(57)【要約】本発明は、被験者における認知機能を改善する方法であって、被験者における認知機能を改善するのに有効な量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を被験者に定期的に投与することを含む方法を提供する。本発明はまた、被験者を治療するのに有効な量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物を被験者に定期的に投与することを含む、アルツハイマー病に罹患した被験者を治療する方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検者における認知機能を改善する方法であって、前記被検者に対して、前記被験者における認知機能を改善するのに有効な量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を定期的に投与することを含む方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、前記認知機能が全般的認知機能、持続的認知、記憶、言語、執行機能、および注意力からなる群から選択される方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法であって、前記認知機能が記憶である方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法であって、前記記憶が短期記憶である方法。
【請求項５】
請求項３に記載の方法であって、前記記憶がワーキングメモリである方法。
【請求項６】
請求項１〜５の何れか１項に記載の方法であって、前記被検者は認知障害に罹患している方法。
【請求項７】
請求項１〜６の何れか１項に記載の方法であって、前記被検者は認知障害を有する傾向があるか、または認知障害の素因を有する方法。
【請求項８】
請求項６〜７の何れか１項に記載の方法であって、前記認知障害は記憶障害である方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、前記記憶障害は短期記憶障害である方法。
【請求項１０】
請求項８または９に記載の方法であって、前記記憶障害は記憶喪失である方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の方法であって、前記記記憶喪失が記憶の加齢変化、軽度認知障害、認知症または鬱病の１以上によって生じる方法。
【請求項１２】
請求項６〜１０の何れか１項に記載の方法であって、前記認知障害が疾患または障害により生じまたはこれに関連する方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法であって、前記疾患または障害は、ＮＭＤＡ受容体に関連した疾患または障害である方法。
【請求項１４】
請求項１２または１３に記載の方法であって、前記疾患または障害は、統合失調症または自閉症である方法。
【請求項１５】
請求項１２または１３に記載の方法であって、前記疾患または障害は、癲癇または不安障害である方法。
【請求項１６】
請求項１２または１３に記載の方法であって、前記疾患または障害は、ハンチントン病である方法。
【請求項１７】
請求項１２または１３に記載の方法であって、前記疾患または障害は、大鬱病性障害（ＭＤＤ）、パーキンソン病、アルツハイマー病、遅発性ジスキネジー、鬱病、鎌状赤血球貧血、脳卒中、慢性疼痛症候群および中毒からなる群より選択される方法。
【請求項１８】
請求項１２または１３に記載の方法であって、前記疾患または障害は、軽度の認知障害、記憶喪失、記憶障害、脳損傷または脳卒中後事象に関連する記憶障害、学習障害、脳腫瘍に関連する行動的および認知的問題からなる群から選択される方法。
【請求項１９】
請求項１２または１３に記載の方法であって、前記疾患または障害は、認知症、レヴィ小体に関連する認知症、加齢性認知力低下、精神病、注意欠陥障害（ＡＤＨＤ）、双極性障害、脳傷害、気分および情動障害、トゥレット症候群、精神遅滞、進行性核上麻痺、クロイツフェルト・ヤコブ病、大脳基底核変性、血管性認知症、およびピック病からなる群から選択される方法。
【請求項２０】
請求項１〜１９の何れか１項に記載の方法であって、前記量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩は、１日１回、前記ヒト被験者に投与される方法。
【請求項２１】
請求項１〜１９の何れか１項に記載の方法であって、前記量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩は、１日１回よりも頻繁に投与される方法。
【請求項２２】
請求項１〜２１の何れか１項に記載の方法であって、前記定期的投与は、少なくとも３間、３０日超、４２日超、８週超、少なくとも１２間、少なくとも２週、または６月超の間継続される方法。
【請求項２３】
請求項１〜２２の何れか１項に記載の方法であって、前記投与されるプリドピジンの量は、２２．５ｍｇ／日〜３１５ｍｇ／日、または９０ｍｇ／日〜３１５ｍｇ／日である方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の方法であって、前記投与されるプリドピジンの量は、約２２．５ｍｇ／日、約４５ｍｇ／日、約６７．５ｍｇ／日、約９０ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日、約１１２．５ｍｇ／日、約１２５ｍｇ／日、約１３５ｍｇ／日、約１５０ｍｇ／日、約１８０ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約２５０ｍｇ／日、または約３１５ｍｇ／日であるである方法。
【請求項２５】
請求項１〜２４の何れか１項に記載の方法であって、前記量のプリドピジンは経口投与される方法。
【請求項２６】
請求項１〜２５の何れか１項に記載の方法であって、前記プリドピジンの医薬的に許容される塩がプリドピジン塩酸塩である方法。
【請求項２７】
請求項１〜２６の何れか１項に記載の方法であって、前記被検者がヒト患者である方法。
【請求項２８】
パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物と、
ｂ）認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被検者を治療するための、前記医薬組成物の使用説明書
を具備するパッケージ。
【請求項２９】
請求項２８に記載のパッケージであって、前記疾患または障害がＮＭＤＡ受容体に関連する疾患または障害であるパッケージ。
【請求項３０】
請求項２８または２９に記載のパッケージであって、前記認知障害が記憶喪失であるパッケージ。
【請求項３１】
請求項２８〜３０の何れか１項に記載のパッケージであって、前記プリドピジンの医薬的に許容可能な塩がプリドピジン塩酸塩であるパッケージ。
【請求項３２】
請求項２８〜３１の何れか１項に記載のパッケージであって、前記医薬組成物中のプリドピジンの量が、２２．５ｍｇ〜３１５ｍｇ、または９０ｍｇ〜３１５ｍｇであるパッケージ。
【請求項３３】
請求項３２に記載のパッケージであって、前記医薬組成物中のプリドピジンの量が、約２２．５ｍｇ、約４５ｍｇ、約６７．５ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１２．５ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３５ｍｇである、請求項３２に記載のパッケージ。約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、または約３１５ｍｇであるパッケージ。
【請求項３４】
認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被検者に投薬するための、または該被検者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、斯かる各単位用量はある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有し、ここでの前記単位用量における前記プリドピジンの量は、前記被験者に投与したときに前記被験者を治療するのに有効である前記単位用量と、
ｂ）その仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療において前記パッケージの使用を指示するラベルを含む前記容器
を具備する治療用パッケージ
【請求項３５】
請求項３４に記載の治療用パッケージであって、前記疾患または障害がＮＭＤＡ受容体に関連する疾患または障害である治療用パッケージ。
【請求項３６】
認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被験者を治療する際に使用するための、ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
【請求項３７】
請求項３６に記載の医薬組成物であって、固体、カプセルまたは錠剤形態である医薬組成物。
【請求項３８】
請求項３６または３７に記載の医薬組成物であって、前記認知障害が記憶喪失である医薬組成物。
【請求項３９】
請求項３６〜３８の何れか１項に記載の医薬組成物であって、前記プリドピジンの医薬的に許容可能な塩がプリドピジン塩酸塩である医薬組成物。
【請求項４０】
請求項３６〜３９の何れか１項に記載の医薬組成物であって、前記医薬組成物中のプリドピジンの量が２２．５ｍｇ〜３１５ｍｇ、または９０ｍｇ〜３１５ｍｇである医薬組成物。
【請求項４１】
請求項４０に記載の医薬組成物であって、前記医薬組成物中のプリドピジンの量が、約２２．５ｍｇ、約４５ｍｇ、約６７．５ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１２．５ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３５ｍｇである、請求項４０に記載の医薬組成物。約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、または約３１５ｍｇである医薬組成物。
【請求項４２】
認知障害に関連した疾患または障害を治療することにおいて有用な単位用量形態の医薬組成物であって、ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有し、ここでの前記組成物中における前記量のプリドピジンは、前記被験者に対して前記組成物の前記単位用量形態の１以上を投与したときに、前記被験者を治療するのに有効である医薬組成物。
【請求項４３】
請求項３５〜４２の何れか１項に記載の医薬組成物であって、前記疾患または障害がＭＤＡ受容体に関連する疾患または障害である医薬組成物。
【請求項４４】
パッケージであって、
ａ）請求項３６〜４３の何れか１項の医薬組成物と、
ｂ）認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被験者を治療するために、前記医薬組成物を使用するための使用説明書
を具備するパッケージ
【請求項４５】
認知障害に関連する疾患または障害の治療において使用するための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項４６】
認知障害に関連する疾患または障害を治療するための医薬の製造における、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩の使用。
【請求項４７】
アルツハイマー病に罹患した被験者を治療する方法であって、前記被験者を治療するのに有効な量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物を、前記被験者に定期的に投与することを含む方法。
【請求項４８】
請求項４７に記載の方法であって、前記量のプリドピジンは前記被験者における神経毒性を低減させるのに有効である方法。
【請求項４９】
請求項４７〜４８の何れか１項に記載の方法であって、前記量のプリドピジンは前記被験者における進行性アルツハイマー病を阻害するのに有効である方法。
【請求項５０】
請求項４７〜４８の何れか１項に記載の方法であって、前記量のプリドピジンは、前記被験者におけるアルツハイマー病の１つ以上の症状を軽減するのに有効である方法。
【請求項５１】
請求項５０に記載の方法であって、前記１以上の症状は、認知障害、機能パフォーマンス障害、日常生活の基本的および器械的活動の障害、生活の質の低下および精神病理からなる群から選択される方法。
【請求項５２】
請求項５０または５１に記載の方法であって、前記１以上の症状は、臨床医のインタビューに基づく変化の印象プラス介護者の入力（ＣＩＢＩＣ−Ｐｌｕｓ）、重度障害バッテリー（ＳＩＢ）、アルツハイマー病協同研究臨床医の全体的な変化の印象（ＡＤＣＳ−ＣＣＧＩＣ）、アルツハイマー病評価尺度−認知（ＡＤＡＳ−Ｃｏｇ）、臨床的認知症評価尺度（ＣＤＲ）、ＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア精神機能障害スケール（ＭＥＮＦＩＳ）、ミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）、Ｍｉｎｉ−ｃｏｇ試験、ブレスト情報-記憶力-集中力検査（ＢＩＭＣ）、ケンブリッジ神経心理学試験自動バッテリー（ＣＡＮＴＡＢ）、アルツハイマー病共同研究−日常生活動作項目（ＡＤＣＳ−ＡＤＬ）評価、ＡＤＣＳ−ＡＤＬ−ＳＩＶ（重度障害バージョン）、認知症のための障害評価表（ＤＡＤ）、機能評価アンケート（ＦＡＱ）、手段的日常生活動作（ＩＡＤＬ）、身体的自己メンテナンススケール（ＰＳＭＳ）および進行性悪化スケール（ＰＤＳ），神経精神症状評価（ＮＰＩ）、アルツハイマー病評価尺度におけるＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア行動病理（Ｂｅｈａｖｅ−ＡＤ）、ＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア精神機能障害スケール（ＭＥＮＦＩＳ）、認知症−Ｌｉｔｅにおける資源活用（ＲＵＤ−Ｌｉｔｅ）、ＥｕｒｏＱｏｌ５次元健康に関連した生活の質スケール（ＥＱ−５Ｄ）、変化の臨床全般印象（ＣＧＩＣ）、臨床面接に基づく印象（ＣＩＢＩ）、または全般的認知機能低下スケール（ＧＤＳ）によって測定される方法。
【請求項５３】
請求項４７〜５２の何れか１項に記載の方法であって、前記定期的投与が経口である方法。
【請求項５４】
請求項４７〜５３の何れか１項に記載の方法であって、１日当たり２２．５〜３１５のプリドピジンが前記患者に投与される方法。
【請求項５５】
請求項５４に記載の方法であって、１日当たり約２２．５ｍｇ、約４５ｍｇ、約６７．５ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１２．５ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、または約３１５ｍｇのプリドピジンが前記患者に投与される方法。
【請求項５６】
請求項４７〜５５の何れか１項に記載の方法であって、前記量のプリドピジンは、約２２．５ｍｇ、約４５ｍｇ、約６７．５ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１２．５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、または約３１５ｍｇのプリドピジンの単位用量によって投与される方法。
【請求項５７】
請求項５６に記載の方法であって、前記単位用量が１日１回投与される方法。
【請求項５８】
請求項５６に記載の方法であって、前記単位用量が１日１回よりも多く投与される方法。
【請求項５９】
請求項５８に記載の方法であって、前記単位用量が１日２回投与される方法。
【請求項６０】
請求項４７〜５９の何れか１項に記載の方法であって、前記プリドピジンがプリドピジン塩酸塩の形態である方法。
【請求項６１】
請求項４７〜６０の何れか１項に記載の方法であって、前記被験者がナイーブな被験者である方法。
【請求項６２】
請求項４７〜６１の何れか１項に記載の方法であって、更に、アルツハイマー病を治療するために承認された薬物の投与を含む方法。
【請求項６３】
請求項６２に記載の方法であって、前記アルツハイマー病を治療するために承認された薬物が、ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン、タクリンまたはメマンチンである方法。
【請求項６４】
請求項４７〜６３の何れか１項に記載の方法であって、更に、向精神薬の投与を含む方法。
【請求項６５】
請求項４７〜６４の何れか１項に記載の方法であって、更に、１以上の抗鬱剤の投与を含む方法。
【請求項６６】
請求項６５に記載の方法であって、前記抗鬱剤が、シタロプラム、フルオキセチン、パロキセイン、セルトラリン、およびトラゾドンからなる群から選択される方法。
【請求項６７】
請求項４７〜６６の何れか１項に記載の方法であって、更に、１以上の抗不安薬の投与を含む方法。
【請求項６８】
請求項６７に記載の方法であって、前記抗不安薬が、ロラゼパムおよびオキサゼパムからなる群から選択される方法。
【請求項６９】
請求項４７〜６８の何れか１項に記載の方法であって、更に、１以上の抗精神病薬の投与を含む方法。
【請求項７０】
請求項６９に記載の方法であって、前記抗不安薬が、前記抗精神病薬が、アリピプラゾール、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン、クエチアピン、リスペリドンおよびジプラシドンからなる群から選択される方法。
【請求項７１】
請求項４７〜７０の何れか１項に記載の方法であって、前記被験者がヒト被験者である方法。
【請求項７２】
アルツハイマー病に罹患した被験者を治療する際に使用するためのプ、リドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項７３】
アルツハイマー病に罹患した被験者を治療する際に使用する医薬の製造のための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項７４】
アルツハイマー病を治療するための、有効量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物。
【請求項７５】
アルツハイマー病に罹患した被験者を治療する際に使用するための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
【請求項７６】
パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンを含有する医薬組成物と、
ｂ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するための、前記医薬組成物の使用説明書
を具備するパッケージ。
【請求項７７】
アルツハイマー病に罹患した被験者に投与するための、またはアルツハイマー病に罹患した被験者に投与することにおいて使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、そのような単位用量の各々がある量のプリドピジンを含み、前記単位用量中の前記プリドピジンの量が、前記被験者に投与したときに前記被験者を治療するために有効である単位用量と、
ｂ）仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含んでおり、前記容器は更に、前記被験者の治療において前記パッケージの使用を指示するラベル含み、または包含する医薬容器
を備えた治療用パッケージ。
【請求項７８】
パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンおよび医薬的に許容可能な担体を含有する第１の医薬組成物と、
ｂ）ある量のアルツハイマー病を治療することが承認された薬物および医薬的に許容可能な担体を含む第２の医薬組成物と、
ｃ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するために、前記第１および前記第２の医薬組成物を一緒に使用するための使用説明書
を具備するパッケージ
【請求項７９】
請求項７８に記載のパッケージであって、前記アルツハイマー病を治療するために承認された薬物が、ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン、タクリン、またはメマンチンであるパッケージ。
【請求項８０】
パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンおよび医薬的に許容可能な担体を含有する第１の医薬組成物と、
ｂ）ある量の１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬、および医薬的に許容可能な担体を含有する第２の医薬組成物と、
ｃ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するために、前記第１および前記第２の医薬組成物を一緒に使用するための使用説明書
を具備するパッケージ
【請求項８１】
請求項８０に記載のパッケージであって、前記抗鬱薬が、シタロプラム、フルオキセチン、パロキセイン、セルトラリン、およびトラゾドンからなる群から選択されるパッケージ。
【請求項８２】
請求項８０に記載のパッケージであって、前記抗不安薬が、ロラゼパムおよびオキサゼパムからなる群から選択されるパッケージ。
【請求項８３】
請求項８０に記載のパッケージであって、前記抗精神病薬が、アリピプラゾール、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン、グアイアピン、リスペリドン、およびジプラシドンからなる群から選択されるパッケージ。
【請求項８４】
アルツハイマー病に罹患した被験者に投薬するため、またはアルツハイマー病に罹患した被験者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、かかる各単位用量が、
ｉ）ある量のプリドピジン、および
ｉｉ）アルツハイマー病を治療することが認可されたある量の薬物
を含有し、単位用量中の前記プリドピジン及び前記アルツハイマー病を治療することが認可された薬物のそれぞれの量が、前記被検者に対する同時投与に際して前記被験者を治療するのに有効である前記単位用量と、
ｂ）そのための仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療における前記パッケージの使用を指示するラベルを含みまたは備える医薬容器
を具備するパッケージを提供する。
【請求項８５】
請求項８４に記載のパッケージであって、前記アルツハイマー病を治療するために承認された薬物が、ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン、タクリン、またはメマンチンであるパッケージ。
【請求項８６】
アルツハイマー病に罹患した被験者に投薬するため、またはアルツハイマー病に罹患した被験者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、斯かる各単位用量が
ｉ）ある量のプリドピジン、および
ｉｉ）ある量の１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬
を含有し、
前記単位用量中の前記プリドピジン及び前記１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬のそれぞれの量が、前記被験者への同時投与に際して有効である単位用量と、
ｂ）そのための仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療における前記パッケージの使用を指示するラベルを含みまたは備える医薬容器
を具備するパッケージ。
【請求項８７】
請求項８６に記載の治療用パッケージであって、前記抗鬱剤が、シタロプラム、フルオキセチン、パロキセイン、セルトラリン、およびトラゾドンからなる群から選択される治療用パッケージ。
【請求項８８】
請求項８６に記載の治療用パッケージであって、前記抗不安薬が、ロラゼパムおよびオキサゼパムからなる群から選択される治療用パッケージ。
【請求項８９】
請求項８６に記載の治療用パッケージであって、前記抗精神病薬が、アリピプラゾール、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン、クエチアピン、リスペリドン、およびジプラシドンからなる群から選択される治療用パッケージ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１５年６月２９日に出願された米国仮出願第６２／１８６，２２１号および２０１５年２月２５日に出願された米国仮出願第６２／１２０，７７１号の優先権を主張し、その全内容を本明細書の一部として本願に援用する。
【０００２】
この出願の全体を通して、様々な刊行物が筆頭著者および出版年によって参照される。これら刊行物の完全な引用は、特許請求の範囲の直前の参照文献の段落に示されている。本明細書に記載する発明日の時点における技術水準をより完全に説明するために、参照文献の段落で引用された刊行物の開示は、その全体を本明細書の一部として本願に援用する。
【背景技術】
【０００３】
プリドピジン（４−［３−（メチルスルホニル）フェニル］−１−プロピル−ピペリジン、ＡＣＲ１６、Ｈｕｎｔｅｘｉｌ）は、ドーパミン作動性の安定化特性を有すると考えられる新規クラスの薬剤のドピジン類（ｄｏｐｉｄｉｎｅｓ）から開発中の薬物である（米国特許公開番号ＵＳ２０１４／０３７８５０８）。ドーパミン作動性安定剤は、ドーパミン作動活性の初期レベルに依存して、中枢神経系（ＣＮＳ）におけるドーパミン依存性機能を増強および相殺できる化合物である（米国特許公開第２０１４／０３７８５０８号）。ドーパミン作動性安定剤は、アンフェタミンなどの覚醒剤によって誘発される過活動を抑制する。対照的に、低レベルのドーパミン機能では、ドーパミン安定剤は行動活性を増強する（米国特許公開第２０１４／０３７８５０８号）。従って、ＨＤ関連の運動症状に対するプリドピジンの主な効果は、プリドピジンの性質を調節するドーパミン伝達を介して起こると予想される（Ｐｏｎｔｅｎ  ２０１０）。プリドピジンおよびその医薬的に許容可能な塩の合成方法は、米国特許第７，９２３，４５９号に開示されている。米国特許第６，９０３，１２０号は、パーキンソン病、ジスキネジー、ジストニア、トゥレット症、医原性および非医原性精神病および幻覚、気分および不安障害、睡眠障害、自閉症スペクトル障害、ＡＤＨＤ、ハンチントン病、加齢関連認知障害、並びにアルコール乱用および麻薬乱用に関連する障害の治療のためのプリドピジンを特許請求の範囲に記載している。
【０００４】
＜アルツハイマー病＞
アルツハイマー病（ＡＤ）は、認知症の最も一般的な形態であり、記憶障害および日常生活を妨害するのに十分なほど深刻なその他の知的能力障害の総称である。ＡＤは認知症症例の６０〜８０％を占めている（ｗｗｗ．ａｌｚ．ｏｒｇ）。
【０００５】
ＡＤは、脳からのシナプスおよびニューロンの喪失、並びに細胞外タンパク質含有沈着物（「老人斑」と呼ばれる）および神経原線維変化の蓄積によって特徴付けられる（Ｓｅｌｋｏｅら、２００１）。
【０００６】
ＡＤの最も一般的な初期症状は、新しく学んだ情報を覚えるのが困難なことである。ＡＤの進行に伴い、方向感覚喪失、気分および行動の変化、並びに会話、嚥下および歩行の困難を含む症状がますます深刻化する。
【０００７】
現在のところ、ＡＤの治療法はない。ＡＤのための新しい効果的な療法が必要とされている。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、被検者における認知機能を改善する方法であって、前記被検者に対して、前記被験者における認知機能を改善するのに有効な量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を定期的に投与することを含む方法を提供する。
【０００９】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物と、
ｂ）認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被検者を治療するための、前記医薬組成物の使用説明書
を具備するパッケージを提供する。
【００１０】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被検者に投薬するための、または該被検者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、斯かる各単位用量はある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有し、ここでの前記単位用量における前記プリドピジンの量は、前記被験者に投与したときに前記被験者を治療するのに有効である前記単位用量と、
ｂ）その仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療において前記パッケージの使用を指示するラベルを含む前記容器
を具備する治療用パッケージを提供する。
【００１１】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被験者を治療する際に使用するための、ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物を提供する。
【００１２】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被験者を治療するのに有用な、ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物を提供する。
【００１３】
本発明はまた、認知障害に関連した疾患または障害を治療することにおいて有用な単位用量形態の医薬組成物を提供し、これはある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有し、ここでの前記組成物中における前記量のプリドピジンは、前記被験者に対して前記組成物の前記単位用量形態の１以上を投与したときに、前記被験者を治療するのに有効である。
【００１４】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）医薬組成物と、
ｂ）認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被験者を治療するために、前記医薬組成物を使用するための使用説明書
を具備するパッケージを提供する。
【００１５】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害の治療において使用するための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００１６】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害を治療するための医薬の製造における、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００１７】
加えて、本発明は、アルツハイマー病に罹患した被験者を治療する方法であって、被験者を治療するのに有効な量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物を提供する。
【００１８】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者の治療に用いるための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００１９】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者の治療において使用するための医薬の製造のための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００２０】
本発明はまた、アルツハイマー病を治療するための有効量のプリドピジンまたはその医薬的に許容される塩を含有する医薬組成物を提供する。
【００２１】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者の治療において使用するための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物を提供する。
【００２２】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンを含む医薬組成物と、
ｂ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するための、前記医薬組成物の使用説明書
を備えたパッケージを提供する。
【００２３】
本発明は、アルツハイマー病に罹患した被験者に投与するための、またはアルツハイマー病に罹患した被験者に投与することにおいて使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、そのような単位用量の各々がある量のプリドピジンを含み、前記単位用量中の前記プリドピジンの量が、前記被験者に投与したときに前記被験者を治療するために有効である単位用量と、
ｂ）仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含んでおり、前記容器は更に、前記被験者の治療において前記パッケージの使用を指示するラベル含み、または包含する医薬容器
を備えた治療用パッケージを提供する。
【００２４】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンおよび医薬的に許容可能な担体を含有する第１の医薬組成物と、
ｂ）ある量のアルツハイマー病を治療することが承認された薬物および医薬的に許容可能な担体を含む第２の医薬組成物と、
ｃ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するために、前記第１および前記第２の医薬組成物を一緒に使用するための使用説明書
を具備するパッケージを提供する。
【００２５】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンおよび医薬的に許容可能な担体を含有する第１の医薬組成物と、
ｂ）ある量の１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬、および医薬的に許容可能な担体を含有する第２の医薬組成物と、
ｃ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するために、前記第１および前記第２の医薬組成物を一緒に使用するための使用説明書
を具備するパッケージを提供する。
【００２６】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者に投薬するため、またはアルツハイマー病に罹患した被験者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、かかる各単位用量が、
ｉ）ある量のプリドピジン、および
ｉｉ）アルツハイマー病を治療することが認可されたある量の薬物
を含有し、該単位用量中の前記プリドピジン及び前記アルツハイマー病を治療することが認可された薬物のそれぞれの量が、前記被検者に対する同時投与に際して前記被験者を治療するのに有効である前記単位用量と、
ｂ）そのための仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療における前記パッケージの使用を指示するラベルを含みまたは備える医薬容器
を具備するパッケージを提供する。
【００２７】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者に投薬するため、またはアルツハイマー病に罹患した被験者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、斯かる各単位用量が
ｉ）ある量のプリドピジン、および
ｉｉ）ある量の１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬
を含有し、
前記単位用量中の前記プリドピジン及び前記１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬のそれぞれの量が、前記被験者への同時投与に際して有効である単位用量と、
ｂ）そのための仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療における前記パッケージの使用を指示するラベルを含みまたは備える医薬容器
を具備するパッケージを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】Ｙ字型迷路における、ＭＫ−８０１により誘発された自発的交替行動の破壊（図１Ａ）および総アーム侵入数（図１Ｂ）に対するプリドピジンの効果。データは平均±ＳＥＭを表す。＊＊ｐ＜０．０１；正常群と比較して統計学的に有意（スチューデントｔ検定）。＃ｐ＜０．０５；対照群と比較して統計的に有意（ダネットの多重比較試験）。各群において１２匹のマウスを使用した。
【図２】ハンチントン病ＳＩＲは神経核内封入体（ＮＮＩ）に蓄積する。
【図３】プリドピジンは、ＹＡＣ１２８皮質層共培養におけるスパインの喪失を救済する。
【図４】プリドピジンは、ＰＳ−ＫＩ（ＡＤ）ニューロンにおけるキノコ状スパインの喪失を救済する。
【図５】ラットのＰＦＣにおけるアセチルコリン（Ａｃｈ）レベルに対するプリドピジン（１５および６０ｍｇ／ｋｇ）の効果（データは平均ベースライン±ＳＥＭとして表した）。
【図６】ラットのＳＴＲでのＡＣｈレベルに対するプリドピジン（１５および６０ｍｇ／ｋｇ）の効果（データは平均ベースライン±ＳＥＭとして表した）。
【図７】ラットの海馬でのＡＣｈレベルに対するプリドピジン（１５および６０ｍｇ／ｋｇ）の効果（データは平均％ベースライン±ＳＥＭとして表した）。
【図８】βアミロイド１〜４２（１０μＭ）の存在下で培養した初代ニューロンの生存に対するプリドピジン（６濃度）およびＢＤＮＦ（５０ｎｇ／ｍL）の効果を、対照のパーセンテージで表したものである（平均±ＳＥＭ；＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００５；βアミロイド１〜４２対プリドピジン／ＢＤＮＦ；一方向Ａｎｏｖａ検定に続くダネット検定）。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明は、被験者における認知機能を改善する方法であって、被検者に対して、被験者における認知機能を改善するのに有効な量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を被験者に周期的に投与することを含む方法を提供する。
【００３０】
一実施形態において、前記認知機能は、全般的認知機能、持続的認知、記憶、言語、執行機能、および注意力からなる群から選択される。別の実施形態では、前記認知機能は記憶である。
【００３１】
一実施形態において、前記記憶は短期記憶である。別の実施形態において、前記記憶はワーキングメモリである。
【００３２】
一実施形態において、前記被験者は認知障害に罹患している。別の実施形態において、前記被験者は認知障害を有する傾向があるか、またはその素因がある。
【００３３】
一実施形態において、前記認知障害は記憶障害である。
【００３４】
一実施形態において、前記記憶障害は、短期記憶障害である。別の実施形態において、前記記憶障害は記憶喪失である。
【００３５】
一実施形態において、前記記憶喪失は、記憶における加齢関連変化、軽度認知障害、認知症または鬱病の１以上によって引き起こされる。
【００３６】
一実施形態において、前記認知障害は、疾患または障害によって引き起こされるか、またはこれと関連する。
【００３７】
一実施形態において、前記疾患または障害はＮＭＤＡ受容体に関連する疾患または障害である。別の実施形態において、前記疾患または障害は、統合失調症または自閉症である。別の実施形態において、前記疾患または障害は癲癇または不安障害である。別の実施形態において、前記疾患または障害は、ハンチントン病である。別の実施形態において、前記疾患または障害は、大鬱病性障害（ＭＤＤ）、パーキンソン病、アルツハイマー病、遅発性ジスキネジー、鬱病、鎌状赤血球貧血、脳卒中、慢性疼痛症候群および中毒からなる群より選択される。別の実施形態では、前記疾患または障害は、軽度の認知障害、記憶喪失、記憶障害、脳損傷または脳卒中後の事象に関連する記憶障害、学習欠陥、脳腫瘍に関連する行動的および認知的な問題が含まれる。別の実施形態において、前記疾患または障害は、認知症、レヴィ小体に関連する認知症、加齢性認知低下、精神病、注意欠陥障害（ＡＤＨＤ）、双極性障害、脳損傷、気分および情動障害、トゥレット進行性核上麻痺、クロイツフェルト−ヤコブ病、大脳基底核変性、血管性認知症、およびピック病が含まれるが、これらに限定されない。
【００３８】
一実施形態において、前記量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩は、１日１回、ヒト被験者に投与される。別の実施形態において、前記量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩は、１日１回よりも頻繁に投与される。別の実施形態において、前記周期的投与は、少なくとも３日間、３０日間を超えて、４２日間を超えて、８週間以上、少なくとも１２週間、少なくとも２４週間、２４週間を超えて、または６カ月以上継続する。
【００３９】
一実施形態において、前記投与されるプリドピジンの量は、２２．５ｍｇ／日〜３１５ｍｇ／日または９０ｍｇ／日〜３１５ｍｇ／日である。別の実施形態において、前記投与されるプリドピジンの量は、約２２．５ｍｇ／日、約４５ｍｇ／日、約６７．５ｍｇ／日、約９０ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日、約１１２．５ｍｇ／日、約１２５ｍｇ／日、約１３５ｍｇ／日、約１５０ｍｇ／日、約１８０ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約２５０ｍｇ／日、約３１５ｍｇ／日である。
【００４０】
一実施形態において、前記量のプリドピジンは経口投与される。
【００４１】
一実施形態において、前記医薬的に許容されるプリドピジンの塩は、塩酸プリドピジンである。
【００４２】
一実施形態において、前記被験者はヒト患者である。
【００４３】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩および医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物と、
ｂ）認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被検者を治療するための、前記医薬組成物の使用説明書
を具備するパッケージを提供する。
【００４４】
一実施形態において、前記疾患または障害は、ＮＤＡ受容体に関連する疾患または障害である。
【００４５】
一実施形態において、前記認知障害は記憶喪失である。
【００４６】
一実施形態において、前記プリドピジンの医薬的に許容可能な塩は、塩酸プリドピジンである。
【００４７】
一実施形態において、前記医薬組成物中のプリドピジンの量は、２２．５ｍｇ〜３１５ｍｇまたは９０ｍｇ〜３１５ｍｇである。別の実施形態において、医薬組成物中のプリドピジンの量は、約２２．５ｍｇ、約４５ｍｇ、約６７．５ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１２．５ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、または約３１５ｍｇである。
【００４８】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被検者に投薬するための、または該被検者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、前記プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物であって、前記単位投与量中の前記プリドピジンの量は、前記被験者に投与すると、前記被験者を治療するのに有効である前記単位用量と、
ｂ）そのための仕上げられた医薬容器であって、該容器は、前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療において前記パッケージの使用を指示するラベルを含み、または包含する前記医薬容器
を具備した治療用パッケージを提供する。
【００４９】
一実施形態において、前記疾患または障害は、ＮＭＤＡ受容体に関連する疾患または障害である。
【００５０】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被験者を治療する際に使用するための、ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物を提供する。
【００５１】
一実施形態において、前記医薬組成物は、固体、カプセルまたは錠剤の形態である。
【００５２】
一実施形態において、前記認知障害は記憶喪失である。
【００５３】
一実施形態において、前記プリドピジンの医薬的に許容可能な塩は、プリドピジン塩酸塩である。
【００５４】
一実施形態において、前記医薬組成物中のプリドピジンの量は、２２．５ｍｇ〜３１５ｍｇまたは９０ｍｇ〜３１５ｍｇである。別の実施形態において、前記医薬組成物中のプリドピジンの量は、約２２．５ｍｇ、約４５ｍｇ、約６７．５ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１２．５ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、または約３１５ｍｇである。
【００５５】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被験者を治療するのに有用な単位用量形態の医薬組成物であって、ある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有し、前記組成物中の前記量のプリドピジンは、前記被検者に１以上の前記単位用量形態の組成物を投与したときに、前記被験者を治療するのに有効である医薬組成物を提供する。
【００５６】
一実施形態において、前記疾患または障害は、ＮＭＤＡ受容体に関連する疾患または障害である。
【００５７】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）医薬組成物と、
ｂ）認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被験者を治療するための医薬組成物の使用説明書
を具備するパッケージを提供する。
【００５８】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害を治療する際に使用するための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００５９】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害を治療するための医薬の製造における、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００６０】
前述のおよび以下の実施形態について、本明細書に開示された各実施形態は、開示された他の各実施形態に適用可能であると考えられる。例えば、本方法の実施形態に列挙される要素は、本明細書に記載の医薬組成物、パッケージ、および使用の実施形態において使用することができ、逆もまた同様である。
【００６１】
本発明は更に、アルツハイマー病に罹患した被験者を治療する方法であって、被験者を治療するために有効な量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物を、被験者に定期的に投与することを含む方法を提供する。
【００６２】
一実施形態において、前記量のプリドピジンは、被験者における神経毒性を低下させるのに有効である。別の実施形態において、前記量のプリドピジンは、被験者における進行性アルツハイマー病を阻止するのに有効である。さらなる実施形態では、プリドピジンの量は、被験者におけるアルツハイマー病の１以上の症状を軽減するのに有効である。
【００６３】
一実施形態において、前記１以上の症状は、認知障害、機能パフォーマンス障害、日常生活の基本的および器械的活動の障害、生活の質の低下および精神病理からなる群から選択される。別の実施形態において、前記１以上の症状は、臨床医のインタビューに基づく変化の印象プラス介護者の入力（ＣＩＢＩＣ−Ｐｌｕｓ）、重度障害バッテリー（ＳＩＢ）、アルツハイマー病協同研究臨床医の全体的な変化の印象（ＡＤＣＳ−ＣＣＧＩＣ）、アルツハイマー病評価尺度−認知（ＡＤＡＳ−Ｃｏｇ）、臨床的認知症評価尺度（ＣＤＲ）、ＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア精神機能障害スケール（ＭＥＮＦＩＳ）、ミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）、Ｍｉｎｉ−ｃｏｇ試験、ブレスト情報-記憶力-集中力検査（ＢＩＭＣ）、ケンブリッジ神経心理学試験自動バッテリー（ＣＡＮＴＡＢ）、アルツハイマー病共同研究−日常生活動作項目（ＡＤＣＳ−ＡＤＬ）評価、ＡＤＣＳ−ＡＤＬ−ＳＩＶ（重度障害バージョン）、認知症のための障害評価表（ＤＡＤ）、機能評価アンケート（ＦＡＱ）、手段的日常生活動作（ＩＡＤＬ）、身体的自己メンテナンススケール（ＰＳＭＳ）および進行性悪化スケール（ＰＤＳ），神経精神症状評価（ＮＰＩ）、アルツハイマー病評価尺度におけるＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア行動病理（Ｂｅｈａｖｅ−ＡＤ）、ＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア精神機能障害スケール（ＭＥＮＦＩＳ）、認知症−Ｌｉｔｅにおける資源活用（ＲＵＤ−Ｌｉｔｅ）、ＥｕｒｏＱｏｌ５次元健康に関連した生活の質スケール（ＥＱ−５Ｄ）、変化の臨床全般印象（ＣＧＩＣ）、臨床面接に基づく印象（ＣＩＢＩ）、または全般的認知機能低下スケール（ＧＤＳ）によって測定される。
【００６４】
一実施形態において、前記定期的投与は経口投与である。
【００６５】
一実施形態では、１日当たり２２．５〜３１５ｍｇのプリドピジンを患者に投与する。別の実施形態では、１日当たり約２２．５ｍｇ、約４５ｍｇ、約６７．５ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１２．５ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、または約３１５ｍｇのプリドピジンを患者に投与する。
【００６６】
一実施形態において、前記量のプリドピジンは、約２２．５ｍｇ、約４５ｍｇ、約６７．５ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１２．５ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、または約３１５ｍｇの単位用量で投与される。
【００６７】
一実施形態において、前記単位用量は１日１回投与される。
【００６８】
一実施形態において、前記単位用量は１日１回より多く投与される。別の実施形態において、前記単位用量は１日２回投与される。
【００６９】
一実施形態において、前記プリドピジンは塩酸プリドピジンの形態である。
【００７０】
一実施形態において、前記被験者はナイーブな被験者である。
【００７１】
一実施形態において、前記方法は更に、アルツハイマー病を治療するために承認された薬物の投与を含む。別の実施形態において、前記方法は更に、向精神薬の投与を含む。一実施形態において、前記アルツハイマー病を治療するために承認された薬物は、ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン、タクリン、またはメマンチンである。
【００７２】
一実施形態において、前記方法は更に、１上の抗鬱剤の投与を含む。別の実施形態において、該抗鬱薬は、シタロプラム、フルオキセチン、パロキセイン、セルトラリン、およびトラゾドンからなる群から選択される。
【００７３】
一実施形態において、前記方法は更に、１以上の抗不安薬の投与を含む。別の実施形態において、該抗不安薬は、ロラゼパムおよびオキサゼパムからなる群から選択される。
【００７４】
一実施形態において、前記方法は更に、１以上の抗精神病薬の投与を含む。別の実施形態において、該抗精神病薬は、アリピプラゾール、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン、クエチアピン、リスペリドンおよびジプラシドンからなる群から選択される。本発明はまた、アルツハイマー病に罹患しているヒト被験者の治療に使用するための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００７５】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するのに使用するための医薬の製造のための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００７６】
本発明はまた、アルツハイマー病を治療するための有効量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物を提供する。
【００７７】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者を治療する際に使用するための、プリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物を提供する。
【００７８】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンを含有する医薬組成物と、
ｂ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するための、前記医薬組成物の使用説明
を具備するパッケージを提供する。
【００７９】
本発明はまた、認知障害に関連する疾患または障害に罹患した被検者に投薬するための、または該被検者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、斯かる各単位用量はある量のプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有し、ここでの前記単位用量における前記プリドピジンの量は、前記被験者に投与したときに前記被験者を治療するのに有効である前記単位用量と、
ｂ）その仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療において前記パッケージの使用を指示するラベルを含む前記容器
を具備する治療用パッケージを提供する。
【００８０】
アルツハイマー病に罹患したヒト患者における神経毒性を低下させる方法であって、前記患者に対して、該患者を治療するのに有効なプリドピジンまたはその医薬的に許容可能な塩を含有する医薬組成物を定期的に投与することを含む方法。
【００８１】
一実施形態において、前記被験者はヒト被験者である。
【００８２】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンおよび医薬的に許容可能な担体を含有する第１の医薬組成物と、
ｂ）ある量のアルツハイマー病を治療することが承認された薬物および医薬的に許容可能な担体を含む第２の医薬組成物と、
ｃ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するために、前記第１および前記第２の医薬組成物を一緒に使用するための使用説明書
を具備するパッケージを提供する。
【００８３】
一実施形態において、前記アルツハイマー病を治療するために承認された薬物は、ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン、タクリン、またはメマンチンである。
【００８４】
本発明はまた、パッケージであって、
ａ）ある量のプリドピジンおよび医薬的に許容可能な担体を含有する第１の医薬組成物と、
ｂ）ある量の１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬、および医薬的に許容可能な担体を含有する第２の医薬組成物と、
ｃ）アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するために、前記第１および前記第２の医薬組成物を一緒に使用するための使用説明書
を具備するパッケージを提供する。
【００８５】
一実施形態において、前記抗鬱薬は、シタロプラム、フルオキセチン、パロキセイン、セルトラリン、およびトラゾドンからなる群から選択される。
【００８６】
一実施形態において、前記抗不安薬は、ロラゼパムおよびオキサゼパムからなる群から選択される。
【００８７】
一実施形態において、前記抗精神病薬は、アリピプラゾール、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン、クエチアピン、リスペリドン、およびジプラシドンからなる群から選択される。
【００８８】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者に投薬するため、またはアルツハイマー病に罹患した被験者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、かかる各単位用量が、
ｉ）ある量のプリドピジン、および
ｉｉ）アルツハイマー病を治療することが認可されたある量の薬物
を含有し、単位用量中の前記プリドピジン及び前記アルツハイマー病を治療することが認可された薬物のそれぞれの量が、前記被検者に対する同時投与に際して前記被験者を治療するのに有効である前記単位用量と、
ｂ）そのための仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療における前記パッケージの使用を指示するラベルを含みまたは備える医薬容器
を具備するパッケージを提供する。
【００８９】
一実施形態において、前記アルツハイマー病を治療するために承認された薬物は、ドネペジル、リバスチグミン、ガランタミン、タクリン、またはメマンチンである。
【００９０】
本発明はまた、アルツハイマー病に罹患した被験者に投薬するため、またはアルツハイマー病に罹患した被験者への投薬において使用するための治療用パッケージであって、
ａ）１以上の単位用量であって、かかる各単位用量が
ｉ）ある量のプリドピジン、および
ｉｉ）ある量の１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬
を含有し、
前記単位用量中の前記プリドピジン及び前記１以上の抗鬱薬、抗不安薬または抗精神病薬のそれぞれの量が、前記被験者への同時投与に際して有効である単位用量と、
ｂ）そのための仕上げられた医薬容器であって、該容器は前記単位用量または複数の単位用量を含み、前記容器は更に、前記被検者の治療における前記パッケージの使用を指示するラベルを含みまたは備える医薬容器
を具備するパッケージを提供する。
【００９１】
一実施形態において、前記抗鬱薬は、シタロプラム、フルオキセチン、パロキセイン、セルトラリン、およびトラゾドンからなる群から選択される。
【００９２】
一実施形態において、前記抗不安薬は、ロラゼパムおよびオキサゼパムからなる群から選択される。
【００９３】
一実施形態において、前記抗精神病薬は、アリピプラゾール、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン、クエチアピン、リスペリドン、およびジプラシドンからなる群から選択される。
【００９４】
上記の実施形態の組み合わせもまた、本発明の範囲内である。
【００９５】
前記抗精神病薬は、幻覚、妄想、攻撃性、興奮、敵意および／または非協調性を治療するために使用することができる。前記抗不安薬は、不安、不穏、口頭での破壊的な行動および／または抵抗を治療するために使用され得る。抗鬱薬は、低気分や過敏症を治療するために使用することができる（ｗｗｗ．ａｌｚ．ｏｒｇ）。
【００９６】
前述の実施形態では、本明細書で開示される各実施形態は、他の開示された各実施形態にも用可能であると考えられる。加えて、医薬組成物の実施形態に列挙される要素は、本明細書に記載の方法および使用の実施形態においても使用することができる。
【００９７】
＜用語＞
本明細書中で使用するとき、別段の記載がない限り、以下の各用語は、下記の定義を有するものとする。
【００９８】
本明細書中で使用するとき、「被験者に投与する」とは、疾患、障害または状態に関連する症状、例えば病的状態を緩和、治癒または軽減するために、被験者に薬剤、薬物、または救済物を与えること、投与すること、または適用することを意味する。経口投与は、本化合物を被験者に投与する１つの方法である。
【００９９】
本明細書で使用するとき、「認知機能」とは、ヒトがアイデアを認識し、知覚し、または理解する知的プロセスを意味する。認知機能は、知覚、思考、推論、および記憶（短期記憶を含む）の全ての側面を含む。
【０１００】
本明細書で使用される場合、「認知機能の改善」とは、認知機能を増大させることに加えて、認知障害の進行の遅延、停止、または逆転を含む。認知機能の領域は、Ｆｉｏｒａｖａｎｔｉ，ｅｔ．ａｌ（２０１２）に記載されている。
【０１０１】
本明細書で使用される場合、「認知障害」は、認知機能に対する障壁として作用する何れかの特徴を説明する包括的な用語である。認知障害には、より高い推論の喪失、忘却、学習障害、集中困難、知能低下、および精神機能の他の低下を含まれ得る。認知障害は先天性であるか、または環境要因、脳損傷、神経障害または精神疾患によって引き起こされる可能性がある。認知力低下および認知機能障害もまた、認知障害とみなされる。
【０１０２】
本明細書で使用される「短期記憶」は、少量の情報が、その発生直後に認識、回想、および復唱する能力である。
【０１０３】
ＭＫ−８０１、またはジゾシルピンは、ＭＤＡ受容体アンタゴニストである。
【０１０４】
本明細書で使用するとき、「ＮＭＤＡ受容体に関連する疾患または障害」と、は、ＮＭＤＡ受容体の不均衡または機能不全に関連するか、またはそれに起因する任意の疾患または障害である。これは、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストにより誘発もしくは惹起され得る疾患または症状、ＭＫ−８０１のようなＮＭＤＡ受容体アンタゴニストにより治療され得る疾患、またはＭＫ−８０１のような受容体アンタゴニストが症状の重篤度を増加もしくは減少させる疾患を含むことができる。
【０１０５】
本発明の方法は、認知障害およびＮＭＤＡ受容体の両方に関連する疾患および障害における認知機能を改善するために有用である。以下の疾患または障害が、認知障害およびＮＭＤＡ受容体に関連している：即ち、統合失調症、自閉症（Ｓａｕｎｄｅｒｓ、２０１２）、癲癇（ｖａｎ  Ｒｉｊｃｋｅｖｏｒｓｅｌ  ２００６、Ｓｔａｆｓｔｒｏｍ  １９９７）、不安障害（Ｆｅｒｒｅｒｉ  ２０１１、Ｄｉｅｔｚ  ２０１４）、大鬱病性障害（ＭＤＤ）（Ｋａｂｆｅ  ２０１４、Ｒａｐａｐｏｒｔ  ２００９）、パーキンソン病（Ｄｕｂｏｉｓ  １９９７、Ｊｏｎｋｅｒｓ  ２０００）、アルツハイマー病（米国特許公報第２０１３００６５９６６号）、遅発性ジスキネジア（Ｋｒａｂｂｅｎｄａｍ  ２０００、Ｓｅｏ  １９９７）、鬱病（Ａｕｓｔｉｎ  ２００１、Ａｔｅｓ−Ａｌａｇｏｚ  ２０１３）、鎌状赤血球貧血症（Ｓｔｅｅｎ  ２００５、米国特許第８６８００４２号）、脳卒中（Ｃｕｍｍｉｎｇ  ２０１３、米国特許公開第２０１３００６５９６６号）、慢性疼痛症候群（Ｈａｒｔ  ２００３、Ｚｅｙｎｅｐ  ２０１３）、慢性疼痛症候群（Ｈａｒｔ  ２００３，  Ｚｅｙｎｅｐ  ２０１３）、常用癖（Ｇｏｕｌｄ  ２０１０、米国特許第５，３２１，０１２号）、及びハンチントン病（Ｆｏｒｏｕｄ  １９９５、米国特許公開番号２０１３００６５９６６）である。
【０１０６】
本発明の方法により治療され得る他の疾患及び障害には次のものが含まれる：即ち、記憶欠損、軽度認知障害、記憶喪失、脳損傷または脳卒中後事象に関連する記憶障害、学習障害、および脳腫瘍に関連する行動障害および認知障害である。
【０１０７】
本発明の方法により治療され得る追加の疾患及び障害には、次のものが含まれる：即ち、認知症、レビー小体に関連した認知症、加齢に関連する認知低下、精神病、注意欠陥障害（ＡＤＨＤ）、双極性障害、脳傷害、気分および情動障害、睡眠時無呼吸症候群、トゥレット症候群、精神遅滞、進行性核上麻痺、クロイツフェルト・ヤコブ病、血管性認知症、大脳皮質基底核変性症、およびピック病である。
【０１０８】
本明細書中で使用される場合、ミリグラムで測定されたプリドピジンの「量」または「用量」は、製剤の形態にかかわらず、製剤中に存在するプリドピジン（４−［３−（メチルスルホニル）フェニル］−１−プロピル−ピペリジン）のミリグラムを指す。例えば、「９０ｍｇプリドピジン」を含有する単位用量は、製剤の形態にかかわらず、製剤中のプリドピジン塩基の量が９０ｍｇであることを意味する。従って、塩、例えばプリドピジン塩酸塩の形態である場合、９０ｍｇのプリドピジンの用量を提供するのに必要な塩形態の重量は、塩の存在のために９０ｍｇより大きいであろう。
【０１０９】
本明細書で使用する「単位用量（単数）」、「単位用量（複数）」および「単位用量形態（複数可）」は、単一の薬物投与実体（単数）／実体（複数）を意味する。
【０１１０】
本明細書で使用する場合、数値または範囲の文脈における「約」は、記載され、または請求された数値または範囲の±１０％を意味する。
【０１１１】
本明細書で使用するとき、目的を達成するのに有効な量における「有効な」とは、本開示の方法で使用されたときに、過度の有害な副作用（例えば毒性、刺激またはアレルギー反応）を伴わずに、合理的な利益／リスク比に見合った指示された治療応答を生じるのに十分な成分量を意味する。例えば、認知障害を治療するのに有効な量である。特定の有効量は、治療される特定の状態、患者の身体状態、処置される哺乳動物のタイプ、治療の持続時間、併用療法の性質（存在する場合）、および使用される特定の製剤化合物またはその誘導体の構造にと共に変化する。
【０１１２】
本明細書中で使用するとき、「治療」または「治療する」とは、障害および／または疾患（例えば、ＡＤ）の阻害、退行または停滞、或いは疾患または障害の重症度を緩和、軽減、抑制、阻害、軽減すること、或いは疾患または障害の症状を実質的に排除または改善することを包含する。
【０１１３】
本明細書中で使用するとき、被験者における疾患の進行または疾患の合併症の「阻害」とは、被験者における疾患の進行および／または疾患の合併症を予防、遅延、または軽減することを意味する。これには、例えば、認知障害の進行を遅延させること、機能遂行の低下を遅延させること、および日常生活の基本的および器械的活動を遅らせること、被験者における１以上の症状の進行を遅らせること、生活の質の低下を遅延させること、または精神病の悪化を遅らせることが含まれる。
【０１１４】
ＡＤに関連する「症状」には、ＡＤに関連する臨床的または実験的症状が含まれ、被験者が感知または観察できるものに限定されない。ＡＤの症状には、認知（記憶および行動、判断／問題解決、注意、集中、命名、理解、推論、言語、コミュニケーション、見当識および応用）、機能的パフォーマンス（ショッピング、食事の準備、家電製品の使用、趣味や興味の実行、人と会う約束を守る、および読書）、生活の質（例えば、移動性、セルフケア、日常活動、痛み／不快感、気分、関係性、全体的な身体状態、不安および抑うつ、嚥下）、または精神病理学（例えば、妄想および妄想の象徴、幻覚、活動障害、概日リズム障害、攻撃性、感情障害および不安、並びに恐怖症）における障害および／または悪化が含まれるが、これらに限定されない。
【０１１５】
ＡＤ患者の状態を評価するための様々な評価ツールがこの分野で受け入れられている。例えば、認知力は、臨床医のインタビューに基づく変化の印象プラス介護者の入力（ＣＩＢＩＣ−Ｐｌｕｓ）、重度障害バッテリー（ＳＩＢ）、アルツハイマー病協同研究臨床医の全体的な変化の印象（ＡＤＣＳ−ＣＣＧＩＣ）、アルツハイマー病評価尺度−認知（ＡＤＡＳ−Ｃｏｇ）、臨床的認知症評価尺度（ＣＤＲ）、ＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア精神機能障害スケール（ＭＥＮＦＩＳ）、ミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）、Ｍｉｎｉ−ｃｏｇ試験、ブレスト情報-記憶力-集中力検査（ＢＩＭＣ）、ケンブリッジ神経心理学試験自動バッテリー（ＣＡＮＴＡＢ）、アルツハイマー病共同研究−日常生活動作項目（ＡＤＣＳ−ＡＤＬ）評価、ＡＤＣＳ−ＡＤＬ−ＳＩＶ（重度障害バージョン）、認知症のための障害評価表（ＤＡＤ）、機能評価アンケート（ＦＡＱ）、手段的日常生活動作（ＩＡＤＬ）、身体的自己メンテナンススケール（ＰＳＭＳ）および進行性悪化スケール（ＰＤＳ），神経精神症状評価（ＮＰＩ）、アルツハイマー病評価尺度におけるＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア行動病理（Ｂｅｈａｖｅ−ＡＤ）、ＣＩＢＩＣプラス−Ｊスコア精神機能障害スケール（ＭＥＮＦＩＳ）、認知症−Ｌｉｔｅにおける資源活用（ＲＵＤ−Ｌｉｔｅ）、例えばプロキシバージョン（ＥＱ−５Ｄプロキシ）を含むＥｕｒｏＱｏｌ５次元健康に関連した生活の質スケール（ＥＱ−５Ｄ）によって評価され得る。加えて、グローバルな評価尺度を用いて患者の状態を評価することができ、これには、例えば、変化の全体的印象（ＣＧＩＣ）、臨床インタビューに基づく印象（ＣＩＢＩ）、全般的悪化スケール（ＧＤＳ）が含まれる。
【０１１６】
「バイオマーカー」は、疾患の重篤度、サブタイプまたは病期の指標となる測定可能なパラメーターである。ＡＤのためのバイオマーカーには、限定されるものではないが、アミロイドベータ（Ａβ）１−４２血漿濃度、例えば陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）によって測定される脳におけるグルコース代謝の変化、および例えば磁気共鳴撮像（ＭＲＩ）により測定される海馬体積の変化が含まれる。アミロイドベータ（Ａβ）１−４２血漿濃度の増加、脳におけるグルコース代謝の減少、および海馬体積の減少は、疾患の重篤度の増加に関連すると考えられる。
【０１１７】
本明細書で使用する「ＡＤに罹患した被験者」とは、例えば、「明確なＡＤ」、「ほぼ確実なＡＤ」または「可能性のあるＡＤ」に罹患していると診断された被験者を含んだ、ＡＤに罹患していると診断された被験者を意味する。一実施形態において、前記被験者は、ＮＩＮＣＤＳ−ＡＤＲＤＡアルツハイマー病基準（ＭｃＫｈａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．１９８４）とも称される１９８４年基準に従って診断される。別の実施形態において、被験者は、アルツハイマー病についての国立老化研究所−アルツハイマー病協会診断ガイドライン（ＭｃＫｈａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．２０１１）のアルツハイマー病の診断のための改訂された基準に従って診断される。別の実施形態において、被験者はＤＳＭ−ＩＶ基準に従って診断される。別の実施形態において、被験者は国際疾病分類に従って診断される。
【０１１８】
「有害事象」または「ＡＥ」とは、医薬品を投与された治験被験者において、治療との因果関係のない任意の不適切な医療的出来事を意味する。従って、有害事象は、治験薬製品に関連するとみなされるか否かに関わらず、治験薬製品の使用に一時的に関連する異常な検査所見、症状、または疾患を含む、好ましくない予期せぬ兆候であり得る。
【０１１９】
本明細書中で使用する場合、「ベースライン」における被験者とは、プリドピジンの定期投与を開始する前の被験者である。
【０１２０】
本明細書で使用するとき、薬物または療法に関して「ナイーブな被験者」または「ナイーブな患者」とは、該被験者が以前に当該薬物または当該療法を受けていないことを意味する。
【０１２１】
「医薬的に許容可能な担体」とは、過度の有害な副作用（毒性、刺激およびアレルギー応答など）を伴わずに、妥当な利益／リスク比に見合った、ヒトおよび／または動物での使用に適した担体または賦形剤を言う。それは、本化合物を被験者に送達するための医薬的に許容可能な溶媒、懸濁化剤またはビヒクルであってよい。
【０１２２】
本明細書で使用するとき、「プリドピジン」の用語は、プリドピジン遊離塩基を言う。特定の実施形態において、プリドピジンには、ＨＣ１塩または酒石酸塩のような任意の医薬的に許容可能な塩も含まれる。好ましくは、ここに記載の本発明の任意の実施形態において、プリドピジンはその塩酸塩の形態である。
【０１２３】
本明細書において使用する場合、「組み合わせ」とは、同時投与または同時存在的投与の何れかによる治療に使用するための、薬剤の集合を意味する。同時投与は、プリドピジンと第２の化合物との混合物（真の混合物、懸濁液、エマルジョンまたは他の物理的な組み合わせ）の投与を指す。この場合、前記組み合わせは、投与直前に組み合わされるプリドピジンおよび第２の化合物の混合物、または別々の容器であってよい。同時存在的投与は、プリドピジンと第２の化合物の別々の投与を、同時に行うこと、またはプリドピジンおよび第２の化合物の何れか単独の活性と比較して相加的または好ましくは相乗的な活性が観察されるように、十分に近接して行うことをいう。
【０１２４】
本明細書で使用するとき、「同時投与」または「同時存在的投与」とは、各薬剤の個々の治療効果が重なり合うことが可能になるように、時間的に十分に近接して与えられる２つの薬剤の投与を意味する。
【０１２５】
本明細書中で使用するとき、「追加」または「追加療法」とは、治療に使用するための試薬の集合を意味し、ここでの治療を受ける被験者は、治療に使用される試薬の全てが同時に開始されないように、１以上の薬剤の第一の治療計画を、該第一の治療計画に加えて１以上の異なる薬剤の第２の治療計画が始まる前に開始する。例えば、既にドネペジル療法を受けている患者にプリドピジン療法を加える。
【０１２６】
本明細書で使用される投薬単位は、単一の化合物またはその化合物の混合物を含み得る。投薬単位は、錠剤、カプセル、ピル、粉末および顆粒のような経口剤型として調製することができる。
【０１２７】
＜医薬的に許容可能な塩＞
本発明に従う使用のための活性化合物は、意図された投与に適した任意の形態で提供することができる。適切な形態には、本発明の化合物の医薬的（即ち、生理学的）に許容可能な塩、およびプレドラッグまたはプロドラッグ形態が含まれる。
【０１２８】
医薬的に許容可能な塩の例には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、アコニット酸塩、アスコルビン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、桂皮酸塩、コハク酸塩、パモ酸、エナント酸塩、フマル酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、フタル酸塩、サリチル酸塩、ソルビン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トルエン−ｐ−スルホン酸塩などが挙げられるが、これらに限定されない。そのような塩は、当該技術において周知かつ記載されている手順によって形成されてよい。
【０１２９】
＜医薬組成物＞
医薬組成物
本発明に従って使用するための化合物は、生の化合物の形態で投与することができるが、前記活性成分は、必要に応じて生理学的に許容される塩の形態で、１以上のアジュバント、賦形剤、担体、緩衝剤、希釈剤、および／または他の慣習的な医薬補助剤をと共に医薬組成物中に導入されるのが好ましい。
【０１３０】
一実施形態において、本発明は、活性化合物またはその医薬的に許容可能な塩もしくは誘導体を、１以上の医薬的に許容可能な担体と共に、場合により、当該技術において知られ且つ使用される他の治療成分および／または予防成分と共に含有する医薬組成物を提供する。前記担体は、当該製剤の他の成分と適合し、且つそのレシピエントに有害でなく、使用できるものでなければならない。
【０１３１】
本発明の医薬組成物は、所望の治療に適した任意の便利な経路で投与することができる。好ましい投与経路には、経口投与、特に錠剤、カプセル、糖衣錠、粉末、または液体形態での投与、並びに非経口投与、特に皮内、皮下、筋肉内または静脈内注射が含まれる。本発明の医薬組成物は、標準的な方法および所望の製剤に適した従来の技術の使用によって、当業者が製造することができる。所望のときには、有効成分の持続放出を与えるように適合された組成物を使用することができる。
【０１３２】
製剤技術および投与技術に関する更なる詳細は、レミングトンの薬学（Ｍａａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ）の最新版に見出すことができる。
【０１３３】
パラメータ範囲が提供される場合、その範囲内の全ての整数およびその１０分の１もまた、本発明によって提供されることが理解される。例えば、「０．１ｍｇ〜４０．０ｍｇ」は、４０．０ｍｇまでの、０．１ｍｇ、０．２ｍｇ、０．３ｍｇ、０．４ｍｇなどを含むものである。
【０１３４】
本発明は、以下の実験の詳細を参照することによって更に良好に理解されるであろうが、当業者は、詳細な具体的な実験は後述の特許請求の範囲においてより完全に記載される本発明の例示に過ぎないことを容易に理解するであろう。
【実験の詳細】
【０１３５】
実施例１：プリドピジンは、Ｙ字型迷路マウスにおけるＭＫ−８０１誘導性ワーキングメモリ欠損を減弱する
この実施例では、ワーキングメモリの欠損に対するプリドピジンの効果およびマウスＹ−迷路におけるＭＫ−８０１に誘発された全アームエントリーにおける増加を調べる。
【０１３６】
＜材料および方法＞
動物：５週齢の雄ｄｄＹマウス（Ｊａｐａｎ  ＳＬＣ  Ｉｎｃ．、Ｓｈｉｚｕｏｋａ、Ｊａｐａｎ）を用いた。これらのマウスは、飼料および水への自由なアクセスが維持された。マウスは実験の少なくとも１時間前に実験室内に置かれた。
【０１３７】
薬剤：塩酸プリドピジンを水に溶解し、経口投与した。（＋）−ＭＫ−８０１マレイン酸水素塩（ジゾシルパンマレイン酸水素塩）［Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）から市販されている］を生理食塩水に溶解し、腹腔内投与した。薬剤は１０ｍＬ／ｋｇの容量で投与した。プリドピジンの用量レベルは、遊離塩基の量として示される。
【０１３８】
Ｙ字型迷路：Ｙ字型迷路は、齧歯類の学習および記憶テストである（ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｕｕｓｅ  ２００５）。Ｙ字型迷路試験は、新規環境を探索するための齧歯類の本来の好奇心に基づいている（Ｌｕｓｚｃｚｋｉ  ｅｔ  ａｌ．、２００５）。これは、齧歯類における探索的行動、学習および記憶機能、短期記憶、ワーキングメモリ、全身運動活性、および常習的行動を評価するために使用される（Ｈａｚｉｍ  ２０１１、Ｏｎａｏｌａｐｏ  ２０１２、Ｄｅｔｒａｉｔ  ２０１０）。
【０１３９】
齧歯類は、迷路アーム間で行きつ戻りつする（交替する）傾向を示し、それによって短期空間記憶の尺度を提供する。高い交替率は、動物が最後に入った腕を記憶して、且つ再度入らないことを記憶しなければならないため、持続的な認知を示す（Ｂｒｙａｎ  ２００９）。
【０１４０】
Ｙ字型迷路は灰色塩化ビニル製であった。各腕は、長さ４０ｃｍ、高さ１３ｃｍ、底部の幅３ｃｍ、頂部の幅１０ｃｍであった。全ての腕は等しい角度で一点に収束された。
【０１４１】
実験手順：本実験は、Ｍａｕｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）により確立された方法に従って行われた。プリドピジンを投与し、その１０分後にＭＫ−８０１を投与した。ＭＫ−８０１の投与から２０分後に、各マウスを一つのアームの一端に置き、８分間のセッション中に迷路を通して自由に移動させた。一連のアームエントリーが記録された。交替は、連続して三つのアーム全てを訪問するものとして定義された。最大交替の数は、アームの総数から２を差し引いたものであった。交替のパーセンテージは、交替の数を最大交替で除して１００を掛けたものとして計算した。
【０１４２】
統計分析：交替および総アームエントリーのパーセンテージを平均±ＳＥＭとして表した。正常群と対照群との間の統計的有意性はスチューデントｔ検定を用いて計算した。薬物治療対対照群の統計解析は、Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較試験を用いて行った。統計的有意性のレベルはｐ＜０．０５であった。
【０１４３】
＜結果＞
ＭＫ−８０１の投与は、有意に（Ｐ＜０．０１、図１Ａ、スチューデントｔ検定を用いて）交替率を減少させた。プリドピジンは、１０および２０ｍｇ／ｋｇにおいて、統計学的有意性をもってＭＫ−８０１処置マウスの交替率を回復させた（Ｐ＜０．０５、図１Ａ、Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較試験による）。ＭＫ−８０１での処置によって増強されたアームエントリーの総数は、有意に（Ｐ＜０．０１、図１Ｂ、スチューデントｔ検定を使用して）高かった。プリドピジンは、ＭＫ−８０１に誘発されたアーム総数の増加が統計的に有意な変化を示さなかった（図１Ｂ）。２０１
＜考察＞
Ｙ字型迷路では、非競合的ＮＭＤＡアンタゴニストであるＭＫ−８０１（ジゾシルピン）は、ワーキングメモリを反映する自発的な交替行動を損ない、運動活性を表すアームのエントリー総数を増大させる（Ｐａｒａｄａ−Ｔｕｒｓｋａ  ａｎｄ  Ｔｕｒｓｋｉ、１９９０）。
【０１４４】
実施例１は、ＭＤＡ受容体ブロックに関連したワーキングメモリ障害に対するプリドピジンの抗健忘効果を実証している。プリドピジンは、１０および２０ｍｇ／ｋｇにおいて統計学的有意性をもって、ＭＫ−８０１誘発性の交替率低下を減弱させた。これらの結果は、プリドピジンが、認知障害をもった患者を含む患者での認知状態を改善し、認知障害（ワーキングメモリなど）を改善することを実証している。
【０１４５】
Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４は、プリドピジンが、マウスにおけるＭＫ−８０１に誘導された行動初期化を妨害することを示した。しかし、Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４で完了した実験は、実施例１に記載の実験とは異なる。具体的には、Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４で完了した実験は、プリドピジンが認知機能または記憶喪失を改善できることを示さなかった。
【０１４６】
実施例１は、上記のように、認知機能および記憶機能の測定に一般的に使用されているＹ字型迷路を使用する。Ｙ字型迷路実験では、齧歯動物の認知機能を使用してＹ迷路のどのアームを以前に移動したかを記憶する能力が、交替率を測定する際に試験される。これと比較して、Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４の実験（さらにＮｉｌｓｓｏｎ  ２００１に記載されている）には、このような記憶コンポーネントは含まれていない。Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４の実験では、齧歯動物を長方形のアリーナに配置し、カメラを使用してマウスの動きおよび行動を測定した。測定された特定の行動は、前方歩行、探索的臭い嗅ぎを伴う立上り、毛繕いおよび穴掘りであった。Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４およびＮｉｌｓｓｏｎ  ２００１において、実験の前にＭＫ−８０１でマウスを処置することは、特定の測定された行動間で自然に交替するマウスに、殆ど単調な前方移動を行わせる（Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００１）。Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４が発見したことは、プリドピジンが、マウスに対するＭＫ−８０１のそのような作用を妨害することであった。しかしながら、Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４の実験では、測定された行動と認知機能との間に明確な関係はない。従って、Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４に示された実験では、プリドピジンが認知機能を高めることを示すことはできない。このことが、Ｎｉｌｓｓｏｎ  ２００４の著者は、プリドピジンが認知機能を高めることができるかどうかを決定するためには追加の検査が必要であると述べている理由であると考えられる。
【０１４７】
実施例２：統合失調症に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的な経口投与（例えば、１日１回または２回）は、統合失調症に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的な経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者における統合失調症に関連する認知障害を軽減するのに有効である。
【０１４８】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、統合失調症に罹患した被験者に経口投与される。組成物の投与は、統合失調症に罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与は、被験者における統合失調症に関連する認知障害を軽減するためにも有効である。
【０１４９】
実施例３：自閉症に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的投与（例えば１日１回または１日２回）は、自閉症に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの周期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者における自閉症に伴う認知障害を軽減するのに有効である。
【０１５０】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、自閉症に罹患している被験者に経口投与される。該組成物の投与は、自閉症を患っている被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、治療における自閉症に伴う認知障害を軽減するのに有効である。
【０１５１】
実施例４：癲癇に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、癲癇に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの周期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者の癲癇に関連する認知障害を軽減するのに有効である。本明細書に記載のプリドピジン組成物は、癲癇に罹患した被験者に経口投与される。組成物の投与は癲癇に罹患した被験者を治療するのに有効である。組成物の投与は、被験者の癲癇に関連する認知障害を軽減するためにも有効である。
【０１５２】
実施例５：不安障害に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの周期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、不安障害に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの周期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者の不安障害に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１５３】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、不安障害に罹患した被験者に経口投与される。組成物の投与は、不安障害に罹患した被験者を治療するのに有効である。組成物の投与はまた、被験者における不安障害に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１５４】
実施例６：大鬱病性障害に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、大鬱病に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者の大鬱病性障害に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１５５】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、大鬱病性障害に罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は、大鬱病性障害に罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、被験者における不安障害に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１５６】
実施例７：パーキンソン病に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、パーキンソン病に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または１日２回）は、被検者におけるパーキンソン病に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１５７】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、パーキンソン病に罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は、パーキンソン病に罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与は、被験者におけるパーキンソン病に関連した認知障害を軽減するためにも有効である。
【０１５８】
実施例８：アルツハイマー病に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、アルツハイマー病に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、アルツハイマー病に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１５９】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、アルツハイマー病に罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は、アルツハイマー病に罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、被験者におけるアルツハイマー病に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１６０】
実施例９：遅発性ジスキネジアに罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、慢性ジスキネジーに罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者における遅発性ジスキネジアに関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１６１】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、遅発性ジスキネジアに罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は、遅発性ジスキネジアに罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、被験者における遅発性ジスキネジアに関連した認知障害を軽減するためにも有効である。
【０１６２】
実施例１０：鬱病に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、鬱病に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者の鬱病に伴う認知障害を軽減するのに有効である。
【０１６３】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、鬱病に罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は鬱病に罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、被験者における鬱病に伴う認知障害を軽減するためにも有効である。
【０１６４】
実施例１１：鎌状赤血球貧血に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、鎌状赤血球貧血に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者における鎌状赤血球貧血に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１６５】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、鎌状赤血球貧血に罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は、鎌状赤血球貧血罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、前記被験者における鎌状赤血球貧血に関連した認知障害を軽減するためにも有効である。
【０１６６】
実施例１２：脳卒中に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、脳卒中後のヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者の脳卒中に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１６７】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、脳卒中に罹患した後、被験者に経口投与される。該組成物の投与は、脳卒中に罹患した後の被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、前記被験者の脳卒中に伴う認知障害を軽減するためにも有効である。
【０１６８】
実施例１３：慢性疼痛症候群に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、慢性疼痛症候群に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、慢性疼痛症候群に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１６９】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、慢性疼痛症候群に罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は、慢性疼痛症候群に罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与は、前記被験者における慢性疼痛症候群に関連する認知障害を軽減するためにも有効である。
【０１７０】
実施例１４：中毒に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、中毒に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば１日１回または１日２回）は、被験者の中毒に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１７１】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、中毒に罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は、中毒に罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、前記被験者における中毒に関連した認知障害を軽減するのに有効である。
【０１７２】
実施例１５：ハンチントン病に罹患した患者を治療するためのプリドピジンの有効性の評価
プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、ハンチントン病に罹患したヒト患者の治療に有効である。プリドピジンの定期的経口投与（例えば、１日１回または２回）は、被験者におけるハンチントン病に関連する認知障害を軽減するのに有効である。
【０１７３】
本明細書に記載のプリドピジン組成物は、ハンチントン病に罹患した被験者に経口投与される。該組成物の投与は、ハンチントン病に罹患した被験者を治療するのに有効である。該組成物の投与はまた、被験者におけるハンチントン病に関連した認知障害を減少させるのに有効である。
【０１７４】
実施例１６
ＨＤ患者の脳では、脊椎の密度における変化および脊椎のサイズおよび形状の異常が観察された（Ｇｒａｖｅｌａｎｄ、１９８５）。図３は、プリドピジンがＹＡＣ１２８皮質線条体共培養物における脊椎喪失を救済することを示す。図４は、プリドピジンがＰＳ−ＫＩ（ＡＤ）ニューロンにおけるマッシュルーム背骨喪失を救済することを示す。
【０１７５】
樹状突起は、認知機能および運動機能を維持する上で重要である。樹状突起の形成は、興奮性シナプスネットワークの確立にとって重要である。脊椎は、学習および記憶の基礎となるシナプスの有効性における生理学的変化の基礎として、構造的可塑性を示す。運動制御は、皮質−中型有棘ニューロンのシナプス結合によって調節される。脊椎がこれらの接続の基礎となる（ｒｅｉｔｚｅｒ  ２００８およびＢｏｕｒｎｅ  ２００８）。
【０１７６】
実施例１７：アセチルコリンおよびプリドピジン
動物：１８匹の成体雄スプラグドーリー系ラット（Ｈａｒｌａｎ、ＵＳＡ）を用いた。実験の前に、ラットをプラスチックケージ（３〜４匹／ケージ）に飼育し、飼料および水を自由に摂取させた。動物を１２／１２時間の明／暗サイクルに維持した。実験は、ブレイン・オンラインＬＬＣの施設内動物管理および使用委員会に承認されたプロトコールに従って行われた。
【０１７７】
微小透析実験：手術の１日後に微小透析実験を行った。実験当日に、プローブを柔軟なＰＥＥＫ配管でマイクロ灌流ポンプ（ハーバードＰＨＤ２０００シリンジポンプ、Ｈｏｌｌｉｓｔｏ、ＭＡ、またはこれと同様のもの）に接続した。微小透析プローブには、１４７ｍＭのＮａＣｌ、３．０ｍＭのＫＣｌ、１．２ｍＭのＣａＣｌ２および１．２ｍＭのＭｇＣｌ２を含有するａＣＳＦを、１．５μＬ／分の流量で灌流した。微小透析サンプルは、既に１５μＬの０．０２Ｍギ酸（ＦＡ）および超純水中の０．０４％のアスコルビン酸を含有する３００μＬのポリスチレン製ミニバイアルの中に、自動フラクションコレクター（８２０微小サンプラー、Ｕｎｉｖｅｎｔｏｒ、Ｍａｌｔａ）を用いて３０分の期間内に収集した。四つの基本サンプルを回収した後に、プリドピジン（１５または６０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ）またはビヒクルを投与した。
【０１７８】
結果：透析液中のアセチルコリン（Ａｃｈ）のレベル
図５，６および７は、それぞれ前頭前野（ＰＦＣ）、線条体（ＳＴＲ）および海馬（Ｈｉｐｐ）におけるＡＣｈのレベルを示す。プリドピジンによる処置は、投与後３０分において（ベースラインから２１９％変化；ｐ＜０．０５）、投与後６０分において（ベースラインから２２６％変化；ｐ＜０．０５）、および投与後９０分において（ベースラインから２２６％変化；ｐ＜０．０５）、１５ｍｇ／ｋｇ投与後に前頭前野におけるＡｃｈに有意な増加をもたらし、また投与後３０分において（ベースラインから２１５％変化；ｐ＜０．０５）、投与後６０分において（ベースラインから２０１％変化；ｐ＜０．０５）、投与後９０分において（ベースラインから２１１％変化；ｐ＜０．０５）および投与後１８０分において（ベースラインから２１２％変化；ｐ＜０．０５）、６０ｍｇ／ｋｇ投与後に前頭前野におけるＡｃｈに有意な増加をもたらした。プリドピジンでの処置は、投与後３０分において（ベースラインから１６０％変化；ｐ＜０．０５）、１５ｍｇ／ｋｇ投与後に海馬におけるＡｃｈに有意な増加をもたらし、また投与後６０分において（ベースラインから１５７％変化；ｐ＜０．０５）、および投与後９０分において（ベースラインから１５８％変化；ｐ＜０．０５）、６０ｍｇ／ｋｇ投与後に海馬におけるＡｃｈに有意な増加をもたらした。表１および２は、１５および６０ｍｇ／ｋｇ投与後の、Ａｃｈレベルにおけるベースラインからの最大％変化を提示する。
【表１】
2018506569.tif 000002
【表２】
2018506569.tif 000003
【０１７９】
アセチルコリンは、神経系における重要な神経伝達物質であり、学習および記憶機能に必要である（Ｗｉｎｋｌｅｒ  １９９５）。アセチルコリンは、海馬における学習および記憶プロセスをサポートする上で重要な役割を果たしている。海馬および前頭前野におけるコリン作用は記憶と相関している（Ｈｉｒｏｎａｋａ  ２００１）。加えて、セプト海馬脊髄路破壊後の海馬におけるＡＣｈの回復は、記憶を救出するのに十分である（Ｐａｒｅｎｔ  ２００４）。
【０１８０】
実施例１８：ＡＤモデルにおけるプリドピジンの効果：ヒトアミロイドβ１−４２によるラット一次皮質ニューロンの損傷
ＡＤは、細胞内神経原線維変化、細胞外実質老化プラーク、およびアミロイド−β１−４２ペプチドからなる脳血管沈着の進行性の蓄積によって特徴付けられる（Ｓａｋｏｎｏら、２０１０）。
【０１８１】
βペプチドは、β−セクレターゼおよびγ−セクレターゼによる切断の結果として起こる、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の逐次タンパク質分解により得られるタンパク質分解生成物である。ＡＰＰ中の切断部位における突然変異は、Ａβオリゴマーの産生を増加させる。ＡＤの病理学的特徴の１つである老人斑の形でのＡβの進行性蓄積は、神経毒性、酸化的損傷および炎症を誘発することにより（Ｐｉｋｅ  ｅｔ  ａｌ．、１９９１；Ｃｕｍｍｉｎｇｓ  ｅｔ  ａｌ．、１９９８；Ｃｏｍｂｓ  ｅｔ  ａｌ．、２０００）、ＡＤ病理の主要な原因の１つとして認識されている（Ｋａｗａｈａｒａ  ａｎｄ  Ｋｕｒｏｄａ、２０００）。ＡＤ脳老人斑において見出される最も豊富なαβペプチド形態は、４０および４２アミノ酸形態である（Ｓｉｓｏｄｉａ  ｅｔ  ａｌ．、１９９０）。
【０１８２】
しかしながら、ＡＤ脳の特定の領域における老人斑の数は、ニューロン死またはシナプス喪失の局所的な程度、または認知障害との相関が低い。最近の研究では、可溶性αβオリゴマー（αβＯ）レベルと、シナプス喪失の程度および認知障害の重篤度との間に強い相関関係が見られた（Ｓａｋｏｎｏ  ｅｔ  ａｌ．、２０１０参照）。
【０１８３】
この研究は、ＡＤのインビトロモデル（Ｃａｌｌｉｚｏｔ  ｅｔ  ａｌ．、２０１３）の存在下で２４時間インキュベートした、皮質ニューロンに対するプリドピジンの神経保護効果を調べた。５０ｎｇ／ｍＬのＢＤＮＦを本試験における陽性対照として用いた。
【０１８４】
＜実験プロトコル＞
・皮質ニューロン細胞培養
ラット皮質ニューロンを以下のように培養した。妊娠１５日の妊娠した雌ラットを頸部脱臼（Ｒａｔｓ  Ｗｉｓｔａｒ；  Ｊａｎｖｉｅｒ  Ｌａｂ）により致死させ、胎児を子宮から取り出した。皮質を取り出し、２％のペニシリン１０．０００Ｕ／ｍLおよびストレプトマイシン１０ｍｇ／ｍＬ（ＰＳ、Ｐａｎｂｉｏｔｅｃｈ、ｒｅｆ：Ｐ０６−０７１００）、並びに１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、Ｐａｎｂｉｏｔｅｃｈ、Ｒｅｆ：Ｐ０６−１３９１１００）を含有するＬｅｉｂｏｖｉｔｚ（Ｌ１５、Ｐａｎｂｉｏｔｅｃｈ、ｒｅｆ：Ｐ０４−２７０５５）の氷冷培地中に入れた。皮質をトリプシン−ＥＤＴＡ（Ｐａｎｂｉｏｔｅｃｈ、Ｒｅｆ：Ｐ１０−０２３１００）により３７℃で２０分間解離させた。この反応を、ＤＮａｓｅｅｌグレードＩＩ（０．１ｍｇ／ｍＬ、Ｐａｎｂｉｏｔｅｃｈ、Ｒｅｆ：Ｐ６０−３７７８０１００）および１０％の胎仔牛血清（ＦＣＳ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ｒｅｆ：１０２７０−０９８）を含有するダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ、Ｐａｎｂｉｏｔｅｃｈ、Ｒｅｆ：Ｐ０４−０３６００）の添加により停止させた。次いで、細胞を１０ｍＬピペットに続けて３回通過させることにより機械的に解離させた。その後、４℃において、細胞を５１５×ｇで１０分間遠心分離した。上清を捨て、Ｂ２７（２％、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ｒｅｆ：１７５０４）、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ、Ｐａｎｂｉｏｔｅｃｈ、ｒｅｆ：Ｐ０４−８０１００）、２％のＰＳ溶液および１０ｎｇ／ｍＬの脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ、ＰａｎＢｉｏｔｅｃｈ、Ｒｅｆ：ＣＢ−１１１５００２）を補充したＮｅｕｒｏｂａｓａｌ（Ｎｂ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ｒｅｆ：２１１０３）からなる定義された培養培地中に再懸濁させた。トリパンブルー排除試験を用いて、Ｎｅｕｂａｕｅｒサイトメーターで生存細胞を計数した。細胞を、ポリ−Ｌ−リシン（Ｇｒｅｉｎｅｒ、ｒｅｆ：６５５９３０）でプレコートした９６ウェルプレートに３０，０００細胞／ウェルの密度で播種し、加湿空気（９５％）／ＣＯ２雰囲気中において、＋３７℃で培養した。
【０１８５】
１１日間培養した後、皮質ニューロンを１０μＭのヒトα１−４２で２４時間麻酔した。
【０１８６】
条件毎に１つの培養、条件ごとに６ウエルでの培養を行った。
【０１８７】
・プリドピジンおよびヒトβアミロイド１−４２処理
ヒトβアミロイド１−４２ペプチドの調製は、ニューロンの専門家によって検証された内部的且つ独自の手順（Ｃａｌｌｉｚｏｔ  ｅｔ  ａｌ．、２０１３）に従って行った。簡単に言えば、培養の１２日目に上清を除去し、ヒトアミロイドβ１−４２（１０μＭ）およびプリドピジンを含む新しい培地を加えた。
【０１８８】
以下の条件が含まれた：
ａ）ヒトβアミロイド１−４２を含まない培地（対照）で２４時間
ｂ）ヒトβアミロイド１−４２（１０μＭ）で２４時間
ｃ）プリドピジン（２００μＭ、５０μＭ、１０μＭ、０．１μＭおよび１０μＭ）と共に、ヒトβアミロイド１−４２（１０μＭ）で２４時間、
ｄ）ＢＤＮＦ（５０ｎｇ／ｍL）と共に、ヒトβアミロイド１−４２（１０μＭ）で２４時間
・エンドポイント評価：ＭＡＰ２ニューロンの総数の測定。
【０１８９】
２４時間インキュベートした後、生存したニューロンをＭＡＰ２で染色した。２４時間後、細胞をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、ＰａｎＢｉｏｔｅｃｈ、ｒｅｆ：Ｐ０４−３６５００）で２回洗浄し、エタノール（９５％、Ｓｉｇｍａ、ｒｅｆ：３２２２１）および酢酸（５％、Ｓｉｇｍａ、ｒｅｆ：３３２０９）で５分間処理した。次いで、細胞を透過処理し、非特異的部位を０．１％サポニン（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、ｒｅｆ：Ｓ７９００）および１％ＦＣＳを含有するＰＢＳ溶液を用いて室温で１５分間ブロックした。次いで、細胞をマウスモノクローナル一次微小管関連タンパク質２抗体（ＭＡＰ−２、Ｓｉｇｍａ、Ｍ４４０３）と共に、１／４００希釈の同じ溶液中で２時間インキュベートした。この抗体をＡｌｅｘａ・Ｆｌｕｏｒ４８８ヤギ抗マウス（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐｒｏｂｅ、ｒｅｆ：Ａ１１００１）を用いて同じ溶液中で１時間現像した。
【０１９０】
細胞の核を蛍光マーカー（Ｈｏｅｃｈｓｔ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ、ＳＩＧＭＡ、ｒｅｆ：Ｂ１１５５）で標識した。
【０１９１】
各条件について、１ウェル当たり２０枚の写真を、ＩｎＣｅｌｌ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（商標）２０００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて倍率２０倍で撮影した。全ての画像は同じ条件で撮影した。
【０１９２】
・統計
データは、平均±ＳＥＭ（条件毎に６または１２のデータ）として表した。データの全体的分析は、一方向分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用して実施した。＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００５。
【０１９３】
・結果
１０μＭで２４時間適用したβアミロイド１−４２損傷は、ＭＡＰ２陽性細胞において大きくかつ有意な減少（〜４０％、ｐ＜０．００５）を誘導した（図８）。
【０１９４】
参照化合物ＢＤＮＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）の適用は、βアミロイド１−４２損傷に起因する細胞死を阻害した。これらの結果は、本研究の正当性を立証する。
【０１９５】
プリドピジンは、βアミロイド１−４２の毒性効果を用量依存的に減少させた。２００μｇ／ｍＬのプリドピジンと共にインキュベートした場合のニューロンの生存割合は、培地対照の８７％であった（ｐ＜０．００５）。１００、５０、２５および１０μｇ／ｍＬのプリドピジンは、βアミロイド１−４２損傷に起因するニューロン生存を有意に増加させた（それぞれ７９％、ｐ＜０．００５；７７％、ｐ＜０．００５；７４％、ｐ＜０．０１、および７１％、ｐ  ＜０．０５）。
【０１９６】
・結論
プリドピジンは、βアミロイド１−４２損傷に起因するニューロンの生存を、用量依存的に有意に増加させた。
【参照文献】
【０１９７】
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2018506569.tif 000006
2018506569.tif 000007
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2018506569.tif 000009
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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2018506569.tif 000019