(57)【要約】  抗ＡＧＥ抗体は、特定のアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含む。抗ＡＧＥ抗体は、カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する。抗ＡＧＥ抗体は、老化細胞を死滅させる、部分的に機能する細胞もしくは非機能細胞を死滅させる、サルコペニアを処置する、組織もしくは臓器の再生を促進する、再生過程を促進するもしくは老化の影響を克服する、アテローム動脈硬化症を処置する、白内障の発症を防止するもしくは遅延させる、脂肪組織の喪失の開始を防止するもしくは遅延させる、健康寿命を増加させる、脊柱前弯・後弯症の発症を防止するもしくは遅延させる、炎症もしくは自己免疫不全を処置する、神経変性障害を処置するまたは癌を処置するために用いることができる。【選択図】図１
2018535953.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＡＧＥ抗体であって、配列番号１、配列番号３、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、および配列番号３９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含み、
カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する、抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２】
抗ＡＧＥ抗体であって、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、および配列番号２８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含み、
カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する、抗ＡＧＥ抗体。
【請求項３】
抗ＡＧＥ抗体であって、
重鎖、および
軽鎖
を含み、
前記重鎖が配列番号１、配列番号１７、配列番号２９、配列番号３１、および配列番号３３からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、または
前記軽鎖が配列番号３、配列番号１９、配列番号３５、配列番号３７、および配列番号３９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ならびに
カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する、
抗ＡＧＥ抗体。
【請求項４】
抗ＡＧＥ抗体であって、
重鎖、および
軽鎖
を含み、
前記重鎖が配列番号１、配列番号１７、配列番号２９、配列番号３１、および配列番号３３からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ならびに
前記軽鎖が配列番号３、配列番号１９、配列番号３５、配列番号３７、および配列番号３９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、ならびに
カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する、
抗ＡＧＥ抗体。
【請求項５】
抗ＡＧＥ抗体であって、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、および配列番号２８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含む相補性決定領域を含み、
カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合し、ならびに
マウス、ラット、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウマ、イヌおよびネコからなる群から選択される種に対して実質的に非免疫原性である、抗ＡＧＥ抗体。
【請求項６】
抗体複合体であって、
配列番号１、配列番号３、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、および配列番号３９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含む抗ＡＧＥ抗体フラグメントと、
前記抗ＡＧＥ抗体フラグメントに共役結合される、ＡＧＥ修飾細胞の破壊を引き起こす薬剤と
を含み、
前記抗ＡＧＥ抗体フラグメントがカルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する、
抗体複合体。
【請求項７】
老化細胞を死滅させることにおける使用のための請求項１〜６のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項８】
部分的に機能する細胞または非機能細胞を死滅させることにおける使用のための請求項１〜７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項９】
部分的に機能する細胞または非機能細胞を死滅させることによって対象中のサルコペニアを処置することにおける使用のための請求項１〜８のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１０】
部分的に機能する細胞または非機能細胞を死滅させることによって対象中の組織または臓器の再生を促進することにおける使用のための請求項１〜９のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１１】
部分的に機能する細胞または非機能細胞を死滅させることによって対象中の再生過程を促進するもしくは老化の影響を克服することにおける使用のための請求項１〜１０のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１２】
部分的に機能する細胞または非機能細胞を死滅させることによって対象中のアテローム動脈硬化症を処置することにおける使用のための請求項１〜７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１３】
対象中の白内障の発症を防止するもしくは遅延させることにおける使用のための請求項１〜７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１４】
対象中の脂肪組織の喪失の開始を防止するもしくは遅延させることにおける使用のための請求項１〜７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１５】
対象中の脊柱前弯・後弯症の発症を防止するもしくは遅延させることにおける使用のための請求項１〜７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１６】
対象中の炎症または自己免疫不全を処置することにおける使用のための請求項１〜７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１７】
対象中の神経変性障害を処置することにおける使用のための請求項１〜７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１８】
対象中の癌を処置することにおける使用のための請求項１〜７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項１９】
老化細胞を死滅させるための薬物の製造のための請求項１〜１８のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体の使用。
【請求項２０】
サルコペニアを処置するため薬物の製造のための請求項１〜１８のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体の使用。
【請求項２１】
前記対象がＡＤ、ＰＤ、レビー小体病、ＭＳ、プリオン病およびＡＬＳからなる群から選択される神経変性障害を有する、請求項１〜２０のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２２】
前記処置することが前記対象の中枢神経系に前記抗ＡＧＥ抗体を投与することを含む、請求項１〜２１のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２３】
前記対象がＡＬＳまたはＭＤを有し、および
前記処置することが前記対象の筋肉に前記抗ＡＧＥ抗体を投与することを含む、
請求項１〜２１のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２４】
前記抗体がヒト、マウス、ラット、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウマ、イヌおよびネコからなる群から選択される種に対して実質的に非免疫原性である、請求項１〜２３のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２５】
前記抗体がヒト化抗体である、請求項１〜２４のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２６】
前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１〜２５のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２７】
前記抗体がヒトに対して実質的に非免疫原性である、請求項１〜２６のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２８】
前記抗体が最大限で９×１０−３／秒の解離速度（ｋｄ）を有する、請求項１〜２７のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項２９】
前記抗体がＡＧＥ修飾細胞の破壊を引き起こす薬剤に共役結合される、請求項１〜２８のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項３０】
前記薬剤が毒物、細胞傷害性薬剤、磁性ナノ粒子、および磁気スピン渦ディスクからなる群から選択される、請求項１〜２９のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項３１】
前記抗体が対象の免疫系による標的細胞の破壊を可能にする定常部を含む、請求項１〜３０のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【請求項３２】
前記抗体が二重特異性抗体である、請求項１〜３１のいずれかに記載の抗ＡＧＥ抗体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
サルコペニアは、老化に伴う筋肉質量、質および強度の低下である。ヒトは、人生の２０代のある時点で筋肉質量と機能を失い始める。この筋肉質量の喪失は、一般的に７５歳頃に加速する。サルコペニアは、身体的に活発な人および身体的に不活発な人の両方に発症する。人の平均寿命が伸び続けるため、サルコペニアは重大な健康上の懸念になっている。サルコペニアによる筋肉質量の喪失は、平衡障害、歩行速度の低下および虚弱をもたらし得る。サルコペニアを患っている人は外傷および能力障害を起こしやすく、その結果として独立して生活することができなくなることがあり得る。サルコペニアの蔓延は、健康管理費および生活介護費の増加をもたらす可能性がある。
【背景技術】
【０００２】
サルコペニアは、避けられない加齢の結果であり、経時的な体の自然劣化であるとみなされてきた。サルコペニアの第一治療は、運動である。身体運動、具体的にはレジスタンストレーニングまたは筋力トレーニングは、サルコペニアの影響を低減できる。テストステロン、タンパク質同化ステロイド、グレリン、ビタミンＤ、アンギオテンシン変換酵素阻害薬（ＡＣＥ阻害薬）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ミオスタチン、選択的アンドロゲン受容体修飾薬（ＳＡＲＭ）、ウロコルチンＩＩ（Ｕｃｎ２）およびホルモン補充療法が調査され、またはサルコペニアの可能性のある治療法として検討されている。この研究にもかかわらず、サルコペニアを治療するための米国食品医薬品局（ＦＤＡ）承認薬剤は、現在のところない。
【０００３】
最近の研究は、細胞老化と、サルコペニアなどの加齢関連障害との間の因果関係を特定した。Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎｉｃ、Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ、Ｍｉｎｎｅｓｏｔａの研究チームは、マウスにおいてそれらの脂肪組織と筋組織から老化細胞を除去することによって明白な副作用なしに加齢の影響を遅延させ得ることを示した（Ｂａｋｅｒ，Ｄ．Ｊ．ら，“Ｃｌｅａｒａｎｃｅ  ｏｆ  ｐ１６Ｉｎｋ４ａ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ  ｃｅｌｌｓ  ｄｅｌａｙｓ  ａｇｅｉｎｇ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ”，Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．４７９，ｐｐ．２３２−２３６，（２０１１））。トランスジェニックマウスにおける老化細胞の除去は、サルコペニアおよび白内障の発症を実質的に遅延し、骨格筋および眼において老化指標を低下させることが示された。この研究は、老化細胞の除去のためのトランスジェニックマウスの生涯にわたる治療および晩年の治療が悪い副作用を有さず、細胞に依存する加齢に関連する表現型を選択的に遅延させることを確立した（同書、２３４頁、２列、１６行目から２３５頁、１列、２行目まで）。著者らは、老化細胞の除去が人における加齢に伴う疾患を治療するまたは遅延する、および健常な人の寿命を向上するための手段となり得るという理論を立てた（同書、２３５頁、２列、３８行目〜５１行目）。
【０００４】
老化細胞は、部分的に機能する、または機能しない細胞であり、不可逆的な増殖停止の状態にある。老化は細胞のはっきり区別できる状態であり、バイオマーカーｐ１６ｉｎｋ４ａの活性化およびβ−ガラクトシダーゼの発現など、バイオマーカーと関連する。
【０００５】
終末糖化産物（ＡＧＥ；  ＡＧＥ修飾タンパク質または糖化最終産物とも呼ばれる）は、老化細胞中で糖とタンパク質側鎖との非酵素的反応から生じる（Ａｎｄｏ，Ｋ．ら，  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ  Ａｒｅ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｂｙ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ  Ｅｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｄｕｒｉｎｇ  Ａｇｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．，Ｖｏｌ．２５８，１２３，１２５（１９９９））。このプロセスはシッフ塩基を形成する還元糖とアミノ基の間の可逆反応で始まり、これが進行して、共有結合したアマドリ転位産物を形成する。一旦形成されると、アマドリ産物はさらなる転位を経てＡＧＥを生成する。糖尿病（ＤＭ）に起因する高血糖症および酸化ストレスは、膜タンパク質のこの翻訳後修飾を促進する（Ｌｉｎｄｓｅｙ  ＪＢ，ら，“Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｆｏｒ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ  Ｅｎｄ−Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  （ＲＡＧＥ）  ａｎｄ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ＲＡＧＥ  （ｓＲＡＧＥ）：  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｖｏｌ．６（１），７−１４，（２００９））。ＡＧＥは、糖尿病合併症、炎症、網膜症、腎症、アテローム性動脈硬化症、脳卒中、内皮細胞機能障害、および神経変性障害を含むいくつかの病態と関連していた（Ｂｉｅｒｈａｕｓ  Ａ，“ＡＧＥｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ＡＧＥ−ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｍｅｌｌｉｔｕｓ．  Ｉ．  Ｔｈｅ  ＡＧＥ  ｃｏｎｃｅｐｔ，”  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｒｅｓ，  Ｖｏｌ．３７（３），５８６−６００（１９９８））。
【０００６】
ＡＧＥ修飾タンパク質は、老化細胞のマーカーでもある。糖化最終産物と老化との間のこの関連性は、当技術分野で周知である。例えば、Ｇｒｕｂｅｒ，  Ｌ．（国際公開第２００９／１４３４１１号，２００９年１１月２６日），Ａｎｄｏ，Ｋ．ら，（Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ  Ａｒｅ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｂｙ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ  Ｅｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｄｕｒｉｎｇ  Ａｇｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．，Ｖｏｌ．２５８，１２３，１２５（１９９９）），  Ａｈｍｅｄ，  Ｅ．Ｋ．ら，（“Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｖｅ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｏｆ  ＷＩ−３８  Ｈｕｍａｎ  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ”  Ａｇｉｎｇ  Ｃｅｌｌｓ，ｖｏｌ．  ９，  ２５２，２６０（２０１０）），Ｖｌａｓｓａｒａ，  Ｈ．ら，（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  Ｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｏｎ  Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｉｎｄｕｃｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ  ｂｙ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．，  Ｖｏｌ．  １６６，５３９，５４５（１９８７））およびＶｌａｓｓａｒａ  ら，（“Ｈｉｇｈ−ａｆｆｉｎｉｔｙ−ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｕｐｔａｋｅ  ａｎｄ  Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｇｌｕｃｏｓｅ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：  Ａ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｒｅｍｏｖａｌ  ｏｆ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ”  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．ＵＳＡＩ，Ｖｏｌ．８２，５５８８，５５９１（１９８５））を参照されたい。さらに、Ａｈｍｅｄ，Ｅ．Ｋらは、糖化最終産物が「細胞タンパク質と細胞外タンパク質への自然損傷の主な原因の１つである」ことを明らかにしている（Ａｈｍｅｄ，Ｅ．Ｋ．  ら，上記３５３頁を参照されたい）。したがって、糖化最終産物の蓄積は、老化と機能不全に関連する。
【０００７】
細胞老化およびＡＧＥの蓄積は、サルコペニアと老化関連障害に加えて多くの疾患および障害に関与している。グリア細胞、アストロサイトおよびミクログリア細胞などの中枢神経系での細胞の老化は、神経変性障害と関連していた。老化アストロサイトの異常な蓄積は、アルツハイマー病（ＡＤ）と関連していた（Ｂｈａｔ，Ｒ．ら，“Ａｓｔｒｏｃｙｔｅ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ａｓ  ａ  Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ”，  ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，Ｖｏｌ．７（９），ｅ４５０６９，  ｐｐ．  １−１０（Ｓｅｐｔ．２０１２））。正常な老化と関連するミクログリア細胞老化は、ＡＤを暗示するアミロイド斑の存在によって悪化する（Ｆｌａｎａｒｙ，Ｂ．Ｅ．ら，“Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  Ｔｈａｔ  Ａｇｉｎｇ  Ａｎｄ  Ａｍｙｌｏｉｄ  Ｐｒｏｍｏｔｅ  Ｍｉｃｒｏｇｌｉａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ”，Ｒｅｊｕｖｅｎａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｖｏｌ．１０（１），ｐｐ  ６１−７４（Ｍａｒｃｈ  ２００７））。ＡＤにおけるアストロサイトおよびミクログリア細胞でのＡＧＥの存在は、老化細胞の存在のさらなるエビデンスである（Ｔａｋｅｄａ，Ａ．，ら，“Ａｄｖａｎｃｅｄ  ｇｌｙｃａｔｉｏｎ  ｅｎｄ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｃｏ−ｌｏｃａｌｉｚｅ  ｗｉｔｈ  ａｓｔｒｏｃｙｅｓ  ａｎｄ  ｍｉｃｒｏｇｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｂｒａｉｎ”，Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ，Ｖｏｌ．９５，ｐｐ．５５５−５５８  １９９８））。最近報告された調査結果に基づいて、Ｃｈｉｎｔａらは、パーキンソン病（ＰＤ）に関連する環境ストレス要因が非神経細胞グリア細胞内で老化を誘発することによって部分的に作用し、この疾患で起こる神経細胞完全性の特徴的な低下の一因となることがあると提唱した（Ｃｈｉｎｔａ，  Ｓ．Ｊ．ら．“Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ  ｓｔｒｅｓｓ，  ａｇｅｉｎｇ  ａｎｄ  ｇｌｉａｌ  ｃｅｌｌ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ：ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｔｉｃ  ｌｉｎｋ  ｔｏ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ？”，  Ｊ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ，  Ｖｏｌ．２７３，ｐｐ．４２９−４３６（２０１３））。アストロサイト老化も、ＰＤと関連している（Ｍ．  Ｍｏｒｉ，“Ｔｈｅ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉａｎ  Ｂｒａｉｎ：Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，  ＳＡＧＥ  （Ｊｕｎｅ  ３０，  ２０１５）（ｓａｇｅ．ｂｕｃｋｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．ｏｒｇ／ｔｈｅ−ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉａｎ−ｂｒａｉｎ−ｃｅｌｌｕｌａｒ−ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ−ａｎｄ−ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ／）。変異スーパーオキドジスムターゼ−１（ｍ−ＳＯＤ１）を過剰発現する家族性筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の齧歯類モデルにおいて、老化表現型を獲得するアストロサイトの速度は、加速される（Ｄａｓ，  Ｍ．  Ｍ．  ａｎｄ  Ｓｖｅｎｄｓｅｎ，  Ｃ．  Ｎ．，“Ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ  ｓｈｏｗ  ｒｅｄｕｃｅｄ  ｓｕｐｐｏｒｔ  ｏｆ  ｍｏｔｏｒ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ａｇｉｎｇ  ｔｈａｔ  ｉｓ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  ｉｎ  ａ  ｒｏｄｅｎｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ＡＬＳ”，Ｎｅｕｒｏｂ���ｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ａｇｉｎｇ，Ｖｏｌ．３６，ｐｐ．１１３０−１１３９（２０１５））。さらに多発性硬化症（ＭＳ）において、マイクログリアおよびマクロファージは、ＳＡＳＰを暗示する強力な炎症誘発性表現型へと変化し、かつ炎症誘発性サイトカインおよび分子を放出することによって神経細胞損傷を強めることがある（Ｌｕｅｓｓｉ，Ｆ．，ら．“Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：  ｎｏｖｅｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ”  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ．  Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒ．，Ｖｏｌ  ９，ｐｐ．１０６１−１０７７（２０１２））。
【０００８】
いくつかの神経変性障害は、中枢神経系の外側で異常な細胞老化と関連している。ＡＬＳ患者の筋肉組織に存在する、筋衛星細胞としても知られる大部分の衛星細胞は、異常な老化様形態を示すが、それらはｉｎ  ｖｉｔｒｏで増殖し得る（Ｐｒａｄａｔ，  Ｐ．−Ｆ．ら，“Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｓａｔｅｌｌｉｔｅ  ｃｅｌｌｓ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ａｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ  ｌａｔｅｒａｌ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ”  Ａｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ  Ｌａｔｅｒａｌ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｖｏｌ．１２，ｐｐ．２６４−２７１（２０１１））。衛星細胞は成熟した筋肉で見つかる小さい多能性細胞であり、さらなる衛星細胞を生じさせることができる、または筋芽細胞へと分化できならびにさらなる筋核を提供できる。デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＭＤ）の動物モデルにおいて、筋芽細胞の低下した増殖能および早期老化が観察された（Ｗｒｉｇｈｔ，  Ｗ．Ｅ．，“Ｍｙｏｂｌａｓｔ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｉｎ  Ｍｕｓｃｕｌａｒ  Ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ”  Ｅｘｐ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ，Ｖｏｌ．１５７，ｐｐ．３４３−３５４（１９８５））。筋芽細胞は、筋細胞（ｍｙｏｃｙｔｅ）（筋細胞（ｍｕｓｃｌｅ  ｃｅｌｌ）とも呼ばれる）へと分化する前駆細胞である。
【０００９】
神経変性障害も、異常タンパク質の蓄積と関連する（Ｋｉｎｇ，  Ｏ．Ｄ．，ら，“Ｔｈｅ  ｔｉｐ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｃｅｂｅｒｇ：ＲＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｗｉｔｈ  ｐｒｉｏｎ−ｌｉｋｅ  ｄｏｍａｉｎｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ  ｄｉｓｅａｓｅ”  Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．  Ｖｏｌ．１４６２，ｐｐ．６１−８０（２０１２））。ＰＤおよびレビー小体病の特徴は、神経細胞内部を形成するレビー小体の形成である。レビー小体の主な構造成分は、原線維の形態での、アルファ−シヌクレインタンパク質である。もつれおよびプラークの存在はＡＤの特徴であり、その存在を用いて、病態を明確に診断する。βアミロイドタンパク質（アミロイドベータ、ＡβまたはＡベータとも呼ばれる）から構成されるプラークは、神経細胞間に蓄積する。タウタンパク質から構成されるもつれは、細胞内でねじれた線維を形成する。プリオン病（伝播性海綿状脳症（ＴＳＥ）としても知られている）は、クロイツフェルト・ヤコブ病、変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ウシ海綿状脳症（「狂牛」病）、スクレイピー（ヒツジおよびヤギにおいて）、慢性消耗病（シカおよびヘラジカにおいて）、クールーおよび致死性家族性不眠症などの種々のヒトおよび動物の障害を含む。プリオンタンパクは、誤って折り畳まれたタンパク質の状態を伝達することにより増殖し得る、誤って折り畳まれたタンパク分子であり、誤って折り畳まれたタンパク質の蓄積をもたらし、および組織損傷と細胞死を引き起こす（Ｄｏｂｓｏｎ，  Ｄ．Ｍ．，“Ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｂａｓｉｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｆｏｌｄｉｎｇ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｌｉｎｋｓ  ｗｉｔｈ  ｈｕｍａｎ  ｄｉｓｅａｓｅ”  Ｐｈｉｌ．  Ｔｒａｎｓ．  Ｒ．  Ｓｏｃ．  Ｌｏｎｄ．  Ｂ，Ｖｏｌ．３５６，ｐｐ．１３３−１４５  （２００１））。これらの疾患において、タンパク質は、誤って折り畳まれるまたは異常な凝集体を形成する正常なタンパク質であると思われる。家族性筋萎縮性側索硬化症のいくらかの患者の場合、変異型スーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）が封入体を形成し、蓄積する（Ｋａｔｏ，  Ｓ．，ら，“Ａｄｖａｎｃｅｄ  ｇｌｙｃａｔｉｏｎ  ｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ  ｄｉｓｍｕｔａｓｅ−１（ＳＯＤ１）−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｉｎｃｌｕｓｉｏｎｓ  ａｒｅ  ｃｏｍｍｏｎ  ｔｏ  ｆａｍｉｌｉａｌ  ａｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ  ｌａｔｅｒａｌ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ＳＯＤ１  ｇｅｎｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｉｃｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ＳＯＤ１  ｗｉｔｈ  ａ  Ｇ８５Ｒ  ｍｕｔａｔｉｏｎ”  Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ，Ｖｏｌ．１００，ｐｐ．４９０−５０５（２０００））。
【００１０】
老化細胞は癌細胞の増殖をあおることも、知られている。老化細胞は、炎症促進因子を含む細胞間シグナル伝達に関与する多くの因子の分泌に関連し、これらの因子の分泌は、細胞老化関連分泌現象、すなわちＳＡＳＰと呼ばれている。ある研究は、老化間葉系幹細胞がＩＬ−６の分泌によって乳癌細胞の増殖および移動を促進することを示した（Ｄｉ，  Ｇ−ｈ．ら，ＩＬ−６  Ｓｅｃｒｅｔｅｄ  ｆｒｏｍ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ  Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ  Ｐｒｏｍｏｔｅｓ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ，  ＰＬＯＳ  Ｏｎｅ，Ｖｏｌ．９，１１，ｅ１１３５７２（２０１４））。別の研究は、老化ヒト線維芽細胞がマトリックスメタロプロテアーゼの分泌によって腫瘍の増殖を増加させることを示した（Ｌｉｕ，  Ｄ．ら，Ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  Ｉｎｃｒｅａｓｅ  ｔｈｅ  Ｅａｒｌｙ  Ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  Ｘｅｎｏｇｒａｆｔ  Ｔｕｍｏｒｓ  ｖｉａ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ，Ｖｏｌ．６７，３１１７−３１２６（２００７））。
【発明の概要】
【００１１】
第１の態様において、本発明は、配列番号１、配列番号３、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、および配列番号３９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含む、抗ＡＧＥ抗体である。抗体は、カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する。
【００１２】
第２の態様において、本発明は、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、および配列番号２８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含む、抗ＡＧＥ抗体である。抗体は、カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する。
【００１３】
第３の態様において、本発明は、重鎖および軽鎖を含む抗ＡＧＥ抗体である。重鎖は、配列番号１、配列番号１７、配列番号２９、配列番号３１、および配列番号３３からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、または軽鎖は、配列番号３、配列番号１９、配列番号３５、配列番号３７、および配列番号３９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。抗体は、カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する。
【００１４】
第４の態様において、本発明は、重鎖および軽鎖を含む抗ＡＧＥ抗体である。重鎖は、配列番号１、配列番号１７、配列番号２９、配列番号３１、および配列番号３３からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、および軽鎖は、配列番号３、配列番号１９、配列番号３５、配列番号３７、および配列番号３９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。抗体は、カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する。
【００１５】
第５の態様において、本発明は、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、および配列番号２８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含む相補性決定領域を含む、抗ＡＧＥ抗体である。抗体は、カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する。抗体は、マウス、ラット、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウマ、イヌおよびネコからなる群から選択される種に対し、実質的に非免疫原性である。
【００１６】
第６の態様において、本発明は、配列番号１、配列番号３、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、および配列番号３９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有する少なくとも１つのアミノ酸配列を含むタンパク質またはペプチドを含む抗ＡＧＥ抗体フラグメントと、ＡＧＥ修飾細胞の破壊を生じさせる薬剤とを含む、抗体複合体である。ＡＧＥ修飾細胞の破壊を生じさせる薬剤は、抗ＡＧＥ抗体フラグメントに共役結合される。抗体は、カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する。
【００１７】
定義
「ペプチド」という用語は、２〜５０のアミノ酸で構成される分子を意味する。
【００１８】
「タンパク質」という用語は、５０を超えるアミノ酸で構成される分子を意味する。
【００１９】
「サルコペニア」という用語は、（１）低筋量および（２）低筋肉機能（低筋力または低下した身体能力）の存在によって特徴づけられる症候群を意味する。筋量は、コンピュータ断層走査（ＣＴスキャン）、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）または二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＸＡまたはＤＥＸＡ）などの身体撮像技術；生体インピーダンス解析（ＢＩＡ）；全身カリウム（ＴＢＫ）もしくは身体の局所カリウム（ＰＢＫ）などの身体カリウム測定；または上腕中央周囲径、皮下脂肪の厚さもしくはふくらはぎ周囲径などの身体測定値によって測定され得る。好ましくは、筋量はＣＴスキャン、ＭＲＩまたはＤＸＡで測定される。筋力は、握力、膝屈曲／伸展または最大呼気流量で測定され得る。好ましくは、筋力は握力で測定される。身体能力は、簡易身体能力バッテリー、歩行速度測定、椅子立ち上がりテスト（ＴＧＵＧ）または階段昇降テストで測定され得る。好ましくは、運動機能は歩行速度測定で測定される。対象は、（１）対象が少なくとも２５歳であり、（２）対象の測定筋量および測定筋機能が同性の健常な２５歳の平均値より２つの標準偏差以上低く、かつ筋量の減少および筋機能の減少を説明する代替症状が特定されていない場合、サルコペニアを有する、または処置を必要とすると特定され得る。好ましくは、サルコペニアの処置を受ける対象は、少なくとも４０歳である。より好ましくは、サルコペニアの処置を受ける対象は、少なくとも５０歳である。もっとも好ましくは、サルコペニアの処置を受ける対象は、少なくとも６０歳である。あるいは、対象は、（１）対象の歩行速度が４ｍコースにわたり１．０ｍ／秒未満であり、（２）対象が、客観的に測定される低い筋量、例えば、身長の二乗に対して四肢の質量が男性対象に関しては７．２３ｋｇ／ｍ２以下であり、または女性対象に関しては５．６７ｋｇ／ｍ２以下など、を有する場合、サルコペニアを有する、または処置を必要とすると特定され得る（Ｆｉｅｌｄｉｎｇ，  Ｒ．Ａ．，ら，“Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ：  ａｎ  ｕｎｄｉａｇｎｏｓｅｄ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ｏｌｄｅｒ  ａｄｕｌｔｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ：ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ，  ｅｔｉｏｌｏｇｙ，ａｎｄ  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｒｅｃｔｏｒｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１２（４），ｐｐ．２４９−２５６（Ｍａｙ  ２０１１）。
【００２０】
「神経変性障害」という用語は、脳を含む中枢神経系において、機能を喪失するおよび／または死んでいくニューロンをもたらす障害を意味する。そのような障害は、ＡＤ、ＰＤ、レビー小体病、ＭＳ、プリオン病（伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）としても知られ、クロイツフェルト・ヤコブ病、変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ウシ海綿状脳症（「狂牛」病）、スクレイピー（ヒツジおよびヤギにおいて）、慢性消耗病（シカおよびヘラジカにおいて）、クールーおよび致死性家族性不眠症を含む）、およびＡＬＳなどの中枢神経系の神経変性障害を含む。
【００２１】
「神経変性タンパク質」は、神経変性障害がある患者において蓄積され、かつ神経変性障害に関連するタンパク質である。例としては、βアミロイドタンパク質プラーク（ＡＤと関連する）、タウタンパク質もつれ（ＡＤと関連する）、変異型スーパーオキシドジスムターゼ１（ＡＬＳと関連する）、プリオンタンパク質凝集体（ＴＳＥと関連する）およびα−シヌクレインタンパク質原線維（ＰＤおよびレビー小体病と関連する）が挙げられる。「神経変性タンパク質」は、神経変性障害の間に蓄積するタンパク質の形態であり、概して変異体の形態または誤って折り畳まれた形態である。
【００２２】
「終末糖化産物」、「ＡＧＥ」、「ＡＧＥ修飾タンパク質またはペプチ」、「糖化最終産物」および「ＡＧＥ抗原」という用語は、さらに再編成し不可逆な架橋を形成するタンパク質側鎖と糖の反応の結果として形成される、修飾タンパク質またはペプチドを指す。このプロセスはシッフ塩基を形成する還元糖とアミノ基の間の可逆反応で始まり、これが進行して、共有結合したアマドリ転位産物を形成する。一旦形成されると、アマドリ産物はさらなる転位を経てＡＧＥを生成する。ＡＧＥ修飾タンパク質およびＡＧＥ修飾タンパク質に対する抗体は、Ｂｕｃａｌａへの米国特許第５，７０２，７０４号（「Ｂｕｃａｌａ」）およびＡｌ−ｂｅｄらへの米国特許第６，３８０，１６５号（「Ａｌ−Ａｂｅｄ」）に記載されている。糖化アルブミンで見つかるＮ−デオキシフルクトシルリジンなどの、ＡＧＥを形成するために必要な再編成を受けなかった糖化タンパク質またはペプチドは、ＡＧＥではない。ＡＧＥは、２−（２−フロイル）−４（５）−（２−フラニル）−１Ｈ−イミダゾール（「ＦＦＩ」）；５−ヒドロキシメチル−１−アルキルピロール−２−カルバルデヒド（「ピラリン」）；非蛍光モデルＡＧＥである１−アルキル−２−ホルミル−３，４−ジグリコシルピロール（「ＡＦＧＰ」）；カルボキシメチルリジン；およびペントシジンなどのＡＧＥ修飾（またはＡＧＥエピトープもしくはＡＧＥ部分と呼ばれる）の存在によって特定され得る。別のＡＧＥであるＡＬｌは、Ａｌ−Ａｂｅｄに記載されている。
【００２３】
「細胞上でＡＧＥ修飾タンパク質に結合する抗体」、「抗ＡＧＥ抗体」または「ＡＧＥ抗体」は、好ましくは抗体の定常部を含むＡＧＥ修飾タンパク質もしくはペプチドに結合する抗体、抗体フラグメントまたは他のタンパク質もしくはペプチドを意味し、ここでＡＧＥ修飾されたタンパク質もしくはペプチドは、細胞の表面、好ましくは哺乳動物細胞、より好ましくはヒト、ネコ、イヌ、ウマ、ラクダ科（例えばラクダもしくはアルパカ）、ウシ、ヒツジ、もしくはヤギの細胞の表面に結合している一般的に見出されるタンパク質もしくはペプチドである。「細胞上のＡＧＥ修飾タンパク質に結合する抗体」、「抗ＡＧＥ抗体」または「ＡＧＥ抗体」は、ＡＧＥ修飾タンパク質もしくはペプチド、および同じ非ＡＧＥ修飾タンパク質もしくはペプチドの両方に同じ特異性および選択性で結合する（すなわち、ＡＧＥ修飾の存在が結合性を増加しない）抗体または他のタンパク質を含まない。アルブミンは細胞の表面上に結合すると一般的に見出されるタンパク質ではないので、ＡＧＥ修飾アルブミンは、細胞上のＡＧＥ修飾タンパク質ではない。「細胞上でＡＧＥ修飾タンパク質に結合する抗体」、「抗ＡＧＥ抗体」または「ＡＧＥ抗体」は、細胞の除去、破壊または死滅を導く抗体を含むだけである。例えば毒素、薬物、または他の化学物質もしくは粒子に結合される抗体も含まれる。好ましくは、抗体はモノクローナル抗体であるが、ポリクローナル抗体も可能である。
【００２４】
「老化細胞」という用語は、不可逆的な増殖停止の状態にありかつｐ１６Ｉｎｋ４ａの活性化または老化関連β−ガラクトシダーゼの発現などの１または複数のバイオマーカーを発現する細胞を意味する。１または複数の老化のバイオマーカーを発現し、ｉｎ  ｖｉｖｏで増殖しないが、特定の条件下のｉｎ  ｖｉｔｒｏで増殖し得る細胞、例えばＡＬＳ患者の筋肉で見つかるいくつかの衛星細胞も含まれる。
【００２５】
「健康寿命を増加させる」という用語は、加齢に関連する表現型を低下させることを意味する。加齢に関連する表現型としては、例えば、サルコペニア、白内障、脂肪組織の喪失および脊柱前弯・後弯症が挙げられる。「変異体」という用語は、明確に同定された配列と異なるヌクレオチド、タンパク質またはアミノ酸の配列を意味し、ここで１または複数のヌクレオチド、タンパク質またはアミノ酸残基が欠失、置換または付加されている。変異体は、天然に起こる対立遺伝子変異体、または天然に起こらない変異体であり得る。同定された配列の変異体は、同定された配列の機能特性の一部もしくは全部を保持し得る。
【００２６】
「パーセント（％）配列同一性」という用語は、最大のパーセント配列同一性を得るように配列を整列させかつ必要に応じてギャップを導入した後の、およびいかなる保存的置換も配列同一性の一部と考えない、参照ポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基の百分率比として定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定することを目的としたアライメントは、一般公開されているコンピューターソフトウェア、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して、種々の方法で達成できる。好ましくは、％配列同一性値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ−２を使用して作成される。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）から一般公開されており、またはソースコードからコンパイルしてもよく、これは米国著作権庁に使用者用書類とともに提出され、米国著作権登録番号第ＴＸＵ５１００８７号として登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、デジタルＵＮＩＸ  Ｖ４．０Ｄを含むＵＮＩＸオペレーティングシステム上での使用のためにコンパイルされなければならない。すべての配列比較パラメータは、ＡＬＩＧＮ−２プログラムによって設定されており、変化しない。
【００２７】
アミノ酸配列比較にＡＬＩＧＮ−２が用いられる状況では、所与のアミノ酸配列Ａの、所与のアミノ酸配列Ｂへの、またはそれとの、またはそれに対する％アミノ酸配列同一性（これはあるいは、所与のアミノ酸配列Ｂへの、またはそれとの、またはそれに対する、一定の％アミノ酸配列同一性を有するもしくは含む所与のアミノ酸配列Ａ、と言い表すこともできる）は、次のように算出される：割合Ｘ／Ｙの１００倍。ここで、Ｘは配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ−２によって、そのプログラムのＡおよびＢのアライメントにおいて完全な一致としてスコアされたアミノ酸残基の数であり、およびＹはＢにおけるアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、Ａ対Ｂの％アミノ酸配列同一性は、Ｂ対Ａの％アミノ酸配列同一性と等しくないことになる。特に他に明示しない限り、本明細書で用いられるすべての％アミノ酸配列同一性値は、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータプログラムを用いて求められる。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】抗体結合実験における反応対時間のグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
細胞老化とサルコペニアとの間の関連性の同定は新しい処置の可能性をもたらす。例えば、抗ＡＧＥ抗体が対象に投与される場合、抗体は特異的にかつ選択的に老化細胞を標的にし、死滅させるか、またはＡＧＥ修飾タンパク質またはペプチドを発現するそのような細胞においてアポトーシスを誘導する。
【００３０】
本発明は、ＡＧＥ修飾タンパク質またはペプチド（ＡＧＥ修飾細胞）を発現する細胞の増強されたクリアランスがサルコペニアを処置するまたは寛解させる際に有益であるという発見を利用する。これは、対象に抗ＡＧＥ抗体を投与することによって達成され得る。
【００３１】
対象に抗ＡＧＥ抗体を投与することは、健康寿命を増加させるためにも用いることができる。健康寿命は、加齢に関連する表現型を減少させることによって増加され得る。抗ＡＧＥ抗体を投与することを用いて、例えば、白内障、脊柱前弯・後弯症または脂肪組織の喪失の発症を防止する、または遅延することができる。
【００３２】
細胞老化と関連する他の疾患または障害も、抗ＡＧＥ抗体で処置または寛解され得る。例えば、抗ＡＧＥ抗体を治療的に用いて、神経変性障害または癌を処置できる。
【００３３】
細胞上でＡＧＥ修飾タンパク質に結合する抗体（「抗ＡＧＥ抗体」または「ＡＧＥ抗体」）は、当技術分野で知られている。例としては、米国特許第５，７０２，７０４号（Ｂｕｃａｌａ）および米国特許第６，３８０，１６５号（Ａｌ−Ｂｅｄ」ら）に記載のものが挙げられる。例としては、ＦＦＩ、ピラリン、ＡＦＧＰ、ＡＬＩ、カルボキシメチルリジン、カルボキシエチルリジンおよびペントシジンなどのＡＧＥ修飾を有する１または複数のＡＧＥ修飾タンパク質に結合する抗体、ならびにそのような抗体の混合物が挙げられる。好ましくは、抗体はカルボキシメチルリジン修飾タンパク質を結合する。好ましくは、抗体は、それが用いられる動物に対し非免疫原性であり、例えばヒト；ネコ、イヌおよびウマを含む伴侶動物；およびラクダ（またはアルパカ）、ウシ（ウシ亜科）、ヒツジ、およびヤギなどの商業的に重要な動物に対し非免疫原性である。より好ましくは、抗体に対する免疫応答を低下させるために、抗体は、動物の抗体として同じ種の定常部を有する、例えば、ヒト化された（ヒトの場合）、ネコ化された（ネコの場合）、イヌ化された（イヌの場合）、ウマ化された（ウマの場合）、ラクダ化された（ラクダもしくはアルパカの場合）、ウシ化された（ウシの場合）、ヒツジ化された（ヒツジの場合）、またはヤギ化された（ヤギの場合）抗体である。最も好ましくは、抗体は、それが用いられる動物の抗体と同一であり（可変領域を除いて）、例えばヒト抗体、ネコ抗体、イヌ抗体、ウマ抗体、ラクダ抗体、ウシ抗体、ヒツジ抗体またはヤギ抗体と同一である。これらの動物についての抗体の定常部および他の部分の詳細は、後述する。好ましくは、抗体はモノクローナル抗体である。
【００３４】
特に好ましい抗ＡＧＥ抗体は、カルボキシメチルリジン修飾を示すタンパク質またはペプチドに結合する抗体である。カルボキシメチルリジン（別名ＣＭＬ、Ｎ（イプシロン）−（カルボキシメチル）リジン、Ｎ（６）−カルボキシメチルリジン、または２−アミノ−６−（カルボキシメチルアミノ）ヘキサン酸）は、酸化ストレスおよび化学糖化の結果としてタンパク質またはペプチドおよび脂質に見られ、および老化と相関していた。ＣＭＬ修飾タンパク質またはペプチドは、種々の細胞上で発現される受容体ＲＡＧＥによって認識される。ＣＭＬは十分に研究されており、ＣＭＬ関連生成物は市販されている。例えば、Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌａｂｓ，Ｉｎｃ．は、ＣＭＬ−ＢＳＡ抗原、ＣＭＬポリクローナル抗体、ＣＭＬ免疫ブロットキット、およびＣＭＬ競合ＥＬＩＳＡキット（ｗｗｗ．ｃｅｌｌｂｉｏｌａｂｓ．ｃｏｍ／ｃｍｌ−ａｓｓａｙｓ）を販売している。特定の好ましい抗体としては、キーホールリンペットヘモシアニンと共役結合されたカルボキシメチルリジンに対して産生された市販のマウス抗糖化最終産物抗体の可変領域、ヒト定常部（またはそれが投与されることになる動物の定常部）を有するように修飾された、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ；カタログ番号ＭＡＢ３２４７）から入手可能なカルボキシメチルリジンモノクローナル抗体（Ｃｌｏｎｅ３１８００３）が挙げられる。市販されている抗体、例えばＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．からのカタログ番号ＭＡＢ３２４７に対応するカルボキシメチルリジン抗体は、診断目的のために意図され、動物またはヒトにおける使用に適さない物質を含有してよい。好ましくは、市販の抗体は、毒素または他の潜在的に有害な物質を除去するために、動物またはヒトにける使用の前に精製されおよび／または分離される。
【００３５】
抗ＡＧＥ抗体は、抗体−抗原複合体からの解離速度、またはｋｄ（ｋｂａｃｋもしくは解離速度とも呼ばれる）が低く、好ましくは多くても９×１０−３、８×１０−３、７×１０−３または６×１０−３（／秒）である。抗ＡＧＥ抗体は、細胞のＡＧＥ修飾タンパク質に対する高い親和性を有し、それは多くても９×１０−６、８×１０−６、７×１０−６、６×１０−６、５×１０−６，４×１０−６または３×１０−６（Ｍ）の低い解離定数ＫＤとして表され得る。好ましくは、抗ＡＧＥ抗体の結合特性は、図１に示す、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ；カタログ番号ＭＡＢ３２４７）から入手可能なカルボキシメチルリジンモノクローナル抗体（Ｃｌｏｎｅ３１８００３）と類似している、それと同様である、またはそれより優れている。
【００３６】
抗ＡＧＥ抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を介してＡＧＥ修飾細胞を破壊できる。ＡＤＣＣは、免疫系のエフェクター細胞がその表層膜抗原が特定の抗体により結合されている標的細胞を活発に溶解する、細胞介在性免疫防御の機序である。ＡＤＣＣは、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、好中球または好酸球によって媒介され得る。エフェクター細胞は、結合された抗体のＦｃ部分に結合する。
【００３７】
抗ＡＧＥ抗体は、ＡＧＥ修飾細胞の破壊を引き起こす薬剤に共役結合され得る。そのような薬剤は、毒素、細胞傷害性薬剤、磁性ナノ粒子、および磁気スピンボルテックスディスクであり得る。
【００３８】
ポア形成毒素（ＰＦＴ）（Ａｒｏｉａｎ  Ｒ．ら，“Ｐｏｒｅ−Ｆｏｒｍｉｎｇ  Ｔｏｘｉｎｓ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｎｏｎ−Ｉｍｍｕｎｅ  Ｄｅｆｅｎｓｅｓ（ＣＮＩＤｓ），”Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１０：５７−６１（２００７）などの、抗ＡＧＥ抗体に共役結合している毒素は、ＡＧＥ修飾細胞を選択的に標的にし除去するために患者に注射されてもよい。抗ＡＧＥ抗体はＡＧＥ修飾細胞を認識し、それに結合する。次いで、毒素は細胞表面でポア形成を引き起こし、続いて浸透圧溶解を介して細胞除去を引き起こす。
【００３９】
抗ＡＧＥ抗体に共役結合された磁性ナノ粒子は、ＡＧＥ修飾細胞を標的にし除去するために患者に注射されてもよい。ＡＧＥ修飾細胞を選択的に除去するために、磁性ナノ粒子は、磁場を適用することによって加熱され得る。
【００４０】
代替として、磁場が適用されるときだけ磁化される磁気スピン渦ディスクを血管をブロックし得る自己凝集を防止するために適用し、磁場が適用されるとスピンし始め、標的細胞の膜破壊を引き起こす。抗ＡＧＥ抗体に共役結合された磁気スピン渦ディスクは、他の細胞を除去することなく、ＡＧＥ修飾細胞型を特異的に標的にする。
【００４１】
抗体は、「Ｙ」字型分子を形成するよう連結したポリペプチドの２つの重鎖と、２つの軽鎖とを一般的に含む。定常部は、抗原を標的にするのに用いられる機序を決定する。「Ｙ」（可変領域）の先端のアミノ酸配列は、異なる抗体の間で変化する。この変化は、結合抗原に対するその特異性を抗体に与える。軽鎖および重鎖の末端を含む可変領域は、超可変領域（ＨＶ、時には相補性決定領域、すなわちＣＤＲと呼ばれることもある）と、フレームワーク（ＦＲ）領域にさらに細区画される。抗体が組換えで調製される場合、２つの異なる抗原に結合する可変領域（すなわち相補性決定領域）を含み、「Ｙ」字の各先端が各抗原に特異的である単一抗体を有することも可能であり、これらは、二重特異性抗体と呼ばれる。
【００４２】
本発明によるヒト化抗ＡＧＥ抗体は、配列番号２２に示されるアミノ酸のヒト定常部配列を有し得る。ヒト化抗ＡＧＥ抗体の重鎖相補性決定領域は、配列番号２３（ＣＤＲ１Ｈ）、配列番号２４（ＣＤＲ２Ｈ）および配列番号２５（ＣＤＲ３Ｈ）に示される１または複数のタンパク質配列を有し得る。ヒト化抗ＡＧＥ抗体の軽鎖相補性決定領域は、配列番号２６（ＣＤＲ１Ｌ）、配列番号２７（ＣＤＲ２Ｌ）および配列番号２８（ＣＤＲ３Ｌ）に示される１または複数のタンパク質配列を有し得る。
【００４３】
ヒト（ホモサピエンス）抗体免疫グロブリンＧ１の重鎖は、配列番号１のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。重鎖の可変ドメインは、配列番号２のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。重鎖（配列番号２）の可変ドメインの相補性決定領域は、配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３に示される。ヒト（ホモサピエンスヒト）抗体免疫グロブリンＧ１のκ軽鎖は、配列番号３のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。κ軽鎖の可変ドメインは、配列番号４のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。任意選択で、配列番号４の１２８位のアルギニン（ＡｒｇまたはＲ）残基は、省略されてもよい。軽鎖（配列番号４）の可変ドメインの相補性決定領域は、配列番号４４、配列番号４５および配列番号４６に示される。可変領域は、コドン最適化され、合成されおよびヒト免疫グロブリンＧ１定常部を含む発現ベクター中にクローン化されてよい。
加えて、可変領域は非ヒト抗体のヒト化において用いられてよい。
【００４４】
抗体重鎖は、マウス抗ＡＧＥ免疫グロブリンＧ２ｂ重鎖である配列番号１２のＤＮＡ配列によってコードされ得る。配列番号１２によってコードされるマウス抗ＡＧＥ免疫グロブリンＧ２ｂ重鎖のタンパク質配列は、配列番号１６に示される。マウス抗体の可変領域は配列番号２０に示され、これは配列番号１６の２５〜１４２位に対応する。抗体重鎖はあるいは、キメラ抗ＡＧＥヒト免疫グロブリンＧ１重鎖である配列番号１３のＤＮＡ配列によって、コードされてよい。配列番号１３によってコードされるキメラ抗ＡＧＥヒト免疫グロブリンＧ１重鎖のタンパク質配列は、配列番号１７に示される。キメラ抗ＡＧＥヒト免疫グロブリンは、２５〜１４２位に配列番号２０のマウス可変領域を含む。抗体軽鎖は、マウス抗ＡＧＥκ軽鎖である配列番号１４のＤＮＡ配列によってコードされてよい。
配列番号１４によってコードされるマウス抗ＡＧＥκ軽鎖のタンパク質配列は、配列番号１８に示される。マウス抗体の可変領域は配列番号２１に示され、配列番号１８の２１〜１３２位に対応する。抗体軽鎖はあるいは、キメラ抗ＡＧＥヒトκ軽鎖である、配列番号１５のＤＮＡ配列によってコードされてよい。配列番号１５によってコードされるキメラ抗ＡＧＥヒトκ軽鎖のタンパク質配列は、配列番号１９に示される。キメラ抗ＡＧＥヒト免疫グロブリンは、２１〜１３２位に配列番号２１のマウス可変領域を含む。
【００４５】
本発明によるヒト化抗ＡＧＥ抗体は、１または複数のヒト化重鎖またはヒト化軽鎖を有し得る、または含み得る。ヒト化重鎖は、配列番号３０、３２または３４のＤＮＡ配列によってコードされてよい。配列番号３０、３２および３４によってコードされるヒト化重鎖のタンパク質配列は、それぞれ、配列番号２９、３１および３３に示される。ヒト化軽鎖は、配列番号３６、３８または４０のＤＮＡ配列によってコードされてよい。配列番号３６、３８および４０によってコードされるヒト化軽鎖のタンパク質配列は、それぞれ、配列番号３５、３７および３９に示される。好ましくは、ヒト化抗ＡＧＥ抗体はヒト配列の量を最大にし、一方で最初の抗体特異性を保持する。配列版後２９、３１および３３から選択されたタンパク質配列を有する重鎖と、配列番号３５、３７および３９から選択されたタンパク質配列を有する軽鎖とを含有する完全ヒト抗体を構築できる。
【００４６】
非ヒト種由来の抗体のタンパク質配列を修飾して、配列番号２に示す配列を有する重鎖、または配列番号４に示す配列を有するκ軽鎖の可変ドメインを含んでよい。非ヒト種は、家ネコもしくは飼いイヌなどの伴侶動物、またはウシ、ウマもしくはラクダなどの家畜であってよい。好ましくは、非ヒト種は、マウスではない。ウマ（Ｅｑｕｕｓ  ｃａｂａｌｌｕｓ）抗体免疫グロブリンγ４の重鎖は、配列番号５（ＥＭＢＬ／ＧｅｎＢａｎｋ受入れ番号ＡＹ４４５５１８）のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。ウマ（Ｅｑｕｕｓ  ｃａｂａｌｌｕｓ）抗体免疫グロブリンδの重鎖は、配列番号６（ＥＭＢＬ／ＧｅｎＢａｎｋ受入れ番号ＡＹ６３１９４２）のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。イヌ（Ｃａｎｉｓ  ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）抗体免疫グロブリンＡの重鎖は、配列番号７（ＧｅｎＢａｎｋ受入れ番号Ｌ３６８７１）のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。イヌ（Ｃａｎｉｓ  ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）抗体免疫グロブリンＥの重鎖は、配列番号８（ＧｅｎＢａｎｋ受入れ番号Ｌ３６８７２）のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。ネコ（Ｆｅｌｉｓ  ｃａｔｕｓ）抗体免疫グロブリンＧ２の重鎖は、配列番号９（ＤＤＢＪ／ＥＭＢＬ／ＧｅｎＢａｎｋ受入れ番号ＫＦ８１１１７５）のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。
【００４７】
ラクダ科の動物、例えばラクダ（Ｃａｍｅｌｕｓ  ｄｒｏｍｅｄａｒｉｕｓおよびＣａｍｅｌｕｓ  ｂａｃｔｒｉａｎｕｓ）、ラマ（Ｌａｍａ  ｇｌａｍａ、Ｌａｍａ  ｐａｃｏｓおよびＬａｍａ  ｖｉｃｕｇｎａ）、アルパカ（Ｖｉｃｕｇｎａ  ｐａｃｏｓ）およびグアナコ（Ｌａｍａ  ｇｕａｎｉｃｏｅ）は、他の哺乳動物で見つからない独特の抗体を有する。重鎖および軽鎖四量体から構成される従来の免疫グロブリンＧ抗体に加えて、ラクダ科動物はまた、軽鎖を含まず重鎖二量体として存在する重鎖免疫グロブリンＧ抗体を有する。これらの抗体は重鎖抗体、ＨＣ抗体、単一ドメイン抗体またはｓｄ抗体として知られており、ラクダ科の重鎖抗体の可変ドメインはＶＨＨとして知られている。ラクダ科の重鎖抗体には、重鎖ＣＨ１ドメインがなく、他の種で見られないヒンジ部がある。ヒトコブラクダ（Ｃａｍｅｌｕｓ  ｄｒｏｍｅｄａｒｉｕｓ）単一ドメイン抗体の可変領域は、配列番号１０（ＧｅｎＢａｎｋ受入れ番号ＡＪ２４５１４８）のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。ヒトコブラクダ（Ｃａｍｅｌｕｓ  ｄｒｏｍｅｄａｒｉｕｓ）四量体免疫グロブリンの重鎖の可変領域は、配列番号１１（ＧｅｎＢａｎｋ受入れ番号ＡＪ２４５１８４）のタンパク質配列を有し得る、または含み得る。
【００４８】
ラクダ科の動物に加えて、重鎖抗体は、軟骨魚類、例えばサメ、ガンギエイおよびアカエイでも見られる。この型の抗体は免疫グロブリン新抗原受容体またはＩｇＮＡＲとして知られており、ＩｇＮＡＲの可変ドメインはＶＮＡＲとして知られている。ＩｇＮＡＲは、各々１つの可変ドメインと５つの定常ドメインとから構成される２つの同一の重鎖二量体として存在する。ラクダ科動物のように、軽鎖はない。
【００４９】
さらなる非ヒト種のタンパク質配列は、オンラインデータベース、例えばＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ），ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ），ｔｈｅ  ＤＮＡ  Ｄａｔａｂａｎｋ  ｏｆ  Ｊａｐａｎ（ｄｄｂｊ．ｎｉｇ．ａｃ．ｊｐ／ａｒｓａ）またはｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）で容易に見出すことができる。
【００５０】
抗ＡＧＥ抗体またはその変異体は、配列番号２または配列番号２０のアミノ酸と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有し、その翻訳後修飾を含む重鎖可変領域を含み得る。少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する可変領域は、参照配列と比較して置換（例えば保存的置換）、挿入、または欠失を含み得るが、その配列を含む抗ＡＧＥ抗体はＡＧＥに結合する能力を保持する。置換、挿入、または欠失は、可変領域外の領域に起こることもある。
【００５１】
抗ＡＧＥ抗体またはその変異体は、配列番号４または配列番号２１のアミノ酸と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有し、その翻訳後修飾を含む軽鎖可変領域を含み得る。少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する可変領域は、参照配列と比較して置換（例えば保存的置換）、挿入、または欠失を含み得るが、その配列を含む抗ＡＧＥ抗体はＡＧＥに結合する能力を保持する。置換、挿入、または欠失は、可変領域外の領域に起こることもある。
【００５２】
あるいは、抗体は、キーホールリンペットヘモシアニン（ＣＭＬ−ＫＬＨ）と共役結合されたカルボキシメチルリジンに対して産生された市販のマウス抗糖化最終産物抗体の相補性決定領域を有してもよく、カルボキシメチルリジンモノクローナル抗体（Ｃｌｏｎｅ３１８００３）はＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ；カタログ番号ＭＡＢ３２４７）から入手可能である。
【００５３】
抗体は、対象の免疫系による標的細胞の破壊を可能にする定常部を有し得る、または含み得る。
【００５４】
ＡＧＥ修飾タンパク質の複数のＡＧＥ型に結合する抗体の混合物も使用できる。
【００５５】
２つの異なるエピトープを対象とする抗ＡＧＥ抗体である二重特異性抗体も使用できる。そのような抗体は、そのうちの１つの抗ＡＧＥ抗体からの可変領域（または相補性決定領域）、および別の抗体からの可変領域（または相補性決定領域）を有する。
【００５６】
抗体フラグメントが、全抗体の代わりに使用されることもある。例えば、免疫グロブリンＧは、酵素による消化によってより小さいフラグメントに分解され得る。パパイン消化は、重鎖間ジスルフィド架橋のＮ末端側を切断して、Ｆａｂフラグメントを生成する。Ｆａｂフラグメントは、軽鎖と、重鎖の２つのＮ末端ドメイン（Ｆｄフラグメントとしても知られる）のうちの１つとを含む。ペプシン消化は、重鎖間ジスルフィド架橋のＣ末端側を切断して、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを生成する。Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、両軽鎖と、ジスルフィド架橋によって連結される２つのＮ末端ドメインとを含む。ペプシン消化はＦｖフラグメント（フラグメント可変）およびＦｃフラグメント（結晶化可能フラグメント）を形成することもできる。Ｆｖフラグメントは、２つのＮ末端可変ドメインを含む。Ｆｃフラグメントは、細胞上で免疫グロブリン受容体と相互作用し補体カスケードの最初の要素と相互作用するドメインを含む。ペプシンは、重鎖の第３の定常ドメイン（ＣＨ３）の前で免疫グロブリンＧを切断して大きいフラグメントＦ（ａｂｃ）と小さいフラグメントｐＦｃ’を生成することもある。抗体フラグメントはあるいは、組換えで生成され得る。
【００５７】
さらなる抗体を所望する場合、抗体は周知の方法を用いて生成され得る。例えば、ポリクローナル抗体（ｐＡｂ）は免疫原と、必要に応じてアジュバントとを１回または複数回注射することによって、哺乳動物宿主中で産生される。一般的に、免疫原（およびアジュバント）は皮下または腹腔内注射によって哺乳動物に注射される。免疫原は、細胞のＡＧＥ修飾タンパク質、例えばＡＧＥ抗トロンビンＩＩＩ、ＡＧＥカルモジュリン、ＡＧＥインスリン、ＡＧＥセルロプラスミン、ＡＧＥコラーゲン、ＡＧＥカテプシンＢ、ＡＧＥアルブミン、ＡＧＥクリスタリン、ＡＧＥプラスミノーゲンアクチベーター、ＡＧＥ内皮細胞膜タンパク質、ＡＧＥアルデヒドレダクターゼ、ＡＧＥトランスフェリン、ＡＧＥフィブリン、ＡＧＥ−銅／亜鉛ＳＯＤ、ＡＧＥアポＢ、ＡＧＥフィブロネクチン、ＡＧＥ膵リボース、ＡＧＥアポＡ−ＩおよびＩＩ、ＡＧＥヘモグロビン、ＡＧＥ−Ｎａ＋／Ｋ＋−ＡＴＰアーゼ、ＡＧＥプラスミノーゲン、ＡＧＥミエリン、ＡＧＥリゾチーム、ＡＧＥ免疫グロブリン、ＡＧＥ赤血球グルコース輸送タンパク質、ＡＧＥ−β−Ｎ−アセチルヘキソミナーゼ、ＡＧＥアポＥ、ＡＧＥ赤血球細胞膜タンパク質、ＡＧＥアルドースレダクターゼ、ＡＧＥフェリチン、ＡＧＥ赤血球スペクトリン、ＡＧＥアルコールデヒドロゲナーゼ、ＡＧＥハプトグロビン、ＡＧＥチューブリン、ＡＧＥ−甲状腺ホルモン、ＡＧＥフィブリノーゲン、ＡＧＥ−β２−ミクログロブリン、ＡＧＥソルビトールデヒドロゲナーゼ、ＡＧＥ−α１−アンチトリプシン、ＡＧＥ炭酸デヒドラターゼ、ＡＧＥリポヌクレアーゼ、ＡＧＥ低密度リポタンパク質、ＡＧＥヘキソキナーゼ、ＡＧＥアポＣ−Ｉ、ＡＧＥリポヌクレアーゼ、リポヌクレアーゼ、ＡＧＥヒトヘモグロビンなどのＡＧＥヘモグロビン、ＡＧＥ−ウシ血清アルブミン（ＡＧＥ−ＢＳＡ）などのＡＧＥ−アルブミン、ＡＧＥ低密度リポタンパク質（ＡＧＥ−ＬＤＬ）およびＡＧＥコラーゲンＩＶであり得る。ＡＧＥ修飾細胞、例えばＡＧＥ修飾赤血球、全細胞、溶解細胞または部分的消化細胞もＡＧＥ抗原として使用できる。アジュバントの例としては、フロイント完全アジュバント、モノホスホリルリピドＡ合成トレハロースジコリノミコラート、水酸化アルミニウム（ミョウバン）、熱ショックタンパク質ＨＳＰ７０またはＨＳＰ９６、一リン酸化リピドＡ含有スクアレンエマルジョン、α２−マクログロブリン、ならびに油エマルジョン、プルロニックポリオール、ポリアニオンおよびジニトロフェノールを含む界面活性物質が挙げられる。免疫応答を向上させるために、免疫原は、例えばキーホールリンペットヘモシニアン、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、コレラ毒素、不安定性エンテロトキシン、シリカ粒子またはダイズトリプシンインヒビターなどの、宿主において免疫原性であるポリペプチドに共役結合されてよい。あるいは、ポリクローナル抗体はニワトリ中で作成されてよく、ＩｇＹ分子を産生する。
【００５８】
モノクローナル抗体（ｍＡｂ）もまた、宿主または宿主からのリンパ球を免疫化し、ｍＡｂ分泌（または分泌する可能性がある）リンパ球を収集し、それらのリンパ球を不死化細胞（例えば、骨髄腫細胞）に融合し、次いで所望のｍＡｂを分泌する細胞を選択することによって作製できる。他の手法、例えばＥＢＶハイブリドーマ手法を用いてもよい。抗体の可変ドメインをコードする遺伝子をヒト（または他の動物）免疫グロブリンの定常ドメインの遺伝子にスプライスすることによるキメラ抗体の生成手法は、アミノ酸レベルで実質的にヒトである（ヒト化）または実質的に別の動物（例えば、ネコ、イヌ、ウマ、ラクダもしくはアルパカ、ウシ、ヒツジ、またはヤギ）に動物「化され」ている「キメラ抗体」をもたらす。必要に応じて、モノクローナル抗体は、従来の方法、例えばプロテインＡ−セファロース、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動法、透析、硫酸アンモニウム沈殿法または親和性クロマトグラフィーによって、培地または腹水から精製されてもよい。さらに、ヒトモノクローナル抗体は、第３のコピーＩｇＧヒトトランス遺伝子座および発現停止された内在性マウスＩｇ遺伝子座位を含有する遺伝子導入マウスの免疫化によって、またはヒト遺伝子導入マウスを用いることによって生成できる。ヒト化モノクローナル抗体およびそのフラグメントの産生は、ファージディスプレイ技術を用いて生成することもできる。
【００５９】
「薬学的に許容される担体」としては、医薬品投与に適合するありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌剤と抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが挙げられる。そのような担体または希釈剤の好ましい例としては、水、生理食塩水、リンガー溶液およびデキストロース溶液が挙げられる。補助的な活性化合物も、組成物中に取り入れてよい。非経口投与のために用いられる溶液および懸濁液としては、注射用水、生理食塩水、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒などの無菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの張度調整剤を挙げることができる。ｐＨは、塩化水素または水酸化ナトリウムなどの酸または塩基で調整できる。非経口製剤は、ガラス製またはプラスチック製のアンプル、使い捨て注射器または多数回投与バイアル中に封入できる。
【００６０】
注射に好適な医薬組成物としては、無菌注射用液剤または分散液の即時調製用の無菌水溶液または無菌分散液が挙げられる。種々の賦形剤は、注射に好適な抗体の医薬組成物に組み入れることができる。静脈内投与の場合、好適な担体としては生理食塩水、静菌水、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ  ＥＬ（登録商標）（ＢＡＳＦ；Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，ＮＪ）またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。すべての場合において、組成物は無菌でなければならず、シリンジを使用して投与されるように、液体でなければならない。そのような組成物は製造および貯蔵の間、安定でなければならず、細菌および真菌などの微生物からの汚染に対して保護されなくてはならない。種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸およびチメロサールは、微生物汚染を含み得る。糖、多価アルコール、例えばマンニトール、ソルビトール、および塩化ナトリウムなどの等張剤が、組成物に含まれてよい。吸収を遅らせることができる組成物としては、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの薬剤が挙げられる。無菌注射用液剤は、必要に応じ成分の１つまたは成分の組み合わせと共に適切な溶媒中の必要量で、抗体、および任意選択で他の治療効果のある構成成分を組み込み、続いて無菌化によって調製できる。無菌注射用液剤の調製のための方法は、真空乾燥および凍結乾燥して固体を得ることを含む。
【００６１】
吸入投与のために、抗体は、好適な噴霧剤、例えば、二酸化炭素などのガスを含む噴霧器または圧力容器からのエアゾールスプレーとして送達されてよい。抗体は、例えば、ｉＳＰＥＲＳＥ（商標）吸入薬送達プラットフォーム（ＰＵＬＭＡＴＲＩＸ，  Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ，  Ｍａｓｓ．）を使用して、乾燥粉末として吸入によって送達されてもよい。吸入で投与される場合、ニワトリ抗体（ＩｇＹ）である抗ＡＧＥ抗体の使用は、ヒトを含む種々の動物において非免疫原性であり得る。
【００６２】
各型の抗体の適切な投与量レベルは、一般に約０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ患者体重である。好ましくは、投与量レベルは約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇであろう。好適な投与量レベルは、約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ、または約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。この範囲内で、投与量は０．０５〜０．５、０．５〜５または５〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。各型の抗体は１日当たり１〜４回、例えば１日１回または２回の投与計画で投与されてよいが、抗体は一般的にｉｎ  ｖｉｖｏで長い半減期を有する。したがって、各型の抗体は、一日１回、１週間に１回、２週間もしくは３週間に１回、１ヵ月に１回、または６０日〜９０日ごとに１回投与されてよい。
【００６３】
抗ＡＧＥ抗体の投与を受ける対象は、抗ＡＧＥ抗体がサルコペニアを処置するのに効果的であったかどうかを決定するために、経時的に筋量の変化を測定することによって検査されてもよい。例えば、対象におけるベースライン筋量が測定され、続いて抗ＡＧＥ抗体の投与を行ってよい。処置の有効性は、対象における筋量を定期的に測定し以降の測定値をベースライン測定値と比較することによって決定されてよい。対象が以降の測定値間でまたは経時的に筋量の喪失を示さない場合、サルコペニアの処置が効果的であったとみなしてよい。あるいは、脂肪または筋組織中の濃度および／または老化細胞の数もモニターされてもよい。望ましい治療結果が達成されるまで、抗体の投与および以降の検査を繰り返してよい。
【００６４】
単位剤形を作成して、投与および投与量の均一性を容易にしてもよい。単位剤形は、処置を受ける対象のための単一投与量として適している物理的に別々の単位を指し、必要とされる医薬担体と共に１または複数の型の抗体の治療有効量を含有する。好ましくは、単位剤形は密閉容器中にあり、無菌である。
【００６５】
細胞老化と関連するサルコペニアまたは他の疾患または障害を発症し得る任意の哺乳動物が本明細書に記載の方法によって処置されてよい。ヒトは、処置のための好ましい哺乳動物である。処置されてよい他の哺乳動物としては、マウス、ラット、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウマおよびイヌまたはネコなどの伴侶動物が挙げられる。処置を必要とする対象は、例えば、糖尿病（１型および２型の両方）などのＡＧＥレベルの上昇をもたらすことが知られている疾患または障害の診断によって、または例えば、アテローム動脈硬化症、炎症、網膜症、腎症、脳卒中、内皮細胞機能障害、神経変性障害または癌などのＡＧＥに関連した病状の存在によって特定できる。加えて、対象は、年齢に基づき処置について特定され得る。例えば、７５歳を超えるヒトはサルコペニアについて処置されるが、一方３０歳未満のヒトはサルコペニアについての処置を必要とするとは特定されない可能性がある。あるいは、上で特定された哺乳動物または対象のいずれかは、サルコペニアの処置を必要とする患者集団から除外されてもよい。
【００６６】
対象は、（１）対象が少なくとも２５歳であり、（２）対象の測定筋量および測定筋機能が同性の健常な２５歳の平均値より２つの標準偏差以上低く、ならびに筋量の減少および筋機能の減少を説明する代替症状が特定されていない場合、サルコペニアを有する、または処置を必要とすると、特定され得る。好ましくは、サルコペニアの処置を受ける対象は、少なくとも４０歳である。より好ましくは、サルコペニアの処置を受ける対象は、少なくとも５０歳である。もっとも好ましくは、サルコペニアの処置を受ける対象は、少なくとも６０歳である。あるいは、対象は、（１）対象の歩行速度が４ｍコースにわたって１．０ｍ／秒未満であり、（２）対象が、客観的に測定される低い筋量、例えば身長の二乗に対して四肢の質量が男性対象に関しては７．２３ｋｇ／ｍ２以下であり、または女性対象に関しては５．６７ｋｇ／ｍ２以下など、を有する場合、サルコペニアを有する、または処置を必要とすると特定され得る。
【００６７】
中枢神経系神経変性障害の場合、抗ＡＧＥ抗体を含む組成物を中枢神経系中へ直接投与することが好ましいこともある。そのような投与の例としては、脊髄鞘内投与；脳の脳室系への投与（脳室内投与）、例えばカテーテルもしくは永久シャンント、または脳室フィステル形成術の間に配置され得る他の投与装置を介する投与（例えば、Ｔａｋａｍｉ，  Ａ．ら、“Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｌｙｍｐｈｏｍａ  ｗｉｔｈ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｂｙ  ｉｎｔｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ−ｓｅｒｕｍ−ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ  ｒｉｔｕｘｉｍａｂ”，Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．Ｖｏｌ．９７，ｐｐ．  ８０−８３（Ｊａｎｕａｒｙ  ２００６）を含み；および対流強化送達（ＣＥＤ）によって投与される（例えば、Ｃｈｅｎ，  Ｋ．Ｓ．，５ら，“ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ  ＡＮＴＩＢＯＤＹ  ＴＨＥＲＡＰＹ  ＦＯＲ  ＭＡＬＩＧＮＡＮＴ  ＧＬＩＯＭＡ”  ｃｈａｐｔｅｒ  １０  ｏｆ  Ｇｌｉｏｍａ：Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，ｐｐ．１３２−１４１（編．Ｒ．  Ｙａｍａｎａｋａ；Ｌａｎｄｅｓ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ＋Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｍｅｄｉａ，２０１２）を参照されたい）。ＡＧＥ抗体の細胞死滅特性を強化するために、すべてのそのような中枢神経系投与は、血清栄養補助剤（例えば自己血清）の投与を任意選択で含んでよく、血清栄養補助剤の投与は、ＡＧＥ抗体の投与の前、同時、または後であってよい。任意選択で、本明細書に記載のＡＧＥ抗体を含む組成物のいずれかは、血清栄養補助剤（例えば自己血清栄養補助剤）をさらに含んでよい。血清栄養補助剤の代わりに、または血清栄養補助剤に加えて、自己免疫系細胞またはドナーからの免疫系細胞のいずれかの、精製された免疫系細胞を用いてもよく、そのような細胞の例としては、ナチュラルキラー細胞が挙げられる。患者またはドナーのナチュラルキラー細胞に加えて、またはその代わりに、抗体に直接結合するように操作された、またはＡＧＥ抗原（カルボキシメシルリジンなど）に直接結合するように操作された、ＮＡＮＴＫＷＥＳＴ（登録商標）などの人工のナチュラルキラー細胞（ｗｗｗ．ｎａｎｔｋｗｅｓｔ．ｃｏｍを参照された）。
【００６８】
癌の場合、転移性癌を発症し得る哺乳動物が、本明細書に記載の方法によって処置され得る。ヒトは、処置のための好ましい哺乳動物である。処置され得る他の哺乳動物としては、マウス、ラット、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウマおよびイヌまたはネコなどの伴侶動物が挙げられる。処置を必要とする対象は、癌の診断によって同定され得る。特に転移の対象となる癌としては、肺癌、黒色腫、結腸癌、腎細胞癌、前立腺癌、子宮頸癌、膀胱癌、直腸癌、食道癌、肝癌、口腔と喉頭がん、多発性骨髄腫、卵巣癌、および胃癌が挙げられる。処置は、転移性癌を経験している患者の処置であり得る。処置は、癌を有する患者にも実施できるが、転移を防止するために、いずれかの特定される転移より前に実施する。抗ＡＧＥ抗体の投与を受ける対象は、抗ＡＧＥ抗体が癌の処置に効果的であったかどうかを決定するために、体の異なる部分、特にリンパ節中の癌の拡散について患者を検査することによって、試験されてもよい。望ましい治療結果が達成されるまで、抗体の投与および以降の試験を繰り返すことができる。
【００６９】
抗ＡＧＥ抗体は、免疫パニングおよび免疫吸着法などの細胞の精製プロセスで使用してもよい。精製プロセスは、望ましい細胞または不必要な細胞を組織培養物、細胞培養物または血液から分離する際に役立つ。細胞精製は、骨髄移植などの移植、または輸血などの輸液で用いることができる。細胞精製は、悪性細胞を除去し有益な幹細胞、例えばＣＤ３４タンパク質（ＣＤ３４＋細胞）を発現する造血細胞を濃縮するために、化学療法の間の自家幹細胞移植に特に役立つ。抗ＡＧＥ抗体を用いる免疫パニングまたは免疫吸着法は、組織培養物、細胞培養物または血液試料から老化細胞などの部分的に機能する細胞もしくは非機能細胞を分離できる。例えば、免疫パニングプロセスは、細胞培養プレートなどの表面に抗ＡＧＥ抗体を固定することを含み得る。組織培養物または細胞培養物が次いで表面に適用され得る。組織培養物または細胞培養物中に存在するどのような老化細胞も抗ＡＧＥ抗体に結合し、老化細胞を含まない精製された組織培養物または細胞培養物を残す。同様に、免疫吸着プロセスは、細胞培養物中の抗ＡＧＥ抗体を老化細胞に結合させることを含み得る。細胞は次いで、抗ＡＧＥ標識老化細胞に結合するタンパク質で被覆されているビーズを充填したカラムを通過させられる。結合しないでカラムを通過する細胞は、完全に機能的な細胞などの、ＡＧＥを発現しない細胞である。免疫吸着法プロセスは、ＣＥＰＲＡＴＥ  ＳＣ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＣｅｌｌＰｒｏ，  Ｉｎｃ．，Ｂｏｔｈｅｌｌ，ＷＡ）または類似の装置で行なわれ得る。
【００７０】
配列番号１に対応する１文字アミノ酸配列を以下に示す：
【化１】
2018535953.tif 000003
【００７１】
上記アミノ酸配列の１６〜１３３位は配列番号２に対応する。上記アミノ酸配列の４６〜５０位は、配列番号４１に対応する。上記アミノ酸配列の６５〜８１位は、配列番号４２に対応する。上記アミノ酸配列の１１４〜１２２位は、配列番号４３に対応する。
【００７２】
配列番号３に対応する１文字アミノ酸配列を以下に示す。
【化２】
2018535953.tif 000004
【００７３】
上記アミノ酸配列の１６〜１２８位は、配列番号４に対応する。任意選択で、配列番号４の１２８位のアルギニン（ＡｒｇまたはＲ）は省略してもよい。上記アミノ酸配列の３９〜５４位は、配列番号４４に対応する。上記アミノ酸配列の７０〜７６位は、配列番号４５に対応する。上記アミノ酸配列の１０９〜１１７位は、配列番号４６に対応する。
【００７４】
配列番号１２に対応するＤＮＡ配列を以下に示す。
ATGGACCCCAAGGGCAGCCTGAGCTGGAGAATCCTGCTGTTCCTGAGCCTGGCCTTCGAGCTGAGCTACGGCCAGGTGCAGCTGCTGCAGCCAGGTGCCGAGCTCGTGAAACCTGGCGCCTCTGTGAAGCTGGCCTGCAAGGCTTCCGGCTACCTGTTCACCACCTACTGGATGCACTGGCTGAAGCAGAGGCCAGGCCAGGGCCTGGAATGGATCGGCGAGATCTCCCCCACCAACGGCAGAGCCTACTACAACGCCCGGTTCAAGTCCGAGGCCACCCTGACCGTGGACAAGTCCTCCAACACCGCCTACATGCAGCTGTCCTCCCTGACCTCTGAGGCCTCCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGCTTACGGCAACTACGAGTTCGCCTACTGGGGCCAGGGCACCCTCGTGACAGTGTCTGTGGCTAAGACCACCCCTCCCTCCGTGTACCCTCTGGCTCCTGGCTGTGGCGACACCACCGGATCCTCTGTGACCCTGGGCTGCCTCGTGAAGGGCTACTTCCCTGAGTCCGTGACCGTGACCTGGAACTCCGGCTCCCTGTCCTCCTCCGTGCACACCTTTCCAGCCCTGCTGCAGTCCGGCCTGTACACCATGTCCTCCAGCGTGACAGTGCCCTCCTCCACCTGGCCTTCCCAGACCGTGACATGCTCTGTGGCCCACCCTGCCTCTTCCACCACCGTGGACAAGAAGCTGGAACCCTCCGGCCCCATCTCCACCATCAACCCTTGCCCTCCCTGCAAAGAATGCCACAAGTGCCCTGCCCCCAACCTGGAAGGCGGCCCTTCCGTGTTCATCTTCCCACCCAACATCAAGGACGTGCTGATGATCTCCCTGACCCCCAAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCGAGGACGACCCTGACGTGCAGATCAGTTGGTTCGTGAACAACGTGGAAGTGCACACCGCCCAGACCCAGACACACAGAGAGGACTACAACAGCACCATCAGAGTGGTGTCTACCCTGCCCATCCAGCACCAGGACTGGATGTCCGGCAAAGAATTCAAGTGCAAAGTGAACAACAAGGACCTGCCCAGCCCCATCGAGCGGACCATCTCCAAGATCAAGGGCCTCGTGCGGGCTCCCCAGGTGTACATTCTGCCTCCACCAGCCGAGCAGCTGTCCCGGAAGGATGTGTCTCTGACATGTCTGGTCGTGGGCTTCAACCCCGGCGACATCTCCGTGGAATGGACCTCCAACGGCCACACCGAGGAAAACTACAAGGACACCGCCCCTGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTACTTCATCTACTCCAAGCTGAACATGAAGACCTCCAAGTGGGAAAAGACCGACTCCTTCTCCTGCAACGTGCGGCACGAGGGCCTGAAGAACTACTACCTGAAGAAAACCATCTCCCGGTCCCCCGGCTAG
【００７５】
配列番号１３に対応するＤＮＡ配列を以下に示す。
ATGGACCCCAAGGGCAGCCTGAGCTGGAGAATCCTGCTGTTCCTGAGCCTGGCCTTCGAGCTGAGCTACGGCCAGGTGCAGCTGCTGCAGCCAGGTGCCGAGCTCGTGAAACCTGGCGCCTCTGTGAAGCTGGCCTGCAAGGCTTCCGGCTACCTGTTCACCACCTACTGGATGCACTGGCTGAAGCAGAGGCCAGGCCAGGGCCTGGAATGGATCGGCGAGATCTCCCCCACCAACGGCAGAGCCTACTACAACGCCCGGTTCAAGTCCGAGGCCACCCTGACCGTGGACAAGTCCTCCAACACCGCCTACATGCAGCTGTCCTCCCTGACCTCTGAGGCCTCCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGCTTACGGCAACTACGAGTTCGCCTACTGGGGCCAGGGCACCCTCGTGACAGTGTCTGTGGCTAGCACCAAGGGCCCCAGCGTGTTCCCTCTGGCCCCCAGCAGCAAGAGCACCAGCGGCGGAACCGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGCGCTCTGACCAGCGGAGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACTCCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAGCCTAAGAGCTGCGACAAGACCCACACCTGCCCTCCCTGCCCCGCCCCCGAGCTGCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCTCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGCACCCCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAGGACCCCGAGGTGAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTCGGGAGGAGCAGTACAACTCCACCTACCGCGTGGTGAGCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTGAGCAACAAGGCCCTGCCCGCTCCCATCGAGAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGGGAGCCTCAGGTGTACACCCTGCCCCCCAGCCGCGACGAGCTGACCAAGAACCAGGTGAGCCTGACCTGCCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCTCCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGAGCCCCGGATAG
【００７６】
配列番号１４に対応するＤＮＡ配列を以下に示す。
ATGGAGACCGACACCCTGCTGCTCTGGGTGCTGCTGCTCTGGGTGCCCGGCTCCACCGGAGACGTCGTGATGACCCAGACCCCTCTGTCCCTGCCTGTGTCTCTGGGCGACCAGGCCTCCATCTCCTGCCGGTCTAGACAGTCCCTCGTGAACTCCAACGGCAACACCTTCCTGCAGTGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCCAAGCTGCTGATCTACAAGGTGTCCCTGCGGTTCTCCGGCGTGCCCGACAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGAAGATCTCCCGGGTGGAAGCCGAGGACCTGGGCCTGTACTTCTGCAGCCAGTCCACCCACGTGCCCCCTACATTTGGCGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAACGGGCAGATGCTGCACCAACTGTATCCATCTTCCCACCATCCAGTGAGCAGTTAACATCTGGAGGTGCCTCAGTCGTGTGCTTCTTGAACAACTTCTACCCCAAAGACATCAATGTCAAGTGGAAGATTGATGGCAGTGAACGACAAAATGGCGTCCTGAACAGTTGGACTGATCAGGACAGCAAAGACAGCACCTACAGCATGAGCAGCACCCTCACGTTGACCAAGGACGAGTATGAACGACATAACAGCTATACCTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAAGAGCTTCAACAGGAATGAGTGTTGA
【００７７】
配列番号１５に対応するＤＮＡ配列を以下に示す。
ATGGAGACCGACACCCTGCTGCTCTGGGTGCTGCTGCTCTGGGTGCCCGGCTCCACCGGAGACGTCGTGATGACCCAGACCCCTCTGTCCCTGCCTGTGTCTCTGGGCGACCAGGCCTCCATCTCCTGCCGGTCTAGACAGTCCCTCGTGAACTCCAACGGCAACACCTTCCTGCAGTGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCCAAGCTGCTGATCTACAAGGTGTCCCTGCGGTTCTCCGGCGTGCCCGACAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGAAGATCTCCCGGGTGGAAGCCGAGGACCTGGGCCTGTACTTCTGCAGCCAGTCCACCCACGTGCCCCCTACATTTGGCGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGGACCGTGGCCGCCCCCAGCGTGTTCATCTTCCCTCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGACTGTCTAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGCTAA
【００７８】
配列番号１６に対応する１文字アミノ酸配列を以下に示す。
（化３）
MDPKGSLSWRILLFLSLAFELSYGQVQLLQPGAELVKPGASVKLACKASGYLFTTYWMHWLKQRPGQGLEWIGEISPTNGRAYYNARFKSEATLTVDKSSNTAYMQLSSLTSEASAVYYCARAYGNYEFAYWGQGTLVTVSVAKTTPPSVYPLAPGCGDTTGSSVTLGCLVKGYFPESVTVTWNSGSLSSSVHTFPALLQSGLYTMSSSVTVPSSTWPSQTVTCSVAHPASSTTVDKKLEPSGPISTINPCPPCKECHKCPAPNLEGGPSVFIFPPNIKDVLMISLTPKVTCVVVDVSEDDPDVQISWFVNNVEVHTAQTQTHREDYNSTIRVVSTLPIQHQDWMSGKEFKCKVNNKDLPSPIERTISKIKGLVRAPQVYILPPPAEQLSRKDVSLTCLVVGFNPGDISVEWTSNGHTEENYKDTAPVLDSDGSYFIYSKLNMKTSKWEKTDSFSCNVRHEGLKNYYLKKTISRSPG*
【００７９】
上記アミノ酸配列の網掛け領域は、配列番号２０に対応する。
【００８０】
配列番号１７に対応する１文字アミノ酸配列を以下に示す。
MDPKGSLSWRILLFLSLAFELSYGQVQLLQPGAELVKPGASVKLACKASGYLFTTYWMHWLKQRPGQGLEWIGEISPTNGRAYYNARFKSEATLTVDKSSNTAYMQLSSLTSEASAVYYCARAYGNYEFAYWGQGTLVTVSVASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG*
【００８１】
配列番号１８に対応する１文字アミノ酸配列を以下に示す。
（化４）
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWYLQKPGQSPKLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGLYFCSQSTHVPPTFGGGTKLEIKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRNEC*
【００８２】
上記アミノ酸配列の網掛け領域は、配列番号２１に対応する。
【００８３】
配列番号１９に対応する１文字アミノ酸配列を以下に示す。
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWYLQKPGQSPKLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGLYFCSQSTHVPPTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC*
【００８４】
配列番号２２に対応する１文字アミノ酸配列を以下に示す。
【化５】
2018535953.tif 000005
【００８５】
配列番号２３に対応する１文字アミノ酸配列は、ＳＹＴＭＧＶＳである。
【００８６】
配列番号２４に対応する１文字アミノ酸配列は、ＴＩＳＳＧＧＧＳＴＹＹＰＤＳＶＫＧである。
【００８７】
配列番号２５に対応する１文字アミノ酸配列は、ＱＧＧＷＬＰＰＦＡＸであり、Ｘは任意の天然アミノ酸であってよい。
【００８８】
配列番号２６に対応する１文字アミノ酸配列は、ＲＡＳＫＳＶＳＴＳＳＲＧＹＳＹＭＨである。
【００８９】
配列番号２７に対応する１文字アミノ酸配列は、ＬＶＳＮＬＥＳである。
【００９０】
配列番号２８に対応する１文字アミノ酸配列は、ＱＨＩＲＥＬＴＲＳである。
【００９１】
配列番号２９に対応する１文字アミノ酸配列は
MDPKGSLSWRILLFLSLAFELSYGQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTTYWMHWVRQAPGQGLEWMGEISPTNGRAYYNQKFQGRVTMTVDKSTNTVYMELSSLRSEDTAVYYCARAYGNYFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
である。
【００９２】
配列番号３０に対応するＤＮＡ配列は
ATGGACCCCAAGGGCAGCCTGAGCTGGAGAATCCTGCTGTTCCTGAGCCTGGCCTTCGAGCTGAGCTACGGCCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAGGTGTCCTGCAAGGCTTCCGGCTACCTGTTCACCACCTACTGGATGCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCGAGATCTCCCCTACCAACGGCAGAGCCTACTACAACAGAAATTCCAGGGCAGAGTGACCATGACCGTGGACAAGTCCACCAACACCGTGTACATGGAACTGTCCTCCCTGCGGAGCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCTAGAGCCTACGGCAACTACGATTCGCCTACTGGGGCCAGGGCACCCTCGTGACAGTGTCCTCTGCTAGCACCAAGGGCCCCAGCGTGTTCCCTCTGGCCCCCAGCAGCAAGAGCACCAGCGGCGGAACCGCCGCCCTGGGCTGCCTGGGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGCGCTCTGACCAGCGGAGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACTCCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCAGCAGCAGCCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAGCCTAAGAGCTGCGACAAGACCCACACCTGCCCTCCCTGCCCCGCCCCGAGCTGCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCTCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGCACCCCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAGGACCCCGAGGTGAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTCGGGAGGAGCAGTACAACTCCACCTACCGCGTGGTGAGCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAGGAGTACAAGTGCAAGGTGAGCAACAAGGCCCTGCCCGCTCCCATCGAGAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGGGAGCCTCAGGTGTACACCCTGCCCCCCAGCCGCGACGAGCTGACAAGAACCAGGTGAGCCTGACCTGCCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCTCCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACAGCGACGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGAGCCCGGATAGTAA
である。
【００９３】
配列番号３１に対応する１文字アミノ酸配列は
MDPKGSLSWRILLFLSLAFELSYGQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTTYWMHWVRQAPGQGLEWMGEISPTNGRAYYNAKFQGRVTMTVDKSTNTAYMELSSLRSEDTAVYYCARAYGNYFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
である。
【００９４】
配列番号３２に対応するＤＮＡ配列は
ATGGACCCCAAGGGCAGCCTGAGCTGGAGAATCCTGCTGTTCCTGAGCCTGGCCTTCGAGCTGAGCTACGGCCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAGGTGTCCTGCAAGGCTTCCGGCTACCTGTTCACCACCTACTGGATGCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCGAGATCTCCCCTACCAACGGCAGAGCCTACTACAACCAAAATTCCAGGGCAGAGTGACCATGACCGTGGACAAGTCCACCAACACCGCTTACATGGAACTGTCCTCCCTGCGGAGCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCTAGAGCCTACGGCAACTACGATTCGCCTACTGGGGCCAGGGCACCCTCGTGACAGTGTCCTCTGCTAGCACCAAGGGCCCCAGCGTGTTCCCTCTGGCCCCCAGCAGCAAGAGCACCAGCGGCGGAACCGCCGCCCTGGGCTGCCTGGGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGCGCTCTGACCAGCGGAGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACTCCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCAGCAGCAGCCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAGCCTAAGAGCTGCGACAAGACCCACACCTGCCCTCCCTGCCCCGCCCCGAGCTGCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCTCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGCACCCCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAGGACCCCGAGGTGAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTCGGGAGGAGCAGTACAACTCCACCTACCGCGTGGTGAGCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAGGAGTACAAGTGCAAGGTGAGCAACAAGGCCCTGCCCGCTCCCATCGAGAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGGGAGCCTCAGGTGTACACCCTGCCCCCCAGCCGCGACGAGCTGACAAGAACCAGGTGAGCCTGACCTGCCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCTCCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACAGCGACGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGAGCCCGGATAGTAA
である。
【００９５】
配列番号３３に対応する１文字アミノ酸配列は
MDPKGSLSWRILLFLSLAFELSYGQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTTYWMHWVRQAPGQGLEWMGEISPTNGRAYYNAKFQGRVTMTVDKSINTAYMELSRLRSDDTAVYYCARAYGNYFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
である。
【００９６】
配列番号３４に対応するＤＮＡ配列は
ATGGACCCCAAGGGCAGCCTGAGCTGGAGAATCCTGCTGTTCCTGAGCCTGGCCTTCGAGCTGAGCTACGGCCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAGGTGTCCTGCAAGGCTTCCGGCTACCTGTTCACCACCTACTGGATGCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCGAGATCTCCCCTACCAACGGCAGAGCCTACTACAACCAAAATTCCAGGGCAGAGTGACCATGACCGTGGACAAGTCCATCAACACCGCTTACATGGAACTGTCCAGACTGCGGAGCGATGACACCGCCGTGTACTACTGCGCTAGAGCCTACGGCAACTACGATTCGCCTACTGGGGCCAGGGCACCCTCGTGACAGTGTCCTCTGCTAGCACCAAGGGCCCCAGCGTGTTCCCTCTGGCCCCCAGCAGCAAGAGCACCAGCGGCGGAACCGCCGCCCTGGGCTGCCTGGGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGCGCTCTGACCAGCGGAGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACTCCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCAGCAGCAGCCTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCTCCAACACCAAGGTGGACAAGAAGGTGGAGCCTAAGAGCTGCGACAAGACCCACACCTGCCCTCCCTGCCCCGCCCCGAGCTGCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCTCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGCACCCCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAGGACCCCGAGGTGAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCTCGGGAGGAGCAGTACAACTCCACCTACCGCGTGGTGAGCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAGGAGTACAAGTGCAAGGTGAGCAACAAGGCCCTGCCCGCTCCCATCGAGAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGGGAGCCTCAGGTGTACACCCTGCCCCCCAGCCGCGACGAGCTGACAAGAACCAGGTGAGCCTGACCTGCCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCTCCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCTGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACAGCGACGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGAGCCCGGATAGTAA
である。
【００９７】
配列番号３５に対応する１文字アミノ酸配列は
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSSQSLVNSNGNTFLQWYQQRPGQSPRLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPPTFGGGTVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
である。
【００９８】
配列番号３６に対応するＤＮＡ配列は
ATGGAGACCGACACCCTGCTGCTCTGGGTGCTGCTGCTCTGGGTGCCCGGCTCCACCGGAGACGTCGTGATGACCCAGTCCCCTCTGTCCCTGCCTGTGACCCTGGGACAGCCTGCCTCCATCTCCTCAGATCCTCCCAGTCCCTCGTGAACTCCAACGGCAACACCTTCCTGCAGTGGTATCAGCAGCGGCCTGGCCAGAGCCCCAGACTGCTGATCTACAAGGTGTCCCTGCGGTTCTCCGGCGTGCCCGACGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGAAGATCTCCCGGGTGGAAGCCGAGGACGTGGGCGTGTACTACTGCTCCCAGAGCACCCACGTGCCCCCTACATTTGGCGGAGGCACCAAGTGGAAATCAAGCGGACCGTGGCCGCCCCCAGCGTGTTCATCTTCCCTCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGACAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGACTGTCTAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGCTAA
である。
【００９９】
配列番号３７に対応する１文字アミノ酸配列は
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWYQQRPGQSPRLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPPTFGGGTVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
である。
【０１００】
配列番号３８に対応するＤＮＡ配列は
ATGGAGACCGACACCCTGCTGCTCTGGGTGCTGCTGCTCTGGGTGCCCGGCTCCACCGGAGACGTCGTGATGACCCAGTCCCCTCTGTCCCTGCCTGTGACCCTGGGACAGCCTGCCTCCATCTCCTCAGATCCAGGCAGTCCCTCGTGAACTCCAACGGCAACACCTTCCTGCAGTGGTATCAGCAGCGGCCTGGCCAGAGCCCCAGACTGCTGATCTACAAGGTGTCCCTGCGGTTCTCCGGCGTGCCCGACGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGAAGATCTCCCGGGTGGAAGCCGAGGACGTGGGCGTGTACTACTGCTCCCAGAGCACCCACGTGCCCCCTACATTTGGCGGAGGCACCAAGTGGAAATCAAGCGGACCGTGGCCGCCCCCAGCGTGTTCATCTTCCCTCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGACAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGACTGTCTAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGCTAA
である。
【０１０１】
配列番号３９に対応する１文字アミノ酸配列は
METDTLLLWVLLLWVPGSTGDVVMTQSPLSSPVTLGQPASISCRSSQSLVNSNGNTFLQWYHQRPGQPPRLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGAGKDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPPTFGQGTLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
である。
【０１０２】
配列番号４０に対応するＤＮＡ配列は
ATGGAGACCGACACCCTGCTGCTCTGGGTGCTGCTGCTCTGGGTGCCCGGCTCCACCGGAGACGTCGTGATGACCCAGTCCCCTCTGTCCAGTCCTGTGACCCTGGGACAGCCTGCCTCCATCTCCTCAGATCCTCCCAGTCCCTCGTGAACTCCAACGGCAACACCTTCCTGCAGTGGTATCACCAGCGGCCTGGCCAGCCTCCCAGACTGCTGATCTACAAGGTGTCCCTGCGGTTCTCCGGCGTGCCCGACGATTTTCCGGCTCTGGCGCTGGCAAGGACTTCACCCTGAAGATCTCCCGGGTGGAAGCCGAGGACGTGGGCGTGTACTACTGCTCCCAGAGCACCCACGTGCCCCCTACATTTGGCCAGGGCACCAACTGGAAATCAAGCGGACCGTGGCCGCCCCCAGCGTGTTCATCTTCCCTCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGTCTGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGCGAGGCCAAGGGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTGACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGACAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGACTGTCTAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACCGGGGCGAGTGCTAA
である。
【０１０３】
実施例
実施例１：抗糖化最終産物抗体の投与のｉｎ  ｖｉｖｏ検査
抗糖化最終産物抗体の効果を検討するために、老齢ＣＤ１（ＩＣＲ）マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）に抗体を３週間の間、週に１回（１日目、８日目および１５日目）、１日２回静脈内注射により投与し、その後１０週間の無処置期間が続いた。試験抗体は、キーホールリンペットヘモシアニンと共役結合されたカルボキシメチルリジンに対して産生された市販のマウス抗糖化最終産物抗体であり、このカルボキシメチルリジンモノクローナル抗体（Ｃｌｏｎｅ３１８００３）はＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｉｎｃ．（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ；カタログ番号ＭＡＢ３２４７）から入手可能であった。対照動物において生理食塩水の対照基準を使用した。
【０１０４】
「若齢」と呼ばれるマウスは８週齢であり、「老齢」と呼ばれるマウスは８８週齢（±２日）であった。この抗体の投与から有害事象は認められなかった。本検査で用いた動物の種々の群を表１に示す。
【０１０５】
【表１】
2018535953.tif 000006
【０１０６】
老化細胞のマーカーであるＰ１６ＩＮＫ４ａｍＲＮＡをリアルタイムｑＰＣＲによって群の脂肪組織で定量化した。結果を表２に示す。表において、ΔΔＣｔ＝ΔＣｔ平均対照群（２）−ΔＣｔ平均実験群（１または３または５）；発現倍数＝２−ΔΔＣｔである。
【０１０７】
【表２】
2018535953.tif 000007
【０１０８】
上の表は、予想通り、無処置老齢マウス（対照群２）が無処置若齢マウス（対照群１）よりもｐ１６Ｉｎｋ４ａｍＲＮＡを２．５５倍多く発現することを示している。これは、回復８５日目の終わりに安楽死させた２群の無処置マウスを処置２２日目の終わりに安楽死させた無処置若齢マウス１群と比較したとき、観察された。無処置老齢マウス２群からの結果を８５日目に安楽死させた処置老齢マウス３群からの結果と比較したとき、ｐ１６Ｉｎｋ４ａｍＲＮＡが３群においてよりも２群において１．２３倍高いことが観察された。したがって、ｐ１６Ｉｎｋ４ａｍＲＮＡ発現のレベルは、老齢マウスを２．５μｇ／ｇ／ＢＩＤ／週の抗体で処置した場合に、より低かった。
【０１０９】
無処置老齢マウス２群（対照）からの結果を２２日目に安楽死させた処置老齢マウス５群（５μｇ／ｇ）からの結果と比較したとき、ｐ１６Ｉｎｋ４ａｍＲＮＡが５群（５μｇ／ｇ）においてよりも２群（対照）において３．０３倍高いことが観察された。この比較は、５群動物が５．０μｇ／ｇ／ＢＩＤ／週で処置された場合ｐ１６Ｉｎｋ４ａｍＲＮＡ発現のより低いレベルを有し、若齢無処置マウス（すなわち１群）の発現レベルに匹敵するｐ１６Ｉｎｋ４ａｍＲＮＡ発現レベルをもたらしたことを示した。回復８５日目の終わりに安楽死させた３群（２．５μｇ／ｇ）マウスとは異なり、５群マウスは処置２２日目の終わりに安楽死させた。
【０１１０】
これらの結果は、抗体投与が老化細胞を死滅させたことを示す。
【０１１１】
抗体投与のサルコペニアに対する効果を決定するために、腓腹筋量も測定した。結果を表３に示す。結果は、対照と比較して抗体の投与が筋量を増加させたが、５．０μｇ／ｇ／ＢＩＤ／週の高い投与量においてのみであったことを示す。
【０１１２】
【表３】
2018535953.tif 000008
【０１１３】
実施例２：試験抗体の親和性および動態
細胞のＡＧＥ修飾タンパク質のためのモデル基質としてＮα，Ｎα−ビス（カルボキシメチル）−Ｌ−リジントリフルオロ酢酸塩（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を使用して、実施例１で使用した試験抗体の親和性および動態を解析した。ブランクとしてＦｃ１、および試験抗体で固定したＦｃ２（分子量１５０，０００Ｄａ）とともにシリーズＳセンサチップＣＭ５（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）を用いて、ラベルフリー相互作用解析をＢＩＡＣＯＲＥ（商標）Ｔ２００  （ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）上で行った。泳動緩衝液は、温度２５℃で、ＨＢＳ−ＥＰ緩衝液（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＥＤＴＡおよび０．０５％のＰ−２０、ｐＨ７．４）であった。ソフトウェアは、ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）Ｔ２００評価用ソフト、２．０版であった。二重基準（Ｆｃ２−１および緩衝液だけの注入）を解析で使用し、データをＬａｎｇｍｕｉｒ１：１結合モデルにフィットさせた。
【０１１４】
【表４】
2018535953.tif 000009
【０１１５】
応答対時間のグラフを図１に示す。以下の値を、解析から決定した：ｋａ（１／Ｍｓ）＝１．８５７×１０３；ｋｄ（１／ｓ）＝６．７８１×１０−３；ＫＤ（Ｍ）＝３．６５１×  １０−６；Ｒｍａｘ（ＲＵ）＝１９．５２；およびＣｈｉ２＝０．１１４。フィッティングのＣｈｉ２値がＲｍａｘの１０％未満であるので、この適合は信頼性が高い。
【０１１６】
実施例３：マウス抗ＡＧＥ  ＩｇＧ２ｂ抗体とキメラ抗ＡＧＥ  ＩｇＧ１抗体の構築および生成
マウス抗ＡＧＥ抗体とキメラヒト抗ＡＧＥ抗体を調製した。マウス抗ＡＧＥ抗体ＩｇＧ２ｂ重鎖のＤＮＡ配列を配列番号１２に示す。キメラヒト抗ＡＧＥ抗体ＩｇＧ１重鎖のＤＮＡ配列を配列番号１３に示す。マウス抗ＡＧＥ抗体κ軽鎖のＤＮＡ配列を配列番号１４に示す。キメラヒト抗ＡＧＥ抗体κ軽鎖のＤＮＡ配列を配列番号１５に示す。これらの遺伝子配列を合成し、哺乳動物高発現ベクター中にクローン化した。配列は、コドン最適化された。完成した構築物は、トランスフェクションに進む前に配列を確認した。
【０１１７】
ＨＥＫ２９３細胞をトランスフェクションの１日前に振とうフラスコ中に播種し、無血清既知組成培地を使用して増殖させた。ＤＮＡ発現構造物を０．０３リットルの懸濁ＨＥＫ２９３細胞中に、一過的にトランスフェクトした。２０時間後に、細胞をサンプリングして生存率と生細胞数を得て、力価を測定した（Ｏｃｔｅｔ  ＱＫｅ，ＦｏｒｔｅＢｉｏ）。さらなる測定値を、一過的トランスフェクション生成ラン全体を通して得た。５日目に培養物を収集し、それぞれについてさらなる試料を、細胞密度、生存率および力価について測定した。
【０１１８】
マウス抗ＡＧＥ抗体およびキメラ抗ＡＧＥ抗体について条件培地を収集し、遠心分離と濾過によって一過的トランスフェクション生成ランから清澄化した。上清をＰｒｏｔｅｉｎ  Ａカラム上に流し、低ｐＨ緩衝液で溶出した。試料の分割の前に、０．２μｍ濾過膜を使用して濾過を行った。精製および濾過の後、タンパク質濃度をＯＤ２８０と吸光係数から算出した。収量およびアリコートの要約を表５に示す。
【０１１９】
【表５】
2018535953.tif 000010
【０１２０】
抗体純度をＬａｂＣｈｉｐ（登録商標）ＧＸＩＩ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用するキャピラリー電気泳動ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ−ＳＤＳ）分析によって評価した。
【０１２１】
実施例４：マウス（親）抗ＡＧＥ抗体およびキメラ抗ＡＧＥ抗体の結合
実施例３に記載のマウス（親）抗ＡＧＥ抗体およびキメラ抗ＡＧＥ抗体の結合を直接結合ＥＬＩＳＡによって検討した。抗カルボキシメチルリジン（ＣＭＬ）抗体（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＭＡＢ３２４７）を対照として使用した。ＣＭＬをＫＬＨに共役結合し（ＣＭＬ−ＫＬＨ）、次いでＣＭＬとＣＭＬ−ＫＬＨの両方をＥＬＩＳＡプレート上に終夜被覆した。ＨＲＰヤギ抗マウスＦｃを用いて、対照抗ＡＧＥ抗体とマウス（親）抗ＡＧＥ抗体を検出した。ＨＲＰヤギ抗ヒトＦｃを用いて、キメラ抗ＡＧＥ抗体を検出した。
【０１２２】
抗原は、ｐＨ６．５の１×リン酸緩衝液中で１μｇ／ｍＬに希釈した。９６ウェルマイクロタイターＥＬＩＳＡプレートを希釈抗原１００μＬ／ウェルで被覆し、４℃で終夜静置した。翌朝、プレートを１×ＰＢＳ、２．５％ＢＳＡでブロックし、室温で１〜２時間静置した。抗体試料を１×ＰＢＳ、１％ＢＳＡで、５０μｇ／ｍＬの濃度にて開始する、段階希釈で調製した。二次抗体を１：５，０００で希釈した。１００μＬの抗体希釈溶液を各ウェルに加えた。プレートを室温でマイクロプレートシェーカー上で０．５〜１時間インキュベートした。プレートを１×ＰＢＳで３回洗浄した。希釈したＨＲＰ共役結合ヤギ抗ヒトＦｃ二次抗体を１００μＬ／ウェルで各ウェルに加えた。プレートをマイクロプレートシェーカー上で１時間インキュベートした。プレートを次いで１×ＰＢＳで３回洗浄した。１００μＬのＨＲＰ基質ＴＭＢを各ウェルに加え、プレートを反応させた。３〜５分経過してから、１００μＬの１Ｎ  ＨＣｌを加えて反応を終了させた。第２の直接結合ＥＬＩＳＡをＣＭＬ被覆だけで行った。マイクロプレートリーダーを使用してＯＤ４５０の吸光度を読み取った。
【０１２３】
ＣＭＬとＣＭＬ−ＫＬＨ  ＥＬＩＳＡについてのＯＤ４５０吸光度の生データを以下のプレートマップに示す。ウェルプレート中９６ウェルのうちの４８を使用した。プレートマップ中の空のウェルは、未使用のウェルを示す。
【０１２４】
【表６】
2018535953.tif 000011
【０１２５】
ＣＭＬだけのＥＬＩＳＡについてのＯＤ４５０吸光度の生データを以下のプレートマップに示す。ウェルプレート中９６ウェルのうちの２４を使用した。プレートマップ中の空のウェルは、未使用のウェルを示す。
【０１２６】
【表７】
2018535953.tif 000012
【０１２７】
対照抗ＡＧＥ抗体およびキメラ抗ＡＧＥ抗体は、ＣＭＬとＣＭＬ−ＫＬＨの両方への結合を示した。マウス（親）抗ＡＧＥ抗体は、ＣＭＬまたはＣＭＬ−ＫＬＨのいずれに対しても極めて弱い結合〜非結合を示した。反復ＥＬＩＳＡからのデータは、ＣＭＬへの対照抗ＡＧＥおよびキメラ抗ＡＧＥの結合を裏付ける。すべての緩衝対照は、ネガティブシグナルを示した。
【０１２８】
実施例５：ヒト化抗体
ヒト化抗体を、親（マウス）抗体配列の抜粋した部分をヒトフレームワーク配列と融合する複数のハイブリッド配列を作成することによって設計した。アクセプターフレームワークを、フレームワークにわたる全体の配列同一性、マッチング界面位置、同様に分類されたＣＤＲ正準位置、および除去されるべきＮ型糖鎖付加部位の存在に基づいて同定した。３つのヒト化軽鎖と３つのヒト化重鎖を、２つの異なる重鎖および軽鎖ヒトアクセプターフレームワークに基づいて設計した。重鎖のアミノ酸配列を配列番号２９、３１および３３に示し、それらは配列番号３０、３２および３４に示すＤＮＡ配列によってそれぞれコードされる。軽鎖のアミノ酸配列を配列番号３５、３７および３９に示し、それらは配列番号３６、３８および４０に示すＤＮＡ配列によってそれぞれコードされる。ヒト化配列を、抗原結合を保持している可能性が最も高い配列を単離するために目視およびコンピュータモデリングで系統的に分析した。目標は、最終ヒト化抗体におけるヒト配列の量を最大にし、一方で本来の抗体特異性を保持することであった。ヒト化軽鎖および重鎖を組み合わせて、９つの異なる完全ヒト化抗体を作成できる。
【０１２９】
３つの重鎖および３つの軽鎖を分析して、それらのヒト化度を決定した。抗体ヒト化スコアを、Ｇａｏ，Ｓ．Ｈ．らによる記載の方法（“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｈｕｍａｎｎｅｓｓ  ｓｃｏｒｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”，  ＢＭＣ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１３：５５（Ｊｕｌｙ  ５，２０１３）に従って、算出した。ヒト化スコアは、抗体可変領域配列がどれほどヒト様抗体に見えるかを表す。重鎖の場合、７９以上のスコアがヒト様に見えることを示し、軽鎖の場合、８６以上のスコアがヒト様に見えることを示す。３つの重鎖、３つの軽鎖、１つの親（マウス）重鎖および１つの親（マウス）軽鎖のヒト化度を以下の表６に示す。
【０１３０】
【表８】
2018535953.tif 000013
【０１３１】
完全長抗体遺伝子を、最初に可変領域配列を合成することで構築した。これらの配列を哺乳動物細胞での発現用に最適化した。これらの可変領域配列を次いで、すでにヒトＦｃドメインを含有する発現ベクター中にクローン化し；重鎖用に、ＩｇＧ１を使用した。
【０１３２】
ヒト化抗体の小規模生産を、無血清で既知組成培地を使用して懸濁ＨＥＫ２９３細胞中に重鎖および軽鎖用のプラスミドをトランスフェクトすることにより行なった。ＭａｂＳｅｌｅｃｔ  ＳｕＲｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａ培地（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して条件培地中の全抗体を精製した。
【０１３３】
９つのヒト化抗体を、配列番号２９、３１および３３に示されるアミノ酸配列を有する３つの重鎖と、配列番号３５、３７および３９に示されるアミノ酸配列を有する３つの軽鎖との各組み合わせから生成した。比較キメラ親抗体も、調製した。抗体およびそれらのそれぞれの力価を、以下の表７に示す。
【０１３４】
【表９】
2018535953.tif 000014
【０１３５】
ヒト化抗体の結合は、例えば、用量依存性結合ＥＬＩＳＡまたは細胞系結合アッセイによって評価できる。
【０１３６】
参照文献
１．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｐｕｂ．Ｎｏ．  ＷＯ  ２００９／１４３４１１  ｔｏ  Ｇｒｕｂｅｒ（２６  Ｎｏｖ．２００９）．
２．Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．５，７０２，７０４  ｔｏ  Ｂｕｃａｌａ  （ｉｓｓｕｅｄ  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ３０，１９９７）．
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９．Ａｎｄｏ  Ｋら，“Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ  Ａｒｅ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｂｙ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ  Ｅｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｄｕｒｉｎｇ  Ａｇｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，”  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｖｏｌ．２５８，１２３−２７（１９９９）．
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１１．Ｂｉｅｒｈａｕｓ  Ａ，“ＡＧＥｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ＡＧＥ−ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｍｅｌｌｉｔｕｓ．  Ｉ．  Ｔｈｅ  ＡＧＥ  ｃｏｎｃｅｐｔ，”  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｒｅｓ，  Ｖｏｌ．３７（３），５８６−６００（１９９８）．
１２．Ｍｅｕｔｅｒ  Ａ．，ら．“Ｍａｒｋｅｒｓ  ｏｆ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ａｒｅ  ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｉｎ  ｍｕｒｉｎｅ  ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｓ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ：  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ｉｎ  ａｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃ  ｏｘｙｇｅｎ”  Ｊ  Ａｓｓｉｓｔ  Ｒｅｐｒｏｄ  Ｇｅｎｅｔ．２０１４  Ａｕｇ  １０．［Ｅｐｕｂ  ａｈｅａｄ  ｏｆ  ｐｒｉｎｔ］．
１３．Ｂａｋｅｒ，  Ｄ．Ｊら，“Ｃｌｅａｒａｎｃｅ  ｏｆ  ｐ１６Ｉｎｋ４ａ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ  ｃｅｌｌｓ  ｄｅｌａｙｓ  ａｇｅｉｎｇ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ”，  Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．４７９，ｐｐ．２３２−２３６，（２０１１）．
１４．Ｊａｎａ  Ｈａｄｒａｂｏｖａ，ら．“Ｃｈｉｃｋｅｎ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ  ｆｏｒ  ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ：  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｉｎｈａｌｅｄ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｏｎ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ａｉｒｗａｙｓ”  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  （ｉｎ  ｐｒｅｓｓ；Ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  ５  Ｍａｙ  ２０１４）．
１５．Ｖｌａｓｓａｒａ，  Ｈら，“Ｈｉｇｈ−ａｆｆｉｎｉｔｙ−ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｕｐｔａｋｅ  ａｎｄ  Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｇｌｕｃｏｓｅ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｒｅｍｏｖａｌ  ｏｆ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ”，  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，Ｖｏｌ．８２，５５８８，５５９１（１９８５）．
１６．  Ｒｏｌｌ，  Ｐ．ら，  “Ａｎｔｉ−ＣＤ２０  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ”，  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，  Ｖｏｌ．５８，  Ｎｏ．６，１５６６−１５７５（２００８）．
１７．Ｋａｊｓｔｕｒａ，  Ｊら，“Ｍｙｏｃｉｔｅ  Ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ａｇｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  Ｈｅａｒｔ”，  Ｃｉｒｃ．  Ｒｅｓ．，  Ｖｏｌ．１０７（１１），１３７４−８６，（２０１０）．
１８．ｄｅ  Ｇｒｏｏｔ，  Ｋ．ら，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｄａｍａｇｅ  ａｎｄ  Ｒｅｐａｉｒ  ｉｎ  Ａｎｔｉｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ  Ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ”，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，Ｖｏｌ．５６（１１），３８４７，３８４７  （２００７）．
１９．Ｍａｎｅｓｓｏ，  Ｅ．ら，“Ｄｙｎａｍｉｃｓ  ｏｆ  β−Ｃｅｌｌ  Ｔｕｒｎｏｖｅｒ：  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  β−Ｃｅｌｌ  Ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ａｎｄ  Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  Ｓｏｕｒｃｅｓ  ｏｆ  β−Ｃｅｌｌｓ  ｏｔｈｅｒ  ｔｈａｎ  β−ｃｅｌｌ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＨＩＰ  Ｒａｔ”，  Ａｍ．Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｍｅｔａｂ．，Ｖｏｌ．２９７，  Ｅ３２３，Ｅ３２４（２００９）．
２０．Ｋｉｒｓｔｅｉｎ，  Ｍ．ら，“Ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｉ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ  ｂｙ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  Ｅｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ”，Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．，  Ｖｏｌ．９０，４３９，４３９−４４０（１９９２）．
２１．Ｍｕｒｐｈｙ，  Ｊ．  Ｆ．，“Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ”，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｓｉｇｈｔｓ：Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１４（４），６７−８０（２０１０）．
２２．Ｖｉｒｅｌｌａ，  Ｇ．ら，“Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  Ｅｎｄ−Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  ＬＤＬ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．４４，４８７−４９３  （２００３）．
２３．Ａｍｅｌｉ，  Ｓ．ら，“Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｗｉｔｈ  Ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ  ＬＤＬ  ａｎｄ  Ｏｘｉｄｉｚｅｄ  ＬＤＬ  ｏｎ  Ｅａｒｌｙ  Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｉｎ  Ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉｃ  Ｒａｂｂｉｔｓ”，Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，  ａｎｄ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１６，１０７４（１９９６）．
２４．“Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ”，ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  ａｔ  ｅｎ．ｗｉｋｉｐｅｄｉａ．ｏｒｇ／ｗｉｋｉ／Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ（Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  １４，２０１４）．
２５．“Ｗｈａｔ  ｉｓ  ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ？”，ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  ａｔ  ｗｗｗ．ｉｏｆｂｏｎｅｈｅａｌｔｈ．ｏｒｇ／ｗｈａｔ−ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ（２０１４）．
２６．Ｂｌａｈｄ，  Ｗ．，“Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ  ｗｉｔｈ  ａｇｉｎｇ”，ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  ａｔ  ｗｗｗ．ｗｅｂｍｄ．ｃｏｍ／ｈｅａｌｔｈｙ−ａｇｉｎｇ／ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ−ｗｉｔｈ−ａｇｉｎｇ  Ａｕｇｕｓｔ  ３，  ２０１４）．
２７．“Ｋｅｙｈｏｌｅ  ｌｉｍｐｅｔ  ｈｅｍｏｃｙａｎｉｎ”，ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  ａｔ  ｅｎ．ｗｉｋｉｐｅｄｉａ．ｏｒｇ／ｗｉｋｉ／Ｋｅｙｈｏｌｅ＿ｌｉｍｐｅｔ＿ｈｅｍｏｃｙａｎｉｎ（Ａｐｒｉｌ  １８，２０１４）．
２８．“ＣＭＬ−ＢＳＡ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄａｔａ  Ｓｈｅｅｔ”，ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  ａｔ  ｗｗｗ．ｃｅｌｌｂｉｏｌａｂｓ．ｃｏｍ／ｓｉｔｅｓ／ｄｅｆａｕｌｔ／ｆｉｌｅｓ／ＳＴＡ−３１４−ｃｍｌ−ｂｓａ．ｐｄｆ（２０１０）．
２９．“ＣＭＬ  （Ｎ−ｅｐｓｉｌｏｎ−（Ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ）Ｌｙｓｉｎｅ）  Ａｓｓａｙｓ  ａｎｄ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ”，ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  ａｔ  ｗｗｗ．ｃｅｌｌｂｉｏｌａｂｓ．ｃｏｍ／ｃｍｌ−ａｓｓａｙｓ  （Ａｃｃｅｓｓｅｄ  ｏｎ  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  １５，  ２０１４）．
３０．Ｃｒｕｚ−Ｊｅｎｔｏｆｔ，  Ａ．  Ｊ．ら．“Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ：  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｏｎ  ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ”，  Ａｇｅ  ａｎｄ  Ａｇｅｉｎｇ，  Ｖｏｌ．３９，ｐｐ．４１２−４２３  （Ａｐｒｉｌ  １３，  ２０１０）．
３１．Ｒｏｌｌａｎｄ，  Ｙ．ら，“Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ：  ｉｔｓ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ，  ｅｔｉｏｌｏｇｙ，  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ”，Ｊ．  Ｎｕｔｒ．  Ｈｅａｌｔｈ  Ａｇｉｎｇ，  Ｖｏｌ．  １２（７），ｐｐ．４３３−４５０（２００８）．
３２．Ｍｅｒａ，  Ｋ．ら，“Ａｎ  ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｙ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｎε−（ｃａｒｂｏｘｙｅｔｈｙｌ）ｌｙｓｉｎｅ  （ＣＥＬ）：Ｐｏｓｓｉｂｌｅ  ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒｅｍｏｖａｌ  ｏｆ  ＣＥＬ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｂｙ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ”，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｖｏｌ．４０７，  ｐｐ．４２０−４２５（Ｍａｒｃｈ  １２，  ２０１１）．
３３．Ｒｅｄｄｙ，  Ｓ．ら，“Ｎε−（ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ）ｌｙｓｉｎｅ  ｉｓ  ａ  ｄｏｍｉｎａｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｇｌｙｃａｔｉｏｎ  ｅｎｄ  ｐｒｏｄｕｃｔ  （ＡＧＥ）  ａｎｔｉｇｅｎ  ｉｎ  ｔｉｓｓｕｅ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ”，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｖｏｌ．３４，ｐｐ．１０８７２−１０８７８（Ａｕｇｕｓｔ  １，  １９９５）．
３４．Ｎａｙｌｏｒ，  Ｒ．  Ｍ．ら，“Ｓｅｎｅｓｃｅｎｔ  ｃｅｌｌｓ：ａ  ｎｏｖｅｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ａｇｉｎｇ  ａｎｄ  ａｇｅ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｄｉｓｅａｓｅｓ”，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｖｏｌ．９３（１），ｐｐ．１０５−１１６（Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ５，  ２０１２）．
３５．Ｋａｔｃｈｅｒ，  Ｈ．  Ｌ．，“Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｔｈａｔ  ｓｈｅｄ  ｎｅｗ  ｌｉｇｈｔ  ｏｎ  ａｇｉｎｇ”，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  （Ｍｏｓｃｏｗ），Ｖｏｌ．７８（９），ｐｐ．１０６１−１０７０（２０１３）．
３６．Ａｈｍｅｄ，  Ｅ．  Ｋ．ら，“Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｖｅ  Ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｏｆ  ＷＩ−３８  Ｈｕｍａｎ  Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ”，Ａｇｉｎｇ  Ｃｅｌｌｓ，Ｖｏｌ．９，２５２，２６０  （２０１０）．
３７．Ｖｌａｓｓａｒａ，  Ｈ．ら，“Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  Ｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｏｎ  Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｉｎｄｕｃｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ  ｂｙ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ”，  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．１６６，５３９，５４５  （１９８７）．
３８．Ｆｉｅｌｄｉｎｇ，  Ｒ．  Ａ．，ら，“Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ：ａｎ  ｕｎｄｉａｇｎｏｓｅｄ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ｏｌｄｅｒ  ａｄｕｌｔｓ．    Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ：  ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ，  ｅｔｉｏｌｏｇｙ，  ａｎｄ  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｒｅｃｔｏｒｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．  １２（４），ｐｐ．２４９−２５６（Ｍａｙ  ２０１１）．
３９．Ｍａａｓｓ，  Ｄ．  Ｒ．ら，“Ａｌｐａｃａ  （Ｌａｍａ  ｐａｃｏｓ）  ａｓ  ａ  ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ  ｓｏｕｒｃｅ  ｏｆ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｃａｍｅｌｉｄ  ｈｅａｖｙ  ｃｈａｉｎ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  （ＶＨＨｓ）”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｖｏｌ．３２４，Ｎｏ．１−２，ｐｐ．１３−２５（Ｊｕｌｙ  ３１，  ２００７）．
４０．Ｓｔｒｉｅｔｚｅｌ，  Ｃ．Ｊ．ら，“Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｅｌｉｎｅ  ＩｇＧｓ”，  Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１５８，ｐｐ．２１４−２２３  （２０１４）．
４１．Ｐａｔｅｌ，  Ｍ．ら，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｄｏｇ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  ａｌｐｈａ  ａｎｄ  ｅｐｓｉｌｏｎ  ｃｏｎｓｔａｎｔ  ｒｅｇｉｏｎ  ｇｅｎｅｓ”，  Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｖｏｌ．４１，ｐｐ．２８２−２８６（１９９５）．
４２．Ｗａｇｎｅｒ，  Ｂ．ら，“Ｔｈｅ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ｍａｐ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｇ  ｈｅａｖｙ  ｃｈａｉｎ  ｃｏｎｓｔａｎｔ  ｇｅｎｅ  ｒｅｇｉｏｎ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ｓｅｖｅｎ  ＩｇＧ  ｉｓｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  ｆｏｒ  ＩｇＤ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｈｏｒｓｅ”，  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  Ｖｏｌ．１７３，ｐｐ．３２３０−３２４２（２００４）．
４３．Ｈａｍｅｒｓ−Ｃａｓｔｅｒｍａｎ，  Ｃ．ら，“Ｎａｔｕｒａｌｌｙ  ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｄｅｖｏｉｄ  ｏｆ  ｌｉｇｈｔ  ｃｈａｉｎｓ”，  Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．３６３，ｐｐ．４４６−４４８（Ｊｕｎｅ  ３，  １９９３）．
４４．Ｄｅ  Ｇｅｎｓｔ，  Ｅ．ら，“Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｉｎ  ｃａｍｅｌｉｄｓ”，  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  ＆  Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３０，ｐｐ．１８７−１９８（ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  Ｊｕｌｙ  １１，  ２００５）．
４５．Ｇｒｉｆｆｉｎ，  Ｌ．Ｍ．ら，“Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｈｅａｖｙ  ａｎｄ  ｌｉｇｈｔ  ｃｈａｉｎ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ  ｃａｍｅｌｉｄ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｃａｍｅｌｕｓ  ｄｒｏｍｅｄａｒｉｕｓ  ａｎｄ  Ｃａｍｅｌｕｓ  ｂａｃｔｒｉａｎｕｓ  ｓｐｅｃｉｅｓ”，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｖｏｌ．４０５，ｐｐ．３５−４６  （ａｖａｉｌａｂｌｅ  ｏｎｌｉｎｅ  Ｊａｎｕａｒｙ  １８，２０１４）．
４６．Ｎｇｕｙｅｎ，  Ｖ．Ｋ．ら，“Ｃａｍｅｌ  ｈｅａｖｙ−ｃｈａｉｎ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  ｄｉｖｅｒｓｅ  ｇｅｒｍｌｉｎｅ  ＶＨＨ  ａｎｄ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｅｎｌａｒｇｅ  ｔｈｅ  ａｎｔｉｇｅｎ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ”，  Ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ，Ｖｏｌ．１９，  Ｎｏ，５，ｐｐ．９２１−９３０（２０００）．
４７．Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ，  Ｓ．ら，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ＶＨ  ｄｏｍａｉｎ  ｆｒｏｍ  ｎａｔｕｒａｌｌｙ  ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ  ｃａｍｅｌ  ｈｅａｖｙ  ｃｈａｉｎ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ  ｌａｃｋｉｎｇ  ｌｉｇｈｔ  ｃｈａｉｎｓ”，  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｖｏｌ．７，Ｎｏ．９，  ｐｐ．１１２９−１１３５（１９９４）．
４８．Ｗｅｓｏｌｏｗｓｋｉ，  Ｊ．ら，“Ｓｉｎｇｌｅ  ｄｏｍａｉｎ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔｏｏｌｓ  ｉｎ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ”，  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１９８，ｐｐ．１５７−１７４（Ｊｕｎｅ  １６，  ２００９）．
４９．Ｙａｎ，  Ｓ．Ｆ．ら，“Ｓｏｌｕｂｌｅ  ＲＡＧＥ：  ｔｈｅｒａｐｙ  ＆  ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  ｉｎ  ｕｎｒａｖｅｌｉｎｇ  ｔｈｅ  ＲＡＧＥ  ａｘｉｓ  ｉｎ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ａｇｉｎｇ”，  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  Ｖｏｌ．７９，Ｎｏ．１０，ｐｐ．１３７９−１３８６（Ｍａｙ  １５，  ２０１０）．
５０．Ｃｈｅｎ，  Ｋ．  Ｓ．ら，“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｇｌｉｏｍａ”，  Ｇｌｉｏｍａ：  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，ｐｐ．１２１−１４１（２０１２）．
５１．Ｇａｏ，  Ｓ．  Ｈ．，ら，“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｈｕｍａｎｎｅｓｓ  ｓｃｏｒｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”，ＢＭＣ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１３：５５  （Ｊｕｌｙ  ５，  ２０１３）．
５２．Ｆｅｉｇｅ，  Ｍ．  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｓｈａｒｋ  ＩｇＮＡＲ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ  ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ”，  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ，Ｖｏｌ．１１１，Ｎｏ．２２，ｐｐ．８１５５−８１６０（Ｊｕｎｅ  ３，  ２０１４）．
【図１】
2018535953.tif 000015
【配列表】
2018535953000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成30年6月14日(2018.6.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2018535953000001.app
【国際調査報告】
2018535953.tif 000016
2018535953.tif 000017
2018535953.tif 000018
2018535953.tif 000019
2018535953.tif 000020
2018535953.tif 000021