(57)【要約】  本出願は、アレルギー、例えば、ピーナッツアレルギーの患者を治療するための組成物および方法に関する。この方法は、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）およびピーナッツアレルゲンを舌下経路を介して患者に投与することを含む。
2018516867.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数のグルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）粒子、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、及び治療有効量のピーナッツタンパク質を水性担体中に含み、  ＤＰＰＣに対するＧＬＡのモル比が約１：１〜約１：３の範囲であり、ピーナッツタンパク質の少なくとも幾らかは、少なくとも１種の脂質粒子中に配置しているか、若しくは水性担体中に遊離しているか、又は両方である医薬組成物。
【請求項２】
医薬組成物が固体又は半固体の投与形態である、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）とピーナッツタンパク質とを含む医薬組成物。
【請求項３】
脂質粒子が、リポソーム又はミセルである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
水性担体が水を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
複数のＧＬＡ粒子が、Ｚ平均直径約１６ｎｍ〜約１８００ｎｍを有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
複数のＧＬＡ粒子が、Ｚ平均直径約８０ｎｍ〜約５００ｎｍを有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
組成物中のＧＬＡの濃度が約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項８】
組成物中のＧＬＡの濃度が約０．０２ｍｇ／ｍＬ〜０．２ｍｇ／ｍＬである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
組成物中のＧＬＡの濃度が約０．１６ｍｇ／ｍＬである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
組成物中のＧＬＡ対ＤＰＰＣのモル比が約１：２である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
組成物中のピーナッツタンパク質の濃度が、約５μｇ／ｍＬ〜約２５，６００μｇ／ｍＬである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
組成物中のピーナッツタンパク質の濃度が、約１，０００μｇ／ｍＬ〜約７，０００μｇ／ｍＬである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
組成物中のピーナッツタンパク質の濃度が約５，０００μｇ／ｍＬである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、  Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７の１種又は、それ以上を含む請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７の１種又は、それ以上から成る請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３及びＡｒａ  ｈ６を含む、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６を含む、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６を含む、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
医薬組成物が液体である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
医薬組成物が半固体である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
医薬組成物が錠剤の形態である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
医薬組成物がゲルカプセル剤の形態である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
医薬組成物を舌下液滴又は舌下噴霧として処方する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
医薬組成物が生体付着成分を含む、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
医薬組成物が、小袋包装形態の多粒子顆粒又はコーティングした微小球体である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
医薬組成物が速崩壊錠（ＦＤＴ）である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
ＦＤＴが超崩壊剤を含む、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
超崩壊剤が、架橋セルロース、架橋ポリビニルピロリドン、架橋デンプン、及び架橋アルギン酸から成る群から選択される、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
ゲル化剤を更に含む、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
結合剤を更に含む、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
滑剤を更に含む、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
抗付着剤を更に含む、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
香味剤、甘味剤、若しくは着色剤、又はそれらの任意の組合せを更に含む、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
組成物が薄膜である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
組成物が可塑化親水コロイドを含む、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
ＧＬＡ若しくはピーナッツタンパク質、又はその両方を薄膜内に配置した、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
ＧＬＡ若しくはピーナッツタンパク質、又はその両方を薄膜の表面上に配置した、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
ＧＬＡ若しくはピーナッツタンパク質、又はその両方を、薄膜の内部と表面上、の両方に配置した、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
アレルギー患者の治療に有効量の複数のグルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）粒子及びピーナッツタンパク質をアレルギーを有する患者に舌下投与することを含む、アレルギー患者を治療する方法。
【請求項４０】
１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）を患者の舌下に投与することを更に含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
複数のＧＬＡ粒子を第１の医薬組成物として処方し、ピーナッツタンパク質を第２の別個の医薬組成物として処方する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
前記の第１及び第２の医薬組成物を同時に投与する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
第２の製剤の前に、第１の製剤を患者に投与する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
第１の製剤の前に、第２の製剤を患者に投与する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
ＧＬＡ及びピーナッツタンパク質を、複数のＧＬＡ粒子とピーナッツタンパク質とを水性担体中に含む単一の医薬組成物中に処方する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４６】
医薬組成物が１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）を更に含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
医薬組成物中のＧＬＡ対ＤＰＰＣのモル比が約１：１〜約１：３の範囲である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
アレルギーが、ピーナッツアレルギーである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４９】
アレルギーが、カバノキ花粉に対するアレルギーである、請求項３９に記載の方法。
【請求項５０】
アレルギーが、桃及び桃と同族の果実に対するアレルギーである、請求項３９に記載の方法。
【請求項５１】
グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及びピーナッツタンパク質を含む医薬組成物をアレルギーを有する患者に舌下投与することを含み、医薬組成物が固体又は半固体の剤形であるアレルギー患者を治療する方法。
【請求項５２】
医薬組成物が薄膜である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
医薬組成物が、錠剤又はカプセル錠である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
アレルギーが、ピーナッツアレルギーである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
アレルギーが、カバノキ花粉に対するアレルギーである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５６】
アレルギーが、桃及び桃と同族の果実に対するアレルギーである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５７】
方法が、医薬組成物を患者に投与する前に、患者に対する好塩基球活性化試験を実施することを含む、請求項３９又は５１に記載の方法。
【請求項５８】
患者が成年のヒトである、請求項３９又は５１に記載の方法。
【請求項５９】
患者が未成年のヒトである、請求項３９又は５１に記載の方法。
【請求項６０】
患者が４歳又はそれより年長である、請求項３９又は５１に記載の方法。
【請求項６１】
医薬組成物の製造方法であり、その方法は
ａ  グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及び１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）をクロロホルム中、モル比１：２で共溶解することにより、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成し、
ｂ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物にピーナッツアレルゲンを添加することにより、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／ピーナッツタンパク質混合物を形成し、
ｃ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／ピーナッツタンパク質混合物からクロロホルムを除去し、
ｄ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／ピーナッツタンパク質混合物に水を添加し、次に
ｅ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／ピーナッツタンパク質混合物を攪拌することによる医薬組成物の形成を含む。
【請求項６２】
医薬組成物の製造方法であり、その方法は
ａ  グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及び１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）をクロロホルム中、モル比１：２で共溶解することにより、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成し、
ｂ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物からクロロホルムを除去し、
ｃ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物に水を添加し、
ｄ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を攪拌し、次に
ｅ  ピーナッツタンパク質をＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物に添加することによる医薬組成物の形成を含む。
【請求項６３】
医薬組成物の製造方法であり、その方法は
ａ  グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及び１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）を水中、モル比１：２で混合することにより、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成し、
ｂ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を７０℃で攪拌し、次に
ｃ  ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物にピーナッツタンパク質を添加することにより、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／ピーナッツタンパク質混合物を形成し、これによる医薬組成物の形成を含む。
【請求項６４】
医薬組成物の製造方法であり、その方法は
ａ  グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）と界面活性剤とを混合し、
ｂ  ＧＬＡ／界面活性剤混合物に水を添加し、
ｃ  ＧＬＡ／界面活性剤混合物を攪拌し、次に
ｄ  ピーナッツタンパク質をＧＬＡ／界面活性剤混合物に添加することによる医薬組成物の形成を含む。
【請求項６５】
工程（ａ）における水が５０℃〜７０℃である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
攪拌が超音波処理を含む、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項６７】
攪拌が、マイクロ流体化若しくは高圧均質化、又はその両方を含む、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項６８】
方法が、医薬組成物を圧縮成形して錠剤を形成することを更に含む、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項６９】
方法が医薬組成物を凍結乾燥又は噴霧乾燥することを更に含む、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７０】
方法が、溶液流延法、半凝固成形法、ホットメルト押出法、固体分散押出法及び圧延法から成る群から選択した方法によりポリマー薄膜を形成し、次に医薬組成物を薄膜内に、及び／又は薄膜の少なくとも１つの表面上に配置することを更に含む、請求項６１から６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７１】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７の１種又はそれ以上を含む、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７２】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７から成る、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７３】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３及びＡｒａ  ｈ６から成る、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７４】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６から成る、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７５】
ピーナッツタンパク質が、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６から成る、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７６】
ピーナッツタンパク質をＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物に添加する前に、ピーナッツタンパク質中のピーナッツアレルゲンに対する好塩基球活性化試験を実施し、ピーナッツアレルゲンの効能を測定する工程を更に含む、請求項６１〜６４の何れか１項に記載の方法。
【請求項７７】
界面活性剤が、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート−８０、ポロキサマー４０７若しくはポロキサマー１８８、又はレシチンとタウロコール酸塩との組合せである、請求項６４に記載の方法。
【請求項７８】
界面活性剤がポリソルベート−８０であり、かつ混合物が更に５０％グリセロール又は６０％グリセロールを含む、請求項６４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本出願は、２０１５年４月２３日に出願の米国仮出願第６２／１５１，９２２号、２０１５年７月１７日に出願の米国仮出願第６２／１９４，０６７号、及び２０１６年３月３日に出願の米国仮出願第６２／３０３，２２４号に基づく優先権を主張し、これらは各々、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。
【０００２】
本発明は、アレルギー、例えばピーナッツアレルギー、の治療に関し、及びグルコピラノシル脂質Ａ（ＧＬＡ）及びピーナッツアレルゲンなどのアレルゲンを含む、アレルギーの治療用として有用な組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
ピーナッツアレルギーは、ピーナッツに通常存在する無害な抗原に対して異常な２型Ｔヘルパー（Ｔｈ−２）免疫応答をすることにより特徴付けられる。北米の就学児童のピーナッツアレルギーの罹患率は約１％であり、しばしばこの状態は生涯に亘り伴う。西洋諸国では、食物に関連する致命的なアレルギー反応で最も一般的な原因である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、少なくとも部分的に、ＴＬＲ４アゴニストを、ピーナッツアレルゲンのようなアレルゲンと共に、舌下的に、投与すると、病原性のアレルゲン特異的免疫応答を調節し得るという判断に基づいている。具体的には、ピーナッツアレルギーのようなアレルギー患者を治療するために、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）をアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）と共に投与することが出来る。開示する医薬組成物は、ＧＬＡ及びピーナッツタンパク質の片方又は両方を含み、舌下免疫療法（ＳＬＩＴ）によるアレルギー（例えば、ピーナッツアレルギー）の治療を意図している。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
従って、一態様において、本明細書は、複数のグルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）粒子（例えば、ＧＬＡリポソーム、ミセル、凝集体、又はそれらの混合物）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）及び、治療有効量のアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）を担体（例えば、水性担体、即ち水が溶媒として作用する担体）中に、含み、ＧＬＡ対ＤＰＰＣのモル比は、約１：１〜約１：３の範囲にあり、しかも、アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）の少なくとも幾らかは、少なくとも部分的に（例えば、完全に）、及び／又は少なくとも脂質粒子（例えば、リポソーム）の少なくとも１種、の中に、及び／又は、の上に配置され、及び／又は、担体（例えば、水性担体）中に遊離し得る医薬組成物を提供する。
【０００６】
別の態様では、本明細書は、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及びアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）を含む医薬組成物を提供するものであり、その医薬組成物は固体又は半固体投与形態である。
【０００７】
本明細書に記載する医薬組成物の実施形態では、水性担体が使用される場合、水性担体は水を含み得る。  ＧＬＡを含む組成物は、複数の脂質粒子、例えばリポソーム、ミセル及び／又は凝集体等を含む形態であり得る。複数の脂質粒子の平均サイズ（例えば、脂質粒子の流体力学的平均直径（Ｚ−平均直径））は、約１０ｎｍ〜約２０００ｎｍ、例えば、約１６ｎｍ〜約１８００ｎｍ、約５０ｎｍ〜約１０００ｎｍ、約８０ｎｍ〜約５００ｎｍ、例えば、約９０ｎｍ、約１００ｎｍ、約２００ｎｍ、約３００ｎｍ又は約４００ｎｍである。ＧＬＡを含む組成物は、コロイド状分散物中に存在し得る。粒子サイズはＭａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒを使用して測定出来、これは測定粒子の平均流体力学的直径（Ｚ平均直径）及び粒子の多分散指数（ＰＤＩ）を提供する。本明細書に記載した幾つかの実施形態における任意の医薬組成物において、アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質及び／又は他のアレルゲン）は、脂質粒子内に含まれ、かつ、脂質粒子内に完全に封入されるか、又は脂質粒子内に部分的に封入されるか、若しくはその両方であり、及び／又は、粒子表面上に配置され得る。他の実施形態では、幾つかのアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）は、脂質粒子によって封入され、及び／又は部分的に封入され、一方、他のものは、医薬組成物中に遊離し、かつ、封入されず、及び／又は、脂質粒子内に部分的に封入される。更に他の実施形態において、実質的に全てのアレルゲン、例えば、ピーナッツタンパク質は、医薬組成物中で遊離しており、脂質粒子内に封入されないか、又は部分的に封入されている。
【０００８】
本明細書に記載した医薬組成物中のＧＬＡの濃度は、例えば約０．２μｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬ、例えば約２μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬ、１５０μｇ／ｍＬ、２００μｇ／ｍＬ、２５０μｇ／ｍＬ、３００μｇ／ｍＬ、４００μｇ／ｍＬ、５００μｇ／ｍＬ、０．８ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ又は約１．６ｍｇ／ｍＬでも良い。例えば、組成物中のＧＬＡの濃度は、約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬ、例えば、約０．０２ｍｇ／ｍＬ〜０．２ｍｇ／ｍＬ、又は０．１６ｍｇ／ｍＬでも良い。医薬組成物は、ＤＰＰＣ  ０．００１〜０．１％、例えばＤＰＰＣ  ０．０１〜０．０５％、例えばＤＰＰＣ  ０．０２〜０．０３％を含んで良い。例えば、組成物は、約ＤＰＰＣ  ０．０１０％、ＤＰＰＣ  ０．０１５％、ＤＰＰＣ  ０．０２０％、ＤＰＰＣ  ０．０２５％、ＤＰＰＣ  ０．０３０％、ＤＰＰＣ  ０．０３５％、ＤＰＰＣ  ０．０４０％、ＤＰＰＣ０．０４５％、又は約ＤＰＰＣ  ０．０５０％を含んでも良い。場合によっては、ＧＬＡ対ＤＰＰＣのモル比は約１：２であり得る。一実施形態では、ＧＬＡ組成物は、グリセロール等の保存剤を含む。例えば、ＳＬＩＴ製剤に使用するＧＬＡ組成物は、ＤＰＰＣ  ０．０２５％、グリセロール６０％及び水を含んで良い。
【０００９】
舌下投与のための医薬組成物中のピーナッツタンパク質の濃度は、約２μｇ／ｍＬ〜約２５，６００μｇ／ｍＬ、例えば、約２，０００μｇ／ｍＬ〜約７，０００μｇ／ｍＬ、例えば、約５，０００μｇ／ｍＬでも良い。幾つかの実施形態において、舌下投与のための医薬組成物中のピーナッツタンパク質の濃度は、約３μｇ／ｍＬ、約４μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ、約６μｇ／ｍＬ、約７μｇ／ｍＬ、約８μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ、約２０μｇ／ｍＬ、約２３μｇ／ｍＬ、約２４μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ、約２６μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、又は約２０ｍｇ／ｍＬである。幾つかの実施形態において、舌下投与のための医薬組成物中のピーナッツタンパク質の濃度は、約６．４ｍｇ／ｍＬ又は約１２．８ｍｇ／ｍＬである。例えば、本明細書に記載した医薬組成物中のピーナッツタンパク質の濃度は、約５μｇ／ｍＬ〜約２５，６００μｇ／ｍＬ又は約１，０００μｇ／ｍＬ〜約７，０００μｇ／ｍＬでも良い。
【００１０】
他のアレルゲンを、ピーナッツアレルゲンの代替物又は添加物として、本明細書に記載した医薬組成物又は医薬組成物の製造方法に含めることが出来る。例えば、場合により、ピーナッツアレルゲン以外の食物アレルゲンを含めても良い。このような食物アレルゲンの例には、ミルクアレルゲン（例えば、全乳又はその抽出物、カゼイン（例えば、αＳ１−カゼイン）及び／又はβ−ラクトグロブリン）、海産物アレルゲン（例えば、脊椎動物（例えば、サケ、タラ、サバ、イワシ、ニシン、アンチョビ、マグロ、マス、ハドック、ウナギ、及び／又はレイ）由来の、及び／又は、無脊椎動物（例えば、甲殻類（例えば、エビ、カニ、ザリガニ及び／又はロブスターアレルゲン）由来の、及び／又は軟体動物（例えば、クラム、ムール貝、カキ、タコ、イカ及び／又はホタテアレルゲン）由来のアレルゲン））、卵アレルゲン、マスタードアレルゲン、胡麻アレルゲン、大豆アレルゲン、小麦アレルゲン（例えばグルテン）、果実アレルゲン（Ｂｅｔ  ｖ１またはそのホモログ、脂質輸送タンパク質及び／又はプロフィリン、及び／又は苺、林檎、アボカド、ブルーベリー、デート、キウイフルーツ、桃、ラズベリー、無花果、葡萄、プラム、サクランボ、グレープフルーツ及び／又はプルーン由来のアレルゲン）、野菜アレルゲン（例えば、アルファルファ、カリフラワー、キュウリ、キノコ、大根、そら豆、ナス、ホウレンソウ、ズッキーニ、ブロッコリー、及び／又は胡椒アレルゲン）またはナッツアレルゲン（例えば、クルミ、アーモンド、カシュー、ピスタチオ及び／又はピーカンアレルゲン）が含まれ、これらの食品各々に対するアレルギーの治療を行なう。代替物として、又は添加物として、ハウスダストダニ（ＨＤＭ）アレルゲン、エアロアレルゲン（例えば、花粉アレルゲン）及び／又は草アレルゲンを、例えば季節性アレルギーのようなアレルギーの治療のために含んでも良い。更に、そのようなアレルゲンを含む組成物は、本明細書に記載したアレルギー（即ち、医薬組成物に含まれるアレルゲンに対するアレルギー）の治療方法に使用しても良い。
【００１１】
幾つかの実施形態において、医薬組成物は、ＧＬＡ約０．１μｇ〜約８０μｇ、例えば、ＧＬＡ  ０．５μｇ〜４０μｇ、例えば０．８μｇ〜２０μｇの用量を送達するように処方しても良い。幾つかの実施形態では、舌下医薬製剤は、約０．５μｇ、約１μｇ、約２μｇ、約５μｇ、約１０μｇ、約２０μｇ、約４０μｇ又は約５０μｇのＧＬＡを含んでも良い。
【００１２】
幾つかの実施形態では、本明細書に記載した医薬組成物は、約５０ｎｇ〜約３０ｇ又はそれ以上のピーナッツタンパク質、例えば、１００ｎｇ〜約２０ｇ又はそれ以上のピーナッツタンパク質、約３００ｎｇ〜約１５ｇ又はそれ以上のピーナッツタンパク質、約５００ｎｇ〜約１０ｇ又はそれ以上のピーナッツタンパク質、８００ｎｇ〜約９グラム又はそれ以上のピーナッツタンパク質、約１０００ｎｇ〜約８．５ｇ又はそれ以上のピーナッツタンパク質、約２μｇ〜約８．３グラム又はそれ以上のピーナッツタンパク質、例えば、約５μｇ、１０μｇ、２０μｇ、４０μｇ、８０μｇ、１００μｇ、１６０μｇ、２５０μｇ、３２０μｇ、５００μｇ、６４０μｇ、１０００μｇ、１２８０μｇ、２０００μｇ、２５６０μｇ、３０００μｇ  ４０００μｇ、５０００μｇ、５１２０μｇ、６０００μｇ、７０００μｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、５００ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、２０００ｍｇ又は約５０００ｍｇ、又はより多いピーナッツタンパク質の用量を送達するように処方される。組成物は、ｐＨ４〜ｐＨ８．５の範囲、例えば約ｐＨ４．５、ｐＨ５．５、ｐＨ７．５、又は約ｐＨ８．５の範囲でも良い。幾つかの実施形態において、組成物は、約ｐＨ８．０、ｐＨ８．１、ｐＨ８．２又は約ｐＨ８．３である。医薬組成物は、約１００μｇ〜約８グラム又はそれ以上のピーナッツタンパク質、例えば、約５００μｇ〜約７．５グラム又はそれ以上のピーナッツタンパク質の用量を送達するように処方し得る。
【００１３】
本明細書に記載した医薬組成物中のピーナッツタンパク質は、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、  Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６及びＡｒａ  ｈ１７、の一種又はそれ以上、若しくはそれらの任意の組合せ、を含み、又は、から成り得る。幾つかの実施形態では、医薬組成物に含まれるピーナッツアレルゲンは、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３及びＡｒａ  ｈ６から成る。他の実施形態では、医薬組成物に含まれるピーナッツアレルゲンは、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６から成る。更に他の実施形態では、医薬組成物に含まれるピーナッツアレルゲンは、ピーナッツアレルゲン成分Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６から成る。
【００１４】
本明細書に記載した医薬組成物は、例えば、液体、半固体、錠剤（例えば、速崩壊錠（ＦＤＴ））、ゲルカプセル、薄膜、舌下液滴、又は舌下噴霧の形態で良い。本明細書に記載した医薬組成物は、生体付着成分を含み得る。医薬組成物は、錠剤又は多粒子顆粒又はコーティングした微小球体の形態、例えば、小袋包装形態でも良い。本明細書に記載したＦＤＴは、超崩壊剤、例えば、架橋セルロース、架橋ポリビニルピロリドン、架橋デンプン、又は架橋アルギン酸、又はそれらの混合物を含んでも良い。本明細書に記載した組成物は、ゲル化剤、結合剤、滑剤、抗付着剤、香味剤、甘味剤、及び／又は着色剤、又はそれらの任意の組合せを含み得る。本明細書に記載した薄膜は、例えば、可塑化親水コロイドを含んでも良い。本明細書に記載したある種の薄膜では、ＧＬＡ又はアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）、又はその両方を薄膜内に配置しても良い。他の薄膜では、ＧＬＡ又はアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）、又はその両方が、薄膜の表面上に配置される。更に他の薄膜では、ＧＬＡ又はアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）、又はその両方が、薄膜の内部及び表面の両方に配置される。
【００１５】
別の態様では、本明細書は、アレルギーを有する患者に、複数のグルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）粒子およびアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）を、患者のアレルギーを治療するのに有効な量で舌下投与することを含む、患者のアレルギーを治療する方法を提供する。その方法は、患者に１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）を舌下投与することを更に含み得る。幾つかの実施形態において、複数のＧＬＡ粒子は、第１の医薬組成物として処方され、かつ、アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）は、第２の別個の医薬組成物として処方される。第１及び第２の医薬組成物は、例えば、同時に投与出来、又は第１の製剤を第２の製剤の前に、患者に投与することが出来、又は第２の製剤を第１の製剤の前に患者に投与することが出来る。他の実施形態において、ＧＬＡ及びアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）は、水性担体中で複数のＧＬＡ粒子及びアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）を含む単一の医薬組成物内に処方される。医薬組成物は、更に、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）を含み得て、場合によっては、医薬組成物中のＧＬＡ対ＤＰＰＣのモル比は、約１：１〜約１：３で良い。
【００１６】
別の態様では、本明細書は、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及びアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）を含む医薬組成物をアレルギーを有する患者に舌下投与することを含む、アレルギー患者を治療する方法を提供し、ここで、その医薬組成物は、固体又は半固体の剤形である。医薬組成物は、例えば、本明細書に記載したように、薄膜又は錠剤又はカプセルで良い。
【００１７】
本明細書に記載したアレルギーの治療方法には、ピーナッツアレルゲンが治療に含まれており、そのアレルギーは、ピーナッツアレルギー、カバノキ花粉に対するアレルギー、桃及び桃と同族の果実アレルギー、又はそれらの組合せでも良い。
【００１８】
本明細書に記載したアレルギーを治療する方法は、治療を施す前に患者に対して好塩基球活性化試験を実施することを更に含み得る。現在記載している方法を用いて治療する患者は、例えば、ヒト、例えば、成年ヒト（１８歳又はそれ以上）又は未成年ヒト（１７歳またはそれ以下）でも良い。患者は、未成年（１２歳〜１７歳）、又は児童（１１歳以下）でも良い。患者は４歳から１１歳の子供でも良い。
【００１９】
一実施形態では、本明細書に記載した舌下製剤によるアレルギー患者の治療は、将来、患者がピーナッツタンパク質に曝露された時のアレルギー反応を予防することが出来る。例えば、ピーナッツアレルギーの治療では、患者への治療により、患者がピーナッツタンパク質、２０グラムまで、又はそれ以上に暴露（例えば、摂取により）されたの後の患者のアレルギー反応の重篤度を予防又は低減することが出来る。例えば、本明細書に記載した補助剤を加えた舌下製剤による患者の治療により、患者が１００ｍｇ〜１０ｇ又はそれ以上のピーナッツタンパク質、例えば約２００ｍｇ、３００ｍｇ、５００ｍｇ、８００ｍｇ、１０００ｍｇ、２０００ｍｇ、３０００ｍｇ、４０００ｍｇ、又は約５０００ｍｇのピーナッツタンパク質に曝露された後の患者のアレルギー反応の重篤度を、予防又は低減することが出来る。通常、舌下製剤による患者の治療により、偶発的なピーナッツタンパク質への暴露の後のアナフィラキシー反応の防止をもたらす。
【００２０】
更に別の態様において、本明細書は、医薬組成物の製造方法を提供するものであり、その方法は、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及び１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）をクロロホルム中、モル比１：２で共溶解することにより、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成し、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物にアレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）を添加することにより、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）混合物を形成し、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）混合物からクロロホルムを除去し、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）混合物に水を添加し、次に、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ／アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）混合物を攪拌することによる医薬組成物の形成を含む。
【００２１】
更に別の態様では、本明細書は、医薬組成物の製造方法を提供するものであり、その方法は、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及び１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）をクロロホルム中、モル比１：２で共溶解することにより、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成し、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物からクロロホルムを除去し、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物に水を添加し、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を攪拌し、次に、アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）をＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物に添加することによる医薬組成物の形成を含む。
【００２２】
更に別の態様において、本明細書は、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）及び１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）をモル比１：２で水中において、例えば約４０℃〜８０℃、例えば５０℃〜７０℃の温度に加熱し、混合することによりＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成することを含む、医薬組成物を製造する方法を提供する。次に、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を昇温下（例えば、約７０℃）で撹拌し、次いで、アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）をＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物に添加することにより医薬組成物を形成する。
【００２３】
更に別の態様では、本明細書は、医薬組成物の製造方法を提供するものであり、その方法は、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）と界面活性剤とを混合し、ＧＬＡ／界面活性剤混合物に水を添加し、ＧＬＡ／界面活性剤混合物を攪拌し、次に、アレルゲン（例えば、ピーナッツタンパク質）をＧＬＡ／界面活性剤混合物に添加することによる医薬組成物の形成することを含む。界面活性剤は、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート−８０、ポロキサマー４０７又はポロキサマー１８８、又はレシチンとタウロコール酸の組合せ、又はそれらの組合せでも良い。一例では、界面活性剤はポリソルベート−８０で良く、混合物は、更に、グリセロールを４０％ｗ／ｖ〜８０％ｗ／ｖ、例えばグリセロールを約５０％ｗ／ｖ、約６０％ｗ／ｖ又は約７０％ｗ／ｖを含み得る。場合によっては、本明細書に記載した医薬組成物を製造する方法において、攪拌は、超音波処理、マイクロ流体化、高圧均質化、又はＵｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘシステムなどを用いる機械的攪拌、若しくはそれらの任意の組合せを含み得る。この方法は、医薬組成物を圧縮成形して錠剤を形成することを含み得る。この方法は、医薬組成物の凍結乾燥又は噴霧乾燥を含み得る。この方法は、溶液流延法、半凝固成形法、ホットメルト押出法、固体分散押出法及び圧延法から成る群から選択される方法によってポリマー薄膜を形成する工程及び、医薬組成物を薄膜内に、及び／又は薄膜の少なくとも１つの表面上に配置する工程を含み得る。
【００２４】
本明細書に記載した医薬組成物、及びその医薬組成物を製造する方法の何れにおいても、ピーナッツタンパク質は、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７、又はそれらの任意の組合せの１種又はそれ以上を含み得る。本明細書に記載した医薬組成物、及びその医薬組成物を製造する方法において、ピーナッツタンパク質は、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７、又はそれらの任意の組合せの１種又はそれ以上からなり得る。例えば、ピーナッツタンパク質は、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７から成り得る。例えば、ピーナッツタンパク質は、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、及びＡｒａ  ｈ６から成り得る。別の例として、ピーナッツタンパク質は、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６から成り得る。更に別の例として、ピーナッツタンパク質は、ピーナッツアレルゲン成分であるＡｒａ  ｈ２及びＡｒ  ｈ６から成り得る。
【００２５】
医薬組成物を製造する方法には、ピーナッツタンパク質をＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物に添加する前に、ピーナッツタンパク質に対する好塩基球活性化試験を実施し、ピーナッツタンパク質の効能を測定する工程を更に含み得る。
【００２６】
又、本明細書では、患者のアレルギー（例えば、ピーナッツアレルギー）の治療のために、舌下製剤中でＧＬＡ及とアレルゲン（例えば、ピーナッツアレルゲン）とを、一緒に又は別々に使用することも提供する。又、本明細書では、アレルギー、例えば、ピーナッツアレルギーの治療又は予防のための舌下薬の製造における、少なくともＧＬＡ及び／又はアレルゲン、例えばピーナッツアレルゲンの使用も提供する。この医薬は、アレルギー患者を治療するための方法に使用し得る。医薬は、本明細書に記載された任意の形態で、例えば、液体、半固体又は固体の組成物でも良い。
【００２７】
ここで使用される用語、「有効量」及び「治療に有効な」とは、投与状況の範囲内で、意図された効果又は生理学的転帰をもたらすために有効な期間（急性または慢性投与および周期的または連続的投与を含む）に利用される本明細書に記載の組成物の量または濃度を意味する。本発明で使用するために、本明細書に記載した組成物の有効量とは、例えば、ピーナッツ、又はピーナッツベースの原料を含む製品の摂取又は暴露に対するアレルギー反応の強度を防止、又は低減する量、そのようなアレルギー反応のリスクを低減する量、そのようなアレルギー反応の１種又はそれ以上の症状を軽減する量、及び／又は他のピーナッツアレルギー治療の転帰を向上する量などである。有効量は、当業者が決定しても良い。
【００２８】
用語「治療する」および「治療」は、本明細書では、例えば、ピーナッツアレルギー、又はピーナッツ又はピーナッツベースの原料を含む製品へのアレルギー反応の症状の有害な影響の発症の遅延、阻害又は緩和を説明するために使用する。
【００２９】
「患者」という用語は、本明細書を通じて、本発明の方法による治療の提供を受ける、動物、ヒト又は非ヒトを説明するために使用する。本発明は獣医学的及び非獣医学的な適用を企図している。ヒトの患者は、成年のヒト又は未成年のヒト（例えば、１８歳未満のヒト）でも良い。ヒトの他に、患者としては、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、フェレット、ネコ、イヌ及び霊長類を含むが、これに限定する訳ではない。例えば、ヒト以外の霊長類（例えば、サル、チンパンジー、ゴリラ等）、げっ歯類（例えば、ラット、マウス、スナネズミ、ハムスター、フェレット、ウサギ）、ウサギ、ブタ（例えば、ブタ、ミニチュアブタ）、ウマ、イヌ、ネコ、ウシ、その他国内の農場の家畜、動物園の動物が含まれる。
【００３０】
特に定義しない限り、本明細書で使用する全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により、一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載したものと類似又は同等な方法及び材料を本発明の実施又は試験に使用することが出来るが、適切な方法及び材料を以下に記載する。本明細書で言及した全ての刊行物、特許出願、特許及び他の参考文献は、その全体が参照により組込まれる。矛盾する場合は、定義を含め、本明細書が支配するものとする。材料、方法、及び実施例は、例示的なものに過ぎず、限定を意図するものではない。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】図１Ａは、粗ピーナッツ抽出物（ＣＰＥ）で暴露した後のマウスにおけるアナフィラキシースコアについてのＧＬＡ及びピーナッツタンパク質の（濃度を変化した時の）治療効果を示す棒グラフである。††＝ビヒクル＋対照（ＣＴ）群と比較してｐ＜０．００１；  ＊ビヒクル＋ＣＰＥ／ＣＴ群と比較してｐ＜０．０５。  図１Ｂは、粗ピーナッツ抽出物（ＣＰＥ）で暴露した後のマウスにおけるアナフィラキシースコアについてのＧＬＡ及びピーナッツタンパク質の（濃度を変化した時の）治療効果を示す棒グラフである。この表示からは、ＣＰＥ単独群を省略した。††＝ビヒクル＋対照（ＣＴ）群と比較してｐ＜０．００１、＊ビヒクル＋ＣＰＥ／ＣＴ群と比較してｐ＜０．０５。
【図２】図２Ａは、粗ピーナッツ抽出物で暴露した後のマウスにおける深部体温低下についてのＧＬＡ及びピーナッツタンパク質（０．５μｇ）の治療効果を示す棒グラフである。†＝ビヒクル＋対照（ＣＴ）群と比較してｐ＜０．０５。  図２Ｂは、粗ピーナッツ抽出物で暴露した後のマウスにおける深部体温低下についてのＧＬＡ及びピーナッツタンパク質（０．５μｇ）の治療効果を示す棒グラフである。この表示からは、ＣＰＥ単独群を省略した。†＝ビヒクル＋対照（ＣＴ）群と比較してｐ＜０．０５。
【図３】図３は、標準的なピーナッツ抽出工程図である。
【図４】図４Ａは、頸部流入領域リンパ節における抗原特異的Ｔ細胞増殖に及ぼす、ＧＬＡを舌下単独投与した効果を示すヒストグラムである。  図４Ｂは、脾臓における抗原特異的Ｔ細胞増殖に及ぼす、ＧＬＡを舌下単独投与した効果を示すヒストグラムである。  図４Ｃは、頸部流入領域リンパ節における抗原特異的Ｔ細胞増殖に及ぼす、Ｏｖａペプチドを舌下単独投与した効果を示すヒストグラムである。  図４Ｄは、脾臓における抗原特異的Ｔ細胞増殖に及ぼす、Ｏｖａペプチドを舌下単独投与した効果を示すヒストグラムである。  図４Ｅは、頸部流入領域リンパ節における抗原特異的Ｔ細胞増殖に及ぼす、ＧＬＡ及びＯｖａペプチドを舌下同時投与した効果を示すヒストグラムである。  図４Ｆは、脾臓における抗原特異的Ｔ細胞増殖に及ぼす、ＧＬＡ及びＯｖａペプチドを舌下同時投与した効果を示すヒストグラムである。
【図５】図５は、抗原とＧＬＡとの舌下投与が、マウスの流入領域リンパ節において抗原特異的Ｔ細胞増殖を増強することを示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本明細書は、ピーナッツタンパク質及びＴＬＲ−４アゴニストＧＬＡなどのアレルゲンを含む製剤が、例えば、ピーナッツアレルギーの治療のために、特に、舌下投与に適していることに、少なくとも部分的に基づいている。従って、本明細書は、患者のアレルギー、例えば、ピーナッツアレルギーを治療するための組成物及び方法を提供する。一般に、患者の治療は、ＧＬＡを少なくとも１種類のアレルゲンと組合せて、舌下経路を経由して投与することにより、達成することが出来る。ＧＬＡ及びアレルゲン（例えば、ピーナッツアレルゲン）の患者への投与は、別々の舌下製剤で、又はＧＬＡ及びアレルゲン（例えば、ピーナッツアレルゲン）の両方を含む単一の舌下製剤の何れかで良い。ここで開示する、ＧＬＡ及びアレルゲン、例えば、ピーナッツアレルゲン、の一方又は両方を含有する医薬製剤は、例えばピーナッツアレルギーの治療のための舌下免疫療法（ＳＬＩＴ）を意図したものである。
【００３３】
グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）
現在、説明している組成物は、当該技術分野で知られ、市販品として入手可能な化合物であるアジュバントＧＬＡを含む。標準的には、ＧＬＡは下記式（Ｉ）、
【化１】
2018516867.tif 000003
又は、医薬的に受容可能なその塩であり、ここで、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５及びＲ６は、Ｃ１１〜Ｃ２０アルキルであり、Ｒ２及びＲ４はＣ１２〜Ｃ２０アルキルであり、より特定の実施形態では、ＧＬＡは、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ５及びＲ６がＣ１１−１４アルキルである上記で言及した式（Ｉ）を有し、Ｒ２及びＲ４はＣ１２−１５アルキル、又はトリデシルである。更に、より特定の実施形態では、ＧＬＡは、上述した式（Ｉ）でＲ１、Ｒ３、Ｒ５及びＲ６がＣ１１アルキル又はウンデシルであり、Ｒ２及びＲ４はＣ１３アルキル又はトリデシルである。更に尚、特定の実施形態では、ＧＬＡは、上述した式（Ｉ）でＲ１、Ｒ３、Ｒ５及びＲ６がウンデシルであり、Ｒ２及びＲ４がトリデシルである。ＧＬＡは当該技術分野において公知であり、当業者によって調製可能であり、及び／又は様々な商業的供給源から入手可能である。
【００３４】
例えば、本発明において特に有用な下式（ＩＩ）のＧＬＡは、例えば、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ、Ｉｎｃから、入手出来る。
【化２】
2018516867.tif 000004
【００３５】
本発明を特徴付ける舌下製剤の使用に適したＧＬＡの医薬的に受容される塩は、アルミニウム塩又はアンモニウム塩、又はベンザチン塩であり得る。他の適切な塩としては、カルシウム、エチレンジアミン、リジン、マグネシウム、メグルミン、カリウム、プロカイン、ナトリウム、トロメタミン及び亜鉛を含む。ＧＬＡのアノマー変異体もまた、本発明を特徴付ける舌下製剤に使用することが出来る。
【００３６】
本発明を特徴づける舌下製剤での使用に適したＧＬＡは、対イオン塩を含まないＧＬＡの遊離酸形態でも良い（上記構造（Ａ）参照）。
【００３７】
本明細書で使用される場合、「アルキル」は、１〜２０個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖、非環状又は環状、不飽和又は飽和脂肪族炭化水素を意味し、或る好ましい実施形態では１１〜２０個の炭素原子を含む。代表的な飽和直鎖アルキルにはメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル等が挙げられ、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシルなどが含まれ、一方、飽和分枝アルキルには、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル等が含まれる。代表的な飽和環状アルキルとしては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等が含まれ、一方、不飽和環状アルキルには、シクロペンテニル及びシクロヘキセニル等が含まれる。環式アルキルは、本明細書において「単素環」又は「単素環式環」とも称する。不飽和アルキルは、隣接する炭素原子間に少なくとも１個の二重結合又は三重結合を含む（各々「アルケニル」又は「アルキニル」と称す）。代表的な直鎖及び分岐アルケニルには、エチレニル、プロピレニル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル等が含まれ、一方、代表的な直鎖及び分岐アルキニルには、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニル等が含まれる。例えば、「Ｃ８−１３アルキル」及び「Ｃ６−１１アルキル」とは、各々、上記で定義したように、炭素原子を８−１３個又は６−１１個含む、アルキルを意味する。
【００３８】
本明細書で使用する場合、「酸官能基」とは、水性媒体中でプロトンを供与する能力を有する官能基（即ち、ブレンステッド−ローリー酸）を意味する。プロトンを供与した後、酸官能基は負電荷種（即ち、酸官能基の共役塩基）となる。酸官能基の例としては、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２（リン酸塩）、−ＯＳ（＝Ｏ）（ＯＨ）２（硫酸塩）、−ＯＳ（ＯＨ）２（亜硫酸塩）、−ＯＣ（ＯＨ）２（カルボン酸塩）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ（アスパラギン酸塩）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ（コハク酸塩）及びＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２（カルボキシメチルホスフェート）を含むがこれに限定する訳ではない。
【００３９】
本明細書で使用する場合、「ヒドロカルビル」とは、炭素原子の配列が直鎖又は分枝鎖で、非環状又は環状で、かつ隣接する炭素原子間の結合が完全に単結合であり、即ち飽和ヒドロカルビルを提供し得るか、又は任意の２つの隣接炭素原子間に存在する二重結合又は三重結合が存在し、即ち不飽和ヒドロカルビルを提供し得る、かつヒドロカルビル基中の炭素原子の数は３〜２４個の炭素原子であり、全て水素と炭素から形成された、化学的部分を意味する。ヒドロカルビルはアルキルであり、代表的な直鎖アルキルには、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル等が挙げられ、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル等が含まれ、一方、分枝アルキルには、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル等が含まれる。代表的な飽和環状ヒドロカルビルには、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等が含まれ、一方、不飽和環状ヒドロカルビルには、シクロペンテニル及びシクロヘキセニル等を含が含まれる。不飽和ヒドロカルビルは、隣接する炭素原子間に少なくとも１個の二重又は三重結合を含む（ヒドロカルビルが非環式である場合には、各々、「アルケニル」又は「アルキニル」と称し、かつ、ヒドロカルビルが少なくとも部分的に環式である場合には、各々シクロアルケニル及びシクロアルキニルと称する）。代表的な直鎖及び分岐アルケニルには、エチレニル、プロピレニル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル等を含み、一方で、代表的な直鎖及び分岐アルキニルには、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニル等を含む。
【００４０】
式Ｉ及び／又は式ＩＩの化合物は、当技術分野で公知の合成方法、例えば、ＰＣＴ国際公開番号第  ２００９／０３５５２８号に開示されている合成方法によって、得ても良い。又、当業者は、ＧＬＡが、例えば、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ、社から商業的に入手出来ることも認識するだろう。
【００４１】
アレルゲン
本明細書で使用する場合、「アレルゲン」とは、患者にアレルゲン特異的アレルギー反応を生じさせ得る任意の抗原性物質である。アレルゲンは、例えば、タンパク質、糖タンパク質、炭水化物、脂質、糖脂質、又は他の有機化合物であり得る。例示的には、本組成物及び方法に有用なアレルゲンの幾つかは、（１）全長抗原、（２）抗原の免疫原性断片、（３）全長抗原又は免疫原性断片の免疫原性変異体、（４）異なったポリペプチド／抗原由来の一部を含むキメラ融合体、及び／又は（５）そのような例の２種又はそれ以上を含む複合体でも良い。
【００４２】
ピーナッツタンパク質は、複数のアレルゲンを含有し、本明細書に記載した組成物及び方法において特に有用である。本明細書に記載した組成物は、少なくとも１種類のピーナッツアレルゲンを含むことが出来る。本明細書に記載した組成物に使用されるピーナッツアレルゲンは、例えば、（１）全長抗原、（２）抗原の免疫原性断片、（３）全長抗原又は免疫原性断片の免疫原性変異体、（４）異なったピーナッツポリペプチド由来の一部を含むキメラ融合体、及び／又は（５）そのようなピーナッツアレルゲンの２種又はそれ以上を含む複合体でも良い。
【００４３】
幾つかの場合において、組成物は、単一種類の単離したピーナッツアレルゲン、単離したピーナッツアレルゲンの混合物、又はピーナッツアレルゲンを含むピーナッツタンパク質の混合物である全ピーナッツ抽出物を含む。本明細書中で使用する場合、用語「単離する」とは、材料がその起源の環境（例えば、天然に由来する場合には自然環境）から取り除くことを意味する。ピーナッツアレルゲンの個々の種類に関しては、少なくとも１７種のアレルゲンが同定されている。その内容とはＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７である。例示的なアレルゲンのｃＤＮＡ配列のジェンバンク目録番号には、Ｌ３４４０２．１（Ａｒａ  ｈ１）、ＡＹ００７２２９．１（Ａｒａ  ｈ２．０１０１）、ＡＹ１５８４６７．１（Ａｒａ  ｈ２．０２０１）、ＡＦ０９３５４１．１（Ａｒａ  ｈ３．０１０１）、ＡＦ０８６８２１．１（Ａｒａ  ｈ３．０２０１）  ＡＦ０５９６１６（Ａｒａ  ｈ５）、ＡＦ０９２８４６．１（Ａｒａ  ｈ６）、ＡＦ０９１７３７．１（Ａｒａ  ｈ７）、ＥＵ０４６３２５．１（Ａｒａ  ｈ７．０２０１）、ＡＹ３２８０８８．１（Ａｒａ  ｈ８．０１０１）、ＥＦ４３６５５０．１（Ａｒａ  ｈ８．０２０１）、ＥＵ１５９４２９．１（Ａｒａ  ｈ９．０１０１）及びＥＵ１６１２７８．１（Ａｒａ  ｈ９．０２０１）、ＡＹ７２２６９４．２（Ａｒａ  ｈ１０．０１０１）、ＡＹ７２２６９５．１（Ａｒａ  ｈ１０．０２０１））、ＤＱ０９７７１６．１（Ａｒａ  ｈ１１）、ＥＹ３９６０８９．１（Ａｒａ  ｈ１２）、ＥＹ３９６０１９．１（Ａｒａ  ｈ１３）、ＡＦ３２５９１７．１（Ａｒａ  ｈ１４．０１０１）、ＡＦ３２５９１８（Ａｒａ  ｈ１４．０１０２）、ＤＱ３６８４９６（Ａｒａ  ｈ１４．０１０３  ）、及びＡＹ７２２６９６（Ａｒａ  ｈ１５）が、夫々、含まれている（例えば、Ｌｅｏｎら，Ｔｈｅ  ｐｅａｎｕｔ  ａｌｌｅｒｇｙ  ｅｐｉｄｅｍｉｃ：ａｌｌｅｒｇｅｎ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ  ｆｏｒ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ．Ｍｏｌ。Ｍｅｄ。Ｖｏｌ．９，  Ｉｓｓｕｅ  １，Ｊａｎｕａｒｙ  ２００７を参照のこと、また、Ａｒｋｗｒｉｇｈｔら、ＩｇＥ  Ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ  ＬｉｐｉｄＴｒａｎｓｆｅｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｒａ  ｈ  ９  ａｎｄ  Ｐｅａｎｕｔ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｂｒｏｎｃｈｏｓｐａｓｍ，ＢｉｏＭｅｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ｖｏｌ．２０１３，Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ７４６５０７を参照のこと）。アレルゲンＡｒａ  ｈ１、２、３、６、８及び９は、ピーナッツ感作の重要なマーカーであり、アレルギー反応を予測することが出来る。Ａｒａ  ｈ１、２及び３は種子貯蔵タンパク質である。Ａｒａ  ｈ２は、Ａｒａ  ｈ１及び３よりも、より重要なピーナッツアレルギーの臨床的な予測因子であり、重篤な反応にしばしば関連している。  Ａｒａ  ｈ６はＡｒ��  ｈ２と交差反応する抗体を誘発し、Ａｒａ  ｈ６及びＡｒａ  ｈ２に対する感作はしばしば一緒に起こる。Ａｒａ  ｈ８は病因関連（ＰＲ）−１０タンパク質であり、感作はしばしば起こる軽度の局在症状と関連している。Ａｒａ  ｈ８は、特定の花粉（例えば、カバノキ及びカバノキ関連樹木の花粉）と交差反応する。Ａｒａ  ｈ９は、脂質移行タンパク質であり、感作は、アナフィラキシーを含む全身反応に至り得る。Ａｒａ  ｈ９に対して敏感な患者は、しばしばＡｒａ  ｈ１−３にも敏感である。Ａｒａ  ｈ９は、桃などの種を除いた（ｐｉｔｔｅｄ）果物と頻繁に交差反応をする。本明細書に記載の組成物は、例えば、Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、  Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６およびＡｒａ  ｈ１７、又は、Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、およびＡｒａ  ｈ１７のアレルギー反応誘発部位から成る群から選択されたピーナッツアレルゲンの少なくとも１種類を含む。例えば、ピーナッツの全抽出物を使用しても良く、ピーナッツアレルゲン単一で、又は、そのアレルギー反応誘発部分を使用しても良く、かつ単離した任意のピーナッツアレルゲンを使用してもよく、及び／又は、それらのアレルギー反応誘発部分を任意に組合わせて使用しても良いことも企図している。例えば、ピーナツ全抽出物の代わりに、組成物は、Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ  １１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７の、若しくはＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ  １１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、  Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７のアレルギー反応誘発部分の少なくとも２種、例えば、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６または１７種の任意の組合せを含み得る。例えば、本明細書に記載した組成物は、Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、およびＡｒａ  ｈ６、またはそのアレルギー反応誘発部分を含み得る。別の例として、組成物は、Ａｒａ  ｈ２およびＡｒａ  ｈ６、またはそのアレルギー反応誘発部分を含み得る。さらに別の例として、組成物は、Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３およびＡｒａ  ｈ６、またはそのアレルギー反応誘発部分を含み得る。更に別の例において、組成物は、Ａｒａ  ｈ１２およびＡｒａ  ｈ１３、またはそのアレルギー反応誘発部分を含み得る。任意の完全長アレルゲンとアレルゲンの任意のアレルギー反応誘発部分との組合わせを一緒に使用し得ることを企図している。
【００４４】
場合によっては、本明細書に記載した組成物は、完全長Ａｒａ  ｈタンパク質の混合物、Ａｒａ  ｈタンパク質のアレルギー反応誘発部分の混合物（即ち、免疫原性断片）、又はＡｒａ  ｈタンパク質の完全長部分及びアレルギー反応誘発部分の両方の組合せを含んで良い。例えば、免疫原性断片は、少なくとも５個の、例えば、少なくとも６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、又は５０、６０、７０、８０、９０、又は少なくとも１００個又はそれ以上のタンパク質の連続したアミノ酸を含み得る。免疫原性断片は小さくても良く、例えば、約５０個若しくはそれ以下のアミノ酸、または約６〜１０個、１０〜１５個、１５〜２０個、２０〜３０個、３０〜４０個、４０〜５０個、５０〜６０個、６０〜７０個、７０〜８０個、８０〜９０個、９０〜１００個、またはそれ以上の連続したアミノ酸を含む。免疫原性断片は、線状エピトープを形成するのに十分な数の連続アミノ酸を含み得て、及び／又は、その断片が由来する全長ポリペプチドと同じ（または十分に類似した）立体構造に折り畳まれ、非線形エピトープを提示することを可能とするのに十分な数の連続アミノ酸を含み得るか、または  エピトープ（この技術分野では立体配座エピトープとも称する）を含み得る。抗原の免疫原性領域及び／又はエピトープを同定することは、当業者にとっては、容易に決定出来、及び／又は当業者がコンピュータ分析およびコンピュータモデリングにより、日常的に実施している方法および技術を使用して実施することができる。
【００４５】
幾つかの例では、本明細書に記載した組成物は、ピーナッツ抽出物、例えば焙煎ピーナッツから製造された抽出物、又は（未焙煎の）生ピーナッツから製造された抽出物を含み得る。医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、ヒトへの使用に適しており、原薬又は薬剤と呼ばれる（例えば、図３参照）。原薬の形態にある医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、薬剤形態でのヒトへの投与のために更に処方しても良い。ヒトへの投与に許容される段階まで処理されてないピーナッツ抽出物を、本明細書においては「粗ピーナッツ抽出物」と称する。粗ピーナッツ抽出物の例には、ピーナッツ粉抽出物、ピーナッツ油及び粗ピーナッツ粉末抽出物、又は液体抽出物を挙げられる。「新しい活性物質」でもあり得る原薬は、凍結乾燥ピーナッツ抽出粉末、ピーナッツ抽出濃縮液、又はピーナッツ抽出希釈液であり得る。原薬は、精製された粉末又は油抽出物でも良い。
【００４６】
原薬、又は薬剤である医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、Ａｒａ  ｈタンパク質含量、総タンパク質含量、脂質含量、多糖含量、金属含量、アフラトキシン含量、微生物含量、含水量（特に、凍結乾燥された抽出物の場合）等の１種、又はそれ以上を測定すること等の種々の方法で特徴付けることが出来る。例えば、抽出物は、ＨＰＴＬＣ（高性能薄層クロマトグラフィー）などによりアフラトキシン生成物Ｂ１、Ｂ２、Ｇ１及びＧ２の１種又はそれ以上の量に従って特徴付けることが出来る。微生物含量には、例えば、全好気性細菌数（ＴＡＭＣ）、全酵母数及び菌数（ＴＹＭＣ）及び特定微生物の測定を含み得る。幾つかの実施形態では、医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、抽出物に含まれる、農薬、溶媒、又は他の有機若しくは無機物質などの特定の不純物の量により、特徴付けることが出来る。
【００４７】
幾つかの実施形態において、抽出物は、特定のＡｒａ  ｈタンパク質、又はＡｒａ  ｈタンパク質類の組合せが抽出物中に、どの程度の量で含まれるかで特徴付けられる。例えば、医薬的に受容されるピーナッツ抽出物又は粗タンパク質抽出物（例えば、タンパク質含量既知の粗タンパク質抽出物）は抽出物中の２種又はそれ以上のＡｒａ  ｈタンパク質、例えば、Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２、Ａｒａ  ｈ３、Ａｒａ  ｈ４、Ａｒａ  ｈ５、Ａｒａ  ｈ６、Ａｒａ  ｈ７、Ａｒａ  ｈ８、Ａｒａ  ｈ９、Ａｒａ  ｈ１０、Ａｒａ  ｈ１１、Ａｒａ  ｈ１２、Ａｒａ  ｈ１３、Ａｒａ  ｈ１４、Ａｒａ  ｈ１５、Ａｒａ  ｈ１６、及びＡｒａ  ｈ１７タンパク質の少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６又は、１７種のタンパク質のパーセント割合により、特徴付けることが出来る。医薬的に受容される抽出物などのピーナッツ抽出物は、抽出物中の２種又はそれ以上のＡｒａ  ｈタンパク質の比によって特徴付けることが出来る。例えば、Ａｒａ  ｈ２／Ａｒａ  ｈ６比は、約３．０から１．０（例えば、約３．０、約２．５、約２．２、約２．０、約１．９、約１．７、約１．５、約１．４、約１．３、約１．１、又は約１．０）の範囲を有し得る。
【００４８】
医薬的に受容される抽出物の総タンパク質含量は、約１２％〜約６％（例えば、約１１．５％、約１１％、約１０．５％、約１０％、約９．５％、約９％、約８．５％、約８％、約７．５％又は約７％）であり得る。
【００４９】
一実施形態では、抽出物はＡｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６の含量及び総タンパク質含量のパーセント含有量により特徴付けられる。別の実施形態では、抽出物は、Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６の含量、総タンパク質含量、及び脂質含量のパーセント含有率によって特徴付けられる。更に別の実施形態では、抽出物は、少なくとも（ｉ）Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６のパーセント含有率、（ｉｉ）総タンパク質含量、（ｉｉｉ）脂質含量、及び（ｉｖ）多糖類含量、により、特徴付けられる。
【００５０】
医薬的に受容されるピーナッツ抽出物等のピーナッツ抽出物の成分は、当該分野で公知の方法によって分析することが出来る。例えば、抽出物中に存在するタンパク質及び総タンパク質含量は、Ｂｒａｄｆｏｒｄ分析、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及びＷｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔ、又はＣｏｏｍａｓｓｉｅ染色などの電気泳動により、ＥＬＩＳＡ分析、又はＨＰＬＣ（高性能液体クロマトグラフ）又はＨＰＬＣ−ＵＶなどのクロマトグラフィー法、又は、ＬＣ−ＭＳ（液体クロマトグラフィー−質量分析）などの質量分析法により分析することが出来る。そのような分析を使用して、ピーナッツ抽出物のタンパク質特性（例えば、Ａｒａ  ｈ１：Ａｒａ  ｈ２：Ａｒａ  ｈ６等のＡｒａ  ｈタンパク質の比）を更に同定することが出来る。ピーナッツ抽出物のＡｒａ  ｈ含量は、例えば、特異的抗体（例えば、Ａｒａ  ｈ１、Ａｒａ  ｈ２又はＡｒａ  ｈ６に特異的に結合する抗体）を用いるＥＬＩＳＡ、又はＬＣ  ＭＳにより、測定することが出来る。脂質含量は、例えば、ＨＰＴＬＣ又はＨＰＬＣ−ＥＳＬＤ（蒸発光散乱検出器）によって測定することが出来る。金属含有量は、例えば、ＩＣＰ−ＭＳ（誘導結合プラズマ質量分析）によって測定することが出来る。
【００５１】
医薬的に受容されるピーナッツ抽出物等のピーナッツ抽出物は、その色又は溶液中での透明度などにより、定性的な評価をすることが出来る。
【００５２】
幾つかの実施形態において、医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、ピーナッツアレルギー患者の生体試料（例えば、血清試料）中のＩｇＥ及びＩｇＧに結合する能力などにより、機能的な特徴付けをすることが出来る。他の実施形態では、医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、ピーナッツアレルギー患者の生体試料（例えば、血液又は血清試料）中の好塩基球又はＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）の一方又は両方を活性化する抽出物の能力等の、抽出物の生物学的活性度により特徴付けをすることが出来る。医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、例えば、以下の実施例に記載するような好塩基球活性化試験を用いて、抽出物の効能を測定することにより、評価することが出来る。
【００５３】
医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、社内規準品（ＩＨＲＰ）として特徴づけ、かつ確立して、バッチ間の整合性を確認しても良い。医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、ＩＨＲＰと同一となるようにタンパク質組成を決定することが可能である。医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、規準製品に対して８０％〜１２０％のタンパク質含量を有し、かつ、個々のアレルゲン（例えば  Ａｒａｈ１、Ａｒａ  ｈ２及びＡｒａ  ｈ６タンパク質等の特定のＡｒａ  ｈタンパク質）は規準製品で測定された量の、５０％〜２００％を有し得る。ある場合には、凍結乾燥した医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、例えば、５％以下の水分を有することもあろう。幾つかの場合では、医薬的に受容されるピーナッツ抽出物は、アレルゲン製品に関する欧州薬局方論文に記載された承認基準を満足するであろう（欧州薬局方７．０  ０１／２０１０：１０６３）。
【００５４】
アレルゲンは、抗原の少なくとも１０個の連続したアミノ酸について少なくとも９０％のアミノ酸同一性を、又は、抗原の少なくとも１５個の連続したアミノ酸について少なくとも８５％のアミノ酸同一性を保持する、１種又はそれ以上の天然に存在するポリペプチド抗原（例、Ａｒａ  ｈタンパク質）の免疫原性変異体でも良い。他の例としては、抗原の少なくとも５０個の連続するアミノ酸について、少なくとも、若しくは約７０％、例えば、少なくとも、若しくは約７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８  ％、又は、少なくとも、若しくは約、９９％が、同一性を有し、又は、抗原の少なくとも１００個の連続するアミノ酸について、少なくとも、若しくは約７０％、例えば、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は少なくとも、若しくは約９９％が、同一性を有する。これらのポリペプチド免疫原性変異体は、天然抗原に特異的である免疫グロブリンと交差反応する能力を保持している。
【００５５】
変異体は、アミノ酸配列における少なくとも１つのアミノ酸の置換、挿入又は欠失を含み得る。アミノ酸の保存的置換は周知であり、ポリペプチド中に天然に存在し得るか、又はポリペプチドを組換え産生する時に導入し得る。アミノ酸の置換、欠失及び付加を、よく知られ、かつ日常的に実施されている突然変異誘発法を用いてポリペプチドに導入し得る。或いは、アラニンスキャニング突然変異誘発、エラープローンポリメラーゼ連鎖反応突然変異誘発、及びオリゴヌクレオチド指定突然変異誘発などのランダム突然変異誘発技術を用いて変異体を調製し得る。
【００５６】
種々の既知の基準は、ペプチド又はポリペプチドの特定の位置で置換されているアミノ酸が保存的（又は類似）であるかどうかを示す。例えば、類似のアミノ酸又は保存的アミノ酸置換とは、アミノ酸残基が類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置換されているものである。類似したアミノ酸は、以下のカテゴリー、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、ヒスチジン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、β−分枝側鎖を有するアミノ酸（例えばスレオニン、バリン、イソロイシン）、及び芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン）内に含み得る。分類がより難しいと考えられるプロリンは、脂肪族側鎖（例えば、ロイシン、バリン、イソロイシン、及びアラニン）を有するアミノ酸と特性を共有する。特定の状況において、グルタミンをグルタミン酸へ又はアスパラギンをアスパラギン酸への置換は、グルタミン及びアスパラギンが各々、グルタミン酸及びアスパラギン酸のアミド誘導体である点で類似の置換であると見なし得る。
【００５７】
ポリペプチドアレルゲンの組換え産生に関する種々の方法が当該技術分野において知られている。組換えポリペプチドを単離及び精製するために使用し得る方法は、例えば、組換えアレルゲン又は抗原を培養培地に分泌する適切な宿主／ベクター系から上清を得、次いで市販のフィルターを用いて培地を濃縮することを含み得る。濃縮の後、濃縮物を単一の適切な精製マトリックス、又は一連の適切なマトリックス、例えば親和性マトリックス又はイオン交換樹脂に適用しても良い。１又はそれ以上の逆相ＨＰＬＣ工程を用いて、組換えポリペプチドを更に精製しても良い。様々な代替的な精製方法が当該分野で公知である。
【００５８】
アレルゲン／抗原を含む組成物は、場合によっては、アレルゲン／抗原を発現する組換え発現ベクターを含む組成物の形態でも良い。従って、本明細書におけるアレルゲン又は抗原を含む組成物へのすべての言及は、アレルゲン又は抗原をコードするヌクレオチドを有するウイルスベクターを含む組成物に等しく適用される。
【００５９】
代替物に又は添加物として、組成物は、異なるアレルゲン由来の複数の部分を含むキメラ融合体、例えば、第２の完全長Ａｒａ  ｈタンパク質に融合した第１の完全長Ａｒａ  ｈタンパク質を含む融合タンパク質、第２のＡｒａ  ｈタンパク質断片に融合した第１のＡｒａ  ｈタンパク質断片、又は第２のＡｒａ  ｈタンパク質断片に融合した第１の完全長Ａｒａ  ｈタンパク質、等、のアレルゲンを含んでも良い。融合タンパク質を作製する方法は当業者に周知であり、当業者であれば、アレルゲン、例えば、Ａｒａ  ｈタンパク質の、全体又は少なくとも２種、例えば、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、又は少なくとも１７種の内の一部を含む融合タンパク質を含む多くの変形が可能であることを理解するであろう。
【００６０】
他のアレルゲンを、ピーナッツアレルゲンの代替物又は添加物として、本明細書に記載した医薬組成物又は医薬組成物の製造方法に含んでも良い例えば、場合によっては、ピーナッツアレルゲン以外の食物アレルゲンを含めることが出来る。このような食物アレルゲンの例には、ミルクアレルゲン（例えば、全乳又はその抽出物、カゼイン（例えば、αＳ１−カゼイン）及び／又はβ−ラクトグロブリン）、海産物アレルゲン（例えば、脊椎動物（例えば、サケ、タラ、サバ、イワシ、ニシン、アンチョビ、マグロ、マス、ハドック、ウナギ、及び／又はレイ）、及び／又は、無脊椎動物（例えば、甲殻類（例えば、エビ、カニ、ザリガニ及び／又はロブスターアレルゲン）、及び／又は軟体動物（例えば、クラム、ムール貝、カキ、タコ、イカ及び／又はホタテアレルゲン））、卵アレルゲン、マスタードアレルゲン、胡麻アレルゲン、大豆アレルゲン、小麦アレルゲン（例えばグルテン）、果実アレルゲン（Ｂｅｔ  ｖ１またはそのホモログ、脂質輸送タンパク質及び／又はプロフィリン、及び／又は苺、林檎、アボカド、ブルーベリー、デート、キウイフルーツ、桃、ラズベリー、無花果、葡萄、プラム、サクランボ、グレープフルーツ及び／又はプルーン）、野菜アレルゲン（例えば、アルファルファ、カリフラワー、キュウリ、キノコ、大根、そら豆、ナス、ホウレンソウ、ズッキーニ、ブロッコリー、及び／又は胡椒アレルゲン）またはナッツアレルゲン（例えば、クルミ、アーモンド、カシュー、ピスタチオ、及び／又はピーカンアレルゲン）が含まれ、これらの食物の各々に対するアレルギーの治療を行なう。代替物として、又は添加物として、ハウスダストダニ（ＨＤＭ）アレルゲン、エアロアレルゲン（例えば、花粉アレルゲン）及び／又は草アレルゲンを、例えば季節性アレルギーのようなアレルギーの治療のために含み得る。更に、ピーナッツアレルゲンへの代替物として、又は添加物として、そのようなアレルゲンを含む組成物は、本明細書に記載したアレルギー（即ち、医薬組成物に含まれるアレルゲンに対するアレルギー）の治療方法に使用することが出来る。
【００６１】
舌下投与用組成物の調製
ＧＬＡ及び別個のアレルゲン（例えば、別個のＧＬＡ及びピーナッツタンパク質組成物）、又はＧＬＡ及びアレルゲンの両方の組合せ（例えば、単一組成物内でのＧＬＡ及びピーナッツタンパク質の組合せ）を、舌下投与剤形内に含む組成物は、様々な方法によって調製することが出来る。例えば、本発明において有用な組成物は、ピーナッツアレルゲンを含む組成物である。ピーナッツタンパク質を抽出し、アレルゲン調製物を製造する方法は、当業者に公知である。例えば、粗ピーナッツ抽出物を製造する方法は、米国特許第６,４８６，３１１号に提供されている。幾つかの方法においては、ピーナッツを供給し（例えば、商業的供給源から）、場合により、ピーナッツ処理技術分野で既知の方法で焙煎し、次いで、（適用可能なら、焙煎した後に）１６３℃〜１７７℃で１３〜１６分間、ヘキサンで脱脂する。次に、粉末状の粗製ピーナッツを、ＮａＣｌ  １ｍｏｌ／Ｌ、リン酸ナトリウム２０ｍｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ７．０）及び尿素８ｍｏｌ／Ｌ中、４℃で４時間抽出してもよい。抽出物は、４℃で２０，０００ｇ、６０分間の遠心分離により澄明化しても良い。他の例示的な方法が、米国特許公開第２０１４／０３６３４７０号に記載され、その内容はピーナッツを粉砕してピーナッツ粉末とし、５０ｍＬのアセトン当たり５ｇのピーナッツ粉末を用いて、アセトン中、３０分間インキュベートし、脱脂ピーナッツ粉末を得、脱脂ピーナッツ粉末を乾燥し、粉末をｐＨが７〜９の緩衝液中に懸濁し、得られた上清を単離して、全ピーナッツ抽出物を得ることを含む。代替物としてまたは添加物として、ピーナッツ抽出物、ピーナッツ粉末（例えば、粉砕しかつ、脱脂したピーナッツを含む）及び／又は個々のアレルゲンは、民間、大学、政府又は商業的供給源（例えば、Ｇｒｅｅｒ社（北カロライナ州、米国）、Ｇｏｌｄｅｎ  Ｐｅａｎｕｔ社（テキサス州、米国）、Ａｍａｎｄａ  Ｎｕｔ製造工場（ドイツ）、ＩＮＤＯＯＲ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社（バージニア州、米国））から入手できる。
【００６２】
本明細書に記載した、ピーナッツタンパク質（単独で又はＧＬＡと組合せて）を含む組成物は、約０．３μｇ／１００ｍｌ〜約２６，０００μｇ／ｍＬの範囲、例えば０．５μｇ／１００ｍｌ〜２５，６００μｇ／ｍＬ、例えば、５μｇ／１００ｍｌ〜約１０，０００μｇ／ｍＬ、例えば、約３μｇ／ｍＬ〜約５，０００μｇ／ｍＬの範囲のピーナッツタンパク質を含んで良い。例えば、組成物は、約１００μｇ／ｍＬ〜約２５，６００μｇ／ｍＬ、又は約２０００μｇ／ｍＬ〜約１０，０００μｇ／ｍＬの範囲のピーナッツタンパク質を含んで良い。本明細書に記載した組成物は、少なくとも又は約、１μｇ／ｍＬ、例えば少なくとも又は約、３μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、２４μｇ／ｍＬ、２５μｇ／ｍＬ、２６μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬ、２００μｇ／ｍＬ、４００μｇ／ｍＬ、５００μｇ／ｍＬ、１０００μｇ／ｍＬ、２０００μｇ／ｍＬ、３０００μｇ／ｍＬ、４０００μｇ／ｍＬ、５０００μｇ／ｍＬ、６０００μｇ／ｍＬ、６４００μｇ／ｍＬ、６５００μｇ／ｍＬ、６６００μｇ／ｍＬ、７０００μｇ／ｍＬ、８０００μｇ／ｍＬ、９０００μｇ／ｍＬ、１０，０００μｇ／ｍＬ、１５，０００μｇ／ｍＬ、２０，０００  μｇ／ｍＬ、２５，０００μｇ／ｍＬ、又は２６，０００μｇ／ｍＬのピーナッツタンパク質を含んで良い。
【００６３】
ピーナッツタンパク質を含む組成物は、塩化ナトリウム又はクエン酸ナトリウムのような塩を０．０５％〜１％、例えば０．１％〜０．５％、例えば０．２％〜０．３％、例えば０．２５％の量で含んでも良い。ピーナッツタンパク質を含む組成物は、グリセロール等の保存剤を、３０％グリセロール〜８０％グリセロール、例えば４０％グリセロール〜６０％グリセロール、例えば４５％グリセロール、５０％グリセロール又は５５％グリセロールの量で含んでも良い。ピーナッツタンパク質を含む組成物は、中性又は塩基性のｐＨ、例えばｐＨ７〜ｐＨ９、例えばｐＨ７．５、ｐＨ８．０、ｐＨ８．２、ｐＨ８．５でも良い。
【００６４】
一実施形態では、舌下投与用のピーナッツタンパク質（ＧＬＡ有り、又は無し）を含む組成物は、ＮａＣｌ  ０．２５％、ＮａＨＣＯ３  ０．２７％、グリセロール  ６０％、及び水を含む。一実施形態では、組成物は約８．２のｐＨを有する。
【００６５】
ＧＬＡを含む組成物は、当該分野で公知の任意の数の方法で調製出来る。１つの例示的な方法では、ＧＬＡは、商業的生産者（例えば、Ａｖａｉｌ  Ｐｈａｒｍａ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ社（Ｄｕｒｈａｍ、ＮＣ）、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ社（Ａｌａｂａｓｔｅｒ、ＡＬ）、Ｉｍｍｕｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社（Ｓｅａｔｔｌｅ，  ＷＡ））等から合成又は入手出来る。ＧＬＡは、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ；例えば、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ、Ｉｎｃ．社から商業的に入手可能）のような脂質と約１：２（ＧＬＡ／ＤＰＰＣ）のモル比で組合せ、場合により、渦流又は他の公知の混合手段により、クロロホルムに溶解しても良い。次いで、クロロホルムを蒸発させ（例えば、真空下で）、得られた薄膜固体混合物を再び水和し、例えば水中で希釈しても良い。次いで、混合物は、（例えば、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ（登録商標）（ＩＫＡ（登録商標）社、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ  ＮＣ）による、ＢｅｃｏＭｉｘ（Ａ．Ｂｅｒｅｎｔｓ  ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．社  ＫＧ、Ｓｔｕｈｒ、Ｇｅｒｍａｎｙ）による、超音波処理による、マイクロ流体化又は高圧均質化、又はそれらの任意の組合せ等の１種又はそれ以上の機械的な撹拌により、ナノ粒子を生成するために）攪拌し、次いで濾過しても良い。この製剤方法の間の超音波処理で、ＧＬＡ脂質粒子、例えばリポソーム、ミセル及び／又は凝集体、又はそれらの組合せを等を含む製剤を得る。ある場合には、最終の平均脂質粒子サイズは１００ｎｍ未満である。場合によっては、本明細書に記載した方法により製造した製剤中の脂質粒子の最終的な平均サイズは、約１０ｎｍ〜約２０００ｎｍ、例えば、約１６ｎｍ〜約１８００ｎｍ、約５０ｎｍ〜約１０００ｎｍ、約８０ｎｍ約５００ｎｍ、約８５ｎｍ〜約３００ｎｍ、約９５ｎｍ〜約２００ｎｍ、約９０ｎｍ〜約１００ｎｍである。幾つかの例では、最終的な平均脂質粒子サイズは５００ｎｍ未満である。
【００６６】
ＧＬＡを含む組成物は、例えばＤＰＰＣ  ０．００１％〜０．１％、例えば  ＤＰＰＣ  ０．０１〜０．０５％、例えばＤＰＰＣ  ０．０２％〜０．０３％、例えばＤＰＰＣ  ０．０２５％の濃度でＤＰＰＣを含有して良い。ＧＬＡを含む組成物は、３０％グリセロール〜８０％グリセロール、例えば４０％グリセロール〜６０％グリセロール、例えば４５％グリセロール、５０％グリセロール又は５５％グリセロールの量で保存剤を含有しても良い。ピーナッツタンパク質を含む組成物は、中性又は塩基性のｐＨ、例えばｐＨ７〜ｐＨ９、例えばｐＨ７．５、ｐＨ８．０、ｐＨ８．２、ｐＨ８．５でも良い。
【００６７】
一実施形態では、ＧＬＡを含む組成物（ピーナッツアレルゲンは有り又は無し）は、ＤＰＰＣ  ０．０２５％ｗ／ｖ、グリセロール６０％ｗ／ｖ及び水を含む。製剤は水中に含まれていても良い。幾つかの実施形態では、製剤を濾過しても良い。
【００６８】
ある場合には、調製方法においてクロロホルムを使用しないことが有益となり得る。従って、別の例示的な方法では、この工程におけるクロロホルムの使用を省略している。例えば、ＧＬＡ及びＤＰＰＣは１：２のモル比で組合せても良い。温精製水（例えば、５０℃〜７５℃）を添加し、混合物を機械的攪拌又は超音波処理などにより撹拌し、濾過する。例えば、一実施形態では、ＧＬＡ及びＤＰＰＣ０．０２５％を組合せる。温純水（例えば、７０℃）を添加し、混合物をＵｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘを用いて機械的に撹拌する。幾つかの実施形態では、混合物を更に濾過する。
【００６９】
重要なことであるが、当業者は、ＤＰＰＣの代替物又は添加物として脂質又は界面活性剤を使用出来ることは理解してるであろう。例示的な代替物としての脂質又は界面活性剤には、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート（ポリソルベート−２０及びツイーン８０としても知られている）、ポロキサマー（Ｓｙｎｐｅｒｏｎｉｃｓ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、及びＫｏｌｌｉｐｈｏｒと言う商品名でも知られている）、例えばポロキサマー４０７又はポロキサマー１８８、樟脳、Ｔｗｅｅｎ−２０、又はそれらの混合物を含む。一例では、調製物は、保存料を含まない製剤を維持するのに有用であり得る、５０％又は６０％のグリセロールを有するポリソルベート（例えば、ポリソルベート−８０）を利用する。一例では、舌下製剤は、レシチン及びタウロコール酸塩の一方又は両方を含む。
【００７０】
一実施形態において、舌下製剤は保存剤を含まない。
【００７１】
現在記載している方法において、特に有用性のあるのは、Ｔｗｅｅｎ−８０（例えば、製剤の０．５％〜１０％で）であり、これは、ＧＬＡと一緒に用いた場合、ＧＬＡ溶液を超音波処理してナノ懸濁物を形成する必要性を低減（又は消去）することが出来、例えば規模拡大工程中で特に有用である。
【００７２】
本明細書に記載した方法により、製造した組成物中のＧＬＡの濃度は、約０．００２ｍｇ／ｍＬ〜約８．０ｍｇ／ｍＬ、約０．００５ｍｇ／ｍＬ〜約７．０ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約６．０ｍｇ／ｍＬ、約０．０２ｍｇ／ｍＬ〜約５．５ｍｇ／ｍＬ、例えば約０．０５ｍｇ／ｍＬ〜約５．０ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約４．０ｍｇ／ｍＬ、約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約３．５ｍｇ／ｍＬ、約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約３ｍｇ／ｍＬ、約０．４ｍｇ／ｍＬ〜約２．５ｍｇ／ｍＬ、約０．５〜約２．０ｍｇ／ｍＬ、又は約０．６〜約２ｍｇ／ｍＬの範囲で良い。例えば、ＧＬＡ濃度は、約０．０２ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．８ｍｇ／ｍＬ又は約１．６ｍｇ／ｍＬで良い。更に、本明細書に記載したＧＬＡを調製する方法において、ＧＬＡ対ＤＰＰＣのモル比は、約１：１〜約１：３、例えば約１：２の範囲で良い。ある場合には、ＧＬＡの外に、少なくとも１種の他のタイプの脂質及び／又はアジュバント（例えば、少なくとも２種、少なくとも３種、又は少なくとも４種の脂質及び／又は少なくとも２種、少なくとも３種、又は少なくとも４種のアジュバント）を本明細書に記載した組成物に含ませても良い。代替物又は添加物として、場合によっては、ＤＰＰＣの外に、少なくとも１種の他のタイプの界面活性剤（例えば、少なくとも２種、少なくとも３種又は少なくとも４種の界面活性剤）を本明細書に記載した組成物に含めて良い。
【００７３】
ＧＬＡ及びピーナッツタンパク質の両方を含む組成物は、上記記載のピーナッツタンパク質の水溶液（例えば、本明細書に記載した全ピーナッツ抽出物又は個々のアレルゲン）をＧＬＡ及び界面活性剤（例えば、ＤＰＰＣ）と混合することにより調製することが出来る。或いは、ＧＬＡを抗原と共沈殿させても良い。一例では、この方法は、クロロホルム等の溶媒中でグルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）とを１：２のモル比で共溶解し、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成し、次いで、ピーナッツタンパク質等の形態でピーナッツアレルゲンをその混合物に添加することを含む。それから、溶媒、例えばクロロホルムをＧＬＡ／ＤＰＰＣ／ピーナッツタンパク質混合物から、例えば真空下で除去する。次いで、ＧＬＡ／ＤＰＰＣ  ／ピーナッツタンパク質混合物に水を添加して混合物を再水和させ、次いで混合物を、例えば超音波処理及び／又は微小流動化により撹拌する。別の例示的な方法は、グルコピラノシル脂質アジュバント（ＧＬＡ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）とをクロロホルム中モル比１：２で共溶解してＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成することを含む。次いで、クロロホルムをＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物から、例えば真空下で除去する。それから、水をＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物に添加し、次いで混合物を（例えば、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘによる機械的攪拌、又は超音波処理及び／又は微小流動化を用いて）撹拌する。次いで、ピーナッツタンパク質抽出物を、タンパク質の所望濃度を達成するのに適切な量を製剤に添加する。
【００７４】
別の例示的な方法では、ＧＬＡ及びＤＰＰＣをクロロホルム中モル比１：２で共溶解してＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物を形成する。次いで、クロロホルムをＧＬＡ／ＤＰＰＣ混合物から、例えば真空下で除去する。次いで、混合物を噴霧乾燥してＧＬＡ／ＤＰＰＣの固体粒子を形成する。次いで、ピーナッツタンパク質を、流動床コーティング工程によってＧＬＡ／ＤＰＰＣ粒子の表面上に積層化する。最終組成物は、ＧＬＡとピーナッツタンパク質とを含有する乾燥粉末である。
【００７５】
或いは当業者は、ＧＬＡ及びピーナッツタンパク質の別個の組成物を本明細書に記載したように作製し、患者への投与直前に一緒に混合しても良いことを理解するであろう。
【００７６】
組成物は、医薬的に受容される希釈剤、担体又は賦形剤を用いて、投与に都合よく適するように処方し得る。医薬賦形剤の詳細は、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ」、第７版（２０１２）、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、，  Ｌｏｎｄｏｎ，  Ｅｄｉｔｏｒｓ：Ｒｏｗｅら、に見出し得る。生理学的に受容し得る担体及び希釈剤としては、例えば、滅菌水又はデキストロース５％水溶液が挙げられる。滅菌生理食塩水及び／又は生理学的ｐＨを有するリン酸緩衝食塩水を使用しても良い。保存剤、安定剤、染料及び／又は香味剤は、本明細書に記載した医薬組成物中に供しても良い。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸及びｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルを保存剤として添加しても良い。抗酸化剤及び／又は懸濁化剤を含んでも良い。
【００７７】
現在記載している組成物の舌下投与は、本発明において特に有用である。ゲル又は他の粘性製剤は、舌下表面と抗原との接触が増加するために有用であり得る。当業者は、製剤が粘膜組織に物理的又は化学的に結合する必要がないことを理解するであろう。
【００７８】
舌下投与に適した製剤は、水性及び非水性滅菌溶液を含んでいても良い。そのような製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、静菌性化合物、及び製剤を個体の体液、例えば粘液と等張にする溶質を含んでも良い。水性及び非水性滅菌懸濁液は、懸濁剤又は増粘剤を含んでも良い。
【００７９】
具体的には、本明細書に記載した組成物は、ＧＬＡ単独又は抗原単独を有する組成物及びＧＬＡ及び抗原の両方を有する組成物を含み、舌下から送達するための形態、例えばゲル、カプセル、ゲルカプセル、ロゼンジ、錠剤、スプレー、ドロップ、細片、若しくはフィルム、などの舌下送達用の形態に導入しても良く、又はパッチ（例えば、長期放出送達用）又はポンプ又は噴霧器のようなデバイスの中に配置しても良い。組成物は、例えば、計量式投薬ポンプによって投与しても良い。或いは、組成物は複数の粒状顆粒又は微小球体中に組み入れても良く、場合により袋などの容器に梱包しても良い。
【００８０】
例として、ピーナッツタンパク質及びＧＬＡを、別々の製剤中で、又は組合せた製剤の、何れかで送達するために、噴霧又はドロップ製剤を調製しても良い。本発明において有用な噴霧又はドロップ製剤は、ＮａＣｌ約０．５％、重炭酸ナトリウム０．５４％、及びグリセロール５０％を含んでも良い。或いは、本発明において有用な噴霧又はドロップ製剤は、ＮａＣｌ約０．５％、重炭酸ナトリウム０．５４％、及びグリセロール６０％を含んでも良い。製剤は、ｐＨ約４．０〜約８．４（例えば、ｐＨ５．０、ｐＨ５．５、ｐＨ６．０、ｐＨ６．８、ｐＨ７．０、ｐＨ７．５又はｐＨ８．０）を有し得る。１つの例示的な噴霧又はドロップ製剤は、クエン酸香味（例えば、オレンジ又はチェリー）などの香味を含み、かつｐＨ４〜４．５を有する。
【００８１】
別の例では、組成物は、膏薬、ペースト、ゲル、溶液、粉末などの形態でも良い。ゲルは、カルボポール、又、カルボマーとしても知られる、カルボキシビニルポリマー、又はヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、又はヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、メチルセルロースなどのセルロースベースの増粘剤を用いて処方しても良い。ゲルは、アラビアゴム、アルギン酸、ベントナイト、カラギーナン、セトステアリルアルコール、ゼラチン、グアーガム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、マルトデキストリン、ポリビニルアルコール、プロピレンカーボネート、アルギン酸プロピレングリコール、コロイド状二酸化ケイ素、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、及び／又はキサンタンガム等を用いて、簡便に処方しても良い。特に有用なものは、カルボポール及びセルロースベースの薬剤である。
【００８２】
舌下錠として製剤化された医薬組成物は、本明細書に記載した方法において特に有用である。舌下錠剤は舌の下に置き、通常は小さく平らで、軽く圧縮して軟らかい錠剤を得る。錠剤は組成物を迅速に吸収させるために溶解が容易でなければならない。種々の技術を用いて、迅速に崩壊するか、溶解する錠剤を製剤することが出来る（例えば、Ｆｕら、Ｃｒｉｔ  Ｒｅｖ  Ｔｈｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ。２００４、２１：４３３−４７６を参照のこと）。直接圧縮は、製剤への超崩壊剤の組み込み、又は速い錠剤崩壊を達成するための高い水溶性を有する賦形剤の使用を包含出来る一つの技術である。直接圧縮は、製剤手順中に水又は熱の使用を必要とせず、かつ湿気や熱に弱い薬物に関して理想的な方法である。超崩壊剤は、例えば、架橋セルロース、架橋ポリビニルピロリドン、架橋デンプン及び架橋アルギン酸を含む。舌下錠剤は、結合剤として、例えば、ゼラチン、微結晶セルロース、デキストリンを含むスクロース、ポリビドン、トラガカント、アラビアゴム、デンプン、又はメチルセルロース等、マトリックス支持／崩壊剤として、例えば、マンニトール、Ｌ−アラニン、コーンスターチ、アルギン酸、セルロース又はセルロース誘導体、ポビドン又はクロスカルメロースナトリウム等、潤滑剤として、例えば、ステアリン酸、ステアリン酸塩（例えば、ステアリン酸マグネシウム）、ステアリルフマル酸ナトリウム、又はタルク等、緩衝剤、界面活性剤、付着防止剤として、コロイド状二酸化ケイ素、硫酸カルシウム、塩化カルシウム、タルク、トウモロコシデンプンから選択されるもの、極性及び非極性溶解剤として、水、エチルアルコール、アセトン、ミリスチン酸イソプロピル、ポリオキシプロピレン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール、７０％ソルビトール、ポリエチレングリコール、鉱油、ペトロラタム、ラノリン、植物性ワックス、動物性ワックス、オリーブ油、綿実油、コーン油、から選択される植物性油又はそれらの混合物等から選択されるもの、及び甘味料（例えば、デキストロース、スクラロース、ステビア、アスパルテーム、アセスルファムカリウム、フルクトース、グルコース、マンニトール、ソルビトール、糖及びスクロース）、又は他の香味剤（例えばチョコレート、メントール、バニリン、シナモン、ソルビトール、クエン酸、サクラ花フレーバー、オレンジフレーバー、パイナップルフレーバー、ピーチフレーバー、ブドウフレーバー、又はイチゴ又はブルーベリーフレーバーのようなベリーフレーバー）等を含んでいても良い。一実施形態において、香味料は、ＳｙｒＳｐｅｎｄ  ｃｈｅｒｒｙ（登録商標）、ＳｙｒＳｐｅｎｄ  ｇｒａｐｅ（登録商標）又はＯｒａ−Ｓｗｅｅｔ  ｃｈｅｒｒｙ（登録商標）のようなクエン酸フレーバーである。香味剤は０．０００１％〜５．０％の割合で存在しても良い。
【００８３】
代表的な錠剤には、速崩壊性舌下錠（ＦＤＴ）（凍結乾燥物でも良い）、生体付着性舌下錠、圧縮錠（ＯＤＴ−口腔内崩壊錠）、及び脂質マトリックス舌下錠を含む。このような錠剤を製造する代表的な方法は、例えば、Ｎｉｂｈａら、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、ｐ．９１３−９２３，ｖｏｌ．３（２）Ａｐｒ．−Ｊｕｎｅ  ２０１２に記載されている。舌下錠は、例えば、ピーナッツ抽出物（焙煎又は生ピーナッツ由来）、ＧＬＡ、コーンスターチ及びラクトース一水和物のステアリン酸マグネシウムを含んでも良い。舌下錠は、別の例として、ピーナッツ抽出物（焙煎又は生ピーナッツ由来）、ＧＬＡ、マンニトール、微結晶質セルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、例えばクロスカルメロースナトリウム、コロイド状無水シリカ、ステアリン酸マグネシウム及びラクトース一水和物を含んでも良い。舌下錠剤の更に別の例としては、ピーナッツ抽出物（焙煎又は生ピーナッツ由来）、ＧＬＡ、ゼラチン、マンニトール及び水酸化ナトリウムを含むものである。幾つかの例では、舌下錠剤製剤は、ＧＬＡ又はピーナッツ抽出物の両方ではなく、１つを含んでも良い。
【００８４】
又、薄膜又は細片が有用である。薄膜又は細片は、液体、例えば、患者の唾液と接触すると溶解し、フィルム又は細片が溶解するのに適切な時間、舌の下に置かれる。速溶性フィルムは、可塑化親水コロイドから作製しても良い。フィルムは、通常、水分に対して安定であり、可撓性であり、包装材料や指に粘り着くのを防ぐように処方しても良い。舌下投与のための薄膜又は細片を作製する例示的な方法としては、溶液流延法、半凝固成形法、ホットメルト押出法、固体分散押出法及び／又は圧延が含まれる（例えば、Ｎｉｂｈａら、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、ｐ．  ９１３−９２３、ｖｏｌ．３（２）Ａｐｒ．−Ｊｕｎｅ  ２０１２）。当業者は、本発明の薄膜又は細片が多数の異なる構成を取り得ることを理解するであろう。例えば、ＧＬＡ又はピーナッツタンパク質（例えば、焙煎又は生ピーナッツから製造したピーナッツ抽出物）、又はその両方を薄膜の内部に配置しても良い。あるいは、ＧＬＡ又はピーナッツタンパク質（例えば、焙煎又は生ピーナッツから製造したピーナッツ抽出物）、又はその両方を、薄膜の表面上に配置しても良い。又、ＧＬＡ又はピーナッツタンパク質（例えば、焙煎又は生ピーナッツから製造したピーナッツ抽出物）、又はその両方を、薄膜の内部及び表面の両方に配置しても良い。
【００８５】
舌下投与のための薄膜又は細片は、通常、１種又はそれ以上の、例えば、マルトデキストリンを有するプルラン又は微結晶セルロース等のポリマー、グリセロール、プロピレングリコール、低分子量ポリエチレングリコール、ジメチル、ジエチル又はジブチルフタレートなどのフタレート誘導体、トリブチル、トリエチル、アセチルクエン酸塩、トリアセチン又はヒマシ油などのクエン酸塩誘導体、甘味料、着色剤、及び増粘剤、及び安定化剤を含有する。
【００８６】
特に有用な化合物は、患者の舌下で製剤の粘着力又は保持力を増強するために製剤に添加しても良いもの、即ち粘膜付着剤である。例示的な粘膜付着剤には、キトサン、ヒアルロン酸塩、アルギン酸塩、ゼラチン、コラーゲン、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）、ポリ（Ｌ−リジン）、ポリ（エチレンイミン）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（２−ヒドロキシルエチルメタクリレート）、及びそれらの誘導体又はコポリマー、並びにそれらの任意の組合せを含む。当業者は、本明細書に記載した製剤又は剤形の何れかに粘膜付着剤を添加しても良いことを理解するであろう。
【００８７】
固体状剤形を製造するための様々な商業的供給源があり、Ｚｙｄｉｓ（登録商標）技術を使用するＣａｔａｌｅｎｔ（登録商標）、ＳｕｇｌｅｔｓRＳｕｇａｒ  Ｓｐｈｅｒｅｓを製造するＣｏｌｏｒｃｏｎR、Ｕｍａｎｇ  Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈは、Ｓｐｒａｙｓｐｈｅｒｅｓ（登録商標）微結晶セルロース（ＭＣＣ）ペレットを製造している。
【００８８】
製剤は、単位用量又は複数用量の容器、例えば、密封したアンプル中に及びバイアル中に存在しても良く、かつ、使用直前に滅菌した液状担体の添加のみを必要とする凍結乾燥状態で保存しても良い。
【００８９】
治療及び組成物の管理
本明細書に記載した治療を実施するために必ずしも必要という訳ではないが、患者を、ピーナッツアレルギーと診断し、及び／又は治療前及び／又は治療中に標準的な臨床基準に従った監視をしても良い。標準的な臨床基準には、例えば、ピーナッツ摂取に一時的に関連する１型過敏反応の病歴（例えば、じん麻疹、腫脹、喘  鳴、腹痛、嘔吐、呼吸困難等）を含み得る。陽性皮膚プリック試験（じん麻疹直径＞３ｍｍ）又はイムノキャップ血清ＩｇＥ＞０．３５ｋＵ／ｌによるピーナッツ特異的ＩｇＥの存在は、ピーナッツアレルギーを指し示し得る。患者の血液は、例えば、以下の実施例の項目に詳細に記載される好塩基球活性化試験を用いて検査しても良い。
【００９０】
組成物は、投薬処方に適合する方法で投与され、その量は、予防的に及び／又は治療的に有効である。投与量は、治療する患者、患者の免疫系の抗体合成の能力、及び所望する防護の程度に依存する。場合によっては、患者は、ピーナッツタンパク質を増量する投与計画を含む一連の投与で治療しても良い。投与する有効成分の正確な量は、当業者の判断に依存しても良く、各々、個々の患者に固有であっても良い。組成物は、単回投与計画でも、又は複数回投与計画で投与しても良い。
【００９１】
例示的な投薬レジメンでは、ＧＬＡを含む固体又は液体組成物等、ＧＬＡを含む組成物を最初に投与し、続いてアレルゲン、例えばピーナッツアレルゲンを含む組成物（例えば固体又は液体組成物）を投与する。別の例示的な投薬レジメンでは、ＧＬＡ及びピーナッツアレルゲンの両方をほぼ同時に投与する。１つのレジメンでは、ＧＬＡ（例えば、１μｇ／５０μｌ又は１０μｇ／５０μｌ、又はこれらの２つの値の間の範囲にある液体製剤）及びＤＰＰＣ（又はＧＬＡ、ＤＰＰＣ及びグリセロール、又はＧＬＡ、ＤＰＰＣ、及びＴｗｅｅｎ８０）を含む組成物を提供する。ＧＬＡ組成物は、舌下的に、即ち患者の舌の下に、ある量で（例えば、液体製剤約５０μｌ〜約５００μｌ）投与する。  ＧＬＡ組成物を患者へ投与した後、及び／又はその間に、ピーナッツタンパク質組成物のある量（例えば、６μｇ／ｍＬ又は２５．６ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を包含する、約６μｇ／ｍＬ〜約２５．６ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度、を有する液体製剤約５０μｌ〜約２００μｌ）を患者の舌の下に投与する。ここで、ピーナッツタンパク質組成物は、例えば、グリセロール５０％又はグリセロール６０％又はグリセロール７０％、及び場合により保存剤としてフェノール０．４％、ＮａＣｌ  ０．２％〜０．５％、重炭酸ナトリウム０．２０％〜０．４５％、グリセロール５０％、を含んで良く、ＰＨは６．８〜８．４である。一実施形態では、ピーナッツタンパク質組成物は、例えばグリセロール約６０％、ＮａＣｌ  ０．２５％、重炭酸ナトリウム０．２７％、グリセロール６０％、及び水を含み、ｐＨは約８．２である。
【００９２】
別の例示的なレジメンでは、ＧＬＡ（例えば固体製剤）とＧＬＡの可溶化を助ける化合物、例えばＤＰＰＣ又はポリソルベート、例えばＰＳ８０又はＰＳ２０、とを含む組成物を提供する。ＧＬＡ組成物は、ＤＰＰＣ、ポリソルベート、グリセロール、又はＴｗｅｅｎ（例えば、Ｔｗｅｅｎ８０）の１種又はそれ以上を含んで良い。ある量のＧＬＡ組成物を舌下的に、即ち患者の舌の下に投与する。例えば、カプセル又は錠剤の形態中の固体製剤は、舌下的投与のために、治療的有効量のＧＬＡ、例えば０．５μｇ、１μｇ、１．５μｇ、２μｇ、３μｇ、５μｇ、７μｇ、１０μｇ、１２μｇ、１５μｇ、２０μｇ又はそれ以上のＧＬＡを含有して良い。
【００９３】
幾つかの例では、ＧＬＡを含む固形製剤とピーナッツタンパク質を含む別個の固形製剤とを、ほぼ同時に、固形製剤を患者の舌の下に、又は舌の下の反対側に一緒に配置することにより投与する。他の例では、ＧＬＡ及びピーナッツタンパク質の両方を含む単一の固形製剤を患者の舌の下に配置する。他の例では、ＧＬＡを含む液体製剤及びピーナッツタンパク質を含む別個の液体製剤とを、ほぼ同時に、液体製剤を患者の舌の下、又は舌の下の反対側に一緒に配置することにより、投与する。更に他の例では、ＧＬＡ及びピーナッツタンパク質の両方を含む単一の液体製剤を患者の舌の下に配置する。更に別の例では、各タイプの組成物の一つ、即ち１つの固体（ＧＬＡ又はピーナッツタンパク質を含む）及び１つの液体（ＧＬＡ又はピーナッツタンパク質を含む、即ちいずれの成分も固体組成物に含まれない）を、患者に投与しても良い。
【００９４】
患者に組成物を投与する頻度は、患者の必要性及び要求される防護レベルに依存して変化し得る。例えば、場合によっては、各組成物（即ち、ＧＬＡ組成物及びピーナッツタンパク質組成物）の１日の単回投与量のみを患者に投与する。他の例では、患者は、１日に２回、３回、又はそれ以上の回数など、１日に２回以上投与しても良い。更に他の例では、患者には、１日１回、複数日間（例えば、少なくとも２日間、例えば少なくとも３、４、５、６又は７日間）、若しくは、数週間（例えば、少なくとも２週間、例えば少なくとも３、４、５、６、７又は、８週間以上）、若しくは、数ヶ月間（例えば、少なくとも２か月間、例えば少なくとも３、４、５、６、又は６ヶ月以上）、又は、１日１回以上（例えば、少なくとも、２回又は少なくとも３回）、複数日間（例えば、少なくとも２日間、例えば少なくとも３、４、５、６又は７日間）、若しくは、数週間（例えば、少なくとも２週間、例えば少なくとも３、４、５、６、７、８又は、８週間以上）、若しくは、数ヶ月間（例えば、少なくとも２か月間、例えば少なくとも３、４、５、６、又は、６ヶ月以上複数年間迄）、投与しても良い。当業者は、ＧＬＡ／ピーナッツタンパク質組合せ製剤を患者に送達するために、この方法を適合させ得ることを理解するであろう。このような製剤は、液体の組合せＧＬＡ／ピーナッツタンパク質製剤、又は固体の溶解性錠剤の複合ＧＬＡ／ピーナッツタンパク質製剤の形態をとり得る。
【００９５】
本明細書において特徴付けたＧＬＡ及びピーナッツＳＬＩＴ製剤の投与に適した被験体としては、１歳又はそれより年長の子供、例えば４歳以上及びそれより年長の子供を含む。本明細書において特徴付けたＧＬＡ及びピーナッツＳＬＩＴ製剤の投与に適した患者としては、２〜１２歳の子供、例えば４〜１０歳、１３〜２０歳の未成年、及び２１歳及びそれより年長の成人が含まれる。
【００９６】
本明細書に記載したピーナッツタンパク質／ＧＬＡ組合せ舌下治療の有効性は、患者の特定のマーカー、例えばサイトカイン及びインターロイキンなどの免疫系のマーカーの発現を調べることによって測定することが出来る。例えば、患者は、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、又はＩＦＮ−γ、ＩＦＮ−β等の、Ｔｈ１サイトカイン又はＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、又はＩＬ−１３等のＴｈ２サイトカインの発現に及ぼす製剤の効果を評価出来る。幾つかの実施形態において、患者は、ＩＬ−１０、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＧＭ−ＣＳＦ、ＣＲＰ（Ｃ反応性タンパク質）フィブリノゲン、ＲＳＡＤ２、ＩＦＩＴ１Ｂ、ＴＬＲ４、ＴＮＦ□、ＴＮＦγ、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ１０、ＣＣＬ４、ＣＣＬ７、ＣＤ１５４、タイプＩのインターフェロン及び／又は生体試料、例えば唾液又は血液又は血清、中のＴＧＦ□、又は舌下粘膜からの試料（例えば、綿棒又は生検で）に及ぼす効果を評価する。例えば、ＧＬＡ及び抗原を含む製剤を投与すると、抗原への曝露の後のＣＤ１５４又はＩＬ−１３発現の発現上昇を防止し、ＩＬ−１０発現レベルを維持又は増加させ、又はＩＬ−１０発現の低下を防止することが出来る。バイオマーカー発現に及ぼす効果は、患者から単離した末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の中で分析することが出来る。発現は、ｍＲＮＡ又はタンパク質レベルの変化を分析することによって監視することが出来る。患者は又、樹枝状細胞（ＤＣ）の発現上昇又はＣＤ４０、ＣＤ８０、ＣＤ８３、ＣＤ８６、及びＭＨＣ  ＩＩの内の１種又はそれ以上のマクロファージ細胞表面発現について監視することも出来る。例えば、患者は、又、ＣＤ８０及びＣＤ８６のマクロファージ発現の発現上昇について監視することが出来る。患者はまた、唾液ピーナッツアレルゲン特異的ＩｇＡ、ピーナッツアレルゲン特異的ＩｇＥ、ピーナッツアレルゲン特異的ＩｇＧ、又はアレルゲン特異的Ｉｇ４の１種又はそれ以上の発現についても監視することが出来る。一実施形態では、患者は、患者の舌下粘膜由来の試料等の生物学的試料中のＩＬ−６レベルに及ぼす製剤の効果に関して評価される。通常、ＧＬＡ／ピーナッツアレルゲン製剤の投与により、舌下投与部位で用量依存的にＩＬ−６レベルの上昇を引き起こす。
【００９７】
幾つかの実施形態では、好塩基球活性化試験を使用して、ＧＬＡ／ピーナッツアレルゲン舌下療法の効果を測定する。例えば、好塩基球活性化試験を使用して、患者からの血液試料中のバイオマーカー発現を標本抽出することが出来る。例示的なバイオマーカーには、ＩｇＥ、ＣＤ２０３ｃ、ＨＬＳ−ＤＲ、ＣＤ１２３、ＣＤ６３、及びＬｉｎが含まれる。通常、ＧＬＡ／ピーナッツアレルゲン試料で治療した患者由来の血液試料中では、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ６３及び好塩基球脱顆粒（例えば、ヒスタミン及びベータヘキソサミニダーゼ放出）が、治療前のレベルと比較して、減少する。また、ピーナッツアレルゲン誘発記憶Ｔ細胞活性化は減少し、これはアレルゲン誘発性増殖、及びＩＬ−２及びＩＬ−１３発現の減少、並びにＩＦＮγ及びＩＬ−１０発現の増加によって明白になるだろう。又、患者をＴ調節細胞活性の予想される増加に関して、監視することも出来、これは通常、ＦｏｘＰ３陽性Ｔ細胞の増加、及びＩＬ−１０発現の増加、及び調節Ｔ細胞のＦｏｘＰ３遺伝子座における後成的な変化の増加によって証明される。患者を又、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｃ、及びＩｇＧ４を含む、ピーナッツアレルゲン特異的ＩｇＧの増加について監視することが出来る。
【００９８】
更に、本発明は、組合せ治療を企図している。例えば、当業者は、本明細書に記載した治療方法がアレルギー、例えばピーナッツアレルギー、のための他の当技術分野で公知の治療、と併せて患者に投与され得ることを理解するであろう。このような併用治療には、アレルギーそのものに関する既知の治療、及び／又は患者におけるアレルギーの１種又はそれ以上の症状を含み得る。
【００９９】
更に、特定のピーナッツアレルゲンは体内で他の非ピーナッツアレルゲンと交差反応するため、当業者は、本明細書に記載した組成物が他の種類のアレルギーの治療に有用であり得ることを理解するであろう。例えば、本明細書に記載したピーナッツアレルゲンを含む組成物及び方法は、カバノキの花粉に対するアレルギーの治療に有用であり得る。代替的に又は添加的に、組成物及び方法は、種取りした果実、例えば、桃及び桃と同族の果実及び製品に対するアレルギーの治療に有用であり得る。
【０１００】
以下の実施例を参照して本発明を説明するが、これは例示に過ぎず、限定する訳ではない。
【実施例】
【０１０１】
実施例１  ＧＬＡ及びピーナッツアレルゲンを舌下に共投与すると、ピーナッツアレルギーに対して防御効果をもたらす。
本実施例では、ＧＬＡとピーナッツアレルゲンとを組合せて、舌下投与した場合、ピーナッツアレルゲンによるその後の暴露に対して防御を与えることを実証するｉｎ  ｖｉｖｏでのマウス研究を記載する。すべての実験はマウスモデルＣ３Ｈ／ＨｅＯｕＪで実施した。簡単に説明すると、マウスは、０、１、２、７、１４及び２１日目に、粗ピーナッツ抽出物（ＣＰＥ）１ｍｇ、及び／又はコレラ毒素（ＣＴ）１０μｇを感作させた。次いで、マウスを、２８、３５、４２、及び４９日目に舌下的に、ＣＰＥ（０．５μｇ、５．０μｇ、又は５０μｇ）、ＧＬＡ（水性製剤、ＧＬＡ−ＡＦ）及びメチルセルロース（ＭＣ）（１．８７５％）で治療した。最後に、ＣＰＥ  ５００μｇを腹腔内（ＩＰ）に暴露した。実験は５７日目に終了した。実験手順書を下表１に要約した。
【０１０２】
【表１】
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【０１０３】
結果を図１Ａ、図１Ｂ、図２Ａ、及び図２Ｂに示した。各図において、ｘ軸には、所与のマウス群に投与した治療の説明を与えた。全てのマウスにＣＰＥ  ５００μｇを腹腔内投与し、これはｘ軸の下に示した。図１Ａ及び１Ｂにおいて、ｙ軸は、各治療に関し、マウスにおいて観察されたアナフィラキシースコアを０〜５のスケールで提供したものである。図２Ａ及び図２Ｂにおいて、ｙ軸は暴露後のマウスにおいて観察される深部体温の変化を提供したものである。重篤な反応は、アナフィラキシースコア（図１Ａ及び１Ｂ）の増加又は体温の低下（図２Ａ及び２Ｂ）として現れた。深部体温の低下又はアナフィラキシーの増加が大きいほど、反応はより重篤である。ＩＰ暴露の後の、重篤な体温低下がより少なくなるか、又はアナフィラキシースコアがより低くなることが観察された場合、防護作用が認められる。
【０１０４】
方法  舌下投与として、無針注射器を用いて、麻酔したマウスの舌下に化合物５μｌを適用した。マウスをケージに戻す前に、マウスを１０分間監視し、用量を吸収する時間を確保した。
【０１０５】
生理食塩水はＮａＣｌ  ０．９％とした。ＣＰＥをＤＰＢＳ（ダルベッコ燐酸緩衝生理食塩水）中で処方し、生理食塩水で希釈した。  ＧＬＡ−ＡＦは、ＧＬＡとＤＰＰＣとをモル比１：２で水中で混合することにより、処方した。投与直前に、メチルセルロースを最終濃度まで添加してゼラチン状混合物を生成した。混合物を激しく渦動し、次いで混合物を１０分間超音波処理した。
【０１０６】
同時処方するＣＰＥ及びＧＬＡ−ＡＦのために、ＣＰＥを生理食塩水中で０．４ｍｇ／ｍＬに希釈した。水中で混合物ＧＬＡ−ＡＦ：ＤＰＰＣのモル比１：２をＣＰＥ  ０．４ｍｇ／ｍＬの混合物に添加して、ＧＬＡ  ０．８（ｍｇ／ｍＬ）／ＣＰＥ  ０．２（ｍｇ／ｍＬ）溶液を得た。次いで、そのＧＬＡ  ０．８（ｍｇ／ｍＬ）／ＣＰＥ  ０．２（ｍｇ／ｍＬ）溶液にメチルセルロースを添加して、ＧＬＡ  ０．４（ｍｇ／ｍＬ）／ＣＰＥ  ０．１（ｍｇ／ｍＬ）／メチルセルロース１．８７５（％）の溶液の最終溶液を作製した。この混合物を激しく渦動し、次いで１０分間超音波処理した。この最終溶液５μＬをマウスに舌下投与し、ＧＬＡ−ＡＦ２．０μｇ＋ＣＰＥ０．５μｇの用量を送達した。
【０１０７】
実施例２  ＧＬＡ及び抗原の舌下的同時投与により、頸部流入領域リンパ節における抗原特異的Ｔ細胞の増殖を誘発する
Ｏｖａ特異的ＯＴ−ＩＩ  ＴｃＲ形質転換Ｔ細胞を細胞トラッカーバイオレット色素で標識し、同系間の野生型マウスに養子導入した。次いで、マウスに、ＧＬＡ（０．２μｇ）単独（図４Ａ及び４Ｂ）、Ｏｖａ３２３−３３９ペプチド（１０μｇ）単独（図４Ｃ及び４Ｄ）、又はＯｖａペプチドと同時投与するＧＬＡ（図４Ｅ及び４Ｆ）を舌下的に投与した。４日後、頸部流入領域リンパ節（図４Ａ、４Ｃ及び４Ｅ）及び脾臓（図４Ｂ、４Ｄ及び４Ｆ）を取リ除き、ＯＴ−ＩＩ  Ｔ細胞増殖（細胞トラッカー色素蛍光の減少を経由する）をフローサイトメトリーで測定した。図４Ａ〜４Ｆに示したように、ＧＬＡ単独でも、又は抗原単独でもなく、Ｏｖａ抗原と共にＧＬＡを舌下投与すると、流入領域リンパ節において抗原特異的Ｔ細胞増殖を誘起するが、脾臓ではしない。
【０１０８】
方法  舌下投与は、実施例１に記載したように実施した。
【０１０９】
Ｏｖａペプチド及び／又はＧＬＡの処方には、実施例１に記載のメチルセルロースを含む。メチルセルロース＋Ｏｖａペプチドの混合物、及びメチルセルロース＋Ｏｖａペプチド＋ＧＬＡの混合物は投与前日に調製した。
【０１１０】
実施例３  ＧＬＡ及びＯｖａ３２３−３２９ペプチドの舌下同時投与後の頸部流入領域リンパ節における抗原特異的Ｔ細胞増殖
Ｏｖａ特異的ＯＴ−ＩＩ  ＴｃＲ形質転換Ｔ細胞を細胞トラッカーバイオレット色素で標識し、同系間の野生型マウスに養子導入した。その後、マウスに、舌下的に、ＧＬＡ（０．２μｇ、０．０２μｇ又は０．００２μｇ）をＯｖａ３２３−３３９ペプチドと共に、又はＧＬＡを含まない（０ｍｇ）ペプチドを同時投与した。４日後、頸部リンパ節を除去し、ＯＴ−ＩＩ  Ｔ細胞増殖（細胞トラッカー色素蛍光の減少を経由）をフローサイトメトリーにより測定した。図５に示すように、抗原と共にＧＬＡを舌下投与すると、流入領域リンパ節における抗原特異的Ｔ細胞増殖が増強し、しかもそれは用量依存的であった。
【０１１１】
方法  舌下投与は、実施例１に記載したように実施した。
【０１１２】
Ｏｖａペプチド及び／又はＧＬＡの処方には、実施例１に記載のメチルセルロースを含む。メチルセルロース＋Ｏｖａペプチドの混合物、及びメチルセルロース＋Ｏｖａペプチド＋ＧＬＡの混合物は投与前日に調製した。
【０１１３】
実施例４．  ＩＬ−６発現は舌下投与部位において増加した。
異なる３種の用量のＧＬＡので治療した非ヒト霊長類（ＮＨＰ）からの舌下粘膜ブラッシングのｍＲＮＡ遺伝子発現分析では、舌下投与の６時間後にＩＬ−６の用量依存的発現を示した。
【０１１４】
ＧＬＡを、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）中に処方し、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（滅菌）水中、ＧＬＡ：ＤＰＰＣが１：２のモル比（Ｍ：Ｍ）とした。動物をケタミン（５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ）／デクスメデトミジン（０．０１ｍｇ／ｋｇ〜０．０１６ｍｇ／ｋｇ）、ＩＭ（筋肉内）でケージ内にいる間に、鎮静させた。一度鎮静させ、それらを実験室に持ち込み、循環水加熱パッド（Ｇａｙｍａｒ）上に置いた。Ｃｏｐａｎ  ＦＬＯＱＳｗａｂｓ（商標）を使用して投与の１５分前に舌下（右側）及び左頬の袋粘膜ブラッシングを行い、ＲＬＴ緩衝液（ＱＩＡｍｐ  Ｍｉｎｉｋｉｔ  Ｐｌｕｓ、Ｑｉａｇｅｎ）中に置き入れ、渦動し、直ちにドライアイス上で凍結した。ＧＬＡ（注射器を介して１００μｌ投与）の舌下投与を動物の舌の右下側で行い、３分間粘膜に吸収させた。更に投薬して６時間後、２４時間後及び４８時間後に舌下及び頬ブラッシングを得た。
【０１１５】
ＲＮＡ処理は、ｇＤＮＡ（ゲノムＤＮＡ）除去カラムを備えるＱＩＡｍｐ  Ｍｉｎｉｋｉｔ  Ｐｌｕｓ（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて、頬及び舌下からのスワブで実施した。遺伝子発現は、標的遺伝子と内在性対照物との間の相対的遺伝子発現定量を計算する比較ＣＴ法を用いて定量した。全ての標的遺伝子を、ハウスキーピング遺伝子ＡＲＬ１の発現と比較して定量した。相対発現を使用して、ベースライン発現の倍数を「（関心のある時点での相対的な遺伝子発現）／（ベースラインとする相対的遺伝子発現）」として計算した。
【０１１６】
発現は舌下粘膜に局在した、というのは、ＩＬ−６は、この時点で、頬からのブラッシング中、又は血液中には検出されなかったからである。ＧＬＡを舌下投与して２４時間後、ＩＬ−６発現は検出されなかった。同時に、ＧＬＡの現行の処方は、口腔内で極めて局所的に作用し、１日以上持続せず、しかも、０．１〜５μｇの範囲で活性な電位窓（ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｗｉｎｄｏｗ）を有することがデータから示唆された。この結果はまた、ＩＬ−６発現がＧＬＡ活性のバイオマーカーであり得ることを示唆した。
【０１１７】
実施例５．  好塩基球活性化試験
本明細書は、好塩基球活性化試験を提供する。テストには少なくとも２つの用途がある。第１は、クリニックにおける使用で、例えば、ピーナッツアレルギー患者の血清中のバイオマーカーを測定するための１本の管式分析に関する。第２は、ピーナッツ抽出物の効能（アレルゲン性）を測定する分析への使用に関連し、本明細書に記載した組成物を産生する際に使用される、異なるバッチのピーナッツ抽出物の効能を標準化するために使用出来る。
【０１１８】
一般に、例示的な試験は以下のように実施出来る。ピーナッツアレルギー患者から全血試料を採取し、好塩基球を、ｒｈＩＬ−３  ４ｎｇ／ｍＬ、及びヘパリン５０００ＩＵ／ｍＬを含有するＢＡＴ緩衝液（Ｂａｓｏｐｈｉｌ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ｔｅｓｔ  Ｂｕｆｆｅｒ）中で、血液と１：１に希釈すること（最終濃度、ｒｈＩＬ−３が２ｎｇ／ｍＬになるよう）により初回抗原刺激し、次に、全血球細胞を３７℃で１０分間インキュベートした。活性化された好塩基球はＩｇＥ抗体を発現する。抗原刺激段階では、初回抗原刺激全血球６００μｌをＢＡＴ緩衝液中の２×抗原調製物（例えば、ピーナッツ抗原調製物）６００μｌに加え、混合物を３７℃の水浴で３０分間インキュベートした。抗原を添加すると、細胞を刺激（及び脱顆粒化）する。その時、好塩基球は表面が染色され、溶解され、固定される。次いで、好塩基球を蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）によって分析し、視覚化を、例えば、ＣＤ６３、リソソーム関連糖タンパク質によって達成出来る。以下の抗体パネルは、好塩基球活性化をモニターするために使用することが出来る例示的な好塩基球抗体反応混液を表す。
ｉ    ＦＩＴＣ        ＩｇＥ
ｉｉ    ＰＥ            ＣＤ２０３ｃ
ｉｉｉ    ＰＥ−Ｃｙ７    ＣＤ１２３
ｉｖ    ＡＰＣ          Ｌｉｎ＊
ｖ    Ｖ４５０        ＣＤ６３
Ｌｉｎ＊＝ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ５６、ＣＤ２３５ａを含むヒト造血系統反応混液
【０１１９】
好塩基性タンパク質の発現上昇、又はタンパク質の発現上昇速度の増加、又はこれらのマーカーの１つ若しくはそれ以上の長期間に亘る過剰発現は、より強いアレルギー反応、又はより強力な（よりアレルギー性の）抗原の製剤であることを意味している。
【０１２０】
感作された好塩基球が抗原（例えば、ピーナッツアレルゲン）に暴露されると、好塩基球が脱感作されるので、ＩｇＥレベルは経時的に低下することが期待される。
【０１２１】
好塩基球は、通常、ＣＣＲ３＋／ＣＤ３−、ＣＤ１２３＋／ＨＬＡ−ＤＲ−、ＩｇＥ＋／ＣＤ２０３ｃ＋、ＣＤ６３＋、などの特異的マーカーによって同定される。ＣＤ６３及びＣＤ２０３ｃの両方は、インビトロ好塩基球活性化測定のために一般的に使用されるマーカーである。幾つかの実験において、ＣＤ２０３ｃの発現レベルは、活性化された好塩基球内のＣＤ６３より早くピークに達し、従って、検出のタイミングが重要となり得る。更に、ＩＬ３抗原刺激はＣＤ６３の発現を増強する。ＣＤ２０３ｃの活性化は、ＣＤ６３の発現よりも一過性かつ迅速であるため、ＣＤ２０３ｃを使用する分析では、検出のタイミングを注意深く検討する必要がある。従って、ＣＤ２０３ｃベースの好塩基球活性化試験は、血液試料を採取した後４時間以内に実施するのが最良である。好塩基球上の細胞表面抗原のＩｇＥ依存性発現上昇に基づく強力な分析はＣＤ６３試験であり、かつＣＤ６３はアレルギー（ＩｇＥ依存性の）反応に関し、より特異的であり、しかも、サイトカイン又は他の因子による非特異的発現上昇に対してより低い感受性を有し得る。好塩基球活性化を測定する１つの方法としては、ＣＤ６３及びＣＤ２０３ｃの両方を用いることもあろう。
【０１２２】
試験の最初の使用において、即ち診療所において、全血液試料が診療所の患者由来であり、抗原刺激段階は、ピーナッツ抽出物又は既知のピーナッツペプチド反応混液から作製した２×抗原製剤を加えることを含む。次いで、好塩基球抗体反応混液を添加して、バイオマーカー発現を探す。例示的な抗体反応混液には、１種又はそれ以上の以下のバイオマーカー、ＩｇＥ、ＣＤ２０３ｃ、ＨＬＳ−ＤＲ、ＣＤ１２３、ＣＤ６３、及びＬｉｎ、に結合する抗体を含む。より重症のピーナッツアレルギーを有する患者は、好塩基球活性化試験において、活性化した好塩基球が、ＩｇＥ、ＣＤ２０３ｃ、ＨＬＳ−ＤＲ、ＣＤ１２３、ＣＤ６３及びＬｉｎ、の１種又はそれ以上を含む好塩基球マーカーを高レベルで発現するか、１種又はそれ以上のより高いレベルのマーカーをより長い期間発現するか、又は、より早くピークに達するマーカーの１種又はそれ以上のレベルを発現する、という結果をもたらす要因となる血液サンプルを産み出すであろう。
【０１２３】
試験の第２の使用において、例えば、ピーナッツ抽出物の効能を測定するために、ピーナッツアレルギードナー由来の血清に既知の抗抗原抗体（例えば、抗Ａｒａ  ｈ２抗体）に既知量を添加して、標準を提供しても良く、その時、「抗原刺激」段階は、試験するために合成したピーナッツ抽出物を添加する必要があるだろう。次に、「好塩基球抗体反応混液」を添加し、バイオマーカー発現を探索することになろう（これは、予想した標準と一致する筈である）。  例示的なバイオマーカーには、ＩｇＥ、ＣＤ２０３ｃ、ＨＬＳ―ＤＲ、ＣＤ１２３、ＣＤ６３、Ｌｉｎが含まれる。より強力な（即ち、よりアレルギー性の）ピーナッツ抽出物は、好塩基球活性化試験において、活性化した好塩基球が、ＩｇＥ、ＣＤ２０３ｃ、ＨＬＳ−ＤＲ、ＣＤ１２３、ＣＤ６３及びＬｉｎ、の１種又はそれ以上を含む好塩基球活性化マーカーを高レベルで発現するか、１種又はそれ以上のより高いレベルのマーカーをより長い期間発現するか、又は、より早くピークに達するマーカーの１種又はそれ以上のレベルを発現する、という結果を産み出すであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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