(57)【要約】  本明細書に提供されるのは、メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及びそれを用いて増殖性疾患を治療又は予防する方法である。【選択図】図２
2018516851.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)の化合物又はその医薬として許容し得る塩:
【化１】
2018516851.tif 000631
(式中:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;かつ
kは、1〜30の整数である)。
【請求項２】
Aが:
【化２】
2018516851.tif 000632
であり、
ここで:
R1が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化３】
2018516851.tif 000633
又はアジドであり、
ここで、RAが、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nが、0〜4の整数であり;
mが、0〜3の整数であり;
pが、0〜6の整数であり;かつ
qが、0〜5の整数である、
請求項1記載の化合物。
【請求項３】
Aが:
【化４】
2018516851.tif 000634
である、請求項1又は2記載の化合物。
【請求項４】
Aが:
【化５】
2018516851.tif 000635
であり、
ここで、nが、0、1、又は2である、
請求項1〜3のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５】
nが0である、請求項1〜4のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
R1が、出現する毎に独立に、アルコキシ又はハロである、請求項1〜4のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７】
Lが:
【化６】
2018516851.tif 000636
であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
【化７】
2018516851.tif 000637
が前記結合剤との1以上の結合であり;
AA1がアミノ酸であり;かつ
AA2がアミノ酸である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
AA1-AA2が:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである、請求項7記載の化合物。
【請求項９】
Lが:
【化８】
2018516851.tif 000638
であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
【化９】
2018516851.tif 000639
が前記結合剤との1以上の結合であり;
RAA1がアミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2がアミノ酸側鎖である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
Lが:
【化１０】
2018516851.tif 000640
であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;かつ
【化１１】
2018516851.tif 000641
が前記結合剤との1以上の結合である、
請求項9記載の化合物。
【請求項１１】
SPがC5-7アルキレンを含む、請求項7〜10のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
SPが:
【化１２】
2018516851.tif 000642
であり、
ここで:
【化１３】
2018516851.tif 000643
が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項11記載の化合物。
【請求項１３】
Lが:
【化１４】
2018516851.tif 000644
であり、
ここで:
【化１５】
2018516851.tif 000645
が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１４】
Lが:
【化１６】
2018516851.tif 000646
であり、
ここで:
BAが抗体であり;
RNが水素原子又はアルキルであり;
RMがアルキルであり;
【化１７】
2018516851.tif 000647
によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１５】
Lが:
【化１８】
2018516851.tif 000648
であり、
ここで、
【化１９】
2018516851.tif 000649
が前記結合剤との結合である、
請求項13記載の化合物。
【請求項１６】
Lが:
【化２０】
2018516851.tif 000650
であり、ここで、
【化２１】
2018516851.tif 000651
が前記結合剤との結合である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１７】
BAが抗体であり、かつ
Lが:
【化２２】
2018516851.tif 000652
であり;
ここで、
【化２３】
2018516851.tif 000653
によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１８】
Lが:
【化２４】
2018516851.tif 000654
であり;
ここで、
【化２５】
2018516851.tif 000655
が前記結合剤との結合である、
請求項1〜6のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１９】
Aが:
【化２６】
2018516851.tif 000656
であり、
ここで:
R1が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２７】
2018516851.tif 000657
又はアジドであり、
ここで、RAがアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数であり;かつ
Lが:
【化２８】
2018516851.tif 000658
であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
【化２９】
2018516851.tif 000659
が前記結合剤との1以上の結合であり;
RAA1がアミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2がアミノ酸側鎖である、
請求項1記載の化合物。
【請求項２０】
Aが:
【化３０】
2018516851.tif 000660
であり;
ここで、R1が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロであり;かつ
Lが:
【化３１】
2018516851.tif 000661
であり、
ここで:
【化３２】
2018516851.tif 000662
が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項1記載の化合物。
【請求項２１】
Aが:
【化３３】
2018516851.tif 000663
であり、
ここで:
nが0、1、又は2であり;かつ
R1が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロであり、
Lが:
【化３４】
2018516851.tif 000664
であり、
ここで:
【化３５】
2018516851.tif 000665
が前記結合剤との結合である、
請求項1記載の化合物。
【請求項２２】
前記化合物が:
【化３６】
2018516851.tif 000666
2018516851.tif 000667
2018516851.tif 000668
2018516851.tif 000669
2018516851.tif 000670
2018516851.tif 000671
2018516851.tif 000672
2018516851.tif 000673
2018516851.tif 000674
2018516851.tif 000675
2018516851.tif 000676
2018516851.tif 000677
2018516851.tif 000678
2018516851.tif 000679
2018516851.tif 000680
2018516851.tif 000681
2018516851.tif 000682
2018516851.tif 000683
2018516851.tif 000684
2018516851.tif 000685
2018516851.tif 000686
2018516851.tif 000687
2018516851.tif 000688
2018516851.tif 000689
2018516851.tif 000690
2018516851.tif 000691
2018516851.tif 000692
2018516851.tif 000693
2018516851.tif 000694
2018516851.tif 000695
2018516851.tif 000696
2018516851.tif 000697
2018516851.tif 000698
2018516851.tif 000699
2018516851.tif 000700
2018516851.tif 000701
2018516851.tif 000702
2018516851.tif 000703
2018516851.tif 000704
2018516851.tif 000705
2018516851.tif 000706
2018516851.tif 000707
2018516851.tif 000708
2018516851.tif 000709
2018516851.tif 000710
2018516851.tif 000711
であり;
ここで:
Abが抗体であり;
【化３７】
2018516851.tif 000712
が該抗体のシステインとの結合であり;
【化３８】
2018516851.tif 000713
が該抗体のリジンとの結合であり;
kが1〜30の整数であり;かつ
tが1〜8の整数である、
請求項1記載の化合物。
【請求項２３】
前記化合物が:
【化３９】
2018516851.tif 000714
である、請求項22記載の化合物。
【請求項２４】
tが1である、請求項1〜23のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２５】
前記BAが抗体である、請求項1〜21のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２６】
前記抗体が抗MUC16抗体又は抗PSMA抗体である、請求項1〜25のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２７】
式IIの化合物又はその医薬として許容し得る塩:
【化４０】
2018516851.tif 000715
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
【請求項２８】
Aが:
【化４１】
2018516851.tif 000716
であり、
ここで:
R1が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化４２】
2018516851.tif 000717
又はアジドであり、
ここで、RAがアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
請求項27記載の化合物。
【請求項２９】
前記式(II)の化合物が式(IIA)の化合物である、請求項28記載の化合物:
【化４３】
2018516851.tif 000718
。
【請求項３０】
前記式(II)の化合物が式(IIB)の化合物である、請求項28記載の化合物:
【化４４】
2018516851.tif 000719
。
【請求項３１】
前記式(II)の化合物が式(IIB2)の化合物である、請求項28記載の化合物:
【化４５】
2018516851.tif 000720
。
【請求項３２】
前記式(II)の化合物が式(IIB3)の化合物である、請求項28記載の化合物:
【化４６】
2018516851.tif 000721
。
【請求項３３】
R1が、独立に、C1-6アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、請求項28〜32のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３４】
R1が、独立に、アルコキシ又はハロである、請求項28〜33のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３５】
n、m、p、及びqが0、1、又は2である、請求項28〜34のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３６】
n、m、p、及びqが0である、請求項28〜35のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３７】
前記化合物が:
【化４７】
2018516851.tif 000722
2018516851.tif 000723
2018516851.tif 000724
である、請求項27記載の化合物。
【請求項３８】
R1が、出現する毎に独立に、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、請求項1、27、又は28記載の化合物。
【請求項３９】
R1がアルコキシである、請求項38記載の化合物。
【請求項４０】
R1がメトキシ、トリフルオロメチル、クロロ、又はフルオロである、請求項38記載の化合物。
【請求項４１】
R1がメトキシである、請求項40記載の化合物。
【請求項４２】
前記化合物が:
【化４８】
2018516851.tif 000725
2018516851.tif 000726
2018516851.tif 000727
である、請求項40記載の化合物。
【請求項４３】
請求項1〜42のいずれか一項記載の化合物及び医薬として許容し得る賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項４４】
増殖性障害を治療する方法であって、該障害を有する患者に、請求項1〜42のいずれか一項記載の化合物又は請求項43記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
【請求項４５】
式P1の化合物:
【化４９】
2018516851.tif 000728
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、かつRLは反応性リンカーである)。
【請求項４６】
前記式P1の化合物が式P1Bの化合物である、請求項45記載の化合物:
【化５０】
2018516851.tif 000729
(式中、
Aは:
【化５１】
2018516851.tif 000730
であり、
ここで:
R1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化５２】
2018516851.tif 000731
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
SPRは、反応性スペーサーである)。
【請求項４７】
前記式P1の化合物が式P1Hの化合物である、請求項45記載の化合物:
【化５３】
2018516851.tif 000732
(式中:
R1は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;かつ
bは、2〜8の整数である)。
【請求項４８】
R1がアルコキシ又はハロアルキルである、請求項47記載の化合物。
【請求項４９】
R1がメトキシ又はトリフルオロメチルである、請求項48記載の化合物。
【請求項５０】
R1がメトキシである、請求項48記載の化合物。
【請求項５１】
前記式P1の化合物が式P1Iの化合物である、請求項45記載の化合物:
【化５４】
2018516851.tif 000733
(式中:
R1は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;かつ
bは、2〜8の整数である)。
【請求項５２】
前記式P1の化合物が式P1Jの化合物である、請求項45記載の化合物:
【化５５】
2018516851.tif 000734
(式中:
R1は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;かつ
bは、2〜8の整数である)。
【請求項５３】
前記式P1の化合物が式P1N又はP1Uの化合物である、請求項45記載の化合物:
【化５６】
2018516851.tif 000735
(式中、RNは、水素原子又はアルキルであり、RMはアルキルであり、R1は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である)。
【請求項５４】
前記式P1の化合物が式P1P又は式P1Tの化合物である、請求項45記載の化合物:
【化５７】
2018516851.tif 000736
(式中、RNは、水素原子又はアルキルであり、RMはアルキルであり、R1は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である)。
【請求項５５】
前記式P1の化合物が式P1Qの化合物である、請求項45記載の化合物。:
【化５８】
2018516851.tif 000737
(式中、R1は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である)。
【請求項５６】
前記式P1の化合物が式P1V又は式P1Wの化合物である、請求項45記載の化合物:
【化５９】
2018516851.tif 000738
(式中、R1は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、gは、2〜8の整数であり、かつbは、2〜8の整数である)。
【請求項５７】
前記式P1の化合物が式P1Kの化合物である、請求項45記載の化合物:
【化６０】
2018516851.tif 000739
(式中、R1は、水素原子、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルである)。
【請求項５８】
前記化合物が:
【化６１】
2018516851.tif 000740
2018516851.tif 000741
2018516851.tif 000742
2018516851.tif 000743
2018516851.tif 000744
2018516851.tif 000745
2018516851.tif 000746
2018516851.tif 000747
2018516851.tif 000748
2018516851.tif 000749
2018516851.tif 000750
2018516851.tif 000751
2018516851.tif 000752
2018516851.tif 000753
2018516851.tif 000754
2018516851.tif 000755
2018516851.tif 000756
2018516851.tif 000757
2018516851.tif 000758
2018516851.tif 000759
2018516851.tif 000760
2018516851.tif 000761
2018516851.tif 000762
2018516851.tif 000763
2018516851.tif 000764
2018516851.tif 000765
2018516851.tif 000766
2018516851.tif 000767
2018516851.tif 000768
2018516851.tif 000769
2018516851.tif 000770
2018516851.tif 000771
2018516851.tif 000772
2018516851.tif 000773
2018516851.tif 000774
2018516851.tif 000775
2018516851.tif 000776
2018516851.tif 000777
2018516851.tif 000778
2018516851.tif 000779
2018516851.tif 000780
2018516851.tif 000781
2018516851.tif 000782
2018516851.tif 000783
2018516851.tif 000784
2018516851.tif 000785
2018516851.tif 000786
2018516851.tif 000787
2018516851.tif 000788
2018516851.tif 000789
2018516851.tif 000790
2018516851.tif 000791
2018516851.tif 000792
2018516851.tif 000793
2018516851.tif 000794
2018516851.tif 000795
2018516851.tif 000796
2018516851.tif 000797
2018516851.tif 000798
2018516851.tif 000799
である、請求項45記載の化合物。
【請求項５９】
前記化合物が:
【化６２】
2018516851.tif 000800
2018516851.tif 000801
である、請求項58記載の化合物。
【請求項６０】
式(I)の化合物:
【化６３】
2018516851.tif 000802
を調製する方法であって、式P1の化合物:
【化６４】
2018516851.tif 000803
を結合剤とコンジュゲーション条件下で接触させることを含み、
ここで、Aがアリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lがリンカーであり;
BAが結合剤であり;
kが1〜10の整数であり;かつ
RLが反応性リンカーである、
前記方法。
【請求項６１】
前記式P1の化合物が、式P2の化合物:
【化６５】
2018516851.tif 000804
を、式P3の化合物:
【化６６】
2018516851.tif 000805
と、アミド合成条件下で接触させることにより調製され、
ここで、RLが反応性リンカーであり、Aがアリーレン又はヘテロアリーレンである、
請求項60記載の方法。
【請求項６２】
式PP5の化合物又はその塩:
【化６７】
2018516851.tif 000806
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
【請求項６３】
前記化合物が式PP5Aの化合物である、請求項62記載の化合物:
【化６８】
2018516851.tif 000807
(式中:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化６９】
2018516851.tif 000808
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキルであり;
nは、0〜4の整数である)。
【請求項６４】
前記化合物が、
【化７０】
2018516851.tif 000809
から選択される化合物である、請求項62記載の化合物。
【請求項６５】
前記式P1の化合物が、式PP3の化合物:
【化７１】
2018516851.tif 000810
を、式PP7の化合物:
【化７２】
2018516851.tif 000811
と、アミド合成条件下で接触させることにより調製され、
ここで、SPRが反応性リンカーであり;
RAA1がアミノ酸側鎖であり;
RAA1がアミノ酸側鎖であり;かつ
Aがアリーレン又はヘテロアリーレンである、
請求項60記載の方法。
【請求項６６】
前記式PP3の化合物が、式PP5の化合物:
【化７３】
2018516851.tif 000812
を還元剤と接触させることにより調製される、請求項65記載の方法。
【請求項６７】
前記還元剤が亜鉛末である、請求項66記載の方法。
【請求項６８】
式PP3の化合物:
【化７４】
2018516851.tif 000813
を製造する方法であって:
(a)式P2の化合物
【化７５】
2018516851.tif 000814
を式PP6の化合物:
【化７６】
2018516851.tif 000815
と、アミド合成条件下で接触させて、式PP5の化合物:
【化７７】
2018516851.tif 000816
を形成させること(ここで、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである);及び
(b)該式PP5の化合物を還元剤と接触させることにより、該式PP5の化合物を還元して、式PP3の化合物を形成させること
を含む、前記方法。
【請求項６９】
前記還元剤が亜鉛である、請求項68記載の方法。
【請求項７０】
前記亜鉛が亜鉛末である、請求項69記載の方法。
【請求項７１】
Aが:
【化７８】
2018516851.tif 000817
であり、
ここで:
R1が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化７９】
2018516851.tif 000818
又はアジドであり、
ここで、RAがアルキル又はヘテロアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
請求項68記載の方法。
【請求項７２】
Aが:
【化８０】
2018516851.tif 000819
である、請求項71記載の方法。
【請求項７３】
Aが:
【化８１】
2018516851.tif 000820
であり、
ここで、nが0、1、又は2である、請求項71〜72記載の方法。
【請求項７４】
nが0である、請求項71〜73記載の方法。
【請求項７５】
R1が、出現する毎に独立に、アルコキシ又はハロである、請求項71〜73記載の方法。
【請求項７６】
Aが:
【化８２】
2018516851.tif 000821
であり、
ここで:
nが0、1、又は2であり;かつ
R1が、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、又はハロである、
請求項71〜73記載の方法。
【請求項７７】
Aが:
【化８３】
2018516851.tif 000822
であり、
ここで、nが0又は1であり;かつR1がアルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである、
請求項71〜73記載の方法。
【請求項７８】
Aが:
【化８４】
2018516851.tif 000823
であり、ここで、nが0又は1であり;かつR1がC1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである、
請求項71〜73記載の方法。
【請求項７９】
Aが:
【化８５】
2018516851.tif 000824
であり、
ここで、nが0又は1であり;かつR1がC1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである、
請求項71〜73記載の方法。
【請求項８０】
前記式PP5の化合物を還元して、式PP3の化合物を形成させることが酸の中で還元することを含む、請求項68〜79のいずれか一項記載の方法。
【請求項８１】
前記酸が酢酸、ギ酸、pTsOH、及びNH4Clからなる群から選択される、請求項80記載の方法。
【請求項８２】
以下の式を有する化合物:
【化８６】
2018516851.tif 000825
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、
L1及びL2は、リンカーであり、
BAは結合剤であり、
kは、0〜30の整数であり、
tは、0〜8の整数である)。
【請求項８３】
kとtの和が1〜8の整数と等しい、請求項82記載の化合物。
【請求項８４】
Aが:
【化８７】
2018516851.tif 000826
であり、
ここで:
R1が、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化８８】
2018516851.tif 000827
又はアジドであり、
ここで、RAがアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
請求項82記載の化合物。
【請求項８５】
L1又はL2が:
【化８９】
2018516851.tif 000828
であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
【化９０】
2018516851.tif 000829
が前記結合剤との1以上の結合であり;
AA1がアミノ酸であり;かつ
AA2がアミノ酸である、
請求項82〜84のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８６】
AA1-AA2が:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである、請求項84記載の化合物。
【請求項８７】
L1又はL2が:
【化９１】
2018516851.tif 000830
であり、
ここで:
SPがスペーサーであり;
【化９２】
2018516851.tif 000831
が前記結合剤との1以上の結合であり;
RAA1がアミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2がアミノ酸側鎖である、
請求項82〜86のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８８】
SPが:
【化９３】
2018516851.tif 000832
であり、
ここで:
【化９４】
2018516851.tif 000833
が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項87記載の化合物。
【請求項８９】
L1が、
【化９５】
2018516851.tif 000834
であり、
ここで:
【化９６】
2018516851.tif 000835
が前記結合剤との結合であり;かつbが2〜8の整数である、
請求項87記載の化合物。
【請求項９０】
L2が、
【化９７】
2018516851.tif 000836
であり、
ここで:
BAが抗体であり;
RNが水素原子又はアルキルであり;
RMがアルキルであり;
【化９８】
2018516851.tif 000837
によって表される2つの結合が該抗体のシステインとの結合であり;かつbが2〜8の整数である、
請求項87記載の化合物。
【請求項９１】
L2が、
【化９９】
2018516851.tif 000838
である、請求項90記載の化合物。
【請求項９２】
式(I)の抗体-薬物-コンジュゲート化合物を調製する方法であって:
(a)脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体を、式(PT1)の化合物:
【化１００】
2018516851.tif 000839
と、トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることを含み、
ここで:
Aがアリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
Lがリンカーである、
前記方法。
【請求項９３】
Aが:
【化１０１】
2018516851.tif 000840
であり、
ここで:
R1が、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化１０２】
2018516851.tif 000841
又はアジドであり、
ここで、RAがアルキル又はヘテロアルキルであり;
nが0〜4の整数であり;
mが0〜3の整数であり;
pが0〜6の整数であり;かつ
qが0〜5の整数である、
請求項92記載の方法。
【請求項９４】
前記リンカーが:
【化１０３】
2018516851.tif 000842
であり、
ここで:
一方の
【化１０４】
2018516851.tif 000843
が前記ペイロードとの結合であり、もう一方の
【化１０５】
2018516851.tif 000844
が前記結合剤との結合であり;かつ
bが2〜8の整数である、
請求項92記載の方法。
【請求項９５】
前記式(PT1)の化合物が、
【化１０６】
2018516851.tif 000845
である、請求項92記載の方法。
【請求項９６】
工程(a)が、約7.0〜約8.0のpHで、少なくとも4時間である、請求項92記載の方法。
【請求項９７】
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が、前記脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体と比較して、少なくとも5モル濃度当量の濃度である、請求項92記載の方法。
【請求項９８】
工程(a)の前記トランスグルタミナーゼが、脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体のミリグラム当たり1〜30Uで存在する、請求項92記載の方法。
【請求項９９】
前記抗体が、工程(a)の前に、ペプチド N-グリコシダーゼF(PNGアーゼF)で脱グリコシル化される、請求項92〜95のいずれか一項記載の方法。
【請求項１００】
前記抗体が非グリコシル化されている、請求項92〜95のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０１】
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が以下の式によるものである、請求項92〜97のいずれか一項記載の方法:
【化１０７】
2018516851.tif 000846
(式中、Aは:
【化１０８】
2018516851.tif 000847
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化１０９】
2018516851.tif 000848
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である)。
【請求項１０２】
工程(a)の前記式(PT1)の化合物が:
【化１１０】
2018516851.tif 000849
である、請求項92〜98のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０３】
工程(a)が、水、緩衝水、食塩水、緩衝食塩水、及び有機化合物からなる群から選択される1以上の溶媒中で実施される、請求項92〜102のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０４】
工程(a)が、リン酸塩、HEPES、又はMOPSで緩衝化された水の中で実施される、請求項92〜103のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０５】
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性ペイロード化合物と反応させて、抗体-ペイロードコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、請求項92〜104のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０６】
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性リンカー-ペイロード化合物と反応させて、抗体-リンカー-ペイロードコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、請求項92〜105のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０７】
(b)前記グルタミニル修飾抗体を反応性リンカー化合物と反応させて、抗体-リンカーコンジュゲートを形成させること;及び
(c)該抗体-リンカーコンジュゲートを反応性ペイロード化合物と反応させて、抗体-リンカー-ペイロードコンジュゲートを形成させること
をさらに含む、請求項92〜105のいずれか一項記載の方法。
【請求項１０８】
請求項92〜104のいずれか一項記載の方法によって産生されるグルタミニル修飾抗体。
【請求項１０９】
請求項108記載の抗体及び1以上の医薬として許容し得る希釈剤、賦形剤、又は担体を含む医薬組成物。
【請求項１１０】
それを必要としている対象の状態を治療する方法であって、該対象に、請求項108記載の抗体の医薬として許容し得る量を投与することを含む、前記方法。
【請求項１１１】
治療のための、請求項108記載のグルタミニル修飾抗体。
【請求項１１２】
癌の治療のための、請求項108記載のグルタミニル修飾抗体。
【請求項１１３】
前記化合物が、
【化１１１】
2018516851.tif 000850
2018516851.tif 000851
2018516851.tif 000852
2018516851.tif 000853
2018516851.tif 000854
2018516851.tif 000855
から選択される、請求項27記載の化合物。
【請求項１１４】
前記化合物が、
【化１１２】
2018516851.tif 000856
2018516851.tif 000857
2018516851.tif 000858
から選択される、請求項45記載の化合物。
【請求項１１５】
【化１１３】
2018516851.tif 000859
2018516851.tif 000860
2018516851.tif 000861
から選択され;かつ
tが1〜8の整数である、
抗体薬物コンジュゲート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、2015年3月27日に出願された、メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及びそれを用いて増殖性疾患を治療する方法という題の米国仮特許出願第62/139,044号に対する優先権、及びその恩典を主張し、また、2015年11月6日に出願された、メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及びそれを用いて増殖性疾患を治療する方法という題の米国仮特許出願第62/252,239号に対する優先権、及びその恩典を主張する。これらの仮特許出願の各々の内容は、あらゆる目的のために引用により完全に本明細書中に組み込まれている。
【０００２】
(分野)
本開示は、メイタンシノイド誘導体、そのコンジュゲート、及びそれを用いて増殖性疾患を治療又は予防する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
(背景)
増殖性疾患、例えば、癌は、異常な細胞の無制御な成長を特徴とする。増殖性疾患の現在の治療には、手術、放射線、化学療法、ホルモンベースの療法、及び/又は免疫療法が含まれる。これらの治療のうちのいくつか、特に、化学療法は、異常な細胞の拡大を制限する抗増殖性薬物を利用している。しかしながら、これらの薬物は、通常、細胞を死滅させるその能力に関して無差別的であり、正常な細胞と異常な細胞の両方に影響を及ぼす。この問題に対処するために、異常な細胞を選択的に標的化するための、腫瘍標的化プローブ(例えば、抗体又は成長因子)と毒素とのコンジュゲートの使用を含む、標的化薬物送達への様々なアプローチが探索されてきた。抗体薬物コンジュゲート(ADC)は、化学的リンカーを介して細胞毒性剤に連結されている抗体から構成された化合物である。そのような化合物は、抗体のその標的に対する結合特異性を利用して、細胞毒性剤を異常な細胞に送達する。したがって、抗増殖性化合物及びそのコンジュゲートが必要とされている。
【発明の概要】
【０００４】
(概要)
本明細書に提供されるのは、式(I)の化合物又はその医薬として許容し得る塩である:
【化１】
2018516851.tif 000003
(式中:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;かつ
kは、1〜30の整数である)。また本明細書に提供されるのは、式(I)の化合物の立体異性体である。
【０００５】
本明細書に提供されるのは、式(II)の化合物又はその医薬として許容し得る塩でもある:
【化２】
2018516851.tif 000004
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。また本明細書に提供されるのは、式(II)の化合物の立体異性体である。
【０００６】
本明細書に提供されるのは、式PP5の化合物又はその塩でもある:
【化３】
2018516851.tif 000005
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。また本明細書に提供されるのは、式PP5の化合物の立体異性体である。
【０００７】
本明細書に提供されるのは、式PT1の化合物又はその塩でもある:
【化４】
2018516851.tif 000006
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、かつLはリンカーである)。また本明細書に提供されるのは、式PT1の化合物の立体異性体である。
【０００８】
さらに、本明細書に提供されるのは、増殖性疾患を治療する方法であって、本明細書に記載される化合物を投与することを含む、方法である。
【０００９】
さらに、本明細書に提供されるのは、増殖性疾患を治療する方法であって、本明細書に記載されるコンジュゲートを投与することを含む、方法である。
【００１０】
さらに、本明細書に提供されるのは、式(I)の化合物を調製する方法であって、脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体を、式(PT1)の化合物と、トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることを含む、方法である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
(図面の簡単な説明)
【図１】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-シトルリン-バリン-カプロリル-6-マレイミジルを調製するための合成順序を示している。
【００１２】
【図２】実施例41で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log10[M]のプロットを示している。
【００１３】
【図３】実施例41で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log10[M]のプロットを示している。
【００１４】
【図４】実施例41で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log10[M]のプロットを示している。
【００１５】
【図５】実施例41で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log10[M]のプロットを示している。
【００１６】
【図６】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-フルオロ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。
【００１７】
【図７】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。
【００１８】
【図８】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-メトキシ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。
【００１９】
【図９】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２０】
【図１０】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２１】
【図１１】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２２】
【図１２】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２３】
【図１３】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２４】
【図１４】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-クロロ-4-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２５】
【図１５】置換基Rが本明細書中で以下に定義されている式(II)の化合物を調製するための一般的な合成順序を示している。
【００２６】
【図１６】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2,5-ジフルオロ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２７】
【図１７】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２８】
【図１８】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-クロロ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００２９】
【図１９】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(5-アミノ-8-カルボキシキノリン)カルボキサミドを調製するための合成順序を示している。
【００３０】
【図２０】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ブロモ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００３１】
【図２１】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００３２】
【図２２】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メチル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００３３】
【図２３】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００３４】
【図２４】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(8-アミノ-5-カルボキシキノリン)カルボキサミドを調製するための合成順序を示している。
【００３５】
【図２５】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。
【００３６】
【図２６】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-6-アミンを調製するための合成順序を示している。
【００３７】
【図２７】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-メトキシ-5-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００３８】
【図２８】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-メトキシ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００３９】
【図２９】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００４０】
【図３０】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-フルオロ-5-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００４１】
【図３１】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００４２】
【図３２】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-フルオロ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００４３】
【図３３】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-アジピン酸-NHSを調製するための合成順序を示している。
【００４４】
【図３４】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-Cap-Malを調製するための合成順序を示している。
【００４５】
【図３５】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-メチルスルホニル-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００４６】
【図３６】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-ヒドロキシ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００４７】
【図３７】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００４８】
【図３８】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(4-メトキシ-2-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００４９】
【図３９】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-モルホリノ-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００５０】
【図４０】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アセトアミド-4-アミノ)ベンズアミドを調製するための合成順序を示している。
【００５１】
【図４１】メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-cap-ジブロモメチルアクリルを調製するための合成順序を示している。
【００５２】
【図４２】抗体薬物コンジュゲートである、実施例43のPRLR-Q-63コンジュゲートのデコンボリューションされた質量分光(MS)スペクトルを示している。
【００５３】
【図４３】実施例43のアイソタイプ対照-Q-63コンジュゲートのデコンボリューションされたMSスペクトルを示している。
【００５４】
【図４４】実施例45で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log10[M]のプロットを示している。
【００５５】
【図４５】実施例45で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log10[M]のプロットを示している。
【００５６】
【図４６】実施例45で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log10[M]のプロットを示している。
【００５７】
【図４７】実施例45で試験された特定の化合物の％細胞生存対Log10[M]のプロットを示している。
【発明を実施するための形態】
【００５８】
(詳細な説明)
(A.定義)
本明細書で使用される場合、「アルキル」は、一価及び飽和炭素水素ラジカル部分を指す。アルキルは任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルキルであることができる。アルキルとしては、1〜20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-20アルキル; 1〜12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-12アルキル; 1〜8個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-8アルキル; 1〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-6アルキル;及び1〜3個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-3アルキルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキル部分の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、i-ブチル、ペンチル部分、ヘキシル部分、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」は、アルキルが、ハロゲン、例えば、F、Cl、Br、又はIから選択される少なくとも1つの置換基を含む、上に定義されているようなアルキルを指す。
【００６０】
本明細書で使用される場合、「アルケニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1以上の非芳香族炭素-炭素二重結合を含有する一価炭素水素ラジカル部分を指す。アルケニルは任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状であることができる。アルケニルとしては、2〜20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-20アルケニル; 2〜12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-12アルケニル; 2〜8個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-8アルケニル; 2〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-6アルケニル;及び2〜4個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-4アルケニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルケニル部分の例としては、ビニル、プロペニル、ブテニル、及びシクロヘキセニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６１】
本明細書で使用される場合、「アルキニル」は、少なくとも2つの炭素原子及び1以上の炭素-炭素三重結合を含有する一価炭素水素ラジカル部分を指す。アルキニルは任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状であることができる。アルキニルとしては、2〜20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-20アルキニル; 2〜12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-12アルキニル; 2〜8個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-8アルキニル; 2〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-6アルキニル;及び2〜4個の炭素原子を有するもの、すなわち、C2-4アルキニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキニル部分の例としては、エチニル、プロピニル、及びブチニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６２】
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」は、一価及び飽和炭素水素ラジカル部分を指し、ここで、該炭化水素は、酸素原子との単結合を含み、かつ該ラジカルは、酸素原子上に位置し、例えば、エトキシの場合、CH3CH2-O・である。アルコキシ置換基は、それが該アルコキシ置換基のこの酸素原子を介して置換する化合物に結合する。アルコキシは任意に置換されており、線状、分岐状、又は環状、すなわち、シクロアルコキシであることができる。アルコキシとしては、1〜20個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-20アルコキシ; 1〜12個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-12アルコキシ; 1〜8個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-8アルコキシ; 1〜6個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-6アルコキシ;及び1〜3個の炭素原子を有するもの、すなわち、C1-3アルコキシが挙げられるが、これらに限定されない。アルコキシ部分の例としては、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、i-プロポキシ、n-ブトキシ、s-ブトキシ、t-ブトキシ、i-ブトキシ、ペントキシ部分、ヘキソキシ部分、シクロプロポキシ、シクロブトキシ、シクロペントキシ、及びシクロヘキソキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６３】
本明細書で使用される場合、「ハロアルコキシ」は、アルコキシが、ハロゲン、例えば、F、Cl、Br、又はIから選択される少なくとも1つの置換基を含む、上に定義されているようなアルコキシを指す。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「アリール」は、環原子が炭素原子である芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す。アリールは任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば、二環式もしくは三環式であることができる。アリール部分の例としては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-20アリール; 6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリール、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリールが挙げられるが、これらに限定されない。アリール部分の例としては、フェニル、ナフチル、フルオレニル、アズレニル、アントリル、フェナントリル、及びピレニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６５】
本明細書で使用される場合、「アリーレン」は、環原子が炭素原子のみである芳香族化合物の二価部分を指す。アリーレンは任意に置換されており、単環式又は多環式、例えば、二環式もしくは三環式であることができる。アリール部分の例としては、6〜20個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-20アリーレン; 6〜15個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-15アリーレン、及び6〜10個の環炭素原子を有するもの、すなわち、C6-10アリーレンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６６】
本明細書で使用される場合、「アルカリール」は、少なくとも1つのアルキルで置換されているアリールを指す。アルカリールは、任意に置換されている。
【００６７】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルキルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルケニル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルケニルを指す。本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキニル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているアルケニルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロアルキル部分の例としては、アミノアルキル、スルホニルアルキル、スルフィニルアルキルが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアルキル部分の例としては、メチルアミノ、メチルスルホニル、及びメチルスルフィニルも挙げられるが、これらに限定されない。
【００６８】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」は、環原子が炭素原子及び少なくとも1つの酸素、硫黄、窒素、又はリン原子を含有する芳香族化合物のラジカルである一価部分を指す。ヘテロアリール部分の例としては、5〜20個の環原子; 5〜15個の環原子;及び5〜10個の環原子を有するものが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリールは、任意に置換されている。
【００６９】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリーレン」は、芳香環の1以上の環原子が酸素、硫黄、窒素、又はリン原子で置換されているアリーレンを指す。ヘテロアリーレンは、任意に置換されている。
【００７０】
本明細書で使用される場合、「ヘテロシクロアルキル」は、1以上の炭素原子がヘテロ原子に置換されているシクロアルキルを指す。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄原子が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキルは、任意に置換されている。ヘテロシクロアルキル部分の例としては、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ジオキソラニル、ジチオラニル、オキサニル、又はチアニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７１】
本明細書で使用される場合、ラジカル部分を説明するために使用されるときの「任意に置換された」、例えば、任意に置換されたアルキルは、そのような部分が任意に1以上の置換基に結合していることを意味する。そのような置換基の例としては、ハロ、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、アジド、エポキシ、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、
【化５】
2018516851.tif 000007
(ここで、RA、RB、及びRCは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルであるか、又はRA及びRBは、それらが結合している原子と一緒に、飽和もしくは不飽和炭素環を形成し、ここで、該環は任意に置換されており、かつ1以上の環原子はヘテロ原子と任意に置換されている)が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、RA、RB、及びRCは、水素原子ではない。いくつかの例において、RAは、メチルである。いくつかの例において、RAは、メチルアミノ、メチルスルホニル、及びメチルスルフィニルである。いくつかの例において、RAは、メチルアミノである。ある実施態様において、ラジカル部分が、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和炭素環と任意に置換されているとき、該任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクロアルキル、又は任意に置換された飽和もしくは不飽和炭素環上の置換基は、それらが置換されている場合、追加の置換基でさらに任意に置換されている置換基で置換されない。いくつかの実施態様において、本明細書に記載される基が任意に置換されているとき、該基に結合している置換基は、別途規定されない限り、非置換である。
【００７２】
本明細書で使用される場合、「結合剤」は、所与の結合パートナーと特異性を伴って結合することができる任意の分子を指す。
【００７３】
本明細書で使用される場合、「リンカー」は、結合剤を本明細書に記載されるメイタンシノイド誘導体と共有結合させる二価部分を指す。
【００７４】
本明細書で使用される場合、「アミド合成条件」は、例えば、カルボン酸、活性化カルボン酸、又はアシルハライドとアミンとの反応によって、アミドの形成を達成するために好適な反応条件を指す。いくつかの例において、アミド合成条件は、カルボン酸とアミンの間のアミド結合の形成を達成するために好適な反応条件を指す。これらの例のいくつかにおいて、カルボン酸は、まず、活性化カルボン酸に変換され、その後、該活性化カルボン酸がアミンと反応して、アミドを形成する。アミドの形成を達成するための好適な条件としては、限定されないが、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ジイソプロピルカルボジイミド(DIC)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)、(ベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)、(7-アザベンゾトリアゾール-1-イルオキシ)トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyAOP)、ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBrOP)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HBTU)、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート(TBTU)、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU)、2-エトキシ-1-エトキシカルボニル-1,2-ジヒドロキノリン(EEDQ)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC)、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリジニウムヘキサフルオロホスフェート(CIP)、2-クロロ-4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン(CDMT)、及びカルボニルジイミダゾール(CDI)を含む、カルボン酸とアミンの反応を達成するための試薬を利用するものが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの例において、カルボン酸は、まず、活性化カルボン酸エステルに変換され、その後、アミンと反応して、アミド結合を形成する。ある実施態様において、カルボン酸を試薬と反応させる。試薬は、カルボン酸を脱プロトン化し、その後、脱プロトン化されたカルボン酸によるプロトン化された試薬への求核攻撃の結果として、脱プロトン化されたカルボン酸との生成物複合体を形成させることにより、カルボン酸を活性化させる。特定のカルボン酸については、この活性化エステルの方が、変換される前のカルボン酸よりも、アミンによる求核攻撃の影響を後に受けやすい。この結果として、アミド結合形成が生じる。したがって、カルボン酸は、活性化されたと記載されている。例示的な試薬としては、DCC及びDICが挙げられる。
【００７５】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」は、疾患もしくは障害の治療もしくは管理における患者への治療的利益を提供するのに又は疾患もしくは障害と関連する1以上の症状を遅延もしくは最小化させるのに十分である(化合物の)量を指す。
【００７６】
特定の基、部分、置換基、及び原子は、該基、部分、置換基、原子が結合している原子を示すために、結合(単数)又は結合(複数)を交差する波線で示されている。例えば、以下のように示されるプロピル基で置換されるフェニル基:
【化６】
2018516851.tif 000008
は、以下の構造:
【化７】
2018516851.tif 000009
を有する。本明細書で使用される場合、環原子間の結合を介して環状基(例えば、芳香族、ヘテロ芳香族、縮合環、及び飽和もしくは不飽和シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル)に結合した置換基を示す図は、別途規定されない限り、該環状基が、本明細書に示されるか又は本開示が関係する分野で公知である技法に従って、環状基中の任意の環位置で又は縮合環基中の任意の環上で、その置換基で置換され得ることを示すことが意図される。例えば、下付き文字qが0〜4の整数であり、かつ置換基R1の位置が一般的に記載されている基
【化８】
2018516851.tif 000010
は、置換基R1の位置が具体的に記載されている以下の基:
【化９】
2018516851.tif 000011
を含む。さらに、例えば、環原子間の結合を介して環状基に結合しているR1以外の置換基の位置が一般的に記載されている基
【化１０】
2018516851.tif 000012
は、R1以外のこれらの置換基の位置が具体的に記載されている以下の基:
【化１１】
2018516851.tif 000013
を含む。また、例えば、環原子間の結合を介して環状基に結合しているR1以外の置換基の位置が一般的に記載されている基
【化１２】
2018516851.tif 000014
は、R1以外のこれらの置換基の位置が具体的に記載されている以下の基:
【化１３】
2018516851.tif 000015
を含む。R1以外の置換基の位置が具体的に記載されているこれらの構造の各々において、置換基R1は、環状基中の任意の環位置に又はR1以外のこれらの置換基のうちの1つによって占められていない縮合環基中の任意の環上で結合していてもよい。以下の非限定的な代表図は、環状基が、任意の環位置で又は縮合環基中のいずれかの基上で、示された置換基:
【化１４】
2018516851.tif 000016
で置換され得ることを示している。
【００７７】
(B.コンジュゲート)
本明細書に提供されるのは、式(I)の化合物又はその医薬として許容し得る塩である:
【化１５】
2018516851.tif 000017
(式中:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;
Lは、リンカーであり;
BAは、結合剤であり;かつ
kは、1〜30の整数である)。
【００７８】
(1.「A」部分)
いくつかの実施態様において、Aは、アリーレンである。いくつかの実施態様において、Aは、ヘテロアリーレンである。いくつかの実施態様において、アリーレン又はヘテロアリーレンは、1以上の電子求引性基及び/又は1以上の電子供与性基で置換されている。
【００７９】
いくつかの実施態様において、Aは、任意に置換されている、ベンゼン、ピリジン、ナフタレン、又はキノロンの二価ラジカルである。
【００８０】
いくつかの実施態様において、Aは、アミノ、アミド、アルキル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、及びハロアルコキシからなる群から選択されるメンバーで任意に置換されているベンゼンの二価ラジカルである。
【００８１】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１６】
2018516851.tif 000018
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化１７】
2018516851.tif 000019
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【００８２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１８】
2018516851.tif 000020
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化１９】
2018516851.tif 000021
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【００８３】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２０】
2018516851.tif 000022
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２１】
2018516851.tif 000023
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【００８４】
いくつかの実施態様において、R1は、C1-6アルキル又はC1-6アルコキシである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R1は、メチル、エチル、メトキシ、又はエトキシである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R1は、メトキシである。
【００８５】
いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルキル又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、ハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、又はトリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。
【００８６】
いくつかの実施態様において、R1は、
【化２２】
2018516851.tif 000024
である。いくつかの実施態様において、R1は、
【化２３】
2018516851.tif 000025
であり、ここで、RAは、メチルである。いくつかの実施態様において、R1は、ヒドロキシルである。いくつかの実施態様において、R1は、N-メチルホルムアミドである。いくつかの実施態様において、R1は、モルホリニルである。
【００８７】
いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルキル、アルコキシ、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、ハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、又はトリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。
【００８８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２４】
2018516851.tif 000026
である。
【００８９】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２５】
2018516851.tif 000027
である。
【００９０】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２６】
2018516851.tif 000028
である。
【００９１】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２７】
2018516851.tif 000029
であり、
ここで、nは、0、1、又は2である。
【００９２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２８】
2018516851.tif 000030
であり、
ここで、nは、0、1、又は2である。
【００９３】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２９】
2018516851.tif 000031
であり、
ここで、nは、0又は1であり;かつR1は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。
【００９４】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３０】
2018516851.tif 000032
であり、
ここで、nは、0又は1であり;かつR1は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。いくつかの例において、R1は、アルコキシである。
【００９５】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３１】
2018516851.tif 000033
であり、
ここで、nは、0又は1であり;かつR1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである。
【００９６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３２】
2018516851.tif 000034
であり、
ここで、nは、0又は1であり;かつR1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである。いくつかの例において、R1は、C1-6アルコキシである。
【００９７】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３３】
2018516851.tif 000035
であり、
ここで、nは、0又は1であり; R1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルであり;かつLは、
【化３４】
2018516851.tif 000036
であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつ
【化３５】
2018516851.tif 000037
は、結合剤との結合である。
【００９８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３６】
2018516851.tif 000038
であり、
ここで、nは、0又は1であり; R1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルであり;かつLは、
【化３７】
2018516851.tif 000039
であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつ
【化３８】
2018516851.tif 000040
は、結合剤との結合である。
【００９９】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３９】
2018516851.tif 000041
であり、
ここで、nは、0、1、2、3、又は4である。
【０１００】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４０】
2018516851.tif 000042
であり、
ここで、nは、0、1、2、3、又は4である。
【０１０１】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４１】
2018516851.tif 000043
であり、
ここで:
R1は、C1-6アルキル、ハロ、又はC1-6ハロアルキルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。
【０１０２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４２】
2018516851.tif 000044
である。
【０１０３】
ここで:
【０１０４】
R1は、C1-6アルキル、ハロ、又はC1-6ハロアルキルであり;かつ
【０１０５】
nは、0、1、又は2である。
【０１０６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４３】
2018516851.tif 000045
であり、
ここで:
R1は、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、ハロ、C1-6ハロアルキル、又はC1-6ハロアルコキシであり;かつ
nは、0、1、2、3、又は4である。
【０１０７】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４４】
2018516851.tif 000046
であり、
ここで:
R1は、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、ハロ、C1-6ハロアルキル、又はC1-6ハロアルコキシであり;かつ
nは、0、1、2、3、又は4である。
【０１０８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４５】
2018516851.tif 000047
であり、
ここで、R1は、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R1は、メトキシ又はメチルである。いくつかの具体的な実施態様において、R1は、メトキシである。
【０１０９】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４６】
2018516851.tif 000048
である。
【０１１０】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４７】
2018516851.tif 000049
であり、
ここで:
R1は、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。
【０１１１】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４８】
2018516851.tif 000050
である。
【０１１２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４９】
2018516851.tif 000051
であり、
ここで:
Xは、水素原子、ハロ、又はトリフルオロメチルである。
【０１１３】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化５０】
2018516851.tif 000052
であり、
ここで:
Xは、水素原子、ハロ、又はトリフルオロメチルであり;
【化５１】
2018516851.tif 000053
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化５２】
2018516851.tif 000054
は、カルボニルとの結合である。
【０１１４】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化５３】
2018516851.tif 000055
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、又はヒドロキシルであり;
【化５４】
2018516851.tif 000056
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化５５】
2018516851.tif 000057
は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R1は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。いくつかの実施態様において、Aは:
【化５６】
2018516851.tif 000058
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、又はヒドロキシルであり;
【化５７】
2018516851.tif 000059
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化５８】
2018516851.tif 000060
は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R1は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。
【０１１５】
いくつかの実施態様において、R1は、スルホニルである。いくつかの実施態様において、R1は、N-メチルホルムアミドである。いくつかの実施態様において、R1は、ヒドロキシルである。いくつかの実施態様において、R1は、モルホリニルである。
【０１１６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化５９】
2018516851.tif 000061
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシであり;
【化６０】
2018516851.tif 000062
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化６１】
2018516851.tif 000063
は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R1は、アルキル又はアルコキシである。いくつかの具体的な実施態様において、R1は、プロピルアミノ、ジフルオロ-メトキシ、フェニル、2-フルオロフェニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。
【０１１７】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化６２】
2018516851.tif 000064
であり;
【化６３】
2018516851.tif 000065
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化６４】
2018516851.tif 000066
は、カルボニルとの結合である。
【０１１８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化６５】
2018516851.tif 000067
であり;
【化６６】
2018516851.tif 000068
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化６７】
2018516851.tif 000069
は、カルボニルとの結合である。
【０１１９】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化６８】
2018516851.tif 000070
であり;
【化６９】
2018516851.tif 000071
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化７０】
2018516851.tif 000072
は、カルボニルとの結合である。
【０１２０】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化７１】
2018516851.tif 000073
であり;
【化７２】
2018516851.tif 000074
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化７３】
2018516851.tif 000075
は、カルボニルとの結合である。
【０１２１】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化７４】
2018516851.tif 000076
であり、ここで、Xは、F、Cl、Br、CN、メトキシ、ジメチルアミノ、又はシクロプロピルであり;
【化７５】
2018516851.tif 000077
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化７６】
2018516851.tif 000078
は、カルボニルとの結合である。
【０１２２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化７７】
2018516851.tif 000079
であり、ここで、Xは、F、Cl、Br、CN、メトキシ、ジメチルアミノ、1-メチル-エチル-チオ、又はシクロプロピルであり;
【化７８】
2018516851.tif 000080
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化７９】
2018516851.tif 000081
は、カルボニルとの結合である。
【０１２３】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化８０】
2018516851.tif 000082
であり、
ここで、各々のR1は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシであり;
【化８１】
2018516851.tif 000083
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化８２】
2018516851.tif 000084
は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R1は、水素、フルオロ、トリフルオロメチル、又はメトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨードである。
【０１２４】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化８３】
2018516851.tif 000085
であり、
ここで
【化８４】
2018516851.tif 000086
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化８５】
2018516851.tif 000087
は、カルボニルとの結合である。
【０１２５】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化８６】
2018516851.tif 000088
であり、
ここで、各々のR1は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシであり、
【化８７】
2018516851.tif 000089
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化８８】
2018516851.tif 000090
は、カルボニルとの結合である。
【０１２６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化８９】
2018516851.tif 000091
であり;
【化９０】
2018516851.tif 000092
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化９１】
2018516851.tif 000093
は、カルボニルとの結合である。
【０１２７】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化９２】
2018516851.tif 000094
であり;
【化９３】
2018516851.tif 000095
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化９４】
2018516851.tif 000096
は、カルボニルとの結合である。
【０１２８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化９５】
2018516851.tif 000097
であり;
【化９６】
2018516851.tif 000098
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化９７】
2018516851.tif 000099
は、カルボニルとの結合である。
【０１２９】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化９８】
2018516851.tif 000100
であり;
【化９９】
2018516851.tif 000101
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１００】
2018516851.tif 000102
は、カルボニルとの結合である。
【０１３０】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１０１】
2018516851.tif 000103
であり;
【化１０２】
2018516851.tif 000104
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１０３】
2018516851.tif 000105
は、カルボニルとの結合である。
【０１３１】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１０４】
2018516851.tif 000106
であり;
【化１０５】
2018516851.tif 000107
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１０６】
2018516851.tif 000108
は、カルボニルとの結合である。
【０１３２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１０７】
2018516851.tif 000109
であり;
【化１０８】
2018516851.tif 000110
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１０９】
2018516851.tif 000111
は、カルボニルとの結合である。
【０１３３】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１１０】
2018516851.tif 000112
である。
【０１３４】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１１１】
2018516851.tif 000113
である。
【０１３５】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１１２】
2018516851.tif 000114
である。
【０１３６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１１３】
2018516851.tif 000115
であり、
ここで:
【化１１４】
2018516851.tif 000116
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１１５】
2018516851.tif 000117
は、カルボニルとの結合である。
【０１３７】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１１６】
2018516851.tif 000118
であり、
ここで:
【化１１７】
2018516851.tif 000119
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１１８】
2018516851.tif 000120
は、カルボニルとの結合である。
【０１３８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１１９】
2018516851.tif 000121
であり、
ここで:
【化１２０】
2018516851.tif 000122
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１２１】
2018516851.tif 000123
は、カルボニルとの結合である。
【０１３９】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１２２】
2018516851.tif 000124
であり、
ここで:
【化１２３】
2018516851.tif 000125
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１２４】
2018516851.tif 000126
は、カルボニルとの結合である。
【０１４０】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１２５】
2018516851.tif 000127
である。
【０１４１】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１２６】
2018516851.tif 000128
であり、
ここで、nは、0、1、2、又は3である。
【０１４２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１２７】
2018516851.tif 000129
であり、
ここで:
R1は、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、ハロ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、C1-6ヘテロアルキルであり;かつ
nは、0、1、2、3、又は4である。
【０１４３】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１２８】
2018516851.tif 000130
である。
【０１４４】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１２９】
2018516851.tif 000131
である。
【０１４５】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１３０】
2018516851.tif 000132
であり、
ここで:
Xは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアルキルである。いくつかの実施態様において、Xは、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、ジメチルアミノ、メチルアミノ、メトキシ、エトキシ、又はトリフルオロメチルである。
【０１４６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１３１】
2018516851.tif 000133
であり、
ここで:
Xは、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアルキルである。いくつかの実施態様において、Xは、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、ジメチルアミノ、メチルアミノ、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメチル、又はメトキシであり;
【化１３２】
2018516851.tif 000134
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化１３３】
2018516851.tif 000135
は、カルボニルとの結合である。
【０１４７】
(2.リンカー)
本明細書に記載されるコンジュゲートのリンカー部分は、結合剤を本明細書に記載されるメイタンシノイド誘導体と共有結合させる二価部分である。好適なリンカーとしては、酵素の存在下、又は特定のpH範囲もしくは値で、メイタンシノイド部分を遊離させるものが挙げられる。
【０１４８】
いくつかの実施態様において、リンカーは、酵素切断可能部分を含む。例示的な酵素切断可能部分としては、ペプチド結合、エステル結合、ヒドラゾン、及びジスルフィド結合が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、リンカーは、カテプシン切断可能リンカーを含む。
【０１４９】
いくつかの実施態様において、リンカーは、非切断可能部分を含む。いくつかの実施態様において、非切断可能リンカーは、
【化１３４】
2018516851.tif 000136
又はその残基である。いくつかの実施態様において、非切断可能リンカーは、
【化１３５】
2018516851.tif 000137
又はその残基である。
【０１５０】
好適なリンカーとしては、単一の結合剤、例えば、抗体の2つのシステイン残基に化学的に結合されるものも挙げられるが、これらに限定されない。そのようなリンカーは、コンジュゲーションプロセスの結果として破壊される抗体のジスルフィド結合を模倣する役割を果たすことができる。
【０１５１】
いくつかの実施態様において、リンカーは、1以上のアミノ酸を含む。好適なアミノ酸としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、リンカーは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリン、又はこれらの誘導体を含む。
【０１５２】
いくつかの実施態様において、リンカーは、バリン及びシトルリンを含む。
【０１５３】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１３６】
2018516851.tif 000138
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化１３７】
2018516851.tif 000139
は、結合剤との1以上の結合であり;
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０１５４】
スペーサーは、AA1-AA2部分を結合剤(BA)に接続する二価部分である。好適なスペーサーとしては、アルキレン又はポリエチレングリコールを含むものが挙げられるが、これらに限定されない。スペーサーの末端、すなわち、結合剤又はAA1に直接結合されるスペーサーの部分は、コンジュゲートの化学合成時に裸の抗体又はAA1をスペーサーとカップリングさせる目的で使用される反応性部分に由来する部分であることができる。
【０１５５】
いくつかの例において、好適なスペーサーとしては、1級アミン終端アルキレン又は1級アミン終端ポリエチレングリコールが挙げられるが、これらに限定されない。スペーサーの1級アミン終端は、トランスグルタミナーゼの存在下で、脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体に直接結合させることができる。
【０１５６】
いくつかの実施態様において、スペーサーは、アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、スペーサーは、C5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１３８】
2018516851.tif 000140
であり、
ここで:
【化１３９】
2018516851.tif 000141
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１５７】
いくつかの実施態様において、スペーサーは、1級アミン終端アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、スペーサーは、NH2-C5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１４０】
2018516851.tif 000142
であり、
ここで:
【化１４１】
2018516851.tif 000143
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１５８】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１４２】
2018516851.tif 000144
であり、
ここで:
【化１４３】
2018516851.tif 000145
は、結合剤との結合である。
【０１５９】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１４４】
2018516851.tif 000146
であり、
ここで:
【化１４５】
2018516851.tif 000147
は、結合剤との結合である。
【０１６０】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１４６】
2018516851.tif 000148
であり、
ここで:
RNは、水素原子又はアルキルであり;
RMは、アルキルであり;
【化１４７】
2018516851.tif 000149
によって表される2つの結合は、結合剤のシステインとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１６１】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１４８】
2018516851.tif 000150
であり、
ここで:
【化１４９】
2018516851.tif 000151
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１６２】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１５０】
2018516851.tif 000152
であり、
ここで:
【化１５１】
2018516851.tif 000153
は、結合剤との結合であり;かつ
gは、2〜20の整数である。いくつかの実施態様において、gは、2〜8である。いくつかの実施態様において、gは、2、4、6、又は8である。
【０１６３】
いくつかの実施態様において、スペーサーは、
【化１５２】
2018516851.tif 000154
であり、ここで、nは、4〜10の整数である。いくつかの実施態様において、nは、4、5、6、7、8、9、又は10である。
【０１６４】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１５３】
2018516851.tif 000155
である。
【０１６５】
いくつかの実施態様において、スペーサーは、
【化１５４】
2018516851.tif 000156
であり、ここで、nは、4〜10の整数である。いくつかの実施態様において、nは、4、5、6、7、8、9、又は10である。
【０１６６】
いくつかの実施態様において、スペーサーは、
【化１５５】
2018516851.tif 000157
である。
【０１６７】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１５６】
2018516851.tif 000158
である。
【０１６８】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１５７】
2018516851.tif 000159
である。
【０１６９】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１５８】
2018516851.tif 000160
である。
【０１７０】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１５９】
2018516851.tif 000161
である。
【０１７１】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１６０】
2018516851.tif 000162
である。
【０１７２】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１６１】
2018516851.tif 000163
である。
【０１７３】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１６２】
2018516851.tif 000164
である。
【０１７４】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化１６３】
2018516851.tif 000165
である。
【０１７５】
ここで、
【化１６４】
2018516851.tif 000166
は、結合剤との結合であり;
Xは、N又はOであり; RN及びRMは、各々独立に、水素又はアルキルであり;かつbは、1〜8の整数である。
【０１７６】
いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである。
【０１７７】
いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリン又はシトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリンである。
【０１７８】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１６５】
2018516851.tif 000167
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化１６６】
2018516851.tif 000168
は、結合剤との1以上の結合であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2は、アミノ酸側鎖である。
【０１７９】
本明細書で使用される場合、「アミノ酸側鎖」は、天然及び非天然アミノ酸を含む、α-アミノ酸のα-炭素に結合した一価非水素置換基を指す。例示的なアミノ酸側鎖としては、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、及びシトルリンのα-炭素置換基が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８０】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１６７】
2018516851.tif 000169
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;かつ
【化１６８】
2018516851.tif 000170
は、結合剤との1以上の結合である。
【０１８１】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１６９】
2018516851.tif 000171
であり、
ここで:
【化１７０】
2018516851.tif 000172
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１８２】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１７１】
2018516851.tif 000173
であり、
ここで:
【化１７２】
2018516851.tif 000174
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１８３】
いくつかの実施態様において、BAは抗体であり、かつリンカーは:
【化１７３】
2018516851.tif 000175
であり、
ここで:
【化１７４】
2018516851.tif 000176
によって表される2つの結合は、該抗体のシステインとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１８４】
いくつかの実施態様において、BAは抗体であり、かつリンカーは:
【化１７５】
2018516851.tif 000177
であり、
ここで:
【化１７６】
2018516851.tif 000178
によって表される2つの結合は、該抗体のシステインとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１８５】
いくつかの実施態様において、BAは抗体であり、かつリンカーは:
【化１７７】
2018516851.tif 000179
であり、
ここで:
RNは、水素原子又はアルキルであり;
RMは、アルキルであり;
【化１７８】
2018516851.tif 000180
によって表される2つの結合は、該抗体のシステインとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１８６】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１７９】
2018516851.tif 000181
であり、
ここで:
【化１８０】
2018516851.tif 000182
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０１８７】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１８１】
2018516851.tif 000183
であり、
ここで:
【化１８２】
2018516851.tif 000184
は、結合剤との結合であり;かつ
gは、2〜20の整数である。いくつかの実施態様において、gは、2〜8である。いくつかの実施態様において、gは、2、4、6、又は8である。
【０１８８】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１８３】
2018516851.tif 000185
である。
【０１８９】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１８４】
2018516851.tif 000186
である。
【０１９０】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１８５】
2018516851.tif 000187
である。
【０１９１】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１８６】
2018516851.tif 000188
である。
【０１９２】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１８７】
2018516851.tif 000189
である。
【０１９３】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１８８】
2018516851.tif 000190
である。
【０１９４】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１８９】
2018516851.tif 000191
である。
【０１９５】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化１９０】
2018516851.tif 000192
である。
【０１９６】
(3.結合剤)
好適な結合剤としては、抗体、リンホカイン、ホルモン、成長因子、ウイルス受容体、インターロイキン、又は任意の他の細胞結合性もしくはペプチド結合性の分子もしくは物質が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１９７】
いくつかの実施態様において、結合剤は抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片(Fab、Fab'、及びF(ab)2、ミニボディ、ダイアボディ、トリボディなど)、又は二重特異性抗体である。本明細書における抗体は、各々引用により完全に組み込まれる、米国特許第6,596,541号及び米国公開第2012/0096572号に記載されている方法を用いてヒト化することができる。
【０１９８】
結合剤が抗体である場合、それは、ポリペプチドであり、かつグリコシル化又はリン酸化されている可能性がある膜貫通分子(例えば、受容体)又は成長因子であり得る、抗原結合パートナーに結合する。例示的な抗原としては、レニンなどの分子;ヒト成長ホルモン及びウシ成長ホルモンを含む成長ホルモン;成長ホルモン放出因子;副甲状腺ホルモン;甲状腺刺激ホルモン;リポタンパク質;α1-アンチトリプシン;インスリンA鎖;インスリンB鎖;プロインスリン;濾胞刺激ホルモン;カルシトニン;黄体形成ホルモン;グルカゴン;凝固因子、例えば、vmc因子、IX因子、組織因子(TF)、及びフォンビルブランド因子;抗凝固因子、例えば、プロテインC;心房性ナトリウム利尿因子;肺サーファクタント;プラスミノゲン活性化因子、例えば、ウロキナーゼ又はヒト尿もしくは組織型プラスミノゲン活性化因子(t-PA);ボンベシン;トロンビン;造血成長因子;腫瘍壊死因子-α及び-β;エンケファリナーゼ; RANTES(活性化時に調節される、正常T細胞による発現及び分泌);ヒトマクロファージ炎症性タンパク質(MlP-I-α);血清アルブミン、例えば、ヒト血清アルブミン;ミュラー管(Muellerian)阻害物質;リラクシンA鎖;リラクシンB鎖;プロリラクシン;マウスゴナドトロピン関連ペプチド;微生物タンパク質、例えば、βラクタマーゼ; DNアーゼ; 19E;細胞傷害性Tリンパ球関連抗原(CTLA)、例えば、CTLA-4;インヒビン;アクチビン;血管内皮成長因子(VEGF);ホルモン又は成長因子の受容体;プロテインA又はD;リウマトイド因子;神経栄養因子、例えば、骨由来神経栄養因子(BDNF)、ニューロトロフィン-3、-4、-5、もしくは-6(NT-3、NT4、NT-5、もしくはNT-6)、又は神経成長因子、例えば、NGF-β;血小板由来成長因子(PDGF);線維芽細胞成長因子、例えば、aFGF及びbFGF;線維芽細胞成長因子受容体2(FGFR2)、上皮成長因子(EGF);形質転換成長因子(TGF)、例えば、TGF-α及びTGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-β4、又はTGF-β5を含むTGF-β;インスリン様成長因子-I及び-II(IGF-I及びIGF-II); des(I-3)-IGF-1(脳IGF-1)、インスリン様成長因子結合タンパク質、EpCAM、GD3、FLT3、PSMA、PSCA、MUC1、MUC16、STEAP、CEA、TENB2、EphA受容体、EphB受容体、葉酸受容体、FOLRI、メソテリン、クリプト、αvβ6、インテグリン、VEGF、VEGFR、EGFR、トランスフェリン受容体、IRTA1、IRTA2、IRTA3、IRTA4、IRTA5; CDタンパク質、例えば、CD2、CD3、CD4、CD5、CD6、CD8、CD11、CD14、CD19、CD20、CD21、CD22、CD25、CD26、CD28、CD30、CD33、CD36、CD37、CD38、CD40、CD44、CD52、CD55、CD56、CD59、CD70、CD79、CD80、CD81、CD103、CD105、CD134、CD137、CD138、CD152、又は米国公開第2008/0171040号もしくは米国公開第2008/0305044号に開示されており、かつ引用により完全に開示されている1以上の腫瘍関連抗原もしくは細胞表面受容体に結合する抗体;エリスロポエチン;骨誘導因子;免疫毒素;骨形成タンパク質(BMP);インターフェロン、例えば、インターフェロン-α、-β、及び-γ;コロニー刺激因子(CSF)、例えば、M-CSF、GM-CSF、及びG-CSF;インターロイキン(IL)、例えば、IL-1〜IL-10;スーパーオキシドジスムターゼ; T細胞受容体;表面膜タンパク質;崩壊促進因子;例えば、HIVエンベロープの部分などのウイルス抗原;輸送タンパク質;ホーミング受容体;アドレシン;調節タンパク質;インテグリン、例えば、CD11a、CD11b、CD11c、CD18、ICAM、VLA-4、及びVCAM;腫瘍関連抗原、例えば、AFP、ALK、B7H4、BAGEタンパク質、β-カテニン、brc-abl、BRCA1、BORIS、CA9(カルボニックアンンヒドラーゼIX)、カスパーゼ-8、CD20、CD40、CD123、CDK4、CEA、CLEC12A、c-kit、cMET、CTLA4、サイクリン-B1、CYP1B1、EGFR、EGFRvIII、エンドグリン、Epcam、EphA2、ErbB2/Her2、ErbB3/Her3、ErbB4/Her4、ETV6-AML、Fra-1、FOLR1、GAGEタンパク質(例えば、GAGE-1、-2)、GD2、GD3、グロボH、グリピカン-3、GM3、gp100、Her2、HLA/B-raf、HLA/EBNA1、HLA/k-ras、HLA/MAGE-A3、hTERT、IGF1R、LGR5、LMP2、MAGEタンパク質(例えば、MAGE-1、-2、-3、-4、-6、及び-12)、MART-1、メソテリン、ML-IAP、Muc1、Muc16(CA-125)、MUM1、NA17、NGEP、NY-BR1、NY-BR62、NY-BR85、NY-ESO1、OX40、p15、p53、PAP、PAX3、PAX5、PCTA-1、PDGFR-α、PDGFR-β、PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D、PLAC1、PRLR、PRAME、PSCA、PSGR、PSMA(FOLH1)、RAGEタンパク質、Ras、RGS5、Rho、SART-1、SART-3、Steap-1、Steap-2、STn、サバイビン、TAG-72、TGF-β、TMPRSS2、Tn、TNFRSF17、TRP-1、TRP-2、チロシナーゼ、及びウロプラキン-3、並びに上記のポリペプチドのいずれかの断片が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１９９】
例示的な抗原としては、BCMA、SLAMF7、B7H4、GPNMB、UPK3A、及びLGR5も挙げられるが、これらに限定されない。
【０２００】
いくつかの実施態様において、抗原としては、プロラクチン受容体(PRLR)又は前立腺特異的膜抗原(PSMA)が挙げられる。
【０２０１】
結合剤としては、アンキリンリピートタンパク質、インターフェロン、リンホカイン、例えば、IL-2又はIL-3、ホルモン様インスリン及びグルココルチコイド、成長因子、例えば、EGF、トランスフェリン、並びにフィブロネクチンタイプIIIも挙げられるが、これらに限定されない。
【０２０２】
いくつかの実施態様において、結合剤は、腫瘍のタイプに特異的な抗原又は特定のタイプの腫瘍上で共有されるか、過剰発現されるか、もしくは修飾される抗原を含む、腫瘍抗原と相互作用するか又は結合する。例としては:肺癌に関するα-アクチニン-4、メラノーマに関するARTC1、慢性骨髄性白血病に関するBCR-ABL融合タンパク質、メラノーマに関するB-RAF、CLPP、又はCdc27、扁平上皮細胞癌に関するCASP-8、及び腎細胞癌に関するhsp70-2、並びに以下の共通の腫瘍特異的抗原、例えば: BAGE-1、GAGE、GnTV、KK-LC-1、MAGE-A2、NA88-A、TRP2-INT2が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２０３】
いくつかの実施態様において、結合剤は、抗体である。いくつかの実施態様において、結合剤は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施態様において、結合剤は、ポリクローナル抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、抗PSMA、抗MUC16、もしくは抗EGFRvIII、又は抗STEAP-2抗体である。
【０２０４】
リンカーは、抗体又は抗原結合分子内の特定のアミノ酸での結合を介して、結合剤、例えば、抗体又は抗原結合分子に結合させることができる。本開示のこの態様との関連で使用することができる例示的なアミノ酸結合としては、例えば、リジン(例えば、US 5,208,020号; US 2010/0129314号; Hollanderらの文献、Bioconjugate Chem., 2008, 19:358-361; WO 2005/089808号; US 5,714,586号; US 2013/0101546号;及びUS 2012/0585592号を参照)、システイン(例えば、US 2007/0258987号; WO 2013/055993号; WO 2013/055990号; WO 2013/053873号; WO 2013/053872号; WO 2011/130598号; US 2013/0101546号;及びUS 7,750,116号を参照)、セレノシステイン(例えば、WO 2008/122039号;及びHoferらの文献、Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2008, 105:12451-12456を参照)、ホルミルグリシン(例えば、Carricoらの文献、Nat. Chem. Biol., 2007, 3:321-322; Agarwalらの文献、Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 2013, 110:46-51、及びRabukaらの文献、Nat. Protocols, 2012, 10:1052-1067を参照)、非天然アミノ酸(例えば、WO 2013/068874号及びWO 2012/166559号を参照)、並びに酸性アミノ酸(例えば、WO 2012/05982号を参照)が挙げられる。リンカーは、トランスグルタミナーゼベースの化学酵素コンジュゲーションにより、グルタミンを介してコンジュゲートすることができる(例えば、Dennlerらの文献、Bioconjugate Chem. 2014, 25, 569-578を参照)。リンカーは、炭水化物(例えば、US 2008/0305497号、WO 2014/065661、及びRyanらの文献、Food & Agriculture Immunol., 2001, 13:127-130を参照)並びにジスルフィドリンカー(例えば、WO 2013/085925号、WO 2010/010324号、WO 2011/018611号、WO 2014/197854号、及びShaunakらの文献、Nat. Chem. Biol., 2006, 2:312-313を参照)との結合を介して抗原結合タンパク質にコンジュゲートすることもできる。
【０２０５】
いくつかの実施態様において、結合剤は抗体であり、抗体は、リジン残基を介してリンカーに結合される。いくつかの実施態様において、抗体は、システイン残基を介してリンカーに結合される。
【０２０６】
(4.例示的実施態様)
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化１９１】
2018516851.tif 000193
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化１９２】
2018516851.tif 000194
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化１９３】
2018516851.tif 000195
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化１９４】
2018516851.tif 000196
は、結合剤との1以上の結合であり;
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０２０７】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化１９５】
2018516851.tif 000197
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化１９６】
2018516851.tif 000198
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化１９７】
2018516851.tif 000199
は、結合剤との1以上の結合であり;
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０２０８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化１９８】
2018516851.tif 000200
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化１９９】
2018516851.tif 000201
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２００】
2018516851.tif 000202
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化２０１】
2018516851.tif 000203
は、結合剤との1以上の結合であり;
AA1は、アミノ酸であり;かつAA2は、アミノ酸である。
【０２０９】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２０２】
2018516851.tif 000204
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２０３】
2018516851.tif 000205
であり、
ここで:
SPは:
【化２０４】
2018516851.tif 000206
であり、
ここで:
【化２０５】
2018516851.tif 000207
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数であり;かつ
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０２１０】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２０６】
2018516851.tif 000208
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化２０７】
2018516851.tif 000209
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２０８】
2018516851.tif 000210
であり、
ここで:
SPは:
【化２０９】
2018516851.tif 000211
であり、
ここで:
【化２１０】
2018516851.tif 000212
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数であり;かつ
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０２１１】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２１１】
2018516851.tif 000213
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２１２】
2018516851.tif 000214
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化２１３】
2018516851.tif 000215
は、結合剤との1以上の結合であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2は、アミノ酸側鎖である。
【０２１２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２１４】
2018516851.tif 000216
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化２１５】
2018516851.tif 000217
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり、nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２１６】
2018516851.tif 000218
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化２１７】
2018516851.tif 000219
は、結合剤との1以上の結合であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2は、アミノ酸側鎖である。
【０２１３】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２１８】
2018516851.tif 000220
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２１９】
2018516851.tif 000221
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;かつ
【化２２０】
2018516851.tif 000222
は、結合剤との1以上の結合である。
【０２１４】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２２１】
2018516851.tif 000223
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２２２】
2018516851.tif 000224
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２２３】
2018516851.tif 000225
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;かつ
【化２２４】
2018516851.tif 000226
は、結合剤との1以上の結合である。
【０２１５】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２２５】
2018516851.tif 000227
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２２６】
2018516851.tif 000228
であり、
ここで:
SPは:
【化２２７】
2018516851.tif 000229
であり、
ここで:
【化２２８】
2018516851.tif 000230
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２１６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２２９】
2018516851.tif 000231
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化２３０】
2018516851.tif 000232
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２３１】
2018516851.tif 000233
であり、
ここで:
SPは:
【化２３２】
2018516851.tif 000234
であり、
ここで:
【化２３３】
2018516851.tif 000235
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２１７】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２３４】
2018516851.tif 000236
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロであり;かつ
n、m、p、及びqは、0、1、又は2であり;かつ
Lは、
【化２３５】
2018516851.tif 000237
であり、
ここで:
【化２３６】
2018516851.tif 000238
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２１８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２３７】
2018516851.tif 000239
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２３８】
2018516851.tif 000240
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは、
【化２３９】
2018516851.tif 000241
であり、
ここで:
【化２４０】
2018516851.tif 000242
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２１９】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２４１】
2018516851.tif 000243
であり;
ここで、
R1は、出現する毎に独立に、C1-6ハロアルキル又はハロであり;かつ
nは、0、1、又は2であり;かつ
Lは:
【化２４２】
2018516851.tif 000244
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化２４３】
2018516851.tif 000245
は、結合剤との1以上の結合であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2は、アミノ酸側鎖である。
【０２２０】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２４４】
2018516851.tif 000246
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化２４５】
2018516851.tif 000247
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
ここで、nは、0〜4の整数であり;
Lは:
【化２４６】
2018516851.tif 000248
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化２４７】
2018516851.tif 000249
は、結合剤との1以上の結合であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2は、アミノ酸側鎖である。
【０２２１】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２４８】
2018516851.tif 000250
であり;
ここで、
R1は、出現する毎に独立に、ハロであり;かつ
nは、0、1、又は2であり;かつ
Lは:
【化２４９】
2018516851.tif 000251
であり、
ここで:
【化２５０】
2018516851.tif 000252
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２２２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２５１】
2018516851.tif 000253
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化２５２】
2018516851.tif 000254
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
Lは:
【化２５３】
2018516851.tif 000255
であり、
ここで:
【化２５４】
2018516851.tif 000256
は、結合剤との結合であり;
ここで、nは、0〜4の整数であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２２３】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２５５】
2018516851.tif 000257
であり;
ここで、
R1は、出現する毎に独立に、ハロであり;かつ
nは、0、1、又は2であり;かつ
Lは:
【化２５６】
2018516851.tif 000258
であり、
ここで、
【化２５７】
2018516851.tif 000259
は、結合剤との結合である。
【０２２４】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２５８】
2018516851.tif 000260
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化２５９】
2018516851.tif 000261
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
ここで、nは、0〜4の整数であり;
Lは:
【化２６０】
2018516851.tif 000262
であり、
ここで、
【化２６１】
2018516851.tif 000263
は、結合剤との結合である。
【０２２５】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２６２】
2018516851.tif 000264
であり;かつ
Lは、
【化２６３】
2018516851.tif 000265
である。
【０２２６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２６４】
2018516851.tif 000266
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はハロアルコキシであり;
【化２６５】
2018516851.tif 000267
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化２６６】
2018516851.tif 000268
は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R1は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。
【０２２７】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２６７】
2018516851.tif 000269
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、水素原子、アルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシであり;
【化２６８】
2018516851.tif 000270
は、窒素原子との結合であり;かつ
【化２６９】
2018516851.tif 000271
は、カルボニルとの結合である。いくつかの実施態様において、R1は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。
【０２２８】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２７０】
2018516851.tif 000272
であり;かつ
Lは、
【化２７１】
2018516851.tif 000273
である。
【０２２９】
いくつかの実施態様において、
BAは、抗体であり、
Aは:
【化２７２】
2018516851.tif 000274
であり;
ここで、
R1は、出現する毎に独立に、ハロであり;かつ
nは、0、1、又は2であり;かつ
Lは:
【化２７３】
2018516851.tif 000275
であり、
ここで、
【化２７４】
2018516851.tif 000276
は、結合剤との結合である。
【０２３０】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２７５】
2018516851.tif 000277
であり;
ここで、
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２７６】
2018516851.tif 000278
又はアジドであり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２７７】
2018516851.tif 000279
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化２７８】
2018516851.tif 000280
は、結合剤との1以上の結合であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2は、アミノ酸側鎖である。
【０２３１】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２７９】
2018516851.tif 000281
であり;
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２８０】
2018516851.tif 000282
又はアジドであり;
ここで、qは、0〜5の整数であり;
Lは:
【化２８１】
2018516851.tif 000283
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化２８２】
2018516851.tif 000284
は、結合剤との1以上の結合であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2は、アミノ酸側鎖である。
【０２３２】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２８３】
2018516851.tif 000285
であり;
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２８４】
2018516851.tif 000286
又はアジドであり;
ここで、qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２８５】
2018516851.tif 000287
であり、
ここで:
【化２８６】
2018516851.tif 000288
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２３３】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２８７】
2018516851.tif 000289
であり;
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２８８】
2018516851.tif 000290
又はアジドであり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
Lは:
【化２８９】
2018516851.tif 000291
であり、
ここで、
【化２９０】
2018516851.tif 000292
は、結合剤との結合である。
【０２３４】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化２９１】
2018516851.tif 000293
であり;
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化２９２】
2018516851.tif 000294
又はアジドであり;
ここで、qは、0〜5の整数である;
Lは:
【化２９３】
2018516851.tif 000295
であり、
ここで、
【化２９４】
2018516851.tif 000296
は、結合剤との結合である。
【０２３５】
いくつかの実施態様において、
Aは:
【化２９５】
2018516851.tif 000297
であり;かつ
Lは、
【化２９６】
2018516851.tif 000298
である。
【０２３６】
いくつかの実施態様において、式Iの化合物は:
【化２９７】
2018516851.tif 000299
であり、式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、L1及びL2はリンカーであり、BAは結合剤であり、kは、0〜30の整数であり、かつtは、0〜8の整数である。これらの実施態様のいくつかにおいて、L1は、リジン残基を介してBAに結合するリンカーである。これらの実施態様のいくつかにおいて、下付き文字kは、BA上のリジン残基を介してBAに結合しているリンカーL1の数を表す。これらの実施態様のいくつかにおいて、L2は、システイン残基を介してBAに結合するリンカーである。これらの実施態様のいくつかにおいて、下付き文字tは、BA上のシステイン残基を介してBAに結合しているリンカーL2の数を表す。いくつかの実施態様において、リンカーL2が単座リンカーであるとき、tは、0〜8の整数である。いくつかの実施態様において、リンカーL2が二座リンカーであるとき、tは、0〜4の整数である。これらの例のいくつかにおいて、k＋tの合計は、1〜8に等しい。
【０２３７】
いくつかの実施態様において、式Iの化合物は:
【化２９８】
2018516851.tif 000300
であり、ここで、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、L1及びL2はリンカーであり、かつBAは結合剤である。これらの実施態様のいくつかにおいて、L1は、リジン残基を介してBAに結合するリンカーである。これらの実施態様のいくつかにおいて、L2は、システイン残基を介してBAに結合するリンカーである。
【０２３８】
いくつかの実施態様において、式Iの化合物は:
【化２９９】
2018516851.tif 000301
であり、ここで、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、L1及びL2はリンカーであり、かつBAは結合剤である。これらの実施態様のいくつかにおいて、L1は、リジン残基を介してBAに結合するリンカーである。これらの実施態様のいくつかにおいて、L2は、システイン残基を介してBAに結合するリンカーである。
【０２３９】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３００】
2018516851.tif 000302
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化３０１】
2018516851.tif 000303
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【０２４０】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化３０２】
2018516851.tif 000304
であり、
ここで:
SPは、スペーサーであり;
【化３０３】
2018516851.tif 000305
は、結合剤との1以上の結合であり;
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０２４１】
スペーサーは、AA1-AA2部分を結合剤(BA)に接続する二価部分である。好適なスペーサーとしては、アルキレン又はポリエチレングリコールを含むものが挙げられるが、これらに限定されない。スペーサーの末端、すなわち、結合剤又はAA1に直接結合されるスペーサーの部分は、コンジュゲートの化学合成時に、抗体又はAA1をスペーサーにカップリングさせる目的で使用される反応性部分に由来する部分であることができる。
【０２４２】
いくつかの実施態様において、スペーサーは、アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、スペーサーは、C5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３０４】
2018516851.tif 000306
であり、
ここで:
【化３０５】
2018516851.tif 000307
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２４３】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３０６】
2018516851.tif 000308
であり、
ここで:
【化３０７】
2018516851.tif 000309
は、結合剤との結合である。
【０２４４】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３０８】
2018516851.tif 000310
であり、
ここで:
RNは、水素原子又はアルキルであり;
RMは、アルキルであり;
【化３０９】
2018516851.tif 000311
によって表される2つの結合は、結合剤のシステインとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２４５】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３１０】
2018516851.tif 000312
であり、
ここで:
【化３１１】
2018516851.tif 000313
は、結合剤との結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０２４６】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３１２】
2018516851.tif 000314
であり、
ここで:
【化３１３】
2018516851.tif 000315
は、結合剤との結合であり;かつ
gは、2〜20の整数である。いくつかの実施態様において、gは、2〜8である。いくつかの実施態様において、gは、2、4、6、又は8である。
【０２４７】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３１４】
2018516851.tif 000316
である。
【０２４８】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３１５】
2018516851.tif 000317
である。
【０２４９】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３１６】
2018516851.tif 000318
である。
【０２５０】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３１７】
2018516851.tif 000319
である。
【０２５１】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３１８】
2018516851.tif 000320
である。
【０２５２】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３１９】
2018516851.tif 000321
である。
【０２５３】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３２０】
2018516851.tif 000322
である。
【０２５４】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３２１】
2018516851.tif 000323
である。
【０２５５】
いくつかの実施態様において、スペーサーは:
【化３２２】
2018516851.tif 000324
である。
【０２５６】
ここで、
【化３２３】
2018516851.tif 000325
は、結合剤との結合であり;
Xは、N又はOであり; RN及びRMは、各々独立に、水素又はアルキルであり;かつbは、1〜8の整数である。
【０２５７】
いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである。
【０２５８】
いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリン又はシトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリンである。
【０２５９】
いくつかの実施態様において、式Iの化合物は:
【化３２４】
2018516851.tif 000326
であり、
式中、Xは、N又はOであり、
RN及びRMは、各々独立に、水素又はアリールであり、
bは、1〜8の整数であり、
Aは、アリール又はヘテロアリールであり、かつ
tは、1〜8の整数である。
【０２６０】
いくつかの実施態様において、式Iの化合物は以下である:
【化３２５】
2018516851.tif 000327
2018516851.tif 000328
2018516851.tif 000329
2018516851.tif 000330
2018516851.tif 000331
2018516851.tif 000332
2018516851.tif 000333
2018516851.tif 000334
2018516851.tif 000335
2018516851.tif 000336
2018516851.tif 000337
2018516851.tif 000338
2018516851.tif 000339
2018516851.tif 000340
2018516851.tif 000341
2018516851.tif 000342
2018516851.tif 000343
2018516851.tif 000344
2018516851.tif 000345
2018516851.tif 000346
2018516851.tif 000347
2018516851.tif 000348
2018516851.tif 000349
2018516851.tif 000350
2018516851.tif 000351
2018516851.tif 000352
2018516851.tif 000353
2018516851.tif 000354
2018516851.tif 000355
2018516851.tif 000356
2018516851.tif 000357
2018516851.tif 000358
2018516851.tif 000359
2018516851.tif 000360
2018516851.tif 000361
2018516851.tif 000362
2018516851.tif 000363
2018516851.tif 000364
2018516851.tif 000365
2018516851.tif 000366
2018516851.tif 000367
2018516851.tif 000368
2018516851.tif 000369
2018516851.tif 000370
2018516851.tif 000371
2018516851.tif 000372
式中:
Abは、抗体であり;
【化３２６】
2018516851.tif 000373
は、該抗体のシステインとの結合であり;
【化３２７】
2018516851.tif 000374
は、該抗体のリジンとの結合であり;
kは、1〜30の整数であり;かつ
tは、1〜8の整数である。いくつかの例において、kは、1〜8の整数である。いくつかの例において、tは、1〜4の整数である。いくつかの例において、
【化３２８】
2018516851.tif 000375
が抗体のシステインとの結合であるとき、本明細書に示される最大8種のコンジュゲートを抗体に結合させることができる。いくつかの例において、
【化３２９】
2018516851.tif 000376
が抗体のリジンとの結合であるとき、本明細書に示される最大30種のコンジュゲートを抗体に結合させることができる。
【０２６１】
いくつかの実施態様において、式Iの化合物は以下である:
【化３３０】
2018516851.tif 000377
2018516851.tif 000378
。
【０２６２】
いくつかの実施態様において、kは、1〜30の整数である。いくつかの実施態様において、kは、1〜8の整数である。いくつかの実施態様において、kは、1〜6の整数である。いくつかの実施態様において、kは、1〜4の整数である。いくつかの実施態様において、kは、1〜3の整数である。いくつかの実施態様において、コンジュゲートの薬物-抗体比(DAR)は、1.0〜3.0である。
【０２６３】
(C.メイタンシノイド誘導体)
本明細書に提供されるのは、式(II)の化合物又はその医薬として許容し得る塩である:
【化３３１】
2018516851.tif 000379
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
【０２６４】
ある実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートのペイロード部分を表し、細胞内へのコンジュゲートの内在化の後、例えば、酵素によるタンパク質分解によって放出される。本明細書に提供される方法は、増殖性疾患、例えば、癌を治療する方法であって、患者に、該患者の細胞内への該コンジュゲートの内在化の後、式(II)の化合物を放出するコンジュゲート、例えば、抗体-薬物コンジュゲートの治療有効量を投与することを含む、方法を含む。
【０２６５】
いくつかの実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートの代謝産物、例えば、酵素によるタンパク質分解産物を表す。いくつかの実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートの異化産物を表す。いくつかの実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートの細胞産物を表す。
【０２６６】
いくつかの実施態様において、Aは、任意に置換されている、ベンゼン、ピリジン、ナフタレン、又はキノロンの二価ラジカルである。
【０２６７】
いくつかの実施態様において、Aは、アリーレンである。
【０２６８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３３２】
2018516851.tif 000380
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化３３３】
2018516851.tif 000381
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【０２６９】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIA)の化合物:
【化３３４】
2018516851.tif 000382
であり、式中、R1及びnは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７０】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB)の化合物:
【化３３５】
2018516851.tif 000383
であり、式中、R1及びqは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７１】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB2)の化合物:
【化３３６】
2018516851.tif 000384
であり、式中、R1及びqは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７２】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB3)の化合物:
【化３３７】
2018516851.tif 000385
であり、式中、R1及びqは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７３】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIC)の化合物:
【化３３８】
2018516851.tif 000386
であり、式中、R1及びqは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７４】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IID)の化合物:
【化３３９】
2018516851.tif 000387
であり、式中、R1及びqは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７５】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIE)の化合物:
【化３４０】
2018516851.tif 000388
であり、式中、R1及びqは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７６】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIF)の化合物:
【化３４１】
2018516851.tif 000389
であり、式中、R1及びqは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７７】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIG)の化合物:
【化３４２】
2018516851.tif 000390
であり、式中、R1及びqは、本明細書に定義されている通りである。
【０２７８】
いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルキル又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6ハロアルキル又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、ハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、又はトリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。
【０２７９】
いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルキル、アルコキシ、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル又はC1-6アルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、メトキシ、エトキシ、プロポキシである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIA)の化合物:
【化３４３】
2018516851.tif 000391
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。
【０２８０】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB)の化合物:
【化３４４】
2018516851.tif 000392
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
qは、0、1、又は2である。
【０２８１】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は:
【化３４５】
2018516851.tif 000393
である。
【０２８２】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、
【化３４６】
2018516851.tif 000394
から選択される化合物である。
【０２８３】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は:
【化３４７】
2018516851.tif 000395
である。
【０２８４】
ある実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートのペイロード部分を表し、細胞内へのコンジュゲートの内在化の後、例えば、酵素によるタンパク質分解によって放出される。本明細書に提供される方法は、増殖性疾患、例えば、癌を治療する方法であって、患者に、該患者の細胞内への該コンジュゲートの内在化の後、式(II)の化合物を放出するコンジュゲート、例えば、抗体-薬物コンジュゲートの治療有効量を投与することを含む、方法を含む。
【０２８５】
いくつかの実施態様において、これらの化合物は、本明細書に記載されるコンジュゲートの代謝産物、例えば、酵素によるタンパク質分解産物を表す。
【０２８６】
いくつかの実施態様において、Aは、任意に置換されている、ベンゼン、ピリジン、ナフタレン、又はキノロンの二価ラジカルである。
【０２８７】
いくつかの実施態様において、Aは、アリーレンである。
【０２８８】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化３４８】
2018516851.tif 000396
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化３４９】
2018516851.tif 000397
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【０２８９】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIA)の化合物:
【化３５０】
2018516851.tif 000398
であり、式中、R1は、出現する毎に独立に、メトキシ、ハロ、又はトリフルオロメチルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。
【０２９０】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB)の化合物:
【化３５１】
2018516851.tif 000399
であり、式中、R1は、出現する毎に独立に、メトキシ、ハロ、又はトリフルオロメチルであり;かつqは、0、1、又は2である。
【０２９１】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB2)の化合物:
【化３５２】
2018516851.tif 000400
であり、式中、R1は、出現する毎に独立に、メトキシ、ハロ、又はトリフルオロメチルであり;かつqは、0、1、又は2である。
【０２９２】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIB3)の化合物:
【化３５３】
2018516851.tif 000401
である。
【０２９３】
式中、R1は、出現する毎に独立に、メトキシ、ハロ、又はトリフルオロメチルであり;かつqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルキル又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6ハロアルキル又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、ハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、又はトリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。
【０２９４】
いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルキル、アルコキシ、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル又はC1-6アルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、メトキシ、エトキシ、プロポキシである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。
【０２９５】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は:
【化３５４】
2018516851.tif 000402
である。
【０２９６】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、式(IIH)の化合物:
【化３５５】
2018516851.tif 000403
であり、式中、R1及びnは、本明細書に定義されている通りである。
【０２９７】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、
【化３５６】
2018516851.tif 000404
から選択される化合物である。
【０２９８】
いくつかの実施態様において、式(II)の化合物は、
【化３５７】
2018516851.tif 000405
から選択される化合物である。
【０２９９】
(D.化合物の調製)
式Iの化合物は、式P1の化合物を、結合剤、例えば、抗体と、標準的なコンジュゲーション条件下でカップリングさせることにより合成することができる(例えば、引用により本明細書中に組み込まれるDoroninaらの文献、Nature Biotechnology 2003, 21, 7, 778を参照)。結合剤が抗体であるとき、該抗体は、該抗体の1以上のシステイン又はリジン残基を介して式P1の化合物にカップリングさせることができる。式P1の化合物は、例えば、抗体を、還元剤、例えば、ジチオスエリトール(dithiotheritol)にさらして、該抗体のジスルフィド結合を切断し、還元された抗体を、例えば、ゲル濾過によって精製し、その後、該抗体を、反応性部分、例えば、マレイミド基を含む式P1の化合物と反応させることにより、システイン残基にカップリングさせることができる。好適な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。反応性部分、例えば、活性化エステル又は酸ハライド基を含む式P1の化合物は、リジン残基にカップリングさせることができる。好適な溶媒としては、水、DMA、DMF、及びDMSOが挙げられるが、これらに限定されない。式Iの化合物は、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、及び限外濾過/透析濾過を含む、既知のタンパク質技法を用いて精製することができる。
【化３５８】
2018516851.tif 000406
(ここで、RLは反応性リンカーであり、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり、Lはリンカーであり、かつBAは結合剤である。)
【０３００】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物はAを含み、ここで、Aは:
【化３５９】
2018516851.tif 000407
であり、ここで、nは、0又は1であり、かつR1は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。
【０３０１】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物はAを含み、ここで、Aは:
【化３６０】
2018516851.tif 000408
であり、ここで、nは、0又は1であり、かつR1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである。
【０３０２】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物はAを含み、ここで、Aは:
【化３６１】
2018516851.tif 000409
であり、ここで、nは、0又は1であり; R1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルであり;かつRLは、
【化３６２】
2018516851.tif 000410
であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつ
【化３６３】
2018516851.tif 000411
は、結合剤との結合である。
【０３０３】
反応性リンカーは、その構造中に、結合剤と反応して(例えば、そのシステイン又はリジン残基で抗体と反応して)式Iの化合物を形成させることができる部分(portion)を含む部分(moiety)である。結合剤とのコンジュゲーションの後、反応性リンカーは、式Iの化合物のリンカー(L)部分になる。例示的な反応性リンカーとしては、結合剤と反応することができるハロアセチル、イソチオシアネート、又はマレイミド部分を含むものが挙げられるが、これらに限定されない。反応性部分には、以下の構造を有する部分も含まれる:
【化３６４】
2018516851.tif 000412
(ここで、Xは、-O-又は-NH-であり、かつLGは、脱離基、例えば、Brである)。
【０３０４】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３６５】
2018516851.tif 000413
であり、
ここで:
SPRは、反応性スペーサーであり;
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０３０５】
反応性スペーサーは、結合剤と反応することができる上記の反応性リンカー部分(portion)を含み、かつこの部分(portion)をAA1に接続する部分(moiety)である。好適なスペーサーとしては、AA1を結合剤と反応することができる部分(例えば、ハロアセチル、イソチオシアネート、又はマレイミド)に接続するアルキレン又はポリエチレングリコールを含むものが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３０６】
いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは、
【化３６６】
2018516851.tif 000414
から選択される非切断可能部分を含む。
【０３０７】
ここで、
【化３６７】
2018516851.tif 000415
は、メイタンシノイド誘導体との1以上の結合を表し;かつnは、4〜10の整数である。いくつかの例において、nは、4、5、6、7、8、9、又は10である。いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは、
【化３６８】
2018516851.tif 000416
である。いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは、
【化３６９】
2018516851.tif 000417
である。
【０３０８】
いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは:
【化３７０】
2018516851.tif 000418
であり、ここで、bは、2〜8の整数である。
【０３０９】
いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは:
【化３７１】
2018516851.tif 000419
である。
【０３１０】
いくつかの実施態様において、スペーサーは、
【化３７２】
2018516851.tif 000420
である。
【０３１１】
いくつかの実施態様において、スペーサーは、
【化３７３】
2018516851.tif 000421
であり、ここで、gは、1〜24の整数である。
【０３１２】
いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは:
【化３７４】
2018516851.tif 000422
であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつgは、2〜20の整数である。
【０３１３】
いくつかの実施態様において、反応性スペーサーは:
【化３７５】
2018516851.tif 000423
である。
【０３１４】
いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリン、シトルリン-バリン、リジン-フェニルアラニン、フェニルアラニン-リジン、バリン-アスパラギン、アスパラギン-バリン、トレオニン-アスパラギン、アスパラギン-トレオニン、セリン-アスパラギン、アスパラギン-セリン、フェニルアラニン-アスパラギン、アスパラギン-フェニルアラニン、ロイシン-アスパラギン、アスパラギン-ロイシン、イソロイシン-アスパラギン、アスパラギン-イソロイシン、グリシン-アスパラギン、アスパラギン-グリシン、グルタミン酸-アスパラギン、アスパラギン-グルタミン酸、シトルリン-アスパラギン、アスパラギン-シトルリン、アラニン-アスパラギン、又はアスパラギン-アラニンである。
【０３１５】
いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリン又はシトルリン-バリンである。いくつかの実施態様において、AA1-AA2は:バリン-シトルリンである。
【０３１６】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３７６】
2018516851.tif 000424
であり、
ここで:
SPRは、反応性スペーサーであり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
RAA2は、アミノ酸側鎖である。
【０３１７】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３７７】
2018516851.tif 000425
であり、
ここで:
SPは、反応性スペーサーである。
【０３１８】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３７８】
2018516851.tif 000426
であり、ここで、bは、2〜8の整数である。
【０３１９】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３７９】
2018516851.tif 000427
であり、ここで、bは、2〜8の整数である。
【０３２０】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８０】
2018516851.tif 000428
であり、ここで、bは、2〜8の整数である。
【０３２１】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８１】
2018516851.tif 000429
であり、ここで、bは、2〜8の整数である。
【０３２２】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８２】
2018516851.tif 000430
であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、RNは、水素原子又はアルキルであり、かつRMはアルキルである。
【０３２３】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８３】
2018516851.tif 000431
であり、ここで、bは、2〜8の整数である。
【０３２４】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８４】
2018516851.tif 000432
であり、ここで、bは、2〜8の整数である。
【０３２５】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８５】
2018516851.tif 000433
であり、ここで、bは、2〜8の整数であり; RNは、水素原子又はアルキルであり;かつRMはアルキルである。
【０３２６】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８６】
2018516851.tif 000434
であり、ここで、bは、2〜8の整数である。
【０３２７】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８７】
2018516851.tif 000435
であり、ここで、gは、2〜8の整数である。
【０３２８】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８８】
2018516851.tif 000436
である。
【０３２９】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３８９】
2018516851.tif 000437
である。
【０３３０】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９０】
2018516851.tif 000438
である。
【０３３１】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９１】
2018516851.tif 000439
である。
【０３３２】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９２】
2018516851.tif 000440
である。
【０３３３】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９３】
2018516851.tif 000441
である。
【０３３４】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９４】
2018516851.tif 000442
である。
【０３３５】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９５】
2018516851.tif 000443
である。
【０３３６】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９６】
2018516851.tif 000444
である。
【０３３７】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９７】
2018516851.tif 000445
である。
【０３３８】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９８】
2018516851.tif 000446
である。
【０３３９】
いくつかの実施態様において、反応性リンカーは:
【化３９９】
2018516851.tif 000447
である。
【０３４０】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Aの化合物:
【化４００】
2018516851.tif 000448
であり、
ここで:
Aは:
【化４０１】
2018516851.tif 000449
であり、
ここで:
R1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化４０２】
2018516851.tif 000450
又はアジドであり、ここで、
RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である;
SPRは、反応性スペーサーであり;
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０３４１】
いくつかの実施態様において、式P1Aの化合物は、Aを含む化合物であり、ここで、Aは:
【化４０３】
2018516851.tif 000451
であり、ここで、nは、0又は1であり;かつR1は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。いくつかの例において、R1は、メチルスルホニル、N-メチルホルムアミド、ヒドロキシル、又はモルホリニルである。
【０３４２】
いくつかの実施態様において、式P1Aの化合物は、Aを含む化合物であり、ここで、Aは:
【化４０４】
2018516851.tif 000452
であり、ここで、nは、0又は1であり;かつR1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである。
【０３４３】
いくつかの実施態様において、式P1Aの化合物は、Aを含む化合物であり、ここで、Aは:
【化４０５】
2018516851.tif 000453
であり、qは、0〜5の整数であり;かつR1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである。
【０３４４】
いくつかの実施態様において、式P1Aの化合物は、Aを含む化合物であり、ここで、Aは:
【化４０６】
2018516851.tif 000454
であり、qは、0〜5の整数であり;かつR1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである。
【０３４５】
いくつかの実施態様において、式P1Aの化合物は、Aを含む化合物であり、ここで、Aは:
【化４０７】
2018516851.tif 000455
であり、ここで、nは、0又は1であり;かつR1は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。いくつかの例において、R1は、メチルスルホニル、N-メチルホルムアミド、ヒドロキシル、又はモルホリニルである。
【０３４６】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Bの化合物:
【化４０８】
2018516851.tif 000456
であり、
式中、
Aは:
【化４０９】
2018516851.tif 000457
であり、
ここで:
R1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化４１０】
2018516851.tif 000458
又はアジドであり、ここで、
RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数であり;かつ
SPRは、反応性スペーサーである。
【０３４７】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Cの化合物:
【化４１１】
2018516851.tif 000459
であり、
式中:
SPRは、反応性スペーサーであり;
AA1は、アミノ酸であり;
AA2は、アミノ酸であり;
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつ
nは、0、1、又は2である。
【０３４８】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Dの化合物:
【化４１２】
2018516851.tif 000460
であり、
式中:
SPRは、反応性スペーサーであり;
AA1は、アミノ酸であり;
AA2は、アミノ酸であり;
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつ
nは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、nは0である。いくつかの実施態様において、nは1である。いくつかの実施態様において、nは2である。
【０３４９】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Dの化合物であり、式中、R1は、アルコキシ、ハロ、又はハロアルキルである。いくつかの実施態様において、R1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルである。いくつかの実施態様において、nは0である。いくつかの実施態様において、nは1である。いくつかの実施態様において、nは2である。
【０３５０】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Dの化合物であり、式中、R1は、C1-6アルコキシ、ハロ、又はC1-6ハロアルキルであり;かつSPR-AA1-AA2は、
【化４１３】
2018516851.tif 000461
であり、ここで、bは、2〜8の整数であり、かつ
【化４１４】
2018516851.tif 000462
は、結合剤との結合である。いくつかの実施態様において、nは0である。いくつかの実施態様において、nは1である。いくつかの実施態様において、nは2である。いくつかの実施態様において、bは2である。いくつかの実施態様において、bは3である。いくつかの実施態様において、bは4である。いくつかの実施態様において、bは5である。いくつかの実施態様において、bは6である。いくつかの実施態様において、bは7である。いくつかの実施態様において、bは8である。
【０３５１】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Eの化合物:
【化４１５】
2018516851.tif 000463
であり、
式中:
SPRは、反応性スペーサーであり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;
RAA2は、アミノ酸側鎖であり;
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつ
nは、0、1、又は2である。
【０３５２】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Fの化合物:
【化４１６】
2018516851.tif 000464
であり、
式中:
SPRは、反応性スペーサーであり;
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつ
nは、0、1、又は2である。
【０３５３】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Gの化合物:
【化４１７】
2018516851.tif 000465
であり、
式中:
SPRは、反応性スペーサーであり;かつ
R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルである。
【０３５４】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Hの化合物:
【化４１８】
2018516851.tif 000466
であり、
式中:
R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０３５５】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Iの化合物:
【化４１９】
2018516851.tif 000467
であり、
式中:
R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０３５６】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Jの化合物:
【化４２０】
2018516851.tif 000468
であり、
式中:
R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０３５７】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Kの化合物:
【化４２１】
2018516851.tif 000469
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルである。
【０３５８】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Lの化合物:
【化４２２】
2018516851.tif 000470
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルである。
【０３５９】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Mの化合物:
【化４２３】
2018516851.tif 000471
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルである。
【０３６０】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Nの化合物:
【化４２４】
2018516851.tif 000472
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である。
【０３６１】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Oの化合物:
【化４２５】
2018516851.tif 000473
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルである。
【０３６２】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Pの化合物:
【化４２６】
2018516851.tif 000474
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である。
【０３６３】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Qの化合物:
【化４２７】
2018516851.tif 000475
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である。
【０３６４】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Rの化合物:
【化４２８】
2018516851.tif 000476
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルである。
【０３６５】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Sの化合物:
【化４２９】
2018516851.tif 000477
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルである。
【０３６６】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Tの化合物:
【化４３０】
2018516851.tif 000478
であり、式中、RNは、水素原子又はアルキルであり、RMはアルキルであり、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である。
【０３６７】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Uの化合物:
【化４３１】
2018516851.tif 000479
であり、式中、RNは、水素原子又はアルキルであり、RMはアルキルであり、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である。
【０３６８】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Vの化合物:
【化４３２】
2018516851.tif 000480
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、かつbは、2〜8の整数である。
【０３６９】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Wの化合物:
【化４３３】
2018516851.tif 000481
であり、式中、R1は、水素原子、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、又はトリフルオロメチルであり、gは、2〜20の整数であり;かつbは、2〜8の整数である。
【０３７０】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Xの化合物:
【化４３４】
2018516851.tif 000482
であり、
式中:
R1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシであり;かつbは、2〜8の整数である。いくつかの実施態様において、R1は、メチル、エチル、メトキシ、又はエトキシである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。
【０３７１】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Yの化合物:
【化４３５】
2018516851.tif 000483
であり、式中、R1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、メチル、エチル、メトキシ、又はエトキシである。これらの実施態様のいくつかにおいて、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。
【０３７２】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、式P1Zの化合物:
【化４３６】
2018516851.tif 000484
であり、式中、Rcは、アルキル又はハロアルキルから選択され、ここで、該アルキル又はハロアルキルは、線状、分岐状、又は環状である。
【０３７３】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、以下の構造のうちの１つを有する化合物である:
【化４３７】
2018516851.tif 000485
2018516851.tif 000486
2018516851.tif 000487
2018516851.tif 000488
2018516851.tif 000489
2018516851.tif 000490
2018516851.tif 000491
2018516851.tif 000492
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2018516851.tif 000494
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2018516851.tif 000498
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2018516851.tif 000500
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2018516851.tif 000511
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2018516851.tif 000513
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2018516851.tif 000518
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2018516851.tif 000540
2018516851.tif 000541
2018516851.tif 000542
2018516851.tif 000543
2018516851.tif 000544
。
【０３７４】
いくつかの実施態様において、式P1の化合物は、以下の構造のうちの1つを有する化合物である:
【化４３８】
2018516851.tif 000545
2018516851.tif 000546
。
【０３７５】
式P1の化合物は、式P2の化合物を、式P3の化合物と、アミド合成条件下で反応させることにより合成することができる。好適なアミド合成条件としては、式P2の化合物をカルボン酸活性化剤及び塩基の存在下で接触させることが挙げられるが、これに限定されない。好適な活性化剤としては、EDC、HATU、HBTU、DCC、BOP、及びEEDQが挙げられるが、これらに限定されない。好適な塩基としては、DIEA、DBU、トリブチルアミン、及び2,6-ルチジンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３７６】
式P2の化合物は、既知の技法を用いて、メイタンシノール及びアラニンから直接合成することができる(例えば、引用により本明細書中に組み込まれる米国特許第4,308,269号を参照)。
【化４３９】
2018516851.tif 000547
【０３７７】
式Iの化合物は、式PP3の化合物:
【化４４０】
2018516851.tif 000548
を、式PP4の化合物:
【化４４１】
2018516851.tif 000549
(式中:
BAは、結合剤であり;
SPは、スペーサーであり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;
RAA2は、アミノ酸側鎖であり;
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
kは、1〜10の整数である)
と、アミド合成条件下でカップリングさせることにより合成することができる。
【０３７８】
式PP3の化合物は、式PP5の化合物:
【化４４２】
2018516851.tif 000550
(式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)を好適な還元剤と接触させることにより合成することができる。
【０３７９】
いくつかの実施態様において、好適な還元剤としては、金属、金属箔、金属粉、金属アマルガム、又は金属の削り屑が挙げられる。ある実施態様において、金属は、亜鉛、鉄、アルミニウム、パラジウム、又はラネーニッケルから選択される。
【０３８０】
例えば、いくつかの実施態様において、以下の還元剤条件を利用する。化合物PP5の量に関して、例えば、本明細書における方法のいくつかにおいて、約20(20)当量の亜鉛末と40(40)当量の酢酸を合わせた。いくつかの例において、還元反応を室温で約1〜20時間実施した。これらの例のいくつかにおいて、前述の酢酸を別の好適な弱酸又はプロトン供与体と置き換える。好適な弱酸又はプロトン供与体の例としては、ギ酸、pTsOH、及びNH4Clが挙げられるが、これらに限定されない。これらの例のいくつかにおいて、還元金属を、鉄、アルミニウム、パラジウム、又はラネーニッケルから選択される好適な還元剤と置き換える。これらの例のいくつかにおいて、好適な溶媒としては、混和性有機溶媒中に(体積で)10〜50％の水を有する溶媒が挙げられる。混和性有機溶媒の例としては、THF、ジオキサン、及びジエチルエーテルが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの例において、本明細書に示される還元反応は、0〜50℃の範囲に及ぶ反応温度で実施される。いくつかの例において、本明細書に示される還元反応は、1〜40時間の範囲に及ぶ反応時間で実施される。
【０３８１】
好適な酸としては、酢酸が挙げられるが、これに限定されない。
【０３８２】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４４３】
2018516851.tif 000551
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルカリール、アラルキル、ハロ、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、
【化４４４】
2018516851.tif 000552
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【０３８３】
いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5Aの化合物:
【化４４５】
2018516851.tif 000553
であり、式中、R1及びnは、本明細書に定義されている通りである。
【０３８４】
いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルキル、アルコキシ、ヘテロアルキル、ハロ、ハロアルキル、又はハロアルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル又はC1-6アルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルコキシである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、メトキシ、エトキシ、プロポキシである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。
【０３８５】
いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5Aの化合物:
【化４４６】
2018516851.tif 000554
であり、
式中:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
nは、0、1、又は2である。
【０３８６】
いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5A2の化合物:
【化４４７】
2018516851.tif 000555
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
qは、0〜5の整数である
【０３８７】
いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5A3の化合物:
【化４４８】
2018516851.tif 000556
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ又はトリフルオロメチルであり;かつ
qは、0〜5の整数である。いくつかの実施態様において、R1は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。
【０３８８】
いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、式PP5A4の化合物:
【化４４９】
2018516851.tif 000557
であり、式中、R1及びnは、本明細書に定義されている通りである。
【０３８９】
式PP5の化合物は、式P2の化合物を、式PP6の化合物:
【化４５０】
2018516851.tif 000558
とアミド合成条件下で接触させることにより合成することができる。
【０３９０】
好適な式PP6の化合物としては、3-ニトロ-安息香酸、3-クロロ-5-ニトロ-安息香酸、3-フルオロ-5-ニトロ-安息香酸、3-ニトロ-1-ナフタレンカルボン酸、2-フルオロ-5-ニトロ-安息香酸、3-(ジメチルアミノ)-5-ニトロ-安息香酸、3-エトキシ-5-ニトロ-安息香酸、2-メトキシ-5-ニトロ-安息香酸、4-メトキシ-3-ニトロ-安息香酸、2,6-ジフルオロ-3-ニトロ-安息香酸、2-クロロ-6-フルオロ-3-ニトロ-安息香酸、6-クロロ-2-フルオロ-3-ニトロ-安息香酸、2-クロロ-4-フルオロ-5-ニトロ-安息香酸、4-クロロ-2-フルオロ-5-ニトロ-安息香酸、2-エトキシ-5-ニトロ-安息香酸、2-(メチルアミノ)-3-ニトロ-安息香酸、6-ニトロ-8-キノリンカルボン酸、4-(ジメチルアミノ)-3-ニトロ-安息香酸塩酸塩(1:1)、2-メチル-ニトロ-安息香酸、3-メチル-4-ニトロ-安息香酸、4-ニトロ-1-ナフタレンカルボン酸、4-ニトロ-1-ナフタレンカルボン酸、2,6-ジメチル-4-ニトロ-安息香酸、3-フルオロ-4-ニトロ-安息香酸、3-クロロ-4-ニトロ-安息香酸、3-ブロモ-4-ニトロ-安息香酸、3-シアノ-4-ニトロ-安息香酸、3-シクロプロピル-4-ニトロ-安息香酸、3-メトキシ-4-ニトロ-安息香酸、2-メトキシ-4-ニトロ-安息香酸、5-クロロ-2-メチル-4-ニトロ-安息香酸、8-ニトロ-5-イソキノリンカルボン酸、5-ニトロ-8-キノリンカルボン酸、8-ニトロ-5-キノリンカルボン酸、2,5-ジフルオロ-4-ニトロ-安息香酸、2-(ジメチルアミノ)-4-ニトロ-安息香酸、2-クロロ-5-フルオロ-4-ニトロ-安息香酸、3-(ジメチルアミノ)-4-ニトロ-安息香酸、2-[(1-メチルエチル)チオ]-4-ニトロ-安息香酸、4-ニトロ-3-(トリフルオロメチル)-安息香酸、4-ニトロ-2-(トリフルオロメチル)-安息香酸、3,5-ジメトキシ-4-ニトロ-安息香酸、4-ニトロ-2-(プロピルアミノ)-安息香酸、3-(ジフルオロメトキシ)-4-ニトロ-安息香酸、2-(2-フルオロ-フェニル)-4-ニトロ-安息香酸、4-ニトロ-2-(4-ピリジニル)-安息香酸、4-ニトロ-3-(4-ピリジニル)-安息香酸、又は4-ニトロ-2-(1-ピロリジニル)-安息香酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３９１】
好適な式PP6の化合物には、以下の式:
【化４５１】
2018516851.tif 000559
(式中、R1は、出現する毎に独立に、C1-6アルキル、C1-6アルコキシ、ハロ、C1-6ハロアルキル、又はC1-6ハロアルコキシであり、ここで、nは、0、1、2、3、又は4である)のいずれか1つを有する化合物が含まれる。これらの実施態様のいくつかにおいて、R1は、メトキシ又はメチルである。いくつかの具体的な実施態様において、R1は、メトキシ、フルオロ、又はトリフルオロメチルである。ある実施態様において、nは、1又は2である。これらの実施態様のいくつかにおいて、nは1である。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨードである。
【０３９２】
いくつかの実施態様において、R1は、1-メチルエチル-チオール、フェニル、2-フルオロフェニル、ピリジニル、4-ピリジニル、ピロリジニル、又は1-ピロリジニルである。いくつかの実施態様において、R1は、トリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、R1は、メトキシである。いくつかの実施態様において、R1は、フルオロである。いくつかの実施態様において、R1は、水素である。
【０３９３】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、式PP5の化合物:
【化４５２】
2018516851.tif 000560
であり、式中、Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである。
【０３９４】
いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は、
【化４５３】
2018516851.tif 000561
から選択される化合物である。
【０３９５】
いくつかの実施態様において、式PP5の化合物は:
【化４５４】
2018516851.tif 000562
である。
【０３９６】
式IIIの化合物:
【化４５５】
2018516851.tif 000563
は、式PP1の化合物:
【化４５６】
2018516851.tif 000564
を、結合剤と、コンジュゲーション条件下で接触させることにより合成することができ、
ここで:
BAは、結合剤であり;
SPは、スペーサーであり;
SPRは、反応性スペーサーであり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;
RAA2は、アミノ酸側鎖であり;
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
kは、1〜30の整数である。
【０３９７】
式PP1の化合物は、式PP2の化合物を式P2の化合物と接触させることにより調製することができる:
【化４５７】
2018516851.tif 000565
(ここで:
SPRは反応性リンカーであり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
【０３９８】
式PP1の化合物は、式PP3の化合物を式PP7の化合物と接触させることにより調製することができる:
【化４５８】
2018516851.tif 000566
(ここで:
SPRは反応性リンカーであり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;
RAA1は、アミノ酸側鎖であり;かつ
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンである)。
【０３９９】
式PP2の化合物は、式PP8の化合物を二官能性スペーサーと接触させることにより調製することができる:
【化４５９】
2018516851.tif 000567
。
【０４００】
式PP7の化合物は、式PP9の化合物を二官能性スペーサーと接触させることにより調製することができる:
【化４６０】
2018516851.tif 000568
。
【０４０１】
二官能性スペーサーは、式PP3の化合物と反応して、式PP2の化合物中に存在するSPR部分を付加する化合物である。例示的な二官能性スペーサーとしては:
【化４６１】
2018516851.tif 000569
が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４０２】
式PP8の化合物は、式PP10の化合物を式PP11の化合物と接触させ、その後、保護基を除去することにより調製することができる:
【化４６２】
2018516851.tif 000570
(ここで、PGはアミン保護基であり、かつYは、それが結合しているカルボニルを求電子性にする部分である)。式PP10の化合物は、例えば、HATU、BOP/HOBt、又はEDC/N-ヒドロキシスクシンアミドをDIEA、DBU、又はトリブチルアミンの存在下で用いる活性エステル形成を含む、標準的なアミノ酸カップリング技法を用いて、その対応するアミノ酸をカップリングさせることにより調製することができる。
【０４０３】
二官能性スペーサーは、式PP9の化合物と反応して、式PP7の化合物中に存在するSPR部分を付加する化合物である。例示的な二官能性スペーサーとしては:
【化４６３】
2018516851.tif 000571
が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４０４】
式(I)の抗体-薬物-コンジュゲート化合物は、好適な抗体、例えば、脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体を、式(PT1)の化合物:
【化４６４】
2018516851.tif 000572
(ここで:
Aは、アリーレン又はヘテロアリーレンであり;かつ
Lはリンカーである)
と、トランスグルタミナーゼの存在下で反応させることにより調製することもできる。
【０４０５】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４６５】
2018516851.tif 000573
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化４６６】
2018516851.tif 000574
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【０４０６】
いくつかの実施態様において、Aは:
【化４６７】
2018516851.tif 000575
であり、
ここで:
R1は、出現する毎に独立に、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、アルカリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シアノ、ニトロ、
【化４６８】
2018516851.tif 000576
又はアジドであり、
ここで、RAは、アルキル又はヘテロアルキルであり;
nは、0〜4の整数であり;
mは、0〜3の整数であり;
pは、0〜6の整数であり;かつ
qは、0〜5の整数である。
【０４０７】
いくつかの実施態様において、R1は、独立に、アルキル又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、C1-6アルキル、C1-6ハロアルキル、又はハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、ハロである。いくつかの実施態様において、R1は、独立に、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、又はトリフルオロメチルである。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0、1、又は2である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0又は1である。いくつかの実施態様において、n、m、p、又はqは、0である。
【０４０８】
いくつかの実施態様において、R1は、
【化４６９】
2018516851.tif 000577
である。いくつかの実施態様において、R1は、
【化４７０】
2018516851.tif 000578
であり、ここで、RAは、メチルである。いくつかの実施態様において、R1は、ヒドロキシルである。いくつかの実施態様において、R1は、N-メチルホルムアミドである。いくつかの実施態様において、R1は、モルホリニルである。
【０４０９】
いくつかの実施態様において、リンカーは、1以上のアミノ酸を含む。好適なアミノ酸としては、天然、非天然、標準的、非標準的、タンパク質構成性、非タンパク質構成性、及びL-又はD-α-アミノ酸が挙げられる。いくつかの実施態様において、リンカーは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン,アルギニン、ヒスチジン、もしくはシトルリン、又はこれらの誘導体を含む。
【０４１０】
いくつかの実施態様において、リンカーは、バリン及びシトルリンを含む。
【０４１１】
いくつかの実施態様において、リンカーは:
【化４７１】
2018516851.tif 000579
であり、
ここで:
一方の
【化４７２】
2018516851.tif 000580
は、ペイロードとの1以上の結合であり;
もう一方の
【化４７３】
2018516851.tif 000581
は、PT1の-NH2との1以上の結合であり;
AA1は、アミノ酸であり;かつ
AA2は、アミノ酸である。
【０４１２】
リンカーは、AA1-AA2部分をPT1の-NH2に接続する二価部分をさらに含むことができる。好適な二価部分としては、アルキレン又はポリエチレングリコールを含むものが挙げられるが、これらに限定されない。二価部分は、化合物の残りの部分との結合を容易にする1以上の反応性基、又はそのような反応性基の1以上の残基を含むことができる。
【０４１３】
PT1としては、1級アミン終端アルキレン又は1級アミン終端ポリエチレングリコールが挙げられる。1級アミン終端部分は、トランスグルタミナーゼの存在下で、脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体に直接結合させることができる。
【０４１４】
いくつかの実施態様において、化合物は、1級アミン終端アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、化合物は、NH2-C5-7アルキレンを含む。いくつかの実施態様において、化合物は:
【化４７４】
2018516851.tif 000582
を含み、
ここで:
【化４７５】
2018516851.tif 000583
は、ペイロードとの結合であり;かつ
bは、2〜8の整数である。
【０４１５】
いくつかの実施態様において、化合物は:
【化４７６】
2018516851.tif 000584
を含み、
ここで:
【化４７７】
2018516851.tif 000585
は、ペイロードとの結合である。
【０４１６】
いくつかの実施態様において、PT1の化合物は、
【化４７８】
2018516851.tif 000586
である。
【０４１７】
いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、結合剤を、PT1と、トランスグルタミナーゼの存在下、トランスグルタミネーション反応に好適な条件下で接触させることにより調製される。いくつかの実施態様において、トランスグルタミナーゼ反応は、約7〜約8のpHで、少なくとも4時間行われる。いくつかの例において、pHは、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.8、又は8である。
【０４１８】
いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、式(PT1)の化合物の濃度が脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体と比較して少なくとも30モル濃度当量であるトランスグルタミナーゼ反応によって調製される。いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、式(PT1)の化合物の濃度が脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体と比較して30〜150モル濃度当量であるトランスグルタミナーゼ反応によって調製される。
【０４１９】
いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、式(PT1)の化合物の濃度が脱グリコシル化抗体又は非グリコシル化抗体のミリグラム当たり1〜30Uであるトランスグルタミナーゼ反応によって調製される。
【０４２０】
いくつかの実施態様において、抗体は、トランスグルタミナーゼ反応の前に、ペプチド N-グリコシダーゼF(PNGアーゼF)で脱グリコシル化されている。
【０４２１】
いくつかの実施態様において、抗体は、非グリコシル化されている。非グリコシル化抗体は、抗体のグリコシル化に必要となる1以上のアミノ酸配列を除去するための突然変異生成技法によって調製することができる。ある実施態様において、抗体は、別のアミノ酸をN180に代用する突然変異を有する重鎖を含む。ある実施態様において、非グリコシル化抗体は、1以上のN180Q重鎖ポリペプチドを含む。
【０４２２】
いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、水、緩衝水、食塩水、緩衝食塩水、及び有機化合物からなる群から選択される1以上の溶媒中で実施されるトランスグルタミナーゼ反応によって調製される。
【０４２３】
いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、リン酸塩、HEPES、又はMOPSで緩衝化された水の中で実施されるトランスグルタミナーゼ反応によって調製される。
【０４２４】
いくつかの実施態様において、式(I)の化合物は、グルタミニル修飾抗体を反応性スペーサー化合物と反応させて、抗体-スペーサーコンジュゲートを形成させること;及びその後、該抗体-スペーサーコンジュゲートを反応性ペイロード化合物と反応させて、抗体-スペーサー-ペイロードコンジュゲートを形成させることを含む、トランスグルタミナーゼ反応によって調製される。
【０４２５】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、本明細書に示される方法によって産生されるグルタミニル修飾抗体である。
【０４２６】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、本明細書に示される方法によって産生されるグルタミニル修飾抗体を含む医薬組成物である。
【０４２７】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、それを必要としている対象の状態を治療する方法であって、該対象に、本明細書に提供される抗体又は抗体-薬物-コンジュゲートの医薬として許容し得る量を投与することを含む、方法である。
【０４２８】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、治療のための本明細書に記載される抗体又は抗体-薬物-コンジュゲートである。
【０４２９】
いくつかの実施態様において、本明細書に提供されるのは、癌の治療のための本明細書に記載される抗体又は抗体-薬物-コンジュゲートである。
【０４３０】
(E.使用方法及び医薬組成物)
本開示は、疾患、疾病、又は障害、例えば、増殖性疾患、例えば、癌を治療又は予防する方法であって、本明細書に開示される化合物のうちの1つ又は複数、例えば、式(I)又は(II)の化合物のうちの1つ又は複数の治療有効量を投与することを含む、方法を含む。疾患、障害、及び/又は疾病としては、本明細書に記載されている抗原と関連するものが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施態様において、抗原は、PSMA、MUC16、又はEGFRvIIIである。
【０４３１】
本明細書に開示される化合物は、脳及び髄膜、中咽頭、肺及び気管支樹、消化管、雄雌生殖器、筋肉、骨、皮膚及び付属器、結合組織、脾臓、免疫系、造血細胞及び骨髄、肝臓及び尿路、並びに特殊感覚器官、例えば、目に発生する原発性及び/又は転移性腫瘍を治療するために使用することができる。ある実施態様において、本明細書に提供される化合物は、以下の癌:腎細胞癌、膵臓癌、頭頸部癌、前立腺癌、悪性神経膠腫、骨肉腫、結腸直腸癌、胃癌(例えば、MET増幅を伴う胃癌)、悪性中皮腫、多発性骨髄腫、卵巣癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、滑膜肉腫、甲状腺癌、乳癌、又は黒色腫のうちの1つ又は複数を治療するために使用される。いくつかの実施態様において、癌は乳癌である。
【０４３２】
本明細書に記載される化合物は、単独で又は1以上の追加の治療剤と一緒に投与することができる。1以上の追加の治療剤は、本明細書に記載される化合物の投与の直前、それと同時、又はその直後に投与することができる。本開示は、1以上の追加の治療剤と組み合わせた本明細書に記載される化合物のいずれかを含む医薬組成物、及びそのような組合せをそれを必要としている対象に投与することを含む治療方法も含む。
【０４３３】
好適な追加の治療剤としては: EGFRアンタゴニスト(例えば、抗EGFR抗体[例えば、セツキシマブもしくはパニツムマブ]又はEGFRの小分子阻害剤[例えば、ゲフィチニブもしくはエルロチニブ])、別のEGFRファミリーメンバー、例えば、Her2/ErbB2、ErbB3、又はErbB4のアンタゴニスト(例えば、抗ErbB2[例えば、トラスツズマブもしくはT-DM1{KADCYLA(登録商標)}]、抗ErbB3もしくは抗ErbB4抗体、又はErbB2、ErbB3、もしくはErbB4活性の小分子阻害剤)、EGFRvIIIのアンタゴニスト(例えば、EGFRvIIIに特異的に結合する抗体)、cMETアンタゴニスト(例えば、抗cMET抗体)、IGF1Rアンタゴニスト(例えば、抗IGF1R抗体)、B-raf阻害剤(例えば、ベムラフェニブ、ソラフェニブ、GDC-0879、PLX-4720)、PDGFR-α阻害剤(例えば、抗PDGFR-α抗体)、PDGFR-β阻害剤(例えば、抗PDGFR-β抗体、又は例えば、メシル酸イマチニブもしくはリンゴ酸スニチニブなどの小分子キナーゼ阻害剤)、PDGFリガンド阻害剤(例えば、抗PDGF-A、-B、-C、又は-D抗体、アプタマー、siRNAなど)、VEGFアンタゴニスト(例えば、VEGF-Trap、例えば、アフリベルセプト、例えば、US 7,087,411号を参照(本明細書において「VEGF阻害融合タンパク質」とも称される)、抗VEGF抗体(例えば、ベバシズマブ)、VEGF受容体の小分子キナーゼ阻害剤(例えば、スニチニブ、ソラフェニブ、又はパゾパニブ))、DLL4アンタゴニスト(例えば、US 2009/0142354号に開示されている抗DLL4抗体、例えば、REGN421)、Ang2アンタゴニスト(例えば、US 2011/0027286号に開示されている抗Ang2抗体、例えば、H1H685P)、FOLH1アンタゴニスト(例えば、抗FOLH1抗体)、STEAP1又はSTEAP2アンタゴニスト(例えば、抗STEAP1抗体又は抗STEAP2抗体)、TMPRSS2アンタゴニスト(例えば、抗TMPRSS2抗体)、MSLNアンタゴニスト(例えば、抗MSLN抗体)、CA9アンタゴニスト(例えば、抗CA9抗体)、ウロプラキンアンタゴニスト(例えば、抗ウロプラキン[例えば、抗UPK3A]抗体)、MUC16アンタゴニスト(例えば、抗MUC16抗体)、Tn抗原アンタゴニスト(例えば、抗Tn抗体)、CLEC12Aアンタゴニスト(例えば、抗CLEC12A抗体)、TNFRSF17アンタゴニスト(例えば、抗TNFRSF17抗体)、LGR5アンタゴニスト(例えば、抗LGR5抗体)、一価CD20アンタゴニスト(例えば、一価抗CD20抗体、例えば、リツキシマブ)などが挙げられるが、これらに限定されない。本開示の化合物と組み合わせて有益に投与し得る他の薬剤としては、例えば、タモキシフェン、アロマターゼ阻害剤、並びにサイトカイン、例えば、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IL-11、IL-12、IL-13、IL-17、IL-18、又はそのそれぞれの受容体に結合する小分子サイトカイン阻害剤及び抗体を含む、サイトカイン阻害剤が挙げられる。
【０４３４】
好適な治療剤としては、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びシクロホスファミド(Cytoxan(商標));アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン;アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ;エチレンイミン並びにアルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド(trietylenephosphoramide)、トリエチレンチオホスホラミド、及びトリメチローロメラミン(trimethylolomelamine)を含むメチラメラミン(methylamelamine);窒素マスタード、例えば、クロラムブシル、クロロナファジン、コロホスファミド(cholophosphamide）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード;ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン;抗生物質、例えば、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリケアマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、6-ジアゾ-5-オキソ-L-ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン(potfiromycin)、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン;代謝拮抗薬、例えば、メトトレキセート及び5-フルオロウラシル(5-FU);葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート;プリン類似体、例えば、フルダラビン、6-メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン;ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、6-アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン;アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン;抗副腎薬(抗副腎薬)、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン;葉酸補給剤、例えば、フォリン酸(frolinic acid);アセグラトン;アルドホスファミドグリコシド;アミノレブリン酸;アムサクリン;ベストラブシル;ビサントレン;エダトラキセート;デホファミン;デメコルシン;ジアジコン;エルフォルニチン(elfornithine);酢酸エリプチニウム;エトグルシド;硝酸ガリウム;ヒドロキシウレア;レンチナン;ロニダミン;ミトグアゾン;ミトキサントロン;モピダモール;ニトラクリン;ペントスタチン;フェナメット;ピラルビシン;ポドフィリン酸;2-エチルヒドラジド;プロカルバジン;PSK(商標);ラゾキサン;シゾフィラン;スピロゲルマニウム;テヌアゾン酸;トリアジコン;2,2',2''-トリクロロトリエチルアミン;ウレタン;ビンデシン;ダカルバジン;マンノムスチン;ミトブロニトール;ミトラクトール;ピポブロマン;ガシトシン;アラビノシド(「Ara-C」);シクロホスファミド;チオテパ;タキサン、例えば、パクリタ���セル(Taxol(商標)、Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton、N.J.)及びドセタキセル(Taxotere(商標);Aventis Antony, France);クロラムブシル;ゲムシタビン;6-チオグアニン;メルカプトプリン;メトトレキセート;白金類似体、例えば、シスプラチン及びカルボプラチン;ビンブラスチン;白金;エトポシド(VP-16);イホスファミド;マイトマイシンC;ミトキサントロン;ビンクリスチン;ビノレルビン;ナベルビン;ノバントロン;テニポシド;ダウノマイシン;アミノプテリン;ゼローダ;イバンドロネート;CPT-11;トポイソメラーゼ阻害剤RFS 2000;ジフルオロメチルオルニチン(DMFO);レチノイン酸;エスペラマイシン;カペシタビンを含む化学療法剤;並びに上記のいずれかの医薬として許容し得る塩、酸、又は誘導体も挙げられるが、これらに限定されない。また本定義に含まれるのは、腫瘍に対するホルモン作用を調節又は阻害するように働く抗ホルモン剤、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害性4(5)-イミダゾール、4-ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケトキシフェン、LY 117018、オナプリストン、及びトレミフェン(Fareston)などを含む抗エストロゲン薬;並びにフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリンなどの抗アンドロゲン薬;並びに上記のいずれかの医薬として許容し得る塩、酸、又は誘導体である。
【０４３５】
本明細書に記載される化合物を、抗ウイルス薬、抗生物質、鎮痛薬、コルチコステロイド、ステロイド、酸素、抗酸化剤、COX阻害剤、心臓保護薬、金属キレート剤、IFN-γ、及び/又はNSAIDsと組み合わせて投与及び/又は共製剤化することもできる。
【０４３６】
本明細書に記載される方法のいくつかの実施態様において、複数用量の本明細書に記載される化合物(又は本明細書に記載される化合物と本明細書で言及される追加の治療剤のいずれかの組合せを含む医薬組成物)を規定のタイムコースで対象に投与することができる。本開示のこの態様による方法は、複数用量の本明細書に記載される化合物を対象に連続的に投与することを含む。本明細書で使用される場合、「連続的に投与すること」は、各々の用量の該化合物を、異なる時点で、例えば、所定の間隔(例えば、時間、日、週、又は月)だけ隔てられた異なる日に対象に投与することを意味する。本開示は、単一の初回用量の本明細書に記載される化合物、その後、1以上の二次用量の該化合物、任意にその後、1以上の三次用量の該化合物を患者に連続的に投与することを含む方法を含む。
【０４３７】
「初回用量」、「二次用量」、及び「三次用量」という用語は、本明細書に記載される化合物の投与の時系列を指す。したがって、「初回用量」は、治療レジメンの開始時に投与される用量(「ベースライン用量」とも称される)であり;「二次用量」は、初回用量の後に投与される用量であり;「三次用量」は、二次用量の後に投与される用量である。初回、二次、及び三次用量は全て、同じ量の本明細書に記載される化合物を含むことができるが、通常、投与の頻度に関して互いに異なることができる。ある実施態様において、初回、二次、及び/又は三次用量に含まれる化合物の量は、治療経過中、互いに異なる(例えば、適宜上方又は下方調節される)。ある実施態様において、2以上の(例えば、2、3、4、又は5)用量を治療レジメンの開始時に「ローディング用量」として投与した後、より少ない頻度で投与される後続用量(例えば、「維持用量」)が続く。
【０４３８】
本開示のある例示的な実施態様において、各々の二次及び/又は三次用量を、直前の用量から1〜26週間後(例えば、1、1 1/2、2、2 1/2、3、3 1/2、4、4 1/2、5、5 1/2、6、6 1/2、7、7 1/2、8、8 1/2、9、9 1/2、10、10 1/2、11、11 1/2、12、12 1/2、13、13 1/2、14、14 1/2、15、15 1/2、16、16 1/2、17、17 1/2、18、18 1/2、19、19 1/2、20、20 1/2、21、21 1/2、22、22 1/2、23、23 1/2、24、24 1/2、25、25 1/2、26、26 1/2週間後、又はそれより後)に投与する。本明細書で使用される「直前の用量」という語句は、一連の複数の投与において、順序に関してまさにその次の用量の投与の前に介入用量なしで患者に投与される化合物の用量を意味する。
【０４３９】
本開示のこの態様による方法は、任意の数の二次及び/又は三次用量の該化合物を患者に投与することを含むことができる。例えば、ある実施態様において、単一の二次用量しか患者に投与されない。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれより多く)の二次用量が患者に投与される。同様に、ある実施態様において、単一の三次用量しか患者に投与されない。他の実施態様において、2以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、又はそれより多く)の三次用量が患者に投与される。投与レジメンは、特定の対象の生涯にわたって無制限に、又はそのような治療がもはや治療上必要でも有利でもなくなるまで実施することができる。
【０４４０】
複数の二次用量を含む実施態様において、各々の二次用量は、他の二次用量と同じ頻度で投与することができる。例えば、各々の二次用量は、直前の用量から1〜2週間又は1〜2カ月後に患者に投与することができる。同様に、複数の三次用量を含む実施態様において、各々の三次用量は、他の三次用量と同じ頻度で投与することができる。例えば、各々の三次用量は、直前の用量から2〜12週間後に患者に投与することができる。本開示のある実施態様において、二次及び/又は三次用量が患者に投与される頻度は、治療レジメンの間に変わることができる。投与の頻度は、臨床検査後の個々の患者の必要に応じて、治療経過中、医師により調整されることもできる。
【０４４１】
本開示は、2〜6ローディング用量が第一の頻度(例えば、1週間に1回、2週間に1回、3週間に1回、1カ月に1回、2カ月に1回など)で患者に投与され、その後、2以上の維持用量がより少ない頻度で患者に投与される投与レジメンを含む。例えば、本開示のこの態様によれば、ローディング用量が1カ月に1回の頻度で投与される場合、維持用量は、6週間に1回、2カ月に1回、3カ月に1回などで患者に投与されることができる。
【０４４２】
本開示は、本明細書に記載される化合物及び/又はコンジュゲート、例えば、式(I)及び(II)の化合物の医薬組成物、例えば、本明細書に記載される化合物、その塩、立体異性体、多形体、並びに医薬として許容し得る担体、希釈剤、及び/又は賦形剤を含む組成物を含む。好適な担体、希釈剤、及び賦形剤の例としては:適切な組成物pHの維持のための緩衝剤(例えば、クエン酸塩緩衝剤、コハク酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、乳酸塩緩衝剤、シュウ酸塩緩衝剤など)、キャリアタンパク質(例えば、ヒト血清アルブミン)、食塩水、ポリオール(例えば、トレハロース、スクロース、キシリトール、ソルビトールなど)、界面活性剤(例えば、ポリソルベート20、ポリソルベート80、ポリオキソレートなど)、抗菌薬、及び抗酸化剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【実施例】
【０４４３】
(F.実施例)
プロトンNMRスペクトルは、Varian Inova 300又は500 MHz機器で獲得し、一方、質量スペクトルは、エレクトロスプレーイオン化源及び単一四重極分析計又はイオントラップ分析計のいずれかを備えたAgilent 1100又は1200シリーズLC/MSDで収集した。酵素アッセイにおける特定のリンカーペイロードは、Waters Xevo TQ-S質量分析計によって分析した。出発材料及び溶媒は全て、別途注記されない限り、市販で購入し、精製しないで使用した。
【０４４４】
(実施例1)
化合物10を、下記のように及び図1に示されているように、化合物1から合成した。
【０４４５】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(10))
(工程A:)丸底フラスコに、Boc-L-バリン(1.03g、4.74mmol)、N-ヒドロキシスクシンイミド(1.22g、10.6mmol)、及びEDC(1.60g、8.35mmol)を量り入れた。試薬を無水DCM(30mL)に溶解させ、フラスコをラバーセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。3日後、(ニンヒドリンで染色した後の)TLCにより、Boc-バリンが残存していなかったので、反応液を水及び飽和水性NaHCO3で洗浄し、水層をDCMで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過した。その後、濾液を蒸発させ、真空中で乾燥させると、Boc-L-バリン-スクシネートが白色の固体(1.52g、100％)として得られた。
【化４７９】
2018516851.tif 000587
【０４４６】
(Boc-L-バリン-L-シトルリン(3):)
前工程のBoc-L-バリン-スクシネート(1)(1.50g、4.77mmol)をアセトニトリル(MeCN、15mL)に溶解させ、L-シトルリン(2、1.07g、6.11mmol)の水(9mL)溶液及び飽和水性NaHCO3(6mL)で処理し、フラスコを通気式セプタムで密閉し、反応液を周囲温度で撹拌した。反応が18時間後に終了していなかったため、さらなる飽和水性NaHCO3(3mL)を添加して、pHを約7に至らせ、反応液をもう36時間撹拌した。該反応液を真空中で一部濃縮して、MeCNを除去し、酢酸エチル(EtOAc)で1回洗浄して、非極性不純物を除去した。その後、水層を10％v/vのHClでpH 3に酸性化し、NaClで飽和させ、9:1のEtOAc/イソプロパノールで4回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過した。その後、濾液を蒸発させ、真空中で乾燥させると、表題化合物が白色の固体(1.56g、87％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C16H30N4O6の計算値、374.2;実測値、375.2(M+H)、397.2(M+Na)。
【０４４７】
(Boc-L-バリン-L-シトルリン-p-アミノ安息香酸 t-ブチルエステル(5):)
(工程B:)前工程の生成物(3、152mg、0.406mmol)、tert-ブチル-4-アミノベンゾエート(4、150mg、0.776mmol)、及び1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム 3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU、488mg、1.28mmol)を丸底フラスコに量り入れ、無水N,N-ジメチルホルムアミド(DMF、3mL)に溶解させた。N,N-ジイソプロピルエチルアミン(DIEA、0.25mL、1.44mmol)を反応液に添加し、フラスコをラバーセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。18時間後、該反応液をISCOシステムにより100g C18 RediSep Goldカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、20分間)。生成物を含む画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、一晩凍結乾燥させると、不純な白色の固体(115mg)が得られた。これをDCMに溶解させ、ISCOにより12gシリカゲルRediSepカラムで再精製し(勾配溶出: DCM中0〜10％メタノール、12分間)、よりゆっくりと泳動する生成物画分を蒸発させ、真空中で乾燥させると、表題化合物が淡黄色の固体(65mg、29％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C27H43N5O7の計算値、549.3;実測値、450.3(M-Boc+H)、572.3(M+Na)、1099.5(2M+H)、1121.5(2M+Na)。
【０４４８】
(L-バリン-L-シトルリン-p-アミノ安息香酸(6):)
(工程C:)表題化合物をMehtaらの方法を用いて調製した(Tet. Lett. 1992, 33, 5441-5444)。前工程の生成物(5、61mg、0.111mmol)を丸底フラスコ中の無水DCM(3mL)に溶解させ、トリフルオロ酢酸(TFA、110uL、1.44mmol)及びトリエチルシラン[TES(Et3SiH)、50uL、0.313mmol]で処理した。フラスコをセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、周囲温度で18時間撹拌した。反応がLCMSにより終了していなかったため、さらなるTFA(90uL)及びTES(25uL)を添加し、反応液をもう6時間撹拌した。反応がまだ終了していなかったため、これに蓋をし、-20℃で3日間保存した。周囲温度に温め、もう24時間撹拌した後、これを真空中で濃縮して油状物にし、ジエチルエーテルで2回研和し、高真空下で乾燥させると、表題化合物がオフホワイト色の固体(55mg、98％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C18H27N5O5の計算値、393.2;実測値、394.0(M+H)、787.2(2M+H)。1H-NMR(500MHz、DMSO-d6)は、アミド回転異性体の混合物を示した：
【化４８０】
2018516851.tif 000588
【０４４９】
(6-(マレイミジル-カプロリル)-L-バリン-L-シトルリン-p-アミノ安息香酸(8):)
(工程D:)前工程の生成物(6、55mg、0.108mmol)を水(3mL)に溶解させ、飽和水性NaHCO3で処理し、その後、6-マレイミジル-カプロン酸スクシネートエステル(56mg、0.182mmol)のMeCN(3mL)溶液で処理した。フラスコにアルゴン下で蓋をし、反応液を周囲温度で22時間撹拌した。反応がLCMSにより終了していたため、これを真空中で一部濃縮し、ISCOにより30g C18 Aq RediSep Goldカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、12分間)。主要な生成物画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、一晩凍結乾燥させると、不純な淡黄色の固体(92mg)が得られた。これは、LCMSにより不純であることが分かったため、これをMeCN/水に溶解させ、100g C18 Aq Goldカラムで再精製した(勾配溶出:水中0〜50％MeCN、両方に0.05％酢酸、20分間)。最もきれいな生成物画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、凍結乾燥させると、表題化合物が白色の固体(34mg、53％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C28H38N6O8の計算値、586.3;実測値、587.3(M+H)、609.3(M+Na)。1H-NMR(500MHz、DMSO-d6)は、アミド回転異性体の混合物を示した：
【化４８１】
2018516851.tif 000589
【０４５０】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-シトルリン-バリン-カプロリル-6-マレイミジル(10):)
(工程E:)前工程の生成物(8、33mg、0.056mmol)、HATU(33mg、0.087mmol)、及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、米国特許出願第2007/0037972 A1号に記載されている方法を用いてメイタンシノールから金色の固体として調製されたもの、25mg、0.038mmol)を丸底フラスコに量り入れ、無水DMF(2mL)に溶解させ、DIEA(20uL、0.115mmol)で処理した。フラスコをラバーセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、反応液を周囲温度で20時間撹拌した。該反応液を水(1mL)で希釈し、ISCOにより50g C18 Aq RediSep Goldカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、12分間)。生成物画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、一晩凍結乾燥させると、表題化合物が白色の固体(8mg、17％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C60H80N9O16Clの計算値、1217.5;実測値、1218.6(M+H)、1200.7(M-H2O+H)、1240.7(M+Na)。
【化４８２】
2018516851.tif 000590
【０４５１】
(実施例2)
化合物15を下記のように及び図6に示されているように合成した。
【０４５２】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-フルオロ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(15))
(Boc-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-フルオロ)安息香酸 t-ブチルエステル(12):)
(工程A:) Wipf及びHeimgartnerの文献(Helv. Chim. Acta, 1998, 71, 140-154)の手順に従って、Boc-L-バリン-L-シトルリン(3、155mg、0.414mmol)及びジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC、95mg、0.460mmol)を無水ジクロロメタン(DCM、3mL)に溶解させ、0℃に冷却し、5分間撹拌した。その後、(+)-カンファー-10-スルホン酸(CSA、15mg、0.065mmol)及びtert-ブチル-4-アミノ-2-フルオロベンゾエート(99mg、0.469mmol)を無水物に添加し、反応液を、3日間撹拌しながら、周囲温度までゆっくりと温めておいた。LCMS分析により、m/z 566(ESI、ネガティブ)の大きな新しいピークが示された。反応液をDCMで希釈し、10％v/vのHCl、水、及び飽和NaHCO3で洗浄した。水層をDCMで各々1回抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過した。その後、濾液を蒸発させ、真空中で乾燥させると、淡い金色の固体が得られ、これをISCOにより24g RediSep Goldカラムで精製した(勾配溶出:酢酸エチル-5:5:1 EtOAc/DCM/メタノール、12分間)。最もきれいな生成物画分を合わせ、真空中で濃縮し、高真空下で乾燥させると、表題化合物が白色の固体(95mg、40％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C27H42N5O7Fの計算値、567.3;実測値、568.3(M+H)、590.4(M+Na)。
【０４５３】
(L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-フルオロ)安息香酸トリフルオロ酢酸塩(13):)
(工程B:)表題化合物を、実施例1の工程Cを用いて、前工程の生成物(12、94mg、0.166)から調製すると、オフホワイト色の固体(112mg)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C18H26N5O5Fの計算値、411.2;実測値、412.2(M+H)、395.2(M-H2O+H)。
【０４５４】
(6-(マレイミド)-カプロアミジル-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-フルオロ)安息香酸(14):)
(工程C:)表題化合物を、実施例1の工程Dを用いて、前工程の生成物(13、106mg、0.166mmol)から調製すると、白色の固体(92mg)が得られた。これは、LCMSにより70％しか純粋でなかったが、それ以上精製することなく使用された。MS(ESI、ポジティブ): C28H37N6O8Fの計算値、604.3;実測値、605.2(M+H)、627.2(M+Na)。
【０４５５】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-フルオロ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(15):)
(工程D:)表題化合物を、実施例1の工程Eを用いて、前工程の生成物(14、50mg、0.077mmol)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)から調製すると、白色の固体(18mg)が得られ、これは、LCMSにより55％しか純粋でなかった。Phenomenex Gemini C18 5u、30×150mmカラム(20〜80％、その後、40〜60％の水中MeCN、どちらの相も0.1％HOAc、20分間、30mL/分)を用いるHPLCにより2回精製すると、表題化合物が白色の固体(3mg、3％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C60H79N9O16ClFの計算値、1235.5;実測値、1236.5(M+H)、1258.5(M+Na)。
【化４８３】
2018516851.tif 000591
【０４５６】
(実施例3)
化合物20を下記のように及び図7に示されているように合成した。
【０４５７】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(20))
(Boc-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)安息香酸 t-ブチルエステル(17):)
(工程A:)表題化合物を、Wipf及びHeimgartnerの文献(Helv. Chim. Acta, 1998, 71, 140-154)の方法を用いて、Boc-L-バリン-L-シトルリン(3、175mg、0.467mmol)及びtert-ブチル-4-アミノ-2-トリフルオロメチルベンゾエート(150mg、0.574mmol)から調製すると、白色の固体(77mg、27％)が得られた。MS(ESI、ネガティブ): C28H42N5O7F3の計算値、617.3;実測値、616.4(M-H)。
【０４５８】
(L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)安息香酸トリフルオロ酢酸塩(18):)
(工程B:)表題化合物を、実施例1の工程Cを用いて、前工程の生成物(17、67mg、0.108)から調製すると、オフホワイト色の固体(77mg)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C19H26N5O5F3の計算値、461.2;実測値、462.3(M+H)、445.2(M-H2O+H)。
【０４５９】
(6-(マレイミド)-カプロアミジル-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)安息香酸(19):)
(工程C:)表題化合物を、実施例1の工程Dを用いて、前工程の生成物(18、75mg、0.108mmol)から調製すると、白色の固体(47mg、66％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C29H37N6O8F3の計算値、654.3;実測値、655.3(M+H)。
【０４６０】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-トリフルオロメチル)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(20):)
(工程D:)表題化合物を、実施例1の工程Eを用いて、前工程の生成物(19、34mg、0.052mmol)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、34mg、0.052mmol)から調製すると、2回目のISCO精製(100g C18 Aq Goldカラム、水中30〜70％MeCN、どちらも0.05％HOAc、15分間、50mL/分)の後、白色の固体(11mg、16％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C61H79N9O16ClF3の計算値、1285.5;実測値、1287.4(M+H)、1268.4(M-H2O+H)、1308.4(M+Na)。
【化４８４】
2018516851.tif 000592
【０４６１】
(実施例4)
化合物25を下記のように及び図8に示されているように合成した。
【０４６２】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-メトキシ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(25))
(Boc-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-メトキシ)安息香酸 t-ブチルエステル(22):)
(工程A:)表題化合物を、Wipf及びHeimgartnerの文献(Helv. Chim. Acta, 1998, 71, 140-154)の方法を用いて、Boc-L-バリン-L-シトルリン(3、143mg、0.382mmol)及びtert-ブチル-4-アミノ-2-メトキシベンゾエート(109mg、0.488mmol)から調製すると、白色の固体(92mg、42％)が得られた。MS(ESI、ネガティブ): C28H45N5O8の計算値、579.3;実測値、580.3(M-H)、602.3(M+Na)。
【０４６３】
(L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-メトキシ)安息香酸トリフルオロ酢酸塩(23):)
(工程B:)表題化合物を、実施例1の工程Cを用いて、前工程の生成物(22、90mg、0.155)から調製すると、淡い色の固体(99mg)が得られ、これをDCMで2回粉砕し、MeCN及びTHFに溶解させ、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させると、表題化合物がオフホワイト色の固体(79mg、95％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C19H29N5O6の計算値、423.2;実測値、424.2(M+H)、407.2(M-H2O+H)、446.2(M+Na)。
【０４６４】
(6-(マレイミド)-カプロアミジル-L-バリン-L-シトルリン-(4-アミノ-2-メトキシ)安息香酸(24):)
(工程C:)表題化合物を、実施例1の工程Dを用いて、前工程の生成物(23、76mg、0.141mmol)から調製すると、白色の固体(50mg、57％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C29H40N6O9の計算値、616.3;実測値、617.2(M+H)。
【０４６５】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-アミノ-2-メトキシ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(25):)
(工程D:)表題化合物を、実施例1の工程Eを用いて、前工程の生成物(24、49mg、0.079mmol)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、34mg、0.052mmol)から調製すると、白色の固体(34mg、34％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C61H82N9O17Clの計算値、1247.6;実測値、1248.5(M+H)、1230.5(M-H2O+H)、1270.5(M+Na)。
【化４８５】
2018516851.tif 000593
【０４６６】
(実施例5)
化合物27を、下記のように及び図9に示されているように、化合物26から合成した。
【０４６７】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド(27))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-ニトロ)ベンズアミド:)
乾燥した丸底フラスコに、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、96mg、0.15mmol)、4-ニトロ安息香酸(26)(42mg、0.25mmol)、及びHATU(0.12g、0.31mmol)を量り入れた。試薬を無水DMF(3.0mL)に溶解させ、DIEA(0.10mL、0.57mmol)で処理し、フラスコをアルゴンでパージし、ラバーセプタムで密閉した。反応液を周囲温度で3日間撹拌し、その後、LCMSにより、メイタン-NMAの完全な変換が示されたため、これを数mLの水で希釈し、100g C18 Aq Goldカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、15分間)。最もきれいな生成物画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、一晩凍結乾燥させると、表題化合物が黄色の固体(64mg、54％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H47N4O12Clの計算値、798.3;実測値、798.4(M+H)。
【０４６８】
(工程B:メイタン-NMA-(4-アミノ)ベンズアミド(27):)
前工程の生成物(63mg、0.079mmol)及び亜鉛末(＜10um、98+％純粋、108mg、1.65mmol)をTHF(4mL)と水(1mL)の混合物に溶解/懸濁させた。酢酸(0.180mL、3.14mmol)を該混合物に添加し、フラスコをラバーセプタムで密閉し、反応液を周囲温度で1時間撹拌した。粗混合物のLCMSにより完全な変換が示されたため、反応液をCelite上で濾過し、MeCNで洗い流し、濾液を真空中で濃縮した。粗生成物を50g C18 Aq Goldカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜80％MeCN、両方に0.05％酢酸、12分間)。最もきれいな生成物画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、一晩凍結乾燥させると、46mgの白色の固体が得られ、これは、LCMSにより88％純粋でしかなかった。これを1:1のMeCN/水(3mL)に溶解させ、2回注入でPhenomenex Gemini C18 5u、30×150mmカラムを用いるHPLCにより再精製し(水中40〜80％及び30〜70％MeCN、どちらの相も0.05％HOAc、20分間、30mL/分)、最もきれいな画分を濃縮し、凍結させ、上記のように凍結乾燥させると、表題化合物が白色の固体(31mg、48％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C41H53N4O12Clの計算値、768.3;実測値、751.2(M-H2O+H)、769.2(M+H)。
【化４８６】
2018516851.tif 000594
【０４６９】
(実施例6)
化合物29を、下記のように及び図10に示されているように、化合物28から合成した。
【０４７０】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(29))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aを用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、40mg、0.056mmol)及び2-フルオロ-4-ニトロ安息香酸(28)(26mg、0.140mmol)から調製すると、薄黄色の固体(16mg、35％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H46N4O12ClFの計算値、816.3;実測値、817.2(M+H)、839.2(M+Na)。
【０４７１】
(工程B:メイタン-NMA-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(29):)
表題化合物を、実施例5の工程Bを用いて、前工程の生成物(15mg、0.018mmol)から調製すると、白色の固体(8mg、50％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H48N4O10ClFの計算値、786.3;実測値、769.2(M-H2O+H)、787.2(M+H)、809.3(M+Na)。
【化４８７】
2018516851.tif 000595
【０４７２】
(実施例7)
化合物31を下記のように及び図11に示されているように合成した。
【０４７３】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミド(31))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-トリフルオロメチル-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aを用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、68mg、0.105mmol)及び2-トリフルオロメチル-4-ニトロ安息香酸(30)(37mg、0.157mmol)から調製すると、淡黄色の固体(82mg、90％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H46N4O12ClF3の計算値、866.3;実測値、867.1(M+H)、889.1(M+Na)。
【０４７４】
(工程B:メイタン-NMA-(2-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミド(31):)
表題化合物を、実施例5の工程Bを用いて、前工程の生成物(79mg、0.091mmol)から調製すると、白色の固体(29mg、35％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H48N4O10ClF3の計算値、836.3;実測値、818.8(M-H2O+H)、836.8(M+H)、858.0(M+Na)。
【化４８８】
2018516851.tif 000596
【０４７５】
(実施例8)
化合物33を下記のように及び図12に示されているように合成した。
【０４７６】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド(33))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メトキシ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aを用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、68mg、0.105mmol)及び2-メトキシ-4-ニトロ安息香酸(32)(32mg、0.162mmol)から調製すると、淡黄色の固体(78mg、90％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H49N4O13Clの計算値、828.3;実測値、811.1(M-H2O+H)、829.2(M+H)、851.2(M+Na)。
【０４７７】
(工程B:メイタン-NMA-(2-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド(33):)
表題化合物を、実施例5の工程Bを用いて、前工程の生成物(75mg、0.090mmol)から調製すると、白色の固体(62mg、79％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51N4O11Clの計算値、798.3;実測値、781.2(M-H2O+H)、799.2(M+H)、821.2(M+Na)。
【化４８９】
2018516851.tif 000597
【０４７８】
(実施例9)
化合物35を下記のように及び図13に示されているように合成した。
【０４７９】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミド(35))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-トリフルオロメチル-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、46mg、0.071mmol)及び3-トリフルオロメチル-4-ニトロ安息香酸(34)(25mg、0.106mmol)から調製すると、薄黄色の固体(37mg、61％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H46N4O12ClF3の計算値、866.3;実測値、849.2(M-H2O+H)、867.2(M+H)、889.2(M+Na)。
【０４８０】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-トリフルオロメチル-4-アミノ)ベンズアミド(35):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(36mg、0.042mmol)から調製すると、白色の固体(17mg、46％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H48N4O10ClF3の計算値、836.3;実測値、819.2(M-H2O+H)、837.2(M+H)、859.2(M+Na)。
【化４９０】
2018516851.tif 000598
【０４８１】
(実施例10)
化合物37を下記のように及び図14に示されているように合成した。
【０４８２】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-クロロ-4-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミド(37))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-クロロ-4-ニトロ-5-フルオロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、46mg、0.071mmol)及び3-トリフルオロメチル-4-ニトロ安息香酸(36、26mg、0.118mmol)から調製すると、白色の固体(33mg、55％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H45N4O12Cl2Fの計算値、850.2;実測値、833.1(M-H2O+H)、851.1(M+H)、873.1(M+Na)。
【０４８３】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-クロロ-4-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミド(37):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(36mg、0.042mmol)から調製すると、白色の固体(17mg、46％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H47N4O10Cl2Fの計算値、820.3;実測値、803.2(M-H2O+H)、821.2(M+H)、843.2(M+Na)。
【化４９１】
2018516851.tif 000599
【０４８４】
(実施例11)
化合物39を下記のように及び図16に示されているように合成した。
【０４８５】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2,5-ジフルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(39))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2,5-ジフルオロ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、48mg、0.074mmol)及び2,5-ジフルオロ-4-ニトロ安息香酸(38、27mg、0.133mmol)から調製すると、黄色の固体(37mg、60％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H45N4O12ClF2の計算値、834.3;実測値、817.2(M-H2O+H)、835.2(M+H)、857.2(M+Na)。
【０４８６】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2,5-ジフルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(39):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(36mg、0.043mmol)から調製すると、白色の固体(22mg、59％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H47N4O10ClF2の計算値、804.3;実測値、787.3(M-H2O+H)、805.3(M+H)、827.3(M+Na)。
【化４９２】
2018516851.tif 000600
【０４８７】
(実施例12)
化合物41を下記のように及び図17に示されているように合成した。
【０４８８】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(41))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-フルオロ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、47mg、0.072mmol)及び3-フルオロ-4-ニトロ安息香酸(40)(24mg、0.130mmol)から調製すると、黄色の固体(40mg、68％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H46N4O12ClFの計算値、816.3;実測値、799.2(M-H2O+H)、817.2(M+H)、839.2(M+Na)。
【０４８９】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(41):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(39mg、0.048mmol)から調製すると、白色の固体(24mg、60％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H48N4O10ClFの計算値、786.3;実測値、769.2(M-H2O+H)、787.2(M+H)、809.2(M+Na)。
【化４９３】
2018516851.tif 000601
【０４９０】
(実施例13)
化合物43を下記のように及び図18に示されているように合成した。
【０４９１】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-クロロ-4-アミノ)ベンズアミド(43))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-クロロ-4-アミノ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、45mg、0.069mmol)及び3-クロロ-4-ニトロ安息香酸(42)(26mg、0.129mmol)から調製すると、黄色の固体(36mg、62％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H46N4O12Cl2の計算値、832.2;実測値、815.2(M-H2O+H)、833.2(M+H)、855.2(M+Na)。
【０４９２】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-クロロ-4-アミノ)ベンズアミド(43):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(35mg、0.042mmol)から調製すると、白色の固体(24mg、67％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H48N4O10Cl2の計算値、802.3;実測値、785.2(M-H2O+H)、803.2(M+H)、825.1(M+Na)。
【化４９４】
2018516851.tif 000602
【０４９３】
(実施例14)
化合物45を下記のように及び図19に示されているように合成した。
【０４９４】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(5-アミノ-8-カルボキシキノリン)カルボキサミド(45))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(5-ニトロ-8-カルボキシキノリン)カルボキサミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、45mg、0.069mmol)及び5-ニトロ-8-カルボキシキノリン(44)(24mg、0.110mmol)から調製すると、淡黄色の固体(26mg、44％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C42H48N5O12Clの計算値、849.3;実測値、832.2(M-H2O+H)、850.2(M+H)、872.2(M+Na)。
【０４９５】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(5-アミノ-8-カルボキシキノリン)カルボキサミド(45):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(25mg、0.029mmol)から調製すると、淡黄色の固体(8mg、31％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C42H50N5O10Clの計算値、819.3;実測値、802.3(M-H2O+H)、820.3(M+H)。
【化４９５】
2018516851.tif 000603
【０４９６】
(実施例15)
化合物47を下記のように及び図20に示されているように合成した。
【０４９７】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ブロモ-4-アミノ)ベンズアミド(47))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ブロモ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、49mg、0.075mmol)及び3-ブロモ-4-ニトロ安息香酸(46)(30mg、0.122mmol)から調製すると、黄色の固体(38mg、58％)が得られた。最も多く存在する同位体について、MS(ESI、ポジティブ): C39H46N4O12BrClの計算値、876.2/878.2;実測値、861.1(M-H2O+H)、879.1(M+H)、901.1(M+Na)。
【０４９８】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ブロモ-4-アミノ)ベンズアミド(47):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(37mg、0.042mmol)から調製すると、白色の固体(28mg、74％)が得られた。最も多く存在する同位体について、MS(ESI、ポジティブ): C39H48N4O10BrClの計算値、846.2/848.2;実測値、831.1(M-H2O+H)、849.1(M+H)、871.2(M+Na)。
【化４９６】
2018516851.tif 000604
【０４９９】
(実施例16)
化合物49を下記のように及び図21に示されているように合成した。
【０５００】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド(49))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、49mg、0.075mmol)及び3-メトキシ-4-ニトロ安息香酸(48)(23mg、0.117mmol)から調製すると、黄色の固体(34mg、55％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H49N4O13Clの計算値、828.3;実測値、811.2(M-H2O+H)、829.3(M+H)、851.3(M+Na)。
【０５０１】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド(49):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(33mg、0.040mmol)から調製すると、白色の固体(25mg、74％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51N4O11Clの計算値、798.3;実測値、781.2(M-H2O+H)、799.2(M+H)。
【化４９７】
2018516851.tif 000605
【０５０２】
(実施例17)
化合物51を下記のように及び図22に示されているように合成した。
【０５０３】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メチル-4-アミノ)ベンズアミド(51))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メチル-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、49mg、0.075mmol)及び2-メチル-4-ニトロ安息香酸(50)(24mg、0.132mmol)から調製すると、淡黄色の固体(32mg、52％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H49N4O12Clの計算値、812.3;実測値、795.3(M-H2O+H)、813.3(M+H)、835.3(M+Na)。
【０５０４】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メチル-4-アミノ)ベンズアミド(51):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(30mg、0.037mmol)から調製すると、白色の固体(17mg、55％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51N4O10Clの計算値、782.3;実測値、765.2(M-H2O+H)、783.2(M+H)。
【化４９８】
2018516851.tif 000606
【０５０５】
(実施例18)
化合物53を下記のように及び図23に示されているように合成した。
【０５０６】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチル-4-アミノ)ベンズアミド(53))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチル-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、49mg、0.075mmol)及び3-メチル-4-ニトロ安息香酸(52)(26mg、0.143mmol)から調製すると、黄色の固体(34mg、56％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H49N4O12Clの計算値、812.3;実測値、795.2(M-H2O+H)、813.2(M+H)。
【０５０７】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチル-4-アミノ)ベンズアミド(53):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(33mg、0.041mmol)から調製すると、白色の固体(24mg、71％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51N4O10Clの計算値、782.3;実測値、765.2(M-H2O+H)、783.2(M+H)。
【化４９９】
2018516851.tif 000607
【０５０８】
(実施例19)
化合物55を下記のように及び図24に示されているように合成した。
【０５０９】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(8-アミノ-5-カルボキシキノリン)カルボキサミド(55))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(8-ニトロ-5-カルボキシキノリン)カルボキサミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、47mg、0.072mmol)及び8-ニトロ-5-カルボキシキノリン(54)(35mg、0.160mmol)から調製すると、淡黄色の固体(30mg、49％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C42H48N5O12Clの計算値、849.3;実測値、832.6(M-H2O+H)、850.7(M+H)。
【０５１０】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(8-アミノ-5-カルボキシキノリン)カルボキサミド(55):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(29mg、0.034mmol)から調製すると、淡黄色の固体(18mg、60％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C42H50N5O10Clの計算値、819.3;実測値、802.0(M-H2O+H)、820.0(M+H)。
【化５００】
2018516851.tif 000608
【０５１１】
(実施例20)
化合物60を下記のように及び図25に示されているように合成した。
【０５１２】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(60))
(工程A:Boc-L-バリン-L-シトルリン-(3-メトキシ-4-アミノ)安息香酸 t-ブチルエステル(57):)
表題化合物を、実施例2の工程Aの方法を用いて、Boc-L-バリン-L-シトルリン(3、100mg、0.267mmol)及び4-アミノ-3-メトキシ安息香酸 tert-ブチルエステル(56、61mg、0.273mmol)から調製すると、白色の固体(74mg、48％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C28H45N5O8の計算値、579.3;実測値、580.4(M+H)、602.6(M+Na)。
【０５１３】
(工程B:L-バリン-L-シトルリン-(3-メトキシ-4-アミノ)安息香酸(58):)
表題化合物を、実施例1の工程Cの方法を用いて、前工程の生成物(57、72mg、0.124mmol)から調製すると、オフホワイト色の固体(68mg、100％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C19H29N5O6の計算値、423.2;実測値、424.4(M+H)、847.4(2M+H)。
【０５１４】
(工程C: 6-(マレイミジル-カプロリル)-L-バリン-L-シトルリン-(3-メトキシ-4-アミノ)安息香酸(59):)
表題化合物を、実施例1の工程Dの方法を用いて、前工程の生成物(58、67mg、0.124mmol)から調製すると、白色の固体(45mg、59％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C29H40N6O9の計算値、616.3;実測値、617.5(M+H)、639.6(M+Na)。
【０５１５】
(工程D:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メトキシ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-Mal(60):)
表題化合物を、実施例1の工程Eの方法を用いて、前工程の生成物(59、44mg、0.071mmol)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、49mg、0.075mmol)から調製すると、白色の固体(14mg、16％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C61H82N9O17Clの計算値、1247.6;実測値、1231.1(M-H2O+H)、1249.1(M+H)、1271.1(M+Na)。
【化５０１】
2018516851.tif 000609
【０５１６】
(実施例21)
化合物63を下記のように及び図26に示されているように合成した。
【０５１７】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-6-アミン(63))
(工程A: Boc-6-アミノヘキサン酸スクシネートエステル:)
表題化合物を、実施例1の工程Aの方法を用いて、Boc-6-アミノヘキサン酸(64、502mg、2.17mmol)から調製すると、白色の固体(712mg、99％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C15H24N2O6の計算値、328.2;実測値、351.2(M+Na)。
【０５１８】
(工程B: Boc-(6-アミノ-カプロリル)-L-バリン-L-シトルリン(62):)
表題化合物を、実施例1の工程Dの方法を用いて、前工程の生成物(710mg、2.16mmol)及びL-バリン-L-シトルリンTFA塩(970mg、2.51mmol)から調製すると、淡い金色の固体(720mg、69％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C22H41N5O7の計算値、487.3;実測値、488.3(M+H)、(M+H)。
【０５１９】
(工程C:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-6-Boc-アミン:)
表題化合物を、実施例2の工程Aの方法を用いて、前工程の生成物(62、25mg、0.051mmol)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド(29、35mg、0.041mmol)から調製すると、白色の固体(17mg、33％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C61H87N9O16ClFの計算値、1255.6;実測値、1238.5(M-H2O+H)、1256.6(M+H)、1278.6(M+Na)。
【０５２０】
(工程D:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-4-アミノ)ベンズアミド-Cit-Val-Cap-6-アミン(63):)
前工程の生成物(16mg、0.013mmol)をアセトニトリル(MeCN、3mL)及び水(1mL)に溶解させ、トリフルオロ酢酸(TFA、1.0mL、13.0mmol)で処理し、フラスコをラバーセプタムで密閉し、アルゴンでパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。24時間後、該反応液を、真空中、周囲温度で一部濃縮し、水(約1mL)で希釈し、ISCOシステムによりC18 Aq RediSep Goldカラムで2回精製した(水中20〜80％MeCN、どちらの相も0.1％TFA)。LCMSによる最も純粋な画分を合わせ、真空中、周囲温度で一部濃縮し、-78℃で凍結させ、凍結乾燥させると、表題化合物が白色の固体(9mg、56％)として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C56H79N9O14ClFの計算値、1155.5;実測値、1156.6(M+H)、1178.6(M+Na)。
【化５０２】
2018516851.tif 000610
【０５２１】
(実施例22)
【０５２２】
化合物65を下記のように及び図27に示されているように合成した。
【０５２３】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-メトキシ-5-アミノ)ベンズアミド(65))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-メトキシ-5-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)及び2-メトキシ-5-ニトロ安息香酸(64)(25mg、0.127mmol)から調製すると、白色の固体(51mg、80％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H49ClN4O13の計算値、829.3;実測値、812.0(M-H2O+H)、830.0(M+H)、852.0(M+Na)。
【０５２４】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-メトキシ-5-アミノ)ベンズアミド(65):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(50mg、0.060mmol)から調製すると、白色の固体(19mg、40％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51ClN4O11の計算値、798.3;実測値、781.3(M-H2O)、799.3(M+H)、822.3(M+Na)。
【０５２５】
(実施例23)
化合物67を下記のように及び図28に示されているように合成した。
【０５２６】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-メトキシ)ベンズアミド(67))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ニトロ-4-メトキシ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)及び3-ニトロ-4-メトキシ安息香酸(66)(25mg、0.127mmol)から調製すると、白色の固体(46mg、72％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H49ClN4O13の計算値、829.3;実測値、812.0(M-H2O+H)、830.0(M+H)、852.0(M+Na)。
【０５２７】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-メトキシ)ベンズアミド(67):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(45mg、0.054mmol)から調製すると、白色の固体(23mg、53％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51ClN4O11の計算値、798.3;実測値、781.3(M-H2O)、799.3(M+H)、822.3(M+Na)。
【０５２８】
(実施例24)
化合物69を下記のように及び図29に示されているように合成した。
【０５２９】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミド(69))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ニトロ-5-フルオロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)及び3-ニトロ-5-フルオロ安息香酸(68)(24mg、0.127mmol)から調製すると、黄色の固体(37mg、59％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H46ClFN4O12の計算値、816.3;実測値、817.2(M+H)。
【０５３０】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-5-フルオロ)ベンズアミド(69):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(37mg、0.045mmol)から調製すると、白色の固体(9.1mg、24％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H48ClFN4O10の計算値、786.3;実測値、769.3(M-H2O)、787.3(M+H)。
【０５３１】
(実施例25)
化合物71を下記のように及び図30に示されているように合成した。
【０５３２】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-フルオロ-5-アミノ)ベンズアミド(71))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-フルオロ-5-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)及び2-フロウロ(flouro)-5-ニトロ安息香酸(70)(24mg、0.127mmol)から調製すると、黄色の固体(37mg、59％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H46ClFN4O12の計算値、816.3;実測値、799.3(M-H2O)、817.2(M+H)。
【０５３３】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-フルオロ-5-アミノ)ベンズアミド(71):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(37mg、0.045mmol)から調製すると、白色の固体(2.2mg、6％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H48ClFN4O10の計算値、786.3;実測値、769.3(M-H2O)、787.3(M+H)。
【０５３４】
(実施例26)
化合物73を下記のように及び図31に示されているように合成した。
【０５３５】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ)ベンズアミド(73))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)及び3-ニトロ安息香酸(72)(21mg、0.127mmol)から調製すると、白色の固体(34mg、56％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H47ClN4O12の計算値、798.3;実測値、781.2(M-H2O)、799.3(M+H)。
【０５３６】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ)ベンズアミド(73):)
【０５３７】
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(34mg、0.043mmol)から調製すると、白色の固体(9.3mg、27％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H49ClN4O10の計算値、768.3;実測値、751.2(M-H2O)、769.2(M+H)。
【０５３８】
(実施例27)
化合物75を下記のように及び図32に示されているように合成した。
【０５３９】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-フルオロ)ベンズアミド(75))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ニトロ-4-フルオロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)及び3-ニトロ-4-フルオロ安息香酸(74)(24mg、0.127mmol)から調製すると、白色の固体(34mg、54％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H46ClFN4O12の計算値、816.3;実測値、799.3(M-H2O)、817.2(M+H)。
【０５４０】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アミノ-4-フルオロ)ベンズアミド(75):)
【０５４１】
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(34mg、0.042mmol)から調製すると、白色の固体(12mg、37％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H48ClFN4O10の計算値、786.3;実測値、769.3(M-H2O)、787.3(M+H)。
【０５４２】
(実施例28)
化合物77を下記のように及び図33に示されているように合成した。
【０５４３】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-アジピン酸-NHS(77))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(4-アミノ)ベンズアミド-アジピン酸(76):)
表題化合物を27(20mg、0.026mmol)及びアジピン酸無水物(17mg、0.133mmol)から調製し、丸底フラスコに量り入れ、ピリジン(1.5mL)に溶解させた。フラスコをラバーセプタムで密閉し、窒素でパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。4時間後、該反応液をISCOシステムにより30g C18 RediSep Gold Aqカラムで直接精製した(勾配溶出:水中20〜90％MeCN、両方に0.05％酢酸、20分間)。生成物を含む画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、凍結乾燥させると、オフホワイト色の固体(16mg、67％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C45H57ClN4O13の計算値、896.4;実測値、879.4(M-H2O)、897.4(M+H)。
【０５４４】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(4-アミノ)ベンズアミド-アジピン酸-NHS(77):)
【０５４５】
表題化合物を、実施例1の工程Aの方法を用いて、前工程の生成物(76、16mg、0.017mmol)から調製すると、白色の固体(10mg、58％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C49H60ClN5O15の計算値、993.5;実測値、976.0(M-H2O)、994.0(M+H)。
【化５０３】
2018516851.tif 000611
【０５４６】
(実施例29)
化合物78を下記のように及び図34に示されているように合成した。
【０５４７】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-4-アミノベンズアミド-Cap-Mal(78))
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、27(15mg、0.019mmol)及び6-マレイミドヘキサン酸(6mg、0.029mmol)から調製すると、オフホワイト色の固体(9.8mg、52％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C49H60ClN5O13の計算値、962.5;実測値、944.8(M-H2O)、962.8(M+H)。
【化５０４】
2018516851.tif 000612
【０５４８】
(実施例30)
化合物80を下記のように及び図35に示されているように合成した。
【０５４９】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-メチルスルホニル-4-アミノ)ベンズアミド(80))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチルスルホニル-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、40mg、0.062mmol)及び3-メチルスルホニル-4-ニトロ安息香酸(79)(25mg、0.102mmol)から調製すると、黄色の固体(37mg、69％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C50H49N4O14ClSの計算値、876.3;実測値、857.6(M-H2O+H)、875.6(M+H)、897.6(M+Na)。
【０５５０】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-メチルスルホニル-4-アミノ)ベンズアミド(80):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(36mg、0.041mmol)から調製すると、白色の固体(28mg、76％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51N4O12ClSの計算値、846.3;実測値、829.1(M-H2O+H)、847.1(M+H)、869.1(M+Na)。
【化５０５】
2018516851.tif 000613
【０５５１】
(実施例31)
化合物82を下記のように及び図36に示されているように合成した。
【０５５２】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-ヒドロキシ-4-アミノ)ベンズアミド(82))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ヒドロキシ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、47mg、0.072mmol)及び3-ヒドロキシ-4-ニトロ安息香酸(81)(20mg、0.109mmol)から調製すると、黄色の固体(29mg、49％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H47N4O13Clの計算値、814.3;実測値、796.8(M-H2O+H)、814.8(M+H)、836.8(M+Na)。
【０５５３】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-ヒドロキシ-4-アミノ)ベンズアミド(82):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(28mg、0.034mmol)から調製すると、淡黄色の固体(20mg、69％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51N4O12ClSの計算値、784.3;実測値、767.7(M-H2O+H)、785.7(M+H)。
【化５０６】
2018516851.tif 000614
【０５５４】
(実施例32)
化合物84を下記のように及び図37に示されているように合成した。
【０５５５】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(2-アミノ)ベンズアミド(84))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、30mg、0.046mmol)及び2-ニトロ安息香酸(83)(15mg、0.092mmol)から調製すると、黄色の固体(26mg、71％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H47N4O12Clの計算値、798.3;実測値、799.3(M+H)、821.3(M+Na)。
【０５５６】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(2-アミノ)ベンズアミド(84):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(24mg、0.038mmol)から調製すると、白色の固体(13mg、54％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C39H49N4O10Clの計算値、768.3;実測値、769.0(M+H)。
【化５０７】
2018516851.tif 000615
【０５５７】
(実施例33)
化合物86を下記のように及び図38に示されているように合成した。
【０５５８】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(4-メトキシ-2-アミノ)ベンズアミド(86))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-メトキシ-2-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、30mg、0.046mmol)及び4-メトキシ-2-ニトロ安息香酸(85)(18mg、0.092mmol)から調製すると、黄色の固体(18mg、47％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H49N4O13Clの計算値、828.3;実測値、829.4(M+H)、851.3(M+Na)。
【０５５９】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(4-メトキシ-2-アミノ)ベンズアミド(86):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(18mg、0.022mmol)から調製すると、白色の固体(15mg、84％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C40H51N4O11Clの計算値、798.3;実測値、799.1(M+H)。
【化５０８】
2018516851.tif 000616
【０５６０】
(実施例34)
化合物88を下記のように及び図39に示されているように合成した。
【０５６１】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-モルホリノ-4-アミノ)ベンズアミド(88))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-モルホリノ-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、30mg、0.046mmol)及び3-モルホリノ-4-ニトロ安息香酸(87)(23mg、0.092mmol)から調製すると、黄色の固体(28mg、70％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C43H54N5O13Clの計算値、883.3;実測値、884.5(M+H)、906.3(M+Na)。
【０５６２】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-モルホリノ-4-アミノ)ベンズアミド(88):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(28mg、0.032mmol)から調製すると、オフホワイト色の固体(12mg、52％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C43H56N5O11Clの計算値、853.4;実測値、853.9(M+H)、875.9(M+Na)。
【化５０９】
2018516851.tif 000617
【０５６３】
(実施例35)
化合物90を下記のように及び図40に示されているように合成した。
【０５６４】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-(3-アセトアミド-4-アミノ)ベンズアミド(90))
(工程A:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-アセトアミド-4-ニトロ)ベンズアミド:)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、メイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)及び3-アセトアミド-4-ニトロ安息香酸(89)(29mg、0.129mmol)から調製すると、ふわふわした淡黄色の固体(36mg、54％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C41H50N5O13Clの計算値、855.3;実測値、839.1(M-H2O)、857.1(M+H)、879.1(M+Na)。
【０５６５】
(工程B:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-(3-アセトアミド-4-アミノ)ベンズアミド(90):)
表題化合物を、実施例5の工程Bの方法を用いて、前工程の生成物(35mg、0.042mmol)から調製すると、白色の固体(19mg、57％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C41H52N5O11Clの計算値、825.3;実測値、808.4(M-H2O)、826.4(M+H)。
【化５１０】
2018516851.tif 000618
【０５６６】
(実施例36)
化合物100を下記のように及び図41に示されているように合成した。
【０５６７】
(メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-cap-ジブロモメチルアクリル(100))
(工程A: 3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルクロリド(92):)
磁気撹拌子及び窒素注入口を備えた10mLの丸底フラスコに、3-ロモ(romo)-2-ブロモメチル-プロピオン酸(91、1.0g; 4.1mmol)及び塩化チオニル(3.0mL)を仕込んだ。この溶液を3時間加熱還流させ、濃縮すると、0.90g(84％収率)が褐色の油状物として得られた。
【化５１１】
2018516851.tif 000619
【０５６８】
(工程B: 6-アミノ-ヘキサン酸 tert-ブチルエステル(94):)
磁気撹拌子及び窒素注入口を備えた50mLの丸底フラスコに、6-アミノヘキサン酸(93、2.0g; 15mmol)及び塩化チオニル(5.0mL; 69mmol; 4.5当量)を仕込んだ。この溶液を30℃以下で2時間撹拌し、真空中で濃縮乾固させた。褐色の半固体に、t-BuOH(5.0mL; 87mmol; 5.7当量)中の重炭酸ナトリウム(2.6g; 30mmol; 2.0当量)のスラリーを添加し、スラリーを周囲温度でもう2時間撹拌した。ブタノールを、真空中、40℃で除去した。粘度が高い白色のスラリーを酢酸エチルで希釈し、4部の1N NaOH、3部のH2O、1部のブラインで洗浄した。有機化合物をNa2SO4上で乾燥させ、濾過し、濃縮すると、2.2g(77％収率)が無色の油状物として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C10H21NO2の計算値、187.3;実測値、188.4(M+H)。
【化５１２】
2018516851.tif 000620
【０５６９】
(工程C: 6-(3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルアミノ)-ヘキサン酸 tert-ブチルエステル(95):)
磁気撹拌子及び窒素注入口を備えた50mLの丸底フラスコに、DCM(5.0mL)中の6-アミノヘキサン酸 tert-ブチルエステル(94、0.50g; 2.7mmol)及びジメチルアミノピリジン(0.03g; 0.27mmol; 0.10当量)を仕込んだ。この溶液を氷浴で0℃に冷却した。3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルクロリド(92、0.90g; 3.4mmol; 1.2当量)をDCM(5mL)に溶解させ、反応混合物に0℃でゆっくりと添加した。撹拌し、周囲温度まで一晩ゆっくりと温めた。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、有機混合物をH2O、5％NaHCO3、及びブラインで洗浄した。有機物をNa2SO4上で乾燥させ、濾過し、濃縮し、ヘキサン中の0〜100％酢酸エチルで溶出させるシリカゲルカラムで精製すると0.49g(42％収率)が透明な黄色の油状物として得られた。
【化５１３】
2018516851.tif 000621
【０５７０】
(工程D: 6-(3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルアミノ)-ヘキサン酸(96):)
磁気撹拌子及び窒素注入口を備えた50mLの丸底フラスコに、DCM(10mL)中の6-(3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルアミノ)-ヘキサン酸 tert-ブチルエステル(95、0.26g; 0.62mmol)及びトリフルオロ酢酸(0.70mL; 9.3mmol; 15当量)を仕込んだ。この溶液を周囲温度で一晩撹拌し、濃縮乾固させ、アセトニトリル及びH2O(各々1.0mL)に溶解させ、凍結させ、凍結乾燥させると、0.22g(100％)が固体として得られた。MS(ESI、ポジティブ): C10H17Br2NO3の計算値、359.0、実測値358.0、360.0、362.0(M+H)、380.0、382.0、384.0(M+Na)、356.0、358.0、360.0(M-H)。
【化５１４】
2018516851.tif 000622
【０５７１】
(工程E: Boc-Val-Cit-4-アミノ安息香酸(97):)
表題化合物を実施例1の工程Dの生成物(6、100mg、0.254mmol)及びジ-tert-ブチルジカルボネート(61mg、0.279mmol)から調製し、これを丸底フラスコに量り入れ、THF(3mL)及びH2O(1.5mL)中の1M NaOH(2mL)で処理した。フラスコをラバーセプタムで密閉し、反応液を周囲温度で一晩撹拌し、真空中で濃縮し、1M HCl(2mL)を滴加してpH 7に中和した。水性反応液を酢酸エチルで、有機層をNa2SO4上で乾燥させ、濾過し、濃縮すると、オフホワイト色の固体(93mg、74％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C23H35N5O7の計算値、493.5;実測値、394.2(M+1-Boc)、494.2(M+H)、516.2(M+Na)。
【０５７２】
(工程F:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-Boc(98):)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、前工程の生成物であるBoc-Val-Cit-4-アミノ安息香酸(97、76mg、0.154mmol)及びメイタンシン-N-メチル-L-アラニン(9、50mg、0.077mmol)から調製すると、白色の固体(22mg、26％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C55H77ClN8O15の計算値、1124.5;実測値、1107.2(M-H2O)、1125.3(M+H)、1147.2(M+Na)。
【０５７３】
(工程G:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val(99):)
表題化合物を前工程の生成物(98、20mg、0.018mmol)から調製し、丸底フラスコに量り入れ、ACN(3mL)及びH2O(1mL)に溶解させ、TFA(1mL)で処理した。フラスコをラバーセプタムで密閉し、窒素でパージし、反応液を周囲温度で撹拌した。48時間後、該反応液をISCOシステムにより30g C18 RediSep Gold Aqカラムで直接精製した(勾配溶出:水中10〜65％MeCN、両方に0.05％酢酸、20分間)。生成物を含む画分を合わせ、真空中で一部濃縮し、ドライアイス上で凍結させ、凍結乾燥させると、オフホワイト色の固体(8mg、46％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C50H69ClN8O13の計算値、1024.5;実測値、1007.2(M-H2O)、1026.2(M+H)。
【０５７４】
(工程H:メイタンシン-N-メチル-L-アラニン-N-4-アミノベンズアミド-Cit-Val-カプリル-ビス(BrMe)アクリルアミド(100):)
表題化合物を、実施例5の工程Aの方法を用いて、前工程の生成物(99、8mg、0.008mmol)及び6-(3-ブロモ-2-ブロモメチル-プロピオニルアミノ)-ヘキサン酸(96)から調製すると、白色の固体(8mg、75％)が得られた。MS(ESI、ポジティブ): C60H84Br2ClN9O15の計算値、1363.4;実測値、1363.1(M+H)。
【化５１５】
2018516851.tif 000623
【０５７５】
(実施例37)
(コンジュゲートの調製及び特徴解析)
下記の手順を用いて、5つの抗体を本開示のリンカー-ペイロード化合物にコンジュゲートさせた。これらの実験で使用される4つの標的化抗体は:(1)WO2007002222A2号に示されているようなクローンAB-PG1-XG1-006の重鎖及び軽鎖可変ドメインを有するPSMA抗体、(2)WO2007001851号のクローン3A5に由来する可変領域を有する抗MUC16抗体、並びに(3)WO2015026907A1号に示されているようなクローンH1H6765P及びH1H6958N2の重鎖及び軽鎖可変ドメインを有する2つのPRLR抗体であった。全てのモノクローナル抗体をCHO細胞で発現させ、プロテインAにより精製した。癌研究と全く関係のない抗原に由来する非結合アイソタイプ対照も使用した。
【０５７６】
(実施例38)
(化合物10のコンジュゲーション方法)
(マレイミドのコンジュゲーション方法)
50mM HEPES、150mM NaCl、pH 7.5中の抗体(1〜10mg/ml)を、1mMジチオスレイトールで、37℃で30分間で処理した。ゲル濾過(G-25、pH 4.5の酢酸ナトリウム)後、DMSO(10mg/ml)中のマレイミドリンカーペイロード誘導体10、15、20、25、60、及び78(1.2当量/SH基)を還元された抗体に添加し、混合物を1M HEPES(pH 7.4)でpH 7.0に調整した。1時間後、反応を過剰のN-エチルマレイミドでクエンチした。コンジュゲートをサイズ排除クロマトグラフィーにより精製し、滅菌濾過した。タンパク質濃度及びペイロード対抗体比をUVスペクトル分析により決定した。サイズ排除HPLCにより、使用した全てのコンジュゲートが95％を超えて単量体であることが立証され、RP-HPLCにより、0.5％未満のコンジュゲートされていないリンカーペイロードが存在することが立証された。全てのコンジュゲート抗体を、Hamblettらの文献、Cancer Res 2004 10 7063に従って、リンカーペイロードローディング値について、UVにより分析した。収率及びペイロード対抗体比は、表1に報告されている。
【０５７７】
(実施例39)
(活性エステルのコンジュゲーション方法)
50mM HEPES、150mM NaCl、pH 8.0、及び15％(v/v)DMA中の抗体(1〜10mg/ml)を、6倍過剰の化合物77と、周囲温度で1〜2時間コンジュゲートさせた。コンジュゲートをサイズ排除クロマトグラフィーにより精製し、滅菌濾過した。タンパク質及びリンカーペイロード濃度をUVスペクトル分析により決定した。サイズ排除HPLCにより、使用した全てのコンジュゲートが95％を超えて単量体であることが立証され、RP-HPLCにより、0.5％未満のコンジュゲートされていないリンカーペイロードが存在することが立証された。収率は、タンパク質に基づいて、表1に報告されている。全てのコンジュゲート抗体を、Hamblettらの文献、Cancer Res 2004 10 7063に従って、リンカーペイロードローディング値について、UVにより分析した。収率及びペイロード対抗体比は、表1に報告されている。
【表１】
2018516851.tif 000624
2018516851.tif 000625
【０５７８】
(実施例40)
(インビトロのリンカー-ペイロード無細胞酵素アッセイ)
(カテプシンBのインキュベーション)
インビトロの無細胞酵素アッセイ手順をDubowchikらの文献、Bioconjugate Chem. 2002 13 855から取り入れた。リンカーペイロード10を、25mM酢酸ナトリウムバッファー、1mM EDTA、pH 5.0中に、最終100μg/mLで準備し、37℃でプレインキュベートした。カテプシンB(Sigma # C8571)を、2当量のカテプシンBストックに対して1当量の30mM DTT、15mM EDTAで、室温で15分間活性化させた。活性化カテプシンB溶液を基質溶液に1:20のモル比で添加した(対照試料については、精製H2Oを活性化カテプシンBの代わりに添加した)。試料を37℃で一晩インキュベートした。得られた試料をQ1スキャンに通してLC-MSにより検出する。
【０５７９】
(LC-MS検出)
試料を12,000gで5分間遠心分離する。上清を回収し、上清から20μl/分で、0.3ml/分の30:70の移動相B:A(移動A: H2O中の0.1％FA;移動相B:アセトニトリル中の0.1％FA)の注入の組合せによって、液体クロマトグラフィー-質量分析(Thermo Quantiva)により分析した。MS1をリンカーペイロード又はペイロードのいずれかの分子イオンの検出のための適切な範囲に設定する。上清は、791.27 M+Naの質量(C39H49ClN4O10のモノアイソトピック質量の計算値、768.31)を有する予測されたペイロードのp-アミノ-ベンズアミドメイタンシノイド(27)を含有し、カテプシンBを含まない対照試料は、1240.50 M+Naの質量(C60H80ClN9O16のモノアイソトピック質量の計算値、1217.54)を有する10を含有していた。予測されたペイロード分子イオンは、対照試料中に検出されなかった。
【０５８０】
本実施例の結果は重要であり、それは、1つには、カテプシンBによる10のタンパク質分解が、酵素が存在する細胞でのADCの内在化の後にしか起こらないからである。抗体が細胞傷害性ペイロードを標的細胞に直接送達するので、オフターゲット効果は軽減されるはずである。
【０５８１】
(実施例41)
(インビトロでの細胞傷害性アッセイ)
本実施例では、抗原を発現する腫瘍細胞をインビトロで死滅させる様々な抗体-薬物コンジュゲート又はその関連ペイロードの能力を評価した。
【０５８２】
Ovcar3(Muc16+)又はC4-2(PSMA+)細胞を、完全成長培地中、1ウェル当たり3000(C42)細胞で96ウェルプレートに播種し、一晩成長させた。細胞生存曲線については、連続希釈したコンジュゲート又はペイロードを300nM〜5pMの範囲の最終濃度で細胞に添加し、3日間インキュベートした。生存を測定するために、細胞をCCK8(Dojindo)とともに最後の1〜3時間インキュベートし、450nmでの吸光度(OD450)をVictor(Perkin Elmer)で決定した。ジギトニン(40nM)処理細胞から決定されたバックグラウンドOD450レベルを全てのウェルから差し引いた。生存は、未処理対照のパーセンテージとして表される。IC50値は、10点応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式から決定した。全てのコンジュゲート曲線及びIC50値をペイロード当量について補正する。
【０５８３】
アイソタイプ対照結合の271倍のPSMAを天然に発現しているC4-2細胞(前立腺癌株)では、メイタンシノイドコンジュゲートPSMA-10及びPSMA-25は、それぞれ、0.11及び0.59nMのIC50値を有していた(図2〜5)。ペイロード27及び33は単独で、それぞれ、0.20及び0.55nMのIC50値を有していた。裸のPSMA抗体及びアイソタイプ対照は、アッセイされた濃度で抗増殖活性を欠いていた。
【０５８４】
アイソタイプ対照結合の320倍のMUC16を天然に発現しているOvcar-3細胞(卵巣癌株)では、メイタンシノイドコンジュゲートMUC16-10及びMUC16-25は、それぞれ、0.74及び0.63nMのIC50値を有していた(図2〜5)。ペイロード27及び33は単独で、それぞれ、0.06及び0.11nMのIC50値を有していた。裸のMUC16抗体及びアイソタイプ対照は、アッセイされた濃度で抗増殖活性を欠いていた。
【０５８５】
表2は、Ovcar3(Muc16+)又はC4-2(PSMA+)細胞の両方におけるペイロードのみの抗増殖能を掲載している。化合物は全て、ナノモル濃度未満の活性を保有し、化合物35及び37は1桁のピコモル濃度のIC50又はそれに近かった。
【表２】
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【０５８６】
(実施例42)
(抗体発現)
アッセイ/実験の種類:部位特異的コンジュゲーションモチーフを含有するように修飾された抗体のクローニング、発現、及び精製。
【０５８７】
本実施例は、トランスグルタミナーゼ反応による部位特異的コンジュゲーションを可能にするアミノ酸配列を有する抗体の作製を提供する。
【０５８８】
抗体を作製するために、ヒトIgG1のCH1、CH2、及びCH3ドメイン(UniprotKBアクセッション番号P01857のアミノ酸1〜330)をコードするプラスミドで突然変異生成を行い、QuikChange Lightning多部位特異的突然変異生成キット(Agilent, # 210516)を用いて、位置180におけるNからQへの突然変異を生じさせた。2つの抗体可変領域重(VH)断片(1つは、抗ヒトPRLR抗体のVHをコードする断片、H1H6958N2(国際特許出願WO 2015026907 A1号)、もう1つは、外因性抗原を認識するアイソタイプ対照抗体のVHをコードする断片)を選択した。プライマーを設計し(idtdna.com)、Kapa HiFi DNAポリメラーゼ(Kapa Biosciences; # KK2102)を用いて、これら2つの抗体のVH領域を増幅させた。PCR増幅が進行している間に、ヒトIgG1 N180Q突然変異を含むプラスミドを、LguI酵素(Fermentas, # FD1934)で、37℃で30分間消化した。増幅が終了したら、消化されたヒトIgG1プラスミド及び両方のPCR産物を、SYBR Safe染料(Life Technologies, # S33102)を含む1％アガロースゲル上で泳動させた。適切なサイズのバンドを同定し、きれいなカミソリの刃を用いてゲルから切り出した。切り出された産物は全て、ゲル抽出キット(Qiagen, #28704)を用いて精製した。その後、3:1の比の消化されたヒトIgG1ベクターとVH PCR産物を用いて、In-Fusionクローニング反応(Clontech, # 638911)を行い、その後、50℃で15分間インキュベートした。インキュベーション後、各々の反応液をミックス・アンド・ゴー(Mix and Go)コンピテント細胞(Zymo, # T3007)に形質転換し、氷上で5分間インキュベートし、コンピテント細胞をLB＋カルベニシリンプレート(Teknova, VWR, # 101320-126)にプレーティングし、これを37℃で一晩インキュベートした。
【０５８９】
翌日、単一のコロニーをプレートから100μg/mLカルベニシリンを含むLBブロスに播種し、37℃の卓上式インキュベーター中で振盪させて、一晩成長させた。その後、細胞を遠心分離によりペレット化し、PureLink HiPureプラスミドミニプレップキット(Thermo Fisher, #K210003)を用いて、Hamilton Starletロボットでミニプレップ処理した。精製DNAをシークエンシングし、結果をSequencherソフトウェア(GeneCodes)を用いて解析した。各々のライゲーション反応からのクローンをミックス・アンド・ゴー(Mix and Go)コンピテント細胞への再形質転換用に選択し、氷上で5分間インキュベートし、コンピテント細胞を、カルベニシリンを含むLBプレートにプレーティングし、これを37℃で一晩インキュベートした。
【０５９０】
翌日、単一のコロニーを各々のプレートから取り、100μg/mLカルベニシリンを含むLBブロス中で3〜4時間成長させた。その後、試料を、100μg/mlカルベニシリンを含むLBブロス中に希釈し、37℃の振盪式インキュベーターに移して、一晩成長させた。その後、マキシプレップDNA抽出を両方のプラスミドに対して行い、全DNAオープンリーディングフレームをシークエンシングした。配列が確認されれば、重鎖DNAを、先にクローニングされていた関連のある軽鎖DNAと一緒に、CHO細胞株に安定にトランスフェクトして、各々の抗体を産生させた。
【０５９１】
N180Q Fc突然変異を含むH1H6958N2(国際特許出願WO 2015026907 A1号)はPRLR-Qと称され、N180Q Fc突然変異も含む外因性抗原を認識するアイソタイプ対照抗体はアイソタイプ対照-Qと称される。
【０５９２】
(実施例43)
(細菌トランスグルタミナーゼコンジュゲーション)
【０５９３】
PRLR-Q(MW 145438Da)抗体及びアイソタイプ対照-Q(MW 144602Da)抗体を、PBS pH 7.4中、1〜10mg/mLでコンジュゲートさせた。リンカーペイロード63を抗体よりも10〜25倍モル濃度過剰で添加し、抗体1mg当たり1〜5ユニットの細菌トランスグルタミナーゼ(Zedira, T1001)を添加することにより酵素反応を開始させ、振盪させながら、37℃で4〜16時間インキュベートした。コンジュゲートをサイズ排除クロマトグラフィーにより精製し、滅菌濾過した。タンパク質及びリンカーペイロード濃度をUVスペクトル分析により決定した。サイズ排除HPLCにより、使用した全てのコンジュゲートが95％を超えて単量体であることが立証された。収率は、タンパク質に基づいて、表1に報告されている。全てのコンジュゲート抗体を、Hamblettらの文献、Cancer Res 2004 10 7063に従って、リンカーペイロードローディング値について、UVにより分析した。さらに、コンジュゲートを、Acquity UPLCと連動したWaters Synapt G2-Si QTOF質量分析を用いて、リンカーペイロードローディングについて、ESI-MSにより分析した。クロマトグラフィーによる分離を、C4カラム(Waters protein BEH C4、50mm×1mm、1.7μm)で、25分の勾配(分:移動相Bのパーセンテージ; 0:20％、1:20％、18:40％、18.1:90、20:95％、20.8:95％、20.9:20％25:20％)で達成した。移動相Aは、水中の0.1％ギ酸であり、移動相Bは、アセトニトリル中の0.1％ギ酸であった。流速は、100μl/分に設定した。検出器TOFスキャンは、m/z 700〜5000、25分間から設定し、主なパラメータは掲載されている通りであった(キャピラリー電圧  3.2kV;サンプリングコーン  150;ソースオフセット  80;ソース温度  120℃;脱溶媒和温度  500℃;トラップ衝突エネルギー  30;移動衝突エネルギー  オフ;ガスコントロール  オフ;分解  四重極: LM分解  4.7)。合わせたスペクトルを、MassLynxソフトウェアのMaxEnt関数を用いてデコンボリューション処理した。得られる分子イオンは、強度に従って加重したとき、表3に掲載されているローディングに対応した。実際の質量分析(mass spec)スペクトルは、図42及び43に掲載されている。
【０５９４】
表3.化合物63のPRLR-Q及びアイソタイプ対照-Qコンジュゲートにおける強度加重平均リンカー-ペイロードローディングのまとめ
【表３】
2018516851.tif 000627
【０５９５】
(実施例44)
未修飾H1H6958N2、PRLR-Q、及びPRLR-Q-63のいずれかである精製抗PRLR抗体に対するヒトPRLR結合の平衡解離定数(KD値)を、Biacore 3000機器を用いるリアルタイム表面プラズモン共鳴バイオセンサーを用いて決定した。Biacoreセンサー表面を、モノクローナルマウス抗ヒトFc抗体(GE, # BR-1008-39)とのアミンカップリングによってまず誘導体化して、抗PRLRモノクローナル抗体を捕捉した。結合試験は全て、0.01M HEPES pH 7.4、0.15M NaCl、3mM EDTA、及び0.05％v/v界面活性剤Tween-20(HBS-ETランニングバッファー)中、25℃及び37℃で行った。HBS-ETランニングバッファー(40nM〜3.33nMの範囲)中の、C-末端myc-myc-ヘキサヒスチジンタグを有する発現された様々な濃度のヒトPRLR細胞外ドメイン(hPRLR-MMH;特許出願WO 2015026907 A1号に記載されている配列番号401)を、抗PRLR抗体が捕捉された表面の上に、50μL/分の流速で4分間注入し、HBS-ETランニングバッファー中でのその解離を8分間モニタリングした。Scrubber 2.0c曲線フィッティングソフトウェアを用いて、リアルタイムセンサーグラムを1:1結合モデルにフィッティングさせることにより、反応速度論的会合速度定数(ka)及び解離速度定数(kd)を決定した。結合解離平衡定数(KD)及び解離半減期(t 1/2)を以下のような反応速度論的速度定数から計算した:
【数１】
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。
【０５９６】
25℃での様々な抗PRLR抗体に対するhPRLR-MMH結合の結合反応速度パラメータを表4に示す。25℃で、hPRLR-MMHは、1.09nMのKD値で親抗体H1H6958N2に結合した。ヒトPRLR-MMHは、850pMのKD値でPRLR-Qに結合し、1.50nMのKD値でPRLR-Q-63に結合した。
表4: 25℃でのhPRLR-MMHに対する抗PRLR抗体結合の結合反応速度パラメータ。
【表４】
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【０５９７】
(実施例45)
本実施例は、本明細書に提供されるコンジュゲートのための細胞傷害性アッセイを提供する。63、60、77、及び78とコンジュゲートされた抗PRLR抗体がPRLR発現細胞株を死滅させる能力を評価するために、その細胞表面に27,000コピーを超えるヒトPRLRを発現することが以前に明らかにされているT47D腺管癌株(ATCC, # HTB-133)を用いたインビトロの細胞傷害性アッセイを利用した。
【０５９８】
本アッセイのために、T47D細胞を、10％FBS、NEAA、及びペニシリン/ストレプトマイシンが補充されたDMEMを含む培地(完全培地)中、2,000細胞/ウェルで、白色の96ウェルプレートに播種した。これらを、37℃、5％CO2で一晩成長させた。細胞生存曲線を決定するために、翌日、抗体薬物コンジュゲート、コンジュゲートされていない抗体、又は遊離のペイロードを、完全培地中、100nM〜0.01nMの範囲の最終連続希釈で細胞に添加し、その後、さらに5日間インキュベートした。残存する生細胞を溶解させて、そのATPを放出させる試薬、ATPの分解を妨げるATPアーゼ阻害剤、並びにルシフェリン及び発光反応を触媒するルシフェラーゼを含む、CellTiter-Glo(商標)試薬(Promega, G7571)を各々のウェルに添加した後、ルシフェラーゼ活性を検出した。培養物中の死細胞はATPを合成せず、その放出されたATPはいずれも内在性ATPアーゼによって破壊されるので、CellTiter-Gloを添加する前の生細胞がATPの唯一の供給源となる。相対光単位(RLU)をVictorルミノメーター(PerkinElmer)で測定し、結果を10点応答曲線(GraphPad Prism)に対する4パラメータロジスティック方程式を用いて決定した。全ての測定値及び計算IC50値をペイロード当量について補正した。IC50値は全てnM濃度で表され、死滅率は、試験した最高濃度について報告されている。結果は、図45〜48にまとめられている。
【０５９９】
図44に示すように、63と部位特異的にコンジュゲートされた抗PRLR抗体(PRLR-Q-63)は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC50は1.1nM、最大死滅率は55％であった。遊離のペイロード29は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC50は0.07nM、最大死滅率は67％であった。63とコンジュゲートされたアイソタイプ対照抗体(アイソタイプ対照-Q-63)は、T47D細胞の死滅を示さず、コンジュゲートされていない抗PRLR抗体(PRLR-Q)は、T47D細胞の死滅を示さなかった。
【０６００】
図45に示すように、60とコンジュゲートされた抗PRLR抗体(PRLR-60)は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC50は0.6nM、最大死滅率は60％であった。遊離のペイロード49は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC50は0.03nM、最大死滅率は69％であった。60とコンジュゲートされたアイソタイプ対照抗体(アイソタイプ対照-60)は、T47D細胞の死滅を示さず、コンジュゲートされていない抗PRLR抗体(PRLR)は、T47D細胞の死滅を示さなかった。
【０６０１】
図46に示すように、77とコンジュゲートされた抗PRLR抗体(PRLR-77)は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC50は0.4nM、最大死滅率は69％であった。遊離のペイロード27は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC50は0.1nM、最大死滅率は67％であった。77とコンジュゲートされたアイソタイプ対照抗体(アイソタイプ対照-77)は、T47D細胞の死滅を示さず、コンジュゲートされていない抗PRLR抗体(PRLR)は、T47D細胞の死滅を示さなかった。
【０６０２】
図47に示すように、78とコンジュゲートされた抗PRLR抗体(PRLR-78)は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC50は0.9nM、最大死滅率は61％であった。遊離のペイロード27は、T47D細胞の細胞傷害性を示し、IC50は0.1nM、最大死滅率は67％であった。78とコンジュゲートされたアイソタイプ対照抗体(アイソタイプ対照-78)は、T47D細胞の死滅を示さず、コンジュゲートされていない抗PRLR抗体(PRLR)は、T47D細胞の死滅を示さなかった。
【０６０３】
表5は、Ovcar3(Muc16+)、C4-2(PSMA+)、及びT47D(PRLR+)細胞におけるペイロードのみの抗増殖能を掲載している。
【表５】
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【０６０４】
上記の実施態様及び実施例は、単に例示的かつ非限定的であることが意図される。当業者は、具体的な化合物、材料、及び手順の数多くの等価物を認識するか、又はそれらをルーチンの実験だけを用いて確認することができるであろう。そのような等価物は全て、本範囲内にあると考えられ、添付の特許請求の範囲によって包含される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2018516851.tif 000868
【図８】
2018516851.tif 000869
【図９】
2018516851.tif 000870
【図１０】
2018516851.tif 000871
【図１１】
2018516851.tif 000872
【図１２】
2018516851.tif 000873
【図１３】
2018516851.tif 000874
【図１４】
2018516851.tif 000875
【図１５】
2018516851.tif 000876
【図１６】
2018516851.tif 000877
【図１７】
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【図１８】
2018516851.tif 000879
【図１９】
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【図２０】
2018516851.tif 000881
【図２１】
2018516851.tif 000882
【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
2018516851.tif 000888
【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
2018516851.tif 000892
【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
2018516851.tif 000901
【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【国際調査報告】
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