(57)【要約】  記載された本発明は、肝臓、腎臓または血管線維症から選択される対象の組織における線維症の進行を低減するための組成物および方法であって、線維症の進行が上記組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着を特徴とする、組成物および方法を提供する。この方法は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）を有するポリペプチドまたはその機能的均等物と、医薬的に許容し得る担体と、を含む医薬的組成物の治療量を投与することを含み、このポリペプチドの治療量は、線維症の進行を低減するため、組織のリモデリングを処置するため、またはそれらの組み合わせに効果的である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のポリペプチド、またはアミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）、ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）、ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）、ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）、ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）およびＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドからなる群から選択される細胞貫通ペプチド（ＣＰＰ）である第一のポリペプチドと、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）、ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９）およびＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０）のポリペプチドからなる群から選択される治療ドメイン（ＴＤ）である第二のポリペプチドとの間の融合物から生成されるその機能的均等物の治療量、およびその医薬的に許容し得る担体を含む医薬的組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、肝組織、腎組織または血管組織の線維症の進行を低減するための方法であって、
前記線維症の進行が、肝組織、腎組織または血管組織におけるリモデリングを生成する異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着の１つまたは複数を特徴とし、
前記ポリペプチドの治療量が、前記線維症の進行を低減するため、前記組織のリモデリングを処置するため、またはその組み合わせのために効果的である、方法。
【請求項２】
前記組織の線維症が、前記組織における炎症をさらに特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記炎症が、急性または慢性炎症である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記炎症が、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、およびインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）からなる群から選択される少なくとも１種のサイトカインにより媒介される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着が、正常な健常対照群の対象の組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の活性と比較して組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な活性を特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記投与ステップが、経口的、気管内、非経口的、静脈内、または腹腔内に行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記医薬組成物が、少なくとも１種のさらなる薬剤をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記さらなる治療薬が、抗感染薬である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記抗感染薬が、抗ウイルス薬である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
抗ウイルス薬が、ソホスブビル（Ｓｏｖａｌｄｉ（登録商標））、ＨＣＶをブーストされたプロテアーゼ阻害剤（ＡＢＴ−４５０、ＡｂｂＶｉｅ）、ノンヌクレオシドＮＳ５Ｂ阻害剤（ダサブビル、ＡＢＴ−３３３、ＡｂｂＶｉｅ）、ＮＳ５ａ阻害剤（オムビタスビル、ＡＢＴ−２６７、ＡｂｂＶｉｅ）、ＡＢＴ−４５０／ｒ（ＡＢＴ−４５０とリトナビルの併用）、ＡＢＴ−２６７を共配合されたＡＢＴ−４５０、ソホスブビルを配合されたＡＢＴ−４５０、およびリバビリンのうちの１つまたは複数である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記さらなる治療薬が、プレドニゾン、ブデソニド、モメタゾンフランカルボン酸エステル、フルチカゾンプロピオン酸エステル、フルチカゾンフランカルボン酸エステル、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるグルココルチコイドである、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記さらなる治療薬が、鎮痛剤である、請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
前記さらなる治療薬が、精製ウシＶ型コラーゲン、ＩＬ−１３受容体拮抗薬、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、内皮受容体拮抗薬、二重エンドセリン受容体拮抗薬、プロスタサイクリン類似体、抗ＣＴＧＦモノクローナル抗体、エンドセリン受容体拮抗薬（Ａ−選択性）、ＡＢ００２４、リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）抗体、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤、ピルフェニドン、ＩＦＮ−γ１ｂ、３つのＴＧＦ−βアイソフォーム全てに対するヒト抗体、ＴＧＦ−β活性化阻害剤、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ｒｈＰＴＸ−２）、二重特異性ＩＬ４／ＩＬ１３抗体、インテグリンαｖβ６を標的とする抗体、Ｎ−アセチルシステイン、シルデナフィル、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）拮抗薬（エタネルセプト）、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物が、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物が、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物が、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５）のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物が、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６）のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物が、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物が、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６）のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物が、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７）のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物の治療ドメイン（ＴＤ）が、前記治療ドメイン（ＴＤ）である前記第二のポリペプチドに動作可能に連結された細胞貫通ペプチド（ＣＰＰ）である前記第一のポリペプチドの融合物から生成され、その配列がアミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と実質的同一性を有するポリペプチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記第二のポリペプチドが、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）のポリペプチドである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記第二のポリペプチドが、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９）のポリペプチドである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記第二のポリペプチドが、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０）のポリペプチドである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記第二のポリペプチドが、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）のポリペプチドである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記第二のポリペプチドが、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）のポリペプチドである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
前記ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物が、第二のポリペプチドに動作可能に連結された第一のポリペプチドを含む融合タンパク質であり、前記第一のポリペプチドが、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）、ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）、ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）、ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）、ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）およびＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドからなる群から選択されるＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）と機能的に均等な細胞貫通ペプチドであり、前記第二のポリペプチドが、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
前記第一のポリペプチドが、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）のポリペプチドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
前記第一のポリペプチドが、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）のポリペプチドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項３０】
前記第一のポリペプチドが、アミノ酸配列ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）のポリペプチドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
前記第一のポリペプチドが、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）のポリペプチドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項３２】
前記第一のポリペプチドが、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）のポリペプチドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項３３】
前記第一のポリペプチドが、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）のポリペプチドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項３４】
前記第一のポリペプチドが、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドである、請求項２３に記載の方法。
【請求項３５】
前記担体が、制御放出性担体、遅延放出性担体、持続放出性担体、および長期放出性担体からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、それぞれの内容が全体として参照により本明細書に組み入れられる２０１４年１１月１７日出願の表題「ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＰＲＥＶＥＮＴＩＮＧ  ＯＲ  ＴＲＥＡＴＩＮＧ  ＤＩＳＥＡＳＥＳ，  ＣＯＮＤＩＴＩＯＮＳ，  ＯＲ  ＰＲＯＣＥＳＳＥＳ  ＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＥＤ  ＢＹ  ＡＢＥＲＲＡＮＴ  ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴ  ＰＲＯＬＩＦＥＲＡＴＩＯＮ  ＡＮＤ  ＥＸＴＲＡＣＥＬＬＵＬＡＲ  ＭＡＴＲＩＸ  ＤＥＰＯＳＩＴＩＯＮ」の米国特許仮出願第６２／０８０，７８４号、および２０１５年１１月１７日出願の表題「ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＰＲＥＶＥＮＴＩＮＧ  ＯＲ  ＴＲＥＡＴＩＮＧ  ＤＩＳＥＡＳＥＳ，  ＣＯＮＤＩＴＩＯＮＳ，  ＯＲ  ＰＲＯＣＥＳＳＥＳ  ＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＥＤ  ＢＹ  ＡＢＥＲＲＡＮＴ  ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴ  ＰＲＯＬＩＦＥＲＡＴＩＯＮ  ＡＮＤ  ＥＸＴＲＡＣＥＬＬＵＬＡＲ  ＭＡＴＲＩＸ  ＤＥＰＯＳＩＴＩＯＮ」の米国特許出願第１４／９４３，７５２号の優先権の利益を主張するものである。
【０００２】
政府後援の表明
記載された本発明は、Ｍｏｅｒａｅ  Ｍａｔｒｉｘ，  ＬＬＣに認可された中小企業技術革新研究プログラム（Ｓｍａｌｌ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  （ＳＢＩＲ））からの米国政府支援によってなされた。米国政府は、本発明において特定の権利を有する。
【０００３】
発明の分野
本発明は、細胞分子生物学、ポリペプチド、ならびに治療的使用方法の分野のものである。
【背景技術】
【０００４】
背景
１．創傷治癒および線維症のメカニズム
用語「創傷治癒」は、身体組織のいずれかへの外傷、特に物理的手段によって生じた連続性の遮断を有するものを身体が修復する過程を指す。
【０００５】
創傷治癒応答は多くの場合、３つの別個の期（損傷期、炎症期および修復期）を有すると言われる。概して言えば、身体は、損傷に対して炎症応答を伴って応答し、炎症応答は、器官の健康および完全性の維持に不可欠である。しかしこの応答が誤って進行すると、組織の破壊を生じ得る。
【０００６】
Ｉ期：損傷
非限定的に自己免疫もしくはアレルギー反応、環境性微粒子、感染または機械的損傷をはじめとする因子によって引き起こされる損傷は多くの場合、正常な組織構造の破壊をもたらし、治癒応答を開始させる。損傷した上皮および内皮細胞は交換されて、それぞれバリア機能および完全性を維持し、血液の損失が予防されなければならない。内皮細胞に対する急性損傷は、炎症媒介物質を遊離させて抗フィブリン溶解性凝固カスケードを開始させ、損傷した血管を血小板および高フィブリン塊により一過性に閉塞する。例えば、特発性肺線維症（ＩＰＦ）患者の肺ホモジネート、上皮細胞または気管支肺胞洗浄液は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および対照の患者と比較して、高レベルの血小板分化因子：Ｘ−ボックス−結合タンパク質−１を含んでおり、血塊形成応答が持続的に活性化されることが示唆される。加えて、トロンビン（フィブリノゲンをフィブリンに変換するのに必要なセリンプロテアーゼ）もまた、幾つかの肺線維症状態の肺および肺胞内の空間で容易に検出されるため、血液凝固経路の活性化がさらに確認される。トロンビンはまた、線維芽細胞を直接活性化して、増殖を増進し、コラーゲン生成筋線維芽細胞への線維芽細胞分化を促進できる。気道上皮、特に肺胞内肺細胞の損傷は、類似の抗フィブリン溶解性カスケードを惹起して、間質性浮腫、急性炎症領域および基底膜の上皮分離をもたらし得る。
【０００７】
血小板動員、脱顆粒および血塊形成は、透過性を上昇させながら血管収縮期へ急速に進行し、血管外遊出（毛細血管からその周辺組織への白血球移動）および損傷部位への白血球の直接的動員を可能にする。実質組織の上皮および内皮の下に存在する細胞外マトリックスを形成する基底膜は、損傷組織への直接的接近を妨げる。この物理的バリアを破壊するために、マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）とも称される亜鉛依存性エンドペプチダーゼが、１つまたは複数の細胞外マトリックス構成成分を切断し、損傷部位内外への細胞の遊出を可能にする。特にＭＭＰ−２（ゼラチナーゼＡ、Ｎ型コラゲナーゼ）およびＭＭＰ−９（ゼラチナーゼＢ、ＩＶ型コラゲナーゼ）は、基底膜の２種の重要な構成成分であるＮ型コラーゲンおよびゼラチンを切断する。近年の研究で、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９がアップレギュレートされることが見出されており、組織の破壊および再生過程が線維化状態に共通することが強調された。ＭＭＰの活性は、ＭＭＰの転写調節、前酵素調節、および特異的な組織阻害物質をはじめとする幾つかのメカニズムによって制御される。ＭＭＰと様々な阻害メカニズムとのバランスが炎症を調節し、治癒応答時に沈着するコラーゲンの正味量を決定し得る。
【０００８】
アレルギー性気道炎症モデル、ならびにＭＭＰ−２-/-、ＭＭＰ−９-/-、およびＭＭＰ−２-/-ＭＭＰ−９-/-ダブルノックアウトマウスによるリモデリングを用いた過去の研究によって、炎症組織から気腔へと炎症細胞がうまく排出および除去されるためにＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９が必要であることが示された。これらのＭＭＰの非存在下では、細胞は、肺の実質内に封入されて気腔へと移動できず、このことが致死性の窒息をもたらした。
【０００９】
ＩＩ期：炎症
組織損傷部位への接近がなされたら、ケモカイングラジエントによって炎症性細胞が動員される。好中球、好酸球、リンパ球およびマクロファージが、食細胞により浄化された細胞屑および壊死領域と共に急性炎症部位で観察される。
【００１０】
炎症性サイトカインおよびケモカインを提供する好酸球、好中球、リンパ球およびマクロファージの初期動員は、局所のＴＧＦ−βおよびＩＬ−１３蓄積に寄与し得る。最初の傷害および炎症細胞の波に続いて、炎症細胞の後期動員が、食作用、細胞屑浄化および過剰な細胞増殖の制御を支援でき、それらが一緒になって正常な治癒に寄与し得る。後期炎症は、抗線維症的役割を果たすことができ、創傷治癒応答をうまく消散するのに必要であり得る。例えば、食細胞性マクロファージに富む後期炎症プロファイルは、局所ケモカイン産生およびＴＧＦ−βを抑制するＩＬ−１０分泌性調節性Ｔ細胞に加えて、線維芽細胞浄化を支援しており、過剰な線維芽細胞活性化を予防し得る。
【００１１】
傷害または原因物質の性質は多くの場合、後続の炎症反応の特徴を規定する。例えば、病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）のような外因性刺激は、Ｔｏｌｌ様受容体およびＮＯＤ様受容体（炎症反応およびアポトーシス反応の調節において様々な機能を有する細胞質タンパク質）などの病原体認識受容体によって認識され、侵入した病原体に対する自然細胞の応答に影響を及ぼす。内因性の危険シグナルもまた局所の自然細胞に影響を及ぼして、炎症カスケードを調整し得る。
【００１２】
炎症反応の性質は、常在する組織細胞および後続の炎症細胞に劇的な影響を及ぼす。炎症細胞自体もまた、ケモカイン、サイトカインおよび増殖因子の分泌を通して更なる炎症を増大させる。多くのサイトカインが、様々な状態で活性化される特異的な遺伝子群と共に、創傷治癒および線維化応答の全体に関与する。例えば、喘息における慢性アレルギー性気道疾患は、一般的に２型ヘルパーＴ細胞（Ｔｈ2）関連サイトカインプロファイル（非限定的にインターロイキン−４（ＩＬ−４）、インターロイキン−５（ＩＬ−５）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−１３（ＩＬ−１３）、およびインターロイキン−９（ＩＬ−９）など）に関連するが、慢性閉塞性肺疾患および線維症性肺疾患（特発性肺線維症など）の患者は、より多くが炎症促進性サイトカインプロファイル（非限定的にインターロイキン−１アルファ（ＩＬ−１α）、インターロイキン−１ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、形質転換増殖因子ベータ（ＴＧＦ−β）、および血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）など）を提示する。これらのサイトカインの各々は顕著な線維形成促進活性を示し、線維芽細胞、マクロファージおよび筋線維芽細胞の動員、活性化および増殖を介して作用することが示されている。
【００１３】
ＩＩＩ期：組織の修復および収縮
創傷治癒の終期は、フィブリン（創傷部位を覆う血塊を形成する「網状組織」を形成するように重合する線維性タンパク質）に富む足場の形成によって誘導される協調的細胞再編成、創傷収縮、創傷閉鎖および創傷の再上皮形成からなる。創傷修復のこの期間に関与する過程を究明する莫大な数の研究が、皮膚創傷の研究およびインビトロ系から得られている。
【００１４】
筋線維芽細胞由来コラーゲンおよび平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）は、マクロファージ、血小板、およびフィブリン骨格を形成する線維芽細胞由来フィブロネクチンと共に、仮の細胞外マトリックスを形成する。集合的にこれらの構造は、一般に顆粒化組織と称される。特発性肺線維症患者から単離された主要線維芽細胞または肺胞マクロファージは、対照の線維芽細胞よりも有意に多くのフィブロネクチンおよびα−ＳＭＡを産生し、これは線維芽細胞活性化が亢進した状態を示す。ステロイド処置を受けているＩＰＦ患者は、処置を受けていないＩＰＦ患者と同様に高レベルのマクロファージ由来フィブロネクチンを有することが報告された。したがって、ステロイド耐性ＩＬ−１３媒介筋線維芽細胞分化と同様に、マクロファージ由来フィブロネクチン放出もまた、ステロイド処置に耐性があるように思われ、それがステロイド治療が無効であり得る別の原因を示している。動物モデルにより、フィブロネクチンのエキストラＩＩＩ型ドメイン（ＥＤＡ）が特異的に欠失したマウスは、それらの野生型対応動物と比較してブレオマイシン投与後の線維症発生が有意に低かったため、フィブロネクチンは肺線維症の発生に必要であるように思われる。
【００１５】
仮の細胞外マトリックスは、フィブロネクチンに加えて、糖タンパク質（ＰＤＧＦなど）、グリコサミノグリカン（ヒアルロン酸など）、プロテオグリカンおよびエラスチンからなる。増殖因子およびＴＧＦ−β活性化線維芽細胞は、細胞外マトリックスネットワークに沿って遊走し、創傷を修復する。皮膚創傷内では、ＴＧＦ−βはまた収縮応答を誘導し、コラーゲン線維の方向性を調節する。線維芽細胞から筋線維芽細胞への分化はまた、先に議論された通り、ストレス線維およびα−ＳＭＡの新たな発現を生じ、それらは両方とも筋線維芽細胞内で高い収縮活性を付与する。「フィブロネクサス」または「超成熟焦点接着（ｓｕｐｅｒ  ｍａｔｕｒｅ  ｆｏｃａｌ  ａｄｈｅｓｉｏｎｓ）」と呼ばれる専用の部位での細胞外マトリックスへの筋線維芽細胞の付着は、一緒になって創傷を引張り、収縮期に病変サイズを減少させる。細胞マトリックスが堆積する程度および活性化筋線維芽細胞の量が、コラーゲン沈着量を決定する。この目的のために、メタロプロテイナーゼ組織阻害物質（ＴＩＭＰ）に対するマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）のバランスおよびコラゲナーゼに対するコラーゲンのバランスが、この応答の間じゅう変化し、コラーゲンの正味の増加なしに、合成促進（ｐｒｏ−ｓｙｎｔｅｈｓｉｓ）およびコラーゲン沈着増加からバランス制御に向けてシフトする。うまく創傷が治癒するためには、線維芽細胞がアポトーシスを受ける際にこの均衡が始まることが多く、炎症が収束し始め、顆粒化組織が後退して、高コラーゲン病変が残留する。炎症細胞、特にα−ＳＭＡ陽性筋線維芽細胞の除去が、コラーゲン沈着の停止に必須である。興味深いことに、特発性肺線維症の患者では、アポトーシス促進分子およびＦＡＳ−シグル伝達分子のレベル上昇が観察されたにもかかわらず、細胞はアポトーシスシグナルに耐容であり、線維芽細胞の除去が遅延し得る。アポトーシスに対するこの相対的耐性は、潜在的にこの線維性疾患の原因であり得る。しかし、幾つかの研究ではまた、特発性肺線維症でコラーゲン分泌線維芽細胞および上皮細胞のアポトーシスの速度増加が観察されており、さらに別のバランスが線維芽細胞アポトーシスと線維芽細胞増殖のモニタリングを要求していることが示唆された。皮膚の研究から、創傷部位の再上皮形成が、バリア機能を再度確立し、封入された細胞の再編成を可能にする。コラーゲンマトリックス上で生育させたヒトもしくはラットの上皮細胞、またはインビボの気管の損傷を用いる、幾つかのインビトロおよびインビボモデルを使用して、細胞の遊走、増殖および細胞増大の重要なステージが同定された。露出した領域の端から上皮が復元すると共に、急速かつ動的な運動性および増殖が最初の創傷から数時間以内に生じる。加えて、上皮細胞のスライディングシートが損傷領域の上部を遊走し、創傷の被覆を支援し得る。血清由来形質転換増殖因子アルファ（ＴＧＦ−α）、およびマトリックスメタロプロテイナーゼ−７（ＭＭＰ−７）（それ自体はＴＩＭＰ−１によって調節される）を含む幾つかの因子が、再上皮形成を調節することが示されている。
【００１６】
総括すると、炎症の程度、血管形成、および細胞外マトリックス沈着の量は全て、最終的な線維症病変の発達に寄与する。したがって、線維芽細胞の活性化、増殖またはアポトーシスを妨害する治療的介入には、創傷修復の全ての期間の完全な理解および認識が必要である。これらの３つの期間は多くの場合、連続的に提示されるが、慢性または反復損傷時にはこれらの過程は並行して機能し、調節メカニズムを大いに必要とする（Ｗｉｌｓｏｎ  ａｎｄ  Ｗｙｎｎ，  Ｍｕｃｏｓａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  ２００９，  ３（２）：１０３−１２１）。
【００１７】
２．病理としての線維症
線維症は、器官または組織における過剰な線維性結合組織の形成または発達であり、正常または異常な／反応性の創傷治癒応答の結果として形成され、瘢痕を生じる。線維症は、例えば非限定的に、異常な細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着、線維芽細胞増殖の異常な促進、線維芽細胞集団の筋線維芽細胞集団への異常な分化誘発、筋線維芽細胞の細胞外マトリックスへの異常な付着促進、またはそれらの組み合わせを特徴とする。
【００１８】
炎症促進性媒介物質
蓄積しつつある証拠から、様々なリンホカイン、インターロイキン、およびケモカインを含む、サイトカインとして知られるポリペプチド媒介物質が、線維症におけるコラーゲン沈着の重要な刺激であることが示唆されている。サイトカインは、常在する組織細胞および動員された炎症細胞によって放出され、線維芽細胞の増殖およびコラーゲンを含む細胞外マトリックスタンパク質の合成増加を刺激すると考えられる。例えば、特発性肺線維症の発病における初期の特色は、肺胞上皮細胞および／または毛細血管細胞損傷である。これは、循環する免疫細胞、例えば、単球、好中球、リンパ球および好酸球の、肺への動員を促進する。その後、これらのエフェクター細胞は、常在する肺細胞、例えばマクロファージ、肺胞上皮細胞および内皮細胞と一緒に、サイトカインを放出し、サイトカインは、標的細胞、典型的には線維芽細胞を刺激して複製させ、コラーゲンの合成量を増加させる。細胞外マトリックスの分解もまた阻害され、線維化過程に寄与する可能性がある（Ｃｏｋｅｒ  ａｎｄ  Ｌａｕｒｅｎｔ，  Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ，  １９９８，；  １１：１２１８−１２２１）。
【００１９】
非限定的に、形質転換増殖因子−β（ＴＧＦ−β）、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、インスリン様増殖因子−１（ＩＧＦ−１）、エンドセリン−１（ＥＴ−１）ならびにインターロイキン類、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）およびインターロイキン−１７（ＩＬ−１７）を含む数多くのサイトカインが、線維症の発病において関連づけられている。正常Ｔ細胞活性化時に調節され、発現および分泌される（ＲＡＮＴＥＳ）因子を含むケモカイン白血球ケモアトラクタントもまた、重要な役割を果たすと考えられる。末梢血中での炎症促進性サイトカイン、例えばインターロイキン−８（ＩＬ−８）のレベル上昇は、細胞間接着分子−１（ＩＣＡＭ−１）および血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）などの関連する下流の接着分子（ＣＡＭ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ−７（ＭＭＰ−７）などのマトリックスメタロプロテイナーゼ、ならびに末梢血中のＳ１００カルシウム結合タンパク質Ａ１２（Ｓ１００Ａ１２、カルグラヌリンＣとしても公知）などのシグナル伝達分子のレベル上昇は、特発性肺線維症の患者で死亡率、肺移植なしの生存率および疾患進行と関連することが見出されている（Ｒｉｃｈａｒｄｓｅｔ  ａｌ，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ，  ２０１２，  １８５：  ６７−７６）。
【００２０】
ＴＧＦ−βタンパク質ファミリーは、細胞外マトリックス沈着に対して強力な刺激作用を有し、実際に遺伝子移転による線維症誘発動物モデルの構築に用いられてきた。インビトロ試験では、潜在的前駆体として分泌されるＴＧＦ−β１は、線維芽細胞のプロコラーゲン遺伝子発現およびタンパク質合成を促進することが示されている。これらのデータは、他の哺乳動物のアイソフォームＴＧＦ−β２およびＴＧＦ−β３もまた、ヒト肺線維芽細胞のコラーゲン合成を刺激しインビトロでの分解を低下させることを示唆している。肺線維症の動物モデルでは、ＴＧＦ−β１遺伝子発現の強化は、コラーゲン遺伝子発現およびタンパク質沈着の増加に時間的および空間的に関係する。ＴＧＦ−β１抗体は、ネズミのブレオマイシン誘発性肺線維症でコラーゲン沈着を低下させ、ヒトの線維症の肺組織は、ＴＧＦ−β１遺伝子およびタンパク質の発現強化を示す。
【００２１】
ＴＮＦ−αは、インビトロで線維芽細胞の複製およびコラーゲン合成を刺激でき、肺のＴＮＦ−α遺伝子発現は、マウスにブレオマイシンを投与した後で上昇する。可溶性ＴＮＦ−α受容体は、ネズミモデルで肺線維症を減少させ、トランスジェニックマウスの肺のＴＮＦ−α過剰発現は、肺線維症を特徴とする。ＩＰＥまたはアスベスト症（アスベスト繊維の吸引および保持によって引き起こされる肺実質組織を冒す慢性炎症性および線維症性症状）の患者では、気管支肺胞洗浄液由来マクロファージが、対照と比較して増加した量のＴＮＦ−αを放出する。
【００２２】
エンドセリン（ＥＴ−１）もまた、線維形成促進性サイトカインの基準を満たす。この分子は線維芽細胞の増殖および化学走性を促進し、プロコラーゲンの生成を刺激する。それは肺線維症の患者の肺に存在し、近年の報告では、ＥＴ−１受容体拮抗薬のボセンタンは、実験動物に投与された場合に肺線維症を軽減することが示唆されている。
【００２３】
未確認の筋線維芽細胞増殖／活性化および線維症病巣形成
線維芽細胞から筋線維芽細胞への分化は、創傷修復および線維症をはじめとする多くの症状における重要な事象であると長い間考えられてきた。例えば、筋線維芽細胞は活発な線維症領域で生じ、肺線維症では細胞外マトリックス（ＥＣＭ）タンパク質の生成および沈着を担うことが報告されている（Ｌｉｕ，  Ｔ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，  ２００７，  ３７：５０７−５１７）。
【００２４】
特発性肺線維症の因果関係についての１つの仮説は、まだ未確認の刺激によって急性肺損傷の反復エピソードがもたらされることを示唆している。これらの損傷部位における創傷治癒は、最終的に線維症をもたらし、肺機能を喪失させる。線維症病巣、つまり特発性肺線維症の診断基準病巣は、間葉細胞の活発な複製および新しい細胞外マトリックスの旺盛な沈着を特色とする。そのような病巣は、肺胞上皮細胞損傷の典型であり、管腔内の血漿滲出および遠位気腔の破壊を伴う。創傷治癒と密接に関係する媒介物質、例えば形質転換増殖因子−β１（ＴＧＦ−β１）および結合組織増殖因子もまた、これらの部位で発現される。この巣状性急性肺損傷および創傷修復の駆動力は、明らかではない。
【００２５】
３．線維症が役割を果たす疾患または状態
線維症は、非限定的に間質性肺疾患、例えば特発性肺線維症、急性肺損傷（ＡＬＩ）、放射線誘発性線維症、移植片拒絶、肝線維症、腎線維症および血管線維症を含む、多数の異質性疾患または症状に関連づけられている。
【００２６】
３．１．特発性肺線維症（ＩＰＦ）
特発性肺線維症（ＩＰＥ；原因不明の線維化肺胞炎（ＣＦＡ）、または特発性線維化間質性肺炎としても公知）は、主として高齢者に発する病因不明の慢性進行性線維化間質性肺炎の特殊形態と定義されており、肺に限定され、かつ通常の間質性肺炎（ＵＩＰ）の放射線学的および組織学的パターンと関連する（Ｒａｇｈｕ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  １８３（６）：７８８−８２４，  ２０１１；Ｔｈａｎｎｉｃｋａｌ，  Ｖ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ  Ａｍ  Ｔｈｏｒａｃ  Ｓｏｃ．，  ３（４）：３５０−３５６，  ２００６）。ＩＰＥは、肺間質の異常かつ過剰な線維症組織沈着を特徴とし得る。高分解能ＣＴ（ＨＲＣＴ）画像によれば、ＵＩＰは、牽引性気管支拡張症に関連することの多い網状混濁の存在を特徴とする。ＩＰＦが進行するにつれ、ハチの巣形状が、より一層際立ってくる（Ｎｅｉｎｉｎｇｅｒ  Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．，  ２７７（５）：３０６５−８，  ２００２）。肺機能試験の多くは、限定的障害および一酸化炭素拡散能力の低下を明らかにする（Ｔｈｏｍａｓ，  Ｔ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，  １０５（５）：  ２０３９−５２，  ２００８）。複数の研究が、特発性肺線維症（ＩＰＦ）の患者におけるＴＮＦ−αおよびＩＬ−６放出の顕著な増加を報告し（Ｚｈａｎｇ，  Ｙ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １５０（９）：４１８８−４１９６，  １９９３）、それは、ＩＬ−１βの発現レベルに起因するとされている（Ｋｏｌｂ，  Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ，  １０７（１２）：１５２９−１５３６，  ２００１）。ＩＰＦの症状である息切れおよび咳の開始は、通常は潜行性であるが徐々に進行し、診断後５年以内に患者の７０％が死亡する。この厳しい予後は、乳癌による年間死亡数に類似する（Ｒａｇｈｕ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  １８３（６）：７８８−８２４，  ２０１１）。
【００２７】
ＩＰＦは、米国でほぼ１３０，０００名の患者が罹患し、世界中で毎年５０，０００名の新たな患者が出現し、毎年４０，０００名が死亡する（Ｒａｇｈｕ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  １８３（６）：７８８−８２４，  ２０１１）。これらのデータは注目に値するが、近年の研究では、ＩＰＦが以前に考えられていたよりも５〜１０倍多い可能性があり、それはおそらく有病率の増加または診断性能の向上のためであろうと報告された（Ｔｈａｎｎｉｃｋａｌ，  Ｖ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ  Ａｍ  Ｔｈｏｒａｃ  Ｓｏｃ．，  ３（４）：３５０−３５６，  ２００６）。肺移植はＩＰＦの最も確実な治療法と見なされているが、肺移植後の５年生存は５０％未満である。したがって、肺移植でさえＩＰＦの「治癒」と考えることはできない。患者の身体的および情緒的な負担に加えて、ＩＰＦは、処置およびケアが極めて高価で、国家の健康維持費は、１００，０００名の患者毎に毎年２８億ドルの範囲に及ぶ。
【００２８】
加えて、過去の研究では、環境性傷害の付加も特発性肺線維症の発病に重要であり得ることが示唆されている。ほとんどの報告された症例シリーズにおいて、特発性肺線維症のインデックス・ペイシェントの７５％までが、現在または過去の喫煙者である。広範囲の疫学研究では、喫煙は特発性肺線維症と強く関連した。加えて、特発性肺線維症の炎症性特徴の多くが、基礎となる肺疾患よりも喫煙状況とより密接に関係する。したがって、喫煙は、特発性肺線維症の独立した危険因子であり得る。潜伏性ウイルス感染、特にヘルペスウイルスファミリーの感染もまた、特発性肺線維症と関連すると報告されている。
【００２９】
ＩＰＦについては肺移植を含む有効な公知の処置が存在しないため、新規な治療薬の開発が依然として緊急に求められている。瘢痕または線維症組織を生成する身体能力を遅延させる、または阻害することが可能な抗線維症療法、および肺での気体交換のための組織面積を増加させる肺の血管拡張剤をはじめとする、現在開発中の様々な治療手段が存在する。肺移植はさておき、潜在的なＩＰＦ治療には、コルチコステロイド、アザチオプリン、シクロホスファミド、抗凝固剤およびＮ−アセチルシステインが含まれる（Ｒａｇｈｕ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  １８３（６）：７８８−８２４，  ２０１１）。加えて、酸素療法および肺リハビリテーションなどの補助療法が日常的に用いられる。しかし、これらのいずれもが、ＩＰＦ患者の長期生存に確実な影響をもたらさず、このことからＩＰＦの治療選択のためのアンメットメディカルニーズがさらに強調される。例として挙げれば、混合臨床プログラムの結果にもかかわらず、ＩｎｔｅｒＭｕｎｅの経口小分子Ｅｓｂｒｉｅｔ（登録商標）（ピルフェニドン（ｐｉｒｆｅｎａｄｏｎｅ））が、ＩＰＦ患者のために欧州および日本での認可を受けた。したがって、Ｅｓｂｒｉｅｔ（登録商標）は、ＩＰＦ処置のために特別に指定された最初の医薬となったが、あいまいな治験結果および薬物副作用のために、米国ではこの薬剤の有用性は懐疑的と見なされ、当時提出されたデータからはＦＤＡの認可は得られなかった。したがって、米国では新薬適用を支持するためにその有効性を決定する大規模な第三相臨床試験が進行中である。
【００３０】
組織病理学的には、ＩＰＥは、線維芽細胞病巣における活性化筋線維芽細胞（または間葉細胞）の蓄積と説明できる（Ｔｈａｎｎｉｃｋａｌ，  Ｖ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ  Ａｍ  Ｔｈｏｒａｃ  Ｓｏｃ．，  ３（４）：３５０−３５６，  ２００６）。筋線維芽細胞の損なわれたアポトーシスは、組織の線維症に終わる持続的で調節不能な修復過程をもたらし得る。議論の余地はあるが、おそらく線維芽細胞の周期的な急性刺激により、炎症もまたＩＰＦで重大な役割を果たす。これらの発見は、治療的介入のための潜在的標的を指し示している。
【００３１】
３．１．１．特発性肺線維症（ＩＰＦ）の発病
発病のメカニズムは完全には理解されていないが、現在受け入れられている理論的枠組では、肺胞上皮への損傷に続いて、正常な組織修復に関連する応答を引き起こす炎症促進性および線維増殖性媒介物質が大量放出されることが提案されている。明確でない理由により、これらの修復過程は消散せず、結果として進行性線維症が起こる（Ｓｅｌｍａｎ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ，  １３４（２）：１３６−１５１，  ２００１；Ｎｏｂｌｅ，  Ｐ．  ａｎｄ  Ｈｏｍｅｒ  Ｒ．，  Ｃｌｉｎ  Ｃｈｅｓｔ  Ｍｅｄ，  ２５（４）：７４９−５８，  ２００４；Ｓｔｒｉｅｔｅｒ，  Ｒ．，  Ｃｈｅｓｔ，  １２８  （５  Ｓｕｐｐｌ  １）：５２６Ｓ−５３２Ｓ，  ２００５）。
【００３２】
３．１．２．肺線維症のブレオマイシンマウスモデル
多数の動物モデルが存在し、有用であり得るが（例えば、ＴＧＦ−βアデノウイルス形質導入モデルまたは放射線誘発性線維症モデル）、ブレオマイシンモデルは、詳しく記載されており、炎症後／線維化前／線維症予防段階で個々の薬剤またはプロテインキナーゼ阻害剤の有効性を実証するために今日使用されている最もよく特徴づけられたネズミモデルである（Ｖｉｔｔａｌ，  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．，  ３２１（１）：３５−４４，  ２００７；Ｖｉｔｔａｌ，  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ．，  １６６（２）：３６７−７５，  ２００５；Ｈｅｃｋｅｒ  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ  Ｍｅｄ．，  １５（９）：１０７７−８１，  ２００９）。
【００３３】
抗生物質のブレオマイシンは、最初ストレプトミセス・ベルチシラツス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｅｒｔｉｃｉｌｌａｔｕｓ）から単離された（Ｕｍｅｚａｗａ，  Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  ２０：  ８９１−８９５，  １９６７）。その後、この抗生物質は扁平上皮癌および皮膚腫瘍に対して有効であることが見出されたが（Ｕｍｅｚａｗａ，  Ｈ．，  Ｆｅｄ  Ｐｒｏｃ，  ３３：  ２２９６−２３０２，  １９７４）、抗新生物薬としてのその有用性は、線維症をもたらす用量依存肺毒性により制限された（Ｍｕｇｇｉａ，  Ｆ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔ  Ｒｅｖ，  １０：  ２２１−２４３，  １９８３）。気管内経路によるブレオマイシンの送達（一般には供給源に応じて１．２５〜４Ｕ／ｋｇ）は、げっ歯類において１回の薬物注射が肺損傷およびその結果としての線維症をもたらすという利点を有する（Ｐｈａｎ，  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｒｅｖ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｄｉｓ  １２１：  ５０１−５０６，  １９８０；Ｓｎｉｄｅｒ，  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｒｅｖ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｄｉｓ．  １１７：  ２８９−２９７，  １９７８；Ｔｈｒａｌｌ，  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ，  ９５：  １１７−１３０，  １９７９）。げっ歯類への薬剤の気管内送達は、最初に肺胞上皮細胞への直接的損傷をもたらす。この事象に続いて、１週間以内に好中球性およびリンパ球性汎肺胞炎が生じる（Ｊａｎｉｃｋ−Ｂｕｃｋｎｅｒ，  Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ａｐｐｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  １００（３）：４６５−７３，  １９８９）。続いて、肺胞の炎症細胞が除去され、線維芽細胞の増殖が認められ、細胞外マトリックスが合成される（Ｓｃｈｒｉｅｒ  Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｒｅｖ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｄｉｓ．，  １２７（１）：６３−６，１９８３）。このモデルでの線維症の発生は、１４日までに生化学的および組織学的に認められ、最大応答は一般的には２１〜２８日前後に認められる（Ｉｚｂｉｃｋｉ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｐａｔｈｏｌ．，  ８３（３）：１１１−９，  ２００２；Ｐｈａｎ，  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｓｔ．，  ８３（５  Ｓｕｐｐｌ）：４４  Ｓｕｐｐｌ）−４５Ｓ，  １９８３）。しかし、２８日を過ぎると、ブレオマイシンへの応答は、より変動的である。最初の報告は、気管内に送達されたブレオマイシンが６０〜９０日間進行または持続する線維症を誘発し得ることを示唆するが（Ｔｈｒａｌｌ  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ．，  ９５（１）：１１７−３０，  １９７９；Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ  Ｒ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｒｅｖ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｄｉｓ．，  １２０（１）：６７−７３，  １９７９；Ｓｔａｒｃｈｅｒ  Ｂ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｒｅｖ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｄｉｓ．，  １１７（２）：２９９−３０５，  １９７８）、他の報告は、この期間を過ぎると緩解が始まる自己限定性応答を実証している（Ｔｈｒａｌｌ  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ．，  ９５（１）：１１７−３０，  １９７９；Ｐｈａｎ，  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｓｔ，  ８３（５  Ｓｕｐｐｌ）：  ４４Ｓ−４５Ｓ，  １９８３；Ｌａｗｓｏｎ  Ｗ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈ���ｌ．  ２００５；１６７（５）：１２６７−１２７７）。緩解を生じるこのモデルの性質はヒトの疾患を模倣していないが、モデルのこの態様は、これらの後期における線維症の緩解を研究する機会を提供する。
【００３４】
３．２．急性肺損傷（ＡＬＩ）
急性肺損傷（ＡＬＩ）およびより重度の形態である急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、急性肺水腫および炎症から生じる急性呼吸不全症候群である。ＡＬＩ／ＡＲＤＳは、敗血症（肺性および非肺性）、肺炎（細菌性、ウイルス性および真菌性）、胃および口腔咽頭内容物の吸引、大きな外傷を含む様々な臨床障害、ならびに重度の急性膵炎、薬剤の過剰投与、および血液製剤を含む複数の他の臨床障害から全年齢の患者で発生する急性呼吸不全の原因である（Ｗａｒｅ，  Ｌ．  ａｎｄ  Ｍａｔｔｈａｙ，  Ｍ．，  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，  ３４２：１３３４−１３４９，  ２０００）。ほとんどの患者は、陽圧による補助換気を必要とする。主要な生理学的異常は、重度の動脈低酸素血症、および肺のデッドスペース部分の急激な増加から派生する微弱換気の顕著な増加である。ＡＬＩ／ＡＲＤＳの患者は、バリアの透過性の増加から派生する肺の間質および気腔区画への液体の滲出から生じる高タンパク質性肺水腫を発症する。さらなる病理学的変化は、肺水腫に関与するメカニズムが複雑であり、水腫はＡＬＩ／ＡＲＤＳにおける病理生理学的事象の１つに過ぎないことを示す。１つの生理学的結果は、呼吸仕事量の増加をもたらす肺コンプライアンスの顕著な低下であり（Ｎｕｃｋｔｏｎ  Ｔ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，  ３４６：１２８１−１２８６，  ２００２）、これがほとんどの患者を支援するために補助換気が必要とされる理由の１つである。
【００３５】
ＡＬＩの主力処置である機械的換気（ＭＶ）は、換気装置関連肺損傷（ＶＡＬＩ）を引き起こす呼吸系の種々の成分への厳しい機械的ストレスによって透過性に潜在的に寄与し、これを悪化させることが示唆された（Ｆａｎ，  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  ＪＡＭＡ，  ２９４：２８８９−２８９６，  ２００５；  ＭａｃＩｎｔｙｒｅ  Ｎ．，  Ｃｈｅｓｔ，  １２８：５６１Ｓ−５６７，  ２００５）。近年の臨床試験は、高換気量（ＨＶT）と比較して低換気量（ＬＶT）で換気された患者で生存が有意に改善されることを実証した（Ｔｈｅ  Ａｃｕｔｅ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｄｉｓｔｒｅｓｓ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ  Ｎ．  Ｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｌｏｗｅｒ  Ｔｉｄａｌ  Ｖｏｌｕｍｅｓ  ａｓ  Ｃｏｍｐａｒｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ  Ｔｉｄａｌ  Ｖｏｌｕｍｅｓ  ｆｏｒ  Ａｃｕｔｅ  Ｌｕｎｇ  Ｉｎｊｕｒｙ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ａｃｕｔｅ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｄｉｓｔｒｅｓｓ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ．  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ；  ３４２：１３０１−１３０８，  ２０００）。おそらくより低い機械的ストレスを付与する、より低い換気量での換気以外に、ＶＡＬＩの病理生理学の機械学的理解はほとんど存在せず、指定される治療法も存在しない。
【００３６】
高換気量（ＨＶT）の機械的換気（ＭＶ）は、ｐ３８ＭＡＰキナーゼのリン酸化、ＭＫ２の活性化、およびＨＳＰＢ１のリン酸化（アクチンをＨＳＰＢ１から解離させ、重合してストレス線維を形成させる過程であり、これが最終的に細胞間の間隙を生じさせ血管透過性を高める）をもたらすことが示唆された。加えて、ｐ３８ＭＡＰキナーゼまたはその下流のエフェクターＭＫ２の阻害は、ＨＳＰＢ１のリン酸化を妨げ、かつアクチンストレス線維の形成および細胞骨格の再編成を停止させることによって血管の透過性から防御することが示され、ＭＫ２の標的阻害は、急性肺損傷の処置のために潜在的な治療方策になり得ることが示唆された（Ｄａｍａｒｌａ，  Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  ＯＮＥ，  ４（２）：  Ｅ４６００，  ２００９）。
【００３７】
さらに、複数の研究から、肺線維症がＡＬＩから生じ得ることも示唆された。ＡＬＩは、完全に緩解するか、または持続的な血中低酸素（低酸素血症）および呼吸毎に肺が拡張する能力の低下（肺コンプライアンスの低下）を伴う線維症肺胞炎に進行する可能性がある。損傷誘発性肺線維症の病因は特発性肺線維症とは異なるが、両疾患は共通の病理学的メカニズム（即ち、線維芽細胞の肺気腔への浸潤）を共有することが示唆された（Ｔａｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．  １４：  ４５−５４，  ２００８；  Ｌｅｙ，  Ｋ．  ａｎｄ  Ｚａｒｂｏｃｋ，  Ａ．，  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．  １４：  ２０−２１；  ２００８）。
【００３８】
３．３．放射線誘発性線維症
線維症は、放射線療法による癌処置および偶発的被爆の両方に共通の後遺症である。放射線療法に続く線維症病変は、皮膚（Ｂｅｎｔｚｅｎ，  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ．  Ｏｎｃｏｌ．  １５：  ２６１−２１４，  １９８９；Ｂｒｏｃｈｅｒｉｏｕ，  Ｃ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｒａｄｉｏｌ．  Ｓｕｐｐｌ．  １９：  １０１−１０８，  １９８６）、肺（Ｌｏｐｅｚ  Ｃａｒｄｏｚｏ，  Ｂ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｒａｄｉａｔ．  Ｏｎｃｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  Ｐｈｙｓ．，  １１：  ９０７−９１４，  １９８５）、心臓（Ｆａｊａｒｄｏ，  Ｌ．  ａｎｄ  Ｓｔｅｗａｒｔ，  Ｊ．，  Ｌａｂ．  Ｉｎｖｅｓｔ．，  ２９：  ２４４−２５７，  １９７３）および肝臓（Ｉｎｇｏｌｄ，  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｏｅｎｔｇｅｎｏｌ．，  ９３：  ２００−２０８，  １９６５）を含む多くの組織で記載されている。
【００３９】
肺（後期応答組織）では、２つの放射線傷害症候群、つまり放射線肺炎および肺線維症が生じ得る。肺炎は、放射線療法の完了後２〜３ヶ月に出現する。病理学的には、肺炎は、間質水腫、間質性および肺胞性炎症細胞の存在、ならびにＩＩ型肺細胞数の増加を特徴とする（Ｇｒｏｓｓ，  Ｎ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒａｄｉａｔ．  Ｒｅｓ．，  ＩＩＩ：  １４３−５０，  １９８１；Ｇｕｅｒｒｙ−Ｆｏｒｃｅ，  Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒａｄｉａｔ．  Ｒｅｓ．  １１４：  １３８−５３，  １９８８）。肺炎では、組織への一次的損傷は、実質細胞の欠乏によって引き起こされる可能性が最も高い（Ｈｅｎｄｒｙ，  Ｊ．，  Ｒａｄｉａｔ．  Ｏｎｃｏｌ．  Ｖｏｌ．  ４，２：  １２３−１３２，  １９９４；Ｒｏｓｉｅｌｌｏ，  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｒｅｖ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｄｉｓ．，  １４８：  １６７１−１６７６，  １９９３；Ｔｒａｖｉｓ，  Ｅ．  ａｎｄ  Ｔｅｒｒｙ，  Ｎ．，  Ｆｒｏｎｔ．  Ｒａｄｉａｔ．  Ｔｈｅｒ．  Ｏｎｃｏｌ．，  ２３：  ４１−５９，  １９８９）。
【００４０】
線維症性反応は、間質のコラーゲン沈着増加、血管壁の肥厚、および血管閉塞を特色とする（Ｖｅｒｇａｖａ，  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｒａｄｉａｔ．  Ｏｎｃｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  Ｐｈｙｓ．  ２：  ７２３−７３２，  １９８７）。線維症病変の組織学的試験によって、線維症組織が、浸潤している炎症細胞、線維芽細胞、および多量の様々な細胞外マトリックス成分を含むことが明らかとなった。線維症組織では、間質コラーゲン、フィブロネクチン、およびプロテオグリカンの合成および沈着増進が記載され（Ｍａａｓｉｈａ，  Ｐ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｒａｄｉａｔ．  Ｏｎｃｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  Ｐｈｙｓ．  ２０：  ９７３−９８０，  １９９１）、これは、線維芽細胞系の放射線誘発性モジュレーションの結果と解釈されている（Ｒｅｍｙ，  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒａｄｉａｔ．  Ｒｅｓ．  １２５：  １４−１９，  １９９１）。
【００４１】
特に肺の、放射線誘発性線維症は、線維性反応に関係する幾つかの細胞系の間での細胞性事象と分子性事象の相互作用によることが示唆された。放射線照射だけで、線維芽細胞／線維細胞の細胞系の未熟な最終分化過程を誘導し、間質コラーゲン合成の数倍の増加を特徴とする、有糸分裂後線維細胞の蓄積増進をもたらすことができる。同時に、付随する実質細胞型、例えば肺胞マクロファージおよび肺胞ＩＩ型肺細胞の放射線照射は、ＴＧＦ−β１のような特異的サイトカインの即時合成を誘発し、その後、実質細胞と線維芽細胞系との相互作用を変える。ＴＧＦ−β１は、線維性反応を担う主要なサイトカインの１つとして、前駆体線維芽細胞型の増大による線維芽細胞増殖および、前駆体線維芽細胞の有糸分裂後線維細胞への未成熟な最終分化を誘導する。これにより、前駆体線維芽細胞と有糸分裂後線維細胞との良好なバランスの細胞型比が撹乱されるため、有糸分裂後線維細胞が蓄積される。放射線照射に続く病理生理学的組織応答が、サイトカインおよび増殖因子によって媒介される多細胞性細胞系の相互作用の改変によって引き起こされ、良好なバランスの間質線維芽細胞／線維細胞の細胞系の細胞型比の乱れを生じることが示唆された（Ｒｏｄｅｍａｎｎ，  Ｈ．  ａｎｄ  Ｂａｍｂｅｒｇ，  Ｍ．，  Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，  ３５，  ８３−９０，  １９９５）。
【００４２】
３．４．移植片拒絶
移植は、細胞、組織または器官をある部位から別の部位へ移行させる作業である。器官系の機能不全は、ドナーから器官（例えば、腎臓、肝臓、心臓または膵臓）を移植することにより修正され得る。しかし、免疫系は依然として、日常的医療処置としての移植に対する最も恐るべきバリアであり、そのような器官の拒絶は、移植される器官における線維症表現型と多くの場合一致する。免疫系は、外来物質との闘いのために精緻で有効なメカニズムを発達させてきた。これらのメカニズムはまた、宿主の免疫系によって外来物と認識される、移植された器官の拒絶にも関与する。
【００４３】
移植片に対する免疫応答の程度は、移植された器官と宿主との間の遺伝的不一致性に一部依存する。異なる種のメンバー間の移植片である異種移植片は、最大の不一致性を有し、最大の免疫応答を誘引して急速な拒絶を受ける。身体のある部分から別の部分への移植片である自家移植片（例えば、皮膚移植片）は、外来組織ではなく、それゆえ拒絶を誘引しない。遺伝的に同一個体（例えば、モノ接合体双生児）間の移植片である同系移植片もまた、拒絶を受けない。
【００４４】
同種移植片は、遺伝的に異なる同じ種のメンバー間の移植片である。これは、最も一般的な移植形態である。同種移植片が拒絶を受ける程度は、ドナーと宿主間での類似性または組織適合性の程度に一部依存する。
【００４５】
応答の程度およびタイプもまた、移植片のタイプにより変動する。幾つかの部位、例えば眼および脳は、免疫学的に特権がある（即ち、それらはほとんどまたは全く免疫系細胞を有さず、不適合移植片にすら耐容し得る）。皮膚移植片は、最初は血管形成されず、したがって血液供給が発達するまで拒絶を発現しない。肺、心臓、腎臓および肝臓は血管が豊富な器官であり、多くの場合、宿主で激しい細胞性応答が生じ、免疫抑制療法を必要とする。
【００４６】
狭窄性細気管支炎（ＣＢ）は、肺移植患者では閉塞性細気管支炎とも称され、主に膜性の呼吸細気管支の壁および連続組織で生じる炎症および線維症であり、それらの細気管支管腔の狭窄をもたらす。ＣＢは、様々な背景で、最も多くは肺および心肺移植の合併症（通常は移植後最初の２年間に３４〜３９％の患者で罹患）および骨髄移植の合併症として見出されるが、関節リウマチでも、有毒物質（例えば二酸化窒素）の吸入後、特定薬剤（例えばペニシラミン）の摂取後および東アジアの野菜アメバシバの摂取後に、そして小児のアデノウイルス、インフルエンザＡ型、麻疹およびマイコプラズマ肺炎感染における希少な合併症として見出される。肺移植では、ＣＢは後に死に至る唯一の最も重要な要因である。ある研究では、全体的死亡率は２５％であった。しかし同時に、無症状でもっぱら経気管支生検によって診断された患者の８７％が、疾患の緩解および安定化を有した。ベースラインからのＦＥＶ1の低下を利用して、移植患者におけるＣＢを臨床的に支援でき、閉塞性気管支炎症候群という用語が、この臨床的機能不全を示すために用いられ、等級づけシステムがそのために確立されて、現在文献で広範囲に用いられる。肺移植でＣＢを発症させる重要な危険因子には、アロ抗原依存性および非依存性メカニズムが含まれる。前者のグループでは、後期急性拒絶およびＡ遺伝子座におけるＨＬＡ不適合があり、後者には虚血／気道への再灌流傷害があり、それは移植手術およびサイトメガロウイルス感染からもたらされる（Ｓｃｈｌｅｓｉｎｇｅｒ  Ｃ．  ｅｔ  ａｌ，  Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｐｕｌｍ．  Ｍｅｄ．，  ４（５）：  ２８８−９３，  １９９８）。
【００４７】
拒絶のメカニズム
移植器官に対する免疫応答は、細胞性（リンパ球媒介）および液性（抗体媒介）メカニズムの両方からなる。他の細胞型もまた関与するが、移植片の拒絶ではＴ細胞が中心的である。拒絶反応は、感作期およびエフェクター期からなる。
【００４８】
感作期
この段階では、ＣＤ４およびＣＤ８細胞が、それらのＴ細胞受容体を介して、外来移植片の細胞上で発現されるアロ抗原を認識する。抗原認識には２つのシグナルが必要である：第一は、Ｔ細胞受容体とＭＨＣ分子によって提示される抗原との相互作用によって提供され、第二は、Ｔ細胞／ＡＰＣ表面上での共刺激受容体／リガンド相互作用によって提供される。数多くの共刺激経路のうち、Ｔ細胞表面上のＣＤ２８とそのＡＰＣ表面リガンド、Ｂ７−１またはＢ７−２（それぞれ一般的にＣＤ８０またはＣＤ８６として公知）との相互作用が最も多く研究されている（Ｃｌａｒｋｓｏｎ，  Ｍ．  ａｎｄ  Ｓａｙｅｇｈ，  Ｍ．，  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；  ８０（５）：  ５５５−５６３，  ２００５）。加えて、細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原−４（ＣＴＬＡ４）もまた、これらのリガンドに結合し、阻害シグナルを提供する。他の共刺激分子としては、ＣＤ４０およびそのリガンドＣＤ４０Ｌ（ＣＤ１５４）が挙げられる。典型的には、ＭＨＣ分子のヘリックスがペプチド結合溝を形成し、正常な細胞タンパク質由来のペプチドによって占有される。胸腺のまたは中枢の耐容メカニズム（クローン欠失）および末梢の耐容メカニズム（例えばアネルギー）は、これらの自己ペプチドＭＨＣ複合体がＴ細胞によって認識されないことを確実にし、それによって自己免疫応答を予防する。
【００４９】
エフェクター期
アロ抗原依存性および非依存性因子が、エフェクターメカニズムに寄与する。最初に、非免疫学的「損傷応答」（虚血）は、非特異的炎症応答を誘導する。このために、接着分子、クラスＩＩＭＨＣ、ケモカインおよびサイトカインの発現がアップレギュレートされると、Ｔ細胞への抗原提示が増加する。それはまた、間接的なアロ認識経路を活性化し得るインタクトで可溶性のＭＨＣ分子の放出を促進する。活性化後に、ＣＤ４−陽性Ｔ細胞がマクロファージ媒介遅延型過敏（ＤＴＨ）応答を開始し、抗体産生のためにＢ細胞への支援を提供する。
【００５０】
移植後早期に、様々なＴ細胞およびＴ細胞由来サイトカイン、例えばＩＬ−２およびＩＦＮ−γが、アップレギュレートされる。後には、ＲＡＮＴＥＳ（活性化時に調節され、正常Ｔ細胞により発現および分泌される）、ＩＰ−１０、およびＭＣＰ−１のようなβ−ケモカインが発現され、これがアロ移植片の強度のマクロファージ浸潤を促進する。ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、誘発型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）および増殖因子もまたこの過程で役割を果たす。ＴＧＦ−βおよびエンドセリンを含む増殖因子は、平滑筋増殖、内膜肥厚、間質線維症、および腎臓の場合には糸球体硬化症を引き起こす。
【００５１】
Ｔ細胞誘導性サイトカインおよびマクロファージによって活性化された内皮細胞は、クラスＩＩ  ＭＨＣ、接着分子および共刺激分子を発現する。これらは抗原を提示し、それによってより多くのＴ細胞を動員し、拒絶過程を増幅できる。ＣＤ８陽性Ｔ細胞は、「致死性ヒット」を送達することによって、あるいはアポトーシスを導入することによって細胞を介する細胞傷害反応を媒介する。
【００５２】
加えて、新たな研究では、器官移植の慢性移植拒絶に線維症過程が関与していることが示唆された。例えば、慢性肺アロ移植片拒絶が、アロ移植片内皮細胞誘導ＨＩＦ−１αの相対的欠乏によって媒介され、移植器官の線維症性リモデリングをもたらすことが示された。（Ｗｉｌｋｅｓ，  Ｄ．，  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．，  １２１（６）：  ２１５５−２１５７，  ２０１１；  Ｊｉａｎｇ，  Ｘ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．，  １２１（６）：  ２３３６−２３４９，  ２０１１）。
【００５３】
３．５．慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、慢性閉塞性気管支炎、気腫、および／または慢性喘息の幾つかの組み合わせによる慢性で相対的に不可逆性の呼気気流機能不全によって代表される肺疾患の総称である。ＣＯＰＤは、疾患の一因となる喫煙を含む一連の環境性および遺伝性危険因子によって引き起こされる。
【００５４】
ＣＯＰＤの有病率は、世界全体で増しており、ＣＯＰＤは米国では４番目に高い死亡原因となった。米国では、この数十年で喫煙数が減少しているにもかかわらず、ＣＯＰＤの有病率およびＣＯＰＤ関連死亡率は増加しており、さらに数年間は増加し続けると見積もられている。加えて、ＣＯＰＤは費用がかかり、中等度またはより重度のＣＯＰＤの患者で大まかに年に一度発生する急性増悪は、最も高価な要素を構成する。
【００５５】
ＣＯＰＤでは、気流の閉塞が、肺での２つの非常に異なる病理生理学的過程のどちらかを基にして発生し得る：１）肺実質のタンパク分解および肺の弾性低下（気腫）をもたらす肺実質の炎症；および２）小気道の炎症、瘢痕形成および狭窄（「小気道疾患」）。個々の患者では、種々の遺伝的要因によって制御され得るこれらの過程の一方が優勢であり得るが、通常は両方が共存する。最終的にはこれらの過程の両方が機能障害の類似のパターン（呼気流の減少、過膨張およびガス交換異常）を生じる。
【００５６】
ＣＯＰＤの初期段階では、ＣＯＰＤ患者の肺で以下の症状が見出される：１）損傷エアロゾルによる気道上皮の裂け目、２）炎症性粘液滲出物の蓄積、３）炎症性免疫細胞による気道壁の浸潤、４）気道のリモデリング／気道壁の肥厚および管腔空間における侵食、ならびに５）気流に対する耐性の上昇。この初期段階の間、平滑筋収縮および過敏性もまた耐性を高めるが、この高められた耐性は、気管支拡張剤によって緩和される。
【００５７】
進行した段階では、ＣＯＰＤ患者は、気道壁を取り巻く上皮下の非通気性区画内に線維性結合組織の堆積を特徴的に発生する。そのような細気管支周囲の線維症は、肺膨張により生じる気道口径の拡大を制限することによって、気道閉塞の固定に寄与する。
【００５８】
３．５．１．慢性気管支炎
慢性気管支炎は、痰を生じることが認識されている他の疾患の非存在下で連続する２年間のうちの少なくとも３ヶ月間、慢性の咳および痰の生成があることと定義される。慢性気管支炎では、疫学的に気管支上皮が、粘液分泌腺の肥大および杯細胞数の増加と共に慢性炎症を示す。線毛もまた破壊され、粘膜線毛エスカレーターの効率が大きく損なわれる。粘液の粘性および粘液生成が増加し、吐出が困難になる。粘液の貯留が、感染に対する感受性を高める。
【００５９】
微視的には、炎症細胞による気道壁の浸潤が存在する。炎症に続いて、壁を肥厚させ、気道の狭窄をももたらす瘢痕化およびリモデリングが生じる。慢性気管支炎が進行すると、扁平上皮異形成（気道の内側を裏打ちする組織中の異常な変化）および線維症（気道壁の更なる肥厚および瘢痕化）が生じる。これらの変化の結果、気流が制限される。経時的に繰り返される感染および炎症が、気道壁への不可逆的な構造的損傷および瘢痕化をもたらし、より小さな抹消気道の狭窄および歪みにつながる。
【００６０】
３．５．２．気腫
気腫は、その病理学的特色に関して定義され、終末細気管支に対し遠位の終末気腔の異常な拡長を特徴とし、それらの壁の破壊および肺弾性の低下を伴う。嚢胞（幅が１ｃｍを超える水疱）が、気腫領域の直径が１ｃｍを超える場合に過剰膨張の結果として発生し得る。異常な気腔の分布によって、２つの主要な気腫パターンに分類される：膨張、および細葉全体（特に肺の下半分）の破壊をもたらす汎細葉性（汎小葉性）気腫。細葉中心部（小葉中心部）気腫は、肺の上葉および下葉上方部分に影響が及ぶ呼気細気管支周囲の損傷を含む。さらに、特定形態の気腫が、線維症に関連することが知られている。
【００６１】
気腫の破壊性過程は、主に喫煙と関係する。タバコの煙は刺激原であり、気道および肺胞の低度の炎症を生じる。タバコは４０００を超える有害化学物質を含み、それらが肺の抗プロテアーゼとプロテアーゼとの間のバランスに影響を及ぼし、永続的な損傷を引き起こすことが知られている。炎症性細胞（マクロファージおよび好中球）は、肺組織の重要な成分であるエラスチンを破壊する、エラスターゼとして知られているタンパク分解酵素を生成する。
【００６２】
肺胞または肺の空気嚢は弾性組織を含み、肺内の気道の潜在力を支援および維持する。肺胞壁の破壊は、気道の開放の維持を支援するガイロープを緩めることによって小気道を狭窄させる。正常な吸気の際、横隔膜は下方に移動する一方で肋骨ケージは外方向に移動し、生じた陰圧により空気が肺内に流入する。呼気の際、肋骨ケージおよび横隔膜は弛緩するため、肺実質の弾性反動が、空気を上方および外方に押す。肺の弾性低下および肺胞のガイロープの喪失をもたらす肺実質の破壊により、小気道が崩壊し、空気の閉じ込めが起こり、肺の過剰膨張に至る。過剰膨張は横隔膜を平坦にし、これが有効収縮の低下および肺胞効率の減少をもたらし、これらは順次、更なる空気の閉じ込めに至る。経時的に、記載されたメカニズムが重度の気流閉塞をもたらし、次の吸気の前に肺が完全に萎むには不十分な吐出になる。
【００６３】
３．５．３．慢性喘息
喘息は、自然にまたは治療により逆転できる広範囲で様々な気道閉塞に至る、気道の慢性炎症状態と定義される。慢性喘息を示すいくらかの患者では、特に、喘息と診断されなかったかもしくは管理を誤ったために喘息が未処置である場合、または喘息が特に重度である場合に、この疾患は進行して、不可逆的な気道閉塞に至る。喘息の小児は、１０人のうち１人が不可逆的な喘息を発症する可能性があるが、成人の喘息発病のリスクは４人に１人である。複数の研究で、小児および成人で彼らの喘息が適切に、特にコルチコステロイド療法により、処置されなければ、喘息は肺機能の不可逆的悪化に至る可能性があることが見出された。
【００６４】
喘息の気道炎症は経時的に、平滑筋の増加、表面上皮の破壊、コラーゲン沈着の増加、および基底膜の肥厚により気道のリモデリングを生じ得る。
【００６５】
３．６．他のタイプの線維症
他のタイプの線維症としては、膵臓および肺の嚢胞性線維症、注射線維症、心内膜心筋線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、腹膜後線維症、および腎性全身性線維症が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６６】
嚢胞性線維症（ＣＦ、ｍｕｃｏｖｉｄｏｓｉｓ、膵線維症）は、常染色体性劣性遺伝疾患である。それは、米国では最も一般的な致死性遺伝傷害の１つで、約３０，０００名が罹患し、白人人口で最も罹患率が高く３，３００名の出生のうち１名に生じる。嚢胞性線維症に関係する遺伝子は、１９８９年に同定され、嚢胞性線維症膜貫通調節因子（ＣＦＴＲ）と称されるタンパク質をコードする。ＣＦＴＲは、全身の外分泌上皮によって通常は発現され、塩素イオン、重炭酸イオンおよびグルタチオンの細胞内外への移動を調節する。嚢胞性線維症患者では、ＣＦＴＲ遺伝子の変異はＣＦＴＲタンパク質機能の変化または完全な喪失をもたらし、外分泌の浸透圧、ｐＨおよびレドックス特性の欠損を生じる。肺では、ＣＦは、気道を塞ぐ高粘性粘液分泌の存在によって症状発現する。他の外分泌器官、例えば汗腺では、ＣＦは、閉塞性表現型によっては症状発現しないが、分泌物の異常な塩組成（したがってＣＦ患者を検出する臨床的な汗の浸透圧試験）によって症状発現し得る。嚢胞性線維症患者の症状および死亡の主な原因は、進行性肺疾患である。気道の通過を妨げるＣＦ粘液の高い粘性は、分泌物の浸透圧の異常から生じると考えられ、ならびに好中球と称される炎症細胞のサブセットに由来する大量のＤＮＡ、アクチン、プロテアーゼおよび前酸化酵素の存在から生じると考えられている。実際、ＣＦ肺疾患は、ウイルス性および細菌性病原体の両方に対する初期の過活動性好中球を介した炎症反応を特徴とする。ＣＦ肺のこの過剰炎症症候群は、幾つかの根拠を有し、その中でとりわけ、炎症促進性ケモカイン、主としてＩＬ−８、と抗炎症性サイトカイン、主としてＩＬ−１０との不均衡が、主要な役割を果たすことが報告されている。Ｃｈｍｉｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｌｉｎ  Ｒｅｖ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ３（１）：５−２７，  ２００２を参照されたい。複数の研究で、嚢胞性線維症患者の気管支肺胞洗浄液中のＴＮＦ−α、ＩＬ−６およびＩＬ−１βのレベルは、健常対照の気管支肺胞洗浄液中のものより高いことが報告された（Ｂｏｎｄｆｉｅｌｄ，  Ｔ．  Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  １５２（１）：２１１１−２１１８，  １９９５）。
【００６７】
注射線維症（ＩＦ）は筋肉内注射の合併症であり、乳児および小児の四頭筋、三頭筋および臀部筋肉で生じることが多く、対象は、患部筋肉を完全に収縮させることができない。典型的には無痛であるが、進行性である。複数の研究で、糖タンパク質オステオポンチン（ＯＰＮ）が組織のリモデリングで役割を果たすこと（Ｌｉａｗ，  Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ，  １０１（７）：１４６９−１４７８，  １９９８）およびこの炎症性媒介物質がヒト単球でＩＬ−１βのアップレギュレーションおよび付随するＴＮＦ−αおよびＩＬ−６生成の増進を誘発することが報告された（Ｎａｌｄｉｎｉ，  Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １７７：４２６７−４２７０，  ２００６；Ｗｅｂｅｒ，  Ｇ．  Ｆ．，  ａｎｄ  Ｃａｎｔｏｒ，  Ｈ．  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖｉｅｗｓ．  ７（３）：２４１−２４８，  １９９６）。
【００６８】
心内膜心筋疾患（好酸球増多症候群（ＨＳ））は、血中の好酸球数の持続的増加（好酸球１５００個／ｍｍ3）を特徴とする疾患過程である。ＨＳは、同時に多くの器官を冒す。複数の研究で、ＩＬ−１β、ＩＬ−１６およびＴＮＦ−αがウイルス性心筋炎患者において高レベルで発現されることが報告された（Ｓａｔｏｈ，  Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｖｉｒｃｈｏｗｓ  Ａｒｃｈｉｖ．  ４２７（５）：５０３−５０９，  １９９６）。症状としては、心筋障害、皮膚病変、血栓塞栓症、肺疾患、神経障害、肝脾腫大症（肝臓および脾臓が同時に肥大する）および心室サイズの低下を挙げることができる。治療としては、コルチコステロイドを使用して好酸球レベルを低下させることを挙げることができる。
【００６９】
縦隔線維症（ＭＦ）は、主要な血管および気道を塞ぐ、リンパ節に集中する侵襲性石灰化線維症を特徴とする。ＭＦは、ヒストプラズマ症の後期合併症である。線維症のネズミモデルにおける複数の研究で、ＩＬ−１０およびＴＮＦ−αが有意に上昇することが報告された（Ｅｂｒａｈｉｍｉ，  Ｂ  ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  １５８：２１１７−２１２５，  ２００１）。
【００７０】
骨髄線維症（骨髄様異形成、慢性特発性骨髄線維症、原発性骨髄線維症）は、骨髄が線維化を受ける骨髄疾患である。骨髄線維症は、進行性の骨髄不全に至る。平均生存は５年であり、死亡原因は感染、出血、器官機能不全、門脈圧促進症、および白血病性形質転換を含む。ウイルス性骨髄線維症の動物モデルでＴＮＦ−αおよびＩＬ−６レベルが上昇することが、報告されている（Ｂｏｕｓｓｅ−Ｋｅｒｄｉｌｅｓ，  Ｍ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｎ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．  ７８：４３４−４４４，  １９９９）。
【００７１】
腹膜後線維症（オルモンド病）は、腹膜後腔における線維組織の増殖を特徴とする疾患である。腹膜後腔は、腎臓、大動脈、尿路、および他の構造を含む身体区画である。ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αが腹膜後線維症の発病に重要な役割を有することが、報告されている（Ｄｅｍｋｏ，  Ｔ．，  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ８：６８４−６８８，  １９９７）。腹膜後線維症の症状としては、背下部の痛み、腎不全、高血圧、および深部静脈血栓症が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７２】
腎性全身性線維症（ＮＳＦ、腎性線維化皮膚障害）は、皮膚、関節、眼および内部器官の線維症を含む。ＮＳＦは、ガドリニウムへの暴露と関係し得る。患者は、線維症結節および斑を有する広域の皮膚硬化を発症する。運動範囲の制限を伴う屈曲拘縮もまた、生じ得る。ＮＳＦは、皮膚線維芽細胞および樹状突起細胞の増殖、肥厚コラーゲン束、弾性線維増加、およびムチンの沈着を示す。幾つかの報告で、炎症促進性状態は腎性全身性線維症を引き起こす素因を提供すること（Ｓａｘｅｎａ，  Ｓ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｉｎｔ．  Ｕｒｏｌ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ４０：７１５−７２４，  ２００８）、およびＴＮＦ−αレベルが腎性全身性線維症の動物モデルで上昇すること（Ｓｔｅｇｅｒ−Ｈａｒｔｍａｎｎ，  Ｔ．，  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｘｐｅｒ．  Ｔｏｘ．  Ｐａｔｈｏｌ．  ６１（６）：  ５３７−５５２，  ２００９）が示唆されている。
【００７３】
４．危険因子
４．１．主要な危険因子
４．１．１．喫煙
線維症性気道疾患に対して多数の危険因子が同定されているが（それらの幾つかはその因果関係において重要な役割を果たし得る）、タバコの煙は、ＣＯＰＤの第一の最も重要な原因である。喫煙するタバコの数が多いほど、線維症性気道疾患の発症リスクは高くなる。線維症性気道疾患を発症する人の大多数は喫煙者であり、彼らの肺機能は、非喫煙者の肺機能よりも急速に低下する。
【００７４】
最も効果的な介入は、好ましくは初期段階での、喫煙の停止である。喫煙を停止した喫煙者は、失われた肺機能を回復することはないが、低下率は、非喫煙者のそれに復帰し得る。初期段階における喫煙停止は、どれほど多くの試みが停止のために必要とされるかにかかわらず予後を改善する。線維症性気道疾患を発症させる個々の感受性は、喫煙との関係で変動する。およそ１５％の喫煙者が臨床的に重要なＣＯＰＤを発症し、一方、およそ５０％はいかなる症状も発症しない。肺機能の低下は漸進的であり、患者は短縮呼吸の症状に適合し得るか、または症状に気づかない場合があるため、疾患は通常、遅れて診断される。複数の研究で、１日あたりに喫煙するタバコの本数に応じて、喫煙者の２４〜４７％が気道閉塞を発症することが示された。受動喫煙への暴露は、この疾患に対する感受性を高める。
【００７５】
４．１．２．アルファ−１アンチトリプシン欠乏症
この希少な遺伝性症状は、肺における重要なアンチプロテアーゼ防御系の１つの完全な欠如をもたらす。それは、人口の１：４０００が罹患する劣性障害である。アルファ−１アンチトリプシン欠乏症の患者は、２０〜４０歳の間の若年期に気腫を発症するリスクがあり、多くの場合この疾患の明確な家族歴を有する。この欠乏症および気腫を有する患者は、各親から１つの異常な遺伝子を受け継ぎ、いわば両親はこの遺伝子の保持者である。そのような両親は、血中に正常レベルの半分のアンチトリプシンを有し、それは、気腫の発症を防御するのに十分であり得る。同様に、アルファ−１アンチトリプシン欠乏症患者の小児は全て、１つの異常な遺伝子を保有するが、発症しないであろう。アルファ−１アンチトリプシン欠乏症の２つの一般的形態は、アルファ−１アンチトリプシンをコードする遺伝子の点突然変異から生じる。
【００７６】
４．２．関連する危険因子
４．２．１．環境汚染
線維症性気道疾患が大気汚染によって増悪し得るという強力な証拠が存在するが、線維症性気道疾患の疫学における汚染の役割は、喫煙の役割と比較すると小さい。石炭および石油化石燃料の燃焼によって生成される重い粒子物質、炭素、および二酸化硫黄を含む大気汚染は、線維症性気道疾患の発症の重要な原因または補因子である。これらは、主として乗り物の排気ガスに由来し、光化学汚染物質、例えばオゾンは、非難されるべきである。特に女性にとって、発展途上国において、換気の悪い家庭での料理および暖房のために燃焼されるバイオマス燃料由来の室内の空気汚染は、線維症性気道疾患、例えばＣＯＰＤの重要な危険因子であり得る。
【００７７】
４．２．２．職業的因子
労働者が石炭、シリカおよび陽イオンに暴露される幾つかの職業、例えば鉱夫、織物職人およびセメント作業員は、線維症性気道疾患のリスク増大と関係する。１９５０年代以来、カドミウム、重金属、および溶接の煙への暴露は、気腫の原因と認識されている。
【００７８】
埃っぽい職業の多くは、ガスまたは煙への暴露よりも危険であり、慢性気管支炎および気道閉塞性疾患の様々な形態の発症と関係している。造船所の溶接工およびコーキン工、ならびにセメントの埃に暴露される建設業作業員もまた、線維症性気道疾患の発症リスクの増大を有することが知られている。
【００７９】
４．２．３．小児の呼吸器感染
生後１年目の胸部感染、例えば肺炎および細気管支炎は、後の人生におけるＣＯＰＤ発症の素因となり得る。これは、若年成人に肺の成長が終了するまで誕生時の呼吸器系の不完全な発育の結果であり得る。発育中の肺が損傷を受けると、最大の潜在的肺機能が達成されず、若年期にＣＯＰＤの症状を発症する。
【００８０】
４．３．他の危険因子
肺線維症などの線維性気道疾患の因果において役割を果たし、そして／またはこの疾患の初期症状として働く他の危険因子としては、過敏症肺炎（最も多くは細菌、真菌、または動物生成物が混入した埃の吸引からもたらされる）、幾つかの典型的な結合組織疾患（例えば関節リウマチ、全身エリテマトーデス（ＳＬＥ）および強皮症）、結合組織と関係する他の疾患（例えばサルコイドーシスおよびウェゲナー肉芽腫）、感染、特定の医薬（例えばアミオダロン、ブレオマイシン、ブスルファン、メトトレキサート、およびニトロフラントイン）、および胸部放射線療法が挙げられる。
【００８１】
５．肝組織リモデリング
肝臓への慢性的損傷は壊死および実質組織を誘導し、結果的に肝硬変、肝細胞癌および肝線維症の元となる細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の沈着増加を誘発するため、肝組織リモデリングは、臨床的に関心を寄せられている（Ｍｏｓｈａｇｅ  Ｈ．，  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  １９９７；  １８１：  ２５７−２６６）。リモデリング中に、肝臓は、本来の構造の再配列を受け、その結果、空間的秩序が変化し組織学的境界が再画定される（Ｇｉａｎｎｅｌｌｉ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｉｓｔｏｌ．  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ．  ２００３；  １８：  １２６７−１２７４）。組織境界の破壊および組織構造の再配列は、ＥＣＭ成分に対するタンパク質分解活性を有する亜鉛エンドエプチダーゼの大きなファミリーであるマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）によって調節されるようである（Ｇｉａｎｎｅｌｌｉ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｉｓｔｏｌ．  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ．  ２００３；  １８：  １２６７−１２７４。
【００８２】
ＭＭＰファミリーの一メンバーであるＭＭＰ２は、ヒトの全身に見出され、ＥＣＭに対して広範囲の作用を有する（Ｇｉａｎｎｅｌｌｉ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｉｓｔｏｌ．  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ．  ２００３；  １８：  １２６７−１２７４）。それはプロエンザイムとして分泌され、メタロプロテイナーゼ−２の組織阻害物質（ＴＩＭＰ２）であるＭＭＰ阻害物質の支援を受け膜型ＭＭＰ（ＭＴ１−ＭＭＰ）によって細胞表面で活性化される（Ｓｔｒｏｎｇｉｎ  Ａ．  Ｙ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  １９９３；  ２６８：  １４０３３−１４０３９）。ＭＭＰ２のタンパク質分解活性は、ＴＩＭＰ２の存在によって均衡が保たれており、ＴＩＭＰ２は、ＭＴ１−ＭＭＰへのＭＭＰ２の結合を容易にすることによってＭＭＰ２を活性化するだけでなく、ＭＭＰ−２を阻害し、ＥＣＭタンパク質分解の調節においてフィードバックシステムを生成する（Ｆｒｉｄｍａｎ  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．  １９９３；  ２８９（Ｐｔ  ２）：  ４１１−４１６）。
【００８３】
炎症および炎症媒介物質もまた、肝組織リモデリングにおいて役割を担う（Ｇｉａｎｎｅｌｌｉ  Ｇ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｉｓｔｏｌ．  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ．  ２００３；  １８：  １２６７−１２７４）。腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−α、インターロイキン（ＩＬ）−１β、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）−β１および血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）を含む多数の異なるサイトカインが、慢性肝炎の際に肝実質においてアップレギュレートされることが、報告されている（Ｃａｓｔｉｌｌａ  Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  １９９１；  ３２４：  ９３３−９４０）。サイトカインのネットワークの改変が、炎症を媒介することにおいてだけでなく、ＭＭＰおよびＴＩＭＰの発現をモジュレートすることにおいても役割を担い、それによりＥＣＭタンパク質の局所タンパク質分解に影響を及ぼすと考えられている（Ｋｎｉｔｔｅｌ  Ｔ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｈｅｐａｔｏｌ．  １９９９；  ３０：  ４８−６０）。
【００８４】
５．１．肝線維症
肝線維症の病因は、コラーゲン原線維および他の細胞外マトリックスタンパク質の著しい沈着を含む。それは、エタノール摂取、ウイルス感染、薬物、毒素、胆汁うっ滞および代謝障害などの要因によって誘発される様々な持続的肝障害に応答した創傷治癒の動的過程である。肝線維症は、肝構造を歪め、内皮細胞開窓の数を減少させ、かつ門脈圧亢進症を誘発する（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。重要な事象は、静止期の肝星細胞の活性化および筋線維芽細胞様細胞への形質転換、続いてタンパク質、例えばα−平滑筋アクチン、間質コラーゲン、マトリックスメタロプロテイナーゼ、メタロプロテイナーゼの組織阻害物質およびプロテオグリカン、のアップレギュレーションである（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。酸化ストレスは、肝線維症の発病への主要な寄与因子であり、それは典型的には、抗酸化防御の低下に関連する（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。現在、進行した肝線維症の効果的治療は存在しない。その早期段階では、肝線維症は原因薬物の中止によって回復可能であり、肝線維形成の過程の理解が近年に発展して、進行した線維症からの回復能力が可能であることが示唆されている（Ｐｅｌｌｉｃｏｒｏ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ  ＆  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｐａｉｒ  ２０１２，  ５（Ｓｕｐｐｌ  １）：  Ｓ２６；  Ｂｅｎｙｏｎ  Ｒ  Ｃ  ａｎｄ  Ｉｒｅｄａｌｅ  Ｊ  Ｐ，  Ｇｕｔ  ２０００；  ４６：  ４４３−４４６  （Ａｐｒｉｌ））。
【００８５】
５．１．１．病因論
ほとんどの慢性肝疾患は線維症に関連し、実質損傷および炎症を特徴とする。アルコール依存症、慢性ウイルス性肝炎（ＨＢＶおよびＨＣＶ）、肥満、自己免疫性肝炎、寄生虫疾患（例えば、住血吸虫病）、代謝障害（例えば、ヘモクロマトーシスおよびウィルソン病）、胆道疾患、毒素および化学薬品への持続的暴露ならびに薬物誘導性慢性肝疾患が、肝線維症の最も一般的な原因である（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。
【００８６】
５．１．１．１．アルコール摂取
アルコール摂取は世界全体での慢性肝疾患の病原性における主要な原因であり、結果的に脂肪肝、アルコール性肝炎、線維症／硬変、および肝細胞癌を生じる（Ｍｉｌｌｅｒ  Ａ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｌｃｏｈｏｌｉｓｍ−Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２０１１；  ３５（５）：  ７８７−７９３）。アルコール代謝産物であるアセトアルデヒドは、トランスフォーミング増殖因子β１（ＴＧＦβ１）の分泌を増加させ、肝臓の重要なコラーゲン産生細胞である肝星細胞（ＨＳＣ）においてＴＧＦβ  ＩＩ型受容体発現を誘導する（Ａｎａｎｉａ  Ｆ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｃｈ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  １９９６；  ３３１（２）：  １８７−１９３）。ＴＧＦβ１は、脂肪過多症および脂肪性肝炎患者でのアルコール性肝疾患（ＡＬＤ）の進行における重大な因子であり、アルコール誘導性肝線維症の媒介物質として大きな役割を担う（Ｗｅｎｇ  Ｈ  Ｌ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００９；  ５０（１）：  ２３０−２４３）。アセトアルデヒドはまた、Ｓｍａｄ２ではなくＳｍａｄ３のリン酸化を選択的に誘導する（Ｇｒｅｅｎｗｅｌ  Ｐ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２０００；  ３１（１）：  １０９−１１６）。エタノールおよびアセトアルデヒドは両者とも、ＣＯＬ１Ａ２プロモータを誘導し、コラーゲンＩ型タンパク質発現をアップレギュレートする（Ｃｈｅｎ  Ａ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．  ２００２；  ３６８（Ｐｔ  ３）：  ６８３−６９３）。
【００８７】
肝アルコール代謝は、活性酸素（ＲＯＳ）を生成して、有意な細胞死を誘発する（Ｐａｒｏｌａ  Ｍ  ａｎｄ  Ｒｏｂｉｎｏ  Ｇ，  Ｊ．  Ｈｅｐａｔｏｌ．  ２００１；  ３５（２）：  ２９７−３０６）。酸化ストレスは、肝細胞の壊死および／またはアポトーシスを促進する。肝細胞内でのＲＯＳの産生は、それが非アルコール性脂肪性肝疾患および非アルコール性脂肪性肝炎において生じるため、代謝状態の改変の結果であり得る（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。あるいはそれは、アルコール性脂肪性肝炎でのようにエタノール代謝から生じる可能性があり、主にミトコンドリア電子輸送系、チトクロムＰ４５０２Ｅ１（ＣＹＰ２Ｅ１）などのＰ４５０アイソフォーム、損傷されたミトコンドリア、キサンチンオキシダーゼ、ＮＡＤＰＨオキシダーゼおよび脂質過酸化最終産物の生成によりＲＯＳが生成される（Ｈａｏｒａｈ  Ｊ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．  Ｂｉｏｌ．  Ｍｅｄ．  ２００８；  ４５（１１）：  １５４２−１５５０）。加えて、慢性アルコール摂取は、グルタチオンレベルを低下させ、したがって肝障害に寄与することが知られている（Ｃｅｄｅｒｂａｕｍ  Ａ  Ｉ，  Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．  ２０１０；  １６（１１）：  １３６６−１３７６）。損傷された隣接細胞によって放出されるＲＯＳ由来媒介物質は、肝星細胞（ＨＳＣ）の挙動に直接影響を及ぼし得る。ＲＯＳは、多数の重要なシグナル伝達経路ならびにｃ−ｊｕｎ  Ｎ−末端キナーゼ（ＪＮＫ）、アクチベータータンパク質１（ＡＰ−１）および核因子κＢ（ＮＦκＢ）を含む転写因子の活性化をおそらく介して、プロコラーゲンＩ型、単球走化性タンパク質１（ＭＣＰ−１）およびメタロプロテイナーゼ−１の組織阻害物質（ＴＩＭＰ１）を含む、線維化に関係する重要な遺伝子の発現をアップレギュレートする（Ｂａｔａｌｌｅｒ  Ｒ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ２００５；  １１５（２）：  ２０９−２１８）。
【００８８】
５．１．１．２．慢性ウイルス性肝炎
慢性Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）およびＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は、世界全体で最も一般的な肝臓疾患の原因であり、慢性感染の個体はそれぞれ３億５千万人および１億７千万人と推定される（Ｃｕｓｔｅｒ  ｂ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．  ２００４；  ３８（１０）：  Ｓ１５８−Ｓ１６８）。両方の症例とも、顕著な慢性肝障害があり、続いて進行した肝線維症へと進行する。
【００８９】
５．１．１．３．肝線維症の他の原因
肝線維症に寄与する他の要因は肥満および脂肪過多症であり、それらは非アルコール性脂肪性肝疾患および慢性脂肪性肝炎に至る可能性がある。非アルコール性脂肪性肝疾患は、発展途上国での非肥満個体においても報告されている（Ｄａｓ  Ｋ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２０１０；  ５１（５）：  １５９３−１６０２）。
【００９０】
自己免疫性肝炎は、肝細胞におけるヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩＩの異常な提示の結果であり、宿主肝臓に対する細胞媒介性免疫応答を誘発し、これは肝線維症に至る可能性がある（Ｌｉｍ  Ｙ  Ｓ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００８；  ４８（１）：  １３３−１３９）。住血吸虫病のような寄生虫感染もまた、進行した肝線維症および門脈圧亢進症を惹起することが示されている（Ａｎｄｅｒｓｓｏｎ  Ｋ  Ｌ  ａｎｄ  Ｃｈｕｎｇ  Ｒ  Ｔ，  Ｃｕｒｒ．  Ｔｒｅａｔ．  Ｏｐｔｉｏｎｓ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．，  ２００７；  １０（６）：  ５０４−５１２）。
【００９１】
ヘモクロマトーシスおよびウィルソン病などの代謝障害は、慢性肝炎および線維症を典型的に伴う（Ｌｅｆｋｏｗｉｔｃｈ  Ｊ  Ｈ，  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．，  ２００６；  ２２（３）：  １９８−２０８）。遺伝性ヘモクロマトーシスにおいて、肝臓を含む組織および臓器における鉄の過剰な吸収および蓄積が、ＨＦＥ（高鉄含有）遺伝子の突然変異に関係する（Ｆｅｄｅｒ  Ｊ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｈｅｐａｔｏｌ．，  ２００３；  ３８（６）：  ７０４−７０９）。鉄の病的蓄積は酸化ストレスを増悪し、脂質過酸化の増加をもたらす。これはオルガネラ膜の破壊をもたらし、次に肝細胞壊死および／またはアポトーシスを介する細胞死をもたらす（Ｓｉｄｏｒｓｋａ  Ｋ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．，  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｂｉｏ．  Ａｎｄ  Ｂｉｏｎａｎｏｔｅｃｈ．，  ２０１１；  ９２（１）：  ５４−６５）。ウィルソン病または肝レンズ核変性症は、肝臓での銅蓄積に至る遺伝的障害であり、銅を輸送するＡＰＴアーゼ（ＡＴＰ７Ｂ）における突然変異を原因とする（Ｚｈａｎｇ  Ｓ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｕｍ．  Ｍｏｌ．  Ｇｅｎｅｔ．，  ２０１１  Ａｕｇ  １５；  ２０（１６）：  ３１７６−３１８７）。ウィルソン病患者は、ペルオキシソーム数の増加、細胞質脂質の液滴および高電子密度のリソゾームに囲まれた脂質胞により形成される特徴的な細胞形質小体であるリポリソゾームの存在と関連する、重大なミトコンドリア変化によって誘発される肝線維症を特徴とする。核は多くの場合、核原形質の組織破壊およびグリコーゲン様封入体に関与する（Ｆａｎｎｉ  Ｄ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２０１４；  ＤＯＩ：  １０．２１７４／０９２９８６７３２１６６６１４０６０１１６３２４４）。
【００９２】
胆管閉塞による胆汁うっ滞は、慢性門脈線維症そして最終的に肝硬変をもたらす。その上、毒素またはＮ−ニトロソジメチルアミン、四塩化炭素（ＣＣｌ4）もしくはチオアセトアミドなどの化学薬品への慢性暴露は、実験動物モデルにおいて重度の肝線維症をもたらす（Ｇｅｏｒｇｅ  Ｊ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  ２００７；  １４（１０）：  ７９０−８０３；  Ｄｏｍｏｅｎｉｃａｌｉ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｈｅｐａｔｏｌ．，  ２００９；  ５１（６）：  ９９１−９９９；  Ｓａｌｇｕｅｒｏ  Ｐ  Ｒ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｌａｂ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ２００８；  ８８（１１）：  １１９２−１２０３）。ヒトにおけるこれらの化学薬品への暴露はまれであり、一般にこれらの化学薬品が日常的に用いられている業界で起こる（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。
【００９３】
５．２．肝線維症の病原性に関与する細胞型
５．２．１．肝星細胞
肝星細胞（ＨＳＣ）は、肝細胞と類洞内皮細胞の間のディッセ腔に存在する（Ｆｒｉｅｄｍａｎ  Ｓ  Ｌ，  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，  ２００８；  １３４（６）：  １６５５−１６６９）。静止期のＨＳＣは、デスミンの顕著な発現およびビタミンＡ貯蔵を特徴とする。肝障害の後、ＨＳＣはビタミンＡ量を損失し、α−平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）の発現を増加させ、筋線維芽細胞様の表現型を獲得し、増殖性、運動性、線維形成促進性、および収縮性になり、多数の粗面小胞体を示す（Ｇｒｅｓｓｎｅｒ  Ａ  Ｍ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  １９９６；  ４９：  Ｓ３９−Ｓ４５）。
【００９４】
多くの因子が、ＨＳＣの活性化に寄与することが知られている。肝細胞への損傷およびクッパー細胞の活性化は、依然としてＨＳＣ活性化を駆動する一次エフェクターと見なされている（Ｎｉｅｔｏ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  ２００２；  ２７７（１２）：  ９８５３−９８６４；  Ｎｉｅｔｏ  Ｎ，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００６；  ４４（６）：  １４８７−１５０１）。脂質過酸化産物などの損傷された幹細胞から放出される媒介物質、薬物または肝毒素の中間代謝産物、アルコール代謝からのアセトアルデヒドおよび１−ヒドロキシエチルラジカル、ならびにＲＯＳ（例えば、過酸化水素およびスーパーオキシドラジカル）は、ＨＳＣ活性化の強い誘導物質である（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。
【００９５】
活性化されたクッパー細胞はまた、ＨＳＣ活性化に重要なＲＯＳおよびサイトカインを放出する（Ｎｉｅｔｏ  Ｎ，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００６；  ４４（６）：  １４８７−１５０１）。それらは、従来からＨＳＣへの重要な線維形成および増殖刺激物質と見なされてきた２種の強力な線維形成促進性サイトカイン：ＴＧＦβおよび血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）の主たる供給源である（Ｔｓｕｋａｍｏｔｏ  Ｈ，  Ａｌｃｏｈｏｌｉｓｍ−Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  １９９２；  ２３（５）：  ９１１−９１６）。クッパー細胞の食細胞活性は、ＨＳＣをさらに活性化しそれらの線維形成能力を誘導し得るＲＯＳを多量に生成する。さらに、相乗作用してクッパー細胞を活性化するエタノールとアラキドン酸との添加が、ＴＮＦα、還元型グルタチオン、およびＴＧＦβを含むメカニズムによって線維形成反応をモジュレートすることが示された（Ｃｕｂｅｒｏ  Ｆ  Ｊ  ａｎｄ  Ｎｉｅｔｏ  Ｎ，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００８；  ４８（６）：  ２０２７−２０３９）。
【００９６】
同様に、チトクロム４５０  ２Ｅ１依存性のＲＯＳ生成が、肝細胞とＨＳＣとの共培養におけるコラーゲンＩ型タンパク質合成の増加にとって重要であることが示された（Ｎｉｅｔｏ  Ｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００２；  ２７７（１２）：  ９８５３−９８６４）。
【００９７】
５．２．２．門脈線維芽細胞
健常な肝臓における門脈結合組織は、静止期門脈線維芽細胞によって取り囲まれているが、この線維芽細胞は、門脈線維症に関与する肝細胞の二番目の集団を構成する（Ｔｕｃｈｗｅｂｅｒ  ｂ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，  １９９６；  ７４（１）：  ２６５−２７８）。小さな門脈血管に由来して、それらはＨＳＣとは異なるマーカ（例えば、エラスチン）を発現する（Ｌｉ  Ｚ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００７；  ４６（４）：  １２４６−１２５６）。胆管細胞の増殖は多くの場合、門脈線維芽細胞の増殖を伴い、門脈線維芽細胞は胆管構造の周辺で玉ネギ状形態を形成し、筋線維芽細胞表現型を獲得する。これらの細胞は、門脈域での細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の早期沈着に関与すると考えられている（Ｄｅｓｍｏｕｌｉｅｒｅ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｌａｂ  Ｉｎｖｅｓｔ，  １９９７；  ７６（６）：  ７６５−７７８）。
【００９８】
５．２．３．骨髄由来間葉系幹細胞
骨髄由来幹細胞が肝線維症の進行および退縮の両方で動員されることが、エビデンスによって示唆されている。ＣＣｌ4誘導性肝線維症からの退縮の際に、骨髄由来間葉系幹細胞が線維性の肝臓中に遊走し、そこでそれらはマトリックスメタロプロテイナーゼ−１３（ＭＭＰ１３）およびＭＭＰ９を発現し得る（Ｃｈｅｎｇ  Ｙ  Ｊ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．，  ２００９；  ８５（１３−１４）：  ５１７−５２５）。加えて、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）および肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）処置は、線維性の肝臓中への骨髄由来細胞の遊走を増進し、肝線維症の退縮を促進する（Ｈｉｇａｓｈｉｙａｍａ  Ｒ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００７；  ４５（１）：  ２１３−２２２）。肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）が顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）と共に過剰発現されるとＭＭＰ９発現が相乗的に刺激され、続いて線維性瘢痕の分解が促進される（Ｂｉｒｄ  Ｔ  Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓ．，  ２００８；  ３３１（１）：  ２８３−３００）。骨髄由来細胞の顕著な寄与がヒト肝線維症において示されているが、どの型の間葉系幹細胞が関与するかについては不明である（Ｆｏｒｂｅｓ  Ｓ  Ｊ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，  ２００４；  １２６（４）：  ９５５−９６３）。
【００９９】
５．２．４．肝細胞および胆管上皮細胞
上皮間葉転換（ＥＭＴ）は、常在の肝細胞または胆管上皮細胞のいずれかに由来する傷害関連の間葉細胞の可能な供給源として浮上している（Ｄｏｏｌｅｙ  Ｓ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，  ２００８；  １３５（２）：  ６４２−６５９；  Ｎｉｔｔａ  Ｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００８；  ４８（３）：  ９０９−９１９）。ＥＭＴを誘導する主な分子は、ＴＧＦβ、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、インスリン様増殖因子ＩＩ（ＩＧＦ−ＩＩ）および線維芽細胞増殖因子−２（ＦＧＦ−２）である（Ｚｅｉｓｂｅｒｇ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００７；  ２８２（３２）：  ２３３３７−２３３４７）。アルブミンを発現する幹細胞はまた、インビボでＣＣｌ4に応答して、またはインビトロでＴＧＦβ１に応答して、線維芽細胞特異性タンパク質−１（ＦＳＰ１）を発現する（Ｚｅｉｓｂｅｒｇ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００７；  ２８２（３２）：  ２３３３７−２３３４７）。肝細胞がインビトロでＴＧＦβ１に応答してＣＯＬ１Ａ１を発現すること、およびＳｍａｄシグナル伝達がＥＭＴを媒介することが、報告されている（Ｋａｉｍｏｒｉ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００７；  ２８２（３０）：  ２２０８９−２２１０１）。
【０１００】
胆管上皮細胞は、肝臓線維形成においてＥＭＴに関与することが記載されている。原発性胆汁性肝硬変において、胆管の細胞が、線維芽細胞の早期マーカーである線維芽細胞特異性タンパク質−１（ＦＳＰ１）およびビメンチンを発現することが示されている（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ  Ｈ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００７；  ４５（４）：  ９７７−９８１）。胆管上皮細胞におけるＥＭＴの結果は門脈線維芽細胞のプールの増幅であり、門脈線維症に著しく寄与する。ヒト胆管上皮細胞を用いたインビトロ試験で、これらの臨床観察が確認された（Ｒｙｇｉｅｌ  Ｋ  Ａ，  Ｌａｂ．  Ｉｎｖｅｓｔ．，  ２００８；  ８８（２）：  １１２−１２３）。したがってＥＭＴは、慢性胆汁うっ滞性肝疾患の病原性に関係するメカニズムと見なすことができる。
【０１０１】
５．２．５．線維細胞
線維細胞は、皮下創傷における組織修復と最初に関係づけられた線維芽細胞様の特性を有する、循環する骨髄由来のＣＤ３４+細胞亜集団である（Ｂｕｃａｌａ  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ．  Ｍｅｄ．  １９９４；  １（１）：  ７１−８１）。それらは、間葉細胞のマーカーを発現する白血球の循環するプールの約１％分率を構成する（Ｍｏｏｒｅ  ｂ  ｂ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．，  ２００５；  １６６（３）：  ６７５−６８４）。骨髄由来循環ＣＤ３４+線維細胞は、ヒトにおける胆管症のための、再現性があり十分に特徴づけられた非外科的マウスモデルであるＡｂｃｂ４−／−マウスにおいて、肝臓線維化の重要な媒介物質であると仮定された（Ｒｏｄｅｒｆｅｌｄ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２０１０；  ５１（１）：  ２６７−２７６）。
【０１０２】
５．３．肝線維症の分子病原性
５．３．１．細胞−細胞および細胞−マトリックス相互作用
正常な細胞−細胞および細胞−マトリックス相互作用における改変が、肝線維症の病原性において大きな役割を担う。正常な細胞−細胞および細胞−マトリックス相互作用が、肝細胞壊死または炎症細胞浸潤によって改変されると、線維形成性応答を惹起する新しい相互作用が確立される（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。線維性の肝臓において、著しい量的および質的変化が、門脈周辺および類洞周辺エリアでのＥＣＭの構成において生じる（Ｚｅｉｓｂｅｒｇ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  ２００６；  ２８３（１−２）：  １８１−１８９）。線維症性の瘢痕は、典型的には線維性コラーゲンＩ型およびＩＩＩ型、プロテオグリカン、フィブロネクチンおよびヒアルロン酸で構成されている（Ｇｅｏｒｇｅ  Ｊ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ＆  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，  ２００４；  ３６（２）：  ３０７−３１９）。結果として、肝臓の生理学的構造における改変が、特にディッセ腔において起こり、そこで低電子密度のＥＣＭが、線維性コラーゲンおよびフィブロネクチンに富むＥＣＭと交換される。これが、内皮細胞開窓の損失、隣接する細胞間の溶質交換の障害、肝細胞機能の改変および続いての非実質細胞の損傷をまねく（Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ−Ｇｅａ  Ｖ．  ａｎｄ  Ｆｒｉｅｄｍａｎ  Ｓ  Ｌ，  Ａｎｎｕ．  Ｒｅｖ．  Ｐａｔｈｏｌ．  ２０１１；  ６：  ４２５−４５６）。
【０１０３】
５．３．２．酸化ストレス
本明細書で用いられる用語「酸化ストレス」は、活性酸素（フリーラジカル）の産生と抗酸化防御との間の均衡の乱れを指す。
【０１０４】
慢性ＨＢＶ感染および長期アルコール摂取は、活性酸素（ＲＯＳ）の産生増加を通して細胞損傷を誘導する（Ｍｕｒｉｅｌ  Ｐ，  Ｈｅｐａｔｏｌ．  Ｉｎｔ．  ２００９；  ３（４）：  ５２６−５３６）。
【０１０５】
酸化ストレスは、ミトコンドリア膜透過性遷移を助長し、肝細胞壊死および／またはアポトーシスを促進し得る（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。いくつかの臨床的に関連する状態において、肝細胞内でのＲＯＳの産生は、非アルコール性脂肪性肝疾患および非アルコール性脂肪性肝炎でのような改変された代謝状態、またはアルコール性脂肪性肝炎において生じるような顕著なエタノール代謝を表し得ると仮定された（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。
【０１０６】
ＲＯＳは、主にミトコンドリア電子輸送系を介して、またはチトクロムＰ４５０（ほとんどがチトクロムＰ４５０  ２Ｅ１）、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ、キサンチンオキシダーゼの活性化を介して、またはミトコンドリアの損傷を介して産生される。産生されたＲＯＳは、ＨＳＣおよび筋線維芽細胞の挙動に直接影響を及ぼし得る（Ｔｉｌｇ  Ｈ  ａｎｄ  Ｈｏｔａｍｉｓｌｉｇｉｌ  Ｇ  Ｓ，  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，  ２００６；  １３１（３）：  ９３４−９４５；  Ｎｉｅｔｏ  Ｎ，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２００６；  ４４（６）：  １４８７−１５０１）。ＲＯＳは、シグナル伝達経路ならびにＪＮＫ、アクチベータータンパク質−１（ＡＰ−１）およびＮＦκＢを含む転写因子の活性化を介して、ＣＯＬ１Ａ１、ＣＯＬ１Ａ２、ＭＣＰ１およびＴＩＭＰ１などの重要な線維症関連遺伝子の発現をアップレギュレートする（Ｂａｔａｌｌｅｒ  Ｒ  ａｎｄ  Ｂｒｅｎｎｅｒ  Ｄ  Ａ，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，  ２００５；  １１５（２）：  ２０９−２１８）。ＨＳＣおよび筋線維芽細胞におけるＲＯＳ産生は、アンギオテンシンＩＩ、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、ＴＧＦβおよびレプチンを含む複数の公知の線維形成促進性媒介物質に応答して起こる（Ｄｅ  Ｍｉｎｉｃｉｓ  Ｓ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，  ２００６；  １３１（１）：  ２７２−２７５）。全体的に見ると、脂質抗酸化の増進と合わせたＧＳＨ、カタラーゼまたはＳＯＤなどの抗酸化防御システムの低下は、コラーゲンＩ型タンパク質発現を増進することによって、線維形成促進性応答をもたらす（Ｇｅｏｒｇｅ  Ｊ，  Ｃｌｉｎ．  Ｃｈｉｍ．  Ａｃｔａ，  ２００３；  ３３５（１−２）：  ３９−４７）。
【０１０７】
ｐ３８有糸分裂促進プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）は、炎症促進性サイトカインのアップレギュレートにおいて必須である場合があり、トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦβ）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、インターロイキン１β（ＩＬ−１β）、および酸化ストレスによって活性化され得る（Ｔｏｒｍｏｓ  Ａ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  ２０１３；  ５７（５）：  １９５０−１９６１）。ｐ３８の基質は、ＭＡＰＫＡＰキナーゼ２（ＭＫ２）およびＭＫ５などのプロテインキナーゼ、ならびにＡＴＦ２、ｐ５３、およびＭｉｔｆなどの転写因子を含む（Ｈｕｉ  Ｌ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ，  ２００７；  ６（２０）：  ２４２９−２４３３）。これらの多様なターゲットは、活性化ｐ３８シグナルを、様々なタイプの細胞機能、例えば分化、アポトーシス、サイトカイン産生、および細胞周期制御へ媒介する（Ｎａｋａｇａｗａ  Ｈ  ａｎｄ  Ｍａｅｄａ  Ｓ，  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  ２０１２；  ｄｏｉ：  １０．１１５５／２０１２／１７２８９４）。近年のインビボ試験で、ｃ−Ｊｕｎ  ＮＨ２−末端キナーゼ（ＪＮＫ）およびｐ３８に向けられるストレス活性化有糸分裂促進プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達が、炎症媒介性肝臓障害および補填的な肝細胞増殖において中心的役割を担うことが示された（Ｓａｋｕｒａｉ  Ｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＮＡＳ，  ２００６；  １０３（２８）：  １０５４４−１０５５１；  Ｈｕｉ  Ｌ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，  ２００７；  ３９（６）：  ７４１−７４９；  Ｈｕｉ  Ｌ，  ｅｔ  ａｌ．，  ＪＣＩ，  ２００８；  １１８（１２）：  ３９４３−３９５３；  Ｓａｋｕｒａｉ  Ｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ，  ２００８；  １４（２）：  １５６−１６５；  Ｍａｅｄａ  Ｓ，  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，  ２０１０；  ｄｏｉ：  １０．１１５５／２０１０／３６７６９４；  Ｗａｇｎｅｒ  Ｅ  Ｆ  ａｎｄ  Ｎｅｂｒｅｄａ  Ａ  Ｒ，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ，  ２００９；  ９（８）：  ５３７−５４９；  Ｍｉｎ  Ｌ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ２０１１；  ２１（１）：  １０−２０）。
【０１０８】
５．３．３．ＭＭＰおよびＴＩＭＰ
ＥＣＭは、繰り返しリモデリングに供される高度に動的な環境である。ＥＣＭリモデリングが過剰または未制御になった場合に、生命を脅かす病的状態が生じる。特に肝臓ＥＣＭ分解に関与する細胞は、ＨＳＣ、好中球およびマクロファージである。ＭＭＰは、ＥＣＭ分解を担う主要酵素である（Ｇｏｔｏ  Ｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ２００４；  １１（３）：  １５３−１５８）。マトリックスメタロプロテイナーゼ−１の組織阻害物質（ＴＩＭＰ）は、ＭＭＰを阻害する能力を有する（Ｇｏｔｏ  Ｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ２００４；  １１（３）：  １５３−１５８）。それゆえ、ＭＭＰ−ＴＩＭＰバランスの調節は、効率的ＥＣＭリモデリングにとって重大である。ＭＭＰ−ＴＩＭＰバランスは、複数の線維形成促進性損傷に応答して傾くようになる。活性化されたＨＳＣは、コラーゲンＩ型およびＩＩＩ型などのＥＣＭタンパク質を合成および分泌するだけでなく、ＭＭＰ１およびＭＭＰ１３も産生する（Ｉｒｅｄａｌｅ  Ｊ  Ｐ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｌｉｎ．  Ｓｃｉ．  （Ｌｏｎｄ），  １９９５；  ８９（１）：  ７５−８１；  Ｋｎｉｔｔｅｌ  Ｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｉｓｏｔｃｈｅｍ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，  ２０００；  １１３（６）：  ４４３−４５３）。しかし、ＭＭＰ１およびＭＭＰ１３発現はＨＳＣ活性化が進行するにつれて減少するが、ＭＭＰ２およびＭＭＰ９以外の他のＭＭＰの活性化は、比較的一定なままである（Ｂｅｎｙｏｎ  Ｒ  Ｃ  ａｎｄ  Ａｒｔｈｕｒ  Ｍ  Ｊ，  Ｓｅｍｉｎ．  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓ．  ２００１；  ２１（３）：  ３７３−３８４）。ＭＭＰ２活性の上昇は正常な小葉構造の歪曲に関連し、これがＨＳＣをさらに活性化する（Ｂｅｎｙｏｎ  Ｒ  Ｃ  ａｎｄ  Ａｒｔｈｕｒ  Ｍ  Ｊ，  Ｓｅｍｉｎ．  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓ．  ２００１；  ２１（３）：  ３７３−３８４）。活性化されたＨＳＣは、ＴＩＭＰ１およびＴＩＭＰ２の発現および合成をアップレギュレートする（Ｉｒｅｄａｌｅ  Ｊ  Ｐ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，  １９９６；  ２４（１）：  １７６−１８４）。ＴＩＭＰ１は、ＭＭＰの遮断によって急速に増加するＥＣＭの分解を予防するだけでなく、活性化されたＨＳＣのアポトーシスも阻害する（Ｍｕｒｐｈｙ  Ｆ  Ｒ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００２；  ２７７（１３）：  １１０６９−１１０７６）。最終結果は、ディッセ腔内の成熟したコラーゲン線維の沈着であり、それが瘢痕形成をもたらす。
【０１０９】
６．腎線維症
腎線維症は、ほぼ全ての型の慢性腎臓疾患において生じる細胞外マトリックスの過剰蓄積の結果である（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７）。慢性腎疾患から腎線維症への進行は、多くの場合、広範囲の組織の瘢痕形成、腎実質の完全な破壊、および透析または腎置換を必要とする状態である末期腎不全に至る（Ｓｃｈｉｅｐｐａｔｉ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００５；  ６８（Ｓｕｐｐｌ  １）：  Ｓ７−Ｓ１０）。腎線維症は、慢性の持続的傷害の後の腎組織の創傷治癒過程の不全を表す。糸球体間質および線維芽細胞活性化を含む複数の細胞内経路、ならびに尿細管上皮間葉転換は、腎臓の疾患状態においてマトリックス産生細胞を産生すると同定された（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７）。
【０１１０】
６．１．腎線維症における細胞事象
腎線維症は病理学的には、尿細管萎縮、毛細血管消失およびポドサイト欠損を特徴とする糸球体硬化症、尿細管間質性線維症、炎症性浸潤および腎実質減少と記載されることが多い（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７）。これらの組織学的提示をまねく根底的細胞事象としては、糸球体間質および線維芽細胞活性化、尿細管上皮間葉転換（ＥＭＴ）、単球／マクロファージおよびＴ細胞浸潤、ならびに細胞アポトーシスが挙げられる（Ｅｄｄｙ  ＡＡ，  Ｐｅｄｉａｔｒ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２０００；  １５：  ２９０−３０１；  Ｉｗａｎｏ  Ｍ  ａｎｄ  Ｎｅｉｌｓｏｎ  ＥＧ，  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ．  ２００４；  １３：  ２７９−２８４；  Ｈｉｒｓｃｈｂｅｒｇ  Ｒ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００５；  １６：  ９−１１；  Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００４；  １５：  １−１２）。
【０１１１】
６．２．腎線維症の分子病原性
様々なサイトカインならびにホルモン因子、代謝因子、および血行力学的因子を含む十数の異なる線維形成因子が、腎線維症の病原性に関連づけられたが、トランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦ−β）およびその下流のＳｍａｄシグナル伝達媒介物質が必須の役割を担うということが、広く受け入れられている（Ｂｏｔｔｉｎｇｅｒ  ＥＰ  ａｎｄ  Ｂｉｔｚｅｒ  Ｍ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００２；  １３：  ２６００−２６１０；  Ｓｃｈｎａｐｅｒ  ＨＷ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｎａｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００３；  ２８４：  Ｆ２４３−Ｆ２５２）。インビトロでは、唯一の因子としてＴＧＦ−βが糸球体間質細胞、間質線維芽細胞、および尿細管上皮細胞を刺激して筋線維芽細胞活性化または転換を起こし、マトリックスを産生する線維形成細胞になり得る（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７；  Ｂｏｔｔｉｎｇｅｒ  ＥＰ  ａｎｄ  Ｂｉｔｚｅｒ  Ｍ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００２；  １３：  ２６００−２６１０；  Ｓｃｈｎａｐｅｒ  ＨＷ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｎａｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００３；  ２８４：  Ｆ２４３−Ｆ２５２）。インビボでの遺伝子送達を介する、またはトランスジェニックマウスにおける、外因性ＴＧＦ−βの発現は、腎線維症を誘発する（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。反対に、複数の方策によるＴＧＦ−βの阻害は、腎線維症性病変を抑制し、腎機能の進行的喪失を防ぐ（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７；  Ｂｏｔｔｉｎｇｅｒ  ＥＰ  ａｎｄ  Ｂｉｔｚｅｒ  Ｍ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００２；  １３：  ２６００−２６１０；  Ｓｃｈｎａｐｅｒ  ＨＷ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｎａｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００３；  ２８４：  Ｆ２４３−Ｆ２５２）。ＴＧＦ−β誘導はまた、多くの他の線維形成因子の効果を直接的または間接的に統合する集中的経路のようである。これらのいくつか、例えばアンギオテンシンＩＩおよび高グルコースは、上流のＴＧＦ−β誘導物質として作用するが、他のもの、例えば結合組織増殖因子は、その下流のエフェクターとして働く（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７；  Ｂｏｔｔｉｎｇｅｒ  ＥＰ  ａｎｄ  Ｂｉｔｚｅｒ  Ｍ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００２；  １３：  ２６００−２６１０；  Ｓｃｈｎａｐｅｒ  ＨＷ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｎａｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００３；  ２８４：  Ｆ２４３−Ｆ２５２）。
【０１１２】
ＴＧＦ−βシグナルは、その細胞膜Ｉ型およびＩＩ型セリン／トレオニンキナーゼ受容体を通して伝達される（Ｂｏｔｔｉｎｇｅｒ  ＥＰ  ａｎｄ  Ｂｉｔｚｅｒ  Ｍ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００２；  １３：  ２６００−２６１０）。受容体活性化は、その下流のシグナル伝達媒介物質Ｓｍａｄ２およびＳｍａｄ３のリン酸化および活性化を惹起する（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。リン酸化されたＳｍａｄ２／３は、共通のパートナーＳｍａｄ４に結合し、続いて核内に移行して、そこでそれらは、ＴＧＦ−β応答遺伝子の転写を制御する（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７；  Ｂｏｔｔｉｎｇｅｒ  ＥＰ  ａｎｄ  Ｂｉｔｚｅｒ  Ｍ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００２；  １３：  ２６００−２６１０；  Ｓｃｈｎａｐｅｒ  ＨＷ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｒｅｎａｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００３；  ２８４：  Ｆ２４３−Ｆ２５２）。ＴＧＦ−β／Ｓｍａｄシグナル伝達は、ＴＧＦ−β遺伝子発現、潜在型ＴＧＦ−β活性化、その受容体発現、および受容体後Ｓｍａｄシグナル伝達を含む複数のレベルのモジュレーションを介して、受容体前および受容体後の両方の段階で調節される（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。線維症性の腎臓において、多重的メカニズムが、ＴＧＦ−β発現の誘導、ＴＧＦ−βタンパク質の翻訳後活性化の増進および潜在型複合体からのＴＧＦ−βタンパク質の放出を含む、過度に活発なＴＧＦ−β／Ｓｍａｄシグナル伝達をもたらす。ＴＧＦ−βの受容体は、罹患した腎臓においても誘導される（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７）。
【０１１３】
正常な腎臓におけるＳｍａｄシグナル伝達は、ＳｎｏＮ、Ｓｋｉ、およびＴＧＩＦを含む、Ｓｍａｄ転写コリプレッサーとして知られるタンパク質のファミリーによって厳しく制限される（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７）。様々なメカニズムを通して、これらのＳｍａｄアンタゴニストは、Ｓｍａｄ媒介性遺伝子転写を効果的に限定し、それにより組織の不適切なＴＧＦ−β応答を防御する（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６；  ６９：  ２１３−２１７）。近年になり、ＳｎｏＮおよびＳｋｉは線維症性の腎臓において進行的に損なわれることが実証され、Ｓｍａｄアンタゴニストの損失がＴＧＦ−βシグナルを増幅する重要なメカニズムであることを示唆している（Ｙａｎｇ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ２００３；  １４：  ３１６７−３１７７）。
【０１１４】
６．３．腎線維症におけるマトリックス分解酵素
一般には、線維症性の腎臓に認められる過剰なマトリックス蓄積は、マトリックス成分の過剰産生とその分解欠損の両方の結果であると考えられている。この考えは、プラスミノーゲン活性化抑制因子−１およびマトリックスメタロプロテイナーゼ−１の組織阻害物質が罹患した腎臓においてアップレギュレートされていることが多い、という多くの観察によって裏づけられる。腎組織は多くのプロテアーゼを産生し、そのうちプラスミノーゲン／プラスミンおよびマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）系は、マトリックスタンパク質の全ての成分を分解することが可能なタンパク質分解網を構成する（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。
【０１１５】
マトリックス分解酵素は、それらのタンパク質分解能力を前提に、マトリックス蓄積を減少させ、それにより傷害後の腎線維症を軽減すると組織学的には見なされている。しかし、ノックアウトマウスを用いた近年の遺伝子試験は、インビボでの線維症性病変に関係するこれらのタンパク質の機能の異なる複雑な実態を表した（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）の除去は閉塞性腎症において腎臓を間質性線維症の発症から防御し、これはそのタンパク質分解活性とほとんど関係ないと思われることが報告されている（Ｙａｎｇ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ２００２；  １１０：  １５２５−１５３８）。閉塞性腎症におけるｔＰＡの病原性作用は、ＭＭＰ−９遺伝子発現を誘導する能力に主として依存する（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。ＭＭＰ−９の増加は尿細管基底膜の完全性を破壊し、これが尿細管ＥＭＴの促進をもたらす。ｔＰＡは細胞膜受容体である低比重リポタンパク質受容体関連タンパク質−１に結合でき、チロシン残基上でのそのリン酸化を誘導し、細胞内シグナル伝達を惹起して、腎間質線維芽細胞におけるＭＭＰ−９遺伝子発現をトランス活性化することが、さらなる研究から明らかである（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。
【０１１６】
マトリックスタンパク質を直接分解してＭＭＰを活性化できるセリンプロテアーゼであるプラスミンもまた、腎線維症を低減することにおいて有益であると考えられる（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。しかし、プラスミノーゲン遺伝子のノックアウトは、尿管閉塞後に線維症性病変を増悪しない。代わりに、プラスミンが欠如したマウスはコラーゲン蓄積の減少を示すことから、この酵素の顕著な病原的作用が示唆される（Ｅｄｇｔｔｏｎ  ＫＬ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００４；  ６６：  ６８−７６）。
【０１１７】
ＭＭＰ−２もまた、インビトロで尿細管ＥＭＴ  を誘導するのに必要でかつ十分であることが見出されている（Ｃｈｅｎｇ  Ｓ  ａｎｄ  Ｌｏｖｅｔｔ  ＤＨ，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  ２００３；  １６２：  １９３７−１９４９）。ＭＭＰ−２の過剰発現を有するトランスジェニックマウスは、線維症性病変を示す（Ｌｉｕ  Ｙ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ２００６）。近年の試験は、ＭＭＰ−３がＲａｃ１発現を誘導し、これが細胞内活性酸素を増加させＥＭＴを促進することを実証している（Ｒａｄｉｓｋｙ  ＤＣ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  ２００５；  ４３６：  １２３−１２７）。
【０１１８】
７．薬物誘導性腎障害
様々なインビトロおよびインビボ試験から、特定の薬物の投与が、様々なＭＡＰＫカスケードを惹起する刺激物質として作用し、一方で腎障害への細胞内応答を媒介することが示された（Ｎａｕｇｈｔｏｎ  Ｃ．Ａ．，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆａｍｉｌｙ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ，  ｖｏｌ．  ７８，  ｎｏ．  ６，  ｐｐ．  ７４３−７５０，  ２００８）。正常なＭＡＰＫシグナル伝達経路の活性化および調節不全は、急性および慢性腎障害の両方に関係づけられた（Ｃａｓｓｉｄｙ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  ２０１２，  Ａｒｔｉｃｌｅ  ａｉｄｈｉ  ４６３６１７，  １５  ｐａｇｅｓ）。ヒトの腎生検から、様々な腎状態におけるＭＡＰＫのアップレギュレーションが示されており、ヒトの腎疾患における関与が示唆された（Ｃａｓｓｉｄｙ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  ２０１２，  Ａｒｔｉｃｌｅ  ａｉｄｈｉ  ４６３６１７，  １５  ｐａｇｅｓ）。
【０１１９】
７．１．抗生物質誘導性腎障害
急性腎障害（ＡＫＩ）は、抗生物質療法の一般的な副作用である。複数の試験から、ＭＡＰＫシグナル伝達カスケードが複数の異なる分類の抗生物質によって発症した抗生物質誘導性腎障害に関係づけられた。
【０１２０】
例えばＶｏｌｐｉｎｉらは、ＭＡＰＫがゲンタマイシン処置後の急性腎不全の病原性に関与し得ることを示した（Ｖｏｌｐｉｎｉ  Ｒ．Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒａｚｉｌｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ｖｏｌ．  ３９，  ｎｏ．  ６，  ｐｐ．  ８１７−８２３，  ２００６）。手短に述べると、尿細管間質性腎炎の進展の際の腎臓におけるｐ−ｐ３８  ＭＡＰＫおよびＮＦ−κＢの発現、ならびに組織学的特徴および腎機能とのその関連が、ＮＦ−κＢ阻害剤の存在下または非存在下でゲンタマイシン処置ラットにおいて検討された。この試験において得られたデータは、ｐ３８  ＭＡＰＫ発現がゲンタマイシン誘導性間質性腎炎の発症の際に増加すること、およびそのような改変が腎皮質におけるＮＦ−κＢ発現および炎症過程の増進に関連することを示し、ゲンタマイシン誘導性腎病変におけるｐ３８  ＭＡＰＫ経路の関与を示唆している（Ｖｏｌｐｉｎｉ  Ｒ．Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒａｚｉｌｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ｖｏｌ．  ３９，  ｎｏ．  ６，  ｐｐ．  ８１７−８２３，  ２００６）。同様に、Ｏｚｂｅｋらは、ｐ３８−ＭＡＰＫがゲンタマイシン処置後のラット腎臓においてアップレギュレートされることを見出しており、脂質低下薬アトルバスタチンとの併用処置がｐ３８−ＭＡＰＫおよびＮＦ−κＢ発現の阻害を通してゲンタマイシン誘導性の腎毒性を改善することが示された（Ｏｚｂｅｋ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｅｎａｌ  Ｆａｉｌｕｒｅ，  ｖｏｌ．  ３１，  ｎｏ．  ５，  ｐｐ．  ３８２−３９２，  ２００９）。
【０１２１】
細胞増殖に及ぼす腎ＬＬＣＰＫ１細胞中のバンコマイシン暴露の影響を研究した試験は、細胞数および細胞内タンパク質総量の用量依存的および時間依存的増加を示した（Ｃａｓｓｉｄｙ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  ２０１２，  Ａｒｔｉｃｌｅ  ａｉｄｈｉ  ４６３６１７，  １５  ｐａｇｅｓ；  Ｋｉｎｇ  Ｄ．Ｗ．  ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈ  Ｍ．Ａ．，  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ，  ｖｏｌ．  １８，  ｎｏ．  ６，  ｐｐ．  ７９７−８０３，  ２００４）。これらの影響は、ＭＡＰＫ阻害剤ＰＤ０９８０５９での前処置により阻害され、これにより細胞周期中へのバンコマイシン誘導性の進入が予防された。このデータは、バンコマイシンの細胞増殖作用とＭＡＰＫシグナル伝達カスケードの導入との間の関連を示唆している（Ｃａｓｓｉｄｙ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  ２０１２，  Ａｒｔｉｃｌｅ  ａｉｄｈｉ  ４６３６１７，  １５  ｐａｇｅｓ；  Ｋｉｎｇ  Ｄ．Ｗ．  ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈ  Ｍ．Ａ．，  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ，  ｖｏｌ．  １８，  ｎｏ．  ６，  ｐｐ．  ７９７−８０３，  ２００４）。
【０１２２】
７．２．カルシニューリン阻害剤誘導性腎障害
カルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）であるＣｓＡおよびＦＫ５０６は、移植臓器のレシピエントにおいて広く用いられている。しかし、腎臓自己移植片においては、ＣｓＡおよびＦＫ５０６が尿細管間質性および糸球体間質性線維症を誘発することが示されている（Ｓｕｔｈｅｒｌａｎｄ  ｂ．Ｗ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，  ｖｏｌ．  ２４，  ｎｏ．  ２６，  ｐｐ．  ４２８１−４２９２，  ２００５）。腎臓自己移植片におけるＣＮＩの線維形成作用は、ＴＧＦ−βの腎臓内発現の増進とそれに続く過剰な細胞外マトリックス（ＥＣＭ）生成によって主に媒介される（Ｓｈｉｈａｂ  Ｆ．Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，  ｖｏｌ．  ３０，  ｎｏ．  １，  ｐｐ．  ７１−８１，  １９９７；  Ｉｇｎｏｔｚ  Ｒ．Ａ．  ａｎｄ  Ｍａｓｓａｇｕｅ  Ｊ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ｖｏｌ．  ２６１，  ｎｏ．  ９，  ｐｐ．  ４３３７−４３４５，  １９８６；  Ｓｃｈｎａｐｅｒ  Ｈ．Ｗ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  ２８４，  ｎｏ．  ２，  ｐｐ．  Ｆ２４３−Ｆ２５２，  ２００３）。ラット腎糸球体間質細胞を用いた試験で、ＣｓＡおよびＦＫ−５０６が、細胞型に特異的な様式で、極めて急速かつ用量依存的なＹ−ボックス結合タンパク質−１（ＹＢ−１）量増加を誘導することが示された。ＹＢ−１は、有糸分裂特性を有する低温ショックタンパク質のファミリーの一員であり特に、近位尿細管細胞におけるＴＧＦ−β１翻訳を制御し、ＭＡＰＫ  ＥＲＫ１／２の下流ターゲットである（Ｌｕ  Ｚ．Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  ２５，  ｎｏ．  １１，  ｐｐ．  ４６２５−４６３７，  ２００５；  Ｆｒａｓｅｒ  Ｄ．Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  ｖｏｌ．  ７３，  ｎｏ．  ６，  ｐｐ．  ７２４−７３２，  ２００８；  Ｈａｎｓｓｅｎ  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  １８７，  ｎｏ．  １，  ｐｐ．  ２９８−３０８，  ２０１１）。
【０１２３】
７．３．化学療法薬誘導性腎障害
癌化学療法薬には、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド）；代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート）；植物アルカロイド（例えば、エトポシド）；アントラサイクリン系（例えば、ドキシルビシン）；抗腫瘍性抗生物質（例えば、マイトマイシンＣ）；白金化合物（例えば、シスプラチン）；およびタキサン系（例えば、タキソール）が含まれるが、これらに限定されない（Ｃｈｕ  Ｅ．  ａｎｄ  Ｄｅｖｉｔａ  Ｊｒ．  Ｖ．Ｔ．，  Ｅｄｓ．，  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｄｒｕｇ  Ｍａｎｕａｌ  ２００１，  Ｊｏｎｅｓ  ａｎｄ  Ｂａｒｔｌｅｔｔ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，  Ｌｏｎｄｏｎ，  ＵＫ，  ２００１）。化学療法薬は、様々な様式で腎毒性を誘発する可能性があり、腎機能への即時作用を発揮する薬物もあれば、累積作用を有し、長期使用後に腎障害を誘発すると知られるものもある（Ｖｏｇｅｌｚａｎｇ  Ｎ．Ｊ．，  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  ５，  ｎｏ．  １０，  ｐｐ．  ９７−１０５，  １９９１）。例えば、今日までの最も有効な抗腫瘍薬の１つであるシスプラチンは、投与１０日後に通常は検出される臨床的に測定可能な腎毒性を有する急性腎障害を誘発する（Ｃａｓｓｉｄｙ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  ２０１２，  Ａｒｔｉｃｌｅ  ａｉｄｈｉ  ４６３６１７，  １５  ｐａｇｅｓ）。
【０１２４】
ＭＡＰＫは、シスプラチン誘導性腎毒性において中枢的役割を担うと考えられている。Ａｒａｎｙらは、ｐ３８またはＪＮＫ／ＳＡＰＫではなくＥＲＫ阻害がシスプラチン誘導性毒性を予防することを示した（Ａｒａｎｙ  Ｉ．  ｅｔ  ａｌ．  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  ２８７，  ｎｏ．  ３，  ｐｐ．  Ｆ５４３−Ｆ５４９，  ２００４）。他の試験は、インビトロおよびインビボの両方でｐ３８の薬理学的阻害が毒性を予防することを示した（Ｒａｍｅｓｈ  Ｇ．  ａｎｄ  Ｒｅｅｖｅｓ  Ｗ．ｂ．，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ｖｏｌ．  ２８９，  ｎｏ．  １，  ｐｐ．  Ｆ１６６−Ｆ１７４，  ２００５；  Ｆｒａｎｃｅｓｃａｔｏ  Ｈ．Ｄ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  ８４，  ｎｏ．  １７−１８，  ｐｐ．  ５９０−５９７，  ２００９）。ＪＮＫ／ＳＡＰＫ阻害が、インビボでのシスプラチン誘導性腎毒性の有意な低減をもたらすことも示された（Ｆｒａｎｃｅｓｃａｔｏ  Ｈ．Ｄ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  Ｄｉａｌｙｓｉｓ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  ２２，  ｎｏ．  ８，  ｐｐ．  ２１３８−２１４８，  ２００７）。Ｐａｂｌａらは、シスプラチン腎毒性の重要な調節物質としてＰＫＣδを同定した。そのデータは、マウス腎溶解物において、シスプラチン腎毒性の際に、Ｓｒｃが、リン酸化され、かつ活性化されたＰＫＣδと相互作用したことを示した。活性化の後、ＰＫＣδは、Ｐ５３ではなくＭＡＰＫを調節して、腎細胞のアポトーシスを誘導した。したがってＰＫＣδの阻害は、腎細胞のアポトーシスおよび組織損傷を薬理学的にまたは遺伝子学的に軽減し、シスプラチン処置中の腎機能を保存した。反対にＰＫＣδの阻害は、複数の癌細胞株においてシスプラチン誘導性細胞死を増進し、複数の異種移植片および同系遺伝子のマウス腫瘍モデルにおいて、腎臓を腎毒性から防御しながら、シスプラチンの化学療法効果を著しく増進した（Ｐａｂｌａ  Ｎ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  １２１，  ｎｏ．  ７，  ｐｐ．  ２７０９−２７２２，  ２０１１；  Ｃａｓｓｉｄｙ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  ２０１２，  Ａｒｔｉｃｌｅ  ａｉｄｈｉ  ４６３６１７，  １５  ｐａｇｅｓ）。
【０１２５】
７．４．非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）誘導性腎障害
非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）としては、カルボン酸系（例えば、アスピリン）；酢酸系（例えば、ジクロフェナク）；プロピオン酸系（例えば、イブプロフェンおよびケトプロフェン）；およびＣｏｘ−２阻害剤（例えば、セレコキシブ）が挙げられる。ＮＳＡＩＤは腎毒性であることが知られており、急性尿細管壊死、急性尿細管間質性腎炎、糸球体腎炎、腎乳頭壊死、慢性腎不全、塩分および水分貯留、高血圧、および高カリウム血症を含む腎毒性の範囲を有する（Ｐｅｒａｚｅｌｌａ  Ｍ．Ａ．  ａｎｄ  Ｔｒａｙ  Ｋ．，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ｖｏｌ．  １１１，  ｎｏ．  １，  ｐｐ．  ６４−６７，  ２００１；  Ｅｊａｚ  Ｐ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  ｏｆ  Ｉｎｄｉａ，  ｖｏｌ．  ５２，  ｐｐ．  ６３２−６４０，  ２００４；  Ｓｃｈｉｅｒ  Ｒ．Ｗ．  ａｎｄ  Ｈｅｎｒｉｃｈ  Ｗ．Ｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．  ２５１，  ｎｏ．  １０，  ｐｐ．  １３０１−１３０２，  １９８４）。
【０１２６】
Ｈｏｕらは、セレコキシブで刺激された糸球体間質細胞において、ストレスマーカー：ヘムオキシゲナーゼ−１（ＨＯ−１）の発現を評価することによって、ＮＳＡＩＤに誘導される腎障害の分子基盤を検査した（Ｈｏ  Ｃ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  １０４２，  ｐｐ．  ２３５−２４５，  ２００５）。セレコキシブでの処置は、濃度依存的および時間依存的なＨＯ−１発現増加をもたらした（Ｈｏ  Ｃ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  １０４２，  ｐｐ．  ２３５−２４５，  ２００５）。反対に、フリーラジカルスカベンジャーであるＮ−アセチルシステインでの処置は、ＨＯ−１発現を大きく減少させ、活性酸素（ＲＯＳ）の関与が示唆された（Ｈｏ  Ｃ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  １０４２，  ｐｐ．  ２３５−２４５，  ２００５）。様々なＭＡＰＫ阻害剤での処置は、特異的ＪＮＫ阻害剤のみがセレコキシブ誘導性ＨＯ−１発現を低減したことを示した（Ｈｏ  Ｃ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  １０４２，  ｐｐ．  ２３５−２４５，  ２００５）。キナーゼアッセイは、ＮＳＡＩＤ処置後のｃ−ＪＮＫのリン酸化および活性化の増進を実証した（Ｈｏ  Ｃ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  １０４２，  ｐｐ．  ２３５−２４５，  ２００５）。ＰＩ−３Ｋ特異性阻害剤での処置は、ＨＯ−１発現の増進を予防し、それはＰＤＫ−１下流基質Ａｋｔ／プロテインキナーゼＢ（ＰＫＢ）のリン酸化の阻害と相関した（Ｈｏ  Ｃ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  １０４２，  ｐｐ．  ２３５−２４５，  ２００５）。この試験の結果から、糸球体間質細胞におけるセレコキシブ誘導性ＨＯ−１発現はＪＮＫ−ＰＩ−３Ｋカスケードを介してＲＯＳにより媒介され得ることが示唆された（Ｈｏ  Ｃ．Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ｖｏｌ．  １０４２，  ｐｐ．  ２３５−２４５，  ２００５）。
【０１２７】
８．血管線維症
血管線維症は、管腔口径の減少および動脈壁の肥厚を特徴とし、これは細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の過剰な沈着に起因する。それは、血管平滑筋細胞（ＶＳＭＣ）の増殖、ＥＣＭの蓄積およびマトリックス分解の阻害を含む。それは、レニン・アンギオテンシン・アルドステロン系（ＲＡＡＳ）、酸化ストレス、炎症因子、増殖因子および内皮由来サイトカイン分泌の不均衡に関連する。特に、アンギオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）およびアルドステロン（ＲＡＡＳの循環するエフェクターホルモン）は、血管線維症の病理生理学に関連づけられている。トランスフォーミング増殖因子−ベータ（ＴＧＦ−ベータ）は、とりわけ結合組織増殖因子（ＣＴＧＦ）および線維芽細胞増殖因子のアップレギュレーションを介し、ＥＣＭ蓄積および血管リモデリングにおいて重要な役割を担うことが示されている。マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）とメタロプロテイナーゼの組織阻害物質（ＴＩＭＰ）との間の不均衡は、コラーゲン蓄積および有害なマトリックスリモデリングをもたらす。ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ（ＰＰＡＲガンマ）の異常な発現または機能もまた、病的線維症および血管リモデリングの進行に寄与することが報告されている（Ｌａｎ  Ｔ−Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２２  （２０１３）  ４０１−４０７）。
【０１２８】
高血圧、高血糖、脂質異常症および高ホモシステイン血症（ＨＨｃｙ）を含む、心血管疾患に関連する危険因子も、血管線維症の発病および進行因子として作用することが示唆されている（Ｌａｎ  Ｔ−Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２２  （２０１３）  ４０１−４０７）。
【０１２９】
８．１．血管線維症の病原性
８．１．１．レニン−アンギオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）
ＲＡＡＳは、血管リモデリングの発達における必須連鎖の１つとして浮上してきた（Ｓｕｎ  Ｙ，  Ｃｏｎｇｅｓｔ．  Ｈｅａｒｔ  Ｆａｉｌ．  ２００２；８：１１−６）。アンギオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）およびアルドステロンは、ＲＡＡＳの循環するエフェクターホルモンであり、血管線維症の病理生理学を担うと認識されている。
【０１３０】
ＡｎｇＩＩは、ＲＡＡＳの第一のエフェクターホルモンであり、血管収縮および血圧調節の即時生理学的作用を媒介するだけでなく、血管細胞の細胞増殖／アポトーシス、ＶＳＭＣの遊走、炎症反応およびＥＣＭリモデリングを含む血管の病理生理学に関与する多くの過程も調節する（Ｒｕｉｚ−Ｏｒｔｅｇａ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ２００１；３８：１３８２−７）。ＡｎｇＩＩは、２つの主な特異性受容体であるＡＴ１およびＡＴ２を通して作用する。ＡｎｇＩＩのＡＴ１受容体への結合は、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）、インスリン受容体、ｃ−Ｓｒｃファミリーキナーゼ、Ｃａ２＋−依存性プロリンリッチチロシンキナーゼ２（Ｐｙｋ２）、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）およびヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）を含む一連のシグナル伝達カスケードを活性化し、その一方で脈管構造におけるＡｎｇＩＩの病理学的影響を調節する（Ｈｕｎｙａｄｙ  Ｌ，  Ｃａｔｔ  ＫＪ，  Ｍｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  ２００６；２０：  ９５３−７０）。ＡＴ１もまた、ＥＲＫ１／２、ｐ３８  ＭＡＰＫ、およびｃ−Ｊｕｎ  ＮＨ２−末端キナーゼ（ＪＮＫ）を含むＰＫＣおよびＭＡＰＫを活性化することによる細胞の生育および異常発達に関係づけられた（Ｓｕｚｕｋｉ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｈｅｍａｔｏｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ２００５；３：３０５−２２）。ＡｎｇＩＩが媒介するＥＧＦＲ活性化は、Ｓｒｃ依存性レドックス感受性の様式で、そしてカルシウム依存性および非依存性経路によっても起こる（Ｅｇｕｃｈｉ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  １９９８；２７３：８８９０−６；  Ｕｓｈｉｏ−Ｆｕｋａｉ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ  ２００１；２１：４８９−９５）。ＰＤＧＦ−β受容体（ＰＤＧＦβ−Ｒ）へのチロシンリン酸化Ｓｈｃの結合によってＡｎｇＩＩがＰＤＧＦβ−Ｒのリン酸化を刺激することが、エビデンスから示唆されている（Ｈｅｅｎｅｍａｎ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２０００；２７５：  １５９２６−３２）。ＡｎｇＩＩはまた、インスリン受容体βサブユニットのセリンリン酸化を増加させて、下流エフェクター（ＰＩ３Ｋ、ＰＤＫ１、Ａｋｔ）からインスリン受容体サブユニット（ＩＲＳ−１）を脱離すること、およびプロテオソーム経路における分解のためにＩＲＳ−１をターゲットにすること、の両者によってＩＲＳ−１の不活性化を誘発することも示されている（Ｆｏｌｌｉ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １９９７；１００：２１５８−６９；  Ｎａｔａｒａｊａｎ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  １９９９；３３：３７８−８４）。ＡｎｇＩＩは、細胞増殖およびＥＣＭ合成および複数の媒介物質、例えばＴＧＦ−β、結合組織増殖因子（ＣＴＧＦ）、サイトカイン（例えば、ＩＬ−６、ＴＮＦ−アルファ）、および単球走化性タンパク質１型（ＭＣＰ−１）の誘導を促進する。ＡｎｇＩＩに誘導されるＥＣＭ産生は、ＴＧＦ−βおよびその下流媒介物質ＣＴＧＦのアップレギュレーションによって主に媒介される（Ｂｏｒｄｅｒ  ＷＡ，  Ｎｏｂｌｅ  Ｎ���，  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  １９９８；３１：１８１−８；  Ｗｏｌｆ  Ｇ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ  ２００６；７０：１９１４−９）。ＡｎｇＩＩは、ＰＫＣおよびｐ３８  ＭＡＰＫ依存性経路を通して、ＴＧＦ−β１プロモータのアクチベータータンパク質−１（ＡＰ−１）の結合部位への核タンパク質の結合を活性化する。近年の研究から、ＡｎｇＩＩがＴＧＦ−β非依存性Ｓｍａｄシグナル伝達経路を介するＣＴＧＦ発現も誘導し、マトリックス分解に関与するＭＭＰの産生も増加させて、血管壁を脆弱化することが示された（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−ｖｉｔａ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００５；１１１：２５０９−１７；  Ｙａｎｇ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ２００９；  ５４：８７７−８４）。ＡｎｇＩＩは、アルドステロン産生を刺激し、これにより線維症およびコラーゲン形成を促進することが知られている（Ｂｒｉｌｌａ  ＣＧ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ  １９９４；２６：８０９−２０）。
【０１３１】
アルドステロンは、ＡｎｇＩＩ受容体のアップレギュレーション、ＴＧＦ−βおよびＣＴＧＦ合成の刺激、ＭＭＰ活性の刺激、ならびにＶＳＭＣ肥厚および内皮機能不全の関係を含む複数のメカニズムを通して線維症およびコラーゲン形成を促進する（Ｅｐｓｔｅｉｎ  Ｍ，  Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｄｉａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ２００３；１８：１９８４−９２）。アルドステロンはプラスミノーゲン活性化因子の主要な生理学的阻害剤であるプラスミノーゲン活性化抑制因子−１（ＰＡＩ−１）の発現を刺激し、これはマトリックス分解を阻害すること、ならびにｐ３８  ＭＡＰＫカスケードおよびミネラルコルチコイド受容体の両方を介してＣＴＧＦ発現を誘導することによって、ＥＣＭ蓄積に関与すると報告されている（Ｂｒｏｗｎ  ＮＪ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ  ２０００；５８：１２１９−２７；  Ｌｅｅ  ＹＳ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｋｏｒｅａｎ  Ｍｅｄ  Ｓｃｉ  ２００４；１９：  ８０５−１１）。アルドステロンは、ミネラルコルチコイド受容体の活性化、ＰＫＣ、およびＭＥＫ／ＥＲＫ経路の活性酸素（ＲＯＣ）依存性活性化を介して成体ラット心室筋細胞においてＭＭＰ活性を誘導することが示されている（Ｒｕｄｅ  ＭＫ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ２００５；４６：５５５−６１）。
【０１３２】
８．１．２．トランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦ−β）
トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）−βは、大きなスーパーファミリーに属する遍在的に発現されるサイトカインであり、そのうちＴＧＦ−β１は、ＥＣＭリモデリングにおいて最も頻繁にアップレギュレートされる（Ｍａｓｓａｇｕｅ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｅｌｌ  ２０００；１０３：２９５−３０９）。ＴＧＦ−βは、２つのタイプの膜貫通セリン／トレオニンキナーゼであるＩ型受容体およびＩＩ型受容体のヘテロマー細胞表面複合体を通してシグナル伝達する（Ｄｅｒｙｎｃｋ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ  Ｇｅｎｅｔ  ２００１；２９：１１７−２）。ＩＩ型受容体によって活性化されるＩ型受容体リン酸化は、下流の標的タンパク質の活性化に必須である（Ｄｅｒｙｎｃｋ  Ｒ，  Ｆｅｎｇ  ＸＨ，  Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  １９９７；１３３３：Ｆ１０５−５０）。
【０１３３】
ＴＧＦ−βは、Ｓｍａｄと呼ばれる転写因子を通して主にシグナル伝達する（Ｍａｓｓａｇｕｅ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ  ２００５；１９：  ２７８３−８１０）。Ｓｍａｄ２およびＳｍａｄ３は、ＴＧＦ−ベータ／アクチビン経路の特異的媒介物質であるが、Ｓｍａｄ１、Ｓｍａｄ５およびＳｍａｄ８は、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）のシグナル伝達に関与し（特にＢＭＰ−７）、これはＩ−Ｓｍａｄ（Ｓｍａｄ６およびＳｍａｄ７）活性化を介してＶＳＭＣ増殖を阻害する（Ｓｉｎｇｈ  ＮＮ，  Ｒａｍｊｉ  ＤＰ，  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖ  ２００６；１７：４８７−９９）。複数の試験から、Ｓｍａｄ６の過剰発現がＢＭＰ受容体シグナル伝達を選択的に阻害し、一方でＳｍａｄ７がＢＭＰおよびＴＧＦ−β／アクチビン受容体シグナル伝達の両方を阻害することが示された（Ｎａｋａｏ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ  ２００２；８：  ３６１−３）。ＴＧＦ−ベータ誘導性フィブロネクチン、コラーゲンおよびＣＴＧＦ発現の阻害をもたらすＳｍａｄ７発現は、ＥＧＦ受容体の活性化と、シグナル伝達物質および転写活性化因子（ＳＴＡＴ）を介するＩＬ−ガンマシグナル伝達と、ＴＮＦ−αによって誘導されるＮＦ−κｂの活性化と、によっても誘導され得る（Ｗａｎｇ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ  ２００６；２６：１５０３−９；  Ｉｋｅｄｏ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ  ２００３；１１：  ６４５−５０．）。
【０１３４】
Ｓｍａｄ経路に加えて、非Ｓｍａｄ経路もまた、ＴＧＦ−βシグナル伝達に参加し、他の主要なシグナル伝達経路と相互干渉するための節点として働く（Ｒｕｉｚ−Ｏｒｔｅｇａ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｒｅｓ  ２００７；７４：  １９６−２０６；  Ｂｏｂｉｋ  Ａ，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ  ２００６；２６：  １７１２−２０）。ＪＮＫ／ｐ３８、Ｅｒｋ／ＭＡＰＫ、Ｒｈｏ様ＧＴＰアーゼ、およびＰＩ３／Ａｋｔ経路は、下流の細胞内応答を強化、軽減またはモジュレートすると考えられており、それはおそらくＴＧＦ−βの様々な影響を説明している（Ｚｈａｎｇ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２００９；２８４：１７５６４−７４）。ＴＧＦ−βは、高血圧、再狭窄、アテローム性硬化症、心肥大、および心不全を含む多くの心血管疾患の病原性に関係する。ＴＧＦ−βは、増殖因子（例えば、ＣＴＧＦ、ＦＧＦ）、関連遺伝子（例えば、ｃ−ｍｙｃ、ｃｊｕｎ、ｊｕｎＢＪＩ、ｐ５３）およびＰＡＩ−１を含む複数の物質の産生をアップレギュレートすることを介してＥＣＭ蓄積および血管リモデリングにおいて重要な役割を担う（Ｐｅｒｂａｌ  ｂ，  Ｌａｎｃｅｔ  ２００４；３６３：  ６２−４；  Ｈａｙａｓｈｉｄａ  Ｔ  ｅｔ  ａｌ．，  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  ２００３；１７：１５７６−８；  Ｓａｍａｒａｋｏｏｎ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２００５；２０４：２３６−４６；  Ｓｅａｙ  Ｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２００５；３１５：１００５−１２）。アンギオテンシンＩＩ、機械的応力、エンドセリン−Ｉ、高グルコース、極度の温度およびｐＨ、ステロイド、ならびに活性酸素は、血管線維症の媒介物質としてＴＧＦ−β活性化を刺激することが見出されている（Ｒｕｉｚ−Ｏｒｔｅｇａ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ  Ｒｅｐ  ２００３；５：  ７３−９；  Ｌｉ  ＪＨ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ  ２００３；６３：  ２０１０−９．）。加えて、ＭＭＰ（ＭＭＰ−２および−９など）は、ＴＧＦ−βの放出を増進し、これがＴＩＭＰを刺激して、最終的にＥＣＭ（即ち、ＥＣＭ蓄積）および血管リモデリングを阻害する（Ｄｅｒｙｎｃｋ  Ｒ，  Ｚｈａｎｇ  ＹＥ，  Ｎａｔｕｒｅ  ２００３；４２５：５７７−８４）。
【０１３５】
８．１．３．結合組織増殖因子（ＣＴＧＦ）
強力な線維形成促進性増殖因子であるＣＴＧＦは、線維芽細胞増殖、細胞接着、血管新生およびＥＣＭ合成に関連づけられている（Ｒｕｐｅｒｅｚ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３；１０８：１４９９−５０５）。ＣＴＧＦは、ＶＳＭＣ増殖、遊走、およびＥＣＭ産生を促進し、アテローム性硬化症の発症および進行において役割を担う可能性がある（Ｌｅａｓｋ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ  Ｒｅｐ  ２００２；４：  １３６−４２）。ＣＴＧＦ発現は、ＴＧＦ−β、ＴＮＦ−α、ｃＡＭＰ、高グルコース、デキサメタゾン、第ＶＩＩａ因子、および機械的応力を含む複数の物質によって調節される（Ｌａｕ  ＬＦ，  Ｌａｍ  ＳＣ，  Ｅｘｐ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ  １９９９；２４８：  ４４−５７）。ＴＧＦ−βに誘導されるＣＴＧＦ産生は、Ｓｍａｄ、Ｒａｓ／ＭＥＫ／Ｅｒｋ、Ａｐ−１／ＪＮＫ、ＰＫＣ、およびＴｙｒを含む複数のシグナル経路に関与し、その発現は、ＴＧＦ−βダウンレギュレーションを介するＴＮＦ−α、ｃＡＭＰ、ＰＧＥ２、ＩＬ−４およびＰＰＡＲによって減少され得る（Ｌｅａｓｋ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２００３；２７８：  １３００８−１５；  Ｌｅａｓｋ  Ａ，  Ａｂｒａｈａｍ  ＤＪ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２００３；８１：  ３５５−６３）。ＣＴＧＦはまた、ＭＭＰ−２の発現を増加させるようである（Ｆａｎ  ＷＨ，  Ｋａｒｎｏｖｓｋｙ  ＭＪ，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２００２；２７７：  ９８００−５）。初代糸球体間質細胞へのＣＴＧＦの添加がフィブロネクチン産生、細胞遊走、および細胞骨格再配列を誘導し、これがＳｒｃの動員、ならびにｐ４２／４４  ＭＡＰＫおよびプロテインキナーゼＢのリン酸化に関連したことが報告されている（Ｃｒｅａｎ  ＪＫ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２００２；２７７：４４１８７−９４）。
【０１３６】
８．１．４．マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）
ＭＭＰは、システインプロテイナーゼ、アスパラギン酸プロテイナーゼ、およびセリンプロテイナーゼと共に、ＥＣＭおよび基底膜（ＢＭ）の分解に関与するタンパク質分解酵素である（Ｌａｎ  Ｔ−Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２２  （２０１３）  ４０１−４０７）。ＭＭＰは、肝硬変、線維症性肺疾患、耳硬化症、アテローム性硬化症、および多発性硬化症でのように、線維症の生理学的作用において重要な役割を担う。ＭＭＰは、ＥＣＭタンパク質の破壊を介して破裂する傾向のある不安定な表現型への安定なアテローム性硬化病変の進行を媒介すると考えられている（Ｌａｎ  Ｔ−Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２２  （２０１３）  ４０１−４０７）。ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−９は、内膜における結合組織マトリックスの脆弱化に参加し、これはプラークの破裂、急性血栓症、ならびにＳＭＣ増殖および遊走をもたらす（Ａｍａｌｉｎｅｉ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｒｏｍ  Ｊ  Ｍｏｒｐｈｏｌ  Ｅｍｂｒｙｏｌ  ２０１０；５１：  ２１５−２８）。炎症細胞の血管外遊出の際のＥＣ基底膜のＭＭＰ分解は、内皮バリア機能の低下および血漿タンパク質の流入増加に寄与し得る。これらの相互作用の全てがマクロファージにおけるＭＭＰ産生を増加させることが示されており、これが隣接する細胞におけるＭＭＰ産生、および分泌されたＭＭＰチモーゲンの活性化のメカニズムへの刺激物質も提供し、その結果さらなる構造的変化を促進してそれらの増殖を可能にするアテローム性硬化症病変を発達させ得る（Ｇａｌｉｓ  ＺＳ，  Ｋｈａｔｒｉ  ＪＪ，  Ｃｉｒｃ  Ｒｅｓ  ２００２；９０：  ２５１−６２）。
【０１３７】
ほとんどのＭＭＰの発現が、特定の生理学的および病理学的リモデリング過程の際にアップレギュレートされ、様々な炎症性サイトカイン、ホルモンおよび増殖因子、例えばＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＥＧＦ、ＰＤＧＦ、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、およびＣＤ４０によって媒介される［１１１〜１１３］。ＴＧＦ−βは、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９の発現をアップレギュレートし、一方でＭＭＰ−１およびＭＭＰ−３の発現を減少させる（Ｍａｕｖｉｅｌ  Ａ，  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  １９９３；５３：  ２８８−９５）。
【０１３８】
完全に活性化されたＭＭＰは、メタロプロテイナーゼの組織阻害物質（ＴＩＭＰ）によって阻害され得る。心筋ＭＭＰとＴＩＭＰとの間の不均衡は、コラーゲン蓄積、有害なマトリックスリモデリングおよび反応性間質性線維症をもたらす（Ｎａｇａｓｅ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｒｅｓ  ２００６；６９：  ５６２−７３）。
【０１３９】
８．１．５．ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ（ＰＰＡＲγ）
ＰＰＡＲγの異常な発現または機能が、病的線維症および血管リモデリングの進行に寄与することが報告されている（Ｗｅｉ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ  ２０１０；２２：  ６７１−６）。ＴＧＦ−βの抑制に及ぼすＰＰＡＲγの拮抗作用は、コラーゲンおよびフィブロネクチン合成の刺激を誘導し、ＴＧＦ−βおよびＣＴＧＦを含む線維形成増殖因子の分泌は、線維形成におけるＰＰＡＲγの抗線維症性の役割を明らかにした（Ｇｈｏｓｈ  ＡＫ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ２００４；５０：  １３０５−１８；  Ｂｕｒｇｅｓｓ  ＨＡ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２００５；２８８：  Ｌ１１４６−５３）。ＰＰＡＲγが、ｐ３００転写コアクチベーターを標的にすることによって、Ｓｍａｄ依存性コラーゲン刺激を抑制することが観察された（Ｇｈｏｓｈ  ＡＫ  ｅｔ  ａｌ．，  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  ２００９；２３：  ２９６８−７７）。ＰＰＡＲγ非依存性経路は、線維芽細胞遊走、脂肪細胞分化、および筋線維芽細胞移行の阻害を含む、ＰＰＡＲγリガンドによって惹起された抗線維症性作用にも関与し得ると仮定されている（Ｌａｎ  Ｔ−Ｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２２  （２０１３）  ４０１−４０７）。
【０１４０】
９．線維症性疾患または症状を処置する現行のおよび出現しつつある治療アプローチ
線維症性疾患の処置に現在用いられている治療薬は、参照により本明細書に組み入れられる、Ｄａｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  １６３：  １４１−１７２，  ２０１１に開示される。そのような治療薬の非限定的例としては、精製ウシＶ型コラーゲン（例えばＩＷ−００１；ＩｍｍｕｎｅＷｏｒｋｓ；Ｕｎｉｔｅｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＩＬ−１３受容体拮抗薬（例えばＱＡＸ５７６；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤（例えばイマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））；Ｃｒａｉｇ  Ｄａｎｉｅｌｓ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、内皮受容体拮抗薬（例えばＡＣＴ−０６４９９２（マシテンタン）；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、二重エンドセリン受容体拮抗薬（例えばボセンタン（Ｔｒａｃｌｅｅｒ（登録商標））；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、プロスタサイクリン類似体（吸入イロプロスト、例えば（Ｖｅｎｔａｖｉｓ（登録商標））；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、抗ＣＴＧＦモノクローナル抗体（例えばＦＧ−３０１９）、エンドセリン受容体拮抗薬（Ａ−選択性）（例えばアンブリセタン（Ｌｅｔａｉｒｉｓ（登録商標））、Ｇｉｌｅａｄ）、ＡＢ００２４（Ａｒｒｅｓｔｏ）、リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）モノクローナル抗体（例えばＧＳ−６６２４（以前はＡＢ００２４）；Ｇｉｌｅａｄ）、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤（例えばＣＣ−９３０；Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ピルフェニドン（例えばＥｓｂｒｉｅｔ（登録商標）（ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ）、Ｐｉｒｅｓｐａ（登録商標）（塩野義））、ＩＦＮ−γ１ｂ（例えばＡｃｔｉｍｍｕｎｅ（登録商標）；ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ）、３つのＴＧＦ−βアイソフォーム全てに対する汎中和ＩｇＧ４ヒト抗体（例えばＧＣ１００８；Ｇｅｎｚｙｍｅ）、ＴＧＦ−β活性化阻害剤（例えばＳｔｒｏｍｅｄｉｘ（ＳＴＸ−１００））、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ｒｈＰＴＸ−２）（例えばＰＲＭ１５１；Ｐｒｏｍｅｄｉｏｒ）、二重特異性ＩＬ４／ＩＬ１３抗体（例えばＳＡＲ１５６５９７；Ｓａｎｏｆｉ）、インテグリンαｖβ６を標的とするヒト化モノクローナル抗体（ＢＩＢＦ  １１２０；Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｎ−アセチルシステイン（Ｚａｍｂｏｎ  ＳｐＡ）、シルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ（登録商標）））、ＴＮＦ拮抗薬（例えばエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））；Ｐｆｉｚｅｒ）、グルココルチコイド（例えばプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾンフランカルボン酸エステル、フルチカゾンプロピオン酸エステル、およびフルチカゾンフランカルボン酸エステル）、気管支拡張剤（例えばロイコトリエン変性剤（例えば（モンテルカスト（ＳＩＮＧＵＡＩＲ（登録商標）））、抗コリン作動性気管支拡張剤（例えばイプラトロピウムブロミドおよびチオトロピウム）、短期作用性β２−作動薬（例えばイソエタリンメシレート（Ｂｒｏｎｋｏｍｅｔｅｒ（登録商標））、アドレナリン、サルブタノール／アルブテロール、およびテルブタリン）、長期作用性β２−作動薬（例えばサルメテロール、フォルモテロール、インデカテロール（Ｏｎｂｒｅｚ（登録商標））、および非限定的にＳＹＭＢＩＣＯＲＴ（登録���標）（ブデソニドおよびフォルモテロールの両方を含む）を含む気管支拡張剤の組み合わせ、コルチコステロイド（例えばプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾンフランカルボン酸エステル）、メチル化キサンチンおよびその誘導体（例えばカフェイン、アミノフィリン、ＩＢＭＸ、パラキサンチン、ペントキシフィリン、テオブロミン、およびテオフィリン）、好中球エラスターゼ阻害剤（例えばＯＮＯ−５０４６、ＭＲ−８８９、Ｌ−６９４，４５８、ＣＥ−１０３７、ＧＷ−３１１６１６、およびＴＥＩ−８３６２、ならびに遷移状態阻害剤、例えばＯＮＯ−６８１８、ＡＥ−３７６３、ＦＫ−７０６、ＩＣＩ−２００，８８０、ＺＤ−０８９２およびＺＤ−８３２１）、ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えばロフルミラスト（ＤＡＸＡＳ（登録商標）；Ｄａｌｉｒｅｓｐ（登録商標））、シロミラスト（Ａｒｉｆｌｏ（登録商標）、ＳＢ−２０７４９９）およびソホスブビル（Ｓｏｖａｌｄｉ（登録商標））が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４１】
９．１．肝線維症の現行の治療
肝線維症を理解することおよび治療のターゲットを定義することにおける著しい発展にもかかわらず、進行した肝疾患患者における臨床使用のために認可された抗線維症薬の数は限られている（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。確立された線維症の退縮が、効果的インターフェロン治療に供された慢性肝疾患の選択された個体において遂行され得る（Ｓｈｉｒａｔｏｒｉ  Ｙ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎ．  Ｉｎｔｅｒｎ．  Ｍｅｄ．  ２０００；  １３２（７）：  ５１７−５２４）。しかし、大規模な患者コホートは、従来の処置に応答せず、したがって線維症から硬変へ進行するリスクを依然として有する（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。
【０１４２】
コルヒチンおよびマロチラートを含む、潜在的抗線維症活性を有する複数の化合物が、ヒトの治験において試験されたが、効果的でないことが見出された（Ｂｒｅｎｎｅｒ  Ｄ  Ａ  ａｎｄ  Ａｌｃｏｒｎ  Ｊ  Ｍ，  Ｓｅｍｉｎ．  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓ．  １９９０；  １０（１）：  ７５−８３；  Ｔａｋａｓｅ  Ｓ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．  Ｊｐｎ．，  １９８８；  ２３（６）：  ６３９−６４５）。マロチラート、ゲニステイン、クルクミンおよびシリマリンなどの多くの薬剤は、インビトロで、そして実験動物モデルにおいて効果的であることが示されている（Ｔａｋａｓｅ  Ｓ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｊｐｎ．  １９８８；  ２３（６）：  ６３９−６４５；  Ｆｕ  Ｙ  Ｍ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｏｌ．  Ｐｈａｒｍ．，  ２００８；  ３（２）：  ３９９−４０９；  Ｇｅｏｒｇｅ  Ｊ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ２００６；  ２６（３−４）：  １８−２６）。異なる機構レベルで作用する併用療法が、ＨＳＣ活性化および肝線維症の病原性を遮断するのにより適切である可能性がある（Ｍｏｒｍｏｎｅ  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｌ．  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．  ２０１１  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３０；  １９３（３）：  ２２５−２３１）。
【０１４３】
１０．キナーゼおよびリン酸化
キナーゼは、リン酸ドナー（通常はアデノシン−５’−三リン酸（ＡＴＰ））から受容体基質へのホスホリル転移反応を触媒する遍在的酵素群である。全てのキナーゼは、本質的に同じホスホリル転移反応を触媒するが、それらは、その基質特異性、構造、およびそれらが参加する経路において著しい多様性を示す。全ての利用可能なキナーゼ配列（およそ６０，０００配列）の近年の分類は、キナーゼが、相同的な（共通の祖先に由来することを意味する）タンパク質の２５のファミリーに群分けし得ることを示している。これらのキナーゼファミリーは、構造的折り畳みの類似性に基づいて１２の折り畳み群に分類される。さらに、２５ファミリーのうち２２（全配列のおよそ９８．８％）が、構造的折り畳みが既知である１０の折り畳み群に属している。他の３つのファミリーのうち、リン酸キナーゼは別個の折り畳み群を形成し、残り２つのファミリーは両方とも膜内在キナーゼであり、最後の折り畳み群を含む。これらの折り畳み群は、最も広範囲に認められるタンパク質折り畳みの幾つか、例えばロスマン様折畳み（トポロジー順序β−α−β−α−βで２つのαヘリックスによって連結される３つ以上のパラレルβ鎖）、フェレドキシン様折畳み（シグネイチャーβαββαβ二次構造をその骨格に沿って有する一般的なα＋βタンパク質）、ＴＩＭバレル折り畳み（ペプチド骨格に沿って交互に入れ替わる８つのαヘリックスおよび８つのパラレルβ鎖からなる保存されたタンパク質折り畳みを意味する）、およびアンチパラレルβバレル折り畳み（ベータバレルは、ツイストおよびコイルにより閉鎖構造を形成する大きなベータシートであり、第一の鎖が最後の鎖と水素結合する）を含むだけでなく、タンパク質構造の全ての主要なクラス（全てα、全てβ、α＋β、α／β）を含む。折り畳み群の中で、各ファミリーのヌクレオチド結合ドメインのコアは同じ構造様式を有し、タンパク質コアのトポロジーは同一であるか、または環の並べ替えによって関連している。折り畳み群内のファミリー間の相同性は意味しない。
【０１４４】
グループＩ（２３，１２４配列）キナーゼは、タンパク質Ｓ／Ｔ−Ｙキナーゼ、非典型プロテインキナーゼ、脂質キナーゼ、およびＡＴＰグラスプ酵素を含み、タンパク質Ｓ／Ｔ−Ｙキナーゼ、および非典型プロテインキナーゼファミリーをさらに含む（２２．０７４配列）。これらのキナーゼとしては、コリンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３２）；プロテインキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３７）；ホスホリラーゼキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３８）；ホモセリンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３９）；Ｉ−ホスファチジルイノシトール４−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．６７）；ストレプトマイシン６−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．７２）；エタノールアミンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．８２）；ストレプトマイシン３’−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．８７）；カナマイシンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．９５）；５−メチルチオリボースキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１００）；ビオマイシンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１０３）；［ヒドロキシメチルグルタリル−ＣｏＡレダクターゼ（ＮＡＤＰＨ２）］キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１０９）；タンパク質チロシンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１１２）；［イソサイトレートデヒドロゲナーゼ（ＮＡＤＰＨ＋）］キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１１６）；［ミオシン軽鎖］キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１１７）；ヒグロマイシン−Ｂキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１１９）；カルシウム／カルモジュリン依存プロテインキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１２３）；ロドプシンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１２５）；［ベータ−アドレナリン作動性受容体］キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１２６）；［ミオシン重鎖］キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１２９）；［タウタンパク質］キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１３５）；マクロライド２’−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１３６）；Ｉ−ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１３７）；［ＲＮＡ−ポリメラーゼ］−サブユニットキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１４１）；ホスファチジルイノシトール−４，５−ビスホスフェート３−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１５３）；およびホスファチジルイノシトール−４−ホスフェート３−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１５４）が挙げられる。グループＩは、脂質キナーゼファミリー（３２１配列）をさらに含む。これらのキナーゼとしては、Ｉ−ホスファチジルイノシトール−４−ホスフェート５−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．６８）；ＩＤ−ミオ−イノシトール−トリホスフェート３−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１２７）；イノシトール−テトラキスホスフェート５−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１４０）；Ｉ−ホスファチジルイノシトール−５−ホスフェート４−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１４９）；Ｉ−ホスファチジルイノシトール−３−ホスフェート５−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１５０）；イノシトール−ポリホスフェートマルチキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１５１）；およびイノシトール−ヘキサキホスフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．１．４２１）が挙げられる。グループＩは、ＡＴＰ−グラスプキナーゼ（７２９配列）をさらに含み、このキナーゼとしてはイノシトール−テトラキホスフェートＩ−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１３４）；ピルベート、ホスフェート二キナーゼ（ＥＣ２．７．９．１）；およびピルベート、水ジキナーゼ（ＥＣ２．７．９．２）が挙げられる。
【０１４５】
グループＩＩ（１７，０７１配列）キナーゼは、ロスマン様キナーゼを含む。グループＩＩは、Ｐ−ループキナーゼファミリー（７，７３２配列）を含む。これらには、グルコノキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１２）；ホスホリブロキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１９）；チミジンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２１）；リボシルニコチンアミドキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２２）；デホスホ−ＣｏＡキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２４）；アデニリルスルフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２５）；パントテン酸キナーゼ（ＥＣ２．７．１．３３）；プロテインキナーゼ（細菌性）（ＥＣ２．７．１．３７）；ウリジンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．４８）；シキメートキナーゼ（ＥＣ２．７．１．７１）；デオキシシチジンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．７４）；デオキシアデノシンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．７６）；ポリヌクレオチド５’−ヒドロキシル−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．７８）；６−ホスフォフルクト−２−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１０５）；デオキシグアノシンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１１３）；テトラアシルジサッカリド４’−キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１３０）；デオキシヌクレオシドキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１４５）；アデノシルコビンアミドキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１５６）；ポリホスフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．１）；ホスホメバロネートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．２）：アデニレートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．３）；ヌクレオシド−ホスフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．４）；グアニレートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．８）；チミジレートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．９）；ヌクレオシド−トリホスフェート−アデニレートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．１０）；（デオキシ）ヌクレオシド−ホスフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．１３）；シチジレートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．１４）；およびウリジレートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．２２）が挙げられる。グループＩＩは、ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼファミリー（８１５配列）をさらに含む。これらの酵素には、プロテインキナーゼ（ＨＰｒキナーゼ／ホスファターゼ）（ＥＣ２．７．１．３７）；ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＧＴＰ）（ＥＣ．４．１．１．３２）；およびホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＡＴＰ）（ＥＣ４．１．１．４９）が挙げられる。グループＩＩは、ホスホグリセレートキナーゼ（１，３５１配列）ファミリーをさらに含む。これらの酵素は、ホスホグリセレートキナーゼ（ＥＣ２．７．２．３）およびホスホグリセレートキナーゼ（ＧＴＰ）（ＥＣ２．７．２．１０）を含む。グループＩＩは、アスパルトキナーゼファミリー（２，１７１配列）をさらに含む。これらの酵素には、カルバメートキナーゼ（ＥＣ２．７．２．２）；アスパルテートキナーゼ（ＥＣ２．７．２．４）；アセチルグルタメートキナーゼ（ＥＣ２．７．２．８１）；グルタメート５−キナーゼ（ＥＣ２．７．２．１）およびウリジレートキナーゼ（ＥＣ２．７．４）が挙げられる。グループＩＩは、ホスホフルクトキナーゼ様キナーゼファミリー（１，９９８配列）をさらに含む。これらの酵素としては、６−ホスホフルクトキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１１）；ＮＡＤ（＋）キナーゼ（ＥＣ２．７．１．２３）；Ｉ−ホスホフルクトキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５６）；ジホスフェート−フルクトース−６−ホスフェートＩ−ホスホトランスフェラーゼ（ＥＣ２．７．１．９０）；スフィンガニンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．９１）；ジアシルグリセロールキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１０７）；およびセラミドキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１３８）が挙げられる。グループＩＩは、リボキナーゼ様ファミリー（２，７２２配列）をさらに含む。これらの酵素としては、グルコキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２）；ケトヘキソキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３）；フルクトキナーゼ（ＥＣ２．７．１．４）；６−ホスホフルクトキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１１）；リボキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１５）；アデノシンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２０）；ピリドキサルキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３５）；２−デヒドロ−デオキシグルコノキナーゼ（ＥＣ２．７．１．４５）；ヒドロキシメチルピリミジンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．４９）；ヒドロキシエチルチアゾールキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５０）；Ｉ−ホスホフルクトキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５６）；イノシンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．７３）；５−デヒドロ−２−デオキシグルコノキナーゼ（ＥＣ２．７．１．９２）；タガトース−６−ホスフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１４４）；ＡＤＰ−依存ホスホフルクトキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１４６）；ＡＤＰ−依存グルコキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１４７）；およびホスホメチルピリミジンキナーゼ（ＥＣ２．７．４．７）が挙げられる。グループＩＩは、チアミンピロホスホキナーゼ（ＥＣ２．７．６．２）を含むチアミンピロホスホキナーゼファミリー（１７５配列）をさらに含む。グループＩＩは、グリセレートキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３１）を含むグリセレートキナーゼファミリー（１０７配列）をさらに含む。
【０１４６】
グループＩＩＩキナーゼ（１０，９７３配列）は、フェロドキシン様折り畳みキナーゼを含む。グループＩＩＩは、ヌクレオシド−ジホスフェートキナーゼファミリー（９２３配列）をさらに含む。これらの酵素は、ヌクレオシド−ジホスフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．６）を含む。グループＩＩＩは、ＨＰＰＫキナーゼファミリー（６０９配列）をさらに含む。これらの酵素は、２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−ヒドロキシメチルジヒドロプテリジンピロホスホキナーゼ（ＥＣ２．７．６．３）を含む。グループＩＩＩは、グアニドキナーゼファミリー（３２４配列）をさらに含む。これらの酵素としては、グアニドアセテートキナーゼ（ＥＣ２．７．３．１）；クレアチンキナーゼ（ＥＣ２．７．３．２）；アルギニンキナーゼ（ＥＣ２．７．３．３）；およびロンブリシンキナーゼ（ＥＣ２．７．３．５）が挙げられる。グループＩＩＩは、ヒスチジンキナーゼファミリー（９，１１７配列）をさらに含む。これらの酵素としては、プロテインキナーゼ（ヒスチジンキナーゼ）（ＥＣ２．７．１．３７）；［ピルベートデヒドロゲナーゼ（リポアミド）］キナーゼ（ＥＣ２．７．１．９９）；および［３−メチル−２−オキシブタノエートデヒドロゲナーゼ（リポアミド）］キナーゼ（ＥＣ２．７．１．１１５）が挙げられる。
【０１４７】
グループＩＶキナーゼ（２，７６８配列）は、リボヌクレアーゼＨ様キナーゼを含む。これらの酵素としては、ヘキソキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１）；グルコキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２）；フルクトキナーゼ（ＥＣ２．７．１．４）；ラミュロキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５）；マンノキナーゼ（ＥＣ２．７．１．７）；グルコノキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１２）；Ｌ−リブロキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１６）；キシルロキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１７）；エリスリトールキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２７）；グリセロールキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３０）；パントテン酸キナーゼ（ＥＣ２．７．１．３３）；Ｄ−リブロキナーゼ（ＥＣ２．７．１．４７）；Ｌ−フコロキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５１）；Ｌ−キシルロキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５３）；アロースキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５５）；２−デヒドロ−３−デオキシガラクトノキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５８）；Ｎ−アセチルグルコサミンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５９）；Ｎ−アシルマンノサミンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．６０）；ポリホスフェート−グルコースホスホトランスフェラーゼ（ＥＣ２．７．１．６３）；ベータ−グルコシドキナーゼ（ＥＣ２．７．１．８５）；アセテートキナーゼ（ＥＣ２．７．２．１）；ブチレートキナーゼ（ＥＣ２．７．２．７）；分枝鎖脂肪酸キナーゼ（ＥＣ２．７．２．１４）；およびプロピオン酸キナーゼ（ＥＣ２．７．２．１５）が挙げられる。
【０１４８】
グループＶキナーゼ（１，１１９配列）は、ＴＩＭβ−バレルキナーゼを含む。これらの酵素は、ピルビン酸キナーゼ（ＥＣ２．７．１．４０）を含む。
【０１４９】
グループＶＩキナーゼ（８８５配列）は、ＧＨＭＰキナーゼを含む。これらの酵素としては、ガラクトキナーゼ（ＥＣ２．７．１．６）；メバロネートキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３６）；ホモセリンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３９）；Ｌ−アラビノキナーゼ（ＥＣ２．７．１．４６）；フコキナーゼ（ＥＣ２．７．１．５２）；シキメートキナーゼ（ＥＣ２．７．１．７１）；４−（シチジン５’−ジホスホ）−２−Ｃ−メチル−Ｄ−エリスリオキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１４８）；およびホスホメバロネートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．２）が挙げられる。
【０１５０】
グループＶＩＩキナーゼ（１，８４３配列）は、ＡＩＲシンターゼ様キナーゼを含む。これらの酵素としては、チアミン−ホスフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．１６）およびセレニド、水ジキナーゼ（ＥＣ２．７．９．３）が挙げられる。
【０１５１】
グループＶＩＩＩキナーゼ（５６５配列）は、リボフラビンキナーゼ（５６５配列）を含む。これらの酵素は、リボフラビンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２６）を含む。
【０１５２】
グループＩＸキナーゼ（１９７配列）は、ジヒドロキシアセトンキナーゼを含む。これらの酵素は、グリセロンキナーゼ（ＥＣ２．７．１．２９）を含む。
【０１５３】
グループＸキナーゼ（１４８配列）は、推定グリセレートキナーゼを含む。これらの酵素は、グリセレートキナーゼ（ＥＣ２．７．１．３１）を含む。
【０１５４】
グループＸＩキナーゼ（４４６配列）は、ポリホスフェートキナーゼを含む。これらの酵素は、ポリホスフェートキナーゼ（ＥＣ２．７．４．１）を含む。
【０１５５】
グループＸＩＩキナーゼ（２６３配列）は、膜内在キナーゼを含む。グループＸＩＩは、ドリコールキナーゼファミリーを含む。これらの酵素は、ドリコールキナーゼ（ＥＣ２．７．１．１０８）を含む。グループＸＩＩは、ウンデカプレノールキナーゼファミリーをさらに含む。これらの酵素は、ウンデカプレノールキナーゼ（ＥＣ２．７．１．６６）を含む。
【０１５６】
キナーゼは多数の細胞代謝経路およびシグナル伝達経路で必須の役割を果たし、それらは、構造レベル、生化学レベルおよび細胞レベルで最もよく研究された酵素の１つである。全てのキナーゼが同じリン酸ドナー（ほとんどの場合ＡＴＰ）を用い、見かけ上同じホスホリル転移反応を触媒するという事実にもかかわらず、それらは、その構造的折り畳みおよび基質認識メカニズムにおいて顕著な多様性を示す。これはおそらく、主にそれらの基質の構造および特性の極めて多様な性質のためである。
【０１５７】
１０．１．有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ（ＭＫ２およびＭＫ３）
ＭＡＰＫ活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰ−ＫＡＰＫ）の異なる群が、有糸分裂促進プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の下流で規定されてきた。これらの酵素は、ＭＡＰＫの直接的基質ではない標的タンパク質にシグナルを伝達し、それゆえＭＡＰＫカスケードによるリン酸化依存性シグナル伝達を多様な細胞機能に中継するように働く。これらの群の１つは、３つのＭＡＰＫＡＰＫ：即ち、ＭＫ２、ＭＫ３（３ｐＫとしても公知）およびＭＫ５（ＰＲＡＫとも称される）によって形成される。有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（「ＭＡＰＫＡＰＫ２」、「ＭＡＰＫＡＰ−Ｋ２」または「ＭＫ２」とも称される）は、セリン／トレオニン（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）プロテインキナーゼファミリーのキナーゼである。ＭＫ２は、ＭＫ３に対して高度に相同である（およそ７５％のアミノ酸同一性）。ＭＫ２およびＭＫ３のキナーゼドメインは、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼ（ＣａＭＫ）、ホスホリラーゼｂキナーゼ、およびリボソームＳ６キナーゼ（ＲＳＫ）アイソフォームのＣ−末端キナーゼドメイン（ＣＴＫＤ）と最も類似する（約３５％〜４０％同一）。ｍｋ２遺伝子は、２つの選択的にスプライスされる転写産物の３７０アミノ酸（ＭＫ２Ａ）および４００アミノ酸（ＭＫ２Ｂ）をコードする。ｍｋ３遺伝子は、３８２アミノ酸の１つの転写産物をコードする。ＭＫ２およびＭＫ３タンパク質は高度に相同であるが、ＭＫ２Ａはより短いＣ−末端領域を有する。ＭＫ２ＢのＣ−末端は、より短いＭＫ２Ａアイソフォームには存在しない、二つの部分に分かれる機能的な核局在化配列（ＮＬＳ）（Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｘａａ10−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３）を有しており、選択的スプライシングがＭＫ２アイソフォームの細胞内局在化を決定することを示している。ＭＫ３は、類似の核局在化配列を有する。ＭＫ２ＢおよびＭＫ３の両方で見出されるこの核局在化配列は、ｐ３８αおよびｐ３８βと、ＭＫ２ＢおよびＭＫ３との特異的な相互作用を媒介することが複数の研究によって示されたＤドメイン（Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４）を包含する。ＭＫ２ＢおよびＭＫ３はまた、ＮＬＳおよびＤドメインに対してＮ−末端に位置する機能的な核外移送シグナル（ＮＥＳ）を有する。ＭＫ２Ｂ中のＮＥＳは、刺激に続く核外移送（レプトマイシンＢによって阻害され得る過程）を惹起するのに十分である。ＭＫ２およびＭＫ３の触媒ドメインに対してＮ−末端の配列は、プロリンに富み、１つ（ＭＫ３）または２つ（ＭＫ２）の推定Ｓｒｃ相同性３（ＳＨ３）ドメイン−結合部位を含み、複数の研究で、ＭＫ２がインビトロでｃ−Ａｂ１のＳＨ３ドメインへの結合を媒介することが示された。近年の研究は、このドメインがＭＫ２媒介性の細胞遊走に関与することを示唆する。
【０１５８】
ＭＫ２ＢおよびＭＫ３は主に休止細胞の核に存在し、一方でＭＫ２Ａは細胞質に存在する。ＭＫ２ＢおよびＭＫ３の両方が、ストレス刺激時に染色体領域維持タンパク質（ＣＲＭ１）依存性メカニズムを介して細胞質に急速に移送される。キナーゼの活性化ループ内のＴｈｒ３３４のホスホミメティック突然変異はＭＫ２Ｂの細胞質局在化を増進するため、ＭＫ２Ｂの核外移送はキナーゼ活性化によって媒介されるようである。理論に拘束されるわけではないが、ＭＫ２ＢおよびＭＫ３は、構成的に活性なＮＬＳおよびリン酸化で調節されるＮＥＳを含み得ると考えられる。
【０１５９】
ＭＫ２およびＭＫ３は普遍的に発現するようであるが、心臓、骨格筋および腎組織で主に発現する。
【０１６０】
１０．１．１．活性化
ｐ３８αおよびｐ３８βの様々なアクチベーターが、ＭＫ２およびＭＫ３活性を強力に刺激する。ｐ３８は、４つのプロリン指定部位（Ｔｈｒ２５、Ｔｈｒ２２２、Ｓｅｒ２７２およびＴｈｒ３３４）でＭＫ２のインビトロおよびインビボリン酸化を媒介する。これらの部位のうち、Ｔｈｒ２５のみがＭＫ３で保存されていない。理論に拘束されるわけではないが、リン酸化Ｔｈｒ２５の機能は不明であるが、２つのＳＨ３ドメイン結合部位の間でのその位置は、それがタンパク質−タンパク質相互反応を調節する可能性があることを示唆している。ＭＫ２中のＴｈｒ２２２（ＭＫ３ではＴｈｒ２０１）は、キナーゼドメインの活性化ループ内に存在し、ＭＫ２およびＭＫ３キナーゼ活性のために必須であることが示された。ＭＫ２中のＴｈｒ３３４（ＭＫ３ではＴｈｒ３１３）は、触媒ドメインに対してＣ−末端に位置し、キナーゼ活性に必須である。ＭＫ２の結晶構造が解明されており、理論に拘束されるわけではないが、Ｔｈｒ３３４のリン酸化がＭＫ２の核内外移送のスイッチとして働き得ることを示唆する。Ｔｈｒ３３４のリン酸化はまた、触媒ドメインへのＭＫ２のＣ−末端の結合を弱めるかまたは妨害して、ＮＥＳを露出させて核外移送を促進できる。
【０１６１】
ｐ３８は核内でＭＫ２およびＭＫ３を活性化できる一方で、実験的証拠から、ＭＫ２およびＭＫ３の活性化および核外移送が、ｐ３８の安定化および局在化も指令するリン酸化依存性立体構造スイッチと連動すること、ならびにｐ３８そのものの細胞内の位置はＭＫ２およびおそらくＭＫ３によって制御されると示唆されることが、複数の研究から示されている。さらに別の研究から、核のｐ３８が、ＭＫ２のリン酸化および活性化に続きＭＫ２との複合体中で細胞質へと移送されることが示された。ｐ３８レベルがＭＫ２欠乏細胞中で低く、触媒的に不活性なＭＫ２タンパク質の発現がｐ３８レベルを回復させることを、複数の研究が示しているため、ｐ３８とＭＫ２との間の相互作用はｐ３８の安定化のために重要であり得る。
【０１６２】
１０．１．２．基質および機能
さらに別の研究によって、小さな熱ショックタンパク質ＨＳＰＢ１（熱ショックタンパク質２７またはＨｓｐ２７としても公知）、リンパ球特異性タンパク質ＬＳＰ−１、およびビメンチンがＭＫ２によってリン酸化されることが示された。ＨＳＰＢ１は大きなオリゴマーを形成するため特に興味深く、それは分子シャペロンとして機能し、細胞を熱ショックおよび酸化ストレスから保護する可能性がある。リン酸化されると、ＨＳＰＢ１は大きなオリゴマーを形成するその能力を失い、アクチン重合を阻止できず、このことは、ＨＳＰＢ１のＭＫ２媒介リン酸化が、アクチンの動力学の調節を目的とする恒常性維持機能に役立ち、さもなければストレス時に脱安定化されるであろうことを示唆している。
【０１６３】
ＭＫ３はまた、インビトロおよびインビボでＨＳＰＢ１をリン酸化することが示されたが、ストレスの多い条件下でのその役割はまだ解明されていない。ＭＫ２は、多くの基質をＭＫ３と共有する。両酵素は、同等の基質優先性を有し、ペプチド基質を類似の速度定数でリン酸化する。ＭＫ２による効率的なリン酸化に必要な最小の配列はＨｙｄ−Ｘａａ−Ａｒｇ−Ｘａａ−Ｘａａ−ｐＳｅｒ／Ｔｈｒ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５）であることが見出された（ここでＨｙｄは、大きな疎水性残基である）。
【０１６４】
実験的証拠は、サイトカイン生合成の調節および細胞遊走におけるｐ３８の役割を支持している。マウスでのｍｋ２遺伝子標的欠失は、ｐ３８が多くの類似のキナーゼの活性化を媒介するにもかかわらず、ＭＫ２がこれらのｐ３８依存性の生物学的過程を担う重要なキナーゼと思われることを示唆している。ＭＫ２の損失は、（ｉ）サイトカイン、例えば腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、およびガンマインターフェロン（ＩＦＮ−γ））のリポ多糖類（ＬＰＳ）誘導性の合成の欠如、ならびに（ｉｉ）マウス胚線維芽細胞、平滑筋細胞、および好中球の遊走における変化、をもたらす。
【０１６５】
炎症応答におけるＭＫ２の役割と一致して、ＭＫ２欠損マウスは、リステリア・モノサイトゲネス（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）感染に対する感受性の上昇および巣状虚血に続く炎症媒介性神経細胞死の減少を示した。ＭＫ２欠損細胞中でｐ３８タンパク質レベルはまた有意に低下するため、これらの表現型がＭＫ２の損失のみによるものか否かを識別する必要が有った。これを達成するために、ＭＫ２変異体をＭＫ２欠損細胞中で発現させ、その結果は、ＭＫ２の触媒活性はｐ３８レベルの回復に必要ではないが、サイトカイン生合成の調節には要求されることを示した。
【０１６６】
ＭＫ２のノックアウトまたはノックダウン研究は、活性化ＭＫ２は、ＩＬ−６ｍＲＮＡの高ＡＵ−３’非翻訳領域と相互作用するタンパク質のリン酸化を介してＩＬ−６ｍＲＮＡの安定性を強化することを強く裏づけた。特に、ＭＫ２は、ｈｎＲＮＰＡ０（ＩＬ−６  ＲＮＡを安定化するｍＲＮＡ結合タンパク質）のリン酸化を主に担うことが示された。加えて、多様な炎症疾患を究明する幾つかのさらに別の研究から、炎症促進性サイトカイン、例えばＩＬ−６、ＩＬ−１β、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−８のレベルが、安定した慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の患者からの、または喫煙者の肺胞マクロファージからの誘発喀痰中で増加することが見出された（Ｋｅａｔｉｎｇｓ  Ｖ．  ｅｔ  ａｌ，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ，  １９９６，  １５３：５３０−５３４；Ｌｉｍ，  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ，  ２０００，  １６２：１３５５−１３６０）。インターロイキン−８（ＩＬ−８）およびインターロイキン−６（ＩＬ−６）などの炎症促進性サイトカインのレベル上昇、ならびに細胞間接着分子−１（ＩＣＡＭ−１）および血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）などの関連する下流の細胞接着分子（ＣＡＭ）、マトリックスメタロプロテイナーゼ−７（ＭＭＰ−７）などのマトリックスメタトプロテイナーゼ、およびＳ１００カルシウム結合タンパク質Ａ１２（Ｓ１００Ａ１２、カルグラヌリンＣとしても公知）などのシグナル伝達分子の末梢血中のレベル上昇は、特発性肺線維症患者における死亡率、肺移植のない場合の生存、および疾患の進行と関係することが見出された（Ｒｉｃｈａｒｄｓｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ，  ２０１２，  １８５：  ６７−７６；Ｒｉｃｈａｒｄｓ，  Ｔ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ，  １８１：  Ａ１１２０，  ２０１０；Ｍｏｏｄｌｅｙ，  Ｙ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．，  ２９（４）：  ４９０−４９８，  ２００３）。総括すれば、これらの研究から、ＭＫ２活性化によって誘発される炎症性サイトカインのレベル上昇が気道または肺組織疾患の病原に関与することを示し、気道または肺組織疾患、例えば特発性肺線維症および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の処置のための抗サイトカイン療法の能力が示唆される（Ｃｈｕｎｇ，  Ｋ．，  Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ，  ２００１，  １８：  Ｓｕｐｐｌ．  ３４：  ５０−５９）。
【０１６７】
１０．１．３．ｍＲＮＡ翻訳の調節
ＭＫ２ノックアウトマウスまたはＭＫ２欠損細胞を用いた過去の研究では、ＭＫ２がそのｍＲＮＡの翻訳速度を高めることによってＴＮＦ−α、ＩＬ−１およびＩＬ−６を含む炎症性サイトカインの生成を増加させることが示された。ＴＮＦ−αの転写、プロセシング、および放出における有意な減少は、ＭＫ２欠損マウスでは検出され得なかった。ｐ３８経路はｍＲＮＡ安定性の調節に重要な役割を果たすことが知られており、ＭＫ２は、それによってｐ３８がこの機能を媒介するおそらく標的である。ＭＫ２欠損マウスを利用する研究で、ＭＫ２の触媒活性がサイトカイン生成および遊走への影響に必要であることが示され、理論に拘束されるわけではないが、ＭＫ２は、ｍＲＮＡ安定性に関与する標的をリン酸化することが示唆される。これと一致して、ＭＫ２は、異種の核リボヌクレオタンパク質（ｈｎＲＮＰ）Ａ０、トリステトラプロリン、ポリ（Ａ）−結合タンパク質ＰＡＢＰ１、およびＨｕＲ（ＲＮＡ結合タンパク質のｅｌａｖ（ドロソフィラ・メラノガスターでの胚致死性異常の視覚（ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ−ｌｅｔｈａｌ  ａｂｎｏｒｍａｌ  ｖｉｓｕａｌ  ｉｎ  Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）ファミリーの遍在的に発現されるメンバー）に結合および／またはこれらをリン酸化することが示された。これらの基質は、その３’−非翻訳領域に高ＡＵ要素を含むｍＲＮＡに結合またはそれらと共精製されることが知られており、ＭＫ２がＴＮＦ−αなどの高ＡＵ  ｍＲＮＡの安定性を調節し得ることが示唆される。現在、ＭＫ３が類似の機能を果たすか否かは不明であるが、ＭＫ２欠損線維芽細胞のＬＰＳ処置はｈｎＲＮＰ  Ａ０のリン酸化を完全に消失させるため、ＭＫ３がＭＫ２の欠損を補填し得ないことが示唆される。
【０１６８】
ＭＫ３は、ＭＫ２と一緒に真核細胞伸長因子２（ｅＥＦ２）キナーゼのリン酸化に加わる。ｅＥＦ２キナーゼは、ｅＥＦ２をリン酸化しこれを不活化する。ｅＥＦ２活性は、翻訳時のｍＲＮＡの伸長に必須であり、Ｔｈｒ５６上でのｅＥＦ２のリン酸化は、ｍＲＮＡ翻訳の終了をもたらす。Ｓｅｒ３７７上でのｅＥＦ２キナーゼのＭＫ２およびＭＫ３リン酸化は、これらの酵素がｅＥＦ２キナーゼ活性をモジュレートし、それによってｍＲＮＡ翻訳伸長を調節し得ることを示唆している。
【０１６９】
１０．１．４．ＭＫ２およびＭＫ３による転写調節
核内ＭＫ２は、多くのＭＫと同様に、ｃＡＭＰ応答配列結合（ＣＲＥＢ）、血清応答因子（ＳＲＦ）、および転写因子ＥＲ８１のリン酸化に寄与する。野生型細胞およびＭＫ２欠損細胞の比較によって、ＭＫ２がストレスによって誘発される主要なＳＲＦキナーゼであることが明らかになり、ストレス媒介性の即時初期応答におけるＭＫ２の役割が示唆される。ＭＫ２およびＭＫ３の両方が、インビボで塩基性ヘリックス−ループ−ヘリックス転写因子Ｅ４７と相互作用し、インビトロでＥ４７をリン酸化する。Ｅ４７のＭＫ２媒介リン酸化はＥ４７の転写活性を抑制しそれによってＥ４７依存性遺伝子発現を阻害することが見出されており、ＭＫ２およびＭＫ３が組織特異性遺伝子発現および細胞分化を調節し得ることが示唆される。
【０１７０】
１０．１．５．ＭＫ２およびＭＫ３の他の標的
幾つかの生物学的過程におけるＭＫ２およびＭＫ３の多様な機能を反映して、幾つかの他のＭＫ２およびＭＫ３の基質もまた同定されている。足場となるタンパク質１４−３−３ζは、生理学的なＭＫ２基質である。複数の研究から、１４−３−３ζがプロテインキナーゼ、ホスファターゼ、および転写因子を含む細胞シグナル伝達経路の多数の成分と相互作用することが示される。また別の研究では、Ｓｅｒ５８上での１４−３−３ζのＭＫ２媒介リン酸化がその結合活性を損なうことが示され、ＭＫ２が、通常は１４−３−３ζによって調節される幾つかのシグナル伝達分子の調節に影響を及ぼし得ることが示唆される。
【０１７１】
さらに別の研究で、ＭＫ２がまた、Ｓｅｒ７７上で７員のＡｒｐ２およびＡｒｐ３複合体のｐ１６サブユニット（ｐ１６−Ａｒｃ）と相互作用し、これをリン酸化することが示された。ｐ１６−Ａｒｃは細胞骨格アクチンの調節において役割を有し、ＭＫ２がこの過程に関与し得ることが示唆される。
【０１７２】
ＭＫ２およびＭＫ３はまた、５−リポキシゲナーゼをリン酸化し得る。５−リポキシゲナーゼは、炎症媒介物質ロイコトリエンの形成における最初の過程を触媒する。チロシンヒドロキシラーゼ、グリコーゲンシンターゼ、およびＡｋｔもまた、ＭＫ２によってリン酸化されることが示された。最後に、ＭＫ２は、腫瘍サプレッサータンパク質ツベリンをＳｅｒ１２１０上でリン酸化し、１４−３−３ζのためのドッキング部位を生じる。通常ツベリンおよびハマルチンは機能的複合体を形成し、この複合体はｍＴＯＲ依存性シグナル伝達と拮抗することによって細胞成長を負の方向に調節することから、ＭＫ２のｐ３８媒介活性化は、ツベリンに結合する１４−３−３ζを増加させることによって細胞成長を調節し得ることが示唆される。
【０１７３】
１０．２．キナーゼの阻害
真核細胞のプロテインキナーゼは、それらの触媒ドメインのおかげで関係する相同性タンパク質の最大のスーパーファミリーの１つを構成する。最も関係の深いプロテインキナーゼは、セリン／トレオニンリン酸化またはチロシンリン酸化のいずれかに特異的である。プロテインキナーゼは、細胞外刺激に対する細胞応答で不可欠の役割を果たす。したがって、プロテインキナーゼの刺激は、シグナル伝達系における最も一般的な活性化メカニズムの１つと考えられる。多くの基質が多数のプロテインキナーゼによってリン酸化を受けることが知られており、様々なプロテインキナーゼの触媒ドメインの一次配列に関するかなり多くの情報が発表されている。これらの配列は、ＡＴＰ結合、触媒、および構造的完全性の維持に関与する多数の残基を共有する。ほとんどのプロテインキナーゼは、よく保存された３０〜３２ｋＤａの触媒ドメインを有する。
【０１７４】
複数の研究で、プロテインキナーゼの調節要素の同定および利用が試みられた。これらの調節要素としては、阻害剤、抗体、および遮断ペプチドが挙げられる。
【０１７５】
１０．２．１．阻害剤
酵素阻害剤は酵素と結合し、それによって酵素活性を低下させる分子である。阻害剤の結合は、基質の酵素活性部位への侵入を停止させ、そして／または酵素がその反応を触媒するのを妨害できる。阻害剤の結合は、不可逆性または可逆性である。不可逆的阻害剤は通常、酵素と反応し、酵素がもはやその反応を触媒できないようにその酵素を化学的に変化させる（例えば、酵素活性に必要とされる重要なアミノ酸残基を修飾することによって）。対照的に、可逆性阻害剤は非共有結合によって結合し、これらの阻害剤が酵素、酵素−基質複合体、またはその両方を結合するか否かに応じて異なるタイプの阻害が生成される。
【０１７６】
酵素阻害剤は多くの場合、その特異性および能力によって評価される。本明細書で用いられる用語「特異性」は、阻害剤の選択的結合または他のタンパク質へのその結合の欠如を指す。本明細書で用いられる用語「能力」は、酵素の阻害に必要とされる阻害剤の濃度を示す、阻害剤の解離定数を指す。
【０１７７】
プロテインキナーゼの阻害剤は、プロテインキナーゼ活性調節のツールとして用いるために研究されてきた。阻害剤は、例えばサイクリン依存性（Ｃｄｋ）キナーゼ、ＭＡＰキナーゼ、セリン／トレオニンキナーゼ、Ｓｒｃファミリータンパク質チロシンキナーゼ、カルモジュリン（ＣａＭ）キナーゼ、カゼインキナーゼ、チェックポイントキナーゼ（Ｃｈｋｌ）、グリコーゲンシンターゼキナーゼ３（ＧＳＫ−３）、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−末端キナーゼ（ＪＮＫ）、有糸分裂促進プロテインキナーゼ１（ＭＥＫ）、ミオシン軽鎖キナーゼ（ＭＬＣＫ）、プロテインキナーゼＡ、Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢ）、プロテインキナーゼＣ、プロテインキナーゼＧ、タンパク質チロシンキナーゼ、Ｒａｆキナーゼ、およびＲｈｏキナーゼと共に使用するために研究されてきた。
【０１７８】
１０．２．２．遮断ペプチド
ペプチドは、２つ以上のアミノ酸の鎖で構成され、それによって鎖の中の１つのアミノ酸のカルボキシル基がペプチド結合を介して他のアミノ酸のアミノ基と連結された化合物である。ペプチドは、とりわけタンパク質の構造および機能の研究で用いられてきた。合成ペプチドは、とりわけタンパク質−ペプチド相互作用が生じる場所を知るプローブとして用いられる。阻害性ペプチドは、とりわけプロテインキナーゼ、癌タンパク質および他の障害の阻害に及ぼすペプチドの影響を調べるために臨床研究で用いられる。
【０１７９】
幾つかの遮断ペプチドの使用が、研究されてきた。例えば、細胞外シグナル調節キナーゼ（ＥＲＫ）である、ＭＡＰＫプロテインキナーゼは、細胞の増殖および分化に必須である。ＭＡＰＫの活性化はカスケードメカニズムを要求し、それによってＭＡＰＫが上流のＭＡＰＫＫ（ＭＥＫ）によってリン酸化され、このＭＥＫは今度は第三のキナーゼＭＡＰＫＫＫ（ＭＥＫＫ）によってリン酸化される。ＥＲＫ阻害性ペプチドは、ＥＲＫに結合することによってＭＥＫデコイとして機能する。
【０１８０】
他の遮断ペプチドには、オートカムチド−２関連阻害性ペプチド（ＡＩＰ）が含まれる。この合成ペプチドは、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ（ＣａＭＫＩＩ）の高度に特異的で強力な阻害剤である。ＡＩＰは、ＣａＭＫＩＩのための高度に選択的なペプチド基質である、オートカムチド−２のリン酸化不能類似体である。ＡＩＰは、１００ｎＭのＩＣ50（ＩＣ50は５０％阻害を得るために必要な阻害剤の濃度である）でＣａＭＫＩＩを阻害する。ＡＩＰ阻害は、シンチド−２（ＣａＭＫＩＩペプチド基質）およびＡＴＰに関して非拮抗的であるが、オートカムチド−２に関しては拮抗的である。この阻害は、Ｃａ2+／カルモジュリンの有無によって影響されない。ＣａＭＫＩＩ活性はＡＩＰ（１μＭ）によって完全に阻害されるが、ＰＫＡ、ＰＫＣおよびＣａＭＫＩＶは、影響されない。
【０１８１】
他の遮断ペプチドとしては、細胞分裂プロテインキナーゼ５（Ｃｄｋ５）阻害ペプチド（ＣＩＰ）が挙げられる。Ｃｄｋ５は、微小管タンパク質タウがｐ２５と結合する時、アルツハイマー病特異的ホスホ−エピトープにおいてこのタンパク質をリン酸化する。ｐ２５は、切り詰められたアクチベーターであり、これはアミロイドβペプチドへの暴露の際に生理学的Ｃｄｋ５アクチベーターｐ３５から生成される。ＣＩＰによるニューロンの感染の際に、ＣＩＰはｐ２５／Ｃｄｋ５活性を選択的に阻害し、皮質ニューロン中で異常なタウのリン酸化を抑制する。ＣＩＰが示すその特異性の理由は、完全には理解されていない。
【０１８２】
さらに別の遮断ペプチドが、細胞外調節キナーゼ２（ＥＲＫ２）、ＥＲＫ３、ｐ３８／ＨＯＧ１、プロテインキナーゼＣ、カゼインキナーゼＩＩ、Ｃａ2+／カルモジュリンキナーゼＩＶ、カゼインキナーゼＩＩ、Ｃｄｋ４、Ｃｄｋ５、ＤＮＡ依存性プロテインキナーゼ（ＤＮＡ−ＰＫ）、セリン／トレオニン−プロテインキナーゼＰＡＫ３、ホスホイノシチド（ＰＩ）−３キナーゼ、ＰＩ−５キナーゼ、ＰＳＴＡＩＲＥ（ｃｄｋ高度保存配列）、リボソームＳ６キナーゼ、ＧＳＫ−４、胚中心キナーゼ（ＧＣＫ）、ＳＡＰＫ（ストレス活性化プロテインキナーゼ）、ＳＥＫＩ（ストレスシグナル伝達キナーゼ）、および巣状接着キナーゼ（ＦＡＫ）について研究されてきた。
【０１８３】
１１．細胞貫通ペプチド（ＣＰＰ）
細胞貫通（ｐｅｎｅｔｒａｔａｉｎｇ）ペプチド（ＣＰＰ）は、哺乳動物細胞の形質膜を貫通し、膜を横断して多くのタイプおよび分子量の化合物を輸送し得るペプチドの一クラスである。これらの化合物には、タンパク質、ＤＮＡ、コンジュゲートペプチド、オリゴヌクレオチドなどのエフェクター分子、およびリポソームなどの小粒子が含まれる。ＣＰＰが、他のタンパク質へと化学的に連結または融合された場合、生じる融合タンパク質は、なおも細胞に侵入できる。形質導入の厳密なメカニズムは不明であるが、これらのタンパク質の内在化は、受容体媒介またはトランスポーター媒介であるとは考えられていない。ＣＰＰは一般的に１０〜１６アミノ酸長であり、例えばアルギニンおよび／またはリジンに富むペプチドなど、それらの組成にしたがって群分けされ得る。
【０１８４】
細胞中にエフェクター分子を輸送できるＣＰＰの使用は、それらが積荷分子の細胞内取り込みを促進することから、薬物の設計においてますます魅力的になった。これらの細胞貫通ペプチドは、それらの配列にしたがって両親媒性（極性または非極性末端の両方を有することを意味する）または陽イオン性（正味の正電荷原子を含むことを意味する、またはそれに関係する）として一般に分類され、巨大分子のための非侵襲性送達技術を提供する。ＣＰＰは多くの場合、「トロージャンペプチド」、「膜輸送配列」、「タンパク質形質導入ドメイン（ＰＴＤ）」、または「細胞透過性タンパク質（ＣＰＰ）」と称される。ＣＰＰはまた、新規なＨＳＰＢ１キナーゼ阻害剤の細胞膜貫通を支援するために用いることができる（出願の内容が参照によりその全体が本明細書に組み入れられる、２００８年１月１０日出願の表題「Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ＨＳＰＢ１  Ｋｉｎａｓｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｆｏｒ」の米国特許出願第１１／９７２，４５９号、および２００８年８月７日出願出願の表題「Ｋｉｎａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」の同第１２／１８８，１０９号を参照）。
【０１８５】
１１．１．ウイルスＣＰＰ含有タンパク質
形質導入特性を有するとして記載されるべき第一のタンパク質は、ウイルス起源のものであった。これらのタンパク質はなおも、最も一般的に許容されるＣＰＰ作用のモデルである。細胞貫通ペプチドのうち、非限定的にＴＡＴペプチドを含む高アルギニン細胞貫通ペプチドが、最も広範囲に研究されている（Ｅｌ−Ｓａｙｅｄ，  Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  ＡＡＰＳＪ．  １１，  １３−２２，  ２００９；Ｗｅｎｄｅｒ，  Ｐ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ６０，  ４５２−４７２，  ２００８）。
【０１８６】
ＴＡＴ（ＨＩＶ−１トランスアクチベーター遺伝子産物）は、８６アミノ酸のポリペプチドであり、組み込まれたＨＩＶ−１ゲノムの強力な転写因子として作用する。ＴＡＴはウイルスゲノム上で作用し、潜伏感染細胞内でウイルス複製を刺激する。ＴＡＴタンパク質の転座特性は、休止した感染細胞の活性化を可能にし、サイトカインを含む多くの細胞遺伝子を調節することによって、その後の感染のために非感染細胞のプライミングに関与できる。ＴＡＴの最小ＣＰＰは、９アミノ酸のタンパク質配列ＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＴＡＴ４９−５７；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０）である。ＴＡＴのより長い断片を用いた研究で、１２０ｋＤａまでの融合タンパク質の形質導入の成功が実証された。多数のＴＡＴ−ＣＰＰおよび合成ＴＡＴ誘導体の付加が、膜における転座を媒介することが実証された。ＴＡＴ  ＣＰＰ含有融合タンパク質が、癌を含む実験、デスタンパク質（ｄｅａｔｈ−ｐｒｏｔｅｉｎ）を細胞に輸送する実験、および神経変性障害の疾患モデルで治療部分として用いられた。
【０１８７】
ＶＰ２２は、ＨＳＶビリオンの構造部分である、ＨＳＶ−１外皮タンパク質である。ＶＰ２２は、受容体に依存せず転座でき、核中に蓄積される。ＶＰ２２のこの特性によって、タンパク質はＣＰＰ含有ペプチドとして分類される。完全長のＶＰ２２を含む融合タンパク質は、形質膜を介して効率的に転座された。
【０１８８】
１１．２．細胞間転座特性を有するホメオタンパク質
ホメオタンパク質は、形態学的過程に関与する高度に保存されたトランス活性化する転写因子である。それらは、６０アミノ酸の特異的配列を介してＤＮＡに結合する。このＤＮＡ結合ホメオドメインは、ホメオタンパク質の最も高度に保存された配列である。幾つかのホメオタンパク質がＣＰＰ様活性を示すことが記載されており、それらは、細胞型特異性なしにエネルギー非依存的なおよびエンドサイトーシス非依存的な様式で細胞膜を介して効率的に転座できる。
【０１８９】
アンテナペディアタンパク質（Ａｎｔｐ）は、細胞膜を介して転座できるトランス活性化する因子であり、転座が可能な最小配列は、タンパク質のホメオドメイン（ＨＤ）の第三ヘリックスに対応する１６アミノ酸ペプチドである。このヘリックスの内在化は４℃で起こり、この過程がエンドサイトーシス依存性ではないことを示唆する。ＡｎｔｐＨＤとの融合タンパク質として生成される１００アミノ酸までのペプチドは、細胞膜を貫通する。
【０１９０】
転座が可能な他のホメオドメインとしては、フシタラズ（Ｆｔｚ）およびエングレイル（Ｅｎ）ホメオドメインが挙げられる。多くのホメオドメインが、高度に保存された第三のヘリックスを共有する。
【０１９１】
１１．３．ヒトＣＰＰ
ヒトＣＰＰは、ヒト患者への導入時に潜在的免疫原性問題を回避できる。ＣＰＳ配列を有するペプチドとしては、Ｈｏｘａ−５、Ｈｏｘ−Ａ４、Ｈｏｘ−Ｂ５、Ｈｏｘ−Ｂ６、Ｈｏｘ−Ｂ７、ＨＯＸ−Ｄ３、ＧＡＸ、ＭＯＸ−２、およびＦｔｚＣＰＰが挙げられる。これらのタンパク質は全て、ＡｎｔｐＣＰＰ中で見出される配列を共有する。他のＣＰＰとしては、エネルギー−、受容体−およびエンドサイトーシス−非依存性転座が可能な、Ｉｓｌｅｔ−１、インターロイキン−１、腫瘍壊死因子、およびカポジ線維芽細胞増殖因子またはＥＧＦ−４シグナルペプチド由来の疎水性配列が挙げられる。未確定ＣＰＰには、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）ファミリーのメンバーが含まれる。
【０１９２】
１２．ＭＫ２阻害剤および線維症性疾患または症状の処置
ｐ３８ＭＡＰＫの下流のセリン／トレオニンキナーゼ基質である、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＡＰＫＡＰＫ２またはＭＫ２）は、瘢痕形成および線維症の合併症である多くの炎症性疾患に関係している（Ｌｏｐｅｓ，  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．，  ３８２（３）：５３５−９，  ２００９）。これらの疾患としては、癌、内膜過形成、器官線維症、腹部癒着、炎症性腸疾患、および慢性関節リウマチが挙げられるが、これらに限定されない。特発性肺線維症（ＩＰＥ）に加えて、炎症および線維症を伴い肺に影響を及ぼす他の疾患としては、急性肺損傷（ＡＬＩ）、臓器移植片拒絶（肺の移植片では、ＩＰＦの後期処置でもある）、敗血症に続発する臓器不全、急性肺不全、強皮症などの自己免疫障害、および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）が挙げられる。
【０１９３】
線維症の発症には、炎症、線維芽細胞の増殖および動員が要求され、筋線維芽細胞表現型の細胞を生じることが公知である（Ｈｏｒｏｗｉｔｚ  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｓｅｍｉｎ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  ２７（６）：６００−６１２，  ２００６）。ＭＫ２は、転写レベルおよび転写後レベルで遺伝子発現を制御し（Ｎｅｉｎｉｎｇｅｒ  Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．  ２００２；２７７（５）：３０６５−８；Ｔｈｏｍａｓ  Ｔ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，  １０５（５）：  ２０３９−５２，  ２００８；Ｊｏｈａｎｓｅｎ  Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，  １７６（３）：１４３１−８，  ２００６；Ｒｏｕｓｓｅａｕ  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．  ２１（２３）：６５０５−１４，  ２００２）、ならびに細胞骨格の構造を制御することが示された（Ｌｏｐｅｓ，  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．，  ３８２（３）：５３５−９，  ２００９）。加えて、活性化ＭＫ２は炎症性サイトカインｍＲＮＡの翻訳および安定性を高めること、およびアクチンの再編成を引き起こすことが示され、さらにＭＫ２の阻害は、炎症の低下（Ｗａｒｄ，  Ｂ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｒｅｓ．，  １６９（１）：ｅ２７−３６，  ２０１１）および筋線維芽細胞の分化（Ｌｏｐｅｓ，  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．，  ３８２（３）：５３５−９，  ２００９）と関連することが示された。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０１９４】
総括すると、これらのデータは、ＭＫ２の阻害が、線維症性疾患または症状、例えば特発性肺線維症（ＩＰＦ）、急性肺損傷（ＡＬＩ）、肝線維症、腎線維症、血管線維症、および移植片拒絶を有する患者に治療的利益を提供し得ることを示唆している。これに関して、記載された本発明は、細胞貫通性のペプチド系ＭＫ２阻害剤を用いて炎症過程および線維症に介入するアプローチを提示する。
【課題を解決するための手段】
【０１９５】
発明の概要
一態様によれば、記載された本発明は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のポリペプチド、またはアミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）、ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）、ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）、ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）、ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）およびＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドからなる群から選択される細胞貫通ペプチド（ＣＰＰ）である第一のポリペプチドと、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）、ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９）およびＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０）のポリペプチドからなる群から選択される治療ドメイン（ＴＤ）である第二のポリペプチドと、の融合物から生成されるその機能的均等物の治療量、およびその医薬的に許容し得る担体を含む医薬的組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、肝組織、腎組織または血管組織から選択される組織における線維症の進行を低減するための方法であって、線維症の進行が、肝組織、腎組織または血管組織におけるリモデリングを生成する異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着の１つまたは複数を特徴とし、ポリペプチドの治療量が、線維症の進行を低減するため、組織のリモデリングを処置するため、またはそれらの組み合わせのために効果的である、方法が提供される。
【０１９６】
一実施形態によれば、線維症は、組織における炎症をさらに特徴とする。別の実施形態によれば、炎症は、急性または慢性炎症である。別の実施形態によれば、炎症は、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、およびインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）からなる群から選択される少なくとも１種のサイトカインにより媒介される。
【０１９７】
一実施形態によれば、組織または組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着は、正常な健常対照群の対象、即ち肝臓、腎臓または血管の線維症性状態、障害または疾患の症状または他のエビデンスを有さない対象の組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の活性と比較して、組織での有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な活性を特徴とする。
【０１９８】
一実施形態によれば、投与のステップは、経口的、気管内、非経口的、静脈内、または腹腔内に行われる。
【０１９９】
一実施形態によれば、医薬組成物は、１種または複数のさらなる治療薬（複数可）をさらに含む。別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、抗感染薬である、別の実施形態によれば、抗感染薬は、抗ウイルス薬である。別の実施形態によれば、抗ウイルス薬は、ソホスブビル（Ｓｏｖａｌｄｉ（登録商標））、ＨＣＶをブーストされたプロテアーゼ阻害剤（ＡＢＴ−４５０、ＡｂｂＶｉｅ）、ノンヌクレオシドＮＳ５Ｂ阻害剤（ダサブビル、ＡＢＴ−３３３、ＡｂｂＶｉｅ）、ＮＳ５ａ阻害剤（オムビタスビル、ＡＢＴ−２６７、ＡｂｂＶｉｅ）、ＡＢＴ−４５０／ｒ（ＡＢＴ−４５０とリトナビルの併用）、ＡＢＴ−２６７を共配合されたＡＢＴ−４５０、またはソホスブビルを配合されたＡＢＴ−４５０、リバビリン、またはそれらの組み合わせのうちの１種または複数である。
【０２００】
一実施形態によれば、さらなる治療薬は、プレドニゾン、ブデソニド、モメタゾンフランカルボン酸エステル、フルチカゾンプロピオン酸エステル、フルチカゾンフランカルボン酸エステル、およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるグルココルチコイドである。
【０２０１】
一実施形態によれば、さらなる治療薬は、鎮痛剤である。
【０２０２】
一実施形態によれば、さらなる治療薬は、精製ウシＶ型コラーゲン、ＩＬ−１３受容体拮抗薬、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、内皮受容体拮抗薬、二重エンドセリン受容体拮抗薬、プロスタサイクリン類似体、抗ＣＴＧＦ抗体、エンドセリン受容体拮抗薬（Ａ−選択性）、ＡＢ００２４、リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）抗体、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤、ピルフェニドン、ＩＦＮ−γ１ｂ、３つのＴＧＦ−βアイソフォーム全てに対する抗体、３つのＴＧＦ−βアイソフォーム全てに対する汎中和ＩｇＧ４ヒト抗体、ＴＧＦ−β活性化阻害剤、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ｒｈＰＴＸ−２）、二重特異性ＩＬ４／ＩＬ１３抗体、インテグリンαｖβ６を標的とする抗体、Ｎ−アセチルシステイン、シルデナフィル、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）拮抗薬（エタネルセプト）、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０２０３】
一実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）のものである。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）のものである。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５）のものである。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６）のものである。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）のものである。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６）のものである。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７）のものである。
【０２０４】
一実施形態によれば、治療ドメイン（ＴＤ）である第二のポリペプチドに動作可能に連結された細胞貫通ペプチド（ＣＰＰ）である第一のポリペプチドの融合物から生成されたポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物の第二のポリペプチドは、その配列がアミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と実質的同一性を有するポリペプチドである。
【０２０５】
一実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）のポリペプチドである。
【０２０６】
一実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、第二のポリペプチドに動作可能に連結された第一のポリペプチドを含む融合タンパク質であり、第一のポリペプチドがアミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）、ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）、ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）、ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）、ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）およびＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドからなる群から選択されるＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）と機能的に均等な細胞貫通ペプチドであり、第二のポリペプチドがアミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）のものである。
【０２０７】
一実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドである。
【０２０８】
一実施形態によれば、担体は、制御放出性担体、遅延放出性担体、持続放出性担体、および長期放出性担体からなる群から選択される。
【図面の簡単な説明】
【０２０９】
【図１】無溶媒噴霧乾燥インスリンの送達性能を示す。
【図２】アンダーソン・カスケード・インパクション（ＡＣＩ）により測定された噴霧乾燥インスリンの粒度分布を示す。
【図３】ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）と２種の市販される「受動式」乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）とで対比させた効率および流速の比較を示す。
【図４】噴霧乾燥された無溶媒ペプチドの流速独立性を示す。
【図５】噴霧乾燥ペプチド（インスリンではない）の代表的な顕微鏡写真を示す。
【図６】噴霧乾燥ペプチド（インスリンではない）の粒度分布を示す。
【図７】次世代インパクション（ＮＧＩ）により測定された微粒子化／ラクトースブレンドの組み合わせの粒度分布を示す。
【図８】微粒子化された小分子（長期作用性ムスカリン作動薬（ＬＡＭＡ）／ラクトースブレンド）の送達性能を示す。
【図９】線維芽細胞病巣における活性化ＭＫ２（即ち、ホスホ−Ｔｈｒ334−ＭＡＰＫＡＰＫ２）の核局在化を示す、パラフィン包埋されたヒト特発性肺線維症ＩＰＦの肺の免疫組織化学分析を示す。正常な肺（左パネル）；ＩＰＦ肺組織生検切片（右パネル）。挿入図は、活性化ＭＫ２に関して陽性に染色された細胞（濃灰色）を有する病巣での上皮内層の破壊を示す。図９に示される略語は、以下の通りである：ＮＬ（肺胞嚢を有する正常な肺構造）；ＡＷ（気道）；ＦＦ（ＩＰＦを有する肺組織外植片からの線維芽細胞病巣）。
【図１０】肺線維症のブレオマイシンマウスモデル（特発性肺線維症（ＩＰＦ）予防モデル）における線維症の発症を阻止する化合物の能力のテストの略図を示す。リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）またはＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））を、炎症サブサイドおよび線維化メカニズムが活性化されたブレオマイシン送達後７日目に開始して、顕著な線維化が観察されるブレオマイシン送達後２１日目まで１日１回、噴霧または腹腔内のいずれかで投与する。
【図１１】ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の吸入療法および全身投与が、マウスにおけるブレオマイシン誘導性肺線維症を防御することを示す。上のパネル：２１日目の代表的なマウス肺組織のヘマトキシリン・エオジン（Ｈ＆Ｅ）染色。下のパネル：同じ視野のマッソントリクローム染色から、ブレオマイシン傷害を有する広範囲のコラーゲン沈着（矢印）が明らかである。略語：ＡＷ：気道；ＮＬ：正常な肺構造；ＦＦ：線維症病巣；Ｖ：静脈。
【図１２】ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）が、ブレオマイシン傷害による顕著なコラーゲン沈着を予防することを示す。値は、平均±ＳＥＭを表す。ｎ＝５匹／群。「*」ｐ＜０．０５；「**」ｐ＜０．０１；「***」ｐ＜０．００１。コラーゲン指数＝コラーゲンの定数因子７．５×ヒドロキシプロリン濃度。
【図１３】ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）が用量依存的様式でブレオマイシン傷害による線維症を予防することを示す。ブレオマイシンマウスの肺切片のマッソントリクローム染色。（Ａ）ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）；（Ｂ）ＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）。
【図１４】全身投与されたＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）がブレオマイシン傷害による全身のＴ細胞活性化を抑制することを示す。値は、平均±ＳＥＭを表す。「ｐ」値＜０．０１。ｎ＝４匹／群。図１４に示される略語は、以下の通りである：（ｉ）ＰＢＳで処置された野生型マウス（ＰＢＳ）；（ｉｉ）ＰＢＳで処置されたブレオマイシンマウス（ＢＬＥＯ）；（ｉｉｉ）噴霧式ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））で処置されたブレオマイシンマウス（ＢＬＯＥ＋ＭＭＩ−０１００（ＮＥＢ））；および（ｉｖ）腹腔内ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））で処置されたブレオマイシンマウス（ＢＬＥＯ＋ＭＭＩ−０１００（ＩＰ））。
【図１５】特発性肺線維症のブレオマイシンモデル（ＩＰＦ処置モデル）における線維症進行を抑制するＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の能力のテストの略図を示す。ＰＢＳまたはＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））を、１日あたり５０μｇ／ｋｇの用量で、ブレオマイシン送達後１４日目から開始してブレオマイシン送達後２８日目まで噴霧化により、または腹腔内に投与する。
【図１６】ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の全身（ＩＰ）または噴霧化（ＮＥＢ）投与が、マウスにおけるブレオマイシン誘導性肺線維症を緩和することを示す。上のパネル：ヘマトキシリン・エオジン（Ｈ＆Ｅ）染色；下のパネル：同じ視野のマッソントリクローム染色。図１６に示される略語は以下の通りである：ＰＢＳ（ＰＢＳで処置された野生型マウス）；ＢＬＥＯ（ＰＢＳで処置されたブレオマイシンマウス）；ＭＭＩ−０１００（ＮＥＢ）（噴霧式ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））で処置されたブレオマイシンマウス）；ＭＭＩ−０１００（ＩＰ）（腹腔内ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）で処置されたブレオマイシンマウス）；ＮＬ（肺胞嚢を有する正常な肺構造）；ＡＷ（気道）；ＦＦ（ＩＰＦを有する肺組織外植片からの線維芽細胞病巣）。
【図１７】ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））がブレオマイシン傷害による顕著なコラーゲン沈着を停止させることを示す。図１７に示される略語は、以下の通りである：ＰＢＳ（ＰＢＳで処置された野生型マウス）；ＢＬＥＯ（ＰＢＳで処置されたブレオマイシンマウス）；ＢＬＥＯ＋ＭＭＩ−０１００（ＮＥＢ）（噴霧式ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））で処置されたブレオマイシンマウス）；ＢＬＥＯ＋ＭＭＩ−０１００（ＩＰ）（腹腔内ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）で処置されたブレオマイシンマウス）。値は、平均±ＳＥＭを表す。ｎ＝５匹／群。コラーゲン指数＝コラーゲンの定数因子７．５×ヒドロキシプロリン濃度。
【図１８】（ｉ）ＰＢＳで処置された野生型マウス（ＰＢＳ）；（ｉｉ）ＰＢＳで処置されたブレオマイシンマウス（ＢＬＥＯ）；（ｉｉｉ）噴霧式ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））で処置されたブレオマイシンマウス（ＢＬＯＥ＋ＭＭＩ−０１００（ＮＥＢ））；および（ｉｖ）腹腔内ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））で処置されたブレオマイシンマウス（ＢＬＥＯ＋ＭＭＩ−０１００（ＩＰ））から得られた肺切片（ブレオマイシン傷害後２８日目）の抗ホスホ−Ｔｈｒ334−ＭＡＰＫＡＰＫ２（ＭＫ２の活性化形態）染色の代表的な顕微鏡像を示す。Ｃ５７−ＢＬ／６マウスを、０日目にブレオマイシン傷害に供した。１４日目から、マウスに１日あたり５０μｇ／ｋｇのＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）を腹腔内（ＩＰ）注射またはネブライザー（ＮＥＢ）により、ブレオマイシン傷害後２８日目まで投与した。最初の倍率：２０倍。
【図１９】ＴＧＦ−βを介する炎症および線維化経路に関与する重要なシグナル伝達分子を示す。
【図２０】最終投与の２４時間後に、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）が、特発性肺線維症のブレオマイシンマウスモデル（処置モデル）における炎症性サイトカインの循環レベルをダウンレギュレートすることを示す。
【図２１】ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）が特発性肺線維症処置モデルにおける筋線維芽細胞α平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）活性化を阻害することを示す。Ｃ５７−ＢＬ／６マウスを、０日目にブレオマイシン傷害に供した。１４日目から２８日目まで、マウスに１日あたり５０μｇ／ｋｇのＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）を腹腔内（ＩＰ）注射またはネブライザー（ＮＥＢ）により投与した。ホルマリン固定された肺組織切片を、α−ＳＭＡに対して免疫染色した。対照染色は、ビオチン化二次ＩｇＧ抗体により実施した。ストレプトアビジン・コンジュゲート・西洋ワサビペルオキシダーゼを、基質である３，３’−ジアミノベンジデンと共に用い、核をヘマトキシリンで対比染色した。最初の倍率：２０倍。
【図２２】正常なヒト胎児肺線維芽細胞（ＩＭＲ−９０）におけるＭＫ２ペプチド阻害剤によるＴＧＦ−βを介した筋線維芽細胞活性化のモジュレーションを示す。ＩＭＲ−９０細胞を、指示された用量のＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）で１時間、前処置し、その後、ＴＧＦ−β１（２ｎｇ／ｍｌ）の存在下または非存在下で４８時間培養した。細胞溶解物をα−ＳＭＡ（筋線維芽細胞活性化のマーカー）およびＧＡＰＤＨ（ローディング対照）に関する抗体に対して免疫ブロットした。
【図２３】ヒト胎児肺線維芽細胞（ＩＭＲ−９０）におけるＴＧＦ−βを介するフィブロネクチン発現のモジュレーションを示す。ＩＭＲ−９０細胞を、指示された用量のＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）で１時間、前処置し、その後、ＴＧＦ−β１（２ｎｇ／ｍｌ）の存在下または非存在下で７２時間培養した。フィブロネクチン（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｏｎ）を、調整した培地中の分泌断片として測定した。調整した培地からの等量（１４μｇ）の総タンパク質を、各レーンにロードした。
【図２４】ＰＤＧＦＲ−βのα５β１−インテグリンを介する活性化を通したフィブロネクチンによる間葉幹細胞遊走の調節に関与する重要なシグナル伝達分子を示す（Ｖｅｅｖｅｒｓ−Ｌｏｗｅ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ，  １２４：  １２８８−１３００，  ２０１１）。
【図２５】ＩＰＦ患者におけるＭＫ２キナーゼ活性化形態のレベルの上昇を示す。（Ａ）正常組織およびＩＰＦ組織におけるホスホ−Ｔｈｒ334レベルの定量分析；（Ｂ）肺機能とＭＫ２活性化との相関。
【図２６】腎線維症の根底にある病原性メカニズム略図を示す（Ｃｈｏ  Ｍ  Ｈ，  Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ．  Ｐｅｄｉａｔｒ．  ２０１０；  ５３（７）：  ７３５−７４０）。
【発明を実施するための形態】
【０２１０】
発明の詳細な説明
記載された本発明は、それを必要とする対象における肝組織、腎組織または血管組織から選択される組織における線維症の進行を低減するための組成物および方法であって、線維症の進行が、血管組織におけるリモデリングを生成する異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着の１つまたは複数を特徴とし、方法が、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＭＭＩ−０１００；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）を有するポリペプチドまたはその機能的均等物を含む組成物の治療量を投与することを含み、ポリペプチドの治療量が、線維症の進行を低減するため、組織のリモデリングを処置するため、またはそれらの組み合わせのために効果的である、組成物および方法を提供する。
【０２１１】
用語解説
本明細書で用いられる用語「気道」は、それを通して空気が体に侵入し、体を離れる通路を指す。肺の気道は、空気が呼吸時に通過する呼吸管部分を含む。
【０２１２】
本明細書で用いられる用語「気道の閉塞」は、気流の何らかの異常な低下を指す。気流に対する抵抗は、上気道から終末気管支までの気道の任意の場所で生じ得る。
【０２１３】
本明細書で用いられる用語「気道疾患」は、肺の内外へ酸素および他の気体を運搬する管（気道）を冒す疾患を指す。気道疾患としては、喘息、気腫および慢性気管支炎を含む慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２１４】
本明細書で用いられる用語「肺組織疾患」は、肺組織、例えば肺間質の構造を冒す疾患を指す。肺組織の瘢痕形成または炎症は、肺の完全な拡張を不能にする（「拘束性肺疾患」）。それはまた、肺が酸素を取り込み（酸素付加）、二酸化炭素を放出する能力を低下させる。肺組織疾患の例としては、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、急性肺損傷（ＡＬＩ）、肺の放射線誘発性線維症、肺移植に伴う線維症症状が挙げられるが、これらに限定されない。サルコイドーシスは、腫脹（炎症）がリンパ節、肺、肝、眼、皮膚、または他の組織で生じる疾患である。
【０２１５】
用語「肺間質」または「肺の間質」は、本明細書では互換的に用いられ、肺の気腔上皮と胸膜中皮との間に存在する領域を指す。マトリックスタンパク質の線維であるコラーゲンおよびエラスチンは、肺の間質の主要成分である。これらの線維の主要な機能は、換気時に構造的完全性を維持する、機械的な足場を形成することである。
【０２１６】
本明細書で用いられる用語「接近可能表面積」または「ＡＳＡ」は、溶媒に暴露される生物分子の表面積を指す。本明細書で用いられる用語「溶媒の接近可能表面または「ＳＡＳ」は、溶媒に接近できる所与の残基の表面積の割合％を指す。それは、残基の三次元構造におけるＡＳＡとその伸展させたペプチド確証（ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ）の最大ＡＳＡとの比率として計算される。
【０２１７】
用語「アミノ酸残基」または「アミノ酸」または「残基」は、互換的に用いられ、非限定的に天然由来アミノ酸および天然由来アミノ酸と類似の様式で機能し得る天然のアミノ酸の公知の類似体を含む、タンパク質、ポリペプチド、またはペプチド中に取り込まれるアミノ酸を指す。アミノ酸は、Ｌ−またはＤ−アミノ酸であり得る。アミノ酸は合成アミノ酸で置換されてよく、ペプチドの半減期を延長させるように、ペプチドの能力を高めるように、またはペプチドの生物学的利用度を高めるように改変できる。
【０２１８】
本明細書では主に、アミノ酸の一文字表記を用いる。当業者に周知の通り、そのような一文字表記は、以下の通りである。
【０２１９】
Ａはアラニン、Ｃはシステイン、Ｄはアスパラギン酸、Ｅはグルタミン酸、Ｆはフェニルアラニン、Ｇはグリシン、Ｈはヒスチジン、Ｉはイソロイシン、Ｋはリジン、Ｌはロイシン、Ｍはメチオニン、Ｎはアスパラギン、Ｐはプロリン、Ｑはグルタミン、Ｒはアルギニン、Ｓはセリン、Ｔはトレオニン、Ｖはバリン、Ｗはトリプトファン、Ｙはチロシンである。
【０２２０】
以下に、互いに保存的置換であるアミノ酸の群を表す：１）アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）；２）アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）；３）アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）；４）アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）；５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）；および６）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）。
【０２２１】
本明細書で用いられる単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明瞭にその他を示さない限り、複数の対応物を含む。例えば、「ａ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ」は、１つまたは複数のポリペプチドを意味する。
【０２２２】
本明細書で用いられる用語「付加」は、ある配列への１つもしくは複数の塩基、または１つもしくは複数のアミノ酸の挿入を指す。
【０２２３】
本明細書で用いられる用語「投与する」は、分配、供給、適用、付与、配分または寄与することを指す。用語「投与すること」または「投与」は、本明細書では互換的に用いられ、インビボ投与、およびエクスビボで組織に直接投与することを包含する。一般に組成物は、全身で、経口、口腔、非経口、外用で、吸入もしくは吹送（即ち、口からまたは鼻から）により、または直腸からのいずれかで、従来の非毒性の医薬的に許容し得る担体、アジュバント、およびビヒクルを含む単位投与剤形として投与するか、あるいは局所的に、例えば非限定的に注射、インプラント、移植、局部塗布の手段によって、または非経口的に投与され得る。追加の投与は、例えば静脈内に、心膜内に、経口的に、インプラントにより、経粘膜的に、経皮的に、外用として、筋肉内に、皮下に、腹腔内に、髄腔内に、リンパ内に、病変内に、または硬膜外に実施され得る。投与は、例えば１回、複数回、および／または１つのまたは複数の長い期間にわたって実施され得る。
【０２２４】
本明細書で用いられる用語「アレルギー反応」は、免疫系の過敏反応を指す。アレルギー反応は、アレルゲンとして知られる通常は無害な環境物質に対して生じ、これらの反応は、後天的で、予測可能であり、かつ急速である。アレルギー反応は、肥満細胞および好塩基球と称される特定の白血球の、ＩｇＥとして知られる抗体タイプによる過剰な活性化を特徴とし、結果として極度の炎症応答を生じる。一般的なアレルギー反応としては、湿疹、蕁麻疹，枯草熱、喘息発作、食物アレルギー、ならびにスズメバチおよびミツバチなどの刺咬昆虫の毒液に対する反応が挙げられる。
【０２２５】
本明細書で用いられる用語「α−平滑筋アクチン」または「α−ＳＭＡ」は、最初に血管平滑筋細胞で単離されたアクチンタンパク質、α−アクチン２（ＡＣＴＡ２；アクチンまたは大動脈平滑筋アクチンとしても公知）を指す。アクチンは、全ての真核細胞で発現される高度に保存されたタンパク質である。アクチンフィラメントは、細胞骨格の一部を形成し、細胞の形状および運動の調節に必須の役割を果たす。６つの別個のアクチンアイソタイプが、哺乳動物細胞で同定されている。各々は、分離された遺伝子によってコードされ、発育により調節される組織特異的な様式で発現される。アルファおよびベータ細胞質アクチンは、非常に様々な細胞で発現されるが、アルファ骨格アクチン、アルファ心アクチン、アルファ血管アクチン、およびガンマ腸管アクチンの発現は、特殊な筋肉細胞型により制限される。アルファ−平滑筋アクチンの遺伝子は、その発現が血管平滑筋細胞に比較的限定されるいくつかの遺伝子の１つであるが、それは現在、筋線維芽細胞形成のマーカーとして最も一般的に用いられている。アルファ平滑筋アクチンの発現はホルモンおよび細胞増殖によって調節され、腫瘍原性形質転換およびアテローム性硬化症を含む病的状態によって変化する。
【０２２６】
本明細書で用いられる用語「肺胞」または「肺胞（複数形）」は、中空の形状を有する解剖学的構造を指す。肺胞は、肺で見出され、血液とガス交換する呼吸部位の球状突出である。肺胞は、幾つかのコラーゲンおよび弾性線維を含む。弾性線維は、肺胞が吸気時に空気で満たされると、肺胞を伸展させる。その後、肺胞は、呼気時に反発して、二酸化炭素に富む空気を吐き出す。
【０２２７】
本明細書で用いられる用語「バイオマーカー」（または「バイオシグネイチャー」）は、ペプチド、タンパク質、核酸、抗体、遺伝子、代謝産物、または生物学的状況の指示薬として用いられる任意の他の物質を指す。それは、正常な生物学的過程、病原性過程、または治療的介入への薬理学的応答の細胞指示薬または分子指示薬として客観的に測定され評価されることが特徴である。
【０２２８】
本明細書で用いられる用語「ブレオマイシン」は、細菌のストレプトマイセス・ベルチシルスによって産生される糖ペプチド抗生物質を指す。それは、ＤＮＡ鎖の破断を誘発し、ＤＮＡ鎖へのチミジン取り込みを阻害することによって機能する。ブレオマイシンの最も重篤な合併症は、肺線維症および肺機能障害である。
【０２２９】
本明細書で用いられる用語「気管支肺胞洗浄」または「ＢＡＬ」は、気管支鏡を口または鼻から肺に通し、液体を肺の小部分に噴出させ、その後、試験のために再回収する医療手順を指す。ＢＡＬは、典型的には肺疾患の診断のために実施される。ＢＡＬは、一般的には免疫系の問題を有する人の感染、換気装置を使用する人の肺炎、幾つかのタイプの肺癌、および肺の瘢痕形成（間質性肺疾患）の診断のために用いられる。ＢＡＬは、上皮基底層液（ＥＬＦ）の成分を採取するための、そして肺気道のタンパク質組成の決定のための最も一般的な手法であり、肺における細胞または病原体レベルの採取手段として免疫学研究で用いられることが多い。
【０２３０】
本明細書で用いられる用語「担体」および「医薬担体」は、１つまたは複数の活性物質を対象へ送達するための医薬的に許容される不活性物質またはビヒクルを指し、多くの場合「賦形剤」と称される。この（医薬）担体は、処置される対象への投与に適切であるように、十分に純度が高く、十分に毒性が低くなければならない。この（医薬）担体はさらに、活性物質、例えば記載された本発明のポリペプチドの安定性および生物学的利用度を維持しなければならない。この（医薬）担体は、液体または固体であり得、所与の組成物の活性物質と他の成分を混合する際、所望の容量、粘稠度などを提供するために、投与を念頭に置く計画的な方法で選択される。この（医薬）担体は、結合剤（例えばプレゼラチン化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースなど）、充填剤（例えばラクトースおよび他の糖類、微晶質セルロース、ペクチン、ゼラチン、硫酸カルシウム、エチルセルロース、ポリアクリレート、リン酸水素カルシウムなど）、滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ、コロイド状二酸化ケイ素、ステアリン酸、ステアリン酸金属、水素添加植物油、トウモロコシデンプン、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなど）、崩壊剤（例えばデンプン、グリコール酸ナトリウムデンプンなど）、または湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウムなど）であり得るが、これらに限定されない。記載された本発明の組成物のための他の適切な（医薬）担体としては、水、食塩溶液、アルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが挙げられるが、これらに限定されない。記載された本発明のポリペプチドの非経口投与用組成物は、無菌的水溶液、アルコールなどの一般的溶媒中の非水性溶液、または液状油性基剤中のポリペプチド溶液などの（医薬）担体を含んでよい。
【０２３１】
本明細書で用いられる用語「コラーゲン」は、哺乳動物の筋肉および結合組織で見出される天然由来タンパク質の群を指す。それは結合組織の主要成分であり、かつ哺乳動物の最も豊富なタンパク質であり、全身タンパク質含量の約２５％〜３５％を構成する。伸長したフィブリルの形態であるコラーゲンは、ほとんどが線維性組織、例えば腱、靭帯および皮膚中に見出され、角膜、軟骨、骨、血管、腸管、および椎間円板中でも豊富である。これまでのところ、２９タイプのコラーゲンが同定されており、身体のコラーゲンの９０％超が、Ｉ型（皮膚、腱、血管、靭帯、器官、骨）、ＩＩ型（軟骨）、ＩＩＩ型（小網（細網線維の主要成分））、およびＩＶ型（細胞基底膜の土台を形成する）である。
【０２３２】
本明細書で用いられる用語「症状」は、様々な健康状態を指し、任意の根底にあるメカニズム、障害、または損傷によって引き起こされる障害または疾患を包含することが意図される。
【０２３３】
用語「サイトカイン」は、他の細胞に様々な影響を有する細胞によって分泌される小さな可溶性タンパク質物質を指し、一般的には、非限定的にリンホカイン、インターロイキンおよびケモカインを含む多くのシグナル伝達分子を指すために用いられる。サイトカインは、増殖、発生、創傷治癒および免疫応答を含む多くの重要な生理学的機能を媒介する。サイトカインは、細胞膜に存在するそれらの細胞特異的受容体に結合し、この細胞内で別個のシグナル伝達カスケードを開始させることにより作用し、これは最終的に標的細胞中で生化学的変化および表現型変化をもたらす。一般的には、サイトカインは局所的に作用するが、幾つかは、ホルモンと類似の多形質発現性オートクリン作用、パラクリン作用、および内分泌作用と共に、全身的な免疫調節作用を有することが見出されている。サイトカインには、多くのインターロイキン、および幾つかの造血性増殖因子を含むＩ型サイトカイン；インターフェロンおよびインターロイキン−１０を含むＩＩ型サイトカイン；ＴＮＦ−αおよびリンホトキシンを含む腫瘍壊死因子（「ＴＮＦ」）関連分子；インターロイキン−１（ＩＬ−１）を含む免疫グロブリンスーパーファミリーメンバー；ならびに極めて多様な免疫および炎症機能で重要な役割を果たす分子ファミリーである、ケモカインが含まれる。同じサイトカインが、細胞の状態に応じてこの細胞で異なる作用を有し得る。サイトカインは多くの場合、他のサイトカインの発現を調節しそのカスケードを惹起する。
【０２３４】
本明細書で用いられる用語「疾患」または「障害」は、原因にかかわらず（遺伝性、環境性、食事性、感染性、外傷性、またはその他の原因）、健康障害または異常な機能状態を指す。障害としては、例えば炎症性および線維症性疾患、線維症、急性肺損傷、放射線誘発性線維症、移植片拒絶、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、内毒素ショック、局所性炎症疾患、アテローム硬化症性心血管疾患、アルツハイマー病、腫瘍疾患、神経虚血、結合組織性および全身性自己免疫障害、関節リウマチ、クローン病、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ショーグレン症候群、強皮症、血管炎、内膜過形成、狭窄症、再狭窄症、アテローム性硬化症、平滑筋細胞腫瘍および転移、平滑筋痙攣、狭心症、プリンツメタル狭心症、虚血、卒中、徐脈、高血圧、心肥大、腎不全、卒中、肺高血圧、喘息、妊娠毒血症、早産、子癇前症、子癇、レイノー病またはレイノー現象、溶血性尿毒症、肛門裂傷、アカラシア、勃起不全、偏頭痛、平滑筋痙攣を伴う虚血性筋損傷、血管症、徐脈型不整脈、うっ血性心不全、昏倒下心筋層、肺高血圧、拡張期機能不全、グリオーシス（星状神経膠細胞の増殖、さらに中枢神経系の損傷領域における細胞外マトリックス（ＥＣＭ）沈着を含むことがある）、慢性閉塞性肺疾患（即ち、気流の閉塞または制限を特徴とする呼吸管の疾患、慢性気管支炎、気腫、および慢性喘息を含むが、これらに限定されない）、骨減少症、内皮機能不全、炎症、変形性関節症、強直性脊椎炎、ギランバレー病、感染症、敗血症、内毒素ショック、乾癬、放射線腸炎、肝硬変、腸管線維症、肺線維症（特発性肺線維症を含む）、大腸炎、虫垂炎、胃炎、喉頭炎、髄膜炎、膵炎、耳炎、再灌流傷害、外傷性脳損傷、脊髄損傷、末梢神経症、多発性硬化症、アレルギー、心代謝性疾患、肥満、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、およびＮＡＳＨ／肝硬変を挙げることができるが、これらに限定されない。
【０２３５】
本明細書で用いられる用語「ドメイン」は、特徴的な三次元構造および機能を有するタンパク質の一領域を指し、およびその直鎖状ペプチド鎖を折り畳むことによって形成されるその三次元構造を一緒に構成するタンパク質の三次元サブユニットのいずれかを指す。
【０２３６】
本明細書で用いられる用語「治療ドメイン」（「ＴＤ」とも称される）は、ペプチドＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）、またはそのセグンメントと実質的同一性を有する、ペプチド、ペプチドセグメントもしくは変種、またはそれらの誘導体を指す。治療ドメインは、単独では一般的に哺乳動物細胞の形質膜を貫通できない。治療ドメインは、一旦、細胞内に入ると、キナーゼの特異的群のキナーゼ活性を阻害できる。
【０２３７】
本明細書で用いられる用語「細胞貫通ペプチド」（「ＣＰＰ」、「タンパク質形質導入ドメイン」、「ＰＴＤ」、「トロージャンペプチド」、「膜輸送配列」および「細胞透過性タンパク質」とも称される）は、一般的には哺乳動物細胞の形質膜を透過できるペプチドの一クラスを指す。それはまた、ペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）、またはその機能的セグメントと実質的同一性を有するペプチド、ペプチドセグメント、もしくは変種またはそれらの誘導体を指し、またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１と機能的に均等なペプチド、ペプチドセグメント、もしくは変種またはそれらの誘導体を指す。ＣＰＰは、一般的には１０〜１６アミノ酸長であり、哺乳動物細胞を貫通して多くのタイプおよび分子量の化合物を輸送できる。そのような化合物としては、エフェクター分子、例えばタンパク質、ＤＮＡ、コンジュゲートペプチド、オリゴヌクレオチド、および小分子、例えばリポソームが挙げられるが、これらに限定されない。他のタンパク質に化学的に連結または融合したＣＰＰは、なおも形質膜を貫通して細胞に侵入できる。
【０２３８】
本明細書で用いられる用語「細胞外マトリックス」は、それと共に細胞が特異的な細胞表面受容体を介して相互作用する、細胞外環境中の足場を指す。細胞外マトリックスは、線維性タンパク質とグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）とが組み合わされた網状組織を構成する。細胞外マトリックスで見出される線維性タンパク質の例としては、コラーゲン、エラスチン、フィブロネクチンおよびラミニンが挙げられるが、これらに限定されない。細胞外マトリックスで見出されるＧＡＧの例としては、プロテオグリカン（例えば硫酸ヘパリン）、コンドロイチン硫酸、ケラチン硫酸、および非プロテオグリカン多糖類（例えばヒアルロン酸）が挙げられるが、これらに限定されない。用語「プロテオグリカン」は、１つまたは複数のグリコサミノグリカンが付着したコアタンパク質を含む糖タンパク質の一群を指す。細胞外マトリックスは、非限定的に、細胞の支持および固定の提供、ある組織と別の組織の隔離、および細胞内連絡の調節を含む多くの機能を提供する。
【０２３９】
用語「機能的均等物」または「機能的に均等な」は、本明細書では互換的に用いられ、類似もしくは同一の作用または用途を有する物質、分子、ポリヌクレオチド、タンパク質、ペプチド、またはポリペプチドを指す。ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と機能的に均等なポリペプチドは、例えば、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１の発現ポリペプチドと実質的に類似または同一の生物学的活性、例えば阻害活性、動態パラメータ、塩阻害、補因子依存性活性、および／または機能単位のサイズを有し得る。
【０２４０】
ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と機能的に均等なポリペプチドの例としては、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）のポリペプチド；アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）のポリペプチド；アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５）のポリペプチド；アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６）のポリペプチド、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６）のポリペプチド、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７）のポリペプチドおよびアミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）のポリペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４１】
本発明に記載のアミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））ペプチドは、治療有効性を高めるために、治療ドメイン（ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）に細胞貫通ペプチド（ＣＰＰ；ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）が動作可能に連結された融合タンパク質を含む。
【０２４２】
ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の治療ドメイン（ＴＤ；ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２））と機能的に均等のポリペプチドの例としては、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）のポリペプチド、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９）のポリペプチド、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０）のポリペプチド、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）のポリペプチド、およびアミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）のポリペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４３】
ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の細胞貫通ペプチド（ＣＰＰ；ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）と機能的に均等なポリペプチドの例としては、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）のポリペプチド、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）のポリペプチド、アミノ酸配列ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）のポリペプチド、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）のポリペプチド、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）のポリペプチド、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）のポリペプチド、およびアミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４４】
本明細書で用いられる用語「内因性」は、内部から生育もしくは発生するか、または内部で誘導されることを指す。
【０２４５】
本明細書で用いられる用語「内皮」は、血管の内部表面を裏打ちし、管腔内の循環血と血管壁の残りの部分との境界を形成する細胞の薄層を指す。内皮細胞は、心臓から最小の毛細血管まで全循環系を裏打ちする。これらの細胞は、血流の乱れを低下させ、液体をさらに遠くへ押し出す。
【０２４６】
本明細書で用いられる用語「好酸球」または「好酸球性顆粒球」は、脊椎動物における多細胞性寄生虫および特定の感染との闘争を担う白血球を指す。それらは、血中に遊走する前の骨髄での造血時に発生する顆粒球である。それらはまた、肥満細胞と共に、アレルギーおよび喘息に関係するメカニズムを制御する。活性化に続いて、好酸球は、（１）陽イオン性顆粒タンパク質の産生および脱顆粒によるそれらの放出、（２）反応性酸素種、例えばスーパーオキシド、過酸化物、および次亜臭素酸塩（次亜臭素酸；好酸球ペルオキシダーゼによって優先的に生成される）の生成、（３）ロイコトリエンおよびプロスタグランジンファミリーからのエイコサノイドなどの、脂質媒介物質の生成、（４）増殖因子、例えば形質転換増殖因子（ＴＧＦ−β）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、および血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）の生成、ならびに（５）サイトカイン、例えばＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１３、およびＴＮＦ−αの生成、を含む多様な機能を発揮する。
【０２４７】
本明細書で用いられる用語「上皮」は、全身体の腔および構造表面に一列に並ぶ細胞で構成される組織を指す。上皮の基底表面は、その下にある結合組織に面し、この２つの層は、基底膜によって分離される。
【０２４８】
本明細書で用いられる「血管外遊出」は、毛細血管からそれらを取り巻く組織への血液細胞成分の移動（漏出）を指す。悪性癌転移の場合、それは、毛細血管から出て器官に侵入する癌細胞を指す。
【０２４９】
本明細書で用いられる用語「滲出」は、それにより循環系から液体が血管壁を通過して病変または炎症領域中に侵入する過程を指す。血液滲出物は、幾つかまたは全ての血漿タンパク質、白血球、血小板および赤血球を含む。
【０２５０】
本明細書で用いられる用語「フィブリン」は、血液凝固に関与する線維性タンパク質を指す。それは、創傷部位を覆う止血の栓または血塊（血小板を組み込む）を形成する「網状組織」を形成するために重合される原線維タンパク質である。フィブリンは、シグナル伝達、血液凝固、血小板活性化、およびタンパク質重合に関与する。
【０２５１】
本明細書で用いられる用語「線維芽細胞」は、非限定的にコラーゲンを含む細胞外マトリックスタンパク質を生成および分泌する、結合組織細胞を指す。結合組織で見出される最も一般的な細胞型である線維芽細胞は、創傷治癒に重要な役割を果たす。結合組織の他の細胞と同様に、線維芽細胞は、初期間葉（３つの胚葉層全てから誘導され胚内に存在する粗い結合組織のタイプ）に由来する。特定の状況では、上皮細胞は、線維芽細胞を生じ得る（上皮間葉転換と称される過程）。線維芽細胞および線維細胞は同じ細胞の２つの状態であり、維持および組織代謝に関わり、前者は活性化状態であり、後者は活性がより低い状態であり、両用語は場合により互換的に用いられる。
【０２５２】
本明細書で用いられる用語「フリーラジカル」は、高度に反応性であり、通常は１つまたは複数の不対電子を伴う寿命の短い分子断片を指す。フリーラジカルは、高度に化学的に反応する分子である。フリーラジカルは、隣接する分子から第二の電子を抽出してその単独の電子と対合させる必要があるため、多くの場合、他の分子と反応し、これが自己増殖連鎖反応におけるより多くのフリーラジカル種の形成を開始する。この自己増殖する能力によって、フリーラジカルは、生存する生物体にとって高度に毒性となる。酸化傷害は、細胞内で広範囲の生化学的損傷をもたらし得る。この損傷を担う分子メカニズムは、複雑である。例えばフリーラジカルは、核酸（例えば、ＤＮＡおよびＲＮＡ）、タンパク質、および脂質などの細胞内巨大分子を損傷し得る。細胞タンパク質に対するフリーラジカル損傷は、酵素機能の損失および細胞死をもたらし得る。ＤＮＡに対するフリーラジカル損傷は、複製または転写において問題を誘発して、細胞死または未制御の細胞増殖をもたらし得る。細胞膜脂質に対するフリーラジカル損傷は、損傷された膜が細胞へ酸素、栄養素または水を輸送する能力を喪失する原因となり得る。
【０２５３】
本明細書で用いられる用語「筋線維芽細胞」は、収縮特性および線維などの平滑筋の幾つかの特徴を有し、一時的にＩＩＩ型コラーゲンを生成すると考えられている、創傷領域中の線維芽細胞を指す。筋線維芽細胞の発達に関しては多くの可能な方法が存在するが、筋線維芽細胞は、それらの分化において線維芽細胞と平滑筋細胞の間にある細胞である。肝臓、肺および腎臓のような多くの器官では、筋線維芽細胞は、主として線維症に関与する。創傷組織では、それらは、創傷の強化（細胞外コラーゲン線維の沈着による）に、続いて創傷の収縮（インテグリンにより媒介されるコラーゲン束への引き寄せによるコラーゲン線維の細胞内収縮および同時アラインメントによる）に関係する。
【０２５４】
本明細書で用いられる用語「フィブロネクチン」は、膜貫通細胞表面マトリックス受容体タンパク質（「インテグリン」）に結合し、かつ細胞外マトリックス成分、例えばコラーゲン、フィブリンおよびヘパリン硫酸プロテオグリカン（例えば、シンデカン）に結合する、高分子量（約４４０ｋＤａ）の細胞外マトリックス糖タンパク質を指す。フィブロネクチンは、一対のジスルフィド結合によって連結される２つのほぼ同一のモノマーからなるダイマーとして存在する。フィブロネクチンには、複数のアイソフォームが存在する。血漿フィブロネクチンは、可溶性で血中および他の体液中で循環し、血液凝固、創傷治癒および食作用を強化すると考えられる。他のアイソフォームは、細胞表面に集積し、高度に不溶性のフィブロネクチン原線維として細胞外マトリックス中に沈着する。線維芽細胞の表面または表面近くで生成されるフィブロネクチン原線維は通常、隣接する細胞内アクチンストレス線維と整列して、これが分泌フィブロネクチン分子の原線維への組み立てを促進し、原線維の方向性に影響を与える。フィブロネクチンは、細胞接着、細胞生育、細胞遊走および細胞分化に主要な役割を果たし、創傷治癒および胚の発生などの過程に重要である。
【０２５５】
本明細書で用いられる用語「線維症」は、ある部分の損傷もしくは炎症の結果としての、またはその血液供給の妨害の結果としての、器官または組織における過剰な線維性結合組織の形成または発達を指す。線維症は、瘢痕に至る正常な治癒応答の結果であるか、異常な反応過程であるか、または原因が不明もしくは解釈不能であり得る。
【０２５６】
本明細書で用いられる用語「吸入」は、医薬が添加された蒸気を呼吸により吸い込む行為を指す。
【０２５７】
本明細書で用いられる用語「吹送」は、身体の腔または小室に加圧下で空気、気体、または粉末を送達する行為を指す。例えば鼻吹送は、加圧下で鼻から空気、気体または粉末を送達する行為に関する。
【０２５８】
本明細書で用いられる用語「吸入送達装置」は、液体または乾燥粉末エアロゾル配合剤から小滴またはエアロゾルを生成する機械／装置または成分を指し、例えば溶液、粉末などで薬物の肺投与を実現するために経口投与に用いられる。吸入送達装置の例としては、ネブライザー、計量吸入装置、および乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２５９】
本明細書で用いられる用語「ネブライザー」は、肺に吸引される霧の形態として液体医薬を投与するために用いられる装置を指す。
【０２６０】
本明細書で用いられる用語「計量吸入装置」、「ＭＤＩ」または「パッファー」は、特定量（「計量」）の医薬を患者の肺へ送達するために噴射剤薬を用いる、携帯式の加圧装置を指す。本明細書で用いられる用語「噴射剤」は、先細の分岐ノズルを通じ通常は気体の圧力によって物質を放出するために用いられる材料を指す。圧力は、圧縮気体、または化学反応によって生じる気体から得ることができる。排気材料は、気体、液体、プラズマであるか、または化学反応前では固体、液体もしくはゲルであり得る。加圧計量吸入装置で使用される噴射剤は液化ガスであり、伝統的にはクロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）でありヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ）が増えつつある。適切な噴射剤としては、例えば、トリクロロフルオロメタン（噴射剤１１とも称される）、ジクロロフルオロメタン（噴射剤１２とも称される）、および１，２−ジクロロ−１，１，２，２−テトラフルオロエタン（噴射剤１１４とも称される）などのクロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）、ヒドロクロロフルオロカーボン、１，１，１，２−テトラフルオロエタン（噴射剤１３４ａ、ＨＦＣ−１３４ａまたはＨＦＡ−１３４ａとも称される）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（噴射剤２２７、ＨＦＣ−２２７またはＨＦＡ−２２７とも称される）などのヒドロフルオロカーボン（ＨＦＣ）、二酸化炭素、ジメチルエーテル、ブタン、プロパン、またはそれらの混合物が挙げられる。他の実施形態において、噴射剤としては、クロロフルオロカーボン、ヒドロクロロフルオロカーボン、ヒドロフルオロカーボン、またはそれらの混合物が挙げられる。他の実施形態において、ヒドロフルオロカーボンが噴射剤として用いられる。他の実施形態において、ＨＦＣ−２２７および／またはＨＦＣ−１３４ａが噴射剤として用いられる。
【０２６１】
本明細書で用いられる用語「乾燥粉末吸入装置」または「ＤＰＩ」は、計量吸入装置と類似するが、薬物が粉末形態である装置を指す。患者は、完全に息を吐き出し、マウスピースに唇を置き、その後、迅速に粉末を吸い込む。乾燥粉末吸入装置では、ＭＤＩで必要なタイミングおよび調整を必要としない。
【０２６２】
本明細書で用いられる用語「粒子」は、その内部または表面に本明細書に記載の組成物が含まれる極めて小さな成分（例えばナノ粒子、微粒子、または幾つかの例ではそれよりも大きい）を指す。
【０２６３】
本明細書で用いられる用語「肺線維症」、「特発性肺線維症」、および「原因不明の線維形成性肺胞炎」は、正常な肺組織構造をリモデリングしてその機能を損なう、異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックスタンパク質沈着を特徴とする間質性肺疾患の主要な成分を指す。特発性肺線維症の特質的病変は、線維芽細胞病巣である。これらの部位は、間葉細胞の活発な複製および新しい細胞外マトリックスの多量の沈着を特色とする。
【０２６４】
本明細書で互換的に用いられる用語「線維症部位」または「線維症病巣」は、過度の線維性組織によって形成または発達した組織内の特異的位置を指す。
【０２６５】
本明細書で用いられる用語「融合タンパク質」は、本来のタンパク質またはポリペプチドの各々に由来する機能的特性を有する１つのポリペプチドまたはタンパク質を作製するために、複数のタンパク質ドメインまたはポリペプチドを結合して構築されるタンパク質またはポリペプチドを指す。融合タンパク質の作製は、組換えＤＮＡ技術を介して各タンパク質ドメインまたはポリペプチドをコードする２つの異なるヌクレオチド配列を動作可能に結合または連結し、それによって所望の融合タンパク質をコードする新規なポリヌクレオチド配列を作製することにより実現され得る。あるいは融合タンパク質は、所望のタンパク質ドメインを化学的に結合させることによって作製され得る。
【０２６６】
本明細書で用いられる用語「特発性」は、自然に、または不確実なもしくは未知の原因から生じることを意味する。
【０２６７】
本明細書で用いられる用語「炎症」は、それにより、脈管が形成されている組織が損傷に応答する生理学的過程を指す。例えば、参照により本明細書に組み入れられるＦＵＮＤＡＭＥＮＴＡＬ  ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ，  ４ｔｈ  Ｅｄ．，  Ｗｉｌｌｉａｍ  Ｅ．  Ｐａｕｌ，  ｅｄ．  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  （１９９９）  ａｔ  １０５１−１０５３を参照されたい。炎症過程の間、解毒および修復に関与する細胞は、炎症媒介物質によって損傷部位に動員される。炎症は多くの場合、炎症部位における白血球、特に好中球（多形核細胞）の強い浸潤を特徴とする。これらの細胞は、血管壁または非損傷組織中で有害物質を放出することによって組織の損傷を促進する。従来、炎症は急性応答と慢性応答に分別されている。
【０２６８】
本明細書で用いられる用語「急性炎症」は、急性損傷に対する急速で短期間の（数分から数日）比較的均一な応答を指し、液体、血漿タンパク質、および好中球系白血球の蓄積を特徴とする。急性炎症を引き起こす傷害性物質の例としては、病原体（例えば細菌、ウイルス、寄生虫）、外因性の（例えばアスベスト）または内因性の（例えば尿酸結晶、免疫複合体）供給源に由来する外来物質、および物理的（例えば熱傷）または化学的（例えば腐食性薬剤）因子が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６９】
本明細書で用いられる用語「慢性炎症」は、より長期間の、終結が不明確および不定である炎症を指す。慢性炎症は、最初の炎症物質（例えば、喫煙）の不完全な除去により、または同じ場所で生じた複数の急性事象の結果として、急性炎症が持続する場合に引き継がれる。慢性炎症は、リンパ球およびマクロファージの流入ならびに線維芽細胞の生育を含み、長期化するまたは繰り返される炎症性活性を示す部位で組織の瘢痕形成をもたらし得る。
【０２７０】
本明細書で用いられる用語「炎症媒介物質」は、炎症および免疫過程の分子性媒介物質を指す。これらの可溶性で拡散性の分子は、組織損傷および感染部位でおよびより離れた部位の両方で局所的に作用する。幾つかの炎症性媒介物質は炎症過程によって活性化されるが、他の媒介物質は急性炎症に応答して、または他の可溶性炎症媒介物質により細胞性供給源から合成および／または放出され、さらに他の媒介物質は抗炎症特性を示す。炎症応答の炎症媒介物質の例としては、血漿プロテアーゼ、補体、キニン、凝固およびフィブリン溶解性タンパク質、脂質媒介物質、プロスタグランジン、ロイコトリエン、血小板活性化因子（ＰＡＦ）、ペプチド、ホルモン（グルココルチコイドなどのステロイドホルモンを含む）、およびアミン、例えば非限定的にヒスタミン、セロトニン、および神経ペプチド、ならびに炎症促進性サイトカイン、例えば非限定的にインターロイキン−１−ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）、インターフェロン−ガンマ（ＩＦ−γ）インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、およびインターロイキン−１７（ＩＬ−１７）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７１】
炎症促進性媒介物質の中で、とりわけＩＬ−１、ＩＬ−６、およびＴＮＦ−αは、急性期応答において肝細胞を活性化して、補体を活性化する急性期タンパク質を合成することが知られている。補体は、病原体と相互作用し食細胞による破壊のためにそれらを標識する、血漿タンパク質の１つの系である。補体タンパク質は、病原体により直接、または病原体結合抗体によって間接的に活性化され、病原体の表面で生じる反応カスケードをもたらし、様々なエフェクター機能を有する活性成分を生成する。ＩＬ−１、ＩＬ−６、およびＴＮＦ−αはまた骨髄内皮を活性化して好中球を動員し、内因性発熱因子として機能して体温を上昇させ、これが身体からの感染体排除を支援する。サイトカインの主要な作用は、視床下部に作用して体温調節を改変すること、筋肉および脂肪細胞に作用して筋肉および脂肪細胞の異化作用を刺激して体温を上昇させることである。高温では、細菌およびウイルスの複製は低減するが、獲得免疫系はより効率的に作動する。
【０２７２】
本明細書で用いられる用語「腫瘍壊死因子」は、抗原または感染に応答して白血球により生成されるサイトカインを指し、それらは腫瘍の壊死（死）を誘発し、広域の炎症促進作用を有する。腫瘍壊死因子はまた、脂質代謝、凝固、インスリン抵抗性、および血管を裏打ちする内皮細胞の機能に及ぼす影響を有する多機能性サイトカインである。
【０２７３】
本明細書で用いられる用語「インターロイキン（ＩＬ）」は、白血球によって分泌され白血球上で作用することがまず初めに観察された、相同的に関係するタンパク質を指す。以来、インターロイキンは広範囲の体細胞によって生成されることが見出された。インターロイキンは、細胞生育、分化、および運動性を調節し、炎症などの免疫応答を刺激する。インターロイキンの例としては、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、およびインターロイキン−１７（ＩＬ−１７）が挙げられる。
【０２７４】
用語「阻害すること」、「阻害する」または「阻害」は、過程の量または速度の低下、過程の完全な停止、またはその作用もしくは機能の低下、制限、もしくは遮断を指すために本明細書で用いられる。阻害は、物質の量、速度、作用機能、または過程の少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の低下または減少を含み得る。
【０２７５】
本明細書で用いられる用語「阻害剤」は、第一の分子に結合しそれによって第一の分子の活性を低下させる、第二の分子を指す。酵素阻害剤は、酵素に結合しそれによって酵素活性を低下させる分子である。阻害剤の結合は、基質が酵素の活性部位に侵入するのを停止させ、および／または酵素がその反応を触媒するのを妨げ得る。阻害剤の結合は、可逆的または不可逆的である。不可逆的阻害剤は通常、酵素と反応して、例えば、酵素活性に必要な主要アミノ酸残基を修飾することによって、酵素を化学的に変化させる。これに対し可逆性阻害剤は非共有的に結合して、これらの阻害剤が酵素、酵素−基質複合体、またはその両方を結合するか否かに応じて、異なるタイプの阻害を生じる。酵素阻害剤は多くの場合、それらの特異性および能力によって評価される。
【０２７６】
本明細書で用いられる用語「損傷」は、外的因子または力（物理的または化学的であり得る）によって引き起こされる、身体の構造または機能に対する傷害または損害を指す。
【０２７７】
本明細書で用いられる用語「単離された」は、（１）その天然に起こる環境で見出されるように通常それに付随するかまたはそれと相互作用する成分を実質的にまたは本質的に含まない、非限定的に核酸、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質などの材料を指す。用語「実質的に含まない」または「本質的に含まない」は、そのような成分が相当にもしくは顕著に含まれず、または約９５％よりも多く、または約９９％よりも多く排除されていることを指すために本明細書で用いられる。単離された材料は、その天然環境においてその材料と一緒に見出されない材料を場合により含み、または（２）材料がその天然の環境にある場合に、この材料は、組成物に対する人の意図的な介入によって合成で（非天然に）改変されており、そして／またはその環境で見出される材料にとって天然ではない細胞中のある場所（例えばゲノムまたは細胞内小器官）に配置されている。合成材料を得るための改変は、その天然状態にある材料に実施されるか、またはその天然状態から取り出された材料に実施される。例えば、天然由来の核酸は、それが由来する細胞内で実施される人間の介入手段によって、その核酸が改変されているか、または改変されたＤＮＡから転写されるならば、単離された核酸になる。例えば、それぞれ参照により本明細書に組み入れられるＥｕｋａｒｙｏｔｉｃ  Ｃｅｌｌｓ，  Ｋｍｉｅｃ，米国特許第５，５６５，３５０号；Ｉｎ  Ｖｉｖｏ  Ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｉｎ  Ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ  Ｃｅｌｌｓ；Ｚａｒｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＣＴ／ＵＳ９３／０３８６８号を参照されたい。同様に、天然由来の核酸（例えば、プロモーター）は、非天然由来の手段によって、その核酸にとって天然ではないゲノムの遺伝子座に導入されるならば、単離された核酸になる。本明細書に定義される「単離された」核酸はまた、「異種の」核酸と称される。
【０２７８】
本明細書で用いられる用語「キナーゼ」は、リン酸基を高エネルギードナー分子から特異的な標的分子または基質へ転移する酵素の一タイプを指す。高エネルギードナー群としては、ＡＴＰが挙げられるが、これに限定されない。
【０２７９】
本明細書で用いられる用語「白血球または白血球細胞（ＷＢＣ））」は、免疫細胞の一タイプを指す。ほとんどの白血球は骨髄で作られ、血液およびリンパ組織中に見出される。白血球は、体が感染および他の疾患と戦うのを援助する。顆粒球、単球、およびリンパ球は白血球である。
【０２８０】
本明細書で用いられる用語「リンパ球」は、疾患に対する身体の防御において大きな役割を果たす小さな白血球細胞（白血球）を指す。２つの主要なタイプの白血球：Ｂ細胞およびＴ細胞が存在する。Ｂ細胞は細菌および毒素を攻撃する抗体を作るが、Ｔ細胞はそれ自体が、ウイルスに接収された時、または癌性になった時、身体の細胞を攻撃する。リンパ球は、多くの他の型の細胞の機能的活性をモジュレートする生成物（リンホカイン）を産生し、多くの場合、慢性炎症部位に存在する。
【０２８１】
本明細書で用いられる用語「マクロファージ」は、微生物を取り囲んで死滅させ、死細胞を除去し、かつ他の免疫系細胞の作用を刺激する、白血球の一タイプを指す。病原体を消化した後、マクロファージは、この病原体の抗原（分子、最も多くは病原体の表面で見出されるタンパク質で、識別のために免疫系で利用される）を対応するヘルパーＴ細胞に提示する。提示は、それを細胞膜中に組み込み、ＭＨＣクラスＩＩ分子に付着させたものを示すことにより行われ、その表面に抗原を有しながらもこのマクロファージが病原体ではないことを他の白血球細胞に示す。最終的に、この抗原提示は、病原体の抗原に付着する抗体の生成をもたらし、マクロファージがそれらの細胞膜および食作用により病原体に接着するのを容易にする。
【０２８２】
本明細書で用いられる用語「間葉細胞」または「間葉」は、３つの胚葉の全てから誘導される細胞を指し、それは結合組織、骨、軟骨、リンパ系、および循環器系に発達し得る。
【０２８３】
本明細書で用いられる用語「ＭＫ２キナーゼ」または「ＭＫ２」は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（「ＭＡＰＫＡＰＫ２」、「ＭＡＰＫＡＰ−Ｋ２」、「ＭＫ２」とも称される）を指し、それはセリン／トレオニン（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）プロテインキナーゼファミリーの１種である。
【０２８４】
本明細書で用いられる用語「空気力学的質量中央径」または「ＭＭＡＤ」は、空気力学的直径に関する、風媒粒子の質量分布の中央値を指す。ＭＭＡＤは、通常、幾何学的標準偏差（ｇまたはシグマｇ）を伴い、それは粒度分布の多様性を特徴づける。
【０２８５】
本明細書で用いられる用語「モジュレートする」は、特定の測定値または割合に調節する、改変する、順応させる、または適合させることを指す。
【０２８６】
本明細書で用いられる用語「単球」は、骨髄中で形成され血液を介して体内の組織へ移動し、そこでマクロファージになる免疫細胞の一タイプを指す。単球は白血球の一タイプおよび食細胞の一タイプである。
【０２８７】
本明細書で用いられる用語「好中球」または「多形核好中球（ＰＭＳ）」は、生来の免疫系の本質的部分を形成する、哺乳動物の最も豊富なタイプの白血球細胞を指す。それらは、好塩基球および好酸球と一緒に多形核細胞ファミリー（ＰＭＮ）の部分を形成する。好中球は通常、血流中で見出される。特に細菌感染および幾つかの癌の結果としての、炎症の開始期（急性期）に、好中球は、炎症部位へ向かって遊走する炎症細胞の最初の応答物質の１つである。それらは、走化性（運動性細胞の誘導性移動）と呼ばれる過程でインターロイキン−８（ＩＬ−８）およびＣ５ａなどの化学物質シグナルに従って、または部分的には化学物質の濃度勾配に沿って好ましいとみなされる環球条件に向かい、そして／または忌避物質を見出す周囲環境から遠ざかるように、血管を通り、その後、間質組織を通り遊走する。
【０２８８】
本明細書で用いられる用語「正常な健常対照群の対象」は、気道の症状もしくは他の臨床的エビデンスまたは肺組織疾患を有さない対象を指す。
【０２８９】
本明細書で用いられる用語「核酸」は、一本鎖または二本鎖形態のいずれかのデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチドを指し、他に断りがなければ、天然由来ヌクレオチドと類似の様式で一本鎖核酸にハイブリダイズする、天然ヌクレオチドの本質的性質を有する公知の類似体（例えばペプチド核酸）も包含する。
【０２９０】
用語「ヌクレオチド」は、複素環塩基、糖、および１つまたは複数のリン酸基からなる化合物を指すために本明細書で用いられる。最も一般的なヌクレオチドでは、塩基はプリンまたはピリミジンの誘導体であり、糖はペントースデオキシリボースまたはリボースである。ヌクレオチドは核酸のモノマーであり、３つ以上が一緒に結合して核酸を形成する。ヌクレオチドは、ＲＮＡ、ＤＮＡ、および非限定的にＣｏＡ、ＦＡＤ、ＤＭＮ、ＮＡＤ、およびＮＡＤＰを含むいくつかの補因子の構造単位である。プリンはアデニン（Ａ）、およびグアニン（Ｇ）を含み、ピリミジンはシトシン（Ｃ）、チミン（Ｔ）、およびウラシル（Ｕ）を含む。
【０２９１】
以下の用語は、２つ以上の核酸またはポリヌクレオチド間の配列関係を記述するために本明細書で用いられる：（ａ）「参照配列」、（ｂ）「比較ウィンドウ」、（ｃ）「配列同一性」、（ｄ）「配列同一性％」、および（ｅ）「実質的同一性」。
【０２９２】
（ａ）用語「参照配列」は、配列比較の基準として用いられる配列を指す。参照配列は、例えば、完全長ｃＤＮＡもしくは遺伝子配列のセグメント、または完全なｃＤＮＡもしくは遺伝子配列としての、特定した配列のサブセットまたは全体であり得る。
【０２９３】
（ｂ）用語「比較ウィンドウ」は、ポリヌクレオチド配列の連続した特定のセグメントを指し、ここでポリヌクレオチド配列が参照配列と比較されてもよく、比較ウィンドウ内のポリヌクレオチド配列の部分が、この２つの配列の最適なアラインメントのために参照配列（付加または欠失を含まない）と比較して付加または欠失（即ち、ギャップ）を含んでいてもよい。一般的に比較ウィンドウは、少なくとも２０の連続ヌクレオチド長であり、場合によって少なくとも３０連続ヌクレオチド長、少なくとも４０連続ヌクレオチド長、少なくとも５０連続ヌクレオチド長、少なくとも１００連続ヌクレオチド長であるか、またはそれより長くてよい。ポリヌクレオチド配列にギャップを含ませることによる参照配列に対する高度な類似性を回避するために、典型的にはギャップペナルティーが導入されマッチする数から差し引かれることは、当業者に理解されよう。
【０２９４】
比較のための配列アラインメントの方法は、当該技術分野で周知である。比較のための配列の最適アラインメントは、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ，  Ａｄｖ．  Ａｐｐｌ．  Ｍａｔｈ．  ２：４８２（１９８１）の局所相同性アルゴリズムによって；Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ４８：４４３（１９７０）の相同アラインメントアルゴリズムによって；Ｐｅａｒｓｏｎ  ａｎｄ  Ｌｉｐｍａｎ，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ８５：２４４４（１９８８）の類似性のための検索方法によって；これらのアルゴリズムのコンピュータ化手段（非限定的にＩｎｔｅｌｌｉｇｅｎｅｔｉｃｓ，  Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，  Ｃａｌｉｆ．によるＰＣ／遺伝子プログラム中のＣＬＵＳＴＡＬ；Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ  （ＧＣＧ），  ５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，  Ｍａｄｉｓｏｎ，  Ｗｉｓ．，  ＵＳＡ内のＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡ、およびＴＦＡＳＴＡなど）によって実施され得、ＣＬＵＳＴＡＬプログラムは、Ｈｉｇｇｉｎｓ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐ，  Ｇｅｎｅ  ７３：２３７−２４４  （１９８８）；Ｈｉｇｇｉｎｓ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐ，  ＣＡＢＩＯＳ  ５：１５１−１５３  （１９８９）；Ｃｏｒｐｅｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １６：１０８８１−９０  （１９８８）；Ｈｕａｎｇ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，  ８：１５５−６５  （１９９２）、およびＰｅａｒｓｏｎ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ２４：３０７−３３１（１９９４）によって十分に記載されている。データベースの類似性検索に用いられ得るプログラムのＢＬＡＳＴファミリーとしては、ヌクレオチドデータベース配列に対するヌクレオチド照会配列のためのＢＬＡＳＴＮ；タンパク質データベース配列に対するヌクレオチド照会配列のためのＢＬＡＳＴＸ；タンパク質データベース配列に対するタンパク質照会配列のためのＢＬＡＳＴＰ；ヌクレオチドデータベース配列に対するタンパク質照会配列のためのＴＢＬＡＳＴＮ；およびヌクレオチドデータベース配列に対するヌクレオチド照会配列のためのＴＢＬＡＳＴＸが挙げられる。Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  Ｃｈａｐｔｅｒ  １９，  Ａｕｓｕｂｅｌ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｄｓ．，  Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９５）を参照されたい。
【０２９５】
他に断りがなければ、本明細書で提供される配列同一性／類似性の値は、規定値パラメータを利用するＢＬＡＳＴ２．０一式のプログラムを用いて得られた値を指す。Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２５：３３８９−３４０２（１９９７）。ＢＬＡＳＴ分析を実施するソフトウェアは、例えばＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ−Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎから、公的に入手できる。このアルゴリズムは、照会配列内で長さＷの短いワードを同定することにより高スコア配列ペア（ＨＳＰ）を最初に同定することを含み、それらのペアはデータベース内の同じ長さのワードを用いてアラインメントを実施した時に、幾つかの正の値の閾値スコアＴと一致または適合する。Ｔは、近傍ワードスコア閾値と称される（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．上掲書）。これらの最初の近傍ワードヒットは、それらを含むより長いＨＳＰを発見するために検索を開始するためのシードとして作用する。このワードヒットをその後、累積的アラインメントスコアが増加し得る限り、各配列に沿って両方向に伸長する。累積スコアは、ヌクレオチド配列については、パラメータＭ（マッチ残基ペアの報奨スコア；常に＞０）およびＮ（ミスマッチ残基のペナルティースコア；常に＜０）を用いて算出する。アミノ酸残基については、スコアリングマトリックスを用いて、累積スコアを算出する。各方向におけるワードヒットの伸長は、累進アライメントスコアが最大達成値から量Ｘだけ減少した時；累積スコアが、負のスコアを与える１つもしくは複数の残基アラインメントの累積のために０以下になった時；またはいずれかの配列の末端に達した時に、停止される。ＢＬＡＳＴアルゴリズムパラメータＷ、Ｔ、およびＸは、アラインメントの感度および速度を決定する。ＢＬＡＳＴＮプログラム（ヌクレオチド配列用）は、規定値として１１のワード長（Ｗ）、１０の期待値（Ｅ）、１００のカットオフ、Ｍ＝５、Ｎ＝−４、および両方の鎖の比較を用いる。アミノ酸配列については、ＢＬＡＳＴＰプログラムは、規定値として３のワード長（Ｗ）、１０の期待値（Ｅ）、およびＢＬＯＳＵＭ６２スコアリングマトリックスを用いる（Ｈｅｎｉｋｏｆｆ  ＆  Ｈｅｎｉｋｏｆｆ（１９８９）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８９：１０９１５を参照されたい）。
【０２９６】
配列同一性％の計算に加えて、ＢＬＡＳＴアルゴリズムはまた、２つの配列間の類似性の統計分析を実施する（例えば、Ｋａｒｌｉｎ    Ａｌｔｓｃｈｕｌ，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ９０：５８７３−５７８７，  １９９３参照）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって提供される類似性の１つの尺度は最小合計確率（Ｐ（Ｎ））であり、それは２つのヌクレオチドまたはアミノ酸配列の間の一致が偶然によって生じる確率を示す。ＢＬＡＳＴ検索は、タンパク質がランダム配列としてモデル化され得ると仮定する。しかし、多くの現実のタンパク質は、非ランダム配列の領域を含み、それはホモポリマー域、短区間のリピート、または１つもしくは複数のアミノ酸に富む領域であり得る。そのような低複雑性領域は、このタンパク質の他の領域が完全に非類似であったとしても、無関係のタンパク質間でアラインメントされ得る。多くの低複雑性フィルタープログラムを用いて、そのような低複雑性アラインメントを減少させることができる。例えば、ＳＥＧ（Ｗｏｏｔｅｎ  ａｎｄ  Ｆｅｄｅｒｈｅｎ，  Ｃｏｍｐｕｔ．  Ｃｈｅｍ．，  １７：１４９−１６３（１９９３））およびＸＮＵ（Ｃｌａｖｅｒｉｅ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｅｓ，  Ｃｏｍｐｕｔ．  Ｃｈｅｍ．，  １７：１９１−２０１（１９９３））低複雑性フィルターを、単独でまたは組み合わせて利用してもよい。
【０２９７】
（ｃ）２つの核酸またはポリペプチド配列の文脈における用語「配列同一性」または「同一性」は、特定の比較ウィンドウ全体で最大一致のアラインメントを実施した時に同一である２つの配列中の残基を指す。配列同一性％が、タンパク質に対して用いられる場合、同一ではない残基位置は、保存的アミノ酸置換によって、即ち、アミノ酸残基が類似する化学的特性（例えば荷電または疎水性）を有する他のアミノ酸で置換され、したがってその分子の機能的特性が変わらない場合、しばしば異なることが認識される。配列が保存的置換において異なる場合、配列同一性％を上方に調整して、この置換の保存的性質について修正できる。そのような保存的置換により異なる配列は、「配列類似性」または「類似性」を有すると言われる。この調整を実施する手段は、当業者に周知である。典型的にはこれは、保存的置換を完全ミスマッチではなく部分的ミスマッチとして評価し、それによって配列同一性％を高めることを含む。したがって、例えば同一アミノ酸が１のスコアを与えられ、非保存的置換が０のスコアを与えられる場合、保存的置換は、０と１の間のスコアが与えられる。保存的置換の評価は、例えばＰＣ／ＧＥＮＥプログラム（Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｅｔｉｃｓ，  Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，  Ｃａｌｉｆ．，  ＵＳＡ）で履行されるように、例えばＭｅｙｅｒｓとＭｉｌｌｅｒ，Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ａｐｐｌｉｃ．  Ｂｉｏｌ．  Ｓｃｉ．，  ４：１１−１７（１９８８）のアルゴリズムにしたがって計算される。
【０２９８】
（ｄ）用語「配列同一性％」は、最適にアラインメントされた２つの配列を、比較ウィンドウ全体で比較することによって決定される値を意味するために本明細書で用いられ、ここで比較ウィンドウ内のポリヌクレオチド配列の部分は、２つの配列の最適なアラインメントのために参照配列（付加または欠失を含まない）と比較して付加または欠失（即ち、ギャップ）を含み得る。その％値は、同一の核酸塩基またはアミノ酸残基が両配列中に存在する位置の数を決定して一致する位置の数を得て、この一致した位置の数を比較ウィンドウ内の位置の総数で割算し、その結果を１００倍して配列同一性の％値を得ることにより計算される。
【０２９９】
（ｅ）ポリヌクレオチド配列の用語「実質的同一性」は、ポリヌクレオチドが、記載されたアラインメントプログラムの１つを用いて標準的なパラメータにより参照配列と比較して、少なくとも７０％の配列同一性、少なくとも８０％の配列同一性、少なくとも９０％の配列同一性および少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むことを意味する。当業者であれば、これらの値を適宜調整して、２つのヌクレオチド配列によってコードされるタンパク質の対応する同一性を、コドンの縮重、アミノ酸類似性、リーディングフレームの位置などを考慮しながら決定できることを認識するであろう。これらの目的のためのアミノ酸配列の実質的同一性は、少なくとも６０％、または少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の配列同一性を意味する。ヌクレオチド配列が実質的に同一であることのもう１つの指標は、ストリンジェントな条件下で２つの分子が互いにハイブリダイズするか否かということである。しかし、ストリンジェントな条件下で互いにハイブリダイズしない核酸は、それらがコードするポリペプチドが実質的に同一であれば、なお実質的に同一である。このようなことは、例えば核酸のコピーが、遺伝子コードによって許容される最大のコドン縮重を用いて作製された場合に、生じ得る。２つの核酸配列が実質的に同一であることの１つの指標は、第一の核酸がコードするポリペプチドが、第二の核酸によってコードされるポリペプチドと免疫学的に交差反応性であることである。
【０３００】
本明細書で用いられる語句「動作可能に連結される」は、生じた融合タンパク質の各タンパク質ドメインまたはポリペプチドがその本来の機能を保持できるように、２つ以上のタンパク質ドメインまたはポリペプチドが、組換えＤＮＡ技術または化学反応により連結または合体された結合を指す。例えば、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１は、細胞貫通ペプチド（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）を治療ドメイン（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と動作可能に連結して、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１の細胞貫通機能およびＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のキナーゼ阻害剤機能の両方を保有する融合ペプチドを作製することによって構築される。
【０３０１】
本明細書で用いられる用語「酸化ストレス」は、活性酸素（フリーラジカル）の産生と抗酸化防御との間の均衡の乱れを指す。
【０３０２】
本明細書で用いられる用語「実質」は、結合組織または血管と対比して、器官の本質的部分を構成する動物組織を指す。用語「実質の」は、器官の実質と関係があることを意味する。
【０３０３】
本明細書で用いられる用語「非経口的」は、注射によって身体に導入すること（即ち、注射による投与）を指し、例えば皮下（即ち、皮下への注射）、筋肉内（即ち、筋肉内への注射）、静脈内（即ち、静脈内への注射）、硬膜下腔内（即ち、脊髄周囲間質内または脳のクモ膜下への注射）、胸骨内注射または輸液技術が挙げられ、さらに腹腔内注射または体腔（例えば、腹腔）への輸液が挙げられる。非経口的に投与される組成物は、針、例えば手術針、または他の身体アクセス用装置を用いて送達される。本明細書で用いられる用語「手術針」は、液体（即ち、流動できる）組成物を選択された解剖学的構造に送達するように適合させた任意のアクセス用装置を指す。注射可能な調製物、例えば滅菌注射用水性または油性懸濁物は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いて公知の技術にしたがって配合され得る。
【０３０４】
本明細書で用いられる用語「微粒子」は、気体または液体中に懸濁された固体または流動物質の微粒子を指す。
【０３０５】
本明細書で用いられるように用語「医薬的に許容し得る担体」は、その中において本発明の単離されたポリペプチドが安定で生物学的利用性を保持するような、医薬の投与に従来から使用可能な、実質的に非毒性の任意の担体を指す。医薬的に許容し得る担体は、処置される哺乳動物への投与に適するように十分に高純度でありかつ十分に低毒性でなければならない。さらにそれは、活性物質の安定性および生物学的利用度を維持しなければならない。医薬的に許容し得る担体は、液体または固体であってよく、予定された投与様式を念頭において、所与の組成物の活性物質および他の成分と一緒にされた時に所望の容量、粘稠度などを提供するように選択される。
【０３０６】
用語「医薬的に許容し得る塩」は、適切な医学的判定の範囲内で、ヒトおよびより下等な動物の組織と接触する使用に適し、過度の毒性、刺激性、アレルギー反応などを有さず、合理的な利益／リスク比に関して釣合いがとれたそれらの塩を意味する。
【０３０７】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーを指すために本明細書で互換的に用いられる。この用語は、天然由来のアミノ酸ポリマーだけでなく、１つまたは複数のアミノ酸残基が対応する天然由来のアミノ酸の人工化学的類似体であるアミノ酸ポリマーにも適用される。天然由来のアミノ酸のそのような類似体の本質的な性質は、タンパク質に取り込まれた場合に、そのタンパク質が、同じタンパク質であるが完全に天然由来アミノ酸からなるタンパク質に対して誘引された抗体に特異的に反応するということである。
【０３０８】
用語「ポリペプチド」および「タンパク質」はまた、本明細書ではそれらの最も広い意味で用いられ、サブユニットアミノ酸、アミノ酸類似体、またはペプチド模倣体の配列を指す。サブユニットは、特記される場合を除きペプチド結合によって連結される。本明細書に記載されたポリペプチドは、化学合成されるか、または組換え発現され得る。記載された本発明のポリペプチドはまた、化学合成され得る。周知の固相、液相技術、もしくはペプチド縮合技術、またはそれらの任意の組み合わせを用いて調製される合成ポリペプチドは、天然または非天然アミノ酸を包含し得る。ペプチド合成に用いられるアミノ酸は、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９６３，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ８５：２１４９−２１５４）の本来の固相手順の標準的脱保護、中和、カップリングおよび洗浄プロトコルを用いる標準的なＢｏｃ（Ｎ−α−保護Ｎ−α−ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノ酸樹脂、またはＣａｒｐｉｎｏおよびＨａｎ（１９７２，  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ３７：３４０３−３４０９）により最初に記載された塩基不安定性Ｎ−α−アミノ保護９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）アミノ酸であり得る。ＦｍｏｃおよびＢｏｃ  Ｎ−α−アミノ保護アミノ酸は両方とも、Ｓｉｇｍａ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ、または当業者に熟知された他の化学品会社から入手できる。加えて、ポリペプチドは、当業者に熟知された他のＮ−α−保護基を用いて合成され得る。固相ペプチド合成は、当業者に熟知され、例えばＳｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ，  １９８４，  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，  Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，  Ｉｌｌ．；Ｆｉｅｌｄｓ  ａｎｄ  Ｎｏｂｌｅ，  １９９０，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｅｐｔ．  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．  ３５：１６１−２１４で提供される技術により、または自動合成装置を用いて、達成され得る。本発明のポリペプチドは、特殊な特性を伝えるために、Ｄ−アミノ酸（Ｌ−アミノ酸特異的プロテアーゼにインビボで耐性である）、Ｄ−およびＬ−アミノ酸の組み合わせ、および様々な「デザイナー」アミノ酸（例えばβ−メチルアミノ酸、Ｃ−α−メチルアミノ酸、およびＮ−α−メチルアミノ酸など）を含んでよい。合成アミノ酸には、リジンのためのオルニチン、およびロイシンまたはイソロイシンのためのノルロイシンが含まれる。加えて、ポリペプチドは、新規な特性を有するペプチドの調製のためにペプチド模倣結合（例えばエステル結合）を有してよい。例えば、還元ペプチド結合を取り込んだペプチドを作製できる。即ち、Ｒ１−ＣＨ２−ＮＨ−Ｒ２であり、式中Ｒ１およびＲ２はアミノ酸残基または配列である。還元ペプチド結合はジペプチドサブユニットとして導入できる。そのようなポリペプチドはプロテアーゼ活性に耐性であり、インビボで延長半減期を有する。したがって、これらの用語はまた、天然に存在するポリマーだけでなく、１つまたは複数のアミノ酸残基が、対応する天然に存在するアミノ酸の人工の化学的類似体であるアミノ酸ポリマーにも適用される。天然に存在するアミノ酸のそのような類似体の本質的な性質は、タンパク質に取り込まれた時、このタンパク質は、同じタンパク質であるが完全に天然に存在するアミノ酸からなるタンパク質に対して誘引された抗体に対して特異的に反応するということである。
【０３０９】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」はまた、非限定的にグリコシル化、脂質結合、硫酸化、グルタミン酸残基のガンマ−カルボキシル化、ヒドロキシル化、およびＡＤＰ−リボシル化を含む修飾を含む。周知であり先にも特記されているように、ポリペプチドは、完全に直鎖状ではないかもしれないことは理解されよう。例えばポリペプチドは、ユビキチン化の結果として分岐し、それらは一般に、天然のプロセッシング事象および自然には生じない人間の操作による事象など、翻訳後事象の結果として分岐を有する、または有さない環状であり得る。環状、分枝状および分枝環状のポリペプチドを、非翻訳天然過程および完全に合成的な方法によって合成できる。幾つかの実施形態において、ペプチドは、任意の長さまたはサイズである。
【０３１０】
本明細書で用いられる用語「前酵素」または「ザイモゲン」は、不活性な酵素前駆体を指す。ザイモゲンは、活性酵素となるために生化学的変化（例えば、活性部位を暴露する加水分解反応、または活性部位暴露のための立体構造の変化）を必要とする。生化学的変化は通常、前駆体酵素の特異的部分を切断して前駆体を活性化するリソゾームで生じる。活性化の際に遊離されるアミノ酸鎖は、活性化ペプチドと呼ばれる。
【０３１１】
本明細書で用いられる用語「増殖」は、単一細胞が同一の娘細胞へと持続的に分裂することによる細胞集団の増大を指す。
【０３１２】
本明細書で用いられる用語「肺間質」は、肺の気嚢周囲の組織および空間を指す。
【０３１３】
本明細書で用いられる用語「肺胞」は、中空の形態を有する解剖学的構造を指す。肺胞は、肺の呼吸帯中で肺胞管および肺胞房の先端に位置し、呼吸管の終末点を形成する。肺胞は、血液とのガス交換を行う呼吸部位の球状露頭部であり、哺乳動物の肺のみで見出される。肺胞膜は、ガス交換表面である。血液は、肺胞に放出するために身体の残りの部分から二酸化炭素を取り込み、肺胞内酸素は、肺胞血管中の血液により取り込まれて、体内の全細胞に輸送される。肺胞は、若干のコラーゲンおよび弾性線維を含む。弾性線維は、肺胞が吸気時に空気で満たされるとそれらを拡張させる。その後、肺胞は、呼気時に急激に復元し、二酸化炭素に富む空気を排出する。肺胞壁には、３つの主要な肺胞細胞型が存在する：（１）肺胞壁の構造を形成する肺胞扁平上皮細胞、（２）水の表面張力を低下させて膜を分離させ、それによってガス交換能力を高めるために、肺界面活性剤を分泌する大肺胞細胞、（３）細菌などの外来病原体を破壊するマクロファージ。
【０３１４】
本明細書で用いられる用語「活性酸素（「ＲＯＳ」）」、例えばフリーラジカルおよび過酸化物は、酸素の代謝から得られ、生得的に全ての好気性生物体に存在する、分子分類を指す。本明細書で用いられる用語「酸素ラジカル」は、不対電子を含む任意の酸素種（遊離酸素以外）を指す。酸素への電子輸送はまた、有毒なフリーラジカル種の産生をもたらし得る。これらを最もよく証明するのが、スーパーオキシドラジカルである。ヒドロキシルラジカル（ＯＨ−）およびスーパーオキシドイオン（Ｏ２−）などの酸素ラジカルは、タンパク質、脂質および核酸への構造的損傷を誘発する非常に強力な酸化剤である。正常な細胞代謝の産物であるフリーラジカルスーパーオキシドアニオンは、酸素の不完全な還元のために主にミトコンドリアで産生される。スーパーオキシドラジカルは、他の多くのラジカルと比較して非反応性であるが、生物学的システムによって、ペルオキシル（ＲＯＯ−）、アルコキシル（ＲＯ−）およびヒドロキシル（ＯＨ−）ラジカルなどの他のより反応性の種に変換され得る。
【０３１５】
本明細書で用いられる語句「組織におけるリモデリング」、「組織リモデリング」などは、胎児または成体の一生の間に生じる動的過程を指し、組織の本来の編成および機能の修飾を含む。
【０３１６】
用語「同様の」は、用語：類似する、匹敵する、または似る、と互換的に用いられ、共通の特質または特徴を有することを意味する。
【０３１７】
本明細書で用いられる用語「溶液」は、２つ以上の物質の均質な混合物を指す。それは必ずではないが多くの場合、液体である。溶液中では、溶質分子（または溶解された物質）は、溶媒分子間に均質に分布される。
【０３１８】
用語「可溶性の」または「溶解度」は、特定の液体（溶媒）に溶解され易い特性を指す。用語「不溶性の」は、特定の溶媒に最小のまたは限定的な可溶性を有する材料の特性を指す。溶液中では、溶質分子（または溶解された物質）は、溶媒分子間に均質に分布される。
【０３１９】
本明細書で用いられる用語「ストレス線維」は、アクチンフィラメント、架橋タンパク質（２つ以上のフィラメントを互いに結合させるタンパク質）、およびミオシンＩＩモーターからなる、細胞内の高次構造を指す。アクチンは球状タンパク質（約４３ｋＤａ）であり、重合して、互いに周囲を包みあう２つのプロトフィラメントを有する秩序だったフィラメント構造を形成し、単一の「アクチンフィラメント」（「ミクロフィラメント」とも称される）を形成する。ストレス線維中のミオシンモーターは移動して、アクチンフィラメントを互いに滑らせ、それにより線維が収縮し得る。収縮が力を発生するには、線維が何かに固着されなければならない。ストレス線維は、細胞膜に固着でき、さらに多くの場合この固着が発生する部位もまた、細胞外構造物（マトリックスまたは他の幾つかの基質）に結合される。これらの結合部位は、巣状接着と称される。多くのタンパク質が、適切な巣状接着の発生および維持に必要となる。これらの固定された外部基質に対する収縮は、ミオシンモーターならびにフィラメント増殖および再編成によって発生した力で細胞を遊走および再形成させるものである。
【０３２０】
本明細書で用いられる用語「懸濁物」は、その中で微細に分割された化学種が別の化学種と混和される分散物（混合物）を指し、前者は、非常に微細に分割され混合されるので、それは急速に沈殿しない。日常で最も一般的な懸濁物は、液体中の固体の懸濁物である。
【０３２１】
用語「対象」または「個体」または「患者」は、非限定的にマウス、ラット、ネコ、ヤギ、ヒツジ、ウマ、ハムスター、フェレット、カモノハシ、ブタ、イヌ、モルモット、ウサギおよび霊長類、例えばサル、類人猿またはヒトを含む、哺乳動物起源の動物種の１種を指すために互換的に用いられる。
【０３２２】
本明細書で用いられる語句「そのような処置を必要とする対象」は、疾患、障害、症状、または病理学的過程を受ける患者を指す。幾つかの実施形態において、用語「そのような処置を必要とする対象」はまた、文脈およびこの語句の使用が他に指定されない限り、（ｉ）本発明の少なくとも１つのポリペプチドを今後、投与される患者、（ｉｉ）本発明の少なくとも１つのポリペプチドを投与されている患者、または（ｉｉｉ）本発明の少なくとも１つのポリペプチドを既に投与された患者を指すために用いられる。
【０３２３】
用語「置換」は、１つの塩基または複数の塩基がＤＮＡ配列中の別の１つの塩基または複数の塩基と交換される状況を指すために用いられる。置換は、同義的置換または非同義的置換であり得る。本明細書で用いられる「同義的置換」は、生成されるアミノ酸配列が修飾されないような、タンパク質をコードする遺伝子のエクソンにおける１つの塩基と別の塩基との置換を指す。本明細書で用いられる用語「非同義的置換」は、生成されるアミノ酸配列が修飾されるような、タンパク質をコードする遺伝子のエクソンにおける１つの塩基と別の塩基との置換を指す。
【０３２４】
活性物質の用語「治療量」、「有効量」、または「医薬的有効量」は、意図する処置利益を提供するのに十分な量を指すために互換的に用いられる。例えば、記載された本発明のキナーゼ阻害組成物の「治療量」は、（１）少なくとも１つの線維症病巣を除去する、もしくはそのサイズを低下させるため；または（２）肺線維症患者の肺間質内のコラーゲンおよびフィブロネクチンを含む細胞外マトリックスの沈着速度を低下させるために十分な量を包含するが、これらに限定されない。この用語はまた、肺線維症患者の少なくとも１つの症状を抑制または軽減するのに十分な量を包含し、ここで症状は、酸素飽和、呼吸困難（呼吸が困難になること）、痰が排出されない咳（おそらく刺激または炎症により誘発され呼吸管から痰を除去しない、肺からの突発的な空気の排出を意味する）、太鼓撥指（指が球根状外観を呈し外観が損なわれること）、およびパチパチ音（吸入時に肺で生じるパチパチという音で、時にラ音または捻髪音と称される）を含む。
【０３２５】
記載された本発明にしたがって用いられ得る活性物質の有効量は、一般に約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｇ／ｋｇ体重の範囲内である。しかし投薬レベルは、損傷のタイプ、患者の年齢、体重、性別、医学的状態、症状の重度、投与経路および頻度、ならびに用いられる特定の活性物質を含む様々な因子に基づく。したがって投薬レジメンは広範囲に変動し得るが、臨床医が標準的な方法を用いて日常的にこれを決定できる。
【０３２６】
用語「処置する」または「処置すること」は、疾患、状態または障害の停止、実質的阻害、その進行の緩徐化または逆行、状態の臨床的または美的症状の実質的緩和、疾患、状態、または障害の臨床的または美的症状の出現の実質的予防、および有害または不快な症状の防御を包含する。処置はさらに、以下の１つまたは複数の達成を指す：（ａ）障害の重度の軽減、（ｂ）処置される障害（複数可）に特徴的な症状の発生の制限、（ｃ）処置される障害（複数可）に特徴的な症状の増悪の制限、（ｄ）過去に障害（複数可）を有した患者における障害（複数可）の再発の制限、および（ｅ）過去に障害（複数可）に対して無症状であった患者での症状の再発の制限。
【０３２７】
用語「変種」、「変異体」、および「誘導体」は、参照ヌクレオチドまたはポリペプチド配列に対して実質的な同一性を有するヌクレオチドまたはポリペプチド配列を指すために本明細書で用いられる。配列における相違は、配列または構造における、天然のまたは計画的な変化の結果であり得る。天然の変化は、特定の核酸配列に本質的な通常の複製または複写過程で生じ得る。計画的な変化は、特定の目的のために特別に設計され、配列に導入される。そのような特別な変化は、様々な変異誘発技術を用いてインビトロで実施され得る。特別に作製されたそのような配列変種は、本来の配列の「変異体」または「誘導体」と称することができる。
【０３２８】
当業者は、１つのまたは複数のアミノ酸置換、欠失、付加または交換（ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔｓ）を有するが、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１と機能的に均等であるポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のポリペプチド変種を生成できる。これらの変種としては、とりわけ：（ａ）１つまたは複数のアミノ酸残基が保存的または非保存的アミノ酸で置換された変種；（ｂ）１つまたは複数のアミノ酸が付加された変種；（ｃ）少なくとも１つのアミノ酸が置換基を含む変種；（ｄ）ある種のアミノ酸残基が保存的または非保存的な位置で別の種の対応する残基と置換された変種；および（ｄ）標的タンパク質が別のペプチドまたはポリペプチド、例えば融合パートナー、タンパク質タグ、または他の化学的成分と融合されて、標的タンパク質に有用な特性（例えば抗体のためのエピトープ）を付与し得る変種、を挙げることができる。非限定的に遺伝的技術（抑制、欠失、変異など）、化学的技術、および酵素的技術を含む、そのような変種を得る技術は、当業者には公知である。本明細書で用いられるように、用語「変異」は、親のタイプには見出されない新規な特徴もしくは特質の創出をもたらす生物の遺伝子もしくは染色体内のＤＮＡ配列の変化、またはそのような変化が、遺伝子をコードするＤＮＡのヌクレオチド配列の改変を介して、もしくは染色体の物理的編成における変化を介して染色体内に生じる過程を指す。変異の３つのメカニズムは、置換（１つの塩基対と別の塩基対との交換）、付加（配列への１つまたは複数の塩基の挿入）、および欠失（１つまたは複数の塩基対の損失）を含む。
【０３２９】
本明細書で用いられる用語「ビヒクル」は、薬物の使用を容易にする物質または薬物と混合される他の材料を指す。
【０３３０】
本明細書で用いられる用語「創傷治癒」または「創傷修復」は一般に、外傷後に組織を修復する身体の自然な過程を指す。個体が傷ついた場合、傷害を修復するために、止血、炎症、増殖、およびリモデリングを含む、一連の複雑な生化学的事象が起こる。
【０３３１】
Ｉ．組成物：異常な線維芽細胞増殖およびコラーゲン沈着を特徴とする疾患を予防または処置するための治療ペプチド
一態様によれば、記載された本発明は、対象の組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックスの沈着を特徴とする疾患、状態、または過程の処置で使用するための医薬組成物であって、
アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のポリペプチドまたはその機能的均等物の治療量と、医薬的に許容し得るその担体と、を含み、
治療量が、対象の組織における線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着を減少させるのに効果的である、
組成物を提供する。
【０３３２】
一実施形態によれば、疾患または状態は、急性肺損傷（ＡＬＩ）または急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）である。
【０３３３】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、放射線誘発性線維症である。
【０３３４】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、移植片拒絶である。
【０３３５】
別の実施形態によれば、組織は、肺組織である。
【０３３６】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、間質性肺疾患である。
【０３３７】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、肺線維症である。
【０３３８】
別の実施形態によれば、肺線維症は、特発性肺線維症である。
【０３３９】
別の実施形態によれば、肺線維症は、ブレオマイシンの投与により生じる。
【０３４０】
別の実施形態によれば、肺線維症は、アレルギー反応、環境性微粒子の吸入、喫煙、細菌感染、ウイルス感染、対象の肺の機械的損傷、肺移植片拒絶、自己免疫障害、遺伝性疾患、またはそれらの組み合わせから生じる。
【０３４１】
別の実施形態によれば、組織は、肝組織である。
【０３４２】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、肝線維症である。
【０３４３】
別の実施形態によれば、組織は、腎組織である。
【０３４４】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、腎線維症である。
【０３４５】
別の実施形態によれば、組織は、血管組織である。
【０３４６】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、血管線維症である。
【０３４７】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、組織の炎症をさらに特徴とする。
【０３４８】
別の実施形態によれば、炎症は、急性または慢性炎症である。
【０３４９】
別の実施形態によれば、炎症は、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、およびインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインによって媒介される。
【０３５０】
別の実施形態によれば、肺線維症は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着、肺における線維芽細胞増殖の異常な促進、肺における筋線維芽細胞分化の異常な誘発、および筋線維芽細胞の細胞外マトリックスへの付着の異常な促進からなる群から選択される少なくとも１つの病態を特徴とする。
【０３５１】
別の実施形態によれば、組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着は、正常な健常対照群の対象の組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の活性と比較して、組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な活性を特徴とする。
【０３５２】
別の実施形態によれば、組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着は、正常な健常対照群の対象の組織における活性化有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の量または分布と比較して、組織における活性化（リン酸化）有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な量または分布によって立証される。
【０３５３】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、本明細書の表１に列挙された群から選択されるキナーゼのキナーゼ活性を阻害する。
【０３５４】
別の実施形態によれば、この阻害は、例えば、対象の組織における線維芽細胞増殖、細胞外マトリックス沈着、またはそれらの組み合わせを減少させるのに効果的であり得る。
【０３５５】
別の実施形態によれば、この阻害は、例えば、正常な健常対照群の対象と比較して、肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着、肺における線維芽細胞増殖の異常な促進、筋線維芽細胞分化の異常な誘発、および筋線維芽細胞の細胞外マトリックスへの付着の異常な促進からなる群から選択される少なくとも１つの病態を減少させるのに効果的であり得る。
【０３５６】
別の実施形態によれば、ＭＭＩ阻害剤のインビボにおける阻害プロファイルは、投薬量、投与経路、およびこれらの阻害剤に応答する細胞型に依存する。
【０３５７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０３５８】
幾つかの実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２キナーゼ）のキナーゼ活性を阻害する。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０３５９】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３キナーゼ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０３６０】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０３６１】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。
【０３６２】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性および有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性を阻害する。
【０３６３】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性およびカルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０３６４】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０３６５】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０３６６】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０３６７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０３６８】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０３６９】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０３７０】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０３７１】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％および有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０３７２】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％およびカルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０３７３】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０３７４】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０３７５】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２、ＭＫ３、ＣａＭＫＩ、ＴｒｋＢの群から選択される少なくとも１つのキナーゼのキナーゼ活性を阻害し、本明細書の表１に列挙された残りの群からの１つまたは複数の他のキナーゼの活性を実質的に阻害しない。
【０３７６】
幾つかの実施形態によれば、ＭＭＩ阻害剤のインビボにおける阻害プロファイルは、投薬量、投与経路、およびこれらの阻害剤に応答する細胞型に依存する。
【０３７７】
そのような実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５０％未満を阻害する。そのような実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の６５％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の４０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の２０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の１５％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の１０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼのキナーゼ活性を上昇させる。
【０３７８】
直前の段落の実施形態によれば、実質的に阻害されない１つまたは複数の選択されるその他のキナーゼは、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ（ＣａＭＫＩＩ、そのサブユニットＣａＭＫＩＩδを含む）、プロトオンコジーンセリン／トレオニンプロテインキナーゼ（ＰＩＭ−１）、細胞性肉腫（ｃ−ＳＲＣ）、脾臓チロシンキナーゼ、（ＳＹＫ）、Ｃ−ｓｒｃチロシンキナーゼ、およびインスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の群から選択される。
【０３７９】
幾つかの実施形態によれば、医薬組成物は、少なくとも１つのさらなる治療薬をさらに含む。
【０３８０】
幾つかのそのような実施形態によれば、そのようなさらなる治療薬の例としては、精製ウシＶ型コラーゲン（例えばＩＷ−００１；ＩｍｍｕｎｅＷｏｒｋｓ；Ｕｎｉｔｅｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＩＬ−１３受容体拮抗薬（例えばＱＡＸ５７６；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤（例えばイマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））；Ｃｒａｉｇ  Ｄａｎｉｅｌｓ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、内皮受容体拮抗薬（例えばＡＣＴ−０６４９９２（マシテンタン）；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、二重エンドセリン受容体拮抗薬（例えばボセンタン（Ｔｒａｃｌｅｅｒ（登録商標））；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、プロスタサイクリン類似体（吸入イロプロスト、例えば（Ｖｅｎｔａｖｉｓ（登録商標））；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、抗ＣＴＧＦモノクローナル抗体（例えばＦＧ−３０１９）、エンドセリン受容体拮抗薬（Ａ−選択性）（例えばアンブリセタン（Ｌｅｔａｉｒｉｓ（登録商標））、Ｇｉｌｅａｄ）、ＡＢ００２４（Ａｒｒｅｓｔｏ）、リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）モノクローナル抗体（例えばＧＳ−６６２４（以前はＡＢ００２４）；Ｇｉｌｅａｄ）、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤（例えばＣＣ−９３０；Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ピルフェニドン（例えばＥｓｂｒｉｅｔ（登録商標）（ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ）、Ｐｉｒｅｓｐａ（登録商標）（塩野義））、ＩＦＮ−γ１ｂ（例えばＡｃｔｉｍｍｕｎｅ（登録商標）；ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ）、３つのＴＧＦ−βアイソフォーム全てに対する汎中和ＩｇＧ４ヒト抗体（例えばＧＣ１００８；Ｇｅｎｚｙｍｅ）、ＴＧＦ−β活性化阻害剤（例えばＳｔｒｏｍｅｄｉｘ（ＳＴＸ−１００））、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ｒｈＰＴＸ−２）（例えばＰＲＭ１５１；Ｐｒｏｍｅｄｉｏｒ）、二重特異性ＩＬ４／ＩＬ１３抗体（例えばＳＡＲ１５６５９７；Ｓａｎｏｆｉ）、インテグリンαｖβ６を標的とするヒト化モノクローナル抗体（ＢＩＢＦ  １１２０；Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｎ−アセチルシステイン（Ｚａｍｂｏｎ  ＳｐＡ）、シルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ（登録商標）））、ＴＮＦ拮抗薬（例えばエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））；Ｐｆｉｚｅｒ）、グルココルチコイド（例えばプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾンフランカルボン酸エステル、フルチカゾンプロピオン酸エステル、およびフルチカゾンフランカルボン酸エステル）、気管支拡張剤（例えばロイコトリエン変性剤（例えば（モンテルカスト（ＳＩＮＧＵＡＩＲ（登録商標）））、抗コリン作動性気管支拡張剤（例えばイプラトロピウムブロミドおよびチオトロピウム）、短期作用性β２−作動薬（例えばイソエタリンメシレート（Ｂｒｏｎｋｏｍｅｔｅｒ（登録商標））、アドレナリン、サルブタノール／アルブテロール、およびテルブタリン）、長期作用性β２−作動薬（例えばサルメテロール、フォルモテロール、インデカテロール（Ｏｎｂｒｅｚ（登録商標））、ソホスブビル（Ｓｏｖａｌｄｉ（登録商標））、ＨＣＶをブーストされたプロテアーゼ阻害剤（ＡＢＴ−４５０、ＡｂｂＶｉｅ）、ノンヌクレオシドＮＳ５Ｂ阻害剤（ダサブビル、ＡＢＴ−３３３、ＡｂｂＶｉｅ）、ＮＳ５ａ阻害剤（オムビタスビル、���ＢＴ−２６７、ＡｂｂＶｉｅ）、ＡＢＴ−４５０／ｒ（ＡＢＴ−４５０とリトナビルの併用）、ＡＢＴ−２６７を共配合されたＡＢＴ−４５０、ソホスブビルを配合されたＡＢＴ−４５０、リバビリン、およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３８１】
幾つかの他の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にロイコトリエン変性剤、抗コリン作動性気管支拡張剤、β２−作動薬、またはそれらの組み合わせを含む。
【０３８２】
幾つかの他の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾン、ベクレメタゾンまたはそれらの組み合わせを含む、コルチコステロイドを含む。
【０３８３】
幾つかの他の実施形態によれば、さらなる治療薬は、抗炎症剤である。
【０３８４】
幾つかのそのような実施形態によれば、抗炎症剤は、非ステロイド系抗炎症剤である。本明細書で用いられる用語「非ステロイド系抗炎症剤」は、それらの作用がアスピリン様である大きな薬剤群を指し、イブプロフェン（Ａｄｖｉｌ（登録商標））、ナプロキセンナトリウム（Ａｌｅｖｅ（登録商標））、およびアセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ（登録商標））を含むが、これらに限定されない。記載された本発明の文脈において使用可能な非ステロイド系抗炎症剤のさらなる例としては、オキシカム、例えばピロキシカム、イソキシカム、テノキシカム、スドキシカム、およびＣＰ−１４，３０４；ジサルシド、ベノリレート、トリリセート、サファプリン、ソルプリン、ジフルニサルおよびフェンドサール；酢酸誘導体、例えばジクロフェナク、フェンクロフェナク、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、イソキセパク、フロフェナク、チオピナク、ジドメタシン、アセマタシン、フェンチアザク、ゾメピラク、クリンダナク、オキセピナク、フェルビナク、およびケトロラク；フェナメート、例えばメフェナミク、メクロフェナミク、フルフェナミク、ニフルミク、およびトルフェナム酸；プロピオン酸誘導体、例えばベノキサプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、フェノプロフェン、フェンブフェン、インドプロフェン、ピルプロフェン、カルプロフェン、オキサプロジン、プラノプロフェン、ミロプロフェン、チオキサプロフェン、スプロフェン、アルミノプロフェン、およびチアプロフェニク；ピラゾール、例えばフェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、フェプラゾン、アザプロパゾン、およびトリメタゾンが挙げられるが、これらに限定されない。これらの非ステロイド系抗炎症剤の混合物、ならびにこれらの薬剤の皮膚学的に許容し得る塩およびエステルもまた利用できる。例えば、フルフェナム酸誘導体であるエトフェナメートは、外用での適用に特に有用である。
【０３８５】
別の実施形態によれば、非ステロイド系抗炎症剤は、形質転換増殖因子−β３（ＴＧＦ−β３）、抗腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）剤、またはそれらの組み合わせを含む。
【０３８６】
別の実施形態によれば、抗炎症剤はステロイド系抗炎症剤である。本明細書で用いられる用語「ステロイド系抗炎症剤」は、１７炭素４環系を含む多数の化合物の任意の１つを指し、ステロール、様々なホルモン（同化作用促進性ステロイドとして）、およびグリコシドを含む。ステロイド系抗炎症薬の代表的な例としては、コルチコステロイド、例えばヒドロコルチゾン、ヒドロキシルトリアムシノロン、アルファ−メチルデキサメタゾン、デキサメタゾンホスフェート、ベクロメタゾンジプロピオン酸エステル、クロベタゾールバレレート、デソニド、デソキシメタゾン、デソキシコルチコステロンアセテート、デキサメタゾン、ジクロリゾン、ジフルコルトロンバレレート、フルアドレノロン、フルクロロロンアセトニド、フルメタゾンピバレート、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルコルチンブチルエステル、フルオコルトロン、フルプレドニデン（フルプレドニリデン）アセテート、フルルアンドレノロン、ハルシノニド、ヒドロコルチゾンアセテート、ヒドロコルチゾンブチレート、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、コルチゾン、コルトドキソン、フルセトニド、フルドロコルチゾン、ジフルオロゾンジアセテート、フルルアドレノロン、フルドロコルチゾン、ジフロロゾンジアセテート、フルルアドレノロンアセトニド、メドリゾン、アムシナフェル、アンシナフィド、ベタメタゾンおよびそのエステルのバランス、クロロプレドニゾン、クロロプレドニゾンアセテート、クロコルテロン、クレシノロン、ジクロリゾン、ジフルルプレドネート、フルクロロニド、フルニソリド、フルオロメタロン、フルペロロン、フルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾンバレレート、ヒドロコルチゾンシクロペンチルプロピオネート、ヒドロコルタメート、メプレドニゾン、パラメタゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、ベクロメタゾンジプロピオン酸エステル、トリアムシノロン、およびそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３８７】
別の実施形態によれば、ステロイド系抗炎症剤は、プレドニゾン、ブデソニド、モメタゾン、ベクレメタゾン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのコルチコステロイドを含む。
【０３８８】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、キサンチンまたはキサンチン誘導体、例えばメチルキサンチンを含む。
【０３８９】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、好中球エラスターゼ阻害剤を含む。
【０３９０】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にＩＣＩ  ２００３５５、ＯＮＯ−５０４６、ＭＲ−８８９、Ｌ−６９４，４５８、ＣＥ−１０３７、ＧＷ−３１１６１６、ＴＥＩ−８３６２、ＯＮＯ−６８１８、ＡＥ−３７６３、ＦＫ−７０６、ＩＣＩ−２００，８８０、ＺＤ−０８９２、ＺＤ−８３２１、およびそれらの組み合わせを含む、少なくとも１つの好中球エステラーゼ阻害剤である。
【０３９１】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にホスホジエステラーゼ４阻害剤を含む少なくとも１つのホスホジエステラーゼ阻害剤を含む。ホスホジエステラーゼ４阻害剤の例としては、ロフルミラスト、シロミラストまたはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３９２】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、鎮痛剤である。幾つかの他の実施形態によれば、鎮痛剤は、意識を撹乱することまたは他の感覚の種類を改変することなく、疼痛閾値を上昇させることによって疼痛を緩和する。幾つかのそのような実施形態によれば、鎮痛剤は、非オピオイド鎮痛剤である。「非オピオイド鎮痛剤」は、疼痛を軽減するがオピオイド鎮痛剤ではない、天然のまたは合成の物質である。非オピオイド鎮痛剤の例としては、エトドラク、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、ナブメトン、ピロキシカム、アセトアミノフェン、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、オキサプロジン、アスピリン、トリサリチル酸コリンマグネシウム、ジフルニサル、メクロフェナム酸、メフェナム酸、およびフェニルブタゾンが挙げられるが、これらに限定されない。幾つかの他の実施形態によれば、鎮痛剤は、オピオイド鎮痛剤である。「オピオイド鎮痛剤」、「オピオイド」、または「催眠性鎮痛剤」は、中枢神経系でオピオイド受容体に結合し、アゴニスト作用を生じる天然のまたは合成の物質である。オピオイド鎮痛剤の例としては、コデイン、フェンタニル、ヒドロモルフォン、レボルファノール、メペリジン、メタドン、モルヒネ、オキシコドン、オキシモルフォン、プロポキシフェン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、デゾシン、ナルブフィン、およびペンタゾシンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３９３】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、抗感染薬である。別の実施形態によれば、抗感染薬は、抗生物質である。本明細書で用いられる用語「抗生物質」は、主に感染症の処置に用いられる、細菌および他の微生物の生育を阻害するか、またはこれらを破壊する能力を有する一群の化学物質群のいずれかを意味する。抗生物質薬の例としては、ペニシリンＧ、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、アンピシリン、アモキシシリン、チカルシリン、カルベニシリン、メズロシリン、アズロシリン、ピペラシリン、イミペネム、アズトレオナム、セファロチン、セファクロル、セフォキシチン、セフロキシム、セフォニシド、セフメタゾール、セフォテタン、セフプロジル、ロラカルベフ、セフェタメト、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフタジジム、セフェピム、セフィキシム、セフポドキシム、デフスロジン、フレロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、エノキサシン、ロメフロキサシン、シノキサシン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、テトラサイクリン、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネチルミシン、トブラマイシン、ストレプトマイシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシン、エリスロマイシンエストレート、エリスロマイシンエチルコハク酸エステル、エリスロマイシングルコヘプトン酸塩、エリスロマイシンラクトビオン酸塩、エリスロマイシンステアリン酸塩、バンコマイシン、テイコプラニン、クロラムフェニコール、クリンダマイシン、トリメトプリム、スルファメトキサゾール、ニトロフラントイン、リファンピン、ムピロシン、メトロニダゾール、セファレキシン、ロキシスロマイシン、コアモキシクラブアネート（Ｃｏ−ａｍｏｘｉｃｌａｖｕａｎａｔｅ）、ペニシリンとタゾバクタムの組み合わせ、ならびにそれらの様々な塩、酸、塩基、および他の誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。抗菌性抗生物質薬としては、ペニシリン、セファロスポリン、カルバセフェム、セファマイシン、カルバペネム、モノバクタム、アミノグリコシド、糖ペプチド、キノロン、テトラサイクリン、マクロライド、およびフルオロキノロンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３９４】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、対象の肺に生じる炎症を阻害する。別の実施形態によれば、炎症は、急性炎症である。別の実施形態によれば、炎症は、慢性炎症である。別の実施形態によれば、炎症は、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）によって媒介される。別の実施形態によれば、炎症は、インターロイキン−６（ＩＬ−６）によって媒介される。別の実施形態によれば、炎症は、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）によって媒介される。
【０３９５】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、対照と比較して肺の腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）の量をモジュレートする。別の実施形態によれば、医薬組成物は、対照と比較して肺のインターロイキン−６（ＩＬ−６）の量をモジュレートする。別の実施形態によれば、医薬組成物は、対照と比較して肺のインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）の量をモジュレートする。
【０３９６】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、熱ショック２７ｋＤａタンパク質１（ＨＳＰＢ１）の活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、線維芽細胞増殖の異常な誘発である。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、筋線維芽細胞の分化の異常な誘発である。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、肺間質への細胞外マトリックスタンパク質の沈着である。別の実施形態によれば、細胞外マトリックスタンパク質は、コラーゲンである。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、線維症巣形成の促進である。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、筋線維芽細胞の収縮活性の増進である。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、細胞外マトリックスへの筋線維芽細胞付着の促進である。
【０３９７】
幾つかの実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と実質的な配列同一性を有する。
【０３９８】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも７０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも８０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９５％の配列同一性を有する。
【０３９９】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）のものである。
【０４００】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）のものである。
【０４０１】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５）のものである。
【０４０２】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６）のものである。
【０４０３】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）のものである。
【０４０４】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６）のものである。
【０４０５】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７）のものである。
【０４０６】
幾つかの他の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、第二のポリペプチドと動作可能に連結された第一のポリペプチドを含む融合タンパク質であり、ここで第一のポリペプチドはアミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）のものであり、該第二のポリペプチドは、その配列がアミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と実質的同一性を有する治療ドメインを含む。
【０４０７】
幾つかのそのような実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも７０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも８０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも９０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも９５％の配列同一性を有する。
【０４０８】
幾つかの実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）のポリペプチドである。
【０４０９】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９）のポリペプチドである。
【０４１０】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０）のポリペプチドである。
【０４１１】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）のポリペプチドである。
【０４１２】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＹＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）のポリペプチドである。
【０４１３】
幾つかの他の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、第二のポリペプチドと動作可能に連結された第一のポリペプチドを含む融合タンパク質であり、ここで第一のポリペプチドは、ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）と機能的に均等の細胞貫通ペプチドを含み、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）のものである。
【０４１４】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）のポリペプチドである。別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドである。
【０４１５】
別の態様によれば、記載された本発明はまた、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも７０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする単離された核酸を提供する。幾つかの実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも８０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。幾つかの他の実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。幾つかの他の実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９５％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。
【０４１６】
幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ（または１００μｇ／ｋｇ）体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約２ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約３ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約４ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約６０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約７０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約８０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約９０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約８０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約７０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約６０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重���約４０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．００００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。
【０４１７】
幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜２５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜２μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２μｇ／ｋｇ／日〜３μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３μｇ／ｋｇ／日〜４μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４μｇ／ｋｇ／日〜５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日〜６μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６μｇ／ｋｇ／日〜７μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、７μｇ／ｋｇ／日〜８μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８μｇ／ｋｇ／日〜９μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９μｇ／ｋｇ／日〜１０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日〜１０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１０μｇ／ｋｇ／日〜１５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１５μｇ／ｋｇ／日〜２０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２５μｇ／ｋｇ／日〜３０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３０μｇ／ｋｇ／日〜３５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３５μｇ／ｋｇ／日〜４０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４０μｇ／ｋｇ／日〜４５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４５μｇ／ｋｇ／日〜５０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５０μｇ／ｋｇ／日〜５５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５５μｇ／ｋｇ／日〜６０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６０μｇ／ｋｇ／日〜６５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６５μｇ／ｋｇ／日〜７０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、７０μｇ／ｋｇ／日〜７５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８０μｇ／ｋｇ／日〜８５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８５μｇ／ｋｇ／日〜９０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９０μｇ／ｋｇ／日〜９５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９５μｇ／ｋｇ／日〜１００μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。
【０４１８】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日である。
【０４１９】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２μｇ／ｋｇ／日である。
【０４２０】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日である。
【０４２１】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１０μｇ／ｋｇ／日である。
【０４２２】
幾つかの実施形態によれば、本発明のポリペプチドは、Ｄ−アミノ酸（Ｌ−アミノ酸特異性プロテアーゼに対しインビボで耐性を有する）、Ｄ−アミノ酸とＬ−アミノ酸の組み合わせ、ならびに特殊な特性を伝える様々な「デザイナー」アミノ酸（例えばβ−メチルアミノ酸、Ｃ−α−メチルアミノ酸、およびＮ−α−メチルアミノ酸など）を含む。合成アミノ酸置換の例として、リジンの代わりのオルニチン、およびロイシンまたはイソロイシンの代わりのノルロイシンが挙げられる。
【０４２３】
幾つかの実施形態によれば、ポリペプチドを他の化合物、例えばポリエチレングリコールまたはデキストランと連結して、インビボでの半減期の延長を促進し得る。そのような連結は、当業者には理解される通り共有結合または非共有結合であり得る。幾つかの他の実施形態によれば、ポリペプチドは、ミセル、例えばポリ（エチレングリコール）−ブロック−ポリ（ポリプロピレングリコール）、またはポリ（エチレングリコール）−ブロック−ポリラクチドで構成されたミセル中にカプセル化することができる。幾つかの他の実施形態によれば、ポリペプチドは、非限定的にポリ酢酸、ポリグリコリド、およびポリカプロラクトンを含む分解性ポリエステルで構成された分解性ナノ粒子またはミクロ粒子中に被包化され得る。
【０４２４】
別の実施形態によれば、ポリペプチドは、固体形態（顆粒、粉末または坐剤を含む）として、または液体形態（例えば、溶液、懸濁液またはエマルジョン）として調製できる。
【０４２５】
別の実施形態によれば、記載された本発明の組成物は、吸入または吹送（それぞれ口または鼻を通して）によって送達される分散性乾燥粉末の形態であり得る。乾燥粉末組成物は、開示が参照により本明細書に組み入れられる国際特許公開ＷＯ９１／１６０３８号および米国特許第６，９２１，５２７号に開示される、当該技術分野で公知の過程、例えば凍結乾燥およびジェットミル処理によって調製され得る。記載された本発明の組成物は、単位投与量処置を対象に提供するのに十分な量で適切な投薬容器に入れられる。投薬容器は、適切な吸入装置内にフィットするものであり、乾燥粉末組成物を気流中に分散させてエアロゾルを形成させてエアロゾルを形成させ、その後、そのようにして生成されたエアロゾルを、処置を必要とする対象のその後の吸入のために取り付けられたマウスピースを有するチャンバー内に捕捉させる。そのような投薬容器としては、気体（例えば、空気）の流れが容器に流れ込み乾燥粉末組成物を分散させる、着脱自在の部分を有するゼラチンまたはプラスチックカプセルなど、当該技術分野で公知の組成物を封入する任意の容器が挙げられる。そのような容器は、米国特許第４，２２７，５２２号、米国特許第４，１９２，３０９号、および米国特許第４，１０５，０２７号に示されたものが具体例である。適切な容器としては、Ｇｌａｘｏの商品名Ｖｅｎｔｏｌｉｎ（登録商標）Ｒｏｔｏｈａｌｅｒの粉末吸入装置またはＦｉｓｏｎの商品名Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）の粉末吸入装置と共に使用されているものも挙げられる。優れた水分バリアを提供する別の適切な単位用量容器は、アルミホイルプラスチックラミネートから形成される。医薬を基剤とする粉末は、成型可能ホイルのくぼみの中に重量または容量により充填され、カバーホイル−プラスチックラミネートで密閉される。粉末吸入装置と共に使用されるそのような容器は、米国特許第４，７７８，０５４に記載されており、ＧｌａｘｏのＤｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）（米国特許第４，６２７，４３２号、同第４，８１１，７３１号および同第５，０３５，２３７号）と共に使用される。これらの参考文献のいずれも、全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０４２６】
別の実施形態によれば、記載された本発明の組成物の担体としては、放出剤、例えば持続放出性または遅延放出性担体が挙げられる。そのような実施形態において、担体は、より効率的な投与、例えばより少ない頻度および／またはポリペプチド投薬量の削減、取り扱いの容易さの改善、および処置、予防または促進される疾患、障害、状態、症候群などに及ぼす影響の延長または遅延を提供するために、ポリペプチドを持続または遅延放出を可能にする任意の材料であり得る。そのような担体の非限定的な例としては、リポソーム、マイクロスポンジ、微小球、または天然ポリマーおよび合成ポリマーのマイクロカプセルなどが挙げられる。リポソームは、非限定的にコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンを含む様々なリン脂質から形成され得る。
【０４２７】
小ペプチドの合成および調製の方法は、当該技術分野で周知であり、例えば米国特許第５，３５２，４６１号、同第５，５０３，８５２号、同第６，０７１，４９７号、同第６，３３１，３１８号、同第６，４２８，７７１号、および米国特許出願公開第２００６００４０９５３号に開示されている。米国特許第６，４４４，２２６号および同第６，６５２，８８５号には、水性懸濁液中のジケトピペラジンの微粒子の調製および提供が記載されており、ここでは活性薬剤を粒子に結合させるために、活性剤の溶液が添加される。これらの特許にはさらに、凍結乾燥により液体媒体を除去して、活性剤を含む微粒子を生成する方法が記載される。粒子への活性薬剤の結合を促進するためのそのような懸濁液の溶媒条件の変更が、米国特許出願第６０／７１７，５２４号、同第１１／５３２，０６３号および同第１１／５３２，０６５号、米国特許第６，４４０，４６３号ならびに米国特許出願第１１／２１０，７０９号および同第１１／２０８，０８７号に開示される。これらの特許および特許出願の各々は、参照により本明細書に組み入れられる。
【０４２８】
幾つかの実施形態において、本発明のＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物は、例えば米国特許出願第Ｎｏ．１１／６７８，０４６号（参照により本明細書に組み入れられる）に開示されている通り、噴霧乾燥の方法によって乾燥させることができる。
【０４２９】
さらに別の実施形態において、本発明のポリペプチドは、様々な溶液中で適用できる。適切な配合剤は、滅菌されており、十分量のポリペプチドを溶解し、提案された適用について有害でない。例えば、記載された本発明の組成物は、有効成分（複数可）が水性懸濁物の製造に適した賦形剤との混合物中に存在する、水性懸濁物として配合され得る。
【０４３０】
そのような賦形剤としては、懸濁剤（例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、およびアカシアゴム）、天然由来ホシファチドを含む分散剤または湿潤剤（例えばレシチン）、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えばステアリン酸ポリオキシエチレン）、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えばヘプタデカエチル−エンオキシセタノール）、またはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトールから得られる部分エステルとの縮合生成物（例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール）、またはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトール無水物から得られる部分エステルとの縮合生成物（例えばモノオレイン酸ポリエチレンソルビタン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４３１】
記載された本発明の組成物はまた、有効成分を植物油（例えばピーナツ油、オリーブ油、ゴマ油、ココナッツ油）中にまたは鉱物油（例えば流動パラフィン）中に懸濁させることによって油性懸濁物として配合され得る。油性懸濁物は、増粘剤（例えば蜜蝋、ハードパラフィンまたはセチルアルコール）を含み得る。
【０４３２】
記載された本発明の組成物はまた、水を添加して水性懸濁物を調製するのに適した分散性粉末または顆粒の形態で配合され得る。そのような粉末および顆粒中の有効成分は、分散または湿潤剤、懸濁剤、および１つまたは複数の防腐剤との混合物として提供される。適切な分散または湿潤剤および懸濁剤は、既に先に挙げられたものが具体例である。さらなる賦形剤もまた、存在し得る。
【０４３３】
幾つかの実施形態によれば、乾燥粉末は、噴霧乾燥工程によって製造される。
【０４３４】
幾つかの他の実施形態によれば、乾燥粉末は、微粒子化によって製造される。
【０４３５】
別の実施形態によれば、乾燥粉末は、１〜５ミクロンの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を有する微粒子を含む。
【０４３６】
別の実施形態によれば、乾燥粉末は、約２ミクロンの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を有する微粒子を含む。
【０４３７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、例えば非限定的にネブライザー、計量吸入装置（ＭＤＩ）、および乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）を含む吸入装置に包装される。
【０４３８】
幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物は、ネブライザーを用いるエアロゾル化送達用液体である。幾つかのそのような実施形態によれば、医薬組成物の流速は、少なくとも０．３ｍＬ／分であり、医薬組成物は、２ｍｍ粒子として送達され最深部肺胞に分配される。
【０４３９】
記載された本発明の組成物はまた、エマルジョンの形態として存在し得る。エマルジョンは、２つの非混合性液体担体を組み合わせることによって調製される二相系であり、担体の一方は、他方の全体に均質分配され、最大コロイド粒子以上の直径を有する小球体からなる。小球体のサイズは重要であり、この系が最大の安定性を達成するようなものでなければならない。通常は、この２つの相の分離は、第三の物質（乳化剤）が組み込まれない限り起こらないであろう。したがって、基本的なエマルジョンは、少なくとも３つの成分（２つの非混合性液体担体および乳化剤）を有効成分と共に含む。ほとんどのエマルジョンは、非水相に水相を取り込む（またはその逆もある）。しかし、基本的に非水性であるエマルジョン、例えば非水性で非混合性の系のグリセリンおよびオリーブ油の陰イオン性および陽イオン性界面活性剤を調製することが可能である。したがって、本発明の組成物は、水中油エマルジョンの形態で存在し得る。油相は、植物油、例えばオリーブ油またはピーナッツ油、または鉱物油、例えば流動パラフィン、またはそれらの混合物であり得る。適切な乳化剤は、天然由来のゴム、例えばアカシアゴムまたはトラガカントゴム、天然由来のホスファチド、例えば大豆レシチン、ならびに脂肪酸およびヘキシトール無水物から得られるエステルまたは部分エステル、例えばモノオレイン酸ソルビタン、ならびに部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンであり得る。
【０４４０】
幾つかの実施形態によれば、記載された本発明のポリペプチドは、化学的に合成される。周知の固相、液相技術、もしくはペプチド縮合技術、またはそれらの任意の組み合わせを用いて調製されるそのような合成ポリペプチドは、天然または非天然のアミノ酸を含んでよい。ペプチド合成に用いられるアミノ酸は、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９６３，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ８５：２１４９−２１５４）の最初の固相方法の標準的脱保護、中和、カップリングおよび洗浄プロトコルを用いる標準的なＢｏｃ（Ｎ−α−保護Ｎ−α−ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノ酸樹脂、またはＣａｒｐｉｎｏとＨａｎ（１９７２，  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ３７：３４０３−３４０９）により最初に記載された塩基不安定性Ｎ−α−アミノ保護９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）アミノ酸であり得る。ＦｍｏｃおよびＢｏｃ  Ｎ−α−アミノ保護アミノ酸は両方とも、Ｓｉｇｍａ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ、または当業者に熟知された他の化学品会社から得ることができる。加えて、ポリペプチドは、当業者に周知の他のＮ−α−保護基を用いて合成できる。固相ペプチド合成は、当業者に熟知された技術によって達成でき、例えばそれぞれが全体として本明細書に組み入れられる、Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ，  １９８４，  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，  Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，  Ｉｌｌ．；Ｆｉｅｌｄｓ  ａｎｄ  Ｎｏｂｌｅ，  １９９０，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｐｅｐｔ．  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．  ３５：１６１−２１４において、または自動合成装置を用いて、提供できる。
【０４４１】
ＩＩ．異常な線維芽細胞増殖およびコラーゲン沈着を特徴とする疾患を予防または処置する方法
別の態様によれば、記載された本発明は、対象の組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着を特徴とする疾患、状態または過程を処置する方法であって、
アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のポリペプチドまたはその機能的均等物の治療量と、医薬的に許容し得るその担体と、を含む医薬組成物を、対象に投与することを含み、
治療量が、対象の組織における線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着を減少させるのに効果的である、
方法を提供する。
【０４４２】
方法の一実施形態によれば、疾患または状態は、急性肺損傷（ＡＬＩ）または急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）である。
【０４４３】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、放射線誘発性線維症である。
【０４４４】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、移植片拒絶である。
【０４４５】
別の実施形態によれば、組織は肺組織である。
【０４４６】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、間質性肺疾患である。
【０４４７】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、肺線維症である。
【０４４８】
別の実施形態によれば、肺線維症は、特発性肺線維症である。
【０４４９】
別の実施形態によれば、肺線維症は、ブレオマイシンの投与により生じる。
【０４５０】
別の実施形態によれば、肺線維症は、アレルギー反応、環境性微粒子の吸入、喫煙、細菌感染、ウイルス感染、対象の肺の機械的損傷、肺移植片拒絶、自己免疫障害、遺伝性疾患、またはそれらの組み合わせから生じる。
【０４５１】
別の実施形態によれば、組織は、肝組織である。
【０４５２】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、肝線維症である。
【０４５３】
肝線維症の検出、診断および処置評価のための方法としては、生検、画像解析および血液検査が挙げられるが、これらに限定されない。画像解析の非限定的例としては、超音波検査法、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）およびエラストグラフィーが挙げられる。エラストグラフィーの例としては、超音波エラストグラフィー、磁気共鳴エラストグラフィーなどが挙げられるが、これらに限定されない。血液検査としては、バイオマーカーの検出のための血液検査が挙げられるが、これらに限定されない。バイオマーカーの非限定的例としては、ペプチド、タンパク質、核酸（例えば、ＤＮＡ，ＲＮＡおよびｍＲＮＡ）、抗体および遺伝子が挙げられる。
【０４５４】
肝線維症のバイオマーカーとしては、直接的バイオマーカー（クラスＩ線維症マーカーとしても公知）；サイトカインおよびケモカイン；ならびに間接的バイオマーカー（クラスＩＩ線維症マーカーとしても公知）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４５５】
超音波検査法は、組織内に向けられた超音波の反射（即ち、エコー）を記録することによって身体の深部構造が視覚化される造影技術である。１００万〜１０００万ヘルツの範囲の周波数が、診断的超音波検査法で用いられる。より低い周波数は、より深い透過を提供し、腹部臓器を検査するのに用いられる。より上部の範囲の周波数は、低い透過を提供し、目などのより表層の構造を検査するのに主に用いられる。超音波検査法の基本原理は、海底部の海洋学的試験における深浅測量のものと同様である。超音波は、波が衝突する表面の性質に応じて、波が向けられる媒体によって、伝達、屈折、吸収、または反射され得る狭い光線に限定される。診断的超音波検査法において、超音波は、トランスデューサーと呼ばれる圧電性結晶を電気的に刺激することによって発生される。光線が様々な音響インピーダンスの組織（例えば、筋肉および血液）の間の界面または境界に衝突すると、音波の一部がエコーとしてトランスデューサーに反射して戻される。エコーはその後、オシロスコープに表示される電気的インパルスへと変換され、検査下の組織の「絵図」を表示する。超音波検査法は、例えば心臓の検査で（心エコー検査）、そして腹骨盤腔における臓器（例えば、肝線維症、肝硬変などでの肝臓）のサイズおよび構造的変化を同定するのに用いることができる。それは、癌および良性嚢腫を同定および識別するのにも有用である。
【０４５６】
コンピュータ断層撮影（ＣＴ）またはコンピュータ体軸断層撮影（ＣＡＴ）は、ドーナッツ形構造内に収容されたｘ線源およびｘ線検出器が、機械によって移動する動力化テーブルに横たわる患者の周囲を円形に移動する、造影技術である。通常、４〜６４列またはそれよりも多い検出器を備えたマルチディテクタスキャナが、より迅速なスキャンおよびより高解像度の画像を可能にするために用いられる。検出器からのデータは本質的に、患者の周囲で複数の角度から撮影した一連のｘ線画像を表す。画像は、直接視覚化されずにコンピュータへ送信され、コンピュータがそれらを所望の任意平面において身体のスライスを表す二次元画像（トモグラフ）へと迅速に再構成する。データは、詳細な三次元画像を構築するのに用いることもできる。いくつかのＣＴスキャンでは、テーブルが徐々に移動し、各スキャン（スライス）が撮影される時に停止する。他のＣＴスキャンでは、テーブルがスキャンの間、連続的に移動し、患者が直線に移動しており検出器が円形に移動するため、連続画像が患者の周囲でらせん様式で撮影されるように見える。平面ｘ線と比較すると、ＣＴのトモグラフィースライスは、より空間的な詳細を提供し、様々な軟組織密度をより良好に識別できる。ＣＴは、ずっと多くの情報を提供するため、ほとんどの頭蓋内、頭頸部、脊柱、胸腔内および腹部内構造を造影するのに、平面ｘ線よりも好ましい。病変の三次元画像は、外科医の手術計画を支援し得る。ＣＴは、泌尿器の結石を検出および位置づけるための最も正確な試験である。ＣＴは、ＩＶコントラストを用いて、または用いずに実施され得る。ノンコントラストＣＴは、例えば脳、泌尿器結石、および肺結節における急性出血を検出するために、そして骨折および他の骨格異常を特徴づけるために用いられる。ＩＶコントラストは、例えば軟組織の腫瘍、感染、炎症、および外傷の造影を改善するため、そして肺塞栓、大動脈瘤、または大動脈解離が疑われる場合などで、血管系を評価するために用いられる。
【０４５７】
肝臓エラストグラフィーは、肝臓の硬度を推定するための方法である。エラストグラフィーは、超音波または磁気共鳴によって遂行できる。
【０４５８】
超音波エラストグラフィー（トランジェントエラストグラフィーとも呼ばれる）
ＦｉｂｒｏＳｃａｎ装置（ＥｃｈｏＳｅｎｓ、フランス  パリ所在）は、肝臓を通して伝達される低振幅で低周波数（５０−Ｈｚ）の振動を利用する。それは弾性のせん断波を誘導し、この波は臓器を通って伝播すると超音波パルスエコー検査によって検出される。波の速度は組織の硬度と相関し、即ち波は、より高密度の線維症性組織ほどより急速に透過する。超音波エラストグラフィーは、肝生検よりもかなり広い面積をサンプリングでき、肝実質全体のより良好な理解を提供する。その上それは、多くはリスクを伴わずに繰り返し実施され得る。
【０４５９】
磁気共鳴エラストグラフィー
磁気共鳴エラストグラフィーは、肝臓内にせん断波を誘導する振動装置を用いる点で、超音波エラストグラフィーと類似している。しかしこの場合、波は、改変された磁気共鳴造影機器によって検出され、色分けされた画像が作成され、それは臓器全体での波の速度、つまり硬度を表す。磁気共鳴エラストグラフィーにおいて、４．４６ｋＰａよりも大きな値は、高い可能性で硬変を示し（そして４．１３未満の値は硬変がないことを示し）、２．８４未満の値は、顕著な線維症の可能性を排除する。
【０４６０】
肝線維症の直接的（クラスＩ）バイオマーカーとしては、マトリックス沈着に関連する直接的マーカーおよびマトリックス分解に関連する直接的マーカーが挙げられるが、これらに限定されない。マトリックス沈着に関連する直接的マーカーの非限定的例としては、プロコラーゲン１型（ＰＣ１ＣＰ）、プロコラーゲン３型（ＰＣＩＩＩＮＰ）、ＩＶ型コラーゲン、ヒアルロン酸（ＨＡ）、ラミニンおよびＹＸＬ−４０  Ｃｈｏｎｄｒｅｘが挙げられる。マトリックス分解に関連する直接的マーカーの例としては、マトリックスメタロプロテイナーゼ−１（ＭＭＰ−１）、マトリックスメタロプロテイナーゼ−２（ＭＭＰ−２）、マトリックスメタロプロテイナーゼ−９（ＭＭＰ−９）およびマトリックスメタロプロテイナーゼの組織阻害物質（ＴＩＭＰ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４６１】
肝線維症のサイトカインおよびケモカインバイオマーカーとしては、トランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦβ）、トランスフォーミング増殖因子−α（ＴＧＦα）および血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４６２】
肝線維症の間接的（クラスＩＩ）バイオマーカーとしては、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ／アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ／ＡＬＴ）比、ＰＧＡ（プロトロンビン指数、γ−グルタミルトランスフェラーゼ（ＧＧＴ）、およびアポリポプロテインＡ１）、ＡＰＲＩ（ＡＳＴ／血小板数比）、ＦｉｂｒｏＳｐｅｃｔ  ＩＩ（ＨＡ、ＴＩＭＰ−１、α２−マクログロブリン）、ＦｉｂｒｏＴｅｓｔ／ＦｉｂｒｏＳｕｒｅ（γ２マクログロブリン、γ２グロブリン、γグロブリン、アポリポプロテインＡ１、ＧＧＴ、総ビリルビン）、ＦｉｂｒｏＩｎｄｅｘ（血小板数、ＡＳＴ、ＧＧＴ）、ＦｉｂｒｏＭｅｔｅｒ（血小板数、γ２マクログロブリン、ＡＳＴ、年齢、プロトロンビン指数、ＨＡ、血中尿素窒素）、Ｆｏｒｎｓ（年齢、血小板数、ＧＧＴ、コレステロールレベル）、Ｈｅｐａｓｃｏｒｅ（年齢、性別、ビリルビン、ＧＧＴ、ＨＡ、γ２マクログロブリン）、ＦＩＢ−４（血小板数、ＡＬＴ、ＡＳＴ、年齢）、ＳＨＡＳＴＡ指数（ＨＡ、ＡＳＴ、アルブミン）、簡易検査（年齢、高血糖、血小板数、アルブミン、ＡＳＴ／ＡＬＴ、ボディーマス指数（ＢＭＩ））およびＯＥＬＦ／ＥＬＦ（年齢、ＨＡ、ＩＩＩ型コラーゲンのＮ−末端プロペプチド、ＴＩＭＰ−１）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４６３】
別の実施形態によれば、組織は、腎組織である。
【０４６４】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、腎線維症である。
【０４６５】
腎線維症の検出、診断および処置評価のための方法としては、生検、画像解析および血液検査が挙げられるが、これらに限定されない。画像解析の非限定的例としては、ピクロシリウスレッド（ｐｒｉｃｒｏｓｉｒｉｕｓ  ｒｅｄ）染色の組織学的定量画像解析が挙げられる。血液検査としては、バイオマーカーの検出のための血液検査が挙げられるが、これらに限定されない。バイオマーカーの非限定的例としては、ペプチド、タンパク質、核酸（例えば、ＤＮＡ，ＲＮＡおよびｍＲＮＡ）、抗体および遺伝子が挙げられる。腎線維症のバイオマーカーとしては、ヒドロキシプロリン、ＭＣＰ−１、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、α−ＳＭＡ、結合組織増殖因子−１（ＣＴＧＦ−１）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０４６６】
別の実施形態によれば、組織は、血管組織である。
【０４６７】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、血管線維症である。
【０４６８】
血管線維症の検出、診断および処置評価のための方法としては、生検、画像解析および血液検査が挙げられるが、これらに限定されない。画像解析の非限定的例としては、ピクロシリウスレッド染色、３’、３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）およびヘマトキシリンの組織学的定量画像解析が挙げられる。血液検査としては、バイオマーカーの検出のための血液検査が挙げられるが、これらに限定されない。バイオマーカーの非限定的例としては、ペプチド、タンパク質、核酸（例えば、ＤＮＡ，ＲＮＡおよびｍＲＮＡ）、抗体および遺伝子が挙げられる。血管線維症のバイオマーカーとしては、ヒドロキシプロリン、ＭＣＰ−１、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、α−ＳＭＡ、結合組織増殖因子−１（ＣＴＧＦ−１）、ＰＡＲＡγなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【０４６９】
別の実施形態によれば、記載された本発明は、単離された核酸を利用する。核酸としては、例えばＤＮＡ，ＲＮＡおよびｍＲＮＡが挙げられる。核酸は、例えば組織、細胞、血液、血清、血漿、尿、唾液、精液などから単離され得る。核酸を単離するためのプロトコルおよび試薬は、公知である。核酸の単離に用いられる試薬の非限定的例としては、グアニジンチオシアン酸塩、グアニジン塩酸塩およびグアニジニウムチオシアン酸塩−フェノール−クロロホルムが挙げられ、この試薬の商標登録された配合剤は、Ｔｒｉｚｏｌ（登録商標）として公知である。
【０４７０】
別の実施形態によれば、記載された本発明は、核酸の増幅を用いる方法を利用する。核酸の増幅は、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって遂行される。ＰＣＲの非限定的例としては、従来のＰＣＲ、リアルタイプＰＣＲ、定量ＰＣＲ、定量リアルタイムＰＣＲ、マルチプレックスＰＣＲ、従来の逆転写ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ、定量ＲＴ−ＰＣＲ、定量リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ、マルチプレックスＲＴ−ＰＣＲなどが挙げられる。
【０４７１】
標的配列（例えば、ＴＧＦβおよびα−ＳＭＡ遺伝子のｍＲＮＡ配列）のＰＣＲ増幅のためのプライマーは、標準的手順に従い、標的配列の配列に基づいて設計され得る。プライマーは、特有の標的配列をアニーリングしおよび増幅するように、そして増幅反応を検出およびモニタリングするためのシグナル発生物質として機能する。幾つかの実施形態によれば、プライマーは標識されていないが（従来のＰＣＲと同様）、他の実施形態において、プライマーは蛍光部分などで標識されている。標識されたプライマーは、典型的には定量ＲＴ−ＰＣＲ反応などで用いられるもの、例えばＳｃｏｒｐｉｏｎｓ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｅａｃｏｎｓなどの任意のタイプであり得る。
【０４７２】
プローブが、プライマーに加えて提供され得る。特有のゲノム配列の増幅を検出するために用いられ得るプローブ（例えば、ＴａｑＭａｎ（登録商標）プローブ）が、２種の増幅プライマーの間の配列に、好ましくはプライマー結合部位の１つの５〜１５塩基以内にハイブリダイズするように設計され得る。典型的にはプローブは、特定の増幅反応、例えば特有の標的配列の増幅のためのプライマーまたはプライマーセットと共に、反応混合物中に存在する。しかしプライマーは、プライマー（複数可）または反応混合物の他の成分から分離された、別々の成分として提供され得る。
【０４７３】
プライマーおよびプローブは、ＰＣＲ反応で用いられるプライマーおよびプローブの典型的サイズを有するように設計される。一般にプライマーは比較的短い（約１０〜３０塩基長）オリゴヌクレオチドであり、一方でプローブ（例えば、ＴａｑＭａｎ（登録商標）プローブ）は約１５〜３５塩基長であり得る。プライマーおよびプローブは、標的核酸上で特有の配列を同定すること、それらの配列を増幅または検出するための短いオリゴヌクレオチドを設計すること、およびオリゴヌクレオチドを合成すること、を含む工程を通して設計される。プライマーおよびプローブを設計する際には、複数の特徴が考慮され得、例えばプローブの融解温度はプライマーの融解温度よりも高くなけらばならず、一方のプライマーの３’末端とそのプライマーの５’末端との間の距離は８ヌクレオチドよりも大きいであろう。当業者は、そのような判断事項および特徴の中から選択して、適切なプライマーおよびプローブを提供できる。オリゴヌクレオチドの合成のためのプロトコルは、当業者に公知である。任意の適切なプロトコルが、本発明のプライマーおよびプローブを合成する際に用いられ得る。
【０４７４】
定量リアルタイムＲＴ−ＰＣＲは、正確かつ精密な高処理能力のアッセイである。リアルタイムＰＣＲは、各試料の反応生成物を各サイクルで定量する工程を自動化している。幾つかの実施形態によれば、リアルタイムＰＣＲシステムは、蛍光レポーターの検出および定量に依存し、そのシグナルは、反応物中のＰＣＲ産物の量に正比例して増加する。
【０４７５】
別の実施形態によれば、例えばレポーターは二本鎖ＤＮＡ特異性色素ＳＹＢＲ（登録商標）Ｇｒｅｅｎ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）であり、それは二本鎖ＤＮＡに結合し、励起によって光を発する。したがって、ＰＣＲ産物が蓄積すると、蛍光が増加する。ＳＹＢＲ（登録商標）Ｇｒｅｅｎ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ、オレゴン州ユージーン所在）システムは、ＰＣＲ産物をリアルタイムで検出および定量する一方法である。ＳＹＢＲ（登録商標）Ｇｒｅｅｎ色素は、配列に非特異的な様式で、二本鎖核酸に結合する。したがってそれは、一本鎖テンプレート（例えば、ｍＲＮＡ）から生成された二本鎖産物の検出および定量に用いられ得る。ａｍｐｌｉｆｌｕｏｒ（登録商標）プローブおよびＤＮＡｚｙｍｅｓなどの他の検出可能なプローブおよびプライマーを最適化して増幅産物の定量的検出に用いてもよい。
【０４７６】
ＳＹＢＲ（登録商標）Ｇｒｅｅｎの別法としては、ＴａｑＭａｎ（登録商標）（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、カリフォルニア州フォスターシティー所在）およびＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｅａｃｏｎｓが挙げられるが、これらに限定されず、それらは両者とも、定量のための蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）に依存するハイブリダイゼーションプローブである。ＴａｑＭａｎ（登録商標）プローブは、典型的には５’塩基上に蛍光色素を、そして典型的には３’塩基上に位置するクエンチング色素を含むオリゴヌクレオチドである。より具体的には、ＴａｑＭａｎ（登録商標）プローブでは、プローブがインタクトである場合、クエンチャーは蛍光標識によって発生されたシグナルをクエンチする。しかし、標的配列へのプローブの結合および続くＴａｑポリメラーゼなどのポリメラーゼの５’−３’エキソヌクレアーゼ活性によるプローブの消化の際に、蛍光部分がクエンチャー部分から放出され、生成される標的核酸の量に比例する検出可能なシグナルが生成されモニタリングできる。一実施形態によれば、Ｔａｑポリメラーゼは、その５’−３’エキソヌクレアーゼ活性のためｑＲＴ−ＰＣＲで用いられ、それはプローブの蛍光を変化させて、ＣＤＲ１  ｍＲＮＡの増幅を可能にする。ＴａｑＭａｎ（登録商標）プローブは、ポリメラーゼによる分解に依存して検出可能なシグナルを発生するが、Ｓｃｏｒｐｉｏｎｓ（登録商標）およびＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｅａｃｏｎｓは、ヘアピン構造の開裂に依存して検出可能なシグナルを提供する。ＴａｑＭａｎ（登録商標）プローブと同様に、Ｓｃｏｒｐｉｏｎｓ（登録商標）は、１つのプローブに蛍光部分とクエンチング部分の両方を含む。しかし、ＴａｑＭａｎ（登録商標）プローブとは異なり、Ｓｃｏｒｐｉｏｎｓ（登録商標）は、増幅反応中に分解されない。むしろそれらは、増幅反応のためのプライマーとして設計されている。Ｓｃｏｒｐｉｏｎｓ（登録商標）プライマーは、溶液中でヘアピン構造を形成するよう設計されており、これが蛍光部分およびクエンチング部分を接近させる。標的核酸へのプライマーの結合はヘアピン構造を展開し、クエンチング部分を、検出可能な蛍光を発する蛍光部分から十分に離れた距離、移動させる。
【０４７７】
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂｅａｃｏｎｓもまた、蛍光色素およびクエンチング色素を含むが、ＦＲＥＴは、クエンチング色素が蛍光色素に直接隣接した場合のみに起こる。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂｅａｃｏｎｓは、ヘアピン構造を採用するよう設計されており、溶液中で遊離の状態では、蛍光色素とクエンチャーを接近させる。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂｅａｃｏｎｓが標的にハイブリダイズすると、蛍光色素とクエンチャーが分離し、ＦＲＥＴが起こらず、蛍光色素が照射により光を発する。
【０４７８】
マルチプレックスＰＣＲ反応は、一般的である。マルチプレキシングによって研究者は、複数のプローブまたはプライマーの使用により１つの反応で２つ以上の異なる遺伝子ターゲットをアッセイでき、複数のプローブまたはプライマーはそれぞれが自身のターゲットに特異的でありそれぞれが特有の波長で発する（他のプローブに比較して）蛍光部分を含む。マルチプレキシングは、ＴａｑＭａｎ（登録商標）プローブ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂｅａｃｏｎｓ、およびＳｃｏｒｐｉｏｎｓを用いてできる。その非特異的結合性のため、ＳＹＢＲ（登録商標）Ｇｒｅｅｎは、マルチプレキシングに適さない場合がある。
【０４７９】
一般に定量ＲＴ−ＰＣＲ反応は、標準曲線との比較、またはＣｔ値の比較という２つの方法の一方によって実施される。これらの方法の最初のものは、特定のｍＲＮＡの増幅産物の標準曲線を、一連の異なる既知量の予め選択された核酸の増幅に基づいて作成する。その後、標的核酸で実施された反応の増幅結果を標準曲線と比較して量を得て、その量を元の試料の中のターゲット量に外挿することができる。標準曲線の提供元としてｍＲＮＡを使用することが好ましいが、ｍＲＮＡの安定性はそのような標準曲線の妥当性に影響を及ぼすことが知られており、この問題を克服することまたは最小限に抑えることは、困難であることが立証されている。標準曲線の提供元としてｍＲＮＡを使用することにかかわる問題を回避するために、研究者らは、標準曲線の作成にＤＮＡを用いてきた。ＤＮＡの使用は、ｍＲＮＡの使用にかかわる問題を克服するが、これらの問題を回避するという単なる事柄が、さらに別の問題を生じ、即ちＤＮＡテンプレートは、比較的安定であり、ＤＮＡの増幅は、最初の鎖合成ステップ（試料または調製物の間で非効率的で可変的になり得る）を必要としないため、ＤＮＡ提供元から作成される標準曲線は多くの場合、検査試料中のｍＲＮＡ量と正確には相関しない。
【０４８０】
ＰＣＲ産物を定量するためのＣｔ比較法では、ハウスキーピング遺伝子（β−アクチンなど）の発現が、標的核酸（例えば、ＴＧＦβおよびα−ＳＭＡ）の増幅を比較する標準として用いられる。多くの場合この方法では、２つの異なる条件下での標的核酸の発現の比較を実施して、発現パターンの変化を測定する。この方法は、従来の標準曲線法を用いる場合に認められる、ＲＮＡの不安定性または対照としてのＤＮＡの使用にかかわる問題を回避する。
【０４８１】
ＰＣＲ産物を定量して試料中の標的核酸の量を決定するために、標的配列と同じＰＣＲ反応混合物中で対照を増幅させる。これらの対照は多くの場合、ハウスキーピング遺伝子の転写産物である。そのようなハウスキーピング遺伝子としては、β−アクチンおよびＧＡＰＤＨが挙げられるが、これらに限定されない。対照を反応混合物に添加して、標的核酸と共増幅させる。両者に特異的な蛍光プローブがこの混合物中に含まれ、２つの増幅曲線が得られる。その後、対照に対する標的核酸の相対的発現が決定される。この技術を利用して、複数の異なる試料を、標的遺伝子（例えば、ＴＧＦβおよびα−ＳＭＡ）の発現に関して、同じ対照を基準にして比較できる。対照を増幅反応に添加することは、発現レベルを定量する別の方法の有用な代替法になり得、試料間でＰＣＲ反応を正規化するための有用な方法であり得るが、増幅反応混合物中、または元の試料中に存在する材料の絶対量を決定することはできない。むしろ、結果は定性的または半定量的であり、別のもの（例えば、対照）と比較した、ある核酸（例えば、標的）の大まかな量を与えるにすぎない。
【０４８２】
別の実施形態によれば、記載された本発明は、対象から得られた試料中のタンパク質を検出する方法を提供する。そのようなタンパク質検出方法としては、ウェスタンブロット、免疫組織化学的検査、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）、放射免疫測定法などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０４８３】
タンパク質を検出する方法は、抗体を用いることもできる。抗体は、血清タンパク質であり、その分子は、それらのターゲット上の小さな化学基に相補的な小さな表面領域を有する。これらの相補性領域（抗体結合部または抗体結合部位と称される）は、抗体分子あたり少なくとも２つ存在し、幾つかの型の抗体分子では１０、８個、または幾つかの種では１２個も存在し、抗原上のそれらの対応する相補性領域（抗原決定基またはエピトープ）と反応して多価抗原の複数の分子を共に連結させて格子状構造を形成できる。
【０４８４】
全抗体分子の基本的構造単位は、４つのポリペプチド鎖と、２つの同一軽（Ｌ）鎖（それぞれが約２２０のアミノ酸を含む）と、２つの同一重（Ｈ）鎖（それぞれが通常、約４４０のアミノ酸を含む）と、からなる。２つの重鎖と２つの軽鎖は、非共有結合と共有（ジスルフィド）結合との組み合わせによってまとまっている。分子は、２つの同一半量体で構成され、そのそれぞれが、軽鎖のＮ−末端領域と重鎖のＮ−末端領域で構成される同一の抗原結合部位を有する。軽鎖と重鎖の両方が通常、協同して抗原結合表面を形成する。
【０４８５】
ヒト抗体は、２種の軽鎖：κおよびλを示し、免疫グロブリンの個々の分子は一般に、どちらか一方のみである。正常な血清において、分子の６０％はκ決定基を有し３０％がλであることが見出されている。多くの他の種は２種の軽鎖を示すことが見出されているが、それらの割合は多様である。例えばマウスおよびラットにおいて、λ鎖は全体の２、３％のみを構成し、イヌおよびネコにおいては、κ鎖は非常に少なく、ウマは、いずれのκ鎖も有さないようであり、ウサギは、血統およびｂ遺伝子座アロタイプに応じて５〜４０％のλを有する場合があり、ニワトリの軽鎖は、κよりもλにより相同性がある。
【０４８６】
哺乳動物には、抗体の５つのクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭが存在し、それぞれが重鎖のその独自のクラス：α（ＩｇＡの場合）、δ（ＩｇＤの場合）、ε（ＩｇＥの場合）、γ（ＩｇＧの場合）およびμ（ＩｇＭの場合）を有する。加えて、ＩｇＧ免疫グロブリンの４つのサブクラス（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）が存在し、それぞれγ１、γ２、γ３、およびγ４重鎖を有する。その分泌形態において、ＩｇＭは、５つの四本鎖単位で構成された五量体であり、合計１０の抗原結合部位が与えられる。各五量体は１コピーのＪ鎖を含み、それは２つの隣接するテール領域の間に共有結合で挿入されている。
【０４８７】
５つの免疫グロブリンクラスの全ては、それらが広範囲の電気泳動移動性を示し均質でないという点で他の血清タンパク質と異なる。この異質性、即ち、例えば個々のＩｇＧ分子が正味電荷において互いに異なることは、免疫グロブリンの固有の性質である。
【０４８８】
抗原決定基またはエピトープは、分子上の抗原部位である。連続的な抗原決定基／エピトープは、本質的に直鎖である。らせん状ポリマーまたはタンパク質などの規則的構造において、抗原決定基／エピトープは本質的に、互いに接近し得る分子の異なる部分からのアミノ酸側鎖を含む構造の中の、または表面の限定された領域または区画であり得る。これらは、コンフォメーション決定基である。
【０４８９】
相補性の原理は、錠における鍵の嵌合によく比較され、比較的弱い結合力（疎水性および水素結合、ファンデルワールス力、およびイオン性相互作用）を含み、それは２種の反応分子が互いに非常に接近し得る場合にのみ効果的に作用でき、実際に非常に接近しているため、一方の分子の突出した構成原子または原子群が、他方の相補的くぼみまたは凹所に嵌合し得る。抗原−抗体相互作用は高度の特異性を示し、多くのレベルで明示される。分子レベルまで下げると、特異性とは、抗原への抗体の組み合わせ部位が、無関係の抗原の抗原決定基と全く類似していない相補性を有することを意味する。２つの異なる抗原の抗原決定基が若干の構造類似性を有する場合には必ず、一方の決定基による、他方への幾つかの抗体の組み合わせ部位内への若干の嵌合が起こる場合があり、この現象は交差反応を引き起こす。交差反応は、抗原・抗体反応の相補性または特異性を理解する上で重要である。免疫特異性または相補性は、抗原の中の少量の不純物／混入物の検出を可能にする。
【０４９０】
モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、免疫化ドナー由来のマウス脾臓細胞をマウス骨髄腫細胞株と融合して、選択培地で生育する樹立されたマウスハイブリドーマクローンを生成することによって作製され得る。ハイブリドーマ細胞は、抗体を分泌するＢ細胞と骨髄腫細胞とのインビトロ融合により得られる不死化ハイブリッド細胞である。インビトロ免疫化は、培養中の抗原特異性Ｂ細胞の一次活性化を指し、マウスモノクローナル抗体を産生する別のよく確立された手段である。用語「ヒト化モノクローナル抗体」は、マウスモノクローナル抗体のフレームワークおよび定常領域を維持しながら、このマウス抗体の抗体結合部位を作り上げる相補性決定領域（「ＣＤＲ」）がヒト抗体のＣＤＲと置換された、モノクローナル抗体を指す。
【０４９１】
末梢血リンパ球由来の免疫グロブリン重（ＶＨ）鎖および軽（ＶκおよびＶλ）鎖可変遺伝子の多様なライブラリーもまた、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）増幅によって増幅され得る。重鎖および軽鎖可変ドメインがポリペプチドスペーサーによって連結された１つのポリペプチド鎖をコードする遺伝子（一本鎖ＦｖまたはｓｃＦｖ）は、ＰＣＲを利用して重鎖Ｖ遺伝子と軽鎖Ｖ遺伝子を無作為に組み合わせることによって作製され得る。その後、コンビナトリアルなライブラリーを、ファージの先端のマイナーコートタンパク質への融合によって、繊維状バクテリオファージの表面での提示のためにクローニングできる。
【０４９２】
誘導選択の技術は、げっ歯類免疫グロブリンＶ遺伝子とのヒト免疫グロブリンＶ遺伝子シャッフリングに基づいている。その方法は、（ｉ）ヒトλ軽鎖のレパトアを、目的の抗原と反応性のあるマウスモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）ドメインとシャッフルすること；（ｉｉ）その抗原上のヒトＦａｂの半量体を選択すること、（ｉｉｉ）２回目のシャッフルにおいてヒト重鎖のライブラリーのための「ドッキングドメイン」として選択されたλ軽鎖遺伝子を用いてヒト軽鎖遺伝子を有するクローンＦａｂ断片を単離すること、（ｖ）その遺伝子を含む哺乳動物細胞発現ベクターで電気穿孔によりマウス骨髄腫細胞をトランスフェクトすること、および（ｖｉ）マウス骨髄腫において、抗原と反応性のあるＦａｂのＶ遺伝子を完全ＩｇＧ１のλ抗体分子として発現すること、を必要とする。
【０４９３】
別の実施形態によれば、記載された本発明は、マルチプレックスビーズ技術（例えば、Ｌｕｍｉｎｅｘ（登録商標））を用いて、タンパク質および核酸バイオマーカーを検出する。例えば、異なるターゲットを認識する、被分析物に特異的な抗体（即ち、タンパク質バイオマーカーの検出のため）または抗ＴＡＧ配列（即ち、核酸バイオマーカーの検出のため）でコーティングされた、色分けされたポリスチレンまたは超常磁性ビーズを共に混合して、ビオチン標識されたターゲット（即ち、タンパク質または核酸バイオマーカー）とインキュベートする。捕捉されたターゲットを、次にストレプトアビジン−フィコエリトリンコンジュゲートを用いて検出する。
【０４９４】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、組織の炎症をさらに特徴とする。
【０４９５】
別の実施形態によれば、炎症は、急性または慢性炎症である。
【０４９６】
別の実施形態によれば、炎症は、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、およびインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインによって媒介される。
【０４９７】
別の実施形態によれば、肺線維症は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着、肺における線維芽細胞増殖の異常な促進、肺における筋線維芽細胞分化の異常な誘発、および筋線維芽細胞の細胞外マトリックスへの付着の異常な促進からなる群から選択される少なくとも１つの病態を特徴とする。
【０４９８】
別の実施形態によれば、組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着は、正常な健常対照群の対象の組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の活性と比較して、組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な活性を特徴とする。
【０４９９】
別の実施形態によれば、組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着は、正常な健常対照群の対象の組織における活性化有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の量または分布と比較して、組織における活性化（リン酸化）有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な量または分布によって立証される。
【０５００】
別の実施形態によれば、肺線維症は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着、肺における線維芽細胞増殖の異常な促進、肺における線維芽細胞集団の筋線維芽細胞集団への異常な分化誘発、および筋線維芽細胞の細胞外マトリックスへの付着の異常な促進からなる群から選択される少なくとも１つの病態を特徴とする。
【０５０１】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）である。別の実施形態によれば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、喫煙によって引き起こされる。別の実施形態によれば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、環境性微粒子によって引き起こされる。別の実施形態によれば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、アルファ−１アンチトリプシン欠乏症によって引き起こされる。別の実施形態によれば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、小児の呼吸器感染によって引き起こされる。
【０５０２】
別の実施形態によれば、肺線維症は、正常な健常対照群の対象と比較して、対象の肺の熱ショック２７ｋＤａタンパク質１（ＨＳＰＢ１）の異常な活性を特徴とする。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、対象の肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着である。別の実施形態によれば、細胞外マトリックスタンパク質は、コラーゲンである。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺における線維芽細胞増殖の異常な促進である。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺における筋線維芽細胞分化の異常な誘発である。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺における線維症巣形成の促進である。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺における筋線維芽細胞の収縮活性の増進である。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺における細胞外マトリックスへの筋線維芽細胞付着の異常な促進である。
【０５０３】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、対象の肺で発生する炎症を阻害する。別の実施形態によれば、炎症は、急性炎症である。別の実施形態によれば、炎症は、慢性炎症である。別の実施形態によれば、炎症は、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）によって媒介される。別の実施形態によれば、炎症は、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）によって媒介される。別の実施形態によれば、炎症は、インターロイキン−６（ＩＬ−６）によって媒介される。
【０５０４】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、未処置の対照と比較して、対象の肺の腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）の量をモジュレートする。別の実施形態によれば、医薬組成物は、対照と比較して、対象の肺のインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）の量をモジュレートする。別の実施形態によれば、医薬組成物は、対照と比較して、対象の肺のインターロイキン−６（ＩＬ−６）の量をモジュレートする。
【０５０５】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、正常な健常対照群の対象と比較して、対象の肺におけるＨＳＰＢ１の異常な活性を阻害する。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着である。別の実施形態によれば、細胞外マトリックスタンパク質は、コラーゲンである。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺における線維芽細胞増殖の異常な促進である。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺における線維芽細胞の筋線維芽細胞への分化の異常な誘発である。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、線維症巣形成の異常な促進である。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、筋線維芽細胞の収縮活性の異常な増進である。別の実施形態によれば、筋線維芽細胞の収縮活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、アルファ平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）のレベル上昇を特徴とする。別の実施形態によれば、筋線維芽細胞の収縮活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、ストレス線維形成の増進を特徴とする。別の実施形態によれば、ＨＳＰＢ１の異常な活性は、正常な健常対照群の対象と比較して、細胞外マトリックスへの筋線維芽細胞付着の異常な促進である。
【０５０６】
一実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２キナーゼ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０５０７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３キナーゼ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０５０８】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０５０９】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。
【０５１０】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性および有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性を阻害する。
【０５１１】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性およびカルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０５１２】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０５１３】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０５１４】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０５１５】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０５１６】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０５１７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０５１８】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０５１９】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％および有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０５２０】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％およびカルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０５２１】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０５２２】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０５２３】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２、ＭＫ３、ＣａＭＫＩ、ＴｒｋＢの群から選択される少なくとも１つのキナーゼのキナーゼ活性を阻害し、本明細書の表１に列挙された残りの群からの１つまたは複数の他のキナーゼの活性を実質的に阻害しない。
【０５２４】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、本明細書の表１に列挙された群から選択されるキナーゼのキナーゼ活性を阻害する。
【０５２５】
別の実施形態によれば、この阻害は、例えば対象の組織における線維芽細胞増殖、細胞外マトリックス沈着、またはそれらの組み合わせを減少させるのに効果的であり得る。
【０５２６】
別の実施形態によれば、この阻害は、例えば、正常な健常対照群の対象と比較して、肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着、肺における線維芽細胞増殖の異常な促進、筋線維芽細胞分化の異常な誘発、および筋線維芽細胞の細胞外マトリックスへの付着の異常な促進からなる群から選択される少なくとも１つの病態を減少させるのに効果的であり得る。
【０５２７】
幾つかの実施形態によれば、ＭＭＩ阻害剤のインビボにおける阻害プロファイルは、投薬量、投与経路、およびこれらの阻害剤に応答する細胞型に依存する。
【０５２８】
そのような実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５０％未満を阻害する。そのような実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の６５％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の４０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の２０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の１５％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の１０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼのキナーゼ活性を上昇させる。
【０５２９】
直前の段落の実施形態によれば、実質的に阻害されない１つまたは複数の選択されるその他のキナーゼは、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ（ＣａＭＫＩＩ、そのサブユニットＣａＭＫＩＩδを含む）、プロトオンコジーンセリン／トレオニンプロテインキナーゼ（ＰＩＭ−１）、細胞性肉腫（ｃ−ＳＲＣ）、脾臓チロシンキナーゼ、（ＳＹＫ）、Ｃ−ｓｒｃチロシンキナーゼ（ＣＳＫ）、およびインスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の群から選択される。
【０５３０】
幾つかの実施形態によれば、医薬組成物は、さらなる治療薬をさらに含む。
【０５３１】
幾つかのそのような実施形態によれば、さらなる治療薬は、精製ウシＶ型コラーゲン（例えばＩＷ−００１；ＩｍｍｕｎｅＷｏｒｋｓ；Ｕｎｉｔｅｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＩＬ−１３受容体拮抗薬（例えばＱＡＸ５７６；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤（例えばイマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））；Ｃｒａｉｇ  Ｄａｎｉｅｌｓ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、内皮受容体拮抗薬（例えばＡＣＴ−０６４９９２（マシテンタン）；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、二重エンドセリン受容体拮抗薬（例えばボセンタン（Ｔｒａｃｌｅｅｒ（登録商標））；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、プロスタサイクリン類似体（吸入イロプロスト、例えば（Ｖｅｎｔａｖｉｓ（登録商標））；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、抗ＣＴＧＦモノクローナル抗体（例えばＦＧ−３０１９）、エンドセリン受容体拮抗薬（Ａ−選択性）（例えばアンブリセタン（Ｌｅｔａｉｒｉｓ（登録商標））、Ｇｉｌｅａｄ）、ＡＢ００２４（Ａｒｒｅｓｔｏ）、リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）モノクローナル抗体（例えばＧＳ−６６２４（以前はＡＢ００２４）；Ｇｉｌｅａｄ）、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤（例えばＣＣ−９３０；Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ピルフェニドン（例えばＥｓｂｒｉｅｔ（登録商標）（ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ）、Ｐｉｒｅｓｐａ（登録商標）（塩野義））、ＩＦＮ−γ１ｂ（例えばＡｃｔｉｍｍｕｎｅ（登録商標）；ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ）、３つのＴＧＦ−βアイソフォーム全てに対する汎中和ＩｇＧ４ヒト抗体（例えばＧＣ１００８；Ｇｅｎｚｙｍｅ）、ＴＧＦ−β活性化阻害剤（例えばＳｔｒｏｍｅｄｉｘ（ＳＴＸ−１００））、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ｒｈＰＴＸ−２）（例えばＰＲＭ１５１；Ｐｒｏｍｅｄｉｏｒ）、二重特異性ＩＬ４／ＩＬ１３抗体（例えばＳＡＲ１５６５９７；Ｓａｎｏｆｉ）、インテグリンαｖβ６を標的とするヒト化モノクローナル抗体（ＢＩＢＦ  １１２０；Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｎ−アセチルシステイン（Ｚａｍｂｏｎ  ＳｐＡ）、シルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ（登録商標）））、ＴＮＦ拮抗薬（例えばエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））；Ｐｆｉｚｅｒ）、グルココルチコイド（例えばプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾンフランカルボン酸エステル、フルチカゾンプロピオン酸エステルおよびフルチカゾンフランカルボン酸エステル）、気管支拡張剤（例えばロイコトリエン変性剤（例えば（モンテルカスト（ＳＩＮＧＵＡＩＲ（登録商標）））、抗コリン作動性気管支拡張剤（例えばイプラトロピウムブロミドおよびチオトロピウム）、短期作用性β２−作動薬（例えばイソエタリンメシレート（Ｂｒｏｎｋｏｍｅｔｅｒ（登録商標））、アドレナリン、サルブタノール／アルブテロール、およびテルブタリン）、長期作用性β２−作動薬（例えばサルメテロール、フォルモテロール、インデカテロール（Ｏｎｂｒｅｚ（登録商標））、ソホスブビル、ＨＣＶをブーストされたプロテアーゼ阻害剤（ＡＢＴ−４５０、ＡｂｂＶｉｅ）、ノンヌクレオシドＮＳ５Ｂ阻害剤（ダサブビル、ＡＢＴ−３３３、ＡｂｂＶｉｅ）、ＮＳ５ａ阻害剤（オムビタスビル、ＡＢＴ−２６７、ＡｂｂＶｉｅ）、ＡＢＴ−４５０／ｒ（���ＢＴ−４５０とリトナビルの併用）、ＡＢＴ−２６７を共配合されたＡＢＴ−４５０、またはソホスブビルを配合されたＡＢＴ−４５０からなる群から選択される１つまたは複数である。別の実施形態によれば、ＨＣＶ処置のためのさらなる治療薬は、リバビリン、およびそれらの組み合わせである。
【０５３２】
幾つかの他の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にロイコトリエン変性剤、抗コリン作動性気管支拡張剤、β２−作動薬、またはそれらの組み合わせを含む気管支拡張剤を含む。
【０５３３】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾン、ベクレメタゾン、ソホスブビル（Ｓｏｖａｌｄｉ（登録商標））またはそれらの組み合わせを含むコルチコステロイドを含む。
【０５３４】
幾つかの他の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にロイコトリエン変性剤、抗コリン作動性気管支拡張剤、β２−作動薬、またはそれらの組み合わせを含む気管支拡張剤を含む。
【０５３５】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾン、ベクレメタゾンまたはそれらの組み合わせを含むコルチコステロイドを含む。
【０５３６】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、抗炎症剤である。
【０５３７】
別の実施形態によれば、抗炎症剤は、非ステロイド系抗炎症剤である。非ステロイド系抗炎症剤の混合物、ならびにこれらの薬剤の皮膚学的に許容し得る塩およびエステルもまた利用できる。例えば、エトフェナメート、フルフェナム酸誘導体は、外用での適用に特に有用である。
【０５３８】
別の実施形態によれば、非ステロイド系抗炎症剤は、形質転換増殖因子−β３（ＴＧＦ−β３）、抗腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）剤、またはそれらの組み合わせを含む。
【０５３９】
別の実施形態によれば、抗炎症剤は、ステロイド系抗炎症剤である。別の実施形態によれば、ステロイド系抗炎症剤は、プレドニゾン、ブデソニド、モメタゾン、ベクレメタゾン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのコルチコステロイドを含む。
【０５４０】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、メチルキサンチンを含む。
【０５４１】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、好中球エラスターゼ阻害剤を含む。
【０５４２】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にＩＣＩ  ２００３５５、ＯＮＯ−５０４６、ＭＲ−８８９、Ｌ−６９４，４５８、ＣＥ−１０３７、ＧＷ−３１１６１６、ＴＥＩ−８３６２、ＯＮＯ−６８１８、ＡＥ−３７６３、ＦＫ−７０６、ＩＣＩ−２００，８８０、ＺＤ−０８９２、ＺＤ−８３２１、およびそれらの組み合わせを含む少なくとも１つの好中球エステラーゼ阻害剤である。
【０５４３】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にホスホジエステラーゼ４阻害剤を含む少なくとも１つのホスホジエステラーゼ阻害剤を含む。該ホスホジエステラーゼ４阻害剤の例としては、ロフルミラスト、シロミラストまたはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０５４４】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、鎮痛剤である。幾つかのそのような実施形態によれば、鎮痛剤は、非オピオイド鎮痛剤である。幾つかの他の実施形態によれば、鎮痛剤は、オピオイド鎮痛剤である。
【０５４５】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、抗感染薬である。別の実施形態によれば、抗感染薬は、抗生物質薬である。
【０５４６】
幾つかの実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と実質的な配列同一性を有する。
【０５４７】
幾つかのそのような実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも７０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも８０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９５％の配列同一性を有する。
【０５４８】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）のものである。
【０５４９】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）のものである。
【０５５０】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５）のものである。
【０５５１】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６）のものである。
【０５５２】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６）のものである。
【０５５３】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７）のものである。
【０５５４】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）のものである。
【０５５５】
幾つかの他の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、第二のポリペプチドと動作可能に連結された第一のポリペプチドを含む融合タンパク質であり、ここで第一のポリペプチドはアミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）のものであり、第二のポリペプチドは、その配列がアミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と実質的同一性を有する治療ドメインを含む。
【０５５６】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも７０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも８０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも９０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも９５％の配列同一性を有する。
【０５５７】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）のポリペプチドである。
【０５５８】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９）のポリペプチドである。
【０５５９】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０）のポリペプチドである。
【０５６０】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）のポリペプチドである。
【０５６１】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）のポリペプチドである。
【０５６２】
幾つかの他の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、第二のポリペプチドと動作可能に連結された第一のポリペプチドを含む融合タンパク質であり、ここで第一のポリペプチドは、ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）と機能的に均等の細胞貫通ペプチドを含み、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）のものであり、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の両方を阻害する。
【０５６３】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）のポリペプチドである。
【０５６４】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）のポリペプチドである。
【０５６５】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）のポリペプチドである。
【０５６６】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）のポリペプチドである。
【０５６７】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）のポリペプチドである。幾つかのそのような実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）のポリペプチドである。幾つかのそのような実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドである。
【０５６８】
別の態様によれば、記載された本発明はまた、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも７０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする単離された核酸を提供する。
【０５６９】
幾つかのそのような実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも８０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。幾つかの他の実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。幾つかの他の実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９５％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。
【０５７０】
別の実施形態によれば、投与ステップは、経口、口腔、非経口、外用として、吸入により、吹送により、または直腸のいずれかにより全身で、あるいは非限定的に注射、インプラント、移植、外用での適用、あるいは非経口的により局所で実施できる。追加の投与は、例えば静脈内に、経粘膜的に、経皮的に、筋肉内に、皮下に、気管内に（肺吸入を含む）、腹腔内に、硬膜下腔内に、リンパ内に、病変内に、または硬膜外に実施され得る。投与は、例えば１回、複数回、および／もしくは１つもしくは複数の長い期間にわたり個々の単位用量として、または複数の薬物および／もしくは物質の反復単位用量を含む治療レジメンの形態で実施され得る。
【０５７１】
幾つかの他の実施形態によれば、投与ステップは、単一用量として１回実施される。幾つかの他の実施形態において、投与ステップは、１期間にわたって複数用量として実施される。幾つかのそのような実施形態によれば、１期間は、１日、１週間、１ヶ月、１年、またはその数倍である。幾つかの実施形態によれば、投与ステップは、少なくとも１週間の期間毎日実施される。幾つかの実施形態によれば、投与ステップは、少なくとも１ヶ月の期間毎週実施される。幾つかの実施形態によれば、投与ステップは、少なくとも２ヶ月の期間毎月実施される。別の実施形態によれば、投与ステップは、少なくとも１年の期間にわたって繰り返し実施される。別の実施形態によれば、投与ステップは、少なくとも毎月１回実施される。別の実施形態によれば、投与ステップは、毎週１回実施される。別の実施形態によれば、投与ステップは、１日１回実施される。
【０５７２】
幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療量は、吸入装置を介して投与される。医薬組成物の投与に用いることができる吸入装置の例としては、ネブライザー、計量吸入装置（ＭＤＩ）、乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）、および乾燥粉末ネブライザーが挙げられるが、これらに限定されない。
【０５７３】
別の実施形態によれば、乾燥粉末は、１〜５ミクロンの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を有する微粒子を含む。別の実施形態によれば、乾燥粉末は、約２ミクロンの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を有する微粒子を含む。
【０５７４】
幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ（または１００μｇ／ｋｇ）体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約２ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約３ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約４ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約６０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約７０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約８０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約９０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約８０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約７０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約６０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重���約４０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．００００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。
【０５７５】
幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜２５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜２μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２μｇ／ｋｇ／日〜３μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３μｇ／ｋｇ／日〜４μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４μｇ／ｋｇ／日〜５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日〜６μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６μｇ／ｋｇ／日〜７μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、７μｇ／ｋｇ／日〜８μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８μｇ／ｋｇ／日〜９μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９μｇ／ｋｇ／日〜１０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日〜１０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１０μｇ／ｋｇ／日〜１５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１５μｇ／ｋｇ／日〜２０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２５μｇ／ｋｇ／日〜３０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３０μｇ／ｋｇ／日〜３５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３５μｇ／ｋｇ／日〜４０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４０μｇ／ｋｇ／日〜４５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４５μｇ／ｋｇ／日〜５０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５０μｇ／ｋｇ／日〜５５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５５μｇ／ｋｇ／日〜６０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６０μｇ／ｋｇ／日〜６５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６５μｇ／ｋｇ／日〜７０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、７０μｇ／ｋｇ／日〜７５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８０μｇ／ｋｇ／日〜８５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８５μｇ／ｋｇ／日〜９０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９０μｇ／ｋｇ／日〜９５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９５μｇ／ｋｇ／日〜１００μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。
【０５７６】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日である。
【０５７７】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２μｇ／ｋｇ／日である。
【０５７８】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日である。
【０５７９】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１０μｇ／ｋｇ／日である。
【０５８０】
ＩＩＩ．異常な線維芽細胞増殖およびコラーゲン沈着を特徴とする疾患を予防または処置する系
別の態様によれば、記載された本発明は、対象の組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着を特徴とする疾患、状態または過程を処置する系であって、
医薬組成物が、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のポリペプチドまたはその機能的均等物の治療量と、医薬的に許容し得るその担体と、を含み、治療量が、対象の組織における線維芽細胞増殖および細胞外マトリックスの沈着を減少させるのに効果的である、
系を提供する。
【０５８１】
方法の一実施形態によれば、疾患または状態は、急性肺損傷（ＡＬＩ）または急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）である。
【０５８２】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、放射線誘発性線維症である。
【０５８３】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、移植片拒絶である。
【０５８４】
別の実施形態によれば、組織は、肺組織である。
【０５８５】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、間質性肺疾患である。
【０５８６】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、肺線維症である。
【０５８７】
別の実施形態によれば、肺線維症は、特発性肺線維症である。
【０５８８】
別の実施形態によれば、肺線維症は、ブレオマイシンの投与により生じる。
【０５８９】
別の実施形態によれば、肺線維症は、アレルギー反応、環境性微粒子の吸入、細菌感染、ウイルス感染、対象の肺の機械的損傷、肺移植片拒絶、自己免疫障害、遺伝性疾患、またはそれらの組み合わせから生じる。
【０５９０】
別の実施形態によれば、組織は、肝組織である。
【０５９１】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、肝線維症である。
【０５９２】
別の実施形態によれば、組織は、腎組織である。
【０５９３】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、腎線維症である。
【０５９４】
別の実施形態によれば、組織は、血管組織である。
【０５９５】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、血管線維症である。
【０５９６】
別の実施形態によれば、疾患または状態は、組織での炎症をさらに特徴とする。
【０５９７】
別の実施形態によれば、炎症は、急性または慢性炎症である。
【０５９８】
別の実施形態によれば、炎症は、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、およびインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）からなる群から選択される少なくとも１つのサイトカインによって媒介される。
【０５９９】
別の実施形態によれば、組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着は、正常な健常対照群の対象の組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の活性と比較して、組織における有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な活性を特徴とする。
【０６００】
別の実施形態によれば、組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着は、正常な健常対照群の対象の組織における活性化有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の量または分布と比較して、組織における活性化（リン酸化）有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な量または分布によって立証される。
【０６０１】
別の実施形態によれば、肺線維症は、正常な健常対照群の対象と比較して、肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着、肺の線維芽細胞増殖の異常な促進、肺の線維芽細胞集団の筋線維芽細胞集団への分化の異常な誘発、および筋線維芽細胞の細胞外マトリックスとの付着の異常な促進からなる群から選択される少なくとも１つの病態を特徴とする。
【０６０２】
別の実施形態によれば、医薬的に許容し得る担体としては、制御放出性担体、遅延放出性担体、持続放出性担体、および長時間放出性担体が挙げられるが、これらに限定されない。
【０６０３】
別の実施形態によれば、吸入装置は、ネブライザーである。
【０６０４】
別の実施形態によれば、吸入装置は、計量吸入装置（ＭＤＩ）である。
【０６０５】
別の実施形態によれば、吸入装置は、乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）である。
【０６０６】
別の実施形態によれば、吸入装置は、乾燥粉末ネブライザーである。
【０６０７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、乾燥粉末の形態である。
【０６０８】
別の実施形態によれば、乾燥粉末は、１〜５ミクロンの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を有する微粒子を含む。
【０６０９】
別の実施形態によれば、乾燥粉末は、約２ミクロンの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を有する微粒子を含む。
【０６１０】
幾つかの実施形態によれば、医薬組成物は、さらなる治療薬をさらに含む。
【０６１１】
幾つかのそのような実施形態によれば、さらなる治療薬は、精製ウシＶ型コラーゲン（例えばＩＷ−００１；ＩｍｍｕｎｅＷｏｒｋｓ；Ｕｎｉｔｅｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＩＬ−１３受容体拮抗薬（例えばＱＡＸ５７６；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤（例えばイマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））；Ｃｒａｉｇ  Ｄａｎｉｅｌｓ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、内皮受容体拮抗薬（例えばＡＣＴ−０６４９９２（マシテンタン）；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、二重エンドセリン受容体拮抗薬（例えばボセンタン（Ｔｒａｃｌｅｅｒ（登録商標））；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、プロスタサイクリン類似体（吸入イロプロスト、例えば（Ｖｅｎｔａｖｉｓ（登録商標））；Ａｃｔｅｌｉｏｎ）、抗ＣＴＧＦモノクローナル抗体（例えばＦＧ−３０１９）、エンドセリン受容体拮抗薬（Ａ−選択性）（例えばアンブリセタン（Ｌｅｔａｉｒｉｓ（登録商標））、Ｇｉｌｅａｄ）、ＡＢ００２４（Ａｒｒｅｓｔｏ）、リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）モノクローナル抗体（例えばＧＳ−６６２４（以前はＡＢ００２４）；Ｇｉｌｅａｄ）、ｃ−Ｊｕｎ  Ｎ−末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤（例えばＣＣ−９３０；Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ピルフェニドン（例えばＥｓｂｒｉｅｔ（登録商標）（ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ）、Ｐｉｒｅｓｐａ（登録商標）（塩野義））、ＩＦＮ−γ１ｂ（例えばＡｃｔｉｍｍｕｎｅ（登録商標）；ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ）、３つのＴＧＦ−βアイソフォーム全てに対する汎中和ＩｇＧ４ヒト抗体（例えばＧＣ１００８；Ｇｅｎｚｙｍｅ）、ＴＧＦ−β活性化阻害剤（例えばＳｔｒｏｍｅｄｉｘ（ＳＴＸ−１００））、組換えヒトペントラキシン−２タンパク質（ｒｈＰＴＸ−２）（例えばＰＲＭ１５１；Ｐｒｏｍｅｄｉｏｒ）、二重特異性ＩＬ４／ＩＬ１３抗体（例えばＳＡＲ１５６５９７；Ｓａｎｏｆｉ）、インテグリンαｖβ６を標的とするヒト化モノクローナル抗体（ＢＩＢＦ  １１２０；Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｎ−アセチルシステイン（Ｚａｍｂｏｎ  ＳｐＡ）、シルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ（登録商標）））、ＴＮＦ拮抗薬（例えばエタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））；Ｐｆｉｚｅｒ）、グルココルチコイド（例えばプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾンフランカルボン酸エステル、フルチカゾンプロピオン酸エステルおよびフルチカゾンフランカルボン酸エステル）、気管支拡張剤（例えばロイコトリエン変性剤（例えば（モンテルカスト（ＳＩＮＧＵＡＩＲ（登録商標）））、抗コリン作動性気管支拡張剤（例えばイプラトロピウムブロミドおよびチオトロピウム）、短期作用性β２−作動薬（例えばイソエタリンメシレート（Ｂｒｏｎｋｏｍｅｔｅｒ（登録商標））、アドレナリン、サルブタノール／アルブテロール、およびテルブタリン）、長期作用性β２−作動薬（例えばサルメテロール、フォルモテロール、インデカテロール（Ｏｎｂｒｅｚ（登録商標））、ソホスブビル（Ｓｏｖａｌｄｉ（登録商標））、ＨＣＶをブーストされたプロテアーゼ阻害剤（ＡＢＴ−４５０、ＡｂｂＶｉｅ）、ノンヌクレオシドＮＳ５Ｂ阻害剤（ダサブビル、ＡＢＴ−３３３、ＡｂｂＶｉｅ）、ＮＳ５ａ阻害剤（オムビタスビル、ＡＢＴ−２６７、Ａｂｂ���ｉｅ）、ＡＢＴ−４５０／ｒ（ＡＢＴ−４５０とリトナビルの併用）、ＡＢＴ−２６７を共配合されたＡＢＴ−４５０、ソホスブビルを配合されたＡＢＴ−４５０、リバビリン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０６１２】
幾つかの他の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にロイコトリエン変性剤、抗コリン作動性気管支拡張剤、β２−作動薬、またはそれらの組み合わせを含む気管支拡張剤を含む。
【０６１３】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾン、ベクレメタゾン、またはそれらの組み合わせを含むコルチコステロイドを含む。
【０６１４】
幾つかのそのような実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にロイコトリエン変性剤、抗コリン作動性気管支拡張剤、β２−作動薬、またはそれらの組み合わせを含む気管支拡張剤を含む。
【０６１５】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にプレドニゾン、ブデソニド、モメタゾン、ベクレメタゾン、またはそれらの組み合わせを含むコルチコステロイドを含む。
【０６１６】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、抗炎症剤である。
【０６１７】
別の実施形態によれば、抗炎症剤は、非ステロイド系抗炎症剤である。非ステロイド系抗炎症剤の混合物、ならびにこれらの薬剤の皮膚学的に許容し得る塩およびエステルもまた利用できる。例えば、エトフェナメート、フルフェナム酸誘導体は、外用での適用に特に有用である。
【０６１８】
別の実施形態によれば、非ステロイド系抗炎症剤は、形質転換増殖因子−β３（ＴＧＦ−β３）、抗腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）剤、またはそれらの組み合わせを含む。
【０６１９】
別の実施形態によれば、抗炎症剤は、ステロイド系抗炎症剤である。別の実施形態によれば、ステロイド系抗炎症剤は、プレドニゾン、ブデソニド、モメタゾン、ベクレメタゾン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのコルチコステロイドを含む。
【０６２０】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、メチルキサンチンを含む。
【０６２１】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、好中球エラスターゼ阻害剤を含む。
【０６２２】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にＩＣＩ  ２００３５５、ＯＮＯ−５０４６、ＭＲ−８８９、Ｌ−６９４，４５８、ＣＥ−１０３７、ＧＷ−３１１６１６、ＴＥＩ−８３６２、ＯＮＯ−６８１８、ＡＥ−３７６３、ＦＫ−７０６、ＩＣＩ−２００，８８０、ＺＤ−０８９２、ＺＤ−８３２１、およびそれらの組み合わせを含む少なくとも１つの好中球エステラーゼ阻害剤である。
【０６２３】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、非限定的にホスホジエステラーゼ４阻害剤を含む少なくとも１つのホスホジエステラーゼ阻害剤を含む。ホスホジエステラーゼ４阻害剤の例としては、ロフルミラスト、シロミラストまたはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０６２４】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、鎮痛剤である。幾つかのそのような実施形態によれば、鎮痛剤は、非オピオイド鎮痛剤である。幾つかの他の実施形態によれば、鎮痛剤は、オピオイド鎮痛剤である。
【０６２５】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、抗感染薬である。別の実施形態によれば、感染薬は、抗生物質である。
【０６２６】
別の実施形態によれば、さらなる治療薬は、抗ウイルス薬である。例示的なそのような抗ウイルス薬としては、ＨＣＶをブーストされたプロテアーゼ阻害剤（ＡＢＴ−４５０、ＡｂｂＶｉｅ）、ノンヌクレオシドＮＳ５Ｂ阻害剤（ダサブビル、ＡＢＴ−３３３、ＡｂｂＶｉｅ）、ＮＳ５ａ阻害剤（オムビタスビル、ＡＢＴ−２６７、ＡｂｂＶｉｅ）、ＡＢＴ−４５０／ｒ（ＡＢＴ−４５０とリトナビルの併用）、ＡＢＴ−２６７を共配合されたＡＢＴ−４５０、ソホスブビルを配合されたＡＢＴ−４５０、リバビリン、またはソホスブビルが挙げられるが、これらに限定されない。別の実施形態によれば、医薬組成物は対象の肺に生じる炎症を阻害する。別の実施形態によれば、炎症は、急性炎症である。別の実施形態によれば、炎症は、慢性炎症である。別の実施形態によれば、炎症は、高レベルの腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）によって媒介される。別の実施形態によれば、炎症は、高レベルのインターロイキン−６（ＩＬ−６）によって媒介される。別の実施形態によれば、炎症は、高レベルのインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）によって媒介される。
【０６２７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、対照と比較して、肺の腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）の量をモジュレートする。別の実施形態によれば、医薬組成物は、対照と比較して、肺のインターロイキン−６（ＩＬ−６）の量をモジュレートする。別の実施形態によれば、医薬組成物は、対照と比較して、肺のインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）の量をモジュレートする。
【０６２８】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＨＳＰＢ１の活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、線維芽細胞増殖の異常な誘発である。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、線維芽細胞集団の筋線維芽細胞集団への分化の異常な誘発である。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、肺間質への細胞外マトリックスタンパク質の沈着である。別の実施形態によれば、細胞外マトリックスタンパク質は、コラーゲンである。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、線維症巣形成の促進である。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、筋線維芽細胞の収縮活性の増進である。別の実施形態によれば、医薬組成物によって阻害されるＨＳＰＢ１の活性は、細胞外マトリックスへの筋線維芽細胞付着の促進である。
【０６２９】
別の実施形態によれば、組織における異常な線維芽細胞増殖および細胞外マトリックス沈着は、正常な健常対照群の対象の組織における活性化有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の量または分布と比較して、組織における活性化（リン酸化）有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）の異常な量または分布によって立証される。
【０６３０】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、本明細書の表１に列挙された群から選択されるキナーゼのキナーゼ活性を阻害する。
【０６３１】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０６３２】
幾つかの実施形態によれば、ＭＭＩ阻害剤のインビボにおける阻害プロファイルは、投薬量、投与経路、およびこれらの阻害剤に応答する細胞型に依存する。
【０６３３】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０６３４】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２キナーゼ）のキナーゼ活性を阻害する。別の他の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の他の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０６３５】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３キナーゼ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＭＫ３キナーゼのキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０６３６】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも８０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも８５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも９０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも９５％を阻害する。
【０６３７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも５０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも７０％を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物はさらに、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも７５％を阻害する。
【０６３８】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性および有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性を阻害する。
【０６３９】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性およびカルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０６４０】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０６４１】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０６４２】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性を阻害する。
【０６４３】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０６４４】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０６４５】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０６４６】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０６４７】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％および有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０６４８】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％およびカルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０６４９】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０６５０】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ）のキナーゼ活性の少なくとも６５％を阻害する。
【０６５１】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、ＭＫ２、ＭＫ３、ＣａＭＫＩ、ＴｒｋＢの群から選択される少なくとも１つのキナーゼのキナーゼ活性を阻害し、本明細書の表１に列挙された残りの群からの１つまたは複数の他のキナーゼの活性を実質的に阻害しない。
【０６５２】
別の実施形態によれば、医薬組成物は、本明細書の表１に列挙される群から選択されるキナーゼのキナーゼ活性を阻害する。
【０６５３】
別の実施形態によれば、この阻害は、例えば対象の組織における線維芽細胞増殖、細胞外マトリックス沈着、またはそれらの組み合わせを減少させるのに効果的であり得る。
【０６５４】
別の実施形態によれば、この阻害は、例えば、正常な健常対照群の対象と比較して、肺間質における細胞外マトリックスタンパク質の異常な沈着、肺における線維芽細胞増殖の異常な促進、筋線維芽細胞分化の異常な誘発、および筋線維芽細胞の細胞外マトリックスへの付着の異常な促進からなる群から選択される少なくとも１つの病態を減少させるのに効果的であり得る。
【０６５５】
幾つかの実施形態によれば、ＭＭＩ阻害剤のインビボにおける阻害プロファイルは、投薬量、投与経路、およびこれらの阻害剤に応答する細胞型に依存する。
【０６５６】
そのような実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５０％未満を阻害する。そのような実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の６５％未満を阻害する。そのような実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の４０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の２０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の１５％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の１０％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼ（複数可）のキナーゼ活性の５％未満を阻害する。別の実施形態によれば、医薬組成物は、選択されるその他のキナーゼのキナーゼ活性を上昇させる。
【０６５７】
直前の段落の実施形態によれば、実質的に阻害されない１つまたは複数の選択されるその他のキナーゼは、Ｃａ2+／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ（ＣａＭＫＩＩ、そのサブユニットＣａＭＫＩＩδを含む）、プロトオンコジーンセリン／トレオニンプロテインキナーゼ（ＰＩＭ−１）、細胞性肉腫（ｃ−ＳＲＣ）、脾臓チロシンキナーゼ、（ＳＹＫ）、Ｃ−ｓｒｃチロシンキナーゼ、およびインスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の群から選択される。
【０６５８】
幾つかの実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と実質的な配列同一性を有する。
【０６５９】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも７０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも８０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９０％の配列同一性を有する。別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９５％の配列同一性を有する。
【０６６０】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）のものである。
【０６６１】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）のものである。
【０６６２】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５）のものである。
【０６６３】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６）のものである。
【０６６４】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）のものである。
【０６６５】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６）のものである。
【０６６６】
別の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７）のものである。
【０６６７】
幾つかの他の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、第二のポリペプチドと動作可能に連結された第一のポリペプチドを含む融合タンパク質であり、ここで第一のポリペプチドはアミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）のものであり、第二のポリペプチドは、その配列がアミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と実質的同一性を有する治療ドメインを含む。
【０６６８】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも７０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも８０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば該第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも９０％の配列同一性を有する。幾つかの他の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）と少なくとも９５％の配列同一性を有する。
【０６６９】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８）のポリペプチドである。
【０６７０】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９）のポリペプチドである。
【０６７１】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０）のポリペプチドである。
【０６７２】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８）のポリペプチドである。
【０６７３】
別の実施形態によれば、第二のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＬＮＲＱＬＡＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９）のポリペプチドである。
【０６７４】
幾つかの他の実施形態によれば、ポリペプチドＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の機能的均等物は、第二のポリペプチドと動作可能に連結された第一のポリペプチドを含む融合タンパク質であり、ここで第一のポリペプチドはＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）と機能的に均等の細胞貫通ペプチドを含み、第二のポリペプチドはアミノ酸配列ＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）のものである。
【０６７５】
さらに別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）のポリペプチドである。
【０６７６】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３）のポリペプチドである。
【０６７７】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４）のポリペプチドである。
【０６７８】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＷＬＲＲＩＫＡＷＬＲＲＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５）のポリペプチドである。
【０６７９】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６）のポリペプチドである。
【０６８０】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７）のポリペプチドである。
【０６８１】
別の実施形態によれば、第一のポリペプチドは、アミノ酸配列ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８）のポリペプチドである。
【０６８２】
別の態様によれば、本発明はまた、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも７０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする単離された核酸を提供する。幾つかのそのような実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも８０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。幾つかのそのような実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。幾つかのそのような実施形態によれば、単離された核酸は、アミノ酸配列ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）と少なくとも９５％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質配列をコードする。
【０６８３】
幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ（または１００μｇ／ｋｇ）体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約１０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約２ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約３ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約４ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約５ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約６０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約７０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約８０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害ペプチドの治療量は、約９０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約９０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約８０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約７０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約６０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重���約４０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約３０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．０００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療量は、約０．０００００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．００００１ｍｇ／ｋｇ体重の量である。
【０６８４】
幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜２５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜２μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２μｇ／ｋｇ／日〜３μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３μｇ／ｋｇ／日〜４μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４μｇ／ｋｇ／日〜５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日〜６μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６μｇ／ｋｇ／日〜７μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、７μｇ／ｋｇ／日〜８μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８μｇ／ｋｇ／日〜９μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９μｇ／ｋｇ／日〜１０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日〜５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日〜１０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１０μｇ／ｋｇ／日〜１５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１５μｇ／ｋｇ／日〜２０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２５μｇ／ｋｇ／日〜３０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３０μｇ／ｋｇ／日〜３５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、３５μｇ／ｋｇ／日〜４０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４０μｇ／ｋｇ／日〜４５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、４５μｇ／ｋｇ／日〜５０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５０μｇ／ｋｇ／日〜５５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５５μｇ／ｋｇ／日〜６０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６０μｇ／ｋｇ／日〜６５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、６５μｇ／ｋｇ／日〜７０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、７０μｇ／ｋｇ／日〜７５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８０μｇ／ｋｇ／日〜８５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、８５μｇ／ｋｇ／日〜９０μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９０μｇ／ｋｇ／日〜９５μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。幾つかの他の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、９５μｇ／ｋｇ／日〜１００μｇ／ｋｇ／日の範囲内である。
【０６８５】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１μｇ／ｋｇ／日である。
【０６８６】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、２μｇ／ｋｇ／日である。
【０６８７】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、５μｇ／ｋｇ／日である。
【０６８８】
別の実施形態によれば、医薬組成物の治療用阻害剤ペプチドの治療用量は、１０μｇ／ｋｇ／日である。
【０６８９】
本出願において他に断りがなければ、利用される技術は、分子クローニング：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  （Ｓａｍｂｒｏｏｋ，  ｅｔ  ａｌ．，  １９８９，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ）；遺伝子発現技術（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，  Ｖｏｌ．  １８５，  ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｄ．  Ｇｏｅｄｄｅｌ，  １９９１．  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ）；Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙの中の「Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ」（Ｍ．Ｐ．  Ｄｅｕｔｓｈｃｅｒ，  ｅｄ．，  （１９９０）  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｉｎｃ．）；ＰＣＲプロトコル：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  （Ｉｎｎｉｓ，  ｅｔ  ａｌ．  １９９０．  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，  ＣＡ）；動物細胞の培養：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，  ２ｎｄ  Ｅｄ．  （Ｒ．Ｉ．  Ｆｒｅｓｈｎｅｙ．  １９８７．  Ｌｉｓｓ，  Ｉｎｃ．  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ）；およびＧｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，  ｐｐ．  １０９−１２８，  ｅｄ．  Ｅ．Ｊ．  Ｍｕｒｒａｙ，  Ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．，  Ｃｌｉｆｔｏｎ，  Ｎ．Ｊ．など、複数の周知参考資料のいずれかに見出すことができ、それらの文献の全てが、参照により本明細書に組み入れられる。
【０６９０】
特に断りがなければ、本明細書で用いられる全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般的に理解する意味と同じ意味を有する。本明細書に記載された方法および材料と類似する、または均等ないずれの方法および材料もまた、本発明の実施または試験に用いることができるが、好ましい方法および材料をこれから記載する。本明細書に記載された全ての発行物は、参照により本明細書に組み入れられ、引用された発行物との関係で方法および／または材料を開示および記載する。
【０６９１】
ある範囲の値が提供される場合、その範囲の上限と下限の間に介在する各値（文脈が明確に示さない限り下限の１０分の１まで）、および任意の他の表記された値または表記範囲中に介在する値が、本発明に包含されることは理解されよう。これらより小さな範囲に独立して含まれ得るより小さな範囲の上限および下限もまた、本発明に包含されるが、ただし表記範囲中の特に排除された任意の限界を受ける。表記の範囲が一方または両方の限界を含む場合、それらの含まれる限界の一方または両方を排除した範囲もまた、本発明に含まれる。
【０６９２】
本明細書および添付の特許請求の範囲で用いられる通り、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかにその他を記載しない限り、複数の対応物を含むこともまた特記されなければならない。本明細書で用いられる全ての技術用語および科学用語は同じ意味を有する。
【０６９３】
本明細書で議論される発行物は、全体として参照により本明細書に組み入れられ、本出願の出願日前のそれらの開示内容を示すためにのみ提供される。それらのいずれも、記載された本発明が先行発明を理由にそのような発行物に先行しないということを容認するものと解釈されるべきではない。さらに、提供される発行物の日付は、実際の発行日とは異なることが有り、それは独立して確認されるべきであろう。
【０６９４】
様々な変更を実施することが可能であり、本発明の真の主旨および範囲から逸脱することなく均等物を代用し得ることは、当業者には理解されるはずである。加えて、具体的な状況、材料、物質の組成、工程、工程ステップまたは複数のステップを、記載された本発明の目的、主旨および範囲に適合させるために、多くの改変が実施され得る。そのような全ての改変は、本明細書に添付された特許請求の範囲内に含まれる。
【０６９５】
実施例
以下の実施例は、記載された本発明の実施および使用の方法の完全な開示および記載を当業者に提供するために示されるものであり、本発明者らが本発明者らの発明とみなすものの範囲を制限しようとするものでもなく、また下記の実験が全てであること、あるいは実施された実験に過ぎないことを表すものでもない。使用する数値（例えば数、温度など）に関して正確さを確保するために努力を払ったが、若干の実験誤差および偏差が考慮されなければならない。他に断りがなければ、部および重量部であり、分子量は平均分子量であり、温度は摂氏であり、圧は大気圧または大気圧近辺である。
【０６９６】
Ｉ．材料と方法
ＭＭＩ−０１００の創薬
ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の優良医薬品製造基準（ＧＭＰ）による製造のために、機械的撹拌装置を備えた５０Ｌのガラス製固相反応合成容器中に、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−Ｗａｎｇ樹脂およそ１ｋｇを移す。この樹脂をジメチルホルミド（ＤＭＦ）中で２時間以上（ＮＬＴ）膨潤させた後、ＤＭＦを排出する。その後、樹脂ビーズをＤＭＦの連続すすぎにより洗浄する。Ｎ−末端保護基（即ち、Ｆｍｏｃ）を、ＤＭＦ中の２０％ピペリジンで処置することによって除去し（脱ブロックのステップ）、この樹脂をＤＭＦで洗浄する。配列中の次のアミノ酸を、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）およびジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）の存在下でカップリングさせる。一般に、合成スケールに対しＦｍｏｃ−アミノ酸（Ｆｍｏｃ−ＡＡ）２．５〜３．５モル等量を、カップリングに用いる。Ｆｍｏｃ−ＡＡをＤＭＦ中に溶解し、ＨＯＢｔおよびＤＩＣの添加によって活性化させる。各カップリングの終了は、ニンヒドリン試験によってモニタリングする。カップリングが不完全である場合、同じアミノ酸による第二のカップリングを、対称無水物法を用いて実施する。一般に、合成スケールに対しＦｍｏｃ−ＡＡ  ３．０〜６．０モル等量をカップリングに用いる。Ｆｍｏｃ−ＡＡをジクロロメタン（ＤＣＭ）および最小容量のＤＭＦ中で溶解し、Ｆｍｏｃ−ＡＡ／ＤＩＣモル比＝１．０／０．５でＤＩＣを添加することにより活性化させる。完全なペプチド配列が完成したら、ペプチド樹脂をＤＭＦおよびＭｅＯＨの連続洗浄で徹底してすすぐ。その後、この樹脂をＮＬＴ３時間、真空乾燥させる。全乾燥ペプチド樹脂の典型的な回収量はおよそ２８００グラムであり、これは約６５％のペプチド樹脂収率を表す。
【０６９７】
その後、磁気撹拌棒を備えた適切なサイズを有するガラス瓶中に、ペプチド樹脂およそ３７０〜５００グラムを移す。このペプチド樹脂を入れたフラスコを氷／水浴中または冷蔵庫中で３０分以内で冷却する。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）カクテル（９５ｍＬ：２．５ｍＬ：２．５ｍＬの比のＴＦＡ、ＴＩＳおよび水の混合物）を氷／水浴中で３０分以内で予備冷却する。樹脂１グラムにつきおよそ８〜１２ｍＬのＴＦＡ切断カクテルを、この容器に加える。ペプチド樹脂およびＴＦＡカクテルが混合されたら直ちに、氷／水浴を取り外し、反応混合物を室温で２〜３時間撹拌する。その後、反応混合物を粗いガラスフィルターでろ過し、樹脂を０．５〜１．０ｍＬのＴＦＡ／ｇ樹脂／洗浄で２回洗浄する。ひとまとめにしたろ液を回収し、樹脂を廃棄する。その後、冷蔵庫で３０分未満の時間、予備冷却されたエーテルにろ液を、エーテル１０ｍＬあたりろ液１ｍＬの比率で添加し、切断ペプチドを沈殿させる。ペプチド−エーテル混合物を室温に３０分以内で平衡化する。沈殿ペプチドを中等度ガラスフィルター上に回収する。少なくともフィルター上の全沈殿物を覆うのに十分な低温エーテルを用いて、沈殿物を３回徹底して洗浄する。その後、このエーテルを同じ中等度ガラスフィルターから溶出させる。粗ペプチドをプラスチック瓶に移し、機械式真空ポンプと連結させたデシケーターに入れ、１２時間以内で乾燥させる。乾燥後、粗ペプチドを５±３℃で貯蔵する。全てのペプチド樹脂が切断されるまで、切断手順を繰り返し行う。全乾燥粗ペプチドの典型的なバッチ回収量は、およそ１２５０グラムであり、これはおよそ１１０％の切断収率を表す。
【０６９８】
２０ｍｇ／ｍＬの最終粗ペプチド濃度でペプチドをＨＰＬＣ緩衝液中に溶解させることによって、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）精製のために切断からの粗ペプチドを調製する。ペプチド溶液を１μｍのガラスフィルター膜でろ過し、Ｃ１８逆相カラムにロードし、このカラムを分取ＨＰＬＣ系で操作する。カラムを洗浄し平衡化させる。直線勾配を用いて粗ペプチドをカラムから溶出させる。各粗ペプチド精製に続いて、Ｋｒｏｍａｓｉｌ  Ｃ１８（５μｍ、１００Å）４．６×２５０ｍｍカラムを用いて分析ＨＰＬＣ系によって分画を分析する。最初の精製から生じた分画を、各分画のＨＰＬＣ純度および不純度プロファイルに基づいてプールする。更なるプロセッシングまで、ペプチドプールを２〜８℃で貯蔵する。粗ペプチドの全てをＨＰＬＣカラムで精製し主なプールの純度基準に適合するまで、この工程を繰り返し行う。酢酸塩への塩交換を、ＨＰＬＣで実施する。最終ペプチド溶液を０．２２μｍのフィルターでろ過し、トレー式凍結乾燥装置に置く。凍結乾燥サイクルを開始する前に、ペプチドを４０℃にて７２０分以内で予備凍結する。凍結乾燥にはおよそ５日を要する。およそ５０〜５５％の最終収率が、精製および凍結乾燥ステップから得られる。
【０６９９】
放射能測定によるＩＣ50の決定
ＩＣ50値は、１／２対数稀釈の１０点曲線から推定した。ペプチドをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に供給した。具体的には、ヒト組換えＭＫ２（ｈ）（５〜１０ｍＵ）を、５０ｍＭ  ３−グリセロリン酸ナトリウム（ｐＨ＝７．５）、０．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、３０μＭ  基質ペプチド（ＫＫＬＮＲＴＬＳＶＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１））、１０ｍＭ酢酸マグネシウム、および９０μＭ  γ−33Ｐ−ＡＴＰ（最終容量２５μＬ）と共に室温で４０分間インキュベートした。その後、反応を３％リン酸で停止させた。この混合物１０μＬをＰ３０フィルターマットにスポットし、７５ｍＭリン酸で５分間３回、およびメタノールで１回洗浄した。最後にこの膜を乾燥させ、シンチレーションカウンターを用いた。ＡＴＰに対する見かけのＫｍの１５μＭ以内のＡＴＰ濃度を選択したが、それはＨａｙｅｓｓおよびＢｅｎｎｄｏｒｆ（Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，  １９９７，  ５３（９）：  １２３９−４７）が、彼らの本来の阻害剤ペプチド（即ち、ペプチドＫＫＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２）のメカニズムはＡＴＰ結合と拮抗しないことを示したからである。
【０７００】
ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）に対するＩＣ50値の決定に加えて、２６６のヒトキナーゼに対する阻害活性を、ＭｉｌｌｉｐｏｒｅのＩＣ50  Ｐｒｏｆｉｌｅｒ  Ｅｘｐｒｅｓｓ  ｓｅｒｖｉｃｅ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，  Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，  ＭＡ）を用いて試験した。
【０７０１】
特異性分析のために、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解したＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）、ＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）、ＭＭＩ−０３００（ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）、ＭＭＩ−０４００（ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）、およびＭＭＩ−０５００（ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）の各々１００μＭを用いた。１００μＭの濃度を選択した理由は、この濃度がインビボ試験で接着形成を阻害したからであった（内容が参照によりその全体が本明細書に組み入れられる米国特許出願第１２／５８２，５１６号（２００９年１０月２０日出願）に開示される）。各キナーゼ活性測定は、二重測定で実施した。
【０７０２】
組織化学および免疫組織化学
マウスの肺線維症モデルを、Ｃ５７ＢＬ／６マウスへの０．０２５Ｕブレオマイシン／ＰＢＳの気管内投与によって作製した。ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）（１日あたり５０μｇ／ｋｇ、７５μｇ／ｋｇ、および１００μｇ／ｋｇの投薬量）を、ブレオマイシン傷害後７日目に開始するか（炎症後／線維化前の分析用；予防モデル）、またはブレオマイシン傷害後１４日目に開始し（線維化後の分析用；治療モデル）、腹腔内または霧状化によりブレオマイシン送達後２１日または２８日まで毎日投与した。ブレオマイシン送達後２１日目（予防モデル）または２８日目（治療モデル）に、マウスの群をペントバルビタールナトリウム注射（１２０ｍｇ／ｋｇ）で殺処分し、胸腔を開いた。右の主気管支を結紮し、右肺を取り出した。気管にカニューレを挿入し、４％ホルムアルデヒドを２１ｃｍの水圧で左肺に灌流させた。その後、組織ブロックをパラフィンに包埋し、４ｍｍ切片を染色のために調製した。各動物の切片を細胞の視覚化のためにヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ）で染色するか、またはコラーゲン沈着を強調するためにマッソントリクローム染色で染色した。インキュベーション後に、切片を０．２％酢酸で洗浄し、９５％アルコールに浸漬して脱水し、染色皿中でキシレン（３〜４回）により澄明化した。染色された切片を、ラベル付きガラススライドに有機マウント剤でマウントした。
【０７０３】
ＩＩ．結果
実施例１．ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のＩＣ50および特異性
ＭＫ２阻害剤ペプチド（ＭＭＩ−０１００；ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））のＩＣ50（１／２最大阻害濃度）値を、ＭｉｌｌｉｐｏｒｅのＩＣ50  Ｐｒｏｆｉｌｅｒ  Ｅｘｐｒｅｓｓ  ｓｅｒｖｉｃｅを用いて決定した。この定量的アッセイは、所与の生物学的過程または過程の成分（即ち、酵素、細胞、または細胞受容体）の５０％を阻害するためにどれほど多くの阻害剤が必要とされるか（［ＩＣ50］）を測定する。具体的には、これらのアッセイでは、キナーゼが阻害剤ペプチドによって阻害されない場合、正電荷の基質がＡＴＰからの放射性標識リン酸基でリン酸化される。その後、正電荷の基質は、負電荷のフィルター膜に引きつけられ、シンチレーションカウンターで定量され、１００％の活性対照と比較される。
【０７０４】
ＡＴＰに対して見かけのＫｍが１５μＭ以内のＡＴＰ濃度を選択したが、それは、Ｋｍ近くのＡＴＰ濃度によって、キナーゼが同じ相対量のリン酸化活性を有することができるためである。ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のＩＣ50は、２２μＭと決定された。
【０７０５】
化合物のＩＣ50を決定することに加えて、ＭＫ２阻害性ペプチドの特異性を、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅのキナーゼプロファイリングサービスの試験で利用可能な２６６のヒトキナーゼ（表１）全ての活性を検査することによって評価した。分析のために、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）、ＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）、ＭＭＩ−０３００（ＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）、ＭＭＩ−０４００（ＫＡＦＡＫＬＡＡＲＬＹＲＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）、およびＭＭＩ−０５００（ＨＲＲＩＫＡＷＬＫＫＩＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７）によって６５％を超えて阻害されるキナーゼを決定した。
【０７０６】
表１に示す通り、１００μＭで、ＭＫ２阻害性ペプチドＭＭＩ−０１００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）、ＭＭＩ−０２００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）、ＭＭＩ−０３００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）、ＭＭＩ−０４００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）、およびＭＭＩ−０５００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５）は特異的なキナーゼ群を阻害し、非常に限定されたオフターゲットキナーゼ阻害を示した。より具体的には、ＭＫ２阻害性ペプチドＭＭＩ−０１００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）、ＭＭＩ−０２００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）、ＭＭＩ−０３００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）、ＭＭＩ−０４００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）、およびＭＭＩ−０５００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５）は、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）、有糸分裂促進プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ３（ＭＫ３）、カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩ（ＣａＭＫＩ、セリン／トレオニン特異的プロテインキナーゼ）、およびＢＤＮＦ／ＮＴ−３増殖因子受容体（ＴｒｋＢ、チロシンキナーゼ）のキナーゼ活性を、インビトロで６５％よりも多く阻害した。
【表１】
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【０７０７】
実施例２．ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物の配合剤
幾つかの実施形態によれば、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物は、噴霧乾燥、微粒子化（例えばジェットミル処理）を介する凍結乾燥粉末として、または霧状化用の液体配合剤として配合される。
【０７０８】
噴霧乾燥
幾つかの実施形態において、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物の調製には、以下の因子を考慮して噴霧乾燥が利用される：
（ａ）タンパク質およびペプチドは変性しやすい（即ち、三次および時には二次構造が破壊されやすい）；
（ｂ）この変性は可逆性または不可逆性である可能性があり、様々な条件、例えば温度上昇、温度低下、極端なｐＨ、溶媒の添加、圧力、および剪断変性（これは微粒子化に適用される）によって引き起こされ得る：
（ｃ）変性タンパク質は、より低い活性であり、治療性がなく、時には完全に不活性である；
（ｄ）噴霧乾燥は、これらの非晶質で大きな分子を特定の粒度分布を有する別個の球状粒子にして、プロセッシングパラメータによって制御でき；
噴霧乾燥粒子は、非常に球状でドーナツ形であり、典型的には中空であり、このことは５μｍを超える粒子は依然として呼吸可能でありながら肺のクリアランスメカニズムに耐性を有し得ることを意味する；さらに
（ｅ）噴霧乾燥は、賦形剤の有無にかかわらず、一般にタンパク質の安定性を改善する。
【０７０９】
ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物の凍結乾燥配合剤を、噴霧乾燥工程との潜在的相乗作用性（例えば最適水分レベル、緩衝液濃度／ｐＨの適合性、賦形剤選択など）について評価し、ペプチド安定性の保護を確認する。
【０７１０】
最初の噴霧乾燥運転は、噴霧乾燥操作のための工程パラメータを規定する目的で共通承認許容基準を目標とする。吸入生成物については、粒子サイズは重要な基準と考えられる。該当する領域の肺胞沈着のために（タイプＩＩ）、１〜５ミクロンの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）が、肺胞間質における末梢沈着に適していると一般に認識される（参照により本明細書に組み入れられるＨｅｙｄｅｒ，  Ｊ．  Ｐｒｏｃ  Ａｍ  Ｔｈｏｒａｃ  Ｓｏｃ，  １（４）：  ３１５−３２０，  ２００４）。他の研究では、１〜３ミクロンのＭＭＡＤが、噴霧乾燥工程に所望の開始目標粒子サイズであることが示唆される。ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の可能性が高い生体間質標的は肺胞領域であるため、約２ミクロンの範囲のＭＭＡＤを最初はターゲットにして、肺胞空間への沈着を確保する。
【０７１１】
許容基準としては、（１）粒子サイズ（即ち、Ｄ90が約２μｍ）；（２）水分レベル（即ち、水分は３％ｗ／ｗ未満）；（３）粉末密度；および（４）表面外観（球状、粗面、トロイダル形）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０７１２】
その後、工程設計実験を実施して、非限定的に（１）入口圧および乾燥温度；（２）原料濃度およびフェデレート（ｆｅｄｅｒａｔｅ）；および（３）ペプチド／賦形剤比（賦形剤は例えば緩衝塩および単糖類である）を含む噴霧乾燥工程のパラメータを最適化する。
【０７１３】
実施例３．連続エアロゾル性能評価のためのＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のバッチの製造
先に記載された定義の工程パラメータで２〜３回の噴霧乾燥運転を実施し、エアロゾル性能評価用の材料を製造する。
【０７１４】
噴霧乾燥粉末は、吸入装置、例えば非限定的にＭｉｃｒｏＤｏｓｅ吸入装置からの送達に十分に適する。ＭｉｃｒｏＤｏｓｅは、混じりけのないブレンドおよび同時噴霧乾燥ブレンドの両ブレンドに関して、高放出用量、および高微粒子分画ならびにこの配合アプローチによる用量の両方を日常的に達成する。噴霧乾燥インスリンの例示的エアロゾル性能が、図１および２に示される。
【０７１５】
乾燥微粒子化は、肺送達用の小分子のための好ましい粉末製造法ではあるが、噴霧乾燥とは対照的に、ストレスの多い方法であり、高い剪断力を用いる。高剪断力の利用はタンパク質およびペプチドの破砕をもたらし得るため、乾燥微粒子化は大きな分子のために日常的には用いられない。加えて、用量サイズが小さい場合、流動性を改善して充填操作時の粉末の正確な測定を可能にするために、充填剤が必要である。主要な賦形剤、およびこの目的のために肺送達用に認可された唯一の賦形剤が、ラクトースであり、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはその機能的均等物との化学的適合性について試験する必要があるが、それはラクトースが特定のペプチドと不適合なためである。
【０７１６】
微粒子化工程は、かなり単純であり、当該技術分野で周知である。簡潔に述べると、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物の凍結乾燥粉末を、予め決定した目標の粒度分布に達成するまで（即ち、ＭＭＡＤ、Ｄ１０、Ｄ５０、Ｄ９０）粉砕段階に通す。この混じりけのない微粒子化粉末を、微粒子化後の活性を確保する能力について試験し、吸入装置からの送達のために最適化し、その化学的および物理的安定性を一次（熱封入ブリスター）パッケージで試験する。混じりけのない粉末をその後、目標に対し認可された肺ラクトースグレードの優先的な選択物とブレンドし、ブレンドの均質性について試験し、同じ吸入装置最適化試験および安定性試験を実施する。
【０７１７】
ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）
幾つかの実施形態によれば、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物は、乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）を用いて投与され得る。例えば、ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）は、呼吸により駆動され患者の吸入流速および吸入体積とは無関係に高効率肺送達を達成する、「能動的」な圧駆動エアロゾル発生装置を有する。効率的な肺送達のために４０〜６０リットル／分（ＬＰＭ）の規模の気流による強く効果的な吸入を必要とする「受動的」ＤＰＩとは異なり、ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ  ＤＰＩは、わずか１０ＬＰＭから９０ＬＰＭまでの非常に広い範囲の流速にわたり、同等の性能で効率的な送達が可能なため、ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ  ＤＰＩでは呼吸術は要求されない（図３および４の性能例を参照されたい）。
【０７１８】
幾つかの実施形態によれば、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物は、「乾燥粉末ネブライザー」（ＤＰＮ）などのタイダル・ブレッシング法を利用して投与できる。ＤＰＮは、わずかに２リットル／分（ＬＰＭ）を引き起こす吸入タイダル・ブレッシングに同調される乾燥粉末用量を送達し、予測されるピーク流は５〜１５ＬＰＭの間でありタイダルボリュームはわずか３０ｍＬであり、これは成人ＩＰＦ患者で予測される条件よりもはるかに困難な条件である。この新規なＤＰＮは、成人での第二次臨床試験が成功のうちに完了し、その第一回目の試験は２０１１年１１月に終了している。これらの結果は以下のＵＲＬ：“ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ０１４８９３０６？ｓｐｏｎｓ＝Ｍｉｃｒｏｄｏｓｅ  ｒａｎｋ＝１．”のワールドワイドウェブ（ｗｗｗ）でインターネットを介してアクセスできる。
【０７１９】
ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ電子吸入システムは極めて柔軟性のある構成であり、上記の両配合剤様式を正確かつ効率的に送達でき、噴霧乾燥生成物に関して特に高い効率を有し、３０を超える小分子および大分子に関してこの性能を示した。一次包装の噴霧乾燥インスリンは、例えば、少なくとも１８ヶ月持続可能である。噴霧乾燥ペプチドおよび微粒子化小分子の両方の送達性能の例を、図５〜８に示す。
【０７２０】
肺膜に及ぼす乾燥粉末配合剤の影響（例えば感作）に関して、乾燥粉末送達は（特に粉末負荷が低い時（＜４〜５ｍｇ））、それが活性分子の本質的な特性でない限り、肺膜に影響を及ぼしたりまたは過敏化（咳など）を引き起こしたりすることはほとんどないであろう（本発明者らは動物実験ではそれらを観察していない）。既に肺について承認され肺における優れた生体適合性を有する賦形剤が選択され、非常に小量（即ち、低いｍｇ範囲）で存在する。例えば、少量のマンニトールは影響を与えることはほとんどない。
【０７２１】
液体の霧状化
あるいは、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物は、液体の霧状化を介して送達され得る。過去の前臨床試験で、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）が、動物での使用に適合させたＡｅｒｏＧｅｎ（登録商標）ネブライザーシステムを介してげっ歯類に送達され得ることが示された。
【０７２２】
送達されて損傷された肺に有益な影響を与えるＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）をの能力に特に対処するために、ブレオマイシン動物モデルの有効性実験において、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の溶液を効果的にエアロゾル化させる。ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の肺局所投与は、Ａｅｒｏｇｅｎ（登録商標）（ｗｗｗ．ａｅｒｏｇｅｎ．ｃｏｍ）により設計および製造されたげっ歯類用ネブライザー装置により達成される。Ａｅｒｏｎｅｂ（登録商標）Ｌａｂ  Ｍｉｃｒｏｐｕｍｐ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒは、前臨床エアロゾル研究および吸入試験での使用のための高効率エアロゾル化技術を用い、前臨床と臨床製品開発との間の貴重な連携を提供する。流速は＞０．３ｍｌ／分であり、２ｍｍサイズの粒子を送達して肺胞最深部に分布させるように設計される。霧状化ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の有効性および肺全体での細胞内取り込みが、ブレオマイシン肺線維症のマウスモデルで実証された（図１６参照）。局所的な、臨床的に意義のある吸入投与は、ＭＫ２活性化の低減において従来の全身性注射と同程度に効果的である。
【０７２３】
実施例４．活性化ＭＫ２のレベルは特発性肺線維症（ＩＰＦ）患者の肺の線維症病変で増加する
有糸分裂促進プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）活性化プロテインキナーゼ２（ＭＫ２）は、ｐ３８ＭＡＰＫ−αおよびβによってストレス時に活性化される。ｐ３８ＭＡＰＫのこれらの２つのアイソフォームがＭＫ２のカルボキシ末端の塩基性ドッキングモチーフに結合し、これが次にその調節部位をリン酸化する。活性化の結果、ＭＫ２は核から細胞質へ移送され、この区画へ活性ｐ３８ＭＡＰＫを同時に輸送する。ＭＫ２はｐ３８ＭＡＰＫの局在化を安定化させ、分化、遊走およびサイトカイン生成に必須である（Ｋｏｔｌｙａｒｏｖ，  Ａ．，  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ２２（１３）：  ４８２７−４８３５，  ２００２）。
【０７２４】
それゆえ、ＩＰＦに罹患した肺でｐ３８ＭＡＰＫ−ＭＫ２シグナル伝達経路が活性化されるか否かを調べるために、正常者およびＩＰＦ患者から得た肺切片を、ＭＫ２の活性化型に対するホスホ特異的抗体（抗ホスホ−Ｔｈｒ334−ＭＡＰＫＡＰＫ２）で染色した。ＤＡＢを用いて正常肺およびＩＰＦ肺の組織を免疫染色し、核をヘマトキシリンで対比染色した。図９に示す通り、正常肺生検組織（左）と比較して、ＩＰＦ患者由来の肺組織外移植片の線維症病巣の細胞で、活性化ＭＫ２の発現増加が観察された。これらの結果から、ＩＰＦ患者の肺の線維症形成はｐ３８ＭＡＰＫ−ＭＫ２シグナル伝達経路の異常な活性化を特徴とすることが示唆される。
【０７２５】
実施例５．霧状化して全身投与したＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）はマウスをブレオマイシン誘発性肺線維症から防御する
特発性肺線維症（ＩＰＦ）の診断基準の１つは、間葉細胞の活性化およびマトリックス（特にコラーゲン）の旺盛な沈着である。生じた肺でのコラーゲン蓄積は、組織学的技術および生化学的技術の両方によって、最も顕著にはヒドロキシプロリンの蓄積から測定できるが、ヒドロキシプロリンはほぼ全てが肺中のコラーゲンに由来し、したがって全肺コラーゲン量の代用物となる（Ｕｍｅｚａｗａ  Ｈ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ，  ２０（５）：８９１−８９５，  １９６７）。
【０７２６】
したがって、肺線維症処置におけるＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の治療有効性を、ブレオマイシン誘発性肺線維症マウスモデルを用いて、予防段階または線維化前の段階（即ち、薬剤投与はブレオマイシン傷害後７日目に開始する；図１０参照）中にＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）ペプチドを全身的に（腹腔内）または局所的に（霧状化投薬により）送達することにより、およびブレオマイシンマウス中の線維症インデックスとしてコラーゲンレベルを測定することにより評価した。
【０７２７】
簡潔に述べると、マウスの肺線維症病変は、約０．０２５Ｕのブレオマイシン（ＰＢＳに溶解）をＣ５７ＢＬ／６マウスの気管内に送達することによって誘発した。予防／線維化前期でのブレオマイシン傷害肺の処置におけるＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の有効性を試験するために、対照（ＰＢＳ）またはＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）を、腹腔内または霧状化を介してブレオマイシン送達後７日目（炎症が沈静化し線維症メカニズムが活性化された時）に開始しブレオマイシン送達後２１日目まで（顕著な線維症が観察された時）毎日投与した（図１０）。ブレオマイシン送達後２１日目に、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）または対照（ＰＢＳ）処置ブレオマイシンマウスから肺組織を単離し、固定し、パラフィン包埋し、染色のために切片を作製した。簡潔に述べると、ペントバルビタールナトリウム注射（１２０ｍｇ／ｋｇ）によりマウスを殺処分し、胸腔を開いた。右の主気管支を結紮し右肺を取り出した。気管にカニューレを挿入し、４％ホルムアルデヒドを２１ｃｍの水圧で左肺に灌流させた。その後、組織ブロックをパラフィンに包埋し、４ｍｍ切片を調製し、ヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ、病理学検査用）またはマッソントリクローム（コラーゲン染色用）で染色した。
【０７２８】
図１１に示す通り、ＰＢＳ処置マウスからの肺切片は、正常な肺構造（ＮＬ）および気道（ＡＷ）を示した。対照的に、ブレオマイシンマウスからの肺切片（２１日目）では、線維症病巣（ＦＦ）の形成を伴う狭窄気道（ＡＷ）が明瞭で（上のパネル：ヘマトキシリン＆エオジン（Ｈ＆Ｅ）染色）、肺組織ではコラーゲンの蓄積が増加し（下のパネルの矢印；マッソントリクローム染色）、これらはＩＰＦ患者に見出されるものを想起させた。しかし霧状化または腹腔内を介したＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の投与は、ブレオマイシンマウスの肺で線維症巣形成の進行を有意に低下させ（上のパネル、ＭＭＩ−０１００（ＮＥＢ）およびＭＭＩ−０１００（ＩＰ））、コラーゲン蓄積を低下させた（下のパネル、ＭＭＩ−０１００（ＮＥＢ）およびＭＭＩ−０１００（ＩＰ））。
【０７２９】
次に、ブレオマイシン傷害マウスの肺での総コラーゲンレベル（図１２）を、ヒドロキシプロリン濃度からコラーゲンに対する定常変換係数（７．５）を計算することによって定量的に分析した（参照により組み入れられるＮｅｕｍａｎ  Ｒ．  ａｎｄ  Ｌｏｇａｎ  Ｍ，  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．，  １８６（２）：５４９−５６，  １９５０）。図１２に示す通り、炎症後／線維化前の段階中のＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の霧状化投与（ＢＬＥＯ＋ＮＥＢＵＬＩＺＥＤ）および全身投与（ＢＬＥＯ＋ＩＰ）は、ブレオマイシン対照と比較して、有意にコラーゲン沈着を低下させた。
【０７３０】
実施例６．特発性肺線維症予防モデルにおけるＭＫ２ペプチド阻害剤の用量反応データ
次に、コラーゲン沈着に及ぼすＭＫ２ペプチド阻害剤の増加の影響を、特発性肺線維症のブレオマイシンマウスモデル（予防モデル）を用いてインビボで検査した。簡潔に述べると、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを０日目にブレオマイシン傷害に供した。７日目に開始し２１日目まで連続で、２５、５０または７５μｇ／ｋｇのＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）をマウスに、毎日腹腔内（ＩＰ）注射により投与した。図１３に示す通り、マッソン青色トリクローム染色から、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））で処置されたブレオマイシン傷害マウスの肺におけるコラーゲンレベルの低下が明らかになり、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）が、ブレオマイシン傷害による肺線維症を用量依存的様式で防御し得ることが示唆された。これらのデータから、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）はより高用量であっても、線維症防止化合物としてのその能力を保持することが示唆される。
【０７３１】
対照的に、ＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）によるブレオマイシン傷害マウスの処置は、試験された用量では肺のコラーゲン沈着を低下させずむしろ増加させた。しかしこの結果は、全てのＭＫ２活性が失われ、線維症表現型の悪化を示した、ＭＫ２ノックアウトマウスおよびＭＫ２−／−マウス胚線維芽細胞（ＭＥＦ）を含む過去の研究と一致した（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，  ３７：  ５０７−５１７，  ２００７）。
【０７３２】
理論に拘束されるわけではないが、これらの結果から、（１）記載された本発明のＭＫ２阻害ペプチドが特異的なキナーゼ群に対して阻害活性範囲を示し得る；（２）ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）は、ＭＫ２および他のキナーゼを分別的に阻害でき、このことは、適用される用量に応じて、この阻害活性範囲に寄与する；（３）筋線維芽細胞形成および／または遊走もまた、活性損傷ではなく線維症の修復期の部分であり得る；（４）したがって、特定レベルのＭＫ２活性がその過程を起こすのに必要である（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，  ３７：  ５０７−５１７，  ２００７）、ということが示唆される。
【０７３３】
加えて、記載された本発明のＭＫ２阻害ペプチドは、ＭＫ２の下流の標的ＨＳＰＢ１の基質結合部位から誘導された。したがってそれらは、ＨＳＰＢ１に対するＭＫ２のキナーゼ活性を拮抗的に阻害し得る。理論に拘束されるわけではないが、線維症に及ぼすＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）の分別的効果は、その配列の相違、ＨＳＰＢ１結合部位に対するその相同性、異なる標的タンパク質結合部位に対するＭＫ２キナーゼ活性の分別的阻害、またはそれらの組み合わせに起因する可能性がある。
【０７３４】
実施例７．ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の投与は特発性肺線維症予防モデルで全身的なＴ細胞活性化を効率的に遮断する
近年の研究で、ブレオマイシン誘発性線維症におけるＴリンパ球の重要な役割が強調された（Ｗｉｌｓｏｎ，  Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ２０７（３）：  ５３５−５５２，  ２０１０）。それゆえ、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）で処置したブレオマイシン損傷マウスにおける脾臓Ｔ細胞（全Ｔ細胞）の機能的役割を究明するために、自家混成リンパ球反応（ＭＬＲ）を過去に報告された通り実施した（参照により本明細書に組み入れられるＷｉｌｋｅｓ，  Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ６４（５）：５７８−５８６，  １９９８）。具体的には、Ｃ５７ＢＬ／６精製抗原提示細胞のＣ５７ＢＬ／６−Ｔリンパ球増殖誘発能力を、このアッセイで試験した。
【０７３５】
Ｃ５７ＢＬ／６マウスを０日目にブレオマイシン傷害に供した。７日目に、マウスに５０μｇ／ｋｇ／日のＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）を、腹腔内（ＩＰ）注射またはネブライザー（ＮＥＢ）により２１日目まで毎日投与した。脾臓Ｔ細胞を単離し、単独でもしくは自家抗原提示細胞（Ｃ５７ＢＬ／６マウスのＡＰＣ）の存在下で培養するか、またはＣＤ３（α−ＣＤ３）に対する抗体で４８時間刺激した。その後、細胞を3Ｈチミジンで１６時間放射性標識し、増殖速度について評価した。
【０７３６】
図１４に示す通り、Ｔ細胞単独は、処置にかかわらず非常に低い増殖能力を示した。しかし、Ｔ細胞を自家抗原提示細胞（即ち、Ｃ５７ＢＬ／６マウスから単離されたＡＰＣ）と共培養した場合、増殖能力は対照マウスよりもブレオマイシン傷害マウスで有意に高かった。興味深いことに、抗原提示細胞の存在下で観察された、ブレオマイシン処置マウス由来Ｔ細胞の増殖は、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の全身投与によって有意に減少したが、予測された通り、吸入方式の場合には有意に減少しなかった。これらのデータから、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）による脾臓Ｔ細胞活性化の抑制が示唆され、ペプチドＭＫ２阻害剤が線維症を防御することが示される。
【０７３７】
Ｔ細胞の生存能力もまた、これらの細胞をα−ＣＤ３（ポリクローナルＴ細胞アクチベーター）に対する抗体で刺激することによって確認された。α−ＣＤ３は、処置群に関係なく安定な細胞増殖を誘発した。ポリクローナルアクチベーターに対する増殖応答は、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）ペプチド阻害剤が脾臓Ｔ細胞の機能的特性に影響を与えないこと、およびこの特別な用量ではＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の投与に関して毒性が存在しないことを示唆している。加えて、霧状化ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）に対する脾臓Ｔ細胞応答がないことから、このペプチド送達方式では全身分布はほとんど生じないことが示唆される。
【０７３８】
実施例８．全身性または霧状化ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）処置は線維症後の病期におけるブレオマイシン傷害肺を防御する
図１０に示す通り、従来のブレオマイシンモデルは、文献では任意の介入の有効性を検査するために線維化前の病期で広く用いられてきた。ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の霧状化および全身投与は両方とも、ブレオマイシン誘発性線維症から肺を顕著に防御するため、ブレオマイシン傷害肺の処置におけるＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の全身（腹腔内）または局所（霧状化）投与の影響を、さらに線維症後の病期において、薬剤介入を１４日目（肺が顕著に線維化される時点）に開始して試験した（図１５）（参照により本明細書に組み入れられるＰｏｔｔｉｅｒ，  Ｎ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ａｎｄ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  １７６（１１）：  １０９８−１１０７，  ２００７）。ＩＰＦ患者の肺が診断時点で既に瘢痕化していることを考慮すると、このモデルで示される瘢痕化肺の救済は、臨床的に意義がある。
【０７３９】
より具体的には、約０．２５Ｕのブレオマイシン（ＰＢＳに溶解）をＣ５７ＢＬ／６マウスに気管内送達することによって、肺の線維症病変を誘発した。線維症後の病期でのブレオマイシン傷害肺の処置におけるＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の有効性を調べるために、ＰＢＳ（対照）またはＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）を、マウスにブレオマイシン送達後１４日目に開始してブレオマイシン送達後２８日まで毎日、腹腔内または霧状化を介して投与した。ブレオマイシン送達後２８日目に、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）または対照（ＰＢＳ）で処置されたブレオマイシンマウスの肺組織を単離し、固定し、パラフィン包埋し、染色のために切片を作成した。マウスをペントバルビタールナトリウム注射（１２０ｍｇ／ｋｇ）により殺処分し、胸腔を開いた。右の主気管支を結紮し右肺を取り出した。気管にカニューレを挿入し、４％ホルムアルデヒドを２１ｃｍの水圧で左肺に灌流させた。その後、組織ブロックをパラフィンに包埋し、４ｍｍ切片を調製し、ヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ、病理学試験用）またはマッソントリクローム（コラーゲン染色用）で染色した。
【０７４０】
図１６に示す通り、薬剤の投与方式にかかわらず（即ち、腹腔内送達であれ、または肺への局所適用であれ）、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）処置は、重度の瘢痕化肺を「救済」した。組織学評価を用いて、肺構造（ヘマトキシリン＆エオジン（Ｈ＆Ｅ）染色、上パネル）およびコラーゲン分布（マッソン青色トリクローム染色、下パネル）を検査した。組織化学試験の結果から、ブレオマイシン傷害肺は重度に瘢痕化したが、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）処置マウスはより滑らかな肺実質を有することが示される。
【０７４１】
次に、全左肺による標準的なヒドロキシプロリンアッセイを用いて、コラーゲン沈着を定量的に測定した。ブレオマイシン傷害後２８日目にネズミ肺のヒドロキシプロリン濃度を分析することによって、総コラーゲン（可溶性および不溶性）沈着を評価した。ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１））は、ブレオマイシン傷害後１４日目に開始して腹腔内注射（ＩＰ）またはネブライザー（ＮＥＢ）によって５０μｇ／ｋｇ／日の用量で投与された。
【０７４２】
図１７に示す通り、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）処置は、ブレオマイシン傷害後２８日目およびＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）処置開始時に、ベースラインと比較して、コラーゲン沈着の更なる進行を停止させた。これまでの文献は創薬において効果的予防を提示したが、ＩＰＦ患者が診断された時には既存の線維症が存在するため、上記の事柄は注目に値する。これらの結果はまた、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）が、この疾患の更なる進行を効果的に停止または遅延させて生活の質を改善する能力を有すること、およびＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）ペプチドは、より高用量および／またはより長い処置期間で使用されるならば、肺の組織学および生理学にさらに大きな改善をもたらし、線維症を減少させ得ることを示唆している。
【０７４３】
実施例９．ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の全身投与または局所投与は特発性肺線維症のブレオマイシンマウスモデルにおける活性化ＭＫ２の低下と相関する
先に議論された通り、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびその機能的均等物の肺における主要な標的の１つは、ＭＫ２キナーゼであり、それは罹患した肺で炎症および線維化応答を誘発する。それゆえ、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）のインビボにおける効果をさらに立証するために、活性化ＭＫ２（ホスホ−Ｔｈｒ334−ＭＡＰＫＡＰＫ２）のレベルを未処置ブレオマイシン傷害マウスおよびＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）処置マウスで検査した。
【０７４４】
手短に述べると、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを０日目にブレオマイシン傷害に供した。１４日目に、マウスに５０μｇ／ｋｇのＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）を、ブレオマイシン傷害後２８日まで毎日、腹腔内（ＩＰ）注射またはネブライザー（ＮＥＢ）により投与した。ホルマリン固定された肺組織切片を、ホスホ−Ｔｈｒ334−ＭＫ２に対して免疫染色した。対照染色にはビオチン化二次ＩｇＧ抗体を用いた。ストレプトアビジン・コンジュゲート西洋ワサビペルオキシダーゼを、基質としての３，３’−ジアミノベンジデンと共に用い、核をヘマトキシリンで対比染色した。ブレオマイシンマウスは、未処置の場合には、ほとんどが特に顕著なコラーゲン沈着領域中で、活性化ＭＫ２の存在（暗色の結節）の目に見える増加を示したが、ＭＭＩ−０１００処置マウスは正常組織に類似の活性化ＭＫ２の存在を示し、そのような分布は気道周囲および血管領域中に集中していた。
【０７４５】
図１８に示す通り、送達方式にかかわらず（即ち、全身投与であれ、または局所投与であれ）、対照と対比して、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の霧状化または腹腔内投与は、ブレオマイシンマウスモデルでホスホ−Ｔｈｒ334−ＭＡＰＫＡＰＫ２染色の減少と関連した。
【０７４６】
実施例１０．ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）は特発性肺線維症治療モデルで炎症性サイトカインをダウンレギュレートする
ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）が肺における線維症形成を阻害し得る１つの潜在的メカニズムは、炎症後サイトカインの局所濃度を低下させ、それによって単球動員充および肺マクロファージによる異常な細胞外リモデリング（例えばコラーゲン沈着の増加、細胞接着および遊走の増加、マトリックス分解の減少）を妨害することによる。この可能性を究明するために、炎症促進性サイトカインの生成を阻害するＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）ペプチドの能力を、腹腔内または液状化によるＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）での処置時にインターロイキン−６（ＩＬ−６）および腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）レベルの変化を測定することによって検査した。
【０７４７】
インターロイキン−６（ＩＬ−６）は多機能性サイトカインであり、その主要な作用には、免疫グロブリン合成の増進、Ｔ細胞の活性化、および急性期タンパク質合成のモジュレーションが含まれる。単球、マクロファージ、内皮細胞および線維芽細胞を含む多くの異なるタイプの細胞がＩＬ−６を生成することが知られており、これらの細胞におけるＩＬ−６遺伝子の発現は、様々な誘導物質によって調節される。インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）は、ＩＬ−６遺伝子発現の公知の重要な２つの誘導物質である。他の誘導物質には、プロテインキナーゼＣのアクチベーター、カルシウムイノフォアＡ２３１８７、および細胞内サイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）レベルの上昇を引き起こす様々な薬剤が含まれる。
【０７４８】
腫瘍壊死因子（ＴＮＦ；ＴＮＦ−αとも称される）は全身性炎症に関与するサイトカインであり、急性期反応を刺激するサイトカイン群の一員である。複数の研究で、ＴＮＦ−αが細胞内の３つの異なるシグナル伝達経路、即ち、１）ＮＦ−κＢ経路、２）ＭＡＰＫ経路および３）死のシグナル伝達経路、を介してＩＬ−６の発現を誘発することが示された。
【０７４９】
図２０に示す通り、腹腔内（ＢＬＥＯ＋（ＩＰ））または霧状化（ＢＬＥＯ＋ＭＭＩ−０１００（ＮＥＢ））ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の投与は、特発性肺線維症のブレオマイシンマウスモデルでのＴＮＦ−α（Ａ、上パネル）およびＩＬ−６（Ｂ、下パネル）の両方の血漿レベルを有意に低下させた。
【０７５０】
実施例１１．ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の全身または局所投与は、ブレオマイシン傷害により顕著に瘢痕化されたネズミ肺での筋線維芽細胞活性化蓄積を効果的に遮断する
特発性肺線維症（ＩＰＦ）の診断基準は、線維症病変の筋線維芽細胞の蓄積および多量のアルファ−平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）（筋線維芽細胞活性化のマーカー）の発現である。さらに、活性化筋線維芽細胞は、肺実質の硬性および肺機能悪化を部分的に担う。
【０７５１】
それゆえ、ブレオマイシン傷害肺のα−ＳＭＡの発現レベルを、全身的に（腹腔内投与による）または局所的に（霧状化による）ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）で処置されたブレオマイシン傷害マウスの肺で評価した。図２１に示す通り、α−ＳＭＡのレベルは、未処置ブレオマイシン傷害肺のα−ＳＭＡのレベルと比較して、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）で処置された肺で有意に低減された。
【０７５２】
実施例１２．インビトロのＴＧＦ−β１誘発性筋線維芽細胞活性化のモジュレートにおけるＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の用量応答試験
特発性肺線維症（ＩＰＦ）の主要な診断基準は、極めて多量のマトリックスタンパク質（コラーゲン、フィブロネクチンおよびマトリックスメタロプロテイナーゼを含む）を分泌する活性化筋線維芽細胞と共に、非典型でアポトーシス性の上皮細胞の存在である（Ｈｏｒｏｗｉｔｚ，  Ｊ  ａｎｄ  Ｔｈａｎｎｉｃｋａｌ，  Ｖ．，  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ５（５）：３２５−４２，  ２００６）。正常な創傷治癒過程の下では、一時的足場として臨時のマトリックスが筋線維芽細胞によって形成される。この臨時のマトリックスの収縮が、その後の再上皮形成および最終的な創傷治癒をもたらす。しかし、活性化された筋線維芽細胞がアポトーシスに耐性である場合、生じた極めて多量のコラーゲン沈着は、マトリックスの安定化をもたらす（Ｔｏｍａｓｅｋ，  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ３（５）：  ３４９−６３，  ２００２）。抑制されない筋線維芽細胞増殖、活性化およびアポトーシス耐性の最終結果は、コラーゲン沈着のために安定化したマトリックスを有する線維症病変であり、したがって最終的には肺構造のねじれをもたらす（Ｙａｍａｓｈｉｔａ，  Ｃ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，  １７９（４）：  １７３３−４５，  ２０１１）。
【０７５３】
それゆえ、線維芽細胞は瘢痕形成に関与する重要な細胞であるため、筋線維芽細胞活性化に及ぼすＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の影響を、ＴＧＦ−βで処置されたヒト胎児肺線維芽細胞（ＩＭＲ−９０細胞）培養物中でα−平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）およびフィブロネクチンのタンパク質レベルを調べることによって評価した。図２２および２３に示される通り、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）は、ＴＧＦ−βによって誘導された筋線維芽細胞活性化を、α−平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）（図２２）およびフィブロネクチン（図２３）の両レベルの低下によって示される通り、用量依存的様式で効果的に予防した。
【０７５４】
対照的に、ＭＭＩ−０２００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＮＲＱＬＧＶＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）は、筋線維芽細胞活性化マーカーであるα−平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）（図２１）およびフィブロネクチン（図２３）のタンパク質レベルに変化がないことによって示される通り、検査された用量ではＴＧＦ−βを介した筋線維芽細胞活性化に影響を与えなかった。理論に拘束されるわけではないが、これらの結果から、（１）記載された本発明のＭＫ２阻害性ペプチドが特定のキナーゼ群に対して阻害活性範囲を示し得る；（２）ＭＭＩ−０１００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）およびＭＭＩ−０２００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）はＭＫ２および他のキナーゼを分別的に阻害でき、それは、適用される用量に応じて、この阻害活性範囲に寄与する；（３）α−平滑筋アクチンを調節する代償性経路が存在する可能性がある；（４）筋線維芽細胞形成および／または遊走もまた、活性損傷ではなくむしろ線維症の修復期の部分であり得る；さらに（５）したがって特定レベルのＭＫ２活性が、この過程を起こすのに必要である（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ，  ３７：  ５０７−５１７，  ２００７）、ということが示唆される。
【０７５５】
加えて、記載された本発明のＭＫ２阻害性ペプチドは、ＭＫ２下流の標的ＨＳＰＢ１の基質結合部位から誘導された。したがって、それらは、ＨＳＰＢ１に対しＭＫ２のキナーゼ活性を拮抗的に阻害できる。理論に拘束されるわけではないが、線維症に対するＭＭＩ−０２００（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９）の分別的効果は、その配列相違、ＨＳＰＢ１結合部位に対するその相同性、および異なる標的タンパク質結合部位に対するＭＫ２キナーゼ活性のその分別的阻害に起因する可能性がある。
【０７５６】
実施例１２．ネズミ肝線維症モデルにおける肝線維症への、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）および抗ウイルス薬、例えばソホスブビル（Ｓｏｖａｌｄｉ（登録商標））と併用されたＭＭＩ−０１００の有効性
実験的肝炎症および線維形成を誘導するのに最も一般的に用いられるアプローチは、マウスにおける四塩化炭素（ＣＣｌ4）の定期的投与である（Ｌｉｅｄｔｋｅ  Ｃ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ  ＆  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｐａｉｒ，  ２０１３；  ６：１９）。ＣＣｌ4モデルは、炎症、再生、線維形成、および潜在的な線維症退縮を含むヒト肝線維症の重要な特性の全てに類似する（Ｌｉｅｄｔｋｅ  Ｃ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ  ＆  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｐａｉｒ，  ２０１３；  ６：１９；  Ｈｅｉｎｄｒｙｃｋｘ  Ｆ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｐａｔｈｏｌ．，  ２００９；  ９０：  ３６７−３８６；  Ｉｒｅｄａｌｅ  Ｊ  Ｐ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．，  １９９８；  １０２：  ５３８−５４９；  Ｋｉｓｓｅｌｅｖａ  Ｔ，  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＮＡＳ，  ２０１２；  １０９：  ９４４８−９４５３）。ほとんどの試験が、豊富な過去の発表との良好な比較性、優れた再現性および動物への軽度の負荷を理由に、マウスにおいて有毒な肝線維症を誘発するＣＣｌ4モデルを依然として頼りにしている（Ｌｉｅｄｔｋｅ  Ｃ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ  ＆  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｐａｉｒ，  ２０１３；  ６：１９）。
【０７５７】
病原体フリーの８〜１０週齢雌ＢＡＬＢ／ｃマウスを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（マサチューセッツ州ウィルミントン所在）から得ることができる。マウスを３群に、つまりＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはその機能的均等物を受ける群１；ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはその機能的均等物＋ソホスブビル（Ｓｏｖａｌｄｉ（登録商標））、ＨＣＶをブーストされたプロテアーゼ阻害剤（ＡＢＴ−４５０、ＡｂｂＶｉｅ）、ノンヌクレオシドＮＳ５Ｂ阻害剤（ダサブビル、ＡＢＴ−３３３、ＡｂｂＶｉｅ）、ＮＳ５ａ阻害剤（オムビタスビル、ＡＢＴ−２６７、ＡｂｂＶｉｅ）、ＡＢＴ−４５０／ｒ（ＡＢＴ−４５０とリトナビルの併用）、ＡＢＴ−２６７を共配合されたＡＢＴ−４５０、ソホスブビルを配合されたＡＢＴ−４５０、リバビリン、またはそれらの組み合わせのうちの１つを受ける群２；リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を受ける群３（対照群）に、分割できる。マウスは、ＣＣｌ4（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス所在）（コーン油で希釈された０．５〜２ｍＬ／ｋｇ体重）を週２〜３回で４〜６週間、腹腔内注射され得る。ＣＣｌ4注射の際に、群１のマウスは、ＭＭＩ−０１００または機能的均等物をＰＢＳ  １００μＬ中で腹腔内に投与され、群２は、ＭＭＩ−０１００または機能的均等物＋抗ウイルス薬をＰＢＳ  １００μＬ中で腹腔内に（例えば、３、３０、１００、３００ｎｇ／ｋｇ）投与され、群３は、ＰＢＳ  １００μＬを腹腔内に投与され得る。試料は、試験期間を通して採取できる（例えば、血液試料を、各腹腔内注射の直前に尾静脈から採取できる）。試験終了時に、肝線維症に及ぼすＭＭＩ−０１００または機能的均等物、およびＭＭＩ−０１００または機能的均等物＋抗ウイルス薬の影響を決定するために、マウスを麻酔し殺処分の前に血液および肝組織試料を採取できる。
【０７５８】
例えば、肝機能は、市販のキットを用い、製造業者（例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス所在）の使用説明書に従って、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、ガンマ−グルタミルトランスフェラーゼ（ＧＧＲ）およびアルブミンの血清レベルを測定することによって決定できる。
【０７５９】
肝線維症のレベルは、肝組織において、例えばヒドロキシプロリン量、組織学的検査、免疫組織化学的検査、ならびに線維症化促進および炎症バイオマーカーのｍＲＮＡ発現によって、評価できる。
【０７６０】
肝組織試料のヒドロキシプロリン量は、以下の手法で決定できる。肝試料１００ｍｇを、６Ｍ  ＨＣｌ中、１００℃で２４時間加水分解できる。次に試料を２，０００ｒｐｍ、４８℃で５分間遠心分離する。上清２ｍＬを採取して、ｐＨ７〜８になるまで１％フェノールフタレイン５０ｍＬおよび８Ｎ  ＫＯＨと混合する。試料５ｍＬを５６０ｎｍで分光光度計に供して、ヒドロキシプロリン量を決定できる。
【０７６１】
組織学的検査および免疫組織化学的検査を、以下の通り実施できる。肝組織を、１０％中性緩衝ホルムアルデヒドで固定して、パラフィンに包埋できる。パラフィン切片をマッソン・トリクローム染色（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス所在）および過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、マサチューセッツ州ビレリカ所在）で染色して、コラーゲン沈着を検査できる。α−平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）およびコラーゲンタンパク質の特異的染色は、抗α−ＳＭＡならびに抗コラーゲンＩおよびＩＩＩ抗体（それぞれ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネソタ州ミネアポリス所在；ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、マサチューセッツ州ビレリカ所在；およびＡｂｃａｍ、マサチューセッツ州ケンブリッジ所在）を用いて実施できる。倍率１００×の顕微鏡像を、マッソン・トリクローム、コラーゲンＩ、コラーゲンＩＩＩおよびα−ＳＭＡで染色された肝臓切片について獲得できる。画像を３チャンネル（赤色、緑色および青色）で１ピクセルあたり２４ビットで識別でき、マッソン・トリクローム、コラーゲンＩ、コラーゲンＩＩＩおよびα−ＳＭＡにより明らかにされる線維症性変性の割合の定量的評価を、画像で実施できる。色付きの画像を、ＩｍａｇｅＪ（Ｗｙｎｅ  Ｒａｓｂａｎｄ，  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、メリーランド州ベセスダ所在）およびＭａｔｌａｂ（Ｔｈｅ  ＭａｔｈＷｏｒｋｓ  Ｉｎｃ．、マサチューセッツ州ネイティック所在）を用いて処理してマップを作製し、マッソン・トリクローム、コラーゲンＩ、コラーゲンＩＩＩおよびα−ＳＭＡでによって染色されたエリアのみを示すことができる。マップは、肝臓のＥＣＭ中に沈着された線維症成分（複数可）に対応する染色エリアとして定義され得る。線維症のバイオマーカー指数（Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  Ｉｎｄｅｘ  ｏｆ  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ）（ＢＩＦ）を、Ｓａｌａｚａｒ−Ｍｏｎｔｅｓら（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  ２００８；  ５９５（１−３）：  ６９−７７）およびＳａｌｇａｄｏら（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，  ２０００；  ２：  ５４５−５５１）によって記載された通り、全画像に対するバイオマーカー（例えば、マッソン・トリクローム、コラーゲンＩ、コラーゲンＩＩＩおよびα−ＳＭＡ）のマップの割合として計算できる。
【０７６２】
ＭＣＰ−１、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦβ、フィブロネクチン−１、α−ＳＭＡ、結合組織増殖因子−１（ＣＴＧＦ−１）を含む線維症化促進および炎症バイオマーカーのｍＲＮＡ発現を、Ｌｕｍｉｎｅｘ（登録商標）（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州カールズバッド所在）アッセイにより、製造業者の使用説明書に従って評価できる。相対的評価を、ヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＰＲＴ）に正規化できる。
【０７６３】
データは、平均＋平均の標準誤差（ＳＥＭ）として表され得る。統計解析を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標）（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，  Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サンディエゴ所在）などのコンピュータソフトウェアを用いて実施できる。群間の処置差は、対応のないｔ検定およびＡＮＯＶＡによって解析できる。
【０７６４】
実施例１３．ネズミ腎線維症モデルにおける腎線維症へのＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の有効性
ますます使用され評判の良い腎線維症動物モデルは、完全な一側尿管結紮（ＵＵＯ）である（Ｃｈｏ  Ｍ  Ｈ，  Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ．  Ｐｅｄｉａｔｒ．  ２０１０；  ５３（７）：  ７３５−７４０）。ＵＵＯ手順は、尿細管間質性線維症をもたらすヒト閉塞性腎症の異なるステージ：細胞浸潤、尿細管増殖およびアポトーシス、上皮間葉転換（ＥＭＴ）、（筋）線維芽細胞蓄積、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）沈着の増加ならびに尿細管萎縮を、加速された様式で模倣するという利点を有する（Ｂａｓｃａｎｄｓ  Ｊ−Ｌ  ａｎｄ  Ｓｃｈａｎｓｔｒａ  Ｊ  Ｐ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．  ２００５；  ６８（３）：  ９２５−９３７）。これらの病理学的特色は急速に表れ（全てがＵＵＯ手順後約１週間以内）、かつ１つの実験と別の実験で高度に再現性がある（Ｂａｓｃａｎｄｓ  Ｊ−Ｌ  ａｎｄ  Ｓｃｈａｎｓｔｒａ  Ｊ  Ｐ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．  ２００５；  ６８（３）：  ９２５−９３７）。
【０７６５】
病原体フリーの７〜８週齢雄ＣＤ−１マウスを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（マサチューセッツ州ウィルミントン所在）から得ることができる。マウスを３群に、つまりＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）または機能的均等物を受ける群１；リン酸緩衝生理食塩水を受ける群２（対照群）；偽手術（即ち、結紮術なし）が実施されＰＢＳを受ける群３に、分割できる。ＵＵＯは、Ｙａｍａｓｈｉｔａら（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  ２００４；  １５（１）：  ９１−１０１）によって記載された通り実施できる。手短に述べると、ペントバルビタール（５０ｍｇ／ｋｇ体重）の腹腔内注射による全身麻酔導入の後、腹腔を正中切開によって露出させることができ、右尿細管を４−０シルクにより３点で結紮できる。０〜５日目に、群１のマウスはＰＢＳ  １００μＬ中のＭＭＩ−０１００または機能的均等物を腹腔内投与され得る（例えば、３、３０、１００、３００ｎｇ／ｋｇ）。群２および群３マウスは、ＰＢＳ  １００μＬを腹腔内に投与され得るる。試料は、試験期間を通して採取できる（例えば、血液試料を、各腹腔内注射の直前に尾静脈から採取できる）。５日目に、腎線維症に及ぼすＭＭＩ−０１００または機能的均等物の影響を決定するために、マウスを麻酔し殺処分の前に血液および腎組織試料を採取できる。ＵＵＯは、骨盤および近位尿細管の弛緩、ならびに遠位尿細管の破裂の観察によって確認できる。結紮が実施されない偽手術の腎臓を対照として用いることができる。
【０７６６】
試験のエンドポイントとしては、例えば体重および腎臓の重量；ピクロシリウスレッド染色の組織学的定量画像解析を介して評価され（Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｉｎｃ．，  ｃａｔａｌｏｇ  ｎｏ．  ２４９０１−２５０、ペンシルバニア州ウォリントン所在）（例えば、２００×光学顕微鏡測定を利用して盲検法で取得および評価される１０枚の画像／深さ／腎臓で、腎皮質エリアの６０〜７０％を採取できる）、閉塞腎からの３つの解剖学的に異なる（例えば、２００〜２５０μｍ離れた）組織切片、または深さの平均陽性染色として表現される複合的コラーゲン体積分率（ＣＶＦ（全画像面積に対する％））によって定量される閉塞腎における線維症；生化学赤分析によって評価される凍結腎皮質組織生検のヒドロキシプロリン量；ならびにヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＰＲＴ）に正規化される相対的発現と共に、Ｌｕｍｉｎｅｘ（登録商標）（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州カールズバッド所在）アッセイにより、製造業者の使用説明書に従って評価されるＭＣＰ−１、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、α−ＳＭＡおよび結合組織増殖因子−１（ＣＴＧＦ−１）などの線維症化促進および炎症バイオマーカーのｍＲＮＡ発現、を挙げることができる  。
【０７６７】
データは、平均＋平均の標準誤差（ＳＥＭ）として表され得る。統計解析を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標）（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，  Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サンディエゴ所在）などのコンピュータソフトウェアを用いて実施できる。群間の処置差は、対応のないｔ検定およびＡＮＯＶＡによって解析できる。
【０７６８】
実施例１４．高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）における血管線維症へのＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）の有効性
高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）が、血管線維症を試験するのに一般に用いられる（Ｇａｏ  Ｄ  ｅｔ  ａｌ．，  ＰＰＡＲ  Ｒｅｓ．  ２０１２；  ２０１２：  ８５６４２６）。この試験では、８〜１０週齢雄ＳＨＲラットおよび週齢を合わせた雄Ｗｉｓｔａｒ  Ｋｙｏｔｏ（ＷＫＹ）ラットを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（マサチューセッツ州ウィルミントン所在）から得ることができる。ＳＨＲは、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）または機能的均等物を受け（実験群１）；ＷＫＹラット（対照群１）は、ＭＭＩ−０１００（ＹＡＲＡＡＡＲＱＡＲＡＫＡＬＡＲＱＬＧＶＡＡ；ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）または機能的均等物を受け；ＳＨＲラットは、ビークル（ＰＢＳ）のみを受けることができる（対照群２）。実験群１および対照群１のラットは、ＰＢＳ  １００μＬ中のＭＭＩ−０１００または機能的均等物（例えば、３、３０、１００、３００ｎｇ／ｋｇ）を腹腔内に投与され、対照群２は、ビヒクルのみを受けることができる。試料は、試験期間を通して採取できる（例えば、血液試料を、各腹腔内注射の直前に尾静脈から採取できる）。試験終了時に、血管線維症に及ぼすＭＭＩ−０１００または機能的均等物の影響を決定するために、ラットを麻酔し殺処分の前に血液および血管組織試料を採取できる。
【０７６９】
例えば、ＰＰＡＲγ、ＭＣＰ−１、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、α−ＳＭＡおよび結合組織増殖因子−１（ＣＴＧＦ−１）を含む線維症化促進および炎症バイオマーカーのｍＲＮＡ発現を、Ｌｕｍｉｎｅｘ（登録商標）（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カリフォルニア州カールズバッド所在）アッセイにより、製造業者の使用説明書に従って評価できる。相対的評価を、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）に正規化できる。
【０７７０】
ＣＴＧＦおよびＴＧＦ−βを含む線維症化促進バイオマーカーのタンパク質発現を、例えばウェスタンブロットによって評価できる。手短に述べると、タンパク質試料（２０μｇ）を１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥで分離して、セミドライシステム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ、カリフォルニア州ハーキュリーズ所在）においてポリフッ化ビニリデン膜に移動させ、ＣＴＧＦ（１：５００）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カリフォルニア州サンタクルーズ所在）、ＴＧＦ−β（１：５００）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カリフォルニア州サンタクルーズ所在）およびβ−アクチン（１：２０００）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カリフォルニア州サンタクルーズ所在）に対する抗体と共にインキュベートできる。タンパク質を、化学発光（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｏｒｐ．、イリノイ州ロックフォード所在）によって視覚化して、Ｇｅｌ  Ｄｏｃ  ２０００システム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いて定量できる。
【０７７１】
ＰＰＡＲγおよびコラーゲンＩＩＩ型（Ｃｏｌ  ＩＩＩ）を含む線維症化促進バイオマーカーのタンパク質発現を、例えば免疫組織化学的検査によって評価できる。手短に述べると、パラフィン包埋されたラット胸部大動脈切片を、ＰＰＡＲγ（１：３００）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｉｎｃ．，イリノイ州シカゴ所在）および  Ｃｏｌ  ＩＩＩ（１：２５０）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｉｎｃ．，イリノイ州シカゴ所在）に対する一次抗体と共に４℃で一晩インキュベートし、その後、ビオチン化されアフィニティー精製されたＩｇＧ（Ｚｙｍｅｄ、米国）二次抗体と共に３７℃で１時間インキュベートできる。ストレプトアビジン−酵素コンジュゲートを連続的に２０分間添加でき、試料を基質３’、３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス所在）と共にインキュベートした後、ヘマトキシリン対比染色（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス所在）を実施できる。定量分析を、Ｑｗｉｎ  ５５０定量画像解析システム（Ｌｅｉｃａ、ドイツ）を用いて、グレースケールを測定することによって実施できる。陰性対照としては、一次抗体と共にインキュベートされていないパラフィン包埋切片を挙げることができる。
【０７７２】
データは、平均＋平均の標準誤差（ＳＥＭ）として表され得る。統計解析を、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標）（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，  Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サンディエゴ所在）などのコンピュータソフトウェアを用いて実施できる。群間の処置差は、対応のないｔ検定およびＡＮＯＶＡによって解析できる。
【０７７３】
記載された本発明は、その具体的な実施形態を参照しながら記載されたが、本発明の真の主旨および範囲を逸脱することなく様々な変更を実施し得ること、および均等物で代用し得ることは、当業者には理解されるはずである。加えて、記載された本発明の目的とする主旨および範囲に対して、多くの改変を実施して、個々の状況、材料、物質組成、工程、工程ステップまたは複数のステップを採用することが可能である。そのような改変の全てが、添付の特許請求の範囲に含まれるものとする。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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