(57)【要約】  本明細書において、新規な診断能を示し、養子免疫療法に対して速やかに機能性が付与されるのを可能にする組成物を提供する。該組成物は、ペプチジル部分を含む化合物（例えば、メディトープ）に結合し得る抗体領域を含むタンパク質をコードしている単離された核酸を含むものである。本明細書において提供する組換えタンパク質は、とりわけ、広くさまざまな治療目的および診断目的に有用である。例えば、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質は、疾患（例えば、がん）の処置前および／または該処置中にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞を特性評価するための非観血的手段として使用され得る。
2018517407.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域、軽鎖可変（ＶＬ）領域、重鎖定常領域（ＣＨ）および軽鎖定常領域（ＣＬ）によって形成され且つフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む、抗体領域；ならびに
（ｉｉ）膜貫通ドメイン
を含むタンパク質をコードしている、単離された核酸。
【請求項２】
前記抗体領域が、抗体断片である、請求項１に記載の単離された核酸。
【請求項３】
前記抗体領域が、Ｆｃドメインを含む、請求項１または２に記載の単離された核酸。
【請求項４】
前記抗体領域が、ヒト化抗体領域である、請求項１から３のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項５】
さらに、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインをコードしている細胞内Ｔ細胞シグナル伝達配列を含む、請求項１から４のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項６】
前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである、請求項５に記載の単離された核酸。
【請求項７】
さらに、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインをコードしている細胞内共刺激シグナル伝達配列を含む、請求項１から６のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項８】
前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである、請求項７に記載の単離された核酸。
【請求項９】
さらに、スペーサー領域をコードしているスペーサー配列を含む、請求項１から８のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項１０】
前記スペーサー領域が、前記膜貫通ドメインと前記抗体領域との間に存在している、請求項９に記載の単離された核酸。
【請求項１１】
さらに、リンカードメインをコードしているリンカー配列を含む、請求項１から１０のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項１２】
前記リンカードメインが、前記膜貫通ドメインと前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している、請求項１１に記載の単離された核酸。
【請求項１３】
前記リンカードメインが、前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとの間に存在している、請求項１１に記載の単離された核酸。
【請求項１４】
前記リンカードメインが、配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含む、請求項１１に記載の単離された核酸。
【請求項１５】
（ｉ）重鎖可変ドメインと前記膜貫通ドメインとを含む前記タンパク質の重鎖ドメインをコードしている、重鎖配列；および
（ｉｉ）軽鎖可変ドメインを含む前記タンパク質の軽鎖ドメインをコードしている、軽鎖配列
を含み、ここで、前記重鎖可変ドメインと前記軽鎖可変ドメインが、一緒になって前記抗体領域の少なくとも一部分を形成している、請求項１から１４のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項１６】
前記重鎖配列と前記軽鎖配列との間に自己切断性ペプチジル配列を含む、請求項１５に記載の単離された核酸。
【請求項１７】
前記自己切断性ペプチジルリンカー配列が、Ｔ２Ａ配列または２Ａ配列である、請求項１６に記載の単離された核酸。
【請求項１８】
前記軽鎖配列が、前記重鎖配列の３’側である、請求項１５から１７のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項１９】
前記抗体領域が、セツキシマブメディトープ使用可能ドメイン、トラスツズマブメディトープ使用可能ドメイン、ペルツズマブメディトープ使用可能ドメイン、Ｍ５Ａメディトープ使用可能ドメインまたはリツキシマブメディトープ使用可能ドメインである、請求項１から１８のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項２０】
抗体重鎖の可変ドメインを含む第１部分および抗体軽鎖の可変ドメインと抗体軽鎖の定常ドメインとを含む第２部分を含むタンパク質をコードしている単離された核酸であって、第１部分がさらに膜貫通ドメインを含む、単離された核酸。
【請求項２１】
前記第１部分が、さらに、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含む、請求項２０に記載の単離された核酸。
【請求項２２】
前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである、請求項２０に記載の単離された核酸。
【請求項２３】
前記第１部分が、さらに、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含む、請求項２０から２２のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項２４】
前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである、請求項２３に記載の単離された核酸。
【請求項２５】
前記第１部分が、さらに、リンカードメインを含む、請求項２０から２４のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項２６】
前記リンカードメインが、前記膜貫通ドメインと前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している、請求項２５に記載の単離された核酸。
【請求項２７】
前記リンカードメインが、前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとの間に存在している、請求項２５に記載の単離された核酸。
【請求項２８】
前記リンカードメインが、配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含む、請求項２５に記載の単離された核酸。
【請求項２９】
前記第１部分が、さらに、ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとを含む、請求項２０に記載の単離された核酸。
【請求項３０】
前記第１部分が、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって：該重鎖の可変ドメイン、重鎖定常ドメイン、該膜貫通ドメイン、該ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインおよび細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含む、請求項２３に記載の単離された核酸分子。
【請求項３１】
さらに、重鎖の可変ドメインと膜貫通ドメインとの間に配置されたスペーサー領域を含む、請求項２０から３０のいずれか１項に記載の単離された核酸分子。
【請求項３２】
前記スペーサー領域が、さらに、ヒンジ領域を含む、請求項３１に記載の単離された核酸。
【請求項３３】
抗体重鎖の可変ドメインおよび抗体軽鎖の可変ドメインが、ヒト化型である、請求項２０に記載の単離された核酸。
【請求項３４】
前記第１部分が、重鎖定常ドメインを含む、請求項２０に記載の単離された核酸。
【請求項３５】
前記第１部分と前記第２部分との間に自己切断性ペプチジル配列を含む、請求項２０に記載の単離された核酸。
【請求項３６】
前記自己切断性ペプチジルコード配列が、Ｔ２Ａコード配列または２Ａコード配列である、請求項３５に記載の単離された核酸。
【請求項３７】
前記第２部分をコードしている核酸配列が、前記第１部分をコードしている核酸配列の３’側である、請求項２０のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項３８】
前記タンパク質が、抗ＣＤ１９タンパク質、抗ＣＤ２０タンパク質、抗ＣＤ２２タンパク質、抗ＣＤ３０タンパク質、抗ＣＤ３３タンパク質、抗ＣＤ４４ｖ６／７／８タンパク質、抗ＣＤ１２３タンパク質、抗ＣＥＡタンパク質、抗ＥＧＰ−２タンパク質、抗ＥＧＰ−４０タンパク質、抗ｅｒｂ−Ｂ２タンパク質、抗ｅｒｂ−Ｂ２，３，４タンパク質、抗ＦＢＰタンパク質、抗胎児型アセチルコリン受容体タンパク質、抗ＧＤ２タンパク質、抗ＧＤ３タンパク質、抗Ｈｅｒ２／ｎｅｕタンパク質、抗ＩＬ−１３Ｒ−ａ２タンパク質、抗ＫＤＲタンパク質、ａｎｔｉ  ｋ−軽鎖タンパク質、抗ＬｅＹタンパク質、抗Ｌ１細胞接着分子タンパク質、抗ＭＡＧＥ−Ａ１タンパク質、抗メソテリンタンパク質、抗マウスＣＭＶ感染細胞タンパク質、抗ＭＵＣ２タンパク質、抗ＮＫＧＤ２タンパク質、抗腫瘍胎児抗原タンパク質、抗ＰＣＳＡタンパク質、抗ＰＳＭＡタンパク質、ｍＡｂ  ＩｆＥによって標的化される抗ＴＡＡタンパク質、抗ＥＧＦＲタンパク質、抗ＴＡＧ−７２  タンパク質または抗ＶＥＧＦ−７２タンパク質である、請求項１から３７のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項３９】
さらに、自殺遺伝子配列を含む、請求項１から３８のいずれか１項に記載の単離された核酸。
【請求項４０】
請求項１から３９のいずれか１項に記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項４１】
前記発現ベクターが、ウイルスベクターである、請求項４０に記載の発現ベクター。
【請求項４２】
前記ウイルスが、レンチウイルスまたはオンコ−レトロウイルスである、請求項４１に記載の発現ベクター。
【請求項４３】
請求項４０から４２のいずれか１項に記載の発現ベクターを含む、Ｔリンパ球。
【請求項４４】
重鎖の可変ドメイン、重鎖定常ドメイン、膜貫通ドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインおよび共刺激Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含む第１ポリペプチドと、軽鎖の可変ドメインおよび軽鎖の定常ドメインを含む第２ポリペプチドとを含む、請求項４３に記載のＴリンパ球。
【請求項４５】
（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域と軽鎖可変（ＶＬ）領域とによって形成され且つフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む、抗体領域；ならびに
（ｉｉ）膜貫通ドメイン
を含む、組換えタンパク質。
【請求項４６】
前記抗体領域が、さらに、重鎖定常領域（ＣＨ）と軽鎖定常領域（ＣＬ）とを含む、請求項４５に記載の組換えタンパク質。
【請求項４７】
前記抗体領域が、Ｆｃドメインを含む、請求項４５または４６に記載の組換えタンパク質。
【請求項４８】
前記抗体領域が、ヒト化抗体領域である、請求項４５から４７のいずれか１項に記載の組換えタンパク質。
【請求項４９】
前記抗体領域が、ｓｃＦｖ抗体領域を含んでいない、請求項４５から４８のいずれか１項に記載の組換えタンパク質。
【請求項５０】
前記タンパク質が、さらに、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含む、請求項４５から４９のいずれか１項に記載の組換えタンパク質。
【請求項５１】
前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである、請求項５０に記載の組換えタンパク質。
【請求項５２】
さらに、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含む、請求項４５から５１のいずれか１項に記載の組換えタンパク質。
【請求項５３】
前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである、請求項５２に記載の組換えタンパク質。
【請求項５４】
さらに、スペーサー領域を含む、請求項４５から５３のいずれか１項に記載の組換えタンパク質。
【請求項５５】
前記スペーサー領域が、前記膜貫通ドメインと前記抗体領域との間に存在している、請求項５４に記載の組換えタンパク質。
【請求項５６】
さらに、リンカードメインを含む、請求項４５から５５のいずれか１項の請求項に記載の組換えタンパク質。
【請求項５７】
前記リンカードメインが、前記膜貫通ドメインと前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している、請求項５６に記載の組換えタンパク質。
【請求項５８】
前記リンカードメインが、前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとの間に存在している、請求項５６に記載の組換えタンパク質。
【請求項５９】
前記リンカードメインが、配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含む、請求項５７または５８に記載の組換えタンパク質。
【請求項６０】
前記抗体領域が、セツキシマブメディトープ使用可能ドメイン、トラスズマブメディトープ使用可能ドメイン、ペルツズマブメディトープ使用可能ドメイン、Ｍ５Ａメディトープ使用可能ドメインまたはリツキシマブメディトープ使用可能ドメインである、請求項４５から５９のいずれか１項に記載の組換えタンパク質。
【請求項６１】
ペプチジル部分を含む化合物が、前記ペプチド結合部位に結合されている、請求項４５から６０のいずれか１項に記載の組換えタンパク質。
【請求項６２】
前記化合物が、多価メディトープである、請求項６１に記載の組換えタンパク質。
【請求項６３】
抗体重鎖の可変ドメインを含む第１部分および抗体軽鎖の可変ドメインと抗体軽鎖の定常ドメインとを含む第２部分を含む組換えタンパク質であって、該第１部分がさらに膜貫通ドメインを含み、該抗体重鎖の可変ドメイン、該抗体軽鎖の可変ドメインおよび該抗体軽鎖の定常ドメインが、一緒になって抗体領域を形成している、組換えタンパク質。
【請求項６４】
前記膜貫通ドメインが、前記Ｔリンパ球の細胞膜内に存在している、請求項４５から６３のいずれか１項に記載の組換えタンパク質を含む、Ｔリンパ球。
【請求項６５】
がんの処置方法であって、がんの処置を必要とする被験体に有効量の請求項６４のＴ−リンパ球を投与することを含み、前記抗体領域が、抗がん抗体領域である、方法。
【請求項６６】
前記Ｔ−リンパ球が、自己Ｔ−リンパ球である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記Ｔ−リンパ球が、異種Ｔ−リンパ球である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
前記がんが、固形腫瘍のがんまたは造血器悪性腫瘍である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６９】
前記がんが、卵巣がん、腎細胞癌、Ｂ細胞性悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、乳がん、結腸直腸がん、前立腺がん、神経芽細胞腫、黒色腫、髄芽細胞腫、肺がん、骨肉腫、膠芽腫または神経膠腫である、請求項６５から６８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７０】
Ｔリンパ球を請求項４０から４２のいずれか１項に記載の発現ベクターと接触させることを含む、Ｔリンパ球のリプログラミング方法。
【請求項７１】
（ｉ）がん患者に、請求項４５から６３のいずれか１項に記載の組換えタンパク質を含み且つここで前記抗体領域が抗がん抗体領域である有効量のＴリンパ球と、前記ペプチド結合部位に結合し得るペプチジル部分を含み且つさらに検出可能な標識を含む化合物を投与すること；
（ｉｉ）前記化合物が、前記ペプチド結合部位に結合し、それにより組換えタンパク質−化合物複合体を形成することを可能にすること；および
（ｉｉｉ）前記がん患者において前記組換えタンパク質−化合物複合体を検出し、それにより、がんを検出すること
を含む、がんの検出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年５月１５日に出願された米国特許仮出願第６２／１６２，５９９号の優先権を主張するものであり、この仮出願の開示内容はその全体があらゆる目的のために本明細書に組み込まれる。
【０００２】
ＡＳＣＩＩテキストファイルとして提出した「配列表」、表またはコンピュータプログラムリスティング付属書類の参照
２０１６年５月１２日にマシンフォーマットＩＢＭ−ＰＣ，ＭＳ−Ｗｉｎｄｏｗｓオペレーティングシステムで作成した１６９，５３４バイトのファイル４８４４０−５５８００１ＷＯ＿ＳＴ２５．ＴＸＴに記載された配列表は、参照によりその全体があらゆる目的のために本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
がんは、米国において死因の第２位であり、慢性呼吸器疾患、アルツハイマー病および糖尿病を含むこれ以下の５つの死因を合わせた数よりも死亡者が多い。桁外れの研究が、がんの検出、予防および処置において行なわれているが、依然として、特に進行症例において、腫瘍の進行を止めるだけでなくすべての腫瘍細胞を効率的に消去する治療をもたらす差し迫った必要性がある。アプローチの１つは、Ｔ細胞養子免疫療法である（５〜７；非特許文献１〜３）。この方法は、患者のＴ細胞の採取すること、この細胞を、腫瘍抗原を認識するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）により操作すること、およびその後、改良したこの細胞を該患者に再導入することを要するものである。リプログラミングされたＴ細胞は、次いで、ＭＨＣペプチドの要件を回避して、直接、抗原発現腫瘍細胞を標的化し、強力だが局所的な免疫応答を誘起する。この処置方法（８；非特許文献４）では、初期段階の臨床試験で、ある程度のプラスの結果が、一握りの患者においてもたらされるが、すべての患者にもたらされるわけではない。当該技術分野において、ＣＡＲ  Ｔ細胞療法の奏功および不奏功がよりよく理解される必要性がある。例えば、当該技術分野において、形質転換細胞上のＣＡＲの密度を特性評価できる必要性、治療中、投与された任意の時点のＣＡＲ  Ｔ細胞を追跡し、その分布を治療転帰と相関させることができる必要性、ＣＡＲ  Ｔ細胞を速やかに機能化し、移植ＣＡＲ  Ｔ細胞の数、位置およびバイアビリティをインサイチュでモニタリングできる必要性、ならびに必要であればＣＡＲ  Ｔ細胞を選択的に消去できる必要性がある。有意義な相関により、医師が最良の処置選択肢を決定することが補助され、研究者らには、この治療アプローチを改変および改善するための重要な手がかりがもたらされよう。本明細書において、当該技術分野におけるこれらおよび他の必要性に対処する組成物および方法を、提供する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｋａｌｏｓ  Ｍ，Ｊｕｎｅ  ＣＨ．Ａｄｏｐｔｉｖｅ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｅｒａ  ｏｆ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｂｉｏｌｏｇｙ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．２０１３；３９（１）：４９−６０．Ｅｐｕｂ  ２０１３／０７／３１．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｉｍｍｕｎｉ．２０１３．０７．００２．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２３８９００６３  ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３８０９０３８．
【非特許文献２】Ｍａｒｄｉｒｏｓ  Ａ，Ｄｏｓ  Ｓａｎｔｏｓ  Ｃ，ＭｃＤｏｎａｌｄ  Ｔ，Ｂｒｏｗｎ  ＣＥ，Ｗａｎｇ  Ｘ，Ｂｕｄｄｅ  ＬＥ，Ｈｏｆｆｍａｎ  Ｌ，Ａｇｕｉｌａｒ  Ｂ，Ｃｈａｎｇ  ＷＣ，Ｂｒｅｔｚｌａｆｆ  Ｗ，Ｃｈａｎｇ  Ｂ，Ｊｏｎｎａｌａｇａｄｄａ  Ｍ，Ｓｔａｒｒ  Ｒ，Ｏｓｔｂｅｒｇ  ＪＲ，Ｊｅｎｓｅｎ  ＭＣ，Ｂｈａｔｉａ  Ｒ，Ｆｏｒｍａｎ  ＳＪ．Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  ＣＤ１２３−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｈｉｍｅｒｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｅｘｈｉｂｉｔ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｙｔｏｌｙｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｏｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ａｇａｉｎｓｔ  ｈｕｍａｎ  ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ．Ｂｌｏｏｄ．２０１３；１２２（１８）：３１３８−４８．Ｅｐｕｂ  ２０１３／０９／１４．ｄｏｉ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ−２０１２−１２−４７４０５６．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２４０３０３７８  ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３８１４７３１．
【非特許文献３】Ｔｕｒｔｌｅ  ＣＪ，Ｈｕｄｅｃｅｋ  Ｍ，Ｊｅｎｓｅｎ  ＭＣ，Ｒｉｄｄｅｌｌ  ＳＲ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｏｒ  ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１２；２４（５）：６３３−９．Ｅｐｕｂ  ２０１２／０７／２４．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｃｏｉ．２０１２．０６．００４．ＰｕｂＭｅｄ  ＰＭＩＤ：２２８１８９４２  ＰＭＣＩＤ：ＰＭＣ３６２２５５１．
【非特許文献４】ＮＣＩ．ＣＡＲ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ’  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｃｅｌｌｓ  ｔｏ  Ｔｒｅａｔ  Ｔｈｅｉｒ  Ｃａｎｃｅｒｓ  ２０１３．Ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｆｒｏｍ：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／ｃａｎｃｅｒｔｏｐｉｃｓ／ｒｅｓｅａｒｃｈ−ｕｐｄａｔｅｓ／２０１３／ＣＡＲ−Ｔ−Ｃｅｌｌｓ．
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
一態様では、単離された核酸を提供する。該核酸は、（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域、軽鎖可変（ＶＬ）領域、重鎖定常領域（ＣＨ）および軽鎖定常領域（ＣＬ）によって形成され且つフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞（ｃｅｎｔｒａｌ  ｃａｖｉｔｙ）を含む抗体領域；ならびに（ｉｉ）膜貫通ドメインを含むタンパク質を、コードしている。
【０００６】
一態様では、単離された核酸を提供する。該核酸は、（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域と軽鎖可変（ＶＬ）領域によって形成され且つフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む抗体領域；ならびに（ｉｉ）膜貫通ドメインを含むタンパク質を、コードしている。
【０００７】
別の態様では、単離された核酸を提供する。該単離された核酸は、抗体重鎖の可変ドメインを含む第１部分および抗体軽鎖の可変ドメインと抗体軽鎖の定常ドメインとを含む第２部分を含むタンパク質をコードしており、ここで、第１部分は、さらに、膜貫通ドメインを含むものである。
【０００８】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する核酸を含む発現ベクターを提供する。
【０００９】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する発現ベクターを含むＴリンパ球を提供する。
【００１０】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する発現ベクターを含む哺乳動物細胞を提供する。
【００１１】
別の態様では、組換えタンパク質を提供する。該組換えタンパク質は、（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域と軽鎖可変（ＶＬ）領域によって形成され且つフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む抗体領域；ならびに（ｉｉ）膜貫通ドメインを、含むものである。
【００１２】
別の態様では、組換えタンパク質を提供する。該組換えタンパク質は、抗体重鎖の可変ドメインを含む第１部分および抗体軽鎖の可変ドメインと抗体軽鎖の定常ドメインを含む第２部分を含むものであり、ここで、第１部分はさらに膜貫通ドメインを含むものであり、該抗体重鎖の可変ドメイン、該抗体軽鎖の可変ドメインおよび該抗体軽鎖の定常ドメインが、一緒になって抗体領域を形成している。
【００１３】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質を含む哺乳動物細胞を提供し、ここで、該膜貫通ドメインは、該哺乳動物細胞の細胞膜に存在している。
【００１４】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質を含むＴリンパ球を提供し、ここで、該膜貫通ドメインは該Ｔリンパ球の細胞膜内に存在している。
【００１５】
別の態様では、がんの処置方法を提供する。該方法は、がんの処置を必要とする被験体に、諸実施形態を含む本明細書において提供する哺乳動物細胞を有効量で投与することを含むものであり、ここで、該抗体領域は、抗がん抗体領域である。
【００１６】
別の態様では、がんの処置方法を提供する。該方法は、がんの処置を必要とする被験体に、諸実施形態を含む本明細書において提供するＴ−リンパ球を有効量で投与することを含むものであり、ここで、該抗体領域は、抗がん抗体領域である。
【００１７】
別の態様では、Ｔリンパ球のリプログラミング方法を提供する。該方法は、Ｔリンパ球を、諸実施形態を含む本明細書において提供する発現ベクターと接触させることを含むものである。
【００１８】
別の態様では、がんの検出方法を提供する。該方法は、（ｉ）がん患者に、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質を含む有効量のＴリンパ球と該ペプチド結合部位に結合し得るペプチジル部分を含む化合物とを投与することを含むものであり、ここで、該化合物は、さらに、検出可能な標識を含むものであり、該抗体領域は、抗がん抗体領域である。該方法は、（ｉｉ）該化合物が該ペプチド結合部位に結合し、これにより組換えタンパク質−化合物複合体を形成することを可能にすることを含むものである。ならびに、（ｉｉｉ）該がん患者において該組換えタンパク質−化合物複合体を検出し、これにより、該がんを検出する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１Ａ】図１Ａから図１Ｂ．図１Ａ：キメラ抗原受容体の模式図。腫瘍を特異的に標的化するため、腫瘍関連抗原を認識する完全ｍＡｂまたはＦａｂ断片を直接、膜貫通ドメインおよびゼータ鎖と融合させる。また、メディトープ（ｍｅｄｉｔｏｐｅ）結合部位をｍＡＢ／Ｆａｂ上にグラフト化し、ＣＡＲ  Ｔ細胞に機能性を付加するさらなる手段をもたらしてもよい。
【図１Ｂ】図１Ａから図１Ｂ．図１Ｂ．２つの鎖を発現させなければならないため（例えば、ｍＡｂの軽鎖と重鎖＋膜貫通シグナル伝達セグメントおよび細胞内シグナル伝達セグメント）、異なる鎖を発現させるための２つの異なる可能性がある。具体的には、軽鎖の後に重鎖または重鎖の後に軽鎖である。
【図２Ａ】図２Ａから図２Ｂ：ＨＥＲ２特異的ＣＡＲ。図２Ａ．２Ａリボソームスキップ配列と細胞の形質導入の不活性免疫原性マーカーとしての機能を果たす切断型ＣＤ１９（ＣＤ１９ｔ）とを含む、ＨＥＲ２特異的ＣＡＲの発現のためのレンチウイルスＣＡＲカセットの略図。
【図２Ｂ】図２Ａから図２Ｂ：ＨＥＲ２特異的ＣＡＲ。図２Ｂ．ＨＥＲ２Ｒ：２８ζを発現させるためにレンチウイルスで形質導入したＴｃｍは、ＣＡＲおよびＣＤ１９の両タンパク質の安定な細胞表面発現を示す。
【図３Ａ】図３Ａから図３Ｂ．ＨＥＲ２−２８ζ  Ｔｃｍは、高発現ＨＥＲ２標的および低発現ＨＥＲ２標的の両方を殺傷する。図３Ａ．乳房腫瘍株およびＨＥＲ２陰性Ｕ８７膠芽腫細胞株のパネルにおいてＨＥＲ２表面発現を評価するフローサイトメトリー解析。
【図３Ｂ】図３Ａから図３Ｂ．ＨＥＲ２−２８ζ  Ｔｃｍは、高発現ＨＥＲ２標的および低発現ＨＥＲ２標的の両方を殺傷する。図３Ｂ．ＨＥＲ２−２８ｚ  ＣＡＲ  Ｔ細胞による殺傷を評価する４時間のクロム放出アッセイは、高発現ＨＥＲ２＋腫瘍細胞株および低発現ＨＥＲ２＋腫瘍細胞株がともに殺傷されることを示す。
【図４Ａ】図４Ａから図４Ｄ．メディトープ試験．：図４Ａ  結晶構造．５−ジフェニル−メディトープおよびタンパク質ＬをトラスツズマブｍｅｍＡｂに結合させる。抗原結合部位を画定するＨＥＲ２の細胞外ドメインをｐｄｂ  １ｎ８ｚを用いて重ね合わせた。注：タンパク質Ｌおよびメディトープは相違するものであり、抗原結合部位から遠位である。
【図４Ｂ】図４Ａから図４Ｄ．メディトープ試験．：図４Ｂ  ＦＡＣＳ．ＳＫＢＲ３細胞を標識トラスツズマブ（親；ｍｅｍＡｂ）および標識メディトープ−タンパク質Ｌ（ＭＰＬ６）により、逐次処理するか、またはこれらの予備混合により処理するかのいずれかとした。トラスツズマブｍｅｍＡｂのみがメディトープ−タンパク質Ｌをシフトさせる。このことは、抗原結合がメディトープ結合を妨害しないことを示す。
【図４Ｃ】図４Ａから図４Ｄ．メディトープ試験．：図４Ｃ  蛍光顕微鏡検査．ＳＫＢＲ３細胞の使用で、メディトープ−タンパク質Ｌ（ＭＰＬ６−ＧＦＰ）と融合させたＧＦＰは、トラスツズマブｍｅｍＡｂと共局在する（上列）が、親トラスツズマブとは共局在しない（下列）。これは、嵩高い生物材料が抗原結合を障害しないことを示す。
【図４Ｄ】図４Ａから図４Ｄ．メディトープ試験：図４Ｄ  超解像顕微鏡検査．個々のＨＥＲ２受容体は、メディトープ−タンパク質Ｌ（ＭＰＬ６−ＧＦＰ）と融合させたｐａＧＦＰおよびトラスツズマブｍｅｍＡｂを用いて可視化され、定量され得る。左パネルは、細胞全体を示す。右パネルは、個々の受容体を示す。
【図５】図５．頭蓋内移植乳房腫瘍に対するＨＥＲ２−ｓｃＦｖ−ＣＡＲ  Ｔｃｍの抗腫瘍活性。ＮＳＧマウスにおける、ｉ．ｃ．移植されたＢＴ４７４  ＥＧＦＰ−ｆｆＬｕｃ＋腫瘍（１×１０５個の細胞）に対する、ＨＥＲ２Ｒ−ＣＡＲ  Ｔ細胞の腫瘍内ｉ．ｃ．注射後の代表的な治療応答。１１日目、マウスに、１×１０６個のＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔｃｍ、ｍｏｃｋ  ＴｃｍまたはＰＢＳのいずれかを投与した。
【図６】図６．ｍｅＨＥＲ２Ｒ−ＣＡＲ  Ｔ細胞。一次ヒトＴ細胞を、ＨＥＲ２−ｓｃＦｖ−ＣＡＲ（ＨＥＲ２Ｒ−ＥＱ−２８Ｚ）またはメディトープ使用可能（ｅｎａｂｌｅｄ）ＨＥＲ２−ＣＡＲ（ｍｅＨＥＲ２Ｒ−ｄＣＨ２−２８Ｚ）のいずれかを発現するようにレンチウイルスで形質導入した。ｍｅＨＥＲ２−ｄＣＨ２−２８Ｚの細胞表面発現を、フローサイトメトリーにより抗Ｆｃ抗体を用いて確認する。
【図７】図７．一次ヒトＴ細胞におけるマウスＴ８４．６６およびヒト化Ｍ５Ａ由来ｓｃＦｖ−ＣＥＡ特異的ＣＡＲ  の発現。ｍｕＴ８４．６６およびＭ５Ａ由来ＣＥＡ−ｓｃＦｖ−ＣＡＲはどちらも、操作した細胞によって安定的に発現される。
【図８Ａ】図８Ａから図８Ｂ．ＣＥＡ＋標的の殺傷に関するマウスＴ８４．６６対ヒト化Ｍ５Ａ  ｓｃＦｖ−ＣＥＡ特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞の比較。図８Ａ：ＣＥＡの標的細胞発現。
【図８Ｂ】図８Ａから図８Ｂ．ＣＥＡ＋標的の殺傷に関するマウスＴ８４．６６対ヒト化Ｍ５Ａ  ｓｃＦｖ−ＣＥＡ特異的ＣＡＲ  Ｔ細胞（対比）の比較。図８Ｂ：４時間のクロム放出アッセイ。ｍｕＴ８４．６６由来ＣＥＡ−ｓｃＦｖ−ＣＡＲ  Ｔ細胞は、４時間のクロム放出アッセイにおいてＣＥＡ＋標的細胞を認識して殺傷する。それに対し、ヒト化Ｍ５Ａ由来ＣＥＡ−ｓｃＦｖ−ＣＡＲ  Ｔ細胞では、ＣＥＡ＋標的細胞は殺傷されない。
【図９】図９．例示的なＦａｂおよびリンカーの立体配置の例示。
【図１０】図１０．ＣＨＯ−Ｓ細胞を、ｍｅｍＡｂトラスツズマブＦａｂ  ＣＡＲ（ｍｅＣＡＲ）またはトラスツズマブｓｃＦｖ−ＣＡＲ（ＨＥＲ２ＣＡＲ）プラスミドのいずれかで、２日間トランスフェクトした。ｍｅＣＡＲおよびＨＥＲ２ＣＡＲ構築物は、ＨＥＲ２標的性成分においてのみ異なり、各々、ＣＨ３、ＣＤ２８膜貫通ドメインおよびＣＤ３ゼータに連結されている。切断型ＣＤ１９もまた、プラスミドから発現されて、トランスフェクション対照として使用され得る。トランスフェクトされたＣＨＯ−Ｓ細胞を４０μｍフィルターで濾過して残屑を除去し、０．３％ＢＳＡ−ＰＢＳで１回洗浄した。次いで細胞を氷上で１時間、以下によって標識した：ＰＥ−抗ＣＤ１９またはイソ型対照、ビオチン化抗Ｆｃγおよびそれに続くストレプトアビジン−ＰＥ、またはＰａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅ−可溶性ＨＥＲ２とＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８−メディトープＦｃ（ＭＦＣ）による二重標識。インキュベーションの終了時、細胞を１回洗浄し、８００μｌの洗浄バッファー中に再懸濁させた。Ｓｙｔｏｘ  ｂｌｕｅをバイアビリティおよび膜透過性の評価のために非標識細胞に添加した。細胞を、前方側方散乱のみでゲーティングした。Ｓｙｔｏｘ  ＢｌｕｅおよびＰａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅは、このスペクトルにおいてかなりの重複を有し、従って、非標識試料のＳｙｔｏｘ  Ｂｌｕｅシグナルは、Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅチャネル内に「漏出」したものである。ＣＨＯ−Ｓ細胞が膜結合型タンパク質を発現する場合、黄色い楕円内の細胞群で示されるように、この膜がＳｙｔｏｘ  Ｂｌｕｅ色素に対してより透過性となることに留意した。ｍｅＣＡＲトランスフェクト細胞およびＨＥＲ２ＣＡＲトランスフェクト細胞は、どちらも、ＣＤ１９、ＣＨ３およびｓＨＥＲ２に陽性であるが、ｍｅＣＡＲだけはＭＦＣ結合にも陽性である。
【図１１Ａ】図１１Ａから図１１Ｃ．一次ヒトＴ細胞におけるメディトープ使用可能Ｆａｂ−ＣＡＲの発現。図１１Ａ，メディトープ（ｍｅ）使用可能トラスツズマブＦａｂ−ＣＡＲカセット（ｍｅＨＥＲ２）概略図であり、Ｔ２Ａリボソームスキップ配列により、抗体軽鎖（ｍｅＬｃ）と、ＩｇＧ４−ＣＨ３−Ｆｃリンカーに融合された重鎖、ＣＤ２８膜貫通ドメイン（Ｔｍ）、ＣＤ２８およびＣＤ３ζ細胞質シグナル伝達ドメイン（Ｈｃ２８ζ）とが、分かれている。発現は、ＥＦ１αプロモーターによって駆動され、２つの配向：Ｌｃ−Ｈｃ２８ζおよびＨｃ２８ζ−Ｌｃで試験された。
【図１１Ｂ】図１１Ａから図１１Ｃ．一次ヒトＴ細胞におけるメディトープ使用可能Ｆａｂ−ＣＡＲの発現。図１１Ｂ，一次ヒトＴ細胞をレンチウイルスで形質導入し、ｍｅＨＥＲ２−ＣＡＲの発現をフローサイトメトリーによって評価した。Ｆａｂ軽鎖に結合するタンパク質Ｌの染色により両方のＣＡＲ配向の細胞表面発現が確認され、Ｈｃ２８ζ−Ｌｃ（ＭＦＩ  ５３５７）ではＬｃ−Ｈｃ２８ζ（ＭＦＩ  ２５９２）配向と比べて高い発現レベル（ＭＦＩ）が観察された。メディトープ−ＡＦ６４７染色によりＣＡＲメディトープポケットの機能的形成が確認され、Ｈｃ２８ζ−Ｌｃ（ＭＦＩ  ６０４２）ではＬｃ−Ｈｃ２８ζ（ＭＦＩ  ２１２１）配向と比べて結合が大きい。
【図１１Ｃ】図１１Ａから図１１Ｃ．一次ヒトＴ細胞におけるメディトープ使用可能Ｆａｂ−ＣＡＲの発現。図１１Ｃ，メディトープペプチドと事前に結合させたｍｅＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞は、タンパク質Ｌおよび可溶性ＨＥＲ２−抗原に結合する能力を保持しており、メディトープ結合は、Ｆａｂの抗原結合特性および構造成分を改変しないことが示唆される。
【図１２Ａ】図１２Ａから図１２Ｄ．メディトープ使用可能ＨＥＲ２−ＣＡＲ（ｍｅＨＥＲ２）Ｔ細胞は、ＨＥＲ２＋標的に応答して、ｓｃＦｖＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞と同等レベルで脱顆粒し、メディトープペプチドはＴ細胞の脱顆粒にマイナスの影響を及ぼさない。図１２Ａ，ＨＥＲ２＋乳がん細胞株ＭＣＦ−７およびＳＫ−ＢＲ−３を、ＨＥＲ２の細胞表面発現についてフローサイトメトリー（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ；カタログ番号３２４４１３）によって評価した。ＭＣＦ−７は、ＨＥＲ２を過剰発現するＳＫ−ＢＲ−３と比較すると相対的に低レベルのＨＥＲ２を発現する。
【図１２Ｂ】図１２Ａから図１２Ｄ．メディトープ使用可能ＨＥＲ２−ＣＡＲ（ｍｅＨＥＲ２）Ｔ細胞は、ＨＥＲ２＋標的に応答して、ｓｃＦｖＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞と同等レベルで脱顆粒し、メディトープペプチドはＴ細胞の脱顆粒にマイナスの影響を及ぼさない。図１２Ｂから１２Ｄ  ＣＤ１０７ａ脱顆粒アッセイ。ＨＤ１８７．２  Ｔ細胞を、ｍｅＨＥＲ２（Ｈｃ−Ｌｃ）：２８ζＣＡＲ、ｍｅＨＥＲ２（Ｌｃ−Ｈｃ）：２８ζＣＡＲ、ｓｃＦｖＨＥＲ２：２８ζＣＡＲまたはＣＡＲなし（模擬）のいずれかを発現するように操作した。ｍｅＨＥＲ２：２８ζ−ＣＡＲ型は、重鎖（Ｈｃ）および軽鎖（Ｌｃ）の配向においてのみ異なる。図１１参照。図１２Ｂ  １：１のエフェクター対ＭＣＦ−７の比（ＣＡＲ発現に基づく）にて５時間の共培養後の模擬Ｔ細胞（陰性対照）およびｓｃＦｖＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞（陽性対照）についてのＣＤ１０７ａ脱顆粒を示す代表的なＦＡＣ。ＣＤ１０７ａ脱顆粒（ＢＤ  ＰｈａｒｍｉｎｇｅｎＴＭ；カタログ番号５５５８００）を、ＣＡＲ＋  ＣＤ８＋細胞に関してゲーティングするフローサイトメトリー（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ；ＭＡＣＳＱｕａｎｔ）によって検出し、ＦＣＳ  Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｄｅ  Ｎｏｖｏ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いて解析した。
【図１２Ｃ】図１２Ａから図１２Ｄ．メディトープ使用可能ＨＥＲ２−ＣＡＲ（ｍｅＨＥＲ２）Ｔ細胞は、ＨＥＲ２＋標的に応答して、ｓｃＦｖＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞と同等レベルで脱顆粒し、メディトープペプチドはＴ細胞の脱顆粒にマイナスの影響を及ぼさない。図１２Ｂから１２Ｄ  ＣＤ１０７ａ脱顆粒アッセイ。ＨＤ１８７．２  Ｔ細胞を、ｍｅＨＥＲ２（Ｈｃ−Ｌｃ）：２８ζＣＡＲ、ｍｅＨＥＲ２（Ｌｃ−Ｈｃ）：２８ζＣＡＲ、ｓｃＦｖＨＥＲ２：２８ζＣＡＲまたはＣＡＲなし（模擬）のいずれかを発現するように操作した。ｍｅＨＥＲ２：２８ζ−ＣＡＲ型は、重鎖（Ｈｃ）および軽鎖（Ｌｃ）の配向においてのみ異なる。図１１参照。図１２Ｃ  ｍｅＨＥＲ２（Ｈｃ−Ｌｃ）：２８ζおよびｍｅＨＥＲ２（Ｌｃ−Ｈｃ）：２８ζＴ細胞をメディトープ−ＡＦ６４７（ＭＥ；２００ｎＭ）とともに、およびメディトープ−ＡＦ６４７なしでインキュベートし、ＭＣＦ−７標的に対する脱顆粒を図１２Ｂに記載のとおりに評価した。
【図１２Ｄ】図１２Ａから図１２Ｄ．メディトープ使用可能ＨＥＲ２−ＣＡＲ（ｍｅＨＥＲ２）Ｔ細胞は、ＨＥＲ２＋標的に応答して、ｓｃＦｖＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞と同等レベルで脱顆粒し、メディトープペプチドはＴ細胞の脱顆粒にマイナスの影響を及ぼさない。図１２Ｂから１２Ｄ  ＣＤ１０７ａ脱顆粒アッセイ。ＨＤ１８７．２  Ｔ細胞を、ｍｅＨＥＲ２（Ｈｃ−Ｌｃ）：２８ζＣＡＲ、ｍｅＨＥＲ２（Ｌｃ−Ｈｃ）：２８ζＣＡＲ、ｓｃＦｖＨＥＲ２：２８ζＣＡＲまたはＣＡＲなし（模擬）のいずれかを発現するように操作した。ｍｅＨＥＲ２：２８ζ−ＣＡＲ型は、重鎖（Ｈｃ）および軽鎖（Ｌｃ）の配向においてのみ異なる。図１１参照。図１２Ｄ，ＭＣＦ−７またはＳＫ−ＢＲ−３のいずれかに対するすべてのｍｅＨＥＲ２およびｓｃＦｖＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞株の同等の脱顆粒を示す棒グラフ。メディトープペプチドとともにインキュベートしたｍｅＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞およびメディトープペプチドなしでインキュベートしたｍｅＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞は、ＣＤ１０７ａ脱顆粒による評価時、同等の活性化を示す。１つの条件あたり３つのウェルの平均および標準偏差をプロットしている。細胞をＣＤ８＋ＣＡＲ＋集団に関してゲーティングした。
【図１３Ａ】図１３Ａから図１３Ｂ．メディトープ使用可能ＨＥＲ２−ＣＡＲ（ｍｅＨＥＲ２）およびｓｃＦｖＨＥＲ２  ＣＡＲ操作したＴ細胞は、ＨＥＲ２＋標的を同等の効率で殺傷し、メディトープペプチドはＴ細胞の殺傷にマイナスの影響を及ぼさない。ｍｅＨＥＲ２およびｓｃＦｖＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞の殺傷効力を比較するための長期殺傷アッセイ。ＨＤ１８７．２  Ｔ細胞を、ｍｅＨＥＲ２（Ｈｃ−Ｌｃ）：２８ζＣＡＲ、ｍｅＨＥＲ２（Ｌｃ−Ｈｃ）：２８ζＣＡＲ、ｓｃＦｖＨＥＲ２：２８ζＣＡＲまたはＣＡＲなし（模擬）のいずれかを発現するように操作した。ｍｅＨＥＲ２：２８ζ−ＣＡＲ型は重鎖（Ｈｃ）および軽鎖（Ｌｃ）の配向においてのみ異なる。図１１参照。ＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞株または模擬対照を、ＨＥＲ２＋乳がん細胞株ＭＣＦ−７およびＳＫＢＲ３とともに、４８時間、１：４のエフェクター対標的の比（ＣＡＲ発現に基づく）において共培養した。殺傷を、共培養後に残存している腫瘍生細胞の数を定量することにより評価した。バイアビリティ染色、ＤＡＰＩ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＰｒｏｂｅｓＴＭ；カタログ番号Ｄ２１４９０）およびヒト白血球抗原ＣＤ４５（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ；カタログ番号３４７４６４）を使用し、死細胞とＴ細胞を生存腫瘍計数から除外した。共培養の前にｍｅＣＡＲ−Ｔ細胞をメディトープ−ＡＦ６４７（２００ｎＭ）とともに、およびなしでインキュベートし、ｍｅＨＥＲ２リダイレクト（ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ）殺傷の能力に対するメディトープペプチドの影響を評価した。図１３Ａ，棒グラフは、１つの組合せあたり三連のウェルの平均生存腫瘍計数を示す（ＤＡＰＩ−ＣＤ４５−）。
【図１３Ｂ】図１３Ａから図１３Ｂ．メディトープ使用可能ＨＥＲ２−ＣＡＲ（ｍｅＨＥＲ２）およびｓｃＦｖＨＥＲ２  ＣＡＲ操作したＴ細胞はＨＥＲ２＋標的を同等の効率で殺傷し、メディトープペプチドはＴ細胞の殺傷にマイナスの影響を及ぼさない。ｍｅＨＥＲ２およびｓｃＦｖＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞の殺傷効力を比較するための長期殺傷アッセイ。ＨＤ１８７．２  Ｔ細胞を、ｍｅＨＥＲ２（Ｈｃ−Ｌｃ）：２８ζＣＡＲ、ｍｅＨＥＲ２（Ｌｃ−Ｈｃ）：２８ζＣＡＲ、ｓｃＦｖＨＥＲ２：２８ζＣＡＲまたはＣＡＲなし（模擬）のいずれかを発現するように操作した。ｍｅＨＥＲ２：２８ζ−ＣＡＲ型は重鎖（Ｈｃ）および軽鎖（Ｌｃ）の配向においてのみ異なる。図１１参照。ＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞株または模擬対照を、ＨＥＲ２＋乳がん細胞株ＭＣＦ−７およびＳＫＢＲ３とともに、４８時間、１：４のエフェクター対標的の比（ＣＡＲ発現に基づく）において共培養した。殺傷を、共培養後に残存している腫瘍生細胞の数を定量することにより評価した。バイアビリティ染色、ＤＡＰＩ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＰｒｏｂｅｓＴＭ；カタログ番号Ｄ２１４９０）およびヒト白血球抗原ＣＤ４５（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ；カタログ番号３４７４６４）を使用し、死細胞とＴ細胞を生存腫瘍計数から除外した。共培養の前にｍｅＣＡＲ−Ｔ細胞をメディトープ−ＡＦ６４７（２００ｎＭ）とともに、およびなしでインキュベートし、ｍｅＨＥＲ２リダイレクト殺傷の能力に対するメディトープペプチドの影響を評価した。図１３Ｂ，棒グラフは、模擬に対して正規化した場合の１つの条件あたりの殺傷された腫瘍のパーセントを表す。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
定義
本発明の種々の実施形態および態様を、本明細書において示して説明するが、当業者には、かかる実施形態および態様は一例として示したものにすぎないことは自明であろう。数多くの変形、変更および置き換えが、ここに、本発明から逸脱することなく当業者に思いつくであろう。本明細書に記載の本発明の諸実施形態に対する種々の代替案が、本発明の実施において使用され得ることは理解されよう。
【００２１】
本明細書で用いているセクションの見出しは、整理の目的のためにすぎず、記載の主題を限定するものと解釈されるべきでない。特許、特許出願、論文、書籍、マニュアルおよび学術論文（これらに限定されない）を含む、本出願書類において挙げたすべての文献または文献の一部分は、参照によりその全体が、あらゆる目的のために明示的に本明細書に組み込まれる。
【００２２】
本明細書で用いている略語は、化学分野および生物学分野におけるその慣用的な意味を有する。本明細書に示した化学構造および化学式は、化学分野で公知の化学結合価の標準的な規則に従って作図されている。
【００２３】
置換基の基を、その慣用的な化学式により、左から右に記載して明示している場合、これは、構造を右から左に記載することにより得られる化学的に同一の置換基も等しく包含しており、例えば、−ＣＨ２Ｏ−は−ＯＣＨ２−と等価である。
【００２４】
用語「アルキル」は、それ自体で、または別の置換基の一部として、特に記載のない限り、直鎖（即ち、非分枝）もしくは分枝の非環状の炭素鎖（もしくは炭素）またはその組合せを意味し、完全飽和型、一価不飽和または多価不飽和であり得、二価および多価の原子団を有していてもよく、指定された数の炭素原子を有する（即ち、Ｃ１−Ｃ１０は１から１０個の炭素を意味する）。飽和型の炭化水素原子団の例としては、限定されないが、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、（シクロヘキシル）メチル、例えば、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチルなどの同族体および異性体などの基が挙げられる。不飽和のアルキル基は、１つ以上の二重結合または三重結合を有するものである。不飽和のアルキル基の例としては、限定されないが、ビニル、２−プロペニル、クロチル、２−イソペンテニル、２−（ブタジエニル）、２，４−ペンタジエニル、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル、１−および３−プロピニル、３−ブチニルならびに高級同族体および異性体が挙げられる。アルコキシは、分子の残部に酸素リンカー（−Ｏ−）によって結合しているアルキルである。アルキル部分は、アルケニル部分であってもよい。アルキル部分は、アルキニル部分であってもよい。アルキル部分は、完全飽和型であってもよい。
【００２５】
用語「アルキレン」は、それ自体で、または別の置換基の一部として、特に記載のない限り、限定されないが−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−によって例示されるような、アルキルから誘導される二価の原子団を意味する。典型的には、アルキル（またはアルキレン）基は１から２４個の炭素原子を有するものであり、１０個以下の炭素原子を有する基が本発明において好ましい。「低級アルキル」または「低級アルキレン」は、一般的には８個以下の炭素原子を有する短鎖のアルキルまたはアルキレン基である。用語「アルケニレン」は、それ自体で、または別の置換基の一部として、特に記載のない限り、アルケンから誘導される二価の原子団を意味する。
【００２６】
用語「ヘテロアルキル」は、それ自体で、または別の用語との組合せで、特に記載のない限り、少なくとも１個の炭素原子と少なくとも１個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｐ、ＳｉまたはＳ）を含む安定な非環状の直鎖もしくは分枝の鎖またはその組合せを意味し、窒素原子およびイオウ原子は場合により酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は場合により４級化されていてもよい。ヘテロ原子（１個または複数）Ｏ、Ｎ、Ｐ、ＳおよびＳｉは、ヘテロアルキル基の任意の内部位置またはアルキル基が分子の残部に結合している位置に配置され得る。例としては、限定されないが：−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２、−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−ＣＨ３、−Ｓｉ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｎ−ＯＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３および−ＣＮが挙げられる。２個または３個までのヘテロ原子が連続していてもよい（例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３および−ＣＨ２−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ３）３など）。ヘテロアルキル部分は１個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロアルキル部分は場合により異なる２個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロアルキル部分は場合により異なる３個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロアルキル部分は場合により異なる４個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロアルキル部分は場合により異なる５個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロアルキル部分は場合により異なる８個までのヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。
【００２７】
同様に、用語「ヘテロアルキレン」は、それ自体で、または別の置換基の一部として、特に記載のない限り、限定されないが−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−および−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−によって例示されるような、ヘテロアルキルから誘導される二価の原子団を意味する。また、ヘテロアルキレン基について、ヘテロ原子が鎖の末端のいずれかまたは両方を占めていてもよい（例えば、アルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノなど）。なおさらには、アルキレン連結基およびヘテロアルキレン連結基について、連結基の式に記載された方向は該連結基の配向を示唆するものではない。例えば、式−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’−は−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’−および−Ｒ’Ｃ（Ｏ）２−の両方を表す。上記のように、ヘテロアルキル基は、本明細書で用いる場合、分子の残部にヘテロ原子を介して結合する基、例えば、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＯＲ’、−ＳＲ’および／または−ＳＯ２Ｒ’を包含している。「ヘテロアルキル」と記載されており、続いて、例えば−ＮＲ’Ｒ’’などの具体的なヘテロアルキル基が記載されている場合、ヘテロアルキルという用語と−ＮＲ’Ｒ’’は重複または相互に排他的でないことを理解されたい。そうではなく、この具体的なヘテロアルキル基は明瞭さを付加するために記載されている。従って、用語「ヘテロアルキル」は本明細書において、例えば−ＮＲ’Ｒ’’などの具体的なヘテロアルキル基は除外されると解釈されるべきでない。
【００２８】
用語「シクロアルキル」および「ヘテロシクロアルキル」は、それ自体で、または別の用語との組合せで、特に記載のない限り、それぞれ、非芳香族の環状型の「アルキル」および「ヘテロアルキル」を意味し、炭素のすべての結合価が非水素原子との結合に関与しているため、環（１つまたは複数）を構成している炭素が水素に結合している必要はない。さらに、ヘテロシクロアルキルについて、ヘテロ原子が、複素環が分子の残部に結合している位置を占めていてもよい。シクロアルキルの例としては、限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、３−シクロヘキセニル、シクロヘプチル、３−ヒドロキシ−シクロブト−３−エニル−１，２，ジオン、１Ｈ−１，２，４−トリアゾリル−５（４Ｈ）−オン、４Ｈ−１，２，４−トリアゾリルなどが挙げられる。ヘテロシクロアルキルの例としては、限定されないが、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリジル）、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルホリニル、３−モルホリニル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニルなどが挙げられる。「シクロアルキレン」および「ヘテロシクロアルキレン」は、単独または別の置換基の一部として、それぞれ、シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキルから誘導される二価の原子団を意味する。ヘテロシクロアルキル部分は１個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロシクロアルキル部分は場合により異なる２個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロシクロアルキル部分は場合により異なる３個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロシクロアルキル部分は場合により異なる４個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロシクロアルキル部分は場合により異なる５個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。ヘテロシクロアルキル部分は場合により異なる８個までの環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＳｉまたはＰ）を含むものであってもよい。
【００２９】
用語「ハロ」または「ハロゲン」は、それ自体で、または別の置換基の一部として、特に記載のない限り、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」などの用語は、モノハロアルキルおよびポリハロアルキルを包含していることを意図する。例えば、用語「ハロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキル」としては、限定されないが、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピルなどが挙げられる。
【００３０】
用語「アシル」は、特に記載のない限り−Ｃ（Ｏ）Ｒを意味し、ここで、Ｒは置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールである。
【００３１】
用語「アリール」は、特に記載のない限り、多価不飽和の芳香族炭化水素置換基を意味し、単環であっても多環（好ましくは、１から３つの環）であってもよく、これらは一体に縮合している（即ち、縮合環アリール）か、または共有結合により連結されている。縮合環アリールは、一体に縮合している多環であって、縮合環の少なくとも１つがアリール環であるものをいう。用語「ヘテロアリール」は、少なくとも１個のヘテロ原子、例えばＮ、ＯまたはＳを含有しているアリール基（または環）をいい、窒素原子およびイオウ原子は場合により酸化されており、窒素原子（１個または複数）は場合により４級化されている。従って、用語「ヘテロアリール」は、縮合環ヘテロアリール基（即ち、一体に縮合している多環であって、縮合環の少なくとも１つが芳香族複素環であるもの）を包含している。５，６−縮合環ヘテロアリーレンは、一体に縮合している２つの環であって、一方の環が５個の構成員を有するものであり、他方の環が６個の構成員を有するものであり、少なくとも一方の環がヘテロアリール環であるものをいう。同様に、６，６−縮合環ヘテロアリーレンは、一体に縮合している２つの環であって、一方の環が６個の構成員を有するものであり、他方の環が６個の構成員を有するものであり、少なくとも一方の環がヘテロアリール環であるものをいう。また、６，５−縮合環ヘテロアリーレンは、一体に縮合している２つの環であって、一方の環が６個の構成員を有するものであり、他方の環が５個の構成員を有するものであり、少なくとも一方の環がヘテロアリール環であるものをいう。ヘテロアリール基は分子の残部に炭素原子またはヘテロ原子を介して結合され得る。アリールおよびヘテロアリール基の非限定的な例としては、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−ビフェニル、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、３−ピラゾリル、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル、ピラジニル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、２−フェニル−４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、３−イソオキサゾリル、４−イソオキサゾリル、５−イソオキサゾリル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−フリル、３−フリル、２−チエニル、３−チエニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、５−ベンゾチアゾリル、プリニル、２−ベンゾイミダゾリル、５−インドリル、１−イソキノリル、５−イソキノリル、２−キノキサリニル、５−キノキサリニル、３−キノリルおよび６−キノリルが挙げられる。上記のアリールおよびヘテロアリール環系の各々に対する置換基は、後述する許容される置換基の群から選択される。「アリーレン」および「ヘテロアリーレン」は、単独または別の置換基の一部として、それぞれ、アリールおよびヘテロアリールから誘導される二価の原子団を意味する。アリールおよびヘテロアリール基の非限定的な例としては、ピリジニル、ピリミジニル、チオフェニル、チエニル、フラニル、インドリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキサニル、チアナフタニル、ピロロピリジニル、インダゾリル、キノリニル、キノキサリニル、ピリドピラジニル、キナゾリノニル、ベンゾイソオキサゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾチオフェニル、フェニル、ナフチル、ビフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、フリルチエニル、ピリジル、ピリミジル、ベンゾチアゾリル、プリニル、ベンゾイミダゾリル、イソキノリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピロリル、ジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ベンゾチアジアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾロピリミジニル、ピロロピリミジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾオキサゾリルまたはキノリルが挙げられる。上記の例は置換型であっても非置換であってもよく、各ヘテロアリールの二価の原子団の上記の例はヘテロアリーレンの非限定的な例である。ヘテロアリール部分は１個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、ＮまたはＳ）を含むものであってもよい。ヘテロアリール部分は場合により異なる２個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、ＮまたはＳ）を含むものであってもよい。ヘテロアリール部分は場合により異なる３個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、ＮまたはＳ）を含むものであってもよい。ヘテロアリール部分は場合により異なる４個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、ＮまたはＳ）を含むものであってもよい。ヘテロアリール部分は場合により異なる５個の環内ヘテロ原子（例えば、Ｏ、ＮまたはＳ）を含むものであってもよい。アリール部分は単環を有するものであってもよい。アリール部分は場合により異なる２つの環を有するものであってもよい。アリール部分は場合により異なる３つの環を有するものであってもよい。アリール部分は場合により異なる４つの環を有するものであってもよい。ヘテロアリール部分は１つの環を有するものであってもよい。ヘテロアリール部分は場合により異なる２つの環を有するものであってもよい。ヘテロアリール部分は場合により異なる３つの環を有するものであってもよい。ヘテロアリール部分は場合により異なる４つの環を有するものであってもよい。ヘテロアリール部分は場合により異なる５つの環を有するものであってもよい。
【００３２】
縮合環ヘテロシクロアルキル−アリールは、ヘテロシクロアルキルに縮合しているアリールである。縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロアリールは、ヘテロシクロアルキルに縮合しているヘテロアリールである。縮合環ヘテロシクロアルキル−シクロアルキルは、シクロアルキルに縮合しているヘテロシクロアルキルである。縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロシクロアルキルは、別のヘテロシクロアルキルに縮合しているヘテロシクロアルキルである。縮合環ヘテロシクロアルキル−アリール、縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロアリール、縮合環ヘテロシクロアルキル−シクロアルキルまたは縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロシクロアルキルは各々、独立して、非置換であってもよく、本明細書に記載の置換基のうちの１つ以上で置換されていてもよい。
【００３３】
用語「オキソ」は、本明細書で用いる場合、炭素原子に二重結合している酸素を意味する。
【００３４】
用語「アルキルスルホニル」は、本明細書で用いる場合、式−Ｓ（Ｏ２）−Ｒ’を有する部分を意味し、式中、Ｒ’は上記に定義した置換もしくは非置換のアルキル基である。Ｒ’は、指定された数の炭素を有するもの（例えば、「Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル」）であり得る。
【００３５】
上記の各用語（例えば、「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」および「ヘテロアリール」）は、表示した原子団の置換型形態と非置換の形態の両方を包含している。各原子団の型に対する好ましい置換基を以下に示す。
【００３６】
アルキルおよびヘテロアルキル原子団（多くの場合、アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニルおよびヘテロシクロアルケニルと称される基も含む）に対する置換基は、限定されないが、−ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）（’Ｒ’’−ＮＲＳＯ２Ｒ’）、−ＣＮおよび−ＮＯ２から選択されるさまざまな基のうちの１つ以上であり得、ゼロから（２ｍ’＋１）までの範囲の数で存在し得、ここで、ｍ’はかかる原子団内の炭素原子の総数である。Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’は各々、好ましくは、独立して、水素、置換もしくは非置換のヘテロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール（例えば、１から３個のハロゲンで置換されているアリール）、置換もしくは非置換のアルキル、アルコキシもしくはチオアルコキシ基またはアリールアルキル基を示す。例えば、本発明の化合物が１つより多くのＲ基を含むものである場合、各Ｒ基は独立して、各Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’基（これらの基のうちの１つより多くが存在している場合）と同様に選択される。Ｒ’とＲ’’が同じ窒素原子に結合している場合、これらが該窒素原子と一体となって４員、５員、６員または７員の環を形成していてもよい。例えば、−ＮＲ’Ｒ’’としては、限定されないが１−ピロリジニルおよび４−モルホリニルが挙げられる。置換基の上記の論考から、当業者には、用語「アルキル」は、水素基以外の基に結合している炭素原子を含む基、例えば、ハロアルキル（例えば、−ＣＦ３および−ＣＨ２ＣＦ３）ならびにアシル（例えば、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣＨ３など）を包含していることを意図していることが理解されよう。
【００３７】
アルキル原子団について記載の置換基と同様、アリールおよびヘテロアリール基に対する置換基もさまざまであり、例えば：−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、ＮＲＣ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ’）（Ｒ’’，−ＮＲＳＯ２Ｒ’）、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ’、−Ｎ３、−ＣＨ（Ｐｈ）２、フルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシおよびフルオロ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択され、ゼロから芳香族環系の空いている結合価の総数までの範囲の数で存在し得、ここで、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’は好ましくは、独立して、水素、置換または非置換のアルキル、置換または非置換のヘテロアルキル、置換または非置換のシクロアルキル、置換または非置換のヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリールおよび置換または非置換のヘテロアリールから選択される。例えば、本発明の化合物が１つより多くのＲ基を含むものである場合、各Ｒ基は独立して、各Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’およびＲ’’’’基（これらの基のうちの１つより多くが存在している場合）と同様に選択される。
【００３８】
ある部分がＲ置換基で置換されている場合、該基は「Ｒで置換されている」と称され得る。ある部分がＲで置換されている場合、該部分は少なくとも１つのＲ置換基で置換されており、各Ｒ置換基は場合により異なっている。例えば、本明細書におけるある部分がＲ１Ａ置換または非置換のアルキルである場合、複数のＲ１Ａ置換基が該アルキル部分に結合していてもよく、ここで、各Ｒ１Ａ置換基は場合により異なっている。Ｒで置換されている部分が複数のＲ置換基で置換されている場合、各Ｒ置換基を、本明細書ではプライム記号（’）を用いてＲ’、Ｒ’’などと識別され得る。例えば、ある部分がＲ３Ａ置換または非置換のアルキルであり、該部分が複数のＲ３Ａ置換基で置換されている場合、該複数のＲ３Ａ置換基は、Ｒ３Ａ’、Ｒ３Ａ’’、Ｒ３Ａ’’’などとして識別され得る。一部の実施形態では、該複数のＲ置換基は３つである。一部の実施形態では、該複数のＲ置換基は２つである。
【００３９】
２つ以上の置換基が場合により連接されてアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル基を形成していてもよい。かかるいわゆる環形成性置換基は典型的には（必ずしもそうでなくてよいが）、環状のベース構造部に結合している状態でみられる。一実施形態では、環形成性置換基は、ベース構造部の隣接している構成員に結合している。例えば、環状のベース構造部の隣接している構成員に結合している２つの環形成性置換基は縮合環構造を作る。別の実施形態では、環形成性置換基は、ベース構造部の単一の構成員に結合している。例えば、環状のベース構造部の単一の構成員に結合している２つの環形成性置換基はスピロ環構造を作る。また別の実施形態では、環形成性置換基は、ベース構造部の隣接していない構成員に結合している。
【００４０】
アリールまたはヘテロアリール環の隣接している原子上の置換基のうちの２つは場合により式−Ｔ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＲＲ’）ｑ−Ｕ−の環を形成していてもよく、式中、ＴおよびＵは独立して、−ＮＲ−、−Ｏ−、−ＣＲＲ’−または単結合であり、ｑは０から３の整数である。または、アリールまたはヘテロアリール環の隣接している原子上の置換基のうちの２つは場合により式−Ａ−（ＣＨ２）ｒ−Ｂ−の置換基で置き換えられていてもよく、式中、ＡおよびＢは独立して、−ＣＲＲ’−、−Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−または単結合であり、ｒは１から４の整数である。このようにして形成される新たな環の単結合のうちの１つは場合により二重結合で置き換えられていてもよい。または、アリールまたはヘテロアリール環の隣接している原子上の置換基のうちの２つは場合により式−（ＣＲＲ’）ｓ−Ｘ’−（Ｃ’’Ｒ’’Ｒ’’’）ｄ−の置換基で置き換えられていてもよく、式中、変数ｓおよびｄは独立して０から３の整数であり、Ｘ’は−Ｏ−、−ＮＲ’−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−または−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−である。置換基Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’およびＲ’’’は好ましくは、独立して、水素、置換または非置換のアルキル、置換または非置換のヘテロアルキル、置換または非置換のシクロアルキル、置換または非置換のヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリールおよび置換または非置換のヘテロアリールから選択される。
【００４１】
本明細書で用いる場合、用語「ヘテロ原子」または「環内ヘテロ原子」は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、イオウ（Ｓ）、リン（Ｐ）およびケイ素（Ｓｉ）を包含していることを意図している。
【００４２】
「置換基の基」は、本明細書で用いる場合、以下の部分：
（Ａ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、ならびに
（Ｂ）（ｉ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリールならびに
（ｉｉ）（ａ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリールならびに
（ｂ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換のアルキル、非置換のヘテロアルキル、非置換のシクロアルキル、非置換のヘテロシクロアルキル、非置換のアリール、非置換のヘテロアリールから選択される少なくとも１つの置換基で置換されているアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール
から選択される少なくとも１つの置換基で置換されているアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール
から選択される少なくとも１つの置換基で置換されているアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール
から選択される基を意味する。
【００４３】
「サイズ限定（ｓｉｚｅ−ｌｉｍｉｔｅｄ）置換基」または「サイズ限定置換基の基」は、本明細書で用いる場合、「置換基」に対して上記されたすべての置換基から選択される基を意味し、ここで、置換もしくは非置換の各アルキルは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ２０アルキルであり、置換もしくは非置換の各ヘテロアルキルは置換もしくは非置換の２から２０員のヘテロアルキルであり、置換もしくは非置換の各シクロアルキルは置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキルであり、置換もしくは非置換の各ヘテロシクロアルキルは置換もしくは非置換の３から８員のヘテロシクロアルキルであり、置換もしくは非置換の各アリールは置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリールであり、置換もしくは非置換の各ヘテロアリールは置換もしくは非置換の５から１０員のヘテロアリールである。
【００４４】
「低級置換基」または「低級置換基の基」は、本明細書で用いる場合、「置換基の基」に対して上記されたすべての置換基から選択される基を意味し、ここで、置換もしくは非置換の各アルキルは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキルであり、置換もしくは非置換の各ヘテロアルキルは置換もしくは非置換の２から８員のヘテロアルキルであり、置換もしくは非置換の各シクロアルキルは置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ７シクロアルキルであり、置換もしくは非置換の各ヘテロシクロアルキルは置換もしくは非置換の３から７員のヘテロシクロアルキルであり、置換もしくは非置換の各アリールは置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリールであり、置換もしくは非置換の各ヘテロアリールは置換もしくは非置換の５から９員のヘテロアリールである。
【００４５】
一部の実施形態では、本明細書における化合物において記載される置換されている基の各々は少なくとも１つの置換基の基で置換されている。より具体的には、一部の実施形態では、本明細書における化合物において記載される置換されているアルキル、置換されているヘテロアルキル、置換されているシクロアルキル、置換されているヘテロシクロアルキル、置換されているアリール、置換されているヘテロアリール、置換されているアルキレン、置換されているヘテロアルキレン、置換されているシクロアルキレン、置換されているヘテロシクロアルキレン、置換されているアリーレンおよび／または置換されているヘテロアリーレンの各々は少なくとも１つの置換基の基で置換されている。他の実施形態では、これらの基のうちの少なくとも１つまたは全部が少なくとも１つのサイズ限定置換基の基で置換されている。他の実施形態では、これらの基のうちの少なくとも１つまたは全部が少なくとも１つの低級置換基の基で置換されている。
【００４６】
本明細書における化合物の他の実施形態では、置換もしくは非置換の各アルキルは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ２０アルキルであり得、置換もしくは非置換の各ヘテロアルキルは置換もしくは非置換の２から２０員のヘテロアルキルであり、置換もしくは非置換の各シクロアルキルは置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキルであり、置換もしくは非置換の各ヘテロシクロアルキルは置換もしくは非置換の３から８員のヘテロシクロアルキルであり、置換もしくは非置換の各アリールは置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリールであり、および／または置換もしくは非置換の各ヘテロアリールは置換もしくは非置換の５から１０員のヘテロアリールである。本明細書における化合物の一部の実施形態では、置換もしくは非置換の各アルキレンは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ２０アルキレンであり、置換もしくは非置換の各ヘテロアルキレンは置換もしくは非置換の２から２０員のヘテロアルキレンであり、置換もしくは非置換の各シクロアルキレンは置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキレンであり、置換もしくは非置換の各ヘテロシクロアルキレンは置換もしくは非置換の３から８員のヘテロシクロアルキレンであり、置換もしくは非置換の各アリーレンは置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレンであり、および／または置換もしくは非置換の各ヘテロアリーレンは置換もしくは非置換の５から１０員のヘテロアリーレンである。
【００４７】
一部の実施形態では、置換もしくは非置換の各アルキルは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキルであり、置換もしくは非置換の各ヘテロアルキルは置換もしくは非置換の２から８員のヘテロアルキルであり、置換もしくは非置換の各シクロアルキルは置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ７シクロアルキルであり、置換もしくは非置換の各ヘテロシクロアルキルは置換もしくは非置換の３から７員のヘテロシクロアルキルであり、置換もしくは非置換の各アリールは置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリールであり、および／または置換もしくは非置換の各ヘテロアリールは置換もしくは非置換の５から９員のヘテロアリールである。一部の実施形態では、置換もしくは非置換の各アルキレンは置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ８アルキレンであり、置換もしくは非置換の各ヘテロアルキレンは置換もしくは非置換の２から８員のヘテロアルキレンであり、置換もしくは非置換の各シクロアルキレンは置換もしくは非置換のＣ３−Ｃ７シクロアルキレンであり、置換もしくは非置換の各ヘテロシクロアルキレンは置換もしくは非置換の３から７員のヘテロシクロアルキレンであり、置換もしくは非置換の各アリーレンは置換もしくは非置換のＣ６−Ｃ１０アリーレンであり、および／または置換もしくは非置換の各ヘテロアリーレンは置換もしくは非置換の５から９員のヘテロアリーレンである。一部の実施形態では、該化合物は、以下の実施例のセクション、図または表に示す化学種である。
【００４８】
本明細書で用いる場合、用語「コンジュゲート」は原子間または分子間の会合をいう。会合は直接的であっても間接的であってもよい。例えば、核酸とタンパク質との間のコンジュゲートは、例えば共有結合による直接的なものであってもよく、または例えば非共有結合（例えば、静電的相互作用（例えば、イオン結合、水素結合、ハロゲン結合）、ファンデルワールス相互作用（例えば、双極子−双極子間、双極子−誘起双極子間、ロンドン分散）、環スタッキング（パイ効果）、疎水性相互作用など）による間接的なものであってもよい。諸実施形態では、コンジュゲートは、求核置換（例えば、ハロゲン化アシル、活性エステルを用いたアミンおよびアルコールの反応）、求電子置換（例えば、エナミン反応）ならびに炭素−炭素および炭素−ヘテロ原子多重結合への付加（例えば、マイケル反応、ディールス・アルダー付加）を含むがこれらに限定されない、コンジュゲートケミストリーを用いて形成される。これらおよび他の有用な反応は、例えば、Ｍａｒｃｈ，ＡＤＶＡＮＣＥＤ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ，３ｒｄ  Ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８５；Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，ＢＩＯＣＯＮＪＵＧＡＴＥ  ＴＥＣＨＮＩＱＵＥＳ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，１９９６；およびＦｅｅｎｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ  ＯＦ  ＰＲＯＴＥＩＮＳ；Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｓｅｒｉｅｓ，Ｖｏｌ．１９８，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，１９８２に論考されている。諸実施形態では、この微小粒子は、固相支持体に、この微小粒子の成分と固相支持体の成分との間の非共有結合的化学反応によって非共有結合により結合される。他の実施形態では、この微小粒子は、１つ以上の反応性部分、例えば、本明細書に記載の共有結合性反応性部分（例えば、アミン反応性部分）を含むものである。他の実施形態では、この微小粒子は、１つ以上の反応性部分、例えば、本明細書に記載の共有結合性反応性部分（例えば、アミン反応性部分）を有するリンカーを含むものである。
【００４９】
本明細書におけるコンジュゲートケミストリー（当該技術分野で知られている「クリックケミストリー」を含む）に使用される有用な反応性部分または官能基としては、例えば：
（ａ）カルボキシル基およびその種々の誘導体、例えば限定されないが、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル、酸ハライド、アシルイミダゾール、チオエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、アルキル、アルケニル、アルキニルおよび芳香族エステル；
（ｂ）エステル、エーテル、アルデヒドなどに変換され得るヒドロキシル基．
（ｃ）ハライドが後に、求核基、例えば、アミン、カルボキシレートアニオン、チオールアニオン、カルバニオンまたはアルコキシドイオンなどで置き換えられることより、該ハロゲン原子部位に新たな基の共有結合を生じ得る、ハロアルキル基；
（ｄ）ディールス・アルダー反応に関与することができるジエノフィル基、例えばマレイミド基など；
（ｅ）カルボニル誘導体、例えば、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾンもしくはオキシムなどの形成によるか、またはグリニャール付加もしくはアルキルリチウム付加などの機構による後続の誘導体化が可能であるような、アルデヒド基またはケトン基；
（ｆ）アミンとの後続の反応（例えば、スルホンアミドを形成する）のための、ハロゲン化スルホニル基；
（ｇ）ハロゲン化アシルと反応するか、または金などの金属に結合する、ジスルフィドに変換され得るチオール基；
（ｈ）例えば、アシル化、アルキル化または酸化され得るアミン基またはスルフヒドリル基；
（ｉ）例えば、付加環化、アシル化、マイケル付加などを行ない得るアルケン；
（ｊ）例えば、アミンおよびヒドロキシル化合物と反応し得るエポキシド；
（ｋ）ホスホロアミダイトおよび核酸合成に有用な他の標準的な官能基；
（ｌ）金属ケイ素の酸化物結合；
（ｍ）例えば、リン酸ジエステル結合を形成するための反応性のリン基（例えば、ホスフィン）への金属の結合；ならびに
（ｎ）スルホン、例えば、ビニルスルホン
が挙げられる。
【００５０】
コンジュゲート（「ｃｌｉｃｋ」）ケミストリーを用いて小さなモジュール単位を連接させることによる組成物の化学合成は当該技術分野で周知であり、例えば、Ｈ．Ｃ．Ｋｏｌｂ，Ｍ．Ｇ．Ｆｉｎｎ  ａｎｄ  Ｋ．Ｂ．Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ（（２００１）．“Ｃｌｉｃｋ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｄｉｖｅｒｓｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ａ  Ｆｅｗ  Ｇｏｏｄ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ”．Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ４０（１１）：２００４−２０２１）；Ｒ．Ａ．Ｅｖａｎｓ（（２００７）．“Ｔｈｅ  Ｒｉｓｅ  ｏｆ  Ａｚｉｄｅ−Ａｌｋｙｎｅ  １，３−Ｄｉｐｏｌａｒ  ‘Ｃｌｉｃｋ’  Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ”．Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ６０（６）：３８４−３９５；Ｗ．Ｃ．Ｇｕｉｄａ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．ｐ  ３  １９９６；Ｓｐｉｔｅｒｉ，Ｃｈｒｉｓｔｉａｎ  ａｎｄ  Ｍｏｓｅｓ，Ｊｏｈｎ  Ｅ．（（２０１０）．“Ｃｏｐｐｅｒ−Ｃａｔａｌｙｚｅｄ  Ａｚｉｄｅ−Ａｌｋｙｎｅ  Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ：Ｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  １，４，５−Ｔｒｉｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  １，２，３−Ｔｒｉａｚｏｌｅｓ”．Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ４９（１）：３１−３３）；Ｈｏｙｌｅ，Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｅ．ａｎｄ  Ｂｏｗｍａｎ，Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ  Ｎ．（（２０１０）．“Ｔｈｉｏｌ−Ｅｎｅ  Ｃｌｉｃｋ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”．Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ４９（９）：１５４０−１５７３）；Ｂｌａｃｋｍａｎ，Ｍｅｌｉｓｓａ  Ｌ．ａｎｄ  Ｒｏｙｚｅｎ，Ｍａｋｓｉｍ  ａｎｄ  Ｆｏｘ，Ｊｏｓｅｐｈ  Ｍ．（（２００８）．“Ｔｅｔｒａｚｉｎｅ  Ｌｉｇａｔｉｏｎ：Ｆａｓｔ  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  Ｂａｓｅｄ  ｏｎ  Ｉｎｖｅｒｓｅ−Ｅｌｅｃｔｒｏｎ−Ｄｅｍａｎｄ  Ｄｉｅｌｓ―Ａｌｄｅｒ  Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ”．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １３０（４１）：１３５１８−１３５１９）；Ｄｅｖａｒａｊ，Ｎｅａｌ  Ｋ．ａｎｄ  Ｗｅｉｓｓｌｅｄｅｒ，Ｒａｌｐｈ  ａｎｄ  Ｈｉｌｄｅｒｂｒａｎｄ，Ｓｃｏｔｔ  Ａ．（（２００８）．“Ｔｅｔｒａｚｉｎｅ  Ｂａｓｅｄ  Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎｓ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｒｅｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｌｉｖｅ  Ｃｅｌｌ  Ｌａｂｅｌｉｎｇ”．  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９（１２）：２２９７−２２９９）；Ｓｔｏｃｋｍａｎｎ，Ｈｅｎｎｉｎｇ；Ｎｅｖｅｓ，Ａｎｄｒｅ；Ｓｔａｉｒｓ，Ｓｈａｕｎ；Ｂｒｉｎｄｌｅ，Ｋｅｖｉｎ；Ｌｅｅｐｅｒ，Ｆｉｎｉａｎ（（２０１１）．“Ｅｘｐｌｏｒｉｎｇ  ｉｓｏｎｉｔｒｉｌｅ−ｂａｓｅｄ  ｃｌｉｃｋ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｆｏｒ  ｌｉｇａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ”．Ｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）に記載されており、これらはすべて、参照によりその全体があらゆる目的のために本明細書に組み込まれる。
【００５１】
本明細書に記載のタンパク質または核酸の化学安定性に関与または干渉しないような反応性官能基が、選択され得る。一例として、核酸は、ビニルスルホンまたは他の反応性部分（例えば、マレイミド）を含むものであり得る。場合により、核酸は、式−Ｓ−Ｓ−Ｒを有する反応性部分を含むものであり得る。Ｒは、例えば保護基であり得る。場合により、Ｒはヘキサノールである。本明細書で用いる場合、ヘキサノールという用語は、式Ｃ６Ｈ１３ＯＨを有する化合物を包含しており、１−ヘキサノール、２−ヘキサノール、３−ヘキサノール、２−メチル−１−ペンタノール、３−メチル−１−ペンタノール、４−メチル−１−ペンタノール、２−メチル−２−ペンタノール、３−メチル−２−ペンタノール、４−メチル−２−ペンタノール、２−メチル−３−ペンタノール、３−メチル−３−ペンタノール、２，２−ジメチル−１−ブタノール、２，３−ジメチル−１−ブタノール、３，３−ジメチル−１−ブタノール、２，３−ジメチル−２−ブタノール、３，３−ジメチル−２−ブタノールおよび２−エチル−１−ブタノールが挙げられる。場合により、Ｒは１−ヘキサノールである。
【００５２】
本明細書で用いる場合、用語「約」は、明示された値を含むある範囲の値であって、当業者により、明示された該値と正当に同様であるとみなされ得るであろう範囲の値を意味する。諸実施形態では、用語「約」は、当該技術分野で一般的に認められている測定を用いた標準偏差の範囲内を意味する。諸実施形態では、約は、明示された値の＋／−１０％に及ぶ範囲を意味する。諸実施形態では、約は明示されたその値を意味する。
【００５３】
用語“ａ”または“ａｎ”は、本明細書で用いる場合、１またはそれ以上を意味する。また、語句「“ａ”または“ａｎ”〜で置換されている」は、本明細書で用いる場合、明示された基が、名前を挙げた置換基のうちのいずれか１つもしくはそれ以上または全部で置換されたものであり得ることを意味する。例えば、基、例えばアルキルまたはヘテロアリール基が、「１つの（“ａ”もしくは“ａｎ”）非置換のＣ１−Ｃ２０アルキルまたは非置換の２から２０員のヘテロアルキルで置換されている」場合、該基は、１つ以上の非置換のＣ１−Ｃ２０アルキルおよび／または１つ以上の非置換の２から２０員のヘテロアルキルを含有しているものであり得る。さらに、ある部分がＲ置換基で置換されている場合、該基は「Ｒで置換されている」と称され得る。ある部分がＲで置換されている場合、該部分は少なくとも１つのＲ置換基で置換されており、各Ｒ置換基は場合により異なっている。
【００５４】
特に定義していない限り、本明細書で用いる科学技術用語は、当業者に一般的に理解されているものと同じ意味を有する。例えば、Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＤＩＣＴＩＯＮＡＲＹ  ＯＦ  ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ  ２ｎｄ  ｅｄ．，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ  １９９４）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＬＯＮＩＮＧ，Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇｓ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇｓ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ  １９８９）を参照のこと。本明細書に記載のものと類似または均等な任意の方法、デバイスおよび材料が、本発明の実施において使用され得る。以下の定義は、本明細書で頻繁に用いている特定の用語の理解を容易にするために示しており、本開示内容の範囲を限定することを意図するものではない。
【００５５】
「生物学的試料」または「試料」は、被験体もしくは患者から採取されたか、または被験体もしくは患者に由来する物質をいう。生物学的試料としては、組織切片、例えば生検および検死の試料、ならびに組織学的目的のために採取された凍結切片が挙げられる。かかる試料としては、体液、例えば、血液および血液分画成分または血液製剤（例えば、血清、血漿、血小板、赤血球など）、痰、組織、培養細胞（例えば、一次培養物、外植片および形質転換細胞）便、尿、滑液、関節組織、滑膜組織、滑膜細胞、線維芽細胞様滑膜細胞、マクロファージ様滑膜細胞、免疫細胞、造血細胞、線維芽細胞、マクロファージ、Ｔ細胞などが挙げられる。生物学的試料は、典型的には、真核生物生物体、例えば哺乳動物、例えば霊長類、例えば、チンパンジーもしくはヒト；ウシ；イヌ；ネコ；齧歯類、例えば、モルモット、ラット、マウス；ウサギ；または鳥類；爬虫類；または魚類から採取されたものである。
【００５６】
「細胞」は、本明細書で用いる場合、ゲノムＤＮＡが保存または複製されるのに充分な代謝機能または他の機能を果たす細胞をいう。細胞は、当該技術分野で周知の方法、例えば、インタクトな膜の存在、特定の色素による染色、子孫細胞を生ずる能力または、配偶子の場合は、第２の配偶子と結合して生存能のある子孫をもたらす能力などによって同定され得る。細胞には、原核生物細胞と真核生物細胞が包含され得る。原核生物細胞としては、限定されないが細菌が挙げられる。真核生物細胞としては、限定されないが、酵母細胞ならびに植物および動物に由来する細胞、例えば、哺乳動物、昆虫（例えば、スポドプテラ属のもの）およびヒトの細胞が挙げられる。細胞は、天然で非接着性であるか、または例えばトリプシン処理によって表面に接着しないように処理されている場合、有用であり得る。
【００５７】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」は、本明細書において、アミノ酸残基のポリマーをいうために互換的に用いられており、ここで、該ポリマーは場合により、アミノ酸からなるものでない部分にコンジュゲートされ得る。これらの用語は、１個以上のアミノ酸残基が天然に存在する対応アミノ酸の人工の化学的模倣物であるアミノ酸ポリマー、ならびに天然に存在するアミノ酸ポリマーおよび天然に存在しないアミノ酸ポリマーに適用される。「融合タンパク質」は、単一の部分として組換え発現される２つ以上の別個のタンパク質配列をコードしているキメラタンパク質をいう。
【００５８】
用語「ペプチジル」および「ペプチジル部分」は一価のペプチドをいう。
【００５９】
「標識」または「検出可能な部分」は、分光学的手段、光化学的手段、生化学的手段、免疫化学的手段、化学的手段または他の物理的手段によって検出可能な組成物である。例えば、有用な標識としては、３２Ｐ、蛍光色素、高電子密度試薬、酵素（例えば、ＥＬＩＳＡに一般的に使用されるようなもの）、ビオチン、ジゴキシゲニンもしくはハプテンおよびタンパク質または例えば、標的ペプチドと特異的に反応性のペプチドもしくは抗体に放射性標識を組み込むことによって検出可能となり得る他の存在体が挙げられる。抗体を標識にコンジュゲートさせるための当該技術分野で公知の任意の適切な方法が使用され得、例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １９９６，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏに記載の方法が使用される。
【００６０】
「標識されたタンパク質またはポリペプチド」は、共有結合（リンカーもしくは化学結合による）または、非共有結合（イオン結合、ファンデルワールス結合、静電結合もしくは水素結合による）のいずれかによって標識に結合されていることにより、標識されたタンパク質またはポリペプチドの存在が、標識された該タンパク質またはポリペプチドに結合された該標識の存在を検出することによって検出され得るものである。または、高親和性相互作用を使用する方法でも同じ結果が得られ得、この場合、結合パートナーのペアの一方が他方に結合する（例えば、ビオチン、ストレプトアビジン）。
【００６１】
用語「アミノ酸」は、天然に存在するアミノ酸および合成アミノ酸、ならびに天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能するアミノ酸アナログおよびアミノ酸模倣物をいう。天然に存在するアミノ酸は、遺伝コードによってコードされているもの、ならびに後で修飾されたアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタメートおよびＯ−ホスホセリンである。アミノ酸アナログは、天然に存在するアミノ酸と同じ基本化学構造、即ち、水素に結合しているα炭素、カルボキシル基、アミノ基およびＲ基を有する化合物、例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムをいう。かかるアナログは、修飾されたＲ基（例えば、ノルロイシン）または修飾されたペプチド骨格を有しているが、天然に存在するアミノ酸と同じ基本化学構造を保持している。アミノ酸模倣物は、アミノ酸の一般化学構造と異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能する化学的化合物をいう。
【００６２】
アミノ酸は、本明細書において、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎによって推奨される一般的に知られた３文字表記または１文字表記のいずれかによって呼称され得る。ヌクレオチドも同様に、一般的に認められた１文字表記によって呼称され得る。
【００６３】
アミノ酸またはヌクレオチド塩基の「位置」は、Ｎ末端（または５’末端）を基準にした位置に基づいて、参照配列内の各アミノ酸（またはヌクレオチド塩基）が順に同定される番号によって表す。最適なアラインメントを決定する場合に考慮され得る欠失、挿入、切断、融合などのため、一般に、Ｎ末端から単純にカウントすることによって決定される試験配列のアミノ酸残基の番号は必ずしも参照配列内の対応する位置の番号と同じではない。例えば、バリアントがアラインメント対象の参照配列と比べて欠失を有する場合、バリアント内には、参照配列内の欠失部位の位置に対応するアミノ酸がない。アラインメント対象の参照配列内に挿入がある場合、該挿入は、参照配列内の番号付けされたアミノ酸位置に対応しない。切断または融合の場合、参照配列またはアラインメントする配列のいずれかに、対応配列内のいずれかのアミノ酸に対応しないアミノ酸鎖が存在し得る。
【００６４】
用語「〜を基準にして番号付けする」または「〜に対応する」は、所与のアミノ酸配列またはポリヌクレオチド配列の番号付けの状況において用いる場合、該所与のアミノ酸配列またはポリヌクレオチド配列を参照配列と比較するときの指定された参照配列の残基の番号付けをいう。タンパク質のアミノ酸残基は、これが、該タンパク質内で該所与の残基と同じ必須構造位置を占めている場合、所与の残基に「対応する」。例えば、選択された抗体（またはＦａｂドメイン）内の選択された残基は、該選択された残基が、カバット方式による位置４０の軽鎖のトレオニンと同じ必須の空間的または他の構造的関係を占めている場合に、カバット方式による位置４０の軽鎖のトレオニンに対応する。一部の実施形態では、選択されたタンパク質が最大相同性で抗体（またはＦａｂドメイン）の軽鎖とアラインメントされる場合、アラインメントされた該選択されたタンパク質内のトレオニン４０とアラインメントされた位置は、トレオニン４０に対応するといえる。また、一次配列アラインメントではなく、３次元構造のアラインメントも、例えば、選択されたタンパク質の構造を最大対応でカバット方式による位置４０の軽鎖のトレオニンとアラインメントし、構造全体を比較する場合に使用され得る。この場合、構造モデル内のトレオニン４０と同じ必須の位置を占めるアミノ酸は、トレオニン４０残基に対応するといえる。
【００６５】
「保存的修飾バリアント」はアミノ酸配列と核酸配列の両方に適用される。特定の核酸配列に関して、保存的修飾バリアントは、同一または本質的に同一のアミノ酸配列をコードしている核酸をいうか、または核酸がアミノ酸配列をコードしていない場合は、本質的に同一の配列をいう。遺伝コードの縮重のため、大量数の機能的に同一の核酸配列が任意の所与のアミノ酸残基をコードしている。例えば、コドンＧＣＡ、ＧＣＣ、ＧＣＧおよびＧＣＵはすべてアミノ酸アラニンをコードしている。従って、アラニンがコドンによって指定されるどの位置においても、コドンを、コードポリペプチドを改変することなく、記載の任意の対応コドンに変更することができる。かかる核酸変異は「サイレント変異」であり、これは保存的修飾変異の一種である。ポリペプチドをコードしている本明細書におけるどの核酸配列についても、該核酸の考えられ得るすべてのサイレント変異も示されているものとする。当業者には、核酸の各コドン（ＡＵＧ（通常、メチオニンの唯一のコドンである）およびＴＧＧ（通常、トリプトファンの唯一のコドンである）を除く）は、機能的に同一の分子を得るために修飾され得ることが認識されよう。従って、ポリペプチドをコードしている核酸の各サイレント変異は、記載の各配列において、発現産物に関しては暗に示されているといえるが、実際のプローブ配列に関してはそうでない。
【００６６】
アミノ酸配列に関して、当業者には、核酸、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質の配列に対して、コード配列内の単一のアミノ酸または少数割合のアミノ酸を改変、付加または欠失させる個々の置換、欠失または付加は「保存的修飾バリアント」であることが認識されよう。この場合、該改変によりアミノ酸は化学的に類似したアミノ酸と置換される。機能的に類似したアミノ酸を示す保存的置換の表は当該技術分野で周知である。かかる保存的修飾バリアントは、本発明の多型バリアント、種間ホモログおよび対立遺伝子に付加的なものであり、これらを排除するものではない。
【００６７】
以下の８つの群は各々、互いに保存的置換体であるアミノ酸を含む：１）アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）；２）アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）；３）アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）；４）アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）；５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）；６）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）；７）セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）；および８）システイン（Ｃ）、メチオニン（Ｍ）（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ（１９８４）参照）。
【００６８】
「核酸」は、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチドおよびその一本鎖もしくは二本鎖のいずれかの形態のポリマーならびにその相補鎖をいう。用語「ポリヌクレオチド」は線形配列のヌクレオチドをいう。用語「ヌクレオチド」は、典型的には、ポリヌクレオチドの１つの単位、即ちモノマーをいう。ヌクレオチドはリボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチドまたはその修飾型であり得る。本明細書において想定されるポリヌクレオチドの例としては、一本鎖および二本鎖のＤＮＡ、一本鎖および二本鎖のＲＮＡ（例えば、ｓｉＲＮＡ）ならびに一本鎖および二本鎖のＤＮＡおよびＲＮＡの混合物を有するハイブリッド分子が挙げられる。また、核酸は、本明細書で用いる場合、天然に存在する核酸と同じ基本化学構造を有する核酸をいう。かかるアナログは、修飾された糖および／または修飾された環置換基を有するが、天然に存在する核酸と同じ基本化学構造を保持しているものである。核酸模倣物は、核酸の一般化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在する核酸と同様の様式で機能する化学的化合物をいう。かかるアナログの例としては、限定されないが、ホスホロチオレート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、キラル−メチルホスホネート、２−Ｏ−メチルリボヌクレオチドおよびペプチド−核酸（ＰＮＡ）が挙げられる。
【００６９】
「配列同一性のパーセンテージ」は、２つの最適にアラインメントされた配列を比較ウィンドウにおいて比較することにより求められ、このとき、比較ウィンドウ内のポリヌクレオチド配列部分またはポリペプチド配列部分は、この２つの配列の最適なアラインメントでは、参照配列（付加または欠失が含まれていない）と比較すると、付加または欠失（即ち、ギャップ）が含まれている場合がある。パーセンテージは、両方の配列で同一の核酸塩基またはアミノ酸残基が存在する位置の数を調べてマッチしている位置の数を得、マッチしている位置の数を比較ウィンドウ内の位置の総数で割り算し、結果に１００を掛け算して配列同一性のパーセンテージを得ることにより計算される。
【００７０】
用語「同一の」または「同一性」パーセントは、２つ以上の核酸配列またはポリペプチド配列において、以下の配列比較アルゴリズムの１つを用いて、または手動アラインメントと目視検査によって、比較ウィンドウまたは指定の領域にわたって比較し、最大対応でアラインメントして測定したとき、２つ以上の配列または部分配列が同じであるか、または指定されたパーセンテージの同じアミノ酸残基もしくはヌクレオチドを有すること（即ち、例えば、本発明のポリペプチド配列全体のうちの指定された領域、または本発明のポリペプチドの個々のドメインの指定された領域において、６０％の同一性、場合により６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％または９９％の同一性）をいう。そのため、かかる配列は「実質的に同一」といわれる。また、この定義は、試験配列の相補鎖についてもいう。場合により、同一性は、少なくとも約５０ヌクレオチド長の領域、またはより好ましくは、１００から５００もしくは１０００もしくはそれ以上のヌクレオチド長の領域にわたって存在する。本発明は、配列番号：１から３５のいずれかと実質的に同一のポリペプチドを包含している。
【００７１】
配列比較では、典型的には、１つの配列が参照配列の機能を果たし、これと試験配列とが比較される。配列比較アルゴリズムを使用する場合、試験配列と参照配列とをコンピュータに入力し、必要であれば部分配列座標を指定し、配列アルゴリズムプログラムパラメータを指定する。デフォルトプログラムパラメータを使用してもよく、または別のパラメータを指定してもよい。次いで、配列比較アルゴリズムにより、参照配列と比較した試験配列の配列同一性パーセントをプログラムパラメータに基づいて計算する。
【００７２】
「比較ウィンドウ」は、本明細書で用いる場合、例えば、完全長配列または２０から６００、約５０から約２００もしくは約１００から約１５０個までのアミノ酸またはヌクレオチドからなる群より選択されるいずれか１つの数の連続している位置のセグメントに対する言及を含み、このとき、配列は、２つの配列を最適にアラインメントした後、同じ数の連続している位置の参照配列と比較され得る。比較のための配列のアラインメント方法は、当該技術分野で周知である。比較のための配列の最適なアラインメントは、例えば、局地的相同性アルゴリズム（Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ（１９７０）Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２ｃ）、相同性アラインメントアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ（１９７０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３）、類似性検索法（Ｐｅａｒｓｏｎ  ａｎｄ  Ｌｉｐｍａｎ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４）、これらのアルゴリズムのコンピュータでの実行（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ＰａｃｋａｇｅにおけるＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡおよびＴＦＡＳＴＡ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）、または手動アラインメントと目視検査（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９５  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）参照）によって行なわれ得る。
【００７３】
配列同一性および配列類似性のパーセントを調べるために好適なアルゴリズムの一例はＢＬＡＳＴおよびＢＬＡＳＴ  ２．０アルゴリズムであり、これらは、それぞれ、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２およびＡｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０に記載されている。ＢＬＡＳＴ解析を行なうためのソフトウェアは、国立生物工学情報センター（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）から公に入手可能である。このアルゴリズムは、クエリー配列内の長さＷのショートワードを、データベース配列内の同じ長さＷのワードとアラインメントしたときにある正の値の閾値スコアＴとマッチしているかまたはこれを満たしているかのいずれかであるものとして特定することにより、まず、高スコアリング配列ペア（ＨＳＰ）を特定することを含む。Ｔは、ネイバーフッドワードスコア閾値と称される（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．上掲）。このような初期ネイバーフッドワードヒットは、これを含むより長いＨＳＰを見つけ出すための検索を開始するためのシード（ｓｅｅｄ）としての機能を果たす。ワードヒットは、累積アラインメントスコアが増加し得る限り、各配列に沿って両方向に拡張される。累積スコアは、ヌクレオチド配列では、パラメータＭ（１対のマッチング残基のリワードスコア；常に＞０）とＮ（ミスマッチ残基のペナルティスコア；常に＜０）を用いて計算される。アミノ酸配列では、スコアリングマトリックスが累積スコアの計算に使用される。各方向のワードヒットの拡張は：累積アラインメントスコアがその最大達成値からＸの量で外れた場合；累積スコアがゼロ以下になった場合（１つ以上の負スコアの残基アラインメントの蓄積のため）；またはいずれかの配列の終点に達した場合に停止される。ＢＬＡＳＴアルゴリズムのパラメータＷ、ＴおよびＸにより、アラインメントの感度と速度が決定される。ＢＬＡＳＴＮプログラム（ヌクレオチド配列用）では、デフォルトとしてワード長（Ｗ）１１、期待値（Ｅ）１０、Ｍ＝５、Ｎ＝−４および両鎖の比較が使用される。アミノ酸配列では、ＢＬＡＳＴＰプログラムにおいて、デフォルトとしてワード長３、および期待値（Ｅ）１０ならびにＢＬＯＳＵＭ６２スコアリングマトリックス（Ｈｅｎｉｋｏｆｆ  ａｎｄ  Ｈｅｎｉｋｏｆｆ（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１０９１５参照）アラインメント（Ｂ）５０、期待値（Ｅ）１０、Ｍ＝５、Ｎ＝−４および両鎖の比較が使用される。
【００７４】
また、ＢＬＡＳＴアルゴリズムにより、２つの配列間の類似性の統計解析も行なわれる。（例えば、Ｋａｒｌｉｎ  ａｎｄ  Ａｌｔｓｃｈｕｌ（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３−５７８７参照）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって得られる類似性の測定値の１つは最小和確率（ｓｍａｌｌｅｓｔ  ｓｕｍ  ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（Ｐ（Ｎ））であり、これは、２つのヌクレオチド配列間またはアミノ酸配列間のマッチングが偶然に起こったものである確率の指標を示す。例えば、核酸は、試験核酸と参照核酸との比較における最小和確率が約０．２未満、より好ましくは約０．０１未満、最も好ましくは約０．００１未満である場合、参照配列と同様とみなす。
【００７５】
２つの核酸配列またはポリペプチドが実質的に同一であることの指標は、第１の核酸にコードされたポリペプチドが、第２の核酸にコードされたポリペプチドに対して生じた抗体と免疫学的に交差反応性であるということである（後述のとおり）。従って、例えば、２つのペプチドが保存的置換だけで異なる場合、ポリペプチドは典型的には第２ポリペプチドと実質的に同一である。２つの核酸配列が実質的に同一であるという別の指標は、２つの分子またはその相補鎖がストリンジェント条件下で互いにハイブリダイズするということである（後述のとおり）。２つの核酸配列が実質的に同一であるというまた別の指標は、配列の増幅に同じプライマーが使用され得るということである。
【００７６】
語「発現」または「発現される」は、遺伝子に関して本明細書で用いる場合、該遺伝子の転写産物および／または翻訳産物を意味する。細胞内におけるＤＮＡ分子の発現レベルは、該細胞内に存在する対応ｍＲＮＡの量または該細胞によってもたらされるＤＮＡにコードされたタンパク質の量のいずれかに基づいて測定され得る。非コード核酸分子（例えば、ｓｉＲＮＡ）の発現レベルは、当該技術分野で周知の標準的なＰＣＲ法またはノザンブロット法によって検出され得る。Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，１８．１−１８．８８を参照のこと。
【００７７】
トランスフェクトされた遺伝子の発現は、細胞内で一過性で起こってもよく、または安定的に起こってもよい。「一過性発現」中、トランスフェクトされた遺伝子は、細胞分裂時に娘細胞に移行されない。その発現はトランスフェクト細胞内に限定されるため、該遺伝子の発現は経時的に失われる。対照的に、トランスフェクトされた遺伝子の安定的発現は、該遺伝子を、該トランスフェクト細胞に対して選択上の有利性を付与する別の遺伝子とコトランスフェクトした場合に起こり得る。かかる選択上の有利性は、該細胞に提示された特定の毒素に対する耐性であり得る。トランスフェクトされた遺伝子の発現は、さらに、宿主のゲノム内へのトランスポゾン媒介性挿入によって行なうことができる。トランスポゾン媒介性挿入中、遺伝子は予測可能な様式で、宿主のゲノム内への挿入ならびにその後の切除を可能にする２つのトランスポゾンリンカー配列間に配置される。トランスフェクトされた遺伝子の安定的発現は、さらに、細胞をレンチウイルスベクター（感染後、細胞内のゲノムの一部を形成する（組み込まれる）ことにより、該遺伝子の安定な発現をもたらす）に感染させることによって行なうことができる。
【００７８】
用語「プラスミド」、「ベクター」または「発現ベクター」は、遺伝子および／または遺伝子発現に必要な調節エレメントをコードしている核酸分子をいう。プラスミドによる遺伝子の発現は、シスまたはトランスで行なわれ得る。遺伝子がシスで発現される場合、該遺伝子と調節エレメントとは同じプラスミドにコードされている。トランスでの発現は、遺伝子と調節エレメントとが別個のプラスミドにコードされている場合をいう。
【００７９】
用語「トランスフェクション」、「形質導入」、「トランスフェクトする」または「形質導入する」は互換的に用いている場合があり、核酸分子またはタンパク質を細胞内に導入する工程と定義する。核酸は細胞に非ウイルス系の方法またはウイルス系の方法を用いて導入される。核酸分子は、完全なタンパク質またはその機能性部分をコードしている遺伝子配列であり得る。トランスフェクションの非ウイルス法には、細胞内に核酸分子を導入するための送達系としてウイルスＤＮＡまたはウイルス粒子を使用しない任意の適切なトランスフェクション法が包含される。例示的な非ウイルス系トランスフェクション法としては、リン酸カルシウムトランスフェクション、リポソームによるトランスフェクション、ヌクレオフェクション、ソノポレーション、ヒートショックによるトランスフェクション、マグネティフェクション（ｍａｇｎｅｔｉｆｅｃｔｉｏｎ）およびエレクトロポレーションが挙げられる。一部の実施形態では、核酸分子は細胞内に、エレクトロポレーションを用いて当該技術分野で周知の標準的な手順に従って導入される。ウイルス系のトランスフェクションの方法では、任意の有用なウイルスベクターが本明細書に記載の方法において使用され得る。ウイルスベクターの例としては、限定されないが、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、レンチウイルスベクターおよびアデノ随伴ウイルスベクターが挙げられる。一部の実施形態では、核酸分子は細胞内に、レトロウイルスベクターを用いて当該技術分野で周知の標準的な手順に従って導入される。また、用語「トランスフェクション」または「形質導入」は、外部環境から細胞内にタンパク質を導入することをいう。典型的には、タンパク質の形質導入またはトランスフェクションは、細胞膜を通過し得るペプチドまたはタンパク質の目的のタンパク質との結合に依存する。例えば、Ｆｏｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ８：１−４およびＰｒｏｃｈｉａｎｔｚ（２００７）Ｎａｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ４：１１９−２０を参照のこと。
【００８０】
「抗体」は、免疫グロブリン遺伝子またはその断片由来のフレームワーク領域を含むポリペプチドであって、抗原に特異的に結合して認識するものをいう。わかっている免疫グロブリン遺伝子としては、κ、λ、α、γ、δ、εおよびμ定常領域遺伝子ならびに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子が挙げられる。軽鎖はκまたはλのいずれかに分類される。重鎖はγ、ｍｕ、α、δまたはεに分類され、これらはさらに、それぞれ免疫グロブリンクラスＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＥを規定する。典型的には、抗体の抗原結合領域は、結合の特異性および親和性の決定において大きな役割を果たす。一部の実施形態では、抗体または抗体断片は、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、ラクダなどを含む種々の生物に由来するものであり得る。本発明の抗体には、抗体の所望の機能（例えば、グリコシル化、発現、抗原認識、エフェクター機能、抗原結合、特異性など）を改善またはモジュレートするために、１つ以上のアミノ酸位置が修飾または変異されている抗体が、包含され得る。
【００８１】
抗体は、入り組んだ内部構造を有する大きな複雑な分子（約１５０，０００の分子量または約１３２０個のアミノ酸）である。天然の抗体分子は２つの同一のポリペプチド鎖のペアを含むものであり、各ペアは１つの軽鎖と１つの重鎖を有する。軽鎖と重鎖は各々さらに、２つの領域：標的抗原の結合に関与する可変（「Ｖ」）領域と、免疫系の他の成分と相互作用する定常（「Ｃ」）領域とからなる。軽鎖の可変領域と重鎖の可変領域とは、３次元空間において一体となり、抗原（例えば、細胞表面上の受容体）に結合する可変領域を形成している。軽鎖または重鎖の各可変領域内には、相補性決定領域（「ＣＤＲ」）と称される３つの短いセグメント（平均１０アミノ酸長）が存在する。抗体可変ドメイン内のこの６つのＣＤＲ（軽鎖内の３つと重鎖内の３つ）が３次元空間において一体にフォールディングし、標的抗原にドッキングする実際の抗体結合部位を形成している。ＣＤＲの位置および長さは、Ｋａｂａｔ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，１９８３，１９８７によって厳密に規定されている。ＣＤＲに含まれない可変領域部分はフレームワーク（「ＦＲ」）と称され、これはＣＤＲのための環境を構成している。
【００８２】
例示的な免疫グロブリン（抗体）の構造単位は、四量体を構成している。各四量体は２つの同一のポリペプチド鎖のペアで構成されており、各ペアは１つの“軽”鎖（約２５ｋＤ）と１つの“重”鎖（約５０から７０ｋＤ）を有する。各鎖のＮ末端は、主に抗原認識を担う約１００から１１０個またはそれ以上のアミノ酸の可変領域を画定している。可変軽鎖（ＶＬ）または軽鎖可変領域および可変重鎖（ＶＨ）または重鎖可変領域という用語は、それぞれ、これらの軽鎖領域および重鎖領域をいう。可変軽鎖（ＶＬ）および軽鎖可変領域という用語は、本明細書において言及している場合、互換的に用いている場合がある。可変重鎖（ＶＨ）および重鎖可変領域という用語は、本明細書において言及している場合、互換的に用いている場合がある。Ｆｃ（即ち、結晶性領域の断片）は、免疫グロブリンの「基部」または「尾部」であり、典型的には、抗体クラスに応じて２つまたは３つの定常ドメインに寄与する２つの重鎖で構成されている。特定のタンパク質に結合することにより、Ｆｃ領域は、各抗体が所与の抗原に対して適切な免疫応答を生じることを確実にする。また、Ｆｃ領域は、種々の細胞受容体（Ｆｃ受容体など）および他の免疫分子（補体タンパク質など）にも結合する。
【００８３】
本明細書において提供する「抗原」という用語は、本明細書において提供する抗体領域結合し得る分子をいい、ここで、該結合部位は該ペプチド結合部位ではない。
【００８４】
抗体は、例えば、インタクトな免疫グロブリンとして、または種々のペプチダーゼでの消化によって生じる幾つかの充分に特性評価された断片として存在する。従って、例えば、ペプシンは、抗体をヒンジ領域内のジスルフィド結合の下で消化し、軽鎖がＶＨ−ＣＨ１にジスルフィド結合によって連接されたものであるＦａｂの二量体であるＦ（ａｂ）’２を生じる。Ｆ（ａｂ）’２を穏やかな条件下で還元してヒンジ領域内のジスルフィド結合を切断すると、それにより、Ｆ（ａｂ）’２二量体はＦａｂ’モノマーに変換され得る。Ｆａｂ’モノマーは本質的に抗原結合部分であり、ヒンジ領域の一部を有する（Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｐａｕｌ  ｅｄ．，３ｄ  ｅｄ．１９９３）参照）。種々の抗体断片はインタクトな抗体の消化に関して規定されるが、当業者には、かかる断片は化学的方法論または組換えＤＮＡ方法論の使用のいずれかによってデノボ合成されたものであってもよいことが認識されよう。従って、抗体という用語は、本明細書で用いる場合、完全抗体の修飾によるか、または組換えＤＮＡ方法論を用いてデノボ合成されるか（例えば、単鎖Ｆｖ）もしくはファージディスプレイライブラリーを用いて同定されるか（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４（１９９０）参照）のいずれかによって生じた抗体断片もまた包含している。
【００８５】
単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）は、典型的には、１０から約２５個のアミノ酸の短鎖リンカーペプチドで接続された免疫グロブリンの重鎖（ＶＨ）の可変領域と軽鎖（ＶＬ）の可変領域との融合タンパク質である。リンカーは、通常、可撓性のためのグリシンならびに可溶性のためのセリンまたはトレオニンについて高含有であり得る。リンカーは、ＶＨのＮ末端をＶＬのＣ末端と接続しているものまたはその逆のいずれかであり得る。
【００８６】
ｍＡｂのエピトープは、該ｍＡｂが結合する対象抗原の領域である。２種類の抗体は、各々が、抗原に対する他方の結合を競合的に阻害（ブロック）する場合、同じかまたは重複するエピトープに結合する。即ち、競合的結合アッセイにおいて測定時、１×、５×、１０×、２０×または１００×過剰の一方の抗体が他方の結合を少なくとも３０％だが好ましくは５０％、７５％、９０％またはさらには９９％阻害する（例えば、Ｊｕｎｇｈａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５０：１４９５，１９９０参照）。または、２種類の抗体は、一方の抗体の結合を低減または消失させる抗原内の本質的にすべてのアミノ酸変異が他方の結合も低減または消失させる場合、同じエピトープを有する。２種類の抗体は、一方の抗体の結合を低減または消失させる幾つかのアミノ酸変異が他方の結合も低減または消失させる場合、重複するエピトープを有する。
【００８７】
本発明の好適な抗体の調製および本発明による使用には、例えば、組換え抗体、モノクローナルまたはポリクローナル抗体、当該技術分野で公知の多くの手法が、使用され得る（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ＆  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５−４９７（１９７５）；Ｋｏｚｂｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ４：７２（１９８３）；Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｐｐ．７７−９６  ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．（１９８５）；Ｃｏｌｉｇａｎ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（１９９１）；Ｈａｒｌｏｗ  ＆  Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９８８）；およびＧｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ（２ｄ  ｅｄ．１９８６）参照）。目的の抗体の重鎖と軽鎖とをコードしている遺伝子を、細胞からクローニングすることができ、例えば、モノクローナル抗体をコードしている遺伝子をハイブリドーマからクローニングし、組換えモノクローナル抗体を作製するために使用することができる。また、モノクローナル抗体の重鎖と軽鎖とをコードしている遺伝子ライブラリーをハイブリドーマまたは形質細胞から作製してもよい。重鎖および軽鎖の遺伝子産物の無作為な組合せにより、異なる抗原特異性を有する大型の抗体プールが得られる（例えば、Ｋｕｂｙ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（３ｒｄ  ｅｄ．１９９７）参照）。一本鎖抗体または組換え抗体の作製のための手法（米国特許４，９４６，７７８、米国特許第４，８１６，５６７号）が、本発明のポリペプチドに対する抗体の作製に適合され得る。また、トランスジェニックマウスまたは他の生物体、例えば他の哺乳動物が、ヒト化抗体またはヒト抗体を発現させるために使用され得る（例えば、米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；同第５，６６１，０１６号、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６−８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８１２−１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４：８４５−５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４：８２６（１９９６）；およびＬｏｎｂｅｒｇ  ＆  Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−９３（１９９５）参照）。または、ファージディスプレイ技術が、選択された抗原に特異的に結合する抗体およびヘテロ二量体Ｆａｂ断片を同定するために使用され得る。（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４（１９９０）；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）参照）。また、抗体を二重特異性に、即ち、２種類の異なる抗原を認識でき���ようにしてもよい（例えば、ＷＯ９３／０８８２９、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：３６５５−３６５９（１９９１）；およびＳｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １２１：２１０（１９８６）参照）。また、抗体をヘテロコンジュゲートに、例えば、共有結合により連接された２種類の抗体または免疫毒素にしてもよい（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、ＷＯ９１／００３６０；ＷＯ９２／２００３７３；およびＥＰ０３０８９参照）。
【００８８】
非ヒト抗体をヒト化または霊長類化するための方法は当該技術分野で周知である（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；同第５，５３０，１０１号；同第５，８５９，２０５号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号；同第５，７７７，０８５号；同第６，１８０，３７０号；同第６，２１０，６７１号；および同第６，３２９，５１１号；ＷＯ８７／０２６７１；ＥＰ特許出願０１７３４９４；Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２；ならびにＶｅｒｈｏｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４）。ヒト化抗体はさらに、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３４９：２９３に記載されている。一般的に、ヒト化抗体は、非ヒトである供給源由来の１個以上のアミノ酸残基が導入されているものである。このような非ヒトアミノ酸残基はしばしばインポート残基と称され、これは典型的にはインポート可変ドメインから採用される。ヒト化は本質的に、Ｗｉｎｔｅｒおよび共同研究者らの方法に従って（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４），Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７（１９８８）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｏｉ，Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４４：６５−９２（１９８８），Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６（１９８８）およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（１９９２），Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．，２８：４８９−４９８（１９９１）；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．，３１（３）：１６９−２１７（１９９４）参照）、齧歯類のＣＤＲまたはＣＤＲ配列をヒト抗体の対応配列で置き換えることにより行なわれ得る。従って、かかるヒト化抗体はキメラ抗体（米国特許第４，８１６，５６７号）であり、この場合、インタクトなヒト可変ドメインのかなり少ない部分が非ヒト種由来の対応配列で置き換えられている。実際、ヒト化抗体は典型的には、一部のＣＤＲ残基および場合によっては一部のＦＲ残基が齧歯類抗体の類似部位の残基で置換されたヒト抗体である。例えば、ヒト化免疫グロブリンのフレームワーク領域をコードしている第１配列および所望の免疫グロブリンの相補性決定領域をコードしている第２配列セットを含むポリヌクレオチドが、合成により、または適切なｃＤＮＡとゲノムＤＮＡセグメントとを合わせることにより作製され得る。ヒト定常領域のＤＮＡ配列は、さまざまなヒト細胞から周知の手順に従って単離され得る。
【００８９】
「キメラ抗体」は、（ａ）定常領域もしくはその一部分が、改変、置き換えもしくは交換されることにより、抗原結合部位（可変領域）が、異なるかもしくは改変されたクラス、エフェクター機能および／または種の定常領域に連結されているか、もしくは該キメラ抗体に新たな特性を付与する完全に異なる分子、例えば、酵素、毒素、ホルモン、増殖因子、薬物などに連結されている抗体分子；または（ｂ）可変領域もしくはその一部分が、異なるかもしくは改変された抗原特異性を有する可変領域で改変、置き換えもしくは交換されている抗体分子である。本発明の好ましい抗体および本発明による使用のための好ましい抗体としては、ヒト化および／またはキメラモノクローナル抗体が挙げられる。
【００９０】
本明細書において提供する「治療用抗体」は、がん、自己免疫疾患、移植片拒絶、心血管疾患または他の疾患もしくは病状（例えば、本明細書に記載のもの）を処置するために使用される任意の抗体またはその機能性断片をいう。治療用抗体の非限定的な例としては、マウス抗体、マウス化キメラ抗体もしくはヒト化キメラ抗体またはヒト抗体が挙げられ、例えば限定されないが、Ｅｒｂｉｔｕｘ（セツキシマブ）、ＲｅｏＰｒｏ（アブシキシマブ）、Ｓｉｍｕｌｅｃｔ（バシリキシマブ）、Ｒｅｍｉｃａｄｅ（インフリキシマブ）；Ｏｒｔｈｏｃｌｏｎｅ  ＯＫＴ３（ムロモナブ−ＣＤ３）；Ｒｉｔｕｘａｎ（リツキシマブ）、Ｂｅｘｘａｒ（トシツモマブ）Ｈｕｍｉｒａ（アダリムマブ）、Ｃａｍｐａｔｈ（アレムツズマブ）、Ｓｉｍｕｌｅｃｔ（バシリキシマブ）、Ａｖａｓｔｉｎ（ベバシズマブ）、Ｃｉｍｚｉａ（セルトリズマブペゴル）、Ｚｅｎａｐａｘ（ダクリズマブ）、Ｓｏｌｉｒｉｓ（エクリズマブ）、Ｒａｐｔｉｖａ（エファリズマブ）、Ｍｙｌｏｔａｒｇ（ゲムツズマブ）、Ｚｅｖａｌｉｎ（イブリツモマブチウキセタン）、Ｔｙｓａｂｒｉ（ナタリズマブ）、Ｘｏｌａｉｒ（オマリズマブ）、Ｓｙｎａｇｉｓ（パリビズマブ）、Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（パニツムマブ）、Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（ラニビズマブ）およびＨｅｒｃｅｐｔｉｎ（トラスツズマブ）が挙げられる。
【００９１】
治療用薬剤を抗体にコンジュゲートさせるための手法は周知である（例えば、Ａｒｎｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｉｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ”，ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｒｅｉｓｆｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．２４３−５６（Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８５）；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”ｉｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ（２ｎｄ  Ｅｄ．），Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．６２３−５３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９８７）；Ｔｈｏｒｐｅ，“Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  Ｏｆ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ  Ｒｅｖｉｅｗ”  ｉｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ‘８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｐｉｎｃｈｅｒａ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．４７５−５０６（１９８５）；およびＴｈｏｒｐｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ａｎｄ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  Ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｔｏｘｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ”，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，６２：１１９−５８（１９８２）参照）。本明細書で用いる場合、用語「抗体−薬物コンジュゲート」または「ＡＤＣ」は、治療用薬剤を抗体にコンジュゲートさせたものまたは別の様式で共有結合により結合させたものをいう。「治療用薬剤」は、本明細書においていう場合、疾患、例えばがんの処置または予防に有用な組成物である。
【００９２】
抗体に「特異的に（もしくは選択的に）結合する」または「〜と特異的に（もしくは選択的に）免疫反応性の」という語句は、タンパク質またはペプチドに言及している場合、該タンパク質の（多くの場合、タンパク質および他の生物材料の不均一な集団における）存在を確定的にする、結合反応をいう。従って、指定されたイムノアッセイ条件下では、明示された抗体は特定のタンパク質に、バックグラウンドの少なくとも２倍、より典型的にはバックグラウンドの１０から１００倍より多く結合する。かかる条件下における抗体に対する特異的結合は典型的には、特定のタンパク質に対するその特異性に関して選択された抗体が必要とされる。例えば、選択された抗原と特異的に免疫反応性であり、他のタンパク質とはそうでない抗体サブセットを得るためだけならポリクローナル抗体が選択され得る。この選択は、他の分子と交差反応性である抗体を除外することにより行なわれ得る。さまざまなイムノアッセイ形式が、特定のタンパク質と特異的に免疫反応性の抗体を選択するために使用され得る。例えば、タンパク質と特異的に免疫反応性の抗体を選択するためには固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイが慣用的に使用される（例えば、特異的免疫反応性を調べるために使用され得るイムノアッセイ形式および条件の説明については、Ｈａｒｌｏｗ  ＆  Ｌａｎｅ，Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９９８）を参照のこと）。
タンパク質）．
【００９３】
「リガンド」は、受容体に結合し得る因子、例えば、ポリペプチドまたは他の分子をいう。
【００９４】
用語「組換え」は、例えば、細胞、核酸、タンパク質またはベクターに関して用いている場合、該細胞、核酸、タンパク質またはベクターが実験室的製法によって修飾されているか、または該方法の結果物であることを示す。従って、例えば、組換えタンパク質は実験室的製法によって作製されたタンパク質を包含している。組換えタンパク質は、天然（非組換え）形態のタンパク質にはみられないアミノ酸残基を含むものであってもよく、修飾された、例えば標識されたアミノ酸残基を含むものであってもよい。
【００９５】
用語「異種（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ）」とは、核酸内の部分に関して用いている場合、該核酸が、自然界では互いに同じ関係でみられない２つ以上の部分配列を含むものであることを示す。例えば、該核酸は典型的には組換え産生され、無関連の遺伝子由来の２つ以上の配列が新たな機能性核酸となるように配列されたものである（例えば、ある供給源由来のプロモーターと別の供給源由来のコード領域）。同様に、異種タンパク質は、該タンパク質が、自然界では互いに同じ関係でみられない２つ以上の部分配列を含むもの（例えば、融合タンパク質）であることを意味する。
【００９６】
用語「単離された」とは、核酸またはタンパク質に適用されている場合、該核酸またはタンパク質が、自然状態では会合している他の細胞成分を本質的に無含有であることを表す。これは、例えば均質な状態であり得、非水性溶液（ｄｒｙ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）中または水溶液中のいずれに存在していてもよい。純度および均質性は典型的には、分析化学的手法、例えば、ポリアクリルアミドゲル電気泳動または高速液体クロマトグラフィーを用いて測定される。調製物中に過半量の種として存在するタンパク質は、実質的に精製されたものである。
【００９７】
「接触させる」は、その単純な通常の意味に従って用いており、少なくとも２種類の相違する種（例えば、生体分子または細胞を含む化学的化合物）を、反応、相互作用または物理的に接触するように充分に近接した状態にする工程をいう。しかしながら、得られる反応生成物は、添加した試薬間の反応により直接生成するものであってもよく、添加した試薬のうちの１種類以上に由来し反応混合物中に生じ得る中間体から生成するものであってもよいことを認識されたい。
【００９８】
用語「接触させる」には、２つの種を反応、相互作用または物理的に接触させることが包含され得、この場合、該２つの種は、例えば、本明細書に記載の化合物および立体障害性化学分子であり得る。諸実施形態では、接触には、例えば、本明細書に記載の化合物を立体障害性化学分子と相互作用させることが包含される。
【００９９】
「対照」試料または値は、試験試料との比較のための参照（通常、既知参照）としての機能を果たす試料をいう。例えば、試験試料は、試験条件から、例えば試験化合物の存在下で採取され、既知条件の、例えば、試験化合物の非存在下（陰性対照）または既知化合物の存在下（陽性対照）の試料と比較され得る。また、対照は、複数の試験または結果から得られる平均値を表す場合もある。当業者には、対照は、任意の数のパラメータ評価のために設計され得ることが認識されよう。例えば、対照は、薬理学的データ（例えば、半減期）または治療測定（例えば、副作用の比較）に基づいて治療有益性を比較するために案出され得る。当業者には、所与の状況においてどの対照が有用であるかが理解され、対照値との比較に基づいてデータを解析することができよう。また、対照は、データの有意性の判定に有用なものである。例えば、所与のパラメータの値が対照において広く異なる場合、試験試料における差異は有意とみなされない。
【０１００】
「患者」または「〜を必要とする被験体」は、本明細書において提供する組成物または医薬組成物の投与によって処置され得る疾患または病状に苦しんでいるか、または易罹患性である生きている生物体をいう。非限定的な例としては、ヒト、他の哺乳動物、ウシ（ｂｏｖｉｎｅ）、ラット、マウス、イヌ、サル、ヤギ、ヒツジ、ウシ（ｃｏｗ）、シカおよび他の非哺乳動物の動物が挙げられる。一部の実施形態では、患者がヒトである。
【０１０１】
用語「疾患」または「病状」は、本明細書において提供する化合物、医薬組成物または方法で処置され得る患者または被験体の体の状態または健康状態をいう。諸実施形態では、疾患ががん（例えば、肺がん、卵巣がん、骨肉腫、膀胱がん、子宮頸がん、肝臓がん、腎臓がん、皮膚がん（例えば、メルケル細胞癌）、精巣がん、白血病、リンパ腫、頭頸部がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膵がん、黒色腫、乳がん、神経芽細胞腫）である。
【０１０２】
用語「処置する」または「処置」は、傷害、疾患、病態または病状（任意の客観的または主観的パラメータを含む）の処置の奏功または改善の任意の指標、例えば、軽減；寛解；症状の減弱または傷害、病態もしくは病状が患者にとってより耐容性になること；変性または減退の速度の低下；変性の最終点の衰弱性を低減させること；患者の身体的または精神的健康状態の改善をいう。症状の処置または改善は、身体検査、神経精神病学検査および／または精神医学的評価の結果を含む客観的または主観的パラメータに基づいたものであり得る。用語「処置する（“ｔｒｅａｔｉｎｇ”）」およびその活用形は、傷害、病態、病状または疾患の予防を包含している。諸実施形態では、「処置する」とは、がんの処置をいう。
【０１０３】
「有効量」は、該化合物なしと比べて記載の目的が達成される（例えば、投与効果が得られる、疾患が処置される、酵素活性が低下する、酵素活性が高まる、シグナル伝達経路が低減される、または疾患もしくは病状の１つ以上の症状が低減される）ために充分な、化合物についての量である。「治療有効量」の一例は、疾患の処置、予防またはその症状（１つもしくは複数）の低減に寄与するのに充分な量であり、これは「治療有効量」とも称され得る。症状（１つまたは複数）の「低減」（およびこの語句の文法的等価語句）は、症状（１つもしくは複数）の重症度もしくは頻度の減少または症状（１つもしくは複数）の解消を意味する。厳密な量は処置の目的に依存し、当業者により公知の手法を用いて確認されよう（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ（ｖｏｌｓ．１−３，１９９２）；Ｌｌｏｙｄ，Ｔｈｅ  Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｐｉｃｋａｒ，Ｄｏｓａｇｅ  Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００３，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ参照）。
【０１０４】
本明細書で用いる場合、用語「がん」は、哺乳動物にみられるあらゆる型のがん、新生物または悪性の腫瘍をいい、白血病、リンパ腫、黒色腫、神経内分泌腫瘍、癌および肉腫を含む。本明細書において提供する化合物、医薬組成物または方法で処置され得る例示的ながんとしては、リンパ腫、肉腫、膀胱がん、骨のがん、脳腫瘍、子宮頸がん、結腸がん、食道がん、胃がん、頭頸部がん、腎臓がん、骨髄腫、甲状腺がん、白血病、前立腺がん、乳がん（例えば、トリプルネガティブ、ＥＲ陽性、ＥＲ陰性、化学療法抵抗性、ハーセプチン抵抗性、ＨＥＲ２陽性、ドキソルビシン抵抗性、タモキシフェン抵抗性、腺管癌、小葉癌、原発性、転移性）、卵巣がん、膵がん、肝臓がん（例えば、肝細胞癌）、肺がん（例えば、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞肺癌、腺癌、大細胞肺癌、小細胞肺癌、カルチノイド、肉腫）、多形性膠芽腫、神経膠腫、黒色腫、前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膠芽腫、卵巣がん、肺がん、扁平上皮細胞癌（例えば、頭部、頸部もしくは食道）、結腸直腸がん、白血病、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）白血病、リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫または多発性骨髄腫が挙げられる。さらなる例としては、甲状腺、内分泌系、脳、乳房、子宮頸部、結腸、頭頸部、食道、肝臓、腎臓、肺、非小細胞肺、黒色腫、中皮腫、卵巣、肉腫、胃、子宮もしくは髄芽細胞腫のがん、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、多形性膠芽腫、卵巣がん、横紋筋肉腫、原発性血小板血症、原発性マクログロブリン血症、原発性脳腫瘍、がん、悪性膵インスリノーマ、悪性カルチノイド、膀胱がん、前癌状態の皮膚病変、精巣がん、リンパ腫、甲状腺がん、神経芽細胞腫、食道がん、尿生殖路のがん、悪性高カルシウム血症、子宮内膜がん、副腎皮質細胞がん、膵内分泌もしくは膵外分泌の新生物、甲状腺髄様がん、甲状腺髄様癌、黒色腫、結腸直腸がん、甲状腺乳頭がん、肝細胞癌、乳頭部のパジェット病、葉状腫瘍、小葉癌、腺管癌、膵星細胞のがん、肝星細胞のがんまたは前立腺がんが挙げられる。
【０１０５】
用語「白血病」は、広く造血器官の進行性の悪性疾患をいい、一般的には、血液および骨髄中の白血球およびその前駆細胞の増殖および発生の歪みを特徴とするものである。白血病は一般的に、（１）疾患の持続期間および性質：急性か慢性か；（２）関与している細胞の型：骨髄系（骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ））、リンパ球系（リンパ性（ｌｙｍｐｈｏｇｅｎｏｕｓ））または単球性；および（３）血液における異常細胞の数の増加の有無：白血球性か非白血球性（亜白血性）か、に基づいて臨床分類される。本明細書において提供する化合物、医薬組成物または方法で処置され得る例示的な白血病としては、例えば、急性非リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、急性顆粒球性白血病、慢性顆粒球性白血病、急性前骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞白血病、非白血性白血病、ロイコサイテミック（ｌｅｕｋｏｃｙｔｈｅｍｉｃ）白血病、好塩基球性白血病、芽細胞白血病、ウシ白血病、慢性骨髄性（ｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ）白血病、皮膚白血病、胎児性白血病、好酸球性白血病、グロス（Ｇｒｏｓｓ）白血病、ヘアリー細胞白血病、赤芽球性（ｈｅｍｏｂｌａｓｔｉｃ）白血病、芽球性白血病、組織球性白血病、幹細胞白血病、急性単球性白血病、白血球減少性白血病、リンパ性（ｌｙｍｐｈａｔｉｃ）白血病、リンパ芽球性白血病、リンパ性（ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ）白血病、リンパ性（ｌｙｍｐｈｏｇｅｎｏｕｓ）白血病、リンパ性（ｌｙｍｐｈｏｉｄ）白血病、リンパ肉腫細胞性白血病、肥満細胞白血病、巨核球性白血病、微小骨髄芽球性（ｍｉｃｒｏｍｙｅｌｏｂｌａｓｔｉｃ）白血病、単球性白血病、骨髄芽球性白血病、骨髄性白血病、骨髄性顆粒球性白血病、骨髄単球性白血病、Ｎａｅｇｅｌｉ型白血病、形質細胞白血病、多発性骨髄腫、形質細胞性白血病、前骨髄球性白血病、リーダー細胞性白血病、Ｓｃｈｉｌｌｉｎｇ型白血病、幹細胞白血病、亜白血性白血病または未分化細胞白血病が挙げられる。
【０１０６】
用語「肉腫」は、一般的に、胚結合組織のような物質で構成されており、一般的に、線維性または均質な物質内にぎっしり埋まった細胞で構成された腫瘍をいう。本明細書において提供する化合物、医薬組成物または方法で処置され得る肉腫としては、軟骨肉腫、線維肉腫、リンパ肉腫、黒肉腫、粘液肉腫、骨肉腫、Ａｂｅｍｅｔｈｙ肉腫、脂肪（ａｄｉｐｏｓｅ）肉腫、脂肪肉腫（ｌｉｐｏｓａｒｃｏｍａ）、胞状軟部肉腫、エナメル芽細胞肉腫、ブドウ状肉腫、緑色腫肉腫、絨毛腺癌、胎児性肉腫、ウィルムス腫瘍肉腫、子宮内膜肉腫、間質肉腫、ユーイング肉腫、筋膜肉腫、線維芽細胞肉腫、巨細胞肉腫、顆粒球性肉腫、ホジキン肉腫、特発性多発性色素性出血性肉腫、Ｂ細胞の免疫芽球性肉腫、リンパ腫、Ｔ細胞の免疫芽球性肉腫、ジェンセン肉腫、カポジ肉腫、クッパー細胞肉腫、血管肉腫、白血肉腫、悪性間葉腫肉腫、骨膜傍肉腫、網状赤血球肉腫、ラウス肉腫、セロシスティック（ｓｅｒｏｃｙｓｔｉｃ）肉腫、滑膜肉腫または毛細血管拡張性（ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔａｌｔｉｃ）肉腫が挙げられる。
【０１０７】
用語「黒色腫」は、皮膚および他の器官のメラニン細胞系から発生する腫瘍を意味すると解釈されたい。本明細書において提供する化合物、医薬組成物または方法で処置され得る黒色腫としては、例えば、末端性黒子性黒色腫、メラニン欠乏性黒色腫、良性若年性黒色腫、クラウドマン黒色腫、Ｓ９１黒色腫、ハーディング・パッセー黒色腫、若年性黒色腫、悪性黒子型黒色腫、悪性黒色腫、結節性黒色腫、爪下黒色腫または表在拡大型黒色腫が挙げられる。
【０１０８】
用語「癌」は、上皮細胞で構成されており、周囲組織に浸潤し、転移をもたらす傾向にある悪性の新生増殖物をいう。本明細書において提供する化合物、医薬組成物または方法で処置され得る例示的な癌としては、例えば、甲状腺髄様癌、家族性甲状腺髄様癌、細葉細胞癌、細葉状癌、腺嚢癌、腺様嚢胞癌、アデノーマ様（ａｄｅｎｏｍａｔｏｓｕｍ）癌、副腎皮質の癌、肺胞癌、肺胞細胞癌、基底細胞（ｂａｓａｌ  ｃｅｌｌ）癌、基底細胞（ｂａｓｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）癌、基底様癌、基底有棘細胞癌、気管支肺胞癌、細気管支癌、気管支原性癌、大脳様癌、胆管細胞癌、絨毛膜癌、膠様癌、面皰癌、子宮体（ｃｏｒｐｕｓ）癌、篩状癌、鎧状（ｅｎ  ｃｕｉｒａｓｓｅ）癌、皮膚（ｃｕｔａｎｅｕｍ）癌、柱状（ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａｌ）癌、柱状細胞癌、管癌、腺管癌、デュラム（ｄｕｒｕｍ）癌、胎児性癌、脳様癌、エピエルモイド（ｅｐｉｅｒｍｏｉｄ）癌、上皮腺癌、外向発育癌、潰瘍癌、フィブロスム（ｆｉｂｒｏｓｕｍ）癌、膠状癌（ｇｅｌａｔｉｎｉｆｏｒｎｉ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、膠様癌、巨細胞癌、巨細胞（ｇｉｇａｎｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）癌、腺癌、顆粒膜細胞癌、毛母基癌、血液様癌、肝細胞癌、ヒュルトレ細胞癌、硝子体癌、副腎（ｈｙｐｅｒｎｅｐｈｒｏｉｄ）癌、乳児胎児性癌、上皮内癌、表皮内癌、上皮内癌、Ｋｒｏｍｐｅｃｈｅｒ癌、Ｋｕｌｃｈｉｔｚｋｙ細胞癌、大細胞癌、水晶体癌、水晶体（ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒｅ）癌、脂肪腫性癌、小葉癌、リンパ上皮癌、髄様（ｍｅｄｕｌｌａｒｅ）、髄様癌、悪性黒色腫（ｍｅｌａｎｏｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、悪性黒色腫（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｏｌｌｅ）、粘液性癌腫、ムシパルム（ｍｕｃｉｐａｒｕｍ）癌、粘膜細胞（ｍｕｃｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）癌、粘膜表皮癌、粘液（ｍｕｃｏｓｕｍ）癌、粘膜癌、粘液腫性（ｍｙｘｏｍａｔｏｄｅｓ）癌、鼻咽腔癌、燕麦細胞癌、骨化組織癌、類骨癌、乳頭状癌、門脈周囲癌、前浸潤癌、有棘細胞癌、糊状癌、腎臓の腎細胞癌、補充細胞癌、肉腫様癌、シュナイダー癌、硬性癌、陰嚢癌、印環細胞癌、単純癌、小細胞癌、ソラノイド（ｓｏｌａｎｏｉｄ）癌、回転楕円面細胞癌、紡錘体細胞癌、海綿体（ｓｐｏｎｇｉｏｓｕｍ）癌、扁平上皮癌、扁平上皮細胞癌、筋肉線維（ｓｔｒｉｎｇ）癌、血管拡張性（ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔａｔｉｃｕｍ）癌、毛細血管拡張症様（ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔｏｄｅｓ）癌、移行上皮癌、結節（ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）癌、管状腺癌、結節性癌、疣状癌または絨毛（ｖｉｌｌｏｓｕｍ）癌が挙げられる。
【０１０９】
本明細書で用いる場合、用語「転移」、「転移性の」および「転移性のがん」は、互換的に用いられる場合があり、１つの器官または別の隣接していない器官もしくは身体部分からの増殖性の疾患または障害、例えばがんの拡延をいう。がんは、起源部位、例えば、乳房で発生し、ここでこの部位は、原発性腫瘍、例えば原発性乳がんと称される。原発腫瘍または起源部位の一部のがん細胞は、局所領域の周囲の正常組織内に浸透および浸潤する能力および／またはリンパ系もしくは血管系の壁に浸透し、体内の他の部位および組織へと該系内を循環する能力を獲得する。原発性腫瘍のがん細胞から形成された臨床的に検出可能な二次腫瘍は、転移性または続発性腫瘍と称される。がん細胞が転移する場合、転移性腫瘍およびその細胞は元の腫瘍のものと同様であると推測される。従って、肺がんが乳房に転移した場合、乳房部位の続発性腫瘍は異常な肺細胞からなるものであり、異常な乳房細胞ではない。乳房の続発性腫瘍は転移性肺がんと称される。従って、転移性がんという語句は、被験体が原発腫瘍を有しているかまたは以前に有していて、かつ１つ以上の続発性腫瘍を有する疾患をいう。非転移性のがんまたは転移性でないがんを有する被験体という語句は、被験体が原発腫瘍を有するが１つ以上の続発性腫瘍を有していない疾患をいう。例えば、転移性肺がんは、原発性肺腫瘍を有するかまたはその病歴を有し、かつ第２の位置または多数の位置、例えば乳房に１つ以上の続発性腫瘍を有する被験体の疾患をいう。
【０１１０】
「抗がん剤」は、その単純な通常の意味に従って用いており、抗新生物特性または細胞の成長もしくは増殖を抑止する能力を有する組成物（例えば、化合物、薬物、拮抗薬、阻害薬、調節薬）をいう。諸実施形態では、抗がん剤は、化学療法薬である。諸実施形態では、抗がん剤は、がんの処置方法において有用性を有する本明細書において特定した薬剤である。諸実施形態では、抗がん剤は、ＦＤＡまたは米国以外の国の同様の規制機関によってがんの処置について承認された薬剤である。
【０１１１】
用語「関連している」または「〜と関連している」は、疾患（例えば、糖尿病、がん（例えば、前立腺がん、腎がん、転移性がん、黒色腫、去勢抵抗性前立腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、膠芽腫、卵巣がん、肺がん、扁平上皮細胞癌（例えば、頭部、頸部または食道）、結腸直腸がん、白血病、急性骨髄性白血病、リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫または多発性骨髄腫））と関連している物質または物質の活性もしくは機能の文脈において、該疾患（例えば、肺がん、卵巣がん、骨肉腫、膀胱がん、子宮頸がん、肝臓がん、腎臓がん、皮膚がん（例えば、メルケル細胞癌）、精巣がん、白血病、リンパ腫、頭頸部がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膵がん、黒色腫、乳がん、神経芽細胞腫）または該疾患の症状が、（全部または一部において）該物質または物質の活性もしくは機能によって引き起こされるものであることを意味する。
【０１１２】
「化学療法薬」または「化学療法剤」は、その単純な通常の意味に従って用いており、抗新生物特性または細胞の成長もしくは増殖を抑止する能力を有する化学的組成物または化合物をいう。
【０１１３】
用語「異常な」は、本明細書で用いる場合、正常と異なることをいう。酵素活性を説明するために用いる場合、異常なとは、活性が正常対照または正常な非疾患対照試料の平均より大きいか、または小さいことをいう。異常な活性は、疾患をもたらす活性の量を示している場合もあり、この場合、異常な活性が、（例えば、本明細書に記載の方法を使用することにより）正常または非疾患関連量に戻ると、該疾患または１つ以上の疾患症状の低減がもたらされる。
【０１１４】
組換え核酸
本明細書において、新規な診断能を示し、養子免疫療法に対して速やかに機能性が付与されるのを可能にする組成物を提供する。本明細書において提供する組換えタンパク質は、とりわけ、広くさまざまな治療目的および診断目的に有用である。例えば、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質は、疾患（例えば、がん）の処置前および／または該処置中にキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞を特性評価するための非観血的手段として使用され得る。ＣＡＲ免疫受容体に機能性を付加することにより、抗原陽性腫瘍を有する患者集団が効率的に処置され得、そのＨＬＡ遺伝子型に関係なくモニタリングされ得る。このような機能的に改善された腫瘍特異的ＣＡＲを発現するＴリンパ球を用いた養子免疫療法は、がんおよび他の疾患（例えば、感染性疾患（例えば、ＨＩＶ感染））の処置のための強力な治療ストラテジーとなり得る。さらに、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質を使用すると、ＣＡＲ  Ｔ細胞の機能性および安全性の試験および改善が可能になる。
【０１１５】
一態様では、単離された核酸を提供する。該核酸は、（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域、軽鎖可変（ＶＬ）領域、重鎖定常領域（ＣＨ）および軽鎖定常領域（ＣＬ）によって形成されかつフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む抗体領域；ならびに（ｉｉ）膜貫通ドメインを含む、タンパク質をコードしている。
【０１１６】
別の態様では、単離された核酸を提供する。該核酸は、（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域と軽鎖可変（ＶＬ）領域によって形成されかつフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む抗体領域；ならびに（ｉｉ）膜貫通ドメインを含む、タンパク質をコードしている。
【０１１７】
本明細書において提供する「抗体領域」は、諸実施形態を含む本明細書において提供するタンパク質の一部を構成する一価または多価タンパク質部分をいう。従って、当業者には、該抗体領域は、抗原（エピトープ）に結合し得るタンパク質部分であることがすぐに認識され得よう。従って、本明細書において提供する抗体領域には、抗体またはその断片（例えば、Ｆａｂ）のドメインが包含され得る。諸実施形態では、該抗体領域は、タンパク質コンジュゲートである。本明細書において提供する「タンパク質コンジュゲート」は、１つより多くのポリペプチドからなる構築物をいい、ここで、該ポリペプチドは共有結合または非共有結合により一体に結合されている。諸実施形態では、該タンパク質コンジュゲートが、ｓｃＦｖ部分（一価のｓｃＦｖ）に共有結合されたＦａｂ部分（一価のＦａｂ）を含むものである。諸実施形態では、該タンパク質コンジュゲートが、複数（少なくとも２つ）のＦａｂ部分を含むものである。諸実施形態では、タンパク質コンジュゲートのポリペプチドが１つの核酸分子にコードされている。諸実施形態では、タンパク質コンジュゲートのポリペプチドが異なる核酸分子にコードされている。諸実施形態では、該ポリペプチドがリンカーを介して接続されている。諸実施形態では、該ポリペプチドが化学的リンカーを介して接続されている。
【０１１８】
諸実施形態では、該抗体領域が複数の軽鎖可変ドメインと複数の重鎖可変ドメインを含むものである。本明細書において提供する「軽鎖可変ドメイン」は、軽鎖可変（ＶＬ）領域を含むポリペプチドをいう。諸実施形態では、軽鎖可変ドメインが軽鎖可変（ＶＬ）領域である。本明細書において提供する「重鎖可変ドメイン」は、重鎖可変（ＶＨ）領域を含むポリペプチドをいう。諸実施形態では、重鎖可変ドメインが重鎖可変（ＶＨ）領域である。諸実施形態では、前記複数の軽鎖可変ドメインと前記複数の重鎖可変ドメインとの各々は化学的に異なる。該複数の軽鎖可変ドメインと該複数の重鎖可変ドメインとが化学的に異なる場合、該軽鎖可変ドメインと該重鎖可変ドメインとの各々は異なる抗原（エピトープ）に結合する。化学的に異なる軽鎖可変ドメインと異なる重鎖可変ドメインとに結合される抗原は、同じタンパク質の一部であってもよく、異なるタンパク質の一部であってもよい。諸実施形態では、抗原ががん細胞の一部を構成している。諸実施形態では、該抗体領域が第１の軽鎖可変ドメインと第１の重鎖可変ドメインおよび第２の軽鎖可変ドメインと第２の重鎖可変ドメインを含むものである。第１の重鎖可変ドメインと第１の軽鎖可変ドメインとは、第１のエピトープに結合する第１のパラトープを構成し、第２の重鎖可変ドメインと第２の軽鎖可変ドメインとは、第２のエピトープに結合する第２のパラトープを構成し、ここで、第１および第２のパラトープは独立して異なるものである。用語「パラトープ」は、抗体またはその断片の抗原結合部位をいう。
【０１１９】
諸実施形態では、該抗体領域が第１の軽鎖可変ドメインと第１の重鎖可変ドメイン、第２の軽鎖可変ドメインと第２の重鎖可変ドメイン、第３の軽鎖可変ドメインと第３の重鎖可変ドメイン、および第４（ｆｏｒｔｈ）の軽鎖可変ドメインと第４の重鎖可変ドメインを含むものである。第１の重鎖可変ドメインと第１の軽鎖可変ドメインは、第１のエピトープに結合する第１のパラトープを構成し、第２の重鎖可変ドメインと第２の軽鎖可変ドメインは、第２のエピトープに結合する第２のパラトープを構成し、第３の重鎖可変ドメインと第３の軽鎖可変ドメインは、第３のエピトープに結合する第３パラトープを構成し、第４の重鎖可変ドメインと第４の軽鎖可変ドメインは、第２のエピトープに結合する第４パラトープを構成し、ここで、第１、第２、第３および第４のパラトープは独立して異なるものである。
【０１２０】
諸実施形態では、第１、第２、第３および第４のパラトープが化学的リンカーを介して接続されている。諸実施形態では、化学的リンカーが共有結合性リンカー、非共有結合性リンカー、ペプチドリンカー（ペプチド部分を含むリンカー）、切断可能なペプチドリンカー、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレンまたは置換もしくは非置換のヘテロアリーレンまたはその任意の組合せである。従って、本明細書において提供する化学的リンカーは複数の化学的部分を含むものであってもよく、この場合、該複数の部分の各々は化学的に異なる。諸実施形態では、リンカーがペプチドリンカーである。諸実施形態では、該ペプチドリンカーが約５から約１５アミノ酸残基長を有するものである。
【０１２１】
諸実施形態では、該抗体領域が二重特異性抗体である。諸実施形態では、該抗体領域が三価の抗体である。諸実施形態では、該抗体領域が四価のＩｇＧである。諸実施形態では、該抗体領域が、Ｊａｋｏｂ  ＣＧ  ｅｔ  ａｌ．（ＭＡｂｓ．２０１３  Ｍａｙ  １；５（３）：３５８−３６３）およびＢｙｒｎｅ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．（Ｃｅｌｌ  Ｖｏｌｕｍｅ  ３１，Ｉｓｓｕｅ  １１，ｐ６２１−６３２，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２０１３）（これらは参照によりその全体があらゆる目的のために本明細書に組み込まれる）に記載のようなデュアル可変ドメイン免疫グロブリンである。
【０１２２】
諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：３１と配列番号：３２を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：３３と配列番号：３４を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：３５と配列番号：３６を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：３７と配列番号：３８を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：３９と配列番号：４０を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：４１と配列番号：４２を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：４３と配列番号：４４を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：４５と配列番号：４６を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：４７と配列番号：４８を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：４９と配列番号：５０を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：５１と配列番号：５２を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：５３と配列番号：５４を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：５５と配列番号：５６を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：５７と配列番号：５８を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：５９と配列番号：６０を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：６１と配列番号：６２を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：６３と配列番号：６４を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：６５と配列番号：６６を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：６７と配列番号：６８を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：６９と配列番号：７０を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：７１と配列番号：７２を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：７３と配列番号：７４を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：７５と配列番号：７６を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：７７と配列番号：７８を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：７９と配列番号：８０を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：８１と配列番号：８２を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：１１１と配列番号：１１２を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：１１３と配列番号：１１４を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：１１５と配列番号：１１６を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：１１７と配列番号：１１８を含むものである。諸実施形態では、該抗体領域が配列番号：１１９と配列番号：１２０を含むものである。
【０１２３】
本明細書において提供する「重鎖可変（ＶＨ）領域」は、抗体またはその断片の重鎖の可変領域を含むドメインである。同様に、本明細書において提供する「軽鎖可変（ＶＬ）領域」は、抗体またはその断片の軽鎖の可変領域を含むドメインである。諸実施形態では、重鎖可変（ＶＨ）領域が抗体の重鎖の可変領域である。諸実施形態では、重鎖可変（ＶＨ）領域が抗体断片の重鎖の可変領域である。諸実施形態では、重鎖可変（ＶＨ）領域がＦａｂの重鎖の可変領域である。諸実施形態では、軽鎖可変（ＶＬ）領域が抗体の軽鎖の可変領域である。諸実施形態では、軽鎖可変（ＶＬ）領域が抗体断片の軽鎖の可変領域である。諸実施形態では、軽鎖可変（ＶＬ）領域がＦａｂの軽鎖の可変領域である。
【０１２４】
諸実施形態では、該抗体領域がさらに重鎖定常領域（ＣＨ）と軽鎖定常領域（ＣＬ）を含むものである。諸実施形態では、重鎖定常領域（ＣＨ）が抗体またはその断片の重鎖の定常領域である。諸実施形態では、軽鎖定常領域（ＣＬ）が抗体またはその断片の軽鎖の定常領域である。諸実施形態では、重鎖定常領域（ＣＨ）がＦａｂの定常領域である。諸実施形態では、軽鎖定常領域（ＣＬ）がＦａｂの軽鎖の定常領域である。諸実施形態では、重鎖定常領域（ＣＨ）がＦ（ａｂ）’２二量体の定常領域である。諸実施形態では、軽鎖定常領域（ＣＬ）がＦ（ａｂ）’２二量体の軽鎖の定常領域である。諸実施形態では、該抗体領域がＦｃドメインである。諸実施形態では、該抗体領域がヒト化抗体領域である。諸実施形態では、該抗体領域がヒト化マウス抗体領域である。諸実施形態では、該抗体領域はｓｃＦＶ抗体領域を含まない。該抗体領域がｓｃＦｖ抗体領域を含まない場合、該抗体領域は、短鎖リンカーペプチドで接続された免疫グロブリンの重鎖（ＶＨ）と軽鎖（ＶＬ）の可変領域の融合タンパク質を含まない。
【０１２５】
「中心空洞」は、Ｆａｂの３次元構造に関して、重鎖および軽鎖の可変領域と定常領域の部分によって内表面が構成（ｌｉｎｅ）されているＦａｂの内部空洞をいい、該空洞内の孔の内表面を構成するアミノ酸を含む。諸実施形態では、該孔を含む中心空洞は、例えば、図４Ａに示すような構造、または図４Ａと同様の構造を有する。諸実施形態では、該抗体領域がＦａｂを含むものである場合、中心空洞は、従って、ＶＨ、ＶＬ、ＣＨ１およびＣＬ領域の残基によって内表面が構成される。中心空洞は抗原結合部位を含まない。従って、諸実施形態では、中心空洞に結合する該化合物は、抗体領域とエピトープとの結合に影響（例えば、測定可能な影響）を及ぼさない。換言すると、諸実施形態では、この部位の占有は抗原結合に影響しない。諸実施形態では、中心空洞は、諸実施形態を含む本明細書において提供するペプチジル部分を含む化合物（例えば、メディトープ）（例えば、式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチド）と相互作用し得るアミノ酸残基によって内表面が構成されている。ペプチジル部分を含む化合物（例えば、メディトープ）と相互作用し得るアミノ酸残基が、該ペプチド結合部位（本明細書においてメディトープ結合部位とも称する）の一部を形成していてもよい（ｍａｙ  ｆｒｏｍ）。該ペプチド結合部位を任意の適切な抗体内に挿入し、それにより、該ペプチド結合部位を有する抗体または抗体領域を形成してもよい（本明細書においてメディトープ使用可能抗体またはメディトープ使用可能抗体領域とも称する）。
【０１２６】
諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置８３に対応する位置の残基、カバット方式による位置３０に対応する位置の残基またはカバット方式による位置５２に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置４０に対応する位置の残基、カバット方式による位置４１に対応する位置の残基、カバット方式による位置３０に対応する位置の残基、カバット方式による位置５２に対応する位置の残基、カバット方式による位置８３に対応する位置の残基またはカバット方式による位置８５に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置４０に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置４１に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置３０に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置５２に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット８３に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置８５に対応する位置の残基を含む。
【０１２７】
諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置３０に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、カバット方式による位置３０に対応する位置の残基が負電荷を有するアミノ酸残基である。諸実施形態では、カバット方式による位置３０に対応する位置の残基がアスパラギン酸である。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置５２に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、カバット方式による位置５２に対応する位置の残基が負電荷を有するアミノ酸残基である。諸実施形態では、カバット方式による位置５２に対応する位置の残基がアスパラギン酸である。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置８３に対応する位置の残基を含む。諸実施形態では、カバット方式による位置８３に対応する位置の残基が負電荷を有するアミノ酸残基である。諸実施形態では、カバット方式による位置８３に対応する位置の残基がグルタミン酸である。諸実施形態では、カバット方式による位置８３に対応する位置の残基がイソロイシンである。諸実施形態では、中心空洞の内表面を構成するアミノ酸残基がカバット方式による位置８５に対応する位置の残基を含む。
【０１２８】
諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｇｌｎ３８、Ｔｈｒ４０、Ｇｌｎ４１、Ｇｌｙ４２、Ｓｅｒ４３、Ａｓｐ  ５２、Ａｓｐ８５、Ｉｌｅ８３、Ｔｙｒ８７、Ｌｙｓ１０３、Ｖａｌ１６３、Ｔｈｒ１６４またはＧｌｕ１６５に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。本明細書において提供する「軽鎖残基」は、抗体または抗体断片の軽鎖の一部を形成している残基をいう。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｇｌｎ３８に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｔｈｒ４０に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている  諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｇｌｎ４１に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｇｌｙ４２に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｓｅｒ４３に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ａｓｐ８５に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｔｙｒ８７に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｌｙｓ１０３に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｖａｌ１６３に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｔｈｒ１６４に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている  諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｇｌｕ１６５に対応する位置の軽鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。
【０１２９】
諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ａｓｐ  ３０、Ｇｌｎ３９、Ｐｒｏ４０、Ｔｈｒ９１、Ａｌａ９２、Ｉｌｅ９３、Ｔｙｒ９５、Ｇｌｎ１１２、Ｌｅｕ１１５、Ｇｌｕ１５５、Ｐｒｏ１５６、Ｐｒｏ１７４、Ａｌａ１７５またはＴｙｒ１８３に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。本明細書において提供する「重鎖残基」は、抗体または抗体断片の重鎖の一部を形成している残基をいう。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｇｌｎ３９に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｐｒｏ４０に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｔｈｒ９１に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ａｌａ９２に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｉｌｅ９３に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｔｙｒ９５に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｇｌｎ１１２に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｌｅｕ１１５に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｇｌｕ１５５に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｐｒｏ１５６に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｐｒｏ１７４に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ａｌａ１７５に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。諸実施形態では、中心空洞は、カバット方式による位置Ｔｙｒ１８３に対応する位置の重鎖残基によって内表面が構成（形成）されている。
【０１３０】
本明細書において提供する中心空洞は、フレームワーク領域のアミノ酸（ＦＲ）残基を含むペプチド結合部位（本明細書においてメディトープ結合部位とも称する）を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は重鎖または軽鎖のＣＤＲ残基を含まない。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は重鎖または軽鎖のＦＲ残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は重鎖および軽鎖のＦＲ残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は、カバット方式による位置８３に対応する位置の残基、カバット方式による位置３０に対応する位置の残基またはカバット方式による位置５２に対応する位置の残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は、カバット方式による位置４０に対応する位置の残基、カバット方式による位置４１に対応する位置の残基、カバット方式による位置３０に対応する位置の残基、カバット方式による位置５２に対応する位置の残基、カバット方式による位置８３に対応する位置の残基またはカバット方式による位置８５に対応する位置の残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は、カバット方式による位置４０に対応する位置の残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は、カバット方式による位置４１に対応する位置の残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は、カバット方式による位置３０に対応する位置の残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は、カバット方式による位置５２に対応する位置の残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は、カバット方式による位置８３に対応する位置の残基を含んでいる。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は、カバット方式による位置８５に対応する位置の残基を含んでいる。諸実施形態では、ペプチド結合部位を形成している残基は、公開米国特許出願ＵＳ２０１２０３０１４００Ａ１（これは、参照によりその全体があらゆる目的のために本明細書に組み込まれる）に記載されたものである。
【０１３１】
諸実施形態では、中心空洞は、ペプチジル部分を含む化合物に結合し得るアミノ酸残基によって内表面が構成されている。従って、諸実施形態では、本明細書において提供するペプチド結合部位はペプチジル部分を含む化合物に結合し得るものである。諸実施形態では、該ペプチド結合部位は該ペプチジル部分に結合し得るものである。諸実施形態では、本明細書において提供するペプチド結合部位がペプチジル部分を含む化合物に結合されている。諸実施形態では、該ペプチド結合部位が該ペプチジル部分に結合されている。諸実施形態では、該ペプチジル部分は、公開米国特許出願ＵＳ２０１２０３０１４００Ａ１およびＡｖｅｒｙ  ｅｔ  ａｌ．２０１５（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ５：７８１７）（これらは、参照によりその全体があらゆる目的のために本明細書に組み込まれる）に記載の部分である。
【０１３２】
諸実施形態では、該ペプチド結合部位に結合する化合物がペプチドであるか、またはペプチジル部分を含むものである。諸実施形態では、該化合物が置換型ペプチドである。諸実施形態では、該ペプチドが５から１６アミノ酸長である。諸実施形態では、該化合物が置換型ペプチジル部分を含むものである。諸実施形態では、該ペプチジル部分が５から１６アミノ酸長である。本明細書において提供するペプチドまたはペプチジル部分は「メディトープ」とも称され得る。諸実施形態では、該ペプチドまたはペプチジル部分は、式：
Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２（Ｉ）
を有するものである。式（Ｉ）の配列がペプチジル部分である場合、当業者は、該ペプチジル部分は該化合物の残部に１つ以上の結合点で結合していることがすぐに理解されよう。式（Ｉ）において、Ｘ１はＣｙｓ、Ｇｌｙ、β−アラニン、２，３−ジアミノプロピオン酸、β−アジドアラニンであるかまたは存在せず；Ｘ２はＧｌｎであるかまたは存在せず；Ｘ３はＰｈｅ、Ｔｙｒ、β−β’−ジフェニル−Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、２−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニン、３−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニン、４−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニン、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、修飾Ｐｈｅ、水和性カルボニル含有残基またはボロン酸含有残基であり；Ｘ４はＡｓｐまたはＡｓｎであり；Ｘ５はＬｅｕ；β−β’−ジフェニル−Ａｌａ、Ｐｈｅ、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシンの非天然アナログ、水和性カルボニル含有残基またはボロン酸含有残基であり；Ｘ６はＳｅｒまたはＣｙｓであり；Ｘ７はＴｈｒ、ＳｅｒまたはＣｙｓであり；Ｘ８はＡｒｇ、修飾（置換型）Ａｒｇ、水和性カルボニルまたはボロン酸含有残基であり；Ｘ９はＡｒｇまたはＡｌａであり；Ｘ１０はＬｅｕ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、β−β’−ジフェニル−Ａｌａ、Ｐｈｅ、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシンの非天然アナログ、水和性カルボニル含有残基またはボロン酸含有残基であり；Ｘ１１はＬｙｓであり；Ｘ１２はＣｙｓ、Ｇｌｙ、７−アミノヘプタン酸、β−アラニン、ジアミノプロピオン酸、プロパギルグリシン、イソアスパラギン酸であるかまたは存在せず；ここで、修飾Ｐｈｅは、１個以上のハロゲンがフェニル環内に組み込まれたＰｈｅであり、修飾Ａｒｇは、式：
【０１３３】
【化１】
2018517407.tif 000003
の構造を有するものである。式（ＩＡ）において、Ｒ、Ｒ’およびＲ”は独立して、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリールまたはＮＨＲ’’’であり、Ｒ’’’は置換または非置換のアルキル、置換または非置換のアリール、置換または非置換のヘテロアリールである。
【０１３４】
諸実施形態では、該ペプチドが環状ペプチドである。諸実施形態では、該ペプチジル部分が環状ペプチジル部分である。諸実施形態では、該ペプチドまたはペプチジル部分が、ジスルフィド結合、チオエーテル結合、ラクタム結合、付加環化を含むものである。諸実施形態では、環状ペプチドまたは環状ペプチジル部分の環状部分が、Ｘ１とＸ１２との間、Ｘ１とＸ１１との間、Ｘ３とＸ１１との間、Ｘ４とＸ１１との間またはＸ２とＸ１２との間の結合によって形成されている。諸実施形態では、非天然アミノ酸がβ−β’−ジフェニル−Ａｌａ、分枝のアルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のヘテロアリールである。諸実施形態では、該１個以上のハロゲンの各々がオルト−、メタ−またはパラ−ブロモフェニル置換基である。
【０１３５】
諸実施形態では、該ペプチドまたはペプチジル部分は、以下の式を有するものである。
【０１３６】
【化２】
2018517407.tif 000004
【０１３７】
式（ＩＩ）において、Ｒ３は水素、Ｒ３Ａ置換もしくは非置換のアリールであり、ここで、Ｒ３Ａは水素、ハロゲンまたは非置換のＣ１−４アルキルである。Ｒ３’は水素、Ｒ３Ａ’置換もしくは非置換のアリールであり、ここで、Ｒ３Ａ’は水素、ハロゲンまたは非置換のＣ１−４アルキルである。Ｒ５はＲ５Ａ置換もしくは非置換のＣ１−８（例えば、Ｃ１−４）アルキルである。Ｒ５Ａはオキソ、アセタール、ケタール、−Ｂ（ＯＨ）２、ボロン酸エステル、ホスホン酸エステル、オルトエステル、−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５Ａ’、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ２Ｒ５Ａ’，−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯＮＨ２またはＲ５Ａ’’置換もしくは非置換のアリール、Ｒ５Ａ’’置換もしくは非置換のヘテロアリール（例えば、ナフチル、イミダゾール、インドール）であり、ここで、Ｒ５Ａ’は置換または非置換のＣ１−４アルキルであり、Ｒ５Ａ’’は−ＯＨ、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードである。Ｒ６は−Ｌ６’ＯＨまたは−Ｌ６’ＳＨであり、ここで、Ｌ６’は置換または非置換のＣ１−４アルキレンである。Ｒ７は−Ｌ７’ＯＨまたは−Ｌ７’ＳＨであり、ここで、Ｌ７’は置換または非置換のＣ１−４アルキルである。符号ｍは０、１、２、３、４または５である。
【０１３８】
式（ＩＩ）において、Ｒ８は−ＯＨ、−ＮＲａＲｂ、−Ｎ（Ｒｃ）Ｃ（Ｏ）Ｒｅまたは−Ｎ（Ｒｃ）Ｃ（＝ＮＲｄ）Ｒｅである。ＲａはＨである。ＲｂはＨであるか、または場合により、オキソ、アセタールおよびケタール、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＳＨ、ボロン酸エステル、ホスホン酸エステル、オルトエステル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ２Ｈまたは−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル基からなる群より選択される１つ以上の置換基で置換されたＣ１−８アルキルである。ＲｃはＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、分枝のアルキルまたはアリールである。ＲｄはＨまたはＣ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、Ｃ３−８シクロアルキル、分枝のアルキルもしくはアリール基であり、各々は場合により、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、ハロゲン、オキソ、アセタール、ケタール、−Ｂ（ＯＨ）２、ボロン酸エステル、ホスホン酸エステル、オルトエステル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル基からなる群より選択される１つ以上の置換基で置換されている。ＲｅはＨ、−ＮＨＲｄであるか；またはＣ１−１２アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ２−１２アルケニル、Ｃ２−８アルキニルもしくはアリール基であり、各々は場合により、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、オキソ、Ｃ２−４アセタール、Ｃ２−４ケタール、−Ｂ（ＯＨ）２、ボロン酸エステル、ホスホン酸エステル、オルトエステル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ２Ｃ１−４アルキルおよび−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル基からなる群より選択される１つ以上の置換基で置換されている。
【０１３９】
式（ＩＩ）において、Ｒ９は置換または非置換のＣ１−４アルキルである。Ｒ１０はＲ１０Ａ置換または非置換のＣ１−８アルキルであり、ここで、Ｒ１０Ａはオキソ、アセタール、ケタール、−Ｂ（ＯＨ）２、ボロン酸エステル、ホスホン酸エステル、オルトエステル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯＮＨ２、Ｒ１０Ｂ置換もしくは非置換のフェニル、Ｒ１０Ｂ置換もしくは非置換のナフチル、Ｒ１０Ｂ置換もしくは非置換のイミダゾリルまたはＲ１０Ｂ置換もしくは非置換のインドリルであり、ここで、Ｒ１０Ｂは−ＯＨまたはハロゲンである。符号ｎは０または１である。符号ｐは０または１である。
【０１４０】
式（ＩＩ）において、ＸはＲＸ置換または非置換のＣ１−８アルキレン、Ｒｘ置換または非置換のＣ２−８アルケニレンであり、Ｒｘはオキソ、−Ｃ（Ｏ）、−ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）または−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒｙであり、ここで、該アルケニレンの１個の炭素は場合により、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ、５員のヘテロアリーレンまたは−Ｓ−Ｓで置き換えられており、Ｒｙは−Ｃ１−４アルキル、−ＣＨ（Ｒｚ）Ｃ（Ｏ）または−ＣＨ（Ｒｚ）ＣＯ２Ｈであり、ここで、Ｒｚは−ＨまたはＲｚ’置換もしくは非置換の−Ｃ１−４アルキルであり、ここで、Ｒｚ’は−ＯＨ、−ＳＨまたは−ＮＨ２である。式（Ｉ）または（ＩＩ）は、医薬として許容される適切なあらゆる塩を包含している。ペプチド結合部位（メディトープ結合部位）およびペプチド（メディトープ）の概念に関するさらなる情報は国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０５５６５６号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０５３８８０号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０３２９３８号および米国特許出願ＵＳ１４／４５３，５８６号において知得され得、これらは、その全体があらゆる目的のために本明細書に組み込まれる。
【０１４１】
本明細書において提供する化合物としては、該ペプチジル部分に結合させた治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤（本明細書において検出可能な薬剤とも称する）も挙げられ得る。諸実施形態では、該化合物を治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤にコンジュゲートさせる。諸実施形態では、該ペプチジル部分（例えば、式（Ｉ）または（ＩＩ）のペプチド）を治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤にコンジュゲートさせる。諸実施形態では、該抗体領域を治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤にコンジュゲートさせる。
【０１４２】
治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤を、化学的リンカーを介して、諸実施形態を含む本明細書において提供する該化合物（例えば、ペプチジル部分）および／または抗体領域に結合させてもよい。諸実施形態では、化学的リンカーは共有結合性リンカー、非共有結合性リンカー、ペプチドリンカー（ペプチド部分を含むリンカー）、切断可能なペプチドリンカー、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のヘテロシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリーレンまたは置換もしくは非置換のヘテロアリーレンまたはその任意の組合せである。
【０１４３】
本明細書において提供する化学的リンカーは複数の化学的部分を含むものであってもよく、その場合、該複数の部分の各々は化学的に異なる。諸実施形態では、治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤が該化合物に非共有結合性または共有結合性リンカーを介して結合している。諸実施形態では、治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤が該ペプチジル部分に非共有結合性または共有結合性リンカーを介して結合している。諸実施形態では、治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤が該抗体領域に非共有結合性または共有結合性リンカーを介して結合している。典型的には、リンカーは本明細書に記載の共有結合性リンカーであり得、コンジュゲート（例えば「クリック」）ケミストリーによって形成され得る。リンカーはさらに、本明細書に記載の切断可能なペプチドリンカーであってもよい。治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤が、諸実施形態を含む本明細書において提供する該化合物、ペプチジル部分および／または抗体領域の一部を形成している場合（例えば、共有結合によって）、該治療用薬剤、診断用薬剤または検出可能な薬剤は、それぞれ、「治療性部分」、「診断性部分」または「検出可能な部分」と称され得る。諸実施形態では、該ペプチド部分（メディトープ）は反応性アミン官能部（例えば、Ｌｙｓｌ  ｌ）を含有しており、これは、メディトープ（ペプチジル部分）と、例えば、構造骨格もしくはリンカーとのコンジュゲーションまたは機能性部分、例えば、本明細書に記載の診断用（例えばイメージング用）薬剤もしくは治療性部分とのコンジュゲーションに使用される。諸実施形態では、チオール官能部がメディトープ（ペプチジル部分）上の任意の適切な位置に導入され、イメージング（ｉｍａｇｉｎｉｎｇ）剤、他のタンパク質およびペプチド、金属キレート剤、ｓｉＲＮＡ、ナノ粒子および細胞毒性薬物を含有している試薬を用いて選択的に修飾される。治療性部分または診断性部分と本明細書において提供するペプチジル部分とのカップリングは、当該技術分野で周知であり、例えばＷＯ２０１３０５５４０４Ａ１（これは、参照によりあらゆる目的のためにその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されたペプチドケミストリー方法論を用いて行なうことができる。
【０１４４】
本明細書において提供する治療性部分としては、限定されないが、ペプチド、タンパク質、核酸、核酸アナログ、小分子、抗体、酵素、プロドラッグ、細胞毒性剤（例えば、毒素）が挙げられ得、限定されないが、リシン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、タキソール、臭化エチジウム、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ジヒドロキシアントラシンジオン、アクチノマイシンＤ、ジフテリア毒素、緑膿菌外毒素（ＰＥ）Ａ、ＰＥ４０、アブリンおよびグルココルチコイドが挙げられる。諸実施形態では、治療性部分が本明細書に記載の抗がん剤または化学療法剤である。諸実施形態では、治療性部分が核酸部分、ペプチド部分または小分子薬物部分である。諸実施形態では、治療性部分が核酸部分である。諸実施形態では、治療性部分が抗体部分である。諸実施形態では、治療性部分がペプチド部分である。諸実施形態では、治療性部分が小分子薬物部分である。諸実施形態では、治療性部分がヌクレアーゼである。諸実施形態では、治療性部分が免疫賦活薬である。諸実施形態では、治療性部分が毒素である。諸実施形態では、治療性部分がヌクレアーゼである。
【０１４５】
本明細書において提供する該化合物、ペプチジル部分または抗体領域は、イメージング部分または検出可能な部分を含むものであってもよい。諸実施形態では、検出可能な部分が該化合物に共有結合性リンカーを介して接続されている。諸実施形態では、検出可能な部分が該抗体領域に共有結合性リンカーを介して接続されている。諸実施形態では、検出可能な部分が該ペプチジル部分に共有結合性リンカーを介して接続されている。本明細書において提供する「イメージング部分または検出可能な部分」は、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、化学的または他の物理的手段によって検出可能な一価の化合物である。諸実施形態では、イメージング部分は該化合物に共有結合により結合されている。諸実施形態では、イメージング部分は該抗体領域に共有結合により結合されている。諸実施形態では、イメージング部分は該ペプチジル部分に共有結合により結合されている。例示的なイメージング部分としては、限定されないが、３２Ｐ、放射性核種、陽電子放出性同位体、蛍光色素、フルオロフォア、抗体、生物発光分子、化学発光分子、光活性分子、金属、高電子密度試薬、酵素（例えば、ＥＬＩＳＡに一般的に使用されるようなもの）、磁性造影剤、量子ドット、ナノ粒子、ビオチン、ジゴキシゲニン、ハプテンおよびタンパク質、または、例えば標的ペプチドと特異的に反応性のペプチドもしくは抗体に放射性標識を組み込むことによって検出可能となり得る他の存在体が、挙げられる。抗体を該部分にコンジュゲートさせるための当該技術分野で公知の任意の方法が使用され得、例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １９９６，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏに記載の方法が使用される。例示的なフルオロフォアとしては、フルオレセイン、ローダミン、ＧＦＰ、クマリン、ＦＩＴＣ、ＡｌＥｘａ  ｆｌｕｏｒ、Ｃｙ３、Ｃｙ５、ＢＯＤＩＰＹおよびシアニン色素が挙げられる。例示的な放射性核種としては、フッ素−１８、ガリウム−６８および銅−６４が挙げられる。例示的な磁性造影剤としては、ガドリニウム、酸化鉄および鉄白金ならびにマンガンが挙げられる。諸実施形態では、イメージング部分が生物発光分子である。諸実施形態では、イメージング部分が光活性分子である。諸実施形態では、イメージング部分が金属である。諸実施形態では、イメージング部分がナノ粒子である。
【０１４６】
本明細書において提供する膜貫通ドメインは、生物学的膜の一部を形成しているポリペプチドをいう。本明細書において提供する膜貫通ドメインは、生物学的膜（例えば、細胞膜）を、該膜の片側から該膜の反対側へと貫通し得るものである。諸実施形態では、膜貫通ドメインは細胞膜の細胞内側から細胞外側に貫通しているものである。膜貫通ドメインは無極性の疎水性残基を含むものであってもよく、これは、生物学的膜（例えば、Ｔ細胞の細胞膜）において、諸実施形態を含む本明細書において提供するタンパク質をアンカリングする。諸実施形態を含む本明細書において提供するタンパク質をアンカリングし得る任意の膜貫通ドメインが想定される。諸実施形態では、膜貫通ドメインがＬ−セレクチンである。本明細書において提供する「Ｌ−セレクチン」という用語は、任意の組換え形態もしくは天然に存在する形態のＬ−セレクチンタンパク質（ＣＤ６２Ｌとしても知られている）、またはＬ−セレクチン活性（例えば、Ｌ−セレクチンと比較して少なくとも５０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％以内の活性）を維持しているそのバリアントもしくはホモログを包含している。諸実施形態では、該バリアントまたはホモログは、配列全体または該配列の一部分（例えば、５０、１００、１５０または２００個の連続するアミノ酸部分）にわたり、天然に存在するＬ−セレクチンポリペプチドと比較して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するものである。諸実施形態では、Ｌ−セレクチンは、ＮＣＢＩ配列参照ＧＩ：２６２２０６３１５によって特定されるタンパク質、そのホモログまたは機能性断片である。膜貫通ドメインの非限定的な例としては、ＣＤ８、ＣＤ４またはＣＤ３−ゼータの膜貫通ドメインが挙げられる。
【０１４７】
諸実施形態では、膜貫通ドメインがＣＤ２８膜貫通ドメインである。本明細書において提供する「ＣＤ２８膜貫通ドメイン」という用語は、ＣＤ２８の膜貫通ドメインの組換え形態もしくは天然に存在する形態、またはＣＤ２８膜貫通ドメイン活性（例えば、ＣＤ２８膜貫通ドメインと比較して少なくとも５０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％以内の活性）を維持しているそのバリアントもしくはホモログのいずれかを包含している。一部の態様では、該バリアントまたはホモログは、配列全体または該配列の一部分（例えば、５０、１００、１５０または２００個の連続するアミノ酸部分）にわたり、天然に存在するＣＤ２８膜貫通ドメインポリペプチドと比較して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のアミノ酸配列同一性を有するものである。諸実施形態では、ＣＤ２８膜貫通ドメインは、配列番号：２２、配列番号：２によって特定されるタンパク質、そのホモログまたは機能性断片である。諸実施形態では、ＣＤ２８は、ＮＣＢＩ配列参照ＧＩ：３４０５４５５０６によって特定されるタンパク質、そのホモログまたは機能性断片である。
【０１４８】
諸実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７、配列番号：８、配列番号：９、配列番号：１０によって特定されるタンパク質、そのホモログまたは機能性断片である。
【０１４９】
諸実施形態では、本明細書において提供する単離された核酸は、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインをコードしている細胞内Ｔ細胞シグナル伝達配列を含むものである。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである。本明細書において提供する「細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメイン」は、諸実施形態を含む本明細書において提供する抗体領域に対する抗原の結合に応答して一次シグナル伝達をもたらし得るアミノ酸配列を含むものである。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインのシグナル伝達により、これを発現しているＴ細胞の活性化がもたらされる。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインのシグナル伝達により、これを発現しているＴ細胞の増殖（細胞分裂）がもたらされる。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインのシグナル伝達は、活性化Ｔ細胞に特徴的であることが当該技術分野で知られているタンパク質（例えば、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＣＤ２８、ＣＤ６９）の前記Ｔ細胞による発現をもたらす。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインは、ヒトＣＤ３複合体のゼータ鎖のシグナル伝達ドメインを含む。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインが配列番号：１１である。
【０１５０】
諸実施形態では、本明細書において提供する単離された核酸は、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインをコードしている細胞内共刺激シグナル伝達配列を含むものである。本明細書において提供する「細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン」は、諸実施形態を含む本明細書において提供する抗体領域に対する抗原の結合に応答して共刺激シグナル伝達をもたらし得るアミノ酸配列を含むものである。諸実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインのシグナル伝達により、サイトカイン産生およびこれを発現しているＴ細胞の増殖がもたらされる。諸実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインがＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである。諸実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインがＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはその任意の組合せを含む。配列および受託番号を含む例示的な細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを表２に示す。諸実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５または配列番号：１６によって特定されるタンパク質を含むものである。諸実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５または配列番号：１６である。
【０１５１】
諸実施形態では、本明細書において提供する単離された核酸は、リンカードメインをコードしているリンカー配列を含むものである。諸実施形態では、リンカードメインが該膜貫通ドメインと該細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している。諸実施形態では、リンカードメインが該細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと該細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとの間に存在している。諸実施形態では、リンカードメインが配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含むものである。
【０１５２】
諸実施形態では、本明細書において提供する単離された核酸は、スペーサー領域をコードしているスペーサー配列を含むものである。諸実施形態では、スペーサー領域が該膜貫通ドメインと該抗体領域との間に存在している。本明細書において提供する「スペーサー領域」は、該抗体領域を該膜貫通ドメインと接続しているポリペプチドである。諸実施形態では、スペーサー領域は、該重鎖定常領域を該膜貫通ドメインと接続しているものである。諸実施形態では、抗原に対する該抗体領域の結合親和性は、スペーサー領域がない場合と比較した高くなる。諸実施形態では、スペーサー領域が存在する場合、抗体領域と抗原との間の立体障害が低減される。
【０１５３】
諸実施形態では、スペーサー領域がＦｃ領域を含む。本明細書において提供する組成物および方法で想定されるスペーサー領域の例としては、限定されないが、免疫グロブリン分子またはその断片（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）およびＦｃ受容体結合に影響する変異を含む免疫グロブリン分子またはその断片（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）が挙げられる。諸実施形態では、スペーサー領域がＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ４）の断片であり、前記断片はＣＨ２ドメインの欠失を含むものである。スペーサー領域はペプチドリンカーであってもよい。諸実施形態では、スペーサー領域がセリン−グリシンリンカーである。諸実施形態では、スペーサー領域が配列ＧＧＳＧを有するものである。諸実施形態では、スペーサー領域が配列ＧＳＧＳＧＳＧＳを有するものである。諸実施形態では、スペーサー領域が少なくとも４アミノ酸長である。諸実施形態では、スペーサー領域が約４アミノ酸長である。諸実施形態では、スペーサー領域が４から２５０アミノ酸長である。スペーサー領域は、本明細書において提供するタンパク質のインビボ（例えば、血漿中）半減期を長くし得る残基を含むものであってもよい。諸実施形態では、スペーサー領域は１０アミノ酸長である。諸実施形態では、スペーサー領域は２２９アミノ酸長である。諸実施形態では、スペーサー領域はＧＧＧＳＳＧＧＧＳＧである。スペーサー領域は「ＰＡＳ化（ｐａｓｙｌａｔｅ）され」ていてもよい。用語「ＰＡＳ化される」または「ＰＡＳ化（ｐａｓｙｌａｔｉｏｎ）」は、その通常の意味で用いており、プロリン、アラニンおよびセリンの含量が高いため、可溶性が高い生物学的ポリマーを形成するアミノ酸配列をいう。従って、諸実施形態では、スペーサー領域が、合わせて約２００個のプロリン、アラニンおよびセリン残基を含むものである。諸実施形態では、スペーサー領域が、合わせて約１０から約２００個のプロリン、アラニンおよびセリン残基を含むものである。諸実施形態では、スペーサー領域が親水性残基を含むものである。諸実施形態では、該組換えタンパク質はスペーサー領域を含まない。諸実施形態では、該核酸は、スペーサー領域をコードしているスペーサー配列を含まない。諸実施形態では、該核酸は、ＷＯ２０１５１０５５２２Ａ１に記載のスペーサー領域をコードしているスペーサー配列を含まない。
【０１５４】
諸実施形態では、該核酸が、（ｉ）該タンパク質の重鎖ドメインをコードしている重鎖配列（該重鎖ドメインは重鎖可変ドメインと該膜貫通ドメインを含むものである）；と（ｉｉ）該タンパク質の軽鎖ドメインをコードしている軽鎖配列（該軽鎖ドメインは軽鎖可変ドメインを含むものである）とを含むものであり、該重鎖可変ドメインと該軽鎖可変ドメインが一緒になって該抗体領域の少なくとも一部分を形成している。
【０１５５】
諸実施形態では、該単離された核酸が、５’末端から３’末端に向かって：軽鎖配列、重鎖配列、膜貫通配列および細胞内共刺激シグナル伝達配列をコードしている。諸実施形態では、該単離された核酸が、５’末端から３’末端に向かって：重鎖配列、膜貫通配列、細胞内共刺激シグナル伝達配列および軽鎖配列をコードしている。諸実施形態では、該単離された核酸が、５’末端から３’末端に向かって：軽鎖配列、自己切断性ペプチジルリンカー配列、重鎖配列、スペーサー配列、膜貫通配列、細胞内共刺激シグナル伝達配列および細胞内Ｔ細胞シグナル伝達配列をコードしている。諸実施形態では、該単離された核酸が、５’末端から３’末端に向かって：重鎖配列、スペーサー配列、膜貫通配列、細胞内共刺激シグナル伝達配列、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達配列、自己切断性ペプチジルリンカー配列および軽鎖配列をコードしている。
【０１５６】
本明細書において提供する「軽鎖配列」は、本明細書において提供する軽鎖ドメインをコードしている核酸配列をいう。本明細書において提供する軽鎖ドメインとしては軽鎖可変（ＶＬ）領域および／または軽鎖定常領域（ＣＬ）が挙げられ得る。本明細書において提供する「重鎖配列」は、本明細書において提供する重鎖ドメインをコードしている核酸配列をいう。本明細書において提供する重鎖ドメインとしては、重鎖可変（ＶＨ）領域および／または重鎖定常領域（ＣＨ）が挙げられ得る。本明細書において提供する「膜貫通配列」は、本明細書において提供する膜貫通ドメインをコードしている核酸配列をいう。本明細書において提供する「細胞内Ｔ細胞シグナル伝達配列」は、本明細書において提供する細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインをコードしている核酸配列をいう。本明細書において提供する「細胞内共刺激シグナル伝達配列」は、本明細書において提供する細胞内共刺激シグナル伝達ドメインをコードしている核酸配列をいう。
【０１５７】
諸実施形態では、該単離された核酸は、重鎖配列と軽鎖配列との間の自己切断性ペプチジルドメインをコードしている自己切断性ペプチジル配列を含むものである。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列がＴ２Ａ配列である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列がＴ２Ａ配列または２Ａ配列である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列が口蹄疫ウイルス配列である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列がＰＶＫＱＬＬＮＦＤＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号：８３）である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列が馬鼻炎Ａウイルス配列である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列がＱＣＴＮＹＡＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号：８４）である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列が豚テスコウイルス１配列である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列がＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号：８５）である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列がＴｈｏｓｅａ  ａｓｉｇｎａウイルス配列である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルリンカー配列がＥＧＲＧＳＬＬＴＣＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号：８６）である。諸実施形態では、軽鎖配列が重鎖配列の３’側である。諸実施形態では、軽鎖配列が重鎖配列の５’側である。
【０１５８】
諸実施形態では、該抗体領域がセツキシマブメディトープ使用可能ドメイン、トラスツズマブメディトープ使用可能ドメイン、ペルツズマブメディトープ使用可能ドメイン、Ｍ５Ａメディトープ使用可能ドメインまたはリツキシマブメディトープ使用可能ドメインである。諸実施形態では、該抗体領域がヒト化セツキシマブメディトープ使用可能ドメインである。諸実施形態では、該抗体領域がヒト化リツキシマブメディトープ使用可能ドメインである。
【０１５９】
別の態様では、単離された核酸を提供する。該単離された核酸は、抗体重鎖の可変ドメインを含む第１部分および抗体軽鎖の可変ドメインと抗体軽鎖の定常ドメインを含む第２部分を含むタンパク質をコードしており、ここで、第１部分はさらに膜貫通ドメインを含むものである。諸実施形態では、該タンパク質は配列番号：１７によって特定されるタンパク質である。諸実施形態では、該タンパク質は配列番号：２８によって特定されるタンパク質である。諸実施形態では、該タンパク質は配列番号：９８によって特定されるタンパク質である。諸実施形態では、該タンパク質は配列番号：１１０によって特定されるタンパク質である。
【０１６０】
諸実施形態では、該タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：配列番号：１８のシグナル伝達ペプチド、配列番号：１９の重鎖ドメイン、配列番号：２０のヒンジ領域、配列番号：２１のスペーサー領域、配列番号：２２の膜貫通ドメイン、配列番号：２３の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、配列番号：２４のリンカードメイン、配列番号：２５の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメイン、配列番号：２６の第１自己切断性ペプチジルリンカードメイン、配列番号：２９のマーカーペプチド、配列番号：３０の第２自己切断性ペプチジルリンカードメイン、配列番号：１８のシグナル伝達ペプチドおよび配列番号：２７の軽鎖ドメインを含むものである。諸実施形態では、該タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：配列番号：１８のシグナル伝達ペプチド、配列番号：１９の重鎖ドメイン、配列番号：２０のヒンジ領域、配列番号：２１のスペーサー領域、配列番号：２２の膜貫通ドメイン、配列番号：２３の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、配列番号：２４のリンカードメイン、配列番号：２５の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメイン、配列番号：２６の第１自己切断性ペプチジルリンカードメイン、配列番号：２９のマーカーペプチド、配列番号：３０の第２自己切断性ペプチジルリンカードメイン、配列番号：１８のシグナル伝達ペプチドまたは配列番号：２７の軽鎖ドメインを含むものである。諸実施形態では、該タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：配列番号：１８のシグナル伝達ペプチド、配列番号：１９の重鎖ドメイン、配列番号：２０のヒンジ領域、配列番号：２１のスペーサー領域、配列番号：２２の膜貫通ドメイン、配列番号：２３の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、配列番号：２４のリンカードメイン、配列番号：２５の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメイン、配列番号：２６の自己切断性ペプチジルリンカードメイン、配列番号：１８のシグナル伝達ペプチドおよび配列番号：２７の軽鎖ドメインを含むものである。諸実施形態では、該タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：配列番号：１８のシグナル伝達ペプチド、配列番号：１９の重鎖ドメイン、配列番号：２０のヒンジ領域、配列番号：２１のスペーサー領域、配列番号：２２の膜貫通ドメイン、配列番号：２３の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、配列番号：２４のリンカードメイン、配列番号：２５の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメイン、配列番号：２６の自己切断性ペプチジルリンカードメイン、配列番号：１８のシグナル伝達ペプチドまたは配列番号：２７の軽鎖ドメインを含むものである。
【０１６１】
用語「シグナル伝達ペプチド」は、本明細書で用いる場合、当該技術分野におけるその通常の意味に従って用いており、約５から３０アミノ酸長を有するペプチドをいう。シグナル伝達ペプチドは、分泌経路の一部を構成する新たに合成されたタンパク質のＮ末端に存在させる。分泌経路のタンパク質としては、限定されないが、特定の細胞小器官（小胞体、ゴルジ体もしくはエンドソーム）の内部に存在しているか、細胞から分泌されたものであるか、または細胞膜内に挿入されたものであるかのいずれかであるタンパク質が挙げられる。諸実施形態では、シグナル伝達ペプチドはタンパク質の膜貫通ドメインの一部を形成している。
【０１６２】
用語「重鎖ドメイン」は、本明細書で用いる場合、当該技術分野におけるその通常の意味に従って用いており、重鎖可変（ＶＨ）領域と重鎖定常領域（ＣＨ）を含むポリペプチドをいう。用語「軽鎖ドメイン」は、本明細書で用いる場合、当該技術分野におけるその通常の意味に従って用いており、軽鎖可変（ＶＬ）領域と軽鎖定常領域（ＣＬ）を含むポリペプチドをいう。
【０１６３】
諸実施形態では、該タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：配列番号：８７のシグナル伝達ペプチド、配列番号：８８の軽鎖ドメイン、配列番号：８９の自己切断性ペプチジルリンカードメイン、配列番号：９０の重鎖ドメイン、配列番号：９１のヒンジ領域、配列番号：９２の第１スペーサー領域、配列番号：９３の第２スペーサー領域、配列番号：９４の膜貫通ドメイン、配列番号：９５の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、配列番号：９６のリンカードメインおよび配列番号：９７の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含むものである。諸実施形態では、該タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：配列番号：８７のシグナル伝達ペプチド、配列番号：８８の軽鎖ドメイン、配列番号：８９の自己切断性ペプチジルリンカードメイン、配列番号：９０の重鎖ドメイン、配列番号：９１のヒンジ領域、配列番号：９２の第１スペーサー領域、配列番号：９３の第２スペーサー領域、配列番号：９４の膜貫通ドメイン、配列番号：９５の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、配列番号：９６のリンカードメインまたは配列番号：９７の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含むものである。
【０１６４】
諸実施形態では、該タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：配列番号：９９のシグナル伝達ペプチド、配列番号：１００の重鎖ドメイン、配列番号：１０１のヒンジ領域、配列番号：１０２の第１スペーサー領域、配列番号：１０３の第２スペーサー領域、配列番号：１０４の膜貫通ドメイン、配列番号：１０５の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、配列番号：１０６のリンカードメインおよび配列番号：１０７の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメイン、配列番号：１０８の自己切断性ペプチジルリンカードメインならびに配列番号：１０９の軽鎖ドメインを含むものである。諸実施形態では、該タンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって：配列番号：９９のシグナル伝達ペプチド、配列番号：１００の重鎖ドメイン、配列番号：１０１のヒンジ領域、配列番号：１０２の第１スペーサー領域、配列番号：１０３の第２スペーサー領域、配列番号：１０４の膜貫通ドメイン、配列番号：１０５の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、配列番号：１０６のリンカードメインおよび配列番号：１０７の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメイン、配列番号：１０８の自己切断性ペプチジルリンカードメインまたは配列番号：１０９の軽鎖ドメインを含むものである。
【０１６５】
諸実施形態では、第１部分がさらに細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含むものである。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインが配列番号：１１である。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである。諸実施形態では、第１部分が細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含むものである。諸実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインがＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである。諸実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５または配列番号：１６である。
【０１６６】
諸実施形態では、第１部分がリンカードメインを含むものである。諸実施形態では、リンカードメインが該膜貫通ドメインと該細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している。諸実施形態では、リンカードメインが該細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと該細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとの間に存在している。諸実施形態では、リンカードメインが配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含むものである。
【０１６７】
諸実施形態では、第１部分がＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとを含むものである。諸実施形態では、第１部分が、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって：該重鎖の可変ドメイン、重鎖定常ドメイン、該膜貫通ドメイン、該ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインおよび細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含むものである。
【０１６８】
諸実施形態では、本明細書において提供する単離された核酸分子は、重鎖の可変ドメインと膜貫通ドメインとの間に配置されたスペーサー領域を含むものである。諸実施形態では、スペーサー領域がヒンジ領域を含む。諸実施形態では、ヒンジ領域がＣＤ８ヒンジ領域である。諸実施形態では、ヒンジ領域がＣＤ２８ヒンジ領域である。本明細書において提供する「スペーサー領域」は、該抗体重鎖の可変ドメインを該膜貫通ドメインと接続しているポリペプチドである。諸実施形態を含む本明細書において提供するタンパク質の第１部分が重鎖定常ドメインを含む場合、該重鎖定常ドメインが該重鎖の可変ドメインをスペーサー領域と接続し、該スペーサー領域が該重鎖定常ドメインを該膜貫通ドメインと接続している。このように、諸実施形態では、スペーサー領域は、重鎖の可変ドメインを膜貫通ドメインと接続しているものである。諸実施形態では、スペーサー領域は重鎖定常ドメインを膜貫通ドメインと接続しているものである。
【０１６９】
諸実施形態では、抗体重鎖の可変ドメインおよび抗体軽鎖の可変ドメインがヒト化型である。諸実施形態では、第１部分が重鎖定常ドメインを含むものである。諸実施形態では、該単離された核酸は、第１部分と第２部分との間に自己切断性ペプチジル配列を含むものである。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルコード配列がＴ２Ａコード配列であるか、または２Ａコード配列である。諸実施形態では、自己切断性ペプチジルコード配列がＴ２Ａコード配列または２Ａコード配列である。諸実施形態では、第２部分をコードしている核酸配列が第１部分をコードしている核酸配列の３’側である。
【０１７０】
諸実施形態では、諸実施形態を含む本明細書において提供するタンパク質または抗体領域は、１種類以上の既知の抗体と抗原結合について競合するもの、該抗体と同じ抗原もしくはエピトープに特異的に結合するもの、および／または該抗体の１つ以上もしくはすべてのＣＤＲ（例えば、重鎖ＣＤＲ１、２および／または３および／または軽鎖ＣＤＲ１、２および／または３など）（または該ＣＤＲと少なくとも、もしくは約７５、８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８もしくは９９％の同一性を含むＣＤＲ）を含むものであり、既知の抗体としては任意の市販の抗体、例えば、アバゴボマブ、アブシキシマブ、アダリムマブ、アデカツムマブ、アレムツズマブ、アルツモマブ、アルツモマブペンテタート、アナツモマブ、アナツモマブマフェナトクス、アルシツモマブ、アトリズマブ、バシリキシマブ、ベクツモマブ、エクツモマブ、ベリムマブ、ベンラリズマブ、ベバシズマブ、ブレンツキシマブ、カナキヌマブ、カプロマブ、カプロマブペンデチド、カツマキソマブ、セルトリズマブ、クリバツズマブテトラキセタン、ダクリズマブ、デノスマブ、エクリズマブ、エドレコロマブ、エファリズマブ、エタラシズマブ、エルツマキソマブ、ファノレソマブ、Ｆｂｔａ０５、フォントリズマブ、ゲムツズマブ、ギレンツキシマブ、ゴリムマブ、イブリツモマブ、イゴボマブ、インフリキシマブ、イピリムマブ、ラベツズマブ、メポリズマブ、ムロモナブ、ムロモナブ−ＣＤ３、ナタリズマブ、ネシツムマブ、ニモツズマブ、オファツムマブ、オマリズマブ、オレゴボマブ、パリビズマブ、パニツムマブ、ラニビズマブ、リツキシマブ、サツモマブ、スレソマブ、イブリツモマブ、イブリツモマブチウキセタン、トシリズマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、Ｔｒｂｓ０７、ウステキヌマブ、ビシリズマブ、ボツムマブ、ザルツムマブおよび／またはブロダルマブ；および／またはアンルキンズマブ、バピネウズマブ、ダロツズマブ、デムシズマブ、ガニツマブ、イノツズマブ、マブリリムマブ、モキセツモマブパスドトクス、リロツムマブ、シファリムマブ、タネズマブ、トラロキヌマブ、トレメリムマブ、ウレルマブ、ハイブリドーマ１０Ｂ５によって産生される抗体（Ｅｄｅｌｓｏｎ  ＆  Ｕｎａｎｕｅ，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０００  Ａｕｇ；１２（４）：４２５−３１参照）、Ｂ６Ｈ１２．２（ａｂｃａｍ）または他の抗ＣＤ４７抗体（Ｃｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，１４２，６９９−７１３，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ３，２０１０参照）が挙げられる。
【０１７１】
諸実施形態では、該タンパク質または抗体領域は：ＣＡ−１２５、糖タンパク質（ＧＰ）ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体、ＴＮＦ−α、ＣＤ５２、ＴＡＧ−７２、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、インターロイキン−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）、ＩＬ−２、インターロイキン−２  受容体ａ−鎖（ＣＤ２５）、ＣＤ２２、Ｂ細胞活性化因子、インターロイキン−５受容体（ＣＤ１２５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＣＤ３０、ＩＬ−１β、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、ＣＤ３、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦ受容体（ＥＧＦＲ）、ＭＵＣ１、ヒトインターロイキン−２受容体、Ｔａｃ、ＲＡＮＫリガンド、補体タンパク質、例えば、Ｃ５、ＥｐＣＡＭ、ＣＤ１１ａ、例えば、ヒトＣＤ１１ａ、インテグリン、例えば、α−ｖβ−３インテグリン、ビトロネクチン受容体αｖβ３インテグリン、ＨＥＲ２、ｎｅｕ、ＣＤ３、ＣＤ１５、ＣＤ２０（小ループおよび／または大ループ）、インターフェロンγ、ＣＤ３３、ＣＡ−ＩＸ、ＴＮＦα、ＣＴＬＡ−４、癌胎児性抗原、ＩＬ−５、ＣＤ３ε、ＣＡＭ、α−４−インテグリン、ＩｇＥ、例えば、ＩｇＥ  Ｆｃ領域、ＲＳＶ抗原、例えば、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）のＦタンパク質、ＴＡＧ−７２、ＮＣＡ−９０（顆粒球細胞抗原）、ＩＬ−６、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＬ−１７、ＣＴＡＡ１６．８８、ＩＬ１３、インターロイキン−１β、β−アミロイド、ＩＧＦ−１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）、デルタ様リガンド４（ＤＬＬ４）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子受容体のαサブユニット、肝細胞増殖因子、ＩＦＮ−α、神経成長因子、ＩＬ−１３、ＣＤ３２６、プログラム細胞死１リガンド  １（ＰＤ−Ｌ１、別名ＣＤ２７４、Ｂ７−Ｈ１）、ＣＤ４７およびＣＤ１３７からなる群より選択される抗原に特異的に結合する。
【０１７２】
諸実施形態では、該タンパク質または抗体領域が抗ＣＤ１９タンパク質、抗ＣＤ２０タンパク質、抗ＣＤ２２タンパク質、抗ＣＤ３０タンパク質、抗ＣＤ３３タンパク質、抗ＣＤ４４ｖ６／７／８タンパク質、抗ＣＤ１２３タンパク質、抗ＣＥＡタンパク質、抗ＥＧＰ−２タンパク質、抗ＥＧＰ−４０タンパク質、抗ｅｒｂ−Ｂ２タンパク質、抗ｅｒｂ−Ｂ２，３，４タンパク質、抗ＦＢＰタンパク質、抗胎児型アセチルコリン受容体タンパク質、抗ＧＤ２タンパク質、抗ＧＤ３タンパク質、抗Ｈｅｒ２／ｎｅｕタンパク質、抗ＩＬ−１３Ｒ−ａ２タンパク質、抗ＫＤＲタンパク質、抗ｋ−軽鎖タンパク質、抗ＬｅＹタンパク質、抗Ｌ１細胞接着分子タンパク質、抗ＭＡＧＥ−Ａ１タンパク質、抗メソテリンタンパク質、抗マウスＣＭＶ感染細胞タンパク質、抗ＭＵＣ２タンパク質、抗ＮＫＧＤ２タンパク質、抗腫瘍胎児抗原タンパク質、抗ＰＣＳＡタンパク質、抗ＰＳＭＡタンパク質、抗ＴＡＡ（ｍＡｂ  ＩｆＥによって標的化）タンパク質、抗ＥＧＦＲタンパク質、抗ＴＡＧ−７２タンパク質または抗ＶＥＧＦ−７２タンパク質である。
【０１７３】
諸実施形態では、該タンパク質または抗体領域が、Ｐ８、Ｖ９もしくはＩ９、Ｉ１０もしくはＬ１０、Ｑ３８、Ｒ３９、Ｔ４０、Ｎ４１  Ｇ４２、Ｓ４３、Ｐ４４、Ｒ４５、Ｄ８２、Ｉ８３、Ａ８４、Ｄ８５、Ｙ８６、Ｙ８７、Ｇ９９、Ａ１００、Ｇ１０１、Ｔ１０２、Ｋ１０３、Ｌ１０４、Ｅ１０５、Ｒ１４２、Ｓ１６２、Ｖ１６３、Ｔ１６４、Ｅ１６５、Ｑ１６６、Ｄ１６７、Ｓ１６８および／またはＹ１７３（カバット方式の番号付けに従う）を含む軽鎖配列を有し、そして／またはＱ６、Ｐ９、Ｒ３８、Ｑ３９、Ｓ４０、Ｐ４１、Ｇ４２、Ｋ４３、Ｇ４４、Ｌ４５、Ｓ８４、Ｄ８６、Ｔ８７、Ａ８８、Ｉ８９、Ｙ９０、Ｙ９１、Ｗ１０３、Ｇ１０４、Ｑ１０５、Ｇ１０６、Ｔ１０７、Ｌ１０８、Ｖ１１１、Ｔ１１０、Ｙ１４７、Ｅ１５０、Ｐ１５１、Ｖ１５２、Ｔ１７３、Ｆ１７４、Ｐ１７５、Ａ１７６、Ｖ１７７、Ｙ１８５、Ｓ１８６および／またはＬ１８７（カバット方式の番号付けに従う）を有する重鎖を有するものである。
【０１７４】
また、本明細書において提供するペプチジル部分を含む１種類以上の化合物に結合させた抗体領域またはタンパク質を含む複合体を提供する。該抗体領域またはタンパク質は、本明細書に記載の抗体（その断片を含む）のいずれかであり得る。本明細書において提供するペプチジル部分を含む１種類以上の化合物としては、本明細書に記載の任意の１種類以上の化合物、例えば、一価および多価の化合物ならびに標識化合物を含むこのセクションに記載のものが挙げられ得る。
【０１７５】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する核酸を含む発現ベクターを提供する。諸実施形態では、該発現ベクターがウイルスベクターである。諸実施形態では、該ウイルスがレンチウイルスまたはオンコ−レトロウイルスである。諸実施形態では、該ウイルスがレンチウイルスまたはオンコ−レトロウイルスである。
【０１７６】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する発現ベクターを含む哺乳動物細胞を提供する。諸実施形態では、哺乳動物細胞がナチュラルキラー（Ｎｋ）細胞である。諸実施形態では、哺乳動物細胞が人工多能性幹細胞である。諸実施形態では、哺乳動物細胞が造血幹細胞である。諸実施形態では、哺乳動物細胞が第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含むものであり、第１ポリペプチドが重鎖の可変ドメイン、重鎖定常ドメイン、膜貫通ドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインおよび共刺激Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含むものであり、第２ポリペプチドが軽鎖の可変ドメインおよび軽鎖の定常ドメインを含むものである。
【０１７７】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する発現ベクターを含むＴリンパ球を提供する。諸実施形態では、該Ｔリンパ球が第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含むものであり、第１ポリペプチドが重鎖の可変ドメイン、重鎖定常ドメイン、膜貫通ドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインおよび共刺激Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含むものであり、第２ポリペプチドが軽鎖の可変ドメインおよび軽鎖の定常ドメインを含むものである。
【０１７８】
組換えタンパク質
別の態様では組換えタンパク質を提供する。該組換えタンパク質は、（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域と軽鎖可変（ＶＬ）領域によって形成されかつフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む抗体領域；ならびに（ｉｉ）膜貫通ドメインを含むものである。諸実施形態では、該抗体領域がさらに重鎖定常領域（ＣＨ）と軽鎖定常領域（ＣＬ）とを含むものである。諸実施形態では、該抗体領域がＦｃドメインを含むものである。諸実施形態では、該抗体領域がヒト化抗体領域（例えば、ヒト化マウス抗体領域）である。諸実施形態では、該抗体領域はｓｃＦｖ抗体領域を含まない。
【０１７９】
諸実施形態では、該タンパク質はさらに、本明細書に記載の細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含むものである。諸実施形態では、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインがＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである。諸実施形態では、該タンパク質はさらに細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含むものである。諸実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインがＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである。
【０１８０】
諸実施形態では、該タンパク質はさらにスペーサー領域を含むものである。諸実施形態では、スペーサー領域が該膜貫通ドメインと該抗体領域との間に存在している。
【０１８１】
諸実施形態では、該タンパク質はさらにリンカードメインを含むものである。諸実施形態では、リンカードメインが該膜貫通ドメインと該細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している。諸実施形態では、リンカードメインが該細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと該細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとの間に存在している。諸実施形態では、リンカードメインが配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含むものである。諸実施形態では、該抗体領域がセツキシマブメディトープ使用可能ドメイン、トラスズマブメディトープ使用可能ドメイン、ペルツズマブメディトープ使用可能ドメイン、Ｍ５Ａメディトープ使用可能ドメインまたはリツキシマブメディトープ使用可能ドメインである。諸実施形態では、ペプチジル部分を含む化合物が該ペプチド結合部位に結合されている。諸実施形態では、該化合物が多価メディトープである。本明細書において提供する「多価メディトープ」は、本明細書に記載のペプチジル部分である。従って、多価メディトープは、諸実施形態を含む本明細書において提供するペプチド結合部位に結合し得るものである。諸実施形態では、多価メディトープは、該ペプチド結合部位の内表面を構成するＦＲに結合するものである。諸実施形態では、多価メディトープが治療性部分または診断性部分に化学的リンカーを介して結合されている。諸実施形態では、多価メディトープが式（Ｉ）または（ＩＩ）の構造を有するものである。該タンパク質および化合物は、諸実施形態を含む本明細書に記載のタンパク質または化合物のいずれかであり得る。
【０１８２】
別の態様では、組換えタンパク質を提供する。該組換えタンパク質は、抗体重鎖の可変ドメインを含む第１部分および抗体軽鎖の可変ドメインと抗体軽鎖の定常ドメインとを含む第２部分を含むものであり、ここで、第１部分はさらに膜貫通ドメインを含むものであり、該抗体重鎖の可変ドメイン、該抗体軽鎖の可変ドメインおよび該抗体軽鎖の定常ドメインが一緒になって抗体領域を形成している。
【０１８３】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質を含む哺乳動物細胞を提供し、ここで、該膜貫通ドメインは該哺乳動物細胞の細胞膜に存在している。諸実施形態では、哺乳動物細胞がナチュラルキラー（Ｎｋ）細胞である。諸実施形態では、哺乳動物細胞が人工多能性幹細胞である。諸実施形態では、哺乳動物細胞が造血幹細胞である。
【０１８４】
別の態様では、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質を含むＴリンパ球を提供し、ここで、該膜貫通ドメインは該Ｔリンパ球の細胞膜内に存在している。
【０１８５】
医薬組成物
本発明によって提供される医薬組成物（例えば、本明細書において提供するタンパク質と化合物）としては、活性成分（例えば、諸実施形態または実施例を含む本明細書に記載の組成物）が治療有効量で、即ち、意図する目的が達成されるのに有効な量で含有されている組成物が挙げられる。具体的な用途に有効な実際の量は、とりわけ処置対象の病状に依存する。疾患を処置するための方法において投与される場合、本明細書に記載の組換えタンパク質には、所望の結果、例えば、標的分子の活性のモジュレーションおよび／または疾患症状の低減、解消もしくはその進行の低速化が得られるのに有効な量の活性成分が含有されている。本発明の化合物の治療有効量の決定は、特に、本明細書において詳述した開示内容に鑑みると、充分に当業者の能力の範囲内である。
【０１８６】
哺乳動物に投与される投薬量および頻度（単回用量または反復用量）は、さまざまな要素、例えば、該哺乳動物が別の疾患に苦しんでいるかどうか、およびその投与経路；レシピエントの体格、年齢、性別、健康状態、体重、ボディマス指数および食生活；処置対象の疾患の症状の性質および程度（例えば、がんの症状およびかかる症状の重症度）、並行処置の種類、処置対象の疾患による合併症または他の健康関連の問題に応じて、変動し得る。他の治療レジメンまたは治療用薬剤を本発明の方法および化合物と一緒に使用してもよい。確立された投薬量（例えば、頻度および期間）の調整および操作は、充分に当業者の能力の範囲内である。
【０１８７】
本明細書において提供する任意の組成物（例えば、組換えタンパク質、核酸）について、治療有効量は最初に、細胞培養アッセイにより決定され得る。目標濃度は、本明細書に記載の方法または当該技術分野で公知の方法を用いて測定したとき、本明細書に記載の方法が達成され得る活性化合物（１種類または複数種）の濃度である。当該技術分野で周知であるように、ヒトにおける使用のための有効量はまた、動物モデルにより決定してもよい。例えば、ヒトに対する用量は、動物において有効であることがわかっている濃度が達成されるように設定され得る。ヒトにおける投薬量は、上記のように、有効性をモニタリングし、投薬量を増減して調整することにより調整され得る。ヒトにおいて最大限の有効性が得られるように上記の方法および他の方法に基づいて用量を調整することは、充分に当業者の能力の範囲内である。
【０１８８】
投薬量は、患者の要求および使用される化合物に応じて異なり得る。患者に投与される用量は、本発明の状況においては、患者において経時的に有益な治療応答がもたらされるのに充分なものであるのがよい。また、用量サイズは、何らかの有害な副作用の存在、性質および程度によっても決定される。具体的な状況に対する適正な投薬量の決定は当業者の技能の範囲内である。一般的に、処置は、該化合物の至適用量より少ない低投薬量から始める。そのあと、投薬量を、状況下で至適効果が達成されるまで少しずつ増やす。
【０１８９】
投薬の量および間隔は、処置対象の具体的な臨床適応症に有効な化合物投与レベルがもたらされるように個々に調整され得る。これにより、個体の疾患状態の重症度に相応した治療レジメンが得られる。
【０１９０】
本明細書において提供する教示を使用し、実質的な毒性を引き起こさないが具体的な患者が示す臨床症状を処置するのに有効である、有効な予防的または治療的処置レジメンを計画することができる。この計画は、好ましくは化合物の効力、相対バイオアベイラビリティ、患者の体重、有害な副作用の存在および重症度などの要素を考慮することにより、活性化合物の注意深い選択を伴うものであるのがよい。
【０１９１】
「医薬として許容される賦形剤」および「医薬として許容される担体」は、被験体への活性薬剤の投与および被験体によるその吸収を補助し、患者に対して有意な有害な毒性学的効果を引き起こすことなく本発明の組成物に含めることができる物質をいう。医薬として許容される賦形剤の非限定的な例としては、水、ＮａＣｌ、標準的な生理食塩水溶液、乳酸加リンゲル液、標準的なスクロース、標準的なグルコース、結合剤、充填剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング、甘味料、フレーバー、塩溶液（例えば、リンゲル液）、アルコール、油類、ゼラチン、糖質、例えば、ラクトース、アミロースまたはデンプン、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチル（ｍｅｔｈｙ）セルロース、ポリビニルピロリジンおよび着色料などが挙げられる。かかる調製物を、滅菌し、所望により、本発明の化合物と有害に反応しない助剤、例えば、滑沢剤、保存料、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を及ぼすための塩、バッファー、着色物質および／または芳香性物質などと混合してもよい。当業者には、他の医薬用賦形剤も本発明において有用であることが認識されよう。
【０１９２】
用語「医薬として許容される塩」は、当該技術分野で周知のさまざまな有機および無機の対イオンにより誘導される塩をいい、一例にすぎないが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなど；および分子が塩基性官能部を含むものである場合は有機酸または無機酸の塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などが挙げられる。
【０１９３】
用語「調製」は、担体として封入材料を用いてカプセル剤を得る、活性化合物の製剤化を包含していることを意図し、ここでは、活性成分が他の担体とともにまたは他の担体を含まずに、担体に囲まれていて、それによりこの担体と会合している。同様に、カシェ剤およびロゼンジ剤も包含される。錠剤、散剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤およびロゼンジ剤は、経口投与に適した固形投薬形態として使用され得る。
【０１９４】
医薬調製物は場合により単位投薬形態である。かかる形態では、調製物が、適切な量の活性成分を含有している単位用量に細分されている。単位投薬形態はパッケージングされた調製物、別個の量の調製物を含有しているパッケージであってもよく、例えば、個包装の錠剤、カプセル剤およびバイアルまたはアンプル内の粉末剤であり得る。また、単位投薬形態は、カプセル剤、錠剤、カシェ剤またはロゼンジ剤自体であってもよく、これらのいずれかが適切な数でパッケージングされた形態であってもよい。単位投薬形態は凍結された分散剤であってもよい。
【０１９５】
処置方法
別の態様では、がんの処置方法を提供する。該方法は、その処置を必要とする被験体に、有効量の諸実施形態を含む本明細書において提供する哺乳動物細胞を投与することを含むものであり、ここで、該抗体領域は抗がん抗体領域である。
【０１９６】
別の態様では、がんの処置方法を提供する。該方法は、その処置を必要とする被験体に、諸実施形態を含む本明細書において提供するＴリンパ球を有効量で投与することを含むものであり、ここで、該抗体領域は抗がん抗体領域である。諸実施形態では、該Ｔリンパ球が自己Ｔリンパ球である。諸実施形態では、該Ｔリンパ球が異種Ｔリンパ球である。諸実施形態では、がんが固形腫瘍のがんまたは造血器悪性腫瘍である。諸実施形態では、がんが卵巣がん、腎細胞癌、Ｂ細胞性悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、乳がん、結腸直腸がん、前立腺がん、神経芽細胞腫、黒色腫、髄芽細胞腫、肺がん、骨肉腫、膠芽腫または神経膠腫である。諸実施形態では、白血病が急性リンパ性白血病である。諸実施形態では、白血病が慢性リンパ性白血病である。諸実施形態では、白血病が急性骨髄性白血病である。諸実施形態では、白血病が慢性骨髄性白血病である。
【０１９７】
別の態様では、Ｔリンパ球のリプログラミング方法を提供する。該方法は、Ｔリンパ球を、諸実施形態を含む本明細書において提供する発現ベクターと接触させることを含むものである。
【０１９８】
別の態様では、がんの検出方法を提供する。該方法は、（ｉ）がん患者に、諸実施形態を含む本明細書において提供する組換えタンパク質を含む有効量のＴリンパ球と該ペプチド結合部位に結合し得るペプチジル部分を含む化合物とを投与することを含むものであり、ここで、該化合物はさらに、検出可能な標識を含むものであり、該抗体領域は抗がん抗体領域である。該方法は、（ｉｉ）該化合物が該ペプチド結合部位に結合し、それにより組換えタンパク質−化合物複合体を形成することを可能にすることを含むものである。ならびに、（ｉｉｉ）該がん患者において該組換えタンパク質−化合物複合体を検出し、これにより、該がんを検出する。
【０１９９】
本明細書で用いる場合、「処置」または「処置する」または「緩和する」または「改善する（ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｎｇ）」は、本明細書において互換的に用いている。これらの用語は、限定されないが、治療有益性および／または予防有益性を含む、有益な結果または所望の結果を得るためのアプローチを示すものである。治療有益性により、処置対象の原障害の根絶または改善を意図する。また、治療有益性は、原障害に伴う生理学的症状のうち１つ以上の根絶または改善を伴うものであり、その結果、患者はまだ原障害に罹患しているかもしれないが、該患者において改善が観察されるように達成されるものである。予防有益性のためには、該組成物は、特定の疾患を発症するリスクのある患者、または疾患の診断がなされていない場合であってもこの疾患の生理学的症状のうち１つ以上が報告されている患者に、投与され得る。処置としては、疾患を予防すること、即ち、疾患の誘導前での防御的組成物の投与によって疾患の臨床症状が現れないようにすること；疾患を抑制すること、即ち、疾患の誘導事象の後だが臨床発現もしくは再発現の前での防御的組成物の投与によって疾患の臨床症状が現れないようにすること；疾患を抑止すること、即ち、最初の発現後での防御的組成物の投与によって臨床症状が現れるのを止めること；疾患の再発を予防および／または疾患を軽減させること、即ち、最初の発現後での防御的組成物の投与によって臨床症状の消退を引き起こすことが挙げられる。例えば、本明細書における一部の特定の方法は、がん（例えば、肺がん、卵巣がん、骨肉腫、膀胱がん、子宮頸がん、肝臓がん、腎臓がん、皮膚がん（例えば、メルケル細胞癌）、精巣がん、白血病、リンパ腫、頭頸部がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膵がん、黒色腫、乳がん、神経芽細胞腫）を処置するものである。例えば、本明細書における一部の特定の方法は、がんを、がんの発生、増殖、転移もしくは進行を減少もしくは低減もしくは抑制することにより処置するもの；またはがんを、がんの症状を低減させることにより処置するものである。がん（例えば、肺がん、卵巣がん、骨肉腫、膀胱がん、子宮頸がん、肝臓がん、腎臓がん、皮膚がん（例えば、メルケル細胞癌）、精巣がん、白血病、リンパ腫、頭頸部がん、結腸直腸がん、前立腺がん、膵がん、黒色腫、乳がん、神経芽細胞腫）の症状は、当業者にはわかるであろうもの、または当業者によって判定され得るものである。
【０２００】
本明細書で用いる場合、用語「処置」、「処置する（“ｔｒｅａｔ”または“ｔｒｅａｔｉｎｇ”）は、プロテアーゼの発現を特徴とする疾患もしくは病状の１つ以上の症状の影響またはプロテアーゼの発現を特徴とする該疾患もしくは病状の症状を低減させる方法をいう。従って、本開示の方法では、処置は、確立された疾患、病状または該疾患もしくは病状の症状の重症度の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％の低減を示すものであり得る。例えば、疾患を処置するための方法は、対照と比較したとき被験体において疾患の１つ以上の症状の１０％の低減がみられる場合、処置であるとみなす。従って、該低減は、未処置または対照レベルと比較したとき、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％または１０％から１００％の間の任意のパーセントの低減であり得る。処置は、必ずしも疾患、病状または該疾患もしくは病状の症状の治癒または完全な消滅を示すものではないことは理解されよう。さらに、本明細書で用いる場合、減少、低減または抑止に対する言及は、対照レベルと比較したとき、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上の変化を包含しており、かかる用語は完全な解消を包含し得るが、必ずしも包含しているとは限らない。
【０２０１】
「有効量」は、記載の目的が達成される（例えば、投与効果が得られる、疾患が処置される、酵素活性が低下する、疾患または病状の１つ以上の症状が低減される）のに充分な量である。「有効量」の一例は、疾患の処置、予防またはその症状（１つもしくは複数）の低減に寄与するのに充分な量であり、これは「治療有効量」とも称され得る。症状（１つまたは複数）の「低減」（およびこの語句の文法的等価語句）は、症状（１つもしくは複数）の重症度もしくは頻度の減少または症状（１つもしくは複数）の解消を意味する。薬物の「予防有効量」は、被験体に投与されると意図された予防効果を有する、例えば、傷害、疾患、病態もしくは病状の予防もしくは発症（もしくは再発）の遅延、または傷害、疾患、病態もしくは病状もしくはその症状の発症（もしくは再発）の尤度の低減の効果を有する薬物の量である。１回用量の投与では必ずしも完全な予防効果はもたらされるとは限らず、一連の用量の投与後にのみもたらされる場合がある。従って、予防有効量は、１回以上の投与で投与され得る。「活性低減量」は、本明細書で用いる場合、拮抗薬の量であって、酵素またはタンパク質の活性を該拮抗薬なしと比べて低減させるのに必要とされる量をいう。「機能破壊量」は、本明細書で用いる場合、拮抗薬の量であって、酵素またはタンパク質の機能を該拮抗薬なしと比べて破壊させるのに必要とされる量をいう。手引きは、所与の分類の医薬製剤品についての適切な投薬量に関する文献において知得され得る。例えば、該所与のパラメータについて、有効量は少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、４０％、５０％、６０％、７５％、８０％、９０％または少なくとも１００％の増減を示す。また、有効性は「倍」の増減として表示され得る。例えば、治療有効量は、対照と比べて少なくとも１．２倍、１．５倍、２倍、５倍またはそれ以上の効果を有するものであり得る。厳密な量は処置の目的に依存し、当業者により公知の手法を用いて確認され得よう（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ（ｖｏｌｓ．１−３，１９９２）；Ｌｌｏｙｄ，Ｔｈｅ  Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｐｉｃｋａｒ，Ｄｏｓａｇｅ  Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００３，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ参照）。
【０２０２】
本明細書で用いる場合、用語「投与する」は、被験体への経口投与、坐剤としての投与、経表面接触、静脈内、腹腔内、筋肉内、病変内、髄腔内、鼻腔内もしくは皮下投与、または低速放出デバイス、例えばミニ浸透圧ポンプの埋め込みを意味する。投与は、非経口および経粘膜（例えば、口腔内、舌下、口蓋、歯肉、経鼻、経膣、経直腸または経皮）を含む任意の経路によるものである。非経口投与としては、例えば、静脈内、筋肉内、細動脈内、皮内、皮下、腹腔内、脳室内および頭蓋内が挙げられる。他の送達様式としては、限定されないが、リポソーム製剤、静脈内輸注、経皮パッチなどの使用が挙げられる。「共投与する」により、本明細書に記載の組成物が、１種類以上のさらなる治療、例えば、がん治療、例えば、化学療法、ホルモン療法、放射線療法または免疫療法の投与と同時、該投与の直前または該投与の直後に投与されることを意図する。本発明の化合物は患者に単独で投与してもよく、共投与してもよい。共投与は、（１種類より多くの化合物と）単独または併用にて、該化合物の同時投与または逐次投与を包含していることを意図する。従って、該調製物はまた、所望される場合は、他の活性物質と、（例えば、代謝による分解を低減させるために）併用され得る。本発明の組成物を、アプリケータスティック、液剤、懸濁剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏、ペースト剤、ゼリー剤、塗薬、粉末剤およびエーロゾル剤として製剤化し、経皮経路、経表面経路によって送達してもよい。
【０２０３】
本発明の組成物にさらに、徐放性および／または快適性をもたらすための成分を含めてもよい。かかる成分としては、高分子量のアニオン性粘液模倣性（ｍｕｃｏｍｉｍｅｔｉｃ）ポリマー、ゲル形成性多糖類および微粉砕薬物担体物質が挙げられる。このような成分は、米国特許第４，９１１，９２０号；同第５，４０３，８４１号；同第５，２１２，１６２号；および同第４，８６１，７６０号にさらに詳細に論考されている。これらの特許の全内容は参照によりその全体があらゆる目的のために本明細書に組み込まれる。また、本発明の組成物を体内での低速放出のためのミクロスフェアとして送達してもよい。例えば、ミクロスフェアは、薬物含有ミクロスフェアの皮内注射によって投与され得、これは皮下でゆっくり放出する（Ｒａｏ，Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ  Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍ．Ｅｄ．７：６２３−６４５，１９９５参照；生分解性注射用ゲル製剤として（例えば、Ｇａｏ  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１２：８５７−８６３，１９９５参照）；または経口投与用ミクロスフェアとして（例えば、Ｅｙｌｅｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４９：６６９−６７４，１９９７参照）。諸実施形態では、本発明の組成物の製剤は、細胞膜と融合するか、またはエンドサイトーシスを受けるリポソームの使用によって、即ち、リポソームに結合させた受容体リガンド（細胞の表面膜タンパク質受容体に結合し、エンドサイトーシスをもたらす）を使用することにより送達され得る。リポソームを使用することにより、特に、リポソーム表面が、標的細胞に特異的な受容体リガンドを担持している場合、または別の様式で優先的に特定の器官に指向される場合、本発明の組成物の送達をインビボで標的細胞内に集中させることができる（例えば、Ａｌ−Ｍｕｈａｍｍｅｄ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ．１３：２９３−３０６，１９９６；Ｃｈｏｎｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：６９８−７０８，１９９５；Ｏｓｔｒｏ，Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．４６：１５７６−１５８７，１９８９を参照のこと）。また、本発明の組成物をナノ粒子として送達してもよい。
【０２０４】
本明細書において提供する教示を使用し、実質的な毒性を引き起こさないが具体的な患者が示す臨床症状を処置するのに有効である有効な予防的または治療的処置レジメンを計画することができる。この計画は、化合物の効力、相対バイオアベイラビリティ、患者の体重、有害な副作用の存在および重症度、選択された薬剤の好ましい投与様式および毒性プロフィールなどの要素を考慮することにより、活性化合物の注意深い選択を伴うものであるのがよい。
【０２０５】
「抗がん剤」は、この単純な通常の意味に従って用いており、抗新生物特性または細胞の成長もしくは増殖を抑止する能力を有する組成物（例えば、化合物、薬物、拮抗薬、阻害薬、調節薬）をいう。諸実施形態では、抗がん剤が化学療法薬である。諸実施形態では、抗がん剤が、がんの処置方法において有用性を有する本明細書において特定した薬剤である。諸実施形態では、抗がん剤が、ＦＤＡまたは米国以外の国の同様の規制機関によってがんの処置について承認された薬剤である。
【０２０６】
本明細書に記載の組成物同士を併用し、がんの処置に有用であることがわかっている他の活性薬剤、例えば抗がん剤とともに使用してもよい。
【０２０７】
抗がん剤の例としては、限定されないが、ＭＥＫ（例えば、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２もしくはＭＥＫ１およびＭＥＫ２）阻害薬（例えば、ＸＬ５１８、ＣＩ−１０４０、ＰＤ０３５９０１、セルメチニブ／ＡＺＤ６２４４、ＧＳＫ１１２０２１２／トラメチニブ、ＧＤＣ−０９７３、ＡＲＲＹ−１６２、ＡＲＲＹ−３００、ＡＺＤ８３３０、ＰＤ０３２５９０１、Ｕ０１２６、ＰＤ９８０５９、ＴＡＫ−７３３、ＰＤ３１８０８８、ＡＳ７０３０２６、ＢＡＹ  ８６９７６６）、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、イホスファミド、クロラムブシル、ブスルファン、メルファラン、メクロレタミン、ウラムスチン、チオテパ、ニトロソウレア、ナイトロジェンマスタード（例えば、メクロレタミン（ｍｅｃｈｌｏｒｏｅｔｈａｍｉｎｅ）、シクロホスファミド、クロラムブシル、メイファラン（ｍｅｉｐｈａｌａｎ））、エチレンイミンおよびメチルメラミン（例えば、ヘキサメチルメラミン、チオテパ）、アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン）、ニトロソウレア（例えば、カルムスチン、ロムスチン（ｌｏｍｕｓｉｔｎｅ）、セムスチン、ストレプトゾシン）、トリアゼン（ダカルバジン））、代謝拮抗薬（例えば、５−アザチオプリン、ロイコボリン、カペシタビン、フルダラビン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、ラルチトレキセド、葉酸アナログ（例えば、メトトレキサート）もしくはピリミジンアナログ（例えば、フルオロウラシル、フロクスウリジン（ｆｌｏｘｏｕｒｉｄｉｎｅ）、シタラビン）、プリンアナログ（例えば、メルカプトプリン、チオグアニン、ペントスタチン）など）、植物アルカロイド（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、ポドフィロトキシン、パクリタキセル、ドセタキセルなど）、トポイソメラーゼ阻害薬（例えば、イリノテカン、トポテカン、アムサクリン、エトポシド（ＶＰ１６）、エトポシドリン酸塩、テニポシドなど）、抗腫瘍抗生物質（例えば、ドキソルビシン、アドリアマイシン、ダウノルビシン、エピルビシン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ミトザントロン、プリカマイシンなど）、白金系化合物（例えば、シスプラチン、オキサロプラチン、カルボプラチン）、アントラセンジオン（例えば、ミトザントロン）、置換尿素（例えば、ヒドロキシ尿素）、メチルヒドラジン誘導体（例えば、プロカルバジン）、副腎皮質機能抑制剤（例えば、ミトタン、アミノグルテチミド）、エピポドフィロトキシン（例えば、エトポシド）、抗生物質（例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン）、酵素（例えば、Ｌ−アスパラギナーゼ）、マイトジェン活性化型プロテインキナーゼシグナル伝達の阻害薬（例えば、Ｕ０１２６、ＰＤ９８０５９、ＰＤ１８４３５２、ＰＤ０３２５９０１、ＡＲＲＹ−１４２８８６、ＳＢ２３９０６３、ＳＰ６００１２５、ＢＡＹ  ４３−９００６、ウォルトマンニンもしくはＬＹ２９４００２、Ｓｙｋ阻害薬、ｍＴＯＲ阻害薬、抗体（例えば、リツキサン）、ゴシホル（ｇｏｓｓｙｐｈｏｌ）、ジェナセンス（ｇｅｎａｓｅｎｓｅ）、ポリフェノールＥ、クロロフシン（Ｃｈｌｏｒｏｆｕｓｉｎ）、全トランス型レチノイン酸（ＡＴＲＡ）、ブリオスタチン、��瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）、５−アザ−２’−デオキシシチジン、全トランス型レチノイン酸、ドキソルビシン、ビンクリスチン、エトポシド、ゲムシタビン、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ．ＲＴＭ．）、ゲルダナマイシン、１７−Ｎ−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７−ＡＡＧ）、フラボピリドール、ＬＹ２９４００２、ボルテゾミブ、トラスツズマブ、ＢＡＹ  １１−７０８２、ＰＫＣ４１２、ＰＤ１８４３５２、２０−ｅｐｉ−１、２５ジヒドロキシビタミンＤ３；５−エチニルウラシル；アビラテロン；アクラルビシン；アシルフルベン；アデシペノール（ａｄｅｃｙｐｅｎｏｌ）；アドゼレシン（ａｄｏｚｅｌｅｓｉｎ）；アルデスロイキン；ＡＬＬ−ＴＫ拮抗薬；アルトレタミン；アンバムスチン；アミドックス；アミホスチン；アミノレブリン酸；アムルビシン；アムサクリン；アナグレリド；アナストロゾール；アンドログラホリド；血管新生阻害薬；拮抗薬Ｄ；拮抗薬Ｇ；アンタレリクス（ａｎｔａｒｅｌｉｘ）；抗背側化（ｄｏｒｓａｌｉｚｉｎｇ）形態形成タンパク質−１；抗アンドロゲン薬、前立腺癌；抗エストロゲン薬；抗新生物薬；アンチセンスオリゴヌクレオチド；アフィジコリングリシン酸塩；アポトーシス遺伝子調節薬；アポトーシス調節薬；アプリン酸；ａｒａ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ；アルギニンデアミナーゼ；アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）；アタメスタン（ａｔａｍｅｓｔａｎｅ）；アトリムスチン；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）１；アキシナスタチン２；アキシナスタチン３；アザセトロン；アザトキシン（ａｚａｔｏｘｉｎ）；アザチロシン；バッカチンＩＩＩ誘導体；バラノール（ｂａｌａｎｏｌ）；バチマスタット；ＢＣＲ／ＡＢＬ拮抗薬；ベンゾクロリン；ベンゾイルスタウロスポリン；βラクタム誘導体；β−アレチン；ベタクラマイシンＢ；ベツリン酸；ｂＦＧＦ阻害薬；ビカルタミド；ビサントレン；ビサジリジニルスペルミン；ビスナフィド；ビストラテン（ｂｉｓｔｒａｔｅｎｅ）Ａ；ビゼレシン（ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ）；ブレフレート（ｂｒｅｆｌａｔｅ）；ブロピリミン；ブドチタン；ブチオニンスルホキシミン；カルシポトリオール；カルホスチンＣ；カンプトセシン誘導体；カナリア痘ＩＬ−２；カペシタビン；カルボキサミド−アミノ−トリアゾール；カルボキシアミドトリアゾール；ＣａＲｅｓｔ  Ｍ３；ＣＡＲＮ  ７００；軟骨由来阻害薬；カルゼレシン（ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）；カゼインキナーゼ阻害薬（ＩＣＯＳ）；カスタノスペルミン；セクロピンＢ；セトロレレリクス（ｃｅｔｒｏｒｅｌｉｘ）；クロリン；クロロキノキサリンスルホンアミド；シカプロスト（ｃｉｃａｐｒｏｓｔ）；シス−ポルフィリン；クラドリビン；クロミフェンアナログ；クロトリマゾール；コリスマイシンＡ；コリスマイシンＢ；コンブレタスタチンＡ４；コンブレタスタチンアナログ；コナゲニン（ｃｏｎａｇｅｎｉｎ）；クランベスシジン（ｃｒａｍｂｅｓｃｉｄｉｎ）８１６；クリスナトール（ｃｒｉｓｎａｔｏｌ）；クリプトフィシン８；クリプトフィシンＡ誘導体；クラシンＡ；シクロペンタントラキノン；シクロプラタム（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）；シペマイシン���シタラビンオクホスファート；細胞溶解性因子；シトスタチン；ダクリキシマブ；デシタビン；デヒドロジデムニン（ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｄｅｍｎｉｎ）Ｂ；デスロレリン；デキサメタゾン；デキシホスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；デクスラゾキサン；デクスベラパミル；ジアジクオン；ジデムニンＢ；ジドックス（ｄｉｄｏｘ）；ジエチルノルスペルミン；ジヒドロ−５−アザシチジン；９−ジオキサマイシン；ジフェニルスピロムスチン；ドコサノール；ドラセトロン；ドキシフルリジン；ドロロキシフェン；ドロナビノール；デュオカルマイシンＳＡ；エブセレン；エコムスチン；エデルホシン；エドレコロマブ；エフロルニチン；エレメン；エミテフル（ｅｍｉｔｅｆｕｒ）；エピルビシン；エプリステリド；エストラムスチンアナログ；エストロゲン作動薬；エストロゲン拮抗薬；エタニダゾール；エトポシドリン酸塩；エキセメスタン；ファドロゾール；ファザラビン；フェンレチニド；フィルグラスチム；フィナステリド；フラボピリドール；フレゼラスチン（ｆｌｅｚｅｌａｓｔｉｎｅ）；フルアステロン（ｆｌｕａｓｔｅｒｏｎｅ）；フルダラビン；フルオロダウノルニシン（ｄａｕｎｏｒｕｎｉｃｉｎ）塩酸塩；ホルフェニメクス；ホルメスタン；ホストリエシン（ｆｏｓｔｒｉｅｃｉｎ）；ホテムスチン；ガドリニウムテキサフィリン；硝酸ガリウム；ガロシタビン；ガニレリクス；ゼラチナーゼ阻害薬；ゲムシタビン；グルタチオン阻害薬；ヘプスルファム（ｈｅｐｓｕｌｆａｍ）；ヘレグリン；ヘキサメチレンビスアセタミド；ヒペリシン；イバンドロン酸；イダルビシン；イドキシフェン；イドラマントン；イルモホシン（ｉｌｍｏｆｏｓｉｎ）；イロマスタット；イミダゾアクリドン；イミキモド；免疫賦活ペプチド；インスリン様増殖因子−１受容体阻害薬；インターフェロン作動薬；インターフェロン；インターロイキン；イオベングアン；ヨードドキソルビシン；イポメアノール、４−；イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）；イルソグラジン；イソベンガゾール；イソホモハリコンドリンＢ；イタセトロン；ジャスプラキノリド；カハラリド（ｋａｈａｌａｌｉｄｅ）Ｆ；ラメラリン−Ｎ三酢酸塩；ランレオチド；レイナマイシン；レノグラスチム；レンチナン硫酸塩；レプトルスタチン（ｌｅｐｔｏｌｓｔａｔｉｎ）；レトロゾール；白血病抑止因子；白血球αインターフェロン；ロイプロリド＋エストロゲン＋プロゲステロン；リュープロレリン；レバミゾール；リアロゾール；線状ポリアミンアナログ；親油性二糖ペプチド；親油性白金化合物；リソクリナミド（ｌｉｓｓｏｃｌｉｎａｍｉｄｅ）７；ロバプラチン；ロンブリシン（ｌｏｍｂｒｉｃｉｎｅ）；ロメトレキソール；ロニダミン；ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）；ロバスタチン；ロキソリビン；ルルトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）；ルテチウムテキサフィリン；リソフィリン（ｌｙｓｏｆｙｌｌｉｎｅ）；溶解性（ｌｙｔｉｃ）ペプチド；マイタンシン；マンノスタチンＡ；マリマスタット；マソプロコール；マスピン；マトリシン阻害薬；マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害薬；メノガリル；メルバロン；メテレリン；メチオニナーゼ；メトクロプラミド；ＭＩＦ阻害薬；ミフェ��リストン；ミルテホシン；ミリモスチム；ミスマッチ二本鎖ＲＮＡ；ミトグアゾン；ミトラクトール；マイトマイシンアナログ；ミトナフィド；ミトトキシン（ｍｉｔｏｔｏｘｉｎ）線維芽細胞増殖因子−サポリン；ミトザントロン；モファロテン；モルグラモスチム；モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン；モノホスホリルリピドＡ＋ミオバクテリウム（ｍｙｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）細胞壁ｓｋ；モピダモール；多剤耐性遺伝子阻害薬；外発性腫瘍抑制因子１系療法；マスタード抗がん剤；マイカペロキシド（ｍｙｃａｐｅｒｏｘｉｄｅ）Ｂ；ミコバクテリア細胞壁抽出物；ミリアポロン；Ｎ−アセチルジナリン；Ｎ置換ベンズアミド；ナファレリン；ナグレスチップ（ｎａｇｒｅｓｔｉｐ）；ナロキソン＋ペンタゾシン；ナパビン（ｎａｐａｖｉｎ）；ナフテルビン；ナルトグラスチム；ネダプラチン；ネモルビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）；ネリドロン酸（ｎｅｒｉｄｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）；中性エンドペプチダーゼ；ニルタミド；ニサマイシン；一酸化窒素調節薬；ニトロキシド酸化防止剤；ニトルリン；Ｏ６−ベンジルグアニン；オクトレオチド；オキセノン；オリゴヌクレオチド；オナプリストン；オンダンセトロン；オンダンセトロン；オラシン；経口サイトカイン誘導薬；オルマプラチン；オサテロン；オキサリプラチン；オキサウノマイシン；パラウアミン；パルミトイルリゾキシン；パミドロン酸；パナキシトリオール；パノミフェン；パラバクチン；パゼリプチン（ｐａｚｅｌｌｉｐｔｉｎｅ）；ペグアスパルガーゼ；ペルデシン；ポリ硫酸ペントサンナトリウム；ペントスタチン；ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）；ペルフルブロン；ペルホスファミド；ペリリルアルコール；フェナジノマイシン；フェニルアセテート；ホスファターゼ阻害薬；ピシバニル；ピロカルピン塩酸塩；ピラルビシン；ピリトレキシム；プラセチンＡ；プラセチンＢ；プラスミノゲンアクチベータ阻害薬；白金錯体；白金化合物；白金−トリアミン複合体；ポルフィマーナトリウム；ポリフィロマイシン；プレドニゾン；プロピルビス−アクリドン；プロスタグランジンＪ２；プロテアソーム阻害薬；プロテインＡ系免疫調節薬；プロテインキナーゼＣ阻害薬；プロテインキナーゼＣ阻害薬、ミクロアルガール；プロテインチロシンホスファターゼ阻害薬；プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害薬；プルプリン；ピラソロアクリジン；ピリ
ドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレン（ｅｔｈｙｌｅｒｉｅ）コンジュゲート；ｒａｆ拮抗薬；ラルチトレキセド；ラモセトロン；ｒａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害薬；ｒａｓ阻害薬；ｒａｓ−ＧＡＰ阻害薬；レテリプチン（ｒｅｔｅｌｌｉｐｔｉｎｅ）脱メチル化型；レニウムＲｅ  １８６エチドロネート；リゾキシン；リボザイム；ＲＩＩレチナミド；ログレチミド；ロヒツキン（ｒｏｈｉｔｕｋｉｎｅ）；ロムルチド；ロキニメクス（ｒｏｑｕｉｎｉｍｅｘ）；ルビジノン（ｒｕｂｉｇｉｎｏｎｅ）Ｂ１；ルボキシル（ｒｕｂｏｘｙｌ）；サフィンゴル（ｓａｆｉｎｇｏｌ）；サイントピン（ｓａｉｎｔｏｐｉｎ）；ＳａｒＣＮＵ；サルコフィトールＡ；サルグラモスチム；Ｓｄｉ  １模倣薬；セムスチン；老化由来（ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｄｅｒｉｖｅｄ）阻害薬１；センスオリゴヌクレオチド；シグナル伝達阻害薬；シグナル伝達調節薬；単鎖抗原結合タンパク質；シゾフラン；ソブゾキサン；ナトリウムボロカプテート；フェニル酢酸ナトリウム；ソルベロール；ソマトメジン結合タンパク質；ソネルミン；スパルホシン（ｓｐａｒｆｏｓｉｃ）酸；スピカマイシンＤ；スピロムスチン；スプレノペンチン；スポンギスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）１；スクアラミン；幹細胞阻害薬；幹細胞分裂阻害薬；スチピアミド（ｓｔｉｐｉａｍｉｄｅ）；ストロメリシン阻害薬；スルフィノシン；超活性血管作動性腸管ペプチド拮抗薬；スラジスタ（ｓｕｒａｄｉｓｔａ）；スラミン；スワインソニン；合成グリコサミノグリカン；タリムスチン；タモキシフェンメチオジド；タウロムスチン；タザロテン；テコガランナトリウム；テガフール；テルラピリリウム（ｔｅｌｌｕｒａｐｙｒｙｌｉｕｍ）；テロメラーゼ阻害薬；テモポルフィン；テモソロミド；テニポシド；テトラクロロデカオキシド；テトラゾミン；サリブラスチン（ｔｈａｌｉｂｌａｓｔｉｎｅ）；チオコラリン；トロンボポエチン；トロンボポエチン模倣薬；チマルファシン；サイモポエチン受容体作動薬；サイモトリナン（ｔｈｙｍｏｔｒｉｎａｎ）；甲状腺刺激ホルモン；エチルエチオプルプルリンスズ（ｔｉｎ  ｅｔｈｙｌ  ｅｔｉｏｐｕｒｐｕｒｉｎ）；チラパザミン；チタノセンビクロリド；トプセンチン（ｔｏｐｓｅｎｔｉｎ）；トレミフェン；全能性幹細胞因子；翻訳阻害薬；トレチノイン；トリアセチルルリジン；トリシリビン；トリメトレキサート；トリプトレリン；トロピセトロン；ツロステリド；チロシンキナーゼ阻害薬；チルホスチン；ＵＢＣ阻害薬；ウベニメクス；尿生殖洞由来成長抑制因子；ウロキナーゼ受容体拮抗薬；バプレオチド；バリオリン（ｖａｒｉｏｌｉｎ）Ｂ；ベクター系、赤血球遺伝子療法；ベラレソール；ベラミン；ベルジン（ｖｅｒｄｉｎ）；ベルテポルフィン；ビノレルビン；ビンキサルチン（ｖｉｎｘａｌｔｉｎｅ）；ビタキシン；ボロゾール；ザナテロン；ゼニプラチン；ジラスコルブ；ジノスタチンスチマラマー、アドリアマイシン、ダクチノマイシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、シスプラチン、アシビシン；アクラルビシン；アコダゾール塩酸塩；アクロニン；アドゼレシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アンボマイシン（ａｍｂｏｍｙｃｉ��）；アメタントロン酢酸塩；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール；アントラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン；バチマスタット；ベンゾデパ；ビカルタミド；ビサントレン塩酸塩；ビスナフィド二メシル酸塩；ビゼレシン；ブレオマイシン硫酸塩；ブレキナール（ｂｒｅｑｕｉｎａｒ）ナトリウム；ブロピリミン；ブスルファン；カクチノマイシン；カルステロン；カラセミド；カルベチマー（ｃａｒｂｅｔｉｍｅｒ）；カルボプラチン；カルムスチン；カルビシン塩酸塩；カルゼレシン；セデフィンゴル（ｃｅｄｅｆｉｎｇｏｌ）；クロラムブシル；シロレマイシン；クラドリビン；クリスナトールメシル酸塩；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ダウノルビシン塩酸塩；デシタビン；デキソルマプラチン；デザグアニン；デザグアニンメシル酸塩；ジアジクオン；ドキソルビシン；ドキソルビシン塩酸塩；ドロロキシフェン；ドロロキシフェンクエン酸塩；ドロモスタノロンプロピオン酸塩；デュアゾマイシン（ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）；エダトレキサート；エフロルニチン塩酸塩；エルサミトルシン（ｅｌｓａｍｉｔｒｕｃｉｎ）；エンロプラチン；エンプロメート（ｅｎｐｒｏｍａｔｅ）；エピプロピジン；エピルビシン塩酸塩；エルブロゾール；エソルビシン塩酸塩；エストラムスチン；エストラムスチンリン酸ナトリウム；エタニダゾール；エトポシド；エトポシドリン酸塩；エトプリン；ファドロゾール塩酸塩；ファザラビン；フェンレチニド；フロクスウリジン；フルダラビンリン酸塩；フルオロウラシル；フルオロシタビン；ホスキドン（ｆｏｓｑｕｉｄｏｎｅ）；ホストリエシンナトリウム；ゲムシタビン；ゲムシタビン塩酸塩；ヒドロキシ尿素；イダルビシン塩酸塩；イホスファミド；イイモホシン（ｉｉｍｏｆｏｓｉｎｅ）；インターロイキンＩＩ（組換えインターロイキンＩＩもしくはｒｌＬ２を含む）、インターフェロンα−２ａ；インターフェロンα−２ｂ；インターフェロンα−ｎ１；インターフェロンα−ｎ３；インターフェロンβ−１ａ；インターフェロンγ−１ｂ；イプロプラチン；イリノテカン塩酸塩；ランレオチド酢酸塩；レトロゾール；ロイプロリド酢酸塩；リアロゾール塩酸塩；ロメトレキソールナトリウム；ロムスチン；ロソキサントロン塩酸塩；マソプロコール；マイタンシン；メクロレタミン塩酸塩；酢酸メゲストロール；メレンゲストロール酢酸塩；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキサート；メトトレキサートナトリウム；メトプリン；メツレデパ；ミチンドミド；ミトカルシン；ミトクロミン；ミトグリン；ミトマルシン；マイトマイシン；ミトスパー（ｍｉｔｏｓｐｅｒ）；ミトタン；ミトザントロン塩酸塩；ミコフェノール酸；ノコダゾイエ（ｎｏｃｏｄａｚｏｉｅ）；ノガラマイシン；オルマプラチン；オキシスラン（ｏｘｉｓｕｒａｎ）；ペグアスパルガーゼ；ペリオマイシン；ペンタムスチン；ペプロマイシン硫酸塩；ペルホスファミド；ピポブロマン；ピポスルファン；ピロキサントロン（ｐｉｒｏｘａｎｔｒｏｎｅ）塩酸塩；プリカマイシン；プロメスタン；ポルフィマーナトリウム；ポリフィロマイシン；プレドニムスチン；プロカルバジ��塩酸塩；ピューロマイシン；ピューロマイシン塩酸塩；ピラゾフリン；リボプリン；ログレチミド；サフィンゴル；サフィンゴル塩酸塩；セムスチン；シムトラゼン（ｓｉｍｔｒａｚｅｎｅ）；スパルホセート（ｓｐａｒｆｏｓａｔｅ）ナトリウム；スパルソマイシン；スピロゲルマニウム塩酸塩；スピロムスチン；スピロプラチン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；スルホフェヌル（ｓｕｌｏｆｅｎｕｒ）；タリソマイシン；テコガランナトリウム；テガフール；テロキサントロン塩酸塩；テモポルフィン；テニポシド；テロキシロン；テストラクトン；チアミプリン；チオグアニン；チオテパ；チアゾフリン；チラパザミン；トレミフェンクエン酸塩；トレストロン酢酸塩；トリシリビンリン酸塩；トリメトレキサート；トリメトレキサートグルクロン酸塩；トリプトレリン；ツブロゾール塩酸塩；ウラシルマスタード；ウレデパ；バプレオチド；ベルテポルフィン；ビンブラスチン硫酸塩；ビンクリスチン硫酸塩；ビンデシン；ビンデシン硫酸塩；ビネピジン硫酸塩；ビングリシネート硫酸塩；ビンロイロシン硫酸塩；ビノレルビン酒石酸塩；ビンロシジン硫酸塩；ビンゾリジン（ｖｉｎｚｏｌｉｄｉｎｅ）硫酸塩；ボロゾール；ゼニプラチン；ジノスタチン；ゾルビシン塩酸塩、細胞をＧ２−Ｍ期で停止させる、および／または微小管の形成もしくは安定性を調節する薬剤（例えば、タキソール（Ｔａｘｏｌ）ＴＭ（即ち、パクリタキセル）、タキソテール（Ｔａｘｏｔｅｒｅ）ＴＭ、タキサン骨格を含む化合物、エルブロゾール（即ち、Ｒ−５５１０４）、ドラスタチン１０（即ち、ＤＬＳ−１０およびＮＳＣ−３７６１２８）、ミボブリンイセチオン酸塩（即ち、ＣＩ−９８０として）、ビンクリスチン、ＮＳＣ−６３９８２９、ディスコデルモライド（即ち、ＮＶＰ−ＸＸ−Ａ−２９６として）、ＡＢＴ−７５１（Ａｂｂｏｔｔ，即ち、Ｅ−７０１０）、アルトリルチン（Ａｌｔｏｒｈｙｒｔｉｎｓ）（例えば、アルトリルチンＡおよびアルトリルチンＣ）、スポンギスタチン（例えば、スポンギスタチン１、スポンギスタチン２、スポンギスタチン３、スポンギスタチン４、スポンギスタチン５、スポンギスタチン６、スポンギスタチン７、スポンギスタチン８およびスポンギスタチン９）、セマドチン塩酸塩（即ち、ＬＵ−１０３７９３およびＮＳＣ−Ｄ−６６９３５６）、エポチロン（例えば、エポチロンＡ、エポチロンＢ、エポチロンＣ（即ち、デスオキシエポチロンＡもしくはｄＥｐｏＡ）、エポチロンＤ（即ち、ＫＯＳ−８６２、ｄＥｐｏＢおよびデスオキシエポチロンＢ）、エポチロンＥ、エポチロンＦ、エポチロンＢ  Ｎ−オキシド、エポチロンＡ  Ｎ−オキシド、１６−アザ−エポチロンＢ、２１−アミノエポチロンＢ（即ち、ＢＭＳ−３１０７０５）、２１−ヒドロキシエポチロンＤ（即ち、デスオキエポチロンＦおよびｄＥｐｏＦ）、２６−フルオロエポチロン、アウリスタチンＰＥ（即ち、ＮＳＣ−６５４６６３）、ソブリドチン（即ち、ＴＺＴ−１０２７）、ＬＳ−４５５９−Ｐ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，即ち、ＬＳ−４５７７）、ＬＳ−４５７８（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，即ち、ＬＳ−４７７−Ｐ）、ＬＳ−４４７７（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、ＬＳ−４５５９（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）���ＲＰＲ−１１２３７８（Ａｖｅｎｔｉｓ）、ビンクリスチン硫酸塩、ＤＺ−３３５８（Ｄａｉｉｃｈｉ）、ＦＲ−１８２８７７（Ｆｕｊｉｓａｗａ，即ち、ＷＳ−９８８５Ｂ）、ＧＳ−１６４（Ｔａｋｅｄａ）、ＧＳ−１９８（Ｔａｋｅｄａ）、ＫＡＲ−２（Ｈｕｎｇａｒｉａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＢＳＦ−２２３６５１（ＢＡＳＦ，即ち、ＩＬＸ−６５１およびＬＵ−２２３６５１）、ＳＡＨ−４９９６０（Ｌｉｌｌｙ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＳＤＺ−２６８９７０（Ｌｉｌｌｙ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＭ−９７（Ａｒｍａｄ／Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）、ＡＭ−１３２（Ａｒｍａｄ）、ＡＭ−１３８（Ａｒｍａｄ／Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）、ＩＤＮ−５００５（Ｉｎｄｅｎａ）、クリプトフィシン５２（即ち、ＬＹ−３５５７０３）、ＡＣ−７７３９（Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ，即ち、ＡＶＥ−８０６３ＡおよびＣＳ−３９．ＨＣｌ）、ＡＣ−７７００（Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ，即ち、ＡＶＥ−８０６２、ＡＶＥ−８０６２Ａ、ＣＳ−３９−Ｌ−Ｓｅｒ．ＨＣｌおよびＲＰＲ−２５８０６２Ａ）、ビチレブアミド（Ｖｉｔｉｌｅｖｕａｍｉｄｅ）、ツブリシン（Ｔｕｂｕｌｙｓｉｎ）Ａ、カナデンソル（Ｃａｎａｄｅｎｓｏｌ）、センタウレイジン（Ｃｅｎｔａｕｒｅｉｄｉｎ）（即ち、ＮＳＣ−１０６９６９）、Ｔ−１３８０６７（Ｔｕｌａｒｉｋ，即ち、Ｔ−６７、ＴＬ−１３８０６７およびＴＩ−１３８０６７）、ＣＯＢＲＡ−１（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈｕｇｈｅｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，即ち、ＤＤＥ−２６１およびＷＨＩ−２６１）、Ｈ１０（Ｋａｎｓａｓ  Ｓｔａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、Ｈ１６（Ｋａｎｓａｓ  Ｓｔａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、Ｏｎｃｏｃｉｄｉｎ  Ａ１（即ち、ＢＴＯ−９５６およびＤＩＭＥ）、ＤＤＥ−３１３（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈｕｇｈｅｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、フィジアノリド（Ｆｉｊｉａｎｏｌｉｄｅ）Ｂ、ラウリマリド（Ｌａｕｌｉｍａｌｉｄｅ）、ＳＰＡ−２（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈｕｇｈｅｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、ＳＰＡ−１（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈｕｇｈｅｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，即ち、ＳＰＩＫＥＴ−Ｐ）、３−ＩＡＡＢＵ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ／Ｍｔ．Ｓｉｎａｉ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，即ち、ＭＦ−５６９）、ナルコシン（ＮＳＣ−５３６６としても知られている）、ナスカピン（Ｎａｓｃａｐｉｎｅ）、Ｄ−２４８５１（Ａｓｔ
ａ  Ｍｅｄｉｃａ）、Ａ−１０５９７２（Ａｂｂｏｔｔ）、ヘミアステルリン（Ｈｅｍｉａｓｔｅｒｌｉｎ）、３−ＢＡＡＢＵ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ／Ｍｔ．Ｓｉｎａｉ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，即ち、ＭＦ−１９１）、ＴＭＰＮ（Ａｒｉｚｏｎａ  Ｓｔａｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、バナドセンアセチルアセトネート、Ｔ−１３８０２６（Ｔｕｌａｒｉｋ）、モンサトロール（Ｍｏｎｓａｔｒｏｌ）、ルナノシン（ｌｎａｎｏｃｉｎｅ）（即ち、ＮＳＣ−６９８６６６）、３−ＩＡＡＢＥ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ／Ｍｔ．Ｓｉｎａｉ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、Ａ−２０４１９７（Ａｂｂｏｔｔ）、Ｔ−６０７（Ｔｕｉａｒｉｋ，即ち、Ｔ−９００６０７）、ＲＰＲ−１１５７８１（Ａｖｅｎｔｉｓ）、エレウテロビン（Ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）（例えば、デスメチルエレウテロビン、デサエチルエレウテロビン、イソエレウテロビンＡおよびＺ−エレウテロビン）、カリバエオシン（Ｃａｒｉｂａｅｏｓｉｄｅ）、カリバエオリン（Ｃａｒｉｂａｅｏｌｉｎ）、ハリコンドリン（Ｈａｌｉｃｈｏｎｄｒｉｎ）Ｂ、Ｄ−６４１３１（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、Ｄ−６８１４４（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、ジアゾンアミド（Ｄｉａｚｏｎａｍｉｄｅ）Ａ、Ａ−２９３６２０（Ａｂｂｏｔｔ）、ＮＰＩ−２３５０（Ｎｅｒｅｕｓ）、タカロノリド（Ｔａｃｃａｌｏｎｏｌｉｄｅ）Ａ、ＴＵＢ−２４５（Ａｖｅｎｔｉｓ）、Ａ−２５９７５４（Ａｂｂｏｔｔ）、ジオゾスタチン、（−）−フェニルアヒスチン（Ｐｈｅｎｙｌａｈｉｓｔｉｎ）（即ち、ＮＳＣＬ−９６Ｆ０３７）、Ｄ−６８８３８（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、Ｄ−６８８３６（Ａｓｔａ  Ｍｅｄｉｃａ）、ミオセベリンＢ、Ｄ−４３４１１（Ｚｅｎｔａｒｉｓ，即ち、Ｄ−８１８６２）、Ａ−２８９０９９（Ａｂｂｏｔｔ）、Ａ−３１８３１５（Ａｂｂｏｔｔ）、ＨＴＩ−２８６（即ち、ＳＰＡ−１１０、トリフルオロ酢酸塩）（Ｗｙｅｔｈ）、Ｄ−８２３１７（Ｚｅｎｔａｒｉｓ）、Ｄ−８２３１８（Ｚｅｎｔａｒｉｓ）、ＳＣ−１２９８３（ＮＣＩ）、レスベラスタチンリン酸ナトリウム、ＢＰＲ−ＯＹ−００７（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ）ならびにＳＳＲ−２５０４１１（Ｓａｎｏｆｉ））、ステロイド（例えば、デキサメタゾン）、フィナステリド、アロマターゼ阻害薬、ゴナドトロピン放出ホルモン作動薬（ＧｎＲＨ）、例えば、ゴセレリンもしくはロイプロリド、副腎皮質ステロイド（例えば、プレドニゾン）、プロゲスチン（例えば、ヒドロキシプロゲステロンカプロン酸エステル、酢酸メゲストロール、酢酸メドロキシプロゲステロン）、エストロゲン（例えば、ジエチルスチルベストロール、エチニルエストラジオール）、抗エストロゲン薬（例えば、タモキシフェン）、アンドロゲン（例えば、テストステロンプロピオン酸塩、フルオキシメステロン）、抗アンドロゲン薬（例えば、フルタミド）、免疫賦活薬（例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ（ＢＣＧ）、レバミゾール、インターロイキン−２、α−インターフェロンなど）、モノクローナル抗体（例えば、抗ＣＤ２０、抗ＨＥＲ２、抗ＣＤ５２、抗ＨＬＡ−ＤＲおよび抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体）、免疫毒素（例えば、抗ＣＤ３３モノクローナル抗体−カリケアミシンコンジュゲート、抗ＣＤ２２モノクローナル抗体−シュードモナス外毒素コンジュゲートなど）、放射免疫療法（例えば、１１１Ｉｎ、９０Ｙもしくは１３１Ｉなどにコンジュゲートさせた抗ＣＤ２０モノクローナル抗体）、トリプトリド、ホモハリングトニン、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、トポテカン、イトラコナゾール、ビンデシン、セリバスタチン、ビンクリスチン、デオキシアデノシン、セルトラリン、ピタバスタチン、イリノテカン、クロファジミン、５−ノニルオキシトリプタミン、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ＥＧＦＲ阻害薬、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）標的化療法もしくは治療薬（例えば、ゲフィチニブ（イレッサ（Ｉｒｅｓｓａ）ＴＭ）、エルロチニブ（タルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）ＴＭ）、セツキシマブ（エルビツクス（Ｅｒｂｉｔｕｘ）ＴＭ）、ラパチニブ（タイケルブ（Ｔｙｋｅｒｂ）ＴＭ）、パニツムマブ（ベクティビックス（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ）ＴＭ）、バンデタニブ（カプレルサ（Ｃａｐｒｅｌｓａ）ＴＭ）、アファチニブ／ＢＩＢＷ２９９２、ＣＩ−１０３３／カネルチニブ、ネラチニブ／ＨＫＩ−２７２、ＣＰ−７２４７１４、ＴＡＫ−２８５、ＡＳＴ−１３０６、ＡＲＲＹ３３４５４３、ＡＲＲＹ−３８０、ＡＧ−１４７８、ダコミチニブ／ＰＦ２９９８０４、ＯＳＩ−４２０／デスメチルエルロチニブ、ＡＺＤ８９３１、ＡＥＥ７８８、ペリチニブ／ＥＫＢ−５６９、ＣＵＤＣ−１０１、ＷＺ８０４０、ＷＺ４００２、ＷＺ３１４６、ＡＧ−４９０、ＸＬ６４７、ＰＤ１５３０３５、ＢＭＳ−５９９６２６）、ソラフェニブ、イマチニブ、スニチニブ、ダサチニブなどが挙げられる。諸実施形態では、本明細書における組成物は、がんの処置において単独で有効でなくもてよいが活性薬剤の有効性に寄与し得る補助剤と併用して使用され得る。
【０２０８】
諸実施形態では、共投与は、第１活性薬剤を第２の活性薬剤の０．５、１、２、４、６、８、１０、１２、１６、２０もしくは２４時間以内に投与することを含むものである。共投与は、２種類の活性薬剤を同時に、ほぼ同時に（例えば、互いに約１、５、１０、１５、２０もしくは３０分以内）または任意の順序で逐次投与することを含むものである。諸実施形態では、共投与は、共製剤化、即ち、両方の活性薬剤を含む単一の医薬組成物を調製することにより行なわれ得る。諸実施形態では、活性薬剤は別々に製剤化され得る。諸実施形態では、活性薬剤および／または補助薬剤が互いに連結またはコンジュゲートされ得る。
【実施例】
【０２０９】
本出願人らは、治療用ｍＡｂセツキシマブのＦａｂアームの中心空洞内に、環状ペプチド（本明細書において「メディトープ」とも称する）に対する特有の結合部位を見出した（１）。本出願人らは、この部位がセツキシマブに特有であり、ヒトｍＡｂには存在しないことを実証した。また、本出願人らは、生化学的に、ならびに細胞培養試験および動物異種移植片試験において、この部位の占有は抗原結合に影響しないことを示した。さらに、本出願人らは、この部位をヒトｍＡｂ上にグラフト化できること（「メディトープ使用可能化（ｅｎａｂｌｉｎｇ）」）ことを実証し、これは、このペプチド結合部位が例えば、標的化イメージング剤のビーコンとして、またはｍＡｂに新たな機能性部をテザーリングするための「ヒッチ」として使用され得ることを示す。広範な操作により、本出願人らは、メディトープ−Ｆａｂ相互作用の親和性が４０，０００倍を超え、推定半減期が室温で６日間を超えるように改善した。本出願人らはさらに、メディトープをＦａｂ結合性タンパク質であるタンパク質Ｌと融合させると、この親和性が有意に改善されることを実証し、この複合体の半減期は８０日間を超えると推定された。最後に、本出願人らは、ＳＰＲ試験により、蛍光マーカー、ＤＯＴＡ、ＧＦＰおよび他のタンパク質ドメインと高親和性メディトープのコンジュゲーション、およびメディトープ−タンパク質Ｌ（ＭＰＬ）融合体とのコンジュゲーションは、ＭＰＬ−Ｆａｂの親和性にもＦａｂ−抗原相互作用にも影響しないことを確認した。総合すると、このようなデータは、機能性部を任意の所与のメディトープ使用可能ｍＡｂ上に「スナップ（ｓｎａｐ）」することができることを示す。
【０２１０】
ＣＡＲ  Ｔ細胞療法は、特にＢ細胞悪性腫瘍において持続性の応答をもたらしており（２から６）、細胞外抗原標的化部分、膜貫通ドメインおよび細胞内シグナル伝達モジュール（ＣＤ３ζならびにＣＤ２８および／またはＣＤ１３７（４−１ＢＢ）の共刺激ドメインを含む）からなる人工受容体を用いて患者のＴ細胞のリプログラミングし、Ｔ細胞を活性化させて免疫応答を誘起することを伴うものである。ＣＡＲの抗原標的化ドメインは、一般的に、腫瘍抗原を認識する単鎖のＦ可変抗体領域（ｓｃＦｖ）である。当該技術分野において：１）形質転換細胞上のＣＡＲの密度を特性評価すること、２）治療中、任意の時点で投与されたＣＡＲ  Ｔ細胞を追跡し、この分布を治療転帰と相関させること、３）ＣＡＲ  Ｔ細胞を速やかに機能化すること、および４）必要であれば、ＣＡＲ  Ｔ細胞を選択的に排除することができることが求められている。諸実施形態では、本明細書において提供する構築物により、これらの必要性が満たされ得る。
【０２１１】
諸実施形態では、本明細書において提供する構築物が、以下の分野に有用である：（ｉ）Ｔ細胞上の受容体分布の直接観察によりＣＡＲ発現を特性評価するための超解像顕微鏡検査の適用。本出願人らは光活性化性ＧＦＰ（ｐａＧＦＰ）を高親和性メディトープと融合させ、そして、細胞由来受容体に結合させたメディトープ使用可能ｍＡｂを「計数」することができそのクラスターサイズを定量することができることを実証した。かかる情報を治療有効性と相関させることができ、クリニックにおいて「品質管理」のために使用することができる。（ｉｉ）ＤＯＴＡコンジュゲート高親和性メディトープを有するメディトープ使用可能ＣＡＲ  Ｔ細胞のインサイチュでのイメージング。本出願人らは、高親和性コンジュゲートメディトープは抗原結合に影響しないことを実証した。従って、ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞を６４Ｃｕ−ＤＯＴＡコンジュゲート高親和性メディトープで事前標識することができ、その遊走を追跡することができる。または、ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞を投与し、局在化させて増殖させた後に、イメージングすることができる。提案するこのプレターゲティング型ｍＡｂ系イメージング法は、操作抗体を用いて高品質のＰＥＴ画像が得られることが実証されている（９から１１）。（ｉｉｉ）ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞に速やかに付加され得る、新規な直行する機能性部．具体的には、メディトープは、第２の腫瘍関連リガンド、強力な細胞毒素、サイトカインを含む免疫調節薬および腫瘍活性化型プロドラッグを認識する生物材料にコンジュゲートされ得る。このようなメディトープは、投与前にｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞に直接的に結合してもよく、ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞を確立した後に付加してもよい。
【０２１２】
［実施例１］
免疫療法のためのメディトープ使用可能ＣＡＲ構築物の作製、特性評価および同定。ＨＥＲ２陽性腫瘍を標的化するメディトープ使用可能ＦａｂベースおよびｍＡｂ−ベースのＣＡＲ（ｍｅＣＡＲ）構築物のさまざまな組合せを作製し、各々をレンチウイルス内にパッケージングし、Ｔ細胞に形質導入してメディトープ使用可能ＨＥＲ２＋−ＣＡＲ（ｍｅＨＥＲ２＋−ＣＡＲ）Ｔ細胞を作製する。ＤＯＴＡ−コンジュゲートメディトープありおよびなしでの各ｍｅＣＡＲの発現レベルを可溶性の細胞外ＨＥＲ２に対するその親和性とともに特性評価する。最後に、各構築物の腫瘍細胞殺傷能を、ＤＯＴＡ−コンジュゲートメディトープの存在下および非存在下にてインビトロで定量する。
【０２１３】
ＣＡＲは、がん細胞を認識して破壊させるための免疫系のリプログラミングにおけるツールである。ＣＡＲは一般的に、抗原認識ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）、スペーサー（例えば、ＩｇＧのＦｃドメインまたはＣＤ８のヒンジドメイン）、膜貫通領域ならびに細胞内共刺激および活性化ドメイン（例えば、ＣＤ２８および／またはＣＤ１３７とＣＤ３ζ鎖）で構成されている。諸実施形態では、メディトープ使用可能ＦａｂまたはｍＡｂで構成された抗原認識ドメインは、ＣＡＲ自体をさらに再操作することに頼らずにペプチドを介して速やかにかつ特異的に新たな機能性を付加するための特有のペプチド結合部位をもたらす。記載のように、このような機能性としては、イメージング能、さらなる腫瘍関連受容体の標的化能、免疫機能の調節能およびＣＡＲ  Ｔ細胞の選択的殺傷能が挙げられ得る。本明細書において、クリニックにおいてＨＥＲ２陽性腫瘍に対するものであり、本出願人らがメディトープ使用可能にした抗ＨＥＲ２  ｍＡｂである、トラスツズマブのための幾つかの発現プラスミドを提供する（１）。軽鎖と重鎖の発現順を改変し、異なる内部リボソーム進入部位の自己切断性２Ａペプチド配列に対する有効性（１５）を試験する。可溶性ＨＥＲ２の結合を定量するとともに、各構築物のメディトープもさまざまな結合アッセイおよび超解像顕微鏡検査を用いて定量する。種々のＣＡＲ構築物のインビトロ機能性を、インビトロＨＥＲ２依存性Ｔ細胞殺傷、脱顆粒、サイトカイン産生および増殖を評価することにより特性評価する。ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞のメディトープ占有の効果を、これらの同じアッセイを用いて特性評価する。トラスツズマブのｓｃＦｖをベースにした古典的（ｃａｎｏｎｉｃａｌ）ＨＥＲ２特異的ＣＡＲを作製し、特性評価する。これは、基準点として発現アッセイおよび機能アッセイの両方に使用され得る。
【０２１４】
乳がん、肉腫および肺がんを含む幾つかの腫瘍は、ＨＥＲ２を異常に発現する。従って、有効な治薬の開発において取り組みがなされており、トラスツズマブはその１つである。しかしながら、ＨＥＲ２＋がん患者の７０％はこの全身性治療薬に応答せず、実際、この薬剤に対してすぐに耐性を発現し得る（１６）。そのため、ＨＥＲ２シグナル伝達経路の阻害に勝り、強力な免疫応答を誘起するためのＨＥＲ２ならびにＨＥＲ２＋  ＣＡＲ  Ｔ細胞に対するワクチンが開発されている。ＣＡＲ  Ｔ細胞の効力および有害な副作用の可能性を考えると（１７）、ＨＥＲ２＋  ＣＡＲ  Ｔ細胞をモニタリングし、調節し、可能であれば破壊することが有用である。ＣＡＲ  Ｔ細胞をメディトープ結合部位で使用可能にすることにより、このような問題が対処される。
【０２１５】
メディトープの相互作用および最適化。本明細書では、セツキシマブのＦａｂアーム内の特有のペプチド結合部位であって、ヒト抗体にはみられない、該部位の内表面を構成する特有のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を説明する。この部位は、ヒトｍＡｂ、例えばトラスツズマブ、ヒト化抗ＣＥＡおよび他のｍＡｂ上にグラフト化され得る。ペプチド結合は、メディトープ使用可能抗体がその抗原に結合する能力に影響しない。該結合部位の位置がＦａｂの中心空洞内であるため、このペプチドは「メディトープ」（“ｍｅｄｉｕｓ”および“ｔｏｐｏ”）と称され得る（図２Ａ）。メディトープ使用可能抗体「ｍｅｍＡｂ」は、ｍｅＦａｂとしてのメディトープ使用可能Ｆａｂをいう（１）。
【０２１６】
複数のメディトープバリアントが作製されており、その親和性測定および結晶学的データが各々について蓄積されている。この試験では、極めて重要な残基を同定し、非天然アミノ酸ならびにＤ−アミノ酸を導入し、結合親和性を有意に改善するための異なる環化ストラテジーを使用した（図２Ｂ）。さらに、点変異をメディトープ結合境界面のＦａｂに導入し（バージョン２）、結合親和性の１００倍の増大を観察した（図２Ｂ）。このような修飾により、メディトープの親和性は、３７℃において１．２μＭから８６０ｐＭまで増大する（１０００倍の増大）。また、メディトープの末端とタンパク質Ｌは、諸実施形態において、トラスツズマブｍｅＦａｂに結合される場合は近接しており（図２Ａ）、短鎖リンカー（ＭＰＬ）を介してメディトープをタンパク質Ｌと融合させることにより、好ましいアビディティが示された。元のトラスツズマブｍｅＦａｂに対するＭＰＬ構築物の親和性は、Ｋｉｎｅｘａ実験による測定時、２５℃においてＫＤ＝１４ｐＭ即ち個々の成分の親和性と比べて８７，０００倍である（データ示さず）。各修飾が独立して作用すると仮定すると、合成ＭＰＬとｍｅｍＡｂの組合せでは、２億５８００万倍の親和性の増大である。ＧＦＰとＭＰＬ構築物との融合はｍｅｍＡｂ結合に影響せず、ｍｅｍＡｂとのＧＦＰ−ＭＰＬ結合は会合もしくは解離の速度論またはＨＥＲ２結合の親和性に影響しない（Ａｖｅｒｙ  ｅｔ  ａｌ．（３７）に示されたとおり）。
【０２１７】
Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７標識ＭＰＬをＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８標識ｍｅｍＡｂとともにＨＥＲ２過剰発現ＳＫＢＲ３細胞に共投与するか、または該細胞を該ｍｅｍＡｂで処理し、充分に洗浄した後に投与するかのいずれかにした。どちらの場合も、標識ＭＰＬはｍｅｍＡｂおよび抗原と共局在した（データ示さず）。また、蛍光顕微鏡検査により、嵩高いＧＦＰとＭＰＬとの融合は細胞の結合に影響しないことが示された（データ示さず）。最後に、光活性化性ＧＦＰをＭＰＬ構築物と融合させ、超解像顕微鏡検査を用いてＢＴ４７４細胞上のＨＥＲ２受容体を定量した（データ示さず）。
【０２１８】
ＨＥＲ２特異的ｓｃＦｖ由来ＣＡＲ  Ｔ細胞はＨＥＲ２陽性腫瘍を標的化し、殺傷する。トラスツズマブ抗体ベースのｓｃＦｖとＣＤ２８およびＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達ドメインとで構成された第２世代のＨＥＲ２特異的ＣＡＲを作製した。このＨＥＲ２特異的ｓｃＦｖ  ＣＡＲ（ＨＥＲ２−２８ζ）およびそれに続く２Ａリボソームスキップ配列および切断型ＣＤ１９（ＣＤ１９ｔ）（形質導入Ｔ細胞の特異的検出を可能にする、細胞内シグナル伝達を欠く不活性細胞表面マーカー）をコードしている、自己不活性型（ＳＩＮ）レンチウイルスベクターカセットを、構築した（図３Ａ）。本明細書において提供する切断型ＣＤ１９（ＣＤ１９ｔ）はまた、「マーカーペプチド」とも称される。用語「マーカーペプチド」または「ｔＣＤ１９」は、全体を通して互換的に用いている場合がある。ＨＥＲ２−２８ζＣＡＲおよびＣＤ１９ｔポリペプチドを発現させるためのヒト中央記憶Ｔ細胞（Ｔｃｍ）をレンチウイルスによる形質導入によって構築し、エキソビボで、ＣＤ３／ＣＤ２８  Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）刺激およびＩＬ−２とＩＬ−１５を補足したＸ−Ｖｉｖｏ培地中での増殖を用いて、ｃＧＭＰ−コンパチブルマニュファクチャリングプラットフォーム（ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ  ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  ｐｌａｔｆｏｒｍ）に従って増殖させた（図３Ｂ）（１８）。
【０２１９】
ヒト翻訳に関連するマウスおよび非ヒト霊長類モデルを使用すると、ＣＤ６２Ｌ＋  Ｔｃｍに由来するＴ細胞は、養子免疫伝達後、血液中に残存し、リンパ節および骨髄内の記憶Ｔ細胞ニッシェに遊走し、記憶Ｔ細胞の表現型特性を再獲得し、抗原刺激にインビボで応答することが観察された（２１，２２，２４，２５）。ＴｃｍまたはＣＤ６２Ｌ＋記憶／ナイーブＴ細胞は、記憶Ｔ細胞の固有の長期残存性ならびにｃＧＭＰ−コンパチブルマニュファクチャリングプラットフォーム（２つのフェーズＩ臨床試験（ＢＢ−ＩＮＤ  １４６４５および１５４９０）のための臨床用製剤品を作製するために使用した）を利用して、メディトープ使用可能ＨＥＲ２−ＣＡＲを発現するように操作することができる（１８）。
【０２２０】
ＨＥＲ２−２８ζＴｃｍは、インビトロで、低（ＭＣＦ７）および高（ＢＴ−４７４およびＳＫ−ＢＲ−３）ＨＥＲ２発現レベルのどちらも示す標的細胞株パネルに対して強力なＨＥＲ２特異的細胞溶解活性を示す（図４Ａから４Ｄ）。さらに、ＨＥＲ２−２８ζＴｃｍの頭蓋内注射は、ＢＴ−４７４  ＨＥＲ２＋乳房腫瘍細胞株に由来する確立された脳腫瘍の退縮を媒介し、１００％のマウスで長期生存をもたらし得る（データ示さず）。
【０２２１】
合成メディトープ使用可能トラスツズマブの重鎖および軽鎖は、レンチウイルス発現ベクター内にサブクローニングされ得る（図５）。各鎖は個々に作製しなければならないため、ＩＲＥＳモチーフが軽鎖と重鎖との間に組み込まれるか、またはリボソームスキップ配列、例えば、Ｔ２Ａまたは２Ａ配列が使用される［１５］。さらに、メディトープ使用可能Ｆａｂが用いられたモノマー型ＣＡＲを作出してもよい。従って、モノマー型メディトープ使用可能Ｆａｂを二価のメディトープと架橋し、ＣＡＲ  Ｔ細胞の活性の調節を可能にしてもよい（図５）。膜貫通ドメインをモノマー型Ｌ−セレクチンで置き換え（２６）、単純なポリグリシン−セリンリンカーを使用する。
【０２２２】
メディトープ使用可能ＣＡＲ  Ｔ細胞。一次ヒトＴ細胞、例えばＣＤ６２Ｌ＋  Ｔｃｍ細胞を少なくとも３例の健常ドナーの末梢血から単離し、ＨＥＲ２−ＣＡＲを発現するようにレンチウイルスによる形質導入によって操作し、特異性および機能的活性についてインビトロで評価する。ＯＫＴ３／ＣＤ２８  Ｄｙｎａｂｅａｄ（Ｒ）とサイトカイン（ＩＬ−２およびＩＬ−１５）刺激とを用いたメディトープ使用可能ＨＥＲ２＋  ＣＡＲ  Ｔｃｍの増殖後、各構築物の発現レベルをＦＡＣＳより、細胞の形質導入およびＣＡＲ発現に対する抗Ｆｃのマーカーとして抗ＣＤ１９を、抗原結合のためにＡｌｅｘａ  ｆｌｕｏｒ  ４８８標識細胞外Ｈｅｒ２−Ｆｃ構築物を、および機能性メディトープ−ＣＡＲドッキングのためにＡｌｅｘａ  ｆｌｕｏｒ  ６４７−コンジュゲートメディトープを用いて、特性評価する。陽性ＣＡＲ  Ｔ細胞を、必要であれば、抗ＣＤ１９磁気細胞選択またはＦＡＣＳによって富化させる。各構築物、メディトープ使用可能Ｆａｂおよびメディトープ使用可能ｍＡｂがＨＥＲ２陽性（低および高ＨＥＲ２発現腫瘍株；図３Ａ）ならびにＨＥＲ２陰性乳がん細胞株を標的化して溶解させる能力を、ＤＯＴＡコンジュゲート高親和性メディトープの存在下および非存在下で標準的なクロム放出アッセイおよび長期共培養アッセイ（２４から９６時間）を用いて調べる。種々のＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞のエフェクター機能を調べるため、腫瘍細胞との共培養後のＨＥＲ２依存性サイトカイン産生、例えばＩＦＮγおよびＴＮＦαの分泌を、この場合もＤＯＴＡコンジュゲート高親和性メディトープの存在下および非存在下で測定する。さらに、活性化および細胞溶解活性のマーカー、即ち、ＣＤ６９、グランザイム−ＢおよびＣＤ１０７ａならびに細胞消耗のマーカー、例えばＰＤ−１を含める。さらに、ＤＯＴＡ−コンジュゲートメディトープの存在下および非存在下での種々のメディトープ使用可能ＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞の抗原依存性増殖能を、ＣＳＦＥを用いたフローサイトメトリー色素希釈解析により測定する。各場合において、結果をｓｃＦｖ  ＣＡＲ  Ｔ細胞と比較する。このようなインビトロ機能アッセイを行なうための方法論は本発明者らのグループによって容易に確立される（６，２７）。
【０２２３】
超解像顕微鏡検査および自己相関解析（２８）を使用し、各メディトープ使用可能ＣＡＲ  Ｔ細胞について受容体分布を調べる。このアプローチにより、クラスター内のタンパク質のサイズ、占有および密度を定量的に測定することが可能になる。本明細書において示すように、超高親和性ｐａＧＦＰ−ＭＰＬ構築物を作製し、超解像顕微鏡検査を用いて１５ｎｍの解像で単一の分子を検出した。また、超解像イメージング用に、ｐａＧＦＰ−ＭＰＬよりも立体的拘束性が少ない、蛍光標識した高親和性１５量体メディトープを作製した。これらの試薬を使用し、メディトープ使用可能ＦａｂまたはｍＡｂを発現している約１２個の個々の細胞を解析し、ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞の有効性を受容体分布と相関させる。
【０２２４】
［実施例２］
動物モデルにおけるメディトープ使用可能ＣＡＲの有効性およびインビボイメージング。ＮＳＧマウスにおいて、腫瘍の増殖阻害に対するメディトープ使用可能ＣＡＲ  Ｔ細胞の有効性を評価し、６４Ｃｕ標識ＤＯＴＡ−コンジュゲートメディトープで前処理したｍｅＨＥＲ２＋−ＣＡＲ  Ｔ細胞をＰＥＴを用いてイメージングする。ＮＳＧマウスをｍｅＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞で処置し、６４Ｃｕ標識ＤＯＴＡ−コンジュゲートメディトープを規定の時間点で投与し、ｍｅＨＥＲ２−ＣＡＲ  Ｔ細胞によるメディトープの取込みをインサイチュで評価する。
【０２２５】
プレターゲティング型イメージングにより、腫瘍におけるｍＡｂの低速蓄積および血中からのｍＡｂの低速排出を、比較的短い半減期の有用なＰＥＴ金属から、２工程法によって分離する。まず、患者に（ストレプトアビジンまたは特有の結合ドメインとの）コンジュゲート型ｍＡｂを、次いで、６４Ｃｕを担持しているホーミングリガンドを投与する。このホーミングリガンドは、腫瘍と結合している修飾ｍＡｂに速やかに結合するか、速やかに排出される。６４Ｃｕの半減期の方が短いため、シグナルは大きくなる。また、このトレーサーは速やかに排出されるため、バックグラウンドが低減される。このアプローチを用いた前臨床画像は、直接コンジュゲーション法よりも有意に良好な画像となる（１０）。患者におけるＣＡＲ  Ｔ細胞の位置、増殖および寿命のイメージングは、この治療法の開発および臨床評価において途方もなく有用である。固形腫瘍、例えば脳腫瘍の処置のためのインビボＣＡＲ  Ｔ細胞マウスモデル（図６）は、本発明らの研究室で充分に確立されている（２７，３４）。
【０２２６】
雌ＮＯＤ−ｓｃｉｄ  ＩＬ２Ｒγヌル（ＮＳＧ）マウスおよび非観血的Ｘｅｎｏｇｅｎイメージングのためのホタルルシフェラーゼ（ｆｆＬｕｃ）と蛍光レポーターＥＧＦＰとの両方を発現するように操作されたＨＥＲ２増幅乳がん株ＢＴ４７４を用いて、直伸性（ｄｕａｌ  ｏｒｔｈｏｔｒｏｐｉｃ）転移性デュアル腫瘍異種移植片モデルが、使用される（２７）。ＥＧＦＰ−ｆｆＬｕｃ＋  ＢＴ４７４腫瘍細胞を、原発疾患のモデリングのために乳腺脂肪体に併存的に（ＰＢＳとマトリゲルの５０μＬの混合物中１×１０６個）、および転移性疾患のモデリングのために頭蓋内（２μＬのＰＢＳ中１×１０５個）に移植した。腫瘍が確立されたら（典型的には、７から１４日間）、単回用量の５×１０６個の各ＨＥＲ２−ｍｅＣＡＲ  Ｔｃｍまたは非操作Ｔｃｍ（模擬）またはＰＢＳを静脈内輸注する。ｉ．ｖ．投与されたＣＡＲ  Ｔ細胞は脳に輸送され、腫瘍の退縮を媒介することが示されている（３５，３６）。腫瘍の増殖／退縮をＸｅｎｏｇｅｎ（登録商標）ＩＶＩＳ光学的イメージングとカリパスでの測定によって非観血的に定量し、生存率をカプラン・マイヤーによって解析する。この試験では、腫瘍内へのＴ細胞の浸潤と残存を免疫組織化学検査により、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ標識メディトープとＣＤ３マーカーを用いて評価し、Ｔｃｍの残存をフローサイトメトリーにより、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ標識メディトープ、ＣＤ４５、ＣＤ４／ＣＤ８およびＣＤ６２Ｌマーカーを用いて腫瘍およびリンパ性組織において定量する。腫瘍およびリンパ性組織における腫瘍（Ｋｉ６７，ＴＵＮＥＬ）の増殖／アポトーシス、ＣＡＲ  Ｔ細胞の活性化および細胞溶解機能（ＣＤ６９、Ｇｒａｎｚｙｍｅ  Ｂ，ＩＦＮγ）をフローサイトメトリーにより測定する。ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞のインビボ有効性を、先に特性評価されたＨＥＲ２−２８ζｓｃＦｖ  ＣＡＲ  Ｔ細胞と比較する。この試験により、ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞がＨＥＲ２＋腫瘍の退縮を媒介する能力が確立され、ｍｅＦａｂまたはｍｅｍＡｂのＣＡＲ  Ｔ細胞間での抗腫瘍活性およびＴ細胞の残存の潜在的な差が示される。
【０２２７】
Ｃ−末端ＤＯＴＡを有する高親和性メディトープを直接、合成する。ＤＯＴＡ−メディトープに６４Ｃｕを付加し、ゲルクロマトグラフィーによって精製し、ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞と混合する。この細胞を、ＥＧＦＰ−ｆｆＬｕｃ＋  ＢＴ４７４腫瘍担持動物に投与する。ＭｉｃｒｏＰＥＴイメージングを、注射直後およびその後の規定の時間点で実施する。１日目と２日目、動物を屠殺し、メディトープとｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞の生体内分布をｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞の原発部位および転移性疾患部位で調べる。次に、プレターゲティング型イメージング法を適用する。ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞を同じ直伸性転移性異種移植片モデルに投与する。６４ＣＵ−ＤＯＴＡメディトープをｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞投与後１時間目に投与し、そのあと、規定の時間点でイメージングする（１、２、３および６時間）。ｍｅＣＡＲ  Ｔ細胞投与後、１日目、３日目および１０日目の同じイメージングスケジュールで行なう。この場合も、動物を屠殺し、生体内分布分布（１つまたは複数）をＸ線撮影によって調べる。
【０２２８】
表
表１．膜貫通ドメインの例。
【０２２９】
【表１】
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【０２３０】
表２．シグナル伝達ドメインの例。
【０２３１】
【表２】
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【０２３２】
参考文献
【０２３３】
【表３】
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【０２３４】
非公式な配列表
【０２３５】
【化３】
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【０２３６】
諸実施形態
実施形態１．（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域、軽鎖可変（ＶＬ）領域、重鎖定常領域（ＣＨ）および軽鎖定常領域（ＣＬ）によって形成され且つフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む、抗体領域；ならびに（ｉｉ）膜貫通ドメインを含むタンパク質をコードしている、単離された核酸。
【０２３７】
実施形態２．前記抗体領域が、抗体断片である、実施形態１の単離された核酸。
【０２３８】
実施形態３．前記抗体領域が、Ｆｃドメインを含む、実施形態１または２の単離された核酸。
【０２３９】
実施形態４．前記抗体領域が、ヒト化抗体領域である、実施形態１から３のうちの１つの単離された核酸。
【０２４０】
実施形態５．さらに、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインをコードしている細胞内Ｔ細胞シグナル伝達配列を含む、実施形態１から４のうちの１つの単離された核酸。
【０２４１】
実施形態６．前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである、実施形態５の単離された核酸。
【０２４２】
実施形態７．さらに、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインをコードしている細胞内共刺激シグナル伝達配列を含む、実施形態１から６のうちの１つの単離された核酸。
【０２４３】
実施形態８．前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである、実施形態７の単離された核酸。
【０２４４】
実施形態９．さらに、スペーサー領域をコードしているスペーサー配列を含む、実施形態１から８のうちの１つの単離された核酸。
【０２４５】
実施形態１０．前記スペーサー領域が、前記膜貫通ドメインと前記抗体領域との間に存在している、実施形態９の単離された核酸。
【０２４６】
実施形態１１．さらに、リンカードメインをコードしているリンカー配列を含む、実施形態１から１０のうちの１つの単離された核酸。
【０２４７】
実施形態１２．前記リンカードメインが、前記膜貫通ドメインと前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している、実施形態１１の単離された核酸。
【０２４８】
実施形態１３．前記リンカードメインが、前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインのと間に存在している、実施形態１１の単離された核酸。
【０２４９】
実施形態１４．前記リンカードメインが、配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含む、実施形態１１の単離された核酸。
【０２５０】
実施形態１５．（ｉ）重鎖可変ドメインと前記膜貫通ドメインとを含む前記タンパク質の重鎖ドメインをコードしている、重鎖配列；および（ｉｉ）軽鎖可変ドメインを含む前記タンパク質の軽鎖ドメインをコードしている、軽鎖配列を含み、ここで、前記重鎖可変ドメインと前記軽鎖可変ドメインが、一緒になって前記抗体領域の少なくとも一部分を形成している、実施形態１から１４のうちの１つの単離された核酸。
【０２５１】
実施形態１６．前記重鎖配列と前記軽鎖配列との間に自己切断性ペプチジル配列を含む、実施形態１５の単離された核酸。
【０２５２】
実施形態１７．前記自己切断性ペプチジルリンカー配列が、Ｔ２Ａ配列または２Ａ配列である、実施形態１６の単離された核酸。
【０２５３】
実施形態１８．前記軽鎖配列が、前記重鎖配列の３’側である、実施形態１５から１７のうちの１つの単離された核酸。
【０２５４】
実施形態１９．前記抗体領域が、セツキシマブメディトープ使用可能ドメイン、トラスツズマブメディトープ使用可能ドメイン、ペルツズマブメディトープ使用可能ドメイン、Ｍ５Ａメディトープ使用可能ドメインまたはリツキシマブメディトープ使用可能ドメインである、実施形態１から１８のうちの１つの単離された核酸。
【０２５５】
実施形態２０．抗体重鎖の可変ドメインを含む第１部分および抗体軽鎖の可変ドメインと抗体軽鎖の定常ドメインとを含む第２部分を含むタンパク質をコードしている単離された核酸であって、第１部分がさらに膜貫通ドメインを含む、単離された核酸。
【０２５６】
実施形態２１．前記第１部分が、さらに、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含む、実施形態２０の単離された核酸。
【０２５７】
実施形態２２．前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである、実施形態２０の単離された核酸。
【０２５８】
実施形態２３．前記第１部分が、さらに、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含む、実施形態２０から２２のうちの１つの単離された核酸。
【０２５９】
実施形態２４．前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである、実施形態２３の単離された核酸。
【０２６０】
実施形態２５．前記第１部分が、さらに、リンカードメインを含む、実施形態２０から２４のうちの１つの単離された核酸。
【０２６１】
実施形態２６．前記リンカードメインが、前記膜貫通ドメインと前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している、実施形態２５の単離された核酸。
【０２６２】
実施形態２７．前記リンカードメインが、前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとの間に存在している、実施形態２５の単離された核酸。
【０２６３】
実施形態２８．前記リンカードメインが、配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含む、実施形態２５の単離された核酸。
【０２６４】
実施形態２９．前記第１部分が、さらに、ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態２０の単離された核酸。
【０２６５】
実施形態３０．前記第１部分が、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって：該重鎖の可変ドメイン、重鎖定常ドメイン、該膜貫通ドメイン、該ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインおよび細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含む、実施形態２３の単離された核酸分子。
【０２６６】
実施形態３１．さらに、重鎖の可変ドメインと膜貫通ドメインとの間に配置されたスペーサー領域を含む、実施形態２０から３０のうちの１つの単離された核酸分子。
【０２６７】
実施形態３２．前記スペーサー領域が、さらに、ヒンジ領域を含む、実施形態３１の単離された核酸。
【０２６８】
実施形態３３．抗体重鎖の可変ドメインおよび抗体軽鎖の可変ドメインが、ヒト化型である、実施形態２０の単離された核酸。
【０２６９】
実施形態３４．前記第１部分が、重鎖定常ドメインを含む、実施形態２０の単離された核酸。
【０２７０】
実施形態３５．前記第１部分と前記第２部分との間に自己切断性ペプチジル配列を含む、実施形態２０の単離された核酸。
【０２７１】
実施形態３６．前記自己切断性ペプチジルコード配列が、Ｔ２Ａコード配列または２Ａコード配列である、実施形態３５の単離された核酸。
【０２７２】
実施形態３７．前記第２部分をコードしている核酸配列が、前記第１部分をコードしている核酸配列の３’側である、実施形態２０のうちの１つの単離された核酸。
【０２７３】
実施形態３８．前記タンパク質が、抗ＣＤ１９タンパク質、抗ＣＤ２０タンパク質、抗ＣＤ２２タンパク質、抗ＣＤ３０タンパク質、抗ＣＤ３３タンパク質、抗ＣＤ４４ｖ６／７／８タンパク質、抗ＣＤ１２３タンパク質、抗ＣＥＡタンパク質、抗ＥＧＰ−２タンパク質、抗ＥＧＰ−４０タンパク質、抗ｅｒｂ−Ｂ２タンパク質、抗ｅｒｂ−Ｂ２，３，４タンパク質、抗ＦＢＰタンパク質、抗胎児型アセチルコリン受容体タンパク質、抗ＧＤ２タンパク質、抗ＧＤ３タンパク質、抗Ｈｅｒ２／ｎｅｕタンパク質、抗ＩＬ−１３Ｒ−ａ２タンパク質、抗ＫＤＲタンパク質、ａｎｔｉ  ｋ−軽鎖タンパク質、抗ＬｅＹタンパク質、抗Ｌ１細胞接着分子タンパク質、抗ＭＡＧＥ−Ａ１タンパク質、抗メソテリンタンパク質、抗マウスＣＭＶ感染細胞タンパク質、抗ＭＵＣ２タンパク質、抗ＮＫＧＤ２タンパク質、抗腫瘍胎児抗原タンパク質、抗ＰＣＳＡタンパク質、抗ＰＳＭＡタンパク質、ｍＡｂ  ＩｆＥによって標的化される抗ＴＡＡタンパク質、抗ＥＧＦＲタンパク質、抗ＴＡＧ−７２  タンパク質または抗ＶＥＧＦ−７２タンパク質である、実施形態１から３７のうちの１つの単離された核酸。
【０２７４】
実施形態３９．さらに、自殺遺伝子配列を含む実施形態１から３８のうちの１つの単離された核酸。
【０２７５】
実施形態４０．実施形態１から３９のうちの１つの核酸を含む、発現ベクター。
【０２７６】
実施形態４１．前記発現ベクターが、ウイルスベクターである、実施形態４０の発現ベクター。
【０２７７】
実施形態４２．前記ウイルスが、レンチウイルスまたはオンコ−レトロウイルスである、実施形態４１の発現ベクター。
【０２７８】
実施形態４３．実施形態４０から４２のうちの１つの発現ベクターを含む、Ｔリンパ球。
【０２７９】
実施形態４４．重鎖の可変ドメイン、重鎖定常ドメイン、膜貫通ドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインおよび共刺激Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含む第１ポリペプチドと、軽鎖の可変ドメインおよび軽鎖の定常ドメインを含む第２ポリペプチドとを含む、実施形態４３のＴリンパ球。
【０２８０】
実施形態４５．（ｉ）重鎖可変（ＶＨ）領域と軽鎖可変（ＶＬ）領域によって形成され且つフレームワーク領域のアミノ酸残基を含むペプチド結合部位を形成している中心空洞を含む、抗体領域；ならびに（ｉｉ）膜貫通ドメインを含む、組換えタンパク質。
【０２８１】
実施形態４６．前記抗体領域が、さらに、重鎖定常領域（ＣＨ）と軽鎖定常領域（ＣＬ）とを含む、実施形態４５の組換えタンパク質。
【０２８２】
実施形態４７．前記抗体領域が、Ｆｃドメインを含む、実施形態４５または４６の組換えタンパク質。
【０２８３】
実施形態４８．前記抗体領域が、ヒト化抗体領域である、実施形態４５から４７のうちの１つの組換えタンパク質。
【０２８４】
実施形態４９．前記抗体領域が、ｓｃＦｖ抗体領域を含んでいない、実施形態４５から４８のうちの１つの組換えタンパク質。
【０２８５】
実施形態５０．前記タンパク質が、さらに、細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインを含む、実施形態４５から４９のうちの１つの組換えタンパク質。
【０２８６】
実施形態５１．前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζ細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインである、実施形態５０の組換えタンパク質。
【０２８７】
実施形態５２．さらに、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含む、実施形態４５から５１のうちの１つの組換えタンパク質。
【０２８８】
実施形態５３．前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、４−１ＢＢ細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、ＩＣＯＳ細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはＯＸ−４０細胞内共刺激シグナル伝達ドメインである、実施形態５２の組換えタンパク質。
【０２８９】
実施形態５４．さらに、スペーサー領域を含む、実施形態４５から５３のうちの１つの組換えタンパク質。
【０２９０】
実施形態５５．前記スペーサー領域が、前記膜貫通ドメインと前記抗体領域との間に存在している、実施形態５４の組換えタンパク質。
【０２９１】
実施形態５６．さらに、リンカードメインを含む、実施形態４５から５５のいずれか１つの実施形態の組換えタンパク質。
【０２９２】
実施形態５７．前記リンカードメインが、前記膜貫通ドメインと前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインとの間に存在している、実施形態５６の組換えタンパク質。
【０２９３】
実施形態５８．前記リンカードメインが、前記細胞内Ｔ細胞シグナル伝達ドメインと前記細胞内共刺激シグナル伝達ドメインとの間に存在している、実施形態５６の組換えタンパク質。
【０２９４】
実施形態５９．前記リンカードメインが、配列ＧＧＣＧＧまたはＧＧＧを含む、実施形態５７または５８の組換えタンパク質。
【０２９５】
実施形態６０．前記抗体領域が、セツキシマブメディトープ使用可能ドメイン、トラスズマブメディトープ使用可能ドメイン、ペルツズマブメディトープ使用可能ドメイン、Ｍ５Ａメディトープ使用可能ドメインまたはリツキシマブメディトープ使用可能ドメインである、実施形態４５から５９のうちの１つの組換えタンパク質。
【０２９６】
実施形態６１．ペプチジル部分を含む化合物が、前記ペプチド結合部位に結合されている、実施形態４５から６０のうちの１つの組換えタンパク質。
【０２９７】
実施形態６２．前記化合物が、多価メディトープである、実施形態６１の組換えタンパク質。
【０２９８】
実施形態６３．抗体重鎖の可変ドメインを含む第１部分および抗体軽鎖の可変ドメインと抗体軽鎖の定常ドメインとを含む第２部分を含む組換えタンパク質であって、第１部分がさらに膜貫通ドメインを含み、該抗体重鎖の可変ドメイン、該抗体軽鎖の可変ドメインおよび該抗体軽鎖の定常ドメインが、一緒になって抗体領域を形成している、組換えタンパク質。
【０２９９】
実施形態６４．前記膜貫通ドメインが、Ｔリンパ球の細胞膜内に存在している実施形態４５から６３のうちの１つの組換えタンパク質を含む、Ｔリンパ球。
【０３００】
実施形態６５．がんの処置方法であって、がんの処置を必要とする被験体に有効量の実施形態６４のＴ−リンパ球を投与することを含み、前記抗体領域が抗がん抗体領域である、方法。
【０３０１】
実施形態６６．前記Ｔ−リンパ球が、自己Ｔ−リンパ球である、実施形態６５の方法。
【０３０２】
実施形態６７．前記Ｔ−リンパ球が、異種Ｔ−リンパ球である、実施形態６５の方法。
【０３０３】
実施形態６８．前記がんが、固形腫瘍のがんまたは造血器悪性腫瘍である、実施形態６５の方法。
【０３０４】
実施形態６９．前記がんが、卵巣がん、腎細胞癌、Ｂ細胞性悪性腫瘍、白血病、リンパ腫、乳がん、結腸直腸がん、前立腺がん、神経芽細胞腫、黒色腫、髄芽細胞腫、肺がん、骨肉腫、膠芽腫または神経膠腫である、実施形態６５から６８のうちの１つの方法。
【０３０５】
実施形態７０．Ｔリンパ球を実施形態４０から４２のうちの１つの発現ベクターと接触させることを含む、Ｔリンパ球のリプログラミング方法。
【０３０６】
実施形態７１．（ｉ）がん患者に、実施形態４５から６３のうちの１つの組換えタンパク質を含み且つここで前記抗体領域が抗がん抗体領域である有効量のＴリンパ球と、前記ペプチド結合部位に結合し得るペプチジル部分を含み且つさらに検出可能な標識を含む化合物とを投与すること；（ｉｉ）前記化合物が、前記ペプチド結合部位に結合し、それにより、組換えタンパク質−化合物複合体を形成することを可能にすること；および（ｉｉｉ）前記がん患者において前記組換えタンパク質−化合物複合体を検出し、それにより、がんを検出することを含む、がんの検出方法。
【０３０７】
実施形態７２．請求項１の単離された核酸を含む、Ｔリンパ球。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１２Ｄ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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