(57)【要約】アゴニスト活性を有する抗原結合ポリペプチド及びその複合体が本明細書で提供される。また、アゴニスト活性を有する複合体またはポリペプチドについてのスクリーニング方法、ポリペプチドのアゴニスト活性の強化方法、ならびに本明細書に記載の複合体及びポリペプチドを使用した細胞表面受容体の作動方法も提供される。【選択図】図８
2018516537.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
６つのサブユニットを含む、アゴニスト活性を有する六量体の抗原結合複合体であって、各サブユニットが、細胞表面受容体に対する少なくとも１つの抗原結合領域と、六量体形成を強化する修飾Ｆｃ領域とを含む、少なくとも１つの抗原結合ポリペプチドを含み、前記複合体は、前記複合体が結合した細胞表面受容体に対してアゴニスト活性を有する、前記六量体の抗原結合複合体。
【請求項２】
各抗原結合ポリペプチドが、同じ細胞表面受容体に結合する、請求項１に記載の複合体。
【請求項３】
各抗原結合ポリペプチドが、同じ細胞表面受容体上の同じエピトープに結合する、請求項２に記載の複合体。
【請求項４】
前記複合体が、同じ細胞表面受容体上の異なるエピトープに結合する２つ以上の抗原結合ポリペプチドを含む、請求項２に記載の複合体。
【請求項５】
前記細胞表面受容体が、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項６】
前記細胞表面受容体が、ＯＸ４０、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項７】
前記抗原結合ポリペプチドが、抗体の抗原結合領域を含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項８】
抗体の前記抗原結合領域が、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される、請求項７に記載の複合体。
【請求項９】
前記修飾Ｆｃ領域が、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１０】
前記Ｆｃ領域が、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１１】
前記減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣのための修飾が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＫ３２２Ａアミノ酸置換を含む、請求項１０に記載の複合体。
【請求項１２】
前記抗原結合領域が、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からの抗原結合領域を含む、請求項７〜１１のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１３】
各抗原結合領域が、同じ細胞表面受容体に結合する単一特異性抗体からのものである、請求項１２に記載の複合体。
【請求項１４】
各抗原結合領域が、ＯＸ４０に結合する単一特異性抗体からのものである、請求項１２に記載の複合体。
【請求項１５】
前記複合体が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項１４に記載の複合体。
【請求項１６】
前記６つのサブユニットの各々が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項１５に記載の複合体。
【請求項１７】
前記複合体が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項１４に記載の複合体。
【請求項１８】
前記６つのサブユニットの各々が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項１７に記載の複合体。
【請求項１９】
前記複合体が、同じ細胞表面受容体上の異なるエピトープに結合する少なくとも２つの単一特異性抗体の組み合わせを含む、請求項１３〜１５及び１７のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項２０】
前記複合体が、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のサブユニット、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のサブユニットを含み、前記ＯＸ４０の第１のエピトープが、前記ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる、請求項１９に記載の複合体。
【請求項２１】
前記第１のサブユニットが、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、
前記第２のサブユニットが、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項２０に記載の複合体。
【請求項２２】
前記抗原結合領域が、二重特異性抗体の２つのアームを含み、前記二重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体の異なるエピトープに結合する、請求項７〜１２のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項２３】
前記二重特異性抗体が、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のアーム、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のアームを含み、前記ＯＸ４０の第１のエピトープが、前記ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる、請求項２２に記載の複合体。
【請求項２４】
前記第１のアームが、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、
前記第２のアームが、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項２３に記載の複合体。
【請求項２５】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項２６】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項２５に記載の複合体。
【請求項２７】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項２５に記載の複合体。
【請求項２８】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、請求項２５または２６に記載の複合体。
【請求項２９】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む、請求項２８に記載の複合体。
【請求項３０】
前記修飾Ｆｃ領域が、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、前記置換が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域にある、請求項２８に記載の複合体。
【請求項３１】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む、請求項２８に記載の複合体。
【請求項３２】
前記Ｆｃ領域が、エフェクター機能を減弱させるための修飾をさらに含む、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項３３】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む、請求項３２に記載の複合体。
【請求項３４】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、請求項３２または３３に記載の複合体。
【請求項３５】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、前記Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない、請求項３２〜３４のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項３６】
前記複合体は、前記複合体が結合した細胞表面受容体によって媒介されるシグナル伝達を強化する、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項３７】
細胞表面受容体に対する抗原結合領域と、修飾Ｆｃ領域とを含む、抗原結合ポリペプチドであって、前記修飾Ｆｃ領域が、（ｉ）前記抗原結合ポリペプチドの六量体形成を強化する修飾、及び（ｉｉ）エフェクター機能を減弱させる修飾を含む、前記抗原結合ポリペプチド。
【請求項３８】
前記細胞表面受容体が、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである、請求項３７に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項３９】
前記細胞表面受容体が、ＯＸ４０、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される、請求項３７または３８に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４０】
前記抗原結合ポリペプチドが、抗体の抗原結合領域を含む、請求項３７〜３９のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４１】
抗体の前記抗原結合領域が、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される、請求項４０に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４２】
前記修飾Ｆｃ領域が、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である、請求項３７〜４１のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４３】
前記Ｆｃ領域が、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含む、請求項３７〜４２のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４４】
前記減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣのための修飾が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＫ３２２Ａアミノ酸置換を含む、請求項４３に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４５】
前記抗原結合領域が、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からの抗原結合領域を含む、請求項４０〜４４のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４６】
前記抗原結合領域が、ＯＸ４０に結合する、請求項４５に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４７】
前記抗原結合領域が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項４６に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４８】
前記抗原結合領域が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項４６に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項４９】
前記抗原結合領域が、二重特異性抗体の２つのアームを含み、前記二重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体の異なるエピトープに結合する、請求項４５に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５０】
前記二重特異性抗体が、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のアーム、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のアームを含み、前記ＯＸ４０の第１のエピトープが、前記ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる、請求項４９に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５１】
前記第１のアームが、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、
前記第２のアームが、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項５０に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５２】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項３７〜５１のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５３】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項５２に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５４】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項５２に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５５】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、請求項５２または５３に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５６】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む、請求項５５に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５７】
前記修飾Ｆｃ領域が、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、前記置換が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域にある、請求項５５に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５８】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む、請求項５５に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項５９】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む、請求項３７〜５８のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６０】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトの前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項５９に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６１】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、前記Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない、請求項３７〜６０のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６２】
細胞表面受容体に対する抗原結合領域と、修飾Ｆｃ領域とを含む、抗原結合ポリペプチドであって、前記修飾Ｆｃ領域が、前記細胞表面受容体に結合した際にＦｃドメイン間の分子間相互作用を強化する修飾を含む、前記抗原結合ポリペプチド。
【請求項６３】
前記ポリペプチドが、前記Ｆｃ領域修飾を有しない同じ抗原結合ポリペプチドと比較して、前記細胞表面受容体に結合した際に受容体アゴニスト性を強化する、請求項６２に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６４】
前記細胞表面受容体が、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである、請求項６２または６３に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６５】
前記細胞表面受容体が、ＯＸ４０、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される、請求項６２〜６４のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６６】
前記抗原結合ポリペプチドが、抗体の抗原結合領域を含む、請求項６２〜６５のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６７】
抗体の前記抗原結合領域が、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される、請求項６６に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６８】
前記修飾Ｆｃ領域が、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である、請求項６２〜６７のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項６９】
前記Ｆｃ領域が、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含む、請求項６２〜６８のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７０】
前記減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣのための修飾が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＫ３２２Ａアミノ酸置換を含む、請求項６９に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７１】
前記抗原結合領域が、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からのものである、請求項６６〜７０のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７２】
前記抗原結合領域が、ＯＸ４０に結合する、請求項７１に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７３】
前記抗原結合領域が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項７２に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７４】
前記抗原結合領域が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項７２に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７５】
前記抗原結合領域が、二重特異性抗体の２つのアームを含み、前記二重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体の異なるエピトープに結合する、請求項７１に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７６】
前記二重特異性抗体が、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のアーム、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のアームを含み、前記ＯＸ４０の第１のエピトープが、前記ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる、請求項７５に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７７】
前記第１のアームが、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、
前記第２のアームが、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項７６に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７８】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項６２〜７７のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項７９】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項７８に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８０】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項７８に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８１】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、請求項７８または７９に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８２】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む、請求項８１に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８３】
前記修飾Ｆｃ領域が、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、前記置換が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域にある、請求項８１に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８４】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む、請求項８１に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８５】
前記修飾Ｆｃ領域が、エフェクター機能を減弱させる修飾をさらに含む、請求項６２〜８４のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８６】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む、請求項８５に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８７】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトの前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項８５または８６に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８８】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、前記Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない、請求項８５〜８７のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチド。
【請求項８９】
請求項３７〜８８のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチドを６つ含む六量体。
【請求項９０】
対象における細胞表面受容体の作動方法であって、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の複合体、請求項８９に記載の六量体、または請求項３７〜８８のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチドを前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項９１】
前記六量体が、前記複合体、六量体または抗原結合ポリペプチドが結合した細胞表面受容体によって媒介されるシグナル伝達を強化する、請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】
抗原結合ポリペプチドのアゴニスト活性の増大方法であって、
（ａ）細胞表面受容体に対する抗原結合領域と、Ｆｃ領域とを含む、抗原結合ポリペプチドを準備することと、
（ｂ）前記Ｆｃ領域に修飾を導入することと、を含み、前記修飾が、細胞表面受容体に結合した際にＦｃドメイン間の分子間相互作用を強化し、前記抗原結合ポリペプチドが、前記Ｆｃ領域修飾を有しない同じ抗原結合ポリペプチドと比較して、前記抗原結合ポリペプチドが結合した細胞表面受容体に対する増大したアゴニスト活性を有する、前記方法。
【請求項９３】
抗原結合ポリペプチドのアゴニスト活性の増大方法であって、
（ａ）細胞表面受容体に対する抗原結合領域と、Ｆｃ領域とを含む、抗原結合ポリペプチドを準備することと、
（ｂ）前記Ｆｃ領域に修飾を導入することと、を含み、前記修飾が、前記抗原結合ポリペプチドの六量体形成を強化し、前記六量体が、前記六量体の個々のサブユニットと比較して、前記抗原結合ポリペプチドが結合した細胞表面受容体に対する増大したアゴニスト活性を有する、前記方法。
【請求項９４】
前記細胞表面受容体が、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである、請求項９２または９３に記載の方法。
【請求項９５】
前記細胞表面受容体が、ＯＸ４０、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される、請求項９２〜９４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９６】
前記抗原結合ポリペプチドが、抗体の抗原結合領域を含む、請求項９２〜９５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９７】
抗体の前記抗原結合領域が、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
前記修飾Ｆｃ領域が、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である、請求項９２〜９７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９９】
前記Ｆｃ領域が、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含む、請求項９２〜９８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１００】
前記減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣのための修飾が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＫ３２２Ａアミノ酸置換を含む、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記抗原結合領域が、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からの抗原結合領域を含む、請求項９６〜１００のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０２】
前記抗原結合領域が、ＯＸ４０に結合する、請求項９６〜１０１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０３】
前記抗原結合領域が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
前記抗原結合領域が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０５】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項９２〜１０４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０６】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０８】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、請求項１０５または１０６に記載の方法。
【請求項１０９】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記修飾Ｆｃ領域が、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、前記置換が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域にある、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１１】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１２】
前記Ｆｃ領域が、エフェクター機能を減弱させるための修飾をさらに含む、請求項９２〜１１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１３】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む、請求項１１２に記載の複合体。
【請求項１１４】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項１１２または１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、前記Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない、請求項１１２〜１１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１６】
前記六量体は、前記六量体が結合した細胞表面受容体によって媒介されるシグナル伝達を強化する、請求項９３〜１１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１７】
細胞表面受容体に対するアゴニスト活性を有する抗原結合ポリペプチドの特定方法であって、
（ａ）複数の抗原結合ポリペプチドを準備することであって、各抗原結合ポリペプチドが、少なくとも１つの抗原結合領域と、前記細胞表面受容体に結合した際にＦｃドメイン間の分子間相互作用を強化する修飾Ｆｃ領域とを含む、準備することと、
（ｂ）前記抗原結合複合体を細胞表面受容体に対してスクリーニングすることと、
（ｃ）前記細胞表面受容体に対するアゴニスト活性を有する抗原結合複合体を選択することと、を含む、前記方法。
【請求項１１８】
細胞表面受容体に対するアゴニスト活性を有する抗原結合ポリペプチドの特定方法であって、
（ａ）複数の六量体の抗原結合複合体を準備することであって、各複合体が、少なくとも１つの抗原結合領域と、六量体形成を強化する修飾Ｆｃ領域とを含む抗原結合ポリペプチドを各々が含む、６つのサブユニットを含む、準備することと、
（ｂ）前記抗原結合複合体を細胞表面受容体に対してスクリーニングすることと、
（ｃ）前記細胞表面受容体に対するアゴニスト活性を有する抗原結合複合体を選択することと、を含む、前記方法。
【請求項１１９】
前記Ｆｃ領域が、エフェクター機能を減弱させる修飾をさらに含む、請求項１１７または１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
前記Ｆｃ領域が、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含む、請求項１１７〜１１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２１】
６つのサブユニットを含む、アゴニスト活性を有する六量体の抗原結合複合体であって、各サブユニットが、細胞表面受容体に対する少なくとも１つの抗原結合領域と、六量体形成を強化する修飾Ｆｃ領域とを含む、少なくとも１つの抗原結合ポリペプチドを含み、前記修飾Ｆｃ領域が、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含み、前記複合体は、前記複合体が結合した細胞表面受容体に対してアゴニスト活性を有する、前記六量体の抗原結合複合体。
【請求項１２２】
各抗原結合ポリペプチドが、同じ細胞表面受容体に結合する、請求項１２１に記載の複合体。
【請求項１２３】
各抗原結合ポリペプチドが、同じ細胞表面受容体上の同じエピトープに結合する、請求項１２２に記載の複合体。
【請求項１２４】
前記複合体が、同じ細胞表面受容体上の異なるエピトープに結合する２つ以上の抗原結合ポリペプチドを含む、請求項１２２に記載の複合体。
【請求項１２５】
前記細胞表面受容体が、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである、請求項１２１〜１２４のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１２６】
前記細胞表面受容体が、ＯＸ４０、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される、請求項１２１〜１２５のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１２７】
前記抗原結合ポリペプチドが、抗体の抗原結合領域を含む、請求項１２１〜１２６のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１２８】
抗体の前記抗原結合領域が、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される、請求項１２７に記載の複合体。
【請求項１２９】
前記修飾Ｆｃ領域が、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である、請求項１２１〜１２８のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１３０】
前記減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣのための修飾が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＫ３２２Ａアミノ酸置換を含む、請求項１２１〜１２９のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１３１】
前記抗原結合領域が、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からの抗原結合領域を含む、請求項１２７〜１３０のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１３２】
各抗原結合領域が、同じ細胞表面受容体に結合する単一特異性抗体からのものである、請求項１３１に記載の複合体。
【請求項１３３】
各抗原結合領域が、ＯＸ４０に結合する単一特異性抗体からのものである、請求項１３１に記載の複合体。
【請求項１３４】
前記複合体が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項１３３に記載の複合体。
【請求項１３５】
前記６つのサブユニットの各々が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項１３４に記載の複合体。
【請求項１３６】
前記複合体が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む、請求項１３３に記載の複合体。
【請求項１３７】
前記６つのサブユニットの各々が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項１３６に記載の複合体。
【請求項１３８】
前記複合体が、同じ細胞表面受容体上の異なるエピトープに結合する少なくとも２つの単一特異性抗体の組み合わせを含む、請求項１３２〜１３４及び１３６のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１３９】
前記複合体が、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のサブユニット、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のサブユニットを含み、前記ＯＸ４０の第１のエピトープが、前記ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる、請求項１３８に記載の複合体。
【請求項１４０】
前記第１のサブユニットが、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、
前記第２のサブユニットが、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項１３９に記載の複合体。
【請求項１４１】
前記抗原結合領域が、二重特異性抗体の２つのアームを含み、前記二重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体の異なるエピトープに結合する、請求項１２７〜１３１のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１４２】
前記二重特異性抗体が、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のアーム、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のアームを含み、前記ＯＸ４０の第１のエピトープが、前記ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる、請求項１４１に記載の複合体。
【請求項１４３】
前記第１のアームが、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、
前記第２のアームが、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに／または（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、請求項１４２に記載の複合体。
【請求項１４４】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項１２１〜１４３のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１４５】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項１４４に記載の複合体。
【請求項１４６】
前記修飾Ｆｃ領域が、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む、請求項１４４に記載の複合体。
【請求項１４７】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む、請求項１４４または１４５に記載の複合体。
【請求項１４８】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む、請求項１４７に記載の複合体。
【請求項１４９】
前記修飾Ｆｃ領域が、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、前記置換が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域にある、請求項１４７に記載の複合体。
【請求項１５０】
前記修飾Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）の前記Ｆｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む、請求項１４７に記載の複合体。
【請求項１５１】
前記Ｆｃ領域が、エフェクター機能を減弱させるための修飾をさらに含む、請求項１２１〜１５０のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１５２】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む、請求項１５１に記載の複合体。
【請求項１５３】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、
（ａ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４の前記Ｆｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２の前記Ｆｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１の前記Ｆｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換（ＥＵ番号付け）を含む、請求項１５１または１５２に記載の複合体。
【請求項１５４】
前記エフェクター機能を減弱させるための修飾が、前記Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない、請求項１５１〜１５３のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１５５】
前記複合体は、前記複合体が結合した細胞表面受容体によって媒介されるシグナル伝達を強化する、請求項１２１〜１５４のいずれか１項に記載の複合体。
【請求項１５６】
請求項１〜３６もしくは１２１〜１５５のいずれか１項に記載の複合体、請求項８９に記載の六量体、または請求項３７〜８８のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチドをコードする、核酸。
【請求項１５７】
請求項１５６に記載の核酸を含むベクター。
【請求項１５８】
前記ベクターが発現ベクターである、請求項１５７に記載のベクター。
【請求項１５９】
請求項１５７または１５８に記載のベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１６０】
前記宿主細胞が原核性である、請求項１５９に記載の宿主細胞。
【請求項１６１】
前記宿主細胞が真核性である、請求項１５９に記載の宿主細胞。
【請求項１６２】
アゴニスト活性を有する抗原結合ポリペプチドの作製方法であって、請求項１５９〜１６１のいずれか１項に記載の宿主細胞を、請求項１〜３６もしくは１２１〜１５５のいずれか１項に記載の複合体、請求項８９に記載の六量体、または請求項３７〜８８のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチドをコードする核酸の発現に好適な条件下で培養することを含む、前記方法。
【請求項１６３】
前記複合体、六量体、またはポリペプチドを前記宿主細胞から回収することをさらに含む、請求項１６２に記載の方法。
【請求項１６４】
請求項１〜３６もしくは１２１〜１５５のいずれか１項に記載の複合体、請求項８９に記載の六量体、または請求項３７〜８８のいずれか１項に記載の抗原結合ポリペプチドと、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年４月７日出願の米国仮出願第６２／０８０，９９１号、２０１５年８月１９日出願の同第６２／２０７，３１５号、及び２０１５年１２月２３日出願の同第６２／３８７，４８５号の優先権の利益を主張するものであり、これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる：コンピュータ可読形式（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：１４６３９２０３３５４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ、記録日：２０１５年４月６日、サイズ：１８７ＫＢ）。
【０００３】
本発明は、アゴニスト性の活性を有する抗原結合複合体、ならびにその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
機能性抗体は、多種多様な疾患の治療のための重要な治療選択肢である。当該技術分野において、機能性抗体、特にアゴニスト性の活性を有する抗体を候補分子のプールから特定するためのよりよい手段が必要とされている。本発明は、これら及び他の必要性を対象とする。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、アゴニスト性の活性を有する抗原結合ポリペプチド及び複合体、ならびにその使用方法を提供する。
【０００６】
一態様では、本願は、６つのサブユニットを含む、アゴニスト活性を有する六量体の抗原結合複合体を提供し、各サブユニットは、細胞表面受容体に対する少なくとも１つの抗原結合領域と、六量体形成を強化する修飾Ｆｃ領域とを含む、少なくとも１つの抗原結合ポリペプチドを含み、この複合体は、複合体が結合した細胞表面受容体に対してアゴニスト活性を有する。
【０００７】
ある特定の実施形態では、抗原結合複合体における各抗原結合ポリペプチドは、同じ細胞表面受容体に結合する。
【０００８】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである細胞表面受容体に結合する。
【０００９】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、ＯＸ４０、デスレセプター５（ＤＲ５）、ＣＤ２７、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される細胞表面受容体に結合する。
【００１０】
ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、抗体の抗原結合領域を含む。ある特定の実施形態では、抗体の抗原結合領域は、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される。
【００１１】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。
【００１２】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含む。例示的な実施形態では、減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣのための修飾は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａアミノ酸置換を含む。
【００１３】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００１４】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００１５】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００１６】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む。ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む。ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、この置換は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域にある。ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む。
【００１７】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からの抗原結合領域を含む。
【００１８】
ある特定の実施形態では、各抗原結合領域は、同じ細胞表面受容体に結合する単一特異性抗体からのものである。
【００１９】
ある特定の実施形態では、各抗原結合領域は、ＯＸ４０に結合する単一特異性抗体からのものである。例示的な実施形態では、複合体は、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む。ある特定の実施形態では、６つのサブユニットの各々が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む。他の例示的な実施形態では、複合体は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む。ある特定の実施形態では、６つのサブユニットの各々が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む。
【００２０】
ある特定の実施形態では、複合体は、同じ細胞表面受容体上の異なるエピトープに結合する少なくとも２つの単一特異性抗体の組み合わせを含む。
【００２１】
ある特定の実施形態では、複合体は、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のサブユニット、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のサブユニットを含み、ＯＸ４０の第１のエピトープは、ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる。例示的な実施形態では、第１のサブユニットは、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、第２のサブユニットは、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。
【００２２】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、二重特異性抗体の２つのアームを含み、二重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体の異なるエピトープに結合する。
【００２３】
ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のアーム、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のアームを含み、ＯＸ４０の第１のエピトープは、ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる。例示的な実施形態では、第１のアームは、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、第２のアームは、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。
【００２４】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、エフェクター機能を減弱させるための修飾をさらに含む。例示的な実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む。
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）を含む。
【００２５】
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない。
【００２６】
ある特定の実施形態では、抗原結合複合体は、複合体が結合した細胞表面受容体によって媒介されるシグナル伝達を強化する。
【００２７】
別の態様では、本願は、６つのサブユニットを含む、アゴニスト活性を有する六量体の抗原結合複合体を提供し、各サブユニットは、細胞表面受容体に対する少なくとも１つの抗原結合領域と、六量体形成を強化する修飾Ｆｃ領域とを含む、少なくとも１つの抗原結合ポリペプチドを含み、修飾Ｆｃ領域は、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含み、この複合体は、複合体が結合した細胞表面受容体に対してアゴニスト活性を有する。
【００２８】
ある特定の実施形態では、抗原結合複合体における各抗原結合ポリペプチドは、同じ細胞表面受容体に結合する。
【００２９】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである細胞表面受容体に結合する。
【００３０】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、ＯＸ４０、デスレセプター５（ＤＲ５）、ＣＤ２７、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される細胞表面受容体に結合する。
【００３１】
ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、抗体の抗原結合領域を含む。ある特定の実施形態では、抗体の抗原結合領域は、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される。
【００３２】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。
【００３３】
ある特定の実施形態では、減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣのための修飾は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａアミノ酸置換を含む。
【００３４】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００３５】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００３６】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００３７】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む。ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む。ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、この置換は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域にある。ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む。
【００３８】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からの抗原結合領域を含む。
【００３９】
ある特定の実施形態では、各抗原結合領域は、同じ細胞表面受容体に結合する単一特異性抗体からのものである。
【００４０】
ある特定の実施形態では、各抗原結合領域は、ＯＸ４０に結合する単一特異性抗体からのものである。例示的な実施形態では、複合体は、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む。ある特定の実施形態では、６つのサブユニットの各々が、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む。他の例示的な実施形態では、複合体は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む。ある特定の実施形態では、６つのサブユニットの各々が、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む、少なくとも１つのサブユニットを含む。
【００４１】
ある特定の実施形態では、複合体は、同じ細胞表面受容体上の異なるエピトープに結合する少なくとも２つの単一特異性抗体の組み合わせを含む。
【００４２】
ある特定の実施形態では、複合体は、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のサブユニット、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のサブユニットを含み、ＯＸ４０の第１のエピトープは、ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる。例示的な実施形態では、第１のサブユニットは、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、第２のサブユニットは、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。
【００４３】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、二重特異性抗体の２つのアームを含み、二重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体の異なるエピトープに結合する。
【００４４】
ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のアーム、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のアームを含み、ＯＸ４０の第１のエピトープは、ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる。例示的な実施形態では、第１のアームは、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、第２のアームは、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。
【００４５】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、エフェクター機能を減弱させるための修飾をさらに含む。例示的な実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む。
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換（ＥＵ番号付け）を含む。
【００４６】
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない。
【００４７】
ある特定の実施形態では、抗原結合複合体は、複合体が結合した細胞表面受容体によって媒介されるシグナル伝達を強化する。
【００４８】
別の態様では、本願は、細胞表面受容体に対する抗原結合領域と、修飾Ｆｃ領域とを含む、抗原結合ポリペプチドを提供し、修飾Ｆｃ領域は、（ｉ）抗原結合ポリペプチドの六量体形成を強化する修飾、及び（ｉｉ）エフェクター機能を減弱させる修飾を含む。
【００４９】
ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである細胞表面受容体に結合する。
【００５０】
ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、ＯＸ４０、ＤＲ５、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される細胞表面受容体に結合する。
【００５１】
ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、抗体の抗原結合領域を含む。ある特定の実施形態では、抗体の抗原結合領域は、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される。
【００５２】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。
【００５３】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００５４】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００５５】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００５６】
ある例示的な実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む。ある例示的な実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む。ある例示的な実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、この置換は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域にある。ある例示的な実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む。
【００５７】
ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からの抗原結合領域を含む。
【００５８】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、ＯＸ４０に結合する。ある例示的な実施形態では、抗原結合領域は、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。ある例示的な実施形態では、抗原結合領域は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。
【００５９】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、二重特異性抗体の２つのアームを含み、二重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体の異なるエピトープに結合する。
【００６０】
ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、（ａ）ＯＸ４０の第１のエピトープに結合する少なくとも第１のアーム、及び（ｂ）ＯＸ４０の第２のエピトープに結合する少なくとも第２のアームを含み、ＯＸ４０の第１のエピトープは、ＯＸ４０の第２のエピトープとは異なる。ある例示的な実施形態では、第１のアームは、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含み、第２のアームは、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。
【００６１】
例示的な実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む。
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトのＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換（ＥＵ番号付け）を含む。
【００６２】
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない。
【００６３】
別の態様では、本願は、本明細書に記載の実施形態のいずれか１つに記載の６つの抗原結合ポリペプチドを含む六量体を提供する。
【００６４】
別の態様では、本願は、本明細書に記載の実施形態のいずれかに記載の複合体または抗原結合ポリペプチドを対象に投与することを含む、対象における細胞表面受容体の作動方法を提供する。
【００６５】
ある特定の実施形態では、六量体は、複合体、六量体または抗原結合ポリペプチドが結合した細胞表面受容体によって媒介されるシグナル伝達を強化する。
【００６６】
別の態様では、本願は、（ａ）細胞表面受容体に対する抗原結合領域、及びＦｃ領域を含む、抗原結合ポリペプチドを準備することと、（ｂ）Ｆｃ領域に修飾を導入することと、を含む、抗原結合ポリペプチドのアゴニスト活性の増大方法を提供し、この修飾は、抗原結合ポリペプチドの六量体形成を強化し、この六量体は、六量体の個々のサブユニットと比較して、抗原結合ポリペプチドが結合した細胞表面受容体に対する増大したアゴニスト活性を有する。
【００６７】
ある特定の実施形態では、細胞表面受容体は、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリー及びＧタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）スーパーファミリーからなる群から選択される受容体ファミリーのメンバーである。ある例示的な実施形態では、細胞表面受容体は、ＯＸ４０、ＤＲ５、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ１３７、及びＴｉｅ２からなる群から選択される。
【００６８】
ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、抗体の抗原結合領域を含む。例示的な実施形態では、抗体の抗原結合領域は、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗体可変領域からなる群から選択される。
【００６９】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、修飾ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域である。
【００７０】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）のための修飾をさらに含む。例示的な実施形態では、減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣのための修飾は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａアミノ酸置換を含む。
【００７１】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ａ、Ｐ２４７Ｃ、Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｈ、Ｐ２４７Ｉ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｌ、Ｐ２４７Ｍ、Ｐ２４７Ｎ、Ｐ２４７Ｒ、Ｐ２４７Ｓ、Ｐ２４７Ｔ、Ｐ２４７Ｖ、またはＰ２４７Ｗ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ａ、Ｉ２５３Ｄ、Ｉ２５３Ｋ、Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｍ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｒ、Ｉ２５３Ｓ、Ｉ２５３Ｖ、Ｉ２５３Ｅ、Ｉ２５３Ｑ、またはＩ２５３Ｔ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｅ、Ｓ２５４Ｆ、Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｈ、Ｓ２５４Ｉ、Ｓ２５４Ｋ、Ｓ２５４Ｌ、Ｓ２５４Ｐ、Ｓ２５４Ｔ、Ｓ２５４Ｖ、またはＳ２５４Ｗ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ａ、Ｈ３１０Ｇ、Ｈ３１０Ｆ、Ｈ３１０Ｋ、Ｈ３１０Ｌ、Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｒ、Ｈ３１０Ｔ、Ｈ３１０Ｖ、Ｈ３１０Ｗ、Ｈ３１０Ｎ、Ｈ３１０Ｑ、またはＨ３１０Ｙ、
（ｖ）Ｑ３１１Ａ、Ｑ３１１Ｃ、Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｇ、Ｑ３１１Ｈ、Ｑ３１１Ｆ、Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｎ、Ｑ３１１Ｐ、Ｑ３１１Ｒ、Ｑ３１１Ｓ、Ｑ３１１Ｔ、Ｑ３１１Ｗ、またはＱ３１１Ｙ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｇ、Ｔ３５９Ｎ、Ｔ３５９Ｐ、またはＴ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｆ、Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｍ、Ｅ３８２Ｐ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｗ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｈ、Ｅ３８２Ｎ、Ｅ３８２Ｑ、Ｅ３８２Ｓ、Ｅ３８２Ｔ、またはＥ３８２Ｙ、
（ｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ａ、Ｑ３８６Ｃ、Ｑ３８６Ｄ、Ｑ３８６Ｅ、Ｑ３８６Ｇ、Ｑ３８６Ｈ、Ｑ３８６Ｆ、Ｑ３８６Ｉ、Ｑ３８６Ｋ、Ｑ３８６Ｌ、Ｑ３８６Ｎ、Ｑ３８６Ｐ、Ｑ３８６Ｒ、Ｑ３８６Ｓ、Ｑ３８６Ｔ、Ｑ３８６Ｖ、Ｑ３８６Ｗ、またはＱ３８６Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｄ、Ｎ４３４Ｅ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｖ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｑ、Ｎ４３４Ｔ、またはＮ４３４Ｙ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｋ、Ｙ４３６Ｌ、Ｙ４３６Ｒ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｗ、Ｙ４３６Ａ、Ｙ４３６Ｅ、Ｙ４３６Ｆ、Ｙ４３６Ｈ、Ｙ４３６Ｍ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｅ、Ｑ４３８Ｉ、Ｑ４３８Ｋ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、Ｑ４３８Ｖ、Ｑ４３８Ｗ、Ｑ４３８Ｙ、Ｑ４３８Ａ、Ｑ４３８Ｇ、Ｑ４３８Ｈ、Ｑ４３８Ｎ、Ｑ４３８Ｑ、またはＱ４３８Ｒ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ａ、Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｌ、Ｋ４３９Ｐ、Ｋ４３９Ｒ、Ｋ４３９Ｔ、Ｋ４３９Ｙ、Ｋ４３９Ｑ、またはＫ４３９Ｗ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ａ、Ｓ４４０Ｃ、Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｇ、Ｓ４４０Ｈ、Ｓ４４０Ｆ、Ｓ４４０Ｉ、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｌ、Ｓ４４０Ｍ、Ｓ４４０Ｎ、Ｓ４４０Ｐ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｒ、Ｓ４４０Ｔ、Ｓ４４０Ｖ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００７２】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ｇ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｌ、Ｉ２５３Ｎ、Ｉ２５３Ｖ、またはＩ２５３Ｑ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｈ３１０Ｐ、Ｈ３１０Ｗ、またはＨ３１０Ｑ、
（ｖ）Ｑ３１１Ｅ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｒ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖｉ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、
（ｖｉｉｉ）Ｔ３５９Ｒ、
（ｉｘ）Ｅ３８２Ｋ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｅ３８２Ｄ、Ｅ３８２Ｑ、またはＥ３８２Ｓ、
（ｘ）Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｅ、またはＧ３８５Ｋ、
（ｘｉ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉｉ）Ｈ４３３Ｒ、
（ｘｉｖ）Ｎ４３４Ｋ、Ｎ４３４Ｒ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｈ、またはＮ４３４Ｑ、
（ｘｖ）Ｙ４３６Ｉ、Ｙ４３６Ｓ、Ｙ４３６Ｔ、Ｙ４３６Ｖ、Ｙ４３６Ｎ、またはＹ４３６Ｑ、
（ｘｖｉ）Ｑ４３８Ｃ、Ｑ４３８Ｌ、Ｑ４３８Ｓ、Ｑ４３８Ｔ、またはＱ４３８Ｎ、
（ｘｖｉｉ）Ｋ４３９Ｄ、Ｋ４３９Ｅ、Ｋ４３９Ｈ、Ｋ４３９Ｒ、またはＫ４３９Ｑ、
（ｘｖｉｉｉ）Ｓ４４０Ｄ、Ｓ４４０Ｅ、Ｓ４４０Ｑ、Ｓ４４０Ｗ、またはＳ４４０Ｙ、及び
（ｘｉｘ）Ｋ４４７Ｄ、Ｋ４４７Ｅ、Ｋ４４７Ｎ、Ｋ４４７Ｑ、またはＫ４４７の欠失、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００７３】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、
（ｉ）Ｐ２４７Ｄ、Ｐ２４７Ｆ、Ｐ２４７Ｇ、Ｐ２４７Ｋ、Ｐ２４７Ｒ、またはＰ２４７Ｓ、
（ｉｉ）Ｉ２５３Ｖ、
（ｉｉｉ）Ｓ２５４Ｇ、Ｓ２５４Ｉ、またはＳ２５４Ｌ、
（ｉｖ）Ｑ３１１Ｉ、Ｑ３１１Ｋ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｐ、またはＱ３１１Ｗ、
（ｖ）Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、またはＥ３４５Ｙ、
（ｖｉ）Ｄ／Ｅ３５６Ｉ、Ｄ／Ｅ３５６Ｌ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｄ／Ｅ３５６Ｔ、またはＤ／Ｅ３５６Ｖ、
（ｖｉｉ）Ｔ３５９Ｎ、
（ｖｉｉｉ）Ｅ３８２ＬまたはＥ３８２Ｖ、
（ｉｘ）Ｇ３８５Ａ、Ｇ３８５Ｄ、Ｇ３８５Ｈ、Ｇ３８５Ｉ、Ｇ３８５Ｌ、Ｇ３８５Ｎ、Ｇ３８５Ｐ、Ｇ３８５Ｑ、Ｇ３８５Ｒ、Ｇ３８５Ｓ、Ｇ３８５Ｔ、Ｇ３８５Ｖ、Ｇ３８５Ｅ、Ｇ３８５Ｋ、Ｇ３８５Ｗ、またはＧ３８５Ｙ、
（ｘ）Ｑ３８６Ｋ、
（ｘｉ）Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、またはＥ４３０Ｙ、
（ｘｉｉ）Ｎ４３４Ｗ、
（ｘｉｉｉ）Ｙ４３６Ｉ、及び
（ｘｉｖ）Ｓ４４０Ｄ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸修飾を含む。
【００７４】
ある特定の実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含む。例示的な実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙからなる群から選択される単一のアミノ酸置換を含む。例示的な実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ、からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含み、この置換は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域にある。例示的な実施形態では、修飾Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙを含む。
【００７５】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、単一特異性抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体からの抗原結合領域を含む。
【００７６】
ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、ＯＸ４０に結合する。例示的な実施形態では、抗原結合領域は、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。例示的な実施形態では、抗原結合領域は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む、ＶＬドメインを含む。
【００７７】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、エフェクター機能を減弱させるための修飾をさらに含む。例示的な実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２９７、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２６７及び３２８、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸残基（ＥＵ番号付け）におけるアミノ酸置換を含む。
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸置換（ＥＵ番号付け）を含む。
【００７８】
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させるための修飾は、Ｆｃ領域のグリコシル化パターンの修飾をもたらさない。
【００７９】
ある特定の実施形態では、六量体は、六量体が結合した細胞表面受容体によって媒介されるシグナル伝達を強化する。
【００８０】
別の態様では、本願は、（ａ）複数の六量体の抗原結合複合体を準備することであって、各複合体が、少なくとも１つの抗原結合領域と、六量体形成を強化する修飾Ｆｃ領域とを含む抗原結合ポリペプチドを各々が含む、６つのサブユニットを含む、準備することと、（ｂ）抗原結合複合体を細胞表面受容体に対してスクリーニングすることと、（ｃ）細胞表面受容体に対してアゴニスト活性を有する抗原結合複合体を選択することと、を含む、細胞表面受容体に対するアゴニスト活性を有する抗原結合ポリペプチドの特定方法を提供する。
【００８１】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、エフェクター機能を減弱させる修飾をさらに含む。
【００８２】
別の態様では、本願は、本明細書に記載の複合体または抗原結合ポリペプチドのいずれかをコードする核酸を提供する。
【００８３】
別の態様では、本願は、本明細書に記載の複合体または抗原結合ポリペプチドのいずれかをコードする核酸を含む、ベクターを提供する。ある特定の実施形態では、ベクターは、発現ベクターである。
【００８４】
別の態様では、本願は、本明細書に記載の複合体または抗原結合ポリペプチドのいずれかをコードする核酸を含むベクターを含む、宿主細胞を提供する。ある特定の実施形態では、宿主細胞は、原核性または真核性である。
【００８５】
別の態様では、本願は、本明細書に記載の複合体または抗原結合ポリペプチドのいずれかをコードする核酸を含むベクターを含む宿主細胞を、複合体または抗原結合ポリペプチドをコードする核酸の発現に好適な条件下で培養することを含む、アゴニスト活性を有する抗原結合ポリペプチドの作製方法を提供する。ある特定の実施形態では、本方法は、複合体、六量体、またはポリペプチドを宿主細胞から回収することをさらに含んでもよい。
【００８６】
別の態様では、本願は、本明細書に記載の複合体または抗原結合ポリペプチドのいずれかと、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物を提供する。
【００８７】
本明細書に記載の様々な実施形態の特性のうちの１つ、いくつか、または全てを組み合わせて、本発明の他の実施形態を形成することができることを理解されたい。本発明のこれら及び他の態様は、当業者に明らかとなろう。本発明のこれら及び他の実施形態は、以下の発明を実施するための形態によってさらに説明される。
【図面の簡単な説明】
【００８８】
【図１】ｈｕ１Ａ７及びｈｕ４Ｄ５のＲＧＹ変異形バージョンが、天然ＩｇＧ１標準対照と比べて、六量体及び単量体種を密集させていることを実証する、分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）クロマトグラムを示す。
【図２】優勢的に六量体（８６５ｋＤａ）の種の存在を確認する、ＲＧＹ  ｈｕ４Ｄ５抗体のサイズ排除クロマトグラフィー−多角度光散乱検出（ＳＥＣ−ＭＡＬＳ）データを示す。単量体（１５７ｋＤａ）抗体のより小さい集団もまた観察される。
【図３−１】溶液中の六量体形成を促進するのに３つ全てのＲＧＹ置換が必要であることを実証する、分析ＳＥＣクロマトグラムを示す。全ての抗体は、ｈｕ４Ｄ５  ＩｇＧ１の関連において構築、産生、及び試験された。ＷＴ＝天然ＩｇＧ１、ＲＧＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｒ＝Ｅ３４５Ｒ、Ｇ＝Ｅ４３０Ｇ、Ｙ＝Ｓ４４０Ｙ、ＲＧ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ、ＲＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｙ、及びＧＹ＝Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ。
【図３−２】溶液中の六量体形成を促進するのに３つ全てのＲＧＹ置換が必要であることを実証する、分析ＳＥＣクロマトグラムを示す。全ての抗体は、ｈｕ４Ｄ５  ＩｇＧ１の関連において構築、産生、及び試験された。ＷＴ＝天然ＩｇＧ１、ＲＧＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｒ＝Ｅ３４５Ｒ、Ｇ＝Ｅ４３０Ｇ、Ｙ＝Ｓ４４０Ｙ、ＲＧ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ、ＲＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｙ、及びＧＹ＝Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ。
【図４】六量体促進置換ＲＧＹと、エフェクター減弱置換Ｎ２９７ＧまたはＬＡＬＡＰＧエフェクター減弱との組み合わせを含有する、ｈｕ４Ｄ５抗体についての分析ＳＥＣクロマトグラムを示す。データは、エフェクター減弱のためのＮ２９７Ｇ使用が六量体化を可能にしない一方で、ＬＡＬＡＰＧはそれを可能にすることを実証する。
【図５】六量体促進置換ＲＧＹと、エフェクター減弱置換Ｎ２９７ＧまたはＬＡＬＡＰＧエフェクター減弱との組み合わせを含有する、ｈｕ１Ａ７抗体についての分析ＳＥＣクロマトグラムを示す。データは、エフェクター減弱のためのＮ２９７Ｇ使用が六量体化を可能にしない一方で、ＬＡＬＡＰＧはそれを可能にすることを実証する。
【図６】抗ＣＤ３抗体及びＣＤ８０＋ＦｃγＲＩＩａ＋Ｌ細胞の存在下での、抗ＯＸ４０または対照抗体によるＣＤ４＋メモリーＴ細胞増殖の共刺激を示す。Ｔ細胞増殖は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によって監視した。抗体は、以下の通りである：１Ａ７＝ヒト化１Ａ７天然ＩｇＧ１、１Ａ７  ＲＧＹ＝ヒト化１Ａ７  ＲＧＹ  ＩｇＧ１、４Ｄ５＝ヒト化４Ｄ５天然ＩｇＧ１、４Ｄ５  ＲＧＹ＝ヒト化４Ｄ５  ＲＧＹ  ＩｇＧ１。
【図７】ＩＬ−１３及びＩＬ−５の放出によって測定した、抗ＯＸ４０または対照抗体によるＣＤ４＋メモリーＴ細胞活性化の共刺激を示す。抗体は、図６に記載される通りである。
【図８】抗ＣＤ３抗体ならびにＣＤ８０＋及びＦｃγＲＩＩａ＋Ｌ細胞の存在下での、抗ＯＸ４０または対照抗体によるＣＤ４＋メモリーＴ細胞の共刺激を示す。Ｔ細胞増殖及び活性化は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（上部グラフ）及びＩＬ−１３の放出（下部グラフ）によって監視した。
【図９】混合ＲＧＹ変異形抗体が互いに交流して、多重特異性六量体複合体を形成することを実証する、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）データを示す。示される抗ＯＸ４０（１Ａ７）及び抗Ｈｅｒ２（４Ｄ５）抗体は、混合され、ＯＸ４０抗原を担持するプレート上に捕捉された。洗浄後、抗体複合体は、ビオチン化Ｈｅｒ２及びＨＲＰ−ストレプトアビジンで検出された。
【図１０】ＲＧＹ変異形抗体（中空の記号及び点線）が、天然ヒトＩｇＧ１抗体（中実の記号及び実線）と比べて迅速に排除されることを実証する、同系ＥＭＴ６マウスがんモデルからの薬物動態（ＰＫ）データを示す。ＰＫ  ＥＬＩＳＡは、血清から試験物質を捕捉するのにヒツジ抗ヒトＩｇＧ抗体を、及び検出するのにヤギ抗ヒトＩｇＧ−ＨＲＰを使用した。７及び１４日目時点のいくつかの試験物質の不在は、データが検出限界未満であったことを示す。
【図１１】ＲＧＹ変異形抗体が、それらの迅速な排除にもかかわらず、それらの親抗体と比べて抗腫瘍活性を強化し、その上、Ｆｃ受容体媒介性架橋結合の不在下でＯＸ４０受容体へのアゴニスト活性を促進することを実証する、同系ＥＭＴ６マウスがんモデルからの腫瘍体積データを示す。
【図１２−１】溶液中の六量体形成を促進するのに３つ全てのＲＧＹ置換が必要であることを実証する、分析ＳＥＣクロマトグラムを示す。全ての抗体は、ｈｕ１Ａ７  ＩｇＧ１の関連において構築、産生、及び試験された。ＷＴ＝天然ＩｇＧ１、ＲＧＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｒ＝Ｅ３４５Ｒ、Ｇ＝Ｅ４３０Ｇ、Ｙ＝Ｓ４４０Ｙ、ＲＧ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ、ＲＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｙ、及びＧＹ＝Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ。
【図１２−２】溶液中の六量体形成を促進するのに３つ全てのＲＧＹ置換が必要であることを実証する、分析ＳＥＣクロマトグラムを示す。全ての抗体は、ｈｕ１Ａ７  ＩｇＧ１の関連において構築、産生、及び試験された。ＷＴ＝天然ＩｇＧ１、ＲＧＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｒ＝Ｅ３４５Ｒ、Ｇ＝Ｅ４３０Ｇ、Ｙ＝Ｓ４４０Ｙ、ＲＧ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ、ＲＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｙ、及びＧＹ＝Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ。
【図１２−３】溶液中の六量体形成を促進するのに３つ全てのＲＧＹ置換が必要であることを実証する、分析ＳＥＣクロマトグラムを示す。全ての抗体は、ｈｕ１Ａ７  ＩｇＧ１の関連において構築、産生、及び試験された。ＷＴ＝天然ＩｇＧ１、ＲＧＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｒ＝Ｅ３４５Ｒ、Ｇ＝Ｅ４３０Ｇ、Ｙ＝Ｓ４４０Ｙ、ＲＧ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ、ＲＹ＝Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｙ、及びＧＹ＝Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ。
【図１３】抗ＣＤ３抗体及びＣＤ８０＋ＦｃγＲＩＩａ＋Ｌ細胞の存在下での、抗ＯＸ４０または対照抗体によるＣＤ４＋メモリーＴ細胞増殖の共刺激を示す。Ｔ細胞増殖は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によって監視した。上グラフは、ｈｕ１Ａ７抗体についてのデータを示し、一方で、下グラフは、ｈｕ３Ｃ８抗体についてのデータを示す。両グラフにおけるｈＩｇＧ１（中実の菱形）は、ｈｕ１Ａ７＿ｈＩｇＧ１抗体である。両グラフにおける陰性対照抗体（Ｎｅｇ  Ｃｎｔｒｌ  Ａｂ）は、抗Ｈｅｒ２  ４Ｄ５  ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ）である。
【図１４】ＲＧ及びＲＹ変異形抗体が、それらの親抗体と比べて抗腫瘍活性を強化し、かつＦｃ受容体媒介性架橋結合の不在下でＯＸ４０受容体へのアゴニスト活性を促進することを実証する、同系ＥＭＴ６マウスがんモデルからの腫瘍体積データを示す。
【図１５】単独で及び１：１混合物として試験したｈ１Ａ７及びｈ３Ｃ８のＲＹ  ＬＡＬＡＰＧ変異形のＴ細胞増殖（上グラフ）及びサイトカイン放出（下グラフ）データを示す。ｘ軸上の抗体濃度は、総計の抗体を表し、故に、混合物（ｈ１Ａ７  ＲＹ  ＬＡＬＡＰＧ＋ｈ３Ｃ８  ＲＹ  ＬＡＬＡＰＧ）に関して、成分抗体の各々は、それが単独で試験された点と比べて、その濃度の５０％である。細胞＋ａＣＤ３は、細胞のみプラス抗ＣＤ３、すなわち、ｈ１Ａ７またはｈ３Ｃ８抗体なし（陰性対照）を示す。
【図１６】ＲＧＹ及びＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ変異形抗ＤＲ５抗体を非六量体のｈＩｇＧ１対照に対して比較する細胞生存能データを示す。
【図１７】ＨＥＫ２９３細胞に対してアポトーシスを促進する変異形抗ＤＲ５抗体の能力を示す。活性データは、抗体重鎖及び軽鎖ＤＮＡのトランスフェクション後２４時間でのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏアッセイにおける発光を表す。
【図１８】非トランスフェクト細胞と比べた変異形抗ＤＲ５抗体の細胞生存倍率（図１７から算出）と、同じ単一、二重、及び三重ＲＧＹ変異形についてのｈ１Ａ７抗ＯＸ４０抗体のＴ細胞活性化倍率との間の相関を示す。
【図１９】抗Ｔｉｅ２抗体についての分析ＳＥＣクロマトグラム。
【図２０】ＲＧＹ抗Ｔｉｅ２のアゴニスト活性が天然リガンドＡｎｇ１を超えることを示す。
【図２１】ＲＧＹ抗Ｔｉｅ２が二価抗Ｔｉｅ２抗体と比べて強力なアゴニスト活性を示すことを実証する。商用の均一性時間分解蛍光測定（ＨＴＲＦ）アッセイ（Ｃｉｓｂｉｏ）を用いたラット大動脈内皮細胞（ＲＡＥＣ）におけるＡＫＴのリン酸化（ｐＡＫＴ）活性測定。
【図２２Ａ】図２２Ａ及び図２２Ｂは、Ｆｃ操作された抗ＤＲ５抗体の２９３細胞に対する抗増殖活性を示す。Ｆｃ操作された抗ＤＲ５抗体の２９３細胞に対する抗増殖活性を示す。データは、トランスフェクション後４８時間時点（図２２Ａ）または２２時間時点（図２２Ｂ）の細胞生存能を表す。黒色バーは、非トランスフェクト天然ＩｇＧ１、ＩｇＧ１  ＬＡＬＡＰＧ、ＲＧＹ、及びＲＧＹ  ＬＡＬＡＰＧ変異形についてのデータを強調する。２２Ｂにおける非トランスフェクト細胞についてのバーは、０時間時点の細胞生存能を表す。
【図２２Ｂ】図２２Ａ及び図２２Ｂは、Ｆｃ操作された抗ＤＲ５抗体の２９３細胞に対する抗増殖活性を示す。Ｆｃ操作された抗ＤＲ５抗体の２９３細胞に対する抗増殖活性を示す。データは、トランスフェクション後４８時間時点（図２２Ａ）または２２時間時点（図２２Ｂ）の細胞生存能を表す。黒色バーは、非トランスフェクト天然ＩｇＧ１、ＩｇＧ１  ＬＡＬＡＰＧ、ＲＧＹ、及びＲＧＹ  ＬＡＬＡＰＧ変異形についてのデータを強調する。２２Ｂにおける非トランスフェクト細胞についてのバーは、０時間時点の細胞生存能を表す。
【図２３】ＬＡＬＡＰＧ及びＬＡＬＡＰＧ／Ｋ３２２Ａ変異形がＲＧＹ六量体抗体のヒトＣ１ｑへの結合を切断することを実証するＥＬＩＳＡデータを示す。
【図２４Ａ】Ｆｃ受容体遮断抗体の存在下でのＦｃ変異形抗ＯＸ４０抗体によるＴ細胞活性化を示す。
【図２４Ｂ】Ｆｃ受容体遮断抗体の不在下でのＦｃ変異形抗ＯＸ４０抗体によるＴ細胞活性化を示す。
【図２５Ａ】ＦｃγＲＩＩａ及びＢ７−１の両方を発現するＬ細胞の存在下での変異形ｈｕ１Ａ７抗ＯＸ４０抗体によるＴ細胞共活性化を示す。
【図２５Ｂ】ＦｃγＲＩＩａのみを発現するＬ細胞の存在下での変異形ｈｕ１Ａ７抗ＯＸ４０抗体によるＴ細胞共活性化を示す。
【図２６Ａ】ＦｃγＲＩＩａ及びＢ７−１の両方を発現するＬ細胞の存在下での変異形ｈｕ３Ｃ８抗ＯＸ４０抗体によるＴ細胞共活性化を示す。
【図２６Ｂ】ＦｃγＲＩＩａのみを発現するＬ細胞の存在下での変異形ｈｕ３Ｃ８抗ＯＸ４０抗体によるＴ細胞共活性化を示す。
【図２７】ＦｃγＲＩＩａのみを発現するＬ細胞の存在下での変異形ｈｕ１Ａ７抗ＯＸ４０抗体によるＴ細胞共活性化を示す。抗体と共に実験された全ての群は、抗ＣＤ３抗体を使用したＣＤ３刺激を含んだ。
【発明を実施するための形態】
【００８９】
Ｉ．定義
「ポリペプチド」または「タンパク質」は、本明細書において、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指すように交換可能に使用される。ポリマーは、直鎖状であっても分岐状であってもよく、修飾アミノ酸を含んでもよく、非アミノ酸によって中断されていてもよい。これらの用語は、自然に、または介入、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または任意の他の操作もしくは修飾、例えば、標識成分もしくは毒素とのコンジュゲーションにより修飾された、アミノ酸ポリマーも包含する。例えば、アミノ酸（例えば、非天然アミノ酸等を含む）の１つ以上の類似体を含有するポリペプチド、及び当該技術分野で既知の他の修飾もこの定義に含まれる。本明細書で使用される「ポリペプチド」及び「タンパク質」という用語は、抗体を具体的に包含する。
【００９０】
本明細書における「抗体」という用語は、本明細書で最も広義に使用され、それらが所望の抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片を含むが、これらに限定されない、種々の抗体構造を包含する。「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語は、本明細書で抗体と交換可能に使用される。
【００９１】
抗体は、様々な構造を有する天然に存在する免疫グロブリン分子であり、それらの構造は全て免疫グロブリン折り畳みに基づく。例えば、ＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合して機能的抗体を形成する２つの「重」鎖及び２つの「軽」鎖を有する。各重鎖及び軽鎖はそれ自体、「定常」（Ｃ）領域及び「可変」（Ｖ）領域を含む。Ｖ領域が抗体の抗原結合特異性を決定する一方で、Ｃ領域は、構造的支持を提供し、免疫エフェクターとの非抗原特異的相互作用において機能する。抗体または抗体の抗原結合断片の抗原結合特異性は、特定の抗原に特異的に結合する抗体の能力である。
【００９２】
「可変」という用語は、可変ドメインのある特定の部分の配列が抗体間で大きく異なり、各特定の抗体のその特定の抗原に対する結合及び特異性において使用されるという事実を指す。しかしながら、可変性は、抗体の可変ドメイン全体にわたって均等に分布していない。これは、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインのいずれにおいても超可変領域と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然重鎖及び軽鎖の可変ドメインは各々、主にβシート構成を採用し、３つの超可変領域によって連結され、βシート構造に連結し、ある場合にはその一部を形成するループを形成する、４つのＦＲを含む。各鎖における超可変領域は、ＦＲによって、他方の鎖の超可変領域と近接して保持されており、抗体の抗原結合部位の形成に寄与している（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１）を参照されたい）。定常ドメインは、抗体の抗原への結合に直接関与していないが、抗体の抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）への関与等の様々なエフェクター機能を呈する。
【００９３】
本明細書で使用される「超可変領域」または「ＨＶＲ」という用語は、配列が高度に変化する（「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」）、かつ／または構造的に規定されたループ（「超可変ループ」）を形成する、かつ／または抗原接触残基（「抗原接触面」）を含有する、抗体可変ドメインの領域の各々を指す。一般に、抗体は、６つのＨＶＲを含み、このうち３つがＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）にあり、３つがＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）にある。本明細書における例示的なＨＶＲには、以下のものが含まれる：
（ａ）アミノ酸残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、９１〜９６（Ｌ３）、２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、及び９６〜１０１（Ｈ３）で生じる超可変ループ（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））、
（ｂ）アミノ酸残基２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）、８９〜９７（Ｌ３）、３１〜３５ｂ（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）、及び９５〜１０２（Ｈ３）で生じるＣＤＲ（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））、
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ〜３６（Ｌ１）、４６〜５５（Ｌ２）、８９〜９６（Ｌ３）、３０〜３５ｂ（Ｈ１）、４７〜５８（Ｈ２）、及び９３〜１０１（Ｈ３）で生じる抗原接触部（ＭａｃＣａｌｌｕｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２−７４５（１９９６））、ならびに
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６〜５６（Ｌ２）、４７〜５６（Ｌ２）、４８〜５６（Ｌ２）、４９〜５６（Ｌ２）、２６〜３５（Ｈ１）、２６〜３５ｂ（Ｈ１）、４９〜６５（Ｈ２）、９３〜１０２（Ｈ３）、及び９４〜１０２（Ｈ３）を含む、（ａ）、（ｂ）、及び／または（ｃ）の組み合わせ。
【００９４】
「フレームワーク」または「ＦＲ」は、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般に、４つのＦＲドメイン、すなわち、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４からなる。したがって、ＨＶＲ及びＦＲ配列は一般に、ＶＨ（またはＶＬ）において以下の配列、すなわち、ＦＲ１−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４で現れる。
【００９５】
「抗体断片」は、好ましくはその抗原結合領域を含む、インタクトな抗体の一部分を含む。抗体断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片；ダイアボディ；タンデムダイアボディ（ｔａＤｂ）、直鎖状抗体（例えば、米国特許第５，６４１，８７０号、実施例２、Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．８（１０）：８（１０）：１０５７−１０６２（１９９５））；一本アーム抗体、単一可変ドメイン抗体、ミニボディ、一本鎖抗体分子；抗体断片から形成された多重特異性抗体（例えば、Ｄｂ−Ｆｃ、ｔａＤｂ−Ｆｃ、ｔａＤｂ−ＣＨ３，（ｓｃＦＶ）４−Ｆｃ、ｄｉ−ｓｃＦｖ、ｂｉ−ｓｃＦｖ、またはタンデム（ジ、トリ）−ｓｃＦｖを含むが、これらに限定されない）；及び二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）が挙げられる。
【００９６】
抗体のパパイン消化により、各々が単一の抗原結合部位を有する、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片、及び、容易に結晶化する能力を反映する名称である、残りの「Ｆｃ」断片がもたらされる。ペプシン処理により、２つの抗原結合部位を有しながら依然として抗原に架橋することができる、Ｆ（ａｂ’）２断片が得られる。
【００９７】
「Ｆｖ」は、完全な抗原認識・抗原結合部位を含む最小抗体断片である。この領域は、緊密な非共有結合性会合にある１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインの二量体からなる。各可変ドメインの３つの超可変領域が相互作用してＶＨ−ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を規定するのは、この構成においてである。集合的に、６つの超可変領域は、抗体に抗原結合特異性を付与する。しかしながら、単一可変ドメイン（または抗原に特異的な超可変領域を３つのみ含むＦｖの半分）でさえも、抗原を認識してそれに結合する能力を有するが、全結合部位よりも親和性が低い。
【００９８】
Ｆａｂ断片は、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）も含む。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域由来の１つ以上のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に数個の残基が付加されているという点でＦａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が少なくとも１つの遊離チオール基を有するＦａｂ’に対する、本明細書における表記である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元来、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として産生されたものである。抗体断片の他の化学的結合もまた知られている。
【００９９】
任意の脊椎動物種由来の抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいてカッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２つの明確に異なる種類のうちの１つに割り当てられ得る。
【０１００】
抗体は、それらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、異なるクラスに割り当てられ得る。インタクトな抗体には５つの主要なクラス、すなわち、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらのうちのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、及びＩｇＡ２にさらに分類され得る。抗体の異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造及び三次元構成は周知である。
【０１０１】
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨ及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖内に存在する。いくつかの実施形態では、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、これにより、ｓｃＦｖが抗原結合に望ましい構造を形成することが可能になる。ｓｃＦｖの概説については、Ｐｌｉｉｃｋｔｈｕｎ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）を参照されたい。
【０１０２】
「ダイアボディ」という用語は、２つの抗原結合部位を有する小さな抗体断片を指し、これらの断片は、同じポリペプチド鎖内の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続した重鎖可変ドメイン（ＶＨ）（ＶＨ−ＶＬ）を含む。同じ鎖上のこれらの２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、これらのドメインは、別の鎖の相補的ドメインと対合させられ、２つの抗原結合部位を作り出す。ダイアボディは、例えば、ＥＰ４０４，０９７、ＷＯ９３／１１１６１、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｅｔ（ＵＳＡ）９０：６４４４−６４４８（１９９３）により完全に記載される。
【０１０３】
「多重特異性抗体」という用語は、最も広義に使用され、ポリエピトープ特異性を有する抗体を具体的に包含する。かかる多重特異性抗体としては、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体（ＶＨＶＬ単位がポリエピトープ特異性を有する）、２つ以上のＶＬドメイン及びＶＨドメインを有する抗体（各ＶＨＶＬ単位が異なるエピトープに結合する）、２つ以上の単一可変ドメインを有する抗体（各単一可変ドメインが異なるエピトープに結合する）、完全長抗体、抗体断片、例えば、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｄｓＦｖ、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、二重特異性ダイアボディ、トリアボディ、三重機能性抗体、共有結合している抗体断片または共有結合していない抗体断片が挙げられるが、これらに限定されない。「ポリエピトープ特異性」とは、同じまたは異なる標的（複数可）上の２つ以上の異なるエピトープに特異的に結合する能力を指す。「単一特異性」とは、１つのエピトープにのみ結合する能力を指す。一実施形態によれば、多重特異性抗体は、５μＭ〜０．００１ｐＭ、３μＭ〜０．００１ｐＭ、１μＭ〜０．００１ｐＭ、０．５μＭ〜０．００１ｐＭ、または０．１μＭ〜０．００１ｐＭの親和性で各エピトープに結合するＩｇＧ抗体である。
【０１０４】
「単一ドメイン抗体」（ｓｄＡｂ）または「単一可変ドメイン（ＳＶＤ）抗体」という表現は、一般に、単一可変ドメイン（ＶＨまたはＶＬ）が抗原結合を付与し得る抗体を指す。言い換えれば、単一可変ドメインは、標的抗原を認識するために別の可変ドメインと相互作用する必要はない。単一ドメイン抗体の例としては、ラクダ科動物（ラマ及びラクダ）ならびに軟骨魚類（例えば、テンジクザメ）由来の抗体、ならびにヒト及びマウス抗体由来の組換え方法から得られる抗体が挙げられる（Ｎａｔｕｒｅ（１９８９）３４１：５４４−５４６、Ｄｅｖ  Ｃｏｍｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ（２００６）３０：４３−５６、Ｔｒｅｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｃｉ（２００１）２６：２３０−２３５、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ（２００３）：２１：４８４−４９０、ＷＯ２００５／０３５５７２、ＷＯ０３／０３５６９４、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ（１９９４）３３９：２８５−２９０、ＷＯ００／２９００４、ＷＯ０２／０５１８７０）。
【０１０５】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、その集団に含まれる個々の抗体は、同一であり、かつ／または同じエピトープに結合するが、モノクローナル抗体の産生中に生じ得る想定される変異形は除外され、かかる変異形は、一般に、少量で存在する。異なる決定基（エピトープ）に対して指向される異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して指向される。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、他の免疫グロブリンが混入していないという点で有利である。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体の集団から得られるという抗体の特徴を示すものであり、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものとして解釈されないものとする。例えば、本明細書で提供される方法に従って使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５（１９７５）によって最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製され得るか、または組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）によって作製され得る。モノクローナル抗体はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８（１９９１）ａｎｄ  Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９１）に記載の技法を用いてファージ抗体ライブラリから単離され得る。
【０１０６】
本明細書におけるモノクローナル抗体には、具体的には、重鎖及び／または軽鎖の一部分が、特定の種に由来するかまたは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または同種であるが、鎖（複数可）の残りが、別の種に由来するかまたは別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または同種である、「キメラ」抗体（免疫グロブリン）、ならびにかかる抗体の断片が含まれるが、これは、それらが所望される生物活性を呈する限りにおいてである（米国特許第４，８１６，５６７号、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１−６８５５（１９８４））。本明細書における目的とするキメラ抗体は、非ヒト霊長類（例えば、ヒヒ、アカゲザル、またはカニクイザル等の旧世界ザル）由来の可変ドメイン抗原結合配列、及びヒト定常領域配列を含む「霊長類化」抗体を含む（米国特許第５，６９３，７８０号）。
【０１０７】
本明細書における目的のために、「アクセプターヒトフレームワーク」は、下に定義される、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに由来する、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワークまたは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同じアミノ酸配列を含んでもよく、またはそれは、アミノ酸配列変化を含有し得る。いくつかの実施形態では、アミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。いくつかの実施形態では、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、配列において、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と同一である。
【０１０８】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列の下位群から行われる。一般に、配列の下位群は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ９１−３２４２，Ｂｅｔｈｅｓｄａ  ＭＤ（１９９１），ｖｏｌｓ．１−３にあるような下位群である。一実施形態では、ＶＬについて、下位群は、上記のＫａｂａｔらにあるような下位群カッパＩである。一実施形態では、ＶＨについて、下位群は、上記のＫａｂａｔらにあるような下位群ＩＩＩである。
【０１０９】
「ヒト化」型の非ヒト（例えば、マウス）抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を含有するキメラ抗体である。ほとんどの場合、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域由来の残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類等の非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域由来の残基に置き換えられる、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの事例では、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基に置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含み得る。これらの修飾は、抗体性能をさらに改良するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、上述のＦＲ置換（複数可）を除いて、超可変ループの全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに対応し、かつＦＲの全てまたは実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のＦＲである少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含む。ヒト化抗体は、任意選択的に、免疫グロブリンの定常領域、典型的には、ヒト免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部分を含む。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（１９９２）を参照されたい。
【０１１０】
「ヒト抗体」は、ヒトもしくはヒト細胞によって産生された、またはヒト抗体レパートリーを利用する非ヒト源に由来する、抗体のアミノ酸配列、または他のヒト抗体コード配列に対応する、アミノ酸配列を保有するものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的に除外する。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、抗体の「エフェクター機能」とは、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列変異形Ｆｃ領域）に起因する生物活性を指し、抗体アイソタイプにより異なる。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合及び抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体の下方制御が挙げられる。
【０１１２】
「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性」または「ＡＤＣＣ」とは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）を発現する非特異的細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、及びマクロファージ）が標的細胞上の結合した抗体を認識し、その後、標的細胞の溶解を引き起こす、細胞媒介性反応を指す。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞、ＮＫ細胞は、ＦｃｙＲＩＩＩのみを発現するが、一方で単球は、ＦｃｙＲＩ、ＦｃｙＲＩＩ、及びＦｃｙＲＩＩＩを発現する。造血細胞でのＦｃＲ発現については、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９：４５７−９２（１９９１）の４６４貢の表３に要約されている。目的とする分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、米国特許第５，５００，３６２号または同第５，８２１，３３７号に記載のアッセイ等のインビトロＡＤＣＣアッセイが行われ得る。かかるアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。代替的に、または追加的に、目的とする分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｅｔ（ＵＳＡ）９５：６５２−６５６（１９９８）に開示される動物モデル等の動物モデルで評価され得る。
【０１１３】
「ヒトエフェクター細胞」は、１つ以上のＦｃＲを発現し、かつエフェクター機能を実行する、白血球である。いくつかの実施形態では、これらの細胞は、少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能を実行する。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞傷害性Ｔ細胞、及び好中球が挙げられ、このうちＰＢＭＣ及びＮＫ細胞が好ましい。
【０１１４】
「補体依存性細胞傷害性」または「ＣＤＣ」とは、補体の存在下で標的を溶解させる分子の能力を指す。補体活性化経路は、補体系の第１の成分（Ｃ１ｑ）の、同種抗原と複合した分子（例えば、ポリペプチド（例えば、抗体）への結合によって開始される。補体活性化を評価するために、例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：１６３（１９９６）に記載されるような、ＣＤＣアッセイを行ってもよい。
【０１１５】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」という用語は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を説明するために使用される。いくつかの実施形態では、ＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。
【０１１６】
さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）に結合するものであり、これらの受容体のアレル変異形及び代替としてはスプライシング形態を含め、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含む。ＦｃγＲＩＩ受容体は、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）を含み、これらは、主にその細胞質ドメインが異なる同様のアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含有する。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含有する（Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−２３４（１９９７）を参照されたい）。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９：４５７−９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４：２５−３４（１９９４）、及びｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０−４１（１９９５）に概説される。今後特定されるＦｃＲを含めて、他のＦｃＲが、本明細書において「ＦｃＲ」という用語に包含される。この用語は、母体ＩｇＧｓの胎児への移行に関与する新生児受容体ＦｃＲｎも含む（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））。
【０１１７】
本明細書で使用される「Ｆｃ領域」は、一般に、免疫グロブリン重鎖のＣ末端ポリペプチド配列を含む二量体の複合体を指し、Ｃ末端ポリペプチド配列は、インタクトな抗体のパパイン消化によって得ることができるものである。Ｆｃ領域は、天然または変異形Ｆｃ配列を含んでもよい。免疫グロブリン重鎖のＦｃ配列の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ配列は通常、およそＣｙｓ２２６位のアミノ酸残基から、またはおよそＰｒｏ２３０位から、Ｆｃ配列のカルボキシル末端に及ぶと定義される。本明細書で別途指定がない限り、Ｆｃ領域または定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９９１に記載される、ＥＵインデックスとも呼ばれる、ＥＵ番号付け方式に従う。免疫グロブリンのＦｃ配列は一般に、２つの定常ドメイン、すなわちＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含み、任意選択的にＣＨ４ドメインを含む。本明細書において「Ｆｃポリペプチド」とは、Ｆｃ領域、例えば単量体Ｆｃを構成する、ポリペプチドのうちの１つを意味する。Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１  ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４サブタイプ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、もしくはＩｇＭ等の任意の好適な免疫グロブリンから得られてもよい。Ｆｃ領域は、ジスルフィドによって一緒に保持された両方のＨ鎖のカルボキシ末端を含む。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域における配列によって決定される。この領域はまた、ある特定の細胞型に見られるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される部分でもある。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、（一般的にはそのＮ末端に）野生型ヒンジ配列の一部または全てを含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、機能性または野生型ヒンジ配列を含まない。
【０１１８】
「修飾Ｆｃ領域」または「Ｆｃ変異形」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾、好ましくは１つ以上のアミノ酸置換（複数可）によって天然配列Ｆｃ領域のものとは異なるアミノ酸配列を含む。好ましくは、修飾Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域における約１個〜約１０個のアミノ酸置換、及び好ましくは約１個〜約５アミノ酸置換を有する。本明細書の修飾Ｆｃ領域は、好ましくは、天然配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域との少なくとも約８０％の相同性、ならびに最も好ましくは、それらとの少なくとも約９０％の相同性、より好ましくは、それらと少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％または少なくとも約９９％の相同性を保有する。
【０１１９】
本明細書で使用される「アゴニスト」、「アゴニスト性の」、「アゴニズム」または「作動する」という用語は一般に、細胞の表面上の受容体に結合し、また、受容体の天然リガンドによって惹起／模倣／刺激される反応または活性と同様または同じである反応または活性を惹起／模倣／刺激することが可能である、結合分子（例えば、抗原結合ポリペプチドまたは抗原結合複合体）を指す。例示的な実施形態では、本明細書に記載されるアゴニストは、受容体に関連するシグナル伝達経路の活性化を誘導／増強／強化／刺激することが可能である。
【０１２０】
本明細書で使用される「細胞表面受容体」という用語は、別途指定されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯類（例えば、マウス及びラット）等の哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源由来の任意の天然細胞表面受容体を指す。この用語は、「完全長」のプロセシングされていない細胞表面受容体、ならびに細胞内のプロセシングからもたらされる細胞表面受容体の任意の形態を包含する。この用語はまた、細胞表面受容体の自然発生変異形、例えば、スプライス変異形または対立遺伝子変異形を包含する。
【０１２１】
「がん」及び「がん性」という用語は、制御されていない細胞成長を典型的に特徴とする哺乳動物における生理学的状態を指すか、または説明する。この定義には、良性がん及び悪性がんが含まれる。がんの例としては、がん腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病が挙げられるがこれらに限定されない。そのようながんのより具体的な例としては、上皮性卵巣がん、卵管がん、原発性腹膜がん、扁平上皮細胞がん、肺がん（小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺の腺がん、及び肺の扁平上皮がんを含む）、腹膜のがん、肝細胞がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃまたはｓｔｏｍａｃｈ）（胃腸がんを含む）、膵がん、神経膠芽腫、子宮頸がん、卵巣がん（白金感受性及び白金抵抗性卵巣がんを含む）、肝がん、膀胱がん、ヘパトーマ、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、卵管、腹膜、子宮内膜または子宮がん、唾液腺がん、腎臓（ｋｉｄｎｅｙまたはｒｅｎａｌ）がん、肝がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝がん、及び様々な型の頭頸部がん、ならびにＢ細胞リンパ腫（低度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）を含む）；小リンパ球（ＳＬ）ＮＨＬ；中度／濾胞性ＮＨＬ；中度拡散ＮＨＬ；高度免疫芽細胞性ＮＨＬ；高度リンパ芽球性ＮＨＬ；高度小非切れ込み型細胞ＮＨＬ；巨大腫瘤病変ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；及びワルデンストレームのマクログロブリン血症）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；毛様細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；及び移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症、浮腫（脳腫瘍と関連付けられるもの等）、及びメーグス症候群と関連付けられる異常血管増殖が挙げられる。
【０１２２】
「親和性成熟」抗体は、変化を有しない親抗体と比較して、１つ以上の超可変領域（ＨＶＲ）において１つ以上の変化を有し、かかる変化が抗原に対する抗体の親和性の改善をもたらす、抗体を指す。
【０１２３】
薬剤、例えば、薬学的製剤の「有効量」とは、所望の治療的または予防的結果を実現するために必要な投薬量及び一定期間にわたる、有効な量を指す。
【０１２４】
「完全長抗体」、「インタクトな抗体」、及び「全抗体」という用語は、本明細書で、天然抗体構造と実質的に同様の構造を有する、または本明細書に定義されるＦｃ領域を含有する重鎖を有する、抗体を指すように交換可能に使用される。
【０１２５】
「宿主細胞」、「宿主細胞株」、及び「宿主細胞培養物」という用語は、交換可能に使用され、外因性核酸が導入された細胞を指し、かかる細胞の子孫を含む。宿主細胞には、初代形質転換細胞及び継代の数に関わらずそれに由来する子孫を含む、「形質転換体」及び「形質転換細胞」が含まれる。子孫は、核酸含量において親細胞と完全に同一でない場合があるが、突然変異を含有し得る。元々形質転換された細胞においてスクリーニングまたは選択されたものと同じ機能または生物活性を有する突然変異体子孫が、本明細書に含まれる。
【０１２６】
別途指定されない限り、可変ドメインにおけるＨＶＲ残基及び他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、本明細書において上記のＫａｂａｔらに従って番号付けされる。
【０１２７】
「個体」または「対象」は、哺乳動物である。哺乳動物には、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及びサル等の非ヒト霊長類）、ウサギ、及び齧歯類（例えば、マウス及びラット）が含まれるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、個体または対象は、ヒトである。
【０１２８】
「単離抗体」は、その天然環境の成分から分離された抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、例えば、電気泳動（例えばＳＤＳ−ＰＡＧＥ、等電点電気泳動法（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）またはクロマトグラフ法（例えば、イオン交換もしくは逆相ＨＰＬＣ）によって決定される、９５％超または９９％超の純度まで精製される。抗体純度の評価のための方法の概説に関しては、例えば、Ｆｌａｔｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ  ８４８：７９−８７（２００７）を参照されたい。
【０１２９】
「単離核酸」は、その天然環境の成分から分離された核酸分子を指す。単離核酸には、核酸分子を通常含有する細胞内に含有される核酸分子が含まれるが、その核酸分子は、染色体外に、またはその天然の染色体位置とは異なる染色体位置に、存在する。
【０１３０】
「天然抗体」は、様々な構造を有する、自然発生免疫グロブリン分子を指す。例えば、天然ＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合されている２つの同一の軽鎖及び２つの同一の重鎖から構成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端まで、各重鎖は、可変重ドメイン（可変重ドメイン）または重鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＨ）、続いて３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３）を有する。同様に、Ｎ末端からＣ末端まで、各軽鎖は、可変軽ドメイン（可変軽ドメイン）または軽鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＬ）、続いて定常軽（ＣＬ）ドメインを有する。抗体の軽鎖には、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２つの型うちの１つが割り当てられ得る。
【０１３１】
参照ポリペプチド配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」は、配列を整列し、配列同一性最大パーセントを実現するために必要な場合はギャップを導入した後に、いかなる保存的置換も配列同一性の部分として考慮せずに、参照ポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一である、候補配列におけるアミノ酸残基の割合として定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアライメントは、当該技術分野における技術の範囲内である種々の方式で、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア等の、公的に利用可能なコンピュータソフトウェアを使用して、達成することができる。当業者は、比較されている配列の完全長にわたる最大のアライメントを得るために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、配列をアライメントするために適切なパラメータを決定することができる。しかしながら、本明細書における目的では、アミノ酸配列同一性％値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ−２を使用して生成される。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．が作成したものであり、ソースコードは、米国著作権局（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．，２０５５９）においてユーザ文書と共に申請されており、これは、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下で登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから公的に入手可能であるか、またはソースコードから編集され得る。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、デジタルＵＮＩＸ  Ｖ４．０Ｄを含むＵＮＩＸオペレーティングシステムで使用する場合は編集すべきである。全ての配列比較パラメータは、ＡＬＩＧＮ−２プログラムによって設定され、変更はない。
【０１３２】
アミノ酸配列比較のためにＡＬＩＧＮ−２が用いられる場合、所与のアミノ酸配列Ｂに対する、それとの、またはそれと対比した、所与のアミノ酸配列Ａのアミノ酸配列同一性％（代替的に、所与のアミノ酸配列Ｂに対する、それとの、またはそれと対比したある特定のアミノ酸配列同一性％を有する、またはそれを含む、所与のアミノ酸配列Ａと表現され得る）は、以下のように算出される：
１００×分数Ｘ／Ｙ
（式中、Ｘは、配列アライメントプログラムＡＬＩＧＮ−２によって、そのプログラムのＡ及びＢのアライメントにおいて完全な一致としてスコア化されたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂ中のアミノ酸残基の総数である）。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、Ｂに対するＡのアミノ酸配列同一性％は、Ａに対するＢのアミノ酸配列同一性％と等しくはならないことが理解されよう。特に別途定めのない限り、本明細書で使用される全てのアミノ酸配列同一性％値は、直前の段落に記載されるように、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータプログラムを使用して得られる。
【０１３３】
「薬学的組成物」または「薬学的製剤」という用語は、調製物の中に含有される活性成分の生物活性が有効になるような形態であり、製剤が投与されるであろう対象にとって許容できないほど有毒である追加の成分を何ら含有しない、調製物を指す。
【０１３４】
「薬学的に許容される担体」は、対象にとって無毒である、活性成分以外の薬学的製剤中の成分を指す。薬学的に許容される担体には、緩衝液、賦形剤、安定剤、または防腐剤が含まれるが、これらに限定されない。
【０１３５】
本明細書で使用される「ベクター」という用語は、連結している別の核酸を増殖することが可能な核酸分子を指す。この用語には、自己複製核酸構造としてのベクター、ならびに導入された宿主細胞のゲノムに組み込まれたベクターが含まれる。ある特定のベクターは、作動的に連結された核酸の発現を導くことが可能である。かかるベクターは、本明細書で「発現ベクター」と称される。
【０１３６】
ＩＩ．アゴニスト活性を有する抗原結合複合体
少なくとも１つの細胞表面受容体に結合し、アゴニスト性の活性を有する、抗原結合複合体が本明細書で提供される（例えば、アゴニスト抗原結合複合体）。複合体は、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、またはそれよりも多くの抗原結合ポリペプチドを含んでもよい。例示的な実施形態では、抗原結合複合体は、６つの抗原結合ポリペプチドを含み、それによって六量体を形成する。
【０１３７】
ある特定の実施形態では、複合体を形成する抗原結合ポリペプチドは、複合体にないときにアゴニスト活性を有する（例えば、その天然の二価形態にある抗体がアゴニスト活性を有し得る）。かかる実施形態では、抗原結合ポリペプチドのアゴニスト活性は、複合体の関連において増加し得、例えば、６つの抗体サブユニットを含む複合体は、天然の二価抗体よりも大きなアゴニスト活性を有し得る。他の実施形態では、複合体を形成する抗原結合ポリペプチドは、複合化されていない形態ではアゴニスト活性を有しない（例えば、その天然の二価形態にある抗体がアゴニスト活性を有しない）が、複合体へと形成されたときにはアゴニスト活性を確かに有する。
【０１３８】
ある特定の実施形態では、複合体を形成する抗原結合ポリペプチドの全てが同じであってもよく、例えば、同じ単一特異性抗体、同じ二重特異性抗体、同じ多重特異性抗体、同じＤＡＦ等の６つのサブユニットで形成された六量体であってもよい。ある特定の実施形態では、複合体は、２つ以上の異なる抗原結合ポリペプチドで形成されてもよい。例えば、複合体は、同じ標的上の異なるエピトープに結合する少なくとも２つの異なる抗体、異なる標的に結合する２つの異なる抗体、少なくとも２つの異なる二重特異性要素（二重特異性要素の各アームが、同じ標的上の異なるエピトープに、または２つの異なる標的に結合し得る）、少なくとも２つの異なるＤＡＦ等で形成されてもよい。一実施形態では、複合体は、同じ細胞表面受容体上の異なるエピトープに結合する少なくとも２つの異なる抗体を含む。別の実施形態では、複合体は、二重特異性抗体を含み、二重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体の異なるエピトープに結合する。
【０１３９】
一実施形態では、抗原結合複合体は、全てが同じ標的に結合する６つの抗体を含む。
【０１４０】
別の実施形態では、抗原結合複合体は、６つの抗体を含み、抗体のうちの少なくとも１つが第１の標的に結合し、かつ抗体のうちの少なくとも１つが第２の標的に結合する。かかる実施形態では、複合体における抗体１対抗体２の比は、任意の可能な組み合わせであってもよく、例えば、１つの抗体サブユニットが標的１に結合し、かつ５つの抗体サブユニットが標的２に結合するか、２抗体サブユニットが標的１に結合し、かつ４つの抗体サブユニットが標的２に結合するか、３つの抗体サブユニットが標的１に結合し、かつ３つの抗体サブユニットが標的２に結合するか、４つの抗体サブユニットが標的１に結合し、かつ２つの抗体サブユニットが標的２に結合するか、または５つの抗体サブユニットが標的１に結合し、かつ１つの抗体サブユニットが標的２に結合する。複合体を構成する抗体の比は、抗体１対抗体２の所望の比を混合し（例えば、等分の抗体１及び抗体２を有する複合体を形成するために１：１）、複合体が自己組織化することを可能にすることによって制御されてもよい。代替的に、複合体を構成する抗体の比は、自己組織化を促進しないが、異なるＦｃ突然変異を有する抗体との組織化のみを促進する、異なる抗体におけるＦｃ突然変異を使用して制御されてもよい（かかる突然変異は下記にさらに記載される）。例示的な実施形態では、抗体１及び抗体２は、ヘテロ二量体化する細胞表面受容体に結合する。
【０１４１】
別の実施形態では、抗原結合複合体は、６つの抗体を含み、抗体のうちの少なくとも３つ、４つ、５つ、または６つ全てが異なる標的に結合する。一実施形態では、抗原結合複合体は、各々が異なる標的に結合する、６つの抗体またはサブユニットを含む。
【０１４２】
別の実施形態では、抗原結合複合体は、同じ標的の組に結合する６つの二重特異性抗体（またはＤＡＦ）を含む。
【０１４３】
別の実施形態では、抗原結合複合体は、６つの二重特異性抗体（またはＤＡＦ）を含み、二重特異性要素のうちの少なくとも１つが、抗原１及び２に結合し、二重特異性要素のうちの少なくとも１つが、抗原３及び４に結合する。単一特異性抗体複合体に関して上述したように、複合体内の二重特異性１対二重特異性２の任意の比が本明細書で企図される。
【０１４４】
別の実施形態では、抗原結合複合体は、６つの二重特異性抗体を含み、二重特異性抗体のうちの少なくとも３つ、４つ、５つ、または６つ全てが異なる標的の組に結合する。一実施形態では、抗原結合複合体は、各々が異なる標的の組に結合する、６つの二重特異性抗体を含む（例えば、複合体は、１２個の異なる標的に結合する）。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、抗原結合複合体は、６つのサブユニットを含み、このうち各サブユニットが、２つの重鎖及び２つの軽鎖を有する抗体を含む。いくつかの実施形態では、各重鎖は、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び一組の重鎖定常メイン、例えば、ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、及び、任意選択的に（例えば、ＩｇＭまたはＩｇＥ抗体の場合）、ＣＨ４ドメインを含む。いくつかの実施形態では、各軽鎖は、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）及び定常軽（ＣＬ）ドメイン（例えば、カッパまたはラムダ）を含む。いくつかの実施形態では、各サブユニットの重鎖は、例えば下記に記載されるように、六量体形成を促進する１つ以上の修飾を含む。いくつかの実施形態では、各サブユニットの重鎖は、例えば下記に記載されるように、エフェクター機能を低減する１つ以上の修飾を含む。
【０１４６】
例示的な実施形態では、本願は、６つの抗体を含むアゴニスト抗原結合複合体を提供し、この抗体は、六量体形成を促進するＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ修飾を含む、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む。
【０１４７】
別の例示的な実施形態では、本願は、６つの抗体を含むアゴニスト抗原結合複合体を提供し、この抗体は、六量体形成を促進するＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ修飾ならびにエフェクター機能を低減する１つ以上の修飾を含む、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む。
【０１４８】
別の例示的な実施形態では、本願は、６つの抗体を含むアゴニスト抗原結合複合体を提供し、この抗体は、六量体形成を促進するＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ修飾ならびにエフェクター機能を低減するＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ修飾を含む、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む。
【０１４９】
抗原結合ポリペプチド
本明細書に記載の複合体を形成するのに好適な抗原結合ポリペプチドは、細胞表面受容体に対する少なくとも１つの抗原結合領域、及びＦｃ領域間の分子間相互作用、例えば、六量体形成等の複合体形成を強化する、修飾Ｆｃ領域を含む。本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、抗体、Ｆｃ領域に融合された抗体の抗原結合領域（例えば、抗体断片）、またはＦｃ領域に融合された非抗体型抗原結合領域タンパク質を含んでもよい。例示的な実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、細胞表面受容体に結合し、修飾Ｆｃ領域を有する、抗体である。
【０１５０】
本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは各々、典型的に、少なくとも２つのポリペプチドを含有する。特に、各抗原結合ポリペプチドのためのＦｃ領域は、２つのポリペプチド間で形成された二量体（下記にさらに記載されるホモ二量体またはヘテロ二量体のいずれか）である。同様に、Ｆｃ領域のポリペプチドのうちの１つに結合された抗原結合領域は、２つのポリペプチドを含有してもよく、例えば、抗原結合領域が抗体断片である場合、それは重鎖及び軽鎖可変領域を含有してもよい。したがって、一実施形態では、抗体である抗原結合ポリペプチドは、４ポリペプチド鎖、例えば、（重鎖可変領域及びＦｃドメインを含む）２つの重鎖及び（軽鎖可変領域を含む）２つの軽鎖を含む。６つのかかる抗原結合ポリペプチドを含む複合体はしたがって、２４個のポリペプチド（例えば、各々が２つの重鎖及び２つの軽鎖を含む６つのサブユニット）を含有する。
【０１５１】
抗体
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗原結合ポリペプチドは、キメラ抗体である。ある特定のキメラ抗体が、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４））に記載される。一例では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサル等の非ヒト霊長類に由来する可変領域）及びヒト定常領域を含む。さらなる例では、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のそれから変更された、「クラススイッチされた」抗体である。
【０１５２】
ある特定の実施形態では、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。典型的に、非ヒト抗体は、親の非ヒト抗体の特異性及び親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性を低減するために、ヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（またはそれらの部分）が非ヒト抗体由来であり、かつＦＲ（またはそれらの部分）がヒト抗体配列由来である、１つ以上の可変ドメインを含む。任意選択的に、ヒト化抗体はまた、ヒト定常領域の少なくとも一部分も含む。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体におけるいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を復元するまたは改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。
【０１５３】
ヒト化抗体及びそれらの作製方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）に概説されており、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）、Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：１００２９−１００３３（１９８９）、米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号、及び同第７，０８７，４０９号、Ｋａｓｈｍｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）グラフトについて記載）、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９−４９８（１９９１）（「リサーフェシング」について記載）、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：４３−６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」について記載）、ならびにＯｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：６１−６８（２００５）及びＫｌｉｍｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２−２６０（２０００）（ＦＲシャッフリングへの「誘導選択」アプローチについて記載）にさらに記載される。
【０１５４】
ヒト化に使用され得るヒトフレームワーク領域としては、「ベストフィット」法を用いて選択されるフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照されたい）、軽鎖または重鎖可変領域の特定の下位集団のヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）、及びＰｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照されたい）、ヒト成熟（体細胞成熟）フレームワーク領域またはヒト生殖系フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）を参照されたい）、ならびにＦＲライブラリのスクリーニングから導かれるフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４（１９９７）及びＲｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１−２２６１８（１９９６）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５５】
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗原結合ポリペプチドは、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野で既知の種々の技法を用いて産生することができる。ヒト抗体は、概して、ｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ａｎｄ  ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８−７４（２００１）及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０−４５９（２００８）に記載される。
【０１５６】
ヒト抗体は、免疫原を、抗原投与に応答してインタクトなヒト抗体またはヒト可変領域を含むインタクトな抗体を産生するように修飾されたトランスジェニック動物に投与することによって、調製されてもよい。かかる動物は典型的に、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置き換える、または染色体外に存在するか、もしくは動物の染色体中に無作為に組み込まれる、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部分を含有する。かかるトランスジェニックマウスにおいて、内因性免疫グロブリン遺伝子座は一般に、不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の概説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７−１１２５（２００５）を参照されたい。例えば、米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号（ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術について記載）、米国特許第５，７７０，４２９号（ＨＵＭＡＢ（登録商標）技術について記載）、米国特許第７，０４１，８７０号（Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術について記載）、ならびに米国特許出願公開第ＵＳ２００７／００６１９００号（ＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）技術について記載）を参照されたい。かかる動物によって生成されたインタクトな抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによって、さらに修飾されてもよい。
【０１５７】
ヒト抗体は、ハイブリドーマに基づく方法によって作製することもできる。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫細胞株及びマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が記載される。（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）、及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照されたい）ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成されるヒト抗体もまた、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２（２００６）に記載される。さらなる方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生について記載）及びＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８（２００６）（ヒト−ヒトハイブリドーマについて記載）に記載の方法が挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）もまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７−２００５（２７）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１８５（９２７）：９１−２００５（３）に記載される。
【０１５８】
ヒト抗体はまた、Ｆｖクローン可変ドメイン配列をヒト由来ファージディスプレイライブラリから単離することによって、生成されてもよい。かかる可変ドメイン配列は次いで、所望のヒト定常ドメインと組み合わされてもよい。抗体ライブラリからヒト抗体を選択するための技法が下記に記載される。
【０１５９】
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗原結合ポリペプチドは、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる部位に対する結合特異性を有する、モノクローナル抗体である。ある特定の実施形態では、結合特異性のうちの一方は、細胞表面受容体に対するものであり、他方は、任意の他の抗原に対するものである。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、同じまたは異なる細胞表面受容体の２つの異なるエピトープに結合してもよい。二重特異性抗体をまた使用して、細胞傷害性薬剤を、細胞表面受容体を発現する細胞に局在させてもよい。
【０１６０】
多重特異性抗体を作製するための技法としては、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の組換え共発現（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７（１９８３）、ＷＯ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：３６５５（１９９１）を参照されたい）、及び「ノブインホール」操作（例えば、米国特許第５，７３１，１６８を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。多重特異性抗体はまた、静電ステアリング効果を操作して抗体Ｆｃ−ヘテロ二量体分子を作製すること（ＷＯ２００９／０８９００４Ａ１）、２つ以上の抗体または断片を架橋すること（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、及びＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照されたい）、ロイシンジッパーを使用して二重特異性抗体を産生すること（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２）を参照されたい）、「ダイアボディ」技術を使用して二重特異性抗体断片を作製すること（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）を参照されたい）、及び一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用すること（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい）、ならびに例えば、Ｔｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）に記載される三重特異性抗体を調製することによって、作製されてもよい。
【０１６１】
「オクトパス抗体」を含む３つ以上の機能的抗原結合部位を有する操作抗体も本明細書に含まれる（例えば、ＵＳ２００６／００２５５７６Ａ１を参照されたい）。
【０１６２】
本明細書における抗体または断片にはまた、細胞表面受容体ならびに別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含む、「二重作用（Ｄｕａｌ  Ａｃｔｉｎｇ）ＦＡｂ」または「ＤＡＦ」も含まれる（例えば、米国第２００８／００６９８２０号を参照されたい）。
【０１６３】
本明細書に記載される抗原結合ポリペプチドとして好適な抗体は、コンビナトリアルライブラリを、所望の活性（単数または複数）を有するポリペプチドについてスクリーニングすることによって、単離されてもよい。例えば、ファージディスプレイライブラリを生成し、かかるライブラリを、所望の結合特性を保有する抗体についてスクリーニングするための、多様な方法が当該技術分野で知られている。かかる方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１−３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）で概説されており、また、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９２）、Ｍａｒｋｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４８：１６１−１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）、Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）、及びＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４）にさらに記載される。
【０１６４】
ある特定のファージディスプレイ法では、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーをポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別個にクローニングし、ファージライブラリ内でランダムに組み換え、次いでこれを、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３−４５５（１９９４）に記載のように抗原結合ファージについてスクリーニングすることができる。ファージは典型的に、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片としてまたはＦａｂ断片としてのいずれかで、抗体断片を提示する。免疫された源からのライブラリは、ハイブリドーマの構築を必要とすることなく、免疫原に対する高親和性抗体を提供する。代替的に、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．１２：７２５−７３４（１９９３）に記載されるように、ナイーブレパートリーを（例えば、ヒトから）クローニングして、いかなる免疫化も伴うことなく、広範な非自己抗原及び自己抗原に対する単一源の抗体を提供することができる。最後に、ナイーブライブラリは、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１−３８８（１９９２）に記載されるように、再配列されていないＶ遺伝子セグメントを幹細胞からクローニングし、ランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを使用して高度可変ＣＤＲ３領域をコードし、インビトロで再配列を達成することによって、合成的に作製することもできる。ヒト抗体ファージライブラリについて記載している特許公報としては、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号、及び同第２００９／０００２３６０号が含まれる。ヒト抗体ライブラリから単離された抗体または抗体断片は、本明細書でヒト抗体またはヒト抗体断片と見なされる。
【０１６５】
抗体の抗原結合領域
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、細胞表面受容体に結合する抗原結合領域と、Ｆｃ領域とを含む。例示的な実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、Ｆｃ領域に融合された、細胞表面受容体に結合する抗体の抗原結合領域を含む。例示的な実施形態では、抗体の抗原結合領域は、抗体断片、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ断片等、ならびに下記に記載される他の断片を指す。ある特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）を参照されたい。ｓｃＦｖフラグメントの概説については、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ），ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）を参照されたく、また、ＷＯ９３／１６１８５、ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号も参照されたい。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、インビボ半減期が増加したＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の考察については、米国特許第５，８６９，０４６号を参照されたい。
【０１６６】
ダイアボディは、二価または二重特異性であり得る、２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、欧州第４０４，０９７号、ＷＯ１９９３／０１１６１、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３）を参照されたい。トリアボディ及びテトラボディもまた、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）に記載される。
【０１６７】
単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは一部分または軽鎖可変ドメインの全てもしくは一部分を含む、抗体断片である。ある特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ、例えば、米国特許第６，２４８，５１６  Ｂ１号）。
【０１６８】
抗体断片は、本明細書に記載されるように、インタクトな抗体のタンパク質消化、ならびに組み換え宿主細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはファージ）による産生を含むがこれらに限定されない、様々な技法によって作製することができる。抗体断片は、例えば、モノクローナル、キメラ、ヒト化、ヒト、二重特異性、多重特異性、ＤＡＦ等の抗体フォーマットを含む、本明細書に記載される抗体のいずれからも作製することができる。
【０１６９】
本明細書に記載の抗原結合領域は、１つ以上のポリペプチドを含んでもよい。ある特定の実施形態では、抗原結合領域は、例えば、抗体の重鎖及び軽鎖可変領域がリンカーを介して結合された一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）等の、１つのポリペプチドを含む。他の実施形態では、抗原結合領域は、例えば、重鎖及び軽鎖可変領域が、自然に会合して６つのＣＤＲを有する抗原結合領域を形成する別個のポリペプチド鎖である、Ｆａｂ抗体断片等の、２つのポリペプチドを含む。
【０１７０】
非抗体型抗原結合領域
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、細胞表面受容体に結合する抗原結合領域と、Ｆｃ領域とを含む。例示的な実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、Ｆｃ領域に融合された、細胞表面受容体に結合する非抗体型抗原結合領域を含む。非抗体型抗原結合領域の例としては、例えば、細胞表面受容体に結合する、リガンド、リガンド断片、またはその多量体が挙げられる。ＯＸ４０に結合する非抗体型抗原結合領域の例は、下記に記載される。Ｔｉｅ２に結合する非抗体型結合領域の例は、ＷＯ２００８／０４９２２７に記載される。
【０１７１】
Ｆｃ領域への抗原結合領域の結合
本明細書に記載の抗原結合領域（抗体由来の抗原結合領域及び非抗体型抗原結合領域の両方）は、本明細書に記載される変異形Ｆｃ領域に融合されてもよい。例えば、（介在するポリペプチドリンカーを用いたまたは用いない）単一のポリペプチドとしての発現、化学結合、または重合体の基（例えば、単一または分岐状のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカー等）を介した結合を含む、２つのポリペプチドを共有結合させるための任意の方法を用いて、抗原結合領域をＦｃドメインと一緒に融合してもよい。ある特定の実施形態では、リンカーは、切断可能なリンカーであり得る。
【０１７２】
ある特定の実施形態では、リンカーは、ポリペプチドリンカーであり得る。一実施形態では、ポリペプチドリンカーは、抗体、またはその変異形からのヒンジ配列である。例えば、ヒンジ配列は、抗体、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３もしくはＩｇＧ４抗体、またはその断片もしくは誘導体等の、アミノ酸残基２１６〜２３８（ＥＵ番号付け）を含み得る。例示的な実施形態では、ヒンジに基づくリンカーは、配列ＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰ（配列番号２１９）、またはその断片もしくは誘導体を含む。ある特定の実施形態では、ポリペプチドリンカーは、様々な長さ（例えば、５個、１０個、１５個、２０個、２５個、３０個、３５個、４０個、４５個、５０個、またはそれよりも多くのアミノ酸）の可動性リンカーであり得る。好適なリンカーは、当該技術分野で知られており、例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，９（３），２９９−３０５，１９９６を参照されたい。例示的なペプチドリンカーは、例えば、
Ｓｅｒ
Ｇｌｙ−Ｓｅｒ
Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ
Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（配列番号２２０）
Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（配列番号２２１）
Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（配列番号２２２）
Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（配列番号２２３）
Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（配列番号２２４）
Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（配列番号２２５）
Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（配列番号２２６）
Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（配列番号２２７）
（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ）ｎ（配列番号２２８）及び
（Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ）ｎ（配列番号２２９）を含み、
ｎは、１以上の整数である。ある特定の実施形態では、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、または２０であり得る。
【０１７３】
ある特定の実施形態では、リンカーは、化学リンカーであり得る。好適な化学リンカーは、当該技術分野において知られており、市販されている。例示的な化学リンカーとしては、例えば、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（ＮＨＳ）、スベリン酸ジスクシンイミジル（ＤＳＳ）、スベリン酸ビス（スルホスクシンイミジル）（ＢＳ３）、ジチオビス（プロピオン酸スクシンイミジル）（ＤＳＰ）、ジチオビス（プロピオン酸スルホスクシンイミジル）（ＤＴＳＳＰ）、エチレングリコビス（コハク酸スクシンイミジル）（ＥＧＳ）、エチレングリコビス（コハク酸スルホスクシンイミジル）（スルホ−ＥＧＳ）、酒石酸ジスクシンイミジル（ＤＳＴ）、酒石酸ジスルホスクシンイミジル（スルホ−ＤＳＴ）、ビス［２−（スクシンイミドオキシカルボニルオキシ）エチル］スルホン（ＢＳＯＣＯＥＳ）、及びビス［２−（スルホスクシンイミドオキシカルボニルオキシ）エチル］スルホン（スルホ−ＢＳＯＣＯＥＳ）が挙げられる。
【０１７４】
ある特定の実施形態では、抗体の抗原結合領域は、Ｆｃドメインを有する単一のポリペプチドとして発現される。Ｆｃドメインが二量体であるとき、Ｆｃ二量体に含有される各ポリペプチドは、（例えば、六量体の複合体が１２個の抗原結合領域を含有するように）抗体の抗原結合領域に融合されてもよく、またはＦｃ二量体に含有されるポリペプチドのうちの１つのみが、（例えば、六量体の複合体が６個の抗原結合領域を含有するように）抗体の抗原結合領域に融合されてもよい。例示的な一実施形態では、Ｆｃ二量体における各ポリペプチドは、六量体の複合体が１２個のＦａｂ断片を含有するように、Ｆａｂ断片に融合される。例示的な一実施形態では、Ｆｃ二量体におけるポリペプチドのうちの１つのみが、六量体の複合体が６個のＦａｂ断片を含有するように、Ｆａｂ断片に融合される。例示的な一実施形態では、Ｆｃ二量体における各ポリペプチドは、六量体の複合体が１２個のＦ（ａｂ’）２断片を含有するように、Ｆ（ａｂ’）２断片に結合される。例示的な一実施形態では、Ｆｃ二量体におけるポリペプチドのうちの１つのみが、六量体の複合体が６個のＦ（ａｂ’）２断片を含有するように、Ｆ（ａｂ’）２断片に結合される。
【０１７５】
ある特定の実施形態では、非抗体型抗原結合領域は、Ｆｃドメインを有する単一のポリペプチドとして発現される。Ｆｃドメインが二量体であるとき、Ｆｃ二量体に含有される各ポリペプチドは、（例えば、六量体の複合体が１２個の非抗体型抗原結合領域を含有するように）非抗体型抗原結合領域に融合されてもよく、またはＦｃ二量体に含有されるポリペプチドのうちの１つのみが、（例えば、六量体の複合体が６個の非抗体型抗原結合領域を含有するように）非抗体型抗原結合領域に融合されてもよい。
【０１７６】
ＯＸ４０アゴニストを含む抗原結合領域
一実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、ヒトＯＸ４０に結合し、それを作動する、抗原結合領域を含む。ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体の抗原結合領域を含む。ある特定の実施形態では、抗原結合ポリペプチドは、非抗体ＯＸ４０アゴニストである抗原結合領域を含む。
【０１７７】
ＯＸ４０アゴニスト抗体
ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体が提供される。いくつかの実施形態では、アゴニスト抗原結合複合体は、６つのＯＸ４０アゴニスト抗体（例えば、６つのＯＸ４０アゴニスト抗体サブユニットを含む六量体の抗原結合複合体）を含む。例示的な抗体サブユニット及びその例示的な特徴が、下記に記載される。いくつかの実施形態では、六量体の抗原結合複合体は、それが結合する抗原（例えば、ＯＸ４０）の生物活性を活性化するアゴニスト抗原結合複合体である。理論に拘束されることを望むものではないが、アゴニスト抗原結合複合体（例えば、六量体のアゴニスト抗原結合複合体）は、エフェクター細胞による抗体架橋が（例えば、標的のクラスター化、及び標的によるその後のシグナル伝達を誘導することによる）アゴニスト活性に重要であり得るが、エフェクター細胞が作用部位で（例えば、エフェクター細胞が低レベルである腫瘍において）豊富にない場合があるシナリオにおいて、特に有利であり得ると考えられる。これらのシナリオにおいて、六量体のアゴニスト抗原結合複合体等のアゴニスト抗原結合複合体は、豊富なエフェクター細胞の不在下でアゴニスト活性を有効にし得、かつ／または強化し得る。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、抗原結合複合体は、下の表Ａに列挙される同じ抗体の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ全てのＨＶＲを含む、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体を含む。例えば、ある特定の実施形態では、複合体に含まれるＯＸ４０抗体は、下の表Ａに列挙される同じ抗体からのＨＶＲの６つ全てを含む。他の実施形態では、複合体は、下の表Ａに列挙される同じ抗体に関する重鎖可変領域（ＶＨ）及び／または軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体を含む。しかしながら、特定の抗体を参照して表Ａに列挙されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列は、これらの特定の抗体に限定されず、代わりに、これらの配列は、表Ａに明示的に列挙されていない多様な構成で、当業者によって好適に組み合わされ得ることが理解されよう。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。別の実施形態では、本抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３及び配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１８２】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０１８３】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【０１８５】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。
【０１８６】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０１８７】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１８８】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【０１８９】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３及び配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。
【０１９０】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０１９１】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１９２】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２、８または９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３、１０、１１、１２、１３または１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【０１９３】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２、８または９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３、１０、１１、１２、１３または１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。別の実施形態では、本抗体は、配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３及び配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号３、１０、１１、１２、１３または１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号２、８または９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３、１０、１１、１２、１３または１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０１９４】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１９５】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２、８または９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３、１０、１１、１２、１３または１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４、１５、または１９から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０１９６】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２、８または９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３、１０、１１、１２、１３または１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号４、１５、または１９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７、２２、２３、２４、２５、２６、２７、または２８から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０１９７】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｈ２は、ＤＭＹＰＤＡＡＡＡＳＹＮＱＫＦＲＥ（配列番号２１６）ではない。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｈ３は、ＡＰＲＷＡＡＡＡ（配列番号２１７）ではない。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｌ３は、ＱＡＡＡＡＡＡＡＴ（配列番号２１８）ではない。
【０１９８】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。別の実施形態では、本抗体は、配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３及び配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｈ２は、ＤＭＹＰＤＡＡＡＡＳＹＮＱＫＦＲＥ（配列番号２１６）ではない。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｈ３は、ＡＰＲＷＡＡＡＡ（配列番号２１７）ではない。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｌ３は、ＱＡＡＡＡＡＡＡＴ（配列番号２１８）ではない。
【０１９９】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｌ３は、ＱＡＡＡＡＡＡＡＴ（配列番号２１８）ではない。
【０２００】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ｉ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号１７４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２０１】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１７５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｈ２は、ＤＭＹＰＤＡＡＡＡＳＹＮＱＫＦＲＥ（配列番号２１６）ではない。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｈ３は、ＡＰＲＷＡＡＡＡ（配列番号２１７）ではない。いくつかの実施形態では、ＨＶＲ−Ｌ３は、ＱＡＡＡＡＡＡＡＴ（配列番号２１８）ではない。
【０２０２】
上記の置換の全ての想定される組み合わせが、配列番号１７２、１７３、１７４、及び１７５のコンセンサス配列に包含される。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。別の実施形態では、本抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３及び配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２０７】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０２０９】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２１０】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【０２１１】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０２１２】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２１３】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０、３１、または３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号３９、４０または４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４２、４３、または４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０、３１、または３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む。別の実施形態では、本抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３及び配列番号４２、４３、または４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４２、４３、または４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号３９、４０または４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０、３１、または３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０２１６】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号３９、４０または４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２、４３、または４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号３９、４０または４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２、４３、または４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０、３１、または３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３９、４０または４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２、４３、または４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０、３１、または３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号３９、４０または４１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４２、４３、または４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む。別の実施形態では、本抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３及び配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号１７８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３、及び配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２を含む。さらなる実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３を含む。
【０２２０】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１７８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０２２１】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｂ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１７８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２２２】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｅ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１７８から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む。
【０２２３】
上記の実施形態のいずれにおいても、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ヒト化されている。一実施形態では、抗ＯＸ４０抗体は、上述の実施形態のうちのいずれかにあるようなＨＶＲを含み、アクセプターヒトフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークをさらに含む。
【０２２４】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０８、１１４、１１６、１８３または１８４のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０８、１１４、１１６、１８３または１８４において置換、挿入かつ／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号配列番号５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０８、１１４、１１６、１８３または１８４（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２２５】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０９、１１５または１１７のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０９、１１５または１１７において置換、挿入、及び／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０９、１１５または１１７（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。
【０２２６】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号５６のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号５６において置換、挿入かつ／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号５６（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２２７】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号５７のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号５７において置換、挿入かつ／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号５７（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。
【０２２８】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号１８０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号１８０において置換、挿入かつ／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号１８０（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２２９】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号１７９のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号１７９において置換、挿入かつ／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号１７９（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。
【０２３０】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号９４において置換、挿入、及び／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号９４（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２３１】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号９５のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号９５において置換、挿入、及び／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号９５（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２３２】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号９６のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号９６において置換、挿入、及び／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号９６（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２３３】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号９７のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号９７において置換、挿入、及び／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号９７（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２３４】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、または１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、または１４８において置換、挿入、及び／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号配列番号１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、または１４８（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２３５】
別の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、または１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。ある特定の実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列と比べて、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１〜１０個のアミノ酸が、配列番号１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、または１４９において置換、挿入、及び／または欠失された。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意選択的に、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、配列番号１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、または１４９（その配列の翻訳後修飾を含む）のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【０２３６】
ある特定の実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号５６及び配列番号５７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号５８及び配列番号５９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号６０及び配列番号６１（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号６２及び配列番号６３（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号６４及び配列番号６５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号６６及び配列番号６７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号６８及び配列番号６９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号７０及び配列番号７１（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号７２及び配列番号７３（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号７４及び配列番号７５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号７６及び配列番号７７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号７８及び配列番号７９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号８０及び配列番号８１（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号８２及び配列番号８３（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号８４及び配列番号８５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号８６及び配列番号８７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号８８及び配列番号８９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号９０及び配列番号９１（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号９２及び配列番号９３（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号９４及び配列番号９５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号９６及び配列番号９７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号９８及び配列番号９９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１００及び配列番号１０１（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１０８及び配列番号１０９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１１４及び配列番号１１５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１１６及び配列番号１１７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、それぞれ配列番号１８３及び配列番号６５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、本抗体は、それぞれ配列番号１８４及び配列番号６９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。
【０２３７】
一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１１８及び配列番号１１９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１２０及び配列番号１２１（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１２２及び配列番号１２３（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１２４及び配列番号１２５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１２６及び配列番号１２７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１２８及び配列番号１２９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１３０及び配列番号１３１（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１３２及び配列番号１３３（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１３４及び配列番号１３５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１３６及び配列番号１３７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１３８及び配列番号１３９（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１４０及び配列番号１４１（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１４２及び配列番号１４３（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１４４及び配列番号１４５（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、それぞれ配列番号１４６及び配列番号１４７（それらの配列の翻訳後修飾を含む）のＶＨ及びＶＬ配列を含む。
【０２３８】
本明細書で開示されるＨＶＲ、ＶＨ、及びＶＬ配列は、任意の数または組み合わせで、本明細書で開示されるＦｃ変異形のうちのいずれとも組み合わされてよいことが理解されよう。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ配列のうちのいずれかもしくはそれらの組み合わせ、ＶＨ配列、及び／またはＶＬ配列と、Ｆｃ領域とを含む。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列のうちのいずれかと、本開示の変異形Ｆｃ領域とを含む。例えば、いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列のうちのいずれかと、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａ修飾（残基のＥＵ番号付け）とを含む。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列のうちのいずれかと、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ（ＥＵ番号付け）から選択される１つ以上のアミノ酸置換とを含む。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列のうちのいずれかと、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ（ＥＵ番号付け）から選択される単一のアミノ酸置換とを含む。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列のうちのいずれかと、（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される一組のアミノ酸置換とを含み、この置換は、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域にある。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列のうちのいずれかと、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるアミノ酸置換Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ（ＥＵ番号付け）とを含む。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列のうちのいずれかと、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）における、表４から選択される１つ以上のアミノ酸置換とを含む。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、表Ａに記載されるＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬ配列のうちのいずれかと、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）における、表４から選択される１つ以上のアミノ酸置換と、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）をもたらすＦｃ領域における１つ以上の修飾、例えば、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ、とを含む。
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【０２３９】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ修飾、（ｂ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）における、表４から選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４１】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ修飾、（ｂ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｃ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｄ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４３】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される単一のアミノ酸置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４４】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、（ｉ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｉｉ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、及び（ｉｉｉ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される一組のアミノ酸置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４５】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、及びＳ４４０Ｙ置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４６】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ修飾、（ｂ）配列番号５６のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｃ）配列番号５７のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）における、表４から選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｂ）配列番号５６のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｃ）配列番号５７のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４８】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｂ）配列番号５６のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｃ）配列番号５７のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２４９】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ修飾、（ｂ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｃ）配列番号５６のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｄ）配列番号５７のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５０】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される単一のアミノ酸置換、（ｂ）配列番号５６のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｃ）配列番号５７のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５１】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、（ｉ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｉｉ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、及び（ｉｉｉ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される一組のアミノ酸置換、（ｂ）配列番号５６のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｃ）配列番号５７のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５２】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、及びＳ４４０Ｙ置換、（ｂ）配列番号５６のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｃ）配列番号５７のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５３】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ修飾、（ｂ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５４】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）における、表４から選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５５】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５６】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ修飾、（ｂ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｃ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｄ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５７】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される単一のアミノ酸置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５８】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、（ｉ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｉｉ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、及び（ｉｉｉ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される一組のアミノ酸置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２５９】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、及びＳ４４０Ｙ置換、（ｂ）（ｉ）配列番号２９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、（ｉｉ）配列番号３０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、及び（ｉｉｉ）配列番号３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＨ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、（ｉｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び（ｉｉｉ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てのＶＬ  ＨＶＲ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２６０】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ修飾、（ｂ）配列番号１１８のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｃ）配列番号１１９のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２６１】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）における、表４から選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｂ）配列番号１１８のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、及び（ｃ）配列番号１１９のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｂ）配列番号１１８のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）配列番号１１９のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２６３】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＫ３２２Ａ修飾、（ｂ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換、（ｃ）配列番号１１８のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｄ）配列番号１１９のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２６４】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される単一のアミノ酸置換、（ｂ）配列番号１１８のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）配列番号１１９のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２６５】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、（ｉ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｉｉ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、及び（ｉｉｉ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される一組のアミノ酸置換、（ｂ）配列番号１１８のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）配列番号１１９のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２６６】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域（残基のＥＵ番号付け）におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、及びＳ４４０Ｙ置換、（ｂ）配列番号１１８のＶＨ配列を含む、ＶＨドメイン、ならびに（ｃ）配列番号１１９のＶＬ配列を含む、ＶＬドメインを含む。
【０２６７】
上述のように、本開示のある特定の態様は、六量体等の複合体に関する。ＯＸ４０に結合する例示的な抗体、抗原結合ドメイン、及び／または抗体断片（例えば、本明細書に記載のＯＸ４０アゴニスト抗体のうちのいずれかのＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬドメイン）のうちのいずれも、任意の組み合わせまたは構成で本開示の複合体または六量体と組み合わせられてよいことが理解されよう。例えば、いくつかの実施形態では、六量体は、同じＯＸ４０アゴニスト抗体の６つのサブユニットによって形成されてもよい。いくつかの実施形態では、六量体は、ＯＸ４０の同じエピトープに結合する２つ以上の異なるＯＸ４０アゴニスト抗体を含んでもよい。いくつかの実施形態では、六量体は、ＯＸ４０の異なるエピトープ（例えば、ヒトＯＸ４０等のＯＸ４０ポリペプチドの部分的に非重複のまたは完全に非重複のエピトープ）に結合する２つ以上の異なるＯＸ４０アゴニスト抗体を含んでもよい。いくつかの実施形態では、六量体は、２つ以上の異なる抗体を含んでもよく、このうちの１つがＯＸ４０に結合し、このうちのもう１つが、本明細書に記載のあるいは当該技術分野で既知の異なるポリペプチドに結合する。
【０２６８】
さらに、二重特異性または多重特異性抗体が本明細書で企図され、この抗体の少なくとも１つのアームが、ＯＸ４０に結合する（例えば、本明細書に記載のＯＸ４０アゴニスト抗体のうちのいずれか、または本明細書に記載のＯＸ４０アゴニスト抗体のうちのいずれかのＨＶＲ、ＶＨ、及び／もしくはＶＬドメインのうちのいずれかを含む任意の抗体）。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体、例えば、ＯＸ４０に結合する。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体の各アームが、同じ細胞表面受容体、例えば、ＯＸ４０の異なるエピトープに結合する。例えば、ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、２つのアームを含んでもよく、各アームが、ＯＸ４０の異なるエピトープに結合する。ＯＸ４０に結合する例示的な抗体、抗原結合ドメイン、及び／または抗体断片（例えば、本明細書に記載のＯＸ４０アゴニスト抗体のうちのいずれかのＨＶＲ、ＶＨ、及び／またはＶＬドメイン）のうちのいずれも、任意の組み合わせで二重特異性または多重特異性抗体と組み合わせられてよいことが理解されよう。
【０２６９】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、約０．４５ｎＭ以下の親和性でヒトＯＸ４０に結合する。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、約１ｎＭ以下の親和性でヒトＯＸ４０に結合する。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０抗体は、約０．４ｎＭ以下の親和性でヒトＯＸ４０に結合する。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０抗体は、約０．５ｎＭ以下の親和性でヒトＯＸ４０に結合する。いくつかの実施形態では、結合親和性は、ラジオイムノアッセイを使用して決定される。
【０２７０】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ヒトＯＸ４０及びカニクイザルＯＸ４０に結合する。いくつかの実施形態では、結合は、ＦＡＣＳアッセイを使用して決定される。いくつかの実施形態では、ヒトＯＸ４０への結合は、約０．２ｕｇ／ｍｌのＥＣ５０を有する。いくつかの実施形態では、ヒトＯＸ４０への結合は、約０．３ｕｇ／ｍｌ以下のＥＣ５０を有する。いくつかの実施形態では、カニクイザルＯＸ４０への結合は、約１．５ｕｇ／ｍｌのＥＣ５０を有する。いくつかの実施形態では、カニクイザルＯＸ４０への結合は、約１．４ｕｇ／ｍｌのＥＣ５０を有する。
【０２７１】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ラットＯＸ４０またはマウスＯＸ４０に結合しない。
【０２７２】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０発現細胞（例えば、Ｔｒｅｇ）においてアポトーシスを誘発しない。いくつかの実施形態では、アポトーシスは、３０ｕｇ／ｍｌの抗体濃度を使用して、例えば、アネキシンＶ及びプロプロジウム（ｐｒｏｐｒｏｄｉｕｍ）ヨウ素染色Ｔｒｅｇを使用してアポトーシスが生じたかどうかを判定することにより、アッセイされる。
【０２７３】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、メモリーＴ細胞増殖を増加させ、かつ／またはメモリー細胞によるサイトカイン産生を増加させる。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、例えば、メモリーＴ細胞増殖を増加させる、及び／またはメモリー細胞によるサイトカイン産生を増加させることによって、メモリーＴ細胞機能を強化する。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ガンマインターフェロンである。
【０２７４】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０アゴニスト抗体での治療前の増殖及び／またはサイトカイン産生と比較して、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞増殖を増加させ、かつ／またはＣＤ４＋エフェクターＴ細胞によるサイトカイン産生を増加させる。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮ−γである。
【０２７５】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、例えば、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞増殖を増加させる、及び／またはＣＤ４＋エフェクターＴ細胞によるガンマインターフェロン産生を増加させる（例えば、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体での治療前の増殖及び／またはサイトカイン産生と比較して）ことによって、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞機能を強化する。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ガンマインターフェロンである。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、例えば、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体での治療前の腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋Ｔ細胞の数と比較して、腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の総数、または、例えば、ＣＤ４５＋細胞中のＣＤ４＋細胞の割合）を増加させる。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、例えば、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体での治療前の、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋Ｔ細胞の数と比較して、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ガンマインターフェロンを発現するＣＤ４＋細胞の総数、または、例えば、総ＣＤ４＋細胞中のガンマインターフェロンを発現するＣＤ４＋細胞の割合）を増加させる。
【０２７６】
いくつかの実施形態では、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の数は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞サイトカイン分泌は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。本方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、個体におけるＣＤ８＋エフェクターＴ細胞は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて強化された増殖、サイトカイン分泌及び／または細胞溶解活性を有する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞サイトカイン分泌は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。
【０２７７】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、例えば、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体での治療前の腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋Ｔエフェクター細胞の数と比較して、腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の総数、または、例えば、ＣＤ４５＋細胞中のＣＤ８＋の割合）を増加させる。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、例えば、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体での治療前の、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋Ｔ細胞の数と比較して、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、例えば、総ＣＤ８＋細胞中のガンマインターフェロンを発現するＣＤ８＋細胞の割合）を増加させる。
【０２７８】
いくつかの実施形態では、腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の総数、または、例えば、ＣＤ４５＋細胞中のＣＤ８＋の割合）は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。本発明の方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、総ＣＤ８＋細胞中の、ガンマインターフェロンを発現するＣＤ８＋細胞の割合）は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて増加する。
【０２７９】
いくつかの実施形態では、個体におけるメモリーＴ細胞は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて強化された増殖及び／またはサイトカイン分泌を有する。いくつかの実施形態では、メモリーＴ細胞の数は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。いくつかの実施形態では、メモリーＴ細胞サイトカイン分泌（レベル）は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。本方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、個体におけるＴｒｅｇは、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて減少したエフェクターＴ細胞機能（例えば、増殖及び／またはサイトカイン分泌）の阻害を有する。いくつかの実施形態では、エフェクターＴ細胞の数は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。いくつかの実施形態では、エフェクターＴ細胞サイトカイン分泌（レベル）は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。
【０２８０】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、エフェクターＴ細胞機能のＴｒｅｇ抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、エフェクターＴ細胞機能は、エフェクターＴ細胞増殖及び／またはサイトカイン産生である。いくつかの実施形態では、エフェクターＴ細胞は、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞である。
【０２８１】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、例えば、エフェクターＴ細胞機能（例えば、エフェクターＴ細胞増殖、及び／またはエフェクターＴ細胞サイトカイン分泌）のＴｒｅｇ抑制を減少させることによって、Ｔｒｅｇ機能を阻害する。いくつかの実施形態では、エフェクターＴ細胞は、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞である。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、腫瘍組織内（浸潤性）Ｔｒｅｇの数（例えば、Ｔｒｅｇの総数、または、例えば、ＣＤ４＋細胞中のＦｏｘ３ｐ＋細胞の割合）を低減する。
【０２８２】
いくつかの実施形態では、腫瘍組織内（浸潤性）Ｔｒｅｇの数（例えば、Ｔｒｅｇの総数、または、例えば、ＣＤ４＋細胞中のＦｏｘ３ｐ＋細胞の割合）は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて低減される。
【０２８３】
いくつかの実施形態では、腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の総数、または、例えば、ＣＤ４５＋細胞中のＣＤ４＋細胞の割合）は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。本発明の方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ガンマインターフェロンを発現する総ＣＤ４＋細胞、または、例えば、総ＣＤ４＋細胞中の、ガンマインターフェロンを発現するＣＤ４＋細胞の割合）は、ＯＸ４０アゴニスト抗体の投与前と比べて上昇する。
【０２８４】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＯＸ４０を発現する標的細胞におけるＯＸ４０シグナル伝達を増加させる。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０シグナル伝達は、ＮＦｋＢ下流シグナル伝達を監視することによって検出される。
【０２８５】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、４０℃で２週間の処理の後、安定である。
【０２８６】
いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ヒトＯＸ４０への結合に対してＯＸ４０Ｌと競合する。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０Ｌの付加は、インビトロアッセイにおいて抗ヒトＯＸ４０抗体機能を強化しない。
【０２８７】
別の実施形態によれば、ＯＸ４０アゴニスト抗体には、以下の特性のうちの任意の１つ、任意の組み合わせ、または全てが含まれる：（１）約０．４５ｎＭ以下の親和性でヒトＯＸ４０に結合し、いくつかの実施形態では、約０．４ｎＭ以下の親和性でヒトＯＸ４０に結合し、いくつかの実施形態では、約０．５ｎＭ以下の親和性でヒトＯＸ４０に結合し、いくつかの実施形態では、結合親和性は、ラジオイムノアッセイを使用して決定される、（２）ヒトＯＸ４０及びカニクイザルＯＸ４０に結合し、いくつかの実施形態では、結合は、ＦＡＣＳアッセイを使用して決定される、（３）約０．２ｕｇ／ｍｌのＥＣ５０でヒトＯＸ４０に結合し、いくつかの実施形態では、約０．３ｕｇ／ｍｌ以下のＥＣ５０でヒトＯＸ４０に結合し、いくつかの実施形態では、約１．５ｕｇ／ｍｌのＥＣ５０でカニクイザルＯＸ４０に結合し、いくつかの実施形態では、約１．４ｕｇ／ｍｌのＥＣ５０でカニクイザルＯＸ４０に結合する、（４）ラットＯＸ４０またはマウスＯＸ４０には実質的に結合しない、（５）（例えば、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体での治療前の増殖及び／またはサイトカイン産生と比較して）例えば、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞増殖を増加させること、及び／またはＣＤ４＋エフェクターＴ細胞によるガンマインターフェロン産生を増加させることによって、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞機能を強化する、（６）例えば、メモリーＴ細胞増殖を増加させる、及び／またはメモリー細胞によるサイトカイン産生を増加させることによって、メモリーＴ細胞機能を強化する、（７）例えば、エフェクターＴ細胞機能（例えば、エフェクターＴ細胞増殖、及び／またはエフェクターＴ細胞サイトカイン分泌）のＴｒｅｇ抑制を減少させることによって、Ｔｒｅｇ機能を阻害する。いくつかの実施形態では、エフェクターＴ細胞は、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞である、（８）ＯＸ４０を発現する標的細胞におけるＯＸ４０シグナル伝達を増加させる（いくつかの実施形態では、ＯＸ４０シグナル伝達は、ＮＦｋＢ下流シグナル伝達を監視することによって検出される）、（９）４０℃で２週間の処理後に安定である。
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【０２８８】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＤＲＹＳＱＶＨＹＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１８５）の配列を含む重鎖、及び／またはＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＰＶＴＰＧＥＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＬＨＳＮＧＹＮＹＬＤＷＹＬＱＫＡＧＱＳＰＱＬＬＩＹＬＧＳＮＲＡＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＱＱＹＹＮＨＰＴＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１８６）の配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗体００８の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗体００８の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２８９】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＤＳＬＰＶＴＰＧＥＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＬＬＨＳＮＧＹＮＹＬＤＷＹＬＱＫＡＧＱＳＰＱＬＬＩＹＬＧＳＮＲＡＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＱＱＹＹＮＨＰＴＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１８７）の配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗体ＳＣ０２００８の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗体ＳＣ０２００８の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＨＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＧＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＧＴＧＧＧＴＹＹＡＤＳＶＭＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＤＮＶＭＧＬＹＷＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１８８）の配列を含む重鎖、及び／またはＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＰＡＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１８９）の配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗体０２３の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗体０２３の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９１】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＹＩＳＳＳＳＳＴＩＤＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＤＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＳＧＷＹＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１９０）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＱＫＰＥＫＡＰＫＳＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＰＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１９１）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，９６０，５１５号に記載の抗体１１Ｄ４の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，９６０，５１５号に記載の抗体１１Ｄ４の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９２】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、米国特許第７，５５０，１４０号に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＳＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＱＳＴＡＤＹＹＦＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１９２）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＥＩＶＶＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１９３）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，９６０，５１５号に記載の抗体１８Ｄ８の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、米国特許第７，９６０，５１５号に記載の抗体１８Ｄ８の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９３】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１２／０２７３２８に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＳＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＥＴＧＥＰＴＹＡＤＤＦＫＧＲＦＶＦＳＬＤＴＳＶＳＴＡＹＬＱＩＳＳＬＫＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＰＹＹＤＹＶＳＹＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１９４）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＹＬＹＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＱＱＨＹＳＴＰＲＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１９５）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１２／０２７３２８に記載の抗体ｈｕ１０６−２２２の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１２／０２７３２８に記載の抗体ｈｕ１０６−２２２の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９４】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１２／０２７３２８に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＥＹＥＦＰＳＨＤＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＬＶＡＡＩＮＳＤＧＧＳＴＹＹＰＤＴＭＥＲＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＨＹＤＤＹＹＡＷＦＡＹＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ（配列番号１９６）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＫＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＬＡＳＮＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＨＳＲＥＬＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１９７）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１２／０２７３２８に記載の抗体Ｈｕ１１９−１２２の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１２／０２７３２８に記載の抗体Ｈｕ１１９−１２２の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９５】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１３／０２８２３１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＭＹＬＧＬＮＹＶＦＩＶＦＬＬＮＧＶＱＳＥＶＫＬＥＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＭＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＡＷＭＤＷＶＲＱＳＰＥＫＧＬＥＷＶＡＥＩＲＳＫＡＮＮＨＡＴＹＹＡＥＳＶＮＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＳＶＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＧＩＹＹＣＴＷＧＥＶＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＴＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１９８）の配列を含む重鎖、及び／またはＭＲＰＳＩＱＦＬＧＬＬＬＦＷＬＨＧＡＱＣＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＬＧＧＫＶＴＩＴＣＫＳＳＱＤＩＮＫＹＩＡＷＹＱＨＫＰＧＫＧＰＲＬＬＩＨＹＴＳＴＬＱＰＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＲＤＹＳＦＳＩＳＮＬＥＰＥＤＩＡＴＹＹＣＬＱＹＤＮＬＬＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１９９）の配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＭＹＬＧＬＮＹＶＦＩＶＦＬＬＮＧＶＱＳＥＶＫＬＥＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＭＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＡＷＭＤＷＶＲＱＳＰＥＫＧＬＥＷＶＡＥＩＲＳＫＡＮＮＨＡＴＹＹＡＥＳＶＮＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＳＶＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＧＩＹＹＣＴＷＧＥＶＦＹＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号２１４）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＭＲＰＳＩＱＦＬＧＬＬＬＦＷＬＨＧＡＱＣＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＬＧＧＫＶＴＩＴＣＫＳＳＱＤＩＮＫＹＩＡＷＹＱＨＫＰＧＫＧＰＲＬＬＩＨＹＴＳＴＬＱＰＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＲＤＹＳＦＳＩＳＮＬＥＰＥＤＩＡＴＹＹＣＬＱＹＤＮＬＬＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ（配列番号２１５）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１３／０２８２３１に記載の抗体Ｍａｂ  ＣＨ  １１９−４３−１の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１３／０２８２３１に記載の抗体Ｍａｂ  ＣＨ  １１９−４３−１の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９６】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１３／０３８１９１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＥＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＫＱＫＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＬＴＳＤＫＳＳＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＮＹＹＧＳＳＬＳＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ（配列番号２００）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＴＴＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＤＧＴＶＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＥＱＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２０１）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１３／０３８１９１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１３／０３８１９１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９７】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１３／０３８１９１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＥＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＴＳＧＹＴＦＫＤＹＴＭＨＷＶＫＱＳＨＧＫＳＬＥＷＩＧＧＩＹＰＮＮＧＧＳＴＹＮＱＮＦＫＤＫＡＴＬＴＶＤＫＳＳＳＴＡＹＭＥＦＲＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＭＧＹＨＧＰＨＬＤＦＤＶＷＧＡＧＴＴＶＴＶＳＰ（配列番号２０２）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＶＭＴＱＳＨＫＦＭＳＴＳＬＧＤＲＶＳＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＡＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＤＲＦＴＧＧＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＮＶＱＳＥＤＬＴＤＹＦＣＱＱＹＩＮＹＰＬＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ（配列番号２０３）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１３／０３８１９１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１３／０３８１９１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９８】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＭＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＳＤＴＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＹＹＧＳＳＬＳＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２０４）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０５）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０２９９】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＭＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＳＤＴＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＹＹＧＳＳＬＳＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２０４）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＶＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０６）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３００】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＡＴＩＴＳＤＴＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＹＹＧＳＳＬＳＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２０７）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０５）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０１】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＡＴＩＴＳＤＴＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＹＹＧＳＳＬＳＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２０７）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＶＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０６）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０２】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＡＴＬＴＳＤＫＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＹＹＧＳＳＬＳＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２０８）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０５）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０３】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＡＴＬＴＳＤＫＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＹＹＧＳＳＬＳＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２０８）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＶＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２０６）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン２０Ｅ５の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０４】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＫＤＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＹＰＮＮＧＧＳＴＹＮＱＮＦＫＤＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＭＧＹＨＧＰＨＬＤＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号２０９）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＡＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＩＮＹＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２１０）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０５】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＫＤＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＹＰＮＮＧＧＳＴＹＮＱＮＦＫＤＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＭＧＹＨＧＰＨＬＤＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号２０９）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＡＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＤＲＦＳＧＧＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＩＮＹＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２１１）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０６】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＫＤＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＧＩＹＰＮＮＧＧＳＴＹＮＱＮＦＫＤＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＭＧＹＨＧＰＨＬＤＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号２１２）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＡＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＩＮＹＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２１０の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０７】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＫＤＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＧＩＹＰＮＮＧＧＳＴＹＮＱＮＦＫＤＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＭＧＹＨＧＰＨＬＤＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号２１２）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＡＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＤＲＦＳＧＧＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＩＮＹＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２１１）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０８】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＫＤＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＧＩＹＰＮＮＧＧＳＴＹＮＱＮＦＫＤＲＡＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＭＧＹＨＧＰＨＬＤＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号２１３）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＡＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＩＮＹＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２１０）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３０９】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＫＤＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＧＩＹＰＮＮＧＧＳＴＹＮＱＮＦＫＤＲＡＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＭＧＹＨＧＰＨＬＤＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号２１３）の配列を含む重鎖可変領域、及び／またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＡＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＤＲＦＳＧＧＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＩＮＹＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号２１１）の配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、ＷＯ２０１４／１４８８９５Ａ１に記載の抗体クローン１２Ｈ３の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３１０】
いくつかの実施形態では、アゴニスト抗ヒトＯＸ４０抗体は、Ｌ１０６  ＢＤ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ製品番号３４０４２０）である。いくつかの実施形態では、本抗体は、抗体Ｌ１０６（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ製品番号３４０４２０）の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、抗体Ｌ１０６（ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ製品番号３４０４２０）の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３１１】
いくつかの実施形態では、アゴニスト抗ヒトＯＸ４０抗体は、ＡＣＴ３５（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号２００７３）である。いくつかの実施形態では、本抗体は、抗体ＡＣＴ３５（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号２００７３）の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、抗体ＡＣＴ３５（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号２００７３）の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３１２】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＭＥＤＩ６４６９である。いくつかの実施形態では、本抗体は、抗体ＭＥＤＩ６４６９の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、抗体ＭＥＤＩ６４６９の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３１３】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニスト抗体は、ＭＥＤＩ０５６２である。いくつかの実施形態では、本抗体は、抗体ＭＥＤＩ０５６２の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つの超可変領域（ＨＶＲ）配列を含む。いくつかの実施形態では、本抗体は、抗体ＭＥＤＩ０５６２の重鎖可変領域配列及び／または軽鎖可変領域配列を含む。
【０３１４】
非抗体型ＯＸ４０アゴニスト
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、非抗体型ＯＸ４０アゴニストを含む抗原結合領域を含む。非抗体型ＯＸ４０アゴニストは、当該技術分野で周知である。
【０３１５】
ＯＸ４０Ｌ（別名、ＣＤ１３４Ｌ）は、ＯＸ４０のリガンドとしての機能を果たす。したがって、ＯＸ４０Ｌの一部または全てを提示するアゴニストは、ＯＸ４０アゴニストとしての機能を果たし得る。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０Ｌの細胞外ドメインを１つ以上含み得る。ＯＸ４０Ｌの細胞外ドメインの例としては、ＯＸ４０結合ドメインが挙げられ得る。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０Ｌの細胞外ドメインを１つ以上含むが、タンパク質の他の不溶性ドメイン、例えば、膜貫通ドメインを欠くＯＸ４０Ｌの可溶性形態であり得る。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０Ｌに結合することができるＯＸ４０Ｌの細胞外ドメインを１つ以上含む可溶性タンパク質である。
【０３１６】
いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、米国特許第７，６９６，１７５号または欧州特許第ＥＰ０６７２１４１  Ｂ１号に記載のＯＸ４０アゴニストのうちのいずれか１つであり得る。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０イムノアドヘシン等の国際公開第ＷＯ２００６／１２１８１０号に記載のＯＸ４０アゴニストのうちのいずれか１つであり得る。いくつかの実施形態では、ＯＸ４０アゴニストは、ＭＥＤＩ６３８３である。
【０３１７】
Ｆｃドメイン間の分子間相互作用を促進するＦｃ変異形
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、Ｆｃドメイン間の分子間相互作用を強化する変異形Ｆｃ領域を含むことによって、本明細書で提供されるアゴニスト結合複合体を形成する。例示的な実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドは、六量体形成を強化する変異形Ｆｃ領域を含むことによって、本明細書で提供されるアゴニスト抗原結合複合体をもたらす。変異形Ｆｃ領域は、例えば、ヒト、齧歯類（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ラビット等）、イヌ、または非ヒト霊長類（例えば、マック（ｍａｃｑｕｅｓ）（例えば、カニクイザルまたはアカゲザル）、ヒヒ、及びチンパンジー等の旧世界ザル、またはマーモセット、タマリン、ホエザル、ウーリーザル、クモザル、ヨザル、オマキザルもしくはリスザル等の新世界ザル）を含む、多様な種からのＦｃ領域の変異形を含んでもよい。Ｆｃ変異形は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２またはＩｇＥ抗体からのＦｃ領域を含む、任意の抗体アイソタイプの変異形であってもよい。ある例示的な実施形態では、Ｆｃ領域は、１つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば置換、欠失または挿入）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４  Ｆｃ領域）の変異形である。
【０３１８】
本明細書に記載のアミノ酸修飾は、Ｆｃドメイン間の分子間相互作用を直接または間接的に促進し得る。例えば、アミノ酸修飾は、それ自体で効果を引き起こし得るか、直接に別の分子のＦｃドメインへの接触に関与し得るか、または直接に別のＦｃドメインと相互作用するように修飾され得るか、または分子間Ｆｃ：Ｆｃ相互作用に間接的に影響を及ぼし得る。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のアミノ酸修飾は、例えば、複合体構造（例えば、六量体、五量体、四量体、三量体、または二量体構造）の安定性を強化する等、複合体形態でのＦｃドメイン間の結合強度を直接または間接的に強化し得る。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のアミノ酸修飾は、ファンデルワールス相互作用、水素結合、電荷‐電荷相互作用、もしくは芳香族スタッキング相互作用等であるが、これらに限定されない、新たな分子間Ｆｃ：Ｆｃ結合の形成を促進もしくは強化し得るか、または水分子の放出によりＦｃ：Ｆｃ相互作用時にエントロピー増大を促進し得る。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形を生産するための例示的な置換は、サイズ、及び分子間Ｆｃ：Ｆｃ相互作用または分子内相互作用（アロステリック変異）に関与するまたはそれを促進する物理化学的性質に基づいて選択されてもよい。
【０３１９】
Ｆｃ変異形がＦｃドメイン間の分子間相互作用を促進する、かつ／または複合体形成（例えば、二量体、三量体、四量体、五量体、または六量体形成）を促進するかどうかを決定するための方法は、当該技術分野で周知のアッセイを用いて、例えば、本明細書の実施例の節にさらに記載されるように、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を用いてＦｃ複合体または抗原結合複合体の分子量を決定することによって、決定され得る。
【０３２０】
ある特定の実施形態では、Ｆｃドメイン間の分子間相互作用を促進するＦｃ変異形は、Ｅ３４５、Ｅ４３０、及びＳ４４０（ＥＵ番号付け）から選択されるＦｃ領域の１つ以上の残基における置換を含む。ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、アミノ酸位置Ｅ３４５、Ｅ４３０、及びＥ４４０（ＥＵ番号付け）のうちの２つ以上における置換を含む。ある例示的な実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下の３つの修飾、すなわちＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、及びＳ４４０Ｙ（ＥＵ番号付け）を含む。
【０３２１】
他の実施形態では、Ｆｃ変異形は、ＷＯ２０１３／００４８４２、ＷＯ２０１４／１０８１９８、ＷＯ２０１４／００６２１７、またはＤｉｅｂｏｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．ＳＣＩＥＮＣＥ、ｖｏｌ．４３４、１２６０−１２６３（２０１４）に記載の修飾のうちのいずれかを含んでもよい。
【０３２２】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、下記の表１に記載のアミノ酸位置のうちの１、２、３、４、５、６つまたはそれよりも多くにおける修飾を含んでもよい。修飾は、１つ以上のアミノ酸の欠失、挿入もしくは置換、またはそれらの組み合わせであってもよい。かかるアミノ酸の置換は、任意の天然型または非天然型アミノ酸で行われてもよい。
【０３２３】
かかる修飾は、Ｆｃドメイン間の分子間相互作用及び複合体形成（例えば、六量体形成）を促進するのに有用である。
表１．Ｆｃドメイン間の分子間相互作用及び六量体形成を促進するための例示的な修飾部位及びアミノ酸置換各アミノ酸残基は、ヒトＩｇＧｌ抗体のＥＵインデックスに従う番号付けにより列挙され、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４親抗体における対応する位置にあるアミノ酸を示す。
2018516537.tif 000040
2018516537.tif 000041
＊ＩｇＧ１において、３５６位は、親抗体においてＤまたはＥのいずれかであり得る。「Ｄ／Ｅ３５６」への言及は、本文脈において、ヒトＩｇＧｌの配列におけるアロタイプ変異形を指す。ヒトＩｇＧｌのＩｇＧｌｍ（ｚａ）アロタイプにおいて、３５６位のアミノ酸はＤであるが、一方でヒトＩｇＧｌのＩｇＧｌｍ（ｆ）アロタイプにおいて、３５６位のアミノ酸はＥである。
【０３２４】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ４３０、Ｓ４４０、Ｑ３８６、Ｐ２４７、Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｑ３１１、Ｄ／Ｅ３５６、Ｔ３５９、Ｅ３８２、Ｙ４３６、及びＫ４４７に対応するものから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾を含む。ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＨ３１０、Ｇ３８５、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｑ４３８、及びＫ４３９に対応するものから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾を含む。
【０３２５】
一実施形態では、Ｆｃは、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｘ、Ｅ４３０Ｘ、Ｓ４４０Ｗ／Ｙ、Ｑ３８６Ｋ、Ｐ２４７Ｇ、Ｉ２５３Ｖ、Ｓ２５４Ｌ、Ｑ３１１Ｉ７Ｗ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｅ３８２Ｖ、Ｙ４３６Ｉ、及びＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するものから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾／欠失を含み、Ｘは、任意のアミノ酸（例えば、天然型アミノ酸）である。
【０３２６】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ４３０、Ｓ４４０、及びＱ３８６から選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾を含む。
【０３２７】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｘ、Ｅ４３０Ｘ、Ｓ４４０Ｗ／Ｙ、Ｑ３８６Ｋから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾を含み、Ｘは、任意のアミノ酸（例えば、天然型アミノ酸）である。
【０３２８】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｑ、Ｎ、Ｋ、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙ；Ｅ４３０Ｔ、Ｓ、Ｇ、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｖ、Ｗ、Ｙ；Ｓ４４０Ｗ、Ｙ、及びＱ３８６Ｋから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾を含む。
【０３２９】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ／Ｑ／Ｎ／Ｋ、Ｅ４３０Ｔ／Ｓ／Ｇ、Ｓ４４０Ｙ／Ｗ、及びＱ３８６Ｋから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾を含む。
【０３３０】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾を含む。一実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ修飾を含む。一実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ４３０Ｇ修飾を含む。一実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＳ４４０Ｙ修飾を含む。
【０３３１】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、例えば、Ｅ３４５Ｙ、Ｄ、Ｗ；Ｅ４３０Ｆ、Ｈ；Ｅ３８２Ｄ、Ｑ、Ｋ、Ｒ；及びＨ４３３Ｒを含む、Ｅ３８２及びＨ４３３から選択される少なくとも１つのアミノ酸残基における修飾を含む。
【０３３２】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下の置換、すなわち、Ｅ３４５Ｒを含む。
【０３３３】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下のアミノ酸残基置換、すなわち、Ｉ２５３からＥ、Ｎ、Ｑ、ＳまたはＴ；Ｈ３１０からＮ、Ｑ、ＷまたはＹ；Ｑ３１１からＥまたはＲ；Ｅ３８２からＤ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹ；Ｇ３８５からＥ、Ｈ、Ｋ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹ；Ｈ４３３からＲ；Ｎ４３４からＤ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹ；Ｙ４３６からＡ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、ＴまたはＶ；Ｑ４３８からＡ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹ；Ｋ４３９からＤ、Ｈ、Ｑ、Ｒ、ＷまたはＹ；またはＳ４４０からＤ、Ｅ、Ｈ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、ＷまたはＹ、のうちの少なくとも１つを含む。
【０３３４】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下のアミノ酸残基置換、すなわち、Ｉ２５３からＮまたはＱ；Ｈ３１０からＱ；Ｑ３１１からＥまたはＲ；Ｅ３８２からＤ、Ｑ、Ｋ、またはＲ；Ｇ３８５からＤ、Ｅ、ＫまたはＲ；Ｈ４３３からＲ；Ｎ４３４からＨ、Ｋ、ＱまたはＲ；Ｙ４３６からＮ、Ｑ、ＳまたはＴ；Ｑ４３８からＮ、ＳまたはＴ；Ｋ４３９からＱ；またはＳ４４０からＤ、ＥまたはＱ、のうちの少なくとも１つを含む。
【０３３５】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下のアミノ酸残基置換、すなわち、Ｅ３８２からＤ、Ｑ、Ｋ、またはＲ；またはＨ４３３からＲ、のうちの少なくとも１つを含む。
【０３３６】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下の置換、すなわち、Ｅ３８２Ｒを含む。
【０３３７】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下の置換、すなわち、Ｈ４３３Ｒを含む。
【０３３８】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下のアミノ酸残基置換、すなわち、Ｐ２４７Ｇ、Ｉ２５３Ｖ、Ｓ２５４Ｌ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｗ、Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、Ｅ３４５Ｙ、Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｔ３５９Ｒ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｑ３８６Ｋ、Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ、Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、Ｅ４３０Ｙ、Ｙ４３６Ｉ、Ｓ４４０ＹまたはＳ４４０Ｗのうちの少なくとも１つを含む。
【０３３９】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下のアミノ酸残基置換、すなわち、Ｅ３８２Ｒ、Ｈ４３３Ｒ、Ｈ４３５Ｒ、またはＨ４３５Ａのうちの少なくとも１つを含む。
【０３４０】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下のアミノ酸残基、すわなち、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ３８２またはＱ３８６、のうちの少なくとも２つにおける修飾を含み、この少なくとも２つのアミノ酸修飾は異なる。
【０３４１】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形が２つ以上のアミノ酸残基における修飾を含む場合、この修飾は、Ｆｃ変異形の重鎖の各々に存在し得るか、またはそれぞれ、アミノ酸修飾のうちの一方がＦｃドメインの重鎖のうちの一方に存在し得、他方のアミノ酸修飾がＦｃドメインの他方の重鎖に存在し得、逆もまた成立する。
【０３４２】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ４３０、Ｓ４４０、Ｑ３８６、Ｐ２４７、Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｑ３１１、Ｄ／Ｅ３５６、Ｔ３５９、Ｅ３８２、Ｙ４３６、及びＫ４４７に対応するものから選択される少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含む。一実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｈ３１０、Ｇ３８５、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｑ４３８、及びＫ４３９に対応するものから選択される少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含む。ある例示的な実施形態では、Ｆｃ変異形は、以下の修飾、すわなち、Ｓ４４０ＹまたはＳ４４０Ｗのうちの１つ以上を含む。
【０３４３】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｘ、Ｅ４３０Ｘ、Ｓ４４０Ｗ／Ｙ、Ｑ３８６Ｋ、Ｐ２４７Ｇ、Ｉ２５３Ｖ、Ｓ２５４Ｌ、Ｑ３１１Ｌ／Ｗ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｅ３８２Ｖ、及びＹ４３６Ｉに対応するものから選択される少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み、Ｘは、任意のアミノ酸（例えば、天然型アミノ酸）である。
【０３４４】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｅ３４５、Ｅ４３０、Ｓ４４０、及びＱ３８６のうちの２つまたは全て等の、Ｅ３４５、Ｅ４３０、Ｓ４４０、及びＱ３８６のうちの少なくとも１つにおける修飾を含む。別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｅ３８２及びＨ４３３のうちの少なくとも１つ、またはＥ３８２及びＨ４３３の両方における修飾を含む。ある特定の実施形態では、かかる変異形は、任意選択的に、表１に列挙される１つ以上の他のアミノ酸におけるさらなる修飾を含んでもよい。ある例示的な実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｘ、Ｅ４３０Ｘ、Ｓ４４０Ｗ／Ｙ、及びＱ３８６Ｋに対応する群から選択される少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み、Ｘは、任意のアミノ酸（例えば、天然型アミノ酸）である。
【０３４５】
少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾の例示的な組み合わせは、Ｅ３４５Ｘ／Ｅ４３０Ｘ、Ｅ３４５Ｘ／Ｓ４４０ＹまたはＷ、Ｅ３４５Ｘ／Ｑ３８６Ｋ、Ｅ４３０Ｘ／Ｓ４４０ＹまたはＷ、及びＥ４３０Ｘ／Ｑ３８６Ｋである。
【０３４６】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｐ２４７Ｇ、Ｉ２５３Ｖ、Ｓ２５４Ｌ、Ｑ３１１Ｌ、Ｑ３１１Ｗ、Ｅ３４５Ａ、Ｅ３４５Ｃ、Ｅ３４５Ｄ、Ｅ３４５Ｆ、Ｅ３４５Ｇ、Ｅ３４５Ｈ、Ｅ３４５Ｉ、Ｅ３４５Ｋ、Ｅ３４５Ｌ、Ｅ３４５Ｍ、Ｅ３４５Ｎ、Ｅ３４５Ｐ、Ｅ３４５Ｑ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ３４５Ｓ、Ｅ３４５Ｔ、Ｅ３４５Ｖ、Ｅ３４５Ｗ、Ｅ３４５Ｙ、Ｄ／Ｅ３５６Ｇ、Ｄ／Ｅ３５６Ｒ、Ｔ３５９Ｒ、Ｅ３８２Ｌ、Ｅ３８２Ｖ、Ｑ３８６Ｋ、Ｅ４３０Ａ、Ｅ４３０Ｃ、Ｅ４３０Ｄ、Ｅ４３０Ｆ、Ｅ４３０Ｇ、Ｅ４３０Ｈ、Ｅ４３０Ｉ、Ｅ４３０Ｋ  Ｅ４３０Ｌ、Ｅ４３０Ｍ、Ｅ４３０Ｎ、Ｅ４３０Ｐ、Ｅ４３０Ｑ、Ｅ４３０Ｒ、Ｅ４３０Ｓ、Ｅ４３０Ｔ、Ｅ４３０Ｖ、Ｅ４３０Ｗ、Ｅ４３０Ｙ、Ｙ４３６Ｉ、Ｓ４４０Ｙ及びＳ４４０Ｗからなる群から選択される少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含む。
【０３４７】
ある例示的な実施形態では、Ｆｃ変異形は、少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み、この修飾は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｑ、Ｎ、Ｋ、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙ；Ｅ４３０Ｔ、Ｓ、Ｇ、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｖ、Ｗ、Ｙ；Ｓ４４０Ｗ、Ｙ；及びＱ３８６Ｋ、からなるから選択される置換である。
【０３４８】
ある例示的な実施形態では、Ｆｃ変異形は、少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み、この修飾は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＩ２５３Ｅ、Ｎ、Ｑ、Ｓ、Ｔ；Ｈ３１０Ｎ、Ｑ、Ｗ、Ｙ；Ｑ３１１Ｅ、Ｒ；Ｅ３８２Ｄ、Ｈ、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ；Ｇ３８５Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ；Ｈ４３３Ｒ；Ｎ４３４Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ；Ｙ４３６、Ａ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ；Ｑ４３８Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｎ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ；Ｋ４３９Ｄ、Ｈ、Ｑ、Ｒ、Ｗ、Ｙ；及びＳ４４０Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｆ、Ｎ、Ｑ、からなるから選択されるアミノ酸置換である。
【０３４９】
ある例示的な実施形態では、Ｆｃ変異形は、少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み、この修飾は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ／Ｑ／Ｎ／Ｋ、Ｅ４３０Ｔ／Ｓ／Ｇ、Ｓ４４０Ｙ／Ｗ、及びＱ３８６Ｋからなる群から選択されるアミノ酸置換である。
【０３５０】
ある例示的な実施形態では、Ｆｃ変異形は、少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み、この修飾は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＩ２５３Ｎ、Ｑ；Ｈ３１０Ｑ；Ｑ３１１Ｅ、Ｒ；Ｅ３８２Ｄ、Ｑ、Ｋ、Ｒ；Ｇ３８５Ｄ、Ｅ、Ｋ、Ｒ；Ｈ４３３Ｒ；Ｎ４３４Ｈ、Ｋ、Ｑ、Ｒ；Ｙ４３６Ｎ、Ｑ、Ｓ、Ｔ；Ｑ４３８Ｎ、Ｓ、Ｔ；Ｋ４３９Ｑ；及びＳ４４０Ｄ、Ｅ、Ｑからなる群から選択されるアミノ酸置換である。
【０３５１】
少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾の例示的な組み合わせは、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｔ、Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｒ／Ｑ３８６Ｋ、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｔ、Ｅ３４５Ｑ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｑ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ４３０Ｔ／Ｑ３８６Ｋ、及びＳ４４０Ｙ／Ｑ３８６Ｋである。
【０３５２】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ３８２またはＱ３８６からなる群から選択される少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み、これらの少なくとも３つのアミノ酸修飾は異なる。
【０３５３】
ある例示的な実施形態では、Ｆｃ変異形は、少なくとも３つのアミノ酸残基における修飾を含み、これらの修飾は、以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｅ３４５Ｒ、Ｑ３９６Ｋ及びＥ４３０Ｇであり、これは、Ｆｃ変異形の重鎖の一方または両方のいずれかにあり得る。
【０３５４】
少なくとも３つのアミノ酸残基における修飾は、表１に列挙される置換から個々に選択され得る。少なくとも３つのアミノ酸残基における修飾の例示的な組み合わせは、下記の通りである：Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｋ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｋ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｎ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｎ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｋ／Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｋ／Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｎ／Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｎ／Ｅ４３０Ｔ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｓ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｓ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｋ／Ｅ４３０Ｓ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｋ／Ｅ４３０Ｓ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｓ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｓ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｎ／Ｅ４３０Ｓ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｎ／Ｅ４３０Ｓ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｆ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｆ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｋ／Ｅ４３０Ｆ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｋ／Ｅ４３０Ｆ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｆ／Ｓ４４０Ｙ、Ｅ３４５Ｑ／Ｅ４３０Ｆ／Ｓ４４０Ｗ、Ｅ３４５Ｎ／Ｅ４３０Ｆ／Ｓ４４０Ｙ、及びＥ３４５Ｎ／Ｅ４３０Ｆ／Ｓ４４０Ｗ。
【０３５５】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、下記で表２に記述されるように、特異的なアミノ酸残基の相互作用の対Ｋ４３９及びＳ４４０における２つの修飾を含んでもよい。
2018516537.tif 000042
【０３５６】
一実施形態では、本願は、Ｆｃ変異形を提供し、この変異形は、下記における修飾を含む：
（ｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９及びＳ４４０に対応するものから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基（但し、例えば、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃにおけるＫ４３９に対応する位置における修飾は、Ｋ４３９Ｄ／Ｅであり、かつ／またはヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃにおけるＳ４４０に対応する位置における修飾は、Ｓ４４０Ｋ／Ｈ／Ｒである等、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＹまたはＳ４４０Ｗではないことを条件とする）、
（ｉｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するもしくはＫ４４７Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４８Ｐに対応する、少なくとも１つのアミノ酸残基、または
（ｉｉｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するもしくはＫ４４７Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４８Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４９Ｐに対応する、少なくとも１つのアミノ酸残基。
【０３５７】
Ｆｃ変異形が、Ｓ４４０及び／またはＫ４４７以外の位置（複数可）にある修飾を含む一実施形態では、変異形は、下記における修飾をさらに含んでもよい：
（ｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９もしくはＳ４４０に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＷまたはＳ４４０Ｙではないことを条件とする）、
（ｉｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するもしくはＫ４４７Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４８Ｐに対応する、少なくとも１つのアミノ酸残基、または
（ｉｉｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するもしくはＫ４４７Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４８Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４９Ｐに対応する、少なくとも１つのアミノ酸残基。
【０３５８】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形はまた、Ｋ４３９ＥまたはＳ４４０Ｋのいずれか等、アミノ酸残基置換のうちの１つのみを含んでもよく、例えば変異形は、任意選択的にＳ４４０における修飾がない、Ｋ４３９における修飾を含んでもよい。
【０３５９】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、アミノ酸残基Ｋ４３９における修飾を含み、この修飾は、Ｋ４３９ＥまたはＫ４３９Ｄ等、Ｅ及びＤから選択されるアミノ酸置換である。
【０３６０】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、任意選択的にＫ４３９における修飾がない、Ｓ４４０における修飾を含む。
【０３６１】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、アミノ酸残基Ｓ４４０における修飾を含み、この修飾は、Ｓ４４０Ｋ、Ｓ４４０ＲまたはＳ４４０Ｈ等、Ｋ、Ｒ及びＨから選択されるアミノ酸置換である。
【０３６２】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｋ４３９及びＳ４４０の両方における修飾を含む。
【０３６３】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｋ４３９における修飾を含み、この修飾は、Ｋ４３９からＤ、ＥまたはＲから選択されるアミノ酸置換であり、Ｓ４４０における修飾は、Ｓ４４０からＤ、Ｅ、Ｋ、ＨまたはＲから選択される。
【０３６４】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｋ４３９Ｄ及びＫ４３９Ｅから選択される、Ｋ４３９における修飾、ならびにＳ４４０Ｋ、Ｓ４４０Ｒ、及びＳ４４０Ｈから選択される、Ｓ４４０における修飾を含む。
【０３６５】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｋ４３９Ｅ及びＳ４４０Ｋ修飾を含む。
【０３６６】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、修飾の組み合わせを含み、この組み合わせは、（ｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ３８２またはＱ３８６に対応するアミノ酸残基、ならびに下記における修飾からなる群から選択されるさらなる修飾を含む：
（ａ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９またはＳ４４０に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＷまたはＳ４４０Ｙではないことを条件とする）、
（ｂ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するもしくはＫ４４７Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４８Ｐに対応する、少なくとも１つのアミノ酸残基、ならびに
（ｃ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するもしくはＫ４４７Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４８Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４９Ｐに対応する、少なくとも１つのアミノ酸残基。
【０３６７】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、修飾の組み合わせを含み、この組み合わせは、（ｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ３８２またはＱ３８６に対応するアミノ酸残基、ならびに下記における修飾からなる群から選択されるさらなる修飾を含む：
（ａ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９またはＳ４４０に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＷまたはＳ４４０Ｙではないことを条件とする）、
（ｂ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するもしくはＫ４４７Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４８Ｐに対応する、少なくとも１つのアミノ酸残基、ならびに
（ｃ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４４７Ｄ／Ｅに対応するもしくはＫ４４７Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４８Ｋ／Ｒ／Ｈ及び４４９Ｐに対応する、少なくとも１つのアミノ酸残基。
【０３６８】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、修飾の組み合わせを含み、この組み合わせは、（ｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ４３０、Ｓ４４０、Ｑ３８６、Ｐ２４７、Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｑ３１１、Ｄ／Ｅ３５６、Ｔ３５９、Ｅ３８２、Ｙ４３６、及びＫ４４７に対応するものから選択される少なくともあるアミノ酸残基における修飾、ならびに（ｉｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９またはＳ４４０に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基におけるさらなる修飾を含む。
【０３６９】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、修飾の組み合わせを含み、この組み合わせは、（ｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｘ、Ｅ４３０Ｘ、Ｓ４４０Ｗ／Ｙ、Ｑ３８６Ｋ（Ｘは、任意のアミノ酸（例えば、天然型アミノ酸）である）に対応するものから選択されるアミノ酸置換、及び（ｉｉ）ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９またはＳ４４０に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基におけるさらなる修飾を含む（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＷまたはＳ４４０Ｙではないことを条件とする）。
【０３７０】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、ＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９及びＳ４４０に対応する位置の両方におけるアミノ酸修飾を含む。
【０３７１】
ある特定の実施形態では、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃにおけるＫ４３９に対応する位置における修飾は、Ｋ４３９Ｄ／Ｅであり、かつ／またはヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃにおけるＳ４４０に対応する位置における修飾は、Ｓ４４０Ｋ／Ｈ／Ｒである。
【０３７２】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ変異形は、修飾の組み合わせを含み、第１の修飾は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ４３０、Ｑ３８６、及びＳ４４０に対応するものから選択されるアミノ酸残基にあり（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＹまたはＳ４４０Ｗではないことを条件とする）、第２及び第３の修飾は、Ｋ４３９ＥまたはＳ４４０Ｋ位におけるアミノ酸置換である。
【０３７３】
さらなる実施形態では、Ｆｃ変異形は、修飾の組み合わせを含み、第１の修飾は、Ｅ３４５Ｒ、Ｑ、Ｎ、Ｋ、Ａ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ、Ｙ、Ｃ、Ｄ；Ｅ４３０Ｔ、Ｓ、Ｇ、Ａ、Ｆ、Ｈ、Ｌ、Ｐ、Ｒ、Ｖ、Ｃ、Ｄ、Ｉ、Ｋ、Ｍ、Ｎ、Ｑ、Ｗ、Ｙ；及びＳ４４０Ｗ、Ｙ、Ｄの群から選択され、第２及び第３の修飾の各々は、Ｋ４３９ＥまたはＳ４４０Ｋ位におけるアミノ酸置換である。
【０３７４】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、修飾の組み合わせを含み、第１の修飾は、Ｅ３４５Ｒ、Ｑ、Ｎ、Ｋ、Ｙ；Ｅ４３０Ｔ、Ｓ、Ｇ、Ｆ、Ｈ  ；Ｓ４４０Ｗ、Ｙ；及びＱ３８６Ｋの群から選択される。
【０３７５】
別の実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｅ３４５Ｒ、Ｋ４３９Ｅ及びＳ４４０Ｋアミノ酸置換を含む。
【０３７６】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ４３０、Ｓ４４０、Ｑ３８６、Ｐ２４７、Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｑ３１１、Ｄ／Ｅ３５６、Ｔ３５９、Ｅ３８２、Ｙ４３６、及びＫ４４７に対応するものから選択される少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＹまたはＳ４４０Ｗではないことを条件とする）、また、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９またはＳ４４０に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基におけるさらなる修飾を含む（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＷまたはＳ４４０Ｙではないことを条件とする）。
【０３７７】
さらなる実施形態では、Ｆｃ変異形は、少なくとも２つのアミノ酸残基における修飾を含み、この修飾は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域における、Ｅ３４５Ｘ、Ｅ４３０Ｘ、Ｓ４４０Ｗ／Ｙ、及びＱ３８６Ｋ（Ｘは任意のアミノ酸（例えば、天然型アミノ酸）である）に対応するものから選択されるアミノ酸置換であり、また、Ｆｃ変異形は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９またはＳ４４０に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基におけるさらなる修飾を含む（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＷまたはＳ４４０Ｙではないことを条件とする）。
【０３７８】
一実施形態では、Ｆｃ変異形は、ＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＫ４３９及びＳ４４０に対応する位置の両方におけるアミノ酸修飾を含む（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＹまたはＳ４４０Ｗではないことを条件とする）。
【０３７９】
さらなる実施形態では、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃにおけるＫ４３９に対応する位置における修飾は、Ｋ４３９Ｄ／Ｅであり、かつ／またはヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃにおけるＳ４４０に対応する位置における修飾は、Ｓ４４０Ｋ／Ｈ／Ｒである。
【０３８０】
さらなる実施形態では、Ｆｃ変異形は、修飾の組み合わせを含み、第１及び第２の修飾は、ヒトＩｇＧｌ重鎖のＦｃ領域におけるＥ３４５、Ｅ４３０、Ｑ３８６、及びＳ４４０からなる群から選択されるアミノ酸置換であり（但し、Ｓ４４０における修飾がＳ４４０ＹまたはＳ４４０Ｗではないことを条件とする）、第３及び第４の修飾は、Ｋ４３９ＥまたはＳ４４０Ｋ位におけるアミノ酸置換である。
【０３８１】
別の実施形態では、本明細書に記載の複合体は、任意の所与のＦｃ変異形が、同じ突然変異を有する別のＦｃ変異形との分子間相互作用を促進しないが、各々がＦｃ領域における異なる修飾を有する２つ以上のＦｃ変異形間で分子間相互作用が促進される、Ｆｃ変異形の混ぜ合わせを含んでもよい。例えば、第１の抗原結合タンパク質は、アミノ酸残基Ｋ４３９の修飾を含むＦｃ変異形であり、第２の抗原結合タンパク質は、アミノ酸残基Ｓ４４０の修飾を含むＦｃ変異形である。かかる実施形態は典型的に、同一のＦｃ分子間での低減されたまたは大きく低減されたＦｃ：Ｆｃ相互作用につながり、これを用いて、２つの異なる抗原結合タンパク質の対合を確実にしてもよい。例えば、全てがＫ４３９またはＳ４４０の修飾を有する抗原結合タンパク質は、分子間相互作用を形成しない場合があるが、第１の抗原結合タンパク質がＫ４３９修飾を有し、第２の抗原結合タンパク質がＳ４４０修飾を有するのであれば、分子間相互作用が形成されるであろう。Ｆｃ変異形の混ぜ合わせについての例示的な修飾部位が下記の表３に示される。
2018516537.tif 000043
【０３８２】
エフェクター機能を低減するＦｃ修飾
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、エフェクター機能（ＣＤＣ及び／またはＡＤＣＣ等）を減弱させるための１つ以上のアミノ酸修飾をさらに含む。例示的な実施形態では、エフェクター機能を減弱させる修飾は、Ｆｃ領域のグリコシル化パターンを変化させない修飾である。ある特定の実施形態では、エフェクター機能を減弱させる修飾は、ヒトエフェクター細胞への結合、１つ以上のＦｃ受容体への結合、及び／またはＦｃ受容体を発現する細胞への結合を低減または排除する。ある例示的な実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、以下の修飾、すなわち、減弱したエフェクター機能をもたらす、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇを含む。
【０３８３】
種々の実施形態では、低減されたエフェクター機能を有するＦｃ変異形は、エフェクター機能（例えば、ＣＤＣ、ＡＤＣＣ、及び／またはＦｃＲへの結合等の活性）を、野生型Ｆｃ領域（例えば、他の突然変異を有し得るが、エフェクター機能を低減する突然変異は有しないＦｃ領域）によって達成されるエフェクター機能と比較して、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％またはそれを超えて低減するＦｃ変異形を指す。ある特定の実施形態では、低減されたエフェクター機能を有するＦｃ変異形は、野生型Ｆｃ領域と比較して、全ての検出可能なエフェクター機能を排除するＦｃ変異形を指す。エフェクター機能を測定するためのアッセイが当該技術分野で知られており、下記に記載される。
【０３８４】
インビトロ及び／またはインビボ細胞傷害性アッセイを実施して、ＣＤＣ及び／またはＡＤＣＣ活性の低減／除去を確認することができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実施して、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを行って、抗体がＦｃγＲ結合を欠く（故にＡＤＣＣ活性を欠く可能性が高い）ことを確実にすることができる。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞であるＮＫ細胞がＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方で、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上のＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ及びＫｉｎｅｔ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−４９２（１９９１）に要約される。目的とする分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例が、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８３：７０５９−７０６３（１９８６）を参照されたい）、及びＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：１４９９−１５０２（１９８５）、５，８２１，３３７（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１−１３６１（１９８７）を参照されたい）に記載される。代替的に、非放射性アッセイ方法が用いられ得る（例えば、フローサイトメトリーのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ及びＣｙｔｏＴｏｘ  ９６（登録商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を参照されたい。かかるアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。代替的に、または追加的に、目的とする分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：６５２−６５６（１９９８）に開示のもの等の動物モデルで評価され得る。Ｃ１ｑ結合アッセイを実行して、抗体がＣ１ｑに結合することができず、それ故にＣＤＣ活性を欠くことを確認することができる。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９及びＷＯ２００５／１００４０２のＣ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照されたい。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイが行われ得る（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：１６３（１９９６）、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０１：１０４５−１０５２（２００３）、及びＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．及び  Ｍ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ  １０３：２７３８−２７４３（２００４）を参照されたい）。
【０３８５】
エフェクター機能が低減したＦｃ変異形には、以下のアミノ酸残基、すなわち、２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７及び３２９のうちの１つ以上でアミノ酸置換を有するものが含まれる（米国特許第６，７３７，０５６号）。かかるＦｃ変異形には、アミノ酸２６５、２６９、２７０、２９７及び３２７位のうちの２つ以上で置換を有するＦｃ変異体、例えば、残基２６５及び２９７のアラニンへの置換を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異形が挙げられる（米国特許第７，３３２，５８１号）。
【０３８６】
ＦｃＲへの結合が改善または減少されたある特定の抗体変異形が記載される（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号、ＷＯ２００４／０５６３１２、及びＳｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１−６６０４（２００１）を参照されたい）。
【０３８７】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、減少したＣ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）をもたらす、Ｆｃ領域における１つ以上の修飾を含むことができ、これは、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２、及びＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−４１８４（２０００）に記載されるようなものである。例示的な実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、ヒトＩｇＧ１（残基のＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるリジン３２２の修飾を含む。いくつかの実施形態では、修飾（複数可）は、例えば、修飾（複数可）を有しないＦｃ領域と比較して、減少したＣ１ｑ結合及び／またはＣＤＣをもたらす。例えば、ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、ヒトＩｇＧ１（残基のＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａ修飾を含み、これは例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２、及びＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−４１８４（２０００）に記載されるようなものである。（ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における、及び残基のＥＵ番号付けに従った）他のかかる例示的な修飾としては、Ｄ２７０Ｋ、Ｄ２７０Ｖ、Ｐ３２９Ａ、及びＰ３３１Ａが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３８８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形のうちのいずれかは、ヒトＩｇＧ１（残基のＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａ修飾、ならびにヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むことができる。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形のうちのいずれかは、ヒトＩｇＧ１（残基のＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａ修飾、ならびにヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される単一のアミノ酸置換を含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形のうちのいずれかは、ヒトＩｇＧ１（残基のＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａ修飾と、ヒトＩｇＧ１（ＥＵ番号付け）のＦｃ領域における（ａ）Ｅ３４５Ｒ及びＥ４３０Ｇ、（ｂ）Ｅ３４５Ｒ及びＳ４４０Ｙ、ならびに（ｃ）Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙから選択される一組のアミノ酸置換とを含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形のうちのいずれかは、ヒトＩｇＧ１（残基のＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、及びＳ４４０Ｙ置換を含むことができる。
【０３８９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形のうちのいずれかは、ヒトＩｇＧ１（残基のＥＵ番号付け）のＦｃ領域における、表４から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形のうちのいずれかは、ヒトＩｇＧ１（残基のＥＵ番号付け）のＦｃ領域におけるＫ３２２Ａ修飾、及び表４から選択される１つ以上のアミノ酸置換を含むことができる。
【０３９０】
ある特定の実施形態では、本明細書に包含されるＦｃ変異形（六量体形成を強化し、この形成された六量体の抗原結合複合体がアゴニスト活性、つまり、Ｆｃ領域における修飾を有しない親抗体のアゴニスト活性と比較して強化されたアゴニスト活性を有する、修飾Ｆｃ領域を含むＦｃ変異形）は、国際特許公開第ＷＯ２０１３／００４８４２号、第ＷＯ２０１４／１０８１９８号及び／または第ＷＯ２０１４／００６２１７号に記載のＦｃ修飾のうちのいずれか１つ以上を含むＦｃ変異形である。ある特定の実施形態では、Ｆｃ修飾のうちの１つ以上を含むＦｃ変異形は、低減された（抑止を含む）ＣＤＣを有するようにさらに修飾される。例えば、限定することなく、いくつかの実施形態では、Ｆｃ変異形は、Ｋ３２２Ａ修飾を含む。
【０３９１】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、Ｓｔｒｏｈｌ、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２０；６８５−６９１（２００９）に記載されるような、エフェクター機能  を低減するＦｃ領域への修飾を含む。例示的な実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、以下のものから選択される１つ以上のアミノ酸残基の修飾を含む（残基のＥＵ番号付け）：
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４及び２３５、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３２９、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２３４及び２３７、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２３５、２３７及び３１８、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２２８及び２３６
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における２６８、３０９、３３０及び３３１、
（ｈ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２０、２２６、２２９及び２３８、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６、２２９、２３３、２３４及び２３５、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２３４、２３５及び３３１、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２２６及び２３０、ならびに
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における２６７及び３２８、
（これらの修飾は、Ｆｃドメインのエフェクター機能を低減する）。
【０３９２】
他の例示的な実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、以下のものから選択される、エフェクター機能を減弱させる修飾を含む（残基のＥＵ番号付け）：
（ａ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＮ２９７Ａ、
（ｂ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
（ｃ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＰ３２９Ｇ、
（ｄ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＶ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
（ｅ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＬ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＥ３１８Ａ、
（ｆ）ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域におけるＳ２２８Ｐ及びＬ２３６Ｅ、
（ｇ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域における１１８〜２６０またはヒトＩｇＧ４のＦｃ領域における２６１〜４４７、
（ｈ）ヒトＩｇＧ２のＦｃ領域におけるＨ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ及びＡ３３１Ｓ、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ及びＰ２３８Ｓ、
（ｊ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ及びＬ２３５Ａ、
（ｋ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及びＰ３３１Ｓ、
（ｌ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＣ２２６Ｓ及びＰ２３０Ｓ、ならびに
（ｍ）ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域におけるＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ。
【０３９３】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＦｃ変異形は、エフェクター機能を減弱されるＮ２９７Ａ修飾を含まない。
【０３９４】
ある例示的な実施形態では、本明細書で提供されるアゴニスト抗原結合複合体は、ＦｃＲ結合の不在下でＯＸ４０に結合し、それを作動する。ある例示的な実施形態では、本明細書で提供されるアゴニスト抗原結合複合体は、エフェクター機能を減弱させるＦｃ領域における突然変異を含まない同等の抗原結合複合体と比較して、低減されたＦｃＲ結合を有しながらＯＸ４０に結合し、それを作動する。種々の実施形態では、本明細書で提供されるアゴニスト抗原結合複合体は、エフェクター機能を減弱させるＦｃ領域における突然変異を含まない同等の抗原結合複合体と比較して、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％またはそれを超えて低減されたＦｃＲ結合を有しながら、ＯＸ４０に結合し、それを作動する。ある特定の実施形態では、本明細書で提供されるアゴニスト抗原結合複合体は、エフェクター機能を減弱させるＦｃ領域における突然変異を含まない同等の抗原結合複合体と比較して、少なくとも５０％、７５％、８０％、８５％、９０、９５％、９７％、９８％またはそれを超えて低減されたＦｃＲ結合を有しながら、ＯＸ４０に結合し、それを作動する。
【０３９５】
ベクター、宿主細胞、及び組換え方法
本明細書で提供される抗原結合ポリペプチドの組換え産生では、この抗原結合ポリペプチドをコードする核酸が単離され、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）のため、または発現のために、複製可能ベクターに挿入される。抗原結合ポリペプチドをコードするＤＮＡは、従来の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用して）容易に単離及び配列決定される。多くのベクターが利用可能である。ベクターの選択は、使用される宿主細胞に部分的に依存する。一般に、好ましい宿主細胞は、原核性または真核性のいずれか（一般に哺乳類であるが、真菌類（例えば酵母）、昆虫、植物、及び他の多細胞生物由来の有核細胞も含む）を起源とする。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、単離された宿主細胞、例えば、細胞培養で成長させられる無脊椎動物（例えば昆虫）または脊椎動物（例えば、マウス、ヒト、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞等）生物に由来する細胞株といった、単離された細胞として成長させられる多細胞生物に由来する宿主細胞である。抗原結合ポリペプチドが抗体である場合、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及び、ＩｇＥ定常領域を含む任意のアイソタイプの定常領域がこの目的で使用され得、かかる定常領域が任意のヒトまたは動物種から得られ得ることが理解される。
【０３９６】
ａ．原核宿主細胞を使用した抗原結合ポリペプチドの生成
ｉ．ベクター構築
本明細書で提供される抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体等）のポリペプチド成分をコードするポリヌクレオチド配列は、標準の組換え技法を用いて得ることができる。所望のポリヌクレオチド配列は、例えば、ハイブリドーマ細胞等の抗体産生細胞から単離及び配列決定され得る。代替的に、ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド合成機またはＰＣＲ技法を用いて合成され得る。得られた時点で、ポリペプチドをコードする配列は、原核生物宿主内で異種ポリヌクレオチドを複製及び発現することができる組換えベクターに挿入される。利用可能であり、かつ当該技術分野で既知の多くのベクターが本発明において使用され得る。適切なベクターの選択は、ベクターに挿入される核酸の大きさ及びベクターで形質転換される特定の宿主細胞に主に依存する。各ベクターは、その機能（異種ポリヌクレオチドの増幅もしくは発現、またはこれらの両方）及びそれが存在する特定の宿主細胞とのその適合性に応じて種々の成分を含有する。ベクター成分には、一般に、複製起点、選択マーカー遺伝子、プロモーター、リボソーム結合部位（ＲＢＳ）、シグナル配列、異種核酸挿入及び転写終結配列が含まれるが、これらに限定されない。
【０３９７】
一般に、宿主細胞と適合性のある種由来のレプリコン及び制御配列を含有するプラスミドベクターが、これらの宿主に関連して使用される。このベクターは、通常、複製部位、及び形質転換細胞において表現型選択を提供することができるマーキング配列を持つ。例えば、Ｅ．ｃｏｌｉは典型的に、Ｅ．ｃｏｌｉ種由来のプラスミドであるｐＢＲ３２２を使用して形質転換される。ｐＢＲ３２２は、アンピシリン（Ａｍｐ）及びテトラサイクリン（Ｔｅｔ）耐性をコードする遺伝子を含有し、それ故に形質転換細胞を特定するための容易な手段を提供する。ｐＢＲ３２２、その誘導体、または他の微生物プラスミドもしくはバクテリオファージは、内因性タンパク質の発現のための微生物によって使用され得るプロモーターも含有し得るか、またはそれを含有するように修飾され得る。特定の抗体の発現のために使用されるｐＢＲ３２２誘導体の例は、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，６４８，２３７号に詳述される。
【０３９８】
加えて、宿主微生物と適合性のあるレプリコン及び制御配列を含有するファージベクターが、これらの宿主に関連して形質転換ベクターとして使用され得る。例えば、λＧΕΜ．ΤΜ．−１１等のバクテリオファージが、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＬＥ３９２等の感受性宿主細胞を形質転換するために使用され得る組換えベクターを作製する際に利用されてもよい。
【０３９９】
本発明の発現ベクターは、ポリペプチド成分の各々をコードする２つ以上のプロモーター−シストロン対を含み得る。プロモーターは、その発現を調節するシストロンの上流（５’）に位置する非翻訳調節配列である。原核生物プロモーターは、典型的には、２つのクラス、すなわち誘導プロモーター及び構成プロモーターに分けられる。誘導プロモーターは、培養条件の変化、例えば、栄養素の存在もしくは不在、または温度の変化に応答してその制御下で増加したレベルのシストロンの転写を開始するプロモーターである。
【０４００】
様々な潜在的宿主細胞によって認識される多数のプロモーターが周知である。選択されたプロモーターは、制限酵素消化によりソースＤＮＡからプロモーターを除去し、かつ単離されたプロモーター配列を本発明のベクターに挿入することによって、例えば、軽鎖または重鎖をコードするシストロンＤＮＡに作動可能に連結され得る。天然プロモーター配列も多くの異種プロモーターもいずれも、標的遺伝子の増幅及び／または発現を誘導するために使用され得る。いくつかの実施形態では、異種プロモーターが一般に天然標的ポリペプチドプロモーターと比較して発現された標的遺伝子のより大きい転写及びより高い収率をもたらすため、異種プロモーターが利用される。
【０４０１】
原核生物宿主との使用に好適なプロモーターには、ＰｈｏＡプロモーター、β−ガラクタマーゼ及びラクトースプロモーター系、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系、及びハイブリッドプロモーター、例えば、ｔａｃまたはｔｒｃプロモーターが含まれる。しかしながら、細菌において機能的である他のプロモーター（他の既知の細菌またはファージプロモーター等）も好適である。それらのヌクレオチド配列が公開されており、それにより、当業者が、任意の必要とされる制限部位を供給するリンカーまたはアダプターを使用して、抗原結合ポリペプチドタンパク質の遺伝子、例えば、標的軽鎖及び重鎖をコードする、シストロンにそれらを作動可能に連結することが可能になっている（Ｓｉｅｂｅｎｌｉｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８０）Ｃｅｌｌ  ２０：２６９）。
【０４０２】
一実施形態では、組換えベクター内の各シストロンは、膜にわたる発現ポリペプチドの転位を誘導する分泌シグナル配列成分を含む。一般に、シグナル配列は、ベクターの成分であり得るか、またはベクターに挿入される標的ポリペプチドＤＮＡの一部であり得る。選択されたシグナル配列は、宿主細胞によって認識及びプロセシングされる（すなわち、シグナルペプチダーゼによって切断される）ものであるべきである。異種ポリペプチドに天然のシグナル配列を認識及びプロセシングしない原核宿主細胞の場合、シグナル配列は、例えば、アルカリ性ホスファターゼ、ペニシリナーゼ、ｌｐｐ、または熱安定性エンテロトキシンＩＩ（ＳＴＩＩ）リーダー、ＬａｍＢ、ＰｈｏＥ、ＰｅｌＢ、ＯｍｐＡ、及びＭＢＰからなる群から選択される原核シグナル配列によって置換される。本発明の一実施形態では、発現系の両シストロンにおいて使用されるシグナル配列は、ＳＴＩＩシグナル配列またはその変異形である。
【０４０３】
別の実施形態では、免疫グロブリンの産生は、宿主細胞の細胞質で生じ得、したがって、各シストロン内での分泌シグナル配列の存在を必要としない。その点で、免疫グロブリン軽鎖及び重鎖は、細胞質内で発現され、折り畳まれ、組み立てられて機能的免疫グロブリンを形成する。ある特定の宿主株（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ  ｔｒｘＢ−株）は、ジスルフィド結合形成に有利な細胞質条件を提供し、それによって、発現されたタンパク質サブユニットの適切な折り畳み及び組み立てを可能にする。Ｐｒｏｂａ  ａｎｄ  Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  Ｇｅｎｅ，１５９：２０３（１９９５）を参照されたい。
【０４０４】
本発明の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）の発現に好適な原核生物宿主細胞には、グラム陰性生物またはグラム陽性生物等のＡｒｃｈａｅｂａｃｔｅｒｉａ及びＥｕｂａｃｔｅｒｉａが含まれる。有用な細菌の例としては、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｂａｃｉｌｌｉ（例えば，Ｂ．Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ種（例えば、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｒｈｉｚｏｂｉａ、Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ、またはＰａｒａｃｏｃｃｕｓが挙げられる。一実施形態では、グラム陰性細胞が使用される。一実施形態では、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞が、本発明の宿主として使用される。Ｅ．ｃｏｌｉ株の例としては、株Ｗ３１１０（Ｂａｃｈｍａｎｎ，Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．：Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８７），ｐｐ．１１９０−１２１９、ＡＴＣＣ寄託番号２７，３２５）及びその誘導体（遺伝子型Ｗ３１１０  ＡｆｈｕＡ（ＡｔｏｎＡ）ｐｔｒ３  ｌａｃ  Ｉｑ  ｌａｃＬ８  ＡｏｍｐＴＡ（ｎｍｐｃ−ｆｅｐＥ）ｄｅｇＰ４１  ｋａｎＲを有する株３３Ｄ３（米国特許第５，６３９，６３５号）を含む）が挙げられる。他の株及びその誘導体、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ  ２９４（ＡＴＣＣ  ３１，４４６）、Ｅ．ｃｏｌｉ  Ｂ、Ｅ  ｃｏｌｉｘ１７７６（ＡＴＣＣ  ３１，５３７）、及びＥ．ｃｏｌｉ  ＲＶ３０８（ＡＴＣＣ  ３１，６０８）も好適である。一実施形態では、Ｅ  ｃｏｌｉ  Ａｌｐｐが特に使用される。これらの例は、限定するものではなく、例証するものである。定義された遺伝子型を有する上述の細菌のうちのいずれの誘導体の構築方法も、当該技術分野で既知であり、例えば、Ｂａｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，８：３０９−３１４（１９９０）に記載される。一般に、細菌の細胞におけるレプリコンの複製可能性を考慮して適切な細菌を選択することが必要である。例えば、ｐＢＲ３２２、ｐＢＲ３２５、ｐＡＣＹＣ１７７、またはｐＫＮ４１０等の周知のプラスミドを使用してレプリコンを提供する場合、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ種が宿主として好適に使用され得る。典型的には、宿主細胞は、最小量のタンパク質分解酵素しか分泌すべきでなく、さらなるプロテアーゼ阻害剤が細胞培養物に組み込まれることが望ましくあり得る。
【０４０５】
ｉｉ．ポリペプチド産生
宿主細胞は、上述の発現ベクターで形質転換され、プロモーターの誘導、形質転換体の選択、または所望の配列をコードする遺伝子の増幅に適切になるように修飾された従来の栄養素培地で培養される。
【０４０６】
形質転換とは、ＤＮＡが染色体外要素として、または染色体組み込み体によってのいずれかで複製可能になるように、ＤＮＡを原核生物宿主に導入することを意味する。使用される宿主細胞に応じて、形質転換がかかる細胞に適切な標準の技法を用いて行われる。一般に、塩化カルシウムを用いるカルシウム処理が、実質的な細胞壁障壁を含有する細菌細胞に使用される。形質転換の別の方法は、ポリエチレングリコール／ＤＭＳＯを用いる。使用されるなおも別の技法は、電気穿孔である。
【０４０７】
本発明のポリペプチドを産生するために使用される原核生物細胞は、当該技術分野で既知の、かつ選択された宿主細胞の培養に好適な培地で成長させられる。好適な培地の例としては、必要な栄養素補充物を含むルリアブロス（ＬＢ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、培地は、発現ベクターを含有する原核生物細胞の成長を選択的に可能にするために、発現ベクターの構築に基づいて選択された選択剤も含有する。例えば、アンピシリンは、アンピシリン耐性遺伝子を発現する細胞を成長させるための培地に添加される。
【０４０８】
炭素、窒素、及び無機リン酸塩源に加えて、任意の必要な補充物も、単独で、または複合窒素源等の別の補充物もしくは培地との混合物として導入される適切な濃度で含まれ得る。任意選択的に、培養培地は、グルタチオン、システイン、シスタミン、チオグリコレート、ジチオエリトリトール、及びジチオスレイトールからなる群から選択される１つ以上の還元剤を含有し得る。
【０４０９】
原核生物宿主細胞は、好適な温度で培養される。Ｅ．ｃｏｌｉ成長の場合、例えば、好ましい温度は、約２０℃〜約３９℃の範囲、より好ましくは約２５℃〜約３７℃の範囲、さらにより好ましくは約３０℃である。培地のｐＨは、主に宿主生物に応じて約５〜約９の範囲の任意のｐＨであり得る。Ｅ．ｃｏｌｉの場合、ｐＨは、好ましくは約６．８〜約７．４、より好ましくは約７．０である。
【０４１０】
誘導プロモーターが本発明の発現ベクターに使用される場合、タンパク質発現は、プロモーターの活性化に好適な条件下で誘導される。本発明の一実施形態では、ＰｈｏＡプロモーターが、ポリペプチドの転写を制御するために使用される。したがって、形質転換宿主細胞は、誘導のためにリン酸塩制限培地で培養される。好ましくは、リン酸塩制限培地は、Ｃ．Ｒ．Ａ．Ｐ培地である（例えば、Ｓｉｍｍｏｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２６３：１３３−１４７を参照されたい）。様々な他の誘導因子が、当該技術分野で既知の用いられるベクター構築物に従って使用され得る。
【０４１１】
本発明の一実施形態では、抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体等）産生は、発酵プロセスによって大量に行われる。様々な大規模供給バッチ発酵手順が組換えタンパク質の産生に利用可能である。大規模発酵は、少なくとも１０００リットルの容量、好ましくは約１，０００〜１００，０００リットルの容量を有する。これらの発酵槽は、酸素及び栄養素、特にグルコース（好ましい炭素／エネルギー源）を分布させるために撹拌インペラーを使用する。小規模発酵とは、一般に、容積がおよそ１００リットル以下であり、約１００リットル〜約１リットルの範囲であり得る発酵槽での発酵を指す。
【０４１２】
発酵プロセスにおいて、タンパク質発現の誘導は、典型的には、細胞が所望の密度、例えば、約１８０〜２２０のＯＤ５５０になるまで好適な条件下で成長した後に開始され、その段階で、細胞は、初期静止期にある。当該技術分野で知られており、また上述されるように、様々な誘導因子が、用いられるベクター構築物に従って使用され得る。細胞は、誘導前により短い期間成長させられてもよい。細胞は、通常、約１２〜５０時間誘導されるが、より長いまたはより短い誘導時間も使用され得る。
【０４１３】
抗原結合ポリペプチド（特にタンパク質分解感受性のもの）のタンパク質分解を最小限に抑えるために、タンパク質分解酵素が欠損したある特定の宿主株が本発明に使用され得る。例えば、宿主細胞株は、既知の細菌プロテアーゼ、例えば、プロテアーゼＩＩＩ、ＯｍｐＴ、ＤｅｇＰ、Ｔｓｐ、プロテアーゼＩ、プロテアーゼＭｉ、プロテアーゼＶ、プロテアーゼＶＩ、及びそれらの組み合わせをコードする遺伝子において遺伝子変異（複数可）をもたらすように修飾され得る。いくつかのＥ．ｃｏｌｉプロテアーゼ欠損株が利用可能であり、例えば、Ｊｏｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：２７７３−２７７７、Ｇｅｏｒｇｉｏｕ  ｅｔ  ａｌ．、米国特許第５，２６４，３６５号、Ｇｅｏｒｇｉｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，５０８，１９２号、Ｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，２：６３−７２（１９９６）に記載される。
【０４１４】
一実施形態では、タンパク質分解酵素が欠損し、かつ１つ以上のシャペロンタンパク質を過剰発現するプラスミドで形質転換されたＥ．ｃｏｌｉ株が、本発明の発現系における宿主細胞として使用される。第２の実施形態では、Ｅ．ｃｏｌｉ株は、外膜のリポタンパク質が欠損している（ΔΙρρ）。
【０４１５】
ｉｉｉ．抗原結合ポリペプチド精製
一実施形態では、本明細書で産生される抗原結合ポリペプチドは、さらなるアッセイ及び使用のために、実質的に同種の調製物を得るようにさらに精製される。当該技術分野で既知の標準のタンパク質精製方法が用いられ得る。以下の手順、すなわち、免疫親和性またはイオン交換カラムでの分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、ＤＥＡＥ等のシリカまたは陽イオン交換樹脂でのクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、硫酸アンモニウム沈殿、及び例えばＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−７５を使用したゲル濾過が、好適な精製手順の例示である。
【０４１６】
一実施形態では、固相に固定化されたプロテインＡが、例えば、本発明の抗原結合ポリペプチドの免疫親和性精製に使用される。プロテインＡは、高親和性で抗原結合ポリペプチドのＦｃ領域に結合するＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ由来の４１ｋＤの細胞壁タンパク質である。Ｌｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９８３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．６２：１  −１３。プロテインＡが固定化される固相は、好ましくは、ガラスまたはシリカ表面を含むカラム、より好ましくは、制御孔ガラスカラムまたはケイ酸カラムである。いくつかの適用では、カラムは、夾雑物の非特異的結合を防止するためにグリセロール等の試薬でコーティングされている。
【０４１７】
精製の第１のステップとして、上述のように細胞培養から得られた調製物がプロテインＡ固定化固相に適用されて、目的とする抗原結合ポリペプチドのプロテインＡへの特異的結合を可能にする。次いで、固相は、固相に非特異的に結合している夾雑物を除去するために洗浄される。抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体等）が、溶出により固相から回収される。
【０４１８】
ｂ．原核宿主細胞を使用した抗原結合ポリペプチドの生成
ベクター成分は概して、以下のもの、すなわち、シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサー要素、プロモーター、及び転写終結配列のうちの１つ以上を含むが、これらに限定されない。
【０４１９】
ｉ．シグナル配列成分
真核宿主細胞において使用するためのベクターもまた、目的とする成熟タンパク質またはポリペプチドのＮ末端に特異的切断部位を有するシグナル配列または他のポリペプチドを含有してもよい。選択される異種シグナル配列は、好ましくは、宿主細胞によって認識及びプロセシング（すなわち、シグナルペプチダーゼによって切断される）ものである。哺乳類細胞発現においては、哺乳類シグナル配列、ならびにウイルス分泌リーダー、例えば、単純ヘルペスｇＤシグナルが利用可能である。かかる前駆体領域のＤＮＡは、リーディングフレームにおいて、所望の抗原結合ポリペプチド（複数可）（例えば、抗体）をコードするＤＮＡに連結される。
【０４２０】
ｉｉ．複製起点
一般に、複製起点成分は、哺乳類発現ベクターに必要とされない。例えば、ＳＶ４０起点が典型的に使用され得るが、これは単に、ＳＶ４０起点が初期プロモーターを含有するためである。
【０４２１】
ｉｉｉ．選択遺伝子構成要素
発現ベクター及びクローニングベクターは、選択遺伝子、別名、選択可能なマーカーを含有し得る。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質もしくは他の毒素、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、もしくはテトラサイクリンへの耐性を与えるか、（ｂ）栄養要求性欠損を補完するか（関連性のある場合）、または（ｃ）複合培地から入手不可能な必須の栄養素を供給する、タンパク質をコードする。
【０４２２】
選択スキームの一例は、宿主細胞の成長を停止する薬物を利用する。異種遺伝子での形質転換に成功した細胞は、薬物耐性を与えるタンパク質を産生し、それ故に選択レジメンで生き残る。かかる優性選択の例は、薬物ネオマイシン、ミコフェノール酸、及びハイグロマイシンを使用する。
【０４２３】
哺乳類細胞に好適な選択可能なマーカーの別の例は、ＤＨＦＲ、チミジンキナーゼ、メタロチオネイン−Ｉ及び−ＩＩ、好ましくは、霊長類メタロチオネイン遺伝子、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼ等の、抗体核酸を取り込むための細胞成分の特定を可能にするものである。
【０４２４】
例えば、ＤＨＦＲ選択遺伝子で形質転換された細胞はまず、ＤＨＦＲの競合アンタゴニストであるメトトレキサート（Ｍｔｘ）を含有する培養培地中で形質転換体の全てを培養することによって、特定される。野生型ＤＨＦＲが用いられるときの適切な宿主細胞は、ＤＨＦＲ活性が欠損したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株（例えば、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−  ９０９６）である。
【０４２５】
代替的に、抗体、野生型ＤＨＦＲタンパク質、及びアミノグリコシド３’−ホスホトランスフェラーゼ（ＡＰＨ）等の別の選択可能なマーカーをコードするＤＮＡ配列で形質転換または共形質転換された宿主細胞（特に、内因性ＤＨＦＲを含有する野生型宿主）は、アミノグリコシド抗生物質、例えば、カナマイシン、ネオマイシン、またはＧ４１８等の選択可能なマーカー用の選択剤を含有する培地中での細胞成長によって選択され得る。例えば、米国特許第４，９６５，１９９号を参照されたい。
【０４２６】
ｉｖ．プロモーター成分
発現ベクター及びクローニングベクターは通常、宿主生物によって認識され、所望のＦｃ含有ポリペプチド（複数可）（例えば、抗体）核酸に作動可能に連結されるプロモーターを含有する。真核生物のためのプロモーター配列が知られている。実質的に全ての真核遺伝子が、転写が始まる部位からおよそ２５〜３０塩基上流に位置するＡＴに富んだ領域を有する。多くの遺伝子の転写開始から７０〜８０塩基上流に見られる別の配列は、Ｎが任意のヌクレオチドであるＣＮＣＡＡＴ領域である。大半の真核遺伝子の３’末端は、コード配列の３’末端へのポリＡ尾部の付加のためのシグナルであり得るＡＡＴＡＡＡ配列である。これらの配列の全てが核発現ベクターに好適に挿入される。
【０４２７】
Ｆｃ含有ポリペプチド（複数可）（例えば、抗体等）の産生の場合、哺乳類宿主細胞におけるベクターからの転写は、例えば、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス、アデノウイルス（アデノウイルス２等）、ウシ乳頭腫ウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、及びシミアンウイルス４０（ＳＶ４０）等のウイルスのゲノムから、異種哺乳類プロモーター、例えば、アクチンプロモーターもしくは免疫グロブリンプロモーターから、または熱ショックプロモーターから得られるプロモーターによって制御され得るが、但し、かかるプロモーターが宿主細胞系と適合性であることを条件とする。
【０４２８】
ＳＶ４０ウイルスの初期プロモーター及び後期プロモーターは、ＳＶ４０ウイルス複製起点も含有するＳＶ４０制限断片として好都合に得られる。ヒトサイトメガロウイルスの前初期プロモーターは、Ｈｉｎｄ  １１１Ｅ制限断片として好都合に得られる。ウシ乳頭腫ウイルスをベクターとして使用して哺乳類宿主におけるＤＮＡを発現させる系が米国特許第４，４１９，４４６号に開示される。この系の修飾については、米国特許第４，６０１，９７８号に記載される。また、単純ヘルペスウイルス由来のチミジンキナーゼプロモーターの制御下でのマウス細胞でのヒトβ−インターフェロンｃＤＮＡの発現に関しては、Ｒｅｙｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２９７：５９８−６０１（１９８２）を参照されたい。代替的に、ラウス肉腫ウイルス長末端反復がプロモーターとして使用され得る。
【０４２９】
ｖ．エンハンサー要素成分
より高次の真核生物による、抗原結合ポリペプチド（複数可）（例えば、抗体等）をコードするＤＮＡの転写は、エンハンサー配列をベクターに挿入することによって増大され得る。哺乳類遺伝子（例えば、グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテイン、及びインスリン遺伝子）由来の多くのエンハンサー配列が現在知られている。また、真核細胞ウイルス由来のエンハンサーを使用してもよい。例としては、複製起点の後半側のＳＶ４０エンハンサー（ｂｐ１００〜２７０）、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後半側のポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーが挙げられる。真核プロモーターの活性化を強化するための要素の説明に関しては、Ｙａｎｉｖ，Ｎａｔｕｒｅ  ２９７：１７−１８（１９８２）も参照されたい。エンハンサーは、エンハンサーが達成される限り、抗体ポリペプチドコード配列の５’位側でも３’位側でもベクターへとスプライシングされ得るが、一般には、プロモーターから５’部位に位置する。
【０４３０】
ｖｉ．転写終結成分
原核宿主細胞において使用される発現ベクターはまた、典型的には、転写の終結及びｍＲＮＡの安定化に必要な配列も含有する。かかる配列は、一般に、真核またはウイルスＤＮＡまたはｃＤＮＡの５’非翻訳領域、時折、３’非翻訳領域から入手可能である。これらの領域は、抗体をコードするｍＲＮＡの非翻訳部分内のポリアデニル化断片として転写されたヌクレオチドセグメントを含有する。１つの有用な転写終結成分は、ウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。ＷＯ９４／１１０２６及びそこで開示される発現ベクターを参照されたい。
【０４３１】
ｖｉｉ．宿主細胞の選択及び形質転換
本明細書におけるベクター内でのＤＮＡのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞には、脊椎動物宿主細胞を含む、本明細書に記載の高等真核生物の細胞が含まれる。培養（組織培養）における脊椎動物細胞の調製は、日常的な手順となってきている。有用な哺乳動物宿主細胞株の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）；ヒト胚腎臓株（２９３細胞または懸濁培養下での増殖のためにサブクローニングされた２９３細胞、Ｇｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７））、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １０）、チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ（ＣＨＯ、Ｕｒｌａｕｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４２１６（１９８０））；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３−２５１（１９８０））；サル腎細胞（ＣＶ１  ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）；アフリカミドリザル腎細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５８７）；ヒト子宮頸がん細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ２）；イヌ腎細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ３４）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ  ３Ａ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７５）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２、ＨＢ  ８０６５）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ５１）；ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ  Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４−６８（１９８２））；ＭＲＣ  ５細胞；ＦＳ４細胞；及びヒト肝がん株（Ｈｅｐ  Ｇ２）である。
【０４３２】
宿主細胞は、所望の抗原結合ポリペプチド（複数可）（例えば、抗体等）産生のために、上述の発現ベクターまたはクローニングベクターで形質転換され、プロモーターの誘導、形質転換対の選択、または所望の配列をコードする遺伝子の増幅のために適宜改変された従来の栄養素培地中で培養される。
【０４３３】
ｖｉｉｉ．宿主細胞の培養
本発明の所望の抗原結合ポリペプチド（複数可）（例えば、抗体等）を産生させるために使用される宿主細胞は、様々な培地中で培養され得る。Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１０（Ｓｉｇｍａ）、最小必須培地（（ＭＥＭ）、（Ｓｉｇｍａ）、ＲＰＭＩ−１６４０（Ｓｉｇｍａ）、及びダルベッコ改変イーグル培地（（ＤＭＥＭ）、Ｓｉｇｍａ）等の市販の培地が、宿主細胞の培養に好適である。加えて、Ｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．５８：４４（１９７９）、Ｂａｒｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０２：２５５（１９８０）、米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、もしくは同第５，１２２，４６９号、ＷＯ９０／０３４３０、ＷＯ８７／００１９５、または米国特許Ｒｅ．３０，９８５号に記載の培地のうちのいずれも、宿主細胞のための培地として使用され得る。これらの培地のいずれにも、必要に応じて、ホルモン及び／または他の増殖因子（インスリン、トランスフェリン、または上皮増殖因子等）、塩（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸塩等）、緩衝液（ＨＥＰＥＳ等）、ヌクレオチド（アデノシン及びチミジン等）、抗生物質（ＧＥＮＴＡＭＹＣＩＮ（商標）薬等）、微量要素（マイクロモルの範囲の最小濃度で通常存在する無機化合物と定義される）、及びグルコースまたは同等のエネルギー源が補充され得る。任意の他の必要な補充物もまた、当業者には既知であろう適切な濃度で含まれ得る。温度、ｐＨ等の培養条件は、発現のために選択された宿主細胞にこれまでに使用されているものであり、当業者には明らかであろう。
【０４３４】
ｉｘ．抗原結合ポリペプチドの精製
組換え技法を使用するとき、抗原結合ポリペプチドは、細胞内で産生され得るか、または培地に直接分泌され得る。抗原結合ポリペプチドが細胞内で産生される場合、第１のステップとして、粒子状残屑、宿主細胞または溶解された断片のいずれかが、例えば、遠心分離または限外濾過によって除去される。抗原結合ポリペプチドが培地に分泌される場合、かかる発現系由来の上清が、一般に、市販のポリペプチド濃縮フィルター、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外濾過装置を使用して最初に濃縮される。タンパク質分解を阻害するためのＰＭＳＦ等のプロテアーゼ阻害剤が前述のステップのうちのいずれかに含まれてもよく、外来性夾雑物の成長を阻止するための抗生物質が含まれてもよい。
【０４３５】
細胞から調製された抗原結合ポリペプチド組成物は、例えば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィ、ゲル電気泳動、透析、及び親和性クロマトグラフィーを使用して精製することができ、このうち親和性クロマトグラフィーが典型的な精製技術である。親和性リガンドとしてのプロテインＡの好適性は、抗体内に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに左右される。プロテインＡを使用して、ヒトγ１、γ２、またはγ４重鎖に基づく抗体を精製することができる（Ｌｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．６２：１−１３（１９８３）。プロテインＧが全てのマウスアイソタイプ及びヒトγ３に推奨される（Ｇｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．５：１５６７１５７５（１９８６）。親和性リガンドが結合するマトリックスは、ほとんどの場合アガロースであるが、他のマトリックスも利用可能である。孔制御ガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼン等の機械的に安定なマトリックスは、アガロースで達成可能なものよりも速い流速、及び短い処理時間を可能にする。抗体がＣＨ３ドメインを含む場合、Ｂａｋｅｒｂｏｎｄ  ＡＢＸ（商標）樹脂（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，Ｎ．Ｊ．）が精製に有用である。タンパク質精製のための他の技法、例えば、イオン交換カラム上での分別、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカ上でのクロマトグラフィー、ヘパリン上でのクロマトグラフィー、アニオンまたはカチオン交換樹脂（ポリアスパラギン酸カラム等）上でのＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（商標）クロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈殿も、回収される抗体に応じて利用可能である。
【０４３６】
任意の予備精製ステップ（複数可）後、目的とする抗体及び夾雑物を含む混合物が、約２．５〜４．５のｐＨの溶出緩衝液を使用して、好ましくは、低塩濃度（例えば、約０〜０．２５Ｍの塩）で行われる、低ｐＨ疎水性相互作用クロマトグラフィーに供され得る。抗原結合ポリペプチドの産生は、（上述の特定の方法のうちのいずれかに対して）代替的にまたは追加的に、ポリペプチドの混合物を含む溶液を透析することを含む。
【０４３７】
ｘ．バキュロウイルスを使用した抗原結合ポリペプチド産生
組換えバキュロウイルスが、例えば、リポフェクション（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬから市販）を用いて、抗原結合ポリペプチドをコードするプラスミド及びＢａｃｕｌｏＧｏｌｄ（商標）ウイルスＤＮＡ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）をＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞（例えば、Ｓｆ９細胞、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １７１１）またはＤｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ  Ｓ２細胞等の昆虫細胞中にコトランスフェクトすることによって、生成されてもよい。特定の例では、抗原結合ポリペプチド配列は、バキュロウイルス発現ベクター内に含有されるエピトープタグの上流に融合される。かかるエピトープタグには、ポリ−Ｈｉｓタグが含まれる。ｐＶＬ１３９３（Ｎｏｖａｇｅｎ）またはｐＡｃＧＰ６７Ｂ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）等の市販のプラスミドに由来するプラスミドを含む、多様なプラスミドが用いられてもよい。手短に述べると、抗原結合ポリペプチドをコードする配列が、５’及び３’領域に相補的なプライマーを用いてＰＣＲによって増幅され得る。５’プライマーは、フランキング（選択の）制限酵素部位を組み込んでもよい。産物は次いで、選択の制限酵素で消化され、発現ベクター中にサブクローニングされ得る。
【０４３８】
発現ベクターでトランスフェクトした後、宿主細胞（例えば、Ｓｆ９細胞）は、２８℃で４〜５日間インキュベートされ、放出されたウイルスが採取され、さらなる増幅に使用される。ウイルス感染及びタンパク質発現が、例えば、Ｏ’Ｒｅｉｌｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．（Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ．Ｏｘｆｏｒｄ：Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ（１９９４）によって記載されるように行われてもよい。
【０４３９】
発現されたポリ−Ｈｉｓタグ抗原結合ポリペプチドは次いで、例えば、Ｎｉ２＋−キレート親和性クロマトグラフィーによって、以下のように精製することができる。抽出物が、Ｒｕｐｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎａｔｕｒｅ  ３６２：１７５−１７９（１９９３）によって記載されるように、組換えウイルス感染Ｓｆ９細胞から調製されてもよい。手短に述べると、Ｓｆ９細胞が洗浄され、超音波処理緩衝液（２５ｍＬ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．９、１２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０％グリセロール、０．１％  ＮＰ−４０、０．４Ｍ  ＫＣｌ）中に再懸濁され、氷上で２０秒間、２回超音波処理される。超音波処理物が遠心分離によって清澄化され、上清がローディング緩衝液（５０ｍＭリン酸塩、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、１０％グリセロールｐＨ７．８）中で５０倍希釈され、０．４５μｍフィルターを通して濾過される。Ｎｉ２＋−ＮＴＡアガロースカラム（Ｑｉａｇｅｎから市販）が、５ｍＬのベッド体積で調製され、２５ｍＬの水で洗浄され、２５ｍＬのローディング緩衝液で平衡化される。濾過された細胞抽出物が、毎分０．５ｍＬでカラム上にローディングされる。カラムが、ローディング緩衝液でＡ２８０のベースラインまで洗浄され、その時点で画分収集が開始される。次に、カラムは、二次洗浄緩衝液（５０ｍＭリン酸塩、３００ｍＭ  Ｎａｌ、１０％グリセロールｐＨ６．０）で洗浄され、それにより、非特異的に結合したタンパク質が溶出される。再びＡ２８０ベースラインに達した後、カラムは、二次洗浄緩衝液中０〜５００ｍＭのイミダゾール勾配で呈色させられる。１ｍＬ画分が収集され、アルカリホスファターゼ標識Ｎｉ２＋−ＮＴＡ（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び銀染色またはウエスタンブロットによって分析される。溶出されたＨｉｓ１０タグ抗原結合ポリペプチドを含有する画分がプールされ、ローディング緩衝液に対して透析される。
【０４４０】
代替的に、抗原結合ポリペプチドの精製は、例えば、プロテインＡまたはプロテインＧカラムクロマトグラフィーを含む、既知のクロマトグラフィー技法を用いて行うことができる。一実施形態では、目的とする抗原結合ポリペプチドは、カオトロピック剤または中性洗剤を含有する溶液中への溶出によって、カラムの固相から回収されてもよい。例示的なカオトロピック剤及び中性洗剤には、グアニジン−ＨＣＩ、尿素、過塩素酸リチウム（ｌｉｔｈｉｕｍ  ｐｅｒｃｌｏｒａｔｅ）、アルギニン、ヒスチジン、ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）、Ｔｗｅｅｎ、Ｔｒｉｔｏｎ、及びＮＰ−４０が含まれるが、これらに限定されず、これらの全てが市販されている。
【０４４１】
標的分子及び使用方法
本開示の抗原結合ポリペプチドまたは抗原結合複合体は、シグナル伝達経路を活性化する標的と相互作用するように使用することができる。ある特定の実施形態では、標的は、シグナル伝達経路を活性化、惹起、変調、かつ／または調節する任意の標的であり得る。本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドまたは抗原結合複合体が標的とし得る分子の例としては、細胞表面受容体が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、細胞表面受容体は、リガンドと組み合わさることによって、オリゴマー化、例えば二量体化（ホモ二量体化またはヘテロ二量体化）し、それによって細胞中にシグナルを伝達する、受容体であり得る。
【０４４２】
ある特定の実施形態では、標的は、例えばそのリガンドと相互作用した際に、オリゴマー化して、シグナル伝達経路を活性化する、任意の標的であり得る。ある特定の実施形態では、標的は、多量体の受容体であり得る。本明細書で使用される「多量体の受容体」という用語は、シグナル伝達活性のために、例えば、同じ種類のかつ／または同じファミリーからの、２つ以上、３つ以上、４つ以上、５つ以上または６つ以上の受容体のオリゴマー化を必要とする受容体を指す。例えば、Ｈｅｉｄｉｎ（１９９５）Ｃｅｌｌ  ８０：２１３−２２３を参照されたい。
【０４４３】
ある特定の実施形態では、標的受容体は、「二量体の」のものであり得、活性のために２つの受容体のオリゴマー化を必要とする。二量体の受容体の非限定的な例としては、神経成長因子、成長因子、セリン／スレオニンキナーゼ受容体及び受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）が挙げられる。例えば、Ｌｉ  ａｎｄ  Ｈｒｉｓｔｏｖａ（２０１０）Ｃｅｌｌ  Ａｄｈｅｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ４（２）：２４９−２５４を参照されたい。
【０４４４】
ある特定の実施形態では、標的受容体は、「三量体の」のものであり得、活性のために３つの受容体のオリゴマー化を必要とする。三量体の受容体の非限定的な例としては、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）が挙げられる。例えば、Ｂｒａｚｉｌ（２００６）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ５：２０を参照されたい。
【０４４５】
ある特定の実施形態では、標的は、本開示の抗原結合ポリペプチドまたは抗原結合複合体と相互作用するときに、上記で定義される「アゴニズム」をもたらす、任意の標的であり得、そのアゴニズムは、親抗体よりも強化されている。
【０４４６】
細胞表面受容体には、例えば、造血因子受容体ファミリー、サイトカイン受容体ファミリー、チロシンキナーゼ受容体ファミリー、セリン／スレオニンキナーゼ受容体ファミリー、ＴＮＦ受容体ファミリー、Ｇタンパク質共役型受容体ファミリー、ＧＰＩアンカー受容体ファミリー、チロシンホスファターゼ受容体ファミリー、接着因子ファミリー、及びホルモン受容体ファミリー等の受容体ファミリーに属する受容体が含まれる。これらの受容体ファミリーに属する受容体及びそれらの特徴に関する種々の参考文献が入手可能であり、例えば、Ｃｏｏｋｅ  Ｂ  Ａ．，Ｋｉｎｇ  Ｒ  Ｊ  Ｂ．，ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｍｏｌｅｎ  Ｈ  Ｊ．ｅｄ．Ｎｅｗ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｖｏｌ．１８Ｂ  ”Ｈｏｒｍｏｎｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  Ａｃｔｉｏｎｓ  Ｐａｒｔ  ＩＩ”  ｐｐ．１−４６（１９８８）Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  ＢＶ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ、Ｐａｔｔｈｙ  Ｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ，６１：１３−１４；Ｕｌｌｒｉｃｈ  Ａ．、ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ，６１：２０３−２１２、Ｍａｓｓａｇｕｌ  Ｊ．（１９９２）Ｃｅｌｌ，６９：１０６７−１０７０、Ｍｉｙａｊｉｍａ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１０：２９５−３３１、Ｔａｇａ  Ｔ．ａｎｄ  Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ  Ｔ．（１９９２）ＦＡＳＥＢ  Ｊ．，７：３３８７−３３９６、Ｆａｎｔｌ  Ｗ  Ｉ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，６２：４５３−４８１、Ｓｍｉｔｈ  Ｃ  Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｃｅｌｌ，７６：９５９−９６２、Ｆｌｏｗｅｒ  Ｄ  Ｒ．（１９９９）Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，１４２２：２０７−２３４、及びＭ．Ｍｉｙａｓａｋａ  ｅｄ．，Ｃｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ  ｖｏｌｕｍｅ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｓｅｒｉｅｓ，”Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｆｏｒ  Ａｄｈｅｓｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒｓ”（１９９４）（Ｓｈｕｊｕｎｓｈａ，Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）が挙げられる。
【０４４７】
ある特定の実施形態では、細胞表面受容体には、例えば、ホルモン受容体及びサイトカイン受容体が含まれる。例示的なホルモン受容体には、例えば、エストロゲン受容体が含まれる。例示的なサイトカイン受容体には、例えば、造血因子受容体、リンフォカイン受容体、成長因子受容体、分化制御因子受容体等が含まれる。サイトカイン受容体の例としては、エリスロポエチン（ＥＰＯ）受容体、トロンボポエチン（ＴＰＯ）受容体、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）受容体、顆粒マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）受容体、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体、インターロイキン−１（ＩＬ−１）受容体、インターロイキン−２（ＩＬ−２）受容体、インターロイキン−３（ＩＬ−３）受容体、インターロイキン−４（ＩＬ−４）受容体、インターロイキン−５（ＩＬ−５）受容体、インターロイキン−６（ＩＬ−６）受容体、インターロイキン−７（ＩＬ−７）受容体、インターロイキン−９（ＩＬ−９）受容体、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）受容体、インターロイキン−１１（ＩＬ−１１）受容体、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）受容体、インターロイキン−１３（ＩＬ−１３）受容体、インターロイキン−１５（ＩＬ−１５）受容体、インターフェロン−アルファ（ＩＦＮ−アルファ）受容体、インターフェロン−ベータ（ＩＦＮ−ベータ）受容体、インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−ガンマ）受容体、成長ホルモン（ＧＨ）受容体、インスリン受容体、血液幹細胞増殖因子（ＳＣＦ）受容体、血管上皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）受容体、上皮細胞成長因子（ＥＧＦ）受容体、神経成長因子（ＮＧＦ）受容体、線維芽成長因子（ＦＧＦ）受容体、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）受容体、トランスフォーミング成長因子−ベータ（ＴＧＦ−ベータ）受容体、白血球遊走阻止因子（ＬＩＦ）受容体、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）受容体、オンコスタチンＭ（ＯＳＭ）受容体、及びノッチファミリー受容体が挙げられる。サイトカイン受容体の追加の非限定的な例は、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７：２９−６０に開示される。
【０４４８】
ある特定の実施形態では、標的は、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）ファミリーのメンバーを含むことができる。ＴＮＦＲの非限定的な例としては、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、リンフォトキシンβ受容体、ＯＸ４０、ＣＤ４０、Ｆａｓ、デコイ受容体３、ＣＤ２７、ＣＤ７０、ＣＤ２２６、ＣＤ１３７、ＩＣＯＳ、２Ｂ４、ＣＤ３０、４−１ＢＢ、デス受容体３（ＤＲ３）、デス受容体４（ＤＲ４）、デス受容体５（ＤＲ５）、デス受容体６（ＤＲ６）、デコイ受容体１、デコイ受容体２、ＮＦκＢ活性化受容体（ＲＡＮＫ）、オステオプロテゲリン（ＯＰＧ）、ＴＷＥＡＫ受容体、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦ受容体（ＢＡＦＦ−Ｒ）、ＨＶＥＭ（ヘルペスウイルス侵入メディエーター、神経成長因子受容体、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、グルココルチコイド誘発性ＴＮＦ受容体（ＧＩＴＲ）、傷害性及びＪＮＫ誘導因子（ＴＡＪ）、ＲＥＬＴ、ＴＮＦＲＳＦ２２、ＴＮＦＲＳＦ２３、エクトジスプラシンＡ２アイソフォーム受容体及びエクトジスプラシン１、無汗性受容体が挙げられる。ＴＮＦＲの追加の非限定的な例は、Ｎａｉｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｓｐｒａｎｇ（１９９８）Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ２３（２）：７４−７９に開示される。
【０４４９】
ある特定の実施形態では、標的は、低比重リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ）ファミリーのメンバーを含むことができる。ＬＤＬＲの非限定的な例としては、ＬＤＬＲ、低比重リポタンパク質受容体関連タンパク質（ＬＲＰ）１、ＬＲＰ１０、ＬＲＰ１Ｂ、ＬＲＰ２、ＬＲＰ４、ＬＲＰ５、ＬＲＰ５Ｌ、ＬＲＰ６、ＬＲＰ８、Ｎｉｄｏｇｅｎ（ＮＩＤ）−１、ＮＩＤ２、Ｓｏｒｔｉｌｉｎ関連受容体、Ｌ（ＳＯＲＬ１）、及び超低比重リポタンパク質受容体（ＶＬＤＬＲ）が挙げられる。
【０４５０】
ある特定の実施形態では、標的は、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーのメンバーを含むことができる。ＲＴＫの非限定的な例としては、白血球受容体チロシンキナーゼ（ＬＴＫ）、受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体（ＲＯＲ）、エフリン受容体（Ｅｐｈｓ）、Ｔｒｋ受容体、インスリン受容体（ＩＲ）、及びＴｉｅ２が挙げられる。ＲＴＫの追加の非限定的な例は、Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２０１３／１４：Ｅｎｚｙｍｅｓ．Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１７０：１７９７−１８６７、Ｌｉ  ａｎｄ  Ｈｒｉｓｔｏｖａ（２０１０）、及びＬｅｍｍｏｎ  ａｎｄ  Ｓｃｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒ（２０１０）Ｃｅｌｌ  １４１（７）：１１１７−１１３４に開示される。
【０４５１】
他の実施形態では、細胞表面受容体は、成長ホルモン受容体、インスリン受容体、レプチン受容体、Ｆｌｔ−３  リガンド受容体、またはインスリン様成長因子（ＩＧＦ）−Ｉ受容体であってもよい。例示的な受容体には、例えば、ｈＥＰＯＲ（Ｓｉｍｏｎ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｂｌｏｏｄ  ７６，３１−３）、ｍＥＰＯＲ（Ｄ’Ａｎｄｒｅａ，ＡＤ．ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｃｅｌｌ  ５７，２７７−２８５）、ｈＧ−ＣＳＦＲ（Ｆｕｋｕｎａｇａ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８７，８７０２−８７０６）、ｍＧ−ＣＳＦＲ（Ｆｕｋｕｎａｇａ，Ｒ．ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ  ６１，３４１−３５０）、ｈＴＰＯＲ（Ｖｉｇｏｎ，Ｉ．ｅｔ  ａｌ．（１９９２）８９，５６４０−５６４４）、ｍＴＰＯＲ（Ｓｋｏｄａ，ＲＣ．ｅｔ  ａｌ．（１９９３）１２，２６４５−２６５３）、ｈＩｎｓＲ（Ｕｌｌｒｉｃｈ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．（１９８５）Ｎａｔｕｒｅ  ３１３，７５６−７６１）、ｈＦｌｔ−３（Ｓｍａｌｌ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．９１，４５９−４６３）、ｈＰＤＧＦＲ（Ｇｒｏｎｗａｌｄ，Ｒ  ＧＫ．ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８５，３４３５−３４３９）、ｈＩＦＮａ／ｂ  Ｒ（Ｕｚｅ，Ｇ．ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ  ６０，２２５−２３４、及びＮｏｖｉｃｋ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｃｅｌｌ  ７７，３９１−４００）が含まれる。
【０４５２】
ある特定の実施形態では、標的は、神経成長因子受容体ファミリー及び／または神経栄養因子受容体ファミリーのメンバーを含むことができる。神経成長因子受容体及び神経栄養因子受容体の非限定的な例としては、ｐ７５（低親和性神経成長因子受容体（ＬＮＧＦＲ）とも称される）、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ及びＴｒｋＣが挙げられる。神経成長因子受容体及び神経栄養因子受容体の追加の非限定的な例は、Ｌｏｔｚ  ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｊ．ｏｆ  Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ６０（１）：１−７に開示される。
【０４５３】
ある特定の実施形態では、標的は、成長因子受容体ファミリーのメンバーを含むことができる。例えば、限定するものではないが、成長因子受容体は、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ、ＭＡＰキナーゼ、及びＰＩ３キナーゼ経路を介してシグナル伝達する受容体であり得る。成長因子受容体の非限定的な例としては、線維芽細胞成長因子受容体（ＦＧＦＲ）、ＥｒｂＢファミリーの受容体（例えば、上皮細胞成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、血管内皮細胞成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）及び血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）が挙げられる。
【０４５４】
ある特定の実施形態では、標的は、細胞シグナルを誘導するためにヘテロ二量体またはヘテロ三量体を形成する受容体を含むことができる。例えば、限定するものではないが、標的は、セリン／スレオニンキナーゼ受容体ファミリーのメンバーであり得る。セリン／スレオニンキナーゼ受容体の非限定的な例としては、アクチビンＡ受容体ＩＩ型様Ｉ（ＡＬＫ１）、アクチビンＡ受容体、Ｉ型（ＡＬＫ２）、骨形成タンパク質受容体、ＩＡ型（ＢＭＰＲ１Ａ）、アクチビンＡ受容体、ＩＢ型（ＡＬＫ４）、アクチビンＡ受容体、ＩＣ型（ＡＬＫ７）、トランスフォーミング成長因子、ベータ受容体１（ＴＧＦＢＲ１）、骨形成タンパク質受容体、ＩＢ型（ＢＭＰＲ１Ｂ）、トランスフォーミング成長因子、ベータ受容体ＩＩ（ＴＧＦＢＲ２）、骨形成タンパク質受容体、ＩＩ型（ＢＭＰＲ２）、抗ミュラー管ホルモン受容体、ＩＩ型（ＭＩＳＲ２）、アクチビンＡ受容体、ＩＩＡ型（ＡｃｔＲ２）、アクチビンＡ受容体、ＩＩＢ型（ＡｃｔＲ２Ｂ）、及びトランスフォーミング成長因子、ベータ受容体ＩＩＩ（ＴＧＦＢＲ３）が挙げられる。
【０４５５】
ある特定の実施形態では、潜在的な標的には、以下のものが除外される：５Ｔ４；ＡＤＡＭ−１０；ＡＤＡＭ−１２；ＡＤＡＭ  １７；ＡＦＰ；ＡＸＬ；ＡＮＧＰＴ２炭疽抗原；ＢＳＧ；ＣＡＩＸ；ＣＡＸＩＩ；ＣＡ  ７２−４；がん関連抗原ＣＴＡＡ１６．８８；ＣＣＬ１１；ＣＣＬ２；ＣＣＲ４；ＣＣＲ５；ＣＣＲ６；ＣＤ２；ＣＤ３Ｅ；ＣＤ４；ＣＤ５；ＣＤ６；ＣＤ１５；ＣＤ１８；ＣＤ１９；ＣＤ２０；ＣＤ２２；ＣＤ２４；ＣＤ２５；ＣＤ２９；ＣＤ３０；ＣＤ３２Ｂ；ＣＤ３３；ＣＤ３７；ＣＤ３８；ＣＤ４０；ＣＤ４０ＬＧ；ＣＤ４４；ＣＤ４７；ＣＤ５２；ＣＤ５６；ＣＤ６６Ｅ；ＣＤ７２；ＣＤ７４；ＣＤ７９ａ；ＣＤ７９ｂ；ＣＤ８０；ＣＤ８６；ＣＤ９８；ＣＤ１３７；ＣＤ１４７；ＣＤ１３８；ＣＤ１６８；ＣＤ２００；ＣＤ２４８；ＣＤ２５４；ＣＤ２５７；ＣＤＨ３；ＣＥＡ；ＣＥＡＣＡＭ５；ＣＥＡＣＡＭ６；ＣＥＡＣＡＭ８；クローディン４；ＣＳ−１；ＣＳＦ２ＲＡ；ＣＳＰＧ−４；ＣＴＬＡ４；Ｃｒｉｐｔｏ；ＤＬＬ４；ＥＤ−Ｂ；ＥＦＮＡ２；ＥＧＦＲ；エンドセリンＢ受容体；ＥＮＰＰ３；ＥＰＣＡＭ；ＥＲＢＢ２；ＥＲＢＢ３；ＦＡＰ  アルファ；Ｆｃ  ガンマ  ＲＩ；ＦＣＥＲ２；ＦＧＦＲ３；フィブリンＩＩ  ベータ鎖；ＦＬＴ１；ＦＯＬＨ１；ＦＯＬＲ１；ＦＲＰ−１；ＧＤ３ガングリオシド；ＧＤＦ２；ＧＬＰ１Ｒ；グリピカン−３；ＧＰＮＭ  Ｂ；ＨＢＶ（Ｂ型肝炎ウイルス）；ＨＣＭＶ（ヒトサイトメガロウイルス）；熱ショックタンパク質９０ホモログ［Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ］；単純ヘルペスウイルス  ｇＤ糖タンパク質；ＨＧＦ；ＨＩＶ−１；ＨＩＶ−１  ＩＩＩＢ  ｇｐｌ２０  Ｖ３ループ；ＨＬＡ−ＤＲＢ（ＨＬＡ−ＤＲ  ベータ）；ヒト呼吸器多核体ウイルス、糖タンパク質Ｆ；ＩＣＡＭ  １；ＩＦＮＡ１；ＩＦＮＡ１；ＩＦＮＢ１二重特異性因子；ＩｇＥ  Ｆｃ；ＩＧＦ１Ｒ；ＩＧＨＥ結合領域；ＩＬ１２Ｂ；ＩＬ１３；ＩＬ１５；ＩＬ１７Ａ；ＩＬＩＡ；ＩＬ１Ｂ；ＩＬ２ＲＡ；ＩＬ４；ＩＬ５；ＩＬ５ＲＡ；ＩＬ６；ＩＬ６Ｒ；ＩＬ９；インターロイキン−２受容体ベータサブユニット；ＩＴＧＡ２；ＩＴＧＡ２Ｂ  ＩＴＧＢ３；ＩＴＧＡ４  ＩＴＧＢ７；ＩＴＧＡ５；ＩＴＧＡＬ；ＩＴＧＡＶ＿ＩＴＧＢ３；ＩＴＧＢ２；ＫＤＲ；Ｌ１ＣＡＭ；ルイス−ｙ；リピドＡ、リポ多糖類（ｌｉｐｏｐｏｌｙａｃｃｈａｒｉｄｅ）ＬＰＳのドメイン；ＬＴＡ；ＭＥＴ；ＭＭ  Ｐ１４；ＭＭｐｌ５；ＭＳＴ１Ｒ；ＭＳＴＮ；ＭＵＣ１；ＭＵＣ４；ＭＵＣ１６；ＭＵＣ５ＡＣ；ＮＣＡ−９０顆粒球細胞  抗原；ネクチン４；ＮＧＦ；ＮＲＰ；ＮＹ−ＥＳＯ−１；ＯＸ４０Ｌ；ＰＬＡＣ−１；ＰＬＧＦ；ＰＤＧＦＲＡ；ＰＤ１；ＰＤＬ１；ＰＳＣＡ；ホスファチジルセリン；ＰＴＫ−７；Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ｓｅｒｏ  ＩＡ型ＴＳ  Ｏｉｌ；ＲＳＶ（ヒト呼吸器多核体ウイルス、糖タンパク質Ｆ）；ＲＯＲ１；ＲＴＮ４；ＳＥＬＬ；ＳＥＬＰ；ＳＴＥＡＰ１；Ｓｈｉｇａ様毒素ＩＩ  Ｂサブユニット［Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ］；ＳＬＡＭ７；ＳＬＣ４４Ａ４；ＳＯＳＴ；Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓリポタイコ酸；Ｔ細胞受容体アルファ＿ベータ；ＴＦ；ＴＧＦＢ１；ＴＧＦＢ２；ＴＭＥＦＦ２；��ＮＣ；ＴＮＦ；ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ；ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ；ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ；ＴＮＦＳＦ１３；ＴＮＦＳＦ１４；ＴＮＦＳＦ２；ＴＮＦＳＦ７；ＴＲＡＩＬＲ２；ＴＲＯＰ２；ＴＹＲＰ１；ＶＡＰ−１；及びビメンチン。
【０４５６】
ある例示的な実施形態では、細胞表面受容体は、ＯＸ４０である。
【０４５７】
別の例示的な実施形態では、細胞表面受容体は、ＤＲ５である。
【０４５８】
別の例示的な実施形態では、細胞表面受容体は、Ｔｉｅ２である。
【０４５９】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドまたは抗原結合複合体は、本明細書に記載の複合体または抗原結合ポリペプチドを対象に投与することを含む、対象における細胞表面受容体の作動のために使用されてもよい。
【０４６０】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチドまたは抗原結合複合体は、例えば、前がん性、非転移性、転移性、及びがん性腫瘍（例えば、早期がん）を含む腫瘍、がん、アレルギー性または炎症性障害、自己免疫疾患、ホルモン障害を含む、受容体へのアゴニズムから利益を得るであろう種々の疾患または障害の治療または予防のため、あるいは、がん（例えば、乳がん、結腸直腸がん、肺がん、腎細胞がん、神経膠腫、または卵巣がん）、アレルギー性もしくは炎症性障害、または自己免疫疾患を発症する危険性のある対象の治療のために、使用されてもよい。
【０４６１】
ＯＸ４０アゴニストの使用
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、対象における免疫応答の強化、がんの治療、がんの予防、他のがん療法の有効性の強化、ワクチン有効性の強化、ウイルスもしくは細菌疾患もしくは障害の治療、またはＴ細胞応答の調節のために使用されてもよい。
【０４６２】
一態様では、有効量の本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体を個体に投与することを含む、がんを有する個体における免疫機能（例えば、細胞媒介性免疫応答を上方制御することによる）の強化方法が提供される。一態様では、有効量の本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体を個体に投与することを含む、がんを有する個体におけるＴ細胞の強化方法が提供される。
【０４６３】
いくつかの実施形態では、「Ｔ細胞機能の強化」は、エフェクターまたはメモリーＴ細胞が再生、持続、または増幅された生物学的機能を有するようにそれを誘導する、それを引き起こす、またはそのように刺激することを含む。Ｔ細胞機能の強化の例としては、介入前のかかるレベルと比べた、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞からのγ−インターフェロンの分泌の増加、ＣＤ４＋メモリー及び／またはエフェクターＴ細胞からのγ−インターフェロンの分泌の増加、ＣＤ４＋エフェクター及び／またはメモリーＴ細胞の増殖の増加、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の増殖の増加、抗原応答性（例えば、クリアランス）の増加が挙げられる。一実施形態では、強化のレベルは、少なくとも５０％、代替的には６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２０％、１５０％、２００％である。この強化を測定する様態は、当業者に知られている。
【０４６４】
一態様では、有効量の本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体を個体に投与することを含む、がんを有する個体における免疫機能（例えば、免疫機能不全及び／または機能不全性免疫応答または免疫細胞の低減による）の強化方法が提供される。いくつかの実施形態では、免疫機能不全の関連における「機能不全」とは、抗原刺激への免疫応答性が低減した状態を指す。いくつかの実施形態では、「機能不全性」はまた、抗原認識に対する不応性または無応答性、特に、抗原認識を下流Ｔ細胞エフェクター機能、例えば増殖、サイトカイン産生（例えばガンマインターフェロン）、及び／または標的細胞殺傷に変換する能力の障害を含む。
【０４６５】
一態様では、有効量の本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体を個体に投与することを含む、がんを有する個体における腫瘍免疫の治療方法及び／または腫瘍免疫原性の強化方法が提供される。いくつかの実施形態では、「腫瘍免疫」とは、腫瘍が免疫認識及びクリアランスを回避するプロセスを指す。故に、いくつかの実施形態では、治療的概念として、腫瘍免疫は、かかる回避が減弱し、腫瘍が免疫系によって認識及び攻撃されるときに「治療される」。腫瘍認識の例としては、腫瘍結合、腫瘍収縮、及び腫瘍クリアランスが挙げられる。いくつかの実施形態では、「免疫原性」とは、免疫応答を誘発する特定の物質の能力を指す。腫瘍は、免疫原性であり、腫瘍免疫原性の増強により、免疫応答による腫瘍細胞のクリアランスが支援される。
【０４６６】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、例えば、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞増殖を増加させる、及び／またはＣＤ４＋エフェクターＴ細胞によるガンマインターフェロン産生を増加させる（例えば、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体での治療前の増殖及び／またはサイトカイン産生と比較して）ことによって、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞機能を強化する。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ガンマインターフェロンである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、例えば、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体での治療前の腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋Ｔ細胞の数と比較して、腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ＣＤ４＋細胞の総数、または、例えば、ＣＤ４５＋細胞中のＣＤ４＋細胞の割合）を増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、例えば、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体での治療前の、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋Ｔ細胞の数と比較して、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ガンマインターフェロンを発現するＣＤ４＋細胞の総数、または、例えば、総ＣＤ４＋細胞中のガンマインターフェロンを発現するＣＤ４＋細胞の割合）を増加させる。
【０４６７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、例えば、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体での治療前の腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数と比較して、腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、ＣＤ８＋細胞の総数、または、例えば、ＣＤ４５＋細胞中のＣＤ８＋の割合）を増加させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、例えば、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体での治療前の、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋Ｔ細胞の数と比較して、ガンマインターフェロンを発現する腫瘍組織内（浸潤性）ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の数（例えば、総ＣＤ８＋細胞中のガンマインターフェロンを発現するＣＤ８＋細胞の割合）を増加させる。
【０４６８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、例えば、メモリーＴ細胞増殖を増加させる、及び／またはメモリーＴ細胞によるサイトカイン産生を増加させることによって、メモリーＴ細胞機能を強化する。いくつかの実施形態では、サイトカインは、ガンマインターフェロンである。
【０４６９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、例えば、エフェクターＴ細胞機能（例えば、エフェクターＴ細胞増殖、及び／またはエフェクターＴ細胞サイトカイン分泌）のＴｒｅｇ抑制を減少させることによって、Ｔｒｅｇ機能を阻害する。いくつかの実施形態では、エフェクターＴ細胞は、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞である。いくつかの実施形態では、抗ヒトＯＸ４０アゴニスト抗体は、腫瘍組織内（浸潤性）Ｔｒｅｇの数（例えば、Ｔｒｅｇの総数、または、例えば、ＣＤ４＋細胞中のＦｏｘ３ｐ＋細胞の割合）を低減させる。
【０４７０】
一実施形態では、本願は、治療上有効量の、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における免疫応答の強化方法を提供する。ある特定の実施形態では、本方法は、哺乳動物の免疫系の任意の応答を刺激、喚起、増大、改善、または増強することを伴う。免疫応答は、細胞応答（すなわち、細胞傷害性Ｔリンパ球媒介性等の、細胞媒介性）であっても体液性応答（すなわち、抗体媒介性応答）であってもよく、また、一次免疫応答であっても二次免疫応答であってもよい。免疫応答の強化の例としては、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞活性の増大及び細胞溶解Ｔ細胞の生成が挙げられる。免疫応答の強化は、細胞傷害性Ｔリンパ球アッセイ、サイトカインの放出（例えばＩＬ−２産生）、腫瘍の退縮、腫瘍保有動物の生存、抗体産生、免疫細胞増殖、細胞表面マーカーの発現、及び細胞傷害活性を含むが、これらに限定されない、当業者に既知のいくつかのインビトロまたはインビボ測定を用いて評価することができる。典型的には、本開示の方法は、未治療の哺乳動物または特許請求される方法を用いて治療されていない動物による免疫応答と比較したときの、哺乳動物による免疫応答を強化する。一実施形態では、本方法は、細胞性免疫応答、特に細胞傷害性Ｔ細胞応答を強化する。別の実施形態では、細胞性免疫応答は、ヘルパーＴ細胞応答である。依然として別の実施形態では、免疫応答は、サイトカイン産生、特にＩＬ−２産生である。
【０４７１】
別の実施形態では、本願は、治療上有効量の、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物におけるがんの治療方法を提供する。ある特定の実施形態では、本方法は、がんと診断された哺乳動物における望ましいまたは有益な効果を引き起こすことを伴う。望ましいまたは有益な効果には、がん細胞のさらなる成長もしくは広がりの阻害、がん細胞の死滅、がん再発の阻害、がんに関連する疼痛の低減、または動物の生存能の改善が含まれ得る。がん再発の阻害は、放射線、化学療法、外科手術、または他の技法によって以前に治療されたことのあるがん部位及び周囲の組織を企図する。効果は、主観的であっても客観的であってもよい。例えば、動物がヒトである場合、そのヒトは、改善または治療応答の客観的症状として、改善された活力もしくは生命力、または減少した疼痛を認め得る。代替的に、臨床医は、理学的検査、臨床検査値、腫瘍マーカーまたはＸ線所見に基づく、腫瘍サイズまたは負荷の減少を認め得る。治療応答に関して臨床医が観察し得るいくつかの臨床徴候には、白血球数、赤血球数、血小板数、赤血球沈降速度、及び種々の酵素レベル等の検査値の正常化が含まれる。追加的に、臨床医は、検出可能な腫瘍マーカーの減少を観察し得る。代替的に、超音波画像法、核磁気共鳴検査、及び陽電子放出検査等の、他の検査を用いて、客観的改善を評価することができる。
【０４７２】
一実施形態では、本願は、治療上有効量の、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物におけるがんの予防方法を提供する。ある特定の実施形態では、本方法は、発がんまたは腫瘍発生の発現の証拠はないが、遺伝子スクリーニングによる決定であろうと他の方法での決定であろうと、がんに対する素因が特定されている哺乳動物における、がんの遅延、阻害、または予防を伴う。この用語はまた、前悪性病態を有する哺乳動物の、前悪性病態の悪性腫瘍への進行を停止する、または前悪性病態の退行を引き起こすための治療も包含する。前悪性病態の例としては、過形成、形成異常、及び異形成が挙げられる。
【０４７３】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体による治療に適するがんには、乳がん、結腸直腸がん、直腸がん、非小細胞肺がん、膠芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、腎細胞がん、前立腺がん、肝臓がん、膵臓がん、軟組織肉腫、カポジ肉腫、カルチノイドがん、頭頸部がん、卵巣がん、中皮腫、及び多発性骨髄腫が挙げられる。いくつかの実施形態では、がんは、非小細胞肺がん、膠芽腫、神経芽腫、黒色腫、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）、胃がん、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、及び肝細胞がんから選択される。さらに、いくつかの実施形態では、がんは、非小細胞肺がん、結腸直腸がん、膠芽腫、及び乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）（それらのがんの転移形態を含む）から選択される。
【０４７４】
いくつかの実施形態では、がんの例としては、Ｂ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽細胞性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ、巨大腫瘤病変性ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、及びヴァルデンストレームマクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；有毛細胞性白血病；慢性骨髄芽球性白血病；及び移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症、浮腫（例えば脳腫瘍に関連するもの等）、Ｂ細胞増殖性障害、及びメーグス症候群に関連する異常血管増殖がさらに挙げられるが、これらに限定されない。より具体的な例としては、再発性または難治性ＮＨＬ、フロントライン低悪性度ＮＨＬ、第ＩＩＩ／ＩＶ病期ＮＨＬ、化学療法耐性ＮＨＬ、前駆Ｂリンパ芽球性白血病及び／またはリンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病及び／または前リンパ球性白血病及び／または小リンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性リンパ腫、免疫細胞腫及び／またはリンパ形質細胞性リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、結節外辺縁帯−ＭＡＬＴリンパ腫、結節性辺縁帯リンパ腫、有毛細胞白血病、形質細胞腫及び／または形質細胞骨髄腫、低悪性度／濾胞性リンパ腫、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、濾胞中心リンパ腫（濾胞性）、中悪性度びまん性ＮＨＬ、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、侵攻性ＮＨＬ（侵攻性フロントラインＮＨＬ及び侵攻性再発性ＮＨＬを含む）、自家幹細胞移植後に再発するまたはそれに対して不応性のＮＨＬ、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、バーキットリンパ腫、前駆体（末梢）大顆粒リンパ球性白血病、菌状息肉腫及び／またはセザリー症候群、皮膚（ｓｋｉｎ）（皮膚（ｃｕｔａｎｅｏｕｓ））リンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫、血管中心性リンパ腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４７５】
いくつかの実施形態では、がんの例としては、Ｂ細胞増殖性障害がさらに挙げられるがこれに限定されず、Ｂ細胞増殖性障害には、リンパ腫（例えば、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ））及び慢性リンパ性白血病がさらに含まれるが、これらに限定されない。かかるリンパ腫及びリンパ性白血病には、例えば、ａ）濾胞性リンパ腫、ｂ）小型非切れ込み核細胞性リンパ腫／バーキットリンパ腫（地域性バーキットリンパ腫、散発性バーキットリンパ腫、及び非バーキットリンパ腫を含む）、ｃ）辺縁帯リンパ腫（結節外辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（粘膜関連リンパ組織リンパ腫、ＭＡＬＴ）、結節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、及び脾臓辺縁帯リンパ腫を含む）、ｄ）マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ｅ）大細胞型リンパ腫（Ｂ細胞びまん性大細胞型リンパ腫（ＤＬＣＬ）、びまん性混合細胞型リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞性リンパ腫、血管中心性リンパ腫、肺Ｂ細胞リンパ腫を含む）、ｆ）有毛細胞性リンパ腫、ｇ）リンパ球性リンパ腫、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、ｈ）急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）／小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、ｉ）形質細胞腫瘍、形質細胞骨髄腫、多発性骨髄腫、形質細胞腫、及び／またはｊ）ホジキン病が含まれる。
【０４７６】
本方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、がんは、Ｂ細胞増殖性障害である。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞増殖性障害は、リンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、侵襲性ＮＨＬ、再発性侵襲性ＮＨＬ、再発性低悪性度ＮＨＬ、難治性ＮＨＬ、難治性低悪性度ＮＨＬ、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫、白血病、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、またはマントル細胞リンパ腫である。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞増殖性障害は、低悪性度ＮＨＬ及び／または侵襲性ＮＨＬ等のＮＨＬである。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞増殖性障害は、低悪性度濾胞性リンパ腫またはびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫である。
【０４７７】
これらの方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、がんは、ヒトエフェクター細胞を呈する（例えば、ヒトエフェクター細胞によって浸潤される）。例えば、ＩＨＣによる方法等のヒトエフェクター細胞の検出方法が当該技術分野で周知である。いくつかの実施形態では、がんは、高レベルのヒトエフェクター細胞を呈する。いくつかの実施形態では、ヒトエフェクター細胞は、ＮＫ細胞、マクロファージ、単球のうちの１つ以上である。いくつかの実施形態では、がんは、本明細書に記載の任意のがんである。いくつかの実施形態では、がんは、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）、胃がん、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、または肝細胞がんである。
【０４７８】
本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、治療において、単独で、または他の薬剤と組み合わせてのいずれかで使用することができる。例えば、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、少なくとも１つの追加の治療剤と併用投与されてもよい。
【０４７９】
上述のかかる併用療法は、併用投与（２つ以上の治療剤が同じまたは別個の製剤中に含まれる）、及び個別投与を包含するが、この場合、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体の投与は、追加の治療剤（単数または複数）の投与の前に、それと同時に、かつ／またはその後に行われ得る。一実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体の投与、及び追加の治療剤の投与は、互いの約１ヶ月以内、または約１、２、もしくは３週間以内、または約１、２、３、４、５、もしくは６日以内に生じる。本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、放射線療法と併用することができる。
【０４８０】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、化学療法または化学療法剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、放射線療法または放射線療法剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、標的治療または標的治療剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、免疫療法または免疫療法剤、例えばモノクローナル抗体と併用投与されてもよい。
【０４８１】
「化学療法剤」は、がんの治療に有用な化学化合物を含む。化学療法剤の例としては、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍ．）、ジスルフィラム、没食子酸エピガロカテキン、サリノスポラミドＡ、カーフィルゾミブ、１７−ＡＡＧ（ゲルダナマイシン）、ラディシコール、乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨ−Ａ）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、スニチブ（ｓｕｎｉｔｉｂ）（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ／Ｓｕｇｅｎ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、フィナスネート（ｆｉｎａｓｕｎａｔｅ）（ＶＡＴＡＬＡＮＩＢ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、ロナファミブ（Ｌｏｎａｆａｍｉｂ）（ＳＣＨ  ６６３３６）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、Ｂａｙｅｒ  Ｌａｂｓ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＧ１４７８、アルキル化剤、例えばチオテパ及びＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロホスファミド；アルキルスルホネート、例えばブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えばベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、及びウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）；エチレンイミン及びメチラメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチロメラミンを含む）；アセトゲニン（特に、ブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（トポテカン及びイリノテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン（ｃａｌｌｙｓｔａｔｉｎ）；ＣＣ−１０６５（そのアゾゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；副腎皮質ステロイド（プレドニゾン及びプレドニゾロンを含む）；酢酸シプロテロン；５α−還元酵素フィナステリド及びデュタステリドを含む）；ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタット  ドラスタチン；アルデスロイキン、タルク  デュオカルマイシン（合成類似体ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エロイテロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）；パンクラチスタチン（ｐａｎｃｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）；サルコジクチイン；スポンジスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）；ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、クロマファジン（ｃｈｌｏｍａｐｈａｚｉｎｅ）、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩（ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ  ｏｘｉｄｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、メルファラン、ノベムビシン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素、例えばカルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチン；抗生物質、例えばエンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンγ１Ｉ及びカリケアマイシンω１Ｉ（Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９４  ３３：１８３−１８６）、ダイネミシン、例えば、ダイネミシンＡ、ビスホスホネート、例えば、クロドロネート、エスペラミシン、ならびにネオカルチノスタチン発光団及び関連色素タンパク質エネジイン抗生物質発光団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）（ドキソルビシン）、モルフォリノ−ドキソルビシン、シアノモルフォリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、例えば、マイトマイシンＣ、マイコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、代謝拮抗剤、例えば、メトトレキセート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート、プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジン、アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、葉酸補給剤、例えば、フロリン酸、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトラキセート、デフォファミン、デメコルシン、ジアジコン、エルフォルニチン、酢酸エリプチニウム、エポチロン、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダミン、メイタンシノイド、例えば、メイタンシン及びアンサマイトシン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダモール、ニトラクリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ロソキサントロン、ポドフィリン酸、２−エチルヒドラジド、プロカルバジン、ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｕｇ��ｎｅ，Ｏｒｅｇ．）、ラゾキサン、リゾキシン、シゾフィラン；スピロゲルマニウム、テニュアゾン酸、トリアジコン、２，２’，２’‘−トリクロロトリエチルアミン、トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラキュリンＡ、ロリデンＡ、及びアングイデン）、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン、アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）、シクロホスファミド、チオテパ、タキソイド、例えば、ＴＡＸＯＬ（パクリタキセル、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（クレモホール不含）、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，ＩＩＩ．）、及びＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）（ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、ドセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）；Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）；クロランムブシル（ｃｈｌｏｒａｎｍｂｕｃｉｌ）；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）（ゲムシタビン）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えばシスプラチン及びカルボプラチン；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）（ビノレルビン）；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド、例えばレチノイン酸；ならびに上述のもののいずれかの薬学的に許容される塩、酸、及び誘導体が挙げられる。
【０４８２】
化学療法剤にはまた、（ｉ）抗エストロゲン剤及び選択的エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭ）といった、腫瘍に対してホルモン作用を制御または阻害するように作用する抗ホルモン剤（例えば、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）、クエン酸タモキシフェン）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン（ｉｏｄｏｘｙｆｅｎｅ）、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）（クエン酸トレミファイン（ｔｏｒｅｍｉｆｉｎｅ  ｃｉｔｒａｔｅ）を含む）；（ｉｉ）副腎におけるエストロゲン産生を制御するアロマターゼ酵素を阻害する、アロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（酢酸メゲストロール）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン、Ｐｆｉｚｅｒ）、フォルメスタニー（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、及びＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）等；（ｉｉｉ）抗アンドロゲン剤、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリン；ブセレリン、トリプテレリン（ｔｒｉｐｔｅｒｅｌｉｎ）、酢酸メドロキシプロゲステロン、ジエチルスチルベストロール、プレマリン、フルオキシメステロン、全てのトランスレチオニン酸（ｔｒａｎｓｒｅｔｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、フェンレチニド、ならびにトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；（ｉｖ）タンパク質キナーゼ阻害剤；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えば、ＰＫＣ−アルファ、Ｒａｌｆ、及びＨ−Ｒａｓ；（ｖｉｉ）リボザイム、例えば、ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））及びＨＥＲ２発現阻害剤；（ｖｉｉｉ）ワクチン、例えば、遺伝子療法用ワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、及びＶＡＸＩＤ（登録商標）；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）、ｒＩＬ−２；トポイソメラーゼ１阻害剤、例えば、ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；ならびに（ｉｘ）上述のもののいずれかの薬学的に許容される塩、酸、及び誘導体が含まれる。
【０４８３】
化学療法剤にはまた、抗体、例えば、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）、及び抗体−薬物コンジュゲート、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）も含まれる。本発明の化合物との併用で薬剤として治療可能性を有するさらなるヒト化モノクローナル抗体には、アポリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、アトリズマブ、バピネオズマブ、ビバツズマブメルタンシン（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ（ｃｅｄｅｌｉｚｕｍａｂ）、セトリズマブペゴール、シドフシツズマブ（ｃｉｄｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、シドツズマブ（ｃｉｄｔｕｚｕｍａｂ）、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ（ｅｒｌｉｚｕｍａｂ）、フェルビズマブ（ｆｅｌｖｉｚｕｍａｂ）、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ（ｍｏｔｏｖｉｚｕｍａｂ）、ナタリズマブ、ニモツズマブ（ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ）、ノロビズマブ（ｎｏｌｏｖｉｚｕｍａｂ）、ヌマビズマブ（ｎｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ（ｐａｓｃｏｌｉｚｕｍａｂ）、ペクフシツズマブ（ｐｅｃｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ペクツズマブ（ｐｅｃｔｕｚｕｍａｂ）、パキセリズマブ、ラリビズマブ（ｒａｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、ラニビズマブ、レスリビズマブ（ｒｅｓｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、レスリズマブ、レシビズマブ（ｒｅｓｙｖｉｚｕｍａｂ）、ロベリズマブ（ｒｏｖｅｌｉｚｕｍａｂ）、ルプリズマブ（ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ）、シブロツズマブ（ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、シプリズマブ、ソンツズマブ（ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ）、タカツズマブテトラキセタン（ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ  ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、タドシズマブ（ｔａｄｏｃｉｚｕｍａｂ）、タリズマブ、テフィバズマブ（ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ）、トシリズマブ、トラリズマブ（ｔｏｒａｌｉｚｕｍａｂ）、ツコツズマブセルモロイキン（ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ  ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ツクシツズマブ（ｔｕｃｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ウマビズマブ（ｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ビジリズマブ、及びインターロイキン−１２  ｐ４０タンパク質を認識するように遺伝子修飾された排他的にヒト配列の組み換え全長ＩｇＧ１  λ抗体である、抗インターロイキン−１２（ＡＢＴ−８７４／Ｊ６９５、Ｗｙｅｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ及びＡｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）が含まれる。
【０４８４】
化学療法剤にはまた、ＥＧＦＲに結合するか、またはさもなければそれと直接相互作用し、そのシグナル伝達活性を阻止または低減する化合物を指し、「ＥＧＦＲアンタゴニスト」とも称される「ＥＧＦＲ阻害剤」も挙げられる。かかる薬剤の例としては、ＥＧＦＲに結合する抗体及び小分子も含まれる。ＥＧＦＲに結合する抗体の例としては、ＭＡｂ  ５７９（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ  ８５０６）、ＭＡｂ  ４５５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ８５０７）、ＭＡｂ  ２２５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ８５０８）、ＭＡｂ  ５２８（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ８５０９）（米国特許第４，９４３，５３３号（Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ  ｅｔ  ａｌ．）を参照されたい）、及びそれらの変異形、例えば、キメラ化２２５（Ｃ２２５またはセツキシマブ、ＥＲＢＵＴＩＸ（登録商標））及び再成形ヒト２２５（Ｈ２２５）（ＷＯ９６／４０２１０（Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．）を参照されたい）、ＩＭＣ−１１Ｆ８、完全ヒトＥＧＦＲ標的抗体（Ｉｍｃｌｏｎｅ）、ＩＩ型変異ＥＧＦＲに結合する抗体（米国特許第５，２１２，２９０号）、米国特許第５，８９１，９９６号に記載のＥＧＦＲに結合するヒト化抗体及びキメラ抗体、ならびにＥＧＦＲに結合するヒト抗体、例えば、ＡＢＸ−ＥＧＦまたはパニツムマブ（ＷＯ９８／５０４３３を参照されたい、Ａｂｇｅｎｉｘ／Ａｍｇｅｎ）、ＥＭＤ５５９００（Ｓｔｒａｇｌｉｏｔｔｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ３２Ａ：６３６−６４０（１９９６））、ＥＧＦＲ結合においてＥＧＦ及びＴＧＦ−アルファの両方と競合するＥＧＦＲに対して指向されたヒト化ＥＧＦＲ抗体ＥＭＤ７２００（マツズマブ）（ＥＭＤ／Ｍｅｒｃｋ）、ヒトＥＧＦＲ抗体ＨｕＭａｘ−ＥＧＦＲ（ＧｅｎＭａｂ）、Ｅ１．１、Ｅ２．４、Ｅ２．５、Ｅ６．２、Ｅ６．４、Ｅ２．１１、Ｅ６．３、及びＥ７．６．３として知られ、かつＵＳ６，２３５，８８３に記載の完全ヒト抗体、ＭＤＸ−４４７（Ｍｅｄａｒｅｘ  Ｉｎｃ）、ならびにｍＡｂ８０６またはヒト化ｍＡｂ８０６（Ｊｏｈｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９（２９）：３０３７５−３０３８４（２００４））が挙げられる。抗ＥＧＦＲ抗体は、細胞傷害性薬物にコンジュゲートし、そのようにしてイムノコンジュゲートを生成してもよい（例えば、ＥＰ６５９，４３９Ａ２、Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨを参照されたい）。ＥＧＦＲアンタゴニストは、米国特許第５，６１６，５８２号、同第５，４５７，１０５号、同第５，４７５，００１号、同第５，６５４，３０７号、同第５，６７９，６８３号、同第６，０８４，０９５号、同第６，２６５，４１０号、同第６，４５５，５３４号、同第６，５２１，６２０号、同第６，５９６，７２６号、同第６，７１３，４８４号、同第５，７７０，５９９号、同第６，１４０，３３２号、同第５，８６６，５７２号、同第６，３９９，６０２号、同第６，３４４，４５９号、同第６，６０２，８６３号、同第６，３９１，８７４号、同第６，３４４，４５５号、同第５，７６０，０４１号、同第６，００２，００８号、及び同第５，７４７，４９８号、ならびに以下のＰＣＴ公報ＷＯ９８／１４４５１、ＷＯ９８／５００３８、ＷＯ９９／０９０１６、及びＷＯ９９／���４０３７に記載の化合物等の小分子を含む。特定の小分子ＥＧＦＲアンタゴニストには、ＯＳＩ−７７４（ＣＰ−３５８７７４、エルロチニブ、ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ））、ＰＤ１８３８０５（ＣＩ１０３３、２−プロペンアミド、Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［３−（４−モルホリニル）プロポキシ］−６−キナゾリニル］−、二塩酸塩、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）、ＺＤ１８３９、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））４−（３’−クロロ−４’−フルオロアニリノ）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＺＭ１０５１８０（（６−アミノ−４−（３−メチルフェニル−アミノ）−キナゾリン、Ｚｅｎｅｃａ）、ＢＩＢＸ−１３８２（Ｎ８−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−Ｎ２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミド［５，４−ｄ］ピリミジン−２，８−ジアミン、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＰＫＩ−１６６（（Ｒ）−４−［４−［（１−フェニルエチル）アミノ］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］−フェノール）、（Ｒ）−６−（４−ヒドロキシフェニル）−４−［（１−フェニルエチル）アミノ］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン）、ＣＬ−３８７７８５（Ｎ−［４−［（３−ブロモフェニル）アミノ］−６−キナゾリニル］−２−ブチンアミド）、ＥＫＢ−５６９（Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル］−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド）（Ｗｙｅｔｈ）、ＡＧ１４７８（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＡＧ１５７１（ＳＵ  ５２７１、Ｐｆｉｚｅｒ）、二重ＥＧＦＲ／ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６またはＮ−［３−クロロ−４−［（３−フルオロフェニル）メトキシ］フェニル］−６［５［［［２−メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］−２−フラニル］−４−キナゾリンアミン）が含まれる。
【０４８５】
化学療法剤にはまた、「チロシンキナーゼ阻害剤」、例えば、前段落に記載のＥＧＦＲ標的薬物、小分子ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、Ｔａｋｅｄａから入手可能なＴＡＫ１６５、ＣＰ−７２４，７１４、ＥｒｂＢ２受容体チロシンキナーゼの経口選択的阻害剤（Ｐｆｉｚｅｒ及びＯＳＩ）、二重ＨＥＲ阻害剤、例えば、ＥＧＦＲに優先的に結合するが、ＨＥＲ２及びＥＧＦＲ過剰発現細胞の両方を阻害するＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈから入手可能）、ラパチニブ（ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ−ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから入手可能）、経口ＨＥＲ２及びＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤、ＰＫＩ−１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓから入手可能）、ｐａｎ−ＨＥＲ阻害剤、例えば、カネルチニブ（ＣＩ−１０３３、Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、Ｒａｆ−１阻害剤、例えば、Ｒａｆ−１シグナル伝達を阻害するＩＳＩＳ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手可能なアンチセンス薬剤ＩＳＩＳ−５１３２、非ＨＥＲ標的ＴＫ阻害剤、例えば、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから入手可能）、多標的チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒから入手可能）、ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、バタラニブ（ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４、Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧから入手可能）、ＭＡＰＫ細胞外制御キナーゼＩ阻害剤ＣＩ−１０４０（Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能）、キナゾリン、例えば、ＰＤ  １５３０３５，４−（３−クロロアニリノ）キナゾリン、ピリドピリミジン、ピリミドピリミジン、ピロロピリミジン、例えば、ＣＧＰ  ５９３２６、ＣＧＰ  ６０２６１、及びＣＧＰ  ６２７０６、ピラゾロピリミジン、４−（フェニルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、クルクミン（ジフェルロイルメタン、４，５−ビス（４−フルオロアニリノ）フタルイミド）、ニトロチオフェン部分を含有するチルホスチ、ＰＤ−０１８３８０５（Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒ）、アンチセンス分子（例えば、ＨＥＲコード核酸に結合するもの）、キノキサリン（米国特許第５，８０４，３９６号）、チルホスチン（米国特許第５，８０４，３９６号）、ＺＤ６４７４（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）、ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）、ｐａｎ−ＨＥＲ阻害剤、例えば、ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）、Ａｆｆｉｎｉｔａｃ（ＩＳＩＳ  ３５２１、Ｉｓｉｓ／Ｌｉｌｌｙ）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））、ＰＫＩ１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＧＷ２０１６（Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈ）、セマキシニブ（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＺＤ６４７４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）、ＩＮＣ−１Ｃ１１（Ｉｍｃｌｏｎｅ）、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標））、または以下の特許公報：米国特許第５，８０４，３９６号、ＷＯ１９９９／０９０１６（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ）、ＷＯ１９９８／４３９６０（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ��、ＷＯ１９９７／３８９８３（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、ＷＯ１９９９／０６３７８（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、ＷＯ１９９９／０６３９６（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、ＷＯ１９９６／３０３４７（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ）、ＷＯ１９９６／３３９７８（Ｚｅｎｅｃａ）、ＷＯ１９９６／３３９７（Ｚｅｎｅｃａ）、及びＷＯ１９９６／３３９８０（Ｚｅｎｅｃａ）のいずれかに記載のものが含まれる。
【０４８６】
化学療法剤にはまた、デキサメタゾン、インターフェロン、コルヒチン、メトプリン、シクロスポリン、アンホテリシン、メトロニダゾール、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アミホスチン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、ＢＣＧ生、ベバシズマブ、ベキサロテン、クラドリビン、クロファラビン、ダルベポエチンアルファ、デニロイキン、デクスラゾキサン、エポエチンアルファ、エルロチニブ、フィルグラスチム、酢酸ヒストレリン、イブリツモマブ、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、レナリドミド、レバミゾール、メスナ、メトキサレン、ナンドロロン、ネララビン、ノフェツモマブ、オプレルベキン、パリフェルミン、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペグアスパラガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド二ナトリウム、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、キナクリン、ラスブリカーゼ、サルグラモスチム、テモゾロミド、ＶＭ−２６、６−ＴＧ、トレミフェン、トレチノイン、ＡＴＲＡ、バルルビシン、ゾレドロネート、及びゾレドロン酸、ならびにそれらの薬学的に許容される塩も含まれる。
【０４８７】
化学療法剤にはまた、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酢酸コルチゾン、ピバル酸チキソコルトール、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸ナトリウム、デキサメタゾン、デキサメタゾンリン酸ナトリウム、フルオコルトロン、ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート、ヒドロコルチゾン−１７−バレレート、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、プレドニカルベート、クロベタゾン−１７−ブチレート、クロベタゾール−１７−プロピオネート、フルオコルトロンカプロエート、ピバル酸フルオコルトロン、及び酢酸フルプレドニデン、免疫選択的抗炎症性ペプチド（ＩｍＳＡＩＤ）、例えば、フェニルアラニン−グルタミン−グリシン（ＦＥＧ）及びそのＤ−異性体形態（ｆｅＧ）（ＩＭＵＬＡＮ  ＢｉｏＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、ＬＬＣ）、抗リウマチ薬、例えば、アザチオプリン、シクロスポリン（シクロスポリンＡ）、Ｄ−ペニシラミン、金塩、ヒドロキシクロロキン、レフルノミドミノサイクリン、スルファサラジン、腫瘍壊死因子アフファ（ＴＮＦα）遮断薬、例えば、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ）、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ）、セルトリズマブペゴル（Ｃｉｍｚｉａ）、ゴリムマブ（Ｓｉｍｐｏｎｉ）、インターロイキン１（ＩＬ−１）遮断薬、例えば、アナキンラ（Ｋｉｎｅｒｅｔ）、Ｔ細胞共刺激遮断薬、例えば、アバタセプト（Ｏｒｅｎｃｉａ）、インターロイキン６（ＩＬ−６）遮断薬、例えば、トシリズマブ（ＡＣＴＥＭＥＲＡ（登録商標））、インターロイキン１３（ＩＬ−１３）遮断薬、例えば、レブリキズマブ、インターフェロンアルファ（ＩＦＮ）遮断薬、例えば、ロンタリズマブ、ベータ７インテグリン遮断薬、例えば、ｒｈｕＭＡｂベータ７、ＩｇＥ経路遮断薬、例えば、抗Ｍ１プライム分泌型ホモ三量体ＬＴａ３及び膜結合型ヘテロ三量体ＬＴａ１／β２遮断薬、例えば、抗リンホトキシンアルファ（ＬＴａ）、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位体）；種々の調査剤、例えばチオプラチン、ＰＳ−３４１、フェニルブチレート、ＥＴ−１８−ＯＣＨ３、またはファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（Ｌ−７３９７４９、Ｌ−７４４８３２）；ポリフェノール、例えばケルセチン、レスベラトロール、ピセアタンノール、没食子酸エピガロカテキン、テアフラビン、フラバノール、プロシアニジン、ベツリン酸及びその誘導体；オートファジー阻害剤、例えばクロロキン；デルタ−９−テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、ＭＡＲＩＮＯＬ（登録商標））；ベータ−ラパコン；ラパコール；コルチシン；ベツリン酸；アセチルカンプトテシン、スコポレクチン、及び９−アミノカンプトテシン）；ポドフィロトキシン；テガフール（ＵＦＴＯＲＡＬ（登録商標））；ベキサロテン（ＴＡＲＧＲＥＴＩＮ（登録商標））；ビスホスホネート、例えばクロドロネート（例えば、ＢＯＮＥＦＯＳ（登録商標）またはＯＳＴＡＣ（登録商標））、エチドロネート（ＤＩＤＲＯＣＡＬ（登録商標））、ＮＥ−５８０９５、ゾレドロン酸／ゾレドロネート（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ（登録商標））、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、チルドロネート（ＳＫＥＬＩＤ（登録商標））、またはリセドロネート（ＡＣＴＯＮＥＬ（登録商標））；ならびに上皮成長因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）；ワクチン、例えばＴＨＥＲＡＴＯＰＥ（登録商標）ワクチン；ペリフォシン、ＣＯＸ−２阻害剤（例えば、セレコキシブまたはエトリコキシブ）、プロテオソーム阻害剤（例えば、ＰＳ３４１）；ＣＣＩ−７７９；チピファルニブ（Ｒ１１５７７）；オラフェニブ、ＡＢＴ５１０；Ｂｃｌ−２阻害剤、例えばオブリメルセンナトリウム（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標））；ピキサントロン；ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばロナファルニブ（ＳＣＨ  ６６３６、ＳＡＲＡＳＡＲ（商標））；及び上記のうちのいずれかの薬学的に許容される塩、酸、または誘導体；ならびに上記のうちの２つ以上の組み合わせ、例えばＣＨＯＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、及びプレドニゾロンの組み合わせ療法の略号）；及びＦＯＬＦＯＸ（５−ＦＵ及びロイコボリンと組み合わせたオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））を用いる治療レジメンの略号）も含まれる。
【０４８８】
化学療法剤にはまた、鎮痛、解熱、及び抗炎症作用を有する非ステロイド性抗炎症性薬物も含まれる。ＮＳＡＩＤには、酵素シクロオキシゲナーゼの非選択的阻害剤が含まれる。ＮＳＡＩＤの具体的な例としては、アスピリン、プロピオン酸誘導体、例えば、イブプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、オキサプロジン、及びナプロキセン、酢酸誘導体、例えば、インドメタシン、スリンダク、エトドラク、ジクロフェナク、エノール酸誘導体、例えば、ピロキシカム、メロキシカム、テノキシカム、ドロキシカム、ロルノキシカム、及びイソキシカム、フェナム酸誘導体、例えば、メフェナム酸、メクロフェナム酸、フルフェナム酸、トルフェナム酸、ならびにＣＯＸ−２阻害剤、例えば、セレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、ロフェコキシブ、及びバルデコキシブが挙げられる。ＮＳＡＩＤの適応症は、リウマチ性関節炎、変形性関節炎、炎症性関節症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、ライター症候群、急性痛風、月経困難症、転移性骨痛、頭痛及び片頭痛、術後疼痛、炎症及び組織損傷に起因する軽度〜中程度の疼痛、発熱、腸閉塞症、ならびに腎疝痛等の状態の症状軽減であり得る。
【０４８９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＰＡＲＰ阻害剤（例えば、オラパラニブ（Ｏｌａｐａｒａｎｉｂ）、ルカパリブ（Ｒｕｃａｐａｒｉｂ）、ニラパリブ（Ｎｉｒａｐａｒｉｂ）、セジラニブ（Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ）、ＢＭＮ６７３、ベリパリブ（Ｖｅｌｉｐａｒｉｂ））、トラベクテジン（Ｔｒａｂｅｃｔｅｄｉｎ）、ｎａｂ−パクリタキセル（アルブメン（ａｌｂｕｍｅｎ）結合パクリタキセル、ＡＢＲＡＸＡＮＥ）、トレバナニブ（Ｔｒｅｂａｎａｎｉｂ）、パゾパニブ（Ｐａｚｏｐａｎｉｂ）、セジラニブ（Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ）、パルボシクリブ（Ｐａｌｂｏｃｉｃｌｉｂ）、エベロリムス、フルオロピリミジン（例えば，ＦＯＬＦＯＸ、ＦＯＬＦＩＲＩ）、ＩＦＬ、レゴラフェニブ、レオリシン（Ｒｅｏｌｙｓｉｎ）、アリムタ（Ａｌｉｍｔａ）、ジカディア（Ｚｙｋａｄｉａ）、ステント（Ｓｕｔｅｎｔ）、トーリセル（Ｔｏｒｉｓｅｌ）（テムシロリムス）、インライタ（Ｉｎｌｙｔａ）（アキシチニブ、Ｐｆｉｚｅｒ）、アフィニトール（Ａｆｉｎｉｔｏｒ）（エベロリムス、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ネクサバール（Ｎｅｘａｖａｒ）（ソラフェニブ、Ｏｎｙｘ／Ｂａｙｅｒ）、ヴォトリエント（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ）、パゾパニブ（Ｐａｚｏｐａｎｉｂ）、アキシチニブ、ＩＭＡ−９０１、ＡＧＳ−００３、カボザンチニブ、ビンフルニン（Ｖｉｎｆｌｕｎｉｎｅ）、Ｈｓｐ９０阻害剤（例えば、アパトルシン（ａｐａｔｏｒｓｉｎ））、Ａｄ−ＧＭ−ＣＳＦ（ＣＴ−００７０）、テマゾロミド（Ｔｅｍａｚｏｌｏｍｉｄｅ）、ＩＬ−２、ＩＦＮａ、ビンブラスチン、サロミド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ）、デカルバジン、シクロホスファミド、レナリドミド、アザシジチン、レナリドミド、ボルテゾミド（ＶＥＬＣＡＤＥ）、アムルビシン、カルフィルゾミブ、プララトレキサート、及び／またはエンザスタウリンと併用投与されてもよい。
【０４９０】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＰＤ−１軸結合アンタゴニストと併用投与されてもよい。ＰＤ−１軸結合アンタゴニストには、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが含まれるが、これらに限定されない。「ＰＤ−１」の代替名には、ＣＤ２７９及びＳＬＥＢ２が含まれる。「ＰＤ−Ｌ１」の代替名には、Ｂ７−Ｈ１、Ｂ７−４、ＣＤ２７４、及びＢ７−Ｈが含まれる。「ＰＤ−Ｌ２」の代替名には、Ｂ７−ＤＣ、Ｂｔｄｃ、及びＣＤ２７３が含まれる。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２は、ヒトＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のそのリガンド結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−１リガンド結合パートナーは、ＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２である。別の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、その結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−Ｌ１結合パートナーは、ＰＤ−１及び／またはＢ７−１である。別の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２の、その結合パートナーへの結合を阻害する分子である。具体的な態様では、ＰＤ−Ｌ２結合パートナーは、ＰＤ−１である。アンタゴニストは、抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、またはオリゴペプチドであり得る。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体（例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体）である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ、ＯＰＤＩＶＯ）、Ｍｅｒｃｋ  ３４７５（ＭＫ−３４７５、ペムブロリズマブ、ＫＥＹＴＲＵＤＡ）、ＣＴ−０１１（ピジリズマブ）、ＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、ＢＧＢ−１０８、及びＢＧＢ−Ａ３１７からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合するＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外またはＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシンである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＡＭＰ−２２４である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌｌ結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌｌ抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌｌ結合アンタゴニストは、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、ＭＤＸ−１１０５、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ（ａｖｅｌｕｍａｂ）からなる群から選択される。ＭＤＸ−１１０５、別名ＢＭＳ−９３６５５９は、ＷＯ２００７／００５８７４に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０（それぞれ、配列番号２０及び２１に示される重鎖及び軽鎖可変領域配列）は、ＷＯ２０１０／０７７６３４  Ａ１に記載される抗ＰＤ−Ｌ１である。ＭＤＸ−１１０６、別名ＭＤＸ−１１０６��０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８、またはニボルマブは、ＷＯ２００６／１２１１６８に記載される抗ＰＤ−１抗体である。ＭＫ−３４７５、別名ＭＫ−３４７５、ＳＣＨ−９００４７５、またはペンブロリズマブは、ＷＯ２００９／１１４３３５に記載される抗ＰＤ−１抗体である。ＣＴ−０１１、別名、ｈＢＡＴ、ｈＢＡＴ−１、またはピジリズマブは、ＷＯ２００９／１０１６１１に記載される抗ＰＤ−１抗体である。ＡＭＰ−２２４、別名Ｂ７−ＤＣＩｇは、ＷＯ２０１０／０２７８２７及びＷＯ２０１１／０６６３４２に記載されるＰＤ−Ｌ２−Ｆｃ融合可溶性受容体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ−１１０６である。「ＭＤＸ−１１０６」の代替名には、ＭＤＸ−１  １０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８、またはニボルマブが含まれる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ（ＣＡＳ登録番号９４６４１４−９４−４）である。
【０４９１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、活性化共刺激分子に対して指向されるアゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、活性化共刺激分子には、ＣＤ４０、ＣＤ２２６、ＣＤ２８、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、またはＣＤ１２７が含まれ得る。いくつかの実施形態では、活性化共刺激分子に対して指向されるアゴニストは、ＣＤ４０、ＣＤ２２６、ＣＤ２８、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、またはＣＤ１２７に結合するアゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、阻害性共刺激分子に対して指向されるアンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、阻害性共刺激分子には、ＣＴＬＡ−４（別名ＣＤ１５２）、ＰＤ−１、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＩＤＯ、ＴＩＧＩＴ、ＭＩＣＡ／Ｂ、またはアルギナーゼが含まれ得る。いくつかの実施形態では、阻害性共刺激分子に対して指向されるアンタゴニストは、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３（例えば、ＬＡＧ−３−ＩｇＧ融合タンパク質（ＩＭＰ３２１）、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＩＤＯ、ＴＩＧＩＴ、ＭＩＣＡ／Ｂ、またはアルギナーゼに結合するアンタゴニスト抗体である。
【０４９２】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＴＬＡ−４（別名ＣＤ１５２）に対して指向されるアンタゴニスト、例えば、遮断抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、イピリムマブ（ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ）（別名ＭＤＸ−０１０、ＭＤＸ−１０１、またはＹｅｒｖｏｙ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、トレメリムマブ（ｔｒｅｍｅｌｉｍｕｍａｂ）（別名チシリムマブ（ｔｉｃｉｌｉｍｕｍａｂ）またはＣＰ−６７５，２０６）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、Ｂ７−Ｈ３（別名ＣＤ２７６）に対して指向されるアンタゴニスト、例えば、遮断抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＭＧＡ２７１と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＴＧＦベータに対して指向されるアンタゴニスト、例えば、メテリムマブ（ｍｅｔｅｌｉｍｕｍａｂ）（別名ＣＡＴ−１９２）、フレソリムマブ（ｆｒｅｓｏｌｉｍｕｍａｂ）（別名ＧＣ１００８）、またはＬＹ２１５７２９９と併用投与されてもよい。
【０４９３】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞（例えば、細胞傷害性Ｔ細胞またはＣＴＬ）の養子移入を含む治療と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＵＣＡＲＴ１９と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＷＴ１２８ｚと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＫＴＥ−Ｃ１９（Ｋｉｔｅ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＴＬ０１９（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ドミナントネガティブＴＧＦベータ受容体、例えばドミナントネガティブＴＧＦベータＩＩ型受容体を含むＴ細胞の養子移入を含む治療と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＨＥＲＣＲＥＥＭプロトコールを含む治療と併用投与されてもよい（例えば、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒ  ＮＣＴ００８８９９５４を参照されたい）。
【０４９４】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ１９に対して指向されるアンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＭＯＲ００２０８と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ３８に対して指向されるアンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ダラツムマブと併用投与されてもよい。
【０４９５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ１３７（別名ＴＮＦＲＳＦ９、４−１ＢＢ、またはＩＬＡ）に対して指向されるアゴニスト、例えば、活性化抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ウレルマブ（ｕｒｅｌｕｍａｂ）（別名ＢＭＳ−６６３５１３）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ４０に対して指向されるアゴニスト、例えば、活性化抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＰ−８７０８９３と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＯＸ４０（別名ＣＤ１３４）に対して指向されるアゴニスト、例えば、活性化抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、異なる抗ＯＸ４０抗体（例えば、ＡｇｏｎＯＸ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ２７に対して指向されるアゴニスト、例えば、活性化抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤＸ−１１２７と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、インドールアミン−２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）に対して指向されるアンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストと共にあるのは、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（別名１−Ｄ−ＭＴ）である。
【０４９６】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ１３７（別名ＴＮＦＲＳＦ９、４−１ＢＢ、またはＩＬＡ）に対して指向されるアゴニスト、例えば、活性化抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ウレルマブ（ｕｒｅｌｕｍａｂ）（別名ＢＭＳ−６６３５１３）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ４０に対して指向されるアゴニスト、例えば、活性化抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＰ−８７０８９３またはＲＯ７００９７８９と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＯＸ４０（別名ＣＤ１３４）に対して指向されるアゴニスト、例えば、活性化抗体。）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ２７に対して指向されるアゴニスト、例えば、活性化抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤＸ−１１２７（別名バルリルマブ（ｖａｒｌｉｌｕｍａｂ））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、インドールアミン−２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）に対して指向されるアンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストと共にあるのは、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（別名１−Ｄ−ＭＴ）である。いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストは、ＷＯ２０１０／００５９５８（その内容は本明細書での記録により明示的に組み込まれる）に示されるＩＤＯアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストは、（例えば、ＷＯ２０１０／００５９５８の実施例２３に記載されるような）４−（｛２−［（アミノスルホニル）アミノ］エチル｝アミノ）−Ｎ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−Ｎ’−ヒドロキシ−１，２，５−オキサジアゾール−３−カルボキシイミドアミドである。いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストは、
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である。
いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストは、ＩＮＣＢ２４３６０である。いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストは、インドキシモド（Ｉｎｄｏｘｉｍｏｄ）（１−メチル−トリプトファンのＤ異性体）である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、抗体−薬物コンジュゲートと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、抗体−薬物コンジュゲートは、メルタンシン（ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）またはモノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、抗ＮａＰｉ２ｂ抗体−ＭＭＡＥコンジュゲート（別名ＤＮＩＢ０６００Ａ、ＲＧ７５９９またはリファスツズマブベドチン（ｌｉｆａｓｔｕｚｕｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、トラスツズマブエムタンシン（別名Ｔ−ＤＭ１、アドトラスツズマブエムタンシン、またはＫＡＤＣＹＬＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、抗ＭＵＣ１６抗体−ＭＭＡＥコンジュゲート、ＤＭＵＣ５７５４Ａと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、抗ＭＵＣ１６抗体−ＭＭＡＥコンジュゲート、ＤＭＵＣ４０６４Ａと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、エンドセリンＢ受容体（ＥＤＮＢＲ）を標的とする抗体−薬物コンジュゲート、例えばＭＭＡＥとコンジュゲートされたＥＤＮＢＲに対して指向される抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、リンパ球抗原６複合体、Ｅ遺伝子座（Ｌｙ６Ｅ）を標的とする抗体−薬物コンジュゲート、例えばＭＭＡＥとコンジュゲートされたＬｙ６Ｅに対して指向される抗体（別名ＤＬＹＥ５９５３Ａ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ポラツズマブベドチン（ｐｏｌａｔｕｚｕｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ３０を標的とする抗体−薬物コンジュゲートと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＡＤＣＥＴＲＩＳ（別名ブレンツキシマブベドチン（ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ  ｖｅｄｏｔｉｎ））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ポラツズマブベドチンと併用投与されてもよい。
【０４９７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、血管新生阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＶＥＧＦ、例えば、ＶＥＧＦ−Ａに対して指向される抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ（別名ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、アンジオポエチン  ２（別名Ａｎｇ２）に対して指向される抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＭＥＤＩ３６１７と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＶＥＧＦＲ２に対して指向される抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ラムシルマブと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＶＥＧＦ受容体融合タンパク質と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、アフリベルセプトと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ｚｉｖ−アフリベルセプト（別名ＶＥＧＦ  ＴｒａｐまたはＺａｌｔｒａｐ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＶＥＧＦ及びＡｎｇ２に対して指向される二重特異性抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＲＧ７２２１（別名バヌシズマブ（ｖａｎｕｃｉｚｕｍａｂ））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、血管新生阻害剤と併用、及びＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−１抗体等のＰＤ−１結合アンタゴニスト、抗ＰＤ−Ｌ１抗体等のＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、及び抗ＰＤ−Ｌ２抗体等のＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−１抗体等のＰＤ−１結合アンタゴニスト、抗ＰＤ−Ｌ１抗体等のＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、及び抗ＰＤ−Ｌ２抗体等のＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ、ＯＰＤＩＶＯ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、��明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＭｅｒｃｋ  ３４７５（ＭＫ−３４７５、ペンブロリズマブ、ＫＥＹＴＲＵＤＡ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＣＴ−０１１（ピジリズマブ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＰＤＲ００１と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＲＥＧＮ２８１０と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＢＧＢ−１０８と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＢＧＢ−Ａ３１７と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＹＷ２４３．５５．Ｓ７０と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＭＰＤＬ３２８０Ａと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＭＥＤＩ４７３６と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＭＤＸ−１１０５と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベバシズマブ及びＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ（ａｖｅｌｕｍａｂ）と併用投与されてもよい。
【０４９８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、抗新生物薬剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＳＦ−１Ｒ（別名Ｍ−ＣＳＦＲまたはＣＤ１１５）を標的とする薬剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体（別名ＩＭＣ−ＣＳ４またはＬＹ３０２２８５５）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、ＲＧ７１５５（別名ＲＯ５５０９５５４またはエマクツズマブ（ｅｍａｃｔｕｚｕｍａｂ））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、インターフェロン、例えばインターフェロンアルファまたはインターフェロンガンマと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、Ｒｏｆｅｒｏｎ−Ａ（別名、組換えインターフェロンアルファ−２ａ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＧＭ−ＣＳＦ（別名、組換えヒト顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、ｒｈｕ  ＧＭ−ＣＳＦ、サルグラモスチム、またはＬｅｕｋｉｎｅ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ−２（別名アルデスロイキンまたはＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ−１２と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ２７と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ−１５と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＡＬＴ−８０３と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ２０を標的とする抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＣＤ２０を標的とする抗体は、オビヌツズマブ（別名ＧＡ１０１またはＧａｚｙｖａ（登録商標））またはリツキシマブである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＧＩＴＲを標的とする抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲを標的とする抗体は、ＴＲＸ５１８である。いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲを標的とする抗体は、ＭＫ０４１６６（Ｍｅｒｃｋ）である。
【０４９９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、イブルチニブと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ１（ＩＤＨ１）及び／またはイソクエン酸デヒドロゲナーゼ２（ＩＤＨ２）の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＡＧ−１２０（Ａｇｉｏｓ）と併用投与されてもよい。
【０５００】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、オビヌツズマブ及びＰＤ−１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−１抗体等のＰＤ−１結合アンタゴニスト、抗ＰＤ−Ｌ１抗体等のＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、及び抗ＰＤ−Ｌ２抗体等のＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト）と併用投与されてもよい。
【０５０１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、がんワクチンと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、がんワクチンは、ペプチドがんワクチンであり、いくつかの実施形態では、個別化ペプチドワクチンである。いくつかの実施形態では、ペプチドがんワクチンは、多価長ペプチド、マルチペプチド、ペプチドカクテル、ハイブリッドペプチド、またはペプチドパルス樹状細胞ワクチンである（例えば、Ｙａｍａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ，１０４：１４−２１，２０１３を参照されたい）。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、アジュバントと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＴＬＲアゴニスト、例えば、Ｐｏｌｙ−ＩＣＬＣ（別名Ｈｉｌｔｏｎｏｌ（登録商標））、ＬＰＳ、ＭＰＬ、またはＣｐＧ  ＯＤＮを含む治療薬と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ−１と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＨＭＧＢ１と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ−１０アンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ−４アンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ−１３アンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ−１７アンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＨＶＥＭアンタゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、例えばＩＣＯＳ−Ｌの投与によってＩＣＯＳアゴニストと、またはＩＣＯＳに対して指向されるアゴニスト性の抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＸ３ＣＬ１を標的とする治療薬と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＸＣＬ９を標的とする治療薬と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＸＣＬ１０を標的とする治療薬と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、���ＣＬ５を標的とする治療薬と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＬＦＡ−１またはＩＣＡＭ１アゴニストと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、セレクチンアゴニストと併用投与されてもよい。
【０５０２】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、Ｂ−Ｒａｆの阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベムラフェニブ（ｖｅｍｕｒａｆｅｎｉｂ）（別名Ｚｅｌｂｏｒａｆ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ダブラフェニブ（ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ）（別名Ｔａｆｉｎｌａｒ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、エンコラフェニブ（ｅｎｃｏｒａｆｅｎｉｂ）（ＬＧＸ８１８）と併用投与されてもよい。
【０５０３】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＥＧＦＲ阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、エルロチニブ（別名Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＥＧＦＲ−Ｔ７９０Ｍの阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ゲフィチニブと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、アファチニブと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、セツキシマブ（別名Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、パニツムマブ（別名Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ロシレチニブ（ｒｏｃｉｌｅｔｉｎｉｂ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＡＺＤ９２９１と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＭＥＫ１（別名ＭＡＰ２Ｋ１）及び／またはＭＥＫ２（別名ＭＡＰ２Ｋ２）等のＭＥＫの阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、コビメチニブ（別名ＧＤＣ−０９７３またはＸＬ−５１８）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、トラメチニブ（別名Ｍｅｋｉｎｉｓｔ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ビニメチニブ（ｂｉｎｉｍｅｔｉｎｉｂ）と併用投与されてもよい。
【０５０４】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、Ｂ−Ｒａｆの阻害剤（例えば、ベムラフェニブまたはダブラフェニブ）及びＭＥＫ（例えば、ＭＥＫ１及び／またはＭＥＫ２（例えば、コビメチニブまたはトラメチニブ）の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＥＲＫ（例えば、ＥＲＫ１／２）の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＧＤＣ−０９９４と併用投与されてもよい）。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、Ｂ−Ｒａｆの阻害剤、ＭＥＫの阻害剤、及びＥＲＫ１／２の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＥＧＦＲの阻害剤、ＭＥＫの阻害剤、及びＥＲＫ１／２の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、１つ以上のＭＡＰキナーゼ経路阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＫ１２７と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、Ｋ−Ｒａｓの阻害剤と併用投与されてもよい。
【０５０５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ｃ−Ｍｅｔの阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、オナルツズマブ（ｏｎａｒｔｕｚｕｍａｂ）（別名ＭｅｔＭＡｂ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、未分化（ａｎａｐｌａｔｉｃ）リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＡＦ８０２（別名ＣＨ５４２４８０２またはアレクチニブ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、クリゾチニブと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、セリチニブと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ブパルリシブ（ｂｕｐａｒｌｉｓｉｂ）（ＢＫＭ−１２０）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ピクチリシブ（ｐｉｃｔｉｌｉｓｉｂ）（別名ＧＤＣ−０９４１）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ブパルリシブ（ｂｕｐａｒｌｉｓｉｂ）（別名ＢＫＭ−１２０）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ペリフォシン（別名ＫＲＸ−０４０１）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）のデルタ選択的阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、イデラリシブ（ｉｄｅｌａｌｉｓｉｂ）（別名ＧＳ−１１０１またはＣＡＬ−１０１）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、タセリシブ（ｔａｓｅｌｉｓｉｂ）（別名ＧＤＣ−００３２）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＢＹＬ−７１９と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、Ａｋｔの阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＭＫ２２０６と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＧＳＫ６９０６９３と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、イパタセルチブ（ｉｐａｔａｓｅｒｔｉｂ）（別名ＧＤＣ−００６８）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ｍＴＯＲの阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、テムシロリムス（別名ＣＣＩ−７７９またはＴｏｒｉｓｅｌ（登録商標））と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、エベロリムス（別名ＲＡＤ００１）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、リダホロリムス（ｒｉｄａｆｏｒｏｌｉｍｕｓ）（別名ＡＰ−２３５７３、ＭＫ−８６６９、またはデホロリムス（ｄｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＯＳＩ−０２７と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＡＺＤ８０５５と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＮＫ１２８と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、二重ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＸＬ７６５と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＧＤＣ−０９８０と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＢＥＺ２３５（別名ＮＶＰ−ＢＥＺ２３５）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＢＧＴ２２６と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＧＳＫ２１２６４５８と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＰＦ−０４６９１５０２と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＰＦ−０５２１２３８４（別名ＰＫＩ−５８７）と併用投与されてもよい。
【０５０６】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、エストロゲン受容体を選択的に分解する薬剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＧＤＣ−０９２７と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＨＥＲ３の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、デュリゴツズマブ（ｄｕｌｉｇｏｔｕｚｕｍａｂ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＬＳＤ１の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＭＤＭ２の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＢＣＬ２の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ベネトクラックスと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＨＫ１の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＧＤＣ−０５７５と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化の阻害剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＥＲＩＶＥＤＧＥと併用投与されてもよい。
【０５０７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、放射線療法と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ゲムシタビンと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ｎａｂ−パクリタキセル（ＡＢＲＡＸＡＮＥ）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、トラスツズマブと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＴＶＥＣと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＩＬ２７と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、シクロホスファミドと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、Ｔ細胞を腫瘍に動員する薬剤と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、リリルマブ（ｌｉｒｉｌｕｍａｂ）（ＩＰＨ２１０２／ＢＭＳ−９８６０１５）と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、イデラリシブと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ３及びＣＤ２０を標的とする抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＲＥＧＮ１９７９と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＣＤ３及びＣＤ１９を標的とする抗体と併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ブリナツモマブと併用投与されてもよい。
【０５０８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、腫瘍溶解性ウイルスと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、カルボプラチン及びｎａｂ−パクリタキセルと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、カルボプラチン及びパクリタキセルと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、シスプラチン及びペメトレキセドと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、シスプラチン及びゲムシタビンと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＦＯＬＦＯＸと併用投与されてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体は、ＦＯＬＦＩＲＩと併用投与されてもよい。
【０５０９】
上述のかかる併用療法は、併用投与（２つ以上の治療剤が同じまたは別個の製剤中に含まれる）、及び個別投与を包含するが、この場合、本明細書に記載の抗原結合ポリペプチド（例えば、抗体）または複合体の投与は、追加の治療剤及び／またはアジュバントの投与の前に、それと同時に、かつ／またはその後に行われ得る。本発明の抗体または複合体はまた、放射線療法と組み合わせて使用することもできる。
【０５１０】
本発明の抗体または複合体（及び任意の追加の治療剤）は、非経口、肺内、及び鼻腔内、ならびに局所両方のために所望される場合、病変内投与を含む、任意の好適な手段によって投与することができる。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与が含まれる。投薬は、任意の好適な経路による、例えば、投与が短時間であるかまたは慢性的であるかに部分的に応じて、静脈内または皮下注射等の、注射によるものであり得る。単回または種々の時点にわたる複数回投与、ボーラス投与、及びパルス注入を含むが、これらに限定されない、種々の投薬スケジュールが本明細書で企図される。
【０５１１】
本発明の抗体または複合体は、良好な医療行為と一致した様式で、製剤化され、投薬され、投与されるであろう。この文脈における考慮の要因には、治療されている特定の障害、治療されている特定の哺乳動物、個々の患者の臨床的病態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与のスケジュール管理、及び医療従事者に既知の他の要因が含まれる。抗体または複合体は、必要ではないが、任意選択的に、問題の障害を予防または治療するために現在使用される１つ以上の薬剤と共に製剤化される。かかる他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗体の量、障害または治療の種類、及び上記で考察された他の要因に依存する。これらは一般に、本明細書に記載されるものと同じ投薬量及び投与経路で、または本明細書に記載される投薬量の約１〜９９％で、または適切であると経験的／臨床的に決定される任意の投薬量及び任意の経路で使用される。
【０５１２】
疾患の予防または治療に関して、本発明の抗体または複合体の適切な投薬量は（単独で、または１つ以上の他の追加の治療剤と組み合わせて使用される場合）、治療される疾患の種類、抗体の種類、疾患の重症度及び経過、抗体が予防目的でそれとも治療目的で投与されるのか、以前の療法、患者の病歴、及び抗体への応答、ならびに主治医の裁量に左右される。抗体または複合体は、患者に、１回で、または一連の治療にわたって、好適に投与される。疾患の種類及び重症度に応じて、例えば、１回以上の別個の投与によるものであれ、連続注入によるものであれ、約１μｇ／ｋｇ〜４０ｍｇ／ｋｇの抗体または複合体が、患者への投与のための初期候補投薬量であり得る。１つの典型的な１日投薬量は、上述の要因に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲に及び得る。病態に応じて数日間以上にわたる反復投与では、治療は一般に、疾患症状の所望の抑制が生じるまで持続されるだろう。そのような用量は、断続的に、例えば毎週または３週間毎（例えば、患者が約２〜約２０回、または例えば約６回の用量の抗体を受容するように）投与されてもよい。初回のより高い負荷用量、続いて１回以上のより低い用量が投与されてもよい。しかしながら、他の投薬レジメンが有用な場合がある。この療法の進行は、従来の技法及びアッセイによって容易に監視される。
【０５１３】
Ｔｉｅ２アゴニストの使用
ある特定の実施形態では、本願は、治療上有効量の、Ｔｉｅ  ２に結合するアゴニスト抗原結合複合体を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における疾患または障害の治療または予防方法を提供する。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＴｉｅ２アゴニストは、血管新生を刺激するために使用されてもよく、また、血管新生の促進が望ましい多様な臨床状況において使用することができる。かかる適応症の非限定的な例としては、再生組織の血管新生、虚血肢疾患、脳虚血、動脈硬化症を含む血管炎症の病態、無血管性壊死、毛髪成長の刺激、及び勃起不全が挙げられる。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＴｉｅ２アゴニストは、例えば漏出血管部位における、血管透過性を減少させるために使用されてもよい。かかる方法は、多様な臨床状況において使用することができ、その非限定的な例としては、脳卒中、黄斑変性、黄斑浮腫、リンパ浮腫、血液網膜関門の崩壊、血液脳関門の崩壊（例えば、化学療法による治療の間）、及び薬物送達を促進し、放射線感受性を高めるための腫瘍血管系の正常化が挙げられる。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のＴｉｅ２アゴニストは、内皮細胞のアポトーシスを阻害するために使用されてもよい。かかる方法は、多様な臨床状況において使用することができ、その非限定的な例としては、腎線維症、脳卒中、黄斑変性、及び糖尿病合併症（例えば、腎臓、眼、皮膚、及び／または肢における）が挙げられる。他の実施形態では、本明細書に記載のＴｉｅ２アゴニストは、創傷治癒を刺激するのに使用されてもよい。
【０５１４】
スクリーニングアッセイ
また、アゴニスト活性を有するポリペプチドの特定方法が本明細書で提供される。具体的には、抗原結合ポリペプチドは、個々のポリペプチド（例えば、個々の抗体、抗体断片、リガンド等）として発現されるときにアゴニスト活性を有しない場合があるが、同じポリペプチドが本明細書に記載の多量体の複合体の関連において提示されるとき、複合体は、アゴニスト活性を呈し得る。したがって、個々のポリペプチドのアゴニスト活性についてスクリーニングすることによって、偽陰性として破棄されるいくつかの候補、例えば、複合体に含有されるときにアゴニストとして作用する能力を有するが、単離形態で提示されるときにはかかる活性を呈しない、ポリペプチドが存在し得る。したがって、本明細書に記載の抗原結合複合体を候補ポリペプチドの最初のスクリーニングにおいて使用して、アゴニスト活性を有するポリペプチドを特定し得る。
【０５１５】
したがって、ある特定の実施形態では、本願は、アゴニスト活性を有する抗原結合ポリペプチド（または抗原結合複合体）の新規の特定方法を提供する。本方法は、本明細書に記載の複数の抗原結合複合体を準備することと、抗原結合複合体を細胞表面受容体に対してスクリーニングすることと、細胞表面受容体に対してアゴニスト活性を有する抗原結合複合体を選択することとを含む。ある特定の実施形態では、抗原結合複合体は、アミノ酸配列が互いに異なる、抗原結合複合体のライブラリとして準備されてもよい。かかるライブラリは、細胞表面受容体に結合し、細胞表面受容体に対するアゴニスト活性を有する抗原結合複合体を特定するのに非常に有用なリソースを提供する。
【０５１６】
ある特定の実施形態では、かかるスクリーニングアッセイにおいて有用な抗原結合複合体は、各抗原結合複合体が単一特異性二価抗体の六量体を含み、所与の複合体における各抗体が同じであり、かつ各六量体の複合体が同じ標的に結合する異なる抗体を含有する、ライブラリ、例えば、本質的に、所与の細胞表面標的に対して産生された単一特異性抗体の六量体の複合体のライブラリであり得る。かかるライブラリは、例えば、細胞表面受容体に結合し、受容体を作動する抗体（または抗原結合複合体）を特定するのに有用であろう。
【０５１７】
ある特定の実施形態では、かかるスクリーニングアッセイにおいて有用な抗原結合複合体は、各抗原結合複合体が二価抗体の六量体であり、各複合体が２つの異なる標的に結合する少なくとも２つの異なる抗体を含み、かつ各複合体が同じ２つの標的に結合する異なる抗体を含有する、ライブラリであり得る。例えば、かかるライブラリは、細胞表面受容体１に結合する抗体のミックス及び細胞表面受容体２に結合する抗体のミックスを含有することがあり得る。この種のライブラリをスクリーニングすることは、例えば、ヘテロ二量体の細胞表面受容体を作動するであろう抗体の組み合わせを特定するのに有用であり、受容体対を作動するであろう二重特異性抗体の開発を伝え得る。
【０５１８】
他の実施形態では、本願は、抗原結合ポリペプチドのアゴニスト活性の増大方法を提供する。ある特定の実施形態では、本方法は、細胞表面受容体に対する抗原結合領域、及びＦｃ領域を含む、抗原結合ポリペプチドを準備することと、Ｆｃ領域に修飾を導入することと、を含む、抗原結合ポリペプチドのアゴニスト活性の増大方法を提供し、この修飾は、抗原結合ポリペプチドの複合体形成（例えば、六量体形成を含む）を強化し、この複合体は、複合体の個々のサブユニットと比較して、抗原結合ポリペプチドが結合した細胞表面受容体に対する増加したアゴニスト活性を有する。
【０５１９】
本明細書に記載の抗原結合複合体または抗原結合ポリペプチドは、それらの物理／化学特性及び生物学的機能について、当該技術分野で既知の種々のアッセイによって特徴付けることができる。例えば、本明細書に例示されるように、六量体形成は、単量体の複合体と多量体（例えば、六量体）の複合体との保持時間の差を監視する、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用して、アッセイされてもよい。
【０５２０】
いくつかの実施形態では、本開示の抗原結合ポリペプチドを含む組成物は、単量体及び多量体（例えば、六量体）形態にある抗原結合ポリペプチドを含んでもよい。本明細書に記載されるように、ある特定の修飾抗原結合ポリペプチドは、溶液中にある割合の多量体種（例えば、六量体）を含んでもよい。しかしながら、本明細書に例示されるように、ある特定の修飾抗原結合ポリペプチドは、溶液中で優勢的にまたは排他的に単量体種を形成するにもかかわらず、ＦｃＲ媒介性架橋結合の不在下で強力なＴ細胞増殖（例えば、修飾（複数可）を有しない抗原結合ポリペプチド等の対照と比較してより強力な増殖応答）を促進し得る。
【０５２１】
ある特定の実施形態では、抗原結合複合体または抗原結合ポリペプチドは、Ｎ末端配列決定、アミノ酸分析、非変性サイズ排除高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、質量分析法、イオン交換クロマトグラフィー、及びパパイン消化を含むが、これらに限定されない一連のアッセイによって、特徴付けることができる。
【０５２２】
ある特定の実施形態では、抗原結合複合体または抗原結合ポリペプチドは、例えば、抗原結合活性等の、生物活性について分析されてもよい。例えば、ウエスタンブロット、ラジオイムノアッセイ、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）、「サンドイッチ」イムノアッセイ、免疫沈降アッセイ、蛍光イムノアッセイ、及びプロテインＡイムノアッセイ等の技法を用いた任意の直接または競合結合アッセイを含む、抗原結合アッセイが当該技術分野で知られており、本明細書で使用することができる。
【０５２３】
他の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合複合体または抗原結合ポリペプチドは、アゴニスト活性について分析されてもよい。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合複合体または抗原結合ポリペプチドのアゴニスト活性は、成長に関してリガンドに依存する細胞が、細胞培養中に抗原結合複合体またはポリペプチドが添加されたときに、リガンドが添加されたときと比較して同じように成長するか否かを分析することによって、決定することができる。細胞が同じまたは同様の様態で成長する場合、抗原結合複合体またはポリペプチドは、アゴニスト性の活性を有すると決定される。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗原結合複合体または抗原結合ポリペプチドのアゴニスト活性は、固有のリガンド依存性活性（成長に限定されない）を有する細胞株が、細胞培養中に抗原結合複合体またはポリペプチドが添加されたときに、そのリガンドが添加されたときと比較して同じ反応を示すか否かを分析することによって、決定することができる。細胞株がリガンドに対するものと同じまたは同様の反応を示す場合、抗原結合複合体またはポリペプチドは、アゴニスト性の活性を有すると決定される。
【０５２４】
ある特定の実施形態では、上述の細胞成長シグナルを伝達することが可能な細胞は、リガンドに対して反応性の受容体を細胞表面上に発現する。これらの細胞は、リガンド（またはアゴニスト抗原結合複合体またはポリペプチド）が受容体に結合すると、細胞成長シグナルを伝達する。ある特定の実施形態では、アゴニスト活性についてのスクリーニングに有用な細胞は、細胞上の細胞表面受容体へのリガンドの結合に際して、増殖するかまたはシグナルを伝達する。他の実施形態では、細胞表面受容体が、細胞内にシグナルを伝達しない受容体である場合、非伝達受容体の細胞外ドメイン（例えば、リガンド結合ドメイン）を、細胞内にシグナルを伝達する受容体の細胞内ドメインに融合することによって、キメラ受容体を作製。リガンド結合受容体との融合によってキメラ受容体を構築するのに好適な受容体には、例えば、Ｇ−ＣＳＦ受容体、ｍｐｌ、ｎｅｕ、ＧＭ−ＣＳＦ受容体、ＥＰＯ受容体、ｃ−Ｋｉｔ、及びＦＬＴ−３受容体を含む、シグナルを伝達する任意の受容体が含まれる。かかる受容体を発現させるのに使用される細胞には、例えば、ＢａＦ３、ＮＦＳ６０、ＦＤＣＰ−１、ＦＤＣＰ−２、ＣＴＬＬ−２、ＤＡ−１、及びＫＴ−３が含まれる。
【０５２５】
ある特定の実施形態では、アゴニスト性の活性は、例えば、細胞内にシグナルを伝達することによってある特定の生理学的活性の変化を誘導するといった、細胞における特定の反応を誘導する、リガンド（または抗原結合複合体またはポリペプチド）結合によって引き起こされる任意の活性を指す。かかる生理学的活性には、例えば、成長活性、成長誘導活性、生存活性、分化活性、分化誘導活性、転写活性、膜輸送活性、結合活性、タンパク質分解活性、リン酸化／脱リン酸化活性、酸化−還元活性、転移活性、核酸分解活性、脱水活性、細胞死誘導活性、及びアポトーシス誘導活性が含まれる。
【０５２６】
本明細書に記載のアゴニスト性の活性は、当業者に既知の方法によって決定することができる。例えば、アゴニスト性の活性は、細胞成長を指標として用いる方法によって評価することができる。より具体的には、アゴニスト性の活性を決定しようとしている抗原結合複合体またはポリペプチドを、アゴニスト依存性成長を示す細胞に添加し、その細胞を培養する。次に、ＷＳＴ−８等の、生細胞数に応じて特定の波長で呈色反応を示す試薬を添加し、吸光度を測定する。測定された吸光度を指標として用いて、アゴニスト性の活性を決定することができる。
【０５２７】
ある特定の実施形態では、アゴニスト活性は、リガンド（または抗原結合複合体またはポリペプチド）への曝露に際しての細胞における定量的及び／または定性的変化を監視することができる指標を用いて、決定される。例えば、無細胞アッセイ指標、細胞ベースのアッセイ指標、組織ベースのアッセイ指標、及びインビボアッセイ指標を用いることが可能である。無細胞アッセイにおいて使用され得る指標には、酵素反応、タンパク質、ＤＮＡ、またはＲＮＡにおける定量的及び／または定性的変化が含まれる。かかる酵素反応には、例えば、アミノ酸転移反応、糖転移反応、脱水反応、脱水素反応、及び基質開裂反応が含まれる。代替的に、タンパク質リン酸化、脱リン酸化、二量体化、多量体化、加水分解、及び解離；ＤＮＡまたはＲＮＡ増幅、開裂、及び延長が、無細胞アッセイにおける指標として使用され得る。例えば、シグナル伝達経路の下流のタンパク質リン酸化が、検出指標として使用されてもよい。細胞表現型の変化、例えば、産物における定量的及び／もしくは定性的変化、成長活性の変化、細胞数の変化、形態変化、または細胞特性の変化が、細胞ベースのアッセイにおける指標として使用され得る。産物には、例えば、分泌タンパク質、表面抗原、細胞内タンパク質、及びｍＲＮＡが含まれる。形態変化には、例えば、樹状突起形成の変化及び／または樹状突起数の変化、細胞偏平度の変化、細胞伸長／軸方向比の変化、細胞サイズの変化、細胞内構造の変化、細胞集団の不均一性／均一性、ならびに細胞密度の変化が含まれる。かかる形態変化は、顕微鏡下で観察することができる。指標として使用されるべき細胞特性には、アンカー依存性、サイトカイン依存性反応、ホルモン依存性、薬物耐性、細胞運動性、細胞遊走活性、脈動活性、及び細胞内物質の変化が含まれる。細胞運動性には、細胞浸潤活性及び細胞遊走活性が含まれる。細胞内物質の変化には、例えば、酵素活性、ｍＲＮＡレベル、Ｃａ２＋及びｃＡＭＰ等の細胞内シグナル伝達分子のレベル、ならびに細胞内タンパク質レベルの変化が含まれる。細胞膜受容体が使用される場合、受容体刺激によって誘導される細胞増殖活性の変化が、指標として使用され得る。組織ベースのアッセイにおいて使用されるべき指標には、対象となる組織について十分な機能的変化が含まれる。インビボアッセイにおいては、組織重量の変化、血液系における変化（例えば、血球数、タンパク質含量、または酵素活性の変化）、電解質レベルの変化、及び循環系における変化（例えば、血圧または心拍数の変化）。
【０５２８】
かかる検出指標のいずれの好適な測定方法も、本明細書に記載の方法に関連して使用されてよい。例えば、吸光度、発光光度、発色現像、蛍光光度、放射能、蛍光偏光、表面プラズモン共鳴シグナル、時間分解蛍光光度、質量、吸収スペクトル、光散乱、及び蛍光共鳴エネルギー移動が使用され得る。これらの測定法は、当業者に知られており、目的に応じて適切に選択され得る。例えば、吸収スペクトルは、従来の光度計、プレートリーダー等を使用して得ることができ、発光光度は、発光光度計等により測定することができ、蛍光光度は、蛍光光度計等により測定することができる。質量は、質量分析計により決定することができる。放射能は、放射の種類に応じてガンマカウンター等のデバイスにより決定することができる。蛍光偏光は、ＢＥＡＣＯＮ（ＴａＫａＲａ）により測定することができる。表面プラズモン共鳴シグナルは、ＢＩＡＣＯＲＥにより得ることができる。時間分解蛍光光度、蛍光共鳴エネルギー移動等は、ＡＲＶＯ等により得ることができる。さらに、フローサイトメーターも測定に使用することができる。上述の方法のうちの１つを用いて、２つ以上の異なる種類の検出指標を測定することが可能である。２つ以上の測定法を同時に及び／または逐次的に用いることによって、より多くの数の検出指標をまた検査してもよい。例えば、蛍光光度及び蛍光共鳴エネルギー移動は、蛍光光度計により同時に測定することができる。
【０５２９】
ＯＸ４０アッセイ
上述のように、本開示のある特定の態様は、細胞表面受容体に対するアゴニスト活性に関する。当業者であれば認識するであろうが、細胞表面受容体に対するアゴニスト活性を決定するために使用される特定のアッセイ（複数可）は、特定の細胞表面受容体に左右され得る。ＯＸ４０活性の決定に関連する例示的なアッセイが、下記に提供される。この手引き及び当該技術分野における共通知識基づいて、当業者は、本明細書に記載の他の細胞表面受容体についてのアッセイを好適に特定し得る。
【０５３０】
一態様では、生物活性を有する、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体を特定するためのアッセイが提供される。生物活性には、例えば、ＯＸ４０に結合すること（例えば、ヒト及び／またはカニクイザルＯＸ４０に結合すること）、ＯＸ４０媒介シグナル伝達を増加させること（例えば、ＮＦｋＢ媒介転写を増加させること）、ヒトＯＸ４０を発現する細胞（例えば、Ｔ細胞）を枯渇させること、ＡＤＣＣ及び／または食作用によってヒトＯＸ４０を発現する細胞を枯渇させること、例えばエフェクターＴ細胞増殖を増加させる及び／またはエフェクターＴ細胞によるサイトカイン産生（例えば、ガンマインターフェロン）を増加させることによって、Ｔエフェクター細胞機能（例えば、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞）を強化すること、例えばメモリーＴ細胞増殖を増加させる及び／またはメモリーＴ細胞によるサイトカイン産生（例えば、ガンマインターフェロン）を増加させることによって、メモリーＴ細胞機能（例えば、ＣＤ４＋メモリーＴ細胞）を強化すること、あるいは（例えば、エフェクターＴ細胞機能（例えば、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞機能）のＴｒｅｇ抑制を減少させることによって）制御性Ｔ細胞機能を阻害すること、が含まれ得る。ある特定の実施形態では、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、ヒトエフェクター細胞への結合の不在下で、列挙された生物活性のうちの１つ以上を有する。ある特定の実施形態では、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体は、列挙された生物活性のうちの１つ以上を有し、かつヒトエフェクター細胞に結合もする。インビボ及び／またはインビトロでかかる生物活性を有する抗体もまた提供される。
【０５３１】
ある特定の実施形態では、本発明の抗体は、かかる生物活性について試験される。
【０５３２】
当該技術分野で既知の方法を用いてＴ細胞共刺激をアッセイすることができ、例示的な方法が本明細書に開示される。例えば、Ｔ細胞（例えば、メモリーまたはエフェクターＴ細胞）は、末梢白血球から得られ得る（例えば、Ｆｉｃｏｌｌ勾配遠心分離を使用してヒト全血から単離され得る）。メモリーＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋メモリーＴ細胞）またはエフェクターＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔｅｆｆ細胞）は、当該技術分野で既知の方法を用いてＰＢＭＣから単離され得る。例えば、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＣＤ４＋メモリーＴ細胞単離キットまたはＭｉｌｔｅｎｙｉナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞単離キットが使用され得る。単離されたＴ細胞は、抗原提示細胞（例えば、ＣＤ３２及びＣＤ８０を発現する照射Ｌ細胞）の存在下で培養され、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体の存在下または不在下で抗ＣＤ３抗体の添加によって活性化される。ＯＸ４０抗体に結合するアゴニスト抗原結合複合体の、Ｔ細胞増殖に対する効果は、当該技術分野で周知の方法を用いて測定され得る。例えば、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏキット（Ｐｒｏｍｅｇａ）が使用されてもよく、結果がマルチラベルリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）で読み取られる。ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体の、Ｔ細胞機能に対する効果も、Ｔ細胞によって産生されたサイトカインの分析によって決定され得る。一実施形態では、ＣＤ４＋Ｔ細胞によるインターフェロンガンマの産生は、例えば、細胞培養上清中のインターフェロンガンマの測定によって決定される。インターフェロンガンマの測定方法は、当該技術分野で周知である。
【０５３３】
当該技術分野で既知の方法を用いてＴｒｅｇ細胞機能をアッセイすることができ、例示的な方法が本明細書に開示される。一例では、エフェクターＴ細胞増殖を抑制するＴｒｅｇの能力がアッセイされる。Ｔ細胞は、当該技術分野で既知の方法を用いて（例えば、メモリーＴ細胞またはナイーブＴ細胞を単離することによって）ヒト全血から単離される。精製されたＣＤ４＋ナイーブＴ細胞が（例えば、ＣＦＳＥで）標識され、精製されたＴｒｅｇ細胞が異なる試薬で標識される。照射抗原提示細胞（例えば、ＣＤ３２及びＣＤ８０を発現するＬ細胞）が、標識され精製されたナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞及び精製されたＴｒｅｇと共に共培養される。共培養物は、抗ＣＤ３抗体を使用して活性化され、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体の存在下または不在下で試験される。好適な時間（例えば、６日間の共培養）後、ＣＤ４＋ナイーブＴ細胞増殖のレベルが、ＦＡＣＳ分析を用いて、低減された標識染色（例えば、低減されたＣＦＳＥ標識染色）における色素希釈によって追跡される。
【０５３４】
当該技術分野で周知の方法を用いてＯＸ４０シグナル伝達をアッセイすることができ、例示的な方法が本明細書に開示される。一実施形態では、ヒトＯＸ４０及びレポーター遺伝子（例えば、ベータルシフェラーゼ）に融合したＮＦｋＢプロモーターを含むレポーター遺伝子を発現するトランスジェニック細胞が生成される。ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体の、それらの細胞への添加により、ＮＦｋＢ転写の増加がもたらされ、これが、レポーター遺伝子についてのアッセイを使用して検出される。
【０５３５】
食作用は、例えば、単球由来のマクロファージ、またはＵ９３７細胞（成熟マクロファージの形態及び特性を有するヒト組織球性リンパ腫細胞株）を使用してアッセイされ得る。ＯＸ４０発現細胞が、ＯＸ４０に結合するアゴニスト抗原結合複合体の存在下または不在下で、単球由来のマクロファージまたはＵ９３７細胞に添加される。これらの細胞を好適な期間培養した後、食作用の割合が、（１）マクロファージまたはＵ９３７細胞及び（２）ＯＸ４０発現細胞のマーカーを二重染色する細胞の割合を試験し、かつこれをＯＸ４０発現細胞のマーカー（例えば、ＧＦＰ）を示す細胞の総数で除することによって、決定される。分析は、フローサイトメトリーによって行われ得る。別の実施形態では、分析は、蛍光顕微鏡分析によって行われ得る。
【０５３６】
上述のインビトロアッセイのうちのいずれかで使用するための細胞には、ＯＸ４０を天然に発現するか、またはＯＸ４０を発現するように操作された細胞または細胞株が含まれる。かかる細胞には、ＯＸ４０を天然に発現する活性化Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、及び活性化メモリーＴ細胞が含まれる。かかる細胞にはまた、ＯＸ４０を発現する細胞株、及びＯＸ４０を通常発現しないが、ＯＸ４０をコードする核酸でトランスフェクトされた細胞株も含まれる。上述のインビトロアッセイのうちのいずれかで使用するための本明細書で提供される例示的な細胞株には、ヒトＯＸ４０を発現するトランスジェニックＢＴ４７４細胞（ヒト乳がん細胞株）が含まれる。
【０５３７】
ＩＩＩ．薬学的組成物
本明細書に記載の抗原結合複合体及びポリペプチドは、良好な医療行為と一致した様式で、製剤化され、投薬され、投与されるであろう。この文脈における考慮の要因には、治療されている特定の障害、治療されている特定の哺乳動物、個々の対象の臨床的病態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与のスケジュール管理、及び医療従事者に既知の他の要因が含まれる。投与される複合体またはタンパク質の「治療上有効量」は、このような考慮によって管理され、特定の障害（例えば、がん、アレルギー性もしくは炎症性障害、または自己免疫障害）を予防、改善、または治療するために必要な最小の量である。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の複合体及びタンパク質は、任意選択的に、障害を予防または治療するために現在使用される１つ以上の薬剤と共に製剤化され得る。かかる他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する複合体またはタンパク質の量、障害または治療の種類、及び上記で考察された他の要因に依存する。
【０５３８】
治療的製剤は、当該技術分野で既知の標準の方法を用いて、所望の純度を有する活性成分を任意の生理学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤と混合することによって調製される（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ），ｅｄ．Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ，２０００，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）。許容される担体には、食塩水、またはリン酸、クエン酸、及び他の有機酸等の緩衝液；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、もしくはリジン等のアミノ酸；グルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む、単糖類、二糖類、及び他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；マンニトールもしくはソルビトール等の糖アルコール；ナトリウム等の塩形成対イオン；ならびに／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）、もしくはＰＥＧ等の非イオン性界面活性剤が含まれる。
【０５３９】
ある特定の実施形態では、製剤は、薬学的に許容される塩、好ましくは塩化ナトリウムを含有し、好ましくは、およそ生理的濃度である。任意選択的に、本発明の製剤は、薬学的に許容される防腐剤を含有することができる。いくつかの実施形態では、防腐剤濃度は、０．１〜２．０（典型的にはｖ／ｖ）％の範囲である。好適な防腐剤には、薬学分野で既知の防腐剤が含まれる。ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、メチルパラベン、及びプロピルパラベンが、好ましい防腐剤である。任意選択的に、本発明の製剤は、薬学的に許容される界面活性剤を０．００５〜０．０２％の濃度で含むことができる。
【０５４０】
本明細書における製剤はまた、治療されている特定の適応症に対する必要に応じて、１つよりも多くの活性化合物、好ましくは相互に悪影響を及ぼさない相補的活性を有する化合物を含有してもよい。かかる分子は、意図される目的に有効である量で組み合わされて存在することが好適である。
【０５４１】
活性成分はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセル及びポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、及びナノカプセル）中に、あるいはマクロエマルジョン中に、封入されてもよい。かかる技術は、上記のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓに開示される。
【０５４２】
徐放性調製物が調製されてもよい。徐放性製剤の好適な例としては、抗原結合複合体または抗原結合ポリペプチドを含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、そのマトリックスは、造形品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態である。持続放出性マトリックスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸とγ−Ｌ−グルタミン酸エチルとのコポリマー、非分解性エチレン酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）等の分解性の乳酸−グリコール酸コポリマー（乳酸−グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドから構成される注射用ミクロスフェア）、ならびにポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。エチレン−酢酸ビニル及び乳酸−グリコール酸等のポリマーが１００日間にわたる分子の放出を可能にする一方で、ある特定のヒドロゲルは、より短い期間にわたってタンパク質を放出する。カプセル化された抗原結合複合体（複数可）または抗原結合ポリペプチド（複数可）が長期間体内に残存するとき、それらは、３７℃の水分への曝露の結果として変性または凝集し、生物活性の喪失、及び免疫原性の考えられる変化をもたらし得る。関与する機構に応じて、安定化のための合理的な方策が講じられ得る。例えば、凝集機構がチオ−ジスルフィド交換による分子間Ｓ−Ｓ結合の形成であると見出されたならば、安定化は、スルフヒドリル残基を修飾し、酸性溶液から凍結乾燥し、水分含量を制御し、適当な添加剤を使用し、特定のポリマーマトリックス組成物を開発することにより達成してもよい。
【０５４３】
本明細書に記載の複合体またはポリペプチドは、ボーラスとしての静脈内投与または一定期間にわたる連続注入による、筋内、腹腔内、脳髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、髄腔内、経口、局所、または吸入経路による等の既知の方法に従い、ヒト対象に投与され得る。広範囲の副作用または毒性が、タンパク質によって認識される標的分子に対するアンタゴニズムに関連付けられる場合には、局所投与が特に所望され得る。エクスビボ戦略を治療用途に使用することもできる。エクスビボ戦略は、対象から得られた細胞に、本発明のタンパク質または複合体をコードするポリヌクレオチドを形質移入または形質導入することを含む。次いで、形質移入または形質導入された細胞を対象に戻す。これらの細胞は、限定なしに、造血細胞（例えば、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、Ｔ細胞、またはＢ細胞）、線維芽細胞、上皮細胞、内皮細胞、角化細胞、または筋細胞を含む広範囲のタイプのうちのいずれかであり得る。
【０５４４】
ＩＶ．製品
本発明の別の実施形態は、本明細書に記載の１つ以上の抗原結合複合体またはポリペプチドと、障害（例えば、自己免疫疾患またはがん）の治療または診断に有用な材料とを含有する、製品である。製品は、容器と、容器上のまたは容器に関連付けられたラベルまたは添付文書とを含む。好適な容器には、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ等が含まれる。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な材料から形成され得る。容器は、病態を治療するのに有効である組成物を保持し、滅菌アクセスポートを有してもよい（例えば、容器は、静注溶液バッグ、または皮下注射針によって穿刺可能な栓を有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの活性な薬剤は、本明細書に記載の抗原結合複合体またはポリペプチドである。ラベルまたは添付文書は、組成物が特定の病態を治療するために使用されることを指示する。ラベルまたは添付文書は、抗原結合複合体またはポリペプチド組成物を対象に投与するための説明書をさらに含む。本明細書に記載の併用治療薬を含む製品及びキットもまた企図される。
【０５４５】
添付文書とは、かかる治療剤製品の適応症、使用法、投薬量、投与、禁忌症についての情報、及び／またはその使用に関する警告を含む、治療薬の商用のパッケージに通例含まれる説明書を指す。
【０５４６】
追加的に、製品は、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンゲル液、及びデキストロース溶液等の薬学的に許容される緩衝剤を含む第２の容器をさらに含み得る。それは、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業的観点及びユーザの観点から考慮される他の材料をさらに含んでもよい。
【０５４７】
前述の記述は、当業者が本発明を実施することを可能にするのに十分であると見なされる。以下の実施例は、例証目的で提示されるにすぎず、決して本発明の範囲を限定するようには意図されていない。実際、本明細書に示され、記載される修正に加えて、本発明の種々の修正が前述の説明から当業者に明らかとなり、添付の特許請求の範囲内にある。
【実施例】
【０５４８】
実施例１．変異形六量体抗体の操作及び特徴付け
標的受容体に対するアゴニスト活性を媒介する抗体を発見することの関心が高まっている。アゴニスト抗体は、シグナル伝達に生産的な様態で受容体に結合し、実質的に代替リガンドとして作用する。いくつかの標的に関しては、抗体媒介性アゴニズムは、ＩｇＧのホモ二量体性質を利用した、受容体への二価結合を介して可能であり得る。しかしながら、いくつかの受容体系は、活性を引き出すのに多価架橋結合を必要とし、それによって、受容体はクラスターへとまとめられて最適なシグナル伝達を引き出す。これらの受容体に関して、インビボでの抗体架橋結合は典型的に、抗体ＦｃのＦｃ受容体との結合によって有効にされる（Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  １９：１０１−１３、Ｋｉｍ  ＆  Ａｓｈｋｅｎａｚｉ，２０１３，Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  ２１０：１６４７−５１、Ｓｔｅｗａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４Ｊｏｕｒｎａｌ  ｆｏｒ  ＩｍｍｕｎｏＴｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  ２：１−１０）。
【０５４９】
発明者らは、抗体六量体化が、１）抗体のアゴニスト活性を促進すること、及び２）エフェクター媒介性架橋結合の不在下でアゴニスト活性を有効にすることができるかどうかを探索した。最近の研究によると、Ｆｃ間相互作用が、天然ヒトＩｇＧ抗体の六量体化の傾向を媒介すること（Ｄｉｅｂｏｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４３：１２６０−１２６３、Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ，２０１４，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６２：４６−５３）、及び操作された変異形が六量体形成を促進し得ること（Ｄｉｅｂｏｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４３：１２６０−１２６３、ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０６３３３９）が示唆されている。この研究では、三重置換変異形Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙが記載されており、これは本明細書でＲＧＹと称され、溶液中の抗体六量体化を促進する。
【０５５０】
ＲＧＹ置換を抗ＯＸ４０ヒト化抗体（ｈｕ１Ａ７）（配列番号５６及び５７）のＦｃ領域に組み入れ操作した。ＯＸ４０は、Ｔ細胞の表面上のＴＮＦＲＳＦであり、ＯＸ４０へのアゴニスト抗体は、架橋結合に依存する様態で天然リガンドＯＸ４０Ｌと同様の共刺激活性を提供することが示されている（Ｖｏｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９１：３６４１−５０）。ＲＧＹ置換をまた、比較物質として抗Ｈｅｒ２抗体トラスツズマブ（本明細書でｈｕ４Ｄ５または４Ｄ５と称される）のＦｃ領域に組み入れ操作した。
【０５５１】
ＲＧＹ置換を、標準的な分子生物学技法を用いて、ｐＲＫ哺乳類発現ベクターにおいて抗ＯＸ４０  ｈｕ１Ａ７  ＩｇＧ１及び抗Ｈｅｒ２トラスツズマブＩｇＧ１の重鎖に組み入れ操作した（Ｅａｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２５：８３４３−８３４７）。各抗体の重鎖及び軽鎖をコードするｐＲＫベクターＤＮＡを、発現のためにＨＥＫ２９３細胞にコトランスフェクトし、結果として生じたタンパク質を、プロテインＡ親和性クロマトグラフィーを用いて上清から精製した。精製した抗体を分析サイズ排除カラム（ＳＥＣ）にかけて、それらの見かけの分子量を特徴付けた。データが図１に示される。ＩｇＧ標準物が、カラムにおいてほぼ単量体（約１５０ｋＤａ）の保持時間で流れる一方で、ｈｕ１Ａ７及びｈｕ４Ｄ５の両方のＲＧＹ変異形バージョンは、単量体（約１５０ｋＤａ）種と六量体（約９００ｋＤａ）種との間で平衡を示し、このうち六量体が優勢な集団である。変異形抗体のサイズのより正確な測定を、サイズ排除クロマトグラフィーと多角度光散乱検出との組み合わせ（ＳＥＣ−ＭＡＬＳ）を用いて得た。図２に示されるデータは、六量体（８６５ｋＤａ）種及び単量体（１５７ｋＤａ）抗体のより小さな集団の存在を確認する。
【０５５２】
個々のＲＧＹ置換の抗体六量体形成への寄与を探索するために一連の変異形を構築した。標準的な分子生物学技法を用いて、単一及び二重置換変異形をｈｕ４Ｄ５のＦｃ領域において構築した。重鎖及び軽鎖をコードするｐＲＫベクターＤＮＡを、発現のためにＨＥＫ２９３細胞にコトランスフェクトし、結果として生じたタンパク質を、プロテインＡ親和性クロマトグラフィーを用いて上清から精製した。精製した抗体を分析ＳＥＣにかけて、それらの見かけの分子量を特徴付けた。図３に示されるデータは、三重置換変異形ＲＧＹ（Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ）のみが特記すべき六量体形成をもたらすことを示す。単一変異形Ｒ（Ｅ３４５Ｒ）、Ｇ（Ｅ４３０Ｇ）、及びＹ（Ｓ４４０Ｙ）、ならびに二重変異形ＲＧ（Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ）、ＲＹ（Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｙ）、及びＧＹ（Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ）の全てが、抗体単量体の保持時間のみを有するクロマトグラフィーピークをもたらした。
【０５５３】
実施例２．減弱されたエフェクター結合を有する変異形六量体抗体の組み入れ操作
ＲＧＹ変異形の先の特徴付けは、補体活性を促進することにおける六量体化の役割にもっぱら焦点を当てていた（Ｄｉｅｂｏｌｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４３：１２６０−１２６３、ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０６３３３９）。対照的に、現在の研究は、抗体によるアゴニズムを強化する、または潜在的に、エフェクター媒介性架橋結合の不在下で受容体へのアゴニズム活性を有効にする、Ｆｃ操作された六量体化の実用性を探索する。インビボでの抗体架橋結合に関するＦｃ受容体結合の依存（典型的に「架橋結合依存性活性」と称される）は、Ｆｃ受容体または補体結合が、作動されている同じ標的細胞のエフェクター媒介性枯渇をもたらし得るため、所望の治療効果にとって反生産的であり得る。
【０５５４】
モノクローナル抗体のエフェクター機能特性を低減するための多様な突然変異戦略が記載されている（Ｓｔｒｏｈｌ，２００９，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ２０：６８５−６９１）。２つのアプローチを用いて、六量体抗体のエフェクター減弱バージョンを設計した。第１に、ＲＧＹ置換を、Ｆｃ領域の２９７位における保存されたＮ結合型グリコシル化部位を除去する置換Ｎ２９７Ｇと組み合わせることによって、脱グリコシル化Ｆｃ領域の関連においてＲＧＹ置換を構築した。第２のアプローチでは、ＲＧＹ置換を、Ｆｃ受容体及び補体への低減された結合が以前に示された（例えば、米国特許公開第２０１２／０２５１５３１号を参照されたい）置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ（Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ／Ｐ３２９Ｇ三重変異形はＬＡＬＡＰＧと称される）と組み合わせた。突然変異誘発技法を用いてｈｕ４Ｄ５及びｈｕ１Ａ７の両方において変異形を構築し、抗体を上述のように発現させ、精製した。精製した抗体を分析ＳＥＣにかけて、それらの見かけの分子量を特徴付けた。ｈｕ４Ｄ５についてのデータが図４に、及びｈｕ１Ａ７についてのデータが図５に示される。驚くべきことに、ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ変異形がＲＧＹ単独と比較すると六量体化した一方で、ＲＧＹ／Ｎ２９７Ｇ変異形は六量体化しなかった。理論に拘束されることを望むものではないが、これらのデータは、グリコシル化が六量体の形成に重要であることを示唆する。この結果は、脱グリコシル化ヒトＩｇＧ４  Ｆｃの結晶構造の結晶充填によって観察される六量体配置とは対照的である（Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ，２０１４，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ６２：４６−５３）。それにもかかわらず、ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ組み合わせ型変異形についての結果は、エフェクター減弱六量体抗体の成功裏の設計を初めて実証するものである。
【０５５５】
実施例３．六量体抗ＯＸ４０抗体のアゴニスト活性
ＯＸ４０は、マウス及びヒト腫瘍における浸潤細胞を含む、抗原を経験したエフェクターＴ（Ｔｅｆｆ）及び調節性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞上で発現されるＴＮＦＲＳＦメンバーの共刺激分子である。アゴニスト抗体によるＯＸ４０の活性化は、Ｔｅｆｆ活性化を強化し、Ｔｒｅｇ媒介性抑制を阻害することによって抗腫瘍免疫を促進することが示されている（Ｖｏｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９１：３６４１−５０）。ＯＸ４０は、ＴＮＦＲＳＦメンバーであり、抗ＯＸ４０抗体によるアゴニズムは、インビボで架橋結合を必要とし、またＦｃγＲとの相互作用に依存することが実証されている。
【０５５６】
変異形抗ＯＸ４０抗体を、ＯＸ４０受容体を作動するそれらの能力について試験した。ＣＤ４＋メモリーＴ細胞（ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯ＋）をバフィーコート（ｂｕｆｆｙ  ｃｏａｔ）から選別し、ＣＤ８０（Ｂ７−１）及びＣＤ３２ａ（ＦｃγＲＩＩａ）を発現するＬ細胞を、代替抗原提示細胞（ＡＰＣ）として使用した。ＣＤ４＋メモリーＴ細胞をＬ細胞と共にインキュベートし、可溶性抗ＣＤ３抗体（マウス抗ヒトＣＤ３クローンＳＰ３４）及び漸増濃度の抗ＯＸ４０抗体または対照としての抗Ｈｅｒ２抗体で刺激した。細胞を７日間培養し、回収し、Ｔ細胞増殖についてはＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によって、及びサイトカイン放出についてはＥＬＩＳＡによってアッセイした。
【０５５７】
Ｔ細胞増殖データが図６に示される。ｈｕ１Ａ７抗ＯＸ４０抗体の六量体ＲＧＹ変異形は、天然ＩｇＧ１と比べて強化されたレベルのＴ細胞共刺激を提供した。抗Ｈｅｒ２抗体は、ＲＧＹであっても天然ＩｇＧ１であっても、活性を何ら示さなかった。ＩＬ−１３及びＬ−５の放出を測定することによって、より劇的なレベルのＴ細胞活性化の強化が観察された（図７）。
【０５５８】
この実験における両方の抗ＯＸ４０抗体が、損なわれていないＦｃ受容体結合を有することから、図６及び図７におけるデータは、六量体抗体が（Ｌ細胞上のＦｃγＲＩＩａによってもたらされる）ＦｃγＲ媒介性架橋結合の存在下でＴ細胞活性化及び増殖を強化し得ることを示す。ＬＡＬＡＰＧ置換を介して設計されたエフェクター減弱抗体を同じアッセイにおいて試験した。図８は、この実験についてのＴ細胞増殖及びサイトカイン放出データを示す。ｈｕ１Ａ７天然ＩｇＧ１とは対照的に、エフェクター減弱変異形（ＬＡＬＡＰＧ）は、Ｔ細胞増殖またはサイトカイン放出の共刺激を何ら提供しなかった。これは、架橋結合が抗ＯＸ４０抗体の活性に必要であることを実証する以前の研究と一致する（Ｖｏｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９１：３６４１−５０）。際だったことに、エフェクター減弱六量体ｈｕ１Ａ７（ＲＧＹ  ＬＡＬＡＰＧ）は、Ｔ細胞増殖及びサイトカイン放出の両方によって監視するとき、強力な共刺激性活性を媒介する。六量体ＲＧＹ  ＬＡＬＡＰＧの活性は、六量体ＲＧＹ単独と同等であったかまたはそれよりも若干低く、かつ天然ＩｇＧ１  ｈｕ１Ａ７よりも高かった。これらの結果は、抗ＯＸ４０抗体をより高次のオリゴマー構造にする操作が、Ｆｃ受容体結合による架橋結合に依存することなくＯＸ４０アゴニスト活性を有効にし得ることを実証する。ＲＧＹ変異形抗体は単量体種と六量体種との間で平衡して存在するように見えるため、発明者らは、異なるＲＧＹ変異形が互いに交流する可能性を調査した。ｈｕ１Ａ７＿ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ）、ｈｕ４Ｄ５＿ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ）、及び対照抗体を１：１比で混合し、４℃で数日間インキュベートした。Ｎｉ−ＮＴＡ  ＨｉｓＳｏｒｂストリップを１ｕｇ／ｍｌのヒトｈｉｓ−ＯＸ４０抗原でコーティングした。洗浄後、様々な濃度の混合抗体を添加した。洗浄後、１ｕｇ／ｍｌのビオチン化−Ｈｅｒ２−ＥＣＤを添加し、ＨＲＰ−ストレプトアビジンを添加し、プレートをＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーで読み取った。結果（図９）は、ＲＧＹ抗体が互いに選択的に交流して、二重特異性を有する混合六量体を形成することを示す。この交流平衡を用いて、二重またはそれよりも大きな特異性を有する六量体複合体を生成し得ることが企図される。例えば、２つの異なる抗原または同じ抗原内の２つの異なるエピトープを標的とする混合六量体を生成し得る。
【０５５９】
実施例４．六量体抗ＯＸ４０抗体のインビボでの抗腫瘍活性
インビボでの六量体抗ＯＸ４０抗体の活性を試験することを望み、発明者らはまず、ＲＧＹ六量体抗体複合体が血清と競合するかどうかを試験した。結果は、ＲＧＹ六量体複合体が１０ｍｇ／ｍｌ組替えＩｇＧまたはヒトウシ血清のいずれとも競合しないことを示した（データは示されず）。発明者らはまた、分析ＳＥＣを用いて、ＲＧＹ変異形がマウスＩｇＧ２ａを六量体化しないことを実証した（データは示されず）。発明者らはしたがって、ＲＧＹ変異形を、ラット抗マウスＯＸ４０（ｍＯＸ４０）可変領域（本明細書で２Ｄ２と称される）及び天然または変異形ヒトＣカッパ及びヒトＩｇＧ１（ｈＩｇＧ１）定常領域を含むキメラ抗体に組み入れ操作した。分析ＳＥＣデータは、全てのＲＧＹ及びＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ変異形が溶液中で六量体を形成することを確認した（データは示されず）。
【０５６０】
六量体変異形抗体を、Ｂａｌｂ／ｃマウスにおける同系ＥＭＴ６／Ｌｕｃ乳がんモデルにおいて、抗腫瘍活性について試験した。マウスの第４乳房脂肪パッド内に、１００マイクロリットルのＨＢＳＳ＋マトリゲル中１０万個のＥＭＴ６／Ｌｕｃ細胞を接種した。マウスの腫瘍を、それらが約１５０ｍｍ３の平均腫瘍体積に達するまで（接種のおよそ７日後）成長させた。この時点で（０日目）、マウスを以下の群に集めた：１．抗ｇＤ＿ｈＩｇＧ１、２．抗ｇＤ＿ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ）、３．抗ｇＤ＿ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ）、４．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１、５．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ）、６．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＬＡＬＡＰＧ）、７．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ）。全ての群についてｎ＝１０。抗ｇＤは、単純ヘルペスウイルスの糖タンパク質Ｄに結合し、陰性対照としての機能を果たす。抗体を滅菌ＰＢＳ中に希釈し、投与体積は１００ｕｌであった。０日目、全ての群に１０ｍｇ／ｋｇの静脈内単回投与を与えた。投与後２４時間時点及び投与後１３日目で５匹（つ）のマウス／群／時点から血液を収集した。眼は、各時点間で交替させた。投与後６日目で他の５匹（つ）のマウス／群／から血液を収集した。イソフルラン誘導麻酔下（吸入で有効）で、血液を眼窩静脈叢採血により収集した（収集体積は１００ｕｌを超えなかった）。ＰＫ分析のために血液から血清を採取した。測定値及び体重を、２回／週で収集した。１５％超の体重減少を示す動物を毎日秤量し、それらが２０％超の体重を失ったら安楽死させた。有害な臨床問題を示す動物をより頻繁に、重症度に応じて最大で毎日観察し、瀕死の場合は安楽死させた。腫瘍体積が３，０００ｍｍ３を超えた場合、または腫瘍が形成しなかった場合は３か月後に、マウスを安楽死させた。これら残りの腫瘍を、１回／週で測定及び秤量した。大型腫瘍または侵攻性に成長している腫瘍が８週間後に存在した場合、これらの特定のマウスの測定値及び体重を、２回／週で収集した。研究の全体にわたって、全マウスの臨床的観察を２回／週で行った。
【０５６１】
抗体の薬物動態は、標準的ＥＬＩＳＡを用いて、捕捉するのにヒツジ抗ヒトＩｇＧ抗体を、及び検出するのにヤギ抗ヒトＩｇＧ−ＨＲＰを使用して試験した。薬物動態データが図１０に示される。結果は、ＲＧＹ及びＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ変異形が天然ヒトＩｇＧ１抗体よりも遥かにより迅速に排除されることを実証した。
【０５６２】
腫瘍体積データが図１１に示される。それらの迅速なクリアランスにもかかわらず、ＲＧＹ変異形抗体は、それらの親抗体と比べて抗腫瘍活性を強化した。ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ）変異形は、天然ｈＩｇＧ１と比べて腫瘍殺傷を強化した。その上、ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ）変異形は、抗腫瘍活性を何ら示さなかったｈＩｇＧ１（ＬＡＬＡＰＧ）と比べていくらかの抗腫瘍活性を提供した。これらの結果は、六量体抗体がＦｃ受容体媒介性架橋結合の不在下でＯＸ４０受容体へのアゴニスト活性を促進し得ることを実証した。
【０５６３】
実施例５．非溶液六量体変異形
発明者らは、インビボでのＲＧＹ変異形の迅速なクリアランスがそのサイズに起因し、したがって、その挙動が抗体免疫複合体の挙動と同様であるという仮説を立てた。発明者らは、ＲＧＹ変異形の個々の置換成分がより有利な溶液特性を提供しながらなおも、強化された架橋結合及び／またはＦｃ非依存的架橋結合を依然として有効にすることができるかどうかを探索した。単一及び二重置換変異形を、天然ｈＩｇＧ１及びＬＡＬＡＰＧ  ｈＩｇＧ１の両方の関連で、上述のように抗ｈＯＸ４０抗体ｈｕ１Ａ７において構築及び作製した。加えて、変異形をまた、ｈｕ１Ａ７と比べてヒトＯＸ４０上の別個のエピトープを標的とする異なる抗体ｈｕ３Ｃ８においても構築及び作製した。Ｂｉａｃｏｒｅデータ（は示されず）は、これらの抗体についての結合親和性が同様であることを実証した。ｈｕ１Ａ７  ＫＤ＝０．５ｎＭ、一方でｈｕ３Ｃ８  ＫＤ＝１．４ｎｍ。精製した抗体を分析ＳＥＣにかけて、それらの見かけの分子量を特徴付けた。図１２に示されるデータは、ｈｕ４Ｄ５抗体での先のデータ（図３）、つまり三重置換変異形ＲＧＹ（Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ）のみが特記すべき六量体形成をもたらすことを確認した。単一変異形Ｒ（Ｅ３４５Ｒ）、Ｇ（Ｅ４３０Ｇ）、及びＹ（Ｓ４４０Ｙ）、ならびに二重変異形ＲＧ（Ｅ３４５Ｒ／Ｅ４３０Ｇ）、ＲＹ（Ｅ３４５Ｒ／Ｓ４４０Ｙ）、及びＧＹ（Ｅ４３０Ｇ／Ｓ４４０Ｙ）の全てが、抗体単量体の保持時間のみを有するクロマトグラフィーピークをもたらした。ｈｕ３Ｃ８抗ｈＯＸ４０抗体について同様の結果が観察された（データは示されず）。
【０５６４】
単一及び二重変異形ｈＩｇＧ１（ＬＡＬＡＰＧ）抗体のＴ細胞活性化の活性を、上述のインビトロヒト一次Ｔ細胞アッセイにおいて試験した。Ｔ細胞増殖データが図１３に示される。結果は、溶液中で単量体種のみを形成したにもかかわらず、３つの二重変異形（ＲＧ、ＲＹ、及びＧＹ）及び単一Ｒ変異形がＦｃＲ媒介性架橋結合の不在下で強力なＴ細胞増殖を促進したことを実証する。Ｇ及びＹ変異形もまた試験したが、活性の強化は何ら示されなかった（データは示されず）。ＦｃＲ非依存的活性は、ｈｕ１Ａ７及びｈｕ３Ｃ８抗体の両方の関連で観察され、ヒトＯＸ４０上の少なくとも２つの独立したエピトープが抗体で標的とされて、Ｔ細胞活性化を促進し得ることを示した。このアッセイにおける陰性対照抗体は、抗Ｈｅｒ２トラスツズマブｈＩｇＧ１（ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ）であった。
【０５６５】
変異形抗体の抗腫瘍活性を、上述のように、Ｂａｌｂ／ｃマウスにおける同系ＥＭＴ６／Ｌｕｃ乳がんモデルにおいて試験した。群は以下の通りであった：１．抗ｇＤ＿ｈＩｇＧ１、２．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＬＡＬＡＰＧ）、３．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＲＧ／ＬＡＬＡＰＧ）、４．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＲＹ／ＬＡＬＡＰＧ）、５．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ）、６．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（Ｒ／ＬＡＬＡＰＧ）、７．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＲＧ）、８．抗ｍＯＸ４０＿ｈＩｇＧ１（ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ）。全ての群についてｎ＝１０匹のマウス。全ての群に１０ｍｇ／ｋｇを、１日目には静脈内投与により、次いで２日目以降は腹腔内投与により隔週で投与した。抗体を滅菌ＰＢＳ中に希釈し、投与体積は１００〜２００ｕＬ／マウスであった。第１回投与後２４時間時点及び第１回投与後１４日目（研究の２日目及び１５日目）で５匹（つ）のマウス／群／時点から血液を収集した。ＰＫ分析のために血液から血清を採取し、腫瘍測定値を上述のように得た。
【０５６６】
腫瘍体積データが図１４に示される。ＲＹ  ＬＡＬＡＰＧ及びＲＧ  ＬＡＬＡＰＧ変異形は、いくらかの抗腫瘍活性を示したが、一方で、他の二重及び単一変異形（ＧＹ  ＬＡＬＡＰＧ及びＲ  ＬＡＬＡＰＧ）は、抗腫瘍活性を示さなかった。注目すべきことに、ＬＡＬＡＰＧ変異形を含まず、故にＦｃ受容体にまだ結合し得るＲＧのｈＩｇＧ１バージョンは、強力な活性を示した。これらのデータは、ｈＩｇＧ１  ＲＹ変異形がさらにより高い抗腫瘍効力を有するはずであることを示唆する。全体として、インビトロ及びインビボデータをまとめると、ＦｃＲ媒介性架橋結合の不在下で、溶液六量体の形成が、強化されたＴ細胞活性化に必要でないことが示される。理論に拘束されることを望むものではないが、１つの仮説は、溶液中で単量体ＩｇＧ種としての挙動を示す単一及び二重変異形が、標的受容体に結合した際に六量体複合体を形成するということである。
【０５６７】
実施例６．六量体抗体の交流及び混合及び二重エピトープ（Ｂｉｅｐｉｔｏｐｉｃ）六量体抗体の考案
上述の交流実験（図９）は、混合六量体複合体が２つ以上の異なる抗体から生成可能であることを示唆した。抗ＯＸ４０アゴニスト活性に対するこの効果を試験するために、ｈ１Ａ７及びｈ３Ｃ８のＲＹ  ＬＡＬＡＰＧ変異形を、Ｔ細胞活性化活性について単独で及び混合物として試験した。図１５は、この実験からのＴ細胞増殖及びサイトカイン放出データを示す。結果は、混合ｈ１Ａ７／ｈ３Ｃ８  ＲＹ  ＬＡＬＡＰＧ変異形抗体が、それらの親抗体単独と比べて活性を強化することを示す。これらのデータは、ＯＸ４０受容体結合の際に混合六量体複合体が形成され、故に、ＦｃＲ媒介性架橋結合の不在下で多価アゴニズム及びＴ細胞活性化を提供することを示唆する。六量体変異形を二重特異性抗体に組み入れ操作して、このエピトープ相乗作用を利用し得ることが本明細書で企図される。例えば、当該技術分野で知られているように（例えばＳｐｉｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、一方のアームがｈ１Ａ７であり、他方のアームが、ＲＹ、ＲＧ、ＲＧＹ、または他の六量体促進変異形を含むｈ３Ｃ８である、二重特異性抗体を操作し得る。
【０５６８】
実施例７．六量体変異形抗ＤＲ５抗体のアゴニスト活性
デス受容体５（ＤＲ５）、別名ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド受容体２（ＴＲＡＩＬ−Ｒ２）は、そのリガンドであるＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＮＦＳＦ１０／ＴＲＡＩＬ／ＡＰＯ−２Ｌ）が結合し、それによって活性化されたときにアポトーシスシグナルを伝達する、細胞表面受容体である。ＤＲ５は、それが、ｐ５３とは独立して細胞外因性経路を介してアポトーシスを開始し、かつ正常細胞よりも腫瘍細胞に対して選択的であることから、がん治療のための有望な標的となっている。ＤＲ５の抗体アゴニストがＦｃＲ媒介性架橋結合に依存することは、十分に立証されている（Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  １９：１０１−１３）。
【０５６９】
ＲＧＹ及びＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ変異形を、臨床開発に進んでいる抗ＤＲ５抗体（Ｃａｍｉｄｇｅ  ２００８，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．８（８））、Ａｐｏｍａｂの可変領域を含むｈＩｇＧ１の関連で構築した。重鎖及び軽鎖をコードするｐＲＫベクターＤＮＡを発現のためにＨＥＫ２９３細胞にコトランスフェクトした。ＲＧＹ変異形Ａｐｏｍａｂ抗体を発現する細胞は、十分に成長せず、タンパク質をほとんど産生しなかった。ＨＥＫ２９３細胞は、ＤＲ５を発現し、故に、六量体ＲＧＹ抗体がＤＲ５を作動させることによってアポトーシスを促進することが可能であった。細胞計数装置を用いて細胞生存能をトランスフェクション後に測定した。データが図１６に示される。結果は、ＲＧＹ及びＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ変異形抗体がｈＩｇＧ１対照と比べて細胞生存能を低減することを確認した。
【０５７０】
単一及び二重ＲＧＹ変異形を抗ＤＲ５  Ａｐｏｍａｂ  ｈＩｇＧ１抗体にさらに構築した。重鎖及び軽鎖をコードするＤＮＡをＨＥＫ２９３細胞中にコトランスフェクトし、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて細胞増殖を監視した。ＨＥＫ２９３細胞の生存能を低減する変異形抗体の能力を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏを用いて細胞増殖を監視することによって試験した。トランスフェクション後２４時間時点での発光が図１７に示される。結果は、全ての変異形が細胞増殖を低減し、このうちＲＧＹ三重変異形が最も高いアポトーシスを引き出し、３つの二重変異形ＧＹ、ＲＹ、及びＲＧが若干より低い活性を媒介し、３つの単一変異形Ｒ、Ｇ、及びＹがより中程度のレベルの活性を示し、このうちＲが３つのうちで最も強力な抗ＤＲ５アゴニストであることを実証する。
【０５７１】
ＤＲ５及びＯＸ４０の両方がＴＮＦＲスーパーファミリーのメンバーである。非トランスフェクト細胞と比べた細胞生存倍率を図１７におけるデータから算出し、同じ単一、二重、及び三重ＲＧＹ変異形についてのｈ１Ａ７抗ＯＸ４０抗体のＴ細胞活性化倍率の関数としてプロットした。結果が図１８に示される。抗ＤＲ５及び抗ＯＸ４０データは、六量体促進変異形についての抗体媒介性アゴニズムの一般化できる機構を示唆する。特にＧＩＴＲ、ＣＤ２７、及びＣＤ１３７を含む、ＴＮＦＲスーパーファミリーの他のメンバーを標的とする抗体のアゴニスト活性を強化するための、これらの変異形の適用が企図される。
【０５７２】
実施例８．他の六量体促進変異形の操作
Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、及びＳ４４０Ｙ置換は、抗体重鎖定常ＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインとの間のひじ領域に存在する。他の置換が六量体形成を促進し、強化されたアゴニスト活性及び／またはＦｃＲ非依存的アゴニスト活性を有効にするかどうかを探索するために、一連の追加の置換をこの接続点において操作した。これらの置換が上記の表４に列挙される。抗ＤＲ５  Ａｐｏｍａｂ  ｈＩｇＧ１抗体の重鎖において変異形を構築した。
【０５７３】
変異形を抗ＤＲ５  Ａｐｏｍａｂ  ｈＩｇＧ１の関連で抗増殖活性についてスクリーニングした。細胞密度が約１．７×１０６細胞／ｍｌになるまでＥｘｐｉ２９３Ｆ細胞を成長させた。各変異形につき、１００μｌのＯｐｔｉ−ＭＥＭ  Ｉ低血清培地を２４ウェルブロックの各々の単一ウェルに、続いて１μｇのＤＮＡ／鎖を単一ウェルにアリコートした。２．７μｌのＤＮＡ−ＥｘｐｉＦｅｃｔａｍｉｎｅ  ２９３試薬及び５０μｌのＯｐｔｉ−ＭＥＭ  Ｉ低血清培地を使用したマスターミックス溶液を各トランスフェクションのために調製し、次いで穏やかに混合し、室温で５分間インキュベートした。５分後、希釈ＥｘｐｉＦｅｃｔａｍｉｎｅ  ２９３試薬を希釈ＤＮＡに添加した。混合物を室温で２０〜３０分間インキュベートさせた。２ｍＬの２９３細胞をＤＮＡ混合物と共に各ウェルに添加した。ブロックを滅菌した通気性シーラーで覆い、試料を３７℃のインキュベータに移した。トランスフェクション後２２時間時点で、３００μｌのトランスフェクトした細胞を採取し、３００μｌのＥｘｐｉ２９３発現培地と混合した。細胞生存能をＶｉ−ＣＥＬＬ  ＸＲ細胞計数装置（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）により測定した。図２２Ａ及び２２Ｂは、天然及び変異形Ａｐｏｍａｂ抗体についてのトランスフェクション後４８時間時点及び２２時間時点（それぞれ）での細胞生存能を示す。
【０５７４】
実施例９．六量体抗Ｔｉｅ２抗体のアゴニスト活性
Ｔｉｅ２は、血管の形成（血管新生）において主要な役割を果たす細胞表面受容体である。Ｔｉｅ２には、アンジオポエチン（Ａｎｇ１、Ａｎｇ２、Ａｎｇ３、Ａｎｇ４）として知られるタンパク質成長因子が結合する。Ａｎｇ１及びＡｎｇ４機能は、Ｔｉｅ２のアゴニスト性または活性化リガンドとして機能するが、一方で、Ａｎｇ２及びＡｎｇ３は、競合アンタゴニストとしての挙動を示す。Ａｎｇ１は、多量体リガンドであり、有効なシグナル伝達及び活性化のためにＴｉｅ２の架橋結合が必要とされることが知られている（Ｂａｒｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｎａｔ  Ｓｔｒｕｃｔ  ＆  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ）。
【０５７５】
一連の抗Ｔｉｅ２モノクローナル抗体をファージディスプレイによって生成した。ヒト抗Ｔｉｅ２抗体のうちの１つを、ヒト天然ＩｇＧ１及びＲＧＹ  ＩｇＧ１をコードする定常領域中にサブクローニングした。各抗体につき、重鎖及び軽鎖をコードするｐＲＫベクターＤＮＡを、発現のためにＨＥＫ２９３細胞にコトランスフェクトし、結果として生じたタンパク質を、プロテインＡ親和性クロマトグラフィーを用いて上清から精製した。精製した抗体を分析サイズ排除カラム（ＳＥＣ）にかけて、それらの見かけの分子量を特徴付けた。データが図１９に示される。他のヒト可変領域を含有する抗体からの結果と一致して、Ｔｉｅ２  ＲＧＹ  ＩｇＧ１抗体は六量体を形成した。
【０５７６】
Ｔｉｅ２  ＲＧＹ  ＩｇＧ１抗体を、商用の均一性時間分解蛍光測定（ＨＴＲＦ）アッセイ（Ｃｉｓｂｉｏ）を用いたラット大動脈内皮細胞（ＲＡＥＣ）におけるＡＫＴのリン酸化（ｐＡＫＴ）を測定することによって、試験した。ＲＧＹ抗Ｔｉｅ２のアゴニスト活性は、天然リガンドＡｎｇ１を超え（図２０）、ＲＧＹ抗Ｔｉｅ２は、二価抗Ｔｉｅ２抗体と比べて強力なアゴニスト活性を示す（図２１）。
【０５７７】
実施例１０．六量体アゴニスト抗体活性に対する補体及びＦｃ受容体結合の寄与
Ｆｃ変異形抗体の強化されたアゴニスト活性の機構をさらに調査するために、置換Ｋ３２２Ａをｈｕ１Ａ７抗ＯＸ４０抗体の関連でＲＧＹ  ＬＡＬＡＰＧ変異形と組み合わせた。Ｋ３２２Ａは、補体タンパク質Ｃ１ｑ及び補体依存性細胞傷害活性（ＣＤＣ）への結合を切断する置換である。
【０５７８】
ヒトＣ１ｑタンパク質への変異形の結合をＥＬＩＳＡ結合アッセイ（Ｉｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６４：４１７８−４１８４に記載）によって評価した。高結合Ｃｏｓｔａｒ  ９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ＮＹ）を、コーティング緩衝液（０．０５Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ９）中の様々な濃度の抗ＯＸ４０抗体で、４℃で一晩コーティングした。各インキュベーション工程の後にプレートをＰＢＳ／０．０５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０、ｐＨ７．４で洗浄し、コーティング後にインキュベーションを室温で行った。コーティング後、プレートを２００μｌのＥＬＩＳＡ希釈液（０．１Ｍ  ＮａＰＯ４／０．１Ｍ  ＮａＣｌ／０．１％ゼラチン／０．０５％  Ｔｗｅｅｎ  ２０／０．０５％  ＰｒｏＣｌｉｎ３００）で１時間ブロッキングし、ＥＬＩＳＡ希釈液中１００μｌの２μｇ／ｍｌのヒトＣ１ｑ（Ａｂｃａｍ、ａｂ９６３６３）で２時間インキュベートした。次いで、ＥＬＩＳＡ希釈液中のヒツジ抗ヒトＣ１ｑペルオキシダーゼ標識抗体（Ａｂｃａｍ  ａｂ４６１９１）の１００μｌの１：１０００希釈液を添加し、１時間インキュベートした。プレートを１００μｌのＴＭＢペルオキシダーゼ基質で呈色させた。１００μｌの４．５Ｎ  Ｈ２ＳＯ４の添加によって反応を停止させ、ＯＤをマイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ  Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ）を用いて４５０ｎｍで測定した。各変異形のプレートへの結合効率を、プローブとして抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃペルオキシダーゼ標識抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を用いて検査した。ＥＬＩＳＡデータ（図２３）は、ＲＧＹ変異形がヒトＩｇＧ１と比べてヒトＣ１ｑへの強化された結合をもたらすことを示し、ＬＡＬＡＰＧ及びＬＡＬＡＰＧ／Ｋ３２２Ａの両方がＲＧＹ六量体抗体のＣ１ｑへの結合を切断することを実証した。
【０５７９】
Ｆｃ変異形抗ＯＸ４０抗体を、上述のヒト一次Ｔ細胞アッセイを用いて、Ｆｃ受容体遮断抗体の存在または不在下でＴ細胞を活性化するそれらの能力について試験した。Ｔ細胞アッセイを、１μｇ／ｍＬの最終濃度の抗ＦｃγＲＩＩａ抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号ＡＦ１８７５）の添加ありまたはなしで、上述のように実施した。Ｔ細胞増殖データが図２４Ａ及び２４Ｂに示される。データは、ｈｕ１Ａ７抗ＯＸ４０抗体の天然ヒトＩｇＧ１バージョンが、Ｌ細胞上のＦｃγＲＩＩａ（ＣＤ３２ａ）とのＦｃ結合の不在下で活性を何ら有しない一方で、ＲＧＹ及びＲＹ変異形バージョン（ＲＧＹ、ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ、ＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ／Ｋ３２２Ａ、ＲＹ、及びＲＹ／ＬＡＬＡＰＧ）全てが、Ｆｃ受容体が遮断されるかどうかとは無関係に強力な活性を示すことを示す。図２３におけるＣ１ｑ結合データと合わせて、この結果は、ＲＧＹ及びＲＹ変異形のアゴニスト活性が、補助Ｌ細胞上のＦｃ受容体または培地中に存在するＣ１ｑのいずれとのＦｃ結合にも依存しないことを実証する。
【０５８０】
実施例１１．操作された抗ＯＸ４０アゴニスト抗体のさらなる特徴付け
これまでに用いたＴ細胞アッセイは、ＦｃγＲＩＩａ（ＣＤ３２ａ）及びＢ７−１（ＣＤ８０）の両方を発現する補助Ｌ細胞を利用してきた。ヒト一次Ｔ細胞アッセイにおいて抗ＯＸ４０アゴニスト活性のＢ７−１への依存を試験した。ＦｃγＲＩＩａ及びＢ７−１の両方、またはＦｃγＲＩＩａのみのいずれかを発現するＬ細胞の存在下での、変異形ｈｕ１Ａ７（図２５Ａ及び２５Ｂ）及び変異形ｈｕ３Ｃ８（図２６Ａ及び２６Ｂ）についてのＴ細胞増殖データが示される。データは、天然ヒトＩｇＧ１抗ＯＸ４０抗体が、Ｂ７−１共刺激の不在下で最低限のＴ細胞活性化を示す一方で、Ｆｃ変異形抗体（ＲＧＹ及びＲＧＹ／ＬＡＬＡＰＧ）が、Ｂ７リガンドによるＴ細胞上のＣＤ２８共活性化に依存することなく強力なＴ細胞活性化を示すことを実証する。加えて、データはまた、ＲＧＹ変異形抗体がＣＤ３刺激の不在下ではＴ細胞を活性化しないことも実証する。このアッセイにおいて、抗ＣＤ３抗体を使用してＣＤ３が活性化されたが、より広くは、これらの結果は、Ｔ細胞受容体のペプチド積載ＭＨＣへの結合が変異形抗ＯＸ４０抗体によるＴ細胞共活性化のための結合であることを示す。
【０５８１】
一組の三重（ＲＧＹ）、二重（ＲＧ及びＲＹ）、及び単一（Ｒ）Ｆｃ変異形抗ＯＸ４０抗体をＦｃγＲＩＩａ＋Ｌ細胞（Ｂ７−１発現を欠く）において試験した。図２７に示されるデータは、全てのＦｃ変異形抗体が、Ｆｃ変異形が溶液中で六量体を形成するかどうかとは無関係に、Ｔ細胞上のＣＤ２８のＢ７−１結合の不在下でＴ細胞を共刺激することを実証する。
【０５８２】
本明細書で引用される全ての特許及び科学文献の開示は、参照によりそれらの全体が明示的に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２−１】
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【図１２−２】
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【図１２−３】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２Ａ】
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【図２２Ｂ】
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【図２３】
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【図２４Ａ】
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【図２４Ｂ】
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【図２５Ａ】
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【図２５Ｂ】
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【図２６Ａ】
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【図２６Ｂ】
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【図２７】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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