(57)【要約】本発明は、Ageratina jocotepecana植物からの（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るためのプロセスに関し、プロセスは、ａ）Ageratina jocotepecana苗条系から有機濃縮抽出物を得ること；ｂ）（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むフラクションを溶離するために、有機濃縮抽出物をカラムクロマトグラフィーにかけること；ｃ）（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含む溶離したフラクションを分離すること；およびｄ）有機溶媒を蒸発させて、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を固体形態で得ること、のステップを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ageratina jocotepecana植物から（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るためのプロセスであって、以下のステップ：
ａ）Ageratina jocotepecana苗条系から有機濃縮抽出物を得ること；
ｂ）前記有機濃縮抽出物を、カラムクロマトグラフィーにかけ、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むフラクションを溶離すること；
ｃ）（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むその溶離したフラクションを分離すること；および
ｄ）有機溶媒を蒸発させて、固体形態の（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得ること、
を含む、プロセス。
【請求項２】
Ageratina jocotepecana植物からの前記有機濃縮抽出物が、以下のステップ：
ａ）Ageratina jocotepecana植物苗条系を乾燥させることであって、Ageratina jocotepecana苗条系が、花、葉および／または茎などの前記植物の気生部分を含むこと；
ｂ）Ageratina jocotepecana植物苗条系を有機溶媒中で、６〜７２時間、浸軟または還流すること；
ｃ）ステップ（ｂ）の浸軟または還流した抽出物をろ別して、Ageratina jocotepecana有機抽出物を得ること；および
ｄ）前記Ageratina jocotepecana有機抽出物から溶媒を蒸発させること、
を含むプロセスにより得られる、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
前記有機溶媒が、ヘキサン、ジクロロメタン、酢酸エチル、クロロホルム、メタノールおよび／またはそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１または２に記載のプロセス。
【請求項４】
前記カラムクロマトグラフィーステップが、固定相としてのシリカゲル中で行われる、請求項１に記載のプロセス。
【請求項５】
前記クロマトグラフィーステップが、ヘキサン、酢酸エチルおよびその混合物を、異なる比でかつ極性が増大する順で含む移動相を使用する、請求項１に記載のプロセス。
【請求項６】
ヘキサン：酢酸エチルの混合物を６０：４０〜４０：６０（すなわち、３：２〜２：３）の比で含む前記溶離したフラクションが、分離される、請求項１に記載のプロセス。
【請求項７】
好ましくは、ヘキサン：酢酸エチルの混合物を５０：５０（すなわち、１：１）の比で含む前記溶離したフラクションが、分離される、請求項６に記載のプロセス。
【請求項８】
（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るための前記有機溶媒の蒸発ステップが、３５〜４５℃の温度および減圧で行われる、請求項１に記載のプロセス。
【請求項９】
（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るための前記有機溶媒の蒸発ステップが、４０℃の温度および減圧で行われる、請求項８に記載のプロセス。
【請求項１０】
（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物は、固体または半固体形態で得られ、前記固体形態は、結晶質または非晶質形態を含むことがあり、前記半固体形態は、シロップ、濃厚な懸濁液またはペーストであり得る、請求項１に記載のプロセス。
【請求項１１】
Ageratina jocotepecana植物からの（−）−アンブロックス化合物を得るためのプロセスであって、以下のステップ：
ａ）Ageratina jocotepecana苗条系から有機濃縮抽出物を得ること；
ｂ）前記有機濃縮抽出物を、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むフラクションを溶離するためにカラムクロマトグラフィーにかけること；
ｃ）（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含む溶離されたフラクションを分離すること；
ｄ）有機溶媒を蒸発させて、固体形態の（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得ること；および
ｅ）（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を環化ステップにかけて、（−）−アンブロックス化合物を得ること、
を含む、プロセス。
【請求項１２】
前記環化ステップが、
ａ）（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を適当な有機溶媒に溶解すること；
ｂ）酸および／または塩基および／または前記環化を行うのに適当な試薬を添加すること、を含む、請求項１１に記載のプロセス。
【請求項１３】
前記有機溶媒が、ヘキサン、ベンゼン、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、またはそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１２に記載のプロセス。
【請求項１４】
前記酸が、ルイス酸またはｐ−トルエンスルホン酸からなる群より選択される、請求項１２に記載のプロセス。
【請求項１５】
前記塩基が、ピリジンまたはＮａＯＨからなる群より選択される、請求項１２に記載のプロセス。
【請求項１６】
前記環化を行うのに適当な試薬が、ＰＯＣｌ３、トリメチルクロロシラン、トシルクロリド、またはジオールを環化させることができる他の化合物からなる群より選択される、請求項１２に記載のプロセス。
【請求項１７】
（−）−アンブロックス化合物のための精製ステップが、任意に行われる、請求項１１に記載のプロセス。
【請求項１８】
（−）−アンブロックス化合物の前記精製ステップが、カラムクロマトグラフィーによって行われる、請求項１７に記載のプロセス。
【請求項１９】
前記カラムクロマトグラフィーが、固定相としてシリカゲルカラムを含み、ヘキサン、酢酸エチルおよびその混合物を異なる比で極性が増大する順で含む移動相を含む、請求項１７に記載のプロセス。
【請求項２０】
ヘキサン：酢酸エチルの４：１混合物の極性を含む前記フラクションが、分離される、請求項１９に記載のプロセス。
【請求項２１】
前記プロセスが、前記ヘキサン：酢酸エチルの混合物を３５〜４５℃の温度で減圧で蒸発させることを含む、請求項２０に記載のプロセス。
【請求項２２】
前記蒸発が、４０℃の温度で減圧で行われる、請求項２１に記載のプロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化合物の合成技術に関し、より詳細には、Ageratina jocotepecanaからの（−）−アンブロックスの合成方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（−）−アンブロックスは、以下の化学構造を有する（−）−３ａ，６，６，９ａ−テトラメチルドデカヒドロナフト（２，１−ｂ）フラン化合物に相当する。
【化１】
2018538360.tif 000002
【０００３】
（−）−アンブロックスは、絶滅危惧種であるマッコウクジラ（Physeter macrocephalus）胃腸管から伝統的に得られた、香水産業における固定剤として主に使用される化合物である。結果として、植物種抽出物から得ることができる出発材料、主にテルペンとして他の天然産物を使用してこの化合物の合成および獲得のための複数の代替手順が開発されている。しかし、後に詳述するように、これらの手順は、３〜２５の範囲のいくつかの反応ステップを含む。さらに、それぞれのルーチン的な単離および精製プロセスは、合成中間体および最終生成物の両方について考慮されるべきである。
【０００４】
モノシクロホモファルネシル酸またはモノシクロホモファルネソールなどのその誘導体から完全に合成的な方法でアンブロックスを得ることが可能である。このようにして、FirmenichのAmbrox DL（登録商標）（＞５０％（±）−アンブロックスおよび＜５０％のジアステレオマー）およびCetalox（登録商標）製品が合成される。中間体（±）−スクラレオリドの光学分割を経ておそらく生成される市販のCetalox Laevo（登録商標）（＞９９％（−）−アンブロックス）もある。これらの合成生成物では、エナンチオマー的に純粋な（−）−アンブロックスを得ることができず、したがってラセミ形態で市販されるか、または場合によっては、高価で複雑なキラル分割方法を適用することによって得られる。
【化２】
2018538360.tif 000003
【０００５】
アンブロックスを得るための別の手法は、スペイン国特許ＥＳ２０６９４６９Ａ１に開示されており、これは、（−）−アンブロックスを調製するために、Juniperus属から得られる、天然に存在するトランス−およびシス−コムニンジテルペン酸からの５ステップ半合成からなる。第１ステップでは、低温での還元オゾン分解によるかなりの位置選択的な方法で、コムニン酸二重結合Δ１２の分解が達成され、ホモセスキテルペンアルコールが得られ、定量的かつ完全に立体選択的に循環させてエポキシドを生成するために、これはニトロメタンの存在下、酸で処理され、最後にメチル基を脱保護して（−）−アンブロックス化合物を得る。前記手順は、（−）−アンブロックス化合物を得るためにいくつかの反応ステップおよび試薬を必要とするため、複雑で時間がかかり、高価である。
【０００６】
さらなる合成は、Rosana A. Giacominiらによって「アンバーグリス臭気物質アンブロキックスの合成」、ARKIVOC 2003(x)、314-322で報告され、オゾン酸からの、これはジアゾメタンエステル化にかけて、新しいジテルペンを得て、次いで、そのオゾン酸メチルエステルを一連の錯反応にかけて、ｅｎｔ−アンブロックスを得て、その反応の中で、オゾン流の使用とその後のＰＰｈ３での処理があり、次いで、ベンゼン中のエチレングリコールとショウノウスルホン酸での処理と、トリメチルホスホニウムブロミドと塩基としてのｎ−ＢｕＬｉを使用したWittig反応がある。前記プロセスも、複雑で、時間がかかり、かつ高価である。
【０００７】
米国特許ＵＳ５６１６７３７に開示されているさらに別のアンブロックス合成手順では、デカヒドロ−２−ヒドロキシ−２，５，５，８−テトラメチル−１−ナフタレンエタノール化合物の環化は、ジオール系の、カラムクロマトグラフィー用に市販されている１０〜１００重量％の活性酸性酸化アルミニウムの存在下、８０℃〜２００℃のその溶融状態までそれを加熱することで実施され、これは、そのプロセスを実施するために必要な試薬と設備が高価であるという欠点を有し、ならびに塩酸で前処理された非常に特異的なアルミナ触媒の使用が含まれる。
【０００８】
また、（−）−アンブロックスの合成のための原料としてスクラレオールを用いる合成法も種々あり、スクラレオールは高価な物質であり、サルビア・スクラレア精油にごく少量しか存在しないという欠点がある。さらに、スクラレオール化合物は、単一の化学反応によってアンブロックスに変換することができず、代わりに、典型的にはメチルケトン、１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールまたはノルアンブレイノリドなどの少なくとも１つの中間体を必要とする。
【０００９】
例えば、米国特許ＵＳ５４６３０８９によれば、（−）−スクラレオール化合物を、酸化またはＯｓＯ４を有する触媒転位にかけて、メチル−ケトン中間体を形成し、酢酸中間体を生成するために、それをBaeyer-Villiger酸化により変換し、これは所望の（−）−アンブロックス化合物に変換される。
【００１０】
別の例として、米国特許出願公開第２０１００２４８３１６では、（−）−スクラレオールをHyphozyma roseoniger微生物で処理して１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得ることが開示されており、これを次いでゼオライトの存在下で環化して（−）−アンブロックス化合物を生成する。このプロセスは非常に長い反応時間を必要とし、ゼオライトの活性化は合成コストを増大する。
【００１１】
あるいは、スペイン国特許出願ＥＳ２０４４７８０Ａ１に記載されているように、（−）−スクラレオール化合物は、４５℃で四酸化オスミウム−過ヨウ素酸ナトリウムで処理することによってＣ１２−Ｃ１３結合の分解プロセスにかけることができ、そして、リチウムアルミニウムヒドリドを用いた還元によって、１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を生成し、次いでこれを、ｐ−トルエンスルホニルクロリドおよびピリジンの存在下で環化して、（−）−アンブロックス化合物を得る。同出願に記載されている別の手順では、１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールがシス−アビエノール化合物から得られ、これは低温での還元オゾン分解によって側鎖分解を受け、１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を形成し、これは、上述のように（−）−アンブロックスに変換される。
【００１２】
（−）−アンブロックスの合成のための別の公知の典型的な方法は、（−）−スクラレオール化合物をクロム酸で酸化して（＋）−ノルアンブレイノリドを合成し、次いで、その（＋）−ノルアンブレイノリドを、水素化リチウムアルミニウム（ＬｉＡｌＨ４）またはボラン酸ナトリウムまたは（ＮａＢＨ４）で還元し、そして、その還元生成物を酸またはブロモトリクロロメタンおよび塩化メチレン中のトリフェニルホスフィンで還流で環化することで、（−）−アンブロックスを得る［Dragoco Report, 11/12,276-283(1979)およびG.Ohloff, Fortschr. Chem. Forsch. 12/2, (1969)］。しかしながら、試薬としてのクロム酸の使用は危険であり、その処分は問題である。加えて、これらは、水素化リチウムアルミニウムなどの他の試薬を使用するが、これは、可燃性が高く工業的使用には適していない。そして、これらの方法によって製造された（−）−アンブロックスは非常に高価である。
【００１３】
スペイン国特許ＥＳ２１９５７７７に記載されているように、ノルアンブレイノリドはまた、室温で過マンガン酸カリウムと反応させることによってスクラレオールから得られる。ノルアンブレイノリドをヨウ化亜鉛の存在下、水素化ホウ素ナトリウムで処理し、または三フッ化ホウ素の存在下、水素化ホウ素カリウムで処理して（−）−アンブロックス化合物を得る。または水素化ホウ素カリウムvitride oで処理して１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールを得て、これを還流でブロモトリクロロメタンおよび塩化メチレン中のトリフェニルホスフィンと反応させて（−）−アンブロックスを得る。これらの方法は、各反応ステップで多数の試薬を使用すること、トリフェニルホスフィンなどのいくつかの毒性試薬を使用するという欠点を有する。
【００１４】
ノルアンブレイノリドに関しては、Chem. Letters, pp. 757-760 (1981), pp. 729-732 (1983)が、（±）−ノルアンブレイノリドの合成方法を提案しており、これは、四塩化スズの存在下、ジクロロメタン中で、（±）−トランス−β−モノサイクル−ホモファルネシル酸を反応させることを含む。
【化３】
2018538360.tif 000004
【００１５】
しかし、この方法では−７８℃という極めて低い温度が必要であり、工業的実施には適していない。さらに、（±）−ノルアンブレイノリドの異性体が形成され、（±）−ノルアンブレイノリド化合物およびその異性体の収率は５７％と低い。
【００１６】
他方、（−）−アンブロックス化合物を得るための１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物の環化を実施するための種々の手法があり、それらの一部については既に上述しており、その他については後述する。
【化４】
2018538360.tif 000005
【００１７】
欧州特許第ＥＰ２０４００９号は、ＨＣｌおよび酸イオン交換体などの酸性化合物の存在下、またはピリジンおよびＮａＯＨなどの塩基の存在下、アリールスルホニルクロリドによる１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールの環化を記載している。しかし、この方法は非常に時間がかかり、高価であり、複雑であり、得られる化合物の適切な純度が得られない。
【００１８】
他方、欧州特許出願第ＥＰ０１６５４５８Ａ２は、（±）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールの環化が、塩基およびｐ−トルエンスルホニルクロリドの存在下で行われることを開示しており、（±）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールのラセミ体は、（±）−トランス−β−モノシクロホモファルネシル酸またはそのエステルとして知られる化合物から合成可能であり、そして、今度はその（±）−トランス−β−モノシクロホモファルネシル酸は、ジヒドロ−β−イオノンから合成可能であり、これは、高価ではなく合成または入手が容易である。しかしながら、このプロセスはいくつかのステップおよび試薬を必要とし、これはプロセスコストを増大させる。さらに、ピリジンは、そのプロセスの１つのステップで塩基として使用され、これは不快な臭いを有し、そのため、得られるエッセンスの品質を調整しなければならず、そして、水性処理では、ピリジンリサイクルは、その溶解性のために非常に困難であり、これはコストの増大に繋がる。
【００１９】
１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールの環化は、ｐ−トルエンスルホン酸または硫酸の存在下で行うこともでき、これは、不利なことに第３級ヒドロキシ基の脱水をもたらし、それにより選択性の消失と低い収率を引き起こす（[V.E. Sibiertseva ら, Maslo-Zhir, Prom.st., 1979 (12), 25-26, ロシア国特許SU345183 (1968から), SU910561 (1980から) および SU529166 (1975から)]およびスペイン国特許第ＥＳ４３２８１５）。
【００２０】
また、１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールは、ピリジン中でｐ−トルエンスルホニルクロリドによって（(R.C. Cambie ら, Aust. J. Chem. 24 (1971), pp. 583-591 および 2365-2377）、または無水ピリジン中でＰＯＣｌ３によって（(独国特許第DE-A 3240054）環化することができる。このような手法は、ピリジンの使用、ならびに長い反応時間および低い収率の欠点を有する。
【００２１】
ロシア国特許第ＳＵ９８８８１７によれば、環化は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中でトリメチルクロロシランでもできるが、ＤＭＳＯは水へのその溶解性のため、水処理後に完全にリサイクルしなければならず、廃水の問題を引き起こし、さらに、反応後に得られた粗エッセンスを、化学的および嗅覚的な面で適切な品質に精製する必要がある。さらに、トリメチルクロロシランは、それが非常に腐食性で有毒であるため、取り扱いが工業的に困難である。
【００２２】
また、１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールの環化のために、触媒として、硫酸、リン酸またはポリリン酸充填白土、アルミナまたはシリコンを１〜２０重量％使用することがあるが、しかしながら、前記酸の使用は、その残渣の取り扱いが商業規模では困難であるために不利である（Chem. Abstr. 105 (1986) 134193k）。
【００２３】
１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールの環化手法の他の例は、独国特許第ＤＥ３９１２３１８に開示されており、これは６０〜８０重量％のＡｌ２Ｏ３を有する粒子と０．４０〜０．６重量％の塩酸を用いて行われ、これは嗅覚要件のために十分に選択的ではないという不都合を有し、そして塩酸で前処理された非常に特異的なアルミナ触媒を使用しなければならず、これはそのコストを増大させる。
【００２４】
上記にかかわらず、Ageratina jocotepecana植物は、それがかなりの量のテルペンを含み、これは様々な産業で有用であるため、最近研究されている。Ageratina jocotepecana植物は、モレリアとザカプウの間の道路で見られるメキシコ固有の植物である。
【００２５】
文書「Absolute Configuration of (13R)- and (13S)-Labdane Diterpenes Coexisting in Ageratina jocotepecana」, Journal of Natural Products, 2014, 77, pp. 1005-1012,によれば、Ageratina jocotepecana植物は、ノルマル−（５Ｓ，１０Ｓ）シリーズに対応する抗菌活性を有するいくつかのラブダンジテルペンを含む。しかし、この論文は、そのジテルペノイド化合物が（−）−アンブロックスの調製に使用し得ることについて述べていない。
【００２６】
Ana I. Perez-Gutierrez, Alejandra Leon Hernandez, Juan D. Hernandez-Hernandez, Luisa U. Roman-Marin, Carlos M. Cerda-Garcia-Rojas, Pedro Joseph-Nathan, Rosa E. del Rio,によって発表された論文 題名「Ageratina jojotepecana una nueva fuente para la obtencion de ent-ambrox」, Biol. Soc. Quim. Mex. 2010, 4 (Special Number)は、Ageratina jocotepecana茎からのヘキサニック抽出物テトラノルラブダンジオールの単離を提案しており、これは、アンブロックス誘導体の合成についての新しい供給源であることが判明した。しかしながら、前記文献は、テトラノルラブダンジオール構造を記載しておらず、前記テトラノルラブダンジオールおよびアンブロックス誘導体の入手のための条件も記載していない。
【００２７】
Sergio I. Martinez-Guido, J. Betzabe Gonzalez-Campos, Rosa E. del Rio, Jose M. Ponce-Ortega, Fabricio Napoles-Rivera, Medardo Serna-Gonzalez, and Mahmoud M. El-Halwagi. によって発表された論文「A Multiobjective Optimization Approach for the Development of a Sustainable Supply Chain of New Fixative in the Perfume Industry」, ACS Sustainable Chemistry Engineering, September 2, 2014, pp. 2380-2390は、Ageratina jocotepecana抽出物が（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールを有すること、それから（−）−アンブロックスがベンゼン中のｐ−トルエンスルホン酸による環化反応によって得られることを述べている。しかしながら、前記文献は、Ageratina jocotepecanaから（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオールを得るための条件を記載も示唆もしていない。
【００２８】
（−）−アンブロックスを得るためのいくつかの報告された合成があるが、スクラレオールは（−）−アンブロックスの合成のための出発物質としていまだ最も広く用いられている化合物である。しかしながら、この化合物からの報告されている合成方法は、主な欠点として、試薬の消費量が高く、コストが高くなり、加えて、手法の担当者の毒性リスクが高くなり、さらに、これらの合成は、通常、それらの開発において広範囲の反応を含むため、その生成物を得るために投入された時間が加わる。
【００２９】
一方、スクラレオール系ではない他の既知の方法は、高価で時間がかかる手法を含むか、またはかなりの量の望ましくない汚染物質および／または副生成物を生成する可能性がある。
【００３０】
上記によれば、より簡単、経済的、持続的に得ることができ、かつ、その入手のためにマッコウクジラを危険にさらすことなく（−）−アンブロックス化合物を得ることができるプロセスのニーズが依然として存在する。さらに、（−）−アンブロックスの合成におけるその使用のために、環境にやさしく経済的な方法で、１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るニーズが依然として存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００３１】
先行技術の欠点を考慮すると、本発明の目的は、Ageratina jocotepecana植物から（−）−アンブロックスを得るための効率的なプロセスを提供することであり、これは、費用、時間、および環境汚染を低減するための可能な限り最小の反応ステップを含む。
【００３２】
本発明の別の目的は、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むAgeratina jocotepecana植物から有機濃縮抽出物を得るプロセスを提供することであり、これは、（−）−アンブロックス化合物の合成に適している。
【００３３】
本発明のさらなる別の目的は、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物のための精製方法を提供することである。
【００３４】
本発明の更なる目的は、（−）−アンブロックスを得るためのプロセスにおける使用のために、Ageratina jocotepecanaの有機濃縮抽出物から得られる、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を提供することである。
【００３５】
本発明のさらに別の目的は、（−）−アンブロックスの入手のための供給源としてのマッコウクジラ（Physeter macrocephalus）の使用を避け、それによってその保護に寄与することである。
【００３６】
発明の概要
本発明は、Ageratina jocotepecana植物からの（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るためのプロセスを含み、これは、（−）−アンブロックス化合物を調製するための貴重な化合物であり、そのプロセスは、以下のステップを含む：ａ）Ageratina jocotepecana植物。B. L. ターナーの苗条系から有機濃縮抽出物を得ること；ｂ）その有機濃縮抽出物を移動相としてヘキサン、酢酸エチルおよびヘキサン：酢酸エチル混合物を用いた、６０：４０〜４０：６０のヘキサン：酢酸エチルの混合物を含む、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけ、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むフラクションを溶離すること；ｃ）（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むその溶離したフラクションを分離すること；およびｄ）その分離したフラクション中のヘキサン：酢酸エチル混合物を蒸発させて、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得ること。
【００３７】
本発明の別の態様は、以下のステップを含む（−）−アンブロックス化合物を得るためのプロセスを含む：ａ）本発明の上記原理に従い、Ageratina jocotepecana植物。B. L. ターナーから（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得ること；およびｂ）その（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を環化ステップにかけて、（−）−アンブロックス化合物を得ること。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
本発明は、Ageratina jocotepecana植物からの（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るためのプロセスに関し、これは、（−）−アンブロックス化合物を調製するための貴重な化合物であり、そのプロセスは、以下のステップを含む：ａ）Ageratina jocotepecana苗条系の有機濃縮抽出物を得ること；ｂ）その有機濃縮抽出物をカラムクロマトグラフィーにかけ、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むフラクションを溶離すること；ｃ）（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むその溶離したフラクションを分離すること；およびｄ）その有機溶媒を蒸発させて、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得ること。
【００３９】
好ましい実施形態では、Ageratina jocotepecana苗条系からの有機濃縮抽出物は、以下のステップを含むプロセスによって得られる：ａ）Ageratina jocotepecana植物の苗条系を乾燥させることであって、Ageratina jocotepecana苗条系が、花、葉、および／または茎などの植物の気生部分を含む、乾燥させること；ｂ）Ageratina jocotepecana植物の苗条系を有機溶媒中で、６〜７２時間、浸軟または還流すること；ｃ）ステップ（ｂ）の浸軟または還流した抽出物をろ別して、Ageratina jocotepecanaの有機抽出物を得ること、およびｄ）Ageratina jocotepecanaの有機抽出物から有機溶媒を蒸発させて、Ageratina jocotepecana苗条系から有機濃縮抽出物を得ること。
【００４０】
好ましい実施形態では、ステップ（ａ）のAgeratina jocotepecana苗条系からの有機濃縮抽出物を得るために使用される有機溶媒は、ヘキサン、ジクロロメタン、酢酸エチル、クロロホルム、メタノールおよび／またはそれらの混合物からなる群より選択される。
【００４１】
好ましい実施形態では、カラムクロマトグラフィーのステップは、固定相としてのシリカゲル中で行われる。より好ましい実施形態では、クロマトグラフィーステップは、ヘキサン、酢酸エチルおよびそれらの混合物を異なる比率で、かつ極性が増える順に含む移動相を使用する。
【００４２】
好ましい実施形態では、ヘキサン：酢酸エチルが６０：４０〜４０：６０（すなわち、３：２〜２：３）の比のヘキサン：酢酸エチルの混合物を含む溶離されたフラクションが、分離され、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を含むフラクションを溶離し、好ましくは、ヘキサン：酢酸エチルが５０：５０（すなわち、１：１）の比である。
【００４３】
さらにより好ましい実施形態では、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るための有機溶媒の蒸発ステップは、３５〜４５℃、より好ましくは４０℃の温度で、かつ、減圧で行われる。
【００４４】
本発明の原理によれば、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物は、固体または半固体形態で得られ、固体形態は結晶質または非晶質形態を含むことがあり、半固体形態は、シロップ、濃厚な懸濁液またはペーストであり得る。
【００４５】
本発明の別の態様では、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を環化ステップにかけるステップが、（−）−アンブロックス化合物の粗生成物を得るために、上記開示されたプロセスに追加される。
【００４６】
環化ステップは、（−）−アンブロックス化合物を含む粗生成物を得るために、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物の環化を行うための公知の方法を含み、前記方法は、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を適当な有機溶媒に溶解すること、次いで、酸および／または塩基および／または環化を行うための適当な試薬を添加することを含む。好ましくは、有機溶媒は、ヘキサン、ベンゼン、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、またはそれらの混合物からなる群より選択される。酸は、好ましくは、ルイス酸またはｐ−トルエンスルホン酸から選択される。塩基は、好ましくは、ピリジンまたはＮａＯＨから選択される。最後に、環化を行うのに適当な試薬は、ＰＯＣｌ３、トリメチルクロロシラン、トシルクロリド、ジオール、より好ましくはラブダンジオールを環化させることができる他の化合物から選択される。
【００４７】
本発明のプロセスの好ましい実施形態では、（−）−アンブロックス化合物の粗生成物は、精製手順にかけられ、結晶形態で（−）−アンブロックス化合物を得て、これには有機化合物を精製するために知られている様々な異なる方法を使用してもよい。好ましくは、カラムクロマトグラフィーによる精製が好ましい。
【００４８】
より好ましい実施形態では、精製プロセスは、固定相としてシリカゲルカラムを含む。
【００４９】
さらにより好ましい実施形態では、精製プロセスは、ヘキサン、酢酸エチル、およびそれらの混合物を異なる比率でかつ極性が増える順で含む移動相を使用する。
【００５０】
さらにより好ましい実施形態では、極性を含むフラクションを４：１のヘキサン：酢酸エチルの混合物から分離する。
【００５１】
さらにより好ましい実施形態では、（−）−アンブロックス結晶を得るための有機溶媒の蒸発ステップは、３５〜４５℃、より好ましくは４０℃の温度かつ減圧で行われる。
【００５２】
上記の詳細な説明に基づいて実施することができる他の例示されていない実施形態を暗示することなく、本発明は、本発明の好ましい実施形態のより良い理解を可能にするためのみの目的で、説明のために与えられた以下の実施例からよりよく理解されるであろう。
【実施例】
【００５３】
実施例１
Ageratina jocotepecana植物苗条系からの有機濃縮抽出物の入手のため、その苗条系は、予め分離して１０〜２８℃の温度で２４０時間陰干しした花、葉、および／または茎などのその植物の気生部分を含み、３２０ｇのAgeratina jocotepecana植物苗条系を秤量し（植物の量）、１５００ｍＬのジクロロメタンを添加して、その混合物を７２時間２５℃で浸軟させ、この後、その浸軟した抽出物をろ別して有機抽出物を得た。これを、４０℃および減圧でロータリーエバポレーターで濃縮した。
【００５４】
実施例２
Ageratina jocotepecana植物苗条系からの有機濃縮抽出物の入手のため、その苗条系は、予め分離して１０〜２８℃の温度で２４０時間陰干しした花、葉、および／または茎などのその植物の気生部分を含み、４５０ｇのAgeratina jocotepecana植物苗条系を秤量し、２０００ｍＬのヘキサンを添加して、その混合物を６の間還流にかけて、この後、その混合物をろ別して有機抽出物を得た。これを、４０℃および減圧でロータリーエバポレーターで濃縮した。
【００５５】
実施例３
実施例１または実施例２の有機濃縮抽出物を、７０〜２３０メッシュのシリカゲル固定相（Ａｌｄｒｉｃｈ（登録商標））を含むカラムクロマトグラフィープロセスにかけ、次いでヘキサン−酢酸エチル勾配混合物を含む移動相を、１０ｍＬのアリコートを得るのに十分な量の極性で添加する。ヘキサン：酢酸エチルの５０：５０（すなわち１：１）の比で溶離されたフラクションを分離し、前記フラクションを４０℃および減圧下でロータリーエバポレーターを用いて蒸発させ、有機溶媒を除去して、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を１３０〜１３５℃の融点を有する無色結晶形態で得る。
【００５６】
実施例４
室温で陰干ししたAgeratina jocotepecana茎を３２０ｇ秤量し、これを粉砕し、３日間２Ｌのヘキサンを用いて浸軟させることにより抽出にかけ、浸軟した抽出物をろ別し、有機溶媒を４０℃および減圧下でロータリーエバポレーターを用いて蒸発させ、有機濃縮抽出物２０ｇを得る。
【００５７】
２ｇの有機濃縮抽出物を秤量し、固定相として７０〜２３０メッシュのシリカゲル（Ａｌｄｒｉｃｈ（登録商標））１５ｇ、直径１．５ｃｍのクロマトグラフィー結晶カラム、および移動相として蒸留したヘキサンおよび酢酸エチル溶媒およびそれらの混合物を異なる比で極性を増大させて用いたカラムクロマトグラフィーにかけて、それぞれ１０ｍＬのフラクションを得る。ヘキサン−酢酸エチル１：１極性を有するフラクションを抽出し、有機溶媒をロータリーエバポレーターで４０℃、減圧下で蒸発させ、１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を結晶形態で１００ｍｇ得る。
【００５８】
実施例５
実施例３または４のいずれかに従って得られた結晶形態の（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物０．１ｇ（０．４２ｍｍｏｌ）を秤量し、それを２０ｍＬのベンゼンに溶解し、４０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸４０ｍｇ（０．２３ｍｍｏｌ）を加えて、環化反応を行い、（−）アンブロックス化合物粗生成物０．０７８ｇを得る。
【００５９】
実施例６
実施例５に従って得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して、固定相としてＭｅｒｃｋ（登録商標）２３０−４００メッシュシリカゲルと、移動相としてヘキサン−酢酸エチルの混合物を異なる比で極性が増大する順で含むものを使用し、１０ｍＬのフラクションを得て、純粋な結晶形態の、不純物のない（−）アンブロックス化合物を得る。４：１の比のヘキサン−酢酸エチルを含むフラクションが分離され、溶媒をロータリーエバポレーターを用いて４０℃および減圧下で蒸発させると、（−）アンブロックス化合物を含む無色の結晶を形成する。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 3.92 (3H, m, H-12), 3.82 (1H, ddd, J = 8 Hz, H-12’), 1.94 (1H, dt, J = 11.5, 3.2,3.2 Hz, H-7), 1.09 (3H, s, CH3-17), 0.87 (3H, s, CH3 -18), 0.84 (3H, s, CH3-19), 0.83 (3H, s, CH3-20)。比旋光度値 [α]D = -8.6 (c=0.4, CHCl3)
【００６０】
上記の記載によれば、本発明のプロセスがAgeratina jocotepecana植物から、（−）アンブロックス化合物の合成のための適当な中間体である、（−）−１３，１４，１５，１６−テトラノル−８α，１２−ラブダンジオール化合物を得るために開発されたことが分かる。そして、上述したような（−）アンブロックスを得るためのプロセスの実施形態が、その細部において、いくつかの主な変更が本発明の範囲を離れることなく可能であるため、例示に過ぎず、本発明を限定するものではないことが当業者には明らかである。
【００６１】
したがって、本発明は、先行技術が要求するものおよび添付の特許請求の範囲を除いて、限定的であると見なされるべきではない。
【国際調査報告】
2018538360.tif 000006
2018538360.tif 000007
2018538360.tif 000008
2018538360.tif 000009
2018538360.tif 000010
2018538360.tif 000011