(57)【要約】  院内疾患、例えば、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる疾患を予防または治療する方法が提供される。本方法は、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶに特異的に結合する規定用量の二重特異的抗体を感受性ヒトに投与することを含む。
2018535227.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
感受性ヒト対象における院内感染を予防または治療する方法であって、約５００〜約３０００ｍｇの、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶに特異的に結合する二重特異的抗体を前記対象に投与することと、投与日から２１日間にわたり症状について前記対象をモニタリングすることとを含み、投与２１日後、前記対象は、無症状のままであるか、またはプラセボを投与された感受性ヒト対象のコホートに対して重症度が低い症状を呈し、
前記二重特異的抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）：ＨＣＤＲ１−Ｐｓｌ、ＨＣＤＲ２−Ｐｓｌ、ＨＣＤＲ３−Ｐｓｌ、ＬＣＤＲ１−Ｐｓｌ、ＬＣＤＲ２−Ｐｓｌ、およびＬＣＤＲ３−Ｐｓｌのセットであって、ＨＣＤＲ１−Ｐｓｌは、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２−Ｐｓｌは、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３−Ｐｓｌは、配列番号１２のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１−Ｐｓｌは、配列番号１３のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２−Ｐｓｌは、配列番号１４のアミノ酸配列を有し、およびＬＣＤＲ３−Ｐｓｌは、配列番号１５のアミノ酸配列を有する、セットを含む緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）Ｐｓｌに特異的に結合する結合ドメインと、ＣＤＲ：ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶのセットであって、ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶは、配列番号２のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶは、配列番号３のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶは、配列番号４のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶは、配列番号６のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶは、配列番号７のアミノ酸配列を有し、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶは、配列番号８のアミノ酸配列を有する、セットを含む緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｃｒＶに特異的に結合する結合ドメインとを含む、方法。
【請求項２】
前記院内感染は、肺炎、菌血症、骨感染、関節感染、皮膚感染、火傷感染、創傷感染、またはそれらの任意の組合せである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記院内感染は、肺炎である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記肺炎は、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
約１５００ｍｇまたは約３０００ｍｇの前記二重特異的抗体が投与される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ＣＨ１は、配列番号１６のアミノ酸配列を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
Ｌ１およびＬ２は、同一であるかまたは異なっており、独立して、（ａ）［ＧＧＧＧＳ］ｎ（式中、ｎは、０、１、２、３、４、または５である）（配列番号２３）、（ｂ）［ＧＧＧＧ］ｎ（式中、ｎは、０、１、２、３、４、または５である）（配列番号２４）、または（ａ）および（ｂ）の組合せを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
Ｈ１は、アミノ酸配列ＥＰＫＳＣ（配列番号１７）を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
Ｈ２は、アミノ酸配列ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰ（配列番号１８）を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
ＣＨ２−ＣＨ３は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
ＣＨ２−ＣＨ３は、配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記重鎖は、配列番号２１のアミノ酸配列を含み、および前記軽鎖は、配列番号２２のアミノ酸配列を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記約５００〜約３０００ｍｇの前記二重特異的抗体は、単回静脈内注入として投与される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記投与時において、前記対象は、気道中で緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成される、請求項１〜１３［０００９］のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記対象は、投与時に肺炎症状を有さない、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象は、下気道中で緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成される、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記対象の気道は、前記二重特異的抗体の投与の１、２、３、または４日前に緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成される、請求項１４〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
コロニー形成は、前記二重特異的抗体の投与前の３６時間以内における気管吸引液中の緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の検出によって計測される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記対象の気道は、前記二重特異的抗体の投与時に黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）によってさらにコロニー形成される、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記対象は、入院予定であるか、現在入院中であるか、最近入院していたか、人工呼吸器を装着しているか、またはそれらの組合せである、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記対象は、集中治療室（ＩＣＵ）内で入院している、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記対象は、挿管されている、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記対象は、気管内または経鼻気管チューブを介して人工呼吸されている、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記投与は、人工呼吸中の肺炎のリスクを低減させる、請求項２０〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記投与は、人工呼吸がもはや要求されなくなった後の肺炎のリスクを低減させる、請求項２０〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
１５００ｍｇの前記二重特異的抗体が投与される、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
３０００ｍｇの前記二重特異的抗体が投与される、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記対象は、前記二重特異的抗体の投与前に前記対象がコロニー形成される緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株に対して活性な抗生物質を受けていない、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
抗生物質を前記対象に投与することをさらに含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記対象がコロニー形成される前記緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株は、前記抗生物質に感受性である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記対象がコロニー形成される前記緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株は、前記抗生物質に耐性であるかまたは部分的に耐性である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記抗生物質は、前記二重特異的抗体の投与前に、前記二重特異的抗体の投与と同時に、前記二重特異的抗体の投与後に、またはそれらの任意の組合せで投与される、請求項２９〜１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記対象は、前記二重特異的抗体の投与の２１日後まで少なくとも約１μｇ／ｍｌの前記二重特異的抗体の血清濃度を維持する、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記対象は、前記二重特異的抗体の投与の２１日後まで少なくとも５．３μｇ／ｍｌの前記二重特異的抗体の血清濃度を維持する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記対象は、前記二重特異的抗体の投与の約７日後、約２１日後、または約２８日後まで少なくとも１．７μｇ／ｍＬの前記二重特異的抗体の血清濃度を維持する、請求項３３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出され、参照により全体として本明細書に組み込まれる配列表を含有する。前記ＡＳＣＩＩコピーは、２０１６年１１月１７日に作成され、ＰＳＥＵＤ−２００−ＷＯ−ＰＣＴ＿ＳＬ．ｔｘｔと命名され、サイズが２２，４１５バイトである。
【背景技術】
【０００２】
緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は重要な院内病原菌であり、肺炎はその最も懸念される兆候の１つである。人工呼吸は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる院内肺炎について最も重要なリスク因子であり、換気の継続時間とともに累積リスクが増加する（非特許文献１）。ある研究において、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は、非人工呼吸患者により集中治療室（ＩＣＵ）内で感染された微生物学的に確定診断された肺炎の症例の１３％を占め、人工呼吸患者の症例の２４％を占めた（非特許文献２）。世界的な疫学的データの観点で、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は、人工呼吸器関連肺炎（ＶＡＰ、非特許文献３）の約２７％を引き起こした。緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）による気道コロニー形成は、別の重要なリスク因子である（非特許文献４）。抗生物質の存在にかかわらず、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）に起因する肺炎、特にＶＡＰは、顕著な死亡率および罹患率、ＩＣＵおよび入院の期間の増加、ならびに多大な経済的負担を伴うままである。
【０００３】
ＩＣＵの患者は重度の肺炎感染を発症するリスクがあり、人工呼吸はＩＣＵにおける肺炎についてのリスクを増加させる。緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は、入院（５５．４日間対７．２日間）、ＩＣＵ入院（１４．８日間対１．１日間）、および人工呼吸のより大きい必要性（６２．３％対７．４％）、ならびに患者の死亡率（２０．２％対３．１％）の増加に有意に寄与するＩＣＵ肺炎の主因である。（非特許文献５）。さらに、多剤耐性により、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の管理が複雑になっている。制限された抗菌治療選択で、新たなアプローチの考慮、例えば、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の予防のための免疫学的予防は、重要で満たされていない必要性に対処する。
【０００４】
ＭＥＤＩ３９０２は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の表面上のＰｃｒＶタンパク質およびＰｓｌエキソポリサッカライドの両方に選択的に結合する二価二重特異的ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）カッパモノクローナル抗体（ｍＡｂ）である。薬理学的研究は、ＭＥＤＩ３９０２が３つの区別される作用機序：緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の抗細胞毒性、オプソニン食作用および傷害作用、ならびに細胞へのその付着阻害を媒介し得ることを実証している。インタクトな緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）上のＰｃｒＶへの結合は、宿主細胞に対する３型分泌（Ｔ３Ｓ）インジェクチソーム媒介細胞毒性および損傷を妨害する。Ｐｓｌへの結合は、宿主エフェクター細胞による緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）のオプソニン食作用傷害作用（ｏｐｓｏｎｏｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ  ｋｉｌｌｉｎｇ）（ＯＰＫ）を媒介し、宿主上皮細胞への緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の付着を阻害する（非特許文献６）。
【０００５】
ＭＥＤＩ３９０２は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ネズミ感染モデルにおいて高度に保護性であった。例えば、ＰＣＴ公開の特許文献１、ＰＣＴ公開の特許文献２、ＰＣＴ出願の特許文献３、およびＰＣＴ出願の特許文献４を参照されたい。さらに、ＭＥＤＩ３９０２は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎に対する抗生物質療法と、抗生物質感受性および抗生物質耐性緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の両方に対する区別される抗生物質クラスとの相乗的向上を提供した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２０１３／０７０６１５号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２０１４／０７４５２８号パンフレット
【特許文献３】ＰＣＴ／米国特許出願公開第２０１５／０２９０６３号明細書
【特許文献４】ＰＣＴ／米国特許出願公開第２０１５／０３６５７６号明細書
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｚａｈａｒ，ＪＲ，ｅｔ  ａｌ．Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．２００９  Ｓｅｐ；３７（９）：２５４５−５１
【非特許文献２】Ｅｓｐｅｒａｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ，Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．２０１０  Ｄｅｃ  １５；１８２（１２）：１５３３−９
【非特許文献３】Ｊｏｎｅｓ，Ｃｌｉｎ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．２０１０  Ａｕｇ  １；５１  Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ８１−７
【非特許文献４】Ｒｅｈｍ  ａｎｄ  Ｋｏｌｌｅｆ，Ｐｏｓｔｅｒ  ＃３６７．４３ｒｄ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｃａｒｅ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ，Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（ＳＣＣＭ）；９−１３  Ｊａｎｕａｒｙ  ２０１４，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ  ＣＡ，ＵＳＡ
【非特許文献５】Ｋｙａｗ  ＭＨ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．（２００５）１９２（３）：３７７−３８６
【非特許文献６】ＤｉＧｉａｎｄｏｍｅｎｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．２０１２  Ｊｕｌ  ２：２０９（７）：１２７３−８７
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は、感受性ヒト対象における院内感染を予防または治療する方法であって、約５００〜約３０００ｍｇ、例えば、約５００、６００、７００、７５０、１０００、１５００または約３０００ｍｇの、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶに特異的に結合する二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）を対象に投与することと、投与日から２１日間にわたり症状について対象をモニタリングすることとを含む方法を提供する。本方法によれば、投与２１日後、対象は、無症状であり得、またはプラセボを投与された感受性ヒト対象のコホートに対して重症度が低い症状を呈し得る。ある態様において、院内感染は、肺炎、例えば、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎、菌血症、骨感染、関節感染、皮膚感染、火傷感染、創傷感染、またはそれらの任意の組合せであり得る。
【０００９】
本開示は、感受性ヒト対象における肺炎、例えば、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎を予防または治療する方法であって、約５００〜約３０００ｍｇ、例えば、約５００、６００、７００、７５０、１０００、１５００または約３０００ｍｇの、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶに特異的に結合する二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）を対象に投与することと、投与日から２１日間にわたり肺炎症状について対象をモニタリングすることとを含む方法をさらに提供する。本方法によれば、少なくとも投与２１日後、対象は肺炎について無症状であり得、またはプラセボを投与された感受性ヒト対象のコホートに対して重症度が低い症状を呈し得る。
【００１０】
一部の実施形態において、二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）の血清標的レベルは、少なくとも約１μｇ／ｍＬ、少なくとも約２μｇ／ｍＬ、少なくとも約３μｇ／ｍＬ、少なくとも約４μｇ／ｍＬ、または少なくとも約５μｇ／ｍＬである。他の実施形態において、二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）の血清標的レベルは、少なくとも約１．７μｇ／ｍＬである。さらなる実施形態において、二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）の血清標的レベルは、少なくとも約５．３μｇ／ｍＬである。一部の実施形態において、投与は、二重特異的抗体の投与２１日後まで少なくとも１μｇ／ｍＬ、少なくとも約２μｇ／ｍＬ、少なくとも約３μｇ／ｍＬ、少なくとも約４μｇ／ｍＬ、または少なくとも約５μｇ／ｍＬの二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）の血清レベルを産生する。他の実施形態において、投与は、二重特異的抗体の投与２１日後まで少なくとも１．７μｇ／ｍＬの二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）の血清レベルを産生する。さらなる実施形態において、二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）の血清標的レベルは、少なくとも約５．３μｇ／ｍＬである。
【００１１】
一部の実施形態において、感受性ヒト対象における院内感染を予防または治療する方法は、相補性決定領域（ＣＤＲ）：ＨＣＤＲ１−Ｐｓｌ、ＨＣＤＲ２−Ｐｓｌ、ＨＣＤＲ３−Ｐｓｌ、ＬＣＤＲ１−Ｐｓｌ、ＬＣＤＲ２−Ｐｓｌ、およびＬＣＤＲ３−Ｐｓｌのセットであって、ＨＣＤＲ１−Ｐｓｌは、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２−Ｐｓｌは、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３−Ｐｓｌは、配列番号１２のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１−Ｐｓｌは、配列番号１３のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２−Ｐｓｌは、配列番号１４のアミノ酸配列を有し、およびＬＣＤＲ３−Ｐｓｌは、配列番号１５のアミノ酸配列を有する、セットを含む緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）Ｐｓｌに特異的に結合する結合ドメインと、ＣＤＲ：ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶのセットであって、ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶは、配列番号２のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶは、配列番号３のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶは、配列番号４のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶは、配列番号６のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶは、配列番号７のアミノ酸配列を有し、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶは、配列番号８のアミノ酸配列を有する、セットを含む緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｃｒＶに特異的に結合する結合ドメインとを含む二重特異的抗体を投与することを含む。ある態様において、二重特異的抗体は、重鎖および軽鎖を有する。重鎖は、式ＶＨ−ＣＨ１−Ｈ１−Ｌ１−Ｓ−Ｌ２−Ｈ２−ＣＨ２−ＣＨ３（式中、ＶＨは、配列番号１のアミノ酸配列を含む抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｃｒＶ重鎖可変ドメインであり、ＣＨ１は、重鎖定常領域ドメイン−１であり、Ｈ１は、第１の重鎖ヒンジ領域断片であり、Ｌ１は、第１のリンカーであり、Ｓは、配列番号９のアミノ酸配列を含む抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）Ｐｓｌ  ＳｃＦｖ分子であり、Ｌ２は、第２のリンカーであり、Ｈ２は、第２の重鎖ヒンジ領域断片であり、ＣＨ２は、重鎖定常領域ドメイン−２であり、ＣＨ３は、重鎖定常領域ドメイン−３である）を含む。軽鎖は、式ＶＬ−ＣＬ（式中、ＶＬは、配列番号５のアミノ酸配列を含む抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｃｒＶ軽鎖可変ドメインであり、ＣＬは、抗体軽鎖カッパ定常領域または抗体軽鎖ラムダ領域である）を含む。ある態様において、ＣＨ１は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み得る。ある態様において、Ｌ１およびＬ２は、同一でも異なっていてもよく、独立して、（ａ）［ＧＧＧＧＳ］ｎ（式中、ｎは、０、１、２、３、４、または５である）（配列番号２３）、（ｂ）［ＧＧＧＧ］ｎ（式中、ｎは、０、１、２、３、４、または５である）（配列番号２４）、または（ａ）および（ｂ）の組合せを含み得る。ある態様において、Ｈ１は、アミノ酸配列ＥＰＫＳＣ（配列番号１７）を含み得る。ある態様において、Ｈ２は、アミノ酸配列ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰ（配列番号１８）を含み得る。ある態様において、ＣＨ２−ＣＨ３は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み得る。���る態様において、ＣＨ２−ＣＨ３は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み得る。ある態様において、二重特異的抗体の重鎖は、配列番号２１のアミノ酸配列を含み得、および軽鎖は、配列番号２２のアミノ酸配列を含む。
【００１２】
本明細書において提供される方法によれば、二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）は、単回静脈（ＩＶ）注入として投与することができる。
【００１３】
本明細書において提供される方法によれば、二重特異的抗体の投与時において、対象は、気道、例えば、下気道中で緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成されてよい。ある態様において、対象は、投与時に肺炎症状を有さない。ある態様において、対象の気道は、二重特異的抗体の投与の１、２、３、または４日前に緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成される。コロニー形成は、例えば、二重特異的抗体の投与前の３６時間以内における気管吸引液中の緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の検出によって計測することができる。ある態様において、対象の気道は、二重特異的抗体の投与時に黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）によってさらにコロニー形成されてよい。
【００１４】
ある態様において、対象は、入院予定であるか、例えば、集中治療室（ＩＣＵ）内で現在入院しているか、最近入院していたか、人工呼吸器を装着しており、例えば、気管内チューブもしくは経鼻気管チューブが挿管されているかもしくはそれらを介して換気しているか、またはそれらの任意の組合せである。本明細書において提供される方法によれば、二重特異的抗体の投与は、肺炎のリスクを低減させ得る一方、人工呼吸中または人工呼吸後にもはや要求されない。
【００１５】
ある態様において、肺炎の微生物学的確定診断としては、培養による緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の呼吸器検体、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の血液培養物、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の胸膜液吸引物もしくは肺組織培養物、またはそれらの任意の組合せを挙げることができる。
【００１６】
ある態様において、対象は、二重特異的抗体（例えば、ＭＥＤＩ３９０２）の投与前に対象がコロニー形成される緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株に対して活性とみなされる抗生物質を受けていない。別の態様において、本方法は、抗生物質を対象に投与することをさらに含み得る。ある態様において、対象がコロニー形成される緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株は、抗生物質に感受性であり得、または抗生物質に耐性であるかもしくは部分的に耐性であり得る。抗生物質を投与する場合、それは、二重特異的抗体の投与前に、二重特異的抗体の投与と同時に、二重特異的抗体の投与後に、またはそれらの任意の組合せで投与することができる。
【００１７】
ある態様において、本方法は、抗ヒスタミン剤を対象に投与することをさらに含み得る。抗ヒスタミン剤を投与する場合、それは、二重特異的抗体の投与前に、二重特異的抗体の投与と同時に、二重特異的抗体の投与後に、またはそれらの任意の組合せで投与することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】第ＩＩｂ相治験プロトコルのフロー図を提供する。ＡＤＡ＝抗薬物抗体、ＩＶ＝静脈内、Ｎ＝対象数、ＰＫ＝薬物動態。有効性は、投与２１日後まで評価し（２２日目）、安全性、ＰＫおよびＡＤＡは、投与４９日後まで評価する（５０日目）。試料サイズは、対象の約５０％を登録し、全集団における事象率および／または損耗率の盲検評価に基づき投与２１日後まで追跡した後に変更することができる。
【図２】細菌病原体に指向されるモノクローナル抗体（例えば、ＭＥＤＩ４８９３）についてＩＣＵ患者におけるクリアランス増加の観察に基づき、ＭＥＤＩ３９０２の単回投与後に人工呼吸されているＩＣＵ患者について薬物動態をモデリングした。（Ａ）１５００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２の単回投与は、約１μｇ／ｍＬにおける血清曝露を＞９０％の対象において≧２１日間維持すると予測される。（Ｂ）３０００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２の単回投与は、約１．７μｇ／ｍＬにおける血清曝露を＞９０％の対象において≧２１日間維持すると予測される。
【図３】６２０６急性肺炎モデル系におけるＭＥＤＩ３９０２処理マウスのインビボ生存試験である。マウス（ｎ＝６）をアイソタイプ対照ＩｇＧ（陰性対照、０．７５ｍｇ／ｋｇ）またはＭＥＤＩ３９０２により３つの用量：１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、または０．２ｍｇ／ｋｇにおいて処理した。処理２４時間後、全てのマウスに約２×１０５ＣＦＵ／動物の緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株６２０６を感染させた。全てのマウスを１６８時間モニタリングした。対照マウスの全ては、感染後約１２０時間までに感染により死亡した。ＭＥＤＩ３９０２処理動物の全ては生存した。結果をカプランマイヤー生存曲線として表す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
略語
本開示において使用される略語を表１に列記する。
【００２０】
【表１】
2018535227.tif 000003
【００２１】
【表２】
2018535227.tif 000004
【００２２】
定義
用語「１つの（ａ）」または「１つの（ａｎ）」実体は、その実体の１つ以上を指すことに留意すべきであり、例えば、「結合分子」は、１つ以上の結合分子を表すと理解される。したがって、用語「１つの（ａ）」（または「１つの（ａｎ）」）、「１つ以上」および「少なくとも１つ」は、本明細書において互換的に使用することができる。
【００２３】
さらに、本明細書において使用される「および／または」は、２つの具体的な特徴部または構成要素の、その他方を伴うまたは伴わないそれぞれの具体的な開示として解釈すべきである。したがって、本明細書における「Ａおよび／またはＢ」のような語句において使用される用語および／または」は、「ＡおよびＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」（単独）、および「Ｂ」（単独）を含むものとする。同様に、「Ａ、Ｂ、および／またはＣ」のような語句において使用される用語「および／または」は、以下の態様：Ａ、Ｂ、およびＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；ＡおよびＣ；ＡおよびＢ；ＢおよびＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；およびＣ（単独）のそれぞれを包含するものとする。
【００２４】
特に定義のない限り、本明細書において使用される技術および科学用語は、本開示が関連する技術分野の当業者により一般に理解されるものと同一の意味を有する。例えば、Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｕｏ，Ｐｅｉ−Ｓｈｏｗ，２ｎｄ  ｅｄ．，２００２，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ；Ｔｈｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ  ｅｄ．，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；およびＯｘｆｏｒｄ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  Ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓは、本開示において使用される用語の多くの一般的辞書を当業者に提供する。
【００２５】
単位、接頭辞、および記号は、それらの国際単位（ＳＩ）により承認された形式で示される。数値範囲は、その範囲を定義する数字を示す。特に示されない限り、アミノ酸配列は、左から右へアミノからカルボキシ方向で記述される。本明細書において提供される見出しは、本明細書を参照することにより全体として把握され得る種々の態様も本開示の態様も限定するものではない。したがって、直後に定義される用語は、本明細書を参照することにより全体としてより完全に定義される。
【００２６】
ある結合分子、またはその抗原結合断片、バリアント、もしくは誘導体が本明細書に開示される。特に全長サイズ抗体、例えば天然に生じる抗体を指さない場合、用語「結合分子」は、全長サイズ抗体およびそのような抗体の抗原結合断片、バリアント、アナログ、または誘導体、例えば、天然に生じる抗体または免疫グロブリン分子またはエンジニアリングされた抗体分子または抗体分子と同様の様式で抗原に結合する断片を包含する。
【００２７】
本明細書において使用される用語「結合分子」は、最も広い意味で、抗原決定基に特異的に結合する分子を指す。本明細書においてさらに記載される結合分子は、１つ以上の「結合ドメイン」を含み得る。本明細書において使用される「結合ドメイン」は、所与の抗原決定基、またはエピトープに特異的に結合し得る二次元もしくは三次元ポリペプチド構造である。結合分子の非限定的な例は、異なる抗原決定基またはエピトープに特異的に結合する少なくとも２つの区別される結合ドメインを含む二重特異的抗体またはその断片である。ある態様において、本明細書において提供される二重特異的抗体は、第１のエピトープに結合する第１の結合ドメイン、および第２のエピトープに結合する第２の結合ドメインを含むと記述することができる。
【００２８】
用語「抗体」および「免疫グロブリン」は、本明細書において互換的に使用することができる。抗体（または本明細書に開示のその断片、バリアント、もしくは誘導体は、少なくとも重鎖の可変ドメインならびに少なくとも重鎖および軽鎖の可変ドメインを含む。脊椎動物系における基本的な免疫グロブリン構造は、比較的十分に理解されている。例えば、Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）を参照されたい。
【００２９】
以下により詳細に考察されるとおり、用語「免疫グロブリン」は、生化学的に区別することができる種々の広いクラスのポリペプチドを含む。当業者は、重鎖がガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロン（γ、μ、α、δ、ε）として分類され、それらは一部のサブクラス（例えば、γ１〜γ４）を有することを認識する。抗体の「クラス」をＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ、またはＩｇＥとしてそれぞれ決定するのはこの鎖の性質である。免疫グロブリンサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１などは、十分に特性決定されており、機能的特殊化を付与することが公知である。これらのクラスおよびアイソタイプのそれぞれの改変バージョンは、本開示に照らして当業者に容易に認識可能であり、したがって本開示の範囲内である。
【００３０】
軽鎖は、カッパまたはラムダ（κ、λ）のいずれかに分類される。それぞれの重鎖クラスは、カッパまたはラムダ軽鎖と結合していてよい。一般に、軽鎖および重鎖は、互いに共有結合しており、免疫グロブリンがハイブリドーマ、Ｂ細胞または遺伝子エンジニアリングされた宿主細胞のいずれかにより生成された場合、２つの重鎖の「テール」部分が共有ジスルフィド結合または非共有結合により互いに結合している。重鎖において、アミノ酸配列は、Ｙ形状のフォーク型末端におけるＮ末端からそれぞれの鎖の下方部におけるＣ末端に及ぶ。
【００３１】
軽鎖および重鎖の両方は、構造および機能ホモロジーの領域に分割される。用語「定常」および「可変」は、機能的に使用される。これに関して、軽（ＶＬ）鎖および重（ＶＨ）鎖部分の両方の可変ドメインが抗原認識および特異性を決定することが認識される。逆に、軽鎖（ＣＬ）および重鎖（ＣＨ１、ＣＨ２またはＣＨ３）の定常ドメインは、重要な生物学的特性、例えば、分泌、経胎盤移動、Ｆｃ受容体結合、補体結合などを付与する。慣習により、定常領域ドメインの番号付与は、それらが抗体の抗原結合部位またはアミノ末端からより遠くなるにつれて増加する。Ｎ末端部分は可変領域であり、Ｃ末端部分は定常領域であり、ＣＨ３およびＣＬドメインは、実際には、重鎖および軽鎖のカルボキシ末端をそれぞれ含む。
【００３２】
上記のとおり、可変領域は、結合分子が抗原上のエピトープを選択的に認識し、それに特異的に結合することを可能とする。すなわち、結合分子、例えば、抗体のＶＬドメインおよびＶＨドメイン、または相補性決定領域（ＣＤＲ）のサブセットは、組み合わさって３次元抗原結合部位を定義する可変領域を形成する。この４元結合分子構造は、Ｙのそれぞれのアームの末端に存在する抗原結合部位を形成する。より具体的には、抗原結合部位は、ＶＨおよびＶＬ鎖のそれぞれの３つのＣＤＲにより定義される。
【００３３】
天然に生じる抗体において、それぞれの抗原結合ドメイン中に存在する６つの「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」は、抗体が水性環境中でその３次元形状を取るため、抗原結合ドメインを形成するように特異的に位置しているアミノ酸の短い不連続配列である。抗原結合ドメイン中のアミノ酸の残部は、「フレームワーク」領域と称され、より小さい分子内変動性を示す。フレームワーク領域は、概して、β−シート立体構造を採用し、ＣＤＲは、このβ−シート構造を接続し、一部の場合、その一部を形成するループを形成する。したがって、フレームワーク領域は、鎖内非共有相互作用による正確な配向におけるＣＤＲの位置決めを提供する足場を形成するように作用する。位置決めされたＣＤＲにより形成された抗原結合ドメインは、免疫反応抗原上のエピトープに対する表面相補性を定義する。この相補性表面は、抗体のそのコグネートエピトープへの非共有結合を促進する。ＣＤＲおよびフレームワーク領域をそれぞれ含むアミノ酸は、任意の所与の重鎖または軽鎖可変領域について当業者により容易に同定することができる。それというのも、それらは既に定義されているためである（参照により全体として本明細書に組み込まれる“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，”Ｋａｂａｔ，Ｅ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，（１９８３）；およびＣｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１−９１７（１９８７）を参照されたい）。
【００３４】
抗体もしくは抗原結合断片、それらのバリアント、または誘導体としては、限定されるものではないが、モノクローナル、ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、および多重特異的抗体、例えば、二重特異的抗体が挙げられる。ｓｃＦｖ分子は、当技術分野において公知であり、例えば、米国特許第５，８９２，０１９号明細書に記載されている。本開示により包含される免疫グロブリンまたは抗体分子は、任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）またはサブクラスの免疫グロブリン分子のものであり得る。
【００３５】
「特異的に結合する」は、一般に、結合分子、例えば、二重特異的抗体またはその断片、バリアント、もしくは誘導体が、抗原結合ドメインを介してエピトープに結合すること、および結合が抗原結合ドメインとエピトープとの間の一部の相補性を必要とすることを意味する。本明細書において提供される結合分子は、同一でも異なっていてもよく、同一のエピトープまたは２つ以上の異なるエピトープに結合し得る１、２、３、４つ以上の結合ドメインを含有し得る。この定義によれば、結合分子は、それがその抗原結合ドメインを介してランダムの無関連なエピトープに結合するよりも容易にそのエピトープに結合する場合、エピトープに「特異的に結合する」と言われる。用語「特異性」は、本明細書において、ある結合分子があるエピトープに結合する相対親和性を特定するために使用される。例えば、結合分子「Ａ」は、所与のエピトープについて結合分子「Ｂ」よりも高い特異性を有するとみなすことができ、または結合分子「Ａ」は、それが関連エピトープ「Ｄ」について有するよりも高い特異性でエピトープ「Ｃ」に結合すると言うことができる。
【００３６】
単鎖抗体を含む抗体断片は、可変領域を単独でまたは以下のものの全部もしくは一部との組合せで含み得る：ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン。可変領域とヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメインとの任意の組合せも含む抗原結合断片も含まれる。本明細書に開示の抗体またはその抗原結合断片は、任意の動物起源、例として鳥類および哺乳動物からのものであり得る。抗体は、ヒト、ネズミ、ロバ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ラマ、ウマ、またはニワトリ抗体であり得る。本明細書において使用される「ヒト」抗体には、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有する抗体が含まれ、下記のおよび例えばＫｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉ  ｅｔ  ａｌ．による米国特許第５，９３９，５９８号明細書に記載のヒト免疫グロブリンライブラリーから、または１つもしくは複数のヒト免疫グロブリンについてトランスジェニックであり、内因性免疫グロブリンを発現しない動物から単離された抗体が含まれる。
【００３７】
本明細書において使用される用語「軽鎖部分」には、免疫グロブリン軽鎖に由来するアミノ酸配列が含まれる。軽鎖部分は、ＶＬまたはＣＬドメインの少なくとも１つを含む。
【００３８】
本明細書において使用される用語「多重特異的抗体」または「二重特異的抗体」は、単一抗体分子内の２つ以上の異なる抗原またはエピトープに特異的な結合ドメインを有する抗体を指す。カノニカル抗体構造に加え、２つの結合特異的を有する他の分子を構築し得ることが認識される。二重特異的抗体による抗原結合は同時または連続的であり得ることがさらに認識される。トリオーマおよびハイブリッドハイブリドーマは、二重特異的抗体を分泌し得る細胞系の２つの例である。二重特異的抗体は、組換え手段により構築することもできる。（Ｓｔｒｏｅｈｌｅｉｎ  ａｎｄ  Ｈｅｉｓｓ，Ｆｕｔｕｒｅ  Ｏｎｃｏｌ．６：１３８７−９４（２０１０）；Ｍａｂｒｙ  ａｎｄ  Ｓｎａｖｅｌｙ，ＩＤｒｕｇｓ．１３：５４３−９（２０１０））。
【００３９】
本明細書において使用される用語「エンジニアリングされた抗体」は、重鎖および軽鎖のいずれかまたは両方の可変ドメインが、既知の特異性の抗体からの１つまたは複数のＣＤＲの少なくとも部分的な置換により、ならびに必要により、部分的なフレームワーク領域置換および配列変化により変化した抗体を指す。ＣＤＲはフレームワーク領域が由来する抗体と同一のクラスまたはさらにはサブクラスの抗体に由来し得るが、ＣＤＲは異なるクラスの抗体、好ましくは、異なる種からの抗体に由来することが想定される。既知の特異性の非ヒト抗体からの１つまたは複数の「ドナー」ＣＤＲがヒト重鎖または軽鎖フレームワーク領域中にグラフトされたエンジニアリングされた抗体は、本明細書において「ヒト化抗体」と称される。ＣＤＲの全てをドナー可変領域からの完全なＣＤＲにより置き換えてある可変ドメインの抗原結合能を別のものに移すことは必要でないことがある。むしろ、標的結合部位の活性を維持するために必要な残基を移すことのみが必要であることがある。例えば、米国特許第５，５８５，０８９号明細書、米国特許第５，６９３，７６１号明細書、米国特許第５，６９３，７６２号明細書、および米国特許第６，１８０，３７０号明細書に記載の説明を考慮すると、それは定型実験の実施により、または機能的エンジニアリングもしくはヒト化抗体を得るための試行錯誤試験により、当業者の能力の十分範囲内である。
【００４０】
本明細書において使用される用語「治療する」または「治療」は、治療的治療を指し、目的は、感染、例えば、肺炎、菌血症、腹膜炎、敗血症、および／または膿瘍と臨床診断された対象における感染原因物質の細菌負荷を消散または低減させることである。「治療」は、治療を受けていない場合に予測される生存と比較して生存を延長させることも意味し得る。治療が必要とされる者としては、既に感染、病態、もしくは障害を有する者、および病態もしくは障害を有する傾向がある者、または例えば、細菌感染、例えば、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染に感受性の火傷患者もしくは免疫抑制患者において病態もしくは障害を予防すべき者が挙げられる。
【００４１】
本明細書において使用される場合、用語「予防する」または「軽減する」は、目的が含む所望な生理学的変化、感染、または障害を予防または遅滞（縮減）させることである療法的治療および防止的または予防的措置の両方を指す。利益または所望の臨床結果には、限定されるものではないが、検出可能か検出不能かにかかわらず、症状の軽減、疾患の程度の縮小、疾患の状態の安定化（すなわち、悪化しない）、対象における感染原因物質、例えば緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）のクリアランスまたは低減、疾患進行の遅延または遅滞、疾患状態の改善または緩和、および寛解（一部または完全を問わない）が含まれる。
【００４２】
本明細書において使用される用語「院内疾患」および「院内感染」は、病院もしくは他のヘルスケア施設内で生じ、またはそれに起因する疾患もしくは感染を指す。院内感染は、典型的には、病院または他のヘルスケア施設内で罹患される感染であり、感染原因物質、例えば、抗生物質に耐性の細菌によって引き起こされ得る。ある態様において、院内感染は、対象が病院またはヘルスケア施設に入所する前に存在も潜伏もせず、病院またはヘルスケア施設への対象の入所後に感染または罹患される。
【００４３】
同様に、「医原病」または「医原性感染」は、医療的ケアによって引き起こされ、またはその結果として生じるものである。
【００４４】
「対象」または「個体」または「動物」または「患者」または「哺乳動物」は、診断、予後診断、または治療が望まれる任意の対象、例えば哺乳動物対象を意味する。哺乳動物対象には、ヒト、家畜動物、農場動物、および動物園、競技、または愛玩動物、例えば、イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマ、畜牛、ウシ、クマなどが含まれる。
【００４５】
本明細書において使用される、「抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的結合分子の投与から利益を受ける対象」および「治療が必要とされる動物」のような語句は、抗シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的結合分子、例えば、二重特異的抗体の投与から利益を受ける対象、例えば、哺乳動物対象を含む。このような結合分子は、例えば、抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的結合分子によるシュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）ＰｓｌもしくはＰｃｒＶの検出（例えば、診断手順のため）に、および／または疾患の治療、すなわち、緩和もしくは予防に使用することができる。本明細書においてより詳細に記載されるとおり、抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的結合分子は、非コンジュゲート形態で使用することができ、または例えば、薬物、プロドラッグ、もしくはアイソトープにコンジュゲートさせることができる。
【００４６】
本明細書において使用される用語「感受性対象」または「感受性ヒト対象」は、過去もしくは現在の損傷もしくは疾患、例えば集中治療室内の計画済の、現在の、もしくは過去の入院、例えば、挿管もしくは気管切開術を介する人工呼吸を介する補助呼吸、および／または例えば気道中の緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）による既知のコロニー形成（緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は、一部の例において抗生物質耐性であり得る）のため、疾患、例えば緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）に関連する疾患に罹患するリスク、例えば低リスク、中程度のリスク、または高リスクがある対象、例えばヒト患者を指す。ある態様において、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成される対象は、無症状であり得、または軽度、中程度、もしくは重度の病状、例えば本明細書の他の箇所に記載の肺炎症状を示し得る。過去または現在の感染は、例えば、火傷感染、関節感染、創傷感染、皮膚感染、腹腔内感染、菌血症、腹膜炎、敗血症、膿瘍、骨感染、または２つ以上のそのような感染の組合せであり得る。ある態様において、対象は、急性肺炎、火傷損傷、角膜感染、嚢胞性線維症、もしくはそれらの組合せを有し得、またはそれらに罹患するリスクがあり得る。ある態様において、感受性ヒト対象は、本明細書において提供される二重特異的抗体により治療して、疾患、例えば、院内疾患、医原病、もしくは緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる疾患が生じるのを予防し、または緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染から生じる疾患もしくは感染症状を緩和軽減、例えば、軽減、低減、縮小、縮減、減弱、軽度化、減衰、緩和、もしくは除去し、または緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）から生じる感染を治療し、例えば、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の細菌負荷を排除もしくは低下させることができる。ある態様において、感受性ヒト対象は、例えば、本明細書において提供される方法により治療可能な疾患に罹患するリスク因子（上記）に基づき、または治療を要求する既存の症状のため、治療が必要とされる対象である。
【００４７】
二重特異的抗体
本開示により提供される方法は、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶに特異的に結合する二重特異的抗体またはその抗原結合断片を利用する。本明細書に開示の二重特異的抗体またはその断片は、例えば、免疫グロブリン分子に由来するＰｓｌ特異的およびＰｃｒＶ特異的抗原結合領域をコードするポリペプチド、例えば、アミノ酸配列を含む。指定のタンパク質「に由来する」ポリペプチドまたはアミノ酸配列は、ポリペプチドの起源を指す。ある場合、特定の出発ポリペプチドまたはアミノ酸配列に由来するポリペプチドまたはアミノ酸配列は、出発配列、または少なくとも１０〜２０アミノ酸、少なくとも２０〜３０アミノ酸、少なくとも３０〜５０アミノ酸からなりもしくは他では起源を出発配列中に有すると当業者に同定可能であるその一部分と本質的に同一のアミノ酸配列を有する。
【００４８】
本明細書において提供される方法で使用される例示的な二重特異的抗体は、例えば、ＰＣＴ公開の国際公開第２０１３／０７０６１５号パンフレット、ＰＣＴ公開の国際公開第２０１４／０７４５２８号パンフレット、ＰＣＴ出願のＰＣＴ／米国特許出願公開第２０１５／０２９０６３号明細書、およびＰＣＴ出願のＰＣＴ／米国特許出願公開第２０１５／０３６５７６号明細書に開示されており、それらの開示は参照により全体として本明細書に組み込まれる。
【００４９】
本明細書において提供される方法で使用される例示的な二重特異的抗体の一部を表２に提示する。ＶＨ、ＶＬ、およびｓｃＦｖ配列中のＣＤＲに下線を付す。リンカー配列に二重下線を付す。
【００５０】
【表３】
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【００５１】
【表４】
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【００５２】
【表５】
2018535227.tif 000007
【００５３】
本明細書の方法に従って投与すべき二重特異的抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）：ＨＣＤＲ１−Ｐｓｌ、ＨＣＤＲ２−Ｐｓｌ、ＨＣＤＲ３−Ｐｓｌ、ＬＣＤＲ１−Ｐｓｌ、ＬＣＤＲ２−Ｐｓｌ、およびＬＣＤＲ３−Ｐｓｌのセットであって、ＨＣＤＲ１−Ｐｓｌは、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２−Ｐｓｌは、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３−Ｐｓｌは、配列番号１２のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１−Ｐｓｌは、配列番号１３のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２−Ｐｓｌは、配列番号１４のアミノ酸配列を有し、およびＬＣＤＲ３−Ｐｓｌは、配列番号１５のアミノ酸配列を有する、セットを含む緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）Ｐｓｌに特異的に結合する結合ドメインと、ＣＤＲ：ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶのセットであって、ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶは、配列番号２のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶは、配列番号３のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶは、配列番号４のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶは、配列番号６のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶは、配列番号７のアミノ酸配列を有し、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶは、配列番号８のアミノ酸配列を有する、セットを含む緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｃｒＶに特異的に結合する結合ドメインとを含む。実施形態において、二重特異的抗体は、重鎖および軽鎖を有する。重鎖は、式ＶＨ−ＣＨ１−Ｈ１−Ｌ１−Ｓ−Ｌ２−Ｈ２−ＣＨ２−ＣＨ３（式中、ＶＨは、配列番号１のアミノ酸配列を含む抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｃｒＶ重鎖可変ドメインであり、ＣＨ１は、重鎖定常領域ドメイン−１であり、Ｈ１は、第１の重鎖ヒンジ領域断片であり、Ｌ１は、第１のリンカーであり、Ｓは、配列番号９のアミノ酸配列を含む抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）Ｐｓｌ  ＳｃＦｖ分子であり、Ｌ２は、第２のリンカーであり、Ｈ２は、第２の重鎖ヒンジ領域断片であり、ＣＨ２は、重鎖定常領域ドメイン−２であり、ＣＨ３は、重鎖定常領域ドメイン−３である）を含む。軽鎖は、式ＶＬ−ＣＬ（式中、ＶＬは、配列番号５のアミノ酸配列を含む抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｃｒＶ軽鎖可変ドメインであり、ＣＬは、抗体軽鎖カッパ定常領域または抗体軽鎖ラムダ領域を含む）を含む。ある態様において、ＣＨ１は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み得る。ある態様において、Ｌ１およびＬ２は、同一でも異なっていてもよく、独立して、（ａ）［ＧＧＧＧＳ］ｎ（式中、ｎは、０、１、２、３、４、または５である）（配列番号２３）、（ｂ）［ＧＧＧＧ］ｎ（式中、ｎは、０、１、２、３、４、または５である）（配列番号２４）、または（ａ）および（ｂ）の組合せを含み得る。ある態様において、Ｈ１は、アミノ酸配列ＥＰＫＳＣ（配列番号１７）を含み得る。ある態様において、Ｈ２は、アミノ酸配列ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰ（配列番号１８）を含み得る。ある態様において、ＣＨ２−ＣＨ３は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み得る。ある態様において、ＣＨ２−ＣＨ３は、配列番号２０のアミノ酸配列を含���得る。ある態様において、二重特異的抗体の重鎖は、配列番号２１のアミノ酸配列を含み得、軽鎖は、配列番号２２のアミノ酸配列を含む。
【００５４】
抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的結合分子を含む医薬組成物
本開示において使用される医薬組成物は、当業者に周知の薬学的に許容可能な担体を含む。非経口投与のための製剤としては、無菌水性または非水性液剤、懸濁液、またはエマルションが挙げられる。
【００５５】
単一剤形を生成するための担体材料と組み合わせることができる抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的抗体またはその断片、バリアントもしくは誘導体の量は、治療対象および特定の投与方式に応じて変動する。例示的な投薬レジメンとしては、約５００〜約３０００ｍｇ、例えば、約５００ｍｇ、６００、７００、７５０、１０００、１５００または約３０００ｍｇの抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的抗体の単回静脈内注入が挙げられる。投薬レジメンは、最適な所望応答（例えば、予防的応答または治療的治療応答）を提供するように調整することもできる。
【００５６】
抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的抗体またはその断片、バリアントもしくは誘導体の投与経路は、例えば、非経口であり得る。本明細書において使用される非経口という用語には、例えば、静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内、または皮下投与が含まれる。投与に好適な形態は、注射、特に静脈内もしくは動脈内注射または点滴用液剤である。
【００５７】
抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的抗体またはその断片、バリアントもしくは誘導体は、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染のインビボ治療または予防について薬学的有効量で投与することができる。これに関して、開示結合分子は、活性剤の投与を易化し、安定性を促進するように配合され得ることが認識される。
【００５８】
本開示の範囲に従うと、抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）およびＰｃｒＶ二重特異的抗体またはその断片、バリアントもしくは誘導体もしくは誘導体は、上記の治療方法に従って治療効果を産生するために十分な量でヒトまたは他の哺乳動物に投与することができる。本明細書に開示の抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）およびＰｃｒＶ二重特異的抗体またはその断片、バリアントもしくは誘導体は、そのようなヒトまたは他の動物に、本開示の抗体を公知の技術に従って慣用の薬学的に許容可能な担体または希釈剤と組み合わせることにより調製された慣用の剤形で投与することができる。
【００５９】
緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の治療のための本開示の組成物の有効用量は、多くの異なる要因、例として、投与手段、標的部位、患者の生理学的状態、患者がヒトか動物か、投与される他の医薬品、および治療が防止的か療法的かに応じて変動する。通常、患者はヒトであるが、非ヒト哺乳動物、例として、トランスジェニック哺乳動物を治療することもできる。治療投与量を当業者に公知の定型方法を使用して力価測定して安全性および効力を最適化することができる。
【００６０】
抗緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶ二重特異的抗体またはその断片、バリアントもしくは誘導体は、当業者に公知の種々の因子に応じて種々の頻度において複数回にわたり、例えば単回投与として投与することができる。
【００６１】
院内疾患を予防または治療する方法
本開示は、感受性ヒト対象における院内疾患を予防する方法であって、約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、例えば、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇまたは３０００ｍｇの用量の、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶに特異的に結合する二重特異的抗体を対象に投与することを含む方法を提供する。二重特異的抗体は、例えば、約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、例えば、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、または３０００ｍｇの単回投与として投与することができる。ある態様において、二重特異的抗体は、ＩＶ注入として投与することができる。本明細書の他の箇所により詳細に記載される感受性ヒト対象は、院内感染に罹患するリスクがあるが、投与時に感染も有さず、感染の症状も示さない者、または介入もしくは緩和軽減を要求する院内感染に罹患した者である。本方法は、二重特異的抗体の投与後、例えば、１日間、３日間、５日間、７日間、１０日間、１５日間、２１日間、２８日間、または３０日間まで症状について対象をモニタリングすることをさらに含む。一実施形態において、本方法は、投与日から少なくとも約２１日間以上まで症状について対象をモニタリングすることを含む。「院内感染」は、本明細書の他の箇所で定義され、それとしては、例えば、肺炎、菌血症、骨感染、関節感染、皮膚感染、火傷感染、創傷感染、腹膜炎、敗血症、および／または膿瘍が挙げられる。院内感染、例えば、肺炎に関連する症状は当技術分野において公知であり、例示的な症状を以下の実施例に記載する。ある態様において、院内感染は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされるかまたは悪化する。本方法によれば、ヒト対象は、例えば、投与１日後、３日後、５日後、８日後、１０日後、１５日後、２１日後、２８日後、または３０日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。一実施形態において、ヒト対象は、投与２１日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。別の実施形態において、ヒト対象は、投与２８または３０日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。
【００６２】
別の態様において、本開示は、感受性ヒト対象における肺炎、例えば、院内感染または非院内感染肺炎を予防または治療する方法であって、約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、例えば、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇまたは３０００ｍｇの用量の、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶに特異的に結合する二重特異的抗体を対象に投与することを含む方法を提供する。二重特異的抗体は、例えば、約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、例えば、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇまたは３０００ｍｇの単回投与として投与することができる。ある態様において、二重特異的抗体は、ＩＶ注入として投与することができる。ある態様において、肺炎は、院内または医原性である。本明細書の他の箇所により詳細に記載される感受性ヒト対象は、肺炎に罹患するリスクがあるが、投与時に肺炎症状を有さない者、または介入もしくは緩和軽減を要求する肺炎に罹患した者である。本方法は、二重特異的抗体の投与後、例えば、１日間、３日間、５日間、７日間、１０日間、１５日間、２１日間、２８日間、または３０日間まで肺炎症状について対象をモニタリングすることをさらに含む。一実施形態において、本方法は、投与日から少なくとも約２１日間まで症状について対象をモニタリングすることを含む。肺炎に関連する症状は当技術分野において公知であり、例示的な症状を以下の実施例に記載する。ある態様において、肺炎は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされるかまたは悪化する。本方法によれば、ヒト対象は、例えば、投与１日後、３日後、５日後、８日後、１０日後、１５日後、２１日後、２８日後、または３０日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。一実施形態において、ヒト対象は、投与７日後に対象が無症状のまま（対象が投与点において無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。一実施形態において、ヒト対象は、投与２１日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。別の実施形態において、ヒト対象は、投与２８または３０日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。
【００６３】
別の態様において、本開示は、感受性ヒト対象における緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる疾患、例えば、肺炎、気管気管支炎、菌血症、心内膜炎、髄膜炎、中耳炎、細菌性角膜炎、眼内炎、骨髄炎、胃腸病、皮膚感染、敗血症、またはそれらの任意の組合せを予防または治療する方法であって、約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、例えば、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、または３０００ｍｇの用量の、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰｓｌおよびＰｃｒＶに特異的に結合する二重特異的抗体を対象に投与することを含む方法を提供する。二重特異的抗体は、約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、例えば、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、または３０００ｍｇの単回投与で投与することができる。ある態様において、二重特異的抗体は、ＩＶ注入として投与することができる。ある態様において、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる疾患は、院内または医原性である。本明細書の他の箇所により詳細に記載される感受性ヒト対象は、本明細書において提供される方法により治療可能または予防可能な疾患に罹患するリスクがあるが、投与時に病状を有さない者、または治療、介入もしくは緩和軽減を要求する緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる疾患に罹患した者である。本方法は、二重特異的抗体の投与後、例えば、１日間、３日間、５日間、８日間、１０日間、１５日間、２１日間、２８日間または３０日間まで症状について対象をモニタリングすることをさらに含む。一実施形態において、本方法は、投与日から少なくとも約２１日間まで症状について対象をモニタリングすることを含む。肺炎に関連する症状は当技術分野において公知であり、例示的な症状を以下の実施例に記載する。本方法によれば、ヒト対象は、例えば、投与１日後、３日後、５日後、８日後、１０日後、１５日後、２１日後、２８日後、または３０日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。一実施形態において、ヒト対象は、投与７日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。一実施形態において、ヒト対象は、投与２１日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。別の実施形態において、ヒト対象は、投与２８または３０日後に対象が無症状のまま（対象が投与時に無症状であった場合）であり、またはＭＥＤＩ３９０２により治療されない場合に予測されるものよりも重症度が低い症状を呈する場合、良好に治療される。
【００６４】
ある態様において、本明細書の方法に従って投与すべき二重特異的抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）：ＨＣＤＲ１−Ｐｓｌ、ＨＣＤＲ２−Ｐｓｌ、ＨＣＤＲ３−Ｐｓｌ、ＬＣＤＲ１−Ｐｓｌ、ＬＣＤＲ２−Ｐｓｌ、およびＬＣＤＲ３−Ｐｓｌのセットであって、ＨＣＤＲ１−Ｐｓｌは、配列番号１０のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２−Ｐｓｌは、配列番号１１のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３−Ｐｓｌは、配列番号１２のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１−Ｐｓｌは、配列番号１３のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２−Ｐｓｌは、配列番号１４のアミノ酸配列を有し、およびＬＣＤＲ３−Ｐｓｌは、配列番号１５のアミノ酸配列を有する、セットを含むＰｓｌに特異的に結合する結合ドメインと、ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶであって、ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶは、配列番号２のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶは、配列番号３のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶは、配列番号４のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶは、配列番号６のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶは、配列番号７のアミノ酸配列を有し、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶは、配列番号８のアミノ酸配列を有する、ＨＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、ＨＣＤＲ３−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ１−ＰｃｒＶ、ＬＣＤＲ２−ＰｃｒＶ、およびＬＣＤＲ３−ＰｃｒＶを含むＰｃｒＶに特異的に結合する結合ドメインとを含む。実施形態において、二重特異的抗体は、重鎖および軽鎖を有する。重鎖は、式ＶＨ−ＣＨ１−Ｈ１−Ｌ１−Ｓ−Ｌ２−Ｈ２−ＣＨ２−ＣＨ３（式中、ＶＨは、配列番号１のアミノ酸配列を含む抗ＰｃｒＶ重鎖可変ドメインであり、ＣＨ１は、重鎖定常領域ドメイン−１であり、Ｈ１は、第１の重鎖ヒンジ領域断片であり、Ｌ１は、第１のリンカーであり、Ｓは、配列番号９のアミノ酸配列を含む抗Ｐｓｌ  ＳｃＦｖ分子であり、Ｌ２は、第２のリンカーであり、Ｈ２は、第２の重鎖ヒンジ領域断片であり、ＣＨ２は、重鎖定常領域ドメイン−２であり、ＣＨ３は、重鎖定常領域ドメイン−３である）を含む。軽鎖は、式ＶＬ−ＣＬ（式中、ＶＬは、配列番号５のアミノ酸配列を含む抗ＰｃｒＶ軽鎖可変ドメインであり、ＣＬは、抗体軽鎖カッパ定常領域または抗体軽鎖ラムダ領域を含む）を含む。ある態様において、ＣＨ１は、配列番号１６のアミノ酸配列を含み得る。ある態様において、Ｌ１およびＬ２は、同一でも異なっていてもよく、独立して、（ａ）［ＧＧＧＧＳ］ｎ（式中、ｎは、０、１、２、３、４、または５である）（配列番号２３）、（ｂ）［ＧＧＧＧ］ｎ（式中、ｎは、０、１、２、３、４、または５である）（配列番号２４）、または（ａ）および（ｂ）の組合せを含み得る。ある態様において、Ｈ１は、アミノ酸配列ＥＰＫＳＣ（配列番号１７）を含み得る。ある態様において、Ｈ２は、アミノ酸配列ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰ（配列番号１８）を含み得る。ある態様において、ＣＨ２−ＣＨ３は、配列番号１９のアミノ酸配列を含み得る。ある態様において、ＣＨ２−ＣＨ３は、配列番号２０のアミノ酸配列を含み得る。ある態様において、二重特異的抗���の重鎖は、配列番号２１のアミノ酸配列を含み得、軽鎖は、配列番号２２のアミノ酸配列を含む。
【００６５】
本明細書において提供される方法で使用される二重特異的抗体は、例えば、約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、例えば、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、または３０００ｍｇの単回投与で投与することができる。
【００６６】
一部の実施形態において、二重特異的抗体またはその抗原結合断片の血清標的レベルは、約１μｇ／ｍＬ〜約１０μｇ／ｍＬ、約２μｇ／ｍＬ〜約９μｇ／ｍＬ、約３μｇ／ｍＬ〜約８μｇ／ｍＬ、約４μｇ／ｍＬ〜約７μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ〜約６μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ〜約７μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ〜約８μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ〜約９μｇ／ｍＬ、または約５μｇ／ｍＬ〜約１０μｇ／ｍＬの範囲内である。他の実施形態において、二重特異的抗体またはその抗原結合断片の血清標的レベルは、約１μｇ／ｍＬ〜約６μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ〜約５μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ〜約４μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ〜約３μｇ／ｍＬ、または約１μｇ／ｍＬ〜約２μｇ／ｍＬの範囲内である。一実施形態において、二重特異的抗体またはその抗原結合断片の血清標的レベルは、少なくとも１．７μｇ／ｍＬである。別の実施形態において、二重特異的抗体またはその抗原結合断片の血清標的レベルは、少なくとも５．３μｇ／ｍＬである。約１．７μｇ／ｍＬの血清標的レベルは、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株の＞８０〜９０％によって引き起こされる感染を予防または治療することが予測される。約５．３μｇ／ｍＬの血清標的レベルは、最も頑強な緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株（例えば、強毒性であり、抗生物質に耐性の株、例えば、ＡＲＣ３９２８およびＡＲＣ３５０２）によって引き起こされる感染を予防または治療することが予測される。
【００６７】
ある態様において、本明細書において提供される方法で使用される二重特異的抗体は、ＩＶ注入として投与することができる。
【００６８】
本明細書において提供される方法は、本明細書の他の箇所に記載の感受性ヒト対象についての使用に好適である。例としては、入院予定の対象、現在入院中の対象、最近入院した対象、人工呼吸器装着予定、現在装着している、もしくは最近装着した対象、またはそれらの組合せが挙げられる。入院は、一部の例において、集中治療室（ＩＣＵ）内での入院であり得る。人工呼吸は、必要に応じて、挿管を介するもの、例えば、気管内もしくは経鼻気管チューブを介するもの、または気管切開術を介するものであり得る。人工呼吸器使用予定、現在使用している、または最近使用した患者は、呼吸器感染、例えば、肺炎、例えば、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎に罹患する増大したリスクを有し得る。人工呼吸が示される状況において、本開示の方法により提供される二重特異的抗体の投与は、例えば、現在の人工呼吸中、人工呼吸がもはや要求されなくなった後、またはそれらの組合せで肺炎に罹患するリスクを低減させ得る。
【００６９】
ある態様において、対象は、二重特異的抗体の投与時において、気道、例えば、下気道中で緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成される。ある態様において、対象の気道は、二重特異的抗体の投与の１、２、３、または４日前に緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成される。コロニー形成は、例えば、二重特異的抗体の投与前の６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、または９６時間以内における気管吸引液中の緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の検出によって計測することができる。本明細書において提供される方法のある態様において、対象は、二重特異的抗体の投与前に対象がコロニー形成される緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株に対して活性であるとみなされる抗生物質を受けていない。ある態様において、対象の気道は、二重特異的抗体の投与時に黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）によってさらにコロニー形成されてよい。
【００７０】
ある態様において、対象は、二重特異的抗体の投与時に肺炎症状を有さない。症状は、臨床肺感染スコア（ＣＰＩＳ）に従って計測することができる。症状の欠如は、例えば、二重特異的抗体の投与の２４時間前に対象が６未満のＣＰＩＳを有する場合に推定することができる。
【００７１】
本明細書において提供される方法は、二重特異的抗体の投与後に病状、例えば、肺炎症状について対象をモニタリングすることを含む。ある態様において、対象は、胸部Ｘ線、呼吸徴候もしくは肺炎の症状の観察、肺炎の微生物学的確定診断、またはそれらの任意の組合せにより肺炎についてモニタリングすることができる。対象は、例えば、肺炎に一致する新たなまたは悪化した浸潤影が胸部Ｘ線で観察された場合、対象が少なくとも２つの小基準または少なくとも１つの大基準の肺炎の呼吸徴候または症状を呈する場合、対象から得られた検体が培養による緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の場合、またはそれらの任意の組合せの場合、肺炎を有すると判定することができる。ある態様において、検体は、対象の呼吸分泌物である。呼吸分泌物は、喀痰から、気管内吸引により、気管支肺胞肺洗浄を伴う気管支鏡検査により、挿管対象における検体保護ブラシサンプリングの使用により、またはそれらの任意の組合せで得ることができる。
【００７２】
小基準の肺炎の呼吸徴候または症状としては、限定されるものではないが、約３８℃超の体温、約３５℃未満の中核体温、１立方ミリメートル（ｍｍ３）当たり１０，０００個超の細胞の白血球数、１ｍｍ３当たり約４，５００個未満の細胞の白血球数、約１５％超のバンド好中球数、新たな化膿性気管内分泌物または痰の産生、新たな聴診所見、打診による濁音、咳嗽、呼吸困難、頻呼吸、低酸素血症の初発、またはそれらの任意の組合せが挙げられる。大基準の肺炎の呼吸徴候または症状としては、限定されるものではないが、少なくとも４時間維持される、約２４０ｍｍＨｇ未満のＰａＯ２／ＦｉＯ２比を含む酸素供給を向上させるための換気サポート系において生じる急激な変化、少なくとも４時間維持される、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比の約５０ｍｍＨｇ超の減少、非人工呼吸対象における人工呼吸を開始または再開させる必要性、またはそれらの任意の組合せを挙げることができる。肺炎の微生物学的確定診断としては、限定されるものではないが、培養による緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の呼吸器検体、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の血液培養物、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の胸膜液吸引物または肺組織培養物、またはそれらの任意の組合せを挙げることができる。
【００７３】
ある態様において、本開示により提供される方法は、二重特異的抗体の投与前に、投与と同時に、および／または投与後に対象に抗生物質を投与することをさらに含み得る。好適な抗生物質としては、限定されるものではないが、アミノグリコシド、チカルシリン、ウレイドペニシリン、シプロフロキサシン、セフェピム、ゲンタマイシン、アミカシン、トブラマイシン、セフタジジム、アズトレオナム、セフォタキシム、またはそれらの任意の組合せを挙げることができる。好適な投与量および治療期間は、ヘルスケア提供者により容易に決定することができる。ある態様において、対象がコロニー形成される緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株は、投与のために選択される抗生物質に感受性である。しかしながら、別の態様において、対象がコロニー形成される緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株は、投与のために選択される利用可能な抗生物質の１つ以上に耐性であるかまたは部分的に耐性である。前臨床試験において、例えば、ＭＥＤＩ３９０２は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎に対する抗生物質療法と、抗生物質感受性および抗生物質耐性緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の両方に対する区別される抗生物質クラスとの相乗的向上を示している。
【００７４】
ある態様において、本開示により提供される方法は、抗ヒスタミン剤を二重特異的抗体の投与前に、投与と同時に、および／または投与後に対象に投与することをさらに含み得る。好適な抗ヒスタミン剤としては、限定されるものではないが、ジフェンヒドラミン、クレマスチン、デクスクロルフェニラミン、アゼラスチン、セチリジン、デスロラタジン、フェキソフェナジン、レボセチリジン、ロラタジン、オロパタジン、またはそれらの任意の組合せを挙げることができる。好適な投与量または治療期間は、ヘルスケア提供者により容易に決定することができる。
【００７５】
ある態様において、本開示により提供される方法は、二重特異的抗体の血清薬物動態、二重特異的抗体の気管分泌物の薬物動態、またはそれらの組合せについて対象をモニタリングすることを含む。対象は、例えば、少なくとも約１μｇ／ｍＬ、少なくとも約２μｇ／ｍＬ、少なくとも約３μｇ／ｍＬ、少なくとも約４μｇ／ｍＬ、少なくとも約５μｇ／ｍＬ、または少なくとも約５．３μｇ／ｍＬ以上の二重特異的抗体の血清レベルを二重特異的抗体の投与後の７日目、１４日目、２１日目、２８日目、３０日目、３５日目、４２日目、または４９日目まで維持し得る。例えば、対象は、少なくとも約１．７μｇ／ｍＬ、または少なくとも約５．３μｇ／ｍＬ以上の二重特異的抗体の血清レベルを二重特異的抗体の投与後の７日目、１４日目、２１日目、２８日目、３０日目、３５日目、４２日目、または４９日目まで維持し得る。細菌病原体に指向されるモノクローナル抗体（例えば、ＭＥＤＩ４８９３）についてＩＣＵ患者におけるクリアランス増加の観察に基づき、ＭＥＤＩ３９０２の単回投与後に人工呼吸されているＩＣＵ患者について薬物動態をモデリングした。１５００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２の単回投与は、約１μｇ／ｍＬにおける血清曝露を＞９０％の対象において≧２１日間維持すると予測される。３０００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２の単回投与は、約１．７μｇ／ｍＬにおける血清曝露を＞９０％対象において≧２１日間維持すると予測される。健康被験者における薬物動態に基づき（例えば、ＩＣＵ患者において観察されるようなクリアランス増加を有さない）、５００ｍｇ、１５００ｍｇまたは３０００ｍｇの単回投与は、約１μｇ／ｍＬにおける血清曝露を＞９０％の対象において≧２１日間、例えば、１．７μｇ／ｍＬを＞９０％の対象において≧２１日間、例えば、約５．３μｇ／ｍＬを＞９０％の対象において≧２１日間維持すると予測される。当然のことながら、二重特異的抗体の血清レベルはモニタリング期間全体にわたり変動し、投与される二重特異的抗体の用量に応じて約１００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ、または約６００μｇ／ｍＬ超の二重特異的抗体の最大濃度またはＣｍａｘに達し得る。ある態様において、ゼロ時間から無限大時間への濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ∞）を計測することができる。例えば、ＡＵＣ∞は、１５００ｍｇ用量の二重特異的抗体について、例えば、約２０００μｇ・日／ｍＬ〜約６０００μｇ・日／ｍＬ、例えば、約４０００μｇ・日／ｍＬであり得る。ある態様において、血清終末半減期を計測することができる。ある態様において、定常状態における分布容積（Ｖｄｓｓ）を計測することができる。対象は、二重特異的抗体の投与後の７日目、１４日目、２１日目、２８日目、３０日目、３５日目、４２日目、４９日目以上まで薬物動態パラメータについてモニタリングすることができる。ある態様において、対象は、２１日目までモニタリングすることができる。ある態様において、対象は、４９日目までモニタリングすることができる。
【００７６】
以下に開示される実施形態は、代表例にすぎない。したがって、以下の実施例において開示される具体的な構造的、機能的、および手順的詳細は限定的なものと解釈すべきでない。
【実施例】
【００７７】
実施例１：臨床試験第１相試験
健康成人対象における単回増量ＩＶ投与のＭＥＤＩ３９０２の安全性および忍容性を評価する、ヒトランダム化、二重盲検、プラセボ対照、用量漸増の初回第１相試験を実施した。有害事象（ＡＥ）、ＰＫ、およびＡＤＡデータを、２５０ｍｇ（ｎ＝３）、７５０ｍｇ（ｎ＝１５）、１５００ｍｇ（ｎ＝１５）、または３０００ｍｇ（ｎ＝９）の用量のＭＥＤＩ３９０２を受けた４２人の対象およびプラセボを受けた１４人の対象において、最終来院日（投与６０日後／６１日目）まで収集した。ＭＥＤＩ３９０２およびプラセボ群の両方におけるＡＥの全ては、重症度グレード１またはグレード２のいずれかであった。最も高頻度に報告されたＡＥは、グレード１またはグレード２注入関連反応（総ＭＥＤＩ３９０２群において１５／４２人の対象［３５．７％］、プラセボ群において０人）およびグレード１またはグレード２頭痛（総ＭＥＤＩ３９０２群において６／４２人の対象［１４．３％］、プラセボ群において２／１４人の対象［１４．３％］）であった。特に注目すべき有害事象（ＡＥＳＩ）は、注入関連反応（総ＭＥＤＩ３９０２群において１５／４２人の対象［３５．７％］、プラセボ群において０人）の事象を含み、それはジフェンヒドラミンによる処理および注入速度の減速により緩和軽減された。ほとんどの注入関連反応の事象は、注入中もしくはその直後のいずれかまたは翌日までに消散した。２人の対象（７５０ｍｇのＭＥＤＩ３９０２投与群における１人の対象および３０００ｍｇ投与群における１人の対象）は、注入関連反応に起因して投薬を完了しなかった。重篤な有害事象（ＳＡＥ）は報告されなかった。
【００７８】
ＭＥＤＩ３９０２のＰＫおよび免疫原性を第１相試験で健康成人被験者において試験した。血液試料を、血清中のＭＥＤＩ３９０２濃度の定量のため、およびＭＥＤＩ３９０２に対するＡＤＡの検出のために投与前および投与６０日後までの種々の時点において回収した。ＩＶ注入後、ＭＥＤＩ３９０２は、健康成人対象において線形ＰＫを示した。血清ピーク濃度は注入直後に観察され、双指数関数的に経時的に低下した。２５０ｍｇ投与コホートのＭＥＤＩ３９０２濃度を投与４２日後まで計測可能であった一方、他の高用量コホートは、投与６０日後まで計測可能な血清濃度を有した。７５０ｍｇＩＶの単回投与は、５．３μｇ／ｍＬの標的レベルを超える血清曝露をこのコホートにおけるほとんどの対象について２８日間維持した。血清中のＭＥＤＩ３９０２曝露は２５０ｍｇから１５００ｍｇまでほぼ用量比例的に増加し、１５００ｍｇから３０００ｍｇまででわずかに用量比例未満であった。Ｃｍａｘは、２５０ｍｇにおける１００μｇ／ｍＬから１５００ｍｇにおける４６８μｇ／ｍＬまで、および３０００ｍｇにおける８３８μｇ／ｍＬまで増加した。ゼロ時間から無限大時間までの濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ∞）は、２５０ｍｇにおける６９４μｇ・日／ｍＬから１５００ｍｇにおける４２４６μｇ・日／ｍＬまで用量比例的に増加した。３０００ｍｇにおけるＡＵＣ∞は、６５４０μｇ・日／ｍＬであった。血清終末半減期は７〜９日間であると推定された。定常状態における分布容積（Ｖｄｓｓ）は３．４〜４．９Ｌであり、血管外スペース中への制限された分布を示した。４２人の対象のうち、コホート４（３０００ｍｇ）の１人の対象は６１日目に投与後ＡＤＡ陽性を試験した。この対象におけるＭＥＤＩ３９０２の血清濃度は、投与４５日後に急速に減少し、投与６０日後に定量下限（ＬＬＯＱ）未満のレベルに降下し、ＭＥＤＩ３９０２のＰＫに対するＡＤＡの影響を示唆した。
【００７９】
ＭＥＤＩ３９０２は、初回第１相試験において一般に、安全であることが見出された。
【００８０】
実施例２：臨床試験第２ｂ相試験
ランダム化、二重盲検、プラセボ対照、単回投与、用量範囲、概念実証の第２相において、約４２９人の対象が登録され、主に欧州の約１２０の場所において投与される。対象を、１５００ｍｇまたは３０００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２、またはプラセボの単回ＩＶ投与を受けるように１：１：１の比にランダムに割り付ける。投薬スキームは、１５００ｍｇ（または３０００ｍｇ）のＭＥＤＩ３９０２またはプラセボの単回ＩＶ投与間の１：１のランダム化に変更することもできる。ランダム化は、地理的領域により、および対象がランダム化前９６時間以内に抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）抗生物質治療（≦７２時間の持続期間）を受けたか否かにより層別化する。対象は、５０日目（治験薬投与４９日後）まで追跡する（図１）。
【００８１】
登録のため、対象は年齢１８歳以上であり、集中治療室に滞在し、現在挿管および人工呼吸されており、試験参加時に少なくとも３日間にわたり挿管および人工呼吸されたままであると予測されることが要求される。対象は、ランダム化前３６時間以内に緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の気管試料を有することにより実証されるとおり下気道中で緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によってコロニー形成もされていなければならないが、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）関連疾患を現在有さない。消散した肺炎の証拠を有する対象を登録することができる。
【００８２】
対象は、それらが登録時またはＭＥＤＩ３９０２を受ける前に確定急性シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）疾患またはその疑いを有する場合、参加資格を有さない。対象は、それらがモノクローナル抗体を既に受けている場合、それらがＭＥＤＩ３９０２投与前の直近の２４時間以内に６以上の臨床肺感染スコア（ＣＰＩＳ）を有する場合、またはそれらが２５以上の急性生理学的および慢性健康評価ＩＩ（ＡＰＡＣＨＥ−ＩＩ）スコアもしくはランダム化時における１２以上のＳＯＦＡスコアを有する場合にも参加資格を有さない。肺炎を診断する能力を妨害する活動性肺疾患（例えば、活動性結核もしくは真菌疾患、閉塞肺癌、多量の胸水もしくは蓄膿症、嚢胞性線維症、または肺「ホワイトアウト」を伴う急性呼吸促拍症候群）を有する対象は資格を有さない。入院前に気管切開依存性の対象および体表面の４０％超に火傷を有する対象は資格を有さない。さらに、対象は、それらがランダム化前の９６時間以内に７２時間超にわたり抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）抗生物質を受け、その抗生物質が、対象がコロニー形成される緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株に対して活性とみなされ、または抗緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）抗生物質の受容継続が見込まれる場合に資格を有さない。
【００８３】
対象を、１日目にＩＶ注入を介して投与される１５００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２、３０００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２、またはプラセボの単回投与を受けるようにランダムに割り付ける。全ての対象に対し、抗ヒスタミン剤、例えば、５０ｍｇのジフェンヒドラミンＩＶ、クレマスチン２ｍｇＩＶ、またはデクスクロルフェニラミン５ｍｇＩＶ（または急性アレルギー反応の管理のために日常的臨床診療において利用される別の抗ヒスタミン製剤）を治験薬注入開始前の１５〜３０分以内に前投与する。治験薬注入の開始前のアセトアミノフェン６５０ｍｇ経口および／もしくはメチルプレドニゾロン２０ｍｇＩＶと抗ヒスタミン剤との組合せ、またはアセトアミノフェンおよび／もしくはメチルプレドニゾロンを用いるもしくは用いないファモチジン２０ｍｇ経口と一緒の抗ヒスタミン剤による対象の追加の前投与を承認することができる。
【００８４】
この試験の主要有効性評価項目は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）院内肺炎についてのリスクがある人工呼吸対象におけるＭＥＤＩ３９０２の単回投与後の投与２１日後（２２日目）までに緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる院内肺炎の発生率である。投与量レベルは、第１相試験（実施例１を参照されたい）からのデータ、前臨床薬理学的試験からのＰＫ／ＰＤデータ（例えば、ネズミ緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）誘導致死肺炎モデルにおけるＥＣ９０）、細菌病原体に指向される他のモノクローナル抗体のＩＣＵ患者におけるクリアランス増加の観察に基づくＰＫモデリング（図２）、および１０日間のＶＡＰ発症までの時間中央値（範囲）の臨床報告に基づき選択した。一部の人工呼吸対象は投与２１日後の期間にわたり人工呼吸を要求し続けるが、一部の対象はこの期間中に人工呼吸器を外すことができる。これらの後者の対象は、それらが人工呼吸をもはや要求しなくなった後に緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる院内肺炎を発症し得るため、それらが投与２１日後の期間中に人工呼吸器を使用し続しているか外したかにかかわらず、登録時に人工呼吸されていた対象において主要有効性を評価する。副次的有効性評価項目は、人工呼吸中に緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる院内肺炎の発生率、および人工呼吸が投与２１日後までもはや要求されなくなった後に緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）によって引き起こされる院内肺炎の発生率を別個に評価する。
【００８５】
主要安全性評価項目は、投与４９日後までＴＥＡＥ、ＴＥＳＡＥ、およびＡＥＳＩを評価する。
【００８６】
副次的評価項目（投与４９日後までのＭＥＤＩ３９０２血清濃度、ＰＫパラメータ、およびＭＥＤＩ３９０２に対するＡＤＡ応答）は、インビボＭＥＤＩ３９０２の存在を評価するように設計する。
【００８７】
データ分析は、全ての対象が試験を完了した後に実施する。有効性、薬物動態（ＰＫ）、抗薬物抗体（ＡＤＡ）、および安全性の分析は、最後の対象が投与４９日後までフォローアップを完了した後に回収される全てのデータに対して実施して１５００ｍｇ（および３０００ｍｇの場合もある）のＭＥＤＩ３９０２の単回ＩＶ投与が許容可能な安全性プロファイルを有し、投与２１日後まで下気道中で緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）がコロニー形成される集中治療室（ＩＣＵ）内の人工呼吸対象における緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎の発生率を低減させ得ることを実証する（診断時における人工呼吸に関わらない）。
【００８８】
対象が挿管されたままである場合、気管吸引液試料を２日目、４日目（±１日）、８日目（±１日）、１５日目（±１日）、２９日目（±１日）、および５０日目（±１日）に緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）コロニー形成の微生物学的評価のために回収する。
【００８９】
対象は、入院中および退院後の症状に従って肺炎および他の重篤な緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の臨床症状について毎日モニタリングする。これらの時間において、モニタリングは、健康診断およびバイタルサインの評価を含む。入院中、対象が人工呼吸されたままである間、ＣＰＩＳを毎日評価する。
【００９０】
重篤な緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の疑いを有する対象について、臨床症状（ＣＰＩＳ、ＳＯＦＡ、健康診断、およびバイタルサイン）を発症日に、次いで消散まで毎日評価する。血液試料を、重篤な緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の疑いを有する全ての対象において発症日および翌２日間分析する。採血分析を、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎について陽性の者において、それらの者が緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陰性になるまで１日おきに繰り返す。気管または気管支吸引液を、挿管されている重篤な緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の疑いを有する対象において発症日および翌２日間分析する。気管または気管支吸引液分析は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎について陽性の者において消散まで毎日繰り返す。喀痰は、挿管されていない重篤な緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の疑いを有する対象において発症日および翌２日間分析する（臨床管理および利用可能なＢＡＬまたはＰＳＢ試料のために気管支鏡検査を実施しない限り）。喀痰分析は、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎について陽性の者において消散まで１日おきに繰り返す。胸部Ｘ線は、重篤な緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染の疑いを有する対象に対して発症日に実施する。胸部Ｘ線は、臨床的に示された確定肺炎を有する者において消散まで繰り返す。
【００９１】
緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎の診断時点において人工呼吸されている対象において、診断についての基準は、対象が、いかなる他の非感染症例にも起因しない以下のＸ線写真、臨床および微生物学的な初発の症状／徴候を実証することを要求する。
１．Ｘ線写真基準：
ａ．事象の２４時間以内に得られた胸部Ｘ線上の肺炎と一致する新たなまたは悪化した浸潤影（有資格放射線科医により診断）、および
２．臨床基準：以下の小基準の少なくとも２つまたは１つの大基準の初発の呼吸徴候または症状：
小基準：
ｂ．感染の全身徴候（以下の１つ以上）：異常温度（＞３８℃の口腔体温、または鼓膜温度、または≧３８．３℃の中核温、または＜３５℃の中核体温により定義される低体温症）、および／または異常なＷＢＣ数（＞１０，０００個の細胞／ｍｍ３のＷＢＣ数、＜４，５００個の細胞／ｍｍ３のＷＢＣ数、または＞１５％のバンド好中球）
ｃ．新たな化膿性気管内分泌物の産生
ｄ．肺炎／肺硬変と一致する新たな健康診断所見、例えば、聴診所見（例えば、水泡音、ロンカイ、気管支呼吸音）または打診による濁音
大基準：
ｅ．ｉ．少なくとも４時間維持される、＜２４０ｍｍＨｇのＰａＯ２／ＦｉＯ２比、または
ｉｉ．少なくとも４時間維持されるＰａＯ２／ＦｉＯ２の≧５０ｍｍＨｇだけの減少
により決定される酸素供給を向上させるための換気サポート系において生じる急激な変化、および
３．微生物学的確定診断（事象の発症の２４時間以内に得られる）：以下の少なくとも１つ：
ｆ．培養による緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の呼吸器検体としては、気管内吸引により、またはＢＡＬを伴う気管支鏡検査もしくは挿管対象におけるＰＳＢサンプリングにより得られる呼吸分泌物の検体が挙げられる。挿管されていないが人工呼吸のプロトコル定義に一致する対象において、喀痰の標本は許容可能である。
ｇ．緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の血液培養物（肺外側の明らかな一次感染源はない）
ｈ．肺炎のエピソード中の緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の胸膜液吸引物または肺組織培養物（対象の必須臨床管理の一部として得られる場合のみ）。
【００９２】
対象は、それらに気管内もしくは経鼻気管チューブが挿管されており、陽圧換気サポートを受けている場合、またはそれらに気管内チューブも経鼻気管チューブも挿管されていないが、直近２４時間以内に８時間以上の陽圧換気を要求する場合、人工呼吸されているとみなす。
【００９３】
緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎の診断時に人工呼吸されていない対象において、診断基準は、対象がいかなる他の非感染症例にも起因しない以下のＸ線写真、臨床および微生物学的な初発の症状／徴候を実証することを要求する。
４．Ｘ線写真基準：
ｉ．事象の２４時間以内に得られた胸部Ｘ線上の肺炎と一致する新たなまたは悪化した浸潤影（有資格放射線科医により診断）、および
５．臨床基準：以下の小基準の少なくとも２つまたは１つの大基準の初発の呼吸徴候または症状：
小基準：
ｊ．感染の全身徴候（以下の１つ以上）：異常温度（＞３８℃の口腔体温、または鼓膜温度、または≧３８．３℃の中核温、または＜３５℃の中核体温により定義される低体温症）、および／または異常なＷＢＣ数（＞１０，０００個の細胞／ｍｍ３のＷＢＣ数、＜４，５００個の細胞／ｍｍ３のＷＢＣ数、または＞１５％のバンド好中球）
ｋ．咳嗽の初発（または咳嗽の悪化）
ｌ．膿性痰の産生
ｍ．肺炎／肺硬変と一致する新たな健康診断の所見、例えば、聴診所見（例えば、水泡音、ロンカイ、気管支呼吸音）、打診による濁音、または胸膜炎性胸痛
ｎ．呼吸困難、頻呼吸（＞３０回の呼吸数／分の呼吸速度）、または
ｉｉｉ．ベースライン未満である場合、室温での＜９０％の酸素（Ｏ２）飽和度もしくは＜６０ｍｍＨｇのＰａＯ２、もしくは
ｉｖ．事象前ベースラインＯ２飽和度を維持するためのＯ２の持続（≧３時間）補給を開始または増加させる必要性
により定義される低酸素血症
大基準：
ｏ．呼吸不全または呼吸状態の悪化のため、非侵襲的人工呼吸を開始し、または侵襲的人工呼吸を再開させる必要性、および
６．微生物学的確定診断（事象の発症の７２時間以内に得られる）：以下の少なくとも１つ：
ｐ．培養による緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の呼吸器検体。喀痰または（対象の必須臨床管理の一部として得られる場合のみ）ＢＡＬを伴う気管支鏡検査もしくはＰＳＢサンプリングにより得られる呼吸器分泌物の検体のいずれかが挙げられる
ｑ．緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の血液培養物（肺外側の明らかな他の一次感染源はない）
ｒ．肺炎のエピソード中の緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）について陽性の胸膜液吸引物または肺組織培養物（対象の必須臨床管理の一部として得られる場合のみ）。
【００９４】
対象は、気管内または経鼻気管チューブが配置されておらず、対象が陽圧換気サポートを少なくとも８時間要求しない場合、人工呼吸されているとみなされない。
【００９５】
投与２１日後までの緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎の発生率を計算して、１５００ｍｇまたは３０００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２の投与が緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎の発生率を低減させることを実証する。投与２１日後までの緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）肺炎の発生率を、人工呼吸されている対象および人工呼吸がもはや要求されない対象において比較する。
【００９６】
有害事象および初発の慢性疾患をレビューして１５００または３０００ｍｇのＭＥＤＩ３９０２の投与が安全であることを実証する。
【００９７】
実施例３：ＭＥＤＩ３９０２は、より低い細菌負荷において急性肺炎モデルの致死率を低減させる
ＭＥＤＩ３９０２投与のインビボ効果は、急性肺炎モデルを使用するマウスにおいて試験した。マウスの群（ｎ＝６）に、漸減濃度のＭＥＤＩ３９０２（１．０ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、または０．２ｍｇ／ｋｇ）、またはアイソタイプ対照ＩｇＧ抗体（陰性対照、０．７５ｍｇ／ｋｇ）のいずれかを腹腔内（ＩＰ）注射した。処理２４時間後、全てのマウスに２×１０５ＣＦＵの緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）株６２０６（１×ＬＤ１００）を経鼻感染させた。図３に示されるとおり、全ての対照処理動物は、感染１２０時間後までに感染により死亡した。しかしながら、ＭＥＤＩ３９０２は、全ての用量にわたり１×ＬＤ１００でも完全な保護を示し、ヒトにおける１．７μｇ／ｍＬのより低い標的血清レベルが緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）のほとんどの株にわたり保護を提供することを示唆した。
【００９８】
本開示の幅および範囲は、上記の例示的実施形態のいかなるものによっても限定されるべきではないが、以下の特許請求の範囲およびその均等物に従ってのみ定義されるべきである。
【図１】
2018535227.tif 000008
【図２】
2018535227.tif 000009
【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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