(57)【要約】クローン病を含む炎症性腸疾患などの胃腸炎症障害を治療する方法が提供される。抗インテグリンベータ７抗体などのインテグリンベータ７アンタゴニストの投与方法及び投薬方法も提供される。加えて、クローン病の寛解を誘導するため、または寛解を誘導し維持するための、かかるインテグリンベータ７アンタゴニストの投与方法及び投薬方法も提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クローン病を有する患者における寛解の誘導方法であって、前記患者に治療有効量のインテグリンベータ７アンタゴニストを皮下投与することを含み、前記治療有効量が、第１の用量の投与の１４週間後に寛解を誘導する、前記方法。
【請求項２】
前記インテグリンベータ７アンタゴニストが、モノクローナル抗インテグリンベータ７抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、キメラ抗体、ヒト抗体、及びヒト化抗体から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、抗体断片である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記抗ベータ７抗体が、６つの超可変領域（ＨＶＲ）を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１が、アミノ酸配列Ａ１−Ａ１１を含み、Ａ１−Ａ１１が、ＲＡＳＥＳＶＤＴＹＬＨ（配列番号１）、ＲＡＳＥＳＶＤＳＬＬＨ（配列番号７）、ＲＡＳＥＳＶＤＴＬＬＨ（配列番号８）、もしくはＲＡＳＥＳＶＤＤＬＬＨ（配列番号９）、または配列番号１、７、８、もしくは９の変異形（配列番号２６）であり、アミノ酸Ａ２が、Ａ、Ｇ、Ｓ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ３が、Ｓ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、Ａ４が、Ｅ、Ｖ、Ｑ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ５が、Ｓ、Ｙ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ６が、Ｖ、Ｒ、Ｉ、Ａ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、及びＱから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ７が、Ｄ、Ｖ、Ｓ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ８が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、Ｅ、Ｔ、Ｐ、及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ９が、Ｌ、Ｙ、Ｉ、及びＭから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１０が、Ｌ、Ａ、Ｉ、Ｍ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１１が、Ｈ、Ｙ、Ｆ、及びＳから成る群から選択され、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２が、アミノ酸配列Ｂ１−Ｂ８を含み、Ｂ１−Ｂ８が、ＫＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２）、ＲＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２０）、もしくはＸａａＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２１、Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）、または配列番号２、２０、もしくは２１の変異形（配列番号２７）であり、アミノ酸Ｂ１が、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｖ、Ａ、Ｆ、Ｑ、Ｈ、Ｐ、Ｉ、Ｌ、Ｙ、及びＸａａ（Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）から成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ４が、Ｓ及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ５が、Ｑ及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ６が、Ｓ、Ｄ、Ｌ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ７が、Ｉ、Ｖ、Ｅ、及びＫから成る群から選択され、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３が、アミノ酸配列Ｃ１−Ｃ９を含み、Ｃ１−Ｃ９が、ＱＱＧＮＳＬＰＮＴ（配列番号３）または配列番号３の変異形（配列番号２８）であり、アミノ酸Ｃ８が、Ｎ、Ｖ、Ｗ、Ｙ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｆ、Ｈ、Ｉ  Ｌ、及びＭから成る群から選択され、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１は、アミノ酸配列Ｄ１−Ｄ１０を含み、Ｄ１−Ｄ１０は、ＧＦＦＩＴＮＮＹＷＧ（配列番号４）であり、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２が、アミノ酸配列Ｅ１−Ｅ１７を含み、Ｅ１−Ｅ１７が、ＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号５）、または配列番号５の変異形（配列番号２９）であり、アミノ酸Ｅ２が、Ｙ、Ｆ、Ｖ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ６が、Ｓ及びＧから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１０が、Ｓ及びＹから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１２が、Ｎ、Ｔ、Ａ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸１３が、Ｐ、Ｈ、Ｄ、及びＡから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１５が、Ｌ及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１７が、Ｓ及びＧから成る群から選択され、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３が、アミノ酸配列Ｆ２−Ｆ１１を含み、Ｆ２−Ｆ１１が、ＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号６）もしくはＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１９）であるか、あるいは、アミノ酸配列Ｆ１−Ｆ１１を含み、Ｆ１−Ｆ１１が、ＡＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１６）、ＡＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１７）、もしくはＡＱＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１８）、または配列番号６、１６、１７、１８、もしくは１９の変異形（配列番号３０）であり、アミノ酸Ｆ２が、Ｒ、Ｍ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｑ、Ｓであり、及び／または、アミノ酸Ｆ１１が、Ｆ及びＹから成る群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、３つの重鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｈ１−Ｈ３）配列、及び３つの軽鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｌ１−Ｌ３）配列を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１が、配列番号７、配列番号８、または配列番号９を含み、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２が、配列番号２を含み、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３が、配列番号３を含み、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１が、配列番号４を含み、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２が、配列番号５を含み、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３が、配列番号６、または配列番号１６、または配列番号１７、または配列番号１９を含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、配列番号３１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変重鎖を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、エトロリズマブである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記患者が、前記第１の用量の前記インテグリンベータ７アンタゴニストの投与前に、中等度から重度の活性クローン病を有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記患者が、前記第１の用量の投与前の７日間中のいずれの時間においても、２２０以上かつ４８０以下のクローン病活性指数（ＣＤＡＩ）スコアを有すると判定される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記患者が、前記第１の用量の投与前の７日間中のいずれの時間においても、１４以上の患者報告アウトカム２（ＰＲＯ２）スコアを有すると判定される、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記患者が、活性炎症を有すると判定され、前記活性炎症が、回腸結腸内視鏡検査（ｉｌｅｏｃｏｌｏｎｏｓｃｏｐｙ）によって判定された場合に７以上のクローン病簡易内視鏡的指数（Ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ  Ｉｎｄｅｘ  ｆｏｒ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ、ＳＥＳ−ＣＤ）スコアとして判定される、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記患者が、孤立性回腸炎を有するかまたは回腸切除後であり、前記患者が、活性炎症を有すると判定され、前記活性炎症が、回腸結腸内視鏡検査によって判定された場合に４以上のＳＥＳ−ＣＤスコアとして判定される、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記患者が、従来の療法に対する不十分な応答、応答の損失、または不耐性を有した、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記従来の療法が、免疫抑制剤療法、コルチコステロイド療法、及び抗ＴＮＦ療法のうちの１つ以上から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記免疫抑制剤療法が、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、及びメトトレキサートから選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記コルチコステロイド療法が、プレドニゾン、プレドニゾン等価物、及びブデソニドから選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗ＴＮＦ療法が、インフリキシマブ、アダリムマブ、及びセルトリズマブペゴールから選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、４週間毎に１０５ｍｇの均一用量で、または４週間毎に２１０ｍｇの均一用量で投与される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記抗インテグトリン（ｉｎｔｅｇｔｒｉｎ）ベータ７抗体が、前記第１の用量において２１０ｍｇ、前記第１の用量の２週間後に２１０ｍｇ、前記第１の用量の４週間後に２１０ｍｇ、前記第１の用量の８週間後に２１０ｍｇ、かつ前記第１の用量の１２週間後に２１０ｍｇの均一用量として投与される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
寛解が、クローン病活性指数（ＣＤＡＩ）スコアによって判定され、前記ＣＤＡＩスコアが、１５０未満である、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記治療有効量が、前記第１の用量の投与の１０週間後に寛解を誘導する、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
寛解が、患者報告アウトカム２（ＰＲＯ２）スコアによって判定され、前記ＰＲＯ２スコアが、１１以下である、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記治療有効量が、クローン病簡易内視鏡的指数（ＳＥＳ−ＣＤ）スコアによって判定される内視鏡的改善を誘導する、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記第１の用量の投与の１４週間後に判定される前記ＳＥＳ−ＣＤスコアが、基線で判定される前記ＳＥＳ−ＣＤスコアと比較して５０％低減する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記治療有効量が、応答を誘導し、前記応答が、基線で判定されるＣＤＡＩスコアと比較して少なくとも７０ポイントのＣＤＡＩスコアの減少として判定される、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記応答が、基線で判定されるＣＤＡＩスコアと比較して少なくとも１００ポイントのＣＤＡＩスコアの減少として判定される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
クローン病を有する患者における寛解の維持方法であって、前記患者に治療有効量のインテグリンベータ７アンタゴニストを皮下投与することを含み、前記治療有効量が、第１の用量の投与後、少なくとも５２週間にわたって、または少なくとも６６週間にわたって、または少なくとも７０週間にわたって、または少なくとも７４週間にわたって寛解を維持する、前記方法。
【請求項２９】
前記治療有効量が、前記第１の用量の投与後、少なくとも７４週間にわたって寛解を維持し、前記患者が、前記第１の用量の投与後、１４週間にわたってコルチコステロイド療法を受け、前記コルチコステロイド療法が、前記第１の用量の投与の１４週間後から開始して中止まで経時的に低減する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記コルチコステロイド療法が、（ｉ）１日当たり２０ｍｇ以下のプレドニゾンであり、前記コルチコステロイド療法が、中止まで１週当たり２．５ｍｇずつプレドニゾンが低減するか、または（ｉｉ）１日当たり２０ｍｇ以下のプレドニゾン等価物であり、前記コルチコステロイド療法が、中止まで１週当たり２．５ｍｇずつプレドニゾン等価物が低減する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記コルチコステロイド療法が、１日当たり６ｍｇ以下の経口ブデソニドであり、前記コルチコステロイド療法が、中止まで２週間毎に３ｍｇずつ経口ブデソニドが低減する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記治療有効量が、持続的寛解を維持し、持続的寛解が、前記第１の用量の投与の２４週間後、前記第１の用量の投与の２８週間後、前記第１の用量の投与の３２週間後、前記第１の用量の投与の４４週間後、前記第１の用量の投与の５６週間後、前記第１の用量の投与の６６週間後、前記第１の用量の投与の７０週間後、及び前記第１の用量の投与の７４週間後から選択される６つ以上の時点の各々において、１５０未満のＣＤＡＩスコアによって判定される、請求項２８〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記インテグリンベータ７アンタゴニストが、モノクローナル抗インテグリンベータ７抗体である、請求項２８〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、キメラ抗体、ヒト抗体、及びヒト化抗体から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、抗体断片である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記抗ベータ７抗体が、６つの超可変領域（ＨＶＲ）を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１が、アミノ酸配列Ａ１−Ａ１１を含み、Ａ１−Ａ１１が、ＲＡＳＥＳＶＤＴＹＬＨ（配列番号１）、ＲＡＳＥＳＶＤＳＬＬＨ（配列番号７）、ＲＡＳＥＳＶＤＴＬＬＨ（配列番号８）、もしくはＲＡＳＥＳＶＤＤＬＬＨ（配列番号９）、または配列番号１、７、８、もしくは９の変異形（配列番号２６）であり、アミノ酸Ａ２が、Ａ、Ｇ、Ｓ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ３が、Ｓ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、Ａ４が、Ｅ、Ｖ、Ｑ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ５が、Ｓ、Ｙ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ６が、Ｖ、Ｒ、Ｉ、Ａ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、及びＱから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ７が、Ｄ、Ｖ、Ｓ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ８が、Ｄ、Ｇ、Ｎ、Ｅ、Ｔ、Ｐ、及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ９が、Ｌ、Ｙ、Ｉ、及びＭから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１０が、Ｌ、Ａ、Ｉ、Ｍ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１１が、Ｈ、Ｙ、Ｆ、及びＳから成る群から選択され、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２が、アミノ酸配列Ｂ１−Ｂ８を含み、Ｂ１−Ｂ８が、ＫＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２）、ＲＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２０）、もしくはＸａａＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２１、Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）、または配列番号２、２０、もしくは２１の変異形（配列番号２７）であり、アミノ酸Ｂ１が、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｖ、Ａ、Ｆ、Ｑ、Ｈ、Ｐ、Ｉ、Ｌ、Ｙ、及びＸａａ（Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）から成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ４が、Ｓ及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ５が、Ｑ及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ６が、Ｓ、Ｄ、Ｌ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ７が、Ｉ、Ｖ、Ｅ、及びＫから成る群から選択され、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３が、アミノ酸配列Ｃ１−Ｃ９を含み、Ｃ１−Ｃ９が、ＱＱＧＮＳＬＰＮＴ（配列番号３）または配列番号３の変異形（配列番号２８）であり、アミノ酸Ｃ８が、Ｎ、Ｖ、Ｗ、Ｙ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｆ、Ｈ、Ｉ  Ｌ、及びＭから成る群から選択され、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１は、アミノ酸配列Ｄ１−Ｄ１０を含み、Ｄ１−Ｄ１０は、ＧＦＦＩＴＮＮＹＷＧ（配列番号４）であり、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２が、アミノ酸配列Ｅ１−Ｅ１７を含み、Ｅ１−Ｅ１７が、ＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号５）、または配列番号５の変異形（配列番号２９）であり、アミノ酸Ｅ２が、Ｙ、Ｆ、Ｖ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ６が、Ｓ及びＧから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１０が、Ｓ及びＹから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１２が、Ｎ、Ｔ、Ａ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸１３が、Ｐ、Ｈ、Ｄ、及びＡから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１５が、Ｌ及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１７が、Ｓ及びＧから成る群から選択され、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３が、アミノ酸配列Ｆ２−Ｆ１１を含み、Ｆ２−Ｆ１１が、ＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号６）もしくはＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１９）であるか、あるいは、アミノ酸配列Ｆ１−Ｆ１１を含み、Ｆ１−Ｆ１１が、ＡＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１６）、ＡＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１７）、もしくはＡＱＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１８）、または配列番号６、１６、１７、１８、もしくは１９の変異形（配列番号３０）であり、アミノ酸Ｆ２が、Ｒ、Ｍ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｑ、Ｓであり、及び／または、アミノ酸Ｆ１１が、Ｆ及びＹから成る群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、３つの重鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｈ１−Ｈ３）配列、及び３つの軽鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｌ１−Ｌ３）配列を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１が、配列番号７、配列番号８、または配列番号９を含み、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２が、配列番号２を含み、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３が、配列番号３を含み、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１が、配列番号４を含み、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２が、配列番号５を含み、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３が、配列番号６、または配列番号１６、または配列番号１７、または配列番号１９を含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、配列番号３１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変重鎖を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、エトロリズマブである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記患者が、前記第１の用量の前記インテグリンベータ７アンタゴニストの投与前に、中等度から重度の活性クローン病を有する、請求項２８〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
前記患者が、前記第１の用量の投与前の７日間中のいずれの時間においても、２２０以上かつ４８０以下のＣＤＡＩスコアを有すると判定される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記患者が、前記第１の用量の投与前の７日間中のいずれの時間においても、１４以上のＰＲＯ２スコアを有すると判定される、請求項４０または４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記患者が、活性炎症を有すると判定され、前記活性炎症が、回腸結腸内視鏡検査によって判定された場合に７以上のＳＥＳ−ＣＤスコアとして判定される、請求項４０〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記患者が、孤立性回腸炎を有するかまたは回腸切除後であり、前記患者が、活性炎症を有すると判定され、前記活性炎症が、回腸結腸内視鏡検査によって判定された場合に４以上のＳＥＳ−ＣＤスコアとして判定される、請求項４０〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記患者が、従来の療法に対する不十分な応答、応答の損失、または不耐性を有した、請求項４０〜４４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
前記従来の療法が、免疫抑制剤療法、コルチコステロイド療法、及び抗ＴＮＦ療法のうちの１つ以上から選択される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記免疫抑制剤療法が、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、及びメトトレキサートから選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記コルチコステロイド療法が、プレドニゾン、プレドニゾン等価物、及びブデソニドから選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
前記抗ＴＮＦ療法が、インフリキシマブ、アダリムマブ、及びセルトリズマブペゴールから選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項５０】
前記抗インテグリンベータ７抗体が、４週間毎に１０５ｍｇの均一用量で、または４週間毎に２１０ｍｇの均一用量で投与される、請求項２８〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
前記抗インテグトリン（ｉｎｔｅｇｔｒｉｎ）ベータ７抗体が、前記第１の用量において２１０ｍｇ、前記第１の用量の２週間後に２１０ｍｇ、前記第１の用量の４週間後に２１０ｍｇ、前記第１の用量の８週間後に２１０ｍｇ、前記第１の用量の１２週間後に２１０ｍｇの均一用量として、かつその後４週間毎に１０５ｍｇで投与される、請求項２８〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
寛解が、クローン病活性指数（ＣＤＡＩ）スコアによって判定され、前記ＣＤＡＩスコアが、１５０未満である、請求項２８〜５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
前記患者が、少なくとも５２週間にわたってコルチコステロイドフリーである、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
寛解が、患者報告アウトカム２（ＰＲＯ２）スコアによって判定され、前記ＰＲＯ２スコアが、１１以下である、請求項２８〜５３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５５】
前記治療有効量が、クローン病簡易内視鏡的指数（ＳＥＳ−ＣＤ）スコアによって判定される内視鏡的改善を誘導する、請求項２８〜５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
前記第１の用量の投与の６６週間後に判定される前記ＳＥＳ−ＣＤスコアが、基線で判定される前記ＳＥＳ−ＣＤスコアと比較して５０％低減する、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記第１の用量の投与の６６週間後の前記内視鏡的改善が、粘膜炎の消散であり、粘膜炎の消散が、ゼロと判定されるＳＥＳ−ＣＤスコアである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
前記治療有効量が、前記第１の用量の投与の１４週間後に応答を誘導し、前記応答が、基線で判定されるＣＤＡＩスコアと比較して少なくとも７０ポイントのＣＤＡＩスコアの減少として判定される、請求項２８〜５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５９】
前記治療有効量が、前記第１の用量の投与の６６週間後に応答を誘導し、前記応答が、基線で判定されるＣＤＡＩスコアと比較して少なくとも１００ポイントのＣＤＡＩスコアの減少として判定される、請求項２８〜５７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６０】
前記インテグリンベータ７アンタゴニストが、プレフィルドシリンジ、またはプレフィルドシリンジと自動注射器との組み合わせを使用して投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年２月２６日出願の米国仮出願第６２／１２１，２９０号の優先権の利益を主張するものであり、この仮出願は、参照によりその全体が本明細書に援用される。
【０００２】
配列表
本出願には、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して提出され、その全体が参照により本明細書に援用される配列表が含まれる。２０１６年２月２４日に作成された該ＡＳＣＩＩコピーは、Ｐ３２６２８ＷＯ＿ＰＣＴＳＬ．ｔｘｔという名称であり、２２，２０１バイトのサイズである。
【０００３】
クローン病を含む炎症性腸疾患などの胃腸炎症障害を治療する方法が提供される。抗インテグリンベータ７抗体などのインテグリンベータ７アンタゴニストの投与方法及び投薬方法も提供される。加えて、クローン病の寛解を誘導するため、または寛解を誘導し維持するための、かかるインテグリンベータ７アンタゴニストの投与方法及び投薬方法も提供される。
【背景技術】
【０００４】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、胃腸（ＧＩ）管の慢性炎症自己免疫状態であり、これは、臨床的に潰瘍性大腸炎（ＵＣ）またはクローン病（ＣＤ）のいずれかとして現れる。ＣＤは、全ＧＩ管のあらゆる部分に影響を及ぼす可能性がある慢性貫壁性炎症疾患であり、ＵＣは、結腸の粘膜炎である。両方の状態は、日常生活の活動が妨害される、頻繁な腸運動、栄養失調、及び脱水を臨床的に特徴とする。ＩＢＤの病因は複雑であり、病態形成の多くの態様が依然として不明確である。
【０００５】
ＣＤは、胃腸管のあらゆる部分に影響を及ぼし得るＩＢＤの慢性かつ再発性の形態であり、症例の４０％〜５０％が小腸に影響を及ぼす。ＣＤは、斑状の貫壁性炎症、潰瘍、及び腸の健康な区画が散在した肉芽腫病変（スキップ病変）を特徴とする。この疾患は進行性であり、未制御の炎症は、狭窄前拡張、閉塞（狭窄性）、ならびに腹腔内または肛門周囲の瘻孔及び膿瘍（穿通性）などの、狭窄性または穿通性の合併症に進展する。臨床徴候及び症状は、慢性下痢、腹痛、悪液質、腹部腫瘤、または圧痛、ならびに瘻孔の顕性徴候を含む。疾患の過程は可変的であり、患者は、重度の初期紅斑に続いて、向こう１０年にわたりわずかな症状（４３％）、または慢性かつ持続性の症状（１９％）、または再発寛解型の症状（３２％）を経験し得る（Ｂａｕｍｇａｒｔ  ＤＣ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  ３８０：１５９０−６０５，２０１２）。
【０００６】
欧州、アジア及び中東、ならびに北米で報告されたＣＤの年間発生率はそれぞれ、１００，０００人年当たり１２．７、５．０、及び２０．２であった（Ｍｏｌｏｄｅｃｋｙ  ＮＡ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４２：４６−５４，２０１２）。北米における現在の有病率は、１００，０００人当たり３１９であると報告されている（同上）。ＣＤの疾患関連死亡率は、疾患の過程の初期に発生する臨床的合併症及び／または手術合併症、または後に発生する腸がんから生じる、この集団における死のおよそ３０％を占める。全世界でのＣＤ発生率は、実質的に増加し続け、患者、医療システム、及び社会に対する長期のコストを伴い、人生で最も形態形成的かつ生産的な時期にある個人に影響を及ぼすことが予想されている（Ｄｕｒｉｃｏｖａ  Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ  １６：３４７−５３，２０１０）。
【０００７】
これまでに、ＣＤの治療法は存在しない。したがって、現在のＣＤの治療目標は、症状改善を誘導及び維持すること、粘膜治癒を誘導すること、手術を回避すること、及び生活の質を向上させることである（Ｌｉｃｈｔｅｎｓｔｅｉｎ  ＧＲ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １０４：４６５−８３，２００９、Ｖａｎ  Ａｓｓｃｈｅ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｒｏｈｎｓ  Ｃｏｌｉｔｉｓ．４：６３−１０１，２０１０）。
【０００８】
全身性コルチコステロイド（ＣＳ）は、寛解を誘導する治療の主力であり、およそ８０％の患者において効果的である（Ｓｕｍｍｅｒｓ  ＲＷ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ７７：８４７−６９，１９７９、Ｍａｌｃｈｏｗ  Ｈ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ８６：２４９−６６，１９８４）。しかしながら、それらは、維持療法としてはあまり効果的でなく、２８％の患者しか１年間の治療後に長期応答を達成せず、３２％の患者はステロイド依存性になる（Ｆａｕｂｉｏｎ  ＷＡ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １２１：２５５−６０，２００１、Ｐｅｙｒｉｎ−Ｂｉｒｏｕｌｅｔ  Ｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １０５：２８９−９７，２０１０）。患者の症状が改善する場合でも、ステロイド治療により内視鏡的改善を達成するのは３０％未満と予想されている（Ｍｏｄｉｇｌｉａｎｉ  Ｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ９８：８１１−８，１９９０）。ステロイドの有害作用は文書で十分に裏付けられており、これが原因で５０％の患者は自身の治療を停止する；長期の安全性転帰は、骨粗鬆症、白内障、及び糖尿病を含む。
【０００９】
免疫抑制剤（ＩＳ）（例えば、アザチオプリン［ＡＺＡ］、６−メルカプトプリン［６−ＭＰ］、またはメトトレキサート［ＭＴＸ］）は、典型的には、ステロイドに対して不耐性または不応性な患者の寛解を誘導するため、及びＣＤの静止を達成する患者の寛解を維持するために投与される。免疫抑制剤は、ＩＳ有効性の２〜４か月の作用発現の間の患者の症状に応じて、ステロイドブリッジありまたはなしで与えられる。回腸または上行結腸の疾患を有する患者において、ブデソニドは、急速な初回通過代謝からもたらされるその低い全身性生体利用能のために、毒性が低くより耐容可能なブリッジとなる。炎症疾患の過程を改変するためのＩＳの早期の開始は、過去２０年間にわたって提唱されてきた。しかしながら、腸切除及び合併症の割合の減少は、この期間中に観察されていない（Ｃｏｓｎｅｓ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇｕｔ  ５４：２３７−４１，２００５）。これは、ＡＺＡ及び６−ＭＰによる血球減少、血小板減少、及びリンパ腫のリスク増加を含む全身毒性（Ｐｒｅｆｏｎｔａｉｎｅ  Ｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｃｈｒａｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ  Ｓｙｓｔ  Ｒｅｖ（４）：ＣＤ０００５４５，２００９）、ならびにＭＴＸによる肝毒性及び脱毛（Ｈａｕｓｍａｎｎ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ  １６：１１９５−２０２，２０１０）に対する懸念から、このトップダウン治療の採用が不十分であることを反映したものであり得る。
【００１０】
腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−αに対するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）の開発は、さらなる治療選択肢を提供している。抗ＴＮＦ薬は相当な割合の患者において効果的であるが、有効性は最適未満である；４週間の誘導療法後の寛解率は３５％未満であり、誘導療法に応答する患者の中でも、２０〜３０週で維持を評価した場合に寛解を達成するのは５０％未満である（Ｐｅｙｒｉｎ−Ｂｉｒｏｕｌｅｔ  Ｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３３：８７０−９，２０１１）。さらに、３０％の患者は、ＴＮＦ−αに推進されたものではない根本的な病理生物学がおそらく原因で、４週間の誘導療法後に評価した際に抗ＴＮＦ療法に対して一次非応答者であると報告されており（Ｔａｒｇａｎ  ＳＲ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３３７：１０２９−３５，１９９７、Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  ２００７：１９；１４６：８２９−３８．Ｅｐｕｂ  ２００７  Ａｐｒ  ３０）、したがって、異なる機構クラスの薬物から利益を受け得る。３０％〜４０％の患者は二次非応答者（すなわち、初めは応答性）であるが、その治療の一年目に応答性を失う、すなわち不耐性になると推定されている（Ｃｏｌｏｍｂｅｌ  ＪＦ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １３２：５２−６５，２００７）。二次非応答性は、低い薬物血清レベルをもたらす中和抗体の開発、薬物クリアランスの加速、または異なる薬理学的標的を用いた療法から利益を受け得る生物学的逃避機構に起因すると考えられている。抗ＴＮＦ薬はまた、重篤感染症、日和見感染、ループス様反応、及びリンパ腫のリスク増加を含む、著しい副作用に関連付けられている（Ｓｉｅｇａｌ  ＣＡ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅｒａｐ  Ａｄｖ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  ２：２４５−５１，２００９）。耐容性の懸念としては、輸注反応（インフリキシマブで治療される患者の９％〜１７％で発生、ｄｅ  Ｖｒｉｅｓ  ＨＳ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ７１：７−１９，２０１１参照）、及び注射部位反応（アダリムマブを受ける患者の１０％で発生、ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｈｅｉｊｄｅ  Ｄ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．５４：２１３６−４６，２００６参照）が挙げられる。全体として、この薬物クラスの利益対リスクは許容可能と見なされているが、炎症及び臨床的続発症を減弱させ、かつＣＤ患者の長期予後を改善する、より良好な利益−リスクプロファイルを有する治療の必要性が、依然として存在する。
【００１１】
インテグリンは、白血球接着、シグナル伝達、増殖、及び遊走を含む多数の細胞プロセスにおいて、かつ遺伝子制御において役割を果たす、アルファ／ベータヘテロ二量体細胞表面糖タンパク質受容体である（Ｈｙｎｅｓ，Ｒ．Ｏ．，Ｃｅｌｌ，１９９２，６９：１１−２５、及びＨｅｍｌｅｒ，Ｍ．Ｅ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９０，８：３６５−３６８）。これは、内皮、上皮、及び細胞外基質タンパク質上の明確に異なる細胞接着分子（ＣＡＭ）に特異的に結合する、２つのヘテロ二量体の非共有結合的に相互作用するα及びβ膜貫通サブユニットから構成される。このようにして、インテグリンは、高度に制御された様式で血液からほぼ全ての組織部位への白血球の動員を補助する組織特異的な細胞接着受容体として機能し、正常な組織及び炎症部位への白血球のホーミングにおいて役割を果たすことができる（ｖｏｎ  Ａｎｄｒｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４３：１０２０−３４（２０００））。免疫系において、インテグリンは、炎症プロセス中の白血球の輸送、接着、及び浸潤に関与する（Ｎａｋａｊｉｍａ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９９４，１７９：１１４５−１１５４）。インテグリンの差次的発現は細胞の接着特性を制御し、異なるインテグリンが異なる炎症応答に関与する。（Ｂｕｔｃｈｅｒ，Ｅ．Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６，２７２：６０−６６）。ベータ７含有インテグリン（すなわち、アルファ４ベータ７及びアルファＥベータ７）は、主に単球、リンパ球、好酸球、好塩基球、及びマクロファージ上で発現されるが、好中球上では発現されない（Ｅｌｉｃｅｓ，Ｍ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，１９９０，６０：５７７−５８４）。
【００１２】
抗インテグリン薬は、ＣＤの治療のために承認された別のクラスの生物製剤である。ナタリズマブは、米国では中等度から重度に活性なＣＤの治療のためにのみ承認されている抗インテグリン薬である。α４β１とα４β７との両方を遮断するナタリズマブの使用は、α４β１／ＶＣＡＭ−１結合の阻害が、稀だが重篤なＣＮＳ感染症である進行性多巣性白質脳症（ＰＭＬ）のリスクを増加させるという懸念のために限定されている。ベドリズマブは、最も近年に承認されたＣＤのための腸選択性抗インテグリン薬であるが、これは、α４β７インテグリン受容体のみを標的にし、接着分子ＭＡｄＣＡＭ−１へのＴリンパ球結合を阻害し、静脈内（ＩＶ）輸注として投与される。ベドリズマブの中枢的な（ｐｉｖｏｔａｌ）治験において、患者の３１％が、６週間の誘導治療で、クローン病活性指数［ＣＤＡＩ］スコアの基線から≧１００ポイントの減少と定義される臨床応答を有し、ベドリズマブ応答者のうち最大３９％が、プラセボを与えられた患者の２２％と比較して、４６週間の維持治療による寛解（≦１５０のＣＤＡＩスコアと定義される）を達成した（Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３６９（８）：７１１−７２１，２０１３、Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３７：２０４−１３，２０１３）。ベドリズマブはＣＤの新たな治療薬としての見込みを示すが、腸選択性であり、より良好な応答及び寛解率を達成する、より簡便な療法の必要性が依然として存在する。
【００１３】
α４β７インテグリン（ベドリズマブの標的）は、小腸内のパイエル板、大腸内のリンパ濾胞、及び腸間膜リンパ節といった腸管粘膜及び会合リンパ組織への細胞の遊走において重要である、白血球ホーミング受容体である。腸において、白血球のローリング及び粘膜内皮への強力な接着が、ケモカインからのシグナルによって開始され、粘膜アドレシン細胞接着分子（ＭＡｄＣＡＭ）−１会合シアリルルイスＸを介して媒介される。ケモカインシグナル伝達は、α４β７インテグリンが低いＭＡｄＣＡＭ−１結合親和性から高いＭＡｄＣＡＭ−１結合親和性への変化を受けることを誘導する。次いで白血球は、血管内皮を通って下層組織に至る溢出のプロセスを停止させ、開始する。この溢出プロセスは、正常な免疫細胞の再循環状態と炎症条件との両方において起こると考えられている（ｖｏｎ  Ａｎｄｒｉａｎら、上記）。浸潤物中のα４β７＋細胞の数、及びリガンドＭＡｄＣＡＭ−１の発現は、ＵＣ患者またはＣＤ患者の腸管内などの慢性炎症の部位において、より高い（Ｂｒｉｓｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  １５１：９７−１１０（１９９７）、Ｓｏｕｚａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｕｔ  ４５：８５６-６３（１９９９））。α４β７は、ＭＡｄＣＡＭ−１及び血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）−１を発現する高内皮細静脈に、そして細胞外基質分子フィブロネクチン断片ＣＳ−１に、優先的に結合する（Ｃｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２６７：８３６６−７０（１９９２）、Ｒｕｅｇｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  １７：１７９−８９（１９９２）、Ｂｅｒｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  ７４：１８５−９５（１９９３））。腸粘膜血管内で構成的に発現されるＭＡｄＣＡＭ−１と一緒になって、α４β７インテグリンは、白血球の腸指向性において選択的な役割を果たすが、末梢組織またはＣＮＳへの白血球のホーミングには寄与しないようである。代わりに、末梢リンパ輸送が、ＶＣＡＭ−１とのa４b１の相互作用と関連付けられている（Ｙｅｄｎｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３５６：６３−６（１９９２）、Ｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ６４：１３３６−４２（２００５））。
【００１４】
もっぱらＴリンパ球上で発現され、粘膜組織と会合するβ７インテグリンファミリーの別のメンバーは、別名ＣＤ１０３として知られるαＥβ７インテグリンである。αＥβ７インテグリンは、上皮細胞上のＥ−カドヘリンに選択的に結合し、上皮内リンパ球区画内の粘膜組織内でのＴ細胞の保持において役割を果たすと提唱されている（Ｃｅｐｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５０：３４５９-７０（１９９３）、Ｋａｒｅｃｌａ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２５：８５２−６（１９９５））。粘膜固有層内のαＥβ７＋細胞は、ストレスを受けたか、または感染した上皮細胞に対して、細胞傷害性を示すと報告されている（Ｈａｄｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５９：３７４８−５６（１９９７）、Ｂｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ  ２０６：１７８−８５（２００５））。αＥβ７の発現は、ＣＤにおいて増加し（Ｅｌｅｗａｕｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｃｔａ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｂｅｌｇ  ６１：２８８−９４（１９９８）、Ｏｓｈｉｔａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ  １２：７１５−９（２００３））、抗αＥβ７抗体治療は、マウスにおける実験的大腸炎を減弱させることが報告されており、ＩＢＤの実験モデルにおけるαＥβ７＋リンパ球の役割が暗示されている（Ｌｕｄｖｉｋｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６２：４９７５−８２（１９９９））。
【００１５】
β７インテグリンサブユニットを標的とするヒト化モノクローナル抗体が、以前に説明されている。例えば、国際特許公開第ＷＯ２００６／０２６７５９号を参照されたい。そのような抗体の１つであるエトロリズマブ（ｒｈｕＭＡｂベータ７）は、ラット抗マウス／ヒトモノクローナル抗体ＦＩＢ５０４に由来する（Ａｎｄｒｅｗ  ＤＰ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５３：３８４７−６１，１９９４）。これは、ヒトＩｇＧ１重鎖及びκ１軽鎖フレームワークを含むように操作された。国際特許公開第ＷＯ２００６／０２６７５９号。
【００１６】
皮下投与されるｍＡｂであるエトロリズマブは、ベドリズマブとは異なり、それぞれ、Ｔ細胞サブセットの輸送及び腸管粘膜内でのその保持を制御する、α４β７受容体とαＥβ７受容体との両方を標的とする、新規の抗インテグリン薬である。したがって、エトロリズマブは、全身性免疫抑制を伴わずに、二重作用機構（ＭＯＡ）を介した、ＣＤにおける付加的な治療効果の潜在性を提示する。エトロリズマブは、高い親和性で、α４β７（Ｈｏｌｚｍａｎｎ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  ５６：３７−４６，１９８９、Ｈｕ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８９：８２５４−８，１９９２）、及びαＥβ７に結合する（Ｃｅｐｅｋ  ＫＬ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５０：３４５９−７０，１９９３）。この機構により、エトロリズマブは、それぞれ、細胞接着分子（ＭＡｄＣＡＭ−１）及びＥ−カドヘリンとの結合を介して起こる、腸管粘膜における白血球亜群のホーミング及び保持を遮断する。したがって、これは、新規の腸粘膜選択性の輸送防止剤（ａｎｔｉ−ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）となり、その選択性は、他の器官及び組織ではなく腸への輸送を優先的に標的にすることによって、全身性免疫抑制を排除し得る。最長６か月の持続期間の複数の非臨床的な一般毒性試験によるデータは、エトロリズマブが、いかなる器官系においても有害作用を及ぼさなかったことを実証した。例えば、Ｓｔｅｆａｎｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １６２：１８５５−１８７０，２０１１、国際特許公開第ＷＯ  ２００９／１４０６８４号を参照されたい。
【００１７】
ナタリズマブとは異なり、エトロリズマブは、α４β１に結合したり、または、α４β１とＶＣＡＭ−１との相互作用、ならびにＣＮＳ及び末梢リンパ組織へのリンパ球の分布及びホーミングを阻害したりしないことに留意することが重要である。したがって、エトロリズマブは、進行性多巣性白質脳症（ＰＭＬ）のリスクを増加するものとは予想されない。エトロリズマブの安全性評価は、中等度から重度の活性ＵＣ患者が単回用量もしくは複数用量のＩＶまたは皮下（ＳＣ）のいずれかのエトロリズマブを受けた、成人の第１相及び第２相研究で完了されている。合計１５８人の患者がエトロリズマブに曝露され、エトロリズマブ治療に関連付けられる重篤感染または日和見感染の比率増加を含む著しい有害な安全性シグナルはなかった。エトロリズマブの臨床経験が限定されていることは認めるが、エトロリズマブで治療された患者においてＰＭＬの事象は報告されていない。
【００１８】
これまで、クローン病臨床治験における一次的評価項目はクローン病活性指数（ＣＤＡＩ）であり、これは、例えばベドリズマブ及びナタリズマブを含む、複数の薬物治療の承認の基準として機能してきた。ＣＤＡＩは、疾患活性の臨床医包括的評価を、患者報告アウトカム（ＰＲＯ）（すなわち、腹痛、患者を睡眠から覚醒させる疼痛、食欲）、身体的徴候（すなわち、１日平均体温、腹部腫瘤）、薬物の使用（すなわち、下痢のためのロペラミドまたはオピエートの使用）、及び検査室試験（すなわち、ヘマトクリット）を表す、１８個の潜在的項目に回帰させることによって、開発された。後ろ向き段階的回帰分析は８つの独立した予測因子を特定し、これらは、液状便または軟便の数、腹痛の重症度、全体的な健康状態、腸外症状の発生、下痢止め薬の必要性、腹部腫瘤の存在、ヘマトクリット、及び体重である。最終スコアは、これらの８つの項目を複合し、０〜６００の範囲の総合的なＣＤＡＩスコアを構築するように回帰係数及び標準化を使用して調整したものであり、より高いスコアは、より高い疾患活性を示す。広く使用されているベンチマークは次の通りである：ＣＤＡＩ＜１５０は臨床的寛解と定義され、１５０〜２１９は軽度に活性な疾患と定義され、２２０〜４５０は中等度に活性な疾患と定義され、４５０超は非常に重度の疾患と定義される（Ｂｅｓｔ  ＷＲ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ７７：８４３−６，１９７９）。ベドリズマブ及びナタリズマブは、実証された臨床的寛解、すなわち、ＣＤＡＩ≦１５０に基づいて承認されている。
【００１９】
ＣＤＡＩは４０年以上にわたって使用されており、薬物承認の基準として機能してきたが、臨床治験の評価項目としてはいくつかの制限を有する。例えば、総合スコアの大部分は、定義が曖昧であり標準化された用語ではない、患者のダイアリーカード項目（疼痛、液状排便の数、及び全体的な健康状態）に由来する（Ｓａｎｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ  ４１：４５１−８，１９８８、Ｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ  １７：１０５−１１，２０１１）。加えて、疼痛の測定は、更新された７ポイントスケールではなく、４ポイントスケールに基づく。残りの５つの指標項目は有効性シグナルの特定にほとんど寄与せず、測定ノイズの源であり得る。さらに、ＣＤＡＩの基準妥当性の不足、報告されているＣＤＡＩと炎症の内視鏡的測定との間の相関性の欠如（これは、ＣＤＡＩを、活性ＣＤ及び過敏性腸症候群の弁別子として不十分なものにし得る）、及び報告されている高いプラセボ率に関する懸念が生じている（Ｋｏｒｚｅｎｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．３５２：２１９３−２０１，２００５、Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５３：１９１２−２５，２００５、Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  １９；１４６：８２９−３８，２００７，Ｅｐｕｂ  ２００７  Ａｐｒ  ３０、Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４６：（５  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  １）Ｓ−３６８，２０１４）。
【００２０】
したがって、新たなＰＲＯツール、または新たなＰＲＯを導出するためのＣＤＡＩの適応形態といった、ＣＤ症状の付加的または代替的な尺度が必要であると、一般的に認識されている。ＰＲＯ２及びＰＲＯ３ツールは、そのようなＣＤＡＩの適応形態であり、Ｋｈａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．４１：７７−８６，２０１５に近年記載された。ＰＲＯ２は、緩い／液状の便の頻度及び腹痛を評価する（同上）。これらの項目は、ＣＤＡＩから導出され、かつそれに従って重み付けられ、全体的な健康状態と併せて、ＣＤＡＩによって測定される観察される臨床的利益に最も寄与する、ＣＤＡＩダイアリーカード項目である（Ｓａｎｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ  ４１：４５１−８，１９８８、Ｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ  １７：１０５−１１，２０１１、Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４６：（５  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  １）Ｓ−３６８，２０１４）。≦１１の寛解スコアは、７日の期間中の平均排便頻度及び疼痛スコアのＣＤＡＩ加重和であり、これは、第ＩＩ相臨床研究における中等度から重度のＣＤのためのウステキヌマブ誘導治療の回顧的データ分析において、ＣＤＡＩ寛解（＜１５０のスコア）の特定に最適な感度及び特異性をもたらした（Ｇａｓｉｎｋ  Ｃ，ｅｔ  ａｌ．，［ａｂｓｔｒａｃｔ］ＡＣＧ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ２０１４）。ＰＲＯ２は、ＣＤＡＩによって測定された活性ＣＤにおけるＭＴＸ治療の回顧的データ分析において連続的評価項目として使用されたとき、高感度かつ応答性であることが示された（Ｋｈａｎｎａ  Ｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ  ２０：１８５０−６１，２０１４）。
【００２１】
クローン病の範囲及び重症度のさらなる評価手段は、内視鏡検査である。クローン病に典型的な内視鏡的病変は、多数の研究において説明されており、例えば、アフタ様潰瘍形成、「穿孔性潰瘍（ｐｕｎｃｈｅｄ−ｏｕｔ  ｕｌｃｅｒ）」、敷石形成（ｃｏｂｂｌｅｓｔｏｎｉｎｇ）、及び狭窄を含む。そのような病変の内視鏡的評価は、初めて妥当性が認められた内視鏡的スコアである、クローン病内視鏡的重症度指数（Ｃｒｏｈｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ  Ｉｎｄｅｘ  ｏｆ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ、ＣＤＥＩＳ）を開発するために使用された（Ｍａｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｕｔ  ３９：９８３−９，１９８９）。より近年になって、ＣＤＥＩＳは時間がかかり日常的用途には複雑かつ非実用的であることから、クローン病簡易内視鏡的活性指数（Ｓｉｍｐｌｉｅｄ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｓｃｏｒｅ  ｆｏｒ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ、ＳＥＳ−ＣＤ）が開発され、妥当性が認められた（Ｄａｐｅｒｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．Ｅｎｄｏｓｃ．６０（４）：５０５−１２，２００４）。ＳＥＳ−ＣＤは、５つの回腸結腸の区域で点数化される、４つの内視鏡的変数（潰瘍の大きさ、潰瘍により覆われた表面の割合、何らかの他の病変（例えば、炎症）がある表面の割合、及び狭小化［狭窄］の存在）から成り、各変数または評価は、０〜３で評点される。
【００２２】
ＣＤにおける疾患の範囲及び重症度の新たなＰＲＯ評価項目ならびに新たな内視鏡検査評価項目の開発及び妥当性検証における、こうした近年の進歩にも関わらず、そのような新たな評価項目を、前向きな第ＩＩＩ相臨床研究、すなわち、治療薬候補の特定の投薬レジメンの有効性を評価することを目的とした、中枢的または登録用（ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎａｌ）研究の設計及び実施において用いる方法を決定するために利用可能な前向き臨床研究は、これまでに発表されていない。したがって、抗インテグリン薬を含む様々なクラスの治療薬候補に関する最適な有効性エンドポイントを定義するために、これらの基準の使用法を改善する必要がある。そのような改善は、最適化された有効性エンドポイントを満たす特定の（例えば、抗インテグリンβ７抗体を含む抗インテグリン薬の）投薬レジメンを定義することに関しても必要とされている。
【００２３】
本明細書に記載される本発明は、上述の必要性のいくつかを満たし、他の利益を提供する。
【００２４】
特許出願及び刊行物を含め、本明細書に引用される参考文献は全て、あらゆる目的のために、参照によりそれらの全体が援用される。
【発明の概要】
【００２５】
本発明の方法は、治療有効量のインテグリンベータ７アンタゴニスト（例えば、エトロリズマブ（ｒｈｕＭＡｂベータ７）を含む、本明細書において抗インテグリンベータ７抗体とも称される抗ベータ７抗体など）が、本明細書に記載のある特定の有効性評価項目を測定することによって判定した場合に有効性を示す、ある特定の投薬レジメンに従って皮下投与され得るという発見に、少なくとも部分的に基づく。
【００２６】
したがって、一態様において、哺乳類対象におけるクローン病（ＣＤ）の治療方法であって、治療有効量のインテグリンベータ７アンタゴニストを該対象に投与することを含む方法が、提供される。ある特定の実施形態において、哺乳動物対象は患者である。ある特定の実施形態において、患者はヒトである。ある特定の実施形態において、インテグリンベータ７アンタゴニストは、皮下投与される。ある特定の実施形態において、インテグリンベータ７アンタゴニストは、抗ベータ７抗体とも称される、モノクローナル抗インテグリンベータ７サブユニット抗体である。ある特定のかかる実施形態において、抗ベータ７抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体、及びヒト化抗体から選択される。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、抗体断片である。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、６つの超可変領域（ＨＶＲ）を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１は、アミノ酸配列Ａ１−Ａ１１を含み、Ａ１−Ａ１１は、ＲＡＳＥＳＶＤＴＹＬＨ（配列番号１）、ＲＡＳＥＳＶＤＳＬＬＨ（配列番号７）、ＲＡＳＥＳＶＤＴＬＬＨ（配列番号８）、もしくはＲＡＳＥＳＶＤＤＬＬＨ（配列番号９）、または配列番号１、７、８、もしくは９の変異形（配列番号２６）であり、アミノ酸Ａ２は、Ａ、Ｇ、Ｓ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ３は、Ｓ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、Ａ４は、Ｅ、Ｖ、Ｑ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ５は、Ｓ、Ｙ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ６は、Ｖ、Ｒ、Ｉ、Ａ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、及びＱから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ７は、Ｄ、Ｖ、Ｓ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ８は、Ｄ、Ｇ、Ｎ、Ｅ、Ｔ、Ｐ、及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ９は、Ｌ、Ｙ、Ｉ、及びＭから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１０は、Ｌ、Ａ、Ｉ、Ｍ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１１は、Ｈ、Ｙ、Ｆ、及びＳから成る群から選択され、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２は、アミノ酸配列Ｂ１−Ｂ８を含み、Ｂ１−Ｂ８は、ＫＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２）、ＲＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２０）、もしくはＸａａＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２１、Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）、または配列番号２、２０、もしくは２１の変異形（配列番号２７）であり、アミノ酸Ｂ１は、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｖ、Ａ、Ｆ、Ｑ、Ｈ、Ｐ、Ｉ、Ｌ、Ｙ、及びＸａａ（Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）から成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ４は、Ｓ及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ５は、Ｑ及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ６は、Ｓ、Ｄ、Ｌ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ７は、Ｉ、Ｖ、Ｅ、及びＫから成る群から選択され、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３は、アミノ酸配列Ｃ１−Ｃ９を含み、Ｃ１−Ｃ９は、ＱＱＧＮＳＬＰＮＴ（配列番号３）または配列番号３の変異形（配列番号２８）であり、アミノ酸Ｃ８は、Ｎ、Ｖ、Ｗ、Ｙ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｆ、Ｈ、Ｉ  Ｌ、及びＭから成る群から選択され、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１は、アミノ酸配列Ｄ１−Ｄ１０を含み、Ｄ１−Ｄ１０は、ＧＦＦＩＴＮＮＹＷＧ（配列番号４）であり、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２は、アミノ酸配列Ｅ１−Ｅ１７を含み、Ｅ１−Ｅ１７は、ＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号５）、または配列番号５の変異形（配列番号２９）であり、アミノ酸Ｅ２は、Ｙ、Ｆ、Ｖ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ６は、Ｓ及びＧから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１０は、Ｓ及びＹから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１２は、Ｎ、Ｔ、Ａ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸１３は、Ｐ、Ｈ、Ｄ、及びＡから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１５は、Ｌ及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１７は、Ｓ及びＧから成る群から選択され、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３は、アミノ酸配列Ｆ２−Ｆ１１を含み、Ｆ２−Ｆ１１は、ＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号６）もしくはＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１９）であるか、あるいは、アミノ酸配列Ｆ１−Ｆ１１を含み、Ｆ１−Ｆ１１は、ＡＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１６）、ＡＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１７）、もしくはＡＱＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１８）、または配列番号６、１６、１７、１８、もしくは１９の変異形（配列番号３０）であり、アミノ酸Ｆ２は、Ｒ、Ｍ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｑ、Ｓであり、及び／または、アミノ酸Ｆ１１は、Ｆ及びＹから成る群から選択される。
【００２７】
ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、３つの重鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｈ１−Ｈ３）配列、及び３つの軽鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｌ１−Ｌ３）配列を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１は、配列番号７、配列番号８、または配列番号９を含み、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２は、配列番号２を含み、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３は、配列番号３を含み、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１は、配列番号４を含み、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２は、配列番号５を含み、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３は、配列番号６、または配列番号１６、または配列番号１７、または配列番号１９を含む。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変重鎖を含む。
【００２８】
ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、ｒｈｕＭＡｂベータ７とも称されるエトロリズマブである。
【００２９】
別の態様では、クローン病を有する患者における寛解の誘導方法が提供される。ある特定の実施形態において、本方法は、患者に治療有効量のインテグリンベータ７アンタゴニストを皮下投与することを含み、該治療有効量は、第１の用量の投与の１４週間後に寛解を誘導する。一部の実施形態において、インテグリンベータ７アンタゴニストは、モノクローナル抗インテグリンベータ７抗体である。一部の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体、及びヒト化抗体から選択される。一部の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、抗体断片である。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、６つの超可変領域（ＨＶＲ）を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１は、アミノ酸配列Ａ１−Ａ１１を含み、Ａ１−Ａ１１は、ＲＡＳＥＳＶＤＴＹＬＨ（配列番号１）、ＲＡＳＥＳＶＤＳＬＬＨ（配列番号７）、ＲＡＳＥＳＶＤＴＬＬＨ（配列番号８）、もしくはＲＡＳＥＳＶＤＤＬＬＨ（配列番号９）、または配列番号１、７、８、もしくは９の変異形（配列番号２６）であり、アミノ酸Ａ２は、Ａ、Ｇ、Ｓ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ３は、Ｓ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、Ａ４は、Ｅ、Ｖ、Ｑ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ５は、Ｓ、Ｙ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ６は、Ｖ、Ｒ、Ｉ、Ａ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、及びＱから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ７は、Ｄ、Ｖ、Ｓ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ８は、Ｄ、Ｇ、Ｎ、Ｅ、Ｔ、Ｐ、及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ９は、Ｌ、Ｙ、Ｉ、及びＭから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１０は、Ｌ、Ａ、Ｉ、Ｍ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１１は、Ｈ、Ｙ、Ｆ、及びＳから成る群から選択され、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２は、アミノ酸配列Ｂ１−Ｂ８を含み、Ｂ１−Ｂ８は、ＫＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２）、ＲＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２０）、もしくはＸａａＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２１、Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）、または配列番号２、２０、もしくは２１の変異形（配列番号２７）であり、アミノ酸Ｂ１は、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｖ、Ａ、Ｆ、Ｑ、Ｈ、Ｐ、Ｉ、Ｌ、Ｙ、及びＸａａ（Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）から成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ４は、Ｓ及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ５は、Ｑ及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ６は、Ｓ、Ｄ、Ｌ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ７は、Ｉ、Ｖ、Ｅ、及びＫから成る群から選択され、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３は、アミノ酸配列Ｃ１−Ｃ９を含み、Ｃ１−Ｃ９は、ＱＱＧＮＳＬＰＮＴ（配列番号３）または配列番号３の変異形（配列番号２８）であり、アミノ酸Ｃ８は、Ｎ、Ｖ、Ｗ、Ｙ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｆ、Ｈ、Ｉ  Ｌ、及びＭから成る群から選択され、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１は、アミノ酸配列Ｄ１−Ｄ１０を含み、Ｄ１−Ｄ１０は、ＧＦＦＩＴＮＮＹＷＧ（配列番号４）であり、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２は、アミノ酸配列Ｅ１−Ｅ１７を含み、Ｅ１−Ｅ１７は、ＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号５）、または配列番号５の変異形（配列番号２９）であり、アミノ酸Ｅ２は、Ｙ、Ｆ、Ｖ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ６は、Ｓ及びＧから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１０は、Ｓ及びＹから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１２は、Ｎ、Ｔ、Ａ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸１３は、Ｐ、Ｈ、Ｄ、及びＡから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１５は、Ｌ及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１７は、Ｓ及びＧから成る群から選択され、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３は、アミノ酸配列Ｆ２−Ｆ１１を含み、Ｆ２−Ｆ１１は、ＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号６）もしくはＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１９）であるか、あるいは、アミノ酸配列Ｆ１−Ｆ１１を含み、Ｆ１−Ｆ１１は、ＡＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１６）、ＡＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１７）、もしくはＡＱＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１８）、または配列番号６、１６、１７、１８、もしくは１９の変異形（配列番号３０）であり、アミノ酸Ｆ２は、Ｒ、Ｍ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｑ、Ｓであり、及び／または、アミノ酸Ｆ１１は、Ｆ及びＹから成る群から選択される。
【００３０】
ある特定の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、３つの重鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｈ１−Ｈ３）配列、及び３つの軽鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｌ１−Ｌ３）配列を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１は、配列番号７、配列番号８、または配列番号９を含み、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２は、配列番号２を含み、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３は、配列番号３を含み、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１は、配列番号４を含み、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２は、配列番号５を含み、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３は、配列番号６、または配列番号１６、または配列番号１７、または配列番号１９を含む。
【００３１】
ある特定の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変重鎖を含む。ある特定の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、エトロリズマブである。
【００３２】
なおも別の態様では、患者は、第１の用量のインテグリンベータ７アンタゴニストの投与前に、中等度から重度の活性クローン病を有する。一部の実施形態において、患者は、第１の用量の投与前の７日間中のいずれの時間においても、２２０以上かつ４８０以下のクローン病活性指数（ＣＤＡＩ）スコアを有すると判定される。一部の実施形態において、患者は、第１の用量の投与前の７日間中のいずれの時間においても、１４以上の患者報告アウトカム２（ＰＲＯ２）スコアを有すると判定される。一部の実施形態において、患者は、活性炎症を有すると判定され、活性炎症は、回腸結腸内視鏡検査（ｉｌｅｏｃｏｌｏｎｏｓｃｏｐｙ）によって判定された場合に７以上のクローン病簡易内視鏡的指数（Ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ  Ｉｎｄｅｘ  ｆｏｒ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ、ＳＥＳ−ＣＤ）スコアとして判定される。一部の実施形態において、患者は、孤立性回腸炎を有するかまたは回腸切除後であり、患者は、活性炎症を有すると判定され、活性炎症は、回腸結腸内視鏡検査によって判定された場合に４以上のＳＥＳ−ＣＤスコアとして判定される。ある特定の実施形態において、患者は、上記に従うＣＤＡＩスコア及びＰＲＯ２スコアを有する。ある特定の実施形態において、患者は、上記に従うＣＤＡＩスコア、ＰＲＯ２スコア、及びＳＥＳ−ＣＤスコアを有する。
【００３３】
なおもさらに別の態様では、患者は、従来の療法に対する不十分な応答、応答の損失、または不耐性を有した。一部の実施形態において、従来の療法は、免疫抑制剤療法、コルチコステロイド療法、及び抗ＴＮＦ療法のうちの１つ以上から選択される。一部の実施形態において、免疫抑制剤療法は、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、及びメトトレキサートから選択される。一部の実施形態において、コルチコステロイド療法は、プレドニゾン（またはプレドニゾン等価物）及びブデソニドから選択される。一部の実施形態において、抗ＴＮＦ療法は、インフリキシマブ、アダリムマブ、及びセルトリズマブペゴールから選択される。
【００３４】
なおもさらに別のさらなる態様では、抗インテグリンベータ７抗体は、４週間毎に１０５ｍｇの均一用量で投与される。ある特定の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、４週間毎に２１０ｍｇの均一用量で投与される。一部の実施形態において、抗インテグトリン（ｉｎｔｅｇｔｒｉｎ）ベータ７抗体は、第１の用量において２１０ｍｇ、第１の用量の２週間後に２１０ｍｇ、第１の用量の４週間後に２１０ｍｇ、第１の用量の８週間後に２１０ｍｇ、かつ第１の用量の１２週間後に２１０ｍｇの均一用量として投与される。一部の実施形態において、抗インテグトリン（ｉｎｔｅｇｔｒｉｎ）ベータ７抗体は、第１の用量において２１０ｍｇ、第１の用量の２週間後に２１０ｍｇ、第１の用量の４週間後に２１０ｍｇ、第１の用量の８週間後に２１０ｍｇ、かつ第１の用量の１２週間後に２１０ｍｇの均一用量として投与される。一部の実施形態において、寛解は、クローン病活性指数（ＣＤＡＩ）スコアによって判定され、ＣＤＡＩスコアは、１５０未満である。一部の実施形態において、治療有効量は、第１の用量の投与の１０週間後に寛解を誘導する。一部の実施形態において、寛解は、患者報告アウトカム２（ＰＲＯ２）スコアによって判定され、ＰＲＯ２スコアは、１１以下である。一部の実施形態において、治療有効量は、クローン病簡易内視鏡的指数（ＳＥＳ−ＣＤ）スコアによって判定される内視鏡的改善を誘導する。一部の実施形態において、第１の用量の投与の１４週間後に判定されるＳＥＳ−ＣＤスコアは、基線で判定されるＳＥＳ−ＣＤスコアと比較して５０％低減する。一部の実施形態において、治療有効量は、応答を誘導し、該応答は、基線で判定されるＣＤＡＩスコアと比較して少なくとも７０ポイントのＣＤＡＩスコアの減少として判定される。一部の実施形態において、該応答は、基線で判定されるＣＤＡＩスコアと比較して少なくとも１００ポイントのＣＤＡＩスコアの減少として判定される。
【００３５】
一態様において、クローン病を有する患者における寛解の維持方法が提供される。ある特定の実施形態において、本方法は、患者に治療有効量のインテグリンベータ７アンタゴニストを皮下投与することを含み、該治療有効量は、第１の用量の投与後、少なくとも５２週間にわたって、または少なくとも６６週間にわたって、または少なくとも７０週間にわたって、または少なくとも７４週間にわたって寛解を維持する。一部の実施形態において、該治療有効量は、第１の用量の投与後、少なくとも７４週間にわたって寛解を維持し、患者は、第１の用量の投与後、１４週間にわたってコルチコステロイド療法を受け、該コルチコステロイド療法は、第１の用量の投与の１４週間後から開始して中止まで経時的に低減する。一部の実施形態において、コルチコステロイド療法は、１日当たり２０ｍｇ以下のプレドニゾンまたはプレドニゾン等価物であり、コルチコステロイド療法は、中止まで１週当たり２．５ｍｇずつプレドニゾンまたはプレドニゾン等価物が低減する。一部の実施形態において、コルチコステロイド療法は、１日当たり６ｍｇ以下の経口ブデソニドであり、コルチコステロイド療法は、中止まで２週間毎に３ｍｇずつ経口ブデソニドが低減する。ある特定の実施形態において、治療有効量は、持続的寛解を維持し、持続的寛解は、第１の用量の投与の２４週間後、第１の用量の投与の２８週間後、第１の用量の投与の３２週間後、第１の用量の投与の４４週間後、第１の用量の投与の５６週間後、第１の用量の投与の６６週間後、第１の用量の投与の７０週間後、及び第１の用量の投与の７４週間後から選択される６つ以上の時点の各々において、１５０未満のＣＤＡＩスコアによって判定される。ある特定の実施形態において、インテグリンベータ７アンタゴニストは、モノクローナル抗インテグリンベータ７抗体である。一部の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、キメラ抗体、ヒト抗体、及びヒト化抗体から選択される。一部の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、抗体断片である。一部の実施形態において、抗ベータ７抗体は、６つの超可変領域（ＨＶＲ）を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１は、アミノ酸配列Ａ１−Ａ１１を含み、Ａ１−Ａ１１は、ＲＡＳＥＳＶＤＴＹＬＨ（配列番号１）、ＲＡＳＥＳＶＤＳＬＬＨ（配列番号７）、ＲＡＳＥＳＶＤＴＬＬＨ（配列番号８）、もしくはＲＡＳＥＳＶＤＤＬＬＨ（配列番号９）、または配列番号１、７、８、もしくは９の変異形（配列番号２６）であり、アミノ酸Ａ２は、Ａ、Ｇ、Ｓ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ３は、Ｓ、Ｇ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、Ａ４は、Ｅ、Ｖ、Ｑ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ５は、Ｓ、Ｙ、Ａ、Ｄ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｎ、Ｐ、Ｒ、Ｔ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ６は、Ｖ、Ｒ、Ｉ、Ａ、Ｇ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、及びＱから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ７は、Ｄ、Ｖ、Ｓ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、及びＴから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ８は、Ｄ、Ｇ、Ｎ、Ｅ、Ｔ、Ｐ、及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ９は、Ｌ、Ｙ、Ｉ、及びＭから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１０は、Ｌ、Ａ、Ｉ、Ｍ、及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ａ１１は、Ｈ、Ｙ、Ｆ、及びＳから成る群から選択され、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２は、アミノ酸配列Ｂ１−Ｂ８を含み、Ｂ１−Ｂ８は、ＫＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２）、ＲＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２０）、もしくはＸａａＹＡＳＱＳＩＳ（配列番号２１、Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）、または配列番号２、２０、もしくは２１の変異形（配列番号２７）であり、アミノ酸Ｂ１は、Ｋ、Ｒ、Ｎ、Ｖ、Ａ、Ｆ、Ｑ、Ｈ、Ｐ、Ｉ、Ｌ、Ｙ、及びＸａａ（Ｘａａは任意のアミノ酸を表す）から成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ４は、Ｓ及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ５は、Ｑ及びＳから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ６は、Ｓ、Ｄ、Ｌ、及びＲから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｂ７は、Ｉ、Ｖ、Ｅ、及びＫから成る群から選択され、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３は、アミノ酸配列Ｃ１−Ｃ９を含み、Ｃ１−Ｃ９は、ＱＱＧＮＳＬＰＮＴ（配列番号３）または配列番号３の変異形（配列番号２８）であり、アミノ酸Ｃ８は、Ｎ、Ｖ、Ｗ、Ｙ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｆ、Ｈ、Ｉ  Ｌ、及びＭから成る群から選択され、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１は、アミノ酸配列Ｄ１−Ｄ１０を含み、Ｄ１−Ｄ１０は、ＧＦＦＩＴＮＮＹＷＧ（配列番号４）であり、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２は、アミノ酸配列Ｅ１−Ｅ１７を含み、Ｅ１−Ｅ１７は、ＧＹＩＳＹＳＧＳＴＳＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号５）、または配列番号５の変異形（配列番号２９）であり、アミノ酸Ｅ２は、Ｙ、Ｆ、Ｖ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ６は、Ｓ及びＧから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１０は、Ｓ及びＹから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１２は、Ｎ、Ｔ、Ａ、及びＤから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸１３は、Ｐ、Ｈ、Ｄ、及びＡから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１５は、Ｌ及びＶから成る群から選択され、及び／または、アミノ酸Ｅ１７は、Ｓ及びＧから成る群から選択され、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３は、アミノ酸配列Ｆ２−Ｆ１１を含み、Ｆ２−Ｆ１１は、ＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号６）もしくはＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１９）であるか、あるいは、アミノ酸配列Ｆ１−Ｆ１１を含み、Ｆ１−Ｆ１１は、ＡＭＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１６）、ＡＲＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１７）、もしくはＡＱＴＧＳＳＧＹＦＤＦ（配列番号１８）、または配列番号６、１６、１７、１８、もしくは１９の変異形（配列番号３０）であり、アミノ酸Ｆ２は、Ｒ、Ｍ、Ａ、Ｅ、Ｇ、Ｑ、Ｓであり、及び／または、アミノ酸Ｆ１１は、Ｆ及びＹから成る群から選択される。一部の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、３つの重鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｈ１−Ｈ３）配列、及び３つの軽鎖超可変領域（ＨＶＲ−Ｌ１−Ｌ３）配列を含み、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１は、配列番号７、配列番号８、または配列番号９を含み、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２は、配列番号２を含み、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３は、配列番号３を含み、
（ｉｖ）ＨＶＲ−Ｈ１は、配列番号４を含み、
（ｖ）ＨＶＲ−Ｈ２は、配列番号５を含み、
（ｖｉ）ＨＶＲ−Ｈ３は、配列番号６、または配列番号１６、または配列番号１７、または配列番号１９を含む。一部の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、配列番号３１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変重鎖を含む。一部の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、エトロリズマブである。
【００３６】
先行の段落に記載の方法の別の態様では、患者は、第１の用量のインテグリンベータ７アンタゴニストの投与前に、中等度から重度の活性クローン病を有する。一部の実施形態において、患者は、第１の用量の投与前の７日間中のいずれの時間においても、２２０以上かつ４８０以下のＣＤＡＩスコアを有すると判定される。一部の実施形態において、患者は、第１の用量の投与前の７日間中のいずれの時間においても、１４以上のＰＲＯ２スコアを有すると判定される。一部の実施形態において、患者は、活性炎症を有すると判定され、活性炎症は、回腸結腸内視鏡検査によって判定された場合に７以上のＳＥＳ−ＣＤスコアとして判定される。一部の実施形態において、患者は、孤立性回腸炎を有するかまたは回腸切除後であり、患者は、活性炎症を有すると判定され、活性炎症は、回腸結腸内視鏡検査によって判定された場合に４以上のＳＥＳ−ＣＤスコアとして判定される。ある特定の実施形態において、患者は、上記に従うＣＤＡＩスコア及びＰＲＯ２スコアを有する。ある特定の実施形態において、患者は、上記に従うＣＤＡＩスコア、ＰＲＯ２スコア、及びＳＥＳ−ＣＤスコアを有する。
【００３７】
先行の段落に記載の方法のなおも別の態様では、患者は、従来の療法に対する不十分な応答、応答の損失、または不耐性を有した。一部の実施形態において、従来の療法は、免疫抑制剤療法、コルチコステロイド療法、及び抗ＴＮＦ療法のうちの１つ以上から選択される。一部の実施形態において、免疫抑制剤療法は、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、及びメトトレキサートから選択される。一部の実施形態において、コルチコステロイド療法は、プレドニゾン、プレドニゾン等価物、及びブデソニドから選択される。一部の実施形態において、抗ＴＮＦ療法は、インフリキシマブ、アダリムマブ、及びセルトリズマブペゴールから選択される。
【００３８】
寛解の維持のなおもさらなる態様において、抗インテグリンベータ７抗体は、４週間毎に１０５ｍｇの均一用量で投与される。一部の実施形態において、抗インテグリンベータ７抗体は、４週間毎に２１０ｍｇの均一用量で投与される。一部の実施形態において、抗インテグトリン（ｉｎｔｅｇｔｒｉｎ）ベータ７抗体は、第１の用量において２１０ｍｇ、第１の用量の２週間後に２１０ｍｇ、第１の用量の４週間後に２１０ｍｇ、第１の用量の８週間後に２１０ｍｇ、第１の用量の１２週間後に２１０ｍｇの均一用量として、かつその後４週間毎に１０５ｍｇで投与される。一部の実施形態において、寛解は、クローン病活性指数（ＣＤＡＩ）スコアによって判定され、ＣＤＡＩスコアは、１５０未満である。一部の実施形態において、患者は、少なくとも５２週間にわたってコルチコステロイドフリーである。一部の実施形態において、寛解は、患者報告アウトカム２（ＰＲＯ２）スコアによって判定され、ＰＲＯ２スコアは、１１以下である。一部の実施形態において、治療有効量は、クローン病簡易内視鏡的指数（ＳＥＳ−ＣＤ）スコアによって判定される内視鏡的改善を誘導する。一部の実施形態において、第１の用量の投与の６６週間後に判定されるＳＥＳ−ＣＤスコアは、基線で判定されるＳＥＳ−ＣＤスコアと比較して５０％低減する。一部の実施形態において、第１の用量の投与の６６週間後の内視鏡的改善は、粘膜炎の消散であり、粘膜炎の消散は、ゼロと判定されるＳＥＳ−ＣＤスコアである。一部の実施形態において、治療有効量は、第１の用量の投与の１４週間後に応答を誘導し、該応答は、基線で判定されるＣＤＡＩスコアと比較して少なくとも７０ポイントのＣＤＡＩスコアの減少として判定される。一部の実施形態において、治療有効量は、第１の用量の投与の６６週間後に応答を誘導し、該応答は、基線で判定されるＣＤＡＩスコアと比較して少なくとも１００ポイントのＣＤＡＩスコアの減少として判定される。
【００３９】
上記の実施形態のうちのいずれかのなおもさらなる態様において、インテグリンベータ７アンタゴニストは、プレフィルドシリンジ、またはプレフィルドシリンジと自動注射器との組み合わせを使用して投与される。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１Ａ】次のコンセンサス配列及び抗ベータ７サブユニット抗体配列に関する可変軽鎖及び重鎖の配列アライメントを示す：軽鎖ヒトサブグループカッパＩコンセンサス配列（図１Ａ、配列番号１２）、重鎖ヒトサブグループＩＩＩコンセンサス配列（図１Ｂ、配列番号１３）、ラット抗マウスベータ７抗体（Ｆｉｂ５０４）可変軽鎖（図１Ａ、配列番号１０）、ラット抗マウスベータ７抗体（Ｆｉｂ５０４）可変重鎖（図１Ｂ、配列番号１１）、及びヒト化抗体変異形：ヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフト可変軽鎖（図１Ａ、配列番号１４）、ヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフト可変重鎖（図１Ｂ、配列番号１５）、変異形ｈｕ５０４−５、ｈｕ５０４−１６、及びｈｕ５０４−３２（変異形ｈｕ５０４−５、ｈｕ５０４−１６、及び５０４−３２（配列番号２５）に関するヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフトからのアミノ酸変化は、図１Ａ）（軽鎖）（記載順にそれぞれ配列番号２２〜２４）、及び図１Ｂ（重鎖）に示されている。
【図１Ｂ】次のコンセンサス配列及び抗ベータ７サブユニット抗体配列に関する可変軽鎖及び重鎖の配列アライメントを示す：軽鎖ヒトサブグループカッパＩコンセンサス配列（図１Ａ、配列番号１２）、重鎖ヒトサブグループＩＩＩコンセンサス配列（図１Ｂ、配列番号１３）、ラット抗マウスベータ７抗体（Ｆｉｂ５０４）可変軽鎖（図１Ａ、配列番号１０）、ラット抗マウスベータ７抗体（Ｆｉｂ５０４）可変重鎖（図１Ｂ、配列番号１１）、及びヒト化抗体変異形：ヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフト可変軽鎖（図１Ａ、配列番号１４）、ヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフト可変重鎖（図１Ｂ、配列番号１５）、変異形ｈｕ５０４−５、ｈｕ５０４−１６、及びｈｕ５０４−３２（変異形ｈｕ５０４−５、ｈｕ５０４−１６、及び５０４−３２（配列番号２５）に関するヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフトからのアミノ酸変化は、図１Ａ）（軽鎖）（記載順にそれぞれ配列番号２２〜２４）、及び図１Ｂ（重鎖）に示されている。
【図２Ａ】エトロリズマブの可変軽鎖領域（配列番号３１）を示す。
【図２Ｂ】エトロリズマブの可変重鎖領域（配列番号３２）を示す。
【図３】実施例１に記載される第ＩＩＩ相臨床治験の誘導期に関する研究スキームを示す。抗ＴＮＦ薬＝抗腫瘍壊死因子；ＣＤ＝クローン病；ＥＴＲＯ＝エトロリズマブ；ＩＳ＝免疫抑制剤；ＳＣ＝皮下；Ｗｋ＝週。
【図４】実施例１に記載される第ＩＩＩ相臨床治験の維持期に関する研究スキームを示す。ＣＳ＝コルチコステロイド；ＥＴＲＯ＝エトロリズマブ；ＯＬＥ＝非盲検拡張期；ＰＢＯ＝プラセボ；ｑ４ｗ＝４週間毎；Ｒｅ−Ｒｘ＝再ランダム化。
【図５】実施例１に記載されるブリストル排便スケールとして知られる医療的補助を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
別段の定義がない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２ｎｄ  ｅｄ．，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．１９９４）、及びＭａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ４ｔｈ  ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．１９９２）は、本出願で使用される用語の多くに関する一般的指針を当業者に提供する。
【００４２】
特定の定義
本明細書を解釈する目的において、以下の定義が適用され、適当な場合はいつでも、単数形で使用される用語は複数形も含み、その逆も同様である。以下に記載されるいずれか定義が、参照により本明細書に援用されるいずれかの文献と矛盾する場合には、以下に記載される定義が優先する。
【００４３】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用される、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」という単数形は、文脈による別段の明確な指示がない限り、複数形の参照対象を含む。したがって、例えば、「ａ  ｐｒｏｔｅｉｎ（タンパク質）」への言及は、複数のタンパク質を含み、「ａ  ｃｅｌｌ（細胞）」への言及は、細胞の混合物を含み、その他も同様である。
【００４４】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において提供される範囲は、両方のエンドポイント及び両エンドポイント間の全ポイントを含む。したがって、例えば、２．０〜３．０の範囲は、２．０、３．０、及び２．０〜３．０の全てのポイントを含む。
【００４５】
「治療」、「治療すること」、及びそれらの文法上の変化形は、個体または細胞が治療される自然経過を改変することを試みる臨床的介入を指し、予防のため、あるいは臨床病理の過程において行うことができる。治療の望ましい効果としては、疾患の発生または再発の防止、症状の緩和、疾患の何らかの直接的または間接的な病理学的帰結の減少、疾患進行の速度の低下、病態の回復または軽減、及び寛解または予後改善が挙げられる。
【００４６】
「治療レジメン」は、投与量の組み合わせ、投与の頻度、または治療期間を指し、第２の薬物の追加の有無を問わない。
【００４７】
「効果的な治療レジメン」は、治療を受ける患者に有益な応答をもたらす治療レジメンを指す。
【００４８】
「治療を改変すること」は、投与量、投与の頻度、もしくは治療期間を変更すること、及び／または第２の薬物の追加を含む、治療レジメンの変更を指す。
【００４９】
「患者の応答」または「患者の応答性」は、（１）減速及び完全停止を含む、疾患進行のある程度の阻害、（２）疾患のエピソード及び／または症状の数の低減、（３）病変サイズの縮小、（４）隣接する末梢器官及び／または組織内への疾患細胞浸潤の阻害（すなわち、低減、減速、または完全停止）、（５）疾患伝播の阻害（すなわち、低減、減速、または完全停止）、（６）疾患病変の退縮または消失をもたらす場合があるがその必要はない、自己免疫応答の減少、（７）障害に関連する１つ以上の症状のある程度の緩和、（８）治療後の無病提示期間の増加、及び／または（９）治療後の所与の時点における死亡率の低下を含むがこれらに限定されない、患者に対する利益を示す任意のエンドポイントを使用して、評価することができる。「応答性」という用語は、完全奏効（ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ、ＣＲ）及び部分奏効（ｐａｒｔｉａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ、ＰＲ）を含む、測定可能な応答を指す。
【００５０】
本明細書で使用される場合、「完全奏効」すなわち「ＣＲ」は、炎症の全徴候の消滅、または治療に応答した寛解を意味する。これは、疾患が治癒したことを必ずしも意味しない。
【００５１】
「部分奏効」すなわち「ＰＲ」は、治療に応答した、炎症の重症度の少なくとも５０％の低下を指す。
【００５２】
インテグリンベータ７アンタゴニストを用いる治療に対する患者の「有益な応答」及び同様の文言は、抗ベータ７インテグリン抗体などのアンタゴニストを用いた治療から、またはその結果として、胃腸炎症障害のリスクがある患者またはそれを患う患者に与えられる、臨床上または治療上の利益を指す。そのような利益としては、細胞応答もしくは生物学的応答、完全奏効、部分奏効、安定状態（ｓｔａｂｌｅ  ｄｉｓｅａｓｅ）（進行もしくは再発を伴わない）、または、アンタゴニストを用いた治療から、もしくはその結果として、患者の再発が遅延する応答が挙げられる。
【００５３】
患者の応答性が治療過程中に時間と共に減少しない場合、「患者は、治療に対する応答性を維持する」。
【００５４】
本明細書で使用される場合、「基線」とは、ある特定の治療剤、例えばインテグリンベータ７アンタゴニストの投与前に判定された患者の状態を説明する、臨床的な値（例えば、徴候または症状）または臨床検査値を意味する。基線値が判定され得る臨床的な値または臨床検査値の例としては、ヘモグロビン、ヘマトクリット、血小板数、ナトリウム、カリウム、塩化物など、ＣＤＡＩスコア、ＳＥＳ−ＣＤスコア、ＰＲＯ２スコア、またはＩＢＤＱもしくはＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳなどの他の患者報告アウトカム基準といった、血液学値及び臨床科学値が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５５】
本明細書で使用される「サンプル」という用語は、例えば、物理的、生化学的、化学的、及び／または生理的特徴に基づいて特性化及び／または特定されることになる、細胞的要素及び／または他の分子的要素を含有する、目的の対象から得られるか、またはそれに由来する、組成物を指す。例えば、「疾患サンプル」という用語、及びその変化形は、特性化される細胞的要素及び／または分子的要素を含有することが予想されるか、または含有することが知られている、目的の対象から得られた任意のサンプルを指す。サンプルは、目的の対象の組織、または対象の末梢血から得ることができる。
【００５６】
「ベータ７インテグリンアンタゴニスト」または「ベータ７アンタゴニスト」は、１つ以上の生物活性を阻害するか、またはベータ７インテグリンがその会合分子のうちの１つ以上と結合することを遮断する、任意の分子を指す。本発明のアンタゴニストは、アルファ４インテグリンサブユニットとの会合、アルファＥインテグリンサブユニットとの会合、ＭＡｄＣＡＭ、ＶＣＡＭ−１、またはフィブロネクチンに対するアルファ４ベータ７インテグリンの結合、及びＥ−カドヘリンに対するアルファＥベータ７インテグリンの結合を含むがこれらに限定されない、インテグリンベータ７会合作用の１つ以上の態様を調整するために使用することができる。これらの作用は、ベータ７サブユニットまたはアルファ４ベータ７もしくはアルファＥベータ７二量体インテグリンに対するリガンド結合の妨害を含む、生物学的に関連する任意の機構によって、及び／または、二量体インテグリンの形成が阻害されるようにアルファ及びベータインテグリンサブユニット間の会合を妨害することによって、調整することができる。本発明の一実施形態において、ベータ７アンタゴニストは、抗ベータ７インテグリン抗体（または抗ベータ７抗体）である。一実施形態において、抗ベータ７インテグリン抗体は、ヒト化抗ベータ７インテグリン抗体、より具体的には、組換えヒト化モノクローナル抗ベータ７抗体（またはｒｈｕＭＡｂベータ７）である。一部の実施形態において、本発明の抗ベータ７抗体は、アルファ４インテグリンサブユニットとのベータ７サブユニットの結合、アルファＥインテグリンサブユニットとの会合、ＭＡｄＣＡＭ、ＶＣＡＭ−１、またはフィブロネクチンに対するアルファ４ベータ７インテグリンの結合、及びＥ−カドヘリンに対するアルファＥベータ７インテグリンの結合を阻害もしくは遮断する、抗インテグリンベータ７アンタゴニスト抗体である。
【００５７】
「ベータ７サブユニット」または「β７サブユニット」とは、ヒトβ７インテグリンサブユニットを意味する（Ｅｒｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６：１１００９−１１０１６）。ベータ７サブユニットは、ヒト．アルファ．４サブユニットなどのアルファ４インテグリンサブユニットと会合する（Ｋｉｌｇｅｒ  ａｎｄ  Ｈｏｌｚｍａｎｎ（１９９５）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．７３：３４７−３５４）。アルファ４ベータ７インテグリンは、報告によると、大部分の成熟リンパ球、ならびに胸腺細胞、骨髄細胞、及びマスト細胞の小集団上で発現される（Ｋｉｌｓｈａｗ  ａｎｄ  Ｍｕｒａｎｔ（１９９１）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２１：２５９１−２５９７、Ｇｕｒｉｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）１４９：１９６４−１９７２、及びＳｈａｗ，Ｓ．Ｋ．ａｎｄ  Ｂｒｅｎｎｅｒ，Ｍ．Ｂ．（１９９５）Ｓｅｍｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３５）。ベータ７サブユニットはまた、ヒトアルファＥインテグリンサブユニットなどのアルファＥサブユニットと会合する（Ｃｅｐｅｋ，Ｋ．Ｌ，ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：３４５９）。アルファＥベータ７インテグリンは、腸内上皮リンパ球（ｉＩＥＬ）上で発現される（Ｃｅｐｅｋ，Ｋ．Ｌ．（１９９３）、上記）。
【００５８】
「アルファＥサブユニット」または「アルファＥインテグリンサブユニット」または「αＥサブユニット」または「αＥインテグリンサブユニット」または「ＣＤ１０３」とは、上皮内リンパ球上のベータ７インテグリンと会合することが見出されているインテグリンサブユニットを意味し、アルファＥベータ７インテグリンは、Ｅ−カドヘリンを発現する腸上皮に対するｉＥＬの結合を媒介する（Ｃｅｐｅｋ，Ｋ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：３４５９、Ｓｈａｗ，Ｓ．Ｋ．ａｎｄ  Ｂｒｅｎｎｅｒ，Ｍ．Ｂ．（１９９５）Ｓｅｍｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３５）。
【００５９】
「ＭＡｄＣＡＭ」または「ＭＡｄＣＡＭ−１」は、本発明の範囲では互換的に使用され、短い細胞質側尾部と、膜貫通領域と、３つの免疫グロブリン様ドメインから構成される細胞外配列とを含む一本鎖ポリペプチドである、タンパク質粘膜アドレシン細胞接着分子１を指す。マウス、ヒト、及びマカクＭＡｄＣＡＭ−１のｃＤＮＡはクローニングされている（Ｂｒｉｓｋｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ，３６３：４６１−４６４、Ｓｈｙｊａｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５６：２８５１−２８５７）。
【００６０】
「ＶＣＡＭ−１」または「血管細胞接着分子１」「ＣＤ１０６」は、活性化された内皮上で発現され、かつ炎症中の白血球の結合及び遊出などの内皮−白血球の相互作用において重要である、アルファ４ベータ７及びアルファ４ベータ１のリガンドを指す。
【００６１】
「ＣＤ４５」は、タンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰ）ファミリーのタンパク質を指す。ＰＴＰは、細胞の増殖、分化、有糸分裂周期、及び発がん性形質転換を含む種々の細胞プロセスを制御するシグナル伝達分子であることが知られている。このＰＴＰは、細胞外ドメイン、単一の膜貫通セグメント、及び２つのタンデム型細胞質内触媒ドメインを含有し、したがって受容体型ＰＴＰに属する。この遺伝子は、造血細胞において特異的に発現される。このＰＴＰは、Ｔ細胞及びＢ細胞抗原受容体シグナル伝達の必須の制御因子であることが示されている。これは、抗原受容体複合体の構成要素との直接的な相互作用を通じて、または抗原受容体シグナル伝達に必要とされる様々なＳｒｃファミリーキナーゼを活性化させることによってのいずれかで、機能する。このＰＴＰはまた、ＪＡＫキナーゼを抑制し、したがって、サイトカイン受容体シグナル伝達の制御因子として機能する。明確に異なるアイソフォームをコードする、この遺伝子の４つの選択的スプライシング転写物変異形が報告されている。（Ｔｃｈｉｌｉａｎ  ＥＺ，Ｂｅｖｅｒｌｅｙ  ＰＣ（２００２）．“ＣＤ４５  ｉｎ  ｍｅｍｏｒｙ  ａｎｄ  ｄｉｓｅａｓｅ．”Ａｒｃｈ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｅｘｐ．（Ｗａｒｓｚ．）５０（２）：８５−９３．Ｉｓｈｉｋａｗａ  Ｈ，Ｔｓｕｙａｍａ  Ｎ，Ａｂｒｏｕｎ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）．“Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６，ＣＤ４５  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｓｒｃ−ｋｉｎａｓｅｓ  ｉｎ  ｍｙｅｌｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．”Ｌｅｕｋ．Ｌｙｍｐｈｏｍａ  ４４（９）：１４７７−８１。
【００６２】
ＣＤ４５の様々なアイソフォームが存在する：ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＢ、ＣＤ４５ＲＣ、ＣＤ４５ＲＡＢ、ＣＤ４５ＲＡＣ、ＣＤ４５ＲＢＣ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４５Ｒ（ＡＢＣ）。ＣＤ４５はまた、高度にグリコシル化されている。ＣＤ４５Ｒは、最も長いタンパク質であり、Ｔ細胞から単離すると２００ｋＤａで遊走する。Ｂ細胞も、より高度のグリコシル化を受けたＣＤ４５Ｒを発現し、分子量を２２０ｋＤａにし、よって、Ｂ２２０（２２０ｋＤａのＢ細胞アイソフォーム）という名称である。Ｂ２２０の発現はＢ細胞に制限されず、活性化されたＴ細胞上、樹状細胞のサブセット上、及び他の抗原提示細胞上でも発現され得る。Ｓｔａｎｔｏｎ  Ｔ，Ｂｏｘａｌｌ  Ｓ，Ｂｅｎｎｅｔｔ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）．“ＣＤ４５  ｖａｒｉａｎｔ  ａｌｌｅｌｅｓ：ｐｏｓｓｉｂｌｙ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  ｏｆ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｅｘｏｎ  ４  ＣＤ４５  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  ＨＩＶ  ｓｅｒｏｐｏｓｉｔｉｖｅ  Ｕｇａｎｄａｎｓ．”Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ  ５６（２）：１０７−１０。
【００６３】
「腸ホーミングリンパ球」は、腸リンパ節及び組織に選択的にホーミングするが、末梢リンパ節及び組織にはホーミングしない特徴を有する、リンパ球のサブグループを指す。リンパ球のこのサブグループは、ＣＤ４、ＣＤ４５ＲＡ、及びベータ７の組み合わせを含むがこれに限定されない、複数の細胞表面分子の組み合わせの特有の発現パターンを特徴とする。典型的には、末梢血ＣＤ４＋リンパ球の少なくとも２つのサブセットが、ＣＤ４５ＲＡ及びベータ７のマーカーに基づいて、ＣＤ４５ＲＡ−β７ｈｉｇｈ細胞、及びＣＤ４５ＲＡ−β７ｌｏｗＣＤ４＋細胞に細分され得る。ＣＤ４５ＲＡ−β７ｈｉｇｈＣＤ４＋細胞は、腸リンパ節及び組織に優先的にホーミングし、一方で、ＣＤ４５ＲＡ−β７ｌｏｗＣＤ４＋細胞は、末梢リンパ節及び組織に優先的にホーミングする（Ｒｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ．１９９６、Ｒｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ．１９９７、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．１９９８、Ｒｏｓｅ  ｅｔ  ａｌ．１９９８、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｂｕｔｃｈｅｒ  １９９７、Ｂｕｔｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．１９９９）。したがって、腸ホーミングリンパ球は、フローサイトメトリーアッセイにおいてＣＤ４５ＲＡ−β７ｈｉｇｈＣＤ４＋と特定される、リンパ球の特有のサブグループである。このグループのリンパ球の特定方法は当該技術分野で周知であり、本出願の実施例においても詳細に開示される。
【００６４】
細胞表面マーカーに関して本明細書において使用される場合、「＋」の記号は、細胞表面マーカーの陽性発現を示す。例えば、ＣＤ４＋リンパ球は、その細胞表面上でＣＤ４が発現されるリンパ球のグループである。
【００６５】
細胞表面マーカーに関して本明細書において使用される場合、「−」の記号は、細胞表面マーカーの陰性発現を示す。例えば、ＣＤ４５ＲＡ−リンパ球は、その細胞表面上でＣＤ４５ＲＡが発現されないリンパ球のグループである。
【００６６】
細胞表面マーカーの発現に関して本明細書において使用される場合、「ｌｏｗ」の記号は、リンパ球上の細胞表面マーカーの発現の比較的低いレベルを示し、一方で「ｈｉｇｈ」は、リンパ球上の細胞表面マーカーの発現の比較的高いレベルを示す。フローサイトメトリーにおいて、β７ｈｉｇｈの強度は、β７ｌｏｗの強度より少なくとも約１０倍または１００倍高い。したがって、例示的な実施形態において本明細書に提供されるように、ＣＤ４５ＲＡ−β７ｌｏｗＣＤ４＋リンパ球及びＣＤ４５ＲＡ−β７ｈｉｇｈＣＤ４＋リンパ球は、フローサイトメトリー分析のドットプロットまたはヒストグラムにおいて明確に異なる部分に位置し、ここで、Ｘ軸はＣＤ４５ＡＲの発現強度であり、Ｙ軸はベータ７の発現強度である。
【００６７】
「末梢ホーミングリンパ球」は、末梢リンパ節及び組織にホーミングし、腸リンパ節及び組織にはホーミングしない特徴を有する、リンパ球のサブグループを指す。ある例示的な実施形態において、上述のように、末梢ホーミングリンパ球は、フローサイトメトリーアッセイにおいてＣＤ４５ＲＡ−β７ｌｏｗＣＤ４＋細胞と特定される、リンパ球の特有のグループである。このグループのリンパ球の特定方法は、当該技術分野で既知である。
【００６８】
「胃腸炎症障害」は、粘膜における炎症及び／または潰瘍形成を引き起こす慢性障害のグループである。これらの障害には、例えば、炎症性腸疾患（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎、不確定大腸炎、及び感染性大腸炎）、粘膜炎（例えば、口腔粘膜炎、胃腸粘膜炎、鼻粘膜炎、及び直腸炎）、壊死性腸炎、及び食道炎が含まれる。
【００６９】
「炎症性腸疾患」または「ＩＢＤ」は、炎症及び／または潰瘍形成を引き起こす腸疾患を指すために本明細書において互換的に使用され、限定されないが、クローン病及び潰瘍性大腸炎を含む。
【００７０】
「クローン病（ＣＤ）」及び「潰瘍性大腸炎（ＵＣ）」は、病因不明の慢性炎症性腸疾患である。クローン病は、潰瘍性大腸炎とは異なり、腸のあらゆる部分に影響を及ぼし得る。最も顕著な特徴クローン病は、腸壁の粒状かつ赤みがかった紫色の浮腫状肥厚である。炎症の発達と共に、これらの肉芽腫は多くの場合その外接境界を失い、周囲の組織と統合される。下痢及び腸の閉塞が、顕著な臨床特徴である。潰瘍性大腸炎と同様に、クローン病の経過は連続的な場合も再発性の場合もあり、軽度の場合も重度の場合もあるが、潰瘍性大腸炎とは異なり、クローン病は、腸の関与する区域の切除によって治癒可能ではない。ほとんどのクローン病患者は、ある時点での手術を必要とするが、後の再発は一般的であり、継続的な医療処置が通常である。
【００７１】
クローン病は、口から肛門までの消化管のあらゆる部分に影響を与え得るが、典型的には、回結腸、小腸、または結腸−肛門直腸の領域に現れる。病理組織学的に、この疾患は、不連続肉芽腫（ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｍａｓ）、陰窩膿瘍、裂傷、及びアフタ性潰瘍によって顕在化する。リンパ球（Ｔ細胞とＢ細胞との両方）、形質細胞、マクロファージ、及び好中球から成る炎症性浸潤物が混合される。ＩｇＭ分泌形質細胞及びＩｇＧ分泌形質細胞、マクロファージ、ならびに好中球が、不釣合に増加する。
【００７２】
抗炎症薬であるスルファサラジン及び５−アミノサリシル酸（５−ａｍｉｎｏｓａｌｉｓｙｌｉｃ  ａｃｉｄ）（５−ＡＳＡ）は、軽度に活性な結腸クローン病を治療するために使用されており、疾患の寛解を維持する試みにおいて一般的に処方されている。メトロイダゾール（Ｍｅｔｒｏｉｄａｚｏｌｅ）及びシプロフロキサシンは、有効性においてスルファサラジンと同様であり、肛門周囲の疾患の治療のために特に処方される。より重度の症例では、コルチコステロイドが活発な増悪を治療するために処方され、寛解を維持することができる場合がある。アザチオプリン及び６−メルカプトプリンもまた、コルチコステロイドの慢性投与を必要とする患者に使用されてきた。これらの薬物は、長期の予防において役割を果たし得ると提唱されている。残念ながら、一部の患者では、作用発現前に非常に長い遅延（最長６か月）があり得る。下痢止め薬もまた、一部の患者において症状緩和をもたらすことができる。栄養療法または成分栄養剤は、患者の栄養状態を改善し、急性疾患の症状の改善を誘導し得るが、持続した臨床的寛解は誘導しない。抗生物質は、二次的な小腸細菌の異常増殖の治療、及び化膿性合併症の治療に使用される。
【００７３】
「有効な投与量」は、投薬時、及び必要な期間にわたって、所望の治療上または予防上の結果を達成するために有効な量を指す。
【００７４】
本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、治療が所望される任意の単一の対象を指す。ある特定の実施形態において、本明細書における患者は、ヒトである。
【００７５】
本明細書における「対象」は、典型的にはヒトである。ある特定の実施形態において、対象は、非ヒト哺乳動物である。例示的な非ヒト哺乳動物としては、実験動物、飼育動物、愛玩動物、競技用動物、及び家畜動物、例えば、マウス、ネコ、イヌ、ウマ、及びウシが挙げられる。典型的に、対象は、治療、例えば胃腸炎症障害の治療に適格である。
【００７６】
本明細書で使用される場合、対象の「寿命」は、治療開始後の対象の生涯の残りを指す。
【００７７】
「不十分な応答」、「応答の損失」、及び「不応性」という用語は、本明細書において互換的に使用され、１つ以上の治療薬、例えば、コルチコステロイド、免疫抑制剤、及び／または抗ＴＮＦ薬を用いた治療歴があるにも関わらず、活性疾患の徴候もしくは症状が持続または再出現することを指す。
【００７８】
「抗体」及び「免疫グロブリン」という用語は、最も広い意味で互換的に使用され、モノクローナル抗体（例えば、完全長すなわち無傷のモノクローナル抗体）、ポリクローナル抗体、多価抗体、多重特異性抗体（例えば、所望の生物活性を示す限りにおいて、二重特異性抗体）を含み、ある特定の抗体断片（本明細書においてより詳細に記載される）を含む場合もある。抗体は、ヒト型、ヒト化型、及び／または親和性成熟型であってもよい。
【００７９】
「抗体断片」は、無傷抗体の一部分のみを含み、この部分は、無傷抗体内に存在する場合にその部分に通常関連する機能のうちの少なくとも１つ、典型的にはほとんどまたは全てを保持することが好ましい。一実施形態において、抗体断片は、無傷抗体の抗原結合部位を含み、したがって、抗原に結合する能力を保持する。別の実施形態では、抗体断片、例えばＦｃ領域を含むものは、無傷抗体内に存在する場合にＦｃ領域に通常関連する生物学的機能、例えばＦｃＲｎ結合、抗体半減期調整、ＡＤＣＣ機能、及び補体結合などのうちの少なくとも１つを保持する。一実施形態において、抗体断片は、無傷抗体と実質的に同様のインビボ半減期を有する一価抗体である。例えば、そのような抗体断片は、断片にインビボ安定性を付与することのできる、Ｆｃ配列に結合した抗原上結合アームを含み得る。
【００８０】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、その集団に含まれる個別の抗体は、微量で存在し得る可能性のある自然発生の突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は、単一の抗原に対して、高度に特異的である。さらに、異なる決定基（エピトープ）を対象とする異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基を対象とする。
【００８１】
本明細書におけるモノクローナル抗体には、それらが所望の生物活性を示す限り、重鎖及び／または軽鎖の一部分が、特定の種に由来するか、または特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体における、対応する配列と同一または相同であり、鎖（複数可）の残部が、別の種に由来するか、または別の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体、ならびにかかる抗体の断片における、対応する配列と同一または相同である、「キメラ」抗体が具体的に含まれる（米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１−６８５５（１９８４））。
【００８２】
「ヒト化」型の非ヒト（例えば、マウス）抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を含有するキメラ抗体である。ほとんどの場合、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域の残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域の残基で置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の例では、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非ヒト残基によって置き換えられている。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体内にもドナー抗体内にも見出されない残基を含んでもよい。これらの修飾は、抗体性能をさらに精錬するためになされる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ここで、超可変ループの全てまたは実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリンｌｏ配列のものである。ヒト化抗体はまた、任意選択により、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの少なくとも一部分を含む。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（１９９２）を参照されたい。また、次の概説論文、及びその中に引用される参考文献を参照されたい：Ｖａｓｗａｎｉ  ａｎｄ  Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ  ＆  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５−１１５（１９９８）、Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ２３：１０３５−１０３８（１９９５）、Ｈｕｒｌｅ  ａｎｄ  Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８−４３３（１９９４）。
【００８３】
「ヒト抗体」は、ヒトによって産生された抗体及び／または本明細書に開示されるヒト抗体を作製するための技術のいずれかを使用して作製されている抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を含む抗体である。そのような技術は、ファージディスプレイライブラリなどのヒト由来コンビナトリアルライブラリをスクリーニングすること（例えば、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）及びＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１９：４１３３−４１３７（１９９１）を参照されたい）；ヒトモノクローナル抗体の産生のためにヒト骨髄腫及びマウス−ヒト異種骨髄腫（ｈｅｔｅｒｏｍｙｅｌｏｍａ）細胞株を使用すること（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５５−９３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）、及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照されたい）；及び、内因性免疫グロブリン産生の非存在下でヒト抗体の完全レパートリーを産生することのできるトランスジェニック動物（例えば、マウス）においてモノクローナル抗体を生成すること（例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ，９０：２５５１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，７：３３（１９９３）を参照されたい）を含む。ヒト抗体のこの定義は、抗原結合残基を含むヒト化抗体を、非ヒト動物から明確に除外する。
【００８４】
「単離」抗体とは、その自然環境の成分から、特定及び分離、及び／または回収されたものである。その自然環境の混入成分は、抗体の診断上または治療上の使用を妨げる材料であり、これらには、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性溶質が含まれ得る。ある特定の実施形態において、抗体は、（１）Ｌｏｗｒｙ法によって判定された場合に９５重量％超の、しばしば９９重量％超の抗体に、（２）回転カップ配列決定装置の使用によりＮ末端もしくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るのに十分な程度まで、あるいは（３）クーマシーブルーもしくは銀染色を使用した還元もしくは非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥによって同種になるように、精製される。単離抗体には、抗体の自然環境の少なくとも１つの成分が存在しないため、組換え細胞内でインサイツの抗体が含まれる。しかしながら、通常、単離抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製される。
【００８５】
「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、本明細書で使用される場合、配列が超可変性であり、及び／または構造的に定義されたループを形成する、抗体可変ドメインの領域を指す。一般に、抗体は６つの超可変領域を含み、このうち３つがＶＨにあり（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、３つがＶＬにある（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。いくつかの超可変領域記述法が使用されており、本明細書に包含される。Ｋａｂａｔ相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列可変性に基づくものであり、最も一般的に使用されている（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。Ｃｈｏｔｈｉａは、その代わりに、構造的ループの位置に言及する（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。ＡｂＭ超可変領域は、ＫａｂａｔのＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａの構造的ループとの折衷物であり、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されている。「接触」超可変領域は、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらＨＶＲの各々の残基を、以下に記載する。
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【００８６】
超可変領域は、次のような「拡張超可変領域」を含んでもよい：ＶＬ内の２４〜３６または２４〜３４（Ｌ１）、４６〜５６または４９〜５６または５０〜５６または５２〜５６（Ｌ２）、及び８９〜９７（Ｌ３）、ならびにＶＨ内の２６〜３５（Ｈ１）、５０〜６５または４９〜６５（Ｈ２）、及び９３〜１０２、９４〜１０２、または９５〜１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、こうした定義の各々について、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記）に従って付番される。
【００８７】
「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書に定義される超可変領域残基以外の可変ドメイン残基である。
【００８８】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。概して、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループからである。概して、配列のサブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌにあるようなサブグループである。一実施形態において、ＶＬについては、サブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌにあるようなサブグループカッパＩである。一実施形態において、ＶＨについては、サブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌにあるようなサブグループＩＩＩである。
【００８９】
「親和性成熟」抗体は、その１つ以上のＣＤＲ内に１つ以上の変化を有し、これらの変化が、これらの変化（複数可）を有しない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性を向上させるものである。ある特定の実施形態において、親和性成熟抗体は、標的抗原に対してナノモルまたはさらにはピコモルの親和性を有する。親和性成熟抗体は、当該技術分野において既知の手技によって産生される。Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）は、ＶＨ及びＶＬドメインシャフリングによる親和性成熟を記載している。ＣＤＲ及び／またはフレームワーク残基のランダム突然変異生成は、Ｂａｒｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，ＵＳＡ  ９１：３８０９−３８１３（１９９４）、Ｓｃｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｇｅｎｅ  １６９：１４７−１５５（１９９６）、Ｙｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４−２００４（１９９５）、Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０−９（１９９５）、及びＨａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９−８９６（１９９２）に記載されている。
【００９０】
「実質的に同様の」または「実質的に同じ」という表現は、本明細書で使用される場合、２つの数値（概して、一方は本発明の抗体に関連し、他方は参照／比較用（ｃｏｍｐａｒａｔｏｒ）抗体に関連する値）間の十分に高い度合いの類似性を表し、これは、当業者が、２つの値の間の差異を、該値（例えば、Ｋｄ値）によって測定される生物学的特徴の文脈において生物学的及び／または統計的有意性がほとんどまたは全くないものと見なすようなものである。該２つの値の間の差異は、参照／比較用抗体に関する値の関数として、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１０％未満である。
【００９１】
「結合親和性」は、概して、分子（例えば、抗体）の単一の結合部位と、その結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有相互作用の合計の強度を指す。別段の指示がない限り、本明細書で使用される「結合親和性」は、結合対のメンバー（例えば、抗体と抗原）の間の１：１の相互作用を反映する、固有結合親和性を指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対する親和性は、概して、解離定数（Ｋｄ）によって表すことができる。親和性は、本明細書に記載されるものを含む、当該技術分野で既知の一般的な方法によって測定することができる。低親和性抗体は、概して、抗原にゆっくり結合し、容易に解離する傾向があるが、高親和性抗体は、概して、抗原により早く結合し、より長く結合したままである傾向がある。結合親和性の種々の測定方法が当該技術分野で知られており、これらのいずれも、本発明において使用することができる。
【００９２】
「可変」という用語は、可変ドメインのある特定の部分の配列が抗体間で大きく異なっており、特定の各抗体の、その特定の抗原に対する結合及び特異性に用いられるという事実を指す。しかしながら、可変性は、抗体の可変ドメイン全体にわたって均一に分布していない。それは、軽鎖と重鎖との両方の可変ドメイン内にある超可変領域と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのうちより高度に保存される部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、それぞれが、概してβシート構成をとる４つのＦＲを含み、これが３つの超可変領域によって接続され、それによってβシート構造を接続するループ、また一部の場合ではその一部を形成するループが形成される。各鎖における超可変領域は、ＦＲによって極めて近接して一緒に保持されており、他方の鎖の超可変領域と共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１））を参照されたい。定常ドメインは、抗原に対する抗体の結合に直接関与しないが、抗体依存性細胞傷害活性（ＡＤＣＣ）における抗体の関与などの様々なエフェクター機能を示す。
【００９３】
抗体のパパイン消化により、各々が単一の抗原結合部位を有する、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片が産生され、残りが「Ｆｃ」断片であり、その名前は、容易に結晶化するその能力を反映している。ペプシン処理により、２つの抗原結合部位を有し、依然として抗原を架橋することができる、Ｆ（ａｂ’）２断片がもたらされる。
【００９４】
「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位及び抗原結合部位を含有する最小の抗体断片である。この領域は、密接な非共有性会合状態にある、１つの重鎖可変ドメインと１つの軽鎖可変ドメインとの二量体から成る。各可変ドメインの３つの超可変領域が相互作用して、ＶＨ−ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を定義するのは、この構成においてである。集合的に、６つの超可変領域が、抗原結合特異性を抗体に付与する。しかしながら、単一の可変ドメイン（すなわち、抗原に対して特異的な３つの超可変領域のみを含むＦｖの半分）でさえ、結合部位全体よりも低い親和性であるにせよ、抗原を認識しそれに結合する能力を有する。
【００９５】
Ｆａｂ断片はまた、軽鎖の定常ドメインと、重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）とを含有する。Ｆａｂ＝断片は、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に数個の残基が付加されているという点でＦａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が少なくとも１つの遊離チオール基を有するＦａｂ’に対する、本明細書における名称である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元々、ヒンジシステインを間に有するＦａｂ’断片の対として産生された。抗体断片の他の化学的カップリングも知られている。
【００９６】
任意の脊椎動物種に由来する抗体の「軽鎖」には、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２つの明確に異なる型のうちの一方を割り当てることができる。
【００９７】
それらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、抗体（免疫グロブリン）が、異なるクラスに割り当てられ得る。免疫グロブリンには５つの主なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらのうちのいくつかは、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２といったサブクラス（アイソタイプ）にさらに分割され得る。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造及び三次元構成は周知であり、例えば、Ａｂｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ  ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．，２０００）に大まかに記載されている。抗体は、抗体と１つ以上の他のタンパク質もしくはペプチドとの共有会合または非共有会合によって形成された、より大きな融合分子の一部であってもよい。
【００９８】
「全長抗体」、「無傷抗体」、及び「全抗体」という用語は、以下に定義される抗体断片ではなく、その実質的に無傷な形態にある抗体を指すように、本明細書において互換的に使用される。これらの用語は、具体的には、Ｆｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。
【００９９】
本明細書における目的のための「裸抗体」は、細胞傷害性部分または放射標識にコンジュゲートされていない抗体である。
【０１００】
本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、天然配列Ｆｃ領域及び変異形Ｆｃ領域を含む、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するように使用される。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６位のアミノ酸残基から、またはＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端まで伸びると定義される。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ付番方式によると残基４４７）は、例えば、抗体の産生もしくは精製の間に、または抗体の重鎖をコードする核酸を組換え操作することによって、除去されてもよい。したがって、無傷抗体の組成物は、全Ｋ４４７残基が除去された抗体集団、除去されたＫ４４７残基がない抗体集団、及びＫ４４７残基を有する抗体と有しない抗体との混合物を有する抗体集団を含んでもよい。
【０１０１】
別段の指示がない限り、本明細書において、免疫グロブリン重鎖内の残基の付番は、参照により本明細書に明確に援用される、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）にあるような、ＥＵ指標の付番である。「ＫａｂａｔにあるようなＥＵ指標」は、ヒトＩｇＧ１  ＥＵ抗体の残基付番を指す。
【０１０２】
「機能的Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域の「エフェクター機能」を有する。例示的な「エフェクター機能」としては、Ｃ１ｑ結合；補体依存性細胞傷害；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体；ＢＣＲ）の下方制御などが挙げられる。そのようなエフェクター機能は、概して、Ｆｃ領域と結合ドメイン（例えば、抗体可変ドメイン）との結合を必要とし、例えば、本明細書に開示される様々なアッセイを使用して評価することができる。
【０１０３】
「天然配列Ｆｃ領域」は、天然で見出されるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＦｃ領域には、天然配列ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域（非Ａ及びＡアロタイプ）、天然配列ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域、天然配列ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域、及び天然配列ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域、ならびに自然発生のそれらの変異形が含まれる。
【０１０４】
「変異形Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾によって天然配列Ｆｃ領域のアミノ酸配列とは異なるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態において、変異形Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１個のアミノ酸置換、例えば、約１個〜約１０個のアミノ酸置換、またある特定の実施形態では、約１個〜約５個のアミノ酸置換を、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域内に有する。ある特定の実施形態において、本明細書における変異形Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の相同性、またはそれらと少なくとも約９０％の相同性、またはそれらと少なくとも約９５％の相同性を有する。
【０１０５】
重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、無傷抗体には、異なる「クラス」が割り当てられ得る。無傷抗体には５つの主なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらのうちのいくつかは、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、及びＩｇＡ２といった「サブクラス」（アイソタイプ）にさらに分割され得る。抗体の異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造及び三次元構成は周知である。
【０１０６】
「抗体依存性細胞媒介細胞傷害」及び「ＡＤＣＣ」は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）を発現する非特異的細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、及びマクロファージ）が、標的細胞上の結合抗体を認識し、その後標的細胞の溶解を引き起こす、細胞媒介反応を指す。ＡＤＣＣを媒介するための主要な細胞であるＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するが、一方で単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。要約されている造血細胞上のＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９：４５７−９２（１９９１）４６４頁の表３である。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、米国特許第５，５００，３６２号または同第５，８２１，３３７号に記載されているようなインビトロＡＤＣＣアッセイを行ってもよい。そのようなアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。代替的にまたは追加的に、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．ＰＮＡＳ（ＵＳＡ）９５：６５２−６５６（１９９８）に開示されるものなどの動物モデルにおいて、評価されてもよい。
【０１０７】
「ヒトエフェクター細胞」は、１つ以上のＦｃＲを発現し、かつエフェクター機能を実行する白血球である。ある特定の実施形態において、これらの細胞は、少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能を実行する。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞傷害性Ｔ細胞、及び好中球が挙げられる。エフェクター細胞は、本明細書に記載されるように、その天然源から、例えば、血液またはＰＢＭＣから単離され得る。
【０１０８】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」という用語は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を説明するために使用される。ある特定の実施形態において、ＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、ＦｃＲは、ＩｇＧ抗体に結合するもの（ガンマ受容体）であり、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含み、これには、これらの受容体の対立遺伝子変異形及び選択的スプライシング型が含まれる。ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害性受容体」）が含まれ、これらは、それらの細胞質側ドメインが主に異なる、同様のアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質側ドメイン内に免疫受容体チロシンベース活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含有する。阻害性受容体ＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質側ドメイン内に免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含有する（Ｍ．ｉｎ  Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−２３４（１９９７）の概説参照）。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９：４５７−９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４：２５−３４（１９９４）、及びｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０−４１（１９９５）に概説されている。他のＦｃＲは、将来特定されるものを含め、「ＦｃＲ」という用語によって本明細書に包含される。この用語にはまた、胎児への母体ＩｇＧの移入の原因となり（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））、かつ免疫グロブリンのホメオスタシスを制御する、新生児型受容体ＦｃＲｎが含まれる。新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が向上し、半減期が増加した抗体は、ＷＯ００／４２０７２（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）及びＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１（Ｈｉｎｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．）に記載されている。これらの抗体は、ＦｃＲｎに対するＦｃ領域の結合性を向上させる１つ以上の置換を中に有するＦｃ領域を含む。例えば、Ｆｃ領域は、２３８位、２５０位、２５６位、２６５位、２７２位、２８６位、３０３位、３０５位、３０７位、３１１位、３１２位、３１４位、３１７位、３４０位、３５６位、３６０位、３６２位、３７６位、３７８位、３８０位、３８２位、４１３位、４２４位、４２８位、または４３４位（残基のＥｕ付番）のうちの１つ以上に置換を有し得る。ある特定の実施形態において、ＦｃＲｎ結合が向上したＦｃ領域を含む抗体変異形は、そのＦｃ領域の３０７位、３８０位、及び４３４位（残基のＥｕ付番）のうちの１つ、２つ、または３つに、アミノ酸置換を含む。
【０１０９】
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨドメイン及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖内に存在する。ある特定の実施形態において、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、このリンカーにより、ｓｃＦｖは、抗原結合に望ましい構造を形成することができる。ｓｃＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）を参照されたい。ＨＥＲ２抗体ｓｃＦｖ断片は、ＷＯ９３／１６１８５、米国特許第５，５７１，８９４号、及び米国特許第５，５８７，４５８号に記載されている。
【０１１０】
「ダイアボディ」という用語は、２つの抗原結合部位を有する小さな抗体断片を指し、この断片は、同じポリペプチド鎖（ＶＨ−ＶＬ）において、可変軽ドメイン（ＶＬ）に接続した可変重ドメイン（ＶＨ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、これらのドメインは、別の鎖の相補的ドメインと対合させられ、２つの抗原結合部位を作り出す。ダイアボディは、例えば、ＥＰ  ４０４，０９７、ＷＯ  ９３／１１１６１、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）において、より詳細に記載されている。
【０１１１】
「親和性成熟」抗体は、その１つ以上の超可変領域内に１つ以上の変化を有し、これらの変化が、これらの変化（複数可）を有しない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性を向上させるものである。ある特定の実施形態において、親和性成熟抗体は、標的抗原に対してナノモルまたはさらにはピコモルの親和性を有する。親和性成熟抗体は、当該技術分野において既知の手技によって産生される。Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）は、ＶＨ及びＶＬドメインシャフリングによる親和性成熟を記載している。ＣＤＲ及び／またはフレームワーク残基のランダム突然変異生成は、Ｂａｒｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，ＵＳＡ  ９１：３８０９−３８１３（１９９４）、Ｓｃｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｇｅｎｅ  １６９：１４７−１５５（１９９５）、Ｙｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４−２００４（１９９５）、Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０−９（１９９５）、及びＨａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９−８９６（１９９２）に記載されている。
【０１１２】
本明細書における「アミノ酸配列変異形」抗体は、主要種抗体とは異なるアミノ酸配列を有する抗体である。ある特定の実施形態において、アミノ酸配列変異形は、主要種抗体と少なくとも約７０％の相同性を有するか、またはそれらは、主要種抗体と少なくとも約８０％、もしくは少なくとも約９０％相同であることとなる。アミノ酸配列変異形は、主要種抗体のアミノ酸配列の中またはそれに隣接するある特定の位置に、置換、欠失、及び／または付加を有する。本明細書におけるアミノ酸配列変異形の例としては、酸性変異形（例えば、脱アミド抗体変異形）、塩基性変異形、１つまたは２つの軽鎖上にアミノ末端リーダー拡張部（例えば、ＶＨＳ−）を有する抗体、１つまたは２つの重鎖上にＣ末端リジン残基を有する抗体などが挙げられ、重鎖及び／または軽鎖のアミノ酸配列に対する変化形の組み合わせが含まれる。本明細書で特に目的とされる抗体変異形は、１つまたは２つの軽鎖上にアミノ末端リーダー拡張部を含む抗体であり、これは、任意選択により、主要種抗体と比べて他のアミノ酸配列及び／またはグリコシル化の差異をさらに含む。
【０１１３】
本明細書における「グリコシル化変異形」抗体は、主要種抗体に結合した１つ以上の炭水化物部分とは異なる１つ以上の炭水化物部分が結合した抗体である。本明細書におけるグリコシル化変異形の例としては、Ｇ０オリゴ糖構造の代わりにＧ１またはＧ２オリゴ糖構造がＦｃ領域に結合した抗体、１つまたは２つの軽鎖に１つまたは２つの炭水化物部分が結合した抗体、抗体の１つまたは２つの重鎖に炭水化物が結合していない抗体など、及びグリコシル化変化形態の組み合わせが挙げられる。抗体がＦｃ領域を有する場合、オリゴ糖構造は、抗体の１つまたは２つの重鎖に、例えば、残基２９９（２９８、残基のＥｕ付番）に結合してもよい。
【０１１４】
本明細書で使用される「細胞傷害剤」という用語は、細胞の機能を阻害もしくは防止する物質、及び／または細胞の破壊を引き起こす物質を指す。この用語は、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、及びＬｕの放射性同位体）、化学療法剤、及び細菌、真菌、植物、もしくは動物起源の小分子毒素または酵素的に活性な毒素などの毒素（それらの断片及び／または変異形を含む）を含むよう意図される。
【０１１５】
「サイトカイン」という用語は、細胞間媒介物として別の細胞に作用する１つの細胞集団によって放出されるタンパク質の総称である。そのようなサイトカインの例は、リンホカイン、モノカイン、及び従来のポリペプチドホルモンである。サイトカインに含まれるのは、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、及びウシ成長ホルモンなどの成長ホルモン；副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；リラキシン；プロリラキシン；卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）などの糖タンパク質ホルモン；肝臓増殖因子；線維芽細胞増殖因子；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；腫瘍壊死因子−α及びβ；ミュラー管阻害物質；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮増殖因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦ−βなどの神経成長因子；血小板成長因子；ＴＧＦ−α及びＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）；インスリン様増殖因子Ｉ及びＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；骨誘導因子；インターフェロン−α、β、及びγなどのインターフェロン；コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、例えばマクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球−マクロファージ−ＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）、及び顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）など；インターロイキン（ＩＬ）、例えばＩＬ−１、ＩＬ−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２など；ＴＮＦ−αまたはＴＮＦ−βなどの腫瘍壊死因子；ならびにＬＩＦ及びｋｉｔリガンド（ＫＬ）を含む他のポリペプチド因子である。本明細書で使用される場合、サイトカインという用語は、天然源由来または組換え細胞培養由来のタンパク質、及び天然配列サイトカインの生物学的に活性な等価物を含む。
【０１１６】
補助療法に関して本明細書で使用される「免疫抑制剤」という用語は、本明細書における治療されている対象の免疫系を抑制またはマスクするように作用する物質を指す。これには、サイトカイン産生を抑制するか、自己抗原発現を下方制御もしくは抑制するか、またはＭＨＣ抗原をマスクする物質が含まれることになる。そのような薬剤の例としては、２−アミノ−６−アリール−５−置換ピリミジン（米国特許第４，６６５，０７７号参照）；非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）；ガンシクロビル；タクロリムス；コルチゾールまたはアルドステロンなどのグルココルチコイド；シクロオキシゲナーゼ阻害薬、５−リポキシゲナーゼ阻害薬、またはロイコトリエン受容体アンタゴニストなどの抗炎症剤；アザチオプリンまたはミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）などのプリンアンタゴニスト；シクロホスファミドなどのアルキル化剤；ブロモクリプチン；ダナゾール；ダプソン；グルタルアルデヒド（これは、米国特許第４，１２０，６４９号に記載のようにＭＨＣ抗原をマスクする）；ＭＨＣ抗原及びＭＨＣ断片に対する抗イディオタイプ抗体；シクロスポリン；６メルカプトプリン；コルチコステロイドもしくはグルココルチコステロイドまたはグルココルチコイド類似体などのステロイド、例えば、プレドニゾン（例えば、ＳＯＬＵ−ＭＥＤＲＯＬ．ＲＴＭ．コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウムを含むメチルプレドニゾロンを含むがこれに限定されないプレドニゾン等価物、及びコルテフ［ヒドロコルチゾン］を含む）、ブデソニド、及びデキサメタゾン；メトトレキサートなどのジヒドロ葉酸レダクターゼ阻害薬（経口または皮下）；クロロキン及びヒドロキシクロロキンなどの抗マラリア剤；スルファサラジン；レフルノミド；抗インターフェロン−アルファ、ベータ、もしくはガンマ抗体、抗腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ抗体（インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ．ＲＴＭ．）、またはアダリムマブ）、抗ＴＮＦ−アルファイムノアドヘシン（エタネルセプト）、抗ＴＮＦ−ベータ抗体、抗インターロイキン−２（ＩＬ−２）抗体、及び抗ＩＬ−２受容体抗体、ならびに抗インターロイキン−６（ＩＬ−６）受容体抗体及びアンタゴニストを含む、サイトカインまたはサイトカイン受容体抗体もしくはアンタゴニスト；抗ＣＤ１１ａ抗体及び抗ＣＤ１８抗体を含む抗ＬＦＡ−１抗体；抗Ｌ３Ｔ４抗体；異種抗リンパ球グロブリン；ｐａｎ−Ｔ抗体、抗ＣＤ３抗体、または抗ＣＤ４／ＣＤ４ａ抗体；ＬＦＡ−３結合ドメインを含有する可溶性ペプチド（１９９０年７月２６日公開のＷＯ９０／０８１８７）；ストレプトキナーゼ；トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦ−ベータ）；ストレプトドマーゼ（ｓｔｒｅｐｔｏｄｏｍａｓｅ）；宿主由来のＲＮＡまたはＤＮＡ；ＦＫ５０６；ＲＳ−６１４４３；クロラムブシル；デオキシスパガリン；ラパマイシン；Ｔ細胞受容体（Ｃｏｈｅｎら、米国特許第５，１１４，７２１号）；Ｔ細胞受容体断片（Ｏｆｆｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５１：４３０−４３２（１９９１）、ＷＯ  ９０／１１２９４、Ｉａｎｅｗａｙ，Ｎａｔｕｒｅ，３４１：４８２（１９８９）、及びＷＯ  ９１／０１１３３）；ＢＡＦＦ抗体もしくはＢＲ���抗体などのＢＡＦＦアンタゴニストまたはイムノアドヘシン及びｚＴＮＦ４アンタゴニスト（概説については、Ｍａｃｋａｙ  ａｎｄ  Ｍａｃｋａｙ，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２３：１１３−５（２００２）を参照されたく、以下の定義も参照されたい）；Ｔ細胞ヘルパーシグナルに干渉する生物剤、例えば、ＣＤ４０−ＣＤ４０リガンドに対する遮断抗体（例えば、Ｄｕｒｉｅ  ｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６１：１３２８−３０（１９９３）、Ｍｏｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５４：１４７０−８０（１９９５））、及びＣＴＬＡ４−Ｉｇ（Ｆｉｎｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６５：１２２５−７（１９９４））を含む、抗ＣＤ４０受容体または抗ＣＤ４０リガンド（ＣＤ１５４）など；ならびにＴ１０Ｂ９などのＴ細胞受容体抗体（ＥＰ  ３４０，１０９）が挙げられる。
【０１１７】
本明細書で使用される場合、「コルチコステロイドフリー」とは、患者、例えばクローン病患者が、患者がコルチコステロイドフリーである期間中に、疾患または疾患の症状を治療するためにコルチコステロイドを使用しなかったことを意味する。例えば、１２か月にわたってコルチコステロイドフリーであるクローン病患者は、１２か月にわたって、クローン病の症状を治療するためにコルチコステロイドを使用しなかった。
【０１１８】
本明細書で使用される「回復させる」または「回復」という用語は、異常もしくは症状を含む、病態、疾患、障害、もしくは表現型の減少、低減、または排除を指す。
【０１１９】
疾患または障害（例えば、炎症性腸疾患、例えば、潰瘍性大腸炎またはクローン病）の「症状」は、対象により経験される疾患を示す、あらゆる病的現象、すなわち構造、機能、もしくは感覚機能における正常からの逸脱である。
【０１２０】
「治療有効量」という表現は、疾患もしくは障害（例えば、炎症性腸疾患、例えば、潰瘍性大腸炎またはクローン病）の防止、回復、または治療に有効な量を指す。例えば、抗体の「治療有効量」は、特定の疾患もしくは障害の防止、回復、または治療に有効な抗体の量を指す。同様に、ある抗体と第２の化合物との組み合わせの治療有効量は、特定の疾患もしくは障害の防止、回復、または治療に有効な、その抗体の量と第２の化合物の量との組み合わせを指す。
【０１２１】
２つの化合物「の組み合わせ」という用語は、それらの化合物を互いに混合されて投与される必要があることを意味するものではないよう理解されるものとする。したがって、そのような組み合わせによる治療、またはその使用は、それらの化合物の混合物、またはそれらの化合物の別々の投与を包含し、同じ日または異なる日における投与を含む。したがって、「組み合わせ」という用語は、２つ以上の化合物が個別に、あるいは互いに混合されて、治療のために使用されることを意味する。ある抗体と第２の化合物とが、例えば、組み合わされて対象に投与される場合、その抗体と第２の化合物とが対象に個別に投与されるか、または混合されて投与されるかに関わらず、その抗体は、第２の化合物も対象内に存在する時点で対象内に存在する。ある特定の実施形態において、抗体以外の化合物は、抗体の前に投与される。ある特定の実施形態において、抗体以外の化合物は、抗体の後に投与される。
【０１２２】
本明細書における目的では、「腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−アルファ）」は、Ｐｅｎｎｉｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３１２：７２１（１９８４）またはＡｇｇａｒｗａｌ  ｅｔ  ａｌ．，ＪＢＣ，２６０：２３４５  （１９８５）に記載されるアミノ酸配列を含むヒトＴＮＦ−アルファ分子を指す。
【０１２３】
本明細書における「ＴＮＦ−アルファ阻害薬」は、ＴＮＦ−アルファの生物学的機能を、概してＴＮＦ−アルファへの結合及びその活性の中和によって、ある程度阻害する薬剤である。本明細書で具体的に想定されるＴＮＦ阻害薬の例は、エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（登録商標））、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標））、アダリムマブ（ＨＵＭＩＲＡ（登録商標））、ゴリムマブ（ＳＩＭＰＯＮＩＴＭ）、及びセルトリズマブペゴール（ＣＩＭＺＩＡ（登録商標））である。
【０１２４】
「コルチコステロイド」は、自然発生のコルチコステロイドの作用を模倣もしくは増補するステロイドの一般的化学構造を備える、いくつかの合成または自然発生の物質のうちのいずれか１つを指す。合成コルチコステロイドの例としては、プレドニゾン、プレドニゾロン（メチルプレドニゾロンを含む）、デキサメタゾントリアムシノロン、ブデソニド、及びベタメタゾンが挙げられる。
【０１２５】
「アンタゴニスト」は、特有もしくは特定のタンパク質の活性（リガンドの場合は１つ以上の受容体に対するその結合、または受容体の場合は１つ以上のリガンドに対する結合を含む）を、中和するか、遮断するか、阻害するか、抑止するか、低減させるか、またはそれに干渉することのできる、分子を指す。アンタゴニストとしては、抗体及びその抗原結合断片、タンパク質、ペプチド、糖タンパク質、糖ペプチド、糖脂質、多糖、オリゴ糖、核酸、生体有機分子、ペプチド模倣薬、薬理学的薬剤及びそれらの代謝物、転写制御配列及び翻訳制御配列などが挙げられる。アンタゴニストとしては、タンパク質の小分子阻害薬、ならびに、タンパク質に特異的に結合することによってその標的に対するその結合を隔絶する、融合タンパク質、受容体分子、及び誘導体、タンパク質のアンタゴニスト変異形、タンパク質を対象とするアンチセンス分子、ＲＮＡアプタマー、ならびにタンパク質に対するリボザイムも挙げられる。
【０１２６】
「自己注射デバイス」は、例えば、患者または家庭内看護者による、治療剤の自己投与のための医療デバイスを指す。自己注射デバイスには、自己投与のために設計された自動注射デバイス及び他のデバイスが含まれる。
【０１２７】
種々の追加の用語は、本明細書において定義ないしは特徴付けられる。
【０１２８】
組成物及び方法
Ａ．ベータ７インテグリンアンタゴニスト
ベータ７インテグリンアンタゴニストを投与することによる、対象、例えばヒトにおける胃腸炎症障害の治療方法が提供される。潜在的なアンタゴニストの例としては、免疫グロブリンのベータ７インテグリンとの融合体に結合するオリゴヌクレオチド、具体的には、限定されないが、ポリクローナル抗体及びモノクローナル抗体ならびに抗体断片、一本鎖抗体、抗イディオタイプ抗体、ならびにそのような抗体もしくは断片のキメラ型またはヒト化型、ならびにヒト抗体及び抗体断片を含む抗体が挙げられる。代替的に、潜在的なアンタゴニストは、密接に関係したタンパク質、例えば、リガンドを認識するが作用を与えず、それによってベータ７インテグリンの作用を競合的に阻害する、ベータ７インテグリンの変異型であってもよい。
【０１２９】
別の潜在的なベータ７インテグリンアンタゴニストは、アンチセンス技術を使用して調製されたアンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡ構築物であり、ここで、例えば、アンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡ分子は、標的ｍＲＮＡにハイブリダイズしタンパク質の翻訳を妨げることによってｍＲＮＡの翻訳を直接遮断するように作用する。アンチセンス技術は、三重らせん体形成またはアンチセンスＤＮＡもしくはＲＮＡによって遺伝子発現を制御するために使用することができ、これらの方法は両方とも、ＤＮＡまたはＲＮＡに対するポリヌクレオチドの結合に基づく。例えば、本明細書においてベータ７インテグリンをコードする、ポリヌクレオチド配列の５’コード部分は、約１０〜４０塩基対の長さのアンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドを設計するために使用される。ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、転写に関与する遺伝子の領域に相補的であるように設計され（三重らせん体−Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，６：３０７３（１９７９）、Ｃｏｏｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４１：４５６（１９８８）、Ｄｅｒｖａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５１：１３６０（１９９１）を参照されたい）、それにより、ベータ７インテグリンの転写及び産生が防止される。アンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドは、ｍＲＮＡにインビボでハイブリダイズし、ｍＲＮＡ分子のベータ７インテグリンタンパク質への翻訳を遮断する（アンチセンス−Ｏｋａｎｏ，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，５６：５６０（１９９１）；Ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｓ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ：Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，１９８８）。上述のオリゴヌクレオチドはまた、アンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡがＰＲＯポリペプチドの産生を阻害するようにインビボで発現され得るように、細胞に送達され得る。アンチセンスＤＮＡが使用される場合、例えば、標的遺伝子ヌクレオチド配列の約−１０位と＋１０位との間にある、翻訳開始部位に由来するオリゴデオキシリボヌクレオチドが典型的である。
【０１３０】
他の潜在的なアンタゴニストとしては、活性部位であるリガンドまたは結合分子の結合部位に結合し、それによってベータ７インテグリンの正常な生物活性を遮断する、小分子が挙げられる。小分子の例としては、小ペプチドまたはペプチド様分子、典型的には可溶性ペプチド、及び合成非ペプチジル有機化合物または無機化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３１】
リボザイムは、ＲＮＡの特異的切断を触媒することのできる酵素的なＲＮＡ分子である。リボザイムは、相補的な標的ＲＮＡへの配列特異的ハイブリダイゼーション、続いてエンドヌクレアーゼ的切断によって作用する。潜在的なＲＮＡ標的内にある特異的なリボザイム切断部位は、既知の技術によって特定することができる。さらなる詳細については、例えば、Ｒｏｓｓｉ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，４：４６９−４７１（１９９４）、及びＰＣＴ公開第ＷＯ  ９７／３３５５１号（１９９７年９月１８日公開）を参照されたい。
【０１３２】
転写を阻害するために使用される三重らせん体形成における核酸分子は、一本鎖であり、かつデオキシヌクレオチドから構成されている必要がある。これらのオリゴヌクレオチドの塩基組成は、フーグスティーン塩基対合則によって三重らせん体形成を促進するように設計され、これは概して、二重鎖の１つの鎖上にかなりの長さのプリンまたはピリミジンを必要とする。さらなる詳細については、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ  ９７／３３５５１号を参照されたい。これらの小分子は、本明細書上文で詳解したスクリーニングアッセイのうちの任意の１つ以上によって、及び／または、当業者に周知の任意の他のスクリーニング技術によって、特定することができる。
【０１３３】
アンタゴニストのスクリーニングアッセイは、本明細書で特定される遺伝子によってコードされるベータ７インテグリンに結合するかもしくはそれと複合体を形成する化合物、またはコードされたポリペプチドの他の細胞タンパク質との相互作用に別様に干渉する化合物を特定するように設計される。そのようなスクリーニングアッセイは、化学ライブラリの高スループットスクリーニングに特に適しており、小分子薬候補の特定に特に好適となる、アッセイを含む。
【０１３４】
アッセイは、タンパク質−タンパク質結合アッセイ、生化学スクリーニングアッセイ、イムノアッセイ、及び細胞ベースアッセイを含む種々の形式で行うことができ、これらは、当該技術分野において十分に特性化されている。
【０１３５】
Ｂ．抗ベータ７インテグリン抗体
一実施形態において、ベータ７インテグリンアンタゴニストは、抗ベータ７抗体である。例示的な抗体としては、以下に記載される、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、及びヘテロコンジュゲート抗体などが挙げられる。
【０１３６】
１．ポリクローナル抗体
ポリクローナル抗体は、関連抗原及びアジュバントの複数回の皮下（ＳＣ）注射または腹腔内（ＩＰ）注射によって、動物内で産生され得る。例えば、マレイミドベンゾイルスルホサクシニミドエステル（システイン残基によるコンジュゲーション）、Ｎ−ヒドロキシサクシニミド（リジン残基による）、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、ＳＯＣｌ２、またはＲ１Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ（式中、Ｒ及びＲ１は異なるアルキル基である）といった二官能性剤または誘導体化剤を使用して、例えばキーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、またはダイズトリプシン阻害薬といった、免疫化されることになる種において免疫原性であるタンパク質に、関連抗原をコンジュゲートすることが、有用であり得る。
【０１３７】
動物は、例えば、１００μｇまたは５μｇのタンパク質もしくはコンジュゲート（それぞれ、ウサギまたはマウスの場合）を３体積の完全フロイントアジュバントと合わせ、その溶液を複数部位で皮内注射することによって、抗原、免疫原性コンジュゲート、または誘導体に対して免疫化される。１か月後、動物を、複数部位における皮下注射により、完全フロイントアジュバント中の最初の量の１／５〜１／１０のペプチドまたはコンジュゲートで追加免疫する。７〜１４日後、動物を採血し、血清を抗体力価についてアッセイする。力価が定常に達するまで動物を追加免疫する。ある特定の実施形態において、動物は、同じ抗原でのコンジュゲートであるが、異なるタンパク質にコンジュゲートしたもの、及び／または異なる架橋試薬によりコンジュゲートしたもので追加免疫される。コンジュゲートはまた、タンパク質融合物として組換え細胞培養で作製することができる。また、ミョウバンなどの凝集剤が免疫応答を増強させるために使用されるのが好適である。
【０１３８】
２．モノクローナル抗体
モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）に最初に記載されたハイブリドーマ法を使用して作製されてもよく、または、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号参照）によって作製されてもよい。
【０１３９】
ハイブリドーマ法では、マウスまたは他の適切な宿主動物、例えばハムスターなどが、上述のように免疫化されて、免疫化に使用されるタンパク質に特異的に結合する抗体を産生するか、または産生することのできるリンパ球が誘発される。代替的に、リンパ球がインビトロで免疫化されてもよい。免疫化の後、リンパ球が単離され、次いでポリエチレングリコールなどの好適な融合剤を使用して骨髄腫細胞株と融合されて、ハイブリドーマ細胞が形成される（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。
【０１４０】
このように調製されたハイブリドーマ細胞は、好適な培地に播種され増殖し、この培地は、非融合の親骨髄腫細胞（融合パートナーとも称される）の増殖または生存を阻害する１つ以上の物質を含有し得る。例えば、親骨髄腫細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマの選択培地は、典型的には、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジンを含むことになり（ＨＡＴ培地）、これらの物質は、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を防止する。
【０１４１】
ある特定の実施形態において、融合パートナー骨髄腫細胞は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定した高レベルの産生を支持し、かつ非融合の親細胞に対して選択する選択培地に対して感受性を示すものである。ある特定の実施形態において、骨髄腫細胞株は、マウス骨髄腫株、例えばＳａｌｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．ＵＳＡから入手可能なＭＯＰＣ−２１及びＭＰＣ−１１マウス腫瘍由来のもの、及びＳＰ−２及び誘導体、例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．，ＵＳＡから入手可能なＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞である。ヒトモノクローナル抗体の産生については、ヒト骨髄腫及びマウス−ヒト異種骨髄腫細胞株も記載されている（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、及びＢｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７））。
【０１４２】
ハイブリドーマ細胞が増殖している培地は、抗原に対するモノクローナル抗体の産生についてアッセイされる。ある特定の実施形態において、ハイブリドーマ細胞により産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降によって、またはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）もしくは酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などのインビトロ結合アッセイによって判定される。
【０１４３】
モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）に記載のＳｃａｔｃｈａｒｄ分析によって判定することができる。所望の特異性、親和性、及び／または活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞が特定されたら、クローンを、限界希釈手技によってサブクローニングし、標準的方法によって増殖させることができる（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。この目的に好適な培地としては、例えば、Ｄ−ＭＥＭ培地またはＲＰＭＩ−１６４０培地が挙げられる。加えて、ハイブリドーマ細胞は、例えば、マウスにこの細胞をｉ．ｐ．注射することによって、動物において腹水癌としてインビボで増殖させることができる。サブクローンにより分泌されるモノクローナル抗体は、例えば、親和性クロマトグラフィ（例えば、タンパク質Ａまたはタンパク質Ｇ−セファロースを使用する）またはイオン交換クロマトグラフィ、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィ、ゲル電気泳動、透析などの従来の抗体精製手技によって、培地、腹水、または血清から好適に分離される。
【０１４４】
モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手技を使用して（例えば、マウス抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することのできるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離及び配列決定される。ハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡの源として機能する。単離されると、ＤＮＡが発現ベクター内に入れられてよく、これは次いで、宿主細胞、例えばＥ．ｃｏｌｉ細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、またはさもなければ抗体タンパク質を産生しない骨髄腫などにトランスフェクトされて、組換え宿主細胞内のモノクローナル抗体の合成体が得られる。抗体をコードするＤＮＡの細菌における組換え発現に関する概説論文には、Ｓｋｅｒｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，５：２５６−２６２（１９９３）及びＰｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖｓ．１３０：１５１−１８８（１９９２）が含まれる。
【０１４５】
さらなる実施形態において、モノクローナル抗体または抗体断片は、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２−５５４（１９９０）に記載の技術を使用して生成された抗体ファージライブラリから単離することができる。Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）及びＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）には、それぞれ、ファージライブラリを使用したマウス抗体及びヒト抗体の単離が記載されている。後続の刊行物は、鎖シャフリングによる高い親和性（ｎＭ範囲）のヒト抗体の産生（Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９−７８３（１９９２））、ならびに非常に大きなファージライブラリを構築する方策としてのコンビナトリアル感染及びインビボ組換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．２１：２２６５−２２６６（１９９３））を記載している。したがって、これらの技術は、モノクローナル抗体の単離のための従来のモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術の実行可能な代替策である。
【０１４６】
抗体をコードするＤＮＡは、例えば、ヒトの重鎖及び軽鎖定常ドメイン（ＣＨ及びＣＬ）配列を、相同なマウス配列と置換することによって（米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１（１９８４））、または、免疫グロブリンコード配列を、非免疫グロブリンポリペプチド（異種ポリペプチド）のコード配列の全てもしくは一部と融合させることによって、キメラまたは融合抗体ポリペプチドを産生するように修飾され得る。非免疫グロブリンポリペプチド配列は、抗体の定常ドメインと置き換わることができるか、またはそれらは、抗体の１つの抗原結合部位の可変ドメインと置き換わって、ある抗原に対する特異性を有する１つの抗原結合部位と、異なる抗原に対する特異性を有する別の抗原結合部位とを有する、キメラ二価抗体を作り出す。
【０１４７】
例示的な抗ベータ７抗体は、Ｆｉｂ５０４、Ｆｉｂ２１、２２、２７、３０（Ｔｉｄｓｗｅｌｌ，Ｍ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９７  Ａｕｇ  １；１５９（３）：１４９７−５０５）またはそれらのヒト化誘導体である。Ｆｉｂ５０４のヒト化抗体は、米国特許公開第２００６００９３６０１号（米国特許第７，５２８，２３６号として交付）に詳細に開示されており、その内容は、参照によりその全体が援用される（以下の詳解も参照されたい）。
【０１４８】
３．ヒト抗体及びヒト化抗体
本発明の抗ベータ７インテグリン抗体は、ヒト化抗体またはヒト抗体をさらに含んでもよい。非ヒト（例えば、マウス）抗体のヒト化型は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含有する、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそれらの断片（例えばＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、または抗体の他の抗原結合部分配列など）である。ヒト化抗体には、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）の残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、またはウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲの残基で置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）が含まれる。一部の例では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基が、対応する非ヒト残基で置き換えられる。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体にも、移入された（ｉｍｐｏｒｔｅｄ）ＣＤＲまたはフレームワーク配列にも見出されない残基を含んでもよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ここで、ＣＤＲ領域の全てまたは実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。ヒト化抗体はまた、最適には、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの少なくとも一部分を含む［Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９３−５９６（１９９２）］。
【０１４９】
非ヒト抗体のヒト化方法は、当該技術分野において周知である。概して、ヒト化抗体は、非ヒトである源からそれに導入された１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、「移入（ｉｍｐｏｒｔ）」残基と称されることが多く、これは典型的に「移入」可変ドメインから取られるものである。ヒト化は、基本的に、Ｗｉｎｔｅｒ及び共同研究者らの方法に従い［Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４−１５３６（１９８８）］、齧歯類ＣＤＲまたはＣＤＲ配列を、ヒト抗体の対応する配列の代わりに用いることによって行うことができる。したがって、そのような「ヒト化」抗体は、無傷のヒト可変ドメインより実質的に少ない部分が、非ヒト種由来の対応する配列で置換されている、キメラ抗体である（米国特許第４，８１６，５６７号）。実際には、ヒト化抗体は典型的には、一部のＣＤＲ残基そして場合により一部のＦＲ残基が、齧歯類抗体中の類似部位からの残基で置換されているヒト抗体である。抗体がヒト治療用途を目的とする場合、ヒト化抗体の作製に使用されるヒト可変ドメインの選択は、軽ドメインと重ドメインとの両方とも、抗原性及びＨＡＭＡ応答（ヒト抗マウス抗体）を低減させることが非常に重要である。いわゆる「ベストフィット」法によると、齧歯類抗体の可変ドメインの配列が、既知のヒト可変ドメイン配列の全ライブラリに対してスクリーニングされる。齧歯類のＶドメイン配列に最も近いヒトＶドメイン配列が特定され、その中のヒトフレームワーク領域（ＦＲ）が、ヒト化抗体のために受け入れられる（Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１（１９８７））。別の方法は、軽鎖または重鎖の特定のサブグループの全ヒト抗体のコンセンサス配列に由来する特定のフレームワーク領域を使用する。同じフレームワークが、いくつかの異なるヒト化抗体に使用され得る（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）、Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３（１９９３））。抗体が抗原に対する高い結合親和性及び他の好ましい生物学的特性を保持してヒト化されることがさらに重要である。この目標を達成するためには、ある特定の実施形態によると、ヒト化抗体は、親配列及びヒト化配列の三次元モデルを使用した、親配列及び様々な概念上のヒト化産物の分析プロセスによって調製される。三次元免疫グロブリンモデルは一般的に利用可能であり、当業者にはよく知られている。選択された候補免疫グロブリン配列の推定される三次元高次構造を例示及び表示するコンピュータプログラムが利用可能である。これらのディスプレイの精査により、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の可能性の高い役割の分析、すなわち、候補免疫グロブリンがその抗原に結合する能力に影響する残基の分析が可能となる。このように、標的抗原（複数��）に対する増加した親和性などの所望の抗体特性が達成されるように、ＦＲ残基をレシピエント配列及び移入配列から選択し、組み合わせることができる。一般に、超可変領域残基は、抗原結合への影響に直接的に、かつ最も実質的に関与している。
【０１５０】
様々な形態のヒト化抗ベータ７インテグリン抗体が想定される。例えば、ヒト化抗体は、Ｆａｂなどの抗体断片であってもよく、これは、免疫コンジュゲートを生成するために、１つ以上の細胞傷害剤（複数可）と任意選択によりコンジュゲートされる。代替的に、ヒト化抗体は、無傷ＩｇＧ１抗体などの無傷抗体であってもよい。
【０１５１】
例示的なヒト化抗ベータ７抗体としてはｒｈｕＭＡｂベータ７が挙げられ、これは、インテグリンサブユニットβ７に対するヒト化モノクローナル抗体であり、ラット抗マウス／ヒトモノクローナル抗体ＦＩＢ５０４に由来したものである（Ａｎｄｒｅｗ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９９４；１５３：３８４７−６１）。これは、ヒト免疫グロブリンＩｇＧ１重鎖及びκ１軽鎖フレームワークを含むように操作されており、チャイニーズハムスター卵巣細胞によって産生される。この抗体は、α４β７（Ｈｏｌｚｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．１９８９  Ｃｅｌｌ，１９８９；５６：３７−４６、Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １９９２；８９：８２５４−８）と、αＥβ７（Ｃｅｐｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １９９３；１５０：３４５９−７０）との２つのインテグリンに結合し、これらは、胃腸管におけるリンパ球サブセットの輸送及び保持を制御し、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）及びクローン病（ＣＤ）などの炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に関与する。ｒｈｕＭＡｂベータ７は、α４β７とそのリガンド（粘膜アドレシン細胞接着分子１［ＭＡｄＣＡＭ］−１、血管細胞接着分子［ＶＣＡＭ］−１、及びフィブロネクチン）との細胞相互作用、ならびにαＥβ７とそのリガンド（Ｅ−カドヘリン）との相互作用の、強力なインビトロ遮断薬である。ｒｈｕＭＡｂベータ７は、同様に高い親和性で、ウサギ、カニクイザル、及びヒト由来のリンパ球上のβ７に可逆的に結合する。これは、マウスβ７にも高い親和性で結合する。ｒｈｕＭＡｂベータ７及びその変異形のアミノ酸配列、ならびにその作製及び使用は、例えば、米国特許出願公開第２００６００９３６０１号（米国特許第７，５２８，２３６として交付）に詳細に開示されており、その内容は、その全体が援用される。
【０１５２】
図１Ａ及び１Ｂは、次の可変軽鎖及び重鎖に関する配列アライメントを示す：軽鎖ヒトサブグループカッパＩコンセンサス配列（図１Ａ、配列番号１２）、重鎖ヒトサブグループＩＩＩコンセンサス配列（図１Ｂ、配列番号１３）、ラット抗マウスベータ７抗体（Ｆｉｂ５０４）可変軽鎖（図１Ａ、配列番号１０）、ラット抗マウスベータ７抗体（Ｆｉｂ５０４）可変重鎖（図１Ｂ、配列番号１１）、及びヒト化抗体変異形：ヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフト可変軽鎖（図１Ａ、配列番号１４）、ヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフト可変重鎖（図１Ｂ、配列番号１５）、変異形ｈｕ５０４−５、ｈｕ５０４−１６、及びｈｕ５０４−３２（変異形ｈｕ５０４−５、ｈｕ５０４−１６、及び５０４−３２（配列番号２５）に関するヒト化ｈｕ５０４Ｋグラフトからのアミノ酸変化は、図１Ａ（軽鎖）（記載順にそれぞれ配列番号２２〜２４）、及び図１Ｂ（重鎖）に示されている。
【０１５３】
４．ヒト抗体
ヒト化に代わるものとして、ヒト抗体を生成することができる。例えば、免疫化すると内因性免疫グロブリン産生の非存在下でヒト抗体の完全レパートリーを産生することのできるトランスジェニック動物（例えば、マウス）を生産することが現在では可能である。例えば、キメラ及び生殖細胞系変異マウスにおける抗体重鎖接合領域（ＪＨ）遺伝子のホモ接合欠失が、内因性抗体産生の完全な阻害をもたらすことが説明されている。そのような生殖細胞系変異マウスにヒト生殖細胞系免疫グロブリン遺伝子アレイを移動させると、抗原投与に際してヒト抗体が産生される。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：２５５１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５−２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ．７：３３（１９９３）、米国特許第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，５９１，６６９号（全てＧｅｎＰｈａｒｍ）、米国特許第５，５４５，８０７号、及びＷＯ  ９７／１７８５２を参照されたい。
【０１５４】
代替的に、ファージディスプレイ技術（ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５３［１９９０］）を使用して、未免疫ドナーの免疫グロブリン可変（Ｖ）ドメイン遺伝子レパートリーから、ヒト抗体及び抗体断片をインビトロで産生することができる。この技術によると、抗体Ｖドメイン遺伝子は、Ｍ１３またはｆｄなどの糸状バクテリオファージの主要あるいは非主要なコートタンパク質遺伝子にインフレームでクローニングされ、ファージ粒子の表面上に機能的抗体断片として提示される。この糸状粒子はファージゲノムの一本鎖ＤＮＡコピーを含有するため、抗体の機能的特性に基づく選択は、それらの特性を示す抗体をコードする遺伝子の選択にもなる。したがって、ファージはＢ細胞の特性の一部を模倣する。ファージディスプレイは、例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｋｅｖｉｎ  Ｓ．ａｎｄ  Ｃｈｉｓｗｅｌｌ，Ｄａｖｉｄ  Ｊ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ３：５６４−５７１（１９９３）に概説されている種々の形式で行うことができる。Ｖ遺伝子セグメントのいくつかの源をファージディスプレイに使用することができる。Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）は、免疫化マウスの脾臓から得られたＶ遺伝子の小さなランダムコンビナトリアルライブラリから、多種多様な抗オキサゾロン抗体を単離した。未免疫のヒトドナー由来のＶ遺伝子のレパートリーを構築することができ、多種多様な抗原（自己抗原を含む）に対する抗体を、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９１）、またはＧｒｉｆｆｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．１２：７２５−７３４（１９９３）に記載される技術に基本的に従って単離することができる。また、米国特許第５，５６５，３３２号及び同第５，５７３，９０５号も参照されたい。
【０１５５】
上記に詳解したように、ヒト抗体は、インビトロ活性化Ｂ細胞によって生成されてもよい（米国特許第５，５６７，６１０号及び同第５，２２９，２７５号を参照されたい）。
【０１５６】
５．抗体断片
ある特定の状況では、全抗体ではなく抗体断片を使用する利点がある。より小さなサイズの断片により、迅速なクリアランスが可能になり、固形腫瘍へのアクセスの改善がもたらされ得る。
【０１５７】
抗体断片の産生のために様々な技術が開発されてきた。従来、これらの断片は、無傷抗体のタンパク質消化によって得られた（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４：１０７−１１７（１９９２）及びＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照されたい）。しかしながら、今日では、これらの断片は、組換え宿主細胞から直接産生することができる。例えば、抗体断片は、上記に詳解した抗体ファージライブラリから単離することができる。代替的に、Ｆａｂ’−ＳＨ断片をＥ．ｃｏｌｉから直接回収し、化学的にカップリングして、Ｆ（ａｂ’）２断片を形成することができる（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７（１９９２））。別の手法によると、Ｆ（ａｂ’）２断片は、組換え宿主細胞培養から直接単離することができる。抗体断片の産生のための他の技術は、当業者には明らかであろう。他の実施形態では、最適な抗体は、一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ  ９３／１６１８５、米国特許第５，５７１，８９４号、及び米国特許第５，５８７，４５８号を参照されたい。抗体断片は、例えば米国特許第５，６４１，８７０号に記載されるように、「線形抗体」であってもよい。そのような線形抗体断片は、単一特異性であっても二重特異性であってもよい。
【０１５８】
６．二重特異性抗体
二重特異性抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープに対する結合特異性を有する抗体である。例示的な二重特異性抗体は、本明細書に記載されるベータ７インテグリンの２つの異なるエピトープに結合し得る。他のそのような抗体は、ＴＡＴ結合部位を、別のタンパク質の結合部位と組み合わせ得る。代替的に、抗ベータ７インテグリンアームは、細胞防御機構をＴＡＴ発現細胞に集中させ局在化させるように、Ｔ細胞受容体分子（例えば、ＣＤ３）などの白血球上の誘発分子、またはＦｃ．γＲＩ（ＣＤ６４）、Ｆｃ．γＲＩＩ（ＣＤ３２）、及びＦｃ．γ．ＲＩＩＩ（ＣＤ１６）などのＩｇＧのＦｃ受容体（Ｆｃ．γ．Ｒ）に結合する、アームと組み合わせられてもよい。二重特異性抗体は、ＴＡＴを発現する細胞に細胞傷害剤を局在化させるために使用されてもよい。これらの抗体は、ＴＡＴ結合アームと、細胞傷害剤（例えば、サポリン、抗インターフェロン−．アルファ．、ビンカアルカロイド、リシンＡ鎖、メトトレキサート、または放射性同位体ハプテン）に結合するアームとを有する。二重特異性抗体は、全長抗体または抗体断片（例えば、Ｆ（ａｂ’）２二重特異性抗体）として調製することができる。
【０１５９】
二重特異性抗体の作製方法は、当該技術分野において既知である。全長二重特異性抗体の従来の産生は、２つの鎖が異なる特異性を有する、２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の同時発現に基づくものである（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７−５３９（１９８３））。免疫グロブリンの重鎖及び軽鎖の分類がランダムであるため、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、潜在的な１０個の異なる抗体分子の混合物を産生し、これらのうちの１つのみが正しい二重特異性構造を有する。通常は親和性クロマトグラフィステップにより行われるこの正しい分子の精製は、幾分厄介であり、生成物収率は低い。同様の手技が、ＷＯ  ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：３６５５−３６５９（１９９１）に開示されている。
【０１６０】
異なる手法によると、所望の結合特異性を有する抗体可変ドメイン（抗体−抗原結合部位）が、免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合される。ある特定の実施形態において、この融合は、ヒンジであるＣＨ２及びＣＨ３領域の少なくとも一部を含むＩｇ重鎖定常ドメインとのものである。ある特定の実施形態において、融合のうちの少なくとも１つに存在する、軽鎖結合に必要な部位を含有する第１の重鎖定常領域（ＣＨ１）。免疫グロブリン重鎖融合体、そして所望の場合は免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡが、別個の発現ベクターに挿入され、好適な宿主細胞に共トランスフェクトされる。これにより、構築に使用される不均等な比率の３つのポリペプチド鎖が、所望の二重特異性抗体の最適収率をもたらす実施形態において、３つのポリペプチド断片の相互割合を調整する際の柔軟性が高くなる。しかしながら、少なくとも２つのポリペプチド鎖の等しい比率の発現が高い収率をもたらす場合、またはその比率が所望の鎖の組み合わせの収率に著しい影響を及ぼさない場合は、２つまたは３つ全てのポリペプチド鎖のコード配列を、単一の発現ベクターに挿入することが可能である。
【０１６１】
ある特定の実施形態において、二重特異性抗体は、一方のアームにある第１の結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖と、他方のアームにあるハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対（第２の結合特異性を提供する）から構成される。二重特異性分子の半分のみに免疫グロブリン軽鎖が存在することで、容易な分離方法が提供されるため、この非対称構造は、望まれない免疫グロブリン鎖の組み合わせからの所望の二重特異性化合物の分離を促進することが見出された。この手法は、ＷＯ  ９４／０４６９０に開示されている。二重特異性抗体の生成に関するさらなる詳細については、例えば、Ｓｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １２１：２１０（１９８６）を参照されたい。
【０１６２】
米国特許第５，７３１，１６８号に記載の別の手法によると、一対の抗体分子間の界面を操作して、組換え細胞培養から回収されるヘテロ二量体の割合を最大にすることができる。ある特定の実施形態において、この界面は、ＣＨ３ドメインの少なくとも一部を含む。この方法では、第１の抗体分子の界面由来の１つ以上の小さなアミノ酸側鎖が、より大きな側鎖（例えば、チロシンまたはトリプトファン）で置き換えられる。大きな側鎖（複数可）と同一または同様の大きさの補償的な「空洞」が、大きなアミノ酸側鎖をより小さなもの（例えば、アラニンまたはスレオニン）と置き換えることによって、第２の抗体分子の界面上に作り出される。これにより、ホモ二量体などの他の望まれない最終産物と比べてヘテロ二量体の収率を増加させるための機構が提供される。
【０１６３】
二重特異性抗体には、架橋抗体または「ヘテロコンジュゲート」抗体が含まれる。例えば、ヘテロコンジュゲート中の抗体の一方がアビジンにカップリングし、他方がビオチンにカップリングし得る。そのような抗体は、例えば、免疫系細胞の標的を望まれない細胞に絞るため（米国特許第４，６７６，９８０号）、そしてＨＩＶ感染の治療のために提唱されている（ＷＯ  ９１／００３６０、ＷＯ  ９２／２００３７３、及びＥＰ  ０３０８９）。ヘテロコンジュゲート抗体は、任意の簡便な架橋方法を使用して作製することができる。好適な架橋剤は当該技術分野において周知であり、いくつかの架橋技術と併せて米国特許第４，６７６，９８０号に開示されている。
【０１６４】
抗体断片から二重特異性抗体を生成するための技術も文献に記載されている。例えば、二重特異性抗体は、化学結合を使用して調製することができる。Ｂｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１（１９８５）は、無傷抗体がタンパク質分解的に切断されてＦ（ａｂ’）．ｓｕｂ．２断片が生成される手技を記載している。これらの断片は、隣接するジチオールを安定化させ、分子間ジスルフィド形成を防止するジチオール錯化剤である、亜ヒ酸ナトリウムの存在下で還元される。生成されたＦａｂ’断片は次いで、チオニトロベンゾエート（ＴＮＢ）誘導体に変換される：次いで、Ｆａｂ’−ＴＮＢ誘導体の一方が、メルカプトエチルアミンによる還元によってＦａｂ’−チオールに再変換され、等モル量の他方のＦａｂ’−ＴＮＢ誘導体と混合されて、二重特異性抗体が形成される。産生された二重特異性抗体は、酵素の選択的固定化のための薬剤として使用することができる。
【０１６５】
近年の進歩により、化学的にカップリングして二重特異性抗体を形成することのできるＦａｂ’−ＳＨ断片をＥ．ｃｏｌｉから直接回収することが容易になった。Ｓｈａｌａｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７５：２１７−２２５（１９９２）は、完全ヒト化二重特異性抗体Ｆ（ａｂ’）２分子の産生を記載している。各Ｆａｂ’断片は、Ｅ．ｃｏｌｉから別々に分泌され、インビトロでの指向性化学的カップリングに供されて、二重特異性抗体が形成された。このように形成された二重特異性抗体は、ＥｒｂＢ２受容体を過剰発現する細胞、及び正常なヒトＴ細胞に結合すると共に、ヒト乳腺腫瘍標的に対するヒト細胞傷害性リンパ球の溶解活性を誘発することができた。組換え細胞培養から直接的に二重特異性抗体断片を作製及び単離するための様々な技術も記載されている。例えば、ロイシンジッパーを使用して二重特異性抗体が産生された。Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２）。Ｆｏｓ及びＪｕｎタンパク質由来のロイシンジッパーペプチドが、遺伝子融合によって２つの異なる抗体のＦａｂ’部分に連結された。抗体ホモ二量体がヒンジ領域で還元されて単量体が形成され、次いで再酸化されて抗体ヘテロ二量体が形成された。この方法は、抗体ホモ二量体の産生にも利用され得る。Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３）に記載された「ダイアボディ」技術は、二重特異性抗体断片の作製のための代替機構を提供している。これらの断片は、同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーによってＶ．ｓｕｂ．Ｌに接続されたＶ．ｓｕｂ．Ｈを含む。したがって、１つの断片のＶ．ｓｕｂ．Ｈドメイン及びＶ．ｓｕｂ．Ｌドメインは、別の断片の相補的なＶ．ｓｕｂ．Ｌドメイン及びＶ．ｓｕｂ．Ｈドメインと対合させられ、それにより、２つの抗原結合部位が形成される。一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体の使用により二重特異性抗体断片を作製するための別の方策も報告されている。Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい。
【０１６６】
２価を超える抗体が想定される。例えば、三重特異性抗体を調製することができる。Ｔｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）。
【０１６７】
７．ヘテロコンジュゲート抗体
ヘテロコンジュゲート抗体もまた、本発明の範囲内である。ヘテロコンジュゲート抗体は、共有結合した２つの抗体から構成される。そのような抗体は、例えば、免疫系細胞の標的を望ましくない細胞に絞るため［米国特許第４，６７６，９８０号］、そしてＨＩＶ感染の治療のために提唱されている［ＷＯ  ９１／００３６０、ＷＯ  ９２／２００３７３、ＥＰ  ０３０８９］。架橋剤を必要とするものを含む、合成タンパク質化学において既知の方法を使用して、抗体がインビトロで調製され得ることが想定される。例えば、ジスルフィド交換反応を使用して、またはチオエーテル結合を形成することによって、免疫毒素を構築してもよい。この目的に好適な試薬の例としては、イミノチオレート及びメチル−４−メルカプトブチルイミデート（ｍｅｒｃａｐｔｏｂｕｔｙｒｉｍｉｄａｔｅ）、ならびに、例えば米国特許第４，６７６，９８０号に開示されているものが挙げられる。
【０１６８】
８．多価抗体
多価抗体は、その抗体が結合する抗原を発現する細胞によって、二価抗体よりも速く内部移行（及び／または異化）され得る。本発明の抗体は、３つ以上の抗原結合部位を有する（ＩｇＭクラス以外の）多価抗体（例えば、四価抗体）とすることができ、これは、抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組換え発現によって容易に産生することができる。多価抗体は、二量体化ドメイン、及び３つ以上の抗原結合部位を含むことができる。ある特定の実施形態において、二量体化ドメインは、Ｆｃ領域またはヒンジ領域を含む（またはそれらから成る）。このシナリオでは、抗体は、Ｆｃ領域と、Ｆｃ領域のアミノ末端側に３つ以上の抗原結合部位とを含むことになる。ある特定の実施形態において、本明細書における多価抗体は、３つ〜約８つ、しかし典型的には４つの抗原結合部位を含む（またはそれらから成る）。多価抗体は、少なくとも１つのポリペプチド鎖（典型的には２つのポリペプチド鎖）を含み、このポリペプチド鎖（複数可）は、２つ以上の可変ドメインを含む。例えば、ポリペプチド鎖（複数可）は、ＶＤ１−（Ｘ１）．ｓｕｂ．ｎ−ＶＤ２−（Ｘ２）．ｓｕｂ．ｎ−Ｆｃを含み得、ここで、ＶＤ１は第１の可変ドメインであり、ＶＤ２は第２の可変ドメインであり、ＦｃはＦｃ領域の１つのポリペプチド鎖であり、Ｘ１及びＸ２はアミノ酸またはポリペプチドを表し、ｎは０または１である。例えば、ポリペプチド鎖（複数可）は、ＶＨ−ＣＨ１−可動性リンカー−ＶＨ−ＣＨ１−Ｆｃ領域鎖、またはＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１−Ｆｃ領域鎖を含んでもよい。本明細書における多価抗体は、少なくとも２つ（典型的には４つ）の軽鎖可変ドメインポリペプチドをさらに含んでもよい。本明細書における多価抗体は、例えば、約２つ〜約８つの軽鎖可変ドメインポリペプチドを含んでもよい。本明細書で想定される軽鎖可変ドメインポリペプチドは、軽鎖可変ドメインを含み、任意選択により、ＣＬドメインをさらに含む。
【０１６９】
９．エフェクター機能操作
例えば、抗体の抗原依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）及び／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を増強するために、エフェクター機能に関して本発明の抗体を修飾することが望ましい場合がある。これは、１つ以上のアミノ酸置換を抗体のＦｃ領域内に導入することによって達成され得る。代替的にまたは追加的に、システイン残基（複数可）をＦｃ領域内に導入し、それにより、この領域における鎖間ジスルフィド結合形成を可能にしてもよい。このように生成されたホモ二量体抗体は、向上した内部移行能力、及び／または、増加した補体媒介性細胞殺滅及び抗体依存性細胞傷害活性（ＡＤＣＣ）を有し得る。Ｃａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．１７６：１１９１−１１９５（１９９２）、及びＳｈｏｐｅｓ，Ｂ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：２９１８−２９２２（１９９２）を参照されたい。抗腫瘍活性が増強されたホモ二量体抗体はまた、Ｗｏｌｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５３：２５６０−２５６５（１９９３）に記載のヘテロ二官能性架橋剤を使用して調製され得る。代替的に、二重Ｆｃ領域を有することにより、増強された補体溶解及びＡＤＣＣ能力を有し得る、抗体を操作することができる。Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ３：２１９−２３０（１９８９）を参照されたい。抗体の血清半減期を増加させるため、例えば米国特許第５，７３９，２７７号に記載されるように、サルベージ受容体結合エピトープを抗体（特に抗体断片）に組み込んでもよい。本明細書で使用される場合、「サルベージ受容体結合エピトープ」という用語は、ＩｇＧ分子のインビボ血清半減期を増加させる原因となる、ＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）のＦｃ領域のエピトープを指す。
【０１７０】
１０．免疫コンジュゲート
本明細書の方法に使用されるアンタゴニストまたは抗体は、任意選択により、細胞傷害剤またはサイトカインなどの別の薬剤にコンジュゲートされる。
【０１７１】
コンジュゲーションは通常、共有結合により達成され、その精確な性質は、標的分子、及びインテグリンベータ７アンタゴニストまたは抗体ポリペプチド上の結合部位によって決定される。典型的には、非ペプチド剤は、化学修飾によって抗体上に導入された、アミノ酸側鎖、炭水化物鎖、または反応性基を介した、抗ベータ７インテグリン抗体へのコンジュゲーションを可能にするリンカーの付加によって修飾される。例えば、薬物は、リジン残基の．イプシロン．−アミノ基を介して、遊離．アルファ．−アミノ基を介して、システイン残基へのジスルフィド交換によって、または過ヨウ素酸による炭水化物鎖内の１，２−ジオールの酸化によって結合され得、シッフ塩基結合を介した様々な求核試薬を含有する薬物の結合が可能となる。例えば、米国特許第４，２５６，８３３号を参照されたい。タンパク質変性剤としては、アミン反応性試薬（例えば、反応性エステル、イソチオシアネート、アルデヒド、及びハロゲン化スルホニル）、チオール反応性試薬（例えば、ハロアセチル誘導体及びマレイミド）、ならびにカルボン酸反応性試薬及びアルデヒド反応性試薬が挙げられる。インテグリンベータ７アンタゴニストまたは抗体ポリペプチドは、二官能性架橋試薬の使用によって、ペプチド剤に共有結合させることができる。ヘテロ二官能性試薬がより一般的に使用されており、２つの異なる反応性部分（例えば、アミン反応性とチオール、ヨードアセトアミド、またはマレイミド）の使用により、２つの異なるタンパク質のカップリングの制御を可能にする。そのような結合剤の使用は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｂｒｉｎｋｌｅｙ（上記）及び米国特許第４，６７１，９５８号を参照されたい。ペプチドリンカーを用いることもできる。代替形態では、融合ポリペプチドの調製によって、抗ベータ７インテグリン抗体ポリペプチドをペプチド部分に結合させることができる。
【０１７２】
さらなる二官能性タンパク質カップリング剤の例としては、Ｎ−サクシニミジル−３−（２−ピリジルジチオール）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、サクシニミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（アジプイミド酸ジメチルＨＣＬなど）、活性エステル（スベリン酸ジサクシニミジルなど）、アルデヒド（グルタレルデヒド（ｇｌｕｔａｒｅｌｄｅｈｙｄｅ）など）、ビス−アジド化合物（ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなど）、ビス−ジアゾニウム誘導体（ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミンなど）、ジイソシアネート（トリエン（ｔｏｌｙｅｎｅ）２，６−ジイソシアネートなど）、及びビス−活性フッ素化合物（１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンなど）が挙げられる。
【０１７３】
１１．免疫リポソーム
本明細書に開示される抗ベータ７インテグリン抗体は、免疫リポソームとして製剤化されてもよい。「リポソーム」は、哺乳動物に薬物を送達するのに有能である、様々な種類の脂質、リン脂質、及び／または界面活性剤から構成された小胞である。リポソームの成分は一般的に、生体膜の脂質配置と同様の二重層構造で配置されている。抗体を含有するリポソームは、例えばＥｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：３６８８（１９８５）、Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４０３０（１９８０）、米国特許第４，４８５，０４５号及び同第４，５４４，５４５号、ならびに１９９７年１０月２３日公開のＷＯ９７／３８７３１に記載されるような、当該技術分野で既知の方法によって調製される。循環時間が向上したリポソームは、米国特許第５，０１３，５５６号に開示されている。
【０１７４】
特に有用なリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロール、及びＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物を用いた逆相蒸発法によって生成することができる。リポソームを、所定の細孔サイズのフィルタを通して押し出すことにより、所望の直径を有するリポソームが得られる。
【０１７５】
本発明の抗体のＦａｂ’断片は、Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５７：２８６−２８８（１９８２）に記載のように、ジスルフィド相互交換反応を介してリポソームにコンジュゲートされ得る。任意選択により、化学療法剤がリポソーム内に含有される。Ｇａｂｉｚｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．８１（１９）：１４８４（１９８９）を参照されたい。
【０１７６】
１２．抗体産生のためのベクター、宿主細胞、及び組換え法
本明細書に記載の抗ベータ７抗体またはポリペプチド剤をコードする単離核酸、該核酸を含むベクター及び宿主細胞、ならびに抗体産生のための組換え技術も提供される。
【０１７７】
抗体の組換え産生では、それをコードする核酸が単離され、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）のため、または発現のために、複製可能ベクターに挿入され得る。別の実施形態では、抗体は、例えば、参照により本明細書に明確に援用される米国特許第５，２０４，２４４号に記載の相同組換えによって産生されてもよい。モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手技を使用して（例えば、抗体の重鎖軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することのできるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離及び配列決定される。多くのベクターが利用可能である。ベクター成分は概して、限定されないが、次のうちの１つ以上を含む：シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサー要素、プロモーター、及び転写終結配列（例えば、１９９６年７月９日に交付され、参照により本明細書に明確に援用される、米国特許第５，５３４，６１５号に記載のもの）。
【０１７８】
本明細書におけるベクター内でのＤＮＡのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞は、上述の原核生物、酵母、または高等真核生物の細胞である。この目的に好適な原核生物としては、真正細菌、例えばグラム陰性またはグラム陽性の生物など、例えば、ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａなどのＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ、例えば、Ｅ．  ｃｏｌｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、例えば、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、例えば、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ、及びＳｈｉｇｅｌｌａ、ならびにＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ及びＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓなどの桿菌（例えば、１９８９年４月１２日公開のＤＤ  ２６６，７１０に開示されているＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ  ４１Ｐ）、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどのＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、ならびにＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓが挙げられる。Ｅ．ｃｏｌｉクローニング宿主の１つは、Ｅ．ｃｏｌｉ  ２９４（ＡＴＣＣ  ３１，４４６）であるが、Ｅ．ｃｏｌｉ  Ｂ、Ｅ．ｃｏｌｉ  Ｘ１７７６（ＡＴＣＣ  ３１，５３７）、及びＥ．ｃｏｌｉ  Ｗ３１１０（ＡＴＣＣ  ２７，３２５）などの他の株も好適である。これらの例は、限定ではなく例示である。
【０１７９】
原核生物に加えて、糸状菌または酵母などの真核微生物が、抗ベータ７インテグリン抗体コードベクターに好適なクローニング宿主または発現宿主である。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、すなわち一般的なパン酵母が、下等真核生物宿主微生物の中で最も一般的に使用されているものである。しかしながら、例えば、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ；例えば、Ｋ．ｌａｃｔｉｓ、Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（ＡＴＣＣ  １２，４２４）、Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ（ＡＴＣＣ  １６，０４５）、Ｋ．ｗｉｃｋｅｒａｍｉｉ（ＡＴＣＣ  ２４，１７８）、Ｋ．ｗａｌｔｉｉ（ＡＴＣＣ  ５６，５００）、Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ（ＡＴＣＣ  ３６，９０６）、Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ、及びＫ．ｍａｒｘｉａｎｕｓなどのＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ宿主；ｙａｒｒｏｗｉａ（ＥＰ  ４０２，２２６）；Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ（ＥＰ  １８３，０７０）；Ｃａｎｄｉｄａ；Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｉａ（ＥＰ  ２４４，２３４）；Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｓｓａ；Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓなどのＳｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ；ならびに、例えば、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ、ならびにＡ．ｎｉｄｕｌａｎｓ及びＡ．ｎｉｇｅｒなどのＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ宿主などの糸状菌といった、いくつかの他の属、種、及び株が、一般的に利用可能であり、本明細書において有用である。
【０１８０】
グリコシル化抗ベータ７抗体の発現に好適な宿主細胞は、多細胞生物から得られる。無脊椎動物細胞の例としては、植物及び昆虫細胞が挙げられる。多数のバキュロウイルス株及び変異形、ならびにＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（イモムシ）、Ａｅｄｅｓ  ａｅｇｙｐｔｉ（蚊）、Ａｅｄｅｓ  ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ（蚊）、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ（ショウジョウバエ）、及びＢｏｍｂｙｘ  ｍｏｒｉなどの宿主由来の対応する許容昆虫宿主細胞が特定されている。トランスフェクションのための種々のウイルス株、例えば、Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ  ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ  ＮＰＶのＬ−１変異形、及びＢｏｍｂｙｘ  ｍｏｒｉ  ＮＰＶのＢｍ−５株が公的に入手可能であり、かかるウイルスは、本発明における本明細書におけるウイルスとして、特にＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞のトランスフェクションのために使用され得る。ワタ、トウモロコシ、ジャガイモ、ダイズ、ペチュニア、トマト、及びタバコの植物細胞培養物を、宿主として利用することもできる。
【０１８１】
しかしながら、脊椎動物細胞が最も注目されており、培養下での脊椎動物細胞の増殖（組織培養）が日常的な手段となっている。有用な哺乳動物宿主細胞株の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）；ヒト胚腎臓株（２９３細胞または懸濁培養下での増殖のためにサブクローニングされた２９３細胞、Ｇｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７））；ベビーハムスター腎細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １０）；チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ（ＣＨＯ、Ｕｒｌａｕｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４２１６（１９８０））；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３−２５１（１９８０））；サル腎細胞（ＣＶ１  ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）；アフリカミドリザル腎細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５８７）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ２）；イヌ腎細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ３４）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ  ３Ａ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７５）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２、ＨＢ  ８０６５）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ５１）；ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ  Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４−６８（１９８２））；ＭＲＣ  ５細胞；ＦＳ４細胞；及びヒト肝癌株（Ｈｅｐ  Ｇ２）である。
【０１８２】
宿主細胞は、抗ベータ７インテグリン抗体産生のための上述の発現ベクターまたはクローニングベクターで形質転換され、プロモーターの誘導、形質転換体の選択、または所望の配列をコードする遺伝子の増幅のために必要に応じて改変される従来の栄養培地において培養される。
【０１８３】
本発明の抗ベータ７インテグリン抗体を産生するために使用される宿主細胞は、種々の培地で培養され得る。Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１０（Ｓｉｇｍａ）、最小必須培地（（ＭＥＭ）、（Ｓｉｇｍａ）、ＲＰＭＩ−１６４０（Ｓｉｇｍａ）、及びダルベッコ改変イーグル培地（（ＤＭＥＭ）、Ｓｉｇｍａ）などの市販の培地が、宿主細胞の培養に好適である。加えて、Ｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．５８：４４（１９７９）、Ｂａｒｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１  ０２：２５５（１９８０）、米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、もしくは同第５，１２２，４６９号、ＷＯ  ９０／０３４３０、ＷＯ  ８７／００１９５、または米国特許Ｒｅ．３０，９８５号に記載の培地のうちのいずれも、宿主細胞の培地として使用され得る。これらの培地のいずれにも、必要に応じて、ホルモン及び／または他の増殖因子（インスリン、トランスフェリン、または上皮増殖因子など）、塩（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸塩など）、緩衝液（ＨＥＰＥＳなど）、ヌクレオチド（アデノシン及びチミジンなど）、抗生物質（ＧＥＮＴＡＭＹＣＩＮ（商標）薬など）、微量要素（マイクロモルの範囲の最小濃度で通常存在する無機化合物と定義される）、及びグルコースまたは同等のエネルギー源が補充され得る。任意の他の必要な補充物もまた、当業者には既知であろう適切な濃度で含まれ得る。温度、ｐＨなどの培養条件は、発現のために選択された宿主細胞にこれまでに使用されているものであり、当業者には明らかであろう。
【０１８４】
組換え技術を使用する際、抗体は、細胞内、細胞膜周辺腔内で産生されてもよいし、または培地に直接分泌されてもよい。抗体が細胞内で産生される場合、第１のステップとして、微粒子状の残骸である宿主細胞または溶解断片のいずれかが、例えば、遠心分離または限外濾過によって除去される。Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７（１９９２）は、Ｅ．ｃｏｌｉの細胞膜周辺腔に分泌される抗体を単離するための手段を記載している。簡潔に述べると、細胞ペーストを、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、及びフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）の存在下で、約３０分間にわたって解凍する。細胞残骸は、遠心分離によって除去することができる。抗体が培地に分泌される場合、かかる発現系の上清は概して、市販のタンパク質濃縮フィルタ、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外濾過ユニットを使用して、まず濃縮される。タンパク質分解を阻害するために、ＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害薬が前述のステップのいずれかに含まれてもよく、外来性混入物の増殖を防止するために、抗生物質が含まれてもよい。
【０１８５】
細胞から調製された抗体組成物は、例えば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィ、ゲル電気泳動、透析、及び親和性クロマトグラフィを使用して精製することができ、親和性クロマトグラフィが典型的な精製技術である。親和性リガンドとしてのタンパク質Ａの好適性は、抗体内に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに左右される。タンパク質Ａは、ヒト．ガンマ．１、．ガンマ．２、または．ガンマ．４重鎖に基づく抗体を精製するのに使用することができる（Ｌｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．６２：１−１３（１９８３））。タンパク質Ｇは、全てのマウスアイソタイプ及びヒト．ガンマ．３に推奨される（Ｇｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．５：１５６７１５７５（１９８６））。親和性リガンドが結合する基質は、ほとんどの場合アガロースであるが、他の基質も利用可能である。孔制御ガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼンなどの機械的に安定な基質により、アガロースで達成可能なものよりも速い流速、及び短い処理時間が可能となる。抗体がＣ．ｓｕｂ．Ｈ３ドメインを含む場合、Ｂａｋｅｒｂｏｎｄ  ＡＢＸ（商標）樹脂（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，Ｎ．Ｊ．）が精製に有用である。タンパク質精製のための他の技術、例えば、イオン交換カラムでの分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカでのクロマトグラフィ、ヘパリンＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（商標）でのクロマトグラフィ、アニオン交換樹脂またはカチオン交換樹脂（例えばポリアスパラギン酸カラムなど）でのクロマトグラフィ、等電点電気泳動、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈殿なども、回収されるべき抗体に応じて利用可能である。任意の予備的な精製ステップ（複数可）の後、目的の抗体及び混入物を含む混合物は、典型的には低い塩濃度（例えば、約０〜０．２５Ｍの塩）で行われる、約２．５〜４．５のｐＨの溶出緩衝液を使用した、低ｐＨ疎水性相互作用クロマトグラフィに供され得る。
【０１８６】
Ｃ．薬学的製剤
本発明の治療剤、アンタゴニスト、または抗体を含む治療製剤は、水溶液、凍結乾燥製剤、または他の乾燥製剤の形態で、所望の純度を有する抗体を、任意選択の生理的に許容可能な担体、賦形剤、または安定化剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））と混合することにより、貯蔵のために調製される。許容可能な担体、賦形剤、または安定化剤は、用いられる投与量及び濃度でレシピエントに対して無毒であり、これらには、リン酸、クエン酸、ヒスチジン、及び他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルアルコール、またはベンジルアルコール；メチルパラベンまたはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む単糖類、二糖類、及び他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロース、またはソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；及び／または非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などが含まれる。
【０１８７】
本明細書における製剤はまた、治療されている特定の適応症に必要な、１つより多くの活性化合物、典型的には互いに有害な作用を及ぼさない相補的な活性を有するものを含有してもよい。そのような分子は、意図される目的に有効な量で組み合わさって存在することが好適である。
【０１８８】
活性成分はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセル及びポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、及びナノカプセル）中に、あるいはマクロエマルジョン中に、封入されてもよい。かかる技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。
【０１８９】
インビボ投与に使用される製剤は、滅菌されていなければならない。これは、滅菌濾過膜を通す濾過によって容易に達成される。
【０１９０】
徐放性調製物を調製してもよい。徐放性調製物の好適な例としては、本発明の免疫グロブリンを含有する固体の疎水性ポリマーの半透性基質が挙げられ、この基質は、成形品、例えばフィルムまたはマイクロカプセルの形態である。徐放性基質の例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸と．ガンマ．エチル−Ｌ−グルタメートとのコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、例えばＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーとリュープロリド酢酸塩とから構成された注射可能なマイクロスフェア）、及びポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。エチレン−酢酸ビニル及び乳酸−グリコール酸などのポリマーが１００日間にわたる分子の放出を可能にする一方で、ある特定のヒドロゲルは、より短い期間にわたってタンパク質を放出する。カプセル化された免疫グロブリンは、長期間にわたって体内に残存する場合、それらは、３７℃の水分への曝露の結果として変性または凝集し、生物活性の損失、及び免疫原性の変化の可能性をもたらし得る。関与する機構に応じて、安定化のための合理的な方策が講じられ得る。例えば、凝集機構がチオ−ジスルフィド相互交換による分子間Ｓ−Ｓ結合形成であると発見されれば、スルフヒドリル残基を修飾すること、酸性溶液から凍結乾燥すること、水分含有量を制御すること、適切な添加剤を使用すること、及び特定のポリマーマトリクス組成物を開発することによって、安定化が達成され得る。
【０１９１】
Ｄ．投与
治療を施す医師は、ラベル上の指示に従うことにより、個別の対象に適切な用量を決定することができるであろう。インテグリンベータ７アンタゴニストと組み合わせて、すなわちそれと併用して投与される市販の第２の治療薬及び他の化合物の調製ならびに投薬スケジュールは、製造元の指示に従って使用されてもよく、または熟練した施術者によって経験的に決定されてもよい。
【０１９２】
ある特定の実施形態において、インテグリンベータ７アンタゴニストは、４週間毎に１回、または第０週、第２週、及び第４週、続いて４週間毎に１回、１か月（４週間）、または２か月、３か月、または６か月、または１２か月、または１８か月、または２４か月の期間にわたって、あるいは患者の生涯にわたって慢性的に投与される。ある特定の実施形態において、治療薬は、患者によって自己投与される。ある特定の実施形態において、患者は、プレフィルドシリンジを含む自動注射デバイスを使用して自己投与する。
【０１９３】
ある特定の実施形態において、均一用量の抗ベータ７抗体が患者に投与される。均一用量とは、体重に関わらずあらゆる患者に投与される抗ベータ７抗体の特定の量である。疾患の種類及び重症度に応じて、約５０ｍｇ〜４５０ｍｇの均一用量の抗ベータ７抗体が患者に投与され、これは、１回以上の別々の注射もしくは輸注または投与であってもよい。そのような均一用量は、皮下投与され得る。ある特定の実施形態において、均一用量は、約１００ｍｇ、または約２００ｍｇ、または約３００ｍｇ、または約４００ｍｇ、または約４５０ｍｇである。ある特定の実施形態において、均一用量は、約１０５ｍｇまたは約２１０ｍｇである。ある特定の実施形態において、均一用量は、１０５ｍｇである。ある特定の実施形態において、均一用量は、２１０ｍｇである。ある特定の実施形態において、均一用量は、４週間毎に１回、皮下投与される。
【０１９４】
ある特定の実施形態において、初回均一負荷用量の抗ベータ７抗体に、１回以上の均一維持用量の抗ベータ７抗体が続く。負荷用量は、維持用量よりも多い量の抗ベータ７抗体である。ある特定の実施形態において、負荷用量は、約２００ｍｇまたは約２１０ｍｇである。ある特定の実施形態において、負荷用量は、２１０ｍｇである。ある特定の実施形態において、２１０ｍｇの抗ベータ７抗体が、第０週、第２週、第４週、第８週、及び第１２週に投与され、維持用量が、その後４週間毎に１回投与される。ある特定の実施形態において、維持用量は、約１００ｍｇまたは約１０５ｍｇである。ある特定の実施形態において、維持用量は、１０５ｍｇである。
【０１９５】
ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、１４週の期間にわたって投与される。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、３か月の期間にわたって投与される。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、６か月の期間にわたって投与される。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、少なくとも１２か月（５２週間）の期間にわたって投与される。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、少なくとも６６週の期間にわたって投与される。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、少なくとも７０週の期間にわたって投与される。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、少なくとも７４週の期間にわたって投与される。ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、対象の生涯にわたって投与される。
【０１９６】
典型的には、臨床医は、本発明の抗体を（単独で、または第２の化合物と組み合わせて）、必要な生物学的作用をもたらす投与量（複数可）に達するまで投与する。本発明の療法の進行は、例えば、クローン病活性指数（ＣＤＡＩ）スコア、患者報告アウトカム２（ＰＲＯ２）スコア、及びクローン病簡易内視鏡的指数（ＳＥＳ−ＣＤ）スコアを含むがこれらに限定されない、本明細書に記載の方法によって監視することができる。
【０１９７】
ある特定の実施形態において、抗ベータ７抗体は、例えば、自己注射デバイス、自動注射デバイス、または自己投与のために設計された他のデバイスを使用して投与される。自動注射デバイスを含む様々な自己注射デバイスが当該技術分野において既知であり、市販されている。例示的なデバイスとしては、プレフィルドシリンジ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社のＢＤ  ＨＹＰＡＫ  ＳＣＦ（登録商標）、ＲＥＡＤＹＦＩＬＬＴＭ、及びＳＴＥＲＩＦＩＬＬ  ＳＣＦＴＭ；Ｂａｘｔｅｒ社のＣＬＥＡＲＳＨＯＴＴＭコポリマープレフィルドシリンジ；ならびにＷｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社から入手可能なＤａｉｋｙｏ  Ｓｅｉｋｏ  ＣＲＹＳＴＡＬ  ＺＥＮＩＴＨ（登録商標）プレフィルドシリンジなど）；Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社のＢＤ  Ｐｅｎなどの使い捨てペン型注射デバイス；超鋭利デバイス及びマイクロニードルデバイス（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社のＩＮＪＥＣＴ−ＥＡＳＥＴＭ及びマイクロインフューザーデバイス；ならびにＶａｌｅｒｉｔａｓ社のＨ−ＰＡＴＣＨＴＭなど）、ならびに無針注射デバイス（Ｂｉｏｊｅｃｔ社から入手可能なＢＩＯＪＥＣＴＯＲ（登録商標）及びＩＪＥＣＴ（登録商標）；ならびにＭｅｄｔｒｏｎｉｃ社から入手可能なＳＯＦ−ＳＥＲＴＥＲ（登録商標）及びパッチデバイス）が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態において、単一用量のエトロリズマブを含むプレフィルドシリンジを備える製造品が提供される。ある特定の実施形態において、単一用量のエトロリズマブを含むプレフィルドシリンジと自動注射器との組み合わせを備える製造品が提供される。
【０１９８】
記載されるように、インテグリンベータ７アンタゴニストは、単独で投与することも、少なくとも第２の治療化合物と組み合わせて投与することもできる。こうした第２の治療化合物は概して、それまでに使用されたものと同じ投与量及び投与経路で、またはそれまでに用いられた投与量の約１〜９９％で使用される。かかる第２の化合物が使用される場合、それらは、ある特定の実施形態では、それにより引き起こされる副作用を排除または低減するように、インテグリンベータ７アンタゴニストが存在しない場合よりも低い量で使用される。
【０１９９】
これもまた記載されるように（例えば以下参照）、ＩＢＤ、例えば、潰瘍性大腸炎、及びクローン病の治療のための、種々の好適な第２の治療化合物が当該技術分野において既知であり、かかる第２の治療化合物の投与量及び投与方法も同様に説明されている。
【０２００】
インテグリンベータ７アンタゴニスト及び任意の第２の治療化合物の投与は、同時に、例えば単一の組成物として、または、２つ以上の明確に異なる組成物として、同じかまたは異なる投与経路を使用して行うことができる。代替的に、または追加的に、投与は、順次、任意の順序で行うことができる。ある特定の実施形態において、分単位から日単位、週単位、月単位に及ぶ間隔が、２つ以上の組成物の投与間に存在し得る。例えば、インテグリンベータ７アンタゴニストがまず投与され、続いて第２の治療化合物が投与されてもよい。しかしながら、同時投与、またはインテグリンベータ７アンタゴニストの前の第２の治療化合物の投与もまた想定される。
【０２０１】
中等度から重度の活性ＣＤを有する対象のための標準治療は、標準用量の全身用コルチコステロイド、例えば、プレドニゾン（もしくはプレドニゾン等価物）もしくはブデソニド、免疫抑制剤、例えばアザチオプリン、６−メルカプトプリン、もしくはメトトレキサートなど、または腫瘍壊死因子阻害薬（抗ＴＮＦ薬）、例えばインフリキシマブ、アダリムマブ、もしくはセルトリズマブペゴールなどを用いる療法を含む。他の抗インテグリン療法がＣＤの治療のために承認されており、これらはナタリズマブ及びベドリズマブである。本明細書に開示される抗ベータ７インテグリン抗体などのインテグリンベータ７アンタゴニストを用いた療法は、疾患寛解の誘導及び／または維持の改善（疾患の迅速な制御及び／または長期寛解）、及び／または、かかる対象に対して抗ＴＮＦ薬を含む標準治療により達成されたものを上回る臨床応答をもたらすであろう。
【０２０２】
一実施形態において、クローン病（ＣＤ）を有するヒト対象におけるＣＤのための本発明の治療は、有効量の治療剤、例えば抗ベータ７インテグリン抗体などを対象に投与することを含み、免疫抑制剤、コルチコステロイド、抗ＴＮＦ薬、疼痛制御剤、下痢止め剤、抗生物質、またはそれらの組み合わせである第２の薬品を有効量で対象に投与することをさらに含む。
【０２０３】
例示的な実施形態において、該第２の医薬は、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、メトトレキサート、プレドニゾン（またはプレドニゾン等価物）、ブデソニド、インフリキシマブ、アダリムマブ、及びセルトリズマブ（ｃｅｒｔｌｉｚｕｍａｂ）ペゴールから成る群から選択される。
【０２０４】
これらの第２の薬品は全て、互いと組み合わせて使用されても、またはそれ自体で第１の薬品と共に使用されてもよく、したがって、本明細書で使用される「第２の薬品」という表現は、それがそれぞれ第１の薬品以外の唯一の薬品であることを意味するものではない。したがって、第２の薬品は１つの薬品である必要はないが、１つより多くのかかる薬物を構成する場合も、それを含む場合もある。
【０２０５】
本明細書における併用投与には、別個の製剤または単一の薬学的製剤を使用する共投与と、いずれかの順序における連続投与とが含まれ、概して、両方（または全て）の活性剤がそれらの生物活性を同時に発揮する期間が存在する。
【０２０６】
第２の薬品の併用投与には、別個の製剤または単一の薬学的製剤を使用する共投与（同時投与）と、いずれかの順序における連続投与とが含まれ、概して、両方（または全て）の活性剤（薬品）がそれらの生物活性を同時に発揮する期間が存在する。
【０２０７】
Ｅ．治療レジメン設計
創薬は複雑かつ高価なプロセスである。新薬を市場にもたらすコストは、８億ドル〜１０億ドルと推定されている。第Ｉ相臨床治験における薬物の１０％未満が、承認段階に至る。薬物が後期に失敗する主な理由の２つは、用量−濃度応答の関係の理解不足、及び予期せぬ安全上の事象である。このシナリオを踏まえると、薬物がどのようにインビボで機能し、臨床治療候補の成功を助けるかを予測するのに役立つ、実用化ツールを有することが重要である（Ｌａｋｓｈｍｉ  Ｋａｍａｔｈ，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  Ｓｕｃｃｅｓｓ  ｉｎ  ＰＫ／ＰＤ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＆  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（２００６））。
【０２０８】
薬物動態（ＰＫ）は、薬物の吸収、分配、代謝、及び排除特性を決定する。薬力学（ＰＤ）は、投与される薬物に対する生理学的及び生物学的な応答を定義する。ＰＫ／ＰＤモデリングは、これら２つのプロセス間の数学的及び理論的関連を確立し、薬物作用のより良好な予測に役立つ。統合されたＰＫ／ＰＤモデリング、及びシミュレーションによるコンピュータ支援治験設計が、多くの創薬プログラムに組み込まれており、影響力を高めている（Ｌａｋｓｈｍｉ  Ｋａｍａｔｈ，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  Ｓｕｃｃｅｓｓ  ｉｎ  ＰＫ／ＰＤ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＆  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（２００６））。
【０２０９】
ＰＫ／ＰＤ試験は、典型的に、創薬プロセスのあらゆる段階で行われる。開発がますます複雑になり、時間がかかり、かつ高コストとなっているため、企業は、ＰＫ／ＰＤデータをより有効に使用して、欠陥のある候補を初期に排除し、臨床成功の見込みが最も大きい候補を特定することを目指している。（Ｌａｋｓｈｍｉ  Ｋａｍａｔｈ、上記）。
【０２１０】
ＰＫ／ＰＤモデリング手法は、バイオマーカー応答、薬物レベル、及び投薬レジメンの間の関係を決定するのに有用であることを示している。薬物候補のＰＫ／ＰＤプロファイル、及びそれに対する患者の応答を予測する能力は、臨床治験の成功に重要である。分子生物学技術における近年の進歩、及び様々な疾患に対する標的の理解の深まりにより、薬物の治療有効性の良好な臨床的指標としてのバイオマーカーの妥当性が認められている。バイオマーカーアッセイは、薬物候補に対する生物学的応答の特定に役立つ。バイオマーカーの妥当性が臨床的に認められると、治験シミュレーションを効果的にモデリングすることができる。バイオマーカーは、いつか創薬における臨床成績に代わり得る代理の地位を得る可能性を有する（Ｌａｋｓｈｍｉ  Ｋａｍａｔｈ、上記）。
【０２１１】
末梢血中のバイオマーカーの量は、インテグリンベータ７アンタゴニストを用いる治療に対する生物学的応答を特定する際に使用され得、したがって、候補治療薬の治療有効性に関する良好な臨床的指標として機能することができる。
【０２１２】
創薬における従来のＰＫ／ＰＤモデリングは、薬物用量濃度、薬物曝露作用、薬物半減期、時間に対する薬物濃度、及び時間に対する薬物作用などのパラメータを定義する。より広く使用される場合、薬物モデリング、疾患モデリング、治験モデリング、及び市場モデリングなどの定量的技術は、開発プロセス全体を支持することができ、これにより、リスクの明確に検討すること、及び知識をより有効に利用することによって、より良好な決定がもたらされる。例えば、Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａにより開発されたＷｉｎＮｏｎｌｉｎ及びＫｎｏｗｌｅｄｇｅｂａｓｅ  Ｓｅｒｖｅｒ（ＰＫＳ）といった種々のＰＫ／ＰＤモデリングツールが、創薬研究者に利用可能である。
【０２１３】
前述の説明及び以下の実施例は、当業者が本発明を実施することを可能にするのに十分であると考えられる。本明細書に示され記載されるものに加えて、本発明の様々な改変形態が、前述の説明及び以下の実施例から当業者には明らかとなり、それらは、添付の特許請求の範囲に含まれるものとする。
【０２１４】
本明細書に含まれる教示を踏まえれば、本発明の教示を特定の問題または状況に適用することは、当業者の能力の範疇内であると理解される。
【０２１５】
本発明のさらなる詳細は、以下の非限定的な実施例によって例示される。本明細書における全ての引用の開示内容は、参照により本明細書に明確に援用される。
【実施例】
【０２１６】
実施例１
中等度から重度の活性クローン病を有する患者のための誘導及び維持治療としてのエトロリズマブの有効性及び安全性を評価するための、第ＩＩＩ相ランダム化二重盲検プラセボ対照多施設共同研究
【０２１７】
研究の説明
研究の論拠
この研究の目的は、腸管粘膜における炎症性Ｔ細胞の輸送及び保持を、α４β７／ＭＡｄＣＡＭ−１、及びαＥβ７／Ｅ−カドヘリン結合の妨害によって阻害することが示されている、特有の作用機構（ＭＯＡ）を有する抗インテグリン薬である、エトロリズマブの有効性及び安全性を評価することである。
【０２１８】
エトロリズマブはＣＤを有するヒトにおいては研究されていないが、ＵＣ患者及びＣＤ患者の切除から単離された腸ＣＤ４＋細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞上での、エトロリズマブの薬理学的標的であるインテグリンβ７受容体の発現の予備研究は、両方の疾患で発現レベルが同様であることを示唆している。ＣＤにおいて報告された、抗α４β７  ｍＡｂであるベドリズマブの有効性は、この疾患の病理生物学におけるα４β７の役割を実証し（Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３７：２０４−１３，２０１３）、このような研究から、エトロリズマブはＣＤにおいて効力があると考えられる。加えて、αＥβ７＋発現は、報告によればＣＤ患者で上昇し（Ｅｌｅｗａｕｔ  Ｄ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｃｔａ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｂｅｌｇ  ６１：２８８−９４，１９９８、Ｏｓｈｉｔａｎｉ  Ｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ  １２：７１５−９，２００３）、遠位腸から近位腸にかけて発現の増加が観察されたことから、エトロリズマブの二重ＭＯＡは、利用可能な抗インテグリン及び抗ＴＮＦ療法と比較して、全身性免疫抑制を伴わずにＣＤにおける有効性の増強をもたらし得る。
【０２１９】
加えて、ＵＣ患者における包括的な第ＩＩ相研究において、エトロリズマブは、中等度から重度のＵＣの治療に効力があり、全患者集団において治療開始１０週間後に（４週間毎に［Ｑ４Ｗ］１０５ｍｇ（１００ｍｇ正規用量））、２０．５％のプラセボ補正臨床的寛解率（ｐ＝０．０５８）、及び１０．３％の内視鏡的寛解率（ｐ＝０．００４）を達成した（Ｖｅｒｍｅｉｒｅ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４４，Ｓ１：Ｓ−３６，２０１３、Ｖｅｒｍｅｉｒｅ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  ３８４：３０９−１８，２０１４、Ｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４６：３０７−３１５，２０１４）。加えて、エトロリズマブは許容可能な安全性プロファイルを有し、臨床的に有意な安全性シグナルは観察されなかった。
【０２２０】
研究設計
これは、中等度から重度の活性ＣＤの誘導及び維持治療中の、プラセボと比較したエトロリズマブの有効性、安全性、及び耐容性を評価する、多施設共同の第ＩＩＩ相二重盲検プラセボ対照研究である。
【０２２１】
研究設計は、１）研究に対する患者の適性を判定するためのスクリーニング期（最長２８日間）、２）誘導期（１４週間）、続いて３）誘導期の最後にＣＤＡＩ−７０応答（ＣＤＡＩ基線スコアからの少なくとも７０ポイントの減少と定義される）を示す患者における維持期（６０週間）、及び４）エトロリズマブ治療を受ける非盲検拡張研究の第１部に参加していない患者に関する、維持期における最後の用量の治験薬の投与後の、安全性経過観察期（１２週間）を含む（図３及び図４参照）。安全性経過観察期の完了時に、患者は、９２週間の拡張されたＰＭＬ監視期（非盲検拡張研究）に入るよう依頼される。独立データモニタリング委員会（ｉＤＭＣ）が、安全性及び研究の運営を継続的に監視する。
【０２２２】
中等度から重度の活性ＣＤは、スクリーニング期において、≧２２０〜≦４８０のＣＤＡＩスコアをもたらす臨床徴候及び症状によって、また、ランダム化の７日前に計算されるＰＲＯ２スコア≧１４によって定義される。併せて、≧７、または孤立性回腸炎もしくは回腸切除後の場合は≧４のＳＥＳ−ＣＤスコアと定義される活性炎症の存在が必要とされ、これは、セントラルリーディングにより点数化されたスクリーニング回腸結腸内視鏡検査によって判定される。
【０２２３】
研究対象集団は、事前に抗ＴＮＦ療法を受けていない（ＴＮＦナイーブ）がコルチコステロイド（ＣＳ）及び／または免疫抑制剤（ＩＳ）療法に対して不応性もしくは不耐性である患者、ならびに抗ＴＮＦ療法に対して不応性もしくは不耐性である患者（以下にさらに記載される）から成る。適格な患者は、ランダム化前の少なくとも８週間にわたって安定したＩＳを受けており、かつ以下に記載される安定用量のＣＳを受けている必要がある。抗ＴＮＦ療法に対して非応答性すなわち不応性（ＴＮＦ−ＩＲ）または抗ＴＮＦ療法に対して不耐性である患者は、自身のランダム化の前に、少なくとも１２週間の期間にわたってこの治療を中止していなければならない。
【０２２４】
およそ１２５０人の患者が、およそ３８０の世界的規模の調査研究現場から３つのコホートのうちの１つに登録することによってランダムに分けられ、研究に含められる。この登録は、まずコホート１、次いで、コホート２、そして最後にコホート３と順次である。
【０２２５】
スクリーニング期
２８日スクリーニング期において、患者の適性を評価する（図３及び図４参照）。主要な適性基準を以下に記載する。
【０２２６】
スクリーニング期中、ＣＳ療法を受けている患者は、自身のランダム化直前の少なくとも２週間にわたって、≦２０ｍｇ／日のプレドニゾン（もしくは等価物）または≦６ｍｇ／日の経口ブデソニドを安定用量で受けていなければならない。同様に、バックグラウンドＩＳ療法（例えば、６−ＭＰ、またはＭＴＸ）を必要とする適格な患者は、自身のランダム化直前の少なくとも８週間にわたって、安定したＩＳ投薬レジメンを受けていなければならない。ＴＮＦ−ＩＲまたは抗ＴＮＦ療法に対して不耐性である患者は、自身のランダム化の前に、少なくとも１２週間の期間にわたってこの治療を中止していなければならない。
【０２２７】
回腸結腸内視鏡検査は、セントラルリーダーによる点数化及び適性の判定に十分な時間を取るため、かつ、回腸結腸内視鏡検査のための腸前処置が基線ＰＲＯ２及びＣＤＡＩスコアの判定に使用される患者報告アウトカム（すなわち、腹痛、全体的な健康状態、及び排便頻度）に影響することを回避するために、スクリーニング期の第−３週から第−２週の間に行われるべきである。
【０２２８】
誘導期
適格な患者を、１４週間の誘導期のために、３つのコホートのうちの１つに順次登録する（図３参照）。
【０２２９】
コホート１（二重盲検、プラセボ対照、探索的コホート；ｎ＝３００）に登録された患者は、１４週間の誘導期において第０週、第２週、第４週、第８週、及び第１２週に、プラセボ、エトロリズマブ１０５ｍｇ、ＳＣ  Ｑ４Ｗ（低用量）、またはエトロリズマブ２１０ｍｇ、ＳＣ（高用量）を受けるように、１：２：２の比でランダム化される（低用量エトロリズマブにランダム化された患者は第２週にプラセボ注射を受けることに留意されたい−以下参照）。コホート２（エトロリズマブ用量盲検、積極的治療コホート；ｎ＝３５０）に登録された患者は、エトロリズマブの低用量レジメンまたは高用量レジメンを受けるように、１：１の比でランダム化される。コホート３（二重盲検、プラセボ対照、中枢的コホート；ｎ＝６００）に登録された患者は、プラセボまたはエトロリズマブを、低用量または高用量で受けるように、２：３：３の比でランダム化される。低用量及び高用量のエトロリズマブは異なる容積のシリンジ内にあるため、盲検性を保つために、３つ全てのコホートの患者が、第０週、第４週、第８週、及び第１２週に２回の注射を受ける。低用量エトロリズマブにランダム化された患者は、１回のプラセボ注射を受ける第２週を除いた各投与時に、１回のプラセボ（一致する高用量プレフィルドシリンジ）及び１回の低用量エトロリズマブ注射を受ける。高用量エトロリズマブにランダム化された患者は、１回の高用量注射を受ける第２週を除いた各投与時に、１回のプラセボ及び１回の高用量エトロリズマブ注射を受ける。最後に、プラセボにランダム化された患者は、１回のプラセボ注射を受ける第２週を除いた毎投与時に、２回のプラセボ注射を受ける。
【０２３０】
全てのコホートにおけるランダム化は、併用経口ＣＳ治療（あり対なし）、併用ＩＳ治療（あり対なし）、基線ＣＤＡＩ≦３３０（正対否）、及びＴＮＦ−ＩＲ患者（正対否）によって階級化される。登録は、コホート３におけるＴＮＦ−ＩＲ患者の割合がおよそ７５％を超えないこと、及び＞４５０〜≦４８０のＣＤＡＩスコアを有する患者の割合が各コホートでおよそ１０％を超えないことが確実になるように管理される。
【０２３１】
誘導期中、全コホートの患者は、ＣＳ及びＩＳ療法の自身の用量（複数可）を一定に保たなければならない（基線のＣＳ／ＩＳを必要とする場合）。これらの薬物の調整は、レスキュー療法と見なされる。レスキュー療法とは、新たなＣＤ症状または悪化しているＣＤ症状のために処方される薬物を意味し、これには、ＣＤのためのあらゆる新たな薬物、または基線ＣＤ薬物の用量もしくはレジメンにおけるあらゆる増加が含まれる。また、必要な場合は下痢止め薬を固定用量に留めるために、あらゆる試みがなされるべきである。下痢止め薬の用量設定がＰＲＯ２のプラセボ応答率に及ぼす影響は、中等度から重度の活性ＣＤ集団において研究されていない。
【０２３２】
第１０週目において、患者が非盲検のエトロリズマブを受けることができる、非盲検拡張（ＯＬＥ）研究（第１部）への任意選択による逃避措置がある。これは、ＣＤＡＩとＰＲＯ２との両方の第１０週目のスコアが患者の基線（第０週）スコアを超えることと定義される疾患の悪化を患者が経験する場合にのみ実施され得る。第１０週目において、疾患の進行を経験し、かつＯＬＥに入っていない患者は、レスキュー療法を使用してもよい。
【０２３３】
第１４週目において、レスキュー療法を使用せずにＣＤＡＩ−７０応答を達成している患者は、維持期へと進む。米国の調査研究現場に参加している患者は、第１４週でＩＳ治療を中止しなければならない。第１４週でＣＤＡＩ−７０応答を達成しない患者及び／または誘導期中にレスキュー療法を使用する患者は、非応答者と見なされ、維持期には不適格となる。第１４週における非応答者は、疾患の悪化（上記の定義の通り）がないときにレスキュー薬物を使用した場合を除いて、非盲検拡張（ＯＬＥ）研究（第１部）に入る選択肢を有する。ＯＬＥに入らない非応答者は、１２週間の安全性経過観察期に入り、その後、９２週間にわたる拡張ＰＭＬ監視期（ＯＬＥ研究、第２部）に登録するよう依頼される。
【０２３４】
維持期
誘導期の最後（第１４週）に、患者は、ＣＤＡＩスコアについて評価され、ＳＥＳ−ＣＤスコアを判定するためのセントラルリーディングを伴う徹底した内視鏡検査（回腸結腸内視鏡検査（ｉｌｅｏｃｏｌｏｎｓｃｏｐｙ））を受ける。回腸結腸内視鏡検査が第１４週目の訪問時またはこの訪問後の５暦日以内に行われるようスケジューリングするためのあらゆる試みがなされるべきであり、この手技は、第１４週以前にスケジューリングされてはならない。腸前処置前の７日間に捕捉される患者報告アウトカム（すなわち、腹痛、全体的な健康状態、及び排便頻度）が、第１４週のＰＲＯ２スコア及びＣＤＡＩスコアを計算するために使用され、したがって、これらのアウトカムに対する腸前処置のあらゆる影響が除かれる。
【０２３５】
誘導期中にプラセボを受け、レスキュー療法を使用せずに第１４週目にＣＤＡＩ−７０応答を達成した患者は、維持期中に盲検プラセボ治療への偽ランダム化を受ける。エトロリズマブを受け、レスキュー療法を使用せずに第１４週目にＣＤＡＩ−７０応答を達成した患者は、プラセボまたはエトロリズマブ１０５ｍｇ  ＳＣ  Ｑ４Ｗを用いた治療における維持期に１：１の比でランダム化される（図４参照）。
【０２３６】
維持期へのランダム化は、第１６週の診療所訪問時に行われ、このとき、第１の維持用量が投与される。患者が維持期に適格であると評価されていれば、ランダム化の連絡は、第１４週（誘導期中の最後の訪問）から第１６週の間に行われ得る。ランダム化は、第１０週と第１４週との両方におけるＣＤＡＩ寛解（あり対なし）、誘導用量レジメン（低用量対高用量）、併用経口ＣＳ治療（あり対なし）、及びＴＮＦ−ＩＲ患者歴（正対否）によって階級化される。
【０２３７】
維持期中、米国内の患者は、維持期中に併用ＩＳ療法を一切受けてはならず、米国外の患者は、研究全体にわたって安定用量のＩＳ療法を受け続けなければならないが、薬物に関連する毒性のために用量低減または中止が必要とされる場合を除く。ＣＳ用量は、第１４週を始めとして漸減する。ＣＳ用量は、次のスケジュールに従って漸減する：≦２０ｍｇ／日のプレドニゾン（または等価物）；中止まで２．５ｍｇ／週の用量低減により用量設定、及び≦６ｍｇ／日の経口ブデソニド：中止まで２週毎に３ｍｇの用量低減により用量設定。ＣＤ症状の再発またはステロイド離脱症状を伴わずにＣＳ漸減に耐容できない患者は、増加したＣＳ用量を受けることができるが、これは、ランダム化時に投与された用量を超過してはならない。用量漸減レジメンは、２週間以内に再開されなければならない。
【０２３８】
２回の連続した訪問時（予定外の訪問を含み得る）における第１４週のＣＤＡＩスコアからのＣＤＡＩスコアの≧１００ポイントの増加、及びＣＤＡＩスコア≧２２０ポイントと定義される、臨床的再発を経験する患者は、維持期中にＯＬＥ研究に逃避する選択肢を有する。
【０２３９】
第７４週に維持期中の最終訪問を完了する患者は、適格であればＯＬＥ研究（第２部）に登録するか、または１２週間の安全性経過観察期に入ることができ、この後、９２週間にわたる拡張ＰＭＬ監視期（ＯＬＥ研究、第２部）に登録するよう依頼される。ＣＤのための外科的介入を必要とする患者は、研究処置を停止し、安全性経過観察期に入り、ＰＭＬ監視のためのＯＬＥ研究第２部に入るよう依頼される。治験から自主的に離脱する患者、またはＯＬＥ治療の適性基準を満たさない患者も、安全性経過観察期に入り、ＰＭＬ監視のためのＯＬＥ研究第２部に入るよう依頼される。
【０２４０】
評価項目
別個の評価項目が、以下にさらに記載されるように、アメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）及び欧州医薬品庁（ＥＭＡ）、ならびに場合により米国外にある他の保健機関（米国外（ｅｘ−Ｕ．Ｓ．））に関して評価される。
【０２４１】
一次有効性評価項目（米国）
誘導期の一次有効性評価項目は、第１４週目のＰＲＯ２寛解である。ＰＲＯ２寛解は、ＰＲＯ２≦１１と定義される。
【０２４２】
維持期の一次有効性評価項目は、第１４週でＰＲＯ２寛解を達成した患者間での第６６週目のＰＲＯ２寛解であるＰＲＯ２寛解は、ＰＲＯ２≦１１と定義される。
【０２４３】
一次有効性評価項目（米国外）
誘導期の一次有効性評価項目は、第１４週目のＣＤＡＩ寛解である。ＣＤＡＩ寛解は、ＣＤＡＩ＜１５０と定義される。
【０２４４】
維持期の一次有効性評価項目は、第１０週及び第１４週でＣＤＡＩ寛解を達成した患者間での、少なくとも５２週間後の、かつ全体にわたりコルチコステロイドフリーでの、ＣＤＡＩ寛解の維持である。
【０２４５】
二次有効性評価項目
上述の誘導期及び維持期に関する米国の一次有効性評価項目は、米国外では、それぞれ誘導及び維持に関する二次有効性評価項目である。上述の誘導期及び維持期に関する米国外の一次有効性評価項目は、米国では、それぞれ誘導及び維持に関する二次有効性評価項目である。
【０２４６】
この研究の誘導期に関する、さらなる世界的規模の二次有効性評価項目は、（１）第１４週目の内視鏡的改善（内視鏡的改善は、基線ＳＥＳ−ＣＤスコアの５０％の低減と定義される）；（２）第１４週目のＣＤＡＩ−１００応答（ＣＤＡＩ−１００応答は、ＣＤＡＩ基線スコアからの少なくとも１００ポイントの減少と定義される；（３）第１０週目及び第１４週目のＣＤＡＩ寛解（ＣＤＡＩ寛解は、ＣＤＡＩスコア＜１５０と定義される）；（４）ＩＢＤＱにより評価される患者報告ＨＲＱＯＬ（ＨＲＱＯＬ＝健康関連の生活の質；ＩＢＤＱ＝炎症性腸疾患質問表）の基線から第１４週にかけての変化；ならびに（５）ＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳ基準（ＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳ＝クローン病患者報告アウトカム徴候及び症状）により評価されるＣＤの徴候及び症状の基線から第１４週にかけての変化である。
【０２４７】
この研究の維持期に関する、さらなる世界的規模の二次有効性評価項目は、（１）第６６週目の（第０週目と比較した）内視鏡的改善（内視鏡的改善は、基線ＳＥＳ−ＣＤスコアの５０％の低減と定義される）；（２）第１４週でＣＤＡ寛解を達成した患者間での、第６６週目のＣＤＡＩ寛解（ＣＤＡＩ寛解は、ＣＤＡＩスコア＜１５０と定義される）；（３）第１４週で臨床応答を達成した患者間での、第６６週目のＣＤＡＩ寛解（ＣＤＡＩ寛解は、ＣＤＡＩスコア＜１５０と定義される）；（４）第６６週目の（第０週目と比較した）ＣＤＡＩ−１００応答（ＣＤＡＩ−１００応答は、ＣＤＡＩ基線スコアからの少なくとも１００ポイントの減少と定義される）；（５）持続的ＣＤＡＩ寛解（次の週：第２４週、第２８週、第３２週、第４４週、第５６週、第６６週、第７０週、及び第７４週のうちの６超で達成される）（持続的ＣＤＡＩ寛解は、維持期中の８回のＣＤＡＩ評価訪問のうち少なくとも６回でＣＤＡＩスコア＜１５０と定義される）；（６）第１４週で臨床応答を達成した患者間での、第６６週目のＣＳフリーＣＤＡＩ寛解（ＣＳフリーＣＤＡＩ寛解とは、コルチコステロイド使用を伴わないＣＤＡＩ寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）を意味する）；（７）第１０週及び第１４週でＣＤＡＩ寛解を達成した患者における、第６６週目の、かつ第６６週以前の２４週間にわたりＣＳフリーでの、ＣＤＡＩ寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）；（８）第１４週で内視鏡的改善及びＣＤＡＩ−７０応答を達成した患者間での、第６６週目の内視鏡的改善の維持（評価項目は上記の定義の通りである）；（９）第６６週目の粘膜炎の消散（ＳＥＳ−ＣＤスコア０）；（１０）ＩＢＤＱにより評価される患者報告ＨＲＱＯＬの第１４週から第６６週にかけての変化；ならびに（１１）ＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳ基準により評価されるＣＤの徴候及び症状の第１４週から第６６週にかけての変化である。
【０２４８】
探索的評価項目
この研究に関する世界的規模の探索的評価項目は、（１）糞中カルプロテクチンレベルの第０週から第１４週にかけての変化；（２）第１４週でＣＤＡＩ−７０応答を達成した患者間での、糞中カルプロテクチンレベルの第１４週から第６６週にかけての変化；（３）ＣＲＰレベルの第０週から第１４週にかけての変化；（４）第１４週でＣＤＡＩ−７０応答を達成した患者間での、ＣＲＰレベルの第１４週から第６６週にかけての変化；ならびに（５）第１４週でＣＤＡＩ−７０応答を達成した患者間での、第１４週から主要なＣＤ関連事象（入院、腸手術、及び非研究手技を含む）までの時間である。
【０２４９】
安全性評価項目
この研究に関する安全性評価項目は、有害事象の発生率及び重症度、重篤な有害事象の発生率、感染に関連する有害事象の発生率及び重症度、感染に関連する重篤な有害事象の発生率、注射部位反応の発生率及び重症度、過敏症反応の発生率及び重症度、治験薬中止につながる有害事象の発生率、特定の検査室の異常の発生率、悪性腫瘍の発生率、ならびにエトロリズマブに対する抗治療抗体（ＡＴＡ）の発生率である。
【０２５０】
薬物動態評価項目
この研究に関する薬物動態評価項目は、第１４週目及び第６６週目のエトロリズマブ血清濃度、及び第１６週〜第６６週の投薬期間中の規定の時点における観察される投薬前トラフ血清濃度Ｃｍｉｎである。
【０２５１】
研究対象集団；患者
標的集団は、中等度から重度の活性ＣＤ（以下の定義の通り）を有し、かつ、コルチコステロイド及び／または免疫抑制剤療法及び／または抗ＴＮＦ薬に対して、不十分な応答、不応性の応答、もしくは不耐性を有したことのある患者である。中等度から重度の活性ＣＤとは、以下の３つの徴候及び症状の基準の各々を満たすことによってスクリーニング期において判定される、中等度から重度の活性疾患を意味する：
１．ランダム化の７日前に計算される≧２２０〜≦４８０のＣＤＡＩスコアをもたらす臨床徴候及び症状；及び
２．ランダム化の７日前に計算されるＰＲＯ２スコア≧１４；及び
３．セントラルリーダーにより点数化されたスクリーニング回腸結腸内視鏡検査によって判定した場合に≧７、または孤立性回腸炎もしくは回腸切除後の場合は≧４のＳＥＳ−ＣＤスコアと定義される活性炎症の存在。
【０２５２】
選択基準
患者は次の研究登録基準を満たさなければならない：（１）書面によるインフォームドコンセントの提供が可能でありそれを厭わない；（２）１８〜８０歳；（３）男性及び閉経後でない女性：治療期間中、かつ治験薬の最後の投薬後少なくとも２４週間にわたる効果的な避妊法の使用；（４）スクリーニング訪問の≧３か月前に確立された臨床的及び内視鏡的な証拠に基づくＣＤの診断；（５）スクリーニング期で判定された、上記に定義されるような中等度から重度の活性疾患；（６）ＣＤのために腸切除を受けたことのある患者に関する、小児内視鏡により横断可能な少なくとも４つの結腸区域または３つの区域（結腸及び／または回腸）との回腸及び／または結腸の関与；（７）＞１０年間の結腸疾患の場合はスクリーニングの≦１２か月前、または患者が腸がんのいずれかのリスクファクターを有する場合はスクリーニングの≦５年前に、調査監視のための結腸内視鏡検査を完了した（調査監視はスクリーニング中に行われてもよい）；（８）スクリーニングから５年以内に、以下の療法のうち少なくとも１つに対する不耐性、難治性疾患、または無応答（以下の定義の通り）を経験したことがある：
【０２５３】
ＣＳ療法：ＣＳ不応性とは、経口の場合は２週間、またはＩＶの場合は１週間にわたって、≧３０ｍｇ／日のプレドニゾン（もしくは等価物）と同等の用量を含む、少なくとも１回の４週誘導レジメンの経緯があるにも関わらず、患者が持続的な活性疾患の徴候／症状を有することを意味する。ＣＳ療法に対する不耐性とは、患者が、クッシング症候群、骨減少症／骨粗鬆症、高血糖、不眠、及び感染症を含むがこれらに限定されない病歴を有することを意味する。
【０２５４】
ＩＳ療法：ＩＳ不応性とは、経口ＡＺＡ（≧１．５ｍｇ／ｋｇ）または６−ＭＰ（≧０．７５ｍｇ／ｋｇ）またはＭＴＸ（≧１５ｍｇ／週）の、少なくとも１回の１２週レジメンの経緯があるにも関わらず、患者が持続的な活性疾患の徴候／症状を有することを意味する。ＩＳ療法（６−ＭＰ、ＡＺＡ、またはＭＴＸ）に対する不耐性とは、患者が、上記（感染症、悪心／嘔吐、腹痛、膵炎、肝機能試験異常、リンパ球減少症、及びチオプリンメチルトランスフェラーゼ遺伝子多型を含むがこれらに限定されない）のうちの≧１に対する不耐性の経緯を有することを意味する。
【０２５５】
抗ＴＮＦ療法：不十分な一次不応答とは、患者が（≧２誘導用量のインフリキシマブ［≧５ｍｇ／ｋｇ］またはアダリムマブ［１６０ｍｇ／８０ｍｇもしくは８０ｍｇ／４０ｍｇ］またはセルトリズマブペゴール［≧４００ｍｇ］のいずれかを受けた後のＣＤに関連する持続的な徴候／症状により裏付けられるように）応答しなかったことを意味する。不十分な二次不応答とは、患者が、インフリキシマブ（≧５ｍｇ／ｋｇ）またはアダリムマブ（≧４０ｍｇ）またはセルトリズマブペゴール（≧４００ｍｇ）での誘導療法に初めは応答したが、維持中にＣＤの再発に関連する徴候／症状を経験したことを意味する。不耐性とは、患者が、著しい注射部位反応、脱髄、うっ血性心不全、感染症、またはいずれかの時点で抗ＴＮＦ療法の継続使用を妨げた他の状態を経験したことを意味する。
【０２５６】
除外基準
以下の基準のいずれかを満たす患者は、研究登録から除外される。胃腸の健康に関連する除外基準としては、次のものが挙げられる：（１）回腸直腸吻合術と共に結腸亜全摘術を受けたか、または結腸全摘除術を受けた；（２）短腸症候群；（３）回腸瘻造設術または人工肛門造設術を受ける；（４）瘻管が生じる疾患、及び／または、腸の十分な内視鏡的評価を妨げる狭窄前拡張を伴う器質的狭窄もしくは小腸狭窄の証拠を有する；（５）ＵＣまたは不確定大腸炎の診断；（６）虚血性大腸炎、放射線大腸炎、または顕微鏡的大腸炎の疑い；（７）腹部膿瘍または肛門周囲膿瘍の証拠；（８）研究中にＣＤ関連合併症を管理するために手術を要すると予想される；（９）過去または現在の腺腫性結腸ポリープ；（１０）過去または現在の疾患に関連する結腸粘膜異形成（以前の年齢に関連するポリープは許容可能である）。
【０２５７】
以前の療法または併用療法に関連する除外基準としては、次のものが挙げられる：（１）ランダム化前の≦１２週間以内に、ＣＤのためにアダリムマブ、セルトリズマブペゴール、またはインフリキシマブのいずれかを受けた；（２）エトロリズマブまたは他の抗インテグリン剤（ベドリズマブ、ナタリズマブ、及びエファリズマブを含む）を用いた、いかなる以前の治療；（３）ランダム化前の≦１２か月以内の、Ｔ細胞枯渇剤またはＢ細胞枯渇剤（例えば、リツキシマブ、アレムツズマブ、またはビジリズマブ）を用いた以前の治療；（４）この研究におけるランダム化前の１２週間以内、または調査研究用産物の５半減期のいずれか長い方の間に、調査研究用ワクチンを含んだ何らかの調査研究用の治療を受けた；（５）キメラ抗体、ヒト抗体、もしくはヒト化抗体、融合タンパク質、またはマウスタンパク質に対する、中等度または重度の、アレルギー性もしくはアナフィラキシー性／アナフィラキシー様の反応、あるいは、エトロリズマブ（活性薬物質）または賦形剤のいずれかに対する過敏症の病歴；（６）ランダム化の≦２週間前のコルチコステロイド浣腸／坐薬及び／または局所（直腸）５−アミニオサリシレート（ａｍｉｎｉｏｓａｌｉｃｙｌａｔｅ）（５−ＡＳＡ）調製物を用いた治療；（７）ランダム化の≧３週間前にＣＤの治療としての経管栄養法、確定調整食、及び／または非経口栄養補給／栄養を中止していない患者；（８）研究中にＣＤの治療として経管栄養法、確定調整食、及び／または非経口栄養補給／栄養を要すると予想される患者（９）ランダム化の≦４週間前にいずれかの生ワクチンまたは弱毒ワクチンを受けた；（１０）救急科において投与される単回のＩＶステロイド投薬を例外とする、スクリーニング中のＩＶステロイドの使用；（１１）ランダム化の≦４週間前のシクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、またはミコフェノール酸モフェチル；（１２）非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の慢性使用。最大３２５ｍｇ／日の予防的なアスピリンの使用は、頭痛、関節炎、筋肉痛、及び生理痛などの状態に対するＮＳＡＩＤの時折の使用と同様に許可される；（１３）経口ＣＳを受けている場合、患者は、ランダム化直前の≧２週間にわたって用量が≦２０ｍｇ／日のプレドニゾン（もしくは等価物）で安定している場合を除いて除外される；（１４）経口もしくは直腸の５アミノサリチル酸（５−ＡＳＡ）を用いた継続治療を受けている場合、患者は、ランダム化直前の≧４週間にわたって用量が安定していなければ除外される；（１５）ＩＳを用いた継続治療を受けている場合、患者は、ランダム化直前の≧８週間にわたって用量が安定していなければ除外される；（１６）ＣＤの治療のために抗生物質を用いた継続治療を受けている場合、患者は、ランダム化直前の≧２週間にわたって用量が安定していなければ除外される。
【０２５８】
感染リスクに関連する除外基準としては、次のものが挙げられる：（１）先天性または後天性の免疫不全；（２）ウェスタンブロットにより確認されたＨＩＶ陽性のＥＬＩＳＡ試験結果；（３）患者がＨＣＶ抗ウイルス治療の成功裏の過程を完了した後＞６か月にわたってＨＣＶ  ＲＮＡが検出不能であると実証した場合を除き、陽性のＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）抗体試験結果；（４）スクリーニングＢ型肝炎評価において、試験でＨＢｓＡｇ陽性と示される患者は研究から除外される；試験でＢ型肝炎コア抗体（ＨＢｃＡｂ）陽性だがＢ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）陰性と示される患者は、研究に適格となるためには確認された陰性のＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）ＤＮＡ試験結果を有していなければならず、研究中はＨＢＶ  ＤＮＡの周期的監視を受ける必要がある；（５）スクリーニング時における、卵もしくは寄生虫に関して陽性の便試験結果、または病原体に関して陽性の便培養物；（６）基線訪問前の８週間以内の、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅの感染及び／またはその治療、あるいはＣ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ感染症に関する他の腸管内病原体治療の証拠；（７）活性もしくは潜在性の結核の病歴、またはランダム化の３か月以内に撮られた胸部Ｘ線写真上に活性結核の疑い；（８）再発性日和見感染の病歴及び／または重度もしくは播種性のウイルス感染症の病歴；（９）スクリーニングの≦６か月前に起こったいかなる重篤な日和見感染；（１０）感染のいかなる現在もしくは近年の徴候または症状（スクリーニングの≦８週間前）；（１１）入院を必要とするいかなる主要な感染エピソード、または、スクリーニングの≦８週間前の静脈内抗生物質を用いた治療、もしくはスクリーニングの≦４週間前の経口抗生物質を用いた治療。
【０２５９】
全体的な安全性に関連する除外基準としては、次のものが挙げられる：（１）妊娠中または授乳中；（２）末梢静脈アクセスの不足；（３）ランダム化前の８週間以内に入院した；（４）調査研究者の意見による、研究プロトコルに従う能力の不足；（５）神経障害、心臓障害、肺障害、腎臓障害、肝臓障害、内分泌障害、またはＧＩ障害（ＣＤ以外）などの著しい未制御の併存疾患；（６）ＰＭＬの監視に干渉し得る神経学的状態または疾患（７）神経学的検査のスクリーニングにおける臨床的に有意な異常；（８）脱髄性疾患の病歴；（９）卒中、ＭＳ、脳腫瘍、神経変性疾患、または癲癇制御不良を含む、主要な神経障害の病歴；（１０）スクリーニングの≦６か月前の、アルコール、薬物、または化学物質の乱用の経緯；（１１）研究経過中に＞２０ｍｇ／日のプレドニゾン（または等価物）を用いる必要を必要とし得るＣＤ以外の状態；（１２）スクリーニング前の５年以内の血液系腫瘍、固形腫瘍、及び細胞腫を含むインサイツのがんの病歴；（１３）前年以内またはスクリーニング時に子宮頸部スメアを受けたことのない女性患者；（１４）臓器移植、または細胞移植の経緯；（１５）何らかの潜在的なスクリーニングの間に害を呈し得る体内の金属の存在のために、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）スキャンが危険と見なされる患者。
【０２６０】
材料及び方法
研究処置
エトロリズマブは、皮下（ＳＣ）投与用の１５０ｍｇ／ｍＬのエトロリズマブを含む単回使用ＰＦＳとして供給される。誘導期中の用量の割当に応じて、患者は、治療スケジュールに従い、０．７ｍＬのエトロリズマブ（１０５ｍｇ用量）を含む１ｍＬのＰＦＳか、または１．４ｍＬのエトロリズマブ（２１０ｍｇ用量）を含む２．２５ｍＬのＰＦＳかのいずれかで治験薬を受ける。誘導期中の治験薬の割当に対する盲検性を保つため、第０週、第４週、第８週、及び第１２週に、全ての患者が２回の注射：１回の０．７ｍＬ用量及び第２の１．４ｍＬ用量を受け、一方（治験薬アームのうちの１つにおける場合）または両方（プラセボアームにおける場合）がプラセボを含有することになる。第２週目に、全ての患者が１回の１．４ｍＬ用量の注射を受け、これは、低用量エトロリズマブ及びプラセボアームにおける患者に対してはプラセボを、そして高用量エトロリズマブアームでは治験薬を含有することになる。維持期において、患者は、治療スケジュールに従ってエトロリズマブまたはプラセボのいずれかを含有する単回の０．７ｍＬ用量（１０５ｍｇ用量）を受ける。
【０２６１】
プラセボについては、その組成は、エトロリズマブが存在しない活性薬産物の組成と全く同じである。
【０２６２】
クローン病活性評価
各患者について、診断日、疾患の重症度、入院、及びスクリーニング時の腸外兆候を含むＣＤの詳細な病歴が収集される。疾患の重症度は、上述のＣＤＡＩ、ＰＲＯ２、及びＳＥＳ−ＣＤを使用して評価される。ＣＤＡＩに関する追加の詳細が以下の表１に提供され、ＳＥＳ−ＣＤに関する追加の詳細が以下の表２に提供される。ＰＲＯ２に関する追加の詳細は次の通りである。
【０２６３】
上記及びＫｈａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ４１：７７−８６，２０１５に記載されるように、ＰＲＯ２は、２つの患者報告要素である、液状便または軟便の頻度、及び腹痛を評価する。ＰＲＯ２スコアは、７日の期間中に測定される平均頻度及び疼痛スコアを取り、各平均スコアに規定の重み付け（ＣＤＡＩスコアに使用されるものと同じ重み付け［以下の表１参照］）を乗じ、重み付き平均を一緒に加算することによって計算される）。Ｋｈａｎｎａら（同上）は、ＣＤＡＩスコア＜１５０として評価される臨床的寛解との最も高感度かつ特異的な相関性をもたらしたスコアの各構成要素に関するカットポイントを特定した。Ｋｈａｎｎａらにより定義される最適なカットポイントは、平均一日排便頻度≦１．５、腹痛≦１である。Ｇａｓｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，［ａｂｓｔｒａｃｔ］ＡＣＧ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ２０１４において公開された結果に基づいて、本発明者らは、（Ｋｈａｎｎａら（同上）により定義された≦１．５と比較して）＜３のカットポイントが中等度−重度ＣＤ集団における液状便／軟便の臨床的寛解を表す、Ｋｈａｎｎａら（同上）とは異なる平均一日排便頻度のカットポイントを定義した。腹痛のカットポイントは≦１である。それに応じて、ＰＲＯ２スコアにより定義される寛解は≦１１である（３の排便頻度×２のＣＤＡＩ増倍係数＝６＋［≦１の腹痛×５のＣＤＡＩ増倍係数］≦５、２つのスコアを合わせて≦１１が得られる）。本発明者らは、この研究が、寛解を定義するために、これらのカットポイントに基づくこの特定のＰＲＯ２スコアを前向き研究で初めて使用するものであると考える。
表１．クローン病活性指数（ＣＤＡＩ）
2018507868.tif 000003
表２．ＳＥＳ−ＣＤの定義（Ｄａｐｅｒｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．Ｅｎｄｏｓｃｏ．６０：５０５，２００４）
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【０２６４】
一次的及び主要な二次的研究エンドポイントの論拠
この研究は、ＣＤにおける適切な治療上の一次的評価項目に関するＥＭＡ及びＦＤＡの別々の推奨に応じて、これらの機関の別々の一次エンドポイントに合わせたデータを生成するように設計されている（ＧＲＥＡＴ２  Ｗｏｒｋｓｈｏｐ  ２０１３  Ｏｃｔｏｂｅｒ  ２１ｓｔ−２２ｎｄ  ２０１３．  ｇｒｅａｔ２．ｏｒｇ。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓ／ｎｅｗｓｅｖｅｎｔｓ／ｕｃｍ３６２７６６．ｈｔｍから利用可能）。この手法により、ＣＤの治療における包括的使用のためにエトロリズマブを開発することが可能になる。ＣＤＡＩスコア≦１５０と定義される臨床的寛解は、ＥＭＡ及び世界のその他の地域（米国外）に関する一次エンドポイント分析として使用される。ＰＲＯ２スコア≦１１と定義される徴候及び症状の寛解は、ＦＤＡ（米国）に関する一次エンドポイントとして使用される。
【０２６５】
ＣＤＡＩは、患者に関する医師の総合的なＣＤ重症度評点を最も良好に予測した式を生成するように多変数回帰分析を使用して開発された（Ｂｅｓｔ  ＷＲ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ７７：８４３−６，１９７９）。この計測法（ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）の妥当性（構成及び内容の妥当性という観点から）は、２５年の期間にわたる複数の臨床治験中に前向き研究により実施され、ＣＤＡＩは再現性よく機能し、変化に対して応答性であった。中等度から重度のＣＤの治療に関して示された全ての認可済み生物学的療法の治療有効性は、寛解を定義する＜１５０のＣＤＡＩスコアに基づいて一貫して評価されている。しかしながら、ＣＤＡＩの基準妥当性の不足、報告されているＣＤＡＩと炎症の内視鏡的測定との間の相関性の欠如（これは、ＣＤＡＩを、活性ＣＤ及び過敏性腸症候群の弁別子として不十分なものにし得る）、及び報告されている高いプラセボ率に関する懸念が生じている（Ｋｏｒｚｅｎｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．３５２：２１９３−２０１，２００５、Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５３：１９１２−２５，２００５、Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  １９；１４６：８２９−３８，２００７，Ｅｐｕｂ  ２００７  Ａｐｒ  ３０、Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４６：（５  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  １）Ｓ−３６８，２０１４）。これらの懸念に対処するため、現在の研究設計は、内視鏡的評価により活性炎症を有する患者の充実を図る。ＦＤＡの推奨に従えば、ＣＤＡＩは、便の形態を一貫して捕捉する患者のための医療的補助としてのブリストル排便スケール（図５）と併せて使用される（Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  Ｖｏｌ  ３２（９）：９２０−９２４，１９９７）。これは、ＣＤＡＩの管理における方法論的変動を評価するために実施された調査において合意が不足している特定の範囲であることが報告された（Ｓａｎｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓｅａｓｅ  １１：１３３−８，２００５）。
【０２６６】
ＣＤの治療のための新たな医薬品の開発に関するＥＭＡの指針に従えば、米国外における分析の主要な研究目的は、維持期の開始時に寛解状態にあった患者間での、１年間（５２週間）にわたるＣＳフリーＣＤＡＩ寛解の維持における、プラセボと比較したエトロリズマブの有効性を評価することである。この分析に含まれる患者は、誘導期の第１０週及び第１４週におけるＣＤＡＩスコア＜１５０に基づいて、寛解状態にあると確認されることになる。少なくとも５２週間後の、かつ全体にわたりＣＳフリーでのＣＤＡＩ寛解の維持という評価項目はこれまでに研究されていないが、ＣＳの長期使用が体重増加、白内障、高血糖、骨粗鬆症、及び感染のリスク増加などの重篤な副作用に関連付けられていることを考えると、これは治療成功の臨床的に有意義な尺度である。サブグループ分析は、基線のＣＳを必要とした患者群においてこの評価項目を評価する。５２週間にわたる、かつ過去２４週間にわたりＣＳフリーでのＣＤＡＩ寛解の維持は、二次的評価項目として評価される。
【０２６７】
ＰＲＯ２は、緩い／液状の便の頻度及び腹痛を評価するＰＲＯ評価項目である（Ｋｈａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．４１：７７−８６，２０１５）。これらの項目は、ＣＤＡＩから導出され、かつそれに従って重み付けられ、全体的な健康状態と併せて、ＣＤＡＩによって測定される観察される臨床的利益に最も寄与する、ＣＤＡＩダイアリーカード項目である（Ｓａｎｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ  ４１：４５１−８，１９８８、Ｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓ  １７：１０５−１１，２０１１、Ｋｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４６：（５  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  １）Ｓ−３６８，２０１４）。≦１１の寛解スコアは、７日の期間中の平均排便頻度及び疼痛スコアのＣＤＡＩ加重和であり、これは、第ＩＩ相ＣＥＲＴＩＦＩ研究における中等度から重度のＣＤのためのウステキヌマブ誘導治療の回顧的データ分析において、ＣＤＡＩ寛解（＜１５０のスコア）の特定に最適な感度及び特異性をもたらした（Ｇａｓｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，［ａｂｓｔｒａｃｔ］ＡＣＧ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ２０１４）。ＰＲＯ２は、ＣＤＡＩによって測定された活性ＣＤにおけるＭＴＸ治療の回顧的データ分析において連続的評価項目として使用されたとき、高感度かつ応答性であることが示された（Ｋｈａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．４１：７７−８６，２０１５）；全体的な健康状態がスコアに組み込まれたとき、治療効果の推定値は改善されなかった。
【０２６８】
ＰＲＯ２の使用は、ＣＤＡＩ寛解と相関する緩い／液状の便の頻度及び腹痛の７日間のスコアを使用する。加えて、複合スコアとして、ＰＲＯ２は、緩い／液状の便及び腹痛がそれらの症状分布において異なり得る、近位から遠位の疾患提示の範囲全体にわたる臨床的寛解を測定することができる。腹痛に関して４ポイント順位スケールを使用すると、このスコアをＣＤＡＩから直接得て、１つのプロトコルにおける異種の疼痛スコアの本質的な複雑さを回避することが可能になる。
【０２６９】
内視鏡的改善は、基線スコアからのＳＥＳ−ＣＤスコア≧５０％の変化と定義され（Ｆｅｒｒａｎｔｅ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４５：９７８−８６，２０１３）、主要な二次エンドポイントである。ＳＥＳ−ＣＤは、５つの回腸結腸の区域で点数化される、４つの内視鏡的変数（潰瘍、潰瘍形成面、炎症面、及び狭小化の存在）から成る。ＳＥＳ−ＣＤは、前向き研究で開発され、Ｄａｐｅｒｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．Ｅｎｄｏｓｃ．６０（４）：５０５−１２，２００４により、軽度から重度のＣＤ（ＣＤＡＩによる）を有する患者において妥当性が認められた。この点数化システムはＦＤＡにより推奨されたものであり、一般に医師により他の尺度よりも好まれているが、これは、潰瘍の大きさの数量化（潰瘍の特徴の定性的評価ではなく）、一区域内の潰瘍形成パーセントの判定（視覚的アナログスケールによる判定ではなく）、及びより良好な評価者間信頼性のためである（クラス間相関係数は、ＳＥＳ−ＣＤ及びクローン病内視鏡的重症度指数に対してそれぞれ０．８３及び０．７１であった；Ｋｈａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．４１：７７−８６，２０１５）。このスコアは可視区域の数に合わせて調整されないため、基線で可視化された区域のみがエンドポイント評価に含まれる。これは、ある区域を点数化のために評価不可能にする炎症に起因する研究処置後の新たな狭小化があれば、その患者が二次エンドポイント分析のための内視鏡的改善を達成していないものと認定されることを意味する。同様に、ある区域を点数化のために評価可能にする研究処置後の炎症の改善はいずれも、エンドポイント評価に反映されない。この統計的分析プランは、エンドポイントに関するこれらの欠けているデータの影響を評価するように計画される、いかなる感度分析をも説明する。全体的な胃腸病学の実践における内視鏡的点数化システムの経験が限定されていることを踏まえて、研究中の全ての回腸結腸内視鏡検査は調査研究現場で記録されるが、セントラルリーダーがＳＥＳ−ＣＤスコアを判定する。
【０２７０】
公開されている研究は、有効性を評価するために複数の内視鏡的エンドポイントを使用しているが、これらは自由裁量によって定義されているようである。粘膜潰瘍の非存在として定性的に定義される粘膜治癒は、いくつかの第ＩＶ相研究で一次的または二次的なエンドポイントとして研究されている（Ｒｕｔｇｅｅｒｔｓ  Ｐ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏ  １２６：１５９３−６１０，２００４［ナタリズマブ］、Ｒｕｔｇｅｅｒｔｓ  Ｐ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｅｎｄｏｓｃ  ６３：４３３−４２，２００６［インフリキシマブ］、Ｃｏｌｏｍｂｅｌ  ＪＦ，Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，Ｒｅｉｎｉｓｃｈ  Ｗ，ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｆｌｉｘｉｍａｂ，ａｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｅ，ｏｒ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３６２：１３８３−９５，２０１０［インフリキシマブ及びアザチオプリン］、Ｈｅｂｕｔｅｒｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｕｔ  ６２：２０１−８，２０１３［セルトリズマブ］、Ｒｕｔｇｅｅｒｔｓ  Ｐ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４２（５）：１０４７−９，２０１２［アダリムマブ］）。いくつかの研究は、これらのスコアの臨床的有意性の透明性のない内視鏡的寛解を表す内視鏡的閾値を定義している（Ｈｅｂｕｔｅｒｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，（同上）［セルトリズマブ］、Ｒｕｔｇｅｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，（同上）２０１２［アダリムマブ］）。この研究では、内視鏡的改善は、治療前の基線スコアに対するＳＥＳ−ＣＤスコアの≧５０％の低減を示す患者の割合と定義される。誘導に関しては、このエンドポイントは第１４週目に測定され、維持に関しては、第１４週で臨床応答を達成した患者間で第６６週に測定される。このエンドポイントは、ＳＯＮＩＣ治験の近年の事後分析に基づき、この治験では、ＳＥＳ−ＣＤスコアの≧５０％の低減が、生物学的療法による５０週間の治療後のＣＳフリーＣＤＡＩ寛解を予測するものと判定された（Ｆｅｒｒａｎｔｅ（同上）、２０１３）。新規の生物剤の２つの治験のうちの１つに参加していた２４人の（中等度から重度の活性ＣＤを有する）プラセボ患者のサンプル中で測定された、６週間の誘導期の最後におけるＳＥＳ−ＣＤスコア変化の高い可変性を考慮すると、この定義も適切である（Ｆｅｒｒａｎｔｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １３８，Ｉｓｓｕｅ  ５，Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  １，Ｓ−３５８，２０１０）。このデータセットは、６人の患者が、ＳＥＳ−ＣＤまたはＣＤＥＩＳスコアのいずれかで５０％の低減と、ＣＤＥＩＳまたはＳＥＳ−ＣＤスコアのいずれかで少なくとも５ポイントの低減との両方を達成したことを示した。
【０２７１】
患者集団の論拠
未制御の中等度から重度の活性ＣＤを有する患者には、炎症の狭窄性または穿通性の合併症、ならびに生活の質を減弱させる症状を発達させるリスクがある。ＣＤの治療目標は、症状改善を誘導及び維持すること、粘膜治癒を誘導すること、及び生活の質を向上させることである。しかしながら、相当な割合の患者にとって、これらの目標は、現在の療法では満たされない（参照セクションエラー！参照元が見つからない。）。したがって、研究対象集団には、従来の療法（ＩＳ及び／またはＣＳ）または抗ＴＮＦ阻害薬で臨床的寛解を達成もしくは維持していない患者が含まれる。潰瘍性大腸炎におけるエトロリズマブの先行研究（Ｒｕｔｇｅｅｒｔｓ，ＰＪ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｕｔ  ６２：１１２２−１１３０，２０１３、Ｖｅｒｍｅｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  ３８４：３０９−１８，２０１４）、ならびにベドリズマブＧＥＭＩＮＩ  ２及び３研究（Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３７：２０４−１３，２０１３、Ｓａｎｄｓ  ＢＥ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４７：６１８−２７，２０１４）からのデータは、これらの患者群における抗α４β７作用機構の好ましい有効性を実証している。各サブグループに属する患者は、本明細書に記載される不応性及び不十分な応答の基準に基づいて特定される。
【０２７２】
中等度から重度の活性ＣＤを有する１８歳〜８０歳の患者が研究される。この年齢範囲は、ＣＤの新たな調査研究用薬剤の臨床治験に登録する患者に典型的であり、また、成人ＣＤが、いかなる年齢においても中等度から重度の活性疾患となり得る、または中等度から重度の活性疾患として持続し得るという観察を反映する。エトロリズマブの主要なクリアランス機構は腎排出でも初回通過代謝でもないことを踏まえて、＞６５歳の患者における蓄積のリスクは低いと見なされ、腎臓及び肝臓の機能不良に関連した検査室による除外によっても軽減される。
【０２７３】
ＥＭＡの指針に従えば、適格な患者は、中等度から重度の活性疾患が炎症の内視鏡的証拠によって裏付けられたＣＤの確定診断を、少なくとも３か月にわたって有していなければならない。これにより、ＣＤＡＩ及びＰＲＯ２評価の特異性の改善が可能になり、内視鏡的改善エンドポイントの評価も可能になる。ＳＥＳ−ＣＤスコアの構成に基づいて、孤立性回腸炎を有するかまたは回腸切除後である患者は、炎症及び潰瘍形成の範囲が患部区域において同じであるかどうかに関わらず、回腸結腸疾患を有する患者と比較するとより低い基線スコアを有すると予想され得る。したがって、これらの患者サブグループには異なるＳＥＳ−ＣＤエントリスコアが提唱される。
【０２７４】
誘導期及び維持期の設計に関する論拠
ＥＭＡ指針と合わせて、誘導期へのランダム化は、ＣＤＡＩスコア≦３３０または＞３３０（生物学的療法によるＣＤＡＩ応答及び寛解率を予測する；Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３７：２０４−１３，２０１３、Ｓａｎｄｓ  ＢＥ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １４７：６１８−２７，２０１４）、ＣＳの使用、ＩＳの使用、及び以前の抗ＴＮＦ不全（全て疾患の活性の指標）に基づく、疾患の活性により階級化される。これらの要素は、治療アーム間で疾患重症度が不均衡になるリスクを軽減させるのに十分であると見なされる。
【０２７５】
第１４週における臨床的寛解及び内視鏡的改善の誘導の評価は、抗インテグリン療法が抗ＴＮＦ療法と比較するとより遅い作用発現を有するという観察（Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５３：１９１２−２５，２００５、Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３７：２０４−１３，２０１３）、ならびに、内視鏡的改善の発現は典型的に、特に治療不応性患者においては誘導療法の１６〜２４週間後に観察されるという臨床上の共通認識（エトロリズマブによるＭａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃスコアの寛解には、ＵＣを有するＴＮＦ−ＩＲ患者において最長１４週間かかったことを示す観察データにより支持される共通認識（Ｖｅｒｍｅｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  ３８４：３０９−１８，２０１４を参照されたい）に基づいて、正当化される。１４週間の誘導期の課題は、エンドポイント分析を混乱させないように、併用ＣＤ療法をその持続期間にわたって安定に保つという要件である。このことは、紅斑の治療のためにレスキュー療法を必要とする患者、及び治療に応答しているが自身のＣＳ用量を漸減させることのできない患者に関しては問題である。この研究設計は、疾患悪化の場合にはレスキュー療法の使用を許可すること（この場合、患者は一次分析に関して非応答者と分類されることになる）、及び最大基線ＣＳを≦２０ｍｇ／日のプレドニゾン等価物用量に制限することによって、これに対処する。治療の調整として禁止されてはいないが、下痢止め薬の用量の増加は避けるべきである。患者は、自身の下痢止め薬用量を可能な限り安定に保つべきである。下痢止め薬の使用は、ＣＤＡＩのプラセボ応答率と比較して不釣合に高いＰＲＯ２のプラセボ応答率を生成するようには思われなかった。この結果は、軽度から中等度の活性ＣＤにおけるＭＴＸのランダム化対照治験からの回顧的データを使用したＰＲＯ２の感度分析において観察され、この治験では、ＰＲＯ２またはＣＤＡＩにより測定した場合に同様のＭＴＸ及びプラセボの寛解率が検出された（Ｋｈａｎｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．４１：７７−８６，２０１５）。しかしながら、中等度から重度に活性な集団において、下痢止め薬の用量設定がＰＲＯ２のプラセボ応答率に及ぼす影響は分かっていない。
【０２７６】
ＰＲＯ２寛解及び内視鏡的改善は、ＣＤの新たな治療評価項目を定義するためのＦＤＡの手法を組み込むものだが、ＣＤＡＩは、ＣＤに関して前向き研究で妥当性が認められた唯一のエンドポイントである。この理由のため、誘導期には、中枢的な誘導コホート（コホート３）だけでなく探索的コホート（コホート１）も含まれ、これは、新たなエンドポイントに関する効果量及び統計的計画仮定の正確性、二分法のエンドポイント定義の臨床的妥当性、ならびにエンドポイントの試験階層を評価するのに十分な大きさである。寛解の維持の統計による（ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ  ｐｏｗｅｒｅｄ）評価に関して、アーム１つ当たりおよそ１６０人の臨床的寛解者を輩出するため、積極的治療誘導コホート（コホート２）も、この研究に含まれる。最後のコホート（コホート３）は、中枢的誘導コホートであり、これは、誘導研究のエンドポイント分析のためのデータを生成する。
【０２７７】
ＥＭＡの指針に従って、誘導期中の寛解の維持は、第１０週と第１４週との両方でＣＤＡＩ寛解状態にある患者の割合を評価する二次エンドポイントによって確認される。レスキュー療法を使用せずに第１４週でＣＤＡＩ−７０応答を達成している患者は、維持期に再ランダム化される。ＰＲＯ２寛解及び内視鏡的改善を達成している患者は、この群内の亜群であると仮定される。維持期へのランダム化は、第１０週と第１４週との両方で疾患活性の使用によって階級化される（誘導期に関して記載されている、ただしＣＤＡＩ≦３３０または＞３３０の代わりにＣＤＡＩ寛解（スコア＜１５０）が使用されることを除く）。加えて、ランダム化は、低用量または高用量のエトロリズマブへの割当によって階級化される（低用量または高用量の誘導療法が維持エンドポイントに及ぼす影響の評価が可能になる）。多数の層を踏まえて、第１４週目の内視鏡的改善者の割合における何らかの不均衡の可能性は、第６６週目の内視鏡的改善エンドポイントについて共変量調整分析（ｃｏｖａｒｉａｔｅ−ａｄｊｕｓｔｅｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ）を使用して対処される。
【０２７８】
維持期の持続期間（６０週間）は、ＦＤＡ及びＥＭＡにより、臨床的寛解の維持を確立するのに適切な期間と見なされる。維持期の最初の８週間中、誘導期中にＣＳを受けた患者は、現在のＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ及びＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｉｔｉｓ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎの指針におけるＣＳ漸減に関する推奨と合わせて、また急激な漸減を避けるＥＭＡの推奨に従って、週１回の用量低減を受ける。この漸減スケジュールにより、第１０週及び第１４週でＣＤＡＩ寛解を達成した患者間での、少なくとも５２週間後の、かつ全体にわたりＣＳフリーでのＣＤＡＩ寛解維持という、米国外の一次的評価項目について、患者を評価することが可能になる。
【０２７９】
エトロリズマブ用量、用量範囲、及びスケジュールの論拠
エトロリズマブは、第ＩＩ相研究において中等度及び重度の活性ＵＣを有する患者で評価されており（Ｖｅｒｍｅｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  ３８４：３０９−１８，２０１４）、この研究では、臨床的に有意義な疾患寛解の誘導が、著しい安全性の懸念を伴わずに、１０５ｍｇ（０．７ｍＬの正規用量の１５０ｍｇ／ｍＬのエトロリズマブ製剤）の４週間毎（Ｑ４Ｗ）（第０週目、第４週目、及び第８週目の３用量）の投与と、３１５ｍｇ  Ｑ４Ｗ＋負荷用量（ＬＤ［第０週目に４２０ｍｇのＬＤ、第２週目、第４週目、及び第８週目に３１５ｍｇ］）とで達成されたことから、このエトロリズマブの投薬レジメン（１０５ｍｇ  ＳＣ  Ｑ４Ｗ）もまた、この研究で試験されるべき用量のうちの１つとして提唱される。加えて、誘導期において、患者は、プラセボ、低用量エトロリズマブ、または高用量エトロリズマブを受けるようにランダム化される。
【０２８０】
低用量エトロリズマブ（１０５ｍｇ）は、Ｑ４Ｗ  ＳＣ（第０週、第４週、第８週、及び第１２週）で投与される。Ｑ４Ｗで１０５ｍｇ  ＳＣの低用量レジメンは、次の検討事項に基づいて、誘導期中に異なる用量に関して規定される：（１）第ＩＩ相ＵＣ治験では、Ｑ４Ｗ  ＳＣで投与された、１００ｍｇの正規用量（バイアル及びシリンジによる０．７ｍＬの１５０ｍｇ／ｍＬ溶液）、１０５ｍｇの実際用量は、ＵＣ患者において臨床的に有意義な寛解の誘導を示し、第ＩＩ相治験において好ましい安全性プロファイルを有した（Ｖｅｒｍｅｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  ３８４：３０９−１８，２０１４）；（２）Ｑ４Ｗ  ＳＣで投与された１０５ｍｇの曝露は、第ＩＩ相治験において評価可能なサンプルを提供した全ての患者から得た血液と結腸組織との両方で最大のβ７受容体占有率に十分であると示された（同上）、（３）集団ＰＫ／ＰＤモデリングは、用量１０５ｍｇ未満のＳＣ  Ｑ４Ｗレジメン（例えば、５０ｍｇ  Ｑ４Ｗ  ＳＣ）が、Ｑ４Ｗ投薬間隔中におよそ４４％の患者で最大β７受容体占有率の損失をもたらし、曝露は非線形ＰＫ範囲内にある可能性が高いことを予測する。
【０２８１】
１０５ｍｇのＱ４Ｗ投薬に加えて、第０週、第２週、第４週、第８週、及び第１２週において２１０ｍｇ  ＳＣのより高い用量レジメンは、次の検討事項に基づいて、誘導期中に異なる用量に関して規定される：（１）病態形成の類似点にも関わらず、ＣＤは、ＵＣと比較した場合、ＧＩ管全体にわたってより複雑な解剖学的疾患提示（すなわち、貫壁性炎症、斑状の分布、及び狭窄）を示す。陽性の曝露−応答関係が、ＣＤ患者における第ＩＩＩ相臨床治験の誘導期後に、インクラスの抗インテグリン抗体であるベドリズマブに関して近年報告された。結果は、誘導用量が全患者で完全な受容体占有率に達するのに十分であることを示した（Ｒｏｓａｒｉｏ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．，（ａｂｓｔｒａｃｔ）Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｉｔｉｓ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｐ−１４０，２０１３）が、臨床応答／寛解の増加は、薬物濃度のより高い患者で観察された（Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３７：２０４−１３，２０１３、Ｒｏｓａｒｉｏ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．，（ａｂｓｔｒａｃｔ），Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｉｔｉｓ  Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ，ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｐ４８９，２０１４）。ベドリズマブ研究によるこれらの観察は、より高いエトロリズマブ曝露が、この患者集団においてより多くの臨床的利益を提示する可能性を有し得ることを示唆する；（２）２１０ｍｇのＱ４Ｗの用量に加えて、第２週における追加の２１０ｍｇの用量は、エトロリズマブ曝露を最初に負荷して曝露が定常状態をより速く達成することを可能にするよう意図される。抗ＴＮＦ剤または抗インテグリン抗体のより早い負荷用量（Ｒｕｔｇｅｅｒｔｓ  Ｐ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏ  １２６：１５９３−６１０，２００４）は、臨床的寛解の誘導に有効であると見出され、そのような負荷用量方策がまた、この研究で実施された；（３）ＣＤ患者において提唱される高用量の２１０ｍｇ×５用量ＳＣ（第０週、第２週、第４週、第８週、及び第１２週）は、１０５ｍｇ  Ｑ４Ｗ×４用量レジメンから総用量が２．５倍異なることになり、許容可能な安全性／耐容性プロファイルを有したＵＣ第ＩＩ相治験において研究された３１５ｍｇ＋４２０ｍｇのＬＤコホートの曝露レベルよりも３０％低い曝露レベルを達成すると予想される（上記参照）。要約すると、エトロリズマブＵＣ第ＩＩ相研究における正規の１００ｍｇ  Ｑ４Ｗコホート（実際用量１０５ｍｇ）で観察された好ましい安全性プロファイル及び陽性の臨床成績を踏まえて、ＣＤ誘導療法に関して１０５ｍｇ  Ｑ４Ｗ用量を評価することは適切である。加えて、ＣＤの複雑な病態生理、血液中の完全な受容体の飽和にも関わらずベドリズマブ治療で観察された陽性の曝露−有効性関係、利用可能な安全性適用範囲、及びエトロリズマブの許容可能な安全性プロファイルを踏まえると、誘導期中のＣＤ患者における用量−応答関係をさらに理解するために、２１０ｍｇ（第０週、第２週、第４週、第８週、及び第１２週）のより高用量のレジメンを評価���るのは、科学的に理にかなっている。
【０２８２】
維持用量レジメンの論拠
誘導期でエトロリズマブ治療に応答する（ＣＤＡＩ基線スコアから少なくとも７０ポイントの減少、すなわち「ＣＤＡＩ−７０応答」を達成する）患者は、維持期中に１０５ｍｇのエトロリズマブまたはプラセボをＱ４Ｗで受けるように再ランダム化され、誘導期でプラセボに応答する患者は、引き続き維持期でプラセボを受ける。Ｑ４Ｗで１０５ｍｇ  ＳＣの低用量レジメンは、次の検討事項に基づいて、維持期中に規定される：（１）ＣＤにおける第ＩＩＩ相研究のために計画された１０５ｍｇのＱ４Ｗ  ＳＣ投薬は、＞８５％の患者において常に完全なβ７受容体占有率を維持すると（集団モデリングにより）期待される。ＵＣ第ＩＩ相研究で投与される１００ｍｇの正規用量（Ｑ４Ｗ  ＳＣ）（１０５ｍｇの実際用量）は、許容可能な安全性プロファイルを実証した（上記参照）；（２）インクラス抗インテグリン薬であるベドリズマブは、最大の受容体占有率を維持するのに十分な平均的定常状態トラフ血清濃度をもたらした８週毎のレジメンで寛解を維持するのに成功した（Ｒｏｓａｒｉｏ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．，（ａｂｓｔｒａｃｔ）Ｃｒｏｈｎ’ｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｉｔｉｓ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｐ−１４０，２０１３、Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３７：２０４−１３，２０１３）。
【０２８３】
患者報告アウトカム評価
ＰＲＯ（ＩＢＤＱ、ＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳ、ＥＱ−５Ｄ、ＰＲＯ２、ならびにＣＤＡＩの緩い排便頻度、腹痛、及び全体的な健康状態の構成要素）は、エトロリズマブの患者報告臨床プロファイルの特性化に役立てるために収集される。これらの計測法は、必要に応じて地域の言語に翻訳される。ＰＲＯデータは、電子ＰＲＯ（ｅＰＲＯ）デバイス（すなわち、ｅ−ダイアリー及びタブレット）の使用により電子的に収集される。調査研究スタッフが、ｅ−ダイアリーと、診療所外で完成させる必要のあるＰＲＯに関してＰＲＯ質問表を電子的に完成させるための指示とを、患者に提供する。患者はまた、スクリーニング中または研究中のいつでも、ｅ−ダイアリーの使用に関する何らかの質問がある場合には、現場に迅速に連絡するよう指示される。ＰＲＯが診療所で完成すべき場合には、患者はタブレット上でそれらに記入する。以前の治験訪問から患者により捕捉された電子データを、各診療所訪問時に患者と共に確認すること。ｅＰＲＯデータは、訪問時に収集及び評価される。スクリーニング中、患者は、ｅ−ダイアリーを適切に使用し質問を完成させる方法について指示される。ＣＤの徴候及び症状、具体的には、液状便または軟便の数、腹痛、及び全体的な健康状態は、スクリーニング期間を含む研究期間全体を通して毎日記録されなければならない。計測法の妥当性、及びデータ規格が保健機関要件を満たすことを確実にするために、現場で完成されるＰＲＯ（ＩＢＤＱ及びＥＱ−５Ｄ）は、他の非ＰＲＯ評価の完成前、そして患者がその訪問中に何らかの病態情報または治験薬を受ける前に、調査研究現場で管理されなければならない。
【０２８４】
上記に詳解したように、ＣＤＡＩは、ＣＤ患者の徴候及び症状を数量化する（表１）。ＣＤＡＩは８つの要素から成り、各要素は、重み付け係数による調整の後に合計される（表１）。ＣＤＡＩの構成要素には、液状便または軟便の数、腹痛、全体的な健康状態、合併症の存在、下痢のためのロミティル（Ｌｏｍｉｔｉｌ）または他のオピエートの使用、腹部腫瘤の存在、ヘマトクリット、及び標準体重からの偏差率が含まれる。患者は、自身の腹痛重症度、緩い排便頻度、及び全体的な健康状態を、ｅ−ダイアリー上で日常的に報告するものとする。ブリストル排便スケールが、緩い便の判定のための参照として患者に提供される（図５）。回腸結腸内視鏡検査の前処置が他の臨床パラメータの評価に干渉し得るため、完全なＣＤＡＩを計算するために使用されるｅ−ダイアリーの入力は、腸前処置、内視鏡検査の日（複数可）、または内視鏡検査の翌日に対応すべきではない。
【０２８５】
上記に詳解したように、ＰＲＯ２は、２つの患者報告要素：液状便または軟便の頻度、及び腹痛を評価する。このスコアは、７日の期間中の平均頻度及び疼痛スコアのＣＤＡＩ加重和を使用して計算される。患者は、自身の緩い排便頻度（ブリストル排便スケール［図５］が提供される）、及び腹痛重症度を、ｅ−ダイアリー上で日常的に報告するものとする。ＣＤＡＩと同様に、ＰＲＯ２スコアは、回腸結腸内視鏡検査に関連する干渉を回避するために、腸前処置、内視鏡検査の日（複数可）、または内視鏡検査の翌日に対応するｅ−ダイアリーの入力を使用すべきではない。
【０２８６】
ＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳ基準は、患者が報告するＣＤの徴候及び症状を評価するために使用される。１４項目の質問表（いくつかの質問は、重症度／頻度に関する補足質問を含む）は、２つのドメイン：ＣＤの徴候及び症状ならびに全身性症状を含む。ＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳは、ＣＤの徴候及び症状の存在、また一部の場合では、症状の重症度または頻度を評価する。ＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳ基準は、２４時間のリコール仕様を有する。患者は、第０週から開始し、その後は研究期間全体を通して各診療所訪問または電話訪問の前の連続９日間にわたって、ｅ−ダイアリー上でＣＤ−ＰＲＯ／ＳＳを完成させる。
【０２８７】
ＩＢＤＱは、患者の健康関連の生活の質（ＨＲＱＯＬ；Ｇｕｙａｔｔ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ  ４２（５）：４０３−４０８，１９８９、Ｉｒｖｉｎｅ  ＥＪ，Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｎｕｔｒ  ２８：Ｓ２３−７，１９９９）を評価する。３２項目の質問表は、４つのドメイン：腸症状（１０項目）、全身性症状（５項目）、感情機能（１２項目）、及び社会的機能（５項目）を含む。これらの項目は、７ポイントのＬｉｋｅｒｔスケールで点数化され、スコアが高いほど良好なＨＲＱＯＬを示す。ＩＢＤＱは、２週間のリコール仕様を有する。患者は、基線において、他の非ＰＲＯ評価を完了させる前の第０週、第１４週、第４４週、及び第７４週において、そして患者がその訪問中に何らかの病態情報または治験薬を受ける前に、タブレット上で調査研究現場にてＩＢＤＱを完了させる。
【０２８８】
ＥｕｒｏＱｏｌ５次元質問票（ＥＱ−５Ｄ）は、健康状態に関する単一指標値を提供する一般的な嗜好ベースのＨＲＱＯＬである（Ｒａｂｉｎ  Ｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｎｎ  Ｍｅｄ  ３３：３３７−４３，２００１）。このツールには、患者の健康状態の複合物を構築するために使用される、可動性、セルフケア、通常の活動、疼痛／不快感、及び不安／鬱に関する質問が含まれる。患者は、他の非ＰＲＯ評価を完成させる前の第０週、第１４週、第４４週、及び第７４週（または早期離脱訪問）において、そして患者がその訪問中に何らかの病態情報または治験薬を受ける前に、タブレット上で調査研究現場にてＥＱ−５Ｄを完成させる。
【０２８９】
統計的検討事項及び分析計画
誘導期に関しては、合計およそ１２５０人の患者が、３つの誘導コホートのうちの１つにランダム化される。各コホートのサンプルサイズは、表３に要約され、以下に記載される。
表３．各コホートの誘導期サンプルサイズ。
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【０２９０】
コホート１のサンプルサイズ（表３参照）は、各エトロリズマブアームとプラセボとの間で≧２０％のＰＲＯ２またはＣＤＡＩ寛解率の差を検出するおよそ９０％の検出力（ｐｏｗｅｒ）と（ＣＤ患者におけるベドリズマブのＧＥＭＩＮＩ  ２治験で報告された結果と同様の、≦１５％のプラセボ寛解率の仮定の下で；Ｓａｎｄｂｏｒｎ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３７：２０４−１３，２０１３）、内視鏡的応答におけるプラセボに対する１５％の差を検出するおよそ８０％の検出力と（≦１０％のプラセボ応答率の仮定の下で）、０．１の有意レベルにおける両側カイ二乗検定とを提供する。
【０２９１】
コホート３のサンプルサイズは、≦１５％のプラセボ寛解率の仮定の下で、各エトロリズマブアームとプラセボとの間で≧１５％のＰＲＯ２またはＣＤＡＩ寛解率の差を検出する≧８５％の検出力と、０．０２５の有意レベルにおける両側χ２検定とを提供すると予想される（表４参照）。
【０２９２】
加えて、これらのサンプルサイズはまた、≦１０％のプラセボ応答率の仮定の下で、内視鏡的改善の主要な二次エンドポイントに関するプラセボに対する１５％の差を検出する≧９０％の検出力と、０．０２５の有意レベルにおける両側カイ二乗検定とを提供する。第１４週目のプラセボ応答率が１０％であるという仮定の下で、プラセボに対する≧１５％の差（１０％対２５％）を検出する検出力は、０．０２５の有意レベルで９３％であると予想される（表４参照）。
【０２９３】
コホート２は、維持期分析のために十分な患者を提供するようなサイズであった。全ての誘導コホート（１、２、及び３）間で、第１４週目にＰＲＯ２寛解にある患者がおよそ３２６人という標的数を達成するように、さらなる患者が、必要に応じてコホート２にランダム化されてもよい。
表４．中枢的誘導期及び維持期における一次的及び主要な二次的有効性分析の検出力の推定
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【０２９４】
維持期に関しては、維持期の一次エンドポイントは、第１４週目にＰＲＯ２寛解にあるエトロリズマブ患者間での第６６週目のＰＲＯ２寛解（ＦＤＡのみ）、及び、第１０週と第１４週との両方においてＣＤＡＩ寛解を達成した患者間での、維持治療の少なくとも５２週間後の、少なくとも５２週間にわたってステロイドを受けていない状態でのＣＳフリーＣＤＡＩ寛解である。第１４週の寛解者間で、プラセボＰＲＯ２の第６６週目の寛解率が最大３０％であると仮定すると、第１４週でＰＲＯ２寛解にある合計およそ３２６人のエトロリズマブ患者は、０．０５の有意レベルの両側カイ二乗検定を使用して１５％の治療差を検出する≧８０％の検出力を提供することになる。第１４週目のＰＲＯ２寛解率が少なくとも３１％であれば、このサンプルサイズは、１０４０人の計画数のエトロリズマブ誘導患者で達成されるであろう。ＣＤＡＩ寛解と比較して同様かまたはそれより高い寛解率を仮定して、第１４週目のＰＲＯ２寛解率は、少なくとも３０％となると見込まれる。
【０２９５】
ＣＳフリーＣＤＡＩ寛解維持の一次エンドポイントに関して≦１０％のプラセボ寛解率を仮定すると、第１０週及び第１４週でＣＤＡＩ寛解にある合計およそ２００人の患者は、０．０５の有意レベルの両側カイ二乗検定を使用して１５％の治療差を検出する≧８０％の検出力を提供することになる。エトロリズマブを用いた第１０週目及び第１４週目のＣＤＡＩ寛解率が少なくとも２０％であると仮定すると、このサンプルサイズは、計画数のエトロリズマブ誘導患者（ｎ＝１０４０）で達成されると予想される。
【０２９６】
誘導期にエトロリズマブで治療された患者（コホート１、２、及び３）の少なくとも５０％が第１４週でＣＤＡＩ−７０応答を達成するという仮定の下では、合計およそ５２０人の患者（１アーム当たりおよそ２６０人）が、中枢的維持コホートに再ランダム化されることになる。このサンプルサイズは、０．０５の有意レベルにおける二次的な内視鏡的改善試験に関して、プラセボに対する≧１５％の差を検出するおよそ９５％の検出力を提供することになる（表４参照）。
【０２９７】
有効性分析
統計的分析の目的のために、誘導期及び維持期は、独立した研究として扱われる。欠けているデータのために、特定の時点における有効性に関して評価不可能である患者は、分類上のエンドポイント全てに関して非応答者と見なされる。加えて、許可されたレスキュー薬物を必要とする患者、及び／または、ＣＤ悪化のための任意のＣＳ増加及び／またはＣＤのための外科的介入の２週間以内にステロイド漸減レジメンを再開しなかった患者、及び／または、禁止されている薬物（例えば、抗インテグリン薬、Ｔ細胞枯渇剤またはＢ細胞枯渇剤、ＴＮＦアンタゴニスト、抗代謝剤、シクロスポリン、タクロリムス、ならびに第１４週後のＡＺＡ、６−ＭＰ、及びＭＴＸなどの免疫抑制剤薬物）を取った患者は、この分析では非応答者と見なされる。一次的有効性エンドポイント及び主要な二次的有効性エンドポイントに関して、次の分析が行われる：（１）規定済みのサブグループ（基線抗ＴＮＦ状態［ナイーブ対ＩＲ］、基線ＣＳ状態［ＣＳ使用中対ＣＳ不使用中］、基線ＩＳ状態［ＩＳ使用中対ＩＳ不使用］、年齢、性別、人種／民族性などを含む）を超えた結果の一貫性を評価するためのサブグループ分析、及び（２）一次分析法（例えば、離脱者の取扱い）に対する結果のロバスト性を評価するための感度分析。
【０２９８】
誘導期
誘導期の有効性分析は、各コホートにつき別々に行われ、これには、ランダム化され、かつ少なくとも研究の１用量を受けた、全患者（修正治療指向意図集団［ｍＩＴＴ］）が含まれる。患者は、ランダム化時に割り当てられた治療に従ってグループ分けされる。
【０２９９】
コホート１：エンドポイントの探索的分析は、コホート１の全患者（ｎ＝３００）が第１４週目の訪問を完了したとき、または完了していない場合は研究を中止したときに行われる。この時点でスポンサーは、コホート１における個別の治療の割当に対して盲検解除（ｕｎｂｌｉｎｄ）される。患者、現場監視者、及び調査研究者は、患者特定の治療割当に対する盲検性を維持する。
【０３００】
この探索的分析は、中枢的コホート３の分析計画に情報提供し、ＰＲＯ２及びＳＥＳ−ＣＤエンドポイントの定義の統計的仮定を評価し、かつ必要に応じて統計方法を改良するものである。コホート１の探索的分析は、研究設計／運営にコホート２もしくは３または維持研究の情報を提供することを目的とするものではないため、これは、コホート２が登録している間に実施される。
【０３０１】
一次的な有効性評価は、層別化因子による層別化を０．１０の有意レベルでのランダム化において用い、Ｃｏｃｈｒａｎ−Ｍａｎｔｅｌ−Ｈａｅｎｓｚｅｌ（ＣＭＨ）検定を使用して、プラセボに対し、各エトロリズマブ用量アームにおいて第１４週でそれぞれＣＤＡＩ寛解及びＰＲＯ２寛解を達成する患者の割合の差を検定する。絶対治療差は９０％の両側ＣＩ推定値と共に提供される。
【０３０２】
分類上の二次エンドポイントは全て、一次エンドポイントと同じ方法論を使用して分析される。
【０３０３】
連続エンドポイントは、ランダム化時に使用される層別化変数、及び共変数としての研究評価項目の基線値と共に、共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）モデルを用いて分析される。
【０３０４】
連続エンドポイントの要約統計量が、各治療アームにつき、絶対変化及び生値に関して計算される。平均値、標準偏差（ＳＤ）、中央値、ならびに下位四分位点及び上位四分位点、ならびに最小値及び最大値が報告される。基線からの変化を含む全ての要約について、基線値を有しない患者は分析から除外される。９５％のＣＩに加えて、両側ｐ値が全ての二次的有効性エンドポイントについて報告される。多重度の調整は行われない。
【０３０５】
コホート２：コホート２は、維持研究に必要なサンプルサイズの達成に役立つ「フィーダー」コホートと見なされる。一次的及び二次的な有効性パラメータの全てが、各治療アームについて記述的に要約される。年齢、性別、人種、地域、コルチコステロイド及び免疫抑制剤の使用、疾患の持続期間、ならびにＣＤ活性スコアなどの人口統計的特徴及び基線特徴が、記述統計学の使用により各治療群について要約される。
【０３０６】
コホート３：一次エンドポイント分析は、プラセボアームに対する各エトロリズマブ用量アームについて、第１４週でＰＲＯ２寛解（ＦＤＡに対する分析）またはＣＤＡＩ寛解（米国外に対する分析）を達成する患者の割合を比較する。一次エンドポイント分析は、プラセボアームに対する各エトロリズマブ用量アームについて、第１４週でＰＲＯ２寛解（ＦＤＡに対する分析）またはＣＤＡＩ寛解（米国外に対する分析）を達成する患者の割合を比較する。
【０３０７】
各エトロリズマブアームとプラセボアームとの間の差は、ランダム化時に用いられる要素によって階級化されたＣＭＨ検定統計量を使用して評価される。絶対治療差は９５％の両側ＣＩ推定値と共に提供される。
【０３０８】
分類上の二次エンドポイントは全て、一次エンドポイントと同じ方法論を使用して分析される。全ての有効性エンドポイントについて、記述的要約統計量が各治療アームに提供される。
【０３０９】
連続エンドポイントは、ランダム化時に使用される層別化変数、及び共変数としての研究評価項目の基線値と共に、ＡＮＣＯＶＡモデルを用いて分析される。
【０３１０】
一次エンドポイントの２つの比較（低用量対プラセボ、及び高用量対プラセボ）のうちの各々について、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ調整した０．０２５の両側有意レベルが使用される。いずれの用量も一次エンドポイントに関して有意であると断定されなければ、他の仮説検定は全て探索的と見なされる。両側０．０２５のレベルで有意である、あらゆる用量レジメンについては、主要な二次エンドポイントが順次検定される。残りの二次エンドポイント及び全ての探索的エンドポイントは、支持的な情報を提供するものと見なされ、複数の比較について調整は行われない。
【０３１１】
維持期
維持期の有効性分析には、維持期にランダム化され、かつ少なくとも１用量の治験薬を受けた、全てのエトロリズマブ誘導患者（ｍＩＴＴ集団）が含まれる。患者は、維持期へのランダム化時に割り当てられた治療に従ってグループ分けされる。
【０３１２】
分類上のエンドポイント全てに関して、２つの治療アーム間の割合の差は、維持期へのランダム化時に用いられる要素によって階級化されたＣＭＨ検定統計量を使用して評価される。検定は、両側０．０５の有意レベルで行われる。絶対治療差は９５％の両側ＣＩ推定値と共に提供される。分類上の二次エンドポイントは全て、一次エンドポイントと同じ方法論を使用して分析される。
【０３１３】
連続エンドポイントは、ランダム化時に使用される層別化変数、及び共変数としての研究評価項目の基線値と共に、ＡＮＣＯＶＡモデルを用いて分析される。
【０３１４】
一次エンドポイントが統計的に有意である場合、主要な二次エンドポイントが順次検定される。
【０３１５】
特定の時点における有効性に関して（例えば、欠けているデータまたはＯＬＥ研究への早期登録のために）評価不可能である患者は、分類上のエンドポイント全てに関して非応答者と見なされる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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