(57)【要約】ＤＭ１などの活性薬剤がリンカーを介してソマトスタチン受容体結合部分などの標的指向性部分に付加されたコンジュゲート、及びかかるコンジュゲートを含む粒子が設計された。かかるコンジュゲート及び粒子は、活性薬剤の時間空間的送達の改善、体内分布及び腫瘍における浸透の改善、及び／又は毒性の低下をもたらすことができる。コンジュゲート、粒子、及びその製剤の作製方法が提供される。例えば癌を治療又は予防するための、それを必要としている対象への製剤の投与方法が提供される。
2018535212.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞の増殖を低下させ、アポトーシスを増加させ、又は細胞周期停止を増加させる方法であって、前記細胞にコンジュゲートを投与することを含み、前記コンジュゲートは、リンカーによってソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）標的化部分にカップリングした活性薬剤を含み、前記活性薬剤はメルタンシン（ＤＭ１）である、方法。
【請求項２】
前記細胞がソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）を発現する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記細胞がＳＳＴＲ２を発現する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記細胞が腫瘍細胞である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記細胞が神経内分泌癌細胞である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記細胞が、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、褐色細胞腫、神経芽細胞腫、神経節神経腫、傍神経節腫、カルチノイド、ガストリノーマ、グルカゴノーマ、血管作動性腸管ポリペプチド分泌腫瘍、膵ポリペプチド分泌腫瘍、非機能性胃腸膵腫瘍、甲状腺髄様癌（ｍｅｄｕａｌｌａｒｙ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｎｃｅｒ）、皮膚メルケル細胞腫、下垂体腺腫、及び膵癌細胞から選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記細胞が、脳癌、卵巣癌、及び結腸直腸癌細胞から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
前記細胞のホスホヒストンＨ３レベルが増加する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記細胞の切断型カスパーゼ３レベルが増加する、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
対象の腫瘍を治療し、腫瘍容積を低下させ、又は腫瘍にＤＭ１を送達する方法であって、前記対象にコンジュゲートを投与することを含み、前記コンジュゲートは、リンカーによってソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）標的化部分にカップリングした活性薬剤を含み、前記活性薬剤はメルタンシン（ＤＭ１）である、方法。
【請求項１１】
前記腫瘍がソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）を発現する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記腫瘍がＳＳＴＲ２を発現する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記コンジュゲートの投与後に前記ＳＳＴＲが細胞にインターナライズする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＳＳＴＲが、オクトレオチドで処理した細胞上のＳＳＴＲよりも速くインターナライズする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
腫瘍が神経内分泌癌である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
前記神経内分泌癌が、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、褐色細胞腫、神経芽細胞腫、神経節神経腫、傍神経節腫、カルチノイド、ガストリノーマ、グルカゴノーマ、血管作動性腸管ポリペプチド分泌腫瘍、膵ポリペプチド分泌腫瘍、非機能性胃腸膵腫瘍、甲状腺髄様癌（ｍｅｄｕａｌｌａｒｙ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｎｃｅｒ）、皮膚メルケル細胞腫、下垂体腺腫、及び膵癌から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記腫瘍が、神経芽細胞腫、乳癌、脳癌、卵巣癌、及び結腸直腸癌から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１８】
前記腫瘍の容積が約６０％以上減少する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１９】
前記腫瘍の容積が少なくとも約９０％減少する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記対象が、ＳＳＴＲシンチグラフィ又は陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）で検出される陽性スキャン結果を有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＳＳＴＲシンチグラフィにおいてインジウム−１１１標識ペンテトレオチドが使用されるか、又はＰＥＴにおいて６８Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＴＡＴＥ、６８Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＴＯＣ、及び６８Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＮＯＣが使用される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記コンジュゲートの投与後に前記対象の体重の低下が約３０％、約２０％、約１５％、約１０％又は約５％未満である、請求項１０に記載の方法。
【請求項２３】
前記コンジュゲートの投与後に前記対象の全血球数（ＣＢＣ）又は白血球（ＷＢＣ）数の低下が約３０％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％未満である、請求項１０に記載の方法。
【請求項２４】
前記コンジュゲートの投与後に前記対象のＡＳＴ又はＡＬＴ値の増加が約３０％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％未満である、請求項１０に記載の方法。
【請求項２５】
前記コンジュゲートが単独で投与したＤＭ１よりも低い毒性を有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項２６】
前記毒性が、前記対象の体重、ＡＳＴ又はＡＬＴ値、又はＷＢＣ数の変化によって計測される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記コンジュゲートが前記腫瘍の血管表面から前記腫瘍の少なくとも約２５、約３０、約３５、約４０、約４５、約５０、約１００、約１５０、約２００、約２５０、約３００、約４００、約５００、約６００、約７００、約８００、約９００、約１０００、約１１００、約１２００、約１３００、約１４００又は約１５００μｍ中まで達する、請求項１０に記載の方法。
【請求項２８】
前記コンジュゲートが前記腫瘍の中心部まで浸透する、請求項１０に記載の方法。
【請求項２９】
前記コンジュゲートが前記腫瘍の中間部まで浸透する、請求項１０に記載の方法。
【請求項３０】
前記コンジュゲートが、前記腫瘍に結合する抗体及び／又は前記抗体を含む抗体薬物コンジュゲートよりも速く前記腫瘍に浸透する、請求項１０に記載の方法。
【請求項３１】
前記コンジュゲートが、前記腫瘍に結合する抗体及び／又は前記抗体を含む抗体薬物コンジュゲートよりも深く前記腫瘍に浸透する、請求項１０に記載の方法。
【請求項３２】
前記ＳＳＴＲ標的化部分がＳＳＴＲ２標的化部分である、請求項１又は１０に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＳＳＴＲ２標的化部分がペプチドである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＳＳＴＲ２標的化部分が、ソマトスタチン、オクトレオチド、オクトレオテート、パシレオチド、バプレオチド、セグリチド、ランレオチド、及びこれらの誘導体からなる群から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ＳＳＴＲ２標的化部分がＴｙｒ３−オクトレオテート（ＴＡＴＥ）又はその誘導体である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記コンジュゲートのＳＳＴＲ２への結合が、そのＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、又はＳＳＴＲ５への結合よりも強い、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記コンジュゲートが低い膜透過性を有する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３８】
前記膜透過性が頂側膜側から側底膜側への向き及び側底膜側から頂側膜側への向きの両方で低い、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
膜透過性が、Ｃａｃｏ−２単層膜で計測した前記コンジュゲートの見かけの透過性（Ｐａｐｐ）によって計測される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記コンジュゲートが、表１、表２、表３、及び表４の任意のコンジュゲートから選択される、請求項１又は１０に記載の方法。
【請求項４１】
前記コンジュゲートがコンジュゲート５７である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
コンジュゲートと追加の活性薬剤とを含む医薬組成物であって、前記コンジュゲートは、リンカーによってソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）標的化部分にカップリングした活性薬剤を含み、前記活性薬剤はメルタンシン（ＤＭ１）である、医薬組成物。
【請求項４３】
前記追加の活性薬剤がＳＳＴＲに結合しない、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記追加の活性薬剤が癌症状緩和薬である、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記癌症状緩和薬がカルチノイド症候群を治療する、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記癌症状緩和薬がテロトリスタット又はテロトリスタットエチプレートである、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記コンジュゲートがシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）酵素を阻害しない、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記ＣＹＰ酵素が、ＣＹＰ３Ａ４ミダゾラム、ＣＹＰ３Ａ４テストステロン、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｂ６、及びＣＹＰ２Ｃ１９である、請求項４７に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記追加の活性薬剤が癌を治療する、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記追加の活性薬剤が神経内分泌腫瘍、腎癌、乳癌、又は脳癌を治療する、請求項４９に記載の医薬組成物（ｐｈａｒａｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）。
【請求項５１】
前記追加の活性薬剤が、Ｌｕ−１７７標識ソマトスタチン類似体ペプチド（ルタセラ）、エベロリムス（アフィニトール（登録商標）（Ａｆｉｎｉｔｏｒ（登録商標）））、カペシタビン（ゼローダ（登録商標）（Ｘｅｌｏｄａ（登録商標）））、エトポシド（エトポホス（登録商標）（Ｅｔｏｐｏｐｈｏｓ（登録商標）））、スニチニブ、ダカルバジン、又はフルオロウラシルである、請求項５０に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
前記ＳＳＴＲ標的化部分がＳＳＴＲ２標的化部分である、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前記ＳＳＴＲ２標的化部分がペプチドである、請求項５２に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
前記ＳＳＴＲ２標的化部分が、ソマトスタチン、オクトレオチド、オクトレオテート、パシレオチド、バプレオチド、セグリチド、ランレオチド、及びこれらの誘導体からなる群から選択される、請求項５３に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
前記ＳＳＴＲ２標的化部分がＴｙｒ３−オクトレオテート（ＴＡＴＥ）又はその誘導体である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
前記コンジュゲートのＳＳＴＲ２への結合が、そのＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、又はＳＳＴＲ５への結合よりも強い、請求項５２に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
前記コンジュゲートが、表１、表２、表３、及び表４の任意のコンジュゲートから選択される、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
前記コンジュゲートがコンジュゲート５７である、請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
前記コンジュゲートが低い膜透過性を有する、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
前記膜透過性が頂側膜側から側底膜側への向き及び側底膜側から頂側膜側への向きの両方で低い、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
膜透過性が、Ｃａｃｏ−２単層膜で計測した前記コンジュゲートの見かけの透過性（Ｐａｐｐ）によって計測される、請求項６０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、標的指向性リガンド、そのコンジュゲート、及び薬物送達用粒子の分野に関する。より詳細には、本発明は、ソマトスタチン受容体を標的とする分子の、例えば癌治療への使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ナノメディシンの開発は、概して、薬物の薬学的特性の改良、及びある場合には、より細胞特異的な標的化送達の向上に向けて行われる。幾つかの細胞特異的薬物が記載されており、モノクローナル抗体、アプタマー、ペプチド、及び小分子が含まれる。かかる薬物の何らかの潜在的利点にも関わらず、サイズ、安定性、製造費用、免疫原性、薬物動態不良及び他の要因を含め、幾つもの問題がそれらの臨床応用を制限している。ナノ粒子薬物送達システムは、例えば透過性・貯留性亢進（ＥＰＲ：ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ）効果によって薬物の循環半減期の延長、薬物の非特異的取込みの低減、及び腫瘍内における薬物貯留の改善を可能にし得るため、全身薬物送達に魅力的である。ナノ粒子として送達用に製剤化された治療薬の例は限られており、ドキシル（登録商標）（ＤＯＸＩＬ（登録商標））（リポソームカプセル化ドキソルビシン（ｄｏｘｙｒｕｂｉｃｉｎ））及びアブラキサン（登録商標）（ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標））（アルブミン結合パクリタキセルナノ粒子）が挙げられる。
【０００３】
薬物又は薬物候補を特異的器官又は組織の特異的罹患細胞及び組織、例えば癌細胞に時間空間的に制御された形で有効に送達するためのナノテクノロジーの開発により、全身毒性などの治療上の課題を解消又は改善できる可能性がある。しかしながら、送達システムのターゲティングによって薬物を治療が必要な部位に優先的に送達し得るものの、ナノ粒子から放出される薬物は、例えば、標的細胞の領域に有効な量で滞留しないこともあり、又は治療効果はなおも達成しつつ治療頻度を減らしたり若しくは投与薬物の減量を可能にしたりするのに十分な長さの時間にわたって比較的非毒性の状態で循環中に滞留しないこともある。抗体薬物コンジュゲートは抗体を含み、及び細胞傷害性ペイロードが設計されている。しかしながら、抗体のサイズが、小型の標的指向性リガンドと比較して固形腫瘍浸透の制限となる（（非特許文献１）（この内容は全体として参照により本明細書に援用される）を参照）。小型の標的指向性リガンドは固形腫瘍への浸透もまた速く、これは高い腫瘍Ｃｍａｘが必要なペイロードにとって重要である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】シャン（Ｘｉａｎｇ）ら著、セラノスティクス（Ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓ）、第５巻、第１０号、ｐ．１０８３〜１０９７、２０１５年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、当該技術分野においては、薬物ターゲティング及び送達の向上並びに固形腫瘍により深く浸透する薬物の設計が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本出願人らは、ソマトスタチン受容体結合部分と活性薬剤、例えば白金含有薬剤などの癌療法剤とのコンジュゲートである分子を創製した。更には、かかるコンジュゲートは粒子にカプセル化することができる。本コンジュゲート及び粒子は、ソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）を発現する細胞に腫瘍細胞傷害剤などの活性薬剤を送達するのに有用である。
【０００７】
本出願人らは、新規コンジュゲート及びポリマーナノ粒子を含めた粒子並びにその医薬製剤を開発した。治療用、予防用、又は診断用薬剤などの活性薬剤のコンジュゲートは、ソマトスタチン受容体に結合することのできる標的指向性部分にリンカーを介して付加される。本コンジュゲート及び粒子は、活性薬剤単独の送達と比較して活性薬剤の時間空間的送達の改善及び／又は体内分布の改善をもたらすことができる。ある場合には、標的指向性部分は治療剤としても働くことができる。一部の実施形態において、標的指向性薬剤は、インビボでの治療剤の有効性を実質的に妨げない。コンジュゲート、粒子、及びかかる粒子を含む製剤を作製する方法が本明細書に記載される。かかる粒子は、活性薬剤に感受性が高い疾患の治療又は予防、例えば癌又は感染症の治療又は予防に有用である。
【０００８】
本コンジュゲートは、リンカーによってつながった標的指向性リガンドと活性薬剤とを含み、ここでコンジュゲートは、一部の実施形態において、式：
（Ｘ−Ｙ−Ｚ）
［式中、Ｘはソマトスタチン受容体標的化部分であり；Ｙはリンカーであり；及びＺは活性薬剤である］を有する。一実施形態において、活性薬剤はＤＭ１であってもよい。
【０００９】
本発明の一態様において、細胞の増殖を低下させ、アポトーシスを増加させ、又は停止を増加させる方法が提供される。この方法は細胞にコンジュゲートを投与することを含み、ここでコンジュゲートは、リンカーによってソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）標的化部分にカップリングした活性薬剤を含み、活性薬剤はメルタンシン（ＤＭ１）である。
【００１０】
本発明の別の態様において、対象の腫瘍を治療し、腫瘍容積を低下させ、又は腫瘍にＤＭ１を送達する方法が提供される。この方法は対象にコンジュゲートを投与することを含み、ここでコンジュゲートは、リンカーによってソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）標的化部分にカップリングした活性薬剤を含み、活性薬剤はメルタンシン（ＤＭ１）である。
【００１１】
本発明の更に別の態様において、神経内分泌癌を治療する方法が提供され、ここで神経内分泌癌は、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、褐色細胞腫、神経芽細胞腫、神経節神経腫、傍神経節腫、カルチノイド、ガストリノーマ、グルカゴノーマ、血管作動性腸管ポリペプチド分泌腫瘍、膵ポリペプチド分泌腫瘍、非機能性胃腸膵腫瘍、甲状腺髄様癌（ｍｅｄｕａｌｌａｒｙ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｎｃｅｒ）、皮膚メルケル細胞腫、下垂体腺腫、及び膵癌から選択される。この方法は細胞にコンジュゲートを投与することを含み、ここでコンジュゲートは、リンカーによってソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）標的化部分にカップリングした活性薬剤を含み、活性薬剤はメルタンシン（ＤＭ１）である。
【００１２】
本発明の更に別の態様において、コンジュゲートと追加の活性薬剤とを含む医薬組成物が提供され、ここでコンジュゲートは、リンカーによってソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）標的化部分にカップリングした活性薬剤を含み、及び活性薬剤はメルタンシン（ＤＭ１）である。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】ドレハー（Ｄｒｅｈｅｒ）ら著、ジャーナル・オブ・ザ・ナショナル・キャンサー・インスティテュート（ＪＮＣＩ）、第９８巻、第５号、ｐ．３３５、２００６年の図６である。
【図２Ａ】コンジュゲート５７治療及びコンジュゲート５７＋オクトレオチド競合体治療によるＮＣＩ−Ｈ５２４細胞増殖を示す図。
【図２Ｂ】コンジュゲート５７治療及びコンジュゲート５７＋オクトレオチド競合体治療によるＮＣＩ−Ｈ５２４細胞周期停止を示す図。
【図２Ｃ】コンジュゲート５７治療単独（競合体−）及びコンジュゲート５７治療と競合体（競合体＋）によるＨ５２４（受容体＋）及びＨ４６０（受容体−）細胞の細胞増殖阻害ＩＣ５０レベルを比較する図。
【図３Ａ】コンジュゲート５７治療後のＨ６９  ＳＣＬＣ腫瘍の周辺部、中間部、及び中心部における細胞周期停止マーカーＰＨ３の増加を示す図。
【図３Ｂ】２４時間〜７２時間のＰＨ３応答を示す図。
【図３Ｃ】２４時間時点のＰＨ３応答を示す図。
【図４】コンジュゲート５７治療後のＰＨ３及びＣＣ３レベルを示すＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍の中央部からの組織切片像を示す図。
【図５】２ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート５７の単回投与後のＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍における切断型カスパーゼ３レベルを示す図。
【図６】２用量のコンジュゲート５７投与後のＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍の平均腫瘍容積を示す図。
【図７】２用量のコンジュゲート５７投与後のＮＣＩ−Ｈ５２４腫瘍の平均腫瘍容積を示す図。
【図８】コンジュゲート５７で治療した動物の平均体重を示す図。
【図９】コンジュゲート５７による治療後又は標準治療併用による治療後のＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍容積を示す図。
【図１０】コンジュゲート５７又はＤＭ１による治療後のＮＣＩ−Ｈ８２腫瘍容積を示す図。
【図１１Ａ】ＮＣＩ−Ｈ５２４  ＳＣＬＣモデルにおける種々の用量のコンジュゲート５７による用量反応試験の腫瘍容積計測値を示す図。
【図１１Ｂ】種々の用量のコンジュゲート５７で治療した動物の体重変化を示す図。
【図１２】コンジュゲート５７又はコンジュゲート１２０治療によるＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍容積変化を示す図。
【図１３】マウス、ラット又はイヌ血漿中のコンジュゲート５７の経時的平均濃度を示す図。
【図１４】マウス、ラット及びイヌにおける対数体重に対するコンジュゲート５７の対数クリアランスを示す図。
【図１５】ＤＭ１又はコンジュゲート５７で治療したＳＤラットにおける白血球（ＷＢＣ）数を示す図。
【図１６Ａ】ＤＭ１又はコンジュゲート５７で治療したＳＤラットにおける肝毒性マーカー：ＡＬＴ（図１６Ａ）及びＡＳＴ（図１６Ｂ）のレベルを示す図。
【図１６Ｂ】ＤＭ１又はコンジュゲート５７で治療したＳＤラットにおける肝毒性マーカー：ＡＬＴ（図１６Ａ）及びＡＳＴ（図１６Ｂ）のレベルを示す図。
【図１７】ＳＳＴＲ２発現の尺度としての種々の腫瘍細胞のＩＨＣ染色を示す図。
【図１８Ａ】Ｈ６９腫瘍におけるＰＨ３応答のウエスタンブロット（Ｗｅｓｔｅｒ  ｂｌｏｔ）結果を示す図。
【図１８Ｂ】Ｈ６９腫瘍におけるＰＨ３応答のＩＨＣ結果を示す図。
【図１９】Ｈ６９腫瘍に対するＣＣ３応答のＩＨＣ結果を示す図。
【図２０】コンジュゲート単独及びナノ粒子に製剤化したコンジュゲートによる治療の腫瘍容積変化を示す図。
【図２１】コンジュゲート５７治療によるＨ６９腫瘍における媒体と比較したＰＨ３及びＣＣ３倍数変化を示す図。
【図２２Ａ】コンジュゲート５７治療後２４時間及び７２時間のＨ６９腫瘍の周辺部、中間部及び中心部におけるＰＨ３（図２２Ａ）及びＣＣ３（図２２Ｂ）染色像を示す図。
【図２２Ｂ】コンジュゲート５７治療後２４時間及び７２時間のＨ６９腫瘍の周辺部、中間部及び中心部におけるＰＨ３（図２２Ａ）及びＣＣ３（図２２Ｂ）染色像を示す図。
【図２３】ＨＣＣ−３３腫瘍の治療におけるコンジュゲート５７の有効性を示す図。
【図２４Ａ】単独又は種々のナノ粒子製剤で投与したときの血漿中におけるコンジュゲート５７の残留％を示す図。
【図２４Ｂ】単独又は種々のナノ粒子製剤で投与したときのラット血漿中におけるコンジュゲート５７濃度変化を示す図。
【図２５Ａ】ＳＳＴＲ２受容体インターナリゼーション強度を示した図。
【図２５Ｂ】種々の時点におけるＨ５２４−ＭＤ腫瘍異種移植片のＳＳＴＲ２インターナリゼーション（ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｉｚａｔｉｏｎ）を示した図。
【図２５Ｃ】ＳＳＴＲ２インターナリゼーション分布レベルを示した図。
【図２５Ｄ】種々の時点におけるＨ５２４腫瘍異種移植片のＳＳＴＲ２内部細胞分布を示した図。
【図２６Ａ】オクトレオチドと共に及び無しでコンジュゲート５７で治療したＩＭＲ−３２細胞における競合アッセイ結果を示した図。
【図２６Ｂ】コンジュゲート５７で治療した継代３代目のＩＭＲ−３２腫瘍を担持するマウスにおける腫瘍容積変化を示した図。
【図２７】コンジュゲート５７で治療したＨＣＣ−３３異種移植片のＴＧＩ％を示した図。
【図２８】小細胞肺癌におけるコンジュゲート及び抗体の腫瘍浸透を比較した図。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
少なくとも５つのソマトスタチン受容体サブタイプが特徴付けられており、腫瘍は様々な受容体サブタイプを発現し得る（例えば、シェア（Ｓｈａｅｒ）ら著、インターナショナル・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｉｎｔ．３．Ｃａｎｃｅｒ）、第７０巻、ｐ．５３０〜５３７、１９９７年を参照）。天然に存在するソマトスタチン及びその類似体は、受容体サブタイプへの結合に差異を呈する。本出願人らは、この特徴を利用して、活性薬剤を含むコンジュゲートの疾患組織標的へのターゲティングを改善する新規粒子を創製した。このようなターゲティングは、例えば、部位における活性薬剤の量を改善し、及び対象に対する活性薬剤毒性を低減し得る。本明細書で使用されるとき、「毒性」は、物質又は組成物が細胞、組織、生物又は細胞環境にとって有害又は有毒となる能力を指す。低毒性とは、物質又は組成物が細胞、組織、生物又は細胞環境にとって有害又は有毒となる能力の低下を指す。かかる毒性の低下又は低毒性は、標準測定値を基準としたものか、治療を基準としたものか、又は治療がない場合を基準としたものであり得る。
【００１５】
毒性は、更に対象の体重減少を基準として計測されてもよく、ここでは体重の１５％超、２０％超又は３０％超の体重減少が毒性の指標となる。嗜眠及び全身倦怠感を含む患者の症状呈示の尺度など、毒性の他の尺度が計測されてもまたよい。好中球減少又は血小板減少もまた毒性の尺度であり得る。
【００１６】
毒性の薬理学的指標としては、ＡＳＴ／ＡＬＴ値の上昇、神経毒性、腎損傷、ＧＩ障害などが挙げられる。
本コンジュゲートは粒子の投与後に放出される。本標的化薬物コンジュゲートは、活性分子ターゲティングを透過性・貯留性亢進効果（ＥＰＲ）及び粒子の全体的な体内分布の改善と組み合わせて利用することにより、標的化粒子又はカプセル化された非標的化薬物の投与と比較してより高い有効性及び忍容性を提供する。
【００１７】
加えて、ＳＳＴＲ非発現細胞に対する活性薬剤に連結されたソマトスタチン標的化部分を含有するコンジュゲートの毒性は、活性薬剤単独の毒性と比較して低下していると予想される。いかなる特定の理論にも拘束されないが、本出願人らは、この特徴が、コンジュゲートされた活性薬剤の細胞侵入能力が活性薬剤単独の細胞侵入能力と比較して低下していることに起因すると考える。従って、本明細書に記載されるとおりの活性薬剤を含むコンジュゲート及びそのコンジュゲートを含有する粒子は、概して、活性薬剤単独と比較して非ＳＳＴＲ発現細胞に対する毒性が低下しており、且つＳＳＴＲ発現細胞に対する毒性が少なくとも同じか又は増加している。
【００１８】
本発明の目的は、時間空間的薬物送達のための改良された化合物、組成物、及び製剤を提供することである。
更に、本発明の目的は、時間空間的薬物送達のための改良された化合物、組成物、及び製剤を作製する方法を提供することである。
【００１９】
また、本発明の目的は、改良された化合物、組成物、及び製剤をそれを必要としている個体に投与する方法を提供することでもある。
Ｉ．コンジュゲート
コンジュゲートは、標的指向性部分、例えばＳＳＴＲに結合することのできる分子にリンカーによって付加された活性薬剤又はそのプロドラッグを含む。本コンジュゲートは、単一の活性薬剤と単一の標的指向性部分との間のコンジュゲート、例えば、構造Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは標的指向性部分であり、Ｙはリンカーであり、及びＺは活性薬剤である］を有するコンジュゲートであり得る。
【００２０】
一部の実施形態において、本コンジュゲートは、２つ以上の標的指向性部分、２つ以上のリンカー、２つ以上の活性薬剤、又はこれらの任意の組み合わせを含有する。本コンジュゲートは任意の数の標的指向性部分、リンカー、及び活性薬剤を有し得る。本コンジュゲートは、構造Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｙ−Ｘ、（Ｘ−Ｙ）ｎ−Ｚ、Ｘ−（Ｙ−Ｚ）ｎ、Ｘ−Ｙ−Ｚｎ、（Ｘ−Ｙ−Ｚ）ｎ、（Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｙ）ｎ−Ｚ［式中、Ｘは標的指向性部分であり、Ｙはリンカーであり、Ｚは活性薬剤であり、及びｎは１〜５０、２〜２０、例えば、１〜５の整数である］を有し得る。Ｘ、Ｙ、及びＺは出現毎に同じ又は異なってもよく、例えば本コンジュゲートは２種類以上の標的指向性部分、２種類以上のリンカー、及び／又は２種類以上の活性薬剤を含有し得る。
【００２１】
本コンジュゲートは、単一の活性薬剤に付加された２つ以上の標的指向性部分を含有し得る。例えば、本コンジュゲートは、複数の標的指向性部分が各々異なるリンカーを介して付加された活性薬剤を含有し得る。本コンジュゲートは、構造Ｘ−Ｙ−Ｚ−Ｙ−Ｘ［式中、各Ｘは、同じであっても又は異なってもよい標的指向性部分であり、各Ｙは、同じであっても又は異なってもよいリンカーであり、及びＺは活性薬剤である］を有し得る。
【００２２】
本コンジュゲートは、単一の標的指向性部分に付加された２つ以上の活性薬剤を含有し得る。例えば本コンジュゲートは、複数の活性薬剤が各々異なるリンカーを介して付加された標的指向性部分を含み得る。本コンジュゲートは、構造Ｚ−Ｙ−Ｘ−Ｙ−Ｚ［式中、Ｘは標的指向性部分であり、各Ｙは、同じであっても又は異なってもよいリンカーであり、及び各Ｚは、同じであっても又は異なってもよい活性薬剤である］を有し得る。
【００２３】
Ａ．活性薬剤
本明細書に記載されるとおりのコンジュゲートは、少なくとも１つの活性薬剤（第１の活性薬剤）を含有する。本コンジュゲートは、第１の活性薬剤と同じであることも又は異なることもある２つ以上の活性薬剤を含有し得る。活性薬剤は、治療用、予防用、診断用、又は栄養用薬剤であってもよい。種々の活性薬剤が当該技術分野において公知であり、本明細書に記載されるコンジュゲートに使用し得る。活性薬剤は、タンパク質又はペプチド、小分子、核酸又は核酸分子、脂質、糖、糖脂質、糖タンパク質、リポタンパク質、又はこれらの組み合わせであってもよい。一部の実施形態において、活性薬剤は、抗原、アジュバント、放射性物質、イメージング剤（例えば蛍光部分）又はポリヌクレオチドである。一部の実施形態において、活性薬剤は有機金属化合物である。
【００２４】
抗癌剤
活性薬剤は癌療法薬であってもよい。癌療法薬としては、例えば、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）又はＦａｓリガンドなどの細胞死受容体作動薬、又は細胞死受容体に結合し若しくはそれを活性化させ、又は他の方法でアポトーシスを誘導する任意のリガンド又は抗体が挙げられる。好適な細胞死受容体としては、限定はされないが、ＴＮＦＲ１、Ｆａｓ、ＤＲ３、ＤＲ４、ＤＲ５、ＤＲ６、ＬＴβＲ及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【００２５】
化学療法剤、サイトカイン、ケモカイン、及び放射線療法剤などの癌療法薬を活性薬剤として使用することができる。化学療法剤としては、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗薬、アントラサイクリン、植物性アルカロイド、トポイソメラーゼ阻害薬、及び他の抗腫瘍剤が挙げられる。かかる薬剤は、典型的には細胞分裂又はＤＮＡの合成及び機能に影響を及ぼす。活性薬剤として使用することのできる療法薬の更なる例としては、モノクローナル抗体及びチロシンキナーゼ阻害薬、例えば特定の種類の癌（例えば、慢性骨髄性白血病、消化管間質腫瘍）の分子異常を直接標的とするメシル酸イマチニブが挙げられる。
【００２６】
化学療法剤としては、限定はされないが、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロラムブシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、タキソール及びその誘導体、イリノテカン、トポテカン、アムサクリン、エトポシド、リン酸エトポシド、テニポシド、エピポドフィロトキシン類、トラスツズマブ、セツキシマブ、及びリツキシマブ、ベバシズマブ、及びこれらの組み合わせが挙げられる。これらのいずれも本コンジュゲートの活性薬剤として使用し得る。
【００２７】
一部の実施形態において、活性薬剤は、２０−ｅｐｉ−ｌ，２５ジヒドロキシビタミンＤ３、４−イポメアノール、５−エチニルウラシル、９−ジヒドロタキソール、アビラテロン、アシビシン、アクラルビシン、塩酸アコダゾール、アクロニン、アシルフルベン、アデシペノール、アドゼレシン、アルデスロイキン、全ｔｋアンタゴニスト、アルトレタミン、アンバムスチン、アンボマイシン（ａｍｂｏｍｙｃｉｎ）、酢酸アメタントロン、アミドクス、アミホスチン、アミノグルテチミド、アミノレブリン酸、アムルビシン、アムサクリン、アナグレリド、アナストロゾール、アンドログラホリド、血管新生阻害薬、アンタゴニストＤ、アンタゴニストＧ、アンタレリクス、アントラマイシン、抗背側化形態形成タンパク質−１、抗エストロゲン薬、アンチネオプラストン、アンチセンスオリゴヌクレオチド、グリシン酸アフィディコリン、アポトーシス遺伝子モジュレータ、アポトーシス調節因子、アプリン酸、ＡＲＡ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ、アルギニンデアミナーゼ、アスパラギナーゼ、アスペルリン、アスラクリン、アタメスタン、アトリムスチン、アキシナスタチン１、アキシナスタチン２、アキシナスタチン３、アザシチジン、アザセトロン、アザトキシン、アザチロシン、アゼテパ、アゾトマイシン、バッカチンＩＩＩ誘導体、バラノール、バチマスタット、ベンゾクロリン類、ベンゾデパ、ベンゾイルスタウロスポリン、βラクタム誘導体、β−アレチン、ベタクラマイシンＢ、ベツリン酸、ＢＦＧＦ阻害薬、ビカルタミド、ビサントレン、塩酸ビサントレン、ビサジリジニルスペルミン（ｂｉｓａｚｉｒｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）、ビスナフィド、ジメシル酸ビスナフィド、ビストラテンＡ、ビゼレシン、ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、ＢＲＣ／ＡＢＬアンタゴニスト、ブレフレート、ブレキナルナトリウム、ブロピリミン、ブドチタン、ブスルファン、ブチオニンスルホキシイミン、カバジタキセル、カクチノマイシン、カルシポトリオール、カルホスチンＣ、カルステロン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体、カナリア痘ＩＬ−２、カペシタビン、カラセミド、カルベチマー、カルボプラチン、カルボキサミド−アミノ−トリアゾール、カルボキシアミドトリアゾール、カレストＭ３（ｃａｒｅｓｔ  Ｍ３）、カルムスチン、アーン７００（ｅａｒｎ  ７００）、軟骨由来阻害薬、塩酸カルビシン、カルゼレシン、カゼインキナーゼ阻害薬、カスタノスペルミン、セクロピンＢ、セデフィンゴール、セトロレリクス、クロラムブシル、クロリン類、クロロキノキサリンスルホンアミド、シカプロスト、シロレマイシン（ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）、シスプラチン、ｃｉｓ−ポルフィリン、クラドリビン、クロミフェン類似体、クロトリマゾール、コリスマイシンＡ、コリスマイシンＢ、コンブレタスタチンＡ４、コンブレタスタチン類似体、コナゲニン、クランベシジン８１６、クリスナトール、メシル酸クリスナトール、クリプトフィシン８、クリプトフィシンＡ誘導体、キュラシンＡ、シクロペンタンセラキノン類、シクロホスファミド、シクロプラタム、シペマイシン、シタラビン、シタラビンオクホスファート、細胞溶解因子、サイトスタチン、ダカルバジン、ダクリキシマ���（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）、ダクチノマイシン、塩酸ダウノルビシン、デシタビン、デヒドロジデムニンＢ、デスロレリン、デキシホスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、デキソルマプラチン、デクスラゾキサン、デクスベラパミル、デアザグアニン、メシル酸デアザグアニン、ジアジコン、ジデムニンＢ、ジドクス（ｄｉｄｏｘ）、ジエチルノルスペルミン、ジヒドロ−５−アザシチジン、ジオキサマイシン、ジフェニルスピロムスチン、ドセタキセル、ドコサノール、ドラセトロン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、塩酸ドキソルビシン、ドロロキシフェン、クエン酸ドロロキシフェン、プロピオン酸ドロモスタノロン、ドロナビノール、ジュアゾマイシン、デュオカルマイシンＳＡ、エブセレン、エコムスチン、エダトレキサート、エデルホシン、エドレコロマブ、エフロルニチン、塩酸エフロルニチン、エレメン、エルサミトルシン、エミテフール、エンロプラチン、エンプロマート、エピプロピジン、エピルビシン、塩酸エピルビシン、エプリステリド、エルブロゾール、赤血球遺伝子療法ベクター系、塩酸エソルビシン、エストラムスチン、エストラムスチン類似体、リン酸エストラムスチンナトリウム、エストロゲン作動薬、エストロゲン拮抗薬、エタニダゾール、エトポシド、リン酸エトポシド、エトプリン、エキセメスタン、ファドロゾール、塩酸ファドロゾール、ファザラビン、フェンレチニド、フィルグラスチム、フィナステリド、フラボピリドール、フレゼラスチン、フロクスウリジン、フルアステロン、フルダラビン、リン酸フルダラビン、塩酸フルオロダウノルニシン（ｆｌｕｏｒｏｄａｕｎｏｒｕｎｉｃｉｎ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、フルオロウラシル、フルロシタビン、ホルフェニメクス、ホルメスタン、ホスキドン、フォストリエシン、フォストリエシンナトリウム、フォテムスチン、ガドリニウムテキサフィリン、硝酸ガリウム、ガロシタビン、ガニレリクス、ゼラチナーゼ阻害薬、ゲムシタビン、塩酸ゲムシタビン、グルタチオン阻害薬、ヘプスルファム、ヘレグリン、ヘキサメチレンビスアセトアミド、ヒドロキシウレア、ヒペリシン、イバンドロン酸、イダルビシン、塩酸イダルビシン、イドキシフェン、イドラマントン（ｉｄｒａｍａｎｔｏｎｅ）、イホスファミド、イルモホシン、イロマスタット、イミダゾアクリドン類（ｉｍｉｄａｚｏａｃｒｉｄｏｎｅｓ）、イミキモド、免疫賦活剤ペプチド、インスリン様成長因子−１受容体阻害薬、インターフェロン作動薬、インターフェロンα−２Ａ、インターフェロンα−２Ｂ、インターフェロンα−Ｎｌ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−ＩＡ、インターフェロンγ−ＩＢ、インターフェロン類、インターロイキン類、ヨーベングアン、ヨードドキソルビシン、イプロプラチン、イリノテカン、塩酸イリノテカン、イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）、イルソグラジン、イソベンガゾール（ｉｓｏｂｅｎｇａｚｏｌｅ）、イソホモハリコンドリンＢ、イタセトロン、ジャスプラキノリド、カハラリドＦ、三酢酸ラメラリン−Ｎ、ランレオチド、ラロタキセル、酢酸ランレオチド、レイナマイシン、レノグラスチム、硫酸レンチナン、レプトルスタチン、レトロゾール、白血病阻害因子、白血球αインターフェロン、酢酸ロイプロリド、ロイプロリド／エストロゲン／プロゲステロン、リュープロレリン、レバミゾール、リアロゾール、塩酸リアロゾール、線状ポリアミン類似体、親油性二糖ペプチド、親油性白金化合物、リソクリナミド７、ロバプラチン、ロンブリシン、ロメトレキソール、ロメトレキソールナトリウム、ロムスチン、ロニダミン、ロソキサントロン、塩酸ロソキサントロン、ロバスタチン、ロキソリビン、ルルトテカン、ルテチウムテキサフィリン、リソフィリン、細胞溶解性ペプチド、マイタンシン、マンノスタチンＡ、マリマスタット、マソプロコール、マスピン、マトリライシン阻害薬、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害薬、メイタンシン、メイタンシノイド、メルタンシン（ＤＭ１）、塩酸メクロレタミン、酢酸メゲストロール、酢酸メレンゲストロール、メルファラン、メノガリル、メルバロン、メルカプトプリン、メテレリン、メチオニナーゼ、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、メトクロプラミド、メトプリン、メツレデパ、微細藻類プロテインキナーゼＣ阻害薬、ＭＩＦ阻害薬、ミフェプリストン、ミルテホシン、ミリモスチム、ミスマッチ二本鎖ＲＮＡ、ミチンドミド、ミトカルシン、ミトクロミン、ミトギリン、ミトグアゾン、ミトラクトール、ミトマルシン、マイトマイシン、マイトマイシン類似体、ミトナフィド、ミトスペル、ミトタン、マイトトキシン線維芽細胞成長因子−サポリン、ミトキサントロン、塩酸ミトキサントロン、モファロテン、モルグラモスチム、モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、モノホスホリルリピドＡ／マイコバクテリウム（ｍｙｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）細胞壁ＳＫ、モピダモール、多剤耐性遺伝子阻害薬、多腫瘍抑制因子１ベースの療法、マスタード抗癌剤、ミカペルオキシドＢ、マイコバクテリア細胞壁抽出物、ミコフェノール酸、ミリアポロン、ｎ−アセチルジナリン、ナファレリン、ナグレスチプ、ナロキソン／ペンタゾシン、ナパビン（ｎａｐａｖｉｎ）、ナフテルピン、ナルトグラスチム、ネダプラチン、ネモルビシン、ネリドロン酸、中性エンドペプチダーゼ、ニルタミド、ニサマイシン、一酸化窒素モジュレータ、ニトロキシド抗酸化剤、ニトルリン（ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ）、ノコダゾール、ノガラマイシン、ｎ−置換ベンズアミド、０６−ベンジルグアニン、オクトレオチド、オキセノン、オリゴヌクレオチド、オナプリストン、オンダンセトロン、オラシン、経口サイトカイン誘導因子、オルマプラチン、オサテロン、オキサリプラチン、オキサウノマイシン、オキシスラン、パクリタキセル、パクリタキセル類似体、パクリタキセル誘導体、パラウアミン、パルミトイルリゾキシン、パミドロン酸、パナキシトリオール、パノミフェン、パラバクチン、パゼリプチン、ペグアスパラガーゼ、ペルデシン、ペリオマイシン、ペンタムスチン、ペントサンポリ硫酸ナトリウム、ペントスタチン、ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）、硫酸ペプロマイシン、ペルフルブロン、ペルホスファミド、ペリリルアルコール、フェナジノマイシン、フェニル酢酸塩、ホスファターゼ阻害薬、ピシバニール、塩酸ピロカルピン、ピポブロマン、ピポスルファン、ピラルビシン、ピリトレキシム、塩酸ピロキサントロン、プラセチンＡ、プラセチンＢ、プラスミノーゲンアクチベーター阻害因子、白金（ＩＶ）錯体、白金化合物、白金−トリアミン錯体、プリカマイシン、プロメスタン、ポルフィマーナトリウム、ポルフィロマイシン、プレドニムスチン、塩酸プロカルバジン、プロピルビス−アクリドン、プロスタグランジンＪ２、前立腺癌抗アンドロゲン薬、プロテアソーム阻害薬、プロテインＡベースの免疫調節薬、プロテインキナーゼＣ阻害薬、タンパク質チロシンホスファターゼ阻害薬、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害薬、ピューロマイシン、塩酸ピューロマイシン、プルプリン類、ピラゾフリン、ピラゾロアクリジン、ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレンコンジュゲート、ＲＡＦアンタゴニスト、ラルチトレキセド、ラモセトロン、ＲＡＳファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害薬、ＲＡＳ阻害薬、ＲＡＳ−ＧＡＰ阻害薬、脱メチル化レテリプチン、エチドロン酸レニウムＲＥ  １８６、リゾキシン、リボプリン、リボザイム、ＲＩＩレチンアミド、ＲＮＡｉ、ログレチミド、ロヒツキン、ロムルチド、ロキニメックス、ルビギノンＢｌ、ルボキシル、サフィンゴール、塩酸サフィンゴール、サイントピン、ｓａｒＣＮＵ、サルコフィトールＡ、サルグラモスチム、ＳＤＩ  １模倣体、セムスチン、老化由来阻害薬１、センスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、シグナル伝達阻害薬、シグナル伝達モジュレータ、シムトラゼン、単鎖抗原結合タンパク質、シゾフィラン、ソブゾキサン、ボロカプテイトナトリウム、フェニル酢酸ナトリウム、ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）、ソマトメジン結合タンパク質、ソネルミン、スパルフォセートナトリウム、スパルホス酸、スパルソマイシン、スピカマイシンＤ、塩酸スピロゲルマニウム、スピロムスチン、スピロプラチン、スプレノペンチン、スポンジスタチン１、スクアラミン、幹細胞阻害薬、幹細胞分裂阻害薬、スチピアミド、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ストロメライシン阻害薬、スルフィノシン、スロフェヌル、超活性血管作動性腸管ペプチド拮抗薬、スラジスタ、スラミン、スウェインソニン、合成グリコサミノグリカン類、タリソマイシン、タリムスチン、タモキシフェンメチオジド、タウロムスチン、タザロテン、テコガランナトリウム、テガフール、テルラピリリウム、テロメラーゼ阻害薬、塩酸テロキサントロン、テモポルフィン、テモゾロミド、テニポ
シド、テロキシロン、テストラクトン、テトラクロロデカオキシド、テトラゾミン、タリブラスチン、サリドマイド、チアミプリン、チオコラリン、チオグアニン、チオテパ、トロンボポエチン、トロンボポエチン模倣体、サイマルファシン、サイモポエチン受容体作動薬、チモトリナン、甲状腺刺激ホルモン、チアゾフリン、エチルエチオプルプリンすず、チラパザミン、チタノセンジクロリド、塩酸トポテカン、トプセンチン、トレミフェン、クエン酸トレミフェン、全能性幹細胞因子、翻訳阻害薬、酢酸トレストロン、トレチノイン、トリアセチルウリジン、トリシリビン、リン酸トリシリビン、トリメトレキサート、グルクロン酸トリメトレキサート、トリプトレリン、トロピセトロン、塩酸ツブロゾール、ツロステリド、チロシンキナーゼ阻害薬、チルホスチン類、ＵＢＣ阻害薬、ウベニメクス、ウラシルマスタード、ウレデパ、泌尿生殖洞由来成長阻害因子、ウロキナーゼ受容体拮抗薬、バプレオチド、バリオリンＢ、ベラレソール、ベラミン（ｖｅｒａｍｉｎｅ）、ベルジン類、ベルテポルフィン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、ビンデシン、硫酸ビンデシン、硫酸ビネピジン、硫酸ビングリシナート、硫酸ビンレウロシン、ビノレルビン、酒石酸ビノレルビン、硫酸ビンロシジン、ビンキサルチン（ｖｉｎｘａｌｔｉｎｅ）、硫酸ビンゾリジン、ビタキシン、ボロゾール、ザノテロン、ゼニプラチン、ジラスコルブ、ジノスタチン、ジノスタチンスチマラマー、又は塩酸ゾルビシンであってもよい。
【００２８】
一部の実施形態において、活性薬剤は小分子である。一部の実施形態において、活性薬剤は小分子細胞毒である。一実施形態において、活性薬剤はカバジタキセル、又はその類似体、誘導体、プロドラッグ、若しくは薬学的に許容可能な塩である。別の実施形態において、活性薬剤はメルタンシン（ＤＭ１）又はＤＭ４、又はその類似体、誘導体、プロドラッグ、若しくは薬学的に許容可能な塩である。ＤＭ１又はＤＭ４は、チューブリンに結合することにより微小管集合を阻害する。ＤＭ１の構造を以下に示す：
【００２９】
【化１】
2018535212.tif 000003
【００３０】
活性薬剤は、１つ以上の金属中心を含有する無機又は有機金属化合物であってもよい。一部の例において、この化合物は１つの金属中心を含有する。活性薬剤は、例えば、白金化合物、ルテニウム化合物（例えば、ｔｒａｎｓ−［ＲｕＣｌ２（ＤＭＳＯ）４］、又はｔｒａｎｓ−［ＲｕＣｌ４（イミダゾール）２等）、コバルト化合物、銅化合物、又は鉄化合物であってもよい。
【００３１】
特定の実施形態において、本コンジュゲートの活性薬剤は、コンジュゲートの構成成分のモル重量百分率の合計が１００％になるようにして約１％〜約１０％、又は約１０％〜約２０％、又は約２０％〜約３０％、又は約３０％〜約４０％、又は約４０％〜約５０％、又は約５０％〜約６０％、又は約６０％〜約７０％、又は約７０％〜約８０％、又は約８０％〜約９０％、又は約９０％〜約９９％の所定のモル重量百分率を占める。コンジュゲートの１つ又は複数の活性薬剤の量はまた、１つ又は複数の標的指向性リガンドに対する比率として表してもよい。例えば、本教示は、約１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４；１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、又は１：１０の活性薬剤対リガンド比を提供する。
【００３２】
Ｂ．標的指向性部分
本明細書に記載されるとおりの標的指向性リガンド（標的指向性部分とも称される）には、１つ以上のＳＳＴＲ、例えば、ヒトＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ２、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、又はＳＳＴＲ５に結合することのできる任意の分子が含まれる。かかる標的指向性リガンドは、ペプチド、抗体模倣体、核酸（例えばアプタマー）、ポリペプチド（例えば抗体）、糖タンパク質、小分子、炭水化物、又は脂質であってもよい。一部の実施形態において、標的指向性部分はソマトスタチン又はソマトスタチン類似体（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｏｎ  ａｎａｌｏｇ）である。
【００３３】
本発明の細胞傷害性又は治療用コンジュゲートは、ソマトスタチン受容体に結合する任意のソマトスタチン類似体を利用し得る。一部の実施形態において、本コンジュゲートのソマトスタチン類似体部分は８〜１８アミノ酸を含有し、コア配列：シクロ［Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ］（配列番号１）又はシクロ［Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ］（配列番号２）を含む。例えば、この類似体のＣ末端はＴｈｒ−ＮＨ２である。
【００３４】
一実施形態において、標的指向性部分は好ましくはＳＳＴＲ２に結合する。従って、標的指向性部分を含む本コンジュゲートは、好ましくはＳＳＴＲ２に結合する。本コンジュゲートのＳＳＴＲ２への結合は、本コンジュゲートのＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４又はＳＳＴＲ５への結合よりも強い。
【００３５】
一部の実施形態において、本明細書に記載されるとおりのコンジュゲートは膜透過性が低い。膜透過性は、頂側膜側から側底膜側への向き及び側底膜側から頂側膜側への向きの両方で低いものであり得る。いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、低い膜透過性は非特異的浸透性の低下によってＳＳＴＲによる選択的取込みを増強する。低浸透性は、ＳＳＴＲ２を発現しない細胞における取込みの低下につながり、非ＳＳＴＲ２発現細胞に対する毒性の低下につながる。膜透過性は当該技術分野において公知の任意の方法により決定し得る。例えば、膜透過性はＣａｃｏ−２単層膜で見かけの透過性（Ｐａｐｐ）を計測することにより決定し得る。
【００３６】
一部の実施形態において、標的指向性部分Ｘは、ソマトスタチン、オクトレオチド、ランレオチド、ルタセラ（１７７Ｌｕ−ＤＯＴＡＴＡＴＥ）、９０Ｙ−ＤＯＴＡＴＯＣ、Ｔｙｒ３−オクトレオテート（ＴＡＴＥ）、バプレオチド、シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）［式中、ＡＡはα−Ｎ−Ｍｅリジン又はＮ−Ｍｅグルタミン酸である］、パシレオチド、ランレオチド、セグリチド、又はソマトスタチン受容体結合リガンドの任意の他の例から選択され得る。一部の実施形態において、標的指向性部分は、ソマトスタチン受容体２型及び／又は５型に結合するソマトスタチン受容体結合部分である。一部の実施形態において、ＸはＣ末端でリンカー部分Ｙに結合している。一部の実施形態において、ＸはＮ末端でリンカー部分Ｙに結合している。一部の実施形態において、標的指向性部分Ｘは少なくとも１つのＤ−Ｐｈｅ残基を含み、及び標的指向性部分ＸのＤ−Ｐｈｅ残基のフェニル環はリンカー含有部分によって置換されている。
【００３７】
本発明において有用なペプチドであるソマトスタチン類似体の例は、本明細書に記載される。有用なソマトスタチン類似体の更なる例が、以下に示す刊行物（これらの各々は本明細書によって全体として参照により援用される）に開示される：
国際公開第０３／０５７２１４号パンフレット（２００３年）
米国特許出願公開第２００３０１９１１３４号明細書（２００３年）
米国特許出願公開第２００３００８３２４１号明細書（２００３年）
米国特許第６，３１６，４１４号明細書（２００１年）
国際公開第０２／１０２１５号パンフレット（２００２年）
国際公開第９９／２２７３５号パンフレット（１９９９年）
国際公開第９８／０８１００号パンフレット（１９９８年）
国際公開第９８／４４９２１号パンフレット（１９９８年）
国際公開第９８／４５２８５号パンフレット（１９９８年）
国際公開第９８／４４９２２号パンフレット（１９９８年）
欧州特許出願第Ｐ５１６４  ＥＵ号明細書（発明者：Ｇ．ケリ（Ｇ．Ｋｅｒｉ））；
ファン・ビンスト・Ｇ（Ｖａｎ  Ｂｉｎｓｔ，Ｇ．）ら著、ペプチド・リサーチ（Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、１９９２年、第５巻、ｐ．８；
ホルバート・Ａ（Ｈｏｒｖａｔｈ，Ａ．）ら著、抄録「抗腫瘍活性を有するソマトスタチン類似体のコンホメーション（Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ  Ａｎａｌｏｇｓ  Ｈａｖｉｎｇ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ）」、第２２回ヨーロッパペプチドシンポジウム、１９９２年９月１３〜１９日、スイス、インターラーケン；
国際公開第９１／０９０５６号パンフレット（１９９１年）；
欧州特許出願公開第０  ３６３  ５８９  Ａ２号明細書（１９９０年）；
米国特許第４，９０４，６４２号明細書（１９９０年）；
米国特許第４，８７１，７１７号明細書（１９８９年）；
米国特許第４，８５３，３７１号明細書（１９８９年）；
米国特許第４，７２５，５７７号明細書（１９８８年）；
米国特許第４，６８４，６２０号明細書（１９８７年）；
米国特許第４，６５０，７８７号明細書（１９８７年）；
米国特許第４，６０３，１２０号明細書（１９８６年）；
米国特許第４，５８５，７５５号明細書（１９８６年）；
欧州特許出願公開第０  ２０３  ０３１  Ａ２号明細書（１９８６年）；
米国特許第４，５２２，８１３号明細書（１９８５年）；
米国特許第４，４８６，４１５号明細書（１９８４年）；
米国特許第４，４８５，１０１号明細書（１９８４年）；
米国特許第４，４３５，３８５号明細書（１９８４年）；
米国特許第４，３９５，４０３号明細書（１９８３年）；
米国特許第４，３６９，１７９号明細書（１９８３年）；
米国特許第４，３６０，５１６号明細書（１９８２年）；
米国特許第４，３５８，４３９号明細書（１９８２年）；
米国特許第４，３２８，２１４号明細書（１９８２年）；
米国特許第４，３１６，８９０号明細書（１９８２年）；
米国特許第４，３１０，５１８号明細書（１９８２年）；
米国特許第４，２９１，０２２号明細書（１９８１年）；
米国特許第４，２３８，４８１号明細書（１９８０年）；
米国特許第４，２３５，８８６号明細書（１９８０年）；
米国特許第４，２２４，１９９号明細書（１９８０年）；
米国特許第４，２１１，６９３号明細書（１９８０年）；
米国特許第４，１９０，６４８号明細書（１９８０年）；
米国特許第４，１４６，６１２号明細書（１９７９年）；
米国特許第４，１３３，７８２号明細書（１９７９年）；
米国特許第５，５０６，３３９号明細書（１９９６年）；
米国特許第４，２６１，８８５号明細書（１９８１年）；
米国特許第４，７２８，６３８号明細書（１９８８年）；
米国特許第４，２８２，１４３号明細書（１９８１年）；
米国特許第４，２１５，０３９号明細書（１９８０年）；
米国特許第４，２０９，４２６号明細書（１９８０年）；
米国特許第４，１９０，５７５号明細書（１９８０年）；
欧州特許第０  ３８９  １８０号明細書（１９９０年）；
欧州特許出願第０  ５０５  ６８０号明細書（１９８２年）；
欧州特許出願第０  ０８３  ３０５号明細書（１９８２年）；
欧州特許出願第０  ０３０  ９２０号明細書（１９８０年）；
国際公開第８８／０５０５２号パンフレット（１９８８年）；
国際公開第９０／１２８１１号パンフレット（１９９０年）；
国際公開第９７／０１５７９号パンフレット（１９９７年）；
国際公開第９１／１８０１６号パンフレット（１９９１年）；
英国特許出願第２，０９５，２６１号明細書（１９８１年）；
仏国特許出願第２，５２２，６５５号明細書（１９８３年）；及び
国際公開第０４／０９３８０７号パンフレット（２００４年）。
米国特許第５，６２０，９５５号明細書（１９９７年）
米国特許第５，７２３，５７８号明細書（１９９８年）
米国特許第５，８４３，９０３号明細書（１９９８年）
米国特許第５，８７７，２７７号明細書（１９９９年）
米国特許第６，１５６，７２５号明細書（２０００年）
米国特許第６，３０７，０１７号明細書（２００１年）
国際公開第９０／０３９８０号パンフレット（１９９０年）
国際公開第９１／０６５６３号パンフレット（１９９１年）
国際公開第９１／１７１８１号パンフレット（１９９１年）
国際公開第９４／０２０１８号パンフレット（１９９４年）
国際公開第９４／２１６７４号パンフレット（１９９４年）
国際公開第０４／０９３８０７号パンフレット（２００４年）；
ソマトスタチンペプチド及び類似体の合成方法については十分に実証されており、前掲の参考文献に例示されるとおり当業者の能力の範囲内にある。以下の例に更なる合成手順を提供する。以下の例はまた、本発明の標的化細胞傷害性化合物の合成方法も例示する。治療剤又は細胞傷害剤の特異的ターゲティングにより、生物活性ペプチドに特異的な受容体を発現する腫瘍を選択的に破壊することが可能になる。例えば、ソマトスタチン受容体を発現する腫瘍には、肺、乳房、前立腺、結腸、脳、胃腸管、神経内分泌軸、肝臓、又は腎臓の新生物が含まれる（シェール（Ｓｃｈａｅｒ）ら著、インターナショナル・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ）、第７０巻、ｐ．５３０〜５３７、１９９７年；シャーヴ（Ｃｈａｖｅ）ら著、ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ）、第８２巻、第１号、ｐ．１２４〜１３０、２０００年；エバンス（Ｅｖａｎｓ）ら著、ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ）、第７５巻、第６号、ｐ．７９８〜８０３、１９９７年を参照）。
【００３８】
一部の実施形態において、標的指向性部分は治療的特徴を有し、例えば標的指向性部分は細胞傷害性又は抗血管新生性である。一部の実施形態において、標的指向性部分は、腫瘍血管系、又は血管新生性の血管、例えばソマトスタチン受容体を過剰発現するものに対する親和性が何らか増加している（デンツラー（Ｄｅｎｚｌｅｒ）及びリュービ（Ｒｅｕｂｉ）、キャンサー（Ｃａｎｃｅｒ）、第８５巻、ｐ．１８８〜１９８、１９９９年；グレック（Ｇｕｌｅｃ）ら著、ジャーナル・オブ・サージカル・リサーチ（Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．）、第９７巻、第２号、ｐ．１３１〜１３７、２００１年；ウォルタリング（Ｗｏｌｔｅｒｉｎｇ）ら著、ジャーナル・オブ・サージカル・リサーチ（Ｊ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．）、第５０巻、ｐ．２４５、１９９１年を参照）。
【００３９】
一部の実施形態において、本発明で使用される標的指向性部分、例えばソマトスタチン類似体は親水性であり、従って水溶性である。一部の実施形態において、かかるコンジュゲート及びかかるコンジュゲートを含有する粒子は、例えば疎水性類似体を含むコンジュゲートと比較してこの特徴が有用となる治療パラダイムで使用される。本明細書に記載される親水性類似体は、血液、脳脊髄液、及び他の体液に対して可溶性であり得るとともに、尿に対しても可溶性であってよく、これにより腎臓による排泄が促進され得る。この特徴は、例えば本来であれば望ましくない肝毒性を呈するであろう組成物の場合に有用となり得る。本発明はまた、類似体の親水性の調節によるコンジュゲートされる様々な細胞傷害剤、例えば以下のコンジュゲート６の化学的及び構造的性質の調整を可能にする、ペプチド類似体に組み込まれる特異的親水性エレメント（例えば、ＰＥＧリンカーの組込み、及び当該技術分野における他の例）も開示する。
【００４０】
一部の実施形態において、標的指向性部分は、モノボディ、例えばアドネクチン（商標）（ＡＤＮＥＣＴＩＮ（商標））（ブリストル・マイヤーズスクイブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ニューヨーク州ニューヨーク）、アフィボディ（登録商標）（Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標））（アフィボディ・アーベー（Ａｆｆｉｂｏｄｙ  ＡＢ）、スウェーデン国ストックホルム）、アフィリン（Ａｆｆｉｌｉｎ）、ナノフィチン（ｎａｎｏｆｉｔｉｎ）（国際公開第２０１２／０８５８６１号パンフレットに記載されるものなどのアフィチン（ａｆｆｉｔｉｎ）、アンチカリン（商標）（Ａｎｔｉｃａｌｉｎ（商標））、アビマー（アビディティ多量体）、ダルピン（商標）（ＤＡＲＰｉｎ（商標））、フィノマー（商標）（Ｆｙｎｏｍｅｒ（商標））、センチリン（商標）（Ｃｅｎｔｙｒｉｎ（商標））及びクニッツドメインペプチドなどの抗体模倣体である。特定の場合には、かかる模倣体は、モル質量が約３〜２０ｋＤａの人工的ペプチド又はタンパク質である。核酸及び小分子が抗体模倣体であってもよい。
【００４１】
別の例において、標的指向性部分はアプタマーであってもよく、これは概して、ポリペプチドなど、特定の標的に結合するオリゴヌクレオチド（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、又はその類似体若しくは誘導体）である。一部の実施形態において、標的指向性部分はポリペプチド（例えば腫瘍マーカーに特異的に結合することのできる抗体）である。特定の実施形態において、標的指向性部分は抗体又はその断片である。特定の実施形態において、標的指向性部分は抗体のＦｃ断片である。
【００４２】
特定の実施形態において、本コンジュゲートの１つ又は複数の標的指向性部分は、コンジュゲートの構成成分のモル重量百分率の合計が１００％になるようにして、約０．１％〜約１０％、又は約１％〜約１０％、又は約１０％〜約２０％、又は約２０％〜約３０％、又は約３０％〜約４０％、又は約４０％〜約５０％、又は約５０％〜約６０％、又は約６０％〜約７０％、又は約７０％〜約８０％、又は約８０％〜約９０％、又は約９０％〜約９９％の所定のモル重量百分率で存在する。本コンジュゲートの標的指向性部分の量はまた、活性薬剤に対する比率として、例えば、約１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４；１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、又は１：１０のリガンド対活性薬剤比で表すこともできる。
【００４３】
Ｃ．リンカー
本コンジュゲートは、活性薬剤と標的指向性部分とをつなぐ１つ以上のリンカーを含有する。リンカーＹが１つ以上の活性薬剤と１つ以上の標的指向性リガンドとに結合することによってコンジュゲートが形成される。リンカーＹは、エステル結合、ジスルフィド、アミド、アシルヒドラゾン、エーテル、カルバメート、炭酸塩、及び尿素から独立して選択される官能基によって標的指向性部分Ｘ及び活性薬剤Ｚに付加される。或いはリンカーは、チオールとマレイミドとの間、アジドとアルキンとの間のコンジュゲーションによってもたらされるような、切断不可能な基によって標的指向性リガンド又は活性薬物のいずれかに付加されてもよい。リンカーは、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリールからなる群から独立して選択され、ここでアルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリール基の各々は、任意選択で、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルから各々独立して選択される１つ以上の基によって置換されており、ここでカルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、又はヘテロシクリルの各々は、任意選択で、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、カルボキシル、カルバモイル、エーテル、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アミド、カルバメート、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリルから各々独立して選択される１つ以上の基によって置換されている。
【００４４】
一部の実施形態において、リンカーは、切断可能である切断可能官能基を含む。切断可能官能基はインビボで加水分解され得るか、又は酵素的に、例えばカテプシンＢによって加水分解されるように設計され得る。「切断可能」リンカーとは、本明細書で使用されるとき、物理的又は化学的に切断されることのできる任意のリンカーを指す。物理的切断の例は、光、放射線放射又は熱による切断であり得る一方、化学的切断の例には、酸化還元反応による切断、加水分解、ｐＨ依存的切断又は酵素による切断が含まれる。
【００４５】
一部の実施形態においてリンカーのアルキル鎖は、任意選択で、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−から選択される１つ以上の原子又は基によって分断されていてもよい。リンカーは、コハク酸、グルタル酸又はジグリコール酸のジカルボン酸誘導体から選択され得る。一部の実施形態において、リンカーＹはＸ’−Ｒ１−Ｙ’−Ｒ２−Ｚ’であってもよく、及び本コンジュゲートは式Ｉａ：
【００４６】
【化２】
2018535212.tif 000004
【００４７】
［式中、Ｘは上記に定義した標的指向性部分であり；Ｚは活性薬剤であり；Ｘ’、Ｒ１、Ｙ’、Ｒ２及びＺ’は本明細書に定義するとおりである］に係る化合物であり得る。
Ｘ’は存在しないか、又はカルボニル、アミド、尿素、アミノ、エステル、アリール、アリールカルボニル、アリールオキシ、アリールアミノ、１つ以上の天然又は非天然アミノ酸、チオ又はスクシンイミドから独立して選択されるかのいずれかであり；Ｒ１及びＲ２は存在しないか、又はアルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ポリエチレングリコール（２〜３０単位）で構成されるかのいずれかであり；Ｙ’は存在しないか、置換又は非置換１，２−ジアミノエタン、ポリエチレングリコール（２〜３０単位）又はアミドであり；Ｚ’は存在しないか、又はカルボニル、アミド、尿素、アミノ、エステル、アリール、アリールカルボニル、アリールオキシ、アリールアミノ、チオ又はスクシンイミドから独立して選択されるかのいずれかである。一部の実施形態において、リンカーは、１つの活性薬剤分子を２つ以上のリガンドに連結させること、又は１つのリガンドを２つ以上の活性薬剤分子に連結させることを可能にし得る。
【００４８】
一部の実施形態において、リンカーＹはＡｍであり、及び本コンジュゲートは式Ｉｂ：
【００４９】
【化３】
2018535212.tif 000005
【００５０】
［式中、Ａは本明細書で定義され、ｍ＝０〜２０］に係る化合物であり得る。
式ＩａのＡはスペーサー単位であり、存在しないか、又は以下の置換基から独立して選択されるかのいずれかである。各置換基について、破線は、Ｘ、Ｚ又はＡの別の独立して選択される単位との置換部位を表し、ここでＸ、Ｚ、又はＡは置換基のいずれの側にも付加され得る：
【００５１】
【化４】
2018535212.tif 000006
【００５２】
［式中、ｚ＝０〜４０、ＲはＨ又は任意選択で置換されているアルキル基であり、及びＲ’は天然又は非天然のいずれかのアミノ酸に見られる任意の側鎖である］。
一部の実施形態において、本コンジュゲートは、式Ｉｃ：
【００５３】
【化５】
2018535212.tif 000007
【００５４】
［式中、Ａは上記に定義され、ｍ＝０〜４０、ｎ＝０〜４０、ｘ＝１〜５、ｙ＝１〜５、及びＣは本明細書に定義される分枝状要素である］に係る化合物であり得る。
式ＩｃのＣは、リジン、２，３−ジアミノプロパン酸、２，４−ジアミノ酪酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、及びシステインなどのアミノ酸を含めた、アミン類、カルボン酸類、チオール類、又はスクシンイミド類から選択される、スペーサー単位、リガンド、又は活性薬物を共有結合的に付加するための３〜６個の官能基を含有する分枝状単位である。
【００５５】
本発明のコンジュゲートの非限定的な例としては、以下の化合物（ｃｏｍｐｏｕｍｄ）が挙げられる：
【００５６】
【化６−１】
2018535212.tif 000008
【００５７】
【化６−２】
2018535212.tif 000009
【００５８】
一部の実施形態において、活性薬剤ＺはＤＭ１であり、及びソマトスタチン受容体結合剤Ｘは、ソマトスタチン、シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）、バプレオチド又はＴＡＴＥから選択される。一部の実施形態において、ＤＭ１はリンカーＹによってＸのＣ末端につながっている。一部の実施形態において、ＤＭ１はリンカーＹによってＸのＮ末端につながっている。一部の実施形態において、ＤＭ１はリンカーＹによってＸにつながっており、ここで標的指向性部分Ｘは少なくとも１つのＤ−Ｐｈｅ残基を含み、及びＤ−Ｐｈｅ残基のフェニル環は、リンカーＹを含有する基によって置換されている。
【００５９】
本発明のＤＭ１コンジュゲートと称される、ＤＭ１を含むコンジュゲートの非限定的な例としては、以下の化合物が挙げられる：
１）シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）ベースのＤＭ１コンジュゲート
一部の実施形態において、シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）がソマトスタチン受容体標的化部分として使用され、及び本コンジュゲートは、
【００６０】
【化７】
2018535212.tif 000010
【００６１】
の一般構造を有する。
一部の実施形態において、標的指向性部分は、アミド結合を作ることが可能なアミノ酸を含有する。一部の実施形態において、リンカーは、アミド結合、即ち、−ＮＨ−ＣＯ−、又は−ＣＯ−ＮＨ−（窒素上の水素は置換されていてもよい）を介して標的指向性部分に結合する。一部の実施形態において、リンカーはアミド結合を介して標的指向性部分に結合しない。一部の実施形態において、リンカーは、アミド結合、即ち、−ＮＨ−ＣＯ−、又は−ＣＯ−ＮＨ−（窒素上の水素は置換されていてもよい）を含む。
【００６２】
シクロ（ＡＡ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ）及びＤＭ１を含むコンジュゲートの非限定的な例を表１に示す：
【００６３】
【表１−１】
2018535212.tif 000011
【００６４】
【表１−２】
2018535212.tif 000012
【００６５】
【表１−３】
2018535212.tif 000013
【００６６】
【表１−４】
2018535212.tif 000014
【００６７】
【表１−５】
2018535212.tif 000015
【００６８】
【表１−６】
2018535212.tif 000016
【００６９】
【表１−７】
2018535212.tif 000017
【００７０】
２）Ｃ末端ＤＭ１コンジュゲート：
一部の実施形態において、ソマトスタチン受容体標的化部分はペプチドであり、及びリンカーはソマトスタチン受容体標的化部分のＣ末端に結合する。一部の実施形態において、ソマトスタチン受容体標的化部分はＴＡＴＥ又はＴＡＴＥ誘導体であり、ここでリンカーはＴＡＴＥ又はＴＡＴＥ誘導体のＣ末端に結合し、Ｃ末端ＴＡＴＥベースのＤＭ１コンジュゲートと称される。Ｃ末端ＤＭ１コンジュゲートは、
【００７１】
【化８】
2018535212.tif 000018
【００７２】
［式中、Ｒは、Ｈ、アルキル、アリール、カルボニル、アミド、アルコール、又はアミン（任意選択で１つ以上の基によって置換されている）から選択され；及び
Ａｒ１及びＡｒ２は、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリール基（任意選択で１つ以上の基によって置換されている）から独立して選択される］の一般構造を有する。
【００７３】
一部の実施形態において、リンカーとソマトスタチン受容体標的化部分のＣ末端とをつなぐ共有結合はアミド結合である。
リンカーがソマトスタチン受容体標的化部分のＣ末端に結合した、ソマトスタチン受容体標的化部分がＴＡＴＥであるＤＭ１コンジュゲートの非限定的な例を表２に示す：
【００７４】
【表２−１】
2018535212.tif 000019
【００７５】
【表２−２】
2018535212.tif 000020
【００７６】
【表２−３】
2018535212.tif 000021
【００７７】
【表２−４】
2018535212.tif 000022
【００７８】
３）Ｎ末端ＤＭ１コンジュゲート
一部の実施形態において、ソマトスタチン受容体標的化部分はペプチドであり、及びリンカーはソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端に結合する。一部の実施形態において、標的部分は、オクトレオチド、バプレオチド、及びＴＡＴＥから選択される。一部の実施形態において、リンカーとソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端とをつなぐ共有結合はアミド結合、即ち−ＮＨ−ＣＯ−である。一部の実施形態において、リンカーは、アミン結合、即ち−ＮＨ−ＣＨ２−（炭素上の水素は置換されていてもよい）を介してソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端に結合する。一部の実施形態において、リンカーは、尿素結合、即ち−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−を介してソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端に結合する。Ｎ末端ＤＭ１コンジュゲートは、
【００７９】
【化９】
2018535212.tif 000023
【００８０】
［式中、Ｒ１及びＲ２は、Ｈ、ＯＨ、アルキル、アリール、カルボニル、エステル、アミド、エーテル、アルコール、又はアミン（任意選択で１つ以上の基によって置換されている）から独立して選択され；及び
Ａｒ１は、ヘテロシクリル、アリール、及びヘテロアリール基（任意選択で１つ以上の基によって置換されている）から選択される］の一般構造を有する。一部の実施形態において、Ｒ１又はＲ２のうちの少なくとも一方はＤＭ１を含む。
【００８１】
リンカーがソマトスタチン受容体標的化部分のＮ末端に結合したＤＭ１コンジュゲートの非限定的な例を表３に示す：
【００８２】
【表３−１】
2018535212.tif 000024
【００８３】
【表３−２】
2018535212.tif 000025
【００８４】
【表３−３】
2018535212.tif 000026
【００８５】
【表３−４】
2018535212.tif 000027
【００８６】
【表３−５】
2018535212.tif 000028
【００８７】
【表３−６】
2018535212.tif 000029
【００８８】
【表３−７】
2018535212.tif 000030
【００８９】
【表３−８】
2018535212.tif 000031
【００９０】
【表３−９】
2018535212.tif 000032
【００９１】
【表３−１０】
2018535212.tif 000033
【００９２】
４）Ｄ−Ｐｈｅ置換ＤＭ１コンジュゲート
一部の実施形態において、ソマトスタチン受容体標的化部分はオクトレオチド又はＴＡＴＥなどの標的指向性リガンドであり、ここで標的指向性リガンドのＤ−Ｐｈｅ残基のフェニル環はリンカー含有部分によって置換されている。Ｄ−Ｐｈｅ置換ＤＭ１コンジュゲートは、
【００９３】
【化１０】
2018535212.tif 000034
【００９４】
［式中、Ｒは、Ｈ、ＯＨ、アルキル、アリール、カルボニル、エステル、アミド、エーテル、アルコール、又はアミン（任意選択で１つ以上の基によって置換されている）から選択される］の一般構造を有する。一部の実施形態において、ＲはＤＭ１を含む。
【００９５】
標的指向性リガンドのＤ−Ｐｈｅ残基のフェニル環がリンカー含有部分によって置換されているＤＭ１コンジュゲートの非限定的な例を表４に示す：
【００９６】
【表４−１】
2018535212.tif 000035
【００９７】
【表４−２】
2018535212.tif 000036
【００９８】
【表４−３】
2018535212.tif 000037
【００９９】
【表４−４】
2018535212.tif 000038
【０１００】
ＩＩ．粒子
１つ以上のコンジュゲートを含有する粒子は、ポリマー粒子、脂質粒子、固体脂質粒子、無機粒子、又はこれらの組み合わせ（例えば、脂質安定化ポリマー粒子）であり得る。一部の実施形態において、粒子はポリマー粒子であるか、又はポリマーマトリックスを含有する。粒子は、本明細書に記載されるポリマー又はその誘導体若しくは共重合体のいずれかを含有し得る。粒子は、概して１つ以上の生体適合性ポリマーを含有する。ポリマーは生分解性ポリマーであってもよい。ポリマーは、疎水性ポリマー、親水性ポリマー、又は両親媒性ポリマーであってもよい。一部の実施形態において、粒子は、追加的な標的指向性部分が付加された１つ以上のポリマーを含有する。
【０１０１】
粒子のサイズは目的の適用に合わせて調整することができる。粒子はナノ粒子又はマイクロ粒子であってもよい。粒子は、約１０ｎｍ〜約１０ミクロン、約１０ｎｍ〜約１ミクロン、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、約２０ｎｍ〜約５００ｎｍ、又は約２５ｎｍ〜約２５０ｎｍの直径を有し得る。一部の実施形態において、粒子は直径約２５ｎｍ〜約２５０ｎｍのナノ粒子である。当業者によれば、複数の粒子が様々なサイズを有し得ることが理解され、及び直径は粒径分布の中位径であるものと理解される。
【０１０２】
様々な実施形態において、粒子はナノ粒子であってもよく、即ち、粒子は約１マイクロメートル未満の特性寸法を有し、ここで粒子の特性寸法とは、粒子と同じ体積を有する完全な球の直径である。複数の粒子は平均直径（例えば、複数の粒子の平均直径）によって特徴付けることができる。一部の実施形態において、粒子の直径はガウス型分布を有し得る。一部の実施形態において、複数の粒子は、約３００ｎｍ未満、約２５０ｎｍ未満、約２００ｎｍ未満、約１５０ｎｍ未満、約１００ｎｍ未満、約５０ｎｍ未満、約３０ｎｍ未満、約１０ｎｍ未満、約３ｎｍ未満、又は約１ｎｍ未満の平均直径を有する。一部の実施形態において、粒子は、少なくとも約５ｎｍ、少なくとも約１０ｎｍ、少なくとも約３０ｎｍ、少なくとも約５０ｎｍ、少なくとも約１００ｎｍ、少なくとも約１５０ｎｍ、又はそれ以上の平均直径を有する。特定の実施形態において、複数の粒子は、約１０ｎｍ、約２５ｎｍ、約５０ｎｍ、約１００ｎｍ、約１５０ｎｍ、約２００ｎｍ、約２５０ｎｍ、約３００ｎｍ、約５００ｎｍなどの平均直径を有する。一部の実施形態において、複数の粒子は、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、約５０ｎｍ〜約４００ｎｍ、約１００ｎｍ〜約３００ｎｍ、約１５０ｎｍ〜約２５０ｎｍ、約１７５ｎｍ〜約２２５ｎｍなどの平均直径を有する。一部の実施形態において、複数の粒子は、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、約２０ｎｍ〜約４００ｎｍ、約３０ｎｍ〜約３００ｎｍ、約４０ｎｍ〜約２００ｎｍ、約５０ｎｍ〜約１７５ｎｍ、約６０ｎｍ〜約１５０ｎｍ、約７０ｎｍ〜約１３０ｎｍなどの平均直径を有する。例えば、平均直径は約７０ｎｍ〜１３０ｎｍであり得る。一部の実施形態において、複数の粒子は、約２０ｎｍ〜約２２０ｎｍ、約３０ｎｍ〜約２００ｎｍ、約４０ｎｍ〜約１８０ｎｍ、約５０ｎｍ〜約１７０ｎｍ、約６０ｎｍ〜約１５０ｎｍ、又は約７０ｎｍ〜約１３０ｎｍの平均直径を有する。一実施形態において、粒子は４０〜１２０ｎｍのサイズを有し、低い乃至ゼロイオン強度（１〜１０ｍＭ）でゼータ電位がほぼ０ｍＶであり、ゼータ電位値が＋５〜−５ｍＶ、及びゼロ／中性又は小さい−ｖｅ表面電荷である。
【０１０３】
Ａ．コンジュゲート
本粒子は上記に記載したとおりの１つ以上のコンジュゲートを含有する。コンジュゲートは、粒子の内面上、粒子の外面上、又は両方に存在し得る。本粒子は、上記に記載される１つ以上のコンジュゲートと対イオンとによって形成される疎水性イオン対形成複合体又は疎水性イオン対を含み得る。
【０１０４】
疎水性イオン対形成（ＨＩＰ）は、クーロン引力によって一体に保持された一対の逆の電荷のイオン間の相互作用である。ＨＩＰは、本明細書で使用されるとき、本発明のコンジュゲートとその対イオンとの間の相互作用を指し、ここで対イオンはＨ＋又はＨＯ−イオンではない。疎水性イオン対形成複合体又は疎水性イオン対は、本明細書で使用されるとき、本発明のコンジュゲートとその対イオンとによって形成された複合体を指す。一部の実施形態において、対イオンは疎水性である。一部の実施形態において、対イオンは疎水性酸又は疎水性酸の塩によって提供される。一部の実施形態において、対イオンは胆汁酸又は塩、脂肪酸又は塩、脂質、又はアミノ酸によって提供される。一部の実施形態において、対イオンは負電荷（アニオン性）である。負電荷対イオンの非限定的な例としては、対イオンスルホコハク酸ナトリウム（ＡＯＴ）、オレイン酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、硫酸デキストラン、デオキシコール酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、アニオン性脂質、アミノ酸、又はこれらの任意の組み合わせが挙げられる。いかなる理論によっても拘束されることを望むものではないが、一部の実施形態において、ＨＩＰは本発明のコンジュゲートの疎水性及び／又は親油性を増加させ得る。一部の実施形態において、本発明のコンジュゲートの疎水性及び／又は親油性の増加は粒子製剤にとって有益となることができ、本発明のコンジュゲートの有機溶媒に対するより高い溶解度をもたらし得る。いかなる理論によっても拘束されることを望むものではないが、ＨＩＰ対を含む粒子製剤は、薬物負荷及び／又は放出プロファイルなど、製剤特性が向上すると考えられる。いかなる理論によっても拘束されることを望むものではないが、一部の実施形態において、水溶液に対するコンジュゲートの溶解度の低下に起因して、粒子からの本発明のコンジュゲートの徐放が起こり得る。加えて、いかなる理論によっても拘束されることを望むものではないが、コンジュゲートを大型の疎水性対イオンと複合体化すると、ポリマーマトリックス内でのコンジュゲートの拡散が緩徐になり得る。一部の実施形態において、ＨＩＰは、対イオンが本発明のコンジュゲートに共有結合的にコンジュゲートすることなく起こる。
【０１０５】
いかなる理論によっても拘束されることを望むものではないが、ＨＩＰの強度は本発明の粒子の薬物負荷及び放出速度に影響を与え得る。一部の実施形態において、本発明のコンジュゲートのｐＫａと対イオンを提供する薬剤のｐＫａとの差の大きさを増加させることにより、ＨＩＰの強度が増加し得る。同様にいかなる理論によっても拘束されることを望むものではないが、イオン対形成条件が本発明の粒子の薬物負荷及び放出速度に影響を与え得る。
【０１０６】
一部の実施形態において、任意の好適な疎水性酸又はそれらの組み合わせが本発明のコンジュゲートとＨＩＰ対を形成し得る。一部の実施形態において、疎水性酸は、カルボン酸（限定はされないが、モノカルボン酸、ジカルボン酸、トリカルボン酸など）、スルフィン酸、スルフェン酸、又はスルホン酸であってもよい。一部の実施形態において、好適な疎水性酸の塩又はそれらの組み合わせを使用して本発明のコンジュゲートとＨＩＰ対を形成し得る。疎水性酸、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、芳香族酸、胆汁酸、高分子電解質の例、それらの水中における解離定数（ｐＫａ）及びｌｏｇＰ値は、国際公開第２０１４／０４３，６２５号パンフレット（この内容は全体として参照により本明細書に援用される）に開示された。疎水性酸の強度、疎水性酸のｐＫａと本発明のコンジュゲート（ｃｏｎｊｕａｇａｔｅ）のｐＫａとの差、疎水性酸のｌｏｇＰ、疎水性酸の相転移温度、疎水性酸と本発明のコンジュゲートとのモル比、及び疎水性酸の濃度もまた、国際公開第２０１４／０４３，６２５号パンフレット（この内容は全体として参照により本明細書に援用される）に開示された。
【０１０７】
一部の実施形態において、ＨＩＰ複合体を含む及び／又は対イオンを提供してコンジュゲートとＨＩＰ複合体を形成する方法によって調製された本発明の粒子は、ＨＩＰ複合体を有しない又はコンジュゲートとのＨＩＰ複合体を形成するいかなる対イオンも提供しない方法によって調製された粒子よりも高い薬物負荷を有し得る。一部の実施形態において、薬物負荷は５０％、１００％、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍増加し得る。
【０１０８】
一部の実施形態において、本発明の粒子は、３７℃のリン酸緩衝溶液中に置いたとき少なくとも約１分、少なくとも約１５分、少なくとも約１時間にわたってコンジュゲートを保持し得る。
【０１０９】
一部の実施形態において、本粒子におけるコンジュゲートの重量百分率は、粒子の構成成分の重量百分率の合計が１００％になるようにして、少なくとも約０．０５％、０．１％、０．５％、１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、又は５０％である。一部の実施形態において、本粒子におけるコンジュゲートの重量百分率は、粒子の構成成分の重量百分率の合計が１００％になるようにして、約０．５％〜約１０％、又は約１０％〜約２０％、又は約２０％〜約３０％、又は約３０％〜約４０％、又は約４０％〜約５０％、又は約５０％〜約６０％、又は約６０％〜約７０％、又は約７０％〜約８０％、又は約８０％〜約９０％、又は約９０％〜約９９％である。
【０１１０】
一部の例では、コンジュゲートは、約５０，０００Ｄａ未満、約４０，０００Ｄａ未満、約３０，０００Ｄａ未満、約２０，０００Ｄａ未満、約１５，０００Ｄａ未満、約１０，０００Ｄａ未満、約８，０００Ｄａ未満、約５，０００Ｄａ未満、又は約３，０００Ｄａ未満の分子量を有し得る。ある場合には、コンジュゲートは、約１，０００Ｄａ〜約５０，０００Ｄａ、約１，０００Ｄａ〜約４０，０００Ｄａ、一部の実施形態において約１，０００Ｄａ〜約３０，０００Ｄａ、一部の実施形態において約１，０００Ｄａ〜約５０，０００Ｄａ、約１，０００Ｄａ〜約２０，０００Ｄａ、一部の実施形態において約１，０００Ｄａ〜約１５，０００Ｄａ、一部の実施形態において約１，０００Ｄａ〜約１０，０００Ｄａ、一部の実施形態において約１，０００Ｄａ〜約８，０００Ｄａ、一部の実施形態において約１，０００Ｄａ〜約５，０００Ｄａ、及び一部の実施形態において約１，０００Ｄａ〜約３，０００Ｄａの分子量を有し得る。コンジュゲートの分子量は、コンジュゲートの式中にある各原子の原子量に各原子の数を乗じたものの合計として計算し得る。分子量はまた、質量分析法、ＮＭＲ、クロマトグラフィー、光散乱、粘度、及び／又は当該技術分野において公知の任意の他の方法によって計測してもよい。当該技術分野において、分子量の単位がｇ／ｍｏｌ、ダルトン（Ｄａ）、又は原子質量単位（ａｍｕ）であり得ることは公知であり、ここで１ｇ／ｍｏｌ＝１Ｄａ＝１ａｍｕである。
【０１１１】
Ｂ．ポリマー
本粒子は１つ以上のポリマーを含有し得る。ポリマーは、以下のポリエステル：本明細書では「ＰＧＡ」と称される、グリコール酸単位を含むホモポリマー、及び本明細書ではまとめて「ＰＬＡ」と称される、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−Ｄ−ラクチド、及びポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチドなど、乳酸単位を含むホモポリマー、及び本明細書ではまとめて「ＰＣＬ」と称される、ポリ（ε−カプロラクトン）など、カプロラクトン単位を含むホモポリマー；及び本明細書ではまとめて「ＰＬＧＡ」と称される、乳酸：グリコール酸の比によって特徴付けられる様々な形態のポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）など、乳酸単位とグリコール酸単位とを含む共重合体；及びポリアクリレート類、及びこれらの誘導体のうちのもう一つを含有し得る。例示的ポリマーにはまた、本明細書ではまとめて「ＰＥＧ化ポリマー」と称される、様々な形態のＰＬＧＡ−ＰＥＧ又はＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体など、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と前述のポリエステル類との共重合体も含まれる。特定の実施形態では、ＰＥＧ領域がポリマーと共有結合的に会合することにより、切断可能なリンカーによって「ＰＥＧ化ポリマー」が生じ得る。
【０１１２】
本粒子は１つ以上の親水性ポリマーを含有し得る。親水性ポリマーとしては、デンプン及び多糖などのセルロース系ポリマー；親水性ポリペプチド；ポリ−Ｌ−グルタミン酸（ＰＧＳ）、γ−ポリグルタミン酸、ポリ−Ｌ−アスパラギン酸、ポリ−Ｌ−セリン、又はポリ−Ｌ−リジンなどのポリ（アミノ酸）；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、及びポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）などのポリアルキレングリコール類及びポリアルキレンオキシド類；ポリ（オキシエチレン化ポリオール）；ポリ（オレフィンアルコール）；ポリビニルピロリドン）；ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）；ポリ（メタクリル酸ヒドロキシアルキル）；ポリ（サッカリド）類；ポリ（ヒドロキシ酸）類；ポリ（ビニルアルコール）；ポリオキサゾリン；及びこれらの共重合体が挙げられる。
【０１１３】
本粒子は１つ以上の疎水性ポリマーを含有し得る。好適な疎水性ポリマーの例としては、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、及びポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）類などのポリヒドロキシ酸類；ポリ３−ヒドロキシブチレート又はポリ４−ヒドロキシブチレートなどのポリヒドロキシアルカノエート類；ポリカプロラクトン類；ポリ（オルトエステル）類；ポリ無水物類；ポリ（ホスファゼン）類；ポリ（ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）類；チロシンポリカーボネート類などのポリカーボネート類；ポリアミド類（合成及び天然ポリアミド類を含む）、ポリペプチド類、及びポリ（アミノ酸）類；ポリエステルアミド類；ポリエステル類；ポリ（ジオキサノン）類；ポリ（アルキレンアルキレート）類；疎水性ポリエーテル類；ポリウレタン類；ポリエーテルエステル類；ポリアセタール類；ポリシアノアクリレート類；ポリアクリレート類；ポリメタクリル酸メチル類；ポリシロキサン類；ポリ（オキシエチレン）／ポリ（オキシプロピレン）共重合体；ポリケタール類；ポリリン酸塩類；ポリヒドロキシバレレート類；ポリアルキレンオキサレート類；ポリアルキレンスクシネート類；ポリ（マレイン酸）類、並びにこれらの共重合体が挙げられる。
【０１１４】
特定の実施形態において、疎水性ポリマーは脂肪族ポリエステルである。一部の実施形態において、疎水性ポリマーは、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、又はポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）である。
【０１１５】
本粒子は１つ以上の生分解性ポリマーを含有し得る。生分解性ポリマーには、水に不溶性又は難溶性の、体内で化学的又は酵素的に水溶性材料に変換されるポリマーが含まれ得る。生分解性ポリマーには、架橋されたポリマーが水に不溶性又は難溶性になるように加水分解性（ｈｙｄｏｌｙｚａｂｌｅ）架橋連結基によって架橋された可溶性ポリマーが含まれ得る。
【０１１６】
粒子中の生分解性ポリマーとしては、ポリアミド類、ポリカーボネート類、ポリアルキレン類、ポリアルキレングリコール類、ポリアルキレンオキシド類、ポリアルキレンテレフタレート（ｔｅｒｅｐｔｈａｌａｔｅ）類、ポリビニルアルコール類、ポリビニルエーテル類、ポリビニルエステル類、ポリハロゲン化ビニル類、ポリビニルピロリドン、ポリグリコリド類、ポリシロキサン類、ポリウレタン類及びこれらの共重合体、アルキルセルロース、例えばメチルセルロース及びエチルセルロースなど、ヒドロキシアルキルセルロース類、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシ−プロピルメチルセルロース、及びヒドロキシブチルメチルセルロースなど、セルロースエーテル類、セルロースエステル類、ニトロセルロース類、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、カルボキシルエチルセルロース、三酢酸セルロース、セルロース硫酸ナトリウム塩、アクリル酸及びメタクリル酸エステルのポリマー、例えば、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）（ｐｏｌｙ（ｈｅｘｌｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ））、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、ポリ（アクリル酸オクタデシル）、ポリエチレン、ポリプロピレン  ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレンテレフタレート）、ポリ（ビニルアルコール）類、ポリ（酢酸ビニル、ポリ塩化ビニル  ポリスチレン及びポリビニルピロリドン（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｒｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ）など、これらの誘導体、これらの線状及び分枝状共重合体及びブロック共重合体、及びこれらのブレンドを挙げることができる。例示的生分解性ポリマーとしては、ポリエステル類、ポリ（オルトエステル）類、ポリ（エチレンイミン）類、ポリ（カプロラクトン）類、ポリ（ヒドロキシアルカノエート）類、ポリ（ヒドロキシバレレート）類、ポリ無水物類、ポリ（アクリル酸）類、ポリグリコリド類、ポリ（ウレタン）類、ポリカーボネート類、ポリリン酸エステル類、ポリホスファゼン類、これらの誘導体、これらの線状及び分枝状共重合体及びブロック共重合体、及びこれらのブレンドが挙げられる。一部の実施形態において、本粒子は生分解性ポリエステル類又はポリ無水物類、例えば、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、及びポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）などを含有する。
【０１１７】
本粒子は１つ以上の両親媒性ポリマーを含有し得る。両親媒性ポリマーは、疎水性ポリマーブロックと親水性ポリマーブロックとを含有するポリマーであり得る。疎水性ポリマーブロックは、上記の疎水性ポリマーのうちの１つ以上又はそれらの誘導体若しくは共重合体を含有し得る。親水性ポリマーブロックは、上記の親水性ポリマーのうちの１つ以上又はそれらの誘導体若しくは共重合体を含有し得る。一部の実施形態において両親媒性ポリマーは、疎水性ポリマーから形成された疎水性末端と親水性ポリマーで形成された親水性末端とを含有するジブロックポリマーである。一部の実施形態において、疎水性末端、親水性末端、又は両方に部分が付加されてもよい。本粒子は２つ以上の両親媒性ポリマーを含有し得る。
【０１１８】
Ｃ．脂質
本粒子は１つ以上の脂質又は両親媒性化合物を含有し得る。例えば、本粒子は、リポソーム、脂質ミセル、固体脂質粒子、又は脂質安定化ポリマー粒子であってもよい。脂質粒子は、１つの脂質又は異なる脂質の混合物で作られていてもよい。脂質粒子は、生理的ｐＨで中性、アニオン性、又はカチオン性であり得る１つ以上の脂質で形成される。脂質粒子は、一部の実施形態において、１つ以上の生体適合性脂質を取り入れる。脂質粒子は２つ以上の脂質の組み合わせを用いて形成されてもよい。例えば、荷電脂質を生理的ｐＨで非イオン性又は非荷電の脂質と組み合わせてもよい。
【０１１９】
本粒子は脂質ミセルであってもよい。薬物送達用の脂質ミセルは当該技術分野において公知である。脂質ミセルは、例えば脂質界面活性剤との油中水型エマルションとして形成することができる。エマルションは２つの不混和相のブレンドであり、界面活性剤を加えることにより分散した液滴が安定化する。一部の実施形態において脂質ミセルはマイクロエマルションである。マイクロエマルションは、少なくとも水、油及び脂質界面活性剤が１ミクロン未満、約１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、又は約１０ｎｍ〜約２５０ｎｍの液滴径の透明な熱力学的安定系を作り出して構成される熱力学的安定系である。脂質ミセルは概して、疎水性治療用薬剤、疎水性予防用薬剤、又は疎水性診断用薬剤を含めた疎水性活性薬剤のカプセル化に有用である。
【０１２０】
本粒子はリポソームであってもよい。リポソームは、球形の二重層状に配置された脂質が水性媒体を取り囲んで構成される小さい小胞である。リポソームは、小型単層小胞、大型単層小胞、又は多重膜小胞に分類することができる。多重膜リポソームは複数の同心円状の脂質二重層を含有する。リポソームを使用すると、水性の内部又は二重層間に親水性薬剤を捕捉することによるか、又は二重層内に疎水性薬剤を捕捉することにより薬剤をカプセル化し得る。
【０１２１】
脂質ミセル及びリポソームは、典型的には水性の中心部を有する。水性の中心部は、水又は水とアルコールとの混合物を含有し得る。好適なアルコールとしては、限定はされないが、メタノール、エタノール、プロパノール（イソプロパノールなど）、ブタノール（ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノールなど、ペンタノール（アミルアルコール、イソブチルカルビノールなど）、ヘキサノール（１−ヘキサノール、２−ヘキサノール、３−ヘキサノールなど）、ヘプタノール（１−ヘプタノール、２−ヘプタノール、３−ヘプタノール及び４−ヘプタノールなど）又はオクタノール（１−オクタノールなど）又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１２２】
本粒子は固体脂質粒子であってもよい。固体脂質粒子はコロイドミセル及びリポソームの代替を提供する。固体脂質粒子は典型的にはサブミクロンサイズであり、即ち、約１０ｎｍ〜約１ミクロン、１０ｎｍ〜約５００ｎｍ、又は１０ｎｍ〜約２５０ｎｍである。固体脂質粒子は、室温で固体の脂質で形成される。固体脂質粒子は水中油型エマルションから、液体油を固体脂質に換えることにより誘導される。
【０１２３】
好適な中性及びアニオン性脂質としては、限定はされないが、ステロール類及び脂質、例えば、コレステロール、リン脂質、リゾ脂質、リゾリン脂質、スフィンゴ脂質又はペグ化脂質などが挙げられる。中性及びアニオン性脂質としては、限定はされないが、ホスファチジルコリン（ＰＣ）（卵ＰＣ、大豆ＰＣなど）、例えば、１，２−ジアシル−グリセロ−３−ホスホコリン類；ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）；糖脂質；スフィンゴリン脂質、例えばスフィンゴミエリン及びスフィンゴ糖脂質（１−セラミジル（ｃｅｒａｍｉｄｙｌ）グルコシド類としても知られる）、例えばセラミドガラクトピラノシド、ガングリオシド類及びセレブロシド類；脂肪酸、ステロール類でカルボン酸基を含有するもの、例えば、コレステロール；１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン、例えば、限定はされないが、１，２−ジオレオイルホスホエタノールアミン（ｄｉｏｌｅｙｌｐｈｏｓｐｈｏｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）（ＤＯＰＥ）、１，２−ジヘキサデシルホスホエタノールアミン（ＤＨＰＥ）、１，２−ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、１，２−ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、及び１，２−ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）が挙げられる。脂質にはまた、脂質の様々な天然の（例えば、組織由来Ｌ−α−ホスファチジル：卵黄、心臓、脳、肝臓、ダイズ）及び／又は合成の（例えば、飽和及び不飽和１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１−アシル−２−アシル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジヘプタノイル−ＳＮ−グリセロ−３−ホスホコリン）誘導体も含まれ得る。
【０１２４】
好適なカチオン性脂質としては、限定はされないが、ＴＡＰ脂質とも称されるＮ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム塩、例えばメチル硫酸塩が挙げられる。好適なＴＡＰ脂質としては、限定はされないが、ＤＯＴＡＰ（ジオレオイル−）、ＤＭＴＡＰ（ジミリストイル−）、ＤＰＴＡＰ（ジパルミトイル−）、及びＤＳＴＡＰ（ジステアロイル−）が挙げられる。リポソームにおける好適なカチオン性脂質としては、限定はされないが、ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）、１，２−ジアシロキシ−３−トリメチルアンモニウムプロパン、Ｎ−［１−（２，３−ジオレオイルオキシ（ｄｉｏｌｏｙｌｏｘｙ））プロピル］−Ν，Ν−ジメチルアミン（ＤＯＤＡＰ）、１，２−ジアシロキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン、Ｎ−［１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、１，２−ジアルキルオキシ−３−ジメチルアンモニウムプロパン、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）、３−［Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノ−エタン）カルバモイル］コレステロール（ＤＣ−Ｃｈｏｌ）；２，３−ジオレオイルオキシ−Ｎ−（２−（スペルミンカルボキサミド）−エチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−プロパンアミニウムトリフルオロ酢酸塩（ＤＯＳＰＡ）、β−アラニルコレステロール、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、ジＣ１４−アミジン、Ｎ−ｆｅｒｆ−ブチル−Ｎ’−テトラデシル−３−テトラデシルアミノ−プロピオンアミジン、Ｎ−（α−トリメチルアンモニオアセチル）ジドデシル−Ｄ−グルタメートクロリド（ＴＭＡＧ）、ジテトラデカノイル−Ｎ−（トリメチルアンモニオ−アセチル）ジエタノールアミンクロリド、１，３−ジオレオイルオキシ−２−（６−カルボキシ−スペルミル）−プロピルアミド（ＤＯＳＰＥＲ）、及びＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−、Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシルエチル）−２，３−ジオレオイルオキシ−１，４−ブタンジアンモニウムヨウ化物が挙げられる。一実施形態において、カチオン性脂質は、１−［２−（アシルオキシ）エチル］２−アルキル（アルケニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）−イミダゾリニウムクロリド誘導体、例えば、１−［２−（９（Ｚ）−オクタデセノイルオキシ）エチル］−２−（８（Ｚ）−ヘプタデセニル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウムクロリド（ＤＯＴＩＭ）、及び１−［２−（ヘキサデカノイルオキシ）エチル］−２−ペンタデシル−３−（２−ヒドロキシエチル）イミダゾリニウムクロリド（ＤＰＴＩＭ）であり得る。一実施形態において、カチオン性脂質は、第４級アミンにヒドロキシアルキル部分を含有する２，３−ジアルキルオキシプロピル第４級アンモニウム化合物誘導体、例えば、１，２−ジオレオイル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル（ｄｉｍｅｔｙｌ）−ヒドロキシプロピルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩ���−ＨＰ）、１，２−ジオレイル−オキシ−プロピル−３−ジメチル−ヒドロキシブチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−ＨＢ）、１，２−ジオレイルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシペンチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ−Ｈｐｅ）、１，２−ジミリスチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）、１，２−ジパルミチルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＰＲＩＥ）、及び１，２−ジステリルオキシプロピル−３−ジメチル−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＳＲＩＥ）であり得る。
【０１２５】
好適な固体脂質としては、限定はされないが、高級飽和アルコール類、高級脂肪酸、スフィンゴ脂質、合成エステル類、並びに高級飽和脂肪酸のモノトリグリセリド類、ジトリグリセリド類、及びトリグリセリド類が挙げられる。固体脂質には、セトステアリルアルコールなど、１０〜４０個、例えば１２〜３０個の炭素原子を有する脂肪族アルコールが含まれ得る。固体脂質には、ステアリン酸、パルミチン酸、デカン酸、及びベヘン酸など、１０〜４０個、例えば１２〜３０個の炭素原子の高級脂肪酸が含まれ得る。固体脂質には、モノステアリン酸グリセリル、ベヘン酸グリセロール、パルミトステアリン酸グリセロール、グリセロールトリラウレート、トリカプリン、トリラウリン、トリミリスチン、トリパルミチン、トリステアリン、及び硬化ヒマシ油など、１０〜４０個、例えば１２〜３０個の炭素原子を有する高級飽和脂肪酸のモノグリセリド類、ジグリセリド類、及びトリグリセリド類を含めたグリセリド類が含まれ得る。好適な固体脂質には、パルミチン酸セチル、蜜ろう、又はシクロデキストリンが含まれ得る。
【０１２６】
両親媒性化合物としては、限定はされないが、０．０１〜６０（脂質重量／ポリマー重量）、例えば０．１〜３０（脂質重量／ポリマー重量）の比で配合される１，２ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジアラキドイルホスファチジルコリン（ＤＡＰＣ）、ジベヘノイルホスファチジルコリン（ＤＢＰＣ）、ジトリコサノイルホスファチジルコリン（ＤＴＰＣ）、及びジリグノセロイルファチジルコリン（ＤＬＰＣ）などのリン脂質が挙げられる。使用し得るリン脂質としては、限定はされないが、ホスファチジン酸類、飽和脂質及び不飽和脂質の両方を含むホスファチジルコリン類、ホスファチジルエタノールアミン類、ホスファチジルグリセロール類、ホスファチジルセリン類、ホスファチジルイノシトール類、リゾホスファチジル誘導体、カルジオリピン、及びβ−アシル−ｙ−アルキルリン脂質が挙げられる。リン脂質の例としては、限定はされないが、ホスファチジルコリン類、例えば、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルコリン、ジペンタデカノイルホスファチジルコリン  ジラウロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジアラキドイルホスファチジルコリン（ＤＡＰＣ）、ジベヘノイルホスファチジルコリン（ＤＢＰＣ）、ジトリコサノイルホスファチジルコリン（ＤＴＰＣ）、ジリグノセロイルファチジルコリン（ＤＬＰＣ）；及びホスファチジルエタノールアミン類、例えば、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン又は１−ヘキサデシル−２−パルミトイルグリセロホスホエタノールアミンが挙げられる。不斉アシル鎖（例えば、６炭素の１つのアシル鎖及び１２炭素のもう１つのアシル鎖）を有する合成リン脂質もまた使用し得る。
【０１２７】
Ｄ．追加の活性薬剤
本粒子は、本コンジュゲート中のものに加えて１つ以上の追加の活性薬剤を含有し得る。追加の活性薬剤は、上記に列挙するとおりの治療用、予防用、診断用、又は栄養用薬剤であってもよい。追加の活性薬剤は、任意の量、例えば、粒子の重量を基準として約０．５％〜約９０％、約０．５％〜約５０％、約０．５％〜約２５％、約０．５％〜約２０％、約０．５％〜約１０％、又は約５％〜約１０％（ｗ／ｗ）で存在し得る。一実施形態において、薬剤は約０．５％〜約１０％の負荷ｗ／ｗで配合される。
【０１２８】
Ｅ．追加の標的指向性部分
本粒子は、本コンジュゲートの標的指向性部分に加え、粒子を特異的な器官、組織、細胞型、又は細胞内コンパートメントに標的化させる１つ以上の標的指向性部分を含有し得る。追加の標的指向性部分は、粒子の表面上、粒子の内面上、又は両方に存在し得る。追加の標的指向性部分は粒子の表面上に固定化されてもよく、例えば、本粒子のポリマー又は脂質に共有結合的に付加されてもよい。一部の実施形態において、追加の標的指向性部分は、標的指向性部分が粒子の表面上に配向するように両親媒性ポリマー又は脂質に共有結合的に付加される。
【０１２９】
ＩＩＩ．製剤
一部の実施形態において、組成物がヒト、ヒト患者又は対象に投与される。本開示の目的上、語句「活性成分」は、概して、本明細書に記載されるとおりの送達されるコンジュゲート又はコンジュゲートを含む粒子を指す。
【０１３０】
本明細書に提供される医薬組成物の説明は、主としてヒトへの投与に好適な医薬組成物に関するが、当業者は、かかる組成物が概して任意の他の動物、例えば非ヒト動物、例えば非ヒト哺乳類への投与に好適であることを理解するであろう。ヒトへの投与に好適な医薬組成物を様々な動物への投与に好適な組成物にするための改良は十分に理解されており、通常の技能を有する獣医薬理学者は、例えあったとしても単に通常の実験をもってかかる改良を設計及び／又は実施することができる。医薬組成物の投与が企図される対象としては、限定はされないが、ヒト及び／又は他の霊長類；哺乳類、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、イヌ、マウス、及び／又はラットなどの商業的に関連性のある哺乳類；及び／又は鳥類、例えば、家禽、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、及び／又はシチメンチョウなどの商業的に関連性のある鳥類が挙げられる。
【０１３１】
本明細書に記載される医薬組成物の製剤は、薬理学の技術分野で公知の又は今後開発される任意の方法によって調製し得る。一般に、かかる調製方法は、活性成分を賦形剤及び／又は１つ以上の他の補助的成分と共にまとめ合わせ、次に、必要である及び／又は望ましい場合にはその製剤を所望の単回又は複数回投与単位に分割し、成形し、及び／又は包装するステップを含む。
【０１３２】
本発明に係る医薬組成物は、バルクで、単一単位用量として、及び／又は複数の単一単位用量として調製、包装、及び／又は販売され得る。本明細書で使用されるとき、「単位用量」は、所定量の活性成分を含む医薬組成物の個別の量である。活性成分の量は、概して対象に投与され得る活性成分の投薬量及び／又はかかる投薬量の好都合な一部、例えばかかる投薬量の２分の１又は３分の１に等しい。
【０１３３】
本発明に係る医薬組成物中の活性成分、薬学的に許容可能な賦形剤、及び／又は任意の追加的な成分の相対量は、治療対象のアイデンティティ、大きさ、及び／又は状態に依存するとともに、組成物を投与する経路にも更に依存して変わり得る。例として、本組成物は０．１％〜１００％、例えば、０．５〜５０％、１〜３０％、５〜８０％、少なくとも８０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み得る。
【０１３４】
本発明のコンジュゲート又は粒子は、１つ以上の賦形剤を用いて製剤化することにより、（１）安定性を増加させる；（２）持続又は遅延放出（例えばモノマレイミドのデポー製剤から）を可能にする；（３）体内分布を変化させる（例えば、モノマレイミド化合物を特異的組織又は細胞型に標的化する）；（４）インビボでのモノマレイミド化合物の放出プロファイルを変化させることができる。賦形剤の非限定的な例としては、あらゆる溶媒、分散媒、希釈剤、又は他の液体媒体、分散又は懸濁助剤、界面活性薬剤、等張剤、増粘又は乳化剤、及び保存剤が挙げられる。本発明の賦形剤としてはまた、限定なしに、リピドイド、リポソーム、脂質ナノ粒子、ポリマー、リポプレックス、コアシェルナノ粒子、ペプチド、タンパク質、ヒアルロニダーゼ、ナノ粒子模倣体及びこれらの組み合わせも挙げることができる。従って、本発明の製剤には、１つ以上の賦形剤が、各々一緒になってモノマレイミド化合物の安定性を増加させる量で含まれ得る。
【０１３５】
賦形剤
医薬製剤は、薬学的に許容可能な賦形剤を更に含むことができ、賦形剤には、本明細書で使用されるとき、所望の特定の剤形に適するとおりのあらゆる溶媒、分散媒、希釈剤、又は他の液体媒体、分散又は懸濁助剤、界面活性薬剤、等張剤、増粘又は乳化剤、保存剤、固体結合剤、滑沢剤などが含まれる。「レミントンの薬学の科学と実践（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ）」、第２１版、Ａ．Ｒ．ジェナーロ（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ）（リッピンコット・ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ）、メリーランド州ボルチモア（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ）、２００６年；全体として参照により本明細書に援用される）が、医薬組成物の製剤化に用いられる様々な賦形剤及びその公知の調製技法を開示している。任意の望ましくない生物学的効果の発生又はその他、医薬組成物の任意の他の１つ又は複数の構成成分との有害な形での相互作用によるなど、任意の従来の賦形剤媒体が物質又はその誘導体と不適合である場合を除き、その使用は本発明の範囲内にあることが企図される。
【０１３６】
一部の実施形態において、薬学的に許容可能な賦形剤は、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の純度である。一部の実施形態において、賦形剤はヒトへの使用及び動物への使用が承認されている。一部の実施形態において、賦形剤は米国食品医薬品局によって承認されている。一部の実施形態において、賦形剤は医薬品グレードである。一部の実施形態において、賦形剤は米国薬局方（ＵＳＰ）、欧州薬局方（ＥＰ）、英国薬局方、及び／又は国際薬局方の規格に適合している。
【０１３７】
医薬組成物の製造に使用される薬学的に許容可能な賦形剤としては、限定はされないが、不活性希釈剤、分散剤及び／又は造粒剤、界面活性薬剤及び／又は乳化剤、崩壊剤、結合剤、保存剤、緩衝剤、潤滑剤、及び／又は油が挙げられる。かかる賦形剤は任意選択で医薬組成物中に含まれ得る。
【０１３８】
例示的希釈剤としては、限定はされないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム  ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、コーンスターチ、粉末糖等、及び／又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１３９】
例示的造粒剤及び／又は分散剤としては、限定はされないが、ジャガイモデンプン、コーンスターチ、タピオカデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、粘土、アルギン酸、グアーガム、柑橘類果肉、寒天、ベントナイト、セルロース及び木産物、天然スポンジ、陽イオン交換樹脂、炭酸カルシウム、ケイ酸塩、炭酸ナトリウム、架橋ポリ（ビニル−ピロリドン）（クロスポビドン）、ナトリウムカルボキシメチルデンプン（デンプングリコール酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロース）、メチルセルロース、アルファ化デンプン（スターチ１５００）、微結晶性デンプン、水不溶性デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ケイ酸アルミウニムマグネシウム（ビーガム（登録商標）（ＶＥＥＧＵＭ（登録商標）））、ラウリル硫酸ナトリウム、第４級アンモニウム化合物等、及び／又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１４０】
例示的界面活性薬剤及び／又は乳化剤としては、限定はされないが、天然乳化剤（例えば、アカシア、寒天、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、コンドラックス（ｃｈｏｎｄｒｕｘ）、コレステロール、キサンタン、ペクチン、ゼラチン、卵黄、カゼイン、羊毛脂、コレステロール、ワックス、及びレシチン）、コロイド粘土（例えば、ベントナイト［ケイ酸アルミニウム］及びビーガム（登録商標）（ＶＥＥＧＵＭ（登録商標））［ケイ酸アルミウニムマグネシウム］）、長鎖アミノ酸誘導体、高分子量アルコール類（例えば、ステアリルアルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、モノステアリン酸トリアセチン、ジステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリル、及びモノステアリン酸プロピレングリコール、ポリビニルアルコール）、カルボマー（例えば、カルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸重合体、及びカルボキシビニルポリマー）、カラギーナン、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、粉末セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース）、ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン［ツイーン（登録商標）（ＴＷＥＥＮ（登録商標））２０］、ポリオキシエチレンソルビタン［ツイーン（登録商標）６０（ＴＷＥＥＮｎ（登録商標）６０）］、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン［ツイーン（登録商標）８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）］、モノパルミチン酸ソルビタン［スパン（登録商標）４０（ＳＰＡＮ（登録商標）４０）］、モノステアリン酸ソルビタン［スパン（登録商標）６０（ＳＰＡＮ（登録商標）６０）］、トリステアリン酸ソルビタン［スパン（登録商標）６５（ＳＰＡＮ（登録商標）６５）］、モノオレイン酸グリセリル、モノオレイン酸ソルビタン［スパン（登録商標）８０（ＳＰＡＮ（登録商標）８０）］）、ポリオキシエチレンエステル類（例えば、モノステアリン酸ポリオキシエチレン［エムワイアールジェイ（登録商標）４５（ＭＹＲＪ（登録商標）４５）］、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエトキシル化ヒマシ油、ステアリン酸ポリオキシメチレン、及びソルトール（登録商標）（ＳＯＬＵＴＯＬ（登録商標）））、スクロース脂肪酸エステル類、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル類（例えばクレモフォール（登録商標）（ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（登録商標）））、ポリオキシエチレンエーテル類（例えばポリオキシエチレンラウリルエーテル［ビーアールアイジェイ（登録商標）３０（ＢＲＩＪ（登録商標）３０）］）、ポリ（ビニルピロリドン）、モノラウリン酸ジエチレングリコール、オレイン酸トリエタノールアミン、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリン酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、プルロニック（登録商標）Ｆ  ６８（ＰＬＵＯＲＩＮＣ（登録商標）Ｆ  ６８）、ポロキサマー（登録商標）１８８（ＰＯＬＯＸＡＭＥＲ（登録商標）１８８）、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドキュセートナトリウム等及び／��はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１４１】
例示的結合剤としては、限定はされないが、デンプン（例えばコーンスターチ及びデンプンペースト）；ゼラチン；糖類（例えば、スクロース、グルコース、デキストロース、デキストリン、糖蜜、ラクトース、ラクチトール、マンニトール）；天然及び合成ゴム（例えば、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アイリッシュモス抽出物、パンワーガム（ｐａｎｗａｒ  ｇｕｍ）、ガッティガム、イサポール（ｉｓａｐｏｌ）殻の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、酢酸セルロース、ポリ（ビニルピロリドン）、ケイ酸アルミウニムマグネシウム（ビーガム（登録商標）（Ｖｅｅｇｕｍ（登録商標）））、及びカラマツのアラビノガラクタン（ａｒａｂｏｇａｌａｃｔａｎ））；アルギン酸；ポリエチレンオキシド；ポリエチレングリコール；無機カルシウム塩；ケイ酸；ポリメタクリレート類；ワックス；水；アルコール等；及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１４２】
例示的保存剤としては、限定はされないが、抗酸化剤、キレート剤、抗微生物性保存剤、抗真菌性保存剤、アルコール保存剤、酸性保存剤、及び／又は他の保存剤を挙げることができる。例示的抗酸化剤としては、限定はされないが、αトコフェロール、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル（ａｃｏｒｂｙｌ  ｐａｌｍｉｔａｔｅ）、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、モノチオグリセロール、メタ重亜硫酸カリウム、プロピオン酸、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、及び／又は亜硫酸ナトリウムが挙げられる。例示的キレート剤としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸一水和物、エデト酸二ナトリウム、エデト酸二カリウム、エデト酸、フマル酸、リンゴ酸、リン酸、エデト酸ナトリウム、酒石酸、及び／又はエデト酸三ナトリウムが挙げられる。例示的抗微生物性保存剤としては、限定はされないが、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミドウレア、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、プロピレングリコール、及び／又はチメロサールが挙げられる。例示的抗真菌性保存剤としては、限定はされないが、ブチルパラベン、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、及び／又はソルビン酸が挙げられる。例示的アルコール保存剤としては、限定はされないが、エタノール、ポリエチレングリコール、フェノール、フェノール化合物、ビスフェノール、クロロブタノール、ヒドロキシ安息香酸塩、及び／又はフェニルエチルアルコールが挙げられる。例示的酸性保存剤としては、限定はされないが、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、βカロチン、クエン酸、酢酸、デヒドロ酢酸、アスコルビン酸、ソルビン酸、及び／又はフィチン酸が挙げられる。他の保存剤としては、限定はされないが、トコフェロール、酢酸トコフェロール、デテロキシムメシレート（ｄｅｔｅｒｏｘｉｍｅ  ｍｅｓｙｌａｔｅ）、セトリミド、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ｂｕｔｙｌａｔｅｄ  ｈｙｄｒｏｘｙｔｏｌｕｅｎｅｄ）（ＢＨＴ）、エチレンジアミン、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）、亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、メタ重亜硫酸カリウム、グリダント・プラス（登録商標）（ＧＬＹＤＡＮＴ  ＰＬＵＳ（登録商標））、フェノニップ（登録商標）（ＰＨＥＮＯＮＩＰ（登録商標））、メチルパラベン、ジャーモール（登録商標）１１５（ＧＥＲＭＡＬＬ（登録商標）１１５）、ジャーマベン（登録商標）ＩＩ（ＧＥＲＭＡＢＥＮ（登録商標）ＩＩ）、ネオロン（商標）（ＮＥＯＬＯＮＥ（商標））、カトン（商標）（ＫＡＴＨＯＮ（商標））、及び／又はユーキシル（登録商標）（ＥＵＸＹＬ（登録商標））が挙げられる。
【０１４３】
例示的緩衝剤としては、限定はされないが、クエン酸塩緩衝溶液、酢酸塩緩衝溶液、リン酸塩緩衝溶液、塩化アンモニウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルビオン酸カルシウム、グルセプト酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、Ｄ−グルコン酸、グリセロリン酸カルシウム、乳酸カルシウム、プロパン酸、レブリン酸カルシウム、ペンタン酸、リン酸水素カルシウム、リン酸、三塩基性リン酸カルシウム、水酸化リン酸カルシウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、カリウム混合物、二塩基性リン酸カリウム、一塩基性リン酸カリウム、リン酸カリウム混合物、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム混合物、トロメタミン、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、パイロジェンフリー水、等張生理食塩水、リンゲル溶液、エチルアルコール等、及び／又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１４４】
例示的潤滑剤としては、限定はされないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、シリカ、タルク、麦芽、ベヘン酸グリセリル（ｇｌｙｃｅｒｙｌ  ｂｅｈａｎａｔｅ）、硬化植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、ラウリル硫酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム等、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１４５】
例示的油としては、限定はされないが、扁桃油、杏仁油、アボカド油、ババス油、ベルガモット油、クロスグリ種子（ｂｌａｃｋ  ｃｕｒｒｅｎｔ  ｓｅｅｄ）油、ルリヂサ油、カデ油、カモミール油、キャノーラ油、カラウェー油、カルナウバ、ヒマシ油、桂皮油、ココアバター、ココナツ油、タラ肝油、コーヒー油、トウモロコシ油、綿実油、エミュー油、ユーカリ油、月見草油、魚油、亜麻仁油、ゲラニオール油、ゴード油、グレープシード油、ヘーゼルナッツ油、ヒソップ油、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ油、ククイナッツ油、ラバンジン油、ラベンダー油、レモン油、リツェアクベバ油、マカダミアナッツ（ｍａｃａｄｅｍｉａ  ｎｕｔ）油、ゼニアオイ油、マンゴー種子油、メドウフォーム種子油、ミンク油、ナツメグ油、オリーブ油、オレンジ油、オレンジラフィー油、パーム油、パーム核油、桃仁油、ピーナッツ油、ケシ種子油、カボチャ種子油、菜種油、米糠油、ローズマリー油、ベニバナ油、ビャクダン油、サザンカ（ｓａｓｑｕａｎａ）油、セイボリー油、シーバックソーン油、ゴマ油、シアバター、シリコーン油、ダイズ油、ヒマワリ油、チャノキ油、アザミ油、ツバキ油、ベチバー油、クルミ油、及びコムギ胚芽油が挙げられる。例示的油としては、限定はされないが、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコーン、セバシン酸ジエチル、ジメチコーン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油、及び／又はこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１４６】
組成物中には、配合者の判断に従い、ココアバター及び坐薬ワックス、着色剤、コーティング剤、甘味料、香味料、及び／又は芳香剤などの賦形剤が存在し得る。
投与
本発明のコンジュゲート又は粒子は、治療上有効な結果をもたらす任意の経路によって投与され得る。そのような経路としては、限定はされないが、経腸、胃腸、硬膜外、経口、経皮、硬膜外（硬膜周囲）、脳内（大脳の中に）、脳室内（脳室の中に）、皮膚上（皮膚の上への適用）、皮内（皮膚それ自体の中に）、皮下（皮膚の下に）、鼻腔投与（鼻を通じて）、静脈内（静脈の中に）、動脈内（動脈の中に）、筋肉内（筋肉の中に）、心臓内（心臓の中に）、骨内注入（骨髄の中に）、髄腔内（脊柱管の中に）、腹腔内（腹膜の中への注入又は注射）、膀胱内注入、硝子体内（眼を通じて）、陰茎海綿体内注射（陰茎の基部の中に）、腟内投与、子宮内、羊膜外投与、経皮（全身に分布させるための無傷の皮膚を通じた拡散）、経粘膜（粘膜を通じた拡散）、インサフレーション（鼻からの吸い込み）、舌下、唇下、浣腸、点眼薬（結膜上に）、又は点耳薬が挙げられる。具体的な実施形態において、組成物は、それが血液脳関門、血管関門、又は他の上皮性関門を通り抜けることを可能にする方法で投与され得る。
【０１４７】
本明細書に記載される製剤は、それを必要としている個体への投与に適切な医薬担体中に有効量のコンジュゲート又は粒子を含有する。本製剤は、非経口的に（例えば注射又は注入によって）投与され得る。本製剤又はその変形例は、経腸、局所（例えば眼に）、又は肺内投与によることを含め、いかなる方法で投与されてもよい。一部の実施形態において本製剤は局所投与される。
【０１４８】
Ａ．非経口製剤
本コンジュゲート又は粒子は、注射又は注入などの非経口送達用に溶液、懸濁液又はエマルションの形態で製剤化することができる。本製剤は、全身的に、局部的に、又は治療しようとする器官又は組織に直接、投与することができる。
【０１４９】
非経口製剤は、当該技術分野において公知の技法を用いて水性組成物として調製することができる。典型的には、かかる組成物は、注射用製剤、例えば溶液又は懸濁液；注射前に再構成媒体を加えて溶液又は懸濁液の調製に使用するのに好適な固体形態；エマルション、例えば、油中水（ｗ／ｏ）型エマルション、水中油（ｏ／ｗ）型エマルション、及びこれらのマイクロエマルション、リポソーム、又はエマルソーム（ｅｍｕｌｓｏｍｅ）として調製することができる。
【０１５０】
担体は、例えば、水、エタノール、１つ以上のポリオール類（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール）、油、例えば植物油（例えば、ピーナッツ油、トウモロコシ油、ゴマ油等）、及びこれらの組み合わせを含有する溶媒又は分散媒であってもよい。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によるか、分散液の場合に必要な粒径の維持によるか及び／又は界面活性剤の使用によって維持することができる。ある場合には、等張剤、例えば、１つ以上の糖類、塩化ナトリウム、又は当該技術分野において公知の他の好適な薬剤が含まれる。
【０１５１】
コンジュゲート又は粒子の溶液及び分散液は、限定はされないが、界面活性剤、分散剤、乳化剤、ｐＨ改変剤、及びこれらの組み合わせを含めた１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤と好適に混合された水又は別の溶媒若しくは分散媒中に調製することができる。
【０１５２】
好適な界面活性剤は、アニオン性、カチオン性、両性又は非イオン性界面活性薬剤であり得る。好適なアニオン性界面活性剤としては、限定はされないが、カルボン酸、スルホン酸及び硫酸イオンを含有するものが挙げられる。アニオン性界面活性剤の例としては、長鎖アルキルスルホネート及びアルキルアリールスルホネートのナトリウム、カリウム、アンモニウム、例えばドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム；ジアルキルスルホコハク酸ナトリウム、例えばドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム；ジアルキルスルホコハク酸ナトリウム、例えばナトリウムビス−（２−エチルチオキシル（ｅｔｈｙｌｔｈｉｏｘｙｌ））−スルホスクシネート；及び硫酸アルキル、例えばラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。カチオン性界面活性剤としては、限定はされないが、第４級アンモニウム化合物、例えば、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、臭化セトリモニウム、塩化ステアリルジメチルベンジルアンモニウム、ポリオキシエチレン及びヤシアミンが挙げられる。非イオン性界面活性剤としては、モノステアリン酸エチレングリコール、ミリスチン酸プロピレングリコール、モノステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル、オレイン酸ポリグリセリル−４、ソルビタンアシレート（ｓｏｒｂｉｔａｎ  ａｃｙｌａｔｅ）、スクロースアシレート（ｓｕｃｒｏｓｅ    ａｃｙｌａｔｅ）、ラウリン酸ＰＥＧ−１５０、モノラウリン酸ＰＥＧ−４００、モノラウリン酸ポリオキシエチレン、ポリソルベート類、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル、ＰＥＧ−１０００セチルエーテル、ポリオキシエチレントリデシルエーテル、ポリプロピレングリコールブチルエーテル、ポロキサマー（登録商標）４０１（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ（登録商標）４０１）、ステアロイルモノイソプロパノールアミド、及びポリオキシエチレン水添タロウアミドが挙げられる。両性界面活性剤の例としては、Ｎ−ドデシル−β−アラニンナトリウム、Ｎ−ラウリル−β−イミノジプロピオン酸ナトリウム、ミリストアンホアセテート（ｍｙｒｉｓｔｏａｍｐｈｏａｃｅｔａｔｅ）、ラウリルベタイン及びラウリルスルホベタインが挙げられる。
【０１５３】
本製剤は、微生物の増殖を防ぐ保存剤を含有し得る。好適な保存剤としては、限定はされないが、パラベン類、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、及びチメロサールが挙げられる。本製剤はまた、１つ又は複数の活性薬剤又は粒子の分解を防ぐ抗酸化剤も含有し得る。
【０１５４】
本製剤は、典型的には非経口投与用に再構成時に３〜８のｐＨに緩衝される。好適な緩衝液としては、限定はされないが、リン酸塩緩衝液、酢酸塩緩衝液、及びクエン酸塩緩衝液が挙げられる。１０％スクロース又は５％デキストロースを使用する場合、緩衝液は不要であり得る。
【０１５５】
非経口投与用の製剤中には多くの場合に水溶性ポリマーが使用される。好適な水溶性ポリマーとしては、限定はされないが、ポリビニルピロリドン、デキストラン、カルボキシメチルセルロース、及びポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１５６】
滅菌注射用溶液は、適切な溶媒又は分散媒中に必要量の本コンジュゲート又は粒子を、必要に応じて上記に列挙する賦形剤のうちの１つ以上と共に配合し、続いてろ過滅菌することにより調製さてもよい。概して、分散液は、基礎分散媒及び上記に列挙するものからの必要な他の成分を含有する無菌媒体中に様々な滅菌コンジュゲート又は粒子を配合することにより調製される。滅菌注射用溶液の調製用の滅菌粉末の場合、調製方法の例としては、予め滅菌ろ過したその溶液から粒子＋任意の追加的な所望の成分の粉末を生じさせる真空乾燥法及び凍結乾燥法が挙げられる。粉末は、粒子が本質的に多孔質となる方法で調製することもでき、これによって粒子の溶解度が高まり得る。多孔質粒子の作製方法は当該技術分野において公知である。
【０１５７】
非経口投与用の医薬製剤は、１つ以上のポリマー−薬物コンジュゲートから形成されたコンジュゲート又は粒子の滅菌水溶液又は懸濁液の形態であってもよい。許容可能な溶媒としては、例えば、水、リンゲル溶液、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、及び等張塩化ナトリウム溶液が挙げられる。本製剤はまた、１，３−ブタンジオールなどの非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤又は溶媒中の滅菌溶液、懸濁液、又はエマルションであってもよい。
【０１５８】
一部の例では、本製剤は液体形態で配布又は包装される。或いは、非経口投与用の製剤は、例えば好適な液体製剤を凍結乾燥することによって得られる固体として包装されてもよい。この固体は、投与前に適切な担体又は希釈剤で再構成され得る。
【０１５９】
非経口投与用の溶液、懸濁液、又はエマルションは、眼球投与に好適なｐＨを維持するのに必要な有効量の緩衝液で緩衝され得る。好適な緩衝液は当業者に周知であり、有用な緩衝液の幾つかの例は、酢酸塩、ホウ酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、及びリン酸塩緩衝液である。
【０１６０】
非経口投与用の溶液、懸濁液、又はエマルションはまた、製剤の等張範囲を調整する１つ以上の等張化剤も含有し得る。好適な等張化剤は当該技術分野において周知であり、幾つかの例としては、グリセリン、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウム、及び他の電解質が挙げられる。
【０１６１】
非経口投与用の溶液、懸濁液、又はエマルションはまた、眼科用薬剤の細菌汚染を防ぐ１つ以上の保存剤も含有し得る。好適な保存剤は当該技術分野において公知であり、ポリヘキサメチレンビグアニジン（ＰＨＭＢ）、塩化ベンザルコニウム（ＢＡＫ）、安定化オキシクロロ錯体（別名ピュライト（登録商標）（Ｐｕｒｉｔｅ（登録商標））として知られる）、酢酸フェニル水銀、クロロブタノール、ソルビン酸、クロルヘキシジン、ベンジルアルコール、パラベン類、チメロサール、及びこれらの混合物が挙げられる。
【０１６２】
非経口投与用の溶液、懸濁液、又はエマルションはまた、分散剤、湿潤剤、及び懸濁剤など、当該技術分野において公知の１つ以上の賦形剤も含有し得る。
Ｂ．粘膜用局所製剤
本コンジュゲート又は粒子は、粘膜表面への局所投与用に製剤化することができる。局所投与に好適な剤形としては、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、スプレー、ゲル、ローション、エマルション、液体、及び経皮パッチが挙げられる。本製剤は、経粘膜、経上皮、又は経内皮投与用に製剤化し得る。本組成物は、１つ以上の化学的浸透促進剤、膜透過剤、膜輸送剤、皮膚軟化剤、界面活性剤、安定剤、及びこれらの組み合わせを含有する。一部の実施形態において、本コンジュゲート又は粒子は、溶液又は懸濁液などの液体製剤、ローション又は軟膏などの半固形製剤、又は固形製剤として投与することができる。一部の実施形態において、本コンジュゲート又は粒子は、点眼薬など、溶液及び懸濁液を含めた液体として、又は眼又は経腟的若しくは経直腸的など、粘膜に対する半固形製剤として製剤化される。
【０１６３】
「界面活性剤」は、表面張力を低下させて、それにより製剤の乳化、発泡、分散、展着及び湿潤特性を増加させる界面活性薬剤である。好適な非イオン性界面活性剤としては、乳化ワックス、モノオレイン酸グリセリル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル類、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリソルベート、ソルビタンエステル類、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、シクロデキストリン類、モノステアリン酸グリセリン、ポロキサマー、ポビドン及びこれらの組み合わせが挙げられる。一実施形態において、非イオン性界面活性剤はステアリルアルコールである。
【０１６４】
「乳化剤」は、ある液体の別の液体中への懸濁を促進し、且つ油と水との安定した混合物、又はエマルションの形成を促進する界面活性物質である。一般的な乳化剤は、金属せっけん、ある種の動物油及び植物油、及び様々な極性化合物である。好適な乳化剤としては、アカシア、アニオン性乳化ワックス、ステアリン酸カルシウム、カルボマー類、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、コレステロール、ジエタノールアミン、パルミトステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリン、モノオレイン酸グリセリル、ヒドロキシプロピルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｐｒｏｐｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ヒプロメロース、ラノリン、含水ラノリンアルコール類、レシチン、中鎖トリグリセリド類、メチルセルロース、鉱油及びラノリンアルコール類、一塩基性リン酸ナトリウム、モノエタノールアミン、非イオン性乳化ワックス、オレイン酸、ポロキサマー、ポロキサマー類、ポリオキシエチレンアルキルエーテル類、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ステアリン酸ポリオキシエチレン類、アルギン酸プロピレングリコール、自己乳化型モノステアリン酸グリセリル、無水クエン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンエステル類、ステアリン酸、ヒマワリ油、トラガカント、トリエタノールアミン、キサンタンガム及びこれらの組み合わせが挙げられる。一実施形態において、乳化剤はステアリン酸グリセロールである。
【０１６５】
浸透促進剤の好適なクラスは当該技術分野において公知であり、限定はされないが、脂肪アルコール類、脂肪酸エステル類、脂肪酸、脂肪アルコールエーテル類、アミノ酸、リン脂質、レシチン類、コール酸塩類、酵素、アミン類及びアミド類、錯化剤（リポソーム、シクロデキストリン、変性セルロース、及びジイミド類）、大環状化合物、例えば、大環状ラクトン類、ケトン類、及び無水物及び環状尿素、界面活性剤、Ｎ−メチルピロリドン及びその誘導体、ＤＭＳＯ及び関連化合物、イオン化合物、アゾン及び関連化合物、及び溶媒、例えば、アルコール類、ケトン類、アミド類、ポリオール類（例えばグリコール類）が挙げられる。これらのクラスの例は当該技術分野において公知である。
【０１６６】
投与
本発明は、本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート又はコンジュゲートを含有する粒子を、それを必要としている対象に投与することを含む方法を提供する。本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート又はコンジュゲートを含有する粒子は、疾患、障害、及び／又は病態（例えば、作業記憶欠損に関連する疾患、障害、及び／又は病態）の予防又は治療又はイメージングに有効な任意の量及び任意の投与経路を用いて対象に投与され得る。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢、及び全身状態、疾患の重症度、詳細な組成物、その投与様式、その活性様式などに応じて対象毎に異なり得る。
【０１６７】
本発明に係る組成物は、典型的には、投与の容易さ及び投薬量の均一性のため投薬量単位形態に製剤化される。しかしながら、本発明の組成物の１日の使用総量は主治医が妥当な医学的判断の範囲内で判断し得ることは理解されるであろう。任意の特定の患者についての具体的な治療有効用量、予防有効用量、又は適切なイメージング用量レベルは、治療下の障害及び障害の重症度；用いられる具体的な化合物の活性；用いられる具体的な組成物；患者の年齢、体重、全般的な健康、性別及び食事；用いられる具体的な化合物の投与タイミング、投与経路、及び排泄速度；治療継続期間；用いられる具体的な化合物と併用して又は同時に使用される薬物；及び医学の技術分野で周知の同様の要因を含め、種々の要因に依存し得る。
【０１６８】
一部の実施形態において、本発明に係る組成物は、所望の治療上、診断上、予防上、又はイメージング上の効果を得るため、１日約０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、又は約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）を送達するのに十分な投薬量レベルで１日１回以上投与され得る。所望の投薬量は、１日３回、１日２回、１日１回、隔日、３日毎、毎週、２週間毎、３週間毎、又は４週間毎に送達され得る。一部の実施形態において、所望の投薬量は複数回の投与（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４回、又はそれ以上の投与）を用いて送達され得る。複数回投与が用いられる場合、本明細書に記載されるものなどの分割投与レジメンが用いられてもよい。
【０１６９】
本発明のコンジュゲート又は粒子の濃度は医薬組成物中約０．０１ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬ、又は約１ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬであり得る。
【０１７０】
本明細書で使用されるとき、「分割用量」とは、単一単位用量又は１日総用量を２用量以上、例えば単一単位用量の２回以上の投与に分けることである。本明細書で使用されるとき、「単一単位用量」とは、１用量／１回／単一経路／単一接触点、即ち単一投与イベントで投与される任意の治療薬の用量である。本明細書で使用されるとき、「１日総用量」は、２４時間の間に与えられる又は処方される量である。これは単一単位用量として投与されてもよい。一実施形態において、本発明のモノマレイミド化合物は分割用量で対象に投与される。モノマレイミド化合物は緩衝液中に製剤化されるのみであってもよく、又は本明細書に記載される製剤に製剤化されてもよい。
【０１７１】
剤形
本明細書に記載される医薬組成物は、局所、鼻腔内、気管内、又は注射用（例えば、静脈内、眼内、硝子体内、筋肉内、心臓内、腹腔内、皮下）など、本明細書に記載される剤形に製剤化することができる。
【０１７２】
液体剤形
非経口投与用の液体剤形としては、限定はされないが、薬学的に許容可能なエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップ剤、及び／又はエリキシル剤が挙げられる。活性成分に加えて、液体剤形は、限定はされないが、水又は他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（詳細には、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ソルビタンのポリエチレングリコール類及び脂肪酸エステル類、及びこれらの混合物を含めた、当該技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤を含み得る。非経口投与用の特定の実施形態において、組成物は、クレモフォール（登録商標）（ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（登録商標））、アルコール類、油、変性油、グリコール類、ポリソルベート類、シクロデキストリン類、ポリマー、及び／又はこれらの組み合わせなどの可溶化剤と混合されてもよい。
【０１７３】
注射剤
注射用製剤、例えば滅菌注射用水性又は油性懸濁液は公知の技術により製剤化することができ、好適な分散剤、湿潤剤、及び／又は懸濁剤を含み得る。滅菌注射用製剤は、非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤及び／又は溶媒中の滅菌注射用溶液、懸濁液、及び／又はエマルション、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液であってもよい。利用し得る許容可能な媒体及び溶媒の中には、限定はされないが、水、リンゲル溶液（Ｕ．Ｓ．Ｐ．）、及び等張塩化ナトリウム溶液が含まれる。滅菌固定油は、従来、溶媒又は懸濁媒として用いられている。この目的上、合成モノグリセリド又はジグリセリドを含め、任意の無刺激性固定油を用いることができる。注射剤の調製には、オレイン酸などの脂肪酸を使用することができる。
【０１７４】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルタでろ過することによって、及び／又は使用前に滅菌水又は他の無菌注射用媒体中に溶解し又は分散させることのできる無菌固体組成物の形態の滅菌剤を配合することによって滅菌し得る。
【０１７５】
活性成分の効果を持続させるため、皮下又は筋肉内注射による活性成分の吸収を遅延させることが望ましい場合もある。これは、難水溶性の結晶性又は非晶質材料の液体懸濁物の使用によって達成し得る。このときモノマレイミド化合物の吸収速度はその溶解速度に依存し、ひいては結晶サイズ及び結晶形態に依存し得る。或いは、非経口投与されるモノマレイミド化合物の遅延吸収は、モノマレイミド（ｍｏｎｏｍａｌｉｍｉｄｅ）を油性媒体中に溶解又は懸濁することにより達成し得る。注射用デポー形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中にモノマレイミド化合物（ｃｏｍｐｕｎｄ）のマイクロカプセルカプセル化マトリックスを形成することにより作られる。モノマレイミド化合物とポリマーの比率及び用いられる詳細なポリマーの性質に応じて、モノマレイミド化合物の放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、限定はされないが、ポリ（オルトエステル）類及びポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用製剤は、生体組織と適合性のあるリポソーム又はマイクロエマルション中にモノマレイミド化合物を封じ込めることにより調製し得る。
【０１７６】
肺内
肺内送達に有用であるとして本明細書に記載される製剤はまた、医薬組成物の鼻腔内送達にも使用し得る。鼻腔内投与に好適な別の製剤は、活性成分を含み且つ約０．２μｍ〜５００μｍの平均粒子を有する粗末であり得る。かかる製剤は、嗅ぐようにして、即ち鼻の近くに保持した粉末容器から鼻道を介して急速吸入することによって投与され得る。
【０１７７】
鼻腔投与に好適な製剤は、例えば、約０．１％（ｗ／ｗ）に過ぎない程度から１００％（ｗ／ｗ）に至るまでの活性成分を含むことができ、本明細書に記載される追加的な成分の１つ以上を含み得る。医薬組成物は、頬側投与に好適な製剤として調製され、包装され、及び／又は販売され得る。かかる製剤は、例えば、従来の方法を用いて作製された錠剤及び／又はロゼンジの形態であってもよく、及び例えば約０．１％〜２０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含有することができ、ここで残りは口腔内で溶解可能な及び／又は分解性の組成物、及び任意選択で、本明細書に記載される追加的な成分の１つ以上が占め得る。或いは、頬側投与に好適な製剤は、活性成分を含む粉末及び／又はエアロゾル化及び／又は微粒化された溶液及び／又は懸濁液を含み得る。かかる粉末化、エアロゾル化、及び／又はエアロゾル化された製剤は、分散時に約０．１ｎｍ〜約２００ｎｍの範囲の平均粒径及び／又は液滴径を有することができ、さらに、本明細書に記載される任意の追加的な成分の１つ以上を含み得る。
【０１７８】
医薬薬剤の製剤化及び／又は製造における一般論については、例えば、レミントン：薬学の科学と実践（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ）、第２１版、リッピンコット・ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ）、２００５年（全体として参照により本明細書に援用される）を参照し得る。
【０１７９】
コーティング又はシェル
錠剤、糖衣剤、カプセル、丸薬、及び顆粒の固形投薬形態は、コーティング及びシェル、例えば腸溶性コーティング及び医薬品製剤化の技術分野において周知の他のコーティングで調製することができる。コーティングは任意選択で乳白剤を含んでもよく、任意選択で遅延する形で腸管の特定の部分において１つ又は複数の活性成分のみを放出する又はそれを優先的に放出する組成物のコーティングであってもよい。使用し得る包埋組成物の例としては、ポリマー物質及びワックスが挙げられる。同様のタイプの固体組成物が、ラクトース又は乳糖並びに高分子量ポリエチレングリコール類などの賦形剤を使用する軟充填及び硬充填ゼラチンカプセル中の充填剤として用いられてもよい。
【０１８０】
ＩＶ．粒子の作製方法
様々な実施形態において、粒子の作製方法は、コンジュゲートを提供すること；粒子を形成するためのＰＬＡ−ＰＥＧ又はＰＬＧＡ−ＰＥＧなどの主薬成分を提供すること；コンジュゲートと主薬成分とを有機溶液中に合わせて第１の有機相を形成すること；及び第１の有機相を第１の水溶液と合わせて第２の相を形成すること；第２の相を乳化してエマルション相を形成すること；及び粒子を回収することを含む。様々な実施形態において、エマルション相は更にホモジナイズされる。
【０１８１】
一部の実施形態において、第１の相は、約５〜約５０重量％、例えば約１〜約４０固形分％、又は約５〜約３０固形分％、例えば、約５％、１０％、１５％、及び２０％のコンジュゲート及び主薬成分を含む。特定の実施形態において、第１の相は約５重量％のコンジュゲート及び主薬成分を含む。様々な実施形態において、有機相は、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、イソプロピルアルコール、酢酸イソプロピル、ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、ジクロロメタン、クロロホルム、アセトン、ベンジルアルコール、ツイーン（登録商標）８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）、スパン（登録商標）８０（ＳＰＡＮ（登録商標）８０）、又はこれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、有機相は、ベンジルアルコール、酢酸エチル、又はこれらの組み合わせを含む。
【０１８２】
様々な実施形態において、水溶液は、水、コール酸ナトリウム、酢酸エチル、又はベンジルアルコールを含む。様々な実施形態において、第１の相、第２の相、又は両方に界面活性剤が加えられる。界面活性剤は、一部の例では、本明細書に開示される組成物の乳化剤又は安定剤として働き得る。好適な界面活性剤は、カチオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、又は非イオン性界面活性剤であり得る。一部の実施形態において、本明細書に記載される組成物の作製に好適な界面活性剤としては、ソルビタン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類及びステアリン酸ポリオキシエチレン類が挙げられる。かかる脂肪酸エステル非イオン性界面活性剤の例は、インペリアル・ケミカル・インダストリーズ（ＩＣＩ）からのツイーン（登録商標）８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）、スパン（登録商標）８０（ＳＰＡＮ（登録商標）８０）、及びエムワイジェイ（登録商標）（ＭＹＪ（登録商標））界面活性剤である。スパン（登録商標）（ＳＰＡＮ（登録商標））界面活性剤としては、Ｃ１２〜Ｃ１８ソルビタンモノエステル類が挙げられる。ツイーン（登録商標）（ＴＷＥＥＮ（登録商標））界面活性剤としては、ポリ（エチレンオキシド）Ｃ１２〜Ｃ１８ソルビタンモノエステル類が挙げられる。エムワイジェイ（登録商標）（ＭＹＪ（登録商標））界面活性剤としては、ステアリン酸ポリ（エチレンオキシド）類が挙げられる。特定の実施形態において、水溶液はまた、ポリソルベートを含めた界面活性剤（例えば乳化剤）も含む。例えば、水溶液はポリソルベート８０を含み得る。一部の実施形態において、好適な界面活性剤としては脂質ベースの界面活性剤が挙げられる。例えば、本組成物は、１，２−ジヘキサノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１，２−ジヘプタノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、ＰＥＧ化１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＰＥＧ５０００−ＤＳＰＥを含む）、ＰＥＧ化１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−５０００］（アンモニウム塩）を含む）を含み得る。
【０１８３】
エマルション相を形成するための第２の相の乳化は、一段階又は二段階の乳化ステップで実施し得る。例えば、一次エマルションを調製し、次に乳化させて微細エマルションを形成し得る。一次エマルションは、例えば、単純混合、高圧ホモジナイザー、プローブソニケータ、撹拌子、又はロータステータホモジナイザーを使用して形成することができる。一次エマルションは、例えばプローブソニケータ又は高圧ホモジナイザーを用いて、例えばホモジナイザーに１回又は複数回通過させることにより微細エマルションに形成し得る。例えば、高圧ホモジナイザーが使用される場合、用いられる圧力は約４０００〜約８０００ｐｓｉ、約４０００〜約５０００ｐｓｉ、又は４０００若しくは５０００ｐｓｉであり得る。
【０１８４】
溶媒の抽出を完了して粒子を固めるためには、溶媒蒸発又は希釈のいずれかが必要になり得る。抽出の反応速度の制御を向上させ、及びプロセスのスケールの調整可能性を高めるため、クエンチ水溶液による溶媒希釈が用いられてもよい。例えば、有機溶媒の全てが溶解してクエンチ相を形成するのに十分な濃度となるようにエマルションを冷水中に希釈することができる。クエンチは、少なくとも一部には約５℃以下の温度で実施してもよい。例えば、クエンチに使用される水は室温未満の温度（例えば約０〜約１０℃、又は約０〜約５℃）であり得る。
【０１８５】
様々な実施形態において、粒子はろ過によって回収される。例えば、限外ろ過膜を使用し得る。例示的ろ過はタンジェンシャルフローろ過システムを用いて実施し得る。例えば、粒子を残留させる一方で溶質、ミセル、及び有機溶媒は通過させるのに好適な細孔径の膜を使用することにより、粒子を選択的に分離することができる。約３００〜５００ｋＤａの分子量カットオフ（約５〜２５ｎｍ）の例示的膜を使用し得る。
【０１８６】
様々な実施形態において、粒子はフリーズドライ又は凍結乾燥され、一部の例ではこれによりその貯蔵寿命が延びる。一部の実施形態において、本組成物はまたリオプロテクタントも含む。特定の実施形態において、リオプロテクタントは、糖、多価アルコール、又はその誘導体から選択される。一部の実施形態において、リオプロテクタントは、単糖、二糖、又はこれらの混合物から選択される。例えば、リオプロテクタントは、スクロース、ラクツロース、トレハロース、ラクトース、グルコース、マルトース、マンニトール、セロビオース、又はこれらの混合物であり得る。
【０１８７】
１つ以上のコンジュゲートを含有する粒子の作製方法が提供される。粒子は、ポリマー粒子、脂質粒子、又はこれらの組み合わせであり得る。本明細書に記載される種々の方法を調整して粒子のサイズ及び組成を制御してもよく、例えばマイクロ粒子の調製には一部の方法が最適である一方、粒子の調製には別の方法が最適である。記載される特性を有する粒子の調製方法の選択は、当業者によって過度の実験なしに実施され得る。
【０１８８】
ｉ．ポリマー粒子
ポリマー粒子の作製方法は当該技術分野において公知である。ポリマー粒子は、当該技術分野において公知の任意の好適な方法を用いて調製することができる。一般的なマイクロカプセル化技法としては、限定はされないが、噴霧乾燥、界面重合、ホットメルトカプセル化、相分離カプセル化（自然エマルションマイクロカプセル化、溶媒蒸発マイクロカプセル化、及び溶媒除去マイクロカプセル化）、コアセルベーション、低温ミクロスフェア形成、及び転相ナノカプセル化（ＰＩＮ）が挙げられる。これらの方法の概要を以下に提供する。
【０１８９】
１．噴霧乾燥
噴霧乾燥法を用いてポリマー粒子を形成する方法が米国特許第６，６２０，６１７号明細書に記載されている。この方法では、ポリマーを塩化メチレンなどの有機溶媒又は水に溶解させる。このポリマー溶液中に、粒子に配合する既知量の１つ以上のコンジュゲート又は追加の活性薬剤を懸濁（不溶性活性薬剤の場合）又は共溶解（可溶性活性薬剤の場合）する。圧縮ガス流によって駆動される微粒子化ノズルにこの溶液又は分散液を圧送し、得られたエアロゾルを加熱したエアサイクロンに懸濁して微液滴から溶媒を蒸発させると粒子が形成される。この方法を用いて０．１〜１０ミクロンの範囲のミクロスフェア／ナノスフェアを得ることができる。
【０１９０】
２．界面重合
界面重合もまた、１つ以上のコンジュゲート及び／又は活性薬剤のカプセル化に用いることができる。この方法を用いて、モノマー及びコンジュゲート又は１つ又は複数の活性薬剤を溶媒中に溶解させる。第１のモノマーと不混和性の第２の溶媒（典型的には水溶液）中に第２のモノマーを溶解させる。第１の溶液を第２の溶液中に撹拌して懸濁することにより、エマルションが形成される。エマルションが安定化したところで水相に開始剤を加えると、エマルションの各液滴の界面で界面重合が起こる。
【０１９１】
３．ホットメルトマイクロカプセル化
マシオウィッツ（Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚ）ら著、リアクテイブ・ポリマーズ（Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ）、第６巻、ｐ．２７５、１９８７年に記載されるとおりのホットメルトマイクロカプセル化方法を用いると、ポリエステル類及びポリ無水物などのポリマーからミクロスフェアを形成することができる。この方法を用いる一部の実施形態では、３，０００〜７５，０００ダルトンの分子量のポリマーが使用される。この方法では、初めにポリマーを溶融させて、次に５０ミクロン未満に篩別しておいた配合しようとする１つ以上の活性薬剤の固体粒子と混合する。この混合物を非混和性溶媒中（シリコン油など）に懸濁し、及び常に撹拌しながら、ポリマーの融点を５℃上回るまで加熱する。エマルションが安定化したところで、それをポリマー粒子が固まるまで冷却する。得られたミクロスフェアを石油エーテルでデカントすることにより洗浄すると、自由流動性粉末が生じる。
【０１９２】
４．相分離マイクロカプセル化
相分離マイクロカプセル化法では、任意選択でカプセル化する１つ以上の活性薬剤の存在下、ポリマー溶液を撹拌する。材料を撹拌することにより均一に懸濁し続ける一方で、この溶液にポリマーに対する非溶媒を徐々に加えてポリマーの溶解度を低下させる。溶媒及び非溶媒中のポリマーの溶解度に応じて、ポリマーは沈殿するか、又はポリマーリッチ相とポリマープア相とに相分離するかのいずれかである。適切な条件下では、ポリマーリッチ相中のポリマーが連続相との界面に移動することになり、外側ポリマーシェルを有する液滴に１つ又は複数の活性薬剤がカプセル化され得る。
【０１９３】
ａ．自然エマルションマイクロカプセル化
自然乳化は、温度を変化させるか、溶媒を蒸発させるか、又は化学的架橋剤を加えることにより、上記で形成した乳化液体ポリマー液滴を固めることを伴う。カプセル材の物理的及び化学的特性、並びに新生粒子に任意選択で配合される１つ以上の活性薬剤の特性により、好適なカプセル化方法が決まる。疎水性、分子量、化学安定性、及び熱安定性などの要因がカプセル化に影響する。
【０１９４】
ｂ．溶媒蒸発マイクロカプセル化
溶媒蒸発法を用いたミクロスフェアの形成方法が、マシオウィッツ（Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚ）ら著、ジャーナル・スキャニング・マイクロスコピー（Ｊ．Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）、第４巻、ｐ．３２９、１９９０年；ベック（Ｂｅｃｋ）ら著、ファーティリティ・アンド・ステリリティ（Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．）、第３１巻、ｐ．５４５、１９７９年；ベック（Ｂｅｃｋ）ら著、アメリカン・ジャーナル・オブ・オブステトリクス・アンド・ガイネコロジー（Ａｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．）、第１３５巻、第３号、ｐ．１９７９；ベニータ（Ｂｅｎｉｔａ）ら著、ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシーズ（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第７３巻、ｐ．１７２１、１９８４年；及び米国特許第３，９６０，７５７号明細書に記載されている。ポリマーを塩化メチレンなどの揮発性有機溶媒に溶解させる。この溶液に、配合する１つ以上の活性薬剤を任意選択で加え、ポリ（ビニルアルコール）などの界面活性薬剤を含有する水溶液にこの混合物を懸濁する。得られたエマルションを有機溶媒がほぼ蒸発するまで撹拌すると、固体のマイクロ粒子／ナノ粒子が残る。この方法は、ポリエステル類及びポリスチレンなどの比較的安定したポリマーに有用である。
【０１９５】
ｃ．溶媒除去マイクロカプセル化
溶媒除去マイクロカプセル化法は主にポリ無水物向けに設計され、例えば国際公開第９３／２１９０６号パンフレットに記載されている。この方法では、配合する物質を塩化メチレンなどの揮発性有機溶媒中の選択ポリマーの溶液に分散又は溶解させる。この混合物をシリコン油などの有機油中で撹拌することによって懸濁すると、エマルションが形成される。この手順により、１〜３００ミクロンの範囲のミクロスフェアを得ることができる。ミクロスフェアに配合し得る物質としては、医薬品、農薬、栄養素、イメージング剤、及び金属化合物が挙げられる。
【０１９６】
５．コアセルベーション
コアセルベーション法を用いた様々な物質のカプセル化手順は、当該技術分野において、例えば英国特許第Ｂ−９２９  ４０６号明細書；同第Ｂ−９２９  ４０１号明細書；及び米国特許第３，２６６，９８７号明細書、同第４，７９４，０００号明細書、及び同第４，４６０，５６３号明細書で公知である。コアセルベーションは、マクロ分子溶液を２つの不混和液相に分離することを伴う。一方の相は、高濃度のポリマーカプセル材（及び任意選択で１つ以上の活性薬剤）を含有する濃密コアセルベート相であり、一方、第２の相は低濃度のポリマーを含有する。濃密コアセルベート相内で、ポリマーカプセル材はナノスケール又はマイクロスケールの液滴を形成する。コアセルベーションは、温度変化、非溶媒の添加又はマイクロ塩の添加によるか（単純コアセルベーション）、又は別のポリマーの添加によってポリマー間複合体を形成させることにより（複合コアセルベーション）誘導し得る。
【０１９７】
６．ミクロスフェアの低温キャスティング
制御放出粒子の超低温キャスティング方法が、米国特許第５，０１９，４００号明細書に記載されている。この方法では、ポリマーを溶媒中に、任意選択で１つ以上の溶解又は分散した活性薬剤と共に溶解させる。次にこの混合物を霧化して、ポリマー物質溶液の凝固点未満の温度の非溶媒液体が入ったベッセルに吹き込み、ポリマー液滴を凍結させる。液滴及びポリマーの非溶媒を加温すると、液滴中の溶媒が融解し、これを非溶媒中に抽出すると、ミクロスフェアの硬化が生じる。
【０１９８】
７．転相ナノカプセル化（ＰＩＮ）
粒子はまた、転相ナノカプセル化（ＰＩＮ：ｐｈａｓｅ  ｉｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｎａｎｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ）方法を用いて形成することもでき、ここではポリマーを「良好な」溶媒に溶解し、薬物など、配合する物質の微粒子をポリマー溶液に混合又は溶解して、この混合物をポリマーに対する強非溶媒に注入すると、好条件下ではポリマーミクロスフェアが自然に生じ、ここでポリマーは粒子で被覆されるか、又は粒子がポリマー中に分散するかのいずれかである。例えば、米国特許第６，１４３，２１１号明細書を参照のこと。この方法を用いると、例えば約１００ナノメートル〜約１０ミクロンを含む幅広いサイズのナノ粒子及びマイクロ粒子の単分散集合体を生じさせることができる。
【０１９９】
有利には、沈殿前にエマルションを形成する必要はない。このプロセスを用いて熱可塑性ポリマーからミクロスフェアを形成することができる。
８．エマルション方法
一部の実施形態において、粒子はエマルション溶媒蒸発法を用いて調製される。例えば、ポリマー材料を水不混和性有機溶媒に溶解し、薬物溶液又は薬物溶液の組み合わせと混合する。一部の実施形態では、カプセル化しようとする治療用、予防用、又は診断用薬剤の溶液をポリマー溶液と混合する。ポリマーは、限定はされないが、以下：ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＣＬ、これらの共重合体、ポリアクリレート類、前述のＰＥＧ化ポリマーのうちの１つ以上であってもよい。薬物分子は、上記に記載したとおりの１つ以上のコンジュゲートと１つ以上の追加の活性薬剤とを含み得る。水不混和性有機溶媒は、限定はされないが、以下：クロロホルム、ジクロロメタン、及び酢酸アシルのうちの１つ以上であってもよい。薬物は、限定はされないが、以下：アセトン、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール、アセトニトリル及びジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のうちの１つ以上に溶解させることができる。
【０２００】
得られたポリマー溶液に水溶液を加え、乳化によってエマルション溶液を生じさせる。乳化技法は、限定はされないが、プローブ音波処理又はホモジナイザーによるホモジナイゼーションであってもよい。
【０２０１】
９．ナノ沈殿法
別の実施形態では、ナノ沈殿方法又はマイクロ流体デバイスを使用してナノ粒子を含有するコンジュゲートが調製される。ポリマー材料を含有するコンジュゲートを薬物又は薬物の組み合わせと、任意選択で追加のポリマーを含有する水混和性有機溶媒中に混合する。追加のポリマーは、限定はされないが、以下：ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＣＬ、これらの共重合体、ポリアクリレート類、前述のＰＥＧ化ポリマーのうちの１つ以上であってもよい。水混和性有機溶媒は、限定はされないが、以下：アセトン、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール、アセトニトリル及びジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のうちの１つ以上であってもよい。次に得られた混合物溶液を水溶液などのポリマー非溶媒に加えると、ナノ粒子溶液が得られる。
【０２０２】
１０．マイクロフルイディクス
マイクロフルイディクスを用いた粒子の作製方法は当該技術分野において公知である。好適な方法としては、米国特許出願公開第２０１０／００２２６８０  Ａ１号明細書に記載されるものが挙げられる。一般に、マイクロ流体デバイスは、混合装置に合流する少なくとも２つのチャネルを備える。これらのチャネルは典型的にはポリマー表面のリソグラフィ、エッチング、エンボス加工、又は成形によって形成される。各チャネルに流体供給源が取り付けられ、供給源に圧力を加えるとチャネルに流体の流れが生じる。圧力はシリンジ、ポンプ、及び／又は重力によって加えられ得る。ポリマー、標的指向性部分、脂質、薬物、ペイロード等を含む流入溶液の流れが集まって混合され、得られた混合物をポリマー非溶媒溶液と合わせると、表面上に所望のサイズ及び密度の部分を有する粒子が形成される。流入チャネルの圧力及び流量並びに流体供給源の性質及び組成を変えることにより、再現可能なサイズ及び構造の粒子を作製することができる。
【０２０３】
ｉｉ．脂質粒子
脂質粒子の作製方法は当該技術分野において公知である。脂質粒子は、当該技術分野において公知の任意の好適な方法を用いて調製された脂質ミセル、リポソーム、又は固体脂質粒子であってもよい。活性薬剤をカプセル化する脂質粒子を作成するための一般的な技法としては、限定はされないが、高圧ホモジナイゼーション法、超臨界流体法、エマルション法、溶媒拡散法、及び噴霧乾燥が挙げられる。これらの方法の概要を以下に提供する。
【０２０４】
１．高圧ホモジナイゼーション（ＨＰＨ）方法
高圧ホモジナイゼーションは、脂質ミセル、リポソーム、及び固体脂質粒子を含めた、狭い粒径分布の小型脂質粒子を作製するために用いられる確実で強力な技法である。高圧ホモジナイザーは高圧（１００〜２０００バール）で微小ギャップ（数ミクロン範囲）に液体を押し通す。流体は、室温で液体の脂質を含有するか、又は室温で固体の脂質の溶融物を含有し得る。流体は極めて短い距離で極めて高速に（１０００Ｋｍ／ｈ超）加速する。これにより高いずり応力及びキャビテーション力が生じ、粒子が概してサブミクロン範囲に至るまで破壊される。概して５〜１０％の脂質含量が用いられるが、最大４０％の脂質含量もまた研究されている。
【０２０５】
ＨＰＨの２つの手法はホットホモジナイゼーション及びコールドホモジナイゼーションであり、バルクの脂質溶液又は溶融物に薬物を混合するという同じ概念に基づき機能する。
【０２０６】
ａ．ホットホモジナイゼーション：
ホットホモジナイゼーションは脂質の融点を上回る温度で行われ、従ってエマルションのホモジナイゼーションと見なすことができる。高剪断混合により、薬物が負荷された脂質溶融物と水性乳化剤相とのプレエマルションが得られる。プレエマルションのＨＰＨは脂質の融点を上回る温度で行われる。所望のサイズの脂質粒子を作製するため、温度、圧力、及びサイクル数を含めた幾つものパラメータを調整することができる。一般に、温度が高いほど、内相の粘度が低下するため粒径が小さくなる。しかしながら、高温では薬物及び担体の分解速度が高まる。ホモジナイゼーション圧力又はサイクル数を増加させると、粒子の運動エネルギーが高くなるため多くの場合に粒径が増加することになる。
【０２０７】
ｂ．コールドホモジナイゼーション
コールドホモジナイゼーションは、ホットホモジナイゼーションに代わるものとして開発された。コールドホモジナイゼーションは、温度によって誘発される薬物分解又はホモジナイゼーション中の水相への薬物分布などの問題に悩まされることがない。コールドホモジナイゼーションは固体脂質粒子に特に有用であるが、少し変更して適用することによりリポソーム及び脂質ミセルを作製し得る。この技法では、薬物を含有する脂質溶融物を冷却し、この固体脂質を粉砕して脂質マイクロ粒子にし、これらの脂質マイクロ粒子を低温の界面活性剤溶液に分散させてプレ懸濁液を生じさせる。このプレ懸濁液を室温以下でホモジナイズし、ここで重力の力は十分に強力であるため脂質マイクロ粒子は破壊されて直接固体脂質ナノ粒子になる。
【０２０８】
２．超音波処理／高速ホモジナイゼーション法
脂質ミセル、リポソーム、及び固体脂質粒子を含めた脂質粒子は、超音波処理／高速ホモジナイゼーションによって調製することができる。超音波処理及び高速ホモジナイゼーションの両方の組み合わせが小型脂質粒子の作製に特に有用である。このプロセスにより、１０ｎｍ〜２００ｎｍ、例えば５０ｎｍ〜１００ｎｍの粒径範囲のリポソームが形成される。
【０２０９】
３．溶媒蒸発法
脂質粒子は溶媒蒸発手法によって調製することができる。水相中に乳化した水不混和性有機溶媒（例えばシクロヘキサン）に親油性材料を溶解する。溶媒を蒸発させると、水性媒体中に脂質が沈殿することにより粒子の分散液が形成される。温度、圧力、溶媒の選択などのパラメータを用いて粒径及び分布を制御することができる。溶媒蒸発速度は圧力の増加／減少又は温度の増加／減少によって調整し得る。
【０２１０】
４．溶媒乳化−拡散法
脂質粒子は溶媒乳化−拡散法によって調製することができる。初めに脂質をエタノール及びアセトンなどの有機相中に溶解させる。酸性水相を使用してゼータ電位を調整し、脂質コアセルベーションを生じさせる。連続フローモードにより、水及びアルコールを継続的に拡散させて脂質溶解度を低下させることが可能であり、それにより熱力学的な不安定性が生じ、リポソームが生成される。
【０２１１】
５．超臨界流体法
リポソーム及び固体脂質粒子を含めた脂質粒子は、超臨界流体法により調製することができる。超臨界流体手法には、他の調製方法で用いられる有機溶媒の代替又は減量という利点がある。脂質、カプセル化する活性薬剤、及び賦形剤を高圧で超臨界溶媒中に溶媒和させることができる。超臨界溶媒は最も一般的にはＣＯ２であるが、他の超臨界溶媒が当該技術分野において公知である。脂質の溶解度を増加させるため、少量の共溶媒を使用してもよい。エタノールが一般的な共溶媒であるが、概して製剤に安全であると見なされる他の少量の有機溶媒を使用することができる。脂質粒子、脂質ミセル、リポソーム、又は固体脂質粒子は、超臨界溶液の膨張によるか、又は非溶媒水相中への注入によって得ることができる。超臨界溶媒、共溶媒、非溶媒、温度、圧力等を調整することによって粒子形成及び粒径分布を制御し得る。
【０２１２】
６．マイクロエマルションベースの方法
マイクロエマルションに基づく脂質粒子の作製方法は当該技術分野において公知である。これらの方法は、多相系、通常二相系の希釈に基づく。脂質粒子を作製するためのエマルション方法は、概して、脂質を含有する多量の不混和性有機溶液に少量の水性媒体を加えることによる油中水型エマルションの形成を伴う。この混合物を撹拌して水性媒体を微小な液滴として有機溶媒全体に分散させると、脂質がひとりでに有機相と水相との間の境界に単層状に整列する。液滴のサイズは、圧力、温度、適用する撹拌及び存在する脂質の量によって制御する。
【０２１３】
油中水型エマルションは、ダブルエマルションの形成によってリポソーム懸濁液に変換することができる。ダブルエマルションでは、水滴を含有する有機溶液を多量の水性媒体に加えて撹拌すると、水中油中水型エマルションが生じる。形成される脂質粒子のサイズ及びタイプは、脂質、温度、圧力、コサーファクタント、溶媒等の選択及び量によって制御することができる。
【０２１４】
７．噴霧乾燥法
ポリマー粒子の作製に関して上記に記載されるものと同様の噴霧乾燥法を用いて固体脂質粒子を作成することができる。典型的には、この方法は、融点が７０℃より高い脂質で用いられる。
【０２１５】
一部の実施形態において、本発明のコンジュゲートは単一の水中油型エマルション方法を用いてポリマー粒子にカプセル化し得る。非限定的な例として、コンジュゲート及び好適なポリマー又はブロック共重合体又はポリマー／ブロック共重合体の混合物を、限定はされないが、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、酢酸エチル（ＥｔＡｃ）又はクロロホルム（ｃｈｏｌｏｆｏｒｍ）などの有機溶媒に溶解させて、油相を形成する。限定はされないが、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル（ＣＡＮ）又はベンジルアルコール（ＢＡ）などの共溶媒を使用して粒子のサイズを制御し、及び／又はコンジュゲートを可溶化し得る。製剤に使用するポリマーとしては、限定はされないが、ＰＬＡ９７−ｂ−ＰＥＧ５、ＰＬＡ３５−ｂ−ＰＥＧ５及びＰＬＡ１６−ｂ−ＰＥＧ５共重合体を挙げることができる。
【０２１６】
一部の実施形態において、粒子製剤は、本発明のコンジュゲートの親油性を変えることによって調製し得る。親油性は、コンジュゲートと種々の対イオンとの疎水性イオン対又は疎水性イオン対形成（ＨＩＰ）を用いて変えることができる。ＨＩＰは本発明のコンジュゲートの溶解度を変化させる。水溶解度を低下させてもよく、有機相の溶解度が増加し得る。
【０２１７】
任意の好適な薬剤を使用して対イオンを提供することにより、本発明のコンジュゲートとのＨＩＰ複合体を形成し得る。一部の実施形態において、ＨＩＰ複合体は粒子の製剤化前に形成されてもよい。
【０２１８】
Ｖ．本コンジュゲート及び粒子の使用方法
本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート又は粒子は、適宜、任意の過剰増殖性疾患、代謝疾患、感染症、又は癌を治療するため投与することができる。本製剤は免疫化に使用することができる。製剤は、注射により、経口的に、又は局所的に、典型的には粘膜表面に（肺内、鼻腔、経口、頬側、舌下、腟内に、直腸に）又は眼に（眼内に又は経眼的に）投与し得る。
【０２１９】
様々な実施形態において、癌を有する対象を治療する方法が提供され、この方法は、癌を有する、癌を有する疑いがある、又は癌の素因を有する対象に本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート又は粒子の治療有効量を投与することを含む。本発明によれば、癌には、無制御な細胞増殖、例えば過剰増殖によって特徴付けられる任意の疾患又は病気が包含される。癌は、腫瘍、例えば固形腫瘍又は任意の新生物によって特徴付けられ得る。
【０２２０】
一部の実施形態において、癌は固形腫瘍である。大型薬物分子は固形腫瘍における浸透が限られている。大型薬物分子の浸透は遅い。他方で、本発明のコンジュゲートのような小分子は固形腫瘍に迅速に且つより深く浸透し得る。薬物の浸透深さに関して、大型分子ほど耐久性の高い薬物動態を有するものの、浸透しにくい。本発明のコンジュゲートのような小分子は、より深く浸透する。ドレハー（Ｄｒｅｈｅｒ）ら（ドレハー（Ｄｒｅｈｅｒ）ら著、ジャーナル・オブ・ザ・ナショナル・キャンサー・インスティテュート（ＪＮＣＩ）、第９８巻、第５号、ｐ．３３５、２００６年（この内容は全体として参照により本明細書に援用される））は、種々のサイズのデキストランの腫瘍異種移植片への浸透を研究した。ドレハー（Ｄｒｅｈｅｒ）の図６（本願の図１を参照）及び表１に要約されるとおり、分子量が３．３ｋＤａ又は１０ｋＤａのデキストランは腫瘍組織への迅速な深い浸透（腫瘍の血管表面から＞３５ｕｍ）を示した。しかしながら、４０ｋＤａ、７０ｋＤａ又は２ｍＤａのサイズのデキストランは３．３ｋＤａ又は１０ｋＤａデキストランと比べて浸透性がはるかに低かった。７０ｋＤａデキストランは腫瘍の血管表面から僅か約１５ｕｍに達したに過ぎなかった。本発明のコンジュゲートは３．３ｋＤａ及び１０ｋＤａデキストランと同等の分子量を有し、一方、抗体薬物コンジュゲートは少なくとも７０ｋＤａデキストランと同程度に大きい分子量を有する。従って、本発明のコンジュゲートは固形腫瘍の中心部／中央部へと深く迅速に浸透し得る。
【０２２１】
一実施形態において、本発明のコンジュゲートは、腫瘍の血管表面から固形腫瘍の少なくとも約２５μｍ、約３０μｍ、約３５μｍ、約４０μｍ、約４５μｍ、約５０μｍ、約７５μｍ、約１００μｍ、約１５０μｍ、約２００μｍ、約２５０μｍ、約３００μｍ、約４００μｍ、約５００μｍ、約６００μｍ、約７００μｍ、約８００μｍ、約９００μｍ、約１０００μｍ、約１１００μｍ、約１２００μｍ、約１３００μｍ、約１４００μｍ又は約１５００μｍ中まで達する。距離ゼロは腫瘍の血管表面として定義され、ゼロより大きい距離はいずれも、最も近い血管表面まで三次元で計測した距離として定義される。
【０２２２】
別の実施形態において、本発明のコンジュゲートは腫瘍の中心部に浸透する。腫瘍の「中心部」は、本明細書で使用されるとき、腫瘍の中央範囲を指す。腫瘍の中心範囲の任意の部分から腫瘍の血管表面までの距離は、腫瘍の長さ又は幅の約３０％〜約５０％である。腫瘍の中心範囲の任意の部分から腫瘍の中心点までの距離は、腫瘍の長さ又は幅の約２０％未満である。腫瘍の中心範囲はおよそ腫瘍の中心１／３である。
【０２２３】
別の実施形態において、本発明のコンジュゲート本発明のコンジュゲートは固形腫瘍の中間部まで浸透する。腫瘍の「中間部」は、本明細書で使用されるとき、腫瘍の中間範囲を指す。腫瘍の中間範囲の任意の部分から腫瘍の血管表面までの距離は、腫瘍の長さ又は幅の約１５％〜約３０％である。腫瘍の中間範囲の任意の部分から腫瘍の中心点までの距離は腫瘍の長さ又は幅の約２０％〜約３５％である。腫瘍の中間範囲はおよそ腫瘍の中心１／３から腫瘍の外側１／３までの間である。
【０２２４】
一部の実施形態において、対象は、他の場合であれば本コンジュゲート又は粒子による治療の適応がないものであり得る。一部の実施形態において、方法は、限定はされないが哺乳類癌細胞を含め、癌細胞の使用を含む。一部の例では、哺乳類癌細胞はヒト癌細胞である。
【０２２５】
一部の実施形態において、本教示のコンジュゲート又は粒子は癌及び／又は腫瘍成長を阻害することが分かった。それらはまた、細胞増殖を含め、侵襲、及び／又は転移も低減し、従ってそれらは癌の治療に有用なものとなる。
【０２２６】
一部の実施形態において、本教示のコンジュゲート又は粒子を使用して腫瘍又は癌の成長を防ぎ、及び／又は腫瘍又は癌の転移を防ぎ得る。一部の実施形態において、本教示の組成物を使用して癌を縮小させ又は破壊し得る。
【０２２７】
一部の実施形態において、本明細書に提供されるコンジュゲート又は粒子は癌細胞の増殖の阻害に有用である。一部の実施形態において、本明細書に提供されるコンジュゲート又は粒子は細胞増殖の阻害、例えば、細胞増殖速度の阻害、細胞増殖の予防、及び／又は細胞死の誘導に有用である。一般に、本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート又は粒子は癌細胞の細胞増殖を阻害し得るか、又は癌細胞の増殖の阻害及び／又は細胞死の誘導の両方を行い得る。一部の実施形態において、細胞増殖は本発明のコンジュゲート（ｃｏｎｊｇｕａｔｅ）又は粒子による治療後に未治療の細胞と比較して少なくとも約２５％、約５０％、約７５％、又は約９０％低下する。一部の実施形態において、細胞周期停止マーカーのホスホヒストンＨ３（ＰＨ３又はＰＨＨ３）が本発明のコンジュゲート（ｃｏｎｊｇｕａｔｅ）又は粒子による治療後に未治療の細胞と比較して少なくとも約５０％、約７５％、約１００％、約２００％、約４００％又は約６００％増加する。一部の実施形態において、細胞アポトーシスマーカーの切断型カスパーゼ３（ＣＣ３）が本発明のコンジュゲート（ｃｏｎｊｇｕａｔｅ）又は粒子による治療後に未治療の細胞と比較して少なくとも５０％、約７５％、約１００％、約２００％、約４００％又は約６００％増加する。
【０２２８】
更には、一部の実施形態において、本発明のコンジュゲート又は粒子は、サイズ（重量、表面積又は容積）の正味の値として計測するか、それとも時間に対する速度として計測するかに関わらず、複数種の腫瘍において腫瘍成長の阻害に有効である。
【０２２９】
一部の実施形態において、腫瘍のサイズは本発明のコンジュゲート又は粒子による治療後に約６０％以上減少する。一部の実施形態において、腫瘍のサイズは、重量、及び／又は面積及び／又は容積で計測して少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約１００％減少する。
【０２３０】
本教示の方法によって治療可能な癌は、概して哺乳類に起こる。哺乳類としては、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウサギ、フェレット、モルモット  ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、及びウシが挙げられる。様々な実施形態において、癌は、肺癌、乳癌、例えば、変異ＢＲＣＡ１及び／又は変異ＢＲＣＡ２乳癌、非ＢＲＣＡ関連乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、膵癌、結腸直腸癌、膀胱癌、前立腺癌、子宮頸癌、腎癌、白血病、中枢神経系癌、骨髄腫、及び黒色腫である。一部の実施形態において、癌は、限定はされないが、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、副腎髄質腫瘍（例えば、褐色細胞腫、神経芽細胞腫、神経節神経腫、又は傍神経節腫）、胃腸膵神経内分泌腫瘍（例えば、カルチノイド、ガストリノーマ、グルカゴノーマ、血管作動性腸管ポリペプチド分泌腫瘍、膵ポリペプチド分泌腫瘍、又は非機能性胃腸膵腫瘍）、甲状腺髄様癌（ｍｅｄｕａｌｌａｒｙ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｎｃｅｒ）、皮膚メルケル細胞腫、下垂体腺腫、及び膵癌などの神経内分泌癌である。ソマトスタチン受容体（ｓｏｍａｔｏｓｔａｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）ＳＳＴＲ２は神経内分泌癌の５０〜９０％で過剰発現する。一部の実施形態において、神経内分泌癌は原発性神経内分泌癌である。一部の実施形態において、神経内分泌癌は神経内分泌転移（ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ｍｅｔａｓｔａｔｓｉｓ）である。神経内分泌転移（ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｓ）は、対象の肝臓、肺、骨、又は脳にあり得る。特定の実施形態において、癌は、脳癌、ヒト肺癌、卵巣癌、膵癌又は結腸直腸癌である。
【０２３１】
一実施形態において、本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート若しくは粒子又は本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート若しくは粒子を含有する製剤を使用して小細胞肺癌が治療される。肺癌患者の約１２％〜１５％が小細胞肺癌を有する。転移性小細胞肺癌（ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｅｒ）の生存率は低い。診断後５年生存率は５％を下回る。米国での小細胞肺癌発生率は約２６Ｋ〜３０Ｋである。これらの患者のうち、約４０％〜８０％がＳＳＴＲ２陽性である。
【０２３２】
一部の実施形態において、本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート若しくは粒子又は本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート若しくは粒子を含有する製剤を使用して、ソマトスタチン受容体（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）を発現又は過剰発現する腫瘍を有する患者（ｐａｉｔｅｎｔ）が治療される。かかる患者は、限定はされないが、放射性核種イメージング剤、放射性標識ソマトスタチン類似体イメージング剤、ＳＳＴＲシンチグラフィ又はＳＳＴＲ陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）を用いるなど、当該技術分野において公知の任意の方法で同定し得る。一実施形態では、１１１インジウム（インジウム１１１）標識ペンテトレオチドシンチグラフィ（オクトレオスキャン（登録商標）（ＯｃｔｒｅｏＳｃａｎ（登録商標）））を用いてＳＳＴＲ発現腫瘍を有する患者を同定する。別の実施形態では、ＰＥＴイメージングにおいて６８Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＴＡＴＥ、６８Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＴＯＣ、又は６８Ｇａ−ＤＯＴＡ−ＮＯＣなどの６８Ｇａコンジュゲートを用いてＳＳＴＲ発現腫瘍を有する患者を同定する。インジウム１１１標識ペンテトレオチドシンチグラフィで検出された陽性スキャン結果を示す患者は、本発明のコンジュゲート（ｃｏｎｊｇｕａｔｅ）又は粒子によって治療する。
【０２３３】
本発明のコンジュゲート又は粒子の特徴は、腫瘍成長を阻害する、例えば遅延させ又は停止させる有効性は維持しつつ、生物にとって比較的低毒性であることである。本明細書で使用されるとき、「毒性」は、物質又は組成物が細胞、組織、生物又は細胞環境にとって有害又は有毒となる能力を指す。低毒性とは、物質又は組成物が細胞、組織、生物又は細胞環境にとって有害又は有毒となる能力の低下を指す。かかる毒性の低下又は低毒性は、標準測定値を基準としたものか、治療を基準としたものか、又は治療がない場合を基準としたものであり得る。例えば、本発明のコンジュゲート又は粒子は、単独で投与した活性薬剤部分Ｚよりも低い毒性を有し得る。ＤＭ１を含むコンジュゲートについては、その毒性は単独で投与したＤＭ１よりも低い。
【０２３４】
毒性は、更に対象の体重減少を基準として計測されてもよく、ここでは体重の１５％超、２０％超又は３０％超の体重減少が毒性の指標となる。嗜眠及び全身倦怠感を含む患者の症状呈示の尺度など、毒性の他の尺度が計測されてもまたよい。好中球減少、血小板減少、白血球（ＷＢＣ）数、全血球（ＣＢＣ）数もまた、毒性の尺度であり得る。毒性の薬理学的指標としては、アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ／ＡＬＴ）値の上昇、神経毒性、腎損傷、ＧＩ障害などが挙げられる。一実施形態において、本発明のコンジュゲート又は粒子は対象の体重の有意な変化を引き起こさない。本発明のコンジュゲート（ｃｏｎｊｇｕａｔｅ）又は粒子による治療後に対象の体重減少は約３０％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％未満である。別の実施形態において、本発明のコンジュゲート又は粒子は対象のＡＳＴ／ＡＬＴ値の有意な増加を引き起こさない。本発明のコンジュゲート又は粒子による治療後に対象のＡＳＴ又はＡＬＴ値は増加が約３０％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％未満である。更に別の実施形態において、本発明のコンジュゲート又は粒子は、本発明のコンジュゲート又は粒子による治療後に対象のＣＢＣ又はＷＢＣ数の有意な変化を引き起こさない。本発明のコンジュゲート又は粒子による治療後に対象のＣＢＣ又はＷＢＣ値は低下が約３０％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％未満である。
【０２３５】
一部の実施形態において、本発明のコンジュゲート又は粒子は少なくとも１つの追加の（ａｄｄｔｉｏｎａｌ）活性薬剤と組み合わされる。活性薬剤は任意の好適な薬物であってもよい。活性薬剤は、癌の治療用薬物など、本明細書に記載される任意の活性薬剤から選択されてもよい。活性薬剤はまた、癌症状緩和薬であってもよい。症状緩和薬の非限定的な例としては、オクトレオチド又はランレオチド；インターフェロン、シプロヘプタジン（ｃｙｐｏｈｅｐｔａｄｉｎｅ）又は任意の他の抗ヒスタミン薬が挙げられる。一部の実施形態において、本発明のコンジュゲート又は粒子は追加の活性薬剤との薬物相互干渉を有しない。一実施形態において、本発明のコンジュゲート又は粒子はシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）アイソザイムを阻害しない。ＣＹＰアイソザイムには、ＣＹＰ３Ａ４ミダゾラム、ＣＹＰ３Ａ４テストステロン、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｂ６、及びＣＹＰ２Ｃ１９が含まれ得る。追加の活性薬剤は本発明のコンジュゲート（ｃｏｎｊｇｕａｔｅ）又は粒子と同時に投与されてもよい。
【０２３６】
一部の実施形態において、追加の活性薬剤は、いかなるソマトスタチン受容体にも結合しないものであり得る。一実施形態において、追加の活性薬剤は癌症状緩和薬である。症状緩和薬は化学療法又は放射線療法の下痢又は副作用を低減し得る。一例において、本発明のコンジュゲート又は粒子は、テロトリスタット又はテロトリスタットエチプレート（ＬＸ１０３２、レキシコン（登録商標）（Ｌｅｘｉｃｏｎ（登録商標）））などのカルチノイド症候群（ｃａｒｃｉｎｏｉｄ  ｓｙｍｄｒｏｍｅ）の症状緩和薬と組み合わせてもよい。テロトリスタットエチプレートは、チェン（Ｃｈｅｎ）らに対する国際公開第２０１３０５９１４６号パンフレット（この内容は全体として参照により本明細書に援用される）に開示されるとおりのテロトリスタットの結晶性馬尿酸塩である。テロトリスタット、その塩及び結晶形態は、当該技術分野において公知の方法により入手することができる（デバサガヤラジ（Ｄｅｖａｓａｇａｙａｒａｊ）らに対する米国特許第７７０９４９３号明細書（この内容は全体として参照により本明細書に援用される）を参照）。米国特許第７７０９４９３号明細書に開示される任意の他の化合物を本発明のコンジュゲート又は粒子と組み合わせ得る。
【０２３７】
テロトリスタット：
【０２３８】
【化１１】
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【０２３９】
別の例では、本発明のコンジュゲート又は粒子を中等用量の化学療法剤、例えばマイトマイシンＣ、ビンブラスチン及びシスプラチンと組み合わせてもよい（エリス（Ｅｌｌｉｓ）ら著、ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・キャンサー（Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ）、第７１巻、第２号、ｐ．３６６〜３７０（１９９５年）（この内容は全体として参照により本明細書に援用される）を参照）。
【０２４０】
本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート若しくは粒子又は本明細書に記載されるとおりのコンジュゲート若しくは粒子を含有する製剤を使用して、治療用、予防用、又は診断用薬剤をそれを必要としている個体又は患者に組織選択的に送達することができる。例えば、本発明のＤＭ１コンジュゲート又は粒子を使用してＤＭ１が選択的な組織に送達される。これらの組織は腫瘍組織であり得る。投薬量レジメンは、最適な所望の反応（例えば、治療的又は予防的反応）がもたらされるように調整し得る。例えば、単回ボーラスを投与してもよく、数回の分割用量を時間をかけて投与してもよく、又は治療状況の緊急性が指示するところに応じて用量を比例的に減量又は増量させてもよい。投薬量単位形態とは、本明細書で使用されるとき、治療する哺乳類対象への単位投薬量として適した物理的に個別の単位を指す；各単位が、所望の治療薬を生じるように計算された所定の分量の活性化合物を含有する。
【０２４１】
様々な実施形態において、粒子中に含まれるコンジュゲートは制御された形で放出される。放出はインビトロ又はインビボであってよい。例えば、米国薬局方及びそのバリエーションに規定されているものを含め、一定の条件下で粒子を放出試験に供することができる。
【０２４２】
様々な実施形態において、粒子が放出試験の条件に曝露された後の最初の１時間以内に、粒子中に含まれるコンジュゲートの約９０％未満、約８０％未満、約７０％未満、約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満が放出される。一部の実施形態において、粒子が放出試験の条件に曝露された後の最初の１時間以内に、粒子中に含まれるコンジュゲートの約９０％未満、約８０％未満、約７０％未満、約６０％未満、又は約５０％未満が放出される。特定の実施形態において、粒子が放出試験の条件に曝露された後の最初の１時間以内に、粒子中に含まれるコンジュゲートの約５０％未満が放出される。
【０２４３】
コンジュゲートがインビボで放出されることに関して、例えば、対象に投与された粒子中に含まれるコンジュゲートは対象の体から保護されていてもよく、及び体もまた、コンジュゲートが粒子から放出されるまでコンジュゲートから隔離されていてもよい。
【０２４４】
従って、一部の実施形態において、本コンジュゲートは、粒子が対象の体に送達されるまで実質的に粒子中に含まれていてもよい。例えば、粒子が対象の体、例えば治療部位に送達される前に粒子から放出されるのは、総コンジュゲートの約９０％未満、約８０％未満、約７０％未満、約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、又は約１％未満である。一部の実施形態において、本コンジュゲートは長期間にわたって放出されてもよく、又はバーストによって放出されてもよい（例えば、多量のコンジュゲートが短時間のうちに放出された後、実質的にコンジュゲートが放出されない時間が続く）。例えば、コンジュゲートは６時間、１２時間、２４時間、又は４８時間かけて放出されてもよい。特定の実施形態において、コンジュゲートは１週間又は１ヵ月間かけて放出される。
【０２４５】
ＶＩ．キット及びデバイス
本発明は、本発明の方法を好都合に及び／又は有効に実行するための種々のキット及びデバイスを提供する。典型的にはキットは、使用者による１又は複数の対象の複数回の治療の実施及び／又は複数回の実験の実施を可能にするのに十分な量及び／又は数の構成要素を含み得る。
【０２４６】
一実施形態において、本発明は、本発明のコンジュゲート及び／又は粒子又は本発明のコンジュゲート及び／又は粒子の組み合わせを任意選択で任意の他の活性薬剤と組み合わせて含む、インビトロ又はインビボで腫瘍細胞成長を阻害するためのキットを提供する。
【０２４７】
本キットは、包装及び説明書及び／又は製剤組成物を形成するためのデリバリー剤を更に含み得る。デリバリー剤には、生理食塩水、緩衝溶液、又は本明細書に開示される任意のデリバリー剤が含まれ得る。各構成成分の量は、一貫した再現可能な高濃度生理食塩水又は単純緩衝液製剤が実現するように変えることができる。構成成分もまた、ある期間にわたる及び／又は種々の条件下における緩衝溶液中のコンジュゲート及び／又は粒子の安定性を増加させるため変えることができる。
【０２４８】
本発明は、本発明のコンジュゲート及び／又は粒子を取り入れ得るデバイスを提供する。これらのデバイスは、それを必要としている対象、例えばヒト患者に即時送達するのに利用可能な安定製剤を含む。一部の実施形態において、対象は癌を有する。
【０２４９】
デバイスの非限定的な例としては、ポンプ、カテーテル、針、経皮パッチ、加圧嗅覚器送達デバイス、イオントフォレシスデバイス、多層マイクロ流体デバイスが挙げられる。これらのデバイスを利用することにより、本発明のコンジュゲート及び／又は粒子を単回、複数回又は分割投与レジメン（ｒｅｇｉｍｅｎｔ）に従い送達し得る。デバイスを利用することにより、本発明のコンジュゲート及び／又は粒子を生体組織を通して、皮内に、皮下に、又は筋肉内に送達し得る。
【０２５０】
ＶＩＩ．定義
用語「化合物」は、本明細書で使用されるとき、示される構造体のあらゆる立体異性体、幾何異性体、互変異性体、及び同位元素を含むことが意図される。本願では、化合物はコンジュゲートと同義的に（ｉｎｔｅｒｅｃｈａｎｇａｂｌｙ）使用される。従って、コンジュゲートもまた、本明細書で使用されるとき、描かれる構造体のあらゆる立体異性体、幾何異性体、互変異性体、及び同位元素を含むことが意図される。
【０２５１】
本明細書に記載される化合物は不斉性であり得る（例えば１つ以上の立体中心を有する）。特に指示されない限り、エナンチオマー及びジアステレオマーなど、あらゆる立体異性体が意図される。非対称に置換された炭素原子を含む本開示の化合物は、光学活性形態又はラセミ体形態で分離することができる。光学活性出発物質から光学活性形態をどのように調製するかに関する方法は、ラセミ混合物の分割によるか又は立体選択的合成によるなど、当該技術分野において公知である。オレフィン類、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体もまた本明細書に記載される化合物に存在してもよく、かかる安定異性体は全て、本開示において企図される。本開示の化合物のシス及びトランス幾何異性体が記載され、異性体の混合物として又は別々の異性体型として分離され得る。
【０２５２】
本開示の化合物にはまた、互変異性型も含まれる。互変異性型は、単結合を隣接する二重結合と交換し、同時にプロトンが移動する結果として生じる。互変異性型は、同じ実験式及び全電荷を有する異性体プロトン化状態であるプロトトロピー互変異性体を含む。プロトトロピー互変異性体の例としては、ケトン−エノール対、アミド−イミド酸対、ラクタム−ラクチム対、アミド−イミド酸対、エナミン−イミン対、及びプロトンが複素環式系の２つ以上の位置を占めることができる環状型、例えば、１Ｈ−及び３Ｈ−イミダゾール、１Ｈ−、２Ｈ−及び４Ｈ−１，２，４−トリアゾール、１Ｈ−及び２Ｈ−イソインドール、及び１Ｈ−及び２Ｈ−ピラゾールが挙げられる。互変異性型は平衡状態であり、又は適切な置換によって一つの形態に立体的に固定される。
【０２５３】
本開示の化合物にはまた、中間体又は最終化合物中に存在する原子のあらゆる同位元素も含まれる。「同位元素」は、同じ原子番号を有するが、核内の中性子の数が異なる結果として質量数が異なる原子を指す。例えば、水素の同位元素にはトリチウム及び重水素が含まれる。
【０２５４】
本開示の化合物及び塩は、常法によって溶媒又は水分子と組み合わせて溶媒和物及び水和物を形成することにより調製し得る。
用語「対象」又は「患者」は、本明細書で使用されるとき、例えば、実験目的、治療目的、診断目的、及び／又は予防目的で粒子を投与し得る任意の生物を指す。典型的な対象としては、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、イヌ、ネコ、ハムスター、ラマ、非ヒト霊長類、及びヒトなどの哺乳類）が挙げられる。
【０２５５】
用語「治療する」又は「予防する」は、本明細書で使用されるとき、ある疾患、障害及び／又は病態に罹り易い素因があり得るものの、まだその疾患、障害又は病態を有すると診断はされていない動物に疾患、障害又は病態が起こらないように防ぐこと；疾患、障害又は病態を阻害する、例えば、その進行を妨げること；及び疾患、障害、又は病態を軽減する、例えば、疾患、障害及び／又は病態の退縮を生じさせることを含み得る。疾患、障害、又は病態を治療するとは、鎮痛剤が疼痛の原因を治療しないにしてもかかる薬剤の投与によって対象の痛みを治療するなど、特定の疾患、障害、又は病態の少なくとも１つの症状を、例え根底にある病態生理が影響を受けないとしても改善することを含み得る。
【０２５６】
「標的」は、本明細書で使用されるとき、標的化されたコンストラクトが結合する部位を意味するものとする。標的はインビボ又はインビトロのいずれであってもよい。特定の実施形態において、標的は、白血病又は腫瘍（例えば、脳、肺（小細胞及び非小細胞）、卵巣、前立腺、乳房及び結腸の腫瘍並びに他の癌腫及び肉腫）に見られる癌細胞であり得る。なおも他の実施形態において、標的は、ハプテン、エピトープ、受容体、ｄｓＤＮＡ断片、炭水化物又は酵素など、標的指向性部分又はリガンドが結合する分子構造を指し得る。標的はある種の組織、例えば、神経組織、腸組織、膵臓組織、肝臓、腎臓、前立腺、卵巣、肺、骨髄、又は乳房組織であってもよい。
【０２５７】
本方法又はコンジュゲート又は粒子の標的となり得る「標的細胞」は、概して動物細胞、例えば哺乳類細胞である。本方法を用いて、インビトロで、即ち細胞培養で、又は細胞が動物組織の一部を形成するか若しくは他の形で存在するインビボで、生細胞の細胞機能を改変し得る。従って、標的細胞には、例えば、血液、リンパ組織、消化管の内側を覆う細胞、例えば口腔粘膜及び咽頭粘膜、小腸の絨毛を形成する細胞、大腸の内側を覆う細胞、動物の呼吸器系（鼻道／肺）の内側を覆う細胞（本発明の吸入によって接触させ得る）、真皮／表皮細胞、腟及び直腸の細胞、胎盤の細胞を含めた内臓器官の細胞及びいわゆる血液脳関門等が含まれ得る。一般に、標的細胞は少なくとも１種類のＳＳＴＲを発現する。一部の実施形態において、標的細胞は、ＳＳＴＲを発現し且つ本明細書に記載されるコンジュゲートによって標的化される、及び本コンジュゲートの活性薬剤の放出によって影響を受ける細胞の近傍にある細胞であり得る。例えば、腫瘍に近接しているＳＳＴＲを発現する血管が標的であってもよく、一方、その部位で放出される活性薬剤は腫瘍に影響を及ぼすことになる。
【０２５８】
用語「治療効果」は当該技術分野で認識されており、薬理活性物質によって引き起こされる動物、詳細には哺乳類、より詳細にはヒトにおける局所又は全身作用を指す。従ってこの用語は、動物、例えばヒトの望ましい身体的又は精神的発達及び状態の増強における疾患、障害又は病態の診断、治癒、緩和、治療又は予防への使用が意図される任意の物質を意味する。
【０２５９】
用語「モジュレーション」は、当該技術分野で認識されており、反応の上方制御（即ち活性化又は刺激）、下方制御（即ち阻害又は抑制）、又はこれら２つを組み合わせで又は別々に指す。モジュレーションは、概して、治療される実体にとって内部又は外部であってもよいベースライン又は基準と比較される。
【０２６０】
「非経口投与」は、本明細書で使用されるとき、消化管（経腸）又は非侵襲性局所経路を介する以外の任意の方法による投与を意味する。例えば、非経口投与には、静脈内、皮内、腹腔内、胸膜内、気管内、骨内（ｉｎｔｒａｏｓｓｉｏｕｓｌｙ）、脳内、髄腔内、筋肉内、皮下、結膜下（ｓｕｂｊｕｎｃｔｉｖａｌｌｙ）への、注射による、及び注入による患者への投与が含まれ得る。
【０２６１】
「局所投与」は、本明細書で使用されるとき、皮膚、開口部、又は粘膜への非侵襲性投与を意味する。局所投与は局所的に送達することができ、即ち、治療薬は全身曝露なしに、又は最小限の全身曝露で、送達領域に局所効果をもたらすことができる。一部の局所製剤は、例えば個体の血流への吸着によって全身作用をもたらすことができる。局所投与には、限定はされないが、皮膚及び経皮投与、頬側投与、鼻腔内投与、腟内投与、膀胱内投与、眼投与、及び直腸投与が含まれ得る。
【０２６２】
「経腸投与」は、本明細書で使用されるとき、胃腸管を通じた吸収による投与を意味する。経腸投与には、経口及び舌下投与、胃投与、又は直腸投与が含まれ得る。
「肺内投与」は、本明細書で使用されるとき、吸入又は気管内投与による肺内への投与を意味する。本明細書で使用されるとき、用語「吸入」は、肺胞に空気を取り入れることを指す。空気の取り入れは口又は鼻から行われ得る。
【０２６３】
本明細書で同義的に使用されるとおりの用語「十分な」及び「有効な」は、１つ以上の所望の結果を実現するのに必要な量（例えば、質量、容積、投薬量、濃度、及び／又は時間）を指す。「治療有効量」は、少なくとも１つの症状又は特定の病態若しくは障害の計測可能な改善又は妨害を生じさせ、平均余命の計測可能な向上を生じさせ、又は患者のクオリティ・オブ・ライフを概して改善するのに要求される少なくとも最小限の濃度である。従って治療有効量は、具体的な生物学的に活性な分子及び治療する具体的な病態又は障害に依存する。抗体など、多くの活性薬剤の治療有効量は、当該技術分野において公知である。本明細書に記載される化合物及び組成物の、例えば特定の障害を治療するための治療有効量は、十分に医師などの当業者の技能の範囲内にある技法によって決定し得る。
【０２６４】
本明細書では同義的に使用されるとおりの用語「生物活性薬剤」及び「活性薬剤」には、限定なしに、身体で局所的又は全身的に作用する生理活性又は薬理活性物質が含まれる。生物活性薬剤は、疾患又は病気の治療（例えば治療用薬剤）、予防（例えば予防用薬剤）、診断（例えば診断用薬剤）、治癒又は緩和に使用される物質、身体の構造又は機能に影響を及ぼす物質、又は所定の生理学的環境に置かれた後に生物学的に活性になる又は活性が高くなるプロドラッグである。
【０２６５】
用語「プロドラッグ」は、インビトロ及び／又はインビボで生物学的に活性な形態に変換される、有機小分子、ペプチド、核酸又はタンパク質を含めた薬剤を指す。プロドラッグは、ある状況において親化合物（活性化合物）よりも投与が容易であり得るため有用であり得る。例えば、プロドラッグは経口投与によるバイオアベイラビリティがあり得るが、親化合物はない。プロドラッグはまた、親薬物と比較して医薬組成物中における溶解度が向上したものであり得る。プロドラッグはまた、親よりも毒性が低いものであり得る。プロドラッグは、酵素的過程及び代謝加水分解を含め、様々な機構によって親薬物に変換され得る。ハーパー，Ｎ．Ｊ．（Ｈａｒｐｅｒ，Ｎ．Ｊ．）、１９６２年、薬物潜在化（Ｄｒｕｇ  Ｌａｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ）、ユッカー（Ｊｕｃｋｅｒ）編、薬物研究の進歩（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第４巻、ｐ．２２１〜２９４；モロゾウィッチ（Ｍｏｒｏｚｏｗｉｃｈ）ら著、１９７７年、身体有機成分のプロドラッグ設計への応用（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｔｏ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ）、Ｅ．Ｂ．ロシュ（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ）編、プロドラッグ及び類似体によるバイオ医薬品特性の設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｓ）、米国薬剤師会（ＡＰｈＡ）；アカデミー・オブ・ファーマシューティカル・リサーチ・アンド・サイエンス（Ａｃａｄ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）；Ｅ．Ｂ．ロシュ（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ）編、１９７７年、薬物設計、理論及び応用における薬物のバイオリバーシブル担体（Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）、米国薬剤師会（ＡＰｈＡ）；Ｈ．バンドゲーアード（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ）編、１９８５年、プロドラッグの設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）、エルゼビア（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）；ワン（Ｗａｎｇ）ら著、１９９９年、ペプチド薬物の送達改善に向けたプロドラッグアプローチ（Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇ）、カレント・ファーマシューティカル・デザイン（Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ．）、第５巻、第４号、ｐ．２６５〜２８７；パウレッティ（Ｐａｕｌｅｔｔｉ）ら著、１９９７年、ペプチドバイオアベイラビリティの向上：ペプチドミメティクス及びプロドラッグ戦略（Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ：Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ）、アドバンスド・ドラッグ・デリバリー・レビューズ（Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．）、第２７巻、ｐ．２３５〜２５６；ミズン（Ｍｉｚｅｎ）ら著、１９９８年、βラクタム系抗生物質の経口送達用プロドラッグとしてのエステルの使用（Ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｅｓｔｅｒｓ  ａｓ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏ��  β−Ｌａｃｔａｍ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）、ファーマシューティカル・バイオテクノロジー（Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．）、第１１巻、ｐ．３４５〜３６５；ガイニョー（Ｇａｉｇｎａｕｌｔ）ら著、１９９６年、プロドラッグ及びバイオプリカーサの設計Ｉ．担体プロドラッグ（Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  Ｉ．Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）、ザ・プラクティス・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｐｒａｃｔ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、ｐ．６７１〜６９６；Ｍ．アスガルネジド（Ｍ．Ａｓｇｈａｒｎｅｊａｄ）、２０００年、プロドラッグによる経口薬物輸送の改善（Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  Ｏｒａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｖｉａ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）、Ｇ．Ｌ．アミドン（Ｇ．Ｌ．Ａｍｉｄｏｎ）、Ｐ．Ｉ．リー（Ｐ．Ｉ．Ｌｅｅ）及びＥ．Ｍ．トップ（Ｅ．Ｍ．Ｔｏｐｐ）編、製剤系の輸送プロセス（Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、マルセル・デッカー（Ｍａｒｃｅｌｌ  Ｄｅｋｋｅｒ）、ｐ．１８５〜２１８；バラント（Ｂａｌａｎｔ）ら著、１９９０年、種々の投与経路による薬物吸収を改善するためのプロドラッグ（Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｖｉａ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｒｏｕｔｅｓ  ｏｆ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・ドラッグ・メタボリズム・アンド・ファーマコキネティクス（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．）、第１５巻、第２号、ｐ．１４３〜５３；バリマネ（Ｂａｌｉｍａｎｅ）及びシンコ（Ｓｉｎｋｏ）著、１９９９年、ヌクレオシド類似体の経口吸収におけるマルチトランスポーターの改善（Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｏｒａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ）、アドバンスド・ドラッグ・デリバリー・レビューズ（Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．）、第３９巻、第１−３号、ｐ．１８３〜２０９；ブラウン（Ｂｒｏｗｎｅ）著、１９９７年、ホスフェニトイン（セレビックス）（Ｆｏｓｐｈｅｎｙｔｏｉｎ（Ｃｅｒｅｂｙｘ））、クリニカル・ニューロファーマコロジー（Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．）、第２０巻、第１号、ｐ．１〜１２；バンドゲーアード（Ｂｕｎｄｇａａｒｄ）著、１９７９年、薬物のバイオリバーシブル誘導体化−原理と薬物の治療効果の改善に向けた適用性（Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ−−ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  ｉｍｐｒｏｖｅ  ｔｈｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ）、Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｃｈｅｍｉ．、第８６巻、第１号、ｐ．１〜３９；Ｈ．バンドゲーアード（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ）編、１９８５年、プロドラッグの設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）、ニューヨーク：エルゼビア（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）；フライシャー（Ｆｌｅｉｓｈｅｒ）ら著、１９９６年、経口薬物送達���改善：溶解度制限がプロドラッグの使用によって解消される（Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ：ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ）、アドバンスド・ドラッグ・デリバリー・レビューズ（Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．）、第１９巻、第２号、ｐ．１１５〜１３０；フライシャー（Ｆｌｅｉｓｈｅｒ）ら著、１９８５年、腸内酵素ターゲティングによる胃腸管吸収の改善に向けたプロドラッグの設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｆｏｒ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｅｎｚｙｍｅ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ）、メソッズ・イン・エンザイモロジー（Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．）、第１１２巻、ｐ．３６０〜８１；ファークワー・Ｄ（Ｆａｒｑｕｈａｒ  Ｄ）ら著、１９８３年、生物学的に可逆的なリン酸塩保護基（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ）、ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシーズ（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第７２巻、第３号、ｐ．３２４〜３２５；ハン・Ｈ．Ｋ．（Ｈａｎ，Ｈ．Ｋ．）ら著、２０００年、薬物送達を最適化するための標的化プロドラッグ設計（Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｄｅｓｉｇｎ  ｔｏ  ｏｐｔｉｍｉｚｅ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ）、製薬科学者協会ファームサイ（ＡＡＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉ．）、第２巻、第１号、ｐ．Ｅ６；サヅカ・Ｙ（Ｓａｄｚｕｋａ  Ｙ．）、２０００年、有効なプロドラッグリポソーム及び活性代謝産物への変換（Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｌｉｐｏｓｏｍｅ  ａｎｄ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｔｏ  ａｃｔｉｖｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ）、カレント・ドラッグ・メタボリズム（Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．）、第１巻、第１号、ｐ．３１〜４８；Ｄ・Ｍ・ランバート（Ｄ．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ）、２０００年、プロドラッグ担体としての脂質の原理及び応用（Ｒａｔｉｏｎａｌｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｌｉｐｉｄｓ  ａｓ  ｐｒｏｄｒｕｇ  ｃａｒｒｉｅｒｓ）、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンシーズ（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．）、第１１巻、補遺２、ｐ．Ｓ１５〜２７；ワン・Ｗ（Ｗａｎｇ，Ｗ．）ら著、１９９９年、ペプチド薬物の送達改善に向けたプロドラッグアプローチ（Ｐｒｏｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｄｒｕｇｓ）、カレント・ファーマシューティカル・デザイン（Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．）、第５巻、第４号、ｐ．２６５〜８７。
【０２６６】
用語「生体適合性」は、本明細書で使用されるとき、任意の代謝産物又はその分解産物と共に、概して被投与者にとって非毒性の、且つ被投与者にいかなる重大な有害作用も引き起こさない材料を指す。一般的に言えば、生体適合性材料は、患者への投与時に重大な炎症反応又は免疫反応を誘発しない材料である。
【０２６７】
用語「生分解性」は、本明細書で使用されるとき、概して、生理条件下で分解し又は侵食されて、対象によって代謝、排出、又は排泄可能なより小さい単位又は化学種になる材料を指す。分解時間は組成及び形態の関数である。分解時間は数時間〜数週間であり得る。
【０２６８】
用語「薬学的に許容可能」は、本明細書で使用されるとき、妥当な医学的判断の範囲内で、米国食品医薬品局などの機関のガイドラインに従い合理的なリスク対効果比に見合った過度の毒性、刺激作用、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症のないヒト及び動物の組織との接触における使用に好適な化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指す。「薬学的に許容可能な担体」は、本明細書で使用されるとき、インビボで組成物の送達を促進する医薬製剤の全ての構成成分を指す。薬学的に許容可能な担体としては、限定はされないが、希釈剤、保存剤、結合剤、滑沢剤、崩壊薬、膨潤剤、充填剤、安定剤、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０２６９】
用語「分子量」は、本明細書で使用されるとき、概して材料の質量又は平均質量を指す。ポリマー又はオリゴマーの場合、分子量は、バルクポリマーの相対的平均鎖長又は相対的鎖質量を指し得る。実際には、ポリマー及びオリゴマーの分子量は、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）又は毛細管粘度測定法を含めた様々な方法で推定し又は特徴付けることができる。ＧＰＣ分子量は、数平均分子量（Ｍｎ）とは対照的に、重量平均分子量（Ｍｗ）として報告される。毛細管粘度測定法は、特定の一組の濃度、温度、及び溶媒条件を用いた希釈ポリマー溶液から決定される固有粘度として分子量の推定値を提供する。
【０２７０】
用語「小分子」は、本明細書で使用されるとき、概して、２０００ｇ／ｍｏｌ未満の分子量、１５００ｇ／ｍｏｌ未満、１０００ｇ／ｍｏｌ未満、８００ｇ／ｍｏｌ未満、又は５００ｇ／ｍｏｌ未満の有機分子を指す。小分子は非ポリマー性及び／又は非オリゴマー性である。
【０２７１】
用語「親水性」は、本明細書で使用されるとき、水と容易に相互作用する強極性基を有する物質を指す。
用語「疎水性」は、本明細書で使用されるとき、水に対する親和性を欠く；撥水して水を吸収しないとともに水中に溶解又は混合しない傾向をもつ物質を指す。
【０２７２】
用語「親油性」は、本明細書で使用されるとき、脂質に対する親和性を有する化合物を指す。
用語「両親媒性」は、本明細書で使用されるとき、親水性特性と親油性（疎水性）特性とを合わせ持つ分子を指す。「両親媒性材料」は、本明細書で使用されるとき、疎水性又は高疎水性のオリゴマー又はポリマー（例えば生分解性オリゴマー又はポリマー）と親水性又は高親水性のオリゴマー又はポリマーとを含有する材料を指す。
【０２７３】
用語「標的指向性部分」は、本明細書で使用されるとき、特定の場所（ｌｏｃａｌｅ）に結合する又はそこに局在化する部分を指す。部分は、例えば、タンパク質、核酸、核酸類似体、炭水化物、又は小分子であり得る。場所は、組織、特定の細胞型、又は細胞内コンパートメントであり得る。一部の実施形態において、標的指向性部分は選択の分子に特異的に結合することができる。
【０２７４】
用語「反応性カップリング基」は、本明細書で使用されるとき、第２の官能基と反応して共有結合を形成する能力を有する任意の化学官能基を指す。反応性カップリング基の選択は当業者の能力の範囲内である。反応性カップリング基の例としては、第一級アミン類（−ＮＨ２）及びアミン反応性連結基、例えば、イソチオシアネート類、イソシアネート類、アシルアジド類、ＮＨＳエステル類、塩化スルホニル類、アルデヒド類、グリオキサール類、エポキシド類、オキシラン類、炭酸塩類、ハロゲン化アリール類、イミドエステル類、カルボジイミド類、無水物類、及びフルオロフェニルエステル類などを挙げることができる。これらの多くはアシル化又はアルキル化のいずれかによってアミン類にコンジュゲートする。反応性カップリング基の例としては、アルデヒド類（−ＣＯＨ）及びアルデヒド反応性連結基、例えば、ヒドラジド類、アルコキシアミン類、及び第一級アミン類を挙げることができる。反応性カップリング基の例としては、チオール基（−ＳＨ）及びスルフヒドリル反応基、例えば、マレイミド類、ハロアセチル類、及びピリジルジスルフィド類を挙げることができる。反応性カップリング基の例としては、光反応性カップリング基、例えばアリールアジド類又はジアジリン類などを挙げることができる。カップリング反応には、触媒、熱、ｐＨ緩衝液、光、又はこれらの組み合わせの使用が含まれ得る。
【０２７５】
用語「保護基」は、本明細書で使用されるとき、所望の官能基をある種の反応条件から保護するため別の所望の官能基に付加され及び／又はそれを置換し、及び所望の官能基を脱保護し又はそれを露出させるため選択的に除去及び／又は置換され得る官能基を指す。保護基は当業者に公知である。好適な保護基としては、グリーン（Ｇｒｅｅｎｅ）及びウッツ（Ｗｕｔｓ）、有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）、１９９１年に記載されるものを挙げることができる。酸感受性保護基としては、ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）、ｔｅｒｔ−ブチルカルバメート（ｔＢｏｃ）及びトリフルオロアセチル（ｔＦＡ）が挙げられる。塩基感受性保護基としては、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、イソブチリル（ｉｓｏｂｕｔｙｒｌ）（ｉＢｕ）、ベンゾイル（Ｂｚ）及びフェノキシアセチル（ｐａｃ）が挙げられる。他の保護基としては、アセトアミドメチル、アセチル、ｔｅｒｔ−アミルオキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、２−（４−ビフェニリル）−２−プロピルオキシカルボニル（（２−（４−ｂｉｐｈεｎｙｌｙｌ）−２−ｐｒｏｐｙ！ｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチル７ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、ｌ−カルボベンゾキサミド（ｃａｒｂｏｂｅｎｚｏｘａｍｉｄｏ）−２，２．２−トリフルオロエチル、２，６−ジクロロベンジル、２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−プロピルオキシカルボニル、２，４−ジニトロフェニル、ジチアスクシニル、ホルミル、４−メトキシベンゼンスルホニル、４−メトキシベンジル、４−メチルベンジル、ｏ−ニトロフェニルスルフェニル、２−フェニル−２−プロピルオキシカルボニル、α−２，４，５−テトラメチルベンジルオキシカルボニル、ｐ−トルエンスルホニル、キサンテニル、ベンジルエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、ｐ−ニトロベンジルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、フェニルエステル、ｐ−ニトロカーボネート、ｐ−ニトロベンジルカーボネート、トリメチルシリル及びペンタクロロフェニルエステルが挙げられる。
【０２７６】
用語「活性化エステル」は、本明細書で使用されるとき、アルキルが良好な脱離基であり、アミノ基を担持する分子による求核攻撃に対する感受性をカルボニルに付与するカルボン酸のアルキルエステルを指す。従って活性化エステルはアミノリシスを起こし易く、アミンと反応してアミドを形成する。活性化エステルはカルボン酸エステル基−ＣＯ２Ｒ［式中、Ｒは脱離基である］を含有する。
【０２７７】
用語「アルキル」は、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、及びシクロアルキル置換アルキル基を含めた飽和脂肪族基のラジカルを指す。
【０２７８】
一部の実施形態において、直鎖又は分枝鎖アルキルはその骨格に炭素原子を３０個以下（例えば、直鎖についてＣ１〜Ｃ３０、分枝鎖についてＣ３〜Ｃ３０）、２０個以下、１２個以下、又は７個以下有する。同様に、一部の実施形態においてシクロアルキル類はその環構造に３〜１０個の炭素原子を有し、例えば環構造に５、６又は７個の炭素を有する。本明細書、実施例、及び特許請求の範囲全体を通じて用いられるとおりの用語「アルキル」（又は「低級アルキル」）は、「非置換アルキル類」及び「置換アルキル類」の両方を含むことが意図され、このうちの後者は、炭化水素骨格の１つ以上の炭素上の水素を置換する１つ以上の置換基を有するアルキル部分を指す。かかる置換基としては、限定はされないが、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミル、又はアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオ酢酸塩、又はチオギ酸塩など）、アルコキシル、ホスホリル、リン酸塩、ホスホン酸塩、ホスフィン酸塩（ａ  ｈｏｓｐｈｉｎａｔｅ）、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、硫酸塩、スルホン酸塩、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、又は芳香族若しくはヘテロ芳香族部分が挙げられる。
【０２７９】
炭素の数が特に指定されない限り、「低級アルキル」は、本明細書で使用されるとき、上記に定義するとおりの、但しその骨格構造に１〜１０個の炭素、又は１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。同様に、「低級アルケニル」及び「低級アルキニル」も同様の鎖長を有する。一部の実施形態において、アルキル基は低級アルキル類である。一部の実施形態において、本明細書においてアルキルとして指定される置換基は低級アルキルである。
【０２８０】
当業者は、炭化水素鎖上の置換された部分が、適切な場合にはそれ自体置換されていてもよいことを理解するであろう。例えば、置換アルキルの置換基としては、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、チオール類、アミノ、アジド、イミノ、アミド、ホスホリル（ホスホン酸塩及びホスフィン酸塩を含む）、スルホニル（硫酸塩、スルホンアミド、スルファモイル及びスルホン酸塩を含む）、及びシリル基、並びにエーテル類、アルキルチオ類、カルボニル類（ケトン類、アルデヒド類、カルボン酸塩類、及びエステル類を含む）、−ＣＦ３、−ＣＮなどを挙げることができる。シクロアルキル類も同様に置換されていてもよい。
【０２８１】
用語「ヘテロアルキル」は、本明細書で使用されるとき、少なくとも１個のヘテロ原子を含有する、直鎖又は分枝鎖、又は環状炭素を含有するラジカル、又はこれらの組み合わせを指す。好適なヘテロ原子としては、限定はされないが、Ｏ、Ｎ、Ｓｉ、Ｐ、Ｓｅ、Ｂ、及びＳが挙げられ、ここで亜リン酸及び硫黄原子は任意選択で酸化されており、及び窒素ヘテロ原子は任意選択で四級化されている。ヘテロアルキル類は、アルキル基に関して上記に定義したとおり置換されていてもよい。
【０２８２】
用語「アルキルチオ」は、硫黄ラジカルが付加された上記に定義するとおりのアルキル基を指す。一部の実施形態において、「アルキルチオ」部分は、−Ｓ−アルキル、−Ｓ−アルケニル、及び−Ｓ−アルキニルのうちの１つによって表される。代表的なアルキルチオ基としては、メチルチオ、及びエチルチオを挙げることができる。用語「アルキルチオ」はまた、シクロアルキル基、アルケン及びシクロアルケン基、及びアルキン基も包含する。「アリールチオ」は、アリール又はヘテロアリール基を指す。アルキルチオ基は、アルキル基に関して上記に定義したとおり置換されていてもよい。
【０２８３】
用語「アルケニル」及び「アルキニル」は、長さ及び可能な置換が上記に記載したアルキル類と同様の、但し少なくとも１つのそれぞれ二重結合又は三重結合を含有する不飽和脂肪族基を指す。
【０２８４】
用語「アルコキシル」又は「アルコキシ」は、本明細書で使用されるとき、酸素ラジカルが付加されている上記に定義するとおりのアルキル基を指す。代表的なアルコキシル基としては、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、及びｔｅｒｔ−ブトキシが挙げられる。「エーテル」は、２つの炭化水素が酸素によって共有結合的に連結したものである。従って、当該のアルキルにエーテルを付与するアルキルの置換基は、−Ｏ−アルキル、−Ｏ−アルケニル、及び−Ｏ−アルキニルのうちの１つによって表され得るなど、アルコキシルであるか、又はそれに似ている。アロキシ（ａｒｏｘｙ）は−Ｏ−アリール又はＯ−ヘテロアリールによって表すことができ、ここでアリール及びヘテロアリールは以下に定義するとおりである。アルコキシ及びアロキシ（ａｒｏｘｙ）基は、アルキルに関して上記に記載したとおり置換されていてもよい。
【０２８５】
用語「アミン」及び「アミノ」は当該技術分野で認識されており、非置換型及び置換型の両方のアミン、例えば、一般式：
【０２８６】
【化１２】
2018535212.tif 000040
【０２８７】
［式中、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ’１０は、各々独立して、水素、アルキル、アルケニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８を表し、又はＲ９及びＲ１０は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、環状構造に４〜８個の原子を有する複素環を完成させ；Ｒ８は、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、複素環又は多環を表し；及びｍは０又は１〜８の範囲の整数である］によって表すことのできる部分を指す。一部の実施形態において、Ｒ９又はＲ１０のうちの一方のみがカルボニルであってもよく、例えば、Ｒ９、Ｒ１０及び窒素は一緒になってイミドを形成しない。なおも他の実施形態において、用語「アミン」にはアミド類は包含されず、例えばＲ９及びＲ１０のうちの一方がカルボニルを表す。更なる実施形態において、Ｒ９及びＲ１０（及び任意選択でＲ’１０）は、各々独立して、水素、アルキル又はシクロアルキル（ｃｙｃｌｏａｌｋｌｙ）、アルケニル又はシクロアルケニル、又はアルキニルを表す。従って、用語「アルキルアミン」は、本明細書で使用されるとき、上記に定義するとおりの、（アルキルに関して上記に記載したとおり）置換されている又は置換されていないアルキルが付加されているアミン基を意味し、即ち、Ｒ９及びＲ１０のうちの少なくとも一方がアルキル基である。
【０２８８】
用語「アミド」は当該技術分野でアミノ置換カルボニルと認識されており、一般式：
【０２８９】
【化１３】
2018535212.tif 000041
【０２９０】
［式中、Ｒ９及びＲ１０は上記に定義するとおりである］によって表すことのできる部分を含む。
「アリール」は、本明細書で使用されるとき、Ｃ５〜Ｃ１０員の芳香族、複素環式、縮合芳香族、縮合複素環式、二芳香族、又は二複素環式環系を指す。広義の「アリール」には、本明細書で使用されるとき、０〜４個のヘテロ原子、例えば、ベンゼン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、トリアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン及びピリミジンなどを含み得る５、６、７、８、９、及び１０員単環芳香族基が含まれる。環状構造にヘテロ原子を有するこれらのアリール基はまた、「アリール複素環」又は「ヘテロ芳香族」とも称され得る。芳香環は１つ以上の環位置で、限定はされないが、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ（又は四級化アミノ）、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホン酸塩、ホスフィン酸塩、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族又はヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、−ＣＮ；及びこれらの組み合わせを含めた１つ以上の置換基によって置換されていてもよい。
【０２９１】
用語「アリール」にまた、２つ以上の炭素が２つの隣接する環に共通する２つ以上の環式環（即ち「縮合環」）を有する多環式環系も含まれ、ここでこれらの環のうちの少なくとも１つが例えば芳香族であり、他の１つ又は複数の環式環が、シクロアルキル類、シクロアルケニル類、シクロアルキニル類、アリール類及び／又は複素環であってもよい。複素環の例としては、限定はされないが、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンズオキサゾリル、ベンゾオキサゾリニル、ベンズチアゾリル、ベンズトリアゾリル、ベンズテトラゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンズイミダゾリニル、カルバゾリル、４ａＨカルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、２Ｈ，６Ｈ−１，５，２−ジチアジニル、ジヒドロフロ［２，３  ｂ］テトラヒドロフラン、フラニル、フラザニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、３Ｈ−インドリル、イサチノイル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドリニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、メチレンジオキシフェニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリル、オキシインドリル、ピリミジニル、フェナントリジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、４−ピペリドニル、ピペロニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドオキサゾール、ピリドイミダゾール、ピリドチアゾール、ピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、４Ｈ−キノリジニル、キノキサリニル、キヌクリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、６Ｈ−１，２，５−チアジアジニル、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、チアントレニル、チアゾリル、チエニル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チオフェニル及びキサンテニルが挙げられる。これらの環の１つ以上は、「アリール」に関して上記に定義したとおり置換されていてもよい。
【０２９２】
用語「アラルキル」は、本明細書で使用されるとき、アリール基（例えば、芳香族基又はヘテロ芳香族基）で置換されているアルキル基を指す。
用語「炭素環」は、本明細書で使用されるとき、環の各原子が炭素である芳香環又は非芳香環を指す。
【０２９３】
「複素環」又は「複素環式」は、本明細書で使用されるとき、３〜１０個の環原子、例えば５〜６個の環原子を含有し、炭素と、各々が非過酸化物酸素、硫黄、及びＮ（Ｙ）［式中、Ｙは存在しないか又はＨ、Ｏ、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、フェニル又はベンジルである］から選択される１〜４個のヘテロ原子とからなり、及び任意選択で１〜３個の二重結合を含有し、及び任意選択で１つ以上の置換基によって置換されている単環式又は二環式環の環状炭素又は窒素を介して結合した環状ラジカルを指す。複素環の例としては、限定はされないが、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンズオキサゾリル、ベンゾオキサゾリニル、ベンズチアゾリル、ベンズトリアゾリル、ベンズテトラゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンズイミダゾリニル、カルバゾリル、４ａＨ−カルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、２Ｈ，６Ｈ−１，５，２−ジチアジニル、ジヒドロフロ［２，３−ｂ］テトラヒドロフラン、フラニル、フラザニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、３Ｈ−インドリル、イサチノイル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドリニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、メチレンジオキシフェニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリル、オキセパニル（ｏｘｅｐａｎｙｌ）、オキセタニル、オキシインドリル、ピリミジニル、フェナントリジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、４−ピペリドニル、ピペロニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドオキサゾール、ピリドイミダゾール、ピリドチアゾール、ピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、４Ｈ−キノリジニル、キノキサリニル、キヌクリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、６Ｈ−１，２，５−チアジアジニル、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、チアントレニル、チアゾリル、チエニル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チオフェニル及びキサンテニルが挙げられる。複素環式基は、任意選択で、１つ以上の位置においてアルキル及びアリールに関して上記に定義したとおりの１つ以上の置換基、例えば、ハロゲン、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、リン酸塩、ホスホン酸塩、ホスフィン酸塩、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族又はヘテロ芳香族部分、−ＣＦ３、及び−ＣＮによって置換されていてもよい。
【０２９４】
用語「カルボニル」は当該技術分野で認識されており、一般式：
【０２９５】
【化１４】
2018535212.tif 000042
【０２９６】
［式中、Ｘは結合であるか又は酸素若しくは硫黄を表し、及びＲ１１は、水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、又はアルキニルを表し、Ｒ’１１は、水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、又はアルキニルを表す］によって表すことができるような部分を含む。式中、Ｘが酸素であり、及びＲ１１又はＲ’１１が水素でない場合、この式は「エステル」を表す。式中、Ｘが酸素であり、及びＲ１１か上記に定義するとおりである場合、この部分は本明細書ではカルボキシル基と称され、特にＲ１１が水素である場合、この式は「カルボン酸」を表す。式中、Ｘが酸素であり、及びＲ’１１が水素である場合、この式は「ギ酸塩」を表す。一般に、上記の式の酸素原子が硫黄に置き換えられる場合、この式は「チオカルボニル」基を表す。式中、Ｘが硫黄であり、及びＲ１１又はＲ’１１が水素でない場合、この式は「チオエステル」を表す。式中、Ｘが硫黄であり、及びＲ１１が水素である場合、この式は「チオカルボン酸」表す。式中、Ｘが硫黄であり、及びＲ’１１が水素である場合、この式は「チオギ酸塩」を表す。他方で、式中、Ｘが結合であり、及びＲ１１が水素でない場合、上記の式は「ケトン」基を表す。式中、Ｘが結合であり、及びＲ１１が水素である場合、上記の式は「アルデヒド」基を表す。
【０２９７】
用語「モノエステル」は、本明細書で使用されるとき、ジカルボン酸の類似体を指し、ここでカルボン酸の一方はエステルとして官能化され、且つ他方のカルボン酸は遊離カルボン酸又はカルボン酸の塩である。モノエステルの例としては、限定はされないが、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、スベリン酸、セバシン酸、アゼライン酸、シュウ酸及びマレイン酸のモノエステルが挙げられる。
【０２９８】
用語「ヘテロ原子」は、本明細書で使用されるとき、炭素又は水素以外の任意の元素の原子を意味する。ヘテロ原子の例は、ホウ素、窒素、酸素、リン、硫黄及びセレンである。他の有用なヘテロ原子としては、ケイ素及びヒ素が挙げられる。
【０２９９】
本明細書で使用されるとき、用語「ニトロ」は−ＮＯ２を意味する；用語「ハロゲン」は−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ又は−Ｉを指示する；用語「スルフヒドリル」は−ＳＨを意味する；用語「ヒドロキシル」は−ＯＨを意味する；及び用語「スルホニル」は−ＳＯ２−を意味する。
【０３００】
用語「置換されている」は、本明細書で使用されるとき、本明細書に記載される化合物の許容されるあらゆる置換基を指す。最も広義には、許容される置換基としては、有機化合物の非環式及び環式、分枝状及び非分枝状、炭素環式及び複素環式、芳香族及び非芳香族の置換基が挙げられる。例示的な置換基としては、限定はされないが、ハロゲン、ヒドロキシル基、又は任意の数の炭素原子、例えば１〜１４個の炭素原子を含む任意の他の有機基が挙げられ、及び任意選択で、線状、分枝状、又は環状構造フォーマットの酸素、硫黄、又は窒素基などの１つ以上のヘテロ原子が挙げられる。代表的な置換基としては、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、フェニル、置換フェニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、置換アルコキシ、フェノキシ、置換フェノキシ、アロキシ（ａｒｏｘｙ）、置換アロキシ（ａｒｏｘｙ）、アルキルチオ、置換アルキルチオ、フェニルチオ、置換フェニルチオ、アリールチオ、置換アリールチオ、シアノ、イソシアノ、置換イソシアノ、カルボニル、置換カルボニル、カルボキシル、置換カルボキシル、アミノ、置換アミノ、アミド、置換アミド、スルホニル、置換スルホニル、スルホン酸、ホスホリル、置換ホスホリル、ホスホニル、置換ホスホニル、ポリアリール、置換ポリアリール、Ｃ３〜Ｃ２０環式、置換Ｃ３〜Ｃ２０環式、複素環式、置換複素環式、アミノ酸、ペプチド、及びポリペプチド基が挙げられる。
【０３０１】
窒素などのヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載される有機化合物の水素置換基及び／又は任意の許容される置換基を有し得る。「置換」又は「置換されている」は、かかる置換が置換原子及び置換基の許容される原子価に従うものであり、及びその置換によって安定化合物、即ち、例えば転位、環化、又は脱離による転換が自然に起こることのない化合物がもたらされるという黙示的な条件を含むことが理解される。
【０３０２】
広義の態様において、許容される置換基としては、有機化合物の非環式及び環式、分枝状及び非分枝状、炭素環式及び複素環式、芳香族及び非芳香族の置換基が挙げられる。例示的な置換基としては、例えば本明細書に記載されるものが挙げられる。適切な有機化合物について許容される置換基は１つ以上であってもよく、及び同じであっても又は異なってもよい。窒素などのヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満たす本明細書に記載される有機化合物の水素置換基及び／又は任意の許容される置換基を有し得る。
【０３０３】
様々な実施形態において、置換基は、アルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバメート、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロゲン、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシル、ケトン、ニトロ、リン酸塩、硫化物、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、及びチオケトンから選択され、これらの各々は任意選択で１つ以上の好適な置換基によって置換されている。一部の実施形態において、置換基は、アルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバメート、カルボキシ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ケトン、リン酸塩、硫化物、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、及びチオケトンから選択され、ここでアルコキシ、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アミド、アミノ、アリール、アリールアルキル、カルバメート、カルボキシ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ホルミル、ハロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ケトン、リン酸塩、硫化物、スルフィニル、スルホニル、スルホン酸、スルホンアミド、及びチオケトンの各々は、更に１つ以上の好適な置換基によって置換されていてもよい。
【０３０４】
置換基の例としては、限定はされないが、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホン酸塩、ホスフィン酸塩、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、チオケトン、エステル、ヘテロシクリル、−ＣＮ、アリール、アリールオキシ、ペルハロアルコキシ、アラルコキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアラルコキシ、アジド、アルキルチオ、オキソ、アシルアルキル、カルボキシエステル類、カルボキサミド、アシルオキシ、アミノアルキル、アルキルアミノアリール、アルキルアリール、アルキルアミノアルキル、アルコキシアリール、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アルキルスルホニル、カルボキサミドアルキルアリール、カルボキサミドアリール、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アルキルアミノアルキルカルボキシ、アミノカルボキサミドアルキル、シアノ、アルコキシアルキル、ペルハロアルキル、アリールアルキルオキシアルキルなどが挙げられる。一部の実施形態において、置換基は、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、及びニトロから選択される。
【０３０５】
用語「共重合体」は、本明細書で使用されるとき、概して、２つ以上の異なるモノマーで構成される単一のポリマー材料を指す。共重合体は、任意の形態、例えば、ランダム、ブロック、又はグラフト共重合体であってもよい。共重合体は、キャッピングされた末端基又は酸性末端基を含め、任意の末端基を有し得る。
【０３０６】
用語「平均粒径」は、本明細書で使用されるとき、概して、組成物中の粒子の統計的平均粒径（直径）を指す。本質的に球形の粒子の直径は、物理的又は流体力学的直径と称され得る。非球形の粒子の直径は、流体力学的直径を指し得る。本明細書で使用されるとき、非球形の粒子の直径とは、粒子の表面上の２点間の最も大きい直線距離を指し得る。平均粒径は、動的光散乱法などの当該技術分野において公知の方法を用いて計測することができる。第１の粒子集団の統計的平均粒径が第２の粒子集団の統計的平均粒径の２０％以内；例えば、１５％以内、又は１０％以内であるとき、２つの集団は「実質的に等価な平均粒径」を有すると言うことができる。
【０３０７】
本明細書で同義的に使用されるとおりの用語「単分散」及び「均一粒径分布」は、粒子、マイクロ粒子、又はナノ粒子の集団が全て同じ又はほぼ同じ粒径を有することを表す。本明細書で使用されるとき、単分散分布とは、分布の９０％が平均粒径の５％以内にある粒子分布を指す。
【０３０８】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」は、概してアミノ酸残基のポリマーを指す。本明細書で使用されるとき、この用語はまた、１つ以上のアミノ酸が対応する天然に存在するアミノ酸の化学的類似体若しくは修飾された誘導体であるか又は非天然アミノ酸であるアミノ酸ポリマーにも適用される。本明細書において一般的に使用されるとおりの用語「タンパク質」は、三次及び／又は四次構造を作り出すのに十分な鎖長のポリペプチドを形成するように互いにペプチド結合によって連結されたアミノ酸のポリマーを指す。用語「タンパク質」は、定義上、小さいペプチドを除外し、小さいペプチドはタンパク質と見なすのに必要な必須の高次構造を欠いている。
【０３０９】
用語「核酸」、「ポリヌクレオチド」、及び「オリゴヌクレオチド」は、線状又は環状コンホメーションの、及び一本鎖又は二本鎖のいずれかの形態のデオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチドポリマーを指して同義的に使用される。これらの用語は、ポリマーの長さに関する限定と解釈されてはならない。これらの用語は、天然ヌクレオチドの公知の類似体、並びに塩基、糖及び／又はリン酸部分（例えばホスホロチオエート骨格）が修飾されたヌクレオチドを包含し得る。一般に、特記されない限り、特定のヌクレオチドの類似体は同じ塩基対合特異性を有する；即ち、Ａの類似体はＴと塩基対合し得る。用語「核酸」は、一続きの少なくとも２つの塩基−糖リン酸モノマー単位を指す専門用語である。ヌクレオチドは核酸ポリマーのモノマー単位である。この用語には、メッセンジャーＲＮＡ、アンチセンス、プラスミドＤＮＡ、プラスミドＤＮＡの一部又はウイルスに由来する遺伝物質の形態のデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）及びリボ核酸（ＲＮＡ）が含まれる。アンチセンス核酸は、ＤＮＡ及び／又はＲＮＡ配列の発現を妨げるポリヌクレオチドである。用語の核酸は、一続きの少なくとも２つの塩基−糖リン酸の組み合わせを指す。天然核酸はリン酸骨格を有する。人工核酸は他のタイプの骨格を含有し得るが、天然核酸と同じ塩基を含有し得る。この用語にはまた、ＰＮＡ（ペプチド核酸）、ホスホロチオエート、及び天然核酸のリン酸骨格の他の変形例も含まれる。
【０３１０】
タンパク質、ポリペプチド又は核酸の「機能的断片」は、配列が完全長タンパク質、ポリペプチド又は核酸と同一でないが、なおも完全長タンパク質、ポリペプチド又は核酸のとおりの少なくとも１つの機能を保持しているタンパク質、ポリペプチド又は核酸である。機能的断片は、対応する天然分子より多い、少ない、又は同じ数の残基を有することができ、及び／又は１つ以上のアミノ酸又はヌクレオチド置換を含有することができる。核酸の機能（例えば、コード機能、別の核酸とのハイブリダイズ能力）を決定する方法は当該技術分野において周知である。同様に、タンパク質機能を決定する方法も周知である。例えば、ポリペプチドのＤＮＡ結合機能は、例えば、フィルタ結合法、電気泳動移動度シフト、又は免疫沈降アッセイによって決定することができる。ＤＮＡ切断はゲル電気泳動によってアッセイすることができる。タンパク質が別のタンパク質と相互作用する能力は、例えば、免疫共沈降、２ハイブリッドアッセイ又は例えば遺伝的若しくは生化学的相補性によって決定することができる。例えば、フィールズ（Ｆｉｅｌｄｓ）ら著、１９８９年、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、第３４０巻、ｐ．２４５〜２４６；米国特許第５，５８５，２４５号明細書及び国際公開第９８／４４３５０号パンフレットを参照のこと。
【０３１１】
本明細書で使用されるとき、用語「リンカー」は、ヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、硫黄等）を含有し且つ１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５，１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０原子長であり得る炭素鎖を指す。リンカーは、限定はされないが、水素原子、アルキル、アルケニル、アルキニル（ａｌｋｙｎｌ）、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、ハロゲン、アリール、複素環式、芳香族複素環式、シアノ、アミド、カルバモイル、カルボン酸、エステル、チオエーテル、アルキルチオエーテル、チオール、及びウレイド基を含め、様々な置換基によって置換されていてもよい。当業者は、これらの基の各々も同様に置換されていてもよいことを認識するであろう。リンカーの例としては、限定はされないが、ｐＨ感受性リンカー、プロテアーゼ切断可能ペプチドリンカー、ヌクレアーゼ感受性核酸リンカー、リパーゼ感受性脂質リンカー、グリコシダーゼ感受性炭水化物リンカー、低酸素感受性リンカー、光切断可能リンカー、熱不安定性リンカー、酵素切断可能リンカー（例えば、エステラーゼ切断可能リンカー）、超音波感受性リンカー、及びＸ線切断可能リンカーが挙げられる。
【０３１２】
用語「薬学的に許容可能な対イオン」は薬学的に許容可能なアニオン又はカチオンを指す。様々な実施形態において、薬学的に許容可能な対イオンは薬学的に許容可能なイオンである。例えば、薬学的に許容可能な対イオンは、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グロクロン酸塩（ｇｌｕｃａｒｏｎａｔｅ）、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩及びパモ酸塩（即ち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート））から選択される。一部の実施形態において、薬学的に許容可能な対イオンは、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、及び乳酸塩から選択される。詳細な実施形態において、薬学的に許容可能な対イオンは、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、及びリン酸塩から選択される。
【０３１３】
用語「薬学的に許容可能な塩」は、本組成物に使用される化合物中に存在し得る酸性基又は塩基性基の塩を指す。塩基性の性質の本組成物に含まれる化合物は、様々な無機酸及び有機酸と種々の塩を形成することが可能である。かかる塩基性化合物の薬学的に許容可能な酸付加塩の調製に使用し得る酸は、非毒性の酸付加塩を形成するもの、即ち、薬理学的に許容可能なアニオンを含有する塩であり、限定はされないが、硫酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グロクロン酸塩（ｇｌｕｃａｒｏｎａｔｅ）、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩及びパモ酸塩（即ち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート））である。アミノ部分を含む本組成物に含まれる化合物は、上述の酸に加え、様々なアミノ酸と薬学的に許容可能な塩を形成し得る。酸性の性質の本組成物に含まれる化合物は、様々な薬理学的に許容可能なカチオンと塩基性塩を形成する能力を有する。かかる塩の例としては、アルカリ金属塩又はアルカリ土類金属塩、特に、カルシウム塩、マグネシウム塩、ナトリウム塩、リチウム塩、亜鉛塩、カリウム塩、及び鉄塩が挙げられる。
【０３１４】
本明細書に記載される化合物が酸付加塩として得られる場合、その酸性塩の溶液を塩基性化することにより遊離塩基を得ることができる。逆に、生成物が遊離塩基である場合、塩基化合物から酸付加塩を調製する従来手順に従い遊離塩基を好適な有機溶媒中に溶解し、その溶液を酸で処理することにより、付加塩、特に薬学的に許容可能な付加塩を作製することができる。当業者は、非毒性の薬学的に許容可能な付加塩の調製に用い得る様々な合成方法を認識しているであろう。
【０３１５】
薬学的に許容可能な塩は、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、２，２−ジクロロ酢酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、２−オキソグルタル酸、４−アセトアミド安息香酸、４−アミノサリチル酸、酢酸、アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウ酸、カンファー−１０−スルホン酸、カプリン酸（デカン酸）、カプロン酸（ヘキサン酸）、カプリル酸（オクタン酸）、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、プロピオン酸（ｐｒｏｐｒｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、ピログルタミン酸、サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、及びウンデシレン酸から選択される酸から誘導され得る。
【０３１６】
用語「生物学的に利用可能」は当該技術分野で認識されており、それ、又は投与量の一部が、それを投与する対象又は患者によって吸収され、取り込まれ、又は他の形で生理学的に利用可能であることを可能にする本発明の一形態を指す。
【０３１７】
以下の実施例は本発明を限定するのでなく、例示するよう意図されることが理解されるであろう。前述の説明及び例の様々な他の実施例及び変形例が、当業者には本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく本開示を読んだ後に明らかであろうとともに、かかる実施例又は変形例は全て添付の特許請求の範囲に含まれることが意図される。本明細書に引用する全ての刊行物及び特許は、本明細書によって全体として参照により援用される。
【０３１８】
（実施例）
実施例１：コンジュゲートの合成、ＨＰＬＣ分析及び膜透過
２０１５年６月３０日に出願されたＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＵＳ１５／３８５６９号明細書（この内容は参照により本明細書に援用される）の実施例Ａ、１〜７、及び１４に開示される方法によって本明細書に記載される化合物の合成及びＨＰＬＣ分析を行った。
【０３１９】
例として、コンジュゲート５７を以下の経路（これについては、２０１５年６月３０日に出願されたＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＵＳ１５／３８５６９号明細書の実施例１４に開示されている）によって合成した：
【０３２０】
【化１５】
2018535212.tif 000043
【０３２１】
コンジュゲート５７の膜透過性（ｍｅｍｂｒａｎｃｅ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ）をＣａｃｏ−２単層膜で計測した。見かけの透過性（Ｐａｐｐ）は、頂側膜側から側底膜側への向き及び側底膜側から頂側膜側への向きの両方で極めて低いことが明らかになった。
【０３２２】
【表５】
2018535212.tif 000044
【０３２３】
実施例２：薬物コンジュゲートのナノ粒子製剤
本発明のコンジュゲートを含むナノ粒子の作製方法は、２０１５年６月３０日に出願されたＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＵＳ１５／３８５６９号明細書（この内容は参照により本明細書に援用される）の実施例１１、１２及び１５に記載されている。ＮＰ４、ＮＰ８、ＮＰ１１及びＮＰ１６など、コンジュゲート５７の様々なナノ粒子製剤を調製した。
【０３２４】
【表６】
2018535212.tif 000045
【０３２５】
加えて、コンジュゲート５７を含むＮＰ１７、ＮＰ１８、ＮＰ１９、ＮＰ２０及びＮＰ２１を調製した。
【０３２６】
【表７】
2018535212.tif 000046
【０３２７】
実施例３：ソマトスタチン受容体に対するコンジュゲートのＫｉ
ソマトスタチン受容体２（ＳＳＴＲ２）への結合を判定するインビトロアッセイにおいて２つのコンジュゲートを評価した。ユーロフィン・パンラブス（Ｅｕｒｏｆｉｎｓ  Ｐａｎｌａｂｓ）（台湾）において放射性リガンド−受容体結合アッセイを実施し、本明細書に記載されるコンジュゲートのＳＳＴＲ２への親和性を決定した。このアッセイは、ＳＳＴＲ２を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞由来の膜標本を用いて、放射性標識リガンドである［１２５Ｉ］標識ソマトスタチンのヒトＳＳＴＲ２への結合を計測する。１０ｕＭの用量から開始して６倍段階希釈を用いたコンジュゲート／化合物の存在下で膜を放射性標識ソマトスタチン（０．０３ｎＭ）とインキュベートして１０ｐｔ曲線を得た。４時間インキュベートした後、膜をろ過して３回洗浄し、カウントして、受容体に結合した残留［１２５Ｉ］ソマトスタチンを決定した。ＩＣ５０値はマスＩＱＴＭ（ＭａｔｈＩＱＴＭ）（ＩＤビジネスソリューションズ・リミテッド（ＩＤ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  Ｌｔｄ．）、英国）を用いて非線形最小二乗回帰分析によって決定した。Ｋｉ値は、チェン・プルソフ式（チェン（Ｃｈｅｎｇ）及びプルソフ式（Ｐｒｕｓｏｆｆ）著、バイオケミカル・ファーマコロジー（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）、第２２巻、ｐ．３０９９〜３１０８、１９７３年）を用いて、被験コンジュゲート／化合物の観察されたＩＣ５０、アッセイに用いた放射性リガンドの濃度、及びユーロフィン（Ｅｕｒｏｆｉｎｓ）で得られたリガンドのＫＤの履歴値を使用して計算した。
【０３２８】
【表８】
2018535212.tif 000047
【０３２９】
これらのデータは、受容体に対するペプチドの高親和性が、ペプチドにリンカー及び薬物を加えた後にも保持されることを実証している。
別の試験では、５つのＳＳＴＲに対するコンジュゲート５７の結合を同じ方法で計測した。コンジュゲート５７は選択的に且つ高親和性でＳＳＴＲ２に結合する。
【０３３０】
【表９】
2018535212.tif 000048
【０３３１】
コンジュゲート５７のオフターゲット結合を更に調べるため、ＧＰＣＲのパネル（１１９個の標的）に対するコンジュゲート５７の結合を１ｕＭ濃度で計測した。コンジュゲート５７はＧＰＣＲのパネルに対して活性を有しない。イオンワークス・クァットロ（ＩｏｎＷｏｒｋｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ）アッセイで最大１０ｕＭのコンジュゲート５７によるｈＥＲＧの阻害を計測した。コンジュゲート５７はｈＥＲＧの阻害を示さなかった。
【０３３２】
実施例４：ソマトスタチン受容体に対するコンジュゲートのインターナリゼーション
ＳＳＴＲ２を判定するインビトロアッセイにおいて２つのコンジュゲートを評価した。以下に概説するステップは、パスハンターエクスプレス（ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ  ｅＸｐｒｅｓｓ）活性化ＧＰＣＲインターナリゼーション細胞及びパスハンター（ＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ）検出試薬を概して製造者の推奨に従い使用したアゴニストアッセイの実施に関するアッセイ容積及び手順を提供する。グラフパッドプリズム（登録商標）（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（登録商標））を使用してアゴニストの用量反応をプロットした。
【０３３３】
【表１０】
2018535212.tif 000049
【０３３４】
これらのデータは、これらのコンジュゲートがＳＳＴＲ２発現細胞の細胞質へのコンジュゲートの選択的送達機構として受容体のインターナリゼーションを強力に誘導することを実証している。
【０３３５】
実施例５：オクトレオチド競合によるＨ５２４細胞の増殖及び細胞周期停止
細胞増殖の阻害を判定するインビトロアッセイで本発明のコンジュゲートを評価した。ＮＣＩ−Ｈ５２４（ＡＴＣＣ）ヒト小細胞肺癌細胞を９６ウェルＶ字底プレート（コスター（Ｃｏｓｔａｒ））に５，０００細胞／ウェルの濃度でプレーティングした。２４時間後、細胞をコンジュゲートで２時間処理し、更に７０時間インキュベートするか、又はオクトレオチド競合実験（ｅｘｐｅｒｉｅｍｅｎｔ）について、１００μＭのオクトレオチドで３０分間処理し、次にコンジュゲートで２時間処理し、更に７０時間インキュベートするかのいずれかとした。コンジュゲートの出発用量は２０μＭであり、合計１０ポイントで３倍段階希釈を行った。処理の２時間後、細胞をスピンダウンし、薬物が入った培地を除去して新鮮完全培地を加え、それを使用して細胞を再懸濁し、それを再びスピンした。洗浄媒体の除去後、細胞を完全培地に再懸濁し、次に白色壁平底９６ウェルプレートに移した。更に細胞を更に７０時間インキュベートして細胞増殖の阻害を計測した。増殖は、標準プロトコルを用いるセルタイターグロー（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ）試薬（プロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ））及びグロマックスマルチ（Ｇｌｏｍａｘ  ｍｕｌｔｉ）＋検出システム（プロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ））を使用して計測した。パーセント増殖阻害は以下の式：％阻害＝（対照−処理）／対照×１００を用いて計算した。対照は媒体単独として定義される。ＩＣ５０曲線はグラフパッドプリズム６（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ６）で非線形回帰分析（４パラメータ）を用いて作成した。ＤＭ１を含むコンジュゲートのＩＣ５０値を以下の表７に示した。
【０３３６】
コンジュゲート５７単独及びオクトレオチド競合を伴い処理した細胞の増殖を図２Ａに示した。オクトレオチド競合（ｃｏｍｐｅｔｉｏｎ）有り又は無しでの強力な活性は、ＩＣ５０に１２．２倍の差があった。
【０３３７】
ホスホヒストンＨ３（ＰＨ３）の増加を調べる細胞周期停止に及ぼす効果を計測するＰＨ３アッセイの結果を図２Ｂに示した。ＰＨ３アッセイにおけるオクトレオチドとの競合は、コンジュゲート５７単独で処理した細胞からのシフト（２．６倍）を示す。
【０３３８】
ＳＳＴＲ２発現細胞株ではないＨ４６０で同様の試験を行う。オクトレオチド競合（＋）は、競合のないコンジュゲート５７単独（−）と比較して細胞増殖阻害のＩＣ５０の差を生じなかった。Ｈ５２４（受容体＋）及びＨ４６０（受容体−）の細胞増殖の結果を図２Ｃに示した。
【０３３９】
これらのデータは、コンジュゲートがソマトスタチンに結合して受容体をインターナライズする能力を保持することを実証している。一部の例では、これはまた、リンカーが切断されて細胞傷害性ペイロードが有効に活性化し、腫瘍細胞を死滅させることも示している。コンジュゲートは受容体依存性の強力な効果を示す。
【０３４０】
実施例６：Ｈ６９腫瘍ＤＭ−１レベル
本発明のコンジュゲートが腫瘍に貯留する能力を調べるため、マウス癌モデルを使用した。全てのマウスは米国実験動物福祉局（ＯＬＡＷ）「実験動物の人道的管理と使用に関する公衆衛生局規範（Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ  Ｐｏｌｉｃｙ  ｏｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ）」及び研究用動物資源協会（ＩＬＡＲ）「実験動物の管理と使用に関する指針（Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ）」に従い取り扱った。全てのインビボ研究は、ブレンド・セラピューティクス（Ｂｌｅｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）施設内動物管理使用委員会によって承認されたプロトコルに従い行った。動物の右側腹部に１：１ＲＰＭＩ  １６４０（インビトロゲン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、カリフォルニア州カールスバッド（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ））／マトリゲル（登録商標）（Ｍａｔｒｉｇｅｌ（登録商標））（ＢＤバイオサイエンシーズ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、カリフォルニア州サンノゼ（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ））中の２．５×１０＾６のＮＣＩ−Ｈ６９  ＳＣＬＣ（小細胞肺癌）細胞を皮下注射によって接種した。腫瘍を約５００ｍｍ３の近似容積に至らせた。次に動物を１時点につき３匹の動物の治療群に無作為化し、１ｍｇ／ｋｇ（遊離コンジュゲートについては注射用水中１０％プロピレングリコール、又はナノ粒子については１０％スクロース）、又はＤＭ−１については０．４ｍｇ／ｋｇ（注射用水中１０％プロピレングリコール）で投与した。２４時間の時点を全コンジュゲートにわたるベンチマークとして使用した。
【０３４１】
液体クロマトグラフィー質量分析法（ＬＣ／ＭＳ−ＭＳ）によって腫瘍ＤＭ−１レベルを決定した。１部の腫瘍ｖ／ｗに対して４容積の５ｍＭ  ６−マレイミドヘキサン酸を加え、ハンドヘルドホモジナイザーで約１０〜１５秒間ホモジナイズした。１０μＬの５００ｍＭトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンを１００ｕＬの腫瘍ホモジネートに加え、十分に混合し、室温で約５〜１５分間インキュベートした。２００〜３００ｕＬのアセトニトリルを使用して腫瘍ホモジネート中のタンパク質を沈殿させ、試料を５分間遠心し、ＤＭ−１分析のため上清をＬＣ／ＭＳ−ＭＳシステムに注入した。Ｈ６９腫瘍ＤＭ−１レベルを表７に示した。
【０３４２】
【表１１−１】
2018535212.tif 000050
【０３４３】
【表１１−２】
2018535212.tif 000051
【０３４４】
実施例７：コンジュゲート５７が腫瘍細胞増殖に及ぼすインビトロ効果
腫瘍細胞の細胞増殖の阻害を判定するインビトロアッセイにおいてコンジュゲート５７を評価した。既報告のＳＳＴＲ２  ｍＲＮＡレベルに基づき様々な腫瘍細胞株を選択した。細胞表面ＳＳＴＲ２受容体発現の特徴付けはウエスタン染色アッセイによって実施した。ウエスタン染色のレベルは、「極めて強い」から「弱い」又は「染色なし」に至るまでの範囲とした。
【０３４５】
【表１２】
2018535212.tif 000052
【０３４６】
増殖アッセイにおけるコンジュゲート５７の活性及びＩＣ５０の程度は、ウエスタン染色（Ｗｅｓｔｅｒ  ｓｔａｉｎｉｎｇ）によって観察されたＳＳＴＲ２細胞表面発現と相関する。
【０３４７】
実施例８：様々な腫瘍モデルにおけるコンジュゲート５７のインビボ試験（ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｓｔｒｕｄｉｅｓ）
ＮＣＩ−Ｈ６９  ＳＣＬＣ異種移植モデルによるインビボ試験においてコンジュゲート５７を評価した。ＮＣＩ−Ｈ６９  ＳＣＬＣ腫瘍を担持するマウスに単回２ｍｇ／ｋｇ用量のコンジュゲート５７を投与した。細胞周期停止マーカーであるホスホヒストンＨ３（ＰＨ３）のレベルを腫瘍の周辺部、中間部及び中心部で計測した。リン酸化ヒストンＨ３は有糸分裂及び減数分裂の両方の間の染色体凝縮に関係している。ＤＭ１は、ＰＨ３を増加させて有糸分裂のＧ２Ｍ期における細胞停止を生じさせることが示されている。ＰＨ３レベルの上昇は、図３Ａに示されるとおり、７２時間まであらゆる腫瘍深さに見られる。ＰＨ３レベルの時間依存的増加が図３Ｂに示される。２４時間における腫瘍のＰＨ３応答を図３Ｃに示した。腫瘍の中央部からの組織切片を図４に示した。コンジュゲート５７からの生物学的効果は血管から離れた腫瘍の深部に見られた。２ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート５７の単回投与後のアポトーシスマーカーである切断型カスパーゼ３（ＣＣ３）レベルを図５に示した。投与後約３日で細胞死ピーク。これらのエビデンスから、コンジュゲート５７の単回投与後の腫瘍全体にわたる持続的反応が実証された。本発明のコンジュゲートは腫瘍に迅速に且つ深部まで浸透することができ、腫瘍生物学に持続的な効果を及ぼすことができる。
【０３４８】
別の試験では、ＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍を担持する１０匹のマウスに２用量のコンジュゲート５７を各２ｍｇ／ｋｇで与えた。ＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍を担持する９匹のマウスに２用量のコンジュゲート５７を各１．３ｍｇ／ｋｇで与えた。腫瘍容積を計測し、平均腫瘍容積を図６に示した。２ｍｇ／ｋｇで投与した１０匹の動物全てが試験終了時に検出可能な腫瘍を有しなかった。コンジュゲート５７  １．３ｍｇ／ｋｇで投与した動物の半数以上（９匹中５匹）が試験終了時に検出可能な腫瘍を有しなかった。
【０３４９】
更に別の試験では、コンジュゲート５７治療はＮＣＩ−Ｈ５２４小細胞肺癌モデルにおいて完全な腫瘍退縮を示した。ＮＣＩ−Ｈ５２４はＳＳＴＲ２を過剰発現する。図７の平均腫瘍容積データは、最大耐用量（ＭＴＤ）（２ｍｇ／ｋｇ）並びにＭＴＤの２分の１の用量（１ｍｇ／ｋｇ）での有意な退縮を示している。図８の平均体重変化は、コンジュゲート５７が良好に忍容されることを実証した。体重減少は最小限であり、毒性学は良好であった。
【０３５０】
更に別の試験では、単回サイクル（ｓｉｎｇｌｅ  ｃｙｌｅ）のコンジュゲート５７治療をＮＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌モデルにおいて２サイクルの標準治療併用と比較した。ＮＣＩ−Ｈ６９担持ラットを２サイクルのオクトレオチド（ｃｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）＋ＤＭ１、１又は２サイクルのシスプラチン＋エトポシド、１サイクルのコンジュゲート５７で治療した。サイクル１は１日目に与え、サイクル２は８日目に与えた。ラットにＭＴＤ（２ｍｇ／ｋｇ）のコンジュゲート５７を投与した。オクトレオチド、ＤＭ１、シスプラチン、及びエトポシド用量はコンジュゲート５７と等価とした。図９の腫瘍容積グラフに示されるとおり、１サイクルのコンジュゲート５７が完全な退縮をもたらした。１又は２サイクルによるシスプラチン＋エトポシドの併用では退縮は生じなかった。オクトレオチド＋ＤＭ１対照は有効性を示さなかった。従って、コンジュゲート５７治療は標準治療併用よりも有効であることが分かった。
【０３５１】
更に別の試験では、低ＳＳＴＲ２発現ＳＣＬＣモデルであるＮＣＩ−Ｈ８２でコンジュゲート５７を評価した。ＮＣＩ−Ｈ８２担持ラットにおいてコンジュゲート５７をサブＭＴＤ用量（２ｍｇ／ｋｇではなく１．２ｍｇ／ｋｇ）、１日目及び８日目に２用量でスクリーニングした。図１０の腫瘍容積グラフに示されるとおり、コンジュゲート５７（Ｃｏｎｇｕａｔｅ  ５７）はＤＭ１治療と比較して明らかな有効性を示した。より高い耐用量での有効性の増加が予想される。
【０３５２】
ＮＩＣ−Ｈ５２４腫瘍異種移植モデル（ＳＳＴＲ２発現）においてコンジュゲート５７の単回投与による用量反応試験を行った。判定した用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、及び２．０ｍｇ／ｋｇであった。コンジュゲート５７の単回投与（ｓｉｎｇｌｅ  ｄｏｅｓ）は、図１１Ａの腫瘍容積グラフからも明らかなとおり、明確な用量反応を有した。２ｍｇ／ｋｇの単回投与が有意な退縮につながる。図１１Ｂの体重変化は、全ての用量が良好に忍容されることを示した。
【０３５３】
ＮＣＩ−Ｈ６９  ＳＣＬＣモデルにおいてコンジュゲート５７と対照コンジュゲート（コンジュゲート１２０、構造は以下に示す）との間のインビボ比較（ｃｏｍｐａｒｉｓｉｏｎ）試験を行い、本発明のＤＭ１コンジュゲートの受容体依存性を実証した。コンジュゲート１２０は、コンジュゲート１２０上の鍵となるＬｙｓが遮断されたため（これによりＳＳＴＲへの結合が遮断される）、いずれのＳＳＴＲにも結合しない。コンジュゲート５７のＳＳＴＲ親和性はコンジュゲート１２０よりも１００，００倍高い。
【０３５４】
【表１３】
2018535212.tif 000053
【０３５５】
【化１６】
2018535212.tif 000054
【０３５６】
ＮＣＩ−Ｈ６９腫瘍担持ラットに１日目、８日目及び１５日目に３用量のコンジュゲート５７又はコンジュゲート１２０（０．７ｍｇ／ｋｇ）を与えた。腫瘍容積を計測した。図１２の腫瘍容積グラフに示されるとおり、コンジュゲート１２０は有効性を有しなかった。従って、本発明のＤＭ１コンジュゲートの受容体結合はインビボでの有効性を左右する。受容体結合を遮断したときは有効でない。
【０３５７】
実施例９：コンジュゲート５７の薬物動態
この例では、マウス、ラット及びイヌでコンジュゲート５７の血漿中薬物動態を調べた。半減期、最高血漿中薬物濃度（Ｃｍａｘ）、薬物クリアランス（ＣＬ）、時点０から最終試料採取時点までの曲線下面積・時間曲線（ＡＵＣ  ０−ｔ）、及び定常状態における見かけの分布容積（Ｖｓｓ）を計測した。
【０３５８】
【表１４】
2018535212.tif 000055
【０３５９】
表９のパラメータ、図１３の平均濃度曲線、及び図１４の対数クリアランス／対数体重曲線によって示されるとおり、試験した３種全てにわたって、一貫した比較的長い半減期、低い血漿クリアランス及び低い分布容積が観察された。アロメトリースケーリングは、試験した種におけるクリアランスの高い相関を示し、ヒトにおける低いクリアランスが予測される。
【０３６０】
血漿タンパク結合もまた計測し、結果を表１０に示した。血漿タンパク結合は濃度依存的でなく、全種にわたって一貫している。
【０３６１】
【表１５】
2018535212.tif 000056
【０３６２】
コンジュゲート５７はヒト血漿中に維持されて腫瘍に貯留し、有効性を実現するであろうことが予想される。
更なる試験では、コンジュゲート５７がシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）を阻害する可能性をＣＹＰ酵素の７つのアイソザイム間で試験した。これらのＣＹＰアイソザイムの全てについて、ＩＣ５０は１０ｕＭを超えると決定され、コンジュゲート５７（Ｃｏｎｊｕａｔｅ  ５７）はＣＹＰ酵素を阻害しないことが示された。このデータはまた、コンジュゲート５７が他の薬物のＣＹＰクリアランスを阻害することによって薬物間相互作用（ＤＤＩ）を引き起こすリスクを呈しないことも示している。ＤＤＩがないことは、併用療法の開発に際して決定的に重要である。
【０３６３】
【表１６】
2018535212.tif 000057
【０３６４】
実施例１０：コンジュゲート５７の毒性試験
７〜１０日間のＳＤ雌ラットにおける単回投与予備的毒性試験（用量０．５ｍｇ／ｋｇ〜１．５ｍｇ／ｋｇ）を行った。臨床所見、体重、臨床血液化学、組織病理学、及び全血球数を評価した。１０日間試験では、ＤＭ１（０．４ｍｇ／ｋｇ）と、ＤＭ１等価用量（１．０ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート）及び５０％高い用量（１．５ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート）のコンジュゲート５７を比較した。コンジュゲート５７は、ＤＭ１と比べて忍容性の有意な向上を実証した。ＤＭ１（０．４ｍｇ／ｋｇ）を投与したラットは５日目に瀕死状態になったため安楽死させなければならなかった。
【０３６５】
【表１７】
2018535212.tif 000058
【０３６６】
５日目に、ＤＭ１治療動物は大幅に体重が減少した。コンジュゲート５７治療動物は、１．０ｍｇ／ｋｇ群には体重変化がなく、１．５ｍｇ／ｋｇ群に僅かな体重減少があった。１０日目には、両方のコンジュゲート５７群が正常体重を有した。
【０３６７】
白血球（ＷＢＣ）数の低下はＤＭ１の公知の用量制限毒性である。全ての群でＷＢＣ数を追跡した。結果を図１５に示した。１．０ｍｇ／ｋｇ及び１．５ｍｇ／ｋｇで投与したコンジュゲート５７は良好に忍容され、全血球数（ＣＢＣ）及びＷＢＣ数に有意な変化はなかった。対照的に、ＤＭ１はＷＢＣ数の劇的な低下を示した。
【０３６８】
肝毒性もまたＤＭ１の公知の用量制限毒性である。アラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）及びアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）は肝毒性のマーカーであり、全ての群でこれらを計測した。結果を図１６Ａ及び図１６Ｂに示した。１．０ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート５７はＡＳＴ及びＡＬＴに対して効果を示さなかった。１．５ｍｇ／ｋｇ用量群はＡＬＴに対して効果を示さず、７日目にＡＳＴレベルが僅かに上昇したが、これは１０日目までに正常に戻った。対照的に、０．４ｍｇ／ｋｇのＤＭ１は５日目にＡＳＴ及びＡＬＴの劇的な増加を示した。コンジュゲート５７群の組織病理学から、１．０及び１．５ｍｇ／ｋｇ用量が可逆的変化に特有の最小限乃至軽度の肝臓及び腎臓所見と関連付けられたことが示された。
【０３６９】
従って、コンジュゲート５７は、体重、臨床血液化学及び肝機能に関して有利な毒性学を有する。
実施例１１：ＳＳＴＲ２発現腫瘍の同定
販売され及び臨床的に使用されている承認済みのイメージング剤である１１１インジウムペンテトレオチドで患者選定を行う。投与後４時間及び２４時間に平面ガンマカメラ又は単一陽電子放射型コンピュータ断層撮影装置を使用して患者をイメージングする。ソマトスタチン受容体を担持する原発性及び転移性神経内分泌腫瘍のシンチグラフィ局在が示され得る。
【０３７０】
コンジュゲート５７及びオクトレオスキャン（インジウム−１１１ペンテトレオチド、文献値を示す）の結合プロファイルが比較されている。コンジュゲート５７はＳＳＴＲ２に対するより高い親和性及びオクトレオスキャンと同様のＳＳＴＲサブタイプ結合プロファイルを有する。
【０３７１】
【表１８】
2018535212.tif 000059
【０３７２】
患者選定（ｐａｔｅｉｅｎｔ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）はまた、ＳＳＴＲ２抗体による免疫組織化学（ＩＨＣ）染色でも行う。ＳＳＴＲ２発現は、染色強度及び分布（ｄｉｓｔｒｉｃｔｉｏｎ）によって計測することができる。Ｈ６９、Ｈ５２６、Ｃａｌｕ−６、Ｈ６９、Ｈ５２４、Ｈ８２、ＨＣＣ−３３及びＩＭＲ−３２を含めた様々な細胞株をＳＳＴＲ２のＩＨＣ染色で試験した。染色像を図１７に示した。染色強度及び分布を表１４に示した。
【０３７３】
【表１９】
2018535212.tif 000060
【０３７４】
実施例１２：ＮＣＩ−Ｈ６９モデルによるコンジュゲートの効果の試験
Ｈ６９モデルでＰＤ試験を行い、腫瘍細胞及びタイミング／ピーク反応に対するコンジュゲート効果のインビボ応答を決定した。コンジュゲート５７及びナノ粒子中のコンジュゲート５７（コンジュゲート５７（Ｃｏｎｊｕａｇｅ  ５７）／ＮＰ２０）を２ｍｇ／ｋｇで試験した。ＮＰ２０製剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｅｉｏｎ）については実施例２に記載している。ウエスタンブロット及びＩＨＣ染色を行いＰＨ３及びＣＣ３レベルを計測した。
【０３７５】
ＰＨ３は有糸分裂及び減数分裂の両方の間の染色体凝縮に関係している。ＤＭ１は、ＰＨ３を増加させて有糸分裂のＧ２Ｍ期における細胞停止を生じさせることが示されている。図１８Ａのウエスタンブロット結果に示されるとおり、コンジュゲート及びナノ粒子中のコンジュゲートの両方について４８時間の時点でＰＨ３のピーク反応が起こる。図１８ＢのＩＨＣ結果から、治療済み試料のＰＨ３シグナルが媒体よりも有意に高かったことが示された；ＰＨ３シグナルはコンジュゲート５７について４８時間、及びコンジュゲート５７／ＮＰ２０について７２時間でピークに達した；コンジュゲート５７はコンジュゲート５７／ＮＰ２０よりも高いＰＨ３ピークレベルを有した。コンジュゲート５７／ＮＰ２０試料についてＰＨ３レベルは一定であった。
【０３７６】
ＣＣ３はアポトーシスのマーカーである。ＣＣ３はアポトーシスの遂行者であり、厳密に制御される。コンジュゲート５７及びコンジュゲート５７／ＮＰ２０の両方について７２時間に活性のピークが見られる（図１９）。コンジュゲート５７の活性はコンジュゲート５７／ＮＰ２０と比較して強力であり、ＰＨ３結果と一致する。
【０３７７】
コンジュゲート５７及びコンジュゲート５７／ＮＰ２０治療による平均腫瘍容積を図２０に示した。表１５は、これらの治療の腫瘍成長阻害％（ＴＧＩ％）を示した。２．０ｍｇ／ｋｇで投与したコンジュゲート５７及び３．０ｍｇ／ｋｇで投与したコンジュゲート５７／ＮＰ２０について、腫瘍阻害は９５％を上回り、ほぼ完全な腫瘍退縮（ｔｕｏｒ  ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）であった。
【０３７８】
【表２０】
2018535212.tif 000061
【０３７９】
Ｈ６９におけるコンジュゲート５７に対するＰＨ３及びＣＣ３応答の倍数変化を図２１に示した。ＰＨ３レベルによって示されるとおりの細胞停止は４８時間でピークに達し、及びＣＣ３レベルによって示されるとおりのアポトーシスは７２時間でピークに達した。
【０３８０】
コンジュゲート５７治療後のＨ６９腫瘍の周辺部、中間部及び中心部におけるＰＨ３及びＣＣ３の組織染色を図２２Ａ及び図２２Ｂに示した。周辺部試料は腫瘍の外側約１／３から採取した。中心部試料は腫瘍の中央約１／３から採取した。中間部試料はこれらの位置の間にある約１／３から採取した。４０倍高倍率対物レンズを使用して、１動物につき１視野で治療群当たり３匹の動物について陽性染色細胞をカウントした。各視野は約５００μｍのサイズであった。腫瘍の周辺部、中間部及び中心部におけるＰＨ３陽性細胞数を表１６Ａに示した。腫瘍の周辺部、中間部及び中心部におけるＣＣ３陽性細胞数を表１６Ｂに示した。一般に、ＰＨ３染色は周辺部で最も強力であり、腫瘍の中央に向かうにつれ低下した。ＣＣ３については、腫瘍の中央部により高強度の染色が見られた。
【０３８１】
【表２１】
2018535212.tif 000062
【０３８２】
【表２２】
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【０３８３】
これらの腫瘍浸透試験から、本発明のコンジュゲートが中央に位置する腫瘍細胞に効果を有し得ることが示された。本発明のコンジュゲートは腫瘍の中心部まで浸透し得る。
実施例１３：コンジュゲートがＨＣＣ−３３及び他のモデルに及ぼすインビボ効果
ＨＣＣ−３３（ＳＣＬＣ）異種移植片でコンジュゲート５７の有効性を調べた。コンジュゲート５７は１日目及び８日目に投与した。腫瘍容積を図２３に示した。腫瘍成長阻害結果を表１７に示した。
【０３８４】
【表２３】
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【０３８５】
両群で腫瘍退縮はほぼ１００％であった。両群で体重が増加した。
ＩＭＲ−３２神経芽細胞腫腫瘍モデル並びに神経内分泌腫瘍、肝腫瘍、髄質腫瘍、甲状腺腫瘍、及び膵神経内分泌腫瘍を含めた他の腫瘍で同様の試験を行う。
【０３８６】
実施例１４：ナノ粒子製剤がコンジュゲートのインビトロ安定性及びインビボＰＫに及ぼす効果
実施例２に記載されるナノ粒子組成物ＮＰ４、ＮＰ８、ＮＰ１１及びＮＰ１６でコンジュゲート５７を製剤化した。図２４Ａは、コンジュゲート５７単独及び各種ナノ粒子組成物（ｎａｎｏｐａｒｔｉｃａｌ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ）による３７℃におけるインビトロコンジュゲート５７血漿放出を示した。図２４Ａは、コンジュゲート５７がナノ粒子製剤の場合に血漿中により多く残留することを示した。ＮＰ８製剤のコンジュゲート５７（Ｃｏｎｇｕａｔｅ  ５７）は血漿中に最長８時間まで１００％残留した。図２４Ｂはインビボコンジュゲート５７のＰＫを示した。コンジュゲート５７濃度はＮＰ８製剤で最もゆっくりと低下した。これらのデータから、異なるインビトロ放出動態に合わせてナノ粒子を調節可能であることが実証された。調節可能なインビトロ放出は、インビボラット薬物動態に直接置き換えることが可能である。ラットＰＫのナノ粒子曝露（ＡＵＣ及びｔ１／２）はインビトロ血漿放出と相関する。
【０３８７】
実施例１５：コンジュゲート５７によるＳＳＴＲ２受容体インターナリゼーション
高度発現ＳＳＴＲ２陽性（ＳＳＴＲ２＋）腫瘍異種移植片：Ｈ５２４＿ＭＤ腫瘍異種移植片においてコンジュゲート５７を使用してＳＳＴＲ２受容体インターナリゼーションを調べた。媒体（０．１％ソルトール（Ｓｏｌｕｔｏｌ）／５％マンニトール）、２ｍｇ／ｋｇのコンジュゲート５７（Ｃｏｎｊｕａｔｅ  ５７）、２ｍｇ／ｋｇのスクランブル化対照（ＢＴ−９８４）、及び１．４ｍｇ／ｋｇのオクトレオチド（リガンド単独）をＳＳＴＲ２＋  Ｈ５２４−ＭＤ腫瘍異種移植片（ｎ＝３／群）に与えた。時点−０時間（媒体）、１５分、１時間、４時間、２４時間及び７２時間。免疫組織化学（ＩＨＣ）染色によってＳＳＴＲ２スコアリングを行った。
【０３８８】
図２５ＡはＳＳＴＲ２受容体インターナリゼーション強度を示した。図２５Ａに示されるとおり、コンジュゲート５７治療後、ＳＳＴＲ２受容体は左上の図中において膜（ｍｅｍｂｒａｎｃｅ）上に位置し、右下の図中においてほとんどが細胞質になった。染色分析のこの強度において、コンジュゲート５７治療は、１時間、４時間、及び７２時間の時点で、スクランブル化したペプチドバージョンの化合物５７（ＢＴ−９８４）及びナイーブと有意に異なる結果を生じた。加えて、７２時間において、コンジュゲート５７治療はオクトレオチドと有意に異なる結果を生じた。
【０３８９】
図２５ＣはＳＳＴＲ２インターナリゼーション分布レベルを示した。右下の画像では、ＳＳＴＲ２インターナリゼーションは＞６６％に達した。染色分析のこの分布において、コンジュゲート５７治療は、４時間、２４時間、及び７２時間の時点で、ＢＴ−９８４及びナイーブと有意に異なる結果を生じた。加えて、７２時間において、コンジュゲート５７治療はオクトレオチドと有意に異なる結果を生じた。
【０３９０】
図２５Ｂは、異なる時点におけるＨ５２４−ＭＤ腫瘍異種移植片のＳＳＴＲ２インターナリゼーション（ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｉｚａｔｉｏｎ）を示した。図２５Ｄは、異なる時点におけるＨ５１４−ＭＤ腫瘍異種移植片のＳＳＴＲ２内部細胞分布を示した。図２５Ｂ及び図２５Ｄの「＊」は、ダンの多重比較検定でコンジュゲート５７とＢＴ−９８４及びナイーブとを比べて有意な差（＊ｐ＜０．０５）があったことを示した。図２５Ｂ及び図２５Ｄの「＋」は、ダンの多重比較検定でコンジュゲート５７とオクトレオチドとを比べて有意な差（＋ｐ＜０．０５）があったことを示した。
【０３９１】
従って、コンジュゲート５７の治療が有意な受容体インターナリゼーション／分布を示したことから、本化合物が（スクランブル化と異なり）インビボで受容体を能動的に標的化するという仮説が裏付けられた。コンジュゲート５７のオクトレオテートリガンドによるＳＳＴＲ２受容体の結合はＳＳＴＲ２受容体のインターナリゼーションを誘導し、ＤＭ−１ペイロードをインターナライズする。意外にも、コンジュゲート５７はオクトレオチド単独よりも高いＳＳＴＲ２インターナリゼーション（ｉｎｔｅｒｎａｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ）を引き起こした。
【０３９２】
実施例１６：コンジュゲート５７によって治療される神経芽細胞腫
神経芽細胞腫は、最も高頻度には副腎に発生する神経内分泌腫瘍である。この試験には神経芽腫細胞株ＩＭＲ−３２を選択した。
【０３９３】
初めにインビトロ競合アッセイを行い、ここではＩＭＲ−３２細胞をオクトレオチドの非存在下又は存在下でコンジュゲート５７によって処理した。コンジュゲート５７はＩＭＲ−３２細胞の成長を阻害した。オクトレオチドと共にプレインキュベートすると、この阻害が影響を受けた。
【０３９４】
更に、継代３代目のＩＭＲ−３２腫瘍を担持するマウスに２．０ｍｇ／ｋｇ又は１．５ｍｇ／ｋｇのいずれかのコンジュゲート５７を週１回、２週間にわたって媒体陰性対照と共に投与した。第２の投与イベント後、２．０ｍｐｋ群に平均８．０％の中程度の体重減少が観察された。１．５ｍｐｋ群は平均２．０％減少したのみであった。投与完了後、全てのマウスが回復した。図２６Ｂに示されるとおり、両方の治療群で腫瘍退縮が観察された。両方の治療群において、１０匹中１０匹のマウスが完全な退縮を示した。
【０３９５】
実施例１７：ＳＣＬＣの治療におけるコンジュゲート５７の有効性
ＨＣＣ−３３（小細胞肺癌）異種移植片を選択してコンジュゲート５７の有効性を調べた。一部の群では、コンジュゲート５７は１．０ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ又は０．３３ｍｇ／ｋｇで毎週、３０日間にわたり、各動物につき合計４用量を与えた。他の一部の群では、コンジュゲート５７はまた０．５ｍｇ／ｋｇ又は０．２５ｍｇ／ｋｇで週２回、３０日間にわたり、合計で各動物につき８合計用量を与えた。
【０３９６】
試験結果から、複数回用量が良好に忍容されたことが確立された。全ての群において体重は良好であった。腫瘍退縮結果を以下の表１８及び図２７に示した。
【０３９７】
【表２４】
2018535212.tif 000065
【０３９８】
実施例１８：コンジュゲート及び抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の腫瘍浸透
抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、典型的には約１５０ＫＤａの分子量を有し、固形腫瘍浸透性が不良である。ＮＣＩ−Ｈ６９小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）異種移植片で行う蛍光試験において本発明のコンジュゲート及びＡＤＣの腫瘍浸透性を比較した。小細胞肺癌腫瘍はソマトスタチン受容体及び神経細胞接着分子（ＮＣＡＭ）受容体を過剰発現する。従って、ＳＳＴＲに結合する標的指向性部分を含む本発明のコンジュゲートはＳＣＬＣ細胞の表面に結合することができる。ＮＣＡＭ抗体もまたＳＣＬＣ細胞の表面に結合する。
【０３９９】
コンジュゲート５７のペプチドにＣｙ７蛍光タグを付加して蛍光コンジュゲート１２０を作製した。ＮＣＡＭ抗体に６８０ＸＬ蛍光色素タグを付加して蛍光抗体を作成した。
【０４００】
【化１７】
2018535212.tif 000066
【０４０１】
ＮＣＩ−Ｈ６９異種移植片を担持する動物にコンジュゲート１２０及び６８０ＸＬタグ付加ＮＣＡＭ抗体の単回投与を与えた。４日目、ＮＣＩ−Ｈ６９異種移植片の蛍光像を撮った。図２８に示されるとおり、コンジュゲート１２０は４日目に既に腫瘍中心部に周辺部を越えて浸透した。それに対して（ｏｎ  ｔｈｅ  ｃｏｎｔｒａｔｒｙ）、抗体は４日目に腫瘍内部に中〜低濃度を有したに過ぎなかった。実際、抗体は腫瘍中心部への浸透を示すのに７日かかる。７日目までに、多くのＡＤＣがそのペイロードから解離する。従って、本発明のコンジュゲートはＳＳＴＲ２発現腫瘍の中心部に迅速に浸透する。本発明のコンジュゲートは、同種の腫瘍を標的化する抗体及びＡＤＣよりも速く且つ深く浸透する。
【０４０２】
実施例１９：本発明のコンジュゲートで治療される乳癌
原発乳癌を有する患者から腫瘍組織標本を入手する。対応する正常組織もまた入手する。腫瘍組織及び正常組織においてＳＳＴＲ２  ｍＲＮＡの定量的評価（ｑｕａｎｔａｔｉｖｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ）をリアルタイムＰＣＲによって計測する。ＳＳＴＲ２はまた、サブタイプ特異的抗体を用いた免疫細胞化学的方法によっても検出する。乳癌でＳＳＴＲ２が過剰発現することが実証される。
【０４０３】
インビトロ研究において、ＭＣＦ−７乳癌細胞にコンジュゲート５７を与える。ＭＣＦ−７細胞の細胞増殖を計測する。コンジュゲート５７はＭＣＦ−７細胞の増殖を低下させる。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
2018535212.tif 000069
【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
2018535212.tif 000071
【図３Ｂ】
2018535212.tif 000072
【図３Ｃ】
2018535212.tif 000073
【図４】
2018535212.tif 000074
【図５】
2018535212.tif 000075
【図６】
2018535212.tif 000076
【図７】
2018535212.tif 000077
【図８】
2018535212.tif 000078
【図９】
2018535212.tif 000079
【図１０】
2018535212.tif 000080
【図１１Ａ】
2018535212.tif 000081
【図１１Ｂ】
2018535212.tif 000082
【図１２】
2018535212.tif 000083
【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
2018535212.tif 000086
【図１６Ａ】
2018535212.tif 000087
【図１６Ｂ】
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【図１７】
2018535212.tif 000089
【図１８Ａ】
2018535212.tif 000090
【図１８Ｂ】
2018535212.tif 000091
【図１９】
2018535212.tif 000092
【図２０】
2018535212.tif 000093
【図２１】
2018535212.tif 000094
【図２２Ａ】
2018535212.tif 000095
【図２２Ｂ】
2018535212.tif 000096
【図２３】
2018535212.tif 000097
【図２４Ａ】
2018535212.tif 000098
【図２４Ｂ】
2018535212.tif 000099
【図２５Ａ】
2018535212.tif 000100
【図２５Ｂ】
2018535212.tif 000101
【図２５Ｃ】
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【図２５Ｄ】
2018535212.tif 000103
【図２６Ａ】
2018535212.tif 000104
【図２６Ｂ】
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【図２７】
2018535212.tif 000106
【図２８】
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【国際調査報告】
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2018535212.tif 000109
2018535212.tif 000110
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