(57)【要約】  本発明は、化学式１で示されるジンセノサイドを有効成分として含有する白髪防止用組成物に関する〔前記化学式１において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２は−Ｏ−ｇｌｃまたは−Ｏ−ｇｌｃ（２−１）ｒｈａであり、Ｒ３は−ｇｌｃである〕。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の化学式１で示されるジンセノサイドを有効成分として含有する白髪防止用組成物。
［化学式１］
【化１】
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前記化学式１において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２は−ｇｌｃまたは−ｇｌｃ（２−１）ｒｈａであり、Ｒ３は−ｇｌｃである。
【請求項２】
前記白髪防止用組成物は、ＷＩＦ−１の発現を抑制するものである請求項１に記載の白髪防止用組成物。
【請求項３】
前記白髪防止用組成物は、シャンプー、リンス、ヘアトニック、毛髪栄養化粧水、ヘアエッセンス、ヘアセラムスカルプトリートメント、ヘアトリートメント、ヘアコンディショナー、ヘアシャンプー及びヘアローションからなる群から選択されるいずれか１つ以上の剤形である請求項１に記載の白髪防止用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、白髪防止用組成物に関する。
【０００２】
本出願は、２０１５年９月３０日に韓国特許庁に提出された韓国特許出願第１０−２０１５−０１３７８３９号の出願日の利益を主張し、その内容のすべては、本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
毛髪と頭皮は、身体の一部分であって、年齢が増加するにつれて皮膚と同様に老化現象が発生する。
【０００４】
頭皮の老化に伴って、毛髪内部の油、水分不足で毛髪が簡単に切れ、毛髪の弾力が落ちるか、毛髪内部の油、水分不足で毛髪外部のキューティクル層が損傷されて浮き立って静電気が発生し、毛髪の端が割れ、ばさばさするか、毛髪外部のキューティクル層が損傷されて浮き立ち、毛髪内部の皮質(cortex)層が破壊され、光による乱反射がひどくなって毛髪全体の艶が落ちるか、あるいは頭皮の紅斑が発生することがあり、毛髪が頭皮の毛嚢から脱落して、これ以上成長しない脱毛症状が発生することがある。
【０００５】
また、頭皮の老化に伴って、毛髪でメラニンの量が減少するか、メラニンが存在しなくなる白髪症状が発生することがある。
【０００６】
一方、Ｗｎｔタンパク質によるＷｎｔ信号伝逹(Wnt signaling pathway)は、人間の脳の形成及び神経細胞の分化に決定的な役割を担うだけでなく、Ｗｎｔ阻害剤(Wnt inhibitor)であるＡＰＣＤＤ１が毛髪成長を抑制する効果があることが知られている（非特許文献１）。
【０００７】
しかしながら、Ｗｎｔ阻害剤であるＷＩＦ−１(Wnt inhibitory factor-1)は、皮膚のシミに関連して、メラニン合成を抑制すると知られている（非特許文献２）。
【０００８】
従って、従来はＷｎｔ阻害剤が毛髪の成長を抑制するため、Ｗｎｔ信号を活性化することにより、毛髪の成長を促進させることに主に焦点を合わせて研究が進められてきた。しかし、未だＷｎｔ阻害剤と白髪形成との関係は明確に知られていないため、これを調節する白髪症状抑制、改善及び防止する物質も知られていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Nature 464, 1043-1047, Yutaka Shimomura et al (2010.04.15．)
【非特許文献２】Journal of Investigative Dermatology (2013) 133, 191-200, Ji-Young Kim et al (2012.09.06.)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、Ｗｎｔ阻害剤の発現を減少させることにより、メラニン合成を促進して頭皮老化に伴う白髪症状を防止することができる組成物を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、下記の化学式１で表示されるジンセノサイドを有効成分として含有する白髪防止用組成物を提供する。
［化学式１］
【化１】
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前記化学式１において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２は−Ｏ−ｇｌｃまたは−Ｏ−ｇｌｃ（２−１）ｒｈａであり、Ｒ３は−ｇｌｃである。
【発明の効果】
【００１２】
本発明による白髪防止用組成物は、前記ジンセノサイドを有効成分として含有して、これを頭皮に塗布時、Ｗｎｔ阻害剤であるＷＩＦ−１の発現を低下させることにより、従来の知られているＷＩＦ−１の顔面部などの皮膚に対するメラニン抑制機序に基づいて、毛嚢及び毛髪のメラニン伝達を改善または活性化して白髪症状を防止する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、下記の試験例１による年齢別の試験群のＷＩＦ−１の相対遺伝子発現量を示したものである。
【図２】図２は、下記の試験例２による無処理群、陽性対照群、ジンセノサイドＲｂ１、ジンセノサイドＲｂ２、ジンセノサイドＲｃ、ジンセノサイドＲｄ、ジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１処理群のＷＩＦ−１の相対遺伝子発現量を示したものである。
【図３】図３は、下記の試験例３による無処理群、陰性対照群、ジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１処理群の相対メラニン合成量を示したものである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明による白髪防止用組成物について詳細に説明する。
【００１５】
本明細書において、白髪防止は、毛髪におけるメラニンの量が減少するか、存在しなくなる白髪症状の予防はもちろん、既に発生した白髪症状を抑制または停止させる白髪症状の改善も含むものと解釈されるべきである。
【００１６】
本明細書において言及される化合物の名称は、他の特別な言及がなければ、米国化粧品協会(Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, CTFA)で発行された国際化粧品原料集(International Cosmetic Ingredient Dictionary, ICID）に登載されたINCI(International Nomenclature Cosmetic Ingredient)Nameに該当する化合物を意味し、該当の名称がINCI Name中に存在しなければ、国際純正・応用化学連合(International Union of Pure and Applied Chemistry, IUPAC)で制定したIUPAC命名法による化合物を意味し、IUPAC命名法による化合物が存在しないと、本発明の技術分野において通用する化合物の名称に対応する化合物を意味する。
【００１７】
本発明による白髪防止用組成物は、下記の化学式１で表示されるジンセノサイドを有効成分として含有する。
［化学式１］
【化１】
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前記化学式１において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２は−ｇｌｃまたは−ｇｌｃ（２−１）ｒｈａであり、Ｒ３は−ｇｌｃである。
【００１８】
本明細書において、ジンセノサイド(Ginsenoside)は、高麗人参から分離されたサポニンの配糖体(glycoside)を意味する。本発明の当該技術分野において、ジンセノサイドの構造は、具体的にジンセノサイドＲｘと命名され、ジンセノサイドＲｘにおいて、“Ｒ”は、根（RadixあるいはRoot）を意味し、“ｘ”は、TLC(Thin Layer Chromatography)上に現れるスポット(spot)の移動距離（Rf値）に基づいて下側から上側へｏ、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ及びｈなどの順で名を付けたものである。
【００１９】
前記のジンセノサイド命名法によるジンセノサイド化合物及びその構造を示すと、下記表１の通りであり、構造はすべて前記化学式１で表示され、化学式のうち、Ｒ１〜Ｒ３の置換基のみ異なる。
【００２０】
【表１】
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【００２１】
本発明による白髪防止用組成物の前記ジンセノサイドは、高麗人参の抽出物から分離されることができ、前記高麗人参の抽出物は、高麗人参の根、幹、葉または果肉から、好ましくは高麗人参の根または葉から抽出したものであり得る。しかしながら、前記高麗人参の抽出物は、その抽出部位によって本発明が限定されるものではない。
【００２２】
本発明の一実施態様において、前記高麗人参の抽出物は、乾燥した高麗人参の全草または一部位を炭素数１〜４の低級アルコールまたはこれらの混合溶媒、好ましくはメタノールで濾過及び減圧濃縮して抽出することができるが、その抽出方法によって本発明が限定されるものではない。
【００２３】
本発明の一実施態様において、前記ジンセノサイドは、好ましくは、前記高麗人参の抽出物に有機溶媒、例えば、ｎ−ヘキサン、エチルアセテート、ｎ−ブタノールなどを順次加えて、これを精製分画した後、クロマトグラフィー、例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(silica gel column chromatography)、エルエイチ−２０カラムクロマトグラフィー(LH-20 column chromatography)、薄層クロマトグラフィー(TLC;thin layer chromatography)、高性能液体クロマトグラフィー(high performance liquid chromatography)などを利用して分離することができるが、その分離方法によって本発明が限定されるものではない。
【００２４】
本明細書において、ｇｌｃはβ−Ｄ−グルコピラノシル基を意味し、ａｒａ（ｐｙｒ）はＬ−アラビノピラノシル基(arabinopyranosyl)を意味し、ａｒａ（ｆｕｒ）はＬ−アラビノフラノシル基(arabinofuranosyl)を意味し、ｒｈａはα−Ｌ−ラムノピラノシル基(rhamnopyranosyl)を意味する。
【００２５】
本明細書において、高麗人参(Panax ginseng)は、ウコギ科の多年草を意味する。
【００２６】
本発明の一実施態様において、前記化学式１で表示されるジンセノサイドは、ジンセノサイドＲｅ、ジンセノサイドＲｇ１またはこれらの混合物である。
【００２７】
本発明の一実施態様において、前記化学式１で表示されるジンセノサイドは、ジンセノサイドＲｅ、またはジンセノサイドＲｇ１である。
【００２８】
本発明の一実施態様において、前記ジンセノサイドは、前記化学式１において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２は−ｇｌｃであり、Ｒ３は−ｇｌｃであるジンセノサイドＲｅである。
【００２９】
本発明の一実施態様において、前記ジンセノサイドは、前記化学式１において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２は−ｇｌｃ（２−１）ｒｈａであり、Ｒ３は−ｇｌｃであるジンセノサイドＲｇ１である。
【００３０】
本発明の一実施態様において、前記化学式１で表示されるジンセノサイドは、ジンセノサイドＲｂ１、ジンセノサイドＲｂ２、ジンセノサイドＲｃ、ジンセノサイドＲｄ、ジンセノサイドＲｅ、ジンセノサイドＲｇ１またはこれらの混合物である。
【００３１】
本発明の一実施態様において、前記ジンセノサイドの含量は、組成物全重量に対して、０．０００００１重量％〜１０重量％、好ましくは０．０００１重量％〜１０重量％である。前記ジンセノサイドの含量が０．０００００１重量％未満であれば、白髪防止活性が不備であり、１０重量％超過であれば、白髪防止活性増加が不備である。
【００３２】
本発明の一実施態様において、前記白髪防止用組成物は、ＷＩＦ−１の発現を抑制するものである。
【００３３】
本明細書において、ＷＩＦ−１は、Ｗｎｔタンパク質を抑制するタンパク質を意味する。
【００３４】
本明細書において、Ｗｎｔタンパク質は、３５０〜４００個のアミノ酸の長さを有する脂質調節された信号伝達糖タンパク質の一群として、Ｗｎｔ信号伝逹(Wnt signaling pathway)の信号伝達の役割を果たし、人間の場合、Ｗｎｔ１、Ｗｎｔ２、Ｗｎｔ２Ｂ、Ｗｎｔ３、Ｗｎｔ３Ａ、Ｗｎｔ４、Ｗｎｔ５Ａ、Ｗｎｔ５Ｂ、Ｗｎｔ６、Ｗｎｔ７Ａ、Ｗｎｔ７Ｂ、Ｗｎｔ８Ａ、Ｗｎｔ８Ｂ、Ｗｎｔ９Ａ、Ｗｎｔ９Ｂ、Ｗｎｔ１０Ａ、Ｗｎｔ１０Ｂ、Ｗｎｔ１１、Ｗｎｔ１６などのタンパク質がこれに該当する。
【００３５】
本発明による白髪防止用組成物は、皮膚外用剤組成物、特に化粧料組成物として剤形化されることができ、化粧品学または皮膚科学的に許容可能な媒質または基剤を含有して剤形化され得る。また、本発明の組成物は、局所適用に適したすべての剤形で提供されることができ、例えば、溶液、水相に油相を分散させて得たエマルジョン、油相に水相を分散させて得たエマルジョン、懸濁液、固体、ゲル、粉末、ペースト、泡沫(foam)またはエアロゾル組成物の剤形で提供され得る。このような剤形の組成物は、当該分野の通常的な方法によって製造され得る。
【００３６】
本発明は、前記化学式１で表示されるジンセノサイドを有効成分として含有する白髪防止用皮膚外用剤組成物の製造において、前記化学式１で表示されるジンセノサイドの用途を提供する。
【００３７】
本発明は、前記化学式１で表示されるジンセノサイドを有効成分として含有する皮膚外用剤組成物を頭皮に塗布する段階を含む白髪防止方法を提供する。
【００３８】
本発明の一実施態様において、前記白髪防止用組成物は、シャンプー、リンス、ヘアトニック、毛髪栄養化粧水、ヘアエッセンス、ヘアセラムスカルプトリートメント、ヘアトリートメント、ヘアコンディショナー、ヘアシャンプー及びヘアローションからなる群から選択されるいずれか１つ以上の剤形である。
【００３９】
本発明による白髪防止用組成物は、前記剤形に応じて適切な成分をさらに含有することができる、これを具体的に説明すると下記の通りである。
【００４０】
本発明の一実施態様において、界面活性剤、防腐剤、及び粘度調節剤、ｐＨ調節剤、香料、染料、毛髪コンディショニング剤及び水からなる群から選択されるいずれか１つ以上をさらに含有する。
【００４１】
本発明の一実施態様において、前記界面活性剤は、陰イオン性界面活性剤、両性界面活性剤及び非イオン性界面活性剤から選択されるいずれか１つ以上である。
【００４２】
前記陰イオン性界面活性剤は、アルキル硫酸またはアルキルエーテル硫酸であることができ、その具体的な例としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム、ラウリル硫酸トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリル硫酸アンモニウムなどを挙げることができる。
【００４３】
前記両性界面活性剤は、アルキルベタインまたはアルキルアミドプロピルベタインであることができ、その具体的な例としては、ココジメチルカルボキシメチルベタイン、ラウリルジメチルカルボキシメチルベタイン、ラウリルジメチル−α−カルボキシエチルベタイン、セチルジメチルカルボキシメチルベタイン、コカミドプロピルベタインなどを挙げることができる。
【００４４】
前記非イオン性界面活性剤は、アルカノールアミドまたはアミンオキシドであることができ、その具体的な例としては、ラウリルジエチルアミンオキシド、ヤシ油アルキルジメチルアミンオキシド、ラウリン酸ジエタノールアミド、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド、ヤシ油脂肪酸モノエタノールアミドなどを挙げることができる。
【００４５】
本発明の一実施態様において、前記防腐剤は、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸プロピル、安息香酸ナトリウム、メチルクロロイソチアゾリノン、メチルイソチアゾリノン及び安息香酸ナトリウムからなる群から選択されたいずれか１つ以上である。
【００４６】
本発明の一実施態様において、前記粘度調節剤は、コカミドＭＥＡ（ＣＭＥ）、コカミドＤＥＡ（ＣＤＥ）、及び塩化ナトリウムからなる群から選択されるいずれか１つ以上である。
【００４７】
本発明の一実施態様において、前記ｐＨ調節剤は、リン酸ナトリウム、リン酸二ナトリウム、クエン酸、及びクエン酸ナトリウムからなる群から選択されるいずれか１つ以上である。
【００４８】
本発明の一実施態様において、前記毛髪コンディショニング剤は、ジメチコンベース、陽イオン性ポリマーまたはこれらの組み合わせである。
【００４９】
本発明の一実施態様において、前記毛髪コンディショニング剤は、３級アミドアミン、４級アンモニウム化合物、高融点化合物及びシリコーン化合物のうち、いずれか１つ以上をさらに含むことができる。
【００５０】
前記３級アミドアミンの具体的な例としては、コカミドプロピルジメチルアミン、ステアラミドプロピルジメチルアミン、ベヘニラミドプロピルジメチルアミン、オレアミドプロピルジメチルアミン、イソステアラミドプロピルジメチルアミンなどを挙げることができる。
【００５１】
前記４級アンモニウム化合物の具体的な例としては、アルキル（炭素数１４〜２２）トリメチルアンモニウムクロライド、ジアルキル（炭素数１４〜２２）ジメチルアンモニウムクロライド、水素化タローアルキルトリメチルアンモニウムクロライド及びジタローアルキルジメチルアンモニウムクロライドなどを挙げることができる。
【００５２】
前記高融点化合物の具体的な例としては、脂肪アルコール系、脂肪酸系、脂肪アルコール誘導体、炭化水素系などであり、より具体的には、セチルアルコール、ステアリルアルコール、セトステアリルアルコールなどを挙げることができる。
【００５３】
前記シリコーン化合物の具体的な例としては、ポリアルキルシロキサン系、ポリアリルシロキサン系、ポリアルキルアリールシロキサン系、ポリエーテルシロキサン共重合体などを挙げることができる。
【実施例】
【００５４】
以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明する。しかし、これらの実施例などは、本発明を具体的に説明しようとするものであるだけで、これらの実施例によって本発明の権利範囲が制限されるものではない。
【００５５】
＜試験例１＞頭皮の老化に伴うＷＩＦ−１発現量の測定
３５歳の男性を対象に、それぞれ頭頂部位の毛髪１０本を採取し、毛髪の根部位を１ｃｍのサイズに切り取った後、切り取った毛髪の根部位に存在する細胞から、ＲＮＡ分離キットを使用してＷＩＦ−１発現量を測定した。このような過程を３６歳の男性、８１歳の男性及び８９歳の男性にも、それぞれ実施してＷＩＦ−１発現量を測定し、３５歳の男性に対するＷＩＦ−１発現量を基準にして、その相対値を下記の表２及び図１に示した。
【００５６】
【表２】
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【００５７】
図１及び表２に示したように、年齢が増加するほど、頭皮からＷＩＦ−１の発現量が増加することを確認することができる。
【００５８】
＜試験例２＞ＷＩＦ−１抑制の測定試験
無処理群、陽性対照群、ジンセノサイドＲｂ１、ジンセノサイドＲｂ２、ジンセノサイドＲｃ、ジンセノサイドＲｄ、ジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１処理群に使用する細胞株として、ＮＩＨ３Ｔ３細胞株（韓国細胞株銀行）を各群当り３つのウェル（ｗｅｌｌ）の培養培地（ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、１％Ｐ／Ｓ）に入れて培養した。
【００５９】
以後、サーモフィッシャーサイエンティフィック(Thermo Fisher SCIENTIFIC)社の商標名ＧＩＰＣＯであるＢＭＰ４誘導因子(Inducer)を、１００ｎｇ／ｍｌの濃度で培地に希釈して無処理群を除いたすべての群に処理した。
【００６０】
次に、無処理群及び陽性対照群を除いたジンセノサイドＲｂ１、ジンセノサイドＲｂ２、ジンセノサイドＲｃ、ジンセノサイドＲｄ、ジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１処理群にそれぞれ該当するジンセノサイド(Sigma-Aldrich)を１０ｍＭの濃度でストック（ｓｔｏｃｋ）製造した後、培地に希釈して０．１μＭの濃度で、各処理群のウェルに既存の培地を除去し、処理した培地を入れた。
【００６１】
すべての群のウェルにＷＩＦ−１プローモーターを含むベクターを細胞に挿入すると、細胞内部でＷＩＦ−１発現が起こる信号が到逹したとき、これを検出することができるルシフェラーゼ(luciferase)が発現される。ここに基質を処理すると光が発生し、これをルミノメーター(luminometer)を使用して測定した。このとき、各細胞のベクター挿入量を正規化するためにコントロールベクターを一緒に挿入するが、コントロール遺伝子としてアルカリホスファターゼ(alkaline phosphatase)が発現され、ルミノメーターで前記アルカリホスファターゼ(alkaline phosphatase)から出る光の量を測定して定量した。各ウェルのＷＩＦ−１発現測定値とコントロール遺伝子発現測定値を割合として計算して、薬物処理に応じて、コントロール遺伝子対比ＷＩＦ−１の発現の増減を把握した。
【００６２】
その結果、陽性対照群のＷＩＦ−１の発現に基づいて、残りの群の遺伝子発現量の相対量を百分率で表３及び図２に示した。
【００６３】
【表３】
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【００６４】
図２及び表３に示したように、ジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１を処理した群は、他のジンセノサイド処理群よりＷＩＦ−１発現量が少ないだけでなく、何らの処理をしていない無処理群よりもＷＩＦ−１発現量が少ないことを確認することができる。
【００６５】
＜試験例３＞メラニン合成測定試験
無処理群、陰性対照群、ジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１処理群に使用する細胞株として、マウスのメラニン形成細胞株(murine melanocyte cell line)であるメラン−ａ細胞株(melan-a cell、入手先:ATCC)を４８ウェルプレートに１．５×１０４細胞／ウェルになるようにシーディング(seeding)し、１０％ＣＯ２、３７℃の条件で２４時間培養した。
【００６６】
次に、無処理群及び陰性対照群を除いたジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１処理群にそれぞれ１００ｎｇ／ｍｌの濃度であるＢＭＰ４タンパク質と１０μＭの濃度の該当ジンセノサイド(Sigma-Aldrich)を各処理群のウェルに処理した後、７２時間培養し、前記ジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１処理群にそれぞれ前記物質などを同一の濃度で処理した後、７２時間、追加培養した。
【００６７】
以後、無処理群、陰性対照群、ジンセノサイドＲｅ及びジンセノサイドＲｇ１処理群をそれぞれＤＰＢＳ(Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline)で洗浄した。その後、すべての群にそれぞれ、２Ｎ−ＮａＯＨ(10%DMSO)を入れ、６０℃で１時間溶解した後、細胞溶解物(cell lysate)を９６ウェルプレートに移して４７５ｎｍで吸光度を測定し、タンパク質量を測定した。
【００６８】
その次に、前記測定された値を合成メラニンに対する標準曲線からメラニン含量(melanin content)として算出した。
【００６９】
算出されたメラニン含量は、各実験群のタンパク質総量で標準化した後、無処理群と相対値を比べて効能を評価した。その結果を下記の表４及び図３に示した。
【００７０】
【表４】
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【００７１】
表４及び図３の結果に示したように、ジンセノサイドＲｇ１及びＲｅ処理群は、ＷＩＦ−１によってメラニン合成が阻害されたメラニン形成細胞でメラニン生成促進効能を示すことを確認することができる．
【００７２】
メラニン合成信号のうちの１つであるＷｎｔ信号を抑制するＷＩＦ−１がメラニンの合成を阻害することにより、白髪を発生させることができ、前記表４及び図３の結果と前記実施例２の結果を総合すると、ジンセノサイドＲｅとＲｇ１がＷＩＦ−１の発現を抑制することにより、メラニン合成信号を正常化してメラニンが合成されることを確認することができ、これらの結果を介してジンセノサイドＲｅとＲｇ１を処理した群は、優れた白髪防止効能を提供することを確認することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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