(57)【要約】式（Ｉ）の化合物：2018535235.tif 000067またはその薬学的に許容できる塩が記載される。Ｑは、ピリダジン−３−イル、６−フルオロピリダジン−３−イルであり得；Ｒ１は、Ｈであり得；Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであり得るか、もしくはＲ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；またはＲ１およびＲ２は、一緒になって−（ＣＨ２）２−であり得、かつＲ３は、−ＣＨ３であり得；Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、もしくは−ＣＮであり得；かつｎは、０、１、もしくは２であり得る。式（Ｉ）の化合物は、グルタミナーゼ、例えばＧＬＳ１を阻害し得る。
2018535235.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2018535235.tif 000066
またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イル、６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであるか、もしくはＲ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；または
Ｒ１およびＲ２は、一緒になって−（ＣＨ２）２−であり、かつＲ３は−ＣＨ３であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、もしくは−ＣＮであり；かつ
ｎは、０、１、もしくは２である）。
【請求項２】
Ｑがピリダジン−３−イルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項３】
ｎが０である、請求項１〜２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項４】
ｎが１であり、かつＲ４がメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、およびシアノであり、かつＲ４が３位に位置する、請求項１〜２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項５】
ｎが１であり、かつＲ４がフルオロおよびメチルからなる群から選択され、かつＲ４が４位に位置する、請求項１〜２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項６】
ｎが２であり、Ｒ４の一例がトリフルオロメトキシであり、かつ３位に位置し、またＲ４の他例がフルオロであり、かつ４位に位置する、請求項１〜２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項７】
Ｒ２およびＲ３が、各々独立してメチルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項８】
Ｒ２およびＲ３が、一緒になって−（ＣＨ２）３−である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項９】
Ｒ１がＨである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項１０】
Ｒ１およびＲ２が、一緒になって−（ＣＨ２）２−であり、かつＲ３が−ＣＨ３である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項１１】
前記化合物が、
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（１Ｓ）−２−メチル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボキサミド；
（１Ｒ）−２−メチル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボキサミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｍ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項１２】
前記化合物が、
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（１Ｓ）−２−メチル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボキサミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｍ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物。
【請求項１４】
がんの治療に用いられる、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項１５】
がんの治療用の薬剤の製造における、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の使用。
【請求項１６】
かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療するための方法であって、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を治療有効量で前記温血動物に投与するステップを含む、方法。
【請求項１７】
前記がんが、乳がん、肺がん、膵がん、腎がん、または肝細胞がんである、請求項１４、１５、または１６に記載の化合物、使用、または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書は、一般に、置換１，３，４−チアジアゾール化合物およびその薬学的に許容できる塩に関する。これらの化合物はグルタミナーゼ１酵素（「ＧＬＳ１」）に作用することから、本明細書は、がんを含むＧＬＳ１媒介性疾患を治療または予防するためのかかる化合物およびその塩の使用にも関する。本明細書はさらに、かかる化合物および塩を含む医薬組成物；かかる化合物および塩を含むキット；かかる化合物および塩の製造方法；かかる化合物および塩の製造において有用な中間体；ならびにがんを含むＧＬＳ１媒介性疾患をかかる化合物および塩を用いて治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
グルタミンは、最も豊富な血漿アミノ酸であり、多数の成長促進経路に関与する。特に、グルタミンは、ＴＣＡ回路における酸化および細胞のレドックス平衡の維持に関与し、ひいてはヌクレオチドおよびアミノ酸合成に窒素を提供する（非特許文献１；非特許文献２、それらの各々はその全体が参照により援用される）。多数のがん細胞が、解糖のピルビン酸がアセチルＣｏＡを生成するのに用いられるのでなく乳酸に変換される場合のワールブルグ効果を含む、細胞内での代謝変化の結果としてのグルタミン代謝に依存する（非特許文献３、その全体が参照により援用される）。グルタミン代謝に対するこの依存性の結果として、かかるがん細胞は、外因性グルタミンレベルにおける変化に対して感受性を示す。さらに、既存の証拠によると、グルタミノリシスが特定のがん型における主要な役割を担い（非特許文献４、その全体が参照により援用される）、Ｍｙｃなどの公知の発癌性ドライバーに関連する（非特許文献５、その全体が参照により援用される）ことが示唆される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｃｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．．２００７，１２，３４４−５７
【非特許文献２】ＤｅＢｅｒａｒｄｉｎｉｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｎｇ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２０１０，３１３−３２４
【非特許文献３】Ｋｏｐｐｅｎｏｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２０１１，１１，３２５−３３７
【非特許文献４】Ｈｅｎｓｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２０１３，１２３，３６７８−３６８４
【非特許文献５】Ｄａｎｇ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１０，７０，８５９−８６３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
グルタミン酸塩に対するグルタミン異化の最初のステップは、２つのアイソフォーム、ＧＬＳ１およびＧＬＳ２（当初、腎臓および肝臓にて各々発現されるものとして同定された）として存在するグルタミナーゼにより触媒される。腎臓グルタミナーゼ（ＧＬＳ１）は、肝臓グルタミナーゼ（ＧＬＳ２）よりも広範に発現されることが知られており、２つのスプライスバリアント、ＫＧＡおよびより短いＧＡＣアイソフォームを有し、それら双方はミトコンドリア内に位置する（Ｅｌｇａｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  １９９９，１，５１−６２；Ｃａｓｓａｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．２０１２，１０９，１０９２−１０９７、それらの各々はその全体が参照により援用される）。ＧＬＳ１の発現は、多数の疾患型における腫瘍成長および悪性度に関連する（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２０１０，１８，２０７−２１９；ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｈｅｕｖａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏ．Ｔｈｅｒ．２０１２，１３，１１８５−１１９４、それらの各々はその全体が参照により援用される）。したがって、ＧＬＳ１の阻害剤は、がんの単独療法としての治療または他の抗がん剤と組み合わせた治療において有用であることが想定される。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
一態様では、式（Ｉ）：
【化１】
2018535235.tif 000003
の化合物またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イル、６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであるか、またはＲ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；
またはＲ１およびＲ２は、一緒になって−（ＣＨ２）２−であり、かつＲ３は−ＣＨ３であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは、０、１、または２である）が提供される。
【０００６】
別の態様では、医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む。
【０００７】
別の態様では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩である。
【０００８】
別の態様では、がんの治療用の薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の使用。
【０００９】
別の態様では、かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療するための方法は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を治療有効量で温血動物に投与するステップを含む。
【００１０】
他の態様が、本明細書および特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
多数の実施形態が、本明細書全体を通じて詳述され、当該技術分野に精通した読者にとって明白になるであろう。本発明は、その任意の特定の実施形態に限定されるものとして解釈されるべきでない。
【００１２】
式（Ｉ）の化合物：
【化２】
2018535235.tif 000004
またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イル、６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであるか、またはＲ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；
またはＲ１およびＲ２は、一緒になって−（ＣＨ２）２−であり、かつＲ３は−ＣＨ３であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは、０、１、または２である）が提供される。
【００１３】
ピリダジン−３−イルおよび６−フルオロピリダジン−３−イル環は、以下の構造：
【化３】
2018535235.tif 000005
を有する。
【００１４】
一部の実施形態では、ｎが１であるとき、Ｒ４は３位に存在し得る、すなわち、
【化４】
2018535235.tif 000006
である。
【００１５】
一部の実施形態では、ｎが１であるとき、Ｒ４は４位に存在し得る、すなわち、
【化５】
2018535235.tif 000007
である。
【００１６】
一部の実施形態では、ｎが２であるとき、Ｒ４の一例は３位に存在し得、かつＲ４の他方の例は４位に存在し得る、すなわち、
【化６】
2018535235.tif 000008
である。
【００１７】
用語「薬学的に許容できる」は、対象（例えば塩、剤形、希釈剤または担体）が患者における使用に適することを明示するために用いられる。薬学的に許容できる塩の事例リストが、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ／Ｚｕｅｒｉｃｈ：Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ／ＶＨＣＡ，２００２（その全体が参照により援用される）中に見出すことができる。式（Ｉ）の化合物の好適な薬学的に許容できる塩は、例えば酸付加塩である。式（Ｉ）の化合物の酸付加塩は、化合物を当業者に公知の条件下で好適な無機酸もしくは有機酸と接触状態にすることにより形成されてもよい。酸付加塩は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸などの無機酸を用いて形成されてもよい。酸付加塩はまた、例えば、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、またはベンゼンスルホン酸などの有機酸を用いて形成されてもよい。
【００１８】
したがって、一実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで薬学的に許容できる塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、またはベンゼンスルホン酸の塩である。
【００１９】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が提供され、薬学的に許容できる塩は、塩酸または臭化水素酸の塩である。
【００２０】
式（Ｉ）の化合物のさらなる好適な薬学的に許容できる塩は、塩基付加塩である。式（Ｉ）の化合物の塩基付加塩は、化合物を当業者に公知の条件下で好適な無機塩基もしくは有機塩基と接触状態にすることにより形成されてもよい。塩基付加塩は、例えば、アルカリ金属水酸化物（ナトリウム、カリウム、またはリチウム水酸化物など）またはアルカリ土類金属水酸化物（水酸化カルシウムまたは水酸化マグネシウムなど）などの無機塩基を用いて形成されてもよい。塩基付加塩はまた、例えば、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンなどの有機塩基を用いて形成されてもよい。
【００２１】
したがって、一実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで薬学的に許容できる塩は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンの塩である。
【００２２】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで薬学的に許容できる塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンの塩である。
【００２３】
さらなる実施形態は、本明細書で定義される実施形態（例えば請求項１の実施形態）のいずれかを、実施例１（ａ）、１（ｂ）、２（ａ）、２（ｂ）、３（ａ）、３（ｂ）、４（ａ）、４（ｂ）、５（ａ）、５（ｂ）、６（ａ）、６（ｂ）、７（ａ）、７（ｂ）、８（ａ）、８（ｂ）、９、１０、１１（ａ）、１１（ｂ）、１２（ａ）、１２（ｂ）、１３、１４、１５、１６、１７、および１８からなる群から選択される１つ以上の特定の実施例（例えば、１つ、２つもしくは３つの特定の実施例、または代替的に１つの特定の実施例）が個別に請求されないという条件で提供する。
【００２４】
式（Ｉ）中の変数群の一部の値は以下の通りである。さらなる実施形態を提供するため、かかる値は、本明細書で定義される定義、請求項（例えば請求項１）、または実施形態のいずれかと組み合わせて用いられてもよい。
【００２５】
Ｑは、ピリダジン−３−イルであり得る。
【００２６】
Ｑは、６−フルオロピリダジン−３−イルであり得る。
【００２７】
ｎは、０であり得る。
【００２８】
ｎは、１であり得る。
【００２９】
ｎは、２であり得る。
【００３０】
Ｒ１は、Ｈであり得る。
【００３１】
Ｒ１はＨであり得、ｎは１であり得、かつＲ４は３位に存在し得る。
【００３２】
Ｒ１はＨであり得、ｎは１であり得、かつＲ４は３−メチル、３−メトキシ、３−ジフルオロメトキシ、３−トリフルオロメトキシ、または３−シアノであり得る。
【００３３】
Ｒ１はＨであり得、ｎは１であり得、かつＲ４は４位に存在し得る。
【００３４】
Ｒ１はＨであり得、ｎは１であり得、かつＲ４は４−フルオロまたは４−メチルであり得る。
【００３５】
Ｒ１はＨであり得、ｎは２であり得、Ｒ４の一例は３位に存在し得、かつＲ４の他方の例は４位に存在し得る。
【００３６】
Ｒ１はＨであり得、ｎは２であり得、Ｒ４の一例は３−トリフルオロメトキシであり、かつＲ４の他方の例は４−フルオロである。
【００３７】
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであり得る。
【００３８】
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してメチルであり得る。
【００３９】
Ｒ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり得る。
【００４０】
Ｒ１は、Ｈであり得る。
【００４１】
Ｒ１およびＲ２は、一緒になって−（ＣＨ２）２−であり、かつＲ３は−ＣＨ３であり得る。
【００４２】
Ｒ４は、Ｈであり得る。
【００４３】
Ｒ４は、ハロであり得る。
【００４４】
Ｒ４は、フルオロであり得る。
【００４５】
Ｒ４は、−ＣＨ３であり得る。
【００４６】
Ｒ４は、−ＯＣＨ３であり得る。
【００４７】
Ｒ４は、−ＯＣＨＦ２であり得る。
【００４８】
Ｒ４は、−ＯＣＦ３であり得る。
【００４９】
Ｒ４は、−ＣＮであり得る。
【００５０】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであるか、またはＲ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは、０、１、または２である）が提供される。
【００５１】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであるか、またはＲ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは、１である）が提供される。
【００５２】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであるか、またはＲ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは１であり、ここでＲ４は３位に存在する）が提供される。
【００５３】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは、０、１、または２である）が提供される。
【００５４】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立してＣ１〜Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは１であり、ここでＲ４は３位に存在する）が提供される。
【００５５】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、Ｈであり；
Ｒ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは、０、１、または２である）が提供される。
【００５６】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１はＨであり；
Ｒ２およびＲ３は、一緒になって−（ＣＨ２）３−であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは１であり、ここでＲ４は３位に存在する）が提供される。
【００５７】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１およびＲ２は、一緒になって−（ＣＨ２）２−であり、かつＲ３は−ＣＨ３であり；
Ｒ４は、ハロ、−ＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨＦ２、−ＯＣＦ３、または−ＣＮであり；かつ
ｎは、０、１、または２）が提供される。
【００５８】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで化合物は、
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（１Ｓ）−２−メチル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボキサミド；
（１Ｒ）−２−メチル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボキサミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｍ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される。
【００５９】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで化合物は、
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（１Ｓ）−２−メチル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボキサミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｍ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される。
【００６０】
本明細書に記載の化合物および塩は、溶媒和形態および非溶媒和形態で存在してもよい。例えば、溶媒和形態は、水和形態、例えば、半水化物、一水和物、二水和物、三水和物またはその代替量であってもよい。本発明は、式（Ｉ）の化合物のすべてのかかる溶媒和および非溶媒和形態を包含する。
【００６１】
本明細書に記載の化合物および塩の原子は、異なる同位体形態で存在してもよい。本発明は、式（Ｉ）の化合物のあらゆる同位体形態、例えば１１Ｃまたは１３Ｃ炭素および１Ｈ、２Ｈ（ジュウテリウム）または３Ｈ（トリチウム）水素を包含する。
【００６２】
本明細書に記載の化合物および塩は、互変異性体の混合物として存在してもよい。「互変異性体」は、水素原子の転位に起因する平衡状態で存在する構造異性体である。本発明は、式（Ｉ）の化合物のあらゆる互変異性体を含む。
【００６３】
式（Ｉ）の化合物は、異なるジアステレオマー形態で調製され得る。本発明は、式（Ｉ）の化合物のあらゆるジアステレオマー形態を含む。
【００６４】
一実施形態では、≧９５％、≧９８％または≧９９％のジアステレオマー過剰率（％ｄｅ）の単一のジアステレオマーである、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。一実施形態では、単一のジアステレオマーは、≧９９％のジアステレオマー過剰率（％ｄｅ）で存在する。
【００６５】
式（Ｉ）の化合物は、例えば、式（ＩＩ）の化合物：
【化７】
2018535235.tif 000009
（式中、Ｑは上で定義されている）と式（ＩＩＩ）の化合物：
【化８】
2018535235.tif 000010
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は上で定義されており、Ｘは、脱離基、例えばハロゲン原子（例えば塩素原子）またはヒドロキシ基である）との反応により調製されてもよい。反応物は、好適な溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド）中、好適な温度、塩基（例えば、ジ−イソプロピルエチルアミン）の存在下で便宜的に実施される。好適な温度は、限定はされないが、室温（約２０℃〜約３０℃）、低下した温度（例えば約−７７℃〜約０℃）、または上昇した温度、例えば約８０℃〜１２０℃の間を含む。Ｘがヒドロキシ基である場合、アミド結合を形成するため、好適なカップリング剤（例えばＨＡＴＵ）を用いることができる。
【００６６】
したがって、式（ＩＩＩ）の化合物、およびその塩は、式（Ｉ）の化合物の調製における中間体として有用であり、さらなる実施形態を提供する。
【００６７】
式（ＩＩ）および式（ＩＩＩ）の化合物は、実施例セクションにて示される場合と同様の方法により調製され得る。
【００６８】
式（ＩＩＩ）の化合物の好適な塩は、塩基付加塩である。式（ＩＩＩ）の化合物の塩基付加塩は、化合物を当業者に公知の条件下で好適な無機塩基または有機塩基と接触状態にすることにより形成されてもよい。かかる塩基は、必ずしも薬学的に許容できる塩を生成しない。塩基付加塩は、例えば、アルカリ金属水酸化物（ナトリウム、カリウム、またはリチウム水酸化物など）またはアルカリ土類金属水酸化物（水酸化カルシウムまたは水酸化マグネシウムなど）などの無機塩基を用いて形成されてもよい。塩基付加塩はまた、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンなどの有機塩基を用いて形成されてもよい。
【００６９】
したがって、一実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物またはその塩が提供され、ここで塩は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン塩である。
【００７０】
ＧＬＳ１を阻害すると考えられる化合物、すなわち、式（Ｉ）の化合物、およびその薬学的に許容できる塩は、治療、例えば少なくとも一部にはＧＬＳ１により媒介される疾患または医学的状態、例えばがんの治療において有用であることが想定される。
【００７１】
「がん」について言及する場合、これが非転移性がん、さらには転移性がんの双方を含むことから、がんの治療は原発性腫瘍、さらには腫瘍転移の双方の治療を含む。
【００７２】
一実施形態では、がんは転移性がんである。
【００７３】
一実施形態では、がんは非転移性がんである。
【００７４】
「ＧＬＳ１阻害活性」は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の存在に対する直接的または間接的応答としてのＧＬＳ１の活性における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の不在下でのＧＬＳ１の活性に対する減少を指す。活性におけるかかる減少は、式（Ｉ）の化合物、もしくはその薬学的に許容できる塩とＧＬＳ１との直接的相互作用に起因する、または式（Ｉ）の化合物、もしくはその薬学的に許容できる塩とＧＬＳ１活性に次々に影響する１つ以上の他の因子との相互作用に起因することがある。例えば、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩は、ＧＬＳ１に直接的に結合することにより；別の因子によるＧＬＳ１活性の減少を（直接的または間接的に）引き起こすことにより；または細胞もしくは生物に存在するＧＬＳ１の量を（直接的または間接的に）低減することにより、ＧＬＳ１を減少させることがある。
【００７５】
用語「治療」は、疾患を治療するかまたは基礎的病理を矯正もしくは補正するというその正常な意味を有することが意図される。用語「治療」はまた、「予防」を、それに対する具体的な指示がない限り、含む。用語「治療的な」および「治療的に」は、対応する様式で解釈されるべきである。
【００７６】
用語「治療有効量」は、被験者における治療法を提供するのに有効である、本明細書中の実施形態のいずれかに記載のような式（Ｉ）の化合物の量を指す。がんの場合、治療有効量は、上記の「治療法」、「治療」および「予防」の定義において記載の通り、被験者において観測可能または測定可能な変化のいずれかを引き起こすことがある。例えば、有効量は、がんまたは腫瘍細胞の数を低減し得る；総腫瘍サイズを低減し得る；腫瘍細胞の例えば軟部組織および骨を含む末梢臓器への浸潤を阻害または停止し得る；腫瘍転移を阻害および停止し得る；腫瘍成長を阻害および停止し得る；がんに関連する症状の１つ以上をある程度軽減し得る；罹患率および死亡率を低減し得る；生活の質を改善し得る；またはかかる効果の組み合わせであり得る。有効量は、ＧＬＳ１活性の阻害に対して応答する疾患の症状を低減するのに十分な量であってもよい。がん療法については、インビボでの有効性は、例えば、生存の持続時間、疾患進行までの時間（ＴＴＰ）、応答速度（ＲＲ）、応答の持続時間、および／または生活の質を評価することにより測定され得る。当業者によって理解されるように、有効量は、投与経路、賦形剤の使用、および他の薬剤との同時使用に応じて変動してもよい。例えば、併用療法が用いられる場合、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できる塩の量および他の薬学的活性剤の量は、組み合わされるとき、動物患者における標的化された障害を治療するのに一緒に有効である。これに関連して、組み合わされた量は、組み合わされるとき、上記のようなＧＬＳ１活性の阻害に対して応答する疾患の症状を低減するのに十分である場合、「治療有効量」に含まれる。典型的には、かかる量は、例えば、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できる塩についての本明細書に記載の用量範囲に始まり、他の薬学的活性化合物の認可されたまたはそうでなければ公表された用量範囲により、当業者によって決定されてもよい。用語「予防」は、その正常な意味を有することが意図され、疾患の発生を予防するための一次予防および疾患が既に発生しており、患者が疾患の増悪または悪化に対して一時的または持続的に保護される場合の二次予防を含む。
【００７７】
用語「治療」は、「治療法」と同義的に用いられる。同様に、用語「治療する」は、「治療法」が本明細書で定義される通りである場合での治療法を適用するものとして見なされ得る。
【００７８】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物が提供される。一実施形態では、医薬組成物は、遊離塩基としての式（Ｉ）の化合物を含む。別の実施形態では、医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容できる塩を含む。
【００７９】
一実施形態では、治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。
【００８０】
一実施形態では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。
【００８１】
一実施形態では、がんの治療用の薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の使用が提供される。
【００８２】
一実施形態では、ＧＬＳ１によって媒介される疾患の治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。一実施形態では、ＧＬＳ１によって媒介される疾患はがんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん（例えばトリプルネガティブ乳がん）、肺がん（例えば非小細胞肺がん）、膵がん、腎がん、または肝細胞がんであり得る。
【００８３】
「トリプルネガティブ乳がん」は、ストロゲン受容体、プロゲステロン受容体およびＨｅｒ２／ｎｅｕにおける遺伝子を発現しない、または過小発現する任意の乳がんである。
【００８４】
一実施形態では、ＧＬＳ１によって媒介される疾患の治療用の薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の使用が提供される。一実施形態では、ＧＬＳ１によって媒介される疾患はがんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん（例えばトリプルネガティブ乳がん）、肺がん（例えば非小細胞肺がん）、膵がん、腎がん、または肝細胞がんであり得る。
【００８５】
一実施形態では、がんの治療用の薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。
【００８６】
一実施形態では、ＧＬＳ１を阻害する方法であって、式（Ｉ）の化合物を投与するステップを含む、方法が提供される。
【００８７】
一実施形態では、ＧＬＳ１の阻害がかかる治療を必要とする温血動物において有利である疾患を治療するための方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を治療有効量で温血動物に投与するステップを含む、方法が提供される。
【００８８】
「温血動物」は、例えばヒトを含む。
【００８９】
一実施形態では、かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療するための方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を治療有効量で温血動物に投与するステップを含む、方法が提供される。一部の実施形態では、がんは、乳がん（例えばトリプルネガティブ乳がん）、肺がん（例えば非小細胞肺がん）、膵がん、腎がん、または肝細胞がんであり得る。
【００９０】
本明細書に記載のがんにおける治療は、唯一の治療として適用されてもよく、または式（Ｉ）の化合物の投与に加えて、通常の手術、放射線療法、もしくは化学療法；もしくはかかる追加的な治療法の組み合わせを含んでもよい。かかる通常の手術、放射線療法、または化学療法は、式（Ｉ）の化合物を用いる治療に対して、同時に、連続的に、または別々に施されてもよい。
【００９１】
したがって、一実施形態では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質が提供される。
【００９２】
一実施形態では、がんの同時の、別々のまたは連続的な治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質が提供される。
【００９３】
一実施形態では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで式（Ｉ）の化合物は、少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質に対して同時に、別々に、または連続的に投与される。
【００９４】
一実施形態では、かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療する方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩および少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質を温血動物に投与するステップを含む、方法が提供され、ここで式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および追加的な抗腫瘍物質の量は、抗がん効果をもたらす上で一緒に有効である。
【００９５】
一実施形態では、かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療する方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を温血動物に投与するステップと、少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質を同時に、別々にまたは連続的に温血動物に投与するステップと、を含む、方法が提供され、ここで式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および追加的な抗腫瘍物質の量は、抗がん効果をもたらす上で一緒に有効である。
【００９６】
任意の実施形態では、追加的な抗腫瘍物質はタキサンである。一実施形態では、タキサンはパクリタキセルである。一実施形態では、タキサンはドセタキセルである。
【００９７】
任意の実施形態では、追加的な抗腫瘍物質は白金治療薬である。一実施形態では、白金治療薬は、シスプラチン、オキサリプラチン、またはカルボプラチンである。
【００９８】
さらなる実施形態によると、
ａ）第１の単位剤形中の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩；
ｂ）第２の単位剤形中の第２の抗腫瘍物質；
ｃ）第１および第２の単位剤形を含有するための容器；および任意選択的には
ｄ）使用説明書
を含むキットが提供される。
【００９９】
式（Ｉ）の化合物、およびその薬学的に許容できる塩は、１つ以上の薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物として投与されてもよい。したがって、一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物が提供される。
【０１００】
組成物は、経口使用（例えば、錠剤、トローチ剤、硬もしくは軟カプセル剤、水性もしくは油性懸濁液、乳剤、分散性散剤もしくは顆粒剤、シロップ剤またはエリキシル剤として）、局所使用（例えば、クリーム、軟膏剤、ゲル剤、または水性もしくは油性の溶液または懸濁液として）、吸入による投与（例えば、微粉化粉末または液体エアロゾルとして）、ガス注入による投与（例えば、微粉化粉末として）または非経口投与（例えば、静脈内、皮下、筋肉内投与用の滅菌水性もしくは油性溶液として）、または坐剤として好適な形態であってもよい。組成物は、通常の医薬賦形剤を用いる通常の手順により得てもよい。したがって、経口使用を意図した組成物は、例えば、１つ以上の着色剤、甘味剤、香味剤、および／または防腐剤を含有してもよい。
【０１０１】
一実施形態では、治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物が提供される。
【０１０２】
一実施形態では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物が提供される。一部の実施形態では、がんは、乳がん（例えばトリプルネガティブ乳がん）、肺がん（例えば非小細胞肺がん）、膵がん、腎がん、または肝細胞がんであり得る。
【０１０３】
式（Ｉ）の化合物は通常、５〜５０００ｍｇ／ｍ２（動物の体面積）、すなわち約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲内の単位用量で温血動物に投与されることになり、これは通常、治療有効用量をもたらす。錠剤またはカプセル剤などの単位用量形態は通常、例えば１〜２５０ｍｇの活性成分を含有することになる。一日量は、必然的に、治療される宿主、特定の投与経路、同時投与されている任意の治療薬、および治療中の疾病の重症度に応じて変動することになる。したがって、任意の特定患者を治療中の施術者が、最適用量を決定してもよい。
【実施例】
【０１０４】
様々な実施形態が以下の実施例によって例示される。本発明は、実施例に限定されるものとして解釈されるべきではない。
【０１０５】
実施例の調製に際して、一般に次のことが言える。
ａ）操作は、特に指定のない限り、環境温度、すなわち約１７〜３０℃の範囲内でかつ窒素などの不活性ガスの雰囲気下で実施した；
ｂ）回転蒸発または真空でＧｅｎｅｖａｃ機器を利用することにより蒸発を行い、固形残留物の濾過による除去後に精査手順を実施した；
ｃ）フラッシュクロマトグラフィー精製は、Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｓｏｌｖｅプレパックシリカカラムを用いた自動化されたＩｓｃｏ  Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ  Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ、ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｇｏｌｄ  Ｃ１８カラムを用いたＩｓｃｏ  Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ  Ｒｆ（逆相フラッシュ）上で実施した；
ｄ）収量（存在する場合）は必ずしも最大の達成可能な収量とは限らない；
ｅ）式（Ｉ）の最終生成物の構造は、δスケールで測定されるＮＭＲ化学シフトを用いた核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光により確認した。プロトン磁気共鳴スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ７００（７００ＭＨｚ）、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ５００（５００ＭＨｚ）、Ｂｒｕｋｅｒ  ４００（４００ＭＨｚ）またはＢｒｕｋｅｒ  ３００（３００ＭＨｚ）機器を用いて測定し；１９Ｆ  ＮＭＲは、２８２ＭＨｚまたは３７６ＭＨｚで測定し；１３Ｃ  ＮＭＲは、７５ＭＨｚまたは１００ＭＨｚで測定し；測定値は、特に指定されない限り、約２０〜３０℃で取得し；以下の略称：ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｑ，四重線；ｍ，多重線；ｄｄ，二重線の二重線；ｄｄｄ，二重線の二重線の二重線；ｄｔ，三重線の二重線；ｂｓ，幅広いシグナル、を用いている；
ｆ）式（Ｉ）の最終生成物はまた、２９９６  ＰＤＡおよび２０００  ａｍｕ  ＺＱ単一四重極質量分析計を有するＷａｔｅｒｓ  ２７９０／９５ＬＣシステムに基づくＨＰＬＣシステムを用いての液体クロマトグラフィー後の質量分析（ＬＣＭＳ）により特徴づけた。用いた溶媒は、Ａ＝水、Ｂ＝アセトニトリル、Ｃ＝５０：５０のアセトニトリル：水／０．１％ギ酸およびＤ＝５０：５０のアセトニトリル：水／０．１％水酸化アンモニウムであった。１．１ｍＬ／分の流速で、試料５μＬを５０×２．１  ５μｍのＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  ＮＸカラム上に注入した。勾配は、４．０分間で９５％のＡから９５％のＢへ移行し、Ｃ（酸分析用、Ｄは塩基分析用に用いる）の５％一定注入を伴った。開始条件に戻す前、９５％のＢで０．５分間フローを保持した。データは、質量分析計で正および負モードの双方にて１５０〜８５０ａｍｕ、およびＰＤＡで２２０〜３２０ｎｍが得られた。ＬＣＭＳはまた、サンプルマネージャーを有するＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｂｉｎａｒｙポンプ、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＰＤＡおよびＳＱＤ質量分析計を用いたＵＰＬＣシステム上で実施した。用いた溶媒は、Ａ１＝０．１％ギ酸（水性）、Ｂ１  アセトニトリル中０．１％ギ酸、Ａ２＝０．１％水酸化アンモニウム（水性）およびＢ２  アセトニトリル中０．１％水酸化アンモニウムであった。１ｍＬ／分の流速で、試料１μＬは、５０×２．１  １．７ｕｍのＷａｔｅｒｓ  ＢＥＨカラム（４０℃）上に注入した。０．２分間保持され、開始条件に戻す前、勾配は１．３０分かけて９７％のＡ１から９７％のＢ１へ移行した（塩基分析においては、Ａ１およびＢ１をＡ２およびＢ２に置き換える）。データは、質量分析計で正および負イオンモードにて１５０〜１０００ａｍｕ、およびＰＤＡで２４５〜３２０ａｍｕが得られた。
ｇ）中間体は、完全に特徴づけることは一般的でなく、純度は、薄層クロマトグラフィー、質量スペクトル、ＨＰＬＣおよび／またはＮＭＲ分析により評価した；
ｈ）以下の略称：ｈ＝時間；ｒ．ｔ．＝室温（約１７〜３０℃）；ｃｏｎｃ．＝濃縮された；ＦＣＣ＝シリカを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィー；ＡＩＢＮ＝アゾビスイソブチロニトリル；ＤＣＭ＝ジクロロメタン；ＤＩＰＥＡ＝ジ−イソプロピルエチルアミン；ＤＭＡ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド；ＥＤＣ＝１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド；Ｅｔ２Ｏ＝ジエチルエーテル；ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル；ＥｔＯＨ＝エタノール；ＨＡＴＵ＝１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＨＯＢＴ＝ヒドロキシベンゾトリアゾール；Ｋ２ＣＯ３＝炭酸カリウム；ＭｅＯＨ＝メタノール；ＭｅＣＮ＝アセトニトリル；ＭｇＳＯ４＝無水硫酸マグネシウム；Ｎａ２ＳＯ４＝無水硫酸ナトリウム；ＮＢＳ＝Ｎ−ブロモスクシンイミド；ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン；ｓａｔ．＝飽和水溶液、を用いている。
【０１０６】
以下の幾つかの例では、化合物のジアステレオマー対を記述する。例えば、実施例１（ａ）および実施例１（ｂ）の化合物は、単一の反応の生成物中の混合物として形成され、その後分離される、化合物のジアステレオマー対を表す。かかる実施例では、立体化学の任意の指定は絶対的なものではない。実例として、実施例１（ａ）および１（ｂ）は、名付けられた化合物の（２Ｓ，３Ｒ）および（２Ｒ，３Ｒ）ジアステレオマーに関連するが、実施例１（ａ）が（２Ｓ，３Ｒ）ジアステレオマーとして、また実施例１（ｂ）が（２Ｒ，３Ｒ）ジアステレオマーとして明確に指定されることを述べる意図はない。
【０１０７】
実施例１（ａ）および１（ｂ）
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化９】
2018535235.tif 000011
ＨＡＴＵ（８６６ｍｇ、２．２８ミリモル）を、０℃でＤＭＦ（６ｍＬ）中の２−（ジメチルアミノ）−２−フェニル−酢酸塩酸塩（４１０ｍｇ、１．９０ミリモル）、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、５００ｍｇ、１．９０ミリモル）、およびＤＩＰＥＡ（０．９９２ｍＬ、５．７０ミリモル）に添加した。次に得られた溶液を環境温度で２時間撹拌した。反応混合物をメタノール（５ｍＬ）で希釈し、２０ｇのＳＣＸカートリッジに通過させ、メタノールで溶出し、非塩基性不純物を除去し、次いでメタノール中アンモニアの３．５Ｎ溶液で溶出し、生成物を取り出した。生成物を含有するメタノール／アンモニア洗浄物を低圧下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がジクロロメタン中（７Ｎ  ＮＨ３／メタノール）０〜９％）。生成物を含有する画分を蒸発させ、粗製材料を得た。残渣を２−メチルテトラヒドロフランおよび鹹水溶液間で分配し、有機層を、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させる前に鹹水溶液で２回洗浄し、生成物（３５０ｍｇ、４３．４％）をガム状物のジアステレオ異性体の混合物として得た。
【０１０８】
混合物をキラルＨＰＬＣ（Ｃ４カラム、２０ミクロンのシリカ、４．６ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、ヘプタン／ＥｔＯＨ−ＭｅＯＨ６０／４０）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１０９】
第１溶出異性体としての実施例１（ａ）（固体、１２８ｍｇ、３７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，２７℃）δ  １．９９−２．０９（１Ｈ，ｍ），２．１３（６Ｈ，ｓ），２．２１−２．３３（１Ｈ，ｍ），３．４４−３．６（３Ｈ，ｍ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ），４．０６（１Ｈ，ｓ），４．３１−４．４（１Ｈ，ｍ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．２５−７．３８（４Ｈ，ｍ），７．４５（２Ｈ，ｄｄ），７．６４（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．１３（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４２５．
【０１１０】
第２溶出異性体としての実施例１（ｂ）（固体、１３７ｍｇ、３９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，２７℃）δ  ２−２．１（１Ｈ，ｍ），２．１３（６Ｈ，ｓ），２．２２−２．３２（１Ｈ，ｍ），３．４３−３．６（３Ｈ，ｍ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ），４．０６（１Ｈ，ｓ），４．３１−４．４１（１Ｈ，ｍ），６．８４（１Ｈ，ｄｄ），７．２７−７．３８（４Ｈ，ｍ），７．４５（２Ｈ，ｄ），７．６４（１Ｈ，ｄ），８．４６（１Ｈ，ｄｄ），１２．１４（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４２５．
【０１１１】
実施例２（ａ）および２（ｂ）
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１０】
2018535235.tif 000012
ＨＡＴＵ（４３３ｍｇ、１．１４ミリモル）を、０℃でＤＭＦ（３ｍＬ）中、２−（ジメチルアミノ）−２−（４−フルオロフェニル）酢酸塩酸塩（２２２ｍｇ、０．９５ミリモル）、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、２５０ｍｇ、０．９５ミリモル）、およびＤＩＰＥＡ（０．４９６ｍＬ、２．８５ミリモル）に添加した。次に得られた溶液を環境温度で２時間撹拌した。反応混合物をメタノール（５ｍＬ）で希釈し、２０ｇのＳＣＸカートリッジに通過させ、メタノールで溶出し、非塩基性不純物を除去し、次いでメタノール中アンモニアの３．５Ｎ溶液で溶出し、生成物を取り出した。生成物を含有するメタノール／アンモニア洗浄物を低圧下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がジクロロメタン中（７Ｎ  ＮＨ３／メタノール）０〜９％）。生成物を含有する画分を蒸発させ、生成物を得た。残渣を２−メチルテトラヒドロフランおよび鹹水溶液間で分配し、有機層を、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させる前に鹹水溶液で２回洗浄し、粗生成物をジアステレオ異性体の混合物として得た。
【０１１２】
混合物をキラルＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００、ＩＢカラム、２０ミクロン（μｍ）のシリカ、４．６ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、溶出剤として６０／４０のヘプタン／ＥｔＯＨ−ＭｅＯＨ）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１１３】
第１溶出異性体としての実施例２（ａ）（固体、９８ｍｇ、３３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，２７℃）δ  ２．０１−２．１（１Ｈ，ｍ），２．１２（６Ｈ，ｓ），２．２１−２．３４（１Ｈ，ｍ），３．４７（１Ｈ，ｄｄ），３．５２−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ），４．０７（１Ｈ，ｓ），４．３７（１Ｈ，ｄｑ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．１４−７．２３（２Ｈ，ｍ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ），７．４４−７．５１（２Ｈ，ｍ），７．６６（１Ｈ，ｄ），８．４６（１Ｈ，ｄｄ），１２．１８（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４４３．
【０１１４】
第２溶出異性体としての実施例２（ｂ）（固体、１００ｍｇ、３３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，２７℃）δ  ２−２．１（１Ｈ，ｍ），２．１２（６Ｈ，ｓ），２．２１−２．３３（１Ｈ，ｍ），３．４６−３．５８（３Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．０７（１Ｈ，ｓ），４．３１−４．４１（１Ｈ，ｍ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．１５−７．２２（２Ｈ，ｍ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ），７．４８（２Ｈ，ｄｄｄ），７．６６（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．１７（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４４３．
【０１１５】
実施例３（ａ）および３（ｂ）
（２Ｓ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１１】
2018535235.tif 000013
ＨＡＴＵ（４１６ｍｇ、１．０９ミリモル）を、窒素下、２１℃で、ＤＭＦ（８ｍＬ）中のＮ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、２４０ｍｇ、０．９１ミリモル）、２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）酢酸（中間体９、２４６ｍｇ、１．００ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．１５９ｍＬ、０．９１ミリモル）に添加した。得られた溶液を２１℃で１時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物を、１Ｍ  ＮＨ３／ＭｅＯＨを用いてカラムから溶出し、純粋画分をシリカに吸着させた。
【０１１６】
粗生成物を、フラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜７％）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、生成物を黄色ガム状物のジアステレオ異性体の混合物として得た。
【０１１７】
混合物をＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００、ＯＪカラム、２０ミクロン（μｍ）のシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、溶出剤として９０／１０のＭｅＣＮ／ＭｅＯＨ）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１１８】
第１溶出異性体としての実施例３（ａ）（固体、５０ｍｇ、１１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．０８（１Ｈ，ｍ），２．２７（１Ｈ，ｍ），２．４９（６Ｈ，ｓ），３．３９−３．６１（３Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｍ），４．３７（１Ｈ，ｍ），６．９５（１Ｈ，ｄ），７．１３−７．２２（１Ｈ，ｄ），７．２９（１Ｈ，ｓ），７．３３−７．４２（４Ｈ，ｍ），７．４８（１Ｈ，ｄ），７．７７（１Ｈ，ｍ），８．４８（１Ｈ，ｄ），１２．２０（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４９１．
【０１１９】
第２溶出異性体としての実施例３（ｂ）（固体、５７ｍｇ、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．０８（１Ｈ，ｍ），２．２７（１Ｈ，ｍ），２．４９（６Ｈ，ｓ），３．３９−３．６１（３Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｍ），４．３７（１Ｈ，ｍ），６．９５（１Ｈ，ｄ），７．１３−７．２２（１Ｈ，ｄ），７．２９（１Ｈ，ｓ），７．３３−７．４２（４Ｈ，ｍ），７．４８（１Ｈ，ｄ），７．７７（１Ｈ，ｍ），８．４８（１Ｈ，ｄ），１２．１９（ｓ，１Ｈ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４９１．
【０１２０】
実施例４（ａ）および４（ｂ）
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド
【化１２】
2018535235.tif 000014
ＨＡＴＵ（３．００ｇ、７．８８ミリモル）を、窒素下、２１℃で、ＤＭＦ（３０ｍＬ）のＮ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１．７３ｇ、６．５７ミリモル）、２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（中間体１１、２．２４８ｇ、８．５４ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（３．４３ｍＬ、１９．７１ミリモル）に添加した。得られた溶液を６０℃で１時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物を、１Ｍ  ＮＨ３／ＭｅＯＨを用いてカラムから溶出し、純粋画分をシリカに吸着させた。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がＤＣＭ中１Ｍ  ＮＨ３／ＭｅＯＨ０〜１０％）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、褐色固体をジアステレオ異性体の混合物として得た。
【０１２１】
混合物をＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＯＤカラム、２０μｍシリカ、１００ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、溶出剤としてヘプタン／ＥｔＯＨの５０／５０混合物、流速４５０ｍＬ／分）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１２２】
第１溶出異性体としての実施例４（ａ）（固体、２５０ｍｇ、７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．７８−１．８７（１Ｈ，ｍ），１．９１（６Ｈ，ｓ），２−２．１３（１Ｈ，ｍ），３．１４−３．４１（３Ｈ，ｍ），３．５１（１Ｈ，ｍ），３．９１（１Ｈ，ｓ），４．１２（２Ｈ，ｍ），６．６２（１Ｈ，ｄｄ），７．０９（２Ｈ，ｄｄ），７．１７−７．３５（３Ｈ，ｍ），７．４０（１Ｈ，ｄ），８．２４（１Ｈ，ｄｄ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０９．
【０１２３】
第２溶出異性体としての実施例４（ｂ）（固体、２８５ｍｇ、９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．０８（１Ｈ，ｍ），２．２７（１Ｈ，ｍ），２．４９（６Ｈ，ｓ），３．３９−３．６１（３Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｍ），４．３７（１Ｈ，ｍ），６．９５（１Ｈ，ｄ），７．１３−７．２２（１Ｈ，ｄ），７．２９（１Ｈ，ｓ），７．３３−７．４２（４Ｈ，ｍ），７．４８（１Ｈ，ｄ），７．７７（１Ｈ，ｍ），８．４８（１Ｈ，ｄ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０９．
【０１２４】
実施例５（ａ）および５（ｂ）
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１３】
2018535235.tif 000015
ＨＡＴＵ（２７９ｍｇ、０．７３ミリモル）を、室温でＮ−メチル−２−ピロリジノン（１５ｍＬ）中の２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（中間体１３、１４５ｍｇ、０．５６ミリモル）、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１４８ｍｇ、０．５６ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．２９５ｍＬ、１．６９ミリモル）に添加した。得られた溶液を室温で４５分間撹拌した。この溶液をメタノール（１５ｍＬ）で希釈し、２０ｇのＳＣＸ−２カートリッジに通過させ、メタノールを流して不純物を除去し、次いでメタノール中アンモニアの１Ｎ溶液を流し、生成物を取り出した。溶媒を低圧下で蒸発させ、粗生成物を得た。粗生成物をメタノール／ジクロロメタンに溶解し、シリカゲル上で蒸発させた。残渣をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がジクロロメタン中メタノール０〜６％）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、生成物をガム状物のジアステレオ異性体の混合物として得た。
【０１２５】
混合物をＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  ＩＡカラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、１２０ｍＬ／分で９５／０５のＭｅＣＮ／ＭｅＯＨ）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１２６】
第１溶出異性体としての実施例５（ａ）（固体、９１ｍｇ、３７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．９７−２．０８（３Ｈ，ｍ），２．２３−２．３１（１Ｈ，ｍ），３．０７−３．１９（４Ｈ，ｍ），３．４６−３．６（３Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），４．２３（１Ｈ，ｓ），４．３７（１Ｈ，ｄｔ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ），７．０３−７．４４（６Ｈ，ｍ），７．６３（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．００（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０３．
【０１２７】
第２溶出異性体としての実施例５（ｂ）（固体、４３ｍｇ、１７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．９７−２．１１（３Ｈ，ｍ），２．２８（１Ｈ，ｄｔ），３．０７−３．１９（４Ｈ，ｍ），３．４８（１Ｈ，ｄｄ），３．５２−３．６（２Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），４．２３（１Ｈ，ｓ），４．３４−４．４２（１Ｈ，ｍ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．０２−７．４３（６Ｈ，ｍ），７．６３（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１１．９８（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０３．
【０１２８】
実施例６（ａ）および６（ｂ）
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１４】
2018535235.tif 000016
ＨＡＴＵ（４１３ｍｇ、１．０９ミリモル）を、室温でＮ−メチル−２−ピロリジノン（１５ｍＬ）中の２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）酢酸（中間体１７、１８５ｍｇ、０．８４ミリモル）、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、２２０ｍｇ、０．８４ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．４３８ｍＬ、２．５１ミリモル）に添加した。得られた溶液を室温で４５分間撹拌した。この溶液をメタノール（１５ｍＬ）で希釈し、２０ｇのＳＣＸ−２カートリッジに通過させ、メタノールを流して不純物を除去し、次いでメタノール中アンモニアの１Ｎ溶液を流し、生成物を取り出した。溶媒を低圧下で蒸発させ、粗生成物を得た。粗生成物をメタノール／ジクロロメタンに溶解し、シリカゲル上で蒸発させた。残渣をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がジクロロメタン中メタノール０〜１２％）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、生成物を固体のジアステレオ異性体の混合物として得た。
【０１２９】
混合物をＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  ＩＥカラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、１２０ｍＬ／分での溶出剤ＥｔＯＨ）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１３０】
第１溶出異性体としての実施例６（ａ）（固体、１３７ｍｇ、３９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．９５−２．１１（３Ｈ，ｍ），２．２２−２．３２（１Ｈ，ｍ），３．１１（４Ｈ，ｄｑ），３．４４−３．５９（３Ｈ，ｍ），３．７１−３．７７（４Ｈ，ｍ），４．１４（１Ｈ，ｓ），４．３６（１Ｈ，ｄｔ），６．８２−６．８８（２Ｈ，ｍ），７．０３（１Ｈ，ｄ），７．０６（１Ｈ，ｄ），７．２４（１Ｈ，ｔ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ），７．６１（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１１．８６（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４６７．
【０１３１】
第２溶出異性体としての実施例６（ｂ）（固体、６７ｍｇ、１９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．９５−２．０９（３Ｈ，ｍ），２．２２−２．３１（１Ｈ，ｍ），３．０４−３．１７（４Ｈ，ｍ），３．４５−３．５９（３Ｈ，ｍ），３．７１−３．７８（４Ｈ，ｍ），４．１４（１Ｈ，ｓ），４．３３−４．４（１Ｈ，ｍ），６．８３−６．８８（２Ｈ，ｍ），７．０３（１Ｈ，ｄ），７．０６（１Ｈ，ｓ），７．２５（１Ｈ，ｔ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ），７．６１（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄ），１１．８８（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４６７．
【０１３２】
実施例７（ａ）および７（ｂ）
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド
【化１５】
2018535235.tif 000017
ＨＡＴＵ（２２５ｍｇ、０．５９ミリモル）を、室温でＮ−メチル−２−ピロリジノン（４ｍＬ）中の２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（中間体２０、１２５ｍｇ、０．４６ミリモル）、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１２０ｍｇ、０．４６ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．２３９ｍＬ、１．３７ミリモル）に添加した。得られた溶液を室温で４５分間撹拌した。この溶液をメタノール（１５ｍＬ）で希釈し、２０ｇのＳＣＸ−２カートリッジに通過させ、メタノールを流して不純物を除去し、次いでメタノール中アンモニアの１Ｎ溶液を流し、生成物を取り出した。溶媒を低圧下で蒸発させ、粗生成物を得た。粗生成物をメタノール／ジクロロメタンに溶解し、シリカゲル上で蒸発させた。残渣をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がジクロロメタン中メタノール０〜７％）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、生成物をガム状物のジアステレオ異性体の混合物として得た。
【０１３３】
混合物をＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＩＡカラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、溶出剤として９０／１０のＭｅＣＮ／ＭｅＯＨ混合物を使用、流速１２０ｍＬ／分）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１３４】
第１溶出異性体としての実施例７（ａ）（固体、７２ｍｇ、３８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．９５−２．０９（３Ｈ，ｍ），２．２６（１Ｈ，ｄｔ），３．１１（４Ｈ，ｄｑ），３．４８（１Ｈ，ｄｄ），３．５１−３．５８（２Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．２６（１Ｈ，ｓ），４．３６（１Ｈ，ｄｔ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．２８−７．３４（２Ｈ，ｍ），７．４５−７．５１（３Ｈ，ｍ），７．６４（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．０９（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５２１．
【０１３５】
第２溶出異性体としての実施例７（ｂ）（固体、７９ｍｇ、４２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．９６−２．１１（３Ｈ，ｍ），２．２３−２．３２（１Ｈ，ｍ），３．０５−３．１６（４Ｈ，ｍ），３．４７（１Ｈ，ｄｄ），３．５１−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ），４．２６（１Ｈ，ｓ），４．３６（１Ｈ，ｄｑ），６．８４（１Ｈ，ｄｄ），７．２７−７．３３（２Ｈ，ｍ），７．４４−７．５（３Ｈ，ｍ），７．６３（１Ｈ，ｄ），８．４６（１Ｈ，ｄｄ），１２．０７（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５２１．
【０１３６】
実施例８（ａ）および８（ｂ）
（１Ｓ）−２−メチル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボキサミドおよび（１Ｒ）−２−メチル−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボキサミド
【化１６】
2018535235.tif 000018
ＨＡＴＵ（２３８ｍｇ、０．６３ミリモル）を、室温でＮ−メチル−２−ピロリジノン（２ｍＬ）およびＤＭＦ（３ｍＬ）中の２−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボン酸、ＨＣｌ（中間体２４、１１０ｍｇ、０．４８ミリモル）、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１２７ｍｇ、０．４８ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．２９５ｍＬ、１．６９ミリモル）に添加した。得られた溶液を室温で４５分間撹拌した。この溶液をメタノール（１５ｍＬ）で希釈し、２０ｇのＳＣＸ−２カートリッジに通過させ、メタノールを流して不純物を除去し、次いでメタノール中アンモニアの１Ｎ溶液を流し、生成物を取り出した。溶媒を低圧下で蒸発させ、粗生成物を得た。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がジクロロメタン中メタノール０〜６％）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、生成物をガム状物のジアステレオ異性体の混合物として得た。
【０１３７】
混合物をＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｏｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ２カラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、１２０ｍＬ／分の流速で溶出剤としてＥｔＯＨを使用）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１３８】
第１溶出異性体としての実施例８（ａ）（固体、４９ｍｇ、４３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．０２−２．１１（１Ｈ，ｍ），２．２３−２．３１（１Ｈ，ｍ），２．３７（３Ｈ，ｓ），２．５４−２．６１（１Ｈ，ｍ），２．７８（１Ｈ，ｄｔ），２．９５（１Ｈ，ｄｔ），３．１８−３．２５（１Ｈ，ｍ），３．４７−３．５９（３Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），４．３５（１Ｈ，ｓ），４．３６−４．４２（１Ｈ，ｍ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．１１−７．１９（４Ｈ，ｍ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ），７．６５（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１１．９５（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４３７．
【０１３９】
第２溶出異性体としての実施例８（ｂ）（固体、５２ｍｇ、４６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．０３−２．１１（１Ｈ，ｍ），２．２３−２．３２（１Ｈ，ｍ），２．３７（３Ｈ，ｓ），２．５４−２．６２（１Ｈ，ｍ），２．７９（１Ｈ，ｄｔ），２．９４（１Ｈ，ｄｔ），３．１８−３．２６（１Ｈ，ｍ），３．４２−３．５９（３Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．３５（１Ｈ，ｓ），４．３７−４．４２（１Ｈ，ｍ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．１１−７．１９（４Ｈ，ｍ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ），７．６５（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１１．９７（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４３７．
【０１４０】
実施例９
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−メチルフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１７】
2018535235.tif 000019
ＨＡＴＵ（３４７ｍｇ、０．９１ミリモル）を、窒素下、２１℃でＤＭＡ（７ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）酢酸（中間体２６、１６１ｍｇ、０．８４ミリモル）、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、２００ｍｇ、０．７６ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．１３３ｍＬ、０．７６ミリモル）に添加した。得られた溶液を０℃で４５分間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物を、１Ｍ  ＮＨ３／ＭｅＯＨを用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、粗生成物をガム状物として得た。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜１０％）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ＤＣＭ／エーテルで粉砕し、濾過し、（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−メチルフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１０９ｍｇ、３３％）をクリーム状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．２５（１Ｈ，ｍ），２．０８（１Ｈ，ｄｔ），２．１９（６Ｈ，ｓ），２．２４−２．３６（４Ｈ，ｍ），３．４８（１Ｈ，ｄｄ），３．５４−３．６５（２Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），４．３４−４．５（１Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ），７．１８（２Ｈ，ｄ），７．２８−７．４４（３Ｈ，ｍ），７．６６（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．１２（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４３９．
【０１４１】
実施例１０
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（３−メチルフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１８】
2018535235.tif 000020
ＨＡＴＵ（４１６ｍｇ、１．０９ミリモル）を、窒素下、２１℃でＤＭＦ（１２ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｍ−トリル）酢酸（中間体２７、１９４ｍｇ、１．００ミリモル）、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、２４０ｍｇ、０．９１ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．１５９ｍＬ、０．９１ミリモル）に添加した。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物を、１Ｍ  ＮＨ３／ＭｅＯＨを用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、ガム状物を得た。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がＤＣＭ中メタノール０〜１０％）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ＤＣＭ／エーテルで粉砕し、濾過し、（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｍ−トリル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（９１ｍｇ、２３％）をクリーム状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．２５（１Ｈ，ｍ），２．０８（１Ｈ，ｄｑ），２．１９−２．４２（１０Ｈ，ｍ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ），３．５７（２Ｈ，ｔｄ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），４．２９−４．４６（１Ｈ，ｍ），６．８８（１Ｈ，ｄｄ），７．１９（１Ｈ，ｓ），７．２６−７．４１（４Ｈ，ｍ），７．７１（１Ｈ，ｓ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．３０（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４３９．
【０１４２】
実施例１１（ａ）および１１（ｂ）
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１９】
2018535235.tif 000021
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体２８、０．０９ｇ、０．３０ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。［２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセチル］オキシリチウム（中間体１、０．０９ｇ、０．３０７ミリモル）、次いでＤＩＰＥＡ（０．０８ｍＬ、０．４６ミリモル）を添加した。混合物をＨＡＴＵ（１３９．９ｍｇ、０．３６ミリモル）の添加前の５分間、次に室温で２時間撹拌した。反応混合物をＭｅＯＨ（１ｍＬ）で希釈し、５ｇのＳＣＸカートリッジに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を結合させ、蒸発させ、１ｇのＳＣＸカートリッジ上に吸収させ、それをＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出し、２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドをオフホワイト固体として得た（８８ｍｇ、５３％）。ジアステレオマーを、１２０ｍＬ／分で９０／１０のＭｅＣＮ／ＭｅＯＨでのキラル分取ＨＰＬＣ（ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＩＡカラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１４３】
第１溶出異性体としての実施例１１（ａ）（３５．４ｍｇ、２１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）１．９７−２．１（３Ｈ，ｍ），２．２３−２．３２（１Ｈ，ｍ），３．０６−３．１７（４Ｈ，ｍ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ），３．５３−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），４．２６（１Ｈ，ｓ），４．３４−４．４２（１Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｄ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ），７．４７−７．５８（２Ｈ，ｍ），７．６４（２Ｈ，ｄｄ），８．４８（１Ｈ，ｄ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５３９．
【０１４４】
第２溶出異性体としての実施例１１（ｂ）（２６．９ｍｇ、１６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）１．９６−２．１１（３Ｈ，ｍ），２．２３−２．３４（１Ｈ，ｍ），３．０７−３．１７（４Ｈ，ｍ），３．４８（１Ｈ，ｄｄ），３．５３−３．６（２Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），４．２６（１Ｈ，ｓ），４．３３−４．４２（１Ｈ，ｍ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ），７．４７−７．５７（２Ｈ，ｍ），７．６４（２Ｈ，ｄｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５３９．
【０１４５】
実施例１２（ａ）および１２（ｂ）
（２Ｓ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド
【化２０】
2018535235.tif 000022
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体６、０．１１ｇ、０．３８ミリモル）および［２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセチル］オキシリチウム（中間体２１、０．１３ｇ、０．４６ミリモル）をＮ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．３４ｍＬ、１．９４３ミリモル）およびＨＡＴＵ（０．４ｍＬ、０．３８９ミリモル）の添加前の５分間、次に室温で２時間撹拌した。粗混合物を５ｇのＳＣＸカラム上に吸収させ、それをＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、オレンジガム状物を得た。塩基性画分を蒸発させ、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を結合させ、蒸発させ、１ｇのＳＣＸカートリッジ上に吸収させ、それをＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出し、２−（アゼチジン−１−イル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミドをオフホワイト固体として得た。ジアステレオマーを、１２０ｍＬ／分で２０／８０のヘプタン／ＥｔＯＡｃ（＋０．２％ＴＥＡ）でのキラル分取ＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＩＣカラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１４６】
第１溶出異性体としての実施例１２（ａ）（２８．６０ｍｇ、１３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）２．０４−２．１８（３Ｈ，ｍ），２．３４（１Ｈ，ｄｔ），３．２０（４Ｈ，ｄｑ），３．５４（１Ｈ，ｄｄ），３．５８−３．６７（２Ｈ，ｍ），３．８１（１Ｈ，ｄｄ），４．３５（１Ｈ，ｓ），４．４−４．４８（１Ｈ，ｍ），７．２３（１Ｈ，ｄｄ），７．３５−７．４（１Ｈ，ｍ），７．４２（１Ｈ，ｄｄ），７．５３−７．５５（１Ｈ，ｍ），７．５７（２Ｈ，ｄ），７．７１（１Ｈ，ｄ），１２．０７（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５３９．
【０１４７】
第２溶出異性体としての実施例１２（ｂ）（１３．５ｍｇ、６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）１．９６−２．１（３Ｈ，ｍ），２．２８（１Ｈ，ｄｔ），３．１３（４Ｈ，ｄｑ），３．４６（１Ｈ，ｄｄ），３．５１−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．２８（１Ｈ，ｓ），４．３４−４．４１（１Ｈ，ｍ），７．１６（１Ｈ，ｄｄ），７．２９−７．３２（１Ｈ，ｍ），７．３４（１Ｈ，ｄｄ），７．４７−７．４９（１Ｈ，ｍ），７．５０（２Ｈ，ｄ），７．６４（１Ｈ，ｄ），１２．００（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５３９．
【０１４８】
実施例１３
（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化２１】
2018535235.tif 000023
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、０．０９ｇ、０．３０ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）酢酸（中間体３２、０．０６ｇ、０．３０７ミリモル）、次いでＤＩＰＥＡ（０．０８ｍＬ、０．４６ミリモル）を添加した。混合物をＨＡＴＵ（１３９．９ｍｇ、０．３６８ミリモル）の添加前の５分間撹拌し、次に室温で９０分間撹拌しておいた。反応混合物をＭｅＯＨ（１ｍＬ）で希釈し、５ｇのＳＣＸカートリッジに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（ＸＢｒｉｄｇｅ  ＯＢＤ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分により精製し、減少する極性比率の０．３ｍＬ／ＬのＮＨ４ＯＨを含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を結合させ、蒸発させ、（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドをベージュ固体として得た（４３ｍｇ、３１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ    ２．０９−２．０２（１Ｈ，ｍ），２．１４（６Ｈ，ｄ），２．３２−２．２４（１Ｈ，ｍ），３．６０−３．４３（３Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．１７（１Ｈ，ｓ），４．３８（１Ｈ，ｑ），６．８７（１Ｈ，ｄｄｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄｄ），７．６０（１Ｈ，ｔｄ），７．７１（１Ｈ，ｄ），７．８０（２Ｈ，ｄｄｑ），７．８７（１Ｈ，ｔ），８．４８（１Ｈ，ｄｔ），１２．３０（１Ｈ，ｓ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４５０．
【０１４９】
実施例１４
（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド
【化２２】
2018535235.tif 000024
ＤＩＰＥＡ（０．１９９ｍＬ、１．１４ミリモル）を、２５℃でＤＭＦ（４ｍＬ）中のＮ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１５０ｍｇ、０．５７ミリモル）、（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（中間体３８、１５０ｍｇ、０．５７ミリモル）、ＥＤＣ（２１８ｍｇ、１．１４ミリモル）およびＨＯＢＴ（８７ｍｇ、０．５７ミリモル）に添加した。得られた混合物を２５℃で１６時間撹拌した。粗生成物を、水およびＭｅＣＮの漸減する極性混合物を溶出剤として用いて、分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム、５μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、１５０ｍｍの長さ）により精製した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミドを褐色固体として得た（１５ｍｇ、５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３０℃）δ  ２．２７−２．３５（ｍ，１Ｈ），２．４４−２．５６（ｍ，１Ｈ），２．８８（ｓ，６Ｈ），３．７２−３．８４（ｍ，３Ｈ），３．９７−４．０３（ｍ，１Ｈ），４．５４−４．５９（ｍ，１Ｈ），５．１６（ｓ，１Ｈ），７．５０−７．７３（ｍ，５Ｈ），７．８４−７．８８（ｍ，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ）；ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ−Ｈ］−  ５０７．
【０１５０】
実施例１８
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド
【化２３】
2018535235.tif 000025
ＤＩＰＥＡ（０．１９９ｍＬ、１．１４ミリモル）を、２５℃でＤＭＦ（４ｍＬ）中のＮ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１５０ｍｇ、０．５７ミリモル）、（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（中間体３９、１５０ｍｇ、０．５７ミリモル）、ＥＤＣ（２１８ｍｇ、１．１４ミリモル）およびＨＯＢＴ（８７ｍｇ、０．５７ミリモル）に添加した。得られた混合物を２５℃で１６時間撹拌した。粗生成物を、水およびＭｅＣＮの漸減する極性混合物を溶出剤として用いて、分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム、５μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、１５０ｍｍの長さ）により精製した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミドを褐色固体として得た（１５ｍｇ、５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，３０℃）δ  ２．２８−２．３５（ｍ，１Ｈ），２．４５−２．５９（ｍ，１Ｈ），２．８６（ｓ，６Ｈ），３．６９−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．７７−３．８４（ｍ，２Ｈ），３．９５−４．０１（ｍ，１Ｈ），４．５６−４．５８（ｍ，１Ｈ），５．１２（ｓ，１Ｈ），７．４９−７．６９（ｍ，５Ｈ），７．７９−７．８４（ｍ，１Ｈ），８．５１（ｄ，１Ｈ）；ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ−Ｈ］−  ５０７．
【０１５１】
さらなる実施例
以下の実施例の化合物を、上の実施例に類似する様式で調製した。
【０１５２】
【表１】
2018535235.tif 000026
【０１５３】
中間体１
Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン
【化２４】
2018535235.tif 000027
１Ｌの丸底フラスコ内に、ＤＭＦ（４００ｍＬ）中の（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−アミンジヒドロクロリド（中間体２、１０．５ｇ、４４．２９ミリモル）、５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（７．９４ｇ、４４．１０ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（１７．０７ｇ、１３２．０８ミリモル）の溶液を入れた。溶液を８０℃で４時間撹拌した。得られた混合物を真空で濃縮した。粗生成物をエタノール／ＥｔＯＡｃからの再結晶化により精製し、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミンを淡黄色固体として得た（１１ｇ、９４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０４（１Ｈ，ｔｄ），２．２２−２．３１（１Ｈ，ｍ），３．４３−３．６２（３Ｈ，ｍ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ），４．２８（１Ｈ，ｄｑ），６．２７（２Ｈ，ｓ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ），７．０７（１Ｈ，ｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６４．２８．
【０１５４】
中間体１はまた、以下の代替手順に従って大規模に調製した。
（Ｒ）−１−（ピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（中間体３、遊離塩基形態、２５．５ｇ、１５０．６３ミリモル）および５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（２９．８ｇ、１６５．７０ミリモル）をＤＩＰＥＡ（３９．４ｍＬ、２２５．９５ミリモル）とともに、４５℃でＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中スラリーとして撹拌した。スラリーを２０℃に冷却し、固体を真空濾過により単離した。５０ｍＬのＭｅＯＨをフィルターケーキの置換洗浄として用い、次にそれを４０℃の真空乾燥器内で一晩乾燥させた。中間体１（３２．９ｇ、８３％）を自由流動性ベージュ粉末として得た。
【０１５５】
中間体２
（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−アミンジヒドロクロリド
【化２５】
2018535235.tif 000028
１Ｌの丸底フラスコ内に、ジオキサン（２００ｍＬ）中、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体４、２０ｇ、７５．６６ミリモル）および濃縮ＨＣｌ（１００ｍＬ）の溶液を入れた。溶液を室温で３０分間撹拌した。得られた混合物を真空で濃縮した。粗生成物を１：２の比でＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃから再結晶化した。これにより、（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−アミンジヒドロクロリドをオフホワイト固体として得た（１３．４ｇ，７５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２６℃）δ  ２．２５−２．４３（２Ｈ，ｍ），３．６６−３．７４（１Ｈ，ｍ），３．７８−３．９０（３Ｈ，ｍ），４．０２−４．１０（１Ｈ，ｍ），７．７５（１Ｈ，ｄ），７．９４（１Ｈ，ｄｄ），８．６６（１Ｈ，ｄ），８．７７−８．９８（３Ｈ，ｂｒｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１６５．
【０１５６】
中間体３（遊離塩基形態）もまた以下の手順に従って調製した。ピリジン（４００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−クロロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体５、２０ｇ、１０７．３８ミリモル）を、炭素上パラジウム水酸化物（Ｐｅａｒｌｍａｎ触媒、２７．５ｇ、２５．８４ミリモル）およびＭｅＯＨ（１３７５ｍＬ）中１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（３１．０ｍＬ、２７６．１３ミリモル）と混合した。次に反応混合物を６５℃に９０分間加熱した。完全な変換が認められると、反応物を冷却して環境温度に戻し、触媒を濾過により除去した。次に、ＭｅＯＨ中３Ｍ  ＨＣｌ（１８４ｍＬ、５５２．２７ミリモル）を反応混合物に負荷し、溶液を６５℃に１時間加熱した。完全な変換が認められると、反応溶液を冷却して環境温度に戻し、１０×５０ｇのＳＣＸカラムに通過させた（それはＭｅＯＨで予備溶出した）。化合物を、ＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてＳＣＸから放出させた。得られた溶液をトルエン（１Ｌ）で希釈し、回転蒸発を介して乾燥するまで濃縮し、自由流動性固体を得た。（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−アミンを、遊離塩基として９７％ｗ／ｗの強度で単離した。
【０１５７】
中間体４
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］カルバメート
【化２６】
2018535235.tif 000029
２Ｌの丸底フラスコ内に、ＭｅＯＨ（８００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−クロロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体５、２３ｇ、７６．９８ミリモル）および炭素上パラジウム（２ｇ）の溶液を入れた。系を水素ガスでパージし、維持した。得られた溶液を室温で４時間撹拌した。固体を濾過除去した。得られた混合物を真空で濃縮し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］カルバメート（２０ｇ、８４％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２４℃）δ  １．４４（９Ｈ，ｓ），２．２５−２．３５（２Ｈ，ｍ），３．４８−３．５６（１Ｈ，ｍ），３．７０−４．１０（３Ｈ，ｍ），４．３５−４．４２（１Ｈ，ｍ），７．２６−７．３２（１Ｈ，ｍ），７．７０−７．７５（１Ｈ，ｍ），８．５３−８．５５（１Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６５．
【０１５８】
中間体５
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−クロロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート
【化２７】
2018535235.tif 000030
１Ｌの丸底フラスコ内に、ピリジン（４００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−ピロリジン−３−イル］カルバメート（２０ｇ、１０７．３８ミリモル）および３，６−ジクロロピリダジン（１６ｇ、１０７．４０ミリモル）の溶液を入れた。得られた溶液を加熱し、一晩還流させた。得られた混合物を真空で濃縮した。粗生成物を、１：３の比でのエタノール／Ｅｔ２Ｏからの再結晶化により精製し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−クロロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（２３ｇ、７２％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  １．４５（９Ｈ，ｓ），２．０２（１Ｈ，ｄｑ），２．３１（１Ｈ，ｔｄ），３．４１（１Ｈ，ｄｄ），３．５４−３．７０（２Ｈ，ｍ），３．７８（１Ｈ，ｄｄ），４．３７（１Ｈ，ｓ），４．７６（１Ｈ，ｓ），６．６１（１Ｈ，ｄ），７．１７（１Ｈ，ｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２９９．
【０１５９】
中間体６
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン
【化２８】
2018535235.tif 000031
ＤＩＰＥＡ（３．４８ｍＬ、１９．９６ミリモル）を、室温で無水ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（１．７９７ｇ、９．９８ミリモル）および（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（中間体７、２ｇ、１０．９８ミリモル）に添加した。得られた溶液を８０℃で４時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物をＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（２．９ｇ、１０３％）を褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  １．９０−２．１２（１Ｈ，ｍ），２．２３（１Ｈ，ｄｔｄ），３．４２（１Ｈ，ｄｄ），３．４７−３．６１（２Ｈ，ｍ），３．６９（１Ｈ，ｄｄ），４．２５（１Ｈ，ｄｑ），６．２５（２Ｈ，ｓ），７．０４（１Ｈ，ｄ），７．１４（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２８２．
【０１６０】
中間体７
（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン
【化２９】
2018535235.tif 000032
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体８、６ｇ、２１．２５ミリモル）を、２５℃でＤＣＭ（７０ｍＬ）およびＴＦＡ（１４．００ｍＬ）に添加した。得られた溶液を２５℃で４時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物をＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（２．０ｇ、５２％）を淡黄色ガム状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  １．５５−１．８３（１Ｈ，ｍ），１．９８−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．８９−３．１４（１Ｈ，ｍ），３．２９−３．４３（１Ｈ，ｍ），３．５４（３Ｈ，ｄｄｔ），７．０６（１Ｈ，ｄｄ），７．３０（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１８３．
【０１６１】
中間体８
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート
【化３０】
2018535235.tif 000033
３，６−ジフルオロピリダジン（６．０６ｇ、５２．２１ミリモル）、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−ピロリジン−３−イル］カルバメート（９．７２ｇ、５２．２１ミリモル）、ＤＩＰＥＡ（２２．８０ｍＬ、１３０．５３ミリモル）およびｎ−ブタノール（１４０ｍＬ）の混合物を１３０℃で１０時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（７５０ｍＬ）で希釈し、水（１５０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させ、粗生成物を得た。次にこれをＤＣＭに溶解し、粗生成物をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ３０〜６５％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（１５ｇ、１０２％）をクリーム状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  １．４６（９Ｈ，ｓ），１．９１−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．３２（１Ｈ，ｄｑ），３．４０（１Ｈ，ｄｄ），３．５６−３．７２（２Ｈ，ｍ），３．７８（１Ｈ，ｄｄ），４．３７（１Ｈ，ｓ），４．７０（１Ｈ，ｓ），６．７８（１Ｈ，ｄｄ），６．９８（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２８３．
【０１６２】
中間体９
２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）酢酸
【化３１】
2018535235.tif 000034
ＴＨＦ中ジメチルアミン２Ｍ（０．６２３ｍＬ、１．２５ミリモル）を、窒素下、２１℃でＭｅＣＮ（８ｍＬ）中の２−ブロモ−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸（中間体１０、３５０ｍｇ、１．２５ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．６６５ｍＬ、３．７４ミリモル）に添加した。得られた混合物を環境温度で２時間撹拌した。次に反応物を蒸発させ、粗製２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−（ジメチルアミノ）酢酸を褐色ガム状物として得て、それを後続するステップにおける粗製物として用いた。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２４６．
【０１６３】
中間体１０
２−ブロモ−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸
【化３２】
2018535235.tif 000035
２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸（２６３ｍｇ、１．３０ミリモル）およびＮＢＳ（２５５ｍｇ、１．４３ミリモル）をクロロホルム（１０ｍＬ）に溶解し、８０℃で加熱した。これに（Ｅ）−２，２’−（ジアゼン−１，２−ジイル）ビス（２−メチルプロパンニトリル）（１０．６８ｍｇ、０．０７ミリモル）を添加し、反応物を８０℃で３時間撹拌した。さらに次に、ＮＢＳを添加し（１２０ｍｇ）、反応物をさらに１．５時間還流しておいた。次に反応物を環境温度で一晩放置した。さらに、ＮＢＳを添加し（６０ｍｇ）、反応物を８０℃でさらに１時間加熱した。反応物を室温に冷却し、クロロホルムを低圧下で除去し、粗製２−ブロモ−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸が残留し、それを後続する反応における粗製物として用いた。ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ−Ｈ］−２７９．
【０１６４】
中間体１１
２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化３３】
2018535235.tif 000036
ＴＨＦ中ジメチルアミン２Ｍ（７．９４ｍＬ、１５．８８ミリモル）を、２１℃でＭｅＣＮ（７５ｍＬ）中の２−ブロモ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（中間体１２、４．７５ｇ、１５．８８ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（８．４８ｍＬ、４７．６５ミリモル）に添加し、わずかな発熱を生じた。得られた混合物を環境温度で２時間撹拌した。次に反応物を蒸発させ、２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸を褐色ガム状物として得て、それを次のステップにおける粗製物として用いた。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６４．
【０１６５】
中間体１２
２−ブロモ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化３４】
2018535235.tif 000037
２−（３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）酢酸（３．５ｇ、１５．９０ミリモル）およびＮＢＳ（３．１１ｇ、１７．４９ミリモル）をクロロホルム（１００ｍＬ）に溶解し、８０℃で加熱した。これに（Ｅ）−２，２’−（ジアゼン−１，２−ジイル）ビス（２−メチルプロパンニトリル）（０．１３１ｇ、０．７９ミリモル）を添加し、反応物を８０℃で６時間撹拌した。次に反応物を環境温度で週末にかけて放置した。次に溶媒を蒸発させ、粗製２−ブロモ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸を得て、それをさらに全く精製することなく用いた。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２９７．
【０１６６】
中間体１３
２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化３５】
2018535235.tif 000038
水（３ｍＬ）中水酸化リチウム一水和物（９６ｍｇ、２．２９ミリモル）の溶液を、メタノール（６ｍＬ）中２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル（中間体１４、３１０ｍｇ、１．１４ミリモル）の溶液に添加し、混合物を室温で１８時間撹拌した。次に反応混合物を２Ｍ水性ＨＣｌの添加によりｐＨ４に調整した。溶液を２０ｇのＳＣＸ−２カートリッジに通過させ、メタノール、次いでメタノール中アンモニアの１Ｎ溶液で溶出し、生成物を取り出した。溶媒を低圧下で蒸発させ、２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（２９０ｍｇ、９９％）をガム状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．１８（２Ｈ，ｐ），３．５６（２Ｈ，ｑ），３．７５（２Ｈ，ｑ），４．４４（１Ｈ，ｓ），７．１２（１Ｈ，ｄｄ），７．１７（１Ｈ，ｓ），７．２０（１Ｈ，ｔ），７．２３（１Ｈ，ｄ），７．３８−７．４３（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２５８．
【０１６７】
中間体１４
２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル
【化３６】
2018535235.tif 000039
ＭｅＣＮ（２ｍＬ）中トリエチルアミン（２６３μｌ、１．８９ミリモル）およびアゼチジン（９８ｍｇ、１．７２ミリモル）の溶液を、０℃でＭｅＣＮ（５ｍＬ）中、２−ブロモ−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル（中間体１５、５０７ｍｇ、１．７２ミリモル）の溶液に液滴添加した。混合物を室温で２時間撹拌し、次に低圧下で濃縮した。残渣を鹹水溶液および酢酸エチル間で分配し、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル（３１０ｍｇ、６７％）を液体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ２．１２（２Ｈ，ｐ），３．１７（２Ｈ，ｑ），３．２８（２Ｈ，ｑ），３．６８（３Ｈ，ｓ），４．０２（１Ｈ，ｓ），６．５２（１Ｈ，ｔ），７．０４−７．０８（１Ｈ，ｍ），７．２０（１Ｈ，ｄ），７．２５−７．２８（１Ｈ，ｍ），７．３３（１Ｈ，ｔ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２７２．
【０１６８】
中間体１５
２−ブロモ−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル
【化３７】
2018535235.tif 000040
四塩化炭素（２０ｍＬ）中、２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル（中間体１６、１．１ｇ、５．０９ミリモル）およびＮＢＳ（０．９５１ｇ、５．３４ミリモル）および（Ｅ）−２，２’−（ジアゼン−１，２−ジイル）ビス（２−メチルプロパンニトリル）（０．０４２ｇ、０．２５ミリモル）の混合物を加熱し、４時間還流し、次に室温に冷却した。固体を濾過除去し、廃棄し、溶媒を低圧下で蒸発させた。フラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がヘプタン中酢酸エチル０〜５％）。生成物を含有する画分を低圧下で蒸発させ、２−ブロモ−２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル（０．８３０ｇ、５５％）を液体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ３．８０（３Ｈ，ｓ），５．３２（１Ｈ，ｓ），６．５２（１Ｈ，ｔ），７．１１（１Ｈ，ｄｔ），７．３２−７．４（３Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＧＣ  ＥＩ  Ｍ＋２９３．９７０１．
【０１６９】
中間体１６
２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル
【化３８】
2018535235.tif 000041
メタノール（３０ｍＬ）中、２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸（１ｇ、４．９５ミリモル）および硫酸（１０．８７μｌ、０．２０ミリモル）の溶液を２時間還流し、次に室温に冷却した。溶媒を低圧下で蒸発させ、残渣を酢酸エチルおよび水性重炭酸ナトリウム間で分配した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、２−（３−（ジフルオロメトキシ）フェニル）酢酸メチル（１．１ｇ、１０３％）を油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ３．６３（２Ｈ，ｓ），３．７０（３Ｈ，ｓ），６．５０（１Ｈ，ｔ），７．０１−７．０７（２Ｈ，ｍ），７．１１−７．１５（１Ｈ，ｍ），７．３１（１Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＧＣ  ＥＩ  Ｍ＋２１６．０５９３．
【０１７０】
中間体１７
２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）酢酸
【化３９】
2018535235.tif 000042
水（３ｍＬ）中水酸化リチウム（６４．１ｍｇ、２．６８ミリモル）の溶液を、メタノール（６ｍＬ）中２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）酢酸メチル（中間体１８、４２０ｍｇ、１．７９ミリモル）の溶液に添加し、混合物を室温で１８時間撹拌した。次に反応混合物を２Ｍ水性ＨＣｌの添加によりｐＨ４に調整した。溶液を２０ｇのＳＣＸ−２カートリッジに通過させ、メタノール、次いでメタノール中アンモニアの１Ｎ溶液で溶出し、生成物を取り出した。溶媒を低圧下で蒸発させ、２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）酢酸（３８０ｍｇ、９６％）を固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．１４−２．２４（２Ｈ，ｍ），３．５８（２Ｈ，ｑ），３．７４（３Ｈ，ｓ），３．７９（２Ｈ，ｑ），４．４０（１Ｈ，ｓ），６．８５−６．８９（１Ｈ，ｍ），６．９１−６．９５（２Ｈ，ｍ），７．２５（１Ｈ，ｔ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２２２．
【０１７１】
中間体１８
２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）酢酸メチル
【化４０】
2018535235.tif 000043
アセトニトリル（２ｍＬ）中、トリエチルアミン（２８４μｌ、２．０４ミリモル）およびアゼチジン（１０６ｍｇ、１．８５ミリモル）の溶液を、ＭｅＣＮ（５ｍＬ）中、２−ブロモ−２−（３−メトキシフェニル）酢酸メチル（中間体１９、４８０ｍｇ、１．８５ミリモル）の０℃の溶液に液滴添加した。混合物を室温で２時間撹拌し、次に低圧下で濃縮した。残渣を鹹水溶液および酢酸エチル間で分配し、有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）酢酸メチル（４２０ｍｇ、９６％）を液体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ２．１１（２Ｈ，ｐ），３．１６（２Ｈ，ｑ），３．３０（２Ｈ，ｑ），３．６７（３Ｈ，ｓ），３．８１（３Ｈ，ｓ），３．９９（１Ｈ，ｓ），６．８２−６．８６（１Ｈ，ｍ），６．９６−７（２Ｈ，ｍ），７．２３（１Ｈ，ｔ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２３６．
【０１７２】
中間体１９
２−ブロモ−２−（３−メトキシフェニル）酢酸メチル
【化４１】
2018535235.tif 000044
四塩化炭素（１５ｍＬ）中、２−（３−メトキシフェニル）酢酸メチル（５５０ｍｇ、３．０５ミリモル）およびＮＢＳ（５７０ｍｇ、３．２０ミリモル）および（Ｅ）−２，２’−（ジアゼン−１，２−ジイル）ビス（２−メチルプロパンニトリル）（２５．０６ｍｇ、０．１５ミリモル）の混合物を加熱し、４時間還流し、次に室温に冷却した。固体を濾過除去し、廃棄し、溶媒を低圧下で蒸発させた。フラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配がヘプタン中酢酸エチル０〜１０％）。生成物を含有する画分を低圧下で蒸発させ、２−ブロモ−２−（３−メトキシフェニル）酢酸メチル（４９０ｍｇ、６２％）を液体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ３．７９（３Ｈ，ｓ），３．８２（３Ｈ，ｓ），５．３３（１Ｈ，ｓ），６．８８（１Ｈ，ｄｄｄ），７．０７−７．１２（２Ｈ，ｍ），７．２３−７．２９（１Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＧＣ  ＥＩ  Ｍ＋２５７．９８８２．
【０１７３】
中間体２０
２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化４２】
2018535235.tif 000045
水（３ｍＬ）中、水酸化リチウム一水和物（１１６ｍｇ、２．７７ミリモル）の溶液を、メタノール（６ｍＬ）中、２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル（中間体２２、４００ｍｇ、１．３８ミリモル）の溶液に添加し、混合物を室温で１８時間撹拌した。次に反応混合物を２Ｍ水性ＨＣｌの添加によりｐＨ４に調整した。溶液を２０ｇのＳＣＸ−２カートリッジに通過させ、メタノール、次いでメタノール中アンモニアの１Ｎ溶液で溶出し、生成物を取り出した。溶媒を低圧下で蒸発させ、２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（３８０ｍｇ、１００％）をガム状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．１９（２Ｈ，ｐ），３．５−３．６（２Ｈ，ｍ），３．７５（２Ｈ，ｑ），４．４９（１Ｈ，ｓ），７．３１（１Ｈ，ｄ），７．３５（１Ｈ，ｓ），７．３９（１Ｈ，ｄ），７．５０（１Ｈ，ｔ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２７６．
【０１７４】
中間体２１
［２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセチル］オキシリチウム
【化４３】
2018535235.tif 000046
２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル（中間体２２、０．９４ｇ、３．２５ミリモル）および水酸化リチウム一水和物（０．２７ｇ、６．５ミリモル）を、メタノール（１０ｍＬ）および水（５ｍＬ）の混合物に溶解した。反応物を室温で３時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、真空で乾燥し、［２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセチル］オキシリチウムを淡黄色固体として得た（９４４ｍｇ、１０３％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １．７９（ｐ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．８７（２Ｈ，ｑ），３．０１（２Ｈ，ｑ），３．５２（１Ｈ，ｓ），７．０２（１Ｈ，ｄｄｔ），７．３０−７．２０（３Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ＋Ｈ］−  ２７５．
【０１７５】
中間体２２
２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル
【化４４】
2018535235.tif 000047
ＭｅＣＮ（４ｍＬ）中、新しいアゼチジン（０．２２ｍＬ、３．１９ミリモル）およびトリエチルアミン（０．４９ｍＬ、３．５１ミリモル）の溶液を、ＭｅＣＮ（１０ｍＬ）中の２−ブロモ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル（中間体２３、１．０ｇ、３．１９ミリモル）に液滴添加し、Ｎ２下、氷槽内で冷却した。混合物を室温に温めておき、５時間撹拌した。反応混合物を蒸発させて乾燥し、残渣をＥｔＯＡｃおよび鹹水（各々、７５ｍＬ）間で分配した。有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発させ、２−（アゼチジン−１−イル）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチルをオレンジ油として得た（９４０ｍｇ、１０１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ２．１３（２Ｈ，ｑ），３．１７（２Ｈ，ｔｄ），３．３４−３．２４（２Ｈ，ｍ），３．６９（３Ｈ，ｓ），４．０４（１Ｈ，ｓ），７．１６（１Ｈ，ｍ），７．３１（１Ｈ，ｄｑ），７．４０−７．３３（２Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２９０．
【０１７６】
中間体２３
２−ブロモ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル
【化４５】
2018535235.tif 000048
四塩化炭素（５０ｍＬ）中、２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル（３．６ｇ、１５．３７ミリモル）、Ｎ−ブロモサクシニミド（２．８７ｇ、１６．１４ミリモル）およびＡＩＢＮ（０．１３ｇ、０．７６ミリモル）の混合物を加熱し、３時間還流した。それを室温に冷却しておき、沈殿物をセライトを通す濾過により除去した。濾液をシリカ上で蒸発させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、勾配溶出がシクロヘキサン中、シクロヘキサン１００％が酢酸エチル１０％に漸増する）により精製した。純粋画分を蒸発させ、２−ブロモ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチルを淡黄色油として得た（３．９７ｇ、８２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ３．８１（３Ｈ，ｓ），５．３３（１Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｄｄｑ），７．５１−７．３７（３Ｈ，ｍ）．
【０１７７】
中間体２４
２−メチル−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−１−カルボン酸，ＨＣｌ
【化４６】
2018535235.tif 000049
ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）中、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸（中間体２５、２．６３ｇ、１４．８４ミリモル）の懸濁液に、酢酸（２０ｍＬ）、塩酸６Ｎ（２．４７４ｍＬ、１４．８４ミリモル）、次いで炭素上パラジウム１０％（３５０ｍｇ、３．２９ミリモル）およびホルムアルデヒド（１．５０６ｇ、１８．５５ミリモル）を添加した。得られた混合物を水素雰囲気（バルーン）下、室温で１８時間撹拌した。触媒を濾過除去し、溶媒を低圧下で蒸発させ、２−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸（３．１５ｇ、９３％）を固体塩酸塩として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．８９（３Ｈ，ｓ），３．１３（２Ｈ，ｔ），３．４２−３．４９（１Ｈ，ｍ），３．７６−３．８５（１Ｈ，ｍ），５．３３（１Ｈ，ｓ），７．２７−７．３８（３Ｈ，ｍ），７．４１−７．４５（１Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１９２．
【０１７８】
中間体２５
１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸
【化４７】
2018535235.tif 000050
３００ｍＬのスチールボム（ｓｔｅｅｌ  ｂｏｍｂ）に、イソキノリン−１−カルボン酸（３ｇ、１７．３２ミリモル）、酢酸（１００ｍＬ）および酸化白金（ＩＶ）（０．２ｇ、０．８８ミリモル）を負荷した。得られた混合物を、機械的に撹拌しながら７バールの圧力で１８時間水素化した。それをＭｅＯＨ（８０ｍＬ）で希釈し、セライトを通して濾過し、ＭｅＯＨおよび酢酸ですすいだ。濾液を濃縮して乾燥し、淡灰色固体を得た。ＭｅＯＨによる粉砕により、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸（２．６３ｇ、８６％）を淡灰色固体として得て、それをさらに全く精製することなく用いた。
【０１７９】
中間体２６
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（４−メチルフェニル）酢酸
【化４８】
2018535235.tif 000051
窒素の不活性雰囲気下でパージし、維持した１Ｌの丸底フラスコ内に、２−アミノ−２−（ｐ−トリル）酢酸（３６ｇ、２１７．９３ミリモル、１．００当量）、塩化水素（１２０ｍＬ、１Ｎ、３．９５モル、１８．１０当量）、メタノール（１２０ｍＬ、２．９６モル、１３．６０当量）、パラホルムアルデヒド（Ｈ２Ｏ中３７％、１２０ｍＬ）および炭素上パラジウム（３６ｇ、３３８．２８ミリモル、１．６０当量）を入れた。得られた溶液を、水素雰囲気（バルーン）下、室温で４８時間撹拌した。固体を濾過除去し、濾液を真空で濃縮した。得られた溶液をメタノール１５００ｍＬで希釈した。溶液のｐＨ値をＭｅＯＮａにより６に調整した。固体を濾過除去し、得られた濾液を真空で濃縮した。粗生成物を予備ＳＦＣ（カラム、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ＳＦＣ、５×２５ｃｍ、５μｍ；移動相、ＣＯ２（５５％）、ＭＥＯＨ（０．２％ＤＥＡ）（４５％）；検出器、ＵＶ２２０ｎｍにより精製した。これにより、（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（ｐ−トリル）酢酸（１０ｇ、２４％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，２５℃）δ  ２．３２（３Ｈ，ｓ），２．６０（６Ｈ，ｓ），７．１９−７．２１（２Ｈ，ｄ），４．２２（１Ｈ，ｓ），７．３７−７．４０（２Ｈ，ｄ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１９４．
【０１８０】
中間体２７
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（３−メチルフェニル）酢酸
【化４９】
2018535235.tif 000052
窒素の不活性雰囲気下でパージし、維持した１Ｌの丸底フラスコ内に、２−アミノ−２−（４−メチルフェニル）酢酸（３６ｇ、２１７．９３ミリモル、１．００当量）、塩化水素（１２０ｍＬ、１Ｎ、２．６０モル、１２．００当量）、メタノール（１２０ｍＬ、２．９６モル、１３．６０当量）、パラホルムアルデヒド（Ｈ２Ｏ中３７％、１２０ｍＬ）および炭素上パラジウム（３６ｇ、３３８．２８ミリモル、１．６０当量）を入れた。得られた溶液を水素雰囲気（バルーン）下、室温で４８時間撹拌した。固体を濾過除去し、濾液を真空で濃縮した。得られた溶液をメタノール（１５００ｍＬ）で希釈した。溶液のｐＨ値をＭｅＯＮａにより６に調整した。固体を濾過除去し、得られた濾液を真空で濃縮した。粗生成物を予備ＳＦＣ（カラム、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ＳＦＣ、５×２５ｃｍ、５μｍ）；移動相、ＣＯ２（６０％）、ＭＥＯＨ（０．２％ＤＥＡ）（４０％）；検出器、ＵＶ２２０ｎｍにより精製した。これにより、（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−（３−メチルフェニル）酢酸（１０ｇ、２４％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ，２７℃）δ  ２．３７（３Ｈ，ｓ），２．６２（６Ｈ，ｓ），４．２０（１Ｈ，ｓ），７．２１−７．３８（４Ｈ，ｍ）；ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１９４．
【０１８１】
中間体２８
［２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセチル］オキシリチウム
【化５０】
2018535235.tif 000053
２−（アゼチジン−１−イル）−２−（３−メトキシフェニル）酢酸メチル（中間体２９、０．７６ｇ、３．２５ミリモル）および水酸化リチウム一水和物（０．１ｇ、２．４９ミリモル）を、メタノール（５ｍＬ）および水（２ｍＬ）の混合物に溶解した。反応物を室温で２時間撹拌し、次に低圧下で蒸発させ、週末にかけて真空で乾燥し、［２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセチル］オキシリチウムを淡黄色固体として得た（０．４８ｇ、９７％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １．７２（２Ｈ，ｐ）２．８０（２Ｈ，ｑ），２．９３（２Ｈ，ｑ），３．４４（１Ｈ，ｓ），７．１６（１Ｈ，ｄｄ），７．２４（１Ｈ，ｄｄｄ），７．３４（１Ｈ，ｄｔ）．ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ−Ｈ］−  ２９４．
【０１８２】
中間体２９
２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル
【化５１】
2018535235.tif 000054
ＭｅＣＮ（５ｍＬ）中、新しいアゼチジン（０．１２ｍＬ、１．８１ミリモル）およびトリエチルアミン（０．２８ｍＬ、１．９９ミリモル）の溶液を、ＭｅＣＮ（１２ｍＬ）中の２−ブロモ−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル（中間体３０、０．６ｇ、１．８１２ミリモル）に液滴添加し、Ｎ２下、氷槽内で冷却した。混合物を室温に温めておき、２時間撹拌した。反応混合物を蒸発させて乾燥し、残渣をＥｔＯＡｃおよび鹹水（各々、１００ｍＬ）間で分配した。有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発させ、２−（アゼチジン−１−イル）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチルを黄色ガム状物として得た（０．５１ｇ、９３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ２．１４（２Ｈ，ｑ）３．１７（２Ｈ，ｔｄ），３．２７（２Ｈ，ｔｄ），３．６９（３Ｈ，ｓ），４．００（１Ｈ，ｓ），７．２０−７．１４（１Ｈ，ｍ），７．３５（１Ｈ，ｄｄｄｄ），７．４３（１Ｈ，ｄｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋３０８．
【０１８３】
中間体３０
２−ブロモ−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル
【化５２】
2018535235.tif 000055
２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル（中間体３１、０．６５ｇ、２．５７８ミリモル）およびＮ−ブロモサクシニミド（４．０８ｇ、２２．９１９ミリモル）を丸底フラスコ中で秤量し、四塩化炭素（６ｍＬ）中、２，２−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）、（ＡＩＢＮ、０．０２ｇ、０．１２９ミリモル）を添加した。反応物を加熱し、４時間還流し、室温に冷却しておいた。沈殿物を濾過除去し、溶液をシリカで処理し、低圧下で蒸発させ、シクロヘキサン中、３０％ＥｔＯＡｃに漸増する１００％シクロヘキサンで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。適切な画分を低圧下で蒸発させ、２−ブロモ−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチルを淡黄色油として得た（１．１ｇ、１２９％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２５℃）δ  ３．８１（３Ｈ，ｓ），５．２９（１Ｈ，ｓ），７．１７−７．２４（１Ｈ，ｍ，），７．４６−７．５２（１Ｈ，ｍ），７．５３−７．５９（１Ｈ，ｍ）．
【０１８４】
中間体３１
２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル
【化５３】
2018535235.tif 000056
４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル酢酸（１．０ｇ、４．１９９ミリモル）をメタノール（１０ｍＬ）に懸濁し、硫酸（０．０７ｍＬ、０．８４ミリモル）で処理し、４５℃で２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却しておき、メタノールを低圧下で除去した。残渣を鹹水（２０ｍＬ）で希釈し、次にＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。結合したＥｔＯＡｃ抽出物を鹹水（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、濾過し、溶媒を低圧下で除去し、２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチルを得た（０．６５ｇ、６１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ３．６３（３Ｈ，ｓ），３．７８（２Ｈ，ｓ），７．３３−７．３９（１Ｈ，ｍ），７．４２−７．５３（２Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２５３．
【０１８５】
中間体３２
（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）酢酸
【化５４】
2018535235.tif 000057
５００ｍＬの３首丸底フラスコ内に、テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中、（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）酢酸エチル（中間体３３、１８ｇ、７７．４９ミリモル、１．００当量）の溶液および水（１００ｍＬ）中、ＬｉＯＨ（３．５６ｇ、１４８．６６ミリモル、２．００当量）の溶液を入れた。得られた溶液を２５℃で３時間撹拌した。得られた溶液を２×１００ｍＬのジクロロメタンで抽出し、有機層を結合させた。溶液のｐＨ値を水性塩化水素（１モル／Ｌ）により３〜４に調整した。得られた混合物を真空で濃縮した。得られた混合物を２×１００ｍＬのアセトンで洗浄した。これにより、１５ｇ（９５％）の（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）酢酸を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ２．４６（６Ｈ，ｓ），４．２８（１Ｈ，ｓ），７．６１−７．５８（１Ｈ，ｔ），７．７７−７．７５（１Ｈ，ｄ），７．８６−７．８１（２Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２０５．
【０１８６】
中間体３３
（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）酢酸エチル
【化５５】
2018535235.tif 000058
１０００ｍＬの３首丸底フラスコ内に、メタノール（２００ｍＬ）中（２Ｓ）−２−アミノ−２−（３−シアノフェニル）酢酸エチル（中間体３４、２０ｇ、９７．９３ミリモル、１．００当量）の溶液、水中ホルムアルデヒド（４４．１ｇ、１．４７モル、６．００当量）の溶液およびＮａＢＨ３ＣＮ（１８．２ｇ、２８９．６２ミリモル、３．００当量）を入れた。得られた溶液を２５℃で一晩撹拌した。得られた混合物を真空で濃縮した。残渣を、酢酸エチル／石油エーテル（１／１）を伴うシリカゲルカラムに適用した。これにより、１８ｇ（７９％）の（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−（ジメチルアミノ）酢酸エチルを白色固体として得た。
【０１８７】
中間体３４
（２Ｓ）−２−アミノ−２−（３−シアノフェニル）酢酸エチル
【化５６】
2018535235.tif 000059
１０００ｍＬの３首丸底フラスコ内に、１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）中、（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−［（２−メチルプロパン−２−スルフィニル）アミノ］酢酸エチル（中間体３５、４０．００ｇ、１２９．７０ミリモル、１．００当量）の溶液および１，４−ジオキサン（２００ｍＬ）中、塩化水素（ｇ）の溶液を入れた。得られた溶液を２５℃で一晩撹拌した。得られた混合物を真空で濃縮した。得られた混合物を１×１００ｍＬのＭＴＢＥで洗浄した。これにより、２０ｇ（７６％）の（２Ｓ）−２−アミノ−２−（３−シアノフェニル）酢酸エチルを淡黄色固体として得た。
【０１８８】
中間体３５
（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−［（２−メチルプロパン−２−スルフィニル）アミノ］酢酸塩
【化５７】
2018535235.tif 000060
２０００ｍＬの４首丸底フラスコ内に、テトラヒドロフラン（１０００ｍＬ）中、（２Ｚ）−２−（３−シアノフェニル）−２−［［（Ｓ）−２−メチルプロパン−２−スルフィニル］イミノ］酢酸エチル（中間体３６、５０ｇ、１６３．２０ミリモル、１．００当量）の溶液を入れた。これに続き、Ｌ−セレクトリド（１９６ｍＬ、９１７．６１ミリモル、１．２０当量）を−７８℃で撹拌しながら液滴添加した。得られた溶液を−７８℃で５時間撹拌した。次に反応物を、水性ＮＨ４Ｃｌ５００ｍＬの添加によりクエンチした。得られた溶液を３×３５０ｍＬの酢酸エチルで抽出し、有機層を結合させた。得られた混合物を１×２００ｍＬの鹹水で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で濃縮した。これにより、４０ｇ（７９％）の（２Ｓ）−２−（３−シアノフェニル）−２−［（２−メチルプロパン−２−スルフィニル）アミノ］酢酸エチルを黄色油として得た。
【０１８９】
中間体３６
（２Ｚ）−２−（３−シアノフェニル）−２−［［（Ｓ）−２−メチルプロパン−２−スルフィニル］イミノ］酢酸エチル
【化５８】
2018535235.tif 000061
３０００ｍＬの４首丸底フラスコ内に、テトラヒドロフラン（８００ｍＬ）中の２−（３−シアノフェニル）−２−オキソ酢酸エチル（中間体３７、８０ｇ、３９３．７１ミリモル、１．００当量）、（Ｓ）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（５２．５ｇ、４３３．１６ミリモル、１．１０当量）およびテトラエトキシチタン（１３４．７ｇ、５９０．５１ミリモル、１．５０当量）の溶液を入れた。得られた溶液を６５℃で一晩撹拌した。次に反応物を、水性ＮａＣｌ２００ｍＬの添加によりクエンチした。固体を濾過除去した。得られた溶液を３×２５０ｍＬの酢酸エチルで抽出し、有機層を結合させた。得られた混合物を１×２００ｍＬの鹹水で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムに適用し、酢酸エチル／石油エーテル（１／２）で溶出した。これにより、５０ｇ（４１％）の（２Ｚ）−２−（３−シアノフェニル）−２−［［（Ｓ）−２−メチルプロパン−２−スルフィニル］イミノ］酢酸エチルを黄色油として得た。
【０１９０】
中間体３７
２−（３−シアノフェニル）−２−オキソ酢酸エチル
【化５９】
2018535235.tif 000062
窒素の不活性雰囲気下でパージし、維持した５０００ｍＬの４首丸底フラスコ内に、テトラヒドロフラン（１０００ｍＬ）中、３−ブロモベンゾニトリル（２００ｇ、１．１０モル、１．００当量）の溶液を入れた。これに続き、ｉ−ＰｒＭｇＣｌ（６６３ｍＬ、５．３８モル、１．２０当量）を０℃で撹拌しながら液滴添加した。得られた溶液を０℃で２時間撹拌した。これに、シュウ酸ジエチル（１９３．６ｇ、１．３２モル、１．２０当量）を−４０℃で撹拌しながら液滴添加した。得られた溶液を−４０℃で１時間撹拌した。次に反応物を、ＨＣｌ８００ｍＬの添加によりクエンチした。得られた混合物を真空で濃縮した。溶液のｐＨ値を重炭酸ナトリウムにより８〜９に調整した。得られた溶液を３×５００ｍＬの酢酸エチルで抽出し、有機層を結合させ、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムに適用し、酢酸エチル／石油エーテル（１／１）で溶出した。これにより、８０ｇ（３６％）の２−（３−シアノフェニル）−２−オキソ酢酸エチルを黄色油として得た。
【０１９１】
中間体３８
（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化６０】
2018535235.tif 000063
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）および塩酸、（１Ｎ）（２ｍＬ）中、（２Ｒ）−２−アミノ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（１ｇ、４．２５ミリモル）、ホルムアルデヒド（１．２７７ｇ、４２．５２ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（０．０４５ｇ、０．４３ミリモル）を、圧力、水素雰囲気下、４０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をセライトを通して濾過した。固体をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄した。濾液を結合させ、蒸発させ、（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（１ｇ、８９％）を白色固体として得た。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６４．
【０１９２】
中間体３９
（２Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化６１】
2018535235.tif 000064
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）および塩酸、（１Ｎ）（２ｍＬ）中、（２Ｓ）−２−アミノ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（１ｇ、４．２５ミリモル）、ホルムアルデヒド（１．２７７ｇ、４２．５２ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（０．０４５ｇ、０．４３ミリモル）を、圧力、水素雰囲気下、４０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をセライトを通して濾過した。固体をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄した。濾液を結合させ、蒸発させ、（２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（１ｇ、８９％）を白色固体として得た。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６４．
【０１９３】
生物検定
本明細書に記載の化合物の効果を測定するため、以下のアッセイ：ａ）ＧＬＳ酵素効力アッセイ；ｂ）ＧＬＳ細胞効力アッセイ；ｃ）ＧＬＳ細胞増殖アッセイを用いた。アッセイの説明に際して、一般に次のことが言える。
ｉ．以下の略称：ＣＯ２＝二酸化炭素；ＤＭＥＭ＝ダルベッコ変法イーグル培地；ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド；ＥＤＴＡ＝エチレンジアミン四酢酸；ＥＧＴＡ＝エチレングリコールテトラ酢酸；ＦＣＳ＝  胎児子ウシ血清；ｈ＝時間；ＮＢＳ＝非結合表面；ＳＤＳ＝ドデシル硫酸ナトリウム；ＴＲＩＳ＝トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、を用いている。
ｉｉ．ＩＣ５０値を、Ｇｅｎｅｄａｔａのスマートフィッティングモデルを用いて算出した。ＩＣ５０値は、生物学的活性の５０％を阻害する試験化合物の濃度であった。
【０１９４】
アッセイａ）：ＧＬＳ酵素効力アッセイ
化合物がインビトロでＧＬＳ１に結合し、ＧＬＳ１の活性を阻害する能力を測定するため、グルタミン酸オキシダーゼ／ＡｍｐｌｅｘＲｅｄ共役アッセイを用いた。大腸菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）中で発現される６Ｈｉｓタグ化ＧＬＳタンパク質（アミノ酸６３〜６６９）を精製し、一定分量を−８０℃で貯蔵した。ＧＬＳ１を２×作業濃度に希釈し、室温でインキュベートし、四量体／二量体型が定常状態に達することを可能にした。アッセイ測定は、５０ｍＭトリス（ｐＨ７．８）、１００ｍＭ  ＮａＰＯ４、ｐＨ７．８、０．００１％ｖ／ｖのツイーン２０を含む緩衝液中で実施した。精製した組換えＧＬＳ１タンパク質をアッセイ緩衝液で１２ｎＭに希釈し、室温で３０分間予備インキュベートした。試験化合物を１００％ＤＭＳＯでの希釈により調製し、１２点濃度応答における正確な用量範囲および適切な容量（２．５〜６０ｎｌ）を得て、Ｌａｂｃｙｔｅ  Ｅｃｈｏ  ５５５アコースティックディスペンサーを用いて３８４ウェルマイクロアッセイプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒの製品コード７８４９００）に分注した。ＤＭＳＯ濃度を、ＤＭＳＯ溶液の戻し充填により２％で維持した。次に、希釈したＧＬＳ１タンパク質（１２ｎＭ）３μＬを、ＢｉｏＲａｐｔｒ自動ディスペンサー（Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて各ウェルに分注し、室温で１５分間インキュベートした。次に、アッセイ緩衝液で希釈した１００ｍＭのグルタミン３μＬを添加し、反応物を室温で６０分間インキュベートした。次に、１００ｍＭトリス（ｐＨ７．５）中、４５μＭの６−（２−ブロモエチニル）−２，３−ジメチル−キナゾリン−４−オン、７５μＭのＡｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ、０．３７５単位／ｍＬの西洋わさびペルオキシダーゼ、０．１２単位／ｍＬのグルタミン酸オキシダーゼの添加により反応を停止させた。暗所、室温で３０分後、５３５／５９０ｎｍの光学フィルターを用いてのＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎでプレートを読み取り、生データをＧｅｎｅｄａｔａを用いて分析し、ＩＣ５０値を得た。また、アッセイ成分に対する非特異的効果を除外するため、６Ｈｉｓタグ化ＧＬＳタンパク質およびグルタミンをアッセイ緩衝液と交換する場合のアッセイのアーチファクトバージョンを用いた。
【０１９５】
アッセイｂ）：ＧＬＳ細胞効力アッセイ
化合物を、細胞のＧＬＳ活性をそれらが阻害する可能性について、細胞のグルタミン酸枯渇を測定するＰＣ３共役アッセイの使用により評価した。試験化合物を１００％ＤＭＳＯでの希釈により調製し、１２点濃度応答における正確な用量範囲および適切な容量（５〜１２０ｎｌ）を得て、Ｌａｂｃｙｔｅ  Ｅｃｈｏ  ５５５アコースティックディスペンサーを用いて３８４ウェルマイクロアッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇの製品コード３７１２）に分注した。ＤＭＳＯ濃度を、ＤＭＳＯ溶液の戻し充填により０．３％で維持した。ＰＣ３細胞を、フェノールを含まないＤＭＥＭ、１０％透析ＦＣＳ、２ｍＭグルタミンで成長させ、トリプシン処理による分散後、分注した化合物を含有する３８４ウェルアッセイプレート内に直接的に増殖培地４０μｌ中、５．６×１０３個の細胞／ウェルで蒔いた。３７℃、５％ＣＯ２で６時間のインキュベーション後、増殖培地を吸引し、１０ｍＭトリス（ｐＨ７．４）、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＮａＦ、２０ｍＭ  Ｎａ４Ｐ２Ｏ７、２ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４、１％トリトンＸ１００、１０％グリセロール、０．１％ＳＤＳおよび０．５％デオキシコール酸塩を含有する緩衝液１５μｌに細胞を溶解した。次に、細胞可溶化物４μｌを３８４ウェルＮＢＳプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇの製品コード３５７５）に移し、３５μｌの２７．５μＭ  Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ、０．１３７５Ｕ／ｍＬの西洋わさびペルオキシダーゼ、０．０４４Ｕ／ｍＬのグルタミン酸オキシダーゼ、１００ｍＭトリス（ｐＨ７．５）を添加した。暗所、室温で３０分後、５３５／５９０ｎｍの光学フィルターを用いてＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎでプレートを読み取り、生データを専売ソフトウェアを用いて分析し、ＩＣ５０値を得た。
【０１９６】
アッセイｃ）：ＧＬＳ細胞増殖アッセイ
化合物が細胞成長を阻害する能力を、３８４ウェルプレートＮＣＩ−Ｈ１７０３細胞増殖アッセイを用いて測定した。ＮＣＩ−Ｈ１７０３細胞を、フェノールレッドを含まないＲＰＭＩ１６４０、１０％ＦＣＳおよび２ｍＭグルタミンで成長させ、クリアボトム３８４ウェルアッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇの製品コード３７１２）内に増殖培地４０μｌ中、７５０細胞／ウェルの密度で播種し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。試験化合物を１００％ＤＭＳＯでの希釈により調製し、１２点濃度応答における正確な用量範囲および適切な容量（５〜１２０ｎｌ）を得て、蒔いた細胞を含有するアッセイプレート内に直接的に分注した。ＤＭＳＯ濃度を、ＤＭＳＯ溶液の戻し充填により０．３％で維持した。プレートを３７℃、５％ＣＯ２で５日間インキュベートし、Ｓｙｔｏｘグリーンおよびサポニンを各最終濃度が２μＭおよび０．２５％になるまで添加し、分析前に６時間インキュベートした。４８８ｎｍの励起および放射用のＦＩＴＣフィルターセット（５００〜５３０ｎｍ）を用いてＡｃｕｍｅｎ  ｅＸ３（ＴＴＰ  Ｌａｂｔｅｃｈ）でプレートを読み取った。ＩＣ５０値を、ＧｅｎｅＤａｔａソフトウェア分析を用いて、０日目成長の最大阻害に対するカーブフィッティングを行うことにより算出した。
【０１９７】
アッセイａ）〜ｃ）からの結果を表１に示す。
【０１９８】
【表２】
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【国際調査報告】
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