(57)【要約】  MEKキナーゼ阻害剤のためのp-トルエンスルホン酸塩、およびその結晶形およびその製造方法を開示する。具体的には、2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-カルボニル-1,6-ジヒドロピリジン-3-ホルムアミド p-トルエンスルホン酸塩（式（I）で表される化合物）、およびI型結晶およびその製造方法を開示する。式（I）で表される化合物の得られたI型結晶は良い結晶形安定性と化学的安定性を有し、用いる結晶化溶媒は低毒性で、残留性も低く、臨床治療により良く用いることができる。2018509407.tif 000009【選択図】なし
2018509407.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）の2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩、
【化１】
2018509407.tif 000008
。
【請求項２】
結晶が、図１に示すような、Cu-Ka線を用いて得られ、2θ角と面間隔で表される、約10.18 (8.68), 11.51 (7.68), 12.34 (7.17), 12.97 (6.82), 13.72 (6.45), 14.83 (5.97), 15.76 (5.62), 17.13 (5.17), 17.59 (5.04), 17.92 (4.95), 18.50 (4.79), 19.72 (4.50), 20.03 (4.43), 20.42 (4.35), 21.04 (4.22), 21.51 (4.13), 21.88 (4.06), 23.15 (3.84), 24.14 (3.68), 24.53 (3.63), 24.77 (3.59), 25.88 (3.44)および26.37 (3.38) に特徴的なピークがあるX線粉末回折スペクトルを有することを特徴とする、請求項１に記載の式（I）の2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩の結晶形I。
【請求項３】
p-トルエンスルホン酸を2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミドと反応させるステップを含む、請求項１に記載の式（I）の2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩の製造方法。
【請求項４】
以下のステップ：
（１）p-トルエンスルホン酸および2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド、または式（I）の2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩の何らかの結晶形またはアモルファス形を有機溶媒または有機溶媒と水の混合溶媒に溶解する（該有機溶媒は3以下の炭素原子を有するアルコール類、ケトン類、ニトリル類およびエーテル類の1以上から選択される）；
（２）結晶をろ過し、次いでそれを洗浄して、乾燥する；
を含む、請求項１に記載の式（I）の2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩の結晶形Iの製造方法。
【請求項５】
ステップ１）における有機溶媒がメタノール、エタノールおよびイソプロパノールの１以上から選択され；有機溶媒と水の混合溶媒がメタノール/水、エタノール/水、イソプロパノール/水、アセトニトリル/水、アセトン/水およびテトラヒドロフラン/水から選択され；好ましくは単一溶媒はイソプロパノールであり、または混合溶媒はアセトン/水であることを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
請求項１に記載の式（I）の2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩またはその結晶形I、および薬学的に許容される担体を含有する、医薬組成物。
【請求項７】
疾患が、好ましくは腫瘍であり、より好ましくはメラノーマであって、MEKキナーゼ阻害剤に関連する該疾患の治療剤の製造における、請求項１に記載の式（I）の2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩、請求項２に記載の結晶形Iまたは請求項６に記載の医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、MEKキナーゼ阻害剤のp-トルエンスルホン酸塩およびその結晶形I、具体的には2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩およびその結晶形Iに関する。
【背景技術】
【０００２】
メラノーマは臨床診療において一般的な悪性腫瘍の一つであり、最も早い増殖率を持つ悪性腫瘍の一つでもあって、その年間増殖率は3-5％である。世界中のメラノーマの新しい症例の年間発生数は199627であり、死亡症例数は46327である。メラノーマの発生率は中国では低いが、近年では増加している。中国では、2000年の発生率は0.2/100,000だけであるが、2005-2007年の発生率は1/100,000であり、新しい症例の年間発生数は約20,000である。それ故、メラノーマは中国人民の健康を著しく脅かす疾患の一つになっている。
【０００３】
現時点で中国では、この疾患の治療薬の研究はまだ初期段階にある。薬剤ベムラフェニブ錠およびイピリムマブ（モノクローナル抗体）がメラノーマの治療に有用であるが、これらの2つの薬剤は、それらの活性を発揮する一方で、扁平上皮癌などの他の皮膚疾患を引き起こす可能性がある。従って、メラノーマの有効な治療薬を見つけることは非常に重要である。
【０００４】
臨床フィードバックの結果によると、MEKキナーゼ阻害剤は、「癌の王」、即ち進行メラノーマに対して優れた効力を有している。それ故、MEKキナーゼ阻害剤は、ホットな抗癌ターゲットとなり、多くの大企業が開発を争っている。
【０００５】
本願の特許出願（特許文献1）は、化学名が2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミドである、次式のMEKキナーゼ阻害剤を提供する。
【化１】
2018509407.tif 000003
この化合物はMEKキナーゼに対し強い阻害活性を有することが見いだされた。それは、メラノーマの新しい治療薬として開発される見込みであり、メラノーマ患者に新しい治療選択肢を提供する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】PCT/CN2014/085976
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
フリー塩基の形態の化合物は、その性状の欠点のために通常薬剤的に許容されないことが当業者に知られている。大抵の薬物について、それらの欠点を改善するために他の形態で活性化合物を提供する必要があり、フリー塩基の形態の化合物をその薬剤的に許容される塩に転換することが一般的な解決法になっている。さらに、薬剤的に活性な成分の結晶構造は、薬物の化学的安定性にしばしば影響を与える。異なる結晶化条件および保存条件は、化合物の結晶構造に違いをもたらし、時には結晶形の他の形態の生成を伴う。一般に、アモルファスの薬物生成物は規則正しい結晶構造を持たず、しばしば貧弱な製品安定性、小さな粒子径、ろ過困難性、易凝集性、および乏しい流動性などの他の欠点を有している。それ故、上記生成物の種々の性質を改善する必要がある。高い純度と良い化学的安定性を有する新しい結晶形を探索する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩（式（I）に示す）を提供する。
【化２】
2018509407.tif 000004
【０００９】
式（I）の化合物は、p-トルエンスルホン酸を2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミドと反応させることにより得ることができる。
2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミドに比べ、式（I）の化合物の溶解性とバイオアベイラビリティは大きく改善されており、式（I）の化合物はより薬剤的に許容である。
【００１０】
式（I）の化合物の一連の結晶生成物を種々の結晶化条件下で得て、X線回折および示差走査熱量（DSC）測定を得られた結晶生成物について行った。式（I）の化合物の安定な結晶形は、結晶形Iと呼ぶが、本発明の特定の結晶化条件下で得られることが判った。本願の結晶形IのDSCスペクトルは、約237℃に融解吸熱ピークを示す。Cu-Ka線を用いて得られ、2θ角と面間隔（d値）で表したX線粉末回折スペクトルを図１に示すが、約10.18 (8.68), 11.51 (7.68), 12.34 (7.17), 12.97 (6.82), 13.72 (6.45), 14.83 (5.97), 15.76 (5.62), 17.13 (5.17), 17.59 (5.04), 17.92 (4.95), 18.50 (4.79), 19.72 (4.50), 20.03 (4.43), 20.42 (4.35), 21.04 (4.22), 21.51 (4.13), 21.88 (4.06), 23.15 (3.84), 24.14 (3.68), 24.53 (3.63), 24.77 (3.59), 25.88 (3.44)および26.37 (3.38) に特徴的なピークがある。
【００１１】
本発明は、また2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド p-トルエンスルホン酸塩の結晶形Iの製造方法も提供する。該方法は、以下：
（１）p-トルエンスルホン酸および2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド、または式（I）の化合物の何らかの結晶形またはアモルファス形を有機溶媒または有機溶媒と水の混合溶媒に溶解する（該有機溶媒は3以下の炭素原子を有するアルコール類、ケトン類、ニトリル類およびエーテル類の1以上から選択される）；
（２）結晶をろ過し、次いでそれを洗浄し、乾燥する；
のステップを含む。
【００１２】
本発明の好ましい実施態様において、ステップ（１）で、有機溶媒は、好ましくはメタノール、エタノールまたはイソプロパノールであり；有機溶媒と水の混合溶媒は、好ましくはメタノール/水、エタノール/水、イソプロパノール/水、アセトニトリル/水、アセトン/水またはテトラヒドロフラン/水である。
【００１３】
さらに、最も好ましい単一溶媒はイソプロパノールである。
【００１４】
本発明の実施態様において、好ましい混合溶媒はアセトン/水であり、両者の比率は特に限定されない。本発明の好ましい実施態様において、両者の容積比は９：１である。
【００１５】
結晶化方法は、特に限定されず、慣用の結晶化方法により行うことができる。例えば、物質、即ち、式（I）の化合物を加熱下に溶媒に溶解し、次いで溶媒をゆっくりと冷却して結晶を沈殿させる。結晶化の完了後、望みの結晶をろ過および乾燥を経て得ることができる。特に、ろ過により得られた結晶は、通常、約30~100°C、好ましくは40~60°Cの加熱温度で減圧下に真空乾燥して結晶化溶媒を除去する。
【００１６】
式（I）の化合物の得られた結晶形は、DSCおよびX線回折スペクトルにより判定する。一方、得られた結晶中の残留溶媒も測定する。
【００１７】
本発明の方法により調製した式（I）の化合物の結晶形Iは、残留溶媒を含まないか、または比較的低含量の残留溶媒のみを含んでいて、薬物製品の残留溶媒の限度に関する中国薬局方の要件を満たしている。それ故、本発明の結晶は、医薬品活性成分としての使用に適している。
【００１８】
研究結果は、本発明により調製した式（I）の化合物の結晶形Iは、高温および高湿度の条件下で安定であり、結晶形Iは、また粉砕、圧力および加熱の条件下でも安定であり、薬物製品の製造、輸送および貯蔵要件にも適合することを示している。その製造工程は、安定で、再現性があり、制御可能であって、工業生産に適している。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】式（I）の化合物の結晶形IのX線粉末回折スペクトルを示す図である。
【図２】式（I）の化合物の結晶形IのDSCスペクトルを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
発明の詳細な説明
本発明を以下の実施例により詳細に説明する。本発明の実施例は、単に発明の技術的解決を記載することのみを意図するものであって、本発明の範囲を限定すると考えてはならない。
【００２１】
実験で使用した試験装置
１．DSCスペクトル
装置タイプ：Mettler Toledo DSC 1 Staree System
パージガス：窒素
加熱速度：10.0℃/分
温度範囲：40-300℃
２．X線回折スペクトル
装置タイプ：Bruker D8 Focus X線粉末回折計
光線：単色Cu-Kα線 (λ=1.5406)
スキャンモード：θ/2θ、スキャン範囲：2-40°
電圧：40KV、電流：40mA
【実施例１】
【００２２】
2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミドの調製
【化３】
2018509407.tif 000005
ステップ1
1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)ウレア
2-フルオロ-4-ヨードアニリン1a（50.80 g, 214 mmol）をトリクロロメタン254 mLに溶解し、トリエチルアミン（60 mL, 429 mmol）を添加した。反応溶液を0℃に冷却して、N,N'-カルボニルジイミダゾール（69.50 g, 429 mmol）を加えた。15分間撹拌した後、反応溶液は室温に温めて、4時間撹拌した。反応溶液は0℃に冷却し、次いでアンモニア水254 mLを加えてろ過した。ろ過ケーキを水（50 mL×2）、トリクロロメタン（20 mL×2）および酢酸エチル（50 mL×2）で続けて洗浄し、乾燥して粗標題化合物1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)ウレア1b（53g, 白色固形物）を得たが、更に精製することなく次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 281.0 [M+1]
【００２３】
ステップ２
2-シアノ-N-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)カルバモイル)アセトアミド
粗1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)ウレア1b（113 g, 404 mmol）をN,N'-ジメチルホルムアミド450mLに溶解して、2-シアノ酢酸（41 g, 488 mmol）を添加した。0℃に冷却した後、反応溶液に塩化メタンスルホニル（55.44 g, 484 mmol）を加え、次いで室温に温めて、2時間撹拌した。反応溶液に780mLの水とイソプロパノールの混合溶液（V: V = 1: 2）を加え、1時間撹拌して、ろ過した。ろ過ケーキを水（200 mL×2）および酢酸エチル（50 mL）で続けて洗浄し、乾燥して粗標題化合物2-シアノ-N-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)カルバモイル)アセトアミド1c（143g, 白色固形物）を得たが、更に精製することなく次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 345.9 [M-1]
【００２４】
ステップ３
6-アミノ-1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン
粗2-シアノ-N-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)カルバモイル)アセトアミド1c（156 g, 430 mmol）を水628mLに溶解して、2M水酸化ナトリウム溶液（22.6 mL, 42 mmol）を添加した。反応溶液を85℃に温めて、1時間撹拌した。0℃に冷却した後、反応溶液に2M塩酸を滴下してpHを3に調整し、イソプロパノール300mLを加えて、ろ過した。ろ過ケーキを水（200 mL×2）およびイソプロパノール（100mL×3）で続けて洗浄し、乾燥して粗標題化合物6-アミノ-1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン1d（128g, 白色固形物）を得たが、更に精製することなく次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 348.0 [M+1]
【００２５】
ステップ４
(E)-N'-(3-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-2,6-ジオキソ-1,2,3,6-テトラヒドロピリミジン-4-イル)-N,N-ジメチルホルムアミジン
粗6-アミノ-1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン1d（128 g, 368.80 mmol）をN,N'-ジメチルホルムアミド250mLに溶解して、N,N'-ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（124 mL, 935 mmol）を添加し、4.5時間撹拌した。反応溶液に720mLの水とイソプロパノールの混合溶液（V: V = 5: 1）を加え、1時間撹拌して、ろ過した。ろ過ケーキを水（200 mL×2）およびイソプロパノール（50 mL×2）で続けて洗浄し、乾燥して粗標題化合物(E)-N'-(3-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-2,6-ジオキソ-1,2,3,6-テトラヒドロピリミジン-4-イル)-N,N-ジメチルホルムアミジン1e（132g, 白色固形物）を得たが、更に精製することなく次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 403.0 [M+1]
【００２６】
ステップ５
(E)-N'-(3-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-1-(4-メトキシベンジル)-2,6-ジオキソ-1,2,3,6-テトラヒドロピリミジン-4-イル)-N,N-ジメチルホルムアミジン
粗(E)-N'-(3-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-2,6-ジオキソ-1,2,3,6-テトラヒドロピリミジン-4-イル)-N,N-ジメチルホルムアミジン1e（20 g, 50 mmol）をN,N'-ジメチルホルムアミド150mLに溶解して、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エン（22.4 mL, 150 mmol）および塩化4-メトキシベンジル（14.1 mL, 104.30 mmol）を添加した。反応溶液を75℃に温めて、3時間撹拌した。室温に冷却した後、反応溶液に675mLの水とイソプロパノールの混合溶液（V: V = 2: 1）を加え、1時間撹拌して、ろ過した。ろ過ケーキを水（200 mL×2）およびイソプロパノール（50 mL×2）で続けて洗浄し、乾燥して粗標題化合物(E)-N'-(3-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-1-(4-メトキシベンジル)-2,6-ジオキソ-1,2,3,6-テトラヒドロピリミジン-4-イル)-N,N-ジメチルホルムアミジン1f（35g, 白色固形物）を得たが、更に精製することなく次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 523.0 [M+1]
【００２７】
ステップ６
1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-6-(メチルアミノ)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン
水素化ホウ素ナトリウム（3.80 g, 100 mmol）を210mLのエタノールとtert-ブタノールの混合溶液（V: V = 1: 2）に溶解して、粗(E)-N'-(3-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-1-(4-メトキシベンジル)-2,6-ジオキソ-1,2,3,6-テトラヒドロピリミジン-4-イル)-N,N-ジメチルホルムアミジン1f（35 g, 67 mmol）を添加した。反応溶液を65℃に温めて、1時間撹拌した。0℃に冷却した後、反応溶液に水175mLおよび10%クエン酸140mLを続けて添加して、ろ過した。ろ過ケーキを水（200 mL×2）およびイソプロパノール（50 mL×2）で続けて洗浄し、乾燥して粗標題化合物1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-6-(メチルアミノ)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン1g（33g, 白色固形物）を得たが、更に精製することなく次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 482.0 [M+1]
【００２８】
ステップ７
1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-5-ヒドロキシ-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチルピリド[2,3-d]ピリミジン-2,4,7(1H,3H,8H)-トリオン
粗1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-6-(メチルアミノ)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン1g（10.80 g, 22.44 mmol）およびマロン酸ジエチル（21.20 g, 157.09 mmol）をフェニルエーテル100mLに溶解した。反応溶液を230℃に加熱して、1時間撹拌した。室温に冷却した後、反応溶液を減圧下に濃縮し、得られた残渣は溶出系Bを用いてシリカゲルカラムクロマトにより精製して、標題化合物1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-5-ヒドロキシ-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチルピリド[2,3-d]ピリミジン-2,4,7(1H,3H,8H)-トリオン1h（8.97 g, オレンジ色固形物）を得た。収率：72.9%
MS m/z (ESI): 550.0 [M+1]
【００２９】
ステップ８
1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチル-2,4,7-トリオキソ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-5-イル トリフルオロメタンスルホン酸塩
1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-5-ヒドロキシ-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチルピリド[2,3-d]ピリミジン-2,4,7(1H,3H,8H)-トリオン1h（8.97 g, 16.33 mmol）をジクロロメタン100mLに溶解し、トリエチルアミン（7.00 g, 65.32 mmol）を添加した。0℃に冷却した後、反応溶液にトリフルオロメタンスルホン酸無水物（9.21 g, 32.66 mmol）を加え、次いで室温に温めて、3時間撹拌した。反応溶液は減圧下に濃縮し、得られた残渣は溶出系Bを用いてシリカゲルカラムクロマトにより精製して、標題化合物1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチル-2,4,7-トリオキソ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-5-イル トリフルオロメタンスルホン酸塩1j（4.13g, 黄色固形物）を得た。収率：37.1%
MS m/z (ESI): 682.0 [M+1]
【００３０】
ステップ９
5-(6-メチルピリジン-3-イルオキシ)-1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチルピリド[2,3-d]ピリミジン-2,4,7(1H,3H,8H)-トリオン
6-メチル-3-ヒドロキシ-ピリジン（26 mg, 0.24 mmol）をテトラヒドロフラン5mLに溶解して、水素化ナトリウム（12 mg, 0.30 mmol）を添加した。2時間撹拌した後、反応溶液に1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチル-2,4,7-トリオキソ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-5-イル トリフルオロメタンスルホン酸塩1j（136 mg, 0.20 mmol）を添加し、60℃に加温して、1時間撹拌した。反応溶液を減圧下に濃縮して、粗標題化合物5-(6-メチルピリジン-3-イルオキシ)-1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチルピリド[2,3-d]ピリミジン-2,4,7(1H,3H,8H)-トリオン31a（128mg, 淡黄色液体）を得たが、更に精製することなく次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 641.1 [M+1]
【００３１】
ステップ１０
4-(6-メチルピリジン-3-イルオキシ)-2-(2-フルオロ-4-ヨードフェニルアミノ)-N-(4-メトキシベンジル)-1-メチル-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド
粗5-(6-メチルピリジン-3-イルオキシ)-1-(2-フルオロ-4-ヨードフェニル)-3-(4-メトキシベンジル)-8-メチルピリド[2,3-d]ピリミジン-2,4,7(1H,3H,8H)-トリオン1k（128mg, 0.20 mmol）を6mLのテトラヒドロフランと水の混合溶液（V: V = 4: 1）に溶解して、水酸化リチウム（168 mg, 4 mmol）を添加した。反応溶液を40℃に加温して、1時間撹拌し、酢酸エチル50mLを添加した。有機相を1M水酸化ナトリウム溶液で洗浄し（30 mL×3）、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、ろ過し、ろ液を減圧下に濃縮して、粗標題化合物4-(6-メチルピリジン-3-イルオキシ)-2-(2-フルオロ-4-ヨードフェニルアミノ)-N-(4-メトキシベンジル)-1-メチル-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド1l（123 mg, 褐色オイル）を得たが、更に精製することなく次のステップに直接使用した。
MS m/z (ESI): 615.0 [M+1]
【００３２】
ステップ１１
4-(6-メチルピリジン-3-イルオキシ)-2-(2-フルオロ-4-ヨードフェニルアミノ)-1-メチル-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド
粗4-(6-メチルピリジン-3-イルオキシ)-2-(2-フルオロ-4-ヨードフェニルアミノ)-N-(4-メトキシベンジル)-1-メチル-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド1l（123 mg, 0.20 mmol）をアニソール5mLに溶解して、塩化アルミニウム（133 mg, 1 mmol）を添加した。反応溶液を120℃に加熱して、4時間撹拌し、酢酸エチル50mLおよび水15mLを添加した。有機相を水で洗浄し（25 mL×3）、無水硫酸ナトリウムで乾燥して、ろ過した。ろ液を減圧下に濃縮し、得られた残渣を分取精製法により精製して、標題化合物2-(2-フルオロ-4-ヨードフェニルアミノ)-1-メチル-4-(6-メチルピリジン-3-イルオキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド1（30 mg, 淡褐色固形物）を得た。収率：30.3%
MS m/z (ESI): 495.0 [M+1]
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.78 (s, 1H), 8.38-8.44 (m, 1H), 7.57-7.75 (m, 4H), 7.35-7.49 (m, 2H), 6.65 (t, 1H), 5.09 (s, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.51 (s, 3H)
【実施例２】
【００３３】
2-((2-フルオロ-4-ヨードフェニル)アミノ)-1-メチル-4-((6-メチルピリジン-3-イル)オキシ)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリジン-3-カルボキサミド（1 g, 2.02 mmol）、p-トルエンスルホン酸（0.39 g, 2.27 mmol）およびイソプロパノール（20.41 g）をフラスコに入れて、2-2.5時間リフラックスした。加熱を止めて、反応混合物を連続して12-14時間撹拌した。反応を終了して、ろ過し、ろ過ケーキをイソプロパノール（100g）で洗浄し、減圧下40-45°Cで6-7時間乾燥して、固形物（1.10g）を収率81.6%で得た。結晶サンプルのX線粉末回折スペクトルを図１に示すが、約10.18 (8.68), 11.51 (7.68), 12.34 (7.17), 12.97 (6.82), 13.72 (6.45), 14.83 (5.97), 15.76 (5.62), 17.13 (5.17), 17.59 (5.04), 17.92 (4.95), 18.50 (4.79), 19.72 (4.50), 20.03 (4.43), 20.42 (4.35), 21.04 (4.22), 21.51 (4.13), 21.88 (4.06), 23.15 (3.84), 24.14 (3.68), 24.53 (3.63), 24.77 (3.59), 25.88 (3.44)および26.37 (3.38) に特徴的なピークがある。DSCスペクトルは図２に示すが、約237℃にシャープな融解吸熱ピークを有している。結晶形は、結晶形Iと定義された。
【実施例３】
【００３４】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を50mLの一口フラスコに加え、加熱下メタノール28mLに溶解した。混合液を室温に冷却して撹拌下に結晶を沈殿させた。混合液をろ過し、減圧乾燥して、固形物を得た（0.30 g、収率：30.0%）。生成物は、X線回折およびDSCスペクトルを検討、比較して、結晶形Iであると同定した。
【実施例４】
【００３５】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を250mLの一口フラスコに加え、加熱下エタノール100mLに溶解した。混合液を室温に冷却して撹拌下に結晶を沈殿させた。混合液をろ過し、減圧乾燥して、固形物を得た（0.40 g、収率：40.0%）。生成物は、X線回折およびDSCスペクトルを検討、比較して、結晶形Iであると同定した。
【実施例５】
【００３６】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を25mLの一口フラスコに加え、加熱下95%メタノール6mLに溶解した。混合液を室温に冷却して撹拌下に結晶を沈殿させた。混合液をろ過し、減圧乾燥して、固形物を得た（0.48 g、収率：48.0%）。生成物は、X線回折およびDSCスペクトルを検討、比較して、結晶形Iであると同定した。
【実施例６】
【００３７】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を50mLの一口フラスコに加え、加熱下95%エタノール24mLに溶解した。混合液を室温に冷却して撹拌下に結晶を沈殿させた。混合液をろ過し、減圧乾燥して、固形物を得た（0.50 g、収率：50.0%）。生成物は、X線回折およびDSCスペクトルを検討、比較して、結晶形Iであると同定した。
【実施例７】
【００３８】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を50mLの一口フラスコに加え、加熱下90%イソプロパノール18mLに溶解した。混合液を室温に冷却して撹拌下に結晶を沈殿させた。混合液をろ過し、減圧乾燥して、固形物を得た（0.48 g、収率：48.0%）。生成物は、X線回折およびDSCスペクトルを検討、比較して、結晶形Iであると同定した。
【実施例８】
【００３９】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を50mLの一口フラスコに加え、加熱下90%アセトニトリル12mLに溶解した。混合液を室温に冷却して撹拌下に結晶を沈殿させた。混合液をろ過し、減圧乾燥して、固形物を得た（0.46 g、収率：46.0%）。生成物は、X線回折およびDSCスペクトルを検討、比較して、結晶形Iであると同定した。
【実施例９】
【００４０】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を50mLの一口フラスコに加え、加熱下95%テトラヒドロフラン28mLに溶解した。混合液を室温に冷却して撹拌下に結晶を沈殿させた。混合液をろ過し、減圧乾燥して、固形物を得た（0.70 g、収率：70.0%）。生成物は、X線回折およびDSCスペクトルを検討、比較して、結晶形Iであると同定した。
【実施例１０】
【００４１】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を50mLの一口フラスコに加え、加熱下90%アセトン20mLに溶解した。混合液を室温に冷却して撹拌下に結晶を沈殿させた。混合液をろ過し、減圧乾燥して、固形物を得た（0.54 g、収率：54.0%）。生成物は、X線回折およびDSCスペクトルを検討、比較して、結晶形Iであると同定した。
【実施例１１】
【００４２】
式（I）の化合物（1.0 g, 1.50 mmol）（実施例２に従って調製）を50mLの一口フラスコに加えて、90%アセトン20mLを添加した。混合液は、溶液が透明になるまで加熱してリフラックスさせた。溶液は室温に冷却し、アセトン40mLを冷却過程中に添加して撹拌下に結晶を沈殿させた。翌日、混合液をろ過し、乾燥して、白色固形物を得た（710mg、収率：71.0%）。
【実施例１２】
【００４３】
実施例２で調製した結晶形Iの製品サンプルを空気中で平らに広げて、照明、加熱（40 °C、60 °C）および高湿度（RH 75%、RH 90%）の条件下で、その安定性を試験した。サンプリングは、5日目と10日目に行った。HPLCで検出した純度を表１に示す。
表１  式（I）の化合物の結晶形Iの安定性
2018509407.tif 000006
結晶形Iの式（I）の化合物を照明、加熱および高湿度の条件下で空気中で平らに広げた後の、安定性試験の結果は、照明、高湿度および高温は生成物の品質に大きな影響を及ぼさないことを示し、結晶形Iが良い安定性を有することを示した。
【実施例１３】
【００４４】
実施例２の方法により調製した式（I）の化合物の結晶形Iを、粉砕、加熱および圧縮をした。結果は、結晶形が安定であることを示した。詳細な試験データは、下記の表２に示す。
表２  式（I）の化合物の結晶形Iの特殊安定性試験
2018509407.tif 000007
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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