(57)【要約】  膀胱痙攣を低減するための方法および組成物が開示される。方法は、それを必要とする対象に、アセトアミノフェンの有効量および少なくとも１つの非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）の有効量を含む医薬組成物を投与することを含む。他の実施形態においては、膀胱痙攣を低減するための方法であって、それを必要とする対象に、少なくとも１つのプロスタグランジン（ＰＧ）経路阻害剤の有効量を含む医薬組成物を投与することを含む方法であって、少なくとも１つのＰＧ経路阻害剤がアセトアミノフェンまたはＮＳＡＩＤでない方法。【選択図】図１
2018526442.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
排尿の頻度を低減するための医薬組成物の製造方法であって、
前記方法は：
即時放出を目的として配合された第１の有効成分及び延長放出を目的として配合された第２の有効成分を有する第１の混合物を形成するステップ；
前記第１の混合物を遅延放出コーティングでコーティングして、１つ以上の鎮痛剤を含む第１の有効成分を含む第１の混合物を形成するステップ；
前記第１の混合物を第１の遅延放出コーティングでコーティングして、第１のコンポーネントを形成するステップであって、前記第１の遅延放出コーティングは、前記第１の混合物を、経口投与後１〜４時間の遅延時間で放出する、ステップ；
１つ以上の鎮痛剤を含む第２の有効成分を含む第２の混合物を形成するステップ；
前記第２の混合物を第２の遅延放出コーティングでコーティングして、第２のコンポーネントを形成するステップであって、前記第２の遅延放出コーティングは、前記第２の混合物を、経口投与後４〜６時間の遅延時間で放出する、ステップ；および
前記第１のコンポーネントと前記第２のコンポーネントとを組み合わせて、第３の混合物を形成するステップ
を含む、方法。
【請求項２】
前記第１の有効成分及び前記第２の有効成分中の前記１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第１の遅延放出コーティングは腸溶性コーティングである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記第１の有効成分、又は前記第２の有効成分、又は前記第１の有効成分及び前記第２の有効成分の両方は、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記第２の遅延放出コーティングは、非水溶性ポリマー（ＷＩＰ）と腸溶性ポリマー（ＥＰ）との、ＷＩＰ：ＥＰ比４：１〜１：２の混合物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記第２の遅延放出コーティングは複数のコーティング層を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記第２の遅延放出コーティングは、膨潤層、および外側の非可溶性であるものの半透過性であるポリマーコーティングを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記膨潤層は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリル酸コポリマー、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、メタクリル酸コポリマー、フタル酸酢酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、コハク酸酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸酢酸ポリビニル、シェラック、およびエチルセルロースからなる群から選択される材料を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第２の遅延放出コーティングは、一端を非可溶性であるものの半透過性かつ膨潤性であるヒドロゲルプラグで閉鎖された非水溶性カプセル本体を含み、前記プラグは、ポリメタクリレート類、受食性圧縮ポリマー類、凝固溶融ポリマー、および酵素で制御される受食性ポリマーからなる群から選択された材料を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記第３の混合物を錠剤形態に圧縮するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記第３の混合物は、前記第１のコンポーネントおよび前記第２のコンポーネントを第３のコンポーネントと組み合わせることによって形成され、
前記第３のコンポーネントは、１つ以上の鎮痛剤を含む第３の有効成分を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の方法を用いて製造された、医薬組成物。
【請求項１３】
排尿の頻度を低減するための医薬組成物の製造方法であって、
前記方法は：
１つ以上の鎮痛剤を含む第１の有効成分を含む第１の混合物を形成するステップ；
前記第１の混合物を第１の遅延放出コーティングでコーティングして、コア構造を形成するステップであって、前記第１の遅延放出コーティングは、前記第１の混合物を、体液との直接接触後１〜４時間の遅延時間で放出する、ステップ；
前記コア構造を第２の混合物でコーティングして、コーティング済みコア構造を形成するステップであって、前記第２の混合物は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される１つ以上の鎮痛剤を含む第２の有効成分を含む、ステップ；ならびに
前記コーティング済みコア構造を第２の遅延放出コーティングでコーティングして、二重コーティング済みコア構造を形成するステップであって、前記第２の遅延放出コーティングは、前記第２の混合物を、経口投与後１〜４時間の遅延時間で放出する、ステップ
を含む、方法。
【請求項１４】
前記第２の遅延放出コーティングは腸溶性コーティングである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記第１の有効成分及び前記第２の有効成分中の前記１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記第１の有効成分、又は前記第２の有効成分、又は前記第１の有効成分及び前記第２の有効成分の両方は、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤をさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
前記二重コーティング済みコア構造を第３のコーティングでコーティングするステップであって、前記第３のコーティングは、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される１つ以上の鎮痛剤を含む第３の有効成分を含む、ステップをさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
前記第３の有効成分は、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤をさらに含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１３に記載の方法を用いて製造された、医薬組成物。
【請求項２０】
アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される１つ以上の鎮痛剤を含む、第１のコンポーネントであって、前記第１のコンポーネントは、１〜４時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される、第１のコンポーネント；並びに
アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される１つ以上の鎮痛剤を含む、第２のコンポーネントであって、前記第２のコンポーネントは、４〜６時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される、第２のコンポーネント
を含む、医薬組成物。
【請求項２１】
前記医薬組成物は、腸溶性コーティングでコーティングされる、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記第１のコンポーネントおよび／または前記第２のコンポーネントは、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤をさらに含む、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記第２のコンポーネントは、非水溶性ポリマー（ＷＩＰ）と腸溶性ポリマー（ＥＰ）との、ＷＩＰ：ＥＰ比４：１〜１：２の混合物でコーティングされる、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記第２のコンポーネントは、複数のコーティング層でコーティングされる、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記第２のコンポーネントは、膨潤層、および外側の非可溶性であるものの半透過性であるポリマーコーティングで被覆される、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記膨潤層は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリル酸コポリマー、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、メタクリル酸コポリマー、フタル酸酢酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、コハク酸酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸酢酸ポリビニル、シェラック、およびエチルセルロースからなる群から選択される材料を含む、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記第２のコンポーネント製剤は、一端を非可溶性であるものの半透過性かつ膨潤性であるヒドロゲルプラグで閉鎖された非水溶性カプセル本体を含み、前記プラグは、ポリメタクリレート類、受食性圧縮ポリマー類、凝固溶融ポリマー、および酵素で制御される受食性ポリマーからなる群から選択された材料を含む、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
５〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンを含む、第１のコンポーネントであって、前記第１のコンポーネントは即時放出を目的として配合される、第１のコンポーネント；並びに
アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンから選択される１つ以上の鎮痛剤を含む、第２のコンポーネントであって、前記第２のコンポーネントは、１〜４時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される、第２のコンポーネント；並びに
アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンから選択される１つ以上の鎮痛剤を含む、第３のコンポーネントであって、前記第３のコンポーネントは、４〜６時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される、第３のコンポーネント
を含む、医薬組成物。
【請求項２９】
前記第２のコンポーネントは、腸溶性コーティングでコーティングされる、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記第１のコンポーネントおよび／または前記第２のコンポーネントおよび／または前記第３のコンポーネントは、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤をさらに含む、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記第２のコンポーネントは、腸溶性コーティングでコーティングされる、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記第２のコンポーネントまたは前記第３のコンポーネントは、非水溶性ポリマー（ＷＩＰ）と腸溶性ポリマー（ＥＰ）との、ＷＩＰ：ＥＰ比４：１〜１：２でコーティングされる、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記第３のコンポーネントは、複数のコーティング層でコーティングされる、請求項２８に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１５年９月１日出願の米国特許出願第１４／８４２，５３９号からの優先権を主張するものである。上記米国特許出願はその全体が参照により本出願に援用される。
【０００２】
本発明は一般に、筋肉の収縮を阻害するための方法および組成物に関し、また特に、膀胱の平滑筋の収縮を阻害するための方法および組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
排尿筋は、らせん状、長軸方向および輪状の束に配列された平滑筋線維よりなる膀胱壁の層である。膀胱が伸展すると、これが副交感神経系にシグナルを送って排尿筋を収縮させる。これにより膀胱は尿道を経て尿を排出するよう促される。
【０００４】
尿が膀胱から出るためには、自律的に制御される内括約筋および随意的に制御される外括約筋が開かなければならない。これらの筋肉の問題は失禁につながることがある。尿の量が膀胱の絶対容量の１００％に達すれば、随意括約筋が不随意になると共に、直ちに尿が排泄されるであろう。
【０００５】
ヒト成人の膀胱は通常約３００〜３５０ｍＬの尿（実働容量）を保持するものの、満量の成人膀胱は、個人によって異なるが、約１０００ｍＬ（絶対容量）まで保持できる。尿が蓄積するにつれ、膀胱壁のしわ（襞）によって生成される隆起が平坦化し、また膀胱壁が伸展するにつれて薄くなるので、膀胱は内部圧の著しい上昇を伴うことなくより大量の尿を蓄積できる。
【０００６】
ほとんどの個体において、排尿への欲求は、膀胱内の尿の体積が約２００ｍｌに到達した時に始まるのが普通である。この段階では、必要であれば、対象は排尿への衝動に容易に耐えることができる。膀胱の充填が続くと、排尿への欲求は強くなり、無視することが困難となる。最終的には、膀胱は、排尿への衝動が圧倒的なものとなる点まで充填され、対象はこれを無視できなくなる。一部の個体では、この排尿への欲求は、膀胱がその作動容積に対して１００％未満しか充填されていない時に始まる。このような排尿への欲求の増大によって、連続した十分な休息時間に睡眠を取る能力を含む、正常な活動が妨害される場合がある。一部の例では、排尿への欲求の増大は、男性の良性前立腺肥大または前立腺癌、または女性の妊娠などの医学的状態に随伴することもある。しかしながら、排尿への欲求の増大は、別の医学的状態によって影響を受けていない男性および女性両方の個体においても発生する。
【０００７】
したがって、膀胱がその作動容積に対して１００％未満しか充填されていない時に排尿への欲求に襲われる男性および女性対象の治療を目的とした組成物および方法に対するニーズが存在する。上記組成物および方法は、膀胱内の尿の体積が膀胱の作動容積の約１００％を超えた時に上記対象の排尿への欲求が始まるようにするための、筋収縮の阻害のために必要とされる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本願の１つの態様は、排尿の頻度を低減するための延長放出医薬組成物の製造方法に関する。いくつかの実施形態では、本方法は：即時放出を目的として配合された第１の有効成分及び延長放出を目的として配合された第２の有効成分を有する第１の混合物を形成するステップ；上記第１の混合物を遅延放出コーティングでコーティングして、１つ以上の鎮痛剤を含む第１の有効成分を含む第１の混合物を形成するステップ；上記第１の混合物を第１の遅延放出コーティングでコーティングして、第１のコンポーネントを形成するステップであって、上記第１の遅延放出コーティングは、上記第１の混合物を、経口投与後１〜４時間の遅延時間で放出する、ステップ；１つ以上の鎮痛剤を含む第２の有効成分を含む第２の混合物を形成するステップ；上記第２の混合物を第２の遅延放出コーティングでコーティングして、第２のコンポーネントを形成するステップであって、上記第２の遅延放出コーティングは、上記第２の混合物を、経口投与後４〜６時間の遅延時間で放出する、ステップ；および上記第１のコンポーネントと上記第２のコンポーネントとを組み合わせて、第３の混合物を形成するステップを含む。
【０００９】
別の実施形態においては、本方法は：１つ以上の鎮痛剤を含む第１の有効成分を含む第１の混合物を形成するステップ；上記第１の遅延放出コーティングが上記第１の混合物を、体液との直接接触後１〜４時間の遅延時間で放出するステップ；上記コア構造を第２の混合物でコーティングして、コーティング済みコア構造を形成するステップであって、上記第２の混合物は、１つ以上の鎮痛剤を含む第２の有効成分を含む、ステップ；および上記コーティング済みコア構造を第２の遅延放出コーティングでコーティングして、二重コーティング済みコア構造を形成するステップであって、上記第２の遅延放出コーティングは、上記第２の混合物を、経口投与後１〜４時間の遅延時間で放出する、ステップを含む。
【００１０】
本願の別の態様は、本願の方法を用いて製造された医薬組成物に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ＬＰＳの非存在下（図１Ａ）または存在下（図１Ｂ）で、鎮痛剤がＲａｗ２６４マクロファージ細胞による共刺激分子の発現を調節することを示す。細胞は単独の、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ  ＬＰＳ（０．０５μｇ／ｍＬ）を伴う鎮痛剤の存在下で２４時間培養された。結果はＣＤ４０＋ＣＤ８０＋細胞の平均相対％である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下の発明を実施するための形態は、任意の当業者が本発明を作製および使用することを可能とするために提示される。説明を目的として、本発明の完全な理解を提供するために具体的な用語が示される。しかし、これらの具体的な詳細は本発明を実践するために必要とされないことが、当業者に対して明らかとなる。具体的な適用の記載は、典型的な実施例としてのみ提供される。本発明は、提示する実施形態に限定されることではなく、本明細書に開示される原理および特徴と一致する可能な限り最も幅広い範囲で一致することを意図する。
【００１３】
本明細書で用いる用語「有効量」は、選択された結果を達成するために必要な量を意味する。
【００１４】
本明細書で用いる用語「鎮痛剤」は、疼痛を緩和するために用いられる物質、化合物または薬剤を意味し、抗炎症化合物を含む。典型的な鎮痛剤および／または抗炎症剤、化合物または薬剤は、以下の物質を含むがこれに限定されない：非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、サリチレート類、アスピリン、サリチル酸、サリチル酸メチル、ジフルニサル、サルサレート、オルサラジン、スルファサラジン、パラアミノフェノール誘導体、アセトアニリド、アセトアミノフェン、フェナセチン、フェナメート類、メフェナム酸、メクロフェナメート、メクロフェナム酸ナトリウム、ヘテロアリール酢酸誘導体、トルメチン、ケトロラク、ジクロフェナク、プロピオン酸誘導体、イブプロフェン、ナプロキセンナトリウム、ナプロキセン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、オキサプロジン；エノール酸、オキシカム誘導体、ピロキシカム、メロキシカム、テノキシカム、アンピロキシカム、ドロキシカム、ピボキシカム、ピラゾロン誘導体、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アンチピリン、アミノピリン、ジピロン、コキシブ類、セレコキシブ、ロフェコキシブ、ナブメトン、アパゾン、インドメタシン、スリンダク、エトドラク、イソブチルフェニルプロピオン酸、ルミラコキシブ、エトリコキシブ、パレコキシブ、バルデコキシブ、チラコキシブ、エトドラク、ダルブフェロン、デクスケトプロフェン、アセクロフェナク、リコフェロン、ブロムフェナク、プラノプロフェン、ロキソプロフェン、ピロキシカム、ニメスリド、シゾリリン、３−ホルミルアミノ−７−メチルスルホニルアミノ−６−フェノキシ−４Ｈ−１−ベンゾピラン−４−オン、メロキシカム、ロルノキシカム、ｄ−インドブフェン、モフェゾラク、アムトルメチン、プラノプロフェン、トルフェナム酸、フルルビプロフェン、スプロフェン、オキサプロジン、ザルトプロフェン、アルミノプロフェン、チアプロフェン酸、その医薬的塩、その水和物、およびその溶媒和物。
【００１５】
本明細書で用いる用語「コキシブ」および「ＣＯＸ阻害剤」は、ＣＯＸ２酵素の活性もしくは発現を阻害できる、または重篤な炎症応答の苦しみ（疼痛および膨潤を含む）を阻害もしくは低減できる、化合物の組成物を意味する。
【００１６】
膀胱は、尿の貯蔵および排出という２つの重要な機能を有する。尿の貯蔵は低圧で行われ、これは、充填段階の間は排尿筋が弛緩していることを暗示している。膀胱内容物の排出は、排尿筋の収縮と尿道の括約筋の弛緩との協調を必要とする。貯蔵機能の障害は、切迫、頻発および緊急性失禁といった下部尿路症状をもたらす場合があり、これらは過活動膀胱症候群の構成要素である。過活動膀胱症候群は、貯蔵段階中の膀胱の平滑筋（排尿筋）の不随意的収縮によるものであり得、これは一般的な、報告の少ない問題であり、その蔓延は最近になって評価されはじめたに過ぎない。
【００１７】
本願の１つの態様は、それを必要とする人物に、遅延放出製剤として配合された医薬組成物を投与することにより、排尿の頻度を低減するための方法に関する。上記医薬組成物は、１つ以上の鎮痛剤、および任意に、１つ以上の抗ムスカリン剤を含む。
【００１８】
本明細書で用いる用語「遅延放出」は、即座に崩壊して１つ以上の有効成分を体内に放出することのない薬物を意味する。一部の実施形態においては、用語「遅延放出」は、投与後の薬剤の放出に所定の遅延がある放出プロフィールを有する薬剤製剤を指して使用される。一部の実施形態においては、遅延放出製剤は、薬物が小腸に達する前にその放出を防止する、経口薬物に適用されるバリアである腸溶性コーティングを含む。腸溶性コーティングなどの遅延放出製剤は、アスピリンなどの胃に対して刺激作用を有する薬剤が胃の中で溶解することを防止する。そのようなコーティングは、酸不安定性薬剤を胃の酸性曝露から保護し、その替わりに分解しない塩基性ｐＨ環境（腸のｐＨ５．５以上）に送達して、その所望の作用を得るためにも用いられる。
【００１９】
用語「パルス型放出」は遅延放出の一種であり、本明細書においては、所定の遅延時間の直後に、短時間内での薬剤の迅速および一過性の放出を提供し、これにより薬剤投与後の薬剤の「パルス型」血漿プロフィールを生成する薬剤製剤に関して用いられる。製剤は、投与後に単パルス型放出または所定の時間間隔での多パルス型放出を提供するよう設計してよい。
【００２０】
ほとんどの腸溶性コーティングは、胃内に見られる高酸性ｐＨにおいて安定しているものの、より低酸性の（相対的により塩基性の）ｐＨにおいて迅速に崩壊する表面を呈することによって作用する。したって、腸溶性コーティング済み丸剤は酸性の胃液（ｐＨ約３）では溶解しないが、小腸内に存在するアルカリ性（ｐＨ７〜９）環境においては溶解する。腸溶性コーティング材料の例は、メチルアクリレート‐メタクリル酸コポリマー、酢酸コハク酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース（酢酸コハク酸ヒプロメロース）、酢酸フタル酸ポリビニル（ＰＶＡＰ）、メチルメタクリレート‐メタクリル酸コポリマー、アルギン酸ナトリウムおよびステアリン酸を含むがこれに限定されない。
【００２１】
一部の実施形態においては、医薬組成物は、遅延放出を提供するために設計された多様な薬剤製剤から経口投与される。遅延経口剤型は、たとえば、錠剤、カプセル剤、カプレット剤などを含み、また封入されることもされないこともある複数の顆粒剤、ビーズ剤、散剤またはペレット剤も含んでよい。錠剤およびカプセル剤は、固形医薬担体が採用される場合の最も簡便な経口剤型を代表する。
【００２２】
遅延放出製剤においては、緩徐な溶解および薬剤の腸内への随伴的放出を促進するために、１つ以上のバリアコーティングをペレット剤、錠剤、またはカプセル剤に適用できる。典型的には、バリアコーティングは、治療組成物または活性コアを収容するか、包囲するか、またはその周囲に層または膜を形成する１つ以上のポリマーを含有する。
【００２３】
一部の実施形態においては、活性剤は投与後の所定の時間に遅延放出を提供する製剤の形態で送達される。遅延は最長約１０分であるか、または約２０分、約３０分、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、約６時間またはそれ以上であってよい。
【００２４】
遅延放出組成物は、単一の投薬単位中に、投与される所与の活性剤の全投薬量の１００％を含んでよい。あるいは遅延放出組成物は、医薬製剤によって送達される１つ以上の活性剤の総投薬量の約３０〜９５％を提供できる複合放出プロフィール製剤のコンポーネントとして含まれていてよい。たとえば、即時放出コンポーネントは、医薬製剤によって送達される１つ以上の活性剤の総投薬量の約５〜７０％、または約５０％を提供してよい。代替的な実施形態においては、遅延放出コンポーネントは、製剤によって送達される１つ以上の活性剤の総投薬量の約３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０または９５％を提供する。
【００２５】
遅延放出製剤は典型的には、１つ以上の有効成分の放出を遅延させるバリアコーティングを含む。このバリアコーティングは、目的に応じて多様な異なる材料から構成できる。さらに製剤は、一時的に放出を促進するための複数のバリアコーティングを含んでよい。コーティングは、糖衣であるか、フィルムコーティング（例：ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリル酸エステルコポリマー、ポリエチレングリコール、および／またはポリビニルピロリドンを基とする）、またはメタクリル酸コポリマー、酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ酢酸フタル酸ビニル、シェラック、および／もしくはエチルセルロースによるコーティングであってよい。さらに製剤は、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンなどの時間遅延材料を追加的に含んでよい。
【００２６】
一部の実施形態においては、遅延放出製剤は、消化管の近位または遠位領域において活性剤の放出を促進する、１つ以上のポリマーを含む腸溶性コーティングを含む。本明細書で用いる用語「腸溶性ポリマーコーティング」は、ｐＨ依存性またはｐＨ非依存性放出プロフィールを有する１つ以上のポリマーからなるコーティングである。典型的には、このコーティングは、胃の酸性媒体中での溶解に耐える一方で、小腸または結腸などの消化管の比較的遠位の領域で溶解または溶出する。腸溶性ポリマーコーティングは典型的には、投与の約３〜４時間後の胃内容物排出の遅滞期間の後、ある程度の時間まで、活性剤の放出を耐える。
【００２７】
ｐＨ依存性腸溶性コーティングは、胃の中のように低ｐＨではその構造的完全性を維持するが、小腸などの消化管のより遠位の領域内のより高いｐＨ環境で溶解し、そこで薬剤内容物が放出される、１つ以上のｐＨ依存性またはｐＨ感受性ポリマーを含む。本発明の目的について、「ｐＨ依存性」は環境ｐＨに応じて変動する特性（例：溶解）を有することと定義される。典型的なｐＨ依存性ポリマーは、メタクリル酸コポリマー；メタクリル酸−メタクリル酸メチルコポリマー（例：ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ１００（Ａ型）、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｓ１００（Ｂ型）、Ｒｏｈｍ  ＧｍｂＨ、ドイツ）、メタクリル酸−アクリル酸エチルコポリマー（例：ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ１００−５５（Ｃ型）およびＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ３０Ｄ−５５コポリマー分散剤、Ｒｏｈｍ  ＧｍｂＨ、ドイツ）；メタクリル酸−メタクリル酸メチルおよびメタクリル酸メチルのコポリマー（ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＦＳ）；メタクリル酸、メタクリル酸エステルおよびアクリル酸エチルのターポリマー、酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）；フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣＰ）（例：ＨＰ−５５、ＨＰ−５０、ＨＰ−５５Ｓ、信越化学工業、日本）；ポリ酢酸フタル酸ビニル（ＰＶＡＰ）（例：ＣＯＡＴＥＲＩＣ（登録商標）、ＯＰＡＤＲＹ（登録商標）腸溶性白色ＯＹ−Ｐ−７１７１）；酢酸コハク酸セルロース（ＣＡＳ）；酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣＡＳ）（例：ＡＱＯＡＴ（登録商標）ＬＦおよびＡＱＯＡＴ（登録商標）ＭＦ（信越化学工業、日本）を含むＨＰＭＣＡＳ  ＬＦグレード、ＭＦグレード、およびＨＦグレード）、シェラック（例：Ｍａｒｃｏａｔ（商標）１２５およびＭａｒｃｏａｔ（商標）１２５Ｎ）；カルボキシメチルエチルセルロース（ＣＭＥＣ、フロイント産業、日本）；酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）（例；ＡＱＵＡＴＥＲＩＣ（登録商標））、酢酸トリメリット酸セルロース（ＣＡＴ）、および重量比約３：１から約２：１のＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）、Ｌ１００−５５とＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｓ１００の混合物、または重量比約３：１から約５：１のＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ３０  Ｄ−５５とＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＦＳの混合物などの、その２つ以上の約２：１から約５：１の間の重量比の混合物を含むが、これに限定されない。
【００２８】
ｐＨ依存性ポリマーは、典型的には特徴的な溶解至適ｐＨを示す。一部の実施形態においては、ｐＨ依存性ポリマーは約５．０と５．５の間、約５．５と６．０の間、約６．０と６．５の間、または約６．５と約７．０の間の至適ｐＨを示す。他の実施形態においては、ｐＨ依存性ポリマーは≧５．０の、≧５．５の、≧６．０の、≧６．５の、または≧７．０の至適ｐＨを示す。
【００２９】
他の実施形態においては、腸溶性コーティングは、１つ以上のｐＨ非依存性ポリマーを含んでよい。これらのポリマーは、ｐＨとは独立して、一定時間後の薬剤の放出をもたらす。本発明の目的について、「ｐＨ非依存性」は、ｐＨに実質的に影響されない特性（たとえば溶解性）を有することとして定義される。ｐＨ非依存性ポリマーは、「時間制御」または「時間依存性」放出プロフィールの文脈で言及されることが多い。
【００３０】
ｐＨ非依存性ポリマーは、非水溶性であっても水溶性であってもよい。例示的な非水溶性ｐＨ非依存性ポリマーは、少量のトリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリドを有する中性メタクリル酸エステル（たとえばＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳおよびＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＬ）；いずれの官能基も有しない中性エステル分散物（たとえばＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＮＥ３０ＤおよびＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＮＥ３０）；エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、酢酸セルロースまたはこれらの混合物といったセルロース系ポリマー；ならびに他のｐＨ非依存性コーティング製品を含むがこれに限定されない。例示的な水溶性ｐＨ非依存性ポリマーは、ＯＰＡＤＲＹ（登録商標）ａｍｂを含む。
【００３１】
一部の実施形態においては、ｐＨ非依存性ポリマーは、胃および腸の両方の中での溶出に耐える、１つ以上の多糖類を含有する。このようなポリマーは結腸内でのみ崩壊できる。結腸は、例えば多糖コーティングを崩壊させて薬剤含有量を制御された時間依存性の方式で放出させる生体崩壊性酵素を含有する、大きな微生物叢を含有する。
【００３２】
特定の実施形態においては、コーティングの方法論は、１つ以上のｐＨ依存性ポリマーおよび１つ以上のｐＨ非依存性ポリマーの配合を用いる。ｐＨ依存性およびｐＨ非依存性ポリマーの配合によって、可溶性ポリマーがその可溶化至適ｐＨに一旦到達した場合の、有効成分の放出速度を低下させることができる。
【００３３】
一部の実施形態においては、１つ以上の活性剤を収容する非水溶性カプセル本体であって、カプセル本体の一方の端が、不溶性であるが浸透性且つ膨潤性のハイドロゲルのプラグで閉じられた非水溶性カプセル本体を用いて、「時間制御」または「時間依存性」放出プロフィールを得ることができる。消化管液または溶媒に触れると、プラグは膨潤し、所定の遅延時間後にそれ自体をカプセルの外に押し出して薬剤を放出し、これはたとえばプラグの位置または寸法などによって制御できる。カプセル本体は、カプセルが小腸に達するまでカプセルを無傷に保つ外層ｐＨ依存性腸溶性コーティングで、さらにコーティングしてもよい。適切なプラグの材料は、たとえばポリメタクリル酸エステル、浸食性圧縮ポリマー（例：ＨＰＭＣ、ポリビニルアルコール）、凝結融解ポリマー（例：モノオレイン酸グリセリン）、ならびに酵素制御浸食性ポリマー（例：アミロース、アラビノガラクタン、キトサン、コンドロイチン硫酸、シクロデキストリン、デキストラン、グアーガム、ペクチンおよびキシランなどの多糖類）を含む。
【００３４】
他の実施形態においては、膨潤層、および不溶性であるが半透過性である外層ポリマーコーティングまたは膜によって被覆された薬剤含有コアを含むよう、カプセルまたは二層錠を製剤化してよい。破裂前の遅延時間は、ポリマーコーティングの浸透および機械特性、ならびに膨潤層の膨潤挙動によって制御できる。典型的には、膨潤層は、膨潤してその構造内に水を保持する膨潤性親水性ポリマーなどの、１つ以上の膨潤剤を含む。
【００３５】
典型的な水膨潤性材料は、ポリエチレンオキシド（たとえばＰＯＬＹＯＸ（登録商標）のように１，０００，０００〜７，０００，０００の平均分子量を有する）；メチルセルロース；ヒドロキシプロピルセルロース；ヒドロキシプロピルメチルセルロース；ポリ（メチレンオキシド）、ポリ（ブチレンオキシド）を含むがこれに限定されない１００，０００〜６，０００，０００の重量平均分子量を有するポリアルキレンオキシド、２５，０００〜５，０００，０００の分子量を有するポリ（メタクリル酸ヒドロキシアルキル）、グリオキサール、ホルムアルデヒド、またはグルタルアルデヒドと架橋する低アセタール残基を有し、２００〜３０，０００の重合度を有するポリ（ビニル）アルコール；メチルセルロース、架橋寒天、およびカルボキシメチルセルロースの混合物；コポリマー中で無水マレイン酸１モルに対して０．００１〜０．５モルの飽和架橋剤により架橋する無水マレイン酸とスチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、またはイソブチレンの微細に分割されたコポリマーの分散を形成することによって生成されるハイドロゲル形成性コポリマー；４５０，０００〜４，０００，０００の分子量を有するＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）酸性カルボキシコポリマー；ＣＹＡＮＡＭＥＲ（登録商標）ポリアクリルアミド；架橋水膨潤性インデン無水マレイン酸ポリマー；８０，０００〜２００，０００の分子量を有するＧＯＯＤＲＩＴＥ（登録商標）ポリアクリル酸；デンプングラフトコポリマー；ジエステル架橋ポリグリカンなどの縮合グルコース単位から構成されるＡＱＵＡ−ＫＥＥＰＳ（登録商標）アクリル酸ポリマー多糖；０．５〜１％ｗ／ｖ水溶液として３，０００〜６０，０００ｍＰａの粘度を有するカルボマー；１％ｗ／ｗ水溶液（２５℃）として約１０００〜７０００ｍＰａの粘度を有するヒドロキシプロピルセルロースなどのセルロースエーテル；２％ｗ／ｖ水溶液として約１０００以上、好ましくは２，５００以上から最大２５，０００ｍＰａの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース；２０℃の１０％ｗ／ｖ水溶液として約３００〜７００ｍＰａの粘度を有するポリビニルピロリドン；ならびにその組み合わせを含むが、これに限定されない。
【００３６】
腸溶性コーティング層は、タルクもしくはモノステアリン酸グリセリンなどの抗粘着剤、および／または可塑化剤をさらに含んでよい。腸溶性コーティング層は、クエン酸トリエチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、ポリエチレングリコールアセチル化モノグリセリド、グリセリン、トリアセチン、プロピレングリコール、フタル酸エステル（例：フタル酸ジエチル、フタル酸ジブチル）、二酸化チタン、酸化第二鉄、ヒマシ油、ソルビトール、およびセバシン酸ジブチルを含むがこれに限定されない１つ以上の可塑剤をさらに含んでよい。
【００３７】
他の実施形態においては、遅延放出製剤は、封入材を利用して有効成分および浸透圧剤を封入する、水透過性であるが非水溶性であるフィルムコーティングを用いる。腸からの水がフィルムを通過して緩徐にコアに拡散するにつれて、コアはフィルムが破裂するまで膨張し、これにより有効成分が放出される。フィルムコーティングを調節して、多様な水浸透速度または放出時間を可能としてよい。
【００３８】
あるいは、薬剤の放出時間は、本体の底部にあって所定の細孔を含む、（エチルセルロース（ＥＣ）などの）非水溶性ポリマー膜の耐性および厚さと、低置換ヒドロキシプロピルセルロース（Ｌ−ＨＰＣ）およびグリコール酸ナトリウムなどの膨潤性添加剤の量とのバランスに依存した崩壊遅延時間によって、制御できる。経口投与後、ＧＩ液が細孔を経て浸透し、膨潤性添加剤の膨潤を引き起こし、これが膨潤性材料を収容する第１のカプセル本体、薬剤を収容する第２のカプセル本体、および第１のカプセル本体に着接する外キャップを含むカプセルコンポーネントを分離させる内圧をもたらす。
【００３９】
他の実施形態においては、薬剤を浸透圧メカニズムによって放出できる。例として、カプセルは単一の浸透圧ユニットと共に製剤化するか、またはゼラチンハードカプセル内に封入された２、３、４、５、または６個のプッシュ−プルユニットを組み入れることによって、それぞれの二層プッシュ−プルユニットが、いずれも半透過性膜に囲まれた浸透圧プッシュ層および薬剤層を含んでよい。１つ以上の開口部が、薬剤層と隣接する膜を経て掘削される。この膜は、胃内容物の排出後まで放出を防止するｐＨ依存性腸溶性コーティングによって、さらに被覆されてよい。ゼラチンカプセルは摂取の直後に溶解する。１つ以上のプッシュ−プルユニットが小腸に入ると、腸溶性コーティングが崩壊し、次にこれが半透過性膜を経た液体の流入を可能とし、浸透圧プッシュコンパートメントが膨潤し、半透過性膜を経た水輸送速度によって正確に制御された速度で、１つ以上の開口部を経て薬剤を押し出させる。薬剤の放出は２４時間以上まで一定の速度で発生できる。
【００４０】
浸透圧プッシュ層は、半透過性膜を経た送達担体コアへの水の輸送のための駆動力を作り出す、１つ以上の浸透圧剤を含む。浸透圧剤の１つのクラスは、親水性ビニルおよびアクリル酸ポリマー、アルギン酸カルシウムなどの多糖類、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリ（メタクリル酸２−ヒドロキシエチル）、ポリ（アクリル）酸、ポリ（メタクリル）酸、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、架橋ＰＶＰ、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ＰＶＡ／ＰＶＰコポリマー、メタクリル酸メチルおよび酢酸ビニルなどの疎水性単量体を有するＰＶＡ／ＰＶＰコポリマー、大きなＰＥＯブロックを含む親水性ポリウレタン、クロスカルメロースナトリウム、カラゲナン、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）およびカルボキシエチルセルロース（ＣＥＣ）、アルギン酸ナトリウム、ポリカルボフィル、ゼラチン、キサンタンガム、ならびにデンプングリコール酸ナトリウムを含むがこれに限定されない、「オスモポリマー」および「ハイドロゲル」とも呼ばれる水膨潤性親水性ポリマーを含む。
【００４１】
その他の浸透圧剤のクラスは、水を吸収して半透過性膜を横断する浸透圧勾配をもたらすことのできるオスモゲンを含む。典型的なオスモゲンは、硫酸マグネシウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、塩化ナトリウム、塩化リチウム、硫酸カリウム、リン酸カリウム、炭酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、硫酸リチウム、塩化カリウム、および硫酸ナトリウムなどの無機塩；デキストロース、フルクトース、グルコース、イノシトール、ラクトース、マルトース、マンニトール、ラフィノース、ソルビトール、シュークロース、トレハロース、およびキシリトールなどの糖類；アスコルビン酸、安息香酸、フマル酸、クエン酸、マレイン酸、セバシン酸、ソルビン酸、アジピン酸、エデト酸、グルタミン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、コハク酸、および酒石酸などの有機酸；尿素；ならびにその混合物を含むが、これに限定されない。
【００４２】
半透過性膜を形成する際に有用な材料は、生理的に妥当なｐＨで水透過性且つ非水溶性であるか、または架橋などの化学的改変によって非水溶性に変化することのできる多様な等級のアクリル、ビニル、エーテル、ポリアミド、ポリエステル、およびセルロース誘導体を含む。
【００４３】
別の実施形態においては、遅延放出製剤は非水透過性の錠剤コーティングを用い、これにより水はコーティング内の制御された開口部を経てコアが破裂するまで流入する。錠剤が破裂すると、薬剤内容物は即時に、またはより長い時間をかけて放出される。これらおよび他の技術は、薬剤の放出が開始される前の所定の遅延時間を可能とするために変更してよい。
【００４４】
活性剤を含有する顆粒剤、ビーズ剤、散剤またはペレット剤、錠剤、カプセル剤、またはその組み合わせに多様なコーティング技術を適用して、相異なる特徴的な放出プロフィールをもたらすことができる。一部の実施形態においては、医薬組成物は単一のコーティング層を含む錠剤またはカプセル剤の形態にある。他の実施形態においては、医薬組成物は複数のコーティング層を含む錠剤またはカプセル剤の形態にある。
【００４５】
一部の実施形態においては、医薬組成物は鎮痛剤、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される複数の有効成分を含む。鎮痙剤の例はカリソプロドール、ベンゾジアゼピン類、バクロフェン、シクロベンザプリン、メタキサロン、メトカルバモール、クロニジン、クロニジンアナログ、およびダントロレンを含むが、これに限定されない。一部の実施形態においては、医薬組成物は１つ以上の鎮痛剤を含む。他の実施形態においては、医薬組成物は、（１）１つ以上の鎮痛剤、ならびに（２）抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される１つ以上の他の有効成分を含む。別の実施形態においては、医薬組成物は、（１）１つまたは２つの鎮痛剤、および（２）１つまたは２つの抗ムスカリン剤を含む。別の実施形態においては、医薬組成物は、（１）１つまたは２つの鎮痛剤、および（２）１つまたは２つの抗利尿剤を含む。別の実施形態においては、医薬組成物は、（１）１つまたは２つの鎮痛剤、および（２）１つまたは２つの鎮痙剤を含む。さらに別の実施形態においては、医薬組成物は、（１）１つまたは２つの鎮痛剤、（２）１つまたは２つの抗ムスカリン剤、および（３）１つまたは２つの抗利尿剤を含む。
【００４６】
１つの実施形態においては、複数の有効成分が即時放出を目的として配合される。他の実施形態においては、複数の有効成分が遅延放出を目的として配合される。他の実施形態においては、複数の有効成分は即時放出および遅延放出の双方を目的として配合される（例：各有効成分の第１の部分は即時放出を目的として配合され、各有効成分の第２の部分は遅延放出を目的として配合される）。さらに他の実施形態においては、複数の有効成分の一部は即時放出を目的として配合され、複数の有効成分の一部は遅延放出を目的として配合される（例：有効成分Ａ、Ｂ、Ｃは即時放出を目的として配合され、有効成分ＣおよびＤは遅延放出を目的として配合される）。
【００４７】
特定の実施形態においては、医薬組成物は、即時放出コンポーネントおよび遅延放出コンポーネントを含む。即時放出コンポーネントは、鎮痛剤、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される１つ以上の有効成分を含んでよい。遅延放出コンポーネントは、鎮痛剤、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される１つ以上の有効成分を含んでよい。一部の実施形態においては、即時放出コンポーネントと延長放出コンポーネントは全く同じ有効成分を有する。他の実施形態においては、即時放出コンポーネントと遅延放出コンポーネントは異なる有効成分を有する。さらに他の実施形態においては、即時放出コンポーネントと遅延放出コンポーネントは、１つ以上の共通する有効成分を有する。
【００４８】
１つの実施形態においては、医薬組成物は、おおよそ同時に即時放出されるよう配合された、２つの有効成分（たとえば２つの鎮痛剤、または１つの鎮痛剤と１つの抗ムスカリン剤もしくは抗利尿剤もしくは鎮痙剤との混合物）を含む。別の実施形態においては、医薬組成物は、おおよそ同時に遅延放出されるよう配合された、２つの有効成分を含む。別の実施形態においては、医薬組成物は、それぞれ異なる遅延放出プロファイルを提供する２つの遅延放出コンポーネントとして配合された、２つの有効成分を含む。たとえば、第１の遅延放出コンポーネントが第１の時点で第１の有効成分を放出し、第２の遅延放出コンポーネントが第２の時点で第２の有効成分を放出する。別の実施形態においては、医薬組成物は、一方が即時放出を目的として配合され、他方が遅延放出を目的として配合された、２つの有効成分を含む。
【００４９】
他の実施形態においては、医薬組成物は、（１）即時放出を目的として配合された２つの有効成分（たとえば２つの鎮痛剤、または１つの鎮痛剤と１つの抗ムスカリン剤もしくは抗利尿剤もしくは鎮痙剤との混合物）、および（２）遅延放出を目的として配合された２つの有効成分（たとえば２つの鎮痛剤、または１つの鎮痛剤と１つの抗ムスカリン剤もしくは抗利尿剤もしくは鎮痙剤との混合物）を含む。他の実施形態においては、医薬組成物は、（１）即時放出を目的として配合された３つの有効成分、および（２）遅延放出を目的として配合された３つの有効成分を含む。他の実施形態においては、医薬組成物は、（１）即時放出を目的として配合された４つの有効成分、および（２）遅延放出を目的として配合された４つの有効成分を含む。これらの実施形態においては、即時放出コンポーネント中の１つ以上の有効成分は、遅延放出コンポーネント中の１つ以上の有効成分と同一とすることができ、または異なるものとすることができる。
【００５０】
本明細書で用いる用語「即時放出」は、溶解速度制御材料を含有しない薬剤製剤を指して使用される。即時放出製剤の投与後の活性剤の放出には、ほとんど遅延はない。即時放出コーティングは、その中の薬剤内容物を放出するために、投与直後に溶解する適切な材料を含んでよい。例示的な即時放出コーティングは、ゼラチン、ポリビニルアルコール‐ポリエチレングリコール（ＰＶＡ‐ＰＥＧ）コポリマー（たとえばＫＯＬＬＩＣＯＡＴ（登録商標））、および当業者に公知の様々な他の材料を含む。
【００５１】
即時放出組成物は、単一の投薬単位中に、投与される所与の活性剤の全投薬量の１００％を含んでよい。あるいは即時放出コンポーネントは、医薬製剤によって送達される１つ以上の活性剤の約１％〜約５０％を提供できる複合放出プロフィール製剤として含まれていてよい。たとえば、即時放出コンポーネントは、製剤によって送達される１つ以上の活性剤の総投薬量の少なくとも約５％、または約１０％〜約３０％、または約４５％〜約５０％を提供してよい。１つ以上の活性剤の残部は、遅延放出製剤中で送達してよい。代替的な実施形態においては、即時放出コンポーネントは、製剤によって送達される１つ以上の活性剤の総投薬量の約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０％を提供する。遅延放出コンポーネントは、製剤によって送達される総投薬量の約９０、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５または５０％を提供する。
【００５２】
一部の実施形態においては、即時放出または遅延放出製剤は、たとえば流動床技術または当業者に既知である他の方法論などを用いて、たとえば薬剤含有フィルム形成性組成物の形態をとる薬剤によりその表面がコーティングされたビーズ、ペレット、丸剤、顆粒状粒子、マイクロカプセル、マイクロスフェア、マイクロ顆粒、ナノカプセル、またはナノスフェアの形態をそれぞれとる、１つ以上の不活性粒子から構成される活性コアを含む。不活性粒子は、低い溶解性にとどまるために十分な大きさである限り、多様なサイズとすることができる。あるいは、活性コアは、原薬を含有するポリマー組成物の造粒および粉砕、ならびに／または押出およびスフェロニゼーションによって調製してよい。
【００５３】
コア中の薬剤の量は必要とされる用量に依存し、典型的には約５〜９０重量％で変動する。一般的に、活性コアに対するポリマーコーティングは、必要とされる遅延時間および放出プロフィールの種類ならびに／または選択されるポリマーおよびコーティング溶媒に応じて、コーティングされる粒子の重量の約１〜５０％となる。当業者は、所望の用量を達成するために、コアにコーティングするための、またはその中に組み入れるための適切な薬剤の量を選択できる。１つの実施形態においては、不活性コアは、薬剤の放出を促進するためにその微小環境を変化させる糖類の球、または炭酸カルシウム、重炭酸ナトリウム、フマル酸、酒石酸などの緩衝剤の結晶または封入された緩衝剤の結晶であってよい。
【００５４】
一部の実施形態においては、遅延放出製剤は、ビーズなどの水溶性／水分散性薬剤含有粒子を、非水溶性ポリマーと腸溶性ポリマーが４：１から１：１の重量比で存在してよい、非水溶性ポリマーと腸溶性ポリマーの混合物でコーティングすることにより形成され、コーティングの総重量はコーティングされるビーズの総重量の１０〜６０重量％である。薬剤積層ビーズは、エチルセルロースの内部溶出速度制御膜を、任意選択として含んでよい。ポリマー膜の外層の組成、さらには内層および外層の個々の重量は、インビトロ／インビボ相関に基づいて予測される、所与の活性についての所望の概日周期放出プロフィールを達成するために最適化される。
【００５５】
他の実施形態においては、製剤は、溶出速度制御ポリマー膜を伴わない即時放出薬剤含有粒子と、たとえば経口投与後２〜４時間の遅延時間を示す遅延放出ビーズの混合物を含み、これにより２パルス放出プロフィールを提供する。さらに他の実施形態においては、製剤は２種類の遅延放出ビーズ：１〜３時間の遅延時間を示す第１の種類および４〜６時間の遅延時間を示す第２の種類の混合物を含む。
【００５６】
一部の実施形態においては、活性コアは、遅延時間を有するまたは有しない所望の放出プロフィールを得るために、溶出速度制御ポリマーの１つ以上の層でコーティングされる。内層膜は、主として水または体液のコアへの吸収後の薬剤放出速度を制御できる一方、外層膜は、所望の遅延時間（水または体液のコアへの吸収後の薬剤放出がほとんどない時間）を提供することができる。内層膜は非水溶性ポリマー、または非水溶性ポリマーと水溶性ポリマーの混合物を含んでよい。
【００５７】
主として６時間までの遅延時間を制御する外膜に適したポリマーは、上述の腸溶性ポリマーおよび非水溶性ポリマーを１０〜５０重量％含んでよい。腸溶性ポリマーに対する非水溶性ポリマーの比率は４：１から１：２まで変動することがあり、好ましくはポリマーは約１：１の比率で存在する。典型的に用いられる非水溶性ポリマーは、エチルセルロースである。
【００５８】
典型的な非水溶性ポリマーは、エチルセルロース、ポリ酢酸ビニル（ＢＡＳＦ製Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ  ＳＲ＃０Ｄ）、アクリル酸エチルおよびメタクリル酸メチルを基とした中性コポリマー、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＮＥ、ＲＳおよびＲＳ３０Ｄ、ＲＬまたはＲＬ３０Ｄなどの、四級アンモニウム基を有するアクリル酸およびメタクリル酸エステルのコポリマーを含む。典型的な水溶性ポリマーは、使用する水および溶媒またはラテックス懸濁液基剤コーティング製剤中の活性の溶解度に応じて、濃度が約１重量％〜１０重量％の低分子量ＨＰＭＣ、ＨＰＣ、メチルセルロース、ポリエチレングリコール（分子量＞３０００のＰＥＧ）を含む。水溶性ポリマーに対する非水溶性ポリマーは、典型的には９５：５から６０：４０、好ましくは８０：２０から６５：３５まで変動してよい。
【００５９】
好ましくは、製剤は、安静な睡眠の妨害を制限するための放出プロフィールで設計され、製剤は、個体が排尿への衝動によって正常に起床した時に、医薬を放出する。たとえば、午後１１時に就寝して、通常午前１２時３０分、午前３時および午前６時に排尿のために起床する個体について考える。遅延放出ビヒクルは医薬を午前１２時１５分に送達してよく、これにより排尿の必要を、恐らく２〜３時間遅延させる。
【００６０】
医薬組成物は、連日、または必要に応じて投与できる。特定の実施形態においては、医薬組成物は対象に、就寝前に投与される。一部の実施形態においては、医薬組成物は就寝直前に投与される。別の実施形態においては、医薬組成物は就寝の約２時間前に投与される。さらなる実施形態においては、医薬組成物は就寝の少なくとも２時間前に投与される。別の実施形態においては、医薬組成物は就寝の約１時間前に投与される。さらなる実施形態においては、医薬組成物は就寝の少なくとも１時間前に投与される。またさらなる実施形態においては、医薬組成物は就寝の１時間未満だけ前に投与される。さらに別の実施形態においては、医薬組成物は就寝直前に投与される。好ましくは、医薬組成物は経口投与される。
【００６１】
即時放出コンポーネントまたは遅延放出コンポーネント中の１つ以上の有効成分の適切な用量（「治療有効量」）は、たとえば、病状の重症度および経過、投与様式、１つ以上の特定の作用剤のバイオアベイラビリティ、患者の年齢および体重、患者の病歴および１つ以上の活性剤に対する反応、医師の裁量などに依存することになる。
【００６２】
一般的な提案として、即時放出コンポーネントまたは遅延放出コンポーネント中の１つ以上の活性剤の治療有効量は、１回の投与によるにせよまたは２回以上の投与によるにせよ、約１００μｇ／ｋｇ体重／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲で投与される。一部の実施形態においては、連日投与される各活性剤の範囲は、約１００μｇ／ｋｇ体重／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日、１００μｇ／ｋｇ体重／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、１００μｇ／ｋｇ体重／日〜約１ｍｇ／ｋｇ体重／日、１００μｇ／ｋｇ体重／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、５００μｇ／ｋｇ体重／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、５００μｇ／ｋｇ体重／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日、５００μｇ／ｋｇ体重／日〜約５ｍｇ／ｋｇ体重／日、１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日、１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、５ｍｇ／ｋｇ体重／投与〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、５ｍｇ／ｋｇ体重／投与〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日、１０ｍｇ／ｋｇ体重／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、および１０ｍｇ／ｋｇ体重／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日である。
【００６３】
本明細書に記載の１つ以上の活性剤は、１ｍｇ〜２０００ｍｇ、５ｍｇ〜２０００ｍｇ、１０ｍｇ〜２０００ｍｇ、５０ｍｇ〜２０００ｍｇ、１００ｍｇ〜２０００ｍｇ、２００ｍｇ〜２０００ｍｇ、５００ｍｇ〜２０００ｍｇ、５ｍｇ〜１８００ｍｇ、１０ｍｇ〜１６００ｍｇ、５０ｍｇ〜１６００ｍｇ、１００ｍｇ〜１５００ｍｇ、１５０ｍｇ〜１２００ｍｇ、２００ｍｇ〜１０００ｍｇ、３００ｍｇ〜８００ｍｇ、３２５ｍｇ〜５００ｍｇ、１ｍｇ〜１０００ｍｇ、１ｍｇ〜５００ｍｇ、１ｍｇ〜２００ｍｇ、５ｍｇ〜１０００ｍｇ、５ｍｇ〜５００ｍｇ、５ｍｇ〜２００ｍｇ、１０ｍｇ〜１０００ｍｇ、１０ｍｇ〜５００ｍｇ、１０ｍｇ〜２００ｍｇ、５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、５０ｍｇ〜５００ｍｇ、５０ｍｇ〜２００ｍｇ、１００ｍｇ〜２５０ｍｇ、１００ｍｇ〜５００ｍｇ、２５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、２５０ｍｇ〜５００ｍｇ、５００ｍｇ〜１０００ｍｇ、５００ｍｇ〜２０００ｍｇの単一用量または複合用量範囲での連日経口投与のために、即時放出コンポーネントまたは遅延放出コンポーネントまたはその組み合わせに含めてよい。予測されるように、用量は病状、サイズ、年齢、および患者の状態に依存的となる。
【００６４】
一部の実施形態においては、医薬組成物は、単一の鎮痛剤を含む。１つの実施形態においては、単一の鎮痛剤はアスピリンである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はイブプロフェンである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はナプロキセンナトリウムである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はインドメタシンである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はナブメトンである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はアセトアミノフェンである。
【００６５】
一部の実施形態においては、単一の鎮痛剤は、１日用量１ｍｇ〜２０００ｍｇ、５ｍｇ〜２０００ｍｇ、２０ｍｇ〜２０００ｍｇ、５ｍｇ〜１０００ｍｇ、２０ｍｇ〜１０００ｍｇ、５０ｍｇ〜５００ｍｇ、１００ｍｇ〜５００ｍｇ、２５０ｍｇ〜５００ｍｇ、２５０ｍｇ〜１０００ｍｇまたは５００ｍｇ〜１０００ｍｇで投与される。特定の実施形態においては、医薬組成物は、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトンまたはアセトアミノフェンを単一の鎮痛剤として含み、鎮痛剤は、５ｍｇ〜２０００ｍｇ、２０ｍｇ〜２０００ｍｇ、５ｍｇ〜１０００ｍｇ、２０ｍｇ〜１０００ｍｇ、５０ｍｇ〜５００ｍｇ、１００ｍｇ〜５００ｍｇ、２５０ｍｇ〜５００ｍｇ、２５０ｍｇ〜１０００ｍｇまたは５００ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲の１日用量で経口投与される。一部の実施形態においては、第２の鎮痛剤が、１日用量１ｍｇ〜２０００ｍｇ、５ｍｇ〜２０００ｍｇ、２０ｍｇ〜２０００ｍｇ、５ｍｇ〜１０００ｍｇ、２０ｍｇ〜１０００ｍｇ、５０ｍｇ〜５００ｍｇ、１００ｍｇ〜５００ｍｇ、２５０ｍｇ〜５００ｍｇ、２５０ｍｇ〜１０００ｍｇまたは５００ｍｇ〜１０００ｍｇで投与される。
【００６６】
他の実施形態においては、医薬組成物は一対の鎮痛剤を含む。そのような一対の鎮痛剤の例は、アセチルサリチル酸とイブプロフェン、アセチルサリチル酸とナプロキセンナトリウム、アセチルサリチル酸とナブメトン、アセチルサリチル酸とアセトアミノフェン、アセチルサリチル酸とインドメタシン、イブプロフェンとナプロキセンナトリウム、イブプロフェンとナブメトン、イブプロフェンとアセトアミノフェン、イブプロフェンとインドメタシン、ナプロキセンナトリウムとナブメトン、ナプロキセンナトリウムとアセトアミノフェン、ナプロキセンナトリウムとインドメタシン、ナブメトンとアセトアミノフェン、ナブメトンとインドメタシン、およびアセトアミノフェンとインドメタシンを含むがこれに限定されない。一対の鎮痛剤は、５ｍｇ〜２０００ｍｇ、２０ｍｇ〜２０００ｍｇ、１００ｍｇ〜２０００ｍｇ、２００ｍｇ〜２０００ｍｇ、５００ｍｇ〜２０００ｍｇ、５ｍｇ〜１５００ｍｇ、２０ｍｇ〜１５００ｍｇ、１００ｍｇ〜１５００ｍｇ、２００ｍｇ〜１５００ｍｇ、５００ｍｇ〜１５００ｍｇ、５ｍｇ〜１０００ｍｇ、２０ｍｇ〜１０００ｍｇ、１００ｍｇ〜１０００ｍｇ、２５０ｍｇ〜５００ｍｇ、２５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、２５０ｍｇ〜１５００ｍｇ、５００ｍｇ〜１０００ｍｇ、５００ｍｇ〜１５００ｍｇ、１０００ｍｇ〜１５００ｍｇ、および１０００ｍｇ〜２０００ｍｇの範囲の複合用量で、０．１：１〜１０：１、０．２：１〜５：１または０．３：１〜３：１の範囲の重量比で混合される。１つの実施形態においては、鎮痛剤の対は重量比１：１で混合される。
【００６７】
一部の他の実施形態においては、本発明の医薬組成物は１つ以上の抗ムスカリン剤をさらに含む。抗ムスカリン剤の例は、オキシブチニン、ソリフェナシン、ダリフェナシン、フェソテロジン、トルテロジン、トロスピウム、アトロピン、および三環系抗うつ剤を含むが、これに限定されない。抗ムスカリン剤の１日用量は０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ、０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、１ｍｇ〜１００ｍｇ、１０ｍｇ〜１００ｍｇ、０．０１ｍｇ〜２５ｍｇ、０．１ｍｇ〜２５ｍｇ、１ｍｇ〜２５ｍｇ、１０ｍｇ〜２５ｍｇ、０．０１ｍｇ〜１０ｍｇ、０．１ｍｇ〜１０ｍｇ、１ｍｇ〜１０ｍｇ、１０ｍｇ〜１００ｍｇおよび１０ｍｇ〜２５ｍｇの範囲内である。
【００６８】
本願の別の態様は、それを必要とする人物に、即時放出製剤へと製剤された医薬組成物を投与することによって、排尿の頻度を低減するための方法に関する。一部の実施形態においては、医薬組成物は１つ以上の鎮痛剤および１つ以上の抗ムスカリン剤を含む。他の実施形態においては、医薬組成物は１つ以上の鎮痛剤および１つ以上の抗利尿剤を含む。さらに別の実施形態においては、医薬組成物は、１つ以上の鎮痛剤、１つ以上の抗ムスカリン剤および１つ以上の抗利尿剤を含む。
【００６９】
他の実施形態においては、本願の医薬組成物はさらに、１つ以上の鎮痙剤を含む。鎮痙剤の例は、カリソプロドール、ベンゾジアゼピン類、バクロフェン、シクロベンザプリン、メタキサロン、メトカルバモール、クロニジン、クロニジンアナログ、およびダントロレンを含むがこれに限定されない。一部の実施形態においては、鎮痙剤は、１日用量１ｍｇ〜１０００ｍｇ、１ｍｇ〜１００ｍｇ、１０ｍｇ〜１０００ｍｇ、１０ｍｇ〜１００ｍｇ、２０ｍｇ〜１０００ｍｇ、２０ｍｇ〜８００ｍｇ、２０ｍｇ〜５００ｍｇ、２０ｍｇ〜２００ｍｇ、５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、５０ｍｇ〜８００ｍｇ、５０ｍｇ〜２００ｍｇ、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、１００ｍｇ〜５００ｍｇ、２００ｍｇ〜８００ｍｇ、および２００ｍｇ〜５００ｍｇで使用される。鎮痙剤は、単独で、または医薬組成物中の他の１つ以上の有効成分と共に、即時放出、遅延放出またはこれらの組み合わせを目的として配合してよい。
【００７０】
特定の実施形態においては、医薬組成物は２つ以上の鎮痛剤を含む。他の実施形態においては、医薬組成物は、１つ以上の鎮痛剤ならびに１つ以上の抗ムスカリン剤および／または抗利尿剤を含む。医薬組成物は錠剤、カプセル剤、糖剤、散剤、顆粒剤、液剤、ゲル剤、または乳濁剤の形態に製剤化してよい。前記液剤、ゲル剤または乳濁剤は、裸の形態またはカプセル内に収容されて対象に摂取され得る。
【００７１】
特定の実施形態においては、鎮痛剤は、サリチレート類、アスピリン、サリチル酸、サリチル酸メチル、ジフルニサル、サルサレート、オルサラジン、スルファサラジン、パラアミノフェノール誘導体、アセトアニリド、アセトアミノフェン、フェナセチン、フェナメート類、メフェナム酸、メクロフェナメート、メクロフェナム酸ナトリウム、ヘテロアリール酢酸誘導体、トルメチン、ケトロラク、ジクロフェナク、プロピオン酸誘導体、イブプロフェン、ナプロキセンナトリウム、ナプロキセン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、オキサプロジン；エノール酸、オキシカム誘導体、ピロキシカム、メロキシカム、テノキシカム、アンピロキシカム、ドロキシカム、ピボキシカム、ピラゾロン誘導体、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アンチピリン、アミノピリン、ジピロン、コキシブ類、セレコキシブ、ロフェコキシブ、ナブメトン、アパゾン、ニメスリド、インドメタシン、スリンダク、エトドラクおよびイソブチルフェニルプロピオン酸からなる群から選択される。抗ムスカリン剤は、オキシブチニン、ソリフェナシン、ダリフェナシンおよびアトロピンからなる群から選択される。
【００７２】
一部の実施形態においては、医薬組成物は、単一の鎮痛剤および単一の抗ムスカリン剤を含む。１つの実施形態においては、単一の鎮痛剤はアスピリンである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はイブプロフェンである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はナプロキセンナトリウムである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はインドメタシンである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はナブメトンである。別の実施形態においては、単一の鎮痛剤はアセトアミノフェンである。鎮痛剤および抗ムスカリン剤は、上述の範囲の用量で投与してよい。
【００７３】
本願の別の態様は、それを必要とする対象に（１）１つ以上の鎮痛剤および（２）１つ以上の抗利尿剤を投与することによって、夜間頻尿を治療するための方法に関する。特定の実施形態においては、１つ以上の抗利尿剤は：（１）バソプレシン分泌を増加させる；（２）バソプレシン受容体活性化を増大させる；（３）心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）もしくはＣ型ナトリウム利尿ペプチド（ＣＮＰ）の分泌を減少させる；または（４）ＡＮＰおよび／もしくはＣＮＰ受容体の活性化を低下させるよう作用する。
【００７４】
抗利尿剤の例は、抗利尿ホルモン（ＡＤＨ）、アンジオテンシンＩＩ、アルドステロン、バソプレシン、バソプレシンアナログ（例：デスモプレシン、アルギプレシン、リプレシン、フェリプレシン、オルニプレシン、テルリプレシン）；バソプレシン受容体作動剤、心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）およびＣ型ナトリウム利尿ペプチド（ＣＮＰ）受容体（すなわちＮＰＲ１、ＮＰＲ２、およびＮＰＲ３）拮抗剤（例：ＨＳ−１４２−１、イサチン、［Ａｓｕ７，２３’］ｂ−ＡＮＰ−（７−２８）］、アナンチン、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｃｏｅｒｕｌｅｓｃｅｎｓ由来環状ペプチド、および３Ｇ１２モノクローナル抗体）；ソマトスタチン２型受容体拮抗剤（例：ソマトスタチン）、医薬上許容可能なその誘導体、およびそのアナログ、塩、水和物および溶媒和物を含むが、これに限定されない。
【００７５】
特定の実施形態においては、１つ以上の鎮痛剤および１つ以上の抗利尿剤は、遅延放出を目的として配合される。
【００７６】
本願の別の態様は、それを必要とする人物に、利尿剤を含む第１の医薬組成物と、これに続いて１つ以上の鎮痛剤を含む第２の医薬組成物とを投与することによって、夜間頻尿を治療するための方法に関する。第１の医薬組成物は、投与６時間以内に利尿効果を有するように投薬および配合され、就寝の少なくとも８時間前に投与される。第２の医薬組成物は、就寝前２時間以内に投与される。
【００７７】
利尿剤の例は：ＣａＣｌ２およびＮＨ４Ｃｌといった酸性化塩；アンフォテリシンＢおよびクエン酸リチウムといったアルギニンバソプレシン受容体２拮抗薬；アキノキリンソウおよびネズといった水利尿薬；ドーパミンといったＮａ−Ｈ交換体拮抗薬；アセタゾラミドおよびドルゾラミドといった炭酸脱水酵素阻害剤；グルコースおよびマンニトールといった浸透圧利尿剤；アミロリド、スピロノラクトン、トリアムテレン、カリウムカンレノエートといった、カリウム保有利尿薬；ベンドロフルメチアジドおよびヒドロクロロチアジドといったチアジド類；ならびにカフェイン、テオフィリンおよびテオブロミンといったキサンチン類を含むがこれに限定されない。
【００７８】
一部の実施形態においては、第２の医薬組成物は１つ以上の抗ムスカリン剤をさらに含む。抗ムスカリン剤の例は、オキシブチニン、ソリフェナシン、ダリフェナシン、フェソテロジン、トルテロジン、トロスピウムおよびアトロピンを含むがこれに限定されない。第２の医薬組成物は、即時放出製剤または遅延放出製剤へと製剤してよい。１つの実施形態においては、第１の医薬組成物は即時放出を目的として配合され、第２の医薬組成物は遅延放出を目的として配合される。
【００７９】
他の一部の実施形態においては、第２の医薬組成物は１つ以上の抗利尿剤をさらに含む。
【００８０】
本願の別の態様は、複数の有効成分および医薬上許容可能な担体を含む医薬組成物に関する。一部の実施形態においては、複数の有効成分は、２つ以上の鎮痛剤を含む。他の実施形態においては、複数の有効成分は、１つ以上の鎮痛剤および１つ以上の抗ムスカリン剤を含む。他の実施形態においては、複数の有効成分は、１つ以上の鎮痛剤および１つ以上の抗利尿剤を含む。さらに他の実施形態においては、複数の有効成分は、１つ以上の鎮痛剤、１つ以上の抗利尿剤および１つ以上の抗ムスカリン剤を含む。他の実施形態においては、上記複数の有効成分のうちの少なくとも１つは、遅延放出を目的として配合される。
【００８１】
一部の実施形態においては、医薬組成物は、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ナプロキセンナトリウム、ナブメトン、アセトアミノフェンおよびインドメタシンからなる群から選択される、２つの異なる鎮痛剤を含む。さらに他の実施形態においては、医薬組成物は：アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ナプロキセンナトリウム、ナブメトン、アセトアミノフェンおよびインドメタシンからなる群から選択される１つの鎮痛剤；ならびにオキシブチニン、ソリフェナシン、ダリフェナシンおよびアトロピンからなる群から選択される抗ムスカリン剤を含む。
【００８２】
本明細書で用いる「医薬上許容可能な担体」は、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤、甘味剤などを含む。医薬上許容可能な担体は、香味剤、甘味剤、ならびに特定の治療用組成物を調製するために必要となり得る緩衝剤および吸収剤といった雑多な材料を含むがこれに限定されない広範な材料から調製してよい。このような媒体および作用剤を医薬活性物質と共に使用することは、当該技術分野において公知である。いずれの従来の媒体および作用剤が有効成分と不適合である場合を除いて、治療用組成物中でのその使用が考えられる。
【００８３】
本願の別の態様は、薬剤耐性の発現を防止するために、２つ以上の鎮痛剤を交互に、それを必要とする対象に投与することによって、排尿の頻度を低減するための方法に関する。１つの実施形態においては、本方法は、第１の期間にわたって第１の鎮痛剤を投与すること；およびこれに続いて、第２の期間にわたって第２の鎮痛剤を投与することを含む。別の実施形態においては、本方法はさらに、第３の期間にわたって第３の鎮痛剤を投与することを含む。第１、第２および第３の鎮痛剤は互いに異なっており、サリチレート類、アスピリン、サリチル酸、サリチル酸メチル、ジフルニサル、サルサレート、オルサラジン、スルファサラジン、パラアミノフェノール誘導体、アセトアニリド、アセトアミノフェン、フェナセチン、フェナメート類、メフェナム酸、メクロフェナメート、メクロフェナム酸ナトリウム、ヘテロアリール酢酸誘導体、トルメチン、ケトロラク、ジクロフェナク、プロピオン酸誘導体、イブプロフェン、ナプロキセンナトリウム、ナプロキセン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、オキサプロジン；エノール酸、オキシカム誘導体、ピロキシカム、メロキシカム、テノキシカム、アンピロキシカム、ドロキシカム、ピボキシカム、ピラゾロン誘導体、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アンチピリン、アミノピリン、ジピロン、コキシブ類、セレコキシブ、ロフェコキシブ、ナブメトン、アパゾン、ニメスリド、インドメタシン、スリンダク、エトドラクおよびイソブチルフェニルプロピオン酸からなる群から選択してよい。
【００８４】
１つの実施形態においては、第１の鎮痛剤はアセトアミノフェンであり、第２の鎮痛剤はイブプロフェンであり、第３の鎮痛剤はナプロキセンナトリウムである。各期間の長さは、各鎮痛剤に対する対象の応答に応じて変動してよい。一部の実施形態においては、各期間は３日〜３週間である。別の実施形態においては、第１、第２および第３の鎮痛剤のうちの１つ以上は、遅延放出を目的として配合される。
【００８５】
本願の別の態様は、（１）１つ以上の鎮痛剤を含む第１のコンポーネント（ここで第１のコンポーネントは、経口投与後１〜４時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される）；および（２）１つ以上の鎮痛剤を含む第２のコンポーネント（ここで第２のコンポーネントは、経口投与後４〜６時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される）を含む、医薬組成物に関する。
【００８６】
一部の実施形態においては、第１のコンポーネントまたは第２のコンポーネント中の１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される。
【００８７】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントは、アセトアミノフェンなどの鎮痛剤を５〜２０００ｍｇの量で含む。
【００８８】
一部の実施形態においては、医薬組成物は、腸溶性コーティングでコーティングされる。
【００８９】
一部の実施形態においては、第１のコンポーネントはさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【００９０】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントはさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【００９１】
一部の実施形態においては、第１および第２のコンポーネントの両方がさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【００９２】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントは、非水溶性ポリマー（ＷＩＰ）と腸溶性ポリマー（ＥＰ）との、ＷＩＰ：ＥＰ比４：１〜１：２の混合物でコーティングされる。
【００９３】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントは、複数のコーティング層でコーティングされる。
【００９４】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントは、膨潤層、および外側の非可溶性であるものの半透過性であるポリマーコーティングによって被覆される。関連する一部の実施形態においては、膨潤層は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリル酸コポリマー、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、メタクリル酸コポリマー、フタル酸酢酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、コハク酸酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸酢酸ポリビニル、シェラック、およびエチルセルロースからなる群から選択される材料を含む。
【００９５】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネント製剤は、一端を非可溶性であるものの半透過性かつ膨潤性であるヒドロゲルプラグで閉鎖された非水溶性カプセル本体を含み、上記プラグは、ポリメタクリレート類、受食性圧縮ポリマー類、凝固溶融ポリマー、および酵素で制御される受食性ポリマーからなる群から選択された材料を含む。
【００９６】
本願の別の態様は：（１）アセトアミノフェンなどの鎮痛剤を５〜２０００ｍｇの量で含む第１のコンポーネント（ここで第１のコンポーネントは、即時放出を目的として配合される）；および（２）１つ以上の鎮痛剤を含む第２のコンポーネント（ここで第２のコンポーネントは、経口投与後１〜４時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される）；および（３）１つ以上の鎮痛剤を含む第３のコンポーネント（ここで第１のコンポーネントは、経口投与後４〜６時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される）を含む、医薬組成物に関する。
【００９７】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントまたは第３のコンポーネントまたはこれら両方の中の１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される。
【００９８】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントは、アセトアミノフェンなどの鎮痛剤を５〜２０００ｍｇの量で含む。
【００９９】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントは腸溶性コーティングでコーティングされる。
【０１００】
一部の実施形態においては、第３のコンポーネントは、アセトアミノフェンなどの鎮痛剤を５〜２０００ｍｇの量で含む。
【０１０１】
一部の実施形態においては、第１のコンポーネントはさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【０１０２】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントはさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【０１０３】
一部の実施形態においては、第３のコンポーネントはさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【０１０４】
一部の実施形態においては、第１および第２のコンポーネントはそれぞれ、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【０１０５】
一部の実施形態においては、第１および第３のコンポーネントはそれぞれ、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【０１０６】
一部の実施形態においては、第２および第３のコンポーネントはそれぞれ、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【０１０７】
一部の実施形態においては、第１、第２および第２のコンポーネントはそれぞれ、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【０１０８】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントは腸溶性コーティングでコーティングされる。
【０１０９】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントまたは第３のコンポーネントは、非水溶性ポリマー（ＷＩＰ）と腸溶性ポリマー（ＥＰ）との、ＷＩＰ：ＥＰ比４：１〜１：２でコーティングされる。
【０１１０】
一部の実施形態においては、第３のコンポーネントは、複数のコーティング層でコーティングされる。
【０１１１】
本願の別の態様は：（１）アセトアミノフェンを５〜２０００ｍｇの量で含む、第１のコンポーネント（ここで第１のコンポーネントは、即時放出を目的として配合される）；および（２）１つ以上の鎮痛剤を含む、第２のコンポーネント（ここで第２のコンポーネントは、経口投与後１〜４時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される）；および（３）１つ以上の鎮痛剤を含む、第３のコンポーネント（ここで第１のコンポーネントは、経口投与後４〜６時間の遅延時間での遅延放出を目的として配合される）を含む、排尿の頻度を低減するための医薬組成物に関し、上記医薬組成物は、それを必要とする患者の排尿の頻度を低減する。
【０１１２】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントまたは第３のコンポーネントまたはこれら両方の中の１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される。
【０１１３】
製造方法
本願の別の態様は、排尿の頻度を低減するための遅延放出医薬組成物の製造方法に関する。一部の実施形態においては、本方法は：１つ以上の鎮痛剤を含む第１の有効成分を含む第１の混合物を形成するステップ；上記第１の混合物を第１の遅延放出コーティングでコーティングして、第１のコンポーネントを形成するステップであって、上記第１の遅延放出コーティングは、上記第１の混合物を、経口投与後１〜４時間の遅延時間で放出する、ステップ；１つ以上の鎮痛剤を含む第２の有効成分を含む第２の混合物を形成するステップ；上記第２の混合物を第２の遅延放出コーティングでコーティングして、第２のコンポーネントを形成するステップであって、上記第２の遅延放出コーティングは、上記第２の混合物を、経口投与後４〜６時間の遅延時間で放出する、ステップ；および上記第１のコンポーネントと上記第２のコンポーネントとを組み合わせて、第３の混合物を形成するステップを含む。
【０１１４】
一部の実施形態においては、第１、第２および／または第３の混合物は、賦形剤などの、医薬上許容可能な担体を含む。
【０１１５】
一部の実施形態においては、第２のコンポーネントまたは第３のコンポーネントまたはこれら両方の中の１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される。
【０１１６】
一部の実施形態においては、第１および第２の有効成分のうちの少なくとも一方は、５ｍｇ〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンなどの鎮痛剤を含有する。一部の実施形態においては、第１の有効成分は、５ｍｇ〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンなどの鎮痛剤を含有する。他の実施形態においては、第２の有効成分は、５ｍｇ〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンなどの鎮痛剤を含有する。さらに他の実施形態においては、第１および第２の有効成分はそれぞれ、５ｍｇ〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンなどの鎮痛剤を含有する。
【０１１７】
一部の実施形態においては、第１および第２の有効成分のうちの少なくとも一方はさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。一部の実施形態においては、第１の有効成分はさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。他の実施形態においては、第２の有効成分はさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。さらに他の実施形態では、第１および第２の有効成分それぞれがさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含有する。
【０１１８】
一部の実施形態においては、第１の遅延放出コーティングは腸溶性コーティングである。一部の実施形態においては、第２の遅延放出コーティングは、非水溶性ポリマー（ＷＩＰ）と腸溶性ポリマー（ＥＰ）との、ＷＩＰ：ＥＰ比４：１〜１：２の混合物を含む。一部の実施形態においては、第２の遅延放出コーティングは複数のコーティング層を含む。
【０１１９】
一部の実施形態においては、第２の遅延放出コーティングは、膨潤層、および外側の非可溶性であるものの半透過性であるポリマーコーティングを含む。関連する実施形態においては、膨潤層は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリル酸コポリマー、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、メタクリル酸コポリマー、フタル酸酢酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、コハク酸酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸酢酸ポリビニル、シェラック、およびエチルセルロースからなる群から選択される材料を含む。
【０１２０】
一部の実施形態においては、第２の遅延放出コーティングは、一端を非可溶性であるものの半透過性かつ膨潤性であるヒドロゲルプラグで閉鎖された非水溶性カプセル本体を含み、上記プラグは、ポリメタクリレート類、受食性圧縮ポリマー類、凝固溶融ポリマー、および酵素で制御される受食性ポリマーからなる群から選択された材料を含む。
【０１２１】
一部の実施形態においては、本方法はさらに、第３の混合物を錠剤形態に圧縮または成形するステップを含む。
【０１２２】
一部の実施形態においては、第３の混合物は、第１のコンポーネントおよび第２のコンポーネントを第３のコンポーネントと組み合わせることによって形成され、この第３のコンポーネントは、１つ以上の鎮痛剤を含む第３の有効成分を含む。一部の実施形態においては、１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される。
【０１２３】
一部の実施形態においては、第１、第２および第３の有効成分はそれぞれ、１つ以上の鎮痛剤を含む。一部の実施形態においては、１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される。一部の実施形態においては、第１、第２および第３の有効成分はそれぞれ、５〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンを含む。一部の実施形態においては、第１、第２および第３の有効成分のうちの１つは、５〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンを含む。一部の実施形態においては、第１、第２および第３の有効成分のうちの２つは、５〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンを含む。
【０１２４】
他の実施形態においては、本方法は：１つ以上の鎮痛剤を含む第１の有効成分を含む第１の混合物を形成するステップ；上記第１の混合物を第１の遅延放出コーティングでコーティングして、コア構造を形成するステップであって、上記第１の遅延放出コーティングは、上記第１の混合物を、体液との直接接触後１〜４時間の遅延時間で放出する、ステップ；上記コア構造を第２の混合物でコーティングして、コーティング済みコア構造を形成するステップであって、上記第２の混合物は、１つ以上の鎮痛剤を含む第２の有効成分を含む、ステップ；および上記コーティング済みコア構造を第２の遅延放出コーティングでコーティングして、二重コーティング済みコア構造を形成するステップであって、上記第２の遅延放出コーティングは、上記第２の混合物を、経口投与後１〜４時間の遅延時間で放出する、ステップを含む。一部の実施形態においては、第１の混合物は、第２の混合物が放出されるまで、体液と直接接触しない。
【０１２５】
一部の実施形態においては、第１の有効成分または第２の有効成分中の１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される。
【０１２６】
一部の実施形態においては、第２の遅延放出コーティングは腸溶性コーティングである。
【０１２７】
一部の実施形態においては、第１の有効成分または第２の有効成分またはこれら両方はさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。
【０１２８】
一部の実施形態においては、第１の有効成分または第２の有効成分またはこれら両方は、アセトアミノフェンを含む。
【０１２９】
一部の実施形態においては、本方法はさらに、第３のコーティングを用いて二重コーティング済みコア構造をコーティングするステップであって、上記第３のコーティングは、１つ以上の鎮痛剤を含む第３の有効成分を含む、ステップを含む。一部の実施形態においては、上記第３の有効成分中の上記１つ以上の鎮痛剤は、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、ナブメトン、およびアセトアミノフェンからなる群から選択される。一部の実施形態においては、第３の有効成分は５ｍｇ〜２０００ｍｇの鎮痛剤を含む。一部の実施形態においては、第３の有効成分は、５ｍｇ〜２０００ｍｇのアセトアミノフェンを含む。
【０１３０】
関連する一部の実施形態においては、第３の有効成分はさらに、抗ムスカリン剤、抗利尿剤および鎮痙剤からなる群から選択される作用剤を含む。関連する他の実施形態においては、第１、第２および第３の有効成分はそれぞれ、アセトアミノフェンを含む。
【０１３１】
一部の実施形態においては、第１の遅延放出コーティングは、１つ以上の多糖類を含有するｐＨ非依存性ポリマーを含み、上記ｐＨ非依存性ポリマーは、胃および腸の両方における溶出に耐えるものの、結腸内で崩壊し得る。
【０１３２】
他の実施形態においては、第１の遅延放出コーティングまたは第２の遅延放出コーティングまたはこれら両方は、コア構造またはコーティング済みコア構造に有効成分および浸透圧剤を封入するための、水透過性であるが非水溶性であるフィルムコーティングを含む。消化管からの水が非水溶性フィルムを通過して緩徐にコア構造に拡散するにつれて、コアはフィルムが破裂するまで膨潤し、これにより有効成分が放出される。フィルムコーティングを調節して、多様な水透過速度または放出時間を可能としてよい。上述のように、薬剤の放出時間は、本体の底部にあって所定の細孔を含む、（エチルセルロース（ＥＣ）などの）非水溶性ポリマー膜の耐性および厚さと、低置換ヒドロキシプロピルセルロース（Ｌ−ＨＰＣ）およびグリコール酸ナトリウムなどの膨潤性添加剤の量とのバランスに依存した崩壊遅延時間によって、制御できる。経口投与後、ＧＩ液が細孔を経て浸透し、膨潤性添加剤の膨潤を引き起こし、これが、カプセルの構成要素を分離させる内圧をもたらす。
【０１３３】
他の実施形態においては、薬剤は浸透圧メカニズムによって放出される。一部の実施形態においては、第１の遅延放出コーティングまたは第２の遅延放出コーティングまたはこれら両方は、半透過性膜を含む。一部の実施形態においては、この半透過性膜を、ｐＨ依存性腸溶性コーティングでさらに被覆して、胃内容物の排出後まで放出を防止する。
【０１３４】
本発明は、制限的であると解釈されるべきでない以下の実施例によってさらに例示される。本明細書の全文にわたって引用された全ての参照文献、特許、および公開特許明細書の内容は、その全文を参照文献として本明細書に援用する。
【実施例１】
【０１３５】
（排尿衝動の阻害）
各々が早すぎる排尿衝動または尿意を経験し、適度に休息をしたと感じる十分な時間の睡眠を取るその能力が妨げられている、男性および女性の志願被験者２０名を組み入れた。各被験者は、就寝時間前にイブプロフェン４００〜８００ｍｇを単回用量として摂取した。少なくとも１４名の被験者が、排尿衝動によって目覚める頻度が高くないために、より良い休息が取れるようになったと報告した。
【０１３６】
数例の被験者は、数週間夜間にイブプロフェンを使用した後、排尿衝動の頻度の減少による利益はもはや認識されなかったと報告した。しかし、これらの被験者は、いずれも投与量の摂取を数日控えると利益が回復するとさらに報告した。より最近の試験により、より低い用量で、その後の利点が全く減少されることなく、同様の結果を達成することができることが確認されている。
【実施例２】
【０１３７】
（炎症性および非炎症性刺激物へのマクロファージの反応に対する鎮痛剤、ボツリヌス神経毒素および抗ムスカリン剤の効果）
（実験デザイン）
本試験は、ＣＯＸ２およびプロスタグランジン（ＰＧＥ、ＰＧＨなど）を介した炎症性および非炎症性刺激物に対するマクロファージ反応を制御する際の、鎮痛剤および抗ムスカリン剤の用量およびインビトロ有効性を判定するようデザインされている。膀胱細胞における炎症および非炎症エフェクターに対し、ベースライン（用量および動態）反応を確立する。簡単に述べると、多様なエフェクターの存在下および非存在下で、培養細胞を鎮痛剤および／または抗ムスカリン剤に曝露する。
【０１３８】
エフェクターは：炎症性刺激物として炎症性物質且つＣｏｘ２誘導物質であるリポ多糖（ＬＰＳ）；非炎症性刺激物として平滑筋収縮刺激剤であるカルバコールまたはアセチルコリン；陽性対照として既知のアセチルコリン放出阻害剤であるボツリヌス神経毒素Ａ；および細胞内でシクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ１およびＣＯＸ２）および末端プロスタグランジンシンターゼによるアラキドン酸（ＡＡ）、γ−リノレン酸（ＤＧＬＡ）、またはエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の連続酸化後に生成されるプロスタグランジンの前駆体としてＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡを含む。
【０１３９】
鎮痛剤は：アスピリンなどのサリチレート；アドビル、モトリン、ヌプリンおよびメディプレンなどのイソブチルプロパンフェノール酸誘導体（イブプロフェン）；アレヴェ、アナプロックス、アンタルジン、フェミナックスウルトラ、フラナックス、インザ、ミドール長時間鎮痛、ナルゲシン、ナポシン、ナプレラン、ナプロゲシック、ナプロシン、ナプロシン懸濁液、ＥＣ−ナプロシン、ナロシン、プロキセン、シンフレックスおよびゼノビドなどのナプロキセンナトリウム；インドメタシン（インドシン）などの酢酸誘導体、ナブメトンまたはレラフェンなどの１−ナフタレン酢酸誘導体；アセトアミノフェンまたはパラセタモール（タイレノール）などのＮ−アセチルパラアミノフェノール（ＡＰＡＰ）誘導体；およびセレコキシブを含む。
【０１４０】
抗ムスカリン薬はオキシブチニン、ソリフェナシン、ダリフェナシンおよびアトロピンを含む。
【０１４１】
マクロファージを以下による短時間（１〜２時間）または長時間（２４〜４８時間）の刺激に付す：
（１）種々の用量の各鎮痛剤単独。
（２）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（３）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（４）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（５）種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ単独。
（６）ＬＰＳ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（７）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（８）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（９）種々の用量の各抗ムスカリン剤単独。
（１０）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１１）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１２）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
【０１４２】
次に、ＰＧＨ２；ＰＧＥ；ＰＧＥ２；プロスタサイクリン；トロンボキサン；ＩＬ−１β；ＩＬ−６；ＴＮＦ−αの放出；ＣＯＸ２活性；ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの産生；ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−αおよびＣＯＸ２  ｍＲＮＡの産生；およびＣＤ８０、ＣＤ８６およびＭＨＣクラスＩＩ分子の表面発現について細胞を分析する。
【０１４３】
（材料および方法）
（マクロファージ細胞）
本試験ではマウスＲＡＷ２６４．７またはＪ７７４マクロファージ細胞（ＡＴＣＣより入手）を用いた。細胞は、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、および１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ１６４０を含有する培地で維持した。細胞は、５％ＣＯ２雰囲気下３７℃で培養し、週に１回分割（継代）した。
【０１４４】
（マクロファージ細胞のインビトロ鎮痛剤処理）
ＲＡＷ２６４．７マクロファージ細胞は、１ウェルにつき細胞培地１００μＬ中１．５×１０５個細胞／ウェルの細胞密度で９６ウェルプレートに播種した。細胞は、（１）多様な濃度の鎮痛剤（アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンまたはナプロキセン）、（２）マクロファージ細胞に対する炎症性刺激のエフェクターである、多様な濃度のリポ多糖（ＬＰＳ）、（３）非炎症性刺激のエフェクターである、多様な濃度のカルバコールまたはアセチルコリン、（４）鎮痛剤とＬＰＳまたは（５）鎮痛剤とカルバコールまたはアセチルコリンで処理した。簡単に述べると、鎮痛剤を無ＦＢＳ培地（すなわち１５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、および１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ１６４０）に溶解し、同培地で連続希釈することにより所望の濃度に希釈した。ＬＰＳ非存在下で鎮痛剤処理する細胞については、鎮痛剤溶液５０μＬと無ＦＢＳ培地５０μＬを各ウェルに加えた。ＬＰＳ存在下で鎮痛剤処理する細胞については、鎮痛剤溶液５０μＬと無ＦＢＳ培地中のＬＰＳ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ由来）５０μＬを各ウェルに加えた。全ての条件を２回ずつ試験した。
【０１４５】
２４または４８時間培養後、培養上清１５０μＬを採取し、８，０００ｒｐｍ、４℃で２分間遠心分離して細胞および残渣を除去し、ＥＬＩＳＡによるサイトカイン反応の分析のため−７０℃で保存した。細胞は捕集し、且つリン酸緩衝液（ＰＢＳ）５００μＬに遠心分離（１，５００ｒｐｍ、４℃で５分間）することにより洗浄した。その後、細胞の半分は液体窒素中で急速冷凍し、−７０℃で保存した。残りの細胞は蛍光モノクローナル抗体で染色し、フローサイトメトリーで分析した。
【０１４６】
（共刺激分子発現のフローサイトメトリー分析）
フローサイトメトリー分析用に、マクロファージを１００μＬのＦＡＣＳ緩衝液（２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）および０．０１％ＮａＮ３を含むリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ））で希釈し、ＦＩＴＣ−コンジュゲート抗ＣＤ４０、ＰＥ−コンジュゲート抗ＣＤ８０、ＰＥコンジュゲート抗ＣＤ８６抗体、抗ＭＨＣクラスＩＩ（Ｉ−Ａｄ）ＰＥ（ＢＤバイオサイエンス）を添加して、４℃で３０分間染色した。その後、細胞をＦＡＣＳ緩衝液３００μＬ中で遠心分離（１，５００ｒｐｍ、４℃で５分間）することにより洗浄した。２回目の洗浄後、細胞をＦＡＣＳ緩衝液２００μＬに再懸濁し、さらにＡｃｃｕｒｉ  Ｃ６フローサイトメーター（ＢＤバイオサイエンス）を用いて、所与のマーカー（単陽性）、またはマーカーの組み合わせ（二重陽性）を発現した細胞の割合を分析した。
【０１４７】
（ＥＬＩＳＡによるサイトカイン反応の分析）
培養上清をサイトカイン特異的ＥＬＩＳＡに付し、鎮痛剤、ＬＰＳ単独、またはＬＰＳと鎮痛剤の組み合わせにより処理したマクロファージの培養におけるＩＬ−１β、ＩＬ−６およびＴＮＦ−α反応を判定した。分析は、０．１Ｍ重炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９．５）中の抗マウスＩＬ−６、ＴＮＦ−α  ｍＡｂ（ＢＤバイオサイエンス）またはＩＬ−１β  ｍＡｂ（Ｒ＆Ｄシステムズ）１００μＬで一晩コーティングしたＮｕｎｃ  ＭａｘｉＳｏｒｐ  Ｉｍｍｕｎｏｐｌａｔｅｓ（Ｎｕｎｃ）上で実施した。ＰＢＳ（２００μＬ／ウェル）で２回洗浄した後、各ウェルにＰＢＳ３％ＢＳＡ２００μＬを添加し（ブロッキング）、さらにプレートを室温で２時間インキュベートした。２００μＬ／ウェルを添加することによりプレートを再度２回洗浄し、サイトカイン標準液および培養上清の連続希釈１００μＬをそれぞれ２ウェルに添加し、プレートを４℃で一晩インキュベートした。最後に、プレートを２回洗浄し、二次ビオチニル化抗マウスＩＬ−６、ＴＮＦα  ｍＡｂ（ＢＤバイオサイエンス）またはＩＬ−１β（Ｒ＆Ｄシステムズ）１００μＬ、その後ペルオキシダーゼ標識ヤギ抗ビオチンｍＡｂ（ベクターラボラトリーズ）でインキュベートした。２，２’−アジノ−ビス（３）−エチルベンジルチアゾリン−６−スルホン酸（ＡＢＴＳ）基質およびＨ２Ｏ２（シグマ）の添加によって呈色反応を発生させ、Ｖｉｃｔｏｒ（登録商標）Ｖマルチラベルプレートリーダー（パーキンエルマー）により４１５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【０１４８】
（ＣＯＸ２活性と、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの産生の測定）
培養マクロファージ中のＣＯＸ２活性は、連続競合ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄシステムズ）により測定する。ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの産生は、ｃＡＭＰアッセイおよびｃＧＭＰアッセイにより判定する。これらのアッセイは当該技術で常用的に実施される。
【０１４９】
(結果)
表１は、Ｒａｗ２６４マクロファージ細胞株を用いて実施した実験、および共刺激分子ＣＤ４０およびＣＤ８０の細胞表面発現に対する鎮痛剤の効果についての主要な所見を要約する。これらの分子の発現はＣＯＸ２および炎症性シグナルによって刺激されるので、これを評価してＣＯＸ２阻害の機能的結果を判定した。
【表１】
2018526442.tif 000003
【０１５０】
表２に示すように、アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンおよびナプロキセンは、共刺激分子の発現を阻害するのではなくむしろ促進するとみられる最高用量（すなわち５×１０６ｎＭ）を除き、全ての試験用量（すなわち５×１０５ｎＭ、５×１０４ｎＭ、５×１０３ｎＭ、５×１０２ｎＭ、５０ｎＭおよび５ｎＭ）で、マクロファージによる共刺激分子ＣＤ４０およびＣＤ８０の基礎的発現を阻害する。図１Ａおよび１Ｂに示すように、ＣＤ４０およびＣＤ５０発現に対するそのような阻害効果は、０．０５ｎＭ（すなわち０．００００５μＭ）と低い鎮痛剤用量で認められた。この所見は、小用量の鎮痛剤の制御放出は大用量の急激な送達よりも好ましくなりうるという概念を裏付ける。実験より、アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンおよびナプロキセンが、ＬＰＳの誘導によるＣＤ４０およびＣＤ８０の発現に対し、同様の阻害効果を有することも明らかになった。
【表２】
2018526442.tif 000004
【０１５１】
表３は、ヒト成人において経口治療用量を投与した後、鎮痛剤の血清レベルを測定した数件の試験の結果を要約する。表３に示すように、経口治療用量の投与後の最高血清レベルは、１０４から１０５ｎＭの範囲内にある。したがって、表２におけるインビトロ試験した鎮痛剤の用量は、ヒトにおいてインビボで達成可能な濃度の範囲を包含する。
【表３】
2018526442.tif 000005
【実施例３】
【０１５２】
（炎症性および非炎症性刺激へのマウス膀胱平滑筋細胞の反応に対する鎮痛剤、ボツリヌス神経毒素および抗ムスカリン剤の効果）
（実験デザイン）
本試験は、実施例２で判定した鎮痛剤の至適用量が、細胞培養または組織培養中の膀胱平滑筋細胞にどのように影響するか特性解析し、且つ異なるクラスの鎮痛剤が相乗作用して、ＣＯＸ２およびＰＧＥ２反応をより効率よく阻害することができるか検討するようデザインされる。
【０１５３】
エフェクター、鎮痛剤および抗ムスカリン剤は実施例２に記載されている。
【０１５４】
マウス膀胱平滑筋細胞の一次培養を以下による短時間（１〜２時間）または長時間（２４〜４８時間）の刺激に付す：
（１）種々の用量の各鎮痛剤単独。
（２）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（３）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（４）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（５）種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ単独。
（６）ＬＰＳ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（７）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（８）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（９）種々の用量の各抗ムスカリン剤単独。
（１０）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１１）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１２）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
【０１５５】
次に、ＰＧＨ２；ＰＧＥ；ＰＧＥ２；プロスタサイジン；トロンボキサン；ＩＬ−１β；ＩＬ−６；ＴＮＦ−αの放出；ＣＯＸ２活性；ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの産生；ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−αおよびＣＯＸ２  ｍＲＮＡの産生；およびＣＤ８０、ＣＤ８６およびＭＨＣクラスＩＩ分子の表面発現について細胞を分析する。
【０１５６】
（材料および方法）
（マウス膀胱細胞の分離および精製）
安楽死動物Ｃ５７ＢＬ／６マウス（８〜１２週齢）より膀胱細胞を摘出し、さらに酵素消化により細胞を分離した後パーコール勾配上で精製した。簡単に述べると、マウス１０匹から採取した膀胱を、消化緩衝液（ＲＰＭＩ１６４０、２％ウシ胎児血清、０．５ｍｇ／ｍＬコラゲナーゼ、３０μｇ／ｍＬ  ＤＮアーゼ）１０ｍＬ中で、はさみを用いて細かなスラリー状に細断した。膀胱スラリーを３７℃で３０分間酵素的に消化した。未消化の断片はセルトレーナーでさらに分散させた。細胞懸濁液をペレット化し、単核球上の精製用不連続２０％、４０％、および７５％パーコール勾配に加えた。各実験には５０〜６０個の膀胱を用いた。
【０１５７】
ＲＰＭＩ１６４０で複数回洗浄した後、膀胱細胞を１０％ウシ胎児血清、１５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、および１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ１６４０に再懸濁し、透明底黒色９６ウェル細胞培養マイクロプレートに、細胞密度３×１０４／ウェルで１００μＬを播種した。細胞は、５％ＣＯ２雰囲気下、３７℃で培養した。
【０１５８】
（細胞のインビトロ鎮痛剤処理）
膀胱細胞を、鎮痛剤溶液（５０μＬ／ウェル）単独か、または非炎症性刺激物の例としてカルバコール（１０モル、５０μＬ／ウェル）、または非炎症性刺激物の例としてＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍのリポ多糖（ＬＰＳ）（１μｇ／ｍＬ，５０μＬ／ウェル）と共に処理した。細胞に他のエフェクターを添加しない場合は、ウシ胎児血清を含有しないＲＰＭＩ１６４０をウェルに５０μＬ加えて最終体積を２００μＬに調節した。
【０１５９】
２４時間培養した後、培養上清１５０μＬを採取し、８，０００ｒｐｍ、４℃で２分間遠心分離して細胞および残渣を除去し、ＥＬＩＳＡによるプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）反応の分析のため−７０℃で保存した。細胞を固定し、透過処理し、ブロッキングして、蛍光原基質を用いてシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ２）を検出した。一部の実験細胞は、ＣＯＸ２反応の分析のためにインビトロで１２時間刺激した。
【０１６０】
（ＣＯＸ２反応の分析）
ＣＯＸ２反応は、ヒト／マウス総ＣＯＸイムノアッセイ（Ｒ＆Ｄシステムズ）を用い、メーカーの指示に従って、細胞ベースＥＬＩＳＡにより分析した。簡単に述べると、細胞の固定および透過処理の後、マウス抗総ＣＯＸ２およびウサギ抗総ＧＡＰＤＨを、透明底黒色９６ウェル細胞培養マイクロプレートのウェルに加えた。インキュベーションおよび洗浄後、ＨＲＰコンジュゲート抗マウスＩｇＧ、およびＡＰコンジュゲート抗ウサギＩｇＧをウェルに加えた。さらに１回インキュベートして１連の洗浄を実施した後、ＨＲＰ−およびＡＰ−蛍光原基質を添加した。最後に、Ｖｉｃｔｏｒ（登録商標）Ｖマルチラベルプレートリーダー（パーキンエルマー）を用いて、６００ｎｍ（ＣＯＸ２蛍光）および４５０ｎｍ（ＧＡＰＤＨ蛍光）で発光する蛍光を読み取った。結果は、相対蛍光単位（ＲＦＵ）として測定し、ハウスキーピングタンパク質ＧＡＰＤＨに対して正規化した、総ＣＯＸ２の相対レベルとして表記する。
【０１６１】
（ＰＧＥ２反応の分析）
プロスタグランジンＥ２反応は、連続競合ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄシステムズ）により分析した。より具体的には、培養上清またはＰＧＥ２標準液を、ヤギ抗マウスポリクローナル抗体でコーティングした９６ウェルポリスチレンマイクロプレートのウェルに加えた。マイクロプレートシェーカー上で１時間インキュベートした後、ＨＲＰコンジュゲートＰＧＥ２を添加し、プレートを室温でさらに２時間インキュベートした。その後、プレートを洗浄しＨＲＰ基質溶液を各ウェルに加えた。３０分間呈色させ、硫酸の添加により反応を停止した後、５７０ｎｍで波長補正しながら４５０ｎｍでプレートを読み取った。結果はＰＧＥ２の平均ｐｇ／ｍＬとして表記する。
【０１６２】
（その他の分析）
ＰＧＨ２；ＰＧＥ、プロスタサイジン；トロンボキサン；ＩＬ−１β；ＩＬ−６；およびＴＮＦ−αの放出；ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの産生；ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−αおよびＣＯＸ２  ｍＲＮＡの産生；およびＣＤ８０、ＣＤ８６およびＭＨＣクラスＩＩ分子の表面発現を、実施例２に記載の通りに判定する。
【０１６３】
（結果）
（鎮痛剤は炎症性刺激物に対するマウス膀胱細胞のＣＯＸ２反応を阻害する）
数種類の鎮痛剤（アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンおよびナプロキセン）を、５μＭまたは５０μＭの濃度でマウス膀胱細胞に対して試験し、鎮痛剤がＣＯＸ２反応を誘導することが可能であるか判定した。２４時間培養の分析より、試験した鎮痛剤はいずれもインビトロでマウス膀胱細胞のＣＯＸ２反応を誘導しないことが示された。
【０１６４】
カルバコールまたはＬＰＳ刺激へのマウス膀胱細胞のＣＯＸ２反応に対する、これらの鎮痛剤の効果もインビトロで試験した。表１に示すように、試験したカルバコールの用量はマウス膀胱細胞のＣＯＸ２レベルに対して有意な効果がない。その一方で、ＬＰＳは総ＣＯＸ２レベルを有意に上昇させた。興味深いことに、アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンおよびナプロキセンは、いずれもＣＯＸ２レベルに対するＬＰＳの作用を抑制することが可能であった。鎮痛剤の抑制効果は、これらの薬剤が５μＭまたは５０μＭのいずれかで試験された場合に見られた（表４）。
【表４】
2018526442.tif 000006
【０１６５】
（鎮痛剤は炎症性刺激に対するマウス膀胱細胞のＰＧＥ２反応を阻害する）
マウス膀胱細胞の培養上清におけるＰＧＥ２の分泌を測定して、鎮痛剤によるマウス膀胱細胞ＣＯＸ２レベルの変化の生物学的重要性を判定した。表５に示すように、非刺激膀胱細胞またはカルバコールの存在下で培養された膀胱細胞の培養上清中に、ＰＧＥ２は検出されなかった。上述のＣＯＸ２反応と一致して、ＬＰＳによるマウス膀胱細胞の刺激は高レベルのＰＧＥ２の分泌を誘導した。鎮痛剤アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンおよびナプロキセンの添加により、ＰＧＥ２分泌に対するＬＰＳの作用が抑制され、また、５または５０μＭ用量の鎮痛剤で処理された細胞の反応の間には差は見られなかった。
【表５】
2018526442.tif 000007
【０１６６】
まとめると、これらのデータより、５μＭまたは５０μＭの鎮痛剤単独では、マウス膀胱細胞のＣＯＸ２およびＰＧＥ２反応を誘導しないことが示される。しかし、５μＭまたは５０μＭの鎮痛剤は、ＬＰＳ（１μｇ／ｍＬ）でインビトロ刺激したマウス膀胱細胞のＣＯＸ２およびＰＧＥ２反応を有意に阻害する。カルバコール（１ｍＭ）で刺激されたマウス膀胱細胞のＣＯＸ２およびＰＧＥ２反応に対しては、鎮痛剤の有意な効果は認められなかった。
【実施例４】
【０１６７】
（マウス膀胱平滑筋細胞収縮に対する鎮痛剤、ボツリヌス神経毒素および抗ムスカリン剤の効果）
（実験デザイン）
培養マウスまたはラット膀胱平滑筋細胞およびマウスまたはラット膀胱平滑筋組織を、多様な濃度の鎮痛剤および／または抗ムスカリン剤の存在下で、炎症性刺激および非炎症性刺激に曝露する。刺激誘導性筋収縮を測定して、鎮痛剤および／または抗ムスカリン剤の阻害効果を評価する。
【０１６８】
エフェクター、鎮痛剤および抗ムスカリン剤は実施例２に記載されている。
【０１６９】
マウス膀胱平滑筋細胞の一次培養を下記による短時間（１〜２時間）または長時間（２４〜４８時間）の刺激に付す：
（１）種々の用量の各鎮痛剤単独。
（２）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（３）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（４）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（５）種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ単独。
（６）ＬＰＳ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（７）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（８）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（９）種々の用量の各抗ムスカリン剤単独。
（１０）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１１）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１２）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
【０１７０】
（材料および方法）
実施例３に記載された通りに、一次マウス膀胱細胞を分離する。一部の実験においては、膀胱組織の培養を用いる。膀胱平滑筋細胞の収縮をＧｒａｓｓポリグラフ（Ｑｕｉｎｃｙ  Ｍａｓｓ、米国）で記録する。
【実施例５】
【０１７１】
（マウス膀胱平滑筋細胞のＣＯＸ２およびＰＧＥ２反応に対する経口鎮痛剤および抗ムスカリン剤の効果）
（実験デザイン）
正常マウスおよび過活動膀胱症候群を有するマウスに、アスピリン、ナプロキセンナトリウム、イブプロフェン、インドシン、ナブメトン、タイレノール、セレコキシブ、オキシブチニン、ソリフェナシン、ダリフェナシン、アトロピンおよびその組み合わせの経口用量を投与する。対照群は、非投与正常マウスおよび過活動膀胱症候群を有する非投与ＯＡＢマウスを含む。最終投与より３０分後、膀胱を採取し、生体外でカルバコールまたはアセチルコリンにより刺激する。一部の実験においては、膀胱をカルバコールで刺激する前にボツリヌス神経毒素Ａで処理する。動物は代謝ケージで維持し、排尿の頻度（および尿量）を評価する。水摂取量およびケージ敷き藁重量をモニタリングすることにより、膀胱排出量を算出する。ＥＬＩＳＡにより血清ＰＧＨ２、ＰＧＥ、ＰＧＥ２、プロスタサイジン、トロンボキサン、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰレベルを測定する。フローサイトメトリーで全血球中のＣＤ８０、ＣＤ８６、およびＭＨＣクラスＩＩ発現を測定する。
【０１７２】
実験終了時に動物を安楽死させ、Ｇｒａｓｓポリグラフで生体外膀胱収縮を記録する。膀胱の一部をホルマリンで固定し、免疫組織化学検査によりＣＯＸ２反応を分析する。
【実施例６】
【０１７３】
（炎症性および非炎症性刺激へのヒト膀胱平滑筋細胞の反応に対する鎮痛剤、ボツリヌス神経毒素および抗ムスカリン剤の効果）
（実験デザイン）
本試験は、実施例１〜５で判定した鎮痛剤の至適用量が、細胞培養または組織培養中のヒト膀胱平滑筋細胞にどのように影響するか特性解析し、且つ異なるクラスの鎮痛剤が相乗作用してＣＯＸ２およびＰＧＥ２反応をより効率よく阻害することができるか検討するようデザインされる。
【０１７４】
エフェクター、鎮痛剤および抗ムスカリン剤は実施例２に記載されている。
【０１７５】
ヒト膀胱平滑筋細胞を以下による短時間（１〜２時間）または長時間（２４〜４８時間）の刺激に付す：
（１）種々の用量の各鎮痛剤単独。
（２）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（３）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（４）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（５）種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ単独。
（６）ＬＰＳ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（７）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（８）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（９）種々の用量の各抗ムスカリン剤単独。
（１０）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。  
（１１）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１２）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
【０１７６】
次に、ＰＧＨ２；ＰＧＥ；ＰＧＥ２；プロスタサイジン；トロンボキサン；ＩＬ−１β；ＩＬ−６；ＴＮＦαの放出；ＣＯＸ２活性；ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの産生；ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦαおよびＣＯＸ２  ｍＲＮＡの産生；およびＣＤ８０、ＣＤ８６およびＭＨＣクラスＩＩ分子の表面発現について細胞を分析する。
【実施例７】
【０１７７】
（ヒト膀胱平滑筋細胞収縮に対する鎮痛剤、ボツリヌス神経毒素および抗ムスカリン剤の効果）
（実験デザイン）
培養ヒト膀胱平滑筋細胞を、多様な濃度の鎮痛剤および／または抗ムスカリン剤の存在下で、炎症性刺激および非炎症性刺激に曝露する。刺激誘導性筋収縮を測定して、鎮痛剤および／または抗ムスカリン剤の阻害効果を評価する。
【０１７８】
エフェクター、鎮痛剤および抗ムスカリン剤は実施例２に記載されている。
【０１７９】
ヒト膀胱平滑筋細胞を以下による短時間（１〜２時間）または長時間（２４〜４８時間）の刺激に付す：
（１）種々の用量の各鎮痛剤単独。
（２）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（３）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（４）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各鎮痛剤。
（５）種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ単独。
（６）ＬＰＳ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（７）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（８）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量のボツリヌス神経毒素Ａ。
（９）種々の用量の各抗ムスカリン剤単独。
（１０）ＬＰＳ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１１）カルバコールまたはアセチルコリン存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
（１２）ＡＡ、ＤＧＬＡまたはＥＰＡ存在下で種々の用量の各抗ムスカリン剤。
【０１８０】
膀胱平滑筋細胞の収縮をＧｒａｓｓポリグラフ（Ｑｕｉｎｃｙ  Ｍａｓｓ、米国）で記録する。
【実施例８】
【０１８１】
（炎症性および非炎症性シグナルへの正常ヒト膀胱平滑筋細胞の反応に対する鎮痛剤の効果）
（実験デザイン）
（正常ヒト膀胱平滑筋細胞の培養）
正常ヒト膀胱平滑筋細胞は、肉眼的に正常なヒト膀胱片から酵素消化によって分離した。細胞は、１０％ウシ胎児血清、１５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１００Ｕ／ｍＬペニシリンおよび１００ｍｇ／ｍＬストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ１６４０中で、５％ＣＯ２雰囲気下、３７℃での培養によりインビトロで消費し、週に１回、細胞を剥離させるトリプシン処理の後で、新たな培養フラスコに再播種することにより継代した。培養第１週目は、培地に０．５ｎｇ／ｍＬ上皮成長因子、２ｎｇ／ｍＬ線維芽細胞成長因子、および５μｇ／ｍＬインスリンを添加した。
【０１８２】
（正常ヒト膀胱平滑筋細胞のインビトロ鎮痛剤処理）
トリプシン処理し、細胞密度３×１０４細胞／ウェル１００μＬでマイクロ培養プレートに播種した膀胱平滑筋細胞を、鎮痛剤溶液（５０μＬ／ウェル）単独か、または非炎症性刺激物の例としてカルバコール（１０モル、５０μＬ／ウェル）、または非炎症性刺激物の例としてＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍのリポ多糖（ＬＰＳ）（１μｇ／ｍＬ、５０μＬ／ウェル）と共に処理した。細胞に他のエフェクターを添加しない場合は、ウシ胎児血清を含有しないＲＰＭＩ１６４０をウェルに５０μＬ加えて、最終体積を２００μＬに調節した。
【０１８３】
２４時間培養した後、培養上清１５０μＬを採取し、８，０００ｒｐｍ、４℃で２分間遠心分離して細胞および残渣を除去し、ＥＬＩＳＡによるプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）反応の分析のため−７０℃で保存した。細胞を固定し、透過処理し、ブロッキングして、蛍光原基質を用いてＣＯＸ２を検出した。一部の実験では、ＣＯＸ２、ＰＧＥ２およびサイトカイン反応の分析を目的として、細胞をインビトロで１２時間刺激した。
【０１８４】
（ＣＯＸ２、ＰＧＥ２およびサイトカイン反応の分析）
ＣＯＸ２およびＰＧＥ２反応を実施例３に記載の方法で分析した。サイトカイン反応を実施例２に記載の方法で分析した。
【０１８５】
（結果）
鎮痛剤は、炎症性および非炎症性刺激に対する正常ヒト膀胱平滑筋細胞のＣＯＸ２反応を阻害する―２４時間培養後の細胞および培養上清の分析により、試験した鎮痛剤は、いずれも単独で正常ヒト膀胱平滑筋細胞のＣＯＸ２反応を誘導しないことが示された。しかし表６に要約したように、カルバコールは、正常ヒト膀胱平滑筋細胞において低いながらも有意なＣＯＸ２反応を誘導した。その一方で、ＬＰＳ処理は正常ヒト膀胱平滑筋細胞においてより高いレベルのＣＯＸ２反応をもたらした。アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンおよびナプロキセンは、いずれもＣＯＸ２レベルに対するカルバコールおよびＬＰＳの作用を抑制することが可能であった。これらの薬剤が５μＭまたは５０μＭのいずれで試験された場合でも、ＬＰＳ誘導性反応に対する鎮痛剤の抑制効果が見られた。
【表６】
2018526442.tif 000008
【０１８６】
鎮痛剤は炎症性および非炎症性刺激に対する正常ヒト膀胱平滑筋細胞のＰＧＥ２反応を阻害する―カルバコールおよびＬＰＳは、上述のＣＯＸ２反応の誘導と一致して、いずれも正常ヒト膀胱平滑筋細胞によるＰＧＥ２の産生を誘導した。アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンおよびナプロキセンも、５μＭまたは５０μＭでＬＰＳ誘導性ＰＧＥ２反応を抑制することが確認された（表７）。
【表７】
2018526442.tif 000009
【０１８７】
鎮痛剤は炎症性刺激に対する正常ヒト膀胱細胞のサイトカイン反応を阻害する―２４時間培養後の細胞および培養上清の分析により、試験した鎮痛剤は、いずれも単独で正常ヒト膀胱平滑筋細胞におけるＩＬ−６またはＴＮＦα分泌を誘導しないことが示された。表８および９に示されるように、正常ヒト膀胱平滑筋細胞において、カルバコール試験用量は低いながらも有意なＴＮＦαおよびＩＬ−６反応を誘導した。その一方で、ＬＰＳ処理によりこれらの炎症誘発性サイトカインの強い誘導がもたらされた。アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェンおよびナプロキセンは、ＴＦＮαおよびＩＬ−６反応に対するカルバコールおよびＬＰＳの作用を抑制する。これらの薬剤が５μＭまたは５０μＭのいずれで試験された場合でも、ＬＰＳ誘導性反応に対する鎮痛剤の抑制効果が見られた。
【表８】
2018526442.tif 000010
【表９】
2018526442.tif 000011
【０１８８】
一次正常ヒト膀胱平滑筋細胞を分離し、培養し、非炎症性（カルバコール）および炎症性（ＬＰＳ）刺激物の存在下で、鎮痛剤に対するその反応について評価した。この試験の目標は、正常ヒト膀胱平滑筋細胞が、マウス膀胱細胞で先に認められた所見を繰り返すか否かを判定することであった。
【０１８９】
上述の実験は、遅延放出、または延長放出製剤、または遅延および延長放出製剤中の鎮痛剤および／または抗ムスカリン剤によって繰り返される。
【０１９０】
上記は、当業者に本発明を実践する方法を教示することを目的としており、且つ本記載を読んだ後で当業者に明らかとなる、その明白な変更または変法の全てを詳述することを意図していない。しかし、そうした全ての明白な変更および変法は、以下の請求項に定義される本発明の範囲内に含まれることが意図される。請求項は、文脈が具体的に反対のことを示さない限り、請求された要素およびそこで意図される目的を満たすために有効である任意の順にあるステップを包含するよう意図される。
【図１】
2018526442.tif 000012
【国際調査報告】
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