(57)【要約】本発明は、山参、山養参、培養根、生人参（スサム）、花旗参、田七参、又は紅参などの人参類サポニンの用途として、細胞の寿命延長、細胞の分化促進、赤血球数増加、及び中性脂肪減少に対するものである。具体的には、前記人参類サポニンを抽出して熱処理し、酵素転換させてコンパウンドＫを含む活性型サポニンＲｄ、Ｆ２、Ｒｇ３を製造して、これらコンパウンドＫ、Ｒｄ、Ｆ２、Ｒｇ３を主成分として９０％以上含んで、細胞の寿命延長、細胞の分化促進、赤血球数増加、及び中性脂肪減少の効果を有する人参類サポニンの用途に関するものである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞の寿命延長及び細胞の分化促進に有用な、人参類サポニンを有効成分として含む、組成物。
【請求項２】
前記細胞の寿命延長は、β−ガラクトシダーゼ（β−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ）の抑制によることを特徴とする、請求項１に記載の人参類サポニンを有効成分として含む組成物。
【請求項３】
前記細胞の分化促進は、幹細胞分化促進であることを特徴とする、請求項１に記載の人参類サポニンを有効成分として含む組成物。
【請求項４】
中性脂肪減少及び赤血球数増加に有用な、人参類サポニンを有効成分として含む組成物。
【請求項５】
前記人参類サポニンは、プロトパナキサジオール（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）系サポニンが９０％以上であることを特徴とする、請求項１又は４に記載の人参類サポニンを有効成分として含む組成物。
【請求項６】
前記プロトパナキサジオール（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）系サポニンは活性型プロトパナキサジオール（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）であり、該活性型プロトパナキサジオールはコンパウンドＫ、Ｒｄ、Ｆ２、Ｒｇ３であることを特徴とする、請求項５に記載の人参類サポニンを有効成分として含む薬学組成物。
【請求項７】
前記人参類サポニンは、
人参類を、多孔性棚を備えた自動温湿度調節装置を利用して１２１℃で１０分間過量の水分を取り除きながら、１．１ｋｇ／ｃｍ２圧力下で蒸気に露出させる段階（Ｓ１段階）と、
前記Ｓ１段階を経た人参類を、連続で空気を注入して９０℃以下で冷却する段階（Ｓ２段階）と、
前記Ｓ１段階と前記Ｓ２段階とを、２回さらに繰り返す段階（Ｓ３段階）と、
前記Ｓ３段階後、前記人参類を自動温度調節装置内で室温まで冷却して、前記人参類を粒子の大きさ１ｍｍ以下に破砕する段階（Ｓ４段階）と、
前記Ｓ４段階を経た人参類に、８０％酒精アルコールを添加してサポニンを抽出し、前記抽出されたサポニンを濃縮する段階（Ｓ５段階）と、
前記Ｓ５段階後、濃縮されたサポニンをエタノールに溶解して滅菌水を添加し、懸濁液を製造する段階（Ｓ６段階）と、
前記Ｓ６段階後、前記懸濁液を一滴ずつペクチナーゼ（ｐｅｃｔｉｎａｓｅ）酵素溶液に添加して反応させる段階（Ｓ７段階）と、に供し、
前記Ｓ７段階の反応を経た溶液を遠心分離して沈澱させ、生成された沈殿物を酒精アルコールに溶解した後、滅菌生理食塩水に再び懸濁して濾過した後に濾液を濃縮したものであることを特徴とする、請求項１又は４に記載の人参類サポニンを有効成分として含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、山参、山養参、培養根、生人参（スサム）、花旗参、田七参、又は紅参などの人参類サポニンの用途に関するものである。具体的には、前記人参類サポニンを抽出し、熱処理して酵素転換させ、コンパウンドＫを含む活性型サポニンＲｄ、Ｆ２、Ｒｇ３を製造し、これらコンパウンドＫ、Ｒｄ、Ｆ２、Ｒｇ３を主成分として９０％以上含んで、細胞の寿命延長、細胞の分化促進、赤血球数増加、及び中性脂肪減少の効果を有する人参類サポニン（以下、「ＣＫＳ」と称する）に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
人参類に含まれているサポニン及び非サポニン系物質（Ｐａｎａｃｅｎ、多糖類、アミノ酸誘導体、ポリアセン誘導体、フェノール化合物）は、優れた薬理活性を有し、有害活性酸素（ｆｒｅｅ  ｒａｄｉｃａｌ）消去に卓越な効能を有する抗癌、血圧降下、脂質降下、肝毒性などに優れた効能を有する。人参類の主要薬理成分としてよく知られた人参サポニンは、ＰＰＤ（Ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）系列及びＰＰＴ（Ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ）系列に分類される。ＰＰＤ系列サポニンは、基本構造であるＰＰＤに多様な置換基が結合された構造を有しており、ジンセノサイドＲｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｆ２、Ｒｇ３、コンパウンドＫなどが代表的である。ＰＰＴ系列サポニンは、ＰＰＴが基本構造であり、ジンセノサイドＲｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１、Ｒｈ１などが代表的である。
【０００３】
一般に、自然界に存在する多くの配糖体化合物らは、それ自体よりは糖が分解されて非糖体になったときに、生理活性が増加する傾向を示すが、人参サポニンの場合も、糖が３個以上結合されたジンセノサイドＲｂ１、Ｒｂ２、Ｒｄ、及びＲｅよりも、一部の糖が加水分解されて生成されたジンセノサイドＲｇ３、Ｒｈ１、Ｒｈ２、Ｆ２、ＣＹ、及びＣＫなどが、生体内への吸収や生理活性などの面において、より優秀な効果を示すものとして知られている。多くの糖が結合されている人参サポニンは、小腸内から吸収される量が非常に少ないものとして知られているが、人の排泄物で抽出された腸内微生物のジンセノサイドＲｂ１の加水分解能力を実験した結果、腸内微生物の２１％は分解能力を有さないことが確認され、分解能力を有する７０％程度の腸内微生物は、人参サポニンを分解する能力に大差があることが確認された。
【０００４】
一般に、サポニン成分を含んだ人参類製品は、水に対する溶解性が高い成分でなされる人参サポニンからなるが、非活性型状態の該成分は、水に対する溶解性が高い反面、腸内で充分に吸収できず、ほとんど効果がないものとして知られている。しかし、前記成分が活性化されて活性型成分へと変化すれば、水に対する溶解性が低下する代わりに、人体内の吸収度が高くなって、その効果がよく発揮されるようになる。
【０００５】
本発明において、活性型サポニン、活性型山養参、活性型成分などで使われる「活性型」という用語は、本発明にて加工された人参類のサポニン又はジンセノサイドの特性をいい、活性型のものは、サポニンの核に結合した糖類が脱離した結果、一般山参、山養参、又は人参に比べてサポニンの総含量が高く、人体に吸収された後にその効果を発揮するようになる。すなわち、糖が３個以上結合されたジンセノサイドＲｂ１、Ｒｂ２、Ｒｄ、及びＲｅではなく、一部の糖が加水分解されて生成されたジンセノサイドＲｇ３、Ｒｈ１、Ｒｈ２、Ｆ２、ＣＹ、及びＣＫからなる群より選択されるいずれか１つ又は２つ以上のジンセノサイドで、生体内への吸収や生理活性などの面で、より優秀な効果を示すサポニンを意味する。
【０００６】
このように、活性型成分とは、人参サポニンに結合している糖が脱離した形態の成分として、人体に吸収された後にその効果を発揮するようになるが、この過程は、主に熱によって分解されるか、又は酵素によって分解される過程であり、一部は腸内の微生物によって活性化された後に吸収される。特に、活性型成分であるコンパウンドＫ（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｋ）の製造は非常に難しく、コンパウンドＫは得られ難いものとして知られている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明者らは、ＣＫＳを製造して研究を進め、抗老化に対する用途を見出そうと試みた。老化とは、生体の構成成分である細胞及び臓器の機能的低下に伴って老廃物が過度に蓄積し、生体の恒常性低下に伴う細胞の自殺誘導が起こり、生体が正常機能を遂行し難い状態のことである。また、疾病や死亡に対する感受性が上昇して衰える過程とも定義することができる。しかし、このような原因は多様かつ複雑で、その原因を一言で表すことは難しい。
【０００８】
本発明者らは、さまざまな老化原因の中でも内部的な要因を、血液分析を通じて確認しようと試みた。年齢を重ねるにつれて、肝機能低下、腎臓機能低下、記憶力減退と共に、特に、総脂肪や中性脂肪の過度な増加が血管に問題を引き起こし、多くの疾病の原因になっている。したがって、血液分析を通じてその結果を観察することを試みた。
【０００９】
生後１２ヶ月のスプラーグドーリー白ネズミ（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ  Ｒａｔ、以下、「ＳＤラット」と称する）を購入して１９ヶ月齢まで飼育し、２０ヶ月齢になる日から３７日間に亘ってＣＫＳを腹腔投与して、未投与対照群と比較した。コンパウンドＫは、製造するのが非常に難しく、それによって高価であるため、購入して実験に使用することは容易でない。本発明者らは、長年の間、酵素転換によってコンパウンドＫを多量に製造する技術を開発してきており、製造されたコンパウンドＫを含むＣＫＳを、老化したＳＤラットに投与して血液分析を実施した。血液分析の結果、中性脂肪の減少が明らかに現われ、赤血球の増加が認められた。活動性が大きく低下した対照群に比べて、薬物投与群は活動性が高く、既に本発明者らが特許出願した運動性増加に対する結果（大韓民国特許出願番号：１０−２０１４−００２３２４４）と併せて、さらなる理由の糾明が試みられ、血液分析を通じてさらなるＣＫＳの影響を確認することができた。骨髄線維症治療剤であるルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）を真性赤血球増加症（ｐｏｌｙｃｙｔｈｅｍｉａ  ｖｅｒａ）患者にも処方することができるように、アメリカ食品医薬局（ＦＤＡ）が適応症を承認したが、これと類似して、赤血球の増加効果の用途でも、ＣＫＳを患者に処方することができる。
【００１０】
老化白ネズミの確保には相当な時間を要する関係で、長期に亘って飼育しなければならず、生体機能がいつ低下するか分からない状況であるので、適切な実験設計を立てることは非常に難しい。これに対して、本発明者らは、白ネズミを１９ヶ月齢まで毎日観察し、ＣＫＳを実験に利用して、脂肪分析及び血球分析を通じて結果を導き出すことを試み、老化白ネズミを対象とした実験で、抗老化に対する良い結果を導き出そうとした。
【００１１】
さらに、幹細胞に対する分化作用を調査し、細胞培養を通じて細胞の寿命延長に対する作用を調べた。幹細胞の分化作用があるということは、ある程度多くの細胞を短時間で作ることができるという意味であり、特に、分化時間を低減させるということは、早期に細胞数を増加させることができるという意味である。
【００１２】
学者らは、細胞寿命延長作用を有する物質を研究し、β−ｇａｌａｃｔａｓｅを抑制する安全な物質を探索する努力を重ねてきた。しかし、このような物質を探索することは容易ではなく、また、安全性及び安定性が確保された物質を利用することは非常に難しい。特に、経済的な面では、物質の価格を考慮しなければならない。本発明者らが長期に亘って研究してきたＣＫＳは、安定性、安全性、価格などの点で最適な物質であると思料される。細胞培養の面では、培養細胞のβ−ｇａｌａｃｔａｓｅを抑制するということは、細胞の寿命延長を起こすという意味である。科学者らは、細胞寿命延長作用を有する物質の研究を重ねてきており、本発明者らは、β−ガラクトシダーゼ（β−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ）の抑制効能を有するＣＫＳを利用し、結果を導き出すことを試みてきた。
【００１３】
本発明は、前記のごとき従来の問題点を解消すべくなされたものであり、次のような目的を有する。
【００１４】
本発明は、人参類サポニンに結合している糖を脱離させ、活性型成分として製造し、前記人参類サポニンを有効成分として含んで、赤血球数増加及び中性脂肪減少に有用な組成物を提供することを目的とする。
【００１５】
また、本発明は、人参類サポニンを有効成分として含んで、幹細胞の分化時間を低減させ、細胞内のβ−ガラクトシダーゼの抑制に通じる、細胞寿命延長に有用な組成物を提供することを目的とする。
【００１６】
本発明は、人参類サポニンを活性型成分として製造するために、熱処理と酵素処理とを並行する一方、酒精アルコールを使用して製造することで、有害性有機溶媒の残留性に関する問題点が解消された人参類サポニンを有効成分として含む組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
前記のごとき目的を達成するために、本発明は、次のような解決手段によって具現される。
【００１８】
本発明は、人参類サポニンを有効成分として含み、赤血球数増加及び中性脂肪減少に有用であり、また、幹細胞の分化作用及び細胞の寿命延長作用にも有用な組成物に関する。具体的に、前記人参類サポニンは、
人参類を、多孔性棚を備えた自動温湿度調節装置を利用して１２１℃で１０分間過量の水分を取り除きながら、１．１ｋｇ／ｃｍ２圧力下で蒸気に露出させる段階（Ｓ１段階）と、
前記Ｓ１段階を経た人参類を、連続で空気を注入して９０℃以下で冷却する段階（Ｓ２段階）と、
前記Ｓ１段階と前記Ｓ２段階とを、２回さらに繰り返す段階（Ｓ３段階）と、
前記Ｓ３段階後、前記人参類を自動温度調節装置内で室温まで冷却して、前記人参類を粒子の大きさ１ｍｍ以下に破砕する段階（Ｓ４段階）と、
前記Ｓ４段階を経た人参類に、８０％酒精アルコールを添加してサポニンを抽出し、前記抽出されたサポニンを濃縮する段階（Ｓ５段階）と、
前記Ｓ５段階後、濃縮されたサポニンをエタノールに溶解して滅菌水を添加し、懸濁液を製造する段階（Ｓ６段階）と、
前記Ｓ６段階後、前記懸濁液を一滴ずつペクチナーゼ（ｐｅｃｔｉｎａｓｅ）酵素溶液に添加して反応させる段階（Ｓ７段階）と、に供し、
前記Ｓ７段階の反応を経た溶液を遠心分離して沈澱させ、生成された沈殿物を酒精アルコールに溶解した後、滅菌生理食塩水に再び懸濁して濾過した後に濾液を濃縮したものであることを特徴とする。
【００１９】
また、本発明は、前記人参類サポニンが、プロトパナキサジオール（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）系サポニンが９０％以上であることを特徴とし、前記プロトパナキサジオール（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）系サポニンが活性型プロトパナキサジオール（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）であり、該活性型プロトパナキサジオールがコンパウンドＫ、Ｒｄ、Ｆ２、Ｒｇ３であることを特徴とする、赤血球数増加及び中性脂肪減少、幹細胞分化作用及び細胞の寿命延長作用に有用な薬学組成物である。
【発明の効果】
【００２０】
本発明は、前記構成によって次のような効果を有する。
【００２１】
本発明の薬学組成物は、結合している糖を脱離させて活性型成分として製造される人参類サポニンを有効成分として含み、赤血球数増加及び中性脂肪減少に有用である一方、有害性有機溶媒の残留性に関する問題点が解消された人参類サポニンを有効成分として含み、赤血球数増加及び中性脂肪減少、幹細胞分化作用及び細胞の寿命延長作用に有用であるという効果を発現する。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】図１は、自動温湿度調節装置の側面図である。
【図２】図２は、ＰＰＴ系列のサポニン構造及びＰＰＤ系列のサポニン構造である。
【図３】図３は、人参類のサポニンで、酵素反応によってグルコースが脱離していく過程を示した図（人参サポニンＲｂ１で、酵素反応によってグルコースが脱離し、活性型サポニンであるコンパウンドＫが製造される過程を示した図）である。
【図４】図４は、「熱処理サポニン懸濁液」で、酵素反応によってグルコースが脱離していく工程を図式化したものである。
【図５】図５は、ＣＫＳの活性型サポニンのＨＰＬＣによる分析結果（総サポニン含量のうち、コンパウンドＫ：５２％、Ｒｄ：３４．４％、Ｆ２：２．６９％、Ｒｇ３：２％の結果を示す）である。
【図６】図６は、粒度分析器によるＣＫＳ溶液の分析結果である（平均粒子が１μｍ以下で分析される）。
【図７】図７は、グループ当たり４匹のＳＤラットの腹腔に、２０ヶ月齢から３７日間、１日１回ＣＫＳを投与して血液を採取した後に分析した、血液及び血球の結果である（中性脂肪（ＴＧ）は、統計的に有意性がある結果である。平均４５０ｍｇ／ｄｌであった対照群に比べて、ＣＫＳ投与実験群は２５０ｍｇ／ｄｌで、５５％水準で減少した。また、総Ｈｅｍａｔｏｃｒｉｔ（Ｈｃｔ）は、４５％に対して５７．８％と高くなり、赤血球（ＲＢＣ）の数値は、７×１０６個／μｌに対して９．１２×１０６個／μｌで、略３０％の増加を示す）。
【図８】図８は、ヒトの歯由来の幹細胞を利用した実験で、中間葉幹細胞（ＭＳＣｓ）の倍加時間（Ｄｏｕｂｌｉｎｇ  ｔｉｍｅ）を観察した結果である（結果として、１０ｎｇ／ｍｌの濃度で一番少ないＰＤＴ（Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ  ｄｏｕｂｌｉｎｇ  ｔｉｍｅ）時間を示した）。
【図９】図９は、ヒトの歯由来の幹細胞を利用した実験で、ヒト由来白血球癌細胞に対するＰＤＴを測定した結果である（１０ｎｇ／ｍｌの濃度で一番長い時間を示し、白血球癌細胞の成長速度を遅くした）。
【図１０】図１０は、細胞内β−ガラクトシダーゼの含量を示すものであり、ヒトの歯由来の幹細胞を利用して評価した結果である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下に、前記課題の解決手段を詳細に説明する。本発明の要旨を不必要に不明瞭にすると判断される公知技術の詳細な内容は省略する。
【００２４】
本発明では、自動温湿度調節装置を利用して人参類を熱処理している。前記人参類とは、山参、山養参、培養根、生人参（スサム）、花旗参、田七参、又は人参の根のいずれか１つ又は２つ以上をいう。まず、自動温湿度調節装置の詳細な構造を図１にて説明する。高温高圧蒸気控室で待機中の蒸気が、バルブを通じて自動温湿度調節室に送られ、ここで連続作業によって活性型人参が製造され、乾燥される。スチーム注入自動バルブが開放されれば、空気バルブが自動で開放されて自動温湿度調節室がスチームで満たされる。空気が除去されれば、自動認識で空気バルブが自動で閉鎖され、温度及び圧力が活性化支点まで到逹すれば、スチーム注入自動バルブが閉鎖されて１０分間維持される。１０分間経過後、空気バルブが自動で開放されて圧力が低下する。温度が９０℃に到達すれば、再び空気バルブが閉鎖され、スチーム注入バルブが開放され、自動温湿度調節室がスチームで満たされる。空気が除去されれば、自動認識で空気バルブが自動で閉鎖され、温度及び圧力が活性化支点まで到逹すれば、スチーム注入自動バルブが閉鎖されて１０分間維持される。前記操作をさらに１回繰り返し、計３回に亘って人参類を熱処理して活性化させる。
【００２５】
本発明では、熱処理によって活性型成分を製造する。具体的には、１２１℃、１．１ｋｇ／ｃｍ２で１０分間熱処理し、計３回繰り返した（Ｈｅａｔｅｄ  Ｓａｐｏｎｉｎ製造、以下「ＨＳ」製造と称する）。これを粉砕機で破砕し、８０％薬局方エタノール（又は、８０％酒精アルコール）に懸濁してサポニン成分を抽出した。これは、ＰＰＴに比べてＰＰＤは、８０％エタノール溶液によって充分に抽出ができるからである。このように抽出したサポニン成分を蒸発濃縮し、これを再び水に懸濁してＰＰＤ活性型製造原料として利用した。懸濁原料を、チューブ連動式ポンプ（Ｐｅｒｉｓｔａｌｔｉｃ  ｐｕｍｐ）を利用して一定量ずつ酵素溶液に注入し、サポニンの糖側鎖を分解して活性型成分を製造した（コンパウンドＫを含むＰＰＤ系列サポニン製造、以下、「ＣＫＳ」製造と称する）。反応原料を一定量ずつ酵素に注入しない場合には、凝固する現象によって反応が充分に進行せず、収率が低い。したがって、本発明では、チューブ連動式ポンプを利用して反応原料を一定量ずつ酵素に注入し、コンパウンドＫを含むＰＰＤ系列の活性型成分を製造した。製造された活性型成分を遠心分離して収去した後、酒精エタノールに再懸濁し、濾過後に濾液を濃縮した。
【実施例】
【００２６】
以下、本発明を実施例及び図面によって具体的に説明する。
【００２７】
＜実施例１＞
空気が除去されて蒸気で満たされた自動温湿度調節装置を利用した。山養参を含む人参類を、１２１℃で１０分間多孔性棚に積載して、水分が落下するようにして過量の水分を取り除きながら、１．１ｋｇ／ｃｍ２圧力下で蒸気に露出させて熱処理した。前記熱処理された人参類を、通気バルブを開放して空気を注入しながら９０℃以下で冷却し、同じ操作をさらに２回繰り返して実施した。
【００２８】
＜実施例２＞
実施例１で製造された活性型人参類を、１ｍｍ以下の粒子に細かく破砕して乾燥した。ここに８０％酒精アルコールを添加して加熱し、充分に活性型サポニンを抽出した。具体的には、製造された活性型人参類６０ｇを破砕して８０％酒精アルコール３００ｍｌを添加して抽出し、略５００μｍ粒子を濾過紙に濾過して固形物を取り除き、酒精アルコール溶液（以下、「熱処理サポニン酒精溶液」又は「ＨＳ酒精溶液」と称する）を収去した。
【００２９】
前記「熱処理サポニン酒精溶液」を、回転濃縮機（Ｒｏｔａｒｙ  ｅｖａｐｏｒａｔｏｒ）を利用して濃縮した（以下、「熱処理サポニン濃縮物」又は「ＨＳ濃縮物」と称する）。前記「熱処理サポニン濃縮物」を少量の酒精アルコール（エタノール）に溶解して滅菌蒸溜水を加え、懸濁液を製造した（以下、「熱処理サポニン懸濁液」と称する。濃度：０．２３ｗ／ｖ％）。汚染によって有害菌が発生することを防止するために、前記「熱処理サポニン懸濁液」を５０℃以上で維持した。
【００３０】
前記「熱処理サポニン懸濁液」とは別に、ペクチナーゼ（Ｐｅｃｔｉｎａｓｅ、商品名：Ｒａｐｉｄａｓｅ、ＤＳＭ  ｆｏｏｄ、オランダ）が含まれた水溶液（２．４％ペクチナーゼ溶液）を、温度自動装置を利用して温度５０℃で維持し（以下、「酵素溶液」と称する）、前記「酵素溶液」に前記「熱処理サポニン懸濁液」を一滴ずつ連続して注入した。前記「熱処理サポニン懸濁液」の注入速度は、５０ｍｌ／ｍｉｎとした。さらに詳しく説明すると、図４のように、チューブ連動式ポンプ（Ｐｅｒｉｓｔａｌｔｉｃ  ｐｕｍｐ）を利用して、「熱処理サポニン懸濁液」を一定量ずつ酵素溶液に注入し（５０ｍｌ／ｍｉｎ）、製造された成分を遠心分離して収去した後、酒精エタノールに再び懸濁して濾過した。その後、濾液を濃縮し、最終的に濃縮物を確保した。水分含量が３０％の山養参６０ｇから、１〜１．４ｇの最終濃縮物が製造された。そのうち、コンパウンドＫ（ＣＫ）の含量が５２％と一番高く、Ｒｄの含量が３４．４％、Ｆ２の含量が２．７％、Ｒｇ３の含量が２％であった（図５及び図６参照）。
【００３１】
【表１】
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【００３２】
前記最終濃縮物では、ＣＫ、Ｒｄ、Ｆ２、Ｒｇ３などのＰＰＤ系列の活性型成分が９１％以上を占めており、コンパウンドＫ（ＣＫ）の含量が５２％と一番高いので、以下、「ＣＫＳ」と称する。
【００３３】
＜実施例３＞
ＣＫＳ懸濁剤の製造及び分析
製造されたＣＫＳを秤量し、１０倍重量の酒精アルコールを添加して溶解した後、０．０１％ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０を含む滅菌生理食塩水に混合して懸濁化した。このように製造した懸濁液を、ｐａｒｔｉｃｌｅ  ｓｉｚｅ  ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｍａｌｖｅｒｎ  ｎａｎｏ  ＺＳ−９０２）を利用して分析した。分析の結果、粒子の平均大きさは７８５．５ｎｍで、１μｍ以下の大きさであることが確認された。
【００３４】
＜実施例４＞
動物投与実験
動物室で１９ヶ月齢まで生育させた雄ＳＤラットを実験に利用し、２０ヶ月齢から３７日間に亘って投与した。計１０匹を５匹ずつ２つのグループに分け、対照群には、滅菌生理食塩水を１ｍｌずつ１日１回腹腔投与し、実験群（ＣＫＳ投与群）には、１．２５ｍｇ／ｋｇの濃度でＣＫＳを１日１回腹腔投与した。実験群には、無菌処理されたＣＫＳ懸濁溶液を利用した。実験途中で自然癌が発生した実験群の１匹については、実験を中止した。３８日目に血液を採取して分析に利用した。血液分析のために、専門血液分析機関である（株）緑十字ラボセルに依頼して試料を確保した。
【００３５】
分析の結果、赤血球（ＲＢＣ）は３０％増加し、ヘマトクリット（Ｈｃｔ）は４５％から５７．８％に増加した。その他、ヘモグロビン（Ｈｂ）、血小板（Ｐｌａｔｅｌｅｔ）、総コレステロール（Ｔ−ｃｈｏ）、高密度コレステロール（ＨＤＬ）、低密度コレステロール（ＬＤＬ）には変化がなかった（図７参照）。
【００３６】
＜実施例５＞
ヒトの親知らず（知歯）を抜いて幹細胞を抽出した。幹細胞を細胞培養しながら、各濃度別にＣＫＳを添加して細胞の数をカウントした。これを基に、世代時間（又は、倍加時間）を計算した。対照群（Ｃｏｎ）は平均４６時間であったが、１０ｎｇ／ｍｌの濃度では平均３０時間で、一番大きく減少した（図８参照）。また、癌細胞に対する抑制能を観察するために、ヒト由来肺癌細胞であるＡ５４９を利用して培養した後、世代時間を調べた。対照群（Ｃｏｎ）は平均２０時間であるのに対して、１０ｎｇ／ｍｌのＣＫＳを用いた場合には平均２５時間で、増加することが分かった。他の濃度でもすべて増加する傾向が認められたが、１０ｎｇ／ｍｌで一番大きい世代時間であった（図９参照）。
【００３７】
＜実施例６＞
ヒトの親知らずを抜いて幹細胞を抽出した。幹細胞を細胞培養しながら、１０ｎｇ／ｍｌのＣＫＳを添加してβ−ガラクトシダーゼ含量分析を実施した。細胞でβ−ガラクトシダーゼの発現の抑制が可能であるということは、細胞の寿命を延ばすことを意味する。ヒトの歯由来幹細胞である中間葉幹細胞を利用して、β−ガラクトシダーゼに対する含量分析を、酵素免疫測定法であるＥＬＩＳＡで分析した。その結果、ＣＫＳ処理をした場合には、３名からそれぞれ分離した親知らず由来の中間葉幹細胞で（Ｄｅｎｔａｌ  ＭＳＣｓ）、β−ガラクトシダーゼの含量はいずれも減少した。１番目の検体（ｄｅｎ１）では、対照群（ｃｏｎ）に比べて１６％減少し、２番目の検体（ｄｅｎ２）では１０％減少し、３番目の検体（ｄｅｎ３）では１２％減少した。β−ガラクトシダーゼの含量は、平均１２．７％減少し、これは細胞の寿命延長と関係があるという結果である。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
結合している糖を脱離させて活性型成分として製造した人参類サポニンを有効成分として含み、赤血球数増加及び中性脂肪減少に有用な薬学組成物が提供される一方、有害性有機溶媒の残留性に関する問題点が解消された人参類サポニンを有効成分として含み、赤血球数増加及び中性脂肪減少、幹細胞分化作用及び細胞の寿命延長作用に有用な薬学組成物が提供され、これらの薬学組成物は、産業上の利用可能性がある。
【図１】
2018538328.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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