(57)【要約】  本発明は、シチジンデアミナーゼ酵素による、式ＩＩの化合物から式Ｉの化合物を得る新規の合成的方法に関する。2018509165.tif 000055
2018509165.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
シチジンデアミナーゼであるヌクレオシドデアミナーゼによって触媒作用を受ける次の反応による、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の製造方法：
【化１】
2018509165.tif 000040
［式中、
Ｚ１は、Ｏ、ＣＨ２、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｚ３は、Ｚ１とは独立して、Ｏ、Ｃ（ＲＳ３ＲＳ４）、Ｓ（ＲＳ３ＲＳ４）、Ｓ（ＲＳ３）およびＮ（ＲＳ３）から選択され；
Ｚ２は、
【化２】
2018509165.tif 000041
から選択され；
Ｚ４は、
【化３】
2018509165.tif 000042
から選択され；
Ｒ１は、Ｏ、ＣＨ２、アルキル、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｒ２は、水素であり；
Ｒ３は、水素であり；
Ｒ４は、水素；ＯＨ；ＮＨ２；ＳＨ；ハロゲン、好ましくはＦ、ＣｌまたはＩ；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−５に連結された、置換されていてもよいアリール；および置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−５に連結された、置換されていてもよい複素環から選択され；
Ｒ５は、水素；ＯＨ；ＮＨ２；ＳＨ；ハロゲン、好ましくはＦ、ＣｌまたはＩ；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−６に連結された、置換されていてもよいアリール；および置換されていてもよいアルキル、アルケニルあるいはアルキニル鎖によってＣ−６に連結された、置換されていてもよい複素環から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、互いに独立して、水素；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；置換されていてもよい複素環；および置換されていてもよいアリール、好ましくはフェニルまたはナフチルから選択され；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＯＨ；ＮＨ２；ＳＨ；Ｎ３；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；トリハロアルキル、ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；置換されていてもよいアルキル、アルケニル、またはアルキニル鎖によってＣ−２′に連結された、置換されていてもよいアリール；および置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−２′に連結された、置換されていてもよい複素環から選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＯＨ；ＮＨ２；ＳＨ；Ｎ３；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；置換されていてもよいアルキル、アルケニル、またはアルキニル鎖によってＣ−２′に連結された、置換されていてもよいアリール；および置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−２′に連結された、置換されていてもよい複素環から選択され；
ＲＳ３は、ＲＳ４とは独立して、水素；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＣＮ；ＮＨ２；ＳＨ；Ｃ≡ＣＨ；Ｎ３；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；および置換されていてもよいアリール；置換されていてもよい複素環；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；およびＯ−Ｓｉ−アリールから選択され；
ＲＳ４は、ＲＳ３とは独立して、水素；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＣＮ；ＮＨ２；ＳＨ；Ｃ≡ＣＨ；Ｎ３；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；置換されていてもよいアリール；置換されていてもよい複素環；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；またＯ−Ｓｉ−アリールから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、水素；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、水素；ＯＨ；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくは、アラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；およびＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；アリール、好ましくはフェニルまたはナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦであり；Ｚ２がＣである場合、Ｚ４はＧであり；かつ、Ｚ２がＤである場合、Ｚ４はＨである］。
【請求項２】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の製造方法であり、
式中、
Ｚ１は、ＯおよびＣＨ２、より好ましくはＯから選択され；
Ｚ３は、Ｚ１とは独立して、ＯおよびＣ（ＲＳ３ＲＳ４）、より好ましくはＣ（ＲＳ３ＲＳ４）から選択され；
Ｚ２は、
【化４】
2018509165.tif 000043
から選択され、
Ｚ４は、
【化５】
2018509165.tif 000044
から選択され、
Ｒ１は、Ｏであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、Ｈであり；
Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ、ＣｌあるいはＩ、より好ましくはＦ；メチル；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；およびＯＣＯ２Ｒ６から選択され；
Ｒ５は、Ｈ；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ、ＣｌあるいはＩ、より好ましくはＦ；メチル；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；およびＯＣＯ２Ｒ６から選択され；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ、メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；およびＯ−Ｓｉ−アリールから選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ、メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；およびＯ−Ｓｉ−アリールから選択され；
ＲＳ３は、ＲＳ４とは独立して、水素；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびハロゲン、好ましくはＦから選択され；
ＲＳ４は、ＲＳ３とは独立して、水素；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびハロゲン、好ましくはＦから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、水素；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、水素；ＯＨ；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；およびアリール、好ましくはフェニルおよびナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；かつ、Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦである。
【請求項３】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の製造方法であり、
式中、
Ｚ１は、Ｏであり；
Ｚ３は、Ｃ（ＲＳ３ＲＳ４）であり；
Ｚ２は、
【化６】
2018509165.tif 000045
から選択され、
Ｚ４は、
【化７】
2018509165.tif 000046
から選択され、
Ｒ１は、Ｏであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、Ｈであり；
Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ；メチルおよびトリハロアルキルから選択され；
Ｒ５は、Ｈ；ＯＨ；ハロゲン；ＯＲ６；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；およびＯＣＯ２Ｒ６から選択され；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＳＯ２Ｒ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびＣＯ２Ｒ６から選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＳＯ２Ｒ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびＣＯ２Ｒ６から選択され；
ＲＳ３は、ＲＳ４とは独立して、水素；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびハロゲン、好ましくはＦから選択され；
ＲＳ４は、ＲＳ３とは独立して、水素；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびハロゲン、好ましくはＦから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、水素；ＯＨ；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；およびアリール、好ましくはフェニルおよびナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；かつ、Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦである。
【請求項４】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の製造方法であり、
式中、
Ｚ１は、Ｏであり；
Ｚ３は、Ｃ（ＲＳ３ＲＳ４）であり、ここでＲＳ３がＨまたはＯＨであり、ＲＳ４がＲＳ３とは独立して、ＨまたはＯＨであり；
Ｚ２は、
【化８】
2018509165.tif 000047
から選択され、
Ｚ４は、
【化９】
2018509165.tif 000048
から選択され、
Ｒ１は、Ｏであり； 
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、Ｈであり；
Ｒ４は、Ｈ、メチルあるいはハロゲン、好ましくはＦであり；
Ｒ５は、Ｈであり；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；およびＯＨから選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；およびＯＨから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、ＯＲ８；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；およびアリール、好ましくはフェニルおよびナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；かつ、Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦである。
【請求項５】
請求項４に記載の式Ｉの化合物の製造方法であり、
式中、
Ｒ４は、Ｈであり；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、ＯＲ８；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；かつ
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択される。
【請求項６】
請求項４に記載の式Ｉの化合物の製造方法であり、
式中、
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；かつ
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択される。
【請求項７】
前記方法が、１８〜１００℃の温度の範囲で実施される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記方法のための反応時間が、１分〜６００時間の範囲である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
媒体ｐＨが、３〜１２の範囲である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の濃度が、０．１ｍＭ〜５００Ｍの範囲である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
シチジンデアミナーゼ活性を有する酵素の量が、０．００１〜１００００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．００１〜１０００ｍｇ／ｍｌの範囲である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
シチジンデアミナーゼ活性を有する酵素の量が、基質１マイクロモル当たり０．００１〜１００００ＡＵ、好ましくは基質１マイクロモル当たり０．００１〜１００ＡＵの範囲である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
反応媒体が水性であり、最大５０％、好ましくは最大３０％、より好ましくは最大１５％の好適な有機溶媒も含有していてもよい、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記有機溶媒が、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｔ−ブタノール、ｎ−ブタノール、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、ジクロロメタン、トルエン、テトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、アセトニトリル、アセトン、シクロペンチルメチルエーテル、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、ジメチルアミド、ジメチルホルムアミドおよびまたジメチルスルホキシドから選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
下記式ＩＩの化合物：
【化１０】
2018509165.tif 000049
（式中、
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＰＧであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＰＧであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＬｅｕ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨＯＨであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＬｅｕ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＰＧであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＰＧであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＶａｌ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨＯＨであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＶａｌ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＰＧであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＰＧであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＡｌａ−イソプロピルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨＯＨであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＡｌａ−イソプロピルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨＯＨであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＡｌａ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨＯＨであり、ＲＳ１はＦであり、ＲＳ２はＦであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＬｅｕ−メチルエステルであり；または 
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＡであり、Ｚ３はＣＨＯＨであり、ＲＳ１はＦであり、ＲＳ２はＦであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＶａｌ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＢであり、Ｚ３はＣＨＯＨであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＶａｌ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ２はＢであり、Ｚ３はＣＨＯＰＯＹ１Ｙ２であり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＶａｌ−メチルエステルであり；
ここで、
Ａは、
【化１１】
2018509165.tif 000050
であって、
Ｒ１＝Ｏ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｒ５＝Ｈであり；
Ｂは、
【化１２】
2018509165.tif 000051
であり、
Ｒ１＝Ｏ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ５＝Ｈであり；
ＰＧは保護基、好ましくは環式アセタールまたはケタールである）。
【請求項１６】
下記式Ｉの化合物：
【化１３】
2018509165.tif 000052
（式中、
Ｚ１はＯであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＨであり、Ｚ４はＥであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＬｅｕ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＨであり、Ｚ４はＥであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＶａｌ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＨであり、Ｚ４はＥであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＡｌａ−イソプロピルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＨであり、Ｚ４はＥであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＯＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＡｌａ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＨであり、Ｚ４はＥであり、ＲＳ１はＦであり、ＲＳ２はＦであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＬｅｕ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＨであり、Ｚ４はＥであり、ＲＳ１はＦであり、ＲＳ２はＦであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＶａｌ−メチルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＨであり、Ｚ４はＥであり、ＲＳ１はＦであり、ＲＳ２はＦであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＡｌａ−イソプロピルエステルであり；または
Ｚ１はＯであり、Ｚ３はＣＨ−ＯＨであり、Ｚ４はＦであり、ＲＳ１はＨであり、ＲＳ２はＨであり、Ｙ１はＯ−Ｐｈであり、かつＹ２はＶａｌ−メチルエステルであり；
ここで、 
Ｅは、
【化１４】
2018509165.tif 000053
であり、
Ｒ１＝Ｏ、Ｒ４＝Ｒ５＝Ｈであり；かつ
Ｆは、
【化１５】
2018509165.tif 000054
であり、
Ｒ１＝Ｏ、Ｒ５＝Ｈである）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヌクレオシド脱アミノ化のため、具体的には、シチジン系（cytidinic）有機リン酸ヌクレオシド類似体（ＮＡ）の脱アミノ化のため、より具体的には、大型の置換基を有するシチジン系有機リン酸ＮＡの脱アミノ化のための新規酵素方法、同様に、それらの医薬品、中間体またはプロドラッグに関する。
【背景技術】
【０００２】
ヌクレオシド類似体（ＮＡ）は、天然ヌクレオシドと構造上関係する合成化合物である。それらの構造の点では、ヌクレオシドは３つの重要な要素：（ｉ）ヒドロキシメチル基、（ｉｉ）ヘテロ環式窒素性塩塩基分および（ｉｉｉ）いくつかの事例で、正確な配向でヒドロキシメチル基と塩基を示すスペーサーとして機能すると思われるフラノース環によって構成されている。
【０００３】
ＮＡは、抗ウイルス薬および抗癌剤として広範囲に使用されている。これら分子は、伝統的に異なる化学的方法によって合成されてきており、それはしばしば、ヘテロ環式塩基および／またはペントース部分でタンパク質−脱保護反応させて天然由来的ヌクレオシドの変性を可能とすることを含む、時間のかかる多段階的方法であった（Boryski J. 2008. Reactions of transglycosylation in the nucleoside chemistry. Curr Org Chem 12:309-325）。この時間のかかる多段階的方法は、しばしば低い収量およびコスト増につながるものである。実際、化学的方法は、通常、正確な立体選択性および位置選択性を有する生成物を得にくくし、不純物として副産物を生成する（Condezo, L. A., et al. 2007. Enzymatic synthesis of modified nucleosides, p. 401-423. Biocatalysis in the pharmaceutical and biotechnology industries. CRC Press, Boca Raton, FL, Mikhailopulo, I. A. 2007; Sinisterra, J.V. et al. 2010. Enzyme-catalyzed synthesis of nonnatural or modified nucleosides, p. 1-25. Encyclopedia of Industrial Biotechnology: Bioprocess, Bioseparation, and Cell Technology, John Wiley & sons, Ed. By M. C. Flickinger, 2010）。さらに、化学的方法には、高価で、環境上有害な化学試薬および有機溶媒の使用が含まれている。 
【０００４】
従って、酵素的アプローチには特別な関心が寄せられていて、その理由としてはそれらがこれらの問題のうちのいくつかを解決することができるからである。具体的には、アミノ含有ヌクレオシドの脱アミノ化は、それらの対応するケトン相当物を合成する興味深い方法である。天然ヌクレオシド（リボ−または２′−デオキシリボヌクレオシドのいずれか）に生じる脱アミノ化反応は、副産物としてシトシン、５−メチルシトシン、グアニン、およびアデニン・ヌクレオシドを含む、核酸塩塩基分で起こり、それらはそれぞれ、核酸塩基としてウラシル、チミン、キサンチン、およびヒポキサンチン、並びに副産物としてアンモニアを含有する、それらの対応するヌクレオシド類似体に転換される。
【０００５】
脱アミノ化酵素は広く分配されているものの、通常、それらは、対応する基質に非常に特異的である（Katsiragi, T. et al. 1986. Cytosine Deaminase from Escherichia coli - Production, Purification, and Some characteristics, Agric. Biol. Chem. 50(7), 1721-1730; Vita, A. et al. 1985. Cytidine Deaminase from Eschericia coli B. Purification and Enzymatic Molecular Properties, Biochemistry, 24, 6020-6024）。
【０００６】
酵素データベース（http://www.brenda-enzymes.info/search_result.php?quicksearch=1&noOfResults=10&a=9&W[2]=deaminase&T[2]=2）によれば、脱アミノ化する酵素の中で、短いグループのみが基質を含有する核酸塩基を脱アミノ化することができるとして開示されている。この特異性によれば、デアミナーゼは、次のものに分割することができる：１）核酸塩基デアミナーゼ；（シトシンデアミナーゼＥＣ  ３．５．４．１；アデニンデアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．２；グアニンデアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．３；８−オキソグアニンデアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．３２など；即ち、天然基質は、それぞれ核酸塩基シトシン、アデニン、グアニンおよび８−オキソグアニンである）；２）ヌクレオシドデアミナーゼ（シチジンデアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．５；  アデノシンデアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．４；グアノシンデアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．１５；  Ｓ−メチル−５′−チオアデノシンデアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．３１；５′−デオキシアデノシンデアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．４１など；即ち、天然基質は、それぞれヌクレオシドシチジン、アデノシン、グアノシン、Ｓ−メチル−５′−チオアデノシンおよび５′−デオキシアデノシンデアミナーゼである）；および３）ヌクレオチドデアミナーゼ（２′−デオキシシチジン三リン酸デアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．１３；２′−デオキシシチジン三リン酸デアミナーゼ（ｄＵＭＰ成形）、ＥＣ  ３．５．４．３０；アデノシン一リン酸デアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．６；アデノシン二リン酸デアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．７；アデノシンリン酸デアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．１７；アデノシン三リン酸デアミナーゼ、ＥＣ  ３．５．４．１８など；即ち、天然基質は、それぞれヌクレオチド２′−デオキシシチジン三リン酸、アデノシン一リン酸、アデノシン二リン酸およびアデノシン三リン酸である）。 
【０００７】
従って、ヌクレオシドデアミナーゼは、ヌクレオチドではなくヌクレオシドを脱アミノ化することができる一方で、ヌクレオチドデアミナーゼは、ヌクレオシドではなくヌクレオチドを脱アミノ化することができる。
【０００８】
基質の構造を考慮すると、有機リン酸ヌクレオシド、即ち、ヌクレオシドの位置Ｃ−５′で酸素に接続した置換されたリン原子を有するヌクレオシド、例えば、有機ホスフェート、ホスフィネート、ホスホネート、ホスホルアミデートなどは、天然ヌクレオチドに類似の基質挙動および特異性を示すに違いない（即ち、少なくとも１つのＰＯ４２−基などを有するヌクレオシド）。従って、当業者にとって、それらの対応する脱アミノ化を触媒するために選択する酵素は、ヌクレオチドデアミナーゼになるだろう。
【０００９】
さらに、バルク状の置換基を組込む特定のヌクレオシドの基質の脱アミノ化は、それらが酵素の活性部位中適合することが困難なため、未解決の問題として残っている。具体的には、糖環に結合した一、二または三リン酸塩基を含有するＮＡは、通常これら酵素の阻害剤としての役割を果たすことが知られている（Faivre-Nitschke, S.E. et al. 1999, A prokaryotic-type cytidine deaminase from Arabidopsis thaliana, Eur. J. Biochem. 263, 896-9033）。
【００１０】
ＷＯ２０１２／１５８８１１  Ａ２には、合成的分取の工業目的に適していない分析的条件下での市販の精製酵素を使用して、アデノシンデアミナーゼによって行なわれた、ヌクレオシドおよび一リン酸塩プロドラッグのためのデアミナーゼアッセイが開示されている。著者は、アデノシンデアミナーゼの天然基質であるデオキシアデノシン（即ち、位置Ｃ−５′で一切置換のない天然ヌクレオシド、従ってそこにはバルク状の置換はない）に対して、５９％の脱アミノ化収量を開示している。そこに開示された任意のプリン一リン酸塩化合物の脱アミノ化に対する参照またはデータは示されていない。
【００１１】
驚くべきことに、上記で引用した有機リン酸シチジンヌクレオシドの生体触媒合成の欠点は、ヌクレオシドデアミナーゼ酵素、より詳細には、シチジンデアミナーゼ酵素、に基づく酵素法の適用によって回避することができると見出された。驚くべきことに、参照した酵素は、適切に変性されたリン含有シチジンヌクレオシド類似基質を認識することができ、位置Ｃ−５′でバルク状の置換基を有するにもかかわらず、脱アミノ化反応を行うことができる。基質としてのシチジンヌクレオチドの使用以外では同一の生体触媒反応により、対応する脱アミノ化生成物としないことが本発明者らによって実証された。
【００１２】
従って、下記に示されるように、本発明は、式ＩＩの化合物の生体触媒脱アミノ化による、式Ｉのような化合物の非常に効率的な合成方法および生産方法に寄与するものである。
【００１３】
本発明は、本出願の出願日時点のシチジンデアミナーゼ酵素の使用に基づく方法で例証されているが、本明細書は、本明細書に開示された方法のためのヌクレオシドデアミナーゼ酵素の使用について先行技術に寄与するものであり、その例は、以降に提供され得るものである。
【発明の具体的説明】
【００１４】
本発明は、ヌクレオシドデアミナーゼ、具体的には、シチジンデアミナーゼ、によって触媒作用を受ける次の反応による式Ｉの化合物を調製する方法に関する（以下、単純に反応ＩＩ−Ｉと称する）。
【化１】
2018509165.tif 000003
［式中、
Ｚ１は、Ｏ、ＣＨ２、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｚ３は、Ｚ１とは独立して、Ｏ、Ｃ（ＲＳ３ＲＳ４）、Ｓ（ＲＳ３ＲＳ４）、Ｓ（ＲＳ３）およびＮ（ＲＳ３）から選択され；
Ｚ２は、
【化２】
2018509165.tif 000004
から選択され；
Ｚ４は、
【化３】
2018509165.tif 000005
から選択され；
Ｒ１は、Ｏ、ＣＨ２、アルキル、ＳおよびＮＨから選択され；
Ｒ２は、水素であり；
Ｒ３は、水素であり；
Ｒ４は、水素；ＯＨ；ＮＨ２；ＳＨ；ハロゲン、好ましくはＦ、ＣｌまたはＩ；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−５に連結された、置換されていてもよいアリール；および置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−５に連結された、置換されていてもよい複素環から選択され；
Ｒ５は、水素；ＯＨ；ＮＨ２；ＳＨ；ハロゲン、好ましくはＦ、ＣｌまたはＩ；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−６に連結された、置換されていてもよいアリール；および置換されていてもよいアルキル、アルケニルあるいはアルキニル鎖によってＣ−６に連結された、置換されていてもよい複素環から選択され；
Ｒ６およびＲ７は、互いに独立して、水素；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；置換されていてもよい複素環；および置換されていてもよいアリール、好ましくはフェニルまたはナフチルから選択され；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＯＨ；ＮＨ２；ＳＨ；Ｎ３；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；トリハロアルキル、ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；置換されていてもよい、アルキル、アルケニル、またはアルキニル鎖によってＣ−２′に連結された、置換されていてもよいアリール；および置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−２′に連結された、置換されていてもよい複素環から選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＯＨ；ＮＨ２；ＳＨ；Ｎ３；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；置換されていてもよい、アルキル、アルケニル、またはアルキニル鎖によってＣ−２′に連結された、置換されていてもよいアリール；および置換されていてもよいアルキル、アルケニルまたはアルキニル鎖によってＣ−２′に連結された、置換されていてもよい複素環から選択され；
ＲＳ３は、ＲＳ４とは独立して、水素；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＣＮ；ＮＨ２；ＳＨ；Ｃ≡ＣＨ；Ｎ３；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；および置換されていてもよいアリール；置換されていてもよい複素環；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；およびＯ−Ｓｉ−アリールから選択され；
ＲＳ４は、ＲＳ３とは独立して、水素；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＣＮ；ＮＨ２；ＳＨ；Ｃ≡ＣＨ；Ｎ３；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；置換されていてもよいアリール；置換されていてもよい複素環；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；またＯ−Ｓｉ−アリールから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、水素；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、水素；ＯＨ；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＣＮ；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；Ｃ（Ｓ）ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくは、アラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；およびＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；アリール、好ましくはフェニルまたはナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦであり；Ｚ２がＣである場合、Ｚ４はＧであり；かつ、Ｚ２がＤである場合、Ｚ４はＨである］。
【００１５】
本発明の文脈において、式Ｉの化合物または式ＩＩの化合物が言及される場合、その薬学的に許容可能な塩も含まれている。
【００１６】
本出願人は、驚くべきことに、式ＩＩに表される有機リン酸ヌクレオシド類似体を含有するシトシンが、シチジンデアミナーゼによって、実際は同条件下では非反応性であるヌクレオチド類似体として認識されるのではなく、それらの天然基質（即ち、つまりヌクレオシド類似体）と同等の転換率および収量で、基質として認識されることを見出した。
【００１７】
このように、本明細書に記載された、シトシン含有有機リン酸ヌクレオシド類似体は、高転換率および高収量（７０％超、通常量的、即ち９９〜１００％）でウリジン系（uridinic）のヌクレオシド類似体の調製／製造を可能とする。
【００１８】
これまでのところ、シチジン誘導体化学的骨格中の位置Ｃ−５′でのこの種のバルク状化学的変性が、シチジンデアミナーゼのために基質特異性を変性させ得るだろうことを指摘している証拠は見つかっていない。
【００１９】
本発明の文脈において、ウリジンまたはウリジン系の誘導体、ヌクレオシド中間体の用語、それらはすべてウリジン骨格に由来した化学的化合物として理解するべきである。具体的には、ウリジンまたはウリジン系の誘導体は、式Ｉによって表わされる有機リン酸ヌクレオシド類似体を含有するウリジンである。
【００２０】
本発明の文脈において、シチジンまたはシチジン系の誘導体、ヌクレオシド中間体の用語、それらはすべてシチジン骨格に由来した化学的化合物として理解するべきである。具体的には、シチジンまたはシチジン系の誘導体は、式ＩＩによって表わされる有機リン酸ヌクレオシド類似体を含有するシトシンである。
【００２１】
反応ＩＩ−Ｉで上に定義されるような式Ｉの化合物を調製する方法に好ましい態様において：
Ｚ１は、ＯおよびＣＨ２、より好ましくはＯから選択され；
Ｚ３は、Ｚ１とは独立して、ＯおよびＣ（ＲＳ３ＲＳ４）、より好ましくはＣ（ＲＳ３ＲＳ４）から選択され；
Ｚ２は、
【化４】
2018509165.tif 000006
から選択され、
Ｚ４は、
【化５】
2018509165.tif 000007
から選択され、
Ｒ１は、Ｏであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、Ｈであり；
Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ、ＣｌあるいはＩ、より好ましくはＦ；メチル；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；およびＯＣＯ２Ｒ６から選択され；
Ｒ５は、Ｈ；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ、ＣｌあるいはＩ、より好ましくはＦ；メチル；トリハロアルキル；ＯＲ６；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；およびＯＣＯ２Ｒ６から選択され；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ、メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；およびＯ−Ｓｉ−アリールから選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ、メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；およびＯ−Ｓｉ−アリールから選択され；
ＲＳ３は、ＲＳ４とは独立して、水素；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびハロゲン、好ましくはＦから選択され；
ＲＳ４は、ＲＳ３とは独立して、水素；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびハロゲン、好ましくはＦから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、水素；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、水素；ＯＨ；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；およびアリール、好ましくはフェニルおよびナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；かつ、Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦである。
【００２２】
反応ＩＩ−Ｉで上記に定義されるような式Ｉの化合物の調製方法により好ましい態様において、
Ｚ１は、Ｏであり；
Ｚ３は、Ｃ（ＲＳ３ＲＳ４）であり；
Ｚ２は、
【化６】
2018509165.tif 000008
から選択され、
Ｚ４は、
【化７】
2018509165.tif 000009
から選択され、
Ｒ１は、Ｏであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、Ｈであり；
Ｒ４は、Ｈ；ＯＨ；ハロゲン、好ましくはＦ；メチルおよびトリハロアルキルから選択され；
Ｒ５は、Ｈ；ＯＨ；ハロゲン；ＯＲ６；ＣＯＲ６；ＣＯＮＲ６Ｒ７；ＣＯ２Ｒ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；およびＯＣＯ２Ｒ６から選択され；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＳＯ２Ｒ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびＣＯ２Ｒ６から選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＳＯ２Ｒ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびＣＯ２Ｒ６から選択され；
ＲＳ３は、ＲＳ４とは独立して、水素；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびハロゲン、好ましくはＦから選択され；
ＲＳ４は、ＲＳ３とは独立して、水素；メチル；ＯＨ；ＯＲ６；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＳＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；Ｏ−ケタール；Ｏ−Ｓｉ−アルキル；Ｏ−Ｓｉ−アリール；およびハロゲン、好ましくはＦから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、水素；ＯＨ；ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＮＲ６Ｒ７；ＯＣＯＲ６；ＯＣＯ２Ｒ６；ＯＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；およびアリール、好ましくはフェニルおよびナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；かつ、Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦである。
【００２３】
反応ＩＩ−Ｉで上に定義されるような式Ｉの化合物を調製する方法の一層より好ましい態様において、
Ｚ１は、Ｏであり；
Ｚ３は、Ｃ（ＲＳ３ＲＳ４）であり、ここでＲＳ３がＨまたはＯＨであり、ＲＳ４がＲＳ３とは独立して、ＨまたはＯＨであり；
Ｚ２は、
【化８】
2018509165.tif 000010
から選択され、
Ｚ４は、
【化９】
2018509165.tif 000011
から選択され、
Ｒ１は、Ｏであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、Ｈであり；
Ｒ４は、Ｈ、メチルあるいはハロゲン、好ましくはＦであり；
Ｒ５は、Ｈであり；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；およびＯＨから選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；およびＯＨから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、ＯＲ８；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、ＯＲ８；ＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＮＲ６Ｒ７；ＮＨＣＯＲ６；ＮＲ６ＣＯ２Ｒ７；ＮＨＣＯ２Ｒ６；ＮＨＣ（Ｓ）ＯＲ６；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；置換されていてもよいアルキル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルケニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアルキニル鎖のエーテル；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；およびアリール、好ましくはフェニルおよびナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；かつ、Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦである。
【００２４】
反応ＩＩ−Ｉで上に定義されるような式Ｉの化合物を調製する方法の一層より好ましい態様において、
Ｚ１はＯであり；
Ｚ３は、Ｃ（ＲＳ３ＲＳ４）であり、ここでＲＳ３がＨまたはＯＨであり、かつＲＳ４がＲＳ３とは独立して、ＨまたはＯＨであり；
Ｚ２は、
【化１０】
2018509165.tif 000012
から選択され、
Ｚ４は、
【化１１】
2018509165.tif 000013
から選択され、
Ｒ１は、Ｏであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、Ｈであり；
Ｒ４は、Ｈであり；
Ｒ５は、Ｈであり；
ＲＳ１は、ＲＳ２とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；およびＯＨから選択され；
ＲＳ２は、ＲＳ１とは独立して、水素；ハロゲン、好ましくはＦ；メチル；およびＯＨから選択され；
Ｙ１は、Ｙ２とは独立してＯＲ８；置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；置換されていてもよい複素環のエーテル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
より好ましくは、Ｙ１は、Ｙ２とは独立して、置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニルまたはＯ−ナフチル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
より好ましくは、Ｙ２は、Ｙ１とは独立して、置換されていてもよいアリールのエーテル、好ましくはＯ−フェニル；および遊離形態であるかまたは好適な官能基によって保護された、アミノ酸、好ましくはアラニン、バリン、ロイシンまたはイソロイシンから選択され；
Ｒ８は、メチル；置換されていてもよいアルキル鎖；置換されていてもよいアルケニル鎖；置換されていてもよいアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルケニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいシクロアルキニル鎖；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよいアリール；ＯまたはＮ原子を介してＰに連結されていてもよい、置換されていてもよい複素環；ならびにアリール、好ましくはフェニルおよびナフチルから選択され；
ここで、Ｚ２がＡである場合、Ｚ４はＥであり；かつ、Ｚ２がＢである場合、Ｚ４はＦである。
【００２５】
本発明の目的である好適な化学的変性は、それらの対応するシチジン相当物からの位置Ｃ−５′でバルク状の置換基を有するウリジン有機リン酸ヌクレオシド類似体のワンステップ生産のための、より便利で効率的な、より容易である方法を提供し、それは先行技術に開示された阻害問題を完全に回避するものである。特に、好ましいリン置換がホスホルアミデート誘導体、より好ましくは、好ましくはイソプロピルエステルとして端末側終端において炭素で保護された、フェニル等の芳香族基およびアラニン等のアミノ酸を含むホスホルアミデート基（これの場合は保護のために好適な官能基）の形態である。
【００２６】
従って、本発明は、従来の多段階式合成を短縮し、全収量を増加させ、副反応および副産物量を減少させることによる、そしてひいては生成物純度および品質が改善される、抗癌生成物および／または抗ウイルス性生成物として有用な、ヌクレオシド類似体の改善された代替的合成方法を提供する。
【００２７】
本明細書の目的で、次の用語はさらに以下のように定義される。
【００２８】
用語「シチジンデアミナーゼ」は、シチジンデアミナーゼ活性を呈する任意のタンパク質を指し、このため、それは、精製タンパク質または任意の製剤補助剤との抽出物のいずれかの形態の、このタンパク質の、任意の触媒的提示を含む。このタンパク質は、天然源から抽出されたかまたは組換え技術によって得られた、シロイヌナズナ（Arabidopsis thaliana）、バチルス・カルドリチクス（Bacillus caldolyticus）、バチルス・セレウス（Bacillus cereus）、枯草菌（Bacillus subtilis）、ウシ（Bos taurus）、ブルギア・パハンギ（Brugia pahangi）、カエノラブディティス・エレガンス（Caenorhabditis elegans）、オオカミ（Canis lupus）、モルモット（Cavia porcellus）、コルンバ種（Columba spp.）、キヌゲネズミ亜科（Cricetinae）族の任意の属、クリチジア・ファシキュラータ（Crithidia fasciculata）、大腸菌（Escherichia coli）、ネコ（Felis catus）、セキショクヤケイ（Gallus gallus）、好熱性細菌（Geobacillus stearothermophilus）、インフルエンザ菌（Haemophilus influenzae）、トコブシ（Haliotis deversicolor）、ホモ・サピエンス（Homo sapiens）、アカゲザル（Macaca mulatta）、ハツカネズミ（Mus musculus）、結核菌（Mycobacterium tuberculosis）、マイコプラズマ・ニューモニア（Mycoplasma pneumoniae）、ノカルジオイデス種（N℃ardioides spp.）、アナウサギ（Oryctolagus cuniculus）、ヒツジ（Ovis aries）、ペニシリウム・パリタンス（Penicillium palitans）、ラナ種（Rana spp.）、ドブネズミ（Rattus norvegicus）、サッカロミケス・セレビジエ（Saccharomyces cerevisiae）、サルモネラ・エンテリカ（Salmonella enterica）、スポロサルチナ・サイクロフィラ（Sporosarcina psychrophila）、イノシシ（Sus scrofa）、クルーズトリパノソーマ（Trypanosoma cruzi）、トウモロコシ（Zea mays）、存在しているシチジンデアミナーゼのような天然由来の酵素であってもよいが、これに限定されず、同様に、シチジンデアミナーゼ活性を提示するこれらタンパク質の任意の突然変異または組換えであってもよい。
【００２９】
用語「活性単位（ＡＵ）」とは、基質１μｍｏｌを生成物へと、標準制御状態下で１分あたりに変換することができる酵素の量を指す。
【００３０】
用語「ヌクレオシド」とは、ヘテロ環式塩基が糖に共有結合しているすべての化合物を指し、特に、ヌクレオシドの糖への好ましいカップリング結合には、糖中の炭素原子のＣ１′−（グリコシド）結合の、ヘテロ環式塩基中の炭素−または複素原子（典型的には窒素）への結合が含まれている。従って、本文脈においては、用語「ヌクレオシド」は、ヘテロ環式塩基の配糖体を意味する。
【００３１】
本明細書で使用される用語「ヌクレオシド」は、天然由来ヌクレオシドおよび非天然由来ヌクレオシドを含むように広く使用される。ヌクレオシドの実例となる例は、リボース部分を含んでなるリボヌクレオシド、同様にデオキシリボース部分を含んでなるデオキシリボヌクレオシドである。そのようなヌクレオシドの塩基に関して、これは任意の天然由来塩基（例えば、アデニン、グアニン、シトシン、チミン、ウラシル）であっても、同様にそれらの任意の変性された変異体または任意の潜在的非天然塩基であってもよいことを理解すべきである。
【００３２】
本明細書で使用される用語「ヌクレオシド類似体」、「ＮＡ」または「ＮＡｓ」とは、構造の少なくとも１つの原子が、天然ヌクレオシド（即ち、とりわけ、アデノシン、シチジン、ウリジン、チミジン、イノシン、グアノシン）中に存在しているものとは異なるすべてのヌクレオシドを指す。
【００３３】
用語「有機リン酸ヌクレオシド」とは、位置Ｃ−５′で酸素に接続された、置換されたリン原子を有するヌクレオシドを示し、式Ｉの化合物および式ＩＩの化合物として表される。本明細書に記載の有機リン酸ヌクレオシド類似体には、限定されるものではないが、有機ホスフェート、ホスフィネート、ホスホネート、ホスホルアミデート等が含まれることを意図しているが、ヌクレオチド（即ち、ＯＨ−５′での置換が一、二または三リン酸塩のいずれかである化合物）は除外される。
【００３４】
本発明において、位置C-5′での置換基を指す場合、用語「バルク状」とは、一リン酸塩PO42-基に相当するものより多くの原子数および／またはより大きな接触可能表面積を含有する任意の基を意味する。
【００３５】
用語「ヌクレオチド」とは、少なくとも1つのリン酸基がC-5′位置で酸素を通じて糖に結合したヌクレオシドを指す。天然ヌクレオチドは、1つ、2つまたは3つのリン酸基を有する。
【００３６】
さらに本明細書で使用されるように、用語「糖」とは、すべての炭水化物およびそれらの誘導体を指し、ここで特に意図する誘導体には、欠失、置換もしくは付加、または糖中の化学的基もしくは原子が含まれる。例えば、特に意図する欠失には、２′−デオキシ、３′−デオキシ、５′−デオキシおよび／または２′，３′−ジデオキシ−糖が含まれる。特に意図する置換には、環酸素の硫黄またはメチレンへの置換、あるいは水酸基のハロゲン、アジド、アミノ−、シアノ、スルフヒドリル−、またはメチル基への置換が含まれ、かつ、特に意図する付加には、メチレンホスホネート基が含まれている。また、さらに意図する糖には、糖類似体（即ち、天然由来ではない糖）および特に炭素環系が含まれている。本明細書で使用される用語「炭素環系」とは、複数の炭素原子が環を形成する任意の分子を指し、特に意図する炭素環系では、環は３つ、４つ、５つ、あるいは６つの炭素原子から形成される。  
【００３７】
用語「酵素的合成」とは、適切な酵素によって行なわれる、生体触媒工程のみを含んでなる方法による、化学的化合物の合成方法を指す。このため、本明細書に記載された合成方法の他の好ましい態様は、そういうものとしてシトシン誘導体として既に調製されたかまたは市場より入手可能な、一般式ＩＩにより表わされた以前に言及されたもののような、シトシン誘導体から出発する完全な生体触媒方法である。
【００３８】
用語「化学−酵素的合成」とは、化学工程および生体触媒工程の組合せを通じた化学的化合物の合成方法を指す。
【００３９】
本出願では、用語「方法（process）」とは、酵素的合成および化学−酵素的合成の両方を含むことを意図している、即ち、当該方法の少なくとも１つの工程には、酵素が使用される。
【００４０】
用語「複素環」または「ヘテロ環式塩基」または「塩基」または「核酸塩基」は、本明細書において代替的に使用し、複数の原子が、複数の共有結合を介して環を形成する任意の化合物を指し、当該環は、炭素原子以外の少なくとも１つの原子を含む。特に意図するヘテロ環式塩基には、それぞれ独立して、非炭素原子として、窒素、酸素および硫黄から選択される、少なくとも１〜４個のヘテロ原子を含む５員環および６員環が含まれる（例えば、イミダゾール、ピロール、トリアゾール、ジヒドロピリミジン）。さらに意図する複素環は、別の環または複素環へ縮合（即ち、共有結合）させてもよく、よって本明細書で使用されるように「縮合複素環」または「縮合ヘテロ環式塩基」と称される。特に意図する縮合複素環には、６員環へ縮合した５員環（例えば、プリン、ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン）および別の６員環またはそれ以上の環へ縮合した６員環（例えば、ピリド［４，５−ｄ］ピリミジン（ベンゾジアゼピン））が含まれる。一層より意図するヘテロ環式塩基は、芳香族であってもよく、あるいは１つ以上の二重または三重結合を含んでいてもよい。さらに、意図するヘテロ環式塩基および縮合複素環は、１つ以上の位置でさらに置換されていてもよい。また、１つ、２つまたは３つの置換基で置換されていてもよい環のいずれか１つは、それぞれ独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、アミノ、モノ−またはジＣ１−６アルキルアミノ、アジド、メルカプト、ポリハロＣ１−６アルキル、ポリハロＣ１−６アルコキシおよびＣ３−７シクロアルキルからなる群から選択される。
【００４１】
用語「核酸塩基」には、天然由来の核酸塩基、同様に非天然由来の核酸塩基も含まれる。これまでに「非天然由来」と見なされていた様々な核酸塩基が、後に自然界で見出されたことは当業者に明らかであるはずである。よって、「核酸塩基」には、既知のプリンおよびピリミジン複素環だけでなく、ヘテロ環式類似体（Ｎ−置換複素環など）およびそれらの互変異性体が含まれる。核酸塩基の実例となる例は、アデニン、グアニン、チミン、シトシン、ウラシル、プリン、キサンチン、２−クロロアデニン、２−フルオロアデニン、ペンチル（５−フルオロ−２−オキソ−１，２，ジヒドロピリミジン−４−イル）カルバメート、シトシンＮ−アルキルカルバメート、シトシンＮ−アルキルエステル、５−アザシトシン、５−ブロモビニルウラシル、５−フルオロウラシル、５−トリフルオロメチルウラシル（5-trifluromethyluracil）、６−メトキシ−９Ｈ−プリン−２−アミンおよび（Ｒ）−３，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［４，５−ｄ］［１，３］ジアゼピン−８−オールである。
【００４２】
用語「核酸塩基」には、これら例、同様にそれらの類似体および互変異性体および位置異性体を含むことが意図されている。これら「核酸塩基」を、本明細書中に同様に存在しているその他のヘテロ環式塩基から区別するために、本明細書では、用語「核酸塩基」とは、主として、式ＩＩ中のZ2として表されるシトシン系塩基および式I中にZ4として表されるウリジン系塩基を指す。 
【００４３】
用語「互変異性体」または「互変異性型」とは、低エネルギー障壁によって相互交換可能な、異なるエネルギーの構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体（prototropic tautomer）としても知られている）には、ケト−エノール異性化およびイミン−エナミン異性化のようなプロトンの移動を介した相互転換が含まれる。原子価互変異性体には、結合電子のうちのいくつかの再編成による相互転換が含まれる。 
【００４４】
用語「位置異性体」とは、原子が、異なる結合順序で結合される、同一の分子式を有する分子を指すという意味で構造異性体、または構造異性体を指す。
【００４５】
用語「転換」とは、生成物、期待される最終生成物、副産物のいずれかに転換されるかまたは分解した生成物にさえも転換される、出発材料の百分率を指す。
【００４６】
用語「収量」とは、出発分子数１つ当たりの生成物の合成された分子数である。多段階合成において、収量は、すべての単一工程の収量を掛けることにより計算することができる。
【００４７】
用語「アノマー純度」とは、化合物の特定のアノマーの、混合物中に存在する当該化合物のすべてのアノマーの合計量で割り、１００を掛けた、量を指す。
【００４８】
用語「中間体」または「中間体（複数）」とは、好適な付加的化学反応によって、最終生成物中に転換され得るあらゆるヌクレオシド類似体型化合物を指し、当該最終生成物は、好ましくはヌクレオシド系構造の活性薬剤成分（ＡＰＩ）である。従って、中間体はＡＰＩ前駆体と見なされ得る分子である。本発明の化合物も中間体化合物と見なすことができ、そのため本発明の範囲に含まれるものである。
【００４９】
水酸基を含んでいる式Ｉの化合物のin vivo加水分解可能エステルには、リン酸エステルおよびα-アシルオキシアルキルエーテルおよび親水酸基を生成するためのエステル分解のin vivo加水分解の結果である関連化合物のような無機エステルが含まれる。α−アシルオキシアルキルエーテルの例として、アセトキシメトキシおよび２，２−ジメチルプロピオニルオキシ−メトキシが挙げられる。ヒドロキシのための、in vivo加水分解可能なエステルを形成する基の選択には、アルカノイル、ベンゾイル、フェニルアセチル、ならびに置換されたベンゾイルおよびフェニルアセチル、アルコキシカルボニル（炭酸アルキルエステルを得るため）、ジアルキルカルバモイルおよびＮ−（ジアルキルアミノエチル）−Ｎ−アルキルカルバモイル（カルバメートを得るため）、ジアルキルアミノアセチルならびにカルボキシアセチルが挙げられる。ベンゾイル上の置換基の例として、環窒素原子からメチレン基を介してベンゾイル環の３位または４位に連結されたモルホリノおよびピペラジノが挙げられる。
【００５０】
治療のための使用に対して、式Ｉの化合物または式ＩＩの化合物のいずれかの塩は、対イオンが薬学的に許容可能であるものである。しかしながら、薬学的に許容可能ではない酸および塩基の塩は、例えば、薬学的に許容可能な化合物の調製か精製で使用してもよい。すべての塩は、薬学的に許容可能であるか否かにかかわらず、本発明の範囲内に含まれている。
【００５１】
上記される薬学的に許容可能な酸および塩基付加塩は、式Ｉの化合物または式ＩＩの化合物のいずれかを形成し得る、治療的に有効な非毒性酸および塩基付加塩形態を含んでなることを意図している。薬学的に許容可能な酸付加塩は、塩基形態をそのような適切な酸で処理することにより都合よく得ることができる。適切な酸は、例えば、ハロゲン化水素酸のような無機酸、例えば、塩酸または臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、などの酸；または例えば、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸（即ち、エタン二酸）、マロン酸、コハク酸（即ち、ブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸（即ち、ヒドロキシブタン二酸）、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモン酸等の酸のような酸有機酸を含んでなる。
【００５２】
反対に、当該塩形態を、適切な塩基で処理することにより遊離塩基形態へと転換させてもよい。
【００５３】
酸性プロトンを含有している式Ｉの化合物または式ＩＩの化合物のいずれかも、適切な有機塩基および無機塩基での処理によって、それらの非毒性金属またはアミン付加塩形態に転換させてもよい。適切な塩基塩形態は、例えば、アンモニウム塩、アルカリおよび土類アルカリ金属、例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムの塩等、有機塩基を有する塩（例えば、ベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミンの塩、および例えば、アルギニン、リジン等のアミノ酸を有する塩を含んでなる。
【００５４】
上記で使用されている用語「付加塩」は、式Ｉの化合物または式ＩＩの化合物のいずれか、同様にそれらの塩を形成し得る溶媒和物も含んでなる。そのような溶媒和物は、例えば、水和物、アルコラート等である。
【００５５】
以上で使用されている用語「第四級アミン」は、式Iまたは式ＩＩの化合物の塩基性窒素と適切な四級化剤（例えば、置換されていてもよいアルキルハリド、アリールハリドまたはアリールアルキルハリド）との間の反応によって式Ｉまたは式ＩＩの化合物のいずれかを形成することができる第四級アンモニア塩を定義するものである（例えば、ヨウ化メチルまたはヨウ化ベンジル）。トリフルオロメタンスルホン酸アルキル、メタンスルホン酸アルキルおよびｐ−トルエンスルホン酸アルキル等の良好な脱離基を有する他の反応物を使用してもよい。第四級アミンは、正電荷を持つ窒素を有する。薬学的に許容可能な対イオンには、クロロ酢酸、ブロモ酢酸、ヨード酢酸、トリフルオロ酢酸およびアセテートが含まれる。選択した対イオンはイオン交換樹脂を使用して導入することができる。
【００５６】
本化合物のN-酸化物形態は、１つまたはいくつかの窒素原子がいわゆるN-酸化物に酸化している、式Ｉの化合物または式ＩＩの化合物のいずれかを含んでなることを意図している。
【００５７】
式Ｉの化合物または式ＩＩの化合物のいずれかが、金属結合、キレート化、複雑な生成特性を有し得、従って、金属複合体または金属キレート物として存在し得ることは理解されよう。式Ｉの化合物のそのようなメタル化誘導体は、本発明の範囲内に含まれることが意図されている。
【００５８】
また、式Ｉの化合物または式ＩＩの化合物のいずれかのいくつかの化合物は、それらの互変異性型で存在し得る。そのような形態は、上記式中に明示的に示されていないものの、本発明の範囲内に含まれていることを意図している。
【００５９】
本明細書に記載の化合物は、不斉中心を有してもよく、本発明に含まれるすべての異性体の形態と共にラセミ化合物、ラセミ混合物、個々のジアステレオマーまたは鏡像体として発生してもよい。キラル中心を有する本発明の化合物は、光学的に活性な形態かつラセミ形態で存在し、単離させることができる。いくつかの化合物は、多型性を示すことができる。 
【００６０】
本明細書で使用されるように用語「アルキル」とは、任意の直鎖状、分岐状、または環式炭化水素を指し、全ての炭素−炭素結合は、単一結合である。アルキル鎖は、ヘテロ原子によって置換されていてもよい。
【００６１】
用語「アルケニル」および「非置換アルケニル」は、本明細書では代替的に使用され、任意の、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、直鎖状、分岐状、または環式のアルキルを指す。
【００６２】
さらに、本明細書で使用される用語「アルキニル」とは、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する、直鎖状、分岐状、もしくは環式のアルキルまたはアルケニルを指す。
【００６３】
本明細書で使用される用語「アリール」とは、基としてまたは基の一部として存在する任意の芳香族環式のアルケニルまたはアルキニルを指し、それぞれ、ハロ、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、アミノ、モノ−またはジＣ１−６アルキルアミノ、アジド、メルカプト、ポリハロＣ１−６アルキルおよびポリハロＣ１−６アルコキシから選択される１つ、２つまたは３つの置換基で置換されていてもよいフェニルまたはナフタレニルである。好ましいアリール基は、フェニルおよびナフチルである。用語「アルカリール」は、アリールが、アルキル、アルケニルまたはアルキニルに共有結合している場合に使用する。
【００６４】
本明細書で使用される用語「置換（された）」とは、原子または化学基の官能基との置換を指し、特に意図する官能基には、求核基（例えば、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＣなど）、求電子基（例えば、Ｃ（Ｏ）ＯＲ、Ｃ（Ｘ）ＯＨなど）、極性基（例えば、−ＯＨ）、非極性基（例えば、アリール、アルキル、アルケニル、アルキニルなど）、イオン性基（例えば、−ＮＨ３＋）、ハロゲン（例えば、−Ｆ、−Ｃｌ）および全てのそれらの化学的に適当な組合せが含まれる。従って、用語「官能基」および用語「置換基」は、本明細書では代替的に使用され、求核基（例えば、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＣ、−ＣＮなど）、求電子基（例えば、Ｃ（Ｏ）ＯＲ、Ｃ（Ｘ）ＯＨ、Ｃ（ハロゲン）ＯＲなど）、極性基（例えば、−ＯＨ）、非極性基（例えば、アリール、アルキル、アルケニル、アルキニルなど）、イオン性基（例えば、−ＮＨ３＋）およびハロゲンを指す。
【００６５】
例えば、−ＯＨ、−ＮＨ２等の官能基は、当業者に知られたもののような保護基（ＰＧと省略する）を組込むことができる（GREENE′S PROTECTIVE. GROUPS IN ORGANIC. SYNTHESIS. Fourth Edition. PETER G. M. WUTS. and. THEODORA W. GREENE. 2007. Wiley-Interscience ）。例証目的で、１，２−ジオールを含む水酸基保護（上記Greene′s、１６〜３６６ページを参照のこと）は、エーテル、エステル、環式アセタール、環式ケタールおよびシリル誘導体の形態であってもよく、例えば、限定することなく、メチルエーテル、メトキシメチルエーテル、メチルチオメチルエーテル、ｔ−ブチルチオメチルエーテル、（フェニルジメチルシスリメトキシメチルエーテル（phenyldimethylsislymethoxymethyl））エーテル、ベンジルオキシメチルエーテル、ｐ−メトキシベンジルオキシメチルエーテル、ｐ−ニトロベンジルオキシメチルエーテル、ｏ−ニトロベンジロキシメチルエーテル（o-nitrobenzyzloxymethyl ether）、（４−メトキシフェノキシ）メチルエーテル、グアイアコルメチルエーテル、ｔ−ブトキシメチルエーテル、４−ペンテニルオキシメチルエーテル、シロキシメチルエーテル、２−メトキシエトキシメチルエーテル（2-methoxethoxymethyl ether）、２，２，２−トリクロロエトキシメチルエーテル、ビス（２−クロロエトキシ）メチルエーテル、２−（トリメチルシリル）エトキシメチルエーテル、メントキシメチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、３−ブロモテトラヒドロピラニルエーテル、テトラヒドロチオピラニルエーテル、１−メトキシシクロヘキシルエーテル、４−メトキシテトラヒドロピラニルエーテル、４−メトキシテトラヒドロチオピラニルエーテル、４−メトキシテトラヒドロチオピラニルＳ、Ｓ−ジオキシドエーテル、１−［（２−クロロ−４−メチル）フェニル］−４−メトキシピペリジン−４−イルエーテル、１，４−ジオキサン−２−イルエーテル、１，４−ジオキサン−２−イルエーテル、
テトラヒドロチオフラニルエーテル、２、３、３ａ、４、５、６、７、７ａ−オクタヒドロ−７、８、８−トリメチル−４，７−メタノベンゾフラン−２−イルエーテル、１−エトキシエチルエーテル、１−（２−クロロエトキシ）エチルエーテル、１−ヒドロキシエチルエーテル、２−ブロモエチルエーテル、１−［２−（トリメチルシリル）エトキシ］エチルエーテル、１−（２−シアノエトキシ）エチルエーテル、プレニルエーテル、シンナミルエーテル、プロパルギルエーテル、ｐ−ニトロフェニルエーテル、１−メチル−１−メトキシエチルエーテル、１−メチル−１−ベンジルオキシエチルエーテル、１−メチル−１−１−ベンジルオキシ−２−フルオロエチルエーテル、２，２，２−トリクロロエチルエーテル、２−トリメチルシリルエチルエーテル、２−（フェニルセレニル）エチルエーテル、ｔ−ブチルエーテル、アリルエーテル、ｐ−クロロフェニルエーテル、ｐ−メトキシフェニルエーテル、２，４−ジニトロフェニルエーテル、ベンジルエーテル、ｐ−メトキシルベンジルエーテル、３，４−ジメトキシベンジルエーテル、２，６−ジメトキシベンジル、ｏ−ニトロベンジルエーテル、ｐ−ニトロベンジルエーテル、ｐ−ブロモベンジルエーテル、ｐ−クロロベンジルエーテル、２，６−ジクロロベンジルエーテル、２，４−ジニトロベンジルエーテル、フルオラスベンジルエーテル、トリメチルシリルキシリルエーテル、ｐ−フェニルベンジルエーテル、クミルエーテル、ｐ−アジドベンジルエーテル、２，６−ジフルオロベンジルエーテル、ｐ−シアノベンジルエーテル、ｐ−フェニルベンジルエーテル、２−ピコリルエーテル、４−ピコリルエーテル、３−メチル−２−ピコリル  Ｎ−オキシドエーテル、ジフェニルメチルエーテル、ｐ，ｐ′−ジニトロベンズヒドリルエーテル、５−ジベンゾスベリルエーテル、トリフェニルメチルエーテル、
α−ナフチルジフェニルメチルエーテル、ｐ−メトキシフェニルジフェニルメチルエーテル、ジ（ｐ−メトキシフェニル）フェニルメチルエーテル、トリ（ｐ−メトキシフェニル）フェニルメチルエーテル、４−（４′−ブロモフェンアシロキシフェニル）ジフェニルメチルエーテル、４，４′，４′′−トリス（４，５−ジクロロフタルイミドフェニル）メチルエーテル、ペンタジエニルニトロベンジル、ｐ−アジドベンジルエーテル、ｐ−（メチルスルフィニル）ベンジルエーテル、２−ナフチルメチルエーテル、２−キノリニルメチルエーテル、１−ピレニルメチルエーテル、４−メトキシジフェニルメチルエーテル、４−フェニルジフェニルメチルエーテル、α−ナフチルジフェニルメチルエーテル、ｐ−メトキシフェニルジフェニルメチルエーテル、アントリルエーテル、９−フェニルチオキサンチルエーテル等；トリメチルシリルエーテル、トリエチルシリルエーテル、トリイソプロピルシリルエーテル、ジメチルヘキシルシリルエーテル、２−ノルボニルジメチルシリルエーテル、ｔ−ブチルジメチルシリルエーテル、ｔ−ブチルジフェニルシリルエーテル、トリベンジルシリルエーテル、トリ−ｐ−キシリルシリルエーテル、トリフェニルシリルエーテル、ジフェニルメチルシリルエーテル、ジ−ｔ−ブチルメチルシリルエーテル、ビス（ｔ−ブチル）−１−ピレニルメトキシシリルエーテル、トリス（トリメチルシリル）シリルエーテル、（２−ヒドロキシスチリル）ジメチルシリルエーテル（2-hidroxystyryl)dimethylsilyl ether）、ｔ−ブトキシジフェニルシリルエーテル、１，１，３，３−テトライソプロピル−３−［２−（トリフェニルメトキシ）エトキシ］ジシロキサン−１−イルエーテル、フルオラスシリルエーテル等のシリルエーテル；ホルメート、ベンゾイルホルメート、アセテート、クロロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸、トリクロロアセトイミデート、トリフルオロ酢酸（trilfuoroacetate）、メトキシ酢酸、トリフェニルメトキシ酢酸、フェンオキシメトキシ酢酸、ｐ−クロロフェニル酢酸（p-chloropheynyacetate）、フェニル酢酸、ジフェニル酢酸、３−プロピオン酸フェニル、撫すフルオラス鎖型プロパノイルエステル、４−ペンテノエート（4-pentenoate）、レブリネート、ピバロエート、アダマントエート、クロトネート、４−メトキシルクロトネート、ベンゾエート、ｐ−安息香酸フェニル、メシトエート、４−ブロモベンゾエート）、２，５−ジフルオロベンゾエート、ｐ−ニトロベンゾエート、ピコリネート、ニコチネート、２−（アジドメチル）ベンゾエート、４−アジドブチレート、（２−アジドメチル）フェニルアセテート、２−｛［（トリチルチオ）オキシ］メチル｝ベンゾエート、２−（アリルオキシ）フェニルアセテート、２−（プレニルオキシメチル）ベンゾエート、４−ベンジルオキシブチレート、４−トリアルキルシロキシブチレート、４−アセトキシ−２，２−ジメチルブチレート、２，２−ジメチル−４−ペンタノエート、２−ヨードベンゾエート、
４−ニトロ−４−メチルペンタノアート、ｏ−（ジブロモメチル）ベンゾエート、２−ホルミルベンゼンスルホネート、４−（メチルチオメトキシ）ブチレート、２−（メチルチオメトキシメチル）ベンゾエート、２−（クロロアセトキシメチル）ベンゾエート、２−［（２−クロロアセトキシ）エチル］ベンゾエート（2-[(2-chloracetoxy)ethyl]benzoate）、２−［２−（ベンジルオキシ）エチル］ベンゾエート、  ２−［２−（４−メトキシベンジルオキシ）エチル］ベンゾエート、２，６−ジクロロ−４−メチルフェノキシアセテート、２，６−ジクロロ−４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）  フェノキシアセテート、クロロジフェニルアセテート、イソブチレート、モノスクシオネート（monosuccionate）、チゴレート（tigloate）、ｏ−（メトキシカルボニル）ベンゾエート、ｐ−ベンゾエート、α−ナフトエート、ニトレート、アルキルＮ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルホスホロジアミデート、２−クロロベンゾエート等のエステル；硫酸塩、アリルスルホネート、メタンスルホネート、ベンジルスルホネート、トシレート、２−トリフルオロメチルスルホネート等のスルホネート；アルキルメチルカーボネート、メトキシメチルカーボネート、９−フルオロメチルカーボネート、エチルカーボネート、ブロモエチルカーボネート、２−（トリメチルシリル）エチルカーボネート、イソブチルカーボネート、ｔ−ブチルカーボネート、ビニルカーボネート、アリルカーボネート、プロパルギルカーボネート、ｐ−ニトロフェニルカーボネート、ベンジルカーボネート、２−ダンシルエチルカーボネート、フェナシルカーボネート、メチルジチオカーボネート、Ｓ−ベンジルチオカーボネート等のカーボネート；ジメチルチオカルバメート、Ｎ−フェニルカルバメート等のカルバメート；メチレンアセタール、エチリデンアセタール、ｔ−ブチルメチリデンアセタール、１−ｔ−ブチルエチリジンケタール、１−フェニルエチリデンケタール（1-phenyethylidene ketal）、２−（メトキシカルボニル）エチリデンアセタール、２−（ｔ−ブチルカルボニル）エチリデンアセタール、フェニルスルホニルエチリデンアセタール、３−（ベンジルオキシ）プロピリデンアセタール、イソプロピリデンアセタールまたはアセトニド、シクロペンチリデンアセタール、ベンジリデンアセタール、ｐ−メトキシベンジリデンアセタール、メシチレンアセタール、ナフトアルデヒドアセタール、９−アントラセンアセタール、ベンゾフェノンケタール等の環式アセタールおよびケタール；ショウノウケタール、メントンケタール等のキラルケトン；メトキシメチレンアセタール、エトキシメチレンアセタール、ジメトキシメチレンオルトエステル（dimethoxymethylene orto ester）、メチリデンオルトエステル（methylidene orto ester）、フタリドオルトエステル（phthalide orto ester）、１，２−ジメトキシエチリデンオルトエステル（1,2-dimethoxyethylidene orto ester）、２−オキサシクロペンチリデンオルトエステル（2-oxacyclopentylidene orto ester）、ブタン２、３−ビスアセタール、シクロヘキサン−１，２−ジアセタール、ジスピロケタール等の環式のオルトエステル；ジ−ｔ−ブチルシリレン基、ジアルキルシリレン（diakkylsilylene）基、１，３−（１，１，３，３−テトラ���ソプロピルジシロキサニリデン誘導体、１，１，３，３−テトラ−ｔ−ブトキシジシロキサニリデン誘導体、メチレン−ビス−（ジイソプロピルシランオキサニリデン）、１，１，４，４−テトラフェニル−１，４−ジシラ二リデン（1,1,4,4-tetrapheynyl-1,4-disilanylidene）、ｏ−キシリルエーテル、３，３′−オキシビス（ジメトキシトリチル）エーテル等のシリル誘導体；環式カーボネート；メチルボロネート、エチルボロネート等の環式ホウ酸塩である。
【００６６】
アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリールおよび複素環を参照する際の用語「置換されていてもよい」とは、オキソ、エチレンジオキシ、アルカノイルオキシ、アルコキシ、アルキルチオ、カルボキシル、ハロゲン、チエニル、アセチル、１−オキソプロピル、２−オキソプロピル、２−オキソブチル、３−オキソブチル、３−オキソペンチル、４−オキソペンチル、４−オキソヘキシル、５−オキソヘキシル、エチレンジオキシメチル、１，１−エチレンジオキシエチル、２，２−エチレンジオキシエチル、１，１−エチレンジオキシプロピル、２，２−エチレンジオキシプロピル、３，３−エチレンジオキシプロピル、１，１−エチレンジオキシブチル、２，２−エチレンジオキシブチル、３，３−エチレンジオキシブチル、４，４−エチレンジオキシブチル、３，３−エチレンジオキシペンチル、４，４−エチレンジオキシヘキシル、５，５−エチレンジオキシヘキシル、アセチルオキシメチル、２−アセチルオキシエチル、３−アセチルオキシプロピル、３−アセチルオキシブチル、４−アセチルオキシブチル、３−プロピオニルオキシブチル、３−ブチリルオキシブチル、３−バレリルオキシペンチル、３−ヘキサノイルオキシヘキシル、４−アセチルオキシペンチル、５−アセチルオキシペンチル、４−アセチルオキシヘキシル、５−アセチルオキシヘキシル、６−アセチルオキシヘキシル、メトキシメチル、エトキシメチル、プロポキシメチル、ブトキシメチル、ペンチロキシメチル、ヘキシロキシメチル、１−メトキシエチル、２−メトキシエチル、２−エトキシエチル、２−プロポキシエチル、２−ブトキシエチル、２−ペンチロキシエチル、２−ヘキシロキシエチル、３−メトキシプロピル、３−エトキシプロピル、２−メトキシブチル、４−エトキシブチル、３−メトキシペンチル、５−エトキシペンチル、４−メトキシヘキシル、６−エトキシヘキシル、メチルチオメチル、エチルチオメチル、プロピルチオメチル、ブチルチオメチル、ペンチルチオメチル、ヘキシルチオメチル、１−メチルチオエチル、２−メチルチオエチル、２−エチルチオエチル、２−メチルチオプロピル、３−メチルチオプロピル、３−エチルチオブチル、４−ブチルチオブチル、５−メチルチオペンチル、６−エチルチオヘキシル、カルボキシメチル、１−カルボキシエチル、２−カルボキシエチル、２−カルボキシプロピル、３−カルボキシプロピル、４−カルボキシブチル、５−カルボキシペンチル、６−カルボキシヘキシル、フルオロメチル、ブロモメチル、クロロメチル、ヨードメチル、２−クロロエチル、２−ブロモプロピル、３−ヨードプロピル、４−フルオロブチル、５−クロロペンチル、６−ブロモヘキシル、２−チエニルメチル、１−（２−チエニル）エチル、２−（２−チエニル）エチル等を有する基を含むことを意図している。
【００６７】
用語「アミノ酸」とは、少なくとも１つのアミノ基、−ＮＨ、および１つのカルボキシル基、−ＣＯＯＨを含有する、任意の種類の有機化合物を指す。これら化合物は、ペプチド中に存在する天然アミノ酸でもよく、または、アミノ基、カルボキシル基もしくは側鎖に任意の置換を含有し得る。また、それらは、ペプチドの天然アミノ酸の異なるキラル性を示すことができるか、または直鎖状もしくは環式の異なる骨格を有することができるが、記載のように少なくとも１つのアミノ基および１つのカルボキシル基を示さなければならない。アミノ酸は、当業者に知られたような機能的基または保護基を組込むことができる（上記のT.W.Greeneを参照のこと）。好ましいアミノ酸には、限定することなく、アラニン、バリン、ロイシンおよびイソロイシンが含まれる。
【００６８】
反応ＩＩ−Ｉのための反応条件に関して、この方法は、以下の条件で、互いに独立して、好ましく実行される：
−１８〜１００℃の温度範囲；
−１分〜６００時間の反応時間範囲；
−３〜１２のｐＨ領域；
−０．１ｍＭ〜５００Ｍの範囲の、上記で定義された式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の濃度；
−濃度の点から、０．００１〜１０００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．００１〜１００００ｍｇ／ｍｌの範囲のシチジンデアミナーゼ活性を有する酵素量、または、基質１マイクロモル当たり０．００１〜１００ＡＵまで、好ましくは基質１マイクロモル当たり０．００１〜１００００ＡＵの範囲のデアミナーゼ活性を有する酵素量。
【００６９】
反応媒体は、限定することなく、ホスフェート、カーボネート、シトレート、アセテート等の有機または無機の塩を含有する、水性の、緩衝されていてもよい溶液である。また、さらなる態様では、反応媒体は、最大５０％、好ましくは最大３０％、より好ましくは最大１５％の好適な有機溶媒を含有していてもよい。好ましくは、当該有機溶媒は、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｔ−ブタノール、ｎ−ブタノール、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、ジクロロメタン、トルエン、テトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、アセトニトリル、アセトン、シクロペンチルメチルエーテル、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、ジメチルアミド、ジメチルホルムアミドおよびジメチルスルホキシドから選択される。
【００７０】
本発明による方法には、クロマトグラフィー、析出、濾過、濃縮および結晶化から選択される標準的操作によって生産されたＮＡの単離および／または精製の工程も含まれていてよい。
【００７１】
また、本発明は、式Ｉおよび式ＩＩによって表わされる新規化合物に関する（表１参照）。 
【００７２】
【表１】
2018509165.tif 000014
2018509165.tif 000015
［表中、
Ａ＝シトシン、ここで、Ｒ１＝Ｏ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｒ５＝Ｈ
Ｂ＝５−アザシトシン、ここで、Ｒ１＝Ｏ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ５＝Ｈ
Ｅ＝ウラシル、ここで、Ｒ１＝Ｏ、Ｒ４＝Ｒ５＝Ｈ
Ｆ＝５−アザウラシル、ここで、Ｒ１＝Ｏ、Ｒ５＝Ｈ
ＰＧ＝上記に定義されたように、保護基。］
【００７３】
本発明は、本発明の範囲を限定する意図することなしに、例によってさらに記載される。比較例も提供される。下記に提供される反応スキームは、本明細書に開示された種々の化合物をどのように得るかを説明することのみを目的としている。当業者において周知であるように、本明細書に開示された一般方法を実行することを条件として、必要な場合、異なる条件を適用することができる。
【実施例】
【００７４】
比較例１：ウリジンへのシチジン（化合物１）の脱アミノ化
ｐＨ７のリン酸緩衝液１００ｍＭ中、シチジン（４９５μｌ）の１００ｍＭ溶液を、リン酸緩衝液中＞３００ＡＵを含有するシチジンデアミナーゼ酵素溶液５０μＬと混合した。反応を、５分間３７℃で行ない、ＨＣｌで停止させた。その後、粗反応物を１０ＫＤａ膜で濾過し、一部を希釈してＵＶ−ＤＡＤ（紫外線−ダイオードアレイ検出）下でＨＰＬＣによって分析した。生成物同定は、標準試料との比較により行なった。ウリジンを量的収率（＞９９％）で得た。
【００７５】
比較例２：ウリジン５′−一リン酸へのシチジン５′−一リン酸の脱アミノ化
ｐＨ７のリン酸緩衝液１００ｍＭ中、シチジン５′−一リン酸（４９５μｌ）の１００ｍＭ溶液を、リン酸緩衝液中＞３００ＡＵを含有するシチジンデアミナーゼ酵素溶液５０μＬと混合した。反応を、５分間３７℃で行ない、ＨＣｌで停止させた。その後、粗反応物を１０ＫＤａ膜で濾過し、一部を希釈してＨＰＬＣ−ＵＶ−ＤＡＤによって分析した。予想していたウリジン５′−一リン酸生成物は、標準試料との比較により、検出されなかった。従って、最終生成物への基質の転換は得られなかった（０％）。
【００７６】
比較例３：２′−デオキシウリジンへの２′−デオキシシチジンの脱アミノ化
ｐＨ７のリン酸緩衝液１００ｍＭ中、２′−デオキシシチジン（４９５μＬ）の１００ｍＭ溶液を、リン酸緩衝液中＞３００ＡＵを含有するシチジンデアミナーゼ酵素溶液５０μＬと混合した。反応を、５分間３７℃で行ない、ＨＣｌで停止させた。その後、粗反応物を１０ＫＤａ膜で濾過し、一部を希釈してＨＰＬＣ−ＵＶ−ＤＡＤによって分析した。生成物同定は、標準試料との比較により行なった。２′−デオキシウリジンを量的収率（＞９９％）で得た。
【００７７】
比較例４：２′−デオキシウリジン５′−一リン酸への２′−デオキシシチジン５′−一リン酸の脱アミノ化
ｐＨ  ７．０のリン酸緩衝液１００ｍＭ中、２′−デオキシシチジン５′−一リン酸（４９５μＬ）の１００ｍＭ溶液を、リン酸緩衝液中＞３００ＡＵを含有するシチジンデアミナーゼ酵素溶液５０μＬと混合した。反応を、５分間３７℃で行ない、ＨＣｌで停止させた。その後、粗反応物を１０ＫＤａ膜で濾過し、一部を希釈してＨＰＬＣ−ＵＶ−ＤＡＤによって分析した。予想していた２′−デオキシウリジン５′−一リン酸生成物は、標準試料との比較により、検出されなかった。従って、最終生産物への基質の転換は得られなかった（０％）。
【００７８】
比較例５：ウリジン５′−三リン酸へのシチジン  ５′−三リン酸の脱アミノ化
ｐＨ  ７のリン酸緩衝液１００ｍＭ中、シチジン  ５′−三リン酸（４９５μＬ）の１００ｍＭ溶液を、リン酸緩衝液中＞３００ＡＵを含有するシチジンデアミナーゼ酵素溶液５０μＬと混合した。反応を、５分間３７℃で行ない、ＨＣｌで停止させた。その後、粗反応物を１０ＫＤａ膜で濾過し、一部を希釈してＨＰＬＣ−ＵＶ−ＤＡＤによって分析した。予想していたウリジン５′−三リン酸生成物は、標準試料との比較により、検出されなかった。従って、最終生産物への基質の転換は得られなかった（０％）。
【００７９】
比較例６：ウリジンアラビノシドへのシタラビン（シトシンアラビノシド）の脱アミノ化
ｐＨ７のリン酸緩衝液１００ｍＭ中、シタラビン（４９５μＬ）の１００ｍＭ溶液を、リン酸緩衝液中＞３００ＡＵを含有するシチジンデアミナーゼ酵素溶液５０μＬと混合した。反応を、５分間３７℃で行ない、ＨＣｌで停止させた。その後、粗反応物を１０ＫＤａ膜で濾過し、一部を希釈してＨＰＬＣ−ＵＶ−ＤＡＤによって分析した。予想していたウリジンアラビノシドは、標準試料との比較により同定され、量的収率（＞９９％）で形成された。
【００８０】
比較例７：ウリジンアラビノシド５′−一リン酸へのシタラビン５′−一リン酸（シトシンアラビノシド５′−一リン酸）の脱アミノ化
ｐＨ  ７のリン酸緩衝液１００ｍＭ中、シタラビン５′−一リン酸（４９５μＬ）の１００ｍＭ溶液を、リン酸緩衝液中＞３００ＡＵを含有するシチジンデアミナーゼ酵素溶液５０μＬと混合した。反応を、５分間３７℃で行ない、ＨＣｌで停止させた。その後、粗反応物を１０ＫＤａ膜で濾過し、一部を希釈してＨＰＬＣ−ＵＶ−ＤＡＤによって分析した。予想していた生成物は検出されなかった。最終生産物への基質の転換は得られなかった（０％）。
【００８１】
比較例８：ウリジンアラビノシドへのゲムシタビン（化合物２）の脱アミノ化
ｐＨ７のリン酸緩衝液１００ｍＭ中、ゲムシタビン（４９５μＬ）の７０ｍＭ溶液を、リン酸緩衝液中＞３００ＡＵを含有するシチジンデアミナーゼ酵素溶液５０μＬと混合した。反応を、５分間３７℃で行ない、ＨＣｌで停止させた。その後、粗反応物を１０ＫＤａ膜で濾過し、一部を希釈してＵＶ−ＤＡＤ（紫外線−ダイオードアレイ検出）下でＨＰＬＣによって分析した。予想していた生成物を、量的収率（粗製反応物から＞９９％）で得た。
【００８２】
例９：（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル塩酸塩（化合物１０）の調製
−工程１：シチジン（化合物１）を保護して２′，３′−保護されたシチジン（化合物８）を得る：
【化１２】
2018509165.tif 000016
還流凝縮器を備えた１００ｍＬ丸底フラスコに、乾燥アセトン（４４ｍＬ）中で懸濁させたシチジン（４．４１ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）を添加した。撹拌した懸濁液に、活性化した４Å分子篩およびＨ２ＳＯ４９８％（０．１４５ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ、０．１５当量）を添加した。懸濁液を５０℃で撹拌し続けた。１６時間後、室温（ｒ．ｔ）にてＮａＨＣＯ３（２ｇ）を添加し、混合物を０．５時間撹拌した。その後、粗混合物を真空濾過した。得られた固体を、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＨ  １／１（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相を合わせ、蒸発させて２′，３′−保護されたシチジンを（化合物８、１．３３ｇ、２５．８％）、白色固形物として得た。
1H-NMR (δ, ppm): 8.19 - 8.32 (m, 1 H), 6.21 (dd, J=8.07, 2.93 Hz, 1 H), 5.93 (s, 1 H), 4.95 - 5.14 (m, 1 H), 4.88 (dd, J=6.24, 2.57 Hz, 1 H), 4.38 (d, J=2.93 Hz, 1 H), 3.66 - 3.83 (m, 2 H), 1.36 - 1.75 (m, 6 H)．
【００８３】
−工程２：（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物４）の調製：
【化１３】
2018509165.tif 000017
５０ｍＬの３つ口丸底フラスコに、不活性雰囲気の下で、乾燥ＤＣＭ（８ｍＬ）中に溶解させた４−ニトロフェニルホスホロジクロリデート（０．５ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を添加した。撹拌している溶液に、−７８℃で、乾燥ＤＣＭ（３ｍＬ）中、フェノール含有溶液（０．１８４ｇ、１．９５ｍｍｏｌ、１当量）、トリエチルアミン（０．３０ｍＬ、２．１４ｍｍｏｌ、１．１当量）を含有する溶液を添加した。溶液を−７８℃で２０分間撹拌し、次いで、不活性雰囲気下で、かつ０℃にて、乾燥ＤＣＭ（５．５ｍＬ）中Ｌ−ロイシンメチルエステル塩酸塩（０．３５５ｇ、１．９５ｍｍｏｌ、１当量）を含有する１００ｍＬの３つ口丸底フラスコにカニューレを介して移した。０℃で２時間撹拌した後、反応物を室温に到達させ、さらに１６時間撹拌した。粗反応物をＳｉＯ２上で、溶媒としてヘキサン／ＡｃＯＥｔ１／１を使用して、カラムクロマトグラフィーによって精製した。５０９ｍｇの（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（収率６２％）を帯黄色油状物として得た。
1H-NMR (δ, ppm): 8.29 (m, 2 H), 7.43 (m, 4 H), 7.26 (m, 3 H), 3.97 (m, 1 H), 3.60 (s, 3 H), 3.35 (m, 1 H), 1.55 (m, 3 H), 0.84 (m, 6 H).
【００８４】
−工程３：化合物８を化合物４と結合させて、（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物９）を得る：
【化１４】
2018509165.tif 000018
２５ｍＬ丸底フラスコに、不活性雰囲気下で、乾燥ＴＨＦ／ＤＭＦ（１．５／１ｍＬ）中に溶解させた４−アミノ−１−（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン（５０ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ）を添加した。撹拌した溶液に、室温で、１Ｍ塩化ｔｅｒｔ−ブチルマグネシウム（０．２６５ｍＬ、０．２６５ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、白色固形物を生成した。３０分後、乾燥ＴＨＦ（１ｍＬ）中に溶解させた（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（９７ｍｇ、０．２２９、１．３当量）を添加し、帯黄色懸濁液を形成した。１６時間後に、溶媒は蒸発し、租生成物をＳｉＯ２上で溶媒としてＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ  ９／１を使用して、カラムクロマトグラフィーによって精製した。４９ｍｇの（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（４９％の産出）を帯黄色半固形物として得た。
1H-NMR (δ, ppm): 7.62 (dd, J = 16.1, 7.3 Hz, 1 H), 7.35 (t, J = 7.7 Hz, 2 H), 7.21 (m, 3 H), 5.84 (m, 2 H), 4.33 (m, 3 H), 3.87 (m, 1 H), 3.67 (s, 3 H), 2.65 (m, 2 H), 1.54 (s, 6 H), 1.35 (m, 3 H), 0.87 (m, 6 H).
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =589
【００８５】
−工程４：化合物９を脱保護して化合物１０を得る：
【化１５】
2018509165.tif 000019
１０ｍＬ丸底フラスコで、不活性雰囲気下にて、（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（４０ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（０．８ｍＬ）に溶解させた。撹拌している溶液に、室温で、ＨＣｌ  １２Ｎ（４５ｕＬ、３．５ｍｍｏｌ、５０当量）を添加した。４８時間後、溶媒を真空蒸発させた。４０ｍｇ（量的収率）の（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル塩酸塩を帯黄色油状物として得た。
MS(m/z):[M+H]+=527([M+Na]+=549
【００８６】
例１０：（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチルの調製（化合物１２）
−工程１：（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物５）の調製：
【化１６】
2018509165.tif 000020
化合物４に記載された手順に従い、４−ニトロフェニルホスホロジクロリデート（０．５ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）およびＬ−バリンメチルエステル塩酸塩（０．３２７ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を使用して、（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（６５４ｍｇ、収率８１．９％）を無色油状物として得た。
1H-NMR (δ, ppm): 8.28 (d, J = 8.8 Hz, 2 H), 7.46 (dd, J = 8.9, 3.4, 2 H), 7.38 (t, J = 7.6 Hz, 2 H), 7.26 (m, 3 H), 3.75 (dt, J = 10.4, 6.3, 1 H), 3.60 (s, 3 H), 2.02 (m, 1 H), 0.87 (t, J = 7.8 Hz, 6 H).
【００８７】
−工程２：化合物（８）を化合物（５）と結合させて、（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物１１）を得る：
【化１７】
2018509165.tif 000021
化合物９に記載された手順に従い、４−アミノ−１−（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン（５０ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ）および（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（９４ｍｇ、２２９ｍｍｏｌ）を使用して、（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（５５ｍｇ、収率５６％）を得た。
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =575
【００８８】
−工程３：化合物１１を脱保護して（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル塩酸塩を得る（化合物１２）：
【化１８】
2018509165.tif 000022
化合物９に記載された手順に従い、（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（５５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を使用して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル塩酸塩（５０ｍｇ、量的収率）を得た。
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =535
【００８９】
例１１：（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル塩酸塩（化合物１４）の調製：
−工程１：（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物６）の調製：
【化１９】
2018509165.tif 000023
化合物４に記載された手順に従い、４−ニトロフェニルホスホロジクロリデート（１．０ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）およびＬ−アラニンイソプロピルエステル塩酸塩（０．６５５ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）を使用して、（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（１．１１ｇ、収率７０％）を無色油状物として得た。
1H-NMR (δ, ppm): 8.28 (d, J = 8.8 Hz, 2 H), 7.46 (dd, J = 15.8, 8.4, 2 H), 7.39 (m, 2 H), 7.26 (m, 3 H), 4.93 (dt, J = 12.5, 6.2, 1 H), 4.01 (m, 1 H), 1.32 (m, 3 H), 1.19 (t, J = 5.9 Hz, 6 H).
【００９０】
−工程２：化合物（８）を化合物（６）と結合させて、（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物１３）を得る：
【化２０】
2018509165.tif 000024
化合物９に記載された手順に従い、４−アミノ−１−（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）ピリミジン−２（１Ｈ）−オン（５０ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ）および  （（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（９４ｍｇ、０．２２９ｍｍｏｌ）を使用して、（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（５５８ｍｇ、収率５２％）を得た。
1H-NMR (δ, ppm): 7.68 (dd, J = 12.8, 7.7 Hz, 1 H), 7.35 (m, 2 H), 7.21 (m, 3 H), 5.89 (dd, J = 17.6, 7.3 Hz, 1 H), 5.79 (d, J = 9.5 Hz, 1 H), 4.97 (m, 1 H), 4.80 (m, 2 H), 4.36 (m, 3 H), 3.89 (m, 1 H), 1.33 (m, 6 H), 1.31 (m, 7 H).
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =575
【００９１】
−工程３：化合物１３を脱保護して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル塩酸塩（化合物１４）を得る：
【化２１】
2018509165.tif 000025
化合物９に記載された手順に従い、（（（（３ａＲ，４Ｒ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−２，２−ジメチルテトラヒドロフロ［３，４−ｄ］［１，３］ジオキソール−４−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（１１３ｍｇ、０．２０５ｍｍｏｌ）を使用して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル塩酸塩（化合物１４）と（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸メチル塩酸塩（化合物１４−Ｍｅ）との混合物を得た（１１５ｍｇ）。化合物１４−Ｍｅは、ＭｅＯＨ／ＨＣｌ中のエステル交換反応により得られた。
化合物１４：
−ＭＳ−ＥＳＩ（＋）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１３，［Ｍ＋Ｎａ］＋  ＝５３５，［Ｍ＋Ｋ］＋  ＝５５１
−ＭＳ−ＥＳＩ（−）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ−Ｈ］−＝５１１
化合物１４−Ｍｅ：
−ＭＳ−ＥＳＩ（＋）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８５，［Ｍ＋Ｎａ］＋  ＝５０７，［Ｍ＋Ｋ］＋  ＝５２３
−ＭＳ−ＥＳＩ（−）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ−Ｈ］−＝４８３
【００９２】
例１２：（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物１６）の調製：
【化２２】
2018509165.tif 000026
化合物９に記載された手順に従い、ゲムシタビン（化合物（２）、５０ｍｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）および（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物４）（１０１ｍｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）を使用して、（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（６４ｍｇ、収率６１％）を得た。
MS-ESI (+): (m/z): [M+H]+ =547, [M+Na]+ =569, [M+K]+ =585  
【００９３】
例１３：（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物１７）の調製：
【化２３】
2018509165.tif 000027
化合物９に記載された手順に従い、ゲムシタビン（化合物（２）、５０ｍｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）および（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物５、１０１ｍｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）を使用して、（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（６０ｍｇ、収率５９％）を得た。
MS-ESI (+): (m/z): [M+H]+ =533, [M+Na]+ =555, [M+K]+ =571
MS-ESI (-): (m/z): [M-H]- =530.9 
【００９４】
例１４：（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物１８）の調製：
【化２４】
2018509165.tif 000028
化合物９に記載された手順に従い、ゲムシタビン（化合物（２）、５０ｍｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）および（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物６、１０１ｍｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）を使用して、（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（４１ｍｇ、収率３８％）を得た。
MS-ESI (+): (m/z): [M+H]+ =533, [M+Na]+ =555, [M+K]+ =571
【００９５】
例１５：（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１）の調製：
【化２５】
2018509165.tif 000029
化合物９に記載された手順に従い、デシタビン（化合物３、２０ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）および（（４−ニトロフェノキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物５、４７ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）を使用して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１、１０ｍｇ、収率２２．８％）を得た。
同時に、（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−２−（（（（（（Ｓ）−１−メトキシ−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）（フェノキシ）ホスホリル）オキシ）メチル）テトラヒドロフラン−３−イル）オキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２２、２２ｍｇ）を得た。
化合物２１：
−ＭＳ−ＥＳＩ（＋）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋＝５２０，［Ｍ＋Ｋ］＋＝５３６
−ＭＳ−ＥＳＩ（−）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ−Ｈ］−＝４９６
化合物２２：
−ＭＳ−ＥＳＩ（＋）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋＝７８９
【００９６】
例１６：（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物１０）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物１０Ｂ）を得る：
【化２６】
2018509165.tif 000030
ｐＨ  ７．０のＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中、化合物１０（１５０μＬ）の２０ｍＭ溶液を、３７℃で９０ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液１５μＬと混合した。５時間後、反応をＨＣｌで停止させ、反応物の一部を希釈し、濾過し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。ＨＰＬＣ分析によれば、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物１０Ｂ）が、粗混合物から＞７０％の収率で得られた。MS-ESI (+): (m/z): [M+H]+=528, [M+Na]+ =550, [M+K]+ =567
MS-ESI (-): (m/z): [M-H]-=526
【００９７】
例１７：（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物１２）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物１２Ｂ）を得る：
【化２７】
2018509165.tif 000031
例１６に記載された手順に従い、ｐＨ７．０のＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の２０ｍＭ溶液１５０μＬである化合物１２を、３７℃で９０ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液１５μＬを使用して脱アミノ化させた。５時間後、反応を１５０μＬのＭｅＯＨで停止させた。反応物のアリコートを希釈し、濾過し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物１２Ｂ）を、収率＞７０％  （粗反応物のＨＰＬＣ分析）で得た。
【００９８】
例１８：イソプロピル（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸塩酸塩（化合物１４）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物１４Ｂ）を得る：
【化２８】
2018509165.tif 000032
例１６に記載された手順に従い、ｐＨ７．０のＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の２０ｍＭ溶液１５０μＬである化合物１４を、３７℃で９０ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液１５μＬを使用して脱アミノ化させた。５時間後、反応を１５０μＬのＭｅＯＨで停止させ、反応物の一部を希釈し、濾過し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。粗反応物のＨＰＬＣ解析によれば、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物１４Ｂ）が、定量的に得られた。
−ＭＳ−ＥＳＩ（＋）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｎａ］＋＝５３６，［Ｍ＋Ｋ］＋＝５５２
−ＭＳ−ＥＳＩ（−）：（ｍ／ｚ）：［Ｍ−Ｈ］−＝５１２
【００９９】
例１９：（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸メチル塩酸塩（化合物１４−Ｍｅ）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸メチル（化合物１４Ｂ−Ｍｅ）を得る：
【化２９】
2018509165.tif 000033
例１６に記載された手順に従い、ｐＨ７．０のＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の２０ｍＭ溶液１５０μＬ中で、３７℃にて９０ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液１５μＬを使用して、化合物１４−Ｍｅに対して脱アミノ化方法を実施した。５時間後、反応を１５０μＬのＭｅＯＨで停止させ、反応物の一部を希釈し、濾過し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。精製前に、（（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸メチル（化合物１４−ＢＭｅ）を収率＞８０％で得た。
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =508, [M+K]+ =524
MS-ESI (-): (m/z): [M-H]- =484
【０１００】
例２０：（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物１６）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物１６Ｂ）を得る：
【化３０】
2018509165.tif 000034
前の例に記載された手順に従い、ｐＨ７．０のＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の１００ｍＭ溶液２５０μＬ中で、３７℃にて、１５０ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液２５μＬを使用して、化合物１６に対して脱アミノ化方法を実施した。５時間後、反応をＨＣｌで停止させ、反応物の一部を希釈し、濾過し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。  （（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−ロイシン酸メチル（化合物１６Ｂ）を定量的に得た。
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =570, [M+K]+ =586
MS-ESI (-): (m/z): [M-H]- = 546
【０１０１】
例２１：（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物１７）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物１７Ｂ）を得る：
【化３１】
2018509165.tif 000035
前の例に記載された手順に従い、ｐＨ７．０のＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の１００ｍＭ溶液４００μＬ中で、３７℃にて、２４０ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液４０μＬを使用して、化合物１７に対して脱アミノ化方法を実施した。５時間後、反応をＨＣｌで停止させ、反応物の一部を希釈し、濾過し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物１７Ｂ）を量的収率で得た（粗混合物のＨＰＬＣ分析によれば）。
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =556, [M+K]+ =572
MS-ESI (-): (m/z): [M-H] -= 532
【０１０２】
例２２：（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物１８）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物１８Ｂ）を得る：
【化３２】
2018509165.tif 000036
前の例に記載された手順に従い、ｐＨ７．０のＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の１００ｍＭ溶液６０μＬ中で、３７℃にて、３６ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液６μＬを使用して、化合物１８に対して脱アミノ化方法を実施した。５時間後、反応をＨＣｌで停止させ、反応物の一部を希釈し、濾過し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。（（（（２Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジン−１（２Ｈ）−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−アラニン酸イソプロピル（化合物１８Ｂ）を量的収率で得た。
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =556, [M+K]+ =572
MS-ESI (-): (m/z): [M-H]- = 532
【０１０３】
例２３：（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（２、４−ジオキソ−３、４−ジヒドロ−１、３、５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）（メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１Ｂ）を得る：
【化３３】
2018509165.tif 000037
前の例に記載された手順に従い、ｐＨ６で、３７℃にて、ＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の１３ｍＭ溶液１００μＬおよび６６ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液１１μＬを使用して、化合物２１に対して脱アミノ化方法を実施した。２４時間後、反応をＭｅＯＨで停止させ、反応物の一部を濾過し、希釈し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１Ｂ）を収率９０％（ＨＰＬＣ分析によれば）超で得て、それを、そのＭＳスペクトルおよび特有のイオンフラグメンテーションに従い、ｉｎ  ｓｉｔｕで（２Ｒ、３Ｓ、５Ｒ）（−５−（３−カルバモイルウレイド）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１Ｄ）にさらに加水分解した。化合物２１Ｄ：
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =511, [M+K]+ =527
【０１０４】
例２４：（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１）の、（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｄ−バリン酸メチル（化合物２１Ｂ）への脱アミノ化
【化３４】
2018509165.tif 000038
前の例に記載された手順に従い、ｐＨ７で、３７℃にて、ＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の１３ｍＭ溶液１００μＬおよび６６ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液１１μＬを使用して、化合物２１に対して脱アミノ化方法を実施した。２４時間後、反応をＭｅＯＨで停止させ、反応物の一部を濾過し、希釈し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。化合物２１は、定量的に（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１Ｂ）へと進化し、それらはそのＭＳスペクトルおよび特有のイオンフラグメンテーションに従い、ｉｎ  ｓｉｔｕで（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイルウレイド）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１Ｄ）にさらに加水分解した。化合物２１Ｄ：
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =511, [M+K]+ =527
【０１０５】
例２５：（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１）を脱アミノ化して、（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（２、４−ジオキソ−３、４−ジヒドロ−１、３、５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１Ｂ）を得る：
【化３５】
2018509165.tif 000039
前の例に記載された手順に従い、ｐＨ８で、３７℃にて、ＫＨ２ＰＯ４１００ｍＭ中の１３ｍＭ溶液１００μＬおよび６６ＡＵを含有しているシチジンデアミナーゼ溶液１１μＬを使用して、化合物２１に対して脱アミノ化方法を実施した。２４時間後、反応をＭｅＯＨで停止させ、反応物の一部を濾過し、希釈し、ＨＰＬＣおよびＭＳ分析を行った。化合物２１は、定量的に（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−１，３，５−トリアジン−１（２Ｈ）−イル）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１Ｂ）へと進化し、それらはそのＭＳスペクトルおよび特有のイオンフラグメンテーションに従い、ｉｎ  ｓｉｔｕで（（（（２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ）−５−（３−カルバモイルウレイド）−３−ヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）メトキシ）（フェノキシ）ホスホリル）−Ｌ−バリン酸メチル（化合物２１Ｄ）にさらに加水分解した。化合物２１Ｄ：
MS-ESI (+): (m/z): [M+Na]+ =511, [M+K]+ =527
【０１０６】
比較例で実証されたように、シチジンデアミナーゼを使用するヌクレオシドの脱アミノ化は、ＯＨ−５′で置換していないシトシン系ヌクレオシドが、シチジンデアミナーゼにとって天然基質であることに起因して、量的転換および収率（シチジン（比較例１）、２′−デオキシシチジン（比較例３）、シタラビン（比較例６）およびゲムシタビン（比較例８）を参照）で生じる。
【０１０７】
その一方で、ＯＨ−５′でリン酸塩置換を有する分子はシチジンデアミナーゼによって認識されないため、基質が、対応するヌクレオチド（シチジン５′−一リン酸（比較例２）、２′−デオキシシチジン５′−一リン酸（比較例４）、シチジン５′−三リン酸（比較例５）およびシタラビン５′−一リン酸（比較例７）である場合、予想されていたように、変換は得られない。
【０１０８】
しかしながら、発明者らは、驚くべきことに、ＯＨ−５′でのヌクレオシドの官能価が、天然ヌクレオシドを除き、バルク状に置換された有機リン酸ヌクレオシドの形態である場合、脱アミノ化反応は、天然のＯＨ−５′置換されていないヌクレオシド中で得られるようなものと類似の転換および収率で行われることを見出した（ゲムシタビン（比較例８）およびそれぞれ例２０、２１および２２中のそのバルク状に置換された有機リン酸誘導体化合物で観察されたとおり）。これは、文献で報告された事から離れる教示であり、その理由としては、何人かの著者が、バルク状置換基を組込むヌクレオシド系基質は、シトシンデアミナーゼ酵素の活性部位にはまりにくいことを示し、場合によっては、それらはこの種の酵素の阻害剤でさえあることを開示してきたからである。従って、本発明は、式ＩＩの化合物の生体触媒脱アミノ化による、式Ｉのような化合物の非常に効率的な合成方法および生産方法に寄与するものである。
【０１０９】
本発明は、本出願の出願日時点でのシチジンデアミナーゼ酵素の使用に基づいた方法により例証されるが、本明細書が、本明細書に開示された方法のためのヌクレオシドデアミナーゼ酵素の使用について先行技術に寄与するものであり、その例は、以降に提供され得るものであることに留意すべきである。
【国際調査報告】
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2018509165.tif 000057
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