(57)【要約】本発明は、とりわけ、アンギオテンシン（１−７）ペプチドを、表皮水疱症に罹患している対象に投与することを含む、表皮水疱症を処置する方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、アンギオテンシン（１−７）ペプチドを、表皮水疱症の１つ以上の合併症に罹患している対象に投与することを含む、表皮水疱症の合併症を処置する方法も提供し、投与は、表皮水疱症の１つ以上の合併症の少なくとも１つの症状または特徴の強度、重症度、持続時間、または頻度の低減をもたらす。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
表皮水疱症を処置する方法であって、
アンギオテンシン（１−７）ペプチドを表皮水疱症に罹患している対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
前記投与が、非経口、経直腸、経口、またはそれらの組み合わせである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記非経口投与が、静脈内、皮下、吸入、皮内、経皮、及び／または経粘膜投与である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記表皮水疱症が、単純型表皮水疱症（ＥＢＳ）、接合部型表皮水疱症（ＪＥＢ）、栄養障害型表皮水疱症（ＤＥＢ）、後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）、及びそれらの組み合わせのうちの１つ以上である、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
表皮水疱症の少なくとも１つの症状または特徴が強度、重症度、持続時間、若しくは頻度において低減されるか、または発症を遅延させるような投与間隔で、前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、定期的に有効な用量で投与される、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記表皮水疱症の１つ以上の合併症が、感染、敗血症、変形、栄養失調症及び貧血、脱水、便秘、眼障害、ならびに皮膚癌から選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、１日１回投与される、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、週１回投与される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、月３回投与される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、月２回投与される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、月１回投与される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、約１〜１，０００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効な用量で投与される、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、約５０〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効な用量で投与される、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、約１〜６０μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効な用量で投与される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）の天然に存在するアンギオテンシン（１−７）アミノ酸配列を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、配列番号１の機能的同等物である、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記機能的同等物が、線状ペプチドである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記線状ペプチドが、前記天然に存在するアンギオテンシン（１−７）に現れる前記７個のアミノ酸から少なくとも４個のアミノ酸を含む配列を含み、前記少なくとも４個のアミノ酸が、それらが前記天然に存在するアンギオテンシン（１−７）に現れるような相対位置を維持する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記線状ペプチドが、４〜２５個のアミノ酸を含有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記線状ペプチドが、前記天然に存在するアンギオテンシン（１−７）のフラグメントである、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
前記線状ペプチドが、前記天然に存在するアンギオテンシン（１−７）におけるアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を含有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
前記線状ペプチドが、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）のアミノ酸配列を有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２３】
前記線状ペプチドが、Ａｌａ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号３）のアミノ酸配列を有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２４】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、プロテアーゼ耐性、血清安定性、及び／または生物学的利用能を増加させる１つ以上の化学修飾を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記１つ以上の化学修飾が、ＰＥＧ化を含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記アンギオテンシン（１−７）ペプチドが、非ペプチド性アンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストである、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記非ペプチド性アンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストが、次の構造：
【化９】
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を有する化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項２６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年１０月１４日に出願された米国仮特許出願第６２／２４１，４８５号に対する優先権を主張するものであり、この開示は、全体として本明細書で参照により組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
表皮水疱症（ＥＢ）は部分的には、明らかな原因がない場合でも、非常に軽微な外傷後に水疱が形成されることを特徴とする遺伝性の結合組織障害の群を指す。正確な有病率は不明であるが、ＥＢは、およそ１／５０，０００の罹患率で存在すると推定される。ＥＢの遺伝的基礎は、非常に複雑であり、３００を超える遺伝子変異がこの疾患に関与していると思われる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明は、とりわけ、限定されないが、単純型表皮水疱症（ＥＢＳ）、接合部型表皮水疱症（ＪＥＢ）、栄養障害型表皮水疱症（ＤＥＢ）、後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）、及びそれらの組み合わせを含む表皮水疱症を処置するための方法及び組成物を提供する。表皮水疱症を処置する方法は、表皮水疱症に罹患している対象にアンギオテンシン（１−７）ペプチドを投与することを含む。
【０００４】
本発明は、一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドを、表皮水疱症の１つ以上の合併症に罹患している対象に投与することを含む、表皮水疱症の合併症を処置する方法も提供し、投与は、表皮水疱症の１つ以上の合併症の少なくとも１つの徴候、症状、または特徴の強度、重症度、持続時間、または頻度の低減をもたらす。一部の実施形態では、表皮水疱症の１つ以上の合併症は、感染、敗血症、変形、栄養失調症及び貧血、脱水、便秘、眼障害、ならびに皮膚癌から選択される。
【０００５】
種々の実施形態は、任意の医学的に適切な経路を介して投与されてもよい。一部の実施形態では、投与は、非経口、経口、または直腸内投与による。一部の実施形態では、非経口投与は、静脈内、皮下、吸入、皮内、経皮、及び／または経粘膜投与である。
【０００６】
種々のタイプの表皮水疱症及び表皮水疱症関連状態の処置は、種々の実施形態に従って検討される。一部の実施形態では、表皮水疱症は、単純型表皮水疱症（ＥＢＳ）、接合部型表皮水疱症（ＪＥＢ）、栄養障害型表皮水疱症（ＤＥＢ）、後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）、及びそれらの組み合わせのうちの１つ以上である。
【０００７】
一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、表皮水疱症の少なくとも１つの症状または特徴が強度、重症度、持続時間、若しくは頻度において低減されるか、または発症を遅延させるような投与間隔で、定期的に有効な用量で投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、１日１回投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、週１回投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、月３回投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、月２回投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、月１回投与される。
【０００８】
種々の実施形態に従って、様々な用量のいずれかが使用されてもよい。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜１，０００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効な用量で投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、約５０〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効な用量で投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜６０μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効な用量で投与される。
【０００９】
一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）の天然に存在するアンギオテンシン（１−７）アミノ酸配列を含む。
【００１０】
一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、配列番号１の機能的同等物である。一部の実施形態では、機能的同等物は、線状ペプチドである。一部の実施形態では、線状ペプチドは、天然に存在するアンギオテンシン（１−７）に現れる７個のアミノ酸から少なくとも４個のアミノ酸を含む配列を含み、少なくとも４個のアミノ酸は、それらが天然に存在するアンギオテンシン（１−７）に現れるような相対位置を維持する。一部の実施形態では、線状ペプチドは、４〜２５個のアミノ酸を含有する。一部の実施形態では、線状ペプチドは、天然に存在するアンギオテンシン（１−７）のフラグメントである。一部の実施形態では、線状ペプチドは、天然に存在するアンギオテンシン（１−７）におけるアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を含有する。一部の実施形態では、線状ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）のアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、線状ペプチドは、Ａｌａ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号３）のアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、非環状ペプチドである。
【００１１】
一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、プロテアーゼ耐性、血清安定性、及び／または生物学的利用能を増加させる１つ以上の化学修飾を含む。一部の実施形態では、１つ以上の化学修飾は、ＰＥＧ化を含む。
【００１２】
一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、非ペプチド性アンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストである。一部の実施形態では、非ペプチド性アンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、次の構造：
【化１】
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を有する化合物またはその薬学的に許容される塩である。
【００１３】
本出願で使用される場合、「約」及び「およそ」という用語は、同等物として使用される。本明細書の任意の刊行物、特許、または特許出願に対する引用は、本明細書に全体として参照により組み込まれる。約／およそを用いてまたは用いずに、本出願に使用される任意の数字は、当業者により理解される任意の正常の変動を網羅するものである。
【００１４】
本発明の他の特徴、目的、及び利点は、続く発明を実施するための形態において明らかである。しかし、詳細な説明は、本発明の実施形態を示しながら、限定ではなく、単に例示として与えられていることが理解されるべきである。発明を実施するための形態により、本発明の範囲内の種々の変更及び修正は、当業者らに明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１Ａ。劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウスをアンギオテンシン（１−７）ペプチドで４週間処置した。アンギオテンシン（１−７）での処置の前後のＲＤＥＢマウスの右前肢の画像から構成される。ＲＤＥＢマウスは、線維化による経時的な指趾の欠損及び融合を示し、アンギオテンシン（１−７）処置は、この有害な表現型の発現を低減させた。図１Ｂ。劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウスをアンギオテンシン（１−７）ペプチドで４週間処置した。処置前の平均足指長の百分率として、アンギオテンシン（１−７）ペプチド（「Ｔａｒｉｘ」）で４週間、またはビヒクル対照（「ビヒクル」）で処置したＲＤＥＢマウスの平均足指長のグラフである。アンギオテンシン（１−７）処置は、ビヒクル処置対照と比較して、ＲＤＥＢマウスの足指長の減少に有意な低減をもたらした。
【図２】処置前の平均足指長の百分率として、アンギオテンシン（１−７）ペプチド、ロサルタン、またはビヒクル対照のいずれかで４週間処理した劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウスの平均足指長のグラフである。アンギオテンシン（１−７）処置は、ビヒクル処置ＲＤＥＢ対照と比較して、足指長の減少に有意な低減をもたらした。アンギオテンシン（１−７）で観察された結果は、ロサルタンで観察されたものと同様であった。
【図３】マウス前肢のテネイシンＣ免疫染色した凍結切片の画像を示す。同齢の野生型マウス、未処置の劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウス、及びアンギオテンシン（１−７）で４週間処置したＲＤＥＢマウスから、凍結切片を得た。各上段パネルは、マウスの肉球の凍結切片に対応し、各下段パネルは、足指の切片に対応する。テネイシンＣは、無傷の皮膚に低量で存在し、線維化皮膚で増加する。免疫染色した画像は、テネイシンＣが未処置のＲＤＥＢマウス前肢真皮において豊富であることを示す。アンギオテンシン（１−７）処置は、テネイシンＣ染色の量を有意に低下させた。主に、テネイシンＣ染色は、アンギオテンシン（１−７）処置マウスの真皮−表皮接合部のすぐ下で観察された。これは、ＲＤＥＢマウスにおける損傷の初期部位に対応する。細胞を、４′，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）で対比染色した。スケールバーは、２００μｍに対応する。
【図４】抗テネイシンＣ抗体で免疫染色したマウス前肢の凍結切片画像の蛍光強度の定量化を示すグラフである。同齢の野生型マウス、未処置の劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウス、及びアンギオテンシン（１−７）で４週間処置したＲＤＥＢマウスから、凍結切片を得た。各バーは、平均値に対応し、エラーバーは、標準誤差（ＳＥＭ）に対応する。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、未処置対照と比較して、テネイシンＣ免疫染色において有意な低減を示した（＊＊＊Ｐ＜０．００１）。
【図５】マウス前肢のα−ＳＭＡ（上段パネル）、フィブロネクチン（中段パネル）、及びＣＤ１１ｂ（下段パネル）を免疫染色した凍結切片の画像を示す。同齢の野生型マウス、未処置の劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウス、及びアンギオテンシン（１−７）で４週間処置したＲＤＥＢマウスから、凍結切片を得た。アンギオテンシン（１−７）処置は、ＲＤＥＢマウス前肢真皮における、α−ＳＭＡ陽性筋線維芽細胞数、真皮フィブロネクチン発現（真皮線維症の指標）、ならびにＣＤ１１ｂ陽性炎症性白血球（好中球及びマクロファージ）の数を低減させた。細胞を４′，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）で対比染色した。
【図６】マウス前肢の免疫染色した凍結切片の画像における１ｍｍ２当たりのＣＤ１１ｂ陽性細胞の定量を示すグラフである。同齢の野生型マウス、未処置の劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウス、及びアンギオテンシン（１−７）で４週間処置したＲＤＥＢマウスから、凍結切片を得た。ＣＤ１１ｂは、好中球及びマクロファージを染色する。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、未処置対照と比較して、ＣＤ１１ｂ陽性細胞密度の低減を示した。各バーは、平均値に対応し、エラーバーは、標準誤差（ＳＥＭ）に対応する。
【図７】マウス前肢の全タンパク質溶解物のテネイシンＣ、トロンボスポンジン１、ｐＳＭＡＤ２／３、ガレクチン３、及びβ−チューブリンウェスタンブロットを示す。同齢の野生型マウス、未処置の劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウス、及びアンギオテンシン（１−７）で４週間処置したＲＤＥＢマウスから、試料を得た。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、未処置対照と比較して、テネイシンＣの低減を示した。これは、アンギオテンシン（１−７）が真皮線維症を低減させたことを示唆する。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、未処置対照と比較して、低減した量のＴＧＦβ活性化トロンボスポンジン１及び低減した量のリン酸化ＳＭＡＤ２／３（ｐＳＭＡＤ２／３）を示した。これは、アンギオテンシン（１−７）がＴＧＦβ媒介シグナル伝達を下方調節したことを示唆する。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、未処置対照と比較して、ガレクチン３の低減を示し、これは、アンギオテンシン（１−７）が線維化前の（ｐｒｏ−ｆｉｂｒｏｔｉｃ）炎症を緩和したことを示唆する。
【図８】テネイシンＣ、トロンボスポンジン１、ｐＳＭＡＤ２／３、及びガレクチン３に対する抗体で免疫染色したウェスタンブロットバンドの定量を示すグラフである。試料は、同齢の野生型マウス、未処置の劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）マウス、及びアンギオテンシン（１−７）で４週間処置したＲＤＥＢマウスから得たマウス前肢の全タンパク質溶解物で構成される。試料を、β−チューブリンに対して正規化した。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、テネイシンＣの低減を示した。これは、アンギオテンシン（１−７）が真皮線維症を低減させたことを示唆する。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、未処置対照と比較して、低減した量のＴＧＦβ活性化トロンボスポンジン１及び低減した量のリン酸化ＳＭＡＤ２／３（ｐＳＭＡＤ２／３）を示した。これは、アンギオテンシン（１−７）がＴＧＦβ活性を下方調節したことを示唆する。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、ガレクチン３の低減を示した。これは、アンギオテンシン（１−７）が線維化前の炎症を緩和したことを示唆する。各バーは、平均値に対応し、エラーバーは、標準誤差（ＳＥＭ）に対応する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
定義
本発明がより容易に理解されるために、まず、特定の用語が以下に定義される。次の用語及び他の用語のさらなる定義は、明細書全体にわたって記載される。
【００１７】
動物：
本明細書で使用される場合、「動物」という用語は、動物界の任意のメンバーを指す。一部の実施形態では、開発の任意の段階での「動物」は、ヒトを指す。一部の実施形態では、開発の任意の段階での「動物」は、非ヒト動物を指す。特定の実施形態では、非ヒト動物は、哺乳動物（例えば、齧歯動物、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類、及び／またはブタ）である。一部の実施形態では、動物は、哺乳動物、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、昆虫、及び／または蠕虫を含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作された動物、及び／またはクローンであってよい。
【００１８】
およそまたは約：
本明細書で使用される場合、１つ以上の目的の値に適用される「およそ」または「約」という用語は、所定の参照値に類似している値を指す。特定の実施形態では、「およそ」または「約」という用語は、別途記載のない限りまたは別途文脈から明らかでない限り、所定の参照値のいずれかの方向（より大きいまたはより小さい）に、２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％以下に入る値の範囲を指す（このような数が可能な値の１００％を超える場合を除く）。
【００１９】
生物学的に活性な：
本明細書で使用される場合、「生物学的に活性な」という語句は、生物系、特に、生体における活性を有する任意の薬剤の特徴を指す。例えば、生物に投与される時に、その生物に対して生物学的効果を有する薬剤は、生物学的に活性であると考えられる。特定の実施形態では、ペプチドが生物学的に活性である場合、ペプチドの少なくとも１つの生物学的活性を共有するペプチドの部分は通常は、「生物学的に活性な」部分と称される。特定の実施形態では、ペプチドは、固有の生物学的活性を有さないが、１つ以上の天然に存在するアンギオテンシン化合物の効果を阻害するものは、生物学的に活性であると考えられている。
【００２０】
担体または賦形剤：
本明細書で使用される場合、「担体」及び「賦形剤」という用語は、医薬製剤の調製に有用な薬学的に許容される（例えば、ヒトへの投与のための安全かつ非毒性である）担体または希釈物質を指す。例示的賦形剤は、滅菌水、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、ｐＨ緩衝液（例えば、リン酸緩衝食塩水）、滅菌生理食塩水、リンガー液、またはデキストロース溶液を含む。
【００２１】
合併症：
本明細書で使用される場合、「合併症」という用語は、１つ以上の徴候、症状、または一部の実施形態では、持続的な期間（例えば、週、月、または年）現れるさらに新しい病理学的変化の発症を含む、疾患の好ましくない進展を指す。一部の実施形態では、合併症（複数可）は、徴候、症状、または他の病理学的変化の進行、例えば、経時的に悪化する軽度の記憶喪失、または麻痺に進行する１つ以上の運動機能障害、を含んでもよい。
【００２２】
剤形：
本明細書で使用される場合、「剤形」及び「単位剤形」という用語は、処置されるべき患者のための治療薬の物理的に別個の単位を指す。各ユニットは、所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性物質を含有する。しかし、組成物の総投薬量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医により決定されると理解されるであろう。
【００２３】
用法：
「用法」（または「治療レジメン」）は、この用語が本明細書で使用される場合、通常は期間により隔てられている、対象に個別に投与される単位用量のセット（通常は複数）である。一部の実施形態では、所与の治療薬（例えば、アンギオテンシン（１−７）ペプチド）は、１回以上の用量を含み得る、推奨される用法を有する。一部の実施形態では、用法は、それぞれが同じ長さの期間により互いに隔てられている複数の用量を含み；一部の実施形態では、用法は、複数の用量及び個別の用量を隔てる少なくとも２つの異なる期間を含む。一部の実施形態では、治療薬は、所定の期間にわたって連続的に投与される。一部の実施形態では、治療薬は、１日１回（ＱＤ）または１日２回（ＢＩＤ）投与される。
【００２４】
機能的同等物または誘導体：
本明細書で使用される場合、「機能的同等物」または「機能的誘導体」という用語は、アミノ酸配列の機能的誘導体の文脈で、元の配列のものと実質的に類似する生物学的活性（機能または構造のいずれか）を保持する分子を表す。機能的誘導体または同等物は、天然誘導体であり得るか、または合成的に調製される。例示的な機能的誘導体は、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、または付加を有するアミノ酸配列を含む。但し、タンパク質の生物活性は保存される。置換アミノ酸は望ましくは、置換アミノ酸のものに類似する化学−物理的性質を有する。望ましい類似の化学−物理的性質としては、電荷の類似性、嵩高さ、疎水性、親水性などが挙げられる。
【００２５】
改善、増加、または低減：
本明細書で使用される場合、「改善する」、「増加させる」、若しくは「低減させる」という用語、または文法的な同義語は、ベースライン測定値、例えば、本明細書に記載の処置を開始する前の同じ個体の測定値または本明細書に記載の処置がない状態での対照対象（若しくは複数の対照対象）の測定値に関連する値を示す。「対照対象」は、処置される対象と同じ型の疾患を罹患している対象であり、これは、処置される対象とほぼ同じ年齢である。
【００２６】
インビトロ：
本明細書で使用される場合、「インビトロ」という用語は、多細胞生体内ではなく、人工環境、例えば、試験管または反応容器、細胞培養などにおいて起こる事象を指す。
【００２７】
インビボ：
本明細書で使用される場合、「インビボ」という用語は、ヒト及び非ヒト動物などの多細胞生体内で起こる事象を指す。細胞ベースのシステムの文脈で、用語は、（例えば、インビトロシステムとは対照的に）生きた細胞内で起こる事象を指すために使用されてもよい。
【００２８】
単離：
本明細書で使用される場合、「単離された」という用語は、（１）（自然設定及び／または実験的設定に関わらず）最初に生成された場合に関連した構成成分の少なくとも一部から分離されており、かつ／または（２）人の手により生成、調製、及び／若しくは製造されている物質及び／若しくは実体を指す。単離された物質及び／または実体は、最初に関連した他の構成成分の少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、約９８％、約９９％、実質的に１００％、または１００％から分離され得る。一部の実施形態では、単離された薬剤は、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、実質的に１００％、または１００％を超える純度である。本明細書で使用される場合、物質は、実質的に他の構成成分を含まない場合、「純粋」である。本明細書で使用される場合、「単離細胞」という用語は、多細胞生体に含有されない細胞を指す。
【００２９】
予防：
本明細書で使用される場合、「予防する」または「予防」という用語は、疾患、障害、及び／または状態の発生に関連して使用される場合、疾患、障害、及び／または状態を発症するリスクを低減させることを指す。「リスク」の定義を参照のこと。
【００３０】
ポリペプチド：
本明細書で使用される「ポリペプチド」という用語は、ペプチド結合を介して一緒に連結されたアミノ酸の連続鎖を指す。用語は、任意の長さのアミノ酸鎖を指すために使用されるが、用語が長い鎖に限定されず、ペプチド結合を介して一緒に連結された２個のアミノ酸を含む最小鎖を指すことができることを、当業者は理解するであろう。当業者らに知られているように、ポリペプチドは、処理及び／または修飾されてもよい。
【００３１】
タンパク質：
本明細書で使用される「タンパク質」という用語は、別個の単位として機能する１つ以上のポリペプチドを指す。単一のポリペプチドが別個の機能ユニットであり、別個の機能ユニットを形成するために他のポリペプチドとの永続的または一時的な物理的会合を必要としない場合、「ポリペプチド」及び「タンパク質」という用語は、互換的に使用されてもよい。別個の機能ユニットが互いに物理的に会合する複数のポリペプチドからなる場合、「タンパク質」という用語は、物理的に結合され、かつ別個のユニットとして一緒に機能する複数のポリペプチドを指す。
【００３２】
リスク：
文脈から理解されるように、疾患、障害、及び／または状態の「リスク」は、特定の個体が疾患、障害、及び／または状態（例えば、表皮水疱症）を発症する可能性を含む。一部の実施形態では、リスクは、百分率として表される。一部の実施形態では、リスクは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０から１００％までである。一部の実施形態では、リスクは、参照試料または参照試料の群に関連するリスクと比較したリスクとして表される。一部の実施形態では、参照試料または参照試料の群は、疾患、障害、状態及び／または事象（例えば、表皮水疱症）の既知のリスクを有する。一部の実施形態では、参照試料または参照試料の群は、特定の個体と同等の個体由来のものである。一部の実施形態では、相対リスクは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上である。
【００３３】
徴候：
本明細書で使用される場合、「徴候」という用語は、（症状とは対照的に、以下を参照のこと）患者以外の人が気づく疾患または異常の存在を示す、正常な身体機能からの逸脱を指す。
【００３４】
安定性：
本明細書で使用される場合、「安定な」という用語は、治療薬が、その治療有効性（例えば、その意図された生物学的活性及び／または物理化学的完全性の全てまたは大部分）を長時間にわたって維持する能力を指す。治療薬の安定性、及び医薬組成物がこのような治療薬の安定性を維持する能力は、長期間（例えば、少なくとも１、３、６、１２、１８、２４、３０、３６ヶ月またはそれ以上）にわたって査定されてもよい。特定の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物は、それらと製剤化される１つ以上の治療薬を安定化し、または代わりにそれらの分解を遅延または防止することができるように製剤化されている。製剤の文脈では、安定な製剤は、その中の治療薬が、保存時及びプロセス（例えば、凍結／解凍、機械的混合、及び凍結乾燥）中に物理的及び／または化学的完全性ならびに生物活性を本質的に保持する製剤である。
【００３５】
対象：
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、ヒトまたは任意の非ヒト動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、イノシシ、ヒツジ、ウマ、または霊長類）を指す。ヒトは、出生前及び出生後の形態を含む。多くの実施形態では、対象は、ヒトである。対象は、疾患の診断または処置のために医療提供者を訪れるヒトを指す患者とすることができる。「対象」という用語は、「個体」または「患者」と互換的に本明細書で使用される。対象は、疾患または障害に罹患している可能性があり、または、それらにかかりやすいが、疾患または障害の症状を示しても示さなくてもよい。
【００３６】
実質的に：
本明細書で使用される場合、「実質的に」という用語は、目的の特徴または特性の全体またはほぼ全体の範囲または程度を示す定性的状態を指す。生物学的及び化学的現象が、あるとしても、まれに、完結し、かつ／若しくは完全に進行し、または絶対的な結果を達成し、若しくは回避することを、生物学的技術における当業者は理解するであろう。それ故、「実質的に」という用語は、本明細書では、多くの生物学的かつ化学的現象に固有の完全性の潜在的な欠如を表現するために使用される。
【００３７】
に罹患している：
疾患、障害、及び／または状態「に罹患している」個体は、疾患、障害、及び／または状態と診断されており、またはそれらの１つ以上の症状を示す。
【００３８】
にかかりやすい：
疾患、障害、及び／または状態「にかかりやすい」個体は、疾患、障害、及び／または状態と診断されていない。一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態にかかりやすい個体は、疾患、障害、及び／または状態の症状を示さなくてもよい。一部の実施形態では、疾患、障害、状態、または事象（例えば、表皮水疱症）にかかりやすい個体は、次の：（１）疾患、障害、及び／または状態の発症に関連する遺伝的変異；（２）疾患、障害、及び／または状態の発症に関連する遺伝的多型；（３）疾患、障害、及び／または状態に関連するタンパク質の発現及び／または活性の増加及び／または減少；（４）疾患、障害、状態、及び／または事象の発症に関連する習慣及び／または生活様式（５）移植を受けていること、移植を受ける予定であること、または移植を必要とすること、のうちの１つ以上を特徴とし得る。一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態にかかりやすい個体は、疾患、障害、及び／または状態を発症するであろう。一部の実施形態では、疾患、障害、及び／または状態にかかりやすい個体は、疾患、障害、及び／または状態を発症しないであろう。
【００３９】
症状：
本明細書で使用される場合、「症状」という用語は、対象または患者が気づく疾患または異常の存在を示す、正常な身体機能からの逸脱を指す。
【００４０】
治療的有効量：
本明細書で使用される場合、治療薬の「治療的有効量」という用語は、疾患、障害及び／または状態に罹患しているか、またはそれらにかかりやすい対象に投与された時に、疾患、障害、及び／または状態を処置し、診断し、予防し、かつ／またはそれらの症状（複数可）の発症を遅延させるのに十分な量を意味する。治療的有効量は通常は、少なくとも１つの単位用量を含む用法により投与されることが、当業者らには理解されるであろう。
【００４１】
処置：
本明細書で使用される場合、「処置する」、「処置」、または「処置すること」という用語は、特定の疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の症状または特徴を部分的または完全に緩和し、改善し、軽減し、阻害し、予防し、その発症を遅延させ、その重症度を低減させ、かつ／またはその発生率を低減させるために使用される任意の方法を指す。処置は、疾患に関連する病理を発症するリスクを減少させる目的で、疾患の徴候を示さず、かつ／または疾患の早期徴候のみを示す対象に投与されてもよい。
【００４２】
特定の実施形態の詳細な説明
本発明は、とりわけ、表皮水疱症及び関連状態を処置するための方法及び組成物を提供する。一部の実施形態では、表皮水疱症は、単純型表皮水疱症（ＥＢＳ）、接合部型表皮水疱症（ＪＥＢ）、栄養障害型表皮水疱症（ＤＥＢ）、後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）、及びそれらの組み合わせであってよい。表皮水疱症を処置するための提示された方法は、アンギオテンシン（１−７）ペプチドを、表皮水疱症に罹患している対象に投与することを含む。
【００４３】
本発明の種々の態様は、次のセクションで詳細に記載される。セクションの使用は、本発明を限定するものではない。各セクションは、本発明の任意の態様に適用することができる。本出願では、別途記載のない限り、「または」の使用は、「及び／または」を意味する。
【００４４】
表皮水疱症
表皮水疱症は、最も軽度の外傷に応答して、皮膚に水疱を形成させる希少疾患の群である。表皮水疱症の徴候及び症状は、摩擦による皮膚上の、特に、手及び足上の液体で満たされた水疱、指の爪及び足指の爪の変形または欠損、声帯、食道、及び上部気道を含む内部の水疱形成、手掌及び足の裏の皮膚の肥厚、頭皮水疱形成、瘢痕及び脱毛（瘢痕脱毛症）、薄く見える皮膚（萎縮性瘢痕）、小白色皮膚隆起（ｔｉｎｙ  ｗｈｉｔｅ  ｓｋｉｎ  ｂｕｍｐｓ）またはにきび（稗粒腫）、歯の問題、例えば、エナメルの不完全形成による齲歯、ならびに嚥下困難（嚥下障害）を含む。
【００４５】
表皮水疱症は通常、遺伝性である。研究者らは、欠陥がある場合には、一種の表皮水疱症を引き起こし得る皮膚の形成に関与する１２を超える遺伝子を同定している。皮膚は、外層（表皮）及び下層（真皮）から構成される。層が合わさる領域は、基底膜ゾーンと呼ばれる。異なるタイプの表皮水疱症は、これらの層の水疱が形成される場所により定義される。
【００４６】
表皮水疱症に関連する合併症は、感染、敗血症、変形、栄養失調及び貧血、脱水、便秘、眼障害、皮膚癌、ならびに死亡を含む。
【００４７】
この状態は通常、乳児期または幼児期に現れるが、一部の人々は、思春期または成人初期まで徴候及び症状を発症しない。表皮水疱症は、治療法がないが、軽度の形態は、年齢と共に改善され得る。処置は、感染及び掻痒などの症状に対処すること、ならびに疼痛及び創傷を予防することに焦点を当てる。重度の形態は、重篤な合併症を引き起こすことがあり、致命的である可能性がある。
【００４８】
表皮水疱症の処置は、合併症を予防し、適切な創傷ケアに伴う水疱の疼痛を緩和することを目的とする。状態は多くの場合、処置にも関わらず進行し、重篤な合併症及び死亡を引き起こす場合がある。多くの態様の創傷ケアを対処することは通常、多くの専門にわたるアプローチを必要とする。薬物療法の選択肢は、疼痛及び掻痒を制御するのに役立つ可能性があるもの、敗血症（例えば、抗生物質）などの合併症に対処する薬物療法、ならびに炎症を低減する薬物療法（例えば、コルチコステロイド）を含む。外科的選択肢は、異常動作を矯正する手術（例えば、指若しくは足指の融合または関節の異常屈曲を矯正する手術）、健康食を摂取する能力を改善する手術（例えば、食道の外科的拡張または栄養チューブの設置）、及び皮膚グラフト（例えば、ＯｒＣｅｌ複合型培養皮膚）を含む。リハビリテーション専門職（理学療法士、作業療法士）との取り組みは、皮膚の瘢痕化及び短縮（拘縮）による運動の制限を緩和するのに役立つ可能性がある。リハビリテーション専門職は、毎日の活動に取り組みながら、安全のための最善の手段についての指導をすることもできる。水泳はまた、運動能の維持または回復に役立ち得る。症状を処置及び軽減するための他の可能な処置は、とりわけ、遺伝子治療、骨髄移植、タンパク質補充療法、細胞ベースの療法、及び／またはそれらの組み合わせを含む。
【００４９】
単純型表皮水疱症（ＥＢＳ）
単純型表皮水疱症（ＥＢＳ）は、表皮水疱症の最も一般的な形態である。多くのタイプのＥＢＳがあり、不完全なケラチンタンパク質をもたらす大部分は常染色体優性遺伝子変異により引き起こされる。ケラチンタンパク質は、皮膚のための足場として機能し、この足場が正しく形成されていない時に、皮膚が崩壊して水疱を形成する可能性がより高い。ＥＢＳは、主な２つのタイプ、全身性及び限局性に分けることができる。より汎発性ＥＢＳでは、水疱形成が身体全体で生じる一方、より一般的な限局性ＥＢＳでは、水疱形成は、ほとんどの外傷を受ける領域、通常、手及び足のみに生じる。ＥＢＳでは、皮膚の最上層の繊維状タンパク質（ケラチン）を生成するのに役立つ遺伝子が不完全である。この状態は、表皮の水疱形成を引き起こす。この軽度の表皮水疱症では、水疱は通常、瘢痕にならない。
【００５０】
接合部型表皮水疱症（ＪＥＢ）
接合部型表皮水疱症（ＪＥＢ）は、表皮を基底膜に付着させる糸状の繊維（線維）の形成に役立つタンパク質（コラーゲン１７またはラミニン５）をコードする遺伝子の変異により引き起こされる常染色体劣性状態である。それらがなければ、皮膚は容易に分離し、水疱を引き起こす。多くの種類のＪＥＢがあり、それらの全てが広範囲にわたる水疱形成を引き起こす。ＪＥＢの一部の形態は、患者の年齢が上がるにつれて改善される一方、まれな形態のＪＥＢは、乳児期に致命的である可能性がある。このタイプは通常、重度であり、出生時に明らかになる。この状態の乳児は、継続的な水疱形成及び声帯の瘢痕化により、かすれた響きの泣き声を発し得る。
【００５１】
栄養障害型表皮水疱症（ＤＥＢ）
栄養障害型表皮水疱症（ＤＥＢ）は、コラーゲン７遺伝子の変異により引き起こされ、優性または劣性である可能性がある。コラーゲン遺伝子は、真皮と呼ばれる皮膚のより深い層を、表皮または皮膚の表層に固定するコラーゲン７タンパク質をコードする。個体が異常コラーゲンタンパク質を有する時、皮膚は脆く、容易に分離して水疱を形成する。優性及び劣性形態のＤＥＢの双方が瘢痕化を引き起こす。優性ＤＥＢを有する個体は一般に、皮膚の軽度から中等度の水疱形成を経験するが、口、食道、及び胃腸管のほんの少量の水疱形成を経験する。このタイプは、手または足の変形をほとんど引き起こさない。
【００５２】
劣性形態のＤＥＢは、最も重篤な慢性タイプの表皮水疱症である。水疱形成は、出生時またはその直後に始まる。皮膚の多くは、水疱で覆われており、広範な内部の水疱形成がある。小児は、指及び足指再発性瘢痕により（擬似合指的に（ｐｓｅｕｄｏｓｙｎｄａｃｔｙｌｙ））引き起こされる変形を発症する可能性があり、手及び腕は、硬い場所に固定される（拘縮）。劣性栄養障害型ＥＢを有する小児は、口、食道、及び胃腸管で生じる内部の水疱形成のために、食物を摂取することがひどく困難である。
【００５３】
後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）
後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）は、遺伝性でないまれなタイプの表皮水疱症である。それは、全ての年齢の人々に起こる可能性がある皮膚及び粘膜の慢性自己免疫表皮下水疱形成疾患である。初期の症状は、非常に変化しやすく、水疱性類天疱瘡のものに似ている場合がある。水疱性病変はほとんどの場合、軽度の外傷を受けやすい領域、例えば、肘の側面ならびに手及び足の背側面、にある。治癒は通常、瘢痕、稗粒腫（表在性の表皮封入嚢胞）、及び色素沈着過剰を生じさせる。しかし、ＥＢＡ患者の部分集合は、汎発性炎症性皮膚水疱表現型を有する。免疫学的には、ＥＢＡは、基底膜を真皮構造に結合する固定用線維の主な構成成分であるＶＩＩ型コラーゲンの非コラーゲン（ＮＣ１）ドメインを標的とする（ほとんどの患者の）免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）自己抗体の存在を特徴とする。固定用線維の喪失により、緻密層として知られている領域内の表皮の真下で水疱が形成される。
一部ＥＢＡ患者は、他の健康上の問題、ほとんどの場合、クローン病、全身性エリテマトーデス、アミロイドーシス、多発性骨髄腫、ならびに、まれに、肺癌及びリンパ腫を有することが報告されている。他の患者は皮膚病のみを有する。自己抗体が産生される理由は不明である。
【００５４】
アンギオテンシン（１−７）ペプチド
本明細書で使用される場合、「アンギオテンシン（１−７）ペプチド」という用語は、天然に存在するアンギオテンシン（１−７）と、天然に存在するアンギオテンシン（１−７）の任意の機能的同等物、アナログ、または誘導体との双方を指す。本明細書で使用される場合、「ペプチド」及び「ポリペプチド」という用語は、互換性のある用語であり、ペプチド結合により一緒に結合された２つ以上のアミノ酸を指す。本明細書で使用される場合、「ペプチド」及び「ポリペプチド」という用語は、線状及び環状ペプチドの双方を含む。「アンギオテンシン（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ）−（１−７）」、「アンギオテンシン（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ）−（１−７）」、及び「Ａｎｇ−（１−７）」という用語は、互換的に使用される。
【００５５】
天然に存在するアンギオテンシン（１−７）
天然に存在するアンギオテンシン（１−７）（Ａｎｇ−（１−７）とも称される）は、以下に示される７個のアミノ酸ペプチド：
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）である。
それは、レニン−アンギオテンシン系の一部であり、アンギオテンシノーゲンとしても知られている前駆体から変換され、これは、構成的に産生され、かつ肝臓により主に血行に放出されるα−２グロブリンである。アンギオテンシノーゲンは、セルピンファミリーのメンバーであり、レニン基質としても知られている。ヒトアンギオテンシノーゲンは、４５２アミノ酸長であるが、他の種は、様々なサイズのアンギオテンシノーゲンを有する。通常、最初の１２個のアミノ酸は、アンギオテンシン活性にとって最も重要である：
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９−Ｌｅｕ１０−Ｖａｌ１１−Ｉｌｅ１２（配列番号４）
【００５６】
異なるタイプのアンギオテンシンは、種々の酵素の作用により形成され得る。例えば、アンギオテンシン（１−７）は、アンギオテンシン変換酵素２（ＡＣＥ２）の作用により生成される。
【００５７】
Ａｎｇ−（１−７）は、Ｍａｓ受容体の内因性リガンドである。Ｍａｓ受容体は、７個の膜貫通領域を含有するＧタンパク質共役受容体である。本明細書で使用される場合、「アンギオテンシン（１−７）受容体」という用語は、Ｇタンパク質共役Ｍａｓ受容体を包含する。
【００５８】
本明細書で使用される場合、「天然アンギオテンシン（１−７）」という用語は、天然供給源及び天然に存在するアンギオテンシン（１−７）のものと同一であるアミノ酸配列を有する任意の組換え産生ペプチドまたは化学合成ペプチドから精製された任意のアンギオテンシン（１−７）ペプチドを含む。
【００５９】
Ａｎｇ−（１−７）の機能的同等物、アナログ、または誘導体
一部の実施形態では、本発明に適するアンギオテンシン（１−７）ペプチドは、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的同等物である。本明細書で使用される場合、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的同等物は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）とアミノ酸配列同一性を共有し、かつ天然に存在するＡｎｇ−（１−７）と同じまたは類似の活性を実質的に保持する任意のペプチドを指す。例えば、一部の実施形態では、本明細書に記載の天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的同等物は、本明細書に記載の若しくは当該技術分野で既知の方法を使用して決定されるような血管新生促進活性、または、血管形成に積極的に影響を及ぼす活性、例えば、一酸化窒素放出、血管拡張、内皮機能の改善、抗利尿作用、若しくは本明細書に記載の他の特性のうちの１つを有する。一部の実施形態では、本明細書に記載の天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的同等物は、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の種々のアッセイを使用して決定される場合、アンギオテンシン（１−７）受容体（例えば、Ｇタンパク質共役Ｍａｓ受容体）に結合し、またはそれを活性化することができる。一部の実施形態では、Ａｎｇ−（１−７）の機能的同等物は、アンギオテンシン（１−７）アナログ若しくは誘導体または機能的誘導体とも称される。一部の実施形態では、Ａｎｇ−（１−７）の機能的同等物は、非環状ペプチドである。
【００６０】
通常、アンギオテンシン（１−７）の機能的同等物は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）とアミノ酸配列類似性を共有する。一部の実施形態では、本発明によるＡｎｇ−（１−７）の機能的同等物は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に現れる７個のアミノ酸から少なくとも３個（例えば、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個）のアミノ酸を含む配列を含有し、少なくとも３個（例えば、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、または少なくとも７個）のアミノ酸は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）に現れるような相対的位置及び／または間隔を維持する。
【００６１】
一部の実施形態では、Ａｎｇ−（１−７）の機能的同等物は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）のアミノ酸配列と少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、７０％、８０％、または９０％）同一の配列を含有する任意のペプチドを包含してもよい。アミノ酸配列同一性の百分率は、アミノ酸配列のアラインメントにより決定することができる。アミノ酸配列のアラインメントは、例えば、公的に利用可能なコンピュータソフトウェア、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して、当該技術分野の技能の範囲内の種々の手段で達成することができる。当業者らは、比較される配列の全長にわたって最大限のアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。好ましくは、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２ソフトウェアは、アミノ酸配列同一性を決定するために使用される（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ２６６，４６０−４８０（１９９６）；ｈｔｔｐ：／／ｂｌａｓｔ．ｗｕｓｔｌ／ｅｄｕ／ｂｌａｓｔ／ＲＥＡＤＭＥ．ｈｔｍｌ）。ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２は、いくつかの検索パラメータを使用し、この大部分は、デフォルト値に設定される。調整可能なパラメータは、次の値：重複スパン＝１、重複フラクション＝０．１２５、ワード閾値（Ｔ）＝１１に設定される。ＨＳＰスコア（Ｓ）及びＨＳＰ  Ｓ２パラメータは、動的値であり、特定の配列の組成に応じてプログラム自体で確定されるが、最小値は、調整されてもよく、上記のように設定される。
【００６２】
一部の実施形態では、Ａｎｇ−（１−７）の機能的同等物、アナログ、または誘導体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）のフラグメントである。一部の実施形態では、Ａｎｇ−（１−７）の機能的同等物、アナログ、または誘導体は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）におけるアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を含有する。Ａｎｇ−（１−７）機能的同等物、アナログ、または誘導体は、置換、付加、及び／または欠失によりアミノ酸配列を変更することにより作製することができる。例えば、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）（配列番号１）の配列内の１つ以上のアミノ酸残基は、機能的同等物として作用する類似の極性の別のアミノ酸により置換されて、サイレント改変をもたらすことができる。配列内のアミノ酸の置換は、アミノ酸が属するクラスの他のメンバーから選択されてもよい。例えば、正電荷を持つ（塩基性）アミノ酸は、アルギニン、リシン、及びヒスチジンを含む。非極性（疎水性）アミノ酸は、ロイシン、イソロイシン、アラニン、フェニルアラニン、バリン、プロリン、トリプトファン、及びメチオニンを含む。非電荷極性アミノ酸は、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、及びグルタミンを含む。負電荷を持つ（酸性）アミノ酸は、グルタミン酸及びアスパラギン酸を含む。アミノ酸グリシンは、無極性アミノ酸ファミリーまたは非荷電（中性）極性アミノ酸ファミリーのいずれかに含まれてもよい。アミノ酸のファミリー内で行われる置換は一般に、保存的置換であると理解される。例えば、ペプチド阻害薬のアミノ酸配列は、修飾または置換することができる。
【００６３】
Ａｎｇ−（１−７）機能的同等物、アナログ、及び誘導体の例は、下記の「例示的なアンギオテンシン（１−７）ペプチド」と題されたセクションに記載されている。
【００６４】
アンギオテンシン−（１−７）ペプチドは、任意の長さとすることができる。一部の実施形態では、本発明によるアンギオテンシン−（１−７）ペプチドは、例えば、４〜２５個のアミノ酸（例えば、４〜２０、４〜１５、４〜１４、４〜１３、４〜１２、４〜１１、４〜１０、４〜９、４〜８、４〜７個のアミノ酸）を含有することができる。一部の実施形態では、線状ペプチドは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５個のアミノ酸を含有する。
【００６５】
一部の実施形態では、アンギオテンシン−（１−７）ペプチドは、プロテアーゼ耐性、血清安定性、及び／または生物学的利用能を増加させる１つ以上の修飾を含有する。一部の実施形態では、好適な修飾は、ＰＥＧ化、アセチル化、グリコシル化、ビオチン化、Ｄ−アミノ酸、及び／若しくは非天然アミノ酸との置換、ならびに／またはペプチドの環化から選択される。
【００６６】
本明細書で使用される場合、「アミノ酸」という用語は、その最も広い意味において、ポリペプチド鎖に取り込むことができる任意の化合物及び／または物質を指す。特定の実施形態では、アミノ酸は、一般的な構造Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｈ）（Ｒ）−ＣＯＯＨを有する。特定の実施形態では、アミノ酸は、天然に存在するアミノ酸である。特定の実施形態では、アミノ酸は、合成または非天然アミノ酸（例えば、α，α−二置換アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸）であり；一部の実施形態では、アミノ酸は、Ｄ−アミノ酸であり；特定の実施形態では、アミノ酸は、Ｌ−アミノ酸である。「標準アミノ酸」は、双方ともに本来ペプチドに組み込まれているＬ−アミノ酸及びＤ−アミノ酸の双方を含む天然に存在するペプチドに一般に見出される２０個の標準アミノ酸のいずれかを指す。「非標準」または「非通常アミノ酸」は、合成的に調製されるか、または天然源から得られるかに関わらず、標準アミノ酸以外の任意のアミノ酸を指す。本明細書で使用される場合、「合成または非天然アミノ酸」は、限定されないが、塩、アミノ酸誘導体（例えば、アミド）、及び／または置換を含む化学修飾アミノ酸を包含する。ペプチド中のカルボキシ末端及び／またはアミノ末端アミノ酸を含むアミノ酸は、メチル化、アミド化、アセチル化、及び／またはその活性に悪影響を及ぼすことなく、ペプチドの循環半減期を変化させる可能性のある他の化学基との置換により修飾することができる。非通常または非天然アミノ酸の例としては、シトルリン、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、４−（Ｅ）−ブテニル−４（Ｒ）−メチル−Ｎ−メチルスレオニン（ＭｅＢｍｔ）、Ｎ−メチル−ロイシン（ＭｅＬｅｕ）、アミノイソ酪酸、スタチン、及びＮ−メチル−アラニン（ＭｅＡｌａ）が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ酸は、ジスルフィド結合に関与し得る。「アミノ酸」という用語は、「アミノ酸残基」と互換的に使用され、ペプチドの遊離アミノ酸及び／またはアミノ酸残基を指し得る。用語がペプチドの遊離アミノ酸または残基を指すかどうかは、それが使用される文脈から明らかとなるであろう。
【００６７】
特定の実施形態では、アンギオテンシン−（１−７）ペプチドは、１つ以上のＬ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸、及び／または非天然アミノ酸を含有する。
【００６８】
天然に存在するアミノ酸のみを含有するペプチドに加えて、ペプチド模倣薬またはペプチドアナログもまた本発明に包含される。ペプチドアナログは、鋳型ペプチドのものと類似の性質を有する非ペプチド薬物として、製薬業界で一般に使用される。非ペプチド化合物は、「ペプチド模倣物」またはペプチド模倣薬と称される（Ｆａｕｃｈｅｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．５４：２８３−２８７（１９８６）；Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０：１２２９−１２３９（１９８７））。治療上有用なペプチドと構造的に関連しており、かつ同等の効果または増強した治療効果若しくは予防効果を生じるために使用され得るペプチド模倣物。一般に、ペプチド模倣薬は、当該技術分野で周知の方法（Ｓｐａｔｏｌａ，Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｖｅｇａ  Ｄａｔａ，１（３）：２６７（１９８３）；Ｓｐａｔｏｌａ  ｅｔ  ａｌ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．３８：１２４３−１２４９（１９８６）；Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｒｅｓ．１４：１７７−１８５（１９７９）；及びＷｅｉｎｓｔｅｉｎ．Ｂ．，１９８３，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ  ｅｄｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ−Ｙｏｒｋ，）により、天然に存在する受容体結合ポリペプチドなどのパラダイムポリペプチド（すなわち、生物学的または薬理学的活性を有するポリペプチド）、例えば、天然に存在する受容体結合ポリペプチド、と構造的に類似しているが、−ＣＨ２ＮＨ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シス及びトランス）、−ＣＨ２ＳＯ−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、−ＣＯＣＨ２−などの連結により任意に置換される１つ以上のペプチド連結を有する。このようなペプチド模倣物は、より経済的な生産、より大きな化学的安定性、増強した薬理学的特性（例えば、半減期、吸収、効能、効率など）、低減した抗原性、及び他のものを含む、天然に存在するポリペプチドに優る重大な利点を有し得る。
【００６９】
Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、通常はペプチドの一部ではない追加の化学的部分を含有する他のタイプのペプチド誘導体も含み、但し、誘導体は、ペプチドの所望の機能的活性を保持する。このような誘導体の例としては、（１）アシル基がアルカノイル基（例えば、アセチル、ヘキサノイル、オクタノイル）、アロイル基（例えば、ベンゾイル）、またはブロック基、例えば、Ｆ−ｍｏｃ（フルオレニルメチル−Ｏ−ＣＯ−）であり得る、アミノ末端または別の遊離アミノ基のＮ−アシル誘導体；（２）カルボキシ末端のエステルまたは別の遊離カルボキシ若しくはヒドロキシル基のエステル；（３）カルボキシ末端のアミド、またはアンモニア若しくは好適なアミンとの反応により生成される別の遊離カルボキシル基のアミド；（４）リン酸化誘導体；（５）抗体または他の生物学的リガンドにコンジュゲートされた誘導体及び他のタイプの誘導体；ならびに（６）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖にコンジュゲートされた誘導体、が挙げられる。
【００７０】
Ａｎｇ（１−７）ペプチドは、合成（例えば、排他的固相合成、部分固相合成、フラグメント縮合、古典的溶液合成、ネイティブケミカルライゲーション）、及び組換え技術を含む、当業者らに既知のペプチド合成の任意の方法により得られることがある。例えば、ペプチドまたはペプチド誘導体は、固相ペプチド合成により得ることができ、これは、簡単に言うと、Ｃ末端アミノ酸のカルボキシル基を樹脂（例えば、ベンズヒドリルアミン樹脂、クロロメチル化樹脂、ヒドロキシメチル樹脂）にカップリングさせること、及びＮ−α保護アミノ酸を連続的に添加すること、から構成される。保護基は、当該技術分野で既知のこのような任意の基であってよい。それぞれの新しいアミノ酸が成長鎖に添加される前に、鎖に添加された前のアミノ酸の保護基が除去される。このような固相合成は、例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９（１９６４）；Ｖａｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２１３：１３９４−１３９７（１９８１）、米国特許第４，３０５，８７２号及び同４，３１６，８９１号、Ｂｏｄｏｎｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｄ．（Ｌｏｎｄｏｎ），３８：１５９７（１９６６）；ならびにＬｕｂｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．“Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２１．１１，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｄｅｓ．Ｔｈｉｅｍｅ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，７１３−８０９（２００５）に概説されている技術によるＰｉｅｔｔａ  ａｎｄ  Ｍａｒｓｈａｌｌ，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．６５０（１９７０）により開示されている。アミノ酸の適切な樹脂へのカップリングもまた、当該技術分野で周知であり、米国特許第４，２４４，９４６号に開示されている（Ｈｏｕｖｅｒ−Ｗｅｙｌ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｖｏｌ  Ｅ２２ａ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ，Ｍｕｒｒａｙ  Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｅｄｉｔｏｒ−ｉｎ−Ｃｈｉｅｆ，Ｔｈｉｅｍｅ．Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  ２００２に概説されている）。
【００７１】
別途記載しない限り、本明細書で使用される科学技術用語及び命名法は、本発明の属する当業者により一般に理解されるのと同じ意味を有する。一般に、細胞培養、感染、分子生物学的方法などの手順は、当該技術分野で使用される一般的な方法である。このような標準的な技術は、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００１；及びＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．，２００１などのリファレンスマニュアルに見出すことができる。
【００７２】
Ａｎｇ−（１−７）ペプチドを調製する任意のプロセス中に、関連する分子のいずれかの感受性の高い反応性基を保護することが望ましいことがある。これは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  Ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｂｙ  Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，１９９１，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ−Ｙｏｒｋ；及びＰｅｐｔｉｄｅｓ：ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｂｙ  Ｓｅｗａｌｄ  ａｎｄＪａｋｕｂｋｅ，２００２，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｈｅｉｎｈｅｉｍ  ｐ．１４２に記載されているような通常の保護基を用いて達成され得る。例えば、α−アミノ保護基は、アシル型保護基（例えば、トリフルオロアセチル、ホルミル、アセチル）、脂肪族ウレタン保護基（例えば、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、シクロヘキシルオキシカルボニル）、芳香族ウレタン型保護基（例えば、フルオレニル−９−メトキシ−カルボニル（Ｆｍｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、Ｃｂｚ誘導体）、及びアルキル型保護基（例えば、トリフェニルメチル、ベンジル）を含む。アミノ酸側鎖保護基は、ベンジル（Ｔｈｒ及びＳｅｒの場合）、Ｃｂｚ（Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ）、メチルエチル、シクロヘキシル（Ａｓｐ、Ｈｉｓ）、Ｂｏｃ（Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｃｙｓ）などを含む。保護基は、当該技術分野で既知の方法を使用して、都合のよい後続の段階で除去されてもよい。
【００７３】
さらに、Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、保護基を有する有機相中で、ＦＭＯＣプロトコールに従って合成されてもよい。望ましくは、ペプチドは、Ｃ１８クロマトグラフィーカラムで、かつ１０〜６０％のアセトニトリル勾配で溶出される高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて７０％の収率で精製される。ペプチドの分子量は、質量分析法（Ｆｉｅｌｄｓ，Ｇ．Ｂ．“Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ．Ｖｏｌ．２８９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９９７に概説されている）により確認することができる。
【００７４】
あるいは、Ａｎｇ−（１−７）ペプチドは、例えば、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を使用して、組換え系で調製されてもよい。ポリペプチドは、同じポリペプチド内に、上記の修飾のうちの複数のものを含有し得ることが理解される。
【００７５】
ペプチドは、インビトロで生物学的活性を誘発するのに有効であり得るが、それらのインビボでの有用性は、プロテアーゼの存在により低減し得る。血清プロテアーゼは、具体的な基質要件を有する。基質は、Ｌ−アミノ酸及び切断のためのペプチド結合の双方を有さなければならない。さらに、血清中でプロテアーゼ活性のある最も顕著な構成成分であるエキソペプチダーゼは通常、ペプチドの最初のペプチド結合に作用し、遊離Ｎ末端を必要とする（Ｐｏｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：１２６８−１２７３（１９９３））。これに照らして、修飾バージョンのペプチドを使用することは多くの場合有利である。修飾ペプチドは、Ａｎｇ−（１−７）の所望の生物学的活性を付与するが、有利にはプロテアーゼ及び／またはエキソペプチダーゼによる切断を容易に受けにくい元のＬ−アミノ酸ペプチドの構造的特徴を保持する。
【００７６】
コンセンサス配列の１つ以上のアミノ酸の、同じタイプのＤ−アミノ酸（例えば、Ｌ−リシンの代わりにＤ−リシン）との系統的置換は、安定なペプチドを生成するために使用されてもよい。従って、本発明のペプチド誘導体またはペプチド模倣薬は、順方向または逆方向のいずれかの、全てＬペプチド、全てＤペプチド、または混合Ｄ、Ｌペプチドであってよい。ペプチダーゼが基質としてＤ−アミノ酸を利用することができないので、Ｎ末端またはＣ末端のＤ−アミノ酸の存在は、ペプチドのインビボでの安定性を増加させる（Ｐｏｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：１２６８−１２７３（１９９３））。リバースＤ−ペプチドは、Ｌ−アミノ酸を含有するペプチドに対して逆順に配置されたＤ−アミノ酸を含有するペプチドである。従って、Ｌ−アミノ酸ペプチドのＣ末端残基は、Ｄ−アミノ酸ペプチドに対するＮ末端になる、等である。リバースＤ−ペプチドは、Ｌ−アミノ酸ペプチドと同じ２次立体配座及びそれ故に類似した活性を保持するが、インビトロ及びインビボでの酵素分解に対してより耐性であり、従って、元のペプチドよりも大きな治療有効性を有することができる（Ｂｒａｄｙ  ａｎｄ  Ｄｏｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：６９２−６９３（１９９４）；Ｊａｍｅｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：７４４−７４６（１９９４））。同様に、リバースＬペプチドは、親ペプチドのＣ末端が逆ＬペプチドのＮ末端の代わりになる標準的な方法を使用して生成されてもよい。重要な２次構造を有さないＬ−アミノ酸ペプチド（例えば、短ペプチド）のリバースＬ−ペプチドは、同じ間隔及びＬ−アミノ酸ペプチドの側鎖の立体配座を保持し、それ故、多くの場合、元のＬ−アミノ酸ペプチドと類似した活性を有すると考えられる。さらに、リバースペプチドは、Ｌ−アミノ酸及びＤ−アミノ酸の組み合わせを含有し得る。アミノ酸及び側鎖の立体配座の間の間隔が保持されて、元のＬ−アミノ酸ペプチドと類似した活性をもたらし得る。
【００７７】
ペプチドのＮ末端またはＣ末端残基に作用するペプチダーゼに対する耐性を付与する別の有効なアプローチは、化学基をペプチド末端に付加させることであり、その結果、修飾ペプチドは、もはやペプチダーゼの基質ではない。このような１つの化学修飾は、一方または双方の末端でのペプチドのグリコシル化である。特定の化学修飾、特に、Ｎ−末端グリコシル化は、ヒト血清中のペプチドの安定性を増加させることが示されている（Ｐｏｗｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：１２６８−１２７３（１９９３））。血清安定性を増強する他の化学的修飾は、アセチル基などの１〜２０個の炭素の低級アルキルからなるＮ末端アルキル基の付加、及び／またはＣ末端アミド若しくは置換アミド基の付加を含むが、これらに限定されない。特に、本発明は、Ｎ末端アセチル基及び／またはＣ末端アミド基を持つペプチドからなる修飾ペプチドを含む。
【００７８】
ペプチドの部分配列中の天然アミノ酸を、天然に存在しないアミノ酸と置換することにより、タンパク質分解に対する耐性を与えることもできる。このような置換は、例えば、生物学的活性に影響を及ぼさずに、Ｎ末端に作用するエキソペプチダーゼによるタンパク質分解に対する耐性を付与することができる。天然に存在しないアミノ酸の例としては、α，α−二置換アミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸、Ｃ−α−メチルアミノ酸、β−アミノ酸、及びβ−メチルアミノ酸が挙げられる。本発明に有用なアミノ酸アナログは、β−アラニン、ノルバリン、ノルロイシン、４−アミノ酪酸、オリチン（ｏｒｉｔｈｉｎｅ）、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、システイン酸、シクロヘキシルアラニン、２−アミノイソ酪酸、６−アミノヘキサン酸、ｔ−ブチルグリシン、フェニルグリシン、ｏ−ホスホセリン、Ｎ−アセチルセリン、Ｎ−ホルミルメチオニン、３−メチルヒスチジン、及び他の非通常アミノ酸を含んでもよいが、これらに限定されない。さらに、当該技術分野において天然に存在しないアミノ酸を有するペプチドの合成は、ルーチンである。
【００７９】
さらに、コンセンサス配列または実質的に同一のコンセンサス配列バリエーションを含む拘束性ペプチドは、当該技術分野で周知の方法により生成されてもよい（Ｒｉｚｏ  ａｎｄ  Ｇｉｅｒａｓｃｈ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７−４１８（１９９２））。例えば、拘束性ペプチドは、ジスルフィド架橋を形成することができるシステイン残基を付加させ、それにより、環状ペプチドをもたらすことにより生成されてもよい。環状ペプチドは、遊離Ｎ末端またはＣ末端を有さないように構築することができる。従って、それらは、ペプチド末端で切断しないエンドペプチダーゼに感受性であり得るが、エキソペプチダーゼによるタンパク質分解を受けにくい。Ｎ末端またはＣ末端のＤ−アミノ酸を有するペプチドのアミノ酸配列、及び環状ペプチドのアミノ酸配列は通常、Ｎ末端若しくはＣ末端のＤ−アミノ酸残基、またはそれらの環状構造の存在を除いて、それらが対応するペプチドの配列とそれぞれ同一である。
【００８０】
環状ペプチド
一部の実施形態では、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の機能的同等物、アナログ、または誘導体は、環状ペプチドである。本明細書で使用される場合、環状ペプチドは、２つの隣接しない残基の間に分子内共有結合を有する。分子内結合は、骨格から骨格へ、側鎖から骨格へ、または側鎖から側鎖への結合であってよい（すなわち、線状ペプチドの末端官能基及び／または末端若しくは内部残基の側鎖官能基は、環化を達成するために連結されてもよい）。代表的な分子内結合としては、ジスルフィド、アミド、及びチオエーテル結合が挙げられる。このようなペプチドに対して行うことができる他の多くの修飾がそうであるように、ポリペプチドを環化するための様々な手段は、当該技術分野において周知である。一般的な検討では、内容が参照により本明細書に組み込まれる国際特許公報ＷＯ０１／５３３３１及びＷＯ９８／０２４５２を参照のこと。このような環状結合及び他の修飾はまた、本発明の環状ペプチド及び誘導体化合物に適用することができる。
【００８１】
本明細書に記載の環状ペプチドは、Ｌ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸、またはそれらの任意の組み合わせの残基を含んでもよい。アミノ酸は、天然または非天然源由来であってよい。但し、少なくとも１つのアミノ基及び少なくとも１つのカルボキシル基が分子内に存在する；α−アミノ酸及びβ−アミノ酸が一般に好ましい。環状ペプチドは、１つ以上の希少アミノ酸（例えば、４−ヒドロキシプロリン若しくはヒドロキシリシン）、有機酸若しくはアミド、及び／または一般的なアミノ酸の誘導体、例えば、多種多様な側鎖の修飾及び／または置換（例えば、メチル化、ベンジル化、ｔ−ブチル化、トシル化、アルコキシカルボニル化など）のいずれかを伴うまたは伴わない、Ｃ末端カルボキシラートがエステル化され（例えば、ベンジル、メチル、若しくはエチルエステル）またはアミド化され、かつ／あるいはＮ末端アミノ基の修飾（例えば、アセチル化またはアルコキシカルボニル化）を有するアミノ酸、も含有してもよい。好適な誘導体としては、（環化前に線状ペプチドのＮ末端であるアミノ基がアセチル化されるような）Ｎ−アセチル基を有するアミノ酸及び／またはＣ末端アミド基（すなわち、環化前に線状ペプチドのカルボキシ末端がアミド化される）が挙げられる。環状ペプチドと共に存在し得る一般的なアミノ酸以外の残基は、ペニシラミン、β，β−テトラメチレンシステイン、β，β−ペンタメチレンシステイン、β−メルカプトプロピオン酸、β，β−ペンタメチレン−β−メルカプトプロピオン酸、２−メルカプトベンゼン、２−メルカプトアニリン、２−メルカプトプリン、オルニチン、ジアミノ酪酸、α−アミノアジピン酸、ｍ−アミノメチル安息香酸、及びα，β−ジアミノプロピオン酸を含むが、これらに限定されない。
【００８２】
Ｎ−アセチル化及び／またはＣ−アミド化を伴うまたは伴わない線状ペプチドの合成後、環化は、当該技術分野で周知の様々な技術のいずれかにより達成され得る。一実施形態では、結合は、反応性アミノ酸側鎖の間に生成されてもよい。例えば、ジスルフィド架橋は、様々な方法のいずれかを使用してペプチドを酸化することにより、２つのチオール含有残基を含む線状ペプチドから形成されてもよい。このような１つの方法では、チオールの空気酸化は、塩基性媒体または中性水性媒体のいずれかを使用して数日間にわたってジスルフィド連結を生成することができる。このペプチドは、凝集及び分子間の副反応を最小にするために高希釈で使用される。あるいは、強い酸化剤、例えば、Ｉ２及びＫ３Ｆｅ（ＣＮ）６は、ジスルフィド連結を形成するために使用することができる。Ｍｅｔ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＨｉｓの感受性の高い側鎖を酸化しないように注意しなければならないことを、当業者らは認識するであろう。さらなる実施形態では、環化は、アミド結合形成により達成され得る。例えば、ペプチド結合は、末端官能基（すなわち、環化前の線状ペプチドのアミノ末端及びカルボキシ末端）の間に形成されてもよい。別のこのような実施形態では、線状ペプチドは、Ｄ−アミノ酸を含む。あるいは、環化は、Ｎ末端アセチル基及び／またはＣ末端アミドの有無に関わらず、１つの末端及び残基の側鎖を連結することにより、または２つの側鎖を使用することにより、達成され得る。ラクタム結合を形成することができる残基は、リシン、オルニチン（Ｏｒｎ）、α−アミノアジピン酸、ｍ−アミノメチル安息香酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、グルタミン酸塩、またはアスパラギン酸塩を含む。アミド結合を形成するための方法は一般に、当該技術分野において周知である。このような１つの方法では、カルボジイミド媒介ラクタム形成は、カルボン酸をＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＡＣ、またはＤＣＣＩと反応させて、Ｏ−アシル尿素が形成されることにより達成することができ、Ｏ−アシル尿素は、遊離アミノ基と直ちに反応して、環化を完了させることができる。あるいは、環化は、反応性アジド中間体がヒドラジドを介してアルキルエステルから生成されるアジド法を使用して実施することができる。あるいは、環化は、活性エステルを使用して達成することができる。エステルのアルコキシ炭素上の電子求引性置換基の存在は、アミノ分解の受けやすさを増加させる。ｐ−ニトロフェノール、Ｎ−ヒドロキシ化合物、及びポリハロゲン化フェノールのエステルの高い反応性により、これらの「活性エステル」がアミド結合の合成に有用になっている。さらなる実施形態では、チオエーテル連結は、チオール含有残基の側鎖及び適切に誘導体化されたα−アミノ酸の間で形成されてもよい。例として、リシン側鎖は、カルボジイミドカップリング法（ＤＣＣ、ＥＤＡＣ）を介してブロモ酢酸に結合させ、次に、チオエーテル連結を形成するために、上述のチオール含有残基のいずれかの側鎖と反応せることができる。ジチオエーテルを形成するために、任意の２つのチオール含有側鎖は、ＤＭＦ中でジブロモエタン及びジイソプロピルアミンと反応させることができる。
【００８３】
例示的なアンギオテンシン−（１−７）ペプチド
特定の態様では、本発明は、非環状（例えば、線状）アンギオテンシン（１−７）ペプチドを提供する。上で検討されるように、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）の構造は、次の通り：
Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号１）
である。
【００８４】
本発明のペプチド及びペプチドアナログは一般に、次の配列：
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｘａａ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｘａａ７（配列番号５）、
またはその薬学的に許容される塩により表すことができる。
【００８５】
Ｘａａ１は、任意のアミノ酸またはジカルボン酸である。特定の実施形態では、Ｘａａ１は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ａｃｐｃ（１−アミノシクロペンタンカルボン酸）、Ａｌａ、Ｍｅ２Ｇｌｙ（Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン）、Ｐｒｏ、Ｂｅｔ（ベタイン、１−カルボキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎトリメチルメタンアミニウムヒドロキシド）、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｓａｒ（サルコシン）、またはＳｕｃ（コハク酸）である。このような特定の実施形態では、Ｘａａ１は、負電荷を持つアミノ酸、例えば、ＡｓｐまたはＧｌｕ、通常は、Ａｓｐである。
【００８６】
Ｘａａ２は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｃｉｔ（シトルリン）、Ｏｒｎ（オルニチン）、アセチル化Ｓｅｒ、Ｓａｒ、Ｄ−Ａｒｇ、及びＤ−Ｌｙｓである。特定の実施形態では、Ｘａａ２は、正電荷を持つアミノ酸、例えば、ＡｒｇまたはＬｙｓ、通常は、Ａｒｇである。
【００８７】
Ｘａａ３は、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ（ノルロイシン）、Ｉｌｅ、Ｇｌｙ、Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、ヒドロキシプロ（ヒドロキシプロリン）、Ａｉｂ（２−アミノイソ酪酸）、Ａｃｐｃ、またはＴｙｒである。特定の実施形態では、Ｘａａ３は、脂肪族アミノ酸、例えば、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＮｌｅ、通常は、ＶａｌまたはＮｌｅである。
【００８８】
Ｘａａ４は、Ｔｙｒ、Ｔｙｒ（ＰＯ３）、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、ｈｏｍｏＳｅｒ（ホモセリン）、ａｚａＴｙｒ（アザ−α１−ホモ−Ｌ−チロシン）、またはＡｌａである。特定の実施形態では、Ｘａａ４は、ヒドロキシル置換アミノ酸、例えば、Ｔｙｒ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒ、通常は、Ｔｙｒである。
【００８９】
Ｘａａ５は、Ｉｌｅ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｖａｌ、またはＧｌｙである。特定の実施形態では、Ｘａａ５は、脂肪族アミノ酸、例えば、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＮｌｅ、通常は、Ｉｌｅである。
【００９０】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、または６−ＮＨ２−Ｐｈｅ（６−アミノフェニルアラニン）である。特定の実施形態では、Ｘａａ６は、完全にまたは部分的に正電荷を持つアミノ酸、例えば、ＡｒｇまたはＨｉｓである。
【００９１】
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、ＰｒｏまたはＡｌａである。
【００９２】
特定の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ７のうちの１つ以上は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一である。このような特定の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ７のうちの１つまたは２つを除く全ては、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ６の全ては、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一である。
【００９３】
特定の実施形態では、Ｘａａ３は、Ｎｌｅである。Ｘａａ３がＮｌｅである時、Ｘａａ１−Ｘａａ２及びＸａａ４〜７のうちの１つ以上は任意に、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一である。このような特定の実施形態では、Ｘａａ１−Ｘａａ２及びＸａａ４〜７のうちの１つまたは２つを除く全ては、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態では、Ｘａａ１−Ｘａａ２及びＸａａ４〜７の全ては、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一であり、結果として、アミノ酸配列：Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号６）になる。
【００９４】
特定の実施形態では、ペプチドは、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）またはＡｌａ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号３）を有する。
【００９５】
一部の実施形態では、本明細書に記載の線状アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９（配列番号２２）の配列を有するペプチドであり、これは、Ａｎｇ（１−９）の配列と同一である。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｎｇ（１−９）の誘導体である。Ａｎｇ（１−９）誘導体を含む例示的なＡｎｇ（１−９）ペプチドの場合、開示が本明細書で参照により組み込まれる米国特許公開第２０１２／０１７２３０１号を参照のこと。
【００９６】
一部の実施形態では、線状アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、Ａｌａ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｔｙｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｐｒｏ７（配列番号２３）のアミノ酸配列を有するペプチドである。配列番号２３に由来するさらなる配列は、開示が本明細書で参照により組み込まれる欧州特許出願第２，２６４，０４８号に見出され得る。
【００９７】
例示的な環状アンギオテンシン（１−７）ペプチド
特定の態様では、本発明は、ＡｎｇにおけるＴｙｒ４及びＰｒｏ７位に対応するアミノ酸の側鎖間などの連結を含む環状アンギオテンシン−（１−７）（Ａｎｇ−（１−７））ペプチドアナログを提供する。これらのペプチドアナログは通常は、７アミノ酸残基を含むが、切断可能な配列も含むことができる。以下でより詳細に検討されるように、本発明は、１つ以上のアミノ酸が別のアミノ酸（フラグメントを含む）により置換されるフラグメント及びアナログを含む。このようなアナログの一例は、Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号２）であり、連結は、Ｓｅｒ４及びＣｙｓ７の間に形成される。このようなアナログの別の例は、Ａｌａ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｓｅｒ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｓ７（配列番号３）であり、連結は、Ｓｅｒ４及びＣｙｓ７の間に形成される。一部の実施形態では、環状アンギオテンシン（１−７）ペプチドアナログは、配列番号１による配列を有さない環状アナログである。一部の実施形態では、環状アンギオテンシン（１−７）ペプチドアナログは、配列番号２による配列を有さない環状アナログである。一部の実施形態では、環状アンギオテンシン（１−７）ペプチドアナログは、配列番号３による配列を有さない環状アナログである。
【００９８】
次のセクションが、４位及び７位の残基を連結するチオエーテル結合の観点で、本発明の態様について記載しているが、（上記のような）他の連結がチオエーテル架橋を交換することができ、かつ他の残基を環化することができたと理解すべきである。チオエーテル架橋は、モノスルフィド架橋、またはＡｌａ−Ｓ−Ａｌａの場合には、ランチオニン架橋とも称される。チオエーテル架橋含有ペプチドは、次の式の１つを有する２つのアミノ酸により形成することができる。
【化２】
2018530590.tif 000004
【化３】
2018530590.tif 000005
【００９９】
これらの式では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は独立して、−Ｈ、アルキル（例えば、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルキル）またはアラルキル基であり、アルキル基及びアラルキル基は、１つ以上のハロゲン、−ＯＨ、または−ＮＲＲ′基（Ｒ及びＲ′は独立して、−ＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルである）で任意に置換される。特定の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６はそれぞれ独立して、−Ｈまたは−ＣＨ３であり、例えば、全てが−Ｈである。
【０１００】
特定の実施形態では、本発明は、式（Ｉ）によるチオエーテル架橋を含むＡｎｇアナログまたは誘導体を提供する。通常は、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は独立して、−Ｈ及び−ＣＨ３から選択される。式（Ｉ）によるチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、ランチビオティック酵素により、またはジスルフィドの硫黄押し出し（ｓｕｌｆｕｒ  ｅｘｔｒｕｓｉｏｎ）により生成することができる。一例では、硫黄が押し出されるジスルフィドは、４位のＤ−システイン及び７位のＬ−システインにより、または４位のＤ−システイン及び７位のＬ−ペニシラミンにより形成することができる（例えば、Ｇａｌａｎｄｅ，Ｔｒｅｎｔ  ａｎｄ  Ｓｐａｔｏｌａ（２００３）Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ７１，５３４−５５１を参照のこと）。
【０１０１】
他の実施形態では、２つのアミノ酸の連結は、式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）に示される架橋とすることができる。式（ＩＩ）によるチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、４位のＤ−ホモシステイン及び７位のＬ−システインにより形成されたジスルフィドの硫黄押し出しにより作製することができる。同様に、式（ＩＩＩ）のようなチオエーテル架橋を含むペプチドは、例えば、４位のＤ−システイン及び７位のＬ−ホモシステインにより形成されたジスルフィドの硫黄押し出しにより、作製することができる。
【０１０２】
上で検討されるように、本発明のＡｎｇアナログ及び誘導体は、長さ及びアミノ酸組成が異なる。本発明のＡｎｇアナログ及び誘導体は、好ましくは、生物学的活性を有し、またはタンパク質分解的に活性化（例えば、１０アミノ酸を有するアンギオテンシン（Ｉ）が、いかに２アミノ酸の切断により活性フラグメントに変換されるか）することができる不活性前駆体分子である。３−７Ｎｌｅ−チオエーテル−環構造を含む「コア」五量体グメントが包含される限り、Ａｎｇアナログまたは誘導体のサイズは、変動する可能性があるが、通常は約５〜１０アミノ酸の間である。本発明のアナログまたは誘導体のアミノ酸配列は、通常、生物学的に活性であり、またはタンパク質分解的に活性化される可能性があるならば、変動する可能性がある。アナログまたは誘導体の生物学的活性は、放射性リガンド結合研究、インビトロ細胞活性化アッセイ、及びインビボ実験を含む、当該技術分野で既知の方法を使用して決定することができる。例えば、Ｇｏｄｅｎｙ  ａｎｄ  Ｓａｙｅｓｋｉ，（２００６）Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９１：Ｃ１２９７−１３０７；Ｓａｒｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．（２００６）７１：７９４−８０２；及びＫｏｚｉａｒｚ  ｅｔ  ａｌ．，（１９３３）Ｇｅｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２４：７０５−７１３を参照のこと。
【０１０３】
ペプチドの長さのみが変動するＡｎｇアナログ及び誘導体は、次のものを含む：
【０１０４】
天然Ａｎｇ−（１−７）から誘導される［Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−７）と称される４，７−環化アナログ（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７、配列番号７）。
天然アンギオテンシンＩ（Ａｎｇ−（１−１０））から誘導される［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−１０）と称される４，７−環化アナログ（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９−Ｌｅｕ１０、配列番号８）；
天然アンギオテンシンＩＩ（Ａｎｇ−（１−８））から誘導される［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−８）と称される４，７−環化アナログ（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号９）；
天然アンギオテンシンＩＩＩ（Ａｎｇ−（２−８））から誘導される［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（２−８）と称される４，７−環化アナログ（Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号１０）；
天然アンギオテンシンＩＶ（Ａｎｇ−（３−８））から誘導される［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（３−８）と称される４，７−環化アナログ（Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８、配列番号１１）；
天然Ａｎｇ−（１−７）から誘導される［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−７）と称される４，７−環化アナログ（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７、配列番号１２）；及び
天然Ａｎｇ−（１−９）から誘導される［Ｎｌｅ３，Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−９）と称される４，７−環化アナログ（Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ｃｙｃ７−Ｐｈｅ８−Ｈｉｓ９、配列番号１３）。
これらのアナログは、Ｃｙｃ４−７部分として、式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）で示されるチオエーテル架橋のうちの１つを有することができ、例えば、Ｃｙｃ４及びＣｙｃ７は、式（Ｉ）（例えば、式中、Ｒ１〜Ｒ４はそれぞれ、−Ｈまたは−ＣＨ３、通常、−Ｈである）で表される。
【０１０５】
天然アンギオテンシンペプチドのアミノ酸配列と比較して、Ｃｙｃ４−７アナログの４位及び７位のアミノ酸は、上記のチオエーテル環構造の導入を可能にするように修飾される。Ａｎｇアナログの長さに加えて、３位、４位、及び７位以外のアミノ酸は、通常はアナログが生物学的機能を保持するならば、天然に存在するペプチドと同じまたは異なる可能性がある。［Ｃｙｃ４−７］Ａｎｇ−（１−１０）のような不活性前駆体のアナログでは、生物学的機能は、アナログを生物活性フラグメント（例えば、Ａｎｇ−（１−８）若しくはＡｎｇ−（１−７））に切断することができるアンギオテンシン変換酵素に対するアナログの感受性のうちの一方若しくは双方、またはフラグメント自体の生物学的活性を指す。特定の実施形態では、本発明のＡｎｇアナログまたは誘導体は、固有の機能を有さないが、１つ以上の天然に存在するアンギオテンシン化合物の効果を阻害する。
【０１０６】
特定の実施形態では、本発明のＡｎｇアナログは、式（ＩＶ）：
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｘａａ３−Ｃｙｃ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｃｙｃ７（ＩＶ、配列番号１４）
により表される。
【０１０７】
Ｘａａ１は、任意のアミノ酸であるが、通常は負電荷を持つアミノ酸、例えば、ＧｌｕまたはＡｓｐ、より典型的には、Ａｓｐである。
【０１０８】
Ｘａａ２は、正電荷を持つアミノ酸、例えば、ＡｒｇまたはＬｙｓ、通常は、Ａｒｇである。
【０１０９】
Ｘａａ３は、脂肪族アミノ酸、例えば、Ｌｅｕ、ＩｌｅまたはＶａｌ、通常は、Ｖａｌである。
【０１１０】
Ｃｙｃ４は、Ｃｙｃ７と共にチオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ４は、Ｄ−立体異性体及び／またはＬ−立体異性体、通常は、Ｄ−立体異性体とすることができる。（Ｃｙｃ７を伴う）Ｃｙｃ４の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）で示される。通常は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）のＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、特に、−Ｈである。
【０１１１】
Ｘａａ５は、脂肪族アミノ酸、例えば、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌ、通常は、Ｉｌｅである。
【０１１２】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓである。
【０１１３】
Ｃｙｃ７は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）のように、Ｃｙｃ４と共にチオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ７は、Ｄ−立体異性体及び／またはＬ−立体異性体、通常は、Ｌ−立体異性体とすることができる。（Ｃｙｃ４を伴う）Ｃｙｃ７の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、及び（ＩＶ）で示される。通常、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）ならびに（ＩＶ）中のＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、特に、−Ｈである。
【０１１４】
特定の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ６（Ｃｙｃ４及びＣｙｃ７を除く）のうちの１つ以上は、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一である。このような特定の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ６のうちの１つまたは２つを除く全ては、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ６の全ては、天然に存在するＡｎｇ−（１−７）中の対応するアミノ酸と同一である。
【０１１５】
特定の実施形態では、Ｃｙｃ４及びＣｙｃ７は独立して、Ａｂｕ（２−アミノ酪酸）及びＡｌａ（アラニン）から選択され、Ａｌａは、少なくとも１つの位置に存在する。従って、環状アナログは、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）、Ｒ１〜Ｒ４はそれぞれ、−Ｈである）；−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｂｕ７−（式（Ｉ）：Ｒ１〜Ｒ３は、−Ｈであり、Ｒ４は、−ＣＨ３である）または−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）：Ｒ１、Ｒ３、及びＲ４は、−Ｈであり、Ｒ２は、−ＣＨ３である）より形成されるチオエーテル連結を有することができる。環状アナログの具体的な例は、−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−連結または−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−連結を含む。
【０１１６】
特定の実施形態では、本発明は、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ａｂｕ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７（配列番号１５）またはアミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｖａｌ３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７（配列番号１６）を有する、４位及び７位の間のチオエーテル架橋を有するＡｎｇ−（１−７）アナログを提供し、これは、次の構造図：
【化４】
2018530590.tif 000006
【化５】
2018530590.tif 000007
により表される。
【０１１７】
特定の実施形態では、本発明のＡｎｇアナログまたは誘導体は、式（Ｖ）：
Ｘａａ１−Ｘａａ２−Ｎｌｅ３−Ｃｙｃ４−Ｘａａ５−Ｘａａ６−Ｃｙｃ７−Ｘａａ８−Ｘａａ９−Ｘａａ１０（Ｖ、配列番号１７）
により表される。
上で検討されるように、特定の実施形態では、Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ８、Ｘａａ９、及びＸａａ１０のうちの１つ以上は存在しない。例えば、（１）Ｘａａ１０は、存在せず、（２）Ｘａａ９及びＸａａ１０は、存在せず、（３）Ｘａａ８、Ｘａａ９、及びＸａａ１０は、存在せず、（４）Ｘａａ１は、存在せず、（５）Ｘａａ１及びＸａａ１０は、存在せず、（６）Ｘａａ１、Ｘａａ９、及びＸａａ１０は、存在せず、（７）Ｘａａ１、Ｘａａ８、Ｘａａ９、及びＸａａ１０は、存在せず、（８）Ｘａａ１及びＸａａ２は、存在せず、（９）Ｘａａ１、Ｘａａ２、及びＸａａ１０は、存在せず、（１０）Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ９、及びＸａａ１０は、存在せず、または（１１）Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ８、Ｘａａ９、及びＸａａ１０は、存在しない。これらの実施形態のそれぞれでは、残りのアミノ酸は、以下に記載される値を有する。
【０１１８】
Ｘａａ１は、存在する場合、任意のアミノ酸であるが、通常は負電荷を持つアミノ酸、例えば、ＧｌｕまたはＡｓｐ、より典型的には、Ａｓｐである。
【０１１９】
Ｘａａ２は、存在する場合、正電荷を持つアミノ酸、例えば、ＡｒｇまたはＬｙｓ、通常は、Ａｒｇである。
【０１２０】
Ｎｌｅ３は、ノルロイシンである。
【０１２１】
Ｃｙｃ４は、Ｃｙｃ７と共にチオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ４は、Ｄ−立体異性体及び／またはＬ−立体異性体、通常は、Ｄ−立体異性体とすることができる。（Ｃｙｃ７を伴う）Ｃｙｃ４の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）で示される。通常は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）のＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、特に、−Ｈである。
【０１２２】
Ｘａａ５は、脂肪族アミノ酸、例えば、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉｌｅ、またはＶａｌ、通常は、Ｉｌｅである。
【０１２３】
Ｘａａ６は、Ｈｉｓである。
【０１２４】
Ｃｙｃ７は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）のように、Ｃｙｃ４と共にチオエーテル架橋を形成する。Ｃｙｃ７は、Ｄ−立体異性体及び／またはＬ−立体異性体、通常は、Ｌ−立体異性体とすることができる。（Ｃｙｃ４を伴う）Ｃｙｃ７の例は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）で示される。通常は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）のＲ基は、−Ｈまたは−ＣＨ３、特に、−Ｈである。
【０１２５】
Ｘａａ８は、存在する場合、Ｐｒｏ以外のアミノ酸、通常は、ＰｈｅまたはＩｌｅである。特定の実施形態では、Ｉｌｅは、Ａｎｇ（１−８）の阻害薬をもたらす。特定の実施形態では、Ｐｈｅは、Ａｎｇ（１−８）またはＡｎｇ（１−１０）の生物学的活性を維持する。
【０１２６】
Ｘａａ９は、存在する場合、Ｈｉｓである。
【０１２７】
Ｘａａ１０は、存在する場合、脂肪族残基、例えば、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、またはＬｅｕ、通常は、Ｌｅｕである。
【０１２８】
特定の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０（Ｎｌｅ３、Ｃｙｃ４、及びＣｙｃ７を除く）のうちの１つ以上は、天然に存在するＡｎｇ（Ａｎｇ−（１−７）、Ａｎｇ（１−８）、Ａｎｇ（１−９）、Ａｎｇ（１−１０）、Ａｎｇ（２−７）、Ａｎｇ（２−８）、Ａｎｇ（２−９）、Ａｎｇ（２−１０）、Ａｎｇ（３−８）、Ａｎｇ（３−９）、及びＡｎｇ（３−１０）を含む）中の対応するアミノ酸と同一である。このような特定の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０のうちの１つまたは２つを除く全て（存在するものの場合）は、天然に存在するＡｎｇ中の対応するアミノ酸と同一である。他の実施形態では、Ｘａａ１〜Ｘａａ１０の全て（存在するものの場合）は、天然に存在するＡｎｇ中の対応するアミノ酸と同一である。
【０１２９】
特定の実施形態では、Ｃｙｃ４及びＣｙｃ７は独立して、Ａｂｕ（２−アミノ酪酸）及びＡｌａ（アラニン）から選択され、Ａｌａは、少なくとも１つの位置に存在する。従って、−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）、Ｒ１〜Ｒ４はそれぞれ、−Ｈである）；−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｂｕ７−（式（Ｉ）：Ｒ１〜Ｒ３は、−Ｈであり、Ｒ４は、−ＣＨ３である）または−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−（式（Ｉ）：Ｒ１、Ｒ３、及びＲ４は、−Ｈであり、Ｒ２は、−ＣＨ３である）より形成されるチオエーテル連結を含む環状アナログが包含される。具体的な環状アナログは、−Ａｂｕ４−Ｓ−Ａｌａ７−連結または−Ａｌａ４−Ｓ−Ａｌａ７−連結を含む。
【０１３０】
特に、本発明は、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ａｂｕ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７（配列番号１８）またはアミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７（配列番号１９）を有する、４位及び７位の間にチオエーテル架橋を有するＡｎｇ−（１−７）アナログまたは誘導体を提供する。
【０１３１】
別の態様では、本発明は、Ａｎｇ−（１−８）アンタゴニスト活性を有する、４位及び７位の間にチオエーテル架橋を有するＡｎｇ−（１−８）アナログまたは誘導体、特に、アミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ａｂｕ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７−Ｉｌｅ８（配列番号２０）またはアミノ酸配列Ａｓｐ１−Ａｒｇ２−Ｎｌｅ３−Ａｌａ４−Ｉｌｅ５−Ｈｉｓ６−Ａｌａ７−Ｉｌｅ８（配列番号２１）を有するＡｎｇ（１−８）アナログまたは誘導体を提供する。
【０１３２】
アルキル基は、完全に飽和した直鎖または分岐非芳香族炭化水素である。通常は、直鎖または分枝アルキル基は、１〜約２０個、好ましくは、１〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖及び分枝アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチル、及びオクチルが挙げられる。Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル基は、「低級アルキル」基とも称される。
【０１３３】
アラルキル基は、アリール基により置換されるアルキル基である。芳香族（アリール）基は、炭素環式芳香族基、例えば、フェニル、ナフチル、及びアントラシル、ならびにヘテロアリール基、例えば、イミダゾリル、チエニル、フリル、ピリジル、ピリミジル、ピラニル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、チアゾリル、オキサゾリル、及びテトラゾリルを含む。芳香族基は、炭素環式芳香族環またはヘテロアリール環を他の１つ以上のヘテロアリール環に縮合させた縮合多環式芳香族環系も含む。例としては、ベンゾチエニル、ベンゾフリル、インドリル、キノリニル、ベンゾチアゾール、ベンゾオキサゾール、ベンズイミダゾール、キノリニル、イソキノリニル、及びイソインドリルが挙げられる。
【０１３４】
Ａｎｇ（１−７）受容体アゴニスト
一部の実施形態では、本発明は、アンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストを、表皮水疱症に罹患している対象に投与することを含む、表皮水疱症を処置する方法を提供する。本明細書で使用される場合、「アンギオテンシン（１−７）受容体アゴニスト」という用語は、アンギオテンシン（１−７）受容体、特に、Ｇタンパク質共役Ｍａｓ受容体の機能にプラスの影響を有する任意の分子を包含する。一部の実施形態では、アンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、アンギオテンシン−（１−７）受容体（すなわち、Ｍａｓ受容体）活性を直接的または間接的に増強し、強化し、活性化し、かつ／または増加させる。一部の実施形態では、アンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、アンギオテンシン−（１−７）受容体（すなわち、Ｍａｓ受容体）と直接相互作用する。例えば、タンパク質、化学化合物、小分子、核酸、抗体、薬物、リガンド、または他の薬剤を含む、このようなアゴニストは、ペプチド性または非ペプチド性である可能性がある。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、非ペプチド性アゴニストである。
【０１３５】
アンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストの例示的なクラスは、１−（ｐ−チエニルベンジル）イミダゾールである。これらの非ペプチドアンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストの例は、構造式（ＶＩ）：
【化６】
2018530590.tif 000008
またはその薬学的に許容される塩（式中：
Ｒ１は、ハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ８）−アルコキシ（式中、１〜６個の炭素原子は、ヘテロ原子Ｏ、Ｓ、若しくはＮＨ（好ましくは、Ｏ）により置換される）、テトラヒドロピラン若しくはテトラヒドロフランなどの飽和環状エーテルにより置換される（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルケニル、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルアリール、または未置換であるか、若しくはハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルコキシ、及びトリフルオロメチルから選択される置換基により置換されるアリールオキシであり；
Ｒ２は、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、または（３）ＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルであり；
Ｒ３は、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはアリールであり；
Ｒ４は、水素、ハロゲン（クロロ、ブロモ、フルオロ）、または（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルであり；
Ｘは、酸素または硫黄であり；
Ｙは、酸素または−ＮＨ−であり；
Ｒ５は、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）−アルキル；または（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルアリールであり、Ｒ５は、Ｙが−ＮＨ−である時に、水素であり；
Ｒ６は、（Ｃ１〜Ｃ５）−アルキルである）により表される。
【０１３６】
特定の実施形態では、Ｒ２がＣＯＯＨまたはＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルである時、Ｒ１は、ハロゲンではない。
【０１３７】
一部の実施形態では、アンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、ＡＶＥ  ０９９１、５−ホルミル−４−メトキシ−２−フェニル−１［［４−［２−（エチルアミノカルボニルスルホンアミド）−５−イソブチル−３−チエニル］−フェニル］−メチル］−イミダゾールであり、これは次の構造：
【化７】
2018530590.tif 000009
により表される。
【０１３８】
アンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストの別の例示的クラスは、ｐ−チエニルベンジルアミドである。これらの非ペプチドアンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストの例は、構造式（ＶＩＩ）：
【化８】
2018530590.tif 000010
またはその薬学的に許容される塩（式中：
Ｒ１は、未置換であるか若しくはＮＨ２、ハロゲン、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル、ＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル、及びＣＯ２Ｈから選択されるラジカルにより置換される（Ｃ１〜Ｃ５）−アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、未置換であるか若しくはハロゲン及びＯ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルにより置換される（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール、アリールラジカルが未置換であるか若しくはハロゲン及びＯ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルにより置換される（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０）−アリール、（Ｃ１〜Ｃ５）−ヘテロアリール、または（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ１〜Ｃ５）−ヘテロアリールであり；
Ｒ２は、水素、未置換であるか若しくはハロゲン及びＯ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルにより置換される（Ｃ１〜Ｃ６）−アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、未置換であるか若しくはハロゲン、Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル、及びＣＯ−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルにより置換される（Ｃ６〜Ｃ１０）アリール、または未置換であるか若しくはハロゲン及びＯ−（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキルから選択されるラジカルにより置換される（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールであり；
Ｒ３は、水素、ＣＯＯＨ、またはＣＯＯ−（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルであり；
Ｒ４は水素、ハロゲン；または（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルであり；
Ｒ５は、水素または（Ｃ１〜Ｃ６）−アルキルであり；
Ｒ６は、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）−アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）−アルキル−（Ｃ３〜Ｃ８）−シクロアルキル、または（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニルであり；
Ｘは、酸素またはＮＨである）により表される。
【０１３９】
アンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストのさらなる例は、米国特許第６，２３５，７６６号に記載されており、その内容は、本明細書に参照として組み込まれる。
【０１４０】
上記の種々のアンギオテンシン−（１−７）受容体アゴニストは、薬学的に許容される塩として存在する可能性がある。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」は、ペプチドまたは同等の化合物の所望の活性を保持するが、好ましくは、ペプチドまたはペプチドを使用するシステムの他の構成成分の活性に悪影響を与えない塩を指す。このような塩の例は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸など、から形成される酸付加塩である。塩はまた、有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パモ酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸などと形成されてもよい。カチオン性物質から形成された塩は、これらの無機及び有機酸の共役塩基を利用し得る。塩はまた、多価金属カチオン、例えば、亜鉛、カルシウム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コバルト、ニッケルなど、あるいはＮ，Ｎ′−ジベンジルエチレンジアミン若しくはエチレンジアミン、またはそれらの組み合わせ（例えば、タンニン酸亜鉛塩）から形成される有機カチオンと形成されてもよい。非毒性の生理学的に許容される塩が好ましい。
【０１４１】
塩は、通常の手段により、例えば、塩が不溶である溶媒若しくは媒体中で、または次に、真空で若しくは凍結乾燥により除去される水などの溶媒中で、遊離酸形態または遊離塩基形態の生成物を、１当量以上の適切な酸または塩基と反応させることにより、あるいは好適なイオン交換樹脂で、存在する塩を別のカチオンと交換することにより、形成することができる。
【０１４２】
アルキル基は、完全に飽和した直鎖または分岐非芳香族炭化水素である。通常は、直鎖または分枝アルキル基は、１〜約２０個、好ましくは、１〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖及び分枝アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチル、及びオクチルが挙げられる。Ｃ１〜Ｃ４直鎖または分枝アルキル基は、「低級アルキル」基とも称される。
【０１４３】
アルケニル基は、１つ以上の二重結合を含む直鎖または分枝非芳香族炭化水素である。通常は、直鎖または分枝アルケニル基は、２〜約２０個、好ましくは、２〜約１０個の炭素原子を有する。直鎖及び分枝アルケニル基の例としては、エテニル、ｎ−プロペニル、及びｎ−ブテニルが挙げられる。
【０１４４】
芳香族（アリール）基は、炭素環式芳香族基、例えば、フェニル、ナフチル、及びアントラシル、ならびにヘテロアリール基、例えば、イミダゾリル、チエニル、フリル、ピリジル、ピリミジル、ピラニル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、チアゾリル、オキサゾリル、及びテトラゾリルを含む。芳香族基は、炭素環式芳香族環またはヘテロアリール環を他の１つ以上のヘテロアリール環に縮合させた縮合多環式芳香族環系も含む。例としては、ベンゾチエニル、ベンゾフリル、インドリル、キノリニル、ベンゾチアゾール、ベンゾオキサゾール、ベンズイミダゾール、キノリニル、イソキノリニル、及びイソインドリルが挙げられる。
【０１４５】
アラルキル基は、アリール基により置換されるアルキル基である。
【０１４６】
製剤化及び投与
本発明の方法によると、本発明の本明細書に記載のＡｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、本明細書に記載されるように、または別途当該技術分野で知られているように、（例えば、精製ペプチドまたは化合物として）または（例えば、疾患の処置のための薬品の製造における）組成物または薬品の構成成分として、単独で対象に投与することができる。組成物は、医薬組成物を調製するために、生理学的に許容される担体または賦形剤と共に製剤化することができる。担体及び組成物は、無菌とすることができる。製剤は、投与様式、例えば、静脈内または皮下投与に適するべきである。組成物を製剤化する方法は、当該技術分野で既知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，（Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄｉｔｏｒ）（１９８９）参照のこと）。
【０１４７】
好適な薬学的に許容される担体としては、水、食塩水（例えば、ＮａＣｌ）、生理食塩水、緩衝食塩水、アルコール、グリセロール、エタノール、アラビアゴム、植物油、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、炭化水素、例えば、ラクトース、アミロースまたはデンプン、糖、例えば、マンニトール、スクロース、または他のもの、デキストロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、香油、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなど、及びそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。医薬調製物は、必要に応じて、助剤（例えば、潤滑剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩、緩衝剤、着色剤、及び／または芳香族物質など）と混合することができ、これは、活性化合物と有害に反応せず、または活性に干渉する。好ましい実施形態では、静脈内投与に適する水溶性担体が使用される。
【０１４８】
組成物または薬品は、必要に応じて、少量の湿潤剤若しくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤も含有する可能性がある。組成物は、液体溶液、懸濁液、エマルション、徐放性製剤、または粉末とすることができる。組成物はまた、トリグリセリドなどの従来の結合剤及び担体を用いて坐剤として製剤化することができる。
【０１４９】
組成物または薬品は、ヒトへの投与に適する、医薬組成物としての所定の手順に従って製剤化することができる。例えば、一部の実施形態では、静脈内投与のための組成物は通常、滅菌等張水性緩衝液中の溶液である。必要な場合、組成物は、注射部位で疼痛を緩和するための可溶化剤及び局所麻酔剤も含んでもよい。一般に、成分は、別々に供給されるか、または単位剤形で、例えば、活性剤の量を示すアンプル若しくはサシェッなどの密閉容器内の乾燥凍結乾燥粉末若しくは水を含まない濃縮物として、共に混合されるかのいずれかである。組成物は、注入により投与される場合、滅菌の薬学的グレードの水、生理食塩水、またはデキストロース／水を含有する注入ボトルで分配することができる。組成物が注射により投与される場合、注射用滅菌水または生理食塩水のアンプルは、投与前に成分が混合され得るように提供することができる。
【０１５０】
本明細書に記載されているようなＡｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、中性または塩形態として製剤化することができる。薬学的に許容される塩は、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などから誘導されるような遊離アミノ基と形成されるもの、及びナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどから誘導されるような遊離カルボキシル基と形成されるものを含む。
【０１５１】
本明細書に記載されるようなＡｎｇ（１−７）ペプチド若しくはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニスト、（または本明細書に記載のＡｎｇ（１−７）ペプチド若しくはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストを含有する組成物若しくは薬品）は、任意の適切な経路で投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のＡｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは皮下投与される。本明細書で使用される場合、「皮下組織」という用語は、皮膚直下のゆるく不規則な結合組織の層と定義される。例えば、皮下投与は、組成物を、限定されないが、大腿部、腹部、臀部、または肩甲骨部を含む領域に注入することにより実施されてもよい。一部の実施形態では、本明細書に記載のＡｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは静脈内投与される。あるいは、本明細書に記載のＡｎｇ（１−７）ペプチド若しくはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニスト（または本明細書に記載のＡｎｇ（１−７）ペプチド若しくはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストを含有する組成物若しくは薬品）は、吸入により、非経口で、皮内に、経皮で、直腸に、または経粘膜的に投与することができる。一部の実施形態では、Ａｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは経口投与される。複数の経路は、必要に応じて同時に使用することができる。
【０１５２】
一部の実施形態では、組成物は、治療上有効な量で、かつ／または特定の所望の結果（例えば、表皮水疱症を処置することまたはこのリスク低減することを伴う）と相関する用法に従って投与される。
【０１５３】
本発明に従って投与されるべき特定の用量または量は、例えば、所望の結果の性質及び／または程度、投与の経路及び／またはタイミングの詳細、ならびに／あるいは１つ以上の特徴（例えば、体重、年齢、個人歴、遺伝的特徴、生活様式パラメータ、心臓欠陥の重症度及び／若しくは心臓欠陥のリスクのレベルなど、またはそれらの組み合わせ）に応じて変動し得る。このような用量または量は、当業者らが決定することができる。一部の実施形態では、適切な用量または量は、標準的な臨床技術に従って決定される。例えば、一部の実施形態では、適切な用量または量は、疾患の重症度指数スコアを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００％またはそれ以上低減させるのに十分な用量または量である。例えば、一部の実施形態では、適切な用量または量は、疾患の重症度指数スコアを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００％低減させるのに十分な用量または量である。代替的または追加的に、一部の実施形態では、適切な用量または量は、投与されるべき望ましいまたは最適な投薬範囲または量を同定するのに役立つ１つ以上のインビトロまたはインビボアッセイの使用により決定される。
【０１５４】
種々の実施形態では、Ａｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、治療的有効量で投与される。本明細書で使用される場合、「治療的有効量」という用語は主に、本発明の医薬組成物に含有される治療薬の総量を基準にして決定される。一般に、治療的有効量は、有意な利益を対象に提供するのに十分である（例えば、根底にある疾患または状態の処置、調節、治癒、予防、及び／または改善）。一部の特定の実施形態では、投与されるべき適切な用量または量は、インビトロまたは動物モデル試験系に由来する用量反応曲線から外挿されてもよい。
【０１５５】
種々の実施形態では、誘導体、アナログ、及び／または塩を含むアンギオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストの治療上有効な投薬量は、様々な量で存在し得る。例えば、一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドの治療的有効量は、約１０〜１，０００ｍｇ（例えば、約２０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、３０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、４０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、５０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、６０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、７０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、８０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、９０ｍｇ〜１，０００ｍｇ、約１０〜９００ｍｇ、１０〜８００ｍｇ、１０〜７００ｍｇ、１０〜６００ｍｇ、１０〜５００ｍｇ、１００〜１，０００ｍｇ、１００〜９００ｍｇ、１００〜８００ｍｇ、１００〜７００ｍｇ、１００〜６００ｍｇ、１００〜５００ｍｇ、１００〜４００ｍｇ、１００〜３００ｍｇ、２００〜１，０００ｍｇ、２００〜９００ｍｇ、２００〜８００ｍｇ、２００〜７００ｍｇ、２００〜６００ｍｇ、２００〜５００ｍｇ、２００〜４００ｍｇ、３００〜１，０００ｍｇ、３００〜９００ｍｇ、３００〜８００ｍｇ、３００〜７００ｍｇ、３００〜６００ｍｇ、３００〜５００ｍｇ、４００ｍｇ〜１，０００ｍｇ、５００ｍｇ〜１，０００ｍｇ、１００ｍｇ〜９００ｍｇ、２００ｍｇ〜８００ｍｇ、３００ｍｇ〜７００ｍｇ、４００ｍｇ〜７００ｍｇ、及び５００ｍｇ〜６００ｍｇ）の範囲に及ぶ量であってよい。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、約１０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ以上の量で存在する。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、約１０００ｍｇ、９５０ｍｇ、９００ｍｇ、８５０ｍｇ、８００ｍｇ、７５０ｍｇ、７００ｍｇ、６５０ｍｇ、６００ｍｇ、５５０ｍｇ、５００ｍｇ、４５０ｍｇ、４００ｍｇ、３５０ｍｇ、３００ｍｇ、２５０ｍｇ、２００ｍｇ、１５０ｍｇ、または１００ｍｇ以下の量で存在する。一部の実施形態では、本明細書に記載の治療的有効量は、１回の投与で提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載の治療的有効量は、１日で提供される。
【０１５６】
他の実施形態では、治療上有効な投薬量は、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜５００ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜４００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜３００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜２００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜９０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜８０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜７０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜６０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜４０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜３０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜２５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜１５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重であってよい。一部の実施形態では、本明細書に記載の治療的有効量は、１回の投与で提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載の治療的有効量は、１日で提供される。
【０１５７】
さらに他の実施形態では、治療上有効な投薬量は、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重であってよい。一部の実施形態では、本明細書に記載の治療的有効量は、１回の投与で提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載の治療的有効量は、１日で提供される。
【０１５８】
さらに他の実施形態では、治療上有効な投薬量は、例えば、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．１ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．０４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．０１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜０．００２ｍｇ／ｋｇ体重であってよい。一部の実施形態では、治療上有効な用量は、０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００２ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００３ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００４ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００５ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００６ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００７ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００８ｍｇ／ｋｇ体重、０．０００９ｍｇ／ｋｇ体重、０．００１ｍｇ／ｋｇ体重、０．００２ｍｇ／ｋｇ体重、０．００３ｍｇ／ｋｇ体重、０．００４ｍｇ／ｋｇ体重、０．００５ｍｇ／ｋｇ体重、０．００６ｍｇ／ｋｇ体重、０．００７ｍｇ／ｋｇ体重、０．００８ｍｇ／ｋｇ体重、０．００９ｍｇ／ｋｇ体重、０．０１ｍｇ／ｋｇ体重、０．０２ｍｇ／ｋｇ体重、０．０３ｍｇ／ｋｇ体重、０．０４ｍｇ／ｋｇ体重、０．０５ｍｇ／ｋｇ体重、０．０６ｍｇ／ｋｇ体重、０．０７ｍｇ／ｋｇ体重、０．０８ｍｇ／ｋｇ体重、０．０９ｍｇ／ｋｇ体重、または０．１ｍｇ／ｋｇ体重であってよい。特定の個体の有効用量は、個体の必要性に応じて、経時的に変動させる（例えば、増加または減少させる）ことができる。
【０１５９】
一部の実施形態では、アンギオテンシン（１〜７）ペプチドは、約１〜１，０００μｇ／ｋｇ／日の範囲の（例えば、約１〜９００μｇ／ｋｇ／日、１〜８００μｇ／ｋｇ／日、１〜７００μｇ／ｋｇ／日、１〜６００μｇ／ｋｇ／日、１〜５００μｇ／ｋｇ／日、１〜４００μｇ／ｋｇ／日、１〜３００μｇ／ｋｇ／日、１〜２００μｇ／ｋｇ／日、１〜１００μｇ／ｋｇ／日、１〜９０μｇ／ｋｇ／日、１〜８０μｇ／ｋｇ／日、１〜７０μｇ／ｋｇ／日、１〜６０μｇ／ｋｇ／日、１〜５０μｇ／ｋｇ／日、１〜４０μｇ／ｋｇ／日、１〜３０μｇ／ｋｇ／日、１〜２０μｇ／ｋｇ／日、１〜１０μｇ／ｋｇ／日の範囲の）有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜５００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効な用量で投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜１００μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効用量で投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、約１〜６０μｇ／ｋｇ／日の範囲の有効な用量で投与される。一部の実施形態では、アンギオテンシン（１−７）ペプチドは、約１、２、４、６、８、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、または１，０００μｇ／ｋｇ／日から選択される有効な用量で投与される。
【０１６０】
併用療法
一部の実施形態では、Ａｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、併用療法の一部として使用されるであろう。一部の実施形態では、Ａｎｇ（１−７）ペプチド及び／またはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストは、１つ以上の追加療法の前に、それと同時に、またはその後に投与されてもよい。表皮水疱症の処置のための任意の既知の治療法または治療薬は、本明細書に開示されるような１つ以上のＡｎｇ（１−７）ペプチド及び／またはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストと共に使用され得ることが検討される。１つ以上のＡｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストと共に使用され得る例示的な療法としては、とりわけ、疼痛及び掻痒の制御に役立つ可能性がある薬物療法、敗血症などの合併症に対処する薬物療法（例えば、抗生物質）、炎症を低減させる薬物療法（例えば、コルチコステロイド）、異常動作を矯正する手術（例えば、指若しくは足指の融合または関節の異常屈曲を矯正する手術）、健康食を摂取する能力を改善する手術（例えば、食道の外科的拡張または栄養チューブの設置）、皮膚グラフト（例えば、ＯｒＣｅｌ複合型培養皮膚）、遺伝子治療、骨髄移植、タンパク質補充療法、細胞ベースの療法、及び／またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６１】
キット
一部の実施形態では、本発明は、Ａｎｇ（１−７）ペプチド、アンギオテンシン（１−７）受容体アゴニスト、またはそれを含有する製剤を含有するキットまたは他の製造物品をさらに提供し、その再構成（凍結乾燥される場合）及び／または使用についての説明書を提供する。キットまたは他の製造物品は、容器、シリンジ、バイアル、及び投与に有用な（例えば、皮下の、吸入による）他の任意の物品、デバイス、または装置を含んでもよい。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ（例えば、予め充填されたシリンジ）、アンプル、カートリッジ、リザーバ、またはｌｙｏ−ｊｅｃｔｓが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成されてもよい。一部の実施形態では、容器は、予め充填されたシリンジである。好適な予め充填されたシリンジとしては、シリコーン焼付コーティングを有するボロシリケートガラスシリンジ、吹き付けシリコーンを有するボロシリケートガラスシリンジ、またはシリコーンを含まないプラスチック樹脂シリンジが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６２】
通常、容器は、１つ以上の製剤、及び容器上のラベルまたは容器に付属するラベルを保持してもよく、これは、再構成及び／または使用のための指示を示し得る。例えば、ラベルは、製剤が上記のような濃度に再構成されることを示し得る。ラベルは、製剤が、例えば、皮下投与に有用であるか、またはそれが意図されることをさらに示し得る。一部の実施形態では、容器は、Ａｎｇ（１−７）ペプチドまたはアンギオテンシン（１−７）受容体アゴニストを含有する単回用量の安定な製剤を含有してもよい。種々の実施形態では、単回用量の安定製剤は、約１５ｍｌ、１０ｍｌ、５．０ｍｌ、４．０ｍｌ、３．５ｍｌ、３．０ｍｌ、２．５ｍｌ、２．０ｍｌ、１．５ｍｌ、１．０ｍｌ、または０．５ｍｌ未満の体積で存在する。あるいは、製剤を保持する容器は、製剤の反復投与（例えば、２〜６回の投与）を可能にするマルチユースバイアルであってよい。キットまたは他の製造物品は、好適な賦形剤（例えば、ＢＷＦＩ、生理食塩水、緩衝食塩水）を含む第２の容器をさらに含んでもよい。賦形剤及び製剤の混合時に、再構成された製剤中の最終タンパク質濃度は一般に、少なくとも１ｍｇ／ｍｌ（例えば、少なくとも５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも２０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも３０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも４０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも７５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１００ｍｇ／ｍｌ）となる。キットまたは他の製造物品は、他の緩衝液、賦形剤、フィルター、針、シリンジ、及び使用についての説明書を含む添付文書を含む、商業的及びユーザーの観点から望ましい他の物質をさらに含んでもよい。一部の実施形態では、キットまたは他の製造物品は、自己投与のための説明書を含んでもよい。
【実施例】
【０１６３】
特定の実施形態による特異性を有する本発明の特定の組成物及び方法が記載されているが、次の実施例は、本発明の化合物及び方法を単に説明するために役立ち、それを限定することを意図するものではない。
【０１６４】
実施例１．アンギオテンシン（１−７）は、表皮水疱症のマウスモデルにおける線維症を緩和する
劣性栄養障害型表皮水疱症（ＲＤＥＢ）は、ＶＩＩ型コラーゲンをコードする遺伝子の変異により引き起こされる。ＲＤＥＢマウスは、経時的な線維症による指趾の欠損及び融合を含む有害な表現型につながる顕著な線維症を示す（例えば、Ｎｙｓｔｒｏｍ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＥＲ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ  ７（９）：１２１１−２８（２０１５）を参照のこと）。
【０１６５】
ＲＤＥＢマウスを、アンギオテンシン（１−７）で４週間処置し（９匹のマウス）、または未処置のままにした（３匹のマウス）。３匹の野生型マウスを、対照として用いた。アンギオテンシン（１−７）は、Ｎｙｓｔｒｏｍ，Ａ．ら（ＥＭＢＯ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＥＲ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ  ７（９）：１２１１−２８（２０１５））が公表した結果と比較して、足指長のＲＤＥＢに関連する減少及び指趾の融合を予防した（図１Ａ〜１Ｂ）。特に、アンギオテンシン（１−７）は、Ｎｙｓｔｒｏｍ，Ａ．らが公表した結果との比較により査定された場合、アンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニストであるロサルタンと同様の有効性を示した（図２）。
【０１６６】
免疫染色は、野生型マウス、未処置ＲＤＥＢマウス、及びアンギオテンシン（１−７）で４週間処置したＲＤＥＢマウスのマウス前肢の凍結切片において実施した。テネイシンＣは、無傷の皮膚に低量で存在するが、線維化皮膚で増加する。蛍光顕微鏡を使用して、テネイシンＣ免疫染色を可視化した（図３）。同一の顕微鏡設定及び曝露時間で得られた画像上で、ＩｍａｇｅＪソフトウェアを用いて、免疫染色を定量化した。２つの群の各順列を対にして、Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定を統計分析のために使用した。
【０１６７】
テネイシンＣ免疫染色は、野生型マウスではほとんど存在しなかったが、テネイシンＣ免疫染色は、未処置のＲＤＥＢマウス前肢真皮で豊富であった（図３及び４）。主に、テネイシンＣ染色は、アンギオテンシン（１−７）処置マウスの真皮−表皮接合部のすぐ下に観察された。これは、ＲＤＥＢマウスにおける損傷の初期部位に対応する（図３）。アンギオテンシン（１−７）で処置したマウスは、未処置対照（図４）と比較して、テネイシンＣ染色の有意な低減を示した（Ｐ＜０．００１）。これらの結果は、アンギオテンシン（１−７）が表皮水疱症の疾患増悪を遅らせることを示唆している。
【０１６８】
マウス前肢の凍結切片を、α−ＳＭＡ（α平滑筋アクチン）、フィブロネクチン、及びＣＤ１１ｂについても免疫染色した。α−ＳＭＡは、線維性疾患と相関する筋線維芽細胞マーカーである。フィブロネクチンは、皮膚線維症と相関する。ＣＤ１１ｂ（インテグリンαＭサブユニット）は、単球、顆粒球（例えば、好中球）、マクロファージ、及びナチュラルキラー細胞により発現される白血球マーカーである。前肢真皮のＣＤ１１ｂ陽性細胞の存在は、細胞が炎症性白血球（例えば、好中球及びマクロファージ）であることを示唆しており、これは、線維性疾患と相関する。
【０１６９】
ＲＤＥＢは、水疱形成に関連し、アンギオテンシン（１−７）処置ＲＤＥＢマウス及び未処置ＲＤＥＢマウスの双方のマウス前肢は、水疱形成を示し、同齢の野生型対照は、水疱形成がなかった。アンギオテンシン（１−７）処置マウスの水疱は、未処置ＲＤＥＢマウスと比較してより少ないα−ＳＭＡ陽性細胞を示した（図５、上段パネル）。この結果は、アンギオテンシン（１−７）が、ＲＤＥＢ動物における水疱形成に関連する筋線維芽細胞媒介線維症を低減させたことを示唆している。
【０１７０】
アンギオテンシン（１−７）で処置したＲＤＥＢマウスは、未処置ＲＤＥＢマウスよりも少ないフィブロネクチン免疫染色を示して、アンギオテンシン（１−７）がＲＤＥＢ動物の線維症を低減させたことを示唆した（図５、中央パネル）。
【０１７１】
アンギオテンシン（１−７）で処置したＲＤＥＢマウスは未処置ＲＤＥＢマウスよりも少ないＣＤ１１ｂ陽性細胞を示して、アンギオテンシン（１−７）がＲＤＥＢ動物の白血球媒介線維症を低減させたことを示唆した（図５、下段パネル）。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを使用して、１ｍｍ２当たりのＣＤ１１ｂ陽性細胞の数を定量した。要約すると、同一の顕微鏡設定及び曝露時間を使用して、野生型、未処置ＲＤＥＢ、及びアンギオテンシン（１−７）処置ＲＤＥＢマウスの前肢凍結切片の画像を取得した。同一の閾値を全画像に適用し、画像をバイナリ画像に変換し、１０平方ピクセルを超える全粒子を自動的に計数した。アンギオテンシン（１−７）で処置したＲＤＥＢマウスは、野生型マウスとほぼ同数の１ｍｍ２当たりのＣＤ１１ｂ陽性細胞を示したが、未処置ＲＤＥＢマウスは、ＣＤ１１ｂ陽性細胞において約３倍の増加を示した（図６）。
【０１７２】
テネイシンＣ、トロンボスポンジン１、ｐＳＭＡＤ２／３、ガレクチン３、及びβ−チューブリンに対する抗体を用いるウェスタンブロッティングにより、マウス前肢の全タンパク質溶解物を分析した（図７）。トロンボスポンジン１は、線維化に関連するトランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦβ）シグナル伝達を活性化することができる。細胞内ＳＭＡＤ経路を通るＴＧＦβシグナル、従って、リン酸化ＳＭＡＤ（例えば、ｐＳＭＡＤ２／３）は、ＴＧＦβ関連線維症と相関する。ガレクチン３の発現は、線維化前の炎症と相関する。ウェスタンブロッティングの結果を、デンシトメトリーで定量化し、β−チューブリンに対して正規化した。
【０１７３】
アンギオテンシン（１−７）で処置したＲＤＥＢマウスは、未処置ＲＤＥＢマウスと比較してテネイシンＣの低減を示した。これは、アンギオテンシン（１−７）が真皮線維症を低減させたことを示唆している（図７及び８）。アンギオテンシン（１−７）で処置したＲＤＥＢマウスは、未処置ＲＤＥＢマウスと比較して、ＴＧＦβ活性化トロンボスポンジン１の存在量の低減及びリン酸化ＳＭＡＤ２／３（ｐＳＭＡＤ２／３）の存在量の低減を示した（図７及び８）。この結果は、アンギオテンシン（１−７）がＴＧＦβ活性を下方調節したことを示唆している。アンギオテンシン（１−７）で処置したＲＤＥＢマウスは、未処置ＲＤＥＢマウスと比較して、ガレクチン３の低減を示し、これは、アンギオテンシン（１−７）が線維化前の炎症を緩和したことを示唆する（図７及び８）。
【０１７４】
均等物及び範囲
当業者らは、本明細書に記載の本発明の具体的な実施形態に対する多くの均等物を認識し、または日常的な実験のみを使用して確認することができるであろう。本発明の範囲は、上記の説明に限定されるものではなく、むしろ、次の特許請求の範囲に記載されている。
【図１】
2018530590.tif 000012
【図２】
2018530590.tif 000013
【図３】
2018530590.tif 000014
【図４】
2018530590.tif 000015
【図５】
2018530590.tif 000016
【図６】
2018530590.tif 000017
【図７】
2018530590.tif 000018
【図８】
2018530590.tif 000019
【手続補正書】
【提出日】平成30年8月16日(2018.8.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2018530590000001.app
【国際調査報告】
2018530590.tif 000020
2018530590.tif 000021