(57)【要約】本開示は二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ、抗ＥｒｂＢ３抗体を、制御性Ｔ細胞作用物質を妨害する１つ以上の治療薬と組み合わせて使用する、患者における癌のための治療方法を提供する。ある一定の実施形態では、前記１つ以上の治療薬はヒトＰＤ−Ｌ１に免疫特異的に結合する拮抗性抗受容体抗体であってもよい。これらの方法は患者に、有効量の、ヒトＩＧＦ−１Ｒ（ＣＤ２２１）の細胞外ドメインおよびヒトＥｒｂＢ３への免疫特異的結合を示す二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ／抗ＥｒｂＢ３抗体を、Ｔｒｅｇ活性を妨害することができる療法と共に投与することを含む。
2018516263.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト患者において癌を治療するための、免疫調節薬と組み合わせた、治療的有効量のイスチラツマブの使用であって、前記免疫調節薬は、（ａ）ヒトＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、または４−１ＢＢに免疫特異的に結合する作動性抗受容体抗体；（ｂ）ヒトＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、ＫＩＲ、ＣＤ４７、ＣＤ２５、Ｂ７−Ｈ３、またはＢ７−Ｈ４に免疫特異的に結合する拮抗性抗受容体抗体；ならびに（ｃ）ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦβ、アンジオポエチン（ａｎｇｉｏｐｏｅｔｉｎ）−２、ＶＥＧＦ、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３、またはＴＮＦαの機能をブロックする抗リガンド抗体からなる群より選択される、使用。
【請求項２】
前記癌は、結腸直腸癌、メラノーマ、Ｂ細胞リンパ腫および線維肉腫からなる群より選択される、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記ヒト患者は、前記癌を治療するための前記イスチラツマブの投与前に、血清中に検出可能な遊離ＩＧＦ−１を有さない、請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
前記ＰＤ−１遮断抗体はニボルマブである、請求項１−３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
前記癌はメラノーマである、請求項１−４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
前記ヒト患者は、前記イスチラツマブの投与前に、能動自己免疫状態を有さない、請求項１−５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
前記イスチラツマブは、前記ヒト患者において前記癌を治療するために、２週間に１回投与される、請求項１−６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記イスチラツマブは、４０ｍｇ／ｋｇまたは２．８ｇの用量で２週間に１回投与される、請求項１−７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記ＰＤ−１遮断抗体は２週間に１回、３ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１−８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
前記抗ＣＴＬＡ−４抗体はイピリムマブまたはトレメリムマブである、請求項１−３および５−８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１１】
前記抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、およびピディリズマブからなる群より選択される、請求項１−９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１２】
前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、およびアベルマブからなる群より選択される、請求項１−３および５−８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１３】
前記抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
前記免疫調節薬はリリルマブである、請求項１−３および５−８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１５】
免疫調節薬は抗ＣＴＬＡ−４抗体であり、前記癌はメラノーマである、請求項１−３、５−８、および１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１６】
能動自己免疫状態と診断されていないヒト患者において、結腸直腸癌、メラノーマ、Ｂ細胞リンパ腫または線維肉腫癌を治療するための、免疫腫瘍学単独療法としての、治療的有効量のイスチラツマブの使用。
【請求項１７】
前記ヒト患者はＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する免疫細胞を有する、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記治療的有効量のイスチラツマブは週に１回または２週間に１回投与される、請求項１５−１７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１９】
イスチラツマブの前記治療的有効量は、２週間に１回投与される、２．８ｇ、２．２４ｇ、または１．９６ｇの固定用量または４０ｍｇ／ｋｇである、請求項１５−１８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２０】
ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する免疫細胞を有し、能動自己免疫状態と診断されていないヒト患者において、結腸直腸癌、メラノーマ、Ｂ細胞リンパ腫または線維肉腫癌を治療するための、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体および抗ＰＤ−１抗体からなる群より選択される免疫調節薬と組み合わされた、治療的有効量のイスチラツマブから構成される抗悪性腫瘍療法の使用。
【請求項２１】
前記ヒト患者はＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現するＴｒｅｇ細胞を有する、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
前記治療的有効量のイスチラツマブは週に１回または２週間に１回投与される、請求項２０または２１に記載の使用。
【請求項２３】
イスチラツマブの前記治療的有効量は、２週間に１回投与される、２．８ｇ、２．２４ｇ、または１．９６ｇの固定用量または４０ｍｇ／ｋｇである、請求項２０−２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２４】
前記患者は、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３の少なくとも１つを発現しない癌細胞を有する、請求項１６−２３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２５】
能動自己免疫状態と診断されておらず、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する免疫細胞を有するヒト患者において、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３の少なくとも１つを発現しない癌を治療するための免疫腫瘍学としての、治療的有効量のイスチラツマブの使用。
【請求項２６】
前記癌は、結腸直腸癌、メラノーマ、Ｂ細胞リンパ腫および線維肉腫癌からなる群より選択される、請求項１６に記載の使用。
【請求項２７】
前記治療的有効量のイスチラツマブは、単独療法として、別の免疫調節薬なしで、週に１回または２週間に１回投与される、請求項２４−２６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２８】
イスチラツマブの前記治療的有効量は、２週間に１回投与される、２．８ｇ、２．２４ｇ、または１．９６ｇの固定用量または４０ｍｇ／ｋｇである、請求項２７に記載の使用。
【請求項２９】
能動自己免疫状態と診断されていないヒト患者において、能動自己免疫状態と診断されておらず、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する免疫細胞を有するヒト患者において、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３の少なくとも１つを発現しない癌を治療するための、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体および抗ＰＤ−１抗体からなる群より選択される免疫調節薬と組み合わせた、イスチラツマブから構成される抗悪性腫瘍療法の使用。
【請求項３０】
前記癌は、結腸直腸癌、メラノーマ、Ｂ細胞リンパ腫および線維肉腫癌からなる群より選択される、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記治療的有効量のイスチラツマブは、イスチラツマブおよび前記免疫調節薬から構成される抗悪性腫瘍療法として、週に１回または２週間に１回投与される、請求項２９または３０に記載の使用。
【請求項３２】
イスチラツマブの前記治療的有効量は、２週間に１回投与される、２．８ｇ、２．２４ｇ、または１．９６ｇの固定用量または４０ｍｇ／ｋｇである、請求項３１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、それぞれ、２０１５年５月２９日および２０１５年１０月２３に出願された米国仮特許出願第６２／１６８，５５３号および６２／２４５，８２５号の優先権および恩典を主張する。前記特許出願の全内容はその全体として参照により組み込まれる。
【０００２】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で、電子的に提出されており、これによりその全体が参照により組み込まれる配列表を含む。２０１６年５月２７に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーは、ＭＭＪ＿０６７ＰＣ＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔと命名され、サイズは９８４，９０２バイトである。
【背景技術】
【０００３】
腫瘍細胞は細胞の増殖を刺激する成長因子およびサイトカインに対する受容体を発現する。そのような受容体に対する抗体は、成長因子およびサイトカインにより媒介される細胞増殖の刺激をブロックするのに有効となり得、よって、腫瘍細胞増殖および腫瘍成長を阻害することができる。癌細胞上の受容体を標的にする市販の治療抗体としては、例えば、乳癌の治療のための、ＨＥＲ２受容体（ＥｒｂＢ２としても知られている）を標的にするトラスツズマブ、および結腸直腸癌および頭頸部癌の治療のための、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１またはＥｒｂＢ１としても知られている）を標的にするセツキシマブが挙げられる。開発中の抗体としては、ＨＥＲ３受容体（ＥｒｂＢ３としても知られている）を標的にし、いくつかの型の癌の治療のために開発されているセリバンツマブ、および、ＴＲＡＩＬ受容体に対する抗体であるマパツズマブが挙げられる。
【０００４】
イスチラツマブ（ｉｓｔｉｒａｔｕｍａｂ）（ＭＭ−１４１）はＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３に結合し、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３シグナル伝達を共阻害する完全なヒト、四価、二重特異性モノクローナル抗体である（例えば、米国特許第８，４７６，４０９号および本明細書において開示される）。システムバイオロジーアプローチを使用して、ＭＭ−１４１は、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２のＩＧＦ−１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）への結合、ヘレグリン（ＨＲＧ）のその受容体ＥｒｂＢ３への結合のブロッキングで、単一特異性抗体およびそれらの組み合わせよりも活性になるように設計された。これらの研究により、ＩＧＦ−１Ｒを単純に阻害することは十分ではないことも証明された。というのも、ＩＧＦ−１Ｒの阻害は、ＥｒｂＢ３発現の増加に至らしめ、よって、ＥｒｂＢ３が補償メカニズムとして作用することができるようになるからである。よって、ＩＧＦ−１および／またはＥｒｂＢ３に依存する癌細胞を効果的に阻害するためには、この経路の二重遮断が必要とされる。
【０００５】
免疫療法は、迅速に、悪性疾患の治療において、患者および腫瘍学者にとって重要な選択肢となった。免疫療法は、その最も基本的なレベルでは、癌および疾患と闘う免疫系を使用する。免疫系は適正に働いている場合、体内の外来および有害成分を同定し、それらを排除することができる。例えば、患者がインフルエンザウイルスまたは細菌感染に感染された場合、免疫系は感染部位に白血球および他の免疫細胞を動員する。そこに到達するとすぐに、免疫系の異なる成分が一緒に働き、外来ウイルスまたは細菌を標的にし、それらを体内から除去する。
【０００６】
癌細胞は様々なメカニズムを使用して、免疫系にとって不可視なままとなっている。場合によっては、癌細胞は、細胞が外来性であり、よって破壊のために標的とされるものであると認識するために、免疫系によって通常使用される細胞表面マーカーまたはタンパク質を下方制御する。癌細胞およびその微小環境内の他の細胞はまた、サイトカインまたはケモカインと呼ばれる可溶性タンパク質を分泌することができ、それらは、免疫細胞の機能を制限する。さらに、癌細胞は免疫系に、それらが破壊されるべきではない正常または「宿主」細胞であると思いこませるために、他の細胞を動員することができる。
【０００７】
正常組織を攻撃するおよび／または自己免疫疾患につながることのないように免疫系を防止するために身体が使用するメカニズムの１つは、任意の位置での制御性Ｔ細胞（「Ｔｒｅｇ」）の数を調節することである。Ｔｒｅｇの数または機能のいずれかの重大な減少につながる遺伝的突然変異は自己免疫疾患に至らしめることが報告されている。しかしながら、癌細胞は、それらを免疫系に対して不可視なものとするために、Ｔｒｅｇをその微小環境に動員することによりこのパラダイムを改変させた。多くの研究が、腫瘍微小環境内の上昇したレベルのＴｒｅｇは、療法への不十分な応答および不十分な全生存と関連することを指摘している。Ｔｒｅｇを標的にする免疫療法は臨床反応速度の改善に導き、よって、癌型の一部における、この経路の重要性が示唆される。
癌免疫療法は、治療様式（すなわち、養子細胞療法、ワクチン、モノクローナル抗体、およびチェックポイント阻害剤）および標的（すなわち、ＣＤ１９、ＧＤ２、ＰＤ１、ＰＤ−Ｌ１、およびＴｒｅｇ）に関係なく、患者の一部内で明るい見通しを示している。目標は、全ての患者に、彼等の癌が治癒する最適の機会を提供するために、これらの作用物質の、単独での、または組み合わされての臨床有用性を拡大することである。よって、癌細胞を標的にする治療薬だけでなく、癌細胞が、免疫系、例えば、Ｔｒｅｇによる検出を逃れることができる微小環境内の細胞を標的にする治療薬を発見するという満たされていない要求がある。下記開示はこの要求に対処する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第８，４７６，４０９号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
ヒト患者において癌のための治療を提供するための方法が本明細書で開示される。これらの方法は患者に、有効量の、ヒトＩＧＦ−１Ｒ（ＣＤ２２１）の細胞外ドメインおよびヒトＥｒｂＢ３への免疫特異的結合を示す二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ／抗ＥｒｂＢ３抗体を、Ｔｒｅｇ活性を妨害することができる療法と共に投与することを含む。好ましい実施形態では、ＩＧＦ−１Ｒへの結合は、ヒトＩＧＦ−１ＲのＩＧＦ−１媒介活性化を阻害するものとして特徴付けられる。他の好ましい実施形態では、抗体の投与量および投与は、下記の１つ以上に対して適合される：ａ）ＩＧＦ−１Ｒリガンド依存性および／またはＩＧＦ−１Ｒリガンド非依存性ＩＧＦ−１Ｒ発現免疫細胞における増殖の阻害；ｂ）ＩＧＦ−１Ｒ発現免疫前駆細胞のＴ細胞、ＮＫＴ細胞、またはＮＫ細胞への分化の阻害、およびｃ）ＩＧＦ−１Ｒ発現免疫細胞の枯渇。そのような適合は、例えば、本明細書で以下に記載されるように、他の抗体または薬物または療法と組み合わせて投与することを含み得る。よって、二重特異性抗体は、単独療法として、または、有効量の、下記の１つ以上と組み合わせて投与され得る：小分子免疫調節薬、１つ以上の抗悪性腫瘍薬（「化学療法」）、放射線、抗癌ワクチン、およびヒトＩＧＦ−１に結合しない免疫調節抗体。
【００１０】
他の実施形態では、ヒトＩＧＦ−１に結合しない免疫調節抗体は、下記の１つ以上である：ａ）ヒトＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、または４−１ＢＢに免疫特異的に結合する作動性抗受容体抗体；ｂ）下記に免疫特異的に結合する拮抗性抗受容体抗体：ｉ）ヒトＣＴＬＡ−４（任意でイピリムマブまたはトレメリムマブ）、ｉｉ）ＰＤ−１（任意でニボルマブ、ペムブロリズマブ、またはピディリズマブ）、ｉｉｉ）ＰＤ−Ｌ１（任意でアテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブ）、ｉｖ）ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、ＫＩＲ（任意でリリルマブ）、ＣＤ４７、ＣＤ２５、Ｂ７−Ｈ３、またはＢ７−Ｈ４；ならびにｃ）ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦβ、アンジオポエチン（ａｎｇｉｏｐｏｅｔｉｎ）−２、ＶＥＧＦ、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３、またはＴＮＦαの機能をブロックする抗リガンド抗体。様々な実施形態では、抗癌ワクチンは、ＯｎｃｏＶｅｘ、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＰＲＯＳＴＶＡＣ、ＧＶＡＸ、ＣＤＸ１１０、ＣＤＸ１３０７、ＣＤＸ１４０１、ＣＶ９１０４、ＢＩＯＶＡＸＩＤ、ＩＭＡ  ９０１およびＡＤＸＳ１１−００１からなる群より選択される。
【００１１】
好ましい二重特異性抗体は、イスチラツマブ（Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３）、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６、ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１、Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６、Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ５７−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ７８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、およびＰ１−Ｇ１−Ｍ７６から選択され；その各々は、米国特許第８，４７６，４０９号および本明細書で記載される。１つの実施形態では、二重特異性抗体は、下記スケジュールの１つで静脈内投与され得る：６ｍｇ／ｋｇ  ｑｗ、９ｍｇ／ｋｇ  ｑｗ、８ｍｇ／ｋｇ  ｑｗ、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ２ｗ、１２ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｗ、１８ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｗ、２０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｗ、３０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｗ、２０ｍｇ／ｋｇ  ｑｗ、または４０ｍｇ／ｋｇ  ｑ２ｗ。別の実施形態では、二重特異性抗体は、２．８ｇ  ｑ２ｗ、２．２４ｇ  ｑ２ｗ、または１．９６ｇ  ｑ２ｗで静脈内投与され得る。投与は静脈内または皮下であってもよい。
【００１２】
様々な実施形態では、二重特異性抗体は、Ｆｃ受容体への結合を増加または減少させるように操作されている。他の例では、二重特異性抗体は、ＣＤ８陽性（ＣＤ８＋）細胞傷害性Ｔ細胞と比べて、制御性Ｔ細胞に対して優先的な結合を示す。好ましくは、制御性Ｔ細胞はＣＤ４陽性（ＣＤ４＋）ならびにＣＤ２５陽性（ＣＤ２５＋）およびＦｏｘＰ３陽性（ＦｏｘＰ３＋）のいずれかまたは両方である。他の実施形態では、二重特異性抗体は、ＩＧＦ−１およびヘレグリンリガンドの形質細胞様樹状細胞活性に対する阻害効果に対抗する、ならびに骨髄系由来抑制性細胞のＣＤ４＋  Ｔ細胞増殖に対する抑制活性を阻害することができ、そのどちらも、抗腫瘍免疫応答を潜在的に改善することができる。
【００１３】
本明細書で開示される治療方法および他の発明は、一部は、本明細書で提供される発見に基づく。例えば、下記実施例で概略が示されるように、出願人は、下記を発見した：（ｉ）制御性Ｔ細胞および他の免疫細胞はそれらの表面にＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する；（ｉｉ）リガンドＩＧＦ−１はＣＤ４＋  Ｔ細胞からのＴｒｅｇ誘導およびＴｒｅｇ増殖を刺激することができ、これは、インビトロでのイスチラツマブを用いた併用治療（ｃｏ−ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）により阻害することができる；（ｉｉｉ）イスチラツマブ単独療法治療は、それらの細胞表面にＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する、または発現しない癌の免疫無防備状態および免疫応答性マウスモデルにおいて改善された抗腫瘍効果を有する；ならびに（ｉｖ）イスチラツマブは癌のマウスモデルにおいて抗ＰＤ−Ｌ１、抗ＣＴＬＡ−４または抗ＰＤ−１治療薬の活性を増強することができる。
【００１４】
別の態様によれば、本明細書で開示される方法を用いて治療される患者は、癌の生検におけるバイオマーカーレベルを評価することにより、治療のために選択され、患者は、生検が治療への好ましい応答を予測するレベルを示した場合、二重特異性抗体を用いて治療される。この態様の様々な実施形態では、バイオマーカーは、１）ＩＧＦ−１Ｒ陽性制御性Ｔ細胞の割合、２）ＩＧＦ−１Ｒ陽性細胞傷害性Ｔ細胞の割合、または３）１）対２）の比であり；ならびに治療への好ましい応答を予測するレベルは、１）または２）または３）が癌を有する患者の母集団中央値レベルに対応する割合または比より高い場合である。この態様の他の実施形態では、バイオマーカーは無血清ＩＧＦ−１であり、治療への好ましい応答を予測するレベルは、患者の無血清ＩＧＦ−１濃度が癌を有する患者の母集団中央値レベルより高い場合である。この態様のさらに他の実施形態では、バイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療への好ましい応答を予測するレベルは、生検ヘレグリンレベルが癌を有する患者の母集団中央値生検ヘレグリンレベルより高い場合であり；またはバイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療への好ましい応答を予測するレベルは、ＲＴ−ＰＣＲにより検出されるのに十分な生検ヘレグリンレベルであり；または、バイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療への好ましい応答を予測するレベルは、ＲＮＡ−ＩＳＨにより検出されるのに十分な生検ヘレグリンレベルである。
【００１５】
１つの実施形態では、治療的有効量のイスチラツマブは、能動自己免疫状態と診断されていないヒト患者において、結腸直腸癌、メラノーマ、Ｂ細胞リンパ腫または線維肉腫癌を治療するために、免疫腫瘍学単独療法として使用することができる（例えば、静脈内投与される）。別の実施形態では、抗悪性腫瘍療法の使用は、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する免疫細胞を有し、能動自己免疫状態と診断されていないヒト患者において、結腸直腸癌、メラノーマ、Ｂ細胞リンパ腫または線維肉腫癌を治療するために、イスチラツマブを、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体および抗ＰＤ−１抗体からなる群より選択される免疫調節薬と組み合わせて投与することから構成することができる。第３の実施形態では、治療的有効量のイスチラツマブは、能動自己免疫状態と診断されておらず、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する免疫細胞を有するヒト患者において、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３の少なくとも１つを発現しない癌を治療するために、免疫腫瘍学として使用することができる。第４の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体および抗ＰＤ−１抗体からなる群より選択される免疫調節薬と組み合わせて、イスチラツマブから構成される抗悪性腫瘍療法は、能動自己免疫状態と診断されていないヒト患者において、能動自己免疫状態と診断されておらず、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する免疫細胞を有するヒト患者において、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３の少なくとも１つを発現しない癌を治療するために使用することができる。
【００１６】
好ましくは、ヒト患者はＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する免疫細胞を有することができる。ヒト患者はＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現するＴｒｅｇ細胞を有することができる。リガンドＩＧＦ−１はヒト患者において、（例えば、無血清ＩＧＦ−１リガンドとして、またはヒト体内のどこかで、例えば組織生検内に）存在し得る。治療的有効量のイスチラツマブは、週に１回または２週間に１回投与することができる。いくつかの実施形態では、イスチラツマブの治療的有効量は、２週間に１回投与される、２．８ｇ、２．２４ｇ、または１．９６ｇの固定用量である。別の実施形態では、イスチラツマブの治療的有効量は、週に１回投与される２０ｍｇ／ｋｇまたは２週間に１回投与される４０ｍｇ／ｋｇである。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】定量フローサイトメトリーにより測定される、ヒト全血のリンパ球集団における、ＩＧＦ−１Ｒ陽性（ＩＧＦ−１Ｒ＋）制御性Ｔ細胞（「Ｔｒｅｇ」；ここでは、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋細胞として同定）およびＣＤ８＋エフェクターＴ細胞（「ＣＤ８」）の平均パーセント発現を示すグラフである。
【図２】定量フローサイトメトリーにより測定される、非ＩＧＦ−１Ｒ−抗体染色対照と比較した、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体により染色された、野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウス由来の脾細胞のリンパ球集団におけるＩＧＦ−１Ｒ＋  Ｔｒｅｇのレベルを示す一組のパネルである。下２つのパネルは抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体で染色された細胞を含み、上２つのパネルは未染色（対照）細胞である。左手パネルでは、内側の大きな正方形中のドットはＣＤ４＋ＣＤ２５＋（Ｔｒｅｇ）細胞を表す。右手パネルでデータを得るために、左手パネル内側正方形からのＴｒｅｇ細胞を再び再分析した；内側右上正方形内中のドットは、ＩＧＦ−１Ｒ＋ＦｏｘＰ３＋でもあるＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞を表す。これらのデータにより、Ｔｒｅｇ細胞のほぼ半分がＩＧＦ−１Ｒを発現することが示される。
【図３Ａ】フローサイトメトリーにより測定される、ＣＤ４＋細胞からのＴｒｅｇの誘導に対するＩＧＦ−１の効果（図３Ａ）および、フローサイトメトリーにより分析される、カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）−フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）染色を用いた、集団倍加の数により証明されるＴｒｅｇの増殖に対するＩＧＦ−１の効果を示す一連のパネルである。Ｔｒｅｇ細胞のパーセンテージは、それぞれ、０および２００ｎｇ／ｍＬのＩＧＦ−１で処理したＣＤ４＋細胞の０．９０８％（左パネル）から３．９１％（右パネル）まで増加した（図３Ａ）。ＣＦＳＥにより測定される増殖の分析は２００ｎｇ／ｍＬのＩＧＦ−１での処理後のＣＦＳＥのより大きな希釈を示し、Ｔｒｅｇ集団の増強された増殖を示す（図３Ｂ）。
【図３Ｂ】フローサイトメトリーにより測定される、ＣＤ４＋細胞からのＴｒｅｇの誘導に対するＩＧＦ−１の効果（図３Ａ）および、フローサイトメトリーにより分析される、カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）−フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）染色を用いた、集団倍加の数により証明されるＴｒｅｇの増殖に対するＩＧＦ−１の効果を示す一連のパネルである。Ｔｒｅｇ細胞のパーセンテージは、それぞれ、０および２００ｎｇ／ｍＬのＩＧＦ−１で処理したＣＤ４＋細胞の０．９０８％（左パネル）から３．９１％（右パネル）まで増加した（図３Ａ）。ＣＦＳＥにより測定される増殖の分析は２００ｎｇ／ｍＬのＩＧＦ−１での処理後のＣＦＳＥのより大きな希釈を示し、Ｔｒｅｇ集団の増強された増殖を示す（図３Ｂ）。
【図４Ａ】定量フローサイトメトリーにより測定される、マウス脾細胞由来Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋として規定）およびＣＤ８＋細胞からのＩＧＦ−１Ｒ＋細胞（／総リンパ球集団）の平均パーセント発現（図４Ａ）ならびにマウス脾細胞由来ＴｒｅｇからのＥｒｂＢ３＋細胞（／総リンパ球集団）の平均パーセント発現（図４Ｂ）に対するイスチラツマブによる処理の効果を示す一組のグラフである。
【図４Ｂ】定量フローサイトメトリーにより測定される、マウス脾細胞由来Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋として規定）およびＣＤ８＋細胞からのＩＧＦ−１Ｒ＋細胞（／総リンパ球集団）の平均パーセント発現（図４Ａ）ならびにマウス脾細胞由来ＴｒｅｇからのＥｒｂＢ３＋細胞（／総リンパ球集団）の平均パーセント発現（図４Ｂ）に対するイスチラツマブによる処理の効果を示す一組のグラフである。
【図５】フローサイトメトリーにより測定される、インビトロでの、脾細胞由来ＦｏｘＰ３＋細胞／ＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞（％Ｔｒｅｇとして表される）に対する、ＩＧＦ−１およびイスチラツマブの処理の、単独および併用での効果を示すグラフである。
【図６】皮下で免疫応答性（野生型、ｗｔ）および胸腺欠損（ｎｕ／ｎｕ）マウスに接種したＡ２０  Ｂ細胞リンパ腫腫瘍に対する、リン酸塩緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、ビヒクル対照処理を表す）またはイスチラツマブによる処置の効果を示すグラフである。ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、ｙ軸は腫瘍体積である（ｍｍ３）。
【図７】皮下で免疫応答性（野生型、ｗｔ）および胸腺欠損（ｎｕ／ｎｕ）マウスに接種したＭＣ３８結腸直腸腫瘍に対するＰＢＳまたはイスチラツマブによる処置の効果を示すグラフである。ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、ｙ軸は平均腫瘍体積である（ｍｍ３）。
【図８】皮下で免疫応答性（野生型、ｗｔ）および胸腺欠損（ｎｕ／ｎｕ）マウスに接種したＢ１６−Ｆ１０メラノーマ腫瘍に対するＰＢＳまたはイスチラツマブによる処置の効果を示すグラフである。ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、ｙ軸は平均腫瘍体積である（ｍｍ３）。
【図９−１】ウェスタンブロッティングによる、Ａ２０  Ｂ細胞リンパ腫細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）  ＴＩＢ−２０８）におけるＩＧＦ−１Ｒ、ＥｒｂＢ３、リン酸化ＡＫＴ（ｐＡＫＴ）、リン酸化ＥＲＫ１／２（ｐＥＲＫ１／２）およびβアクチンの基礎およびリン酸化発現（Ａ）、および、ＩＧＦ−１Ｒ／ＥｒｂＢ３陰性Ａ２０腫瘍細胞を接種されたマウスに対する、ＰＢＳ、イスチラツマブ、抗ＰＤ−Ｌ１（アテゾリズマブ）および併用でのイスチラツマブ＋抗ＰＤ−Ｌ１による処置の効果（Ｂ、この場合、各ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、各ｙ軸は腫瘍体積である（ｍｍ３））を示す一連のグラフである。パートＣでは、抗ＰＤ−Ｌ１＋イスチラツマブ（パートＢにおいて概略が示される）による処置に対して完全奏功を達成したマウス（ＣＲ；ｎ＝４、三角を用いてプロットされたデータ点）は、薬物処置中止後２ヶ月でのＡ２０細胞による再チャレンジで抗腫瘍免疫を保持する。Ａ２０細胞を接種されたナイーブマウスからのデータ（接種した細胞の腫瘍形成能を確認するため）が菱形を用いてプロットされる。
【図９−２】ウェスタンブロッティングによる、Ａ２０  Ｂ細胞リンパ腫細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）  ＴＩＢ−２０８）におけるＩＧＦ−１Ｒ、ＥｒｂＢ３、リン酸化ＡＫＴ（ｐＡＫＴ）、リン酸化ＥＲＫ１／２（ｐＥＲＫ１／２）およびβアクチンの基礎およびリン酸化発現（Ａ）、および、ＩＧＦ−１Ｒ／ＥｒｂＢ３陰性Ａ２０腫瘍細胞を接種されたマウスに対する、ＰＢＳ、イスチラツマブ、抗ＰＤ−Ｌ１（アテゾリズマブ）および併用でのイスチラツマブ＋抗ＰＤ−Ｌ１による処置の効果（Ｂ、この場合、各ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、各ｙ軸は腫瘍体積である（ｍｍ３））を示す一連のグラフである。パートＣでは、抗ＰＤ−Ｌ１＋イスチラツマブ（パートＢにおいて概略が示される）による処置に対して完全奏功を達成したマウス（ＣＲ；ｎ＝４、三角を用いてプロットされたデータ点）は、薬物処置中止後２ヶ月でのＡ２０細胞による再チャレンジで抗腫瘍免疫を保持する。Ａ２０細胞を接種されたナイーブマウスからのデータ（接種した細胞の腫瘍形成能を確認するため）が菱形を用いてプロットされる。
【図１０】ウェスタンブロッティングによる、ＷＥＨＩ１６４線維肉腫細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）  ＣＲＬ−１７５１（商標））におけるＩＧＦ−１Ｒ、ＥｒｂＢ３、ｐＡＫＴ、ｐＥＲＫ１／２およびβアクチンの基礎発現を示す一組のデータである（Ａ）。パネルＢは、ＩＧＦ−１Ｒ／ＥｒｂＢ３陽性ＷＥＨＩ１６４腫瘍細胞を接種されたマウスに対する、ＰＢＳ、イスチラツマブ、抗ＰＤ−Ｌ１（アテゾリズマブ）および併用でのイスチラツマブ＋抗ＰＤ−Ｌ１による処置の効果を示す。ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、ｙ軸は平均腫瘍体積である（ｍｍ３）。
【図１１】ウェスタンブロッティングによる、ＭＣ３８結腸直腸細胞におけるＩＧＦ−１Ｒ、ＥｒｂＢ３、ｐＡＫＴ、ｐＥＲＫ１／２およびβアクチンの基礎発現を示す一連のグラフである（Ａ）。図１１Ｂは、ＩＧＦ−１Ｒ／ＥｒｂＢ３陽性ＭＣ３８腫瘍細胞を接種されたマウスに対する、ＰＢＳ、イスチラツマブ、抗ＰＤ−Ｌ１（アテゾリズマブ）および併用でのイスチラツマブ＋抗ＰＤ−Ｌ１による処置の効果を示し、ここで、各ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、各ｙ軸は腫瘍体積である（ｍｍ３）。
【図１２】ウェスタンブロッティングによる、Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞における、ＩＧＦ−１Ｒ、ＥｒｂＢ３、ｐＡＫＴ、ｐＥＲＫ１／２およびβアクチンの基礎発現を示す一組のデータである（Ａ）。パネルＢは、ＩＧＦ−１Ｒ／ＥｒｂＢ３陽性Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍細胞を接種されたマウスに対する、ＰＢＳ、イスチラツマブ、抗ＣＴＬＡ−４（クローン９Ｄ９）および併用でのイスチラツマブ＋抗ＣＴＬＡ−４による処置の効果を示し、ここで、各ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、各ｙ軸は腫瘍体積である（ｍｍ３）。
【図１３】ＩＧＦ−１Ｒ／ＥｒｂＢ３陽性Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍細胞を接種されたマウスに対する、ＰＢＳ、イスチラツマブ、抗ＰＤ−１（クローンＪ４３）および併用でのイスチラツマブ＋抗ＰＤ−１による処置の効果を示す一組のデータであり、ここで、各ｘ軸は腫瘍細胞埋め込み後の日数であり、各ｙ軸は腫瘍体積である（ｍｍ３）。
【図１４】様々なヒト全血由来免疫細胞集団でのＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３の発現を示す一組のデータである。
【図１５】フローサイトメトリーにより測定される、ＳＤ−１０１による活性化後の、形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）活性（ＣＤ８３、ＣＤ８６；平均蛍光強度により測定される）、インターフェロンα（ＩＦＮα）発現（ｐｇ／ｍＬ培地）およびＰＤ−Ｌ１発現（平均蛍光強度により測定される）のマーカーに対するリガンドヘレグリン（ＨＲＧ）またはＩＧＦ−１、およびＭＭ−１４１の効果を示す一組のデータである。
【図１６】フローサイトメトリーにより分析されるＣＦＳＥ−ＦＩＴＣ染色により測定される、活性化されていないおよび活性化されたＣＤ４＋  Ｔ細胞増殖に対する骨髄系由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）の活性に対するＭＭ−１４１の効果を示す一組のヒストグラムである。
【図１７−１】図１７Ａは、拮抗性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｂは、作動性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｃは、抗リガンド抗体のリストである。
【図１７−２】図１７Ａは、拮抗性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｂは、作動性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｃは、抗リガンド抗体のリストである。
【図１７−３】図１７Ａは、拮抗性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｂは、作動性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｃは、抗リガンド抗体のリストである。
【図１７−４】図１７Ａは、拮抗性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｂは、作動性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｃは、抗リガンド抗体のリストである。
【図１７−５】図１７Ａは、拮抗性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｂは、作動性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｃは、抗リガンド抗体のリストである。
【図１７−６】図１７Ａは、拮抗性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｂは、作動性抗受容体抗体のリストである。図１７Ｃは、抗リガンド抗体のリストである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本開示は、その必要のあるヒトおよび非ヒト患者における障害の治療のための組成物、方法、およびキットを提供する。特定的には、この開示は、二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ、抗ＥｒｂＢ３抗体を免疫抑制細胞、例えば、制御性Ｔ細胞、活性を調節する１つ以上の治療薬（下記を含み得るが、それらに限定されない：小分子免疫調節薬、ヒトＩＧＦ１に結合しない免疫調節抗体、抗癌ワクチン、および放射線投与）と組み合わせて使用する、または単独療法もしくは併用療法としての、患者における癌のための治療方法を提供する。例示的な抗体はイスチラツマブ（本明細書では、Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３とも記載される）である。イスチラツマブは、制御性Ｔ細胞活性を妨害する１つ以上の治療薬の追加あり、およびなしの両方で、癌細胞の表面上でＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する癌型に対して有効であることが本明細書で示されている。二重特異性抗体および制御性Ｔ細胞活性を妨害する作用物質の併用療法は癌細胞の治療に対し、いずれかの作用物質が、同じ用量で単独療法として投与される場合よりも大きい効果を有する。さらに、イスチラツマブは、癌細胞の表面上でＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現しない癌型に対しても有効であることが本明細書で示されており（Ａ２０細胞株を使用する、実施例４を参照されたい）、その抗癌活性は主として、Ｔ細胞の抗腫瘍活性の漸加により生じる。
【００１９】
定義
便宜上、明細書、実施例、および添付の特許請求の範囲において使用されるある一定の用語および句の意味を以下で提供する。
【００２０】
「作用物質」は、活性分子、例えば、治療タンパク質、例えば、薬物を示す。
【００２１】
「ａａ置換」は、タンパク質中の１つの特定のアミノ酸（「ａａ」）の、別のａａとの置き換えを示す。置換は、以下で規定される保存的置換であってもよい。
【００２２】
「投与する」または「投与」は、体外に存在する物質（例えば、本明細書で開示される分子の製剤）を患者中に、例えば、粘膜、皮内、静脈内、筋肉内送達および／または本明細書で記載される、または当技術分野で知られている物理送達の任意の他の方法により、注射するまたは別様に物理的に送達する行為を示す。疾患、またはその症状が治療される場合、物質の投与は典型的には、疾患またはその症状の発症後に起こる。疾患、またはその症状が防止される場合、物質の投与は典型的には疾患またはその症状の発症前に起こる。
【００２３】
「抗ＥｒｂＢ３結合部位」は、ヒトＥｒｂＢ３に特異的に結合する結合部位を示す。
【００２４】
「抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位」は、ヒトＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合する結合部位を示す。
【００２５】
「抗原結合部位」は、抗体のＶＨおよび／またはＶＬドメイン、またはその少なくとも１つのＣＤＲを含む結合部位を示す。例えば、抗原結合部位は、ＶＨＣＤＲ３を単独で、またはＶＨＣＤＲ２および任意でＶＨＣＤＲ１と一緒に含み、これから本質的に構成され、またはこれから構成され得る。ある一定の実施形態では、抗原結合部位はＶＨドメインおよびＶＬドメインを含み、これらは同じポリペプチド上にあってもよく、または２つの異なるポリペプチド上にあってもよく、例えば、ＶＨドメインは重鎖上に存在し、ＶＬドメインは軽鎖上に存在する。
【００２６】
抗体の「抗原結合部分」は、抗原（例えば、ＩＧＦ−１ＲまたはＥｒｂＢ３）に特定的に結合する能力を保持する抗体の１つ以上のフラグメントを示す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体のフラグメントにより保持され得ることが示されている。抗体の「抗原結合部分」という用語内に包含される結合フラグメントの例としては下記が挙げられる（ｉ）Ｆａｂフラグメント、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインから構成される一価フラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂフラグメントを含む二価フラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインから構成されるＦｄフラグメント；（ｉｖ）抗体のシングルアームのＶＬおよびＶＨドメインから構成されるＦｖフラグメント、（ｖ）ＶＨドメインから構成されるｄＡｂフラグメント；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）。さらに、ＶＬおよびＶＨはＦｖフラグメントの２つのドメインであるが、ＶＬおよびＶＨは別個の遺伝子によりコードされ、それらは、組換え方法を用い、合成リンカーにより結合させることができ、それらを単一タンパク質鎖とすることが可能となり、ここで、ＶＬおよびＶＨ領域は対合して、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている一価タンパク質を形成する。米国特許第５，８９２，０１９号を参照されたい。そのような単鎖抗体もまた、抗体の「抗原結合部分」という用語内に包含されることが意図される。他の型の単鎖抗体、例えばダイアボディもまた、包含される。ダイアボディは二価の二重特異性抗体であり、この場合、ＶＨおよびＶＬドメインが単一ポリペプチド鎖上で発現されるが、使用されるリンカーは同じ鎖上の２つのドメイン間での対合を可能にするには短すぎ、よって、ドメインは別の鎖の相補的ドメインと対合させられ、２つの抗原結合部位が生成される。
【００２７】
「結合親和性」は、結合相互作用の強度を示し、実際の結合親和性ならびに見かけの結合親和性の両方を含む。実際の結合親和性は、脱会合速度に対する会合速度の比率である。見かけの親和性は、例えば、多価相互作用に起因する結合活性を含み得る。解離定数（Ｋｄ）は、典型的には結合親和性の逆数であり、便宜上、表面プラズモン共鳴アッセイ（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ  ３０００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）において、例えば、組換えＥｒｂＢ３を分析物として、および抗ＥｒｂＢ３抗体をリガンドとして使用して決定される）または細胞結合アッセイを用いて測定され得、それらのアッセイの各々が米国特許第７，８４６，４４０号の実施例３において記載される。
【００２８】
「結合部分」、「結合ドメイン」または「結合部位」は、抗体の標的分子（すなわち、抗原）への特異的結合の媒介に直接関与する、結合ポリペプチド、あるいは、そのように特定される場合、その重または軽鎖の部分、領域、または部位を示す。例示的な結合ドメインとしては、抗原結合部位、リガンドの受容体結合ドメイン、受容体のリガンド結合ドメインまたは酵素ドメインが挙げられる。好ましい実施形態では、結合ドメインは、抗原結合部位（例えば、可変重（ＶＨ）鎖配列および可変軽（ＶＬ）鎖配列または代替フレームワーク領域（例えば、任意で１つ以上のａａ置換を含むヒトフレームワーク領域）中に配置された抗体由来の６つのＣＤＲを含む）を含み、またはこれから構成される。ある一定の実施形態では、結合部位は、本質的にＶＨまたはＶＬ鎖配列のみから構成され得る。結合部位は完全に１つの種由来であってもよく、例えば、これは１つの種の生殖系列配列に由来する配列のみを有する。例えば、結合部位はヒト（すなわち、ヒト種由来）、マウス、またはラットであってもよい。結合部位はまた、ヒト化されてもよく、すなわち、ＣＤＲは１つの種由来であり、フレームワーク（ＦＲ）は別の種由来である。例えば、結合部位はマウス抗体に由来するＣＤＲおよびヒト種に由来するＦＲを有し得る。ある一定のヒト化結合部位は１つ以上のＣＤＲにおいて突然変異を含み、ＣＤＲは、ドナー抗体のＣＤＲにより似ることになる。ある一定のヒト化抗体はまた、１つ以上のＦＲ中に突然変異を含み得る。一般に、結合部位における突然変異は、結合部位のその標的抗原への結合の親和性を増強させることができ、および／または、それらは結合部位を安定化させることができ、例えば、その半減期が延長される。
【００２９】
「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」は、重および軽鎖ポリペプチドの両方のＶＲ内で見出される非隣接抗原結合部位を示す。これらの特定の領域は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２，６６０９−６６１６（１９７７）およびＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｔｅｒｅｓｔ．（１９９１）により、ならびにＣｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７）により、およびＭａｃＣａｌｌｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２−７４５（１９９６）により説明されており、ここで、定義は、互いに比較した場合、ａａ残基の重複またはサブセットを含む。上記引用参考文献の各々により規定されるＣＤＲを包含するａａ残基は比較のために明記される。本明細書で使用されるように、別に特定されない限り、「ＣＤＲ」は、Ｋａｂａｔにより規定される通りである。
【表１】
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【００３０】
「ＣＨ１ドメイン」は、ＶＨドメインとヒンジと間に位置する重鎖免疫グロブリン定常ドメインを示す。これはＥＵ位置１１８−２１５に及ぶ。ＣＨ１ドメインは天然起源のＣＨ１ドメイン、または１つ以上のａａが置換、付加または欠失させられた天然起源のＣＨ１ドメインであってもよく、ただし、ＣＨ１ドメインが所望の生物学的特性を有することを条件とする。所望の生物活性は、天然起源の配列に対して、天然の生物活性、増強された生物活性または低減された生物活性であり得る。
【００３１】
「ＣＨ２ドメイン」は、ヒンジとＣＨ３ドメインの間に位置する重鎖免疫グロブリン定常ドメインを示す。これはＥＵ位置２３１−３４０に及ぶ。ＣＨ２ドメインは天然起源のＣＨ２ドメイン、または１つ以上のａａが置換、付加または欠失させられた天然起源のＣＨ２ドメインであってもよく、ただし、ＣＨ２ドメインが所望の生物学的特性を有することを条件とする。所望の生物活性は、天然起源の配列に対して、天然の生物活性、増強された生物活性または低減された生物活性であり得る。
【００３２】
「ＣＨ３ドメイン」は、ＣＨ２ドメインのＣ末端に位置し、ＣＨ２ドメインのＮ末端からおよそ１１０残基に及ぶ、例えば、約位置３４１−４４６ｂ（ＥＵ番号付けシステム）の重鎖免疫グロブリン定常ドメインを示す。ＣＨ３ドメインは天然起源のＣＨ３ドメイン、または１つ以上のａａ（「ａａ」）が置換、付加または欠失させられた天然起源のＣＨ３ドメインであってもよく、ただし、ＣＨ３ドメインが所望の生物学的特性を有することを条件とする。所望の生物活性は、天然起源の配列に対して、天然の生物活性、増強された生物活性または低減された生物活性であり得る。ＣＨ３ドメインは、Ｃ末端リジンを含んでも、または含まなくてもよい。
【００３３】
「ＣＨ４ドメイン」は、ＩｇＭおよびＩｇＥ抗体におけるＣＨ３ドメインのＣ末端に位置する重鎖免疫グロブリン定常ドメインを示す。ＣＨ４ドメインは、天然起源のＣＨ４ドメイン、または１つ以上のａａが置換、付加または欠失させられた天然起源のＣＨ４ドメインであってもよく、ただし、ＣＨ４ドメインが所望の生物学的特性を有することを条件とする。所望の生物活性は、天然起源の配列に対して、天然の生物活性、増強された生物活性または低減された生物活性であり得る。
【００３４】
「ＣＬドメイン」は、ＶＨドメインに対して、Ｃ末端に位置する軽鎖免疫グロブリン定常ドメインを示す。これは約Ｋａｂａｔ位置１０７Ａ−２１６に及ぶ。ＣＬドメインは、天然起源のＣＬドメイン、または１つ以上のａａが置換、付加または欠失させられた天然起源のＣＬドメインであってもよく、ただし、ＣＬドメインが所望の生物学的特性を有することを条件とする。所望の生物活性は、天然起源の配列に対して、天然の生物活性、増強された生物活性または低減された生物活性であり得る。ＣＬドメインは、Ｃ末端リジンを含んでも、または含まなくてもよい。
【００３５】
「併用療法」、「共投与」、「共投与された」または「同時投与」（またはこれらの用語のわずかな変化）は、少なくとも２つの治療薬の患者への同時に起こる投与、または、第１の投与される治療薬が、第２の投与される治療薬が投与される時に、依然として患者体内（例えば、患者の血漿または血清中）に存在している期間内でのそれらの連続投与を示す。
【００３６】
「保存的置換」または「保存的ａａ置換」は、タンパク質またはペプチドでの１つ以上のａａ残基の、各特定の置換前ａａ残基について、特定の置き換えａａによる置き換えを示し、そのような特定のａａ残基がそのような特定の置き換えａａにより置換される、タンパク質またはペプチドの確認または機能のいずれかは変化する可能性が低いことが知られている。そのような保存的置換は典型的には１つのａａを電荷および／またはサイズが第１のａａと類似する別のものと置き換えることを含み、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）、またはロイシン（Ｌ）のいずれかを互いに置き換えること、アスパラギン酸（Ｄ）をグルタミン酸（Ｅ）に（逆の場合も同じ）；グルタミン（Ｑ）をアスパラギン（Ｎ）に（逆の場合も同じ）；ならびにセリン（Ｓ）をスレオニン（Ｔ）に（逆の場合も同じ）置換することを含む。特に配列または構造環境において保存的である他の置換が、当技術分野で知られている。例えば、アラニンおよびバリン（Ｖ）のように、グリシン（Ｇ）およびアラニン（Ａ）は頻繁に、互いに置換され、保存的置換が得られ得る。メチオニン（Ｍ）は比較的疎水性であるが、頻繁に、ロイシンまたはイソロイシン、および時としてバリンに、保存的にとって代わることができ、またはこれにより保存的に置換され得る。リジン（Ｋ）およびアルギニン（Ｒ）は、ａａ残基の重要な特徴がその電荷であり、これらの２つの塩基性ａａ残基の異なるｐＫ値は重要であると予測されない場所で、頻繁に互換的である。そのような置換の効果は、ＰＡＭ１２０、ＰＡＭ−２００、およびＰＡＭ−２５０などの置換スコアマトリックスを用いて計算することができる。他のそのような保存的置換、例えば、同様の疎水性特性を有する全領域（例えば、膜貫通ドメイン）の置換がよく知られている。
【００３７】
免疫グロブリンの軽鎖上のＣＲドメインは、「ＣＬ」、「軽鎖ＣＲドメイン」、「ＣＬ領域」または「ＣＬドメイン」と互換的に呼ばれる。免疫グロブリンの重鎖上の定常ドメイン（例えば、ヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２またはＣＨ３ドメイン）は、「ＣＨ」、「重鎖定常ドメイン」、「ＣＨ」領域または「ＣＨドメイン」と互換的に呼ばれる。免疫グロブリン軽鎖上の可変ドメインは、「ＶＬ」、「軽鎖可変ドメイン」、「ＶＬ領域」または「ＶＬドメイン」と互換的に呼ばれる。免疫グロブリン重鎖上の可変ドメインは、「ＶＨ」、「重鎖可変ドメイン」、「ＶＨ領域」または「ＶＨドメイン」と互換的に呼ばれる。
【００３８】
「ドメイン」は、例えば、β−プリーツシートおよび／または鎖内ジスルフィド結合により安定化され得るペプチドループ（例えば、１〜４のペプチドループ）を含み得る、重または軽鎖ポリペプチドの領域、例えば、独立した折り畳みの、球状領域または非球状領域（例えば、リンカードメイン）を示す。免疫グロブリン重および軽鎖の定常およびＶＲは、典型的には、ドメインに折り畳まれる。特に、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４、ＣＬ、ＶＨおよびＶＬドメインの１つ１つが典型的にはループ構造を形成する。
【００３９】
「投与量」は、規定された量／単位時間（例えば、１時間あたり、１日あたり、１週あたり、１ヶ月あたり、など）で薬物を患者に投与するためのパラメータを示す。そのようなパラメータとしては、例えば、各用量のサイズが挙げられる。そのようなパラメータはまた各用量の構成を含み、これは、１つ以上の単位として、例えば、１つ以上の投与として、例えば、経口的（例えば、１、２、３またはそれ以上の丸薬、カプセル、などとして）または注射（例えば、ボーラスまたは注入として）のいずれかまたは両方で投与され得る。投与サイズはまた、連続して（例えば、数分または数時間の期間にわたる静脈内注入として）投与される用量と関連し得る。そのようなパラメータは、さらに、別個の用量の投与の頻度を含み、その頻度は、時間と共に変化し得る。
【００４０】
「用量」は、単一投与において与えられる薬物の量を示す。
【００４１】
「ＥＣ５０」または「ＥＣ５０」は、結合アッセイまたはシグナル伝達経路などの特定の系に対しタンパク質の最大効果の５０％を提供する分子例えば、ＰＢＡの濃度を示す。
【００４２】
「有効量（単数形または複数形）」、「有効投与量（単数形または複数形）」、または「有効用量（単数形または複数形）」は、抗体、タンパク質または追加の治療薬の量（１つ以上の用量で投与される）を示し、その量はその必要がある被験体に有効な治療を提供するのに十分である。「有効な治療」は、被験体における障害の症状の減少または休止を示す。癌の場合、有効な治療は下記結果の１つ以上を含み得るが、それらに限定されない：１つ以上の腫瘍のサイズの低減、被験体における腫瘍の数の低減、被験体における癌性細胞の数の低減、被験体における腫瘍成長の阻害、または癌を有する動物に対する生存時間の延長。記載される病状の治療のための本開示の組成物の有効量は、多くの異なる因子、例えば（限定はされないが）投与手段、標的部位、患者の生理状態（患者がヒトか動物かに関係なく）、および投与される他の薬物療法によって変動する。治療投与量は、安全性および効力を最適化するために当業者に知られているルーチン法を使用して滴定され得る。
【００４３】
「ＥｒｂＢ３」および「ＨＥＲ３」は本明細書および米国特許第５，４８０，９６８号で記載されるＥｒｂＢ３タンパク質を示す。ヒトＥｒｂＢ３タンパク質配列は、本明細書では、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４４４として提供され、これは、米国特許第５，４８０，９６８号のＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４に対応し、ここで、最初の１９ａａは、成熟タンパク質から切断されるリーダー配列に対応する。ＥｒｂＢ３は受容体のＥｒｂＢファミリーのメンバーであり、これの他のメンバーはＥｒｂＢ１（ＥＧＦＲ）、ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／Ｎｅｕ）およびＥｒｂＢ４を含む。ＥｒｂＢ３自体はチロシンキナーゼ活性を欠いているが、それ自体、ＥｒｂＢ３の別のＥｒｂＢファミリー受容体、例えば、ＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ２およびＥｒｂＢ４（受容体チロシンキナーゼである）との二量体化でリン酸化される（ｐｈｏｒｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ）。ＥｒｂＢファミリーのためのリガンドとしては、ヘレグリン（ＨＲＧ）、ベータセルリン（ＢＴＣ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、ヘパリン−結合上皮成長因子（ＨＢ−ＥＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子α（ＴＧＦ−α）、アンフィレギュリン（ＡＲ）、エピジェン（ＥＰＧ）およびエピレギュリン（ＥＰＲ）が挙げられる。ヒトＥｒｂＢ３のａａ配列はＧｅｎｂａｎｋ受入番号ＮＰ＿００１９７３．２（受容体チロシン−プロテインキナーゼｅｒｂＢ−３アイソフォーム１前駆体）で提供され、遺伝子ＩＤ：２０６５が割り当てられる。
【００４４】
「ＥＵ」は、重鎖ＣＲ中のａａ位置（ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン中のａａ位置を含む）が本明細書では、ＥＵ指標番号付けシステムに従い番号付けされたことを示す（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，ｉｎ  “Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，第５版，１９９１を参照されたい）。
【００４５】
「Ｆａｂ」は、下記２つの鎖を含む抗体の抗原結合部分を示す：ＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインを含む第一の鎖ならびにＶＬドメインおよびＣＬドメインを含む第二の鎖。Ｆａｂは典型的には、パパイン処理されており、ヒンジ領域の部分を含む抗体のＮ末端フラグメントとして記載されるが、これはまた、本明細書では、重鎖がヒンジの部分を含まない結合ドメインを示すものとして使用される。
【００４６】
「Ｆｃ領域」は、パパイン切断部位のすぐ上流のヒンジ領域で始まり（すなわち、重鎖ＣＲの最初の残基を１１４と考えて、ＩｇＧ中の残基２１６）、抗体のＣ末端で終わる単一免疫グロブリン重鎖の部分を示す。したがって、完全Ｆｃ領域は、少なくとも、ヒンジ、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメインを含む。二量体化された２つのＦｃ領域は、「Ｆｃ」または「Ｆｃ二量体」と呼ばれる。Ｆｃ領域は天然起源のＦｃ領域、または１つ以上のａａが置換、付加または欠失させられた天然起源のＦｃ領域であってもよく、ただし、Ｆｃ領域が所望の生物学的特性を有することを条件とする。所望の生物活性は、天然起源の配列に対して、天然の生物活性、増強された生物活性または低減された生物活性であり得る。
【００４７】
「製剤」および「組成物」は、特定の材料成分（例えば、抗ＩＧＦ−１Ｒ、抗ＥｒｂＢ３二重特異性抗体）を、任意で、特定の量で含む生成物、ならびに、任意で、特定の量の特定の材料成分の組み合わせから直接的または間接的に得られる任意の生成物を示す。
【００４８】
「賦形剤（単数形または複数形）」は、薬物のために希釈剤、ビヒクル、保存剤、バインダ、安定化剤、などとして一般的に使用される不活性物質を示し、タンパク質（例えば、血清アルブミン、など）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、グリシン、ヒスチジン、など）、脂肪酸およびリン脂質（例えば、スルホン酸アルキル、カプリラート、など）、界面活性剤（例えば、ＳＤＳ、ポリソルベート、非イオン性界面活性剤、など）、サッカライド（例えば、スクロース、マルトース、トレハロース、など）およびポリオール（例えば、マンニトール、ソルビトール、など）が挙げられるが、それらに限定されない。また、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９９０）Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（これによりその全体が参照により組み込まれる）も参照されたい。
【００４９】
「フレームワーク領域」または「ＦＲ」または「ＦＲ領域」は、ＶＲの一部であるが、ＣＤＲの一部ではないａａ残基を含む（例えば、ＣＤＲのＫａｂａｔ定義を使用する）。そのため、ＶＲフレームワークは約１００−１２０ａａの長さであるが、ＣＤＲの外側のそれらのａａのみを含む。重鎖ＶＲの具体例については、およびＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，同書により規定されるＣＤＲについては、フレームワーク領域１は、ａａ１−３０を包含するＶＲのドメインに対応し；フレームワーク領域２は、ａａ３６−４９を包含するＶＲのドメインに対応し；フレームワーク領域３は、ａａ６６−９４を包含するＶＲのドメインに対応し、ならびにフレームワーク領域４は、ａａ１０３からＶＲの末端までのＶＲのドメインに対応する。軽鎖に対するフレームワーク領域は、軽鎖ＶＲ  ＣＤＲの各々により同様に分離される。同様に、ＣｈｏｔｈｉａらまたはＭｃＣａｌｌｕｍらによるＣＤＲの定義を使用すると、フレームワーク領域境界は、以上で記載される通り、個々のＣＤＲ末端により分離される。好ましい実施形態では、ＣＤＲはＫａｂａｔにより規定される通りである。
【００５０】
「全長抗体」は、１つ以上の重鎖および１つ以上の軽鎖を含む抗体である。各重鎖は重鎖ＶＲ（本明細書でＶＨと省略）および重鎖ＣＲから構成される。重鎖ＣＲは３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３、任意で第４のドメイン、ＣＨ４から構成される。各軽鎖は、軽鎖ＶＲ（本明細書ではＶＬと省略）および軽鎖ＣＲから構成される。軽鎖ＣＲは、１つのドメイン、ＣＬから構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれ、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存された領域が散在する超可変性の領域にさらに細分することができる。ＶＨおよびＶＬの各々は、典型的には３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端まで下記順序で配列される：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４。免疫グロブリンタンパク質は任意の型のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ）または、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡｌおよびＩｇＡ２）またはサブクラスを有することができる。
【００５１】
「Ｇｌｙ−Ｓｅｒリンカー」または「Ｇｌｙ−Ｓｅｒペプチド」は、グリシンおよびセリン残基から構成されるペプチドを示す。例示的なＧｌｙ−Ｓｅｒペプチドはａａ配列（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９５）を含み、ここで、ｎ＝１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０またはそれ以上である。ある一定の実施形態では、ｎは１〜５の数であり、ｎは６〜１０の数であり、ｎは１１〜１５の数であり、ｎは１６〜２０の数であり、ｎは２１〜２５の数であり、またはｎは２６〜３０の数である。
【００５２】
「重鎖免疫グロブリンＣＲ」または「ＨＣ  Ｉｇ  ＣＲ」はＣＨ１ドメインおよびＦｃ領域を含むことができ、そのＦｃ領域はヒンジ、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメインおよび／またはＣＨ４ドメインを含み得る。軽鎖免疫グロブリンＣＲはＣＬドメインを含み得る。
【００５３】
「ヒンジ」または「ヒンジ領域」または「ヒンジドメイン」は、ＣＨ１ドメインとＣＨ２ドメインの間に位置する重鎖のフレキシブル部分を示す。これはおよそ２５ａａの長さであり、「上ヒンジ」、「中ヒンジ」および「下ヒンジ」に分割される。ヒンジは天然起源のヒンジ、または１つ以上のａａが置換、付加または欠失させられた天然起源のヒンジであってもよく、ただし、ヒンジが所望の生物学的特性を有することを条件とする。所望の生物活性は、天然起源の配列に対して、天然の生物活性、増強された生物活性または低減された生物活性であり得る。
【００５４】
「ＩＣ５０」または「ＩＣ５０」は、最大活性（例えば、刺激に対する応答または恒常的活性）の５０％阻害を提供する分子、例えば、ＰＢＡの濃度、すなわち、活性を、最大活性とベースラインの間の中間レベルまで低減させる濃度を示す。ＩＣ５０値は、例えば、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を用いて、絶対阻害定数（Ｋｉ）に変換させることができる。本明細書で提供される抗体または二重特異的結合タンパク質などの結合剤により阻害される系では、ＩＣ５０はＥＣ５０とは区別がつかない可能性がある。
【００５５】
「ＩＧＦ−１Ｒ」または「ＩＧＦ１Ｒ」は、インスリン様増殖因子１（ＩＧＦ−１、以前はソマトメジンＣとして知られている）に対する受容体を示す。ＩＧＦ−１Ｒはまた、インスリン様増殖因子２（ＩＧＦ−２）に結合し、これにより活性化される。ＩＧＦ１−Ｒは受容体チロシンキナーゼであり、ＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２により活性化されると、自動リン酸化される。ヒトＩＧＦ−１Ｒ前駆体のａａ配列はＧｅｎｂａｎｋ受入番号ＮＰ＿０００８６６で提供され、遺伝子ＩＤ：３４８０が割り当てられる。
【００５６】
「ＩｇＧ−（ｓｃＦｖ）２」は２つのＮ末端Ｆａｂ結合部位（各々がＩｇＧ重鎖およびＩｇＧ軽鎖から構成される）を有するＩｇＧから構成される四価ＰＢＡを示し、ここで、各重鎖のＣ末端は、ＶＨドメインおよびＶＬドメインから構成される結合部位を有するｓｃＦｖに連結される。免疫グロブリンＣＲがＩｇＧ１のものである場合、ＰＢＡは「ＩｇＧ１−（ｓｃＦｖ）２」と呼ばれる。例示的なＩｇＧ１−（ｓｃＦｖ）２ＰＢＡは、４つの結合部位が２つの本質的に同一の抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位および２つの本質的に同一の抗ＥｒｂＢ３結合部位を含むものである。下記および米国特許８，４７６，４０９号において記載されるある一定の四価ＰＢＡは各々、２つの結合された本質的に同一のサブユニットを含み、各サブユニットは互いにジスルフィド結合された重および軽鎖を含み、例えば、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８４およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２）、Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２６およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４）、およびＰ４−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４）が、そのようなＩｇＧ１−（ｓｃＦｖ）２タンパク質の例示的な実施形態である。
【００５７】
「免疫グロブリンＣＲ」または「ＩｇＣＲ」は、その可変ドメインの外側の免疫グロブリン（すなわち、抗体）の一部を示す。ある一定の実施形態では、免疫グロブリンＣＲは「重鎖免疫グロブリンＣＲ」および「軽鎖免疫グロブリンＣＲ」を含む。
【００５８】
結合タンパク質による生物活性の「阻害」は、結合タンパク質により媒介される生物活性の任意の再現性良く検出可能な減少を示す。いくつかの実施形態では、阻害は、生物活性の統計的に有意な減少、例えば、結合タンパク質がない場合に決定される生物活性に対して、約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％の生物活性の減少を提供する。
【００５９】
ポリヌクレオチド、ポリペプチドまたはタンパク質に関連して「単離された」は、その１つのポリヌクレオチド、ポリペプチドまたはタンパク質が、これまたはその類似体が自然に共に生じる、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、タンパク質または他の巨大分子から実質的に除去されたことを意味する。「単離された」という用語は、特定の程度の純度を要求することを意図しないが、典型的には、タンパク質は少なくとも約７５％純粋、より好ましくは少なくとも約８０％純粋、より好ましくは少なくとも約８５％純粋、より好ましくは少なくとも約９０％純粋、より好ましくはさらに少なくとも約９５％純粋、最も好ましくは少なくとも約９９％純粋である。
【００６０】
免疫グロブリンａａ配列位置の指定と併用される「Ｋａｂａｔ」は、軽鎖ＣＲ（例えば、ＣＬドメイン）中のａａ位置は、Ｋａｂａｔ指標番号付けシステム（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１．，前掲書中を参照されたい）に従い番号付けされることを示す。
【００６１】
「に連結される」は、文脈中、ａａまたはヌクレオチドの直接または間接連結または結合を示す。「間接連結」は、例えば、１つ以上のａａまたはヌクレオチドを含むリンカーまたはドメインにより媒介される連結を示す。「直接連結」または「直接連結される」は、２つのポリペプチドセグメントに言及する場合、２つのポリペプチドセグメント間の共有結合の存在を示し、例えば、２つのポリペプチドセグメントは介在配列なしに隣接して結合される。
【００６２】
「リンカー」は、２つのドメインまたは領域を一緒に結合させる１つ以上のａａを示す。リンカーはフレキシブルであってもよく、リンカーにより結合されるドメインは適正な三次元構造を形成することができ、よって、要求される生物活性を有することができる。ｓｃＦｖのＶＨおよびＶＬを結合させるリンカーは、本明細書では、「ｓｃＦｖリンカー」と呼ばれる。ＶＨドメインのＮ末端またはＣＨ３ドメインのＣ末端を第２のＶＨドメイン、例えば、ｓｃＦｖのものに結合させるリンカーは「結合リンカー」と呼ばれる。
【００６３】
「モジュール」は、ＰＢＡの構造的および／または機能的に異なる部分、例えば結合部位（例えば、ｓｃＦｖドメインまたはＦａｂドメイン）およびＩｇ定常ドメインを示す。本明細書で提供されるモジュールは、他のモジュールとの多くの組み合わせで、再配列させることができ（核酸を組み換えること、あるいは新しいポリヌクレオチドの完全または部分デノボ合成のいずれかにより、それらをコードする配列を組み換えることにより）、例えば、本明細書で開示される多種多様のＰＢＡが生成される。例えば、「ＳＦ」モジュールは、すなわち、少なくとも、ＳＦ  ＶＨおよびＳＦ  ＶＬドメインのＣＤＲを含む結合部位「ＳＦ」を示す。「Ｃ８」モジュールは、結合部位「Ｃ８」を示す。
【００６４】
「患者（単数形または複数形）」、または「被験体（単数形または複数形）」は、本出願で記載される組成物により治療可能な１つ以上の病状を有する１以上のヒトまたは非ヒト動物を示す。いくつかの実施形態では、患者は１つ以上の型の癌を有し得る。
【００６５】
「ＰＢＡ」は、多価二重特異性抗体、少なくとも２つの異なる結合部分またはドメイン、よって少なくとも２つの異なる結合部位（例えば、２つの異なる抗体結合部位）を含む人工ハイブリッドタンパク質を示し、ここで、複数の結合部位の１つ以上は、例えば、ペプチド結合を介して、互いに共有結合により連結される。本明細書で記載される１つのＰＢＡは抗ＩＧＦ−１Ｒ＋抗ＥｒｂＢ３  ＰＢＡであり、これは、ＩＧＦ−１Ｒタンパク質、例えば、ヒトＩＧＦ−１Ｒタンパク質に特異的に結合する、１つ以上の第１の結合部位、および、ＥｒｂＢ３タンパク質、例えば、ヒトＥｒｂＢ３タンパク質に特異的に結合する、１つ以上の第２の結合部位を含む多価二重特異性抗体である。抗ＩＧＦ−１Ｒ＋抗ＥｒｂＢ３  ＰＢＡは、分子中の抗ＩＧＦ−１Ｒおよび抗ＥｒｂＢ３結合部位の相対配向に関係なく、そのように命名され、一方、ＰＢＡ名がスラッシュ（／）により分離された２つの抗原を含む場合、スラッシュの左側の抗原はスラッシュの右側の抗原に対しアミノ末端である。ＰＢＡは二価結合タンパク質、三価結合タンパク質、四価結合タンパク質または４を超える結合部位を有する結合タンパク質であってもよい。例示的なＰＢＡは、四価二重特異性抗体、すなわち、４つの結合部位を有するが、２つの異なる抗原またはエピトープのみに結合する抗体である。例示的な二重特異性抗体は四価「抗ＩＧＦ−１Ｒ／抗ＥｒｂＢ３」ＰＢＡおよび「抗ＥｒｂＢ３／抗ＩＧＦ−１Ｒ」ＰＢＡである。典型的には、四価ＰＢＡのＮ末端結合部位はＦａｂであり、Ｃ末端結合部位はｓｃＦｖである。
【００６６】
「パーセント同一」または「％同一」は、２つの配列が最大対応のために整列され、比較された時に、同じ（１００％同一）であるか、または同じである特定のパーセンテージのヌクレオチドまたはａａ残基を有する２つ以上の核酸もしくはポリペプチド配列または部分配列を示す。最大対応のために整列させるために、ギャップが比較される配列の１つ中に導入され得る。対応する位置のａａ残基またはヌクレオチドはその後比較され、定量化される。第１の配列中のある位置が第２の配列中の対応する位置と同じ残基により占められている場合、そうすると、配列はその位置で同一である。２つの配列間のパーセント同一性は、その配列により共有される同一位置の数の関数である（例えば、％同一性＝同一位置の数／位置の総数（例えば、重複位置）×１００）。ある一定の実施形態では、２つの配列は同じ長さである。１つの配列が別の配列と％同一であると測定される決定は数学的アルゴリズムを使用して決定することができる。２つの配列のそのような比較のために使用される数学的アルゴリズムの非限定的例は、ＧＣＧ配列アライメントソフトウェアパッケージの一部であるＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれる。例えば、ａａ配列を比較するためにＡＬＩＧＮプログラムを使用する場合、ＰＡＭ１２０重量残基表、１２のギャップ長ペナルティ、および４のギャップペナルティが使用され得る。配列解析のための追加のアルゴリズムは当技術分野でよく知られており、多くがオンラインで入手可能である。
【００６７】
「医薬併用物」または「医薬組成物」は、１を超える活性材料成分の混合または組み合わせから得られ、活性材料成分の固定化および非固定化組み合わせの両方を含む生成物を示す。「固定化組み合わせ」という用語は、活性材料成分、例えば、開示された方法で有用な化合物および共作用物質がどちらも患者に、同時に単一実体または投与量の形態で投与されることを意味する。「非固定化組み合わせ」という用語は、活性材料成分、例えば、開示された方法で有用な化合物および共作用物質がどちらも患者に別個の実体として、同時に、同時期にまたは順次のいずれかで、特定の時間制限なしで投与されることを意味し、ここで、そのような投与は、患者の体内で、２つの化合物の治療的に有効なレベルを提供する。後者はまた、カクテル療法、例えば、３つ以上の活性材料成分の投与にもあてはまる。
【００６８】
参照部分（例えば、ドメイン、例えば、天然起源のドメイン）の「部分」または「フラグメント」（例えば、ドメインの）は、参照部分のサイズの少なくとも、またはせいぜい１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、または９９％である、全体の参照部分の別々の部分を示す。
【００６９】
「優先的に結合する」または「優先的に結合している」は、１つの結合剤の１つまたは複数の標的エピトープへの特異的結合が、第２の結合剤の同じ１つまたは複数の標的エピトープへの特異的結合より強いことを示す。
【００７０】
「ｓｃＦｖリンカー」は、ｓｃＦｖのＶＬとＶＨドメインの間に挿入されるペプチドまたはポリペプチドドメインを示す。ｓｃＦｖリンカーは好ましくは抗原結合立体構造でのＶＬおよびＶＨドメインの配向を可能にする。１つの実施形態では、ｓｃＦｖリンカーは、グリシンおよびセリンのみを含むペプチドまたはポリペプチドリンカーを含み、またはこれから構成される（「Ｇｌｙ−Ｓｅｒリンカー」）。ある一定の実施形態では、ｓｃＦｖリンカーは、ジスルフィド結合を含む。
【００７１】
「ｓｃＦｖタンパク質」は、１つの軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、および１つの重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む単一ポリペプチドから構成される結合タンパク質を示し、ここで、各可変ドメインは、同じかまたは異なる抗体に由来する。ｓｃＦｖタンパク質は典型的にはＶＨドメインとＶＬドメインの間に挿入されるｓｃＦｖリンカーを含む。ＳｃＦｖタンパク質は当技術分野で知られており、例えば、米国特許第５，８９２，０１９号で記載される。
【００７２】
２つ以上のポリペプチド配列との関連での、「類似性」または「パーセント類似性」は、比較され、最大対応のために整列された場合、同じか保存的に置換された、特定のパーセンテージのａａ残基を有する、２つ以上の配列または部分配列を示す。例として、第１の配列に含まれる数と等しい数のａａと比較した場合、または当技術分野で知られているコンピュータ類似性プログラムにより整列されたポリペプチドのアライメントと比較した場合、第１のａａ配列が、第２のａａ配列に対して少なくとも５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、９０％、またはさらに９５％同一である、または保存的に置換された場合、第１のａａ配列は、第２のａａ配列に類似すると考えることができる。これらの用語はまた、２つ以上のポリヌクレオチド配列に適用可能である。
【００７３】
「小分子免疫調節物質」は、免疫系の１つ以上の機能を実行する小分子作用物質である。
【００７４】
「特異的結合」、「特異結合する」、「選択的結合」および「選択結合する」ならびに「免疫特異的に結合する」、「特異的に結合する」、「選択的に結合する」は結合部位のその標的エピトープへ、または結合部位の組み合わせのそれらの標的エピトープへの結合を示す時に使用され得る用語であり、結合部位（複数可）が標的エピトープ（複数可）への免疫特異的結合を示すことを意味する。
【００７５】
エピトープに特異的に結合する結合部位は標的エピトープに対して認識できる親和性を示し、一般に、任意の非関連エピトープに対して認識できる親和性を示さない、および、好ましくは、標的エピトープに対する親和性に等しい、より大きい、またはより２桁以内で低い、任意の非関連エピトープに対する親和性を示さないという点で、他のエピトープとは交差反応性を示さない。「認識できる」または好ましい結合は、１０−８、１０−９Ｍ、１０−１０、１０−１１、１０−１２Ｍ、１０−１３Ｍの解離定数（Ｋｄ）またはさらに低いＫｄ値を有する結合を含む。Ｋｄ（解離定数）に対するより低い値はより高い結合親和性を示し、よって１０−７のＫｄは１０−８のＫｄより高いＫｄ値であるが、１０−８のＫｄよりも低い結合親和性を示すことに注意されたい。約１０−７Ｍ、さらには約１０−８Ｍという低い値を有する解離定数は、治療抗体に好適な解離定数のハイエンドにある。結合親和性は、例えば、１０−６〜１０−１２Ｍ、１０−７〜１０−１２Ｍ、１０−８〜１０−１２Ｍまたはそれより良好な解離定数の範囲（すなわち、またはより低い値の解離定数）により示され得る。ナノモル（１０−９Ｍ）からピコモル（１０−１２Ｍ）範囲またはそれ以下の解離定数は、典型的には、治療抗体に最も有用である。好適な解離定数は５０ｎＭ以下のＫｄ（すなわち、５０ｎＭ以上の結合親和性−例えば、４５ｎＭのＫｄ）または４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎｍ、１００ｐＭ、１０ｐＭまたは１ｐＭ以下のＫｄである。特異的または選択的結合は、そのような結合を決定するための、任意の当該技術分野において承認されている手段に従い、例えば、例としてＳｃａｔｃｈａｒｄ分析および／または競合結合アッセイに従い決定することができる。
【００７６】
治療の方法
１つの態様では、治療的有効量の抗ＩＧＦ−１Ｒおよび抗ＥｒｂＢ３抗体、好ましくはイスチラツマブ（ＭＭ−１４１）を、単独で、または免疫調節治療薬と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する（例えば、固形腫瘍を有する患者を治療する）方法が本明細書で提供される。
【００７７】
いくつかの実施形態では、免疫調節治療薬はヒト細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）−遮断抗体である。免疫調節治療薬は切除不能なまたは転移性メラノーマの治療のために指示することができる。いくつかの実施形態では、癌は、イスチラツマブをＣＴＬＡ−４遮断抗体と組み合わせて癌、例えば固形腫瘍を有する癌と診断されたヒト患者に投与することにより治療することができる。いくつかの実施形態では、イスチラツマブは、切除不能なまたは転移性メラノーマを有する患者の治療のために、単独で、またはＣＴＬＡ−４遮断抗体（例えば、イピルムマブ（ｉｐｉｌｕｍｕｍａｂ））と組み合わせて投与される。
【００７８】
好ましくは、ヒト患者は、イスチラツマブの単独での、またはＣＴＬＡ−４遮断抗体と組み合わせての投与由来の、医学的に望ましくない合併症の容認できないリスクを上昇させる自己免疫状態を有さない。例えば、下記の１つ以上を有する患者は、イスチラツマブおよびＣＴＬＡ−４遮断抗体の組み合わせを受けることから排除することができる：能動自己免疫疾患または臓器移植のために全身免疫抑制を受けるもの。いくつかの実施形態では、関連する病歴、例えば、有害反応または病状、例えば心筋炎、血管障害、側頭動脈炎、血管炎、リウマチ性多発筋痛症、結膜炎、眼瞼炎、上強膜炎、強膜炎、白血球破壊性血管炎、紅斑多形、乾癬、膵炎、関節炎、および自己免疫性甲状腺炎を有する患者もまた、抗悪性腫瘍療法を受けることから排除することができる。
【００７９】
いくつかの実施形態では、癌を治療する方法は抗悪性腫瘍療法の投与を含み、ここで、抗悪性腫瘍療法は、治療的に有効な用量のイスチラツマブ（例えば、４０ｍｇ／ｋｇまたは２．８グラム固定用量、または下記表による低減された固定用量）を、２週間に１回、単独で、または抗ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせて投与することから構成される（例えば、３ｍｇ／ｋｇイピリムマブを静脈内注入として９０分にわたり、３週間に１回）。いくつかの実施形態では、イスチラツマブは、例えば９０−１２０分の期間にわたる静脈内注入として（例えば、９０分注入を２週間に１回または１２０分注入を２週間に１回、または１２０分注入を第１の投与で、続いて９０分注入をその後の投与で）投与される。いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は、単独で、またはＰＤ−１遮断抗体と組み合わせて投与される、表２に示されるイスチラツマブの用量の１以上の低減を含み、またはこれから構成される。いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は、単独で、またはＰＤ−Ｌ１遮断抗体と組み合わせて投与される、表２に示されるイスチラツマブの用量の１以上の低減を含み、またはこれから構成される。いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は、単独で、またはＣＴＬＡ４遮断抗体と組み合わせて投与される、表２に示されるイスチラツマブの用量の１以上の低減を含み、またはこれから構成される。
【表２】
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【００８０】
例えば、いくつかの実施形態では、方法は、抗悪性腫瘍療法を癌と診断されたヒト患者に投与することを含み、ここで、抗悪性腫瘍療法は２．８、２．２４または１．９６ｇのイスチラツマブの患者への投与（例えば、２週間に１回）から構成され、ここで、ヒト患者は診断された能動自己免疫疾患を有さない。別の実施形態では、方法は、抗悪性腫瘍療法を癌と診断されたヒト患者に投与することを含み、ここで、抗悪性腫瘍療法は、２．８、２．２４または１．９６ｇのイスチラツマブを、２週間に１回、３ｍｇ／ｋｇイピリムマブ、３週間に１回、合計４回までのイピルムマブ（ｉｐｉｌｕｍｕｍａｂ）投与と組み合わせて患者に投与することから構成され、ここで、ヒト患者は切除不能なまたは転移性メラノーマと診断されている。あるいは、いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は週に１回投与され、６ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇ／用量の治療的に有効な用量でのイスチラツマブの投与から構成される。
【００８１】
別の態様では、治療的有効量の抗ＩＧＦ−１Ｒおよび抗ＥｒｂＢ３抗体、好ましくはイスチラツマブ（ＭＭ−１４１）を、単独で、またはヒトプログラム細胞死受容体−１、またはＰＤ−１、遮断抗体と組み合わせて投与することを含む、癌を治療する（例えば、固形腫瘍を有する患者を治療する）方法が本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、癌は、イスチラツマブをＰＤ−１遮断抗体と組み合わせてヒト患者（例えば、固形腫瘍と診断された患者）に投与することにより治療することができる。いくつかの実施形態では、切除不能なまたは転移性メラノーマを有する患者およびイピリムマブ、および、ＢＲＡＦ  Ｖ６００突然変異が陽性である場合、ＢＲＡＦ阻害剤後の疾患進行の治療のために、イスチラツマブが単独で、またはＰＤ−１遮断抗体（例えば、ニボルマブ）と組み合わせて投与される。
【００８２】
１つの実施形態では、ヒト患者は、単独での、またはＰＤ−１遮断抗体と組み合わせてのイスチラツマブの投与由来の、医学的に望ましくない合併症の容認できないリスクを上昇させる能動自己免疫状態を有さない。例えば、いくつかの実施形態では、下記の１つ以上を有する患者は、イスチラツマブおよびＰＤ−１遮断抗体の組み合わせを受けることから排除することができる：診断された自己免疫疾患を有する患者、開始イベントの１２週以内に解決されなかった、または不十分に制御された、前のイピリムマブ関連グレード４有害反応（内分泌疾患を除く）またはグレード３イピリムマブ関連有害反応を有する患者ならびにコルチコステロイド（＞１０ｍｇ毎日プレドニゾン等価物）または他の免疫抑制薬物療法による慢性全身治療を必要とする病状、ＢまたはＣ型肝炎のための陽性試験、およびＨＩＶの病歴を有する患者。いくつかの実施形態では、免疫媒介有害反応、例えば膵炎、ぶどう膜炎、脱髄、自己免疫性ニューロパチー、副腎不全、ならびに顔面および外転神経不全麻痺を含む病歴を有する患者は、療法から排除される。
【００８３】
いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は２週間に１回投与され、ここで、療法は治療的に有効な用量のイスチラツマブ（例えば、４０ｍｇ／ｋｇまたは２．８グラム固定用量）を、単独で、または抗ＰＤ−１抗体と組み合わせて（例えば、３ｍｇ／ｋｇニボルマブを静脈内注入として６０分にわたって）投与することから構成される。いくつかの実施形態では、イスチラツマブは静脈内注入として、例えば９０−１２０分の期間にわたり（例えば、９０分注入、２週間に１回または１２０分注入、２週間に１回、または１２０分注入を第１の投与で、続いて、９０分注入をその後の投与で）投与される。いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は、単独で、またはＰＤ−１遮断抗体と組み合わせて投与される、表２に示されるイスチラツマブの用量の１以上の低減を含み、またはこれから構成される。
【００８４】
いくつかの実施形態では、方法は抗悪性腫瘍療法を２週間に１回、癌と診断されたヒト患者に投与することを含み、ここで、抗悪性腫瘍療法は２．８、２．２４または１．９６ｇのイスチラツマブの患者への投与から構成され、ここで、ヒト患者は診断された自己免疫疾患を有さない。別の実施形態では、方法は抗悪性腫瘍療法を２週間に１回、癌と診断されたヒト患者に投与することを含み、ここで、抗悪性腫瘍療法は、２．８、２．２４または１．９６ｇのイスチラツマブを、３ｍｇ／ｋｇニボルマブと組み合わせて、患者に投与することから構成され、ここで、ヒト患者は切除不能なまたは転移性メラノーマ、ならびに、イピルムマブ（ｉｐｉｌｕｍｕｍａｂ）および、ＢＲＡＦ  Ｖ６００突然変異陽性である場合、ＢＲＡＦ阻害剤後の疾患進行と診断されている。あるいは、抗悪性腫瘍療法は週に１回投与され、６ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇ／用量の治療的に有効な用量でのイスチラツマブの投与から構成される。
【００８５】
いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は２週間に１回、イピリムマブによる前の治療後の癌疾患進行（例えば、メラノーマ疾患進行）を有する患者に投与され、ここで、抗悪性腫瘍療法は、治療的に有効な用量のイスチラツマブ（例えば、４０ｍｇ／ｋｇまたは２．８グラム固定用量）を、単独で、または抗ＰＤ−１抗体と組み合わせて（例えば、３ｍｇ／ｋｇニボルマブを静脈内注入として６０分にわたって）投与することから構成される。イスチラツマブは、静脈内注入として、例えば９０−１２０分の期間にわたり（例えば、９０分注入、２週間に１回または１２０分注入、２週間に１回、または１２０分注入を第１の投与で、続いて、９０分注入をその後の投与で）投与することができる。いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は、単独で、またはＰＤ−１遮断抗体と組み合わせて投与される、表２に示されるイスチラツマブの用量の１以上の低減を含み、またはこれから構成される。
【００８６】
いくつかの実施形態では、免疫調節治療薬はプログラム細胞死−リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）遮断抗体である。免疫調節治療薬は局所進行性または転移性尿路上皮癌の治療のために指示することができ、白金を含む化学療法中または後の疾患進行を有する患者および白金を含む化学療法を有するネオアジュバントまたはアジュバント治療の１２ヶ月以内の疾患進行を有する患者が含まれる。いくつかの実施形態では、癌は、イスチラツマブをＰＤ−Ｌ１遮断抗体と組み合わせて、癌、例えば固形腫瘍を有する癌と診断されたヒト患者に投与することにより治療される。いくつかの実施形態では、イスチラツマブは、切除不能なまたは転移性メラノーマを有する患者の治療のために、単独で、またはＰＤ−Ｌ１遮断抗体（例えば、アテゾルズマブ（ａｔｅｚｏｌｕｚｕｍａｂ））と組み合わせて投与される。
【００８７】
好ましくは、ヒト患者は、イスチラツマブの単独での、またはＰＤ−Ｌ１遮断抗体と組み合わせての投与由来の、医学的に望ましくない合併症の容認できないリスクを上昇させる自己免疫状態を有さない。例えば、下記の１つ以上を有する患者は、イスチラツマブおよびＰＤ−Ｌ１遮断抗体の組み合わせを受けることから排除することができる：能動自己免疫疾患または臓器移植のために全身免疫抑制を受けるもの。いくつかの実施形態では、関連する病歴を有する患者はまた、抗悪性腫瘍療法を受けることから排除することができ、下記を有する／有した患者が含まれる：自己免疫疾患の病歴、活動性またはコルチコステロイド依存性脳転移、治療前２８日以内での弱毒生ワクチンの投与、または全身性免疫賦活剤または全身性免疫抑制薬物療法の投与。
【００８８】
いくつかの実施形態では、癌を治療する方法は抗悪性腫瘍療法の投与を含み、ここで、抗悪性腫瘍療法は、治療的に有効な用量のイスチラツマブ（例えば、４０ｍｇ／ｋｇまたは２．８グラム固定用量）を、２週間に１回、単独で、または抗ＰＤ−Ｌ１抗体（例えば、１２００ｍｇアテゾリズマブ、３週間に１回）と組み合わせて投与することを含み、またはこれから構成される。イスチラツマブは、静脈内注入として、例えば９０−１２０分の期間にわたり（例えば、９０分注入を２週間に１回または１２０分注入を２週間に１回、または１２０分注入を第１の投与で、続いて、９０分注入をその後の投与で）投与することができる。いくつかの実施形態では、抗悪性腫瘍療法は、単独で、またはＰＤ−Ｌ１遮断抗体と組み合わせて投与される、表２に示されるイスチラツマブの用量の１以上の低減を含み、またはこれから構成される。
【００８９】
制御性Ｔ細胞活性を妨害する作用物質
制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）活性を妨害する作用物質としては、小分子免疫調節薬、放射線、抗癌ワクチン、および免疫調節抗体（ヒトＩＧＦ−１に結合しない）が挙げられる。Ｔｒｅｇは、以前はサプレッサーＴ細胞として知られており、免疫系を調節し、他の細胞に対する免疫応答を抑制し、自己抗原に対する寛容性を維持するＴ細胞の亜集団である。一般に、これらの細胞は、エフェクターＴ細胞の誘導および増殖を抑制または下方制御する。よって、制御性Ｔ細胞活性が妨害されると、これらの細胞の免疫応答抑制活性が減じられ、または除去される。
【００９０】
免疫調節抗体
いくつかの実施形態では、治療的に有効な用量のイスチラツマブ（ＭＭ−１４１）は、免疫調節抗体と組み合わせて投与される。以上で記載される通り、免疫調節抗体は、好ましくは下記からなる群より選択される：ヒト細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）−遮断抗体、例えばイピリムマブ、およびヒトプログラム細胞死受容体−１（ＰＤ−１）抗体、例えばニボルマブ。免疫調節薬は、単独での、またはイスチラツマブと組み合わせての、切除不能なまたは転移性メラノーマの安全で有効な治療のために指示することができる。
【００９１】
ＩＧＦ−１に結合しない免疫調節抗体の追加の例としては、下記から構成される群より選択され得るが、それらに限定されない免疫調節抗体が挙げられる：（ａ）ヒトＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、または４−１ＢＢに免疫特異的に結合する作動性抗受容体抗体；（ｂ）ヒトＣＴＬＡ−４（細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４、ＣＤ１５２としても知られている）、ＰＤ−１（プログラム細胞死タンパク質１、ＣＤ２７９としても知られている）、ＰＤ−Ｌ１（プログラム細胞死−リガンド１、ＣＤ２７４またはＢ７−Ｈ１としても知られている）、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、ＫＩＲ、ＣＤ４７、ＣＤ２５、Ｂ７−Ｈ３、またはＢ７−Ｈ４に免疫特異的に結合する拮抗性抗受容体抗体；ならびに（ｃ）ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦβ、アンジオポエチン（ａｎｇｉｏｐｏｅｔｉｎ）−２、ＶＥＧＦ、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３、またはＴＮＦαの機能をブロックする抗リガンド抗体。１つの実施形態では、第２の作用物質は抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＣＴＬＡ−４抗体である。別の実施形態では、第２の作用物質はアテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである。別の実施形態では、第２の作用物質は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、およびピディリズマブからなる群より選択される。別の実施形態では、第２の作用物質はイピリムマブまたはトレメリムマブである。別の実施形態では、第２の作用物質はリリルマブである。
【００９２】
ヒトＩＧＦ−１に結合しない免疫調節抗体は、図１７Ａ−１７Ｃにおいてさらに詳述される。
【００９３】
抗癌ワクチン
１つの態様では、制御性Ｔ細胞活性を妨害する本明細書で提供される治療的組み合わせは抗癌ワクチンである。いくつかの実施形態では、抗癌ワクチンは、下記からなる群より選択されるが、それらに限定されない：ＯｎｃｏＶｅｘ、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＰＲＯＳＴＶＡＣ、ＧＶＡＸ、ＣＤＸ１１０、ＣＤＸ１３０７、ＣＤＸ１４０１、ＣＶ９１０４、ＢＩＯＶＡＸＩＤ、ＩＭＡ  ９０１、およびＡＤＸＳ１１−００１。
【００９４】
多価二重特異性（抗ＩＧＦ−１Ｒおよび抗ＥｒｂＢ３）抗体
ある一定の実施形態では、本明細書で開示される方法において使用するための二重特異性（抗ＩＧＦ−１Ｒおよび抗ＥｒｂＢ３）抗体はイスチラツマブ（ＭＭ−１４１）である。上記で言及される米国特許第８，４７６，４０９号に加えて、本明細書で開示される方法において有用な二重特異性抗体に関する開示が、下記において見出され得る：米国特許公開第２０１２−０２４４１６３号；米国特許公開第２０１５−０２３１２１９号（ＷＩＰＯ公開第ＷＯ２０１３／１５２０３４号もまた、参照されたい）；ならびにＷＩＰＯ公開第ＷＯ２０１５／１３０５５４号。開示された方法において使用するための二重特異性抗体のさらなる議論が以下で記載される。単離されたモノクローナル抗体であってもよい多価二重特異性抗体（「ＰＢＡ」）が本明細書で提供される。例示的なＰＢＡは、少なくとも１つの抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位および少なくとも１つの抗ＥｒｂＢ３結合部位または少なくとも２つの抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位および少なくとも２つの抗ＥｒｂＢ３結合部位を含む。好ましい実施形態では、抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位は、ヒトＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合し、抗ＥｒｂＢ３結合部位はヒトＥｒｂＢ３に特異的に結合する。ある一定の実施形態では、ＰＢＡは互いに会合し、単一タンパク質を形成する２つの重−軽鎖対を含み、ここで、各重−軽鎖対は抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位および抗ＥｒｂＢ３結合部位を含む。ある一定の実施形態では、第１の重−軽鎖対の抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位および抗ＥｒｂＢ３結合部位は免疫グロブリンＣＲを介して結合され、この免疫グロブリンＣＲは別の重−軽鎖対の免疫グロブリンＣＲと会合し（例えば、ジスルフィド結合により）、例えば、単一ＩｇＧ様タンパク質を形成する。本明細書で記載される好ましいＰＢＡは有利な特性、例えば腫瘍細胞増殖を阻害する、ならびに、その単離された抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部分またはその単離された抗ＥｒｂＢ３結合部分のいずれかと同等に、またはこれより強力に腫瘍成長を低減させ、または安定化させる能力、ならびに、ある一定の実施形態では、腫瘍侵襲性および腫瘍転移のいずれかまたは両方を阻害する能力を有する。本明細書で記載される例示的なＰＢＡは、その単離された抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部分またはその単離された抗ＥｒｂＢ３結合部分のいずれかと同等に、またはこれより強力に、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３媒介シグナル伝達のいずれかまたは両方、例えばＩＧＦ−１Ｒ、ＥｒｂＢ３およびＡＫＴリン酸化を阻害することができる。例示的なＰＢＡは、（ｉ）腫瘍細胞の成長を、例えば、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上だけ阻害する；あるいは（ｉｉ）ＩＧＦ−１ｒ、ＥｒｂＢ３またはＡｋｔリン酸化を、例えば、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上だけ、例えば、その単離された抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部分またはその単離された抗ＥｒｂＢ３結合部分のいずれかと同程度に、またはこれより強力に阻害し、あるいは（ｉ）および（ｉｉ）の両方である。例示的なＰＢＡは（ｉｉｉ）４℃、室温または３７℃で１、２、３、４、５日またはそれ以上の後、安定であり、例えば、溶液中で少なくとも８０％モノマであり、あるいは（ｉｖ）少なくとも５０℃、５５℃、６０℃、６５℃またはそれ以上のＴｍ（例えば、ＤＳＦにより決定される）を有し、または（ｉｉｉ）および（ｉｖ）の両方である。
【００９５】
本明細書で開示される方法は１つ以上の多価二重特異性抗体（ＰＢＡ）の使用または投与を含むことができ、この抗体は２対のポリペプチド鎖を含むタンパク質であり、前記２つの対の各対は、少なくとも１つの重−軽鎖結合により軽鎖に連結された重鎖を含み；ここで、（ａ）各対は少なくとも１つの抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位および少なくとも１つの抗ＥｒｂＢ３結合部位を含み；ならびに（ｂ）各対はＰＢＡの重鎖のＮ末端部分およびＰＢＡの軽鎖のＮ末端部分を含む第１の結合部位、ならびにＰＢＡの重鎖から完全に構成されるＣ末端ｓｃＦｖである第２の結合部位を含み、前記Ｃ末端ｓｃＦｖは、ｓｃＦｖリンカーにより軽鎖ＶＲに連結された重鎖ＶＲを含み；ならびに抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位は、ＰＢＡの重鎖から構成される重鎖免疫グロブリン（ＨＣ  Ｉｇ）定常領域（ＣＲ）を介して、抗ＥｒｂＢ３結合部位に連結され、２つの対は各対のＨＣ  Ｉｇ  ＣＲ間の少なくとも１つの結合により結合される。好ましい実施形態では、抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位は、（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８−３１およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８４−３８５からなる群より選択されるＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯの（に明記される）ａａ配列を含むａａ配列を有する重鎖のＶＨＣＤＲ１（ａａ番号２６−３５）、ＶＨＣＤＲ２（ａａ番号５１−６６）、およびＶＨＣＤＲ３（ａａ番号９９−１１１）；または（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０２を含むＶＨＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０３を含むＶＨＣＤＲ２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０４を含むＶＨＣＤＲ３を含む一組の３つのＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）のいずれかを含む、一組の３つのＶＨ相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、ならびに、（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２−３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２−１３３、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８６−３８７からなる群より選択されるＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯのａａ配列を含むａａ配列を有する軽鎖のＶＬＣＤＲ１（ａａ番号２４−３４）、ＶＬＣＤＲ２（ａａ番号５０−５６）およびＶＬＣＤＲ３（ａａ番号８９−９７）；または（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０５を含むＶＬＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０６を含むＶＬＣＤＲ２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０７またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０８を含むＶＬＣＤＲ３を含む一組の３つのＶＬＣＤＲのいずれかを含む、一組の３つのＶＬＣＤＲを含む軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含み、各ＣＤＲはアミノ末端およびカルボキシ末端をさらに含み、ここで、各組のＣＤＲのＣＤＲは、対応する重または軽鎖において、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の直線のアミノ〜カルボキシ順で配列され、または、ここで、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３の配列は可変ａａを含み、かつＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３の配列は可変ａａを含み、ただし、ＰＢＡは、（ｉ）抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＳＦモジュールおよび抗ＥｒｂＢ３  Ｃ８モジュールの両方を含まない；または（ｉｉ）それぞれ、ＳＦまたはＣ８モジュールのＣＤＲまたはＦＲ由来の１つ以上のａａが異なる少なくとも１つのＣＤＲまたはＦＲを含むことを条件とする。ある一定の実施形態では、抗ＥｒｂＢ３結合部位は、（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４−５、���ＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４−１６５、およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８８からなる群より選択されるＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯのａａ配列を含むａａ配列を有する重鎖のＶＨＣＤＲ１（ａａ番号２６−３５）、ＶＨＣＤＲ２（ａａ番号５１−６６）およびＶＨＣＤＲ３（ａａ番号９９−１１１）、または（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０９を含むＶＨＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１０を含むＶＨＣＤＲ２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１１を含むＶＨＣＤＲ３を含む一組の３つのＶＨ  ＣＤＲのいずれかを含む、一組の３つのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨドメイン、ならびに、（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６−７およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６−２００からなる群より選択されるＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯのａａ配列を含むａａ配列を有する軽鎖のＶＬＣＤＲ１（ａａ番号２３−３３）、ＶＬＣＤＲ２（ａａ番号４９−５５）およびＶＬＣＤＲ３（ａａ番号８８−９８）；または（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１２を含むＶＬＣＤＲ１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１３を含むＶＬＣＤＲ２およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１４またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１５を含むＶＬＣＤＲ３を含む一組の３つのＶＬＣＤＲを含む軽鎖可変（ＶＬ）ドメインのいずれかを含む、一組の３つのＶＬＣＤＲを含む軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含み、各ＣＤＲはアミノ末端およびカルボキシ末端をさらに含み、ここで、ＣＤＲの各組のＣＤＲは、抗体において、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３の直線のアミノ〜カルボキシ順で配列され、または、ここで、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２およびＶＨＣＤＲ３の配列は可変ａａを含み、かつＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３の配列は可変ａａを含み、ここで、ＰＢＡは（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５を含む軽鎖およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１を含む重鎖を含む抗ＩＧＦ−１Ｒモジュール、ならびにｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５を含む軽鎖およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４５を含む重鎖を含む抗ＥｒｂＢ３  Ｃ８モジュールの両方は含まない。ある一定の実施形態では、抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０８を含み、または、抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１５を含む。ある一定の実施形態では、２対のポリペプチド鎖は本質的に同一配列を有する。ＨＣ  Ｉｇ  ＣＲ結合間の少なくとも１つの結合の少なくとも１つはジスルフィド結合であり、およびジスルフィド結合またはファンデルワールス結合であってもよく、または前記少なくとも１つの重−軽鎖結合の少なくとも１つはジスルフィド結合であり、ジスルフィド結合またはファンデルワールス結合であってもよい。ある一定の実施形態では、抗ＥｒｂＢ３結合部位はＣ末端ｓｃＦｖであり、ある一定の実施形態では、抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位はＣ末端ｓｃＦｖである。ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位、ＨＣ  Ｉｇ  ＣＲおよび抗ＥｒｂＢ３結合部位は、その対の重鎖を含んでもよく、これは単一の、近接ポリペプチド鎖から構成される。
【００９６】
１つ以上のＰＢＡは、（ｉ）腫瘍細胞の成長をインビトロで、１μＭ以下、または１００ｎＭ以下、または１０ｎＭ以下、または１ｎＭ以下の濃度で阻害することができ、またはｉｉ）ｐＥｒｂＢ３およびｐＩＧＦ−１Ｒのいずれかまたは両方のリン酸化の阻害により示されるように、ヘレグリンおよびＩＧＦ１誘導シグナル伝達のいずれかまたは両方を、１０ｎＭ以下または１ｎＭ以下または１００ｐＭ以下のＩＣ５０で、または少なくとも７０％または少なくとも８０％または少なくとも９０％の最大パーセント阻害で阻害する。成長阻害は、ＣＴＧアッセイにより、培養中のＤＵ１４５細胞において測定され得る。シグナル伝達の阻害は、８０ｎｇ／ｍｌでのＩＧＦ−１および２０ｎｇ／ｍｌでのヘレグリンによる１５分間の刺激後、培養中のＢｘＰＣ−３細胞において決定され得る。
【００９７】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各ＨＣ  Ｉｇ  ＣＲは、他の対のＣＨ３ドメインとの結合を媒介するＣＨ３ドメインを含む。各ＨＣ  Ｉｇ  ＣＲはまた、ＣＨ２ドメイン、ヒンジ、およびＣＨ１ドメインを含み得る。ある一定の実施形態では、ＰＢＡのＣＨ１ドメインはそのＣ末端でヒンジのＮ末端に連結され、ヒンジはそのＣ末端で、ＣＨ２ドメインのＮ末端に連結され、ＣＨ２ドメインはそのＣ末端でＣＨ３ドメインのＮ末端に連結される。
【００９８】
各第１の結合部位は第１のＶＨドメインを含むことができ、ＰＢＡの各ＣＨ１ドメインは、そのＮ末端で第１のＶＨドメインのＣ末端に連結され得る。ＰＢＡの各ＣＨ３ドメインはそのＣ末端でｓｃＦｖのＮ末端に連結され得る。ＰＢＡの各ＣＨ３ドメインは、そのＣ末端で結合リンカーのＮ末端に連結され得、結合リンカーはそのＣ末端でｓｃＦｖのＮ末端に連結される。各軽鎖は第１のＶＨドメインと会合する第１のＶＬドメインを含むことができ、第１の結合部位が形成される。各第１のＶＬドメインはそのＣ末端でＣＬドメインのＮ末端に連結され得る。各第１の結合部位は抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位であってもよく、各ｓｃＦｖは抗ＥｒｂＢ３  ｓｃＦｖであってもよい。各第１の結合部位は抗ＥｒｂＢ３結合部位であってもよく、各ｓｃＦｖは抗ＩＧＦ−１Ｒ  ｓｃＦｖであってもよい。ＰＢＡのＨＣ  Ｉｇ  ＣＲはＩｇＧ  ＣＲ、例えば、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２  ＣＲであってもよい。
【００９９】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。
【０１００】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。
【０１０１】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。
【０１０２】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。
【０１０３】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。
【０１０４】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。
【０１０５】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。
【０１０６】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５の対応するＣＤＲのａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６の対応するＣＤＲのａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２およびＶＬＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９の対応するＣＤＲのａａ配列を含む。
【０１０７】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１の配列を含むＶＨドメインを含み、ここで、配列は可変ａａを含み、および／またはＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２（または３）の配列を含むＶＬドメインを含み、ここで、配列は可変ａａを含む。
【０１０８】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４（または５）の配列を含むＶＨドメインを含み、ここで、配列は可変ａａを含み、および／またはＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６（または７）の配列を含むＶＬドメインを含み、ここで、配列は可変ａａを含む。
【０１０９】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１の配列を含むＶＨドメインおよびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２（または３）の配列を含むＶＬドメインを含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４（または５）の配列を含むＶＨドメインおよびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６（または７）の配列を含むＶＬドメインを含む。
【０１１０】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１のａａ配列を含むＶＨドメイン（ここで、Ｘ１はＴでなく、Ｘ２はＶでなく、Ｘ６はＲでなく、Ｘ８はＤでなく、またはＸ１０はＩでない）、またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３のａａ配列を含むＶＬドメインを含み、またはＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３結合部位は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５のａａ配列を含むＶＨドメインまたはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７の配列を含むＶＬドメインを含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１のａａ配列を含むＶＨドメイン（Ｘ１はＴでなく、Ｘ２はＶでなく、Ｘ６はＲでなく、Ｘ８はＤでなく、またはＸ１０はＩでない）、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３の配列を含むＶＬドメインを含み；ならびにＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５のａａ配列を含むＶＨドメインおよびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７の配列を含むＶＬドメインを含む。
【０１１１】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ結合部位はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８−３１からなる群より選択されるａａ配列を含むＶＨドメインおよび／またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２−１３３からなる群より選択されるａａ配列を含むＶＬドメインを含み、および／または各抗ＥｒｂＢ３結合部位は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４−１６５からなる群より選択されるＶＨａａ配列；および／またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６−２００からなる群より選択されるＶＬａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、（ａ）各第１のＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８−３１からなる群より選択されるａａ配列を含み、各第１のＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２−１３３からなる群より選択されるａａ配列を含み、各第２のＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４−１６５からなる群より選択されるａａ配列を含み、各第２のＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６−２００からなる群より選択されるａａ配列を含み、または（ｂ）各第１のＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４−１６５からなる群より選択されるａａ配列を含み、各第１のＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６−２００からなる群より選択されるａａ配列を含み、各第２のＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８−３１からなる群より選択されるａａ配列を含み、各第２のＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２−１３３からなる群より選択されるａａ配列から構成される。
【０１１２】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のａａ配列を含む。
【０１１３】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５のａａ配列を含む。ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含む。
【０１１４】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５のａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含む。
【０１１５】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５のａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含む。
【０１１６】
ある一定の実施形態では、各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のａａ配列を含み、各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５のａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含む。
【０１１７】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５のａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含む。
【０１１８】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５のａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含む。
【０１１９】
ある一定の実施形態では、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＩＧＦ−１Ｒ  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のａａ配列を含み；ならびに（ａ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のａａ配列を含み；または（ｂ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のａａ配列を含み、ＰＢＡの抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のａａ配列を含み；または（ｃ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のａａ配列を含み；または（ｄ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含み；または（ｅ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のａａ配列を含み；または（ｆ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のａａ配列を含み；または（ｇ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のａａ配列を含み；または（ｈ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のａａ配列を含み；または（ｉ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のａａ配列を含み；または（ｊ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５のａａ配列を含み；または（ｋ）ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＨドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のａａ配列を含み、ＰＢＡの各抗ＥｒｂＢ３  ＶＬドメインはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のａａ配列を含む。
【０１２０】
ある一定の実施形態では、（ａ）ＰＢＡの各重鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列を含み：ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１２）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１４）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１６）；ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１８）；ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２２）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２４）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２６）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３４）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３６）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３８）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４０）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４４）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４６）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４８）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５０）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５２）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５４）およびＭ５７−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５６）、および／またはＰＢＡの各軽鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列を含み：ＳＦκ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２）；Ｐ４κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４）；Ｍ７８κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６）；およびＭ５７κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８）；または（ｂ）ＰＢＡの各重鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列を含み：Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６８）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７０）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７２）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７４）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７６）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７８）；Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８０）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７（（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８２）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８４）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８６）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８８）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９０）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９２）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９４）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９６）；Ｂ６０−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５５）およびＭ７−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５７）、および／または、ＰＢＡの各軽鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列を含む：Ｐ１λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５８）；Ｍ２７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６０）；Ｍ７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２）；Ｂ７２λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６４）；およびＢ６０λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６）。
【０１２１】
ある一定の実施形態では、（ａ）ＰＢＡの各重鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列とは少なくとも１つのａａ付加、欠失または置換が異なるａａ配列を含み：ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１２）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１４）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１６）；ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１８）；ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２２）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２４）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２６）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３４）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３６）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３８）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４０）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４４）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４６）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４８）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５０）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５２）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５４）およびＭ５７−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５６）、ＰＢＡの各軽鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列を含み：ＳＦκ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２）；Ｐ４κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４）；Ｍ７８κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６）；およびＭ５７κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８）；または（ｂ）ＰＢＡの各重鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列を含み：ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１２）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１４）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１６）；ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１８）；ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２２）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２４）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２６）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３４）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３６）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３８）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４０）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４４）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４６）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４８）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５０）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５２）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５４）およびＭ５７−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５６）；なら��にＰＢＡの各軽鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列とは少なくとも１つのａａ付加、欠失または置換が異なるａａ配列を含み：ＳＦκ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２）；Ｐ４κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４）；Ｍ７８κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６）；およびＭ５７κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８）；または（ｃ）ＰＢＡの各重鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列とは少なくとも１つのａａ付加、欠失または置換が異なるａａ配列を含み：Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６８）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７０）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７２）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７４）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７６）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７８）；Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８０）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７（（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８２）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８４）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８６）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８８）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９０）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９２）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９４）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９６）；Ｂ６０−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５５）およびＭ７−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５７）、ＰＢＡの各軽鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列を含み：Ｐ１λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５８）；Ｍ２７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６０）；Ｍ７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２）；Ｂ７２λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６４）；およびＢ６０λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６）；または（ｄ）ＰＢＡの各重鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列を含み：Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６８）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７０）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７２）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７４）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７６）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７８）；Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８０）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７（（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８２）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８４）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８６）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８８）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９０）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９２）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９４）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９６）；Ｂ６０−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５５）およびＭ７−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５７）、ＰＢＡの各軽鎖は、下記からなる群より選択されるａａ配列とは少なくとも１つのａａ付加、欠失または置換が異なるａａ配列を含み：Ｐ１λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５８）；Ｍ２７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６０）；Ｍ７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２）；Ｂ７２λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６４）；およびＢ６０λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６）、ここで、ＰＢＡは、少なくとも１つのａａ、ＣＤＲまたは可変ドメインにおいて、１６Ｆとは異なる。
【０１２２】
ある一定の実施形態では、（ａ）少なくとも１つの結合によりＰＢＡの他の重鎖に結合されたＰＢＡの各重鎖は、下記ａａ配列の１つと少なくとも９０％同一であるまたは下記ａａ配列の１つとは、１−３０のａａ置換、欠失および／または付加において異なるａａ配列を含み：ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１２）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１４）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１６）；ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１８）；ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２２）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２４）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２６）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３４）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３６）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３８）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４０）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４４）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４６）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４８）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５０）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５２）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５４）およびＭ５７−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５６）ならびに（ｂ）少なくとも１つの結合により（ａ）の１つの重鎖に結合されたＰＢＡの各軽鎖は下記ａａ配列の１つと少なくとも９０％同一であるまたは下記ａａ配列の１つとは、１−３０のａａ置換、欠失および／または付加において異なるａａ配列を含み：ＳＦκ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２）；Ｐ４κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４）；Ｍ７８κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６）；およびＭ５７κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８）；または（ｃ）少なくとも１つの結合によりＰＢＡの他の重鎖に結合されたＰＢＡの各重鎖は下記ａａ配列の１つと少なくとも９０％同一であるまたは下記ａａ配列の１つとは、１−３０のａａ置換、欠失および／または付加において異なるａａ配列を含み：Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６８）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７０）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７２）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７４）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７６）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７８）；Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８０）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７（（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８２）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８４）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８６）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８８）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９０）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９２）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９４）；およびＢ６０−Ｇ１−Ｍ７��（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９６））；Ｂ６０−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５５）およびＭ７−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５７）ならびに（ｄ）少なくとも１つの結合により（ｃ）の１つの重鎖に結合されたＰＢＡの各軽鎖は下記ａａ配列の１つと少なくとも９０％同一であるまたは下記ａａ配列の１つとは、１−３０のａａ置換、欠失および／または付加において異なるａａ配列を含む：Ｐ１λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５８）；Ｍ２７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６０）；Ｍ７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２）；Ｂ７２λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６４）；およびＢ６０λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６）。
【０１２３】
ある一定の実施形態では、（ａ）ＰＢＡの各重鎖は下記ａａ配列の１つと少なくとも９５％同一である、または下記ａａ配列の１つとは１−１０のａａ置換、欠失および／または付加において異なるａａ配列を含み：ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１２）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１４）；ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１６）；ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１８）；ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２２）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２４）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２６）；Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８）；Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３０）；Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３４）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３６）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３８）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４０）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４２）；Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４４）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４６）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４８）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５０）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５２）；Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５４）およびＭ５７−Ｇ１−Ｂ６９（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５６）、ならびに（ｂ）ＰＢＡの各軽鎖は下記ａａ配列の１つと少なくとも９５％同一である、または下記ａａ配列の１つとは１−１０のａａ置換、欠失および／または付加において異なるａａ配列を含み：ＳＦκ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２）；Ｐ４κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４）；Ｍ７８κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６）；およびＭ５７κ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８）；または（ｃ）ＰＢＡの各重鎖は下記ａａ配列の１つと少なくとも９５％同一である、または下記ａａ配列の１つとは１−１０のａａ置換、欠失および／または付加において異なるａａ配列を含み：Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６８）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７０）；Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７２）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７４）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７６）；Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７８）；Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８０）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７（（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８２）；Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８４）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８６）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８８）；Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９０）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９２）；Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９４）；およびＢ６０−Ｇ１−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９６）；Ｂ６０−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５５）およびＭ７−Ｇ２−Ｍ７８（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５７）ならびに（ｄ）ＰＢＡの各軽鎖は��記ａａ配列の１つと少なくとも９５％同一である、または下記ａａ配列の１つとは１−１０のａａ置換、欠失および／または付加において異なるａａ配列を含む：Ｐ１λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５８）；Ｍ２７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６０）；Ｍ７λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２）；Ｂ７２λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６４）；Ｂ６０λ軽鎖（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６）。
【０１２４】
例示的なＰＢＡとしては下記が挙げられる：（ａ）下記を含むＳＦ−Ｇ１−Ｐ１  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１２の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２の軽鎖配列を含む２つの軽鎖；（ｂ）下記を含むＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１４の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｃ）下記を含むＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１６の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｄ）下記を含むＳＦ−Ｇ１−Ｐ６  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１８の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｅ）下記を含むＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２０の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０２の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｆ）下記を含むＰ４−Ｇ１−Ｃ８  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２２の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖（ｇ）下記を含むＰ４−Ｇ１−Ｐ１  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２４の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｈ）下記を含むＰ４−Ｇ１−Ｍ１．３  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２６の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｉ）下記を含むＰ４−Ｇ１−Ｍ２７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２８の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｊ）下記を含むＰ４−Ｇ１−Ｐ６  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３０の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｈ）下記を含むＰ４−Ｇ１−Ｂ６９  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３２の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｉ）下記を含むＭ７８−Ｇ１−Ｃ８  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３４の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｊ）下記を含むＭ７８−Ｇ１−Ｐ１  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３６の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｋ）下記を含むＭ７８−Ｇ１−Ｍ１．３  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３８の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｌ）下記を含むＭ７８−Ｇ１−Ｍ２７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４０の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｍ）下記を含むＭ７８−Ｇ１−Ｐ６  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４２の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｎ）下記を含むＭ７８−Ｇ１−Ｂ６９  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４４の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｏ）下記を含むＭ５７−Ｇ１−Ｃ８  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４６の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｐ）下記を含むＭ５７−Ｇ１−Ｐ１  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４８の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｒ）下記を含むＭ５７−Ｇ１−Ｍ１．３  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５０の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｓ）下記を含むＭ５７−Ｇ１−Ｍ２７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５２の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｔ）下記を含むＭ５７−Ｇ１−Ｐ６  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５４の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｕ）下記を含むＭ５７−Ｇ１−Ｂ６９  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５６の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｖ）下記を含むＰ１−Ｇ１−Ｐ４  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６８の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｗ）下記を含むＰ１−Ｇ１−Ｍ５７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７０の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｘ）下記を含むＰ１−Ｇ１−Ｍ７８  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７２の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５８の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｙ）下記を含むＭ２７−Ｇ１−Ｐ４  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７４の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６０の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ｚ）下記を含むＭ２７−Ｇ１−Ｍ５７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７６の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６０の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ａａ）下記を含むＭ２７−Ｇ１−Ｍ７８  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７８の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６０の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ａｂ）下記を含むＭ７−Ｇ１−Ｐ４  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８０の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ａｃ）下記を含むＭ７−Ｇ１−Ｍ５７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８２の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２の軽鎖ａａ配列を含む２つの��鎖；（ａｄ）下記を含むＭ７−Ｇ１−Ｍ７８  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８４の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６２の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ａｅ）下記を含むＢ７２−Ｇ１−Ｐ４  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８６の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ａｆ）下記を含むＢ７２−Ｇ１−Ｍ５７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８８の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ａｇ）下記を含むＢ７２−Ｇ１−Ｍ７８  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９０の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６４の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ａｈ）下記を含むＢ６０−Ｇ１−Ｐ４  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９２の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；（ａｉ）下記を含むＢ６０−Ｇ１−Ｍ５７  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９４の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖；ならびに（ａｊ）下記を含むＢ６０−Ｇ１−Ｍ７８  ＰＢＡ：各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９６の重鎖ａａ配列を含む２つの重鎖；および各々がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６６の軽鎖ａａ配列を含む２つの軽鎖。
【０１２５】
医薬組成物
この開示の方法において有用な化合物は、医薬組成物として、任意の従来経路により、特に経腸的に、例えば、経口的に、例えば、錠剤もしくはカプセルの形態で、または非経口的に、例えば、注射溶液もしくは懸濁液の形態で、局所的に、例えば、ローション、ゲル、軟膏剤もしくはクリームの形態で、または経鼻もしくは坐薬形態で投与することができる。開示された方法において有用な化合物を遊離形態で、または薬学的に許容される塩形態で、少なくとも１つの薬学的に許容される担体もしくは希釈剤と共に含む医薬組成物は、従来通りに混合、顆粒化またはコーティング方法により製造することができる。例えば、経口組成物は活性材料成分を下記と共に含む錠剤またはゼラチンカプセルとすることができる：ａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ）潤滑剤、例えば、シリカ、滑石、ステアリン酸、そのマグネシウムもしくはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤については、ｃ）バインダ、例えば、マグネシウムケイ酸アルミニウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよびまたはポリビニルピロリドンもまた；所望であればｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩、または発泡性混合物；および／またはｅ）吸収剤、着色剤、香味および甘味料。注射用組成物は等張水溶液または懸濁液とすることができ、坐薬は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から調製することができる。組成物は滅菌することができ、および／またはアジュバント、例えば保存剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調節するための塩および／またはバッファーを含み得る。加えて、これらはまた、他の治療的に有効な物質を含み得る。経皮適用に好適な製剤は有効量の化合物を担体と共に含む。担体は、宿主の皮膚の通過を補助する吸収性の薬理学的に許容される溶媒を含むことができる。例えば、経皮装置は、裏当部材、化合物を任意で担体と共に含むリザーバ、任意で化合物を宿主の皮膚に、制御された、あらかじめ決められた速度で、長期間にわたって送達させるための律速バリア、および装置を皮膚に固定するための手段を含む、包帯の形態である。マトリックス経皮製剤もまた、使用され得る。例えば、皮膚または目への局所適用に好適な製剤は好ましくは、当技術分野でよく知られている水溶液、軟膏剤、クリームまたはゲルである。そのようなものは、可溶化剤、安定剤、張度増強剤、バッファーおよび保存剤を含み得る。
【０１２６】
開示された方法において有用な化合物は治療的有効量で１つ以上の治療薬（医薬併用物）と組み合わせて投与することができる。化合物が他の療法と併用して投与される場合、共投与される化合物の投与量は当然、使用される共薬の型、使用される特定の薬物、治療される病状などによって変動する。
【０１２７】
併用療法は被験体への化合物の、他の生物活性材料成分（例えば、限定はされないが、第２のおよび異なる抗悪性腫瘍薬）および非薬物療法（例えば、限定はされないが、外科手術または放射線治療）とさらに組み合わせた投与を含む。例えば、化合物は、他の薬学的に活性な化合物、好ましくは元の医薬併用物の効果を増強させることができる化合物と組み合わせて使用することができる。化合物は、他の薬物療法と同時に（単一調製物または別個の調製物として）または順次投与することができる。一般に、併用療法は、単一サイクルまたは治療過程中、２つ以上の薬物の投与を想定する。
【０１２８】
ある一定の実施形態では、これらの組成物は、任意でさらに、１つ以上の追加の治療薬を含む。あるいは、開示された方法で有用な化合物は、その必要がある患者に、１つ以上の他の治療薬の投与と組み合わせて投与され得る。例えば、開示された方法で有用な化合物との、コンジョイント投与または医薬組成物中での包含のための追加の治療薬は制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）活性を妨害する作用物質である。第２の作用物質は、小分子免疫調節薬、ヒトＩＧＦ−１に結合しない免疫調節抗体、抗癌ワクチン、および放射線投与から選択され得るが、それらに限定されない。
【０１２９】
開示された方法で有用な化合物および医薬組成物は併用療法において使用することができ、すなわち、化合物および医薬組成物は、１つ以上の他の所望の治療法または医学的手順と同時に、その前に、またはその後に投与することができることもまた認識されるであろう。併用レジメンで使用するための療法（治療法または手順）の特定の組み合わせは、所望の治療法および／または手順の適合性ならびに達成される所望の治療効果を考慮するであろう。使用される療法は同じ障害について所望の効果を達成することができ（例えば、化合物は、別の抗癌剤と同時に投与され得る）、またはそれらは異なる効果を達成することができる（例えば、任意の有害作用の制御）こともまた認識されるであろう。
【０１３０】
例えば、開示された方法で有用な化合物と組み合わせて使用され得る他の療法または抗癌剤としては、下記が挙げられるが、それらに限定されない：外科手術、放射線療法（例えば、γ線、中性子ビーム放射線療法、電子ビーム放射線療法、陽子線治療、密封小線源治療、および全身性放射性同位体）、内分泌療法、生物学的応答調節物質（例えば、インターフェロン、インターロイキン、抗体、アプタマー、ｓｉＲＮＡｓ、オリゴヌクレオチド、酵素、イオンチャネルおよび受容体阻害剤または活性化剤）、温熱療法および寒冷療法、任意の有害作用を減弱させる作用物質（例えば、制吐薬）、および他の認可された化学療法薬、例えば、限定はされないが、アルキル化薬（例えば、メクロレタミン、クロランブシル、シクロホスファミド、メルファランＨＣｌ、イホスファミド）、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート）、プリンアンタゴニストおよびピリミジンアンタゴニスト（例えば、６−メルカプトプリン、５−フルオロウラシル、シタラビン（シトシンアラビノシド）、ゲムシタビン）、紡錘体毒（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、パクリタキセル、ｎａｂ−パクリタキセル）、ポドフィロトキシン（例えば、エトポシド、イリノテカン、トポテカン）、抗生物質（例えば、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン）、ニトロソウレア（例えば、カルムスチン、ロムスチン）、無機イオン（例えば、シスプラチン、カルボプラチン）、酵素（例えば、アスパラギナーゼ）、およびホルモン（例えば、タモキシフェン、リュープロリド、フルタミド、およびメゲストロール）。最新の癌療法のより包括的な考察のためには、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ，第１７版  １９９９を参照されたい（その全内容はこれにより参照により組み込まれる）。ＦＤＡに認可された腫瘍薬物のリストについては、国立癌研究所（ＣＮＩ）ウェブサイト（ｎｃｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）および食品医薬品局（ＦＤＡ）ウェブサイト（ｆｄａ．ｇｏｖ／ｃｄｅｒ／ｃａｎｃｅｒ／ｄｍｇｌｉｓｔｆｒａｒｎｅ）もまた、参照されたい。
【０１３１】
ある一定の実施形態では、開示された方法で有用な医薬組成物は、１つ以上の追加の治療的に活性な材料成分（例えば、化学療法薬および／または対症療法薬）をさらに含む。この開示の目的のために、「対症的」という用語は、疾患の症状および／または治療レジメンの副作用の軽減に焦点を当てているが、根治的ではない治療を示す。例えば、対症療法は、痛み止め、抗悪心薬物療法、解熱薬、および病気防止薬を包含する。加えて、化学療法、放射線療法および外科手術は全て対症的に（すなわち、治癒に向かわずに症状を低減させるため；例えば、腫瘍を縮小させるため、血圧、出血、疼痛および癌の他の症状を低減させるために）使用することができる。
【０１３２】
化合物および組成物は下記と一緒に投与することができる：ホルモンおよびステロイド抗炎症薬、例えば限定はされないが、エストラジオール、結合型エストロゲン（例えば、プレマリン、プレンプロ、およびプレムフェーズ）、１７βエストラジオール、カルシトニン−サケ、レボチロキシン、デキサメタゾン、メドロキシプロゲステロン、プレドニゾン、コルチゾン、フルニソリド、およびヒドロコルチゾン；非ステロイド性抗炎症薬、例えば限定はされないが、トラマドール、フェンタニル、メタミゾール、ケトプロフェン、ナプロキセン、ナブメトン、ケトララク（ｋｅｔｏｒａｌａｃ）、トロメタミン、ロキソプロフェン、イブプロフェン、アスピリン、およびアセトアミノフェン；抗ＴＮＦα抗体、例えばインフリキシマブ（レミケード）およびエタネルセプト（エンブレル）。
【０１３３】
開示された方法で有用な医薬組成物は１つ以上の薬学的に許容される担体と一緒に製剤化された、治療的有効量の化合物を含む。本明細書では、「薬学的に許容される担体」という用語は、無毒性、不活性固体、半固体または液体フィラー、希釈剤、封入材料または任意の型の製剤化助剤を意味する。本明細書で開示される方法において有用な医薬組成物はヒトおよび他の動物に、経口的に、直腸に、非経口的に、大槽内に、腟内に、腹腔内に、局所的に（粉末、軟膏剤、または液滴により）、頬側に、またはスプレー式経口もしくは点鼻薬として投与することができる。
【０１３４】
開示された治療法によれば、障害は被験体、例えばヒト患者または他の動物において、被験体に治療的有効量の化合物を、所望の結果を達成するのに必要であるような量および時間で投与することにより治療または防止される。
【０１３５】
一般に、開示された方法で有用な化合物は、治療的有効量で、当技術分野で知られている普通の許容される様式のいずれかにより、単独で、または１つ以上の治療薬と組み合わせて投与される。治療的有効量は疾患の重症度、被験体の年齢および相対的な健康、使用される化合物の効力および他の因子によって広く変動し得る。治療量または用量もまた、投与経路、ならびに他の作用物質との共使用の可能性によって変動する。
【０１３６】
投与量
いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は下記スケジュールの１つで投与される：６ｍｇ／ｋｇ  ｑｗ、９ｍｇ／ｋｇ  ｑｗ、８ｍｇ／ｋｇ  ｑｗ、１０ｍｇ／ｋｇ  ｑ２ｗ、１２ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｗ、１８ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｗ、２０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｗ、３０ｍｇ／ｋｇ  ｑ３ｗ、２０ｍｇ／ｋｇ  ｑｗ、または４０ｍｇ／ｋｇ  ｑ２ｗ。あるいは、二重特異性抗体は、表２で概略が示される投与スケジュールに従い、投与される。
【０１３７】
生体試料
開示された方法は、試料の遺伝子突然変異状態または試料の遺伝子発現レベル状態を決定するために、生体試料を患者から採取することを含み得る。例えば、生体試料は、腫瘍組織、腫瘍生検、全血、血清、血漿、精液、尿、粘液、または他の身体試料由来とすることができる。好ましい実施形態では、生体試料は、血清、血漿、腫瘍組織、または腫瘍生検試料である。腫瘍組織はホルマリン固定されたパラフィン包埋腫瘍組織または新鮮凍結腫瘍組織であってもよい。
【０１３８】
バイオマーカー
多くの有用なバイオマーカーを検出する方法がよく知られている。いくつかのそのような有用な方法は、下記実施例において開示されており、他のものが、ＷＩＰＯ公開第ＷＯ２０１５／１００４５９号；米国特許第８，６２３，５９２号；ＷＩＰＯ公開第ＷＯ／２０１６／０５４４１４号、および米国特許出願第１４／９６７，１５８号（その各々は、その全体として参照により組み込まれる）において見出され得る。本開示で有用なバイオマーカーとしては、下記障害の１つ以上の認識において、その診断のために、またはその予後を決定するために使用されるそれらのバイオマーカーが挙げられるが、それらに限定されない：癌、骨髄腫、膵臓癌、卵巣癌、肝細胞癌、副甲状腺癌、肉腫、肺癌、結腸癌、Ｂ細胞リンパ腫、および乳癌。バイオマーカーレベルは、生体試料を使用して、当技術分野で知られている任意の方法により評価することができ、その方法としては、ＲＴ−ＰＣＲ（逆転写ポリメラーゼ連鎖反応）、ＰＣＲ−ＩＳＨ（ポリメラーゼ連鎖反応インサイチューハイブリダイゼーション）、およびＲＮＡ−ＩＳＨ（ＲＮＡインサイチューハイブリダイゼーション）を挙げることができるが、それらに限定されない。例えば、本明細書で開示される方法を使用するために評価される患者は、癌の生検中のバイオマーカーレベルを評価することにより治療のために選択され得、生検が治療への好ましい応答を予測するレベルを示した場合、患者はその後、二重特異性抗体で治療され得る。この態様の様々な実施形態では、バイオマーカーは１）ＩＧＦ−１Ｒ陽性制御性Ｔ細胞の割合、２）ＩＧＦ−１Ｒ陽性細胞傷害性Ｔ細胞の割合、または３）１）対２）の比率であり；ならびに、治療への好ましい応答を予測するレベルは、１）または２）または３）が、癌を有する患者の母集団中央値レベルに対応する割合または比率よりも高い場合である。他の実施形態では、バイオマーカーは無血清ＩＧＦ−１であり、治療への好ましい応答を予測するレベルは、患者の無血清ＩＧＦ−１濃度が癌を有する患者の母集団中央値レベルより高い場合である。この態様のさらに他の実施形態では、バイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療への好ましい応答を予測するレベルは、生検ヘレグリンレベルが癌を有する患者の母集団中央値生検ヘレグリンレベルより高い場合であり；またはバイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療への好ましい応答を予測するレベルは、ＲＴ−ＰＣＲにより検出されるのに十分な生検ヘレグリンレベルであり；またはバイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療への好ましい応答を予測するレベルは、ＲＮＡ−ＩＳＨにより検出されるのに十分な生検ヘレグリンレベルである。
【０１３９】
キット
開示された方法において使用するためのキットもまた本明細書で提供される。１つの実施形態では、キットは、ヒトＥｒｂＢ３およびヒトＩＧＦ−１Ｒ（ＣＤ２２１）の細胞外ドメインに免疫特異的に結合する二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ／抗ＥｒｂＢ３抗体である第１の作用物質、制御性Ｔ細胞活性を妨害する第２の作用物質、および使用説明書を含む。第２の作用物質は、下記の１つ以上から選択され得る：小分子免疫調節薬、ヒトＩＧＦ−１に結合しない免疫調節抗体、および抗癌ワクチン。キットの免疫調節抗体は下記からなる群より選択される１つ以上の抗体であってもよい：（ａ）ヒトＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、または４−１ＢＢに免疫特異的に結合する作動性抗受容体抗体；（ｂ）ヒトＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、ＫＩＲ、ＣＤ４７、ＣＤ２５、Ｂ７−Ｈ３、またはＢ７−Ｈ４に免疫特異的に結合する拮抗性抗受容体抗体；ならびに（ｃ）ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦβ、アンジオポエチン（ａｎｇｉｏｐｏｅｔｉｎ）−２、ＶＥＧＦ、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３、またはＴＮＦαの機能をブロックする抗リガンド抗体。１つの実施形態では、抗ＣＴＬＡ−４抗体はイピリムマブまたはトレメリムマブである。別の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、およびピディリズマブからなる群より選択される。別の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、およびアベルマブからなる群より選択される。
【０１４０】
抗ＫＩＲ抗体はリリルマブであってもよい。抗癌ワクチンは、ＯｎｃｏＶｅｘ、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＰＲＯＳＴＶＡＣ、ＧＶＡＸ、ＣＤＸ１１０、ＣＤＸ１３０７、ＣＤＸ１４０１、ＣＶ９１０４、ＢＩＯＶＡＸＩＤ、ＩＭＡ  ９０１およびＡＤＸＳ１１−００１からなる群より選択され得る。
【０１４１】
例示的な追加の実施形態
ある一定の実施形態の非限定的な例が、以下で提供される：
１．患者に、有効量の、ヒトＥｒｂＢ３およびヒトＩＧＦ−１Ｒ（ＣＤ２２１）の細胞外ドメインに免疫特異的に結合する二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ／抗ＥｒｂＢ３抗体である第１の作用物質、および制御性Ｔ細胞活性を妨害する第２の作用物質を投与することを含み、癌が治療される、患者において癌を治療する方法。
２．ＩＧＦ−１Ｒに結合する第１の作用物質はヒトＩＧＦ−１ＲのＩＧＦ−１−媒介活性化を阻害する、実施形態１の方法。
３．有効量の第１の作用物質は、下記からなる群より選択される少なくとも１つの効果を及ぼす、実施形態１または２の方法：（ａ）ＩＧＦ−１Ｒリガンド依存性および／またはＩＧＦ−１Ｒリガンド非依存性ＩＧＦ−１Ｒ発現免疫細胞の増殖を阻害する；（ｂ）ＩＧＦ−１Ｒ発現免疫前駆細胞のＴ細胞、ＮＫＴ細胞、またはＮＫ細胞への分化を阻害する；ならびに（ｃ）ＩＧＦ−１Ｒ発現免疫細胞を枯渇させる。
４．第２の作用物質は、小分子免疫調節薬、ヒトＩＧＦ１に結合しない免疫調節抗体、抗癌ワクチン、および放射線投与からなる群より選択される、実施形態１−３のいずれか一つの方法。
５．免疫調節抗体は、下記からなる群より選択される少なくとも１つである、実施形態１−３のいずれか一つの方法：（ａ）ヒトＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、または４−１ＢＢに免疫特異的に結合する作動性抗受容体抗体；（ｂ）ヒトＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、ＫＩＲ、ＣＤ４７、ＣＤ２５、Ｂ７−Ｈ３、またはＢ７−Ｈ４に免疫特異的に結合する拮抗性抗受容体抗体；ならびに（ｃ）ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦβ、アンジオポエチン（ａｎｇｉｏｐｏｅｔｉｎ）−２、ＶＥＧＦ、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３、またはＴＮＦαの機能をブロックする抗リガンド抗体。
６．抗ＣＴＬＡ−４抗体はイピリムマブまたはトレメリムマブである、実施形態５の方法。
７．抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、およびピディリズマブからなる群より選択される、実施形態５の方法。
８．抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、およびアベルマブからなる群より選択される、実施形態５の方法。
９．抗ＫＩＲ抗体はリリルマブである、実施形態５の方法。
１０．抗癌ワクチンは、ＯｎｃｏＶｅｘ、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＰＲＯＳＴＶＡＣ、ＧＶＡＸ、ＣＤＸ１１０、ＣＤＸ１３０７、ＣＤＸ１４０１、ＣＶ９１０４、ＢＩＯＶＡＸＩＤ、ＩＭＡ  ９０１およびＡＤＸＳ１１−００１からなる群より選択される、実施形態４の方法。
１１．第１の作用物質は、イスチラツマブ（Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３）、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６、ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１、Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６、Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ５７−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ７８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、およびＰ１−Ｇ１−Ｍ７６からなる群より選択される、実施形態１の方法。
１２．第１の作用物質は静脈内または皮下に投与される、実施形態１−１２のいずれかの方法。
１３．第１の作用物質は、６ｍｇ／ｋｇで週１回、９ｍｇ／ｋｇで週１回、８ｍｇ／ｋｇで週１回、１０ｍｇ／ｋｇで２週間ごと、１２ｍｇ／ｋｇで３週間ごと、１８ｍｇ／ｋｇで３週間ごと、２０ｍｇ／ｋｇで３週間ごと、３０ｍｇ／ｋｇで３週間ごと、２０ｍｇ／ｋｇで週１回、または４０ｍｇ／ｋｇで２週間ごとにて静脈内に投与される、実施形態１−１３のいずれかの方法。
１４．第１の作用物質は、Ｆｃ受容体結合を増加または減少させるように操作されている、実施形態１の方法。
１５．第１の作用物質はＣＤ８陽性（ＣＤ８＋）細胞傷害性Ｔ細胞と比べて、制御性Ｔ細胞に優先的に結合する、前記実施形態のいずれかの方法。
１６．制御性Ｔ細胞はＣＤ４陽性（ＣＤ４＋）であり、かつ、ＣＤ２５陽性（ＣＤ２５＋）およびＦｏｘＰ３陽性（ＦｏｘＰ３＋）のいずれかまたは両方である、実施形態１５の方法。
１７．患者は、癌の生検においてバイオマーカーレベルを評価することにより選択され、生検が治療応答性を予測するレベルを示した場合、患者は治療される、前記実施形態のいずれかの方法。
１８．バイオマーカーは、（ａ）ＩＧＦ−１Ｒ陽性制御性Ｔ細胞の割合、（ｂ）ＩＧＦ−１Ｒ陽性細胞傷害性Ｔ細胞の割合、または（ｃ）（ａ）対（ｂ）の比率であり；ならびに
治療応答性を予測するレベルは（ａ）または（ｂ）または（ｃ）が、癌を有する患者の母集団中央値レベルに対応する割合（ａ）、割合（ｂ）または（ａ）対（ｂ）の比率よりも高い場合である、実施形態１７の方法。
１９．バイオマーカーは無血清ＩＧＦ−１（すなわち、患者の血清由来の遊離ＩＧＦ−１）であり、治療応答性を予測するレベルは、患者の無血清ＩＧＦ−１濃度が癌を有する患者の母集団中央値レベルより高い場合である、実施形態１７または１８の方法。
２０．バイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療応答性を予測するレベルは、生検ヘレグリンレベルが癌を有する患者の母集団中央値生検ヘレグリンレベルより高い場合である、実施形態１７−１９のいずれか一つの方法。
２１．バイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療応答性を予測するレベルはＲＴ−ＰＣＲにより検出されるのに十分な生検ヘレグリンレベルである、実施形態１７−２０のいずれか一つの方法。
２２．バイオマーカーは生検ヘレグリンレベルであり、治療応答性を予測するレベルはＲＮＡ−ＩＳＨにより検出されるのに十分な生検ヘレグリンレベルである、実施形態１７−２０のいずれか一つの方法。
２３．癌は、骨髄腫、膵臓癌、卵巣癌、肝細胞癌、副甲状腺癌、肉腫、肺癌、結腸癌、Ｂ細胞リンパ腫、および乳癌からなる群より選択される、前記実施形態のいずれかの方法。
２４．第１の作用物質はイスチラツマブであり、第２の作用物質は抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり、癌は、膵臓癌、卵巣癌、肝細胞癌、副甲状腺癌、肉腫、肺癌、結腸癌、Ｂ細胞リンパ腫、および乳癌からなる群より選択される、実施形態１の方法。
２５．抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０ａ）であり、癌は結腸癌である、実施形態２４の方法。
２６．第１の作用物質はイスチラツマブであり、第２の作用物質は抗ＣＴＬＡ−４抗体であり、癌はメラノーマである、実施形態１の方法。
２７．第１の作用物質および第２の作用物質の併用での投与は、第１のおよび第２の作用物質の各々が、単独療法として、組み合わせと同じ量で投与される場合よりも、より効果的に癌を治療する、前記実施形態のいずれかの方法。
２８．有効量の、ヒトＥｒｂＢ３およびヒトＩＧＦ−１Ｒ（ＣＤ２２１）の細胞外ドメインに免疫特異的に結合する二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ／抗ＥｒｂＢ３抗体を患者に投与することを含み、癌は治療され、癌は、膵臓癌、卵巣癌、肝細胞癌、副甲状腺癌、肉腫、肺癌および乳癌からなる群より選択される、患者において癌を治療する方法。
２９．二重特異性抗体を投与することは、ＣＤ８＋  Ｔ細胞においてではなく、脾細胞由来制御性Ｔ細胞上でのＩＧＦ−１Ｒの発現の低減と相関する、実施形態２８の方法。
３０．二重特異性抗体を投与することは、制御性Ｔ細胞の増殖の低減と相関する、実施形態２８の方法。
３１．二重特異性抗体は、イスチラツマブ（Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３）、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６、ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１、Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６、Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ５７−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ７８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、およびＰ１−Ｇ１−Ｍ７６からなる群より選択される、実施形態２８−３０のいずれかの方法。
３２．二重特異性抗体はイスチラツマブである、実施形態３１の方法。
３３．有効量の、ヒトＥｒｂＢ３およびヒトＩＧＦ−１Ｒ（ＣＤ２２１）の細胞外ドメインに免疫特異的に結合する二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ／抗ＥｒｂＢ３抗体を患者に投与することを含み、自然免疫細胞およびＴ細胞の抗腫瘍活性が腫瘍に動員される、自然免疫細胞（非Ｔ細胞）およびＴ細胞の抗腫瘍活性を、患者における腫瘍に動員する方法。
３４．腫瘍はＩＧＦＲ−１またはＥｒｂＢ３受容体を発現しない、実施形態３３の方法。
３５．腫瘍はＢ細胞リンパ腫腫瘍である、実施形態３３または３４の方法。
３６．二重特異性抗体は、イスチラツマブ（Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３）、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６、ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１、Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６、Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ５７−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ７８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、およびＰ１−Ｇ１−Ｍ７６からなる群より選択される、実施形態３３−３５のいずれかの方法。
３７．二重特異性抗体はイスチラツマブである、実施形態３３−３６のいずれか一つの方法。
３８．ヒトＥｒｂＢ３およびヒトＩＧＦ−１Ｒ（ＣＤ２２１）の細胞外ドメインに免疫特異的に結合する二重特異性抗ＩＧＦ−１Ｒ／抗ＥｒｂＢ３抗体である第１の作用物質、制御性Ｔ細胞活性を妨害する第２の作用物質、および使用説明書を含む、キット。
３９．第１の作用物質は、イスチラツマブ（Ｐ４−Ｇ１−Ｍ１．３）、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ１、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ１．３、ＳＦ−Ｇ１−Ｍ２７、ＳＦ−Ｇ１−Ｐ６、ＳＦ−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ４−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ１、Ｐ４−Ｇ１−Ｍ２７、Ｐ４−Ｇ１−Ｐ６、Ｐ４−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ７８−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ７８−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ７８−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ７８−Ｇ１−Ｂ６９、Ｍ５７−Ｇ１−Ｃ８、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ１、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｍ５７−Ｇ１−Ｍ２７、Ｍ５７−Ｇ１−Ｐ６、Ｍ５７−Ｇ１−Ｂ６９、Ｐ１−Ｇ１−Ｐ４、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ５７、Ｐ１−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ２７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ２７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｍ７−Ｇ１−Ｐ４、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ５７、Ｍ７−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ７２−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ７２−Ｇ１−Ｍ７８、Ｂ６０−Ｇ１−Ｐ４、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ５７、Ｂ６０−Ｇ１−Ｍ７８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｍ１．３、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｃ８、Ｐ４Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、Ｐ３３Ｍ−Ｇ１−Ｐ６Ｌ、およびＰ１−Ｇ１−Ｍ７６からなる群より選択される、実施形態３８のキット。
４０．第２の作用物質は、小分子免疫調節薬、ヒトＩＧＦ１に結合しない免疫調節抗体、および抗癌ワクチンからなる群より選択される、実施形態３９のキット。
４１．免疫調節抗体は、（ａ）ヒトＯＸ４０、ＣＤ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、または４−１ＢＢに免疫特異的に結合する作動性抗受容体抗体；（ｂ）ヒトＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、ＫＩＲ、ＣＤ４７、ＣＤ２５、Ｂ７−Ｈ３、またはＢ７−Ｈ４に免疫特異的に結合する拮抗性抗受容体抗体；ならびに（ｃ）ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦβ、アンジオポエチン（ａｎｇｉｏｐｏｅｔｉｎ）−２、ＶＥＧＦ、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３、またはＴＮＦαの機能をブロックする抗リガンド抗体からなる群より選択される少なくとも１つである、実施形態４０のキット。
４２．抗ＣＴＬＡ−４抗体はイピリムマブまたはトレメリムマブである、実施形態４１のキット。
４３．抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、およびピディリズマブからなる群より選択される、実施形態４１のキット。
４４．抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、およびアベルマブからなる群より選択される、実施形態４１のキット。
４５．抗ＫＩＲ抗体はリリルマブである、実施形態４１のキット。
４６．抗癌ワクチンは、ＯｎｃｏＶｅｘ、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＰＲＯＳＴＶＡＣ、ＧＶＡＸ、ＣＤＸ１１０、ＣＤＸ１３０７、ＣＤＸ１４０１、ＣＶ９１０４、ＢＩＯＶＡＸＩＤ、ＩＭＡ  ９０１およびＡＤＸＳ１１−００１からなる群より選択される、実施形態４０のキット。
【０１４２】
実施例
本開示は、下記実施例により、さらに説明され、これらの実施例は、さらに制限するものと解釈されるべきではない。本出願を通して引用される配列表、図および全ての参考文献、特許、および公開特許出願の内容は、参照により本明細書に明確に組み込まれる。
【０１４３】
実施例１：
この実施例は、ＣＤ４＋  Ｔ細胞の、インスリン様増殖因子リガンド（ＩＧＦ−１）による処理の結果を説明し、この場合、ＣＤ４＋  Ｔ細胞の、ＩＧＦ−１による処理はより大きなパーセンテージの制御性Ｔ細胞をＣＤ４＋  Ｔ細胞から生成させ（Ｔｒｅｇ；ここでは、フローサイトメトリーにより、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＦｏｘＰ３＋細胞として同定）、また、これらのＴｒｅｇの増殖をインビトロで増加させる。
【０１４４】
制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、以前はサプレッサーＴ細胞として知られており、免疫系を調節し、他の細胞に対する免疫応答を抑制し、および自己抗原に対する寛容性を維持するＴ細胞の亜集団である。本明細書では、ＴｒｅｇはＣＤ４＋ならびにＣＤ２５＋およびＦｏｘＰ３＋のいずれかまたは両方として規定される。ＴｒｅｇはまたＣＤ８陰性（ＣＤ８−）である。無病ヒト患者からの全血に由来するＴｒｅｇおよびＣＤ８＋  Ｔ細胞（細胞傷害性Ｔ細胞）はＩＧＦ−１Ｒを発現し、Ｔｒｅｇ細胞上でのこの受容体の発現は、ＣＤ８＋  Ｔ細胞と比べて大きい（図１）。雌Ｃ５７ＢＬ／６（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｓ）マウス由来の脾細胞もまた、それらのＴｒｅｇの表面上でＩＧＦ−１Ｒを発現する（図２）。加えて、マウス脾細胞由来ＣＤ４＋  Ｔ細胞のＩＧＦ−１による処理により、Ｔｒｅｇの誘導の増加がインビトロで導かれた。Ｔｒｅｇ細胞のパーセンテージは、それぞれ、０および２００ｎｇ／ｍＬのＩＧＦ−１で処理されたＣＤ４＋細胞の０．９０８％から３．９１％まで増加した（図３Ａ）。その上、ＣＦＳＥ希釈により測定される増殖の分析は、ＩＧＦ−１で処理された細胞において存在する複数のピーク（これらは細胞分裂を示す）により示されるように、これらのＴｒｅｇ集団の増強された増殖を示した（図３Ｂ）。ＣＦＳＥは、共有結合により細胞の細胞質成分に付着し、よって、均一な明るい蛍光を生じさせる、細胞浸透性フルオレセイン系染料である。細胞分裂すると、染料は娘細胞の間で等しく分配され、フローサイトメトリーにより、８サイクルまでの細胞分裂の分解能が可能である。
【０１４５】
図１で概略が示される定量フローサイトメトリー実験では、ヒト全血を無病患者からＥＤＴＡを含まないＫ２バキュテナー（登録商標）中に採取し、室温で分析まで維持した（＜２４時間）。白血球画分を、全血からＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ（商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ：Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）上で遠心分離により単離し、赤血球を、ＡＣＫバッファー（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で２分間インキュベートすることにより溶解させた。総細胞数を取得し、細胞のアリコートをＣＤ２５−ＰｅｒＣｐ／Ｃｙ５．５、ＣＤ４−ＡＰＣ／Ｃｙ７、ＣＤ８−ＡｍＣｙａｎ、ＦｏｘＰ３−ＡＰＣ、ＩＧＦ−１Ｒ−ビオチンおよびストレプトアビジン−Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ（商標）  ４２１で染色した。ＩＧＦ−１Ｒ＋  ＴｒｅｇまたはＣＤ８＋細胞のパーセント発現を、定量フローサイトメトリーにより測定される、ＩＧＦ−１Ｒを発現する、Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＦｏｘＰ３＋）またはＣＤ８＋細胞のパーセンテージを分析することにより決定した（ＦＡＣＳ  Ｃａｎｔｏ、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）。獲得後、全てのゲートおよびデータ分析を、ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）  ８．７ソフトウェア（ＦｌｏｗＪｏ、ＬＬＣ）を使用して実施した。
【０１４６】
図２で概略が示される定量フローサイトメトリー実験では、脾臓をＣ５７ＢＬ／６マウスから抽出し、ホモジナイズして単細胞懸濁液とし、赤血球をＡＣＫ（アンモニウム−塩化物−カリウム）溶解バッファー（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で２分間インキュベートすることにより溶解させた。総細胞数を取得し、細胞のアリコートをＣＤ２５−Ｐｅ／Ｃｙ７、ＣＤ４−ＦＩＴＣ、ＦｏｘＰ３−ＡＰＣ、ＩＧＦ−１Ｒ−ビオチンおよびストレプトアビジン−Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ（商標）  ４２１（Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅチャンネルで視認可能である）で染色した。全ての蛍光抗体はＢｉｏＬｅｇｅｎｄ（登録商標）から入手した。ＩＧＦ−１Ｒ特異染色を確認するために、１アリコートの細胞をストレプトアビジン−Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ（商標）  ４２１で、ＩＧＦ−１Ｒ−ビオチンなしで染色させ、計算のためのゲートを設定するために使用した。ＩＧＦ−１Ｒ＋  Ｔｒｅｇのパーセント発現を、定量フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ  Ｃａｎｔｏ、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）により測定されるＩＧＦ−１Ｒを発現するＴｒｅｇ（ここでは、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、およびＦｏｘＰ３＋として同定）のパーセンテージを分析することにより決定した。獲得後、全てのゲートおよびデータ分析を、ＦｌｏｗＪｏ  ８．７ソフトウェアを使用して実施した。
【０１４７】
図３において概略が示されるインビトロでのＴｒｅｇの誘導および増殖では、ＣＤ４＋  Ｔ細胞を、Ｃ５７ＢＬ／６マウス脾臓から図２において概略が示されるように単離した。これらの細胞をＣＦＳＥ（５μＭ）と共に８分間３７℃でインキュベートし、洗浄し、４０，０００細胞／ウェルで９６ウェルプレートにおいて、ＴＧＦ−β（０．３９ｎＭ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、ＩＬ−２（５０ｎｇ／ｍＬ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８ビーズ（マウスＴアクチベーターＤｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）、ＢＤ）およびＩＧＦ−１（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；０、５０、１００および２００ｎｇ／ｍＬ）を含む培地中で蒔いた。３７℃で５日後、細胞をＣＤ２５−Ｐｅ／Ｃｙ７、ＣＤ４−ＡＰＣ／Ｃｙ７およびＦｏｘＰ３−ＡＰＣで染色し、ＣＤ４＋細胞の％Ｔｒｅｇを異なる濃度のＩＧＦ−１で処理された細胞の全ての集団において測定した。Ｔｒｅｇの増殖を、ＦＩＴＣチャンネル中でのＣＦＳＥ標識の希釈を分析することにより測定した。獲得後、全てのゲートおよびデータ分析を、ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）  ８．７ソフトウェアを用いて実施した。
【０１４８】
実施例２：
この実施例は、脾細胞由来制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ；フローサイトメトリーによりＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＦｏｘＰ３＋細胞として規定）の、異なる濃度でのインスリン様増殖因子リガンド（ＩＧＦ−１）による処理の結果、およびイスチラツマブ（ＭＭ−１４１）による、単独または併用での処理の効果を開示し、ここで、ＩＧＦ−１リガンドによる処理により、インビトロでの％Ｔｒｅｇの増加が得られ、イスチラツマブによる処理は、この効果を阻害する。
【０１４９】
実施例１において概略が示されるように、ＩＧＦ−１により、ＣＤ４＋細胞からのＴｒｅｇの誘導の増加ならびにこれらのＴｒｅｇ細胞のインビトロでの増殖の増加が導かれる。イスチラツマブ（ＭＭ−１４１）による処理は、マウス脾細胞由来Ｔｒｅｇ上でＩＧＦ−１Ｒの発現を著しく低減させたが、ＣＤ８＋  Ｔ細胞ではそうではなかった（図４Ａ）。図４Ｂに示されるように、Ｔｒｅｇはまた低レベルのＥｒｂＢ３を発現し、これらのレベルはイスチラツマブによる処理により影響を受けない。イスチラツマブによる処理はまた、基礎レベル（処理なし）と比べて％Ｔｒｅｇを減少させ、ＩＧＦ−１とのインキュベーションにより引き起こされる％Ｔｒｅｇの増加に対抗した（１００−４００ｎｇ／ｍＬ；図５）。
【０１５０】
図４に関する実験では、Ｃ５７ＢＬ／６雌マウスに、１０，０００のＥＬ４  Ｔリンパ腫細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）  ＴＩＢ−３９）を含む無補充ＤＭＥＭ培地を、皮下、左側腹部に接種した。マウスを２つの異なる処置群（５マウス／群）に分割し、ＰＢＳ（０．２ｍＬ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）またはイスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）を研究持続期間の間投与した。ＰＢＳおよびイスチラツマブの投与を腫瘍細胞接種後第１日に開始した。腫瘍細胞接種後第２６日に、マウスを安楽死させ、脾臓を収集し、ホモジナイズして単細胞懸濁液とし、赤血球を、ＡＣＫバッファー（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で２分間インキュベートすることにより溶解させた。総細胞数を取得し、細胞のアリコートをＣＤ２５−Ｐｅ／Ｃｙ７、ＣＤ４−ＦＩＴＣ、ＦｏｘＰ３−ＡＰＣ、ＩＧＦ−１Ｒ−ビオチンおよびストレプトアビジン−Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ（商標）  ４２１（Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅチャンネルで視認可能である）で染色した。全ての蛍光抗体はＢｉｏＬｅｇｅｎｄ（登録商標）から入手した。ＩＧＦ−１Ｒ特異染色を確認するために、１アリコートの細胞をＩＧＦ−１Ｒ−ビオチンなしだが、ストレプトアビジン−Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ  ４２１を含むもので染色し、計算のためのゲートを設定するために使用した。ＩＧＦ−１Ｒ＋  Ｔｒｅｇのパーセント発現を、定量フローサイトメトリーにより測定されるＩＧＦ−１Ｒを発現するＴｒｅｇ（ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＦｏｘＰ３＋）のパーセンテージを分析することにより決定した（ＦＡＣＳ  Ｃａｎｔｏ、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）。
【０１５１】
図５で概略が示される定量フローサイトメトリー実験では、脾臓を雌野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスから抽出し、ホモジナイズして単細胞懸濁液とし、赤血球を、ＡＣＫバッファー（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で２分間インキュベートすることにより溶解させた。細胞をＣＤ２５−ＰＥおよびＣＤ４−ビオチン標識抗体で染色し、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋デュアルマーカー陽性細胞をＡＵＴＯＭＡＣＳ磁気細胞選別機を用いて単離した。単離されたＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞を、８０，０００細胞／ウェルで９６ウェルプレートにおいてＩＬ−２（５０ｎｇ／ｍＬ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）および抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８ビーズ（マウスＴアクチベーターＤｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）、ＢＤ）を含む培地中で蒔いた。適用可能な場合、ＩＧＦ−１（０、１００、２００および４００ｎｇ／ｍＬ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）および／またはイスチラツマブ（０．５μＭ）を添加した。３７℃で５日後、細胞を蛍光染料−ＣＤ２５−Ｐｅ／Ｃｙ７（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、ＣＤ４−ＡＰＣ／Ｃｙ７（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）およびＦｏｘＰ３−ＡＰＣ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）にコンジュゲートされた抗体で染色し、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞の％ＦｏｘＰ３＋細胞をフローサイトメトリーにより測定した。獲得後、全てのゲートおよびデータ分析をＦｌｏｗＪｏ（登録商標）  ８．７ソフトウェアを用いて実施した。
【０１５２】
制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、外来のまたは異常な細胞型への免疫系応答を調節し、自己抗原に対する寛容性を維持するＴ細胞の亜集団を含む。マウス脾細胞由来Ｔｒｅｇの増殖は、いくつかの同時刺激タンパク質により調節され、これはまた、ＩＧＦ−１リガンドによる処理により誘導される。図５に示されるように、イスチラツマブによる処理は、フローサイトメトリーにより測定されるＴｒｅｇのパーセンテージを基礎レベル未満に減少させた。さらに、ＩＧＦ−１の％Ｔｒｅｇに対する効果は、細胞がイスチラツマブで共処理されたると排除される。
【０１５３】
実施例３：
この実施例は、癌（膵臓癌、卵巣癌、肝細胞癌、副甲状腺癌、肉腫、Ｂ細胞リンパ腫、肺癌または乳癌）のイスチラツマブによる処置の方法を記載する。イスチラツマブをＷＩＰＯ公開第ＷＯ／２０１５／１３０５５４号で記載されるように投薬、および投与するが、本開示によれば、これを、ＷＯ／２０１５／１３０５５４号で開示されない作用物質との併用療法として投与されることを除く。
【０１５４】
Ａ２０  Ｂ細胞リンパ腫腫瘍を保有する免疫応答性ＢＡＬＢ／ｃまたは胸腺欠損ヌードマウスをイスチラツマブ単独療法で処置すると、ＰＢＳビヒクル対照による処置と比べて、時間と共に腫瘍体積が低減した（図６）。胸腺欠損マウス（Ｔ細胞欠損である）におけるイスチラツマブ単独療法抗腫瘍活性により、イスチラツマブ媒介メカニズムは自然（非Ｔ細胞）免疫細胞の抗腫瘍活性を漸加することができることが示唆される。免疫応答性マウスにおけるイスチラツマブ抗腫瘍活性は胸腺欠損マウスより大きく、イスチラツマブ媒介メカニズムはまた、自然免疫細胞に加えて、Ｔ細胞の抗腫瘍活性を漸加することが示唆され、というのも、全ての免疫細胞サブタイプが免疫応答性マウスにおいて存在し、機能するからである。図７において概略が示されるように、ＭＣ３８腫瘍を保有する胸腺欠損マウスでは、イスチラツマブによる処置では、処置の過程にわたって、腫瘍体積の著しい低減は得られなかった。対照的に、ＭＣ３８結腸腫瘍を保有する免疫応答性マウスのイスチラツマブ単独療法による処置では、ＰＢＳ対照と比べて、腫瘍体積の低減が得られた。これらの所見により、イスチラツマブ媒介メカニズムが主として、このモデルにおいて、Ｔ細胞の抗腫瘍活性を漸加することができることが示唆される。図８では、イスチラツマブで処置された、Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ腫瘍を保有する免疫応答性および胸腺欠損マウスでは、ＰＢＳ処置マウスと比べて、時間と共に腫瘍体積が低減し、Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマモデルでは、複数の、同時的な、イスチラツマブ媒介抗腫瘍メカニズムの可能性があることが示唆される。
【０１５５】
図６において示されるように、雌ＢＡＬＢ／ｃ（野生型、免疫応答性；黒記号および実線）または雌胸腺欠損ヌード（ｎｕ／ｎｕ、Ｔ細胞欠損；白記号、点線）マウス（１０匹のマウス／群）に、皮下で、６×１０６  Ａ２０  Ｂ細胞リンパ腫細胞を含む非補充ＲＰＭＩ  １６４０懸濁液を左側腹部に接種した。腫瘍細胞接種後第４日に開始して、ＢＡＬＢ／ｃマウスおよび胸腺欠損ヌードマウスに研究持続期間の間、記載されるように、ＰＢＳ（０．２ｍＬ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ；菱形）またはイスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ；三角）を投薬した。腫瘍体積を週２回測定した。
【０１５６】
図７で概略が示されるインビボ研究では、雌Ｃ５７ＢＬ／６（野生型、免疫応答性；黒記号および実線；１０匹／群）または雌胸腺欠損ヌード（白記号および点線；１０匹／群）マウスに、皮下で、３×１０６ＭＣ３８結腸直腸細胞（ＮＣＩ（登録商標））を含む非補充ＲＰＭＩ  １６４０懸濁液を左側腹部に接種した。腫瘍細胞接種後第４日に開始して、Ｃ５７ＢＬ／６マウスおよび胸腺欠損ヌードマウスに研究持続期間の間、ＰＢＳ（０．２ｍＬ．ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ；菱形）またはイスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ；三角）を投薬した。腫瘍体積を週２回測定した。
【０１５７】
図８において概略が示されるように、雌Ｃ５７ＢＬ／６（黒記号および実線；５匹／群）または雌胸腺欠損ヌード（白記号および点線；１０匹／群）マウスに、皮下で、５×１０５Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）  ＣＲＬ−６４７５）を含む非補充ＤＭＥＭ懸濁液を左側腹部に接種した。腫瘍細胞接種後第４日に開始して、マウスに研究持続期間の間、ＰＢＳ（０．２ｍＬ．ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ；菱形）またはイスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ；三角）を投薬した。腫瘍体積を週２回測定した。
【０１５８】
実施例４：
この実施例は、チェックポイント阻害剤およびイスチラツマブの組み合わせによる癌（例えば、Ｂ細胞リンパ腫）の治療方法を記載し、ここで、組み合わせの治療効果は、免疫チェックポイント阻害薬またはイスチラツマブ単独の治療効果（各々が、単独療法として、組み合わせと同じ用量で投与された場合）よりも大きい。イスチラツマブを、上記、実施例３で特定されるように投薬、および投与し、免疫チェックポイント阻害薬を、図１７において示されるように投薬、および投与する。
【０１５９】
図９Ａにおいて示されるように、Ａ２０  Ｂ細胞リンパ腫細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）  ＴＩＢ−２０８）はＩＧＦ−１ＲまたはＥｒｂＢ３受容体を発現しなかった。図９Ｂに示されるように、イスチラツマブの抗ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせての投薬は、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３非発現Ａ２０  Ｂ細胞リンパ腫細胞株腫瘍の成長を阻害するのに、いずれかの作用物質単独の投薬よりも活性であった。図９Ｃに示されるように、イスチラツマブおよび抗ＰＤ−Ｌ１の組み合わせによる処置に対して完全奏功（ＣＲ；明白な腫瘍なし）を有したマウスは、作用物質による処置の中止後２ヶ月でのＡ２０腫瘍細胞の再接種後に、腫瘍を形成しなかった。
【０１６０】
図９Ａで詳述される免疫ブロッティング実験では、Ａ２０細胞を、１２ウェル皿（３×１０５細胞／ウェル）上、１０％血清添加培地中に蒔き、一晩インキュベートした。細胞密度がおよそ７０％に到達するとすぐに、細胞をプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む溶解バッファー中に回収し、ウェスタンブロッティングにより分析した。
【０１６１】
図９Ｂで概略が示されるインビボ研究では、ＢＡＬＢ／ｃ雌マウスに、６×１０６Ａ２０細胞を含む非補充ＲＰＭＩ  １６４０培地を皮下、左側腹部に接種した。マウスを４つの異なる処置群に分割し（１０匹のマウス／群）、ＰＢＳ（０．２ｍＬ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）、イスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）、抗ＰＤ−Ｌ１（ＭＰＤＬ３２８０ａ／アテゾリズマブ；２００μｇ／マウス／用量、ｉ．ｐ．、週３回：月曜日、水曜日、金曜日）、またはイスチラツマブおよび抗ＰＤ−Ｌ１の組み合わせ（各々、単独療法で投薬されるのと同様）を、研究持続期間の間、投薬した。イスチラツマブの投薬を腫瘍細胞接種後第１日に開始し、抗ＰＤ−Ｌ１の投薬を腫瘍細胞接種後第４日に開始した。腫瘍体積を週２回測定した。図９Ｃに示される再チャレンジアッセイでは、図９Ｂの抗ＰＤ−Ｌ１＋イスチラツマブで処置された４匹の完全奏功（ＣＲ）マウス（右下パネル）は、１０００万のＡ２０細胞を皮下、右側腹部（前に使用しなかった側腹部）に接種することにより再チャレンジさせた。１０匹のナイーブＢＡＬＢ／ｃ雌マウスに、１０００万のＡ２０細胞を比較対照と同時に接種した。腫瘍体積を週２回測定した。
【０１６２】
実施例５：
この実施例は図１７の抗体およびイスチラツマブの組み合わせによる癌（例えば、線維肉腫）の治療方法を説明し、この場合、組み合わせの治療効果は、各々が、単独療法として組み合わせと同じ用量で投与された場合の、免疫チェックポイント阻害薬またはイスチラツマブ単独の治療効果よりも大きい。
【０１６３】
図１０Ａにおいて示されるように、ＷＥＨＩ１６４線維肉腫細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）  ＣＲＬ−１７５１）はＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３受容体を発現した。図１０Ｂに示されるように、イスチラツマブの抗ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせての投薬は、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３発現ＷＥＨＩ１６４線維肉腫細胞株腫瘍の成長の阻害について、いずれかの作用物質単独の投薬よりも活性であった。
【０１６４】
図１０Ａで詳述される免疫ブロッティング実験では、ＷＥＨＩ１６４細胞を、１２ウェル皿（３×１０５細胞／ウェル）上に、１０％血清添加培地中に蒔き、一晩インキュベートした。細胞密度がおよそ７０％に到達するとすぐに、細胞をプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む溶解バッファー中に回収し、ウェスタンブロッティングにより分析した。
【０１６５】
図１０Ｂで概略が示されるインビボ研究では、ＢＡＬＢ／ｃ雌マウスに、４．５×１０６ＷＥＨＩ１６４線維肉腫細胞を含む非補充ＤＭＥＭ培地を皮下、左側腹部に接種した。マウスを４つの異なる処置群（１０匹のマウス／群）に分割し、ＰＢＳ（０．２ｍＬ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ；黒菱形、黒実線）、イスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ；白四角、点線）、抗ＰＤ−Ｌ１（アテゾリズマブ／ＭＰＤＬ３２８０ａ；２００μｇ／マウス／用量、ｉ．ｐ．、週３回（月曜日、水曜日、金曜日）；黒三角、黒実線）、またはイスチラツマブおよび抗ＰＤ−Ｌ１の組み合わせ（白丸、点線）（単独療法のために投薬されるように）を研究持続期間の間投与した。イスチラツマブの投薬を腫瘍細胞接種後第１日に開始し、抗ＰＤ−Ｌ１の投薬を腫瘍細胞接種後第４日に開始した。腫瘍体積を週２回測定した。
【０１６６】
実施例６：
この実施例は癌（例えば、結腸癌）の図１７の抗体およびイスチラツマブの組み合わせによる治療方法を説明し、この場合、組み合わせの治療効果は、各々が、単独療法として組み合わせと同じ用量で投与された場合の、免疫チェックポイント阻害薬またはイスチラツマブ単独の治療効果よりも大きい。
【０１６７】
図１１Ａは、ＭＣ３８結腸直腸細胞はＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現することを示す。図１１Ｂに示されるように、チェックポイント阻害剤抗ＰＤ−Ｌ１で処置されたマウスのほとんどで時間と共に腫瘍体積が低減した（１つの完全奏功を含む）が、イスチラツマブおよび抗ＰＤ−Ｌ１の両方で処置されたマウスは、さらに大きな全体応答を示した（３つの完全奏功を含む）。
【０１６８】
図１１Ａで詳述される免疫ブロッティング実験では、ＭＣ３８細胞を、１２ウェル皿（３×１０５細胞／ウェル）上で、１０％血清添加培地において蒔き、一晩インキュベートした。細胞密度がおよそ７０％に到達するとすぐに、細胞をプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む溶解バッファー中に回収し、ウェスタンブロッティングにより分析した。
【０１６９】
図１１Ｂで概略が示されるインビボ研究では、雌Ｃ５７ＢＬ／６マウス（１０匹／群）に、皮下で、３×１０６ＭＣ３８結腸直腸癌細胞を含む非補充ＲＰＭＩ  １６４０懸濁液を左側腹部に接種した。腫瘍細胞接種後第４日に開始して、マウスに研究持続期間の間、ＰＢＳ（０．２ｍＬ．ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）、イスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）、抗ＰＤ−Ｌ１（アテゾリズマブ／ＭＰＤＬ３２８０ａ；１００μｇ／用量、ｉ．ｐ．、週３回（月曜日、水曜日、金曜日））、またはイスチラツマブおよび抗ＰＤ−Ｌ１の組み合わせ（単独療法のために投薬されるように）を投薬した。腫瘍体積を週２回測定した。
【０１７０】
実施例７：
この実施例は癌（例えば、メラノーマ）の図１７の抗体およびイスチラツマブの組み合わせによる治療方法を説明し、この場合、組み合わせの治療効果は、各々が、単独療法として組み合わせと同じ用量で投与された場合の、免疫チェックポイント阻害薬またはイスチラツマブ単独の治療効果よりも大きい。
【０１７１】
Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞はＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する（図１２Ａ）。図１２Ｂに示されるように、チェックポイント阻害剤抗ＣＴＬＡ−４で処置されたマウスのサブセットでは、時間と共に腫瘍体積が低減したが、イスチラツマブおよび抗ＣＴＬＡ−４の両方で処置されたマウスは、さらに大きな全体応答を示した。加えて、イスチラツマブおよび抗ＰＤ−１阻害剤で処置されたマウスは、改善された抗腫瘍応答を有した（図１３）。
【０１７２】
図１２Ａで詳述される免疫ブロッティング実験では、Ｂ１６−Ｆ１０細胞を、１２ウェル皿（３×１０５細胞／ウェル）上で１０％血清添加培地中に蒔き、一晩インキュベートした。細胞密度がおよそ７０％に到達するとすぐに、細胞をプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む溶解バッファー中に回収し、ウェスタンブロッティングにより分析した。
【０１７３】
図１２Ｂで概略が示されるインビボ研究では、雌Ｃ５７ＢＬ／６マウス（１０匹／群）に、皮下で、５×１０５Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞を含む非補充ＤＭＥＭ懸濁液を左側腹部に接種した。腫瘍細胞接種後第４日に開始して、マウスにＰＢＳ（０．２ｍＬ．ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）、イスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）、抗ＣＴＬＡ−４（クローン９Ｄ９、マウスＩｇＧ２ｂモノクローナル抗体、カタログ＃：ＢＥ０１６４、ＢｉｏＸＣｅｌｌ（登録商標）；１００μｇ／用量、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ、第４、７および１０日のみ）、またはイスチラツマブおよび抗ＣＴＬＡ−４の組み合わせ（単独療法のために投薬されるように）を投薬した。マウスにＰＢＳまたはイスチラツマブを研究持続期間の間投薬した。腫瘍体積を週２回測定した。
【０１７４】
図１３で概略が示されるインビボ研究では、雌Ｃ５７ＢＬ／６マウス（１０匹／群）に、皮下で、５×１０５Ｂ１６−Ｆ１０メラノーマ細胞を含む非補充ＤＭＥＭ懸濁液を左側腹部に接種した。腫瘍細胞接種後第４日に開始して、マウスにＰＢＳ（０．２ｍＬ．ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）、イスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．、ｑ３ｄ）、抗ＰＤ−１（クローンＪ４３ハムスター抗体の室内作製マウスＩｇＧ２ａバージョン；１００μｇ／用量、ｉ．ｐ．、第４、８、１１、１４および１８日のみ）、またはイスチラツマブおよび抗ＰＤ−１の組み合わせ（単独療法のために投薬されるように）を投薬した。マウスにＰＢＳまたはイスチラツマブを研究持続期間の間投薬した。腫瘍体積を週２回測定した。
【０１７５】
実施例８：
この実施例は、形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ；ＣＤ１２３＋ＣＤ３０３＋として規定）のリガンド、インスリン様増殖因子リガンド（ＩＧＦ−１）およびヘレグリン（ＨＲＧ）、ならびにイスチラツマブによる処理の結果を開示し、この場合、ｐＤＣのＩＧＦ−１およびＨＲＧによる処理は、ｐＤＣの活性化（フローサイトメトリー（ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｒｙ）による、細胞表面活性化マーカーＣＤ８３およびＣＤ８６の発現、およびＥＬＩＳＡによる培地中でのインターフェロンα（ＩＦＮα）産生により測定される）およびＰＤ−Ｌ１発現（フローサイトメトリーにより測定される）を阻害し、イスチラツマブによる処理はｐＤＣ活性に影響しない。ヒト全血に由来する形質細胞様樹状細胞は、フローサイトメトリーにより決定されるように、高レベルのＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３を発現する。
【０１７６】
形質細胞様樹状細胞は血液中で循環する自然免疫細胞の亜集団であり、末梢リンパ器官において見出される。それらは末梢血単核球の０．４％未満を構成する。ヒトでは、これらの細胞は、表面マーカーＣＤ１２３およびＣＤ３０３を発現する。刺激され、その後活性化されると、これらの細胞は大量のＩ型インターフェロン（主にＩＦＮ−α（アルファ）およびＩＦＮ−β（ベータ））を産生し、それらは幅広い効果を媒介する重要な多面的抗ウイルス化合物である。フローサイトメトリーに基づくと、ｐＤＣは、高レベルの細胞表面ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３受容体を発現する（図１４）。リガンド処理によるｐＤＣ活性の阻害（図１５）により、これらのリガンドをブロックするとｐＤＣの活性が増加し、これにより、潜在的に抗腫瘍免疫応答が改善されることが示唆される。
【０１７７】
図１４で概略が示される実験では、ヒト全血を、３人の無病患者から、ＥＤＴＡを含まないＫ２バキュテナー（登録商標）中に採取した。白血球画分を、全血からＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ（商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ：Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）上で遠心分離により単離した。様々な細胞免疫細胞集団を細胞表面マーカー発現により下記の通り規定し（ＣＤ４＋  Ｔ細胞、ＣＤ４＋；Ｔｒｅｇ、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＧＩＴＲ＋；ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＣＤ８＋；ＮＫ、ＣＤ５６＋ＣＤ３−；ＮＫＴ、ＣＤ５６＋ＣＤ３＋；単球、ＣＤ１４＋；Ｂ細胞、ＣＤ１９＋；ｐＤＣ、ＣＤ１２３＋ＣＤ３０３＋；ｍＤＣｓ、ＣＤ１９−ＣＤ１ｃ＋）、ＩＧＦ−１ＲおよびＥｒｂＢ３受容体の同時発現について、フローサイトメトリーにより測定されるように、特異抗体を用いて試験した。
【０１７８】
図１５で概略が示される定量フローサイトメトリー実験では、ヒト全血を無病患者からＥＤＴＡを含まないＫ２バキュテナー（登録商標）中に採取した。白血球画分を、全血からＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ（商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ：Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）上で遠心分離により単離し、赤血球を、ＡＣＫバッファー（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で２分間インキュベートすることにより溶解させた。総細胞数を取得し、ｐＤＣを陰性濃縮によりヒトｐＤＣ単離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）およびＡＵＴＯＭＡＣＳ磁気細胞選別機を使用して単離した。単離されたｐＤＣ（ＣＤ１２３＋ＣＤ３０３＋として規定）は、ＣＤ１２３＋ＣＤ３０３＋純度分析に基づくと、＞８０％純粋であった。ＣＤ１２３＋ＣＤ３０３＋細胞を、２０，０００細胞／ウェルで９６ウェルプレートにおいて、１０％ウシ胎仔血清およびβメルカプトエタノール（５０μＭ）を含むＲＰＭＩ培地中にて、ＳＤ−１０１（トール様受容体９アゴニスト；０．５μＭ）、ＩＧＦ−１（５０ｎＭ）、ＨＲＧ（１０ｎＭ）またはイスチラツマブ（３００ｎＭ）の存在下、またはこれなしで１６時間の間、３７セルシウス度で蒔いた。細胞培地中での、ＣＤ８３およびＣＤ８６（ｐＤＣ活性のマーカー、平均蛍光強度として表される）のパーセント発現およびインターフェロンα発現の変化を、それぞれ、フローサイトメトリーおよびＥＬＩＳＡを用いて定量化した。
【０１７９】
実施例９：
この実施例は、骨髄系由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ；Ｇｒ１ｄｉｍＬｙ６Ｃ陰性（Ｌｙ６Ｃ＿）として規定）のイスチラツマブによる処理の結果を開示し、ＭＤＳＣのイスチラツマブによる処理は、ＣＤ４＋  Ｔ細胞増殖に対するこの細胞集団の抑制活性を阻害した。
【０１８０】
Ｔｒｅｇと同様に、ＭＤＳＣは免疫活性化の抑制因子であり、これは、ＣＤ４＋  Ｔ細胞を含む免疫細胞の増殖を弱めることができる。マウスをイスチラツマブを用いてインビボにて処置すると、これらのマウスの脾臓から単離されたＭＤＳＣの、活性化ＣＤ４＋  Ｔ細胞増殖をインビトロで抑制する能力が弱められ、イスチラツマブ処置マウス由来のＭＤＳＣの存在下でのＣＤ４＋  Ｔ細胞増殖の７７％阻害と比べて、未処置マウス由来のＭＤＳＣの存在下でのＣＤ４＋  Ｔ細胞増殖の９２％阻害が得られた（図１６）。
【０１８１】
図１６において概略が示されるように、２匹のＣ５７ｂｌ／６マウスをイスチラツマブ（３０ｍｐｋ、ｉ．ｐ．ｑ３ｄ×３）で処置した。脾臓を、ＭＤＳＣ単離のためにイスチラツマブ処置マウスから、ＣＤ４＋  Ｔ細胞単離のために２匹の未処置Ｃ５７ｂｌ／６マウスから単離した。ＭＤＳＣおよびＣＤ４＋  Ｔ細胞を、それぞれ、ＭＤＳＣ単離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）およびＣＤ４＋  Ｔ細胞単離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）、ならびにＡＵＴＯＭＡＣＳ磁気細胞選別機を使用して単離した。ＭＤＳＣをＣＦＳＥで染色し、およびＣＤ４＋  Ｔ細胞をＦａｒ  Ｒｅｄ  Ｃｅｌｌ  ｔｒａｃｋｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）で染色し、その後、５０，０００のＣＤ４＋  Ｔ細胞を２５，０００ＭＤＳＣと共に、適用可能な場合、１：０、１：０．５および０：１  ＣＤ４＋：ＭＤＳＣで３日間、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ（ＣＤ４＋  Ｔ細胞の活性化剤）の存在下、またはこれなしで蒔いた。ＣＤ４＋  Ｔ細胞増殖を、フローサイトメトリーにより、ＡＰＣチャンネルにおいてＦａｒ  Ｒｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｃｋｅｒ希釈を評価することにより測定した。活性化されていないＣＤ４＋  Ｔ細胞は増殖しなかった（単一最右ピークにより証明される）が、活性化ＣＤ４＋  Ｔ細胞は、Ｆａｒ  Ｒｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｃｋｅｒシグナルにおける左方向シフト（すなわち減少）により証明されるように増殖した。
【０１８２】
注釈
本発明について、その特定の実施形態と関連させて説明してきたが、さらなる改変が可能であり、本出願は、一般に、発明の原理に従い、発明が属する技術分野内で公知になり、慣行となっており、本明細書で明記される必須特徴に適用され得る本開示からのそのような発展を含む、発明の全てのバリエーション、使用または適合を包含することが意図されることが理解されるであろう。本明細書で参照される、各、および全ての米国、国際、または他の特許または特許出願もしくは公開の開示は、これにより、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
追加の配列
【表３−１】
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【表３−２】
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【表３−３】
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【表３−４】
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【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９−１】
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【図９−２】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７−１】
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【図１７−２】
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【図１７−３】
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【図１７−４】
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【図１７−５】
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【図１７−６】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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2018516263.tif 000035
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