(57)【要約】本発明の１つ以上の実施形態において、方法が提供され、この方法は、（ａ）ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬；及び（ｂ）ＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分を癌患者に投与するステップを含む。本発明の１つ以上の実施形態において、組成物が提供され、この組成物は、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と；ＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含む。本発明の１つ以上の実施形態において、キットが提供され、このキットは、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と；ＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分と；ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５部分の使用に関する説明書とを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌に罹患している患者の治療方法であって、（ａ）ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬を患者に投与するステップ；及び（ｂ）ＩＬ−１５活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５作動薬を投与するステップを含む方法。
【請求項２】
前記患者がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記癌が固形癌である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記固形癌が、乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、結腸直腸癌、胃癌、悪性黒色腫、肝癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、甲状腺癌、腎癌、胆管癌、脳癌、子宮頸癌、上顎洞癌、膀胱癌、食道癌、ホジキン病及び副腎皮質癌からなる群から選択される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
前記癌が結腸癌である、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記癌が乳癌である、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
ステップ（ａ）がステップ（ｂ）を行う前に行われる、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項８】
（ａ）がステップ（ｂ）を行った後に行われる、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項９】
ステップ（ａ）及び（ｂ）が同時に行われる、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１０】
ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬とＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含む組成物。
【請求項１１】
癌を有する対象の治療への使用に関する説明書が添付された、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含むキット。
【請求項１２】
ＩＬ−２Ｒβ活性化量の前記ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬とＩＬ−１５Ｒ活性化量の前記長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含む、請求項１１に記載のキット。
【請求項１３】
前記ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び前記長時間作用型ＩＬ−１５部分が単一の組成物中に含まれる、請求項１１又は１２に記載のキット。
【請求項１４】
前記単一の組成物が薬学的に許容可能な賦形剤をさらに含む、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
前記ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と前記長時間作用型ＩＬ−１５部分とが別個の容器に提供される、請求項１１又は１２に記載のキット。
【請求項１６】
前記説明書が、ヒト対象における使用について記載している、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１７】
前記説明書が、癌を有するヒト対象の治療への使用について記載しており、前記癌が固形癌である、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１８】
前記説明書が、乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、結腸直腸癌、胃癌、悪性黒色腫、肝癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、甲状腺癌、腎癌、胆管癌、脳癌、子宮頸癌、上顎洞癌、膀胱癌、食道癌、ホジキン病及び副腎皮質癌からなる群から選択される癌を有するヒト対象の治療への使用について記載している、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１５年１０月８日に出願された“ＣＯＭＢＩＮＡＴＩＯＮ  ＯＦ  ＡＮ  ＩＬ−２ＲＢＥＴＡ−ＳＥＬＥＣＴＩＶＥ  ＡＧＯＮＩＳＴ  ＡＮＤ  Ａ  ＬＯＮＧ−ＡＣＴＩＮＧ  ＩＬ−１５  ＡＧＯＮＩＳＴ”と題される米国仮特許出願第６２／２３９，２０７号明細書に対する優先権、及びその利益を主張するものであり、この仮特許出願の内容は参照によって本明細書に援用される。
【０００２】
本発明は（特に）癌免疫療法の分野に関し、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬を別の薬理活性剤と併用して患者に投与することによる、癌に罹患している個体の治療を含む。
【背景技術】
【０００３】
癌に罹患している患者の治療における薬理学的介入という文脈では、併用療法に多くの利点があり得る。例えば、併用療法は薬剤耐性の発生を抑えることができる。加えて、併用療法は単剤療法よりも効果的（全生存率の上昇をもたらすことを含む）であり得る。さらに、より効果的な場合、併用治療では全治療回数が少なくなり、従って治療費の低下がもたらされ得る。
【０００４】
併用療法に関連する課題の一つは、有益であると予想される組み合わせの特定である。
【０００５】
ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の投与は、そうすることにより調節性Ｔ細胞の免疫抑制効果が低下する一方でＣＤ８＋メモリーＴ細胞が増加し、それによって患者自身の免疫系が癌細胞の排除に動員されると予想されるため、ある種の癌に罹患している患者に有益であることが提案されている。Ｃｈａｒｙｃｈ  ｅｔ  ａｌ．ＡＡＣＲ  ２０１３，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ＃４８２を参照のこと。
【０００６】
癌の治療におけるＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の投与による癌患者の免疫系の動員（これは直接の免疫活性化であり得る）は、他の薬剤を投与することによってさらに増強し得る。
サイトカインとして、ＩＬ−１５は、自然免疫系及び適応免疫系の両方に効果を及ぼす。ＤｉＳａｂｉｔｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖ．２２：１９−３３。ＩＬ−１５は、宿主にとって外来性（又は「非自己」）に見える細胞と闘うことのできる免疫系内の多数の細胞の増殖及び維持を刺激するため、癌に罹患している個体の治療への使用が提案されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｃｈａｒｙｃｈ  ｅｔ  ａｌ．ＡＡＣＲ  ２０１３，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ＃４８２
【非特許文献２】ＤｉＳａｂｉｔｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖ．２２：１９−３３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
従って、本発明は（特に）ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬（本明細書ではＩＬ−２Ｒβバイアス作動薬とも称される）とＩＬ−１５作動薬とを含む有益な併用療法を特定しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
この及び当該技術分野における他の必要性が本発明によって対処される。幾つもの態様及び実施形態が本明細書に記載される。このように、本明細書に記載される特徴及び実施形態の各々は、明記されていないとしても、反する旨が示されない限り、任意の他の態様、実施形態又は特徴又は特徴の組み合わせに適用可能であることが意図される（しかし適用可能である必要はない）。
【００１０】
１つ以上の態様において、方法が提供され、この方法は、（ａ）ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬；及び（ｂ）ＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分を癌患者に投与するステップを含む。明確にしておくと、この方法におけるステップの順序に関して、特に指示されない限り本方法はこのステップの順序に限定されず、ステップ（ａ）がステップ（ｂ）の実施前、その後又はそれと同時に実施されてもよい。１つ以上の実施形態において、ステップ（ａ）はステップ（ｂ）の前に実施される。
【００１１】
さらに１つ以上の別の態様において、組成物が提供され、この組成物は、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬とＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含む。
【００１２】
さらに別の態様において、キットが提供され、このキットは、使用説明書が添付された、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含む。概して、本キットはＩＬ−２Ｒβ活性化量のＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬とＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含む。ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５部分は単一の組成物中に提供されてもよく、或いは別個の容器に、例えば癌と診断された患者による使用に関する適切な説明書と共に提供されてもよい。
【００１３】
さらなる態様及び関連する実施形態が以下の説明及び特許請求の範囲に示される。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１Ａ、図１Ｂ及び図１Ｃは、マウス結腸癌モデルにおける様々な介入によって治療したマウスの生存パーセント及び日数を示すプロットを提供し、このモデル及び試験については実施例１にさらに記載する。図１Ａは、試験群Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、及びＨについてのプロットを提供する。図１Ｂは、試験群Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｉ、Ｊ、及びＫについてのプロットを提供する。図１Ｃは、試験群Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｌ、Ｍ、及びＮについてのプロットを提供する。試験群の詳細は表１に記載する。
【図２】図２Ａ、図２Ｂ及び図２Ｃは、マウス転移性黒色腫モデルにおける様々な介入によって治療したマウスの生存パーセント及び日数を示すプロットを提供し、このモデル及び試験については実施例１にさらに記載する。図２Ａは、試験群Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、及びＨについてのプロットを提供する。図２Ｂは、試験群Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｉ、Ｊ、及びＫについてのプロットを提供する。図２Ｃは、試験群Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｌ、Ｍ、及びＮについてのプロットを提供する。試験群の詳細は表１に記載する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本明細書で使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」には、文脈上特に明確に指示されない限り複数の指示対象が含まれる。
【００１６】
本発明の記載及び特許請求の範囲においては、以下に記載する定義に従い以下の用語を使用する。
【００１７】
「水溶性非ペプチドポリマー」は、室温で水に対して少なくとも３５％（重量基準）可溶であり、好ましくは７０％超（重量基準）、より好ましくは９５％超（重量基準）可溶であるポリマーを指す。典型的には、「水溶性」ポリマーの未ろ過水溶液調製物は、ろ過後の同じ溶液によって透過される光の量の少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも９５％を透過する。しかしながら、水溶性ポリマーは水に対して少なくとも９５％（重量基準）可溶であるか又は水に対して完全に可溶であることが最も好ましい。「非ペプチド性」であることに関して、ポリマーは、それが有するアミノ酸残基が３５％未満（重量基準）であるとき非ペプチド性である。
【００１８】
用語「単量体」、「単量体サブユニット」及び「単量体ユニット」は、本明細書では同義的に使用され、ポリマーの基本構造単位の１つを指す。ホモポリマーの場合、単一の繰り返し構造単位がポリマーを形成する。コポリマーの場合、２つ以上の構造単位が−あるパターンで又はランダムに−繰り返すことでポリマーを形成する。本発明との関連において使用される好ましいポリマーはホモポリマーである。水溶性非ペプチドポリマーは、連続的に結合された１つ以上の単量体を含んで単量体の鎖を形成する。
【００１９】
「ＰＥＧ」又は「ポリエチレングリコール」は、本明細書で使用されるとき、任意の水溶性ポリ（エチレンオキシド）を包含することが意図される。特に指示されない限り、「ＰＥＧポリマー」又はポリエチレングリコールは、実質的に全ての（好ましくは全ての）単量体サブユニットがエチレンオキシドサブユニットであるものであり、しかしながらポリマーは、例えば反応又はコンジュゲーション用に、個別のエンドキャッピング部分又は官能基を含有してもよい。本発明で使用されるＰＥＧポリマーは、１つ又は複数の末端酸素が例えば合成変換中に置換されたか否かに応じて、以下の２つの構造のうちの一方を含み得る：「−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−」又は「−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−１ＣＨ２ＣＨ２−」。前述のとおり、ＰＥＧポリマーについては、変量（ｎ）は（特に明記しない限り）約３〜４０００の範囲であり、末端基及びＰＥＧ全体の構造は様々であり得る。
【００２０】
ポリマーの幾何学的配置又は全体構造に関して「分枝状」は、分岐点から延在する２つ以上のポリマー「アーム」を有するポリマーを指す。
【００２１】
「生理学的に切断可能な」又は「加水分解性の」又は「分解性の」結合とは、生理学的条件下で水と反応する（即ち加水分解される）比較的不安定な結合である。結合が水中で加水分解する傾向は、所与の分子内で２つの原子をつなぐ一般的な種類の結合に依存するのみならず、それらの原子に結合した置換基にもまた依存し得る。加水分解に不安定な又は弱い適切な結合としては、限定はされないが、カルボン酸エステル、リン酸エステル、無水物、アセタール、ケタール、アシルオキシアルキルエーテル、イミン、オルトエステル、ペプチド、オリゴヌクレオチド、チオエステル、及びカーボネートが挙げられる。
【００２２】
「酵素分解性の結合」は、１つ以上の酵素により分解を受ける結合を意味する。
【００２３】
「安定な」結合（ｌｉｎｋａｇｅ）又は結合（ｂｏｎｄ）は、水中で実質的に安定な化学結合、即ち、長期間にわたり生理学的条件下でいかなる認め得る程度の加水分解も受けない結合を指す。加水分解に安定な結合の例としては、限定はされないが、以下が挙げられる：炭素−炭素結合（例えば脂肪族鎖中の）、エーテル類、アミド類、ウレタン類、アミン類など。概して、安定な結合は、生理学的条件下で１日約１〜２％未満の加水分解速度を呈するものである。代表的な化学結合の加水分解速度は、多くの標準的な化学テキストブックを参照することができる。
【００２４】
「実質的に」又は「本質的に」とは、ほぼ全体的にまたは完全に、例えば、ある所与の分量の９５％以上、より好ましくは９７％以上、さらにより好ましくは９８％以上、さらにより好ましくは９９％以上、なおもさらにより好ましくは９９．９％以上を意味し、９９．９９％以上が最も好ましい。即ち、「実質的に」又は「本質的に」は、ある所与の分量の最低でも９５％又はそれ以上を意味する。
【００２５】
「薬学的に許容可能な賦形剤」又は「薬学的に許容可能な担体」は、本明細書に提供される医薬組成物中に含まれ得る成分であって、患者に重大な有害毒性効果を引き起こさない成分を指す。
【００２６】
用語「患者」は、本明細書に記載されるとおりの化合物又は化合物の組み合わせ、又は組成物の投与によって予防又は治療することのできる病態に罹患している又はそれに罹り易い生物を指し、ヒト及び動物の両方が含まれる。
【００２７】
本開示は、少なくとも一部には、長時間作用型ＩＬ−２Ｒ作動薬、より具体的にはＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と長時間作用型ＩＬ−１５作動薬とを含む特に有益な療法薬併用の発見に基づく。興味深いことに、添付の実施例に例示されるとおりの前述の免疫療法薬併用は、特に、いずれの単一の長時間作用型薬剤と比べても２つの異なるマウス腫瘍モデルにおいて生存期間中央値の増加の点で有効性が高く、また長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ作動薬と天然ＩＬ−１５（即ち非長時間作用型ＩＬ−１５作動薬）との併用と比べても有効性が高かったことが発見された。特に、長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の共投与は、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の免疫系活性化機能を弱める又は抑制するようには見えず、むしろその抗癌能力を例えばＣＤ８＋Ｔ細胞産生の刺激によって増強し、ＣＤ８：調節性Ｔ細胞比の増加をもたらすように思われた。例えば、本明細書において実施例に提供される裏付けデータを参照のこと。
【００２８】
ここで上記に示したとおりの本方法、組成物、キット、及び関連する実施形態について見ると、１つ以上の態様において、本明細書には（特に）癌に罹患している患者の治療方法が提供される。この方法は、（ａ）ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬を患者に投与するステップ；及び（ｂ）ＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５作動薬を患者に投与するステップを含む。投与ステップ（ａ）及び（ｂ）に関して、これらの投与ステップはいずれの順序でも（並びに同時に）実施することができ、この点で本方法は限定されない。１つ以上の関連する実施形態では、投与ステップ（ａ）が投与ステップ（ｂ）の前に行われる。さらに１つ以上の代替的実施形態では、投与ステップ（ｂ）が投与ステップ（ａ）の前に行われる。さらに１つ以上のさらなる実施形態において、投与ステップ（ａ）及び（ｂ）の両方が同時に行われる。本方法が長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と長時間作用型ＩＬ−１５作動薬との同時投与を含む例では、投与は、治療量、即ちＩＬ−２Ｒβ活性化量（即ち治療量）の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬又はＩＬ−１５Ｒ活性化量（即ち治療量）の長時間作用型ＩＬ−１５作動薬を各々含む別個の組成物の投与であってもよく、又は各々が上記に記載したとおりの治療有効量の、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の両方を含む単一の組成物の投与であってもよい。さらに、１つ以上の実施形態において、ステップ（ａ）及び／又は（ｂ）は治療過程にわたって繰り返し投与されることになる。或いは、又はそれ以上の実施形態において、ステップ（ａ）及び（ｂ）は１回のみ行われることになる。長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と長時間作用型ＩＬ−１５作動薬とは、別個に投与されるとき、必ずしも必須というわけではないが、同じ投与（即ち投薬）プロトコルに従い投与され得る。即ち、１つの治療サイクルが長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬を１回又は複数回投与することを含んでもよく、一方で治療有効用量の長時間作用型ＩＬ−１５作動薬が長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬よりも高頻度又は低頻度のいずれかで投与されてもよい。一部の実施形態では、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬を長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の前に投与することが好ましい。
【００２９】
本明細書に記載される治療方法は、典型的には、患者ケアを監督する臨床医がその治療方法を有効である、即ち患者が治療に応答していると見なす限り継続される。治療方法が有効であることの指標となる非限定的なパラメータには、以下の１つ以上が含まれ得る：腫瘍縮小（重量及び／又は容積及び／又は外観の点で）；個別の腫瘍コロニーの数の減少；腫瘍消失；無進行生存；好適な腫瘍マーカーによる適切な応答（該当する場合）、ＮＫ（ナチュラルキラー）細胞数の増加、Ｔ細胞数の増加、メモリーＴ細胞数の増加、及びセントラルメモリーＴ細胞数の増加。
【００３０】
特許請求される方法における治療過程に関連する例示的時間の長さには、約１週間；２週間；約３週間；約４週間；約５週間；約６週間；約７週間；約８週間；約９週間；約１０週間；約１１週間；約１２週間；約１３週間；約１４週間；約１５週間；約１６週間；約１７週間；約１８週間；約１９週間；約２０週間；約２１週間；約２２週間；約２３週間；約２４週間；約７ヵ月；約８ヵ月；約９ヵ月；約１０ヵ月；約１１ヵ月；約１２ヵ月；約１３ヵ月；約１４ヵ月；約１５ヵ月；約１６ヵ月；約１７ヵ月；約１８ヵ月；約１９ヵ月；約２０ヵ月；約２１ヵ月；約２２ヵ月；約２３ヵ月；約２４ヵ月；約３０ヵ月；約３年；約４年；約５年；永久（例えば、進行中の維持療法）が含まれる。前述の期間は１回又は複数回の治療ラウンド／サイクルを伴い得る。
【００３１】
長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の投与頻度に関して、当業者は適切な頻度を決定することが可能であろう。例えば、臨床医は、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬を比較的低頻度で（例えば２週間に１回）投与し、患者が忍容性を示すことに伴い投薬間の期間を徐々に短縮することに決めてもよい。長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の投与頻度に関して、これらの薬剤の頻度も同様にして決定することができる。加えて、一部の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５作動薬に関しては詳細情報が分かっている（及び、一部の例では、臨床試験における特定の作動薬の使用から導き出される）ことに伴い、文献を参照して適切な投与頻度を把握することもまた可能である（治療レジメンの併用効果を考慮して幾らかの調整が必要となり得ることに留意する）。
【００３２】
１つ以上のさらなる態様において、組成物が提供され、この組成物は、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬とＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含み、その特徴については以下にさらに詳細に記載する。
【００３３】
加えて、本明細書には、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と；ＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分と；ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５部分の例えば癌の治療への使用に関する説明書とを含むキットが提供される。一実施形態において、説明書には、本明細書に記載されるとおりの、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及びＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分を投与することが記載される。少なくとも１回の治療ラウンド又はサイクルにわたって、ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５部分の両方が投与される。例えば、一実施形態において、本キットは、本明細書に記載されるとおりの、ＩＬ−２Ｒβ活性化量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬とＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５部分とを含む組成物を含む。１つ以上の関連する実施形態において、本組成物又は併用は活性成分として長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５作動薬のみを含む。さらに１つ以上のさらなる実施形態において、本組成物又は併用は１つ以上の追加の活性薬剤を含む。本キットはまた、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と長時間作用型ＩＬ−１５作動薬とが、別個の異なる組成物として投与されるように別個の容器に入っていてもよい。例えば、ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の各々が、例えば１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤を含む薬学的に許容可能な組成物内に含まれてもよく、ここでは各別個の異なる組成物が使用に好適な容器に収容されている。特定の実施形態において、長時間作用型インターロイキンの各々は、添付の説明書に従う再構成及び続く投与に好適な固体形態で提供される。
【００３４】
本明細書に記載される方法、組成物、及びキットは、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬を含む。これに関連して、本発明は、その作動薬がＩＬ−２が呈するより少なくとも５倍高い（より好ましくは少なくとも１０倍高い）ＩＬ−２Ｒαβへの結合親和性に対するＩＬ−２Ｒβへの結合親和性の比を呈する限り、いかなる特定の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬にも限定されない。例として、ＩＬ−２に対する結合親和性を基準として計測することが可能である。例えば、例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬ＲＳＡＩＬ−２のＩＬ−２Ｒα及びＩＬ−２Ｒβへの結合親和性を表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ−１００）によって直接計測し、臨床的に利用可能なＩＬ−２（アルデスロイキン）と比較した。より具体的には、ＥＤＣ／ＮＨＳ化学を用いて抗ヒト抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）をＣＭ−５センサーチップの表面に結合させた。次にヒトＩＬ−２Ｒα−Ｆｃ又はＩＬ−２Ｒβ−Ｆｃ融合タンパク質のいずれかをこの表面にわたって捕捉リガンドとして使用した。酢酸塩緩衝液ｐＨ４．５に、５ｍＭから始まるＲＳＡＩＬ−２の段階希釈物を作成した。次にこれらの希釈物をリガンドに５分間結合させて、結合した反応単位（ＲＵ）を濃度に対してプロットし、ＥＣ５０値を決定した。次に各ＩＬ−２受容体サブタイプに対する各アイソフォームの親和性をＩＬ−２と比べた倍数変化として計算した。
【００３５】
これに関連して、国際公開第２０１５／１２５１５９号パンフレットの実施例１に言及されるＲＳＬＡＩＬ−２は、ＩＬ−２と比べてＩＬ−２Ｒαβへの親和性の約６０倍の低下を呈するが、ＩＬ−２Ｒβへの親和性はＩＬ−２と比べて約５倍の低下に過ぎない−これによりＩＬ−２β受容体に対するその選択性又はバイアスが示される。
【００３６】
長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の非限定的な例が国際公開第２０１２／０６５０８６号パンフレット及び同第２０１５／１２５１５９号パンフレットに記載されている。例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬は、国際公開第２０１５／１２５１５９号パンフレットの実施例１に言及されるＲＳＬＡＩＬ−２である。これに関連して、ＲＳＬＡＩＬ−２は、以下の式：
【化１】
2018530568.tif 000002
［式中、ＩＬ−２はＩＬ−２の残基であり、及び「ｎ」は約３〜約４０００の整数である］に包含される化合物、及びその薬学的に許容可能な塩を含む組成物である。１つ以上の実施形態において、この組成物は、以下の式
【化２】
2018530568.tif 000003
［式中、ＩＬ−２はＩＬ−２の残基であり、「ｎ」は約３〜約４０００の整数であり、「ｎ’」は、１、２、３、７及び＞７からなる群から選択される整数である］に包含される化合物、及びその薬学的に許容可能な塩を２５％以下（モル量基準）、好ましくは１０％以下（モル量基準）、又はより好ましくは５％以下（モル量基準）含有する。ＲＳＬＡＩＬ−２のさらなる例示的な組成物は、両方のポリエチレングリコールアームを含めた分子のポリマー部分が約２５０ダルトン〜約９０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量を有する上記の式に係る化合物を含む。さらなる好適な範囲としては、約１，０００ダルトン〜約６０，０００ダルトンから選択される範囲、約５，０００ダルトン〜約６０，０００ダルトンの範囲、約１０，０００ダルトン〜約５５，０００ダルトンの範囲、約１５，０００ダルトン〜約５０，０００ダルトンの範囲、及び約２０，０００ダルトン〜約５０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量が挙げられる。
【００３７】
ポリエチレングリコールポリマー部分のさらなる例示的な重量平均分子量としては、約２００ダルトン、約３００ダルトン、約４００ダルトン、約５００ダルトン、約６００ダルトン、約７００ダルトン、約７５０ダルトン、約８００ダルトン、約９００ダルトン、約１，０００ダルトン、約１，５００ダルトン、約２，０００ダルトン、約２，２００ダルトン、約２，５００ダルトン、約３，０００ダルトン、約４，０００ダルトン、約４，４００ダルトン、約４，５００ダルトン、約５，０００ダルトン、約５，５００ダルトン、約６，０００ダルトン、約７，０００ダルトン、約７，５００ダルトン、約８，０００ダルトン、約９，０００ダルトン、約１０，０００ダルトン、約１１，０００ダルトン、約１２，０００ダルトン、約１３，０００ダルトン、約１４，０００ダルトン、約１５，０００ダルトン、約２０，０００ダルトン、約２２，５００ダルトン、約２５，０００ダルトン、約３０，０００ダルトン、約３５，０００ダルトン、約４０，０００ダルトン、約４５，０００ダルトン、約５０，０００ダルトン、約５５，０００ダルトン、約６０，０００ダルトン、約６５，０００ダルトン、約７０，０００ダルトン、及び約７５，０００ダルトンが挙げられる。
【００３８】
長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５部分は薬学的に許容可能な塩の形態であってもよい。典型的には、かかる塩は薬学的に許容可能な酸又は酸等価物との反応によって形成される。これに関連して用語「薬学的に許容可能な塩」は、概して、比較的非毒性の無機酸及び有機酸付加塩を指し得る。これらの塩は、投与媒体又は剤形製造過程においてインサイチューで、又は別途本明細書に記載されるとおりの長時間作用型インターロイキンを好適な有機酸又は無機酸と反応させて、そのようにして形成された塩を単離することにより調製し得る。代表的な塩としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩（ｎａｐｔｈｙｌａｔｅ）、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、及びラウリルスルホン酸塩などが挙げられる。（例えば、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）「薬学的塩（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ）」，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１−１９を参照のこと）。従って、記載されるとおりの塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸に由来してもよく；又は酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸（ｓａｌｉｃｙｃｌｉｃ）、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸（ｉｓｏｔｈｉｏｎｉｃ）などの有機酸から調製されてもよい。
【００３９】
前述のＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬に関して、用語「ＩＬ−２」は、本明細書で使用されるとき、ヒトＩＬ−２活性を有する部分を指す。用語、「残基」は、ＩＬ−２の残基の文脈では、上記の式に示されるとおり、ＩＬ−２分子のうち１つ以上の共有結合部位においてポリエチレングリコールなどのポリマー剤との共有結合後に残る部分を意味する。非修飾ＩＬ−２がポリエチレングリコールなどのポリマーに結合すると、その１つ又は複数のポリマーとの連結に付随する１つ以上の共有結合の存在によってＩＬ−２は僅かに変化することが理解されるであろう。この僅かに変化した形態の、別の分子に結合したＩＬ−２が、ＩＬ−２の「残基」と称される。
【００４０】
例えば、国際公開第２０１２／０６５０８６号パンフレットに記載される配列番号１〜４のいずれか一つに対応するアミノ酸配列を有するタンパク質が、それらと実質的に相同な任意のタンパク質又はポリペプチドと同様に、例示的ＩＬ−２タンパク質である。用語の実質的に相同とは、特定の対象配列、例えば突然変異配列が１つ以上の置換、欠失、又は付加だけ参照配列と異なるが、その正味の効果は参照配列と対象配列との間に有害な機能的相違をもたらさないものであることを意味する。本明細書の目的上、９５パーセントより高い相同性、等価な生物学的活性（必須ではないが等価な生物学的活性強度）、及び等価な発現特性を有する配列が、実質的に相同と見なされる。相同性を決定する目的上、成熟配列のトランケーションは無視しなければならない。本明細書で使用されるとき、用語「ＩＬ−２」には、例えば部位特異的突然変異誘発によるとおり意図的に修飾されるか、又は突然変異を通じて偶発的に修飾されたタンパク質が含まれる。これらの用語にはまた、１〜６つのさらなるグリコシル化部位を有する類似体、タンパク質のカルボキシ端側末端に少なくとも１つのさらなるアミノ酸を有する類似体であって、そのさらなる１つ又は複数のアミノ酸が少なくとも１つのグリコシル化部位を含む類似体、及び少なくとも１つのグリコシル化部位を含むアミノ酸配列を有する類似体も含まれる。この用語には、天然の部分及び組換え生成された部分の両方が含まれる。加えて、ＩＬ−２は、ヒト供給源、動物供給源、及び植物供給源に由来し得る。一つの例示的ＩＬ−２は、アルデスロイキンと称される組換えＩＬ−２である。
【００４１】
本明細書に記載される方法、組成物、及びキットは、長時間作用型ＩＬ−１５作動薬をさらに含む。これに関連して、本発明は、−患者への投与後に−その作動薬がＩＬ−１５を投与した場合よりも長い時間にわたってインビボでＩＬ−１５アゴニスト性を呈する限り、いかなる特定の長時間作用型ＩＬ−１５作動薬にも限定されない。
【００４２】
長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の非限定的な例が国際公開第２０１５／１５３７５３号パンフレットに記載される。かかる例としては、以下：
【化３】
2018530568.tif 000004
［式中、各構造について、各ＩＬ−１５はＩＬ−１５の残基であり、各（ｎ）は約３〜約４０００の整数である］、及びその薬学的に許容可能な塩が挙げられる。加えて、この段落中の前述の構造の各々はモノＰＥＧ化形態で描かれるが、例示的な長時間作用型ＩＬ−１５作動薬には、対応するジＰＥＧ化、トリＰＥＧ化、クアトロＰＥＧ化が含まれ、さらに高級なＰＥＧ化形態も同様に含まれる。さらなる例示的な長時間作用型ＩＬ−１５作動薬は、両方のポリエチレングリコールアームを含めた分子のポリマー部分が約２５０ダルトン〜約９０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量を有する上記の式に係る化合物を含む。さらなる好適な範囲としては、約１，０００ダルトン〜約６０，０００ダルトンから選択される範囲、約５，０００ダルトン〜約６０，０００ダルトンの範囲、約１０，０００ダルトン〜約５５，０００ダルトンの範囲、約１５，０００ダルトン〜約５０，０００ダルトンの範囲、及び約２０，０００ダルトン〜約５０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量が挙げられる。
【００４３】
長時間作用型ＩＬ−１５作動薬のポリエチレングリコールポリマー部分のさらなる例示的な重量平均分子量としては、約２００ダルトン、約３００ダルトン、約４００ダルトン、約５００ダルトン、約６００ダルトン、約７００ダルトン、約７５０ダルトン、約８００ダルトン、約９００ダルトン、約１，０００ダルトン、約１，５００ダルトン、約２，０００ダルトン、約２，２００ダルトン、約２，５００ダルトン、約３，０００ダルトン、約４，０００ダルトン、約４，４００ダルトン、約４，５００ダルトン、約５，０００ダルトン、約５，５００ダルトン、約６，０００ダルトン、約７，０００ダルトン、約７，５００ダルトン、約８，０００ダルトン、約９，０００ダルトン、約１０，０００ダルトン、約１１，０００ダルトン、約１２，０００ダルトン、約１３，０００ダルトン、約１４，０００ダルトン、約１５，０００ダルトン、約２０，０００ダルトン、約２２，５００ダルトン、約２５，０００ダルトン、約３０，０００ダルトン、約３５，０００ダルトン、約４０，０００ダルトン、約４５，０００ダルトン、約５０，０００ダルトン、約５５，０００ダルトン、約６０，０００ダルトン、約６５，０００ダルトン、約７０，０００ダルトン、及び約７５，０００ダルトンが挙げられる。
【００４４】
長時間作用型ＩＬ−１５部分に関して、用語「ＩＬ−１５」は、本明細書で使用されるとき、ヒトＩＬ−１５活性を有するペプチド又はタンパク質部分を指す。当業者は、任意の所与の部分がＩＬ−１５活性を有するかどうかを決定することができる。国際公開第２０１５／１５３７５３号パンフレットに提供されるとおりの配列番号１〜３のいずれか一つに対応するアミノ酸配列を含む代表的なタンパク質が、上記に提供される説明に係るそれらと実質的に相同な任意のタンパク質又はポリペプチドと同様に、例示的ＩＬ−１５タンパク質である。本明細書で使用されるとき、用語「ＩＬ−１５」には、例えば部位特異的突然変異誘発によるとおり意図的に修飾されるか、又は突然変異を通じて偶発的に修飾されたペプチド及びタンパク質が含まれる。この用語にはまた、１〜６つのさらなるグリコシル化部位を有する類似体、ペプチド又はタンパク質のカルボキシ端側末端に少なくとも１つのさらなるアミノ酸を有する類似体であって、そのさらなる１つ又は複数のアミノ酸が少なくとも１つのグリコシル化部位を含む類似体、及び少なくとも１つのグリコシル化部位を含むアミノ酸配列を有する類似体も含まれる。この用語には、天然に、組換え的に及び合成的に生成された部分が含まれる。
【００４５】
所与の化合物がＩＬ−１５作動薬として作用し得るかどうかを決定するためのアッセイは、当業者がルーチンの実験によって決定することができる。ＩＬ−１５作動薬活性をインビトロで決定する様々な方法が当該技術分野において記載されている。例示的手法はｐＳＴＡＴアッセイに基づく。簡潔に言えば、ＩＬ−１５依存性ＣＴＬＬ−２細胞がＩＬ−１５活性を有する被験物質に曝露された場合、定量的に計測することのできるチロシン残基６９４（Ｔｙｒ６９４）におけるＳＴＡＴ５のリン酸化を含むシグナル伝達カスケードの惹起が起こる。アッセイプロトコル及びキットは公知であり、例えば、ＭＳＤ  Ｐｈｏｓｐｈｏ（Ｔｙｒ６９４）／Ｔｏｔａｌ  ＳＴＡＴａ，ｂ全細胞ライセートキット（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，ＬＬＣ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）が挙げられる。本明細書における使用上、５分間又は１０分間の少なくとも一方で約３００ｎｇ／ｍＬ未満（より好ましくは約１５０ｎｇ／ｍＬ未満）のｐＳＴＡＴ５  ＥＣ５０値を呈する提案されるＩＬ−１５部分が、本発明との関連における「ＩＬ−１５作動薬」と見なされる。しかしながら、本発明で使用するＩＬ−１５作動薬はより強力である（例えば、５分又は１０分の少なくとも一方の時点で約１ｎｇ／ｍＬ未満、さらにはより好ましくは約０．５ｎｇ／ｍＬ未満など、少なくとも５分又は１０分の一方の時点で１５０ｎｇ／ｍＬ未満のｐＳＴＡＴ５  ＥＣ５０値を有する）ことが好ましい。１つ以上の実施形態において、長時間作用型ＩＬ−１５作動薬はＩＬ−１５Ｒα依存性を保持していることが好ましい。
【００４６】
長時間作用型ＩＬ−１５作動薬であると提案される化合物は、−患者への投与後に−その作動薬がＩＬ−１５を投与した場合よりも長い時間にわたってインビボでＩＬ−１５アゴニスト性を呈する限り、本発明に係る長時間作用型であると決定され得る。化合物の放射標識、そのインビボ投与、及びそのクリアランスの決定が関わるものなどの従来手法を用いて、長時間作用型ＩＬ−１５作動薬であると提案される化合物が「長時間作用型」である（即ち、同じインビボ系で投与されるＩＬ−１５と比べて長いクリアランスを有する）かどうかを決定することができる。本明細書における目的上、長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の長時間作用する性質又はＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の長時間作用する性質は、典型的には、マウスにおいて評価しようとする作動薬の投与後の様々な時点でフローサイトメトリーを用いてリンパ球のＳＴＡＴ５リン酸化を計測することにより決定される。参考として、ＩＬ−１５又はＩＬ−２では約２４時間までにシグナルが失われるが、長時間作用型ＩＬ−１５又はＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬についてはそれより長い期間持続する。例示として、ＲＳＡＩＬ−２及びＬＡＩＬ−１５バージョン１及びバージョン２の両方の組成物についてシグナルは数日間持続する。
【００４７】
本明細書に記載される方法、組成物、及びキットによれば、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬はＩＬ−２Ｒβ活性化量で提供される。当業者は、どのくらいの所与の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬がＩＬ−２Ｒβにおける臨床的に有意味なアゴニスト活性をもたらすのに十分であるかを決定することができる。例えば、当業者は文献を参照してもよく、及び／又は一連の漸増量の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬を投与して、どの１つ又は複数の量がＩＬ−２Ｒβの臨床的に有意味なアゴニスト活性をもたらすかを決定してもよい。或いは、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬及び長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の両方の活性化量を、上記に記載されるインビボＳＴＡＴ５リン酸化アッセイを用いて決定する（投与後にインビボで決定する）ことができ、ここではピーク時点でＮＫ細胞の１０％を上回るＳＴＡＴ５リン酸化を誘導するのに十分な量が活性化量と見なされる。
【００４８】
しかしながら、１つ以上の例において、ＩＬ−２Ｒβ活性化量は、タンパク質の量で表される以下の範囲の１つ以上に包含される量である：約０．０１〜１ｍｇ／ｋｇ；約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約０．１ｍｇ／ｋｇ；約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ；約２ｍｇ／ｋｇ〜約９００ｍｇ／ｋｇ；約３ｍｇ／ｋｇ〜約８００ｍｇ／ｋｇ；約４ｍｇ／ｋｇ〜約７００ｍｇ／ｋｇ；約５ｍｇ／ｋｇ〜約６００ｍｇ／ｋｇ；約６ｍｇ／ｋｇ〜約５５０ｍｇ／ｋｇ；約７ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇ；約８ｍｇ／ｋｇ〜約４５０ｍｇ／ｋｇ；約９ｍｇ／ｋｇ〜約４００ｍｇ／ｋｇ；約５ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ；約２ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ；約５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ；約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ；及び約１０ｍｇ／ｋｇ〜約６０ｍｇ／ｋｇ。
【００４９】
本明細書に記載される方法、組成物、及びキットによれば、ＩＬ−１５Ｒ活性化量の長時間作用型ＩＬ−１５作動薬が提供される。当業者は、ＩＬ−１５受容体（「ＩＬ−１５Ｒ」）における臨床的に有意味なアゴニスト活性をもたらすのに十分な長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の量を決定することができる。
【００５０】
しかしながら、１つ以上の例において、ＩＬ−１５Ｒ活性化量は以下の範囲の１つ以上に包含される（Ｉｌ−１５含有量を基準とした量）：約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ；約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ；約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ；約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ；約２ｍｇ／ｋｇ〜約９００ｍｇ／ｋｇ；約３ｍｇ／ｋｇ〜約８００ｍｇ／ｋｇ；約４ｍｇ／ｋｇ〜約７００ｍｇ／ｋｇ；約５ｍｇ／ｋｇ〜約６００ｍｇ／ｋｇ；約６ｍｇ／ｋｇ〜約５５０ｍｇ／ｋｇ；約７ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇ；約８ｍｇ／ｋｇ〜約４５０ｍｇ／ｋｇ；約９ｍｇ／ｋｇ〜約４００ｍｇ／ｋｇ；約５ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ；約２ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ；約５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ；約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ；及び約１０ｍｇ／ｋｇ〜約６０ｍｇ／ｋｇ。
【００５１】
確認のために言えば、長時間作用型ＩＬ−１５作動薬のＩＬ−１５Ｒ活性化量に関して本明細書で使用されるとき、活性化の量及び程度は大きく異なり得るとともに、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬との併用がなおも有効であり得る。例えば、ＩＬ−１５Ｒをごく最小限だけ活性化する長時間作用型ＩＬ−１５作動薬の量は、本明細書に記載される方法、組成物、及びキットが臨床的に意味のある応答を可能にする限りはなおも本明細書で使用されるとおりの活性化量であり得る。同様に、ＩＬ−２Ｒβでごく最小限のアゴニスト活性を十分に長期間にわたり呈する長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の量は、本明細書に記載される方法、組成物、及びキットが臨床的に意味のある応答を可能にする限りはなおも長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬であり得る。一部の例では、（例えば）相乗的反応に起因して、長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬の存在下ではＩＬ−１５Ｒ経路の活性化は最小限だけ要求され得るに過ぎない。さらに他の例では、（例えば）相乗的反応に起因して、ＩＬ−１５Ｒ活性化の存在下ではＩＬ−２Ｒβのアゴニスト活性は最小限だけ要求され得る。
【００５２】
本明細書に記載される方法、組成物、及びキットで提供される実際の用量は、対象の年齢、体重、及び全身状態並びに治療下の病態の重症度、医療専門家の判断、並びに本方法、組成物、及びキットの化合物に応じて異なり得る。
【００５３】
本併用、及びその関連する方法、組成物、キットなどを裏付けるデータが、実施例１に提供される。実施例１は、結腸癌及び転移性黒色腫の両方のマウス腫瘍モデルにおける長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と長時間作用型ＩＬ−１５作動薬との例示的な且つ特定の好ましい併用の評価について記載する。より具体的には、ＲＳＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン１又はＬＡＩＬ−１５バージョン２のいずれかとの併用をＣＴ−２６マウス結腸癌モデル及びマウスＢ１６Ｆ１０転移性黒色腫モデルの両方で評価した。種々の投与プロトコルを調べ、ここで変数には、投薬プロトコル、２つの長時間作用型サイトカイン組成物の投与順序、及び用いられる詳細な長時間作用型ＩＬ−１５作動薬組成物が含まれた。表１は、種々の試験群及び治療スケジュールの概要を提供する。表２は、表１に記載する併用及びプロトコルに従い治療した皮下結腸癌腫瘍を担持するマウスの試験群の各々に関する生存期間中央値の概要を提供する。図１Ａ、図１Ｂ、及び図１Ｃは、例示的な試験群の各々についての経時的なパーセント生存率を示すプロットである。見て分かるとおり、群Ｇは、ＲＳＡＩＬ−２を天然（非長時間作用型）ＩＬ−１５と併用する対応する群（群Ｍ）と比べて有意に高い生存期間中央値を呈し、結腸癌などの癌の治療におけるＲＳＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５、バージョン１との例示的併用の特に顕著で有益な効果が示唆された。両方のモデルとも、単一の長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬、ＲＳＡＩＬ−２は、単独投与したときのＬＡＩＬ−１５（対照として）のいずれのバージョンと比べても腫瘍成長の阻害における有効性が高いように思われ、しかしながら、特定の併用では、ＬＡＩＬ−１５はＲＳＡＩＬ−２の抗腫瘍効果の増強に特に有効であるように思われる。従って、ＬＡＩＬ−１５を加えると、ＲＳＡＩＬ−２の免疫刺激性の抗癌効果を阻害するのでなく、むしろ、恐らくはこれらの２つの長時間作用型サイトカインの補完的免疫活性化機構に起因してＲＳＡＩＬ−２が補完されるように思われる。表３に提供するとおり、転移性黒色腫マウスモデルにおいても同様の結果が見られる。見て分かるとおり、幾つかの治療群Ｆ、Ｇ、Ｉ及びＪは、併用に用いた長時間作用型インターロイキンの各々を単剤として投与したときと比較すると、及びＲＳＡＩＬ−２と天然（又は非長時間作用型）ＩＬ−１５との対応する併用と比較すると、有意に長い生存時間を呈した。図２Ａ、図２Ｂ、及び図２Ｃも参照のこと。これらの結果は、これらの例示的な長時間作用型ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬、ＲＳＡＩＬ−２と、ＬＡＩＬ−１５、バージョン１及び２によって例示される長時間作用型ＩＬ−１５作動薬との間の相乗的相互作用を強力に示唆しており、癌の治療に対する主題の免疫療法薬併用の意外な有効性が指摘される。
【００５４】
本開示は、（特に）本併用の化合物による治療に応答性の病態に罹患している患者を治療するのに有用な方法、組成物、及びキットを提供する。例えば、患者は、個々の薬剤単独にも、また薬剤併用にも応答し得るが、薬剤併用に対する応答性がより高い。さらなる例として、患者は個別の薬剤の一つに対して非反応性であり得るが、薬剤併用には応答する。さらに別の例として、患者はいずれの個別の薬剤単独に対しても非応答性であり得るが、薬剤併用には応答する。
【００５５】
特定の実施形態において、本明細書に記載される方法、組成物、及びキットは、注射による治療有効量の活性薬剤の送達に有用である。肺内、鼻内、頬側、直腸、舌下及び経皮など、他の投与方法もまた企図される。本明細書で使用されるとき、用語「非経口」には、皮下、静脈内、動脈内、腹腔内、心臓内、くも膜下腔内、及び筋肉内注射、並びに点滴注射が含まれる。本方法の各薬理成分は別々に投与することができる。或いは、２つの薬理成分の投与が同時であることが所望される（及び２つの薬理成分が互いに及び所与の製剤で適合する）場合、単一剤形／製剤の投与（例えば、両方の薬理活性剤を含有する静脈内製剤の静脈内投与）によって同時投与を実現することができる。例えば、患者への投与は、ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と希釈剤とを含む組成物を注射することによって達成し得る。加えて、患者への投与は、長時間作用型ＩＬ−１５作動薬と希釈剤とを含む組成物を注射することによって達成し得る。さらに、投与は、ＩＬ−２Ｒβ選択的作動薬と長時間作用型ＩＬ−１５作動薬と希釈剤とを含む組成物を注射することによって達成し得る。可能な希釈剤に関して、希釈剤は、注射用静菌水、水中デキストロース５％、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル溶液、乳酸加リンゲル溶液、生理食塩水、滅菌水、脱イオン水、及びこれらの組み合わせからなる群から選択することができる。当業者は、２つの所与の薬理成分が所与の製剤中で共に適合するかどうかをルーチンの試験で決定することができる。
【００５６】
ここに記載した方法、組成物、及びキットは、本方法、組成物、及びキットによって治癒又は予防し得る任意の病態に罹患している患者の治療に用いることができる。例示的病態は、癌、例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣癌、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫（例えば、ぶどう膜黒色腫、粘膜黒色腫、及び軟膜黒色腫を含む）、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、及び白血病である。
【００５７】
本明細書において参照される全ての論文、書籍、特許、特許公報及び他の刊行物は、全体として参照により援用される。本明細書の教示と参照によって援用される技術との間に不一致が生じた場合、その教示の意味及び本明細書の定義が（特に本明細書に添付される特許請求の範囲で用いられる用語に関して）優先するものとする。例えば、本願及び参照によって援用される刊行物が同じ用語を別様に定義する場合、定義が載せられている文書の教示の範囲内でその用語の定義が維持されるものとする。
【実施例】
【００５８】
本発明は特定の好ましい具体的な実施形態と併せて説明されているが、前述の説明並びに以下の例は例示を意図するもので、本発明の範囲を限定する意図はないことが理解されるべきである。本発明が関係する技術分野の当業者には、本発明の範囲内の他の態様、利点及び変形例が明らかであろう。
【００５９】
本明細書に提供される実施例との関連において、以下の材料を使用した。
【００６０】
「ＲＳＬＡＩＬ−２」は、国際公開第２０１５／１２５１５９号パンフレットの実施例１の手順に従うと得ることが可能な組成物を指し、概してマルチＰＥＧ化形態のＩＬ−２を含む組成物であって、ここでコンジュゲートの形成に用いられるＰＥＧ試薬の結合は投与後に遊離可能な結合である。ＲＳＬＡＩＬ−２は以下のとおり調製した。１．４４ｍｇ／ｍｌの精製ｒＩＬ−２（１０６．４ｍＬ）を第１の容器に入れ、続いて５３．６ｍＬの製剤化緩衝液（１０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ４．５、５％トレハロース）を加えた。ｐＨを測ると４．６２であり、温度を測ると２１．２℃であった。ＰＥＧ試薬のＣ２−ＰＥＧ２−ＦＭＯＣ−ＮＨＳ−２０Ｋ（国際公開第２００６／１３８５７２号パンフレットに記載されるとおり利用可能）（１３．１ｇ）を第２の容器に入れ、続いて７３．３ｍＬの２ｍＭ  ＨＣｌを加えた。得られた溶液を手動で２５分間かき混ぜた。第１の容器にホウ酸ナトリウム（０．５Ｍ、ｐＨ９．８）を加えてｐＨを約９．１に上昇させ、次にＰＥＧ試薬が入った第２の容器を１〜２分間かけて第１の容器に加えた。次に８．１ｍＬの２ｍＭ  ＨＣｌを第２の容器に入れることによってリンスステップを行い、第１の容器に加えた。コンジュゲーション反応では、最終的なｒＩＬ−２濃度は０．６ｍｇ／ｍＬであり、ホウ酸ナトリウム濃度は１２０ｍＭであり、ｐＨは９．１±０．２であり、温度は２０〜２２℃であった。試薬の活性（置換レベル）を調整した後のＰＥＧ試薬とｒＩＬ−２とのモル比は３５：１である。コンジュゲーション反応を３０分間進行させ、次に７５ｍＬの２Ｎ酢酸を使用した酸性化反応（ここではｐＨが４．０１に降下する）で停止させた。反応の生成物を水で希釈し、希釈したＰＥＧ化ｒＩＬ−２溶液を０．２ミクロンフィルタを使用してろ過した。ろ過した生成物は滅菌容器に入れる。
【００６１】
ＳＰセファロースＦＦ樹脂（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を充填したクロマトグラフィーカラムに溶液をロードすることにより、希釈したＰＥＧ化ｒＩＬ−２溶液を精製した。洗浄ステップ後、塩化ナトリウム勾配を用いてＰＥＧ化ｒＩＬ−２を溶出させる。１ｍｅｒ、２ｍｅｒ又は３ｍｅｒを含む画分は取り除き、一方、４ｍｅｒ、５ｍｅｒ、６ｍｅｒ、７ｍｅｒ及び任意のそれより高度なＰＥＧ化を含む画分はプールし、それにより主として４ｍｅｒ、５ｍｅｒ及び６ｍｅｒを有する組成物を得る（８ｍｅｒ及びそれより高度なＰＥＧ化は、クロマトグラフィーに関連する洗浄ステップの間に取り除かれることが分かった）。この得られた組成物は、「ＲＳＬＡＩＬ−２」と称する。
【００６２】
「ＬＡＩＬ−１５バージョン１」は、国際公開第２０１５／１５３７５３号パンフレットの実施例３の手順に従うと得ることが可能な組成物を指し、概してマルチＰＥＧ化形態のＩＬ−１５を含む組成物であって、ここでコンジュゲートの形成に用いられるＰＥＧ試薬の結合は投与後に遊離可能な結合である。モノＰＥＧ化形態の「ＬＡＩＬ−１５バージョン１」の構造を以下に図示する：
【化４】
2018530568.tif 000005
式中、ＩＬ−１５は天然ＩＬ−１５の残基であり、及び各「ｎ」は、コンジュゲートの形成に用いられるポリマー試薬の重量平均分子量が約２０，０００ダルトンとなるような値を有する整数である。より具体的には、「ＬＡＩＬ−１５バージョン１」は以下のとおり調製した。−８０℃でアルゴン下に保存されているｍＰＥＧ２−Ｃ２−ｆｍｏｃ−２０Ｋ−ＮＨＳ（ＩＬ−１５とのコンジュゲーション前の〜Ｏ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル反応物）を窒素パージ下で周囲温度に加温した。ｍＰＥＧ２−Ｃ２−ｆｍｏｃ−２０Ｋ−ＮＨＳのストック溶液（２００ｍｇ／ｍＬ）を２ｍＭ  ＨＣｌ中に調製し、５：１〜１００：１の範囲のｍＰＥＧ２−Ｃ２−ｆｍｏｃ−２０Ｋ−ＮＨＳ対ｒＩＬ−１５のモル比でｍＰＥＧ２−Ｃ２−ｆｍｏｃ−２０Ｋ−ＮＨＳをｒＩＬ−１５に加えた。混合物中のｒＩＬ−１５の最終濃度は０．５ｍｇ／ｍＬ（０．０３１ｍＭ）であった。この混合物に重炭酸ナトリウム緩衝液（１Ｍ、ｐＨ８．０）を１００ｍＭの最終濃度に達するように加え、コンジュゲーションを３０分間進行させると、［ｍＰＥＧ２−Ｃ２−ｆｍｏｃ−２０Ｋ］−［ｒＩＬ−１５］コンジュゲートが提供された。３０分後、反応混合物に１Ｍグリシン（ｐＨ６．０）を１００ｍＭの最終濃度が実現するように加えてクエンチを達成した。次にクエンチした反応混合物のｐＨを氷酢酸を用いて４．０に調整した後、カラムクロマトグラフィー精製及び特徴付けを行った。
【００６３】
「ＬＡＩＬ−１５バージョン２」は、国際公開第２０１５／１５３７５３号パンフレットの実施例４の手順に従うと得ることが可能な組成物を指し、概してマルチＰＥＧ化形態のＩＬ−１５を含む組成物であって、ここでコンジュゲートの形成に用いられるＰＥＧ試薬の結合は投与後に遊離可能な結合である。モノＰＥＧ化形態の「ＬＡＩＬ−１５バージョン２」の構造を以下に図示する：
【化５】
2018530568.tif 000006
式中、ＩＬ−１５は天然ＩＬ−１５の残基であり、及び各（ｎ）は、コンジュゲートの形成に用いられるポリマー試薬の重量平均分子量が約２０，０００ダルトンとなるような値を有する整数である。より具体的には、「ＬＡＩＬ−１５バージョン２」は以下のとおり調製した。−８０℃でアルゴン下に保存されているｍＰＥＧ２−ＣＡＣ−ｆｍｏｃ−２０Ｋ−ＮＨＳ（ＩＬ−１５とのコンジュゲーション前の〜Ｏ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル反応物）を窒素パージ下で周囲温度に加温した。ｍＰＥＧ２−ＣＡＣ−ｆｍｏｃ−２０Ｋ−ＮＨＳのストック溶液（２００ｍｇ／ｍＬ）を２ｍＭ  ＨＣｌ中に調製し、５：１〜１００：１の範囲のｍＰＥＧ２−ＣＡＣ−ｆｍｏｃ−２０Ｋ−ＮＨＳ対ｒＩＬ−１５のモル比でｍＰＥＧ２−ＣＡＣ−ｆｍｏｃ−２０Ｋ−ＮＨＳをｒＩＬ−１５に加えた。混合物中のｒＩＬ−１５の最終濃度は０．５ｍｇ／ｍＬ（０．０３１ｍＭ）であった。この混合物に重炭酸ナトリウム緩衝液（１Ｍ、ｐＨ８．０）を１００ｍＭの最終濃度に達するように加え、コンジュゲーションを３０分間進行させると、［ｍＰＥＧ２−ＣＡＣ−ｆｍｏｃ−２０Ｋ］−［ｒＩＬ−１５］コンジュゲートが提供された。３０分後、反応混合物に１Ｍグリシン（ｐＨ６．０）を１００ｍＭの最終濃度が実現するように加えてクエンチを達成した。次にクエンチした反応混合物のｐＨを氷酢酸を用いて４．０に調整した後、カラムクロマトグラフィー精製及び特徴付けを行った。
【００６４】
実施例１
それぞれＢａｌｂ／Ｃ及びＣ５７ＢＬ／６マウスのＣＴ２６誘導及びＢ１６Ｆ１０誘導皮下腫瘍モデルにおけるＲＳＬＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン１及びバージョン２の各々との併用の抗腫瘍活性の評価
６〜８週齢雌Ｂａｌｂ／Ｃ又はＣ５７ＢＬ／６マウスにおいて同系腫瘍を誘導した。皮下、後腹部腹側に、マウス結腸癌細胞又は転移性黒色腫細胞を１００μＬ容積の無血清細胞培養培地中それぞれ２又は１×１０６細胞ｍＬ−１の密度で注入した。マウスにおいてＣＴ２６腫瘍が８〜９日までに約２００ｍｍ３、及びＢ１６Ｆ１０腫瘍が６〜７日までに１００ｍｍ３の腫瘍に成長した。マウス（別個にＣＴ２６又はＢ１６Ｆ１０のいずれかの腫瘍を有するＢａｌｂ／Ｃ及びＣ５７ＢＬ／６マウス）を１４群に分けた；各群が１０匹の動物からなった。各群を以下のとおり１つの介入に割り付けた：媒体（群Ａ）；天然ＩＬ−１５単独（群Ｂ）；ＲＳＬＡＩＬ−２単独（群Ｃ）；ＬＡＩＬ−１５バージョン１単独（群Ｄ）；ＬＡＩＬ−１５バージョン２単独（群Ｅ）；ＲＳＬＡＩＬ−２感作及びＬＡＩＬ−１５バージョン１：同時（群Ｆ）；ＲＳＬＡＩＬ−２感作及びＬＡＩＬ−１５バージョン１：後感作（群Ｇ）；ＲＳＬＡＩＬ−２感作及びＬＡＩＬ−１５バージョン１：前感作（群Ｈ）；ＲＳＬＡＩＬ−２感作及びＬＡＩＬ−１５バージョン２：同時（群Ｉ）；ＲＳＬＡＩＬ−２感作及びＬＡＩＬ−１５バージョン２：後感作（群Ｊ）；ＲＳＬＡＩＬ−２感作及びＬＡＩＬ−１５バージョン１：前感作（群Ｋ）；ＲＳＬＡＩＬ−２感作及び天然ＩＬ−１５：同時（群Ｌ）；ＲＳＬＡＩＬ−２感作及び天然ＩＬ−１５：後感作（群Ｍ）；及びＲＳＬＡＩＬ−２感作及び天然ＩＬ−１５：前感作（群Ｎ）。表１は、これらの２つのモデルの各々について使用した試験群及び治療スケジュールの概要を提供する。
【００６５】
【表１】
2018530568.tif 000007
【００６６】
介入の投与後、皮下結腸癌腫瘍又は転移性黒色腫腫瘍の成長の変化に関してマウスを週３回デジタルノギスによって適宜計測した。毎日臨床徴候もモニタした。
【００６７】
皮下結腸腫瘍担持マウスにおいては、図１Ａ、図１Ｂ及び図１Ｃに示されるとおり、媒体対照が９日目までに試験エンドポイントに達した一方、他の群は全て継続した。
【００６８】
さらに、表２に示されるとおり、ログランク（マンテル・コックス）検定により、全ての治療群の生存期間中央値が媒体と比較して統計学的に有意であることが分かる。詳細には、「群Ｇ」に関して記載される手法におけるＲＳＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン１との併用が、ＲＳＡＩＬ−２単独と比べて有意な生存期間中央値を呈し、相乗効果が示唆された。
【００６９】
【表２】
2018530568.tif 000008
【００７０】
さらに、全ての薬理活性介入群が良好に忍容され、マウスは大幅な体重減少又は有害な臨床徴候のいずれも示さなかった。
【００７１】
皮下転移性黒色腫腫瘍担持マウスにおいては、図２Ａ、図２Ｂ及び図２Ｃに示されるとおり、媒体対照が１０日目までに試験エンドポイントに達した一方、他の群は全て継続した。
【００７２】
さらに、表３に示されるとおり、ログランク（マンテル・コックス）検定により、全ての治療群の生存期間中央値が媒体と比較して統計学的に有意であることが分かる。
【００７３】
【表３】
2018530568.tif 000009
【００７４】
天然ＩＬ−１５、ＬＡＩＬ−１５バージョン１、ＬＡＩＬ−１５バージョン２、及びＲＳＬＡＩＬ−２で治療したマウスは、大幅な体重減少も有害な臨床徴候も示さなかった。しかしながら、ＲＳＬＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン１（前感作及び同時感作）との併用投与は、５日目までに約１０％の平均体重の減少を呈した。この減少した体重は７日目までに回復し、可逆的な性質のものであることが示された。
【００７５】
実施例２
マウスでの代替的な皮下腫瘍モデルにおけるＲＳＬＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン２との併用の抗腫瘍活性の評価
実施例１の腫瘍モデルと異なるマウスでの腫瘍モデルにおいてＲＳＬＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン２との併用を評価した。ＲＳＬＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン２との併用は、新生腫瘍及び樹立腫瘍に対する有効性に関して評価した。新生腫瘍及び樹立腫瘍の両方ともに、ＲＳＬＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン２との併用は腫瘍サイズの低減に有効であった。
【００７６】
新生及び樹立マウス腫瘍モデルにおいてＲＳＬＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン２との併用投与後に特定の免疫系細胞の数、及び関連する比が増加した。
【００７７】
これらの結果は、ＲＳＬＡＩＬ−２とＬＡＩＬ−１５バージョン２との併用が有望な見込みのあるイムノオンコロジー治療であることを示唆している。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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