(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物に関する。本発明はまた、クリプトフィシンペイロードと、クリプトフィシンコンジュゲートと、これらを含有する組成物と、特に抗がん剤としてのこれらの治療用途とにも関する。本発明はまた、これらのコンジュゲートを製造するための方法にも関する。  【化１】2018535255.tif 000380
2018535255.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2018535255.tif 000363
のクリプトフィシン化合物
（式中：
・Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｒ２およびＲ３は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
または代替的にＲ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキルもしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨ（Ｒ１２）基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈ基を表し；
または代替的にＲ４およびＲ５は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキルもしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ６は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｒ７およびＲ８は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル２基を表し；
または代替的にＲ７およびＲ８は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル基もしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ９は、水素原子、−ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、ハロゲン原子、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたは−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル２または−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）シクロアルキルまたは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキルから互いに独立して選択されるフェニル核の１つまたはそれ以上の置換基を表し；
・Ｒ１０は、水素原子および（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルから選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基を表し；
・Ｗは、
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨ（Ｒ１１）、
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ、
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨ、
・ＣＯ２ＨもしくはＣ（＝Ｏ）ＮＨ２；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈもしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２；または
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ３を表し；
・Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基である）。
【請求項２】
次の構造：
【化２】
2018535255.tif 000364
を有する、請求項１に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項３】
Ｒ１はメチル基を表すことを特徴とする、請求項１または２に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項４】
Ｒ２およびＲ３のそれぞれは水素原子を表すことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項５】
Ｒ２およびＲ３の一方はメチル基を表し、他方は水素原子を表すことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項６】
Ｒ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒にシクロプロピル基を形成していることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項７】
Ｒ４およびＲ５のそれぞれはメチル基を表すことを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項８】
Ｒ６は水素原子を表すことを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項９】
Ｒ７およびＲ８は互いに独立して水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表すことを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項１０】
Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表すことを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項１１】
Ｒ１０は水素原子を表すことを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項１２】
・Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルを表し；
・Ｒ２およびＲ３のそれぞれは水素原子を表し；
・Ｒ６は水素原子を表し；
・Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表し；
・Ｒ１０は水素原子を表す
ことを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項１３】
・Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルを表し；
・Ｒ２およびＲ３の一方は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルを表し、他方は水素原子を表し；
・Ｒ６は水素原子を表し；
・Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表し； 
・Ｒ１０は水素原子を表す
ことを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項１４】
Ｗは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨＲ１１、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨおよび（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈから選択されることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項１５】
Ｗは、ＣＨ２−ＮＨ２またはＣＨ２−ＯＨ基を表すことを特徴とする、請求項１４に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項１６】
次のリスト：
【化３】
2018535255.tif 000365
【化４】
2018535255.tif 000366
から選択される、請求項１に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項１７】
式（ＩＩ）：
【化５】
2018535255.tif 000367
のクリプトフィシンペイロード
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は請求項１〜１３に規定のとおりであり、
・Ｙは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１１、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｏ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｓ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−トリアゾール基から選択され；
・Ｒ１１は、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｌはリンカーを表し；
・ＲＣＧ１は該リンカーの末端に存在する反応性化学基を表す）。
【請求項１８】
次の構造：
【化６】
2018535255.tif 000368
を有する、請求項１７に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード。
【請求項１９】
Ｙは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１１を表すことを特徴とする、請求項１７または１８に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード。
【請求項２０】
ＹはＣＨ２−ＮＨを表すことを特徴とする、請求項１９に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード。
【請求項２１】
Ｌは式（ＩＶ）：
【化７】
2018535255.tif 000369
であることを特徴とする、請求項１７〜２０のいずれか１項に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード
（式中：
・Ｌ１は、
・Ｙ＝（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ（Ｒ１１）である場合、単結合またはＮＲ１６（ヘテロ）アリール−ＣＲ１５Ｒ１４−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）基；
・Ｙ＝（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｏまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｓである場合、ＮＲ１８−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１７−Ｃ（＝Ｏ）基またはＮＲ１６（ヘテロ）アリール−ＣＲ１５Ｒ１４−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１８−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１７−Ｃ（＝Ｏ）基；
・Ｙ＝Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）Ｏまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨの場合、ＮＲ１６（ヘテロ）アリール−ＣＲ１５Ｒ１４−基を表し；
・Ｒ１１、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７およびＲ１８は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・（ＡＡ）ｗは、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２の範囲の整数を表し；
・Ｌ２は、単結合または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｉ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基またはＣＨ（ＳＯ３Ｈ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＨ（ＳＯ３Ｈ）基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−シクロヘキシル基またはＮＲ１９−（Ｃ１〜Ｃ６）
アルキル基またはＮＲ２０−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｉ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基またはＮＲ２１−アリール基またはＮＲ２１−へテロアリール基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ２２Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ２２Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ基を表し；
・Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１およびＲ２２は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・ｉは１から５０の間の整数を表し；
ＡＡは、立体配置ＤまたはＬの天然または非天然アミノ酸を示し、アラニン（Ａｌａ）、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、２−アミノ−２−シクロヘキシル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酢酸、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、システイン（Ｃｙｓ）、α，α−ジメチル−γ−アミノ酪酸、β，β−ジメチル−γ−アミノ酪酸、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リジン（Ｌｙｓ）、ε−アセチル−リジン（ＡｃＬｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、バリン（Ｖａｌ）から選択される）。
【請求項２２】
配列（ＡＡ）Ｗは式：
【化８】
2018535255.tif 000370
を有することを特徴とする、請求項２１に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード
（式中、Ｒ２３はＡＡの側鎖を表す）。
【請求項２３】
配列ＡＡは、アラニン（Ａｌａ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ε−アセチル−リジン（ＡｃＬｙｓ）、バリン（Ｖａｌ）を表すことを特徴とする、請求項２１または２２に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード。
【請求項２４】
ＲＣＧ１は：
−  −Ｃ（＝Ｏ）−ＺａＲａ基
（式中、
・Ｚａは、単結合、ＯまたはＮＨを表し、
・Ｒａは、Ｈまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、（Ｃ５〜Ｃ１０）ヘテロアリールもしくは（Ｃ３〜Ｃ７）ヘテロシクロアルキル基もしくはスクシンイミジル基を表す）；
−  次の反応基のうちの１つ：
マレイミド基
【化９】
2018535255.tif 000371
ハロアセタミド基
【化１０】
2018535255.tif 000372
（式中、Ｒ１３は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表す）；
−Ｃｌ；−Ｎ３；−ＯＨ；−ＳＨ；−ＮＨ２；
−Ｃ≡ＣＨ、
【化１１】
2018535255.tif 000373
基、または
Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルヒドロキシルアミン基
から選択されることを特徴とする、請求項１７〜２３のいずれか１項に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード。
【請求項２５】
Ｌ２は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ基またはＣＨ（ＳＯ３Ｈ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表すことを特徴とする、請求項１７〜２３のいずれか１項に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード。
【請求項２６】
次のリスト：
【化１２】
2018535255.tif 000374
【化１３】
2018535255.tif 000375
から選択される、請求項１７に記載の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロード。
【請求項２７】
式（ＩＩＩ）：
【化１４】
2018535255.tif 000376
のコンジュゲート
（式中、
・Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は請求項１〜１３に規定のとおりであり；
・ＹおよびＬは請求項１７〜２３に規定のとおりであり；
・Ｇは、リンカーの末端に存在する反応基であるＲＣＧ１と、Ａｂ上に存在する直交反応基であるＲＣＧ２との間の反応生成物を表し；
・Ａｂは抗体を表す）。
【請求項２８】
次の構造：
【化１５】
2018535255.tif 000377
を有する、請求項２７に記載の式（ＩＩＩ）のコンジュゲート。
【請求項２９】
ＲＣＧ２は、
・  抗体の表面に存在するリジン残基の側鎖が有する、リジンのε−アミノ基；
・  抗体の重鎖および軽鎖のＮ末端アミノ酸のα−アミノ基；
・  ヒンジ領域のサッカリド基；
・  鎖内ジスルフィド結合の還元によって生じるシステインのチオール、または工学的に操作されたシステインのチオール；
・  抗体の表面に存在する、一部のグルタミン残基の側鎖が有するアミド基；
・  ホルミルグリシン生成酵素を使用して導入したアルデヒド基
から選択されることを特徴とする、請求項２７または２８に記載の式（ＩＩＩ）のコンジュゲート。
【請求項３０】
・  ＲＣＧ１はＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルを表す場合、ＲＣＧ２は−ＮＨ２基を表し；
・  ＲＣＧ１はマレイミドもしくはハロアセタミド官能基または−Ｃｌ基を表す場合、ＲＣＧ２は−ＳＨ基を表し；
・  ＲＣＧ１は−Ｎ３基を表す場合、ＲＣＧ２は−Ｃ≡ＣＨ基または活性化Ｃ≡Ｃを表し；
・  ＲＣＧ１は−ＯＨ基または−ＮＨ２基を表す場合、ＲＣＧ２はカルボン酸官能基またはアミド官能基を表し；
・  ＲＣＧ１は−ＳＨ基を表す場合、ＲＣＧ２はマレイミド官能基またはハロアセタミド官能基を表し；
・  ＲＣＧ１は−Ｃ≡ＣＨ官能基または活性化Ｃ≡Ｃを表す場合、ＲＣＧ２は−Ｎ３基を表し；
・  ＲＣＧ１は、Ｏ−アルキルヒドロキシルアミン官能基またはＰｉｃｔｅｔ−Ｓｐｅｎｇｌｅｒ反応基質を表す場合、ＲＣＧ２はアルデヒド官能基またはケトン官能基を表す、
ことを特徴とする、請求項２７または２８に記載の式（ＩＩＩ）のコンジュゲート。
【請求項３１】
Ｇは：
【化１６】
2018535255.tif 000378
から選択されることを特徴とする、請求項２７〜３０のいずれか１項に記載の式（ＩＩＩ）のコンジュゲート。
【請求項３２】
工程：
【化１７】
2018535255.tif 000379
を含む、式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物を製造するための方法であって、
ここで：
−  工程（ｉ）は、カップリング試薬の存在下でのフラグメントＡＤ３と代替のＢＣとの間のペプチドカップリングであり；
−  工程（ｉｉ）は、触媒の存在下での閉環メタセシスによる大環状化であり；
−  工程（ｉｉｉ）は、酸性条件でのｐ−メトキシベンジルエーテルの脱保護であり；
−  工程（ｉｖ）は、酸化剤を使用するアルコールの酸化であり；
−  工程（ｖ）は、塩基の存在下での、適切に置換された、イソチオシネオール由来のキラルスルホニウムを使用する、不斉Ｃｏｒｅｙ−Ｃｈａｙｋｏｖｓｋｙ反応によるエポキシドの導入であり；
−  工程（ｖｉ）はアジド基の還元である、
前記方法。
【請求項３３】
式（ＩＩＩ）のコンジュゲートを製造するための方法であって、
（ｉ）：
−  修飾剤によって場合により修飾されている抗体の、場合により緩衝化された水溶液と、
−  請求項１７〜２６のいずれか１項に規定の式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロードの水溶液であって、
式（ＩＩ）の該クリプトフィシンペイロードの化学基ＲＣＧ１は該抗体上に存在する化学基ＲＣＧ２に向けて、特に抗体上に存在するアミノ基に向けて反応性であり、
前記化学基ＲＣＧ２は、適切であれば、
共有結合の形成によって式（ＩＩ）の該クリプトフィシンペイロードを該抗体に結合するように、該修飾剤によって導入されている、
該クリプトフィシンペイロードの水溶液と
を接触させ、反応させる工程と；
（ｉｉ）次いで、工程（ｉ）で形成させた該コンジュゲートを、式（ＩＩ）の該クリプトフィシンペイロードおよび／または未反応抗体および／または形成し得た任意の凝集体から場合により分離する工程と
を含む、前記方法。
【請求項３４】
医薬であって、該医薬は請求項２７〜３１のいずれか１項に記載の式（ＩＩＩ）のコンジュゲートを含むことを特徴とする、前記医薬。
【請求項３５】
医薬組成物であって、該医薬組成物は請求項２７〜３１のいずれか１項に記載の式（ＩＩＩ）のコンジュゲートを含み、また、少なくとも１つの医薬的に許容される賦形剤を含むことを特徴とする、前記医薬組成物。
【請求項３６】
抗がん剤としての、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物の使用。
【請求項３７】
抗がん剤としての、請求項２７〜３１のいずれか１項に記載の式（ＩＩＩ）のコンジュゲートの使用。
【請求項３８】
がんの処置に使用するための、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物。
【請求項３９】
がんの処置に使用するための、請求項２７〜３１のいずれか１項に記載の式（ＩＩＩ）のコンジュゲート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なクリプトフィシン化合物と、新規なクリプトフィシンペイロードと、新規なクリプトフィシンコンジュゲートと、これらを含有する組成物と、特に抗がん剤としてのこれらの治療用途とに関する。本発明はまた、これらのコンジュゲートを製造するための方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
クリプトフィシンは、ネンジュモ属の藍色細菌によって産生される大環状デプシペプチドのクラスに属する二次代謝産物である。分子のこのクラスの第１の代表、クリプトフィシン−１（Ｃ−１）は、１９９０年に藍色細菌であるネンジュモ属ｓｐから単離された（ＡＴＣＣ５３７８９；非特許文献１を参照されたい）。エポキシド官能基によって特徴づけられるクリプトフィシンＣ−１およびＣ−５２は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでの抗腫瘍活性を有することが１９９０年代初期に発見された。これらのクロロヒドリン、Ｃ−８およびＣ−５５は、非常に活性が強いが、安定な溶液として製剤化することができなかった（非特許文献２）。これらの高い活性は、細胞内での相応するエポキシドを生成するこれらの推定活性によって関連付けられた。クロロヒドリンを適切に安定化させる方法が無かった当時、クリプトフィシンＣ−５２（ＬＹ３５５７０３）は治験に入ったが、肺がんの第ＩＩ相臨床試験において３０〜４０％の疾患の安定を伴ったもののごくわずかな抗腫瘍活性を生じ、したがって中止となった（非特許文献３および非特許文献４）。
【０００３】
【化１】
2018535255.tif 000003
【０００４】
メイタンシノイドおよびオーリスタチンによるこれらの高い力価および一般的なメカニズムを考慮して、この２種の細胞障害性分子が抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）向けに臨床において検証され、この系列はＡＤＣ向けの可能性のあるチューブリン結合剤として考慮された。したがって、クリプトフィシン系列のコンジュゲートは、大環状体のパラ−ベンジル位での誘導体化から出発して開発された（非特許文献５）。
【０００５】
特許文献１には、クリプトフィシン抗体−薬物コンジュゲートが記載されているが、このコンジュゲート向けに、種々の種類のリンカーを使用して、細胞障害性部分がパラ−ベンジル位を通して抗体にリンクしている。これらは、切断可能であっても、ジスルフィドもしくはプロテアーゼ感受性であっても、切断不可能であってもよい。
【０００６】
特許文献１には、クリプトフィシン抗体−薬物コンジュゲートに関してさらなる最適化について記載されているが、この最適化によって、有力な抗腫瘍活性を提示するがマウス血漿中では不安定であることが見いだされたものの、いっぽう、非げっ歯類の血漿中では安定である、強力なクリプトフィシンコンジュゲートがもたらされた。それ故、改善された安定特性を示すクリプトフィシンコンジュゲートが必要であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】ＷＯ２０１１／００１０５２
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｅｉｓｓｌｅｒ  Ｓ．ら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２００６、２２、３７４７〜３７８９
【非特許文献２】Ｂｉｏｎｐａｌｌｙ  Ｒ．Ｒ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２００３、５２、２５〜３３
【非特許文献３】Ｅｄｅｌｍａｎ  Ｍ．Ｊ．ら、Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００３、３９、１９７〜９９
【非特許文献４】Ｓｅｓｓａ  Ｃ．ら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００２、３８、２３８８〜９６
【非特許文献５】Ａｌ−Ａｗａｒ  Ｒ．Ｓ．ら、Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００３、４６、２９８５〜３００７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、抗体に一旦コンジュゲートしたらマウス血漿中で安定な新規の大環状クリプトフィシンおよびこういった安定な環状体から構成される新規なクリプトフィシンコンジュゲートを提案することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
この点で、本発明は式（Ｉ）：
【化２】
2018535255.tif 000004
のクリプトフィシン化合物に関する
（式中：
・Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｒ２およびＲ３は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
または代替的にＲ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキルもしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨ（Ｒ１２）基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈ基を表し；
または代替的にＲ４およびＲ５は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜
Ｃ６）シクロアルキルもしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ６は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｒ７およびＲ８は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル２基を表し；
または代替的にＲ７およびＲ８は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル基もしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ９は、水素原子、−ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、ハロゲン原子、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）シクロアルキルまたは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキルから互いに独立して選択されるフェニル核の１つまたはそれ以上の置換基を表し；
・Ｒ１０は、水素原子および基（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルから選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基を表し；
・Ｗは、
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨ（Ｒ１１）、より具体的には（ＣＨ２）ｎＮＨＲ１１；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ、より具体的には（ＣＨ２）ｎＯＨ；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨ、より具体的には（ＣＨ２）ｎＳＨ；
・ＣＯ２ＨもしくはＣ（＝Ｏ）ＮＨ２；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈもしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２；または
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ３を表し；
Ｗは、フェニル核のオルト（ｏ）位、メタ（ｍ）位またはパラ（ｐ）位に位置し、
・Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、より具体的にはメチル基を表し；
・ｎは１から６の間の整数を表す）。
【００１１】
本発明はさらに、式（ＩＩ）：
【化３】
2018535255.tif 000005
のクリプトフィシンペイロードに関する
（式中：
・Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は式（Ｉ）に規定のとおりであり；
・Ｙは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１１もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｏもしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｓを表し；
または代替的にＹは、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）Ｏもしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨを表し；
または代替的にＹは、
【化４】
2018535255.tif 000006
のような（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−トリアゾール−を表し；
Ｙは、フェニル核のオルト（ｏ）位、メタ（ｍ）位またはパラ（ｐ）位に位置し；
・Ｒ１１は、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｌはリンカーを表し；
・ＲＣＧ１はリンカーの末端に存在する反応性化学基を表し、ＲＣＧ１は抗体上に存在する反応性化学基に向けて反応性である）。
【００１２】
本発明はまた、式（ＩＩＩ）：
【化５】
2018535255.tif 000007
のコンジュゲートにも関する
（式中：
・Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は式（Ｉ）に規定のとおりであり；
・ＹおよびＬは式（ＩＩ）に規定のとおりであり；
・Ｇは、リンカーの末端に存在する反応性化学基であるＲＣＧ１と、抗体（Ａｂ）上に存在する直交反応性化学基であるＲＣＧ２との間の反応生成物を表し；
・Ａｂは抗体を表す）。
【００１３】
各置換基Ｒ１〜Ｒ１１は、例に記載の空間配置（例えば、ＲもしくはＳまたは代替的にＺもしくはＥ）のうちの１つを取ることもできる。
【００１４】
式（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の化合物は、１つまたはそれ以上の不斉炭素原子を含有することができる。それ故、それらはエナンチオマーまたはジアステレオ異性体の形態で存在することができる。こういったエナンチオマーおよびジアステレオ異性体、ならびにこれらの混合物は、ラセミ混合物を含めて、本発明の一部を形成する。
【００１５】
式（Ｉ）の化合物は、例示されているものを含めて、塩基の形態で、または特に医薬的に許容される酸の、酸付加塩の形態で存在することができる。
【００１６】
定義
本発明に関して、ある特定の用語は次の定義を有する：
・アルケニル基：アルケンから１個の水素原子を取り外すことによって得られる炭化水素基。アルケニル基は直鎖であっても分枝であってもよい。言及することができる例としては、エテニル（−ＣＨ＝ＣＨ２、ビニルともいう）およびプロペニル（−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ２、アリルともいう）が挙げられる。
・アルコキシ基：基−Ｏ−アルキルであり、アルキル基は下に定義のとおりである；
・アルキル基：アルカンから１個の水素原子を取り外すことによって得られる、直鎖のまたは分枝の飽和脂肪族の炭化水素に基づく基。言及することができる例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、２，２−ジメチルプロピルおよびヘキシル基が挙げられる；
・アルキレン基：アルカンから２個の水素原子を取り外すことによって得られる、実験式−ＣｎＨ２ｎ−の飽和した二価の基。アルキレン基は直鎖であっても分枝であってもよい。言及することができる例としては、メチレン（−ＣＨ２−）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ブチレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）およびヘキシレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）基または次の分枝基；
【化６】
2018535255.tif 000008
が挙げられ、好ましくは、アルキレン基は、式−（ＣＨ２）ｎ−のもので、ｎは、整数を表す；値の範囲には限度値が含まれる（例えば、「１から６までの範囲のｎ」または「１から６の間」というタイプの範囲は、限度値１および６を含む）；
・抗体：生物学的標的に対して親和性を有する抗体、より具体的にはモノクローナル抗体。抗体の機能は、細胞傷害性化合物としての生物学的活性化合物を生物学的標的に向けて誘導することである。抗体は、モノクローナルであっても、ポリクローナルであっても、多重特異性であってもよい；これはまた抗体フラグメントであってもよい；これはまた、マウス抗体でも、キメラ抗体でも、ヒト化抗体でもヒト抗体でもよい。「抗体」は、２本の重鎖が相互にジスルフィド結合によって連結し、各重鎖が軽鎖に対してジスルフィド結合によって連結している、天然の、または従来の抗体であってよい（「完全長抗体」ともいう）。用語「従来の（または完全長）抗体」とは、シグナルペプチド（またはプロペプチド、存在する場合）を含む抗体と、上記の鎖が分泌されかつタンパク質分解の処理を受けて得られる成熟型と、の両方を指す。ラムダ（ｌ）およびカッパ（ｋ）の２タイプの軽鎖が存在する。主たる５つ重鎖のクラス（またはアイソタイプ）：ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡおよびＩｇＥが存在し、これらは抗体分子の機能的活性を決定する。各鎖は、別個の配列のドメインを含有する。軽鎖は、１つの可変ドメイン（ＶＬ）および１つの定常ドメイン（ＣＬ）の、２つのドメインまたは領域を含む。重鎖は、１つの可変ドメイン（ＶＨ）および３つの定常ドメイン（集合的にＣＨと呼ぶ、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）の４つのドメインを含む。軽鎖（ＶＬ）および重鎖（ＶＨ）両方の可変ドメインは、抗原に対する結合の認識および特異性を決定する。軽鎖（ＣＬ）および重鎖（ＣＨ）の定常領域ドメインは、抗体鎖の会合、分泌、経胎盤の移動性、補体結合、およびＦｃ受容体（ＦｃＲ）に対する結合のような、重要な生物学的性質を付与する。Ｆｖフラグメントは、免疫グロブリンのＦａｂフラグメントのＮ末端部分であり、１本の軽鎖および１本の重鎖の可変ポーションからなる。抗体の特異性は、抗体の結合性の部位と抗原性決定基との間の構造的な相補性にある。抗体の結合性の部位は、主に高頻度可変性領域、または相補性決定領域（ＣＤＲ）に由来する残基から構成されている。時には、非高頻度可変性領域、またはフレームワーク領域（ＦＲ）由来の残基がドメイン構造全体に、それゆえに結合部位に影響を及ぼす。相補性決定領域すなわちＣＤＲとは、天然の免疫グロブリン結合部位の自然のＦｖ領域の結合親和性および特異性を一緒に規定するアミノ酸配列を指す。免疫グロブリンの軽鎖および重鎖それぞれは、ＣＤＲ１−Ｌ、ＣＤＲ２−Ｌ、ＣＤＲ３−Ｌ、およびＣＤＲ１−Ｈ、ＣＤＲ２−Ｈ、ＣＤＲ３−Ｈとそれぞれ呼ばれる、３つのＣＤＲを有する。したがって、従来の抗体の抗原結合部位は、重鎖のＶ領域および軽鎖のＶ領域のそれぞれに由来するＣＤＲのセットを含む、６つのＣＤＲを含む。本明細書で使用する用語「抗体」とは、従来の（完全長）抗体およびそのフラグメント、ならびに単一ドメイン抗体およびそのフラグメント、特に単一ドメイン抗体の可変重鎖を示す。（従来の）抗体のフラグメントは、インタクトな抗体のポーション、特に、インタクトな抗体の抗原結合性領域または可変領域を典型的に含み、従来の抗体の生物学的機能を保持している。そのようなフラグメントの例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、ｄｓＦｖ、（ｄｓＦｖ）２、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２およびダイアボディが挙げられる。
【００１７】
抗体の機能は、細胞傷害性化合物としての生物学的活性化合物を生物学的標的に向けて誘導することである。
・アリール基：５〜１０個の間の炭素原子を含有する環式芳香族基。アリール基の例としては、フェニル、トリル、キシリル、ナフチルが挙げられる；
・生物学的標的：好ましくは、がん細胞または本腫瘍に関連する間質細胞の表面に存在している抗原（または抗原の群）；こういった抗原は、例えば、増殖因子受容体、がん遺伝子産物もしくは変異「腫瘍抑制」遺伝子産物、血管新生関連分子または接着分子とすることができる；
・コンジュゲート：抗体−薬物コンジュゲートまたはＡＤＣ、すなわち、細胞傷害性化合物の少なくとも１つの分子がリンカーを介して共有結合で結合している抗体；
・シクロアルキル基：環状構造に係合している３個から６個の間の炭素原子を含む環状アルキル基。言及することができる例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル基が挙げられる；
・ＤＡＲ（薬物／抗体比）：リンカーを介して１抗体に結合している細胞障害性分子の平均数；
・ハロゲン：４つの元素、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素のいずれか；
・ヘテロアリール基：２〜１０個の間の炭素原子と、当該環に係合しかつ当該環を形成している炭素原子に結合している窒素、酸素または硫黄のような１〜５個の間のヘテロ原子と、を含有するアリール基。ヘテロアリール基の例としては、ピリジル、ピリミジル、チエニル、イミダゾリル、トリアゾリル、インドリル、イミダゾ−ピリジル、ピラゾリルが挙げられる；
・ヘテロシクロアルキル基：２〜８個の間の炭素原子と、当該環に係合しかつ当該環を形成している炭素原子に結合している窒素、酸素または硫黄のような１〜３個の間のヘテロ原子と、を含有するシクロアルキル基。例としては、アジリジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフラニル、テトラヒドロピラニル、アゼチジニル、オキセタニルおよびピラニルが挙げられる；
・リンカー：コンジュゲートを形成するために、細胞傷害性化合物を抗体に共有結合で結合させることができる原子団または単結合；
・フラグメント：クリプトフィシン化合物の全合成を可能とするより単純な分子；
・ペイロード：リンカーが共有結合で結合している細胞障害性物質；
・反応性化学基：化学反応を進行させるかまたは起こすことができる原子団。
【００１８】
略語
ＡＤＣ：抗体−薬物コンジュゲート；ＡｃＯＨ：酢酸；ＡＩＢＮ：アゾビスイソブチロニトリル；ＡＬＫ：（Ｃ１〜Ｃ１２）アルキレン基、より具体的には（Ｃ１〜Ｃ６）アルキレン、より具体的には−（ＣＨ２）ｎ−の形態のもの、ここで、ｎは、１から１２の整数、好ましくは１から６の整数である；ａｑ．：水性；Ａｒ：アルゴン；ＡＵＣ：曲線下面積；ＢＥＭＰ：２−ｔｅｒｔ−ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１，３−ジメチルペルヒドロ−１，３，２−ジアザホスホリン；ＢＦ３：三フッ化ホウ素；Ｂｏｃ２Ｏ：ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート；ＢｕＬｉ：ブチルリチウム；ＣＡＮ：硝酸セリウムアンモニウム；Ｃｂｚ：カルボキシベンジル；ＣＨＣｌ３：クロロホルム；ＣＨ３ＣＮ：アセトニトリル；ＣＨ３Ｉ：ヨウ化メチル；ＣＯ２：二酸化炭素；ＣＬ：クリアランス；ｍ−ＣＰＢＡ：ｍ−クロロ過安息香酸；ＣＲ：完全奏功；
クリプトは、式
【化７】
2018535255.tif 000009
のユニットを示し、ここで、クリプトは、後に記載のＤ１〜Ｄ１９クリプトフィシン化合物のうちの１つまたは一例の一クリプトフィシン化合物を特に示す；Ｄ１とは１のＤＡＲを有するＡＤＣを指し、Ｄ２とは２のＤＡＲを有するＡＤＣを指す、等；ｄ：日；ＤＡＲ：薬物対抗体比；ＤＢＵ：８−ジアザビシクロ「５．４．０」ウンデカ−７−エン；ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド；ＤＣＥ：ジクロロエタン；ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＤＤＱ：２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン；ＤＩＣ：Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド；ＤＩＡＤ：ジイソプロピルアゾジカルボキシレート；ＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＡ：ジメチルアセトアミド；ＤＭＡＰ：４−（ジメチルアミノ）ピリジン；ＤＭＥ：ジメトキシエタン；ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地；ＤＭＥＭ／Ｆ１２：ダルベッコ改変イーグル培地栄養素混合物Ｆ−１２；ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；ＤＰＢＳ：ダルベッコのリン酸緩衝食塩水；ＤＰＰＡ：ジフェニルホスホラジド（ＰｈＯ）２Ｐ（＝Ｏ）Ｎ３；ＤＳＣ：Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカーボネート；ＥＤＡ：エチレンジアミン；ＥＤＣ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド；ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸；ＥＥＤＱ：Ｎ−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキノリン；ＥＬＳＤ：蒸発光散乱検出器；ｅｑ．：当量；ＥＳ：エレクトロスプレー；ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル；ＥｔＯＨ：エタノール；Ｅｘ．：例；ＦＣＳ：ウシ胎児血清；Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル；ＦｍｏｃＯＳｕ：Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ）スクシンイミド；ＧＩ：電気誘導性基（ｅｌｅｃｔｒｏｉｎｄｕｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐ）；グラブスＩ：ベンジリデン−ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ジクロロルテニウム；グラブスＩＩ：（１，３−ビス（２，４，６−トリメチルフェニル）−２−イミダゾリジニリデン）ジクロロ（フェニルメチレン）（トリシクロヘキシルホスフィン）ルテニウム；ｈ：時；Ｈ２Ｏ：水；Ｈａｌ：ハロゲン；ＨＡＴＵ：１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＨＣｌ：塩化水素酸；ＨＥＰＥＳ：４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸；ＨＩＣ：疎水性相互作用クロマトグラフィー；ＨＯＡｔ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール；ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール；ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー；ＨＲＭＳ：高分解能質量分析；ＩＣ５０：半抑制濃度；ｉ．ｅ．：ｉｄ  ｅｓｔはすなわちを意味する；ＩＥＣ：イオン交換クロマトグラフィー；ｉＰｒＯＨ：２−プロパノール；ｉＰｒ２Ｏ：ジイソプロピルエーテル；ｉ．ｖ．：静脈内；Ｋ２ＣＯ３：炭酸カリウム；ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド；ＬｉＯＨ：水酸化リチウム；ｍａｒｇ．：ごくわずかに；ＭｅＯＨ：メタノール；ＭｅＴＨＦ：２−メチル−テトラヒドロフラン；ＭｇＳＯ４：硫酸マグネ��ウム；ｍｉｎ：分；ＭＮＢＡ：２−メチル−６−ニトロ安息香酸無水物；ＭＴＢＥ：メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル；ＭＴＤ：最大耐性量；ＮａＨ：水素化ナトリウム；ＮａＨＳＯ４：重硫酸ナトリウム；Ｎａ２Ｓ２Ｏ３：チオ硫酸ナトリウム；ＮａＣｌ：塩化ナトリウム；ＮａＨＣＯ３：炭酸水素ナトリウム；ＮａＨＳＯ３：亜硫酸水素ナトリウム；ＮａＨＳＯ４：硫酸水素ナトリウム；ＮａＯＨ：水酸化ナトリウム；ＮＨ４Ｃｌ：塩化アンモニウム；ＮＨＳ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド；ＮＭＰ：１−メチル−２−ピロリドン；ＮＭＲ：核磁気共鳴；Ｐ２−Ｅｔ：１−エチル−２，２，４，４，４−ペンタキス（ジメチルアミノ）−２λ５，４λ５−カテナジ（ホスファゼン）；ＰＢＳ：リン酸緩衝食塩水；ＰＥＧ：ポリエチレングリコール；ＰＫ：薬物動態；ＰＭＢ：パラ−メトキシベンジル；ＰＮＧａｓｅ  Ｆ：ペプチド−Ｎ−グリコシダーゼＦ；ＰＰｈ３：トリフェニルホスフィン；ｐｐｍ：百万分率；ＰＲ：部分奏功；ＱＳ：ｑｕａｎｔｕｍ  ｓａｔｉｓとは必要とされる量を意味する；Ｑ−Ｔｏｆ：四重極飛行時間；ｑｕａｎｔ．：定量的収量；ＲＣＧ：反応性化学基；ＲＴ：室温；ｓａｔ．：飽和；ｓ．ｃ．：皮下；ＳＣＩＤ：重症複合免疫不全症；ＳＥＣ：サイズ排除クロマトグラフィー；ＴＢＡＦ：テトラブチルアンモニウムフルオライド；ｔＢｕＯＫ：カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド；ＴＣＥＰ：トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩；ＴＥＡ：トリエチルアミン；ＴＥＭＰＯ：（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシル；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；ＴＦＳ：無腫瘍生存；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；ＴＨＰ：テトラヒドロピラン；ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー；ｔ１／２：半減期；ｔＲ：保持時間；ｐ−ＴｓＯＨ：パラ−トルエンスルホン酸；ＵＰＬＣ：超高速液体クロマトグラフィー；ＵＶ：紫外線；Ｖｓｓ：定常状態での見かけの分布容積。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】実施例３の高分解能質量スペクトルを示す図である。
【図２】実施例７の高分解能質量スペクトルを示す図である。
【図３】実施例１０の高分解能質量スペクトルを示す図である。
【図４】実施例１４の高分解能質量スペクトルを示す図である。
【図５】実施例２０の高分解能質量スペクトルを示す図である。
【図６】実施例２３の高分解能質量スペクトルを示す図である。
【図７】ＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植に対する実施例３のインビボ効果を示す図である。
【図８】ＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植に対する実施例７のインビボ効果を示す図である。
【図９】ＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植に対する実施例１０のインビボ効果を示す図である。
【図１０】ＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植に対する実施例１４のインビボ効果を示す図である。
【図１１】ＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植に対する実施例２０のインビボ効果を示す図である。
【図１２】ＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植に対する実施例２３のインビボ効果を示す図である。
【図１３】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後のＡＤＣ１のインビボＰＫプロファイルを示す図である。
【図１４】非げっ歯類における単回静脈内投与後のＡＤＣ１のインビボＰＫプロファイルを示す図である。
【図１５】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後の実施例３のインビボＰＫプロファイルを示す図である。
【図１６】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後の実施例７のインビボＰＫプロファイルを示す図である。
【図１７】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後９６時間目での脱グリコシルしたＡＤＣ１のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【図１８】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後９６時間目でのＡＤＣ２軽鎖のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【図１９】非げっ歯類における単回静脈内投与後６日目での脱グリコシルしたＡＤＣ１のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【図２０】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後９６時間目での実施例３のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【図２１】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後９６時間目での実施例７のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【図２２】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後９６時間目での実施例１０のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【図２３】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後９６時間目での実施例１４のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【図２４】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後９６時間目での実施例２０のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【図２５】ＳＣＩＤマウスにおける単回静脈内投与後９６時間目での実施例２３のＨＲＭＳスペクトルを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明は、式（Ｉ）：
【化８】
2018535255.tif 000010
のクリプトフィシン化合物に関する
（式中：
・Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｒ２およびＲ３は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
または代替的にＲ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキルもしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ４およびＲ５は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨ（Ｒ１２）基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈ基を表し；
または代替的にＲ４およびＲ５は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキルもしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ６は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｒ７およびＲ８は、互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈ基もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル２基を表し；
または代替的にＲ７およびＲ８は、それらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル基もしくは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基を形成し；
・Ｒ９は、水素原子、−ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、ハロゲン原子、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたは−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル２または−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ６）シクロアルキルまたは（Ｃ３〜Ｃ６）ヘテロシクロアルキル基から互いに独立して選択されるフェニル核の１つまたはそれ以上の置換基を表し；
・Ｒ１０は、水素原子および基（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルから選択されるフェニル核の少なくとも１つの置換基を表し；
・Ｗは、
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨ（Ｒ１１）、より具体的には（ＣＨ２）ｎＮＨＲ１１；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ、より具体的には（ＣＨ２）ｎＯＨ；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨ、より具体的には（ＣＨ２）ｎＳＨ；
・ＣＯ２ＨもしくはＣ（＝Ｏ）ＮＨ２；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈもしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２；または
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ３を表し；
Ｗは、フェニル核のオルト（ｏ）位、メタ（ｍ）位またはパラ（ｐ）位に位置し、
・Ｒ１１およびＲ１２は、互いに独立して、水素原子または基（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、より具体的にはメチル基を表し；
・ｎは１から６の間の整数を表す）。
【００２１】
クリプトフィシン化合物は、次のＤ１〜Ｄ１９：
【化９】
2018535255.tif 000011
【化１０】
2018535255.tif 000012
のうちの１つとすることができる
（式中：
・ＷおよびＲ１２は式（Ｉ）に既定のとおりである）。
【００２２】
または、クリプトフィシン化合物は、上記例のうちの１つに記載の同等のユニットとすることができる。
【００２３】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１の群の化合物は、Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表す化合物から構成される。
【００２４】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第２の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３のそれぞれは水素原子を表す化合物から構成される。
【００２５】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第３の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３の一方は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表し、他方は水素原子を表す化合物から構成される。
【００２６】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第４の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３はそれらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル基、特にシクロプロピル基を形成している化合物から構成される。
【００２７】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第５の群の化合物は、Ｒ４およびＲ５のそれぞれは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表す化合物から構成される。
【００２８】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第６の群の化合物は、Ｒ６は水素原子を表す化合物から構成される。
【００２９】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第７の群の化合物は、Ｒ７およびＲ８は互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表す化合物から構成される。
【００３０】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第８の群の化合物は、Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表す化合物から構成される。より具体的には、フェニル核は２つの置換基をフェニル核の３位および４位に含む。好ましくは、これは３−Ｃｌおよび４−メトキシである。
【００３１】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第９の群の化合物は、Ｒ１０は水素原子を表す化合物から構成される。
【００３２】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１０の群の化合物は、Ｗはフェニル核のパラ位に位置している化合物から構成される。
【００３３】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１１の群の化合物は、Ｗは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨＲ１１、特に（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＮＨＲ１１、特にＣＨ２−ＮＨ２ 基；（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ、特に（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＯＨ、特にＣＨ２−ＯＨ基；（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨ、特に（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＳＨ、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈ、特に（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＣＯ２Ｈから選択される、化合物から構成される。
【００３４】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１２の群の化合物は、Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表し、Ｒ２およびＲ３のそれぞれは水素原子を表し、Ｒ６は水素原子を表し、Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表し、より具体的には、フェニル核は２つの置換基をフェニル核の３位および４位に含み、好ましくは、これは３−Ｃｌおよび４−メトキシであり、Ｒ１０は水素原子を表す、化合物から構成される。
【００３５】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１３の群の化合物は、Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表し、Ｒ２およびＲ３の一方は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表し、他方は水素原子を表し、Ｒ６は水素原子を表し、Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表し、より具体的には、フェニル核は２つの置換基をフェニル核の３位および４位に含み、好ましくは、これは３−Ｃｌおよび４−メトキシであり、Ｒ１０は水素原子を表す、化合物から構成される。
【００３６】
代替的に、Ｗは（ＣＨ２）ｎＮＨＲ１１、（ＣＨ２）ｎＳＨ、（ＣＨ２）ｎＯＨから選択され、ここで、ｎは１から６の間の整数を表す。
【００３７】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１４の群の化合物は、次の構造（ベータエポキシド立体配置）：
【化１１】
2018535255.tif 000013
の化合物から構成される。
【００３８】
単独でまたは組み合わせで使用されるこういったサブグループの全ては本発明の一部である。
【００３９】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、次の化合物：
【化１２】
2018535255.tif 000014
【化１３】
2018535255.tif 000015
を特に言及することができる。
【００４０】
本発明はさらに、式（ＩＩ）：
【化１４】
2018535255.tif 000016
のクリプトフィシンペイロードに関する
（式中：
・Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は式（Ｉ）に規定のとおりであり；
・Ｙは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１１または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｏもしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｓを表し；
または代替的にＹは、Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）Ｏもしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨを表し；
または代替的にＹは、
【化１５】
2018535255.tif 000017
のような（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−トリアゾール−を表し；
Ｙは、フェニル核のオルト（ｏ）位、メタ（ｍ）位もしくはパラ（ｐ）位に位置し；
・Ｒ１１は、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｌはリンカーを表し；
・ＲＣＧ１はリンカーの末端に存在する反応性化学基を表し、ＲＣＧ１は抗体上に存在する反応性化学基に向けて反応性である）。
【００４１】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第１の群の化合物は、Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表す化合物から構成される。
【００４２】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第２の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３のそれぞれは水素原子を表す化合物から構成される。
【００４３】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第３の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３の一方は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表し、他方は水素原子を表す化合物から構成される。
【００４４】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第４の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３はそれらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル基、特にシクロプロピル基を形成している化合物から構成される。
【００４５】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第５の群の化合物は、Ｒ４およびＲ５のそれぞれは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、特にメチル基を表す化合物から構成される。
【００４６】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第６の群の化合物は、Ｒ６は水素原子を表す化合物から構成される。
【００４７】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第７の群の化合物は、Ｒ７およびＲ８は互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表す化合物から構成される。
【００４８】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第８の群の化合物は、Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表す化合物から構成される。より具体的には、フェニル核は２つの置換基をフェニル核の３位および４位に含む。好ましくは、これは３−Ｃｌおよび４−メトキシである。
【００４９】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第９の群の化合物は、Ｒ１０は水素原子を表す化合物から構成される。
【００５０】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第１０の群の化合物は、Ｙはフェニル核のパラ位に位置している化合物から構成される。
【００５１】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第１１の群の化合物は、Ｙは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１１特に（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＮＲ１１より具体的には
ＣＨ２−ＮＨを表す化合物から構成される。
【００５２】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１２の群の化合物は、Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表し、Ｒ２およびＲ３のそれぞれは水素原子を表し、Ｒ６は水素原子を表し、Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表し、より具体的には、フェニル核は２つの置換基をフェニル核の３位および４位に含み、好ましくは、これは３−Ｃｌおよび４−メトキシであり、Ｒ１０は水素原子を表す、化合物から構成される。
【００５３】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１３の群の化合物は、Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表し、Ｒ２およびＲ３の一方は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表し、他方は水素原子を表し、Ｒ６は水素原子を表し、Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表し、より具体的には、フェニル核は２つの置換基をフェニル核の３位および４位に含み、好ましくは、これは３−Ｃｌおよび４−メトキシであり、Ｒ１０は水素原子を表す、化合物から構成される。
【００５４】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第１４の群の化合物は、次の構造（ベータエポキシド立体配置）：
【化１６】
2018535255.tif 000018
の化合物から構成される。
【００５５】
単独でまたは組み合わせで使用されるこういったサブグループの全ては本発明の一部である。
【００５６】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、次の化合物：
【化１７】
2018535255.tif 000019
【化１８】
2018535255.tif 000020
を特に言及することができる。
【００５７】
本発明はまた、式（ＩＩＩ）：
【化１９】
2018535255.tif 000021
コンジュゲートにも関する
（式中：
・Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は式（Ｉ）に規定のとおりであり；
・ＹおよびＬは式（ＩＩ）に規定のとおりであり；
・Ｇは、リンカーの末端に存在する反応性化学基であるＲＣＧ１と、抗体（Ａｂ）上に存在する直交反応性化学基であるＲＣＧ２との間の反応生成物を表し；
・Ａｂは抗体を表す）。
【００５８】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第１の群の化合物は、Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、特にメチル基を表す化合物から構成される。
【００５９】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第２の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３のそれぞれは水素原子を表す化合物から構成される。
【００６０】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第３の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３の一方は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、特にメチル基を表し、他方は水素原子を表す化合物から構成される。
【００６１】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第４の群の化合物は、Ｒ２およびＲ３はそれらが結合している炭素原子と一緒に（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル基、特にシクロプロピル基を形成している化合物から構成される。
【００６２】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第５の群の化合物は、Ｒ４およびＲ５のそれぞれは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、特にメチル基を表す化合物から構成される。
【００６３】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第６の群の化合物は、Ｒ６は水素原子を表す化合物から構成される。
【００６４】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第７の群の化合物は、Ｒ７およびＲ８は互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表す化合物から構成される。
【００６５】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第８の群の化合物は、Ｒ９は、メトキシ基および塩素原子から選択される２つの置換基を表す化合物から構成される。より具体的には、フェニル核は２つの置換基をフェニル核の３位および４位に含む。好ましくは、これは３−Ｃｌおよび４−メトキシである。
【００６６】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第９の群の化合物は、Ｒ１０は水素原子を表す化合物から構成される。
【００６７】
本発明の主題である、式（ＩＩ）の化合物のうちで、第１０の群の化合物は、Ｙはフェニル核のパラ位に位置している化合物から構成される。
【００６８】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、第１１の群の化合物は、Ｙは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１１特に（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル−ＮＲ１１より具体的にはＣＨ２−ＮＨを表す化合物から構成される。
【００６９】
本発明の主題である、式（Ｉ）の化合物のうちで、第１２の群の化合物は、次の構造（ベータエポキシド立体配置）：
【化２０】
2018535255.tif 000022
の化合物から構成される。
【００７０】
単独でまたは組み合わせで使用されるこういったサブグループの全ては本発明の一部である。
【００７１】
本発明の主題である、式（ＩＩＩ）の化合物のうちで、次の化合物：
【化２１】
2018535255.tif 000023
【化２２】
2018535255.tif 000024
を特に言及することができる。
【００７２】
式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロードと抗体の間の結合は、式（ＩＩＩ）のコンジュゲートを得るために、抗体上に存在する反応基ＲＣＧ２に向けて反応性である、ペイロード上に存在する反応性化学基ＲＣＧ１によって、生じる。ＲＣＧ１とＲＣＧ２の間の反応によって、共有結合が形成されることで式（ＩＩ）の化合物が抗体に結合することが確保される。式（ＩＩＩ）のコンジュゲートでは、ＲＣＧ１の一部とＲＣＧ２の一部とが、リンカーと抗体の間の結合を形成し続けることが可能である。
【００７３】
言及することができるＲＣＧ１の例としては、
（ｉ）−Ｃ（＝Ｏ）−ＺａＲａ反応基、ここで、Ｚａは、単結合、ＯまたはＮＨ、より具体的にはＯを表し、Ｒａは、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリールもしくは（Ｃ３〜Ｃ７）ヘテロシクロアルキル基を表す。アリール基は、ハロゲン、特にＦ、アルキル、アルコキシ、ニトロおよびシアノ基から選択される１〜５の基によって置換されていてもよい；
（ｉｉ）次の反応基のうちの１つ；
マレイミド基；
【化２３】
2018535255.tif 000025
ハロアセタミド基
【化２４】
2018535255.tif 000026
（式中、Ｒ１３は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、より具体的にはＭｅを表す）；
−Ｃｌ；−Ｎ３；−ＯＨ；−ＳＨ；−ＮＨ２；−Ｃ≡ＣＨまたは
【化２５】
2018535255.tif 000027
のようなシクロオクチン部分等の活性化Ｃ≡ＣＣ；
Ｏ−アルキルヒドロキシルアミン基または
Ａｇａｒｗａｌ  Ｐら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ ２０１３、２４、８４６〜８５１に記載の
【化２６】
2018535255.tif 000028
等のＰｉｃｔｅｔ−Ｓｐｅｎｇｌｅｒ反応基質、
を挙げることができる。
【００７４】
より具体的には、−ＺａＲａは、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、
【化２７】
2018535255.tif 000029
（Ｏ−ＮＨＳ）または
【化２８】
2018535255.tif 000030
（式中、カチオンは例えばナトリウム、カリウム、またはセシウムを表す）または
【化２９】
2018535255.tif 000031
または
【化３０】
2018535255.tif 000032
基（式中、ＧＩは、−ＮＯ２または−Ｈａｌ、特に−Ｆ等の少なくとも１つの電気誘導性基を表す）を表す。
【００７５】
これらは例えば次の基：
【化３１】
2018535255.tif 000033
であってもよい。−Ｃ（＝Ｏ）ＺａＲａ基の別のタイプの次の通り：
【化３２】
2018535255.tif 000034
である。より具体的には、ＲＣＧ１は例に記載のもののうちの１つから選択することができる。
【００７６】
言及することができるＲＣＧ２の例としては：
（ｉ）抗体の表面に存在するリジン残基の側鎖が有する、リジンのε−アミノ基；
（ｉｉ）抗体の重鎖および軽鎖のＮ末端アミノ酸のα−アミノ基；
（ｉｉｉ）ヒンジ領域のサッカリド基；
（ｉｖ）鎖内ジスルフィド結合の還元によって生じるシステインのチオール、または工学的に操作されたシステインのチオール；
（ｖ）抗体の表面に存在する、一部のグルタミン残基の側鎖が有するアミド基；
（Ｖｉ）ホルミルグリシン生成酵素を使用して導入したアルデヒド基
が挙げられる（Ｇａｒｎｅｔｔ  Ｍ．Ｃ．ら、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２００１、５３、１７１〜２１６）。
【００７７】
さらに最近、他のコンジュゲーションアプローチ、例えば、突然変異によるシステインの導入（Ｊｕｎｕｔｕｌａ  Ｊ．Ｒ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２００８、２６、９２５〜９３２）、他のタイプの化学反応を可能にする非天然アミノ酸の導入（Ａｘｕｐ  Ｊ．Ｙ．ら、ＰＮＡＳ  ２０１２、１０９、４０、１６１０１〜１６１０６）、または抗体グリカン上でのコンジュゲーション（Ｚｈｏｕ  Ｑ．ら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２０１４、２５、５１０〜５２０）が検討されている。抗体の部位特異的修飾に関する別のアプローチは、例えば微生物トランスグルタミナーゼ（Ｊｅｇｅｒ  Ｓ．ら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１０、４９、９９９５〜９９９７；Ｓｔｒｏｐ  Ｐ．ら、Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２０１３、２０、１６１〜１６７）またはホルミルグリシン生成酵素（Ｈｕｄａｋ  Ｊ．Ｅ．ら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１２、５１、４１６１〜４１６５）を使用する、酵素による標識に基づいている。部位特異的コンジュゲーションの戦略に関する総説については、Ａｇａｒｗａｌ  Ｐ．およびＢｅｒｔｏｚｚｉ  Ｃ．Ｒ．、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ  ２０１５、２６、１７６〜１９２を参照されたい。こういったコンジュゲーション技法はまた、本発明に記載のクリプトフィシンペイロードに適用できる。
【００７８】
抗体を化学的に修飾して新規な反応性化学基ＲＣＧ２を導入することも可能である。したがって、例えば活性化ジスルフィド、チオール、マレイミドまたはハロアセタミド基を導入する修飾剤を用いて抗体を修飾する方法は、当業者によく知られている（とりわけＷＯ２００５／０７７０９０、１４頁およびＷＯ２０１１／００１０５２を参照されたい）。上記の修飾によって、コンジュゲーション反応の改善およびより幅広い様々な基ＲＣＧ１の使用が可能となる。
【００７９】
より具体的には、ＲＣＧ１が上のタイプ（ｉｉ）のものである場合、適切な修飾剤を使用して抗体を化学修飾することが可能であり、または１つもしくはそれ以上の非天然アミノ酸を導入して適切な官能基ＲＣＧ２を導入することが可能である。例えば：
−  ＲＣＧ１はＮ−ヒドロキシスクシンイミジルエステルを表す場合、ＲＣＧ２は−ＮＨ２基を表し；
−  ＲＣＧ１はマレイミドもしくはハロアセタミド官能基または−Ｃｌ基を表す場合、ＲＣＧ２は−ＳＨ基とすることができ； 
−  ＲＣＧ１は−Ｎ３基を表す場合、ＲＣＧ２は−Ｃ≡ＣＨ基またはシクロオクチン部分等の活性化Ｃ≡Ｃとすることができ；
−  ＲＣＧ１は−ＯＨ基または−ＮＨ２基を表す場合、ＲＣＧ２はカルボン酸官能基またはアミド官能基とすることができ；
−  ＲＣＧ１は−ＳＨ基を表す場合、ＲＣＧ２はマレイミド官能基またはハロアセタミド官能基とすることができ；
−  ＲＣＧ１は−Ｃ≡ＣＨ官能基または活性化Ｃ≡Ｃを表す場合、ＲＣＧ２は−Ｎ３基とすることができ；
−  ＲＣＧ１は、Ｏ−アルキルヒドロキシルアミン官能基またはＰｉｃｔｅｔ−Ｓｐｅｎｇｌｅｒ反応基質を表す場合、ＲＣＧ２はアルデヒド官能基またはケトン官能基とすることができる。
【００８０】
言及することができるＧの例としては：
【化３３】
2018535255.tif 000035
を挙げることができる。
【００８１】
本発明は、式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロードと式（ＩＩＩ）のコンジュゲート：
【化３４】
2018535255.tif 000036
とに関し、
【００８２】
ここで、リンカーＬは式（ＩＶ）：
【化３５】
2018535255.tif 000037
である
（式中：
・Ｌ１は、
・Ｙ＝（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ（Ｒ１１）である場合、単結合またはＮＲ１６（ヘテロ）アリール−ＣＲ１５Ｒ１４−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）基；
・Ｙ＝（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｏ−または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｓである場合、ＮＲ１８−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１７−Ｃ（＝Ｏ）基またはＮＲ１６（ヘテロ）アリール−ＣＲ１５Ｒ１４−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１８−（Ｃ２〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１７−Ｃ（＝Ｏ）基；
・Ｙ＝Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）Ｏまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨの場合、ＮＲ１６（ヘテロ）アリール−ＣＲ１５Ｒ１４基を表し；
・Ｒ１１、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７およびＲ１８は、互いに独立して、Ｈまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・（ＡＡ）ｗは、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２、好ましくは１から６の範囲の整数を、より具体的には２または３を表し；
・Ｌ２は、単結合または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｉ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基またはＣＨ（ＳＯ３Ｈ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＨ（ＳＯ３Ｈ）基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−シクロヘキシル基またはＮＲ１９−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基またはＮＲ２０−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｉ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基またはＮＲ２１−アリール基またはＮＲ２１−へテロアリール基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ２２Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ２２Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ基を表す。より具体的には、Ｌ２は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ基またはＣＨ（ＳＯ３Ｈ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１およびＲ２２は、互いに独立して、Ｈまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・ｉは１から５０の間の、好ましくは１から１０の間の整数を表す。（ｉは１と５０の間の全ての値を取ることができる））。
【００８３】
ＡＡは、立体配置ＤまたはＬの天然または非天然アミノ酸を示し、より具体的には：アラニン（Ａｌａ）、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、２−アミノ−２−シクロヘキシル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酢酸、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、システイン（Ｃｙｓ）、α，α−ジメチル−γ−アミノ酪酸、β，β−ジメチル−γ−アミノ酪酸、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リジン（Ｌｙｓ）、ε−アセチル−リジン（ＡｃＬｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、バリン（Ｖａｌ）から選択される。より具体的には、ＡＡは、アラニン（Ａｌａ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ε−アセチル−リジン（ＡｃＬｙｓ）、バリン（Ｖａｌ）から選択される。
【００８４】
配列（ＡＡ）ｗは式：
【化３６】
2018535255.tif 000038
を有する
（式中、Ｒ２３は、上に記載のアミノ酸のうちの１つの側鎖を表す）。配列の例は次のとおりである：Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−ＡｃＬｙｓ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ａｌａ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ａｌａ、Ｐｈｅ−Ｃｉｔ、Ｌｅｕ−Ｃｉｔ、Ｉｌｅ−Ｃｉｔ、Ｔｒｐ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ａｌａ、Ａｌａ−Ｐｈｅ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｈｅ、Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｃｉｔ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ。
【００８５】
Ｙ＝（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ（Ｒ１１）、より具体的にはＣＨ２ＮＨの場合、ＲＣＧ１−Ｌは次の（ＩＶ１〜１７）：
【００８６】
【表１】
2018535255.tif 000039
【００８７】
【表２】
2018535255.tif 000040
のうちの１つとすることができる
（式中：
・（ＡＡ）ｗは、上に記載の、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２、好ましくは１から６の範囲の整数を、より具体的には２または３を表し；
・ｉは１から５０の間の、好ましくは１から１０の間の整数を表し（ｉは１と５０の間の全ての値を取ることができる）；
・Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３およびＭ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、より具体的には水素原子またはメチル基を表す）。
【００８８】
Ｙ＝（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｏまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｓ、より具体的にはＣＨ２ＯまたはＣＨ２Ｓの場合、ＲＣＧ１−Ｌは次の（ＩＶ１８〜３４）：
【００８９】
【表３】
2018535255.tif 000041
【００９０】
【表４】
2018535255.tif 000042
のうちの１つとすることができる
（式中：
・（ＡＡ）ｗは、上に記載の、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２、好ましくは１から６の範囲の整数を、より具体的には２または３を表し；
・ｉは１から５０の間の、好ましくは１から１０の間の整数を表し（ｉは１と５０の間の全ての値を取ることができる）；
・Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３およびＭ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、より具体的には水素原子またはメチル基を表す）。
【００９１】
Ｙ＝（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ（Ｒ１１）、より具体的にはＣＨ２ＮＨの場合、ＲＣＧ１−Ｌはまた次の（ＩＶ３５〜５１）：
【００９２】
【表５】
2018535255.tif 000043
【００９３】
【表６】
2018535255.tif 000044
のうちの１つとすることができる
（式中：
・（ＡＡ）ｗは、上に記載の、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２、好ましくは１から６の範囲の整数を、より具体的には２または３を表し；
・ｉは１から５０の間の、好ましくは１から１０の間の整数を表し（ｉは１と５０の間の全ての値を取ることができる）；
・Ｊ１、Ｊ２、Ｊ３ およびＪ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３およびＭ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２４は、互いに
独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、より具体的には水素原子またはメチル基を表す）。
【００９４】
Ｙ＝（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｏまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｓ、より具体的にはＣＨ２ＯまたはＣＨ２Ｓの場合、ＲＣＧ１−Ｌはまた次の（ＩＶ５２〜６８）：
【００９５】
【表７】
2018535255.tif 000045
【００９６】
【表８】
2018535255.tif 000046
のうちの１つとすることができる
（式中：
・（ＡＡ）ｗは、上に記載の、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２、好ましくは１から６の範囲の整数を、より具体的には２または３を表し；
・ｉは１から５０の間の、好ましくは１から１０の間の整数を表し（ｉは１と５０の間の全ての値を取ることができる）；
・Ｊ１、Ｊ２、Ｊ３ およびＪ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３およびＭ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２および
Ｒ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、より具体的には水素原子またはメチル基を表す）。
【００９７】
Ｙ＝Ｃ（＝Ｏ）Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）Ｏまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ、より具体的にはＣ（＝Ｏ）ＯまたはＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）Ｏの場合、ＲＣＧ１−Ｌは次の（ＩＶ６９〜８５）：
【００９８】
【表９】
2018535255.tif 000047
【００９９】
【表１０】
2018535255.tif 000048
のうちの１つとすることができる
（式中：
・（ＡＡ）ｗは、上に記載の、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２、好ましくは１から６の範囲の整数を、より具体的には２または３を表し；
・ｉは１から５０の間の、好ましくは１から１０の間の整数を表し（ｉは１と５０の間の全ての値を取ることができる）；
・Ｊ１、Ｊ２、Ｊ３ およびＪ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３およびＭ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２４は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、より具体的には水素原子またはメチル基を表す）。
【０１００】
Ｙ＝Ｃ（＝Ｏ）または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）の場合、本発明はまた、式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロードと式（ＩＩＩ）のコンジュゲート：
【化３７】
2018535255.tif 000049
とに関し、
ここで、リンカーＬは式（Ｖ）：
【化３８】
2018535255.tif 000050
である
（式中：
・（ＡＡ）’ｗは、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２、好ましくは１から６の範囲の整数を、より具体的には２または３を表し；
・Ｒ２５は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｌ３は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｉ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ基またはＣＨ（ＳＯ３Ｈ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｉ−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基またはＮＲ１９−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基またはＮＲ２０−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｉＣＨ２ＣＨ２基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−シクロヘキシル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１９−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−シクロヘキシル−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２０−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｉ−ＣＨ２ＣＨ２基またはＮＲ２１−アリール−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１９−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基またはＮＲ２１−ヘテロアリール−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１９−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ２２Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｉ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２およびＲ２５は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・ＲＣＧ１は、上に規定の通り、抗体上に存在する反応性化学基に向けて反応性である、反応性化学基を表し；
・Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は上に規定のとおりである）。
【０１０１】
ＡＡは、立体配置ＤまたはＬの天然または非天然アミノ酸を示し、より具体的には、アラニン（Ａｌａ）、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、２−アミノ−２−シクロヘキシル酢酸、２−アミノ−２−フェニル酢酸、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、システイン（Ｃｙｓ）、α，α−ジメチル−γ−アミノ酪酸、β，β−ジメチル−γ−アミノ酪酸、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リジン（Ｌｙｓ）、ε−アセチル−リジン（ＡｃＬｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、バリン（Ｖａｌ）から選択される。より具体的には、ＡＡは、アラニン（Ａｌａ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ε−アセチル−リジン（ＡｃＬｙｓ）、バリン（Ｖａｌ）から選択される。
【０１０２】
配列（ＡＡ）’ｗは式：
【化３９】
2018535255.tif 000051
を有する
（式中、Ｒ２６は、上に記載のアミノ酸のうちの１つの側鎖を表す）。配列の例は次のとおりである：Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｌｙｓ−Ｐｈｅ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ、ＡｃＬｙｓ−Ｖａｌ、Ｃｉｔ−Ｖａｌ、Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ、Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−ＤＰｈｅ、Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ、Ｌｙｓ−Ａｌａ、Ａｌａ−Ｖａｌ、Ｃｉｔ−Ｐｈｅ、Ｃｉｔ−Ｌｅｕ、Ｃｉｔ−Ｉｌｅ、Ｃｉｔ−Ｔｒｐ、ＡｌａーＰｈｅ、Ｐｈｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｙ、Ｃｉｔ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ、Ｃｉｔ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ、Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ。
【０１０３】
Ｙ＝Ｃ（＝Ｏ）または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）、より具体的にはＣ（＝Ｏ）またはＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）の場合、ＲＣＧ１−Ｌは次の（ＩＶ８６〜１０１）：
【０１０４】
【表１１】
2018535255.tif 000052
【０１０５】
【表１２】
2018535255.tif 000053
のうちの１つとすることができる
（式中：
・（ＡＡ）’ｗは、上に記載の、ペプチド結合を介して互いに連結しているｗ個のアミノ酸ＡＡの配列を表し；
・ｗは１から１２、好ましくは１から６の範囲の整数を、より具体的には２または３を表し；
・ｉは１から５０の間の、好ましくは１から１０の間の整数を表し（ｉは１と５０の間の全ての値を取ることができる）；
・Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３およびＭ４は、互いに独立して、ＣＲ２４およびＮから選択され；
・Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２４およびＲ２５は、互いに独立して、水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、より具体的には水素原子またはメチル基を表す）。
【０１０６】
リンカーＬはまた、例示の化合物から選択することができる。
【０１０７】
本発明によれば、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の化合物を以下の方法により製造できる。
【０１０８】
クリプトフィシン化合物を製造するための方法
Ｗ＝ＣＨ２Ｎ３またはＣＨ２ＮＨ２の場合での式（Ｉ）の化合物を製造するための一般ルートＡ
【化４０】
2018535255.tif 000054
【０１０９】
以下に詳述した工程を用いて、フラグメントＡ、Ｂ、ＣおよびＤによりクリプトフィシン化合物Ｐ１からＰ３を製造する：
工程（ｉ）：例えばＨＯＡｔおよびＨＡＴＵ等のカップリング試薬の存在下でのフラグメントＡＤ１とＢＣとの間のペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばＴＦＡを用いる酸性条件での脱保護および例えばＨＯＡｔおよびＨＡＴＵ等のカップリング試薬の存在下での大環状化；
工程（ｉｉｉ）：例えばｍ−ＣＰＢＡを使用するオレフィンのエポキシドへの酸化；
工程（ｖ）：例えばＴＣＥＰを使用するアジド基の還元。
【０１１０】
フラグメントＡおよびＢを以下に記載した合成に従って製造した。メチルエステルとして保護化されたフラグメントＣは、Ｒ４＝Ｈ、Ｒ５＝Ｍｅ（Ｒ）、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ（ＣＡＳ番号［９２５３５−２６−７］）；Ｒ４＝Ｈ、Ｒ５＝Ｍｅ（Ｓ）、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ（ＣＡＳ番号［１１８１３８−５６−０］）；Ｒ４＝Ｒ５＝Ｍｅ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ（ＣＡＳ番号［２５３０７−８２−８］）；Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｍｅ（Ｒ）、Ｒ４＝Ｈ、Ｒ５＝Ｍｅ（Ｒ）（ＣＡＳ番号［８６５４４−９２−５］）；Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｍｅ（Ｓ）、Ｒ４＝Ｈ、Ｒ５＝Ｍｅ（Ｒ）（ＣＡＳ番号［８６５４４−９３−６］）；Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｍｅ（Ｒ）、Ｒ４＝Ｒ５＝Ｍｅ（ＣＡＳ番号［１３１５０５２−２５−５］）；Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｍｅ（Ｓ）、Ｒ４＝Ｒ５＝Ｍｅ（ＣＡＳ番号［１３１５０５０−９６−４］）；Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ｉＰｒ（Ｒ）、Ｒ４＝Ｒ５＝Ｍｅ（ＣＡＳ番号［１３１４９９９−０６−８］）；Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ｉＰｒ（Ｓ）、Ｒ４＝Ｒ５＝Ｍｅ（ＣＡＳ番号［１３１５０５４−３３−１］）；Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｒ５＝Ｍｅ（ＣＡＳ番号［９０８８６−５３−６］）；Ｒ４およびＲ５はそれらが結合する炭素原子と一緒になってシクロプロピル基を形成（ＣＡＳ番号［９１４２２６−２６−９］）に関して市販されている。これらは実施例に記載した通りに製造もできる。市販されていないフラグメントＣは実施例に記載した通りに製造した。全てのフラグメントＤは市販されている：Ｌ−Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（ＣＡ
Ｓ番号［３５６６１−３９−３］）；Ｌ−Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（ＣＡＳ番号［６８８５８−２０−８］）；Ｌ−Ｆｍｏｃ−ｔｅｒｔ−Ｌｅｕ−ＯＨ（ＣＡＳ番号［１３２６８４−６０−７］）；Ｌ−Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（ＣＡＳ番号［３５６６１−６０−０］）；Ｌ−Ｆｍｏｃ−ＮＭｅ−Ｌｅｕ−ＯＨ（ＣＡＳ番号［１０３４７８−６２−２］）；Ｌ−Ｆｍｏｃ−３−ジメチルアミノ−Ａｌａ−ＯＨ（ＣＡＳ番号［５８７８８０−８６−２］）；Ｌ−Ｆｍｏｃ−（Ｏアリル）Ａｓｐ−ＯＨ（ＣＡＳ番号［１４６９８２−２４−３］）；Ｌ−Ｆｍｏｃ−４−メチル−Ｌｅｕ−ＯＨ（ＣＡＳ番号［１３９５５１−７４−９］）。構成単位ＡＤ１およびＢＣは以下に記載した合成に従って製造した。
【０１１１】
Ｗ＝ＣＨ２ＯＨまたはＣＨ２Ｎ３またはＣＨ２ＮＨ２の場合での式（Ｉ）の化合物を製造するための一般ルートＢ
【化４１】
2018535255.tif 000055
【０１１２】
以下に詳述した工程を用いて、フラグメントＡ、Ｂ、ＣおよびＤによりクリプトフィシン化合物Ｐ２からＰ４を製造する：
工程（ｉ）：例えばＨＯＡｔおよびＨＡＴＵ等のカップリング試薬の存在下でのフラグメントＡＤ１とＢＣとの間のペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばＴＦＡを用いる酸性条件での脱保護、例えばＨＯＡｔおよびＨＡＴＵ等のカップリング試薬の存在下での大環状化および水およびＡｃＯＥｔの混合物中例えばＮａＯＨを用いるｐＨ６〜７での酢酸塩の加水分解；
工程（ｉｉｉ）：例えばイミダゾール等の塩基の存在下例えばクロロトリイソプロピルシランを用いるシリルエーテルとしてのベンジル酸アルコール保護化；例えばｍ−ＣＰＢＡを使用するオレフィンのエポキシドへの酸化；例えばＴＢＡＦ溶液を使用するシリルエーテルの脱保護。
工程（ｉｖ）：ＤＰＰＡおよび例えばＤＢＵ等の塩基の存在下でのアジド化；
工程（ｖ）：例えばＴＣＥＰを使用するアジド基の還元。
【０１１３】
フラグメントＡおよびＢは以下に記載した合成に従って製造した。フラグメントＣは前章に報告した通り市販されているか、または実施例に記載した通りに製造される。全てのフラグメントＤは前章に報告した通り市販されている。構成単位ＡＤ２およびＢＣは以下に記載した合成に従って製造した。
【０１１４】
Ｗ＝ＣＨ２ＯＨまたはＣＨ２Ｎ３またはＣＨ２ＮＨ２の場合での式（Ｉ）の化合物を製造するための一般ルートＣ
【化４２】
2018535255.tif 000056
【０１１５】
以下に詳述した工程を用いて、ＳａｋｕｒａｉアルコールならびにフラグメントＢ、ＣおよびＤによりクリプトフィシン化合物Ｐ２からＰ４を製造する：
工程（ｉ）：例えばＨＯＡｔおよびＨＡＴＵ等のカップリング試薬の存在下でのフラグメントＡＤ３と代替のＢＣとの間のペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばＧｒｕｂｂｓ  Ｉ触媒等の触媒の存在下での閉環メタセシスによる大環状化；
工程（ｉｉｉ）：例えば１０％ＴＦＡ等の酸性条件でのｐ−メトキシベンジルエーテルの脱保護；
工程（ｉｖ）：次亜塩素酸ナトリウムの存在下例えばＴＥＭＰＯ等の酸化剤を使用するアルコールの酸化；
工程（ｖ）：例えばホスファゼン塩基Ｐ２−Ｅｔ等の塩基の存在下での、適切に置換されたイソチオシネオール−誘導化キラルスルホニウムを使用する不斉Ｃｏｒｅｙ−Ｃｈａｙｋｏｖｓｋｙ反応によるエポキシドの導入；
工程（ｖｉ）：例えばＴＣＥＰを使用するアジド基の還元。
【０１１６】
ＳａｋｕｒａｉアルコールおよびフラグメントＢは以下に記載した合成に従って製造した。フラグメントＣは前章に報告した通り市販されているか、または実施例に記載した通りに製造される。全てのフラグメントＤは前章に報告した通り市販されている。構成単位ＡＤ３および代替のＢＣは以下に記載した合成に従って製造した。
【０１１７】
Ｗ＝ＣＨ２ＳＨの場合での式（Ｉ）の化合物の製造
【化４３】
2018535255.tif 000057
【０１１８】
以下に詳述した工程を用いて、Ｐ４により他のクリプトフィシン化合物Ｐ５およびＰ６を製造する：
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下メタンスルホニルクロリドを用いるクロロ基の導入；
工程（ｉｉ）：スキーム３に示した中間体の二量体が通常生成される反応の過程で、Ｈｕ  Ｊ．ら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９９年、６４巻、４９５９〜４９６頁に従いＴＢＡＦおよびヘキサメチルジシラチアンからｉｎ  ｓｉｔｕで製造したテトラブチルアンモニウムトリメチルシリルチオレートを用いる官能基化；
工程（ｉｉｉ）：例えばＴＣＥＰ等のホスフィンを使用する二量体の還元。
【０１１９】
スキーム１、２、３および４はｎ＝１の場合を表すが、以下に詳述しおよびＷＯ２０１１／００１０５２のスキーム２に記載されている工程を用いてＰ２、Ｐ３またはＰ４を出発物としｎ＞１の場合の式（Ｉ）の化合物を製造するためにも適用できる：
【化４４】
2018535255.tif 000058
【０１２０】
工程（ｉ）：ジオール基を得るための酸性媒体中でのエポキシ環の開環；例えば濃過塩素酸を使用できる；
工程（ｉｉ）：例えば過ヨウ素酸ナトリウムを使用するジオールの酸化開裂；
工程（ｉｉｉ）：例えば臭化物の適切なハロゲン化ホスホニウム、および一例としてＢｕＬｉの強塩基を使用するＷｉｔｔｉｇ反応；
工程（ｉｖ）：例えばｍ−ＣＰＢＡを使用するオレフィンのエポキシドへの酸化；
工程（ｖ）：例えばＴＢＡＦ溶液を使用するシリルエーテルの脱保護。
【０１２１】
Ｗ＝ＣＯ２Ｈの場合での式（Ｉ）の化合物の製造
【化４５】
2018535255.tif 000059
【０１２２】
以下に詳述した工程を用いて、Ｐ４により他のクリプトフィシン化合物Ｐ７およびＰ８を製造する：
工程（ｉ）：デス−マーチン試薬を使用する酸化；
工程（ｉｉ）：２メチル−２−ブテンの存在下でのＰｉｎｎｉｃｋ型の酸化（Ｐｉｎｎｉｃｋ  Ｈ．Ｗ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９８１年、３７巻、２０９１〜２０９６頁）。
【０１２３】
スキーム６はｎ＝０の場合を示すが、Ｗ＝（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｈの場合において（ＣＨ２）ｎ＋１ＯＨ基を有するＰ４の類似体を出発物として、式（Ｉ）の化合物を製造するためにも適用できる。スキーム１、２、３、４、５および６はパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これらはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１２４】
クリプトフィシンペイロードを製造するための方法
式（ＩＩ）の化合物は式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物およびリンカー前駆体（ＬＰ）を出発物としスキーム７に従って製造できた：
【化４６】
2018535255.tif 000060
【０１２５】
Ｗは、
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＨ（Ｒ１１）、より具体的には（ＣＨ２）ｎＮＨＲ１１；・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＯＨ、より具体的には（ＣＨ２）ｎＯＨ；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＳＨ、より具体的には（ＣＨ２）ｎＳＨ；
・ＣＯ２Ｈ；
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＣＯ２Ｈ、より具体的には（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｈ；または
・（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｎ３を表す。
式中、Ｒ１１は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、より具体的にはメチル基を示す。
リンカー前駆体ＬＰは、Ｗ基とＬＰ上に存在する化学官能基との反応後に、クリプトフィシン化合物中にリンカーＬの前駆体を導入する機能を有する。
【０１２６】
スキーム７において、種々の工程および／または反応がクリプトフィシン化合物（Ｉ）を出発物としてクリプトフィシンペイロード（ＩＩ）を製造するために必要である。例えばＺａＲａ＝−Ｏ−ＮＨＳの場合、ＺａＲａ＝−Ｏ−アリルであるリンカーＬは、対応するリンカー前駆体を使用して導入し、続いてエステル官能基を脱保護し、−Ｏ−ＮＨＳを導入できる。例えばモルホリンの捕捉剤アミンの存在下例えばＰｄ（ＰＰｈ３）４のパラジウム触媒で処理することにより脱保護を行うことができ、例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣを用いてまたは例えばＤＣＣ等のカップリング剤の存在下ＮＨＳを用いて活性化を行うことができる。このＺａＲａ基の他のＺａＲａ基への変換（例えば−Ｏ−アリル→−Ｏ−ＮＨＳ）は、他のＺａＲａ基、特に前記した基を得るために適用できる。
【０１２７】
スキーム７’は同様に、各々マレイミド、ハロアセトアミド、アミノまたはアジド基を有するリンカーを含むクリプトフィシン化合物の製造を示す（Ｌ＊はＬ＝−Ｌ＊−マレイミドまたはＬ＝−Ｌ＊−ハロアセトアミドまたはＬ＝−Ｌ＊−ＮＨ２−またはＬ＝−Ｌ＊−Ｎ３のようなリンカーのフラグメントを示す）。
【０１２８】
【化４７】
2018535255.tif 000061
【０１２９】
これらの化合物は、アミノ基を含むリンカーＬ’を含むクリプトフィシン化合物と変性剤との間の反応により得られ、各々マレイミド、ハロアセトアミド、アミノまたはアジド基を導入する。
【０１３０】
式（ＩＩ）の化合物は代替的に、同じ式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物および他のリンカー前駆体（ＬＰ’）を出発物とし、スキーム８に従って製造できた：
【化４８】
2018535255.tif 000062
【０１３１】
スキーム８において、いくつかの工程および／または反応により、クリプトフィシン化合物（Ｉ）を出発物としてクリプトフィシンペイロード（ＩＩ）に導かれることが必然である。例えばＺａＲａ＝−Ｏ−ＮＨＳの場合、保護化リンカー前駆体Ｌ’を導入し、続いて脱保護し、リンカー前駆体Ｌ’’とカップリングしてＺａＲａ＝−Ｏ−ＮＨＳに直接活性化できるカルボン酸官能基を導入する、または最初に脱保護し引き続いて活性化する（Ｌ’およびＬ’’はＬ＝Ｌ’−Ｌ’’のようにリンカーのフラグメントを表す）。例えばピペリジンの塩基で処理することにより脱保護を行うことができ、リンカーＬ’’へのカップリングは、例えばグルタル酸無水物の環状無水物の開環を通して進行し、例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣを用いてまたは例えばＤＣＣ等のカップリング剤の存在下ＮＨＳを用いて活性化を行うことができる。
【０１３２】
Ｗ基とＬＰ上に存在する化学官能基との間での反応の例は、カルボン酸官能基を有するリンカー前駆体ＬＰとＷ＝（ＣＨ２）ｎＮＨ２との間またはアミン官能基を有するリンカー前駆体ＬＰとＷ＝ＣＯ２Ｈまたは（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｈとの間のいずれかのアミド化であり、例えばＥＤＣＩまたはＨＯＢｔ等のカップリング剤の存在下でこの反応を行うことができる。これはアミン官能基を有するリンカー前駆体ＬＰとＷ＝（ＣＨ２）ｎＯＨおよびｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（アルコールをカルボネートの形で活性化）から得られたＷ’＝（ＣＨ２）ｎＯ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）とを以下のスキーム（Ｒ１７＝Ｈまたは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）に従って反応させることもできる：
−ＮＨＲ１７＋クリプト−（ＣＨ２）ｎＯ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（４−ニトロフェニル）→クリプト−（ＣＨ２）ｎＯ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ１７−
【０１３３】
同種の反応は、カルボネートとして活性化されたアルコール官能基を有するリンカー前駆体ＬＰとＷ＝（ＣＨ２）ｎＮＨ２との間で行うこともできる。他の反応の例は、アルコール官能基を有するリンカー前駆体とＷ＝ＣＯ２Ｈまたは（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｈとの間のエステル化であり、例えばＭＮＢＡ等のカップリング剤の存在下でこの反応を行うことができる。他の反応の例は、アルキン基を有するリンカー前駆体とＷ＝（ＣＨ２）Ｎ３との間の銅触媒アジド−アルキンシクロ付加であり、この反応は硫酸銅およびアスコルビン酸ナトリウムの存在下で行うことができる。
【０１３４】
スキーム７に基づき、Ｗ＝（ＣＨ２）ｎＮＨ２ならびにｎ＝１、Ｒ１５＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ１）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化４９】
2018535255.tif 000063
【０１３５】
工程（ｉ）：例えばＥＤＣおよびＨＯＡｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばテトラキス−（トリフェニルホスフィン）パラジウム等の触媒の存在下でのアリルエステルの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１３６】
スキーム８に基づき、Ｗ＝（ＣＨ２）ｎＮＨ２ならびにｎ＝１、Ｒ１１＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ１）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５０】
2018535255.tif 000064
【０１３７】
工程（ｉ）：例えばＥＤＣおよびＨＯＡｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：グルタル酸無水物とのカップリング；
工程（ｉｖ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１３８】
スキーム９および１０は、ｎ＝１、Ｒ１１＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ１）の場合を表すが、これらはＲＣＧ１＝Ｃ（＝Ｏ）ＯＮＨＳであるその他のリンカーＬ、すなわちｎ≠１および／またはＲ１１≠Ｈおよび／またはＡＬＫ≠（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ１）の場合ならびにＬ（ＩＶ２）およびＬ（ＩＶ３）の場合にも適用できる。これらはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これらはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）のその他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１３９】
ｎ＝１、Ｒ１１＝ＨおよびＲＣＧ１＝マレイミド、ハロアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるＷ＝（ＣＨ２）ｎＮＨ２すなわちリンカーＬ（ＩＶ４）からＬ（ＩＶ１７）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５１】
2018535255.tif 000065
【０１４０】
工程（ｉ）：例えばＥＤＣおよびＨＯＡｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護。
【０１４１】
スキーム１１は、ｎ＝１、Ｒ１１＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）５であるＬ（ＩＶ４）、ｎ＝１およびＲ１１＝ＨであるＬ（ＩＶ８）、ｎ＝１、Ｒ１１＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）４であるＬ（ＩＶ１２）、ｎ＝１、Ｒ１１＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ１４）ならびにｎ＝１、Ｒ１１＝Ｈ、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）３およびＡＬＫ’＝（ＣＨ２）２であるＬ（ＩＶ１６）の場合を表すが、これはＲＣＧ１＝マレイミド、ヨード
アセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるその他のリンカーＬ（ＩＶ４）からＬ（ＩＶ１７）にも適用できる。これはヨードアセトアミド反応性基に対して示すが、ブロモアセトアミド反応性基に対して同様に適用できる。これはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）のその他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１４２】
スキーム７に基づき、Ｘ＝ＯまたはＳであるＷ＝（ＣＨ２）ｎＸならびにｎ＝１、Ｒ１７およびＲ１８＝ＨならびにＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ１８）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５２】
2018535255.tif 000066
【０１４３】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールまたはベンジル酸チオールのｐ−ニトロフェニル−（チオ）カルボネートとしての活性化。
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのアミンとの反応による（チオ）カルバメートの生成；
工程（ｉｉｉ）：例えばテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム等の触媒の存在下でのアリルエステルの脱保護；
工程（ｉｖ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１４４】
スキーム８に基づき、Ｘ＝ＯまたはＳであるＷ＝（ＣＨ２）ｎＸならびにｎ＝１、Ｒ１７およびＲ１８＝ＨならびにＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ１８）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５３】
2018535255.tif 000067
【０１４５】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのアミンとの反応による（チオ）カルバメートの生成；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：グルタル酸無水物とのカップリング；
工程（ｉｖ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１４６】
スキーム１２および１３は、ｎ＝１、Ｒ１７およびＲ１８＝ＨならびにＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ１８）の場合を表すが、これらはＲＣＧ１＝Ｃ（＝Ｏ）ＯＮＨＳであるその他のリンカーＬ、すなわちｎ≠１および／またはＲ１７、Ｒ１８≠Ｈおよび／またはＡＬＫ≠（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ１８）の場合ならびにＬ（ＩＶ１９）およびＬ（ＩＶ２０）の場合にも適用できる。これらはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これらはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）のその他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１４７】
Ｘ＝ＯまたはＳおよびＲＣＧ１＝マレイミド、ハロアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるＷ＝（ＣＨ２）ｎＸすなわちリンカーＬ（ＩＶ２１）から（ＩＶ３４）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５４】
2018535255.tif 000068
【０１４８】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う、（チオ）カルバメートの生成；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護。
【０１４９】
スキーム１４は、ｎ＝１、Ｒ１７およびＲ１８＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）５であるＬ（ＩＶ２１）の場合、ｎ＝１およびＲ１７およびＲ１８＝ＨであるＬ（ＩＶ２５）の場合、ｎ＝１、Ｒ１７およびＲ１８＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）４であるＬ（ＩＶ２９）の場合、ｎ＝１、Ｒ１７およびＲ１８＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ３１）の場合ならびにｎ＝１、Ｒ１７、Ｒ１８およびＲ２２＝Ｈ、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）３ならびにＡＬＫ’＝（ＣＨ２）２であるＬ（ＩＶ３３）の場合を表すが、これはＲＣＧ１＝マレイミド、ヨードアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるその他のリンカーＬ（ＩＶ２１から３４）にも適用できる。これはヨードアセトアミド反応性基に対して示すが、ブロモアセトアミド反応性基に対して同様に適用できる。これはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）のその他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１５０】
スキーム７に基づき、Ｗ＝（ＣＨ２）ｎＮＨ２ならびにｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ３５）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５５】
2018535255.tif 000069
【０１５１】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う、カルバメートの生成；
工程（ｉｉ）：例えばテトラキス−（トリフェニルホスフィン）パラジウム等の触媒の存在下でのアリルエステルの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１５２】
スキーム８に基づき、Ｗ＝（ＣＨ２）ｎＮＨ２ならびにｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ３５）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５６】
2018535255.tif 000070
【０１５３】
工程（ｉ）：適切なｐ−ニトロフェニルカルボネート試薬の存在下例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う、カルバメートの生成；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：グルタル酸無水物とのカップリング；
工程（ｉｖ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１５４】
スキーム１５および１６は、ｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ３５）の場合を表すが、これらはＲＣＧ１＝Ｃ（＝Ｏ）ＯＮＨＳであるその他のリンカーＬ、すなわちｎ≠１および／またはＲ１１、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６≠Ｈおよび／またはＪ１、Ｊ２、Ｊ３、Ｊ４≠ＣＨおよび／またはオルト−ベンジル酸アルコールおよび／またはＡＬＫ≠（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ３５）の場合ならびにＬ（ＩＶ３６）およびＬ（ＩＶ３７）の場合にも適用できる。これらはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これらはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１５５】
ｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびＲＣＧ１＝マレイミド、ハロアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるＷ＝（ＣＨ２）ｎＮＨ２すなわちリンカーＬ（ＩＶ３８）からＬ（ＩＶ１５１）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５７】
2018535255.tif 000071
【０１５６】
工程（ｉ）：適切なｐ−ニトロフェニルカルボネート試薬の存在下例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う、カルバメートの生成；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護。
【０１５７】
スキーム１７は、ｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）５であるＬ（ＩＶ３８）、ｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝ＨおよびＪ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびパラ−ベンジル酸アルコールであるＬ（ＩＶ４２）、ｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）４であるＬ（ＩＶ４６）、ｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ４８）ならびにｎ＝１、Ｒ１１＝Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ２２＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコール、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）３およびＡＬＫ’＝（ＣＨ２）２であるＬ（ＩＶ５０）の場合を示すが、これはＲＣＧ１＝マレイミド、ヨードアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるその他のリンカーＬ（ＩＶ３８）からＬ（ＩＶ５１）にも適用できる。これはパラ−ベンジル酸アルコールを与えるが、これはオルト−ベンジル酸アルコールにも適用できる。これはヨードアセトアミド反応性基に対して示すが、ブロモアセトアミド反応性基に対して同様に適用できる。これはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１５８】
スキーム７に基づき、Ｘ＝ＯまたはＳであるＷ＝（ＣＨ２）ｎＸならびにｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ１７＝Ｒ１８＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ５２）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５８】
2018535255.tif 000072
【０１５９】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのアミンとの反応による（チオ）カルバメートの生成；
工程（ｉｉ）：例えばテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム等の触媒の存在下でのアリルエステルの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１６０】
スキーム８に基づき、Ｘ＝ＯまたはＳであるＷ＝（ＣＨ２）ｎＸならびにｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ１７＝Ｒ１８＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ５２）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化５９】
2018535255.tif 000073
【０１６１】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのアミンとの反応による（チオ）カルバメートの生成；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：グルタル酸無水物とのカップリング；
工程（ｉｖ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１６２】
スキーム１８および１９は、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ１７＝Ｒ１８＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ５２）の場合を表すが、これらはＲＣＧ１＝Ｃ（＝Ｏ）ＯＮＨＳであるその他のリンカーＬ、すなわちｎ≠１および／またはＲ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８≠Ｈおよび／またはＪ１、Ｊ２、Ｊ３、Ｊ４≠ＣＨおよび／またはオルト−ベンジル酸アルコールおよび／またはＡＬＫ≠（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ５２）の場合ならびにＬ（ＩＶ５３）およびＬ（ＩＶ５４）の場合にも適用できる。これらはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これらはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１６３】
Ｘ＝ＯまたはＳおよびＲＣＧ１＝マレイミド、ハロアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるＷ＝（ＣＨ２）ｎＸすなわちリンカーＬ（ＩＶ５５）から（ＩＶ６８）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化６０】
2018535255.tif 000074
【０１６４】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのアミンとの反応による（チオ）カルバメートの生成；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護。
【０１６５】
スキーム２０は、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ１７＝Ｒ１８＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコール、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）２およびＡＬＫ’＝（ＣＨ２）５であるＬ（ＩＶ５５）の場合、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ１７＝Ｒ１８＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）２であるＬ（ＩＶ５９）の場合、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ１７＝Ｒ１８＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコール、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）２およびＡＬＫ’＝（ＣＨ２）４であるＬ（ＩＶ６３）の場合、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ１７＝Ｒ１８＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコール、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）２およびＡＬＫ’＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ６５）の場合ならびにｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ１７＝Ｒ１８＝Ｒ２２＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコール、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）２、ＡＬＫ’＝（ＣＨ２）５およびＡＬＫ’’＝（ＣＨ２）２であるＬ（ＩＶ６７）の場合を表すが、これはＲＣＧ１＝マレイミド、ヨードアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるその他のリンカーＬ（ＩＶ５５から６８）にも適用できる。これはヨードアセトアミド反応性基に対して示すが、ブロモアセトアミド反応性基に対して同様に適用できる。これはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１６６】
スキーム７に基づき、Ｗ＝Ｃ（＝Ｏ）ＯならびにＲ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ６９）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化６１】
2018535255.tif 000075
【０１６７】
工程（ｉ）：例えばＭＮＢＡ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＭＡＰおよびＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのエステル化；
工程（ｉｉ）：例えばテトラキス−（トリフェニルホスフィン）パラジウム等の触媒の存在下でのアリルエステルの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１６８】
スキーム８に基づき、Ｗ＝Ｃ（＝Ｏ）ＯならびにＲ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ＝（ＩＶ６９）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化６２】
2018535255.tif 000076
【０１６９】
工程（ｉ）：例えばＭＮＢＡ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＭＡＰおよびＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのエステル化；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護；
工程（ｉｉｉ）：グルタル酸無水物とのカップリング；
工程（ｉｖ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１７０】
スキーム２１および２２は、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ６９）の場合を表すが、これらはＲＣＧ１＝Ｃ（＝Ｏ）ＯＮＨＳであるその他のリンカーＬ、すなわちＲ１４、Ｒ１５、Ｒ１６≠Ｈおよび／またはＪ１、Ｊ２、Ｊ３、Ｊ４≠ＣＨおよび／またはオルト−ベンジル酸アルコールおよび／またはＡＬＫ≠（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ６９）の場合ならびにＬ（ＩＶ７０）およびＬ（ＩＶ７１）の場合にも適用できる。これらはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これらはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１７１】
Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびＲＣＧ１＝マレイミ
ド、ハロアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるＷ＝Ｃ（＝Ｏ）ＯすなわちリンカーＬ（ＩＶ７２）からＬ（ＩＶ８５）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化６３】
2018535255.tif 000077
【０１７２】
工程（ｉ）：例えばＭＮＢＡ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＭＡＰおよびＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのエステル化；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基の存在下でのＦｍｏｃアミンの脱保護。
【０１７３】
スキーム２３は、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）５であるＬ（ＩＶ７２）、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝ＨおよびＪ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨおよびパラ−ベンジル酸アルコールであるＬ（ＩＶ７６）、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）４であるＬ（ＩＶ８０）、ｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコールおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（ＩＶ８２）ならびにｎ＝１、Ｒ１４＝Ｒ１５＝Ｒ１６＝Ｒ２２＝Ｈ、Ｊ１＝Ｊ２＝Ｊ３＝Ｊ４＝ＣＨ、パラ−ベンジル酸アルコール、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）３およびＡＬＫ’＝（ＣＨ２）２であるＬ（ＩＶ８４）の場合を表すが、これはＲＣＧ１＝マレイミド、ヨードアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるその他のリンカーＬ（ＩＶ７２）からＬ（ＩＶ８５）にも適用できる。これはパラ−ベンジル酸アルコールを与えるが、これはオルト−ベンジル酸アルコールにも適用できる。これはヨードアセトアミド反応性基に対して示すが、ブロモアセトアミド反応性基に対して同様に適用できる。これはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１７４】
Ｗ＝Ｃ（＝Ｏ）ＯならびにＲ２５＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）７であるＬ＝（Ｖ８６）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化６４】
2018535255.tif 000078
【０１７５】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのペプチドカップリング；
工程（ｉｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＳＣで処理することによるカルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化。
【０１７６】
スキーム２４は、Ｒ２５＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）７であるＬ（Ｖ８６）の場合を表すが、これらはＲＣＧ１＝Ｃ（＝Ｏ）ＯＮＨＳである他のリンカーＬ、すなわちＲ２５≠Ｈおよび／またはＡＬＫ≠（ＣＨ２）７であるＬ（Ｖ８６）の場合ならびにＬ（Ｖ８７）およびＬ（Ｖ８８）の場合にも適用できる。これらはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これらはクリプトフィシン化合物を与え
るが、式（Ｉ）の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１７７】
Ｒ３０＝ＨおよびＲＣＧ１＝マレイミド、ハロアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンであるＷ＝Ｃ（＝Ｏ）ＯすなわちリンカーＬ（Ｖ８９）からＬ（Ｖ１０１）の場合の式（ＩＩ）の化合物の製造
【化６５】
2018535255.tif 000079
【０１７８】
工程（ｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばＴＣＥＰ等の還元剤で処理することによるアジドの還元。
【０１７９】
スキーム２５は、Ｒ２５＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）５であるＬ（Ｖ８９）、Ｒ２５＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（Ｖ９３）、Ｒ２５＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）４であるＬ（Ｖ９６）、Ｒ２５＝ＨおよびＡＬＫ＝（ＣＨ２）３であるＬ（Ｖ９８）ならびにＲ２２＝Ｒ２５＝Ｈ、ＡＬＫ＝（ＣＨ２）３およびＡＬＫ’＝（ＣＨ２）２であるＬ（Ｖ１００）の場合を表すが、これはＲＣＧ１＝マレイミド、ヨードアセトアミド、ＮＨ２、Ｎ３またはシクロオクチンである他のリンカーＬ（Ｖ８９）からＬ（Ｖ１０１）にも適用できる。これはヨードアセトアミド反応性基に対して示すが、ブロモアセトアミド反応性基にも同様に適用できる。これはパラ位にリンカーを与えるが、オルトまたはメタ位に同様に適用できる。同様に、これはクリプトフィシン化合物を与えるが、式（Ｉ）
の他の化合物、特にＤ１〜Ｄ１９を製造するためにも適用できる。
【０１８０】
クリプトフィシンコンジュゲートを製造するための方法
式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロードおよび抗体（Ａｂ）を出発物としスキーム２６に従って製造できた：
【化６６】
2018535255.tif 000080
（式中：
・Ｙは、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ＮＲ１１もしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｏもしくは（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｓを表し；
または代替的にＹは、Ｃ（＝Ｏ）ＯもしくはＯ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−Ｃ（＝Ｏ）Ｏを表し；
または代替的にＹは、
【化６７】
2018535255.tif 000081
のような（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−チアゾール−を表し；
Ｙはフェニル核のオルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位に位置し；
・Ｒ１１は水素原子または（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し；
・Ｌは、上記定義した通り、フェニル核のオルト（ｏ）、メタ（ｍ）またはパラ（ｐ）位に位置するリンカーを表し；
・ＲＣＧ１は、上記定義した通り、抗体上に存在する反応性化学基に向けて反応性である反応性化学基を表し；
・Ａｂは抗体を表す）。
【０１８１】
式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物を合成するための構成単位を製造するための方法
フラグメントＡの一般的合成
【化６８】
2018535255.tif 000082
【０１８２】
以下に詳述した工程を用いて、フラグメントＡを適切なヒドロキシエステルを出発物として１２工程で製造できる：
工程（ｉ）：例えばｐ−ＴｓＯＨ等の触媒量の酸の存在下トリクロロアセトイミデートとして活性化されたｐ−メトキシベンジルアルコールを用いるｐ−メトキシベンジルエーテルとしてのアルコールの保護化；
工程（ｉｉ）：例えば水素化ホウ素リチウム等の還元剤を使用するエステルの還元；
工程（ｉｉｉ）：次亜塩素酸ナトリウムの存在下例えばＴＥＭＰＯ等の酸化剤を使用するアルコールの酸化；
工程（ｉｖ）：四塩化スズの存在下アリルトリブチルスズを用いるジアステレオ選択的アリル化；
工程（ｖ）：例えばＧｒｕｂｂｓ  ＩＩ触媒等の触媒の存在下ｔｅｒｔ−ブチルアクリレートを用いるクロスメタセシス；
工程（ｖｉ）：ＣＡＮを用いるｐ−メトキシベンジルエーテルの脱保護および引き続く例えばｐ−ＴｓＯＨ等の触媒量の酸の存在下エタンジチオールでの処理；
工程（ｖｉｉ）：例えばイミダゾール等の塩基の存在下クロロトリエチルシランを用いるシリルエーテルとしてのアルコールの保護化；
工程（ｖｉｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＤＭＳＯおよび塩化オキサリルを用いるＳｗｅｒｎ酸化；
工程（ｉｘ）：例えば臭化物の適切なハロゲン化ホスホニウムおよび例えばＢｕＬｉ等の強塩基を用いるＷｉｔｔｉｇ反応；
工程（ｘ）：例えばＴＢＡＦ溶液を使用するシリルエーテルの脱保護。
工程（ｘｉ）：例えば酸化マンガン等の酸化剤を使用するベンジル酸アルコールの酸化；工程（ｘｉｉ）：ベンゼンチオールの存在下ＡＩＢＮを使用する二重結合の異性化。
【０１８３】
ヒドロキシエステルはＲ１＝Ｍｅ（ＣＡＳ番号［７２６５７−２３−９］）、Ｅｔ（ＣＡＳ番号［７２６０４−８１−０］）およびｉＰｒ（ＣＡＳ番号［７２６０４−８２−１］）に関して市販されている。ハロゲン化ホスホニウムの製造はＷＯ２０１１／００１０
５２に記載されている。
【０１８４】
フラグメントＢの一般的合成
【化６９】
2018535255.tif 000083
【０１８５】
以下に詳述した工程を用いて、フラグメントＢを適切なアミノ酸を出発物として２工程で製造できる：
工程（ｉ）：例えばＴＥＡ等の塩基の存在下Ｂｏｃ２Ｏで処理することによるアミンの保護化；
工程（ｉｉ）：例えばＬｉＯＨ等の塩基を使用するメチルエステルの鹸化。
【０１８６】
メチルエステルとして保護化されたアミノ酸は、Ｒ９＝３−Ｃｌ、４−ＯＭｅ（ＣＡＳ番号［７０４８７０−５４−２］）；３−Ｃｌ、４−ＯＥｔ（ＣＡＳ番号［１２５６９６３−００−９］）；３−Ｃｌ、４−ＯＰｒ（ＣＡＳ番号［１２５９７０９−５９−９］）；３−Ｃｌ、４−ＯＭｅ、５−Ｆ（ＣＡＳ番号［１２１３６７０−９８−４］）；３−Ｃｌ、４−ＯＭｅ、５−Ｃｌ（ＣＡＳ番号［１２５９７０１−４２−２］）；３−Ｃｌ、４−ＯＭｅ、５−ＯＭｅ（ＣＡＳ番号［１２１２８２０−３４−２］）；３−Ｃｌ、４−ＯＨ、５−ＯＭｅ（ＣＡＳ番号［１２１３４２６−９３−７］）；３−Ｃｌ、４−ＮＨ２（ＣＡＳ番号［１２１３６７２−６４−０］）；２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−ＮＨ２（ＣＡＳ番号［１２１３６０７−４９−８］）；３−Ｃｌ、４−ＮＨ２、５−Ｆ（ＣＡＳ番号［１２１３４００−６６−８］）；３−Ｃｌ、４−ＮＨ２、５−Ｃｌ（ＣＡＳ番号［１２１３４８０−３０−８］）に関して市販されている。
【０１８７】
構成単位ＡＤ１の一般的合成
【化７０】
2018535255.tif 000084
【０１８８】
以下に詳述した工程を用いて、フラグメントＡおよびＤより構成単位ＡＤ１を製造する：
工程（ｉ）：例えばＭＮＢＡ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＭＡＰおよびＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのフラグメントＤのフラグメントＡを用いるエステル化；
工程（ｉｉ）：例えばトリメトキシ水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤を使用するアルデヒドのアルコールへの還元；
工程（ｉｉｉ）：例えばＴＥＡ等の塩基の存在下メタンスルホニルクロリドで処理することによるアルコールのメシレートとしての活性化；アジ化ナトリウムで処理することによるアジド基によるメシレートの置換；
工程（ｉｖ）：例えばピペリジン等の塩基で処理することによるアミンの脱保護。
【０１８９】
構成単位ＡＤ２の一般的合成
【化７１】
2018535255.tif 000085
【０１９０】
以下に詳述した工程を用いて、フラグメントＡおよびＤより構成単位ＡＤ２を製造する：
工程（ｉ）：例えばＭＮＢＡ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＭＡＰおよびＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのフラグメントＤのフラグメントＡを用いるエステル化；
工程（ｉｉ）：例えばトリメトキシ水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤を使用するアルデヒドのアルコールへの還元；
工程（ｉｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基で処理することによるアミンの脱保護。
【０１９１】
構成単位ＡＤ３の一般的合成
【化７２】
2018535255.tif 000086
【０１９２】
工程（ｉ）：例えばＭＮＢＡ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＭＡＰおよびＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのフラグメントＤのＳａｋｕｒａｉアルコールを用いるエステル化；
工程（ｉｉ）：例えばピペリジン等の塩基で処理することによるアミンの脱保護。
【０１９３】
構成単位ＢＣの一般的合成
【化７３】
2018535255.tif 000087
【０１９４】
以下に詳述した工程を用いて、フラグメントＢおよびＣより構成単位ＢＣを製造する：工程（ｉ）：例えばＨＯＢｔおよびＥＤＣ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのフラグメントＢのフラグメントＣとのペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばＬｉＯＨ等の塩基を使用するメチルエステルの鹸化。
【０１９５】
代替の構成単位ＢＣの一般的合成
【化７４】
2018535255.tif 000088
【０１９６】
以下に詳述した工程を用いて、フラグメントＢおよびＣより代替の構成単位ＢＣを製造する：
工程（ｉ）：例えばＨＯＢｔおよびＥＤＣ等のカップリング剤ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でのフラグメントＢのフラグメントＣとのペプチドカップリング；
工程（ｉｉ）：例えばＴＦＡを使用する酸性条件中でのＢｏｃ基の脱保護；
工程（ｉｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下アクリロイルクロリドで処理することによるアクリルアミドの生成；
工程（ｉｖ）：例えばｔＢｕＯＫ等の塩基を使用するメチルエステルの鹸化。
【０１９７】
リンカー前駆体ＬＰの製造
ＬＰは以下の一つである；ＬＰ１からＬＰ１０１はＬアミノ酸を使用して記載されるが、Ｄアミノ酸にも適用できる。これらはｗ＝２に関して得られるが、ペプチドカップリング工程を必要なだけ何回も繰り返すことによりｗ＞２にも同様に適用できる。
【０１９８】
ＬＰ１
【化７５】
2018535255.tif 000089
は下記のスキームに従って製造される：
【化７６】
2018535255.tif 000090
【０１９９】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中室温で反応を行う。
【０２００】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；アリルエステルとしてモノ保護化された二酸はｎ＝２（モノアリルスクシネート）に関して市販されているか、またはメチルもしくはｔｅｒｔ−ブチルモノエステルのトランスエステル化により製造でき、これらはｎ＝２から６に関して市販されている。
【０２０１】
ＬＰ２
【化７７】
2018535255.tif 000091
は下記のスキームに従って製造される：
【化７８】
2018535255.tif 000092
【０２０２】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えば担持ＤＣＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２０３】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；アリルエステルとしてモノ保護化されたＰＥＧ二酸は以下のスキームに従って製造できる：
ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化７９】
2018535255.tif 000093
ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化８０】
2018535255.tif 000094
【０２０４】
工程（ｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、不飽和の保護化酸をナトリウムの活性化により生成させた触媒量のアルコキシドで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。後者の場合、構造上に存在するアルコール官能基のトリフルオロ酢酸塩を生成できる。このトリフルオロ酢酸塩は続く工程（ｉｉｉ）の間で開裂する；
工程（ｉｉｉ）：メチルエステルとしてのカルボン酸の保護化；ＭｅＯＨ等の極性非プロトン性溶媒中トリメチルシリルジアゾメタンで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：メチルエステルの鹸化；ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒の混合物中ＬｉＯＨの存在下で反応を行う；
工程（ｖ）：アリルエステルとしてのカルボン酸の保護化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中アリルアルコール、例えばＥＤＣ等のカップリング剤および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｖｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、ハロゲン化エステルをＴＨＰエーテルとしてモノ保護化されたＰＥＧジオールのアルコキシドで処理することにより反応を行う。このタイプのモノ保護化ＰＥＧジオールの製造は文献に十分に記載されている：例えばＲｉｃｈａｒｄ  Ａ．ら、Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００５年、１１巻、７３１５〜７３２１頁またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕ  Ｅ．Ｇ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２００３年、５９巻、９０８３〜９０９０頁参照。
【０２０５】
出発物のＰＥＧジオールはｉ＝３から１２に関して市販されている。
【０２０６】
ＬＰ３
【化８１】
2018535255.tif 000095
は下記のスキームに従って製造される：
【化８２】
2018535255.tif 000096
【０２０７】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中室温で反応を行う。
【０２０８】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；アリルエステルとしてモノ保護化されたスルホ二酸は以下のスキームに従って製造できる：
【化８３】
2018535255.tif 000097
代替のＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化８４】
2018535255.tif 000098
【０２０９】
工程（ｉ）：アリルエステルとしてのカルボン酸の保護化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中アリルアルコール、例えばＥＤＣ等のカップリング剤および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：カルボン酸のα−スルホン化；ＤＣＥのような極性非プロトン性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下クロロスルホン酸で処理することにより７５℃で反応を行う。
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸部分の生成；水酸化ナトリウムで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：チオアセチルによる臭化物の置換；ＴＨＦ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下チオ酢酸を使用して−２０℃で反応を行う；
工程（ｖ）：スルホン酸部分の生成；過酸化水素および酢酸で処理することにより室温で反応を行う。
【０２１０】
シアノカルボン酸はｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０２１１】
ＬＰ４
【化８５】
2018535255.tif 000099
は下記のスキームに従って製造される：
【化８６】
2018535255.tif 000100
【０２１２】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２１３】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；マレイミドカルボン酸はｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０２１４】
ＬＰ５
【化８７】
2018535255.tif 000101
は下記のスキームに従って製造される：
【化８８】
2018535255.tif 000102
【０２１５】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えば担持ＤＣＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２１６】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；マレイミド酸はＡＬＫ＝ＡＬＫ’＝ＣＨ２ＣＨ２およびｉ＝１から７に関して市販されており、その他は以下のスキームに従って製造できる：
【０２１７】
ＡＬＫ＝ＡＬＫ’＝ＣＨ２ＣＨ２およびｉ＞７の場合
【化８９】
2018535255.tif 000103
ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２およびＡＬＫ’＝ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化９０】
2018535255.tif 000104
ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２およびＡＬＫ’≠ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化９１】
2018535255.tif 000105
ＡＬＫおよびＡＬＫ’≠ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化９２】
2018535255.tif 000106
【０２１８】
工程（ｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、不飽和の保護化酸をナトリウムの活性化により生成させた触媒量のアルコキシドで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：マレイミドへの光延反応；ＴＨＦ等の極性非プロトン性溶媒中ＰＰｈ３およびＤＩＡＤの存在下マレイミドをＰＥＧヒドロキシ酸により処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護；
工程（ｉｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、ハロゲン化エステルをＴＨＰエーテルとしてモノ保護化されたＰＥＧジオールのアルコキシドで処理することにより反応を行う。このタイプのモノ保護化ＰＥＧジオールの製造は、文献に十分に記載されている：例えばＲｉｃｈａｒｄ  Ａ．ら、Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００５年、１１巻、７３１５〜７３２１頁またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕ  Ｅ．Ｇ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２００３年、５９巻、９０８３〜９０９０頁参照；
工程（ｖ）：ＴＨＰエーテルの選択的脱保護；ＭｅＯＨ等の極性プロトン性溶媒中触媒量の塩化アセチルを使用して反応を行う；
工程（ｖｉ）：アルコールのメシレートとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＴＥＡ等の塩基の存在下でメタンスルホニルクロリドにて処理することにより反応を行う；
工程（ｖｉｉ）：求核置換；ＤＭＦ等の極性非プロトン性溶媒中例えば水素化ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｖｉｉｉ）：アルコールのベンジルエーテルとしての保護化；ＴＨＦ等の極性非プロトン性溶媒中例えば水素化ナトリウム等の塩基の存在下で臭化ベンジルにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｘ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するアルコールの脱保護；工程（ｘ）：例えば炭素担持パラジウム等の触媒の存在下で水素化分解することによるアルコールの脱保護。
【０２１９】
出発物のＰＥＧジオールはｉ＝３から１２に関して市販されている。出発物のＡＬＫジオールはｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０２２０】
ＬＰ６
【化９３】
2018535255.tif 000107
は下記のスキームに従って製造される：
【化９４】
2018535255.tif 000108
【０２２１】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２２２】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；マレイミドシクロヘキサンカルボン酸はＡＬＫ＝ＣＨ２に関して市販されており、その他は下記のスキームに従って製造することができる：
【０２２３】
ｎ＝２から４の場合
【化９５】
2018535255.tif 000109
ｎ＞４の場合
【化９６】
2018535255.tif 000110
【０２２４】
工程（ｉ）：水素化；酢酸中例えば６０ｐｓｉの水素圧下酸化白金等の触媒の存在下にて６０℃で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの保護化；ジオキサン／Ｈ２Ｏ混合物等の極性プロトン性溶媒中例えばＮａＯＨ等の塩基の存在下でベンジルクロロホルメートにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸の保護化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング試薬および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下でｔｅｒｔ−ブタノールにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：アミンの脱保護；ＭｅＯＨ等の極性プロトン性溶媒中例えばパラジウム等の触媒の存在下で水素化分解することにより反応を行う；
工程（ｖ）：マレイミド部分の導入；ＤＭＦ等の極性非プロトン性溶媒中ＮＨＳの存在下無水マレイン酸および例えばＥＤＣ等のカップリング試薬で処理することにより反応を行う；
工程（ｖｉ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護；
工程（ｖｉｉ）：パラジウム−触媒カップリング；ＴＨＦ等の極性非プロトン性溶媒中塩化リチウム、亜鉛およびトリメチルクロロシランならびに例えばテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム等の触媒の存在下でブロモ−ＡＬＫ−シアノ誘導体にて処理することにより反応を行う。
【０２２５】
適切なブロモ−ＡＬＫ−シアノ誘導体はｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０２２６】
ＬＰ７
【化９７】
2018535255.tif 000111
は下記のスキームに従って製造される：
【化９８】
2018535255.tif 000112
【０２２７】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のα−スルホン化；ＤＣＥのような極性非プロトン性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でクロロスルホン酸にて処理することにより７５℃で反応を行う；
工程（ｉｖ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートにて処理することにより室温で反応を行う；
工程（ｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中室温で反応を行う。
【０２２８】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；マレイミド酸はｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０２２９】
ＬＰ８
【化９９】
2018535255.tif 000113
は下記のスキームに従って製造される：
【化１００】
2018535255.tif 000114
【０２３０】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２３１】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されている。
【０２３２】
ＬＰ９
【化１０１】
2018535255.tif 000115
は下記のスキームに従って製造される：
【化１０２】
2018535255.tif 000116
【０２３３】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしてのカップリングおよび活性化；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートとアミノカルボン酸とのカップリングを、ＤＣＭ／ＤＭＦ混合物等の極性非プロトン性溶媒中室温で行い、続いてＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートおよび例えばＤＩＥＡ等の塩基を加える；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２３４】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテート、ｎ＝１から１２に関してアミノカルボン酸およびｎ＝１から７に関してＮ−メチル化アミノカルボン酸は市販されている。
【０２３５】
ＬＰ１０
【化１０３】
2018535255.tif 000117
は下記のスキームに従って製造される：
【化１０４】
2018535255.tif 000118
【０２３６】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしてのカップリングおよび活性化；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートとアミノカルボン酸とのカップリングをＤＣＭ／ＤＭＦ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で行い、続いてＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートおよび例えばＤＩＥＡ等の塩基を加える；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２３７】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されており；ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２およびＲ２０＝Ｈの場合、アミノＰＥＧカルボン酸はｉ＝１から６に関して市販されており、その他はｔｅｒｔ−ブチルアクリレートおよび対応するアミノ−ＰＥＧ−アルコールから製造でき；ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合、これらは以下のスキームに従って製造できる：
【０２３８】
ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２およびＲ２０≠Ｈの場合
【化１０５】
2018535255.tif 000119
ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合
Ｒ２０＝Ｈの場合
【化１０６】
2018535255.tif 000120
Ｒ２０≠Ｈの場合
【化１０７】
2018535255.tif 000121
【０２３９】
工程（ｉ）：アミンの保護化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＴＥＡ等の塩基の存在下でアミンをジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：カルボン酸の保護化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング試薬および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下でｔｅｒｔ−ブタノールにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：窒素原子のアルキル化；ＴＨＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中ハロゲン化物等の脱離基を有する試薬の存在下で水素化ナトリウム等の塩基にて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護；
工程（ｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、ハロゲン化エステルをＷＯ２００７／１２７４４０に記載されている通りに水素化ナトリウムまたはカリウムナフタレニドの活性化により生成したベンゾフェノン−イミン−ＰＥＧ−アルコールのアルコキシドで処理することにより反応を行う；
工程（ｖｉ）：エステルの鹸化；Ｈ２Ｏの存在下エステルをＬｉＯＨと反応させることにより反応を行う。
【０２４０】
アミノ−ＰＥＧ−アルコールは、例えばｉ＝３、４、７、８に関して市販されており、または米国特許第７２３０１０１号に記載されている手順に従ってｉ＝３から１２に関して市販されているＰＥＧジオールから製造できる。アミン官能基のベンゾフェノンでの保護化は、ＢＦ３エーテレート等のＬｅｗｉｓ酸の存在下共沸脱水により行うことができる。
【０２４１】
ＬＰ１１
【化１０８】
2018535255.tif 000122
は下記のスキームに従って製造される：
【化１０９】
2018535255.tif 000123
【０２４２】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンＦｍｏｃの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしてのカップリングおよび活性化；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートとアミノカルボン酸とのカップリングをＤＣＭ／ＤＭＦ混合物等の極性非プロトン性溶媒中室温で行い、続いてＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートおよび例えばＤＩＥＡ等の塩基を加える；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中室温で反応を行う。
【０２４３】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されており；アミノ−（ヘテロ）アリール−カルボン酸は、例えば４−アミノ−２−安息香酸、６−アミノ−３−ピリジンカルボン酸、５−アミノ−２−ピラジンカルボン酸、２−アミノ−５−ピリミジンカルボン酸または６−アミノ−１，２，４，５−テトラジンカルボン酸等が市販されている。
【０２４４】
ＬＰ１２
【化１１０】
2018535255.tif 000124
は下記のスキームに従って製造される：
【化１１１】
2018535255.tif 000125
【０２４５】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２４６】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；アミノカルボン酸はｎ＝１から１１に関して市販されている。
【０２４７】
ＬＰ１３
【化１１２】
2018535255.tif 000126
は下記のスキームに従って製造される：
【化１１３】
2018535255.tif 000127
【０２４８】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えば担持ＤＣＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２４９】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２の場合、Ｆｍｏｃ−保護化アミノＰＥＧカルボン酸はｉ＝１から６に関して市販されており、その他はｔｅｒｔ−ブチルアクリレートおよび対応するアミノ−ＰＥＧ−アルコールから製造でき；ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合、これらはリンカー前駆体ＬＰ１０にて記載したスキームに従って製造できる。アミン基のＦｍｏｃ基での保護化は例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＦｍｏｃＯＳｕ（ＣＡＳ番号［８２９１１−６９−１］）で処理することにより実現できる。
【０２５０】
ＬＰ１４
【化１１４】
2018535255.tif 000128
は下記のスキームに従って製造される：
【化１１５】
2018535255.tif 000129
【０２５１】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：アジド基の導入；アセトン／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中アジ化ナトリウムで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２５２】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；ブロモカルボン酸はｎ＝１から１１に関して市販されている。
【０２５３】
ＬＰ１５
【化１１６】
2018535255.tif 000130
は下記のスキームに従って製造される：
【化１１７】
2018535255.tif 000131
【０２５４】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えば担持ＤＣＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２５５】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；アジドＰＥＧ酸は以下のスキームに従って製造できる：
ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化１１８】
2018535255.tif 000132
ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化１１９】
2018535255.tif 000133
【０２５６】
工程（ｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、不飽和の保護化酸をナトリウムの活性化により生成させた触媒量のアルコキシドで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：アルコール官能基の活性化；ＤＣＭ等の極性溶媒中例えばＴＥＡ等の塩基の存在下メタンスルホニルクロリドを使用して反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：アジド基によるメシレートの置換；アセトン／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中アジ化ナトリウムで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用する脱保護；
工程（ｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、ＴＨＰエーテルとしてモノ保護化されたＰＥＧジオールのアルコキシド、例えば水素化ナトリウムで生成したアルコキシドでハロゲン化エステルを処理することにより反応を行う。このタイプのモノ保護化ＰＥＧジオールの製造は文献に十分に記載されている：例えばＲｉｃｈａｒｄ  Ａ．ら、Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００５年、１１巻、７３１５〜７３２１頁またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕ  Ｅ．Ｇ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２００３年、５９巻、９０８３〜９０９０頁参照；
工程（ｖｉ）：メチルエステルの鹸化；ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒の混合物中ＬｉＯＨの存在下で室温で反応を行う。
【０２５７】
出発物のＰＥＧジオールはｉ＝３から１２に関して市販されており；ブロモメチルエステルはｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０２５８】
ＬＰ１６
【化１２０】
2018535255.tif 000134
は下記のスキームに従って製造される：
【化１２１】
2018535255.tif 000135
【０２５９】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：シクロオクチンカップリング；ＤＣＭ等の極性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｖ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２６０】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；シクロオクチンはｎ’＝１、２、３および５に関して市販されており；ＮＨＳエステルとして一活性化されている二酸はｎ＝１から３に関しおよびｎ＝４から１０に関して市販されており、これらは例えばＤＣＣ等のカップリング剤および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下、市販されている二酸をＮＨＳで活性化することにより製造できる。
【０２６１】
ＬＰ１７
【化１２２】
2018535255.tif 000136
は下記のスキームに従って製造される：
【化１２３】
2018535255.tif 000137
【０２６２】
工程（ｉ）：Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：シクロオクチンカップリング；ＤＣＭ等の極性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｖ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用する脱保護；
工程（ｖ）：ＮＨＳエステルとしてのシクロオクチン−ＰＥＧカルボン酸の活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｖｉ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う。
【０２６３】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；シクロオクチンはｎ’＝１、２、３および５に関して市販されており；ＮＨＳエステルとして一活性化されているＰＥＧ二酸は以下のスキームに従って製造する：
ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化１２４】
2018535255.tif 000138
ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化１２５】
2018535255.tif 000139
【０２６４】
工程（ｉ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、不飽和の保護化酸をナトリウムの活性化により生成させた触媒量のアルコキシドで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護；
工程（ｉｉｉ）：一酸のＮＨＳエステルとしてのモノ活性化；ＴＨＦ等の極性溶媒中例えばＤＣＣ等のカップリング剤および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｖ）：ＰＥＧ鎖の伸長；ＴＨＦまたはＤＭＦ等の無水極性非プロトン性溶媒中、ハロゲン化エステルをＴＨＰエーテルとしてモノ保護化されたＰＥＧジオールのアルコキシドで処理することにより反応を行う。このタイプのモノ保護化ＰＥＧジオールの製造は文献に十分に記載されている：例えばＲｉｃｈａｒｄ  Ａ．ら、Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００５年、１１巻、７３１５〜７３２１頁またはＳａｋｅｌｌａｒｉｏｕ  Ｅ．Ｇ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２００３年、５９巻、９０８３〜９０９０頁参照；
工程（ｖ）：メチルエステルとしてのカルボン酸の保護化；ＭｅＯＨ等の極性非プロトン性溶媒中トリメチルシリルジアゾメタンで処理することにより反応を行う；
工程（ｖｉ）：メチルエステルの鹸化；ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒の混合物中ＬｉＯＨの存在下で反応を行う；
工程（ｖｉｉ）：酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＴＨＦ等の極性溶媒中例えばＤＣＣ等のカップリング剤および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下でＮＨＳを用いて反応を行う。
【０２６５】
出発物のＰＥＧジオールはｉ＝３から１２に関して市販されている。
【０２６６】
ＬＰ１８
【化１２６】
2018535255.tif 000140
は下記のスキームに従って製造される：
【化１２７】
2018535255.tif 000141
【０２６７】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２６８】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されている。アリルエステルとしてモノ保護化された二酸はｎ＝２（モノアリルスクシネート）に関して市販されているか、またはメチルまたはｔｅｒｔ−ブチルモノエステルのトランスエステル化により製造でき、これらはｎ’＝２から６に関して市販されている。
【０２６９】
ＬＰ１９
【化１２８】
2018535255.tif 000142
は下記のスキームに従って製造される：
【化１２９】
2018535255.tif 000143
【０２７０】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２７１】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；アリルエステルとしてモノ保護化されたＰＥＧ二酸はリンカー前駆体ＬＰ２にて記載したスキームに従って製造される。
【０２７２】
ＬＰ２０
【化１３０】
2018535255.tif 000144
は下記のスキームに従って製造される：
【化１３１】
2018535255.tif 000145
【０２７３】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２７４】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；アリルエステルとしてモノ保護化されたスルホ二酸はリンカー前駆体ＬＰ３にて記載したスキームに従って製造される。
【０２７５】
ＬＰ２１
【化１３２】
2018535255.tif 000146
は下記のスキームに従って製造される：
【化１３３】
2018535255.tif 000147
【０２７６】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う。
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２７７】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；マレイミドカルボン酸はｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０２７８】
ＬＰ２２
【化１３４】
2018535255.tif 000148
は下記のスキームに従って製造される：
【化１３５】
2018535255.tif 000149
【０２７９】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えば担持ＤＣＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２８０】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；マレイミドＰＥＧ酸はＡＬＫ＝ＡＬＫ’＝ＣＨ２ＣＨ２およびｉ＝１から７に関して市販されており、その他はリンカー前駆体ＬＰ５にて記載したスキームに従って製造される。
【０２８１】
ＬＰ２３
【化１３６】
2018535255.tif 000150
は下記のスキームに従って製造される：
【化１３７】
2018535255.tif 000151
【０２８２】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２８３】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；マレイミドシクロヘキサンカルボン酸はＡＬＫ＝ＣＨ２に関して市販されており、その他はリンカー前駆体ＬＰ６に関して記載したスキームに従って製造できる。
【０２８４】
ＬＰ２４
【化１３８】
2018535255.tif 000152
は下記のスキームに従って製造される：
【化１３９】
2018535255.tif 000153
【０２８５】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のα−スルホン化；ＤＣＥのような極性非プロトン性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でクロロスルホン酸にて処理することにより７５℃で反応を行う；
工程（ｉｖ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖｉ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２８６】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；マレイミド酸はｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０２８７】
ＬＰ２５
【化１４０】
2018535255.tif 000154
は下記のスキームに従って製造される：
【化１４１】
2018535255.tif 000155
【０２８８】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２８９】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されている。
【０２９０】
ＬＰ２６
【化１４２】
2018535255.tif 000156
は下記のスキームに従って製造される：
【化１４３】
2018535255.tif 000157
【０２９１】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしてのカップリングおよび活性化；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートとアミノカルボン酸とのカップリングをＤＣＭ／ＤＭＦ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で行い、続いてＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートおよび例えばＤＩＥＡ等の塩基を加える；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２９２】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されており；アミノカルボン酸はｎ＝１から１２に関して、Ｎ−メチル化アミノカルボン酸はｎ＝１から７に関して市販されている。
【０２９３】
ＬＰ２７
【化１４４】
2018535255.tif 000158
は下記のスキームに従って製造される：
【化１４５】
2018535255.tif 000159
【０２９４】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしてのカップリングおよび活性化；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートとアミノカルボン酸とのカップリングをＤＣＭ／ＤＭＦ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で行い、続いてＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートおよび例えばＤＩＥＡ等の塩基を加える；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２９５】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されており；ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２およびＲ２０＝Ｈの場合、アミノＰＥＧカルボン酸はｉ＝１から６に関して市販されており、その他はｔｅｒｔ−ブチルアクリレートおよび対応するアミノ−ＰＥＧ−アルコールから製造でき；ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合、これらはリンカー前駆体ＬＰ１０にて記載したスキームに従って製造できる。
【０２９６】
ＬＰ２８
【化１４６】
2018535255.tif 000160
は下記のスキームに従って製造される：
【化１４７】
2018535255.tif 000161
【０２９７】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしてのカップリングおよび活性化；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートとアミノカルボン酸とのカップリングをＤＣＭ／ＤＭＦ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で行い、続いてＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートおよび例えばＤＩＥＡ等の塩基を加える；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０２９８】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されており；アミノ−（ヘテロ）アリール−カルボン酸は例えば４−アミノ−２−安息香酸、６−アミノ−３−ピリジンカルボン酸、５−アミノ−２−ピラジンカルボン酸、２−アミノ−５−ピリミジンカルボン酸または６−アミノ−１，２，４，５−テトラジンカルボン酸等が市販されている。
【０２９９】
ＬＰ２９
【化１４８】
2018535255.tif 000162
は下記のスキームに従って製造される：
【化１４９】
2018535255.tif 000163
【０３００】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３０１】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；アミノカルボン酸はｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０３０２】
ＬＰ３０
【化１５０】
2018535255.tif 000164
は下記のスキームに従って製造される：
【化１５１】
2018535255.tif 000165
【０３０３】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えば担持ＤＣＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３０４】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；Ｆｍｏｃ保護化アミノＰＥＧカルボン酸はｉ＝１から６に関して市販されており、その他はｔｅｒｔ−ブチルアクリレートおよび対応するアミノ−ＰＥＧ−アルコールから製造でき；ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合、これらはリンカー前駆体ＬＰ１０に関するスキームに従って製造できる。アミン官能基のＦｍｏｃ基での保護化は例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＦｍｏｃＯＳｕ（ＣＡＳ番号［８２９１１−６９−１］）で処理することにより実現できる。
【０３０５】
ＬＰ３１
【化１５２】
2018535255.tif 000166
は下記のスキームに従って製造される：
【化１５３】
2018535255.tif 000167
【０３０６】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＥＤＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３０７】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；アジドカルボン酸はリンカー前駆体ＬＰ１４にて記載したスキームに従って製造できる。
【０３０８】
ＬＰ３２
【化１５４】
2018535255.tif 000168
は下記のスキームに従って製造される：
【化１５５】
2018535255.tif 000169
【０３０９】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えば担持ＤＣＣ等のカップリング剤の存在下でＮＨＳにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３１０】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；アジドＰＥＧカルボン酸はリンカー前駆体ＬＰ１５にて記載したスキームに従って製造できる。
【０３１１】
ＬＰ３３
【化１５６】
2018535255.tif 000170
は下記のスキームに従って製造される：
【化１５７】
2018535255.tif 000171
【０３１２】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３１３】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；ＮＨＳエステルとして活性化されたシクロオクチンリンカーは、リンカー前駆体ＬＰ１６にて記載したスキームに従って製造できる。
【０３１４】
ＬＰ３４
【化１５８】
2018535255.tif 000172
は下記のスキームに従って製造される：
【化１５９】
2018535255.tif 000173
【０３１５】
工程（ｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下またはＤＣＭ等の極性溶媒中プロピルホスホン酸無水物等のカップリング試薬および例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アミンの脱保護；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：ジペプチドとＮＨＳエステルとの間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｖ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３１６】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；モノ保護化ジアミンはｎ＝２から４ならびにそれぞれ独立にＲ１７およびＲ１８＝ＨまたはＭｅに関して市販されており；ＮＨＳエステルとして活性化されたシクロオクチンリンカーは、リンカー前駆体ＬＰ１７にて記載したスキームに従って製造できる。
【０３１７】
ＬＰ３５
【化１６０】
2018535255.tif 000174
は下記のスキームに従って製造される：
【化１６１】
2018535255.tif 000175
【０３１８】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３１９】
多くのアニリン誘導体は、例えば４−（ヒドロキシメチル）−アニリン（ＣＡＳ番号［６２３−０４−１］）、４−（１−ヒドロキシエチル）−アニリン（ラセミ体の（ＣＡＳ番号［１４５７２−８９−５］）またはエナンチオピュア（Ｒ）（ＣＡＳ番号［２１０７５４−２５−９］）または（Ｓ）（ＣＡＳ番号［５００２２９−８４−５］））、４−アミノ−α，α−ジメチル−ベンゼン−メタノール（ＣＡＳ番号［２３２４３−０４−１］）、４−アミノ−α−メトキシ−α−メチル−ベンゼンメタノール（ＣＡＳ番号［１３７９３１８−８１−６］）、４−アミノ−α−メチル−α−トリフルオロメチル−ベンゼンメタノール（ＣＡＳ番号［８５１６５２−５６−７］）、２−アミノ−ベンゼンメタノール（ＣＡＳ番号［５３４４−９０−１］）、２−アミノ−α−メチル−ベンゼンメタノール（ラセミ（ＣＡＳ番号［１０５１７−５０−７］）またはエナンチオピュア（Ｒ）（ＣＡＳ番号［３２０５−２１−８］）または（Ｓ）（ＣＡＳ番号［３２０５−２１−８］））、６−アミノ−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［１１３２９３−７１−３］）、６−アミノ−α−メチル−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［１３３５０５４−８３−５］）、６−アミノ−α−エチル−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［１３５５２２５−８５−２］）、６−アミノ−α，α−ジメチル−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［８４３６４６−０３−８］）、５−アミノ−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［８７３６５１−９２−４］）、２−アミノ−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［２３６１２−５７−９］）、２−アミノ−α−メチル−３−ピリジンメタノール（ラセミ（ＣＡＳ番号［８６９５６７−９１−９］）またはエナンチオピュア（Ｒ）（ＣＡＳ番号［９３６７１８−０１−３］）または（Ｓ）（ＣＡＳ番号［９３６７１８−００−２］））、２−アミノ−α−エチル−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［９１４２２３−９０−８］）、２−アミノ−α，α−ジメチル−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［２１３６６６−９６−７］）、３−アミノ−４−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［１５２３９８−０５−５］）、３−アミノ−α−メチル−４−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［１２４２４７０−８８−７］）、３−アミノ−α，α−メチル−４−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［１３３５７−８１−８］）、４−アミノ−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［１３８１１６−３４−４］）、４−アミノ−α−メチル−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［７４１２２３−４９−４］）、４−アミノ−α，α−メチル−３−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［１３３９０１３−２６−１］）、３−アミノ−２−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［５２３７８−６３−９］）、３−アミノ−α−メチル−２−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［９５４２４０−５４−１］）、３−アミノ−α，α−メチル−２−ピリジンメタノール（ＣＡＳ番号［８９９４３８−５７−４］）等市販されている。
【０３２０】
ＬＰ３６
【化１６２】
2018535255.tif 000176
は下記のスキームに従って製造される：
【化１６３】
2018535255.tif 000177
【０３２１】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ２とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３２２】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３２３】
ＬＰ３７
【化１６４】
2018535255.tif 000178
は下記のスキームに従って製造される：
【化１６５】
2018535255.tif 000179
【０３２４】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ３とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３２５】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３２６】
ＬＰ３８
【化１６６】
2018535255.tif 000180
は下記のスキームに従って製造される：
【化１６７】
2018535255.tif 000181
【０３２７】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４とアニリン誘導体との間のペプチドカップリン
グ；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３２８】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３２９】
ＬＰ３９
【化１６８】
2018535255.tif 000182
は下記のスキームに従って製造される：
【化１６９】
2018535255.tif 000183
【０３３０】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ５とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３３１】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３３２】
ＬＰ４０
【化１７０】
2018535255.tif 000184
は下記のスキームに従って製造される：
【化１７１】
2018535255.tif 000185
【０３３３】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ６とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３３４】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３３５】
ＬＰ４１
【化１７２】
2018535255.tif 000186
は下記のスキームに従って製造される：
【化１７３】
2018535255.tif 000187
【０３３６】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ７とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３３７】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３３８】
ＬＰ４２
【化１７４】
2018535255.tif 000188
は下記のスキームに従って製造される：
【化１７５】
2018535255.tif 000189
【０３３９】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ８とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３４０】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３４１】
ＬＰ４３
【化１７６】
2018535255.tif 000190
は下記のスキームに従って製造される：
【化１７７】
2018535255.tif 000191
【０３４２】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ９３とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３４３】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３４４】
ＬＰ４４
【化１７８】
2018535255.tif 000192
は下記のスキームに従って製造される：
【化１７９】
2018535255.tif 000193
【０３４５】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１０とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３４６】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３４７】
ＬＰ４５
【化１８０】
2018535255.tif 000194
は下記のスキームに従って製造される：
【化１８１】
2018535255.tif 000195
【０３４８】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１１とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３４９】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３５０】
ＬＰ４６
【化１８２】
2018535255.tif 000196
は下記のスキームに従って製造される：
【化１８３】
2018535255.tif 000197
【０３５１】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１２とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３５２】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３５３】
ＬＰ４７
【化１８４】
2018535255.tif 000198
は下記のスキームに従って製造される：
【化１８５】
2018535255.tif 000199
【０３５４】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１３とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３５５】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３５６】
ＬＰ４８
【化１８６】
2018535255.tif 000200
は下記のスキームに従って製造される：
【化１８７】
2018535255.tif 000201
【０３５７】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１４とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３５８】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３５９】
ＬＰ４９
【化１８８】
2018535255.tif 000202
は下記のスキームに従って製造される：
【化１８９】
2018535255.tif 000203
【０３６０】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１５とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３６１】
ＬＰ５０
【化１９０】
2018535255.tif 000204
は下記のスキームに従って製造される：
【化１９１】
2018535255.tif 000205
【０３６２】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１６とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３６３】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３６４】
ＬＰ５１
【化１９２】
2018535255.tif 000206
は下記のスキームに従って製造される：
【化１９３】
2018535255.tif 000207
【０３６５】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ１７とアニリン誘導体との間のペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合物等の極性溶媒中例えばＥＥＤＱ等のカップリング剤の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ｐ−ニトロフェニル−クロロホルメートで処理することによるベンジル酸アルコールのｐ−ニトロフェニル−カルボネートとしての活性化。
【０３６６】
多くのアニリン誘導体は、例えばＬＰ３５に関して示した誘導体等市販されている。
【０３６７】
ＬＰ５２
【化１９４】
2018535255.tif 000208
は下記のスキームに従って製造される：
【化１９５】
2018535255.tif 000209
【０３６８】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ３５とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３６９】
ＬＰ５３
【化１９６】
2018535255.tif 000210
は下記のスキームに従って製造される：
【化１９７】
2018535255.tif 000211
【０３７０】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ３６とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３７１】
ＬＰ５４
【化１９８】
2018535255.tif 000212
は下記のスキームに従って製造される：
【化１９９】
2018535255.tif 000213
【０３７２】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ３７とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３７３】
ＬＰ５５
【化２００】
2018535255.tif 000214
は下記のスキームに従って製造される：
【化２０１】
2018535255.tif 000215
【０３７４】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ３８とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３７５】
ＬＰ５６
【化２０２】
2018535255.tif 000216
は下記のスキームに従って製造される：
【化２０３】
2018535255.tif 000217
【０３７６】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ３９とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３７７】
ＬＰ５７
【化２０４】
2018535255.tif 000218
は下記のスキームに従って製造される：
【化２０５】
2018535255.tif 000219
【０３７８】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４０とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３７９】
ＬＰ５８
【化２０６】
2018535255.tif 000220
は下記のスキームに従って製造される：
【化２０７】
2018535255.tif 000221
【０３８０】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４１とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３８１】
ＬＰ５９
【化２０８】
2018535255.tif 000222
は下記のスキームに従って製造される：
【化２０９】
2018535255.tif 000223
【０３８２】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４２とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３８３】
ＬＰ６０
【化２１０】
2018535255.tif 000224
は下記のスキームに従って製造される：
【化２１１】
2018535255.tif 000225
【０３８４】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４３とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３８５】
ＬＰ６１
【化２１２】
2018535255.tif 000226
は下記のスキームに従って製造される：
【化２１３】
2018535255.tif 000227
【０３８６】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４４とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３８７】
ＬＰ６２
【化２１４】
2018535255.tif 000228
は下記のスキームに従って製造される：
【化２１５】
2018535255.tif 000229
【０３８８】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４５とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３８９】
ＬＰ６３
【化２１６】
2018535255.tif 000230
は下記のスキームに従って製造される：
【化２１７】
2018535255.tif 000231
【０３９０】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４６とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３９１】
ＬＰ６４
【化２１８】
2018535255.tif 000232
は下記のスキームに従って製造される：
【化２１９】
2018535255.tif 000233
【０３９２】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４７とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３９３】
ＬＰ６５
【化２２０】
2018535255.tif 000234
は下記のスキームに従って製造される：
【化２２１】
2018535255.tif 000235
【０３９４】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４８とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３９５】
ＬＰ６６
【化２２２】
2018535255.tif 000236
は下記のスキームに従って製造される：
【化２２３】
2018535255.tif 000237
【０３９６】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ４９とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３９７】
ＬＰ６７
【化２２４】
2018535255.tif 000238
は下記のスキームに従って製造される：
【化２２５】
2018535255.tif 000239
【０３９８】
工程（ｉ）：リンカー前駆体ＬＰ５０とモノ保護化ジアミンとの間でのカルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０３９９】
ＬＰ６８
【化２２６】
2018535255.tif 000240
は下記のスキームに従って製造される：
【化２２７】
2018535255.tif 000241
【０４００】
工程（ｉ）：カルバメートの生成；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護。
【０４０１】
ＬＰ６９
【化２２８】
2018535255.tif 000242
はリンカー前駆体ＬＰ３５について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４０２】
ＬＰ７０
【化２２９】
2018535255.tif 000243
はリンカー前駆体ＬＰ３６について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４０３】
ＬＰ７１
【化２３０】
2018535255.tif 000244
はリンカー前駆体ＬＰ３７について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４０４】
ＬＰ７２
【化２３１】
2018535255.tif 000245
はリンカー前駆体ＬＰ３８について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４０５】
ＬＰ７３
【化２３２】
2018535255.tif 000246
はリンカー前駆体ＬＰ３９について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４０６】
ＬＰ７４
【化２３３】
2018535255.tif 000247
はリンカー前駆体ＬＰ４０について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４０７】
ＬＰ７５
【化２３４】
2018535255.tif 000248
はリンカー前駆体ＬＰ４１について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４０８】
ＬＰ７６
【化２３５】
2018535255.tif 000249
はリンカー前駆体ＬＰ４２について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４０９】
ＬＰ７７
【化２３６】
2018535255.tif 000250
はリンカー前駆体ＬＰ４３について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１０】
ＬＰ７８
【化２３７】
2018535255.tif 000251
はリンカー前駆体ＬＰ４４について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１１】
ＬＰ７９
【化２３８】
2018535255.tif 000252
はリンカー前駆体ＬＰ４５について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１２】
ＬＰ８０
【化２３９】
2018535255.tif 000253
はリンカー前駆体ＬＰ４６について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１３】
ＬＰ８１
【化２４０】
2018535255.tif 000254
はリンカー前駆体ＬＰ４７について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１４】
ＬＰ８２
【化２４１】
2018535255.tif 000255
はリンカー前駆体ＬＰ４８について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１５】
ＬＰ８３
【化２４２】
2018535255.tif 000256
はリンカー前駆体ＬＰ４９について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１６】
ＬＰ８４
【化２４３】
2018535255.tif 000257
はリンカー前駆体ＬＰ５０について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１７】
ＬＰ８５
【化２４４】
2018535255.tif 000258
はリンカー前駆体ＬＰ５１について記載した１番目の工程に従って製造される。
【０４１８】
ＬＰ８６
【化２４５】
2018535255.tif 000259
は下記のスキームに従って製造される：
【化２４６】
2018535255.tif 000260
【０４１９】
工程（ｉ）：エステル化によるＷａｎｇ樹脂への酸のカップリング；ＤＣＭ等の極性溶媒中例えばＤＩＣ等のカップリング試薬および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：Ｆｍｏｃ基の脱保護；ＤＭＦ等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基で処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＦ等の極性溶媒中例えばＨＯＢｔおよびＨＡＴＵ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｖ）：樹脂の開裂；ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えばＴＦＡ等の酸の存在下で反応を行う。
【０４２０】
Ｆｍｏｃ保護化アルキル−アミノ酸はｎ＝１から９に関して市販されており；Ｆｍｏｃ  Ｌ−アミノ酸は市販されている。
【０４２１】
ＬＰ８７
【化２４７】
2018535255.tif 000261
は下記のスキームに従って製造される：
【化２４８】
2018535255.tif 000262
【０４２２】
工程（ｉ）：エステル化によるＷａｎｇ樹脂への酸のカップリング；ＤＣＭ等の極性溶媒中例えばＤＩＣ等のカップリング試薬および例えばＤＭＡＰ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：Ｆｍｏｃ基の脱保護；ＤＭＦ等の極性溶媒中例えばピペリジン等の塩基で処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：ペプチドカップリング；ＤＭＦ等の極性溶媒中例えばＨＯＢｔおよびＨＡＴＵ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｖ）：樹脂の開裂；ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えばＴＦＡ等の酸の存在下で反応を行う。
【０４２３】
Ｆｍｏｃ−保護化アミノＰＥＧカルボン酸はｉ＝１から６に関して市販されており、その他はｔｅｒｔ−ブチルアクリレートおよび対応するアミノ−ＰＥＧ−アルコールから製造でき；ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２の場合、これらはリンカー前駆体ＬＰ１０にて記載したスキームに従って製造できる。アミン官能基のＦｍｏｃ基での保護化は、例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下ＦｍｏｃＯＳｕ（ＣＡＳ番号［８２９１１−６９−１］）で処理することにより実現でき；Ｆｍｏｃ  Ｌ−アミノ酸は市販されている。
【０４２４】
ＬＰ８８
【化２４９】
2018535255.tif 000263
は下記のスキームに従って製造される：
【化２５０】
2018535255.tif 000264
【０４２５】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：スルホアミノ酸とのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４２６】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；スルホアミノ酸はｎ＝１および２に関して市販されており、またはその他は以下のスキームに従って製造できる：
【化２５１】
2018535255.tif 000265
【０４２７】
工程（ｉ）：チオアセチルによる臭化物の置換；例えばＴＨＦ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でチオ酢酸を使用して反応を行う；
工程（ｉｉ）：スルホン酸部分の生成；過酸化水素および酢酸で処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：アジドによる臭化物の置換；例えばＤＭＡ等の極性溶媒中アジ化ナトリウムで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：メチルエステル脱保護；例えばＨＣｌとＡｃＯＨとの混合物等の酸性条件下で反応を行う；
工程（ｖ）：アジドの還元；Ｈ２Ｏ等の極性溶媒中炭素担持パラジウム等の触媒の存在下で加水分解することにより反応を行う。
【０４２８】
ジブロモ誘導体はｎ＝３、４および９に関して市販されている。
【０４２９】
ＬＰ８９
【化２５２】
2018535255.tif 000266
は下記のスキームに従って製造される：
【化２５３】
2018535255.tif 000267
【０４３０】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：マレイミドアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４３１】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；マレイミドアミンはｎ＝２から６に関して市販されている。
【０４３２】
ＬＰ９０
【化２５４】
2018535255.tif 000268
は下記のスキームに従って製造される：
【化２５５】
2018535255.tif 000269
【０４３３】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：マレイミドＰＥＧアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４３４】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；マレイミドＰＥＧアミンはＡＬＫ＝ＡＬＫ’＝ＣＨ２ＣＨ２ならびにｉ＝０および１に関して市販されており、またはその他は以下のスキームに従って製造できる：ＡＬＫ＝ＡＬＫ’＝ＣＨ２ＣＨ２およびｉ＞１の場合
【化２５６】
2018535255.tif 000270
ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２およびＡＬＫ’＝ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化２５７】
2018535255.tif 000271
ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２およびＡＬＫ’≠ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化２５８】
2018535255.tif 000272
ＡＬＫおよびＡＬＫ’≠ＣＨ２ＣＨ２の場合
【化２５９】
2018535255.tif 000273
【０４３５】
工程（ｉ）：マレイミドへの光延反応；例えばＴＨＦ等の極性非プロトン性溶媒中ＰＰｈ３およびＤＩＡＤの存在下でＰＥＧヒドロキシ酸によりマレイミドを処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護；
工程（ｉｉｉ）：アルコールのトシレートとしての活性化；例えばＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＴＥＡ等の塩基の存在下で塩化トシルにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｖ）：トシル基の置換；例えばＴＨＦ等の極性非プロトン性溶媒中例えば水素化ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う
工程（ｖ）：ベンジル基の脱保護；例えばＭｅＯＨ等の極性溶媒中例えば炭素担持パラジウム等の触媒量の触媒の存在下で水素化分解することにより反応を行う；
工程（ｖｉ）：アルコールのメシレートとしての活性化；例えばＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＴＥＡ等の塩基の存在下でメタンスルホニルクロリドにて処理することにより反応を行う；
工程（ｖｉｉ）：求核置換；例えばＤＭＦ等の極性非プロトン性溶媒中水素化ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
【０４３６】
出発物のＢｏｃ−保護化ＰＥＧアミノアルコールはｉ＝２から４に関して市販されており、またはｉ＝５から８に関して市販されているＰＥＧアミノアルコールをＢｏｃ２Ｏにより処理することにより製造でき；出発物のＡＬＫアミノアルコールはｎ＝１および３から１０に関して市販されており；出発物のベンジル基でモノ保護化されたＰＥＧジオールはｉ＝１から９に関して市販されており；出発物のＡＬＫ’ジオールはｎ＝１から１２に関して市販されている。
【０４３７】
ＬＰ９１
【化２６０】
2018535255.tif 000274
は下記のスキームに従って製造される：
【化２６１】
2018535255.tif 000275
【０４３８】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：マレイミドアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４３９】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；マレイミドアミンは以下のスキームに従って製造できる：
【化２６２】
2018535255.tif 000276
【０４４０】
工程（ｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：ペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４４１】
マレイミドシクロヘキサンカルボン酸はＡＬＫ＝ＣＨ２に関して市販されており、またはその他はＬＰ６にて記載したスキームに従って製造でき；Ｂｏｃ基でモノ保護化されたジアミンはｎ＝１から１０に関して市販されている。
【０４４２】
ＬＰ９２
【化２６３】
2018535255.tif 000277
は下記のスキームに従って製造される：
【化２６４】
2018535255.tif 000278
【０４４３】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：マレイミドＰＥＧアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４４４】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；マレイミドＰＥＧアミンは以下のスキームに従って製造できる：
【化２６５】
2018535255.tif 000279
【０４４５】
工程（ｉ）：カルボン酸のＮＨＳエステルとしての活性化；ＤＭＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下でＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネートにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：ペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４４６】
マレイミドシクロヘキサンカルボン酸はＡＬＫ＝ＣＨ２に関して市販されており、またはその他はＬＰ６にて記載したスキームに従って製造でき；Ｂｏｃ基でモノ保護化されたＰＥＧジアミンはｉ＝１から９に関して市販されている。
【０４４７】
ＬＰ９３
【化２６６】
2018535255.tif 000280
は下記のスキームに従って製造される：
【化２６７】
2018535255.tif 000281
【０４４８】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：ハロゲノアセトアミドＰＥＧアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４４９】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；ハロゲノアセトアミドアミンはｎ＝２から４および８に関して市販されており、または以下のスキームに従って製造できる：
【化２６８】
2018535255.tif 000282
【０４５０】
工程（ｉｉ）：ペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４５１】
Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されており；Ｂｏｃ基でモノ保護化されたジアミンはｎ＝１から１０に関して市販されている。
【０４５２】
ＬＰ９４
【化２６９】
2018535255.tif 000283
は下記のスキームに従って製造される：
【化２７０】
2018535255.tif 000284
【０４５３】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：ハロゲノアセトアミドＰＥＧアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４５４】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；ハロゲノアセトアミドアミンはｎ＝２から４および８に関して市販されており、または以下のスキームに従って製造できる：
【化２７１】
2018535255.tif 000285
【０４５５】
工程（ｉｉ）：ペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４５６】
Ｎ−スクシンイミジルブロモ−およびヨード−アセテートは市販されており；Ｂｏｃ基でモノ保護化されたＰＥＧジアミンはｉ＝１から９に関して市販されている。
【０４５７】
ＬＰ９５
【化２７２】
2018535255.tif 000286
は下記のスキームに従って製造される：
【化２７３】
2018535255.tif 000287
【０４５８】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：ハロゲノアセトアミドアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４５９】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；ハロゲノアセトアミドアミンは以下のスキームに従って製造できる：
【化２７４】
2018535255.tif 000288
【０４６０】
工程（ｉｉ）：ペプチドカップリング；ＤＣＭ／ＣＨ３ＣＮ混合物等の極性非プロトン性溶媒中で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４６１】
ハロゲノアセトアミドのＮＨＳエステルはリンカー前駆体ＬＰ１１にて記載した通りに製造でき；Ｂｏｃ基でモノ保護化されたジアミンはｎ＝１から１０に関して市販されている。
【０４６２】
ＬＰ９６およびＬＰ９８
【化２７５】
2018535255.tif 000289
は下記のスキームに従って製造される：
【化２７６】
2018535255.tif 000290
【０４６３】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アジドアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４６４】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；アジドアミンはｎ＝２から８および１０に関して市販されている。
【０４６５】
ＬＰ９７およびＬＰ９９
【化２７７】
2018535255.tif 000291
は下記のスキームに従って製造される：
【化２７８】
2018535255.tif 000292
【０４６６】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：アジドＰＥＧアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４６７】
Ｌ−アミノ酸は市販されており；Ｂｏｃ−保護化Ｌ−アミノ酸のＮＨＳエステルは市販されており；ＡＬＫ＝ＣＨ２ＣＨ２に関して、アジドＰＥＧアミンはｉ＝１から８および１０に関して市販されており、ＡＬＫ≠ＣＨ２ＣＨ２に関して、アジドＰＥＧアミンは以下のスキームに従って製造できる：
【化２７９】
2018535255.tif 000293
【０４６８】
工程（ｉ）：アルコールのメシレートとしての活性化；例えばＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＴＥＡ等の塩基の存在下でメタンスルホニルクロリドにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：アジド基によるメシレートの置換；アセトン／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中アジ化ナトリウムで処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４６９】
出発物のＰＥＧアミノアルコールは、リンカー前駆体ＬＰ９０にて記載した通りに製造できる。
【０４７０】
ＬＰ１００
【化２８０】
2018535255.tif 000294
は下記のスキームに従って製造される：
【化２８１】
2018535255.tif 000295
【０４７１】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：シクロオクチンアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４７２】
シクロオクチンアミンはｎ＝１、２、３および５に関して市販されている。
【０４７３】
ＬＰ１０１
【化２８２】
2018535255.tif 000296
は下記のスキームに従って製造される：
【化２８３】
2018535255.tif 000297
【０４７４】
工程（ｉ）：Ｂｏｃ−Ｌ−アミノ酸−ＯＮＨＳとＬ−アミノ酸との間のペプチドカップリング；ＤＭＥ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ混合物等の極性溶媒中例えば重炭酸ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉ）：シクロオクチンＰＥＧアミンとのペプチドカップリング；ＣＨ３ＣＮ等の極性溶媒中例えばＤＣＣおよびＨＯＢｔ等のカップリング試薬ならびに例えばＤＩＥＡ等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸の溶液（例えばジオキサン中溶液）を使用するＢｏｃ基の脱保護。
【０４７５】
シクロオクチンＰＥＧアミンは以下のスキームに従って製造できる：
【化２８４】
2018535255.tif 000298
【０４７６】
工程（ｉ）：アルコールのメシレートとしての活性化；例えばＤＣＭ等の極性非プロトン性溶媒中例えばＴＥＡ等の塩基の存在下でメタンスルホニルクロリドにて処理することにより反応を行う；
工程（ｉｉ）：求核置換；例えばＤＭＦ等の極性非プロトン性溶媒中水素化ナトリウム等の塩基の存在下で反応を行う；
工程（ｉｉｉ）：塩酸（例えばジオキサン中溶液）のまたはトリフルオロ酢酸の溶液を使用する脱保護；
工程（ｉｖ）：アミンのＢｏｃ基での保護化；例えばＤＣＭ等の極性溶媒中例えばＴＥＡ等の塩基の存在下でＢｏｃ２Ｏにて処理することにより反応を行う；
工程（ｖ）：ペプチドカップリング；例えばＤＣＭ等の極性溶媒中例えばＨＯＢｔおよびＥＤＣ等のカップリング試薬の存在下で反応を行う。
【０４７７】
出発物のＡＬＫアミノアルコールはｎ＝１から１０に関して市販されており；シクロオクチンはｎ＝１、２、３および５に関して市販されている。
【０４７８】
【表１３】
2018535255.tif 000299
【０４７９】
【表１４】
2018535255.tif 000300
【０４８０】
【表１５】
2018535255.tif 000301
【０４８１】
【表１６】
2018535255.tif 000302
【０４８２】
【表１７】
2018535255.tif 000303
【０４８３】
【表１８】
2018535255.tif 000304
【０４８４】
【表１９】
2018535255.tif 000305
【０４８５】
【表２０】
2018535255.tif 000306
【０４８６】
【表２１】
2018535255.tif 000307
【０４８７】
【表２２】
2018535255.tif 000308
【０４８８】
【表２３】
2018535255.tif 000309
【０４８９】
【表２４】
2018535255.tif 000310
【０４９０】
【表２５】
2018535255.tif 000311
【０４９１】
【表２６】
2018535255.tif 000312
【０４９２】
【表２７】
2018535255.tif 000313
【０４９３】
【表２８】
2018535255.tif 000314
【０４９４】
式（ＩＩＩ）のコンジュゲートを製造するための方法
本発明のコンジュゲートは、
（ｉ）
修飾剤によって場合によりまず修飾されている抗体の、場合により緩衝化された水溶液と、
式（ＩＩ）のクリプトフィシンペイロードの水溶液であって、
式（ＩＩ）の化合物の化学基ＲＣＧ１は抗体上に存在する化学基ＲＣＧ２に向けて、特に抗体上に存在するアミノ基に向けて反応性であり、
前記化学基ＲＣＧ２は、適切であれば、共有結合の形成によって式（ＩＩ）の化合物を抗体に結合するように、修飾剤によって導入されている、
クリプトフィシンペイロードの水溶液と
を接触させ、反応させること；
（ｉｉ）次いで、工程（ｉ）で形成させたコンジュゲートを、クリプトフィシンペイロードおよび／または未反応抗体および／または形成された任意の凝集体から、場合により分離すること
にある工程を含む方法によって得ることができる。
【０４９５】
一変形形態によれば、より具体的には、工程（ｉｉ）において、工程（ｉ）からのコンジュゲートを、未反応クリプトフィシンペイロードと形成された任意の凝集体とからだけ分離し、任意の未反応抗体を溶液中に放置する。
【０４９６】
接触させることの機能は、共有結合の形成によりクリプトフィシンペイロードを抗体に確実に結合させるために化学基ＲＣＧ１と化学基ＲＣＧ２とを反応させることであり；好ましくは
・ＲＣＧ１が、−Ｃ（＝Ｏ）−ＺａＲａを表す場合、上記反応は、抗体のアミノ官能基上で、とりわけ抗体のリジン（Ｌｙｓ）残基の側鎖が持つε−アミノ基上で、ならびに抗体の重鎖および軽鎖のＮ末端のアミノ酸のα−アミノ基の上で、起こるのが好ましい。次式のコンジュゲート：ｍＡｂ−［ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｌ＊−クリプト］ｄがこの場合得られるが、ここで、Ｌ＊＝リンカーＬのフラグメントはＲＣＧ１＝−Ｃ＝（＝Ｏ）−ＺａＲａおよびＬ＝−Ｌ＊Ｃ（＝Ｏ）−ＺａＲａ等のものを含み、ｄは薬物対抗体比すなわちＤＡＲを表す；
・ＲＣＧ１は、−Ｃｌまたはマレイミドもしくはハロアセタミド基を表す場合、抗体はチオール化学基を含むことができ；
・ＲＣＧ１はアジド基を表す場合、抗体は−Ｃ≡ＣＨ部分またはシクロオクチン等の活性化三重結合を含むことができ；
・ＲＣＧ１が−ＮＨ２を表す場合、上記反応は、酵素的触媒を使用して抗体のアミド官能基上で、とりわけ抗体のグルタミン（Ｇｌｎ）残基の側鎖が持つアミド基上で起こることができる。次式のコンジュゲート：ｍＡｂ−［Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｌ＊−クリプト］ｄがこの場合得られるが、ここで、Ｌ＊＝リンカーＬのフラグメントはＲＣＧ１＝−ＮＨ２およびＬ＝−Ｌ＊ＮＨ２等のものを含み、ｄは薬物対抗体比すなわちＤＡＲを表す；
・ＲＣＧ１が−Ｃ≡ＣＨまたはシクロオクチン部分等の活性化Ｃ≡Ｃを表す場合、抗体はアジド基を含むことができる。
【０４９７】
用語「凝集体」とは、２つ以上抗体の間で形成し得る会合体を意味し、当該抗体は、コンジュゲーションによって改変された可能性がある。凝集体は、溶液中での抗体の高い濃度、溶液のｐＨ、高い剪断力、グラフトされている薬物の数およびこれらの疎水性、温度といった広範な様々なパラメータの影響下で、形成しやすいが（Ｊ．Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｓｃｉ．２００８、３１８、３１１〜３１６の序論に引用されている参考文献を参照のこと）、これらのパラメータのうちの幾つかの影響は、明確に解明されていない。タンパク質または抗体の場合、ＡＡＰＳ  Ｊｏｕｒｎａｌ、「Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ」２００６、８（３）、Ｅ５７２〜Ｅ５７９を参照することができる。凝集体含有量は、ＳＥＣ等の既知の技法によって決定することができる（これに関しては、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９３、２１２（２）、４６９〜４８０を参照されたい）。
【０４９８】
抗体の水溶液を、例えばリン酸カリウムもしくはＨＥＰＥＳまたは後で説明する緩衝剤Ａ等の緩衝剤の混合物といった緩衝剤で緩衝することができる。緩衝剤は、抗体の性質によって異なる。クリプトフィシンペイロードを例えばＤＭＳＯまたはＤＭＡ等の極性有機溶媒に溶解させる。
【０４９９】
反応を一般には２０℃から４０℃の間の温度で行う。反応時間は、１時間から２４時間の間で様々であり得る。抗体とクリプトフィシンペイロードの間の反応の進度を決定するために、屈折率検出器および／もしくは紫外線検出器を備えるＳＥＣならびに／またはＨＲＭＳによって、その反応をモニタリングすることができる。置換度が不十分である場合、反応をより長く放置してもよく、および／またはクリプトフィシン化合物を添加してもよい。特定の条件に関するさらなる詳細については実施例の節で参照することができる。特定の実施形態については、例３、７、１０、１４、２０および２３に記載されている。
【０５００】
当業者であれば、工程（ｉｉ）の分離向けに様々なクロマトグラフ技法を自由に使える：例えば、立体排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により、吸着クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、ＩＥＣ）により、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）により、アフィニティークロマトグラフィーにより、セラミックヒドロキシアパタイト等の混合支持体でのクロマトグラフィーにより、またはＨＰＬＣにより、コンジュゲートを精製することができる。透析または透析濾過による精製を使用することもできる。
【０５０１】
工程（ｉ）または（ｉｉ）の後、コンジュゲートの溶液を限外濾過および／または透析濾過工程（ｉｉｉ）に付してもよい。これらの工程の後、水溶液のコンジュゲートはこのようにして得られる。
【０５０２】
抗体
抗体は、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体およびヒト抗体からなる群から選択されるモノクローナル抗体とすることができる。
【０５０３】
一実施形態では、抗体は単一特異性抗体、すなわち１つの単一標的に特異的に結合する抗体である。代替的に、これは多重特異性［ＲＣＰ１］抗体であってもよい。
【０５０４】
一実施形態では、抗体は、ＩｇＧ抗体、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４抗体である。
【０５０５】
本発明による抗体は、標的に特異的に結合し、それによって、細胞傷害性化合物としての生物学的活性化合物を前記標的に向けて誘導する。本明細書で使用する、「特異的に結合する」または「に特異的に結合する」または「に結合する」その他は、抗体またはその抗原結合性フラグメントが、生理的条件下で比較的に安定的である、抗原との複合体を形成することを意味する。特異的な結合は、少なくとも約１×１０−８Ｍ以下の平衡解離定数（ＫＤ）（例えば、より小さいＫＤはより密接な結合を示す）によって特徴付けることができる。２個の分子が特異的に結合するか否か決定する方法は、当技術分野においてよく知られており、例えば、平衡透析、表面プラズモン共鳴法等が挙げられる。本明細書に記載の通り、抗体は、表面プラズモン共鳴法、例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）を使用して、これが標的および／または標的抗原に特異的に結合することによって、特徴付けられた。
【０５０６】
標的は、細胞表面で発現するタンパク質、例えば、腫瘍細胞の表面で発現するタンパク質に通常は相当する。
【０５０７】
一実施形態では、標的はＥｐｈＡ２受容体である。ＥｐｈＡ２受容体はエフリン受容体であり、「ＥＰＨ受容体Ａ２」または「上皮細胞受容体タンパク質−チロシンキナーゼ」とも呼ばれる（例えば、ＯＭＩＭ  Ｅｎｔｒｙ  ＊１７６９４６を参照のこと、ｏｍｉｍ．ｏｒｇ／ｅｎｔｒｙ／１７６９４６  ｗｏｒｌｄ  ｗｉｄｅ  ｗｅｂ  ｓｉｔｅで入手可、バージョンは２０１６年７月２１日に更新）［ＲＣＰ２］。ＥｐｈＡ２受容体に特異的に結合する抗体は、例えば、ＷＯ２００８／０１０１０１またはＷＯ２０１１／０３９７２４に記載の抗体のうちの１つに相当するであろう。
【０５０８】
別の実施形態では、標的はＣＤ１９である。ＣＤ１９は、Ｂリンパ球および造血系の濾胞性樹状細胞によって特異的に発現される細胞表面分子であり、「Ｂリンパ球抗原ＣＤ１９」とも呼ばれる（例えば、ＯＭＩＭ  Ｅｎｔｒｙ  ＊１０７２６５を参照のこと、ｏｍｉｍ．ｏｒｇ／ｅｎｔｒｙ／１０７２６５  ｗｏｒｌｄ  ｗｉｄｅ  ｗｅｂ  ｓｉｔｅで入手可、バージョンは２０１５年５月１１日に最終更新）。ＣＤ１９に特異的に結合する抗体は、例えばコルツキシマブ（Ｃｏｌｔｕｘｉｍａｂ）、すなわちコルツキシマブ  ラブタンシン（Ｃｏｌｔｕｘｉｍａｂ  Ｒａｖｔａｎｓｉｎ）の抗体部分（部分）に相当するであろう。
【０５０９】
抗体は、場合により、先に記載のクリプトフィシンペイロードの結合を促進するように修飾剤で修飾することができる。抗体は、特に、モノクローナル、ポリクローナルまたは多重特異性とすることができる。これは、抗体フラグメントであってもよい。これはまた、マウス抗体でも、ヒト抗体でも、ヒト化抗体でも、キメラ抗体であってもよい。本発明の例において使用される抗体は、ｈｕ２Ｈ１１＿Ｒ３５７４、ＥｐｈＡ２受容体に対するアンタゴニスト抗体である。ｈｕ２Ｈ１１＿Ｒ３５７４の配列は、ＷＯ２０１１／０３９７２４（重鎖については配列番号１８、軽鎖については配列番号１６）に記載されている。
【０５１０】
コンジュゲート
コンジュゲートは、一般に、抗体に共有結合で結合している約１から１０のクリプトフィシン化合物を含む（これが、グラフト度、または「薬物対抗体比」すなわち「ＤＡＲ」である）。この数は、抗体のおよびクリプトフィシン化合物の性質の関数として変化するとともに、またコンジュゲーションプロセスで使用される操作条件（例えば、抗体に対するクリプトフィシン化合物の当量数、反応時間、溶媒のおよび任意の共溶媒の性質）の関数としても変化する。抗体とクリプトフィシン化合物とを接触させることによって、様々なＤＡＲにより互いに個々に区別される幾つかのコンジュゲート、場合により未反応抗体、場合により凝集体を含む混合物がもたらされる。したがって、最終溶液で決定されるＤＡＲは、平均ＤＡＲに相当する。ＤＡＲは、コンジュゲートのＳＥＣ−ＨＲＭＳスペクトルのデコンボリューションから算出することができる。ＤＡＲ（ＨＲＭＳ）は、０．５超であることが好ましく、より具体的には１から１０の間であり、さらにより具体的には２から７の間である。
【０５１１】
上記コンジュゲートを抗がん剤として使用することができる。抗体が存在するため、コンジュゲートは、健常細胞ではなく腫瘍細胞に対して高選択的となる。このことにより、クリプトフィシン化合物を腫瘍に類似した環境へとまたは直接腫瘍中へ誘導することが可能になる；（これに関しては、がん処置におけるモノクローナル抗体コンジュゲートの使用について記載している次の出版物を参照されたい：「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｒｕｇ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ」、Ｃａｒｔｅｒ  Ｐ．Ｊ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．２００８、１４、１５４〜１６９；「Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ：ｃｏｎｆｅｒｒｉｎｇ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｔｏ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ｄｒｕｇｓ」、Ｃｈａｒｉ  Ｒ．、Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．２００８、４１、９８〜１０７））。固形がんまたはリキッドがん（ｌｉｑｕｉｄ  ｃａｎｃｅｒ）を処置することが可能である。コンジュゲートは、単独で使用することができ、または少なくとも１つの他の抗がん剤と併用することができる。
【０５１２】
上記コンジュゲートは、一般には１ｍｇ／ｍＬから１０ｍｇ／ｍＬの間の濃度で、緩衝水溶液の形態で製剤化される。この溶液自体を潅流形態で注入することができ、またはこの溶液を再希釈して潅流溶液を形成することができる。
【実施例】
【０５１３】
以下の実施例は、本発明に従う特定の化合物の製造を記載する。これらの実施例は限定的ではなく、単に本発明を説明するのみである。
【０５１４】
使用した分析方法
高圧液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣＭＳ）
方法Ａ１
スペクトルを、ＥＬＳＤおよびＵＶ（２１０〜４００ｎｍ）検出を使用する正のおよび／または負のエレクトロスプレーモード（ＥＳ＋／−）でのＷａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ−ＳＱＤシステムで取得した。クロマトグラフィー条件は以下であった：
カラム：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＢＥＨ  Ｃ１８−１．７μｍ−２．１×５０ｍｍ；溶媒：Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）；カラム温度：５０℃；流速：０．８ｍＬ／分；濃度勾配（２．５分）：１．８分で５から１００％のＢ；２．４分：１００％のＢ；２．４５分：０．０５分で１００から５％のＢ。
【０５１５】
方法Ａ２
スペクトルを、ＥＬＳＤおよびＵＶ（２１０〜４００ｎｍ）検出を使用する正のエレクトロスプレーモード（ＥＳ＋）でのＷａｔｅｒｓ  ＸｅＶｏ−ＱＴｏｆシステムで取得した。クロマトグラフィー条件は以下であった：
カラム：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＢＥＨ  Ｃ１８−１．７μｍ−２．１×１００ｍｍ；溶媒：Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）；カラム温度：７０℃；流速：０．５５ｍＬ／分；濃度勾配（１１分）：８．３分で５から９７％のＢ；８．６分：９７％のＢ；９分：０．７分で９７から５％のＢおよび２分間５％のＢ。
【０５１６】
方法Ａ３
スペクトルを、正のエレクトロスプレーモード（ＥＳ＋）でのＷａｔｅｒｓ  ＸｅＶｏ−ＱＴｏｆシステムで取得した。クロマトグラフィー条件は以下であった：
カラム：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＢＥＨ  Ｃ１８−１．７μｍ−２．１×１００ｍｍ；溶媒：Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）；カラム温度：４５℃；流速：０．６ｍＬ／分；濃度勾配（５．３分）：３分間５％のＢ；３．７分で５から１００％のＢ；４．６分：１００％のＢ；５．３分５％のＢ。
【０５１７】
方法Ａ４
スペクトルを、ＥＬＳＤおよびＵＶ（２１０〜４００ｎｍ）検出を使用する正のおよび／または負のエレクトロスプレーモード（ＥＳ＋／−）でのＷａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ−ＳＱＤシステムで取得した。クロマトグラフィー条件は以下であった：
カラム：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＢＥＨ  Ｃ１８−１．７μｍ−２．１×５０ｍｍ；溶媒：Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）；カラム温度：４５℃；流速：０．８ｍＬ／分；濃度勾配（１０分）：８．６分で５から１００％のＢ；９．６分：１００％のＢ；９．８分：５％のＢ。
【０５１８】
方法Ａ５
スペクトルを、ＥＬＳＤおよびＵＶ（２１０〜４００ｎｍ）検出を使用する正のおよび／または負のエレクトロスプレーモード（ＥＳ＋／−）でのＷａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ−ＳＱＤシステムで取得した。クロマトグラフィー条件は以下であった：
カラム：ＡＣＱＵＩＴＹ  ＣＳＨ  Ｃ１８−１．７μｍ−２．１×５０ｍｍ；溶媒：Ａ：Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）、Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）；カラム温度：４０℃；流速：０．８５ｍＬ／分；濃度勾配（２．５分）：１．８分で５から１００％のＢ；２．４分：１００％のＢ；２．４５分：０．０５分で１００から５％のＢ。
【０５１９】
１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ）
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを、モデルＤＲＸ−３００、ＤＲＸ−４００またはＤＲＸ−５００のいずれかのＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ分光計により獲得した。化学シフト（δ）をｐｐｍで与える。
【０５２０】
サイズ排除クロマトグラフィー−高分解能質量分析法（ＳＥＣ−ＨＲＭＳ）
クロマトグラフ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ１１００マシンおよびＷａｔｅｒｓ  ＢＥＨ  ＳＥＣ２００  １．７μｍ（２．１×１５０ｍｍ）カラムにて、３０℃で０．５ｍＬ／分の流量および（Ａ）２５ｍＭギ酸アンモニウム＋１％ギ酸／（Ｂ）ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ギ酸７０／３０の１５分間の定組成溶離を用いて行った。質量分析法は、Ｗａｔｅｒｓ  ＱＴＯＦ−ＩＩマシンにて、正のモードでのエレクトロスプレーイオン化（ＥＳ＋）を用いて行った。質量スペクトルをＷａｔｅｒｓ  ＭａｘＥｎｔ１ソフトウェアでデコンボリューションした。
【０５２１】
分析的サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）
分析を、フォトダイオードアレイ検出器を装備したＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＰＬＣシステムまたはＨｉｔａｃｈｉ  ＬａｃｈｒｏｍシステムならびにＫＣｌ（０．２Ｍ）、ＫＨ２ＰＯ４（０．０５２Ｍ）、Ｋ２ＨＰＯ４（０．１０７Ｍ）およびイソプロパノール２０容量％を含むｐＨ７の緩衝液を用いる流速０．５ｍＬ／分および３０分の定組成溶離でのＴｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＴＳＫｇｅｌ  Ｇ３０００  ＳＷＸＬ  ５μｍ（７．８×３００ｍｍ）カラムで行った。
【０５２２】
緩衝液
・緩衝液Ａ（ｐＨ６．５）：ＮａＣｌ（５０ｍＭ）、リン酸カリウム（５０ｍＭ）、ＥＤＴＡ（２ｍＭ）
・緩衝液Ｂ（ｐＨ６．５）：ＮａＣｌ（１４０ｍＭ）、リン酸カリウムおよびリン酸ナトリウム（９．６ｍＭ）
・ＰＢＳ（ｐＨ７．４）：ＫＨ２ＰＯ４（１．０６ｍＭ）、ＮａＣｌ（１５５．１７ｍＭ）、Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ（２．９７ｍＭ）
・ＤＰＢＳ：５Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ／緩衝液１０００ｍＬ）を用いてｐＨ６．５で調節したＫＣｌ（２．６７ｍＭ）、ＫＨ２ＰＯ４（１．４７ｍＭ）、ＮａＣｌ（１３６．９ｍＭ）、Ｎａ２ＨＰＯ４（８．１０ｍＭ）
【０５２３】
抗体−薬剤コンジュゲート（ＡＤＣ）の製造に使用した一般方法
緩衝液Ａと１Ｎ  ＨＥＰＥＳとの９６：４混合物から成る水性緩衝液中の抗体溶液を、最終抗体濃度が３ｍｇ／ｍＬになるようにおよび水性緩衝液中のＤＭＡの百分率が２０％になるように、およそ１０ｍＭでの過剰のクリプトフィシンペイロードのＤＭＡ中溶液で処理した。２時間撹拌した後、混合物をＳＥＣ−ＨＰＬＣにより分析して、モノマー抗体集団に関するＤＡＲを決定した。ＤＡＲが不十分と考えられる場合、混合物を更に過剰（１から５当量）のＤＭＡ中クリプトフィシン溶液で、攪拌しながら室温で更に２時間処理した。ＮＭＰ１０から２０％を含む水性緩衝液ｐＨ６．５（緩衝液ＢまたはＤＰＢＳ）で予め平衡させたＳｕｐｅｒｄｅｘ  ２００ｐｇマトリックス（ＨｉＬｏａｄ１６／６０または２６／６０脱塩カラム、ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用するゲル濾過により混合物を精製した。モノマー形態のコンジュゲート化抗体を含有するフラクションをプールし、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５（１０ｋまたは５０ｋのＵｌｔｒａｃｅｌ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で２ｍｇ／ｍＬと５ｍｇ／ｍＬの間の濃度に濃縮した。次いで緩衝液の交換または適切な緩衝液中への希釈を行って、最終緩衝液におけるコンジュゲートを形成させた。緩衝液交換の場合、組成およびｐＨがそれぞれのコンジュゲートに適している最終水性緩衝液で予め平衡させたＳｅｐｈａｄｅｘ（商標）Ｇ２５マトリックス（ＮＡＰ−５、ＮＡＰ−１０、ＮＡＰ−２５／ＰＤ−１０またはＨｉｐｒｅｐ  ２６／１０脱塩カラム、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用するゲル濾過により実現させた。コンジュゲートをＳｔｅｒｉｆｌｉｐ（登録商標）濾過ユニット（０．２２μｍのＤｕｒａｐｏｒｅ（登録商標）ＰＶＤＦ膜、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に最後に通して濾過した。コンジュゲート濃度を測定するためのＵＶスペクトルまたはＳＥＣ−ＨＰＬＣにより、モノマー純度を決定するためのＳＥＣ−ＨＰＬＣによりおよびコンジュゲートの質量スペクトルのデコンボリューションからＤＡＲを決定するためのＳＥＣ−ＨＰＬＣにより、最終コンジュゲートをアッセイした。
【０５２４】
フラグメントＡ：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル８−（４−ホルミルフェニル）−５−ヒドロキシ−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエートの合成
【化２８５】
2018535255.tif 000315
【０５２５】
化合物１：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−ヒドロキシ−７−（（４−メトキシベンジル）オキシ）−６−メチルヘプタ−２−エノエート
アルゴン下、（２Ｒ，３Ｓ）−１−［（４−メトキシフェニル）メトキシ］−２−メチル−５−ヘキセン−３−オールまたはＳａｋｕｒａｉアルコール（ＣＡＳ番号［２０３９２６−５５−０］、１００ｇ、３９９．５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３５０ｍＬ）中溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルアクリレート（３５４．７ｍＬ、２．４３５ｍｏｌ）およびＧｒｕｂｂｓ触媒（４．８４９ｇ、２．４３５ｍｏｌ）を加えた。室温で１７時間撹拌した後、反応混合物をシリカ２３０ｇ上で濾過し、ヘプタン／ＡｃＯＥｔの混合物（５０／５０、６×３００ｍＬ）で溶離した。濃縮後、残留物をシリカゲル１．２ｋｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配溶離）により精製して、茶褐色油状物１４０．８ｇを得た。油状物を無水ＤＣＭ（５５０ｍＬ）に溶解し、ｑｕａｄｒａＰｕｒｅ（商標）ＴＵ樹脂１０ｇを加えて、過剰の触媒を除去した。混合物を３５℃で３時間撹拌した。樹脂を濾過し、ＤＣＭで洗浄し、濾液を濃縮し、真空乾固して、化合物１（１３５．７５ｇ）を茶褐色油状物として得た（９７％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.42 (s, 9 H); 1.72 (m, 1 H); 2.18 (m, 1 H); 2.30 (m, 1 H); 3.24 (dd, J = 7.0および9.3 Hz, 1 H); 3.46 (dd, J = 7.7および9.3 Hz, 1 H); 3.49 (m, 1 H); 3.73 (s, 3 H); 4.35 (s, 2 H); 4.65 (d, J = 5.8 Hz, 1 H); 5.76 (td, J = 1.5および15.6 Hz, 1 H); 6.83 (td, J = 7.4および15.6 Hz, 1 H); 6.90 (d, J = 8.8 Hz, 2 H); 7.23 (d, J = 8.8 Hz, 2 H).
【０５２６】
化合物２：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５，７−ジヒドロキシ−６−メチルヘプタ−２−エノエート
化合物１のＣＨ３ＣＮ（９１０ｍＬ）中溶液に、Ｈ２Ｏ（９０ｍＬ）を加え、混合物を１２℃で冷却した後、ＣＡＮ（１９６．７ｇ、３５８．９ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（３００ｍＬ）中溶液を２５分で加えた。室温で１時間撹拌を続けた。更にＣＨ３ＣＮ（７０ｍＬ）とＨ２Ｏ（３０ｍＬ）との混合物に溶解したＣＡＮ（１８．８３ｇ、３４．３６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌して、反応を完結させた。水層が飽和するまで混合物をＮａＣｌでクエンチし、次いでＭＴＢＥ（４００ｍＬ）を加えた。デカント除去した後、水層をＭＴＢＥ（２×８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を５％ＮａＨＣＯ３／Ｈ２Ｏの３：１混合物（３×２００ｍＬ）、飽和ブライン（２×１３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。水層を２Ｎ  ＨＣｌでｐＨ４にまで酸性化し、次いでＮａＣｌで飽和し、ＭＴＢＥ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。この２番目の有機層を５％ＮａＨＣＯ３（６０ｍＬ）、飽和ブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮し、最初の有機層と合わせて、茶褐色オレンジ色油状物を得た。
【０５２７】
混合物をＭｅＴＨＦ（３００ｍＬ）に溶解し、次いで１，２−エタンジチオール（２２ｍＬ、０．２６０ｍｏｌ）およびｐ−ＴｓＯＨ（１．６５１ｇ、８．５９０ｍｍｏｌ）を加えた。６０℃で５時間撹拌した後、ＭＴＢＥ（２００ｍＬ）を反応混合物に加え、これを５％ＮａＨＣＯ３（２×１２０ｍＬ）、飽和ブライン（１２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル５２０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭＴＢＥの濃度勾配溶離）により精製して、化合物２（２９．４８ｇ）を黄色油状物として得た（７５％）。
【０５２８】
化合物３：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル６−メチル−５，７−ビス（（トリエチルシリル）オキシ）ヘプタ−２−エノエート
アルゴン下、化合物２（３９．３８ｇ、０．１７１ｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（５００ｍＬ）中溶液に、イミダゾール（５１．５４０ｇ、０．７４９ｍｏｌ）を加えた。黄色混合物を０℃で冷却し、次いでトリエチルクロロシラン（６３．９９ｍＬ、０．３７４ｍｏｌ）を加え、溶液を室温に終夜加温した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（４００ｍＬ）、ＭＴＢＥ（３００ｍＬ）および氷でクエンチした。２Ｍ  ＮａＨＳＯ４を用いてｐＨを４で調節し、激しく撹拌した後層を分離した。水層をＭＴＢＥ（２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を半飽和ＮＨ４Ｃｌ（２×２５０ｍＬ）、リン酸塩緩衝液ｐＨ７（１５０ｍＬ）、飽和ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル４９０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／Ｅｔ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、化合物３（７４．５２ｇ）を淡黄色油状物として得た（９５％）。
【０５２９】
化合物４：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル６−メチル−７−オキソ−５−（（トリエチルシリル）オキシ）ヘプタ−２−エノエート
アルゴン下、ＤＭＳＯ（１０２．４００ｍＬ、１．４２７ｍｏｌ）のＤＣＭ（３００ｍＬ）中溶液に、−７５℃で塩化オキサリル（６３ｍＬ、０．７１９ｍｏｌ）を１時間で滴下添加し、１５分間撹拌を続けた後、温度を−７０℃未満に維持しながら−７５℃で化合物３のＤＣＭ（１５０ｍＬ）中溶液を加えた。反応混合物を−４０℃に加温し、２時間撹拌を続けた。反応混合物を−７５℃で再度冷却し、次いで温度を−６５℃未満に維持しながらＤＩＥＡ（４２５ｍＬ、２．４３２ｍｏｌ）を７５分で加えた。反応混合物を室温に加温し、次いでＭＴＢＥ（５００ｍＬ）、氷、飽和ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍＬ）および２Ｍ
ＮａＨＳＯ４でクエンチして、ｐＨ４に達した。激しく撹拌した後、層を分離した。水層をＭＴＢＥ（２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮＨ４Ｃｌ（３×３００ｍＬ）、リン酸塩緩衝液ｐＨ７（３００ｍＬ）、飽和ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル１．２５ｋｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／Ｅｔ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、化合物４（５１．７４ｇ）をオレンジ色油状物として得た（９３％）。
【０５３０】
化合物５：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−ヒドロキシ−８−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート
アルゴン下、ホスホニウムブロミド（ＷＯ２０１１／００１０５２に記載されている合成、１４７ｇ、０．２３７ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１．５Ｌ）中懸濁液に、−５０℃でｎ−ＢｕＬｉのヘキサン中２．５Ｍ溶液（９０ｍＬ、０．２２５ｍｏｌ）を加えた。温度を−４０℃にまで加温し、１５分間撹拌を続けた。室温に加温した後、赤色混合物を１時間撹拌した。反応媒体を−７０℃で冷却した後、温度を−６５℃未満に維持しながら化合物４（５１．６３ｇ、１２６．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）中溶液を加えた。添加が完了した時点で、反応混合物を室温に加温し、終夜撹拌を続けた。反応混合物を濾過して不溶物を除去し、これをＭＴＢＥ（５００ｍＬ）で洗浄した。濾液を４２℃で部分的に濃縮（１／３）し、次いで氷、ＮＨ４Ｃｌ（５００ｍＬ）、ＭＴＢＥ（５００ｍＬ）および２Ｍ  ＮａＨＳＯ４でクエンチして、ｐＨ４にした。層を分離し、水層をＭＴＢＥ（２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を半飽和ＮＨ４Ｃｌ（２５０ｍＬ）、リン酸塩緩衝液ｐＨ７（２５０ｍＬ）、飽和ブライン（２５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、２５０ｍｂａｒまでの真空で半濃縮した。懸濁液を氷浴で冷却した５０：５０ヘプタン／ＭＴＢＥ（６００ｍＬ）で希釈し、濾別し、５０：５０ヘプタン／ＭＴＢＥで洗浄した。濾液を真空で濃縮して、茶褐色油状物として１００．０５ｇ得た。
【０５３１】
粗製の化合物を無水ＴＨＦ（３２０ｍＬ）に溶解し、次いでＴＢＡＦ３水和物（９０ｇ、２８２．４０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を３時間撹拌した。真空で濃縮した後、粗製物を１０：１ＭＴＢＥ／ＴＨＦ（７７０ｍＬ）で希釈し、半飽和ＮＨ４Ｃｌ（３×２００ｍＬ）、１Ｍ  ＮａＨＳＯ４（２００ｍＬ）、リン酸塩緩衝液ｐＨ７（２００ｍＬ）、飽和ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。水層をＭＴＢＥで抽出した。デカント除去した後、有機層をリン酸塩緩衝液ｐＨ７（３０ｍＬ）、飽和ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過した。濃縮後、合わせた有機層をシリカゲル１．２５ｋｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／Ｅｔ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、化合物５（３６．９１ｇ）を赤茶褐色油状物として得た（８８％）。
【０５３２】
フラグメントＡ：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル８−（４−ホルミルフェニル）−５−ヒドロキシ−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート
アルゴン下、化合物５（３０．３ｇ、９１．７ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（６００ｍＬ）中溶液に、１０℃で酸化マンガン（１７５ｇ、３．０１３ｍｏｌ）を加え、反応混合物を３５℃で４時間撹拌した。酸化剤をセライトのプラグに通して濾過し、加温アセトンで洗浄した。濾液を濃縮して、赤オレンジ色油状物３０．４３ｇを得た。
【０５３３】
アルゴン下、油状物をベンゼン（８００ｍＬ）で希釈し、ＡＩＢＮ（８８０ｍｇ、４．５８ｍｍｏｌ）およびチオフェノール（２．８１ｍＬ、２７．５１ｍｍｏｌ）の存在下１時間還流した。更にＡＩＢＮ（５３０ｍｇ、０．０３当量）およびチオフェノール（１．０３ｍＬ、１０．０８７ｍｍｏｌ）を加え、更に１時間還流を続けた。更にＡＩＢＮ（５３０ｍｇ、０．０３当量）およびチオフェノール（１．０３ｍＬ、１０．０８７ｍｍｏｌ）を加え、３時間還流を続けた。更にＡＩＢＮ（３５３ｍｇ、１．８３４ｍｍｏｌ）およびチオフェノール（４６８μＬ、４．５８ｍｍｏｌ）を加え、１時間還流を続けた。Ｅ／Ｚ比は９２／８であり、ＡＩＢＮ（３５２．６ｍｇ）を加え、１時間還流を続けた。反応混合物を室温に冷却し、真空で濃縮して、フラグメントＡ（２８．０３ｇ）をオレンジ色油状物として（９２％）、９８／２を超えるＥ／Ｚ比で得た。
【０５３４】
フラグメントＢ：（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシ−フェニル）プロパン酸の合成
【化２８６】
2018535255.tif 000316
メチル（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフィル）−プロパノエート（ＣＡＳ番号［１６２４６５−４４−３］、３０ｇ、８７．２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２２５ｍＬ）中溶液に、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）およびＬｉＯＨ一水和物（４．４ｇ、１０４．８５ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で２時間撹拌した。この後、反応媒体をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、次いで５Ｎ  ＨＣｌ（２０ｍＬ）を用いてｐＨ２で酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２×２５０ｍＬ）により抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、Ｅｔ２Ｏで希釈し、真空で濃縮して、フラグメントＢ（２６．９ｇ）を白色固体として得た（９４％）。
RMN 1H (300 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.21〜1.37 (m, 9 H); 2.74 (dd, J = 11.0および14.3 Hz, 1 H); 2.96 (dd, J = 5.0および14.3 Hz, 1 H); 3.81 (s, 3 H); 4.04 (m, 1 H); 6.99〜7.09 (m, 2 H); 7.18 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1 H); 7.29 (d, J = 2.3 Hz, 1 H); 12.60 (広幅なm, 1 H).
【０５３５】
フラグメントＣ１：メチル３−アミノ−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩の合成
【化２８７】
2018535255.tif 000317
【０５３６】
化合物６：メチル３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２，２−ジメチルプロパノエート
アルゴン下、３−（［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニル］アミノ）−２，２−ジメチルプロパン酸（ＣＡＳ番号［１８０１８１−０２−６］、２５０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）中溶液に、０℃で黄色が変化しなくなるまで（トリメチルシリル）ジアゾメタン（８１９．８６μＬ、１．６４ｍｍｏｌ）を滴下添加した。次いで変色が完了するまでＡｃＯＨを加えた。反応混合物を真空で濃縮し、次いでＨ２Ｏで希釈し、ＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機相を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物６（２６０ｍｇ）を無色油状物として得た（定量的）。
【０５３７】
フラグメントＣ１：メチル３−アミノ−２，２−ジメチルプロパノエート塩酸塩
化合物６（２６０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）中溶液に、１，４−ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（２．８１ｍＬ、１１．２４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、次いで真空で濃縮して、フラグメントＣ１（２００ｍｇ、定量的）を得た。
【０５３８】
フラグメントＣ２：メチル３−アミノ−２，２−ジメチルブタノエート塩酸塩の合成
【化２８８】
2018535255.tif 000318
【０５３９】
化合物７：３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブタン酸
ＤＬ−３−アミノ酪酸（ＣＡＳ番号［５４１−４８−０２］、１８．７２ｇ、１７６．０９ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（９６ｍＬ）中溶液に、Ｈ２Ｏ（７６ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３９．６２ｇ、１７６．０９ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（８．０３ｇ、２００．７４ｍｍｏｌ）を、次いでｔｅｒｔ−ブチルアルコール（１３２ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。この後、反応媒体を真空で濃縮し、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、希薄ＨＣｌを用いてｐＨ３で酸性化した。安定化した後、水相をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物７（３４．５ｇ）を無色油状物として得た（８２％）。
RMN 1H (300 MHz, δ ppm, CDCl3-d1): 1.25 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.45 (s, 9 H); 2.55 (m, 2 H); 4.04 (m, 1 H); 4.93 (広幅なm, 1 H); 8,41 (広幅なm, 1 H).
【０５４０】
化合物８：メチル３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブタノエート
アルゴン下、化合物７（１０ｇ、４９．２０ｍｍｏｌ）のトルエン（３５０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中溶液を＋５℃で撹拌した。＋５℃と＋１０℃との間で、（トリメチルシリル）ジアゾメタン（７３．８１ｍＬ、１４７．６１ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を３時間撹拌し、次いで真空で蒸発させて、化合物８（１０．８ｇ）を淡黄色油状物として得た（定量的）。
RMN 1H (300 MHz, δ ppm, CDCl3-d1): 1.20 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.45 (s, 9 H); 2.50 (m, 2 H); 3.69 (s, 3 H); 4.03 (m, 1 H); 4.90 (広幅なm, 1 H).
【０５４１】
化合物９：メチル３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−メチルブタノエート
アルゴン下、ＬＤＡ（ＴＨＦ中２Ｍ、２５．３２ｍＬ、５０．６３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４８ｍＬ）中溶液に、−７０℃で化合物８（５ｇ、２３．０１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６２ｍＬ）中溶液を滴下添加した。反応混合物を−７５℃で１時間撹拌し、次いでヨードメタン（５．７９ｍＬ、９２．０５ｍｍｏｌ）を−７０℃で滴下添加した。反応混合物を−７５℃で３時間、次いで室温で終夜撹拌した。この後、２０％ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１００ｍＬ）およびＥｔ２Ｏ（１２５ｍＬ）を加えた。安定化した後、有機相を飽和ＮａＨＣＯ３（８０ｍＬ）次いで飽和ＮａＣｌ（８０ｍＬ）で洗浄した。合わせた水相をＥｔ２Ｏ（１２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、粗製の油状物５．４９ｇを得た。ペンタン（１５ｍＬ）で結晶化し、真空乾固した後、化合物９（２．６５ｇ）を得た。ペンタン溶液を真空で濃縮し、シリカゲル１００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／Ｅｔ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、化合物９（１．９８ｇ）を得た。２つのバッチをプールし（８７％）、以下の工程にそのまま使用した。
【０５４２】
化合物１０：メチル３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２，２−ジメチルブタノエート
アルゴン下、ＴＨＦ（４６ｍＬ）を−７２℃で冷却し、次いでＬＤＡ（ＴＨＦ中２Ｍ、２２ｍＬ、４４．０ｍｍｏｌ）を加え、−７２℃（＋／−２℃）で化合物９（４．６０ｇ、１９．８９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６４ｍＬ）中溶液を滴下添加した。反応混合物を−７５℃で１時間１５分撹拌し、次いでヨードメタン（５ｍＬ、７９．５５ｍｍｏｌ）を−７２℃（＋／−２℃）で滴下添加した。反応媒体を−７５℃で３時間、次いで室温で終夜撹拌した。この後、２０％ＮＨ４Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）およびＥｔ２Ｏ（８０ｍＬ）を加えた。安定化した後、有機相を飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）および飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた水相をＥｔ２Ｏ（８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、粗製の油状物６．５ｇを得、これをシリカゲル２００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ｉＰｒ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、化合物１０（１．９ｇ）を無色油状物として得た（３９％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.92 (d, J = 7.1 Hz, 3 H); 1.02 (s, 3 H); 1.04 (s, 3 H); 1.48 (s, 9 H); 3.58 (s, 3 H); 3.88 (m, 1 H); 6.62 (広幅なd, J = 10.5 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 146, m/z = 246 [M+H]+; tR = 1.2分.
【０５４３】
フラグメントＣ２：メチル３−アミノ−２，２−ジメチルブタノエート塩酸塩
丸底フラスコ中に機械撹拌しながら、化合物１０（０．３ｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を、続いて１，４−ジオキサン（５ｍＬ）および１，４−ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）を導入した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、次いで真空で濃縮した。得られた粗製の固体をｉＰｒ２Ｏ（１５ｍＬ）中で沈殿させ、濾過し、乾燥して、フラグメントＣ２（２１０ｍｇ）を白色固体として得た（９５％）。
ＬＣＭＳ（Ａ１）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝１４６［Ｍ＋Ｈ］＋；ｔＲ＝０．８分。
【０５４４】
フラグメントＣ３：エチル２−（１−アミノシクロプロピル）−２，２−ジメチルプロパノエートの合成
【化２８９】
2018535255.tif 000319
アルゴン下、エチル２−シアノ−２−メチルプロピオネート（ＣＡＳ番号［１５７２−９８−１］、２ｇ、１３．８８ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ（４８ｍＬ）中溶液に、チタン（ＩＶ）イソプロポキシド（４．６３ｇ、１５．９７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１０分間撹拌し、次いで−５℃で冷却した。３ＭエチルマグネシウムブロミドのＥｔ２Ｏ中溶液（９．７２ｍＬ、２９．１６ｍｍｏｌ）を−５℃〜０℃で２５分にて滴下添加し、次いで反応混合物を冷却浴を用いずに４０分間撹拌した。この時点で、ＴＬＣは反応が完結していることを示した。反応媒体を０℃で冷却し、三フッ化ホウ素ジエチルエーテレート（Ｅｔ２Ｏ中３Ｍ、３．６ｍＬ、２９．１６ｍｍｏｌ）を０℃で滴下添加した。反応混合物を冷却浴を用いずに３０分間撹拌した。この後、１Ｎ  ＨＣｌを０℃でｐＨが１〜２になるまで加え（８ｍＬ）、次いでｐＨ８になるまで２Ｎ  ＮａＯＨ（２８ｍＬ）を加え、反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、粗製の黄色油状物２．４ｇを得、これをシリカゲル７０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、フラグメントＣ３（９１５ｍｇ）を淡黄色油状物として得た（３９％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, CDCl3-d1): 0.52 (m, 2 H); 0.70 (m, 2 H); 1.11 (s, 6 H);
1.27 (t, J = 7.2 Hz, 3 H); 1.64 (広幅なs, 2 H); 4.18 (q, J = 7.2 Hz, 2 H).
【０５４５】
フラグメントＣ４：メチル３−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパノエート塩酸塩の合成
【化２９０】
2018535255.tif 000320
【０５４６】
化合物１１：３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−メチルプロパン酸
ＤＬ−３−アミノイソ酪酸（ＣＡＳ番号［１０５６９−７２−９］、５ｇ、４７．５２ｍｍｏｌ）の２Ｎ  ＮａＯＨ（２４．７ｍＬ）中溶液に、氷水浴で反応媒体温度を３０℃未満に維持しながら、Ｂｏｃ２Ｏ（１１．７３ｇ、５３．２２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７５ｍＬ）中溶液を滴下添加した。反応媒体を室温で１８時間撹拌し、次いで真空で濃縮し、Ｈ２Ｏ（７５ｍＬ）に希釈し、ＭＴＢＥ（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。水相を１００ｇ／Ｌでのクエン酸（１５０ｍＬ）を加えることによりｐＨ３に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（３×４５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物１１（９．４ｇ）を無色油状物として得た（９７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.01 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.38 (s, 9H); 2.48 (m, 1H); 2.91 (dt, J = 6.1, 6.5および13.5 Hz, 1H); 3.15 (ddd, J = 6.1, 7.4および13.5 Hz, 1H); 6.80 (t, J = 6.1 Hz, 1H); 12.15 (広幅なs, 1H).
【０５４７】
化合物１２：メチル３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−メチルプロパノエート
化合物１１（９．４ｇ、４６．２５ｍｍｏｌ）のアセトン（３００ｍＬ）中溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１６．１４ｇ、１１５．６３ｍｍｏｌ）およびＣＨ３Ｉ（１３．２６ｇ、９２．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体、黄色懸濁液を室温で２０時間撹拌し、次いでＣｌａｒｃｅｌ上で濾過した。このように得られたケーキをアセトンで洗浄し、濾液を真空で濃縮し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、Ｃｌａｒｃｅｌ上で濾過し、このように得られたケーキをＤＣＭで洗浄し、濾液を真空で濃縮して、化合物１２（９．４ｇ）を黄色液体として得た（９３％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.01 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.37 (s, 9H); 2.54 
(m, 1H); 2.91 (dt, J = 6.2および13.5 Hz, 1H); 3.15 (ddd, J = 6.2, 6.9および13.5 Hz, 1H); 3.59 (s, 3H); 6.90 (t, J = 6.2 Hz, 1H).
【０５４８】
化合物１３：メチル３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−（（（４−メトキシベンジル）オキシ）メチル）−２−メチルプロパノエート
−７５℃で冷却したＤＩＥＡ（３．２ｍＬ、２２．４５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）中溶液に、１．６Ｍ  ｎ−ＢｕＬｉのＴＨＦ中溶液（１４ｍＬ、２２．４ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応媒体を−７５℃で２０分間撹拌し、次いで−７５℃で化合物１２（２ｇ、９．２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１６ｍＬ）中溶液を滴下添加し、反応混合物を−７５℃で１０分間撹拌した。次いで１−（（クロロメトキシ）メチル）−４−メトキシベンゼン（１．７２ｇ、９．２１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１６ｍＬ）中溶液を、反応混合物に素早く加え、−２５℃で４時間撹拌を行った。反応媒体をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈した後、温度を５℃未満に維持しながら１００ｇ／Ｌでのクエン酸溶液（５０ｍＬ）を加えた。反応媒体を室温で１５分間撹拌した。有機相を１００ｇ／Ｌでのクエン酸溶液（２×５０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（３×５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、黄オレンジ色油状物４．０８ｇを得、これをシリカゲル１５０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配溶離）により精製して、化合物１３（２．０５ｇ）を無色油状物として得た（６０％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.03 (s, 3H); 1.37 (s, 9H); 3.14 (d, J = 6.8 Hz, 2H); 3.31 (d, J = 9.1 Hz, 1H); 3.48 (d, J = 9.1 Hz, 1H); 3.58 (s, 3H); 3.73 (s, 3H); 4.38 (s, 2H); 6.76 (t, J = 7.1 Hz, 1H); 6.90 (d, J = 8.9 Hz, 2H); 7.20 (m, 2H).
【０５４９】
フラグメントＣ４：メチル３−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパノエート塩酸塩
化合物１３（１．５ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）を室温で１時間ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ溶液（２４ｍＬ）にて処理した。次いで反応媒体を真空で濃縮し、トルエンの存在下で共蒸発させて、フラグメントＣ４（７９４ｍｇ）を粘稠性油状物として得た（定量的）。
【０５５０】
ＡＤ１：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（アジドメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエートの合成
【化２９１】
2018535255.tif 000321
【０５５１】
化合物１４：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−４−メチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−ホルミルフェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート
アルゴン下丸底フラスコ中で機械撹拌しながら、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４．９ｇ、１３．８６ｍｍｏｌ）を、続いてＤＣＭ（１００ｍＬ）中のフラグメントＡ（３．５ｇ、１０．５９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６．６ｍＬ、３８．１３ｍｍｏｌ）を導入した。次いでＭＮＢＡ（５ｇ、１４．５２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（６２０ｍｇ、５．０７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。この後、反応媒体をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）および飽和ブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、粗製のオレンジ色油状物９．１ｇを得、これをシリカゲル４００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物１４（５ｇ）を淡黄色油状物として得た（７１％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.77 (d, J = 6.8 Hz, 6 H); 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.33〜1.64 (m, 4 H); 1.38 (s, 9 H); 2.39〜2.63 (部分的にマスクされたm, 2 H); 4.01 (m, 1 H); 4.13〜4.31 (m, 3 H); 4.95 (m, 1 H); 5.81 (d, J = 15.9 Hz, 1
H); 6.37 (dd, J = 8.8および16.2 Hz, 1 H); 6.52 (d, J = 16.2 Hz, 1 H); 6.70 (td,
J = 7.3および15.9 Hz, 1 H); 7.29 (t, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.40 (t, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.67 (dd, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.74〜7.82 (m, 3 H); 7.87 (d, J = 7.9 Hz, 2 H); 9.93 (s, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 666 [M+H]+, m/z = 689 [M+Na]+; tR = 1.92分.
【０５５２】
化合物１５：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−４−メチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート
アルゴン下、化合物１４（５ｇ、７．５１ｍｍｏｌ）のＭｅＴＨＦ（６０ｍＬ）中溶液に、トリメトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．２ｇ、８．９１ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。反応媒体を室温で５時間撹拌した。この後、飽和ＮＨ４Ｃｌ（１００ｍＬ）およびアセトン（２０ｍＬ）を加えた。反応媒体を室温で１時間撹拌した。安定化した後、有機相をＨ２Ｏで、次いで飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、粗製の黄色油状物５．３ｇを得、これをシリカゲル３００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物１５（３．１５ｇ）を白色半固体として得た（６３％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80 (m, 6 H); 1.02 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.35〜1.66 (m, 4 H); 1.38 (s, 9 H); 2.35〜2.56 (部分的にマスクされたm, 2 H); 4.02 (m, 1 H); 4.15〜4.32 (m, 3 H); 4.43 (d, J = 5.5 Hz, 2 H); 4.92 (m, 1 H); 5.12 (t, J = 5.5 Hz, 1 H); 5.80 (d, J = 15.9 Hz, 1 H); 6.10 (dd, J = 8.8および16.2 Hz, 1 H); 6.39 (d, J = 16.2 Hz, 1 H); 6.69 (m, 1 H); 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 2 H);  7.28〜7.33 (m, 4 H); 7.41 (t, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.69 (t, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.80 (d, J = 8.2 Hz, 1 H); 7.88 (d, J = 7.9 Hz, 2 H). LCMS (A1): ES m/z = 668 [M+H]+; m/z = 690 [M+Na]+; m/z = 712 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.84分.
【０５５３】
化合物１６：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−４−メチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（アジドメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート
アルゴン下、化合物１５（３．１５ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（５０ｍＬ）を丸底フラスコ中に導入した。０℃で、ＴＥＡ（９８７μＬ、７．０８ｍｍｏｌ）を、続いてメタンスルホニルクロリド（４３８μＬ、５．６６ｍｍｏｌ）を加え、反応媒体を０℃で１時間および室温で１３時間撹拌した。この後、ＤＣＭ（５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）を加えた。安定化した後、有機相を飽和ブライン（３×２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、真空で濃縮した。アルゴン下、このように得られた粗生成物をＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解し、アジ化ナトリウム（６４４ｍｇ、９．９１ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌した。この後、ＤＭＦを真空で濃縮し、ＡｃＯＥｔを加えた。得られた混合物を０．１Ｎ  ＨＣｌ（２５ｍＬ）で、飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）および飽和ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して粗製物３．３ｇを得、これをシリカゲル２００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物１６（１．８ｇ）を無色ゴム状物として（５５％）および化合物ＡＤ１（７４０ｍｇ、３３％）を得た。
ＬＣＭＳ（Ａ２）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝７１５［Ｍ＋Ｎａ］＋；ｔＲ＝８．９５分。
【０５５４】
化合物ＡＤ１：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（アジドメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート
アルゴン下丸底フラスコ中で機械撹拌しながら、化合物１６（１．８ｇ、２．６ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（５０ｍＬ）を、続いてピペリジン（１．６ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）を導入した。反応媒体を室温で終夜撹拌した。この後、これを１Ｎ  ＨＣｌで、次いで飽和ＮａＨＣＯ３、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して粗製物２ｇを得、これをシリカゲル１３０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物ＡＤ１（１．４８ｇ）を淡黄色油状物として得た（定量的）。
ＬＣＭＳ（Ａ３）：ＥＳ  ｍ／ｚ＝４７１［Ｍ＋Ｈ］＋；ｔＲ＝２．６５分。
【０５５５】
ＡＤ２：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート塩酸塩の合成
【化２９２】
2018535255.tif 000322
【０５５６】
化合物１７：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−４，４−ジメチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−ホルミルフェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート
アルゴン下丸底フラスコ中、化合物Ａ（１．６３３ｇ、４．９４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６０ｍＬ）中溶液に、Ｌ−Ｆｍｏｃ−ｔｅｒｔ−Ｌｅｕ−ＯＨ（１．８２ｇ、４．９４ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（２．５７ｍＬ、１４．８３ｍｍｏｌ）、ＭＮＢＡ（１．７０ｇ、４．９４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２４１．５１ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２時間撹拌した後、反応媒体をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機相をクエン酸（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）および飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、粗製の化合物１７（３．２４ｇ）を得、引き続く還元に直接使用した（９６％）。
【０５５７】
化合物１８：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−４，４−ジメチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート
アルゴン下丸底フラスコ中、化合物１７（３．２４ｇ、４．７７ｍｍｏｌ）のＭｅＴＨＦ（６０ｍＬ）中溶液に、０℃でトリメトキシ水素化ホウ素ナトリウム（６７０．５６ｍｇ、５．２４ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間撹拌した後、更にトリメトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３０４ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。次いで反応媒体を０℃で冷却し、アセトン（１８ｍＬ）および飽和ＮＨ４Ｃｌ（３６ｍＬ）で希釈し、ＡｃＯＥｔで抽出した。合わせた有機相を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル１００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配）により精製して、化合物１８（２．６１ｇ）を無色非晶性固体として得た（８０％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80 (s, 9 H); 1.02 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.35〜1.60 (m, 4 H); 1.38 (s, 9 H); 2.37〜2.58 (部分的にマスクされたm, 2 H); 4.04 (m, 1 H); 4.16〜4.33 (m, 3 H); 4.45 (d, J = 5.7 Hz, 2 H); 4.91 (m, 1 H); 5.12 (t, J = 5.7 Hz, 1 H); 5.80 (d, J = 16.0 Hz, 1 H); 6.10 (dd, J = 8.8および16.2 Hz, 1 H); 6.39 (d, J = 16.2 Hz, 1 H); 6.69 (m, 1 H); 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 2 H);  7.25〜7.33 (m, 4 H); 7.40 (t, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.68 (t, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.78 (d, J = 8.3 Hz, 1 H); 7.88 (d, J = 7.9 Hz, 2 H). LCMS (A1): ES m/z = 608; m/z = 682 [M+H]+; m/z = 726 [M-H+HCO2H]-; tR= 1.85分.
【０５５８】
化合物ＡＤ２：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（（（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエノエート塩酸塩
アルゴン下丸底フラスコ中、化合物１８（２．６１ｇ、３．８３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４０ｍＬ）中溶液に、ピペリジン（７．６０ｍＬ、７６．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応媒体を室温で１時間撹拌した。次いでこれを濃縮し、ＡｃＯＥｔで抽出した。合わせた有機層を１Ｎ  ＨＣｌ、Ｈ２Ｏおよび飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮した。残留物をｉＰｒ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、室温で４０時間撹拌した。粗生成物を濾過し、ｉＰｒ２Ｏで洗浄し、４０℃で３時間真空乾固して、化合物ＡＤ２（１．７０６ｇ）を無色非晶性固体として得た（９０％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.88 (s, 9 H); 1.10 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.39〜1.49 (m, 1 H); 1.42 (s, 9 H); 1.75 (dd, J = 6.1および15.1 Hz, 1 H); 2.47〜2.64 (部分的にマスクされたm, 2 H); 3.92 (t, J = 5.5 Hz, 1 H); 4.47 (d, J = 5.7 Hz, 2 H); 5.02 (m, 1 H); 5.15 (t, J = 5.7 Hz, 1 H); 5.90 (d, J = 15.9 Hz, 1 H); 6.15 (dd, J = 8.3および16.1 Hz, 1 H); 6.44 (d, J = 16.1 Hz, 1 H); 6.77 (td, J = 7.3および15.9 Hz, 1 H); 7.26 (d, J = 8.4 Hz, 2 H);  7.34 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 8.10 (広幅なm, 3 H). LCMS (A1): ES m/z = 460 [M+H]+; tR = 0.95分.
【０５５９】
ＡＤ３：（２Ｒ，３Ｓ）−１−（（４−メトキシベンジル）オキシ）−２−メチルヘキサ−５−エン−３−イル（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノエートの合成
【化２９３】
2018535255.tif 000323
【０５６０】
化合物１９：（２Ｒ，３Ｓ）−１−（（４−メトキシベンジル）オキシ）−２−メチルヘキサ−５−エン−３−イル（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−４，４−ジメチルペンタノエート
Ｓａｋｕｒａｉアルコール（１．０２ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−４，４−ジメチルペンタン酸（１．５ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中溶液に、２，４，６−トリクロロベンゾイルクロリド（１．０２ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）を加え、ＴＥＡ（１．１４ｍＬ、８．１６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１２６．０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応媒体を室温で５時間撹拌し、次いで氷浴を使用して冷却した後、温度を１０℃未満に維持しながら１Ｎ  ＨＣｌ（６０ｍＬ）を加えた。得られた媒体を室温で１５分間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）、飽和ブライン（３×１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル上での連続した３種のフラッシュクロマトグラフィー（１５０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配溶離；１５０ｇおよび２０ｇ、ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物１９（１．７８ｇ）を無色油状物として得た（７２％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 0.89 (s, 9H); 1.51 (dd, J = 2.8および14.3 Hz, 1H); 1.61 (dd, J = 9.0および14.3 Hz, 1H); 1.95 (m, 1H); 2.21 (m, 1H); 2.31 (m, 1H); 3.20 (dd, J = 6.5および9.6 Hz, 1H); 3.35 (m, 1H); 3.73 (s, 3H); 4.04 (m, 1H); 4.18〜4.34 (m, 5H); 4.83 (m, 1H); 5.00 (dq, J = 2.1および10.3 Hz, 1H); 5.05 (dq, J = 2.1および7.3 Hz, 1H); 5.70 (m, 1H); 6.87 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.17 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.30 (m, 2H); 7.41 (t, J = 7.8 Hz, 2H); 7.70 (d, J = 7.8 Hz, 2H); 7.75 (d, J = 8.3 Hz, 1H); 7.90 (d, J = 7.8 Hz, 2H). LCMS (A5): ES m/z = 600 [M+H]+; m/z = 617 [M+H+NH3]+; m/z = 644 [M-H+HCO2H]-; tR
= 1.86分.
【０５６１】
化合物ＡＤ３：（２Ｒ，３Ｓ）−１−（（４−メトキシベンジル）オキシ）−２−メチルヘキサ−５−エン−３−イル（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノエート
化合物１９（１．７８ｇ、２．９８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６３ｍＬ）中溶液に、ピペリジン（１．７７ｍＬ、１７．９ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応媒体を室温で４時間撹拌し、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（２×２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）、飽和ブライン（３×２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル５０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配溶離）により精製して、化合物ＡＤ３（６４４ｍｇ）を無色油状物として得た（５７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.88 (s, 9H); 0.89 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.21 (dd, J = 6. 9および13.9 Hz, 1H); 1.56 (dd, J = 5.0および13.9 Hz, 1H); 1.66 ( 広幅なs, 2H); 2.00 (m, 1H); 2.24 (m, 1H); 2.33 (m, 1H); 3.26 (m, 2H); 3.38 (dd, J = 5.5および9.4Hz, 1H); 3.74 (s, 3H); 4.36 (s, 2H); 4.84 (m, 1H); 5.00〜5.10 (m, 
2H); 5.72 (m, 1H); 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 2H); 7.22 (d, J = 8.8 Hz, 2H). LCMS (A5): ES m/z = 378 [M+H]+; tR= 0.88分.
【０５６２】
ＢＣ１：３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルプロパン酸の合成
【化２９４】
2018535255.tif 000324
【０５６３】
化合物２０：メチル３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルプロパノエート
アルゴン下、丸底フラスコ中にフラグメントＣ１（９８１．４５ｍｇ、４．００ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（５０ｍＬ）を、続いてＤＩＥＡ（１．８４ｍＬ、１０．９２ｍｍｏｌ）、フラグメントＢ（１．２ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５６３．４０ｍｇ、４．００ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（１．４５ｍＬ、８．０１ｍｍｏｌ）を導入した。反応媒体を室温で終夜撹拌した。この後、反応媒体をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機相を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して粗製の油状物２．５ｇを得、これをシリカゲル１１０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物２０（１．０６ｇ）を白色メレンゲ状物として得た（６６％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.06 (s, 3 H); 1.07 (s, 3 H); 1.30 (s, 9 H); 2.65 (dd, J = 11.6および13.9 Hz, 1 H); 2.82 (dd, J = 4.0および13.9 Hz, 1 H); 3.18 (dd, J = 6.1および13.4 Hz, 1 H); 3.29 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.60 (s, 3 H); 3.81 (s, 3 H); 4.11 (m, 1 H); 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.04 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.19 (dd, J = 2.3および8.6 Hz, 1 H); 7.33 (広幅なs, 1 H); 7.75 (大きなt, J = 6.1 Hz, 1 H).
【０５６４】
化合物ＢＣ１：３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルプロパン酸
アルゴン下、丸底フラスコ中に化合物２０（１．０６ｇ、２．３９ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２５ｍＬ）を、続いてＬｉＯＨ（７０．１８ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）およびＨ２Ｏ（１ｍＬ）を導入した。反応媒体を数時間撹拌した後、ＬｉＯＨ（７０ｍｇ）を加え、室温で終夜撹拌した。この後、Ａｍｂｅｒｌｉｔ樹脂をｐＨが４になるまで加え、濾過し、次いでＴＨＦで洗浄し、真空で濃縮して、化合物ＢＣ１（１ｇ）を白色固体として得た（９７％）。
【０５６５】
ＢＣ２：３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタン酸の合成
【化２９５】
2018535255.tif 000325
【０５６６】
化合物２１：メチル３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタノエート
アルゴン下、丸底フラスコ中にフラグメントＢ（１．０２ｇ、２．７８ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（２５ｍＬ）を、続いてＥＤＣ（５９２ｍｇ、３．０３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（４７８ｍｇ、３．０３ｍｍｏｌ）を導入した。反応媒体を１５分間撹拌し、次いでフラグメントＣ２（０．５ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．７ｍＬ、９．７３ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌した。この後、反応媒体を真空で濃縮し、次いでＡｃＯＥｔで希釈した。有機層を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して粗製の油状物１．４５ｇを得、これをシリカゲル１００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物２１（８４５ｍｇ）を白色泡状物として得た（６７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): ジアステレオ異性体混合物50:50; 0.87 (d, J = 6.8 Hz, 1.5 H); 0.97 (d, J = 6.8 Hz, 1.5 H); 1.01 (s, 1.5 H); 1.03 (s, 1.5 H); 1.07 (s, 3 H); 1.31 (s, 9 H); 2.58〜2.87 (m, 2 H); 3.59 (s, 1.5 H); 3,60 (s, 1.5 H); 3.81 (s, 3 H); 3.99〜4.20 (m, 2 H); 6.90 (d, J = 9.0 Hz, 0.5 H); 6.97 (d, J = 9.0 Hz, 0.5 H); 7.05 (広幅なd, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.19 (分割されたdd, J = 2.4および8.6 Hz, 1 H); 7.32 (d, J = 2.4 Hz, 0.5 H); 7.34 (d, J = 2.4 Hz, 0.5 H); 7.54
(d, J = 10.1 Hz, 0.5 H); 7.62 (d, J = 10.1 Hz, 0.5 H). LCMS (A3): ジアステレオ異性体混合物50:50; ES m/z = 457 [M+H]+; m/z = 479 [M+Na]+; tR = 3.19-3.2分.
【０５６７】
化合物２１ステレオマー１および２：メチル３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタノエートステレオマー１および２
アルゴン下丸底フラスコ中、フラグメントＢ（１．１７ｇ、３．５５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）中溶液に、ＥＤＣ（７４１．７５ｍｇ、３．８７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５９２．５７ｍｇ、３．８７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１５分撹拌した後、フラグメントＣ２（６３９ｍｇ、３．５２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２．１７ｍＬ、１２．３１ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を４時間撹拌し、次いで濃縮し、ＡｃＯＥｔ（１００ｍＬ）で希釈した。有機層をＨ２Ｏ（２×１０ｍＬ）および飽和ブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮した。粗生成物をシリカゲル５０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、ジアステレオ異性体の混合物（１．３０６ｇ、８１％）を得、これを連続した２種のフラッシュクロマトグラフィーにより分離し、シリカゲル１００ｇ上での最初の溶離（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により化合物２１ステレオマー１（３７６ｍｇ、２３％）を得、シリカゲル７０ｇ上での２番目の溶離（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により化合物２１ステレオマー１（１８１ｍｇ、１１％）、化合物２１ステレオマー２（２７９ｍｇ、１７％）およびジアステレオ異性体の混合物４７６ｍｇを得た。
【０５６８】
化合物２１ステレオマー１
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (d, J = 6.8 Hz, 3 H); 1.07 (s, 6 H); 1.31 (s, 9 H); 2.57 (m, 1H); 2.80 (dd, J = 5.2および13.8 Hz, 1 H); 3.60 (s, 3 H); 3.81 (s, 3 H); 4.05 (m, 1 H); 4.16 (m, 1 H); 6.99 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.20 (dd, J = 2.0および8.6 Hz, 1 H); 7.34 (d, J=2.0 Hz, 1 H); 7.57 (d, J=10.1 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 381; m/z = 401; m/z = 455 [M-H]-; m/z = 457 [M+H]+; tR = 1.29分.
化合物２１ステレオマー２
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.95 (d, J = 6.8 Hz, 3 H); 1.00 (s, 3 H); 1.03 (s, 3 H); 1.31 (s, 9 H); 2.55 (m, 1H); 2.80 (dd, J = 5.0および14.3 Hz, 1 H); 3.59 (s, 3 H); 3.81 (s, 3 H); 4.09〜4.22 (m, 2 H); 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.20 (dd, J = 2.0および8.6 Hz, 1 H); 7.34 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 7.64 (d, J = 10.1 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 381; m/z = 401; m/z = 455 [M-H]-; m/z = 457 [M+H]+; tR = 1.29分.
【０５６９】
化合物ＢＣ２：３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタン酸
化合物２１（０．８４５ｇ、１．８５ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（２０ｍＬ）を、続いて１０Ｍ  ＮａＯＨ（１．８ｍＬ）を丸底フラスコ中に導入した。溶液を撹拌し、５０℃で終夜加熱した。反応媒体を真空で蒸発させ、次いでＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、５Ｎ
ＨＣｌで中和した。溶液をＡｃＯＥｔで２回抽出した。合わせた有機層を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物ＢＣ２（８００ｍｇ）を白色泡状物として得た（９７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): ジアステレオ異性体混合物50:50; 0.91 (d, J = 6.8 Hz, 1.5 H); 0.97 (d, J = 6.8 Hz, 1.5 H); 1.00 (s, 3 H); 1.03 (s, 1.5 H); 1.07 (s, 1.5 H); 1.31 (s, 9 H); 2.57 (m, 1 H); 2.83 (m, 1 H); 3.81 (s, 3 H); 4.01〜4.16 (m, 2 H); 6.90 (d, J = 9.0 Hz, 0.5 H); 6.95 (d, J = 9.0 Hz, 0.5 H); 7.03 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.20 (広幅, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.31 (広幅なs, 1 H); 7.49 (d, J = 10.1 Hz, 0.5 H); 7.54 (d, J = 10.1 Hz, 0.5 H); 11.94 (広幅なm, 1 H). LCMS (A1): ジアステレオ異性体混合物50:50; ES m/z = 387; m/z = 443 [M+H]+; tR = 1.20-1.21分.
【０５７０】
化合物ＢＣ２ステレオマー１：３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタン酸ステレオマー１
化合物２１ステレオマー１（０．３２５ｇ、１．８５ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（８ｍＬ）を、続いて１０Ｍ  ＮａＯＨ（０．６９２ｍＬ）を丸底フラスコ中に導入した。黄色溶液を撹拌し、５０℃で終夜加熱した。反応媒体を真空で蒸発させ、次いでＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、ＡｃＯＥｔ（３×５ｍＬ）で抽出した。水層を５Ｎ  ＨＣｌで酸性化し、ＡｃＯＥｔ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ブライン（５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物ＢＣ２ステレオマー１（３０３ｍｇ）を白色泡状物（９６％）として得、引き続く反応に直接使用した。
【０５７１】
化合物ＢＣ２ステレオマー２：３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタン酸ステレオマー２
化合物２１ステレオマー２（１．０９４ｇ、２．３９ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）を、続いてＬｉＯＨ（３０１ｍｇ、７．１８ｍｍｏｌ）を丸底フラスコ中に導入した。溶液を室温で４４時間撹拌した。反応は完結しておらず、ＬｉＯＨ（３０１ｍｇ）を加えた。混合物を４８時間撹拌し、次いでＬｉＯＨ（３０１ｍｇ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中で加え、反応媒体を６０℃で４０時間撹拌した。反応媒体を真空で蒸発させた。１Ｍクエン酸をｐＨ２になるまで加え、混合物をＡｃＯＥｔ（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＨ２Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物ＢＣ２ステレオマー２（１．０９６ｇ）を白色非晶性固体として得（定量的）、引き続く反応に直接使用した。
【０５７２】
ＢＣ３：エチル２−（（Ｒ）−１−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）シクロプロピル）−２−メチルプロパン酸の合成
【化２９６】
2018535255.tif 000326
【０５７３】
化合物２２：エチル２−（（Ｒ）−１−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）シクロプロピル）−２−メチルプロパノエート
アルゴン下、丸底フラスコ中にフラグメントＣ３（１．２ｇ、７．０１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１６．５ｍＬ）を、続いてフラグメントＢ（２．５４ｇ、７．７１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．７７ｇ、８．７６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１．２３ｇ、８．０６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．３５ｍＬ、７．７１ｍｍｏｌ）を導入した。反応媒体を室温で２時間撹拌した。この後、反応媒体をＨ２Ｏ（２５ｍＬ）で希釈し、ＡｃＯＥｔ（２５０ｍＬ）で抽出した。有機層をＨ２Ｏ（２×２５ｍＬ）、飽和ブライン（２×２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、シリカゲル２００ｇ上での最初の溶離（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により、化合物２２（２．１６ｇ）を無色泡状物として（６４％）、および所望の化合物を含む混合物３４３ｍｇを得、これをシリカゲル３０ｇ（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）上で更に精製して、化合物２２（１６０ｍｇ）を無色泡状物として得た（４．７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.62 (m, 1 H); 0.74〜0.99 (m, 3 H); 1.03 (s, 3 H); 1.10 (s, 3 H); 1.24 (t, J = 7.2 Hz, 3 H); 1.42 (s, 9 H); 2.90 (m, 2 H); 3.88 (s, 3 H); 4.08 (m, 1 H); 4.10 (q, J = 7.2 Hz, 2 H); 4.96 (m, 1 H); 6.33 (広幅なs, 1 H); 6.85 (d, J = 8.5 Hz, 1 H); 7.03 (dd, J = 2.4および8.5 Hz, 1 H); 7.17 (d, J = 2.4 Hz, 1 H).
【０５７４】
化合物ＢＣ３：２−（（Ｒ）−１−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）
−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）シクロプロピル）−２−メチルプロパン酸
化合物２２（２．０９ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（８ｍＬ）を、続いてＬｉＯＨ（７２６．３３ｍｇ、１７．３１ｍｍｏｌ）を丸底フラスコ中に導入した。溶液を撹拌し、６５℃で加熱した。１６時間後、反応は完結しておらず、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）中のＬｉＯＨ（７２６．３３ｍｇ）を加えた。混合物を６５℃で４８時間撹拌した。冷却後、反応媒体をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、次いでＡｃＯＥｔ（３×４０ｍＬ）で抽出した。有機層をＨ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、エステル／酸の混合物１．２９ｇを得た。水層を５Ｎ  ＨＣｌでｐＨ３にまで酸性化し、次いでＡｃＯＥｔ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層をＨ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物ＢＣ３（７８７ｍｇ）をベージュ色泡状物として得た（４０％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.50〜0.90 (m, 4 H); 1.03 (s, 6 H); 1.30 (s, 9 H); 2.60 (dd, J = 10.5および14.1 Hz, 1 H); 2.78 (dd, J = 5.0および14.1 Hz, 1 H); 3.81 (s, 3 H); 3.97 (m, 1 H); 6.80 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.03 (d, J = 8.5 Hz, 1 H); 7.18 (dd, J = 2.0および8.5 Hz, 1 H); 7.31 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 7.86 (s, 1 H); 12.11 (広幅なm, 1 H).
【０５７５】
ＢＣ４：（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタン酸の合成
【化２９７】
2018535255.tif 000327
【０５７６】
化合物２３：メチル（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタノエート
フラグメントＢ（２ｇ、６．０６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６０ｍＬ）中溶液に、ＥＤＣ（１．１３ｍＬ、７．０６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（９４８ｍｇ、６．６７ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で１５分間撹拌し、次いでメチル（Ｓ）−３−アミノ−２，２−ジメチルブタノエート（８８１ｍｇ、６．０６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．５３ｍＬ、９．１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で４時間撹拌し、真空で濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル１５０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配溶離）により精製して、化合物２３（２．２１ｇ）を無色ラッカーとして得た（７９％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 1.08 (s, 6H); 1.32 (s, 9H); 2.67 (dd, J = 9.9および13.6 Hz, 1H); 2.82 (dd, J = 5.2および13.6 Hz, 1H); 3.62 (s, 3H); 3.83 (s, 3H); 4.06 (m, 1H); 4.77 (m, 1H) 6.97 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.4および8.6 Hz, 1H); 7.33 (d, J = 2.4 Hz, 1H); 7.55 (d, J = 9.8 Hz, 1H).
【０５７７】
化合物２４：メチル（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタノエート２，２，２−トリフルオロアセテート
化合物２３（２．２ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２５ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（３．６ｍＬ、４８．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌し、真空で濃縮し、トルエンの存在下で共蒸発させて、化合物２４（２．０ｇ）をジアステレオ異性体混合物として得た（８８％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 1.04 (s, 3H); 1.10 (s, 3H); 2.95 (d, J = 7.0 Hz, 2H); 3.62 (s, 3H); 3.84 (s, 3H); 4.00 (m, 1H); 4.15 (m, 1H); 7.10〜7.30 (m, 3H); 8.00 (d, J = 9,5 Hz, 1H); 8.22 (広幅なs, 3H).
【０５７８】
化合物２５：メチル（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタノエート
化合物２４（２．０ｇ、４．２５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に、塩化アクリロイル（５３６μＬ、６．３７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２．５ｍＬ、１２．７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で２時間撹拌し、次いでＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈した。水相をＤＣＭ（２×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル１００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配溶離）により精製して、化合物２５（８５０ｍｇ）を８５：１５ジアステレオ異性体混合物として得た（６８％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 1.03 (s, 3H); 1.04 (s, 3H); 2.72 (dd, J = 9.7および13.9 Hz, 1H); 2.86 (dd, J = 5.8および13.9 Hz, 1H); 3.58 (s, 3H); 3.80 (s, 3H); 4.15 (m, 1H); 4.56 (m, 1H); 5.56 (dd, J = 2.3および10.2 Hz, 1H); 6.03 (dd, J = 2.3および17.2 Hz, 1H); 6.28 (dd, J = 10.2および17.2 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.5 Hz, 1H); 7.17 (dd, J = 2.2および8.5 Hz, 1H); 7.31 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 7.72 (d, J = 9.8 Hz, 1H); 8.36 (d, J = 8.6 Hz, 1H).
【０５７９】
化合物ＢＣ４：（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタン酸
０℃で冷却したｔＢｕＯＫ（１．１１ｇ、９．８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）中溶液に、Ｈ２Ｏ（４７μＬ）および化合物２５（４５０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で３時間撹拌し、次いで１Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）で酸性化した。水相をＤＣＭ（２×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮した。２種のジアステレオマーをＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ  １０μｍカラム上での超臨界流体クロマトグラフィー（８５／１５ＣＯ２／［ＭｅＯＨ＋０．１％ＴＥＡ］での定組成溶離）により分離して、化合物ＢＣ４（３８５ｍｇ）を非晶性固体として得た（８９％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.88 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 0.99 (s, 3H); 1.00 (s, 3H); 2.71 (dd, J = 9.4および13.7 Hz, 1H); 2.88 (dd, J = 5.3および13.7 Hz, 1H); 3.80 (s, 3H); 4.10 (m, 1H); 4.54 (m, 1H); 5.55 (dd, J = 2.3および10.2 Hz, 1H); 6.01 (dd, J = 2.3および17.1 Hz, 1H); 6.28 (dd, J = 10.2および17.1 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.17 (dd, J = 2.4および8.7 Hz, 1H); 7.32 (d, J = 2.4 Hz, 1H); 7.80 (d, J = 9.8 Hz, 1H); 8.39 (d, J = 8.8 Hz, 1H); 12.00 (広幅なs, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 395 [M-H]-; m/z = 397 [M+H]+; tR = 0.92分.
【０５８０】
ＢＣ５：（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタン酸の合成
【化２９８】
2018535255.tif 000328
メチル（３Ｓ）−３−アミノ−２，２−ジメチルブタノエート（ＭＦＣＤ０９２５６６８９）を出発物とし、スキーム３２に示し、化合物ＢＣ１およびＢＣ２にて説明した構成単位ＢＣの一般的合成に従って、化合物ＢＣ５を製造した。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.89 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 1.02 (s, 3H); 1.04 (s, 3H); 1.30 (s, 9H); 2.68 (dd, J = 13.6および10.2 Hz, 1H); 2.82 (dd, J = 5.2および13.6 Hz, 1H); 3.80 (s, 3H); 4.05 (m, 1H); 4.12 (m, 1H); 7.00 (d, J = 8.7 Hz,
1H); 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 1H); 7.32 (d, J =
2.2 Hz, 1H); 7.52 (d, J = 9.9 Hz, 1H); 12.35 (広幅なs, 1H). LCMS (A1): ES m/z =
441 [M-H]-; m/z = 443 [M+H]+; m/z = 883 [2M-H]- ; tR = 1.16分.
【０５８１】
ＢＣ６：３−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパン酸の合成
【化２９９】
2018535255.tif 000329
【０５８２】
化合物２６：メチル３−（（Ｒ）−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパノエート
フラグメントＣ４（１．０５９ｇ、５．７７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（２．０６ｍＬ、１１．７６ｍｍｏｌ）、フラグメントＢ（１．９０ｇ、５．７７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９３５ｍｇ、６．９２ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（１．２３ｍＬ、６．９２ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で４８時間撹拌し、真空で濃縮し、シリカゲル２００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの定組成溶離）により精製して、化合物２６（１．０５ｇ）を無色油状物として得た（３９％）。RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.98 (s, 3H); 1.30 (s, 9H); 2.63 (m, 1H); 2.83 (m, 1H); 3.18〜3.48 (m, 4H); 3.60 (s, 3H); 3.80 (s, 3H); 4.10 (m, 1H); 4.81 (m, 1H); 6.98 (d, J = 8.9 Hz, 1H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.1および8.7 Hz, 1H); 7.35 (d, J = 2.1 Hz, 1H); 7.83 (m, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 457 [M-H]-; m/z = 459 [M+H]+; m/z = 503 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.1分.
【０５８３】
化合物２７：メチル３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパノエート塩酸塩
化合物２６（１．０５ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）を室温で１時間ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（１６ｍＬ、６４ｍｍｏｌ）で処理した。反応媒体を真空で濃縮し、トルエンの存在下２回共蒸発させた。粗生成物をｉＰｒ２Ｏ（１０ｍＬ）で摩砕し、濾過し、ｉＰｒ２Ｏ（５ｍＬ）で２回洗浄した。次いでケーキをＤＣＭに溶解し、濾過し、真空で濃縮して、化合物２７（８０９ｍｇ）を白色泡状物として得（９０％）、これを更には精製せずに使用した。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.92 (s, 1.5H); 0.97 (s, 1.5H); 2.88 (m, 1H);
3.00 (m, 1H); 3.19〜3.47 (m, 4H); 3.60 (s, 3H); 3.85 (s, 3H); 4.05 (m, 1H); 4.89 (m, 1H); 7.11 (分割されたd, J = 8.6 Hz, 1H); 7.19 (分割されたdd, J = 2.0および8.6 Hz, 1H); 7.38 (分割されたd, J = 2.0 Hz, 1H); 8.15 (広幅なs, 3H); 8.39 (m, 1H).
【０５８４】
化合物２８：メチル３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２−メチル−２−（（（トリエチルシリル）オキシ）メチル）プロパノエート
氷浴で冷却した化合物２７（８０９ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）中溶液に、温度を４℃未満に維持しながらＴＥＡ（１．４３ｍＬ、１０．２３ｍｍｏｌ）およびクロロトリエチルシラン（１．３７ｍＬ、８．１９ｍｍｏｌ）を加えた。４℃で１０分間撹拌を行い、次いで反応媒体を室温で２０時間撹拌した。飽和ブライン（２０ｍＬ）およびＤＣＭを媒体に加え、これを１０分間撹拌した。有機相を飽和ブライン（３×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル７０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物２８（７０６ｍｇ）を淡黄色油状物として得た（７３％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.52 (q, J = 8.0 Hz, 6H); 0.89 (t, J = 8.0 Hz, 9H); 0.98 (s, 3H); 1.70 (広幅なs, 2H); 2.54 (m, 1H); 2.82 (m, 1H); 3.18〜3.45 (m, 3H); 3.58 (m, 2H); 3.60 (s, 3H); 3.80 (s, 3H); 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.14 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1H); 7.28 (分割されたd, J = 2.3 Hz, 1H); 7.78 (m, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 471 [M-H]-; m/z = 473 [M+H]+; m/z = 517 [M-H+HCO2H]-; tR = 0.97分.
【０５８５】
化合物２９：メチル３−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２−メチル−２−（（（トリエチルシリル）オキシ）メチル）プロパノエート
氷／アセトン浴で冷却した化合物２８（７０４ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１９ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（７８０μＬ、４．４６ｍｍｏｌ）を加え、塩化アクリロイル（１８１μＬ、２．２３ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応媒体を０〜５℃で１時間撹拌し、次いでＥｔＯＡｃ（３８ｍＬ）を加え、媒体を１Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（５ｍＬ）、飽和ブライン（３×１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル３０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物２９（７４２ｍｇ）を無色油状物として得た（９４％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.52 (分割されたq, J = 8.0 Hz, 6H); 0.89 (分割されたt, J = 8.0 Hz, 9H); 0.99 (s, 1.5H); 1.01 (s, 1.5H); 2.69 (m, 1H); 2.87 (m, 1H); 3.20 (m, 1H); 3.28 (m, 1H); 3.50 (dd, J = 3.1および9.9 Hz, 1H); 3.58 (s, 3H); 3.68 (d, J = 9.9 Hz, 1H); 3.80 (s, 3H); 4.59 (m, 1H); 5.55 (d, J = 10.3 Hz, 1H); 6.00 (d, J = 17.3 Hz, 1H); 6.25 (分割されたdd, J = 10.3および17.3 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.5 Hz, 1H); 7.18 (分割されたdd, J = 2.0および8.5 Hz, 1H); 7.31 (分割されたd, J = 2.0 Hz, 1H); 7.96 (m, 1H); 8.39 (d, J = 8.9 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 525 [M-H]-; m/z = 527 [M+H]+; m/z = 571 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.54分.
【０５８６】
化合物ＢＣ６：３−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパン酸
氷／アセトン浴で冷却したｔＢｕＯＫ（１．４２ｇ、１２．６５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍＬ）中懸濁液に、Ｈ２Ｏ（５０μＬ）を加え、媒体を１０分間撹拌した後、化合物２９（７４１ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍＬ）中溶液を加えた。０℃で１０分間次いで室温で１時間撹拌を行った。反応媒体を氷浴で冷却した後、１Ｎ  ＨＣｌ（１６．９ｍＬ）を加えた。１５分撹拌した後、反応媒体をＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ブライン（２×１５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物ＢＣ６（６５６ｍｇ）を黄色泡状物として得た（定量的）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.91 (s, 3H); 2.69 (m, 1H); 2.90 (dd, J = 4.8および13.6 Hz, 1H); 3.18〜3.42 (m, 4H); 3.80 (s, 3H); 4.59 (m, 1H); 4.73 (広幅, 1H); 5.55 (d, J = 2.3および10.3 Hz, 1H); 6.00 (dd, J = 2.3および17.2 Hz, 1H); 6.24 (dd, J = 10.3および17.2 Hz, 1H); 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.19 (dd, J = 2.0および8.7 Hz, 1H); 7.35 (d, J = 2.0 Hz, 1H); 8.00 (m, 1H); 8.39 (d, J = 8.8 Hz, 1H); 12.30 (広幅なs, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 397 [M-H]-; m/z = 399 [M+H]+; tR = 0.77分.
【０５８７】
実施例１から３：アザ−Ｃ５２のベンジル酸アミン、グルタリル−Ｖａｌ−Ａｌａ−アザ−Ｃ５２ベンジル酸アミンのＮＨＳエステルおよび対応するＡＤＣの合成
【化３００】
2018535255.tif 000330
【０５８８】
化合物３０：（６Ｒ，１３Ｓ）−（１Ｅ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｅ）−１−（４−（アジドメチル）フェニル）−８−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−メチル−８−オキソオクタ−１，６−ジエン−４−イル６−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１３−イソブチル−２，２，１０，１０−テトラメチル−４，７，１１−トリオキソ−３−オキサ−５，８，１２−トリアザテトラデカン−１４−オエート
アルゴン下、丸底フラスコ中にＤＭＦ（２５ｍＬ）中の化合物ＢＣ１（８９９．５５ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（８６１ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３０２ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）を導入した。混合物を室温で３０分間撹拌した。この後、化合物ＡＤ１（９４０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．０５ｍＬ、５．９９ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で４時間撹拌した。この後、反応媒体をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＡｃＯＥｔ（２×４０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル８０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物３０（１．０１１ｇ）を黄色半固体として得た（５７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.76 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.78 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.07 (s, 6 H); 1.39 (s, 9 H); 1.37〜1.63 (m, 3 H); 1.41 (s, 9 H); 2.36〜2.60 (部分的にマスクされたm, 3 H); 2.64 (dd, J = 9.5および14.1 Hz, 1 H); 2.86 (dd, J = 5.6および14.1 Hz, 1 H); 3.18 (dd, J = 6.1および13.5 Hz, 1 H); 3.25 (dd, J = 6.9および13.5 Hz, 1 H); 3.79 (s, 3 H); 4.09 (m, 1 H); 4.26 (m, 1 H); 4.40 (s, 2 H); 4.92 (m, 1 H); 5.81 (d, J = 15.9 Hz, 1 H); 6.17 (dd, J = 8.4および16.1 Hz, 1 H); 6.44 (d, J = 15.9 Hz, 1 H); 6.70 (m, 1 H); 6.94 (d, J = 8.9 Hz, 1 H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.18 (dd, J = 2.3および8.9 Hz, 1 H); 7.31 (m, 3 H); 7.42 (d, J = 8.5 Hz, 2 H); 7.59 (t, J = 6.3 Hz, 1 H); 7.77 (d, J = 7.9 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 879 [M-H]-; m/z = 881 [M+H]+; m/z = 925 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.89分.
【０５８９】
化合物３１：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｒ，Ｅ）−４−（４−（アジドメチル）フェニル）ブタ−３−エン−２−イル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
化合物３１を２工程で製造した。
工程１：丸底フラスコ中にＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物３０（１．０１１ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を導入した。０℃に冷却した後、ＴＦＡ（１．７２ｍＬ、２２．９４ｍｍｏｌ）およびＨ２Ｏ（１００μＬ）を加えた。反応媒体を室温で７２時間撹拌した。完結した時点で、トルエンを媒体に加え、これを真空で濃縮して、アミノ／酸中間体９００ｍｇ（定量的）を得た。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.76 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.78 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.07 (s, 3 H); 1.08 (s, 3 H); 1.38〜1.62 (m, 3 H); 2.35〜2.58 (部分的にマスクされたm, 3 H); 2.79 (dd, J = 11.0および13.8 Hz, 1 H); 3.00 (dd, J = 4.1および13.8 Hz, 1 H); 3.16 (dd, J = 5.9および13.5 Hz, 1 H); 3.28〜3.39 (マスクされたm, 1 H); 3.81 (s, 3 H); 4.03 (m, 1 H); 4.26 (m, 1 H); 4.40 (s, 2 H); 4.92 (m, 1 H); 5.82 (d, J = 16.1 Hz, 1 H); 6.16 (dd, J = 8.8および16.4 Hz, 1 H); 6.42 (d, J = 16.4 Hz, 1 H); 6.73 (m, 1 H); 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.18 (dd, J = 2.0および8.6 Hz, 1 H); 7.32 (d, J = 8.6 Hz, 2 H); 7.37 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 7.41 (d, J = 8.6 Hz, 2 H); 7.84 (d, J = 7.9 Hz, 1 H); 8.01 (広幅で大きなs, 3 H); 8.10 (t, J = 6.4 Hz, 1 H); 12.2 (広幅なs, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 723 [M-H]-; m/z = 725 [M+H]+; tR = 1.09分.
【０５９０】
工程２：丸底フラスコ中、アミノ／酸中間体（８４０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（２００ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（１．９５ｍＬ、１１．５８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１５９．２３ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（４９９．４０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で３時間撹拌した。真空で濃縮した後、粗製物をＡｃＯＥｔ（２００ｍＬ）で希釈し、０．５Ｍクエン酸（１２ｍＬ）および１Ｎ  ＨＣｌ（６ｍＬ）で中和した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＳＯ３、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル４０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物３１（５５８ｍｇ）を白色固体として得た（６８％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.60 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.61 (d, J = 6.7 H
z, 3 H); 0.97 (s, 3 H); 1.07 (s, 3 H); 1.09 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.15 (m, 1 H);
1.33〜1.48 (m, 2 H); 2.24 (m, 1 H); 2.53〜2.70 (m, 2 H); 2.88 (大きなd, J = 13.6 Hz, 1 H); 3.01 (dd, J = 3.5および14.5 Hz, 1 H); 3.23〜3.32 (マスクされたm, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 4.18 (m, 1 H); 4.35 (m, 1 H); 4.40 (s, 2 H); 4.95 (m, 1 H); 5.86 (dd, J = 1.7および15.8 Hz, 1 H); 6.13 (dd, J = 8.8および16.1 Hz, 1 H); 6.40 (m, 1 H); 6.47 (d, J = 16.1 Hz, 1 H); 7.04 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.18 (dd, J = 2.0および8.6 Hz, 1 H); 7.29 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 7.32 (d, J = 8.6 Hz, 2 H); 7.41 (広幅なd, J = 8.6 Hz, 3 H); 7.89 (d, J = 8.9 Hz, 1 H); 8.1 (d, J = 8.2 Hz, 1 H).
LCMS (A1): ES m/z = 705 [M-H]-; m/z = 707 [M+H]+; tR = 1.58分.
【０５９１】
化合物３２：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アジドメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
丸底フラスコ中、化合物３１（４１０ｍｇ、０．５７９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）中溶液に、０℃でｍ−ＣＰＢＡ（２５９ｍｇ，１．１６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１６時間撹拌した後、ｍ−ＣＰＢＡ（１３０ｍｇ）を２４時間で２回加えた。反応が完結した時点で、粗製の混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）および飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（１５ｍＬ）と共に１時間撹拌し、次いでＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、αおよびβエポキシドの混合物４４０ｍｇを黄色半固体として得た。αおよびβエポキシドをキラル液体クロマトグラフィーにより分離し、これは８０：２０ヘプタン／ＥｔＯＨでの定組成溶離を使用し、１０μｍのＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ（１．１ｋｇ、アミローストリス−３，５−ジメチルフェニルカルバメートをシリカゲル担体上に被覆、Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｅｕｒｏｐｅ）でパックした７６×３５０ｍｍカラム上で行った。濃縮後、化合物３２（１８５ｍｇ）を白色固体として得（４４％）、αエポキシド１１８ｍｇを白色固体として得た（２８％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.72 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.74 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.96 (s, 3 H); 1.04 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.08 (s, 3 H); 1.11 (m, 1 H); 1.40〜1.55 (m, 2 H); 1.79 (m, 1 H); 2.26 (m, 1 H); 2.64 (m, 2 H); 2.85 (広幅なd, J = 13.2 Hz, 1 H); 3.00 (m, 2 H); 3.25 (dd, J = 10.2および13.2 Hz, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.90 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 4.17 (m, 1 H); 4.35 (m, 1 H); 4.46 (s, 2 H); 5.12 (m, 1 H); 5.80 (dd, J = 1.7および16.0 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 3.8, 11.6および16.0 Hz, 1 H); 7.04 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.18 (dd, J = 2.0および8.6 Hz, 1 H); 7.29 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 7.31〜7.40 (m, 5 H); 7.94 (d, J = 9.1 Hz, 1 H); 8.40 (d, J = 8.1 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 723 [M+H]+; tR = 1.48分.
【実施例１】
【０５９２】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アミノメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
丸底フラスコ中、化合物３２（１８５ｍｇ、２５５．７９μｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）、ＭｅＯＨ（６ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．８ｍＬ）中溶液に、ＴＣＥＰ（８１，４７ｍｇ、２８１，３７μｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で１６時間撹拌した。反応が完結した時点で、粗製の混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１５ｇ上での連続した２種のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、実施例１（９０ｍｇ）を白色固体として得た（５１％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.72 (d, J = 6.6 Hz, 3 H); 0.75 (d, J = 6.6 Hz, 3 H); 0.97 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.1 Hz, 3 H); 1.07 (s, 3 H); 1.14 (m, 1 H); 1.42〜1.57 (m, 2 H); 1.77 (m, 1 H); 1.92 (広幅なm, 2 H); 2.26 (m, 1 H); 2.64 (m, 2 H); 2.86 (広幅なd, J = 13.0 Hz, 1 H); 2.94 (dd, J = 2.0および8.0 Hz, 1 H); 3.00 (dd, J = 3.6および14.4 Hz, 1 H); 3.27 (dd, J = 10.2および13.0 Hz, 1 H); 3.70 (s, 2 H); 3.80 (s, 3 H); 3.84 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 4.18 (m, 1 H); 4.34 (m, 1 H); 5.11 (m, 1 H); 5.79 (dd, J = 1.7および15.6 Hz, 1 H); 6.38 (ddd, J = 4.1, 11.6および15.6 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.0および8.6 Hz, 1 H); 7.22 (d, J = 8.5 Hz, 2 H); 7.28 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 7.31 (d, J = 8.5 Hz, 2 H); 7.35 (d, J = 10.2 Hz, 1 H); 7.91 (d, J = 9.0 Hz, 1 H); 8.38 (d, J = 8.0 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 695 [M-H]-; m/z = 697 [M+H]+; tR = 0.83分.
【０５９３】
化合物３３：（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）−３−メチルブタンアミド
アルゴン下丸底フラスコ中、実施例１（９０ｍｇ、１２９．０１μｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に、（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタン−アミド）プロパン酸またはＦｍｏｃＶａｌＡｌａ（ＣＡＳ番号［１５０１１４−９７−９］、７９．４７ｍｇ、１９３．６１μｍｏｌ）、ＥＤＣ（３４．２７μＬ、１９３．６１μｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（２０．９３ｍｇ、１５４．９μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌した。この後、ピペリジン（１２９μＬ、１．２９ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。溶媒を除去し、粗製の残留物をシリカゲル１５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物３３（５０ｍｇ、４５％）を白色固体として得た。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.75 (m, 9 H); 0.88 (d, J = 7.1 Hz, 3 H); 0.96 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.1 Hz, 3 H); 1.08 (s, 3 H); 1.18 (m, 1 H); 1.23 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.42〜1.57 (m, 2 H); 1.70 (広幅なm, 2 H); 1.79 (m, 1 H); 1.92 (m, 1 H); 2.26 (m, 1 H); 2.63 (m, 2 H); 2.86 (広幅なd, J = 13.0 Hz, 1 H); 2.99 (m, 3 H); 3.22〜3.33 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.86 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 4.18 (m, 1 H); 4.28 (d, J = 6.3 Hz, 2 H); 4.33 (m, 2 H); 5.11 (m, 1 H); 5.79 (dd, J = 1.7および15.6 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 4.1, 11.6および15.6 Hz, 1 H); 7.03 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.0および8.6 Hz, 1 H); 7.24 (s, 4 H); 7.28 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 7.37 (d, J = 10.2 Hz, 1 H); 7.92 (d, J = 9.1 Hz, 1 H); 8.07 (広幅なd, J = 8.3 Hz, 1 H); 8.38 (d, J = 8.1 Hz, 1 H); 8.42 (t, J = 6.3 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 434 [M+2H]2+; m/z = 865 [M-H]-; m/z = 867 [M+H]+; m/z = 911 [M-H+HCO2H]-; tR = 0.88分.
【０５９４】
化合物３４：５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタン酸
アルゴン下丸底フラスコ中、化合物３３（５４ｍｇ、５７．６４μｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中溶液に、グルタル酸無水物（８ｍｇ、６９．１７μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で３．５時間撹拌した。この後、溶媒を除去し、粗製の残留物をシリカゲル１．８ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物３４（５１ｍｇ）を白色固体として得た（９０％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.73 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.76 (d, J = 6.7 Hz, 3 H);  0.81 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.84 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.97 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.2 Hz, 3 H); 1.05 (s, 3 H); 1.15 (m, 1 H); 1.22 (d, J = 7.2 Hz, 3 H); 1.43〜1.52 (m, 2 H); 1.70 (m, 2 H); 1.77 (m, 1 H); 1.97 (m, 1 H); 2.17 (m, 2 H); 2.24 (m, 1 H); 2.55〜2.68 (m, 2 H); 2.85 (広幅なd, J = 12.7 Hz, 1 H); 2.96 (dd, J = 1.8および7.7 Hz, 1 H); 2.99 (dd, J = 3.0および14.6 Hz, 1 H); 3.23〜3.40 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.85 (d, J = 1.8 Hz, 1 H); 4.22〜4.38 (m, 4 H); 5.11 (m, 1 H); 5.79 (d, J = 14.9 Hz, 1 H); 6.37 (ddd, J = 4.1, 11.3および14.9 Hz, 1 H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.15 (dd, J = 2.0および8.7 Hz, 1 H); 7.23 (広幅なs, 4 H); 7.28 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 7.37 (広幅なd, J = 10.7 Hz, 1 H); 7.87 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.93 (d, J = 9.2 Hz, 1 H); 8.06 (大きなm, 1 H); 8.37 ( 広幅なm, 1 H); 8.41 (広幅なm, 1 H); 12.03 (広幅なm, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 979 [M-H]-; m/z = 981 [M+H]+; tR= 1.17分.
【実施例２】
【０５９５】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタノエート
アルゴン下丸底フラスコ中、化合物３４（３０ｍｇ、３０．５６μｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（５．３４μＬ、３０．５６μｍｏｌ）およびＤＳＣ（１６．３１ｍｇ、６１．１３μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で２時間撹拌した。この後、溶媒を除去し、粗製の残留物をシリカゲル１．３ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ｉＰｒＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、実施例２（９ｍｇ）を白色固体として得た。不純物と共に所望の化合物を含む２番目のバッチをＭｅＴＨＦで希釈し、Ｈ２Ｏ、飽和ブラインで２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、実施例２（１５ｍｇ）を白色固体として得た（合計収率７３％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.73 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.77 (d, J = 6.7 Hz, 3 H);  0.82 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.84 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.96 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.2 Hz, 3 H); 1.07 (s, 3 H); 1.15 (m, 1 H); 1.23 (d, J = 7.2 Hz, 3 H); 1.43〜1.56 (m, 2 H); 1.78 (m, 1 H); 1.81 (m, 1 H); 1.97 (m, 1 H); 2.20〜2.33 (m, 3 H); 2.58〜2.69 (m, 4 H); 2.80 (s, 4 H); 2.85 (広幅なd, J = 12.7 Hz, 1 H); 2.98 (dd, J = 2.1および7.9 Hz, 1 H); 3.00 (dd, J = 3.2および14.7 Hz, 1 H); 3.22〜3.34 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.85 (d, J = 2.1 Hz, 1 H); 4.15 (m, 2 H); 4.22〜4.38 (m, 4 H); 5.11 (m, 1 H); 5.79 (d, J = 15.1 Hz, 1 H); 6.38 (ddd, J = 3.9, 11.2および15.1 Hz, 1 H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.15 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 1 H); 7.22 (広幅なs, 4 H); 7.29 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 7.36 (広幅なd, J = 10.3 Hz, 1 H); 7.89 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.92 (d, J =  8.9 Hz, 1 H); 8.04 (d, J = 7.4 Hz, 1 H); 8.32 (t, J = 6.1 Hz, 1 H); 8.39 (d, J = 8.0 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 540; m/z = 1076 [M-H]-; m/z = 1078 [M+H]+; m/z = 1122 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.23分.
【実施例３】
【０５９６】
ｍＡｂ−Ｅｘ２
前に記載した一般方法を実施例３の製造に使用した。ｈｕ２Ｈ１１＿Ｒ３５−７４（６０ｍｇ）を、実施例２のＤＭＡ中９．９６ｍＭ溶液（１６１μＬ、１．７３３ｍｇ、４当量）と２時間反応させた。この時点で、実施例２の溶液（１２１μＬ、３当量）を加え、媒体を２時間撹拌した。この時点で、実施例２の溶液（１２１μＬ、３当量）を加え、２時間撹拌した。ＤＰＢＳ  ｐＨ６．５＋２０％ＮＭＰ中Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００ｐｇ上で精製し、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５上で濃縮し、緩衝液Ｂ  ｐＨ６．５＋５％ＮＭＰ中ＰＤ−１０上で緩衝液を交換し、Ｓｔｅｒｉｆｌｉｐ上で濾過した後、実施例３（３９．９ｍｇ）を無色透明溶液として２．２８ｍｇ／ｍＬの濃度でＤＡＲ４．６（ＨＲＭＳ）、単量体純度９９％および合計収率６６％にて得た。
【０５９７】
ＳＥＣ−ＨＲＭＳ：図１におけるインタクトＡＤＣのスペクトル；ｍ／ｚ＝１５０３４６（Ｄ１）；ｍ／ｚ＝１５１３０７（Ｄ２）；ｍ／ｚ＝１５２２７４（Ｄ３）；ｍ／ｚ＝１５３２４０（Ｄ４）；ｍ／ｚ＝１５４２００（Ｄ５）；ｍ／ｚ＝１５５１６５（Ｄ６）；ｍ／ｚ＝１５６１３３（Ｄ７）；ｍ／ｚ＝１５７０９５（Ｄ８）。
【０５９８】
実施例４から７：（Ｓ）−３−ネオペンチル−アザ−Ｃ５２のベンジル酸アミン、グルタリル−Ｖａｌ−Ａｌａ−（Ｓ）−３−ネオペンチル−アザ−Ｃ５２ベンジル酸アミンのＮＨＳエステルおよび対応するＡＤＣの合成
【化３０１】
2018535255.tif 000331
【化３０２】
2018535255.tif 000332
【０５９９】
化合物３５：（６Ｒ，１３Ｓ）−（１Ｅ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｅ）−８−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）−３−メチル−８−オキソオクタ−１，６−ジエン−４−イル６−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−２，２，１０，１０−テトラメチル−１３−ネオペンチル−４，７，１１−トリオキソ−３−オキサ−５，８，１２−トリアザテトラデカン−１４−オエート
アルゴン下丸底フラスコ中、フラグメントＢＣ１（１．３２ｇ、３．０８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６０ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（１．５３ｍＬ、９．２５ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（５０３．７５ｍｇ、３．７０ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．４１ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）を加えた。黄色懸濁液を室温で３０分間撹拌し、次いでフラグメントＡＤ２（１．７ｇ、３．０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で２時間撹拌した。この後、ＤＩＥＡ（１．５３ｍＬ）を加え、１時間撹拌した。混合物を１Ｍクエン酸（５０ｍＬ）で中和し、ＡｃＯＥｔ（２×８０ｍＬ）で抽出した。有機層を１Ｍ  ＮａＨＳＯ４、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物３５（１．４７５ｇ）を無色固体として得た（５７％）。
【０６００】
化合物３６：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−５−（（（Ｓ）−２−（３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルプロパンアミド）−４，４−ジメチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（ヒドロキシメチル）−フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエン酸
丸底フラスコ中、化合物３５（１．４７５ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（８ｍＬ、５２．２７ｍｍｏｌ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）を加えた。反応媒体を室温で５時間撹拌した。溶媒を除去した。残留物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）およびＡｃＯＥｔ（２０ｍＬ）で希釈し、室温で２時間２Ｍ  ＮａＯＨ（２ｍＬ）で処理した。有機層を分離し、水層をＡｃＯＥｔ（２×１０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、無色固体１．２４ｇを得た。固体をＡｃＯＥｔ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）に溶解し、室温で２時間２Ｍ  ＮａＯＨ（４００μＬ）で処理した。有機層を分離し、水層をＡｃＯＥｔ（２×１０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物３６（９９０ｍｇ）を白色固体として得た（８２％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80 (s, 9 H); 0.99 (s, 3 H); 1.02 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.05 (s, 3 H); 1.52 (dd, J = 2.0および14.8 Hz, 1 H); 1.69 (dd, J = 9.9および14.8 Hz, 1 H); 2.36〜2.61 (部分的にマスクされたm, 4 H); 2.84 (dd, J = 5.0および13.9 Hz, 1 H); 3.18 (d, J = 7.5 Hz, 2 H); 3.40 (dd, J = 5.1および8.1 Hz, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 4.29 (m, 1 H); 4.45 (s, 2 H); 4.90 (m, 1 H); 5.12 (広幅なm, 1 H); 5.81 (d, J = 15.5 Hz, 1 H); 6.10 (dd, J = 8.4および15.9 Hz, 1 H); 6.40 (d, J = 15.9 Hz, 1 H); 6.70 (td, J = 7.5および15.5 Hz, 1 H); 7.01 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.11 (dd, J = 2.4および8.7 Hz, 1 H); 7.25 (m, 3 H); 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 2 H); 7.72 (t, J = 6.5 Hz, 1 H); 7.79 (d, J = 7.8 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 712 [M-H]-; m/z = 714 [M+H]+; tR = 0.94分.
【０６０１】
化合物３７：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｒ，Ｅ）−４−（４−（ヒドロキシメチル）−フェニル）ブタ−３−エン−２−イル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
アルゴン下、丸底フラスコ中に化合物３６（９９０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）およびＣＨ３ＣＮ（１５０ｍＬ）を導入し、完全に溶解するまで水浴で５０℃にて加熱し、１０分間撹拌した。この後、ＤＩＥＡ（６８７．２０μＬ、４．１６ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２０７．５１ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５７９．７ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間撹拌した。反応媒体を１Ｍクエン酸（３０ｍＬ）で中和した。溶媒を除去し、水層をＡｃＯＥｔ（２×４０ｍＬ）で抽出した。有機層を１Ｍ  ＮａＨＳＯ４、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。粗製の固体をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、１時間撹拌した。固体を濾過し、次いでＡｃＯＥｔで希釈し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、化合物３７とＨＡＴＵとの混合物を得た。固体をＭｅＴＨＦ（５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５０ｍＬ）と共に撹拌した。有機層を分離し、Ｈ２Ｏ（４×２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）により精製して、化合物３７（６８０ｍｇ）を無色固体として得た（７０％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.68 (s, 9 H); 0.98 (s, 3 H); 1.03 (s, 3 H); 1.09 (d, J = 6.9 Hz, 3 H); 1.19 (広幅なd, J = 14.5 Hz, 1 H); 1.58 (dd, J = 10.3および14.5 Hz, 1 H); 2.23 (m, 1 H); 2.52〜2.70 (m, 3 H); 2.86 (広幅なd, J = 12.7
Hz, 1 H); 3.00 (dd, J = 3.3および14.8 Hz, 1 H); 3.22〜3.33 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 4.18 (m, 1 H); 4.42 (m, 1 H); 4.46 (d, J = 6.0 Hz, 2 H); 4.91 (m, 1 H); 5.13 (t, J = 6.0 Hz, 1 H); 5.85 (広幅なd, J = 15.0 Hz, 1 H); 6.05 (dd, J = 8.4および15.9 Hz, 1 H); 6.40 (m, 2 H); 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.18 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 1 H); 7.25 (d, J = 8.5 Hz, 2 H); 7.29 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.31 (d, J = 8.5 Hz, 2 H); 7.42 (d, J = 10.6 Hz, 1 H); 7.94 (d, J = 9.1 Hz, 1 H); 8.41 (d, J = 8.2 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 694 [M-H]-; m/z = 696 [M+H]+; tR = 1.36分.
【０６０２】
化合物３８：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−１６−（（Ｒ，Ｅ）−４−（４−（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）ブタ−３−エン−２−イル）−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
アルゴン下０℃で丸底フラスコ中、化合物３７（６８０ｍｇ、０．９７６ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）中溶液に、１Ｈ−イミダゾール（３０５．８４ｍｇ、４．４９ｍｍｏｌ）およびクロロトリイソプロピルシラン（４８０．１３μｌ、２．２５ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で５時間撹拌し、次いで飽和ＮＨ４ＣｌおよびＭＴＢＥ（３０ｍＬ）で希釈した。有機層を１Ｍ  ＮａＨＳＯ４、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、化合物３８（９７０ｍｇ）をオレンジ色非晶性固体として得た（定量的）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.63 (s, 9 H); 0.87〜1.17 (m, 31 H); 1.53 (dd, J = 10.9および14.3 Hz, 1 H); 2.22 (m, 1 H); 2.51〜2.70 (m, 3 H); 2.86 (広幅なd, J = 13.0 Hz, 1 H); 3.00 (dd, J = 3.2および14.9 Hz, 1 H); 3.24〜3.35 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 4.18 (m, 1 H); 4.41 (m, 1 H); 4.76 (s, 2 H); 4.91 (m, 1 H); 5.87 (広幅なd, J = 15.4 Hz, 1 H); 6.06 (dd, J = 8.9および15.9 Hz, 1 H); 6.40 (m, 2 H); 7.03 (d, J = 8.5 Hz, 1 H); 7.18 (広幅なd, J = 8.5 Hz, 1 H); 7.25 (d, J = 8.3 Hz, 2 H); 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 2 H); 7.30 (広幅なs, 1 H); 7.42 (d, J = 10.5 Hz, 1 H); 7.93 (d, J = 9.2 Hz, 1 H); 8.42 (d, J = 8.1 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 850 [M-H]-; m/z = 852 [M+H]+; m/z = 896 [M-H+HCO2H]-; tR = 2.15分.
【実施例４】
【０６０３】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（ヒドロキシ−メチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
実施例４を２工程で製造した。
工程１：アルゴン下丸底フラスコ中、化合物３８（８３２ｍｇ、０．９７６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液に、ｍ−ＣＰＢＡ（３３９．１５ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）を３回で加えた。反応混合物を室温で５０時間撹拌し、次いでＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）およびＮａ２Ｓ２Ｏ３（３０ｍＬ）と共に１５分間撹拌した。有機層を分離し、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、αおよびβエポキシドの混合物１．１ｇを無色泡状物として得た（定量的）。
【０６０４】
工程２：αおよびβエポキシドの混合物をＴＨＦ（３０ｍＬ）に希釈し、１Ｍ  ＴＢＡＦ（９５２．３２μＬ）を加えた。２時間撹拌した後、ＴＢＡＦ（９５２μＬ）を加えた。１時間撹拌した後、混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＡｃＯＥｔ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、αおよびβエポキシドの混合物７７０ｍｇを黄色固体として得た（定量的）。αおよびβエポキシドをキラル液体クロマトグラフィーにより分離し、これは７５：２５ヘプタン／ＥｔＯＨでの定組成溶離を使用し、１０μｍのＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ（１．１ｋｇ、アミローストリス−３，５−ジメチルフェニルカルバメートをシリカゲル担体上に被覆、Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｅｕｒｏｐｅ）でパックした７６×３５０ｍｍカラム上で行った。濃縮後、実施例４（１９０ｍｇ）を白色固体として得（３１％）、αエポキシド１２５ｍｇを白色固体として得た（２０％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.81 (s, 9 H); 0.98 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.05 (s, 3 H); 1.26 (m, 1 H); 1.71 (dd, J = 10.4および14.5 Hz, 1 H); 1.82 (m, 1 H); 2.26 (m, 1 H); 2.52 (m, 2 H); 2.84 (d, J = 12.8 Hz, 1 H); 2.92 (dd, J = 2.1および7.8 Hz, 1 H); 3.00 (dd, J = 3.1および14.5 Hz, 1 H); 3.24〜3.36 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.81 (s, 3 H); 3.90 (d, J = 2.1 Hz, 1 H); 4.17 (ddd, J = 3.4, 8.0および11.7 Hz, 1 H); 4.42 (m, 1 H); 4.50 (d, J = 6.0 Hz, 2 H); 5.10 (m, 1 H); 5.20 (t, J = 6.0 Hz, 1 H); 5.79 (dd, J = 1.8および15.4 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 3.8, 11.5および15.4 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.1および8.6 Hz, 1 H); 7.26 (d, J = 8.3 Hz, 2 H); 7.29 (d, J = 2.1 Hz, 1 H); 7.32 (d, J = 8.3 Hz, 2 H); 7.41 (d, J = 10.3 Hz, 1 H); 8.02 (d, J = 9.2 Hz, 1 H); 8.38 (d, J = 8.2 Hz, 1H). LCMS (A1): ES m/z = 710 [M-H]-; m/z = 712 [M+H]+; tR = 1.28分.
【０６０５】
化合物３９：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アジドメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
アルゴン下丸底フラスコ中、実施例４（１００ｍｇ、１４０μｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液に、ＤＰＰＡ（１５６．８２μｌ、７０１．９８μｍｏｌ）およびＤＢＵ（１１０．２２μｌ、７０１．９８μｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で６時間撹拌し、次いでＨ２Ｏで希釈し、ＡｃＯＥｔ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１５ｇ（ＤＣＭ／ｉＰｒＯＨの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物３９（１００ｍｇ）を白色固体として得た（４０％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80 (s, 9 H); 0.97 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.04 (s, 3 H); 1.28 (d, J = 14.5 Hz, 1 H); 1.69 (dd, J = 10.7および14.5 Hz, 1 H); 1.84 (m, 1 H); 2.28 (m, 1 H); 2.62 (m, 2 H); 2.84 (d, J = 12.8 Hz, 1 H); 2.93〜3.03 (m, 2 H); 3.22〜3.34 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.92 (広幅なs, 1 H); 4.17 (m, 1 H); 4.40〜4.49 (m, 3 H); 5.10 (m, 1 H); 5.80 (d, J = 15.8 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 3.8, 11.7および15.8 Hz, 1 H); 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 1 H); 7.28 (d, J = 2.1 Hz, 1 H); 7.32 (d, J = 8.3 Hz, 2 H); 7.39 (d, J = 8.3 Hz, 2 H); 7.41 (m, 1 H); 8.00 (d, J = 9.1 Hz, 1 H); 8.36 (d, J = 8.2 Hz, 1H). LCMS (A1): ES m/z = 735 [M-H]-; m/z = 737 [M+H]+; tR = 1.54分.
【実施例５】
【０６０６】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アミノメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
丸底フラスコ中、化合物３９（１００ｍｇ、１２２．０７μｍｏｌ）のＤＣＭ（２．５ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２．５ｍＬ）中溶液に、ＴＣＥＰ（３８．８８ｍｇ、１３４．２８μｍｏｌ）のＨ２Ｏ（５００μＬ）中溶液を滴下添加した。反応媒体を室温で２４時間撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏおよび飽和ＮａＨＣＯ３で希釈し、ＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、実施例５（７３ｍｇ）を白色固体として得（８４％）、更には精製せずに次の工程に使用した。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.82 (s, 9 H); 0.97 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.
0 Hz, 3 H); 1.04 (s, 3 H); 1.29 (d, J = 14.4 Hz, 1 H); 1.70 (dd, J = 10.2および14.4 Hz, 1 H); 1.80 (m, 1 H); 2.02 (広幅なm, 2 H); 2.25 (m, 1 H); 2.62 (m, 2 H); 2.83 (d, J = 13.0 Hz, 1 H); 2.93 (dd, J = 2.2および7.8 Hz, 1 H); 2.99 (dd, J = 3.4および14.5 Hz, 1 H); 3.23〜3.35 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.71 (s, 2 H); 3.80 (s, 3 H); 3.88 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 4.17 (ddd, J = 3.5, 8.5および11.5 Hz, 1 H); 4.41 (m, 1 H); 5.09 (m, 1 H); 5.79 (d, J = 15.7 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 3.7, 11.4および15.7 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1 H); 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.28 (d, J = 2.3 Hz, 1 H); 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.40 (d, J = 10.3, 1 H); 8.02 (d, J = 8.9 Hz, 1 H); 8.38 (d, J = 8.2 Hz, 1H). LCMS (A1): ES m/z = 709 [M-H]-; m/z = 711 [M+H]+; tR = 0.86分.
【０６０７】
化合物４０：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート
アルゴン下、丸底フラスコ中に実施例５（７３ｍｇ、８２．１０μｍｏｌ）およびＤＭＦ（１ｍＬ）を、続いてＦｍｏｃＶａｌＡｌａ（５０．５５ｍｇ、１２３．１６μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１７．７５ｍｇ、１３１．３７μｍｏｌ）、ＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＥＤＣ（１４．５３μｌ、８２．１０μｍｏｌ）を導入した。溶液を室温で４時間撹拌し、次いでＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１５ｇ（ＤＣＭ／ｉＰｒＯＨの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物４０（９０ｍｇ）を無色固体として得た（９９％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80 (s, 9 H); 0.84 (d, J = 7.1 Hz, 3 H); 0.86 (d, J = 7.1 Hz, 3 H); 0.93 (s, 3 H); 1.02 (d, J = 7.1 Hz, 3 H); 1.04 (s, 3 H); 1.24 (d, J = 7.3 Hz, 3 H); 1.29 (d, J = 14.5 Hz, 1 H); 1.70 (dd, J = 10.5および14.5 Hz, 1 H); 1.81 (m, 1 H); 1.99 (m, 1 H); 2.25 (m, 1 H); 2.60 (m, 2 H); 2.82 (d, J = 13.0 Hz, 1 H); 2.91 (dd, J = 1.9および7.6 Hz, 1 H); 2.99 (dd, J = 3.4および14.5 Hz, 1 H); 3.29 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.88 (d, J = 1.9 Hz, 1 H); 3.90 (m, 1 H); 4.16 (ddd, J = 3.4, 8.0および11.8 Hz, 1 H); 4.20〜4.35 (m, 6 H); 4.41 (m, 1 H); 5.09 (m, 1 H); 5.79 (d, J = 15.7 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 3.7, 11.6および15.7 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.15 (dd, J = 2.5および8.6 Hz, 1 H); 7.21 (d, J = 8.5 Hz, 2 H); 7.24 (d, J = 8.5 Hz, 2 H); 7.28 (d, J = 2.5 Hz, 1 H); 7.32 (t, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.38〜7.47 (m, 4 H); 7.73 (t, J = 7.9 Hz, 2 H); 7.89 (d, J = 7.9 Hz, 2 H); 8.03 (d, J = 9.1 Hz, 1 H); 8.05 (d, J = 7.9 Hz, 1 H); 8.39 (m, 2 H). LCMS (A1): ES m/z = 1103 [M+H]+; m/z = 1147 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.71分.
【０６０８】
化合物４１：（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）−３−メチルブタンアミド
アルゴン下、丸底フラスコ中にＤＣＭ（５ｍＬ）中の化合物４０（１０４ｍｇ、７６．６５μｍｏｌ）を、続いてピペリジン（１３８．８７μｌ、１．４０ｍｍｏｌ）を導入した。溶液を室温で５時間撹拌し、次いで濃縮し、シリカゲル１０ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物４１（５０ｍｇ）を無色固体として得た（６０％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.76 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.81 (s, 9 H); 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.97 (s, 3 H); 1.02 (d, J = 7.1 Hz, 3 H); 1.04 (s, 3 H); 1.22 (d, J = 7.3 Hz, 3 H); 1.29 (d, J = 14.6 Hz, 1 H); 1.66 (広幅なm, 2 H); 1.70 (dd, J = 10.6および14.6 Hz, 1 H); 1.81 (m, 1 H); 1.92 (m, 1 H); 2.25 (m, 1 H); 2.60 (m, 2 H); 2.83 (d, J = 13.0 Hz, 1 H); 2.93 (dd, J = 1.9および7.4 Hz, 1 H); 2.99 (m, 2 H); 3.28 (dd, J = 10.4および13.0 Hz, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.89 (d, J = 1.9 Hz, 1 H); 4.16 (ddd, J = 3.2および8.2および11.8 Hz, 1 H); 4.29 (d, J = 6.0 Hz, 2 H); 4.34 (m, 1 H); 4.41 (m, 1 H); 5.09 (m, 1 H); 5.79 (dd, J = 1.7および15.5 Hz, 1 H); 6.38 (ddd, J = 3.8, 11.3および15.5 Hz, 1 H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 1 H); 7.25 (m, 4 H); 7.29 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 7.40 (d, J = 10.4 Hz, 1 H); 8.02 (d, J = 9.1 Hz, 1 H); 8.08 (大きなd, J = 7.7 Hz, 1 H); 8.39 (d, J = 8.2 Hz, 1 H); 8.45 (t, J = 6.0 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 441 [M+2H]2+; m/z = 879 [M-H]-; m/z = 881 [M+H]+; m/z = 925 [M-H+HCO2H]-; tR = 0.99分.
【０６０９】
化合物４２：５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシ−ベンジル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタン酸
アルゴン下、丸底フラスコ中にＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物４１（５０ｍｇ、５１．０５μｍｏｌ）を、続いてグルタル酸無水物（１０．４８ｍｇ、９１．８９μｍｏｌ）を導入した。反応媒体を室温で２時間撹拌し、濃縮し、シリカゲル１０ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物４２（４２ｍｇ）を無色固体として得た（８２％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80 (s, 9 H); 0.82 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.85 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.97 (s, 3 H); 1.02 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.04 (s, 3 H); 1.23 (d, J = 7.2 Hz, 3 H); 1.29 (d, J = 14.2 Hz, 1 H); 1.70 (m, 3 H); 1.81 (m, 1 H); 1.96 (m, 1 H); 2.18〜2.25 (m, 5 H); 2.61 (m, 2 H); 2.83 (d, J = 13.0 Hz, 1 H); 2.93 (dd, J = 2.0および7.4 Hz, 1 H); 3.00 (dd, J = 3.1および14.5 Hz, 1 H); 3.29 (dd, J = 10.4および13.0 Hz, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.89 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 4.16 (m, 2 H); 4.25〜4.31 (m, 3 H); 4.42 (m, 1 H); 5.09 (m, 1 H); 5.79 (dd, J = 1.9および15.5 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 3.8, 11.6および15.5 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.15 (dd, J = 2.1および8.7 Hz, 1 H); 7.23 (m, 4 H); 7.28 (d, J = 2.1 Hz, 1 H); 7.40 (d, J = 10.4 Hz, 1 H); 7.83 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 8.02 (m, 2 H); 8.35 (t, J = 6.1 Hz, 1 H); 8.39 (d, J = 8.0 Hz, 1 H); 12.04 (広幅なm, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 498 [M+2H]2+; m/z = 993 [M-H]-; m/z = 995 [M+H]+; tR = 1.27分.
【実施例６】
【０６１０】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６−ジメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタノエート
アルゴン下、丸底フラスコ中にＤＣＭ（５ｍＬ）中の化合物４２（２３ｍｇ、２３．１０μｍｏｌ）を、続いてＤＳＣ（８．２９ｍｇ、３２．３４μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５．６３μＬ、３２．３４μｍｏｌ）を導入した。反応媒体を室温で２時間撹拌した。この後、ＤＳＣ（２ｍｇ）、ＤＩＥＡ（１μＬ）およびＤＣＭ（２ｍＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。溶媒を除去し、粗製の残留物をシリカゲル１０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ｉＰｒＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、実施例６（２０ｍｇ）を無色固体として得た（７９％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80 (s, 9 H); 0.82 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.85 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.97 (s, 3 H); 1.02 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.04 (s, 3 H); 1.23 (d, J = 7.2 Hz, 3 H); 1.30 (d, J = 14.2 Hz, 1 H); 1.70 (dd, J = 10.7および14.7 Hz, 1 H); 1.81 (m, 3 H); 1.97 (m, 1 H); 2.21〜2.32 (m, 3 H); 2.61 (m, 2 H); 2.68 (t, J = 7.8 Hz, 2 H); 2.80 (広幅なs, 4 H); 2.83 (d, J = 13.0 Hz, 1 H); 2.94 (dd, J = 2.0および7.6 Hz, 1 H); 3.00 (dd, J = 3.4および14.9 Hz, 1 H); 3.28 (dd, J = 10.5および13.0 Hz, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.88 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 4.16 (m, 2 H); 4.23〜4.31 (m, 3 H); 4.42 (m, 1 H); 5.10 (m, 1 H); 5.79 (dd, J = 1.9および15.3 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 3.8, 11.4および15.3 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.8 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.2および8.8 Hz, 1 H); 7.23 (m, 4 H); 7.28 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 7.40 (d, J = 10.5 Hz, 1 H); 7.89 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 8.02 (d, J = 9.1 Hz, 1 H); 8.06 (d, J = 7.5 Hz, 1 H); 8.34 (t, J = 6.1 Hz, 1 H); 8.39 (d, J = 8.1 Hz, 1 H).  LCMS (A1): ES m/z = 546.5 [M+2H]2+; m/z = 1090 [M-H]-; m/z = 1092 [M+H]+; m/z = 1136 [M-H+HCO2H]-; tR= 1.34分.
【実施例７】
【０６１１】
ｍＡｂ−Ｅｘ６
前に記載した一般方法を実施例７の製造に使用した。ｈｕ２Ｈ１１＿Ｒ３５−７４（６０ｍｇ）を、実施例６のＤＭＡ中１０．６ｍＭ溶液（２３３μＬ、５当量）と２時間反応させた。ＤＰＢＳ  ｐＨ６．５＋２０％ＮＭＰ中Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００ｐｇ上で精製し、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５上で濃縮し、緩衝液Ｂ  ｐＨ６．５＋５％ＮＭＰ中ＮＡＰ−２５上で緩衝液を交換し、Ｓｔｅｒｉｆｌｉｐ上で濾過した後、実施例７（３９ｍｇ）を無色透明溶液として１．９８ｍｇ／ｍＬの濃度でＤＡＲ４．１（ＨＲＭＳ）、単量体純度１００％および合計収率６６％にて得た。
【０６１２】
ＳＥＣ−ＨＲＭＳ：図２におけるインタクトＡＤＣのスペクトル；ｍ／ｚ＝１４９３７０（ネイキッドｍＡｂ）；ｍ／ｚ＝１５０３５７（Ｄ１）；ｍ／ｚ＝１５１３３０（Ｄ２）；ｍ／ｚ＝１５２３０７（Ｄ３）；ｍ／ｚ＝１５３２８５（Ｄ４）；ｍ／ｚ＝１５４２６２（Ｄ５）；ｍ／ｚ＝１５５２３８（Ｄ６）；ｍ／ｚ＝１５６２２２（Ｄ７）。
【０６１３】
実施例８から１０：７−Ｍｅ−アザ−Ｃ５２ステレオマー１のベンジル酸アミン、グルタリル−Ｖａｌ−Ａｌａ−７−Ｍｅ−アザ−Ｃ５２ベンジル酸アミンステレオマー１のＮＨＳエステルおよび対応するＡＤＣの合成
【化３０３】
2018535255.tif 000333
【０６１４】
化合物４３：（６Ｒ，１３Ｓ）−（１Ｅ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｅ）−１−（４−（アジドメチル）フェニル）−８−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−メチル−８−オキソオクタ−１，６−ジエン−４−イル６−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１３−イソブチル−２，２，９，１０，１０−ペンタメチル−４，７，１１−トリオキソ−３−オキサ−５，８，１２−トリアザテトラデカン−１４−オエート
アルゴン下、丸底フラスコ中にＤＭＦ（５ｍＬ）中のフラグメントＢＣ２（１．１０ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）を、続いてＨＡＴＵ（９５０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３４０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を導入した。混合物を室温で３０分間撹拌し、次いでフラグメントＡＤ１（１．２４ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．２ｍＬ、６．８７ｍｍｏｌ）を加えた。黄色溶液を室温で１６時間撹拌し、Ｈ２Ｏでクエンチし、ＡｃＯＥｔ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層をＨ２Ｏ、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル２００ｇ（ヘプタン／ＡｃＯＥｔの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物４３（１．５５ｇ）を白色メレンゲ状物として得た（７７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 55/45 ジアステレオ異性体混合物; 0.82〜0.89 (m, 6 H); 0.85 (d, J = 7.0 Hz, 1.65 H); 0.91 (d, J = 7.0 Hz, 1.35 H); 0.99〜1.09 (m, 9 H); 1.30 (s, 9 H); 1.40 (s, 10 H); 1.50〜1.70 (m, 2 H); 2.38〜2.59 (部分的にマスクされたm, 3 H); 2.68 (m, 1 H); 2.84 (m, 1 H); 3.79 (s, 1.35 H); 3.81 (s, 1.65 H); 4.00〜4.18 (m, 2 H); 4.30 (m, 1 H); 4.40 (広幅なs, 2 H); 4.92 (m, 1 H);
5.81 (d, J = 15.7 Hz, 1 H); 6.18 (dd, J = 8.3および16.1 Hz, 1 H); 6.45 (d, J = 16.1 Hz, 1 H); 6.71 (td, J = 7.3および15.7 Hz, 1 H); 6.94 (d, J = 8.1 Hz, 0.45 H); 6.96 (d, J = 8.1 Hz, 0.55 H); 7.04 (分割されたd, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.19 (広幅なd, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.30 (d, J = 7.8 Hz, 2 H); 7.32 (広幅なs, 1 H); 7.41 (d, J = 8.7 Hz, 2 H); 7.52 (d, J = 10.1 Hz, 0.45 H); 7.59 (d, J = 10.1 Hz, 0.55 H); 7.74 (m, 1 H). LCMS (A1): 55/45 ジアステレオ異性体混合物; ES m/z = 895 [M+H]+; m/z = 917 [M+Na]+; tR = 6.94-6.98分.
【０６１５】
化合物４４および４５：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｒ，Ｅ）−４−（４−（アジドメチル）フェニル）ブタ−３−エン−２−イル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
化合物４４および４５を２工程で得た。
工程１：０℃で丸底フラスコ中、化合物４３（１．５０ｇ、１．６７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１１ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（２．６ｍＬ、３４．６５ｍｍｏｌ）およびＨ２Ｏ（１００μＬ）を加えた。混合物を０℃で１５分間および室温で６．５時間撹拌した。次いで反応媒体を真空で蒸発させ、トルエンの存在下で共蒸発させて、脱保護中間体１．７ｇをオレンジ色固体として得た。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 55/45 ジアステレオ異性体混合物; 0.70〜0.80 (m, 7.65 H); 0.90 (s, 1.35 H); 0.95 (m, 3 H); 1.01〜1.09 (m, 6 H); 1.38〜1.68 (m, 3 H); 2.40〜2.60 (部分的にマスクされたm, 3 H); 2.80〜3.02 (m, 2 H); 3.81 (s, 1.35 H); 3.82 (s, 1.65 H); 3.96〜4.08 (m, 1 H); 4.18 (m, 1 H); 4.28 (m, 1 H); 4.41 (s, 2 H); 4.91 (m, 1 H); 5.83 (d, J = 15.7 Hz, 0.45 H); 5.85 (d, J = 15.7 Hz, 0.55 H); 6.18 (m, 1 H); 6.43 (d, J = 16.1 Hz, 0.45 H); 6.46 (d, J = 16.1 Hz, 0.55 H); 6.74 (m, 1 H); 7.08〜7.20 (m, 2 H); 7.30 (マスクされたm, 0.45 H); 7.32 (d, J = 7.8 Hz, 2 H); 7.37 (d, J = 2.0 Hz, 0.55 H); 7.42 (m, 2 H); 7.76 (d, J = 8.00 Hz, 0.45 H); 7.79 (d, J = 8.00 Hz, 0.55 H); 7.86 (d, J = 10.1 Hz, 0.55 H); 8.00 (d, J = 10.1 Hz, 0.45 H); 8.11 (広幅なm, 3 H); 12.22 (広幅なm, 1 H). LCMS (A1): 55/45 ジアステレオ異性体混合物; ES m/z = 737 [M-H]-; m/z = 739 [M+H]+; tR = 1.07-1.09分.
【０６１６】
工程２：丸底フラスコ中、脱保護中間体（１．４３ｇ、１．６８ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（２５ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（３ｍＬ、１６．２３ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（２５０．９１ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（７００．９１ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。次いで溶媒を除去し、媒体をＡｃＯＥｔ（２００ｍＬ）で希釈し、０．５Ｍクエン酸およびＨＣｌで中和した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＳＯ３、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１００ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物４４および４５（６４０ｍｇ）を黄色固体として得た（５３％）。
【０６１７】
Ｃ７でのジアステレオ異性体をキラル液体クロマトグラフィーにより分離し、これは５０：５０ヘプタン／ＥｔＯＨでの定組成溶離を使用する１０μｍのＷｈｅｌｋ  ０１  ＳＳ（１．１ｋｇ、４−（３，５−ジニトロベンズアミド）テトラヒドロフェナントレン、Ｒｅｇｉｓ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）でパックした７６．５×３５０ｍｍカラム上で行った。濃縮後、化合物４４（２１０ｍｇ、ステレオマー１）を白色固体として得（１７％）、化合物４５（２３６ｍｇ、ステレオマー２）を白色固体として得た（１９％）。
【０６１８】
化合物４４（ステレオマー１）：
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.60 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.62 (d, J = 6.7 Hz, 3 H);  0.98 (s, 3 H); 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.10 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.14 (s, 3 H); 1.18 (m, 1 H); 1.40〜1.54 (m, 2 H); 2.24 (m, 1 H); 2.48〜2.61 (部分的にマスクされたm, 2 H); 2.65 (dd, J = 11.8および14.5 Hz, 1 H); 3.04 (dd, J = 3.2および14.5 Hz, 1 H); 3.55 (m, 1 H); 3.81 (s, 3 H); 4.19 (m, 2 H); 4.40 (s, 2 H); 4.96 (m, 1 H); 5.91 (dd, J = 1.4および15.5 Hz, 1 H); 6.13 (dd, J = 8.9および16.1 Hz, 1 H); 6.40 (ddd, J = 3.9, 11.3および15.5 Hz, 1 H); 6.46 (d, J = 16.1 Hz, 1 H); 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.19 (dd, J = 2.1および8.7 Hz, 1 H); 7.30 (d, J = 2.1 Hz, 1 H); 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.87 (d, J = 8.9 Hz, 1 H); 8.36 (d, J = 9.9 Hz, 1 H); 8.40 (d, J = 8.0 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 719 [M-H]-; m/z = 721 [M+H]+; tR = 1.61分
化合物４５（ステレオマー２）：
RMN 1H (δ ppm, DMSO-d6): 0.59 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.67 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.88 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 1.03 (s, 3 H); 1.10 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.19 (s, 3 H); 1.21 (m, 1 H); 1.49〜1.60 (m, 2 H); 2.23 (m, 1 H); 2.46〜2.61 (部分的にマスクされたm, 2 H); 2.71 (dd, J = 11.3および14.5 Hz, 1 H); 2.98 (dd, J = 3.7および14.5 Hz, 1 H); 3.48 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 4.05 (m, 1 H); 4.11 (ddd, J = 3.7, 7.6および11.3 Hz, 1 H); 4.40 (s, 2 H); 4.90 (m, 1 H); 5.93 (d, J = 15.7 Hz, 1 H); 6.14 (dd, J = 8.7および16.1 Hz, 1 H); 6.47 (d, J = 16.1 Hz, 1 H); 6.51 (ddd, J = 5.2, 10.3および15.5 Hz, 1 H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.21 (dd, J = 2.4および8.7 Hz, 1 H); 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.37 (d, J = 2.4 Hz, 2 H); 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.87 (d, J = 6.9 Hz, 1 H); 7.89 (d, J = 9.0 Hz, 1 H); 8.51 (d, J = 7.6 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 719 [M-H]-; m/z = 721 [M+H]+; tR = 1.61分.
【０６１９】
化合物４６：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（３−（４−（アジドメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
０℃でアルゴン下丸底フラスコ中、化合物４４（１５４ｍｇ、２１３．５１μｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液に、ｍ−ＣＰＢＡ（８０ｍｇ、３２４．５１μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で５日間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１５ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（６ｍＬ）およびＮａ２Ｓ２Ｏ３（６ｍＬ）と共に１５分間撹拌した。有機層を分離し、飽和ブライン（２×３ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、化合物４６（１５０ｍｇ）を白色固体として得た（定量的）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 60/40 ジアステレオ異性体混合物; 0.75 (d, J = 6.8 Hz, 1.8 H); 0.79 (d, J = 6.8 Hz, 3 H); 0.85 (d, J = 6.8 Hz, 1.2 H); 0.95〜0.99 (m, 4.2 H); 1.02〜1.09 (m, 4.8 H); 1.15 (s, 1.8 H); 1.18 (s, 1.2 H); 1.20 (m, 0.6 H); 1.38 (m, 0.4 H); 1.59〜1.62 (m, 2 H); 1.80 (m, 0.6 H); 1.89 (m, 0.4 H); 2.25 (m, 0.6 H); 2.40〜2.71 (部分的にマスクされたm, 2.4 H); 2.96〜3.08 (m, 2 H); 3.54 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.82 (d, J = 1.9 Hz, 0.4 H); 3.92 (d, J = 1.9 Hz, 0.6 H); 4.14〜4.29 (m, 2 H); 4.40〜4.50 (m, 2 H); 5.11 (m, 1 H); 5.85 (dd, J = 2.0および15.5 Hz, 0.6 H); 5.95 (dd, J = 2.0および15.5 Hz, 0.4 H); 6.38 (m, 1 H); 7.04 (分割されたd, J = 8.8 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.2および8.8 Hz, 0.6 H); 7.19 (dd, J = 2.2および8.8 Hz, 0.4 H); 7.28 (d, J = 2.2 Hz, 0.6 H); 7.30 (d, J = 2.2 Hz, 0.4 H); 7.30〜7.40 (m, 4 H); 7.89 (d, J = 8.1 Hz, 0.6 H); 7.92 (d, J = 8.1 Hz, 0.4 H); 8.29 (d, J = 10.0 Hz, 0.6 H); 8.32 (d, J = 8.1 Hz, 0.6 H); 8.35 (d, J = 10.0 Hz, 0.4 H); 8.40 (d, J = 8.1 Hz, 0.4 H). LCMS (A1): ES m/z = 735 [M-H]-; m/z = 737 [M+H]+; tR = 1.52分.
【実施例８】
【０６２０】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
０℃で丸底フラスコ中、化合物４６（６０ｍｇ、８１．３８μｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）およびＭｅＯＨ（３ｍＬ）中溶液に、ＴＣＥＰ（３８．９ｍｇ、１３４．３μｍｏｌ）のＨ２Ｏ（１ｍＬ）中溶液を滴下添加した。反応混合物を室温で３５時間撹拌し、次いでＤＣＭ（１５ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３で希釈した。１０分間撹拌した後、有機層を分離し、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル５ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）上で精製して、実施例８（２３ｍｇ）を白色固体として得た（４０％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 60/40 ジアステレオ異性体混合物; 0.77 (d, J = 7.0 Hz, 1.8 H); 0.81 (分割されたd, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 1.4 H); 0.95 (d, J = 7.0 Hz, 1.2 H); 0.98 (s, 1.8 H); 1.00 (s, 1.2 H); 1.02〜1.09 (m, 4.8 H); 1.17 (s, 1.8 H); 1.19 (s, 1.2 H); 1.22 (m, 0.6 H); 1.40 (m, 0.4 H); 1.51〜1.64 (m, 2 H); 1.78 (m, 0.6 H); 1.89 (m, 0.4 H); 2.28 (m, 0.6 H); 2.40〜2.71 (部分的にマスクされたm, 2.4 H); 2.96 (dd, J = 2.2および7.5 Hz, 0.6 H); 2.99 (dd, J = 2.2および7.5 Hz, 0.4 H); 3.03 (m, 1 H); 3.55 (m, 1 H); 3.70 (s, 1.2 H); 3.72 (s, 1.8 H); 3.78 (d, J = 2.2 Hz, 0.4 H); 3.81 (s, 3 H); 3.88 (d, J = 2.2 Hz, 0.6 H); 4.12〜4.30 (m, 2 H); 5.12 (m, 1 H); 5.84 (dd, J = 1.8および15.6 Hz, 0.6 H); 5.96 (dd, J = 1.8および15.6 Hz, 0.4 H); 6.39 (m, 1 H); 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.16〜7.38 (m, 6 H); 7.90 (d, J = 8.1 Hz, 0.6 H); 7.93 (d, J = 8.1 Hz, 0.4 H); 8.28 (d, J = 10.0 Hz, 0.6 H); 8.32 (d, J = 8.1 Hz, 0.6 H); 8.37 (d, J = 10.0 Hz, 0.4 H); 8.41 (d, J = 8.1 Hz, 0.4 H). LCMS (A1): ES m/z = 709 [M-H]-; m/z = 711 [M+H]+; tR = 0.86分.
【０６２１】
化合物４７：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート
アルゴン下、丸底フラスコ中に実施例８（１１０ｍｇ、１５４．６５μｍｏｌ）およびＤＭＦ（２ｍＬ）を、続いてＦｍｏｃＶａｌＡｌａ（９０ｍｇ、２１９μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３０ｍｇ、２２２μｍｏｌ）、ＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＥＤＣ（３５μｌ、１９７．５２μｍｏｌ）を導入した。溶液を室温で３時間３０分撹拌し、次いでＨ２Ｏ（１０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（３×１０ｍＬ）により抽出した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、トルエンの存在下で濃縮し、シリカゲル１５ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物４７（４９ｍｇ）を白色固体として得た（４６％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 60/40 ジアステレオ異性体混合物; 0.76 (d, J = 7.0 Hz, 1.8 H); 0.80 (m, 3 H); 0.82〜0.89 (m, 6.4 H); 0.95 (d, J = 7.0 Hz, 1.2 H); 0.98 (s, 1.8 H); 1.00 (s, 1.2 H); 1.02〜1.09 (m, 4.8 H); 1.17 (s, 1.8 H); 1.19 (s, 1.2 H); 1.20〜1.32 (m, 3.6 H); 1.40 (m, 0.4 H); 1.51〜1.63 (m, 2 H); 1.78 (m, 0.6 H); 1.85 (m, 0.4 H); 2.00 (m, 1 H); 2.27 (m, 0.6 H); 2.40〜2.72 (部分的にマスクされたm, 2.4 H); 2.96 (m, 1 H); 3.04 (m, 1 H); 3.55 (m, 1 H); 3.77 (d, J = 2.2 Hz, 0.4 H); 3.81 (s, 3 H); 3.88 (d, J = 2.2 Hz, 0.6 H); 3.90 (m, 1 H); 4.15〜4.38 (m, 6 H); 5.12 (m, 1 H); 5.85 (dd, J = 1.8および15.6 Hz, 0.6 H); 5.95 (dd, J = 1.8および15.6 Hz, 0.4 H); 6.39 (m, 1 H); 7.05 (分割されたd, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.15〜7.48 (m, 19 H); 7.73 (t, J = 8.1 Hz, 2 H); 7.90 (d, J = 8.1 Hz, 2.6 H); 7.92 (d, J = 8.1 Hz, 0.4 H); 8.05 (d, J = 8.1 Hz, 1 H); 8.25〜8.45 (m, 3 H).
LCMS (A1): ES m/z = 552 [M+2H]2+; m/z = 1103 [M+H]+; m/z = 1147 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.55-1.57分.
【０６２２】
化合物４８：（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（２Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（１Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）−３−メチルブタンアミド
丸底フラスコ中、ピペリジン（６０μＬ、６００．６μｍｏｌ）を、化合物４７（５０ｍｇ、４５．３０μｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に加えた。得られた混合物を室温で２４時間撹拌し、真空で濃縮し、シリカゲル５ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）上で精製して、αおよびβエポキシド７０ｍｇを得た。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 60/40 ジアステレオ異性体混合物; 0.75 (d, J = 7.0 Hz, 1.8 H); 0.80 (m, 3 H); 0.82〜0.92 (m, 6.4 H); 0.96 (d, J = 7.0 Hz, 1.2 H); 0.98 (s, 1.8 H); 1.00 (s, 1.2 H); 1.02〜1.09 (m, 4.8 H); 1.15 (s, 1.8 H); 1.19 (s, 1.2 H); 1.20〜1.42 (m, 4 H); 1.50〜1.70 (マスクされたm, 2 H); 1.78 (m, 0.6 H); 1.85 (m, 0.4 H); 2.00 (m, 1 H); 2.25 (m, 0.6 H); 2.40〜2.72 (部分的にマスクされたm, 2.4 H); 2.92〜3.08 (m, 3 H); 3.54 (m, 1 H); 3.79 (d, J = 2.1 Hz, 0.4 H); 3.81 (s, 3 H); 3.88 (d, J = 2.1 Hz, 0.6 H); 4.13〜4.41 (m, 6 H); 5.12 (m, 1 H); 5.85 (d, J = 15.4 Hz, 0.6 H); 5.93 (d, J = 15.4 Hz, 0.4 H); 6.38 (m, 1 H); 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.15〜7.32 (m, 6 H); 7.90 (d, J = 8.3 Hz, 0.6 H); 7.93 (d, J = 8.3 Hz, 0.4 H); 8.10〜8.55 (m, 7 H). LCMS (A1): ES m/z = 441 [M+2H]2+; m/z = 879 [M-H]-; m/z = 881 [M+H]+; m/z = 925 [M-H+HCO2H]-; tR = 0.92分.
【０６２３】
αおよびβエポキシドをキラル液体クロマトグラフィーにより分離し、これは７０：３０ヘプタン／ＥｔＯＨでの定組成溶離を使用する１０μｍのＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ（１．１ｋｇ、アミローストリス−３，５−ジメチルフェニルカルバメートをシリカゲル担体上に被覆、Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｅｕｒｏｐｅ）でパックされた７６×３５０ｍｍカラム上で行った。濃縮後、化合物４８（２８ｍｇ）を白色固体（７０％）として得、αエポキシド１９ｍｇを白色固体として得た。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.75 (d, J = 7.0 Hz, 6 H); 0.80 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.98 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 6 H); 1.17 (s, 3 H); 1.23 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.35 (m, 1 H); 1.50〜1.68 (m, 2 H); 1.78 (m, 1 H); 1.91 (m, 1 H); 2.26 (m, 1 H); 2.58〜2.70 (m, 2 H); 2.96 (dd, J = 1.9および7.7 Hz, 1 H); 2.99 (d, J = 4.8 Hz, 1 H); 3.02 (dd, J = 3.3および14.8 Hz, 1 H); 3.53 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.89 (d, J = 1.9 Hz, 1 H); 4.10〜4.23 (m, 3 H); 4.28 (d, J = 6.1 Hz, 2 H); 4.35 (m, 1 H); 5.11 (m, 1 H); 5.83 (dd, J = 1.9および15.2 Hz, 1 H); 6.37 (ddd, J = 4.0, 11.2および15.2 Hz, 1 H); 7.03 (d, J = 8.8 Hz, 1 H); 7.18 (dd, J = 2.4および8.8 Hz, 1 H); 7.26 (s, 4 H); 7.29 (d, J = 2.4 Hz, 1 H); 7.90 (d, J = 8.2 Hz, 1 H); 8.08 (広幅なd, J = 7.7 Hz, 1 H); 8.29 (d, J = 10.1 Hz, 1 H); 8.33 (d, J = 8.2 Hz, 1 H); 8.46 (t, J = 6.7 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 441 [M+2H]2+; m/z = 879 [M-H]-; m/z = 881 [M+H]+; m/z = 925 [M-H+HCO2H]-; tR = 0.92分.
【０６２４】
化合物４９：５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタン酸
アルゴン下丸底フラスコ中、グルタル酸無水物（３．７８ｍｇ、３２．４４μｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）中溶液を、化合物４８（２６ｍｇ、２９．５μｍｏｌ）のＤＣＭ（９ｍＬ）中溶液に加えた。得られた混合物を室温で２時間撹拌し、真空で濃縮し、シリカゲル２．５ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物４９（１８ｍｇ）を白色固体として得た（６１％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.78 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.80 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.82 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.84 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.97 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 6 H); 1.15 (s, 3 H); 1.23 (広幅なd, J = 7.0 Hz, 4 H); 1.49〜1.61 (m, 2 H); 1.70 (m, 2 H); 1.78 (m, 1 H); 1.97 (m, 1 H); 2.20 (m, 4 H); 2.25 (m, 1 H); 2.62 (m, 2 H); 2.95 (m, 1 H); 3.02 (m, 1 H); 3.53 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.88 (s, 1 H); 4.10〜4.22 (m, 3 H); 4.24〜4.31 (m, 3 H); 5.11 (m, 1 H); 5.83 (d, J = 15.7 Hz, 1 H); 6.36 (m, 1 H); 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.19 (広幅なd, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.23 (m, 4 H); 7.29 (広幅なs, 1 H); 7.87 (d, J = 8.9 Hz, 1 H); 7.90 (d, J = 8.1 Hz, 1 H);  8.06 (大きなd, J = 7.3 Hz, 1 H); 8.29 (d, J = 10.1 Hz, 1 H); 8.37 (m, 2 H); 12.0 (広幅なm, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 993 [M-H]-; m/z = 995 [M+H]+; tR = 1.21分.
【実施例９】
【０６２５】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタノエート
アルゴン下丸底フラスコ中、化合物４９（１５ｍｇ、１５．０７μｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に、ＤＳＣ（５．６３ｍｇ、２１．０９μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３．５６μＬ、２１．０９μｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１時間撹拌し、真空で濃縮し、シリカゲル２．５ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）上で精製して、実施例９（７．７ｍｇ）を白色固体として得た（４７％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.78 (d, J = 6.7 Hz, 3 H); 0.80 (d, J = 6.7 Hz, 3 H);  0.82 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.85 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.99 (s, 3 H); 1.04 (d, J = 7.2 Hz, 6 H); 1.18 (s, 3 H); 1.26 (m, 4 H); 1.57 (m, 2 H); 1.79 (m, 1 H); 1.83 (m, 2 H); 1.99 (m, 1 H); 2.22〜2.33 (m, 3 H); 2.60〜2.71 (m, 4 H); 2.82 (s, 4 H); 2.97 (dd, J = 2.1および7.7 Hz, 1 H); 3.04 (dd, J = 3.4および14.7 Hz, 1 H); 3.55 (m, 1 H); 3.81 (s, 3 H); 3.89 (d, J = 2.1 Hz, 1 H); 4.19 (m, 3 H); 4.26〜4.34 (m, 3 H); 5.12 (m, 1 H); 5.86 (dd, J = 2.0および15.7 Hz, 1 H); 6.38 (ddd, J = 3.8, 11.2および15.7 Hz, 1 H); 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.19 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 1 H); 7.26 (m, 4 H); 7.29 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 7.91 (m, 2 H); 8.09 (m, 1 H); 8.29 (d, J = 9.9 Hz, 1 H); 8.35 (m, 2 H). LCMS (A1): ES m/z = 1092 [M+H]+; m/z = 1136 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.26分.
【実施例１０】
【０６２６】
ｍＡｂ−Ｅｘ９
前に記載した一般方法を実施例１０の製造に使用した。ｈｕ２Ｈ１１＿Ｒ３５−７４（６０ｍｇ）を実施例９のＤＭＡ中１０．７８ｍＭ溶液（１９８μＬ、５当量）と２時間反応させた。この時点で、実施例９の溶液（１２０μＬ、３当量）を加え、媒体を２時間撹拌した。ＤＰＢＳ  ｐＨ６．５＋２０％ＮＭＰ中Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００ｐｇ上で精製し、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５上で濃縮し、緩衝液Ｂ  ｐＨ６．５＋５％ＮＭＰ中ＰＤ−１０上で緩衝液を交換し、Ｓｔｅｒｉｆｌｉｐ上で濾過した後、実施例１０（４６ｍｇ）を無色透明溶液として２．２３ｍｇ／ｍＬの濃度でＤＡＲ４．７（ＨＲＭＳ）、単量体純度９９．２％および合計収率７８％にて得た。
【０６２７】
ＳＥＣ−ＨＲＭＳ：図３におけるインタクトＡＤＣのスペクトル；ｍ／ｚ＝１５０３４５（Ｄ１）；ｍ／ｚ＝１５１３１９（Ｄ２）；ｍ／ｚ＝１５２２９７（Ｄ３）；ｍ／ｚ＝１５３２７４（Ｄ４）；ｍ／ｚ＝１５４２５１（Ｄ５）；ｍ／ｚ＝１５５２２２（Ｄ６）；ｍ／ｚ＝１５６２０２（Ｄ７）；ｍ／ｚ＝１５７１８３（Ｄ８）。
【０６２８】
実施例１１から１４：３−（Ｓ）−ネオペンチル−７−Ｍｅ−アザ−Ｃ５２ステレオマー１のベンジル酸アミン、グルタリル−Ｖａｌ−Ａｌａ−３−（Ｓ）−ネオペンチル−７−Ｍｅ−アザ−Ｃ５２ベンジル酸アミンステレオマー１のＮＨＳエステルおよび対応するＡＤＣの合成
【化３０４】
2018535255.tif 000334
【０６２９】
化合物５０：（６Ｒ，１３Ｓ）−（１Ｅ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｅ）−８−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）−３−メチル−８−オキソオクタ−１，６−ジエン−４−イル６−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−２，２，９，１０，１０−ペンタメチル−１３−ネオペンチル−４，７，１１−トリオキソ−３−オキサ−５，８，１２−トリアザテトラデカン−１４−オエート
アルゴン下丸底フラスコ中、フラグメントＢＣ２（７４２ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（７１６ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（２５１ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分撹拌した。次いでフラグメントＡＤ１（７３０ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）およびＤＩＥＡ（９８１μＬ、５．５６ｍｍｏｌ）中溶液を加えた。反応媒体を室温で２４時間撹拌した。この後、反応媒体を氷（２００ｇ）で希釈し、ＡｃＯＥｔ（４×２００ｍＬ）で抽出した。有機層をＨ２Ｏ（８０ｍＬ）、飽和ブライン（２×８０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、連続した２種のフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、シリカゲル３００ｇ上での最初の溶離（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）として、およびシリカゲル７０ｇ上での２番目の溶離（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）として、化合物５０（４２８ｍｇ）を無色泡状物として得た（３０％）。
【０６３０】
化合物５１：（２Ｅ，５Ｓ，６Ｒ，７Ｅ）−５−（（（２Ｓ）−２−（３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）−プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタンアミド）−４，４−ジメチルペンタノイル）オキシ）−８−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）−６−メチルオクタ−２，７−ジエン酸
丸底フラスコ中に化合物５０（４２８ｍｇ、４８３．８７μｍｏｌ）およびＤＣＭ（２７ｍＬ）を導入した。溶液を０℃で冷却し、次いでＴＦＡ（８ｍＬ、１０６．６２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌した。溶媒を除去し、減圧下トルエン（３×１００ｍＬ）を用いて共蒸発させた。粗製の油状物を１：１ＡｃＯＥｔ／Ｈ２Ｏ（７５ｍＬ）で希釈し、２Ｍ  ＮａＯＨ（２５０μＬ）でｐＨ６〜７まで中和した。混合物を室温で６時間撹拌した。層を分離した。水層をＡｃＯＥｔ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ブライン（２×１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、化合物５１（３７４ｍｇ）を無色泡状物として得た（定量的）。
【０６３１】
化合物５２：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｒ，Ｅ）−４−（４−（ヒドロキシメチル）−フェニル）ブタ−３−エン−２−イル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
アルゴン下丸底フラスコ中、化合物５１（３５２ｍｇ、４８３．３１μｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（６０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（２０８ｍｇ、５３１．６４ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（７３．０９ｍｇ、５３１．６４μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２４４．５２μＬ、１．４５ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で４５分間撹拌した。この後、反応媒体を０．５Ｎクエン酸でｐＨ４まで中和し、真空で部分的に濃縮し、ＡｃＯＥｔ（１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）、飽和ブライン（３×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物５２（１８８ｍｇ）を無色泡状物として得た（５４％）。
【０６３２】
化合物５３：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１６−（（Ｒ，Ｅ）−４−（４−（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）ブタ−３−エン−２−イル）−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
０℃でアルゴン下丸底フラスコ中、化合物５２（１８８ｍｇ、２６４．６８μｍｏｌ）のＤＣＭ（７ｍＬ）中溶液に、１Ｈ−イミダゾール（８３．７２ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）および１Ｍクロロトリイソプロピルシラン（１３４．１５μｌ）を加えた。反応媒体を室温で５時間撹拌し、次いで飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、１５分間撹拌した。層を分離した。水層をＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出した。有機層を１Ｍ  ＮａＨＳＯ４（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）、飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物５３（１３７ｍｇ）を無色泡状物として得た（５９％）。
【実施例１１】
【０６３３】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
実施例１１を２工程で製造した。
工程１：０℃でアルゴン下丸底フラスコ中、化合物５３（１３７ｍｇ、１５８．０８μｍｏｌ）のＤＣＭ（５．５ｍＬ）中溶液に、ｍ−ＣＰＢＡ（５０．６６ｍｇ、２０５．５１μｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）中溶液を加え、反応媒体を２時間撹拌した。次いで２時間撹拌した後、ｍ−ＣＰＢＡ（３９ｍｇ）を２回加えた。１６時間撹拌した後、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３（３０ｍＬ）およびＮａ２Ｓ２Ｏ３（３０ｍＬ）でクエンチし、１５分間撹拌し、ＤＣＭ（４０ｍＬ）で希釈した。層を分離した。水層をＤＣＭ（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ブライン（２×８ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、αおよびβエポキシド１６０ｍｇを無色固体として得た（定量的）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 60/40 ジアステレオ異性体混合物; 0.80〜0.91 (m, 12 H); 0.97〜1.09 (m, 24 H); 1.12〜1.21 (m, 6 H); 1.32 (d, J = 14.7 Hz, 0.6 H); 1.40 (d, J = 14.7 Hz, 0.4 H); 1.70〜1.87 (m, 1 H); 1.90 (dd, J = 10.1および14.7 Hz, 0.4 H); 1.97 (dd, J = 10.1および14.7 Hz, 0.6 H); 2.28 (m, 0.6 H); 2.40 (m, 0.4 H); 2.55〜2.79 (m, 2 H); 2.90〜3.00 (m, 2 H); 3.44 (m, 1 H); 3.79 (d, J = 2.1 Hz, 0.4 H); 3.80 (s, 3 H); 3.90 (d, J = 2.1 Hz, 0.6 H); 4.03〜4.22 (m, 2 H); 4.78 (s, 0.8 H); 4.80 (s, 1.2 H); 5.03 (m, 1 H); 5.90 (dd, J = 1.5および15.5 Hz, 0.6 H); 5.99 (dd, J = 1.5および15.5 Hz, 0.4 H); 6.40〜6.55 (m, 1 H); 7.02〜7.07 (m, 1 H); 7.13〜7.38 (m, 6 H); 7.85〜7.93 (m, 2 H); 8.40 (d, J = 7.3 Hz, 0.6 H); 8.51 (d, J = 7.3 Hz, 0.4 H). LCMS (A1): ES m/z = 880 [M-H]-; m/z = 882 [M+H]+; m/z = 926 [M-H+HCO2H]-; tR= 2.05-2.06分.
【０６３４】
工程２：０℃でアルゴン下丸底フラスコ中、αおよびβエポキシド（１７７ｍｇ、２００．５３μｍｏｌ）のＴＨＦ（７．５ｍＬ）中溶液に、１Ｍ  ＴＢＡＦ（２２１μＬ、２２１μｍｏｌ）を滴下添加した。室温で２時間撹拌した後、ＴＢＡＦ（５０μＬ）を加え、３．５時間撹拌した。反応媒体をＨ２Ｏ（９ｍＬ）で希釈し、１０分間撹拌し、ＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ブライン（３×８ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、αおよびβエポキシド２１０ｍｇを無色固体として得た（定量的）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 60/40 ジアステレオ異性体混合物; 0.82〜1.25 (m, 21 H); 1.32 (d, J = 14.5 Hz, 0.6 H); 1.42 (d, J = 14.5 Hz, 0.4 H); 1.80 (m, 1 H); 1.91 (dd, J = 10.0および14.5 Hz, 0.4 H); 1.98 (dd, J = 10.0および14.5 Hz, 0.6 H); 2.22〜2.48 (m, 1 H); 2.55〜2.78 (m, 2 H); 2.89〜3.03 (m, 2 H); 3.44 (m, 1 H); 3.79 (d, J = 2.2 Hz, 0.4 H); 3.80 (s, 3 H); 3.90 (d, J = 2.2 Hz, 0.6 H); 4.04〜4.22 (m, 2 H); 4.48 (d, J = 5.8 Hz, 0.8 H); 4.50 (d, J = 5.8 Hz, 1.2 H); 5.03 (m, 1 H); 5.16 (t, J = 5.8 Hz, 0.4 H); 5.19 (t, J = 5.8 Hz, 0.6 H); 5.89 (dd, J = 1.9および15.6 Hz, 0.6 H); 5.99 (dd, J = 1.9および15.6 Hz, 0.4 H); 6.40〜6.52 (m, 1 H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 0.6 H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 0.4 H); 7.16〜7.37 (m, 6 H); 7.83〜7.94 (m, 2 H); 8.39 (d, J = 7.4 Hz, 0.6 H); 8.50 (d, J = 7.4 Hz, 0.4 H). LCMS (A1): ES m/z = 724 [M-H]-; m/z = 726 [M+H]+; tR = 1.29分.
【０６３５】
αおよびβエポキシドをキラル液体クロマトグラフィーにより分離し、これは７５：２５ヘプタン／ＥｔＯＨでの定組成溶離を使用し、１０μｍのＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ（１．１ｋｇ、アミローストリス−３，５−ジメチルフェニルカルバメートをシリカゲル担体上に被覆、Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｅｕｒｏｐｅ）でパックした７６×３５０ｍｍカラム上で行った。濃縮後、実施例１１（６６ｍｇ）を白色固体として得（４５％）、αエポキシド４５ｍｇを白色固体として得た（３１％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.82〜0.89 (m, 12 H); 0.99 (s, 3 H); 1.03 (d,
J = 6.9 Hz, 3 H); 1.19 (s, 3 H); 1.34 (d, J = 14.6 Hz, 1 H); 1.80 (m, 1 H); 1.98 (dd, J = 10.1および14.6 Hz, 1 H); 2.26 (m, 1 H); 2.61 (m, 1 H); 2.69 (dd, J = 11.1および14.6 Hz, 1 H); 2.91 (dd, J = 2.1および7.8 Hz, 1 H); 2.94 (dd, J = 3.7および14.6 Hz, 1 H); 3.42 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.91 (d, J = 2.1 Hz, 1 H); 4.03〜4.14 (m, 2 H); 4.50 (d, J = 5.8 Hz, 2 H); 5.03 (m, 1 H); 5.19 (t, J = 5.8 Hz, 1 H) ; 5.89 (dd, J = 2.1および15.5 Hz, 1 H); 6.43 (ddd, J = 4.7, 10.9および15.5 Hz, 1 H); 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.20 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1 H); 7.23 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.30 (d, J = 2.3 Hz, 1 H); 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.86 (d, J = 8.4 Hz, 1 H); 7.92 (d, J = 7.1 Hz, 1 H); 8.39 (d, J = 9.1 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 724 [M-H]-; m/z = 726 [M+H]+; tR = 1.29分.
【０６３６】
化合物５４：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アジドメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
アルゴン下丸底フラスコ中、実施例１１（６６ｍｇ、９０．８７μｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中溶液に、０℃でＤＰＰＡ（１００．２３μｌ、４５４．３６μｍｏｌ）およびＤＢＵ（６９．２７μｌ、４５４．３６μｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で５時間撹拌し、次いでＨ２Ｏで希釈し、ＡｃＯＥｔ（２×１５ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、飽和ブライン（２×５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、シリカゲル１５ｇ（ＤＣＭ／ｉＰｒＯＨの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物５４（６４ｍｇ）を無色固体として得た（９４％）。
【実施例１２】
【０６３７】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アミノメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
丸底フラスコ中、化合物５４（６４ｍｇ、８５．１８μｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３ｍＬ）およびＨ２Ｏ（４００μＬ）中溶液に、ＴＣＥＰ（２６．８６ｍｇ、９３．７０μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で２４時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１５ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３で希釈し、１０分間撹拌し、ＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、アミノプロピルで修飾したシリカゲル４．５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、実施例１２（４２ｍｇ）を白色固体として得た（６８％）。
【０６３８】
化合物５５：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（２Ｓ）−１−（（（２Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（１Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート
アルゴン下、丸底フラスコ中に実施例１２（４２ｍｇ、５７．９１μｍｏｌ）およびＤＭＦ（１ｍＬ）を、続いてＦｍｏｃＶａｌＡｌａ（３４．４４ｍｇ、８６．８６μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１３．２０ｍｇ、９３．８１μｍｏｌ）、ＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＥＤＣ（１０．３６μｌ、５７．９１μｍｏｌ）を導入した。反応媒体を室温で３時間撹拌し、次いでＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、室温で１０分間撹拌し、ＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、化合物５５（８３ｍｇ）を白色固体として得た（定量的）。
【０６３９】
化合物５６：（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−（（２Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（１Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）−３−メチルブタンアミド
丸底フラスコ中、ピペリジン（５７．８μＬ、５７９．１０μｍｏｌ）を、化合物５５（６４．７３ｍｇ、５７．９１μｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中溶液に加えた。５時間撹拌した後、ピペリジン５７．８μＬを加え、媒体を室温で終夜撹拌した。反応媒体を真空で濃縮し、シリカゲル１５ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配）上で精製して、化合物５６（３０ｍｇ）を無色固体として得た（５８％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.86 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.82〜0.90 (m, 15 H); 1.00 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.19 (s, 3 H) ; 1.24 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.34 (d, J = 14.6 Hz, 1 H); 1.66 (広幅なm, 2 H); 1.80 (m, 1 H); 1.91 (m, 1 H); 1.98 (dd, J = 10.2および14.6 Hz, 1 H); 2.27 (m, 1 H); 2.60 (m, 1 H); 2.69 (dd, J = 11.1および14.6 Hz, 1 H); 2.91 (dd, J = 2.0および7.7 Hz, 1 H); 2.94 (dd, J = 3.7および14.6 Hz, 1 H); 2.99 (d, J = 4.9 Hz, 1 H); 3.43 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.91 (d, J = 2.0 Hz, 1 H); 4.03〜4.12 (m, 2 H); 4.29 (d, J = 6.2 Hz, 2 H); 4.34 (m, 1 H); 5.03 (m, 1 H); 5.89 (dd, J = 1.8および15.6 Hz, 1 H); 6.43 (ddd, J = 4.8, 10.9および15.6 Hz, 1 H); 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.20 (dd, J = 2.2および8.6 Hz, 1 H); 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.26 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.32 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 7.86 (d, J = 8.4 Hz, 1 H); 7.92 (d, J = 7.2 Hz, 1 H); 8.07 (広幅なd, J = 7.9 Hz, 1 H); 8.40 (d, J = 7.3 Hz, 1 H); 8.45 (t, J = 6.2 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 448 [M+2H]2+; m/z = 893 [M-H]-; m/z = 895 [M+H]+; m/z = 939 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.29分.
【０６４０】
化合物５７：５−（（（２Ｓ）−１−（（（２Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（１Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタン酸
アルゴン下丸底フラスコ中、グルタル酸無水物（４．２９ｍｇ、３６．８５μｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）中溶液を、化合物５６（３０ｍｇ、３３．５μｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）中溶液に加えた。反応媒体を室温で２時間撹拌し、真空で部分的に濃縮し、シリカゲル２．５ｇ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配溶離）上で精製して、化合物５７（３４ｍｇ）を無色ラッカーとして得た（定量的）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80〜0.89 (m, 18 H); 0.99 (s, 3 H); 1.03 (d,
J = 7.0 Hz, 3 H); 1.19 (s, 3 H); 1.24 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.34 (d, J = 14.6 H
z, 1 H); 1.70 (m, 2 H); 1.80 (m, 1 H); 1.97 (m, 2 H); 2.19 (m, 4 H); 2.26 (m, 1 H); 2.60 (m, 1 H); 2.70 (dd, J = 11.2および14.6 Hz, 1 H); 2.90 (dd, J = 2.2および7.8 Hz, 1 H); 2.95 (dd, J = 3.7および14.6 Hz, 1 H); 3.43 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.91 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 4.03〜4.18 (m, 3 H); 4.22〜4.33 (m, 3 H); 5.03 (m, 1 H); 5.90 (d, J = 15.5 Hz, 1 H); 6.43 (ddd, J = 4.9, 11.0および15.5 Hz, 1 H); 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.19〜7.28 (m, 5 H); 7.32 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 7.85 (広幅なd, J = 8.9 Hz, 2 H); 7.91 (d, J = 7.2 Hz, 1 H); 8.06 (広幅なd, J = 7.5 Hz, 1 H); 8.36 (広幅なt, J = 6.6 Hz, 1 H); 8.42 (d, J = 7.8 Hz, 1 H); 12.10 (広幅なm, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 1007 [M-H]-; m/z = 1009 [M+H]+; tR = 1.21分.
【実施例１３】
【０６４１】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル５−（（（２Ｓ）−１−（（（２Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（１Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタノエート
アルゴン下丸底フラスコ中、化合物５７（３３ｍｇ、３２．６９μｍｏｌ）のＤＣＭ（８ｍＬ）中溶液に、ＤＳＣ（１１．７２ｍｇ、４５．７６μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（７．７μＬ、４５．７６μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で１時間撹拌し、真空で濃縮し、シリカゲル２．５ｇ上での連続した２種のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ｉＰｒＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、実施例１３（１７．９ｍｇ）を無色固体として得た（４９％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.80〜0.90 (m, 18 H); 1.00 (s, 3 H); 1.04 (d,
J = 7.0 Hz, 3 H); 1.19 (s, 3 H); 1.24 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.34 (d, J = 14.6 Hz, 1 H); 1.80 (m, 1 H); 1.83 (m, 2 H); 1.98 (m, 2 H); 2.26 (m, 1 H); 2.29 (m, 2 H); 2.60 (m, 1 H); 2.68 (t, J = 7.5 Hz, 2 H); 2.70 (dd, J = 11.2および14.6 Hz, 1
H); 2.80 (s, 4 H); 2.91 (dd, J = 2.2および7.6 Hz, 1 H); 2.95 (dd, J = 3.7および14.6 Hz, 1 H); 3.43 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.90 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 4.06〜4.15 (m, 2 H); 4.18 (dd, J = 6.9および8.7 Hz, 1 H); 4.21〜4.33 (m, 3 H); 5.03 (m, 1 H); 5.89 (d, J = 15.5 Hz, 1 H); 6.43 (ddd, J=4.9, 10.9および15.5 Hz, 1 H); 7.02 (d, J=8.7 Hz, 1 H); 7.20 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1 H); 7.23 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 2 H); 7.31 (d, J = 2.3 Hz, 1 H); 7.84 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 7.89 (m, 2 H); 8.04 (d, J = 7.5 Hz, 1 H); 8.33 (t, J = 6.5 Hz, 1 H); 8.39 (d, J = 7.6 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 796; m/z = 1104 [M-H]-; m/z = 1106 [M+H]+; m/z = 1150 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.26分.
【実施例１４】
【０６４２】
ｍＡｂ−Ｅｘ１３
前に記載した一般方法を実施例１４の製造に使用した。ｈｕ２Ｈ１１＿Ｒ３５−７４（６０ｍｇ）を、実施例１３のＤＭＡ中１０．０５ｍＭ溶液（２００μＬ、５当量）と２時間反応させた。この時点で、実施例１３の溶液（１８０μＬ、４．５当量）を加え、媒体を２時間撹拌した。緩衝液Ｂ  ｐＨ６．５＋１０％ＮＭＰ中のＳｕｐｅｒｄｅｘ  ２００ｐｇ上で精製し、Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−１５上で濃縮し、緩衝液Ｂ  ｐＨ６．５＋５％ＮＭＰ中ＰＤ−１０上で緩衝液を交換し、Ｓｔｅｒｉｆｌｉｐ上で濾過した後、実施例１４（４６ｍｇ）を無色透明溶液として２ｍｇ／ｍＬの濃度でＤＡＲ３．５（ＨＲＭＳ）、単量体純度９９．７％および合計収率７７％にて得た。
【０６４３】
ＳＥＣ−ＨＲＭＳ：図４におけるインタクトＡＤＣのスペクトル；ｍ／ｚ＝１４９３３６（ネイキッドｍＡｂ）；ｍ／ｚ＝１５０３２８（Ｄ１）；ｍ／ｚ＝１５１３１９（Ｄ２）；ｍ／ｚ＝１５２３１１（Ｄ３）；ｍ／ｚ＝１５３３０２（Ｄ４）；ｍ／ｚ＝１５４２９５（Ｄ５）；ｍ／ｚ＝１５５２９０（Ｄ６）；ｍ／ｚ＝１５６２８２（Ｄ７）。
【実施例１５】
【０６４４】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｓ）−１−（３−（４−（ヒドロキシ−メチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−３，６，６−トリメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
【化３０５】
2018535255.tif 000335
スキーム２に示し、実施例４および１１にて記載した一般ルートＢに従って、実施例１５を製造した。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 65/35 ジアステレオ異性体混合物; 0.93〜1.26 (m, 12 H); 1.75 (m, 0.65 H); 1.83 (m, 0.35 H); 2.22 (m, 0.65 H); 2.41 (m, 0.35 H); 2.55〜2.70 (m, 2 H); 2.81 (d, J = 13.7 Hz, 0.65 H); 2.88 (d, J = 13.7 Hz, 0.35 H); 2.93 (dd, J = 2.1および8.2 Hz, 0.65 H); 3.00 (m, 1.35 H); 3.22〜3.35 (部分的にマスクされたm, 1 H); 3.77 (d, J = 2.1 Hz, 0.35 H); 3.81 (s, 3 H); 3.88 (d, J = 2.1 Hz, 0.65 H); 4.25〜4.39 (m, 1.65 H); 4.34 (m, 0.35 H); 4.48 (d, J = 6.0 Hz, 0.7 H); 4.50 (d, J = 6.0 Hz, 1.3 H); 5.08 (m, 1 H); 5.17 (t, J = 6.0 Hz, 0.35 H); 5.20 (t, J = 6.0 Hz, 0.65 H); 5.78 (dd, J = 1.9および15.5 Hz, 0.65 H); 5.89 (dd, J = 1.9および15.5 Hz, 0.35 H); 6.40 (m, 1 H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.16 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 0.65 H); 7.19 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 0.35 H); 7.20〜7.34 (m, 5 H); 7.58 (広幅なd, J = 10.2 Hz, 0.65 H); 7.64 (広幅なd, J = 10.2 Hz, 0.35 H); 8.00 (d, J = 8.4 Hz, 0.65 H); 8.07 (d, J = 8.4 Hz, 0.35 H); 8.35 (d, J = 8.3 Hz, 0.65 H); 8.44 (d, J = 8.3 Hz, 0.35 H). LCMS (A1): ES m/z = 654 [M-H]-; m/z = 656 [M+H]+; tR = 1.06分.
【実施例１６】
【０６４５】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｓ）−１−（３−（４−（ヒドロキシ−メチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−６，６−ジメチル−３−イソプロピル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
【化３０６】
2018535255.tif 000336
スキーム２に示し、実施例４および１１にて記載した一般ルートＢに従って、実施例１
６を製造した。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 60/40 ジアステレオ異性体混合物; 0.72 (d, J = 7.0 Hz, 1.8  H); 0.82 (d, J = 7.0 Hz, 1.2 H); 0.84 (d, J = 7.0 Hz, 1.8 H); 0.87 (d, J = 7.0 Hz, 1.2 H); 0.98 (s, 1.8 H); 0.99 (d, J = 7.0 Hz, 1.8 H); 1.01 (s, 1.2 H); 1.05 (d, J = 7.0 Hz, 1.2 H); 1.09 (s, 1.8 H); 1.11 (s, 1.2 H); 1.82 (m, 1 H); 1.91 (m, 0.6 H); 2.01 (m, 0.4 H); 2.30 (m, 1 H); 2.52〜2.72 (m, 2 H); 2.88〜3.04 (m, 3 H); 3.25〜3.35 (マスクされたm, 1 H); 3.79 (d, J = 2.2 Hz, 0.4 H); 3.80 (s, 3 H); 3.88 (d, J = 2.2 Hz, 0.6 H); 4.09〜4.21 (m, 2 H); 4.48 (d, J = 5.8 Hz, 0.8 H); 4.50 (d, J = 5.8 Hz, 1.2 H); 5.14〜5.29 (m, 2 H); 5.79 (dd, J = 1.7および15.4 Hz, 0.6 H); 5.90 (dd, J = 1.7および15.4 Hz, 0.4 H); 6.40〜6.52 (m, 1 H); 7.05 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.10 (dd, J = 2.0および10.2 Hz, 1 H); 7.17 (m, 1 H); 7.21〜7.35 (m, 5 H); 7.70 (d, J = 9.3 Hz, 0.6 H); 7.80 (d, J = 9.3 Hz, 0.4 H); 8.39 (d, J = 8.0 Hz, 0.6 H); 8.44 (d, J = 8.0 Hz, 0.4 H). LCMS (A1): ES m/z = 682 [M-H]-; m/z = 684 [M+H]+; tR = 1.16分.
【実施例１７】
【０６４６】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｓ）−１−（３−（４−（ヒドロキシ−メチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−６，６−ジメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
【化３０７】
2018535255.tif 000337
スキーム２に示し、実施例４および１１にて記載した一般ルートＢに従って、実施例１７を製造した。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 50/50 ジアステレオ異性体混合物; 0.90 (s, 4.5 H); 0.91 (s, 4.5 H); 1.00 (d, J = 7.0 Hz, 1.5 H); 1.03 (s, 1.5 H); 1.05 (s, 1.5 H); 1.06 (d, J = 7.0 Hz, 1.5 H); 1.10 (s, 1.5 H); 1.12 (s, 1.5 H); 1.85 (m, 1H);
2.32 (m, 1H); 2.55〜2.72 (m, 2 H); 2.90〜3.03 (m, 3 H); 3.25〜3.35 (マスクされたm, 1 H); 3.81 (s, 3 H); 3.90 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 4.15 (m, 1 H); 4.36 (d, J =
10.0 Hz, 0.5 H); 4.43 (d, J = 10.0 Hz, 0.5 H); 4.49 (d, J = 5.9 Hz, 1 H); 4.51 (d, J = 5.9 Hz, 1 H); 5.15 (t, J = 5.9 Hz, 0,5 H); 5.18 (t, J = 5.9 Hz, 0.5 H); 5.29 (m, 1 H); 5.79 (dd, J = 2.0および15.4 Hz, 0.5 H); 5.90 (d, J = 15.4 Hz, 0.5
H); 6.39 (m, 1 H); 6.91 (dd, J = 2.5および10.4 Hz, 0.5 H); 6.98 (dd, J = 2.5および10.4 Hz, 0.5 H); 7.05 (分割されたd, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.15 (分割されたdd, J = 2.4および8.7 Hz, 1 H); 7.20〜7.39 (m, 6 H); 8.32 (d, J = 7.9 Hz, 0.5 H); 8.40 (d, J = 7.9 Hz, 0.5 H). LCMS (A4): ES m/z = 696 [M-H]-; m/z = 698 [M+H]+; tR= 4.13-4.16分.
【実施例１８】
【０６４７】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アミノメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
【化３０８】
2018535255.tif 000338
スキーム１に示し、実施例８にて記載した一般ルートＡに従って、実施例１８を製造した。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.78 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.84 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.87 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.00 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.19 (s, 3 H); 1.30 (m, 1 H); 1.50〜1.90 (m, 5 H); 2.28 (m, 1 H); 2.55〜2.76 (m, 2 H); 2.90〜3.00 (m, 2 H); 3.48 (m, 1 H); 3.70 (s, 2 H); 3.80 (s, 3 H); 3.89 (s, 1 H); 4.02〜4.15 (m, 2 H); 5.06 (m, 1 H); 5.88 (d, J = 15.5 Hz, 1 H); 6.47 (m, 1
H); 7.03 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.20 (m, 3 H); 7.31 (m, 3 H); 7.80 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.89 (d, J = 7.3 Hz, 1 H); 8.41 (d, J = 8.2 Hz, 1 H).
【実施例１９】
【０６４８】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−３−イソブチル−６，６，７−トリメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタノエート
【化３０９】
2018535255.tif 000339
スキーム３に示し、実施例２、６、９および１３にて記した通りに、実施例１９を製造した。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.79 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.81〜0.89 (m, 18 H); 1.01 (s, 3 H); 1.03 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.20 (s, 3 H); 1.24 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.31 (m, 1 H); 1.60〜1.74 (m, 2 H); 1.78〜1.86 (m, 3 H); 1.96 (m, 1 H); 2.21〜2.31 (m, 3 H); 2.55〜2.72 (m, 4 H); 2.80 (s, 4 H); 2.96 (m, 2 H); 3.47 (m, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.89 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 4.03〜4.14 (m, 2 H); 4.17 (dd, J = 6.8および8.6 Hz, 1 H); 4.21〜4.33 (m, 3 H); 5.06 (m, 1 H); 5.89 (d, J = 15.5 Hz, 1 H); 6.47 (ddd, J = 5.2, 10.5および15.5 Hz, 1 H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.20 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1 H); 7.23 (m, 4 H); 7.32 (d, J = 2.3 Hz, 1 H); 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 1 H); 7.89 (m, 2 H); 8.04 (d, J = 7.6 Hz, 1 H); 8.32 (t, J = 6.3 Hz, 1 H); 8.42 (d, J = 7.6 Hz, 1 H). LCMS (A1): ES m/z = 1092 [M+H]+; m/z = 1136 [M-H+HCO2H]-; tR= 1.23分.
【実施例２０】
【０６４９】
ｍＡｂ−Ｅｘ１９
【化３１０】
2018535255.tif 000340
実施例２０を実施例３、７、１０および１４と同様の方法で製造した。実施例２０（４５ｍｇ）を無色透明溶液として２．５５ｍｇ／ｍＬの濃度でＤＡＲ４．４（ＨＲＭＳ）、単量体純度９９．１％および合計収率７８％にて得た。
【０６５０】
ＳＥＣ−ＨＲＭＳ：図５におけるインタクトＡＤＣのスペクトル；ｍ／ｚ＝１５０３６８（Ｄ１）；ｍ／ｚ＝１５１３５０（Ｄ２）；ｍ／ｚ＝１５２３２７（Ｄ３）；ｍ／ｚ＝１５３３０４（Ｄ４）；ｍ／ｚ＝１５４２８１（Ｄ５）；ｍ／ｚ＝１５５２５５（Ｄ６）；ｍ／ｚ＝１５６２３７（Ｄ７）；ｍ／ｚ＝１５７２１７（Ｄ８）。
【実施例２１】
【０６５１】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−７−シクロプロピル−３−イソブチル−６，６−ジメチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロ−ヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
【化３１１】
2018535255.tif 000341
スキーム１に示し、実施例１および８にて記載した一般ルートＡに従って、実施例２１を製造した。
【実施例２２】
【０６５２】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル５−（（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−７−シクロプロピル−３−イソブチル−６，６−ジメチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）アミノ）−５−オキソペンタノエート
【化３１２】
2018535255.tif 000342
スキーム３に示し、実施例２、６、９および１３にて記載した通りに、実施例２２を製造した。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.34 (m, 1 H); 0.66 (m, 1 H); 0.74 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.76 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.78 (s, 3 H); 0.80 (m, 1 H); 0.82 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 0.85 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.04 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.08 (s, 3 H); 1.11 (m, 1 H); 1.20 (m, 1 H); 1.23 (d, J = 7.0 Hz, 3 H); 1.43〜1.54 (m, 2 H); 1.78 (m, 1 H); 1.82 (m, 2 H); 1.98 (m, 1 H); 2.22 (m, 1 H); 2.28 (m, 2 H); 2.65 (m, 3 H); 2.79 (m, 1 H); 2.81 (s, 4 H); 2.97 (dd, J = 2.2および7.9 Hz, 1 H); 3.80 (s, 3 H); 3.89 (d, J = 2.2 Hz, 1 H); 4.02 (m, 1 H); 4.17 (dd, J = 6.7および8.7 Hz, 1 H); 4.27 (d, J = 6.3 Hz, 2 H); 4.30 (m, 1 H); 4.37 (m, 1 H); 5.10 (m, 1 H); 5.79 (dd, J = 1.8および15.5 Hz, 1 H); 6.39 (ddd, J = 4.0, 11.6および15.5 Hz, 1 H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1 H); 7.11 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1 H); 7.20 (d, J = 2.3 Hz, 1 H); 7.22 (m, 4 H); 7.46 (s, 1 H); 7.77 (d, J = 9.0 Hz, 1 H); 7.89 (d, J = 8.6 Hz, 1 H); 8.05 (d, J = 7.5 Hz, 1 H); 8.29 (d, J = 7.6 Hz, 1 H); 8.32 (t, J = 6.3 Hz, 1 H).
【実施例２３】
【０６５３】
ｍＡｂ−Ｅｘ２２
【化３１３】
2018535255.tif 000343
実施例２３を実施例３、７、１０および１４と同様の方法で製造した。実施例２３（４５ｍｇ）を無色透明溶液として２．１４ｍｇ／ｍＬの濃度でＤＡＲ３．６（ＨＲＭＳ）、単量体純度１００％および合計収率７５％にて得た。
【０６５４】
ＳＥＣ−ＨＲＭＳ：図６におけるインタクトＡＤＣのスペクトル；ｍ／ｚ＝１５０３４１（Ｄ１）；ｍ／ｚ＝１５１３２９（Ｄ２）；ｍ／ｚ＝１５２３１７（Ｄ３）；ｍ／ｚ＝１５３３０８（Ｄ４）；ｍ／ｚ＝１５４２９６（Ｄ５）；ｍ／ｚ＝１５５２８７（Ｄ６）；ｍ／ｚ＝１５６２７９（Ｄ７）；ｍ／ｚ＝１５７２６７（Ｄ８）。
【実施例２４】
【０６５５】
（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アジドメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）−エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
【化３１４】
2018535255.tif 000344
スキーム３に示し、実施例３２にて記載した一般ルートＣに従って、実施例２４を製造した。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.83 (s, 9H); 0.88 (d, J = 6.8 Hz, 3H); 1.00 (s, 3H); 1.03 (d, J = 7,1 Hz, 3H); 1.19 (s, 3H); 1.33 (d, J = 14.5 Hz, 1H); 1.84
(m, 1H); 1.97 (dd, J = 9.8および14.5 Hz, 1H); 2.27 (dd, J = 11.1および14.5 Hz, 1H); 2.61 (m, 1H); 2.69 (dd, J = 11.1および14.2 Hz, 1H); 2.92 (dd, J = 2.1および7.7 Hz, 1H); 2.96 (dd, J = 3.6および14.2 Hz, 1H); 3.43 (m, 1H); 3.80 (s, 3H); 3.96 (d, J = 2.1 Hz, 1H); 4.08 (ddd, J = 3.6, 7.1および11.1 Hz, 1H);  4.12 (m, 1H); 4.46 (s, 2H); 5.05 (ddd, J = 1.3, 3.9および11.3 Hz, 1H); 5.90 (dd, J = 1.3および15.3 Hz, 1H); 6.45 (ddd, J = 4.7, 10.7および15.3 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.4および8.7 Hz, 1H); 7.32 (m, 3H); 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H); 7.92 (d, J = 7.1 Hz, 1H); 8.40 (d, J = 7.4 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 749 [M-H]-; m/z = 751 [M+H]+; m/z = 795 [M-H+HCO2H]-; tR= 1.52分.
【実施例２５】
【０６５６】
（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アミノメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
【化３１５】
2018535255.tif 000345
【０６５７】
実施例１、５、８および１１に記載した通りに、実施例２５を製造した。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.86 (s, 9H); 0.88 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 0.98 (s, 3H); 1.02 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.18 (s, 3H); 1.34 (d, J = 14.5 Hz, 1H); 1.80
(m, 1H); 1.98 (dd, J = 9.8および14.5 Hz, 1H); 2.27 (dd, J = 11.1および14.5 Hz, 1H); 2.40 (広幅なm, 2H); 2.62 (m, 1H); 2.68 (dd, J = 11.1および14.2 Hz, 1H); 2.90 (dd, J = 2.1および7.7 Hz, 1H); 2.96 (dd, J = 3.6および14.2 Hz, 1H); 3.43 (m, 1H); 3.76 (s, 2H); 3.80 (s, 3H); 3.91 (d, J = 2.1 Hz, 1H); 4.02〜4.15 (m, 2H); 5.04 (ddd, J = 1.3, 3.9および11.3 Hz, 1H); 5.88 (dd, J = 1.3および15.4 Hz, 1H); 6.45 (ddd, J = 4.7, 10.7および15.3 Hz, 1H); 7.03 (d, J = 8.5 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.2および8.5 Hz, 1H); 7.23 (d, J = 8.3 Hz, 2H); 7.32 (d, J = 2.2 Hz, 2H); 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 2H); 7.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H); 7.93 (d, J = 6.9 Hz, 1H); 8.40 (d, J = 7.1 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 723 [M-H]-; m/z = 725 [M+H]+; m/z = 769 [M-H+HCO2H]-; tR = 0.87分.
【０６５８】
実施例２６から２８：３−（Ｓ）−ネオペンチル−７−（Ｓ）−Ｍｅ−アザ−Ｃ５２ベンジル酸アルコール、グルタリル−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＥＤＡ−３−（Ｓ）−ネオペンチル−７−（Ｓ）−Ｍｅ−アザ−Ｃ５２ベンジル酸アルコールのＮＨＳエステルおよび対応するＡＤＣの合成
【化３１６】
2018535255.tif 000346
【化３１７】
2018535255.tif 000347
【０６５９】
化合物５８：（２Ｒ，３Ｓ）−１−（（４−メトキシベンジル）オキシ）−２−メチルヘキサ−５−エン−３−イル（Ｓ）−２−（（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−２，２−ジメチルブタンアミド）−４，４−ジメチルペンタノエート
化合物ＢＣ４（３６５ｍｇ、９１９．７μｍｏｌ）のＤＭＦ（１２ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（４０２ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１４４ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を加え、反応媒体を室温で３０分間撹拌し、次いで化合物ＡＤ３（３６５ｍｇ、９６５．７μｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）およびＤＩＥＡ（５６２μＬ、３．２２ｍｍｏｌ）中溶液を加えた。反応媒体を室温で４時間撹拌し、次いでＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）、飽和ブライン（３×１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル３０ｇ上での連続した２種のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨおよびヘプタン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配溶離）により精製して、化合物５８（５６４ｍｇ）を無色泡状物として得た（８１％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.83 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 0.85 (s, 9H); 0.87 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 1.00 (s, 3H); 1.03 (s, 3H); 1.55 (dd, J = 2.4および14.5 Hz,
1H); 1.78 (dd, J = 9.5および14.5 Hz, 1H); 1.96 (m, 1H); 2.20 (m, 1H); 2.30 (m, 1H); 2.72 (dd, J = 9.6および13.9 Hz, 1H); 2.87 (dd, J = 5.3および13.9 Hz, 1H); 3.20 (dd, J = 6.5および9.5 Hz, 1H); 3.37 (dd, J = 5.4および9.5 Hz, 1H); 3.76 (s, 3H); 3.80 (s, 3H); 4.19 (m, 1H); 4.28 (m, 1H); 4.34 (s, 2H); 4.55 (m, 1H); 4.82 (m, 1H); 5.00 (d, J = 10.2 Hz, 1H); 5.07 (d, J = 17.4 Hz, 1H); 5.55 (dd, J = 2.3および10.2 Hz, 1H); 5.71 (m, 1H); 6.01 (dd, J = 2.3および17.1 Hz, 1H); 6.28 (dd,
J = 10.2および17.1 Hz, 1H); 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H);
7.17 (dd, J = 2.3および8.6 Hz, 1H); 7.22 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.32 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 7.65 (d, J = 9.5 Hz, 1H); 7.70 (d, J = 7.9 Hz, 1H); 8.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 754 [M-H]-; m/z = 756 [M+H]+; m/z = 800 [M-H+HCO2H]-;
tR = 1.62分.
【０６６０】
化合物５９：（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｒ）−１−（（４−メトキシ−ベンジル）オキシ）プロパン−２−イル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
化合物５８（５６０ｍｇ、７４０．４μｍｏｌ）のＤＣＭ（５６ｍＬ）中溶液に、Ａｒ下Ｇｒｕｂｂｓ  Ｉ触媒（３１．０ｍｇ、３７．０２μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で１時間３０分撹拌した後、触媒３１．０ｍｇを加えた。室温で１時間３０分撹拌を行った後、触媒３１．０ｍｇを加えた。室温で１時間３０分撹拌を行った後、触媒３１．０ｍｇを加え、反応媒体を室温で１時間３０分撹拌した。次いでこれを真空で濃縮し、シリカゲル２５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物５９（３３０ｍｇ、６１％）および２２０ｍｇを得、これをシリカゲル１５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により更に精製して、化合物５９（２０４ｍｇ、３７％）をトリシクロヘキシルホスフィンオキシドとの混合物として得た。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (s, 9H); 0.88 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 0.91 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.04 (s, 3H); 1.20 (s, 3H); 1.29 (d, J = 14.5 Hz, 1H); 1.95
(dd, J = 9.8および14.5 Hz, 1H); 1.99 (m, 1H); 2.26 (m, 1H); 2.43 (m, 1H); 2.72 (dd, J = 10.1および14.3 Hz, 1H); 2.97 (dd, J = 3.6および14.3 Hz, 1H); 3.27 (dd, J = 6.1および9.3 Hz, 1H); 3.40 (dd, J = 5.8および9.3 Hz, 1H); 3.46 (m, 1H) ; 3.72 (s, 3H); 3.80 (s, 3H); 4.10 (m, 1H); 4.13 (m, 1H); 4.38 (s, 2H); 4.97 (m, 1H); 5.93 (d, J = 15.4 Hz, 1H); 6.43 (ddd, J = 4.8, 10.7および15.4 Hz, 1H); 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.17 (d, J = 8.6 Hz, 3H); 7.36 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 7.88 (m, 2H); 8.48 (d, J = 7.5 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 726 [M-H]-; m/z = 728 [M+H]+; m/z = 772 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.54分.
【０６６１】
化合物６０：（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｒ）−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
化合物５９（５３２ｍｇ、７３０．４μｍｏｌ）を、室温でＴＦＡ（３．９３ｍＬ）のＤＣＭ（３６ｍＬ）中溶液で３０分間処理した。反応媒体を機械撹拌しながら９％ＮａＨＣＯ３水溶液（１３０ｍＬ）上に注ぎ入れた。３０分間撹拌を行い、次いで水相をＤＣＭ（２×７０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（３×２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル３０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物６０（２９９ｍｇ）を白色泡状物として得た（６７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.88 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 0.89 (s, 9H); 0.90 (d, J = 7.0 Hz, 3H) 1.03 (s, 3H); 1.20 (s, 3H); 1.36 (dd, J = 1.8および14.5 Hz, 
1H); 1.80 (m, 1H); 1.96 (dd, J = 9. 6および14.5 Hz, 1H); 2.25 (m, 1H); 2.43 (m, 1H); 2.72 (dd, J = 11.1および14.3 Hz, 1H); 2.97 (dd, J = 3.8および14.3 Hz, 1H); 3.25 (m, 1H); 3.45 (m, 2H); 3.80 (s, 3H); 4.10 (m, 1H); 4.16 (m, 1H); 4.57 (t, J
= 5.3 Hz, 1H); 4.98 (m, 1H); 5.93 (dd, J = 1.3および15.3 Hz, 1H); 6.45 (ddd, J = 4.9, 10.7および15.3 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.22 (dd, J = 2.3および8.6 Hz, 1H); 7.36 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 7.89 (m, 2H); 8.48 (d, J = 7.3 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 606 [M-H]-; m/z = 608 [M+H]+; tR = 1.2分.
【０６６２】
化合物６１：（Ｓ）−２−（（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）プロパナール
氷／アセトン浴で冷却した化合物６０（２９７ｍｇ、４８８．４μｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）中溶液に、０℃でＫＢｒ（５８．１１ｍｇ、４８８．４μｍｏｌ）のＨ２Ｏ（１．１８ｍＬ）中溶液、ＴＥＭＰＯ（１．５７ｍｇ、９．８μｍｏｌ）を加え、１．５６Ｍ次亜塩素酸ナトリウム水溶液ｐＨ９．５（４６７．６μＬ、７３２．５２μｍｏｌ）を滴下添加した。０℃で１５分間撹拌を行い、次いで０℃で飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（３．５６ｍＬ）を加え、氷浴を除去し、反応媒体を１０分間撹拌した。次いでこれをＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル１５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物６１（１３９ｍｇ）を白色ラッカーとして得た（４７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (s, 9H); 0.90 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 1.03 (s, 3H) ; 1.04 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 1.20 (s, 3H); 1.26 (d, J = 15.3 Hz, 1H); 1.95 (m, 1H); 2.44 (m, 1H); 2.57 (m, 1H); 2.72 (dd, J = 11.2および14.4 Hz, 1H); 2.80 (m, 1H); 2.98 (dd, J = 3.1および14.4 Hz, 1H); 3.80 (s, 3H); 4.10 (m, 3H); 5.22 (m, 1H); 5.98 (d, J = 15.3 Hz, 1H); 6.47 (ddd, J = 4.9, 10.8および15.3 Hz, 1H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.22 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1H); 7.37 (s, 1H); 7.90 (m, 1H); 7.92 (d, J = 8.2 Hz, 1H); 8.53 (d, J = 7.6 Hz, 1H); 9.68 (s, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 604 [M-H]-; m/z = 606 [M+H]+; m/z = 650 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.28分.
【０６６３】
化合物６２：（４−（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）メタノール
１，４−ベンゼンジメタノール（２ｇ、１４．３３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液に、イミダゾール（１．１３ｇ、１６．４８ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で１５分間撹拌し、次いでトリイソプロピルシリルクロリド（３．１４ｍＬ、１４．３３ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌を行った。Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）を反応混合物に加え、有機相を飽和ブライン（１００ｍＬ）で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４上で濾過し、真空で濃縮し、ＤＣＭに溶解し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル２００ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（８：２ヘプタン／ＥｔＯＡｃの定組成溶離）により精製して、化合物６２（１．９ｇ）を無色油状物として得た（４５％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.04 (d, J = 6,7 Hz, 18H); 1.15 (m, 3H); 4.48
(d, J = 5.7 Hz, 2H); 4.78 (s, 2H); 5.13 (t, J = 5.7 Hz, 1H); 7.29 (s, 4H).
【０６６４】
化合物６３：（（４−（ブロモメチル）ベンジル）オキシ）トリイソプロピルシラン
０℃で冷却したＮ−ブロモスクシンイミド（１．２９ｇ、７．１６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６５ｍＬ）中懸濁液に、ジメチルスルフィド（９５３μＬ、１２．９ｍｍｏｌ）を滴下添加した。０℃で１０分間撹拌を行い、次いで反応媒体を−２０℃で冷却し、−２０℃で１０分間撹拌した。次いで−２０℃で冷却した化合物６２（１．９ｇ、６．４５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）中溶液を滴下添加した。−２０℃で１５分間次いで０℃で１５分間および室温で終夜撹拌を行った。反応媒体を飽和ブライン（１００ｍＬ）で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル４０ｇ上での連続した２種のフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの濃度勾配溶離）により精製した。所望の化合物を含むフラクションを合わせ、真空で濃縮し、ヘプタン（８ｍＬ）に溶解した。懸濁液を濾過し、濾液を真空で濃縮し、Ｅｔ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、−２０℃で冷却し、濾過し、真空で濃縮して、化合物６３（１．１８ｇ）を淡黄色油状物として得た（５１％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.04 (d, J = 6,8 Hz, 18H); 1.15 (m, 3H); 4.70
(s, 2H); 4.81 (s, 2H); 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 2H). LCMS
(A5): ES m/z = 104; m/z = 356 [M]+; tR= 1.99分.
【０６６５】
化合物６４：（１Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−４，７，７−トリメチル−６−（４−（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）−６−チアビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イウムトリフルオロメタンスルホネート
（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４，７，７−トリメチル−６−チアビシクロ［３．２．１］オクタン（ＣＡＳ番号［５７１８−７５−２］、５６２．３ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）に、化合物６３（１．１８ｇ、３．３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３．４ｍＬ）中溶液を加えた。次いでトリフルオロメタンスルホン酸リチウム（２．６３ｇ、１６．５１ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（３ｍＬ）中溶液を滴下添加し、反応媒体を室温で終夜撹拌した。次いでＨ２Ｏ（１５ｍＬ）およびＤＣＭ（１５ｍＬ）を反応媒体に加え、室温で１０分間撹拌を行った。水相をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（３×８ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮した。淡黄色油状物をｉＰｒ２Ｏ（５ｍＬ）中で摩砕し、このように得られた固体を濾過し、ｉＰｒ２Ｏ（２×５ｍＬ）で洗浄し、真空乾固して、化合物６４（１．１２５ｇ）を白色固体として得た（５７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.04 (m, 21H); 1.15 (m, 3H); 1.45 (m, 1H); 1.60 (m, 2H); 1.68 (s, 3H); 1.71 (m, 1H); 1.74 (s, 3H); 1,98 (m, 1H); 2.40 (d, J = 14.6 Hz, 1H); 2.45 (m, 1H); 2.58 (広幅なd, J = 14.6 Hz, 1H); 3.85 (m, 1H); 4.56 (d, J = 12.6 Hz, 1H); 4.83 (s, 2H); 4.90 (d, J = 12.6 Hz, 1H); 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 2H).
【０６６６】
化合物６５：（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
−７０℃で冷却した化合物６１（１３８ｍｇ、２２７．７μｍｏｌ）および６４（１４９．５ｍｇ、２５０．４μｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）中溶液に、ＢＥＭＰ（ＣＡＳ番号［９８０１５−４５−３］、９０．２μＬ、２９６．０μｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を−７０℃で２時間撹拌し、飽和ブライン（７ｍＬ）を反応混合物に加え、浴を除去し、室温にまで激しく撹拌を行った。水相をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル１０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物６５（１６３ｍｇ）を無色油状物（３０％）としておよび化合物６１（６０ｍｇ、４３％）を得た。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.84 (s, 9H); 0.88 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 1.00 (s, 3H); 1.04 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.05 (d, J = 7.3 Hz, 18H); 1.15 (m, 3H); 1.19
(s, 3H); 1.32 (d, J = 14.8 Hz, 1H); 1.82 (m, 1H); 1.97 (dd, J = 9.9および14.8 Hz, 1H); 2.28 (dt, J = 11.1および14.9 Hz, 1H); 2.61 (m, 1H); 2.69 (dd, J = 11.2および14.3 Hz, 1H); 2.91 (dd, J = 2.2および7.6 Hz, 1H); 2.95 (dd, J = 3.8および14.3 Hz, 1H); 3.43 (m, 1H); 3.80 (s, 3H); 3.91 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 4.08 (ddd, J = 3.8, 7.4および11.2 Hz, 1H); 4.12 (m, 1H); 4.81 (s, 2H); 5.04 (ddd, J = 1.5, 4.5および11.1 Hz, 1H); 5.89 (dd, J = 1.5および15.2 Hz, 1H); 6.44 (ddd, J = 4.5, 10.6および15.2 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H); 7.91 (d, J = 7.1 Hz, 1H); 8.39 (d, J = 7.4 Hz, 1H). LCMS (A4): ES m/z = 120; m/z = 882 [M+H]+; tR = 7.65分.
【実施例２６】
【０６６７】
（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（ヒドロキシメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
０℃で冷却した化合物６５のＴＨＦ中溶液に、ＴＢＡＦを加えた。反応媒体を０℃で１時間３０分撹拌し、次いでＨ２Ｏ（５ｍＬ）を加え、２０分間撹拌を行った。反応媒体をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（３×５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル１５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、実施例２６（６９ｍｇ）を白色ラッカーとして得た（９１％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (s, 9H); 0.89 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 1.00 (s, 3H); 1.04 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.19 (s, 3H); 1.35 (d, J = 14.8 Hz, 1H); 1.80
(m, 1H); 1.99 (dd, J = 9.9および14.8 Hz, 1H); 2.27 (dt, J = 11.1および14.9 Hz, 1H); 2.61 (m, 1H); 2.69 (dd, J = 11.2および14.3 Hz, 1H); 2.90 (dd, J = 2.2および7.6 Hz, 1H); 2.95 (dd, J = 3.8および14.3 Hz, 1H); 3.43 (m, 1H); 3.80 (s, 3H); 3.91 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 4.06〜4.15 (m, 2H); 4.50 (d, J = 5.9 Hz, 2H); 5.03 (dd, J = 1.5, 3.7および11.5 Hz, 1H); 5.20 (t, J = 5.9 Hz, 1H); 5.89 (dd, J = 1.5および15.3 Hz, 1H); 6.43 (ddd, J = 4.6, 10.7および15.3 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.2および8.6 Hz, 1H); 7.23 (d, J = 8.3 Hz, 2H); 7.32 (m, 3H); 7.87 (d, J = 8.3 Hz, 1H); 7.92 (d, J = 7.0 Hz, 1H); 8.40 (d, J = 7.4 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 724 [M-H]-; m/z = 726 [M+H]+; m/z = 770 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.29分.
【０６６８】
化合物６６：４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル（４−ニトロフェニル）カルボネート
実施例２６（６８ｍｇ、９３．６μｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に、ビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（１１８．７ｍｇ、３７４．５μｍｏｌ）を加え、ＤＩＥＡ（４９μＬ、２８１．０μｍｏｌ）を滴下添加した。反応媒体を室温で６日間撹拌し、次いで飽和ブラインを加え、これをＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物６６（７９ｍｇ）を白色ラッカーとして得た（９４％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (s, 9H); 0.89 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 1.00 (s, 3H); 1.05 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.19 (s, 3H); 1.34 (d, J = 14.6 Hz, 1H); 1.83
(m, 1H); 1.97 (dd, J = 9.9および14.6 Hz, 1H); 2.28 (dt, J = 11.1および14.9 Hz, 1H); 2.61 (m, 1H); 2.69 (dd, J = 11.2および14.3 Hz, 1H); 2.93 (m, 2H); 3.42 (m, 1H); 3.79 (s, 3H); 3.99 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 4.09 (m, 2H); 5.05 (dd, J = 1.3, 4.0および11.1 Hz, 1H); 5.31 (s, 2H); 5.89 (dd, J = 1.3および15.3 Hz, 1H); 6.47 (ddd, J = 4.8, 10.8および15.3 Hz, 1H); 7.01 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.21 (dd, J = 2.2および8.6 Hz, 1H); 7.31 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 7.36 (d, J = 8.5 Hz, 2H); 7.50 (d, J = 8.5 Hz, 2H); 7.59 (d, J = 9.3 Hz, 2H); 7.87 (d, J = 8.3 Hz, 1H); 7.92 (d, J = 7.0 Hz, 1H); 8.32 (d, J = 9.3 Hz, 2H); 8.39 (d, J = 7.4 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 889 [M-H]-; m/z = 891 [M+H]+; m/z = 935 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.55分.
【０６６９】
化合物６７：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２−ＮＢｏｃ−アミノエチル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート塩酸塩
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＯＨ（３．５ｇ、８．５３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍＬ）中懸濁液に、ＴＥＡ（３．６ｍＬ、２５．５８ｍＬ）を加えて、出発物Ｎ−Ｂｏｃ−ＥＤＡ（１．６２ｍＬ、１０．２３ｍｍｏｌ）およびプロピルホスホン酸無水物（６．５１ｇ、１０．２３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ中５０％溶液を完全に溶解させた。反応媒体を室温で３時間撹拌し、次いで１Ｎ  ＮａＯＨ（５０ｍＬ）を加え、懸濁液を濾過し、Ｈ２ＯおよびＤＣＭで洗浄した。濾液の有機相をＨ２Ｏで洗浄した。ケーキおよび有機相を合わせ、真空で部分的に濃縮し、濾過し、ＤＣＭで洗浄し、乾燥して、化合物６７（３．９５２ｇ）を白色粉体として得た（８４％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.84 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.86 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 1.19 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.37 (s, 9H); 1.99 (m, 1H); 2.92〜3.14 (m, 4H); 3.88 (dd, J = 6.9および9.1 Hz, 1H);  4.19〜4.35 (m, 4H); 6.71 (m, 1H); 7.32 (m, 2H); 7.38 (m, 1H); 7.42 (m, 2H); 7.73 (m, 2H); 7.84 (t, J = 6.8 Hz, 1H); 7.89 (d, J = 7.8 Hz, 2H); 7.92 (d, J = 7.8 Hz, 1H).
【０６７０】
化合物６８：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（２−アミノエチル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート塩酸塩
化合物６７（１００ｍｇ、１５９．５μｍｏｌ）のジオキサン（３ｍＬ）中懸濁液に、ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（９０５μＬ、３．６２ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で２０時間撹拌し、次いで真空で濃縮した。粗生成物をｉＰｒ２Ｏ（３ｍＬ）に再度懸濁し、超音波浴中に浸漬し、濾過した。このように得られたケーキをｉＰｒ２Ｏ（２×３ｍＬ）で洗浄し、真空乾固して、化合物６８（７８ｍｇ）を白色固体として得た（８８％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.85 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 0.87 (d, J = 6.9 Hz, 3H); 1.23 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.99 (m, 1H); 2,83 (m, 2H); 3.29 (m, 2H); 3.89 (dd, J = 6.9および8.9 Hz, 1H);  4.19〜4.38 (m, 4H); 7.33 (m, 2H); 7.42 (m, 3H); 7.75 (m, 2H); 7.88 (広幅なs, 3H); 7.90 (d, J = 7.6 Hz, 2H); 8.08 (d, J = 7.3 Hz, 1H);  8.14 (d, J = 5.9 Hz, 1H).
【０６７１】
化合物６９：４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル（２−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）エチル）カルバメート
化合物６６（７８ｍｇ、８７．５μｍｏｌ）および６８（５１．４ｍｇ、１０５．０μｍｏｌ）のＤＣＭ中懸濁液に、ＤＩＥＡ（４４．０μＬ、２６２．５μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌し、次いで化合物６８（２４ｍｇ、４９μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１５μＬ）を加え、室温で１日間撹拌を行った。ピペリジン（８７．０μＬ、８７５．０μｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌を行った。反応媒体を真空で濃縮し、シリカゲル５ｇ上での連続する２種のフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、化合物６９（５７ｍｇ）を白色ラッカーとして得た（６６％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.75 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.85 (s, 9H); 0.86 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.87 (d, J = 6.7 Hz, 3H); 0.99 (s, 3H); 1.04 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 1.18 (m, 6H); 1.33 (d, J = 14.5 Hz, 1H); 1.75 (広幅なs, 2H); 1.81 (m, 1H); 1.92 (m, 1H); 1.98 (dd, J = 10.0および14.5 Hz, 1H); 2.28 (m, 1H); 2.61 (m, 1H); 2.69 (dd, J = 11.3および14.7 Hz, 1H); 2.90 (dd, J = 2.0および7.5 Hz, 1H); 2.96 (m, 1H); 2.98 (d, J = 4.7 Hz, 1H); 3.05 (m, 2H); 3.12 (m, 2H); 3.43 (m, 1H); 3.81 (s, 3H); 3.93 (d, J = 2.0 Hz, 1H); 4.09 (m, 2H); 4.26 (m, 1H); 5.01 (s, 2H); 5.04 (m, 1H); 5.89 (dd, J = 1.5および15.2 Hz, 1H); 6.45 (ddd, J = 4.5, 10.4および15.2 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.4および8.8 Hz, 1H); 7.26 (t, J = 6.0 Hz, 1H); 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.32 (d, J = 2.5 Hz, 1H); 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H); 7.93 (d,  J = 7.1 Hz, 1H); 8.00 (t, J = 6.0 Hz, 1H); 8.03 (d, J = 8.1 Hz, 1H); 8.41 (d, J = 7.2 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 492 [M+2H]2+; m/z = 980 [M-H]-; m/z = 982 [M+H]+; m/z = 1026 [M-H+HCO2H]-; tR= 0.91分.
【０６７２】
化合物７０：（９Ｓ，１２Ｓ）−１−（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシ−ベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）フェニル）−１２−イソプロピル−９−メチル−３，８，１１，１４−テトラオキソ−２−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザオクタデカン−１８−オン酸
化合物６９（５６．０ｍｇ、５６．８μＬ）のＤＣＭ（８ｍＬ）中溶液に、グルタル酸無水物（７．２７ｍｇ、６２．５μｍｏｌ）のＤＣＭ（４ｍＬ）中溶液を加えた。反応媒体を室温で２時間撹拌し、真空で濃縮し、シリカゲル５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、化合物７０（３５．５ｍｇ）を白色ラッカーとして得た（５６％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.81 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.85 (s, 9H); 0.87 (d, J = 6.5 Hz, 3H); 0.99 (s, 3H); 1.04 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.19 (m, 6H); 1.32 (d, J = 14.3 Hz, 1H); 1.70 (m, 2H); 1.81 (m, 1H); 1.92 (m, 1H); 1.98 (m, 2H); 2.15 (m, 2H); 2.19 (t, J = 7.5 Hz, 2H); 2.27 (m, 1H); 2.61 (m, 1H); 2.69 (dd, J = 11.1および14.1 Hz, 1H); 2.91 (d, J = 7.6 Hz, 1H); 2.95 (m, 1H); 3.04 (m, 2H); 3.10 (m, 2H); 3.41 (m, 1H); 3.80 (s, 3H); 3.93 (s, 1H); 4.03〜4.16 (m, 3H); 4.19 (m, 1H); 5.01 (s, 2H); 5.04 (m, 1H); 5.89 (d, J = 15.6 Hz, 1H); 6.43 (ddd, J = 5.3, 11.0および15.6 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1H); 7.28 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.30 (m, 1H); 7,32 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.88 (m, 2H); 7.93 (d, J = 7.4 Hz, 1H); 7.98 (広幅なs, 1H); 8.06 (広幅なs, 1H); 8.42 (d, J = 7.4 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 549 [M+2H]2+; m/z = 1094 [M-H]-; m/z = 1096 [M+H]+; tR = 1.21分.
【実施例２７】
【０６７３】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル（９Ｓ，１２Ｓ）−１−（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロ−ヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）フェニル）−１２−イソプロピル−９−メチル−３，８，１１，１４−テトラオキソ−２−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザオクタデカン−１８−オエート
化合物７０（１４．６ｍｇ、１３．３μｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に、Ａｒ下ＤＳＣ（４．３ｍｇ、１６．０μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２．８μＬ、１６．０μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で３時間撹拌し、次いでＤＳＣ（１．５ｍｇ、５．６μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１μＬ、５．７μｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌を行った。反応媒体を真空で濃縮し、ジオールで修飾したシリカゲル１６．４ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ｉＰｒＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、実施例２７（１１．４ｍｇ）を白色ラッカーとして得た（７２％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.81 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.85 (s, 9H); 0.88 (d, J = 6.5 Hz, 3H); 0.99 (s, 3H); 1.04 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.19 (m, 6H); 1.34 (d, J = 14.4 Hz, 1H); 1.83 (m, 3H); 1.98 (m, 2H); 2.26 (m, 1H); 2.29 (m, 2H); 2.60 (m, 1H); 2.68 (t, J = 7.6 Hz, 2H); 2.70 (dd, J = 11.2および14.3 Hz, 1H); 2.80 (s, 4H); 2.91 (dd, J = 2.3および7.6 Hz, 1H); 2.95 (dd, J = 3.7および14.3 Hz, 1H); 2.99〜3.20 (m, 4H); 3.43 (m, 1H); 3.80 (s, 3H); 3.93 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 4.05〜4.25 (m, 4H); 5.01 (m, 2H); 5.03 (m, 1H); 5.89 (dd, J = 1.6および15.4 Hz, 1H); 6.44 (ddd, J = 4.6, 10.9および15.4 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.5 Hz, 1H); 7.20 (m, 2H); 7.28 (d, J = 8.5 Hz, 2H); 7.31 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 7.37 (d, J = 8.5 Hz, 2H); 7.86 (m, 3H); 7.91 (d, J = 7.1 Hz, 1H); 7.95 (d, J = 7.6 Hz, 1H); 8.39 (d, J = 7.3 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 311; m/z = 1191 [M-H]-; m/z = 1193 [M+H]+; m/z = 1237 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.26分.
【実施例２８】
【０６７４】
ｍＡｂ−Ｅｘ２７
実施例２８を実施例３、７、１０および１４と同様の方法で製造した。実施例２８（１．５６ｍｇ）を無色透明溶液として０．７８ｍｇ／ｍＬの濃度でＤＡＲ４（ＨＲＭＳ）、単量体純度１００％および合計収率１３％にて得た。
ＳＥＣ−ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ＝１４９４０５（ネイキッドｍＡｂ）；ｍ／ｚ＝１５０４８６（Ｄ１）；ｍ／ｚ＝１５１５６８（Ｄ２）；ｍ／ｚ＝１５２６４５（Ｄ３）；ｍ／ｚ＝１５３７２５（Ｄ４）；ｍ／ｚ＝１５４８０２（Ｄ５）；ｍ／ｚ＝１５５８８２（Ｄ６）；ｍ／ｚ＝１５６９６１（Ｄ７）；ｍ／ｚ＝１５８０３９（Ｄ８）。
【０６７５】
実施例２９：マレイミド−ｍｃ−ｖｃ−ＰＡＢＡ−３−（Ｓ）−ネオペンチル−７−（Ｓ）−Ｍｅ−アザ−Ｃ５２ベンジル酸アミンの合成
【化３１８】
2018535255.tif 000348
【０６７６】
化合物７１：４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カルボネート
Ｖｅｒｍａ  Ｖ．Ａ．ら、Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ  ２０１５年、２５巻、８６４〜８６８頁により記載されている通りに、化合物７２を製造した。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.87 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 1.18 (m, 2H); 1.31〜1.75 (m, 8H); 1.96 (m, 1H); 2.10 (m, 1H); 2.18 (m, 1H); 2.96 (m, 1H); 3.01 (m, 1H); 3.37 (t, J = 7.2 Hz, 2H); 4.19 (dd, J = 7.0および8.6 Hz, 1H); 4.38 (m, 1H); 5.24 (s, 2H); 5.42 (s, 2H); 5.98 (t, J = 6.0 Hz, 1H); 7.00 (s, 2H); 7.40 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.57 (d, J = 9.2 Hz, 2H); 7.66 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 8.12 (d, J = 7.9 Hz, 1H); 8.31 (d, J = 9.2 Hz, 2H); 10.08 (s, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 738 [M+H]+; m/z = 782 [M-H+HCO2H]-; tR= 1.1分.
【実施例２９】
【０６７７】
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチル−ブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）カルバメート
化合物７１（１６．０ｍｇ、２１．７μｍｏｌ）に、実施例２５（１４．３ｍｇ、１９．７μｍｏｌ）のＤＣＭ（２．５ｍＬ）およびＤＩＥＡ（３．４μＬ、１９．７μｍｏｌ）中溶液を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌し、次いでＤＭＦ（１ｍＬ）を加え、室温で１日間撹拌を行った。Ｈ２Ｏ（８ｍＬ）を反応媒体に加え、１５分間撹拌を行い、次いで水相をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、トルエンを用いて２回共蒸発させ、シリカゲル５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、実施例２９（１５．８ｍｇ）を白色固体として得た（６０％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.81 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.85 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 0.86 (s, 9H); 0.89 (d, J = 6.8 Hz, 3H); 0.99 (s, 3H); 1.04 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 1.18 (s, 3H); 1.19 (m, 2H); 1.31〜1.75 (m, 9H); 1.80 (m, 1H); 1,96 (m, 2H) 2.10 (m, 1H); 2.18 (m, 1H); 2,27 (m, 1H); 2.61 (m, 1H); 2,69 (dd, J = 10.8および14.3 Hz, 1H); 2,90 (dd, J = 2.1および7.6 Hz, 1H); 2.96 (m, 2H); 3.01 (m, 1H); 3.37 (t, J = 7.2 Hz, 2H); 3.42 (m, 1H); 3.80 (s, 3H); 3.90 (d, J = 2.1 Hz, 1H); 4.08 (m, 1H); 4.11 (m, 1H); 4.20 (m, 3H); 4.39 (m, 1H); 4.97 (s, 2H); 5.04 (m, 1H); 5.40 (s, 2H); 5.89 (dd, J = 1.7および15.5 Hz, 1H); 5.97 (t, J = 6.2 Hz, 1H); 6.45 (ddd, J = 4.8, 10.7および15.5 Hz, 1H); 6.99 (s, 2H); 7.01 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 1H); 7.21〜7.30 (m, 6H);  7.31 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 7.59 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.78 (m, 2H); 7.85 (d, J = 8.5 Hz, 1H); 7.90 (d, J = 6.9 Hz, 1H); 8.07 (d, J = 7.8 Hz, 1H); 8.39 (d, J = 7.3 Hz, 1H); 9.97 (s, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 662 [M+2H]2+; m/z = 1322 [M-H]-; m/z = 1324 [M+H]+; m/z = 1368 [M-H+HCO2H]-; tR= 1.3分.
【０６７８】
実施例３０および３１：非開裂性トリアゾール−３−（Ｓ）−ネオペンチル−７−（Ｓ）−Ｍｅ−アザ−Ｃ５２のＮＨＳエステルおよび対応するＡＤＣの合成
【化３１９】
2018535255.tif 000349
【０６７９】
化合物７２：ｔｅｒｔ−ブチル３−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）プロパノエート
プロパルギルアルコール（１．３６２ｍＬ、２３．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２３ｍＬ）中溶液に、ナトリウム（２０．０８ｍｇ、０．８７４ｍｍｏｌ）を加え、ナトリウムが完全に溶解するまで反応媒体を６０℃で加熱し、次いで室温で冷却した後、ｔｅｒｔ−ブチルアクリレート（２．２８６ｍＬ、１５．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌し、次いでＨ２Ｏ（２５ｍＬ）を加え、水相をＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、化合物７２（２ｇ）を無色油状物として得た（７０％）。
【０６８０】
化合物７３：３−（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）プロパン酸
化合物７２（２．０ｇ、１０．８６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）中溶液に、ＴＦＡ（８．０６５ｍＬ、１０８．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌し、真空で濃縮し、トルエンを用いて共蒸発させ、シリカゲル８０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物７３（１．１ｇ）を油状物として得た（８０％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 2.46 (t, J = 6.4 Hz, 2H); 3.43 (t, J = 2.4 Hz, 1H); 3.63 (t, J = 6.4 Hz, 2H); 4.11 (d,J = 2.4 Hz, 2H); 12.20 (広幅, 1H).
【０６８１】
化合物７４：３−（（１−（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）プロパン酸
実施例２４（５０ｍｇ、６６．６μｍｏｌ）のＴＨＦ（０．５ｍＬ）中溶液に、化合物７３（１７．０５ｍｇ、１１３．１μｍｏｌ）、０．１Ｍ硫酸銅（ＩＩ）水溶液（２６６μＬ、２６．６μｍｏｌ）および０．２Ｍアスコルビン酸ナトリウム水溶液（２６６μＬ、５３．２μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で１日間撹拌し、次いでＨ２Ｏ（１ｍＬ）を加え、水相をＥｔＯＡｃ（３×１ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ２０（ＤＣＭ溶離）上での濾過により精製して、油状物４０ｍｇを得、これをシリカゲル５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により更に精製して、化合物７４（２０ｍｇ、３５％）を得た。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.82 (s, 9H); 0.88 (d, J = 6.7 Hz, 3H); 1.00 (s, 3H); 1.04 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.18 (s, 3H); 1.31 (d, J = 14.6 Hz, 1H); 1.80
(m, 1H); 1.97 (dd, J = 10.0および14.6 Hz, 1H); 2.25 (m, 1H); 2.42 (t, J = 6.6 Hz, 2H); 2.60 (m, 1H); 2,70 (dd, J = 10.9および14.4 Hz, 1H); 2.90 (dd, J = 2.2および7.6 Hz, 1H); 2.95 (dd, J = 3.6および14.4 Hz, 1H); 3.44 (m, 1H); 3.62 (t, J =
6.6 2H); 3.80 (s, 3H); 3.94 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 4.08 (m, 2H); 4.49 (s, 2H); 5.03 (m, 1H); 5.59 (s, 2H); 5.89 (dd, J = 1.7および15.3 Hz, 1H); 6.43 (ddd, J = 4.8, 10.8および15.3 Hz, 1H); 7.02 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.4および8.7 Hz, 1H); 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.32 (d, J = 2.4 Hz, 1H); 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H); 7.90 (d, J = 7.0 Hz, 1H); 8.13 (s, 1H); 8.46 (m, 1H); 12.20 (広幅, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 440 [M+2H]2+; m/z = 877 [M-H]-; m/z = 879 [M+H]+; tR = 1.24分.
【実施例３０】
【０６８２】
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（（１−（４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（（Ｓ）−１−（（３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６，６，７−トリメチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−１−オキサ−４，８，１１−トリアザ−シクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）エチル）オキシラン−２−イル）ベンジル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）プロパノエート
化合物７４（２０ｍｇ、２２．７μｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中溶液に、ＤＩＥＡ（５．０μＬ、２８．５μｍｏｌ）およびＤＳＣ（６．３４ｍｇ、２３．８μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で３時間撹拌し、次いでＤＳＣ（３ｍｇ、１１．３μｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５μＬ、２８．５μｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌を行った。次いで反応媒体を真空で濃縮し、ジオールで修飾したシリカゲル１．５ｇ上での連続した２種のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ｉＰｒＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、実施例３０（１１．５ｍｇ、５０％）を得た。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.83 (s, 9H); 0.87 (d, J = 6.6 Hz, 3H); 0.99 (s, 3H); 1.03 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.04 (d, J = 6.6 Hz, 3H); 1.19 (s, 3H); 1.32 (d, J = 14.5 Hz, 1H); 1.81 (m, 1H); 1.96 (dd, J = 10.2および14.5 Hz, 1H); 2.25 (m, 1H); 2.60 (m, 1H); 2.70 (dd, J = 11.2および14.5 Hz, 1H); 2.80 (s, 4H); 2.90 (dd, J = 2.0および7.4 Hz, 1H); 2.94 (t, J = 6.1 Hz, 2H); 2.97 (dd, J = 3.6および14.1 Hz, 1H); 3.42 (m, 1H); 3.74 (t, J = 6.1 Hz, 2H); 3.80 (s, 3H); 3.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H); 4.09 (m, 2H); 4.55 (s, 2H); 5.03 (m, 1H); 5.59 (s, 2H); 5.89 (dd, J
= 1.6および15.2 Hz, 1H); 6.44 (ddd, J = 4.7, 10.6および15.2 Hz, 1H); 7.02 (d, J
= 8.6 Hz, 1H); 7.20 (dd, J = 2.4および8.6 Hz, 1H); 7.29 (d, J = 8.3 Hz, 2H); 7.32 (m, 3H); 7.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H); 7.90 (d, J = 6.9 Hz, 1H); 8.14 (s, 1H); 8.39 (d, J = 7.5 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 120; m/z = 974 [M-H]-; m/z = 976 [M+H]+; m/z = 1020 [M-H+HCO2H]-; tR = 1.29分.
【実施例３１】
【０６８３】
ｍＡｂ−実施例３０
実施例３１を実施例３、７、１０および１４と同様の方法で製造した。実施例３１（５．４ｍｇ）を無色透明溶液として１．８ｍｇ／ｍＬの濃度でＤＡＲ４（ＨＲＭＳ）、単量体純度９８．１％および合計収率４５％にて得た。
ＳＥＣ−ＨＲＭＳ：ｍ／ｚ＝１４９３９９（ネイキッドｍＡｂ）；ｍ／ｚ＝１５０２４５（Ｄ１）；ｍ／ｚ＝１５１１０１（Ｄ２）；ｍ／ｚ＝１５１９６５（Ｄ３）；ｍ／ｚ＝１５２８３１（Ｄ４）；ｍ／ｚ＝１５３６７９（Ｄ５）；ｍ／ｚ＝１５４５４６（Ｄ６）；ｍ／ｚ＝１５５４０８（Ｄ７）；ｍ／ｚ＝１５６２７３（Ｄ８）；ｍ／ｚ＝１５７２８４（Ｄ９）。
【０６８４】
実施例３２：３−（Ｓ）−ネオペンチル−６−Ｍｅ−６−ＣＨ２ＯＨ−アザ−Ｃ５２ベンジル酸アミンの合成
【化３２０】
2018535255.tif 000350
【０６８５】
化合物７５：（２Ｒ，３Ｓ）−１−（（４−メトキシベンジル）オキシ）−２−メチルヘキサ−５−エン−３−イル（２Ｓ）−２−（（４−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−（３−クロロ−４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−３−（ヒドロキシメチル）−３−メチル−２−オキソブチル）アミノ）−４，４−ジメチルペンタノエート
化合物ＢＣ６（３８５．６ｍｇ、７７３．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（１２ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（３４８．７ｍｇ、８８９．５μｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１２２．３ｍｇ、８８９．５μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を室温で３０分間撹拌し、次いで化合物ＡＤ３（２９２ｍｇ、７７３．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）およびＤＩＥＡ（４７５．２μＬ、２．７１ｍｍｏｌ）中溶液を加え、室温で４時間撹拌を行った。Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を加え、水相をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）、飽和ブライン（３×１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル３０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物７５（３８３ｍｇ）を黄色油状物として得た（６５％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 55/45 ジアステレオ異性体混合物; 0.85〜0.88 (m, 12H); 0.91 (s, 1.65H) ; 0.92 (s, 1.35H) ; 1.56 (m, 1H) ; 1.60 (m, 1H) ; 1.98 (m, 1H) ; 2.21 (m, 1H) ; 2.30 (m, 1H); 2.71 (m, 1H); 2.92 (m, 1H); 3.19〜3.45 (m, 6H); 3.73 (s, 3H); 3.80 (s, 3H); 4.29 (m, 1H); 4.33 (m, 2H); 4.58 (m, 1H); 4.82 (m, 1H); 4.95〜5.09 (m, 3H); 5.55 (dd, J = 2.2および10.2 Hz, 1H); 5.71 (m, 1H); 6.01 (dd, J = 2.2および17.2 Hz, 1H); 6.23 (dd, J = 10.2および17.2 Hz, 1H); 6.89 (m, 2H); 7.01 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.17 (dd, J = 2.2および8.6 Hz, 1H); 7.21 (m, 2H); 7.34 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 7.82 (d, J = 8.0 Hz, 0.45H); 7.84 (d, J = 8.0 Hz, 0.55H); 7.98 (t, J = 6.5 Hz, 0.45H); 8.00 (t, J = 6.5 Hz, 0.55H); 8.39 (d, J = 8.6 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 756 [M-H]-; m/z = 758 [M+H]+; m/z = 802 [M-H+HCO2H]-; tR= 1.54-1.56分.
【０６８６】
化合物７６：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６−（ヒドロキシメチル）−１６−（（Ｒ）−１−（（４−メトキシベンジル）オキシ）プロパン−２−イル）−６−メチル−３−ネオペンチル−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
化合物７５（３８０ｍｇ、５０１．１μｍｏｌ）のＤＣＭ（３８ｍＬ）中溶液に、Ａｒ下Ｇｒｕｂｂｓ  Ｉ触媒（２０．９７ｍｇ、２５．０５μｍｏｌ）を加えた。反応媒体をＡｒ下室温で４時間撹拌し、次いでＧｒｕｂｂｓ  Ｉ触媒（２０．９７ｍｇ、２５．０５μｍｏｌ）を加えた。室温で３時間撹拌を行い、次いでＧｒｕｂｂｓ  Ｉ触媒（２０．９７ｍｇ、２５．０５μｍｏｌ）を加え、室温で撹拌を行った。２４時間反応した後、Ｇｒｕｂｂｓ  Ｉ触媒（２０．９７ｍｇ、２５．０５μｍｏｌ）を加え、４時間撹拌を行った。反応媒体を真空で濃縮し、シリカゲル２０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの定組成溶離）により精製して、化合物７６ステレオマー１（１７０ｍｇ、５６％）および化合物７６ステレオマー２（１３８ｍｇ、３７％）を得た。
【０６８７】
化合物７６ステレオマー１
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.83 (s, 9H); 0.91 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.02 (s, 3H); 1.30 (dd, J = 2.4および14.6 Hz, 1H); 1.53 (dd, J = 9.9および14.6 Hz, 1H); 1.99 (m, 1H); 2.28 (m, 1H); 2.45 (m, 1H); 2.67 (m, 1H); 2.91 (dd, J = 3.0および13.7 Hz, 1H); 2.97 (dd, J = 4.0および14.5 Hz, 1H); 3.17〜3.49 (m, 5H); 3.72 (s, 3H); 3.80 (s, 3H); 4.18 (m, 1H); 4.37 (m, 2H); 4.50 (td, J = 2.4および9.6 Hz, 1H); 5.00 (m, 3H); 5.82 (dd, J = 1.9および15.4 Hz, 1H); 6.39 (ddd, J = 4.2, 11.6および15.4 Hz, 1H); 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.04 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.12 (m, 1H); 7.15 (dd, J = 2.3および8.6 Hz, 1H); 7.21 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.28 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 8.09 (d, J = 9.6 Hz, 1H); 8.38 (d, J = 8.0 Hz, 1H). LCMS (A4): ES m/z = 728 [M-H]-; m/z = 730 [M+H]+; m/z = 774; tR = 5.15分.
化合物７６ステレオマー２
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.83 (s, 9H); 0.88 (s, 3H); 0.91 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.28 (dd, J = 2.4および14.6 Hz, 1H); 1.67 (dd, J = 9.9および14.6 Hz, 1H); 1.99 (m, 1H); 2.28 (m, 1H); 2.45 (m, 1H); 2.67 (m, 1H); 3.02 (dd, J = 3.3および14.2 Hz, 1H); 3.08 (dd, J = 1.9および13.5 Hz, 1H); 3.25〜3.42 (m, 4H); 3.55 (dd, J = 5.1および11.0 Hz, 1H); 3.73 (s, 3H); 3.81 (s, 3H); 4.17 (m, 1H); 4.37 (m, 2H); 4.44 (td, J = 2.1および9.3 Hz, 1H); 4.80 (t, J = 5.1 Hz, 1H); 5.00 (m, 2H); 5.86 (dd, J = 1.6および15.1 Hz, 1H); 6.38 (ddd, J = 4.0, 11.4および15.3 Hz, 1H); 6.90 (d, J = 8.8 Hz, 2H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.19 (dd, J = 2.2および8.7 Hz, 1H); 7.22 (d, J = 8.8 Hz, 2H); 7.30 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 7.42 (d, J = 10.4 Hz, 1H); 7.92 (d, J = 8.9 Hz, 1H); 8.45 (d, J = 8.0 Hz, 1H). LCMS (A4): ES m/z = 728 [M-H]-; m/z = 730 [M+H]+; m/z = 774; tR = 4.79分.
【０６８８】
化合物７７：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｒ）−１−（（４−メトキシ−ベンジル）オキシ）プロパン−２−イル）−６−メチル−３−ネオペンチル−６−（（（トリエチルシリル）オキシ）メチル）−１−オキサ−４，８，１１−トリアザ−シクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
氷浴で冷却した化合物７６ステレオマー１（１７０ｍｇ、２３２．８μｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中溶液に、４℃でクロロトリエチルシラン（１５９．３μＬ、９３１．１μｍｏｌ）を加え、ＴＥＡ（１３１．１μＬ、９３１．１μｍｏｌ）を滴下添加した。反応媒体を４℃で３０分間、次いで室温で２０時間撹拌した。反応媒体をＤＣＭ（５０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で希釈し、１０分間撹拌を行った。有機相を飽和ブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮した。化合物７６のその他のジアステレオマー（１３８ｍｇ、１８９．０μｍｏｌ）を同様に保護化し、両バッチをプールし、シリカゲル２０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃの定組成溶離）により精製して、化合物７７ステレオマー１（１３９ｍｇ）を無色泡状物として（３９％）、化合物７７ステレオマー２（１０７ｍｇ）を無色泡状物として得た（３０％）。
【０６８９】
化合物７７ステレオマー１
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.62 (q, J = 8.1 Hz, 6H); 0.83 (s, 9H); 0.91 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 0.96 (t, J = 8.1 Hz, 9H); 1.04 (s, 3H); 1.66 (dd, J = 3.4および14.4 Hz, 1H); 1.43 (dd, J = 9.3および14.4 Hz, 1H); 1.99 (m, 1H); 2.28 (m, 1H); 2.47 (m, 1H); 2.68 (m, 1H); 2.92 (dd, J = 3.0および13.5 Hz, 1H); 2.99 (dd, J = 4.0および14.8 Hz, 1H); 3.21〜3.40 (m, 3H); 3.48 (m, 1H); 3.63 (d, J = 10.3 Hz, 1H); 3.73 (s, 3H); 3.81 (s, 3H); 4.17 (m, 1H); 4.36 (m, 2H); 4.51 (td, J = 2.9および9.4  Hz, 1H); 5.02 (m, 1H); 5.82 (dd, J = 1.8および15.4 Hz, 1H); 6.39 (ddd, J = 4.3, 11.6および15.4 Hz, 1H); 6.89 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.02 (m, 1H); 7.04 (d, J = 8.7 Hz, 1H); 7.15 (dd, J = 2.3および8.7 Hz, 1H); 7.21 (d, J = 8.7 Hz, 2H); 7.29 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 7.96 (d, J = 9.4 Hz, 1H); 8.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H).
LCMS (A4): ES m/z = 842 [M-H]-; m/z = 844 [M+H]+; m/z = 888 [M-H+HCO2H]-; tR= 7.08分.
化合物７７ステレオマー２
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.52 (q, J = 8.1 Hz, 6H) 0.84 (s, 9H); 0.88〜0.93 (m, 15H); 1.29 (dd, J = 2.6および14.5 Hz, 1H); 1.68 (dd, J = 10.1および14.5
Hz, 1H); 1.99 (m, 1H); 2.28 (m, 1H); 2.47 (m, 1H); 2.68 (m, 1H); 3.01 (dd, J = 3.4および14.5 Hz, 1H); 3.15 (d, J = 12.8 Hz, 1H); 3.33 (m, 1H); 3.48 (d, J = 10.4 Hz, 1H); 3.73 (s, 3H); 3.81 (s, 3H); 3.83 (d, J = 10.4 Hz, 1H); 4.17 (m, 1H); 4.36 (m, 2H); 4.45 (td, J = 2.4および9.2 Hz, 1H); 5.01 (m, 1H); 5.84 (dd, J = 1.8および15.3  Hz, 1H); 6.39 (ddd, J = 3.9, 11.4および15.3 Hz, 1H); 6.90 (d, J = 8.8 Hz, 2H); 7.05 (d, J = 8.6 Hz, 1H); 7.19 (dd, J = 2.2および8.6 Hz, 1H); 7.22 (d, J = 8.8 Hz, 2H); 7.30 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 7.47 (d, J = 10.4 Hz, 1H); 8.01 (d, J = 9.2 Hz, 1H); 8.41 (d, J = 8.0 Hz, 1H). LCMS (A4): ES m/z = 842 [M-H]-; m/z = 844 [M+H]+; m/z = 888 [M-H+HCO2H]-; tR= 6.88分.
【０６９０】
化合物７８：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−１６−（（Ｒ）−１−ヒドロキシプロパン−２−イル）−６−メチル−３−ネオペンチル−６−（（（トリエチルシリル）オキシ）メチル）−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
氷／アセトン浴で冷却した化合物７７の両方のジアステレオマー（２４５ｍｇ、２９０．１μｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２．５ｍＬ）中溶液に、ＤＤＱ（３３９．４ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）および２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルピリジン（１７１．７ｍｇ、８７０．３μｍｏｌ）を加えた。反応媒体を０℃で２時間撹拌し、次いでＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）およびＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、１０分間撹拌を行った。水相をＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（３×５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル２０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物７８（１５５ｍｇ）を白色泡状物として得た（７４％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.49〜0.65 (m, 6H); 0.80〜1.07 (m, 24H); 1.35〜1.71 (m, 2H); 1.83 (m, 1H); 2.28 (m, 1H); 2.47 (m, 1H ; 2.68 (m, 1H); 2.90〜3.50 (m, 5.96H); 3.65 (d, J = 10.6 Hz, 0.52H); 3.80 (s, 3H); 3.82 (d, J = 10.6 Hz, 0.52H); 4.18 (m, 1H); 4.29〜4.70 (m, 2H); 5.02 (m, 1H); 5.80〜5.89 (m, 1H); 6.05 (m, 0.11H); 6.39 (m, 0.89H); 6.98〜7.31 (m, 3.48H); 7.47 (d, J = 10.6 Hz, 0.52H); 7.87 (d, J = 9.4 Hz, 0.11H); 7.96 (d, J = 9,4 Hz, 0.52H); 8.00 (d, J = 9.4 Hz, 0.37H); 8.31 (d, J = 8.0 Hz, 0.63H); 8.42 (d, J = 8.4 Hz, 0.37H). LCMS (A4): ES m/z = 722 [M-H]-; m/z = 724 [M+H]+; m/z = 768 [M-H+HCO2H]-; tR = 5.68-5.78分.
【０６９１】
化合物７９：（２Ｓ）−２−（（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６−メチル−３−ネオペンチル−２，５，９，１２−テトラオキソ−６−（（（トリエチルシリル）オキシ）メチル）−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−１６−イル）プロパナール
氷／アセトン浴で冷却した化合物７８（１５４ｍｇ、２１２．６μｍｏｌ）のＤＣＭ（１．５ｍＬ）中溶液に、０℃でＫＢｒ（２５．６ｍｇ、２１２．６μｍｏｌ）のＨ２Ｏ（６１２μＬ）中溶液、５ｍｇ／ｍＬでのＴＥＭＰＯのＤＣＭ中溶液（１３７μＬ、４．２５μｍｏｌ）を加え、１．５６Ｍ次亜塩素酸ナトリウム水溶液ｐＨ９．５（２０４μＬ、３１８．９μｍｏｌ）を滴下添加した。０℃で１５分間撹拌を行い、次いで０℃で飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（１．９ｍＬ）を加え、氷浴を除去し、反応媒体を１０分間撹拌した。次いでこれをＤＣＭ（３×２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２×１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル１５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物６１（３６ｍｇ、２３％）を得た。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 72/28 ジアステレオ異性体混合物: 0.49〜0.65 (m, 6H); 0.80〜1.08 (m, 24H); 1.32〜1.69 (m, 2H); 2.40 (m, 1H); 2.68 (m, 2H); 2.79 (m, 1H); 2.89〜3.70 (m, 5H); 3.80 (s, 3H); 4.10〜4.53 (m, 2H); 5.02 (m, 0.28H); 5.28 (m, 0.72H); 5.78〜5.91 (m, 1H); 6.07 (m, 0.28H); 6.40 (m, 0.72H); 7.00〜7.51 (m, 4H); 7.90 (d, J = 9.4 Hz, 0.28H); 7.98 (d, J = 9.4 Hz, 0.72H); 8.34 (m, 1H); 9.59 (d, J = 2.5 Hz, 0.28H); 9.63 (d, J = 1.8 Hz, 0.72H). LCMS (A5): m/z = 722 [M+H]+; tR = 1.71分.
【０６９２】
化合物８０：１−（アジドメチル）−４−（ブロモメチル）ベンゼン
ｐ−キシレンジブロミド（２．０ｇ、７．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液に、２０分でアジ化ナトリウム（５８４．９ｍｇ、８．６４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液を加えた。反応媒体を室温で２０時間撹拌し、次いで氷（１００ｇ）上に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和ブライン（３×１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、トルエンを用いて共蒸発させ、シリカゲル７０ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２Ｏ溶離）により精製して、化合物８０（７７３ｍｇ）を無色油状物として得た（４７％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 4.45 (s, 2H); 4.71 (s, 2H); 7.35 (d, J = 8.5 Hz, 2H); 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H).
【０６９３】
化合物８１：（１Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（４−（アジドメチル）ベンジル）−４，７，７−トリメチル−６−チアビシクロ［３．２．１］オクタン−６−イウムトリフルオロメタンスルホネート
（１Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−４，７，７−トリメチル−６−チアビシクロ［３．２．１］オクタン（ＣＡＳ番号［５７１８−７５−２］、５８０．１ｍｇ、３．４１ｍｍｏｌ）に、化合物８０（７７０ｍｇ、３．４１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．２ｍＬ）中溶液を加えた。次いでトリフルオロメタンスルホン酸リチウム（２．７１ｇ、１７．０３ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（２ｍＬ）中溶液を滴下添加し、反応媒体を室温で２日間撹拌した。次いでＨ２Ｏ（１５ｍＬ）およびＤＣＭ（１５ｍＬ）を反応媒体に加え、室温で１０分間撹拌を行った。水相をＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を飽和ブライン（３×８ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮した。淡黄色油状物をｉＰｒ２Ｏ（５ｍＬ）中で摩砕し、このように得られた固体を濾過し、ｉＰｒ２Ｏ（２×５ｍＬ）で洗浄し、真空乾固して、化合物８１（１．２６６ｇ）を白色固体として得た（７９％）。
RMN 1H (400 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 1.08 (d, J = 7.2 Hz, 3H); 1.45 (m, 1H); 1.55〜1.80 (m, 3H); 1.69 (s, 3H); 1.75 (s, 3H); 1.99 (m, 1H); 2.40 (d, J = 13.8 Hz, 1H); 2.45 (m, 1H); 2.59 (dm, J = 13.8 Hz, 1H); 3.88 (t, J = 4.6 Hz, 1H); 4.52 (s, 2H); 4.60 (d, J = 12.8 Hz, 1H); 4.90 (d, J = 12.8 Hz, 1H); 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H); 7.61 (d, J = 8.5 Hz, 2H).
【０６９４】
化合物８２：（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アジドメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６−メチル−３−ネオペンチル−６−（（（トリエチルシリル）オキシ）メチル）−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
−７０℃で冷却した化合物７９（３５ｍｇ、４８．５μｍｏｌ）および８１（２４．８ｍｇ、５３．３μｍｏｌ）のＤＣＭ（１．５ｍＬ）中溶液に、ＢＥＭＰ（ＣＡＳ番号［９８０１５−４５−３］、１８．６μＬ、６３．０μｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を−７０℃で２時間３０分撹拌し、飽和ブライン（１．５ｍＬ）を反応混合物に加え、浴を除去し、室温にまで激しく撹拌を行った。水相をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨの濃度勾配溶離）により精製して、化合物８２（１０．２ｍｇ）を無色ラッカーとして得た（２４％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.61 (q, J = 8.1 Hz, 6H); 0.80 (s, 9H); 0.98 (t, J = 8.1 Hz, 9H); 1.02 (s, 3H); 1.03 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.34 (dd, J = 2.5および14.4 Hz, 1H); 1.44 (dd, J = 10.0および14.4 Hz, 1H); 1.85 (m, 1H); 2.27 (m, 1H); 2.62 (m, 2H); 2.88 (dd, J = 2.6および13.5 Hz, 1H); 2.97 (dd, J = 3.7および14.2 Hz, 1H); 3.00 (dd, J = 2.3および7.3 Hz, 1H); 3,35 (m, 1H); 3.48 (dd, J = 9.5および14.2 Hz, 1H); 3.61 (d, J = 10.3 Hz, 1H); 3.81 (s, 3H); 3.92 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 4.15 (m, 1H); 4.46 (s, 2H); 4.48 (td, J = 2.5および9.7 Hz, 1H); 5.10 (m, 1H); 5.78 (dd, J = 2.2および15.3 Hz, 1H); 6.40 (ddd, J = 4.3, 11.6および15.3 Hz, 1H); 7.04 (m, 2H); 7.14 (dd, J = 2.3および8.6 Hz, 1H); 7.28 (d, J = 2.3 Hz, 1H); 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.39 (d, J = 8.4 Hz, 2H); 7.96 (d, J = 9.7 Hz, 1H); 8.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 120; m/z = 865 [M-H]-; m/z = 867 [M+H]+; m/z = 911 [M-H+HCO2H]-; tR= 1.87分.
【実施例３２】
【０６９５】
（３Ｓ，１０Ｒ，１６Ｓ，Ｅ）−１６−（（Ｓ）−１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（４−（アミノメチル）フェニル）オキシラン−２−イル）エチル）−１０−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−６−メチル−３−ネオペンチル−６−（（（トリエチルシリル）オキシ）メチル）−１−オキサ−４，８，１１−トリアザシクロヘキサデカ−１３−エン−２，５，９，１２−テトラオン
化合物８２（９．４ｍｇ、１０．８４μｍｏｌ）のＤＣＭ（１．３ｍＬ）およびＭｅＯＨ（０．７ｍＬ）中溶液に、ＴＣＥＰ（３．４５ｍｇ、１１．９μｍｏｌ）のＨ２Ｏ（０．７ｍＬ）中溶液を加えた。反応媒体を室温で終夜撹拌し、次いでＮａＨＣＯ３水溶液（２．５ｍＬ）を加え、１０分間撹拌を行った。水相をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮し、シリカゲル５ｇ上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏの濃度勾配溶離）により精製して、実施例３２（４．５５ｍｇ）を白色ラッカーとして得た（５７％）。
RMN 1H (500 MHz, δ ppm, DMSO-d6): 0.82 (s, 9H); 1.01 (s, 3H); 1.03 (d, J = 7.1 Hz, 3H); 1.33 (dd, J = 2.3および14.5 Hz, 1H); 1.56 (dd, J = 10.1および14.5 Hz, 1H); 1.82 (m, 1H); 2.27 (m, 1H); 2.64 (m, 2H); 2.88 (dd, J = 2.6および13.5 Hz, 1H); 2.92 (dd, J = 2.2および7.3 Hz, 1H); 2.96 (dd, J = 4.0および11.2 Hz, 1H); 3,19 (dd, J = 4.3および10.9 Hz, 1H); 3.41 (m, 2H); 3.74 (s, 2H); 3.81 (s, 3H); 3.88 (d, J = 2.2 Hz, 1H); 4.18 (m, 1H); 4.47 (td, J = 2.1および9.4 Hz, 1H); 4.91 (dd, J = 4.2および6.2  Hz, 1H); 5.08 (m, 1H); 5.76 (dd, J = 2.3および15.5 Hz, 1H); 6.40 (ddd, J = 3.7, 11.5および15.5 Hz, 1H); 7.05 (d, J = 8.8 Hz, 1H); 7.11 (m, 1H); 7.14 (dd, J = 2.4および8.8 Hz, 1H); 7.22 (d, J = 8.3 Hz, 2H); 7.25 (d, J = 2.4 Hz, 1H); 7.35 (d, J = 8.3 Hz, 2H); 8.08 (d, J = 9.4 Hz, 1H); 8.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H). LCMS (A5): ES m/z = 725 [M-H]-; m/z = 727 [M+H]+; tR = 0.79分.
【０６９６】
薬理学的結果
本発明の化合物を、その抗腫瘍効果を決定するための薬理学的試験に供した。式（ＩＩＩ）のＡＤＣはまた、血漿安定性に関して評価した。
【０６９７】
例示の目的のために、ＷＯ２０１１／００１０５２に由来する以下に示す２つのコンジュゲート、ＡＤＣ１およびＡＤＣ２も試験した。
【化３２１】
2018535255.tif 000351
【０６９８】
式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物によるＨＣＴ１１６細胞株およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の増殖の阻害の評価
指数増殖期にあるＨＣＴ１１６細胞およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞をトリプシン処理し、これらのそれぞれの培地（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞についてはＤＭＥＭ／Ｆ１２  Ｇｉｂｃｏ＃２１３３１、１０％ＦＣＳ  Ｇｉｂｃｏ＃１０５００−０５６、２ｎＭグルタミン  Ｇｉｂｃｏ＃２５０３０；ＨＣＴ１１６細胞についてはＤＭＥＭ  Ｇｉｂｃｏ＃１１９６０、１０％ＦＣＳ  Ｇｉｂｃｏ＃１０５００−０５６、２ｍＭグルタミン  Ｇｉｂｃｏ＃２５０３０）に再懸濁させた。細胞懸濁液を、血清を含有する全培地のＣｙｔｏｓｔａｒ  ９６ウエル培養プレート（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｅｕｒｏｐｅ、＃ＲＰＮＱ０１６３）に５０００細胞／ウエルの密度で播種した。４時間のインキュベーション後、クリプトフィシン化合物の系列希釈物をウエルに１０−７から１０−１２Ｍの漸減濃度で添加した（各濃度について３回重複で）。５％ＣＯ２を含有する雰囲気中３７℃で
、クリプトフィシン化合物の存在中で、細胞を３日間培養した。第４日目に、各ウエルに１４Ｃ−チミジン溶液（０．１μＣｉ／ウエル、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＃ＮＥＣ５６８２５０００）１０μｌを添加した。実験開始の９６時間後、マイクロベータ放射能カウンター（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して１４Ｃ−チミジンの取り込みを測定した。クリプトフィシン化合物で処理した細胞で得られた低下したカウントと（培地のみで処理した）対照ウエルの細胞で得られたカウントとの間の比を決定することにより、生存の百分率の形でデータを表した。
【０６９９】
阻害活性は、活性の５０％を阻害する濃度によって与えられている。
【０７００】
【表２９】
2018535255.tif 000352
【０７０１】
１式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物は、「構造のコメント」と題する欄に指定の、純粋なβエポキシドとしてまたはαおよびβエポキシドの混合物としていずれかで試験した。βエポキシドはαエポキシドより通常５０〜１００倍強力であることが、文献から知られている（例えば、Ａｌ−Ａｗａｒ  Ｒ．Ｓ．ら、Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００３、４６、２９８５〜３００７を参照されたい）。
【０７０２】
式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物は、５０ｐＭから２．８１５ｎＭの範囲のＩＣ５０でＨＣＴ１１６細胞株およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の増殖を阻害することが見出された。
【０７０３】
式（ＩＩＩ）のＡＤＣによるＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の増殖の阻害の評価
指数増殖期にあるＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞をトリプシン処理し、その培地（ＤＭＥＭ／Ｆ１２  Ｇｉｂｃｏ＃２１３３１、１０％ＦＣＳ  Ｇｉｂｃｏ＃１０５００−０５６、２ｎＭグルタミン  Ｇｉｂｃｏ＃２５０３０）に再懸濁させた。細胞懸濁液を、血清を含有する全培地のＣｙｔｏｓｔａｒ  ９６ウエル培養プレート（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｅｕｒｏｐｅ、＃ＲＰＮＱ０１６３）に５０００細胞／ウエルの密度で播種した。４時間のインキュベーション後、ＡＤＣの系列希釈物をウエルに１０−７から１０−１２Ｍの漸減濃度で添加した（各濃度について３回重複で）。５％ＣＯ２を含有する雰囲気中３７℃で、ＡＤＣの存在中で、細胞を３日間培養した。第４日目に、各ウエルに１４Ｃ−チミジン溶液（０．１μＣｉ／ウエル、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＃ＮＥＣ５６８２５０００）１０μｌを添加した。実験開始の９６時間後、マイクロベータ放射能カウンター（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して１４Ｃ−チミジンの取り込みを測定した。ＡＤＣで処理した細胞で得られた低下したカウントと（培地のみで処理した）対照ウエルの細胞で得られたカウントとの間の比を決定することにより、生存の百分率の形でデータを表した。ある特定の実験では、ネイキッド抗体を実験の開始時に１μＭの濃度でウエルに添加し、増殖の阻害を先に記載の通り測定した。
【０７０４】
【表３０】
2018535255.tif 000353
【０７０５】
式（ＩＩＩ）のクリプトフィシンＡＤＣならびにＡＤＣ１およびＡＤＣ２は、２０ｐＭから１３０ｐＭの範囲のＩＣ５０で、かつ１８５から５００の間の選択比、ＡＤＣ単独ｖｓＡＤＣ＋ネイキッド抗体で、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の増殖を阻害することが見出された
【０７０６】
ＳＣＩＤマウスにおける単回ｉ．ｖ．投与後の式（ＩＩＩ）のＡＤＣのＭＴＤの決定
個々のマウスについて３日間連続で１５％の体重減を誘導しないか、もしくは１日のうちで２０％の体重減を誘導しないか、または死亡を誘導しない最大用量として、ＭＴＤを決定した。これについては、３匹のメスＳＣＩＤマウスにおける単回の静脈内（ｉ．ｖ．）ボーラス注射後および処置後２８日の期間、評価を行った。
【０７０７】
【表３１】
2018535255.tif 000354
【０７０８】
式（ＩＩＩ）のクリプトフィシンＡＤＣは、ＳＣＩＤマウスにおいてＭＴＤは２０ｍｇ／ｋｇから≧５０ｍｇ／ｋｇまでの範囲であることを示した。
【０７０９】
単回ｉ．ｖ．投与後のＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ-ＭＢ-２３１に対する式（ＩＩＩ）のＡＤＣのｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍活性の評価
ｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍活性を、メスＳＣＩＤマウスにｓ．ｃ．移植した測定可能な乳房ＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植片に対して３用量レベルで評価した。対照群は未処置のままとした。コンジュゲートを単一のｉ．ｖ．ボーラス注射によって投与し、処置の日を各グラフ上に矢印（↓）で示した。
【０７１０】
コンジュゲートの抗腫瘍活性の評価のため、動物を週２回秤量し、キャリパーで腫瘍を週２回測定した。動物の体重には腫瘍の重量が含まれていた。質量（ｍｍ３）＝［長さ（ｍｍ）×幅（ｍｍ）２］／２の式を使用して腫瘍の体積を算出した。主要評価項目は、ΔＴ／ΔＣ、メディアン退縮パーセント、部分退縮および完全退縮（ＰＲおよびＣＲ）とした。特定された観察日の腫瘍量から最初の処置日（ステージング日）の腫瘍量を引くことによって、処置した各腫瘍（Ｔ）のおよび対照（Ｃ）の腫瘍量の変化を各腫瘍に対して算出した。メディアンΔΤを処置したグループに対して算出し、メディアンΔＣを対照グループに対して算出した。次いで比ΔΤ／ΔＣを算出し、百分率：ΔΤ／ΔＣ＝（デルタＴ／デルタＣ）×１００として表現した。
【０７１１】
腫瘍退縮の百分率は、最初の処置の初日（ｔ０）における腫瘍量と比較した場合の、特定された観察日（ｔ）における処置したグループの腫瘍量の減少の％と定義した。特定の時間点および各動物に対して、％退縮を算出した。よって、処置したグループに対するメディアン％退縮を算出した：％退縮（ｔにおいて）＝（（体積ｔ０−体積ｔ）／体積ｔ０）×１００。退縮は、処置開始時の腫瘍量の５０％まで腫瘍量が低減した場合、部分的（ＰＲ）であると、および腫瘍量が測定不能である場合（０ｍｍ３）、完全（ＣＲ）であると、定義した。無腫瘍（ＴＦＳ）とは、実験の終わりに、腫瘍が検出不能な動物と定義した（最終処置後＞１００日）。
【０７１２】
単回ｉ．ｖ．投与後のＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１に対するＥｘ．３のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍活性の評価
【表３２】
2018535255.tif 000355
【０７１３】
単回ｉ．ｖ．投与後のＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１に対するＥｘ．７のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍活性の評価
【表３３】
2018535255.tif 000356
【０７１４】
単回ｉ．ｖ．投与後のＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１に対するＥｘ．１０のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍活性の評価
【表３４】
2018535255.tif 000357
【０７１５】
単回ｉ．ｖ．投与後のＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１に対するＥｘ．１４のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍活性の評価
【表３５】
2018535255.tif 000358
【０７１６】
単回ｉ．ｖ．投与後のＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１に対するＥｘ．２０のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍活性の評価
【表３６】
2018535255.tif 000359
【０７１７】
単回ｉ．ｖ．投与後のＳＣＩＤマウスにおけるＭＤＡ−ＭＢ−２３１に対するＥｘ．２３のｉｎ  ｖｉｖｏ抗腫瘍活性の評価
【表３７】
2018535255.tif 000360
【０７１８】
これらの結果が示すところによれば、本発明の試験された全ての例ならびにＡＤＣ２は、０．６２５ｍｇ／ｋｇから５ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で抗腫瘍活性を提示した。
【０７１９】
ＳＣＩＤマウスにおける単回ｉ．ｖ．投与後（５ｍｇ／ｋｇ）のＥｘ．３およびＥｘ．７に関するＰＫパラメータの決定
ＡＤＣおよび全抗体のｉｎ  ｖｉｖｏ薬物動態を、コンジュゲートを単回ｉ．ｖ．ボーラス注射による投与後、メスＳＣＩＤマウスにおいて評価した。メスＳＣＩＤマウス（５〜６週齢、平均体重２０〜２５ｇ）は、無菌室に、ラミナーフード中に無菌条件下で収容し、飼料は自由摂取とした。ＡＤＣは、１回の用量レベル（１０ｍＬ／ｋｇ）でのｉ．ｖ．ボーラスとして投与した（非シリアルデザイン、ｎ＝３／サンプリング時）。各動物についておよび選択された各時点において（すなわち０．０８３、０．２５、２４、７２、９６、１６８、２４０、３３６ｈ）、血液６００μＬを心臓穿刺を介して採取し、血液試料は次いで遠心分離した（４℃および３５００ｔｒ／分で１５分）。血漿試料のＡＤＣおよび全抗体の定量化をイムノアッセイを使用して行った。マウスにおけるコンジュゲートおよび全抗体の血漿濃度対時間プロファイルおよびＰＫパラメータを、非コンパートメント分析（Ｐｈｏｅｎｉｘ、ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ  バージョン６．３）を使用して特徴付けしたが、これらを図１５および図１６に示す。濃度時間曲線下面積、ＡＵＣ（μｇ．日／ｍＬ）を台形法により推定した。ｔ＝０における濃度Ｃ０（μｇ／ｍＬ）、クリアランスＣＬ（Ｌ／（日．ｋｇ）、および終末消失半減期ｔ１／２（日）を曲線から導出し算出した。
【０７２０】
【表３８】
2018535255.tif 000361
【０７２１】
ＳＣＩＤマウスにおける５ｍｇ／ｋｇでの単回ｉ．ｖ．投与後の式（ＩＩＩ）のクリプトフィシンＡＤＣの血漿安定性に関するＨＲＭＳによる評価
ＰＫ試験由来の血漿試料についてはＬＣ−ＨＲＭＳによる分析も行った。クロマトグラフ分析を、下に記載の（Ａ）水＋０．１％ギ酸／（Ｂ）ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ギ酸からなる勾配溶出を使用して、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｉ  Ｃｌａｓｓおよび８０℃でのＷａｔｅｒｓ  Ｍａｓｓ  Ｐｒｅｐ  Ｍｉｃｒｏ  Ｄｅｓａｌｔｉｎｇ  ２０μｍ（２．１×５ｍｍ）カラム上で行った。
【０７２２】
【表３９】
2018535255.tif 000362
【０７２３】
質量分析を正のモード（ＥＳ＋）のエレクトロスプレーイオン化法を使用してＷａｔｅｒｓ  ＱＴＯＦ  Ｓｙｎａｐｔ  Ｇ２−Ｓ器で行った。マススペクトルはＷａｔｅｒｓ  Ｂｉｏｐｈａｌａｌｙｎｘソフトウェアを使用してデコンボリューションした。ＨＲＭＳスペクトルについては試験した例全てについて得たが、これらを図２０〜図２５に示す。
これらの結果が示すところによれば、本発明の試験された全ての例は、基準ＡＤＣ、ＡＤＣ１およびＡＤＣ２で観察された代謝を提示しなかった。
【０７２４】
したがって、本発明の化合物は抗がん活性を有すること、および本発明のコンジュゲートはマウス血漿において改善された安定性を提示していることは明らかである。
【０７２５】
したがって、その態様の別の態様では、本発明はまた、抗がん剤としての式（Ｉ）のクリプトフィシン化合物の使用または式（ＩＩＩ）のコンジュゲートの使用にも関する。
【０７２６】
本発明はまた、その態様の別の態様によれば、式（ＩＩＩ）のコンジュゲートを含む医薬を提供する。
【０７２７】
これらの医薬は治療的に、特にがんの処置に用いられる。
【０７２８】
その態様の別の態様によれば、本発明は、本発明による式（ＩＩＩ）のコンジュゲートを有効成分として含む医薬組成物に関する。これらの医薬組成物は、本発明による式（ＩＩＩ）の少なくとも１つのコンジュゲートの有効量およびまた少なくとも１つの医薬的に許容される賦形剤を含む。
【０７２９】
前記賦形剤は、当業者に知られている通常の賦形剤から、所望の医薬形態および投与方法に従って、選択される。
【０７３０】
本発明はまた、その態様の別の態様によれば、本発明による式（ＩＩＩ）のコンジュゲートの有効量を患者に投与することを含む、上記の病状を処置する方法も提供する。
【図１】
2018535255.tif 000381
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2018535255.tif 000385
【図６】
2018535255.tif 000386
【図７】
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【図８】
2018535255.tif 000388
【図９】
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【図１０】
2018535255.tif 000390
【図１１】
2018535255.tif 000391
【図１２】
2018535255.tif 000392
【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
2018535255.tif 000396
【図１７】
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【図１８】
2018535255.tif 000398
【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
2018535255.tif 000402
【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【国際調査報告】
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