長する方法である。ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の用量の何れも、これらの方法において該哺乳動物に投与できる。いくつかの例において、ＮＬＲＰ３活性化因子を経口投与、腹腔内投与、筋肉内投与、動脈内投与または静脈内投与により投与する。ＮＬＲＰ３活性化因子を、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、週１回、週２回、週３回、２週に１回、３週に１回、月に１回、月に２回、２ヶ月に１回、３ヶ月に１回、４ヶ月に１回、５ヶ月に１回、６ヶ月に１回、７ヶ月に１回、８ヶ月に１回、９ヶ月に１回、１０ヶ月に１回、１１ヶ月に１回または１２ヶ月に１回投与し得る。いくつかの例において、該哺乳動物は、癌を有するとして診断されている。ある実施態様は、さらに、該哺乳動物における癌を診断するステップを含む。
【０２４５】
哺乳動物における癌の寛解期間を延長する方法の何れかのある実施態様において、寛解期間の延長は、対照哺乳動物(例えば、同じまたは類似するタイプの癌を有する哺乳動物または哺乳動物集団)と比較する。ある実施態様において、該哺乳動物は、早期段階の癌を有し得る(例えば、ステージ１または２)。ある実施態様において、該哺乳動物は、後期段階の癌を有し得る(例えば、ステージ３または４)。いくつかの例において、生存期間延長は, 統計学的に有意な延長である。いくつかの例において、生存期間延長は、約１日〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月、約２ヶ月、約１ヶ月または約２週；約２週〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月、約２ヶ月または約１ヶ月；約１ヶ月〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月または約２ヶ月；約２ヶ月〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月または約４ヶ月；約４ヶ月〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月または約６ヶ月；約６ヶ月〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月または約８ヶ月；約８ヶ月〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年または約１０ヶ月；約１０ヶ月〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年または約１年；約１年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年または約１.５年；約１.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年または約２年；約２年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年または約２.５年；約２.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年または約３年；約３年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年または約３.５年；約３.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年または約４年；約４年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２���年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年または約４.５年；約４.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年または約５年；約５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年または約５.５年；約５.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年または約６年；約６年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年または約６.５年；約６.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年または約７年、約７年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年または約７.５年；約７.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年または約８年；約８年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年、約９年または約８.５年；約８.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年、約９.５年または約９年；約９年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年、約１０年または約９.５年；約９.５年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年、約１４年、約１２年または約１０年；約１０年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年���約１４年または約１２年；約１２年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年、約１６年または約１４年；約１４年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年、約１８年または約１６年；約１６年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年、約２０年または約１８年；約１８年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年、約２２年または約２０年；約２０年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年、約２４年または約２２年；約２２年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年、約２６年または約２４年；約２４年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年、約２８年または約２６年；約２６年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年、約３０年または約２８年；約２８年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年、約３２年または約３０年；約３０年〜約４０年、約３８年、約３６年、約３４年または約３２年；約３２年〜約４０年、約３８年、約３６年または約３４年；約３４年〜約４０年、約３８年または約３６年；約３６年〜約４０年または約３８年；または約３８年〜約４０年(例えば、対照哺乳動物、例えば、同じまたは類似するタイプの癌を有する哺乳動物または哺乳動物集団と比較して)である。
【０２４６】
癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)および固形腫瘍を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか)を同定し、(ｂ)同定した該哺乳動物からＴ細胞を採取し(例えば、ここに記載する方法の何れかを使用)、(ｃ)該Ｔ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大のための条件の何れか)に培養し(例えば、ここに記載する培養方法、培養培地、培養条件および培養時間の何れかを使用)、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む、癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法である。ここに記載するＴ細胞を培養するまたは該哺乳動物から採取(単離)する方法の何れかを、これらの方法において使用できる。該哺乳動物からのＴ細胞の採取は、例えば、該哺乳動物から血液サンプルまたはアフェレーシス産物を得ることを含み得る。ＮＬＲＰ３活性化因子、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れかおよび／またはここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れかを、これらの方法において使用できる。Ｔ細胞を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与して戻してよい。Ｔ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に静脈内投与、動脈内投与または腫瘍内注射により投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２４７】
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)および固形腫瘍を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか)を同定し、そして(ｂ)該同定した哺乳動物に治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を投与することを含む、癌を有する哺乳動物における固形腫瘍のサイズを減少させる方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子の何れかを、これらの方法において使用できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ＮＬＲＰ３活性化因子についてここに記載する投与経路の何れかを使用して、投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２４８】
これらの方法の何れかのいくつかの例において、該哺乳動物は、癌を有するとして診断される。これらの方法のある実施態様は、さらに、哺乳動物を、癌を有するとして診断することを含む(例えば、ここに記載する方法例の何れかを使用)。
【０２４９】
これらの方法のいくつかの例は、哺乳動物における１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０固形腫瘍のサイズの減少をもたらす。いくつかの例において、１以上の固形腫瘍(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０固形腫瘍)のサイズの減少は、約１％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％、約１８％、約１６％、約１４％、約１２％、約１０％、約８％、約６％、約４％または約２％；約２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％、約１８％、約１６％、約１４％、約１２％、約１０％、約８％、約６％または約４％；約４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％、約１８％、約１６％、約１４％、約１２％、約１０％、約８％または約６％；約６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％、約１８％、約１６％、約１４％、約１２％、約１０％または約８％；約８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％、約１８％、約１６％、約１４％、約１２％または約１０％；約１０％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、���８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％、約１８％、約１６％、約１４％または約１２％；約１２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％、約１８％、約１６％または約１４％；約１４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％、約１８％または約１６％；約１６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％、約２０％または約１８％；約１８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％、約２２％または約２０％；約２０％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％、約２４％または約２２％；約２２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５���％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％、約２６％または約２４％；約２４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％、約２８％または約２６％；約２６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％、約３０％または約２８％；約２８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％、約３２％または約３０％；約３０％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％、約３４％または約３２％；約３２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％、約３６％または約３４％；約３４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％、約３８％または約３６％；約３６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％、約４０％または約３８％；約３８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６���、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％、約４２％または約４０％；約４０％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％、約４４％または約４２％；約４２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％、約４６％または約４４％；約４４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％、約４８％または約４６％；約４６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％、約５０％または約４８％；約４８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％、約５２％または約５０％；約５０％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％、約５４％または約５２％；約５２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７
６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％、約５６％または約５４％；約５４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％、約５８％または約５６％；約５６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％、約６０％または約５８％；約５８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％、約６２％または約６０％；約６０％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％、約６４％または約６２％；約６２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％、約６６％または約６４％；約６４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％、約６８％または約６６％；約６６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％、約７０％または約６８％；約６８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％、約７２％または約７０％；約７０％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％、約７４％または約７２％；約７２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％、約７６％または約７４％；約７４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％、約７８％または約７６％；約７６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％、約８０％または約７８％；約７８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％、約８２％または約８０％；約８０％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％、約８４％または約８２％；約８２％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％、約８６％または約８４％；約８４％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％、約８８％または約８６％；約８６％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％、約９０％または約８８％；約８８％〜約１００％、約９８％、約９６％、約９４％または約９０％；約９０％〜約１００％、約９８％、約９６％または約９４％；約９２％〜約１００％、約９８％または約９６％；約９４％〜約１００％または約９８％；約９６％〜約１００％または約９８％；または約９８％〜約１００％である。哺乳動物における固形腫瘍のサイズを検出する方法は、例えば、ＰＥＴスキャン、ＭＲＩ、ＣＴスキャン、超音波およびＸ線を含む。
【０２５０】
いくつかの例において、１以上の固形腫瘍のサイズの縮小および／または処置の期間は、約１週間〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月、約２ヶ月または約１ヶ月；約１ヶ月〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月または約２ヶ月；約２ヶ月〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月または約４ヶ月；約４ヶ月〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月、約８ヶ月または約６ヶ月；約６ヶ月〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年、約１０ヶ月または約８ヶ月；約８ヶ月〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年、約１年または約１０ヶ月；約１０ヶ月〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約１.５年または約１年；約１年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年または約１.５年；約１.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年または約２年；約２年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年または約２.５年；約２.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年または約３年；約３年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年または約３.５年；約３.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年または約４年；約４年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年または約４.５年；約４.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年、約５.５年または約５年；約５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年、約６年または約５.５年；約５.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年、約６.５年または約６年；約６年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年、約７年または約６.５年；約６.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年、約７.５年または約７年；約７年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２���、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年、約８年または約７.５年；約７.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年、約８.５年または約８年；約８年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年、約９年または約８.５年；約８.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年、約９.５年または約９年；約９年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年、約１０年または約９.５年；約９.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年、約１０.５年または約１０年；約１０年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年、約１１年または約１０.５年；約１０.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年、約１１.５年または約１１年；約１１年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年、約１２年または約１１.５年；約１１.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年、約１２.５年または約１２年；約１２年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年、約１３年または約１２.５年；約１２.５年〜約１５年、約１４.５年、約１４年、約１３.５年または約１３年；約１３年〜約１５年、約１４.５年、約１４年または約１３.５年；約１３.５年〜約１５年、約１４.５年または約１４年；約１４年〜約１５年または約１４.５年；または約１４.５年〜約１５年にわたり生じる。
【０２５１】
癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法
またここに提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか)を同定し、(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性(例えば、ここに記載するＴ細胞の抗腫瘍活性の何れか)の改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む、培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れか)に培養し(例えば、ここに記載する培養方法、培養培地、培養条件または培養時間の何れかを使用)、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む、癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れかおよび／またはここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れかを、これらの方法において使用できる。Ｔ細胞を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与して戻してよい。Ｔ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に静脈内投与、動脈内投与または腫瘍内注射により投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２５２】
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する該哺乳動物の何れか)を同定し、そして(ｂ)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を、該同定した哺乳動物に投与することを含む、癌を有する哺乳動物の予後を改善する方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子の何れかを、これらの方法において使用できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ＮＬＲＰ３活性化因子についてここに記載する投与経路の何れかを使用して、投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２５３】
これらの方法の何れかのいくつかの例において、該哺乳動物は、癌を有するとして診断される。これらの方法のある実施態様は、さらに、哺乳動物を、癌を有するとして診断することを含む(例えば、ここに記載する方法例の何れかを使用)。
【０２５４】
これらの方法の何れにおいても、該哺乳動物の予後は、処置を受けていない哺乳動物または同じまたは類似する癌を有し、処置を受けていないかまたは異なる処置を受けている哺乳動物または哺乳動物集団の予後と比較して、改善される。これらの方法の何れかのいくつかの例において、癌を有する哺乳動物の改善された予後は、哺乳動物における生存期間が延長する可能性の増加、転移を発症する可能性の減少、１以上のさらなる転移の発症の可能性の減少、少なくとも一つの固形腫瘍が経時的にサイズが減少する可能性の増加および癌の寛解期間が延長する可能性の増加の１以上を含み得る(例えば、同じまたは類似する癌を有し、処置を受けていないかまたは異なる処置を受けている哺乳動物または哺乳動物集団と比較して)。
【０２５５】
癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する該哺乳動物の何れか)を同定し、(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れか)に培養し(例えば、ここに記載する培養方法、培養培地、培養条件および／または培養時間の何れかを使用)、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性(例えば、ここに記載するＴ細胞の抗腫瘍活性の何れか)の改善をもたらし、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む、癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れかおよび／またはここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れかを、これらの方法において使用できる。Ｔ細胞を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与して戻してよい。Ｔ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に静脈内投与、動脈内投与または腫瘍内注射により投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２５６】
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する該哺乳動物の何れか)を同定し、そして(ｂ)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を、該同定した哺乳動物に投与することを含む、癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクを低減する方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子の何れかを、これらの方法において使用できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ＮＬＲＰ３活性化因子についてここに記載する投与経路の何れかを使用して、投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、該哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２５７】
これらの方法の何れかのいくつかの例において、該哺乳動物は、癌を有するとして診断される。これらの方法のある実施態様は、さらに、哺乳動物を、癌を有するとして診断することを含む(例えば、ここに記載する方法例の何れかを使用)。
【０２５８】
癌を有する哺乳動物における転移またはさらなる転移を発症するリスクの減少を、処置前の哺乳動物または処置を受けていないまたは異なる処置を受けている、類似のまたは同じ癌を有する哺乳動物または哺乳動物集団の転移またはさらなる転移を発症するリスクと比較し得る。転移またはさらなる転移を発症するリスクの減少は、処置前の哺乳動物または処置を受けていないまたは異なる処置を受けている、類似のまたは同じ癌を有する哺乳動物または哺乳動物集団における転移またはさらなる転移を発症するリスクと比較して、約１％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％または約５％；約５％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％または約１０％；約１０％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％または約１５％；約１５％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％または約２０％；約２０％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％または約２５％；約２５％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％または約３０％；約３０％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％または約３５％；約３５％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％または約４０％；約４０％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％または約４５％；約４５％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％または約５０％；約５０％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％または約５５％；約５５％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％または約６０％；約６０％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％または約６５％；約６５％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％または約７０％；約７０％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％または約７５％；約７５％〜約９９％、約９５％、約９０％、約８５％または約８０％；約８０％〜約９９％、約９５％、約９０％または約８５％；約８５％〜約９９％、約９５％または約９０％；約９０％〜約９９％または約９０％；または約９５％〜約９９％であり得る。
【０２５９】
いくつかの例において、転移またはさらなる転移を発症するリスクは、約２週、１ヶ月、１.５ヶ月、２ヶ月、２.５ヶ月、３ヶ月、３.５ヶ月、４ヶ月、４.５ヶ月、５ヶ月、５.５ヶ月、６ヶ月、６.５ヶ月、７ヶ月、７.５ヶ月、８ヶ月、８.５ヶ月、９ヶ月、９.５ヶ月、１０ヶ月、１０.５ヶ月、１１ヶ月、１１.５ヶ月、１２ヶ月、１.５年、２年、２.５年、３年、３.５年、４年、４.５年、５年、５.５年、６年、６.５年、７年、７.５年、８年、８.５年、９年、９.５年または１０年にわたる。
【０２６０】
抗腫瘍リンホカインおよび／または抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する該哺乳動物の何れか)を同定し、(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)を採取し、(ｃ)該Ｔ細胞をアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性の改善に十分量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れか)培養し(例えば、ここに記載する培養方法、培養培地、培養条件および／または培養時間の何れかを使用)、それによりＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし(例えば、ここに記載する抗腫瘍活性の何れか)、そして(ｄ)該Ｔ細胞を該哺乳動物に投与することを含む、癌を有する哺乳動物における、少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０)の抗腫瘍リンホカインおよび／または少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れかおよび／またはここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件の何れかを、これらの方法において使用できる。Ｔ細胞を、ここに記載する用量の何れかで、該哺乳動物に投与して戻してよい。Ｔ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。Ｔ細胞を、該哺乳動物に静脈内投与、動脈内投与または腫瘍内注射により投与できる。Ｔ細胞を、哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２６１】
また提供されるのは、(ａ)癌(例えば、ここに記載する癌の何れか)を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する該哺乳動物の何れか)を同定し、そして(ｂ)治療有効量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を、該同定した哺乳動物に投与することを含む、癌を有する哺乳動物における、少なくとも一つ(例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０)の抗腫瘍リンホカインおよび／または少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインのレベルを増加させる方法である。ＮＬＲＰ３活性化因子の何れかを、これらの方法において使用できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ここに記載する用量の何れかで、哺乳動物に投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、ＮＬＲＰ３活性化因子についてここに記載する投与経路の何れかを使用して、投与できる。ＮＬＲＰ３活性化因子を、哺乳動物に、ここに記載する投与頻度の何れかで投与できる。
【０２６２】
これらの方法の何れかのいくつかの例において、該哺乳動物は、癌を有するとして診断される。これらの方法のある実施態様は、さらに、哺乳動物を、癌を有するとして診断することを含む(例えば、ここに記載する方法例の何れかを使用)。
【０２６３】
ある実施態様において、少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインは、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８およびＩＬ−２１からなる群から選択される。哺乳動物からのサンプルにおける抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルは、１以上の抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインに特異的に結合する抗体(例えば、抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインに特異的に結合する１以上の市販の抗体)を使用して検出できる。いくつかの例において、少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルの増加は、処置前の哺乳動物における少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルと比較する。いくつかの例において、少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルの増加は、同じまたは類似する癌を有するが、処置を受けていないまたは異なる処置を受けている哺乳動物または哺乳動物集団における少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルと比較する。
【０２６４】
いくつかの例において、少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルの増加は、処置前の哺乳動物における少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルまたは同じまたは類似する癌を有するが、処置を受けていないまたは異なる処置を受けている哺乳動物または哺乳動物集団における少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルと比較して、約１％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％、約８０％、約７０％、約６０％、約５０％、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％または約５％；約５％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％、約８０％、約７０％、約６０％、約５０％、約４０％、約３０％、約２０％または約１０％；約１０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％、約８０％、約７０％、約６０％、約５０％、約４０％、約３０％または約２０％；約２０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％、約８０％、約７０％、約６０％、約５０％、約４０％または約３０％；約３０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％、約８０％、約７０％、約６０％、約５０％または約４０％；約４０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％、約８０％、約７０％、約６０％または約５０％；約５０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％、約８０％、約７０％または約６０％；約６０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％、約８０％または約７０％；約７０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％、約９０％または約８０％；約８０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％、約１００％または約９０％；約９０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％、約１２０％または約１００％；約１００％〜約２００％、約１８０％、約１６０％、約１４０％または約１２０％；約１２０％〜約２００％、約１８０％、約１６０％または約１４０％；約１４０％〜約２００％、約１８０％または約１６０％；約１６０％〜約２００％または約１８０％；または約１８０％〜約２００％である。
【０２６５】
少なくとも一つの抗腫瘍サイトカインおよび／またはリンホカインのレベルの増加は、処置の約１日〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月、約１２ヶ月、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月、約２ヶ月、約１ヶ月、約２週または約１週間；約１週間〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月、約１２ヶ月、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月、約２ヶ月、約１ヶ月または約２週；約２週間〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月、約１２ヶ月、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月、約２ヶ月または約１ヶ月；約１ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月、約１２ヶ月、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月、約４ヶ月または約２ヶ月；約２ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月、約１２ヶ月、約１０ヶ月、約８ヶ月、約６ヶ月または約４ヶ月；約４ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月、約１２ヶ月、約１０ヶ月、約８ヶ月、ｔｏ  約６ヶ月；約６ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月、約１２ヶ月、約１０ヶ月または約８ヶ月；約８ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月、約１２ヶ月または約１０ヶ月；約１０ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月、約１４ヶ月または約１２ヶ月；約１２ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月、約１６ヶ月または約１４ヶ月；約１４ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月、約１８ヶ月または約１６ヶ月；約１６ヶ月〜約２年、約２２ヶ月、約２０ヶ月または約１８ヶ月；約１８ヶ月〜約２年、約２２ヶ月または約２０ヶ月；約２０ヶ月〜約２年または約２２ヶ月；または約２２ヶ月〜約２４ヶ月後に決定できる。
【０２６６】
組み換えＴ細胞を哺乳動物に投与後、該哺乳動物において組み換えＴ細胞の集団を維持する方法
また提供されるのは、(ａ)癌を有する哺乳動物(例えば、ここに記載する癌の何れか)を同定し、(ｂ)該同定した哺乳動物からＴ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)を採取し、(ｃ)組み換え核酸を該Ｔ細胞に導入して、組み換えＴ細胞(例えば、異種ＴＣＲまたはＣＡＲ  Ｔ細胞を含むＴ細胞)を産生し、(ｄ)該組み換えＴ細胞を、アナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な(例えば、ここに記載するアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分である培養培地の何れか)および／またはＴ細胞の抗腫瘍活性(例えば、ここに記載するＴ細胞の抗腫瘍活性の何れかの１以上)改善に十分な量のＮＬＲＰ３活性化因子(例えば、ここに記載するＮＬＲＰ３活性化因子の何れか)を含む培養培地中および／またはアナプレロティック反応の誘発および／または増大に十分な条件下に培養し、それにより組み換えＴ細胞の抗腫瘍活性の改善をもたらし、そして(ｄ)該組み換えＴ細胞を該哺乳動物に投与することを含み、ここで、組み換えＴ細胞の集団は、哺乳動物に組み換えＴ細胞投与後、少なくとも１ヶ月哺乳動物において持続する、哺乳動物(例えば、ここに記載する哺乳動物の何れか、例えば、ヒト)に組み換えＴ細胞投与後、少なくとも１ヶ月該哺乳動物において組み換えＴ細胞の集団を維持する方法である。組み換えＴ細胞を、ここに記載する培養方法の何れかを使用して培養できる。ここに記載する組み換えＴ細胞の用量の何れも、これらの方法において該哺乳動物に投与し得る。組み換えＴ細胞は、例えば、動脈内投与、静脈内投与または腫瘍内注射により投与され得る。組み換えＴ細胞を、週１回、週２回、週３回、２週に１回、３週に１回、月に１回、月に２回、２ヶ月に１回、３ヶ月に１回、４ヶ月に１回、５ヶ月に１回、６ヶ月に１回、７ヶ月に１回、８ヶ月に１回、９ヶ月に１回、１０ヶ月に１回、１１ヶ月に１回または１２ヶ月に１回投与し得る。組み換えＴ細胞を、ここに記載する製剤の何れかで投与できる。
【０２６７】
該哺乳動物は、癌を有するとして診断され得る。ある実施態様は、さらに、哺乳動物を癌を有するとして診断する能動的ステップを含む。ある実施態様において、該哺乳動物は既に処置剤を投与されており、該処置剤は有効ではなかった。
【０２６８】
いくつかの例において、本方法は、哺乳動物に組み換えＴ細胞投与後、哺乳動物において、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１年、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１６ヶ月、少なくとも１７ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも１９ヶ月、少なくとも２０ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２２ヶ月、少なくとも２３ヶ月、少なくとも２年、少なくとも２５ヶ月、少なくとも２６ヶ月、少なくとも２７ヶ月、少なくとも２８ヶ月、少なくとも２９ヶ月、少なくとも３０ヶ月、少なくとも３１ヶ月、少なくとも３２ヶ月、少なくとも３３ヶ月、少なくとも３４ヶ月、少なくとも３５ヶ月、少なくとも３年、少なくとも３７ヶ月、少なくとも３８ヶ月、少なくとも３９ヶ月、少なくとも４０ヶ月、少なくとも４１ヶ月、少なくとも４２ヶ月、少なくとも４３ヶ月、少なくとも４４ヶ月、少なくとも４５ヶ月、少なくとも４６ヶ月、少なくとも４７ヶ月、少なくとも４年、少なくとも４９ヶ月、少なくとも５０ヶ月、少なくとも５１ヶ月、少なくとも５２ヶ月、少なくとも５３ヶ月、少なくとも５４ヶ月、少なくとも５５ヶ月、少なくとも５６ヶ月、少なくとも５７ヶ月、少なくとも５８ヶ月、少なくとも５９ヶ月、少なくとも５年、少なくとも６１ヶ月、少なくとも６２ヶ月、少なくとも６３ヶ月、少なくとも６４ヶ月、少なくとも６５ヶ月、少なくとも６６ヶ月、少なくとも６７ヶ月、少なくとも６８ヶ月、少なくとも６９ヶ月、少なくとも７０ヶ月、少なくとも７１ヶ月または少なくとも６年の維持されている組み換えＴ細胞の集団をもたらす。
【０２６９】
いくつかの例において、方法は、哺乳動物における組み換えＴ細胞の集団の約１ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月、約１０ヶ月、約９ヶ月、約８ヶ月、約７ヶ月、約６ヶ月、約５ヶ月、約４ヶ月、約３ヶ月または約２ヶ月；約２ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月、約１０ヶ月、約９ヶ月、約８ヶ月、約７ヶ月、約６ヶ月、約５ヶ月、約４ヶ月または約３ヶ月；約３ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月、約１０ヶ月、約９ヶ月、約８ヶ月、約７ヶ月、約６ヶ月、約５ヶ月または約４ヶ月；約４ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月、約１０ヶ月、約９ヶ月、約８ヶ月、約７ヶ月、約６ヶ月または約５ヶ月；約５ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月、約１０ヶ月、約９ヶ月、約８ヶ月、約７ヶ月または約６ヶ月；約６ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月、約１０ヶ月、約９ヶ月、約８ヶ月または約７ヶ月；約７ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月、約１０ヶ月、約９ヶ月または約８ヶ月；約８ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月、約１０ヶ月または約９ヶ月；約９ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年���約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月、約１１ヶ月または約１０ヶ月；約１０ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月、約１２ヶ月または約１１ヶ月；約１１ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月、約１３ヶ月または約１２ヶ月；約１２ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月、約１４ヶ月または約１３ヶ月；約１３ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月、約１５ヶ月または約１４ヶ月；約１４ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月、約１６ヶ月または約１５ヶ月；約１５ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月、約１７ヶ月または約１６ヶ月；約１６ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月、約１８ヶ月または約１７ヶ月；約１７ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月、約１９ヶ月または約１８ヶ月；約１８ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月、約２０ヶ月または約１９ヶ月；約１９ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月、約２１ヶ月または約２０ヶ月；約２０ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月、約２２ヶ月または約２１ヶ月；約２１ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年、約２３ヶ月または約２２ヶ月；約２２ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年、約２年または約２３ヶ月；約２３ヶ月〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年、約２.５年または約２年；約２年〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年、約３年または約２.５年；約２.５年〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年、約３.５年または約３年；約３年〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年、約４年または約３.５年；約３.５年〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年、約４.５年または約４年；約４年〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年、約５年または約４.５年；約４.５年〜約７年、約６.５年、約６年、約５.５年または約５年；約５年〜約７年、約６.５年、約６年または約５.５年；約５.５年〜約７年、約６.５年または約６年；約６年〜約７年または約６.５年；または約６.５年〜約７年の維持をもたらす。
【０２７０】
少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性の増大のための候補薬物を同定する方法
また提供されるのは、(ａ)ＮＬＲＰ３タンパク質を発現する哺乳動物細胞(例えば、上皮細胞、内皮細胞、ＨＥＫ細胞、ＣＨＯ細胞またはここに記載する自然免疫細胞の何れかまたはここに記載するＴ細胞の何れか)を提供し、(ｂ)該哺乳動物細胞と薬物(例えば、５kDa未満の質量を有する分子、タンパク質、脂質、核酸、糖類またはこれらの任意の組み合わせ)を接触させ、(ｃ)ステップ(ｂ)における該細胞のＮＬＲＰ３活性を検出し、そして(ｄ)ＮＬＲＰ３活性の対照レベルまたはＮＬＲＰ３の対照レベルと比較して、細胞におけるＮＬＲＰ３活性またはＮＬＲＰ３(例えば、ＮＬＲＰ３タンパク質またはＮＬＲＰ３タンパク質をコードする核酸)のレベルを増加させる薬物を、少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞の抵抗性を増大させる候補薬物として同定することを含む、Ｔ細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)の少なくとも一つの免疫抑制性サイトカイン(例えば、ここに記載する免疫抑制性サイトカインの何れか)に対する抵抗性を増大させるための候補薬物を同定する方法(例えば、インビトロ方法)である。ＮＬＲＰ３活性の対照レベルは、該薬物非存在下の該細胞(または類似細胞)におけるＮＬＲＰ３のレベル活性である。ＮＬＲＰ３の対照レベルは、該薬物非存在下の該細胞(または類似細胞)におけるＮＬＲＰ３タンパク質またはＮＬＲＰ３タンパク質をコードする核酸のレベルである。ＮＬＲＰ３の活性を検出する、ＮＬＲＰ３タンパク質レベルを検出するおよびＮＬＲＰ３タンパク質をコードする核酸のレベルを検出する方法の例はここに記載される。ある実施態様において、ＮＬＲＰ３活性はＮＬＲＰ３下流シグナル伝達活性である(例えば、ここに記載する種々のＮＬＲＰ３下流シグナル伝達事象)。
【０２７１】
ある実施態様は、さらに(ｅ)哺乳動物細胞(例えば、ここに記載するＴ細胞の何れか)と少なくとも一つの免疫抑制性サイトカイン(例えば、ここに記載する免疫抑制性サイトカインの何れか)および候補薬物を接触させ、そして(ｆ)該候補薬物がＴ細胞における少なくとも一つの免疫抑制性サイトカインの免疫抑制性活性を遮断する能力を決定する
ことを含む。
【実施例】
【０２７２】
実施例１. ＮＬＲＰ３活性化因子は、免疫抑制性サイトカインに対するＴ細胞抵抗性を増加させる
目的
本実験を、例示するＮＬＲＰ３活性化因子、ＩＬ−１βが、例示する免疫抑制性サイトカイン、ＴＧＦ−βに対するＴ細胞抵抗性を増大できるかを見るために実施した。
【０２７３】
モデル
ＯＶＡアルブミン(ＯＡ)発現胸腺腫細胞株、ＥＧ７を使用して、マウスに脇腹腫瘍を形成した。トランスジェニックＯＴ−１マウス(そのＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＯＡにおける免疫優性ペプチドを認識)からの脾臓細胞を、種々のサイトカインを用いてインビトロで活性化し、大腫瘍を有するマウスに養子移入した。これは、インビトロ分化細胞の抗癌活性を評価するための十分に確立されたモデルである。
【０２７４】
材料および方法
細胞単離および培養
ＥＧ７は、ＯＶＡ  ｃＤＮＡ構築物でトランスフェクトした親マウス胸腺腫細胞株(ＥＬ４)の誘導物である。ＥＧ７細胞を１００mg／ml  Ｇ４１８、１０％ウシ胎児血清、２mM  グルタミン、１００Ｕ／ml  ペニシリン、１００μg／ml  ストレプトマイシン、１００mM  ピルビン酸ナトリウムおよび２.５％β−メルカプトエタノール添加ＲＰＭＩ培地(Ｇｉｂｃｏ)からなる培地で培養し、維持した。
【０２７５】
インビトロＴ細胞刺激および単離
ＯＴ−１マウスを麻酔し、脾臓を採取し、７０μmフィルターを１０％ＦＢＳ含有ＰＢＳを用いて通した。赤血球を、溶解緩衝液(BD Pharmingen)で１５分、室温で除去した。洗浄後、細胞を計数し、１×１０６細胞／mLの最終濃度で組織培養に入れた。ＯＴ−１脾臓細胞を、０日目にSIINFEKLペプチド(１μg／mL)(Bachem, King of Prussia, PA)含有培地で活性化させた。細胞をＴＧＦ−β(１０ng／mL)(R&D Systems, Minneapolis, MN)またはＴＧＦ−β(１０ng／mL)とＩＬ−１β(１０ng／mL)で処理するかまたは処理しなかった。５日後、ＣＤ８＋細胞を、MylteniからのＣＤ８単離キットを使用して、磁気ビーズを用いる負の選択により単離し、ＰＢＳに再懸濁し、養子移入およびＴ細胞試験に使用した。
【０２７６】
マウス系統および飼育
９週齢Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雌マウスをJackson Laboratoryから購入し、華氏６８〜７４°で、日周１２時間明サイクルで、特定の病原体フリー施設において、換気ケージ中で飼育した。餌および水は自由に摂取させた。動物を、実験開始前７日、環境細菌叢に順化させた。
【０２７７】
動物腫瘍モデル
腫瘍を、１００μL  ＰＢＳに懸濁した１×１０６細胞の脇腹皮下注射により、確立させた。腫瘍を週３回測定し、体積を式３.１４×[最大直径×(垂直直径)２]／６を使用して、計算した。腫瘍が触知可能となった７日後、処置剤を投与し、マウスを腫瘍成長について追跡した。推定腫瘍体積が２５００mm３を超えたときまたはマウスが苦悶の兆候を示したとき、マウスを屠殺した。
【０２７８】
養子Ｔ細胞移入
インビトロでＴＧＦ−β存在下またはＴＧＦ−βとＩＬ−１β存在下活性化させた、脾臓細胞から単離されたＣＤ８＋細胞を、ＰＢＳに再懸濁した。各群について(無サイトカイン、ＴＧＦ−β、ＴＧＦ−βおよびＩＬ−１β)、２００μLのＰＢＳ(媒体)中５×１０６細胞のみを腹腔内注射により養子移入した。対照群のマウスに媒体のみを注射して、処置非存在下の腫瘍成長を推定した。
【０２７９】
治療効果の計算
組み合わせ処置群の経時的な平均腫瘍体積をプロットし、媒体処置対照と比較した。各実験は、１０マウス／群であった。統計的比較のために、２元配置Ａｎｏｖａとボンフェローニ補正をGaphPrismソフトウェアで計算した。
【０２８０】
結論
これらのデータは、ＮＬＲＰ３活性化因子を、Ｔ細胞の免疫抑制性サイトカインに対する抵抗性の増大に使用でき、それにより、Ｔ細胞の抗腫瘍活性の増大が生じることを示す。
【０２８１】
他の実施態様
本発明は、その詳細な記載と共に記載しているが、上の記載は説明を意図するものであり、添付する特許請求の範囲により規定される本発明の範囲を限定するものではないことは理解されるべきである。他の態様、利点および修飾は、添付する特許請求の範囲の範囲内である。
【図１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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