(57)【要約】本明細書において開示される対象は、薬剤を送達するため、及び／または患者における疾患もしくは障害を治療するために使用することができる形状記憶粒子を含む組成物、方法及びキットを提供する。特に、本明細書において開示される形状記憶粒子の形状変化を使用して、患者における薬剤送達を空間的に、及び／または一時的に制御することができる。また、患者におけるＨＩＦ活性の阻害のため、及び／または低酸素関連疾患または障害の治療のための、化学療法剤の有無にかかわらず、ナノ粒子及び低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含む組成物、方法及びキットも提供する。【選択図】図１Ｂ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む、異方性形状記憶粒子を含む組成物。
【請求項２】
薬剤を患者に送達する方法であって、
（ａ）ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含み、少なくとも１種の薬剤が装填された、異方性形状記憶粒子を含む組成物を、患者に投与すること、ならびに
（ｂ）前記患者内の標的位置において、前記異方性形状記憶粒子から前記少なくとも１種の薬剤を放出させるために、前記少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子に刺激を与えること
を含む方法。
【請求項３】
それを必要とする患者における疾患または障害を治療する方法であって、
（ａ）ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含み、疾患または障害を治療することが可能である少なくとも１種の薬剤が装填された、異方性形状記憶粒子を含む組成物を、患者に投与すること、ならびに
（ｂ）前記患者内の標的位置において、前記異方性形状記憶粒子から前記少なくとも１種の薬剤を放出させ、それによって、前記患者における疾患または障害が治療されるように前記、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子に刺激を与えること
を含む方法。
【請求項４】
ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物。
【請求項５】
患者における１つまたはそれ以上の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）を阻害する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された異方性ナノ粒子を患者に投与すること、それによって、前記患者における前記１つまたはそれ以上のＨＩＦが阻害されることを含む方法。
【請求項６】
それを必要とする患者における低酸素関連疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された異方性ナノ粒子を患者に投与すること、それによって、前記患者における前記低酸素関連疾患または障害が治療されることを含む方法。
【請求項７】
患者における１つまたはそれ以上の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）を阻害する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された、ポリマーマトリックスを含むナノ粒子を患者に投与すること、それによって、前記患者における前記１つまたはそれ以上のＨＩＦが阻害されることを含む方法。
【請求項８】
それを必要とする患者における低酸素関連疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された、ポリマーマトリックスを含むナノ粒子を患者に投与すること、それによって、前記患者における前記低酸素関連疾患または障害が治療されることを含む方法。
【請求項９】
請求項１または４に記載の組成物を含むキット。
【請求項１０】
ポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含む前記ナノ粒子が、異方性である、請求項４及び７〜８のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１１】
ポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含む前記ナノ粒子または前記異方性ナノ粒子が、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子をさらに含む、請求項４〜１０のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１２】
前記方法が、前記患者内の標的位置において、前記ＨＩＦ阻害剤を放出させるために、前記少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子に刺激を与えることをさらに含む、請求項４〜１１のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１３】
前記患者内の標的位置に、前記異方性形状記憶粒子、前記ナノ粒子または前記異方性ナノ粒子の標的を定めることをさらに含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１４】
前記標的位置が、がん部位である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１５】
前記標的位置が、固体腫瘍及び／または転移部である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１６】
前記異方性形状記憶粒子、前記ナノ粒子または前記異方性ナノ粒子の表面が、少なくとも１種の生体分子を含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１７】
前記少なくとも１種の生体分子が、標的薬剤及び／または治療剤を含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１８】
前記標的薬剤及び／または治療剤が、小分子、炭水化物、糖、タンパク質、ペプチド、核酸、抗体またはその抗体フラグメント、ホルモン、ホルモン受容体、受容体リガンド及びがん細胞特異的リガンドからなる群から選択される、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項１９】
前記少なくとも１種の生体分子が、抗体を含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２０】
前記異方性形状記憶粒子、前記ナノ粒子または前記異方性ナノ粒子が、前記患者において生分解性及び／または生体適合性である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２１】
前記ポリマーマトリックスが、ポリ（乳酸）ベースである、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２２】
前記ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスが、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ―グリコリド）（ＰＬＧＡ）またはポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）（ＰＤＬＬＡ）を含む、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２３】
前記異方性形状記憶粒子の径が、約１０ナノメートル〜約５００ミクロンの範囲である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２４】
少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含む前記ナノ粒子または前記異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含む前記ナノ粒子または前記異方性ナノ粒子の径が、約１０ナノメートル〜約５００ミクロンの範囲である、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２５】
前記ポリマーマトリックスが、異方性ポリマーマトリックスを形成するために、ポリマー転移温度より高く、ポリマー分解温度までの温度で伸張される、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２６】
前記ポリマーマトリックスが、ポリマー転移温度より高いが、その付近の温度で伸張される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２７】
前記ポリマーマトリックスの伸張によって、前記ポリマーマトリックスが、一般に球形の形状から異方性の形状に変化する、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２８】
前記少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子が、金及び／または鉄を含む、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項２９】
前記少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子が、空間的に、及び／または一時的に活性化させることが可能である、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３０】
前記少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子の刺激が、前記患者を刺激することによってもたらされる、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３１】
熱、光及び電気からなる群から選択される少なくとも１つの刺激によって、前記少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子が活性化されるか、または前記患者が刺激される、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３２】
前記少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子の活性化または前記患者の刺激によって、前記異方性形状記憶粒子または前記異方性ナノ粒子の前記形状の変化が誘発される、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３３】
前記少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子の活性化または前記患者の刺激によって、異方性形状から別の異方性形状または一般に球形の形状への、前記異方性形状記憶粒子または前記異方性ナノ粒子の前記形状の変化が誘発される、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３４】
前記異方性形状記憶粒子または前記異方性ナノ粒子の前記形状の変化が、前記異方性形状記憶粒子または前記異方性ナノ粒子からの少なくとも１種の薬剤分子の放出と同時に生じる、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３５】
前記少なくとも１種の薬剤分子の放出が、前記異方性形状記憶粒子または前記異方性ナノ粒子の形状変化の約１日後〜約２カ月後の範囲で生じる、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３６】
前記異方性形状記憶粒子または前記異方性ナノ粒子の形状変化が、患者において生じる、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３７】
前記刺激が、前記患者内の標的位置付近で、前記患者に外部から適用される、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３８】
前記患者の前記標的位置が、固体腫瘍及び／または転移部を含む、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項３９】
前記異方性形状記憶粒子または前記異方性ナノ粒子が、前記患者においてマクロファージによって取り込まれない、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項４０】
前記低酸素関連疾患または障害が、がんまたは眼疾患である、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項４１】
前記がんが、脳、結腸、乳房、前立腺、肝臓、腎臓、肺、食道、頭頸部、卵巣、子宮頸管、胃、結腸、直腸、膀胱、子宮、睾丸及び膵臓からなる群から選択される、請求項１〜４０のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項４２】
前記眼疾患が、糖尿病性網膜症、黄斑変性症及び黄斑水腫からなる群から選択される、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項４３】
前記低酸素関連疾患または障害が、化学療法抵抗性である、請求項１〜４２のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項４４】
前記少なくとも１種の薬剤が、ＨＩＦ阻害剤である、請求項１〜４３のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項４５】
前記ＨＩＦ阻害剤が、強心配糖体、アントラサイクリンまたはＨＩＦ−１二量体化阻害剤である、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項４６】
前記ＨＩＦ阻害剤が、ジゴキシンまたはアクリフラビンである、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項４７】
前記ＨＩＦ阻害剤と一緒に化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項１〜４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
化学療法剤をさらに含む、請求項１〜４７のいずれか一項に記載の組成物またはキット。
【請求項４９】
前記化学療法剤が、パクリタキセルまたはゲムシタビンである、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項５０】
前記ＨＩＦが、低酸素誘導性因子−１（ＨＩＦ−１）、低酸素誘導性因子−２（ＨＩＦ−２）及び低酸素誘導性因子−３（ＨＩＦ−３）からなる群から選択される、請求項１〜４９のいずれか一項に記載の方法、組成物またはキット。
【請求項５１】
疾患または障害の治療のための請求項１及び４に記載の組成物の使用。
【請求項５２】
疾患または障害の治療のための医薬品の製造のための請求項１及び４に記載の組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、２０１５年４月６日出願の米国仮特許出願第６２／１４３，４８２号、及び２０１５年１１月１９日出願の同第６２／２５７，２７８号の利益を主張する。上記仮特許出願の内容は、参照によって全体的に本明細書に組み込まれる。
【０００２】
連邦政府資金による研究開発
本発明は、アメリカ国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）（ＮＩＨ）によって授与されたＲ０１−ＥＢ０１６７２１の下、政府支援を受けてなされたものである。アメリカ政府は、本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
形状記憶効果は、多くの生物医学的応用を可能にする、非慣例的な機械的機能性である。形状記憶ポリマーは、それらが「スマート」であり、かつ熱、光及び電気などの種々の外部刺激による誘引時に形状変換をすることが可能であるという点でユニークである。しかしながら、誘引環境または外形記憶ポリマー自体の生体適合性の欠如が、これまで、これらのポリマーを生物医学的応用から妨げる主な課題であった。
【０００４】
薬剤担体システムは、がん化学療法における薬物動態及び安全プロフィールを変更する高い可能性を保持するが、１種またはそれ以上の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤の送達のために安全かつ有効な特定の配合物は、当該分野において知られていない。例えば、ヒトの用量制限毒性によると、ジゴキシンが有効な抗がん剤として使用されることは不可能である。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の実施は、典型的に、他に明記されない限り、当該分野の技能内である、細胞生物学、細胞培養、分子生物学、遺伝子組換え生物学、微生物学、組換体核酸（例えば、ＤＮＡ）技術、免疫学及びＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）の従来技術を使用するであろう。これらの技術のいくつかの非限定的な説明は、次の刊行物に見られる：Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．，ｅｔ  ａｌ．，（ｅｄｓ．），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，ａｎｄ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ａｌｌ  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．，ｅｄｉｔｉｏｎ  ａｓ  ｏｆ  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００８；Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｒｕｓｓｅｌｌ，ａｎｄ  Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ．Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，２００１；Ｈａｒｌｏｗ，Ｅ．ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ｄ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ−Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，１９８８；Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，Ｒ．Ｉ．，”Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌｓ，Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ”，５ｔｈ  ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，Ｎ．Ｊ．，２００５。治療薬剤及びヒト疾患に関する非限定的な情報は、Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１ｔｈ  Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ，２００５，Ｋａｔｚｕｎｇ，Ｂ．（ｅｄ．）Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ／Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇｅ  １０ｔｈ  ｅｄ．（２００６）または１１ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｊｕｌｙ  ２００９）に見られる。遺伝子及び遺伝子障害に関する非限定的な情報は、ＭｃＫｕｓｉｃｋ，Ｖ．Ａ．：Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ  Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ  ｉｎ  Ｍａｎ．Ａ  Ｃａｔａｌｏｇ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ：Ｊｏｈｎｓ  Ｈｏｐｋｉｎｓ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９９８（１２ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ）またはより最近のオンラインデータベース：Ｏｎｌｉｎｅ  Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ  Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ  ｉｎ  Ｍａｎ，ＯＭＩＭ（商標）．ＭｃＫｕｓｉｃｋ−Ｎａｔｈａｎｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｏｈｎｓ  Ｈｏｐｋｉｎｓ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍｄ．）、及びＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌｉｂｒａｒｙ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．）（２０１０年５月１日現在），Ｗｏｒ���ｄ  Ｗｉｄｅ  Ｗｅｂ  ＵＲＬ：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｏｍｉｍ／、ならびにＯｎｌｉｎｅ  Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ  Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ  ｉｎ  Ａｎｉｍａｌｓ（ＯＭＩＡ）（（ヒト及びマウス以外の）哺乳生物の遺伝子、遺伝性障害及び特徴のデータベース）、ｈｔｔｐ：／／ｏｍｉａ．ａｎｇｉｓ．ｏｒｇ．ａｕ／ｃｏｎｔａｃｔ．ｓｈｔｍｌに見られる。
【０００６】
本明細書に記載された全ての特許、特許出願ならびに他の刊行物（例えば、科学論文、本、ウェブサイト及びデータベース）は、参照によって全体的に組み込まれる。本明細書と、組み込まれた参照との間に矛盾がある場合、本明細書（組み込まれた参照に基づき得る、そのいずれかの修正も含む）が標準となるべきである。他に示されない限り、標準的な当該分野で容認される用語の意味が、本明細書において使用される。種々の用語に関して、本明細書中、標準的な略語が使用される。
【０００７】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む、異方性形状記憶粒子を含む組成物を提供する。
【０００８】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、薬剤を患者に送達する方法であって、（ａ）ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含み、少なくとも１種の薬剤が装填された、異方性形状記憶粒子を含む組成物を、患者に投与すること、ならびに（ｂ）患者内の標的位置において、異方性形状記憶粒子から少なくとも１種の薬剤を放出させるために、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子に刺激を与えることを含む方法を提供する。
【０００９】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、それを必要とする患者における疾患または障害を治療する方法であって、（ａ）ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含み、疾患または障害を治療することが可能である少なくとも１種の薬剤が装填された、異方性形状記憶粒子を含む組成物を、患者に投与すること、ならびに（ｂ）患者内の標的位置において、異方性形状記憶粒子から少なくとも１種の薬剤を放出させ、それによって、患者における疾患または障害が治療されるように、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子に刺激を与えることを含む方法を提供する。
【００１０】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物を提供する。
【００１１】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、患者における１つまたはそれ以上の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）を阻害する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された異方性ナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における１つまたはそれ以上のＨＩＦが阻害されることを含む方法を提供する。
【００１２】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、それを必要とする患者における低酸素関連疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された異方性ナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における低酸素関連疾患または障害が治療されることを含む方法を提供する。
【００１３】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、患者における１つまたはそれ以上の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）を阻害する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された、ポリマーマトリックスを含むナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における１つまたはそれ以上のＨＩＦが阻害されることを含む方法を提供する。
【００１４】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、それを必要とする患者における低酸素関連疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された、ポリマーマトリックスを含むナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における低酸素関連疾患または障害が治療されることを含む方法を提供する。
【００１５】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む異方性形状記憶粒子を含む組成物を含むキットを提供する。
【００１６】
いくつかの態様において、本明細書に開示される対象は、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物を含むキットを提供する。
【００１７】
いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子は、異方性である。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子は、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子をさらに含む。いくつかの実施形態において、本方法は、患者内の標的位置において、ＨＩＦ阻害剤を放出させるために、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子に刺激を与えることをさらに含む。
【００１８】
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、患者内の標的位置に、異方性形状記憶粒子、ナノ粒子または異方性ナノ粒子の標的を定めることをさらに含む。いくつかの実施形態において、標的位置は、がん部位である。いくつかの実施形態において、標的位置は、固体腫瘍及び／または転移部である。
【００１９】
いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子、ナノ粒子または異方性ナノ粒子の表面は、少なくとも１種の生体分子を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の生体分子は、標的薬剤及び／または治療剤を含む。いくつかの実施形態において、標的薬剤及び／または治療剤は、小分子、炭水化物、糖、タンパク質、ペプチド、核酸、抗体またはその抗体フラグメント、ホルモン、ホルモン受容体、受容体リガンド及びがん細胞特異的リガンドからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の生体分子は、抗体を含む。
【００２０】
いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子、ナノ粒子または異方性ナノ粒子は、患者において生分解性及び／または生体適合性である。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、ポリ（乳酸）ベースである。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスは、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ―グリコリド）（ＰＬＧＡ）またはポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）（ＰＤＬＬＡ）を含む。
【００２１】
いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子の径は、約１０ナノメートル〜約５００ミクロンの範囲である。いくつかの実施形態において、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子の径は、約１０ナノメートル〜約５００ミクロンの範囲である。
【００２２】
いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、異方性ポリマーマトリックスを形成するために、ポリマー転移温度より高く、ポリマー分解温度までの温度で伸張される。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、ポリマー転移温度より高いが、その付近の温度で伸張される。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスの伸張によって、ポリマーマトリックスは一般に球形の形状から異方性の形状に変化する。
【００２３】
いくつかの実施形態において、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子は、金及び／または鉄を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子は、空間的に、及び／または一時的に活性化させることが可能である。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子の刺激は、患者を刺激することによってもたらされる。いくつかの実施形態において、熱、光及び電気からなる群から選択される少なくとも１つの刺激によって、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子は活性化されるか、または患者は刺激される。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子の活性化または患者の刺激によって、異方性形状記憶粒子または異方性ナノ粒子の形状の変化が誘発される。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子の活性化または患者の刺激によって、異方性形状から別の異方性形状または一般に球形の形状への、異方性形状記憶粒子または異方性ナノ粒子の形状の変化が誘発される。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子または異方性ナノ粒子の形状の変化は、異方性形状記憶粒子または異方性ナノ粒子からの少なくとも１種の薬剤分子の放出と同時に生じる。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の薬剤分子の放出は、異方性形状記憶粒子または異方性ナノ粒子の形状変化の約１日後〜約２カ月後の範囲で生じる。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子または異方性ナノ粒子の形状変化は患者において生じる。
【００２４】
いくつかの実施形態において、刺激は、患者内の標的位置付近で、患者に外部的に適用される。いくつかの実施形態において、患者の標的位置は、固体腫瘍及び／または転移部を含む。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子または異方性ナノ粒子は、患者においてマクロファージによって取り込まれない。
【００２５】
いくつかの実施形態において、低酸素関連疾患または障害は、がんまたは眼疾患である。いくつかの実施形態において、がんは、脳、結腸、乳房、前立腺、肝臓、腎臓、肺、食道、頭頸部、卵巣、子宮頸管、胃、結腸、直腸、膀胱、子宮、睾丸及び膵臓からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、眼疾患は、糖尿病性網膜症、黄斑変性症及び黄斑水腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、低酸素関連疾患または障害は、化学療法抵抗性である。
【００２６】
いくつかの実施形態において、少なくとも１種の薬剤は、ＨＩＦ阻害剤である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤は、強心配糖体、アントラサイクリンまたはＨＩＦ−１二量体化阻害剤である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤は、ジゴキシンまたはアクリフラビンである。
【００２７】
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法は、ＨＩＦ阻害剤と一緒に化学療法剤を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される組成物またはキットは、化学療法剤をさらに含む。いくつかの実施形態において、化学療法剤は、パクリタキセルまたはゲムシタビンである。
【００２８】
いくつかの実施形態において、ＨＩＦは、低酸素誘導性因子−１（ＨＩＦ−１）、低酸素誘導性因子−２（ＨＩＦ−２）及び低酸素誘導性因子−３（ＨＩＦ−３）からなる群から選択される。
【００２９】
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、疾患または障害の治療のための本明細書に開示される組成物の使用を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、疾患または障害の治療のための医薬品の製造のための本明細書に開示される組成物の使用を提供する。
【００３０】
本明細書に開示される対象の特定の態様が上記され、これらは、本明細書に開示される対象によって、全体的に、または部分的に言及されるが、他の態様は、本明細書において以下に最良に記載されるとおり、添付の実施例及び図面と関連して解釈される場合、記載が進むにつれて、明白になるであろう。
【００３１】
したがって、本明細書に開示される対象は、一般論として記載されるが、必ずしも一定の縮尺で記載されていない添付の図面が参照されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】図１Ａ及び図１Ｂは、ポリマー粒子エントロピーによって引き起こされる形状記憶効果を示す。図１Ａは、ポリ（Ｄ，Ｌ乳酸）粒子が、疎水性脂質によって安定化された金ナノ粒子を封入して、合成されたことを示す。使用されるポリマーの高い分子量のため、試料中にポリマーの物理的架橋が存在した。図１Ｂは、ポリマー粒子が、低温または高温で伸張されて、異方性形状になり、次いで、エントロピーによって引き起こされる形状記憶効果が、熱手段によって誘引されることを示す。低温伸張粒子は、それらの初期形状に戻るが、高温伸張粒子は戻らない。
【図２】図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃ及び図２Ｄは、ポリマー微小粒子の形状記憶効果を示す。ポリ（Ｄ，Ｌ乳酸）微小粒子（図２Ａ）が、６５℃（図２Ｂ）または９０℃（図２Ｃ）のいずれかで伸張されて、異方性形状になり、次いで、（左から右に）１分間、５分間、１５分間、３０分間または６０分間、インキュベーションし、次いで、ＳＥＭで分析した。像分析によって、形状記憶効果は、低温伸張粒子において誘引されたが、高温伸張粒子において誘引されなかったことが実証される。図２Ｄは、ポリマー配列が、９０℃伸張粒子とは対照的に、６５℃伸張粒子において、より高度に存在し、これは、観察された形状記憶効果の背後にある推進力として、ポリマーの物理的架橋を示す。
【図３】図３Ａ、図３Ｂ、図３Ｃ、図３Ｄ及び図３Ｅは、粒子の特徴決定を示す。球形（図３Ａ）及び非球状（図３Ｂ）粒子のＳＥＭ特徴決定。図３Ｃは、約４μｍの径を実証する、球形粒子の径特徴決定を示す。図３Ｄ及び図３Ｅは、（４００μＬのＤＭＳＯ中５ｍｇの）純粋なＰＤＬＬＡ微小粒子の存在下でのＡｕＮＰ（１ｍＬのトルエン中の様々な濃度）の吸光度スペクトル（図３Ｄ）及び標準曲線（図３Ｅ）を示す。金ナノ粒子は、１．６３＊１０粒子／ｍｇ粒子で存在し、そして吸光度ピークは５３０ｎｍであった。
【図４】形状記憶微小粒子の熱活性化を示す。粒子を６０℃または９０℃で伸張させ、これらの粒子を、３０分間まで、３つの異なる温度（４０℃、４５℃及び５０℃）の水浴中でインキュベーションした。
【図５】図５Ａ、図５Ｂ、図５Ｃ、図５Ｄ、図５Ｅ、図５Ｆ、図５Ｇ及び図５Ｈは、封入された金ナノ粒子のレーザ加熱によって誘引される形状記憶効果の空間時間的制御を示す。粒子を６５℃（図５Ａ）または９０℃（図５Ｂ）で伸張させ、そして（左から右に）０分間、１分間、２分間、３分間または５分間、５３２ｎｍのレーザーによってレーザー処理した。形状記憶効果は、９０℃とは対照的に、６５℃で伸張した粒子において観察された。図５Ｃは、図５Ａ及び図５Ｂの粒子のアスペクト比分析を示し、３分のレーザー処理以内で球形に戻る粒子の復元を実証する（ＡＲ＝１）。図５Ｄは、６５℃で伸張された粒子が１００％アスペクト比復元を達成し、９０℃の粒子は約２０％のアスペクト比復元を達成することを実証する、実施例１に記載の標準化を示す。エラーバーは、分析された２０の粒子の標準誤差である。図５Ｅは、２つの試料の温度が、加熱の間に異ならないことを示す。図５Ｆは、ＰＥＧハイドロゲル中に固定化された粒子が、形状記憶効果の空間的選択を実証することを示す。レーザーが適用された領域は、粒子が形状記憶を達成する領域である。図５Ｇは、ＰＥＧハイドロゲルの熱ＩＲ像が、全ゲルを通しての加熱を実証することを示す。図５Ｈは、つなぎ合わせた共焦点像のアスペクト比分析が、レーザーが粒子を照射するスポットにおいてのみ、粒子の完全に近い復元を実証することを示す。
【図６】図６Ａ、図６Ｂ及び図６Ｃは、細胞の取込みの形状依存を示す。図６Ａ及び図６Ｂは、伸張された粒子（図６Ｂ）以上に球形粒子（図６Ａ）を取り込むことに対するマクロファージの明確な優先性を示す。図６Ｃは、様々な用量での優先性の確認を示す。青＝ＤＡＰＩ、緑＝アクチン、赤＝粒子。
【図７】図７Ａ、図７Ｂ及び図７Ｃは、食細胞崩壊細胞が、レーザーによって誘引される異なる伸張粒子に対する異なる応答を実証することを示す。（図７Ａ）６５℃伸張及び（図７Ｂ）９０℃伸張粒子は、レーザー照射によって誘引され、そして４時間、マクロファージと一緒にインキュベーションされた。共焦点像によって、非球形粒子と比較して高い量で球形粒子を食細胞崩壊的に取り込むマクロファージの優先性があることが実証される。青＝ＤＡＰＴ、赤＝アクチン、緑＝粒子。図７Ｃは、流動細胞計測法によって分析されるポジティブ取込み率が、６５℃伸張レーザー誘引形状記憶粒子が４時間過程のより高い率で取り込まれることを実証することを示す。エラーバーは、ｎ＝４反復の標準誤差である。
【図８】図８Ａ、図８Ｂ、図８Ｃ及び図８Ｄは、金ナノ粒子の存在を分析するためにＴＥＭで像化された、金ナノ粒子を封入する球形（図８Ａ）及び非球形（図８Ｂ）ＰＤＬＬＡ微小粒子を示す。球形（図８Ｃ）及び伸張（図８Ｄ）微小粒子の端部（最小ポリマーＴＥＭ像干渉の領域）の拡大写真は、ポリマー微小粒子内に封入された金ナノ粒子（赤矢印）の存在を実証する。
【図９】代表的な混合粒子形状記憶実験を示す。６５℃で伸張された粒子（青）及び９０℃で伸張された粒子（ピンク）を１：１の比率で混合して、そして４０℃においてインキュベーション時間で加熱した。次の試料の共焦点像は、粒子伸張温度に対する形状記憶効果の唯一の依存を実証する。
【図１０】細胞生存能力が、様々な用量への細胞の暴露によって変化しないことを示す。細胞代謝速度は、ＭＴＳアッセイによって、粒子への４時間の曝露の後に評価された。次いで、この速度は、パーセント代謝活性を算出するために、未処理の細胞に対して標準化された。有意な減少は指摘されなかった。エラーバーは、ｎ＝４反復の標準誤差である。
【図１１】ＰＬＧＡ−薬剤配合物の直径（ｎ≧２）及びゼータ電位（ｎ＝３）を示す。
【図１２】ＰＬＧＡ−アクリフラビン（ｎ＝３）及びＰＬＧＡ−ドキソルビシン（ｎ＝２）の時間に対する累積的放出を示す［ＰＬＧＡ、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド］。
【図１３】ＰＬＧＡ−アクリフラビン（ｎ＝３）及びＰＬＧＡ−ドキソルビシン（ｎ＝２）の時間に対する放出率を示す。
【図１４】ＰＬＧＡ−ジゴキシンの時間に対する累積的放出を示す（ｎ＝３）。
【図１５】ＰＬＧＡ−ジゴキシンの時間に対する放出率を示す（ｎ＝３）。
【図１６】図１６Ａ、図１６Ｂ及び図１６Ｃは、薬剤放出の温度依存を示す。図１６Ａは、ＰＬＡベースのポリマーからのパクリタキセル放出が、薬剤放出温度及びポリマーＴｇの間の差異に対して強い依存を示すことを示す。図１６Ｂは、類似の結果が、微小粒子からのドキソルビシン放出に関しても見られることを示す。図１６Ｃは、累積的ジゴキシン放出を示す。
【図１７】図１７Ａ、図１７Ｂ及び図１７Ｃは、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）オルトグラフト（ｏｒｔｈｏｇｒａｆｔｓ）において、ジゴキシンが、乳がん幹細胞（ＢＣＳＣ）のパクリタキセル誘導富化を阻害することを示す。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、メスの重症複合型免疫不全（Ｓｃｉｄ）マウスの乳房脂肪パッドに移植した。マウスは、食塩水（対照、Ｃ）；ジゴキシン（Ｄ）；パクリタキセル（Ｐ）またはパクリタキセル及びジゴキシン（Ｐ／Ｄ）で治療される４つの群に無作為抽出された。図１７Ａは、２〜３日ごとに決定された腫瘍体積を示す。アルデヒドデヒドロゲナーゼ発現（ＡＬＤＨ＋）ＢＣＳＣの百分率を決定するためのＡｌｄｅｆｌｕｏｒアッセイ（図１７Ｂ）、ならびにインターロイキン（ＩＬ）８、ＩＬ−６をコード化するｍＲＮＡ及び多薬剤耐性タンパク質ＭＤＲ１の発現を定量化するためのＲＴ−ｑＰＣＲアッセイ（図１７Ｃ）のために、第１２日に腫瘍を採取した。データは、平均＋ＳＥＭ（ｎ＝３）として示される。スチューデントｔ検定によって、＊Ｐ＜Ｃと比較して０．００１、及び＃Ｐ＜Ｐと比較して０．００１。
【図１８】図１８は、ゲムシタビンとジゴキシンとの併用療法が腫瘍再発を予防することを示す。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、メスＳｃｉｄマウスの乳房脂肪パッドに移植した。腫瘍が触知可能である時に（第１日）、マウスは、食塩水、ゲムシタビン［第５日、第１０日、第１５日、第２０日及び第２５日において２０ｍｇ／ｋｇ（矢印）］またはゲムシタビン及びジゴキシン（第１〜２５日において２ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射で治療される３つの群に無作為抽出された。腫瘍体積は、２〜３日ごとに決定され、そして平均±ＳＥＭ（ｎ＝３）が示される。食塩水で処理されたマウスは、第２４日に、腫瘍体積が１，０００ｍｍ３を超えた時に安楽死させた（Ｅ）。治療を中止した７日後の第３２日に実験を終了した。スチューデントｔ検定によって、＊Ｐ＜０．００１。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本特許または本出願ファイルは、カラーで制作された少なくとも１つの図面を含有する。カラー図面のある本特許または本特許出願公開のコピーは、請求時及び必要な料金の支払い時に事務所によって提供されるであろう。
【００３４】
本明細書に開示される対象は、本発明の全てではないが、いくつかの実施形態が示される添付の図面を参照にすることによって、以後、より完全に説明されるであろう。全体を通して、同様の数字は、同様の要素を指す。本明細書に開示される対象は、多くの異なる形態で実施させられてもよく、そして本明細書に明らかにされる実施形態に限定されると解釈されるべきではない。どちらかと言えば、本開示が適用可能な法的な必要条件を満たすように、これらの実施形態は提供される。実際に、上記記載及び関連する図面に提示される教示の利点を有する、本明細書に開示される対象が関連するものへの、本明細書に明らかにされる本明細書に開示される対象の多くの変更及び他の実施形態を、当業者は想定するであろう。したがって、本明細書に開示される対象が、開示された特定の実施形態に限定されないこと、ならびに変更及び他の実施形態が、添付の請求の範囲内に含まれるように意図されることは理解されるはずである。
【００３５】
Ｉ．形状記憶粒子を含む方法及び組成物
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、形状を変化させるために活性化されるか、または刺激されることが可能である形状記憶粒子を含む、組成物、方法及びキットを提供する。これらの形状記憶粒子は、生理学的温度において、それらの一時的形状を維持し、そして患者への外部刺激の適用時に、それらの一次形状に戻ることができる。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される形状記憶粒子の薬剤送達容量及び形状変化容量は、患者内の標的位置への薬剤送達及び／または有効性を強化することができる。したがって、いくつかの実施形態において、薬剤送達は、細胞内及び細胞外の治療剤の送達を媒介するために、空間的及び／または一時的に制御されることが可能である。例えば、形状記憶粒子は、特定の時間及び／または患者内の位置において、薬剤などのそれらの装填を放出するように強制されることが可能である。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される形状記憶粒子は、身体が耐えることができる温度範囲、例えば、約３７℃〜約４５℃の温度で誘引されることが可能である。
【００３６】
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む、異方性形状記憶粒子を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む、異方性形状記憶粒子を含む組成物を提供する。本明細書で使用される場合、「形状記憶粒子」という用語は、外部刺激によって誘引される時に形状変換が可能である微小粒子またはナノ粒子を意味する。
【００３７】
「異方性」という用語は、球形ではない微小粒子またはナノ粒子を意味する。いくつかの実施形態において、「異方性」粒子は、ｘ軸に沿う寸法（ａ）、ｙ軸に沿う寸法（ｂ）及びｚ軸に沿う寸法（ｃ）によって画定される非対称形状を有する三次元微小粒子またはナノ粒子を意味する。（ａ）、（ｂ）または（ｃ）の少なくとも１つは、少なくとも１つの他の寸法（ａ）、（ｂ）または（ｃ）と等しくない。いくつかの実施形態において、「異方性」粒子は、以下の範囲の１つから選択される少なくとも１つの軸に沿っての曲率半径を有する非対称形状を有する三次元微小粒子またはナノ粒子を意味する：（ａ）約１ｎｍ〜約１０ｎｍ；（ｂ）約１１ｎｍ〜約１００ｎｍ；（ｃ）約１０１ｎｍ〜約４００ｎｍ；（ｄ）約４０１ｎｍ〜約１μｍ；（ｅ）約１０μｍ〜約２０μｍ；（ｆ）約２０μｍ〜約１００μｍ；及び（ｇ）約１０１μｍ〜約１ｍｍ。いくつかの実施形態において、非球形形状は、方程式ａ＞ｂ＝ｃによって定義される楕円体を含む。いくつかの実施形態において、非球形形状は、方程式ａ＞ｂ＞ｃによって記載することができる三軸楕円体を含む。いくつかの実施形態において、非球形形状は、方程式ａ＝ｂ＞ｃによって記載することができる扁球楕円体を含む。いくつかの実施形態おいて、非球形形状は、ｙ軸に沿う寸法（ｂ）寸法に等しいｘ軸に沿う寸法（ａ）を有し、これらは両方とも、ｚ軸に沿う寸法（ｃ）よりはるかに短く、ａ＝ｂ＜＜ｃであり、かつ三次元微小粒子またはナノ粒子は桿状体を含む。
【００３８】
本明細書で使用される場合、「ナノ粒子」という用語は、（約１、２、５、１０、２０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、５００及び１０００ｎｍならびに中間の全ての整数及び分数を含めて、）１ｎｍ〜１０００ｎｍのいずれの整数も含む、約１ｎｍ〜約１０００ｎｍの範囲の少なくとも１つの寸法を有する粒子を意味する。いくつかの実施形態において、ナノ粒子は、少なくとも１つの寸法、例えば、約１００ｎｍの直径を有する。いくつかの実施形態において、ナノ粒子は、約２００ｎｍの直径を有する。他の実施形態において、ナノ粒子は、約５００ｎｍの直径を有する。なお他の実施形態において、ナノ粒子は、約１０００ｎｍ（１μｍ）の直径を有する。そのような実施形態において、粒子は、「微小粒子」とも呼ばれることができる。したがって、「微小粒子」という用語は、約１マイクロメートル（μｍ）、すなわち、１×１０−６メートル〜約１０００μｍの範囲の寸法を有する粒子を含む。「粒子」という用語は、本明細書で使用される場合、ナノ粒子及び微小粒子を含むように意図される。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子の径は、約１０ナノメートル〜約５００ミクロンの範囲である。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子の径は、約５０ナノメートル〜約５ミクロンの範囲である。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子の径は、少なくとも１０、２０、３０、４０または５０ナノメートルである。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子の径は、５００、４００、３００、２００、１００、５０または５ミクロン未満である。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子は、それらが正常組織ではなく腫瘍組織で蓄積する傾向があるように、強化された浸透性及び滞留（ＥＰＲ）効果を有するために十分小さい。例えば、異方性形状記憶粒子の径は、ＥＰＲ効果を利用するために、４００ナノメートル未満であることが可能である。いくつかの実施形態において、ＥＰＲ効果を利用する粒子の径は、約２００〜約２２５ナノメートルである。いくつかの実施形態において、ＥＰＲ効果を利用する異方性形状記憶粒子の径は、２００ナノメートル未満である。
【００３９】
いくつかの実施形態において、微小粒子またはナノ粒子は、約１．１〜約５の範囲のアスペクト比を有する。いくつかの実施形態において、アスペクト比は、約５〜約１０の範囲を有する。いくつかの実施形態において、アスペクト比は、約１０〜約１００の範囲を有する。
【００４０】
いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスの非限定的な例としては、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス、例えば、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）及びポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）（ＰＤＬＬＡ）、ならびに非ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス、例えば、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）及びポリ（ベータ−アミノエステル）（ＰＢＡＥ）が含まれる。
【００４１】
本明細書で使用される場合、「ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス」という用語は、ポリ（乳酸）を含むポリマーマトリックスを意味する。非限定的な例としては、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）及びポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）（ＰＤＬＬＡ）が含まれる。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスは、ＰＬＡを含む。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスは、ＰＤＬＬＡを含む。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスは、ＰＬＧＡを含む。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスは、ＰＤＬＬＡとＰＬＧＡとの組合せなどの１種より多くのポリ（乳酸）を含む。
【００４２】
いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、ポリ（乳酸）ベースのポリマーとＰＬＡと、非ポリ（乳酸）ベースのポリマーとのコポリマー、例えば、ＰＬＡとポリカプロラクトン（ＰＣＬ）との組合せを含む。いくつかの実施形態において、ＰＬＧＡ／ＰＣＬまたはＰＬＧＡ／ＰＢＡＥなどのポリエステルのブレンドが使用されてもよい。いくつかの実施形態において、ＰＬＧＡ含有量は約５０〜約９０％であり、残りはＰＣＬ及び／またはＰＢＡＥである。
【００４３】
本明細書で使用される場合、「感刺激性ナノ粒子」は、外部刺激によって活性化することが可能であるナノ粒子を意味する。感刺激性ナノ粒子の非限定的な例としては、金ナノ粒子、金ナノロッド、金ナノスフィア、金ナノシェルなどの感光性ナノ粒子及び酸化鉄などの感磁気性ナノ粒子が含まれる。いくつかの実施形態において、感刺激性ナノ粒子は、空間的及び／または一時的に活性化可能である。例えば、いくつかの実施形態において、感刺激性ナノ粒子は、それが患者内の標的位置に到達した時に活性化可能である。別の例として、いくつかの実施形態において、感刺激性ナノ粒子は、患者に投与された後の一定時間で活性化可能である。
【００４４】
いくつかの実施形態において、本明細書で開示される対象は、患者に薬剤を送達するために形状記憶粒子を使用する方法を提供する。いくつかの実施形態において、薬剤を患者に送達する方法であって、（ａ）ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含み、少なくとも１種の薬剤が装填された、異方性形状記憶粒子を含む組成物を、患者に投与することと、（ｂ）患者内の標的位置において、異方性形状記憶粒子から少なくとも１種の薬剤を放出させるために、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子に刺激を与えることを含む方法が提供される。本明細書で使用される場合、「薬剤」は、被験者に導入される時に生理学的効果を有する物質である。
【００４５】
いくつかの実施形態において、薬剤を放出するために、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を刺激することは、患者を刺激することによって生じる。いくつかの実施形態において、薬剤を放出するために、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を刺激することは、患者の外部で生じる。感刺激性ナノ粒子を刺激するか、または活性化するために使用することができる刺激の非限定的な例としては、熱、光（例えば、レーザー光線）及び電気が含まれる。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される形状記憶粒子の活性化温度は、感刺激性ナノ粒子を使用する形状記憶粒子内部での効率的な局部加熱によって有効に操作される。例えば、いくつかの実施形態において、レーザーからの光が、外部から患者の位置に適用され、そして光からの熱が、患者内の感刺激性ナノ粒子を活性化し、それによって、以前に患者に投与されて、かつ患者内の標的位置に標的を定められた形状記憶粒子が形状を変化させて、そしてそれらの薬剤装填を放出させる。いくつかの実施形態において、薬剤混合物が同時に患者に投与されることが可能であるように、１種より多くの薬剤が、本明細書において開示される粒子に装填される。
【００４６】
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、それを必要とする患者における疾患または障害を治療する方法であって、（ａ）ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含み、疾患または障害を治療することが可能である少なくとも１種の薬剤が装填された、異方性形状記憶粒子を含む組成物を、患者に投与することと、（ｂ）患者内の標的位置において、異方性形状記憶粒子から少なくとも１種の薬剤を放出させ、それによって、患者における疾患または障害が治療されるように、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子に刺激を与えることを含む方法を提供する。
【００４７】
いくつかの実施形態において、治療可能な疾患または障害は、疾患または障害を治療するための薬剤を含む、本明細書において開示される粒子が標的を定めることが可能であるいずれの疾患でもあることが可能である。疾患及び障害の非限定的な例としては、心臓血管疾患、伝染性及び寄生性疾患、がん、呼吸器疾患、消化器疾患、神経変性疾患、免疫機構障害、筋骨格障害、眼疾患などが含まれる。
【００４８】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される粒子は、患者において生分解性及び／または生体適合性である。本明細書で使用される場合、「生分解性」化合物は、細胞中に導入される時に、細胞機構によって、または加水分解によって、細胞が、細胞に有意な毒性作用を及ぼさずに再利用可能であるか、または排除することが可能である成分に分解されるものである（すなわち、成分が生体外で細胞に添加された時に、細胞の約２０％未満が死滅する）。成分は、好ましくは、生体内で炎症または他の悪影響を誘発しない。本明細書で使用される場合、「生体適合性」という用語は、合理的な用量で投与される場合に、化合物が患者に毒性または不利な生物学的反応を起こさないことを意味する。
【００４９】
一般に、生分解性があるために、本明細書において開示される材料、例えば、微小粒子及び／またはナノ粒子は、分解可能な結合を含有する。代表的な分解可能な結合としては、限定されないが、以下を含む。
【化１】
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【００５０】
生分解性ポリマーの非限定的な例としては、生分解性ポリ−β−アミノ−エステル（ＰＢＡＥ）、ポリ（アミドアミン）、ポリエステル、多無水物、生物学的に還元可能なポリマー及び他の生分解性ポリマーが含まれる。生分解性ポリマーの非限定的な例としては、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）（ＰＤＬＬＡ）、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ（アクリル酸）（ＰＡＡ）、ポリ−３−ヒドロキシブチレート（Ｐ３ＨＢ）及びポリ（ヒドロキシブチレート−コ−ヒドロキシバレレート）が含まれる。本明細書において開示される対象での使用に適切な他の生分解性ポリマーは、参照によって全体として本明細書に組み込まれる、２０１０年１１月１８日公開の、Ｇｒｅｅｎらへの「Ｍｕｌｔｉｃｏｍｐｏｎｅｎｔ  Ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ」と題された国際ＰＣＴ特許出願公開第ＷＯ／２０１０／１３２８７９号に提供される。いくつかの実施形態において、ポリスチレンなどの当該技術において使用される非分解性ポリマーを生分解性ポリマー（複数可）とブレンドして、本明細書において開示される粒子が形成される。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される粒子は、ＧＲＡＳ（一般に安全であると見なされる（Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  Ｒｅｇａｒｄｅｄ  Ａｓ  Ｓａｆｅ））材料を含む。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、ポリ（乳酸）をベースとする。
【００５１】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される粒子の表面は、標的薬剤及び／または治療剤を含む、少なくとも１種の生体分子を含む。標的薬剤の非限定的な例としては、糖、ペプチド、抗体または抗体フラグメント、ホルモン、ホルモン受容体、受容体リガンドなどが含まれる。いくつかの実施形態において、標的薬剤は、腫瘍関連因子に対して親和性を有する部分、例えば、ＲＧＤシーケンス、低密度リポタンパク質シーケンス、ＮＡＡＬＡＤａｓｅ阻害剤、表皮性成長因子及び標的細胞（例えば、がん細胞）に対して特異的に結合する他の薬剤である。いくつかの実施形態において、標的薬剤は、炎症因子に対して親和性を有する部分（例えば、サイトカインまたはサイトカイン受容体部分（例えば、ＴＮＦ−α受容体））である。抗体は、様々な生物学的標的（例えば、病原体、腫瘍細胞及び正常組織）上の抗原または免疫抗原（例えば、腫瘍、組織または病原体特異抗原）に標的を定めることを可能にするために発生することが可能である。そのような抗体としては、限定されないが、ポリクローン型、モノクローン型、キメラ型、単鎖、Ｆａｂフラグメント及びＦａｂ発現ライブラリが含まれる。
【００５２】
治療剤の非限定的な例としては、小有機または無機分子などの小分子；糖；オリゴ糖；多糖；ペプチド、タンパク質、ペプチドアナログ及び誘導体からなる群から選択される生体高分子；ペプチド模倣薬；核酸、例えば、ＤＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、ｍｉＲＮＡから選択されるＲＮＡ干渉分子、ならびにリボザイム、デンドリマー及びアプタマー；抗体フラグメント及び細胞内抗体を含む、免疫抗体；ならびにそれらのいずれの組合せも含まれる。
【００５３】
いくつかの実施形態において、標的薬剤及び／または治療剤は、小有機分子、炭水化物、糖、タンパク質、ペプチド、核酸、抗体またはその抗体フラグメント、ホルモン、ホルモン受容体、受容体リガンドまたはがん細胞特異リガンドである。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される粒子は、１種より多い標的薬剤及び／または治療剤を含む。
【００５４】
本明細書で使用される場合、「小分子」という用語は、「天然産物様」である薬剤を意味することができるが、「小分子」という用語は、「天然産物様」である薬剤に限定されない。むしろ、小分子は、典型的に、それが、いくつかの炭素−炭素結合を含有し、かつ５０００ダルトン（５ｋＤ）未満、好ましくは３ｋＤ未満、なおより好ましくは２ｋＤ未満、そして最も好ましくは１ｋＤ未満の分子量を有するという点で特徴づけられる。いくつかの場合、小分子が７００ダルトン以下の分子量を有することが好ましい。
【００５５】
本明細書で使用される場合、「ＲＮＡ干渉分子」は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）によって標的遺伝子またはゲノム配列の発現を干渉するか、または阻害する薬剤を意味する。そのようなＲＮＡ干渉剤としては、限定されないが、標的遺伝子またはゲノム配列に相同的であるＲＮＡ分子またはそれらのフラグメント、短干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、短ヘアピンまたは小ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、極小ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）及びＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）によって標的遺伝子の発現を干渉するか、または阻害する小分子を含む、核酸分子が含まれる。
【００５６】
「ポリヌクレオチド」という用語は、本明細書中、「核酸」と交換可能に使用され、これは、ヌクレオシドのポリマーを示す。典型的に、ポリヌクレオチドは、ホスホジエステル結合によって結合された、ＤＮＡまたはＲＮＡ中に自然に見られるヌクレオシド（例えば、アデノシン、チミジン、グアノシン、シチジン、ウリジン、デオキシアデノシン、デオキシチミジン、デオキシグアノシン及びデオキシシチジン）から構成される。しかしながら、この用語には、天然由来の核酸に見出されるか否かにかかわらず、化学的または生物学的に変性された塩基、変性主鎖などを含有するヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体を含む分子が含まれ、そしてそのような分子は特定の用途に好ましくなり得る。本出願がポリヌクレオチドに関する場合、ＤＮＡ、ＲＮＡの両方及びそれぞれの場合に、一本鎖型及び二本鎖型（ならびにそれぞれの一本鎖型分子の補体）の両方が提供されることは理解される。
【００５７】
「ポリペプチド」という用語は、本明細書で使用される場合、アミノ酸のポリマーを意味する。「タンパク質」及び「ポリペプチド」という用語は、本明細書中、交換可能に使用される。ペプチドは、比較的短いポリペプチドであり、典型的に、その長さは、約２〜６０個のアミノ酸である。本明細書中で典型的に使用されるポリペプチドとしては、最も一般にタンパク質に見られる２０Ｌ−アミノ酸などのアミノ酸が含まれる。しかしながら、当該技術において既知の他のアミノ酸及び／またはアミノ酸類似体を使用することも可能である。ポリペプチド中のアミノ酸の１個またはそれ以上は、例えば、炭水化物基、ホスフェート基、脂肪酸基、結合用リンカー、官能基化などの化学的実体の添加によって変性され得る。共有結合または非共有結合的にそれを用いて連結された非ポリペプチド部分を有するポリペプチドも、「ポリペプチド」であると思われる。代表的な変性としては、糖修飾及びパルミトイル化が含まれる。ポリペプチドは天然供給源から精製され、組換えＤＮＡ技術を使用して製造され、従来の固相ペプチド合成などの化学的手段によって合成されてよい。
【００５８】
本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、抗原との免疫学的反応を可能にする抗原の抗原決定基の特徴を補足する内部表面形状及び電荷分布を有する三次元結合空間を形成するために抗体分子の可変ドメインの折り畳みから抗体結合ドメインが形成される、少なくとも１個の結合ドメインを含むポリペプチドまたはポリペプチドの基を意味する。抗体は、結合ドメイン、ならびにＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２及びＦ（ａｂ’）２フラグメントを含むフラグメントを含む組換体タンパク質を含む。
【００５９】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される方法は、患者内の標的位置に、本明細書において開示される粒子の標的を定めることをさらに含む。いくつかの実施形態において、患者内の標的位置は、形状記憶粒子が標的を定めることができるいずれの部位、特に疾患部位であり得る。標的位置の非限定的な例としては、脳、結腸、乳房、前立腺、肝臓、腎臓、肺、食道、頭頸部、卵巣、子宮頸、胃、結腸、直腸、膀胱、子宮、睾丸及び膵臓が含まれる。
【００６０】
いくつかの実施形態において、標的位置は、がん部位である。患者の「がん部位」は、がん誘発細胞に典型的な特徴、例えば、無制限増殖、特殊機能の喪失、不死、有意な転移能、抗アポトーシス活性の有意な増加、急成長及び増殖速度、ならびに特定の特徴的モルフォロジー及び細胞マーカーを有する細胞の存在を示す部位を意味する。本明細書において開示される形状粒子で治療することが可能であるがんの非限定的な例としては、脳、結腸、乳房、前立腺、肝臓、腎臓、肺、食道、首頸部、卵巣、子宮頸管、胃、結腸、直腸、浮嚢、子宮、睾丸及び膵臓が含まれる。いくつかの実施形態において、標的位置は固体腫瘍である。「固形腫瘍」は、本明細書で使用される場合、一般に、嚢胞または液体部分を有さない異常大量組織である。本明細書で使用される場合、「転移」及び「転移部」という用語は、原発腫瘍の転移に起因するがんを意味する。本明細書において開示される粒子で治療することが可能である固体腫瘍及び／または転移部の非限定的な例としては、脳、結腸、乳房、前立腺、肝臓、腎臓、肺、食道、頭頸部、卵巣、子宮頸、胃、結腸、直腸、膀胱、子宮、睾丸及び膵臓が含まれる。
【００６１】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される方法は、本明細書において開示される粒子を伸張させて、異方性形状記憶粒子を形成することをさらに含む。例えば、いくつかの実施形態において、方法は、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む形状記憶粒子を伸張させて、異方性形状記憶粒子を形成することを含む。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、感刺激性ナノ粒子を用いずに伸張される。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、感刺激性ナノ粒子と一緒に伸張される。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、感刺激性ナノ粒子を用いずに伸張され、そして感刺激性ナノ粒子は、伸張されたポリマーマトリックスとは別に、患者に投与される。伸張方法及びデバイスは、参照によって全体的に本明細書に組み込まれる、Ｍｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．Ａ．２０１５，１０３（８）：２７４７−５７）に見い出され得る。
【００６２】
いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、異方性ポリマーマトリックスを形成するために、ポリマー転移温度より高く、ポリマー分解温度までの温度で伸張される。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、ポリマー転移温度より高いが、その付近の温度で伸張される。例えば、いくつかの実施形態において、ポリマー転移温度が約６０℃である場合、ポリマーマトリックスは、６０℃より高く、約７０℃までの温度で伸張される。いくつかの実施形態において、ポリマー転移温度が約６０℃である場合、ポリマーマトリックスは、６０℃より高く、約８０℃までの温度で伸張される。本明細書で使用される場合、「ポリマー転移温度」は、ポリマー転移によって、硬質材料から軟質またはゴム様材料が形成される温度範囲である。本明細書で使用される場合、「ポリマー分解温度」は、ポリマーが分解し始める温度である。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、約６０℃〜約９０℃の温度で伸張され、異方性ポリマーマトリックスが形成される。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスは、約６０℃の温度で伸張される。
【００６３】
いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックスを伸張することによって、ポリマーマトリックスは一般に球形形状から異方性形状へと変化する。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子の活性化によって、異方性形状から別の異方性形状または一般に球形形状などへの異方性形状記憶粒子の形状の変化を誘発する。いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子の形状の変化は、異方性形状記憶粒子からの少なくとも１種の薬剤分子の放出と同時に生じることが可能である。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の薬剤分子の放出は、異方性形状記憶粒子が形状を変化した１日後から約２カ月後の範囲で生じる。いくつかの実施形態において、形状記憶粒子からの薬剤の放出は、１、２、３、４、５、６、７日以上後に生じる。いくつかの実施形態において、形状記憶粒子からの薬剤の放出は、１、２、３、４、５、６、７、８週以上後に生じる。
【００６４】
いくつかの実施形態において、異方性形状記憶粒子の形状の変化は、患者において生じる。いくつかの実施形態において、刺激は、固体腫瘍及び／または転移部の付近などの患者内の標的位置の付近で、外部から患者に適用される。いくつかの実施形態において、患者は、熱、光及び電気からなる群から選択される少なくとも１つの刺激によって刺激される。いくつかの実施形態において、患者の刺激によって、異方性形状から別の異方性形状または一般に球形形状へなどの異方性形状記憶粒子の形状の変化が誘発される。
【００６５】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される形状記憶粒子は、形状変換によって細胞反応を制御することができる。例えば、本明細書において開示される異方性粒子よりも球形粒子に対するマクロファージ食細胞崩壊の優先性があることが見出され、このことは、本明細書において開示される異方性粒子は、それらの標的位置へと移動しながら、免疫機構を首尾よく逃れる可能性がより高いことを示唆する。
【００６６】
本明細書で使用される場合、「治療」という用語には、疾患、障害またはそのような用語が適用される状態の可能性、あるいはそのような疾患、障害または状態の１つまたはそれ以上の症候または症状の回復、緩和、進行の阻害、予防または減少が含まれることが可能である。いくつかの実施形態において、「治療」は、がんを患う患者などの患者の生存を延長することを意味する。
【００６７】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される粒子を含む方法は、腫瘍進行の可能性を減少し、かつ／または腫瘍退縮を媒介する。例えば、（単独で、または多薬もしくは多様式がん療法の一部として投与される）本明細書において開示される粒子を含む方法は、本明細書において開示される粒子を含む方法が使用されない場合の患者における腫瘍進行の可能性及び／または腫瘍退縮と比較して、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３３％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６６％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上、腫瘍進行の可能性を減少し、かつ／または腫瘍退縮を媒介することができる。
【００６８】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される粒子を含む方法は、患者の生存を延長する。例えば、本明細書において開示される方法は、本明細書において開示される方法が使用されない場合の患者の生存と比較して、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３３％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６６％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１倍、１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、１．６倍、１．７倍、１．８倍、１．９倍、２．０倍、２．５倍、３．０倍、３．５倍、４．０倍、５．０倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍またはそれ以上、患者の生存（例えば、無増悪生存）を延長する。いくつかの実施形態において、生存は、無増悪生存である。
【００６９】
本明細書において開示される対象は、疾患または障害の治療のためのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む異方性形状記憶粒子を含む組成物の使用を提供する。本明細書において開示される対象は、疾患または障害の治療のためのポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む異方性形状記憶粒子を含む組成物の使用も提供する。加えて、疾患または障害の治療のための医薬品製造のためのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む異方性形状記憶粒子を含む組成物の使用を提供される。さらに、疾患または障害の治療のための医薬品製造のためのポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む異方性形状記憶粒子を含む組成物の使用も提供される。
【００７０】
ＩＩ．低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）の阻害及び低酸素関連疾患または障害の治療方法
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される対象は、低酸素関連疾患または障害を治療するために患者内の標的位置へと低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を送達するための組成物、キット及び方法を提供する。いくつかの実施形態において、形状記憶粒子は、ＨＩＦ阻害剤を送達するために使用される。いくつかの実施形態において、形状記憶のないナノ粒子は、ＨＩＦ阻害剤を送達するために使用される。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤の送達は、空間的及び／または一時的に制御される。
【００７１】
いくつかの実施形態において、本明細書において開示される対象は、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される対象は、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスは、ＰＬＡを含む。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスは、ＰＤＬＬＡを含む。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスは、ＰＬＧＡを含む。
【００７２】
いくつかの実施形態において、ＨＩＦは、低酸素誘導性因子−１α（ＨＩＦ−１α）、低酸素誘導性因子−１β（ＨＩＦ−１β）、低酸素誘導性因子−２α（ＨＩＦ−２α）または低酸素誘導性因子−３α（ＨＩＦ−３α）などのいずれかのＨＩＦまたはそのサブユニットである。いくつかの実施形態において、ＨＩＦは、ＨＩＦ−１である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦは、ＨＩＦ−２である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦは、ＨＩＦ−３である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦは、ＨＩＦ−１及びＨＩＦ−２である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦは、ＨＩＦ−１、ＨＩＦ−２及びＨＩＦ−３である。
【００７３】
いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤は、本明細書において開示される粒子中に装填可能であるいずれのＨＩＦ阻害剤であることも可能である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤は、ＨＩＦ−１α  ｍＲＮＡ阻害剤（例えば、アミノフラボン）、ＨＩＦ−１αタンパク質合成阻害剤（例えば、ｍＴＯＲ阻害剤、強心配糖体、微小管標的薬剤、トポイソメラーゼ阻害剤、オリゴヌクレオチド、アミノフラボン、ＰＸ−４７８）、ＨＩＦ−１αタンパク質安定化阻害剤（例えば、ＨＳＰ９０阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、酸化防止剤、オリゴヌクレオチド、ベルベリン、ＳＥ−メチルセレノシステイン、ＰＸ−１２、ＹＣ−１）、ＨＩＦ−１α：ＨＩＦ−１β二量体化阻害剤（例えば、アクリフラビン、トリパフラビン、硫酸プロフラビン）、ＨＩＦ−１  ＤＮＡ結合阻害剤（例えば、アントラサイクリン、エキノマイシン）またはＨＩＦ−１トランス活性化阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）などのＨＩＦ−１阻害剤である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤は、オレアンドリン、ウワバイン、ブファリン、ジギトキシン、ジゴキシン、シノブファタリン、シノブファギン、レジブホゲニン、デスラノシド、ジギタリン、ジギタリス、プロスシラリジンなどの強心配糖体である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤は、アクチノマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン（ダウノマイシン）、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、バルルビシンなどのアントラサイクリンである。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤は、強心配糖体、アントラサイクリンまたはＨＩＦ−１二量体化阻害剤である。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤は、ジゴキシンまたはアクリフラビンである。
【００７４】
いくつかの実施形態において、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子の径は、約１０ナノメートル〜約５００マイクロメートルの範囲である。いくつかの実施形態において、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子の径は、約５０ナノメートル〜約５ミクロンの範囲である。いくつかの実施形態において、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子の径は、少なくとも１０、２０、３０、４０または５０ナノメートルである。いくつかの実施形態において、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子の径は、５００、４００、３００、２００、１００、５０、あるいは５ミクロン未満である。いくつかの実施形態において、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子は、それらが正常組織ではなく腫瘍組織で蓄積する傾向があるように、強化された浸透性及び滞留（ＥＰＲ）効果を有するために十分小さい。例えば、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子の径は、ＥＰＲ効果を利用するために、４００ナノメートル未満、例えば、約２００〜約２２５ナノメートルであることが可能である。いくつかの実施形態において、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子、あるいはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子の径は、２００ナノメートル未満である。いくつかの実施形態において、ナノ粒子または異方性ナノ粒子は、生分解性及び／または生体適合性である。
【００７５】
いくつかの実施形態において、患者における１つまたはそれ以上の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）を阻害する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された異方性ナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における１つまたはそれ以上のＨＩＦが阻害されることを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、患者における１つまたはそれ以上の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）を阻害する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された、ポリマーマトリックスを含むナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における１つまたはそれ以上のＨＩＦが阻害されることを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、患者における１つまたはそれ以上の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）を阻害する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスを含むナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における１つまたはそれ以上のＨＩＦが阻害されることを含む方法を提供する。
【００７６】
本明細書で使用される場合、「減少」または「阻害」という用語及びその文法的な誘導体は、生体分子、経路または作用機序をブロックする、部分的にブロックする、干渉する、低下させる、減少させる、または非活性化する、薬剤の能力を意味する。したがって、当業者は、「阻害」という用語が、活性の完全及び／または部分的損失、例えば、少なくとも１０％の活性損失、いくつかの実施形態において、少なくとも２０％、３０％、５０％、７５％、９５％、９８％及び１００％までの活性の損失を含むことを認識するであろう。
【００７７】
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、それを必要とする患者における低酸素関連疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された異方性ナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における低酸素関連疾患または障害が治療されることを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、それを必要とする患者における低酸素関連疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された、ポリマーマトリックスを含むナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における低酸素関連疾患または障害が治療されることを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される対象は、それを必要とする患者における低酸素関連疾患または障害を治療する方法であって、少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤が装填された、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックスを含むナノ粒子を患者に投与すること、それによって、患者における低酸素関連疾患または障害が治療されることを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子は異方性である。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子は異方性である。いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子を形成するために、ＨＩＦ阻害剤を装填する前に、ポリマーマトリックスは伸張される。
【００７８】
いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子は、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子をさらに含む。いくつかの実施形態において、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子または異方性ナノ粒子は、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子をさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される方法は、固体腫瘍の部位及び／または転移部などにおいて、患者内の標的位置においてＨＩＦ阻害剤を放出するために、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を刺激することをさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される方法は、患者内の標的位置にナノ粒子または異方性ナノ粒子の標的を定めることをさらに含む。いくつかの実施形態において、ナノ粒子または異方性ナノ粒子の表面は、標的薬剤及び／または治療剤などの少なくとも１種の生体分子を含む。いくつかの実施形態において、標的薬剤及び／または治療剤は、抗体である。
【００７９】
いくつかの実施形態において、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を刺激することは、患者の外部刺激によって生じる。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子の活性化または患者の刺激によって、異方性形状から別の異方性形状または一般に球形形状へなどの異方性ナノ粒子の形状の変化が誘発される。いくつかの実施形態において、異方性ナノ粒子の形状の変化は、異方性ナノ粒子からの少なくとも１種の薬剤分子の放出と同時に生じる。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の薬剤分子の放出は、異方性ナノ粒子の形状が変化した約１日〜約２カ月後の範囲で生じる。いくつかの実施形態において、異方性ナノ粒子の形状の変化は、患者において生じる。いくつかの実施形態において、異方性ナノ粒子は、患者においてマクロファージによって取り込まれない。
【００８０】
いくつかの実施形態において、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子は異方性ではない。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される配合物は、異方性ナノ粒子を使用することなく、ＨＩＦ阻害剤の徐放のために使用することができることが見い出された。いくつかの実施形態において、ＨＩＦ阻害剤の放出は、外部刺激の適用を用いずに生じる。
【００８１】
いくつかの実施形態において、低酸素関連疾患または障害は、がんである。いくつかの実施形態において、がんは、脳、結腸、乳房、前立腺、肝臓、腎臓、肺臓、食道、頭頸部、卵巣、子宮頸管、胃、結腸、直腸、膀胱、子宮、睾丸及び膵臓からなる群から選択される。
【００８２】
いくつかの実施形態において、低酸素関連疾患または障害は、眼疾患である。眼疾患の非限定的な例には、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、黄斑水腫、緑内障、格子状ジストロフィー、網膜色素変性症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、湿潤または乾燥ＡＭＤと関連する光受容体退行変性症、他の網膜退行変性症、視神経乳頭ドルーゼン、眼神経病変及び視神経炎が含まれる。いくつかの実施形態において、眼疾患は、糖尿病性網膜症、黄斑変性症及び黄斑水腫からなる群から選択される。
【００８３】
いくつかの実施形態において、低酸素関連疾患または障害は、化学療法抵抗性である。本明細書で使用される場合、「化学療法抵抗性」という用語は、化学療法剤に対する部分的または完全な抵抗性を意味する。いくつかの実施形態において、本明細書において開示される方法は、ＨＩＦ阻害剤と一緒に化学療法剤を患者に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、化学療法剤は、本明細書において開示されるナノ粒子中にＨＩＦ阻害剤と一緒に装填される。いくつかの実施形態において、化学療法剤は、異なる投与経路を使用することなどによって、ＨＩＦ阻害剤とは別に患者に投与される。
【００８４】
「化学療法剤」は、がんの治療において投与される化合物または組成物を暗示するために使用される。化学療法剤としては、限定されないが、チオテパ及びシクロホスファミドなどのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファンなどのアルキルスルホネート；ベンゾドパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）及びウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ）などのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチロールメラミンを含むエチレンイミンならびにメチルアメラミン；クロランブシル、クロルナファジン、コロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロリド、メルファラン、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン（ｐｒｅｄｎｉｍｕｓｔｉｎｅ）、トロフォスファミド（ｔｒｏｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン（ｃｈｌｏｒｏｚｏｔｏｃｉｎ）、フォテムスチン（ｆｏｔｅｍｕｓｔｉｎｅ）、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチンなどのニトロソウレア；アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリケアミシン（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｕｂｉｃｉｎ）、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン（ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン、マルセロマイシン（ｍａｒｃｅｌｌｏｍｙｃｉｎ）、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン（ｏｌｉｖｏｍｙｃｉｎｓ）、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピュロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン（ｚｉｎｏｓｔａｔｉｎ）、ゾルビシン（ｚｏｒｕｂｉｃｉｎ）などの抗生物質；メトトレザト及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの抗代謝剤；デノプテリン、メトトレザト、プテロプテリン、トリメトレキセートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５−フルオロウラシルなどのピリミジン類似体；カルステロン、ドロモスタノロンプロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトーテン、トリロスタンなどの抗腎上体；フォリン酸などの葉酸補液；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デホファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルシン；ジアジコン；エフロルニチン；エリプチニウムアセテート；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（ｍｏｐｉｄａｍｏｌ）；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸（ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ；ラゾキサン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（Ａｒａ−Ｃ）；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル及びドセタキセル；クロランブシル（ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）；ゲンチタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；シスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体；白金；エトポシド；イホスファミド；ミトマイシンＣ；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼロータ；イバンドロネート；ＣＰＴ１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン；レチノイン酸；エスペラミシン；カペシタビン；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体が含まれる。
【００８５】
化学療法剤としては、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害４（５）−イミダゾール、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン及びトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）を含む抗エストロゲン；ならびにフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、エンザルタミド、リュープロレド、アビラテロン及びゴセレリンなどの抗アンドロゲンなどの腫瘍上でホルモン作用を調節するか、または阻害するように作用する抗ホルモン剤、ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体が含まれる。
【００８６】
いくつかの実施形態において、化学療法剤は、トポイソメラーゼ阻害剤である。トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼ酵素（例えば、トポイソメラーゼＩまたはＩＩ）の作用に干渉する化学療法剤である。トポイソメラーゼ阻害剤としては、限定されないが、ドキソルビシンＨＣｌ、ダウノルビシンシトラート、ミトキサントロンＨＣｌ、アクチノマイシンＤ、エトポシド、トポテカンＨＣｌ、テニポシド及びイリノテカン、ならびにこれらのいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体が含まれる。
【００８７】
いくつかの実施形態において、化学療法剤は、抗代謝剤である。抗代謝剤は、標準的な生化学的反応のために必要とされる代謝物と類似しているが、細胞分裂などの細胞の１つまたはそれ以上の標準的な機能に干渉するために十分異なる構造を有する化学物質である。抗代謝剤としては、限定されないが、ゲムシタビン、フルオロウラシル、カペシタビン、メトトレザトナトリウム、ラリトレキセド、ペメトレキセド、テガフール、シトシンアラビノシド、チオグアニン、５−アザシチジン、６−メルカプトプリン、アザチオプリン、６−チオグアニン、ペントスタチン、フルダラビンホスフェート及びクラドリビン、ならびにこれらのいずれかの薬学的に許容される、塩、酸または誘導体が含まれる。
【００８８】
特定の実施形態において、化学療法剤としては、限定されないが、チューブリンを結合する薬剤を含む、抗有糸分裂剤が含まれる。いくつかの実施形態において、薬剤は、タキサンである。特定の実施形態において、薬剤は、パクリタキセル、カバジタキセルまたはドセタキセル、あるいはパクリタキセル、カバジタキセルまたはドセタキセルの薬学的に許容される塩、酸または誘導体である。特定の別の実施形態において、抗有糸分裂剤は、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビンまたはビンデシン、あるいはその薬学的に許容される塩、酸または誘導体などのビンカアルカロイドを含む。
【００８９】
いくつかの実施形態において、化学療法剤は、パクリタキセルまたはゲムシタビンである。
【００９０】
本明細書において開示される対象は、疾患または障害の治療のためのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物の使用を提供する。本明細書において開示される対象は、疾患または障害の治療のためのポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物の使用も提供する。加えて、疾患または障害の治療のための医薬品の製造のためのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物の使用が提供される。さらに、疾患または障害の治療のための医薬品の製造のためのポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物の使用が提供される。
【００９１】
本明細書中、「被験者」及び「患者」という用語は、交換可能に使用される。それらの多くの実施形態において、本明細書において開示される方法によって治療される被験者は、望ましくは、ヒト被験者であるが、本明細書に開示される方法は、「被験者」という用語に含まれるように意図される全ての脊椎動物種に関して有効であることは理解されるはずである。したがって、「被験者」としては、既存の条件または疾患の治療あるいは条件または疾患の発症を防ぐための予防治療などの医学的目的のためのヒト被験者、あるいは医療、獣医的目的または発達的目的での動物被験者を含むことができる。適切な動物被験者としては、限定されないが、霊長類、例えば、ヒト、サル、類人猿など；ウシ属、例えば、ウシ、雄ウシなど；ヒツジ属、例えば、ヒツジなど；ヤギ属、例えば、ヤギ、など；ブタ属、例えば、ブタ、雄ブタ、など；ウマ科、例えば、ウマ、ロバ、シマウマなど；野生及び家畜のネコを含むネコ科；イヌを含むイヌ科；ウサギ、ノウサギなどを含むウサギ科；ならびにマウス、ネズミなどを含む、げっ歯類を含む哺乳動物が含まれる。動物は、遺伝子導入動物であってもよい。いくつかの実施形態において、被験者は、限定されないが、胎児、新生児、幼児、子供及び成人の被検者を含むヒトである。さらに、「被験者」としては、条件または疾患に悩むか、または悩むことが推測される患者を含むことができる。
【００９２】
一般に、本明細書において開示される組成物（例えば、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む異方性形状記憶粒子、またはポリマーマトリックス及び少なくとも１種のＨＩＦ阻害剤を含むナノ粒子を含む組成物）は、経口、経鼻、経粘膜、眼内投与、直腸内投与、膣内投与、あるいは静脈、筋肉、皮下、髄内注射、ならびに髄腔内、直接心室内、静脈内、関節骨内、胸骨内、滑液内、肝臓内、病巣内、頭蓋内、腹腔内、鼻腔内または眼内注射を含む非経口、大槽内投与、口腔内投与及び舌下投与を含む、粉末、軟膏または点滴剤（点眼液を含む）による局所投与、吸入スプレーを含む経皮投与、あるいは当該技術において既知の他の送達様式を含む、いずれかの適切な投与経路によって、療法のために被験者に投与することができる。
【００９３】
「全身投与」、「全身的に投与される」、「末梢性投与」及び「非末梢的に投与される」という句は、本明細書で使用される場合、それらが患者の器官系に入って、そして代謝及び他の同様のプロセスを受ける組成物の投与、例えば、皮下または静脈内投与を意味する。
【００９４】
「非経口投与」及び「非経口的に投与される」という句は、本明細書で使用される場合、経腸及び局所投与以外の、通常、注射による投与の様式を意味し、限定されないが、これには、静脈、筋肉、動脈、髄腔内、嚢内、眼窩内、眼内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内及び胸骨内注射及び注入が含まれる。
【００９５】
本明細書において開示される医薬組成物は、当該技術において既知の様式で、例えば、従来の混合、溶解、粒状化、ドラジェ作成、浮揚、乳状化、カプセル化、封入または凍結乾燥プロセスの手段によって製造可能である。
【００９６】
別の実施形態において、本明細書において開示される医薬組成物は、ペグ化された（ＰＥＧｙｌａｔｅｄ）治療剤（例えば、ペグ化された抗体）を含んでもよい。ペグ化は、抗体、タンパク質及びペプチドの範囲の変性のための良好に確立され、かつ実証されたアプローチであって、そして抗体、タンパク質及びペプチドの特定の部位におけるポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の付加を伴う（Ｃｈａｐｍａｎ（２００２）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．５４：５３１−５４５）。ペグ化のいくつかの効果としては、以下が含まれる：（ａ）ポリマーが分子の見掛けの径を糸球体のろ過限界より上に増加させることの結果としての腎クリアランスの回避及び／または細胞クリアランス機構のいずれかのため、生体内での顕著に改善された循環半減期；（ｂ）改善された薬物動態；（ｃ）改善された溶解性−ＰＥＧは、水からトルエン、塩化メチレン、エタノール及びアセトンなどの多くの有機溶媒に及ぶ多くの種々の溶媒中に可溶性であることが見い出された；（ｄ）ペグ化された抗体フラグメントは、２００ｍｇ／ｍｌまで濃縮させることが可能であり、そしてそのような能力のため、高いタンパク質用量の皮下投与などの配合物及び投薬選択肢が可能である；これは、典型的に静脈投与される多くの他の治療抗体と対照的である；（ｅ）複合タンパク質の強化されたタンパク分解抵抗性（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ−Ｒｕｎｄｌｅｓ  ｅｔ．ａｌ．（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．１５２：１７７−１９０）；（ｆ）皮下注射部位における減少した損失による改善された生物学的利用能；（ｇ）減少した毒性が観察された；毒性がピークプラズマレベルと関係する薬剤に関して、ペグ化されたタンパク質の皮下投与によって達成される、より平坦な薬物動態プロフィールが有利である；毒性結果を有する免疫反応を引き出すタンパク質も、ペグ化の結果として利益となり得る；ならびに（ｈ）ペグ化された分子の改善された熱及び機械的安定度。
【００９７】
非経口投与のための医薬組成物は、組成物の水溶液を含む。注射のために、本明細書において開示される医薬組成物は、水溶液中で、例えば、いくつかの実施形態において、Ｈａｎｋ溶液Ｒｉｎｇｅｒ溶液または生理学的に緩衝された食塩水などの生理学的に適合性の緩衝液中で配合することができる。水性注射懸濁液は、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ソルビトールまたはデキストランなどの懸濁液の粘度を増加させる物質を含有することができる。加えて、組成物の懸濁液は、脂油、例えば、ゴマ油、あるいは合成脂肪酸エステル、例えば、エチルオレエート、トリグリセリドまたはリポソームを含む。任意に、懸濁液は、高濃縮溶液の調製を可能にするように組成物の溶解性を増加させる適切な安定剤または薬剤を含有することができる。
【００９８】
一般に、経鼻または経粘膜的投与のために、特定のバリアを浸透させるために適切な浸透剤が配合物中で使用される。そのような浸透剤は、一般に、当該技術において既知である。
【００９９】
吸入送達のためにも、本開示の薬剤は、当業者に既知の方法によって配合することが可能であり、これらには、例えば、限定されないが、食塩水、防腐剤、例えば、ベンジルアルコール、吸収促進剤、及びフルオロカーボンなどの物質の溶解、希釈または分散の例が含まれ得る。
【０１００】
追加成分は、そのような成分が薬学的に許容され、かつ上皮細胞またはそれらの機能に有害ではない限り、局所投与のための組成物に添加可能である。さらに、そのような追加成分は、組成物の上皮性浸透効率に悪影響を与えるべきでなく、かつ組成物の安定性の変敗を引き起こすべきではない。例えば、芳香剤、乳濁剤、酸化防止剤、ゲル化剤、安定剤、界面活性剤、皮膚軟化剤、発色剤、防腐剤、緩衝剤などが存在することができる。本明細書において開示される局所組成物のｐＨは、組成物が被験者の皮膚と生理的に適合性であるように、それに対して緩衝剤を添加することによって、約６．０〜約９．０の生理的に受容できる範囲に調整可能である。
【０１０１】
選択された投与の経路にかかわらず、本明細書において開示される組成物は、本明細書に開示されるものなどの薬学的に許容される剤形に、または当業者に既知の他の従来法によって配合される。
【０１０２】
一般に、活性薬剤または薬剤送達デバイスの「有効量」または「治療有効量」は、望ましい生物学的応答を引き出すために必要な量を意味する。当業者によって正しく認識されるであろうとおり、薬剤またはデバイスの有効量は、望ましい生物学的終点、送達される薬剤、封入マトリックスの組成、標的組織などの因子によって異り得る。
【０１０３】
「組合せ」という用語は、その最も広い意味で使用され、そして被験者が少なくとも２種の薬剤を投与されることを意味する。特に、「組合せにおいて」という用語は、例えば、単一疾患状態の治療のため２種（またはそれ以上）の活性剤の同投与を意味する。本明細書で使用される場合、活性剤は、単一剤形で組み合わせて投与されても、別々の剤形として同時に投与されても、あるいは同日または別日に交互に、または連続的に投与される別々の剤形として投与されてもよい。本明細書において開示される対象のいくつかの実施形態において、活性剤は、単一剤形で組み合わせて投与される。いくつかの実施形態において、活性剤は、別々の剤形で投与される（例えば、他の量は変更せず、１種の量を変更させることが望ましい場合）。単一剤形は、疾患状態の治療のための追加的な活性剤を含み得る。
【０１０４】
さらに、本明細書において開示される組成物は、単独で、あるいは薬剤の安定性を強化し、特定の実施形態において、それらを含有する医薬組成物の投与を促進し、溶解または分散の増加を提供し、活性を増加させ、補助剤療法を提供するなどの他の活性成分を含む補助剤と組み合わせて投与することが可能である。有利であることに、そのような併用療法は、従来の治療剤より低い用量を利用し、したがって、それらの薬剤が単独療法として使用される場合に生じる毒性の可能性及び副作用が回避される。
【０１０５】
２種（またはそれ以上）の薬剤の投与のタイミングは、これらの薬剤の組合せの有益な効果が達成される限り、変動可能である。加えて、「との組合せにおいて」という句は、本明細書において開示される組成物、及び任意に追加薬剤の同時、連続またはそれらの組合せのいずれかの投与を意味する。したがって、本明細書において開示される組成物及び任意に追加薬剤の組合せを投与された被験者は、全ての薬剤の組合せの硬化が被験者において達成される限り、本明細書において開示される組成物及び任意に追加薬剤を同時（すなわち、同時）に、または異なる時間（すなわち、いずれかの順番で、同日または別日に、連続）に受けることができる。
【０１０６】
連続的に投与される場合、薬剤は、他方の１、５、１０、３０、６０、１２０、１８０、２４０分またはそれ以上の範囲内で投与することが可能である。他の実施形態において、連続的に投与される薬剤は、他方の１、２、３、４、５、１０、１５、２０日またはそれ以上の範囲内で投与することが可能である。薬剤が同時に投与される場合、それらは、それぞれが本明細書において開示される組成物及び任意に追加薬剤を含む個々の医薬組成物として被験者に投与することが可能であるか、あるいはそれらは、全ての薬剤を含む単一医薬組成物として投与することが可能である。いくつかの実施形態において、１種の薬剤が投与され、そして他の薬剤は３日後に投与される。いくつかの実施形態において、１種の薬剤が投与され、そして他の薬剤は、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０日またはそれ以上後に投与される。
【０１０７】
組合せにおいて投与される場合、特定の生物学的応答を引き出すためのそれぞれの薬剤の有効濃度は、単独で投与される場合のそれぞれの薬剤の有効濃度未満であり得、それによって、薬剤が単独薬剤として投与される場合に必要とされるであろう用量と比較して、１種またはそれ以上の薬剤の用量の低下が可能となる。複数の薬剤の効果は、必ずしも必要ではないが、加算的または相乗的であり得る。薬剤は、複数回投与されてもよい。
【０１０８】
いくつかの実施形態において、組合せにおいて投与される場合、２種またはそれ以上の薬剤は相乗効果を有することが可能である。本明細書で使用される場合、「相乗効果」または「相乗的な組合せ」または「相乗的な組成物」などにおける「相乗作用」、「相乗的な」、「相乗的に」という用語及びそれらの派生語は、薬剤及び少なくとも１種の追加治療剤の組合せの生物学的活性が、個々に投与れる場合のそれぞれの薬剤の生物学的活性の合計より大きい状況を意味する。
【０１０９】
相乗作用は、一般に、
ＱａＱＡ＋ＱｂＱＢ＝相乗指数（ＳＩ）
によって決定される比率から、Ｆ．Ｃ．Ｋｕｌｌ  ｅｔ  ａｌ．Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ９，５３８（１９６１）に記載の方法によって決定することができる、「相乗指数（ＳＩ）」に関して表現することができる。ここで、
ＱＡは、成分Ａに関する終点を生じる、単独で作用する成分Ａの濃度であり；
Ｑａは、終点を生じる、混合物中の成分Ａの濃度であり；
ＱＢは、成分Ｂに関する終点を生じる、単独で作用する成分Ｂの濃度であり；かつ
Ｑｂは、終点を生じる、混合物中の成分Ｂの濃度である。
【０１１０】
一般に、Ｑａ／ＱＡ及びＱｂ／ＱＢの合計が１を超える場合、対抗作用が示される。合計が１と等しい場合、加算性が示される。合計が１以下である場合、相乗作用が示される。ＳＩが低いほど、特定の混合物によって示される相乗作用が大きい。したがって、「相乗的な組合せ」は、単独で使用される場合の個々の成分の観察された活性に基づき予想することができるものよりも高い活性を有する。さらに、成分の「相乗的に有効な量」は、例えば、組成物中に存在する別の治療剤における相乗効果を引き出すために必要な成分の量を意味する。
【０１１１】
別の態様において、本明細書において開示される対象は、単独で、または薬学的に許容される賦形剤との混合物中の１種またはそれ以上の追加治療剤との組合せで、医薬組成物及び任意に追加薬剤を提供する。
【０１１２】
特に、本明細書において開示される対象は、医薬組成物と、任意に追加薬剤と、薬学的に許容される担体とを提供する。
【０１１３】
治療及び／または診断用途において、本開示の化合物は、全身的及び局所的または局地的投与を含む、様々な投与様式のために配合されることができる。技術及び配合物は、一般に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（２０ｔｈ  ｅｄ．）Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ（２０００）に見い出され得る。
【０１１４】
全身投与に適切な用量への、本開示の実施のために本明細書に開示される化合物を配合するための薬学的に許容される不活性担体の使用は、本開示の範囲内にある。担体の適切な選択及び適切な製造実施によって、本開示の組成物、特に、溶液として配合されたものは、静脈注射などによって、非経口的にされ得る。化合物は、当業者に周知の薬学的に許容される担体を使用して、経口投与に適切な用量に、容易に配合することができる。そのような担体によって、本開示の化合物を、治療される被験者（例えば、患者）による経口摂取のためのタブレット、ピル、カプセル、液体、ジェル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして配合することが可能となる。
【０１１５】
経鼻または吸入送達のためにも、本開示の薬剤は、当業者に既知の方法によって配合されてよく、そして例えば、限定されないが、食塩水；ベンジルアルコールなどの防腐剤；吸収促進剤；及びフルオロカーボンなどの物質の溶解、希釈または分散の例が含まれ得る。
【０１１６】
本開示での使用のために適切な医薬組成物としては、その意図された目的を達成するために有効な量で活性成分が含まれる組成物が含まれる。有効量の決定は、特に、本明細書に提供された詳細な開示を考慮に入れて、当業者の能力の十分範囲内である。一般に、本開示による化合物は、広範囲の用量範囲において有効である。例えば、成人のヒトの治療において、１日あたり０．０１〜１０００ｍｇ、０．５〜１００ｍｇ、１〜５０ｍｇ、１日あたり５〜４０ｍｇの用量が、使用されてよい用量の例である。非限定的な用量は、１日あたり１０〜３０ｍｇである。正確な用量は、投与経路、化合物が投与される形態、治療される被験者、治療される被験者の体重、ならびに担当医の好み及び経験次第であろう。
【０１１７】
活性成分に加えて、これらの医薬組成物は、製薬において使用可能である製剤への有効な化合物の加工を容易にする賦形剤及び補助剤を含む適切な薬学的に許容される担体を含み得る。経口投与のために配合された調製は、タブレット、ドラジェ、カプセルまたは溶液の形態であり得る。
【０１１８】
ＩＩＩ．本明細書において開示される粒子を含むキット
一般に、本明細書において開示されるキットは、本明細書において開示される対象による方法を実施するためのいくつか、または全ての成分、試薬、供給材料などを含有する。いくつかの実施形態において、「キット」という用語は、本明細書において開示されるナノ粒子または微小粒子配合物を含む、いずれかの意図された製造物品（例えば、パッケージまたは容器）を意味する。
【０１１９】
いくつかの実施形態において、キットは、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む異方性形状記憶粒子と、患者に薬物を送達ため、及び／または患者における疾患もしくは障害を治療するための特定の取扱説明書のセットとを含む。いくつかの実施形態において、キットは、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の感刺激性ナノ粒子を含む異方性形状記憶粒子と、患者に薬物を送達ため、及び／または患者における疾患もしくは障害を治療するための特定の取扱説明書のセットとを含む。
【０１２０】
いくつかの実施形態において、キットは、ポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子と、１種もしくはそれ以上のＨＩＦを阻害するため、及び／または低酸素関連疾患もしくは障害を治療するための特定の取扱説明書のセットとを含む。いくつかの実施形態において、キットは、ポリ（乳酸）ベースのポリマーマトリックス及び少なくとも１種の低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）阻害剤を含むナノ粒子と、１種もしくはそれ以上のＨＩＦを阻害するため、及び／または低酸素関連疾患もしくは障害を治療するための特定の取扱説明書のセットとを含む。
【０１２１】
キットは、カートン、ボトル、アンプル、チューブなどの分割または非分割容器中にパッケージされることができる。本明細書において開示される組成物は、乾燥、凍結乾燥または液体形態でパッケージされることができる。提供された追加成分は、乾燥成分の再構成のための媒体を含むことができる。好ましくは、全てのそのような媒体は、それらが悪影響を引き起こすことなく、患者への注射に適切であるように、殺菌性及び非発熱性である。
【０１２２】
長年の特許法規約に従って、「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」という用語は、請求項を含む本出願において使用される場合、「１またはそれ以上」を示す。したがって、例えば、文脈上明らかに反対でない限り（例えば、複数の被験者など）、「被験者」は、複数の被験者を含む。
【０１２３】
本明細書及び請求項を通して、「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」、「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」及び「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」という用語は、文脈上他が必要とされない限り、非排他的意味で使用される。同様に、「ｉｎｃｌｕｄｅ」という用語及び文法的変形は、リスト中の項目の記述が、代用可能であるか、列挙された項目に追加可能である同様の項目の排除ではないように、非限定的であるように意図される。
【０１２４】
本明細書及び添付の請求項の目的のため、他に明記されない限り、明細書及び請求項において使用される量、径、直径、特性、形状、配合物、パラメーター、百分率、パラメーター、量、特徴及び他の数値的変数を表す全ての数値は、全ての例において、「約」という用語が、値、量または範囲と一緒に特別に記載されない場合でさえ、「約」という用語によって修飾されることは理解されるべきである。したがって、他に示されない限り、次の明細書及び添付の請求項において明らかにされる数値パラメーターは、正確なく、かつ正確である必要はあり得ないが、本明細書において開示される対象によって得られることが求められる所望の特性に依存して、許容誤差、変換因子、四捨五入、測定誤差など及び当業者に既知の他の因子を反映して、おおよそであり得、かつ／または所望より大きくなり得るか、もしくは小さくなり得る。例えば、「約」という用語は、値を参照する場合、いくつかの実施形態において±１００％、いくつかの実施形態において±５０％、いくつかの実施形態において±２０％、いくつかの実施形態において±１０％、いくつかの実施形態において±５％、いくつかの実施形態において±１％、いくつかの実施形態において±０．５％、そしていくつかの実施形態において±０．１％の特定の量からの変動を包含するように意味することが可能であり、そのような変動は、本開示の方法を実施するため、または本開示の組成物を利用するために適切である。
【０１２５】
さらに、「約」という用語が、１またはそれ以上の数値または数値範囲に関連して使用される場合、範囲内の全ての数値を含む、全てのそのような数値を意味すると理解されるべきであり、かつ明らかにされた数値の上下の境界を拡張することによって、その範囲は変更される。終点による数値範囲の記述は、全ての数値、例えば、その範囲内に包括されるそれらの分数を含む全整数（例えば、１〜５という記述には、１、２、３、４及び５、ならびにそれらの分数、例えば、１．５、２．２５、３．７５、４．１などが含まれる）ならびにその範囲内のいずれかの範囲が含まれる。
【実施例】
【０１２６】
以下の実施例は、本明細書において開示される対象の代表的な実施形態を実施するために、当業者に基準を提供するために含まれる。本開示及び当該技術における一般的なレベルを考慮に入れて、当業者は、以下の実施例が模範的であるようにのみ意図されること、ならびに多数の変更、修正及び交替が、本明細書において開示される対象の範囲から逸脱することなく利用可能であることを認識することができる。以下の実施例は、実例として提供され、限定するものではない。
【０１２７】
実施例１
生物医学的使用のための形状記憶粒子
材料及び方法
疎水性金ナノ粒子合成：Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）の修正版を使用して、疎水性金ナノ粒子を合成した。より特に、凍結乾燥された１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（Ａｖａｎｔｉ（登録商標）Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ；ＤＯＰＣ）を、クロロホルム中２５ｍｇ／ｍＬで再構成して、そしてトルエンと混合し、２５０μｇ／ｍＬ溶液（３３ｍＬ）を形成し、これを約１０秒間、ボルテックスした。（金属キャップインサートの下で）６種の異なる２０ｍＬのシンチレーションバイアルに入れた５ｍＬのこの溶液を抽出して、そしてＡｕ３＋を還元しないように各キャップから廃棄した。テトラクロロ金酸３水和物（ＨＡｕＣｌ４）を超高純度蒸留水中で１００ｍｇ／ｍＬに再構成して、そしてストックとして利用した。２５０μＬのストックＨＡｕＣｌ４溶液を２４．７５ｍＬの超高純度蒸留水と混合し、１ｍｇ／ｍＬのＨＡｕＣｌ４溶液を形成した。この１ｍｇ／ｍＬ溶液２ｍＬを、トルエン中５ｍＬの２５０μｇ／ｍＬのＤＯＰＣ溶液をすでに含有する、６種の２０ｍＬシンチレーションバイアルのそれぞれに添加した。それぞれのバイアルは、ＶＷＲマグネティック撹拌棒も含有した。マルチポジション撹拌プレート上にシンチレーションバイアルを配置する前に、それぞれのバイアルをボルテックスし、水相及び有機相の非透明及び可能な程度まで均質の混合物を製造し、その後、１０ｍｇ／ｍＬの液滴で、１ｍＬのクエン酸三ナトリウム二水和物を添加した。撹拌を約１８時間継続した。完了後、有機相及び水相を数分かけて十分に分離し、そして有機トルエン相を抽出して、混合し、そして新しいシンチレーションバイアル中に入れた。相分離が生じた場合、全ての水性溶媒を再び有機相から抽出した。
【０１２８】
ＰＤＬＬＡ微小粒子中に、脂質によってコーティングされた金ナノ粒子をカプセル化するはずであった日に、金ナノ粒子（１．５ｍＬチューブ中トルエン中の１ｍＬの金ナノ粒子；合計５ｍＬ）を１６，０００ｒｃｆで遠心分離処理した。ペレット以外の全てを吸引し（９７５μＬ）、そして同体積のジクロロメタン（ＤＣＭ）で置き換えた。金ナノ粒子を超音波処理し（Ｍｉｓｏｎｉｘ）、ＤＣＭ中で均質混合物となった。ＰＤＬＬＡ微小粒子形成の間、ＤＣＭ中の５ｍＬの金ナノ粒子を単一エマルジョンカプセル化で直接使用した。
【０１２９】
ＰＤＬＬＡ異方性微小粒子合成及び特徴決定：脱イオンＭｉｌｌｉＱ水中で２種のポリビニルアルコールの溶液を製造した（ＰＶＡ１＝１％  ＰＶＡ；ＰＶＡ０．５＝０．５％  ＰＶＡ）。２００ｍＬのＰＶＡ０．５を、４５０ｒｐｍで回転するＶＷＲ撹拌棒を備えたビーカーに入れた。１００ｍｇのＰＤＬＬＡを、５ｍＬの金ナノ粒子含有ＤＣＭに溶解し、そして均質化しながら（５０００ｒｐｍ）、５０ｍＬのＰＶＡ１に注ぎ入れた。粒子の蛍光可視化のため、１ｍｇのＮｉｌｅ  Ｒｅｄまたは７−アミノ−４−メチルクマリンをＤＣＭ混合物に添加した。次いで、金ナノ粒子をカプセル化する微小粒子溶液を、すでに撹拌しているＰＶＡ０．５中に注ぎ入れて、そしてさらに４時間撹拌して、有機溶媒を蒸発させた。その後、微小粒子を４℃で遠心分離によって３回洗浄した（４０００ｒｐｍ；５分）。３回目の洗浄後、微小粒子を、１ｍＬの脱イオン水中で再び懸濁させて、凝集を回避するために倍散させ、液体窒素で急速凍結し、凍結乾燥させ、そしてさらなる使用の時まで、４℃の最高温度で貯蔵した。次いで、粒子は、Ｍｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）に記載される自動化薄膜伸張手順によって異方性形状に変形された。
【０１３０】
微小粒子径及び形状の特徴決定のため、走査型電子顕微鏡法を利用した。凍結乾燥された粒子試料を、アルミニウムタックに配置されたカーボンテープ上に延展した。次いで、粒子を、３０ｎｍの金−クロム合金でスパッタコーティングし、そしてＬｅｏＦＥＳＥＭで像化した。径は、得られたＳＥＭ顕微鏡写真のＩｍａｇｅＪ分析によって決定した。全ての研究を通して、アスペクト比は、平坦な粒子の分析によって、そしてより長い軸対短い軸の比率を取って決定した。蛍光粒子像分析のため、共焦点像は、Ｚｅｉｓｓ  ８００  ＦＣＳ共焦点顕微鏡を使用して完成した。
【０１３１】
ＰＤＬＬＡ微小粒子中の金ナノ粒子の特徴決定：微小粒子内のＡｕＮＰの数を定量化するために、標準曲線を作成した；ＡｕＮＰのストック濃度は、３．１８９×１０１０Ｍ−１ｃｍ−１の減衰係数を使用して、Ｂｅｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ法則（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，２００７）を使用して算定された。４００μＬのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解された５ｍｇの純粋なＰＤＬＬＡ微小粒子によるトルエン（１ｍＬ）中でのＡｕＮＰの種々の希薄を使用して、標準曲線を作成し；１４００μＬの全体積の１μＬを、ＮａｎｏＤｒｏｐ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）による吸光度評価のために使用した（図３）。粒子１ｍｇあたり、どの程度のＡｕＮＰが存在するかを定量化する場合、５ｍｇの４種の未知試料を、１ｍＬのトルエン及び４００μＬのＤＭＳＯ中に溶媒和させた。試料のＡｕＮＰ／μＬの数は、標準曲線で補間挿入され、そして１４００（μＬの全体積）を掛けて、そして５ｍｇで割った。
【０１３２】
形状記憶効果のレーザー誘引：形状記憶効果の一時的制御の分析のため、粒子を、直径５ｍｍの円形スポット全体に分散した２Ｗのパワーの５３２ｎｍのレーザー（レーザ仕様）で照射した。粒子は、ガラスキュベット中の４＊１０７粒子／ｍＬの濃度において照射された。温度は、Ｆｌｕｋｅ熱電対デバイスを用いて評価された。実験で示された照射時間後、粒子を回収し、そしてアスペクト比の評価のためにＳＥＭで像化した。次いで、測定したアスペクト比（ＡＲｍ）を初期アスペクト比（ＡＲｏ）に標準化し、そして次式に従って形状復元率を求めた。
【数１】
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【０１３３】
形状記憶効果の空間的選択性の特徴決定は、２＊１０５粒子／ｍＬ  ＰＥＧゲルの濃度でのＰＥＧハイドロゲル中の粒子の固定化によって達成された。次いで、ハイドロゲルをレーザーに取り付けて、そして５分間、直径約５ｍｍの単一円形スポッで照射した。ＰＥＧハイドロゲルの加熱は、ＦＬ−ＩＲカメラでの像化によって追跡した。レーザー照射後、共焦点顕微鏡法でゲルを像化し、そして幅２００μｍの個々の像が生じ、そしてハイドロゲルの長さとつなぎ合わせた。次いで、アスペクト比を像全体で定量化し、レーザースポット径に及ぼす形状記憶効果の空間的依存性を分析した。
【０１３４】
細胞取込み実験：形状記憶効果を受けるために誘引された粒子の細胞取込みは、ＲＡＷ  ２６４．７マクロファージを使用して分析した。細胞取込みは、流動細胞計測法及び共焦点顕微鏡法を使用して評価した。流動細胞計測法のために、細胞は、実験開始の２日前に、３０，０００細胞／ウェルの密度で、９６ウェルプレートにシードされた。実験の日、媒体を吸引し、そして示された用量で粒子を含有する媒体が添加された。次いで、細胞を３７℃で４時間、インキュベーションし、そして４時間の終了時に、それらを１×ＰＢＳで３回洗浄した。粒子を細胞から区別するため、次いで、製造業者のプロトコルに従って、細胞をカルボキシフルオレスセインスクシニルエステル（ＣＦＳＥ）で着色させた。ＣＦＳＥで着色させた細胞は、強力な倍散によってプレートから除去され、そして流動細胞計測法によって分析した。共焦点顕微鏡法のために、細胞を、ウェルあたり３０，０００細胞の密度において、ＬａｂＴｅｋチャンバースライド上で培養させた。粒子による４時間のインキュベーション時間後、過剰量の粒子を、１×ＰＢＳによって３回洗浄し、次いで、１０％のホルマリンを用いて１５分間室温で細胞を固定した。固定化及び洗浄の後、製造業者のプロトコルに従って、アクチン可視化のためのＡｌｅｘａ  ６４７ファロイジン及び核可視化のためのＤＡＰＩで細胞を着色した。次いで、Ｚｅｉｓｓ  ＦＣＳ  ８００共焦点顕微鏡を使用して、細胞を像化した。細胞生存能力は、製造業者のプロトコルに従って、細胞タイターアッセイを使用して評価された。
【０１３５】
結果
金ナノ粒子をカプセル化するポリ（Ｄ，Ｌ乳酸）（ＰＤＬＬＡ）マトリックスから構成される形状記憶微小粒子が作成された（図１Ａ）。代表的な形状記憶活性化機構を図１Ｂに示す。球形金ナノ粒子が包埋されたＰＤＬＬＡ微小粒子の一時的に伸張された形状は、微小粒子中のポリマーの物理的な絡み合いネットワークを中断させることなく、同等に低い温度で、フィルム伸張を使用して得られた（図１Ｂ）。
【０１３６】
図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃ及び図２Ｄは、ポリマー微小粒子の形状記憶効果を示す。ポリ（Ｄ，Ｌ乳酸）微小粒子（図２Ａ）が、６５℃（図２Ｂ）または９０℃（図２Ｃ）のいずれかで伸張されて、異方性形状になり、１分間、５分間、１５分間、３０分間または６０分間、インキュベーションし、次いで、ＳＥＭで分析した。像分析によって、形状記憶効果は、低温伸張粒子において誘引されたが、高温伸張粒子において誘引されなかったことが実証された。図２Ｄは、ポリマー配列が、９０℃伸張粒子とは対照的に、６５℃伸張粒子において、より高度に存在し、これは、観察された形状記憶効果の背後にある推進力として、ポリマーの物理的架橋を示す。
【０１３７】
形状記憶微小粒子モルフォロジーを、伸張後に調査し、そして伸張された微小粒子の異方性形状を実証した（図３Ａ、図３Ｂ、図３Ｃ、図３Ｄ及び図３Ｅ）。球形（図３Ａ）及び非球状（図３Ｂ）粒子は、ＳＥＭを使用して特徴づけられた。図３Ｃは、球形粒子の径特徴決定によって約４μｍの径が実証されたことを示す。図３Ｄ及び図３Ｅは、純粋なＰＤＬＬＡ微小粒子の存在下でのＡｕＮＰの吸光度スペクトル（図３Ｄ）及び標準曲線（図３Ｅ）を示す。
【０１３８】
微小粒子の形状記憶効果は、ポリマー粒子のバルク加熱によって確認した（図４）。光学顕微鏡像によって、４５℃の水浴中、６０℃で伸張された粒子は、一般に、３０分以内にそれらの異方性形状を球形形状に変化させたが、９０℃で伸張された粒子は、それらの異方性形状を３０分まで維持したことを示した。定量分析によって、６０℃で伸張された粒子のアスペクト比は、３つの水浴全てにおいて急速に低下し、それぞれ、４０℃、４５℃及び５０℃において１まで減少するのに、３０分、１５分及び５分かかったことが示された。それとは対照的に、９０℃で伸張された粒子のアスペクト比は、４０℃の水浴中で約３を維持したが、より高温の水浴中では、約２まで、わずかに減少した。
【０１３９】
金ナノ粒子をカプセル化する微小粒子の形状記憶効果は、レーザー誘引によっても達成された（５Ａ、図５Ｂ、図５Ｃ、図５Ｄ、図５Ｅ、図５Ｆ、図５Ｇ及び図５Ｈ）。粒子を６５℃（図５Ａ）または９０℃（図５Ｂ）で伸張し、そして０分、１分、２分、３分または５分間レーザー処理した。６０℃で伸張された形状記憶微小粒子のアスペクト比は、３．８Ｗでのレーザー暴露の５分間以内に急速に減少した（図５Ｃ）。それとは対照的に、９０℃で伸張されたＰＤＬＬＡ微小粒子は、それらの異方性形状を維持した（図５Ｃ）。これは、微小粒子が、９０℃での伸張プロセスの間に、ポリマー絡み合いネットワークの再構成のため、それらの形状記憶効果を失ったことを示す。重要なことに、レーザー誘引の間に測定された最高温度は、人体に優しい温度範囲内である４２℃であった。図５Ｄは、６５℃で伸張された粒子が１００％のアスペクト比復元を達成し、かつ９０℃で伸張された粒子が約２０％のアスペクト比復元を達成したことを示す。試料の温度は加熱の間に異ならなかった（図５Ｅ）。加えて、ＰＥＧハイドロゲルに固定化された粒子は、形状記憶効果の空間的選択性を実証した。レーザーが適用された領域は、粒子が形状記憶を達成した領域であった（図５Ｆ）。ＰＥＧハイドロゲルの熱ＩＲ像は、ゲル全体の加熱を実証した（図５Ｇ）。つなぎ合わせた共焦点像のアスペクト比分析によって、レーザーが粒子を照射したスポットのみで粒子の完全に近い復元が実証された（図５Ｈ）。
【０１４０】
形状記憶粒子のレーザー誘引は、形状取込み効果による微小粒子の細胞食作用に影響を与えることが見い出された。図６Ａ及び図６Ｂは、球形粒子（図５Ａ）及び伸張された粒子（図６Ｂ）を取り込むマクロファージの共焦点像を示す。これらの像は、楕円体粒子（図６Ａ及び図６Ｂ）以上のレーザー照射された形状後退粒子に対するマクロファージ食細胞崩壊優先性を示す。取込み率を球形粒子及び楕円体粒子に関して計算し、そして図６Ｃにグラフ式で示す。
【０１４１】
図７Ａ、図７Ｂ及び図７Ｃは、食細胞崩壊細胞が、レーザーによって誘引される異なる伸張粒子に対する異なる応答を実証することを示す。共焦点像によって、非球形粒子と比較して高い量で球形粒子を食細胞崩壊的に取り込むマクロファージの優先性があることが実証された。
【０１４２】
図８Ａ、図８Ｂ、図８Ｃ及び図８Ｄは、金ナノ粒子の存在を分析するためにＴＥＭで像化された、金ナノ粒子を封入する球形（図８Ａ）及び非球形（図８Ｂ）ＰＤＬＬＡ微小粒子を示す。球形（図８Ｃ）及び伸張（図８Ｄ）微小粒子の端部（最小ポリマーＴＥＭ像干渉の領域）の拡大写真は、ポリマー微小粒子内に封入された金ナノ粒子（赤い矢印）の存在を実証した。
【０１４３】
図９は、代表的な混合粒子形状記憶実験を示す。６５℃で伸張された粒子（青）及び９０℃で伸張された粒子を１：１の比率で混合して、そして４０℃においてインキュベーション時間で加熱した。次の試料の共焦点像は、粒子伸張温度に対する形状記憶効果の唯一の依存を実証する。
【０１４４】
図１０は、細胞生存能力が、様々な用量への細胞の暴露によって変化しなかったことを示す。細胞代謝速度は、ＭＴＳアッセイによって、粒子への４時間の曝露の後に評価された。次いで、この速度は、パーセント代謝活性を算出するために、未処理の細胞に対して標準化された。有意な減少は指摘されなかった。
【０１４５】
要約
これが、ヒトの生理学的環境で誘導することができる生体適合性の形状記憶微小粒子の製造の最初の開示であると思われる。金ナノ粒子（ＰＤＬＬＡ微小粒子における金）をカプセル化するＰＤＬＬＡマトリックスから構成される、生体適合性の光によって誘導された形状記憶微小粒子が首尾よく開発された。
【０１４６】
熱またはレーザーのいずれかを適用して、金ナノ粒子が包埋されたＰＤＬＬＡ微小粒子の形状記憶効果を誘引することができた。これらの形状記憶微小粒子は、ポリマー絡み合いネットワークを維持しながら、応力復元のため、一時的に伸張された形状から最初の球形形状への形状の変化を経験した。そのような形状記憶効果は、全てのポリマーに普遍的であり、生物学的応用のための新規形状記憶材料を探究するための新規窓口を開放する。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、これらの材料は、直接的または間接的誘引による組織再生または腫瘍治療のための細胞取込み及び／または薬剤送達を積極的に制御するために特に有用である。
【０１４８】
実施例２
低酸素誘導性要因（ＨＩＦ）のポリマーナノ粒子含有阻害剤
方法
ナノ粒子沈殿：全ての薬剤配合物は、単一エマルジョンナノ沈殿法を使用して形成した。特に、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）−アクリフラビンナノ粒子配合物は、次のように形成した：
【０１４９】
メタノール中のアクリフラビンの５ｍｇ／ｍＬ溶液を、１：４の体積対体積比でのアセトン中の商業的に入手されたポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０：５０；分子量：７ｋＤａ〜１７ｋＤａ）の３３．３ｍｇ／ｍＬ溶液と混合した。次いで、このアクリフラビン／ＰＬＧＡ混合物を、１：２．５の体積対体積比での超純粋蒸留水中のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）の１０ｍｇ／ｍＬ溶液に注入し、そして即座に、２分間、６０の振幅においてＭｉｓｏｎｉｘ超音波処理器を使用して超音波処理した。有機相を、２４時間、氷上で真空チャンバー中で蒸発させた。次いで、配合物を１５分間、３９０００ＲＣＦで超遠心分離によって３回洗浄し、その後、凍結及び凍結乾燥させた。
【０１５０】
ＰＬＧＡ−キソルビシン配合物は、アクリフラビン配合物と同様に形成したが、メタノール中５ｍｇ／ｍＬ溶液ではなく、１．２５ｍｇ／ｍＬ溶液を使用した。ＰＬＧＡ−ジゴキシン配合物も同様に製造したが、ジクロロメタン（塩化メチレン）及びメタノールの５０：５０混合物中の５ｍｇ／ｍＬ溶液を使用した。
【０１５１】
直径及びゼータ電位：配合物のそれぞれの直径は、リン酸緩衝食塩水中で、ナノ粒子追跡分析ソフトウェア（ＮａｎｏＳｉｇｈｔ）を使用して定量化した。ゼータ電位は、水中で、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒを使用して定量化した。
【０１５２】
薬剤装填及び放出の定量化：薬剤装填及び放出は、アクリフラビン（それぞれ、４３０及び５１５ｎｍの励振及び発光）、ならびにドキソルビシン（それぞれ、４８５及び５９０ｎｍの励振及び発光）に関して、蛍光を使用して定量化した。ＰＬＧＡ−ジゴキシン配合物に関する薬剤装填及び放出は、ジゴキシンＥＬＩＳＡキット（Ｍｏｎｏｂｉｎｄ）を使用して定量化した。
【０１５３】
放出は、リン酸緩衝食塩水中、３７℃で達成された。試料は、様々な時点で遠心分離機にかけられ、そして上清を凍結、凍結乾燥させ、そしてアクリフラビン及びドキソルビシンに関してはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中、またはジゴキシンに関しては７０％のエタノール中で再構成した。放出時間を評価するためのＰＬＧＡ−薬剤配合物の初期濃度は、アクリフラビン及びドキソルビシンに関しては１ｍｇ／ｍＬ、そしてジゴキシンに関しては２０ｍｇ／ｍＬであった。
【０１５４】
ＰＬＧＡ−アクリフラビン及びＰＬＧＡ−ドキソルビシン配合物に関しての装填は、試料をアセトン中に溶解し、真空チャンバー中で蒸発させ、次いで、ＤＭＳＯ中で再構成することによって定量化した。これらの試料は、定量化の前にＰＬＧＡを分離するために遠心分離にかけられた。ＰＬＧＡ−ジゴキシンに関しての装填は、１Ｍ  ＨＣｌ及び１Ｍ  ＮａＯＨを添加し、ｐＨを中性化し、凍結、凍結乾燥させ、次いで、７０％エタノール中で再構成することによって定量化した。
【０１５５】
統計：報告された全ての誤差は平均の標準誤差である。
【０１５６】
結果
直径及びゼータ電位：ＰＬＧＡ−アクリフラビン、ＰＬＧＡ−ドキソルビシン及びＰＬＧＡ−ジゴキシン配合物の直径は、それぞれ、２２０±２０（ｎ＝２）、２１０±１０（ｎ＝２）及び２１０±１０ｎｍ（ｎ＝３）であった（図１１）。ＰＬＧＡ−アクリフラビン、ＰＬＧＡ−ドキソルビシン及びＰＬＧＡ−ジゴキシン配合物のゼータ電位は、それぞれ、−１３．９±０．７（ｎ＝３）、−１３．０±０．９（ｎ＝３）及び−１５．２±０．１ｍＶ（ｎ＝３）であった（図１１）。
【０１５７】
薬剤装填及び放出定量化：ＰＬＧＡ−アクリフラビン、ＰＬＧＡ−ドキソルビシン及びＰＬＧＡ−ジゴキシン配合物の装填は、それぞれ、カプセル化されたＰＬＧＡ−薬剤質量の４３±３、１５．０±０．５及び９０±１０μｇ／ｍｇであった。ＰＬＧＡ−アクリフラビン、ＰＬＧＡ−ドキソルビシン及びＰＬＧＡ−ジゴキシン配合物の累積放出は、それぞれ、ＰＬＧＡ−薬剤の１５．１±０．８（図１２）、７．５±０．８（図１４）及び５３±４μｇ／ｍｇ（図１２）に達した。アクリフラビン、ドキソルビシン及びジゴキシンの放出率は、それぞれ、３５±２（図１３）、５０±５（図１３）及び５６±４％（図１５）でピークに達した。ＰＬＧＡ−アクリフラビン及びＰＬＧＡ−ドキソルビシン配合物からの薬剤のほとんどは、約１週間で放出されたが（図１２及び図１３）、ＰＬＧＡ−ジゴキシン配合物は、数カ月の規模のより長い期間で放出した（図１４及び図１５）。
【０１５８】
薬剤放出の温度依存：ＰＬＡベースのポリマーからのパクリタキセル放出は、薬剤放出温度及びポリマーＴｇの間の差異に強い依存性を示した（図１６Ａ）。図１６Ｂは、類似の結果が、微小粒子からのドキソルビシン放出に関しても見られたことを示す。図１６Ｃは、ジゴキシン放出が、（図１１に示される）より小さい径のナノ粒子からでも同様の放出動態を示したことを示す。
【０１５９】
ジゴキシンは、ＴＮＢＣオルトグラフトにおけるパクリタキセルによって誘導されたＢＣＳＣ富化を阻害する：パクリタキセル及びジゴキシンの組合せは、ジゴキシンまたはパクリタキセルのみの場合と比較して、腫瘍増殖に有意に高い阻害作用を与えた（図１７Ａ）。新たに採取された腫瘍を、単一細胞懸濁液中に溶解し、そしてＡｌｄｅｆｌｕｏｒアッセイを受けさせたところ、食塩水処理と比較して、パクリタキセルは、乳がん幹細胞に対して富化されるアルデヒドデヒドロゲナーゼ発現（ＡＬＤＨ＋）細胞の率を有意に増加させたことが明らかとなった（図１７Ｂ）。それとは対照的に、ジゴキシンは、ＡＬＤＨ＋細胞の率を有意に減少させ、そしてＡＬＤＨ＋細胞のパクリタキセルによって誘導された富化を停止した（図１７Ｂ）。同じ腫瘍において、パクリタキセルは、乳がん幹細胞表現型を促進するＩＬ−６、ＩＬ−８及びＭＤＲ１  ｍＲＮＡの発現を増加し、そしてこの効果は、ジゴキシンによって阻害された（図１７Ｃ）。
【０１６０】
ジゴキシンとゲムシタビンとの同時投与が腫瘍再発を予防する：腫瘍再発に対するＨＩＦ阻害の効果を調査するために、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、Ｓｃｉｄマウスの乳房脂肪パッドに移植した。腫瘍が触知可能になった時、マウスは、食塩水、ゲムシタビン（第５日、第１０日、第１５日、第２０日及び第２５日において２０ｍｇ／ｋｇ）またはジゴキシン及びゲムシタビンの組合せ（第１〜２５日において２ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射を受ける３つの群に無作為抽出された。治療は、腫瘍が、ジゴキシン／ゲムシタビン併用療法を受けるマウスにおいて触知可能でなくなった時に停止した。ゲムシタビンによる治療によって、腫瘍増殖は顕著に減少したが、治療の中止後、急速な腫瘍増殖が再開した（図１８）。対照的に、ゲムシタビン／ジゴキシンの併用療法は、原発腫瘍を排除したのみならず、いずれの即時腫瘍再発も予防した。
【０１６１】
要約
低酸素誘導性因子（ＨＩＦ）の発現は、化学療法抵抗性と関連する腫瘍内低酸素の特徴であることが見出された。ジゴキシンなどのＨＩＦ阻害剤と、パクリタキセルまたはゲムシタビンなどの細胞毒素化学療法剤との同時投与が、化学療法剤への乳がん幹細胞の抵抗性を克服し、マウスで腫瘍根絶が導かれたことが実証された。これらの実験は、乳がん幹細胞に及ぼす細胞毒素化学療法剤の反治療効果を阻止し、それによって、治療後の腫瘍再発を予防することにおけるジゴキシンの有用性を実証する。ヒトにおけるジゴキシンの毒性増加は、この様式における遊離薬剤の使用を妨げるが、この障害は、腫瘍内に粒子が位置するまで放出されないＨＩＦ阻害剤を含有するポリマー形状記憶ナノ粒子の使用によって克服することができる。
【０１６２】
参照
本明細書で記載された全ての刊行物、特許出願、特許及び他の参照文献は、本明細書において開示される対象が関する技術の当業者のレベルを示す。全ての刊行物、特許出願、特許及び他の参照文献は、本明細書中、参照することによって、それぞれの個々の刊行物、特許出願、特許及び他の参照文献が、参照によって組み込まれたことが特に、及び個々に示されたかのように組み込まれる。多数の特許出願、特許及び他の参照文献が本明細書に参照されるが、そのような参照文献は、これらの文献のいずれも、当該技術における共通の一般知識の一部を形成することの承認を構成しない。本明細書と組み込まれた参照文献との間に矛盾がある場合、（組み込まれた参照文献に基づき得る、それらの補正を含む）本明細書が対照標準がとなるべきである。他に示されない限り、用語の標準的な技術によって受け入れられる意味が、本明細書中に使用される。様々な用語の標準的な略語が本明細書中に使用される。
【０１６３】
Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｙ  ｏｆ  ＤＭＰＣ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  Ｇｏｌｄ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＭＲＳ  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ２００７，１０６１，１０６１−ＭＭ０９−０８  ｄｏｉ：１０．１５５７／ＰＲＯＣ−１０６１−ＭＭ０９−０８．
【０１６４】
Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｔｉｎｃｔｉｏｎ  ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｏｆ  ｇｏｌｄ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｗｉｔｈ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｓｉｚｅｓ  ａｎｄ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｃａｐｐｉｎｇ  ｌｉｇａｎｄｓ．Ｃｏｌｌｏｉｄｓ  Ｓｕｒｆ  Ｂ，５８（２００７），ｐｐ．３−７．
【０１６５】
Ｍｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎ  ａｕｔｏｍａｔｅｄ  ｍｕｌｔｉｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  ｔｈｉｎ  ｆｉｌｍ  ｓｔｒｅｔｃｈｉｎｇ  ｄｅｖｉｃｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｉｓｏｔｒｏｐｉｃ  ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  ｍｉｃｒｏ−  ａｎｄ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．Ａ．２０１５，１０３（８）：２７４７−５７．
【０１６６】
上記対象が、理解の明快さの目的のための説明及び例として、いくらか詳細に記載されたが、特定の変更及び修正を、添付の請求の範囲内で実施することができることを当業者は理解するであろう。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図５Ｅ】
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【図５Ｆ】
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【図５Ｇ】
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【図５Ｈ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１６Ｃ】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１７Ｃ】
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【図１８】
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【国際調査報告】
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