(57)【要約】  本発明の目的は、薄板（１）の堆積表面（４）上で、生体細胞（１０）の層を生成させるための装置であって、前記装置は、導管（１４）を装備する本体を備え、前記本体は、生体液体（５）を含む容器（２）の内部に進入するようにされプラグ（６）により閉じられる入力先端（１２）を形成する第１の端部（１８）と、堆積表面（４）の上で液体小滴を堆積させるようにされている堆積先端（１５）を形成する第２の端部（１７）と、を備え、前記第２の端部（１７）は、堆積表面（４）の平面（２４）と傾斜角αを形成する平面（２８）に調製される薄層（２２）を備える分散化手段（２０）と、薄板と前記第２の端部の間に挿入される弾性回復手段２１と、を備えている。【選択図】図３
2018509626.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
薄板（１）の堆積表面（４）上で生体細胞（１０）の層を生成するための装置であって、前記装置は、導管（１４）を装備する本体（１１）を備え、前記本体は、生体液体（５）を含みプラグ（６）により閉じられる容器（２）の、内部に挿入することを目的とする、入力先端（１２）を形成する第１の端部（１８）と、前記生体液（３）の小滴を堆積表面（４）上に堆積させるように設計される、堆積先端（１５）を形成する第２の端部（１７）と、を備え、
前記第２の端部（１７）は、堆積表面（４）に対して支持することを意図する担体手段（２３）と、液体小滴を拡散させて生体細胞層を生成するための分散化手段（２０）と、を備え、
前記分散化手段（２０）は、堆積表面（４）の平面（２４）と傾斜角Ａを形成する平面（２８）に調製される薄層（２２）と、薄板と前記第２の端部（１７）との間に挿入される弾性回復手段（２１）と、を含むことを特徴とする、生体細胞（１０）の層を生成するための装置。
【請求項２】
請求項１に記載の生体細胞（１０）の層を生成するための装置であって、前記分散化手段（２０）は、実質的に矩形形態を有する薄層（２２）を含み、前記薄層は、弾性回復手段（２１）により第２の端部（１７）に接続される第１端（２７）と、距離ｈ２だけ担体手段（２３）の平面（２４）とは離れる第２端（２６）と、を備え距離ｈ２と弾性回復手段（２１）とは、生体液小滴を確実に制御分散化させて生体細胞の層を生成するように、共に協力し合うことを特徴とする、生体細胞（１０）の層を生成するための装置。
【請求項３】
請求項１または２に記載の生体細胞（１０）の層を生成するための装置であって、前記堆積先端（１５）は、堆積表面（４）上で堆積させるための生体液の量を決定して画定された、距離ｈ１を示す担体手段（２３）により区切られるように、平面（２４）との間隔が置かれることを特徴とする、生体細胞（１０）の層を生成するための装置。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の生体細胞（１０）の層を生成するための装置であって、第２端（２６）の形態は、堆積表面（４）の形状に適応されるように構成されることを特徴とする、生体細胞（１０）の層を生成するための装置。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の生体細胞（１０）の層を生成するための装置であって、本体（１１）は、容器プラグ（６）の区域（７）に対し、支援台に対して適用させるように設計された担体表面（１３）を含んでいることを特徴とする、生体細胞（１０）の層を生成するための装置。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の生体細胞（１０）の層を生成するための装置であって、入口先端（１２）は、前記容器のプラグ（６）設けるように設計された斜切端を与えることを特徴とする、生体細胞（１０）の層を生成するための装置。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の生体細胞（１０）の層を生成するための装置であって、堆積表面（４）上で堆積先端（１５）により保管される際に液体小滴（３）との接触を防止するよう、前記担体手段（２３）及び分散化手段（２０）は、堆積先端（１５）に応じて配置されることを特徴とする、生体細胞（１０）の層を生成するための装置。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の生体細胞（１０）の層を生成するための装置であって、前記担体手段（２３）が、ウィンドウＦを装備する端を含んでいることを特徴とする、生体細胞（１０）の層を生成するための装置。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の生体細胞（１０）の層を生成するための装置を用いた、生体細胞層を自動生成するための装置（１００）であって、
前記装置は、以下：
−堆積表面（４）を備えた薄板（１）を受けるように設計された支持ユニット（１０２）；
−生体液の小滴を生体液体（２）を含む容器から採取することと、制御方法により生体液の前記小滴を拡散して生体細胞の微細層を実現することとを行う、生成装置（１０）の実施手段を含む生成ユニット（１１０）；
−堆積表面（４）上での液体小滴の存在をモニタする手段；および、
−供給装置の抽出手段、
を含む、生体細胞層を自動生成するための装置。
【請求項１０】
請求項９に記載の生体細胞層を自動生成するための装置（１００）であって、生成ユニット（１１０）は、生体液体（２）を受け取る対象となる固定取付け具（１０４）を含んでおり、前記固定取付け具（１０４）は、一方では垂直方向Ｚに従って可動であり、他方では軸（１１２）のまわりに回転されるように設置されたトレイ（１０７）によって輸送されることを特徴とする、生体細胞層を自動生成するための装置。
【請求項１１】
請求項９または１０に記載の生体細胞層を自動生成するための装置（１００）であって、血液小滴の存在を管理する手段は、発光部と、光受容部とを含んでいることを特徴とする、生体細胞層を自動生成するための装置。
【請求項１２】
請求項９〜１１のいずれか１項に記載の生体細胞層を自動生成するための装置（１００）であって、装置（１０）への導入を可能にする開口（１０６）を含んでいることを特徴とする、体細胞層を自動生成するための装置。
【請求項１３】
請求項９〜１２のいずれか１項に記載の生体細胞層を自動生成するための装置（１００）であって、薄板（１）の配置または停滞される位置と、薄板が生成ユニット（１１０）内に配置される位置との間で、支持ユニット（１０２）を移動するための、水平方向に従った転移における移動手段を含んでいることを特徴とする、生体細胞層を自動生成するための装置。
【請求項１４】
生体細胞層の生成のための方法であって、血液細胞を含み、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の生体細胞層を自動生成するための装置（１００）を実施するものであり、
前記プロセスは、以下の段階：
−上に向いた堆積表面（４）を備えた薄板（１）を、担体ユニット（１０２）に適所に配置させる；
−上に向いた容器のプラグ（６）を有する固定取付け具（１０４）上で、生体液体（２）を含んだ容器を定着させる；
−入口先端（１２）がプラグ（６）に向き合う開口（１０６）内に、生成装置（１０）を定着させる；
−容器（２）の入口先端（１２）を導入するために、前記容器（２）を生成装置（１０）の方向に垂直に移動させる；
−堆積先端（１５）が、薄板の堆積表面（４）に向けられるように、前記容器（２）及び前記生成装置（１０）を配置させる；
−堆積先端（１５）のレベルで生体液の小滴（３）を外へ作製するために容器（２）の内部を圧縮しながら、堆積表面（４）に対して担体手段（２３）を接触させ、担体表面（１３）に対してプラグ（６）を適用するため、薄板（１）の堆積表面（４）の方向に前記容器（２）を垂直に移動させて、前記小滴が表面張力の効果で堆積先端（１５）から分離され堆積表面（４）上に堆積されるようにする；
−生体液の小滴を制御方法で拡散して生体細胞の微細層を実現するために、水平方向に従って薄板を移動させて、分散化手段（２０）と堆積表面（４）との間での相対移動を実現させる、
を備えていることを特徴とする、生体細胞層の生成のための方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の生体細胞の層の生成のための方法であって、プロセスは、小滴を広げるために薄板を移動する前に、現存の制御手段により有機液体の小滴の存在を検出する付加的な段階を含んでいることを特徴とする、生体細胞層の生成のための方法。
【請求項１６】
請求項１４または１５に記載の生体細胞の層の生成のための方法であって、プロセスは、薄板堆積表面（４）上に小滴（３）を堆積させる前に、容器（２）を撹拌して生体液を均質化する付加的な段階を含んでいることを特徴とする、生体細胞の層の生成のための方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体液の小滴から顕微鏡薄板上に生体細胞層を生成するための装置に関する。
また、本発明は、この装置を用いた生体細胞層の自動生成装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明の範囲において、語「生体液」とは、血等の細胞や骨髄を含有する細胞内液または生物学的製剤を意味し、語「細胞」とは、同様に、赤血球、白血球および血小板をはじめとする生体液中に存在するその他全ての細胞型である最も伝統的な細胞を意味する。
【０００３】
この液体をその後顕微鏡で検査するために、生体液体を用いて薄板上に層を作り出すことが、周知である。この技術は、たとえば血液で細胞を観察し識別することを実現する。
層の品質は、たとえば自動血液細胞差動分析器のためには重要であり、この層が均一・微細でない場合に、その精度が影響されることがある。この血液細胞の層は、血液塗抹という名前でも知られている。
【０００４】
血液塗抹の業績は、しばしば、少量の血をチューブ内に採取する手動操作であり、その後、水平に一面上に設置した第１の薄板ガラス上の、容積が約５ｍｍ３の小滴を、除去する。その後、第２の薄板が、約３０°傾斜し、端部が小滴と接触するまで前進する。血液の小滴は、毛細管力によって端部に沿って広げられる。赤血球、白血球及び血小板から成る血液細胞の血球を生成する目的で、第１の薄板の表面上に血液を散布するために、スライド薄板を用いる。その後、血液細胞の層を乾燥させた後、少なくとも１つの適切な試薬により着色して、以降の顕微鏡下で細胞の解析を可能にする。この解析により、所定の病理学の診断に不可欠な、対象の血液サンプルの組成物を判断することが、特に可能となる。
【０００５】
従って、この血液塗抹は、検鏡で集中されるべき単層内に配置される細胞区域を含んでいるだろう。単層領域がさらに拡張され、細胞を検査することがさらに可能であり、従って、検鏡は質がさらに向上する。
【０００６】
この血液分散のマニュアル作成は、特に、血液の拡張に関して様々な問題を引き起こし、血液中に存在する細胞の量に関わらず、細胞が薄板上に均一に分配されるためには、完全に制御される必要がある。従って、このような操作は、血液塗抹、すなわち、細胞を重畳することなく薄過ぎずまたは厚過ぎない均一な細胞層、を実現できるようしっかりと育成された検査技師または生物学者を、しばしば必要とする。
さらに、再現性は重要である。
【０００７】
また、この手動操作は、操作者に対して血液との接触のリスクを示している。
【０００８】
他の問題としては、比較的脆弱なガラスの薄板を取り扱うことに関している。
【０００９】
採血及び薄板上の小滴形成における段階を単純化し、血液による操作者の汚染リスクを縮小するため、米国特許第５７１４１２４号明細書（特許文献１）及び米国特許第５１６３５８３号明細書（特許文献２）では、サンプリング装置及び経路チャネルを備えた薄板上での血液小滴の分配を記載し、チャネルの一端部は、血液チューブのプラグを穿孔するための空孔手段を装備し、もう一方の端部は、分配先端を形成して小滴を除去する。この穿孔作業は、垂直配置される血液チューブおよび上位置開口で、操作者によりマニュアルで行われる。その後、チューブを復帰させる。小滴を除去するため、操作者は、チューブ内に圧力を適用させる必要がある。装置は、プラグを支持する架台を有している。後者は、柔軟材物質中に成立し、圧力下で血液チューブの内部を変形させて穿ち、管から血液が出てくることを強制して、小滴をチューブの出口端部で生成する。大きくなった小滴が表面上に落下して薄板上に置かれれば、操作者は、圧力を停止する。
【００１０】
たとえこの装置が採血を容易に出来るようにしたとしても、血液の小滴の形成を制御することは困難である。
【００１１】
血液小滴の形成の制御に対してのこの問題の修復を試みるため、米国特許第５３４４６６６号明細書（特許文献３）、米国特許第５６９７５２２号明細書（特許文献４）及び米国特許出願公開第２０１３／０２２８５９６号明細書（特許文献５）は、サンプリング装置、および、供給本体からなる血液小滴の顕微鏡薄板上への供給を記載し、この血液小滴の供給本体は、導管、穿孔手段を有する一つの端部、および供給先端及び担体表面を含む反対側端部を含んでいる。操作者は、血液のチューブから開口に穿孔手段を導入し、全体を復帰させて、担体表面と接触して、薄板の除去のための表面に接触するようする。操作者は、供給先に血液の小滴を作製するため、支持面に応じて、チューブに力を加える。供給血液の量は、供給の先端と担体表面で定められた面との距離により決定される。
【００１２】
また、米国特許第５８０１０６２号明細書（特許文献６）は、導管を備えた血液収集システムを記載し、導管の一方の端部は、容器内に血液を採取するための針部を備え、反対の端部は、薄板上の血液小滴のための供給先端と、血液小滴を広げるために用いられる拡張手段とを含んでいる。しかしながら、この拡張手段は、供給の先端の周壁を介して一体に接続され、隔壁に直交するように調製された、薄板の形態である。従って、血液小滴を採取した際に、操作者は、装置を水平に配置して、薄板を用いて血液を広げるようにする必要がある。従って、拡散は操作者により主導で行われ、層の均一性を含む拡張の質を調査することは可能ではない。
【００１３】
他の重要な不利益に従い、これら全ての前記装置において、操作者は、分散装置を手動で取得する必要があり、これは、ユーザーのための汚染のリスクを制限できるものではない。さらに、穿孔手段は一般に、金属針により形成され、これは顕著なリスクを操作者に示す。
【００１４】
米国特許第４１５１９１５号明細書（特許文献７）は、血液小滴の分散化を自動化できるようにする装置を提案する。しかしながら、この装置は、血液を回収することおよび薄板上の小滴を除去することを可能とする手段を含んでいない。操作者は、装置が行う分散化段階への前に、この段階を行う必要がある。
【００１５】
また、本発明は、液体の小滴を正確に堆積すること、および、小滴の拡散を制御することを、可能にする装置を提案することにより、先行技術の不利な点を修復しようと試みる。また、本発明は、血液塗抹の生成の全てのステージにおける自動化を可能にする装置を提案する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１６】
【特許文献１】米国特許第５７１４１２４号明細書
【特許文献２】米国特許第５１６３５８３号明細書
【特許文献３】米国特許第５３４４６６６号明細書
【特許文献４】米国特許第５６９７５２２号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２０１３／０２２８５９６号明細書
【特許文献６】米国特許第５８０１０６２号明細書
【特許文献７】米国特許第４１５１９１５号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
このため、本発明は、薄板を堆積した表面上に生体細胞層を生成させる装置に関することを目的とし、
前記装置は、導管を装備した本体を備え、
前記本体は、生体液体を含んだ容器の内部に浸透することを目的とし、栓により閉じられる、入口のピークを形成する第１の端部と、堆積表面上に前記生体液の小滴を堆積させることを目的として、堆積の先端を形成する第２の端部と、を備え、
前記第２の端部は、堆積表面に対する支点となることを目的とした担体手段と、液体の小滴を拡散して生体細胞の層を生成する分散化手段とを含み、
前記装置は、拡張の前記手段が、堆積表面に傾斜角αを形成する面に調製した小薄片、および、薄板と前記第２の端部との間に挿入される弾性回復手段を含んでいることが、特徴である。
【００１８】
また、本発明は、上記に画定した生成装置を用いた、生体細胞層の自動生成の装置に関し、前記装置は、以下を含んでいる：
−堆積表面を備えた薄板を受けるように設計された支持ユニット；
−生体液の小滴を生体液体を含む容器から採取することと、制御方法により生体液の前記小滴を拡散して生体細胞の微細層を実現することとを行う、生成装置の実施手段を含む生成ユニット；
−堆積表面上での液体小滴の存在をモニタする手段；および、
−供給装置の抽出手段。
【００１９】
また、本発明は、この生体細胞層自動生成装置を実現するプロセスに関し、前記プロセスは、以下段階を含む：
−上に向いた堆積表面を備えた薄板を、担体ユニットに適所に配置させる；
−上に向いた容器の栓を有する取付け器具上で、生体液体を含んだ容器を定着させる；
−入口の先端がプラグに向き合う開口内に、生成装置を定着させる；
−容器の入口先端を導入するために、前記容器を生成装置の方向に垂直に移動させる；
−堆積先端が、薄板の堆積表面に向けられるように、前記容器及び前記生成装置を配置させる；
−堆積先端のレベルで生体液の小滴を外へ作製するために容器の内部を圧縮しながら、堆積表面に対して担体手段を接触させ、担体表面に対してプラグを適用するため、薄板の堆積表面の方向に前記容器を垂直に移動させて、前記小滴が表面張力の効果で堆積先端から分離され堆積表面上に堆積されるようにする；
−生体液の小滴を制御方法で拡散して生体細胞の微細層を実現するために、水平方向に従って薄板を移動させて、分散化手段と堆積表面との間での相対移動を実現させる。
【００２０】
有利な業績の形態に従い、プロセスは、小滴を広げるために薄板を移動する前に、現存の制御手段により有機液体の小滴の存在を検出する付加的な段階を含んでいる。
【００２１】
好ましくは、プロセスは、薄板堆積の表面上に小滴を堆積させる前に、容器を撹拌して生体液を均質化する付加的な段階を含んでいる。
【００２２】
本発明の他の特性及び利点は、付加図面に関連して非限定的な例として与えられる本発明の現実化の親和性モードから明らかな、以下記載を含む：
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】本発明に従った生体細胞層生成の堆積装置の概略斜視図である。
【図２Ａ】図１の堆積装置の正面図である。
【図２Ｂ】ＡＡ軸に沿った図２Ａの断面図である。
【図３】薄板堆積表面上での血液小滴の形成において、装置内に位置する血液のチューブを示す図２Ｂの堆積装置の図である。
【図４Ａ】血液塗抹生成の異なったステージにおける図３の堆積装置の先端を表す図である。
【図４Ｂ】血液塗抹生成の異なったステージにおける図３の堆積装置の先端を表す図である。
【図４Ｃ】血液塗抹生成の異なったステージにおける図３の堆積装置の先端を表す図である。
【図５Ａ】図３の堆積装置の変異形態の一部の特徴の概略図である。
【図５Ｂ】図５Ａの上面図である。
【図６Ａ】血液塗抹生成の異なったステージにおける、前記図の生成装置を用いた自動生成装置の概略斜視図である。
【図６Ｂ】血液塗抹生成の異なったステージにおける、前記図の生成装置を用いた自動生成装置の概略斜視図である。
【図６Ｃ】血液塗抹生成の異なったステージにおける、前記図の生成装置を用いた自動生成装置の概略斜視図である。
【図６Ｄ】血液塗抹生成の異なったステージにおける、前記図の生成装置を用いた自動生成装置の概略斜視図である。
【図６Ｅ】血液塗抹生成の異なったステージにおける、前記図の生成装置を用いた自動生成装置の概略斜視図である。
【図６Ｆ】血液塗抹生成の異なったステージにおける、前記図の生成装置を用いた自動生成装置の概略斜視図である。
【図６Ｇ】血液塗抹生成の異なったステージにおける、前記図の生成装置を用いた自動生成装置の概略斜視図である。
【図６Ｈ】血液塗抹生成の異なったステージにおける、前記図の生成装置を用いた自動生成装置の概略斜視図である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
図１及び２は、本発明に従って生体細胞層を調製する装置１０を示している。この装置１０は、血液細胞層を調製することに特に適している。
【００２５】
従来の方法において、図３に示すように、生体液または血液５は、プラグ６により閉められる容器２の内部に含まれている。容器は概して、チューブ２であり、プラグ６はエラストマー型の柔軟材物質である。
【００２６】
装置１０は、垂直方向に延在する本体１１を備えている。
【００２７】
実際の記載において、重力Ｇは垂直方向に平行に作用し、この重力Ｇは上下に作用することを相当する。
【００２８】
主要部１１は、第１の端部１８と第２の端部１７との間に延在する導管１４により形成される通路を装備している。
【００２９】
第１の端部１８は、血液２のチューブの内部にまで入りこむようにされている入口の先端１２を生成している。
【００３０】
好ましい形態に従い、入口の先端１２は、穿孔の手段を生成するように構成される。図１〜３に示される例のように、穿孔の手段は、プラグ６に穴をあけるように設計された斜切端により形成される。
【００３１】
実施形態に従い、入口１２の先端が栓を通して導入された際に前記プラグ６への圧力を働かせるよう、担体が容器の栓６の区域７に接して容器の内部に押し込まれるように、主要部１１は、担体１３の表面をさらに含んでいる。この担体１３の表面は、チューブ２内に浸透される主要部１１の長さを定義して、架台を生成することができようにしている。
【００３２】
実施形態に従い、この担体１３の表面は、主要部１１の外壁上に形成される環状肩部１３により形成される。
【００３３】
第２の端部１７は、一般にレンズにある顕微鏡薄板の堆積４の表面上に、液体３の小滴を堆積させるようになっている、堆積先端１５を形成する。
【００３４】
図２Ｂおよび図３に示した本発明の重要な表面形状に従い、第２の端部１７は、生体細胞層を生成するために液体３の小滴を拡大するための、分散化手段２０をさらに含んでいる。この分散化手段２０は、堆積表面４の平面２４と傾斜角αを生成する平面２８に調製される分散化薄層２２と、分散化薄層２２と第２の端部１７との間に挿入される弾性回復手段２１とを含んでいる。
【００３５】
実施形態に従い、「薄板」との語は、分散化薄層２２を示している。
【００３６】
本発明の特に有利な形態に従い、前記分散化手段２０は、方形の形態を実質的有している薄層２２を含んでいる。この小薄片は、弾性回復手段２１により第２の端部１７を介して接続される上部の第１端２７と、堆積表面４と接触するための下部の第２端２６とを含んでいる。
【００３７】
好ましくは、薄層２２の幅Ｌ１は、血液塗抹のサイズに相当し、かつ、薄板１のサイズよりも小さい。
【００３８】
好ましくは、下部第２端２６の形態は、薄板１の堆積表面４の輪郭に適応されるように構成される。
【００３９】
さらに、弾性回復手段２１は、傾斜角αを調整して、分散化の厚さの調整を可能にすることができるようになる。好ましくは、この傾斜角は、２５°〜３５°の間にある。
【００４０】
好ましくは、弾性回復手段２１は、弾力物質で実行される結合領域の形態である。
【００４１】
図２Ｂに示される形態に従い、本発明の装置はさらに、装置１０を配置する際に、堆積表面４に対して堆積先端１５とのスペースで画定される距離がｈ１である、薄板の堆積表面４と接触した、堆積表面４に対して支持される担体手段２３を、含んでいる。従って、堆積先端１５は、距離ｈ１を有する担体手段の底端部２９により、平面２４が区切られる。この距離は、堆積表面上４に堆積させるための生体液量を決定するために用いられる。小滴を堆積させるために装置１０が堆積表面４と接触して配置される際、担体手段２３により範囲を決められる平面２４は、堆積表面４により形成される面と混同される。
【００４２】
本発明の特に有利な形態に従い、担体手段２３は、ウィンドウ１６を除いて堆積先端１５を部分的に包囲するスカートの形態である。
【００４３】
本発明の特に有利な形態に従い、堆積先端１５によって保管される際に、液体３の小滴との接触を防止するように、担体手段２３及び分散化手段２０は、堆積先端１５に応じて配置される。従って、端部の径は、液体の性質に従って十分な大きさの必要がある。
【００４４】
実際、薄層２２の下部の第２端２６は、図２Ｂに示すように距離ｈ２を有する担体手段２３に定義される平面２４よりも低くなり、この距離ｈ２および弾性回復手段２１は、確実に生体液小滴の制御分散化を行うように、共に協力して、下記の説明のように、生体細胞血球を生成する。
【００４５】
装置１０の手動操作は、その次に行われ、図３および図４Ａ〜Ｃに示される。
【００４６】
装置１０は、その入口先端１２によりプラグ６を介して、担体表面１３がプラグ６に接触するまで、導入される。本発明の好ましい形態に従い、空洞７はプラグの中央に装備され、担体表面１３はこの空洞内に受け取られる。入口先端１２は、チューブ２内に配置される。
【００４７】
本発明に従った装置が装備されるチューブはもとに戻され、担体手段２３は、堆積表面４と接触する。血液チューブ２は垂直に向き、プラグ６は底面の方に向く。
【００４８】
チューブ内に挿入可能な装置の主要部の長さは、空洞底面７を介して担体内に挿入される担体表面１３により制限されている。
【００４９】
液体小滴を堆積先端１５の高さにするため、担体表面１３がプラグ６に対して支持し、圧力をチューブ２の内部に変形させて配置するように、チューブ２上で、鉛直力、すなわち、端部２３の低端部２９を通して堆積表面４に対して伝送される力を適用させる必要がある。液体５が前記チューブ２内で加圧された後に、液体小滴が、堆積先端１５の高さに生成し、堆積４の表面に接触し、生じた毛細管力により、堆積先端１５の小滴が分離する。
【００５０】
チューブに加えられた力はその後、リリースされ、小滴は形成されない。図４Ａに示すように、担体手段２３の端の低端部２９は、堆積表面４と接触したままである。また同時に、薄層２２は堆積４の表面上で支持されている。
【００５１】
血液細胞または血液塗抹の微細層を実現するため、端２３の低端部２９が、ｈ２より著しく短い距離で、堆積表面４から逸脱するように、装置１０は、重力Ｇと平行な軸に沿って再装備される。この動きは、図４Ｂの矢印Ｄ１により示される。同時に、薄層２２は常に、堆積４の表面上にわずかに支持されている。従って、低部の第２端２６は、所与の圧力で堆積表面４上にわずかに押圧され、その弾性率が高さｈ２に限定されない弾性回復手段２１の特性に対して、一定及び画一関連している。次に、装置１０に対して、薄板１に応じた小滴３の方向に変位を実現させる。この動きは、図４Ｂの矢印Ｄ２により示される。拡張手段２０の第２端２６は、毛細管力により第２端２６に沿って拡散した小滴３と接触する。小滴は、第２端２６と薄板１の堆積表面４との間で、毛細管力により維持される。そして、矢印Ｄ３に従って薄層２２が小滴上において引かれる行程の方向で、装置１０を移動させる。
その後、薄板１に沿って、第２端２６の幅上で、小滴を拡張させる。様々なステージの間に、第２の小滴を発生させることなく、堆積表面４の上で薄板の接触のみをキープする取り組みが適応される。
【００５２】
厚さ及びスプロール現象の長さは、圧力によりその後画定する厚さおよび分散化の長さはその後、薄層が堆積表面４上で摺動しながら支持されているため一定である弾性回復手段２１によって作用される圧力により画定される。
【００５３】
動きの間に第２端２６と堆積表面４との間で毛細管力により維持される血液が用いられるため、この分散化の厚さは小さくなる。従って、塗抹標本の末端において、顕鏡観察に適した細胞の血球が得られる。
【００５４】
図５Ａおよび５Ｂに示す装置１０の新たな具体化形態に従い、担体手段２３の低端部２９は、薄層２２とは反対位置に配置される開口３０を含んでいる。開口の幅Ｌ２は、薄層２２の低端部２６の幅Ｌ１よりも非常に広い。このように、小滴の上まで引きよせる薄層の変位を考慮して、担体手段２３の低端部２９と堆積表面４との間にスペースを生成するように、装置１０を持ち上げる必要はなく、開口３０は血液塗抹の上方にデッキを生成する。
【００５５】
本発明の特に有利な形態に従い、装置１０は、装置製造のコストを低減することが可能な鋳型材料を作製することが可能である。
【００５６】
図６Ａ〜６Ｈでは、以下に記載される装置１０を用いた、本発明による生体細胞層の自動生成装置１００を示した。
【００５７】
この装置は、生体細胞床１１０の生成ユニットを含むフレーム１０１と、薄板支持ユニット１０２とを含んでいる。生成ユニット１１０は、図３及び図４Ａ〜４Ｃにつき上記した生成装置１０の操作の自動化手段を備えている。このフレームは、記号Ｘ、Ｙ、Ｚを含んでおり、Ｚ軸は、垂直方向に指向し、平面ＸＹは、水平面に対応する。
【００５８】
装置の記載の結果、血液塗抹とも呼ばれる血液細胞層の生成の範囲に、装置が記載されている。
【００５９】
薄板支援ユニット１０２は、薄板１を受け取る目的の水平支援台１０３を含む。この薄板は、実質的に矩形のガラスであり、血液塗抹を調製する堆積表面４を含んでいる。
【００６０】
装置は、支援台上の括弧上での薄板の実施または除去のために、培地が操作者には十分利用可能である位置と、血液小滴を薄板１上に生成させ血液小滴を広げて制御方法で血液塗抹を生成させるよう予測されるように、薄板を生成ユニット１１０内に配置させる位置との間で、水平方向Ｙに従って水平支援台１０３を移動させる移動手段を、含んでいる。
【００６１】
語「被制御」とは、一方で、血液小滴内の制御容積、他方で、血液塗抹の制御厚さ、を指す。
【００６２】
支援台が移動せず固定されるので、血液小滴の堆積は、薄板の一定の位置に遂行される。支援台の変位は、適切な行程における移動手段の媒介によって遂行される。
【００６３】
図６Ｂに示されるように、薄板１は、操作者のための薄板の区域領域９と、血液塗抹のための堆積表面４を備える確保領域とを含んでいる。薄板が生成ユニット１１０内に配置された際、操作者には区域領域９のみが可視であり、血液の小滴の中に画定する位置は予約の領域に隣接して位置される。
【００６４】
生成１１０のユニットは、軸ＹＹに平行に延在する軸１１２のまわりに回転するように設置されるトレイ１０７と、血液チューブ２を受け取ることを目的とする取付け器具１０４と、を含んでいる。取付け器具１０４は、トレイ１０７の直径に沿って配置される。取付け器具１０４は、垂直方向Ｚに従った有働部分である一方、回転プレート１０７によって支えられる。
【００６５】
装置は、異なる位置で、トレイ１０７の１つの方向または他の方向に連続して回転させることに適したモーター手段を含んでいる。従って、トレイを、位置の角度を変えて配置させることが可能である。
【００６６】
血液チューブの取付け器具１０４は、管状の形態を有しており、Ｚ方向に延びる側面開口１０９を備えている。側面開口に向かい合う２つの側は、変形可能なゴム材料内で実現可能な固定取付け具１０８を備えている。この軸方向の開口の大きさは、チューブ２の大きさよりも小さい。固定取付け具に対するチューブの確立のために、チューブは、軸方向の開口を介してクリッピングにより間挿され、培地中の位置内に保たれる。
【００６７】
トレイが、図６Ａに示される位置に相当する初期位置または休止位置とされる位置にあるときは、固定取付け具１０４を、Ｚ軸に依存して、垂直方向に導いた。図６Ｂに示されるクリッピングにより、血液チューブが固定取付け具１０４に固定されるときは、血液２のチューブは、プラグ６が上方に向きチューブ底面が下方に向くように、配置される。
固定取付け具１０４上のチューブ２の実装は、手動で行われる。操作者には、リスクがない。
【００６８】
フレーム１０１は、フレーム１０１の正面上に配置される開口１０６を含み、装置を血液塗抹生成ができるように構成し、これは基準１０により全体として示され、図１に示される。
【００６９】
図６Ｂに示すように、生成装置１０が開口１０６に適所に配置されるときは、装置は、垂直に配置され、窪み内に導入され血液チューブから栓に向けられる入力先端１２と、開口外側に位置し頂部に向けられる堆積先端１５とを有している。生成ユニット１１０内における生成装置１０の本体の実施は、手動で行われる。
【００７０】
好ましくは、開口１０６は、血液塗抹生成の全てのステージの間に、生成装置１０を垂直位に維持する機能を有する扉１０５により閉じられる。
【００７１】
血液チューブ２上に固定される固定取付け具１０４は、垂直軸Ｚに沿うトレイに従った可動性を有している。装置は、支援台１０４の垂直変位を生じさせる適切なモーター手段を含んでいる。図６Ｂでは矢印Ｆで示される取付け具１０４の動きにより、プラグ６を設けるための生成本体の入口先端１２の方向に対して、垂直上向きにチューブの動作を制御することを可能にする。入口先端１２は、その後プラグを通り抜け、チューブ２内に導入される。
【００７２】
好ましくは、チューブの変位の動きは、異なるモデルのチューブに対応するための「平均」普遍行程である。
【００７３】
特に有利な本発明の特性に従い、装置は、薄板上の血液小滴の堆積段階の前に、チューブの血液を均質化することができる撹拌手段を含んでいる。これらの撹拌手段は、プレート１０７の回転により実現され、その原理は図６Ｃおよび６Ｄに示される。
【００７４】
図６Ｂでは、生成装置がチューブに関連する際、後者であるチューブは、基準Ｐ０の垂直位に上方に向かうプラグ６を有している。撹拌を実現するためには、トレイは、位置Ｐ１（図６Ｃ）と位置Ｐ２（図６Ｄ）との間で、部分的な回転の動きを正の角度で行う。
プレートの回転運動の向きは、矢印Ａで表示される。
【００７５】
各図で示される例では、回転運動の広がりは、３０°〜１６０°としてもよい。
【００７６】
これら２つの位置の間での、部分回転の大きさは、十分な撹拌を得る１０〜２０であり、これは、指標としてのみ与えられる。
【００７７】
変異形に従い、回転運動を、逆の角度Ｂで遂行することも可能である。回転運動の向きは、矢印Ｂにより表示される。
【００７８】
撹拌の段階が完了した際、チューブは、その基準位置Ｐ０から垂直位で１８０°と逆向きになり、生成本体の堆積先端１５は、図６Ｅに示すように、底面を向くようになる。
【００７９】
次に、生成本体の堆積先端１５が、薄板除去のための表面上で定義された位置の方へ向けられるように、薄板支援台上で調製される薄板１は、生成ユニット１１０内で、方向Ｔに従って並進する。
【００８０】
担体手段２３が堆積表面４と接触して配置されるように、チューブ２は、下方向に移動する。チューブは、プラグ６を担体表面１３に対して適用するために移動させること、ならびに、堆積先端１５のレベルで血液小滴を取り出すためにチューブ内部の容積を圧縮することを、継続させる。血液小滴は、堆積表面と接触する際に、堆積表面のレベルと同様の表面張力により動かされ、堆積物の先端から分離される。
【００８１】
本発明を遂行する態様に従い、小滴が薄板の除去表面上に堆積されるか否かを調べるため、装置は、薄板上に存在する血液小滴の存在を管理するための手段を有することが好ましい。
【００８２】
図に示されない本発明の特に有利な形態に従い、このような管理の手段は、血液小滴の位置が薄板表面と向き合うように配置される発光部および光受容部を含んでいる。血液小滴の存在を、光反射から推論するものである。
【００８３】
変異形に従い、発光部及び受容部は、薄板の両側で、血液小滴の位置に配置される。
この場合、光伝送から血液小滴の存在を推論するものである。
【００８４】
従って、検出部が薄板上で小滴の存在を検出した時は、チューブに加えられる力は、固定取付け具１０４の上部を介したチューブの移動により停止される一方、薄板１の表面における担体手段２３との接触を維持する。薄層２２は、支援台上で薄板１の表面に面している。
【００８５】
小滴の分散化を実現するため、チューブは上部へ移動して、ｈ２より著しく小さな距離を有する薄板表面から端２３の低端部２９を退けるようにする。この構造では、拡張手段２０の薄層２２は、その表面上で薄板を支持したままである。分散化は、薄層２２の第２のパネル２６と薄板の堆積表面４との間の相対移動により遂行される。
【００８６】
装置１００が図５Ａおよび５Ｂに示される装置の変異形を用いる場合には、担体手段２３は、堆積表面４と接触したままになる。
【００８７】
本発明に従い、拡張を生じさせる（図６Ｆ）水平方向ＹＹでは、薄板支援台の媒介により、薄板は移動する。拡張手段の薄層２２は、手作業の操作の場合のように固定および加圧にとどまっている。薄板移動の動きは、矢印Ｔにより表される。血液細胞８の血球は、その後薄板（図６Ｇ）上で形成される。
【００８８】
有利なことに、このＹ方向での薄板移動により、薄板を操作者が利用可能な出力位置に配置することが、同時に可能になる（図６Ｇ）。
【００８９】
特に有利な形態に従い、装置は、また、血液チューブに関する塗抹標本生成サイクルの終わりまでの生成装置の抽出手段を含んでいる。また、フレームは、使用済み装置の受付窪み１１１を含んでおり、フレームの鍔１１３の上に位置している。
【００９０】
図６Ｇに示される等の、本発明の特に有利な形態に従い、抽出手段は、軸ＸＸに対して約４５°の角度を形成する位置に配置される。血液塗抹の生成が完了した際、装置の第２の端部は、底面の方に向けられる（図６Ｆ）。生成装置１０を取り出すため、抽出手段と接触する第２の端部を配置するように、トレイを順に移動させる。この位置において、図６Ｇに示すように、血液チューブは、軸ＸＸに対して約４５°の角度を形成する。トレイは、窪みの外になるよう、垂直位（図６Ｈ）で生成装置から分離されるチューブを配置するように、その回転を続ける。
【００９１】
従って、本発明により提案される解決案により、生体細胞層生成のためのステップ集合を自動化することができるようになり、このため、１つのチューブから他のチューブへの相互汚染のリスクを除去するとともに、操作者に対する生体液との接触を保護することができるようになる。
【００９２】
この自動化により、血液塗抹の実施を単純化することができるようになる。
【００９３】
さらに、同様に実現された塗抹標本の品質は、もはや操作者の能力に影響されるものではない。細胞層の均一性は、制御方法で遂行され、再生可能である。
【００９４】
装置は、サイズが限定されており、必要な機械手段のコストが限られているため、品質を備えることができ、従って品質を改良することができる。
【００９５】
また、表面除去に関して血液小滴の存在を検出する手段により、信頼できる自動化の操縦も可能になる。
【符号の説明】
【００９６】
２  容器
４  堆積表面
６  プラグ
７  区域
９  区域
１０  装置
１１  本体
１２  先端
１３  環状肩部
１４  導管
１５  堆積先端
１６  ウィンドウ
１７  第２の端部
１８  第１の端部
２０  分散化手段
２１  弾性回復手段
２２  薄層
２３  担体手段
２４  平面
２６  第２端
２７  第１端
２９  底端部
１００  自動生成装置
１０１  フレーム
１０２  薄板支持ユニット
１０３  水平支援台
１０４  固定取付け具
１０６  開口
１０７  トレイ
１０８  固定取付け具
１０９  側面開口
１１０  生体細胞床
１１２  軸
【図１】
2018509626.tif 000003
【図２Ａ】
2018509626.tif 000004
【図２Ｂ】
2018509626.tif 000005
【図３】
2018509626.tif 000006
【図４Ａ】
2018509626.tif 000007
【図４Ｂ】
2018509626.tif 000008
【図４Ｃ】
2018509626.tif 000009
【図５Ａ】
2018509626.tif 000010
【図５Ｂ】
2018509626.tif 000011
【図６Ａ】
2018509626.tif 000012
【図６Ｂ】
2018509626.tif 000013
【図６Ｃ】
2018509626.tif 000014
【図６Ｄ】
2018509626.tif 000015
【図６Ｅ】
2018509626.tif 000016
【図６Ｆ】
2018509626.tif 000017
【図６Ｇ】
2018509626.tif 000018
【図６Ｈ】
2018509626.tif 000019
【国際調査報告】
2018509626.tif 000020
2018509626.tif 000021
2018509626.tif 000022
2018509626.tif 000023
2018509626.tif 000024
2018509626.tif 000025