(57)【要約】  本開示は、（ａ）アルファ−アイソフォーム特異的ＰＩ３Ｋ阻害剤および（ｂ）ＡＫＴ阻害剤を含む医薬組み合わせ物、その組み合わせ調製物および医薬組成物、がんの治療または予防におけるそのような組み合わせ物の使用、ならびに、そのような組み合わせ物の治療有効量を投与することを含む、それを必要とする対象においてがんを治療または予防する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）式（Ｉ）の構造を有する化合物
【化１】
2018526375.tif 000021
またはその薬学的に許容される塩と、
（ｂ）ＡＫＴ阻害剤と
を含む、医薬組み合わせ物。
【請求項２】
前記ＡＫＴ阻害剤が、
式（ＩＩ）の構造を有する化合物
【化２】
2018526375.tif 000022
式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物
【化３】
2018526375.tif 000023
式（ＩＶ）の構造を有する化合物
【化４】
2018526375.tif 000024
およびこれらの薬学的に許容される塩
からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項３】
前記ＡＫＴ阻害剤が、式（ＩＩ）の構造を有する化合物
【化５】
2018526375.tif 000025
またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項４】
前記ＡＫＴ阻害剤が、
式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物
【化６】
2018526375.tif 000026
式（ＩＶ）の構造を有する化合物
【化７】
2018526375.tif 000027
およびこれらの薬学的に許容される塩
からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項５】
式（Ｉ）の構造を有する前記化合物および前記ＡＫＴ阻害剤が、同じ製剤の中にある、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項６】
式（Ｉ）の構造を有する前記化合物および前記ＡＫＴ阻害剤が、別々の製剤の中にある、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項７】
同時または順次投与のためのものである、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項８】
それを必要とする対象においてがんを治療または予防する方法であって、治療有効量の請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物を前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項９】
前記がんが固形腫瘍である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記がんが、肺（小細胞肺がん、および非小細胞肺がんを含む）、気管支、前立腺、乳房（散発性乳がん、およびカウデン病罹患者を含む）、膵臓、胃腸管、結腸、直腸、結腸癌、結腸直腸、甲状腺、肝臓、胆道、肝内胆管、肝細胞、副腎、胃部、胃、神経膠腫、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、髄芽細胞腫、子宮内膜、腎臓、腎盂、膀胱、子宮、子宮頸部、膣、卵巣、精巣、多発性骨髄腫、食道、頸部または頭部、脳、口腔および咽頭、喉頭、小腸、骨の良性または悪性腫瘍、黒色腫、絨毛結腸腺腫、肉腫（ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、骨肉腫を含む）、新生物、上皮性新生物、乳癌、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、光線角化症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性白血病、および骨髄球性白血病を含む）、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫およびホジキンリンパ腫を含む）、骨髄様転移を有する骨髄線維症、ワルデンシュトレーム病、バナヤンゾナナ症候群、レルミットデュクロ病、ウィルムス腫瘍、中皮腫、唾液腺、ならびにＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）からなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記がんが、卵巣がん、乳がん、膵がん、前立腺がん、または結腸直腸がんである、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記がんが、ＢＲＡＦ突然変異、ＫＲＡＳ突然変異、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現のうちの１つまたは複数により特徴付けられる、請求項８から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記がんが、ＡＫＴ阻害剤による治療に対して抵抗性がある、または難治性である、請求項８から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
がんの治療または予防における使用のための、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項１５】
がんの治療または予防のための医薬の調製における使用のための、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項１６】
前記がんが固形腫瘍である、請求項１４または１５に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項１７】
前記がんが、肺（小細胞肺がん、および非小細胞肺がんを含む）、気管支、前立腺、乳房（散発性乳がん、およびカウデン病罹患者を含む）、膵臓、胃腸管、結腸、直腸、結腸癌、結腸直腸、甲状腺、肝臓、胆道、肝内胆管、肝細胞、副腎、胃部、胃、神経膠腫、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、髄芽細胞腫、子宮内膜、腎臓、腎盂、膀胱、子宮、子宮頸部、膣、卵巣、精巣、多発性骨髄腫、食道、頸部または頭部、脳、口腔および咽頭、喉頭、小腸、骨の良性または悪性腫瘍、黒色腫、絨毛結腸腺腫、肉腫（ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、骨肉腫を含む）、新生物、上皮性新生物、乳癌、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、光線角化症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性白血病、および骨髄球性白血病を含む）、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫およびホジキンリンパ腫を含む）、骨髄様転移を有する骨髄線維症、ワルデンシュトレーム病、バナヤンゾナナ症候群、レルミットデュクロ病、ウィルムス腫瘍、中皮腫、唾液腺、ならびにＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）からなる群から選択される、請求項１４または１５に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項１８】
前記がんが、卵巣がん、乳がん、膵がん、前立腺がん、または結腸直腸がんである、請求項１４または１５に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項１９】
前記がんが、ＢＲＡＦ突然変異、ＫＲＡＳ突然変異、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現のうちの１つまたは複数により特徴付けられる、請求項１４から１８のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項２０】
前記がんが、ＡＫＴ阻害剤による治療に対して抵抗性がある、または難治性である、請求項１４から１９のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物。
【請求項２１】
がんの治療または予防のための医薬の製造のための、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物の使用。
【請求項２２】
がんの治療または予防のための、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組み合わせ物の使用。
【請求項２３】
前記がんが固形腫瘍である、請求項２１または２２に記載の使用。
【請求項２４】
前記がんが、肺（小細胞肺がん、および非小細胞肺がんを含む）、気管支、前立腺、乳房（散発性乳がん、およびカウデン病罹患者を含む）、膵臓、胃腸管、結腸、直腸、結腸癌、結腸直腸、甲状腺、肝臓、胆道、肝内胆管、肝細胞、副腎、胃部、胃、神経膠腫、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、髄芽細胞腫、子宮内膜、腎臓、腎盂、膀胱、子宮、子宮頸部、膣、卵巣、精巣、多発性骨髄腫、食道、頸部または頭部、脳、口腔および咽頭、喉頭、小腸、骨の良性または悪性腫瘍、黒色腫、絨毛結腸腺腫、肉腫（ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、骨肉腫を含む）、新生物、上皮性新生物、乳癌、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、光線角化症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性白血病、および骨髄球性白血病を含む）、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫およびホジキンリンパ腫を含む）、骨髄様転移を有する骨髄線維症、ワルデンシュトレーム病、バナヤンゾナナ症候群、レルミットデュクロ病、ウィルムス腫瘍、中皮腫、唾液腺、ならびにＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）からなる群から選択される、請求項２１または２２に記載の使用。
【請求項２５】
前記がんが、卵巣がん、乳がん、膵がん、前立腺がん、または結腸直腸がんである、請求項２１または２２に記載の使用。
【請求項２６】
前記がんが、ＢＲＡＦ突然変異、ＫＲＡＳ突然変異、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現のうちの１つまたは複数により特徴付けられる、請求項２１から２５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２７】
前記がんが、ＡＫＴ阻害剤による治療に対して抵抗性がある、または難治性である、請求項２１から２６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２８】
（ａ）式（Ｉ）の構造を有する化合物
【化８】
2018526375.tif 000028
またはその薬学的に許容される塩と、
（ｂ）ＡＫＴ阻害剤と
を含む、医薬組成物。
【請求項２９】
前記ＡＫＴ阻害剤が、
式（ＩＩ）の構造を有する化合物
【化９】
2018526375.tif 000029
式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物
【化１０】
2018526375.tif 000030
式（ＩＶ）の構造を有する化合物
【化１１】
2018526375.tif 000031
およびこれらの薬学的に許容される塩
からなる群から選択される、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記ＡＫＴ阻害剤が、式（ＩＩ）の構造を有する化合物
【化１２】
2018526375.tif 000032
またはその薬学的に許容される塩である、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記ＡＫＴ阻害剤が、
式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物
【化１３】
2018526375.tif 000033
式（ＩＶ）の構造を有する化合物
【化１４】
2018526375.tif 000034
およびこれらの薬学的に許容される塩
からなる群から選択される、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
１つまたは複数の添加剤を更に含む、請求項２８から３１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
（ａ）式（Ｉ）の構造を有する化合物
【化１５】
2018526375.tif 000035
またはその薬学的に許容される塩と、
（ｂ）式（ＩＩＩ）、式（ＩＶ）の構造を有する化合物
【化１６】
2018526375.tif 000036
またはその薬学的に許容される塩と
を含む、乳がんの治療または予防における使用のための医薬組み合わせ物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、（ａ）アルファ−アイソフォーム特異的ＰＩ３Ｋ阻害剤および（ｂ）ＡＫＴ阻害剤を含む医薬組み合わせ物、それを含む医薬組成物、ならびにがんの治療または予防におけるそのような組み合わせ物および組成物の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）は、リン酸塩がイノシトール脂質のＤ−３’位に移動してホスホイノシトール−３−リン酸（ＰＩＰ）、ホスホイノシトール−３，４−二リン酸（ＰＩＰ２）、およびホスホイノシトール−３，４，５−三リン酸（ＰＩＰ３）を産生させ、次にプレクストリン相同性、ＦＹＶＥ、Ｐｈｏｘ、および他のリン脂質結合ドメインを含有するタンパク質を、多くの場合に細胞膜にある様々なシグナル伝達複合体にドッキングさせることにより、シグナル伝達カスケードにおける第２のメッセンジャーとして作用するように触媒する、脂質キナーゼのファミリーを含む（Vanhaesebroeck et al., Annu. Rev. Biochem 70:535 (2001); Katso et al., Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17:615 (2001)）。２つのクラス１  ＰＩ３Ｋのうち、クラス１Ａ  ＰＩ３Ｋは、ｐ８５α、ｐ５５α、ｐ５０α、ｐ８５β、またはｐ５５γでありうる調節サブユニットと構成的に会合する触媒性ｐ１１０サブユニット（α、β、δアイソフォーム）から構成されるヘテロ二量体である。クラス１Ｂサブクラスは、２つの調節サブユニットのｐ１０１またはｐ８４のうちの１つと会合する触媒性ｐ１１０γサブユニットから構成されるヘテロ二量体である、１つのファミリーメンバーを有する（Fruman et al., Annu Rev. Biochem. 67:481 (1998); Suire et al., Curr. Biol. 15:566 (2005)）。ｐ８５／５５／５０サブユニットのモジュラードメイン（modular domain）は、ホスホチロシン残基を、特定の配列の文脈において、活性化された受容体および細胞質チロシンキナーゼに結合し、クラス１Ａ  ＰＩ３Ｋの活性化および局在化をもたらす、Ｓｒｃ相同性（ＳＨ２）ドメインを含む。クラス１Ｂ  ＰＩ３Ｋは、多様なレパートリーのペプチドおよび非ペプチドリガンドに結合するＧタンパク質共役受容体によって、直接活性化される（Stephens et al., Cell 89:105 (1997)); Katso et al., Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17:615-675 (2001)）。したがって、もたらされたクラスＩ  ＰＩ３Ｋのリン脂質産物は、上流の受容体を、増殖、生存、走化性、細胞輸送、運動性、代謝、炎症、およびアレルギー応答、転写、ならびに翻訳を含む下流の細胞活性と関連付ける（Cantley et al., Cell 64:281 (1991); Escobedo and Williams, Nature 335: 85 (1988); Fantl et al., Cell., 69: 413 (1992)）。
【０００３】
多くの場合において、ＰＩＰ２およびＰＩＰ３は、ウイルスがん遺伝子ｖ−Ａｋｔのヒト相同体の産物であるＡｋｔを、細胞膜へと動員し、そこで成長および生存にとって重要な多くの細胞内シグナル伝達経路の節点として作用する（Fantl et al., Cell 69:413-423(1992); Bader et al., Nature Rev. Cancer 5:921 (2005); Vivanco and Sawyer, Nature Rev. Cancer 2:489 (2002)）。多くの場合にＡｋｔ活性化を介して生存を増加させるＰＩ３Ｋの異常な調節は、ヒトがんにおいて最も一般的な事象の１つであり、複数のレベルにおいて生じることが示されている。イノシトール環の３’位でホスホイノシチドを脱リン酸化し、そうすることによってＰＩ３Ｋ活性を拮抗する腫瘍抑制遺伝子のＰＴＥＮは、様々な腫瘍において機能的に欠失している。他の腫瘍では、ｐ１１０αアイソフォームであるＰＩＫ３ＣＡの遺伝子、およびＡｋｔの遺伝子が増幅され、遺伝子産物のタンパク質発現が増加されることが、いくつかのヒトがんにおいて実証されている。
【０００４】
更に、ｐ８５−ｐ１１０複合体を上方調節するように機能するｐ８５αの突然変異および転位が、ヒトがんにおいて記載されている。最後に、下流シグナル伝達経路を活性化するＰＩＫ３ＣＡにおける体細胞ミスセンス突然変異が、多種多様なヒトがんにおいて著しく頻繁に記載されている（Kang at el., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102:802 (2005); Samuels et al., Science 304:554 (2004); Samuels et al., Cancer Cell 7:561-573 (2005)）。これらの観察は、ホスホイノシトール−３キナーゼ、ならびにこのシグナル伝達経路の上流および下流構成成分の調節解除は、ヒトがんおよび増殖性疾患に関連する最も一般的な調節解除の１つである（Parsons et al., Nature 436:792 (2005); Hennessey at el., Nature Rev. Drug Disc. 4:988-1004 (2005)）。
【０００５】
下記に提示されている式（Ｉ）の２−カルボキサミドシクロアミノ尿素誘導体が、有益な薬理学的特性を有すること、および例えばＰＩ３Ｋ（ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ）を阻害することが見出された。特に、これらの化合物は、好ましくは、ベータおよび／またはデルタおよび／またはガンマサブタイプよりもＰＩ３Ｋアルファに対する改善された選択性を示す。したがって式（Ｉ）の化合物は、例えば、ＰＩ３キナーゼに依存する疾患（特に、ＰＩ３Ｋアルファに依存する、例えば、ＰＩ３Ｋアルファの過剰発現もしくは増幅を示すもの、またはＰＩＫ３ＣＡの体細胞突然変異を示すもの）、とりわけ腫瘍疾患および白血病などの増殖性疾患の治療における使用に適している。
【０００６】
更に、これらの組成物は、好ましく、改善された代謝安定性を示し、したがって低減されたクリアランスを示し、改善された薬物動態プロファイルをもたらす。
【０００７】
多くのがん、特に、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現を有するものは、例えば、ＡＫＴ阻害剤による治療を受け入れやすい。しかし、特定の場合において、がんは選択された治療薬に対して抵抗性を取得し、最終的には治療に対して難治性になる。
【０００８】
がん患者には多数の治療選択肢があるにもかかわらず、有効で安全な治療剤の必要性、および組み合わせ療法におけるそれらの優先的な使用の必要性が、依然として存在する。特に、がん、とりわけ現行の療法に対して抵抗性がある、および／または難治性であるがんを治療または予防する有効な方法の必要性が存在する。
【発明の概要】
【０００９】
アルファ−アイソフォーム特異的ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤およびＡＫＴ阻害剤を含む医薬組み合わせ物が、本明細書において提供される。
【００１０】
１つの態様において、
（ａ）式（Ｉ）の構造を有する化合物
【００１１】
【化１】
2018526375.tif 000002
【００１２】
（本明細書において「化合物（Ｉ）」、「化合物Ａ」、もしくは「ＢＹＬ７１９」とも呼ばれる）
またはその薬学的に許容される塩と、
（ｂ）ＡＫＴ阻害剤と
を含む医薬組み合わせ物が、本明細書において提供される。
【００１３】
式（Ｉ）の構造を有する化合物またはその薬学的に許容される塩と、ＡＫＴ阻害剤との組み合わせ物は、本明細書において「本発明の組み合わせ物」とも呼ばれる。
【００１４】
本発明の組み合わせ物の１つの実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、
式（ＩＩ）の構造を有する化合物
【００１５】
【化２】
2018526375.tif 000003
【００１６】
式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物
【００１７】
【化３】
2018526375.tif 000004
【００１８】
式（ＩＶ）の構造を有する化合物
【００１９】
【化４】
2018526375.tif 000005
【００２０】
およびこれらの薬学的に許容される塩
からなる群から選択される。
【００２１】
本発明の組み合わせ物の別の実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、式（ＩＩ）の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
【００２２】
本発明の組み合わせ物の別の実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物、式（ＩＶ）の構造を有する化合物、およびこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【００２３】
本発明の組み合わせ物の１つの実施形態において、式（Ｉ）の構造を有する化合物およびＡＫＴ阻害剤は、同じ製剤の中にある。
【００２４】
本発明の組み合わせ物の別の実施形態において、式（Ｉ）の構造を有する化合物およびＡＫＴ阻害剤は、別々の製剤の中にある。
【００２５】
別の実施形態において、本発明の組み合わせ物は、同時または順次投与のためのものである。
【００２６】
１つの態様では、がんを、それを必要性とする対象において治療または予防する方法であって、治療有効量の本発明の医薬組み合わせ物を対象に投与することを含む方法が、本明細書において提供される。
【００２７】
１つの実施態様において、がんは固形腫瘍である。
【００２８】
別の実施形態において、がんは、肺（小細胞肺がん、および非小細胞肺がんを含む）、気管支、前立腺、乳房（散発性乳がん、およびカウデン病罹患者を含む）、膵臓、胃腸管、結腸、直腸、結腸癌、結腸直腸、甲状腺、肝臓、胆道、肝内胆管、肝細胞、副腎、胃部、胃、神経膠腫、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、髄芽細胞腫、子宮内膜、腎臓、腎盂、膀胱、子宮、子宮頸部、膣、卵巣、精巣、多発性骨髄腫、食道、頸部または頭部、脳、口腔および咽頭、喉頭、小腸、骨の良性または悪性腫瘍、黒色腫、絨毛結腸腺腫、肉腫（ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、骨肉腫を含む）、新生物、上皮性新生物、乳癌、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、光線角化症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性白血病、および骨髄球性白血病を含む）、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫およびホジキンリンパ腫を含む）、骨髄様転移を有する骨髄線維症、ワルデンシュトレーム病、バナヤンゾナナ症候群、レルミットデュクロ病、ウィルムス腫瘍（Wilm's tumor）、中皮腫、唾液腺、ならびにＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）からなる群から選択される。
【００２９】
別の実施形態において、がんは、卵巣がん、乳がん、膵がん、前立腺がん、または結腸直腸がんである。
【００３０】
別の実施形態において、がんは、ＢＲＡＦ突然変異、ＫＲＡＳ突然変異、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現のうちの１つまたは複数により特徴付けられる。
【００３１】
本明細書において提供される方法のなお別の実施形態において、がんは、ＡＫＴ阻害剤による治療に対して抵抗性がある、または難治性である。
【００３２】
１つの実施形態において、本発明の医薬組み合わせ物は、がんの治療または予防における使用のためのものである。
【００３３】
別の実施形態において、本発明の医薬組み合わせ物は、がんの治療または予防のための医薬の調製における使用のためのものである。
【００３４】
１つの態様では、がんの治療または予防のための医薬の製造における本発明の組み合わせ物の使用が、本明細書において提供される。
【００３５】
別の態様では、がんの治療または予防のための本発明の組み合わせ物の使用が、本明細書において提供される。
【００３６】
別の態様では、
（ａ）式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩と、
（ｂ）ＡＫＴ阻害剤と
を含む医薬組成物が、本明細書において提供される。
【００３７】
医薬組成物の１つの実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、式（ＩＩ）の構造を有する化合物、式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物、式（ＩＶ）の構造を有する化合物、およびこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【００３８】
医薬組成物の更なる実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、式（ＩＩ）の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
【００３９】
医薬組成物の別の実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物、式（ＩＶ）の構造を有する化合物、およびこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【００４０】
１つの実施態様において、医薬組成物は１つまたは複数の添加剤を更に含む。
【００４１】
別の態様では、乳がんの治療または予防に使用される、（ａ）式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩と、（ｂ）式（ＩＩＩ）もしくは式（ＩＶ）の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組み合わせ物が、本明細書において提供される。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】２３個の結腸直腸がん細胞系に対する、化合物Ａ（ＢＹＬ７１９とも呼ばれる）および化合物Ｂ（ＭＫ−２２０６とも呼ばれる）、ならびに化合物Ａと化合物Ｂの組み合わせ物の用量応答曲線を示す図である。ｘ軸は、ｌｏｇ１０の治療希釈を示し、ｙ軸は、ＤＭＳＯと比べた、処理後の細胞計数を示す。濃い破線（strong dashed line）は、処理開始前（「ベースライン」）の細胞数を示す。
【図２】２３個の結腸直腸がん細胞系の２４時間、４８時間、および７２時間後（異なるモノクロ階調）における、化合物Ａおよび化合物Ｂ、ならびに化合物Ａと化合物Ｂの組み合わせ物の最大カスパーゼ３／７誘発を示す図である。ｘ軸は、処理を示し、ｙ軸は、各処理において見られた最大カスパーゼ３／７誘発（細胞の％）を示す。
【図３】ＰＩＫ３ＣＡ突然変異系に対する化合物Ａの選択性を示す図である。正規化細胞計数は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異およびＰＩＫ３ＣＡ野生型の系間で、化合物Ａ処理の全ての用量で、片側ｔ検定を使用して比較した（＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１）。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
アルファ−アイソフォーム特異的ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤およびＡＫＴ阻害剤を含む医薬組み合わせ物が、本明細書において提供される。具体的には、
（ａ）式（Ｉ）の構造を有する化合物
【００４４】
【化５】
2018526375.tif 000006
【００４５】
（本明細書において「化合物（Ｉ）」、「化合物Ａ」、もしくは「ＢＹＬ７１９」とも呼ばれる）
またはその薬学的に許容される塩と、
（ｂ）ＡＫＴ阻害剤と
を含む医薬組み合わせ物が、本明細書において提供される。
【００４６】
本明細書において提供される医薬組み合わせ物は、特に、がんの治療における使用のためのものである。
【００４７】
本明細書において使用される特定の用語が、下記に記載される。本発明の化合物は、標準的な命名法の使用により記載される。別段に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術および科学用語は、本発明が属する当業者により一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
【００４８】
用語「組み合わせ物」、「治療的組み合わせ物」、または「医薬組み合わせ物」は、本明細書において使用されるとき、１つの単位剤形の固定された組み合わせ物、もしくは固定されていない組み合わせ物、または２つ以上の治療剤が、同時に、もしくはある時間間隔の範囲内で、とりわけこの時間間隔が、組み合わせ相手が協調的な、例えば相乗的な効果を示すことを可能にする範囲内で別々に、独立して投与されうる組み合わせ投与のためのキットの一部を指す。
【００４９】
用語「組み合わせ療法」は、本開示に記載されている治療状態または障害を治療する、２つ以上の治療剤の投与を指す。そのような投与は、活性成分の固定比を有する単一製剤、または各活性成分が別々の製剤（例えば、カプセル剤、および／もしくは静注製剤）などの、実質的に同時の方法によるこれらの治療剤の共投与を包含する。加えて、そのような投与は、ほぼ同時または異なる時点での、順次的な、または別々の方法による、それぞれの種類の治療剤の使用も包含する。活性成分が単一製剤または別々の製剤で投与されるかにかかわらず、薬物は、同じ治療過程の一部として同じ患者に投与される。いずれの場合においても、治療レジメンは、本明細書に記載されている状態または障害の治療に有益な効果を提供する。
【００５０】
用語「アルファ−アイソフォーム特異的ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ阻害剤」、「アルファ−アイソフォーム特異的ＰＩ３Ｋ阻害剤」、「アルファ−アイソフォーム選択的ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ阻害剤」、および「アルファ−アイソフォーム選択的ＰＩ３Ｋ阻害剤」は、本明細書において使用されるとき、ベータ、および／またはデルタ、および／またはガンマサブタイプよりもアルファ−アイソフォームＰＩ３Ｋの少なくとも１つの活性を選択的に標的にする、減少する、または阻害する化合物を指す。例示的なアルファ−アイソフォーム特異的ＰＩ３Ｋ阻害剤は、国際ＰＣＴ出願国際公開第２０１０／０２９０８２号パンフレットに開示されており、これはその全体が参照として本明細書に組み込まれる。
【００５１】
用語「ＡＫＴ阻害剤」は、本明細書において使用されるとき、ＡＫＴの少なくとも１つの活性を選択的に標的にする、減少する、または阻害する化合物を指す。
【００５２】
用語「医薬組成物」は、哺乳動物が冒されている特定の疾患または状態を予防または治療するため、対象に、例えば哺乳動物またはヒトに投与される、少なくとも１つの治療剤を含有する混合物または溶液を指すことが本明細書において定義される。
【００５３】
用語「薬学的に許容される」は、本明細書において使用されるとき、健全な医療判断の範囲内において、妥当な利益／危険比に見合うように、過剰な毒性、刺激アレルギー応答、および他の問題のある合併症を有することなく、温血動物、例えば哺乳動物またはヒトの組織との接触に適している化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。
【００５４】
用語「固定された組み合わせ物」、「固定用量」、および「単一製剤」は、本明細書において使用されるとき、両方の治療剤の、がんの治療または予防に共同で治療的に有効な量を患者に送達するように製剤化された単一の担体もしくはビヒクル、または剤形を指す。単一ビヒクルは、それぞれの薬剤の量を、任意の薬学的に許容される担体または添加剤と共に送達するように設計される。一部の実施形態において、ビヒクルは、錠剤、カプセル剤、丸剤、またはパッチ剤である。他の実施形態において、ビヒクルは、溶液剤または懸濁剤である。
【００５５】
用語「固定されていない組み合わせ物」、「キットの一部」、および「別々の製剤」は、活性成分、すなわち化合物（Ｉ）およびＡＫＴ阻害剤が、両方とも別々の実体として、特定の時間制限なしで同時に、同時発生的に、または順次に患者に投与されることを意味し、そのような投与は、２つの化合物の治療効果レベルを、それを必要とする患者の身体にもたらす。
【００５６】
用語「単位用量」は、治療される患者に、１つの剤形により両方の薬剤を一緒に同時投与することを意味するために、本明細書において使用される。一部の実施形態において、単位用量は単一製剤である。ある特定の実施形態において、単位用量は、各ビヒクルが有効量の少なくとも１つの薬剤を薬学的に許容される担体および添加剤と共に含むように、１つまたは複数のビヒクルを含む。一部の実施形態において、単位用量は、患者に同時に投与される、１つまたは複数の錠剤、カプセル剤、丸剤、注射剤、注入剤、パッチ剤などである。
【００５７】
「経口剤形」は、経口投与用に処方または意図された単位投与量形態を含む。
【００５８】
用語「治療する」または「治療」は、本明細書において使用されるとき、対象の少なくとも１つの症状を軽減、低減、もしくは緩和する、または疾患の進行を遅延させる治療を含む。例えば、治療は、障害の１つ、もしくはいつかの症状の減少、またはがんなどの障害の完全な消滅でありうる。本開示の意味の範囲内において、用語「治療する」は、発症を阻止すること、遅延すること（すなわち、疾患の臨床症状前の期間）、および／または疾患が発生もしくは悪化する危険性を低減することも意味する。用語「保護する」は、対象において、例えば哺乳動物またはヒトにおいて、疾患の発生、継続、または増悪を予防する、遅延する、もしくは治療する、または適切であれば、それら全てを行うことを意味するため、本明細書において使用される。用語「予防する」、「予防すること」、または「予防」は、本明細書において使用されるとき、予防される状態、疾患、または障害に関連する、または起因する少なくとも１つの症状を予防することを含む。
【００５９】
用語、治療剤の組み合わせ物の「薬学的有効量」、「治療有効量」、または「臨床有効量」は、組み合わせ物により治療される障害のベースラインの臨床的に観察可能な兆候および症状に対して、観察可能な、または臨床的に有意な改善をもたらすのに十分な量である。
【００６０】
用語「共同治療活性」また「共同治療効果」は、本明細書において使用されるとき、治療される温血動物、とりわけヒトにおいて依然として（好ましくは、相乗的に）相互作用（共同治療効果）を示すことを選択するような時間間隔で（経時的にずれた方法で、とりわけ特定の順番で）治療剤を別々に与えることができることを意味する。このことが当てはまるかは、とりわけ、両方の化合物が治療されるヒトの血液中に少なくとも特定の時間間隔にわたって存在することを示す、化合物の血中レベルを追跡することによって、決定することができる。
【００６１】
用語「対象」または「患者」は、本明細書において使用されるとき、がん、またはがんに直接的もしくは間接的に関与する任意の障害を患う、または罹患する可能性がある動物を含むことが意図される。対象の例としては、哺乳動物、例えば、ヒト、類人猿、サル、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ、ラット、および遺伝子導入非ヒト動物が挙げられる。１つの実施形態において、対象は、ヒト、例えば、がんを患っている、患う危険性のある、または患う潜在的な可能性があるヒトである。
【００６２】
用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、特に示されない限り、開放型の非限定的な意味において本明細書に使用される。
【００６３】
本発明を記載する文脈における（とりわけ、以下の特許請求の範囲の文脈における）用語「ａ」および「ａｎ」および「ｔｈｅ」、ならびに同様の参照は、本明細書において特に指示のない限り、または文脈により明確に否定されない限り、単数形および複数形の両方を網羅すると解釈されるべきである。複数形態が化合物、塩などに使用される場合、これは、単一の化合物、塩なども意味すると解釈される。
【００６４】
用語「約」または「およそ」は、関連する対象分野に知識をもつ人物によって一般的に理解されるが、特定の条件下では、所定の値または範囲の２０％以内、１０％以内、または５％以内を意味することができる。あるいは、とりわけ生物系において、用語「約」は、所定の値の約対数（すなわち、桁）の範囲内、または二倍以内を意味する。
【００６５】
本明細書において使用されるとき、ＰＩ３Ｋ阻害剤は（Ｓ）−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸２−アミド１−（｛４−メチル−５−［２−（２，２，２−トリフルオロ−１，１−ジメチル−エチル）−ピリジン−４−イル］−チアゾール−２−イル｝−アミド）であり、クラスＩＡ  ＰＩ３Ｋのアルファ（α）−アイソフォームを強力および選択的に標的にする特異的２−カルボキサミドシクロアミノ尿素誘導体化合物であり、以下の化学構造を有する。
【００６６】
【化６】
2018526375.tif 000007
【００６７】
式（Ｉ）の構造を有する化合物は、当該技術においてアルペリシブとしても公知であり、本明細書において、「化合物（Ｉ）」、「化合物Ａ」、または「ＢＹＬ７１９」と呼ばれる。便宜上、式（Ｉ）の構造を有する化合物、ならびに可能なその塩および溶媒和物は、集合的に化合物（Ｉ）と呼ばれ、化合物（Ｉ）への参照は、選択肢において任意の化合物またはその薬学的に許容される塩を指すことを意味する。
【００６８】
化合物（Ｉ）およびその薬学的に許容される塩は、ＰＣＴ出願国際公開第２０１０／０２９０８２号パンフレットに記載されており、これは、その全体が参照として本明細書に組み込まれ、その調製方法は、例えばその実施例１５に記載されている。化合物（Ｉ）の調製は、本明細書の実施例１にも記載されている。好ましくは、化合物（Ｉ）は遊離塩基形態である。化合物（Ｉ）の塩は、好ましくは薬学的に許容される塩であり、適切な対イオン形成性の薬学的に許容される塩は、当該分野において公知である。
【００６９】
化合物（Ｉ）は、約１〜６．５ｍｇ／ｋｇの有効１日用量で成人または小児に経口投与されうる。化合物（Ｉ）は、単回用量により、または１日あたり４回までの分割用量により、約７０ｍｇ〜４５５ｍｇ、例えば、約２００〜４００ｍｇ、または約２４０ｍｇ〜４００ｍｇ、または約３００ｍｇ〜４００ｍｇ、または約３５０ｍｇ〜４００ｍｇの１日投与量で７０ｋｇの体重の成人に経口投与されうる。好ましくは、化合物（Ｉ）は、約３５０ｍｇ〜約４００ｍｇの１日投与量で７０ｋｇの体重の成人に投与される。
【００７０】
いくつかのＡＫＴ阻害剤が当業者に公知であり、本発明の組み合わせ物の範囲内である。
【００７１】
１つの実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、８−［４−（１−アミノシクロブチル）フェニル］−９−フェニル−１，２，４−トリアゾロ［３，４−ｆ］［１，６］ナフチリジン−３（２Ｈ）−オン（ＭＫ−２２０６、ＣＡＳ１０３２３４９−９３−１）であり、この化合物は、式（ＩＩ）を有する構造によって表される。
【００７２】
【化７】
2018526375.tif 000008
【００７３】
便宜上、式（ＩＩ）の構造を有する化合物、ならびに可能なその塩および溶媒和物は、集合的に「化合物（ＩＩ）」と呼ばれ、化合物（ＩＩ）への参照は、選択肢において任意の化合物またはその薬学的に許容される塩を指すことを意味する。化合物（ＩＩ）は、本明細書において「化合物Ｂ」または「ＭＫ−２２０６」とも呼ばれる。
【００７４】
化合物（ＩＩ）は、隔日に約６０ｍｇの量まで、または１週間にわたって約２００ｍｇの量までの有効１日用量で成人に経口投与することができる。
【００７５】
別の実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、Ｎ−｛（１Ｓ）−２−アミノ−１−［（３−フルオロフェニル）メチル］エチル｝−５−クロロ−４−（４−クロロ−１−メチル−１−Ｈ−ピラゾール−５−イル）−２−チオフェンカルボキサミド、またはその薬学的に許容される塩であり、この化合物は、式（ＩＩＩ）を有する構造によって表される。
【００７６】
【化８】
2018526375.tif 000009
【００７７】
便宜上、式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物、ならびに可能なその塩および溶媒和物は、集合的に「化合物（ＩＩＩ）」と呼ばれ、化合物（ＩＩＩ）への参照は、選択肢において任意の化合物またはその薬学的に許容される塩を指すことを意味する。
【００７８】
化合物（ＩＩＩ）は、その薬学的に許容される塩と共に、国際出願日が２００８年２月７日の国際出願番号第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０５３２６９、国際公開日が２００８年８月１４日の国際公開第２００８／０９８１０４号パンフレットに、ＡＫＴ活性の阻害剤として、特にがんの治療に有用であることが開示および主張されており、これらは全開示が本明細書に参照として組み込まれ、化合物（ＩＩＩ）は、実施例９６の化合物である。化合物（ＩＩＩ）は、国際出願番号第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０５３２６９に記載されているように調製することができる。
【００７９】
特定の実施形態において、化合物（ＩＩＩ）は塩酸塩の形態である。塩形態は、２００９年１月３０日に出願した米国特許仮出願第６１／１４８４９０号明細書の記載によって、当業者により調製することができる。
【００８０】
化合物（ＩＩＩ）は、経口投与することができる。化合物ＩＩＩは、単回用量により、または分割用量により、１日あたり約７５ｍｇ〜約１２５ｍｇの有効１日用量で成人に経口投与することができる。好ましくは、化合物ＩＩＩは、約１００ｍｇ〜約１２５ｍｇの１日投与量で７０ｋｇの体重の成人に投与される。
【００８１】
別の実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、Ｎ−｛（１Ｓ）−２−アミノ−１−［（３，４−ジフルオロフェニル）メチル］エチル｝−５−クロロ−４−（４−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−２−フランカルボキサミド、またはその薬学的に許容される塩であり、この化合物は、式（ＩＶ）を有する構造によって表される。
【００８２】
【化９】
2018526375.tif 000010
【００８３】
便宜上、式（ＩＶ）の構造を有する化合物、ならびに可能なその塩および溶媒和物は、集合的に「化合物（ＩＶ）」と呼ばれ、化合物（ＩＶ）への参照は、選択肢において任意の化合物またはその薬学的に許容される塩を指すことを意味する。
【００８４】
化合物（ＩＶ）は、その薬学的に許容される塩と共に、国際出願日が２００８年２月７日の国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０５３２６９、国際公開日が２００８年８月１４日の国際公開番号国際公開第２００８／０９８１０４号パンフレットに、ＡＫＴ活性の阻害剤として、特にがんの治療に有用であることが開示および主張されており、これらは全開示が本明細書に参照として組み込まれ、化合物（ＩＶ）は、実施例２２４の化合物である。化合物（ＩＶ）は、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０５３２６９に記載されているように調製することができる。
【００８５】
化合物（ＩＶ）は、経口投与することができる。化合物ＩＶは、単回用量により、または分割用量により、１日あたり約５０ｍｇ〜約７５ｍｇの有効１日用量で成人に経口投与することができる。好ましくは、化合物（ＩＶ）は、約５０ｍｇ〜約７５ｍｇの１日投与量で７０ｋｇの体重の成人に投与される。
【００８６】
化合物（Ｉ）、またはＡＫＴ阻害剤（例えば、化合物（ＩＩ）、化合物（ＩＩＩ）、もしくは化合物（ＩＶ））を、あるいは両方とも、遊離形態または薬学的に許容される塩形態によって投与することができる。「薬学的に許容される塩」は、本明細書において使用されるとき、特に指示のない限り、本発明の化合物に存在しうる酸性および塩基性基の塩を含む。性質上塩基性である本発明の化合物は、様々な無機および有機酸と多種多様な塩を形成することができる。本発明のそのような塩基性化合物の薬学的に許容される酸付加塩の調製に使用できる酸は、非毒性の酸付加塩、すなわち、薬学的に許容されるアニオンを含有する塩、例えば、酢酸塩、安息香酸塩、臭化物、塩化物、クエン酸塩、フマル酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物、乳酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、および酒石酸塩を形成するものである。
【００８７】
特に指定のない限り、または文脈により明確に示されない限り、本明細書において提供される医薬組み合わせ物に有用な治療剤への参照は、化合物の遊離塩基および化合物の全ての薬学的に許容される塩の両方を含む。
【００８８】
アルファ−アイソフォーム選択的ＰＩ３Ｋ阻害剤（化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩）と、ＡＫＴ阻害剤（例えば、その薬学的に許容される塩を含む、化合物（ＩＩ）、化合物（ＩＩＩ）、または化合物（ＩＶ））とを含む組み合わせ療法が、本明細書において提供される。組み合わせ物の投与は、単一製剤または単位剤形による組み合わせ物の投与、組み合わせ物の個別の薬剤の同時発生的であるが別々の投与、または組み合わせ物の個別の薬剤の任意の適切な経路による順次の投与を含む。組み合わせ物の個別の薬剤の投与量は、組み合わせ物において、他の薬剤と比較して薬剤のうちの１つのより頻繁な投与を必要とする可能性がある。したがって、適切な投与を可能にするため、包装された医薬品は、薬剤の組み合わせ物を含有する１つまたは複数の剤形と、薬剤の組み合わせ物のうちの１つを含有するが、組み合わせ物の他の薬剤を含有しない１つまたは複数の剤形とを含有することができる。
【００８９】
本発明は、特に、がんを治療または予防する本発明の組み合わせ物に関する。１つの実施形態において、本発明の組み合わせ物は、がんの治療または予防のために使用され、有効量の式（Ｉ）の構造を有する化合物またはその薬学的に許容される塩、および有効量のＡＫＴ阻害剤を投与することを含む組み合わせ療法を、対象に投与することを含む。好ましくは、これらの化合物は、組み合わされたとき、有益な効果を提供する治療有効投与量で投与される。投与は、別々、同時、または順次でありうる。１つの実施形態において、投与は同時または順次である。
【００９０】
したがって１つの実施形態において、本発明の組み合わせ物は、がんの治療または予防における使用のためのものである。１つの実施形態において、組み合わせ物は、がんの治療における使用のためのものである。
【００９１】
また、がんの治療または予防のための本発明の組み合わせ物の使用が、本明細書において提供される。１つの実施形態において、組み合わせ物の使用は、がんの治療のためである。
【００９２】
１つの実施形態において、がんは固形腫瘍である。用語「固形腫瘍」は、とりわけ、黒色腫、乳がん、卵巣がん、結腸直腸がんおよび一般的な胃腸管のがん、子宮頸がん、肺がん（小細胞肺がんおよび非小細胞肺がんを含む）、頭頸部がん、膀胱がん、または前立腺がんを意味する。本組み合わせ物は、固形腫瘍、また液性腫瘍の成長を阻害する。更に、腫瘍の種類および使用される特定の組み合わせ物に応じて、腫瘍体積の減少を得ることができる。本明細書に開示されている発明の組み合わせ物は、腫瘍の転移性拡散および微小転移の成長または発生を予防するためにも適している。本明細書に開示されている発明の組み合わせ物は、不十分な予後の患者、とりわけ、卵巣がん、乳がん、膵がん、  がん、または結腸直腸がんを有するような不十分な予後の患者の治療に適している。本明細書に開示されている発明の組み合わせ物は、ＢＲＡＦ突然変異、ＫＲＡＳ突然変異、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現のうちの１つまたは複数により特徴付けられるがんの治療にも適している。
【００９３】
本明細書において提供される医薬組み合わせ物のいずれかの別の実施形態において、がんは、肺（小細胞肺がん、および非小細胞肺がんを含む）、気管支、前立腺、乳房（散発性乳がん、およびカウデン病罹患者を含む）、膵臓、胃腸管、結腸、直腸、結腸癌、結腸直腸、甲状腺、肝臓、胆道、肝内胆管、肝細胞、副腎、胃部、胃、神経膠腫、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、髄芽細胞腫、子宮内膜、腎臓、腎盂、膀胱、子宮、子宮頸部、膣、卵巣、精巣、多発性骨髄腫、食道、頸部または頭部、脳、口腔および咽頭、喉頭、小腸、骨の良性または悪性腫瘍、黒色腫、絨毛結腸腺腫、肉腫（ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、骨肉腫を含む）、新生物、上皮性新生物、乳癌、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、光線角化症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性白血病、および骨髄球性白血病を含む）、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫およびホジキンリンパ腫を含む）、骨髄様転移を有する骨髄線維症、ワルデンシュトレーム病、バナヤンゾナナ症候群、レルミットデュクロ病、ウィルムス腫瘍、中皮腫、唾液腺、ならびにＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）からなる群から選択される。
【００９４】
別の実施形態において、がんは、卵巣がん、乳がん、膵がん、前立腺がん、または結腸直腸がんである。
【００９５】
別の実施形態において、がんは、ＢＲＡＦ突然変異、ＫＲＡＳ突然変異、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現のうちの１つまたは複数により特徴付けられる。
【００９６】
別の実施形態において、がんは、ＡＫＴ阻害剤による治療に対して抵抗性がある、または難治性である。
【００９７】
別の態様では、乳がんの治療または予防に使用される、（ａ）化合物（Ｉ）と、（ｂ）化合物（ＩＩＩ）または化合物（ＩＶ）とを含む医薬組み合わせ物が、本明細書において提供される。１つの実施形態では、（ａ）化合物（Ｉ）と、（ｂ）化合物（ＩＩＩ）または化合物（ＩＶ）とを含む医薬組み合わせ物が、乳がんの治療に使用される。
【００９８】
がんの性質は多因子性である。特定の状況下では、異なる作用機構を有する薬物を組み合わせることができる。しかし、異なる作用様式を有する治療剤の任意の組み合わせを考慮するだけでは、有利な効果を有する組み合わせ物をもたらすとは限らない。
【００９９】
本発明の医薬組み合わせ物の投与は、有益な効果、例えば、症状の緩和、症状の進行の遅延、または症状の抑制に関する、例えば相乗的な治療効果のみならず、本発明の組み合わせ物に使用される薬学的治療剤の１つのみを適用する単剤療法と比較して、更に驚くべき有益な効果、例えば、少ない副作用、より長続きする応答、改善された生活の質、または罹患率の減少をもたらすこともできる。
【０１００】
更なる利益は、例えば、多くの場合に投与量が少量でありうるのはもちろん、少ない頻度でも適用されうるように、低い用量の治療剤の本発明の組み合わせ物を使用できること、または組み合わせ相手の１つの単独により観察される副作用の発生を減らすために使用できることである。このことは、治療される患者の希望および要求に合致している。
【０１０１】
本発明の組み合わせ物が本明細書前記に記載された有益な効果をもたらすことは、確立された試験モデルによって示すことができる。当業者は、そのような有益な効果を実証するために、関連した試験モデルを選択することが十分に可能である。本発明の組み合わせ物の薬理学的活性は、例えば、臨床研究または動物モデルによって実証することができる。
【０１０２】
１つまたは複数の成分の相乗的相互作用を決定するためには、効果におけるそれぞれの構成成分の最適な効果範囲および絶対用量範囲を、治療を必要とする患者への異なるｗ／ｗ比範囲および用量にわたる構成成分の投与により明確に測定することができる。ヒトでは、患者において臨床研究を実施する複雑さ、および費用が、相乗作用の一次モデルとしてのこの試験形態の使用を実用的でなくすることがある。しかし、特定の実験（例えば、実施例２を参照されたい）において相乗作用を観察することによって、種における効果を予測することができ、存在する動物モデルを使用して、相乗効果を更に定量化することができる。そのような研究の結果を使用して、有効用量比の範囲、ならびに絶対用量および血漿濃度を予測することもできる。
【０１０３】
１つの実施形態では、本明細書において提供される組み合わせ物、もしくは組成物は、または両方とも、相乗効果を示す。用語「相乗効果」は、本明細書において使用されるとき、例えば、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩、およびＡＫＴ阻害剤（例えば、化合物（ＩＩ）、化合物（ＩＩＩ）、または化合物（ＩＶ））などの２つの薬剤の効果を生じる作用、例えば、がんの症候性進行またはその症状を緩徐する作用を指し、これは、薬物を単独でそれぞれ投与した効果を単に加算したものより大きい。相乗効果は、例えば、Ｓｉｇｍｏｉｄ−Ｅｍａｘ方程式（Holford, N. H. G. and Scheiner, L. B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981))、Ｌｏｅｗｅ加算方程式（Loewe, S. and Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926)）、および半有効方程式（Chou, T. C. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984)）などの適切な方法を使用して計算することができる。上記に参照されたそれぞれの方程式を実験データに適用して、薬物組み合わせ物の効果を評価するのに役立つ対応するグラフを生成することができる。上記に参照された方程式に関連した対応するグラフは、それぞれ、濃度効果曲線、アイソボログラム曲線、および組み合わせ指数曲線（combination index curve）である。相乗効果を示す追加的な方法は、帰無仮説の最高単剤モデル（highest single agent model）（ＨＳＡ）である（Berenbaum 1989）。ＨＳＡモデルにおける超過は、阻害標的間の機能的な繋がりを予測する（Lehar, Zimmermann et al. 2007, Lehar, Krueger et al. 2009）。この方法は、組み合わせ物の強度ｚＣの指標をもたらす（例えば、本発明の組み合わせ物のある特定の実施形態のｚＣスコアの表２を含む、実施例２を参照されたい）。
【０１０４】
更なる実施形態において、本発明は、本発明の組み合わせ物を含む、ヒトへの投与のための相乗作用組み合わせ物を提供し、各構成成分の用量範囲は、適切な腫瘍モデルまたは臨床研究において示唆された相乗作用範囲に相当する。
【０１０５】
別の態様では、（ａ）化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩、および（ｂ）ＡＫＴ阻害剤を含む組み合わせ調製物または医薬組成物などの医薬組成物が、本明細書において提供される。
【０１０６】
１つの実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、化合物（ＩＩ）、化合物（ＩＩＩ）、化合物（ＩＶ）、およびこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【０１０７】
１つの実施形態において、医薬組成物は、（ａ）化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩、および（ｂ）化合物（ＩＩ）またはその薬学的に許容される塩を含む。
【０１０８】
別の実施形態において、医薬組成物は、（ａ）化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩、ならびに（ｂ）化合物（ＩＩＩ）、化合物（ＩＶ）、およびこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物を含む。
【０１０９】
本明細書において提供される医薬組成物のいずれかのうちの１つの実施態様において、組成物は１つまたは複数の添加剤を更に含む。更なる実施態様において、医薬組成物は１つまたは複数の薬学的に許容される添加剤を更に含む。
【０１１０】
本明細書で使用されるとき、用語「薬学的に許容される添加剤」または「薬学的に許容される担体」は、任意および全ての溶媒、分散媒体、被覆、界面活性剤、酸化防止剤、保存剤（例えば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、吸収遅延剤、塩、保存剤、薬物、薬物安定剤、結合剤、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、香味剤、色素など、ならびにこれらの組み合わせ物を含み、当業者には公知である（例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289-1329を参照されたい）。任意の従来の担体が活性成分と適合性がない場合を除いて、治療用または医薬組成物におけるその使用が考慮される。
【０１１１】
固定された組み合わせ物、すなわち本発明の組み合わせ物を含む単一ガレノス組成物による投与のための医薬組成物は、それ自体公知の方法で調製することができ、治療有効量の少なくとも１つの薬理学的に活性な組み合わせ相手を単独で、例えば上記に示されたように含む、または経腸もしくは非経口適用にとりわけ適している１つまたは複数の薬学的に許容される担体と組み合わせて含む、ヒトを含む哺乳動物（温血動物）への経口または直腸などの経腸投与、および非経口投与に適したものである。
【０１１２】
医薬組成物は、約０．１％〜約９９．９％、好ましくは約１％〜約６０％の治療剤を含有することができる。経腸または非経口投与のための組み合わせ療法に適した医薬組成物は、例えば、糖衣錠、錠剤、カプセル剤もしくは坐剤、またはアンプル剤などの単位剤形のものである。特に指示のない限り、これらはそれ自体公知の方法により、例えば、様々な従来の混合、微粉砕、直接圧縮、造粒、糖衣、溶解、凍結乾燥法、溶融造粒、または当業者に容易に理解される製作技術によって調製される。それぞれの剤形の個別の用量に含有される組み合わせ相手の単位含有量は、必要な有効量が複数の投与単位の投与により達成されうるので、それ自体有効量を構成する必要がないことが理解される。
【０１１３】
１つの態様では、がんの治療または予防のための医薬の製造における本発明の組み合わせ物の使用が、本明細書において提供される。１つの実施形態において、医薬組み合わせ物の使用は、がんを治療する医薬の製造のためである。
【０１１４】
また、がんの治療または予防のための医薬の調製に使用される本発明の組み合わせ物が、本明細書において提供される。１つの実施形態において、組み合わせ物は、がんの治療のための医薬の調製における使用のためのものである。
【０１１５】
本発明の組み合わせ物におけるそれぞれの組み合わせ相手の治療有効量を、同時に、または順次に任意の順番で投与することができ、構成成分を、同じ製剤または別々の製剤により投与することができる。
【０１１６】
本発明の組み合わせ物に用いられるそれぞれの組み合わせ相手の有効投与量は、用いられる特定の化合物または医薬組成物、投与様式、治療される状態、および治療される状態の重篤度に応じて変わりうる。したがって、本発明の組み合わせ物の投与量レジメンは、投与経路、ならびに患者の腎臓および肝臓機能を含む様々な要因によって選択される。
【０１１７】
毒性を有することなく有効性を生じる本発明の組み合わせ物における組み合わせ相手（例えば、化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩、ならびに化合物（ＩＩ）、化合物（ＩＩＩ）、化合物（ＩＶ）、およびこれらの任意の薬学的に許容される塩のいずれか１つ）の最適比、個別の、および組み合わせた投与量、ならびに濃度は、標的部位へ治療剤利用能の動態学に基づいており、当業者に公知の方法を使用して決定される。
【０１１８】
それぞれの組み合わせ相手の有効投与量は、組み合わせ物における他の化合物と比較して、１つの化合物のより頻繁な投与を必要とする場合がある。したがって、適切な投与を可能にするため、包装された医薬品は、化合物の組み合わせ物を含有する１つまたは複数の剤形と、化合物の組み合わせ物のうちの１つを含有するが、組み合わせの他の化合物を含有しない１つまたは複数の剤形とを含有することができる。
【０１１９】
本発明の組み合わせ物に用いられる組み合わせ相手が、市販されている単剤としての形態に適用されるとき、これらの投与量および投与様式は、本明細書に別段の記載がない場合は、それぞれの市販薬の添付文書に提供されている情報に従うことができる。
【０１２０】
がんを治療または予防するためのそれぞれの組み合わせ相手の最適投与量は、公知の方法を使用してそれぞれの個体のために経験的に決定することができ、疾患の進展の程度、個体の年齢、体重、身体全体の健康、性別および食事、投与の時間および経路、ならびに個体が服用している他の薬剤を含むが、これらに限定されない様々な要因によって左右される。最適投与量は、当該技術において周知である日常的な試験および手順を使用して確立することができる。
【０１２１】
担体材料と組み合わせて単一剤形を生成することができるそれぞれの組み合わせ相手の量は、治療される個体および特定の投与様式に応じて変わる。一部の実施形態において、本明細書に記載されている薬剤の組み合わせ物を含有する単位剤形は、薬剤が単独で投与される場合に典型的に投与される量の、組み合わせ物におけるそれぞれの薬剤を含有する。投与の頻度は、使用される化合物、および治療または予防される特定の状態に応じて変わりうる。治療または予防される状態に適したアッセイを使用して、治療有効性について患者を一般にモニターすることができ、このことは当業者に熟知されている。
【０１２２】
本発明は、がんの進行遅延または治療に使用するために、本発明の組み合わせ物を、同時、別々、またはその順次投与用の取り扱い説明書と一緒に治療剤として含む、商業的な包装を更に提供する。
【０１２３】
治療方法
それを必要とする対象においてがんを治療または予防する方法であって、治療有効量の本発明の医薬組み合わせ物、すなわち、（ａ）化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩と、（ｂ）ＡＫＴ阻害剤とを含む医薬組み合わせ物を対象に投与することを含む方法が、本明細書において提供される。
【０１２４】
１つの実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、化合物（ＩＩ）、化合物（ＩＩＩ）、化合物（ＩＶ）、およびこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【０１２５】
更なる実施態様において、ＡＫＴ阻害剤は、化合物（ＩＩ）またはその薬学的に許容される塩である。
【０１２６】
なお更なる実施形態において、ＡＫＴ阻害剤は、化合物（ＩＩＩ）、化合物（ＩＶ）、およびこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
【０１２７】
１つの実施形態では、それを必要とする対象においてがんを治療する方法であって、治療有効量の本発明の組み合わせ物を対象に投与することを含む方法が、本明細書において提供される。
【０１２８】
本明細書において提供される方法のいずれかのうちの１つの実施態様において、がんは固形腫瘍である。用語「固形腫瘍」は、とりわけ、黒色腫、乳がん、卵巣がん、結腸直腸がん、および一般的な胃腸管のがん、子宮頸がん、肺がん（小細胞肺がん、および非小細胞肺がんを含む）、頭頸部がん、膀胱がん、または前立腺がんを意味する。本組み合わせ物は、固形腫瘍、また液性腫瘍の成長を阻害する。更に、腫瘍の種類および使用される特定の組み合わせ物に応じて、腫瘍体積の減少を得ることができる。本明細書に開示されている発明の組み合わせ物は、腫瘍の転移性拡散および微小転移の成長または発生を予防するためにも適している。本明細書に開示されている発明の組み合わせ物は、不十分な予後の患者、とりわけ、卵巣がん、乳がん、膵がん、  がん、または結腸直腸がんを有するような不十分な予後の患者の治療に適している。本明細書に開示されている発明の組み合わせ物は、ＢＲＡＦ突然変異、ＫＲＡＳ突然変異、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現のうちの１つまたは複数により特徴付けられるがんの治療にも適している。
【０１２９】
本明細書において提供される方法のいずれかの別の実施形態において、がんは、肺（小細胞肺がん、および非小細胞肺がんを含む）、気管支、前立腺、乳房（散発性乳がん、およびカウデン病罹患者を含む）、膵臓、胃腸管、結腸、直腸、結腸癌、結腸直腸、甲状腺、肝臓、胆道、肝内胆管、肝細胞、副腎、胃部、胃、神経膠腫、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、髄芽細胞腫、子宮内膜、腎臓、腎盂、膀胱、子宮、子宮頸部、膣、卵巣、精巣、多発性骨髄腫、食道、頸部または頭部、脳、口腔および咽頭、喉頭、小腸、骨の良性または悪性腫瘍、黒色腫、絨毛結腸腺腫、肉腫（ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、骨肉腫を含む）、新生物、上皮性新生物、乳癌、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、光線角化症、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性白血病、および骨髄球性白血病を含む）、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫およびホジキンリンパ腫を含む）、骨髄様転移を有する骨髄線維症、ワルデンシュトレーム病、バナヤンゾナナ症候群、レルミットデュクロ病、ウィルムス腫瘍、中皮腫、唾液腺、ならびにＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍）からなる群から選択される。
【０１３０】
別の実施形態において、がんは、卵巣がん、乳がん、膵がん、前立腺がん、または結腸直腸がんである。
【０１３１】
別の実施形態において、がんは、ＢＲＡＦ突然変異、ＫＲＡＳ突然変異、ＡＫＴ１突然変異、ＡＫＴ２突然変異、ＡＫＴ１過剰発現、ＡＫＴ２過剰発現、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異、およびＰＩＫ３ＣＡ過剰発現のうちの１つまたは複数により特徴付けられる。
【０１３２】
別の実施形態において、がんは、ＡＫＴ阻害剤による治療に対して抵抗性がある、または難治性である。
【０１３３】
別の態様では、それを必要とする対象において乳がんを治療または予防する方法であって、治療有効量の、（ａ）化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩と、（ｂ）化合物（ＩＩＩ）もしくはその薬学的に許容される塩、または化合物（ＩＶ）もしくはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組成物を、対象に投与することを含む方法が、本明細書において提供される。
【０１３４】
なお別の態様では、それを必要とする対象において乳がんを治療する方法であって、治療有効量の、（ａ）化合物（Ｉ）またはその薬学的に許容される塩と、（ｂ）化合物（ＩＩＩ）もしくはその薬学的に許容される塩、または化合物（ＩＶ）もしくはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組成物を、対象に投与することを含む方法が、本明細書において提供される。
【０１３５】
本発明によってがんを治療する方法は、共同で治療上有効である量、好ましくは相乗的に有効である量により、例えば、本明細書に記載されている量に対応する１日または断続的投与量により、同時に、または任意の順番で順次に、（ｉ）遊離または薬学的に許容される塩形態の薬剤（ａ）を投与すること、および（ｉｉ）遊離また薬学的に許容される塩形態の薬剤（ｂ）を投与することを含むことができる。本発明の組み合わせ物の個別の組み合わせ相手を、分割した、または単一の組み合わせ形態により、治療経過の間の異なる時間で別々に、または同時発生的に投与することができる。したがって本発明は、そのようなレジメンの同時または交互治療を全て包含すると理解されるべきであり、用語「投与する」は、そのように解釈されるべきである。
【０１３６】
以下の実施例は、上記に記載された本発明を例示しているが、本発明の範囲をいかようにも制限することを意図しない。本発明の医薬組み合わせ物の有益な効果は、それ自体当業者に公知の他の試験モデルによって決定することもできる。
【実施例】
【０１３７】
実施例１：
Ｉ．（Ｓ）−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸２−アミド１−｛［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン−４−イル）−４−メチル−チアゾール−２−イル］−アミド｝の合成
【０１３８】
【化１０】
2018526375.tif 000011
【０１３９】
Ｅｔ３Ｎ（１．５４ｍＬ、１１．１ｍｍｏｌ、３当量）を、ＤＭＦ（２５ｍＬ）中のイミダゾール−１−カルボン酸［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン−４−イル）−４−メチル−チアゾール−２−イル］−アミド（ステップ１．１）（１．２６ｇ、３．７ｍｍｏｌ）およびＬ−プロリンアミド（０．５４８ｇ、４．８ｍｍｏｌ、１．３当量）の溶液に、アルゴン雰囲気下で加える。反応混合物を室温で１４時間撹拌し、ＮａＨＣＯ３飽和溶液の添加によりクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機相をＮａＨＣＯ３の飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１：０→９４：６）により精製し、続いてＥｔ２Ｏ中ですり混ぜて、１．２２ｇの表題化合物をオフホワイトの固体として得る。ＥＳＩ−ＭＳ：３８８．１［Ｍ＋Ｈ］＋；ｔＲ＝２．３５分（系１）；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３６（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９：１）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ(ppm): 1.32 (s, 9 H) 1.75-1.95 (m, 3 H) 1.97 - 2.13 (m, 1 H) 2.39 (s, 3 H) 3.38-3.50 (m, 1 H) 3.52-3.65 (m., 1 H) 4.10-4.40 (m, 1 H) 6.94 (br. s., 1 H) 7.22 (d, 1 H) 7.30 - 7.48 (m, 2 H) 8.49 (d, 1 H) 10.87 (br. s., 1 H).
【０１４０】
ステップ１．１：イミダゾール−１−カルボン酸［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン−４−イル）−４−メチル−チアゾール−２−イル］−アミド
【０１４１】
【化１１】
2018526375.tif 000012
【０１４２】
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の５−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン−４−イル）−４−メチル−チアゾール−２−イルアミン（ステップ１．２）（１ｇ、４．０５ｍｍｏｌ）および１，１’−カルボニルジイミダゾール（０．９８４ｇ、６．０７ｍｍｏｌ、１．５当量）の混合物を還流下で４時間撹拌し、冷ます。得られた沈殿物を濾過により収集して、１．２６ｇの表題化合物を白色の固体として得る。ＥＳＩ−ＭＳ：３４０．２［Ｍ−Ｈ］−；ｔＲ＝２．８５分（系１）。
【０１４３】
ステップ１．２：５−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン−４−イル）−４−メチル−チアゾール−２−イルアミン
【０１４４】
【化１２】
2018526375.tif 000013
【０１４５】
Ｎ−［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン−４−イル）−４−メチル−チアゾール−２−イル］−アセトアミド（ステップ１．３）（２ｇ、７ｍｍｏｌ）、ＨＣｌの６Ｎ水溶液（１０ｍＬ）、およびＥｔＯＨ（５０ｍＬ）の混合物を、８５℃で２時間撹拌し、冷却し、ＮａＨＣＯ３飽和溶液の添加によりクエンチし、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（９：１、ｖ／ｖ）で抽出する。有機相をＮａＨＣＯ３の飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１：０→９６：４）により精製して、１．２１ｇの表題化合物を黄色の固体として得る。ＥＳＩ−ＭＳ：２４８．１［Ｍ＋Ｈ］＋；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３６（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９：１）。
【０１４６】
ステップ１．３：Ｎ−［５−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン−４−イル）−４−メチル−チアゾール−２−イル］−アセトアミド
【０１４７】
【化１３】
2018526375.tif 000014
【０１４８】
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の２−アセトアミド−４−メチルチアゾール（１．２ｇ、７．７ｍｍｏｌ、１．１当量）、炭酸セシウム（４．５５ｇ、１４ｍｍｏｌ、２当量）、トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィニウムテトラフルオロボレート（０．４０６ｇ、１．４ｍｍｏｌ、０．２当量）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．１５ｇ、０．７ｍｍｏｌ、０．１当量）、および４−ブロモ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン（ステップ１．４）（１．５ｇ、７ｍｍｏｌ）の混合物を、アルゴン雰囲気下、９０℃で１．５時間撹拌し、冷却し、ＮａＨＣＯ３飽和溶液の添加によりクエンチし、セライドパッドで濾過する。濾液をＥｔＯＡｃで抽出する。有機相をＮａＨＣＯ３の飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１：０→９７：３）により精製して、２．０２ｇの表題化合物を黄色の固体として得る。ＥＳＩ−ＭＳ：２９０．１［Ｍ＋Ｈ］＋；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９：１）。
【０１４９】
ステップ１．４：４−ブロモ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピリジン
【０１５０】
【化１４】
2018526375.tif 000015
【０１５１】
２−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−ピリジン−４−オン（ステップ１．５）（４．２５ｇ、２８ｍｍｏｌ）およびＰＯＢｒ３（８．８８ｇ、３１ｍｍｏｌ、１．１当量）の混合物を１２０℃に加熱し、１５分間撹拌し、冷却し、ＮａＨＣＯ３飽和溶液の添加によりクエンチし、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（９：１、ｖ／ｖ）で抽出する。有機相をＮａＨＣＯ３の飽和溶液で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ、９５：５）により精製して、５．１８ｇの表題化合物を黄色の油状物として得る。ＥＳＩ−ＭＳ：２１４．０／２１６．０［Ｍ＋Ｈ］＋；ｔＲ＝２．４９分（系１）；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ、１：１）。
【０１５２】
ステップ１．５：２−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−ピリミジン−４−オン
【０１５３】
【化１５】
2018526375.tif 000016
【０１５４】
２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラン−４−オン（ステップ１．６）（５．７４ｇ、３７．７ｍｍｏｌ）および水酸化アンモニウムの３０％水溶液（１００ｍＬ）の混合物を還流下で１時間撹拌し、冷却し、濃縮する。残留物をＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中ですり混ぜ、濾過する。濾液を濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ３水溶液、９４：５：１→９２：７：１）により精製して、４．４６ｇの表題化合物を黄色の固体として得る。ＥＳＩ−ＭＳ：１５２．０［Ｍ＋Ｈ］＋；ｔＲ＝１．４５分（系１）；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１１（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９：１）。
【０１５５】
ステップ１．６：２−ｔｅｒｔ−ブチル−ピラン−４−オン
【０１５６】
【化１６】
2018526375.tif 000017
【０１５７】
ベンゼン（２５０ｍＬ）中の５−ヒドロキシ−１−メトキシ−６，６−ジメチル−ヘプタ−１，４−ジエン−３−オン（ステップ１．７）（６．８ｇ、３６．９ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（５．６５ｍＬ、７４ｍｍｏｌ、２当量）の混合物を室温で１４時間撹拌し、濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ、１：０→７５：２５）による残留物の精製は、５．７４ｇの表題化合物を黄色の油状物としてもたらす。ＥＳＩ−ＭＳ：１５３．１［Ｍ＋Ｈ］＋；ｔＲ＝３．２１分（系１）；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２２（Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ、１：１）。
【０１５８】
ステップ１．７：５−ヒドロキシ−１−メトキシ−６，６−ジメチル−ヘプタ−１，４−ジエン−３−オン
【０１５９】
【化１７】
2018526375.tif 000018
【０１６０】
ＬｉＨＭＤＳ（ＴＨＦ中１Ｍ、１００ｍＬ、２当量）を、ＴＨＦ（４００ｍＬ）中の４−メトキシ−３−ブテン−２−オン（１０ｍＬ、１００ｍｍｏｌ、２当量）の冷却（−７８℃）溶液に滴下添加する。−７８℃で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の塩化ピバロイル（６．１２ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）の溶液を加える。得られた混合物を２時間かけて室温に温め、ＮＨ４Ｃｌの飽和溶液の添加によりクエンチする。ＴＨＦを真空下で除去する。濃縮混合物をＥｔ２Ｏで抽出する。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ、１：０→８５：１５）により精製して、６．８３ｇの表題化合物を黄色の油状物として得る。ＥＳＩ−ＭＳ：１８５．１［Ｍ＋Ｈ］＋；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．８７（Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ、１：１）。
【０１６１】
ＩＩ．（Ｓ）−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸２−アミド１−（｛４−メチル−５−［２−（２，２，２−トリフルオロ−１，１−ジメチル−エチル）−ピリジン−４−イル］−チアゾール−２−イル｝−アミド）（化合物（Ｉ）または化合物ＡまたはＢＹＬ７１９）の合成
表題化合物は、上記に記載された手順に類似しているが、以下の修正を伴って調製される。ステップ１．１では、反応混合物を還流下で１４時間撹拌する。ステップ１．２では、反応混合物を８５℃で１時間撹拌し、クエンチした後、ＥｔＯＡｃで抽出する。ステップ１．３では、反応混合物を１２０℃で２．５時間撹拌する。ステップ１．４では、反応混合物を８３℃で１時間撹拌し、クエンチした後、ＥｔＯＡｃで抽出する。ステップ１．５では、反応混合物を６５℃で１時間撹拌し、ＭｅＯＨ中でのすり混ぜは実施しない。ステップ１．６では、粗生成物を精製しない。ステップ１．７では、３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチル−プロピオニルクロリドを使用する。
【０１６２】
表題化合物：ＥＳＩ−ＭＳ：４４２．０［Ｍ＋Ｈ］＋；ｔＲ＝３．０２分（系１）；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９：１）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ(ppm): 1.60 (s, 6 H) 1.70-1.95 (m, 3 H) 1.99 - 2.16 (m, 1 H) 2.40 (s, 3 H) 3.38 - 3.51 (m, 1 H) 3.51 - 3.69 (m, 1 H) 4.10-4.40 (m, 1 H) 6.95 (br. s., 1 H) 7.39 (d, 2 H) 7.53 (s, 1 H) 8.58 (d, 1 H) 10.93 (br. s., 1 H)
【０１６３】
代替的な手順において、表題化合物は、上記に記載された手順に類似しているが、以下の修正を伴って調製される。Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドをＤＭＦの代わりに使用し、混合物を６５℃で２時間撹拌する。ステップ１．１では、クロロギ酸フェニル（ゆっくりと添加した）を１，１’−カルボニルジイミダゾールの代わりに使用し、反応を、Ｎ，Ｎ−ジエチル−イソプロピルアミンの存在下、ＴＨＦ中において室温で（１．５時間）実施する。ステップ１．２では、反応混合物を（還流下で）５時間撹拌しながら加熱し、クエンチした後、ＥｔＯＡｃで抽出する。ステップ１．３では、反応混合物を１００℃で２時間撹拌する。ステップ１．４では、反応を１．１当量のＰＯＢｒ３および１．１当量のトリプロピルアミンを使用してトルエン中で実施し、混合物を８０℃で２時間撹拌し、クエンチした後、ＥｔＯＡｃで抽出する。ステップ１．５では、反応混合物を６５℃で１時間撹拌し、ＭｅＯＨ中でのすり混ぜは実施しない。ステップ１．６では、トルエンをベンゼンの代わりに使用し、粗生成物を精製しない。ステップ１．７では、３，３，３−トリフルオロ−２，２−ジメチル−プロピオニルクロリドを使用する。
【０１６４】
実施例２：結腸直腸がん細胞系におけるＰＩＫ３ＣＡ（またはＰＩ３Ｋ）阻害剤の化合物（Ｉ）（化合物Ａ、ＢＹＬ７１９）をＡＫＴ阻害剤の化合物（ＩＩ）（化合物Ｂ、ＭＫ−２２０６）と組み合わせることによる増殖に対するインビトロ効果
化合物ＡおよびＢを１００％ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｄ２６５０）に２０ｍＭの濃度で溶解し、使用するまで−２０℃で保存した。化合物を薬物マスタープレート（drug master plate）（Ｇｒｅｉｎｅｒ、カタログ番号７８８８７６）に配列し、２０００×濃度で３倍に連続希釈（７ステップ）した。
【０１６５】
この研究に使用される結腸直腸がん細胞系を、商業的供給者のＡＴＣＣ、ＣｅｌｌＢａｎｋ  Ａｕｓｔｒａｌｉａ、ＤＳＭＺ、ＥＣＡＣＣ、ＨＳＲＲＢおよびＲＩＫＥＮ（表１）から得て、培養し、処理した。全ての細胞系の培地には、１０％ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ、カタログ番号ＳＨ３００７１．０３）を補充した。ＬＩＭ２４０５およびＬＩＭ２５５１の培地には、０．６μｇ／ｍＬのインスリン（ＳＩＧＭＡ、カタログ番号Ｉ９２７８）、１μｇ／ｍＬのヒドロコルチゾン（ＳＩＧＭＡ、カタログ番号Ｈ０１３５）、および１０μＭの１−チオグリセロール（ＳＩＧＭＡ、カタログ番号Ｍ６１４５）を追加的に補充した。
【０１６６】
【表１】
2018526375.tif 000019
【０１６７】
細胞系を、３７℃および５％ＣＯ２のインキュベーターで培養し、Ｔ−７５フラスコで拡大させた。全ての場合において、細胞は、凍結貯蔵物から解凍し、１：３希釈を使用して≧１継代で拡大させ、平板培養する前に、ＶｉＣｅｌｌ計数器（Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して計数し、生存度について評価した。細胞系を分裂および拡大させるため、細胞を、０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡ（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号２５２００）を使用してフラスコから取り出した。Ｉｄｅｘｘ  Ｒａｄｉｌ（Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＯ，ＵＳＡ）により実施されたＰＣＲ検出方法により決定され、ＳＮＰパネルの検出によって正確に確認されたように、全ての細胞系には、マイコプラズマ汚染がないことが決定された。
【０１６８】
細胞増殖に対する化合物Ａおよび化合物Ｂの組み合わせ物の効果を試験するため、細胞を、透明底を有する黒色３８４ウェルマイクロプレート（Ｍａｔｒｉｘ／Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号４３３２）において、ウェル１つあたり５０μＬの培地に５００〜１２５０細胞／ウェルの細胞密度（表１）で平板培養し、３７度、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。２４時間後、細胞系１つあたり１つの３８４ウェルプレートを、処理を受けることなく（＝「ベースライン」）、顕微鏡検査法による細胞計数のために調製した（下記を参照されたい）。他の細胞プレートは、ＡＴＳ音響液体分配器（acoustic liquid dispenser）（ＥＣＤ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）の使用により薬物マスタープレートから２５ｎＬの２０００×化合物を移し、最終１×濃度をもたらすことによって処理した。化合物Ａを１３ｎＭ〜１０μＭの最終濃度範囲で使用し、化合物Ｂを１３ｎＭ〜１０μＭの最終濃度範囲で使用した（１：３希釈の７段階）。化合物Ａと化合物Ｂの組み合わせ物では、単剤をそれぞれの希釈において１：１の固定比で組み合わせて、７つの組み合わせ処理をもたらした。加えて、陰性対照（ＤＭＳＯ＝「ビヒクル」）および陽性対照（スタウロスポリン＝細胞死滅、１６ｎＭ〜１μＭの用量範囲の７ポイント１：２希釈系列）を、処理対照として移し、試験細胞系に有効性のない化合物を化合物Ａおよび化合物Ｂと組み合わせて、組み合わせ対照（より有効な単剤の有効性を超えない組み合わせ物＝「非相互作用」組み合わせ物）として使用した。化合物を添加した後、５０ｎＬの２ｍＭ  ＣｅｌｌＥｖｅｎｔ  カスパーゼ３／７緑色検出試薬（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、カタログ番号Ｃ１０４２３）を、ＨＰ  Ｄ３００  Ｄｉｇｉｔａｌ  Ｄｉｓｐｅｎｓｅｒ（Ｔｅｃａｎ）の使用により３回の複製のうちの１回に加えた。カスパーゼ３／７誘発を、処理により誘発されるアポトーシスの代理として測定した。細胞を倍加時間に応じて７２時間から９６時間処理し（表１）、カスパーゼ３／７活性化を、４×対物レンズおよびＦＩＴＣ励起／発光フィルターを備えたＩｎＣｅｌｌ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ２０００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して、顕微鏡検査法により２４時間毎に測定した。処理の最後に、細胞を顕微鏡検査法による細胞計数のために調製した。細胞を、ＰＢＳ（Ｂｏｓｔｏｎ  Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ、カタログ番号ＢＭ−２２０）中の４％ＰＦＡ（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号１５７１４）、０．１２％ＴＸ−１００（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号２２１４０）において、４５分間にわたって固定および透過処理した。細胞をＰＢＳで３回洗浄した後、それらのＤＮＡをＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、カタログ番号Ｈ３５７０）により最終濃度４μｇ／ｍｌで３０分間染色した。細胞をＰＢＳで３回洗浄し、次にプレートをＰｌａｔｅＬｏｃ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）の使用によりアルミニウムシール（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号  ０６６４４−００１）でヒートシールし、画像化するまで４℃で保存した。全��の細胞では、ウェル／処理毎に４×対物レンズおよびＤＡＰＩ励起／発光フィルターを備えたＩｎＣｅｌｌ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ２０００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用する蛍光顕微鏡検査法により単一画像を撮った。
【０１６９】
以前に記載された方法（Horn, Sandmann et al. 2011, Nat. Methods 8(4): 341-346）を適用し、ＲのＢｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒパッケージＥＢＩｍａｇｅ（Pau, Fuchs et al. 2010, Bioinformatics 26(7):979-981）を使用した後、画像を分析した。両方のチャンネルにおける対象物、ＤＡＰＩ（Ｈｏｅｃｈｓｔ／ＤＮＡの）およびＦＩＴＣ（カスパーゼ３／７の）を適応閾値化により別々にセグメント化し、計数した。カスパーゼ３／７陽性対象物の閾値は、陰性対照（ＤＭＳＯ）と陽性対照（スタウロスポリン）とを比較した後、細胞系１つ毎に手作業により確定した。ＤＮＡチャンネルにおいて対象物／核の１７の追加的特徴（形状および強度特徴）を分析することによって、細片／断片化核を確認した。このため、細胞系１つ毎に、陽性対照（スタウロスポリン）および陰性対照（ＤＭＳＯ）の追加的な特徴の分布を、手作業により比較した。条件によって差が生じうる特徴（例えば、ＤＭＳＯとスタウロスポリンとを比較した特徴測定分布におけるシフト）を、「生存」核の集団に対して「細片」集団を確定するために使用した。細片計数を、生の核計数から差し引いた。得られた核の数を細胞増殖の測度（「細胞計数」）として使用した。
【０１７０】
細胞増殖に対する化合物の効果を、陰性対照（ＤＭＳＯ）の細胞計数に対する処理細胞計数から計算し、図１では、ｙ軸に「正規化細胞計数」（＝「ｘｎｏｒｍ」）と示されている。相乗的組み合わせ物は、帰無仮説の最高単剤モデル（ＨＳＡ）（Berenbaum 1989）を使用して確認した。ＨＳＡモデルにおける超過は、阻害標的間の機能的な繋がりを予測する（Lehar, Zimmermann et al. 2007, Lehar, Krueger et al. 2009）。モデルの入力は、薬物用量毎の阻害値である。
Ｉ＝１−ｘｎｏｒｍ
Ｉ：阻害
ｘｎｏｒｍ：正規化細胞計数（３回の複製の中央値）
【０１７１】
組み合わせ処理の全ての用量点において、組み合わせ物の阻害と、２つの単剤のより強力な方の阻害との差を計算した（＝残差モデル）。高い阻害での組み合わせ効果が好ましいので、残差には、同じ用量点で観察された阻害を加重した。薬物組み合わせ物の全体的な組み合わせスコアＣは、全ての濃度の加重残差の合計である。
Ｃ＝Σ濃度（Ｉデータ＊（Ｉデータ−Ｉモデル））
Ｉデータ：測定阻害値
Ｉモデル：ＨＳＡ帰無仮説による阻害値
【０１７２】
堅牢な組み合わせｚスコア（ｚＣ）を、処理の組み合わせスコアＣと、非相互作用組み合わせ物の絶対偏差の中央値（ｍａｄ）との比として計算した。
ｚＣ＝Ｃ／ｍａｄ（Ｃゼロ）
Ｃゼロ：非相互作用組み合わせ物の組み合わせスコア
【０１７３】
ｚＣは、組み合わせ物の強さの指標である。
ｚＣ≧３：相乗作用
３＞ｚＣ≧２：弱い相乗作用
ｚＣ＜２：相乗作用なし
【０１７４】
ＩＣ５０は、ＤＭＳＯに対して５０％の細胞計数をもたらす化合物濃度である。ＩＣ５０の計算（表２を参照されたい）は、ＲのＤＲＣパッケージ（Ritz and Streibig January 2005, Journal of Statistical Software, “Bioassay analysis using R”, 12:5:1-22）を使用し、データに４パラメーター対数ロジスティック関数を当てはめて行った。
【０１７５】
アポトーシスに対する化合物の効果は、生の細胞計数（細片を差し引く前）と比べた、処理および時点毎の活性化カスパーゼ３／７を有する細胞のパーセンテージを計算することによって決定した（図２のｙ軸）。実験的に測定しなかった時点の細胞計数は、０日目および処理の最終日に対数変換細胞計数を線形モデルに当てはめる（指数細胞成長を推定する）回帰分析によって得た。
【０１７６】
この実験では、ＰＩＫ３ＣＡ阻害剤（化合物（Ｉ）、化合物Ａ）およびＡＫＴ阻害剤（化合物（ＩＩ）、化合物Ｂ）の有効性を、ＫＲＡＳ、ＢＲＡＦ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＫＲＡＳ、およびＰＩＫ３ＣＡ、ＢＲＡＦおよびＰＩＫ３ＣＡ、またはＭＥＫ１に対して突然変異があった合計で２３個の結腸直腸がん細胞系において、個別および組み合わせにより評価した（表１）。３個の細胞系は、３個の遺伝子（ＨＴ−５５、ＣＯＬＯ−３２０、ＣＷ−２）のいずれにも突然変異を有さなかった。化合物Ａは、単剤として、ＰＩＫ３ＣＡへの突然変異を有する細胞系の成長を、ＰＩＫ３ＣＡ野生型の細胞系と比較して有意に強力に阻害し（図３）、マイクロモルのＩＣ５０値で阻害した（図１および表２）。化合物Ｂは、単剤として、混合型の応答を示し、主に、細胞系の成長をマイクロモルのＩＣ５０値で阻害した（図１および表２）。組み合わせ処理は、２３個の系のうち１８個に相乗的阻害（ＨＳＡモデルによる）を引き起こし、試験した２３個の系のうち３個に追加的な弱い相乗的阻害を引き起こし（表２）、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ経路の二重阻害の利益を示している。組み合わせ物の阻害および相乗作用は、両方とも、ＫＲＡＳ突然変異細胞と比較してＢＲＡＦ突然変異細胞に対して選択的であった（それぞれ、ｐ＝０．０２８およびｐ＝０．００２、片側ｔ検定）。組み合わせ物は、試験した細胞モデルにおいて異なる程度でアポトーシス誘発し（カスパーゼ３／７誘発の測定により評価）（図２）、組み合わせ物を単剤と比較すると、最強の誘発は、ＬＩＭ２５５１およびＬＳ４１１Ｎにおいて見られた。ＢＲＡＦ突然変異結腸直腸がんにおけるＰＩＫ３ＣＡおよびＡＫＴを組み合わせた阻害は、それぞれの単剤と比較して改善された応答が可能である有効な治療様式を提供し、臨床においてより長続きする応答をもたらすことができる。
【０１７７】
【表２】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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