(57)【要約】  本出願は、一連の塩析および濾過工程を通して植物抽出物からサポニンを得て精製し、高純度のサポニン抽出物を大量に提供する方法に関する。【選択図】図１
2018538286.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む、植物からサポニンを精製する方法：
サポニンを含む植物抽出物を提供する工程；
抽出物を塩および溶媒と混合して第１の溶液を形成する工程、なお、第１の溶液は、サポニンおよびイオン−多糖複合体を含む；
第１の溶液のｐＨを６〜７に調整する工程；
少なくとも１つのリン酸塩を第１の溶液に添加し、それによって、可溶性イオン−多糖類複合体を実質的に含まない第１の混合物を形成する工程；
任意選択で、第１の混合物を加熱する工程；
第１の混合物を濾過して第２の溶液を得る工程；
第２の溶液を清澄化して精製サポニンの抽出物を生成する工程。
【請求項２】
以下を含む、サポニンを含有する植物抽出物を提供する、請求項１に記載の方法：
植物バイオマスを提供する工程；
バイオマスを乾燥および粉砕する工程；
溶媒をバイオマスに添加する工程；
【請求項３】
バイオマスが、Ｑｕｉｌｌａｊａｃｅａｅ、Ａｓｐａｒａｇａｃｅａｅ、Ａｒａｌｉａｃｅａｅ、ＦａｂａｃｅａｅおよびＳａｐｉｎｄａｃｅａｅのファミリーから選択される植物から得られる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
バイオマスが、種Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａから得られる、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記溶媒が水である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記塩がカルシウムクロリドである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記第１の溶液のｐＨを調節する工程が、前記第１の溶液に水酸化カルシウムを添加する工程を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記少なくとも１つのリン酸塩が、リン酸水素ナトリウムである、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
さらに前記第１の混合物を７０℃〜９０℃に加熱する工程を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記第１の混合物を濾過する工程は、珪藻土フィルタを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記第２の溶液を清澄化する工程が、さらに以下を含む、請求項１に記載の方法：
前記第２の溶液のｐＨを７未満に低下させる工程；
少なくとも１つのポリマー吸着剤、および、少なくとも１つの粘土由来材料を加え、少なくとも１つのポリマー吸着剤、および、少なくとも１つの粘土由来材料を濾過によって除去する工程。
【請求項１２】
前記第２の溶液のｐＨを低下させる工程は、前記第２の溶液に塩酸を添加する工程を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも１つのポリマー吸着剤が、ウシゼラチン、魚ゼラチン、植物起源のタンパク質、アルブミン、乳タンパク質、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリビニルポリピロリドン（ＰＶＰＰ）、および、それらの組み合わせから選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記粘土由来材料が、ベントナイトである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記少なくとも１つのポリマー吸着剤、および、少なくとも１つの粘土由来材料を除去し、前記粘土由来材料が珪藻土フィルタを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
さらに浄化サポニンのさらなる浄化を含み、ナノ濾過、限外濾過およびダイアフィルトレーション、または、それらの組み合わせのうちの１つ以上を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれかに記載の方法により得られる、精製サポニンの抽出物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は植物から化合物を得る技術分野に関し、特に、植物からサポニン類を製造および浄化するための方法を提供する技術分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
（関連技術の説明）
サポニンは、１つ以上の糖（糖）基に結合したステロイドまたはトリテルペノイド部分を含む化学構造を有する、多種多様な植物に存在する化合物である。サポニンの多種多様な化学構造は、多様な物理化学的および生物学的特徴を提供し、したがって、食品、化粧品、採掘、農業、および製薬分野などの多くの産業用途を提供する。
【０００３】
サポニンを含有する製品を得るためには、植物材料からのこれらの化合物の抽出および精製が必要である。しかしながら、サポニンの化学構造の多様性と、サポニンの供給源に存在する無数の望ましくない化合物および不純物との両方のために、高純度のサポニン抽出物を得ることは技術的に困難である。例えば、望ましくない不純物としてはフェノール化合物、タンパク質、炭水化物および多糖類があげられるが、これらに限定されない。抽出物中の望ましくない不純物の含有量は、その工業用途に直接影響する。実際、免疫学的アプリケーションにおけるサポニンの使用は高度に精製されたサポニン、すなわち、その医薬品使用に悪影響を及ぼし得るいかなる不純物も含有しないサポニンを必要とする。
【０００４】
溶媒抽出、吸着、限外濾過、または、クロマトグラフィーを含む、サポニンの浄化のための種々の公知の方法がある。例えば、米国特許出願公開第２０１４／００３０３１８号は、可溶化化合物および可溶化溶媒を使用し、続いて希釈または透析を行うサポニンの浄化方法を記載している。チリ特許出願第２００２０２５７３号は、吸着剤を用いて不純物を除去し、続いて濾過することによるサポニンの製造方法を開示している。同様に、米国特許第６，３５５，２４９号は、限外濾過、高速液体クロマトグラフィー、および、逆相クロマトグラフィーによるサポニンの浄化を記載している。
【０００５】
しかしながら、現行の浄化方法は、（ｉ）工業的レベルにスケールアップできない；（ｉｉ）高価である；（ｉｉｉ）浄化されたサポニンを得るために過度に長い期間を必要とする。例えば、９０％のサポニン（乾燥固形分に基づく）に基づく製品のバッチの製造時間は、これらの従来の方法を用いて約２ヶ月かかる可能性がある。さらに、これらの処理は、不純物、特に植物抽出物中に存在する多糖類を、それらの大きなサイズが限外濾過膜を通過するのを妨げるので、完全に除去することができない。これらの多糖類は液体サポニン抽出物の貯蔵中に、またはエンドユーザーによって使用されるときに、望ましくない沈殿物を形成し得、したがって、精製サポニンについての特に負の特質と考えられる。
【０００６】
したがって、多糖類および他の不純物を十分に除去し、時間および生産コストの両方において効率的で高度に精製されたサポニンを得るための新しい方法が必要とされる。
【発明の概要】
【０００７】
いくつかの実施形態は、サポニン、および、非サポニン多糖類を含有する植物抽出物を提供する工程、抽出物を溶媒に溶解、および／または、懸濁された塩と混合してイオン−多糖類複合体を含有する混合物を形成する工程、混合物のｐＨを調節する工程、イオン−多糖類複合体を沈殿させる工程、沈殿物を濾過する工程、および残りの溶液を清澄化してサポニンの抽出物を生成する工程を含む、植物からサポニンを得るための方法を提供する。したがって、本出願は、工業的規模で、従来の方法よりもはるかに速く、精製サポニンを迅速かつ再現可能に得るための植物抽出物の不純物の除去を提供する。
【０００８】
いくつかの実施形態は、サポニンを含有する植物抽出物を提供する工程と、抽出物を塩および溶媒と混合して第１の溶液を形成する工程であって、第１の溶液はサポニンおよびイオン−多糖複合体を含む工程と、第１の溶液のｐＨを６から７の間に調整する工程と、第１の溶液に少なくとも１つのリン酸塩を加える工程によって、可溶性イオン多糖複合体を実質的に含まない第１の混合物を形成する工程と、任意選択で第１の混合物を加熱する工程と、第２の溶液を得るために第１の混合物を濾過する工程と、精製されたサポニンの抽出物を生成するために第２の溶液を清澄化する工程とを含む、植物からサポニンを精製する方法を提供する。
【０００９】
いくつかの実施形態において、サポニンを含有する植物抽出物を提供する工程は、植物バイオマスを提供する工程；バイオマスを乾燥および粉砕する工程；および、溶媒をバイオマスに添加する工程を含む。
【００１０】
いくつかの実施形態において、バイオマスは、Ｑｕｉｌｌａｊａｃｅａｅ、Ａｓｐａｒａｇａｃｅａｅ、Ａｒａｌｉａｃｅａｅ、ＦａｂａｃｅａｅおよびＳａｐｉｎｄａｃｅａｅのファミリーから選択される植物から得られる。いくつかの実施形態において、バイオマスは、種Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａから得られる。
【００１１】
いくつかの実施形態では、バイオマスが少なくとも６ヶ月齢、少なくとも１２ヶ月齢、少なくとも１８ヶ月齢、少なくとも２４ヶ月齢、少なくとも３０ヶ月齢、少なくとも３６ヶ月齢、少なくとも４２ヶ月齢、少なくとも４８ヶ月齢、少なくとも５歳齢、少なくとも６歳、少なくとも７歳、少なくとも８歳、少なくとも９歳、少なくとも１０歳、少なくとも１１歳、少なくとも１２歳、少なくとも１３歳、少なくとも１４歳、少なくとも１５歳、少なくとも１６歳、少なくとも１７歳、少なくとも１８歳、少なくとも１９歳、少なくとも２０歳、少なくとも２１歳、少なくとも２５歳、少なくとも２６歳、少なくとも２７歳、少なくとも２８歳、少なくとも２９歳、少なくとも３０歳、少なくとも３５歳、少なくとも４０歳、少なくとも４５歳、少なくとも５０歳、少なくとも５５歳、少なくとも６０歳、少なくとも６５歳、少なくとも７０歳、少なくとも７５歳、少なくとも８０歳、または、それらの任意の組み合わせの植物から選択される。
【００１２】
いくつかの実施形態では、植物抽出物は固体として提供される。いくつかの実施形態では、植物抽出物は溶液として提供される。いくつかの実施形態において、植物抽出物は、スラリーとして提供される。
【００１３】
いくつかの実施形態では、溶媒は水である。いくつかの実施形態では塩はカルシウムクロリドである。いくつかの実施形態では、第１の溶液のｐＨを調節する工程は、第１の溶液に水酸化カルシウムを添加する工程を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのリン酸塩がリン酸水素ナトリウムである。いくつかの実施形態では、この方法が第１の混合物を７０℃〜９０℃に加熱する工程をさらに含む。
【００１４】
いくつかの実施形態では、第１の混合物を濾過する工程は珪藻土フィルタを含む。いくつかの実施形態では、第２の溶液を清澄化する工程が第２の溶液のｐＨを７未満に低下させる工程と、少なくとも１つのポリマー吸着剤、および、少なくとも１つの粘土由来材料を添加する工程と、濾過によって少なくとも１つのポリマー吸着剤、および、少なくとも１つの粘土由来材料を除去する工程とをさらに含む。いくつかの実施形態では、第２の溶液のｐＨを低下させる工程は第２の溶液に塩酸を添加する工程を含む。
【００１５】
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのポリマー吸着剤がウシゼラチン、魚ゼラチン、植物起源のタンパク質、アルブミン、乳タンパク質、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリビニルポリピロリドン（ＰＶＰＰ）、および、それらの組み合わせから選択される。いくつかの実施形態では、粘土由来材料はベントナイトである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのポリマー吸着剤、および、少なくとも１つの粘土由来材料を除去する工程は珪藻土フィルタを含む。いくつかの実施形態は、ナノ濾過、限外濾過およびダイアフィルトレーション、または、それらの組み合わせのうちの１つ以上を含む、浄化サポニンのさらなる浄化をさらに含む。
【００１６】
いくつかの実施形態は、本明細書に記載の方法によって得られる精製サポニンの抽出物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、キラヤ・サポナリア・モリナ（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａ）の樹皮からのサポニンの精製プロセスの概略図である。
【００１８】
【図２】図２は、キラヤ・サポナリア・モリナ（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａ）のバイオマスからのサポニンの精製プロセスの概略図である。
【００１９】
【図３】図３は、従来の方法によって得られる、サポニンを含有する生成物からのサポニンの精製プロセスの概略図である。
【００２０】
【図４】図４は、全植物バイオマスから液体および粉末精製サポニン製品までサポニンを得るための完全なプロセスの一般的な概略図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
先に記載したように、本出願はサポニンの抽出およびその後の不純物、特に遊離多糖類（すなわち、サポニンの一部でない多糖類）の除去を含む、植物からサポニンを得て浄化する方法に関する。
【００２２】
驚くべきことに、サポニンを含有する植物抽出物への塩の添加は一定遊離多糖不純物とイオン−多糖複合体を形成するが、サポニンの糖鎖とは形成しない。これは、サポニンが溶液中に維持されている間、イオン−多糖複合体の除去を促進する。
【００２３】
いくつかの実施形態において、沈殿は、１つ以上のリン酸塩を添加する工程によって促進される。いくつかの実施形態において、沈殿は、ヒドロキシドな塩基を添加する工程によって促進される。
【００２４】
本出願を説明するために使用される全ての専門用語は、当該技術分野における基礎的知識を有する者にとって理解されるのと同じ意味を有する。しかしながら、本出願の範囲をより明確に定義するために、本説明で使用される用語のリストを以下に含める。
【００２５】
用語「サポニン」は、ステロイドまたはトリテルペノイドを含む不溶物疎水性部分、および１つ以上の糖鎖を含む親水性部分を含むことを特徴とする任意のグリコシドとして理解されなければならない。糖類は、グルコース、アラビノース、ガラクトース、ラムノース、キシロース、フコース、キシロース、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、キトビオース、イソマルトース、ソホロース、ソルビトール、マンニトール、グルクロン酸およびガラクツロン酸を含むがこれらに限定されない任意の糖であり得る。
【００２６】
本明細書で使用される「植物抽出物」という用語は、とりわけ、溶媒抽出、吸着、浸軟、蒸留などの当技術分野で知られている任意の方法によって、植物の一部から抽出することによって得られる任意の物質または誘導製品を指す。「植物抽出物」はまた、以前に第１の抽出処理を受け、液体または粉末の両方として一般大衆に販売されて見出され得る、植物抽出物に基づく任意の産物とみなされる。
【００２７】
本明細書で使用される「バイオマス」という用語は、植物界に由来する任意の生物学的材料を指す。例えば、バイオマスは、樹皮、幹、葉、茎、根、シード、花、果実、または、それらのいずれかの組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、全植物バイオマスが使用される。「全植物バイオマス」とは、根より上の植物の少なくともその部分（すなわち、幹または幹の上）をいう。いくつかの実施形態では、バイオマスが樹皮、幹、葉、茎、根、シード、花、および／または、果実を含む。いくつかの実施形態では、バイオマスは樹皮である。いくつかの実施形態において、バイオマスは、クローン的に成長した全植物から得られる。いくつかの実施形態において、バイオマスは、クローン的に成長した全植物の樹皮、幹、葉、茎、根、シード、花、および／または、果実から得られる。いくつかの実施形態において、バイオマスは、クローン的に成長した全植物由来の樹皮である。
【００２８】
本明細書で使用される「酸」という用語は、プロトンを供与するか、または１ペアの電子を受け入れることができる化合物を指す。酸の例としては塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、フッ化水素酸、過塩素酸、ホウ酸、硫酸、リン酸、硝酸、Ｃ１−Ｃ６カルボン酸、シュウ酸、乳酸、リンゴ酸、クエン酸、安息香酸、炭酸、メタンスルホン酸、および、トリフルオロメタンスルホン酸があげられるが、これらに限定されない。
【００２９】
本明細書で使用される「塩基」という用語は、プロトンを受け入れるか、または一対の電子を供与することができる化合物を指す。塩基の例としては、アンモニア、水酸化アンモニウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化バリウム、水酸化カルシウム、水酸化セシウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸セシウム、リン酸リチウム、リン酸ナトリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸バリウム、リン酸マグネシウム、リン酸カルシウム、リン酸セシウム、ピリジン、Ｃ１−Ｃ６トリアルキルアミン、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミン、Ｃ１−Ｃ６モノアルキルアミン、イミダゾール、Ｎ−メチルイミダゾール、ベンズイミダゾール、および、ヒスチジンがあげられるが、これらに限定されない。
【００３０】
いくつかの実施形態では、塩基は水酸化物である。いくつかの実施形態では、塩基がナトリウムヒドロキシドである。いくつかの実施形態では、塩基がカルシウムヒドロキシドである。
【００３１】
本明細書で使用される「不純物」という用語は溶液または混合物中の任意の望ましくない物質を指し、すなわち、主要な化合物または金利の化合物を指さない。本出願では主な化合物はサポニンであり、フェノール化合物（とりわけタンニン、ケルセチン、ロイコシアニジン、ケンフェロールなど）、有機酸（カフェイン酸、没食子酸、クマル酸など）、遊離糖類、遊離多糖類、脂質、および窒素含有化合物など、存在する他の物質はとりわけ不純物と考えられる。
【００３２】
本明細書で使用される「清澄化」という用語は、錯化、電荷、同伴または化学反応によって他の不溶性成分と相互作用する特定の化合物の除去を指す。精澄化は、珪藻類による濾過、凝集による濾過、または凝固剤の使用を含むがこれらに限定されない様々な技法によって達成することができる。
【００３３】
本明細書で使用される「遊離」という用語は例えば、「遊離多糖類」および「遊離フェノール化合物」において、サポニンの一部ではない化合物を指す。したがって、サポニンは１つ以上の糖環を含んでもリングが、そのような糖は「遊離」糖ではない。
【００３４】
前述したように、本出願の目的は植物からサポニンを得るための方法および方法に関し、以下を含む：サポニンを含有する植物抽出物を提供し、アルカリ土類金属のグループから選択される塩を抽出物に添加して、他の化合物の中でもイオン−多糖類錯体を含有する第１の溶液を形成し、第１の溶液のｐＨを６〜７に調整し、サポニンおよびイオン−多糖類錯体を含む第１の混合物を形成するために１つ以上のリン酸塩を添加し、第２の溶液を得るために第１の混合物を濾過し、精製されたサポニンの抽出物を生成するために第２の溶液を清澄化する。
【００３５】
いくつかの実施形態では、バイオマスがそのサポニンプロファイルに基づいて選択される。例えば、所望のサポニンプロファイルは、食品、ワクチン、植物成長刺激剤、および殺虫剤がそれぞれ異なる所望のサポニンプロファイルを有する最終製品の同一性に従って変化する。いくつかの実施形態において、サポニンプロファイルは、ＨＰＬＣ、ＵＰＬＣ、または、それらの組み合わせによって決定される。
【００３６】
いくつかの実施形態では、サポニンを含有する植物抽出物を得る工程は溶、媒抽出を含む。好ましくは、本出願に使用される植物抽出物を得る工程は以下を含む：植物のバイオマスを提供し、バイオマスを乾燥、および／または、粉砕し、溶媒をバイオマスに添加して抽出物を得る。いくつかの実施形態において、溶媒は、抽出物を得た後に除去される。いくつかの実施形態では、連続抽出器が使用される。
【００３７】
いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、抽出処理の前に乾燥される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、太陽によって乾燥される。いくつかの実施形態では、植物バイオマスが約２０℃〜約８０℃に加熱される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、抽出処理の前に粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、歯髄に粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、スラリーに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約３．５メッシュに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約４メッシュに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約５メッシュに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約６メッシュに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約７メッシュに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約８メッシュに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約９メッシュに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約１０メッシュに粉砕される。いくつかの実施形態において、植物バイオマスは、約１２メッシュに粉砕される。
【００３８】
いくつかの実施形態では、溶媒が極性プロトン性溶媒である。いくつかの実施形態では、溶媒が極性非プロトン性溶媒である。いくつかの実施形態では、溶媒は非極性溶媒である。いくつかの実施形態では、溶媒が酢酸、アセトン、アセトニトリル、ベンゼン、１−ブタノール、２−ブタノール、２−ブタノン、ｔ−ブチルアルコール、四塩化炭素、クロロベンゼン、クロロホルム、シクロヘキサン、１，２−ジクロロエタン，ジエチレングリコール、ジエチルエーテル、ジグリム、１，２−ジメトキシエタン，ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、１，４−ジオキサン，エタノール、酢酸エチル、エチレングリコール、グリセリン、ヘプタン、ヘプタン、ヘキサメチルアミド、ヘキサメチルホスホリレンエーテル、塩化メチレン、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン，ペンタン、ペンペンペルエチレン、ペロエチレン、石油エーテル、１−ブチルエーテル、１−プロパノール、トリヒドロエチル、トルエン、トルエン、トリプロピレン、トリヒドロプロピレン、トリオキシルアミン、またはこれらの任意の組み合わせから選択される。いくつかの実施形態では、溶媒は水である。
【００３９】
いくつかの実施形態では、本出願で使用されるバイオマスがサポニンを含有する任意の植物から得られる。サポニンは１００以上の植物ファミリーに存在し、その中で最も関連性が高いと言われている：とりわけ、キラヤシー科、アスパラガシー科、ジオスコレエー科、リリアシー科、カリオフィラーシー科、アラリアシー科、レグミノサーエ科、サピンダシーエ科、アマランタシーエ科、アセラシーエ科、ラムナシーエ科、ヒポカスタナシーエ科、クルビタシーエ科、アラリアシーエ科、デンスタエディエーエ科。植物に含まれるサポニンの金額および既存の化学構造の種類は、種、植物起源、ならびに農学および環境要因に依存する。例えば、ステロイドサポニンは主に単子葉植物に見出されるが、トリテルペノイドサポニンは主に双子葉植物に見出される。医療および産業応用に使用される主な植物サポニン源は、アルファルファ（Ｍｅｄｉｃａｇｏ  ｓａｔｉｖａ）、ウマ−チェストナッツ（Ａｅｓｃｕｌｕｓ  ｈｉｐｐｏｃａｓｔａｎｕｍ）、リコリス（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）、ユッカ（Ｙｕｃｃａ  ｓｃｈｉｄｉｇｅｒａ）、ニンジン（Ｐａｎａｘｇｅｎｕｓ）および石鹸樹皮（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ）である。
【００４０】
いくつかの実施形態では、バイオマスがＱｕｉｌｌａｊａｃｅａｅ、Ａｓｐａｒａｇａｃｅａｅ、Ａｒａｌｉａｃｅａｅ、ＦａｂａｃｅａｅおよびＳａｐｉｎｄａｃｅａｅのグループから選択される植物から得られる。好ましくは、使用される植物がキラヤ・サポナリア・モリナ（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａ）種に対応する。
【００４１】
いくつかの実施形態では、植物抽出物が約１ｋｇのバイオマスから約５万ｋｇのバイオマスから得られる。いくつかの実施形態では、植物抽出物が約１０ｋｇのバイオマスから約４万ｋｇのバイオマスから得られる。いくつかの実施形態では、植物抽出物が約１００ｋｇのバイオマスから約３万ｋｇのバイオマスから得られる。いくつかの実施形態では、植物抽出物が約１，０００ｋｇのバイオマスから約２万ｋｇのバイオマスから得られる。いくつかの実施形態では、植物抽出物が約１，５００ｋｇのバイオマスから約１５，０００ｋｇのバイオマスから得られる。いくつかの実施形態では、植物抽出物が約２，０００ｋｇのバイオマスから約１万ｋｇのバイオマスから得られる。いくつかの実施形態では、植物抽出物が約２，５００ｋｇのバイオマスから約８，０００ｋｇのバイオマスから得られる。いくつかの実施形態では、植物抽出物が約３，０００ｋｇのバイオマスから約６，０００ｋｇのバイオマスから得られる。いくつかの実施形態では、植物抽出物が約４，０００ｋｇのバイオマスから約５，０００ｋｇのバイオマスから得られる。
【００４２】
いくつかの実施態様において、固体植物エキスの量は、約１ｋｇから約１，０００ｋｇ、約５ｋｇから約９５０ｋｇ、約１０ｋｇから約９００ｋｇ、約１５ｋｇから約８５０ｋｇ、約２０ｋｇから約８００ｋｇ、約２５ｋｇから約７５０ｋｇ、約３０ｋｇから約７００ｋｇ、約３５ｋｇから約６５０ｋｇ、約４０ｋｇから約６００ｋｇ、約４５ｋｇから約５５０ｋｇ、約５０ｋｇから約５００ｋｇ、約５５ｋｇから約４５０ｋｇ、約６０ｋｇから約４００ｋｇ、約６５ｋｇから約３５０ｋｇ、約７０ｋｇから約３５０ｋｇ、約７５ｋｇから約３５０ｋｇ、約８０ｋｇから約８０ｋｇ、約８５ｋｇから約１５０ｋｇ、約８５ｋｇから約１５０ｋｇ、又は約９０ｋｇから約１００ｋｇである。
【００４３】
いくつかの実施形態では、溶液またはスラリー植物抽出物の量が約５００Ｌ〜約５万Ｌ、約１，０００Ｌ〜約４万Ｌ、約２，０００Ｌ〜約３万Ｌ、約３，０００Ｌ〜約２万Ｌ、約４，０００Ｌ〜約１万Ｌ、約５，０００Ｌ〜約８，０００Ｌ、または約５，０００Ｌ〜約６，０００Ｌである。
【００４４】
いくつかの実施形態では塩はアルカリ金属塩、アルカリ土類塩、遷移金属塩、アンモニウム塩、または上記の組み合わせから選択される。
【００４５】
いくつかの実施形態では塩はリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、ストロンチウム塩、バリウム塩、クロム塩、マンガン塩、鉄塩、コバルト塩、ニッケル塩、銅塩、亜鉛塩、アルミニウム塩、銀塩、またはこれらの組み合わせから選択される。いくつかの実施形態では塩はアルカリ金属ハロゲン化物塩およびアルカリ土類ハロゲン化物塩、または、それらの組み合わせから選択される。いくつかの実施形態では塩はＭｇＣｌ２、ＣａＣｌ２、ＳｒＣｌ２、ＢａＣｌ２、ＭｇＢｒ２、ＣａＢｒ２、ＳｒＢｒ２、ＢａＢｒ２、または、それらの組み合わせから選択される。
【００４６】
いくつかの実施形態では、塩を植物抽出物に添加して、アルカリ土類金属塩を溶液に形成する。いくつかの実施形態では、塩は塩化カルシウム（ＣａＣｌ２）である。いくつかの実施形態では、塩は塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２）である。いくつかの実施態様において、塩は水溶性無機カルシウム又はマグネシウム塩である。いくつかの実施形態において、塩は、食品グレードのカルシウムまたはマグネシウム塩である。
【００４７】
いくつかの実施形態では、混合物のｐＨが約２〜１０、約３〜９、約４〜８、約５〜７、約６〜７、約６〜８、約６〜９、約６〜１０、約２〜７、約３〜７、約４〜４、または約４〜５に調整される。
【００４８】
いくつかの実施形態において、１つ以上のリン酸塩は、アルカリ金属リン酸塩である。いくつかの実施形態において、１つ以上のリン酸塩は、アルカリ土類リン酸塩である。いくつかの実施形態では、１つまたは複数のリン酸塩がリン酸リチウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、リン酸バリウム、リン酸マグネシウム、リン酸カルシウム、リン酸セシウム、リン酸水素リチウム、リン酸水素ナトリウム、リン酸水素カリウム、リン酸水素水素バリウム、リン酸水素水素マグネシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸水素水素セシウム、リン酸二水素リチウム、リン酸二水素ナトリウム、およびリン酸二水素カリウムから選択される。
【００４９】
いくつかの実施形態において、添加される１つ以上のリン酸塩は、好ましくはリン酸水素ナトリウム（Ｎａ２ＨＰＯ４）であるが、リン酸二水素ナトリウム（ＮａＨ２ＰＯ４）、リン酸ナトリウム（Ｎａ３ＰＯ４）または水素二リン酸ナトリウム（Ｎａ２Ｈ２ＰＯ７）などのリン酸ナトリウムのいずれであってもよい。
【００５０】
いくつかの実施形態において、イオン−多糖類複合体の沈殿物が得られる混合物は、混合物を加熱する工程からなる熱処理に供される。いくつかの実施形態では、混合物が少なくとも約３０℃；少なくとも約３５℃；少なくとも約４０℃；少なくとも約４５℃；少なくとも約５０℃；少なくとも約５５℃；少なくとも約６０℃；少なくとも約６５℃；少なくとも約７０℃；少なくとも約７５℃；少なくとも約８０℃；少なくとも約８５℃；少なくとも約９０℃；少なくとも約９５℃；少なくとも約１００℃；少なくとも約１０５℃；または少なくとも約１１０℃に加熱される。いくつかの実施形態では、混合物が約５０℃〜約１００℃に加熱される。いくつかの実施形態では、混合物が約６０℃〜約９０℃に加熱される。いくつかの実施形態では、混合物が約７０℃〜約９０℃に加熱される。
【００５１】
いくつかの実施形態では、混合物を約３０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約６０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約９０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約１２０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約１５０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約１８０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約２１０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約２４０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約２７０分間加熱する。いくつかの実施形態では、混合物を約３００分間加熱する。
【００５２】
いくつかの実施形態において、沈殿イオン−多糖類複合体は、１つ以上のペクチン、デンプン、キシラン、タンパク質、または、それらの組み合わせとのカルシウムまたはマグネシウム複合体を含む。
【００５３】
いくつかの実施形態において、沈殿物は、シリカ、アルミナ、セライト、珪藻土、パーライト、または、それらの組み合わせを通して濾過される。いくつかの実施形態において、沈殿物は、キャンドルフィルター、劣性板のフィルター、板およびフレームフィルター、カートリッジフィルター、デプスフィルター、デカンター、ディスクフィルター、セルロース板フィルター、産業用遠心分離機、回転ドラムフィルター、または、それらの組み合わせから選択されるフィルターで濾過される。
【００５４】
いくつかの実施形態において、残りの溶液を清澄化する工程は、本明細書中に記載される工程のうちの１つ以上、続いて濾過を含む。
【００５５】
いくつかの実施形態では、残りの溶液を清澄化する工程は溶液のｐＨを７未満に低下させる工程を含む。いくつかの実施形態では、残りの溶液を清澄化する工程は溶液のｐＨを６未満に低下させる工程を含む。いくつかの実施形態では、残りの溶液を清澄化する工程は溶液のｐＨを５未満に低下させる工程を含む。いくつかの実施形態では、残りの溶液を清澄化する工程は溶液のｐＨを４未満に低下させる工程を含む。いくつかの実施形態では、残りの溶液を清澄化する工程は溶液のｐＨを３未満に低下させる工程を含む。
【００５６】
いくつかの実施形態では、残りの溶液を清澄化する工程は残りの溶液にポリマー吸着剤を添加する工程を含む。いくつかの実施形態では、ポリマー吸着剤がゼラチン、アルブミン、乳蛋白、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリビニルポリピロリドン（ＰＶＰＰ）、または、それらの組み合わせを含む。
【００５７】
いくつかの実施形態では、残りの溶液を清澄化する工程は残りの溶液に粘土由来材料を添加する工程を含む。いくつかの実施形態では、粘土由来材料がナトリウムベントナイト、カルシウムベントナイト、または、それらの組み合わせを含む。
【００５８】
この濾過処理の後、精製されたサポニンの抽出物が得られる。任意に、抽出物は、先行技術において知られている任意の濾過技術によって濃縮することができる。好ましくは、精製サポニンの抽出物の濃度がナノ濾過、限外濾過およびダイアフィルトレーション、または、これらの技術の任意の組み合わせによって実施される。
【００５９】
サポニン抽出物の貯蔵寿命を長くするために、低温殺菌ＶＡＴ、ＨＴＳＴ、ＵＨＴ、または、それらの組合せのような、当該技術分野において公知の任意の通常の低温殺菌法の手段によって、精製サポニンの抽出物に対して低温殺菌工程を任意に行うことができる。
【００６０】
この処理の後、精製され、濃縮され、低温殺菌されたサポニンの抽出物を含む生成物が、液体形態で得られる。任意選択で、液体製品は、従来技術で既知である任意の技法によって、粉末製品に変換することができる。好ましくは、粉末製品が生成されるプロセスが噴霧乾燥または粉砕による。
【００６１】
本出願のステージまたは工程は、シーケンシャル工程と見なされてはならず、したがって、説明された順序とは異なる順序で実行することができる。例えば、植物抽出物はカルシウム塩を添加する工程の前に清澄化され得、最終的に、上記の順序で行われるプロセスと比較して、精製されたサポニンの同じ抽出物を得る。
【００６２】
いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約５０％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約５５％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約６０％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約６５％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約７０％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約７５％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約８０％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約８５％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約９０％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約９５％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約９８％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約９９％純度である。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約９９．５％純度である。いくつかの代表的なサポニン構造を表１に示す。
【表１】
2018538286.tif 000003
2018538286.tif 000004
2018538286.tif 000005
【００６３】
いくつかの実施形態において、サポニン抽出物は、ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、ＱＳ２１、ＤＳ−１、ＤＳ−２、ＱＨＡ、ＱＨＣ、およびＱＨ−９５７のうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物がＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８およびＱＳ２１のうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態において、サポニン抽出物は、少なくとも５０％のＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、および、ＱＳ２１、少なくとも６０％ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、および、ＱＳ２１、少なくとも７０％ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、および、ＱＳ２１、少なくとも８０％ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、および、ＱＳ２１、少なくとも９０％ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、および、ＱＳ２１、少なくとも９５％ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、および、ＱＳ２１、少なくとも９８％ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、および、ＱＳ２１、または、少なくとも９９％ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、および、ＱＳ２１を含む。
【００６４】
いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約５％ＱＳ７、少なくとも約１０％ＱＳ７、少なくとも約１５％ＱＳ７、少なくとも約２０％ＱＳ７、少なくとも約２５％ＱＳ７、少なくとも約３０％ＱＳ７、少なくとも約３５％ＱＳ７、少なくとも約４０％ＱＳ７、少なくとも約４５％ＱＳ７、少なくとも約５０％ＱＳ７、少なくとも約５５％ＱＳ７、少なくとも約６０％ＱＳ７、少なくとも約６５％ＱＳ７、少なくとも約７０％ＱＳ７、少なくとも約７５％ＱＳ７、少なくとも約８０％ＱＳ７、少なくとも約８５％ＱＳ７、少なくとも約９０％ＱＳ７、または少なくとも約９５％ＱＳ７である。
【００６５】
いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約５％ＱＳ１７、少なくとも約１０％ＱＳ１７、少なくとも約１５％ＱＳ１７、少なくとも約２０％ＱＳ１７、少なくとも約２５％ＱＳ１７、少なくとも約３０％ＱＳ１７、少なくとも約３５％ＱＳ１７、少なくとも約４０％ＱＳ１７、少なくとも約４５％ＱＳ１７、少なくとも約５０％ＱＳ１７、少なくとも約５５％ＱＳ１７、少なくとも約６０％ＱＳ１７、少なくとも約６５％ＱＳ１７、少なくとも約７０％ＱＳ１７、少なくとも約７５％ＱＳ１７、少なくとも約８０％ＱＳ１７、少なくとも約８５％ＱＳ１７、少なくとも約９０％ＱＳ１７、または少なくとも約９５％ＱＳ１７である。
【００６６】
いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約５％ＱＳ１８、少なくとも約１０％ＱＳ１８、少なくとも約１５％ＱＳ１８、少なくとも約２０％ＱＳ１８、少なくとも約２５％ＱＳ１８、少なくとも約３０％ＱＳ１８、少なくとも約３５％ＱＳ１８、少なくとも約４０％ＱＳ１８、少なくとも約４５％ＱＳ１８、少なくとも約５０％ＱＳ１８、少なくとも約５５％ＱＳ１８、少なくとも約６０％ＱＳ１８、少なくとも約６５％ＱＳ１８、少なくとも約７０％ＱＳ１８、少なくとも約７５％ＱＳ１８、少なくとも約８０％ＱＳ１８、少なくとも約８５％ＱＳ１８、少なくとも約９０％ＱＳ１８、または少なくとも約９５％ＱＳ１８である。
【００６７】
いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が少なくとも約５％ＱＳ２１、少なくとも約１０％ＱＳ２１、少なくとも約１５％ＱＳ２１、少なくとも約２０％ＱＳ２１、少なくとも約２５％ＱＳ２１、少なくとも約３０％ＱＳ２１、少なくとも約３５％ＱＳ２１、少なくとも約４０％ＱＳ２１、少なくとも約４５％ＱＳ２１、少なくとも約５０％ＱＳ２１、少なくとも約５５％ＱＳ２１、少なくとも約６０％ＱＳ２１、少なくとも約６５％ＱＳ２１、少なくとも約７０％ＱＳ２１、少なくとも約７５％ＱＳ２１、少なくとも約８０％ＱＳ２１、少なくとも約８５％ＱＳ２１、少なくとも約９０％ＱＳ２１、または少なくとも約９５％ＱＳ２１である。
【００６８】
いくつかの実施形態において、サポニン抽出物は、３０％以下のＱＳ７、２５％以下のＱＳ７、２０％以下のＱＳ７、１５％以下のＱＳ７、１２％以下のＱＳ７、１０％以下のＱＳ７、９％以下のＱＳ７、８％以下のＱＳ７、７％以下のＱＳ７、６％以下のＱＳ７、５％以下のＱＳ７、４％以下のＱＳ７、３％以下のＱＳ７、２．５％以下のＱＳ７、２％以下のＱＳ７、１．５％以下のＱＳ７、１％以下のＱＳ７、０．５％以下のＱＳ７、０．１％以下のＱＳ７、または検出可能なレベルのＱＳ７を含む。
【００６９】
いくつかの実施形態において、サポニン抽出物は、３０％以下のＱＳ１７、２５％以下のＱＳ１７、２０％以下のＱＳ１７、１５％以下のＱＳ１７、１２％以下のＱＳ１７、１０％以下のＱＳ１７、９％以下のＱＳ１７、８％以下のＱＳ１７、７％以下のＱＳ１７、６％以下のＱＳ１７、５％以下のＱＳ１７、４％以下のＱＳ１７、３％以下のＱＳ１７、２．５％以下のＱＳ１７、２％以下のＱＳ１７、１．５％以下のＱＳ１７、１％以下のＱＳ１７、０．５％以下のＱＳ１７、０．１％以下のＱＳ１７、または検出可能なレベルのＱＳ１７を含む。
【００７０】
いくつかの実施形態において、サポニン抽出物は、３０％以下のＱＳ１８、２５％以下のＱＳ１８、２０％以下のＱＳ１８、１５％以下のＱＳ１８、１２％以下のＱＳ１８、１０％以下のＱＳ１８、９％以下のＱＳ１８、８％以下のＱＳ１８、７％以下のＱＳ１８、６％以下のＱＳ１８、５％以下のＱＳ１８、４％以下のＱＳ１８、３％以下のＱＳ１８、２．５％以下のＱＳ１８、２％以下のＱＳ１８、１．５％以下のＱＳ１８、１％以下のＱＳ１８、０．５％以下のＱＳ１８、０．１％以下のＱＳ１８、または検出可能なレベルのＱＳ１８を含む。
【００７１】
いくつかの実施形態において、サポニン抽出物は、３０％以下のＱＳ２１、２５％以下のＱＳ２１、２０％以下のＱＳ２１、１５％以下のＱＳ２１、１２％以下のＱＳ２１、１０％以下のＱＳ２１、９％以下のＱＳ２１、８％以下のＱＳ２１、７％以下のＱＳ２１、６％以下のＱＳ２１、５％以下のＱＳ２１、４％以下のＱＳ２１、３％以下のＱＳ２１、２．５％以下のＱＳ２１、２％以下のＱＳ２１、１．５％以下のＱＳ２１、１％以下のＱＳ２１、０．５％以下のＱＳ２１、０．１％以下のＱＳ２１、または検出可能なレベルのＱＳ２１を含む。
【００７２】
いくつかの実施態様において、サポニン抽出物は、遊離多糖３０％以下、遊離多糖２５％以下、遊離多糖２０％以下、遊離多糖１５％以下、遊離多糖１２％以下、遊離多糖１０％以下、遊離多糖９％以下、遊離多糖８％以下、遊離多糖７％以下、遊離多糖６％以下、遊離多糖５％以下、遊離多糖４％以下、遊離多糖３％以下、遊離多糖２．５％以下、遊離多糖１．５％以下、遊離多糖１％以下、遊離多糖０．５％以下、遊離多糖０．１％以下、又は遊離多糖０．１％以下を含有する。
【００７３】
いくつかの実施態様において、サポニン抽出物は、遊離フェノール化合物３０％以下、遊離フェノール化合物２５％以下、遊離フェノール化合物２０％以下、遊離フェノール化合物１５％以下、遊離フェノール化合物１２％以下、遊離フェノール化合物１０％以下、遊離フェノール化合物９％以下、遊離フェノール化合物８％以下、遊離フェノール化合物７％以下、遊離フェノール化合物６％以下、遊離フェノール化合物５％以下、遊離フェノール化合物４％以下、遊離フェノール化合物３％以下、遊離フェノール化合物２．５％以下、遊離フェノール化合物２．５％以下、遊離フェノール化合物１．５％以下、遊離フェノール化合物１％以下、遊離フェノール化合物０．５％以下、遊離フェノール化合物０．１％以下又は遊離フェノール化合物０．１％以下のレベルを含有する。
【００７４】
いくつかの実施形態において、サポニン抽出物は、タンパク質を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物が多糖類を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、サポニン抽出物がフェノール化合物を実質的に含まない。
【００７５】
任意選択で、抽出処理は、ＨＰＬＣ、ＭＳ、ＬＣ／ＭＳ、ＧＣ／ＭＳ、ＵＰＬＣ、ＵＶ／Ｖｉｓ分光分析、ＮＭＲ、および／または、ＴＬＣなどの分析方法を使用して、１つまたは複数の工程で観察される。
【００７６】
いくつかの実施形態において、抽出手順は、標準圧力で行われる。いくつかの実施形態において、手順の１つ以上の工程は、約０．１気圧；約０．５気圧；約１気圧；約５気圧；約１０気圧；約２５気圧；約５０気圧；約１００気圧；約２００気圧；約３００気圧；約４００気圧；または約５００気圧で行われる。
【００７７】
いくつかの実施形態において、１つ以上の工程は、少なくとも約５℃；少なくとも約１０℃；少なくとも約１５℃；少なくとも約２０℃；少なくとも約２５℃；少なくとも約３０℃；少なくとも約３５℃；少なくとも約４０℃；少なくとも約４５℃；少なくとも約５０℃；少なくとも約５５℃；少なくとも約６０℃；少なくとも約６５℃；少なくとも約７０℃；少なくとも約７５℃；少なくとも約８０℃；少なくとも約８５℃；少なくとも約９０℃；少なくとも約９５℃；少なくとも約１００℃；少なくとも約１０５℃；または少なくとも約１１０℃の温度で行われる。
【００７８】
いくつかの実施形態では、抽出手順が約２時間、約４時間、約８時間、約１６時間、約２４時間、約４８時間、約９６時間、約５日、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、または約６週間で完了する。
【実施例】
【００７９】
〔実施例１〕
Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  ｂａｒｋからサポニンを得る。
図１には、キラヤ・サポナリア・モリナ  バイオマス１（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａ  ｂｉｏｍａｓｓ）から精製サポニン３０の液体生成物および精製サポニン３２の粉末生成物までサポニンを得るための完全な処理の好ましい態様の概略図が示されている。
【００８０】
植物抽出物２の生成のために、予め乾燥および粉砕された２１０ｋｇのキラヤ・サポナリア・モリナ樹皮１を、１．０００Ｌの軟水３とともに使用し、これらを以下のように異なるタンクに装填した：
【００８１】
ａ）抽出タンク４、５、６の各々に樹皮１を７０ｋｇ加え、次にタンク４に軟水３を２５０Ｌ加え、タンク４の内容物を６０℃に３時間加熱し、抽出物を得、これを移送ライン７を通してタンク５にポンプ輸送した。
【００８２】
ｂ）再びタンク４に軟水３を２５０Ｌ加え、タンク４、５の内容物を６０℃に３時間加熱し、各タンクから抽出液を得た。タンク５からの抽出物は移送ライン８を通ってタンク６内にポンプ輸送され、タンク４からの抽出物は移送ライン７を通ってタンク５内にポンプ輸送された。
【００８３】
ｃ）再びタンク４に軟水３を２５０Ｌ加え、タンク４、５、６の内容物を６０℃に３時間加熱し、各タンクの抽出液を得た。タンク６からの抽出物は移送ライン９を通って終了タンク１０に向かってポンピングされ、タンク５の抽出物は移送ライン８を通ってタンク６にポンピングされ、タンク４からの抽出物は移送ライン７を通ってタンク５にポンピングされた。
【００８４】
ｄ）再びタンク４に軟水３を２５０Ｌ加え、タンク４、５、６の内容物を６０℃に３時間加熱し、各タンクから抽出液を得た。タンク６からの抽出物は移送ライン９を通ってタンク１０内にポンプ輸送され、タンク５からの抽出物は移送ライン８を通ってタンク６内にポンプ輸送され、タンク４からの抽出物は移送ライン７を通ってタンク５内にポンプ輸送された。
【００８５】
ｅ）次に、タンク５および６の内容物を６０℃で３時間加熱し、これらのタンクから抽出物を得た。タンク６からの抽出物は移送ライン９を通ってタンク１０内にポンプ輸送され、タンク５からの抽出物は移送ライン８を通ってタンク６内にポンプ輸送された。
【００８６】
ｆ）最後に、タンク６の内容物を６０℃に３時間加熱し、抽出物を得、これを移送ライン９を通してタンク１０にポンプで送り込んだ。
【００８７】
タンク１０で得られた植物抽出物２を、移送ライン１１を通して攪拌タンク１２に移した。抽出物２を１５℃に冷却し、２．８ＫｇのＣａＣｌ２  １３および０．４６ＫｇのＣａ（ＯＨ）２  １４を加えてｐＨを中和し、３０分間撹拌した。３．２ＫｇのＮａ２ＨＰＯ４  １５および０．５ＫｇのＮａＯＨ  １６を含有する６０Ｌの容量の溶液を、得られた混合物に添加し、次いで３０分間撹拌した。得られた混合物を摂氏８０度で１．５時間加熱して、カルシウム多糖類錯体の沈殿を確実にし、それらを除去し、混合物を珪藻土１７を通して濾過した。得られた溶液１８を撹拌槽１９に移した。溶液１８を１５℃に冷却し、ＨＣｌ  ２０を加えてｐＨを４．３〜４．５の範囲に調整した。２０ｋｇの量のＰＶＰＰ２１および５３Ｌのベントナイト２２の水性懸濁液（７５ｇ／Ｌ）を添加し、撹拌した。得られた混合物をケイソウ土２３を通して濾過し、１リットル当たり３５〜６５ｇの抽出溶質を含有する清澄化抽出物２４または精製サポニンの抽出物を得た。
【００８８】
ナノ濾過２５を通して清澄化抽出物２４から水を除去し、１リットル当たり８５〜１００ｇの抽出溶質を含有する濃縮抽出物を生成した。次いで、水および低分子量不純物を、限外ろ過２６（１万〜７５，０００Ｄａ膜）によって濃縮抽出物からさらに除去した。濃縮抽出物中の溶質の濃度が１リットルあたり抽出溶質２００−２５０ｇに達したとき、ダイアフィルトレーションモード２７に変更して、１リットルあたり抽出溶質１３０〜１５０ｇを含む液状前駆物質２８を生成した。液状前駆物質２８からのサポニンの純度は、乾燥固体に対して８３〜９１％のｗ／ｗであった。この液状前駆体２８を加熱槽２９内で８６℃に３０〜１２０分間加熱して低温殺菌し、精製サポニン３０の液状生成物を得た。任意選択で、製品３０は、２つのノズル３１（空気吸入口温度、２００℃；空気出口温度、１０５〜１１０℃）を有する装置で噴霧乾燥の工程に供され、８〜１０ｋｇの精製サポニンが乾燥固体に対して８３〜９１％のｗ／ｗの純度を有する粉末製品３２として生成された。
【００８９】
図２は、キラヤ・サポナリア・モリナ（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａ）のバイオマス  １からのサポニンの精製プロセスの別の好ましい実施形態の概略図であり、ここで、植物抽出物２の精澄化プロセスは、カルシウム塩の添加前に行われた。すなわち、タンク１０で得られた植物抽出物２を攪拌タンク１９に移した。抽出物２を１５℃に冷却し、ＨＣｌ  ２０を加えてｐＨを４．３〜４．５の範囲に調整した。ＰＶＰＰ２１およびベントナイト２２の水性懸濁液（７５ｇ／Ｌ）を加え、次いで撹拌した。得られた混合物を珪藻土２３を通して濾過し、清澄化抽出物２４を得た。清澄化抽出物２４を１５℃に冷却し、ＣａＣｌ２  １３およびＣａ（ＯＨ）２  １４を添加してｐＨを中和し、次いで３０分間撹拌した。得られた混合物に、Ｎａ２ＨＰＯ４  １５およびＮａＯＨ  １６の溶液を加え、さらに３０分間撹拌した。得られた混合物を８０℃に加熱して、カルシウム−多糖類錯体の沈殿を確実にし、それらを除去し、混合物を珪藻土１７を通して濾過した。これらの段階を逆にすることは、図１に概説した工程に従うことによって得られた製品と同様に、乾燥固体に対して８３〜９１％のｗ／ｗを有するサポニンの抽出物が得られたので、最終結果に影響を与えなかった。
【００９０】
〔実施例２〕
Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａバイオマスからサポニンを得る。
この例では、植物の樹皮のみを用いた先の例とは対照的に、キラヤ・サポナリア・モリナ（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａ）  １由来の全植物バイオマスを用いた。
【００９１】
植物抽出物２の生成のために、３，５００ｋｇの完全キラヤ・サポナリア・モリナ  １  バイオマスを、予め乾燥および粉砕し、６，３００Ｌの軟水３とともに使用し、これらを上記の方法に従って異なるタンクに装填した。
【００９２】
表２は、キラヤ・サポナリア・モリナ  バイオマスから得られた植物抽出物２の容量、ｐＨおよび組成を示す。
【表２】
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【００９３】
タンク１０で得られた植物抽出物２を、移送ライン１１を通して攪拌タンク１２に移した。抽出物２を１５℃に冷却し、７．４ＫｇのＣａＣｌ２  １３を加えた。カルシウム塩が完全に解散した後、１．８ＫｇのＣａ（ＯＨ）２粉末１４を添加してｐＨを７．０に上昇させた。この混合物を均質化した後、８．２ＫｇのＮａ２ＨＰＯ４  １５および１．３ＫｇのＮａＯＨ  １６を含有する溶液１５４Ｌを加え、３０分間撹拌した。この混合物を摂氏８０度まで１．５時間加熱し、次いで珪藻土１７を通して濾過して溶液１８を生成し、これを撹拌タンク１９に移した。溶液１８を１５℃に冷却し、ＨＣｌ  ２０を添加してｐＨを４．３〜４．５の範囲に調整した。４５ｋｇのＰＶＰＰ２１および１２０Ｌのベントナイト２２の水性懸濁液（７５ｇ／Ｌ）を加え、撹拌した。得られた混合物をケイソウ土２３を通して濾過し、１リットル当たり２５〜３５ｇの抽出溶質を含有する清澄化抽出物２４または精製サポニンの抽出物を得た。
【００９４】
ナノ濾過２５を通して清澄化抽出物２４から水を除去し、１リットル当たり８５〜１００ｇの抽出溶質を含有する濃縮抽出物を生成した。次いで、水および低分子量不純物を、限外ろ過２６（１万〜７５，０００Ｄａ膜）によって濃縮抽出物からさらに除去した。濃縮抽出物中の溶質の濃度が１リットルあたり抽出溶質２００−２５０ｇに達したとき、ダイアフィルトレーションモード２７に変更して、１リットルあたり抽出溶質１３０〜１５０ｇを含む液状前駆物質２８を生成した。液状前駆物質２８からのサポニンの純度は、乾燥固体に対して８３〜９１％のｗ／ｗであった。この液状前駆体２８を加熱槽２９内で８６℃に３０〜１２０分間加熱して低温殺菌し、精製サポニン３０の液状生成物を得た。任意選択で、製品３０は、２つのノズル３１（空気吸入口温度、２００℃；空気出口温度、１０５〜１１０℃）を有する装置内で噴霧乾燥の工程に供され、乾燥固形物に対して８６〜９４％のｗ／ｗの純度を有する粉末製品３２として、３３〜３８ｋｇの精製サポニンが生成された。得られた生成物の特性の詳細を表３に示す。
【表３】
2018538286.tif 000007
【００９５】
〔実施例３〕
Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ由来の粉末製品からサポニンを得る。
本実施例では、キラヤ・サポナリア・モリナ  サポニン（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａ  ｓａｐｏｎｉｎｓ）の粉末生成物３３を６０ｋｇ使用し、基準常法を用いて抽出方法精製し、生成物を軟水３に溶解して常法生成物３４の溶液を生成した。従来の製品３４は表４に特徴があり、本出願のこの実施形態のスキームを図３に示す。
【００９６】
従来製品３４の溶液を撹拌タンク１２内で１５℃に冷却し、２．５ＫｇのＣａＣｌ２  １３を加えた。このカルシウム塩を完全に解散した後、０．５〜１，５ＫｇのＣａ（ＯＨ）２粉末１４を添加してｐＨを中和した。この混合物を均質化した後、３．０ＫｇのＮａ２ＨＰＯ４  １５および０．５ＫｇのＮａＯＨ  １６を含有する６０Ｌの溶液を添加し、３０分間撹拌した。この混合物を８０℃に加熱し、珪藻土１７を通して濾過し、溶液１８を生成した。この溶液１８を攪拌槽１９内で１５℃に冷却し、２５ＫｇのＰＶＰＰ２１を加えて攪拌した。得られた混合物を珪藻土２３を通して濾過し、清澄化抽出物２４または精製サポニンの抽出物を得た。この抽出物２４を、ナノ濾過２５、限外ろ過２６およびダイアフィルトレーション２７処理にかけて、表４に特徴付けられる液体前駆体２８を生成した。
【表４】
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【００９７】
〔実施例４〕
バイオマスからサポニンを得る工程
図４において、サポニンを全植物バイオマス１から精製サポニン３０の液体生成物および精製サポニン３２の粉末生成物まで得るための完全なプロセスの一般的な概略図が示される。
【００９８】
植物抽出物２の生成のために、予め乾燥および粉砕されたバイオマス１が溶媒３とともに使用され、溶媒３は、以下のように異なるタンクに装填される：
【００９９】
ａ）バイオマス１を抽出タンク４、５、６の各々に添加し、次いで溶媒３をタンク４に添加し、タンク４の内容物を３０〜１００℃の間で１〜１０時間加熱し、抽出物を得、これを移送ライン７を通してタンク５にポンプ輸送する。
【０１００】
ｂ）溶媒３を再びタンク４に加え、次いでタンク４および５の内容物を３０〜１００℃の間で１〜１０時間加熱し、これらのタンクのそれぞれから抽出物を得る。タンク５からの抽出物は移送ライン８を通ってタンク６にポンプで送られ、タンク４からの抽出物は移送ライン７を通ってタンク５にポンプで送られる。
【０１０１】
ｃ）溶媒３を再びタンク４に加え、次いでタンク４、５、６の内容物を３０〜１００℃の間で１〜１０時間加熱し、これらのタンクのそれぞれの抽出物を得る。タンク６からの抽出物は移送ライン９を通って終了タンク１０に向かってポンピングされ、タンク５の抽出物は移送ライン８を通ってタンク６にポンピングされ、タンク４からの抽出物は移送ライン７を通ってタンク５にポンピングされる。
【０１０２】
ｄ）溶媒３を再びタンク４に加え、次いでタンク４、５、６の内容物を３０〜１００℃の間で１〜１０時間加熱し、これらのタンクのそれぞれから抽出物を得る。タンク６からの抽出物は移送ライン９を通ってタンク１０内に圧送され、タンク５からの抽出物は移送ライン８を通ってタンク６内に圧送され、タンク４からの抽出物は移送ライン７を通ってタンク５内に圧送される。
【０１０３】
ｅ）次いで、タンク５および６の内容物を３０〜１００℃で１〜１０時間加熱し、これらのタンクのそれぞれから抽出物を得る。タンク６からの抽出物は移送ライン９を通ってタンク１０内に圧送され、タンク５からの抽出物は移送ライン８を通ってタンク６内に圧送される。タンク４、５、および／または、６のいずれも、０．１ａｔｍから１００ａｔｍまで加圧することができる。
【０１０４】
ｆ）最後に、タンク６の内容物を３０〜１００℃の間で１〜１０時間加熱し、抽出物を得、これを移送ライン９を通してタンク１０にポンプで送り込む。
【０１０５】
タンク１０内の植物抽出物２は、移送ライン１１を通って攪拌タンク１２に移送される。抽出物２を５〜１５℃に冷却し、塩１３および塩基１４を加えてｐＨを調整し、３０分間撹拌する。塩１５および別の塩基１６を含む溶液を混合物に加え、３０分間撹拌する。混合物を６０〜１００℃で０．５〜３時間加熱し、混合物を珪藻土１７を通して濾過する。溶液１８は攪拌タンク１９に移される。溶液１８を５〜１５℃に冷却し、酸２０を加えてｐＨを調整する。第１のポリマー吸着剤２１および粘土吸着剤２２の水性懸濁液を撹拌しながら加える。得られた混合物をケイソウ土２３を通して濾過し、清澄化抽出物２４または精製サポニンの抽出物を得る。
【０１０６】
溶媒は、ナノ濾過２５を通して清澄化抽出物２４から除去され、１リットル当たり８５〜１００ｇの抽出溶質を含有する濃縮抽出物を生成する。次いで、溶媒および低分子量不純物を、限外ろ過２６（１万〜７５，０００Ｄａ膜）によって濃縮抽出物からさらに除去する。濃縮抽出物中の溶質の濃度が１リットルあたり抽出溶質２００-２５０ｇに達したとき、ダイアフィルトレーションモード２７に変更して、１リットルあたり抽出溶質１３０〜１５０ｇを含む液状前駆物質２８を生成する。液体前駆体２８からのサポニンの純度は、乾燥固体に対して６０−９９．９％ｗ／ｗの範囲である。液体前駆体２８を加熱タンク２９内で８６℃に３０〜１２０分間加熱して低温殺菌し、精製サポニン３０の液体生成物を得る。製品３０の一部は、乾燥装置において噴霧乾燥の工程に供され、乾燥固体上の８０−９９．９％のｗ／ｗを有する粉末製品３２を得る。タンク４、５、６、１２、１９、および／または、２９のいずれも、０．１ａｔｍから１００ａｔｍまで加圧することができる。
【０１０７】
個々に同定された工程のうちの１つまたは複数は、本開示の範囲内の処理として企図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年7月25日(2018.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む、植物からサポニンを精製する方法：
サポニンを含む植物抽出物を提供する工程；
抽出物を塩および溶媒と混合して第１の溶液を形成する工程、なお、第１の溶液は、サポニンおよびイオン−多糖複合体を含む；
第１の溶液のｐＨを６〜７に調整する工程；
少なくとも１つのリン酸塩を第１の溶液に添加し、それによって、可溶性イオン−多糖類複合体を実質的に含まない第１の混合物を形成する工程；
任意選択で、第１の混合物を加熱する工程；
第１の混合物を濾過して第２の溶液を得る工程；
第２の溶液を清澄化して精製サポニンの抽出物を生成する工程。
【請求項２】
以下を含む、サポニンを含有する植物抽出物を提供する、請求項１に記載の方法：
植物バイオマスを提供する工程；
バイオマスを乾燥および粉砕する工程；
溶媒をバイオマスに添加する工程；
【請求項３】
バイオマスが、Ｑｕｉｌｌａｊａｃｅａｅ、Ａｓｐａｒａｇａｃｅａｅ、Ａｒａｌｉａｃｅａｅ、ＦａｂａｃｅａｅおよびＳａｐｉｎｄａｃｅａｅのファミリーから選択される植物から得られる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
バイオマスが、種Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａから得られる、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記溶媒が水である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記塩がカルシウムクロリドである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記第１の溶液のｐＨを調節する工程が、前記第１の溶液に水酸化カルシウムを添加する工程を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記少なくとも１つのリン酸塩が、リン酸水素ナトリウムである、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
さらに前記第１の混合物を７０℃〜９０℃に加熱する工程を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記第１の混合物を濾過する工程は、珪藻土フィルタを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記第２の溶液を清澄化する工程が、さらに以下を含む、請求項１に記載の方法：
前記第２の溶液のｐＨを７未満に低下させる工程；
少なくとも１つのポリマー吸着剤、および、少なくとも１つの粘土由来材料を加え、少なくとも１つのポリマー吸着剤、および、少なくとも１つの粘土由来材料を濾過によって除去する工程。
【請求項１２】
前記第２の溶液のｐＨを低下させる工程は、前記第２の溶液に塩酸を添加する工程を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも１つのポリマー吸着剤が、ウシゼラチン、魚ゼラチン、植物起源のタンパク質、アルブミン、乳タンパク質、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリビニルポリピロリドン（ＰＶＰＰ）、および、それらの組み合わせから選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記粘土由来材料が、ベントナイトである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記粘土由来材料が珪藻土フィルタを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
さらに浄化サポニンのさらなる浄化を含み、ナノ濾過、限外濾過およびダイアフィルトレーション、または、それらの組み合わせのうちの１つ以上を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれかに記載の方法により得られる、精製サポニンの抽出物。
【国際調査報告】
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