(57)【要約】本開示の実施形態は、内皮細胞の機械的刺激によって引き起こされる内膜損傷を改善させるためまたは予防するための方法および／または組成物を包含する。その損傷は、血管内の血栓、塞栓または動脈硬化巣を除去するなどのために個体の動脈内、静脈内または毛細血管内でデバイスを使用することによって引き起こされ得る。処置および予防の実施形態は、治療有効量の、機械的刺激時にアップレギュレートされるＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの１つ以上のアンタゴニストに関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
個体の血管における内皮細胞の機械的刺激による内皮の内膜損傷を予防する、減少させるおよび／または処置する方法であって、治療有効量のＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの１つ以上のアンタゴニストを該個体に投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
前記投与が、前記機械的刺激の前、その間および／またはその後に行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記機械的刺激が、血管内の血栓または塞栓または動脈硬化巣を除去するためおよび／または破壊するためのデバイスの使用によって生じる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記機械的刺激が、血管内へのステントの挿入によって生じる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記アンタゴニストが、ＳＵＲ１アンタゴニストである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記ＳＵＲ１アンタゴニストが、グリベンクラミド、トルブタミド、レパグリニド、ナテグリニド、メグリチニド、ＬＹ３９７３６４、ＬＹ３８９３８２、グリクラジド、グリメピリド、エストロゲン、エストロゲン関連化合物（エストラジオール、エストロン、エストリオール、ゲニステイン、非ステロイド性エストロゲン（例えば、ジエチルスチルベストロール）、フィトエストロゲン（例えば、クメストロール）、ゼアラレノンなど）、ＭｇＡＤＰ、クロルプロパミド、グリピジド、トラザミド、グリボルヌリド、グリキドン、グリソキセピド、グリクロピラミド、グリメピリド、ＪＢ５５８、ＪＢ２５３、もしくは中央のＳ−フェニルスルホニル尿素構造ならびに該フェニル環上のｐ−置換基（Ｒ）および該尿素Ｎ’末端基の末端をなす様々な基（Ｒ２）を有する任意の化合物（下記の図を参照のこと）、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項５に記載の方法。
【化１】
2018516981.tif 000003
【請求項７】
前記アンタゴニストが、ＴＲＰＭ４アンタゴニストである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記ＴＲＰＭ４アンタゴニストが、フルフェナム酸、９−フェナントロール、スペルミン、デカバナジン酸、ＢＴＰ２、抗ＴＲＰＭ４抗体、ＴＲＰＭ４  ｓｉＲＮＡ、ＴＲＰＭ４  ｓｈＲＮＡ、ＴＲＰＭ４アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチドおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、参照により全体が本明細書中に援用される、２０１５年５月２９日に出願された米国仮特許出願第６２／１６８，５８９号の優先権を主張する。
【０００２】
本開示の実施形態は、少なくとも細胞生物学、分子生物学および医学の分野に関する。
【背景技術】
【０００３】
本開示は、当該分野の長年にわたる要求に対処するものであり、血管の内皮細胞が機械的刺激を受けた際の個体の血管内の内膜損傷を減少させるまたは予防するための方法を提供する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本開示の実施形態において、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネル（ＮＣｃａ−ＡＴＰチャネルと呼ばれることもある）は、機械的刺激によって内皮細胞においてアップレギュレートされる。そのようなアップレギュレーションは、影響を受けた細胞、組織および／または器官に生理学的悪影響をもたらすことがあり、本開示は、そのようなプロセスを回避する方法またはそのようなプロセスによって直接もしくは間接的に引き起こされる病状を処置する方法を提供する。具体的な実施形態において、上記チャネルの１つ以上のアンタゴニストが、１つ以上のチャネル構成要素のアップレギュレーションを妨げるか、または１つ以上のチャネル構成要素のアップレギュレーションを減少させる。
【０００５】
スルホニル尿素受容体１（ＳＵＲ１）および／または一過性受容体電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４（ＴＲＰＭ４）に対して作用する化合物を用いることにより、内皮細胞の機械的刺激によって直接または間接的に引き起こされる内膜損傷を予防するおよび／または減少させるおよび／または処置することができる。そのような機械的刺激は、任意の血管内手技、例えば、カテーテル血管造影法、機械的血栓摘出術、血管内動脈瘤修復などの間（および／または後）に起こり得る。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】図１Ａ、１Ｂおよび１Ｃ。内皮細胞の機械的刺激は、ＮＦκＢの活性化およびＴＲＰＭ４のアップレギュレーションを引き起こす。内皮細胞を、フレキシブルボトムのディッシュ内で培養し、ディッシュの底面に空気をひと吹きすることによって、それらの細胞を機械的に刺激した。図１Ａおよび１Ｃ：コントロール条件下（図１Ａ、左のパネル）および機械的刺激の５分後（図１Ａ、右のパネル）におけるＮＦ−κＢのサブユニットであるｐ６５に対する免疫蛍光標識およびＤＡＰＩによる核染色（青色）は、ｐ６５の顕著な核移行を示している；定量によって、細胞の約８０％においてｐ６５の核移行の強い増加が示された（図１Ｃ，左）；＊＊，Ｐ＜０．０１。図１Ｂおよび１Ｃ：機械的刺激の６時間後のＴＲＰＭ４に対する内皮細胞の免疫蛍光標識は、ＴＲＰＭ４の顕著なアップレギュレーション（図１Ｂ）およびＴＲＰＭ４を発現している細胞数の６倍増加（図１Ｃ、右）を明らかにした；＊＊，Ｐ＜０．０１．これらのデータは、機械的刺激が、機械感受性転写因子であるＮＦ−κＢの活性化を介してチャネルサブユニットの転写のアップレギュレーションを引き起こすことと一致する。
【０００７】
【図２】図２Ａおよび２Ｂ。内皮細胞の機械的刺激は、機能的なＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアップレギュレーションを引き起こす。内皮細胞を、フレキシブルボトムのディッシュ内で培養し、ディッシュの底面に空気をひと吹きすることによって、それらの細胞を機械的に刺激した。図２Ａ：パッチクランプ記録法によって、以下の特性を有する機能的なＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネル電流が実証された：（ｉ）Ｃｓ＋イオンによって運ばれるチャネル電流；（ｉｉ）ＡＴＰ枯渇（アジ化ナトリウム＋２−デオキシグルコースを使用する）によって誘導されるチャネルの開口：（ｉｉｉ）Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン（ＮＭＤＧ）によるチャネルの遮断。図２Ｂ：コントロール条件下、機械的活性化の前（ＣＴＲ）、機械的活性化の後（ＳＴＲ）、ネガティブコントロールとしてのＮＦ−κＢ阻害剤ピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ）の存在下における機械的活性化の後、およびポジティブコントロールとしての腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）の存在下における機械的活性化なしにおいて、−５０ｍＶにおいて計測されたＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネル電流の振幅。これらのデータによって、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアップレギュレーションにおける機械感受性転写因子ＮＦ−κＢの決定的な役割が確かめられる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
Ｉ．例示的な定義
語「ａ」または「ａｎ」の使用は、特許請求の範囲および／または明細書において用語「含む」とともに使用されるとき、「１つ」を意味し得るが、「１つ以上」、「少なくとも１つ」および「１つまたは１つより多い」の意味とも一致する。特許請求の範囲における用語「または」の使用は、ただ１つの選択肢のことを指すと明示的に示されない限りまたは選択肢が相互排他的であると明示的に示されない限り、「および／または」を意味するために使用されるが、本開示は、ただ１つの選択肢および「および／または」を指す定義を支持する。
【０００９】
本明細書中で使用されるとき、用語「アンタゴニスト」とは、別の化学的物質または生物学的物質の生理学的活性を低下させるように身体内で作用する生物学的作用物質または化学的作用物質のことを指す。本発明では、アンタゴニストは、内皮細胞（例えば、脈管構造の内皮細胞）のＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの活性を阻止する、阻害する、低下させるおよび／または減少させる。本発明では、アンタゴニストは、内皮細胞（例えば、脈管構造の内皮細胞）のＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルと連結するか、結合するか、または会合して、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルが閉じる（不活性化される）。これは、病的状態における生物学的活性と比べて生物学的活性が低下していることを意味する。ある特定の実施形態において、アンタゴニストは、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの調節性サブユニット、特にＳＵＲ１と連結するか、結合するか、または会合する。あるいは、アンタゴニストは、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのポア形成サブユニット、特にＴＲＰＭ４と連結し、結合し、および／または会合して、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルが閉じる（不活性化される）。アンタゴニストまたは阻害剤という用語は、交換可能に使用することができる。
【００１０】
用語「予防する」は、本明細書中で使用されるとき、疾患状態が発生するリスクあるいは疾患の状態もしくは進行または他の異常なもしくは有害な状態に関連するパラメータを最小にするか、減少させるか、または抑制することを指す。
【００１１】
ＩＩ．一般的な実施形態
特定の実施形態において、処置は、特に個体内の任意のタイプの血管において、内膜損傷を引き起こす処置または内膜損傷を引き起こす可能性を有する処置に曝露されることになっているおよび／または曝露されるおよび／または曝露される予定の、処置を必要とする個体に提供される。
【００１２】
内膜損傷を引き起こし得る方法の例
いくつかの実施形態において、内膜損傷を引き起こし得る方法は、任意の種類であってよく、その内膜損傷は、哺乳動物の任意の種類の脈管構造において生じ得る。具体的な実施形態において、その損傷は、動脈または静脈または毛細血管またはそれらの組み合わせを含む、任意の種類の血管において生じるかまたは生じる可能性を有する。特定の実施形態において、内膜損傷は、あるデバイスが一過性にまたは永久に内膜に曝される１つ以上の機械的処置によって生じ得る。そのデバイスは、血管内に血餅（または血栓または塞栓または動脈硬化巣）が存在することを理由に使用されてもよいし、そうでなくてもよく、その血餅は、脳、心臓、付属器、腸、筋肉、肺などを含む、個体内の任意の場所に位置し得る。具体的な実施形態において、血餅は、デバイスによってではなく、例えば、ｔＰＡなどの薬物によって除去される。
【００１３】
特定の実施形態において、本開示の方法および／または組成物は、心臓血管に適用するために使用される。具体的な実施形態において、血管内皮細胞への損傷は、例えば、冠状動脈もしくは頚動脈または肢の末梢血管にステントを導入した後に予防される。
【００１４】
ある特定の実施形態において、機械的処置には、大脳動脈を塞いでいる血栓塞栓（ｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｕｓ）に血餅破壊デバイスまたは血餅回収デバイスを直接送達するためのカテーテルの使用が含まれる。たいていのデバイスは、２〜５ｍｍの大脳血管において使用される。機械的な血栓溶解／血栓摘出デバイスは、ものの数分で血餅を除去できる。ＭＥＲＣＩ回収システム（Ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｃ  Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ，ＵＳＡ）は、頭蓋内血栓摘出術について認可された最初のデバイスである。このデバイスは、血栓摘出術中に血栓をひっかからせるらせん状のニチノールコイルを備える。
【００１５】
Ｐｅｎｕｍｂｒａデバイスは、急性脳卒中において血餅が残っている場合に、減量および吸引法に続いて直接血栓を抽出することによる血管再開通のために特別にデザインされた。
【００１６】
自己拡張ステントの植え込みは、ステント支柱と血管壁との間に血栓が捕捉されることによって、血流がほぼすぐに回復することを可能にする。
【００１７】
ステントリーバー（ｓｔｅｎｔｒｉｅｖｅｒｓ）として知られる最近開発されたデバイスは、より古いデバイス、例えば、Ｍｅｒｃｉ  Ｒｅｔｒｉｅｖｅｒ（登録商標）およびＰｅｎｕｍｂｒａデバイスで見られたものよりも高い再開通率および良好な結果を示した。従来のステント術に加えて、ステントリトリーバーは、配置されたステントをガイドカテーテルに引き戻すこと（それによってステントの支柱が血栓材料にひっかかる）によって行われる血栓摘出術を可能にする。特に有益であるのは、そのステントが、繰り返し適用可能であり、小さな末梢血管分枝でさえも使用できる点である。従来のステントシステムとは対照的に、ステントリトリーバーは、そのステントが永久に配置されないので、抗凝固または抗凝集処置を必要としない。
【００１８】
ステントリトリーバーの場合、その介入は、全身麻酔下においてまたは意識下鎮静において行われる。６−８Ｆｒガイドカテーテルを、経大腿動脈アクセスによって標的動脈に入れる。遠位の血栓の遊走を防止するためおよび血栓摘出術中の吸引を高めるために、いくつかのグループおよび製造者が、この目的のためにバルーンガイドカテーテルの使用を推奨している。可撓性の５−６Ｆカテーテルを中間カテーテルとして使用することにより、閉塞したセグメントの近くまで遠位アクセスを得ることができる。血栓は、０．０２１インチまたは０．０２７インチのマイクロカテーテルで横断される。血栓より遠位のマイクロカテーテルの先端の適切な位置を証明するためおよび血餅の長さを推定するために、マイクロカテーテルを介して血管造影を行うべきである。その後、リトリーバーデバイスを適所に保ちつつ、マイクロカテーテルを引き戻すことによって、ステントリトリーバーを開放する。ステントリトリーバーは、ステントが開いたときに血流を回復させるために、閉塞の全長に及ぶべきである。そのデバイスは、ガイドカテーテルまたは中間カテーテルを介した持続的な吸引によってマイクロカテーテルとともにゆっくり回収される。近位バルーンカテーテルが使用される場合、順方向の血流を遮断するために、バルーンを一時的に膨張させる。この操作を数回繰り返すことにより、血餅の除去が完了し得る。動脈内ｒｔＰＡも投与され得る。虚血性脳卒中の場合、血栓摘出デバイスの使用は、ｔＰＡ投与の時間枠を超えて、例えば、脳卒中の発生後、約４．５時間を超えて、６時間を超えて、８時間を超えて、１０時間を超えて、１２時間を超えて、または２４時間までも、十分に行われ得る。そのような場合、Ｓｕｒ１−Ｔｒｐｍ４アンタゴニスト（Ｓｕｒ１、Ｔｒｐｍ４またはその両方を阻害するアンタゴニスト）による処置は、例えば、脳卒中の発生後、約４．５時間後に、６時間を超えて、８時間を超えて、１０時間を超えて、１２時間を超えて、または２４時間後までに開始され得る。
【００１９】
虚血性脳卒中の場合、血栓摘出デバイスの使用は、脳卒中のためのＳｕｒ１−Ｔｒｐｍ４阻害剤の典型的な投与のための時間枠を超えて、例えば、脳卒中の発生後、約４．５時間を超えて、６時間を超えて、８時間を超えて、１０時間を超えて、１２時間を超えて、または２４時間までも、十分に行われ得る。そのような場合、Ｓｕｒ１−Ｔｒｐｍ４アンタゴニストによる処置は、例えば、脳卒中の発生後、約４．５時間後、６時間を超えて、８時間を超えて、１０時間を超えて、１２時間を超えて、または２４時間後までに開始され得る。
【００２０】
ＩＩＩ．処置方法
特定の実施形態において、処置方法は、血管内で使用されるデバイスによって引き起こされ、その血管の内皮細胞においてＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの１つ以上の構成要素の発現がアップレギュレートする、内膜損傷を処置するために使用される。
【００２１】
ある特定の実施形態において、機械的刺激によって引き起こされる内膜損傷の原因となるデバイスを含み得る手技としては、任意のタイプの器官（脳、心臓などを含む）の診断上の血管造影図が挙げられる。ある特定の実施形態において、その手技は、血流を回復させる血栓摘出術（血栓または塞栓の除去）；アテロームまたは血管痙攣によって狭窄した血管を拡張する血管形成術；血管形成術後の血管を支持し開くステント術；動脈瘤を処置するための、コイル術、ステント／コイル術または分流器の留置などを含む、任意の器官における動脈内治療に関する。これらの手技のすべてが、内皮の機械的刺激を誘導することがあり、個体を内膜解離、および内皮損傷の他の結果の危険に曝すことがある。
【００２２】
機械的血栓摘出デバイス（例えば）を使用して、血餅を除去するとき（虚血性脳卒中ならびに肢虚血において）、そのデバイスは、動脈を通って進んで血餅に到達する。この前進中、血餅除去中、ならびに血餅およびデバイスの回収中に、内皮細胞の機械的刺激が生じ、そのような機械的刺激が、上記チャネルのアップレギュレーションを引き起こす。
【００２３】
いくつかの実施形態において、機械的デバイスの血管の侵入を伴う方法の場合、上記チャネルは、血管（動脈など）のいくつかの細胞においてすでにアップレギュレートされている場合があり、この機械的刺激は、さらなるアップレギュレーション（激化したアップレギュレーション）を引き起こし得る。いくつかの実施形態において、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアップレギュレーションは、新たなものであり、機械的刺激の前には存在していない。特定の実施形態において、そのような機械的原因によって引き起こされる激化したアップレギュレーションまたは新たなアップレギュレーションは、脳卒中もしくは閉塞した動脈自体によって、または機械的血栓摘出術が用いられない脳卒中においてｒｔＰＡが引き起こし得る任意の損傷によって引き起こされるＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４のアップレギュレーションとはまったく別個である。このＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルアップレギュレーションのアップレギュレーションの結果は、内皮細胞が機能不全になり得ることまたはそうでなかった場合よりも機能不全になり得ることである。次に、機能不全は、例えば、血液脳関門の破壊、浮腫、出血、および／また大動脈（例えば、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３および内／外頚動脈）における内膜の解離（内膜解離）にさえ至る。開いたＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルを閉じることまたは閉じたＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルを閉じたまま維持することによって、これらの内皮細胞に対する損傷を予防するおよび／または減少させるおよび／または処置することによって、そのようなデバイスによってもたらされる内皮の機能不全、浮腫、出血および／または内膜解離が、回避され得るかまたは回復し得る。上述のことを回避するまたは回復させることによって、ニューロン、アストロサイトならびに組織および／または器官（例えば、脳、心臓、腸、肺および／または肢など）全般に対するさらなる損傷が回避され得る（浮腫、出血および解離が、さらなる損傷および病変の成長、ならびに別段損傷されていなかった脳領域における新たな虚血性病変に関与し得ることは周知である）。
【００２４】
血栓摘出デバイスが使用されるとき、場合によっては、脳卒中（脳における場合）および血餅の存在の診断は、まず、ＣＴＡ、ＭＲＡ、ＭＲＩ、ＣＴＰもしくはＣＴまたはこれらの組み合わせを用いて行われ；血餅の存在の診断は、血管造影図、超音波、静脈造影法、ＣＴスキャン、それらの組み合わせなどによって行われ得る。そのような場合、診断は、まず、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストを投与する前に行われ得るか、またはＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストを投与した後に行われ得る。閉塞の存在または状態のモニタリングが、特定の時間にわたって行われ得る。
【００２５】
機械的刺激を引き起こし得る手技の場合におけるＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストによる処置は、脳卒中後、次いで、血栓摘出術の前、その間および／またはその後に行われ得る。機械的血栓摘出術が行われ得る場合のＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストによる処置は、脳卒中後、次いで、血栓摘出術の前、その間および／またはその後に行われ得る。
【００２６】
カテーテル血管造影法が行われるとき、デバイスは、脈管構造を通って前進する。この前進中および後退中に、内皮細胞の機械的刺激が生じ、それによって、上記チャネルのアップレギュレーションが引き起こされる。場合によっては、上記チャネルは、動脈のいくつかの細胞においてすでにアップレギュレートされている場合があり、この機械的刺激は、さらなるアップレギュレーション（激化したアップレギュレーション）を引き起こし得る。いくつかの場合、アップレギュレーションは、新たなものであり得る。このＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルアップレギュレーションのアップレギュレーションの結果は、内皮細胞が機能不全になり得ることであり、そしてその機能不全は、浮腫、出血、および大動脈（例えば、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３および内／外頚動脈）における内膜解離にさえ至る。開いたＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルを閉じることまたは閉じたＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルを閉じたまま維持することによって、これらの内皮細胞に対する損傷を予防するおよび／または減少させるおよび／または処置することによって、そのようなデバイスによってもたらされる内皮の機能不全、浮腫、出血および／または内膜解離が、回避され得るかまたは回復し得る。上述のことを回避するまたは回復させることによって、ニューロン、アストロサイトおよび脳全般に対するさらなる損傷が回避され得る（浮腫、出血および内膜解離が、さらなる損傷および病変の成長、ならびに別段損傷されていなかった脳領域における新たな虚血性病変に関与し得ることは周知である）。
【００２７】
他の実施形態において、内膜の化学的刺激（同時に機械的刺激ありまたはなし）は、内膜の内皮細胞においてＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアップレギュレーションをもたらす。そのような化学的刺激は、個体内の血管における閉塞を標的化する目的で個体に投与された化合物からの刺激であってもよいし、そうでなくてもよい。
【００２８】
ＩＶ．薬学的製剤
ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストは、任意の手段によって、例えば、経口的に、静脈内に、経鼻的に、経皮的に、腹腔内になど、投与され得る。具体的な実施形態において、投与経路は、静脈内である。１つの例において、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストは、ＳＵＲ１アンタゴニスト、例えば、スルホニル尿素、例えば、グリブリドである。１つの具体例において、グリブリドの製剤は、Ｊａｃｏｂｓｏｎが記載しているとおりである（米国特許第８，２７７，８４５号（参照により本明細書中に援用される））。別の例では、投与方法および投薬は、Ｊａｃｏｂｓｏｎが記載しているとおりである（米国特許第８，９４６，２９３号（参照により本明細書中に援用される））。他の投与および投薬レジメンも使用され得る。投与は、特定の手技（例えば、血栓摘出術、血管造影法、ステントの挿入または血管造影法）の前、その後またはその間に開始され得る。投与は、血栓摘出術の非存在下における１つ以上の血餅溶解薬（ｃｌｏｔ−ｂｕｓｔｉｎｇ  ｄｒｕｇｓ）による処置の前、その間またはその後に行われ得るが、いくつかの場合、その個体は、血栓摘出術を受けたことがあるか、受ける予定であるか、または受けている。ある場合においては、血管内治療が行われている動脈の内皮を特異的に標的化するために、および／またはＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストの全身濃度は有意に高めずに標的血管におけるその濃度を高めるために、血管内手技の前、その間および／またはその後に、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストが動脈内に投与され得る。そのような動脈内投与は、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４に対して作用する薬物の単独投与であり得るか、または例えば静脈内投与などのＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４アンタゴニストの別の投与経路による投与の前、その間および／またはその後に行われ得る。
【００２９】
いくつかの実施形態において、細胞に投与され得るＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアンタゴニストの有効量は、約０．０００１ｎＭ〜約２０００μＭの用量を含む。より詳細には、投与されるべきアゴニストの用量は、約０．０１ｎＭ〜約２０００μＭ；約０．０１μＭ〜約０．０５μＭ；約０．０５μＭ〜約１．０μＭ；約１．０μＭ〜約１．５μＭ；約１．５μＭ〜約２．０μＭ；約２．０μＭ〜約３．０μＭ；約３．０μＭ〜約４．０μＭ；約４．０μＭ〜約５．０μＭ；約５．０μＭ〜約１０μＭ；約１０μＭ〜約５０μＭ；約５０μＭ〜約１００μＭ；約１００μＭ〜約２００μＭ；約２００μＭ〜約３００μＭ；約３００μＭ〜約５００μＭ；約５００μＭ〜約１０００μＭ；約１０００μＭ〜約１５００μＭおよび約１５００μＭ〜約２０００μＭである。当然のことながら、これらの量のすべてが、例示的であって、これらの点の間の任意の量も、本発明において有用であると予想される。
【００３０】
ある特定の実施形態において、処置としての、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアゴニストおよび／もしくはアンタゴニストまたはその関連化合物の有効量は、処置される宿主および特定の投与様式に応じて変動する。本発明の１つの実施形態において、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアゴニストおよび／もしくはアンタゴニストまたはその関連化合物の用量の範囲は、約０．０１μｇ／ｋｇ体重〜約２０，０００μｇ／ｋｇ体重であり得る。用語「体重」は、動物が処置されているときに適用可能である。単離された細胞が処置されているとき、本明細書中で使用される「体重」は、「総細胞体重（ｔｏｔａｌ  ｃｅｌｌ  ｂｏｄｙ  ｗｅｉｇｈｔ）」を意味すると理解すべきである。用語「総体重」は、単離された細胞の処置と動物の処置の両方に適用するために使用され得る。すべての濃度および処置レベルが、本願において「体重」または単に「ｋｇ」として表現され、類似の「総細胞体重」および「総体重」濃度を網羅するとも見なされる。しかしながら、当業者は、種々の投与量の範囲、例えば、０．０１μｇ／ｋｇ体重〜２０，０００μｇ／ｋｇ体重、０．０２μｇ／ｋｇ体重〜１５，０００μｇ／ｋｇ体重、０．０３μｇ／ｋｇ体重〜１０，０００μｇ／ｋｇ体重、０．０４μｇ／ｋｇ体重〜５，０００μｇ／ｋｇ体重、０．０５μｇ／ｋｇ体重〜２，５００μｇ／ｋｇ体重、０．０６μｇ／ｋｇ体重〜１，０００μｇ／ｋｇ体重、０．０７μｇ／ｋｇ体重〜５００μｇ／ｋｇ体重、０．０８μｇ／ｋｇ体重〜４００μｇ／ｋｇ体重、０．０９μｇ／ｋｇ体重〜２００μｇ／ｋｇ体重または０．１μｇ／ｋｇ体重〜１００μｇ／ｋｇ体重の有用性を認識するだろう。さらに、当業者は、種々の異なる投与量レベル、例えば、０．０００１μｇ／ｋｇ、０．０００２μｇ／ｋｇ、０．０００３μｇ／ｋｇ、０．０００４μｇ／ｋｇ、０．００５μｇ／ｋｇ、０．０００７μｇ／ｋｇ、０．００１μｇ／ｋｇ、０．１μｇ／ｋｇ、１．０μｇ／ｋｇ、１．５μｇ／ｋｇ、２．０μｇ／ｋｇ、５．０μｇ／ｋｇ、１０．０μｇ／ｋｇ、１５．０μｇ／ｋｇ、３０．０μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、７５μｇ／ｋｇ、８０μｇ／ｋｇ、９０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１４０μｇ／ｋｇ、１５０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ、２００μｇ／ｋｇ、２２５μｇ／ｋｇ、２５０μｇ／ｋｇ、２７５μｇ／ｋｇ、３００μｇ／ｋｇ、３２５μｇ／ｋｇ、３５０μｇ／ｋｇ、３７５μｇ／ｋｇ、４００μｇ／ｋｇ、４５０μｇ／ｋｇ、５００μｇ／ｋｇ、５５０μｇ／ｋｇ、６００μｇ／ｋｇ、７００μｇ／ｋｇ、７５０μｇ／ｋｇ、８００μｇ／ｋｇ、９００μｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇおよび／または３０ｍｇ／ｋｇが有用であることを認識するだろう。
【００３１】
上記チャネルは、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネル阻害剤、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネル遮断剤、１型スルホニル尿素受容体（ＳＵＲ１）アンタゴニスト、ＳＵＲ１阻害剤、ＴＲＰＭ４アンタゴニスト、ＴＲＰＭ４阻害剤、または上記チャネルを介して膜電流の振幅を減少させることができる化合物によって阻害され得る。具体的な実施形態において、上記チャネルのアンタゴニストは、そのチャネルの任意の構成要素に間接的にまたは直接結合する。特定の実施形態において、ＳＵＲ１アンタゴニストは、グリベンクラミド、トルブタミド、レパグリニド、ナテグリニド、メグリチニド、ＬＹ３９７３６４、ＬＹ３８９３８２、グリクラジド（ｇｌｙｃｌａｚｉｄｅ）、グリメピリド、エストロゲン、エストロゲン関連化合物（エストラジオール、エストロン、エストリオール、ゲニステイン、非ステロイド性エストロゲン（例えば、ジエチルスチルベストロール（ｄｉｅｔｈｙｓｔｉｌｂｅｓｔｒｏｌ））、フィトエストロゲン（例えば、クメストロール）、ゼアラレノンなど）、ＭｇＡＤＰ、クロルプロパミド（ｃｈｌｏｐｒｏｐａｍｉｄｅ）、グリピジド、トラザミド、グリボルヌリド、グリキドン、グリソキセピド、グリクロピラミド、グリメピリド、ＪＢ５５８、ＪＢ２５３、または中央のＳ−フェニルスルホニル尿素構造ならびにそのフェニル環上のｐ−置換基（Ｒ）およびその尿素Ｎ’末端基の末端をなす様々な基を有する任意の化合物からなる群より選択される。
【００３２】
（Ｒ２）
【化１】
2018516981.tif 000002
【００３３】
スルホニル尿素基ＳＯ２ＮＨＯＮＨ
【００３４】
具体的な実施形態において、ＳＵＲ１アンタゴニストは、ＫＡＴＰチャネルを阻害することまたは遮断することができる。
【００３５】
本発明のある特定の実施形態において、ＴＲＰＭ４のアンタゴニストが、方法および／または組成物において使用される。アンタゴニストは、任意の種類であってよいが、特定の実施形態において、アンタゴニストは、タンパク質、核酸、小分子などである。具体的な場合において、ＴＲＰＭ４アンタゴニストは、フルフェナム酸および／または９−フェナントロールおよび／またはスペルミンおよび／またはデカバナジン酸（ｄｅｃａｖａｎａｄａｔｅ）および／またはＢＴＰ２および／または抗ＴＲＰＭ４抗体を含む。具体的な場合において、ＴＲＰＭ４核酸アンタゴニストは、ＲＮＡｉ、例えば、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡまたはアンチセンスオリゴデオキシヌクレオチド（ＡＳ−ＯＤＮ）を含む。一緒に使用されたとき、ＴＲＰＭ４発現の減少および脊髄損傷によるアウトカムの改善に高度に有効であると見出されたＡＳ−ＯＤＮの対は、以下の配列を有する：（ＴＲＰＭ４−ＡＳ１：５’−ＧＴＧＴＧＣＡＴＣＧＣＴＧＴＣＣＣＡＣＡ−３’（配列番号１）；およびＴＲＰＭ４−ＡＳ２：５’−ＣＴＧＣＧＡＴＡＧＣＡＣＴＣＧＣＣＡ  ＡＡ−３’（配列番号２）；内在性ヌクレアーゼから保護するためにホスホロチオエート化されたセンス（ＳＥ）またはアンチセンス（ＡＳ）オリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）が投与された。
【００３６】
ある特定の実施形態において、調節物質は、ＳＵＲ１（調節サブユニット）および／またはポア形成サブユニットであるＴＲＰＭ４を含む分子実体の転写および／または翻訳を調節する化合物（タンパク質、核酸、ｓｉＲＮＡなど）であり得る。
【００３７】
具体的な実施形態において、アンチセンス分子、ＲＮＡ干渉分子、ｓｉＲＮＡ分子、ｍｉＲＮＡ分子などが、ＳＵＲ１および／またはＴＲＰＭ４を標的化するために使用され得る。
【００３８】
本発明の薬学的組成物は、薬学的に許容され得る担体に溶解もしくは分散された、有効量のＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの１つ以上の調節物質（アンタゴニストおよび／またはアゴニスト）もしくは関連化合物またはさらなる作用物質を含む。句「薬学的または薬理学的に許容され得る」とは、必要に応じて、例えば、ヒトなどの動物に投与されたとき、副反応、アレルギー反応または他の有害反応をもたらさない分子実体および組成物のことを指す。ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの少なくとも１つの調節物質（アンタゴニストおよび／またはアゴニスト）もしくは関連化合物またはさらなる活性成分を含む薬学的組成物の調製法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０（参照により本明細書中に援用される）によって例証されているように、本開示に照らして当業者に公知であり得る。さらに、動物（例えば、ヒト）への投与の場合、調製物は、ＦＤＡ  Ｏｆｆｉｃｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓが要求する無菌性、発熱性、全般的な安全性および純度の規格を満たすべきであることが理解されるだろう。
【００３９】
本明細書中で使用されるとき、「薬学的に許容され得る担体」には、当業者に公知であるような、任意のおよびすべての溶媒、分散媒、コーティング、界面活性物質、酸化防止剤、保存剤（例えば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、吸収遅延剤、塩、保存剤、薬物、薬物安定剤、ゲル、結合剤、賦形剤、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、香味剤、色素、そのような同様の材料およびそれらの組み合わせが含まれる（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０，ｐｐ．１２８９−１３２９（参照により本明細書中に援用される）を参照のこと）。任意の従来の担体が活性成分と不適合である場合を除いて、薬学的組成物におけるその使用が企図される。
【００４０】
ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの調節物質（アンタゴニストおよび／またはアゴニスト）または関連化合物は、それが固体、液体またはエアロゾルの形態で投与されるか、およびそれが注射のような投与経路のために滅菌される必要があるかに応じて、種々のタイプの担体を含み得る。本発明は、当業者に公知であるように、静脈内に、皮内に、経皮的に、髄腔内に、脳室内に、動脈内に、腹腔内に、鼻腔内に、膣内に、直腸内に、局所的に（ｔｏｐｉｃａｌｌｙ）、筋肉内に、皮下に、粘膜に、経口的に、局所的に（ｔｏｐｉｃａｌｌｙ）、局所的に（ｌｏｃａｌｌｙ）、吸入（例えば、エアロゾル吸入）、注射、注入、持続注入、標的細胞を直接灌流浴に浸漬する局所灌流、カテーテルを介して、洗浄を介して、クリームとして、脂質組成物（例えば、リポソーム）として、もしくは他の方法によって、または前述（ｆｏｒｇｏｉｎｇ）の任意の組み合わせによって投与され得る（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０（参照により本明細書中に援用される）を参照のこと）。
【００４１】
ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの調節物質（アンタゴニストおよび／またはアゴニスト）または関連化合物は、遊離塩基、中性または塩の形態で組成物に製剤化され得る。薬学的に許容され得る塩としては、酸付加塩、例えば、タンパク質性組成物の遊離アミノ基と形成されるもの、または無機酸（例えば、塩酸またはリン酸）もしくは有機酸（例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸またはマンデル酸）と形成されるものが挙げられる。遊離カルボキシル基と形成される塩も、無機塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウムまたは水酸化第二鉄）；または有機塩基（例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ヒスチジンまたはプロカイン）から誘導され得る。溶液は、製剤化されると、その投与製剤と適合する様式で、治療的に有効であるような量で、投与される。それらの製剤は、種々の剤形、例えば、非経口的投与のために製剤化された剤形（例えば、注射可能な溶液または肺に送達するためのエアロゾル）または食事性（ａｌｉｍｅｎｔａｒｙ）投与のために製剤化された剤形（例えば、薬物放出カプセルなど）で容易に投与される。
【００４２】
さらに、本発明によると、投与に適した本発明の組成物は、不活性な希釈剤を含むまたは含まない薬学的に許容され得る担体において提供される。その担体は、吸収可能であるべきであり、それらには、液体、半固体、すなわちペーストまたは固体の担体が含まれる。任意の従来の媒質、作用物質、希釈剤または担体が、レシピエントまたは含まれる組成物の治療有効性にとって有害である場合を除いて、本発明の方法の実施において使用するための投与可能な組成物におけるその使用は、適切である。担体または希釈剤の例としては、脂肪、油、水、生理食塩水、脂質、リポソーム、樹脂、結合剤、充填剤などまたはそれらの組み合わせが挙げられる。その組成物は、１つ以上の構成要素の酸化を遅らせる様々な酸化防止剤も含み得る。さらに、様々な抗菌剤および抗真菌剤などの保存剤が微生物の作用を防止することができ、それらの保存剤としては、パラベン（例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン）、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールまたはそれらの組み合わせが挙げられるがこれらに限定されない。
【００４３】
本発明によると、組成物は、任意の好都合なおよび実用的な様式で、すなわち、溶解、懸濁、乳化、混合、カプセル化、吸収などによって、担体と混和される。そのような手順は、当業者にとって日常的なものである。
【００４４】
本発明の具体的な実施形態において、組成物は、半固体または固体の担体と十分に混和または混合される。その混合は、粉砕などの任意の好都合な様式で行うことができる。治療活性の損失、すなわち胃での変性から組成物を保護するために、混合プロセスにおいて安定化剤も添加され得る。組成物において使用するための安定剤の例としては、緩衝剤、アミノ酸（例えば、グリシンおよびリジン）、炭水化物（例えば、デキストロース、マンノース、ガラクトース、フルクトース、ラクトース、スクロース、マルトース、ソルビトール、マンニトールなど）が挙げられる。
【００４５】
さらなる実施形態において、本発明は、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの調節物質（アンタゴニストおよび／またはアゴニスト）または関連化合物、１つ以上の脂質および水性溶媒を含む薬学的脂質ビヒクル組成物の使用に関し得る。本明細書中で使用されるとき、用語「脂質」は、特徴的に水に不溶性であって有機溶媒で抽出可能である広範囲の任意の物質を含むように定義される。この広範囲の化合物は、当業者に周知であり、用語「脂質」が本明細書中で使用されるとき、それは、任意の特定の構造に限定されない。例としては、長鎖脂肪族炭化水素を含む化合物およびそれらの誘導体が挙げられる。脂質は、天然に存在するものまたは合成のもの（すなわち、人間がデザインしたものまたは生成したもの）であり得る。しかしながら、脂質は、通常、生物学的物質である。生物学的脂質は、当該分野で周知であり、それらとしては、例えば、中性脂肪、リン脂質、ホスホグリセリド、ステロイド、テルペン、リゾ脂質（ｌｙｓｏｌｉｐｉｄｓ）、グリコスフィンゴリピド、糖脂質、スルファチド、エーテルおよびエステルに結合した脂肪酸を有する脂質、および重合可能な脂質、ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。当然のことながら、本明細書中に具体的に記載されるもの以外の、当業者が脂質と理解している化合物も、本発明の組成物および方法によって包含される。
【００４６】
当業者であれば、脂質ビヒクルに組成物を分散させるために用いることができる手法の範囲に精通しているだろう。例えば、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの調節物質（アンタゴニストおよび／またはアゴニスト）または関連化合物は、当業者に公知の任意の手段によって、脂質を含む溶液に分散され得るか、脂質とともに溶解され得るか、脂質とともに乳化され得るか、脂質と混合され得るか、脂質と混和され得るか、脂質に共有結合され得るか、脂質における懸濁液として含められ得るか、ミセルもしくはリポソームとともに含められ得るかもしくはミセルもしくはリポソームと複合体化され得るか、またはそうでなければ脂質もしくは脂質構造と会合され得る。その分散液は、リポソームを形成することもあるし、形成しないこともある。
【００４７】
動物患者に投与される本発明の組成物の実際の投与量は、身体的および生理学的な因子、例えば、体重、状態の重症度、処置されている疾患のタイプ、以前のまたは同時の治療的および／または予防的介入、患者の特発症および投与経路によって決定され得る。投与量および投与経路に応じて、好ましい投与量および／または有効量の投与の回数は、被験体の反応に従って変動し得る。いずれにしても、投与に関与する実施者が、組成物中の活性成分の濃度および個別の被験体に対する適切な用量を決定する。
【００４８】
ある特定の実施形態において、薬学的組成物は、例えば、少なくとも約０．１％の活性な化合物を含み得る。他の実施形態において、その活性な化合物は、例えば、その単位重量の約２％〜約７５％または約２５％〜約６０％およびその中の導き出せる任意の範囲を含み得る。当然、調製され得る治療的に有用な各組成物中の活性な化合物の量は、その化合物の任意の所与の単位用量において好適な投与量が得られるような量である。溶解度、バイオアベイラビリティ、生物学的半減期、投与経路、生成物の貯蔵寿命ならびに他の薬理学的に考慮すべき事柄などの因子が、そのような薬学的製剤を調製する当業者によって企図され、したがって、種々の投与量および処置レジメンが望ましい場合がある。
【００４９】
血栓溶解剤を含む実施形態
【００５０】
具体的な実施形態において、本開示の方法および／または組成物は、血栓摘出術に供されている個体に提供される。そのような場合、血栓摘出術を受ける予定のおよび／または受けているおよび／または受けたことがある個体は、例えば、静脈内ｔＰＡなどの１つ以上の血栓溶解剤による処置に反応しなかった可能性がある。特定の実施形態において、血栓摘出術を受ける予定のおよび／または受けているおよび／または受けたことがある個体は、例えば、動脈内ｔＰＡなどの１つ以上の血栓溶解剤も提供される。
【００５１】
Ｖ．本開示のキット
本明細書中に記載されるいずれの組成物もキットに含められ得る。非限定的な例において、ＳＵＲ１および／またはＴＲＰＭ４に選択的に結合する化合物がキットに含められ得ることが想定される。そのような化合物としては、抗体（モノクローナルまたはポリクローナル）、オリゴヌクレオチド、ポリペプチド、小分子またはそれらの組み合わせ、アンタゴニスト、アゴニストなどが挙げられ得るが、これらに限定されない。これらの化合物のいずれもが、迅速な測定のために放射性物質および／または蛍光マーカーおよび／または酵素タグに連結され得ることが想定される。キットは、好適な容器手段の中に、脂質および／またはさらなる作用物質、例えば、放射性マーカーまたは酵素マーカーまたは蛍光マーカーも含み得る。
【００５２】
キットの構成要素は、水性媒体中においてまたは凍結乾燥された形態で包装され得る。キットの容器手段は、通常、ある構成要素が入れられ得る、好ましくは、適切に分注され得る、少なくとも１つのバイアル、試験管、フラスコ、ボトル、注射器または他の容器手段を含み得る。１つより多い構成要素がキットに存在する場合、そのキットは、第２、第３または他のさらなる容器も含み、それらには、通常、さらなる構成要素が別々に入れられている可能性がある。しかしながら、構成要素の様々な組み合わせが、１つのバイアルに含められてもよい。本発明のキットは、典型的には、ＳＵＲ１および／またはＴＲＰＭ４アンタゴニストを含めるための手段ならびに他の任意の試薬容器も、市販するために厳重に閉じ込めた状態で含む。そのような容器としては、所望のバイアルが保持される射出成形またはブロー成形のプラスチック容器が挙げられ得る。
【００５３】
本発明の治療用キットは、アンタゴニスト、アゴニストまたはその関連化合物を含み得るキットである。処置されている状態および／または疾患に応じて、そのキットは、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルを遮断するおよび／または阻害するためのＳＵＲ１および／もしくはＴＲＰＭ４アンタゴニストまたはその関連化合物を含み得る。そのようなキットは、通常、ＳＵＲ１および／またはＴＲＰＭ４アンタゴニストまたはその関連化合物の薬学的に許容され得る製剤を好適な容器手段の中に含む。キットは、単一の容器手段を有してもよく、および／または各化合物に対して異なる容器手段を有してもよい。
【００５４】
キットの構成要素が、１つおよび／またはそれを超える液体溶液として提供されるとき、その液体溶液は水溶液であり、滅菌された水溶液が特に好ましい。ＳＵＲ１および／またはＴＲＰＭ４アンタゴニストまたはその関連化合物は、注射器使用可能な（ｓｙｒｉｎｇｅａｂｌｅ）組成物にも製剤化され得る。そのような場合、容器手段自体が、注射器、ピペットおよび／または他の同様の装置であり得、それらから、製剤が、身体の感染領域に適用され得る、動物に注射され得る、ならびに／またはそのキットの他の構成要素に適用され得るおよび／もしくはそのキットの他の構成要素と混合され得る。
【００５５】
水溶液の例としては、エタノール、ＤＭＳＯおよび／またはリンガー溶液が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態において、使用されるＤＭＳＯまたはエタノールの濃度は、０．１％または（１ｍｌ／１０００Ｌ）を超えない。
【００５６】
しかしながら、キットの構成要素は、乾燥した粉末として提供されてもよい。試薬および／または構成要素が、乾燥粉末として提供されるとき、その粉末は、好適な溶媒を添加することによって再構成され得る。その溶媒も別の容器手段の中に提供され得ることが想定される。
【００５７】
容器手段としては、通常、少なくとも１つのバイアル、試験管、フラスコ、ボトル、注射器および／または他の容器手段が挙げられ、それらに、ＳＵＲ１アンタゴニスト、アゴニストまたはその関連化合物が好適に配置される。キットは、滅菌された薬学的に許容され得る緩衝液および／または他の希釈剤を含めるための第２の容器手段も含み得る。
【００５８】
本発明のキットは、典型的には、市販するためにバイアルを厳重に閉じ込めて含めるための手段（例えば、所望のバイアルが保持される射出成形および／またはブロー成形のプラスチック容器）も含む。
【００５９】
容器の数および／またはタイプに関係なく、本発明のキットは、動物の身体内にＳＵＲ１アンタゴニスト、アゴニストまたはその関連化合物を注射／投与および／または留置することを助けるための器具も含み得る、および／またはそのような器具とともに包装され得る。そのような器具は、注射器、ピペット、鉗子および／または任意のそのような医学的に認められた送達ビヒクルであり得る。具体的な実施形態において、内皮細胞の機械的刺激を直接または間接的に引き起こし得るデバイスが、ＳＵＲ１および／またはＴＲＰＭ４アンタゴニストと同じキットに含められ得る。
【００６０】
ＳＵＲ１および／もしくはＴＲＰＭ４アンタゴニストまたはその関連化合物に加えて、キットは、第２の活性成分も含み得る。第２の活性成分の例としては、低血糖症を予防するための物質（例えば、グルコース、Ｄ５Ｗ、グルカゴンなど）、血栓溶解剤、抗凝固剤、抗血小板物質、スタチン、利尿剤、血管拡張剤などが挙げられる。これらの第２の活性成分は、ＳＵＲ１および／もしくはＴＲＰＭ４アンタゴニスト、アゴニストまたはその関連化合物と同じバイアルにおいて混和され得るか、またはそれらは、別個のバイアルに含められ得る。
【００６１】
なおもさらに、本発明のキットは、グルコース試験キットも含み得る。したがって、そのグルコース試験キットを用いて患者の血糖が測定され、次いで、ＳＵＲ１アンタゴニスト、アゴニストまたはその関連化合物が、被験体に投与された後、患者の血糖が測定され得る。
【００６２】
上記のキットに加えて、本発明の治療用キットは、ＩＶバッグが隔壁またはチャンバーを備えるように構築され得、その隔壁またはチャンバーが、開かれるかまたは破壊されることにより、ＩＶバッグに化合物が放出され得る。別のタイプのキットとしては、ボーラスキットが挙げられ得、そのボーラスキットは、予め充填された注射器または同様の使用しやすい速やかに投与可能なデバイスを含む。注入キットは、バイアルまたはアンプル、およびそれらのバイアルまたはアンプル用の、注入前に加えられるべきＩＶ溶液（例えば、リンガー溶液）を含み得る。その注入キットは、注入前、注入中または注入後に被験体に投与されるボーラス／負荷投与用のボーラスキットも含み得る。
【実施例】
【００６３】
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を実証するために含められる。以下の実施例に開示される手法は、本発明の実施において十分に機能すると本発明者が見出した手法であるので、本発明を実施するための好ましい形態を構成すると見なすことができることが当業者によって理解されるべきである。しかしながら、当業者は、本開示に照らして、本発明の精神および範囲から逸脱することなく類似または同様の結果をもたらす開示される多くの変更を具体的な実施形態において行うことができることを理解するべきである。
【実施例１】
【００６４】
機械的刺激時のＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアップレギュレーション
【００６５】
フレキシブルボトムのディッシュ内で内皮細胞を培養し、ディッシュの底面に空気をひと吹きすることによって、それらの細胞を機械的に刺激した。機械的刺激によって、機械感受性転写因子ＮＦ−κＢが活性化し、それによって、ＮＦ−κＢのサブユニットｐ６５の迅速な（５分）核移行がもたらされた（図１Ａおよび１Ｃ）。ＮＦκＢの活性化は、６時間後に、ＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルの強い転写性アップレギュレーションを引き起こした（図１Ｂおよび１Ｃ）。パッチクランプ記録法によって、機能的なＳＵＲ１−ＴＲＰＭ４チャネルのアップレギュレーション（ＡＴＰ枯渇（アジ化ナトリウム＋２−デオキシグルコースを用いる）によって誘導されるチャネル開口の特性を示す）およびＮ−メチル−Ｄ−グルカミン（ＮＭＤＧ）によるチャネルの遮断が確認された（図２Ａ）。Ｓｕｒ１−Ｔｒｐｍ４チャネルのアップレギュレーションにおける機械感受性転写因子ＮＦ−κＢの決定的な役割を、ＮＦ−κＢ阻害剤であるピロリジンジチオカルバメート（ＰＤＴＣ）をネガティブコントロールとして使用し、ＮＦ−κＢ活性化剤である腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）をポジティブコントロールとして使用して、確認した（図２Ｂ）。
【００６６】
したがって、本開示の実施形態において、ＳＵＲ１および／またはＴＲＰＭ４に対して作用する薬物を使用することにより、内皮細胞の機械的刺激によって引き起こされる内膜損傷を予防するおよび／または減少させるおよび／または処置することができる。そのような機械的刺激は、任意の血管内手技、例えば、カテーテル血管造影法、機械的血栓摘出術、血管内動脈瘤修復などの間に起こり得る。
【００６７】
前述は、以下の本発明の詳細な説明がよりよく理解され得るように、本発明の特徴および技術的利点をかなり広く概説した。本発明の特許請求の範囲の主題を形成する本発明のさらなる特徴および利点は、本明細書中に記載される。開示される概念および具体的な実施形態は、本発明の同じ目的を果たすために他の構造の改変または設計の基礎として容易に利用され得ることが当業者によって理解されるべきである。そのような等価な構造は、添付の特許請求の範囲に示されているような本発明の精神および範囲から逸脱しないことも当業者によって認識されるべきである。その構成と操作方法の両方に関して、本発明に特有であると考えられる新規の特徴は、さらなる目的および利点とともに、添付の図面に関連して考慮されるとき、以下の説明からより十分に理解されるだろう。しかしながら、各図は、例証および説明のためだけに提供されているのであって、本発明の限定の定義と意図されないことが明白に理解されるべきである。
【図１】
2018516981.tif 000004
【図２】
2018516981.tif 000005
【配列表】
2018516981000001.app
【国際調査報告】
2018516981.tif 000006
2018516981.tif 000007