(57)【要約】  本発明は、新規の医薬品と、癌（特に、脳癌）などの増殖性疾患の処置におけるその使用とに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2018505170.tif 000026
（式中、Ｘは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルであり、
Ｙは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｎ−アルキル、Ｎ−アルケニル、ＳまたはＯであり、
Ｗは、Ｏ、ＳまたはＮＨであり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｎ−アルキル、Ｎ−アルケニル、ＳまたはＯであり、
Ｒ１は、ハロ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、前記シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基は任意選択的に置換されており、
Ａｒは、アリールまたはヘテロアリール基であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２またはＮＯ２である）
の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグ。
【請求項２】
前記ＸがＣ２アルキルまたはＣ２アルケニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記ＹがＣＨ２である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
前記ＺがＮＨである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
前記ＺがＯである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
前記ＹがＮＨである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項７】
前記ＹがＯである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項８】
前記ＺがＣＨ２である、請求項１、２、６または７に記載の化合物。
【請求項９】
前記ＹおよびＺの両方がＮＨである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項１０】
前記ＷがＯである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
前記Ｒ１がハロ基である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
前記ハロ基がＢｒである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
前記Ｒ１がアリール基である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
前記アリール基が単環式または二環式である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
前記アリール基がフェニルまたはナフチルである、請求項１３または１４に記載の化合物。
【請求項１６】
前記アリール基が置換されている、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
前記置換基がハロ基およびヘテロアルキル基から選択される、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
前記ハロ基がＦである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
前記ヘテロアルキル基がＯ−アルキルである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２０】
前記Ｏ−アルキルが−ＯＣＨ３である、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
前記ヘテロアルキル基がアミノアルキルである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２２】
前記アミノアルキルが−ＣＨ２ＮＨ２である、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
前記Ｒ１がヘテロアリール基である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
前記ヘテロアリール基が単環式または二環式である、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
前記ヘテロアリール基が１つまたは複数の窒素原子を含む、請求項２３または２４に記載の化合物。
【請求項２６】
前記ヘテロアリール基がピラゾール、イソオキサゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、キノリン、ベンゾイミダゾールまたはインドールである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
前記ヘテロアリール基が置換されている、請求項２３〜２６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２８】
前記置換基がハロ基およびヘテロアルキル基から選択される、請求項２７に記載の化合物。
【請求項２９】
前記ハロ基がＦである、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
前記ヘテロアルキル基がＯ−アルキルである、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３１】
前記Ｏ−アルキルが−ＯＣＨ３である、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
前記ヘテロアルキル基がアミノアルキルである、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３３】
前記アミノアルキルが−ＣＨ２ＮＨ２である、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
前記Ｒ１がヘテロシクロアルキル基である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３５】
前記ヘテロシクロアルキル基が１つまたは複数の窒素原子を含む、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
前記ヘテロシクロアルキル基がピペラジンである、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
前記ヘテロシクロアルキル基が１つまたは複数の酸素原子を含む、請求項３４または３５に記載の化合物。
【請求項３８】
前記ヘテロシクロアルキル基がモルホリンである、請求項３７に記載の化合物。
【請求項３９】
前記ヘテロシクロアルキル基が置換されている、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４０】
前記置換基がハロ基およびヘテロアルキル基から選択される、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４１】
前記ハロ基がＦである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４２】
前記ヘテロアルキル基がＯ−アルキルである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４３】
前記Ｏ−アルキルが−ＯＣＨ３である、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４４】
前記ヘテロアルキル基がアミノアルキルである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４５】
前記アミノアルキルが−ＣＨ２ＮＨ２である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項４６】
前記Ａｒがアリール基である、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４７】
前記アリール基がフェニル基である、請求項４６に記載の化合物。
【請求項４８】
前記Ａｒがヘテロアリール基である、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４９】
前記ヘテロアリール基が１つまたは複数の窒素原子を含む、請求項４８に記載の化合物。
【請求項５０】
前記ヘテロアリール基が４または５個の環炭素原子を有する、請求項４８または４９に記載の化合物。
【請求項５１】
前記ヘテロアリール基がピリジンまたはピリミジンである、請求項４８〜５０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５２】
前記Ｒ２がＨまたはＯＨである、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５３】
前記Ｒ２がパラ位にある、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５４】
請求項１〜５３のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物を、薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と一緒に含む医薬組成物。
【請求項５５】
被験対象において増殖性障害を処置または予防する方法であって、治療的に有効な量の請求項１〜５３のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物を前記被験対象に投与することを含む方法。
【請求項５６】
被験対象において増殖性障害を処置または予防する方法であって、請求項５４に記載の医薬組成物を前記被験対象に投与することを含む方法。
【請求項５７】
前記増殖性障害が癌である、請求項５５または５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記癌が脳癌である、請求項５７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品と、癌（特に、脳癌）などの増殖性疾患の処置におけるその使用とに関する。
【背景技術】
【０００２】
脳の固形癌（すなわち、脳腫瘍）の現在の処置方法は、手術、放射線療法および化学療法のうちの１つまたは複数を含む。例えば、神経膠芽腫（人間の最も一般的な脳癌である）は、Ｓｔｕｐｐプロトコールを用いて処置される。これは、放射線／テモゾロミドに基づく化学療法の併用と、その後のテモゾロミド単独による補助化学療法とを含み、腫瘍を最大限に外科的切除した後に実行される。テモゾロミドは生存期間を（放射線のみの場合と比較して）約３カ月延長し、神経膠芽腫患者の生存期間中央値は１５カ月である。アバスチンは再発性神経膠芽腫に対して承認されているが、生存期間の改善はほとんど得られていない。
【０００３】
さらに、神経膠芽腫の５０％が上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）のシグナル伝達に依存するにもかかわらず、臨床的に利用可能なＥＧＦＲ阻害薬は神経膠芽腫の臨床試験に失敗している。いくつかの阻害薬は十分な血液脳関門（ＢＢＢ）透過性を有さなかった。また最近の研究では、神経膠芽腫はＩＩ型ＥＧＦＲ阻害薬のみに応答するが、Ｉ型阻害薬が試験されたことも明らかにされた。また神経膠芽腫の極端な不均一性および侵襲性も、分子標的療法が脳癌の有効な処置として機能しないことの一因となっている。
【０００４】
いくつかの脳以外の癌において有効であることが示されている別の種類の化合物は、チューブリン−ターゲティング化学療法薬である。しかしながら、臨床的に使用されるチューブリン阻害薬（例えば、タキソール）は、ＢＢＢを貫通することができない非常に大きい分子である。さらに、タキソールおよび他のチューブリン−ターゲティング化学療法薬（例えば、ビンブラスチンおよびビンクリスチンなど）は、重篤な副作用（例えば、化学療法誘導性の末梢神経障害）を有する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、癌などの増殖性疾患のための新規の処置を見出すこと、特に、脳癌に有効な処置を見出すことが必要とされている。
【０００６】
本明細書における任意の従来技術への言及は、この従来技術が任意の管轄権における共通の一般知識の一部を形成すること、またはこの従来技術が当業者により理解され、関連があると見なされ、そして／あるいは先行技術の他の部分と組み合わされるものであると合理的に予想され得ることの承認または示唆ではない。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は上記の問題の１つまたは複数に対処すること、および／または癌の治療における改善を提供することを追求し、第１の態様では、式（Ｉ）：
【化１】
2018505170.tif 000002
（式中、Ｘは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルであり、
Ｙは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｎ−アルキル、Ｎ−アルケニル、ＳまたはＯであり、
Ｗは、Ｏ、ＳまたはＮＨであり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｎ−アルキル、Ｎ−アルケニル、ＳまたはＯであり、
Ｒ１は、ハロ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、ここで、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基は任意選択的に置換されており、
Ａｒは、アリールまたはヘテロアリール基であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２またはＮＯ２である）
の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグを提供する。
【０００８】
化合物は式（Ｉ）：
【化２】
2018505170.tif 000003
（式中、Ｘは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルであり、
Ｙは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｎ−アルキル、Ｎ−アルケニル、ＳまたはＯであり、
Ｗは、Ｏ、ＳまたはＮＨであり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｎ−アルキル、Ｎ−アルケニル、ＳまたはＯであり、
Ｒ１は、ハロ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、ここで、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基は任意選択的に置換されており、
Ａｒは、アリールまたはヘテロアリール基であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２またはＮＯ２である）
の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグであり得るが、ただし化合物は、以下の構造：
【化３】
2018505170.tif 000004
を有さないものとする。
【０００９】
化合物は、式（Ｉ）：
【化４】
2018505170.tif 000005
（式中、Ｘは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたはＣ２〜Ｃ６アルケニルであり、
Ｙは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｎ−アルキル、Ｎ−アルケニル、ＳまたはＯであり、
Ｗは、Ｏ、ＳまたはＮＨであり、
Ｚは、ＣＨ２、ＮＨ、Ｎ−アルキル、Ｎ−アルケニル、ＳまたはＯであり、
Ｒ１は、ハロ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、ここで、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基は任意選択的に置換されており、
Ａｒは、アリールまたはヘテロアリール基であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２またはＮＯ２である）
の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグであり得るが、ただしＲ１がアリール（特に、フェニル）である場合、Ｒ１はＦによって置換されていないものとする。
【００１０】
Ｘは、Ｃ２アルキルまたはＣ２アルケニルであり得る。
【００１１】
ＹはＣＨ２であり得る。ＺはＮＨであり得る。ＺはＯであり得る。ＺはＣＨ２であり得る。
【００１２】
ＹはＮＨであり得る。ＹはＯであり得る。
【００１３】
ＹおよびＺの両方がＮＨであってもよい。
【００１４】
ＹがＣＨ２、そしてＺがＮＨであってもよい。
【００１５】
ＺがＣＨ２、そしてＹがＮＨであってもよい。
【００１６】
ＹがＣＨ２、そしてＺがＯであってもよい。
【００１７】
ＹがＯ、そしてＺがＣＨ２であってもよい。
【００１８】
ＷはＯであり得る。
【００１９】
Ｒ１はハロ基（例えば、Ｂｒ）であり得る。Ｒ１はアリール基であり得る。アリール基は単環式または二環式であり得る。アリール基はフェニルまたはナフチルであり得る。
【００２０】
アリール基は置換されていてもよい。置換基は、ハロ基およびヘテロアルキル基から選択され得る。ハロ基はＦであってもよく、ヘテロアルキル基はＯ−アルキル（例えば、−ＯＣＨ３）またはアミノアルキル（例えば、−ＣＨ２ＮＨ２）であってもよい。
【００２１】
Ｒ１はヘテロアリール基であり得る。ヘテロアリール基は単環式または二環式であり得る。ヘテロアリール基は、１つまたは複数の窒素原子を含み得る。例えば、ヘテロアリール基は、ピラゾール、イソオキサゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、キノリン、ベンゾイミダゾールまたはインドールであり得る。ヘテロアリール基は置換されていてもよい。例えば、置換基は、ハロ基（例えば、Ｆ）またはヘテロアルキル基（例えば、−ＯＣＨ３などのＯ−アルキル、または−ＣＨ２ＮＨ２などのアミノアルキル）であり得る。
【００２２】
Ｒ１はヘテロシクロアルキル基であり得る。ヘテロシクロアルキル基は、１つまたは複数の窒素原子を含み得る。ヘテロシクロアルキル基はピペラジンであり得る。ヘテロシクロアルキル基は、１つまたは複数の酸素原子を（１つまたは複数の窒素原子に加えて、またはこれらの代替として）含み得る。ヘテロシクロアルキル基はモルホリンであり得る。ヘテロシクロアルキル基は、例えば、ハロ基（例えば、Ｆ）またはヘテロアルキル基（例えば、−ＯＣＨ３などのＯ−アルキル、または−ＣＨ２ＮＨ２などのアミノアルキル）によって置換されていてもよい。
【００２３】
Ａｒはアリール基であり得る。アリール基はフェニルであり得る。一実施形態では、Ａｒはヘテロアリール基である。ヘテロアリール基は、１つまたは複数の窒素原子および／またはＮＨ基を含み得る。ヘテロアリール基は４または５個の環炭素原子を有し得る。ヘテロアリール基はピリジンまたはピリミジンであり得る。
【００２４】
Ｒ２は、ＨまたはＯＨであり得る。Ｒ２はパラ位であってもよい。
【００２５】
式（Ｉ）の化合物は、以下から選択され得る：
【化５】
2018505170.tif 000006
【化６】
2018505170.tif 000007
【化７】
2018505170.tif 000008
【００２６】
式（Ｉ）の化合物は、以下から選択され得る：
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド
４−（４−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド
４−（４−（２，６−ジフルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド
４−（４−（６−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド
Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（ピリジン−３−イル）フェニル）ブタンアミド
Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（２−メトキシピリミジン−５−イル）フェニル）ブタンアミド
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−フェニルブタンアミド
４−（４−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−フェニルブタンアミド
Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（ピリミジン−５−イル）フェニル）ブタンアミド
４−（４’−（アミノメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド
Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（キノリン−３−イル）フェニル）ブタンアミド。
【００２７】
第２の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物（本発明の第１の態様に従う）を、薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と一緒に含む医薬組成物に関する。
【００２８】
本発明に従う化合物および医薬組成物は、増殖性疾患の処置または予防のために適切であり得る。従って、別の態様では、本発明は、被験対象において増殖性疾患を処置または予防する方法に関し、本方法は、有効量の本発明の第１の態様に従う式（Ｉ）の化合物または本発明の第２の態様に従う医薬組成物を被験対象に投与することを含む。
【００２９】
さらなる態様では、本発明は、増殖性疾患を処置または予防するための薬剤の製造における、本発明の第１の態様に従う式（Ｉ）の化合物または本発明の第２の態様に従う医薬組成物の使用に関する。
【００３０】
さらなる態様では、本発明は、被験対象における増殖性疾患の処置または予防のための、本発明の第１の態様に従う式（Ｉ）の化合物または本発明の第２の態様に従う医薬組成物の使用に関する。
【００３１】
さらなる態様では、本発明は、被験対象における増殖性疾患の処置または予防において使用するための、本発明の第１の態様に従う式（Ｉ）の化合物または本発明の第２の態様に従う医薬組成物に関する。
【００３２】
一実施形態では、増殖性疾患は癌である。癌は、脳癌、乳癌、肺癌、前立腺癌、卵巣癌、子宮癌、皮膚癌、結腸癌および膀胱癌からなる群から選択され得る。
【００３３】
癌は原発性であり得る。癌は転移性であり得る。癌は良性であり得る。癌は悪性であり得る。
【００３４】
癌は、脳癌（例えば、未分化星状細胞腫、星状細胞腫、中枢神経細胞腫、脈絡叢癌、脈絡叢乳頭腫、脈絡叢腫瘍、びまん性内因性橋膠腫、胚芽異形成性神経上皮腫瘍、上衣腫瘍、線維性星状細胞腫、巨細胞神経膠芽腫、多形神経膠芽腫、大脳神経膠腫症、神経膠肉腫、血管周囲細胞腫、髄芽細胞腫、髄様上皮腫、髄膜癌腫症、神経芽細胞腫、神経細胞腫、乏突起星状細胞腫、乏突起神経膠腫、視神経鞘髄膜腫、小児上衣腫、毛様細胞性星状細胞腫、松果体芽細胞腫、松果体細胞腫、多形未分化神経芽細胞腫、多形黄色星状細胞腫、原発性中枢神経系リンパ腫、蝶形骨翼髄膜腫（ｓｐｈｅｎｏｉｄ  ｗｉｎｇ  ｍｅｎｉｎｇｉｏｍａ）、上衣下巨細胞性星状細胞腫、上衣下腫、三側性網膜芽細胞腫）であり得る。脳癌は原発性癌（例えば、神経膠腫、髄膜腫、下垂体腺腫または神経鞘腫瘍）であり得る。脳癌は転移性癌（例えば、メラノーマまたは肺癌の結果）であり得る。
【００３５】
さらなる態様では、本発明は、被験対象における固形腫瘍の再発を完全または部分的に予防する方法に関し、本方法は、有効量の本発明の第１の態様に従う式（Ｉ）の化合物または本発明の第２の態様に従う医薬組成物を被験対象に投与することを含む。
【００３６】
別の態様では、本発明は、固形腫瘍の再発を完全または部分的に予防するための薬剤の製造における、本発明の第１の態様に従う化合物または本発明の第２の態様に従う医薬組成物の使用に関する。
【００３７】
さらなる態様では、本発明は、被験対象における固形腫瘍の再発を完全または部分的に予防するための、本発明の第１の態様に従う式（Ｉ）の化合物または本発明の第２の態様に従う医薬組成物の使用に関する。
【００３８】
さらなる態様では、本発明は、被験対象における固形腫瘍の再発の完全または部分的な予防において使用するための、本発明の第１の態様に従う式（Ｉ）の化合物または本発明の第２の態様に従う医薬組成物に関する。
【００３９】
固形腫瘍は脳癌（例えば、神経膠芽腫、星状細胞腫、神経膠腫）であり得る。脳癌は原発性癌であり得る。脳癌は転移性癌であり得る。
【００４０】
式（Ｉ）の化合物は治療において単独で、あるいは例えば併用療法の一部として、１つまたは複数の他の治療薬と組み合わせて使用され得る。
【００４１】
本発明の更なる態様および前述の段落に記載される態様のさらなる実施形態は、例として与えられる以下の記載から、そして添付図面を参照すれば明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】癌細胞の生存率およびＳＣ−３８の細胞毒性を試験するためのＳＣ−３８による種々の癌細胞株の処理の結果である。
【図２】悪性細胞に関するＳＣ−３８の細胞毒性を試験するためのＳＣ−３８による種々の癌細胞株の処理の結果を示す。
【図３】化合物１〜１８の脳への取込みを示す。
【図４】Ｕ８７およびＵ８７ｖＩＩＩ細胞におけるＳＣ−３８誘導性アポトーシスを示す。
【図５】ＳＣ−３８処理後のＵ８７およびＵ８７ｖＩＩＩ細胞におけるＰＡＲＰ切断のウエスタンブロット分析を示す。（Ａ）Ｕ８７（レーン１〜３）およびＵ８７ｖＩＩＩ（レーン４〜６）細胞を１および５μＭのＳＣ−３８により４８時間処理した。３回の独立した実験の代表的なブロットが示される。負荷対照としてＧＡＰＤＨを使用した。（Ｂ）ＰＡＲＰ切断を定量化し、ＧＡＰＤＨに対して基準化した（倍数変化として表される）。結果は、３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。一元配置ＡＮＯＶＡおよびその後のＤｕｎｎｅｔのポストテストを用いて統計的有意性を決定した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊＊Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。
【図６】化合物１−０８は、Ｕ８７およびＵ８７ｖＩＩＩ細胞においてアポトーシスを誘導した。Ｕ８７（Ａ−Ｂ）およびＵ８７ｖＩＩＩ（Ｃ−Ｄ）細胞を化合物１−０８で４８時間処理し、アネキシン−ＦＩＴＣ／７−ＡＡＤにより染色した。ＭＵＳＥセルアナライザー（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いてアポトーシス細胞を可視化した。結果は、３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。一元配置ＡＮＯＶＡおよびその後のＤｕｎｎｅｔのポストテストを使用して、統計的有意性を計算した（＊＊＊Ｐ＜０．００１）。
【図７】化合物１−０８処理後のＵ８７およびＵ８７ｖＩＩＩ細胞におけるＰＡＲＰ切断のウエスタンブロット分析を示す。（Ａ）Ｕ８７（レーン１〜３）およびＵ８７ｖＩＩＩ（レーン４〜６）細胞を１および５μＭの化合物１−０８により４８時間処理した。３回の独立した実験の代表的なブロットが示される。負荷対照としてＧＡＰＤＨを使用した。（Ｂ）ＰＡＲＰの切断を定量化し、ＧＡＰＤＨに対して基準化した（倍数変化として表される）。結果は、３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。一元配置ＡＮＯＶＡおよびその後のＤｕｎｎｅｔのポストテストを用いて統計的有意性を決定した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。
【図８】Ｕ８７、Ｕ８７ｖＩＩＩおよびＵ２５１中のＢｃｌ−２ファミリータンパク質に対するＳＣ−３８処理の効果を示す。
【図９】Ｕ８７、Ｕ８７ｖＩＩＩおよびＵ２５１中のＢｃｌ−２ファミリータンパク質に対する化合物１−０８処理の効果を示す。Ｕ８７（レーン１〜３）、Ｕ８７ｖＩＩＩ（レーン４〜６）およびＵ２５１（レーン７〜９）細胞。代表的なブロットは（Ａ）に示され、相対的なタンパク質の発現として提示される定量化は（Ｂ〜Ｅ）に示される。結果は２回の独立した実験からの平均±ＳＥＭであり、対応のないｔ検定を使用して統計的有意性を決定した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１）。
【図１０】化合物１−０８（「ｃｍｐｄ１３」および「化合物１３」と称される）は、微小管破壊と一致する作用機構を示す。（Ａ）化合物１−０８は、インビトロでチューブリン重合を阻害する。データは、少なくとも３回の独立した実験からの平均で表され、各データポイントをトリプリケートで実施した。（Ｂ）化合物１−０８（２４時間）で処理したＵ８７細胞は、Ａｌｅｘａ４８８標識化抗βチューブリン抗体（緑色）またはＤＡＰＩ（青色）により染色した。処理は微小管ネットワークを強く妨害し、多核細胞の形成を引き起こした（白色矢印）。白色スケールバーは５０μｍを表す。多核細胞を手作業で数え、各サンプルにつき少なくとも２００個の細胞を数えた。棒グラフのデータ（Ｃ）は、平均±ＳＥＭで表される（ｎ＝３；＊Ｐ＜０．０５、＊＊＊Ｐ＜０．００１；一元配置ＡＮＯＶＡおよびその後のＮｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓのポストテスト）。（Ｄ）Ｕ８７細胞を化合物１−０８（４８時間）で処理し、（Ｂ）と同様にチューブリンおよびＤＮＡを染色した。１−０８による処理は、不完全な紡錘体形成を引き起こした。３回の独立した実験からの代表的な画像が示される。白色スケールバーは２μｍを表す。
【図１１】２つの神経膠芽腫サブタイプを表す原発性神経膠腫球における、ＳＣ−３８（「ＣＭＰＤ１」と称される）、化合物１−０８（「ｃｍｐｄ１３」と称される）、化合物１−１８（「ｃｍｐｄ７」と称される）、および化合物１−３８（「ｃｍｐｄ１０」と称される）の効力を示す。（Ａ）ＲＮ１、古典的、および（Ｂ）ＷＫ１、間葉系。試験化合物の細胞効力（ＥＣ５０）は、薬物処理の７２時間後にＡｌａｍａｒＢｌｕｅ細胞生存率アッセイを用いて決定した。データは、トリプリケートで実施される３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
本発明は、式（Ｉ）の化合物が癌（特に、脳癌）などの増殖性疾患の処置における予想外の改善を提供するという驚くべき知見に基づく。
【００４４】
化合物は、一般的に、本明細書では標準命名法を用いて記載される。不斉中心を有する化合物の場合、他に規定されない限り、光学異性体およびその混合物の全てが包含されることは理解されるであろう。また２つ以上の不斉要素を有する化合物はジアステレオマーの混合物として存在することができる。さらに、炭素−炭素二重結合を有する化合物はＺ型およびＥ型で存在することができ、化合物の全ての異性体型は、他に規定されない限り本発明に含まれる。化合物が種々の互変異性型で存在する場合、記載される化合物は、どの１つの特定の互変異性体にも限定されず、むしろ全ての互変異性型を包含することが意図される。記載される化合物はさらに、１つまたは複数の原子が同位体、すなわち同じ原子番号を有するが質量数が異なる原子で置換された化合物を包含することが意図される。一般的な例として、そして限定することなく、水素の同位体はトリチウムおよび重水素を含み、炭素の同位体は１１Ｃ、１３Ｃ、および１４Ｃを含む。
【００４５】
１つまたは複数の不斉中心を有する、本明細書で提供される式に従う化合物は、少なくとも５０％のエナンチオマー過剰率を有する。例えば、このような化合物は、少なくとも６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９８％のエナンチオマー過剰率を有し得る。化合物のいくつかの実施形態は、少なくとも９９％のエナンチオマー過剰率を有する。不斉合成、光学的に純粋な前駆体からの合成、生合成によって、あるいはラセミ体の分割、例えば、酵素的分割または従来の方法（例えば、分割剤の存在下での結晶化、または例えばキラルＨＰＬＣカラムを用いるクロマトグラフィなど）による分割によって、単一のエナンチオマー（光学活性型）を得ることができることは明らかであろう。
【００４６】
特定の化合物は、本明細書において、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺなどの変数を含む一般式を用いて記載される。他に規定されない限り、このような式中の各変数は、任意の他の変数とは独立して定義され、式中に２回以上出現する任意の変数は、各出現において独立して定義される。従って、例えば、基が０、１または２個のＲ＊によって置換されていると示される場合、その基は置換されていなくてもよいし、２個までのＲ＊基によって置換されていてもよく、各出現におけるＲ＊は、Ｒ＊の定義から独立して選択される。また、置換基および／または変数の組み合わせは、このような組み合わせが、安定した化合物、すなわち単離され、特徴付けされ、そして生物活性について試験され得る化合物を生じる場合にだけ許容される。
【００４７】
本明細書に開示される化合物の「薬学的に許容可能な塩」は、過剰な毒性または発癌性を伴わずに、そして好ましくは、刺激作用、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずにヒトまたは動物の組織と接触して使用するのに適していると当該技術分野において一般的に考えられる酸または塩基塩である。特に、本発明に従う薬学的に許容可能な塩は、化合物がＢＢＢを通過する能力に悪影響を与えない塩である。このような塩は、アミンなどの塩基性残基の鉱酸および有機酸塩、ならびにカルボン酸などの酸性残基のアルカリまたは有機塩を含む。
【００４８】
適切な薬学的に許容可能な塩には、塩酸、リン酸、臭化水素酸、リンゴ酸、グリコール酸、フマル酸、硫酸、スルファミン酸、スルファニル酸、ギ酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエチルスルホン酸、硝酸、安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、ステアリン酸、サリチル酸、グルタミン酸、アスコルビン酸、パモ酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、プロピオン酸、ヒドロキシマレイン酸、ヨウ化水素酸、フェニル酢酸、アルカン酸（例えば、酢酸、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ（式中、ｎは０〜６の任意の整数、すなわち０、１、２、３、４、５または６である）など）などの酸の塩が含まれるが、これらに限定されない。同様に、薬学的に許容可能なカチオンには、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウムおよびアンモニウムが含まれるが、これらに限定されない。当業者は、本明細書で提供される化合物のためのさらなる薬学的に許容可能な塩を認識するであろう。一般に、薬学的に許容可能な酸性または塩基性塩は、任意の従来の化学的方法によって、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から合成することができる。簡単に言うと、このような塩は、水中または有機溶媒（例えば、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルなど）中、あるいは２つの混合物中で、これらの化合物の遊離酸または塩基形態と、化学量論的な量の適切な塩基または酸とを反応させることによって調製することができる。
【００４９】
式（Ｉ）の各化合物は水和物、溶媒和物または非共有結合性複合体として存在し得るが、必ずしもそうでなくてもよいことは認識されるであろう。さらに、種々の結晶形態および多形も、本明細書で提供される式（Ｉ）の化合物のプロドラッグと同様に、本発明の範囲内に含まれる。
【００５０】
「プロドラッグ」は、本明細書で提供される化合物の構造要件を完全に満足させなくてもよいが、被験対象または患者への投与後にインビボで変更されて、本明細書で提供される式（Ｉ）の化合物を生じる化合物である。例えば、プロドラッグは、本明細書で提供される化合物のアシル化誘導体であり得る。プロドラッグは、ヒドロキシ、カルボキシ、アミンまたはスルフヒドリル基が任意の基に結合された化合物を含み、哺乳類被験対象に投与されたときに切断されて、それぞれ、遊離ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、またはスルフヒドリル基を形成する。プロドラッグの例としては、本明細書で提供される化合物中のアルコールおよびアミン官能基の酢酸、ギ酸、リン酸および安息香酸誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で提供される化合物のプロドラッグは、修飾がインビボで切断されて親化合物を生じるような形で、化合物中に存在する官能基を修飾することによって調製され得る。
【００５１】
「置換基」は、本明細書で使用される場合、対象の分子内の原子に共有結合した分子部分を指す。例えば、「環置換基」は、環員である原子、好ましくは炭素または窒素原子に共有結合した、ハロゲン、アルキル基、ヘテロアルキル基、ハロアルキル基または本明細書に記載される他の置換基などの部分であり得る。「置換される」という用語は、本明細書で使用される場合、指定の原子上の任意の１つまたは複数の水素が、指示された置換基から選択されたもので置き換えられることを意味するが、ただし指定の原子の通常の原子価は超過されず、置換は、安定した化合物、すなわち単離され、特徴付けされ、そして生物活性について試験され得る化合物を生じるものとする。置換基がオキソ、すなわち＝Ｏである場合、原子上の２つの水素が置換される。芳香族炭素原子の置換基であるオキソ基は、−ＣＨ−から−Ｃ（＝Ｏ）−への転化と、芳香族性の喪失とをもたらす。例えば、オキソにより置換されたピリジル基はピリドンである。適切な置換基の例は、アルキル（ハロアルキル、例えばＣＦ３を含む）、ヘテロアルキル（例えば、−ＯＣＨ３、−ＣＨ２ＮＨＣＨ３、−ＣＨ２ＮＨ２）、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子）、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、ＳＯ３Ｈ、ＮＨ２、＝ＮＨ、Ｎ３およびＮＯ２基である。
【００５２】
「アルキル」という用語は、飽和直鎖または分枝状炭化水素基を指す。アルキル基の特定の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシルおよび２，２−ジメチルブチルである。
【００５３】
「ヘテロアルキル」という用語は、酸素、窒素および硫黄（特に、酸素および窒素）から選択される１つまたは複数のへテロ原子を含有する、上記で定義されるアルキル基を指す。ヘテロアルキル基の特定の例は、Ｏ−アルキル基、例えば、メトキシ、トリフルオロメトキシ、エトキシ、ｎ−プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブチルオキシ、メトキシメチル、エトキシメチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＯＨ、メトキシエチル、１−メトキシエチル、１−エトキシエチル、２−メトキシエチルまたは２−エトキシエチル、アミノアルキル（例えば、−ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２など）メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、イソプロピルエチルアミノ、メチルアミノメチル、エチルアミノメチル、ジ−イソプロピルアミノエチル、メチルチオ、エチルチオ、イソプロピルチオ、エノールエーテル、ジメチルアミノメチル、ジメチルアミノエチル、アセチル、プロピオニル、ブチリルオキシ、アセチルオキシ、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロピオニルオキシ、アセチルアミノ、プロピオニルアミノ、カルボキシメチル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルカルバモイルおよびＮ−メチルカルバモイルである。ヘテロアルキル基のさらなる例は、ニトリル、イソニトリル、シアナート、チオシアナート、イソシアナート、イソチオシアナートおよびアルキルニトリル基である。
【００５４】
「アルケニル」という用語は、少なくとも２つの炭素原子を含有する（すなわち、Ｃ２アルケニル）少なくとも部分的に不飽和の直鎖または分枝状炭化水素基を指す。アルケニル基の特定の例は、エテニル（ビニル）、プロペニル（アリル）、イソプロペニル、ブテニル、エチニル、プロピニル、ブチニル、アセチレニル、プロパルギル、イソプレニルおよびヘキサ−２−エニル基である。好ましくは、アルケニル基は１つまたは２つの二重結合を有する。
【００５５】
「シクロアルキル」という用語は、１つまたは複数の環（好ましくは１つまたは２つ）を含有し、かつ３〜１４個の環炭素原子、好ましくは３〜１０個（特に、３、４、５、６または７個）の環炭素原子を含有する、飽和または部分不飽和（例えば、シクロアルケニル基）環状基を指す。シクロアルキル基の特定の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、スピロ［４，５］デカニル、ノルボルニル、シクロヘキシル、シクロペンテニル、シクロヘキサジエニル、デカリニル、ビシクロ［４．３．０］ノニル、テトラリン、アダマンタン（すなわち、トリサイクル［３．３．１．１３，７］デカン）、シクロペンチルシクロヘキシルおよびシクロヘキサ−２−エニルである。
【００５６】
「ヘテロシクロアルキル」という用語は、１つまたは複数（好ましくは、１、２または３個）の環炭素原子がそれぞれ独立して、酸素、窒素、ケイ素、セレン、リンまたは硫黄原子によって（好ましくは、酸素、硫黄または窒素原子によって）置換された、上記で定義されるシクロアルキル基を指す。これには、これらの原子を含有する基、例えばＮＨなどが含まれる。ヘテロシクロアルキル基は、好ましくは、３〜１０個（特に、３、４、５、６または７個）の環原子（好ましくは、Ｃ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される）を含有する１または２つの環を有する。特定の例は、ピペリジル、プロリニル、イミダゾリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、ウロトロピニル、ピロリジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフリルおよび２−ピラゾリニル基であり、またラクタム、ラクトン、環状イミドおよび環状無水物である。
【００５７】
「アリール」という用語は、６〜１４個の環炭素原子、好ましくは６〜１０個（特に、６個）の環炭素原子を含有する１つまたは複数の環を含有する芳香族基を指す。例としては、フェニル、ナフチルおよびビフェニル基などがある。
【００５８】
「ヘテロアリール」という用語は、５〜１４個の環原子、好ましくは５〜１０個（特に、５または６個）の環原子を含有し、かつ１つまたは複数（好ましくは、１、２、３または４個）の酸素、窒素、リンまたは硫黄環原子（好ましくは、Ｏ、ＳまたはＮ）を含有する１つまたは複数の環を含有する芳香族基を指す。これには、Ｏ、ＳまたはＮ含有基、例えばＮＨなどが含まれる。例としては、ピリジル（例えば、４−ピリジル）、イミダゾリル（例えば、２−イミダゾリル）、フェニルピロリル（例えば、３−フェニルピロリル）、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、インドリル、インダゾリル、テトラゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、インダゾリル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ピリダジニル、キノリニル、イソキノリニル、ピロリル、プリニル、カルバゾリル、アクリジニル、ピリミジル、２，３’ービフリルおよびピラゾリル（例えば、３−ピラゾリル）基などがある。
【００５９】
「ハロゲン」または「ハロゲン原子」という表現は、本明細書で使用される場合、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。
【００６０】
「任意選択的に置換された」という用語は、１つ、２つ、３つまたはそれ以上の水素原子が、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子）によって、そして／あるいは例えば、ＯＨ、＝Ｏ、ＳＨ、ＳＯ３Ｈ、ＮＨ２、Ｎ−アルキル、ＮＨ−アルキル、Ｎ３またはＮＯ２基によって、互いに独立して置き換えられた基を指す。またこの表現は、１つ、２つ、３つまたはそれ以上のアルキル、アルケニルまたはヘテロアルキル（例えば、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＮＨＣＨ３および−ＣＨ２ＮＨ２）基によって置換された基も指す。これらの基はそれ自体が置換されていてもよい。例えば、アルキル基置換基は１つまたは複数のハロゲン原子によって置換され得る（すなわち、ハロアルキル基であり得る）。「ハロアルキル」という用語は、１つまたは複数のハロゲン原子（上記で定義される）によって置換されたアルキル基（同様に上記で定義される）を指す。ハロアルキル基の特定の例は、トリフルオロメチル、ジクロロエチル、ジクロロメチルおよびヨードエチルである。
【００６１】
本明細書で使用される場合、長さの範囲の限定を定義する表現、例えば「１〜５」などは、１から５までの任意の整数、すなわち１、２、３、４および５を意味する。言い換えると、明確に言及される２つの整数によって定義される任意の範囲は、前記限定を定義する任意の整数および前記範囲内に含まれる任意の整数を包含および開示することが意図される。
【００６２】
式（Ｉ）の好ましい化合物は、ＸがＣ１、Ｃ２もしくはＣ３アルキル、またはＣ２もしくはＣ３アルケニル（例えば、Ｃ２アルキルまたはＣ２アルケニル）であるものである。ＸはＣ１アルキルであってもよい。
【００６３】
ＹはＣＨ２であり得る。ＺはＮＨであり得る。ＺはＯであり得る。ＺはＣＨ２であり得る。
【００６４】
ＹはＮＨであり得る。ＹはＯであり得る。
【００６５】
ＹおよびＺの両方がＮＨであってもよい。
【００６６】
ＹがＣＨ２、そしてＺがＮＨであってもよい。
【００６７】
ＺがＣＨ２、そしてＹがＮＨであってもよい。
【００６８】
ＹがＣＨ２、そしてＺがＯであってもよい。
【００６９】
ＹがＯ、そしてＺがＣＨ２であってもよい。
【００７０】
Ｒ１はハロ基（例えば、Ｂｒ）であり得る。Ｒ１はアリール基であり得る。アリール基は単環式または二環式であり得る。アリール基はフェニルまたはナフチルであり得る。
【００７１】
アリール基は置換されていてもよい。置換基は、ハロ基およびヘテロアルキル基から選択され得る。ハロ基はＦであってもよく、ヘテロアルキル基はＯ−アルキル（例えば、ＯＣＨ３またはＯＣＨ２ＣＨ３）またはアミノアルキル（例えば、−ＣＨ２ＮＨ２または−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であってもよい。
【００７２】
Ｒ１はヘテロアリール基であり得る。ヘテロアリール基は単環式または二環式であり得る。ヘテロアリール基は、１つまたは複数の窒素原子を含み得る。例えば、ヘテロアリール基は、ピラゾール、イソオキサゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、キノリン、ベンゾイミダゾールまたはインドールであり得る。ヘテロアリール基は置換されていてもよい。例えば、置換基は、ハロ基（例えば、Ｆ）またはヘテロアルキル基（例えば、−ＯＣＨ３もしくはＯＣＨ２ＣＨ３などのＯ−アルキル、または−ＣＨ２ＮＨ２もしくは−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２などのアミノアルキル）であり得る。
【００７３】
Ｒ１はヘテロシクロアルキル基であり得る。ヘテロシクロアルキル基は、１つまたは複数の窒素原子を含み得る。ヘテロシクロアルキル基はピペラジンであり得る。ヘテロシクロアルキル基は、１つまたは複数の酸素原子含み得る。ヘテロシクロアルキル基はモルホリンであり得る。ヘテロシクロアルキル基は、例えば、ハロ基（例えば、Ｆ）またはヘテロアルキル基（例えば、−ＯＣＨ３もしくはＯＣＨ２ＣＨ３などのＯ−アルキル、または例えば、−ＣＨ２ＮＨ２もしくは−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２などのアミノアルキル）によって置換されていてもよい。
【００７４】
Ａｒはアリール基であり得る。アリール基はフェニルであり得る。Ａｒはヘテロアリール基であり得る。ヘテロアリール基は、１つまたは複数の窒素原子を含み得る。ヘテロアリール基は４または５個の環炭素原子を有し得る。ヘテロアリール基はピリジンまたはピリミジンであり得る。
【００７５】
Ｒ２は、ＨまたはＯＨであり得る。Ｒ２はパラ位であってもよい。
【００７６】
本発明の化合物の特定の例は、以下の表１に示される。
【００７７】
【表１】
2018505170.tif 000009
【００７８】
【表２】
2018505170.tif 000010
【００７９】
【表３】
2018505170.tif 000011
【００８０】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、上記の表１からの化合物１−０１、１−０７、１−０８、１−１７、１−１８、１−１９、１−２０、１−２１、１−２２、１−３８および２０からなる群から選択される。
【００８１】
別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、上記の表１からの化合物ＳＣ−３８を含まない。
【００８２】
一実施形態では、本発明の化合物は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物であるが、ただし化合物は、以下の構造：
【化８】
2018505170.tif 000012
を有さないものとする。
【００８３】
一実施形態では、本発明の化合物は、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物であるが、ただしＲ１がアリール（特に、フェニル）である場合、Ｒ１はＦによって置換されていないものとする。
【００８４】
本発明の化合物は、当業者に知られている任意の適切な方法によって合成することができる。一般的合成は、スキーム１において以下に示される。
【化９】
2018505170.tif 000013
【００８５】
本発明の化合物は、高い抗増殖活性、特に脳癌に対する高い効力を示し得る。特に、本明細書中の実施例では、特定の化合物はアポトーシスを誘導することが示され、ＢＢＢを通過することもできる。
【００８６】
式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、ならびに製剤および医薬組成物（式（Ｉ）の化合物の混合物を含む）の治療的使用は、本発明の範囲内に含まれる。従って、本発明は、治療的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物もしくはプロドラッグと、１つまたは複数の薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物にも関する。
【００８７】
「医薬品の担体、希釈剤または賦形剤」には、適切な水溶性担体を含む任意の生理学的な緩衝（すなわち、約ｐＨ７．０〜７．４）媒体、従来の溶媒、分散媒、充填剤、固体担体、コーティング、抗菌および抗真菌剤、等張および吸収遅延剤が含まれるが、これらに限定されない。適切な水溶性担体には、生理食塩水、デキストロース、コーン油、ジメチルスルホキシド、およびゼラチンカプセルが含まれるが、これらに限定されない。他の従来の添加剤には、ラクトース、マンニトール、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、結合剤、例えば、結晶性セルロース、セルロース誘導体、アカシア、ゼラチン、崩壊剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および潤滑剤、例えば、タルクまたはステアリン酸マグネシウムが含まれる。
【００８８】
医薬組成物は、例えば、局所（例えば、経皮または眼内）、経口、頬側、経鼻、膣、直腸または非経口投与を含む任意の適切な投与経路のために処方され得る。「非経口」という用語は、本明細書で使用される場合、皮下、皮内、血管内（例えば、静脈内）、筋肉内、脊髄、頭蓋内、くも膜下腔内、眼内、眼周囲、眼窩内、滑液包内および腹腔内注射、ならびに任意の同様の注射または注入技術を含む。特定の実施形態では、経口使用または非経口使用に適した形態の組成物が好ましい。適切な経口形態は、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性もしくは油性懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒、エマルション、ハードもしくはソフトカプセル、またはシロップもしくはエリキシルを含む。静脈内、筋肉内、皮下、または腹腔内投与のために、１つまたは複数の化合物は、好ましくはレシピエントの血液と等張性である無菌水溶液と混ぜ合わせられ得る。このような製剤は、塩化ナトリウムまたはグリシンなどの生理学的に適合性の物質を含有し、生理学的条件に適合する緩衝ｐＨを有する水中に固体活性成分を溶解して水溶液を生じさせ、前記溶液を無菌にすることによって調製され得る。製剤は、単位用量または複数用量容器、例えば密封アンプルまたはバイアルなどの中に存在し得る。適切な成分の例は、Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ−Ｔｈｅ  Ｅｘｔｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ  １９９３）およびＭａｒｔｉｎ（ｅｄ．），Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓに記載されている。
【００８９】
増殖性障害の処置のために、本発明に従う生物活性化合物の用量は幅広い限界内で異なることができ、個々の要求に対して調整することができる。本発明に従う活性化合物は、一般的に、治療的に有効な量で投与される。好ましい用量は、１日に体重１キログラム当たり約０．１ｍｇ〜約１４０ｍｇ（例えば、約０．５ｍｇ〜約７ｇ／患者／日）の範囲である。１日の用量は、単一の用量として、あるいは複数の用量で投与され得る。単一の剤形を作製するために担体材料と組み合わせることができる活性成分の量は、処置される宿主および特定の投与モードに応じて異なり得る。単位剤形は、一般的に、約１ｍｇ〜役５００ｍｇの活性成分を含有するであろう。
【００９０】
しかしながら、任意の特定の患者に対する特定の用量レベルは、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康、性別、食事、投与の時間、投与経路、および排泄速度、薬物の併用（すなわち、他の薬物が患者の処置に使用されている）、治療を受けている特定の障害の重症度、ならびに望ましくない増殖性細胞の位置を含む様々な要因に依存し得ることが理解されるであろう。化合物が全身的ではなく局所的に、そして処置ではなく予防のために投与される場合には、投薬量は一般的により少ないであろう。このような処置は、処置する医師により、必要である度に、そして必要と判断された期間実施され得る。当業者は、投与される式（Ｉ）の化合物の投薬計画または治療的に有効な量を、各個人に対して最適化する必要があり得ることを認識するであろう。
【００９１】
異なる障害を処置するために異なる投薬量が必要とされ得ることは、認識されるであろう。薬剤の有効量は、腫瘍性細胞の数、成長またはサイズにおける統計的に有意な低下を引き起す量である。本発明の薬剤に応答する腫瘍性障害には脳癌が含まれるが、これらに限定されない。
【００９２】
「治療的に有効な量」または「有効量」という用語は、増殖性障害の症状の予防、改良または改善をもたらす式（Ｉ）の化合物の量を指す。本発明の化合物または医薬組成物の剤形および量は、既知の処置または予防レジメンを参照することによって容易に確立することができる。
【００９３】
本発明の好ましい化合物は、特定の薬理学的特性を有するであろう。このような特性は、上記の好ましい経口剤形がインビボで治療的に有効なレベルの化合物を提供することができるように、経口バイオアベイラビリティおよびＢＢＢ透過性を含むが、これらに限定されない。
【００９４】
本発明の化合物は、好ましくは、経口または非経口的に患者（例えば、ヒト）に投与され、患者の少なくとも１つの体液または組織内に存在する。従って、本発明はさらに、増殖性障害（脳癌などの癌を含む）を患っている患者の処置方法を提供する。
【００９５】
「処置する」、「処置」および「治療」という用語は、本明細書において、治癒的療法を指すために使用される。従って、本開示との関連では、「処置する」という用語は、癌またはその関連症状を治癒させるまたはその重症度を改善することを包含する。
【００９６】
「予防する」または「予防」は、癌の発生を防止すること、あるいは本発明の化合物または医薬組成物の投与の後に発生する場合には癌の重症度を和らげることを意味する。これは、臨床的に明らかな不要な細胞増殖の開始を完全に防止するか、あるいはリスクのある人において発症前に明らかな不要な急速細胞増殖段階の開始を防止する。
【００９７】
患者には、霊長類、特にヒト、飼いならされたコンパニオン動物、例えばイヌ、ネコ、ウマなど、および家畜、例えばウシ、ブタ、ヒツジなどが含まれ得るが、これらに限定されず、投薬量は本明細書に記載される通りである。
【００９８】
本発明の化合物は、細胞増殖に関連する状態および疾患（脳癌などの癌を含む）の処置および／または予防ために有用であり得る。従って、本発明は、治療的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物もしくはプロドラッグを患者に投与することを含む、患者の増殖性障害の処置または予防方法にも関する。また本発明は、増殖性障害を処置または予防するための、療的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物もしくはプロドラッグの使用にも関する。また本発明は、本明細書に記載される実施形態のいずれかにおいて、増殖性障害の処置または予防において使用するための医薬組成物も提供する。また本発明は、増殖性障害の処置または予防のための薬剤を製造するための、治療的に有効な量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物もしくはプロドラッグの使用にも関する。
【００９９】
また本発明は、増殖性障害の処置または予防方法において使用する場合の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物もしくはプロドラッグにも関する。また本発明は、増殖性障害の処置または予防において使用するための活性成分を有する組成物にも関し、活性成分は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物もしくはプロドラッグである。また本発明は、上記のような、増殖性障害の処置または予防における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物もしくはプロドラッグを含有する医薬組成物の使用にも関する。一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、組成物の本質的に唯一の活性成分である。一実施形態では、増殖性障害は癌である。一実施形態では、癌は脳癌（例えば、固形腫瘍）である。
【０１００】
本発明に従う式（Ｉ）の化合物、およびその医薬組成物は、増殖性疾患、好ましくは癌の処置または予防において使用され得る。本発明の化合物および組成物は、例えば、脳癌、乳癌、肺癌、前立腺癌、卵巣癌、子宮癌  脳癌、皮膚癌、結腸癌および膀胱癌などの固形腫瘍を含むがこれらに限定されない、様々な種類の癌（腫瘍）の処置のために有用であり得る。
【０１０１】
本発明に従う処置に適している可能性のある癌または腫瘍細胞のタイプには、例えば、乳房、結腸、肺、および前立腺の癌、食道癌、胃癌、結腸直腸癌、結腸直腸腫瘍に関連するポリープ、膵癌および胆のう癌を含む消化管癌、副腎皮質の癌、ＡＣＴＨ産生腫瘍、膀胱癌、脳癌（以下で議論されるものを含む）、ユーイング肉腫、口腔癌および喉頭癌を含む頭頸部癌、腎細胞癌を含む腎癌、肝癌、小細胞および非小細胞肺癌を含む肺癌、悪性腹水、悪性胸水、悪性メラノーマ、ヒト皮膚ケラチノサイトの腫瘍進行、扁平上皮癌、基底細胞癌、および血管周囲細胞腫を含む皮膚癌、中皮腫、カポージ肉腫、骨腫および肉腫、例えば繊維肉腫および骨肉腫などを含む骨癌、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、卵巣（胚細胞）癌および卵胞の固形腫瘍、膣癌、外陰部の癌、および子宮頸癌を含む女性生殖管の癌、乳癌（小細胞および管）、陰茎癌、網膜芽細胞腫、精巣癌、甲状腺癌、栄養膜新生物、ならびにウィルムス腫瘍が含まれる。一実施形態では、癌は原発性である。一実施形態では、癌は転移性である。一実施形態では、癌は良性である。一実施形態では、癌は悪性である。
【０１０２】
一実施形態では、処置および／または予防される増殖性障害は脳癌である。脳癌は、未分化星状細胞腫、星状細胞腫、中枢神経細胞腫、脈絡叢癌、脈絡叢乳頭腫、脈絡叢腫瘍、びまん性内因性橋膠腫、胚芽異形成性神経上皮腫瘍、上衣腫瘍、線維性星状細胞腫、巨細胞神経膠芽腫、多形神経膠芽腫、大脳神経膠腫症、神経膠肉腫、血管周囲細胞腫、髄芽細胞腫、髄様上皮腫、髄膜癌腫症、神経芽細胞腫、神経細胞腫、乏突起星状細胞腫、乏突起神経膠腫、視神経鞘髄膜腫、小児上衣腫、毛様細胞性星状細胞腫、松果体芽細胞腫、松果体細胞腫、多形未分化神経芽細胞腫、多形黄色星状細胞腫、原発性中枢神経系リンパ腫、蝶形骨翼髄膜腫、上衣下巨細胞性星状細胞腫、上衣下腫および三側性網膜芽細胞腫から選択され得る。従って、好ましくは、脳癌は腫瘍（好ましくは、固形腫瘍）である。脳癌は、原発性癌（例えば、神経膠腫、髄膜腫、下垂体腺腫または神経鞘腫瘍）または転移性癌（すなわち、メラノーマまたは肺癌などの他の身体部位の癌の結果として生じた脳癌）であり得る。
【０１０３】
代替的または付加的に、化合物は、他の薬剤、例えば、化学療法もしくは免疫刺激薬または治療剤と組み合わせて投与され得る。
【０１０４】
本発明の化合物および１つまたは複数の他の医薬品の使用の定義における「併用療法」または「補助療法」という用語は、薬物の組み合わせの有益な効果を提供し得るレジメンにおける逐次的な方法での各薬剤の投与を包含することが意図され、そして、これらの活性剤を固定比率で含む単一の製剤、または各薬剤の複数の別々の製剤などにおける実質的に同時的な方法でのこれらの薬剤の同時投与を包含することも同様に意図される。
【０１０５】
本発明の種々の実施形態によると、式（Ｉ）の１つまたは複数の化合物は、１つまたは複数の他の治療薬と組み合わせて処方または投与され得る。従って、本発明の種々の実施形態によると、式（Ｉ）の１つまたは複数の化合物は、手術および／または他の既知の処置もしくは治療薬、例えば他の抗癌剤、特に、化学療法剤、放射線治療薬、および／または補助もしくは予防薬との併用治療レジメンに含まれ得る。
【０１０６】
商業用途、臨床評価および前臨床開発において利用可能な抗悪性腫瘍薬が多数あり、併用薬物化学療法による癌または他の新生物の処置のために選択され得る。このような抗悪性腫瘍薬は、いくつかの主要なカテゴリー、すなわち、抗生物質型の薬剤、代謝拮抗薬、ホルモン剤、免疫学的薬剤、インターフェロン型の薬剤および種々の薬剤のカテゴリーに分類される。あるいは、メタロマトリックスプロテアーゼ阻害薬などの他の抗悪性腫瘍薬が使用されてもよい。併用療法において使用され得る適切な薬剤は、当業者によって認識されるであろう。適切な薬剤は、例えば、Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ，Ａｎ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐａｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，１２ｔｈ  Ｅｄ．，１９９６に記載されている。
【０１０７】
併用レジメンは、活性剤が一緒に、逐次的に、または各場合において必要に応じて間隔を開けて投与されることを含み得る。本発明の化合物を含む活性剤の組み合わせは相乗的であり得る。
【０１０８】
式（Ｉ）の化合物の同時投与は、式（Ｉ）の化合物が化学療法薬または他の抗癌剤と同じ単位用量中にあることによって行われてもよいし、あるいは式（Ｉ）の化合物および化学療法薬または他の抗癌剤は、同時またはほぼ同時に投与される個々の別々の単位用量中に存在していてもよい。逐次的投与は必要に応じて任意の順序でよく、特に累積または相乗効果が所望される場合、第１または最初の化合物の進行中の生理的効果は、第２またはその後の化合物が投与される際に続いていることが必要とされ得る。
【０１０９】
種々の用途のために、本発明の化合物は、同位体、蛍光もしくは発光マーカー、抗体もしくは抗体断片、任意の他のアフィニティ標識（ナノボディ、アプタマー、ペプチドなどのような）、酵素または酵素基質によって標識化することができる。本発明のこれらの標的化化合物は、オートラジオグラフィーによるインビボ、エキソビボ、インビトロおよびインサイツ（例えば、組織切片における）での受容体の位置のマッピングのために、そして陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）イメージングや単一光子放射断層撮影断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）などのための放射性トレーサとして、生体または他の材料中でこれらの受容体を特徴付けるのに有用である。本発明に従う標的化化合物は、治療、診断および他の用途、例えば、インビボおよびインビトロの研究手段、特に本明細書に開示される用途において使用され得る。
【０１１０】
本明細書において開示および定義される本発明が、言及されるあるいは本文または図面から明らかである個々の特徴の２つ以上の全ての代替的な組み合わせまで及ぶことは理解されるであろう。これらの異なる組み合わせは全て、本発明の種々の代替的な態様を構成する。
【０１１１】
単に例示のために提供され、いかなる形でも本発明の範囲を限定すると考えられてはならない実施例を参照して、本発明の実施形態はより詳細にこれから議論されるであろう。
【実施例】
【０１１２】
ボロン酸をＦｒｏｎｔｉｅｒｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｌｏｇａｎ，ＵＴ，ＵＳＡ）から購入したこと除いて、全ての化学物質は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）から入手した。マイクロ波照射は、ＣＥＭ−Ｄｉｓｃｏｖｅｒマイクロ波反応器（Ｋａｍｐ−Ｌｉｎｔｆｏｒｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて実行した。１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、ＢＲＵＫＥＲ「Ａｖａｎｃｅ  ３００」３００ＭＨｚ  ＮＭＲスぺクトロメーター（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｃｏｒｐ．，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ，ＵＳＡ）において得た。ｄ６−ＤＭＳＯまたはＣＤＣｌ３は、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから入手した。高速液体クロマトグラフィは、Ａｇｉｌｅｎｔ  １２６０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  バイナリポンプおよび統合型真空脱気装置を備えたＡｇｉｌｅｎｔシリーズ１２００  ＬＣシステム、オートサンプラーおよびダイオードアレイ検出器（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ，ＵＳＡ）において行った。Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｃ１８カラム（粒径：５μＭ、１５０×４．６ｍｍ内径）において、４０分間にわたる０から１００％までのアセトニトリル：水の勾配を用いて０．２ｍＬ／分の流速でサンプルを分析した。Ａｇｉｌｅｎｔ  ６１２０四重極質量分析計を用いて溶出サンプルを分析した。Ａｇｉｌｅｎｔ  ＯｐｅｎＬＡＢクロマトグラフィデータシステム（ＣＤＳ）ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ  Ｅｄｉｔｉｏｎをデータ獲得および処理のために使用した。
【０１１３】
Ｂｃｌ−２、ＰＡＲＰ（＃９５４２５）に対する一次抗体、二次抗ウサギ（＃７０７４）および抗マウス（＃７０７６）ＨＲＰ結合抗体は、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｄａｎｖｅｒｓ，ＭＡ，ＵＳＡ）から入手した。ＥＧＦＲ（＃ｓｃ０３）およびＧＡＰＤＨ（＃ｓｃ７３７１７９）抗体は、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｄａｌｌａｓ，ＴＸ，ＵＳＡ）から得た。β−チューブリン（＃ａｂ１１３０８）に対する抗体はＡｂｃａｍから購入した。Ａｌｅｘａ４８８結合抗マウス二次抗体およびＤＡＰＩ（４’，６’−ジアミノ−２−フェニルインドール）は、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから得た。ＣＭＰＤ１（＃ｓｃ−２０３１３８）は、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙから入手した。パクリタキセルおよびビンブラスチンはＳｉｇｍａから購入した。
【０１１４】
合成
化合物の調製のためのスキーム１も参照される。
【０１１５】
４−（４−ブロモフェニル）−４−オキソブタン酸４
無水コハク酸３（５．０ｇ、５０ｍｍｏｌ）およびブロモベンゼン２（４８ｇ、３００ｍｍｏｌ）を０℃に冷却した。塩化アルミニウム（１３．３ｇ、１００ｍｍｏｌ）を添加し、窒素雰囲気下、混合物を０℃で４時間攪拌した。反応を室温まで温め、窒素雰囲気下で９６時間攪拌した。反応を０℃まで冷却し、および濃ＨＣｌ（１２５ｍＬ）を添加し、反応を窒素下でさらに１時間攪拌した。反応をろ過し、水（１Ｌ）で洗浄して淡黄色の固体が得られ、これをトルエンから再結晶し、４−（４−ブロモフェニル）−４−オキソブタン酸４（１２ｇ、４６．６８ｍｍｏｌ、９３．４％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ１０Ｈ９ＢｒＯ３の計算値：２５５．９７，２５７．９７；実測値：２５８．０（１１），２５７．０（９８），２５６．０（１２），２５５．０（１００），２１３．０（１８），２１１．０（１７）（陰イオン）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝２４．４分
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ：２．５９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，ＣＨ２），３．２１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，ＣＨ２），７．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ＡｒＨ），７．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ＡｒＨ），１２．１９（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ）。
【０１１６】
４−（４−ブロモフェニル）ブタン酸５
亜鉛（１３．０ｇ、２００ｍｍｏｌ）および塩化水銀（１．００ｇ、４８０ｍｍｏｌ）を水（１０ｍＬ）および濃ＨＣｌ（０．６ｍＬ）と共に５分間攪拌した。液体をデカンテーションし、トルエン（２０ｍＬ）、濃ＨＣｌ（２０ｍＬ）および水（８ｍＬ）を連続して添加した。４−（４−ブロモフェニル）−４−オキソブタン酸４（２．５５ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を添加し、１００℃で２４時間加熱還流させ、６時間毎にＨＣｌ（１ｍＬ）を添加した。反応を室温まで冷却させ、ろ過し、有機層から溶媒を除去して透明な液体が得られ、これを冷却すると白色結晶が生じた。これらをシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン，１：３）で精製して、４−（４−ブロモフェニル）ブタン酸５（２．３３ｇ、９．６３ｍｍｏｌ、９１．４％）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ１０Ｈ１１ＢｒＯ２の計算値：２４１．９９，２４３．９９；実測値：２４４．０（１０），２４３．０（９８），２４２．０（１１），２４１．０（１００）（陰イオン）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝２７．７分。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（δ／ｐｐｍ）７．４０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），２．６３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ＣＨ２），２．３６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ２），１．９７，（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．２，７．８Ｈｚ，ＣＨ２），ＯＨは観察されず。
【０１１７】
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド７（１−１７）
４−（４−ブロモフェニル）ブタン酸４（０．５ｇ、２．０７ｍｍｏｌ）およびベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢＯＰ（１．０７ｇ、２．０７ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中に溶解させた。ジイソプロピルエチルアミン（７１０μＬ、４．１４ｍｍｏｌ）を添加し、反応を０℃で３０分間攪拌した。４−アミノフェノール６（０．２６９ｍｇ、２．４８ｍｍｏｌ）を添加し、反応を室温で１２時間攪拌した。反応を水（９０ｍＬ）で希釈し、生成物をジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。溶媒を除去し、生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ３５：６５から６０：４０）により精製して、４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド７を白色固体として得た（３５０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、５１％）。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ１６Ｈ１６ＢｒＮＯ２の計算値：３３３．０４，３３５．０４；実測値：３３４．０（１００），３３５．０（１８），３３６．０（９３），３３７．０（１７）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝２８．２分。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．５９（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），９．１５（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），７．４７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，ＡｒＨ），７．３３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，ＡｒＨ），７．１８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），６．６７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ＡｒＨ），２．５９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ＣＨ２），２．２４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ２），１．８５（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．２，７．８Ｈｚ，ＣＨ２）。
【０１１８】
４−（４−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド１０（１−１８）
【化１０】
2018505170.tif 000014
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド７（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、（２−フルオロピリジン−３−イル）ボロン酸８（５０．９ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（６３．８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１２０℃で１０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。反応を冷却し、溶媒を除去して黄色の固体を得た。生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ４５：１００から６０：４０）により精製して、４−（４−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド１０をオフホワイトの固体として得た（４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、３８％）。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ２１Ｈ１９ＦＮ２Ｏ２の計算値：３５０．１４；実測値：３５１．２（１００），３５２．２（２４）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝２６．１分。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．６１（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），９．１２（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），８．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ＡｒＨ），８．０９（１Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．４，ＡｒＨ），７．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．４７（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ＡｒＨ），７．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，ＡｒＨ），６．６８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ＡｒＨ），２．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ＣＨ２），２．３０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），１．９３（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．８，７．５Ｈｚ，ＣＨ２）。
【０１１９】
４−（４−（２，６−ジフルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド１２（１−２２）
【化１１】
2018505170.tif 000015
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド７（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、（２，６−ジフルオロピリジン−３−イル）ボロン酸１１（５７．０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（６３．８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１２０℃で１０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。反応を冷却し、溶媒を除去して黄色の固体を得た。生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ２５：１００から５０：５０）により精製して、４−（４−（２，６−ジフルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド１２をオフホワイトの固体として得た（３０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、２７％）。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ２１Ｈ１８Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値：３６８．１３；実測値：３６９．１（１００），３７０．１（２３）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝２８．６分。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．６２（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），９．１７（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），８．２９（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．５，５．０Ｈｚ，ＡｒＨ），７．５２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，ＡｒＨ），７．３５（４Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．７Ｈｚ，ＡｒＨ），６．６７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，ＡｒＨ），２．６７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ＣＨ２），２．２９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），１．９１（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．８，７．５Ｈｚ，ＣＨ２）。
【０１２０】
４−（４−（６−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド１４（１−２１）
【化１２】
2018505170.tif 000016
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド７（１００ｍｇ、０．２９９ｍｍｏｌ）、（６−フルオロピリジン−３−イル）ボロン酸１３（５０．９６ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（６３．８ｍｇ、０．６００ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１２０℃で１０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。反応を冷却し、溶媒を除去して黄色の固体を得た。生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ２５：１００から５０：５０）により精製して、４−（４−（６−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド１４をオフホワイトの固体として得た（３０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、２９％）。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ２１Ｈ１９ＦＮ２Ｏ２の計算値：３５０．１４；実測値：３５１．１（１００），３５２．１（２３）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝２６．８分。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．６１（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），９．１６（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），８．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，ＡｒＨ），８．２５（１Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２．４，ＡｒＨ），７．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．３４（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ＡｒＨ），７．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．２，３．０Ｈｚ，ＡｒＨ），６．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ＡｒＨ），２．６６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ＣＨ２），２．２８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），１．９０（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．８，７．５Ｈｚ，ＣＨ２）。
【０１２１】
Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（ピリジン−３−イル）フェニル）ブタンアミド１６（１−３８）
【化１３】
2018505170.tif 000017
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド７（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、ピリジン−３−イルボロン酸１５（６７．１ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（６３．８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１２０℃で１０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。反応を冷却し、溶媒を除去して黄色の固体を得た。生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ２５：１００から５０：５０）により精製して、Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（ピリジン−３−イル）フェニル）ブタンアミド１６をオフホワイトの固体として得た（４０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、３５％）。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ２１Ｈ２０Ｎ２Ｏ２の計算値：３３２．１５；実測値：３３３．２（１００），３３４．１（２３）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝１７．３分。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．６２（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），９．１６（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），８．８８（１Ｈ，ｓ，ＡｒＨ），８．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，ＡｒＨ），８．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ＡｒＨ），７．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ＡｒＨ），７．４８（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，ＡｒＨ），７．３５（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），６．６７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７），２．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，ＣＨ２），２．２９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），１．９２（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝６．９，７．５Ｈｚ，ＣＨ２）。
【０１２２】
Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（２−メトキシピリミジン−５−イル）フェニル）ブタンアミド１８（１−１９）
【化１４】
2018505170.tif 000018
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド７（１００ｍｇ、０．２９９ｍｍｏｌ）、（２−メトキシピリミジン−５−イル）ボロン酸１７（５５．２５ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（６３．８ｍｇ、０．６００ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１２０℃で１０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。薄層クロマトグラフィにより反応は転化率が低いことが決定され、従って上記と同様のマイクロ波照射によりさらに２０分間加熱した。溶媒を除去し、生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ２５：１００から５０：５０）により精製して、４−（４−（６−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド１８をオフホワイトの固体として得た（３ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、３％）。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ２１Ｈ２１Ｎ３Ｏ３の計算値：３６３．１６；実測値：３６４．２（１００），３６５．２（２４）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝２４．３分。
【０１２３】
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−フェニルブタンアミド２０
【化１５】
2018505170.tif 000019
４−（４−ブロモフェニル）ブタン酸５（０．５ｇ、２ｍｍｏｌ）およびベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢＯＰ）（１．０７ｇ、２．０７ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中に溶解させた。ジイソプロピルエチルアミン（７１０μＬ、４．１４ｍｍｏｌ）を添加し、反応を０℃で３０分間攪拌した。アニリン１９（２２５．０μＬ、２．４７ｍｍｏｌ）を添加し、反応を室温で１２時間攪拌した。次に、反応を水（９０ｍＬ）で希釈し、生成物をジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。溶媒を除去し、生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ２０：８０から４０：６０）により精製して、４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−フェニルブタンアミド２０を白色固体として得た（５００ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ、７６％）。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ１６Ｈ１６ＢｒＮＯの計算値：３１７．０４，３１９．０４；実測値：３１８．１（１００），３１９．１（１９），３２０．１（９６），３２１．１（１７），３４０．０（３３），３４１．０（６），３４２．０（３３），３４３．０（５）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝３５．７分。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．８５（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），７．５７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＡｒＨ），７．４６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．２７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，ＡｒＨ），７．１８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．０１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＡｒＨ），２．６０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ２），２．３０，（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），１．８７（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．２，７．５Ｈｚ，ＣＨ２）。
【０１２４】
４−（４−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−フェニルブタンアミド２１（１−２０）
【化１６】
2018505170.tif 000020
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−フェニルブタンアミド２０（１００ｍｇ、０．３１４ｍｍｏｌ）、（２−フルオロピリジン−３−イル）ボロン酸８（５２．８ｍｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（６６．７ｍｇ、０．６２８ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１２０℃で１０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。反応を冷却し、溶媒を除去して黄色の固体を得た。生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ３０：１００から６０：４０）により精製して、４−（４−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−Ｎ−フェニルブタンアミド２１を黄色の固体として得た（３０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、３８％）。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＱＵＡＤＲＵＰＯＬＥ）ｍ／ｚ：Ｃ２１Ｈ１９ＦＮ２Ｏ：３３４．１５；実測値３３５．２（１００），３３６．２（２３），３５７．２（１４）。
ＨＰＬＣ：ｔｒ＝３１．１分。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．８５（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），８．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，ＡｒＨ），８．０９（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１０．２，４．８，１．８Ｈｚ，ＡｒＨ），７．５６（４Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．２８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．０１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＡｒＨ），２．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），２．３５，（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），１．９４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．５，７．５Ｈｚ，ＣＨ２）。
【０１２５】
Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（ピリミジン−５−イル）フェニル）ブタンアミド（１−０１）
【化１７】
2018505170.tif 000021
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、ピリミジン−５−イルボロン酸（４４．８ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（６４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２１ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１２０℃で１０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。反応を冷却し、溶媒を除去して黄色の固体を得た。生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ３５：７５から８５：１５）により精製し、Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（ピリミジン−５−イル）フェニル）ブタンアミドをオフホワイトの固体として得た（２０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ、２０％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．６１（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），９．１６（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），９．１３（３Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，ＡｒＨ），７．３８（４Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），６．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ＡｒＨ），２．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ２），２．２９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ２），１．９２（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２）。
【０１２６】
４−（４’−（アミノメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド（１−０７）
【化１８】
2018505170.tif 000022
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド（１０１ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、（４−（アミノメチル）フェニル）ボロン酸（７１ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（７５ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２７ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１３０℃で３０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。反応を冷却し、溶媒を除去して黄色の固体を得た。生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（メタノール：ジクロロメタン、勾配  ５：９５から１５：８５）により精製して、４−（４’−（アミノメチル）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミドをオフホワイトの固体として得た（３０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、３０％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．６２（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），７．５７（４Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．３４（６Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），６．６７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，ＡｒＨ），３．７５（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２），２．６４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），２．２８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ＣＨ２），１．８９６（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２）。
【０１２７】
Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（キノリン−３−イル）フェニル）ブタンアミド（１−０８）
【化１９】
2018505170.tif 000023
４−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）ブタンアミド（１０５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、キノリン−３−イルボロン酸（６５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（５５ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２１ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）をエタノール：水（４：１  ｖ／ｖ、２ｍＬ）中に溶解させた。溶液を窒素でパージし、１２０℃で６０分間、密封管中でマイクロ波照射（出力を５０Ｗ始動に調節、圧力を制御しない）により加熱した。反応を冷却し、溶媒を除去して黄色の固体を得た。生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、勾配  ６０分間にわたって０：１００から１００：０）により精製し、Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）−４−（４−（キノリン−３−イル）フェニル）ブタンアミドをオフホワイトの固体として得た（３０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、２５％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）（δ／ｐｐｍ）９．６１（１Ｈ，ｂｒｓ，ＮＨ），９．２５（１Ｈ，ｓ，ＡｒＨ），９．１１（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ），８．６２（１Ｈ，ｓ，ＡｒＨ），８．０５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．８２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ），７．７７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ＡｒＨ），７．６１（１Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．３８（４Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），６．６７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ＡｒＨ），２．７０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ＣＨ２），２．３１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，ＣＨ２），１．９５（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２）。
【０１２８】
生物学的評価
Ｕ８７およびＵ２５１細胞株は、ＣｅｌｌＢａｎｋ  Ａｕｓｔｒａｌｉａを通してＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ（ＥＣＡＣＣ）から入手した。Ｕ８７−ＥＧＦＲｖＩＩＩ細胞株をその起源の研究室（Ｎｉｓｈｉｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９１：７７２７−７７３１）から入手し、免疫ブロットおよびフローサイトメトリーによってＥＧＦＲ増幅および突然変異について試験した。１０％ＦＢＳ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を補充したＤＭＥＭ培地（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ＵＳＡによるＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中、３７℃および５％ＣＯ２で細胞を培養した。原発性の神経膠腫球（ｇｌｉｏｍａｓｐｈｅｒｅ）（ＲＮ１、古典的；ＷＫ１、間葉系）を神経膠芽腫検体から誘導し（Ｄａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｃａｎｃｅｒｓ  ５：３５７−３７１；Ｄａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２３：２３８−２４８）、ＥＧＦおよびＦＧＦを補充したＳｔｅｍＰｒｏ  ＮＳＣ無血清培地（全て、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中に保持し、マトリゲル被覆フラスコにおいて成長させた（Ｐｏｌｌａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  ４：５６８−５８０）。
【０１２９】
本発明の化合物のＥＣ５０値
処理の７２時間後にＡｌａｍａｒ  ｂｌｕｅアッセイを用いて細胞生存率を決定した（表２）。ＥＣ５０値は、Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ  バージョン５において非線形回帰を用いて計算した。ｃＬｏｇＰ値は、ＣｈｅｍＢｉｏＤｒａｗソフトウェアを用いて計算した。結果は、トリプリケートで実施される３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。
【０１３０】
【表４】
2018505170.tif 000024
【０１３１】
さらなる分析
図１に示されるように、ＳＣ−３８は、神経膠腫細胞株の生存率を低下させ、選択的に細胞毒性である。細胞をＳＣ−３８（１０ｎＭ〜１０μＭ）で７２時間処理した。細胞に生存率試験を行い（左側、Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ  生存率アッセイ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、生物発光細胞毒性分析のために上澄みを回収した（右側、ＴｏｘｉＬｉｇｈｔＴＭバイオアッセイキット、Ｌｏｎｚａ）。
【０１３２】
図２に示されるように、ＳＣ−３８は、悪性細胞に対して選択的に毒性である。細胞をＳＣ−３８（１μＭ）で７２時間処理し、生存率アッセイ（ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ、ＭＴＴまたはＰＩ染色）を実施して、悪性（Ｕ８７、原発性神経膠腫）および非悪性（ミクログリア、ニューロン、星状細胞、マクロファージ）細胞の生存率を決定した。
【０１３３】
図３に示されるように、化合物１−１８はＢＢＢを容易に通過した。ＢＡＬＢ／ｃマウスに試験阻害薬（１０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注射し、３０分および６０分で脳を回収した。脳ホモジネートを用いて固相抽出を実施し、ＨＰＬＣにより試験化合物の量を決定した。ラパチニブデータは、Ｐｏｌｌｉ，Ｊ．Ｗ．ｅｔ  ａｌ．“Ｔｈｅ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｅｆｆｌｕｘ  ａｎｄ  Ｕｐｔａｋｅ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ｉｎ  Ｎ−｛３−Ｃｈｌｏｒｏ−４−［（３−ｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｙｌ）ｏｘｙ］ｐｈｅｎｙｌ｝−６−［５−（｛［２−（ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ）ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ｝ｍｅｔｈｙｌ）−２−ｆｕｒｙｌ］−４−ｑｕｉｎａｚｏｌｉｎａｍｉｎｅ（ＧＷ５７２０１６，Ｌａｐａｔｉｎｉｂ）Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ”，Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ  ３６，６９５−７０１（２００８）から得られる。
【０１３４】
図４に示されるように、Ｕ８７およびＵ８７ｖＩＩＩ細胞においてＳＣ−３８はアポトーシスを誘導した。Ｕ８７（図４、Ａ−Ｂ）およびＵ８７ｖＩＩＩ（図４、Ｃ−Ｄ）細胞をＳＣ−３８で４８時間処理し、アネキシン−ＦＩＴＣ／７−ＡＡＤにより染色した。ＭＵＳＥセルアナライザー（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いてアポトーシス細胞を可視化した。結果は、３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。一元配置ＡＮＯＶＡおよびその後のＤｕｎｎｅｔのポストテストを使用して、統計的有意性を計算した（＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１）。
【０１３５】
ＳＣ−３８処理後のＵ８７およびＵ８７ｖＩＩＩ細胞におけるＰＡＲＰ切断のウエスタンブロット分析も実行した（図５を参照）。Ｕ８７（レーン１〜３）およびＵ８７ｖＩＩＩ（レーン４〜６）細胞を１および５μＭのＳＣ−３８により４８時間処理した。３回の独立した実験の代表的なブロットが示される（図５Ａ）。負荷対照としてＧＡＰＤＨを使用した。ＰＡＲＰ切断を定量化し、ＧＡＰＤＨに対して基準化した（倍数変化として表される）。図５Ｂを参照。結果は、３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。一元配置ＡＮＯＶＡおよびその後のＤｕｎｎｅｔのポストテストを用いて統計的有意性を決定した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊＊Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。
【０１３６】
図６に示されるように、化合物１−０８は、Ｕ８７およびＵ８７ｖＩＩＩ細胞においてアポトーシスを誘導した。Ｕ８７（図６、Ａ−Ｂ）およびＵ８７ｖＩＩＩ（図６、Ｃ−Ｄ）細胞を化合物１−０８で４８時間処理し、アネキシン−ＦＩＴＣ／７−ＡＡＤにより染色した。ＭＵＳＥセルアナライザー（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いてアポトーシス細胞を可視化した。結果は、３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。一元配置ＡＮＯＶＡおよびその後のＤｕｎｎｅｔのポストテストを使用して、統計的有意性を計算した（＊＊＊Ｐ＜０．００１）。
【０１３７】
化合物１−０８処理後のＵ８７およびＵ８７ｖＩＩＩ細胞におけるＰＡＲＰ切断のウエスタンブロット分析も実行した（図７）。Ｕ８７（レーン１〜３）およびＵ８７ｖＩＩＩ（レーン４〜６）細胞を１および５μＭの化合物１−０８により４８時間処理した。３回の独立した実験の代表的なブロットが示される（図７Ａを参照）。負荷対照としてＧＡＰＤＨを使用した。ＰＡＲＰの切断を定量化し、ＧＡＰＤＨに対して基準化した（倍数変化として表される）。図７Ｂを参照。結果は、３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭである。一元配置ＡＮＯＶＡおよびその後のＤｕｎｎｅｔのポストテストを用いて統計的有意性を決定した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。
【０１３８】
Ｕ８７、Ｕ８７ｖＩＩＩおよびＵ２５１中のＢｃｌ−２ファミリータンパク質に対するＳＣ−３８処理の効果も試験した（図８を参照）。Ｕ８７（レーン１〜３）、Ｕ８７ｖＩＩＩ（レーン４〜６）およびＵ２５１（レーン７〜９）細胞をＳＣ−３８（１および５μＭ）により２４時間処理し、ウエスタンブロット分析を行い、負荷対照としてＧＡＰＤＨを使用した。代表的なブロットは図８Ａに示され、倍数変化として提示されるＧＡＰＤＨに対して基準化された定量化は、図８Ｂ−Ｅに示される。結果は、３回の独立した実験からの平均±ＳＥＭであり、対応のないｔ検定を使用して統計的有意性を決定した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。
【０１３９】
Ｕ８７、Ｕ８７ｖＩＩＩおよびＵ２５１中のＢｃｌ−２ファミリータンパク質に対する化合物１−０８処理の効果も調査した（図９を参照）。Ｕ８７（レーン１〜３）、Ｕ８７ｖＩＩＩ（レーン４〜６）およびＵ２５１（レーン７〜９）細胞を化合物１−０８（１および５μＭ）により２４時間処理し、ウエスタンブロット分析を行い、負荷対照としてＧＡＰＤＨを使用した。代表的なブロットは図９Ａに示され、相対的なタンパク質発現として提示される定量化は図９Ｂ−Ｅに示される。結果は２回の独立した実験からの平均±ＳＥＭであり、対応のないｔ検定を使用して統計的有意性を決定した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１）。
【０１４０】
１０および５０μＭにおける化合物１−０８のキナーゼプロファイリングをＰｒｏＱｉｎａｓｅ  ＧｍｂＨ（Ｆｒｅｉｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）により実施した。３８７のタンパク質キナーゼおよび１３の脂質キナーゼのキナーゼ活性を測定するために、それぞれ、放射性タンパク質キナーゼアッセイ（３３ＰａｎＱｉｎａｓｅ（登録商標）活性アッセイ）および非放射性ＡＤＰ−ＧｌｏＴＭアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡ）を使用した。結果は表３に示される（上位１０個のキナーゼのみが記載され、選択性スコアは、全ての試験キナーゼに関して、５０％を超えて阻害されたキナーゼの部分を説明する）。
【０１４１】
【表５】
2018505170.tif 000025
【０１４２】
１０μＭでは、化合物１−０８はＭＥＲＴＫを５１％レベルで阻害した。いくつかの他のキナーゼは、５０μＭの濃度で阻害された。
【０１４３】
チューブリン重合および紡錘体形成に対する化合物１−０８の効果も調査した。チューブリン重合アッセイキット（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ，ＣＯ，ＵＳＡ）を製造業者の説明書通りに用いて、５５μＬの最終容積で蛍光ベースのチューブリン重合アッセイを行った。試験化合物（パクリタキセル、ビンブラスチンおよび化合物１−０８）と共にブタ脳チューブリンを３７℃でインキュベートし、ＦＬＵＯｓｔａｒ  Ｏｍｅｇａマイクロプレートリーダー（ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈ，Ｏｒｔｅｎｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ；励起３５５ｎｍおよび発光４６０ｎｍ）を用いて蛍光を測定した。対照と比較して、パクリタキセルはチューブリン重合を増強し、ビンブラスチンおよび化合物１−０８はチューブリン重合を用量依存的に阻害した（図１０Ａ）。化合物１−０８がインビボで微小管を変化させるかどうかを試験するために、Ｕ８７神経膠芽腫細胞を化合物１−０８で処理し、β−チューブリンの免疫蛍光染色によって微小管に対する効果を決定した。化合物１−０８（１および５μＭ）によるＵ８７細胞の処理は、微小管の分解（図１０Ｂ）および多核細胞の数の用量依存的増加（図１０Ｂおよび１０Ｃ）をもたらした。化合物１３により誘導される微小管の解重合の結果は、紡錘体集合の破壊であった（図１０Ｄ）。有糸分裂を受けている未処理のＵ８７細胞では、微小管は双極紡錘体に構築される（対照画像）。しかしながら、化合物１−０８による処理は、不完全な紡錘体形成および染色体のミスアライメントをもたらした。これらの結果は、化合物１−０８がチューブリン解重合剤であり、紡錘体形成を妨害して、多核細胞の形成を引き起すことを示す。
【０１４４】
患者由来の神経膠腫球を用いる細胞生存率アッセイにおけるＳＣ−３８、ならびに化合物１−０８、１−１８および１−３８の効果も調査した。古典的サブタイプの神経膠芽腫を表すＲＮ１神経膠腫球は、処置に対して応答性が最も高かった（図１１、ここで、ＳＣ−３８は「ＣＭＰＤ１」と称され、化合物１−０８は「化合物１３」と称され、化合物１−１８は「化合物７」と称され、化合物１−３８は「化合物１０」と称される）。ＳＣ−３８および化合物１−０８はＲＮ１神経膠腫球の生存率を減弱し、ＥＣ５０はそれぞれ０．２６および０．５４μＭであった（図１１Ａ）。ＳＣ−３８は、間葉系ＷＫ１神経膠腫球の成長も強力に減弱した（ＥＣ５０＝０．９１μＭ、図１１Ｂ）。間葉系神経膠腫球において、化合物１−１８は、化合物１−０８（ＥＣ５０＝３．８２μＭ）と比べてより効果的であった（ＥＣ５０＝２μＭ）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図５】
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【図６−１】
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【図６−２】
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【図７】
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【図８−１】
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【図８−２】
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【図９−１】
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【図９−２】
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【図１０−１】
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【図１０−２】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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