(57)【要約】  同時投与または逐次投与のための、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドまたはその医薬的に許容される塩と、本明細書において定義されるような少なくとも１種の活性成分またはその医薬的に許容される塩と、任意選択で、医薬的に許容される担体とを含む、組合せ医薬；増殖性疾患の治療におけるそのような組合せの使用；および治療有効量のそのような組合せを投与することを含む、増殖性疾患を患う対象を治療する方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と
を含む、組合せ医薬。
【請求項２】
（ｉ）Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの、クエン酸塩または遊離形態と、
（ｉｉ）
ａ）３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩、
ｂ）８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンの遊離形態、
ｃ）７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩、
ｄ）（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドの遊離形態、および
ｅ）４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と
を含む、請求項１に記載の組合せ医薬。
【請求項３】
少なくとも１種の医薬的に許容される担体をさらに含む、請求項１または２に記載の組合せ医薬。
【請求項４】
医薬品として使用するための、請求項１から３のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
【請求項５】
増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための、請求項１から４のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
【請求項６】
増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬品の製造における、請求項１から３のいずれか一項に記載の組合せ医薬の使用。
【請求項７】
増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬組成物の製造における、請求項１から３のいずれか一項に記載の組合せ医薬の使用。
【請求項８】
遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（ｉｉ）における前記活性成分が、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、請求項１から３のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
【請求項９】
（１）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの１つまたは複数の単位剤形と、
（２）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択されるさらなる活性成分の１つまたは複数の単位剤形と
を含む、複合製剤。
【請求項１０】
（１）Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの、クエン酸塩または遊離形態の１つまたは複数の単位剤形と、
（２）
ａ）３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩、
ｂ）８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンの遊離形態、
ｃ）７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩、
ｄ）（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドの遊離形態、
ｅ）４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩
からなる群から選択されるさらなる活性成分の１つまたは複数の単位剤形と
を含む、請求項９に記載の複合製剤。
【請求項１１】
請求項１から３のいずれか一項に記載の組合せと、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【請求項１２】
遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（ｉｉ）における活性成分は、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療において使用するための、請求項１から３のいずれか一項に記載の組合せ医薬を、その同時投与または逐次投与のための説明書とともに含む、コマーシャルパッケージ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、本明細書において定義されるような少なくとも１種のさらなる活性成分と、任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、組合せ医薬；増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療または予防におけるそのような組合せの使用；および治療有効量のそのような組合せを投与することを含む、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんを患う対象を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
がんを有する患者のための治療の選択肢は数多くあるが、有効かつ安全な治療剤に対する必要性、およびがんの有効な長期間治療のために投与することができる新規併用療法に対する必要性は、依然として存在する。
【０００３】
肝臓がん（liver cancer）または肝がん（hepatic cancer）は、原発性肝臓がん（すなわち、肝臓の組織内で形成されるがん）および続発性肝臓がん（すなわち、身体の別の部分から肝臓に広がってきたがん）に分類される。米国国立衛生研究所の国立がん研究所によれば、２０１４年の米国での肝臓がんおよび肝内胆管がんの新患者および死亡者の推定数は、それぞれ、３３，１９０人および２３，０００人であった。重要なことには、肝臓がんおよび肝内胆管がんと診断された後の５年生存率は、わずか約１６％である。
【０００４】
ここで、遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、本明細書において定義されるような少なくとも１種のさらなる活性成分との組合せが、実験の章において示されているように、インビトロ細胞増殖アッセイにおいて相乗的組合せ活性を示し、それ故に増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療にとって有効であり得ることが見出された。
【０００５】
実験の章において示される相乗的組合せ活性に基づき、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分との組合せが、
増殖性疾患、特にがん、より具体的には肝臓がんの治療における予期せざる改善をもたらし得ることが予期されるであろう。この予期せざる改善により、例えば、各化合物にとって必要とされる用量の低減がもたらされ、例えば、副作用の低減または治療におけるこれらの化合物の長期的な臨床的有効性の増進につながることになる。
【０００６】
同時投与または逐次投与された場合、遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および本明細書において定義されるような少なくとも１種のさらなる活性成分は、相乗的様式で相互作用して、細胞増殖を強力に阻害するため、肝臓がんにおいて驚くほど効果的であり得る。この予期せざる相乗的反応により、例えば、各化合物にとって必要とされる用量の低減がもたらされ、例えば、副作用の低減または治療におけるこれらの化合物の長期的な臨床的有効性の増進につながることになる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、腫瘍の細胞成長の阻害にとって、さらには増殖性疾患、特にがん、より具体的には肝臓がんの治療にとって有用であり得る、組合せ医薬および治療方法を提供する。
【０００８】
本発明は、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、本明細書において定義されるような少なくとも１種のさらなる活性成分と、任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、組合せ医薬を提供する。
【０００９】
本発明の組合せにおいて、（ｉｉ）における活性成分は、
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される。
【００１０】
本発明はさらに、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と、
任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体と
を含む、複合製剤または医薬組成物に関する。一実施形態において、本発明は、（１）組合せパートナー（ｉ）の１つまたは複数の単位剤形と、（２）本明細書に定義されるような組合せパートナー（ｉｉ）の１つまたは複数の単位剤形とを含む、複合製剤に関する。
【００１１】
本発明は特に、それを必要とする対象における増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療または予防において使用するための、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と、
任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体と
を含む、組合せ医薬に関する。
【００１２】
本発明はまた、それを必要とする対象における増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療または予防のための医薬組成物または医薬品の製造において使用するための、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と、
任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体と
を含む、組合せ医薬に関する。
【００１３】
本発明はさらに、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療または予防のための医薬組成物または医薬品の製造のための、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と
の使用に関する。
【００１４】
本発明は、それを必要とする対象における増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんを治療する方法に関し、本方法は、前記対象に対して、治療有効量の、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドを、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と、
任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とともに同時投与または逐次投与することを含む。
【００１５】
ある実施形態において、本発明は、それを必要とする対象における増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんを治療する方法に関し、本方法は、治療有効量の、
（ｉ）Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの、クエン酸塩または遊離形態を、
（ｉｉ）
ａ）３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩、
ｂ）８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンの遊離形態、
ｃ）７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩、
ｄ）（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドの遊離形態、および
ｅ）４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分とともに同時投与または逐次投与することを含む。
【００１６】
本発明はさらに、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療において使用するために、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と
を含む組合せ医薬を、その同時投与または逐次投与のための説明書とともに含む、コマーシャルパッケージを提供する。
【００１７】
上記組合せはまた、医薬品として使用するため、特に、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療または予防において使用するために提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１ａ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩（ＣＰｉｉ−ａと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図１ｂ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩（ＣＰｉｉ−ａと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図１ｃ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩（ＣＰｉｉ−ａと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図２ａ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（ＣＰｉｉ−ｂと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図２ｂ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（ＣＰｉｉ−ｂと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図２ｃ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（ＣＰｉｉ−ｂと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図３ａ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩（ＣＰｉｉ−ｄと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図３ｂ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩（ＣＰｉｉ−ｄと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図３ｃ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩（ＣＰｉｉ−ｄと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図４ａ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド（ＣＰｉｉ−ｅと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図４ｂ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド（ＣＰｉｉ−ｅと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図４ｃ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド（ＣＰｉｉ−ｅと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図５ａ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩（ＣＰｉｉ−ｆと略す）で治療した場合の、治療の３日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図５ｂ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩（ＣＰｉｉ−ｆと略す）で治療した場合の、治療の３日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【図５ｃ】ある濃度範囲のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ＣＰｉと略す）、および４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩（ＣＰｉｉ−ｆと略す）で治療した場合の、治療の３日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、本明細書において定義されるような少なくとも１種のさらなる活性成分と、任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、組合せ医薬を提供する。
【００２０】
したがって、（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、（ｉｉ）本明細書において定義されるような少なくとも１種のさらなる活性成分またはその医薬的に許容される塩と、任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む組合せ医薬は、本明細書において、本発明の組合せと呼ばれる。この用語はまた、（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、（ｉｉ）本明細書において定義されるような１種のさらなる活性成分とを、単独の活性成分として含む組合せ医薬を意味するようにも採用される。
【００２１】
本発明は、
（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と、
任意選択で、少なくとも１種の医薬的に許容される担体と
を含む、組合せ医薬を提供する。
【００２２】
本発明は、医薬品として使用するため、特に、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療または予防において使用するための、そのような組合せ医薬に関する。
【００２３】
本明細書において定義されるような本発明の組合せは、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療にとって有効であり得る。具体的には、本明細書において定義されるような組合せは、例えば、単剤療法を上回る、増殖性疾患、特にがん、より具体的には肝臓がんの治療における予期せざる改善をもたらし得る。この予期せざる改善により、本発明の組合せにおいて使用される活性成分のうちの１つのみを適用する単剤療法と比較して、例えば、活性成分（ｉ）［すなわち、遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド］にとって必要とされる用量もしくは投薬頻度の低減；本明細書において定義されるような活性成分（ｉｉ）にとって必要とされる用量もしくは投薬頻度の低減；本明細書において定義されるような活性成分（ｉ）および（ｉｉ）の両方にとって必要とされる用量もしくは投薬頻度の低減；本明細書において定義されるような、活性成分（ｉ）、（ｉｉ）、もしくはそれら両方の副作用の低減；改善された生活の質もしくは低下した罹患率；または本明細書において定義されるような活性成分（ｉ）、（ｉｉ）、もしくはそれら両方の長期的な臨床的有効性の増進がもたらされることになる。好ましくは、本発明の組合せは、例えば増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行を緩和すること、遅延させること、またはその症状を抑制することに関して、相乗的治療効果を提供することになる。
【００２４】
本明細書において使用される一般用語は、別途明確に述べられない限り、以下の意味を有するものとして定義される。
【００２５】
「含む（comprising）」および「含む（including）」は、本明細書において、特に断りの無い限り、それらの無制限かつ非限定的意味で使用される。
【００２６】
本明細書において特に指示の無い限り、または文脈によって明確に否定されない限り、本発明について説明する文脈における（特に、以下の特許請求の範囲の文脈における）「１つの（a）」および「１つの（an）」および「その（the）」という用語、ならびに類似する言及は、単数形および複数形の両方を網羅すると解釈されるものとする。化合物、塩などに関して複数形が使用される場合、これはまた、単独の化合物、塩などをも意味するように採用されている。
【００２７】
本明細書において使用される場合、「組合せ」または「組合せ医薬」という用語は、１つの単位剤形（例えば、カプセル剤、錠剤、またはサシェ剤）での固定的組合せ、非固定的組合せ、または併用投与のためのパーツのキットのいずれかを指し、ここで、遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド［すなわち、活性成分（ｉ）］、および本明細書において定義されるような少なくとも１種のさらなる活性成分［例えば、活性成分（ｉｉ）］またはその医薬的に許容される塩は、同時に投与されてもよく、同時に独立して投与されてもよく、あるいは組合せパートナーに協同効果、例えば相乗効果を示させるような時間間隔内で別個に投与されてもよい。「固定的組合せ」という用語は、活性成分、すなわち本明細書において定義されるような活性成分（ｉ）、および１種または複数の組合せパートナー［すなわち、本明細書において定義されるような活性成分（ｉｉ）］が、患者に対して、単一のエンティティまたは単位剤形の形態で同時に投与されることを意味する。「非固定的組合せ」という用語は、活性成分、すなわち本明細書において定義されるような活性成分（ｉ）、および１種または複数の組合せパートナー［すなわち、本明細書において定義されるような活性成分（ｉｉ）］が、患者に対して、別個のエンティティとして、同時に投与されるか、あるいは具体的な時間制限を伴わずに逐次投与されることを意味し、そのような投与によって、患者の身体内においてこれら２種の化合物の治療有効レベルが提供される。これは、２種の活性成分の組合せに当てはまり、また、カクテル療法、例えば３種以上の活性成分の投与にも当てはまる。
【００２８】
本明細書において、「複合製剤」という用語は、本明細書において定義されるような組合せパートナー［すなわち、活性成分（ｉ）および活性成分（ｉｉ）］が、独立して投薬され得るか、あるいは異なる量の組合せパートナー［例えば、活性成分（ｉ）および活性成分（ｉｉ）］を伴う異なる固定的組合せを同時にまたは異なる時点において使用することによって投薬され得るという意味において、特に「パーツのキット」を指すように定義される。そして、パーツのキットのパーツは、同時に投与されてもよく、あるいは経時的に互い違いに投与されてもよく、すなわち、パーツのキットのうちの任意のパーツに関して、異なる時点において、かつ等しいまたは異なる時間間隔を伴って投与されてもよい。複合製剤として投与される、１種の組合せパートナーの総量の、その他の組合せパートナーの総量に対する比は、例えば、治療される患者のサブ集団のニーズまたは単独の患者のニーズに対応するために、変動してもよい。
【００２９】
活性成分（ｉｉ）または「さらなる活性成分」について言及する場合、「少なくとも１種の」という用語は、１、２、３、または４種を指す。好ましくは、これは１種である。
【００３０】
本発明によれば、好適な組合せパートナー（ｉｉ）［すなわち、本明細書においては活性成分（ｉｉ）とも呼ばれる］としては、
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、式
【００３１】
【化１】
2018509448.tif 000002
（国際公開第２００６／０００４２０号パンフレットの実施例１４５に記載）を有する、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、特にその一リン酸塩の形態（国際公開第２０１１／０７１８２１号パンフレットの実施例３に記載）；
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、式
【００３２】
【化２】
2018509448.tif 000003
（ＰＣＴ国際出願第２０１５／０５０３４５号の実施例１に記載）を有する、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、特にその遊離形態；
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、式
【００３３】
【化３】
2018509448.tif 000004
（国際公開第２０１０／０２０６７５号パンフレットの実施例７４に記載）を有し、かつ以下の化学名：７−シクロペンチル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２−（（５−（ピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）アミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボキサミドも有する、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、特にそのコハク酸塩の形態（国際公開第２０１２／０６４８０５号パンフレットに記載）；
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、式
【００３４】
【化４】
2018509448.tif 000005
（国際公開第２０１０／０２９０８２号パンフレットの実施例１５に記載）を有する、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、特にその遊離形態；
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、式
【００３５】
【化５】
2018509448.tif 000006
（国際公開第２００７／０８４７８６号パンフレットの実施例１０に記載）を有し、かつ以下の化学名：５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン２−イルアミン、または
５−（２，６−ジ−４−モルホリニル−４−ピリミジニル）−４−トリフルオロメチルピリジン−２−アミン、または
５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）−４−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−アミン、または
５−（２，６−ジ−４−モルホリニル−４−ピリミジニル）−４−（トリフルオロメチル）−２−ピリジンアミンも有する、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン、特にその塩酸塩（国際公開第２０１２／０４４７２７号パンフレットに記載）が挙げられる。
【００３６】
上記の化合物、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンは、ラセミ混合物の形態、（Ｒ）体、または（Ｓ）体であり得る。一実施形態において、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンは、ラセミ混合物である。一実施形態において、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンは、以下に描写されるような（Ｒ）体である。
【００３７】
【化６】
2018509448.tif 000007
【００３８】
一実施形態において、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンは、以下に描写されるような（Ｓ）体である。
【００３９】
【化７】
2018509448.tif 000008
【００４０】
上に引用された参考文献の各々は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４１】
本明細書において、「医薬組成物」という用語は、哺乳動物またはヒトに影響を及ぼす特定の疾患または病態、例えば、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんを予防または治療するために、対象、例えば哺乳動物またはヒトに投与される少なくとも１種の活性成分または治療剤を含有する混合物または溶液を指すように定義される。
【００４２】
本明細書において、「医薬的に許容される」という用語は、堅実な医学的判断の範囲内にあり、過剰な毒性、刺激性アレルギー応答、および他の問題となる合併症を伴わずに、対象、例えば哺乳動物またはヒトの組織との接触にとって好適であり、妥当な損益比に見合うような、化合物、材料、組成物、および／または剤形を指すように定義される。
【００４３】
「薬物」、「活性物質」、「活性成分」、「活性剤」、「薬剤」という用語は、遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である化合物、特に本明細書において特定される化合物を意味すると理解されるものとする。また、本明細書において、「活性成分（ｉ）」という用語は「組合せパートナー（ｉ）」とも呼ばれ、遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドに関する。また、同様に、「活性成分（ｉｉ）」という用語は、「組合せパートナー（ｉｉ）」とも呼ばれ、
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
のいずれかを指す。
【００４４】
本明細書において使用される場合、「同時投与」または「併用投与」という用語は、選択された活性成分を、それを必要とする単独の対象（例えば、患者）に投与することを包含するように定義され、薬剤が必ずしも同じ投与経路で、あるいは同時に投与されるわけではない治療レジメンを含むことが意図される。
【００４５】
本明細書において使用される場合、「治療する」、「治療している」、「治療」、または「療法」という用語は、対象における少なくとも１つの症状を和らげる、低減する、または緩和する、あるいは疾患の進行の遅延に影響を及ぼす治療を含む。例えば、治療は、障害の１つもしくはいくつかの症状を縮減すること、またはがんなどの障害を完全に根絶することであり得る。また、本発明の意味において、「治療する」という用語は、発症（すなわち、疾患の臨床症状よりも前の期間）を阻止すること、遅延すること、および／または疾患が生じるリスクもしくは悪化するリスクを低減することも表す。本明細書において、「保護する」という用語は、対象、例えば哺乳動物またはヒトにおける疾患の発生、または継続、または重症化を適切に予防、遅延、もしくは治療すること、またはこれらすべてを行うことを意味するように使用される。
【００４６】
本明細書において使用される場合、「予防する」、「予防している」、または「予防」という用語は、予防されることになる状態、疾患、または障害と関連付けられる、あるいはそれによって引き起こされる、少なくとも１つの症状の予防を含む。
【００４７】
本明細書において使用される場合、「共同的に治療上有効な量」という用語は、治療剤が、治療される温血動物、特にヒトに対して別個に（経時的に互い違いの様式で、特に順序を特定する様式で）与えられた場合、（好ましくは相乗的な）相互作用（共同的な治療上の効果）を示すような量を意味する。これが当てはまるかどうかは、とりわけ、血中濃度を追跡し、少なくともある特定の時間間隔の間、治療されるヒトの血液中に両方の化合物が存在していることを示すことで決定することができる。
【００４８】
治療剤の組合せの「医薬有効量」という用語は、その組合せで治療される障害の、ベースラインである観察可能な徴候および症状に対する観察可能な向上を提供するのに十分な量である。
【００４９】
本明細書において使用される場合、「相乗効果」という用語は、少なくとも２種の治療剤：本明細書において定義されるような、活性成分（ｉ）および本明細書において定義されるような、少なくとも１種の活性成分（ｉｉ）の効果を指し、これは、各薬物自体が投与される単純添加の効果よりも大きい。この効果は、例えば、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんまたはその症状の、症状的進行を緩徐にすることであり得る。相乗効果は、実施例において示されるように算出することができる。類似して、「相乗的有効量」は、相乗効果を得るために必要とされる量を指す。
【００５０】
本明細書において使用される場合、「対象」または「患者」という用語は、がん、または直接的もしくは間接的にがんに関与する任意の障害、特に肝臓がんなどの増殖性疾患を患う、あるいはそれに侵される可能性のある動物を含む。対象の例としては、哺乳動物、例えばヒト、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ、ラット、およびトランスジェニック非ヒト動物が挙げられる。好ましい実施形態において、対象は、ヒト、例えば増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんを患うか、患うリスクを有するか、あるいは潜在的に患う可能性のあるヒトである。
【００５１】
「約」または「およそ」という用語は、所与の値または範囲の１０％以内、より好ましくは５％以内の意味を有するものとする。
【００５２】
活性成分（ｉ）について述べる場合、「塩（salt）」または「塩（salts）」という用語は、活性成分（ｉ）の塩であるものと理解され、好ましくは医薬的に許容される塩である。医薬的に許容される酸付加塩は、無機酸および有機酸で形成されてもよい。塩を誘導可能な無機酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが挙げられる。塩を誘導可能な有機酸としては、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルホサリチル酸などが挙げられる。活性成分（ｉ）の最も好ましい塩は、クエン酸塩である。活性成分（ｉ）のクエン酸塩の化学量論は、好ましくは、１：１（クエン酸：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド）である。
【００５３】
別途指示される場合を除き、本明細書および特許請求の範囲における特定の化合物の記載または名称は、それらの個々のエナンチオマーの両方、ジアステレオマーの混合物、ラセミ体などを含むことが意図される。したがって、本発明はまた、本発明の化合物のジアステレオマーの混合物および分割されたエナンチオマーを含む、すべてのそのような異性体をも含む。ジアステレオマーの混合物は、それらの物理的化学的差異に基づいて、当業者に公知の方法によって、例えば、クロマトグラフィーまたは分別晶析法によって、それらの個別のジアステレオマーへと分離することができる。エナンチオマーは、適切な光学活性化合物（例えば、アルコール）との反応によってエナンチオマー混合物をジアステレオマーの混合物に変換し、これらのジアステレオマーを分離し、個別のジアステレオマーを対応する純粋なエナンチオマーへと変換する（例えば、加水分解する）ことによって分離することができる。立体化学の決定方法、および立体異性体の分離方法については、当該技術分野において周知である（“Advanced organic Chemistry”, 4thedition, J. March. John Wiley and Sons, New York, 1992の第４章の考察を参照されたい）。
【００５４】
活性成分（ｉｉ）に関する場合、特に指示の無い限り、「塩（salt）」または「塩（salts）」という用語は、活性成分（ｉｉ）中に存在し得る酸性基および塩基性基の塩を含む。性質が塩基性である活性成分（ｉｉ）は、様々な無機酸および有機酸と多種多様な塩を形成することができる。医薬的に許容される酸付加塩は、無機酸および有機酸で形成されてもよい。塩を誘導可能な無機酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが挙げられる。塩を誘導可能な有機酸としては、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルホサリチル酸などが挙げられる。活性成分（ｉｉ）は２つ以上の酸性部分または塩基性部分を含み得るため、活性成分（ｉｉ）は、単一の活性成分中に単塩、二塩、または三塩を含んでもよい。活性成分（ｉｉ）中の酸性部分の場合には、活性成分（ｉｉ）を、塩基性化合物、特に無機塩基で処理することによって、塩を形成することができる。例えば、無機塩は、リチウム、ナトリウム、カリウム、バリウム、およびカルシウムなどの、アルカリ金属およびアルカリ土類金属で形成されるものである。有機塩基の塩としては、例えば、アンモニウム、ジベンジルアンモニウム、ベンジルアンモニウム、２−ヒドロキシエチルアンモニウム、ビス（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム、フェニルエチルベンジルアミン、ジベンジル−エチレンジアミンなどの塩が挙げられる。酸性部分の他の塩としては、例えば、プロカイン、キニーネ、およびＮ−メチルグルコサミン（N-methylglusoamine）で形成されるような塩、ならびにグリシン、オルニチン、ヒスチジン、フェニルグリシン、リジン、およびアルギニンなどの塩基性アミノ酸で形成される塩を挙げることができる。本発明の活性成分（ｉｉ）の好ましい塩は、本明細書において定義される通りである。
【００５５】
別途特定されない限り、あるいは本文によって明確に指示されない限り、本発明の組合せ医薬において有用な治療剤への言及は、活性成分（ｉ）および活性成分（ｉｉ）の、遊離形態と、すべての医薬的に許容される塩との両方を含む。
【００５６】
特許出願の引用が上に提供されているそれぞれの場合において、化合物に関する主題は、ここに、参照により本出願に組み込まれる。本発明の組合せ医薬において治療剤として使用される化合物は、引用される文献に記載されているように、それぞれ、調製および投与することができる。また、上に明示されるような２種の別個の治療剤の組合せも本発明の範囲内にあり、すなわち、本発明の範囲内の組合せ医薬は、３種以上の治療剤を含んでもよい。
【００５７】
ある実施形態において、本発明の組合せは、増殖性疾患の治療のために使用される。一実施形態において、増殖性疾患はがんである。特に、がんは、肝臓がん、乳がん、神経膠芽腫、前立腺がん、横紋筋肉腫、胃がん、卵巣がん、肺がん、結腸がんから選択される。より具体的には、がんは肝臓がんである。
【００５８】
ある実施形態において、本発明の組合せはまた、陽性ＦＧＦＲ４発現を特徴とする固形悪性腫瘍の治療においても有用であり得る。
【００５９】
ある実施形態において、本発明の組合せはまた、陽性ＫＬＢ（ｂｅｔａ−ｋｌｏｔｈｏ）発現を特徴とする固形悪性腫瘍の治療においても有用であり得る。
【００６０】
ある実施形態において、本発明の組合せはまた、陽性ＦＧＦ１９発現を特徴とする固形悪性腫瘍の治療においても有用であり得る。
【００６１】
ある実施形態において、本発明の組合せはまた、陽性ＦＧＦＲ４および陽性ＫＬＢ発現を特徴とする固形悪性腫瘍の治療においても有用であり得る。
【００６２】
ある実施形態において、本発明の組合せはまた、陽性ＦＧＦＲ４および陽性ＦＧＦ１９発現を特徴とする固形悪性腫瘍の治療においても有用であり得る。
【００６３】
ある実施形態において、本発明の組合せはまた、陽性ＦＧＦＲ４、陽性ＫＬＢおよび陽性ＦＧＦ１９発現を特徴とする固形悪性腫瘍の治療においても有用であり得る。
【００６４】
上記のような、ＦＧＦＲ４、ＫＬＢ、および／またはＦＧＦ１９における任意の陽性発現は、例えばＲＴ−ｑＰＣＲ、ウェスタンブロッティング法、ＥＬＩＳＡ、免疫組織化学的検査などの、当業者に公知の方法で評価することができる。
【００６５】
両方の組合せパートナーの個別投与のための、あるいは固定的組合せでの投与のための医薬組成物、すなわち本発明の組合せを含む単独のガレヌス組成物は、それ自体が公知である様式で調製されてもよく、ヒトを含む哺乳動物（温血動物）に対する、経口投与または直腸内投与などの経腸投与、および非経口投与にとって好適なものであり、治療有効量の少なくとも１種の薬理活性組合せパートナーを、例えば上記に示したように単独で、あるいは特に経腸投与または非経口投与にとって好適な１種または複数の医薬的に許容される担体とともに含む。医薬組成物は、約０．１％〜約９９．９％、好ましくは約１％〜約６０％の治療剤を含有してもよい。
【００６６】
経腸投与または非経口投与のための併用療法にとって好適な医薬組成物は、例えば、糖衣錠、錠剤、カプセル剤、坐薬、またはアンプルなどの単位剤形のものである。別途指示されない場合、これらは、それ自体が公知である様式、例えば様々な従来の混合、粉砕、直接打錠、造粒、糖衣、溶解、凍結乾燥工程、または当業者には容易に明らかとなる製造技法によって調製される。各剤形の個別の用量中に含有される組合せパートナーの単位含有量は、それ自体で有効量を構成する必要はないが、これは、必要となる有効量には複数の単位剤形を投与することによって到達すればよいためであることが理解されるであろう。
【００６７】
薬剤の組合せ、または薬剤の組合せのうちの個別の薬剤を含有する単位剤形は、カプセル、例えばゼラチンカプセルの内部に封入されたミクロ錠剤の形態であってもよい。この場合、Ｐｆｉｚｅｒから入手可能である、ＣＡＰＳＵＧＥＬとして知られる硬質ゼラチンカプセルなどの、医薬製剤において採用されるようなゼラチンカプセルを使用することができる。
【００６８】
さらに、本発明の単位剤形は、医薬に使用される、さらなる従来の担体または賦形剤を任意選択で含んでもよい。そのような担体の例としては、限定されるものではないが、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、流動促進剤、安定化剤、および充填剤、希釈剤、着色剤、風味剤、ならびに保存料が挙げられる。当業者であれば、通例の実験により、いかなる余計な負担も伴わずに、剤形の特定の所望される特性に関して、前述の担体のうちの１つまたは複数を選択することができる。使用される各担体の量は、当該技術分野において慣習的な範囲内で変動し得る。以下の参考文献は、経口投与剤形を配合するために使用される技法および賦形剤について開示しており、これらの文献はすべて、参照により本明細書に組み込まれる。The Handbook of Pharmaceutical Excipients, 4th edition, Rowe et al., Eds., American Pharmaceuticals Association (2003)、およびRemington: the Science and Practice of Pharmacy, 20thedition, Gennaro, Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2003)を参照されたい。
【００６９】
これらの任意のさらなる従来の担体は、１つまたは複数の従来の担体を、造粒の前または造粒中に、開始混合物に組み込むことによって、あるいは、１つまたは複数の従来の担体を、薬剤の組合せ、または薬剤の組合せのうちの個別の薬剤を含む顆粒と、経口投与剤形の形態へと組み合わせることによって、経口投与剤形へと組み込まれてもよい。後者の実施形態においては、組み合わされた混合物は、例えばＶ型ブレンダーでさらにブレンドされ、続いて錠剤、例えばモノリス錠剤へと圧縮または成型されるか、カプセルによってカプセル化されるか、あるいはサシェ剤に充填されてもよい。
【００７０】
医薬的に許容される崩壊剤の例としては、限定されるものではないが、デンプン；クレイ；セルロース；アルギネート；ガム；架橋ポリマー、例えば架橋ポリビニルピロリドンまたはクロスポビドン、例えばＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｗａｙｎｅ、ＮＪ）からのＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ  ＸＬ；架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムまたはクロスカルメロースナトリウム、例えばＦＭＣからのＡＣ−ＤＩ−ＳＯＬ；および架橋カルボキシメチルセルロースカルシウム；ダイズ多糖類；ならびにグアーガムが挙げられる。崩壊剤は、組成物の約０重量％〜約１０重量％の量で存在してもよい。一実施形態において、崩壊剤は、組成物の約０．１重量％〜約５重量％の量で存在する。
【００７１】
医薬的に許容される結合剤の例としては、限定されるものではないが、デンプン；セルロースおよびその誘導体、例えば微結晶セルロース、例えばＦＭＣ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ）からのＡＶＩＣＥＬ  ＰＨ、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ．（Ｍｉｄｌａｎｄ、ＭＩ）からのＭＥＴＨＯＣＥＬ；スクロース；デキストロース；コーンシロップ；多糖類；ならびにゼラチンが挙げられる。結合剤は、組成物の約０重量％〜約５０重量％、例えば２〜２０重量％の量で存在してもよい。
【００７２】
医薬的に許容される滑沢剤および医薬的に許容される流動促進剤の例としては、限定されるものではないが、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、デンプン、タルク、第三リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ポリエチレングリコール、粉末セルロース、および微結晶セルロースが挙げられる。滑沢剤は、組成物の約０重量％〜約１０重量％の量で存在してもよい。一実施形態において、滑沢剤は、組成物の約０．１重量％〜約１．５重量％の量で存在してもよい。流動促進剤は、約０．１重量％〜約１０重量％の量で存在してもよい。医薬的に許容される充填剤および医薬的に許容される希釈剤の例としては、限定されるものではないが、粉砂糖、圧縮糖、デキストレート（dextrate）、デキストリン、デキストロース、ラクトース、マンニトール、微結晶セルロース、粉末セルロース、ソルビトール、スクロース、およびタルクが挙げられる。充填剤および／または希釈剤は、例えば、組成物の約０重量％〜約８０重量％の量で存在してもよい。
【００７３】
本発明によれば、治療有効量の、本発明の組合せの組合せパートナーの各々、すなわち活性成分（ｉ）および本明細書において定義されるような活性成分（ｉｉ）は、同時に投与されてもよく、あるいは任意の順序で逐次投与されてもよく、これらの組合せパートナーは、別個に投与されてもよく、あるいは固定的組合せとして投与されてもよい。例えば、本発明による増殖性疾患を治療する方法は、共同的に治療上有効な量で、好ましくは相乗有効量で、例えば１日投与量または断続的投与量で、同時にあるいは任意の順序で逐次、（１）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、活性成分（ｉ）を投与することと、（２）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、活性成分（ｉｉ）を投与することとを含み得る。本発明の組合せの個別の組合せパートナー、すなわち本明細書において定義されるような、活性成分（ｉ）および活性成分（ｉｉ）は、療法の過程で異なる時間において別個に投与されてもよく、あるいは分割された、または単一の組合せ形態で同時に投与されてもよい。さらに、「投与すること」という用語はまた、それ自体がインビボで組合せパートナーへと転化するような、組合せパートナーのプロドラッグの使用も包含する。したがって、本発明は、そのような同時または交互の治療レジメンをすべて包括すると理解されるものとし、「投与すること」という用語は、適宜解釈されるものとする。
【００７４】
本発明の組合せにおいて採用される組合せパートナーの各々の有効投与量は、採用される特定の化合物または医薬組成物、投与方式、治療される病態、および治療される病態の重症度に応じて変動し得る。したがって、本発明の組合せの投与レジメンは、投与経路ならびに患者の腎機能および肝機能を含む、様々な因子に従って選択される。通常の技量を有する臨床医または内科医であれば、病態の進行を緩和、それに対抗、またはそれを阻止するのに必要とされる単独の治療剤の有効量を、容易に決定および処方することができる。
【００７５】
毒性を伴わずに有効性をもたらす、本発明の組合せの組合せパートナー、すなわち活性成分（ｉ）および本明細書において定義されるような活性成分（ｉｉ）の、最適比、個別の投与量および合わせた投与量、ならびに濃度は、標的部位に対する治療剤の利用可能性の動態に基づき、当業者に公知の方法を用いて決定することができる。
【００７６】
組合せパートナーの各々の有効投与量は、化合物のうちの一方の、その組合せのうちの他方の化合物と比較した場合に、より頻繁な投与を必要とすることがある。したがって、適切な投薬を可能にするために、パッケージ化された医薬製品が、化合物の組合せを含有する１つまたは複数の剤形と、化合物の組合せのうちの１つを含有するが、組合せのうちの他方の化合物を含有しない、１つまたは複数の剤形とを含有してもよい。
【００７７】
本発明の組合せにおいて採用される組合せパートナーが、単独の薬剤として販売されている場合、それらの投与量および投与方式は、本明細書において別途言及されていない限り、それぞれの販売されている薬物の添付文書に提供されている情報に従ってよい。
【００７８】
増殖性疾患の治療のための各組合せパートナーの最適な投与量は、公知の方法を用いて、各個体について経験的に決定することができ、限定されるものではないが、疾患の進行度；個体の年齢、体重、健康全般、性別、および食餌；投与時間および経路；ならびに個体が摂取している他の薬品を含む、様々な因子に左右されることになる。
【００７９】
単位剤形を製造するために、担体材料と組み合わせることができる各組合せパートナーの量は、治療される個体および特定の投与方式に応じて変動し得る。一部の実施形態において、本明細書において記載されるような薬剤の組合せを含有する単位剤形は、それらの薬剤が単独で投与される場合に典型的に投与されるような、組合せのうちの各薬剤の量を含有することになる。
【００８０】
投与頻度は、使用される化合物、および治療または予防される特定の病態に応じて、変動し得る。一般に、効果的な療法を提供するのに十分な最少投与量の使用が好ましい。患者は、概して、治療または予防される病態にとって好適なアッセイを用いて、治療有効性についてモニタリングされてもよく、これらのアッセイについては、当業者にはよく知られている。
【００８１】
好ましい実施形態
本発明の様々な列挙される実施形態について、本明細書において説明する。各実施形態において特定される特色は、本発明のさらなる実施形態を提供するために、他の特定される特色と組み合わせてもよいことが認識されるであろう。
【００８２】
実施形態１．（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、
（ｉｉ）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分と
を含む、組合せ医薬。
【００８３】
実施形態２．Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１に記載の組合せ医薬。
【００８４】
実施形態３．Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１に記載の組合せ医薬。
【００８５】
実施形態４．（ｉｉ）における活性成分が、
ａ）３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩、
ｂ）８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンの遊離形態、
ｃ）７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩、
ｄ）（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドの遊離形態、および
ｅ）４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩
からなる群から選択される、実施形態１から３のいずれかに記載の組合せ医薬。
【００８６】
実施形態５．活性成分、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、ラセミ混合物の形態である、実施形態１から４のいずれかに記載の組合せ医薬。
【００８７】
実施形態６．活性成分、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、（Ｒ）体である、実施形態１から４のいずれかに記載の組合せ医薬。
【００８８】
実施形態７．活性成分、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、（Ｓ）体である、実施形態１から４のいずれかに記載の組合せ医薬。
【００８９】
実施形態８．少なくとも１種の医薬的に許容される担体をさらに含む、実施形態１から７のいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【００９０】
実施形態９．遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（ｉｉ）における活性成分が、単独の活性成分である、実施形態１から８のいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【００９１】
実施形態１０．医薬品として使用するための、実施形態１から９のいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【００９２】
実施形態１１．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための、実施形態１から１０のいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【００９３】
実施形態１２．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬品の製造のための、実施形態１から９のいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【００９４】
実施形態１３．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬組成物の製造のための、実施形態１から９のいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【００９５】
実施形態１４．遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（ｉｉ）における活性成分が、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態１から９のいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【００９６】
実施形態１５．（１）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの１つまたは複数の単位剤形と、（２）
ａ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素、
ｂ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン、
ｃ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミド、
ｄ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド、および
ｅ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミン
からなる群から選択される少なくとも１種のさらなる活性成分の１つまたは複数の単位剤形と
を含む、複合製剤。
【００９７】
実施形態１６．遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（ｉｉ）における活性成分が、単独の活性成分である、実施形態１５に記載の複合製剤。
【００９８】
実施形態１７．Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１５に記載の複合製剤。
【００９９】
実施形態１８．Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの遊離形態、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（ｉｉ）における活性成分が、単独の活性成分である、実施形態１７に記載の複合製剤。
【０１００】
実施形態１９．Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１５に記載の複合製剤。
【０１０１】
実施形態２０．Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドのクエン酸塩、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（ｉｉ）における活性成分が、単独の活性成分である、実施形態１９に記載の複合製剤。
【０１０２】
実施形態２１．（ｉｉ）における活性成分が、
ａ）３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩、
ｂ）８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンの遊離形態、
ｃ）７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩、
ｄ）（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドの遊離形態、および
ｅ）４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩
からなる群から選択される、実施形態１５から２０のいずれかに記載の複合製剤。
【０１０３】
実施形態２２．遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および（ｉｉ）における活性成分が、単独の活性成分である、実施形態２１に記載の複合製剤。
【０１０４】
実施形態２３．活性成分、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、ラセミ混合物の形態である、実施形態１５から２２のいずれかに記載の複合製剤。
【０１０５】
実施形態２４．活性成分、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、（Ｒ）体である、実施形態１５から２２のいずれかに記載の複合製剤。
【０１０６】
実施形態２５．活性成分、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、（Ｓ）体である、実施形態１５から２２のいずれかに記載の複合製剤。
【０１０７】
実施形態２６．実施形態１から９のいずれか１つに記載の組合せと、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【０１０８】
実施形態２７．遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（ｉｉ）における活性成分が、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態２６に記載の医薬組成物。
【０１０９】
実施形態２８．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療において使用するために、実施形態１から９のいずれか１つに記載の組合せ医薬を、その同時投与または逐次投与のための説明書とともに含む、コマーシャルパッケージ。
【０１１０】
実施形態Ａ：
実施形態１ａ：（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、（ｉｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素と
を含む、組合せ医薬。
【０１１１】
実施形態２ａ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドは、遊離形態である、実施形態１ａに記載の組合せ医薬。
【０１１２】
実施形態３ａ：（ｉ）Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および（ｉｉ）３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素が、クエン酸塩の形態である、実施形態１ａに記載の組合せ医薬。
【０１１３】
実施形態４ａ：３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素が、一リン酸塩の形態である、実施形態１ａから３ａのいずれかに記載の組合せ医薬。
【０１１４】
実施形態５ａ：少なくとも１種の医薬的に許容される担体をさらに含む、実施形態１ａから４ａのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１１５】
実施形態６ａ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素が、単独の活性成分である、実施形態１ａから５ａのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１１６】
実施形態７ａ：医薬品として使用するための、実施形態１ａから６ａのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１１７】
実施形態８ａ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための、実施形態１ａから７ａのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１１８】
実施形態９ａ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬品の製造のための、実施形態１ａから６ａのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０１１９】
実施形態１０ａ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬組成物の製造のための、実施形態１ａから６ａのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０１２０】
実施形態１１ａ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素が、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態１ａから６ａのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１２１】
実施形態１２ａ：（１）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの１つまたは複数の単位剤形と、（２）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の１つまたは複数の単位剤形とを含む、複合製剤。
【０１２２】
実施形態１３ａ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素が、単独の活性成分である、実施形態１２ａに記載の複合製剤。
【０１２３】
実施形態１４ａ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１２ａに記載の複合製剤。
【０１２４】
実施形態１５ａ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの遊離形態、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素が、単独の活性成分である、実施形態１４ａに記載の複合製剤。
【０１２５】
実施形態１６ａ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１２ａに記載の複合製剤。
【０１２６】
実施形態１７ａ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドのクエン酸塩、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素が、単独の活性成分である、実施形態１６ａに記載の複合製剤。
【０１２７】
実施形態１８ａ：３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素は、一リン酸塩の形態である、実施形態１２ａから１７ａのいずれかに記載の複合製剤。
【０１２８】
実施形態１９ａ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩が、単独の活性成分である、実施形態１８ａに記載の複合製剤。
【０１２９】
実施形態２０ａ：実施形態１ａから６ａのいずれか１つに記載の組合せと、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【０１３０】
実施形態２１ａ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素が、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態２０ａに記載の医薬組成物。
【０１３１】
実施形態２２ａ．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療において使用するために、実施形態１ａから６ａのいずれか１つに記載の組合せ医薬を、その同時投与または逐次投与のための説明書とともに含む、コマーシャルパッケージ。
【０１３２】
実施形態Ｂ：
実施形態１ｂ：（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、（ｉｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンとを含む、組合せ医薬。
【０１３３】
実施形態２ｂ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１ａに記載の組合せ医薬。
【０１３４】
実施形態３ｂ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１ａに記載の組合せ医薬。
【０１３５】
実施形態４ｂ：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、遊離形態である、実施形態１ｂから３ｂのいずれかに記載の組合せ医薬。
【０１３６】
実施形態５ｂ：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、ラセミ混合物の形態である、実施形態１ｂから４ｂのいずれかに記載の組合せ医薬。
【０１３７】
実施形態６ｂ：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、（Ｒ）体である、実施形態１ｂから４ｂのいずれかに記載の組合せ医薬。
【０１３８】
実施形態７ｂ：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、（Ｓ）体である、実施形態１ｂから４ｂのいずれかに記載の組合せ医薬。
【０１３９】
実施形態８ｂ：少なくとも１種の医薬的に許容される担体をさらに含む、実施形態１ｂから７ｂのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１４０】
実施形態９ｂ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、単独の活性成分である、実施形態１ｂから８ｂのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１４１】
実施形態１０ｂ：医薬品として使用するための、実施形態１ｂから９ｂのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１４２】
実施形態１１ｂ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための、実施形態１ｂから１０ｂのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１４３】
実施形態１２ｂ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬品の製造のための、実施形態１ｂから９ｂのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０１４４】
実施形態１３ｂ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬組成物の製造のための、実施形態１ｂから９ｂのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０１４５】
実施形態１４ｂ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態１ｂから９ｂのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１４６】
実施形態１５ｂ：（１）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの１つまたは複数の単位剤形と、（２）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンの１つまたは複数の単位剤形とを含む、複合製剤。
【０１４７】
実施形態１６ｂ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、単独の活性成分である、実施形態１５ｂに記載の複合製剤。
【０１４８】
実施形態１７ｂ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１５ｂに記載の複合製剤。
【０１４９】
実施形態１８ｂ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの遊離形態、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、単独の活性成分である、実施形態１７ｂに記載の複合製剤。
【０１５０】
実施形態１９ｂ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１５ｂに記載の複合製剤。
【０１５１】
実施形態２０ｂ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドのクエン酸塩、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、単独の活性成分である、実施形態１９ｂに記載の複合製剤。
【０１５２】
実施形態２１ｂ：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、遊離形態である、実施形態１５ｂから２０ｂのいずれかに記載の複合製剤。
【０１５３】
実施形態２２ｂ：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、ラセミ混合物の形態である、実施形態１５ｂから２１ｂのいずれかに記載の複合製剤。
【０１５４】
実施形態２３ｂ：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、（Ｒ）体である、実施形態１５ｂから２１ｂのいずれかに記載の複合製剤。
【０１５５】
実施形態２４ｂ：８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、（Ｓ）体である、実施形態１５ｂから２１ｂのいずれかに記載の複合製剤。
【０１５６】
実施形態２５ｂ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンが、単独の活性成分である、実施形態２１ｂから２４ｂのいずれかに記載の複合製剤。
【０１５７】
実施形態２６ｂ：実施形態１ｂから９ｂのいずれか１つに記載の組合せと、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【０１５８】
実施形態２７ｂ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンは、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態２６ｂに記載の医薬組成物。
【０１５９】
実施形態２８ｂ．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療において使用するために、実施形態１ｂから９ｂのいずれか１つに記載の組合せ医薬を、その同時投与または逐次投与のための説明書とともに含む、コマーシャルパッケージ。
【０１６０】
実施形態Ｄ：
実施形態１ｄ：（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、（ｉｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドとを含む、組合せ医薬。
【０１６１】
実施形態２ｄ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１ｄに記載の組合せ医薬。
【０１６２】
実施形態３ｄ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１ｄに記載の組合せ医薬。
【０１６３】
実施形態４ｄ：７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドが、コハク酸塩の形態である、実施形態１ｄから３ｄのいずれかに記載の組合せ医薬。
【０１６４】
実施形態５ｄ：少なくとも１種の医薬的に許容される担体をさらに含む、実施形態１ｄから４ｄのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１６５】
実施形態６ｄ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドが、単独の活性成分である、実施形態１ｄから５ｄのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１６６】
実施形態７ｄ：医薬品として使用するための、実施形態１ｄから６ｄのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１６７】
実施形態８ｄ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための、実施形態１ｄから７ｄのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１６８】
実施形態９ｄ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬品の製造のための、実施形態１ｄから６ｄのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０１６９】
実施形態１０ｄ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬組成物の製造のための、実施形態１ｄから６ｄのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０１７０】
実施形態１１ｄ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドが、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態１ｄから６ｄのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１７１】
実施形態１２ｄ：（１）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの１つまたは複数の単位剤形と、（２）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドの１つまたは複数の単位剤形とを含む、複合製剤。
【０１７２】
実施形態１３ｄ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドが、単独の活性成分である、実施形態１２ｄに記載の複合製剤。
【０１７３】
実施形態１４ｄ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが遊離形態である、実施形態１２ｄに記載の複合製剤。
【０１７４】
実施形態１５ｄ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの遊離形態、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドが、単独の活性成分である、実施形態１４ｄに記載の複合製剤。
【０１７５】
実施形態１６ｄ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１２ｄに記載の複合製剤。
【０１７６】
実施形態１７ｄ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドのクエン酸塩、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドが、単独の活性成分である、実施形態１６ｄに記載の複合製剤。
【０１７７】
実施形態１８ｄ：７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドが、コハク酸塩の形態である、実施形態１２ｄから１７ｄのいずれかに記載の複合製剤。
【０１７８】
実施形態１９ｄ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩が、単独の活性成分である、実施形態１８ｄに記載の複合製剤。
【０１７９】
実施形態２０ｄ：実施形態１ｄから６ｄのいずれか１つに記載の組合せと、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【０１８０】
実施形態２１ｄ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドが、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態２０ｄに記載の医薬組成物。
【０１８１】
実施形態２２ｄ．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療において使用するために、実施形態１ｄから６ｄのいずれか１つに記載の組合せ医薬を、その同時投与または逐次投与のための説明書とともに含む、コマーシャルパッケージ。
【０１８２】
実施形態Ｅ：
実施形態１ｅ：（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、（ｉｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドとを含む、組合せ医薬。
【０１８３】
実施形態２ｅ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１ｅに記載の組合せ医薬。
【０１８４】
実施形態３ｅ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１ｅに記載の組合せ医薬。
【０１８５】
実施形態４ｅ：（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１ｅから３ｅのいずれかに記載の組合せ医薬。
【０１８６】
実施形態５ｅ：少なくとも１種の医薬的に許容される担体をさらに含む、実施形態１ｅから４ｅのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１８７】
実施形態６ｅ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドが、単独の活性成分である、実施形態１ｅから５ｅのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１８８】
実施形態７ｅ：医薬品として使用するための、実施形態１ｅから６ｅのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１８９】
実施形態８ｅ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための、実施形態１ｅから７ｅのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１９０】
実施形態９ｅ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬品の製造のための、実施形態１ｅから６ｅのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０１９１】
実施形態１０ｅ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬組成物の製造のための、実施形態１ｅから６ｅのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０１９２】
実施形態１１ｅ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドが、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態１ｅから６ｅのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０１９３】
実施形態１２ｅ：（１）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの１つまたは複数の単位剤形と、（２）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドの１つまたは複数の単位剤形とを含む、複合製剤。
【０１９４】
実施形態１３ｅ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドが、単独の活性成分である、実施形態１２ｅに記載の複合製剤。
【０１９５】
実施形態１４ｅ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１２ｅに記載の複合製剤。
【０１９６】
実施形態１５ｅ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの遊離形態、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドが、単独の活性成分である、実施形態１４ｅに記載の複合製剤。
【０１９７】
実施形態１６ｅ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１２ｅに記載の複合製剤。
【０１９８】
実施形態１７ｅ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドのクエン酸塩、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドが、単独の活性成分である、実施形態１６ｅに記載の複合製剤。
【０１９９】
実施形態１８ｅ：（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１２ｅから１７ｅのいずれかに記載の複合製剤。
【０２００】
実施形態１９ｅ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドの遊離形態が、単独の活性成分である、実施形態１８ｅに記載の複合製剤。
【０２０１】
実施形態２０ｅ：実施形態１ｅから６ｅのいずれか１つに記載の組合せと、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【０２０２】
実施形態２１ｅ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミドが、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態２０ｅに記載の医薬組成物。
【０２０３】
実施形態２２ｅ．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療において使用するために、実施形態１ｅから６ｅのいずれか１つに記載の組合せ医薬を、その同時投与または逐次投与のための説明書とともに含む、コマーシャルパッケージ。
【０２０４】
実施形態Ｆ：
実施形態１ｆ：（ｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドと、（ｉｉ）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンとを含む、組合せ医薬。
【０２０５】
実施形態２ｆ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１ｆに記載の組合せ医薬。
【０２０６】
実施形態３ｆ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１ｆに記載の組合せ医薬。
【０２０７】
実施形態４ｆ：４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンが、塩酸塩の形態である、実施形態１ｆから３ｆのいずれかに記載の組合せ医薬。
【０２０８】
実施形態５ｆ：少なくとも１種の医薬的に許容される担体をさらに含む、実施形態１ｆから４ｆのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０２０９】
実施形態６ｆ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンが、単独の活性成分である、実施形態１ｆから５ｆのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０２１０】
実施形態７ｆ：医薬品として使用するための、実施形態１ｆから６ｆのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０２１１】
実施形態８ｆ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための、実施形態１ｆから７ｆのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０２１２】
実施形態９ｆ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬品の製造のための、実施形態１ｆから６ｆのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０２１３】
実施形態１０ｆ：増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療のための医薬組成物の製造のための、実施形態１ｆから６ｆのいずれか１つに記載の組合せ医薬の使用。
【０２１４】
実施形態１１ｆ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンが、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態１ｆから６ｆのいずれか１つに記載の組合せ医薬。
【０２１５】
実施形態１２ｆ：（１）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの１つまたは複数の単位剤形と、（２）遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの１つまたは複数の単位剤形とを含む、複合製剤。
【０２１６】
実施形態１３ｆ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンが、単独の活性成分である、実施形態１２ｆに記載の複合製剤。
【０２１７】
実施形態１４ｆ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、遊離形態である、実施形態１２ｆに記載の複合製剤。
【０２１８】
実施形態１５ｆ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの遊離形態、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンが、単独の活性成分である、実施形態１４ｆに記載の複合製剤。
【０２１９】
実施形態１６ｆ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドが、クエン酸塩の形態である、実施形態１２ｆに記載の複合製剤。
【０２２０】
実施形態１７ｆ：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドのクエン酸塩、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンが、単独の活性成分である、実施形態１６ｆに記載の複合製剤。
【０２２１】
実施形態１８ｆ：４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンが、塩酸塩の形態である、実施形態１２ｆから１７ｆのいずれかに記載の複合製剤。
【０２２２】
実施形態１９ｆ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩が、単独の活性成分である、実施形態１８ｆに記載の複合製剤。
【０２２３】
実施形態２０ｆ：実施形態１ｆから６ｆのいずれか１つに記載の組合せと、少なくとも１種の医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【０２２４】
実施形態２１ｆ：遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、および遊離形態または医薬的に許容される塩の形態である、４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンが、増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの治療において使用するための相乗有効量で提供される、実施形態２０ｆに記載の医薬組成物。
【０２２５】
実施形態２２ｆ．増殖性疾患、例えばがん、特に肝臓がんの進行の遅延または治療において使用するために、実施形態１ｆから６ｆのいずれか１つに記載の組合せ医薬を、その同時投与または逐次投与のための説明書とともに含む、コマーシャルパッケージ。
【０２２６】
以下の実施例は、上記の発明を例証するものであるが、本発明の範囲をいかようにも限定することを意図するものではない。本発明の組合せ医薬の有益効果は、関連技術分野における当業者にそのようなものとして公知の他の試験モデルによって決定することもできる。
【０２２７】
【表１−１】
2018509448.tif 000009
【０２２８】
【表１−２】
2018509448.tif 000010
【０２２９】
他の略語：
ＨＵＨ７＝ヒトヘパトーマ細胞株７
ＨＣＣ＝肝細胞癌
ＡＴＣＣ＝アメリカ培養細胞系統保存機関
ＣＴＧ＝ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ
ＣＩ＝組合せインデックス
ＡＴＰ＝アデノシン三リン酸
ＰＢＳ＝リン酸緩衝生理食塩水
Ｅｔ２Ｏ＝ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＤＩＥＡまたはＤＩＰＥＡ＝Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー
ｍＬ＝ミリリットル
Ｐｄ２（ｄｂａ）３＝トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム
キサントホス（Xantophos）＝４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（キサントホス）
【０２３０】
実験の章において、以下の略語を使用して、以下の化合物を指す。
Ｃｐｉ＝Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド、
Ｃｐｉｉ−ａ＝３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩、
Ｃｐｉｉ−ｂ＝（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
Ｃｐｉｉ−ｄ＝７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩
Ｃｐｉｉ−ｅ＝（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド
Ｃｐｉｉ−ｆ＝４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩
【実施例】
【０２３１】
Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（本明細書においてはＣＰｉと略され、また実施例８３とも呼ばれる）およびその塩の合成については、ＰＣＴ国際出願第２０１４／０６５５８５号に開示されており、この内容は、本明細書において以下に記載されるように、参照により組み込まれる。
【０２３２】
実施例８３：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド。
【０２３３】
【化８】
2018509448.tif 000011
【０２３４】
ＴＨＦ（３ｍｌ）および水（１ｍｌ）中の、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−（ジメトキシメチル）−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（中間体８０、４７０ｍｇ、０．８０８ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で、濃塩酸（０．４０ｍｌ）を添加した。室温で３時間撹拌した後、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液を添加し、この混合物を、ＤＣＭを用いて抽出し（３回）、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、蒸発させた。残留物を、ＥｔＯＡｃ（６ｍｌ）およびペンタン（６ｍｌ）とともに超音波処理し、次いで濾過した。その後、得られた白色固体をＤＣＭ（６ｍｌ）中に溶解させ、ＥｔＯＡｃ（３ｍｌ）を添加し、溶液を温め、密封し、室温で２時間静置した。濾過および乾燥により、表題化合物を白色固体として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.43 (s, 1H), 10.06 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.96 (t, br, 1H), 4.86 (s, 2H), 3.96 - 3.90 (m, 2H), 3.52 - 3.46 (m, 2H), 3.39 - 3.33 (m, 2H), 3.30 - 3.21 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.02 (s, 2H), 2.93 - 2.86 (m, 2H), 2.61 - 2.56 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.95 - 1.85 (m, 2H).
（ＵＰＬＣ−ＭＳ  ６）ｔＲ  ０．７０，ＥＳＩ−ＭＳ  ５０７．２，［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２３５】
適切な対イオンとの沈殿により、上のＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミドの遊離形態から、以下の塩を調製した。
【０２３６】
１：１の化学量論（ｍｗ  ６４０．６６）、ｍｐ（ＤＳＣ）１８１．１℃（開始）を有するリンゴ酸塩：リンゴ酸（２６．４ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）およびＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（１００ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）の混合物に、アセトン（２ｍｌ）を添加し、この混合物を、５５から５℃への加熱−冷却サイクルで、繰り返しサイクルを７回、ミニブロックにおいて加熱した（加熱速度：１．５℃／分、冷却速度：０．２５℃／分）。遠心分離によって白色固体を収集し、４０℃で１８時間乾燥させて、表題の塩を得た。
【０２３７】
１：０．５の化学量論を有する酒石酸塩（ｍｗ  ５８１．７２）、ｍｐ（ＤＳＣ）１７６．７℃（開始）。酒石酸（７５．７ｍｇ）のメタノール（５ｍｌ）中溶液を、室温で調製した（０．１Ｍ）。次いで、０．１Ｍの酒石酸のアセトン溶液の一部（２ｍｌ）を、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（１００ｍｇ）のメタノール（４ｍｌ）中懸濁液に添加し、この混合物を１分間超音波処理し、次いで５５℃で２時間撹拌しながら加熱した。次いで、濾過によって白色固体を収集し、メタノール（２ｍｌ）を用いて２回洗浄し、真空下４０℃で１８時間乾燥させて、表題の塩を得た。
【０２３８】
１：１の化学量論（ｍｗ  ６５６．６６）、ｍｐ（ＤＳＣ）１６９．９℃（開始）を有する酒石酸塩：酒石酸（７５．７ｍｇ）のアセトン（５ｍｌ）中溶液を、室温で調製した（０．１Ｍ）。次いで、０．１Ｍの酒石酸のアセトン溶液の一部（２ｍｌ）を、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（１００ｍｇ）のメタノール（４ｍｌ）中懸濁液に添加し、この混合物を１分間超音波処理し、次いで５５℃で２時間撹拌しながら加熱した。次いで、濾過によって白色固体を収集し、アセトン（２ｍｌ）を用いて２回洗浄し、真空下４０℃で１８時間乾燥させて、表題の塩を得た。
【０２３９】
１：０．５の化学量論（ｍｗ  ６０２．７３）、ｍｐ（ＤＳＣ）１６８．４℃（開始）を有するクエン酸塩：クエン酸（９６．９ｍｇ）のメタノール（５ｍｌ）中溶液を、室温で調製した（０．１Ｍ）。次いで、０．１Ｍのクエン酸のメタノール溶液の一部（２ｍｌ）を、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（１００ｍｇ）のメタノール（４ｍｌ）中懸濁液に添加し、この混合物を１分間超音波処理し、次いで５５℃で２時間撹拌しながら加熱した。次いで、濾過によって白色固体を収集し、アセトン（２ｍｌ）を用いて２回洗浄し、真空下４０℃で１８時間乾燥させて、表題の塩を得た。
【０２４０】
１：１の化学量論（ｍｗ  ６９８．７０）、ｍｐ（ＤＳＣ）１６８．８℃（開始）を有するクエン酸塩：クエン酸（９６．９ｍｇ）のアセトン（５ｍｌ）中溶液を、室温で調製した（０．１Ｍ）。次いで、０．１Ｍのクエン酸のアセトン溶液の一部（２ｍｌ）を、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（１００ｍｇ）のアセトン（４ｍｌ）中懸濁液に添加し、この混合物を１分間超音波処理し、次いで５５℃で２時間撹拌しながら加熱し、その後室温までゆっくりと冷却した。次いで、濾過によって白色固体を収集し、アセトン（２ｍｌ）を用いて２回洗浄し、真空下４０℃で１８時間乾燥させて、表題の塩を得た。
【０２４１】
あるいは、Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（６．５ｍｇ、１２．８３ｍｍｏｌ）を、５００ｍｌの四ツ口フラスコ反応器に入れた。４９ｍｌの氷酢酸を添加し、結果として得られた懸濁液を、透明な混合物が得られるまで２３℃で撹拌した。別のフラスコにおいて、２−ヒドロキシプロパン−１，２，３−トリカルボン酸無水物（２．５９ｇ、１３．４７ｍｍｏｌ、１．０５当量）を、透明な溶液が得られるまで、４９ｍｌの氷酢酸中に５０℃で溶解させた。次いで、この溶液を、２３℃で、先に調製したＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド溶液に添加した。この混合物を２３℃で３０分間撹拌した後、７５℃に温めた１９２ｍｌの酢酸エチルに１時間かけて滴加した。添加中、この温度は一定に保った。添加の最後に、混合物の温度をゆっくりと２３℃まで冷却し、穏やかに撹拌しながらこの温度で１６時間放置した。懸濁液を５〜１０℃まで冷却し、濾過した。ケーキを、１５ｍｌの酢酸エチルおよび１５ｍｌのアセトンを用いて洗浄した。ウェットケーキ（約８．５ｇ）を、１９２ｍｌの乾燥アセトンが入った５００ｍｌのフラスコに移した。結果として得られた懸濁液を、２４時間還流させた。懸濁液を濾過し、ケーキを、１５ｍｌの乾燥アセトンを用いて２回洗浄した後、真空下５０℃で数時間乾燥させて、表題の塩を得た。
【０２４２】
中間体８０：Ｎ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−（ジメトキシメチル）−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド。
０℃に冷却したジ（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）メタノン（４１０ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１．５ｍｌ）の混合物に、６−アミノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ニコチノニトリル（中間体７５、４８１ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１．５ｍｌ）溶液を、１０分間かけて滴加した。０℃で４５分間撹拌した後、反応混合物を室温まで温め、室温でさらに９０分間経過した後、１−（（２−（ジメトキシメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）メチル）−４−メチルピペラジン−２−オン（中間体８１、４１８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍｌ）溶液を添加した。この反応混合物を室温で１７．５時間撹拌し、ＭｅＯＨを添加することによってクエンチし、蒸発させた。残留物を、８０ｇのＲｅｄｉＳｅｐ（登録商標）シリカカラムにＤＣＭ溶液として適用し、ＤＣＭからＤＣＭ中２％のＭｅＯＨという勾配で溶出させて、順相クロマトグラフィーによって精製した。生成物を含有する画分を合わせて、蒸発させ、表題化合物を橙色の発泡体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.50 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.93 (t, 1H), 5.45 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.94 - 3.89 (m, 2H), 3.54 - 3.50 (m, 2H), 3.40 - 3.35 (m, 2H), 3.38 (s, 6H), 3.29 (s, 3H), 3.20 - 3.16 (m, 2H), 3.05 (s, 2H), 2.86 - 2.80 (m, 2H), 2.61 - 2.55 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.94 - 1.88 (m, 2H).（ＵＰＬＣ−ＭＳ  ６）ｔＲ  ０．７２；ＥＳＩ−ＭＳ  ５５３．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４３】
中間体８１：１−（（２−（ジメトキシメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−イル）メチル）−４−メチルピペラジン−２−オン。
１，２−ジクロロエタン（２０ｍｌ）中の、２−（ジメトキシメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルバルデヒド（中間体４１、２．３０ｇ、９．７４ｍｍｏｌ）、２−（（２−アミノエチル）（メチル）アミノ）酢酸エチル二塩酸塩（中間体８２、２．６ｇ、１４．６１ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（６．７５ｍｌ、４８．７ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３．１０ｇ、１４．６１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２１時間撹拌し、さらなるナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２．６ｇ、９．７４ｍｍｏｌ）を添加した。室温でさらに４時間撹拌した後、さらなるナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１．３ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）を再度添加し、この反応を２．５日間４℃に維持した。その後、反応混合物を室温まで温め、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液を添加し、この混合物を、ＤＣＭを用いて抽出し（３回）、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、蒸発させた。残留物を、１２０ｇのＲｅｄｉＳｅｐ（登録商標）シリカカラムにＤＣＭ溶液として適用し、ＤＣＭからＤＣＭ中１０％のＭｅＯＨという勾配で溶出させて、順相クロマトグラフィーによって精製した。生成物を含有する画分を合わせて、蒸発させ、表題化合物を橙色の発泡体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.08 (s, 1H), 5.30 (s, br, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.69 (s, 2H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 3.40 (s, 6H), 3.22 - 3.15 (m, 2H), 3.24 (s, 2H), 2.71 - 2.64 (m, 2H), 2.58 - 2.50 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.98 - 1.82 (m, 2H).（ＵＰＬＣ−ＭＳ  ６）ｔＲ  ０．３３；ＥＳＩ−ＭＳ  ３３５．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４４】
中間体８２：２−（（２−アミノエチル）（メチル）アミノ）酢酸エチル二塩酸塩。
ＴＨＦ（２０ｍｌ）およびＥｔＯＨ（１００ｍｌ）中の２−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）（メチル）アミノ）酢酸エチル（中間体８３、３．０５ｇ、１１．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で、濃塩酸（１０ｍｌ）を添加した。室温で１時間撹拌した後、この反応混合物を蒸発させ、エタノール（２０ｍｌ）を添加し、蒸発させ、さらなるエタノール（５０ｍｌ）を添加し、次いで６０℃で７０分間撹拌した。その後、冷却した反応混合物を蒸発させて、表題化合物を淡黄色のガラス状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, br, 3H), 4.19 (q, 2H), 4.26 - 4.15 (m, 2H), 3.44 (s, br, 2H), 3.21 (s, br, 2H), 2.88 (s, 3H), 1.21 (t, 3H).
【０２４５】
中間体８３：２−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）（メチル）アミノ）酢酸エチル。
（２−（メチルアミノ）エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．０ｇ、１１．４８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４．８１ｍｌ）、およびＴＨＦ（２４ｍｌ）の混合物に、０℃で、ブロモ酢酸エチル（１．２７ｍｌ、１１．４８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２４時間撹拌した後、この反応混合物を、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液とＤＣＭとの間で分配し、ＤＣＭを用いて２回抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、蒸発させて表題化合物を透明な淡黄色の油状物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.20 (s, br, 1H), 4.18 (q, 2H), 3.24 (s, 2H), 3.22 - 3.16 (m, 2H), 2.65 - 2.61 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.24 (t, 3H).
【０２４６】
中間体４１：２−（ジメトキシメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルバルデヒド。
６−ブロモ−７−（ジメトキシメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン（中間体１２、１５．０ｇ、５２．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４００ｍｌ）中溶液に、アルゴン下−７８℃で、ＭｅＬｉ（Ｅｔ２Ｏ中１．６Ｍ、３２．６ｍｌ、５２．２ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を５分間撹拌した後、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、３５．９ｍｌ、５７．５ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、溶液を２０分間撹拌した。ＴＨＦ（１００ｍｌ）を、−７８℃でこの反応に添加した。続いて、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、４９．０ｍｌ、７８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を２０分間撹拌した後、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、６．５３ｍｌ、１０．４５ｍｍｏｌ）を再度添加し、混合物を−７８℃で１０分間撹拌した。ＤＭＦ（２．１０ｍｌ、２７．２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を−７８℃で４５分間撹拌した後、これを室温に温まるまで放置し、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液に注ぎ入れ、ＤＣＭを用いて２回抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、蒸発させて、表題化合物を橙色の油状物として得た。（ＵＰＬＣ−ＭＳ  ３）ｔＲ  ０．６３分；ＥＳＩ−ＭＳ  ２３７．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２４７】
中間体１２：６−ブロモ−７−（ジメトキシメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン。
３ｌの四ツ首丸底フラスコに、アセトニトリル（２ｌ）中の７−（ジメトキシメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン（中間体４、１１４．６ｇ、５５０．３ｍｍｏｌ）を入れた。この後、ＮＢＳ（１０３ｇ、５７８ｍｏｌ）を、２５℃で撹拌しながら少量ずつ添加した。結果として得られた溶液を、２５℃で３０分間撹拌した。結果として得られた混合物を、真空下で濃縮し、残留物を、１０００ｍｌのジエチルエーテルを用いて希釈した。この混合物を、３×１００ｍｌの氷／水を用いて洗浄した。水性相を、２×１００ｍｌのジエチルエーテルを用いて抽出し、有機層を合わせた。結果として得られた混合物を、１×１００ｍｌのブラインを用いて洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、真空下で濃縮して、表題化合物を淡黄色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：（ＥＳ，ｍ／ｚ）：２８６．０３［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR: (300MHz, CDCl3) δ 1.86 - 1.94 (2H, m), 2.70 - 2.74 (2H, m), 3.9 - 3.43 (2H, m), 3.47 (6H, s), 5.23 (1H, s), 5.58 (1H, s), 7.29 (1H, s).
【０２４８】
中間体４：７−（ジメトキシメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，８−ナフチリジン。
J. Org. Chem., 2004, 69 (6), pp 1959-1966に記載されている手順を使用した。５ｌの圧力タンク反応器（５ａｔｍ）に、２−（ジメトキシメチル）−１，８−ナフチリジン（中間体５、２００ｇ、９７９ｍｍｏｌ）、エタノール（３ｌ）、ＰｔＯ２（１２ｇ）を入れた。反応器を脱気し、窒素を３回流した後、水素を流した。混合物を、水素の雰囲気の下、２３℃で一晩撹拌した。この反応を４回繰り返した。固形物を濾過して取り出し、結果として得られた混合物を真空下で濃縮して、表題化合物を黄色の固体として得た。
【０２４９】
中間体５：２−（ジメトキシメチル）−１，８−ナフチリジン。
J. Org. Chem., 2004, 69 (6), pp 1959-1966に記載されている手順を使用した。２０ｌの四ツ首丸底フラスコに、２−アミノピリジン−３−カルバルデヒド（１０００ｇ、８．１９ｍｏｌ）、１，１−ジメトキシプロパン−２−オン（１２５７ｇ、１０．６４ｍｏｌ）、エタノール（１０ｌ）、および水（２ｌ）を入れた。この後、水酸化ナトリウム（４０９．８ｇ、１０．２４ｍｏｌ）の水（１０００ｍｌ）溶液を、０〜１５℃で撹拌しながら滴加した。この溶液を、０〜２０℃で３時間撹拌し、次いで真空下で濃縮した。結果として得られた溶液を、３×１２００ｍｌの酢酸エチルを用いて抽出し、有機層を合わせた。混合物を硫酸ナトリウムで脱水し、真空下で濃縮した。残留物を、３×３００ｍｌのヘキサンを用いて洗浄し、固形物を濾過によって収集した。これにより、表題化合物を黄色の固体として得た。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.11 (dd, 1H), 8.53 (d, 1H), 8.50 (dd, 1H), 7.73 (d, 1H), 7.67 (dd, 1H), 5.44 (s, 1H), 3.41 (s, 6H).
【０２５０】
中間体７５：６−アミノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ニコチノニトリル。
６−アミノ−４−フルオロニコチノニトリル（中間体２１、１．１０ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）のＤＭＡ（２０ｍｌ）中溶液を、２−メトキシエチルアミン（２．０７ｍｌ、２４．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４．２０ｍＬ、２４．１ｍｍｏｌ）で処理し、５０℃に加熱し、１５時間撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、濃縮した。粗製物質を、順相クロマトグラフィー（２４ｇのシリカゲルカートリッジ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  １００：０から０：１００）によって精製した。画分を含有する生成物を濃縮し、真空下で乾燥させて、表題化合物をオフホワイト色の固体として得た。
【０２５１】
６−アミノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ニコチノニトリルの代替的合成について、以下に概説する。
【０２５２】
Ｎ−｛５−シアノ−４−［（２−メトキシエチル）アミノ］ピリジン−２−イル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（中間体２８７、７ｇ）に、３０〜３６％のＨＣｌ水溶液（４０ｍｌ）を添加し、この混合物を室温で３０分間撹拌し、完全に変換するまでクロマトグラフィーでモニタリングした。次いで、この溶液を、２０〜３０％のＮａＯＨ溶液を用いて、ｐＨ＝９〜１０になるまで塩基性化し、濾過して白色の固体を得た。この固体を酢酸エチル（１５ｍｌ）に添加し、５０〜５５℃に加熱して透明な溶液を形成した。次いで、この溶液を３〜６℃に冷却し、２〜３時間撹拌し、濾過した。その後、ウェットケーキを乾燥させて、表題化合物を白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.92 (s, 1H), 6.39 (s, 2H), 6.15 (t, 1H), 5.61 (s, 1H), 3.46 (t, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.24 (q, 2H).（ＵＰＬＣ−ＭＳ  ３）ｔＲ  ０．６２；ＥＳＩ−ＭＳ  １９３．１［Ｍ＋Ｈ］＋。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.14 (d, 1H), 6.51 (d, 1H), 6.47 - 6.41 (m, 1H), 4.98 (s, 1H), 3.28 - 3.19 (m, 2H), 3.23 (s, 6H), 2.64 (t, 2H), 1.73 - 1.79 (m, 2H).
【０２５３】
中間体２１：６−アミノ−４−フルオロニコチノニトリル。
ＤＭＡ（８００ｍｌ）中の、４−フルオロ−５−ヨードピリジン−２−アミン（中間体２２、２４０ｇ、１ｍｏｌ）、シアン化亜鉛（１２５ｇ、１．０５ｍｏｌ）、亜鉛（１３ｇ、０．２ｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２５ｇ、２５ｍｍｏｌ）、およびｄｐｐｆ（５５ｇ、０．１ｍｏｌ）を脱気し、窒素下の丸底フラスコ中に装入した。この混合物を１００℃で３時間撹拌した。反応混合物を５％のＮａＨＣＯ３（２ｌ）で希釈し、ＥｔＯＡＣを用いて抽出した（４×６００ｍｌ）。合わせた有機層を５％のＮａＯＨ（１ｌ）を用いて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、７００ｍｌになるまで濃縮した。結果として得られた有機相を、ＥｔＯＡｃ（１．７ｌ）を用いてシリカゲルカラムを通して溶出させた。合わせた有機の濾液を、２ＭのＨＣｌを用いて洗浄した（３×８００ｍｌ）。水性相のｐＨを、ＮａＨＣＯ３飽和溶液を用いて１０に調整した。水性相を、ＤＣＭを用いて抽出した（３×５００ｍｌ）。合わせたＤＣＭをＮａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮した。残留物を、カラムクロマトグラフィー（ペンタン：ＥｔＯＡｃ  １０：１から３：２を用いて溶出）によってさらに精製した後、ペンタン／ＥｔＯＡｃ  ３／１から再結晶させて、表題化合物を白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.40 (d, 1H), 7.40 (s, 2H), 6.34 (d, 1H).
【０２５４】
中間体２２：４−フルオロ−５−ヨードピリジン−２−アミン。
ＭｅＣＮ（９ｌ）中の、４−フルオロピリジン−２−アミン（３３６ｇ、２．５ｍｏｌ）およびＮＩＳ（７４５ｇ、２．７５ｍｏｌ）の懸濁液を、ＴＦＡ（１１４ｇ、１ｍｏｌ）で処理した。次いで、この反応混合物を室温で８時間撹拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（１０ｌ）で希釈し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３飽和水溶液（２×５ｌ）、ブライン（４×５ｌ）を用いて洗浄した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を、ＥｔＯＡｃ／ペンタン（１／１０）から再結晶することで精製して、表題化合物を白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.14 (d, 1H), 6.45 (s, 2H), 6.33 (d, 1H).
【０２５５】
中間体２８７：（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル。
ＤＭＳＯ（８０ｍｌ）中の、（４−クロロ−５−シアノピリジン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（中間体２８８、９．８ｇ、３８．６ｍｍｏｌ）、２−メトキシエチルアミン（５．８ｇ、７７．３ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（６ｇ、４６．４ｍｍｏｌ）の混合物を、６５〜７０℃に２４時間加熱し、完全に変換するまでクロマトグラフィーでモニタリングした。次いで、この溶液を室温まで冷却すると、白色の固形物が徐々に沈殿した。その後、水（２０ｍｌ）をゆっくりと１時間以内に添加した。この懸濁液をさらに１時間撹拌し、濾過し、乾燥させて、表題化合物を白色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 9.87 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.86 (s, 9H), 3.51 (t, 2H), 3.36 (t, 2H), 3.28 (s, 3H), 1.47 (s, 9H).
【０２５６】
中間体２８８：（４−クロロ−５−シアノピリジン−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＨＦ（１５０ｍｌ）中の、２，４−ジクロロ−５−シアノピリジン（１０ｇ、５７．８ｍｍｏｌ）、カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８．２ｇ、７０．５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（０．２６ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、キサントホス（１．３４ｇ、２．３ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（１２ｇ、８７ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素を用いて３回脱気した。次いで、この混合物を、４〜５時間７０℃に加熱し、完全に変換するまでクロマトグラフィーでモニタリングした。反応の完了後、さらなるＴＨＦ（１００ｍｌ）を添加し、混合物を７０℃でさらに１時間加熱し、その後室温まで冷却した。次いで、懸濁液を、セライトのパッドを通して濾過し、固形物を取り除いた。その後、濾液を濃縮し、酢酸エチルとともに共沸蒸留した（azotropically distilled）後、濾過して表題化合物を得た。1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 10.82 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 1.49 (s, 9H).
【０２５７】
実施例８３に関するインビトロ生化学的キナーゼアッセイ
アッセイは、３８４ウェルのマイクロタイタープレートで実施した。各アッセイプレートに、試験化合物についての８点連続希釈物と、参照化合物としてのスタウロスポリンの４つの８点連続希釈物、さらに１６の高対照および１６の低対照を含有させた。
【０２５８】
液体処理およびインキュベーションステップは、ロボットアームを備えたＩｎｎｏｖａｄｙｎｅ  Ｎａｎｏｄｒｏｐ  Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｔｈｅｒｍｏ  ＣａｔＸ、Ｃａｌｉｐｅｒ  Ｔｗｉｓｔｅｒ  ＩＩ）およびインキュベータ（Ｌｉｃｏｎｉｃ  ＳＴＸ４０、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｃｙｔｏｍａｔ  ２Ｃ４５０）で行った。アッセイプレートは、ウェルあたり５０ｎｌの化合物の９０％ＤＭＳＯ溶液の添加により調製した。キナーゼ反応は、ウェルあたり４．５μｌのペプチド／ＡＴＰ−溶液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１ｍＭのＤＴＴ、０．０２％のＴｗｅｅｎ２０、０．０２％のＢＳＡ、０．６％のＤＭＳＯ、１０ｍＭのβ−グリセロリン酸、および１０μＭのオルトバナジウム酸ナトリウム、１６ｍＭのＭｇＣｌ２、１１２２μＭのＡＴＰ、４μＭのペプチド（５−Ｆｌｕｏ−Ａｈｘ−ＫＫＫＫＥＥＩＹＦＦＦＧ−ＮＨ２、Ｂｉｏｓｙｎｔａｎ  ＧｍｂＨ））と、ウェルあたり４．５μｌの酵素溶液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１ｍＭのＤＴＴ、０．０２％のＴｗｅｅｎ２０、０．０２％のＢＳＡ、０．６％のＤＭＳＯ、１０ｍＭのβ−グリセロリン酸、および１０μＭのオルトバナジウム酸ナトリウム、１６ｍＭのＭｇＣｌ２、６ｎＭのＦＧＦＲ４（ＧＳＴ−ＦＧＦＲ４（３８８−８０２）、昆虫細胞による発現および親和性クロマトグラフィーによる自家製））とを段階的に添加することによって開始した。キナーゼ反応は、３０℃で６０分間インキュベートし、続いてウェルあたり１６μｌの停止溶液（１００ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、５％のＤＭＳＯ、０．１％のＣａｌｉｐｅｒコーティング試薬、１０ｍＭのＥＤＴＡ、および０．０１５％のＢｒｉｊ３５）を添加して終了させた。終了したキナーゼ反応物を含んだプレートを、読取りのために、Ｃａｌｉｐｅｒ  ＬＣ３０００ワークステーションに移した。リン酸化および非リン酸化ペプチドは、Ｃａｌｉｐｅｒマイクロ流体モビリティーシフト技術を用いて分離した。簡潔に述べると、終了したキナーゼ反応物由来の試料をチップに適用した。分析物を、チップを通じて一定のバッファーフローにより移し、基質ペプチドの移動を、そのペプチドの標識の蛍光シグナルによって観察する。リン酸化ペプチド（生成物）および非リン酸化ペプチド（基質）は、それらの電荷／質量比により電場内で分離される。キナーゼ活性は、形成されたリン酸化ペプチドの量から算出した。ＩＣ５０値は、異なる化合物濃度での阻害パーセント値から非線形回帰分析により決定した。
【０２５９】
化合物希釈液の調製
試験化合物を、ＤＭＳＯ（１０ｍＭ）中に溶解させ、１．４ｍＬの平底または特有の２Ｄマトリックスを有するＶ字形マトリックスチューブに移した。すぐに使用しない場合は、原液を＋２℃で保存した。試験手順のために、バイアルの霜は取り除き、スキャナで特定した。このスキャナにより、後続の操作ステップを指示するワーキングシートが作成された。
【０２６０】
化合物希釈液は、９６ウェルプレートで作製した。希釈プロトコールは、「前希釈プレート」、「マスタープレート」、および「アッセイプレート」の製造を含んだ。
【０２６１】
前希釈プレート：９６ポリプロピレンウェルプレートを、前希釈プレートとして使用した。合計で４枚の前希釈プレートを準備し、これらの前希釈プレートは、それぞれの試験化合物をプレートのＡ１〜Ａ１０の位置に、１種の標準化合物をＡ１１に、および１つのＤＭＳＯ対照をＡ１２に含んだ。すべての希釈ステップは、ＨａｍｉｌｔｏｎＳＴＡＲロボットで行った。
【０２６２】
マスタープレート：４枚の「前希釈プレート」の標準化合物および対照を含む３０μＬの個々の化合物希釈物を、３８４「マスタープレート」に移した。これには、それぞれ、９０％ＤＭＳＯ中、１’８１０、３６２、７２．５、５４．６、１４．５、２．９、０．５８、および０．１２μＭの濃度が含まれた。
【０２６３】
アッセイプレート：次いで、同一の「アッセイプレート」を、「マスタープレート」の５０ｎＬの各化合物の希釈物を、３８４ウェルの「アッセイプレート」に、ＨｕｍｍｉｎｇＢｉｒｄ  ３８４−チャネルディスペンサーで分注することによって準備した。これらのプレートを、総体積９．０５μＬで実行するアッセイのために直接使用した。これにより、アッセイにおける化合物の最終濃度が１０、２．０、０．４、０．０８、０．０１６、０．００３２、０．０００６４、および０．０００１２８μＭ、ＤＭＳＯの最終濃度が０．５％となった。
【０２６４】
ＦＧＦＲ４に関するインビトロ細胞キナーゼアッセイ
細胞のＦＧＦＲ４キナーゼ活性についての読取りとして、ＦＧＦＲ４におけるチロシンリン酸化含有量を測定するアッセイを行った。このために、ＢａＦ３−Ｔｅｌ−ＦＧＦＲ４細胞株を生成した。ＢａＦ３細胞を、膜近傍（yuxtamembrane）ドメインを含むＦＧＦＲ４の細胞質ドメインに融合させた、ＴＥＬ（ａａ１−３３７）のアミノ末端部分からなる融合タンパク質をコードするレトロウイルスで、安定に形質導入した。ＴＥＬドメインの存在により、オリゴマー化による融合ＦＧＦＲ４キナーゼの構成的活性化、したがってチロシン部位での自己リン酸化が媒介される。
【０２６５】
ＭＳＤ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）−ベース捕捉ＥＬＩＳＡを展開させ、以下のように使用した：
−  細胞処理：ウェルあたり２５００００個のＢａＦ３−Ｔｅｌ−ＦＧＦＲ４細胞を、４０μＬの成長培地（１０％ウシ胎仔血清、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、２ｍＭの安定グルタミン、および１×ペニシリン−ストレプトマイシンで補充された、ＲＰＭＩ−１６４０（Ａｍｉｍｅｄカタログ番号１−４１Ｆ０１−Ｉ））中において、９６ウェル組織培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇカタログ番号３３５９）に播種した。液体処理デバイス（Ｖｅｌｏｃｉｔｙ  １１  Ｂｒａｖｏ、Ａｇｉｌｅｎｔ）を用いて、化合物の連続３倍希釈物をＤＭＳＯで調製し、成長培地で前希釈し、その後、ウェル当たり１０μＬで細胞プレートに移した。１時間、３７℃／５％のＣＯ２でインキュベートした後、５０μＬの溶解緩衝液（１５０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．５）、１ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＥＧＴＡ、１％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１０ｍＭのＮａＦ、プロテアーゼ阻害剤（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｍｉｎｉ、Ｒｏｃｈｅカタログ番号１１８３６１５３００１）およびホスファターゼで補充）阻害剤（供給業者の説明書によれば、Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ｉｎｈｉｂ  Ｉ、ＳＩＧＭＡカタログ番号Ｐ２８５０、Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ｉｎｈｉｂ  ＩＩ、ＳＩＧＭＡカタログ番号Ｐ５７２６）を添加し、３００ｒｐｍで振盪させながら、氷上で３０分間インキュベートした。次いで試料プレートを凍結し、７０℃で保存した。氷上で解凍後、試料プレートを、６℃で１５分間、１２００ｒｐｍで遠心分離した。
−  ＥＬＩＳＡアッセイ：マルチアレイ９６ウェルプレート（ＭＳＤ、カタログ番号Ｌ１５ＸＢ−３）を、室温で１時間、ＰＢＳ／Ｏで１：４００に希釈した、ウェル当たり２５μＬのマウス抗Ｈ−ＴＥＬ抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、カタログ番号ｓｃ−１６６８３５）でコーティングした。１５０μＬの３％ＭＳＤ−ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ（カタログ番号Ｒ９３ＢＡ−１）含有ＴＢＳ−Ｔ（５０ｍＭのＴｒｉｓ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０２％のＴｗｅｅｅｎ−２０）を添加後、プレートを、室温で１時間、振盪しながらインキュベートした。次いで、プレートを、ウェル当たり２００μＬのＴＢＳ−Ｔで３回洗浄した。次いで、５０μＬの細胞溶解物を、コーティングされたプレートに移し、４℃で１５時間インキュベートした後、ウェル当たり２００μＬのＴＢＳ−Ｔで３回洗浄し、ＴＢＳ−Ｔ＋１％  ＭＳＤ  Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａで１：２５０に希釈した、ＭＳＤ  ＳＵＬＦＯＴＡＧＧＥＤ  ＰＹ２０抗体（ＭＳＤカタログ番号Ｒ３２ＡＰ−５）を、ウェル当たり２５μｌ添加した。室温で１時間、振盪しながらインキュベーションした後、ウェルを、ウェル当たり２００μＬのＴＢＳ−Ｔで３回洗浄した。ナノウォーターで１：４に希釈した、ＭＳＤリードバッファー（ＭＳＤ、カタログ番号Ｒ９２ＴＣ−２）原液を１５０μＬ添加した後、電気化学発光シグナル生成を、ＳｅｃｔｏｒＩｍａｇｅｒ６０００（ＭＳＤ）ですぐに定量した。ＩＣ５０算出：データ分析においては、アッセイバックグラウンドを、培地および溶解緩衝液を含有するが細胞を含有しないウェルで決定し、相当する値を、すべてのデータ点から差し引いた。ＦＧＦＲ４リン酸化に対する特定の試験化合物の濃度の影響は、ビヒクルのみ（ＤＭＳＯ、０．２％最終濃度）で処置した細胞について得られた読取り値を１００とするバックグラウンド補正を行った電気化学発光読取り値の百分率として表す。最大半量シグナル阻害（ＩＣ５０）につながる化合物濃度は、標準４パラメータカーブフィッティング（ＸＬｆｉｔ  ５．４、ＩＤＢＳ）によって決定した。
【０２６６】
細胞増殖アッセイ
メチレンブルー染色増殖アッセイ（ＭＢＳ）：化合物の細胞増殖に対する影響は、ＪＣＲＢ細胞バンク（Japanese Collection of Research Bioresources Cell Bank、カタログ番号ＪＣＲＢ０４０３）から入手し、ベンダーが推奨する培地（ＤＭＥＭ高グルコース（Ａｍｉｍｅｄカタログ番号１−２６Ｆ０１−Ｉ）、１０％ウシ胎仔血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１６１４０−０７１）、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム（Ａｍｉｍｅｄカタログ番号５−６０Ｆ００−Ｈ）、１×ペニシリン／ストレプトマイシン（Ａｍｉｍｅｄカタログ番号４−０１Ｆ００−Ｈ））中で、３７℃、加湿した５％ＣＯ２のインキュベータにおいて培養したＨｕＨ−７肝細胞癌細胞を用いて評価する。具体的には、三重反復で、ウェル当たり５０００個の細胞を、９６ウェル組織培養プレート（ＴＰＰカタログ番号９２６９６）に、ウェル当たり１００μｌの総培地体積で播種し、化合物の漸増希釈物またはＤＭＳＯを２４時間後に添加した。化合物の添加から７２時間後、ウェル当たり２５μＬの２０％グルタルアルデヒド（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈカタログ番号Ｇ４００−４）を添加することで細胞を固定し、室温で１０分間インキュベートした。細胞を、ウェル当たり２００μＬのＨ２Ｏで３回洗浄し、ウェル当たり１００μＬの０．０５％メチレンブルー（ＡＢＣＲ  ＧｍｂＨカタログ番号ＡＢ１１７９０４）を用いて室温で１０分間染色した。細胞を、ウェル当たり２００μＬのＨ２Ｏで３回洗浄し、次いで、振盪させながら室温で３０分間、ウェル当たり２００μＬの３％ＨＣｌ（Ｆｌｕｋａカタログ番号８４４２２）を添加することによって溶解させた。光学濃度は、Ａ６５０ｎｍで測定した。ＤＭＳＯ処理細胞に対して５０％の増殖阻害率を提供した化合物の濃度を、ＸＬＦｉｔソフトウェアを用いて決定した（ＩＣ５０）。
【０２６７】
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）アッセイ：化合物の細胞増殖に対する機能効果は、ＪＣＲＢ細胞バンク（カタログ番号ＪＣＲＢ０４０３）から入手し、ベンダーが推奨する培地（ＤＭＥＭ高グルコース（Ａｍｉｍｅｄカタログ番号１−２６Ｆ０１−Ｉ）、１０％ウシ胎仔血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１６１４０−０７１）、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム（Ａｍｉｍｅｄカタログ番号５−６０Ｆ００−Ｈ）、１×ペニシリン／ストレプトマイシン（Ａｍｉｍｅｄカタログ番号４−０１Ｆ００−Ｈ））中で、３７℃、加湿した５％ＣＯ２のインキュベータにおいて培養したＨｕＨ−７肝細胞癌細胞を用いて評価する。化合物によって媒介された、細胞増殖／生存能の抑制については、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（ＣＴＧ）試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７３）を用いて、細胞のＡＴＰレベルを定量することによって評価する。簡潔に述べると、細胞を、３’０００個の細胞／ウェル／８０μＬの新鮮培地で、組織培養処理９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒカタログ番号３９０４）に播種した後、それらの最終目的濃度の５倍で化合物希釈物を含有する２０μＬの培地を添加する。用量応答作用は、１０μＭから開始する、試験化合物の３倍連続希釈物で評価する。細胞を３７℃および５％のＣＯ２において３日間インキュベートした後、細胞の生存能に対する阻害剤の影響を、ベンダーのマニュアルに従って、５０μＬのＣＴＧを添加して、蛍光測定（積分時間：５００ｍｓ）により、対応して装備されたマルチモードプレートリーダー（Ｍ２００Ｐｒｏ、ＴＥＣＡＮ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を用いて定量する。データ分析においては、培地を含有するが細胞を含有しないウェルで決定したアッセイバックグラウンド値を、すべてのデータ点から差し引いている。細胞毒性化合物と細胞増殖抑制性化合物との区別を可能にするために、生存細胞数を、別個の細胞プレートを用いて、化合物の添加時に観察された生存細胞数（０日目）と比較して評価する。細胞増殖／生存能に対する特定の試験化合物の濃度の影響は、ビヒクルのみ（ＤＭＳＯ、０．１％最終濃度）で処置した細胞について得られた読取り値を１００％として、一方では培地のみを含有するが細胞は含有しないウェルについての発光読取り値を−１００％とするバックグラウンド補正および０日目補正を行った発光読取り値の百分率として表す。最大半量成長阻害（ＧＩ５０）につながる化合物濃度は、標準４パラメータカーブフィッティング（ＸＬｆｉｔ  ５．２．、ＩＤＢＳ、ＵＫ）を用いて決定する。
【０２６８】
【表２】
2018509448.tif 000012
【実施例１】
【０２６９】
（Ｓ）および（Ｒ）の８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミンの合成は、本明細書において以下に記載されるように、ＰＣＴ国際出願第２０１５／０５０３４５号に開示されている。
【０２７０】
（Ｓ）および（Ｒ）の８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０２７１】
【化９】
2018509448.tif 000013
【０２７２】
ステップａ：ＤＩＰＥＡ（３ｍＬ）中の、６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（２００ｍｇ、０．６５２ｍｍｏｌ）およびＮ−（４−メトキシベンジル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（３５８ｍｇ、１．３０４ｍｍｏｌ）の溶液を、１３０℃で６０時間撹拌した。室温まで冷却した後、揮発性物質を減圧下で除去した。結果として得られた残留物を、ＴＦＡ（３ｍＬ）中に溶解させ、この溶液をマイクロ波反応器内において１６０℃で１時間、および１８０℃で１５分間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、結果として得られた残留物を、ＨＰＬＣ（勾配溶出  水中２５〜５０％のアセトニトリル、５ｍＭのＮＨ４ＯＨ改質剤）で精製して、８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（７３ｍｇ、０．４８２ｍｍｏｌ、ＨＲＭＳに基づいて純度８３％）を得た。この化合物を１９ｍｇ、ＨＰＬＣ（勾配溶出  水中２５〜５０％のアセトニトリル、０．１％のＴＦＡ改質剤）でさらに精製して、純粋な表題化合物（９．５ｍｇ）を得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 8.29 (dd, J=4.42, 1.39 Hz, 1 H), 7.48 (s, 1 H), 7.19-7.41 (m, 2 H), 4.06-4.26 (m, 2 H), 2.89-3.14 (m, 2 H), 2.71 (t, J=7.33 Hz, 1 H), 1.86-2.00 (m, 1 H), 1.73-1.84 (m, 1 H), 1.43-1.72 (m, 5 H), 1.27-1.42 (m, 2 H), 1.17-1.27 (m, 1 H). 19F NMR (376 MHz, メタノール-d4) δ ppm -66.45 (s).Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｆ３Ｓ（Ｍ＋Ｈ）＋のＨＲＭＳ算出値４２５．１７３５、実測値４２５．１７５３．ＩＣ５０は０．０２３μＭである。
【０２７３】
ステップｂ：上記の表題化合物のキラルＳＦＣ精製を、以下の通り実施した。カラム：ＩＤ  ２１×２５０ｍｍ、流速：毎分７５ｇ、移動相：ＣＯ２中３５％のＭｅＯＨおよび１０ｍＭのＮＨ４ＯＨ、検出：単一のエナンチオマーを得るために２７０ｎｍのＵＶ、Ｒｔ（Ｐ１）＝４．９分；ＩＣ５０は０．０１１μＭであり、Ｒｔ（Ｐ２）＝６．４分；ＩＣ５０は０．１６７μＭであり、ＩＣ５０はＳＨＰ２活性を選択的に阻害する能力を指す。阻害性は、以下のアッセイのうちのいずれか１つにおいて試験することによって裏付けた。
【０２７４】
ＳＨＰ２アロステリック阻害アッセイ
ＳＨＰ２は、ビス−チロシル−リン酸化（phorphorylated）ペプチドとそのＳｒｃ相同性２（ＳＨ２）ドメインとの結合を通じて、アロステリックに活性化される。後の活性化ステップによって、ＳＨＰ２の自己阻害性界面が放出され、それによってＳＨＰ２タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰ）が活性になり、基質認識および反応触媒作用にとって利用可能となる。ＳＨＰ２の触媒活性は、迅速な蛍光アッセイ型式において代替基質ＤｉＦＭＵＰを用いてモニタリングした。
【０２７５】
より具体的には、ホスファターゼ反応を、室温において、３８４ウェルの黒色ポリスチレンプレートの平底低フランジの非結合表面（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３５７５）で、最終的な反応体積２５μＬおよび以下のアッセイバッファー条件：６０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．２、７５ｍＭのＮａＣｌ、７５ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％のＰ−２０、５ｍＭのＤＴＴを用いて実施した。
【０２７６】
ＳＨＰ２の阻害率（濃度は、０．００３〜１００μＭで変動する）を、アッセイを用いてモニタリングし、このアッセイでは、０．５ｎＭのＳＨＰ２を、０．５μＭのペプチドＩＲＳ１＿ｐＹ１１７２（ｄＰＥＧ８）ｐＹ１２２２（配列：Ｈ２Ｎ−ＬＮ（ｐＹ）ＩＤＬＤＬＶ（ｄＰＥＧ８）ＬＳＴ（ｐＹ）ＡＳＩＮＦＱＫ−アミド）とともにインキュベートした。２５℃で３０〜６０分間インキュベートした後、代替基質ＤｉＦＭＵＰ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号Ｄ６５６７）を反応に添加し、２５℃で３０分間インキュベートした。次いで、ｂｐＶ（Ｐｈｅｎ）（Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号ＡＬＸ−２７０−２０４）の１６０μＭ溶液を５μｌ添加することによって、反応をクエンチした。蛍光シグナルを、マイクロプレートリーダー（Ｅｎｖｉｓｉｏｎ、Ｐｅｒｋｉ−Ｅｌｍｅｒ）を用いて、それぞれ３４０ｎｍおよび４５０ｎｍの励起波長および発光波長を用いてモニタリングした。阻害剤の用量応答曲線を、正規化ＩＣ５０回帰カーブフィッティングを用いて、対照をベースとする正規化で分析した。
【０２７７】
ｐ−ＥＲＫ細胞アッセイ
ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ＳｕｒｅＦｉｒｅ（商標）ホスホ−ＥＲＫ１／２キット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いるｐ−ＥＲＫ細胞アッセイ：ＫＹＳＥ−５２０細胞（ウェル当たり３０，０００個の細胞）を、９６ウェルプレート培養物中で一晩成長させ、２０、６．６、２．２、０．７４、０．２４，０．０８、０．０２７μＭの濃度のＳｈｐ２阻害剤を用いて、３７℃で２時間処理した。インキュベーションを、ＳｕｒｅＦｉｒｅホスホ−細胞外シグナル制御キナーゼ（ｐＥＲＫ）アッセイキット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）で供給された溶解緩衝液（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を３０μＬ添加することによって終了させた。試料を、製造業者の指示に従って処理した。ｐＥＲＫからの蛍光シグナルを、２１０１マルチラベルリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎ）を用いて二重に測定した。阻害百分率を、全ＥＲＫシグナルによって正規化し、ＤＭＳＯビヒクル対照と比較した。
【０２７８】
コロニー形成アッセイおよび細胞増殖アッセイ
ＫＹＳＥ−５２０細胞（ウェル当たり１５００個の細胞）を、２４ウェルプレートの培地３００μＬ（１０％のＦＢＳを含有するＲＰＭＩ−１６４０、Ｌｏｎｚａ）に蒔いた。薬物処置では、様々な濃度（２０、１０、５、２．５、１．２５μＭ）の本発明の化合物を、細胞を蒔いてから２４時間後および５日後に添加した。１１日目に、コロニーを、０．２％クリスタルバイオレット（ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ）で染色し、続いて、Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて定量化するために、２０％酢酸に溶解させた。細胞増殖アッセイにおいて、細胞（ウェル当たり１５００個の細胞）を、９６ウェルプレートの培地１００μＬ（１０％のＦＢＳを含有するＲＰＭＩ−１６４０、Ｌｏｎｚａ）に蒔いた。６日目に、Ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）５０μＬを添加し、発光シグナルを、供給業者の説明書（Ｐｒｏｍｅｇａ）に従って決定した。
【０２７９】
中間体１
６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン
【０２８０】
【化１０】
2018509448.tif 000014
【０２８１】
ステップａ：ジオキサン（１２ｍＬ）中の、３−ブロモ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（１．０ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）、キサントホス（２５６ｍｇ、０．４４２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２０３ｍｇ、０．２２１ｍｍｏｌ）の溶液に、（室温およびＮ２下において）３−メルカプトプロピオン酸２−エチルヘキシル（１．１ｍＬ、４．８７ｍｍｏｌ）を添加し、その後ＤＩＰＥＡ（１．５５ｍＬ、８．８５ｍｍｏｌ）を添加した。結果として得られた溶液を、マイクロ波反応器内において１１０℃で１時間撹拌した。室温まで冷却した後、この反応を、セライトのパッドを通して濾過し、その後ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、結果として得られた残留物を、シリカクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタンの０〜３０％の勾配）によって精製して、３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）プロピオン酸２−エチルヘキシル（１．４１ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６４．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８２】
ステップｂ：３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）プロピオン酸２−エチルヘキシル（１．０ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍＬ）中溶液に、−７８℃およびＮ２下において、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ、８．２５ｍＬ、８．２５ｍｍｏｌ）を添加した。−７８℃で２０分間激しく撹拌した後、この反応を、Ｋ２ＣＯ３水溶液（２Ｍ、５００μＬ）を用いてクエンチし、揮発性物質を減圧下で除去した。結果として得られた残留物を、Ｋ２ＣＯ３水溶液（２Ｍ、３０ｍＬ）の入った分液漏斗に注ぎ入れ、それをＥｔ２Ｏで抽出した（２×２０ｍＬ）。水性相を、ｐＨが４になるまで６ＭのＨＣｌを用いて酸性化し、結果として得られた濁った懸濁液を、ＣＨＣｌ３：ＩＰＡ（９：１、３×２０ｍＬ）を用いて抽出して、２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−チオール（３８０ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １８０．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８３】
ステップｃ：ジオキサン（２ｍＬ）中の、２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−チオール（２８５ｍｇ、１．５９１ｍｍｏｌ）、３−ブロモ−６−クロロピラジン−２−アミン（４１４ｍｇ、１．９８８ｍｍｏｌ）、キサントホス（１０１ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）、およびＰｄ２（ｄｂａ）３（７２．８ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、（室温およびＮ２下において）ＤＩＰＥＡ（５５６μＬ、３．１８ｍｍｏｌ）を添加した。結果として得られた溶液を、マイクロ波反応器内において１３０℃で１．５時間撹拌した。室温まで冷却した後、この反応を、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、これを、セライトのパッドを通して濾過し、その後ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、結果として得られた残留物を、シリカクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタンの０〜３０％の勾配）によって精製して、６−クロロ−３−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−アミン（１．４１ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.64 (dd, J=4.55, 1.26 Hz, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.82 (dd, J=8.08, 0.76 Hz, 1 H), 7.46 (dd, J=8.08, 4.80 Hz, 1 H); 19F NMR (376 MHz, クロロホルム-d) δ ppm -64.34 (s, 1 F).ＭＳ  ｍ／ｚ  ３０７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８４】
中間体７
Ｎ−（４−メトキシベンジル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン
【０２８５】
【化１１】
2018509448.tif 000015
【０２８６】
ステップａ：ＤＣＥ（７ｍＬ）中の、１−オキソ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．８ｇ、７．１１ｍｍｏｌ）および（４−メトキシフェニル）メタンアミン（１．０７ｇ、７．８２ｍｍｏｌ）の溶液に、シアノ水素化ほう素ナトリウム（２．２３ｇ、３５．５ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、室温で６５時間撹拌した。この混合物を、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃを用いて抽出した（３×２０ｍＬ）。合わせた有機相を、ブラインを用いて洗浄し、濃縮した。結果として得られた残留物を、シリカクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭの０〜２％の勾配、０．２５％のＥｔ３Ｎ改質、その後ＥｔＯＡｃ／ヘプタンの０〜５０％の勾配）によって精製して、１−（（４−メトキシベンジル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．１ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）を無色のワックスとして得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３７５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８７】
ステップｂ：ＤＣＭ（２ｍＬ）中の、１−（（４−メトキシベンジル）アミノ）−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．１ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）の溶液を、０℃で１５分間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去した。結果として得られた残留物を、ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃを用いて抽出して（４×１０ｍＬ）、Ｎ−（４−メトキシベンジル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（０．８ｇ、２．９２ｍｍｏｌ）を無色の油状物として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ２７５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【実施例２】
【０２８８】
本発明の組合せによる治療後の、肝細胞癌細胞株ＨＵＨ７の細胞成長阻害率および相乗作用の評価
細胞増殖アッセイ：ヒト肝細胞癌細胞株ＨＵＨ７は、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）から購入した。これらの細胞を、１０％ウシ胎仔血清（ＧＩＢＣＯ、カタログ番号Ｆ４１３５）で補充された、ＲＰＭＩ−１６４０成長培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号２０−２００１）で、加湿した５％ＣＯ２のインキュベータにおいて３７℃で培養した。７日間の細胞増殖アッセイの場合、ＨＵＨ７細胞を、ウェル当たり１５００個の細胞密度で、組織培養処理９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３９０４）に播種し、加湿した５％ＣＯ２のインキュベータにおいて３７℃で一晩結合させた。７日間の用量マトリックス組合せ研究の場合、単剤として、あるいは組合せで、チェッカーボード的フォーマットで、細胞を、以下の薬剤のペアの連続希釈物に対して暴露した：ＣＰｉ＋ＣＰｉｉ−ａ、ＣＰｉ＋ＣＰｉｉ−ｂ、ＣＰｉ＋ＣＰｉｉ−ｄ、またはＣＰｉ＋ＣＰｉｉ−ｅ。７日間の治療の後、細胞成長を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７２）を用いて、製造業者の説明書で推奨されているように、ＡＴＰレベルを測定することによって分析した。
【０２８９】
３日間のマトリックス組合せ研究の場合、ＨＵＨ７細胞を、ウェル当たり５００個の細胞密度で、組織培養処理３８４ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒカタログ番号３７０７）に播種し、加湿した５％ＣＯ２のインキュベータにおいて３７℃で一晩結合させた。次いで、単剤として、あるいは組合せで、チェッカーボード的フォーマットを用いて、細胞を、ＣＰｉおよびＣＰｉｉ−ｆの連続希釈物に対して暴露した。３日間の治療の後、細胞成長を、ＣＴＧをウェルに添加する前に水中で１：１に前希釈したことを除いて、上記のように、ＡＴＰレベルを測定することによって分析した。組合せ活性は、オーダーメードのソフトウェアを用いて、Ｌｏｅｗｅ加算性モデルに従って決定した（組合せ分析モジュール）。簡潔に述べると、濃度マトリックスにおける２種の化合物の各組合せについて、組合せ効果は、測定された阻害率と、Ｌｏｅｗｅ加算性モデルによる阻害率との間の差異として算出される。組合せインデックス（ＣＩ）は、以下の等式から導出される：
【０２９０】
【数１】
2018509448.tif 000016
【０２９１】
式中、
−  Ｃ（Ａ）およびＣ（Ｂ）は、組み合わさって阻害率５０％をもたらす、薬物ＡおよびＢの濃度であり、
−  ＥＣ５０（Ａ）およびＥＣ５０（Ｂ）は、個別に阻害率５０％をもたらす、薬物ＡおよびＢの濃度である。
【０２９２】
ＣＩの値は、相乗作用（ＣＩ＜１）、相加効果（ＣＩ＝１）、および拮抗作用（ＣＩ＞１）について、定量的に定義するものである。
【０２９３】
ＣＰｉとＣＰｉｉ−ｅとの間の組合せ活性を評価するために、フローサイトメトリーを使用した。ＨＵＨ７細胞を、二重ウェルで、ウェル当たり１５００個の細胞密度で、組織培養処理９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３９０４）に播種し、加湿した５％ＣＯ２のインキュベータにおいて３７℃で一晩結合させた。次いで、細胞を以下の薬物治療に対して暴露した：ＣＰｉの濃度範囲、ＣＰｉｉ−ｅの濃度範囲、およびこれら２種の薬剤の、濃度範囲マトリックス全体における組合せ。７日間の治療の後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、次いで、トリプシン処理した細胞を、最終体積が２００μｌになるように、低結合丸底９６ウェルプレートに移した。製造業者の説明書に従って、細胞を、最終濃度１０μＭのＳｙｔｏｘ溶液（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓカタログ番号Ｓ７０２０）で標識した。ＦｌｏＪｏソフトウェアを用いて、分析を完了させた。組合せ活性を、上記のように算出した。
【０２９４】
結果：
図１は、ある濃度範囲の３−（２，６−ジクロロ−３，５−ジメトキシ−フェニル）−１−｛６−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−ピリミジン−４−イル｝−１−メチル−尿素の一リン酸塩（ここではＣＰｉｉ−ａと略す）およびＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ここではＣＰｉと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率を図示している。成長阻害パーセント（組合せデータのヒートマップ）、および広い濃度マトリックスにまたがる、２種の薬剤のチェッカーボード的組合せ（checkerboard combination）に関する相乗作用の評価（Ｌｏｅｗｅ過剰ヒートマップ）、または５０％成長阻害濃度（Ｌｏｅｗｅアイソボログラム）が示されている。０．３２７の組合せインデックスを伴う治療の７日後に、相乗的組合せ活性が、ＣＰｉおよびＣＰｉｉ−ａによる濃度マトリックスの全体で観察される。
【０２９５】
図２は、ある濃度範囲の（Ｒ）−８−（６−アミノ−５−（（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）チオ）ピラジン−２−イル）−８−アザスピロ［４．５］デカン−１−アミン（ここではＣＰｉｉ−ｂと略す）およびＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ここではＣＰｉと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率を図示している。成長阻害パーセント（組合せデータのヒートマップ）、および広い濃度マトリックスにまたがる、２種の薬剤のチェッカーボード的組合せに関する相乗作用の評価（Ｌｏｅｗｅ過剰ヒートマップ）、または５０％成長阻害濃度（Ｌｏｅｗｅアイソボログラム）が示されている。０．３６３の組合せインデックスを伴う治療の７日後に、相乗的組合せ活性が、ＣＰｉおよびＣＰｉｉ−ｂによる濃度マトリックスの全体で観察される。
【０２９６】
図３は、ある濃度範囲の７−シクロペンチル−２−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−カルボン酸ジメチルアミドのコハク酸塩（ここではＣＰｉｉ−ｄと略す）およびＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ここではＣＰｉと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率を図示している。成長阻害パーセント（組合せデータのヒートマップ）、および広い濃度マトリックスにまたがる、２種の薬剤のチェッカーボード的組合せに関する相乗作用の評価（Ｌｏｅｗｅ過剰ヒートマップ）、または５０％成長阻害濃度（Ｌｏｅｗｅアイソボログラム）が示されている。０．７２９の組合せインデックスを伴う治療の７日後に、相乗的組合せ活性が、ＣＰｉｉ−ｄおよびＣＰｉによる濃度マトリックスの全体で観察される。
【０２９７】
図４は、ある濃度範囲の（Ｓ）−Ｎ１−（４−メチル−５−（２−（１，１，１−トリフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）ピリジン−４−イル）チアゾール−２−イル）ピロリジン−１，２−ジカルボキサミド（ここではＣＰｉｉ−ｅと略す）およびＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ここではＣＰｉと略す）で治療した場合の、治療の７日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率を図示している。成長阻害パーセント（組合せデータのヒートマップ）、および広い濃度マトリックスにまたがる、２種の薬剤のチェッカーボード的組合せに関する相乗作用の評価（Ｌｏｅｗｅ過剰ヒートマップ）、または５０％成長阻害濃度（Ｌｏｅｗｅアイソボログラム）が示されている。０．３８５の組合せインデックスを伴う治療の７日後に、相乗的組合せ活性が、ＣＰｉおよびＣＰｉｉ−ｅによる濃度マトリックスの全体で観察される。
【０２９８】
図５は、ある濃度範囲の４−（トリフルオロメチル）−５−（２，６−ジモルホリノピリミジン−４−イル）ピリジン−２−アミンの塩酸塩（ここではＣＰｉｉ−ｆと略す）およびＮ−（５−シアノ−４−（（２−メトキシエチル）アミノ）ピリジン−２−イル）−７−ホルミル−６−（（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）メチル）−３，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１（２Ｈ）−カルボキサミド（ここではＣＰｉと略す）で治療した場合の、治療の３日後のＨＵＨ７細胞の成長阻害率を図示している。成長阻害パーセント（組合せデータのヒートマップ）、および広い濃度マトリックスにまたがる、２種の薬剤のチェッカーボード的組合せに関する相乗作用の評価（Ｌｏｅｗｅ過剰ヒートマップ）、または５０％成長阻害濃度（Ｌｏｅｗｅアイソボログラム）が示されている。０．５２４の組合せインデックスを伴う治療の３日後に、相乗的組合せ活性が、ＣＰｉｉ−ｆおよびＣＰｉによる濃度マトリックスの全体で観察される。
【０２９９】
結論：要約すると、ＣＰｉをＣＰｉｉ−ａ、ＣＰｉｉ−ｂ、ＣＰｉｉ−ｄ、ＣＰｉｉ−ｅ、またはＣＰｉｉ−ｆと組み合わせた場合、インビトロ細胞増殖アッセイにおいて、相乗的組合せ活性が観察された。
【図１ａ】
2018509448.tif 000017
【図１ｂ】
2018509448.tif 000018
【図１ｃ】
2018509448.tif 000019
【図２ａ】
2018509448.tif 000020
【図２ｂ】
2018509448.tif 000021
【図２ｃ】
2018509448.tif 000022
【図３ａ】
2018509448.tif 000023
【図３ｂ】
2018509448.tif 000024
【図３ｃ】
2018509448.tif 000025
【図４ａ】
2018509448.tif 000026
【図４ｂ】
2018509448.tif 000027
【図４ｃ】
2018509448.tif 000028
【図５ａ】
2018509448.tif 000029
【図５ｂ】
2018509448.tif 000030
【図５ｃ】
2018509448.tif 000031
【国際調査報告】
2018509448.tif 000032
2018509448.tif 000033
2018509448.tif 000034
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