(57)【要約】  式(I)の化合物及び当該化合物を含む組成物でウイルス感染症を治療する方法を開示する。2018536000.tif 000029
2018536000.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式I:
【化１】
2018536000.tif 000027
[式中:
Xは、O又はCH2であり;
R1は、C1〜6アルキルであり、前記アルキルは、シクロアルキル部分を含有してもよく;
Wは、結合、-CH=CH-、-C≡C-、C1〜3アルキレン、-CH2C(O)NH-、-NHC(O)-、-N(CH3)C(O)-、-N(CH3)C(O)CH2-、-C(O)-、-CH2C(O)-、又は-NHC(O)CH2-であり、各Wは、1個又は2個のメチル基により場合により置換されており;
R2は、H、C1〜6アルキル、C5〜14アリール、C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリールであり、各R2基は、ハロ、C1〜6アルキル、C1〜6ヘテロアルキル、又はC1〜6アルキレン若しくはC1〜6ヘテロアルキレンから選択される1〜4個の置換基により場合により置換されており、前記C1〜6アルキレン又はC1〜6ヘテロアルキレンは、前記C5〜14アリール、C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリール上で隣接する炭素原子に結合して縮合環を形成しており;
Lは、結合、-CH2(CO)-、-C1〜3アルキレン-、-SO2-、-C(O)-、-C(S)-、-C(NH)-、-C(O)NH-、-C(O)NHCH2-、-C(O)N-、-C(O)OCH2-、-C(O)O-、-C(O)C(O)-、-SO2-NH-、又は-CH2C(O)-であり;
R3は、H、CN、オキソ、C1〜6アルキル、C5〜14アリール、CH2C5〜14アリール、CH2C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルキル、C3〜7スピロシクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、若しくはC5〜9ヘテロアリールであるか、又はR3は、1個のR6と共に結び付いて縮合5〜7員環を形成してもよく、各R3基は、ハロ、オキソ、C1〜6アルキル、C3〜7シクロアルキル、C1〜3フルオロアルキル、-OC1〜6アルキル、-C(O)R4、-C(O)NR4、-C(O)NHR4、C5〜14アリール、C1〜6ヘテロアルキル、-B(OH)2、C3〜9ヘテロ環、C5〜9ヘテロアリール、-C(O)OC1〜6アルキルから選択される1〜4個の置換基により場合により置換されているか、又は2個の置換基は、共に結合して縮合環、スピロ環、若しくは架橋環を形成してもよく、その縮合環、スピロ環、若しくは架橋環は、R4で場合により置換されていてもよく;
R4は、CN、ハロ、-OC1〜6アルキル、C1〜6アルキル、C3〜7シクロアルキル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜14アリールであり;
各R5は、独立して、H、C1〜3アルキル、C3〜6シクロアルキル、CH2F、CHF2、又はCF3であり;
各R6は、独立して、H、又はC1〜3アルキル、C5〜14アリール、C3〜9ヘテロ環、C5〜9ヘテロアリール、-C(O)NR4、若しくは-C(O)NHR4であるか、又は両方のR6は共に、2〜4個の炭素原子を含み、共に結び付いて架橋環系を形成してもよく;但し、少なくとも1個のR6は、H以外のものであり;
各ヘテロ環、ヘテロアリール、ヘテロアルキル及びヘテロアルキレンは、S、N、B、又はOから選択される1〜3個のヘテロ原子を含む]
の化合物。
【請求項２】
R1がC1〜6アルキルである、請求項1に記載の化合物。
【請求項３】
XがOである、請求項1又は2に記載の化合物。
【請求項４】
Wが結合である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項５】
R2が、場合により置換されたフェニルである、請求項1〜4のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項６】
R2が、フッ素、メチル、-CH2CH2CH2O-(前記-CH2CH2CH2O-は、前記フェニル上で隣接する炭素原子と結合して二環式環を形成する)、又は-NHCH2CH2O-(前記-NHCH2CH2O-は、前記フェニル上で隣接する炭素原子と結合して二環式環を形成する)から選択される1〜4個の置換基により置換されたフェニルである、請求項5に記載の化合物。
【請求項７】
R3が、C1〜6アルキル、フェニル、ナフチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピリジル、又はテトラヒドロピラニルであり、これらはそれぞれハロゲン、C1〜6アルキル、-OC1〜6アルキル、C1〜3フルオロアルキル又はフェニルから選択される1〜3個の置換基により場合により置換されている、請求項1〜6のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項８】
各R5がメチルである、請求項1〜7のいずれか1項に記載の化合物。
【請求項９】
XR1が結合している炭素の立体化学が、以下に示す通りである、請求項1〜8のいずれか1項に記載の化合物。
【化２】
2018536000.tif 000028
【請求項１０】
請求項1〜9のいずれか1項に記載の化合物の薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物又は塩を含む、医薬組成物。
【請求項１２】
ウイルスのレトロウイルス科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された患者のウイルス感染症を治療する方法であって、前記患者に請求項11に記載の組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１３】
前記ウイルス感染症が、HIVウイルスによって媒介される、請求項12に記載の方法。
【請求項１４】
薬物療法に使用するための、請求項1〜10のいずれか1項に定義される化合物又は塩。
【請求項１５】
ヒトにおけるウイルス感染症の治療に使用するための、請求項1〜10のいずれか1項に定義される化合物又は塩。
【請求項１６】
ヒトにおけるウイルス感染症の治療に使用するための医薬品の製造における、請求項1〜10のいずれか1項に定義される化合物又は塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、置換されたイソインドリン化合物、医薬組成物、及びこのような化合物を投与することにより、(i)HIVに感染した対象におけるHIV複製を阻害するか、又は(ii)HIVに感染した対象を治療するための、それらの使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒト免疫不全ウイルス1型(HIV-1)は、後天性免疫不全疾患(AIDS)の罹患をもたらす。HIVの症例数は増加し続け、現在、世界で2500万人以上が当該ウイルスに罹患している。今日、抗レトロウイルス薬によるウイルス複製の長期的な抑制が、HIV-1感染症の治療のための唯一の選択肢である。確かに、米国食品医薬品局は、6つの異なる阻害剤クラスに亘る25種類の薬物を承認し、この承認によって患者の生存及びQOLをかなり向上させた。しかし、望ましくない薬物間相互作用、薬物-食物相互作用、治療に対するノンアドヒアランス、及び酵素標的の変異による薬物耐性により、追加の治療が依然として必要とされている。
【０００３】
現在、ほとんど全てのHIV陽性患者が高活性抗レトロウイルス剤療法(「HAART」)と呼ばれる抗レトロウイルス薬の併用の治療方式で治療を受けている。しかし、HAART療法は、薬物耐性HIV-1変異株の急速な出現を避けるために、異なる薬物の組み合わせを患者に毎日投与しなければならないことが多いため、複雑になることが多い。HAARTが患者の生存に良い影響を与えるにもかかわらず、薬物耐性が依然として発生する可能性がある。多剤耐性HIV-1分離株の出現は、深刻な臨床結果を示し、サルベージ療法として知られている薬物による新治療方式で抑制しなければならない。
【０００４】
現在のガイドラインでは、サルベージ療法に少なくとも2つ、好ましくは3つの十分に活性な薬物を含めることを推奨している。典型的には、第一選択治療は、ウイルス逆転写酵素及びプロテアーゼを標的とする3〜4つの薬物を組み合わせる。サルベージ療法の1つの選択肢は、耐性分離株に対して活性を維持している、同じ機序的クラスからの異なる組み合わせの薬物を投与することである。しかし、耐性変異が同じクラスの異なる薬物に広範な交差耐性を頻繁に与えるために、サルベージ療法のアプローチの選択肢が限定的であることが多い。最近、代替治療戦略が融合、侵入及びインテグラーゼ阻害剤の開発で利用可能になってきている。しかし、3つの新薬クラス全てに対する耐性が、検査室と患者の両方で、既に報告されている。したがって、抗レトロウイルス薬によるHIV-1感染患者の持続的な好成績の治療には、新しい標的及び作用機序を有する新しい改良された薬物の継続的な開発が必要とされる。
【０００５】
例えば、過去10年間に亘るHIV阻害剤は、HIV-1インテグラーゼと水晶体上皮細胞由来増殖因子/p75(「LEDGF」)とのタンパク質間相互作用を標的とすることが報告されている。LEDGFは、組込み前複合体をクロマチンに繋ぎ止めることによって、逆転写ウイルスcDNAを宿主細胞のゲノムにウイルスで組み込むことを促進する、HIV-1インテグラーゼの細胞転写補助因子である。HIV複製の初期段階における決定的に重要な役割のために、LEDGFとインテグラーゼとの相互作用はHIV薬物治療の別の魅力的な標的でもある。
【０００６】
米国仮特許出願第62/027,359号は、以下の式:
【０００７】
【化１】
2018536000.tif 000003
を有する特定のイソインドリン化合物を開示している。
【発明の概要】
【０００８】
手短に言えば、一態様において、本発明は、式I:
【０００９】
【化２】
2018536000.tif 000004
[式中:
Xは、O又はCH2であり;
R1は、C1〜6アルキルであり、前記アルキルは、シクロアルキル部分を含有してもよく;
Wは、結合、-CH=CH-、-C≡C-、C1〜3アルキレン、-CH2C(O)NH-、-NHC(O)-、-N(CH3)C(O)-、-N(CH3)C(O)CH2-、-C(O)-、-CH2C(O)-、又は-NHC(O)CH2-であり、各Wは、1個又は2個のメチル基により場合により置換されており;
R2は、H、C1〜6アルキル、C5〜14アリール、C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリールであり、各R2基は、ハロ、C1〜6アルキル、C1〜6ヘテロアルキル、又はC1〜6アルキレン若しくはC1〜6ヘテロアルキレンから選択される1〜4個の置換基により場合により置換されており、前記C1〜6アルキレン又はC1〜6ヘテロアルキレンは、前記C5〜14アリール、C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜9ヘテロアリール上で隣接する炭素原子に結合して縮合環を形成しており;
Lは、結合、-CH2(CO)-、-C1〜3アルキレン-、-SO2-、-C(O)-、-C(S)-、-C(NH)-、-C(O)NH-、-C(O)NHCH2-、-C(O)N-、-C(O)OCH2-、-C(O)O-、-C(O)C(O)-、-SO2-NH-、又は-CH2C(O)-であり;
R3は、H、CN、C1〜6アルキル、C5〜14アリール、CH2C5〜14アリール、CH2C3〜7シクロアルキル、C3〜7シクロアルキル、C3〜7スピロシクロアルキル、C3〜7シクロアルケニル、C3〜9ヘテロ環、若しくはC5〜9ヘテロアリール、オキソであるか、又はR3は、R6若しくはR7と共に結び付いて縮合5〜7員環を形成してもよく、各R3基は、ハロ、オキソ、C1〜6アルキル、C3〜7シクロアルキル、C1〜3フルオロアルキル、-OC1〜6アルキル、-C(O)R4、-C(O)NR4、-C(O)NHR4、C5〜14アリール、C1〜6ヘテロアルキル、-B(OH)2、C3〜9ヘテロ環、C5〜9ヘテロアリール、-C(O)OC1〜6アルキルから選択される1〜4個の置換基により場合により置換されているか、又は2個の置換基は、共に結合して縮合環、スピロ環、若しくは架橋環を形成してもよく、その縮合環、スピロ環、若しくは架橋環は、R4で場合により置換されていてもよく;
R4は、CN、ハロ、-OC1〜6アルキル、C1〜6アルキル、C3〜7シクロアルキル、C3〜9ヘテロ環、又はC5〜14アリールであり;
各R5は、独立して、H、C1〜3アルキル、C3〜6シクロアルキル、CH2F、CHF2、又はCF3であり;
各R6は、独立して、H、又はC1〜3アルキル、C5〜14アリール、C3〜9ヘテロ環、C5〜9ヘテロアリール、-C(O)NR4、若しくは-C(O)NHR4であるか、又は両方のR6は共に、2〜4個の炭素原子を含み、共に結び付いて架橋環系を形成してもよく;但し、少なくとも1個のR6は、H以外のものであり;
各ヘテロ環、ヘテロアリール、ヘテロアルキル及びヘテロアルキレンは、S、N、B、又はOから選択される1〜3個のヘテロ原子を含む]
の化合物を開示する。
【００１０】
別の態様では、本発明は、式Iの化合物の薬学的に許容される塩を開示する。
【００１１】
別の態様では、本発明は、式Iの化合物又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を開示する。
【００１２】
別の態様では、本発明は、ウイルスのレトロウイルス(retrovirus)科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された患者のウイルス感染症を治療する方法であって、式Iの化合物又はその薬学的に許容される塩を含む組成物を当該患者に投与することを含む、方法を開示する。いくつかの実施形態では、ウイルス感染症はHIVウイルスによって媒介される。
【００１３】
別の態様では、本発明の特定の実施形態は、HIVに感染した対象を治療する方法であって、治療有効量の式Iの化合物又はその薬学的に許容される塩を当該対象に投与することを含む、方法を提供する。
【００１４】
さらに別の態様では、本発明の特定の実施形態はHIVに感染するリスクのある対象のHIV感染の進行を阻害する方法であって、治療有効量の式Iの化合物又はその薬学的に許容される塩を当該対象に投与することを含む、方法を提供する。これら及びその他の実施形態は以下にさらに記述する。
【００１５】
本発明の別の実施形態に従って、ウイルスのレトロウイルス科に属するウイルスによって少なくとも部分的に媒介された、哺乳動物のウイルス感染症を予防又は治療する方法を提供し、当該方法は、前記ウイルス感染症と診断された、又は前記ウイルス感染症を発現するリスクのある哺乳動物に、式Iに定義される化合物を投与することを含み、前記ウイルスはHIVウイルスであり、さらに、HIVウイルスに対して活性の治療有効量の1つ以上の薬剤を投与することを含み、HIVウイルスに対して活性の前記薬剤はヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、非ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、侵入、結合及び融合阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、成熟阻害剤、CXCR4阻害剤、及びCCR5阻害剤から成る群から選択される。
［発明の詳細な説明］
【００１６】
好ましくは、R1は、C1〜6アルキルである。最も好ましくは、R1は、t-ブチルである。
【００１７】
好ましくは、Xは、Oである。
【００１８】
好ましくは、Wは、結合である。
【００１９】
好ましくは、R2は、場合により置換されたフェニルである。最も好ましくは、R2は、フッ素、メチル、-CH2CH2CH2O-(前記-CH2CH2CH2O-は、前記フェニル上で隣接する炭素原子と結合して二環式環を形成する)、又は-NHCH2CH2O-(前記-NHCH2CH2O-は、前記フェニル上で隣接する炭素原子と結合して二環式環を形成する)から選択される1〜4個の置換基により置換されたフェニルである。
【００２０】
好ましくは、R3は、C1〜6アルキル、フェニル、ナフチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピリジル、又はテトラヒドロピラニルであり、これらはそれぞれハロゲン、C1〜6アルキル、-OC1〜6アルキル、C1〜3フルオロアルキル又はフェニルから選択される1〜3個の置換基により場合により置換されている。
【００２１】
好ましくは、各R5は、メチルである。
【００２２】
好ましくは、XR1が結合している炭素の立体化学は、以下に示す通りである。
【００２３】
【化３】
2018536000.tif 000005
【００２４】
「薬学的に許容される塩」は、当該技術分野で周知の様々な有機及び無機対イオンから生じる薬学的に許容される塩を指し、例に過ぎないが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、及びテトラアルキルアンモニウムを含み、分子が塩基性官能基を有する場合は、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、及びシュウ酸塩等の有機酸又は無機酸の塩を含む。適切な塩として、P.Heinrich Stahl、Camille G.Wermuth(Eds.)、Handbook of Pharmaceutical Salts Properties,Selection,and Use;2002年に記載の塩が挙げられる。
【００２５】
[実施例]
本発明の化合物は、周知の標準的な合成方法を含む様々な方法によって作製することができる。例示的な一般合成方法を以下に示し、次いで本発明の特定の化合物を実施例で調製する。
【００２６】
以下の実施例は、上記の本発明の製造及び使用方法をより完全に説明するものである。これらの実施例は、本発明の真の範囲を限定するものでは決してなく、例証の目的のために提示されたものであることが理解される。以下の実施例及び上記の合成スキームにおいて、下記の略語は下記の意味を有する。略語が定義されていない場合は、略語はその一般に容認されている意味を有する。
aq.=水溶液
μL=マイクロリットル
μM=マイクロモル
NMR=核磁気共鳴
boc=tert-ブトキシカルボニル
br=広域
Cbz=ベンジルオキシカルボニル
d=二重線
δ=化学シフト
℃=摂氏度
DCM=ジクロロメタン
dd=二重線の二重線
DMEM=ダルベッコ変法イーグル培地
DMF=N,N-ジメチルホルムアミド
DMSO=ジメチルスルホキシド
EtOAc=酢酸エチル
g=グラム
h又はhr=時間
HCV=C型肝炎ウイルス
HPLC=高速液体クロマトグラフィー
Hz=ヘルツ
IU=国際単位
IC50=50%阻害の阻害濃度
J=結合定数(別段の定めがない限り、Hzで示される)
m=多重線
M=モーラー
M+H+=親マススペクトルピーク+H+
mg=ミリグラム
min=分
mL=ミリリットル
mM=ミリモーラー
mmol=ミリモル
MS=マススペクトル
nm=ナノモーラー
ppm=百万分率
q.s.=十分量
s=一重線
RT=室温
sat.=飽和
t=三重線
TFA=トリフルオロ酢酸
Z=ベンジルオキシカルボニル
【００２７】
【化４】
2018536000.tif 000006
【００２８】
(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート
【００２９】
【化５】
2018536000.tif 000007
【００３０】
工程1:エチル2-ヒドロキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート。
【００３１】
【化６】
2018536000.tif 000008
無水THF(2.5L)中のTMS-アセチレン(250g、2.55mol)の氷冷溶液を、内部温度を5℃未満に維持しながら、EtMgBr(933mL、2.80mol、Et2O中の3.0M)で滴下処理した。30分後、懸濁液を、無水THF(5L)中のグリオキシル酸エチル(624g、3.05mol、トルエン中50%)の氷冷溶液が入ったフラスコに、カニューレを用いて入れた。1時間後、反応混合物を、飽和NH4Cl水溶液(3L)でクエンチし、EtOAc(1Lで2回)で抽出した。合わせた有機物を、減圧下で濃縮した。残渣をEtOAc(3L)で希釈し、水(1Lで2回)及びブライン(1Lで2回)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(0〜10%EtOAc/石油エーテル)により精製し、標題化合物を黄色油状物として得た(285g、56%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 4.83 (d, J=7.3 Hz, 1H), 4.34 (qq, J=7.2, 10.8 Hz, 2H), 3.02 (d, J=7.3 Hz, 1H), 1.34 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.22 - 0.16 (m, 9H).
【００３２】
工程2:エチル2-アセトキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート
【００３３】
【化７】
2018536000.tif 000009
10LフラスコにEtOAc(7.5L)を入れ、続いてAc2O(400mL)を入れた。室温で30分間の撹拌後、混合物を0℃まで冷却し、さらなる分量のAc2O(2.1L)で処理した。0℃で1時間後、溶液を室温になるまで置いておいた。溶液に、エチル2-ヒドロキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート(520g、2.60mol)を添加した。室温で1時間の撹拌後、溶液を、1NのNaOH水溶液(3回、合計20L)で洗浄した。次に、溶液をブライン(5L)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、減圧下で濃縮乾固した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、0〜5%EtOAc/石油エーテル)により精製し、標題化合物を黄色油状物として得た(590g、94%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 5.69 (s, 1H), 4.36 - 4.21 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.32 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.25 - 0.15 (m, 9H).
【００３４】
工程3:(S)-エチル2-ヒドロキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート
【００３５】
【化８】
2018536000.tif 000010
アセトン(1.88L)及びリン酸緩衝液(pH7.2、7.5L)中のエチル2-アセトキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート(150g、0.620mol)の溶液に、Amano Lipase PS(75g)を添加した。20℃で終夜撹拌後、反応混合物を水(2.5L)で希釈し、EtOAc(3L)で抽出した。層を分離させ、有機層をブライン(3回、合計体積10L)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、0〜10%EtOAc/石油エーテル)により精製し、標題化合物を黄色油状物として得た(55g、44%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 4.83 (d, J=7.3 Hz, 1H), 4.34 (qq, J=7.2, 10.8 Hz, 2H), 3.02 (d, J=7.3 Hz, 1H), 1.34 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.22 - 0.16 (m, 9H).
【００３６】
工程4:(S)-エチル2-(tert-ブトキシ)-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート
【００３７】
【化９】
2018536000.tif 000011
t-BuOAc(2.5L)中の(S)-エチル2-ヒドロキシ-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート(100g、0.500mol)の溶液に、HClO4(41mL、0.500mol)を室温で滴下添加した。40分間の撹拌後、混合物をNaHCO3粉末でクエンチし、水(2L)で希釈し、EtOAc(2L)で抽出した。EtOAc溶液をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、0〜5%EtOAc/石油エーテル)により精製し、標題化合物を黄色油状物として得た(103g、81%)。1H NMR (400MHz, クロロホルム-d) δ = 4.72 (s, 1H), 4.33 - 4.20 (m, 2H), 1.31 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.28 (s, 9H), 0.17 (s, 9H).
【００３８】
【化１０】
2018536000.tif 000012
【００３９】
[実施例1]
(2S)(M)-2-(tert-ブトキシ)-2-(-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-2-(3-フルオロベンゾイル)-1-メチル-4,7-ビス(トリフルオロメチル)イソインドリン-5-イル)酢酸
【００４０】
【化１１】
2018536000.tif 000013
【００４１】
工程1:メチルN-((ベンジルオキシ)カルボニル)-N-(ブタ-2-イン-1-イル)-D-アラニネート
【００４２】
【化１２】
2018536000.tif 000014
DMF(100mL)中の1-ブロモブタ-2-イン(5.7g、43.1mmol)及びNaH(60%、2g、51mmol)の0℃溶液を、メチル((ベンジルオキシ)カルボニル)-D-アラニネート(9.3g、39.2mmol)で処理した。2時間後、得られた混合物を、飽和NH4Cl水溶液でクエンチし、EtOAcで抽出した。有機層を、ブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して粗生成物を得て、ISCO(PE中0〜10%EtOAc)により精製し、標題化合物を黄色油状物として得た(6.8g、60%収率)。LCMS(m/z ES+):290.3(M+1)。
【００４３】
工程2:N-((ベンジルオキシ)カルボニル)-N-(ブタ-2-イン-1-イル)-D-アラニン
【００４４】
【化１３】
2018536000.tif 000015
LiOH(33mL、6N)及びTHF(66mL)中のメチルN-((ベンジルオキシ)カルボニル)-N-(ブタ-2-イン-1-イル)-D-アラニネート(3.8g、13.1mmol)の溶液を、周囲温度で撹拌した。3時間後、得られた混合物を、3N HClで酸性化し、EtOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題化合物を黄色油状物として得て(3.5g、97%収率)、これはさらに精製することなく次の工程で使用した。LCMS(m/z ES-):274.3(M-1)。
【００４５】
工程3:ベンジル(R)-ブタ-2-イン-1-イル(1-(メトキシ(メチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート
【００４６】
【化１４】
2018536000.tif 000016
DMF(30mL)中のN-((ベンジルオキシ)カルボニル)-N-(ブタ-2-イン-1-イル)-D-アラニン(3.5g、12.7mmol)、N,O-ジメチルヒドロキシルアミン、HCl塩(1.6g、16.5mmol)、及びDIPEA(3mL)の混合物を、HBTU(7.4g、19.1mmol)で処理した。1時間後、得られた混合物を、飽和NaHCO3水溶液でクエンチし、EtOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(PE中0〜15%EtOAc)により精製し、標題化合物を無色油状物として得た(3.8g、95%収率)。LCMS(m/z ES+):319.0(M+1)。
【００４７】
工程4:ベンジル(R)-ブタ-2-イン-1-イル(1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート
【００４８】
【化１５】
2018536000.tif 000017
THF(38mL)中のベンジル(R)-ブタ-2-イン-1-イル(1-(メトキシ(メチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート(3.8g、11.9mmol)の-78℃溶液を、DIBAL-H(16mL、23.8mmol、トルエン中1.5M)で処理した。4時間後、得られた混合物を、1N HClでクエンチし、EtOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(PE中0〜15%EtOAc)により精製し、標題化合物を無色油状物として得た(2.5g、83%収率)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.63 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 7.43 - 7.28 (m, 5H), 5.17 (d, J = 15.2 Hz, 2H), 4.26 - 4.06 (m, 3H), 1.78 (t, J = 2.4 Hz, 3H), 1.45 - 1.37 (m, 3H). LCMS (m/z ES+): 260.5 (M+1).
【００４９】
工程5:ベンジル(R)-ブタ-2-イン-1-イル(ブタ-3-イン-2-イル)カルバメート
【００５０】
【化１６】
2018536000.tif 000018
MeOH(25mL)中のベンジル(R)-ブタ-2-イン-1-イル(1-オキソプロパン-2-イル)カルバメート(2.5g、9.7mmol)、ジメチル(1-ジアゾ-2-オキソプロピル)ホスホネート(2.2g、11.6mmol)及びK2CO3(2.7g、19.3mmol)の混合物を、周囲温度で撹拌した。3時間後、得られた混合物を、EtOAcとH2Oとの間で分配した。有機層を、飽和NH4Cl水溶液及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(PE中0〜10%EtOAc)により精製し、標題化合物を無色油状物として得た(1.0g、41%収率)。LCMS(m/z ES+):256.4(M+1)。
【００５１】
工程6:ベンジル(R)-ブタ-2-イン-1-イル(ペンタ-3-イン-2-イル)カルバメート
【００５２】
【化１７】
2018536000.tif 000019
THF(6mL)中のベンジル(R)-ブタ-2-イン-1-イル(ブタ-3-イン-2-イル)カルバメート(600mg、2.34mmol)の-20℃溶液を、n-BuLi(2.5M、1.87mL、4.69mmol)で処理した。1時間後、MeI(0.43mL、7.03mmol)を添加し、反応混合物を1時間にわたり周囲温度になるまで置いておいた。反応混合物を、飽和NH4Cl水溶液でクエンチし、EtOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得た。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(PE中0〜10%EtOAc)により精製し、標題化合物を無色油状物として得た(250mg、40%収率)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44 - 7.27 (m, 5H), 5.18 (s, 2H), 5.12 - 5.03 (m, 1H), 4.18 - 4.04 (m, 2H), 1.91 - 1.67 (m, 6H), 1.43 (d, J = 7.0 Hz, 3H). LCMS (m/z ES+): 270.3 (M+1).
【００５３】
工程7:(R)-ベンジル5-((S)-1-(tert-ブトキシ)-2-エトキシ-2-オキソエチル)-1,4,7-トリメチル-6-(トリメチルシリル)イソインドリン-2-カルボキシレート
【００５４】
【化１８】
2018536000.tif 000020
DCM(1mL)中の[Rh(cod)]BF4(13.3mg、0.033mmol)、(R)-BINAP(20.4mg、0.033mmol)の混合物を、周囲温度、H2雰囲気下で4時間撹拌した。反応混合物にN2を充填し、DCM(1mL)中のエチル(S)-2-(tert-ブトキシ)-4-(トリメチルシリル)ブタ-3-イノエート(120mg、0.47mmol)溶液を導入した。40℃に加熱した後、DCM(2mL)中のベンジル(R)-ブタ-2-イン-1-イル(ペンタ-3-イン-2-イル)カルバメート(250mg、0.94mmol)溶液を、反応混合物に滴下添加し、40℃で30分間撹拌した。得られた混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィー(PE中0〜10%EtOAc)により精製し、標題化合物を黄色油状物の、(R)-メチル位置異性体の1:1混合物として得た(150mg、61%収率)。LCMS(m/z ES+):526.5(M+1)。
【００５５】
工程8:(R)-ベンジル5-((S)-1-(tert-ブトキシ)-2-エトキシ-2-オキソエチル)-6-ヨード-1,4,7-トリメチルイソインドリン-2-カルボキシレート
【００５６】
【化１９】
2018536000.tif 000021
DCM(4mL)中のベンジル(R)-5-((S)-1-(tert-ブトキシ)-2-エトキシ-2-オキソエチル)-1,4,7-トリメチル-6-(トリメチルシリル)イソインドリン-2-カルボキシレート(150mg、0.286mmol)及びNaHCO3(480mg、5.71mmol)の0℃溶液を、DCM(0.3mL)中のICl(51mg、0.314mmol)溶液で処理した。20分後、得られた混合物を、飽和Na2S2O3水溶液でクエンチし、EtOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(PE中0〜20%EtOAc)により精製し、標題化合物を黄色油状物の、(R)-メチル位置異性体の1:1混合物として得た(153mg、93%収率)。LCMS(m/z ES+):580.4(M+1)。
【００５７】
工程9:(1R,6R)-ベンジル5-((S)-1-(tert-ブトキシ)-2-エトキシ-2-オキソエチル)-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-1,4,7-トリメチルイソインドリン-2-カルボキシレート
【００５８】
【化２０】
2018536000.tif 000022
DMF(2mL)中のベンジル(2S)(M)-5-(-1-(tert-ブトキシ)-2-エトキシ-2-オキソエチル)-6-ヨード-1,4,7-トリメチルイソインドリン-2-カルボキシレート(153mg、0.264mmol)、(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)ボロン酸(89mg、0.423mmol)、Pd2(dba)3(48.4mg、0.053mmol)、MePhos(19.3mg、0.053mmol)及びK3PO4(168mg、0.793mmol)の混合物を、80℃で、N2雰囲気下で撹拌した。18時間後、反応混合物を、EtOAcとH2Oとの間で分配した。有機層を、飽和NH4Cl水溶液及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(PE中0〜30%EtOAc)により精製し、標題化合物を無色油状物の、(R)-メチル位置異性体の1:1混合物として得た(80mg、50%収率)。LCMS(m/z ES+):618.6(M+1)。
【００５９】
工程10:エチル(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((1R,6R)-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-1,4,7-トリメチルイソインドリン-5-イル)アセテート
【００６０】
【化２１】
2018536000.tif 000023
MeOH(2mL)中のベンジル(1R,6R)-5-((S)-1-(tert-ブトキシ)-2-エトキシ-2-オキソエチル)-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-1,4,7-トリメチルイソインドリン-2-カルボキシレート(80mg、0.13mmol)及び10%Pd/C(40mg)の混合物を、H2雰囲気下(1気圧)で水素化した。1時間後、反応混合物をセライトのパッドを通して濾過し、残渣を減圧下で濃縮し、粗製の標題生成物を褐色油状物として得て(60mg、定量的収率)、これはさらに精製することなく次の工程で使用した。生成物は、(R)-メチル位置異性体の1:1混合物であった。LC/MS(m/z)ES+=484.1(M+1)。
【００６１】
工程11:エチル(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((1R,6R)-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-2-(3-フルオロベンゾイル)-1,4,7-トリメチルイソインドリン-5-イル)アセテート
【００６２】
【化２２】
2018536000.tif 000024
EtOAc(3mL)中のエチル(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((1R,6R)-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-1,4,7-トリメチルイソインドリン-5-イル)アセテート(60mg)及び3-フルオロ安息香酸(32mg、0.25mmol)の溶液に、プロピルホスホン酸無水物(150mg、0.25mmol、50%EtOAc溶液)及びEt3N(0.11mL、0.74mmol)を添加した。1時間後、反応混合物を、飽和NaHCO3水溶液でクエンチし、EtOAcで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(PE中0〜30%EtOAc)により精製し、標題化合物を黄色油状物の、(R)-メチル位置異性体の1:1混合物として得た(47mg、60%収率)。LC/MS(m/z)ES+=606.5(M+1)。
【００６３】
工程11:(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((1R,6R)-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-2-(3-フルオロベンゾイル)-1,4,7-トリメチルイソインドリン-5-イル)酢酸
【００６４】
【化２３】
2018536000.tif 000025
ジオキサン(4mL)及びH2O(0.7mL)中のエチル(S)-2-(tert-ブトキシ)-2-((1R,6R)-6-(8-フルオロ-5-メチルクロマン-6-イル)-2-(3-フルオロベンゾイル)-1,4,7-トリメチルイソインドリン-5-イル)アセテート(47mg、0.078mmol)の溶液を、LiOH(28mg、1.17mmol)で処理し、80℃に加熱した。18時間後、反応混合物を周囲温度まで冷却し、1N HClで酸性化し、EtOAcで抽出した。有機物層をブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を逆相HPLC(C18、0.1%のギ酸を含むH2O中の55〜100%MeCN)により精製し、標題化合物を白色粉末の、(R)-メチル位置異性体の1:1混合物として得た(4.0mg、9%収率)。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.34 (br, 1H), 7.41 - 7.32 (m, 1H), 7.32 - 7.25 (m, 1H), 7.25 - 7.20 (m, 1H), 7.11 (dd, J = 16.4, 7.9 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 5.77 - 5.59 (m, 1H), 5.04 - 4.94 (m, 1H), 4.75 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 4.19 (dd, J = 10.7, 6.0 Hz, 2H), 2.71 - 2.53 (m, 2H), 2.39 - 2.09 (m, 3H), 2.05 (dd, J = 10.1, 5.9 Hz, 2H), 1.85 - 1.73 (m, 3H), 1.65 - 1.41 (m, 6H), 1.05 (d, J = 4.7 Hz, 9H). LC/MS (m/z) ES+ = 578.6 (M+1).
【００６５】
抗HIV活性
MT4アッセイ
表1の本発明の化合物についての抗ウイルスHIV活性及び細胞毒性の値は、既述された方法に基づいて、HTLV-1形質転換細胞株MT-4において並行して測定した(Hazenら、2007年、「他の抗レトロウイルスと組み合わせた、一団のプロテアーゼ阻害耐性HIV剤に対する、新規のチロシル系ヒト免疫不全ウイルス(HIV)1型プロテアーゼ阻害剤ブレカナビル(GW640385)のインビトロ抗ウイルス活性」(Hazenら、「In vitro antiviral activity of the novel, tyrosyl-based human immunodeficiency virus (HIV) type 1 protease inhibitor brecanavir (GW640385) in combination with other antiretrovirals and against a panel of protease inhibitor-resistant HIV)」、Antimicrob.Agents Chemother.2007年、51:3147〜3154頁;及びPauwelsら、「Sensitive and rapid assay on MT-4 cells for the detection of antiviral compounds against the AIDS virus」、J.of Virological Methods 1987年、16:171〜185頁)。
【００６６】
ルシフェラーゼ活性は、cell titer glo(Promega、Madison、Wis.)を添加することにより、96時間後に測定した。細胞保護阻害率(%)のデータを、化合物を含まない対照に対してプロットした。同じ条件下で、化合物の細胞毒性は、cell titer Glo(商標)(Promega、Madison、Wis)を用いて決定した。IC50は、各化合物について3〜4倍の連続希釈を用いて10点用量反応曲線から決定し、濃度範囲は1000倍超である。
【００６７】
これらの値は、標準的な4パラメータロジスティック方程式を用いて化合物のモル濃度に対してプロットする:
y=((Vmax*x∧n)/(K∧n+x∧n))+Y2
式中:
Y2=最小のy、n=傾斜因子
Vmax=最大のy、x=化合物濃度[M]
K=EC50
【００６８】
MT4アッセイで試験したとき、化合物は、表1に示したIC50の値を有することが分かった。
【００６９】
【表１】
2018536000.tif 000026
【国際調査報告】
2018536000.tif 000030
2018536000.tif 000031
2018536000.tif 000032