(57)【要約】  ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンと、溶媒とを含有するコロイド分散液が開示される。コロイド分散液は、食品、油田、医薬品、パーソナルケア及び特殊品の産業などの様々な用途での有用性を有する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び
（ｂ）溶媒；
を含有するコロイド分散液。
【請求項２】
前記ポリα−１，３−１，６−グルカンが、
（ａ）少なくとも３０％のグリコシド結合がα−１，３結合であり、
（ｂ）少なくとも３０％のグリコシド結合がα−１，６結合である、
α−１，３及びα−１，６−グリコシド結合を有する、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項３】
前記ポリα−１，３−グルカン及びポリα−１，３−１，６−グルカンが５ｎｍ〜２００ｎｍの平均粒径サイズを有する粒子を含む、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項４】
前記粒子が球状又は円筒状の形態を有する、請求項３に記載のコロイド分散液。
【請求項５】
前記粒子が１０ｎｍ〜２００μｍの平均凝集径サイズを有する凝集体を形成する、請求項３に記載のコロイド分散液。
【請求項６】
前記溶媒が水である、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項７】
前記ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンが前記コロイド分散液全体の０．１重量％〜１５重量％を占める、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項８】
前記コロイド分散液が少なくとも１０ｃＰｓの粘度を有する、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項９】
前記コロイド分散液が１〜１４のｐＨを有する、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項１０】
前記コロイド分散液が、前記ｐＨが２〜１１の範囲にわたって変化する際に、前記粘度が１０％未満しか変化しない粘度及びｐＨを有する、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項１１】
前記コロイド分散液が、塩又は界面活性剤を更に含有し、前記コロイド分散液は前記塩又は界面活性剤の添加後に１０％未満しか変化しない粘度を有する、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項１２】
前記コロイド分散液がずり流動挙動又はずり粘稠挙動を有する、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項１３】
前記コロイド分散液がパーソナルケア製品、医薬品、食品、家庭用品、又は工業製品の形態である、請求項１に記載のコロイド分散液。
【請求項１４】
コロイド分散液を含むパーソナルケア製品であって、
（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び
（ｂ）溶媒；
を含有する、パーソナルケア製品。
【請求項１５】
コロイド分散液を含む食品であって、
（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び
（ｂ）溶媒；
を含有する、食品。
【請求項１６】
ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液の製造方法であって、
（ａ）酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するスラリーを製造すること；
（ｂ）前記スラリーをろ過してウエットケーキの形態で前記ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを分離すること；
（ｃ）前記ウエットケーキを水で洗浄すること；及び
（ｄ）前記ウエットケーキを水に分散させてポリα−１，３−グルカンコロイド分散液を形成すること；
を含む、方法。
【請求項１７】
前記方法が、
（ａ）２０〜２５℃で２４時間の前記酵素反応溶液の加熱；
（ｂ）ポリα−１，３−グルカンを製造するための前記酵素がストレプトコッカス  サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）ｇｔｆＪである；
（ｃ）ポリα−１，３−１，６−グルカンを製造するための前記酵素がストレプトコッカス  オラリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｒａｌｉｓ）ｇｔｆ４２９７、ストレプトコッカス  ｓｐ．（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）Ｃ１５０  ｇｔｆ  ３２９８、又はストレプトコッカス  ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）ｇｔｆ  ０５４４である；
（ｄ）前記塩基性緩衝水溶液がアルカリ金属リン酸塩緩衝液であるｐＨ緩衝剤を有する；
（ｅ）前記アルカリ金属がカリウムである前記アルカリ金属リン酸塩緩衝液；
（ｆ）前記塩基性緩衝水溶液が７〜５のｐＨを有する；
（ｇ）前記抗菌剤がＦｅｒｍａＳｕｒｅ（登録商標）である；及び
（ｈ）前記ウエットケーキが６０〜８０重量％の水を含む；
のうちの少なくとも１つを有する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１６に従って作製されるポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１５年２月６日に出願された米国仮特許出願第６２／１１２，９６０号の利益を主張するものであり、この全てはその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、コロイド分散液の分野に関する。具体的には、本開示は、ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液中での使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
酵素的合成、又は微生物もしくは植物宿主の遺伝子組み換え技術を用いた新規な構造の多糖類を見出したいとの願いから、研究者らは、生分解性であり、再生可能な資源を主体とする原料から経済的に製造可能な多糖類を発見してきた。１つのそのような多糖はポリα−１，３−グルカンであり、α−１，３−グリコシド結合を有することを特徴とするグルカンポリマーである。このポリマーは、ストレプトコッカス  サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）から単離されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素とスクロースの水溶液とを接触させることによって単離された（非特許文献１）。ポリα−１，３−グルカンから作製されるフィルムは、最大１５０℃の温度に耐え、β−１，４−結合した多糖類から得られるポリマーと比べて優れている（非特許文献２）。
【０００４】
特許文献１には、ストレプトコッカス  サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）ｇｔｆＪ酵素を使用した、ヘキソース単位を含みポリマー中の少なくとも５０％のヘキソース単位がα−１，３−グリコシド結合を介して連結されている多糖繊維の作製法が開示されている。この酵素は、最終生成物としてのポリα−１，３−グルカン及びフルクトースを生成する重合反応において、基質としてスクロースを利用する（Ｓｉｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５）。開示されているグルカントリアセテートポリマーは、溶媒中又は溶媒を含む混合物中に臨界濃度を超えて溶解した際に液晶溶液を形成した。この溶液から連続的で頑丈な繊維が紡糸された。グルカンへ戻す再生の後、繊維製品での使用に非常に適した綿状の繊維が形成され、使用された。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第７，０００，０００号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｓｉｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  １４１：１４５１−１４６０，１９９５
【非特許文献２】Ｏｇａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｉｂｅｒ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ４７：３５３−３６２，１９８０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
食品、油田、医薬品、パーソナルケア及び特殊品産業などの様々な用途での潜在的な有用性を備えた新規なコロイド分散液の開発が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
第１の実施形態においては、本開示は、（ａ）ポリα−１，３−グルカン、又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び（ｂ）溶媒；を含有するコロイド分散液に関する。
【０００９】
第２の実施形態においては、ポリα−１，３−１，６−グルカンは、（ａ）少なくとも３０％のグリコシド結合がα−１，３結合であり、（ｂ）少なくとも３０％のグリコシド結合がα−１，６結合である、α−１，３及びα−１，６−グリコシド結合を有する。
【００１０】
第３の実施形態においては、ポリα−１，３−グルカン及びポリα−１，３−１，６−グルカンは、５ｎｍ〜２００ｎｍの平均粒径サイズを有する粒子を含む。
【００１１】
第４の実施形態においては、粒子は球状又は円筒状の形態を有する。
【００１２】
第５の実施形態においては、粒子は１０ｎｍ〜２００μｍの平均凝集径サイズを有する凝集体を形成する。
【００１３】
第６の実施形態においては、溶媒は水である。
【００１４】
第７の実施形態においては、ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンはコロイド分散液全体の０．１重量％〜１５重量％を占める。
【００１５】
第８の実施形態においては、コロイド分散液は少なくとも１０ｃＰｓの粘度を有する。
【００１６】
第９の実施形態においては、コロイド分散液は１〜１４のｐＨを有する。
【００１７】
第１０の実施形態においては、コロイド分散液はｐＨが２〜１１の範囲にわたって変化する際に粘度が１０％未満しか変化しない粘度及びｐＨを有する。
【００１８】
第１１の実施形態においては、コロイド分散液は塩又は界面活性剤を更に含有し、コロイド分散液は塩又は界面活性剤の添加後に１０％未満しか変化しない粘度を有する。
【００１９】
第１２の実施形態においては、コロイド分散液はずり流動挙動又はずり粘稠挙動を有する。
【００２０】
第１３の実施形態においては、コロイド分散液はパーソナルケア製品、医薬品、食品、家庭用品、又は工業製品の形態である。
【００２１】
第１４の実施形態においては、本開示は、（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び（ｂ）溶媒；を含有するコロイド分散液を含むパーソナルケア製品に関する。
【００２２】
第１５の実施形態においては、本開示は、（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び（ｂ）溶媒；を含有するコロイド分散液を含む食品に関する。
【００２３】
第１６の実施形態においては、本開示は、（ａ）酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するスラリーを製造すること；（ｂ）スラリーをろ過してウエットケーキの形態でポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを分離すること；（ｃ）ウエットケーキを水で洗浄すること；及び（ｄ）ウエットケーキを水に分散させてポリα−１，３−グルカンコロイド分散液を形成すること；
を含むポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液の製造方法に関する。
【００２４】
第１７の実施形態においては、本開示は、（ａ）２０〜２５℃で２４時間の酵素反応溶液の加熱；（ｂ）ポリα−１，３−グルカンを製造するための酵素がストレプトコッカス  サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）ｇｔｆＪである；（ｃ）ポリα−１，３−１，６−グルカンを製造するための酵素がストレプトコッカス  オラリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｒａｌｉｓ）ｇｔｆ４２９７、ストレプトコッカス  ｓｐ．（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）Ｃ１５０  ｇｔｆ  ３２９８、又はストレプトコッカス  ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）ｇｔｆ  ０５４４である；（ｄ）塩基性緩衝水溶液がアルカリ金属リン酸塩緩衝液であるｐＨ緩衝剤を有する；（ｅ）アルカリ金属がカリウムであるアルカリ金属リン酸塩緩衝液；（ｆ）塩基性緩衝水溶液が７〜５のｐＨを有する；（ｇ）抗菌剤がＦＥＲＭＡＳＵＲＥ（登録商標）である；及び（ｈ）ウエットケーキが６０重量％〜８０重量％の水を含む；
のうちの少なくとも１つを有し得る、ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液の製造方法に関する。
【００２５】
第１８の実施形態においては、本開示は、（ａ）酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するスラリーを製造すること；（ｂ）スラリーをろ過してウエットケーキの形態でポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを分離すること；（ｃ）ウエットケーキを水で洗浄すること；及び（ｄ）ウエットケーキを水に分散させてポリα−１，３−グルカンコロイド分散液を形成すること；
を含む方法に従って作製されるポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液に関する。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本明細書に引用されている全ての特許文献及び非特許文献の開示内容は、それらの全体が参照により本明細書に包含される。
【００２７】
本明細書において、用語「コロイド分散液」とは、分散相と分散媒体とを有する不均一系、すなわち微視的に分散されている不溶性の粒子が別の物質全体に懸濁されていることをいう。水の中のコロイド分散液の例は親水コロイドである。コロイド分散液は安定なコロイド分散液であってもよいし、不安定なコロイド分散液であってもよい。安定なコロイド分散液は、室温で及び／又は高温で、例えば４０〜５０℃で少なくとも１か月の期間、目に見える沈殿なしで安定である。不安定な分散液では、同じ条件で、分散液から沈降した少なくとも一部のポリα−１，３−グルカン及び／又はポリα−１，３−１，６−グルカンが見られる場合がある。沈降した物質を撹拌すると、通常はコロイド分散液が再形成されるであろう。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液は安定な分散液である。別の実施形態においては、コロイド分散液は不安定な分散液である。
【００２８】
用語「ポリα−１，３−グルカン」、「α−１，３−グルカンポリマー」及び「グルカンポリマー」は、本明細書においては同じ意味で使用される。ポリα−１，３−グルカンは、少なくとも５０％のグリコシド結合がα−１，３−グルカン結合である、グリコシド結合によって互いに連結したグルコースモノマー単位を含むポリマーである。ポリα−１，３−グルカンは多糖の一種である。ポリα−１，３−グルカンの構造は以下のように示すことができる。
【化１】
2018507929.tif 000002
【００２９】
ポリα−１，３−グルカンは、化学的な手法を用いて作製することができる。あるいは、これはポリα−１，３−グルカンを生成する菌類などの様々な微生物からこれを抽出することによって得ることができる。またあるいは、ポリα−１，３−グルカンは、例えば米国特許第７，０００，０００号明細書、並びに米国特許出願公開第２０１３／０２４４２８８号明細書及び第２０１３／０２４４２８７号明細書（これら全ては参照により本明細書に包含される）に記載されているように、１種以上のグルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素（例えばｇｔｆＪ）を利用してスクロースから酵素的に製造することができる。
【００３０】
用語「ポリα−１，３−１，６−グルカン」、「α−１，３−１，６−グルカンポリマー」、及び「ポリ（α−１，３）（α−１，６）グルカン」は本明細書では同じ意味で使用される（これらの用語における結合の記号「１，３」及び「１，６」の順序は重要ではない）。本明細書におけるポリα−１，３−１，６−グルカンは、グリコシド結合によって互いに連結した（すなわちグリコシド結合）グルコースモノマー単位を含むポリマーであって、グリコシド結合の少なくとも３０％がα−１，３−グリコシド結合であり、グリコシド結合の少なくとも３０％がα−１，６−グリコシド結合であるポリマーである。ポリα−１，３−１，６−グルカンは、混合グリコシド結合成分を含む多糖の種類である。本明細書の特定の実施形態においては、用語ポリα−１，３−１，６−グルカンの意味からは、連続的に互いに交互するα−１，３結合と−１，６結合とを含むグルカンである「オルタナン」は除外される（米国特許第５７０２９４２号明細書、米国特許出願公開第２００６／０１２７３２８号明細書）。互いに「連続的に交互する」α−１，３結合と−１，６結合は、視覚的に…Ｇ−１，３−Ｇ−１，６−Ｇ−１，３−Ｇ−１，６−Ｇ−１，３−Ｇ−１，６−Ｇ−１，３−Ｇ−…と表すことができ、Ｇは例えばグルコースを表す。
【００３１】
本明細書においてポリα−１，３−グルカン化合物の作製のために使用されるポリα−１，３−グルカンのグルコースモノマー単位間のα−１，３であるグリコシド結合の割合は、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％（又は５０％〜１００％の任意の整数値）である。したがって、このような実施形態においては、ポリα−１，３−グルカンは５０％、４０％、３０％、２０％、１０％、５％、４％、３％、２％、１％、又は０％（又は０％〜５０％の任意の整数値）未満の、α−１，３−ではないグリコシド結合を有する。
【００３２】
グルカンウエットケーキは、濾過により水を除去することによってグルカンコロイド分散液から形成される。水はグルカン固体粒子表面上に残り、また粒子間に捕捉される。グルカンコロイド分散液が流動可能な液体である一方で、ウエットケーキは軟らかい固体状の稠度を有する。
【００３３】
本明細書における用語「ポリα−１，３−グルカンスラリー」は、ポリα−１，３−グルカン、スクロース、１種以上のグルコシルトランスフェラーゼ酵素、グルコース、及びフルクトースなどのグルコシルトランスフェラーゼ酵素反応の成分を含む水性混合物のことをいう。
【００３４】
本明細書における用語「ポリα−１，３−グルカンウエットケーキ」は、スラリーから分離されてから水又は水溶液で洗浄されたポリα−１，３−グルカンのことをいう。ウエットケーキを作製する場合にはポリα−１，３−グルカンは乾燥されない。
【００３５】
本明細書で使用される用語「粘度」は、親水コロイドなどの流体又は水性組成物がこれを流動させようとする力に対して抵抗する程度の尺度のことをいう。本明細書で使用され得る様々な粘度の単位には、センチポアズ（ｃＰｓ）及びパスカル−秒（Ｐａ・ｓ）が含まれる。センチポアズは１００分の１ポアズであり、１ポアズは０．１００ｋｇ・ｍ−１・ｓ−１に相当する。したがって、本明細書において使用される用語「粘度調整剤」及び「粘度修正剤」は、流体又は水性組成物の粘度を変える／修正することができるもののことをいう。
【００３６】
本明細書において使用される用語「ずり流動挙動」は、せん断速度が増加するにつれてコロイド分散物の粘度が減少することをいう。本明細書において使用される用語「ずり粘稠挙動」は、せん断速度が増加するにつれてコロイド分散物の粘度が増加することをいう。本明細書において、「せん断速度」とは、コロイド分散液に累進せん断変形が加えられる時点の速度をいう。回転によってせん断変形が加えられてもよい。
【００３７】
本明細書におけるポリα−１，３−グルカン及びポリα−１，３−グルカン化合物の「分子量」は、数平均分子量（Ｍｎ）又は重量平均分子量（Ｍｗ）として表すことができる。あるいは、分子量はダルトン、グラム／モル、ＤＰｗ（重量平均重合度）、又はＤＰｎ（数平均重合度）として表すこともできる。これらの分子量の大きさを計算するためには、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、又はゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）などの様々な手法が当該技術分野で公知である。
【００３８】
用語「体積パーセント（ｐｅｒｃｅｎｔ  ｂｙ  ｖｏｌｕｍｅ、ｖｏｌｕｍｅ  ｐｅｒｃｅｎｔ）」、「体積％」、及び「ｖ／ｖ％」は、本明細書においては同じ意味で使用される。溶液中の溶質の体積パーセントは、式：［（溶質の体積）／（溶液の体積）］×１００％を使用して決定することができる。
【００３９】
用語「重量パーセント（重量％）」、「重量パーセンテージ（ｗｔ％）」、及び「重量−重量パーセンテージ（％ｗ／ｗ）は、本明細書においては同じ意味で使用される。重量パーセントとは、組成物、混合物、又は溶液中に含まれる質量を基準とした物質のパーセンテージのことをいう。
【００４０】
粘度は、３℃〜１１０℃（又は３〜１１０℃の任意の整数）の任意の温度でコロイド分散液を用いて測定することができる。あるいは、粘度は４℃〜３０℃、又は２０℃〜２５℃の温度で測定することができる。粘度は、大気圧（約７６０ｔｏｒｒ）又は他の任意のそれより高い若しくは低い圧力で測定することができる。
【００４１】
本明細書に開示のコロイド分散液の粘度は、粘度計もしくはレオメーターを使用して、あるいは当該技術分野で公知の任意の他の手段を使用して測定することができる。ずり流動挙動又はずり粘稠挙動を示す（すなわち流動条件によって変動する粘度を有する液体）本開示のこれらの親水コロイド及び水溶液の粘度を測定するためにレオメーターを使用できることは当業者が理解するであろう。そのような実施形態の粘度は、例えば１０〜１０００ｒｐｍ（回転毎分）（又は１０〜１０００ｒｐｍの任意の整数）の回転せん断速度で測定することができる。あるいは、粘度は１０、６０、１５０、２５０、又は６００ｒｐｍの回転せん断速度で測定することができる。
【００４２】
本明細書に開示のコロイド分散液のｐＨは２．０〜１２．０であってもよい。あるいは、ｐＨは２．０、３．０、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、１０．０、１１．０、１２．０；又は４．０〜８．０；又は３．０〜１１．０であってもよい。ある実施形態においては、コロイド分散液の粘度は３．０〜１１．０のｐＨで大きく変動しない。
【００４３】
本明細書に開示のポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン化合物は、少なくとも０．０１％、０．０５％、０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１．０％、１．２％、１．４％、１．６％、１．８％、２．０％、２．５％、３．０％、３．５％、４．０％、４．５％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、又は１５％の重量パーセント（ｗｔ％）でコロイド分散液の中に存在していてもよい。
【００４４】
本明細書に開示のコロイド分散液は、パーソナルケア製品、医薬品、食品、家庭用品、又は工業製品の形態であってもよく、及び／又はそれらの中に含まれていてもよい。本明細書のポリα−１，３−グルカン化合物は、これら製品のそれぞれの中の増粘剤として使用することができる。そのような増粘剤は、必要に応じて、米国特許第８，５４１，０４１号明細書（この開示の全体は参照により本明細書に組み込まれる）に開示されているものなどの１種以上の他の種類の増粘剤と組み合わせて使用されてもよい。
【００４５】
本明細書におけるパーソナルケア製品としては、これらに特に限定されるものではないが、例えばスキンケア組成物、化粧品組成物、抗真菌性組成物、及び抗菌性組成物が挙げられる。本明細書におけるパーソナルケア製品は、例えばローション、クリーム、ペースト、バーム、軟膏、ポマード、ジェル、液体、これらの組み合わせ等の形態であってもよい。本明細書に開示のパーソナルケア製品は、少なくとも１種の活性成分を含んでいてもよい。活性成分は、一般的には意図する薬理作用を生じさせる成分として認識される。
【００４６】
ある実施形態においては、ポリα−１，３−グルカン及び／又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するコロイド分散液は、水分の不足に関連する肌のダメージに対処するために肌に塗布することができるスキンケア製品であってもよい。スキンケア製品は、肌の外観（例えばかさついた、ひび割れた、及び／又は赤い肌の見かけを軽減）及び／又は肌の感触（例えば肌の軟らかさ及び緻密さを改善しながら肌の荒れ及び／又は乾燥を軽減）に対処するために使用されてもよい。コロイド分散液に加えて、スキンケア製品は、酸化亜鉛、ワセリン、白色ワセリン、鉱油、タラ肝油、ラノリン、ジメチコーン、固い脂肪、ビタミンＡ、アラントイン、カラミン、カオリン、グリセリン、又はコロイド状オートミール、及びこれらの組み合わせなどの、肌の疾患の治療もしくは予防、化粧効果の付与、又は肌への保湿効果の付与のための１種以上の活性成分を更に含有していてもよい。スキンケア製品は、例えばセラミド、ヒアルロン酸、グリセリン、スクワラン、アミノ酸、コレステロール、脂肪酸、トリグリセリド、リン脂質、スフィンゴ糖脂質、尿素、リノール酸、グリコサミノグリカン、ムコ多糖、乳酸ナトリウム、又はピロリドンカルボン酸ナトリウムなどの１種以上の天然保湿因子を含んでいてもよい。スキンケア製品の中に含まれ得る他の成分としては、これらに限定されるものではないが、グリセリド、杏仁油、菜種油、スクワラン、スクワレン、ヤシ油、トウモロコシ油、ホホバ油、ホホバワックス、レシチン、オリーブ油、ベニバナ油、ゴマ油、シアバター、大豆油、甘扁桃油、ヒマワリ油、チャノキ油、シアバター、パーム油、コレステロール、コレステロールエステル、ワックスエステル、脂肪酸、及びオレンジ油が挙げられる。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液を含むスキンケア製品は、オイル、ワックス、香料、ＵＶ吸収剤、顔料、アミノ酸、脂肪酸、染料、酸化防止剤、ビタミン、レチノール、αヒドロキシ酸、サリチル酸、又は上に列挙した成分のいずれかのうちの１種以上を更に含んでいてもよい。
【００４７】
ポリα−１，３−グルカン及び／又はポリα−１，３−１，６−グルカンは、パーソナルケア製品組成物の総重量基準で０．０５〜１５重量％の範囲でパーソナルケア製品中に存在していてもよい。別の実施形態においては、ポリα−１，３−グルカン及び／又はポリα−１，３−１，６−グルカンは０．１〜１０重量％、又は０．１〜５重量％の範囲で存在していてもよく、全ての重量パーセントはパーソナルケア製品組成物の総量基準である。
【００４８】
いくつかの実施形態においては、パーソナルケア製品は、ポリα−１，３−グルカン及び／又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するコロイド分散液と、１種以上のオイルと、１種以上の乳化剤と、水と、１種以上の保存料とを含むか、これらから本質的になる。別の実施形態においては、パーソナルケア製品は、ポリα−１，３−グルカン及び／又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するコロイド分散液と、１種以上のオイルと、１種以上の乳化剤と、水と、１種以上のエモリエントと、１種以上の保存料とを含むか、これらから本質的になる。また別の実施形態においては、パーソナルケア製品は、ポリα−１，３−グルカン及び／又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するコロイド分散液と、１種以上のオイルと、１種以上の乳化剤と、水と、１種以上のエモリエントと、１種以上の香料と、１種以上の保存料とを含むか、これらから本質的になる。
【００４９】
本明細書のパーソナルケア製品は、これらに限定されるものではないが、例えばリップクリーム、マスカラ、口紅、ファンデーション、頬紅、アイライナー、リップライナー、リップグロス、他の化粧品、日焼け止め（サンスクリーン、サンブロック）、マニュキュア、ムース、ヘアスプレー、スタイリングジェル、ネイルコンディショナー、バスジェル、シャワージェル、ボディーソープ、洗顔料、シャンプー、ヘアコンディショナー（リーブイン又は洗い流し）、クリームリンス、毛髪染料、ヘアカラー製品、ヘアシャイン製品、ヘアセラム、くせ毛防止製品、枝毛修復製品、リップバーム、スキンコンディショナー、コールドクリーム、保湿剤、ボディースプレー、石鹸、ボディースクラブ、スクラブ剤、収れん化粧水、スクラッフィングローション、脱毛剤、パーマ液、ふけ防止剤、制汗用組成物、消臭剤、シェービング製品、プレシェービング製品、アフターシェービング製品、洗浄剤、スキンジェル、リンス、歯磨き粉、又は洗口液などの、化粧品又は他の製品の形態であってもよい。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液を含むパーソナルケア製品は、オイル、ワックス、香料、ＵＶ吸収剤、ＵＶ吸収剤、顔料、アミノ酸、脂肪酸、染料、酸化防止剤、ビタミン、レチノール、αヒドロキシ酸、サリチル酸、又は上に列挙した成分のいずれかのうちの１種以上を更に含んでいてもよい。
【００５０】
本明細書における医薬品は、例えば乳液、液体、エリキシル剤、ゲル、懸濁液、溶液、クリーム、又は軟膏の形態であってもよい。また、本明細書における医薬品は、本明細書に開示のいずれかのパーソナルケア製品の形態であってもよい。医薬品は、１種以上の医薬的に許容可能な担体、希釈剤、及び／又は医薬的に許容可能な塩を更に含んでいてもよい。本明細書に開示のポリα−１，３−グルカン化合物は、カプセル、カプセル材料、錠剤コーティングの中で、並びに薬剤及び薬品のための賦形剤としても使用することができる。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液を含む医薬品は、活性成分、甘味料、着色剤、ラクトース、レシチン、香料、酸化マグネシウム、リンゴ酸、安息香酸、ベンジルアルコール、パラベン、炭酸塩、ワックス、オイル、セルロース、コーンスターチ、又はこれらの組み合わせのうちの１種以上を更に含んでいてもよい。医薬品の一部となり得る不活性成分は、アメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）によって注意深く管理されている。公知のＦＤＡに認められているこれらの成分のうちのいずれも、医薬品の一部として使用することができる。
【００５１】
本明細書における食品の非限定的な例としては、野菜、肉、及び大豆パティ；改質海産物；改質チーズスティック；クリームスープ；肉汁及びソース；サラダドレッシング；マヨネーズ；オニオンリング；ジャム、ゼリー、及びシロップ；パイのフィリング；フライドポテト及び押出成形ポテトなどのジャガイモ製品；フライ料理の衣用生地、パンケーキ／ワッフル、及びケーキ；ペットフード；飲料；冷菓；アイスクリーム；カッテージチーズ、ヨーグルト、チーズ、及びサワークリームなどの発酵乳製品；ケーキのアイシング及びグレーズ；ホイップクリーム；膨張させた及び膨張させていない焼いた食品等が挙げられる。
【００５２】
ポリα−１，３−グルカン及び／又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するコロイド分散液は、食品中の増量剤として使用されてもよく、あるいは別の実施形態においては、食品中の油脂の少なくとも一部の代替物として使用されることで食品の低脂肪バージョンが製造されてもよい。
【００５３】
家庭用品又は工業製品の非限定的な例は液体洗剤である。グルカンコロイド分散液は、液体洗剤製剤の成分を安定化するための構造化剤又は増粘剤として使用することができる。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液を含有する家庭用品は、アルコール、界面活性剤、ポリマー、顔料、染料、香料、酵素、ビルダー、キレート化剤、ｐＨ調整剤、アミン、オイル、ワックス、又はこれらの組み合わせのうちの１種以上を更に含有していてもよい。家庭用品用の公知の数多くの成分をコロイド分散液と共に使用することができる。これらの公知の成分のいずれも使用することができる。
【００５４】
本開示は、（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び（ｂ）溶媒；を含有するコロイド分散液に関する。いくつかの実施形態においては、コロイド分散液は、（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び（ｂ）溶媒から本質的になる。別の実施形態においては、コロイド分散液は、１重量％未満のスクロース及び／又はフルクトースを含有し、ここで重量パーセントはコロイド分散液の総量基準である。ポリα−１，３−１，６−グルカンは、（ａ）少なくとも３０％、４０％、又は５０％のグリコシド結合がα−１，３結合であり、（ｂ）少なくとも３０％、４０％、又は５０％のグリコシド結合がα−１，６結合である、α−１，３及びα−１，６−グリコシド結合を有する。
【００５５】
ポリα−１，３−グルカン及びポリα−１，３−１，６−グルカンは、５ｎｍ、１０ｎｍ、又は２０ｎｍと、１００ｎｍ、１５０ｎｍ、又は２００ｎｍとの間の平均粒径サイズを有する粒子を含む。好ましくは、粒子は５ｎｍ〜２００ｎｍ、より好ましくは１０ｎｍ〜１００ｎｍの平均粒径サイズを有する。粒子は球状又は円筒形状を有していてもよい。典型的には、粒子は実質的に球状の形態である。実質的に、とは、粒子の５０％超が球状の形態であることを意味する。粒子は、１０ｎｍ、１００ｎｍ、１μｍ、又は１０μｍと、１００μｍ、１５０μｍ、又は３００μｍとの間の平均凝集径サイズを有する凝集体を形成していてもよい。好ましくは、凝集体は１０ｎｍ〜２５０μｍ、より好ましくは１０μｍ〜２２５μｍの平均凝集径サイズを有する。全ての場合において、平均サイズは、Ｄ５０粒子サイズ、又は、粒子の５０％がＤ５０値よりも大きく粒子の５０％がＤ５０値よりも小さい粒子サイズのことをいう。
【００５６】
コロイド分散液のための溶媒は水であってもよい。別の実施形態においては、溶媒は、水と、５０重量％未満の水と混和性のある１種以上の有機溶媒（例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、プロパノール、アセトン、エチレングリコール、酢酸、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、又はこれらの組み合わせ）との組み合わせであってもよく、ここでの重量パーセントは溶媒の総量基準である。
【００５７】
コロイド分散液の、α−１，３−グリコシド結合を有することを特徴とするポリα−１，３−グルカン、又はα−１，３及びα−１，６−グリコシド結合を有することを特徴とするポリα−１，３−１，６−グルカンは、コロイド分散液全体の０．１、１、又は５重量％と、１０、１５、２０、４０、又は６０重量％との間を占める。好ましくは、コロイド分散液のポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンは、０．１重量％〜１５重量％、より好ましくは０．１重量％〜１０重量％を占める。
【００５８】
コロイド分散液は、少なくとも１０、１００、１，０００、１０，０００、１００，０００、又は１，０００，０００ｃＰｓの粘度を有する。
【００５９】
コロイド分散液は、１又は２と、１１、１２、１３、又は１４との間のｐＨを有する。ｐＨは好ましくは１〜１４であり、より好ましくは２〜１１である。
【００６０】
コロイド分散液は、ｐＨが１又は２と１１、１２、１３、又は１４との間の範囲にわたって変化する際に粘度が１０、２０、３０、４０、又は５０％未満しか変化しない、粘度及びｐＨを有する。好ましくは、ｐＨが１〜１４の範囲にわたって変化する際に粘度は５０％未満しか変化せず、より好ましくは、ｐＨが２〜１１の範囲にわたって変化する際に粘度は１０％未満しか変化しない。
【００６１】
コロイド分散液は、塩又は界面活性剤の添加後に１０％未満しか変化しない粘度を有するような塩又は界面活性剤を更に含有していてもよい。
【００６２】
コロイド分散液は、ずり流動挙動又はずり粘稠挙動を有する。
【００６３】
コロイド分散液は、パーソナルケア製品、医薬品、食品、家庭用品、又は工業製品の形態で使用することができる。
【００６４】
本開示は更に、（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び（ｂ）溶媒；を含有するコロイド分散液を含むパーソナルケア製品に関する。
【００６５】
本開示はまた更には、（ａ）ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカン；及び（ｂ）溶媒；を含有するコロイド分散液を含む食品に関する。
【００６６】
本開示はまた更には、（ａ）酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するスラリーを製造すること；（ｂ）スラリーをろ過してウエットケーキの形態でポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを分離すること；（ｃ）ウエットケーキを水で洗浄すること；及び（ｄ）ウエットケーキを水に分散させてポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液を形成すること；を含むポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液の製造方法に関する。方法は、（ａ）２０〜２５℃で２４時間の酵素反応溶液の加熱；（ｂ）ポリα−１，３−グルカンを製造するための酵素がストレプトコッカス  サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）ｇｔｆＪである；（ｃ）ポリα−１，３−１，６−グルカンを製造するための酵素がストレプトコッカス  オラリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｒａｌｉｓ）ｇｔｆ４２９７、ストレプトコッカス  ｓｐ．（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）Ｃ１５０  ｇｔｆ  ３２９８、又はストレプトコッカス  ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）ｇｔｆ  ０５４４である；（ｄ）塩基性緩衝水溶液がアルカリ金属リン酸塩緩衝液であるｐＨ緩衝剤を有する；（ｅ）アルカリ金属がカリウムであるアルカリ金属リン酸塩緩衝液；（ｆ）塩基性緩衝水溶液が７〜５のｐＨを有する；（ｇ）抗菌剤がＦＥＲＭＡＳＵＲＥ（登録商標）亜塩素酸ナトリウムである；及び（ｈ）ウエットケーキが６０重量％〜８０重量％の水を含む；
のうちの少なくとも１つを有し得る。
【００６７】
本開示はまた更には、（ａ）酵素の塩基性緩衝水溶液と、スクロースと、任意選択的な抗菌剤とを含有する酵素反応溶液を加熱して、ポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するスラリーを製造すること；（ｂ）スラリーをろ過してウエットケーキの形態でポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンを分離すること；（ｃ）ウエットケーキを水で洗浄すること；及び（ｄ）ウエットケーキを水に分散させてポリα−１，３−グルカンコロイド分散液を形成すること；を含む方法によって調製されるポリα−１，３−グルカン又はポリα−１，３−１，６−グルカンのコロイド分散液に関する。
【００６８】
試験方法
粒径は、ポリα−１，３−グルカンのスラリーを用いて原子間力顕微鏡（ＡＦＭ）で分析した一次粒径によって測定した。１０ｕＬのポリα−１，３−グルカンスラリーを、劈開したてのマイカ表面の上に載せ、６０００ｒ／ｓで１０秒回転させ、室温で乾燥させ、ＡＦＭのタッピングモードで撮像した。ＡＦＭ画像は、Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  Ｉｃｏｎ走査型プローブＤｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  Ｉｃｏｎ走査型プローブ顕微鏡（Ｂｒｕｋｅｒ，Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）を使用して得た。顕微鏡はタッピングモードで操作した。この中では、カンチレバーは共鳴点で振動し、フィードバック制御が一定のタッピング振幅になるように調節する。典型的には、タッピングモードはトポグラフィー画像と位相的な画像の両方を得るために使用された。トポグラフィー画像は、表面の定量的な三次元画像であり、画像の全てのピクセルの色又は明度は高さを表す。走査は、３７〜５５Ｎ／ｍのばね定数を有する１２５−／ｍ−の長さの市販のシリコン製ＯＴＥＳＰチップを使用し、０．８５〜０．６５の中程度のタッピング比で３００ｋＨ超の周波数を使用して空気中で行った。
【００６９】
粒子凝集サイズは、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  ＬＳ１３３２０を用いて測定した。これは、０．４〜２０００ｕｍの範囲の粒子の領域の体積分布を決定するためにレーザー回折を利用する。粒径分布測定のために、標準的なフラウンホーファー回帰モデルを使用した。試料の安定性及び装置の再現性の確認として、試験は３回繰り返す。
【００７０】
粘度は、温度を制御（２０℃）するための再循環浴及びＹＵＬＡ１５−Ｅ（Ｚ）スピンドルを備えたＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＤＶ３Ｔレオメーターによって測定した。せん断速度は、０．０１〜２５０ｒｐｍから増加させ、その後、せん断速度を２０秒毎に７．０５（１／ｓ）ずつ増加させるグラジエントプログラムを用いて増加させた。
【００７１】
ｐＨはＶＷＲ  ｓｙｍｐｈｏｎｙ  Ｈ１０Ｐによって測定した。
【００７２】
グリコシド結合の決定は、ＮＭＲ（核磁気共鳴）によって決定した。ｇｔｆ酵素により合成されたグルカン生成物中の２０個のグリコシド結合を１３Ｃ  ＮＭＲ又は１Ｈ  ＮＭＲによって決定した。
【００７３】
１３Ｃ  ＮＭＲのために、５０℃で撹拌しながら３重量％のＬｉＣｌを含む１ｍＬの重ＤＭＳＯの中に、乾燥グルカンポリマー（２５〜３０ｍｇ）を溶解させた。ガラスピペットを使用して、０．８ｍＬの溶液を５−ｍｍのＮＭＲ管の中に移した。２６０４１．７Ｈｚのスペクトル窓を使用して、スペクトル周波数１２５．７６ＭＨｚで、ＣＰＤＵＬクライオプローブを備えたＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ５００−ＭＨｚ  ＮＭＲスペクトロメーター（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を使用して２５個の定量的な１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを得た。取り込み時間０．６２９秒、パルス間遅延５秒、６０００  ３０パルスで、ｗａｌｔｚデカップリングを用いた逆ゲートデカップリングパルスシーケンスを使用した。時間ドメインのデータは２．０Ｈｚの指数関数的乗算を使用して変換した。
【００７４】
１Ｈ  ＮＭＲのために、分析天秤の上で約２０ｍｇのグルカンポリマー試料をバイアルの中に秤量した。バイアルを天秤から取り出し、３重量％のＬｉＣｌを含む０．８ｍＬの重ＤＭＳＯ（ＤＭＳＯ−ｄ６）をバイアルの中に添加した。混合物を、グルカン試料が溶解するまで磁気撹拌子５を用いて撹拌し、９０℃まで温めた。溶液を室温まで放冷した。室温で撹拌しながら、２０体積％のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）が入ったＤＭＳＯ−ｄ６溶液０．２ｍＬをポリマー溶液に添加した。全てのヒドロキシルプロトンシグナルを、炭水化物環のプロトンシグナル１０が生じるスペクトル領域の外に出すために、ＴＦＡを添加した。最終的な溶液の一部の０．８ｍＬを、ガラスピペットを使用して５−ｍｍのＮＭＲ管の中に移した。定量的な１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、５００ＭＨｚ以上のプロトン周波数でＮＭＲスペクトロメーターを使用して得た。スペクトルは、１１．０ｐｐｍのスペクトル窓及び５．５ｐｐｍのトランスミッターオフセットを使用して得た。パルス間１５遅延１０秒及び取り込み時間１．５秒で、９０°のパルスを３２パルスかけた。時間ドメインのデータは０．１５Ｈｚの指数関数的乗算を使用して変換した。
【実施例】
【００７５】
本開示を以降の実施例においてさらに詳しく定義する。これらの実施例は本開示の特定の好ましい態様を示しているが、これらは例示のためのみに示されていることが理解されるべきである。上の議論及びこれらの実施例から、当業者であれば本開示の特徴の本質を突き止めることができ、またその趣旨及び範囲から逸脱することなしに本開示の様々な変更及び変形を行って様々な用途及び条件に適応させることができる。
【００７６】
実施例１
ポリα−１，３−グルカンを含有するコロイド分散液の調製
米国特許第７，０００，０００号明細書では、ストレプトコッカス  サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）ｇｔｆＪ酵素を使用した、ヘキソース単位を含み、ポリマー中の少なくとも５０％のヘキソース単位がα−１，３−グリコシド結合を介して連結されている多糖繊維が開示された。この酵素は、最終生成物としてのポリα−１，３−グルカン及びフルクトースを生成する重合反応において、基質としてスクロースを利用する。
【００７７】
ポリα−１，３−グルカンのスラリーは米国特許出願第２０１３／０２４４２８８号明細書（これはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のストレプトコッカス  サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）ｇｔｆＪ酵素（１００ユニット／Ｌ）、ＯｍｎｉＰｕｒ  Ｓｕｃｒｏｓｅから入手したスクロース（ＥＭ８５５０）（１００ｇ／Ｌ）、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから入手したリン酸カリウム緩衝液（１０ｍＭ）、ＤｕＰｏｎｔから入手したＦｅｒｍａＳｕｒｅ（登録商標）抗菌剤（１００ｐｐｍ）を含む、ｐＨ５．５に調整された水溶液（０．５Ｌ）から調製した。得られた酵素反応溶液を２０〜２５℃に２４時間維持した。反応で合成されるポリα−１，３−グルカンは水に不溶性であることからスラリーが形成された。反応で生成したポリα−１，３−グルカンの固体を、４０マイクロメートルの濾紙上に３２５−メッシュスクリーンが取り付けられたブフナー漏斗を使用して集め、約６０重量％〜８０重量％の水を含むウエットケーキを形成した。ポリα−１，３−グルカンのウエットケーキをその後、高せん断、高温、長い混合時間、又は別の混合工程なしで、従来の撹拌装置を使用して水に分散させる。例えば、水への分散には、典型的には８０００ｒｐｍで周囲温度で５分、Ｉｋａ  Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ（登録商標）  Ｔ２５  デジタル分散機を使用する。
【００７８】
実施例２ａ〜ｃ
ポリα−１，３−１，６−グルカンを含有するコロイド分散液の調製
ポリα−１，３−１，６−グルカンは、ポリα−１，３−１，６−グルカンのスラリーから作製した。ポリα−１，３−１，６−グルカンのスラリーは、実施例２ａ〜ｃについて、それぞれ米国特許出願第２０１４／００８７４３１号明細書（これはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のストレプトコッカス  オラリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｒａｌｉｓ）ｇｔｆ  ４２９７、ストレプトコッカス  ｓｐ．（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）Ｃ１５０  ｇｔｆ  ３２９８、又はストレプトコッカスミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）ｇｔｆ  ０５４４の酵素（１００ユニット／Ｌ）、ＯｍｎｉＰｕｒ  Ｓｕｃｒｏｓｅから入手したスクロース（ＥＭ８５５０）（１００ｇ／Ｌ）、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈから入手したリン酸カリウム緩衝液（５０ｍＭ）、及びＤｕＰｏｎｔから入手したＦｅｒｍａＳｕｒｅ（登録商標）（１００ｐｐｍ）を含む、ｐＨ６．５に調整された水溶液（０．５Ｌ）から調製した。得られた酵素反応溶液を２２〜２５℃に２４〜３０時間維持した。反応で合成されるポリα−１，３−１，６−グルカンは水に不溶性であることからスラリーが形成された。反応で生成したポリα−１，３−１，６−グルカンの固体を、４０マイクロメートルの濾紙上に３２５−メッシュスクリーンが取り付けられたブフナー漏斗を使用して集め、約６０重量％〜８０重量％の水を含むウエットケーキを形成した。その後、ポリα−１，３；１，６−グルカンのウエットケーキを典型的には８０００ｒｐｍで５分、Ｉｋａ  Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ（登録商標）  Ｔ２５  デジタル分散機を使用して水に分散させる。異なる酵素で異なる比率の１，３対１，６のグリコシド結合の比率が得られた。酵素ストレプトコッカス  オラリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｒａｌｉｓ）ｇｔｆ  ４２９７は、３１％のα−１，３結合と６７％のα−１，６結合を生成し、ストレプトコッカス  ｓｐ．（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）Ｃ１５０  ｇｔｆ  ３２９８は、５０％のα−１，３結合と５０％のα−１，６結合を生成し、ストレプトコッカス  ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）ｇｔｆ  ０５４４は、６２％のα−１，３結合と３６％のα−１，６結合を生成した。
【００７９】
実施例３
グルカンの一次粒径
一次粒径は、実施例１に記載したポリα−１，３−グルカンのスラリーを使用して原子間力顕微鏡（ＡＦＭ）を用いて分析した。１０ｕＬのポリα−１，３−グルカンスラリーを劈開したてのマイカ表面の上に載せ、６０００ｒ／ｓで１０秒回転させ、室温で乾燥させ、ＡＦＭのタッピングモードで撮像した。ＡＦＭ画像は、Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  Ｉｃｏｎ走査型プローブＤｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  Ｉｃｏｎ走査型プローブ顕微鏡（Ｂｒｕｋｅｒ，Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）を使用して得た。顕微鏡はタッピングモードで操作した。この中では、カンチレバーは共鳴点で振動し、フィードバック制御によって一定のタッピング振幅になるように調節される。典型的には、タッピングモードはトポグラフィー画像と位相的な画像の両方を得るために使用された。トポグラフィー画像は、表面の定量的な三次元画像であり、画像中の全てのピクセルの色又は明度は高さを表す。走査は、３７〜５５Ｎ／ｍのばね定数を有する１２５−／ｍ−の長さの市販のシリコン製ＯＴＥＳＰチップを使用し、０．８５〜０．６５の中程度のタッピング比で３００ｋＨ超の周波数を使用して空気中で行った。ＡＦＭ画像は、一次粒子の平均径が２０〜３０ｎｍであることを示している。
【００８０】
実施例４
グルカンの粒径分布
粒径分布は、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  ＬＳ１３３２０を用いて実施例１及び実施例２で記載した試料を用いて測定した。これは、０．４〜２０００ｕｍの範囲の粒子の領域の体積分布を決定するためにレーザー回折を利用する。粒径分布測定のために、標準的なフラウンホーファー回帰モデルを使用した。試料の安定性及び装置の再現性の確認として、試験は３回繰り返す。表１中、Ｄ１０、Ｄ５０、及びＤ９０は、それぞれ累積分布における１０％、５０％、及び９０％での粒子又はクラスターの直径を示す。Ｄ５０は、粒径分布のメジアン径又は中央値を示す。
【００８１】
【表１】
2018507929.tif 000003
【００８２】
実施例５
グルカンの粒子形状
ほとんどの粒子は通常球状の形態を有しているが、幾らかの粒子は円筒状又は棒状の形態を有している。円筒形状の大きさを測定する目的で、円筒形状の粒子の質量を球状の形態を有しているかのように調整した後に直径を有効径として計算する。
【００８３】
実施例６
グルカンの粘度に対するせん断速度の影響
５重量％のポリα−１，３−グルカン分散液を調製するために、８．６ｇのポリα−１，３−グルカンのウエットケーキ（Ｌ６Ｂ１Ｃ６、２９重量％）を実施例１に記載したように５０ｍＬの脱イオン水の中に分散させた。水に分散されたポリα−１，３−グルカンの様々なせん断速度での粘度を決定するために、温度を制御（２０℃）するための再循環浴及びＹＵＬＡ１５−Ｅ（Ｚ）スピンドルを備えたＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＤＶ３Ｔレオメーターを使用して親水コロイド試料に対して様々なせん断速度をかけた。せん断速度は、０．０１〜２５０ｒｐｍから増加させ、その後、せん断速度を２０秒毎に７．０５（１／ｓ）ずつ増加させるグラジエントプログラムを用いて増加させた。表２にまとめられている結果は、水の中に分散されているポリα−１，３−グルカンの粘度が、せん断速度が増加するにつれて減少することを示している。この観察結果は、親水コロイドが著しいずり流動挙動を示すことを意味する。
【００８４】
【表２】
2018507929.tif 000004
【００８５】
実施例７
グルカンの粘度に対するｐＨの影響
実施例１に記載の通りに５重量％のポリα−１，３−グルカンの水性分散液の６つのアリコートを調製した。水性分散液のｐＨは５．５であった。２つのアリコートを１Ｎの硝酸を使用してｐＨ２．０〜ｐＨ４．０に調整した。３つのアリコートを１Ｎの水酸化ナトリウムを使用してｐＨ７．０、ｐＨ９．０及びｐＨ１１．０に調整した。１つのアリコートはｐＨ調整なしで使用した。粘度測定は上述した通りに行った。表３にまとめられている結果は、水中に分散されたグルカンの粘度にｐＨは有意な影響を与えないことを示している。
【００８６】
【表３】
2018507929.tif 000005
【００８７】
実施例８
グルカンの粘度に対する塩化アルミニウムの影響
１５重量％の塩化アルミニウムが入った５重量％のポリα−１，３−グルカン分散液を調製するために、均一化方法を使用して、８．６ｇのポリα−１，３−グルカンウエットケーキ（Ｌ６Ｂ１Ｃ６，２９重量％）及び７．５ｇの塩化アルミニウムを実施例１に記載の通りに５０ｍＬの脱イオン水の中に分散させた。５重量％のポリα−１，３−グルカン分散液は実施例６に記載の通りに調製した。実施例６に記載の通りに粘度測定を行った。表４にまとめられている結果は、塩化アルミニウムの存在は水中のグルカンの粘度に有意な影響を与えなかったことを示している。
【００８８】
【表４】
2018507929.tif 000006
【００８９】
実施例９
グルカンの粘度に対する界面活性剤の影響
２重量％の界面活性剤が入った５重量％のポリα−１，３−グルカン分散液を調製するために、８．６ｇのポリα−１，３−グルカンウエットケーキ（Ｌ６Ｂ１Ｃ６，２９重量％）及び１ｇの界面活性剤を実施例１に記載の通りに５０ｍＬの脱イオン水の中に分散させた。ＣＴＡＢ（臭化セントリモニウム）、モノオレイン酸ソルビタン、Ｔｗｅｅｎ２０（又はポリソルベート２０）、及びＺｅｌｅｃ  ＡＮ（アミン中和リン酸エステル）を含む４つの異なる界面活性剤を用いて４つの試料を調製した。５重量％のポリα−１，３−グルカンの分散液は実施例６に記載の通りに調製した。実施例６に記載の通りに粘度測定を行った。表５にまとめられている結果は、界面活性剤の存在は水中のグルカンの粘度に有意な影響を与えなかったことを示している。
【００９０】
【表５】
2018507929.tif 000007
【００９１】
実施例１０
パーソナルケア用製剤中でのグルカンの利用
スキンケア用製剤の試作品を作製するために、表６中の（Ａ）と（Ｂ）を２つの別個の容器の中に入れ、プロペラ攪拌機を使用して７５℃で混合した。５分後、（Ａ）を（Ｂ）に添加し、プロペラ攪拌機を使用してこれらを７５℃で１分混合した。次いで、（Ｃ）を（Ａ）と（Ｂ）との混合物に４５℃で添加した。混合の際、プロペラ攪拌機は５００ｒｐｍに設定した。
【００９２】
【表６】
2018507929.tif 000008
【００９３】
ニキビ治療用製剤の試作品を作製するために、表７中の（Ｄ）と（Ｅ）を２つの別個の容器の中に入れ、プロペラ攪拌機を使用して７５℃で混合した。５分後、（Ｄ）を（Ｅ）に添加し、プロペラ攪拌機を使用してこれらを７５℃で１分混合した。次いで、（Ｆ）を（Ｄ）と（Ｅ）との混合物に４５℃で添加した。混合の際、プロペラ攪拌機は５００ｒｐｍに設定した。
【００９４】
【表７】
2018507929.tif 000009
【００９５】
ロールオン式の制汗製剤の試作品を作製するために、表８中の（Ｇ）と（Ｈ）を２つの別個の容器の中に入れ、プロペラ攪拌機を使用して７５℃で混合した。５分後、（Ｇ）を（Ｈ）に添加し、プロペラ攪拌機を使用してこれらを７５℃で１分混合した。次いで、（Ｃ）を（Ｇ）と（Ｈ）の混合物に４５℃で添加した。混合の際、プロペラ攪拌機は５００ｒｐｍに設定した。
【００９６】
【表８】
2018507929.tif 000010
【００９７】
ヘアケア製剤の試作品を作製するために、表９中の（Ｊ）と（Ｋ）を２つの別個の容器の中に入れ、プロペラ攪拌機を使用して７５℃で混合した。５分後、（Ｊ）を（Ｋ）に添加し、プロペラ攪拌機を使用してこれらを７５℃で１分混合した。次いで、（Ｌ）を（Ｊ）と（Ｋ）との混合物に４５℃で添加した。混合の際、プロペラ攪拌機は５００ｒｐｍに設定した。
【００９８】
【表９】
2018507929.tif 000011
【００９９】
実施例１１
ハンドローションの調製
官能評価のために様々なハンドローションを調製した。ハンドローションは、下の基本手順に従って、表１０の成分を使用して調製した。
【０１００】
室温で、相Ａの成分を混合物が均一になるまで撹拌した。相Ｂの成分を別の容器の中で合わせ、均一になるまで手でマイズした。相Ｂの均一な組成物を相Ａの均一な混合物に撹拌しながらゆっくり添加した。添加が完了した後、混合物を５０００〜９０００回転毎分（ｒｐｍ）で５〜１０分間混合することにより均一化した。次いで相Ｃの成分を撹拌しながら添加することで目的とするハンドローションを形成した。比較例Ｂのために、２０重量％の水酸化ナトリウム水溶液を添加することによってローションのｐＨを５．５に調整した。ＤＩ水は脱イオン水を意味する。％活性は、各実施例で添加された組成物中の成分の割合を意味する。重量％は最終的な製剤中の成分の重量割合である。
【０１０１】
【表１０】
2018507929.tif 000012
【０１０２】
【表１１】
2018507929.tif 000013
【０１０３】
【表１２】
2018507929.tif 000014
【０１０４】
皮膚感触の結果：ＡＳＴＭ  Ｅ１４９０−３に従って、二重盲検の皮膚感触分析を行った。この試験で評価された主要な特性は：拭き取り後のぬるつき、使用後のべたつき、取り出し時の曳糸性、及び取り出し時のべたつきであった。パネリストは１〜５のスケールで特性を評価した。１が最も小さい特性を示し、５が最も大きい特性を示す。結果は、各特性についてのパネリストの採点の平均値として下の表１１に報告されている。これらの値の合計平均は、ポリα−１，３−グルカンを用いて製造されたローションについての全体な感覚の体感がキサンタンガム又はＣａｒｂｏｐｏｌ  Ｕｌｔｒｅｚ  １０のいずれかを用いて製造された同様のローションの結果よりも勝っていることを示している。
【０１０５】
【表１３】
2018507929.tif 000015
【０１０６】
実施例１２
低脂肪マヨネーズ中でのグルカンの利用
表１２の全ての成分をＳｉｌｖｅｒｓｏｎホモジナイザーを用いて６５００ｒｐｍで５分混合することによって、低脂肪マヨネーズをポリα−１，３−グルカンを用いて調製した。得られた配合物は、低脂肪マヨネーズのテクスチャを全脂肪製品と同様な水準に回復させた。
【０１０７】
【表１４】
2018507929.tif 000016
【国際調査報告】
2018507929.tif 000017
2018507929.tif 000018