(57)【要約】本開示は、とりわけ、移植の前、移植と同時及び／または移植後に有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することによって、腎移植のような臓器移植の必要な個体を処置するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法は、アロ抗体、パネル反応性抗体（ＰＲＡ）、及び／または移植片拒絶のリスクを低減し得る。いくつかの実施形態では、この方法はさらに、移植前に個体に対してある用量の静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を投与することを包含する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
臓器移植の必要な個体を処置するための方法であって、前記臓器移植の前、同時及び／または後に有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を前記個体に投与することを包含する、前記方法。
【請求項２】
前記臓器移植が腎移植である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記方法が前記個体におけるアロ抗体のレベルを低減する、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記方法が前記個体におけるパネル反応性抗体（ＰＲＡ）のレベルを低減する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記方法が、移植の可能性を高める、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記方法が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与後約１２ヵ月内に移植の可能性を高める、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記方法が、適切な移植片を受け取るための前記個体の待機時間を短縮する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記個体が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与無しだと交差不適合性であったであろう交差適合性の移植片を受け入れる、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
アロ抗体のレベルを前記低減することが、前記臓器移植後の前記個体におけるドナー特異的抗体のレベルを低減することを包含する、請求項３〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
アロ抗体のレベルを前記低減することが、前記臓器移植後の移植片拒絶のリスクを低減する、請求項３〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記移植片拒絶が、細胞性免疫応答、体液性免疫応答、またはその両方による急性拒絶である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記移植片拒絶が抗体媒介性拒絶（ＡＭＲ）である、請求項１０または請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記方法が移植片の生存を延長する、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記方法が移植片の機能を改善する、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記方法が前記個体の全生存を延長する、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記抗ＣＤ２０抗体が静脈内投与される、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
約９００ｍｇと約１１００ｍｇとの間の前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量を、前記臓器移植の前に前記個体に投与する、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記用量が約１０００ｍｇである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記臓器移植の前に第２の用量の約９００ｍｇと約１１００ｍｇとの間の前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を前記個体に投与することをさらに包含し、前記ＩＩ型ＣＤ２０抗体の前記第２の用量が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の約１０日〜約１８日後または約１週間〜約３週間後に、投与される、請求項１７または請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第２の用量が約１０００ｍｇである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第２の用量が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の約１４日後または約２週間後に投与される、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記個体が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の投与後約６週間〜約５２週間の間に前記臓器移植を受ける、請求項１７〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記臓器移植の前に、約９００ｍｇと約１１００ｍｇとの間の前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第３の用量を前記個体に投与することをさらに包含し、ここで、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第３の用量が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の約１５４日〜約１８２日後または約２２週間〜約２６週間後に投与される、請求項１７〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第３の用量が、約１０００ｍｇである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第３の用量が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約１６８日後または約２４週間後に投与される、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記個体が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の投与後約２８週間〜約５２週間の間に前記臓器移植を受ける、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記臓器移植前に前記個体に対してある用量の静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を投与することをさらに包含する、請求項１７〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＩＶＩＧの前記用量が、高用量である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＩＶＩＧの前記用量が、約２ｇ／ｋｇである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＩＶＩＧの前記用量が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の投与後約１４日〜約２８日の間、または約２週間〜約４週間の間に前記個体に投与される、請求項２７〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＩＶＩＧの前記用量が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の投与の約２１日後または約３週間後に前記個体に投与される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記臓器移植前に前記個体に対して第２の用量の静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を投与することをさらに包含する、請求項２７〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＩＶＩＧの前記第２の用量が、高用量である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＩＶＩＧの前記第２の用量が、約２ｇ／ｋｇである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ＩＶＩＧの前記第２の用量が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の投与後約３５日〜約４９日の間、または約５週間〜約７週間の間に前記個体に投与される、請求項３２〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記ＩＶＩＧの前記第２の用量が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の投与の約４２日後または約６週間後に前記個体に投与される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
約９００ｍｇと約１１００ｍｇとの間の用量の前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体が前記臓器移植と同時に前記個体に投与され、ここで前記臓器移植と同時に前記個体に投与される前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記用量が、前記臓器移植の４８時間内に投与される、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記臓器移植と同時に前記個体に投与される前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記用量が約１０００ｍｇである、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
約９００ｍｇと約１１００ｍｇとの間の前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量を、前記臓器移植の前に前記個体に投与する、請求項１〜３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記臓器移植の後に前記個体に投与される前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記用量が約１０００ｍｇである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記臓器移植の後に前記個体に投与される前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記用量が、前記臓器移植の約１５４日〜約１８２日後または約２２週間〜約２６週間後に投与される、請求項３９または請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記臓器移植の後に前記個体に投与される前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記用量が、前記臓器移植の約１６８日後または約２４週間後に投与される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体が、ヒトまたはヒト化されている、請求項１〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体が、配列番号１のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２のＨＶＲ−Ｈ２配列、及び配列番号３のＨＶＲ−Ｈ３を含む重鎖、及び／または配列番号４のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号５のＨＶＲ−Ｌ２配列、及び配列番号６のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む、請求項１〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体が、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項４４または請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体が、アフコシル化されている、請求項１〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
前記抗ＣＤ２０抗体が、オブニツズマブである、請求項１〜４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
前記対象が、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の前記第１の用量の前に少なくとも約２０％のパネル反応性抗体（ＰＲＡ）を有する、請求項１〜４８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
前記個体が末期腎疾患を有する、請求項２〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
前記個体が、以前の臓器移植、輸血、及び妊娠のうちの１つ以上を経験している、請求項１〜５０のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国仮特許出願第６２／１８６，３０３号（２０１５年６月２９日に出願され、その全体が参照によって本明細書に援用される）の優先権利益を主張する。
【０００２】
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出の内容は、その全体が参照によって本明細書に援用される：コンピューター読み取り可能型（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：１４６３９２０３２３４０ＳｅｑＬｉｓｔ．ｔｘｔ、記録日：２０１６年６月２２日、サイズ：３６ＫＢ）。
【０００３】
発明の分野
本開示は、臓器移植（例えば、腎移植）の分野に関する。具体的には、本明細書で提供されるのは、移植の前、移植と同時及び／または移植後に有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することによって、移植の必要な個体を処置するための方法である。
【背景技術】
【０００４】
腎移植は、末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を有する患者のために選択される処置である。移植レシピエントは、長期透析のＥＳＲＤ患者と比較して平均的に生活の質の大きい向上、生存の延長及び全体的なコストの低下を享受する。しかし、移植片に由来する外来抗原（ＨＬＡ抗原など）に対する移植レシピエントのアロ抗体は、即時性の及び致命的な移植片拒絶をもたらし得、そのため同種移植の成功に対して大きな障壁となる。従って、移植界では、見込みがあるレシピエントに利用可能な移植片を割り当てるための交差適合手順を厳密に採用した。候補者における移植失敗のリスクを評価するための一般的な手順は、パネル反応性抗体（ＰＲＡ）レベル、またはドナーリンパ球（候補者の血清が反応して細胞死滅を誘導する）のプールのパーセンテージを決定することである。
【０００５】
２０％を超えるＰＲＡを有する患者は、高感作の移植候補とみなしてもよく、それらは米国の待機リスト上の全ての腎移植候補の約２０％〜３０％に相当する。高感作患者の移植率は、非感作患者における移植率のわずか四分の一にしか過ぎない。前の臓器移植、輸血、及び妊娠は、すべて既存のアロ抗体を引き起こし、ＰＲＡ及び移植候補者の待機時間を延長し、移植後の移植片生存の機会を低減し得る。高感作はまた、他の固形臓器移植を待っている患者の間で広範な問題である。この十分支援されていない患者集団には、未だ満たされていない医療ニーズが存在する。
【０００６】
低用量及び高用量の静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）、血漿交換（ＰＬＥＸ）、及びＢ細胞枯渇剤（例えば、リツキシマブ）を含む、高感作腎移植患者の間で互換性のあるドナーの利用可能性を最適化するために、種々の脱感作プロトコルが研究されている（Ｖｏ，Ａ．Ａ．ａｎｄ  Ｊｏｒｄａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １７８（２０１４）：４８−５１）。これらの方法は、アロ抗体及び自己特異的Ｂ細胞を抑制することを目的としており、それにより、ＰＲＡを減少させて、利用可能な移植片に対するマッチングの機会を増やし、移植後の抗体媒介性拒絶反応（ＡＭＲ）の発生率を減少させることができる。
【０００７】
高ＰＲＡを有する移植患者の脱感作及び移植後の移植片拒絶のリスクを低減するための有効かつ安全な薬剤がまだ必要とされている。
【０００８】
本明細書で開示される全ての参考文献、刊行物、及び特許出願は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【発明の概要】
【０００９】
いくつかの態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体を処置するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体における臓器拒絶の予防を提供するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植を受けている個体における臓器拒絶の予防を提供するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体の生存を延長するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体における移植片生存を延長するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体における移植片の機能を改善するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体におけるアロ抗体のレベルを低減するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体におけるパネル反応性抗体（ＰＲＡ）のレベルを低減するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体における移植の可能性を高めるための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体における交差適合性を増大するための方法が提供される。他の態様では、本明細書では、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植の必要な個体における移植片拒絶の可能性を低減するための方法が提供される。上記の任意の実施形態と組み合され得るいくつかの実施形態では、臓器移植は腎移植である。
【００１０】
いくつかの実施形態では、上記方法は、個体におけるアロ抗体のレベルを低減する。いくつかの実施形態では、上記方法は、個体におけるパネル反応性抗体（ＰＲＡ）のレベルを低減する。いくつかの実施形態では、上記方法は、移植の可能性を高める。いくつかの実施形態では、上記方法は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与後約１２ヵ月内に移植の可能性を高める。いくつかの実施形態では、上記方法は、適切な移植片（例えば、腎臓移植片）を受け取る個体の待機時間を短くする。いくつかの実施形態では、上記個体は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与無しだと交差不適合性であったであろう交差適合性の移植片（例えば、腎臓移植片）を受け入れる。いくつかの実施形態では、アロ抗体のレベルを低減するステップは、臓器移植後の個体におけるドナー特異的抗体のレベルを低減するステップを包含する。いくつかの実施形態では、アロ抗体のレベルを低減するステップは、臓器移植後の移植片拒絶のリスクを低減する。いくつかの実施形態では、上記移植片拒絶は、細胞性免疫応答、体液性免疫応答、またはその両方による急性拒絶である。いくつかの実施形態では、上記移植片拒絶は抗体媒介性拒絶（ＡＭＲ）である。いくつかの実施形態では、上記方法は、移植片生存を延長する。いくつかの実施形態では、上記方法は、移植片機能を改善する。いくつかの実施形態では、上記方法は、個体の全生存を延長する。
【００１１】
いくつかの実施形態では、上記抗ＣＤ２０抗体は静脈内に投与される。いくつかの実施形態では、約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇの間の用量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を、臓器移植の前に上記個体に投与する。いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は約１０００ｍｇである。いくつかの実施形態では、この方法は、臓器移植の前に第２の用量の約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇのＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することをさらに包含し、ここでＩＩ型ＣＤ２０抗体の上記第２の用量が、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約１０日〜約１８日後または約１週間〜約３週間後に投与される。いくつかの実施形態では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第２の用量は、約１０００ｍｇである。いくつかの実施形態では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第２の用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約１４日後または約２週間後に投与される。いくつかの実施形態では、上記個体は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与後約６週間〜約５２週間の間に臓器移植を受ける。いくつかの実施形態では、上記方法は、上記臓器移植の前に、約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇの間のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第３の用量を個体に投与することをさらに包含し、ここでこのＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第３の用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約１５４日〜約１８２日後または約２２週間〜約２６週間後に投与される。いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第３の用量は約１０００ｍｇである。いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第３の用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約１６８日後または約２４週間後に投与される。いくつかの実施形態では、上記個体は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与後約２８週間〜約５２週間の間に臓器移植を受ける。いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの第１の用量が、臓器移植の前に個体に投与される。上記個体は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与後約６週間〜約５２週間の間に臓器移植を受ける。ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの間の用量が、臓器移植と同時に個体に投与され、ここで臓器移植と同時にこの個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の４８時間内に投与される。ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの間の用量が、臓器移植の後に個体に投与され、ここで臓器移植の後にこの個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の約１６８日後または約２４週間後に投与される。いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの第１の用量は、臓器移植の前に個体に投与される。ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの第２の用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約１４日後または約２週間後に個体に投与される。この個体は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与後約６週間〜約５２週間の間に臓器移植を受ける。上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの間の用量は、臓器移植と同時に個体に投与され、ここで臓器移植と同時にこの個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の４８時間内に投与される。そしてＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの間の用量は、臓器移植の後に個体に投与され、ここで臓器移植の後にこの個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の約１６８日後または約２４週間後に投与される。いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの第１の用量は、臓器移植の前に個体に投与される。ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの第２の用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約１４日後または約２週間後に個体に投与される。上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの第３の用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約１６８日後または約２４週間後に個体に投与される。この個体は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与後約２８週間〜約５２週間の間に臓器移植を受ける。上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの間の用量は、臓器移植と同時に個体に投与され、ここで臓器移植と同時にこの個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の４８時間内に投与される。そしてＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の約１０００ｍｇの間の用量は、臓器移植の後に個体に投与され、ここで臓器移植の後にこの個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の約１６８日後または約２４週間後に投与される。
【００１２】
いくつかの実施形態では、この方法はさらに、臓器移植前に個体に対してある用量の静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を投与することを包含する。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの用量は高用量である。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの用量は約２ｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、上記ＩＶＩＧの用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与後約１４日〜約２８日の間、または約２週間〜約４週間の間に個体に投与される。いくつかの実施形態では、上記ＩＶＩＧの用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与の約２１日後または約３週間後に個体に投与される。いくつかの実施形態では、この方法はさらに、臓器移植前に個体に対して第２の用量の静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を投与することを包含する。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの第２の用量は高用量である。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの第２の用量は約２ｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、上記ＩＶＩＧの第２の用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与後約３５日〜約４９日の間、または約５週間〜約７週間の間に個体に投与される。いくつかの実施形態では、上記ＩＶＩＧの第２の用量は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の投与の約４２日後または約６週間後に個体に投与される。
【００１３】
いくつかの実施形態では、約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇの間の用量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体が、臓器移植と同時に個体に投与され、ここで臓器移植と同時に個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の４８時間内に投与される。いくつかの実施形態では、臓器移植と同時に上記個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は約１０００ｍｇである。
【００１４】
いくつかの実施形態では、約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇの間のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量を、臓器移植の後に個体に投与する。いくつかの実施形態では、臓器移植の後に上記個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は約１０００ｍｇである。いくつかの実施形態では、臓器移植の後に上記個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の約１５４日〜約１８２日後または約２２週間〜約２６週間後に投与される。いくつかの実施形態では、臓器移植の後に上記個体に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、臓器移植の約１６８日後または約２４週間後に投与される。
【００１５】
いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、ヒトまたはヒト化されている。いくつかの実施形態では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、配列番号１のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２のＨＶＲ−Ｈ２配列、及び配列番号３のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖及び／または配列番号４のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号５のＨＶＲ−Ｌ２配列、及び配列番号６のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、上記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体はアフコシル化されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体はオビヌツズマブである。
【００１６】
いくつかの実施形態では、上記対象は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の前に少なくとも約２０％のパネル反応性抗体（ＰＲＡ）を有する。いくつかの実施形態では、上記個体は末期腎疾患を有する。いくつかの実施形態では、上記個体は、以前の臓器移植、輸血、及び妊娠のうちの１つ以上を経験している。
【００１７】
本明細書に記載の様々な実施形態の特性のうちの１つ、いくつか、または全てを組み合わせて、本発明の他の実施形態を形成し得ることを理解されたい。本発明のこれら及び他の態様は、当業者に明らかとなろう。本発明のこれら及び他の実施形態は、以下の詳細な説明によってさらに説明される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】高感作腎移植患者における静脈内オビヌツズマブに加えて高用量静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を検討する第Ｉｂ相臨床治験の例示的な治験のデザインを示す。治験のデザインは、実施例１に記載する。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
一態様では、臓器移植（例えば、腎移植）を必要とする個体を処置するための方法であって、臓器移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する方法が本明細書において提供される。いくつかの実施形態では、この方法は、個体におけるアロ抗体のレベル、例えば個体におけるパネル反応性抗体（ＰＲＡ）のレベルを低減する。いくつかの実施形態では、約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇの間のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の１つ以上の用量を、臓器移植の前に個体に投与してもよい。いくつかの実施形態では、この方法は、臓器移植前に静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）の１回以上の用量を個体に投与することをさらに包含する。いくつかの実施形態において、約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇの間のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量が、臓器移植と同時に個体に投与される。いくつかの実施形態では、約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇの間のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の１つ以上の用量を、臓器移植後に個体に投与してもよい。
【００２０】
Ｉ．一般的技術
本明細書に記載または参照される技術及び手順は、一般的によく理解されており、かつ当業者による従来の方法、例えば、以下に記載される広範に利用される方法論などを用いて通常使用される：Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ３ｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，（２００３））、ｔｈｅ  ｓｅｒｉｅｓ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）：ＰＣＲ  ２：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｍ．Ｊ．ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ，Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ  ａｎｄ  Ｇ．Ｒ．Ｔａｙｌｏｒ  ｅｄｓ．（１９９５））、Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，ｅｄｓ．（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，ａｎｄ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，ｅｄ．（１９８７））、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ，ｅｄ．，１９８４）、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ，ｅｄ．，１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ），ｅｄ．，１９８７）、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．Ｍａｔｈｅｒ  ａｎｄ  Ｐ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ，Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，ａｎｄ  Ｄ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ，ｅｄｓ．，１９９３−８）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．Ｗｅｉｒ  ａｎｄ  Ｃ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，ｅｄｓ．）、Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．Ｍｉｌｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ，ｅｄｓ．，１９８７）、ＰＣＲ：Ｔｈｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ，（Ｍｕｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９４）、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９１）、Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９９）、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．Ｊａｎｅｗａｙ  ａｎｄ  Ｐ．Ｔｒａｖｅｒｓ，１９９７）、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ，１９９７）、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ．，ｅｄ．，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，１９８８−１９８９）、Ｍｏｎｏｃｌｏｎ��ｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．Ｓｈｅｐｈｅｒｄ  ａｎｄ  Ｃ．Ｄｅａｎ，ｅｄｓ．，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，２０００）、Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９９９）、Ｔｈｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．Ｚａｎｅｔｔｉ  ａｎｄ  Ｊ．Ｄ．Ｃａｐｒａ，ｅｄｓ．，Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９５）、及びＣａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（Ｖ．Ｔ．ＤｅＶｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９３）。
【００２１】
ＩＩ．定義
「移植片」という用語は、本明細書において使用される場合、レシピエントへの移植のための、ドナーに由来する生物学的物質を指す。移植片としては、例えば、膵島細胞及び神経由来細胞（例えば、シュワン細胞）などの単離された細胞、新生児の羊膜、骨髄、造血前駆細胞などの組織、ならびに臓器、例えば、皮膚、心臓、肝臓、脾臓、膵臓、甲状腺葉、肺、腎臓、管状臓器（例えば、腸、血管または食道）等の臓器のような多様な材料が挙げられる。管状臓器は、食道、血管、または胆管の損傷した部分を置き換えるために使用され得る。皮膚移植片は、火傷だけでなく、損傷した腸への包帯材として、または横隔膜ヘルニアなどのある特定の欠陥を閉じるために使用されてもよい。移植片は、死体由来であるか生きたドナー由来であるかを問わず、ヒトを含む任意の哺乳動物源に由来し得る。移植片は、腎臓または心臓などの固形臓器であってもよい。代表的な臓器移植では、移植片のドナー及び移植片の宿主（すなわちレシピエント）は好ましくは、移植前に交差適合性である。
【００２２】
「ドナー」という用語は、本明細書において用いる場合、移植片が由来する哺乳動物種を生死にかかわらず指す。好ましくは、ドナーとはヒトである。一般的に、ヒトドナーには、健康診断で正常なボランティア血液関連ドナー、及び同じ主要ＡＢＯ血液型群のドナーが含まれ得る。本発明において企図されるヒトドナーとしてはまた、限定するものではないが、レシピエントと遺伝的に類似しないドナー、及び処置前にレシピエントと交差不適合であるが処置後または処置の一部の後にレシピエントと交差適合性であるドナーを含んでもよい。
【００２３】
「移植」という用語及びその変化形は、宿主（すなわちレシピエント）への移植片の挿入であって、この移植が同系（ここではドナー及びレシピエントが遺伝的に同一）、同種異系（ここではドナー及びレシピエントが同種であるが、異なる遺伝的起源のものである）、または異種（ここではドナー及びレシピエントが異なる種由来である）である移植片の挿入を指す。したがって、典型的なシナリオでは、宿主はヒトであり、移植片は同種または異種の遺伝的起源のヒト由来の同種移植片である。別のシナリオでは、移植片は、移植される種とは異なる種由来、例えば、ヒトレシピエント宿主に移植されたヒヒ心臓由来であり、これには、系統学的に広く離れた種由来の動物、例えば、ヒト宿主に移植されたブタ心臓弁、または動物のベータ島細胞または神経細胞が挙げられる。
【００２４】
「アロ抗体」という用語は、同じ種の別の個体のアロ抗原と反応する、ある個体によって産生される抗体を指す。「アロ抗原」とは、同じ種の異なる個体において同じ遺伝子座にコードされた対立遺伝子型で存在する抗原である。外来物質及び宿主における高度に多型性の遺伝子の産物間の相違のせいで、アロ抗原によって免疫応答が誘発され得る。アロ抗原の主要な供給源は、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子としても知られているヒト白血球抗原（ＨＬＡ）分子由来である。
【００２５】
「交差適合」という用語は、例えば、ドナー細胞に対するレシピエントの血清の反応性によって実証されるような、臓器移植におけるドナーと予想されるレシピエントとの間の適合性を決定する試験を指す。陽性の交差適合によって、ドナーと予想されるレシピエントとの間の不適合が示され、陰性の交差適合によって、ドナーと予測されるレシピエントとの間の適合性が示される。例示的な交差適合試験としては、限定するものではないが、ドナー特異的フローサイトメトリー交差適合、補体依存性細胞傷害性交差適合、及びＴ細胞補体依存性細胞傷害性パネル反応性抗体アッセイを挙げることができる。交差適合及び例示的な交差適合試験のより詳細な説明については、例えば、Ｍｕｌｌｅｙ，Ｗ．Ｒ．ａｎｄ  Ｋａｎｅｌｌｉｓ，Ｊ．（２０１１）Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  １６：１２５−３３を参照されたい。
【００２６】
「抗体」という用語は、モノクローナル抗体（免疫グロブリンＦｃ領域を有する全長抗体を含む）、ポリエピトープ性特異性を有する抗体組成物、多価特異的抗体（例えば、二価特異的抗体、ダイアボディ、及び単鎖分子、ならびに抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ）を包含する。別段特定しない限り（例えば、「静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）」という用語で用いる場合）、「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語は、本明細書では「抗体」と交換可能に用いられる。
【００２７】
基本的な４本の鎖の抗体ユニットは、２本の同一な軽鎖（Ｌ）と２本の同一な重鎖（Ｈ）とから構成されるヘテロ四量体糖タンパク質である。ＩｇＭ抗体は、５つの基本的なヘテロ四量体ユニットと併せて、Ｊ鎖と呼ばれる追加のポリペプチドからなり、１０個の抗原結合部位を含有しているが、一方でＩｇＡ抗体は、２〜５個の基本的な４本鎖ユニットから構成されており、このユニットは、重合してＪ鎖と組み合わさった多価集合体を形成し得る。ＩｇＧの場合、４本鎖ユニットは、概して約１５０，０００ダルトンである。各Ｌ鎖は、１つのジスルフィド共有結合によってＨ鎖に連結されているが、一方で２本のＨ鎖は、Ｈ鎖アイソタイプに応じて１つ以上のジスルフィド結合によって互いに連結されている。各々のＨ鎖及びＬ鎖はまた、規則的に離間した鎖間ジスルフィド架橋も有する。各Ｈ鎖は、Ｎ末端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、続いてα及びγ鎖のそれぞれについては３つの定常ドメイン（ＣＨ）、ならびにμ及びεアイソタイプについては４つのＣＨドメインを有する。各Ｌ鎖は、Ｎ末端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、続いてその反対側の端部に定常ドメインを有する。ＶＬは、ＶＨと整列しており、ＣＬは、重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）と整列している。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。ＶＨとＶＬとが一緒に対合することにより、単一の抗原結合部位が形成される。異なるクラスの抗体の構造及び特性については、例えば、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｄａｎｉｅｌ  Ｐ．Ｓｔｉｅｓ，Ａｂｂａ  Ｉ．Ｔｅｒｒ  ａｎｄ  Ｔｒｉｓｔｒａｍ  Ｇ．Ｐａｒｓｏｌｗ（ｅｄｓ），Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４，ｐａｇｅ  ７１  ａｎｄ  Ｃｈａｐｔｅｒ  ６を参照されたい。任意の脊椎動物種に由来するＬ鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ及びラムダと呼ばれる２つの明確に異なる種類のうちの１つに割り当てられ得る。それらの重鎖の定常ドメイン（ＣＨ）のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、異なるクラスまたはアイソタイプに割り当てられ得る。免疫グロブリンには、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭの５つのクラスがあり、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと表記される重鎖を有する。γ及びαクラスは、更に、ＣＨの配列及び機能における比較的わずかな相違に基づいて更にサブクラスに分類され、例えば、ヒトは、以下のサブクラス：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２を発現する。
【００２８】
抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」とは、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、それぞれ、「ＶＨ」及び「ＶＬ」と称されてもよい。これらのドメインは、一般に、抗体の最も可変性の高い部分であり（同じクラスの他の抗体と比べて）、抗原結合部位を含有する。
【００２９】
「可変」という用語は、抗体間で、可変ドメインのある特定のセグメントが、配列において大きく異なるという事実を指す。Ｖドメインは、抗原結合を媒介し、特定の抗体の、その特定の抗原に対する特異性を定義する。しかしながら、可変性は、可変ドメイン全体に均等に分布しているわけではない。そうではなく可変性は、軽鎖及び重鎖の両方の可変ドメインにおいて、超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは各々、ベータシート構造を接続し、かついくつかの場合では、ベータシート構造の一部を形成するループを形成する３つのＨＶＲによって接続されたベータシート立体配置を主として採用する４つのＦＲ領域を含む。各鎖のＨＶＲは、ＦＲ領域によって極めて近接して一緒に保持され、他方の鎖からのＨＶＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）を参照されたい）。定常ドメインは、抗原への抗体の結合に直接関与しないが、抗体依存性細胞毒性における抗体の関与など、様々なエフェクター機能を示す。
【００３０】
本明細書に使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体集団から得られる抗体を指す、すなわち、その集団に含まれる個々の抗体は、微量で存在し得る自然に発生する可能性のある変異及び／または翻訳後修飾（例えば、異性化、アミド化）を除いて、同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位を対象としている。異なる決定基（エピトープ）を対象とする異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基を対象としている。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ培養により合成され、他の免疫グロブリンが混入されていないという点で、有利である。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体の集団から得られるという抗体の特徴を示すものであり、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本発明により用いられるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５−９７（１９７５）、Ｈｏｎｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１４（３）：２５３−２６０（１９９５）、Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）、Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ５６３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組み換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９２）、Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）、及びＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４）を参照されたい）、及びヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子座または遺伝子の一部または全てを有する動物におけるヒト抗体またはヒト様抗体の産生技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３、ＷＯ１９９６／３４０９６、ＷＯ１９９６／３３７３５、ＷＯ１９９１／１０７４１、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：２５５１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６２：２５５−２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）、米国特許第５，５４５，８０７号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６３３，４２５号、及び同第５，６６１，０１６号、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）、Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６−８５９（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８１２−８１３（１９９４）、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５−８５１（１９９６）、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）、ならびにＬｏｎｂｅｒｇ  ａｎｄ  Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−９３（１９９５）を含む種々の技術によって作成され得る。
【００３１】
「裸の抗体」という用語は、細胞毒性部分または放射標識に複合体化されていない抗体を指す。
【００３２】
「全長抗体」、「インタクトな抗体」または「全抗体」という用語は、抗体断片とは対照的に、その実質的にインタクトな形態にある抗体を指して互換的に使用される。具体的には、全抗体とは、Ｆｃ領域を含む重鎖及び軽鎖を有するものを含む。定常ドメインとは、天然配列の定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列の定常ドメイン）であっても、またはそのアミノ酸配列変異形であってもよい。一部の場合には、インタクトな抗体とは、１つ以上のエフェクター機能を有してもよい。
【００３３】
「抗体断片」は、インタクト抗体の一部分、好ましくはインタクト抗体の抗原結合領域及び／または可変領域を含む。抗体断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖ断片、ダイアボディ、直鎖状抗体が挙げられる（米国特許第５，６４１，８７０号、実施例２、Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７−１０６２［１９９５］を参照されたい）、一本鎖抗体分子、ならびに抗体断片から形成された多重特異性抗体が挙げられる。抗体のパパイン消化によって、「Ｆａｂ」断片、及び残りの「Ｆｃ」断片（容易に結晶化する能力を反映する名称）と呼ばれる、２つの同一の抗原結合断片が産生された。Ｆａｂ断片は、Ｌ鎖全体と共にＨ鎖の可変領域ドメイン（ＶＨ）、及び１つの重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）からなる。各Ｆａｂ断片は、抗原結合に関しては一価であり、すなわち、単一の抗原結合部位を有する。抗体のペプシン処理は、単一の大型Ｆ（ａｂ’）２断片をもたらし、これは、異なる抗原結合活性を有する２つのジスルフィド結合したＦａｂ断片にほぼ対応し、やはり抗原を架橋することができる。Ｆａｂ’断片は、ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に、抗体ヒンジ領域由来の１つ以上のシステインを含む、いくつかのさらなる残基を有することにより、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨとは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つ、Ｆａｂ’の本明細書における呼称である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元来、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として産生された。抗体断片の他の化学的結合もまた公知である。
【００３４】
Ｆｃ断片は、ジスルフィドによって一緒に保持された両方のＨ鎖のカルボキシ末端部分を含む。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域における配列によって決定され、この領域はまた、ある特定の細胞型に見られるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される。
【００３５】
「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位及び抗原結合部位を含有する最小の抗体断片である。この断片は１つの重鎖可変領域ドメインと１つの軽鎖可変領域ドメインが、非共有結合で緊密に結合した二量体からなる。これらの２つのドメインの折り畳みにより、抗原結合のためのアミノ酸残基を提供し、抗原結合特異性を抗体に与える、６つの超可変ループ（Ｈ鎖及びＬ鎖からそれぞれ３つのループ）が生じる。しかしながら、全結合部位よりも低い親和性であるが、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的なＨＶＲを３つしか含まないＦｖの半分）でさえも、抗原を認識し、それに結合する能力を有する。
【００３６】
「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも略される「一本鎖Ｆｖ」は、接続されて単一のポリペプチド鎖になるＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含む抗体断片である。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドは、ＶＨとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーを更に含んでおり、このリンカーにより、ｓＦｖが抗原結合に望ましい構造を形成することが可能となっている。ｓＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）を参照されたい。
【００３７】
本発明の抗体の「機能性断片」は、インタクトな抗体の一部分を含み、これには、概して、インタクトな抗体の抗原結合領域若しくは可変領域、または修飾されたＦｃＲ結合能力を保持するか若しくは有する抗体のＦｃ領域が含まれる。抗体断片の例としては、線形抗体、一本鎖抗体分子、及び抗体断片から形成された多重特異性抗体が挙げられる。
【００３８】
「ダイアボディ」という用語は、鎖内ではなく鎖間のＶドメイン対合を達成し、それによって二価断片、すなわち、２つの抗原結合部位を有する断片が得られるように、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間に短いリンカー（約５〜１０個の残基）を有するｓＦｖ断片（前の段落を参照されたい）を構築することによって調製された小さな抗体断片を指す。二重特異性ダイアボディは、２つの抗体のＶＨドメイン及びＶＬドメインが異なるポリペプチド鎖上に存在する２つの「交差（クロスオーバー）」ｓＦｖ断片のヘテロ二量体である。ダイアボディは、さらに詳細には、例えば、ＥＰ４０４，０９７、ＷＯ９３／１１１６１、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３）を参照されたい。
【００３９】
本明細書におけるモノクローナル抗体には、具体的には、重鎖及び／または軽鎖の一部分が、特定の種に由来するかまたは特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同であるが、鎖（複数可）の残りが、別の種に由来するかまたは別の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同である、「キメラ」抗体（免疫グロブリン）、ならびにかかる抗体の断片が含まれるが、これは、それらが所望される生物活性を呈する限りにおいてである（米国特許第４，８１６，５６７号、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４））。本明細書における目的のキメラ抗体としては、ＰＲＩＭＡＴＩＺＥＤ（登録商標）抗体が含まれ、ここで、この抗体の抗原結合領域は、例えば、マカクザルに目的の抗原で免疫付与を行うことによって産生される抗体に由来する。本明細書に使用されるとき、「ヒト化抗体」は、「キメラ抗体」のサブセットとして使用される。
【００４０】
「ヒト化」型の非ヒト（例えば、マウス）抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を含有するキメラ抗体である。一実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲ（以下に定義される）からの残基が、所望される特異性、親和性、及び／または能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲからの残基で置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の事例では、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク（「ＦＲ」）残基は、対応する非ヒト残基で置き換えられている。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含んでもよい。これらの修飾を、結合親和性など、抗体の性能を更に改良するために行ってもよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むことになり、ここで、超可変ループの全てまたは実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリン配列のものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全てが、ヒト免疫グロブリン配列のものであるが、ＦＲ領域には、結合親和性、異性体化、免疫原性などの抗体の性能を向上させる１つ以上の個々のＦＲ残基置換が含まれてもよい。ＦＲ領域におけるこれらのアミノ酸置換の数は、典型的に、Ｈ鎖では６個以下であり、Ｌ鎖では３個以下である。ヒト化抗体はまた、任意に、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの少なくとも一部分を含む。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（１９９２）を参照されたい。また、例えば、Ｖａｓｗａｎｉ  ａｎｄ  Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ  ＆  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５−１１５（１９９８）、Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ２３：１０３５−１０３８（１９９５）、Ｈｕｒｌｅ  ａｎｄ  Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８−４３３（１９９４）、ならびに米国特許第６，９８２，３２１号及び同第７，０８７，４０９号も参照されたい。
【００４１】
「ヒト抗体」は、ヒトによって産生された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、及び／または本明細書に開示されるヒト抗体を作製する技法の内の任意のものを用いて作製された抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的には除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリを含む当該技術分野で既知の様々な技法を使用して産生され得る。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１（１９９１）、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）。Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）、Ｂｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６−９５（１９９１）に記載の方法も、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。ｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ａｎｄ  ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５：３６８−７４（２００１）もまた参照されたい。ヒト抗体は、抗原チャレンジに応答してかかる抗体を産生するように修飾されているが、その内因性遺伝子座が無効化されているトランスジェニック動物、例えば、免疫化異種マウスに抗原を投与することにより調製され得る（例えば、米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号をＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関して参照されたい）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成されるヒト抗体に関しては、例えば、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２（２００６）も参照されたい。
【００４２】
本明細書で使用される場合、「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、配列が超可変性であり、及び／または構造的に定義されたループを形成する抗体可変ドメインの領域を指す。一般に、抗体は、６つのＨＶＲを含み、３つがＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）にあり、３つがＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）にある。天然抗体において、Ｈ３及びＬ３が６つのＨＶＲの最も高い多様性を呈し、特にＨ３が、抗体に優れた特異性を与える上で特有の役割を果たすと考えられる。例えば、Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １３：３７−４５（２０００）、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｗｕ，ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４８：１−２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）を参照されたい。実際には、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ抗体は、軽鎖の非存在下で機能的であり、かつ安定している。例えば、Ｈａｍｅｒｓ−Ｃａｓｔｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６３：４４６−４４８（１９９３）、Ｓｈｅｒｉｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：７３３−７３６（１９９６）を参照されたい。
【００４３】
多数のＨＶＲ描写が本明細書で使用され、かつ包含される。Ｋａｂａｔ相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列可変性に基づくものであり、最も一般的に使用されている（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１）を参照されたい）。Ｃｈｏｔｈｉａは、代わりに、構造ループの位置を指す（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。ＡｂＭ  ＨＶＲは、Ｋａｂａｔ  ＨＶＲとＣｈｏｔｈｉａ構造的ループとの間の妥協案を示し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアにより使用される。「接触」ＨＶＲは、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらＨＶＲの各々の残基を、以下に記載する。
ループ  Ｋａｂａｔ        ＡｂＭ            Ｃｈｏｔｈｉａ    接触
Ｌ１    Ｌ２４−Ｌ３４    Ｌ２４−Ｌ３４    Ｌ２６−Ｌ３２    Ｌ３０−Ｌ３６
Ｌ２    Ｌ５０−Ｌ５６    Ｌ５０−Ｌ５６    Ｌ５０−Ｌ５２    Ｌ４６−Ｌ５５
Ｌ３    Ｌ８９−Ｌ９７    Ｌ８９−Ｌ９７    Ｌ９１−Ｌ９６    Ｌ８９−Ｌ９６
Ｈ１    Ｈ３１−Ｈ３５Ｂ  Ｈ２６−Ｈ３５Ｂ  Ｈ２６−Ｈ３２    Ｈ３０−Ｈ３５Ｂ（Ｋａｂａｔ付番）
Ｈ１    Ｈ３１−Ｈ３５    Ｈ２６−Ｈ３５    Ｈ２６−Ｈ３２    Ｈ３０−Ｈ３５（Ｃｈｏｔｈｉａ付番）
Ｈ２    Ｈ５０−Ｈ６５    Ｈ５０−Ｈ５８    Ｈ５３−Ｈ５５    Ｈ４７−Ｈ５８
Ｈ３    Ｈ９５−Ｈ１０２  Ｈ９５−Ｈ１０２  Ｈ９６−Ｈ１０１  Ｈ９３−Ｈ１０１
【００４４】
ＨＶＲは、以下の「伸長ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬにおいて、２４〜３６または２４〜３４（Ｌ１）、４６〜５６または５０〜５６（Ｌ２）、及び８９〜９７または８９〜９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおいて、２６〜３５（Ｈ１）、５０〜６５または４９〜６５（Ｈ２）、及び９３〜１０２、９４〜１０２、または９５〜１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの定義の各々について、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記）に従って付番される。
【００４５】
「Ｋａｂａｔにあるような可変ドメイン残基付番」または「Ｋａｂａｔにあるようなアミノ酸位置付番」という表現、及びそれらの変形形態は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記）における抗体の編成において重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用されている付番方式を指す。この付番システムを使用して、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲ若しくはＨＶＲの短縮、またはそれへの挿入に対応するより少ないアミノ酸または追加のアミノ酸を含有し得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２後に単一のアミノ酸挿入（Ｋａｂａｔに従って残基５２ａ）を、そして重鎖ＦＲ残基８２後に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔに従って残基８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃ等）を含んでもよい。残基のＫａｂａｔ付番は、所与の抗体に対して、「標準の」Ｋａｂａｔによって付番された配列との抗体の配列の相同領域での整列によって決定され得る。
【００４６】
「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【００４７】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」または「アクセプターヒトフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループから行われる。概して、配列のサブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）にあるようなサブグループである。例には、ＶＬに関するものが含まれ、サブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記）にあるようなサブグループカッパＩ、カッパＩＩ、カッパＩＩＩ、またはカッパＩＶであってもよい。更に、ＶＨについては、サブグループは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記）にあるようなサブグループＩ、サブグループＩＩ、またはサブグループＩＩＩであり得る。あるいは、ヒトコンセンサスフレームワークは、特定の残基、例えば、ドナーフレームワーク配列を様々なヒトフレームワーク配列の集合とアライメントすることによって、ヒトフレームワーク残基が、ドナーフレームワークに対するその相同性に基づいて選択される場合など、上記のものに由来し得る。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、それと同じアミノ酸配列を含んでもよく、またはそれは既存のアミノ酸配列変化を含有してもよい。一部の実施形態では、既存のアミノ酸変化の数は、１０個以下、９個以下、８個以下、７個以下、６個以下、５個以下、４個以下、３個以下、または２個以下である。
【００４８】
「ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワーク」は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記）の可変重鎖サブグループＩＩＩにおけるアミノ酸配列から得られるコンセンサス配列を含む。一実施形態では、ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークアミノ酸配列は、以下の配列の各々のうちの少なくとも一部または全てを含む：ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳ（ＨＣ−ＦＲ１）（配列番号３５）、ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶ（ＨＣ−ＦＲ２）、（配列番号３６）、ＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲ（ＨＣ−ＦＲ３、配列番号３７）、ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ（ＨＣ−ＦＲ４）、（配列番号３８）。
【００４９】
「ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワーク」は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記）の可変軽鎖カッパサブグループＩにおけるアミノ酸配列から得られるコンセンサス配列を含む。一実施形態では、ＶＨサブグループＩコンセンサスフレームワークアミノ酸配列は、以下の配列の各々のうちの少なくとも一部または全てを含む：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（ＬＣ−ＦＲ１）（配列番号３９）、ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹ（ＬＣ−ＦＲ２）（配列番号４０）、ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（ＬＣ−ＦＲ３）（配列番号４１）、ＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（ＬＣ−ＦＲ４）（配列番号４２）。
【００５０】
例えばＦｃ領域の規定位置における「アミノ酸修飾」とは、規定の残基の置換若しくは欠失、または規定の残基に隣接する少なくとも１個のアミノ酸残基の挿入を指す。指定残基に「隣接する」挿入とは、その１〜２個の残基内への挿入を意味する。挿入は、指定残基のＮ末端側またはＣ末端側であり得る。本明細書における好ましいアミノ酸修飾は、置換である。
【００５１】
「親和性成熟」抗体とは、その１つ以上のＨＶＲに１つ以上の変化を有し、これらの変化が、それらの変化（複数可）を有さない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性の向上をもたらす抗体である。一実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対するナノモルまたは更にはピコモルの親和性を有する。親和性成熟抗体は、当該技術分野で既知の手順によって産生される。例えば、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）は、ＶＨ及びＶＬドメインシャフリングによる親和性成熟を記載している。ＨＶＲ及び／またはフレームワーク残基のランダム変異生成は、例えば、Ｂａｒｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：３８０９−３８１３（１９９４）、Ｓｃｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｇｅｎｅ  １６９：１４７−１５５（１９９５）、Ｙｅｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４−２００４（１９９５）、Ｊａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０−９（１９９５）、及びＨａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９−８９６（１９９２）に記載されている。
【００５２】
本明細書で使用されるとき、「に特異的に結合する」または「に対して特異的」であるという用語は、生体分子を含む分子の異種集団の存在下で標的の存在を決定するものである、標的と抗体との間の結合等の測定可能かつ再現可能な相互作用を指す。例えば、標的（これはエピトープであり得る）に特異的に結合する抗体は、他の標的に結合するよりも高い親和性、結合力で、より容易に、及び／またはより長い持続時間でこの標的に結合する、抗体である。一実施形態では、抗体が無関係の標的に結合する程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定される、抗体の標的への結合の約１０％未満である。ある特定の実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、１μＭ以下、１００ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下の解離定数（Ｋｄ）を有する。ある特定の実施形態では、抗体は、異なる種由来のタンパク質間で保存されるタンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の実施形態では、特異的結合としては、排他的結合を含んでもよいが、それを必要としない。
【００５３】
本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、天然配列Ｆｃ領域及び変異形Ｆｃ領域を含む、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するように使用される。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は変化し得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６位のアミノ酸残基から、またはＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端まで伸びると定義される。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ付番方式によると残基４４７）は、例えば、抗体の産生若しくは精製の間に、または抗体の重鎖をコードする核酸を組換え操作することによって、除去されてもよい。したがって、インタクトな抗体の組成物は、全Ｋ４４７残基が除去された抗体集団、Ｋ４４７残基が除去されない抗体集団、及びＫ４４７残基を有する抗体と有しない抗体との混合物を有する抗体集団を含んでもよい。本発明の抗体における使用に好適な天然配列のＦｃ領域には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２（ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ）、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４が挙げられる。
【００５４】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を表す。好ましいＦｃＲは、天然配列のヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）に結合するものであり、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体（これらの受容体の対立遺伝子変異形及び代替的にスプライス型を含む）を含み、ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害性受容体」）が含まれ、これらは、それらの細胞質側ドメインが主に異なる、同様のアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含有する。阻害性レセプターＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに免疫レセプターチロシンベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含む。（Ｍ．Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−２３４（１９９７）を参照されたい。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４：２５−３４（１９９４）、及びｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０−４１（１９９５）に概説されている。今後特定されるＦｃＲを含めて、他のＦｃＲが、本明細書において「ＦｃＲ」という用語に包含される。
【００５５】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」という用語にはまた、胎児への母体ＩｇＧの移入を担う、新生児型受容体であるＦｃＲｎも含まれる。Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４）。ＦｃＲｎへの結合を測定する方法は公知である（例えば、Ｇｈｅｔｉｅ  ａｎｄ  Ｗａｒｄ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ  １８：（１２）：５９２−８（１９９７）、Ｇｈｅｔｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １５（７）：６３７−４０（１９９７）、Ｈｉｎｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９（８）：６２１３−６（２００４）、ＷＯ２００４／９２２１９（Ｈｉｎｔｏｎら）を参照されたい）。ヒトＦｃＲｎ高親和性結合ポリペプチドのインビボでのＦｃＲｎへの結合及び血清中半減期は、例えば、ヒトＦｃＲｎを発現するトランスジェニックマウス若しくはトランスフェクトヒト細胞株において、または変異形Ｆｃ領域を有するポリペプチドが投与される霊長類においてアッセイすることができる。ＷＯ２００４／４２０７２（Ｐｒｅｓｔａ）は、ＦｃＲへの結合を向上または減少させた抗体変異形を記載している。また、例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１−６６０４（２００１）を参照されたい。
【００５６】
「実質的に低減された」または「実質的に異なる」という表現は、本明細書に使用されるとき、２つの数値（一般に、一方がある分子と関連付けられており、他方が参照／比較分子と関連付けられている）の間の十分に高い相違を表し、結果として、当業者であれば、これら２つの値の間の相違が、かかる値（例えば、Ｋｄ値）によって測定される生物学的特徴の状況において、統計学的に有意なものであると見なすであろう。かかる２つの値の間の相違は、例えば、参照／比較分子の値の関数として、約１０％超、約２０％超、約３０％超、約４０％超、及び／または約５０％超である。
【００５７】
「実質的に同様の」または「実質的に同じ」という用語は、本明細書に使用されるとき、２つの数値（例えば、一方が本発明の抗体と関連付けられており、他方が参照／比較分子と関連付けられている）の間の十分に高い類似性を示し、結果として、当業者であれば、これら２つの値の間の相違が、かかる値（例えば、Ｋｄ値）によって測定される生物学的特徴に関して、生物学的及び／または統計的有意性がほとんどない、または全くないと見なすであろう。かかる２つの値の間の相違は、例えば、基準／比較対象の値の関数として、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、及び／または約１０％である。
【００５８】
本明細書で使用される「担体」としては、用いられる投与量及び濃度でそれに曝露されている細胞または哺乳動物にとって無毒である、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤が挙げられる。多くの場合、生理的に許容される担体は、ｐＨ緩衝水溶液である。生理学的に許容される担体の例としては、リン酸、クエン酸、及び他の有機酸などの緩衝液、アスコルビン酸を含む抗酸化剤、低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド、血清アルブミン、ゼラチン、若しくは免疫グロブリンなどのタンパク質、ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、若しくはリジンなどのアミノ酸、グルコース、マンノース、若しくはデキストリンを含む、単糖類、二糖類、及び他の炭水化物、ＥＤＴＡなどのキレート剤、マンニトール若しくはソルビトールなどの糖アルコール、ナトリウムなどの塩形成対イオン、及び／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）などの非イオン性界面活性剤が挙げられる。
【００５９】
「添付文書」とは、適応症、使用法、投与量、投与、禁忌症、パッケージングされた製品と組み合わせられる他の薬に関する情報、及び／またはかかる薬の使用に関する警告等を含む、薬の商用のパッケージに通例含まれる指示に関する情報を含む、薬の商用のパッケージに通例含まれる指示書を指す。
【００６０】
「個体」または「対象」または「患者」とは、哺乳動物である。哺乳動物には、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及びサル等の非ヒト霊長類）、ウサギ、及び齧歯類（例えば、マウス及びラット）が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、この個体または対象または患者とはヒトである。
【００６１】
「有効量」とは、特定の障害または状態の測定可能な改善または予防を実現するのに必要な少なくとも最低限の濃度である。本明細書における有効量は、患者の疾患状態、年齢、性別、及び体重、ならびに個体における所望の応答を誘発する抗体の能力などの要因に応じて異なり得る。有効量は、治療上有益な効果が処置の任意の毒性効果または有害効果を上回るものでもある。予防的使用の場合、有益なまたは所望の結果には、疾患の生化学的、組織学的、及び／または挙動的症状、その合併症、ならびに疾患の発症中に現れる中間病理学的表現型を含む、その疾患のリスクの排除若しくは低減、その疾患の重症度の軽減、またはその疾患の発生の遅延などの結果が含まれる。治療的使用の場合、有益なまたは所望の結果には、疾患から生じる１つ以上の症状の低減、疾患に罹患している者の生活の質の向上、疾患を処置するために必要な他の薬剤の用量の減少、別の薬剤の効果の増強（例えば、標的による）、疾患の進行の遅延、及び／または生存期間の延長などの臨床結果が含まれる。臓器移植を待つ感作された個体を処置する場合、有効量の薬物は、個体におけるアロ抗体及び／またはＰＲＡのレベルにおいて効果を有するか、及び／またはある程度まで低減する効果を有し得る。臓器移植を受けている個体（感作された個体など）を処置する場合、有効量の薬物は、臓器移植に関連する症状または状態（例えば、移植片拒絶）の１つ以上において効果を有するか及び／またはある程度まで緩和する効果を有し得る。有効量は、１回以上の投与で投与してもよい。本発明の目的に関しては、薬物、化合物、または薬学的組成物の有効量は、予防的または治療的処置を直接または間接的に達成するのに十分な量である。臨床分野において理解されるように、薬物、化合物、または薬学的組成物の有効量は、別の薬物、化合物、または薬学的組成物と併せて達成されても、されなくてもよい。したがって、「有効量」とは、１つ以上の治療剤を投与するという点で考慮されてもよく、単剤は、１つ以上の他の薬剤と併せて、望ましい結果が達成され得るか、または達成される場合、有効量で与えられると見なされてもよい。
【００６２】
本明細書で使用される「ＣＤ２０」とは、ヒトＢリンパ球抗原ＣＤ２０（ＣＤ２０、Ｂリンパ球表面抗原Ｂ１、Ｌｅｕ−１６、Ｂｐ３５、ＢＭ５及びＬＦ５としても公知であり、その配列はＳｗｉｓｓＰｒｏｔデータベースエントリーＰ１１８３６により特徴付けられる）は、プレＢ及び成熟Ｂリンパ球上に位置する約３５ｋＤの分子量を有する疎水性膜貫通タンパク質を指す。（Ｖａｌｅｎｔｉｎｅ，Ｍ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４（１９）（１９８９  １１２８２−１１２８７、Ｔｅｄｄｅｒ，Ｔ．Ｆ．，ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５（１９８８）２０８−１２、Ｓｔａｍｅｎｋｏｖｉｃ，Ｉ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６７（１９８８）１９７５−８０、Ｅｉｎｆｅｌｄ，Ｄ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．７（１９８８）７１１−７、Ｔｅｄｄｅｒ，Ｔ．Ｆ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４２（１９８９）２５６０−８）。対応するヒト遺伝子は、膜貫通型４ドメイン、サブファミリーＡ、メンバー１（ＭＳ４Ａ１としても公知）である。この遺伝子は膜貫通型４Ａ遺伝子ファミリーのメンバーをコードする。この新生タンパク質ファミリーのメンバーは、共通の構造的特徴及び類似のイントロン／エクソンスプライス境界によって特徴づけられ、造血細胞及び非リンパ組織の間で固有の発現パターンを示す。この遺伝子は、Ｂ細胞の発達及び血漿細胞への分化にある役割を果たすＢリンパ球表面分子をコードする。このファミリーメンバーは、ファミリーメンバーのクラスターの中でも１１ｑ１２に局在する。この遺伝子の選択的スプライシングにより、同じタンパク質をコードする２つの転写変異形が生成される。
【００６３】
「ＣＤ２０」及び「ＣＤ２０抗原」という用語は、本明細書では互換的に使用され、細胞によって自然に発現されるか、またはＣＤ２０遺伝子でトランスフェクトされた細胞上で発現される、ヒトＣＤ２０の任意の変異形、アイソフォーム及び種相同体を包含する。本発明の抗体のＣＤ２０抗原への結合は、ＣＤ２０を不活性化することによってＣＤ２０を発現する細胞（例えば、腫瘍細胞）の死滅を媒介する。ＣＤ２０を発現する細胞の死滅は、以下の機構のうちの１つ以上によって生じ得る：細胞死／アポトーシス誘導、ＡＤＣＣ及びＣＤＣ。
【００６４】
当該技術分野で認識されているＣＤ２０の類義語としては、Ｂリンパ球抗原ＣＤ２０、Ｂリンパ球表面抗原Ｂ１、Ｌｅｕ−１６、Ｂｐ３５、ＢＭ５及びＬＦ５が挙げられる。
【００６５】
本発明による「抗ＣＤ２０抗体」という用語は、ＣＤ２０抗原に特異的に結合する抗体である。ＣＤ２０抗原に対する抗ＣＤ２０抗体の結合特性及び生物学的活性に依存して、２種類の抗ＣＤ２０抗体（Ｉ型及びＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）は、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０３（２００４）２７３８−２７４３、及びＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０１（２００３）１０４５−１０５２によって識別され得る（以下の表１を参照されたい）。
表１：Ｉ型及びＩＩ型の抗ＣＤ２０抗体の特性
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【００６６】
ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の例としては、例えば、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体ＩｇＧ１（ＷＯ２００５／０４４８５９に開示されるキメラヒト化ＩｇＧ１抗体）、１１Ｂ８  ＩｇＧ１（ＷＯ２００４／０３５６０７に開示の）、及びＡＴ８０  ＩｇＧ１が挙げられる。典型的には、ＩｇＧ１アイソタイプのＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、特徴的なＣＤＣ特性を示す。ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプのＩ型抗体と比較して、（ＩｇＧ１アイソタイプの場合）ＣＤＣが低下している。
【００６７】
Ｉ型抗ＣＤ２０抗体の例としては、例えば、リツキシマブ、ＨＩ４７  ＩｇＧ３（ＥＣＡＣＣ、ハイブリドーマ）、２Ｃ６  ＩｇＧ１（ＷＯ２００５／１０３０８１に開示の）、２Ｆ２  ＩｇＧ１（ＷＯ２００４／０３５６０７及びＷＯ２００５／１０３０８１に開示の）及び２Ｈ７  ＩｇＧ１（ＷＯ２００４／０５６３１２に開示の）が挙げられる。
【００６８】
本発明によるアフコシル化抗ＣＤ２０抗体は、好ましくは、ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５に記載されているように、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体、より好ましくはアフコシル化ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体である。
【００６９】
「リツキシマブ」抗体（参照抗体、Ｉ型抗ＣＤ２０抗体の例）は、ヒトＣＤ２０抗原に対するモノクローナル抗体を含有する遺伝子操作されたキメラヒトガンマ１マウス定常ドメインである。しかし、この抗体は糖鎖操作（ｇｌｙｃｏｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ）されておらず、かつアフコシル化されておらず、したがって少なくとも８５％のフコースの量を有する。このキメラ抗体は、ヒトγ１定常ドメインを含み、かつＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎに譲渡された１９９８年４月１７日に発行された米国特許第５，７３６，１３７号（Ａｎｄｅｒｓｅｎら）の名称「Ｃ２Ｂ８」によって同定される。リツキシマブは、再発性または難治性の低悪性度または濾胞性のＣＤ２０陽性、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫の患者の処置に承認されている。インビトロでの作用機序研究によって、リツキシマブがヒト補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）を呈することが示されている（Ｒｅｆｆ，Ｍ．Ｅ．，ｅｔ．ａｌ，Ｂｌｏｏｄ  ８３（２）（１９９４）４３５−４４５）。さらに、これによって、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を測定するアッセイで活性が示される。
【００７０】
本明細書で使用される「ＧＡ１０１抗体」という用語は、ヒトＣＤ２０に結合する以下の抗体のいずれか１つを指す：（１）配列番号１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号５のアミノ酸を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体、（２）配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを含む抗体、（３）配列番号９の及び配列番号１０のアミノ酸配列を含む抗体、（４）オビヌツズマブとして公知の抗体、または（５）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗体。一実施形態では、ＧＡ１０１抗体はＩｇＧ１アイソタイプ抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体である。
【００７１】
「ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体」という用語は、マウスモノクローナル抗ＣＤ２０抗体Ｂ−Ｌｙ１（マウス重鎖（ＶＨ）の可変領域：配列番号１１、マウス軽鎖（ＶＬ）の可変領域：配列番号１２  −Ｐｏｐｐｅｍａ，Ｓ．ａｎｄ  Ｖｉｓｓｅｒ，Ｌ．，Ｂｉｏｔｅｓｔ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ３（１９８７）１３１−１３９を参照されたい）から、ＩｇＧ１からのヒト定常ドメインとのキメラ化、その後のヒト化によって得た、ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５に開示されるヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体を指す（ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５を参照のこと）。これらの「ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体」は、ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５に詳細に開示されている。
マウスモノクローナル抗ＣＤ２０抗体Ｂ−Ｌｙ１重鎖（ＶＨ）の可変領域（配列番号１１）
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マウスモノクローナル抗ＣＤ２０抗体Ｂ−Ｌｙ１軽鎖（ＶＬ）の可変領域（配列番号１２）
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【００７２】
一実施形態では、「ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体」は、配列番号７、８及び１３〜３３の群から選択される重鎖（ＶＨ）の可変領域（とりわけ、ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５のＢ−ＨＨ２〜Ｂ−ＨＨ９及びＢ−ＨＬ８〜Ｂ−ＨＬ１７に対応する）を有する。１つの特定の実施形態では、このような可変ドメインは、配列番号１４、１５、７、１９、２５、２７及び２９（ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５のＢ−ＨＨ２、ＢＨＨ−３、Ｂ−ＨＨ６、Ｂ−ＨＨ８、Ｂ−ＨＬ８、Ｂ−ＨＬ１１及びＢ−ＨＬ１３に対応する）からなる群より選択される。１つの特定の実施形態では、「ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体」は、配列番号８の軽鎖（ＶＬ）の可変領域を有する（ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５のＢ−ＫＶ１に対応する）。１つの特定の実施形態では、「ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体」は、配列番号７の重鎖の可変領域（ＶＨ）（ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５のＢ−ＨＨ６に対応する）及び配列番号８の軽鎖の可変領域（ＶＬ）（ＷＯ２００５／０４４８５９及びＷＯ２００７／０３１８７５のＢ−ＫＶ１に対応する）を有する。さらに一実施形態では、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体はＩｇＧ１抗体である。本発明によれば、そのようなアフコシル化ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体は、ＷＯ２００５／０４４８５９、ＷＯ２００４／０６５５４０、ＷＯ２００７／０３１８７５、Ｕｍａｎａ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７（１９９９）１７６−１８０及びＷＯ９９／１５４３４２に記載された手順に従って、Ｆｃ領域において糖鎖操作（ＧＥ）されている。一実施形態では、アフコシル化された糖鎖操作されたヒト化Ｂ−Ｌｙ１は、Ｂ−ＨＨ６−Ｂ−ＫＶ１  ＧＥである。一実施形態において、抗ＣＤ２０抗体は、オビヌツズマブである（推奨ＩＮＮ、ＷＨＯ  Ｄｒｕｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．４，２０１２，ｐ．４５３）。本明細書で使用される場合、オビヌツズマブは、ＧＡ１０１またはＲＯ５０７２７５９の同義語である。これは、以前のすべてのバージョン（例えば、Ｖｏｌ．２５，Ｎｏ．１，２０１１，ｐ．７５−７６）に置き換わり、以前はアフツズマブとして知られている（推奨ＩＮＮ、ＷＨＯ  Ｄｒｕｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．２３，Ｎｏ．２，２００９，ｐ．１７６；Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．２，２００８，ｐ．１２４）。いくつかの実施形態では、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む抗体、またはその抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体は、配列番号９の３つの重鎖ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び配列番号１０の３つの軽鎖ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。
重鎖（配列番号９）
2018520153.tif 000006
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軽鎖（配列番号１０）
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【００７３】
いくつかの実施形態では、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体は、アフコシル化された糖鎖を操作されたヒト化Ｂ−Ｌｙ１である。そのような糖鎖操作されたヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体は、好ましくはフコース残基のレベルが低減した、Ｆｃ領域におけるグリコシル化のパターンの変化を有する。好ましくは、フコースの量は、Ａｓｎ２９７におけるオリゴ糖の総量の６０％以下である（一実施形態では、フコースの量は４０％〜６０％であり、別の実施形態ではフコースの量は５０％以下であり、さらに別の実施形態では、フコースの量は３０％以下である）。さらに、Ｆｃ領域のオリゴ糖は好ましくは二分される。これらの糖鎖操作されたヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体は、ＡＤＣＣが増大している。
【００７４】
「リツキシマブと比較した、抗ＣＤ２０抗体のＲａｊｉ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ−８６）上でのＣＤ２０に対する結合能の比」は、直接免疫蛍光測定（平均蛍光強度（ＭＦＩ）を測定する）によって、Ｒａｊｉ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ−８６）とともにＦＡＣＳＡｒｒａｙ（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）中、Ｃｙ５と複合体化されたこのような抗ＣＤ２０抗体、及びＣｙ５と複合体化されたリツキシマブを用いて測定し（実施例２に記載のとおり）、かつ以下のように計算した：
Ｒａｊｉ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ−８６）でのＣＤ２０に対する結合能の比＝
2018520153.tif 000009
【００７５】
ＭＦＩは、平均蛍光強度である。ここで、「Ｃｙ５標識比」とは、本明細書で用いる場合、抗体１分子あたりのＣｙ５標識分子の数を意味する。
【００７６】
典型的には、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、リツキシマブと比較して前記第２の抗ＣＤ２０抗体のＲａｊｉ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ−８６）上のＣＤ２０に対する結合能の比が、０．３〜０．６、及び一実施形態では、０．３５〜０．５５であり、さらに別の実施形態では、０．４〜０．５である。
【００７７】
一実施形態では、前記ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体、例えばＧＡ１０１抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）が増大している。
【００７８】
「抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）の増大した抗体」とは、当業者に公知の任意の適切な方法によって決定されるＡＤＣＣの増大がある、本明細書で定義される用語の抗体を意味する。許容される１つのインビトロＡＤＣＣアッセイは以下のとおりである：
１）このアッセイは、抗体の抗原結合領域によって認識される標的抗原を発現することが知られている標的細胞を使用する、
２）このアッセイでは、ランダムに選択された健康なドナーの血液からエフェクター細胞として単離されたヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を用いる、
３）このアッセイは以下のプロトコールに従って行う：
ｉ）ＰＢＭＣを標準密度遠心分離手順を用いて単離し、ＲＰＭＩ細胞培養培地中５×１０６細胞／ｍｌで懸濁する、
ｉｉ）標準的な組織培養法により標的細胞を増殖させ、指数増殖期から９０％より高い生存率で採取し、ＲＰＭＩ細胞培養培地で洗浄し、１００μキュリーの５１Ｃｒで標識し、細胞培養培地で２回洗浄し、細胞培養液中に１０５細胞／ｍｌの密度で再懸濁させ、
ｉｉｉ）上記の最終標的細胞懸濁液１００マイクロリットルを９６ウェルマイクロタイタープレートの各ウェルに移し、
ｉｖ）細胞培養培地中で抗体を４０００ｎｇ／ｍｌから０．０４ｎｇ／ｍｌまで段階希釈し、得られた抗体溶液５０マイクロリットルを９６ウェルマイクロタイタープレート中の標的細胞に添加し、上記の全濃度範囲をカバーする３連の種々の抗体濃度で試験する、
ｖ）最大放出（ＭＲ）対照について、標識された標的細胞を含有するプレート中の３つのさらなるウェルに、非イオン性界面活性剤（Ｎｏｎｉｄｅｔ、Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）の２％（ＶＮ）水溶液５０マイクロリットルを、抗体溶液（上記のｉｖ項目）の代わりに入れる、
ｖｉ）自発放出（ＳＲ）対照のために、標識された標的細胞を含むプレート中の３つのさらなるウェルに、抗体溶液（上記ｉｖ項目）の代わりに５０マイクロリットルのＲＰＭＩ細胞培養培地を入れる、
ｖｉｉ）次いで、９６ウェルマイクロタイタープレートを５０ｘｇで１分間遠心分離し、４℃で１時間インキュベートする、
ｖｉｉｉ）５０マイクロリットルのＰＢＭＣ懸濁液（上記のｉ項目）を各ウェルに添加して、エフェクター：標的細胞比２５：１として、プレートを３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で４時間インキュベーターに入れる、
ｉｘ）各ウェルからの無細胞上清を採取し、実験的に放出された放射能（ＥＲ）をガンマカウンターを用いて定量する、
ｘ）溶解比のパーセンテージは、式（ＥＲ−ＭＲ）／（ＭＲ−ＳＲ）×１００に従って、各抗体濃度について算出し、ここで、ＥＲは、その抗体濃度について定量された平均放射能（上記ｉｘの項目を参照されたい）であり、ＭＲは、ＭＲ対照（上記のＶの項目を参照）について定量された平均放射能（上記のｉｘ項目を参照されたい）であり、ＳＲは、ＳＲ対照（上記のｖｉ項目を参照されたい）について定量された平均放射能（上記ｉｘ項目を参照されたい）である。
４）「増大したＡＤＣＣ」とは、上記で試験した抗体濃度範囲内で観察された溶解比の最大パーセンテージの増大、及び／または上記で試験した抗体濃度範囲内で観察される溶解比の最大パーセンテージの半分を達成するために必要とされる抗体の濃度の低減のいずれかとして定義される。一実施形態では、ＡＤＣＣの増大とは、当業者に公知である、同じ標準の産生、精製、処方及び保存方法を用いて、同じ型の宿主細胞によって産生された同じ抗体によって媒介される、上記アッセイで測定されたＡＤＣＣと比較した増大であり、ただし、比較の抗体（ＡＤＣＣの増大がない）がＧｎＴＩＩＩを過剰発現するように遺伝子操作されるか、及び／またはフコシルトランスフェラーゼ８（ＦＵＴ８）遺伝子（例えば、例としては、ＦＵＴ８ノックアウトのために遺伝子操作された）からの発現が減少するように遺伝子操作されている宿主細胞によって産生されていないことを除いた増大である。
【００７９】
前記「増加したＡＤＣＣ」は、例えば、前記抗体の突然変異及び／または糖鎖操作によって得ることができる。一実施形態では、抗体は糖鎖操作されて、ＧｌｃＮＡｃによって二分される抗体のＦｃ領域に結合された二分岐オリゴ糖を有する（例えばＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔら）、米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａら）、ＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａら）、Ｕｍａｎａ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７（１９９９）１７６−１８０）。別の実施形態では、抗体は、タンパク質フコシル化が欠損している宿主細胞（例えば、Ｌｅｃ１３  ＣＨＯ細胞またはα−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子（ＦＵＴ８）欠失があるか、またはＦＵＴ遺伝子発現のノックダウンされた細胞中で抗体を発現させることによって、Ｆｃ領域に結合した炭水化物上のフコースを欠くように糖鎖操作される（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）、Ｋａｎｄａ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０−６８８（２００６）、及びＷＯ２００３／０８５１０７を参照のこと）。さらに別の実施形態では、抗体配列は、そのＦｃ領域において、ＡＤＣＣを増強するように遺伝子操作されている（例えば、一実施形態では、そのような操作された抗体変異形は、Ｆｃ領域の２９８位、３３３位、及び／または３３４位で１つ以上のアミノ酸置換（ＥＵの残基付番）を有するＦｃ領域を含む）。
【００８０】
「補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）」という用語は、補体の存在下での本発明による抗体によるヒト腫瘍標的細胞の溶解を指す。ＣＤＣは、補体の存在下で、本発明による抗ＣＤ２０抗体を用いたＣＤ２０発現細胞の調製物の処理によって測定してもよい。ＣＤＣは、抗体が４時間後に腫瘍細胞の２０％またはそれ以上の溶解（細胞死）を１００ｎＭの濃度で誘導する場合に見出される。一実施形態では、アッセイは、５１ＣｒまたはＥｕ標識された腫瘍細胞及び放出された５１ＣｒまたはＥｕの測定によって行われる。対照は、腫瘍標的細胞と補体とのインキュベーションを包含するが、ただし抗体とのインキュベーションではない。
【００８１】
「ＣＤ２０の発現」抗原という用語は、細胞、例えば、Ｔ細胞またはＢ細胞における有意なレベルのＣＤ２０抗原の発現を示すことを意図している。一実施形態では、本発明の方法によって処置すべき患者は、Ｂ細胞で有意なレベルのＣＤ２０を発現する。Ｂ細胞上のＣＤ２０発現は、当該分野で公知の標準的なアッセイによって決定することができる。例えば、ＣＤ２０抗原発現は、免疫組織化学的（ＩＨＣ）検出、ＦＡＣＳまたは対応するｍＲＮＡのＰＣＲに基づく検出を用いて測定される。
【００８２】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されている場合、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」には、その内容が明確に他を示すのでない限り、複数の指示対象が含まれる。従って、例えば、「分子」という言及は、場合により、２つ以上のそのような分子の組み合わせなどを包含する。
【００８３】
本明細書で使用される「約」という用語は、当業者であれば容易に理解するそれぞれの値の通常の誤差範囲を指す。本明細書における「約」値またはパラメータへの言及は、その値またはパラメータ自体を対象とする実施形態を含む（かつ説明する）。
【００８４】
本明細書に記載される本発明の態様及び実施形態は、態様及び実施形態「を含む」、「からなる」、及び「から本質的になる」を含むことが理解される。
【００８５】
ＩＩＩ．方法
一態様では、臓器移植（例えば、腎移植）を必要とする個体を処置するための方法であって、移植の前、同時及び／または後に、有効量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する方法が本明細書において提供される。
【００８６】
いくつかの実施形態では、この方法は、個体、例えば、臓器移植（例えば、腎移植）を受けたか、受けているか、または受ける予定の個体における臓器拒絶の予防を提供する。いくつかの実施形態において、この方法は、生存期間（例えば、宿主及び／または移植片の生存）を延長する。いくつかの実施形態では、この方法は個体におけるアロ抗体のレベルを低減する。いくつかの実施形態では、この方法は、個体のパネル反応性抗体（ＰＲＡ）を減少させる。いくつかの実施形態では、この方法は、移植の可能性を高める。いくつかの実施形態では、この方法は、移植後の移植片拒絶のリスクを低減する。いくつかの実施形態では、この方法は、個体が適切な腎臓移植片を受けるための待機時間を短縮する。いくつかの実施形態において、この方法によって、個体は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の投与無しだと交差適合性ではなかったであろう交差適合性の腎臓移植片を受容することが可能になる。いくつかの実施形態では、この方法は移植片の生存を延長する。いくつかの実施形態では、本方法は移植片の機能を改善する。いくつかの実施形態では、この方法は移植片拒絶の可能性を低減する。
【００８７】
いくつかの実施形態では、個体は、処置前に少なくとも２０％のＰＲＡを有する。いくつかの実施形態では、上記個体は末期腎疾患を有する。いくつかの実施形態では、上記個体は、以前の臓器移植、輸血、過去の妊娠、またはそれらの任意の組み合わせのような、以前のアロ抗原暴露事象を経験している。
【００８８】
いくつかの実施形態では、この方法は、個体に対して、少なくとも第１の用量（例えば、第１の用量のみ、第１の用量に続いてその後約１０日間〜約１８日間の第２の用量を含む）の抗ＣＤ２０抗体、続いて、任意の補充用量の抗ＣＤ２０抗体を投与することを包含し、ここでこの補充用量は、抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約２３週間〜約２５週間後まで提供されない。いくつかの実施形態では、上記個体は、抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約６週間〜約５２週間後に臓器移植（腎移植など）を受ける。いくつかの実施形態では、本方法は、個体が臓器移植（腎移植など）を受けた時点で、個体に抗ＣＤ２０抗体の第１の追加用量を投与することをさらに包含する。いくつかの実施形態では、この方法は、個体が臓器移植（腎移植など）を受けた後、約２３週間〜約２５週間後、抗ＣＤ２０抗体の第２の追加用量をその個体に投与することをさらに包含する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体の各用量（第１の用量、第２の用量、補充用量、第１の追加用量、及び第２の追加用量を含む）は、抗ＣＤ２０抗体の約１８００ｍｇ〜約２２００ｍｇの間である。以下に記載されるように、いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２のＨＶＲ−Ｈ２配列、及び配列番号３のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖、ならびに配列番号４のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号５のＨＶＲ−Ｌ２配列、及び配列番号６のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号９のアミノ酸配列及び配列番号１０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、この抗体は、配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗体を含む。
抗ＣＤ２０抗体
【００８９】
本開示のある特定の態様は、例えば、アロ抗体のレベルを低減するための方法における使用のための抗ＣＤ２０抗体に関する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、ＩＩ型抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体はヒトであるか、またはヒト化されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体はアフコシル化されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、ＧＡ１０１抗体である。
【００９０】
ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の例としては、例えば、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体ＩｇＧ１（ＷＯ２００５／０４４８５９に開示されるキメラヒト化ＩｇＧ１抗体）、１１Ｂ８  ＩｇＧ１（ＷＯ２００４／０３５６０７に開示の）、及びＡＴ８０  ＩｇＧ１が挙げられる。典型的には、ＩｇＧ１アイソタイプのＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、特徴的なＣＤＣ特性を示す。ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプのＩ型抗体と比較して、（ＩｇＧ１アイソタイプの場合）ＣＤＣが低下している。
【００９１】
Ｉ型抗ＣＤ２０抗体の例としては、例えば、リツキシマブ、ＨＩ４７  ＩｇＧ３（ＥＣＡＣＣ、ハイブリドーマ）、２Ｃ６  ＩｇＧ１（ＷＯ２００５／１０３０８１に開示の）、２Ｆ２  ＩｇＧ１（ＷＯ２００４／０３５６０７及びＷＯ２００５／１０３０８１に開示の）及び２Ｈ７  ＩｇＧ１（ＷＯ２００４／０５６３１２に開示の）が挙げられる。
【００９２】
いくつかの実施形態では、上記抗ＣＤ２０抗体は、本明細書で記載されるＧＡ１０１抗体である。いくつかの実施形態では、この抗ＣＤ２０は、ヒトＣＤ２０に結合する以下の抗体のうちの任意の１つである：（１）ＧＹＡＦＳＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、ＦＰＧＤＧＤＴＤ（配列番号２）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、ＮＶＦＤＧＹＷＬＶＹ（配列番号３）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＮＧＩＴＹＬＹ（配列番号４）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、ＱＭＳＮＬＶＳ（配列番号５）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及びＡＱＮＬＥＬＰＹＴ（配列番号６）のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体、（２）配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを含む抗体、（３）配列番号９のアミノ酸配列及び配列番号１０のアミノ酸配列を含む抗体、（４）オビヌツズマブとして公知の抗体、または（５）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗体。一実施形態では、ＧＡ１０１抗体はＩｇＧ１アイソタイプ抗体である。
【００９３】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）及び配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
2018520153.tif 000010
（配列番号７）
2018520153.tif 000011
（配列番号８）
【００９４】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
2018520153.tif 000012
（配列番号９）
2018520153.tif 000013
（配列番号１０）
【００９５】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体である。いくつかの実施形態では、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体は、配列番号９の３つの重鎖ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び配列番号１０の３つの軽鎖ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体は、配列番号９の配列を含む重鎖及び配列番号１０の配列を含む軽鎖を含む。
【００９６】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、以下の表２に列挙するポリペプチド配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一のアミノ酸配列を含む。
表２．ポリペプチド配列
2018520153.tif 000014
2018520153.tif 000015
【００９７】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）は、アフコシル化された糖鎖操作された抗体である。そのような糖鎖操作された抗体は、Ｆｃ領域におけるグリコシル化パターンが変更されており、好ましくはフコース残基のレベルが低減している。好ましくは、フコースの量は、Ａｓｎ２９７におけるオリゴ糖の総量の６０％以下である（一実施形態では、フコースの量は４０％〜６０％であり、別の実施形態ではフコースの量は５０％以下であり、さらに別の実施形態では、フコースの量は３０％以下である）。さらに、Ｆｃ領域のオリゴ糖は好ましくは二分される。これらの糖鎖操作されたヒト化抗ＣＤ２０（例えば、Ｂ−Ｌｙ１）抗体は、ＡＤＣＣが増大している。
【００９８】
オリゴ糖成分は、物理的安定性、プロテアーゼ攻撃に対する抵抗性、免疫系との相互作用、薬物動態、及び特異的生物学的活性を含む、治療用糖タンパク質の有効性に関連する特性に有意に影響し得る。このような特性は、オリゴ糖の存在または非存在だけでなく、特定の構造にも依存し得る。オリゴ糖構造と糖タンパク質機能との間でいくつかの一般的なことが言える。例えば、ある特定のオリゴ糖構造は、特定の炭水化物結合タンパク質との相互作用を通じて血流からの糖タンパク質の迅速なクリアランスを仲介するが、他の構造は抗体によって結合され、望ましくない免疫反応を引き起こし得る。（Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４（１９９６）９７５−８１）。
【００９９】
哺乳動物細胞は、ヒト適用のために最も適合する形態でタンパク質をグリコシル化するそれらの能力のおかげで、治療用糖タンパク質の産生に好ましい宿主である。（Ｃｕｍｍｉｎｇ，Ｄ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  １（１９９１）１１５−３０、Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４（１９９６）９７５−８１）。細菌はタンパク質を極めてまれにしかグリコシル化せず、酵母、糸状菌、昆虫及び植物細胞などの他のタイプの一般的な宿主と同様に、血流からの迅速なクリアランス、望ましくない免疫相互作用に関連するグリコシル化パターンを生じ、ある特定の場合には、生物学的活性を低減した。哺乳類細胞の中で、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞は、過去２０年間に最も一般的に用いられてきた。適切なグリコシル化パターンを与えることに加えて、これらの細胞によって、遺伝的に安定で生産性の高いクローン細胞株の一貫した生成が可能になる。それらは、無血清培地を用いた単純なバイオリアクターで高密度に培養可能であり、安全かつ再現性のあるバイオプロセスの開発を可能にする。他の一般的に使用される動物細胞としては、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、ＮＳＯ及びＳＰ２／０マウス骨髄腫細胞が挙げられる。さらに最近では、トランスジェニック動物からの生産も試験されている。（Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４（１９９６）９７５−９８１）。
【０１００】
全ての抗体は、重鎖定常領域の保存された位置に炭水化物構造を含み、各アイソタイプはタンパク質アセンブリ、分泌または機能活性に可変的に影響を及ぼすＮ結合型炭水化物構造の明確な配列を有する。（Ｗｒｉｇｈｔ，Ａ．，ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．１５（１９９７）２６−３２）。結合したＮ結合型炭水化物の構造は、処理の程度に応じてかなり変化し、高マンノース型、多分岐型及び二分岐型の複合オリゴ糖を含んでもよい。（Ｗｒｉｇｈｔ，Ａ．，ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．１５（１９９７）２６−３２）。典型的には、特定のグリコシル化部位に結合したコアオリゴ糖構造の不均質なプロセシングが存在し、その結果、モノクローナル抗体でさえも複数の糖型として存在する。同様に、抗体グリコシル化の大きな相違が細胞株間で生じ、異なる培養条件下で増殖させた所与の細胞株についてもわずかな相違が見られることが示されている。（Ｌｉｆｅｌｙ，Ｍ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  ５（８）（１９９５）８１３−２２）。
【０１０１】
単純な産生プロセスを維持し、かつ有意な望ましくない副作用を潜在的に回避しながら、力価の大きな増大を得るための１つの方法は、Ｕｍａｎａ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７（１９９９）１７６−１８０及びＵＳ６，６０２，６８４に記載されているように、そのオリゴ糖成分を遺伝子操作することによってモノクローナル抗体の天然の細胞媒介性エフェクター機能を増強することである。癌免疫療法において最も一般的に使用される抗体であるＩｇＧ１型抗体は、各ＣＨ２ドメイン中のＡｓｎ２９７において保存されたＮ結合グリコシル化部位を有する糖タンパク質である。Ａｓｎ２９７に結合した２つの複合二分岐オリゴ糖は、ＣＨ２ドメイン間に埋め込まれ、ポリペプチド骨格との広範な接触を形成し、その存在は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）などのエフェクター機能を媒介するために抗体にとって必須である（Ｌｉｆｅｌｙ，Ｍ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  ５（１９９５）８１３−８２２、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ，Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．１６３（１９９８）５９−７６、Ｗｒｉｇｈｔ，Ａ．，ａｎｄ  Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１５（１９９７）２６−３２）。
【０１０２】
二分オリゴ糖の形成を触媒するグリコシルトランスフェラーゼであるβ（１，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩ１１（「ＧｎＴＩＩ１７ｙ」）のチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞における過剰発現は、遺伝子操作されたＣＨＯ細胞によって産生される抗神経芽細胞腫キメラモノクローナル抗体（ｃｈＣＥ７）のインビトロのＡＤＣＣ活性を有意に増大させることが以前に示された。（Ｕｍａｎａ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７（１９９９）１７６−１８０、及びＷＯ９９／１５４３４２を参照されたい、その全体の内容は参照によって本明細書に援用される）。抗体ｃｈＣＥ７は、高い腫瘍親和性及び特異性を有するが、ＧｎＴＩＩＩ酵素を欠く標準的な工業細胞株で産生される場合には臨床的有用性があまりにも低い力価である大きなクラスの非複合体化モノクローナル抗体に属する（Ｕｍａｎａ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７（１９９９）１７６−１８０）。この研究は、ＧｎＴＩＩＩを発現するように抗体産生細胞を遺伝子操作することによってＡＤＣＣ活性の大幅な増加が得られることを最初に示したが、これはまた、天然に存在する抗体に見られるレベルよりも高い、定常領域（Ｆｃ）関連二分オリゴ糖（二分の、非フコシル化オリゴ糖を含む）の割合の増大につながった。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）は、ヒトＦｃ領域（例えば、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域）を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、修飾されたＮ−結合型オリゴ糖を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域のＮ−結合型オリゴ糖は、修飾されていないＮ−結合型オリゴ糖を有する抗体と比較して、フコース残基が減少している。いくつかの実施形態では、二分オリゴ糖は、二分複合オリゴ糖である。いくつかの実施形態では、Ｎ−結合型オリゴ糖は、増大した二分の非フコシル化オリゴ糖を有するように改変されている。いくつかの実施形態では、二分の非フコシル化オリゴ糖はハイブリッド型である。いくつかの実施形態では、二分の非フコシル化オリゴ糖は複合型である。より詳細な説明については、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔら、）、米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａら）、ＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａら）、及び米国特許第８，８８３，９８０号（Ｕｍａｎａら）を参照されたい。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）は、多価特異的抗体、または二重特異的抗体である。
【０１０５】
抗体の調製
上記の実施形態のいずれかによる抗体（例えば、本開示のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）は、以下のセクション１−７に記載されるように、単独で、または組み合わせて、任意の特徴を組み込んでもよい：
【０１０６】
１．抗体親和性
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば１０−８Ｍ以下、例えば１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。
【０１０７】
一実施形態では、Ｋｄは、放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される。一実施形態では、ＲＩＡは、目的とする抗体のＦａｂバージョン及びその抗原を用いて実施される。例えば、抗原に対するＦａｂの溶液結合親和性は、未標識抗原の一連の滴定の存在下で、Ｆａｂを最低濃度の（１２５Ｉ）標識抗原と平衡させ、次いで、抗Ｆａｂ抗体をコーティングしたプレートで結合した抗原を捕獲することによって測定される（例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５−８８１（１９９９）を参照されたい）。アッセイのための条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（登録商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を、５０ｍＭの炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）中５μｇ／ｍＬの捕獲抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ  Ｌａｂｓ）で一晩コーティングし、その後、ＰＢＳ中の２％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミンにより、室温（およそ２３℃）で２〜５時間ブロッキングする。非吸着プレート（Ｎｕｎｃ＃２６９６２０）中で、１００ｐＭまたは２６ｐＭの［１２５Ｉ］抗原を、目的のＦａｂの段階希釈と混合する（例えば、Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９（１９９７）における抗ＶＥＧＦ抗体Ｆａｂ−１２の評価と一致して）。目的のＦａｂを次いで一晩インキュベートするが、インキュベーションは、平衡に到達することを確実にするために、より長い期間（例えば、約６５時間）継続してもよい。その後、混合物を、室温での（例えば、１時間にわたる）インキュベーションのために、捕獲プレートに移す。その後、溶液を除去し、プレートをＰＢＳ中の０．１％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（登録商標））で８回洗浄する。プレートが乾燥したとき、１５０μＬ／ウェルのシンチラント（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｎｔ）（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ−２０（商標）、Ｐａｃｋａｒｄ）を添加し、プレートをＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ）により１０分間カウントする。最大結合の２０％以下をもたらす各Ｆａｂの濃度を、競合結合アッセイにおいて使用するために選定する。
【０１０８】
別の実施形態によると、Ｋｄは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定される。例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用したアッセイは、２５℃で、約１０の応答単位（ＲＵ）で固定化抗原ＣＭ５チップを用いて行う。一実施形態では、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）を、供給者の指示書に従って、Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を用いて活性化する。抗原を１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）で５μｇ／ｍＬ（約０．２μＭ）まで希釈した後、５μＬ／分の流速で注入して、カップリングされたタンパク質のおよそ１０応答単位（ＲＵ）を達成する。抗原の注入後、１Ｍのエタノールアミンを注入して、未反応の基をブロッキングする。動態測定のために、２倍に段階希釈したＦａｂ（０．７８ｎＭ〜５００ｎＭ）を、２５℃でおよそ２５μｌ／分の流量で０．０５％のポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）を有するＰＢＳ中に注入する。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）を、会合センサグラム及び解離センサグラムを同時に適合することによって、単純１対１Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ第３．２版）を使用して算出する。平衡解離定数（Ｋｄ）は、比率ｋｏｆｆ／ｋｏｎとして算出する。例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５−８８１（１９９９）を参照されたい。結合速度が、上の表面プラズモン共鳴アッセイによって、１０６Ｍ−１ｓ−１を超える場合、結合速度は、撹拌されたキュベットを備えるストップトフロー装着分光光度計（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または８０００−シリーズＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）等の分光計において測定される、漸増濃度の抗原の存在下で、２５℃で、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）中２０ｎＭ抗抗原抗体（Ｆａｂ型）の蛍光発光強度（励起＝２９５ｎｍ、発光＝３４０ｎｍ、１６ｎｍ帯域通過）の増大または低下を測定する、蛍光消光技法を使用することによって、決定してもよい。
【０１０９】
２．抗体断片
ある特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、抗体断片である。抗体断片としては、限定するものではないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ断片、ならびに下に記載される他の断片が挙げられる。ある特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）を参照のこと。ｓｃＦｖフラグメントの概説については、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ），ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）を参照されたく、また、ＷＯ９３／１６１８５、ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号も参照されたい。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、延長したインビボ半減期を有するＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の考察に関しては、米国特許第５，８６９，０４６号を参照されたい。
【０１１０】
ダイアボディとは、二価性または二重特異性であり得る、２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、ＥＰ４０４，０９７号、ＷＯ１９９３／０１１６１、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３）を参照されたい。トリアボディ及びテトラボディはまた、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）にも記載される。
【０１１１】
単一ドメイン抗体とは、抗体の重鎖可変ドメインの全て若しくは一部分または軽鎖可変ドメインの全て若しくは一部分を含む、抗体断片である。ある特定の実施形態では、単一ドメイン抗体とは、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ、例えば、米国特許第６，２４８，５１６  Ｂ１号を参照されたい）。
【０１１２】
抗体断片は、本明細書に記載されるように、インタクトな抗体のタンパク質消化、ならびに組み換え宿主細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはファージ）による産生を含むがこれらに限定されない、様々な技法によって作製することができる。
【０１１３】
３．キメラ及びヒト化抗体
ある特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、キメラ抗体である。ある特定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４）に記載される。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサル等の非ヒト霊長類に由来する可変領域）及びヒト定常領域を含む。さらなる実施例において、キメラ抗体とは、クラスまたはサブクラスが親抗体のそれから変更された、「クラススイッチされた」抗体である。キメラ抗体としては、それらの抗原結合断片が包含される。
【０１１４】
ある特定の実施形態において、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、親の非ヒト抗体の特異性及び親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性を低減するために、ヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（またはそれらの部分）が非ヒト抗体由来であり、かつＦＲ（またはそれらの部分）がヒト抗体配列由来である、１つ以上の可変ドメインを含む。ヒト化抗体はまた、任意選択でヒト定常領域の少なくとも一部分も含む。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体におけるいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を復元するかまたは改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。
【０１１５】
ヒト化抗体及びそれらを作製する方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）に概説されており、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９（１９８８）、Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：１００２９−１００３３（１９８９）、米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号、及び同第７，０８７，４０９号、Ｋａｓｈｍｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）グラフトについて記載）、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９−４９８（１９９１）（「リサーフェシング」について記載）、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：４３−６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」について記載）、ならびにＯｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：６１−６８（２００５）及びＫｌｉｍｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２−２６０（２０００）（ＦＲシャッフリングへの「誘導選択」アプローチについて記載）にさらに記載される。
【０１１６】
ヒト化に使用され得るヒトフレームワーク領域としては：「ベストフィット」法を用いて選択されるフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照されたい）、軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）、及びＰｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照されたい）、ヒト成熟（体細胞成熟）フレームワーク領域またはヒト生殖系フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）を参照されたい）、ならびにＦＲライブラリのスクリーニングから導かれるフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４（１９９７）及びＲｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１−２２６１８（１９９６）を参照されたい）が含まれるが、これらに限定されない。
【０１１７】
４．ヒト抗体
ある特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野で公知の種々の技法を用いて産生することができる。ヒト抗体は、概して、ｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ａｎｄ  ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８−７４（２００１）及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０−４５９（２００８）に記載される。
【０１１８】
ヒト抗体は、抗原チャレンジに応答してインタクトなヒト抗体またはヒト可変領域を含むインタクトな抗体を産生するように修飾されたトランスジェニック動物に免疫原を投与することによって、調製されてもよい。かかる動物は典型的に、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置き換える、または染色体外に存在するか、若しくは動物の染色体中に無作為に組み込まれる、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部分を含有する。かかるトランスジェニックマウスにおいて、内因性免疫グロブリン遺伝子座は一般に、不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の概説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７−１１２５（２００５）を参照されたい。例えば、米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号（ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術について記載）、米国特許第５，７７０，４２９号（ＨｕＭＡＢ（登録商標）技術を記載）、米国特許第７，０４１，８７０号（Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術について記載）、ならびに米国特許出願公開第２００７／００６１９００号（ＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載）も参照のこと。かかる動物によって生成されるインタクトな抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによって、さらに修飾されてもよい。
【０１１９】
ヒト抗体はまた、ハイブリドーマベースの方法によって作製することもできる。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫細胞株及びマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が記載されている。（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）、及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照されたい）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成されるヒト抗体はまた、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２（２００６）にも記載される。さらなる方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生について記載）及びＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８（２００６）（ヒト−ヒトハイブリドーマについて記載）に記載の方法が挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（Ｔｒｉｏｍａ技術）はまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７−９３７（２００５）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５−９１（２００５）にも記載される。
【０１２０】
ヒト抗体はまた、ヒト由来ファージディスプレイライブラリから選択したＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによって、生成されてもよい。かかる可変ドメイン配列は次いで、所望のヒト定常ドメインと組み合わされてもよい。抗体ライブラリからヒト抗体を選択するための技法は、下に記載する。
【０１２１】
５．ライブラリ由来抗体
本発明の抗体は、所望の活性（複数可）を有する抗体に関してコンビナトリアルライブラリをスクリーニングすることにより単離され得る。例えば、ファージディスプレイライブラリを生成し、かかるライブラリを、所望の結合特性を保有する抗体についてスクリーニングするための、多様な方法が当該技術分野で知られている。かかる方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１−３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）で概説されており、さらに、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９２）、Ｍａｒｋｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｄｂｕｒｙ，ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４８：１６１−１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）、Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）、及び  Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４）にさらに記載される。
【０１２２】
ある特定のファージディスプレイ法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーを、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別個にクローニングし、ファージライブラリ中で無作為に組み換え、それを次いで、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３−４５５（１９９４）に記載のように抗原結合ファージについてスクリーニングしてもよい。ファージは典型的に、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片としてまたはＦａｂ断片としてのいずれかで、抗体断片を提示する。免疫源由来のライブラリによって、ハイブリドーマを構築する必要なしに、免疫原に対する高親和性抗体が提供される。代わりに、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．１２：７２５−７３４（１９９３）に記載されるように、ナイーブレパートリーを（例えば、ヒトから）クローニングして、いかなる免疫化も伴うことなく、広範な非自己抗原及び自己抗原に対する単一源の抗体を提供し得る。最後に、ナイーブライブラリはまた、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１−３８８（１９９２）に記載されるように、再配列されていないＶ遺伝子セグメントを幹細胞からクローニングし、ランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを使用して高度可変ＣＤＲ３領域をコードし、インビトロで再配列を達成することによって、合成的に作製してもよい。ヒト抗体ファージライブラリについて記載している特許公報としては、例えば：米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号、及び同第２００９／０００２３６０号が挙げられる。
【０１２３】
ヒト抗体ライブラリから単離された抗体または抗体断片は、本明細書でヒト抗体またはヒト抗体断片と見なされる。
【０１２４】
６．多重特異性抗体
ある特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる部位に対する結合特異性を有する、モノクローナル抗体である。ある特定の実施形態では、結合特異性の一方は、ＣＤ２０に対するものであり、他方は、任意の他の抗原に対するものである。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、ＣＤ２０の２つの異なるエピトープに結合し得る。二重特異性抗体は、ＣＤ２０を発現する細胞に細胞傷害剤を局在化させるために使用されてもよい。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片として調製されてもよい。
【０１２５】
多重特異性抗体を作製するための技法としては、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の組換え共発現（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７，１９８３）、ＷＯ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：３６５５（１９９１）を参照されたい）、及び「ノブインホール」遺伝子操作（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。多重特異性抗体はまた、静電ステアリング効果を操作して抗体Ｆｃ−ヘテロ二量体分子を作製すること（ＷＯ２００９／０８９００４Ａ１）、２つ以上の抗体または断片を架橋すること（例えば、米国特許第４，６７６，９８０、及びＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照されたい）、ロイシンジッパーを使用して二重特異性抗体を産生すること（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２）を参照されたい）、「ダイアボディ」技術を使用して二重特異性抗体断片を作製すること（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）を参照されたい）、及び一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用すること（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい）、ならびに例えば、Ｔｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）に記載される三重特異性抗体を調製することによって、作製されてもよい。
【０１２６】
「オクトパス抗体」を含む３つ以上の機能的抗原結合部位を有する遺伝子操作抗体も本明細書に含まれる（例えば、ＵＳ２００６／００２５５７６Ａ１を参照されたい）。
【０１２７】
本明細書における抗体または断片にはまた、ＣＤ２０及び別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含む、「二重作用（Ｄｕａｌ  Ａｃｔｉｎｇ）ＦＡｂ」または「ＤＡＦ」も含まれる（例えば、ＵＳ２００８／００６９８２０を参照されたい）。
【０１２８】
７．抗体変異形
ある特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体のアミノ酸配列変異形が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び／または他の生物学的特性を改善することが望ましい場合もある。抗体のアミノ酸配列変異形は、適切な修飾を、抗体をコードするヌクレオチド配列中に導入することによって、またはペプチド合成によって、調製してもよい。かかる修飾としては、例えば、抗体のアミノ酸配列からの残基の欠失、及び／またはそこへ残基の挿入、及び／またはその内の残基の置換が挙げられる。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせを作製して、最終構築物に到達することができるが、但し、その最終構築物が、所望の特性、例えば、抗原結合性を保有することを条件とする。
【０１２９】
ａ）置換、挿入、及び欠失変異形
ある特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異形が提供される。置換型突然変異生成に対する目的の部位としては、ＨＶＲ及びＦＲが挙げられる。保存的置換は、表３において、「好ましい置換」の見出しの下に示される。より実質的な変化は、表Ａにおいて、「例示的な置換」の見出しの下に提供され、またアミノ酸側鎖クラスを参照して以下にさらに記載される。アミノ酸置換が目的の抗体中に導入され、産物が、所望の活性、例えば、保持／改善された抗原結合、減少した免疫原性、または改善されたＡＤＣＣ若しくはＣＤＣについて、スクリーニングされてもよい。
表３．好ましい置換。
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【０１３０】
アミノ酸は、次の一般的な側鎖特性に従って分類されてもよい：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、
（２）中性の親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ、
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０１３１】
非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーを別のクラスと交換することを伴うであろう。
【０１３２】
置換型変異形の１つの種類は、親抗体（例えば、ヒト化またはヒト抗体）の１個以上の超可変領域残基を置換することを伴う。一般に、さらなる研究のために選択される、結果として生じる変異形（複数可）は、親抗体と比べて、ある特定の生物学的特性における修飾（例えば、改善）（例えば、増加した親和性、低減された免疫原性）を有することになり、及び／または親抗体の、実質的に保持されたある特定の生物学的特性を有することになる。例となる置換型変異形は、例えば、本明細書に記載されるもの等のファージディスプレイベースの親和性成熟技法を使用して、好都合に生成され得る、親和性成熟抗体である。簡潔に述べると、１個以上のＨＶＲ残基が突然変異させられ、変異形抗体がファージ上で提示され、特定の生物活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
【０１３３】
変化（例えば、置換）をＨＶＲにおいて行って、例えば、抗体親和性を改善してもよい。かかる改変が、ＨＶＲ「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を経るコドンによってコードされた残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９−１９６（２００８）を参照されたい）、及び／または抗原と接触する残基において行われてもよく、結果として生じる変異形ＶＨまたはＶＬは、結合親和性について試験される。二次ライブラリの構築及びそれからの再選択による親和性成熟については、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１−３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，（２００１））に記載されている。親和性成熟のいくつかの実施形態において、多様性が、多様な方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャフリング、またはオリゴヌクレオチド指向性突然変異生成）のうちのいずれかによって、成熟のために選定された可変遺伝子中に導入される。二次ライブラリが次いで作り出される。ライブラリは次いで、所望の親和性を有する任意の抗体変異形を特定するために、スクリーニングされる。多様性を導入する別の方法は、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４〜６個の残基）がランダム化されるＨＶＲ指向性アプローチを伴う。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング突然変異生成またはモデリングを使用して、具体的に特定されてもよい。特にＣＤＲ−Ｈ３及びＣＤＲ−Ｌ３が、しばしば標的とされる。
【０１３４】
ある特定の実施形態において、置換、挿入、または欠失は、かかる変化が、抗体が抗原に結合する能力を実質的に低減しない限り、１つ以上のＨＶＲ内で生じてもよい。例えば、結合親和性を実質的に低減しない保存的変化（例えば、本明細書に提供される保存的置換）が、ＨＶＲにおいて行われてもよい。かかる改変は、例えば、ＨＶＲ内の抗原接触残基の外側であってもよい。上に提供される変異形ＶＨ及びＶＬ配列のある特定の実施形態において、各ＨＶＲは、変化させられないか、または１つ、２つ、若しくは３つ以下のアミノ酸置換を含有するにすぎないかのいずれかである。
【０１３５】
突然変異生成のための標的とされ得る、抗体の残基または領域の特定のための有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１−１０８５によって記載される、「アラニンスキャニング変異生成」と呼ばれるものである。この方法においては、標的残基（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、及びｇｌｕ等の荷電残基）のうちのある残基または基を特定し、中性または負荷電のアミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）によって置き換えて、抗原との抗体の相互作用が影響を受けるかどうかを決定する。さらなる置換が、最初の置換に対する機能的感受性を示すアミノ酸の場所に導入されてもよい。代替的に、または加えて、抗体と抗原との間の接触点を特定するための抗原−抗体複合体の結晶構造。かかる接触残基及び隣接する残基は、置換の候補として標的とされるか、または排除されてもよい。変異形をスクリーニングして、それらが所望の特性を含有するかどうかを決定してもよい。
【０１３６】
アミノ酸配列挿入としては、１個の残基から１００個以上の残基を含有するポリペプチドの範囲の長さである、アミノ末端及び／またはカルボキシル末端融合、ならびに単一のまたは複数のアミノ酸残基の配列内（ｉｎｔｒａｓｅｑｕｅｎｃｅ）挿入が挙げられる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入型変異形としては、抗体の血清半減期を増加させる酵素（例えば、ＡＤＥＰＴのための）またはポリペプチドに対する抗体のＮ末端若しくはＣ末端への融合が挙げられる。
【０１３７】
ｂ）グリコシル化変異形
ある特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体を、その抗体がグリコシル化される程度を増加または減少させるように変化させる。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、１つ以上のグリコシル化部位が作り出されるか、または除去されるように、アミノ酸配列を変化させることによって、好都合に遂行されてもよい。
【０１３８】
抗体がＦｃ領域を含む場合、そこに結合した炭水化物が変化させられてもよい。哺乳類細胞によって産生される天然抗体は、典型的に、一般にＮ−結合によって、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に結合される、分岐した二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．ＴＩＢＴＥＣＨ  １５：２６−３２（１９９７）を参照されたい。オリゴ糖類には、種々の炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖類構造の「ステム」においてＧｌｃＮＡｃに結合したフコースが含まれ得る。いくつかの実施形態では、ある特定の特性が改善された抗体変異形を作製するために、本発明の抗体におけるオリゴ糖の修飾を行ってもよい。
【０１３９】
一実施形態において、Ｆｃ領域に（直接的にまたは間接的に）結合されるフコースを欠いた炭水化物構造を有する、抗体変異形が提供される。例えば、かかる抗体におけるフコースの量は、１％〜８０％、１％〜６５％、５％〜６５％、または２０％〜４０％であってもよい。フコースの量は、例えば、ＷＯ２００８／０７７５４６に記載されるように、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法によって測定するとき、Ａｓｎ  ２９７に結合した全ての糖鎖構造（例えば、複合体、ハイブリッド、及び高マンノース構造）の合計と比べて、Ａｓｎ２９７における糖鎖内のフコースの平均量を算出することによって決定される。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域における約２９７位（Ｆｃ領域残基のＥｕ付番）に位置するアスパラギン残基を指す、しかし、Ａｓｎ２９７はまた、抗体における小規模な配列変異に起因して、２９７位から約±３アミノ酸上流または下流、すなわち、２９４位〜３００位の間にも位置してもよい。かかるフコシル化変異形は、改善されたＡＤＣＣ機能を有してもよい。例えば、米国特許公開第２００３／０１５７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）、ＵＳ２００４／００９３６２１（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照されたい。「脱フコシル化」または「フコース欠損」抗体変異形に関する刊行物の例としては：ＵＳ２００３／０１５７１０８、ＷＯ２０００／６１７３９、ＷＯ２００１／２９２４６、ＵＳ２００３／０１１５６１４、ＵＳ２００２／０１６４３２８、ＵＳ２００４／００９３６２１、ＵＳ２００４／０１３２１４０、ＵＳ２００４／０１１０７０４、ＵＳ２００４／０１１０２８２、ＵＳ２００４／０１０９８６５、ＷＯ２００３／０８５１１９、ＷＯ２００３／０８４５７０、ＷＯ２００５／０３５５８６、ＷＯ２００５／０３５７７８、ＷＯ２００５／０５３７４２、ＷＯ２００２／０３１１４０、Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９−１２４９（２００４）、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）が挙げられる。脱フコシル化抗体を産生することができる細胞株の例としては、タンパク質フコシル化が欠損したＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３−５４５（１９８６）、米国特許出願公開第ＵＳ２００３／０１５７１０８Ａ１号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ）、及びＷＯ２００４／０５６３１２Ａ１（Ａｄａｍｓら）、具体的には、実施例１１）、及びノックアウト細胞株、例えば、α−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）、Ｋａｎｄａ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０−６８８（２００６）、及びＷＯ２００３／０８５１０７を参照のこと）。
【０１４０】
二分されたオリゴ糖類を有する、例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖類がＧｌｃＮＡｃによって二分される、抗体変異形がさらに提供される。かかる抗体変異形は、低減されたフコシル化及び／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。かかる抗体変異形の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔら）、米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａら）、及びＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａら）に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖類において少なくとも１個のガラクトース残基を有する、抗体変異形もまた提供される。かかる抗体変異形は、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。かかる抗体変異形は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌら）、ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）、及びＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）に記載される。
【０１４１】
ｃ）Ｆｃ領域変異形
ある特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸修飾を、本明細書に提供される抗体のＦｃ領域に導入し、それによってＦｃ領域変異形を生成してもよい。Ｆｃ領域変異形は、１つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を含む、ヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４  Ｆｃ領域）を含んでもよい。
【０１４２】
ある特定の実施形態において、本発明は、全てのエフェクター機能ではないが、いくつかのエフェクター機能を保有し、それにより、インビボでの抗体の半減期が重要であるが、なおもある特定のエフェクター機能（補体及びＡＤＣＣ等）が不必要または有害である場合の適用に対する望ましい候補となる、抗体変異形を企図する。インビトロ及び／またはインビボの細胞傷害性アッセイを実行して、ＣＤＣ及び／またはＡＤＣＣ活性の低減／枯渇を確認してもよい。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実行して、抗体がＦｃγＲ結合を欠いている（そのため、ＡＤＣＣ活性を欠いている可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能力を保持することを確実にしてもよい。ＡＤＣＣを媒介するための主要な細胞であるＮＫ細胞は、Ｆｃ（ＲＩＩＩのみを発現するが、一方で単球は、Ｆｃ（ＲＩ、Ｆｃ（ＲＩＩおよびＦｃ（ＲＩＩＩを発現する。造血細胞上でのＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−４９２（１９９１）の４６４ページの表３に要約される。目的とする分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８３：７０５９−７０６３（１９８６）を参照されたい）、及びＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：１４９９−１５０２（１９８５）、５，８２１，３３７（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１−１３６１（１９８７）を参照されたい）に記載される。代替的に、非放射性アッセイ法が使用されてもよい（例えば、フローサイトメトリーのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ、及びＣｙｔｏＴｏｘ  ９６（登録商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を参照されたい。かかるアッセイに有用なエフェクター細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー細胞が含まれる。代替的に、または追加的に、目的とする分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：６５２−６５６（１９９８）に開示のもの等の動物モデルで評価され得る。Ｃ１ｑ結合アッセイをまた行って、抗体がＣ１ｑに結合不可能であり、よってＣＤＣ活性を欠いていることを確認してもよい。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９及びＷＯ２００５／１００４０２のＣ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照されたい。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイが行われ得る（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：１６３（１９９６）、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０１：１０４５−１０５２（２００３）、ならびにＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ａｎｄ  Ｍ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ  １０３：２７３８−２７４３（２００４）を参照されたい）。当該技術分野で既知の方法を使用して、ＦｃＲｎ結合及びインビボクリアランス／半減期の決定を行ってもよい（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９−１７６９（２００６）を参照されたい）。
【０１４３】
低減したエフェクター機能を有する抗体としては、Ｆｃ領域残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、及び３２９のうちの１つ以上の置換を有する抗体が挙げられる（米国特許第６，７３７，０５６号）。かかるＦｃ変異体には、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７、及び３２７のうちの２つ以上での置換を有するＦｃ変異体、例えば、残基２６５及び２９７のアラニンへの置換を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体が挙げられる（米国特許第７，３３２，５８１号）。
【０１４４】
ＦｃＲへの改善されたまたは減少した結合を有する、ある特定の抗体変異形が記載される。（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号、ＷＯ２００４／０５６３１２、及びＳｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１−６６０４（２００１）を参照されたい）。
【０１４５】
ある特定の実施形態において、抗体変異形は、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８、３３３、及び／または３３４位（残基のＥＵ付番）における置換を有する、Ｆｃ領域を含む。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２及びＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−４１８４（２０００）に記載されているように、Ｃ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）を変化させる（すなわち、改善または減少させる）変更がＦｃ領域でなされる。
【０１４７】
母体ＩｇＧの胎児への移送に関与する半減期の延長及び新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合の改善を有する抗体（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）、及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））は、ＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１（Ｈｉｎｔｏｎら）に記載される。それらの抗体は、Ｆｃ領域のＦｃＲｎへの結合を改善する１つ以上の置換を有するＦｃ領域をそこに含む。かかるＦｃ変異形は、Ｆｃ領域残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、または４３４のうちの１つ以上での置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換を有するものを含む（米国特許第７，３７１，８２６号）。
【０１４８】
Ｄｕｎｃａｎ  ＆  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  ３２２：７３８−４０（１９８８）、米国特許第５，６４８，２６０号、米国特許第５，６２４，８２１号、及びＷＯ９４／２９３５１もＦｃ領域変異形の他の例に関して参照されたい。
【０１４９】
ｄ）システイン遺伝子操作された抗体変異形
ある特定の実施形態では、抗体の１つ以上の残基が、システイン残基で置換されている、システイン遺伝子操作された抗体、例えば、「ｔｈｉｏＭａｂ」を作製することが望ましい場合がある。特定の実施形態において、置換残基は、抗体の利用しやすい部位において生じる。それらの残基をシステインで置換することによって、反応性のチオール基はそれによって、抗体の利用しやすい部位に位置付けられ、それを使用して、抗体を、薬物部分またはリンカー−薬物部分等の他の部分に複合して、本明細書にさらに記載される、免疫複合体を作り出してもよい。ある特定の実施形態では、以下の残基、軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔ付番）、重鎖のＡ１１８（ＥＵ付番）、及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ付番）のうちの任意の１つ以上が、システインで置換されてもよい。システイン遺伝子操作された抗体は、例えば、米国特許第７，５２１，５４１号に記載されるように生成され得る。
【０１５０】
ｅ）抗体誘導体
ある特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、当該技術分野で既知であり、容易に入手可能な、追加の非タンパク質性部分を含有するようにさらに修飾されてもよい。抗体の誘導体化に好適な部分としては、水溶性ポリマーが含まれるが、これらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストランまたはポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレン（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）グリコールホモポリマー、プロリプロピレン（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性に起因して、製造における利点を有し得る。ポリマーは、任意の分子量のものであってもよく、分岐していても非分岐であってもよい。抗体に結合したポリマーの数は、変化し得、１つを超えるポリマーが結合される場合、それらは、同じ分子であっても、または異なる分子であってもよい。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／または種類は、改善対象の抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が規定の条件下で治療において使用されるか否か等を含むが、これらに限定されない考慮に基づいて、決定することができる。
【０１５１】
別の実施形態において、放射線への曝露によって選択的に加熱され得る、抗体及び非タンパク質性部分の複合体が提供される。一実施形態において、非タンパク質性部分は、カーボンナノチューブである（Ｋａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０２：１１６００−１１６０５（２００５））。放射線は、任意の波長のものであってもよく、これには、一般の細胞を害さないが、非タンパク質性部分を、抗体−非タンパク質性部分に近位の細胞が死滅させられる温度まで加熱する波長が含まれるが、これらに限定されない。
【０１５２】
Ａ．組み換え法及び組成物
抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されるもの等の組み換え方法及び組成物を使用して産生され得る。一実施形態では、本明細書に記載される抗ＣＤ２０抗体をコードする単離核酸が提供される。かかる核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び／またはＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／または重鎖）をコードし得る。さらなる実施形態において、かかる核酸を含む１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。さらなる実施形態において、かかる核酸を含む宿主細胞が提供される。１つのかかる実施形態において、宿主細胞は、（１）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、または（２）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第１のベクター、及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第２のベクターを含む（例えば、それらで形質転換されている）。一実施形態において、宿主細胞は、真核生物、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。一実施形態では、抗ＣＤ２０抗体を作製する方法が提供され、本方法は、上記されるような上記抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、抗体の発現に好適な条件下で培養するステップと、任意選択で、抗体を宿主細胞（または宿主細胞培養培地）から回収するステップとを包含する。
【０１５３】
抗ＣＤ２０抗体の組み換え産生のために、例えば、上述のもの等の、抗体をコードする核酸が単離され、宿主細胞内でのさらなるクローニング及び／または発現のために、１つ以上のベクター中に挿入される。かかる核酸は、慣例の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合可能である、オリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離され、配列決定され得る。
【０１５４】
抗体コードベクターのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞としては、本明細書に記載される原核細胞または真核細胞が含まれる。例えば、抗体は、特にグリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされない場合に、細菌において産生されてもよい。細菌での抗体フラグメント及びポリペプチドの発現については、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号、同第５，７８９，１９９号、及び同第５，８４０，５２３号を参照されたい。（また、Ｅ．ｃｏｌｉ内での抗体断片の発現を記載するＣｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３），ｐｐ．２４５−２５４も参照されたい。）発現後、抗体は、可溶性画分において細菌細胞ペーストから単離されてもよく、またさらに精製されてもよい。
【０１５５】
原核生物に加えて、糸状菌または酵母等の真核微生物は、抗体コードベクターに好適なクローニングまたは発現宿主であり、それには、グリコシル化経路が「ヒト化」されており、部分的または完全ヒトグリコシル化パターンを有する抗体の産生をもたらす、真菌及び酵母株が含まれる。Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２：１４０９−１４１４（２００４）、及びＬｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４：２１０−２１５（２００６）を参照されたい。
【０１５６】
グリコシル化抗体の発現に好適な宿主細胞はまた、多細胞生物（無脊椎動物及び脊椎動物）にも由来する。無脊椎動物細胞の例としては、植物及び昆虫細胞が挙げられる。昆虫細胞と併せて、特にＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａの細胞のトランスフェクションのために使用され得る、多数のバキュロウイルス株が特定されている。
【０１５７】
植物細胞培養物もまた、宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、同第６，０４０，４９８号、同第６，４２０，５４８号、同第７，１２５，９７８号、及び同第６，４１７，４２９号（トランスジェニック植物における抗体の産生のためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術を記載している）を参照されたい。
【０１５８】
脊椎動物細胞もまた、宿主として使用され得る。例えば、懸濁液中で成長するように適合される哺乳類細胞株が、有用であり得る。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０により形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７）、ヒト胚性腎臓株（例えば、Ｇｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７）に記載される２９３または２９３細胞）、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）、マウスセルトリ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３−２５１（１９８０）に記載されるＴＭ４細胞）、サル腎臓細胞（ＣＶ１）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６）、ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ）、イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ  ３Ａ）、ヒト肺細胞（Ｗ１３８）、ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２）、マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２）、例えば、Ｍａｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ  Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４−６８（１９８２）に記載されるＴＲＩ細胞、ＭＲＣ  ５細胞、及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳類宿主細胞株としては、ＤＨＦＲ−  ＣＨＯ細胞（Ｕｒｌａｕｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４２１６（１９８０））を含む、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ならびにＹ０、ＮＳ０及びＳｐ２／０などの骨髄腫細胞系が挙げられる。抗体産生に好適なある特定の哺乳類宿主細胞株の概説については、例えば、Ｙａｚａｋｉ  ａｎｄ  Ｗｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ），ｐｐ．２５５−２６８（２００３）を参照されたい。
【０１５９】
Ｂ．アッセイ
本明細書に提供される抗ＣＤ２０抗体は、それらの物理的／化学的特性及び／または生物活性について、当該技術分野で既知の様々なアッセイによって、特定され、スクリーニングされ、または特徴付けられてもよい。
【０１６０】
１．結合アッセイ及び他のアッセイ
一態様では、本発明の抗体は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット等の公知の方法によってその抗原結合活性について試験される。ＣＤ２０結合性は、当該技術分野で既知の方法を使用して決定されてもよく、例示的な方法が本明細書に開示される。一実施形態では、結合性は、ラジオイムノアッセイを使用して測定される。例示的なラジオイムノアッセイは以下に示す。ＣＤ２０抗体をヨウ素化し、固定濃度のヨウ素化抗体及び減少した濃度の段階希釈された非標識ＣＤ２０抗体を含有する競合反応混合物を調製する。ＣＤ２０を発現する細胞（例えば、ヒトＣＤ２０で安定的にトランスフェクトされたＢＴ４７４細胞）を、反応混合物に添加する。インキュベーションに続いて、細胞を洗浄し、遊離ヨウ素化ＣＤ２０抗体を、細胞に結合したＣＤ２０抗体から分離する。例えば、細胞に関連する放射能を計数することによって結合したヨウ素化ＣＤ２０抗体のレベルが決定され、標準的な方法を使用して結合親和性が決定される。別の実施形態では、ＣＤ２０抗体が表面発現ＣＤ２０に（例えば、Ｂ細胞サブセット上で）結合する能力を、フローサイトメトリーを使用して評価する。末梢血白血球が得られ（例えば、ヒト、カニクイザル、ラット、またはマウスから）、細胞は血清で遮断される。標識ＣＤ２０抗体を段階希釈物内に付加し、Ｔ細胞をまた染色して、Ｔ細胞サブセットを特定する（当該技術分野で公知の方法を使用して）。試料のインキュベーション及び洗浄に続いて、フローサイトメーターを使用して細胞を分類し、当該技術分野で周知の方法を使用してデータを分析する。別の実施形態では、表面プラズモン共鳴を使用してＣＤ２０結合性を分析してもよい。例示的な表面プラズモン共鳴方法は、実施例において例証される。
【０１６１】
別の態様において、競合アッセイを使用して、本明細書に開示されるＣＤ２０への結合のための抗ＣＤ２０抗体のいずれかと競合する抗体を特定してもよい。ある特定の実施形態では、かかる競合抗体は、本明細書に開示される抗ＣＤ２０抗体のいずれかによって結合される、同じエピトープ（例えば、直線状または立体配座エピトープ）に結合する。抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な例示的方法は、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）”Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，”ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｖｏｌ．６６（Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）に示される。競合アッセイは、実施例において例証される。
【０１６２】
例示的な競合アッセイにおいて、固定されたＣＤ２０を、ＣＤ２０に結合する第１の標識抗体（例えば、リツキシマブ、ＧＡ１０１抗体など）、及びＣＤ２０への結合について第１の抗体と競合する能力について試験されている第２の非標識抗体を含む溶液中でインキュベートする。第２の抗体は、ハイブリドーマ上清中に存在してもよい。対照として、固定されたＣＤ２０を、第１の標識抗体を含むが第２の非標識抗体を含まない溶液中でインキュベートする。第１の抗体のＣＤ２０への結合を許容する条件下でのインキュベーションの後、過剰な非結合抗体を除去し、固定化されたＣＤ２０に関連する標識の量を測定する。固定化されたＣＤ２０に関連する標識の量が、対照試料と比較して試験試料中で実質的に低減される場合、それによって、第２の抗体がＣＤ２０への結合について第１の抗体と競合していることが示される。Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ｃｈ．１４（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ）を参照されたい。
【０１６３】
活性アッセイ
本開示の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗体）は、当該分野で公知の１つ以上の活性アッセイによって特定及び／または特徴付けられ得る。例えば、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）及び／または抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を、本明細書に記載されるように使用してもよい。
【０１６４】
本発明の免疫複合体を抗ＣＤ２０抗体の代わりにまたはそれに加えて使用して、任意の上述のアッセイを行ってもよいことが理解される。
【０１６５】
上記のアッセイはいずれも、抗ＣＤ２０抗体及び追加の治療剤を使用して行ってもよいことが理解される。
【０１６６】
２．免疫複合体
本発明はまた、化学療法剤若しくは化学療法薬、成長阻害剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、若しくは動物起源の酵素活性毒素、またはそれらの断片）、または放射性同位体等の１つ以上の細胞傷害性薬剤と複合体化された本明細書における抗ＣＤ２０抗体を含む、免疫複合体を提供する。
【０１６７】
一実施形態では、免疫複合体は、抗体が、マイタンシノイド（米国特許第５，２０８，０２０号、同第５，４１６，０６４号、及び欧州特許第ＥＰ０４２５２３５  Ｂ１号を参照されたい）、モノメチルオーリスタチン薬物部分ＤＥ及びＤＦ（ＭＭＡＥ及びＭＭＡＦ）などのオーリスタチン（米国特許第５，６３５，４８３号、及び同第５，７８０，５８８号、及び同第７，４９８，２９８号を参照されたい）、ドラスタチン、カリケアマイシンまたはその誘導体（米国特許第５，７１２，３７４号、同第５，７１４，５８６号、同第５，７３９，１１６号、同第５，７６７，２８５号、同第５，７７０，７０１号、同第５，７７０，７１０号、同第５，７７３，００１号、及び同第５，８７７，２９６号、Ｈｉｎｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５３：３３３６−３３４２（１９９３）、ならびにＬｏｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５８：２９２５−２９２８（１９９８）を参照されたい）、ダウノマイシンまたはドキソルビシンなどのアントラサイクリン（Ｋｒａｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１３：４７７−５２３（２００６）、Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ  １６：３５８−３６２（２００６）、Ｔｏｒｇｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１６：７１７−７２１（２００５）、Ｎａｇｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：８２９−８３４（２０００）、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．＆  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ  １２：１５２９−１５３２（２００２）、Ｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５：４３３６−４３４３（２００２）、及び米国特許第６，６３０，５７９号を参照されたい）、メトトレキサート、ビンデシン、ドセタキセル、パクリタキセル、ラロタキセル、テセタキセル、及びオルタタキセルなどのタキサン、トリコテセン、ならびにＣＣ１０６５を含むがこれらに限定されない１つ以上の薬物と複合体化されている抗体薬物複合体（ＡＤＣ）である。
【０１６８】
別の実施形態では、免疫複合体は、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ由来）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ−サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ  ｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンシンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ−Ｓ）、ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ阻害剤、クルシン、クロチン、ｓａｐａｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、及びトリコテセンを含むが、これらに限定されない、酵素的活性毒素またはその断片に複合体化される、本明細書に記載される抗体を含む。
【０１６９】
別の実施形態では、免疫複合体は、放射性原子に複合体化されて放射性複合体を形成する、本明細書に記載される抗体を含む。様々な放射性同位体が、放射性複合体の産生のために利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、ＢＩ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２及びＬｕの放射性同位体が挙げられる。放射性複合体が検出のために使用される場合、それは、シンチグラフィー研究のための放射性原子、例えば、ｔｃ９９ｍ若しくはＩ１２３、または核磁気共鳴（ＮＭＲ）画像法（磁気共鳴画像法、ｍｒｉとしても既知である）のためのスピン標識、例えば、ここでもヨード−１２３、ヨード−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガン、若しくは鉄を含んでもよい。
【０１７０】
抗体及び細胞傷害性薬剤の複合体は、Ｎ−サクシニミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオン酸塩（ＳＰＤＰ）、サクシニミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸塩（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（アジプイミド酸ジメチルＨＣｌなど）、活性エステル（スベリン酸ジサクシニミジルなど）、アルデヒド（グルタルアルデヒドなど）、ビス−アジド化合物（ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなど）、ビス−ジアゾニウム誘導体（ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミンなど）、ジイソシアネート（トルエン  ２，６−ジイソシアネートなど）、及びビス−活性フッ素化合物（１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンなど）などの様々な二官能性タンパク質カップリング剤を使用して作製され得る。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３８：１０９８（１９８７）に記載されるように調製してもよい。炭素−１４標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、抗体への放射性ヌクレオチドの複合のための、例となるキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照されたい。リンカーは、細胞内において細胞傷害性薬物の放出を容易にする「切断可能リンカー」であってもよい。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカー、またはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５２：１２７−１３１（１９９２）、米国特許第５，２０８，０２０号）を使用してもよい。
【０１７１】
本明細書の免疫複合体またはＡＤＣは、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＣＣ、及びスルホ−ＳＭＰＢ、ならびに市販される（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．より）、ＳＶＳＢ（スクシンイミジル−（４−ビニルスルホン）ベンゾエート）を含むがこれらに限定されない、架橋剤試薬で調製されたかかる複合体を明白に企図するが、これらに限定されない。
【０１７２】
臓器移植の必要な個体を処置するための方法
本開示のある特定の態様は、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体を処置するための方法に関する。
【０１７３】
本明細書で使用されるように、障害または状態を「処置する」または「処置すること」とは、治療的処置及び予防的または防止的措置（例えば、移植片の生存、移植片機能のような良好な処置の転帰の可能性の増大、または処置への好ましくない反応のような好ましくない転帰の可能性の減少、または移植のような好ましい処置を行う可能性を減少させる状態）の両方を含む、医薬的または他の療法による障害または状態の管理を指す。本明細書で言及される「障害または状態」としては、障害または状態に関連する病理学的状態及び症状、ならびに障害または状態の処置選択肢への個体のアクセスを妨害または制限する問題または状態、例えば感作、高感作、臓器移植（例えば、腎移植）を待つ個体への移植片の利用可能性を制限する高ＰＲＡレベル及び／または既存のアロ抗体の存在が挙げられる。処置を必要とする患者としては、障害または状態が既に存在するもの、ならびに障害または状態が予防されるべきものが挙げられる。障害または状態の処置は、その障害または状態と関連する免疫媒介事象を抑制しても、その障害または状態の症状を改善しても、その障害または状態の重篤度を低減させても、その障害または状態進行の経過を変えても、及び／またはその基本的な障害または状態を改善または治癒してもよい。
【０１７４】
例えば、臓器移植を待つ個体の成功した処置としては、限定するものではないが、アロ抗体のレベルの低減、パネル反応性抗体（ＰＲＡ）の低減、個体がより多くの交差適合の適合性ドナーを得ることを可能にすること、個体が移植片を受ける確率または可能性を高めること、移植片のための個体の予想される待機時間を短縮すること、個体を脱感作すること、移植関連の症状または状態（以下に記載されるような免疫媒介事象など）のリスクを低下させること、またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【０１７５】
例えば、臓器移植を受ける個体の首尾良い処置としては、限定するものではないが、移植された臓器または組織の長期間にわたる保護及び維持が含まれ、これには、症状または状態の機能的または組織学的徴候によって測定される、ドナー特異的アロ抗体（ＤＳＡ）の生成、抗体媒介性拒絶（ＡＭＲ）、超急性移植片拒絶反応、慢性移植片拒絶、移植片不全、及び移植片喪失を含むがこれらに限定されない免疫媒介性の事象などの臓器移植に関連する１つ以上の症状または望ましくない状態を制御、逆転、緩和、遅延または予防することを包含する。障害または状態（例えば、移植片拒絶）を制御することができる処置としては、その障害または状態の機能的または組織学的兆候（例えば、移植片拒絶反応）が観察された後に開始される場合、疾患プロセスの進行を遅くする処置を挙げてもよい。さらに、疾患または状態（例えば、移植片拒絶）を逆転できる処置としては、その疾患または状態の機能的または組織学的兆候（例えば、移植片拒絶反応）が現れた後に開始されると、その疾患プロセスを逆行させ、機能的及び組織学的所見を正常近くに戻す処置を包含し得る。障害または状態（例えば、移植拒絶）の「進行を遅延させる」ことができる処置としては、その障害または状態（例えば、移植片拒絶）の発達を延期、妨害、緩徐化、遅延、安定化及び／または先延ばしすることを包含し得る。この遅延は、処置されている疾患の病歴及び／または処置されている個体に応じて異なる期間であってもよい。当業者に明らかであるように、個体、例えば、障害または状態を発症する危険性のある個体が、その障害または状態を発症しないという点で、十分なまたは有意な遅延は、事実上、予防を包含し得る。
【０１７６】
本発明が企図する臓器移植としては、限定するものではないが、骨髄、腎臓、心臓、肝臓、神経組織、肺、膵臓などの適切な移植片の移植が挙げられる。
【０１７７】
いくつかの実施形態において、個体は、腎移植を必要とする。いくつかの実施形態では、個体は慢性腎疾患を有する。いくつかの実施形態では、個体は、米国国立腎臓財団のガイドラインによって規定される慢性腎疾患のステージ１、２、３Ａ、３Ｂ、４または５のいずれかを有する。いくつかの実施形態では、個体は、約９０ｍＬ／分超、約６０〜９０ｍＬ／分、約４５〜６０ｍＬ／分、約３０〜４０ｍＬ／分、約１５〜２９ｍＬ／分、及び１５ｍＬ／分未満のいずれかのＧＦＲレベルを有する。いくつかの実施形態において、個体は、ステージ５の慢性腎疾患または末期腎不全を有する。いくつかの実施形態において、個体は末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を有し、この状態は腎臓が日常生活に必要なレベルでもはや機能できなくなる場合に生じる状態である。いくつかの実施形態では、個体は、１５ｍＬ／分未満の糸球体濾過率（ＧＦＲ）を有する。いくつかの実施形態では、ＥＳＲＤは、糖尿病、高血圧、腎臓への傷害または外傷、慢性腎臓疾患（例えば、ステージＶの慢性腎疾患）、大量の失血、または腎臓の機能を損なう他の状態によって引き起こされる。いくつかの実施形態では、個体は、約１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、１２ヶ月、２年、３年、４年、５年またはそれ以上のいずれかの期間にわたって透析中である。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、臓器移植（例えば、腎移植）を必要とする個体は、臓器移植を待っている。いくつかの実施形態において、個体は、生存ドナーからの移植片臓器を待っている。いくつかの実施形態では、個体は、死んだドナーからの移植片臓器を待っている。いくつかの実施形態では、個体は、少なくとも約６ヶ月、９ヶ月、１年、２年、３年、５年またはそれ以上の間、または移植を禁止する正の交差適合で少なくとも１人の死亡ドナーの申し出があるのに十分な時間、臓器割り当てプログラム（ＵＮＯＳなど）の待機リストに載っている。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体は、少なくとも約５％、１０％、１５％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上のうちのいずれかのＰＲＡ（例えばｃＰＲＡ）を有する。いくつかの実施形態では、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体は、約５％〜約９９％、約２％〜約５０％、約５０％〜約９９％、約５％〜約２０％、約２０％〜約３０％、約３０％〜約４０％、約４０％〜約５０％、約５０％〜約８０％、約２０％〜約８０％、または約４０％〜約７０％のいずれか１つのＰＲＡ（例えば、ｃＰＲＡ）を有する。いくつかの実施形態において、個体は感作される。いくつかの実施形態では、個体は高度に感作される（例えば、約２０％超または約３０％超のＰＲＡを有する）。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量のＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することによって、少なくとも２０％（例えば少なくとも３０％）のＰＲＡ（例えばｃＰＲＡ）を有する個体におけるアロ抗体のレベルを低減する方法である。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、個体は、その個体を外来性のアロ抗原に曝露する、以前の曝露事象を経験している。いくつかの実施形態では、個体は、以前の臓器移植、輸血、以前の妊娠、またはそれらの任意の組み合わせを経験している。いくつかの実施形態において、個体は、その個体が抗ＣＤ２０抗体処置を受ける時間の約５年、４年、３年、２年、１年またはそれ未満のいずれか内に曝露事象を経験している。いくつかの実施形態では、個体は２つ以上（例えば、２、３、４、５、６またはそれ以上）の曝露事象を経験している。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、本開示の方法は、例えば、移植前に、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する。いくつかの実施形態では、この方法は、例えば、移植前に、第２の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することをさらに包含する。いくつかの実施形態では、この方法は、例えば、移植前に、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することをさらに包含する。本明細書に記載の任意の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）及び／またはそのような抗体の用量は、例えば、オビヌツズマブなどのＧＡ１０１抗体を使用してもよい。
【０１８２】
いくつかの実施形態では、第２の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約７日〜約２１日後に投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体の第２の用量（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の、約７日後、約８日後、約９日後、約１０日後、約１１日後、約１２日後、約１３日後、約１４日後、約１５日後、約１６日後、約１７日後、約１８日後、約１９日後、約２０日後または約２１日後のいずれか１つに投与される。いくつかの実施形態では、第２の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の、ほぼ次の日数のうちのいずれか未満の日数後投与される：８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、または２１日。いくつかの実施形態では、第２の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の、ほぼ次の日数のうちのいずれかよりも長い日数後投与される：７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０日。すなわち、第２の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、第１の用量の投与の、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０または２１日という上限、及び７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０日という独立して選択される下限の日数後投与され、ここで下限は上限を下回る。
【０１８３】
いくつかの実施形態では、第２の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約１週間〜約３週間後に投与される。ある特定の実施形態では、第２の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約２週間後に投与される。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、この方法は、例えば、移植前に、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することをさらに包含する。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約１５４日〜約１８２日後に投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第３の用量は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の、約１５４日後、約１５５日後、約１５６日後、約１５７日後、約１５８日後、約１５９日後、約１６０日後、約１６１日後、約１６２日後、約１６３日後、約１６４日後、約１６５日後、約１６６日後、約１６７日後、約１６８日後、約１６９日後、約１７０日後、約１７１日後、約１７２日後、約１７３日後、約１７４日後、約１７５日後、約１７６日後、約１７７日後、約１７８日後、約１７９日後、約１８０日後、約１８１日後、または約１８２日後のいずれか１つに投与される。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の後、ほぼ次の日数のうちのいずれか未満の日数後投与される：１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、または  １８２日。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の、ほぼ次の日数のうちのいずれかよりも長い日数後投与される：１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、または１８１日。すなわち、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、第１の用量の、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、または１８２日という上限、及び１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、または１８１日という独立して選択される下限の日数後投与され、ここで、下限は上限を下回る。
【０１８５】
いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約２２週間〜約２６週間後に投与される。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の、約２２週間後、約２３週間後、約２４週間後、約２５週間後、または約２６週間後のいずれか１つに投与される。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の、ほぼ次の週数のうちのいずれか未満の日数後投与される：２６、２５、２４、または２３週間。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の、ほぼ次の週数のうちのいずれかよりも長い日数後投与される：２２、２３、２４、または２５週間。すなわち、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、第１の用量の投与の、２６、２５、２４または２３週間という上限、及び２２、２３、２４または２５週間という独立して選択される下限の週数後投与され、ここで下限は上限を下回る。ある特定の実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の第１の用量の約２４週間後に投与される。
【０１８６】
いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、個体のＰＲＡが、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量及び／または第２の用量の後、約２％、５％、１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、または５０％のいずれか未満のＰＲＡ値まで低減しない場合に投与される。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、個体のＰＲＡが、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量及び／または第２の用量の後、約２％、５％、１０％、１５％、２０％、３０％、４０％または５０％のいずれか未満のＰＲＡ値まで低減する場合には投与されない。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、個体が、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の、約２０週間〜約２８週間（例えば、約２３週間、及び２５週間、または約２４週間）後、少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上のいずれかのＰＲＡを有する場合に投与される。いくつかの実施形態では、第３の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量及び／または第２の用量の後、個体が、移植片拒絶（例えば、抗体媒介性拒絶）のリスクが高い（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、またはそれを超える確率のいずれか）場合に投与される。
【０１８７】
いくつかの実施形態では、個体は、抗ＣＤ２０抗体の第１の用量及び／または抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第２の用量の後、臓器移植（例えば、腎移植）を受ける。いくつかの実施形態では、この個体は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の、約６週間後、８週間後、１０週間後、１２週間後、１４週間後、１６週間後、１８週間後、２０週間後、２２週間後、２４週間後、２６週間後、２８週間後、３０週間後、３２週間後、３４週間後、３６週間後、３８週間後、４０週間後、４２週間後、４４週間後、４６週間後、４８週間後、５０週間後、または５２週間後のいずれかで臓器移植（例えば、腎移植）を受ける。いくつかの実施形態では、個体は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の、ほぼ次の週数のうちのいずれか１つ未満の週数後、臓器移植（例えば、腎移植）を受ける：５２、５０、４８、４６、４４、４２、４０、３８、３６、３４、３２、３０、２８、２６、２４、２２、２０、１８、１６、１４、１２、１０、または８週間。いくつかの実施形態では、個体は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の、ほぼ次の週数のうちのいずれか１つよりも長い週数後、臓器移植（例えば、腎移植）を受ける：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、または５０週間。すなわち、個体は、５２、５０、４８、４６、４４、４２、４０、３８、３６、３４、３２、３０、２８、２６、２４、２２、２０、１８、１６、１４、１２、１０、または８週間という上限、及び２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、または５０週間という独立して選択された下限の範囲を有する任意の週数後、臓器移植（例えば、腎移植）を受けてもよく、ここでこの下限は、この上限未満である。いくつかの実施形態では、上記個体は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約６週間〜約５２週間後に臓器移植（腎移植など）を受ける。ある特定の実施形態では、例えば、もし個体が、第３の用量のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を投与される場合、この個体は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約２８週間〜約５２週間後に臓器移植（例えば、腎移植）を受ける。いくつかの実施形態では、上記個体は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の最も最近の用量の少なくとも約４週間（４週間を含む）後に臓器移植（腎移植など）を受ける。
【０１８８】
いくつかの実施形態では、ある用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植（例えば、腎移植）の前に個体に投与される。本明細書において用いる場合、移植の「前」とは、移植の少なくとも１週前、少なくとも２週前、少なくとも３週前、または少なくとも４週前という任意の時間を指してもよい。
【０１８９】
いくつかの実施形態において、ある用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を、移植（例えば、腎移植）と同時に個体に投与する。本明細書中で使用される場合、移植「と同時」とは、移植の２日または４８時間以内の任意の時間を指してもよく、移植手順の正確な時間に限定されない。例えば、いくつかの実施形態では、個体に対して移植と同時に投与されるＩＩ型抗ＣＤ２０抗体の用量は、移植の６時間以内、１２時間以内、１８時間以内、２４時間以内、３０時間以内、３６時間以内、４２時間以内、または４８時間以内に投与される。
【０１９０】
いくつかの実施形態では、ある用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植（例えば、腎移植）の後に個体に投与される。本明細書において用いる場合、移植の「後」とは、移植の少なくとも１週間後、少なくとも２週間後、少なくとも３週間後、または少なくとも４週間後という任意の時間を指してもよい。
【０１９１】
いくつかの実施形態では、ある用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植（例えば、腎移植）の後に個体に投与される。いくつかの実施形態では、この方法は、例えば、移植後に、ある用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することをさらに包含する。いくつかの実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の約１５４日〜約１８２日後に投与される。いくつかの実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の約１５４日後、約１５５日後、約１５６日後、約１５７日後、約１５８日後、約１５９日後、約１６０日後、約１６１日後、約１６２日後、約１６３日後、約１６４日後、約１６５日後、約１６６日後、約１６７日後、約１６８日後、約１６９日後、約１７０日後、約１７１日後、約１７２日後、約１７３日後、約１７４日後、約１７５日後、約１７６日後、約１７７日後、約１７８日後、約１７９日後、約１８０日後、約１８１日後、または約１８２日後のいずれか１つに投与される。いくつかの実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の、ほぼ次の日数のうちのいずれか未満の日数後投与される：１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、または１８２日。いくつかの実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の、ほぼ次の日数のうちのいずれかよりも長い日数後投与される：１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、または１８１日。すなわち、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、または１８２日という上限、及び１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、または１８１日という独立して選択される下限の日数後投与され、ここで、下限は上限を下回る。
【０１９２】
いくつかの実施形態では、ある用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植（例えば、腎移植）の後に個体に投与される。いくつかの実施形態では、この方法は、例えば、移植後に、ある用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することをさらに包含する。いくつかの実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の約２２週間〜約２６週間後に投与される。いくつかの実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）は、移植の約２２週間後、約２３週間後、約２４週間後、約２５週間後、または約２６週間後のいずれか１つで投与される。いくつかの実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の、ほぼ次の週数のうちのいずれか未満の週数後投与される：２６、２５、２４、または  ２３週間。いくつかの実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の、ほぼ次の週数のうちのいずれかよりも長い日数後投与される：２２、２３、２４、または２５週間。すなわち、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の、２６、２５、２４または２３週間という上限、及び２２、２３、２４または２５週間という独立して選択される下限の週数後投与され、ここで下限は上限を下回る。ある特定の実施形態では、この用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、移植の約２４週間後に投与される。
【０１９３】
本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）のいずれかまたはすべての用量における抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の量は、例えば、臓器移植の種類、使用される抗ＣＤ２０抗体の種類、第２の医薬が使用されるかどうか及びどの種類の第２の医薬が使用されるか、並びに投与の方法及び頻度に依存し得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の用量は、約８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１０５０ｍｇ、１１００ｍｇ、１０５０ｍｇまたは１２００ｍｇのいずれかの抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、ある用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）は、以下の任意の範囲の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を含んでもよく、ここでこの範囲は：８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１０５０ｍｇ、１１００ｍｇ、１０５０ｍｇまたは１２００ｍｇのいずれかの上限及び８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１０５０ｍｇ、１１００ｍｇまたは１１５０ｍｇのいずれかの独立して選択された下限を有し、ここで、この下限は上限より小さい。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇ（例えば、約１０００ｍｇ）である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第２の用量は、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇ（例えば、約１０００ｍｇ）である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第３の用量は、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇ（例えば、約１０００ｍｇ）である。いくつかの実施形態では、移植と同時に投与される抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の用量は、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇ（例えば、約１０００ｍｇ）である。いくつかの実施形態では、移植の後に投与される抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の用量は、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の約９００ｍｇ〜約１１００ｍｇ（例えば、約１０００ｍｇ）である。
【０１９４】
いくつかの実施形態では、本開示のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、静脈内に投与される（例えば、ＩＶ注入によって）。他の実施形態では、本開示のＩＩ型抗ＣＤ２０抗体は、皮下に投与される。
【０１９５】
本明細書に記載された任意の投薬プロトコール及びレジメンは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体の処置のための、以下に記載の医薬の製造における方法、組成物及び使用のいずれにも適用し得る。
【０１９６】
抗ＣＤ２０抗体は、本明細書に記載の任意の方法で個体に投与される唯一の薬物であり得るが、いくつかの実施形態では、この方法は、個体に第２の医薬を投与することをさらに包含し、ここでこの抗ＣＤ２０抗体が、第１の医薬である。いくつかの実施形態では、第１の医薬及び第２の医薬は、単一組成物として、または別々の組成物としてのいずれかで、個体に同時に投与される（同一または異なる経路を含む）。いくつかの実施形態において、第１の医薬及び第２の医薬は、個体に順次投与される。いくつかの実施形態において、この第２の医薬は、抗ＣＤ２０抗体の投与前（例えば、少なくとも約６時間、１２時間、１日、２日、３日、７日またはそれ以上前のいずれかで）個体に投与される。いくつかの実施形態において、この第２の医薬は、抗ＣＤ２０抗体の投与後（例えば、少なくとも約６時間、１２時間、１日、２日、３日、７日またはそれ以上後のいずれかで）個体に投与される。
【０１９７】
いくつかの実施形態では、この方法はさらに、例えば、移植（例えば、腎移植）前に個体に対してある用量の静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を投与することを包含する。ＩＶＩＧは、静脈内投与可能である様々な形態の製剤中の１０００人以上の血液ドナー由来の血漿プールから得られた正常な多価特異的ＩｇＧの治療用調製物として当該技術分野で公知である。ＩＶＩＧレジメンは、ＨＬＡ感作移植レシピエントにおける免疫調節剤として使用されている（例えば、米国特許第６，１７１，５８５号を参照されたい）。高用量のＩＶＩＧとは、約２ｇ／ｋｇのような高用量で投与されるＩＶＩＧを意味し得る。いくつかの実施形態において、高用量ＩＶＩＧは、毎月投与される。
【０１９８】
いくつかの実施形態では、ある用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約１４日〜約２８日後に投与される。いくつかの実施形態では、この用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約１４日後、約１５日後、約１６日後、約１７日後、約１８日後、約１９日後、約２０日後、約２１日後、約２２日後、約２３日後、約２４日後、約２５日後、約２６日後、約２７日後、または約２８日後のいずれか１つに投与される。いくつかの実施形態では、この用量のＩＶＩＧ（例えば高用量）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の、ほぼ次の日数のうちのいずれか未満の日数後投与される：２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、または１５日。いくつかの実施形態では、この用量のＩＶＩＧ（例えば高用量）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（例えばＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）の、ほぼ次の日数のうちのいずれかよりも長い日数後投与される：１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、または２７日。すなわち、この用量のＩＶＩＧ（例えば高用量）は、第１の用量の、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、または１５日という上限の日数、及び１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、または２７日という独立して選択される下限の日数後投与され、ここで下限は上限を下回る。いくつかの実施形態では、この用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約２１日後に投与される。いくつかの実施形態では、この用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約２週間〜約４週間後に投与される。いくつかの実施形態では、この用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約２週間後、約３週間後、または約４週間後に投与される。
【０１９９】
いくつかの実施形態では、第２の用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）が、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の後に投与される。いくつかの実施形態では、この第２の用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の、約３５日後、約３６日後、約３７日後、約３８日後、約３９日後、約４０日後、約４１日後、約４２日後、約４３日後、約４４日後、約４５日後、約４６日後、約４７日後、約４８日後、または約４９日後のいずれか１つに投与される。いくつかの実施形態では、この第２の用量のＩＶＩＧ（例えば高用量）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（例えばＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）の、ほぼ次の日数のうちのいずれか未満の日数後投与される：４９、４８、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、または３６日。いくつかの実施形態では、この第２の用量のＩＶＩＧ（例えば高用量）は、第１の用量の抗ＣＤ２０抗体（例えばＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）の、ほぼ次の日数のうちのいずれかよりも長い日数後投与される：３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、または４８日。すなわち、この第２の用量のＩＶＩＧ（例えば高用量）は、第１の用量の投与の、４９、４８、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、または３６日という上限の日数、及び３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、または４８日という独立して選択される下限の日数後投与され、ここで下限は上限を下回る。いくつかの実施形態では、この第２の用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約４２日後に投与される。いくつかの実施形態では、この第２の用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約５週間〜約７週間後に投与される。いくつかの実施形態では、この第２の用量のＩＶＩＧ（例えば、高用量）は、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）の第１の用量の約５週間後、約６週間後、または約７週間後に投与される。
【０２００】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０処置が、特定の種類の臓器移植、及び臓器移植を受けている個体の特定の状態に基づいて当業者が選択し得る標準治療法に加えて、個体に施される。投与量、投与経路及び標準治療法のスケジュールは、当該分野で公知のものに基づいて選択してもよい。例えば、腎移植用の例示的な標準治療法としては、移植の直後の、アレムツズマブ及び／または他の免疫抑制または免疫調節抗体などの生物学的誘導剤、標準的な免疫抑制剤、例えば、ミコフェノール酸モフェチル（例えば、２回に分けて投与される１２００ｍｇ／ｍ２／日）、タクロリムス（例えば、０．２〜０．３ｍｇ／ｋｇを１日２回に分けた）、プレドニゾン（負荷用量及び漸減）、それらの組み合わせ、ならびにガンシクロビル、バルガンシクロビル、ナイスタチン、トリメトプリム、スルファメトキサゾール、他のウイルス、真菌、及び細菌の予防剤およびそれらの組み合わせなどの感染予防剤が挙げられるがこれらに限定されない。本明細書で使用される「免疫抑制剤」とは、移植片が移植されている宿主の免疫系を抑制またはマスクする薬剤を指す。この薬剤としては、例えば、サイトカイン産生を抑制し、自己抗原発現をダウンレギュレート若しくは抑制するか、またはＭＨＣ抗原をマスクする物質が挙げられよう。本開示によって企図される例示的な免疫抑制剤としては、限定するものではないが、２−アミノ−６−アリール−５−置換ピリミジン（米国特許第４，６６５，０７７号を参照されたい）、アザチオプリン（または、もしアザチオプリンに対する有害反応が存在する場合、シクロホスファミド）、ブロモクリプチン、グルタルアルデヒド（これは、米国特許第４，１２０，６４９号に記載されているように、ＭＨＣ抗原をマスクする）、ＭＨＣ抗原及びＭＨＣ断片に対する抗イディオタイプ抗体、シクロスポリンＡ、ステロイド、例えばグルココルチコステロイド、例えば、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、及びデキサメタゾン、抗インターフェロンγ、βまたはα抗体を含むサイトカインまたはサイトカイン受容体アンタゴニスト、抗腫瘍壊死因子−α抗体、抗腫瘍壊死因子−β抗体、抗インターロイキン−２抗体及び抗ＩＬ−２レセプター抗体、抗Ｌ３Ｔ４抗体、異種抗リンパ球グロブリン、汎Ｔ抗体、好ましくは抗ＣＤ３または抗ＣＤ４／ＣＤ４ａ抗体、ＬＦＡ−３結合ドメインを含む可溶性ペプチド（ＷＯ９０／０８１８７、１９９０年７月２６日公開）、ストレプトキナーゼ、ＴＧＦ−β、ストレプトドマーゼ、宿主由来のＲＮＡまたはＤＮＡ、ＦＫ５０６、ＲＳ−６１４４３、デオキシスペルグアリン、イムノフィリンを標的とする薬物（例えば、タクロリムス、シロリムス、ラパマイシン及びその類似体、シクロスポリンなど）、ｍＴＯＲ活性部位阻害剤、Ｔ細胞レセプター（米国特許第特許第５，１１４，７２１号）、Ｔ細胞受容体断片（Ｏｆｆｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５１：４３０−４３２（１９９１）、ＷＯ９０／１１２９４、及びＷＯ９１／０１１３３）、及びＴ細胞受容体抗体（ＥＰ３４０，１０９）、例えば、Ｔ１０Ｂ９が挙げられる。これらの薬剤は、抗ＣＤ２０抗体と同時にまたは別々の時間に投与され、当該技術分野で示されているものと同じまたはより少ない用量で使用される。
【０２０１】
本発明の一態様では、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるアロ抗体のレベルを低減する方法であって、個体に有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を投与することを包含する方法が本明細書で提供される。いくつかの実施形態において、個体におけるアロ抗体のレベルは、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上のいずれか低減される。本明細書で使用する「低減する」または「低減すること」としては、処置前の同じ個体のレベルまたは値に対する低減、及び処置を受けていない匹敵する個体群の平均または中央のレベルまたは値に対する低減が挙げられる。本明細書中で使用される場合、「匹敵する個体」は、類似の障害または状態（重症度、期間、遺伝的素因、ＰＲＡ、症状、及び／またはケアレジメンの基準などを含む）、及び必要に応じて同様の人口統計学的要因（例えば、年齢、性別、民族性など）を有する個体を指す場合がある。この低減は、一時的な低減、特定の時点で測定された低減（例えば、処置の直後、適合性確認の時点、または臓器移植を受ける前）、または長期間にわたる持続的な低減（例えば、任意の約１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１２ヶ月、１８ヶ月、２年、３年、５年以上）を指す場合がある。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、臓器移植（腎移植など）前の個体におけるアロ抗体のレベルを低減する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるアロ抗体のレベルの持続的な低減を提供する方法であって、個体に有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を投与することを包含する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるアロ抗体のレベルのリバウンドを予防する方法であって、個体に有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を投与することを包含する方法である。いくつかの実施形態では、このリバウンドとは、ある特定の期間（例えば、約１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１２ヶ月のうちのいずれかまたはそれ以上）のうちで個体における処置の前の最初のレベルのアロ抗体の約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％のいずれかまでのアロ抗体のレベルの増大である。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、本明細書で企図されるアロ抗体のレベルとしては、全てのアロ抗体の量、特定のクラスのアロ抗体の量（例えば、特定のクラスのアロ抗原に対するアロ抗体、特定の免疫グロブリンアイソタイプのアロ抗体など）、または個体におけるアロ抗体の代表的な種または種の代表的なプールの量が挙げられる。抗体のレベル（例えば、アロ抗体またはアロ抗体のサブタイプ）も、抗体の「力価」と称してもよい。アロ抗体のレベルは、限定するものではないが、フローサイトメトリー、イムノアッセイ、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）アッセイ、及び他の標準的な交差適合技術を含む、当該技術分野で公知の任意の方法を用いて測定してもよい。いくつかの実施形態では、新たに採取した血清試料を用いてアロ抗体のレベルを測定する。アロ抗体のレベルを測定するために、体液、リンパ系生検、脾臓生検などの他の適切な試料も使用してもよい。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、アロ抗体は、抗ＨＬＡ（抗ＨＬＡクラスＩ及び抗ＨＬＡクラスＩＩを含む）アロ抗体である。いくつかの実施形態では、アロ抗体は、Ａ、Ｂ、Ｂｗ４、Ｂｗ６、及びＤＲ、ＨＬＡ−Ｃｗ、ＤＲｗ５１、ＤＲｗ５２、ＤＲｗ５３またはＤＱ抗原を含む抗原に特異的である。いくつかの実施形態では、アロ抗体は、ＩｇＧ及び／またはＩｇＭアイソタイプを有する。いくつかの実施形態では、アロ抗体は、パネル反応性抗体、すなわち当該技術分野で公知の標準的なパネル反応性抗体（ＰＲＡ）試験で使用されるドナー細胞のプール（ドナーＢ及び／またはＴリンパ球など）に対して反応性のアロ抗体を含む。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、アロ抗体とは、外来性アロ抗原に対する個体の以前の曝露に起因して発生したアロ抗体などの既存のアロ抗体である。個体を外来性アロ抗原に曝露する例示的な曝露事象としては、限定するものではないが、以前の臓器または組織移植、輸血、妊娠、及びこれらの任意の組み合わせが挙げられる。曝露事象とは、最近の事象、または遠い過去（例えば、１年以上前）に発生した事象、単一の事象、または反復事象であってもよい。いくつかの実施形態では、この方法は、個体における既存のアロ抗体のレベルを、（例えば、以前の曝露事象によって）感作されていない個体に見られる正常レベルまで低減する。いくつかの実施形態では、この方法は、（例えば、以前の暴露事象によって）感作されていない個体において見出されるレベルの約１０、８、６、５、４、３、２、１．５、または１倍のいずれかまで既存のアロ抗体のレベルを低減する。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、臓器移植（例えば、腎移植）の必要な個体のパネル反応性抗体（「ＰＲＡ」とも呼ばれる）（パネル反応性抗体のレベル、または以下に記載されるようなＰＲＡの値を含む）を低減する方法であって、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）をこの個体に投与することを包含する方法である。いくつかの実施形態において、個体のＰＲＡ（例えば、ｃＰＲＡ）は、処置の前であり、かつ同様の試験条件下で測定されるＰＲＡ（例えば、ｃＰＲＡ）と比較して、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上のいずれか低減する。「ＰＲＡ」または「パネル反応性抗体」という用語は、個体の血清が反応して細胞死を誘導するドナーリンパ球のプールのパーセンテージの尺度を指す。ＰＲＡは、試験されている個体が既存のアロ抗体（ＨＬＡ抗原に対するアロ抗体など）を介して反応する、ドナー集団の予想される割合に相当し得る０％〜９９％のパーセージとして表すことができる。Ｘ％のＰＲＡとは、個体がＸ％のドナーとの交差適合が不適合であると予想されることを示し得る。ＰＲＡ値は、典型的には、全米臓器配分ネットワーク（ＵＮＯＳ）などの移植割り当てシステムで使用されて、移植臓器の待機リストにおいて、個体の利用可能な移植臓器の割り当てを優先させる。高いＰＲＡを有する個体ほど、低いＰＲＡを有する個体よりも、適切な臓器が提供される前に待機リスト上でさらに長時間待機すると予想される。決定されたＰＲＡの値は、ＰＲＡ試験の感度ならびにプール中のドナー抗原の選択に依存し得る。本明細書で使用されるように、ＰＲＡとはまた、計算されたＰＲＡ（ｃＰＲＡ）のようなＰＲＡの変化形を指す場合もある。例えば、２００９年にＵＮＯＳによって導入されたｃＰＲＡは、容認できないＨＬＡ抗原（または個体の既存のアロ抗体によって認識されるＨＬＡ抗原）の頻度、及び１つ以上の許容できないＨＬＡ抗原を発現する実際の臓器移植ドナーの割合に相当する、２００３年から２００５年の間の米国における約１２，０００人の腎臓ドナーの中のＨＬＡ抗原の頻度に基づいて計算される。ＰＲＡが高い（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、またはそれ以上のいずれか）個体は、「感作された」または「高度に感作された」とみなしてもよい。遺伝的素因（例えば、低頻度のＨＬＡ対立遺伝子または血清型を有する）に加えて、個体は、アロ抗体の発生をもたらし得る、外来のヒト抗原への曝露によって感作性になり得る。個体を外来のヒト抗原に曝露する例示的な曝露事象としては、限定するものではないが、以前の移植、輸血、妊娠及びそれらの任意の組み合わせが挙げられる。「感作された」個体は、高いＰＲＡを有する場合があり、及び／または以前の１回以上（１、２、３、４、５、６、またはそれ以上を含む）の曝露事象を経験している場合がある。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、ＰＲＡの低減は、潜在的な交差適合適合性ドナー由来の移植片を使用してその後首尾よい臓器移植（例えば、腎移植）を可能にする。いくつかの実施形態において、交差適合の適合性ドナーは、レシピエントが抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を受ける前に、レシピエントと不適合な交差適合であったであろう。いくつかの実施形態では、将来の臓器移植（腎移植など）のレシピエントに有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を投与することによって、交差適合の不適合ドナーを交差適合の適合性ドナーに変換する方法が本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、臓器移植（例えば腎移植）を待つ感作された個体（高感作の個体など）を脱感作する方法であって、個体に有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を投与することを包含する方法である。いくつかの実施形態では、脱感作された個体は、処置後に、最初に交差適合の不適合性であったドナーから臓器移植（例えば、腎移植）を受けることが可能である。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、臓器移植（腎移植など）を待機している個体の待機時間を短縮させる方法である。いくつかの実施形態では、個体の待機時間は、同じ臓器移植を待っている匹敵する個体群（例えば、処置前の個体と同様のＰＲＡを有する個体）の平均または中央値の待機時間と比較して、約１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、９ヶ月、１２ヶ月、１８ヶ月、２４ヶ月、３６ヶ月、４８ヵ月、６０ヶ月、またはそれ以上のいずれか短くなる。いくつかの実施形態では、個体の待機時間は、同じ臓器移植を待っている匹敵する個体群（例えば、処置前の個体と同様のＰＲＡを有する個体）の平均または中央値の待機時間の約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上のいずれか短縮される。いくつかの実施形態では、この方法は、生体臓器ドナーから移植臓器のための個体の待機時間を短縮する。いくつかの実施形態では、この方法は、死んだ臓器ドナーから移植臓器のための個体の待機時間を短縮する。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、個体の適切な臓器移植（腎移植など）を受ける可能性を高める方法であって、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）をその個体に投与することを包含する方法である。いくつかの実施形態において、適切な臓器移植を受ける可能性は、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上のいずれか増大される。いくつかの実施形態では、この方法は、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）の投与後、約１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１２ヶ月またはそれ以上のいずれか内で適切な臓器移植を受ける可能性を高める。いくつかの実施形態では、この方法は、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）の投与後、約６ヶ月〜１２ヶ月、６ヶ月〜１０ヶ月、６ヶ月〜９ヶ月、４ヶ月〜８ヶ月、及び５ヶ月〜７ヶ月のいずれかの期間内に適切な臓器移植を受ける可能性を増大させる。いくつかの実施形態では、この方法は、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）の投与後３６週間または９ヶ月以内に適切な臓器移植を受ける可能性を高める。いくつかの実施形態では、この方法は、個体が生体臓器ドナーから移植片臓器を受け取る可能性を高める。いくつかの実施形態では、この方法は、死亡した臓器ドナーから個体が移植片臓器を受け取る可能性を高める。
【０２０９】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、臓器移植（腎移植など）後の個体（例えば、感作された個体）における移植片拒絶のリスクを低減させる方法である。移植片拒絶は、急性（例えば、約１週間、２週間、４週間、６週間、８週間、１２週間、１６週間、２４週間、３６週間またはそれ以上のいずれか内）であっても、または慢性（例えば、約３ヵ月、０．５年、１年、１．５年、２年、２．５年、３年、３．５年、４年、４．５年、５年、６年、１０年、またはそれ以上のいずれか）であっても、アロ抗体（例えば、ＤＳＡ）若しくはＴ細胞によって媒介されても、体液性または細胞性の免疫応答によって媒介されてもよい。移植片拒絶としては、限定するものではないが、超急性反応、急性抗体媒介拒絶及び慢性ドナー特異的抗体拒絶が挙げられる。移植片拒絶のリスクは、全ての移植片拒絶エピソードの発生率、またはある特定の期間（例えば、約１週間、２週間、４週間、８週間、１２週間、２４週間、３６週間、５２週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、０．５年、１年、１．５年、２年、２．５年、３年、３．５年、４年、４．５年、５年、６年、１０年、またはそれ以上のいずれか）をにわたる特定の種類の移植片拒絶エピソードによって決定され得る。移植片拒絶エピソードとしては、任意の程度またはレベルの症候性エピソード、及び移植片に対する損傷または免疫応答の組織学的徴候を伴う無症候性事象を含み得る。いくつかの実施形態において、移植片拒絶のリスクは、抗ＣＤ２０抗体処置なしの同様の個体群中の移植片拒絶の典型的なリスク（例えば、平均リスクまたは中央値リスク）に関して、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上のいずれか低減される。いくつかの実施形態では、移植片拒絶のリスクは、約１年または１２ヵ月内で評価される。いくつかの実施形態では、移植片拒絶は、細胞性免疫応答、体液性免疫応答、またはその両方による急性（例えば、臓器移植後約１２週間以内）の拒絶である。いくつかの実施形態において、移植片拒絶反応は、急性（例えば、臓器移植後約２４週間以内）ＡＭＲ及び慢性（例えば、臓器移植後約５２週間以内）のＡＭＲを含む抗体媒介拒絶（ＡＭＲ）である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、臓器移植を受けた個体における移植片拒絶を予防する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、臓器移植を受けた個体における移植片拒絶を処置する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体を個体に投与することを包含する、臓器移植（腎移植など）後の従来の免疫抑制剤による処置に対する個体の耐性の発達を予防する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を個体に投与することを包含する、臓器移植を受けた個体における移植片（同種異系移植片など）耐性を改善する方法である。
【０２１０】
いくつかの実施形態では、この方法は、ドナー特異的抗体（ＤＳＡ）を低減することによって、移植片拒絶のリスクを低減する。ＤＳＡは、移植片中の細胞などのドナー細胞を特異的に認識し得る抗ＨＬＡ抗体を含む。いくつかの実施形態では、ＤＳＡは、既存のアロ抗体である。いくつかの実施形態では、ＤＳＡは、臓器移植後の移植片に応答して個体において新たに生成される。いくつかの実施形態では、ＤＳＡは、移植片に対する細胞傷害性免疫応答をもたらす。いくつかの実施形態において、ＤＳＡの存在は、移植片拒絶のリスクを増大させる。いくつかの実施形態では、ＤＳＡは、臓器移植（腎移植など）の、約１２週間後、２４週間後、３６週間後、４８週間後、５２週間後、またはそれ以上のいずれかで測定される。いくつかの実施形態において、ＤＳＡは、臓器移植（腎移植など）の前または臓器移植時に測定される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるＤＳＡを低減する方法であって、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）をこの個体に投与する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体において低レベルのＤＳＡを維持する方法であって、この個体に有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ抗ＣＤ２０抗体）を投与する、方法である。低レベルのＤＳＡとは、低ＰＲＡ（例えば、３０％、２０％、５％、またはそれ以下のいずれか未満）または機能的または組織学的な徴候または症状によって測定される移植臓器に対するＤＳＡの有害な免疫応答をＤＳＡが引き起こさない十分に低いレベルのＤＳＡを有する個体において典型的に検出されるＤＳＡのレベルを指す。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、臓器移植（例えば、腎移植）を受けた個体におけるアロ抗体（例えば、ＤＳＡ）のレベルの持続的な低減を提供するための方法であって、個体に有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を投与することを包含する方法である。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ２０抗体による継続的な処置は、臓器移植を待つ個体または腎移植後の個体におけるアロ抗体（例えば、ＤＳＡ）のレベルを安定化させる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、臓器移植（例えば、腎移植）を受けた個体における新生ＤＳＡの産生を予防または阻害する方法であって、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）をその個体に投与することを包含する方法である。
【０２１１】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、個体における同種免疫を阻害する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、個体におけるアロ抗原に対する耐性を誘導する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、同種移植片レシピエントにおけるアロ抗体の産生を阻害する方法である。
【０２１２】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を個体に投与することを包含する、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体における移植片喪失を予防する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を個体に投与することを包含する、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体における移植片喪失のリスクを低減する方法である。いくつかの実施形態では、上記移植片喪失は、移植片拒絶、例えば、抗体媒介性拒絶によって生じる。いくつかの実施形態では、上記移植片喪失は、慢性移植片拒絶（例えば、ドナー特異的抗体によって媒介される）によって生じる。いくつかの実施形態において、移植片喪失のリスクは、抗ＣＤ２０抗体処置なしの同様の個体群中の移植片喪失の典型的なリスク（例えば、平均リスクまたは中央値リスク）に関して、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上のいずれか低減される。いくつかの実施形態では、移植片喪失のリスクは、臓器移植後（腎移植など）の後、約１２週間、２４週間、３６週間、５２週間、２年、３年、５年、またはそれ以上のいずれか内に決定される。
【０２１３】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を個体に投与することを包含する、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体における移植片生存を延長する方法である。いくつかの実施形態では、移植片生存は、同様の臓器移植を受けている匹敵する個体群中の移植片生存の平均または中央値時間と比較して、約３ヵ月、６ヵ月、９ヵ月、１２ヵ月、１８ヵ月、２４ヵ月、３６ヵ月、４８ヵ月、６０ヵ月、またはそれ以上のいずれか延長される。いくつかの実施形態では、移植片生存は、同じ臓器移植を受けている匹敵する個体群中の平均または中央値時間と比較して、約１０％、２０％、３０％、５０％、７５％、１００％、２００％、５００％、またはそれ以上のいずれか延長される。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるのは、有効量の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）を個体に投与することを包含する、個体における移植片機能を改善する方法である。移植片機能は、当該分野で公知の標準的なアッセイ及び検査方法を用いて測定する。例えば、腎移植片の機能は、個体の血清クレアチニン値を測定することによって測定してもよい。いくつかの実施形態では、移植片の機能は、臓器移植（腎移植など）の後、約４週間、約１２週間、２４週間、３６週間、５２週間、２年、３年、５年、またはそれ以上のいずれか内で測定される。いくつかの実施形態では、移植片機能は、同様の条件下で測定した同様の臓器移植を受けている匹敵する個体群の平均または中央値の移植片機能に対して、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上のいずれか改善される。いくつかの実施形態では、正常または許容される移植片機能（例えば、対応する健康な臓器の機能の約３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上のいずれか）が、同様の臓器移植を受けている匹敵する群のものに比較してさらに長期間（例えば、約１０％、２０％、３０％、５０％、７５％、１００％、２００％、５００％、またはそれ以上）個体で維持される。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体のクオリティオブライフを改善する方法であって、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を個体に投与することを包含し、ここでこの抗ＣＤ２０抗体の投与によって、適切な臓器移植（腎移植など）を個体が受けることが可能になる方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体の長期医療コストを低減する方法であって、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を個体に投与することを包含し、ここでこの抗ＣＤ２０抗体の投与によって、適切な臓器移植（腎移植など）を個体が受けることが可能になる方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体の全生存を延長する方法であって、有効量の抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）を個体に投与することを包含し、ここでこの抗ＣＤ２０抗体の投与によって、適切な臓器移植（腎移植など）を個体が受けることが可能になる方法である。いくつかの実施形態では、個体の全生存は、抗ＣＤ２０処置をしていないか、及び／または臓器移植をしていない匹敵する個体群中の平均のまたは中央値の全生存と比較して、約３ヵ月、６ヵ月、９ヵ月、１２ヵ月、１８ヵ月、２４ヵ月、３年、４年、６年、１０年、またはそれ以上のいずれか延長される。
【０２１６】
本発明はさらに、臓器移植（腎移植など）の必要な個体を処置するのにおける使用のための本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つをさらに提供する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるアロ抗体（例えば、ＤＳＡ）のレベルの低減における使用のための本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるＰＲＡの低減における使用のための本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体における移植片拒絶（例えば、ＡＭＲ）のリスクの低減における使用のための本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体における移植片生存の延長における使用のための本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つである。いくつかの実施形態において、個体は、腎移植を必要とする。いくつかの実施形態において、個体は感作される。いくつかの実施形態では、個体は、少なくとも２０％（例えば、少なくとも３０％）のＰＲＡを有する。いくつかの実施形態では、個体は、末期腎不全を有する。
【０２１７】
本発明によってさらに提供されるのは、臓器移植（腎移植など）の必要な個体を処置するための医薬の製造における本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つの使用である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるアロ抗体（例えば、ＤＳＡ）のレベルを低減するための医薬の製造における本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つの使用である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるＰＲＡを低減するための医薬の製造における本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つの使用である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体における移植片拒絶（例えば、ＡＭＲ）のリスクを低減するための医薬の製造における本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つの使用である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体における移植片生存を延長するための医薬の製造における本明細書に記載の抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）またはその組成物のいずれか１つの使用である。いくつかの実施形態において、個体は、腎移植を必要とする。いくつかの実施形態において、個体は感作される。いくつかの実施形態では、個体は、少なくとも約２０％（例えば、少なくとも３０％）のＰＲＡを有する。いくつかの実施形態では、個体は、末期腎不全を有する。
【０２１８】
ＩＶ．製品またはキット
本発明の別の態様において、上記のような臓器移植（腎移植など）の必要な個体を処置するために有用な材料を含む製品またはキットが提供される。製品またはキットは、容器、及び容器上のまたは容器に付着されたラベルまたは添付文書を備える。好適な容器には、例えば、ボトル、バイアル瓶、シリンジ、ＩＶ溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な材料から形成され得る。容器は、病態の処置、予防、及び／または診断に有効である組成物を、それ自体で、または別の組成物と組み合わせて保持し、かつ滅菌アクセスポートを有してもよい（例えば、容器は、静脈注射溶液バッグまたは皮下注射針によって貫通可能な栓を有するバイアル瓶であってもよい）。組成物中の少なくとも１つの活性薬剤は、本発明の抗体（例えば、本開示の抗ＣＤ２０抗体、例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）である。ラベルまたは添付文書は、組成物が選定した病態を処置するために使用されることを表示する。さらに、製品またはキットは、（ａ）本発明の抗体を含む組成物をその中に収容した第１の容器、及び（ｂ）さらなる細胞傷害性薬剤、さもなければ治療剤を含む組成物をその中に収容した第２の容器を備えてもよい。本発明のこの実施形態の製品は、組成物が特定の病態を処置するために使用され得ることを表示する、添付文書をさらに含んでもよい。代替的に、または加えて、製品またはキットは、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液、及びデキストロース溶液などの薬学的に許容される緩衝剤を含む第２の（または第３の）容器をさらに含み得る。それは、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業的及び使用者の立場から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）、及び必要に応じて薬学的に許容される担体を含む医薬、ならびに必要に応じて、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体におけるアロ抗体（例えば、ＤＳＡ）のレベルを低減するための医薬の投与のための指示を含む添付文書を備えるキットである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）、及び必要に応じて薬学的に許容される担体を含む医薬、ならびに必要に応じて、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体においてＰＲＡを低減するための医薬の投与のための指示を含む添付文書を備えるキットである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、抗ＣＤ２０抗体（例えば、ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体）、及び必要に応じて薬学的に許容される担体を含む医薬、ならびに必要に応じて、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体において移植片拒絶（例えば、ＡＭＲ）のリスクを低減するための医薬の投与のための指示を含む添付文書を備えるキットである。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、抗ＣＤ２０抗体（ＩＩ型抗ＣＤ２０抗体など）、及び必要に応じて薬学的に許容される担体を含む医薬、ならびに必要に応じて、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体において移植片生存を延長するための医薬の投与のための指示を含む添付文書を備えるキットである。
【０２２０】
いくつかの実施形態では、このキットはさらに、第２の医薬（例えば、高用量のＩＶＩＧ）、及び必要に応じて薬学的に許容される担体、及び必要に応じて、臓器移植（腎移植など）を必要とする個体を処置するためにこの第２の医薬の投与のための指示を含む添付文書を備えるキットである。
【０２２１】
上記製造品のうちのいずれかは、抗ＣＤ２０抗体の代わりに、またはそれに加えて本発明の免疫複合体を含んでもよいことが理解される。
【０２２２】
本明細書は、当業者が本発明を実施することを可能にするのに十分なものであると見なされる。本明細書に示されて説明される修正に加えて、本発明の様々な修正は、前述の説明から当業者に明らかになり、それらは添付の特許請求の範囲内におさまる。本明細書に引用される全ての刊行物、特許、及び特許出願は、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に援用される。
【実施例】
【０２２３】
本発明は、以下の実施例を参照することによってさらに理解され得るが、実施例は、例示として提供されるものであり、限定的であることを意図するものではない。
【０２２４】
実施例１：腎移植を待っている末期腎不全を有する及び高感作の患者における高用量ＩＶＩＧとともに投与された静脈内オビヌツズマブの第Ｉｂ相臨床治験
研究設計
１０００ｍｇの静脈内注入として投与されたオビヌツズマブの単回及び反復用量の第Ｉｂ相非盲検治験は、移植の候補であり、かつｃＰＲＡが５０％以上である高感作の証拠を有するＥＳＲＤの成人で行った。患者は、１つ（コホート１）または２つ以上（コホート２）のオビヌツズマブ注入のいずれかを受けた２つのコホートに登録されてもよい。ＩＲＲのリスクを低減するために、両コホートは、各オビヌツズマブ注入の前に抗ヒスタミン剤、抗発熱物質及び８０ｍｇのメチルプレドニゾロンを用いて標準的な前処置を受ける。
【０２２５】
治験のデザインを図１に示す。本研究では、脱感作療法を受ける個体の２つのコホートがある。コホート１（１０００ｍｇ単回用量のオビヌツズマブ）には、１日目にオビヌツズマブ注入、その後２２日目及び４３日目に高用量ＩＶＩＧ（２ｇ／ｋｇ）を投与される５例の患者が含まれる。重篤な注入関連反応（ＩＲＲ）（有害事象の共通用語基準［ＣＴＣＡＥ］等級４以上のオビヌツズマブ処置の２４時間以内に起こる注入反応として定義される）も、重大な予期せぬ安全事象もない場合、コホート２は、コホート１の患者番号５が一旦、そのオビヌツズマブ注入を完了し、投与後４週間モニターされれば、先に進めてもよい。コホート２（１０００ｍｇオビヌツズマブ×２）には、１日目と１５日目にオビヌツズマブ１０００ｍｇ注入の後、２２日目と４３日目に高用量のＩＶＩＧ（２ｇ／ｋｇ）を投与される２０例の患者が含まれる。ＨＬＡアロ抗体に対してこの時点で観察される減少が、抗体媒介性拒絶のリスクが低い腎臓移植に進む可能性として十分ではないという治験責任医師の意見があれば、２４週目で追加の１０００ｍｇのオビヌツズマブ注入が、コホート２で投与され得る。２４週目の投与を進める前に、治験薬モニターとの相談が推奨される。
【０２２６】
コホート１またはコホート２に包含された後に、移植の資格を有し、適合性の腎臓提供を受けると認められる患者は、１０００ｍｇのオビヌツズマブの２回の追加の注入を受ける。移植時に１回の注入を行う（脱感作期の事前のオビヌツズマブ注入が移植日の４週間以上前に投与された場合のみ）。移植から最初の４８時間以内のオビヌツズマブ注入の正確なタイミングは、治験責任医師の最善の医学的判断に委ねられている。
【０２２７】
１０００ｍｇのオビヌツズマブの第２のさらなる注入を、移植後第２４週で投与する。この試験の主要エンドポイントは、脱感作段階の第２４週に、オビヌツズマブ／ＩＶＩＧ誘導レジメンの安全性及び忍容性を評価する。後で移植された患者の集団における安全性及び忍容性をさらに特徴付けるために、移植後２８週目に安全性データの検討を行ってもよい。すべての患者を、最後のオビヌスツマブ注入後の最低１２ヶ月間モニタリングする。
【０２２８】
以下に詳述するように、研究対象の患者はＥＳＲＤを有し、１８〜６５歳であり、感作事象の履歴及び５０％以上のｃＰＲＡ証明を有する。妊娠中若しくは授乳中であるか、または活動性若しくは慢性感染症を有するか、または重大なウイルス感染の病歴、悪性腫瘍の病歴（適切な処置を受けた子宮頸部の癌腫、非メラノーマ皮膚癌、またはステージＩの子宮癌を除く）、重度の貧血、血小板減少症もしくは白血球減少症、肝炎、または重大な心肺疾患がある患者は、過去４週間に生ワクチンを受けた患者と一緒に除外する。選択された集団は、提唱された第ＩＩＩ相試験に参加する意思決定を可能にする、ｃＰＲＡレベルに対するオビヌツズマブの安全性及び影響に関する決定を可能にする、移植を待機している感作患者の大多数を代表するものである。以前の移植を受けた限られた数の患者（ｎ≦６）を研究に登録してもよい。
【０２２９】
本研究に関する選択基準には以下を含む：
（ａ）感作事象（例えば、輸血、妊娠、または以前の移植）の病歴を有するＥＳＲＤ、
（ｂ）全米臓器分配ネットワーク（ＵＮＯＳ）−記載があり、過去１年間に死亡したドナー腎臓について少なくとも１回の適合の試行
（ｃ）スクリーニング時にｃＰＲＡが５０％以上であることが証明されている。ｃＰＲＡ計算は、局所移植チームからの入力に基づいており、具体的には、サイト生成データ（例えば、ＨＬＡ特異的アロ抗体評価）を組み込む。
（ｄ）スクリーニング時に１８歳〜６５歳、
（ｅ）妊娠可能性のある女性の場合：禁欲を保つ（異性間性交を控える）ことに同意するか、または処置期間中、及び治験薬の最後の投与後少なくとも１８ヶ月間に１年に１％未満の失敗率を有する少なくとも１つの方法を含む２つの適切な避妊方法を使用する。女性が、初経後であり、閉経後の状態（閉経以外の原因が特定されていない無月経が連続１２ヶ月以上）に達しておらず、外科的滅菌（卵巣及び／または子宮の除去）を受けていない場合は、妊娠可能であると考えられている。１年未満の不良率を有する避妊法の例としては、両側卵管結紮、男性不妊、ホルモン移植、確立された経口または注射ホルモン避妊薬の適切な併用、及びある特定の子宮内デバイスが挙げられる。性的禁欲の信頼性は、臨床研究の期間及び患者の好ましくかつ通常の生活様式との関連で評価されるべきである。定期的な禁忌（例えば、予定表、排卵、症状のある、または排卵後の方法）及び膣外射精は、避妊の許容可能な方法ではない。バリア法は常に殺精子剤の使用で補わなければならない、
（ｆ）男性について：以下に定義するように、禁忌（異性間性交を控える）または避妊措置を使用すること、及び精子の供与を拒否することについて合意すること：
（ｉ）妊娠している可能性のある女性パートナーまたは妊娠中の女性パートナーがいる場合、処置期間中、及び治験薬の最終投与後少なくとも１２ヶ月間、男性は禁欲を維持するか、またはコンドームを使用しなければならない。性的禁欲の信頼性は、臨床研究の期間及び患者の好ましくかつ通常の生活様式との関連で評価されるべきである。定期的な禁忌（例えば、予定表、排卵、症状のある、または排卵後の方法）及び膣外射精は、避妊の許容可能な方法ではない、ならびに
（ｉｉ）男性は、処置期間中、及び治験薬の最終投与後少なくとも１２ヶ月間、精子提供を控えなければならない。
【０２３０】
重要な除外基準としては以下が挙げられる：
（ａ）最近の大手術からの不完全な回復、またはベースライン以前の大手術から１２週間未満、腎臓移植を除いてベースラインの２４週間以内の計画された手術。最小限の侵襲的処置（例えば、瘻孔穿孔及びＰｅｒｍａｃａｔｈ配置）は認められている、
（ｂ）妊娠または授乳中、
（ｃ）最初のオビヌスツマブ注入前に測定された陽性血清ｈＣＧ；
（ｄ）ＨＩＶ感染の既往歴を含む一次または二次免疫不全（病歴または現在活性である）、
（ｅ）Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）またはコア抗体（ＨＢｃＡｂ）に対して血清陽性またはＣ型肝炎に対して血清陽性、
（ｆ）以下のスクリーニング試験の１つによって確認された活動性または潜伏性結核（ＴＢ）の病歴：
（ｉ）陽性ツベルクリン（精製タンパク質誘導体［ＰＰＤ］）皮膚試験、または
（ｉｉ）陽性ＱｕａｎｔｉＦＥＲＯＮ（登録商標）ＴＢ  Ｇｏｌｄ試験。ｂａｃｉｌｌｅ  Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ（ＢＣＧ）の予防接種の既往歴がある対象は、ＱｕａｎｔｉＦＥＲＯＮ試験の陰性結果と陰性胸部放射線写真が適格である必要がある。
（ｇ）無作為化の３ヵ月以内に撮影された胸部Ｘ線写真（Ｘ線、前後及び側方）における活動性ＴＢの疑い（投与の１日目）。
（ｈ）任意の種類の既知の活動性感染（爪床の真菌感染を除く）、またはベースラインの４週間内にＩＶ抗感染薬による入院または処置を必要とする任意の主要な感染のエピソードまたはベースライン前２週間以内の経口抗感染薬の完了、
（ｉ）ベースライン前２４週間以内の深部空間／組織感染（例えば、筋膜炎、膿瘍、骨髄炎）の病歴、
（ｊ）重度の再発性または慢性感染の病歴、
（ｋ）現在進行中のアルコール若しくは薬物乱用、またはアルコール若しくは薬物乱用の履歴、
（ｌ）複数の臓器移植を受けた患者。以前の単一腎移植を受けた患者（合計６人までの患者）は、試験に入ることを許可され、いずれのコホートに登録してもよい。
（ｍ）同期臓器移植の候補（例えば、腎臓−膵臓、腎臓−肝臓）、
（ｎ）スクリーニング訪問から１ヶ月以内の任意の弱毒生ワクチン（複数可）のレシピエント、
（ｏ）以下を含む異常なスクリーニング検査結果：ＷＢＣ＜３．０×１０３／ｍＬ、血小板カウント＜１００×１０３／ｍＬ、Ｈｇｂ＜７．０ｇ／ｄＬ、ＡＳＴ／ＳＧＯＴまたはＡＬＴ／ＳＧＰＴ＞５×正常の上限（ＵＬＮ）、
（ｐ）主要な心臓血管または肺疾患の既往のある患者（例えば、スクリーニング前の６ヶ月以内の心筋梗塞、ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）のクラスＩＩＩ／ＩＶ心不全、制御不能な狭心症、不整脈、及び虚血または能動伝導異常に関するＥＣＧの証拠）、
（ｑ）無作為化の１２週間内または５半減期内のうちのいずれか大きい方の期間内の治験薬の使用、
（ｒ）過去１２ヶ月以内の抗ＣＤ２０療法の使用、
（ｓ）ＩＶＩＧまたはオビヌツズマブに対して既知の禁忌、
（ｔ）固形腫瘍、血液悪性腫瘍及び上皮内癌を含むがんの病歴（処置または摘出され、解消された皮膚の基底細胞癌を除く）、
（ｕ）モノクローナル抗体またはオビヌツズマブ注入の成分に対する重度のアレルギーまたはアナフィラキシー反応の病歴、ならびに
（ｖ）腹膜透析を行っているＥＳＲＤを有する患者。
【０２３１】
投薬及び非治験薬
この研究のための被験薬は、オビヌツズマブであり、かつコホート１において１日目に、及びコホート２において１日目及び１５日目に１０００ｍｇの用量でＩＶ注入によって投与される。さらなる任意の１０００ｍｇ注入を、コホート２の患者で、１６９日に投与してもよい。
【０２３２】
移植に適格であることが見出され、かつ適合性の腎臓提供を受けた患者は、オビヌツズマブ１０００ｍｇの２回の追加の注入を、移植の時点で（脱感作期の事前のオビヌツズマブ注入が移植日の４週間以上前に投与された場合のみ）、及び移植後２４週目に投与される。
【０２３３】
オビヌツズマブの各注入の前に、患者は注入期間の開始前に３０〜６０分、８０ｍｇのＩＶメチルプレドニゾロン、経口アセトアミノフェン（６５０〜１０００ｍｇ）及び経口ジフェンヒドラミン（５０ｍｇ、または同等の用量の抗ヒスタミン薬）で予防的処置を受けるべきである。
【０２３４】
オビヌツズマブに加えて、全ての患者は、２２日目及び４３日目に高用量ＩＶＩＧ（２ｇ／ｋｇ）を投与される。患者は、根底にある状態（例えば、抗高血圧薬、コレステロール低下薬、骨粗鬆症の処置）の標準的な施設主導の療法及び血液透析などの処置を継続する。研究中、移植前及び移植後の状況におけるＥＳＲＤ及びその合併症の管理のために、治験責任医師が医学的に必要とみなす任意の処置を受けることを患者に許可してもよい。
【０２３５】
研究の経過中に移植された患者の場合、移植に向けられた治療は、標準的な免疫抑制レジメン、例えば、ミコフェノール酸モフェチル（例えば、２回の分割用量で、１２００ｍｇ／ｍ２／日で投与される）、タクロリムス（例えば、０．２〜０．３ｍｇ／ｋｇを毎日２回に分けて投与）、及びセンタープロトコールによるプレドニゾン負荷用量及び漸減を包含してもよい。リンパ球枯渇レジメン（例えば、アレムツズマブ）を含む誘導レジメンは、治験責任医師によって適切であると判断される場合に使用してもよい。
【０２３６】
併用療法と臨床診療
併用療法は、治験薬の開始３０日前から治験終了／中止訪問までに患者が使用した任意の薬物（例えば、処方薬、市販薬、薬草またはホメオパシー療法、栄養補助食品）を含む。そのような投薬はすべて治験責任医師に報告し、記録しなければならない。
【０２３７】
患者は、研究に登録し、根底にある状態（例えば、抗高血圧薬、コレステロール低下薬、骨粗鬆症の処置）の標準的な施設主導の療法及び及び血液透析などの処置を継続してもよい。研究中、移植前及び移植後の状況におけるＥＳＲＤ及びその合併症の管理のために、治験責任医師が医学的に必要とみなす任意の処置を受けることを患者に許可してもよい。
【０２３８】
ＩＶＩＧの全ての用量は、血液透析期間の直前または最中に注入される。
【０２３９】
患者が適合ドナーとの移植のための適切な候補とみなされる場合、移植に向けられた療法は、センタープロトコールに従って、標準的な免疫抑制レジメン、例えば、毎日２回の分割量で与えられる１２００ｍｇ／ｍ２／日のミコフェノール酸モフェチル、毎日２回に分け０．２〜０．３ｍｇ／ｋｇで投与されるタクロリムス、及びプレドニゾン負荷用量及び漸減を包含し得る。リンパ球枯渇レジメンを含む誘導レジメンは、治験責任医師が適切と判断した場合に使用してもよい。腎臓移植患者の約６４％が移植時にＴ細胞枯渇剤を投与される（ＯＰＴＮ／ＳＲＴＲ  ２０１２年次データ報告）。さらに、感作された患者は、移植後の急性移植片拒絶のリスクがより高く、施設ではリツキシマブによる脱感作後にリンパ球枯渇剤（例えば、アレムツズマブ）を使用していることが認識されている（Ｖｏ，Ａ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３５９：２４２−２５１、Ｖｏ，Ａ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．（２０１４）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ９８：３１２−３１９）。上記の理由から、移植に向かう場合がある本研究の患者にＴ細胞枯渇剤の使用しないよう推奨することは難しいようである。移植後に感染合併症の可能性が認識されれば、参加センターは、細菌感染、ウイルス感染、及び真菌感染に対する局所感染予防プロトコールを厳格に実施するよう指示される。
【０２４０】
研究の目的及び転帰の指標
この研究の第１の目的は、末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を有する、移植を待つ成人患者におけるオビヌツズマブの単回及び反復静脈内（ＩＶ）用量の安全性及び忍容性、ならびに上昇した計算パネル反応性抗体（ｃＰＲＡ）によって測定される高感作の証拠を評価することである。さらに、その後の移植患者において安全性及び忍容性が評価され得る。経時的な安全性、ｃＰＲＡ、薬物動態（ＰＫ）、及びその他転帰測定値に関する記述統計は、各投与量コホートについて提示することができる。
【０２４１】
本研究の第２の目的は、単一用量及び反復用量のオビヌツズマブのＰＫ及び薬力学（ＰＤ）プロファイルを特徴づけることである。ＰＫプロファイルの特徴付けは以下にさらに記載され、ＰＤプロファイルは、末梢血及びヒト白血球抗原（ＨＬＡ）アロ抗体におけるＣＤ１９＋Ｂ細胞に主に基づく。
【０２４２】
本研究のための安全性目標は以下のとおりである：
（ａ）以下のエンドポイントに基づいて、移植を待つＥＳＲＤ患者の高感作患者におけるオビヌツズマブの安全性を評価すること：
（ｉ）重篤及び非重篤な有害事象の性質、頻度及び重症度、
（ｉｉ）規則的な身体検査、バイタルサイン、血液及び化学検査室試験、検尿、ＥＣＧ、及び有害事象の発生率及び重症度の使用を通じて、検査値、バイタルサイン及び他の安全性バイオマーカーへの影響、
（ｉｉｉ）さらに、以下を検査してもよい：循環Ｂ細胞、Ｔ細胞、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、血清免疫グロブリン（総Ｉｇ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、及びＩｇＡ）、妊娠、ならびに流行性耳下腺炎、風疹、水痘、破傷風、インフルエンザ、及び肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）の抗体力価、
（ｂ）重篤及び非重篤の有害事象の性質、頻度及び重症度の評価、ならびに白血球数、Ｉｇ数及び抗体力価のモニタリングにより、腎移植及び追加の免疫抑制療法を受けている患者のオビヌツズマブの安全性を評価すること、そして
（ｃ）抗薬物抗体を測定し、かつ他の結果判定とのそれらの関係を評価することにより、オビヌツズマブの免疫原性の可能性を特徴付けること。
【０２４３】
この研究のための薬物動態（ＰＫ）目的は以下のとおりである：
（ａ）ＥＳＲＤ集団におけるオビヌツズマブの薬物動態を、オビヌツズマブの用量−濃度−時間データの非線形混合効果モデリング（ソフトウェアＮＯＮＭＥＭによる）を用いて特徴づけること。ＰＫプロファイルデータは、主なパラメーター（例えば、クリアランス）に対する主要な共変量（例えば、性別、人種／民族性、ベースラインでの体重、生化学的パラメータ及び血液学的パラメータ、基礎疾患の程度）の影響を含むＰＫモデルをさらに発展させるために使用されてもよい。ＡＵＣ０−τ、最大血清濃度（Ｃｍａｘ）などの曝露の個々の尺度の導出は、この分析に使用される最終的なＰＫモデルに依存し得る。この分析の結果は個別に報告されてもよい。血清オビヌツズマブは、本研究で要約（平均、最小、最大、ＳＤ、幾何平均）されて、報告されてもよい、
（ｂ）オビヌツズマブと、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を含む併用薬物との間の潜在的なＰＫ相互作用、及び潜在的に移植時に使用される他の医薬を特定し、記述すること。オビヌツズマブで処置された患者の重篤な有害事象及び安全性検査室パラメータの異常の出現が、オビヌツズマブ曝露に起因する可能性があるか否かを評価するために、探索的なグラフィカル分析を行ってもよい。また、応答の変動（例えば、ＰＤ及び／または探索的臨床測定を含む薬理学的応答）が、オビヌツズマブ曝露の変動性に起因する可能性があるかどうかを評価するために、探索的なグラフィカル分析を行ってもよい。曝露パラメータと安全パラメータとの間の関連する観察された関係は、ロジスティック回帰分析及び間接応答モデリングなどの異なるアプローチを用いてさらに特徴付けてもよい、そして
（ｃ）必要に応じて、追加のＰＫ分析を実施してもよい。
【０２４４】
この研究のための薬理学的（ＰＤ）目的及びバイオマーカーの目的は以下のとおりである：
（ａ）移植時に１、２２、１６９、３６５、５３２日目に、及び移植後１６９、３６５及び５３２日後に循環ＣＤ１９＋Ｂ細胞のレベルを評価することにより、オビヌツズマブを用いた処置後の末梢血中のＣＤ１９＋Ｂ細胞及び他の免疫細胞の変化を特徴づけるため、そして
（ｂ）以下に対するオビヌツズマブの効果を記述するため：オビヌツズマブでの処置前及び処置後に採取した試料について、ＳＡＢ  Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイを用いたＨＬＡアロ抗体測定基準、オビヌツズマブで前処置及び後処置した収集された血清中で測定したＢ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ）レベルを含むがこれに限定されない免疫状態の探索的バイオマーカー、ならびに腎生検及びリンパ節組織病理からの探索的バイオマーカー（移植生検及びその後の生検でのＢ細胞の存在及び枯渇について）。
【０２４５】
この研究のための探索的臨床目的は以下のとおりである：
（ａ）単一抗原ビーズＬｕｍｉｎｅｘプラットフォームによって、及び複数の時点でのオビヌツズマブ及び高用量ＩＶＩＧ後の同種感作を示す他の測定基準によって測定されるアロ抗体状態への影響を評価すること、ならびに
（ｂ）移植速度などの臨床的有効性の指標に対するオビヌツズマブの影響を評価する。
【０２４６】
本研究のための探索的結果測定は以下を含む：研究期間中に移植を受けた患者の割合、ならびに血清クレアチニン及び推定糸球体濾過率などの腎機能の移植前及び移植後の測定値。
【０２４７】
この研究の終了は、最後にオビヌツズマブを注入してから１２ヶ月後と定義される。最初の患者のスクリーニングから試験の終了までの研究期間は、約３０ヶ月であると予想される。
【０２４８】
研究室、バイオマーカー、及びその他の生物学的試料
血清中のオビヌツズマブの薬物動態を評価するために、血液試料を収集する。オビヌツズマブの血清濃度に由来するＰＫパラメーターは、以下のように計算してもよい：
（ａ）最大血清濃度：
（ｉ）全研究期間中（Ｃｍａｘ）、
（ｉｉ）治験薬の第１の経過後（Ｃｍａｘ１）、
（ｉｉｉ）治験薬の第２の経過後（Ｃｍａｘ２）、
（ｂ）濃度−時間曲線下の面積（ＡＵＣ）、
（ｃ）全身クリアランス、
（ｄ）定常状態条件下での分布容積（Ｖｓｓ）、及び
（ｅ）血清濃度−時間曲線の末端部分の半減期（ｔ１／２）。
【０２４９】
ＰＫパラメータは、集団ＰＫ分析による血清濃度データを有する全ての患者について決定され得る。ＰＫパラメータは、投与及び／若しくはサンプリングスケジュールに準拠していない患者、または試料がＡＤＡによる妨害（データの包含を排除する）を有し得る患者を除き（これらの患者は分析から除外してもよい）、血清濃度データを有するすべての患者について計算することができる。
【０２５０】
ＰＫ分析は、この患者集団におけるオビヌスツマブの薬物動態学に影響を与えるベースライン共変量を同定するための探索的分析を含んでもよい。検査され得るベースライン共変量としては、人口統計、他の患者の特徴（疾患重症度及び体重など）、及び選択された実験室測定値が挙げられる。
【０２５１】
ＩＶＩＧとの併用療法がオビヌツズマブのＰＫに影響を及ぼすかどうかを評価するために、集団ＰＫモデリングを使用して、コホート２における最初の処置注入後と第２４週のオビヌスツマブ注入後とのオビヌツズマブのＰＫを比較してもよい。
【０２５２】
ＰＫデータは、平均、標準偏差、幾何平均、変動係数、中央値、及び範囲を含む記述統計を用いて要約してもよい。
【０２５３】
血液試料からの探索的ＰＤマーカー及び腎生検及びリンパ節における炎症／浸潤の探索的バイオマーカー測定値は、コホートによって経時的にグラフ化及び記述的に要約し得る、これらのマーカーには、限定するものではないが、末梢ＣＤ１９＋Ｂ細胞数、Ｂ細胞サブセット、ＨＬＡ特異的アロ抗体、及び組織Ｂ細胞が挙げられ得る。
【０２５４】
適格性を決定するための具体的な実験室評価は以下のとおりである：
（ａ）血液学：ヘモグロビン、ＷＢＣ（絶対値及び相違）、及び定量的血小板数、
（ｂ）生化学：クレアチニン、アミラーゼ、リパーゼ、ＡＳＴ、ＡＬＴ、
（ｃ）尿検査（無尿性ではない患者）：蛋白、クレアチニン、顕微鏡検査及び尿検査検診（局所読み取り）。
（ｄ）妊娠検査：血清ｈＣＧ、
（ｅ）Ｂ型肝炎：ＨＢｓＡｇ及びＨＢｃＡｂ、
（ｆ）Ｃ型肝炎：Ｃ型肝炎血清学、
（ｇ）オビヌツズマブのＰＫ及び抗薬物抗体（ＡＤＡ）、ならびに
（ｈ）ｃＰＲＡ計算を支援するＨＬＡ特異的アロ抗体評価。これらの評価は現地で行われる。血清試料も採取して中央実験室で処理する。
【０２５５】
評価の研究スケジュールに従って評価することができる完全な実験室評価を以下に記載する：
（ａ）血液学：ヘモグロビン、ヘマトクリット、ＲＢＣ、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＷＢＣ（絶対値及び相違）及び定量的血小板数を含める。溶血性貧血を評価するために検査が必要な場合は、現地で行ってもよい、
（ｂ）血液化学：ＡＳＴ／ＳＧＯＴ、ＡＬＴ／ＳＧＰＴ、アルカリホスファターゼ、総タンパク質、アルブミン、コレステロール、総ビリルビン、ＢＵＮ、尿酸、クレアチニン、ランダムグルコース、乳酸デヒドロゲナーゼ、カリウム、ナトリウム、塩化物、カルシウム、マグネシウム、及びリン。スクリーニング時及び予定外の訪問時に、アミラーゼ及びリパーゼも含まれてもよい、
（ｃ）尿検査（無尿性ではない患者）：尿蛋白、クレアチニン、
（ｄ）フローサイトメトリー：Ｂ細胞（ＣＤ１９、ＣＤ２７、ＣＤ３８、ＩｇＤを含む）、Ｔ細胞（ＣＤ３、４、８）及びＮＫ細胞（ＣＤ１６、ＣＤ５６）。
（ｅ）ＨＬＡ特異的アロ抗体評価：Ｌｕｍｉｎｅｘプラットフォーム上での単一抗原ビーズの使用による固相アッセイ、
（ｆ）定量的免疫グロブリン：ＩｇＧ、ＩｇＭ及びＩｇＡアイソタイプを含む総Ｉｇレベル、
（ｇ）抗体力価：一般的な抗原（流行性耳下腺炎、風疹、水痘、破傷風、インフルエンザ、及び肺炎球菌（Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ））に対する抗体力価の測定は、評価のスケジュールに従って行ってもよい。この情報を、細菌抗原及びウイルス抗原に対する特異的な体液性免疫に対するオビヌツズマブの効果を評価するために使用する、
（ｈ）妊娠検査：妊娠可能な全ての女性は定期的な妊娠検査を受ける。これらの検査は、無尿性ではない患者では尿で、または無尿性の場合は血清のいずれで行ってもよい。スクリーニング時、各試験薬物注入前、及び試験終了／早期終了時に、血清妊娠試験を実施しなければならない。妊娠検査結果が陰性でない限り、注入を施してならない。他のすべての時点で、月経歴及び妊娠リスクに基づいて尿妊娠検査を行ってもよい。尿妊娠検査の結果が陽性であれば、その後の陰性血清検査が投与前に必要である、そして
（ｉ）以下の試料をまた、分析のためにスポンサーまたは被指名者に送付してもよい：Ｂ細胞用血清及びその他の自己免疫疾患／炎症マーカー（ＢＡＦＦを含むがこれに限定されない）。
【０２５６】
注入
オビヌツズマブは、ＩＶ注入によって１０００ｍｇの絶対（フラット）用量として、第１日（両方のコホート）、１５（コホート２）、及び第１６９日（コホート２）の任意の注入として、投与される。移植された患者は、移植時期の注入（第１〜２日）及び移植の１６９日後の別の注入を投与される。
【０２５７】
オビヌツズマブは、完全な緊急蘇生施設がすぐに利用可能であり、かつ患者が常に治験責任医師の厳密な監督下にあるべきである臨床環境（入院患者または外来患者）において患者に投与される。オビヌツズマブはＩＶプッシュまたはボーラスとしては投与されない。最初の注入の終了後、ＩＶラインは、必要に応じてＩＶ薬を投与できるように、２時間以上の間、所定の位置にとどまる。２時間後に有害事象が起こらない場合、ＩＶラインは除去されてもよい。その後の注入では、注入の終了から少なくとも３０分間、ＩＶラインを通したアクセスが適所に維持されなければならず、３０分後に有害事象が発生しなければ、ＩＶアクセスは取り除かれてもよい。
【０２５８】
対象は、試験薬物注入の３０〜６０分前に、経口によるアセトアミノフェン（６５０〜１０００ｍｇ）及びジフェンヒドラミン（５０ｍｇまたは同等の用量の同等の薬剤）による予防的処置を受けるべきである。メチルプレドニゾロン８０ｍｇ  ＩＶは、毎回のオビヌツズマブ注入の開始の３０〜６０分前に与えなければならない。
【０２５９】
注入速度を以下の表４に記載する。
表４．オビヌツズマブの注入速度。
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輸液関連反応の管理は、以下の表５に記載されているように行ってもよい。
表５．注入関連反応の管理。
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注：これらの勧告は、すべての適切な標準措置（完全な蘇生薬及び器具を含む）が利用可能でなければならず、臨床的に必要であれば使用されるべきである、アナフィラキシーを含む生命を脅かす事象に対処するものではない。
ａ症状の評価のために、有害事象のための全国がん研究所共通用語集（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  Ａｄｖｅｒｓｅ  Ｅｖｅｎｔｓ）、バージョン４．０を参照のこと。この表は、免疫グロブリンＥ媒介アレルギー反応の管理を指すものではない。
ｂ補助療法：アセトアミノフェン／パラセタモール及び抗ヒスタミン剤、例えば、ジフェンヒドラミンを最後の４時間以内に受けていない患者は、それを用いて処置されるべきある。静脈内の生理食塩水を指示してもよい。気管支痙攣、蕁麻疹、または呼吸困難の場合、患者は抗ヒスタミン薬、酸素、コルチコステロイド（例えば、１００ｍｇのＩＶプレドニゾロンまたは同等物）及び／または気管支拡張薬を必要とする場合がある。低血圧の場合、患者は昇圧剤を必要とする場合がある。
ｃ再開始後の輸液速度漸増：症状が完全に解消された時点で、注入は、中断前の速度の５０％で再開してもよい。注入関連症状がない場合、注入速度は３０分毎に５０ｍｇ／時の増分で４００ｍｇ／時の最大速度まで漸増されてもよい。
【０２６０】
オビヌツズマブに加えて、全ての患者は、２２日目及び４３日目に高用量ＩＶＩＧ（２ｇ／ｋｇ）を投与される。リツキシマブ及びＩＶＩＧを通じたＢ細胞枯渇の脱感作効果を評価する先行研究では、ＩＶＩＧの最初の注入後にモノクローナル抗体を典型的には投与した（Ｖｏ，Ａ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３５９（２００８）：２４２−２５２）。この提唱された研究では、最初のＩＶＩＧ注入は、オビヌツズマブ注入（複数可）が投与された後に起こり得る。この順序によって、１日目の後の最初の３週間、オビヌツズマブ単独療法に関するデータの生成が可能になる。また、これによってオビヌツズマブの薬物動態（ＦｃＲｎ飽和による）に対する以前のＩＶＩＧ注入の潜在的な交絡効果に関する理論的懸念を緩和し得る（Ｈａｎｓｅｎ，Ｒ．Ｊ．及びＢａｌｔｈａｓａｒ，Ｊ．Ｐ．（２００２）Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．８８：８９８−８９９）及び／または薬力学（Ｆｃγ受容体飽和及びＡＤＣＣでの妨害）（Ｎａｇｅｌｋｅｒｋｅ，Ｓ．Ｑ．及びＫｕｉｊｐｅｒｓ，Ｔ．Ｗ．（２０１５）Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．５：６７４）。
【０２６１】
大量の注入が行われるため、ＩＶＩＧ注入は、血液透析期間の直前または最中に行われる。
【０２６２】
各オビヌスマブ注入の前に、８０ｍｇのＩＶメチルプレドニゾロン、６５０〜１０００ｍｇの経口アセトアミノフェン、及び５０ｍｇの経口ジフェンヒドラミン（または他の抗ヒスタミン薬）を、注入の３０分〜６０分前に投与してもよい。
【０２６３】
本明細書において引用される全ての特許、特許出願、文書、及び論文は、参照によりそれら全体が本明細書に組み込まれる。
【図１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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