(57)【要約】
2018535986.tif 000095  式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩（式中、Ｑは、１，２，４−トリアジン−３−イル、ピリダジン−３−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、または６−フルオロピリダジン−３−イルであり得；Ｒ１は、水素、メトキシ、トリフルオロメトキシ、オキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルであり得；Ｒ２は、水素またはフルオロであり得；Ｒ３は、水素またはメトキシであり得；かつＲ４は、メトキシ、エトキシ、またはメトキシメチルであり得；但し、Ｒ１が水素、メトキシまたはトリフルオロメトキシである場合、Ｒ３は、水素でなく、かつ／またはＲ４はメトキシメチルである）に関する。式（Ｉ）の化合物は、グルタミナーゼ、例えばＧＬＳ１を阻害し得る。
2018535986.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2018535986.tif 000094
またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、１，２，４−トリアジン−３−イル、ピリダジン−３−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、または６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、水素、メトキシ、トリフルオロメトキシ、オキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルであり；
Ｒ２は、水素またはフルオロであり；
Ｒ３は、水素またはメトキシであり；かつ
Ｒ４は、メトキシ、エトキシ、またはメトキシメチルであり；
但し、Ｒ１が水素、メトキシまたはトリフルオロメトキシである場合、Ｒ３は水素でなく、かつ／またはＲ４はメトキシメチルである）。
【請求項２】
Ｒ１がメトキシであり、かつＲ３がメトキシである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項３】
Ｒ１がオキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル；３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項４】
Ｒ２がＨである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項５】
Ｒ３がメトキシである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項６】
Ｒ４がメトキシである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項７】
Ｑが１，２，４−トリアジン−３−イル、またはピリダジン−３−イルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項８】
前記化合物が、
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］プロパンアミド；
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［（３Ｒ）−３−（ピリダジン−３−イルアミノ）ピロリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（５−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項９】
前記化合物が、
（２Ｓ）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される、化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物。
【請求項１１】
治療に用いられる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項１２】
がんの治療に用いられる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【請求項１３】
がんの治療用の薬剤の製造における、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の使用。
【請求項１４】
かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療するための方法であって、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を治療有効量で前記温血動物に投与するステップを含む、方法。
【請求項１５】
前記がんが、乳がん、肺がん、膵がん、腎がん、または肝細胞がんである、請求項１２、１３、または１４に記載の化合物、使用、または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書は、一般に、置換１，３，４−チアジアゾール化合物およびその薬学的に許容できる塩に関する。これらの化合物はグルタミナーゼ１酵素（「ＧＬＳ１」）に作用することから、本明細書は、がんを含むＧＬＳ１媒介性疾患を治療または予防するためのかかる化合物およびその塩の使用にも関する。本明細書はさらに、かかる化合物および塩を含む医薬組成物；かかる化合物および塩を含むキット；かかる化合物および塩の製造方法；かかる化合物および塩の製造において有用な中間体；ならびにがんを含むＧＬＳ１媒介性疾患をかかる化合物および塩を用いて治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
グルタミンは、最も豊富な血漿アミノ酸であり、多数の成長促進経路に関与する。特に、グルタミンは、ＴＣＡ回路における酸化および細胞のレドックス平衡の維持に関与し、ひいてはヌクレオチドおよびアミノ酸合成に窒素を提供する（非特許文献１；非特許文献２、それらの各々はその全体が参照により援用される）。多数のがん細胞が、解糖のピルビン酸がアセチルＣｏＡを生成するのに用いられるのでなく乳酸に変換される場合のワールブルグ効果を含む、細胞内での代謝変化の結果としてのグルタミン代謝に依存する（非特許文献３、その全体が参照により援用される）。グルタミン代謝に対するこの依存性の結果として、かかるがん細胞は、外因性グルタミンレベルにおける変化に対して感受性を示す。さらに、既存の証拠によると、グルタミノリシスが特定のがん型における主要な役割を担い（非特許文献４、その全体が参照により援用される）、Ｍｙｃなどの公知の発癌性ドライバーに関連する（非特許文献５、その全体が参照により援用される）ことが示唆される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｃｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．．２００７，１２，３４４−５７
【非特許文献２】ＤｅＢｅｒａｒｄｉｎｉｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｎｇ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２０１０，３１３−３２４
【非特許文献３】Ｋｏｐｐｅｎｏｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２０１１，１１，３２５−３３７
【非特許文献４】Ｈｅｎｓｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２０１３，１２３，３６７８−３６８４
【非特許文献５】Ｄａｎｇ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１０，７０，８５９−８６３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
グルタミン酸塩に対するグルタミン異化の最初のステップは、２つのアイソフォーム、ＧＬＳ１およびＧＬＳ２（当初、腎臓および肝臓にて各々発現されるものとして同定された）として存在するグルタミナーゼにより触媒される。腎臓グルタミナーゼ（ＧＬＳ１）は、肝臓グルタミナーゼ（ＧＬＳ２）よりも広範に発現されることが知られており、２つのスプライスバリアント、ＫＧＡおよびより短いＧＡＣアイソフォームを有し、それら双方はミトコンドリア内に位置する（Ｅｌｇａｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  １９９９，１，５１−６２；Ｃａｓｓａｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．２０１２，１０９，１０９２−１０９７、それらの各々はその全体が参照により援用される）。ＧＬＳ１の発現は、多数の疾患型における腫瘍成長および悪性度に関連する（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２０１０，１８，２０７−２１９；ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｈｅｕｖａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏ．Ｔｈｅｒ．２０１２，１３，１１８５−１１９４、それらの各々はその全体が参照により援用される）。したがって、ＧＬＳ１の阻害剤は、がんの単独療法としての治療または他の抗がん剤と組み合わせた治療において有用であることが想定される。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
一態様では、式（Ｉ）：
【化１】
2018535986.tif 000003
の化合物またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、１，２，４−トリアジン−３−イル、ピリダジン−３−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、または６−フルオロピリダジン−３−イルであり得；
Ｒ１は、水素、メトキシ、トリフルオロメトキシ、オキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルであり得；
Ｒ２は、水素またはフルオロであり得；
Ｒ３は、水素またはメトキシであり得；かつ
Ｒ４は、メトキシ、エトキシ、またはメトキシメチルであり得；
但し、Ｒ１が水素、メトキシまたはトリフルオロメトキシである場合、Ｒ３は水素でなく、かつ／またはＲ４はメトキシメチルである）。
【０００６】
別の態様では、
（２Ｓ）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【０００７】
別の態様では、医薬組成物は、上記のような化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む。
【０００８】
別の態様では、治療に用いられる、上記のような化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【０００９】
別の態様では、がんの治療に用いられる、上記のような化合物、またはその薬学的に許容できる塩。
【００１０】
別の態様では、がんの治療用の薬剤の製造における、上記のような化合物、またはその薬学的に許容できる塩の使用。
【００１１】
別の態様では、かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療するための方法は、上記のような化合物、またはその薬学的に許容できる塩を治療有効量で温血動物に投与するステップを含む。
【００１２】
他の態様が、本明細書および特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
多数の実施形態が、本明細書全体を通じて詳述され、当該技術分野に精通した読者にとって明白になるであろう。本発明は、その任意の特定の実施形態に限定されるものとして解釈されるべきでない。
【００１４】
式（Ｉ）
【化２】
2018535986.tif 000004
の化合物またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、１，２，４−トリアジン−３−イル、ピリダジン−３−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、または６−フルオロピリダジン−３−イルであり得；
Ｒ１は、水素、メトキシ、トリフルオロメトキシ、オキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル；３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルであり得；
Ｒ２は、水素またはフルオロであり得；
Ｒ３は、水素またはメトキシであり得；かつ
Ｒ４は、メトキシ、エトキシ、メトキシメチル、またはエトキシメチルであり得；
但し、Ｒ１が水素、メトキシまたはトリフルオロメトキシである場合、Ｒ３は水素でなく、かつ／またはＲ４はメトキシメチルである）
が提供される。
【００１５】
１，２，４−トリアジン−３−イル、ピリダジン−３−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、および６−フルオロピリダジン−３−イル環は、以下の構造：
【化３】
2018535986.tif 000005
を有する。
【００１６】
オキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル；３−メトキシアゼチジン−１−イル、および３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル環は、以下の構造：
【化４】
2018535986.tif 000006
を有する。
【００１７】
一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の式（Ｉａ）：
【化５】
2018535986.tif 000007
（式中、Ｑ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は上で定義の通りである）
を有する。
【００１８】
（２Ｓ）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容できる塩もまた提供される。
【００１９】
用語「薬学的に許容できる」は、対象（例えば塩、剤形、希釈剤または担体）が患者における使用に適することを明示するために用いられる。薬学的に許容できる塩の事例リストが、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ／Ｚｕｅｒｉｃｈ：Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ／ＶＨＣＡ，２００２（その全体が参照により援用される）中に見出すことができる。式（Ｉ）の化合物の好適な薬学的に許容できる塩は、例えば酸付加塩である。式（Ｉ）の化合物の酸付加塩は、化合物を当業者に公知の条件下で好適な無機酸もしくは有機酸と接触状態にすることにより形成されてもよい。酸付加塩は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸などの無機酸を用いて形成されてもよい。酸付加塩はまた、例えば、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、またはベンゼンスルホン酸などの有機酸を用いて形成されてもよい。
【００２０】
したがって、一実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで薬学的に許容できる塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、またはベンゼンスルホン酸の塩である。
【００２１】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が提供され、薬学的に許容できる塩は、塩酸または臭化水素酸の塩である。
【００２２】
式（Ｉ）の化合物のさらなる好適な薬学的に許容できる塩は、塩基付加塩である。式（Ｉ）の化合物の塩基付加塩は、化合物を当業者に公知の条件下で好適な無機塩基もしくは有機塩基と接触状態にすることにより形成されてもよい。塩基付加塩は、例えば、アルカリ金属水酸化物（ナトリウム、カリウム、またはリチウム水酸化物など）またはアルカリ土類金属水酸化物（水酸化カルシウムまたは水酸化マグネシウムなど）などの無機塩基を用いて形成されてもよい。塩基付加塩はまた、例えば、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンなどの有機塩基を用いて形成されてもよい。
【００２３】
したがって、一実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで薬学的に許容できる塩は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンの塩である。
【００２４】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで薬学的に許容できる塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンの塩である。
【００２５】
さらなる実施形態は、本明細書で定義される実施形態（例えば請求項１の実施形態）のいずれかを、実施例１（ａ）、１（ｂ）、２（ａ）、２（ｂ）、３（ａ）、３（ｂ）、４（ａ）、４（ｂ）、５（ａ）、５（ｂ）、６（ａ）、６（ｂ）、７（ａ）、７（ｂ）、８（ａ）、８（ｂ）、９（ａ）、９（ｂ）、１０（ａ）、１０（ｂ）、１１（ａ）、１１（ｂ）、１２（ａ）、１２（ｂ）、１３（ａ）、１３（ｂ）、１４（ａ）、１４（ｂ）、１５（ａ）、１５（ｂ）、１６（ａ）、１６（ｂ）、１７（ａ）、１７（ｂ）、１８（ａ）、１８（ｂ）、１９（ａ）、１９（ｂ）、２０（ａ）、２０（ｂ）、２１（ａ）、２１（ｂ）、２２（ａ）、２２（ｂ）、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５（ａ）、４５（ｂ）、４６（ａ）、４６（ｂ）、４７（ａ）、４７（ｂ）、４８（ａ）、４８（ｂ）、４９（ａ）、４９（ｂ）、５０（ａ）、５０（ｂ）、５１（ａ）、５１（ｂ）、５２（ａ）、５２（ｂ）、５３（ａ）、５３（ｂ）、５４（ａ）、および５４（ｂ）からなる群から選択される１つ以上の特定の実施例（例えば、１つ、２つもしくは３つの特定の実施例、または代替的に１つの特定の実施例）が個別に請求されないという条件で提供する。
【００２６】
式（Ｉ）中の変数群の一部の値は以下の通りである。さらなる実施形態を提供するため、かかる値は、本明細書で定義される定義、請求項（例えば請求項１）、または実施形態のいずれかと組み合わせて用いられてもよい。
【００２７】
Ｒ１は、メトキシまたはトリフルオロメトキシであり得る。
【００２８】
Ｒ１はメトキシであり得、かつＲ３はメトキシであり得る。
【００２９】
Ｒ１は、オキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルであり得る。
【００３０】
Ｒ１は、オキセタン−３−イルであり得る。
【００３１】
Ｒ１は、３−フルオロアゼチジン−１−イルであり得る。
【００３２】
Ｒ１は、３−メトキシアゼチジン−１−イルであり得る。
【００３３】
Ｒ１は、３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルであり得る。
【００３４】
Ｒ２は、Ｈであり得る。
【００３５】
Ｒ２は、フルオロであり得る。
【００３６】
Ｒ３は、メトキシであり得る。
【００３７】
Ｒ４は、メトキシまたはエトキシであり得る。
【００３８】
Ｒ４は、メトキシであり得る。
【００３９】
Ｒ４は、メトキシメチルであり得る。
【００４０】
Ｑは、１，２，４−トリアジン−３−イルまたはピリダジン−３−イルであり得る。
【００４１】
Ｑは、１，２，４−トリアジン−３−イルであり得る。
【００４２】
Ｑは、ピリダジン−３−イルであり得る。
【００４３】
Ｑは、６−メチルピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり得る。
【００４４】
Ｑは、６−メチルピリダジン−３−イルであり得る。
【００４５】
Ｑは、６−フルオロピリダジン−３−イルであり得る。
【００４６】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、１，２，４−トリアジン−３−イル、ピリダジン−３−イル、６−メチルピリダジン−３−イル、または６−フルオロピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、メトキシ、トリフルオロメトキシ、オキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルであり；
Ｒ２は、水素またはフルオロであり；
Ｒ３は、水素またはメトキシであり；かつ
Ｒ４は、メトキシ、エトキシ、またはメトキシメチルであり；
但し、Ｒ１がメトキシまたはトリフルオロメトキシである場合、Ｒ３は水素でなく、かつ／またはＲ４はメトキシメチルである）
が提供される。
【００４７】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルであり；かつ
Ｒ１は、メトキシまたはトリフルオロメトキシである）
が提供される。
【００４８】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルであり；かつ
Ｒ１は、オキセタン−３−イル、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルである）
が提供される。
【００４９】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、ピリダジン−３−イルであり；
Ｒ１は、メトキシであり；かつ
Ｒ３は、メトキシである）
が提供される。
【００５０】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩（式中、
Ｑは、６−メチルピリダジン−３−イルまたは６−フルオロピリダジン−３−イルであり；かつ
Ｒ１は、３−フルオロアゼチジン−１−イル、３−メトキシアゼチジン−１−イル、または３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イルである）
が提供される。
【００５１】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで化合物は、
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］プロパンアミド；
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［（３Ｒ）−３−（ピリダジン−３−イルアミノ）ピロリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（５−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される。
【００５２】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで化合物は、
（２Ｓ）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド；
（２Ｒ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド；および
（２Ｓ）−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
からなる群から選択される。
【００５３】
本明細書に記載の化合物および塩は、溶媒和形態および非溶媒和形態で存在してもよい。例えば、溶媒和形態は、水和形態、例えば、半水化物、一水和物、二水和物、三水和物またはその代替量であってもよい。本発明は、式（Ｉ）の化合物のすべてのかかる溶媒和および非溶媒和形態を包含する。
【００５４】
本明細書に記載の化合物および塩の原子は、異なる同位体形態で存在してもよい。本発明は、式（Ｉ）の化合物のあらゆる同位体形態、例えば１１Ｃまたは１３Ｃ炭素および１Ｈ、２Ｈ（ジュウテリウム）または３Ｈ（トリチウム）水素を包含する。
【００５５】
本明細書に記載の化合物および塩は、互変異性体の混合物として存在してもよい。「互変異性体」は、水素原子の転位に起因する平衡状態で存在する構造異性体である。本発明は、式（Ｉ）の化合物のあらゆる互変異性体を含む。
【００５６】
式（Ｉ）の化合物は、異なるジアステレオマー形態で調製され得る。本発明は、式（Ｉ）の化合物のあらゆるジアステレオマー形態を含む。
【００５７】
一実施形態では、≧９５％、≧９８％または≧９９％のジアステレオマー過剰率（％ｄｅ）の単一のジアステレオマーである、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。一実施形態では、単一のジアステレオマーは、≧９９％のジアステレオマー過剰率（％ｄｅ）で存在する。
【００５８】
ＧＬＳ１を阻害すると考えられる化合物、すなわち、式（Ｉ）の化合物、およびその薬学的に許容できる塩は、治療、例えば少なくとも一部にはＧＬＳ１により媒介される疾患または医学的状態、例えばがんの治療において有用であることが想定される。
【００５９】
「がん」について言及する場合、これが非転移性がん、さらには転移性がんの双方を含むことから、がんの治療は原発性腫瘍、さらには腫瘍転移の双方の治療を含む。
【００６０】
一実施形態では、がんは転移性がんである。
【００６１】
一実施形態では、がんは非転移性がんである。
【００６２】
「ＧＬＳ１阻害活性」は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の存在に対する直接的または間接的応答としてのＧＬＳ１の活性における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の不在下でのＧＬＳ１の活性に対する減少を指す。活性におけるかかる減少は、式（Ｉ）の化合物、もしくはその薬学的に許容できる塩とＧＬＳ１との直接的相互作用に起因する、または式（Ｉ）の化合物、もしくはその薬学的に許容できる塩とＧＬＳ１活性に次々に影響する１つ以上の他の因子との相互作用に起因することがある。例えば、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩は、ＧＬＳ１に直接的に結合することにより；別の因子によるＧＬＳ１活性の減少を（直接的または間接的に）引き起こすことにより；または細胞もしくは生物に存在するＧＬＳ１の量を（直接的または間接的に）低減することにより、ＧＬＳ１を減少させることがある。
【００６３】
用語「治療」は、疾患を治療するかまたは基礎的病理を矯正もしくは補正するというその正常な意味を有することが意図される。用語「治療」はまた、「予防」を、それに対する具体的な指示がない限り、含む。用語「治療的な」および「治療的に」は、対応する様式で解釈されるべきである。
【００６４】
用語「治療有効量」は、被験者における治療法を提供するのに有効である、本明細書中の実施形態のいずれかに記載のような式（Ｉ）の化合物の量を指す。がんの場合、治療有効量は、上記の「治療法」、「治療」および「予防」の定義において記載の通り、被験者において観測可能または測定可能な変化のいずれかを引き起こすことがある。例えば、有効量は、がんまたは腫瘍細胞の数を低減し得る；総腫瘍サイズを低減し得る；腫瘍細胞の例えば軟部組織および骨を含む末梢臓器への浸潤を阻害または停止し得る；腫瘍転移を阻害および停止し得る；腫瘍成長を阻害および停止し得る；がんに関連する症状の１つ以上をある程度軽減し得る；罹患率および死亡率を低減し得る；生活の質を改善し得る；またはかかる効果の組み合わせであり得る。有効量は、ＧＬＳ１活性の阻害に対して応答する疾患の症状を低減するのに十分な量であってもよい。がん療法については、インビボでの有効性は、例えば、生存の持続時間、疾患進行までの時間（ＴＴＰ）、応答速度（ＲＲ）、応答の持続時間、および／または生活の質を評価することにより測定され得る。当業者によって理解されるように、有効量は、投与経路、賦形剤の使用、および他の薬剤との同時使用に応じて変動してもよい。例えば、併用療法が用いられる場合、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できる塩の量および他の薬学的活性剤の量は、組み合わされるとき、動物患者における標的化された障害を治療するのに一緒に有効である。これに関連して、組み合わされた量は、組み合わされるとき、上記のようなＧＬＳ１活性の阻害に対して応答する疾患の症状を低減するのに十分である場合、「治療有効量」に含まれる。典型的には、かかる量は、例えば、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できる塩についての本明細書に記載の用量範囲に始まり、他の薬学的活性化合物の認可されたまたはそうでなければ公表された用量範囲により、当業者によって決定されてもよい。
【００６５】
用語「予防」は、その正常な意味を有することが意図され、疾患の発生を予防するための一次予防および疾患が既に発生しており、患者が疾患の増悪または悪化に対して一時的または持続的に保護される場合の二次予防を含む。
【００６６】
用語「治療」は、「治療法」と同義的に用いられる。同様に、用語「治療する」は、「治療法」が本明細書で定義される通りである場合での治療法を適用するものとして見なされ得る。
【００６７】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物が提供される。一実施形態では、医薬組成物は、遊離塩基としての式（Ｉ）の化合物を含む。別の実施形態では、医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容できる塩を含む。
【００６８】
一実施形態では、治療法に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。
【００６９】
一実施形態では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。
【００７０】
一実施形態では、がんの治療用の薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の使用が提供される。
【００７１】
一実施形態では、ＧＬＳ１によって媒介される疾患の治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。一実施形態では、ＧＬＳ１によって媒介される疾患はがんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん（例えばトリプルネガティブ乳がん）、肺がん（例えば非小細胞肺がん）、膵がん、腎がん、または肝細胞がんであり得る。
【００７２】
「トリプルネガティブ乳がん」は、ストロゲン受容体、プロゲステロン受容体およびＨｅｒ２／ｎｅｕにおける遺伝子を発現しない、または過小発現する任意の乳がんである。
【００７３】
一実施形態では、ＧＬＳ１によって媒介される疾患の治療用の薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩の使用が提供される。一実施形態では、ＧＬＳ１によって媒介される疾患はがんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん（例えばトリプルネガティブ乳がん）、肺がん（例えば非小細胞肺がん）、膵がん、腎がん、または肝細胞がんであり得る。
【００７４】
一実施形態では、がんの治療用の薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供される。
【００７５】
一実施形態では、ＧＬＳ１を阻害する方法であって、式（Ｉ）の化合物を投与するステップを含む、方法が提供される。
【００７６】
一実施形態では、ＧＬＳ１の阻害がかかる治療を必要とする温血動物において有利である疾患を治療するための方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を治療有効量で温血動物に投与するステップを含む、方法が提供される。
【００７７】
「温血動物」は、例えばヒトを含む。
【００７８】
一実施形態では、かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療するための方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を治療有効量で温血動物に投与するステップを含む、方法が提供される。一部の実施形態では、がんは、乳がん（例えばトリプルネガティブ乳がん）、肺がん（例えば非小細胞肺がん）、膵がん、腎がん、または肝細胞がんであり得る。
【００７９】
本明細書に記載のがんにおける治療は、唯一の治療として適用されてもよく、または式（Ｉ）の化合物の投与に加えて、通常の手術、放射線療法、もしくは化学療法；もしくはかかる追加的な治療法の組み合わせを含んでもよい。かかる通常の手術、放射線療法、または化学療法は、式（Ｉ）の化合物を用いる治療に対して、同時に、連続的に、または別々に施されてもよい。
【００８０】
したがって、一実施形態では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質が提供される。
【００８１】
一実施形態では、がんの同時の、別々のまたは連続的な治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質が提供される。
【００８２】
一実施形態では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩が提供され、ここで式（Ｉ）の化合物は、少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質に対して同時に、別々に、または連続的に投与される。
【００８３】
一実施形態では、かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療する方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩および少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質を温血動物に投与するステップを含む、方法が提供され、ここで式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および追加的な抗腫瘍物質の量は、抗がん効果をもたらす上で一緒に有効である。
【００８４】
一実施形態では、かかる治療を必要とする温血動物におけるがんを治療する方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を温血動物に投与するステップと、少なくとも１つの追加的な抗腫瘍物質を同時に、別々にまたは連続的に温血動物に投与するステップと、を含む、方法が提供され、ここで式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および追加的な抗腫瘍物質の量は、抗がん効果をもたらす上で一緒に有効である。
【００８５】
任意の実施形態では、追加的な抗腫瘍物質はタキサンである。一実施形態では、タキサンはパクリタキセルである。一実施形態では、タキサンはドセタキセルである。
【００８６】
任意の実施形態では、追加的な抗腫瘍物質は白金治療薬である。一実施形態では、白金治療薬は、シスプラチン、オキサリプラチン、またはカルボプラチンである。
【００８７】
さらなる実施形態によると、
ａ）第１の単位剤形中の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩；
ｂ）第２の単位剤形中の第２の抗腫瘍物質；
ｃ）第１および第２の単位剤形を含有するための容器；および任意選択的には
ｄ）使用説明書
を含むキットが提供される。
【００８８】
式（Ｉ）の化合物、およびその薬学的に許容できる塩は、１つ以上の薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物として投与されてもよい。したがって、一実施形態では、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物が提供される。
【００８９】
組成物は、経口使用（例えば、錠剤、トローチ剤、硬もしくは軟カプセル剤、水性もしくは油性懸濁液、乳剤、分散性散剤もしくは顆粒剤、シロップ剤またはエリキシル剤として）、局所使用（例えば、クリーム、軟膏剤、ゲル剤、または水性もしくは油性の溶液または懸濁液として）、吸入による投与（例えば、微粉化粉末または液体エアロゾルとして）、ガス注入による投与（例えば、微粉化粉末として）または非経口投与（例えば、静脈内、皮下、筋肉内投与用の滅菌水性もしくは油性溶液として）、または坐剤として好適な形態であってもよい。組成物は、通常の医薬賦形剤を用いる通常の手順により得てもよい。したがって、経口使用を意図した組成物は、例えば、１つ以上の着色剤、甘味剤、香味剤、および／または防腐剤を含有してもよい。
【００９０】
一実施形態では、治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物が提供される。
【００９１】
一実施形態では、がんの治療に用いられる、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および少なくとも１つの薬学的に許容できる希釈剤もしくは担体を含む医薬組成物が提供される。一部の実施形態では、がんは、乳がん（例えばトリプルネガティブ乳がん）、肺がん（例えば非小細胞肺がん）、膵がん、腎がん、または肝細胞がんであり得る。
【００９２】
式（Ｉ）の化合物は通常、５〜５０００ｍｇ／ｍ２（動物の体面積）、すなわち約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲内の単位用量で温血動物に投与されることになり、これは通常、治療有効用量をもたらす。錠剤またはカプセル剤などの単位用量形態は通常、例えば１〜２５０ｍｇの活性成分を含有することになる。一日量は、必然的に、治療される宿主、特定の投与経路、同時投与されている任意の治療薬、および治療中の疾病の重症度に応じて変動することになる。したがって、任意の特定患者を治療中の施術者が、最適用量を決定してもよい。
【実施例】
【００９３】
様々な実施形態が以下の実施例によって例示される。本発明は、実施例に限定されるものとして解釈されるべきではない。
【００９４】
実施例の調製に際して、一般に次のことが言える。
ａ）操作は、特に指定のない限り、環境温度、すなわち約１７〜３０℃の範囲内でかつ窒素などの不活性ガスの雰囲気下で実施した；
ｂ）回転蒸発または真空でＧｅｎｅｖａｃ機器を利用することにより蒸発を行い、固形残留物の濾過による除去後に精査手順を実施した；
ｃ）フラッシュクロマトグラフィー精製は、Ｇｒａｃｅ  Ｒｅｓｏｌｖｅプレパックシリカカラムを用いた自動化されたＩｓｃｏ  Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ  Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ、ＲｅｄｉＳｅｐ  Ｇｏｌｄ  Ｃ１８カラムを用いたＩｓｃｏ  Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ  Ｒｆ（逆相フラッシュ）上で実施した；
ｄ）収量（存在する場合）は必ずしも最大の達成可能な収量とは限らない；
ｅ）式（Ｉ）の最終生成物の構造は、δスケールで測定されるＮＭＲ化学シフトを用いた核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光により確認した。プロトン磁気共鳴スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ７００（７００ＭＨｚ）、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ５００（５００ＭＨｚ）、Ｂｒｕｋｅｒ  ４００（４００ＭＨｚ）またはＢｒｕｋｅｒ  ３００（３００ＭＨｚ）機器を用いて測定し；１９Ｆ  ＮＭＲは、２８２ＭＨｚまたは３７６ＭＨｚで測定し；１３Ｃ  ＮＭＲは、７５ＭＨｚまたは１００ＭＨｚで測定し；測定値は、特に指定されない限り、約２０〜３０℃で取得し；以下の略称：ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｑ，四重線；ｍ，多重線；ｄｄ，二重線の二重線；ｄｄｄ，二重線の二重線の二重線；ｄｔ，三重線の二重線；ｂｓ，幅広いシグナル、を用いている；
ｆ）式（Ｉ）の最終生成物はまた、２９９６  ＰＤＡおよび２０００  ａｍｕ  ＺＱ単一四重極質量分析計を有するＷａｔｅｒｓ  ２７９０／９５ＬＣシステムに基づくＨＰＬＣシステムを用いての液体クロマトグラフィー後の質量分析（ＬＣＭＳ）により特徴づけた。用いた溶媒は、Ａ＝水、Ｂ＝アセトニトリル、Ｃ＝５０：５０のアセトニトリル：水／０．１％ギ酸およびＤ＝５０：５０のアセトニトリル：水／０．１％水酸化アンモニウムであった。１．１ｍＬ／分の流速で、試料５μＬを５０×２．１  ５μｍのＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  ＮＸカラム上に注入した。勾配は、４．０分間で９５％のＡから９５％のＢへ移行し、Ｃ（酸分析用、Ｄは塩基分析用に用いる）の５％一定注入を伴った。開始条件に戻す前、９５％のＢで０．５分間フローを保持した。データは、質量分析計で正および負モードの双方にて１５０〜８５０ａｍｕ、およびＰＤＡで２２０〜３２０ｎｍが得られた。ＬＣＭＳはまた、サンプルマネージャーを有するＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｂｉｎａｒｙポンプ、Ａｃｑｕｉｔｙ  ＰＤＡおよびＳＱＤ質量分析計を用いたＵＰＬＣシステム上で実施した。用いた溶媒は、Ａ１＝０．１％ギ酸（水性）、Ｂ１  アセトニトリル中０．１％ギ酸、Ａ２＝０．１％水酸化アンモニウム（水性）およびＢ２  アセトニトリル中０．１％水酸化アンモニウムであった。１ｍＬ／分の流速で、試料１μＬは、５０×２．１  １．７ｕｍのＷａｔｅｒｓ  ＢＥＨカラム（４０℃）上に注入した。０．２分間保持され、開始条件に戻す前、勾配は１．３０分かけて９７％のＡ１から９７％のＢ１へ移行した（塩基分析においては、Ａ１およびＢ１をＡ２およびＢ２に置き換える）。データは、質量分析計で正および負イオンモードにて１５０〜１０００ａｍｕ、およびＰＤＡで２４５〜３２０ａｍｕが得られた。
ｇ）  中間体は、完全に特徴づけることは一般的でなく、純度は、薄層クロマトグラフィー、質量スペクトル、ＨＰＬＣおよび／またはＮＭＲ分析により評価した；
ｈ）以下の略称：ｈ＝時間；ｒ．ｔ．＝室温（約１７〜３０℃）；ｃｏｎｃ．＝濃縮された；ＦＣＣ＝シリカを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィー；ＡＩＢＮ＝アゾビスイソブチロニトリル；ＤＣＭ＝ジクロロメタン；ＤＩＰＥＡ＝ジ−イソプロピルエチルアミン；ＤＭＡ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド；ＥＤＣ＝１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド；Ｅｔ２Ｏ＝ジエチルエーテル；ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル；ＥｔＯＨ＝エタノール；ＨＡＴＵ＝１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート；ＨＯＢＴ＝ヒドロキシベンゾトリアゾール；Ｋ２ＣＯ３＝炭酸カリウム；ＭｅＯＨ＝メタノール；ＭｅＣＮ＝アセトニトリル；ＭｇＳＯ４＝無水硫酸マグネシウム；Ｎａ２ＳＯ４＝無水硫酸ナトリウム；ＮＢＳ＝Ｎ−ブロモスクシンイミド；ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン；ｓａｔ．＝飽和水溶液、を用いている。
【００９５】
以下の幾つかの例では、化合物のジアステレオマー対を記述する。例えば、実施例１（ａ）および実施例１（ｂ）の化合物は、単一の反応の生成物中の混合物として形成され、その後分離される、化合物のジアステレオマー対を表す。かかる実施例では、立体化学の任意の指定は絶対的なものではない。実例として、実施例１（ａ）および１（ｂ）は、名付けられた化合物の（２Ｓ，３Ｒ）および（２Ｒ，３Ｒ）ジアステレオマーに関連するが、実施例１（ａ）が（２Ｓ，３Ｒ）ジアステレオマーとして、また実施例１（ｂ）が（２Ｒ，３Ｒ）ジアステレオマーとして明確に指定されることを述べる意図はない。
【００９６】
実施例１（ａ）および１（ｂ）
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化６】
2018535986.tif 000008
ＨＡＴＵ（３５１ｍｇ、０．９２ミリモル）を、室温でＮ−メチル−２−ピロリジノン（２ｍＬ）およびＤＭＦ（３ｍＬ）中、［２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−アセチル］オキシリチウム（中間体１７、１７０ｍｇ、０．７１ミリモル）、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１８７ｍｇ、０．７１ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．３７２ｍＬ、２．１３ミリモル）に添加した。得られた溶液を室温で４５分間撹拌した。この溶液をＭｅＯＨ（１５ｍＬ）で希釈し、ＭｅＯＨ、次いでＭｅＯＨ中１Ｎ  ＮＨ３を流しながら、２０ｇのＳＣＸカートリッジに通過させ、生成物を溶出させた。溶媒を低圧下で蒸発させ、粗生成物を得て、それをＭｅＯＨ／ＤＣＭに溶解し、シリカゲル上で蒸発させた。残渣をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜１２％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ジアステレオ異性体の混合物をガム状物として得た（２８０ｍｇ）。ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分でのＭｅＯＨ）により分離し、次を得た。
【００９７】
第１溶出異性体の実施例１（ａ）、２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（６５ｍｇ，２３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０７（１Ｈ，ｄｑ），２．２３−２．３２（１Ｈ，ｍ），３．４０−３．５９（３Ｈ，ｍ），３．７１−３．７８（１Ｈ，ｍ），３．８０−３．９３（２Ｈ，ｍ），４．１４（２Ｈ，ｄｔ），４．３７（１Ｈ，ｄｔ），４．８７（１Ｈ，ｓ），５．４８（１Ｈ，ｄｔｔ），６．４３（１Ｈ，ｄｄ），６．５８（１Ｈ，ｓ），６．８０（１Ｈ，ｄ），６．８５（１Ｈ，ｄｄ），７．１７（１Ｈ，ｔ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ），７．６４（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．１０（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４８５．
【００９８】
第２溶出異性体の実施例１（ｂ）  ２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（６８ｍｇ，２４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０６（１Ｈ，ｄｄ），２．２８（１Ｈ，ｔｄ），３．４２−３．５９（３Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），３．８−３．９３（２Ｈ，ｍ），４．１４（２Ｈ，ｄｔ），４．３７（１Ｈ，ｄｔ），４．８８（１Ｈ，ｓ），５．４８（１Ｈ，ｄｄｄ），６．４４（１Ｈ，ｄｄ），６．５７−６．６１（１Ｈ，ｍ），６．８１（１Ｈ，ｄ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ），７．１８（１Ｈ，ｔ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ），７．６５（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．１２（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４８５．
【００９９】
実施例２（ａ）および２（ｂ）
（２Ｓ）−２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化７】
2018535986.tif 000009
ＨＡＴＵ（２２５ｍｇ、０．５９ミリモル）を、室温でＮ−メチル−２−ピロリジノン（２ｍＬ）およびＤＭＦ（３ｍＬ）中、２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸（中間体２２、１１７ｍｇ、０．４６ミリモル）、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１２０ｍｇ、０．４６ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．２３９ｍＬ、１．３７ミリモル）に添加した。得られた溶液を室温で４５分間撹拌した。この溶液をＭｅＯＨ（１５ｍＬ）で希釈し、ＭｅＯＨを流しながら、２０ｇのＳＣＸカートリッジに通過させ、不純物を除去し、次いでＭｅＯＨ中ＮＨ３の１Ｎ溶液を流すことで、生成物を溶出させた。溶媒を低圧下で蒸発させ、粗生成物を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜６％）により精製した。純粋画分を蒸発させ、ジアステレオ異性体の混合物としての生成物をガム状物として得た（１３５ｍｇ）。ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ２カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分でのＭｅＯＨ／ＥｔＯＨ）により分離し、次を得た。
【０１００】
第１溶出異性体の実施例２（ａ）  ２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（５５ｍｇ，４１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０７（１Ｈ，ｄｔ），２．２２−２．３２（１Ｈ，ｍ），３．４８（１Ｈ，ｄｄ），３．５１−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．２５（４Ｈ，ｔ），４．３７（１Ｈ，ｄｑ），４．８９（１Ｈ，ｓ），６．４９−６．５６（１Ｈ，ｍ），６．６７（１Ｈ，ｄ），６．８１−６．９１（２Ｈ，ｍ），７．２１（１Ｈ，ｔ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ），７．６４（１Ｈ，ｄ），８．４６（１Ｈ，ｄｄ），１２．１１（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０３．
【０１０１】
第２溶出異性体の実施例２（ｂ）  ２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（６１ｍｇ，４５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）２．００−２．１１（１Ｈ，ｍ），２．２２−２．３１（１Ｈ，ｍ），３．４８（１Ｈ，ｄｄ），３．５２−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．２５（４Ｈ，ｔ），４．３６（１Ｈ，ｄｔ），４．８８（１Ｈ，ｓ），６．５２（１Ｈ，ｄｄ），６．６６（１Ｈ，ｓ），６．８２−６．９１（２Ｈ，ｍ），７．２１（１Ｈ，ｔ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ），７．６１（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．１１（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０３．
【０１０２】
実施例３（ａ）および３（ｂ）
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化８】
2018535986.tif 000010
ＨＡＴＵ（２１６ｍｇ、０．５７ミリモル）を、室温でＮ−メチル−２−ピロリジノン（２ｍＬ）およびＤＭＦ（３ｍＬ）中、２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］酢酸（中間体２５、１１０ｍｇ、０．４４ミリモル）、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１１５ｍｇ、０．４４ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．２２９ｍＬ、１．３１ミリモル）に添加した。得られた溶液を室温で４５分間撹拌した。この溶液をＭｅＯＨ（１５ｍＬ）で希釈し、ＭｅＯＨ、次いでＭｅＯＨ中ＮＨ３の１Ｎ溶液を流しながら、２０ｇのＳＣＸカートリッジに通過させ、不純物を除去し、生成物を溶出させた。溶媒を低圧下で蒸発させ、粗生成物を得た。粗生成物をＭｅＯＨ／ＤＣＭに溶解し、シリカゲル上で蒸発させた。残渣をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜１０％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ジアステレオ異性体の混合物としての生成物をガム状物として得た（１４０ｍｇ）。結合したジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分での１００％ＭｅＯＨ）により分離し、次を得た。
【０１０３】
第１溶出異性体の実施例３（ａ）  ２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（７４ｍｇ，１５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．１３（１Ｈ，ｔｄ），２．３−２．３８（１Ｈ，ｍ），３．３０（３Ｈ，ｓ），３．３５（３Ｈ，ｓ），３．５４（１Ｈ，ｄｄ），３．５８−３．６７（４Ｈ，ｍ），３．８１（１Ｈ，ｄｄ），４．０５−４．１２（２Ｈ，ｍ），４．３７（１Ｈ，ｄｄｄ），４．４４（１Ｈ，ｄｑ），４．９２（１Ｈ，ｓ），６．４５（１Ｈ，ｄｄ），６．６１（１Ｈ，ｄ），６．８２（１Ｈ，ｄ），６．９１（１Ｈ，ｄｄ），７．２１（１Ｈ，ｔ），７．３８（１Ｈ，ｄｄ），７．７１（１Ｈ，ｄ），８．５３（１Ｈ，ｄｄ），１２．１６（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４９７．
【０１０４】
第２溶出異性体の実施例３（ｂ）  ２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（６７ｍｇ，１４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．１１（１Ｈ，ｄｑ），２．３３（１Ｈ，ｄｔ），３．２９（３Ｈ，ｓ），３．３４（３Ｈ，ｓ），３．５４（１Ｈ，ｄｄ），３．５８−３．６６（４Ｈ，ｍ），３．８０（１Ｈ，ｄｄ），４．０５−４．１２（２Ｈ，ｍ），４．３６（１Ｈ，ｄｄｄ），４．４−４．４７（１Ｈ，ｍ），４．９１（１Ｈ，ｓ），６．４４（１Ｈ，ｄｄ），６．６０（１Ｈ，ｓ），６．８２（１Ｈ，ｄ），６．９１（１Ｈ，ｄｄ），７．２０（１Ｈ，ｔ），７．３７（１Ｈ，ｄｄ），７．６９（１Ｈ，ｄ），８．５３（１Ｈ，ｄｄ），１２．１５（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４９７．
【０１０５】
実施例４（ａ）および４（ｂ）
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化９】
2018535986.tif 000011
ＨＡＴＵ（３２９ｍｇ、０．８７ミリモル）を、窒素下、２１℃でＤＭＦ（６ｍＬ）中、２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−酢酸（中間体２８、１９６ｍｇ、０．８７ミリモル）、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体６、２００ｍｇ、０．７２ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．２５２ｍＬ、１．４４ミリモル）に添加した。得られた溶液を２１℃で２時間撹拌した。粗混合物をＳＣＸカラムを用いるイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物を、ＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてカラムから溶出させ、純粋画分を蒸発させて乾燥し、粗生成物を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜１２％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、褐色ガム状物を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜８％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ジアステレオ異性体の混合物を黄色ガム状物として得た。ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｘ  Ｃ２カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分での１００％ＭｅＯＨ）により分離し、次を得た。
【０１０６】
第１溶出異性体の実施例４（ａ）  ２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（２１ｍｇ，６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２７℃）δ  １．９８−２．１０（１Ｈ，ｍ），２．１８−２．３１（１Ｈ，ｍ），２．４０（３Ｈ，ｓ），３．３０（９Ｈ，ｓ），３．４３（１Ｈ，ｍ），３．４７−３．６１（２Ｈ，ｍ），３．７２（１Ｈ，ｍ），４．３６（１Ｈ，ｍ），４．８７（１Ｈ，ｓ），６．４５（１Ｈ，ｔ），６．６２（２Ｈ，ｄ），６．８１（１Ｈ，ｄ），７．２１（１Ｈ，ｄ），７．６４（１Ｈ，ｓ），１２．１２（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４８６．
【０１０７】
第２溶出異性体の実施例４（ｂ）  ２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１８ｍｇ，５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２７℃）δ  １．９８−２．１０（１Ｈ，ｍ），２．１８−２．３１（１Ｈ，ｍ），２．４０（３Ｈ，ｓ），３．３０（９Ｈ，ｓ），３．４３（１Ｈ，ｍ），３．４７−３．６１（２Ｈ，ｍ），３．７２（１Ｈ，ｍ），４．３６（１Ｈ，ｍ），４．８７（１Ｈ，ｓ），６．４５（１Ｈ，ｔ），６．６２（２Ｈ，ｄ），６．８１（１Ｈ，ｄ），７．２１（１Ｈ，ｄ），７．６４（１Ｈ，ｓ），１２．１２（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４８６．
【０１０８】
実施例５（ａ）および５（ｂ）
（２Ｒ）−３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］プロパンアミドおよび（２Ｓ）−３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］プロパンアミド
【化１０】
2018535986.tif 000012
ＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ、０．５７ミリモル）、ＨＡＴＵ（１７３．２８ｍｇ、０．４５６ミリモル）および３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロパン酸（中間体２９、０．０９ｇ、０．４１８ミリモル）を、ＤＭＦ（４ｍＬ）中、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、０．１ｇ、０．３８ミリモル）の溶液に添加した。混合物を室温で１８時間撹拌した。これを水（５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭに抽出し（１０ｍＬ）、蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を、ＳＣＸカートリッジに通過させ、メタノールで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させて乾燥し、ジアステレオ異性体の混合物をＳＦＣ（Ｌｕｘ  Ｃ１カラム、５μｍ、２１．２ｍｍ×２５０ｍｍ、４０℃、５０ｍＬ／分の流速での０．１％ｖ／ｖ  ＮＨ３を含有する５０：５０のＭｅＯＨ：ＣＯ２）により分離し、次を得た。
【０１０９】
第１溶出異性体の実施例５（ａ）  ３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］プロパンアミド（２５．３ｍｇ，１４．６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２５℃）δ  ２．００−２．１２（１Ｈ，ｍ），２．２２−２．３１（１Ｈ，ｍ），３．２５（３Ｈ，ｓ），３．４５−３．５９（４Ｈ，ｍ），３．７１−３．７９（４Ｈ，ｍ），３．９７（１Ｈ，ｔ），４．０３−４．１０（１Ｈ，ｍ），４．３１−４．４３（１Ｈ，ｍ），６．８３−６．９４（４Ｈ，ｍ），７．２６（１Ｈ，ｔ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），７．６８（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．２３（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４５６．
【０１１０】
第２溶出異性体の実施例５（ｂ）  ３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］プロパンアミド（２２．３ｍｇ，１２．８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２５℃）δ  ２．００−２．１４（１Ｈ，ｍ），２．２２−２．３６（１Ｈ，ｍ），３．２５（３Ｈ，ｓ），３．４３−３．５２（２Ｈ，ｍ），３．５２−３．６１（２Ｈ，ｍ），３．６９−３．７８（４Ｈ，ｍ），３．９７（１Ｈ，ｔ），４．０１−４．１０（１Ｈ，ｍ），４．３１−４．４３（１Ｈ，ｍ），６．７９−６．９５（４Ｈ，ｍ），７．２６（１Ｈ，ｔ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），７．６８（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．２３（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４５６．
【０１１１】
実施例６（ａ）および６（ｂ）
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１１】
2018535986.tif 000013
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、０．２ｇ、０．７６ミリモル）および２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−酢酸（中間体３３、０．１８ｇ、０．７６ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．３４ｍＬ、１．９４３ミリモル）およびＨＡＴＵ（０．２９ｇ、０．７６ミリモル）の添加前５分間、次に室温で１時間撹拌した。粗混合物を５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を低圧下で蒸発させ、２ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を低圧下で蒸発させ、ジアステレオ異性体の混合物としての生成物をベージュ泡状物として得た。ジアステレオ異性体をＳＦＣ（Ａｍｙ−Ｃカラム、５μｍ、２０ｍｍ×２５０ｍｍ、５０ｍＬ／分での修飾因子としてＮＨ３を含有するＭｅＯＨ／ＣＯ２（４５％））により分離し、次を得た。
【０１１２】
第１溶出異性体の実施例６（ａ）  ２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（７０ｍｇ，１９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  １．１６（３Ｈ，ｔ），２．０４（１Ｈ，ｄｑ），３．３８−３．５０（３Ｈ，ｍ），３．５１−３．５８（２Ｈ，ｍ），３．６６−３．７８  （７Ｈ，ｍ），４．３５（１Ｈ，ｑ），４．９６（１Ｈ，ｓ），６．４４（１Ｈ，ｔ），６．６２（２Ｈ，ｄ），６．８４（１Ｈ，ｄｄ），７．３０（１Ｈ，ｄｄ），７．６７（１Ｈ，ｄ），８．４５（１Ｈ，ｄｄ），１１．９６（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４８６．
【０１１３】
第２溶出異性体の実施例６（ｂ）  ２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（７４ｍｇ，２０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  １．１８（３Ｈ，ｔ），２．０７（１Ｈ，ｄｔ），２．２７（１Ｈ，ｄｔ），３．６０−３．３９（５Ｈ，ｍ），３．７９−３．７０（６Ｈ，ｍ），４．３８（１Ｈ，ｑ），４．９９（１Ｈ，ｓ），６．４７（１Ｈ，ｔ），６．６４（２Ｈ，ｄ），６．８８（１Ｈ，ｄｄ），７．３４（１Ｈ，ｄｄ），７．７１（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．１５（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４８６．
【０１１４】
実施例７（ａ）および７（ｂ）
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［（３Ｒ）−３−（ピリダジン−３−イルアミノ）ピロリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［（３Ｒ）−３−（ピリダジン−３−イルアミノ）ピロリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１２】
2018535986.tif 000014
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１０８ｍｇ、０．４１ミリモル）および２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸（中間体３４、１１０ｍｇ、０．４１ミリモル）を、窒素下、室温でＤＭＦ（３．５ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．１１ｍＬ、０．６１ミリモル）およびＨＡＴＵ（１８６ｍｇ、０．４９ミリモル）の添加前５分間、次に室温で一晩撹拌した。粗混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、次にＤＣＭに抽出した（３×５０ｍＬ）。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、次に蒸発させ、オレンジガム状物を得て、それを分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。所望される生成物を含有する画分を結合させ、蒸発させ、５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、ジアステレオ異性体の混合物を得た。ジアステレオ異性体を次にＳＦＣ（Ｌｕｘ  Ｃ３カラム、５μｍ、２１．２Ｍｍ×２５０ｍｍ、ＮＨ３修飾因子を含有するＭｅＯＨ／ＣＯ２（３０％）、５０ｍＬ／分）により分離し、次を得た。
【０１１５】
第１溶出異性体の実施例７（ａ）  ２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［（３Ｒ）−３−（ピリダジン−３−イルアミノ）ピロリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１１ｍｇ，５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  １．９４−２．１２（１Ｈ，ｍ），２．１９−２．３６（１Ｈ，ｍ），３．２３（３Ｈ，ｓ），３．２７（３Ｈ，ｓ），３．４３−３．６１（３Ｈ，ｍ），３．６２−３．７７（３Ｈ，ｍ），４．０７−４．１９（２Ｈ，ｍ），４．２２−４．３０（１Ｈ，ｍ），４．３２−４．４３（１Ｈ，ｍ），４．８７（１Ｈ，ｓ），６．６６（１Ｈ，ｄｄ），６．７３−６．８４（１Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ），７．０４（１Ｈ，ｄｄ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ），７．７０（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．１８（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１５．
【０１１６】
第２溶出異性体の実施例７（ｂ）  ２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［（３Ｒ）−３−（ピリダジン−３−イルアミノ）ピロリジン−１−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１１ｍｇ，５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  ２．００−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．２２−２．３４（１Ｈ，ｍ），３．２３（３Ｈ，ｓ），３．２８（３Ｈ，ｓ），３．４２−３．６０（３Ｈ，ｍ），３．６３−３．８０（３Ｈ，ｍ），４．０９−４．１８（２Ｈ，ｍ），４．２４−４．３３（１Ｈ，ｍ），４．４３−４．４５（１Ｈ，ｍ），４．８７（１Ｈ，ｓ），６．６７（１Ｈ，ｄｄ），６．７５−６．８３（１Ｈ，ｍ），６．８７（１Ｈ，ｄｄ），７．０５（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），７．７０（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．１８（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１５．
【０１１７】
実施例８（ａ）および８（ｂ）
（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１３】
2018535986.tif 000015
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１００ｍｇ、０．３８ミリモル）および２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸リチウム（中間体３８、１００ｍｇ、０．３８ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２．０ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．１０ｍＬ、０．５７ミリモル）およびＨＡＴＵ（１７３ｍｇ、０．４６ミリモル）の添加前５分間撹拌し、次に室温で一晩撹拌した。粗混合物を５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、オレンジガム状物を得た。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。生成物を含有する画分を結合させ、蒸発させ、５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、ジアステレオ異性体の混合物をオフホワイト固体として得た（９４ｍｇ）。ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分でのＭｅＯＨ／ＥｔＯＨ）により分離し、次を得た。
【０１１８】
第１溶出異性体の実施例８（ａ）  ２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（３３ｍｇ，１７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３１℃）２．０３−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．２４−２．３３（１Ｈ，ｍ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ），３．５４−３．６１（２Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），３．９７（２Ｈ，ｄｄ），４．１９−４．３１（２Ｈ，ｍ），４．３５−４．４３（１Ｈ，ｍ），４．８９（１Ｈ，ｓ），５．３６−５．５６（１Ｈ，ｍ），６．７１（１Ｈ，ｄｄ），６．８−６．８９（２Ｈ，ｍ），７．０７（１Ｈ，ｄｄ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ），７．６５（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．１３（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０３．
【０１１９】
第２溶出異性体の実施例８（ｂ）  ２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（３４ｍｇ，１８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）２．０１−２．１１（１Ｈ，ｍ），２．２４−２．３４（１Ｈ，ｍ），３．４７−３．６１（３Ｈ，ｍ），３．７６（１Ｈ，ｄｄ），３．９７（２Ｈ，ｄｄ），４．１８−４．３２（２Ｈ，ｍ），４．３５−４．４３（１Ｈ，ｍ），４．８８（１Ｈ，ｓ），５．３５−５．５７（１Ｈ，ｍ），６．７１（１Ｈ，ｄｄ），６．８１−６．８９（２Ｈ，ｍ），７．０７（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），７．６４（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄ），１２．１４（１Ｈ，ｓ），２１に割り当てられたＨｓ：プラスＯＭｅプロトンは、３．３０ｐｐｍで溶媒により観察されず不明瞭．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０３．
【０１２０】
実施例９（ａ）および９（ｂ）
（２Ｓ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセトアミド
【化１４】
2018535986.tif 000016
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体９、０．１１ｇ、０．３８９ミリモル）および［２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセチル］オキシリチウム（中間体２４、０．１２ｇ、０．４６６ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．３４ｍＬ、１．９４３ミリモル）、およびＨＡＴＵ（０．４ｍＬ、０．３８９ミリモル）の添加前５分間、次に室温で２時間撹拌した。粗混合物を一晩静置状態にし、次に５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、オレンジガム状物を得て、それを分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を結合させ、蒸発させ、１ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出し、ジアステレオ異性体の混合物をオフホワイト固体として得た。ジアステレオ異性体の混合物を分取キラルＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分での溶出剤ＭｅＯＨ）により分離し、次を得た。
【０１２１】
第１溶出異性体の実施例９（ａ）  Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセトアミド（３９．１ｍｇ，１９．５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  ２．０７（１Ｈ，ｄｔ），２．２７（１Ｈ，ｄｔ），３．２４（３Ｈ，ｓ），３．２８（３Ｈ，ｓ），３．４６（１Ｈ，ｄｄ），３．５０−３．６１（４Ｈ，ｍ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ），４．００−４．０７（２Ｈ，ｍ），４．２７−４．４２（２Ｈ，ｍ），４．８４（１Ｈ，ｓ），６．３９（１Ｈ，ｄｄ），６．５５（１Ｈ，ｓ），６．７６（１Ｈ，ｄ），７．１２−７．２０（２Ｈ，ｍ），７．３６（１Ｈ，ｄｄ），７．６３（１Ｈ，ｄ），１２．１６（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１５．
【０１２２】
第２溶出異性体の実施例９（ｂ）  Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセトアミド（４２．８ｍｇ，２１．４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  ２．０５（１Ｈ，ｔｄ），２．２７（１Ｈ，ｄｔ），３．２４（３Ｈ，ｓ），３．２８（３Ｈ，ｓ），３．４７（１Ｈ，ｄｄ），３．５−３．６（４Ｈ，ｍ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ），３．９９−４．０７（２Ｈ，ｍ），４．２７−４．４（２Ｈ，ｍ），４．８３（１Ｈ，ｓ），６．３９（１Ｈ，ｄｄ），６．５５（１Ｈ，ｄ），６．７７（１Ｈ，ｄ），７．１２−７．２（２Ｈ，ｍ），７．３６（１Ｈ，ｄｄ），７．５９（１Ｈ，ｄ），１２．１７（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１５．
【０１２３】
実施例１０（ａ）および１０（ｂ）
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１５】
2018535986.tif 000017
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１３４ｍｇ、０．５１ミリモル）および２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−酢酸リチウム（中間体４０、１３７ｍｇ、０．５１ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．１３ｍＬ、０．７６ミリモル）およびＨＡＴＵ（２３２ｍｇ、０．６１ミリモル）の添加前５分間撹拌し、次に室温で一晩撹拌した。粗混合物を５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、オレンジガム状物を得て、それを分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。所望される質量を含有する画分を結合させ、蒸発させ、５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、ジアステレオ異性体の混合物をオフホワイト固体として得た（１２３ｍｇ）。ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分での１００％ＭｅＯＨ）により分離し、次を得た。
【０１２４】
第１溶出異性体の実施例１０（ａ）  ２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（４５ｍｇ，１７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，２２℃）２．０７（１Ｈ，ｄｑ），２．２８（１Ｈ，ｄｔ），３．２８（３Ｈ，ｓ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ），３．５２−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７１（３Ｈ，ｓ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），３．８０−３．８６（１Ｈ，ｍ），３．８６−３．９２（１Ｈ，ｍ），４．０６−４．２０（２Ｈ，ｍ），４．３７（１Ｈ，ｄｔ），４．８２（１Ｈ，ｓ），５．４７（１Ｈ，ｄｔｄ），５．９８（１Ｈ，ｔ），６．１３−６．２１（１Ｈ，ｍ），６．３９−６．４５（１Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），７．６７（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．１３（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１５．
【０１２５】
第２溶出異性体の実施例１０（ｂ）  ２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（４６ｍｇ，１７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，２２℃）２．０６（１Ｈ，ｄｑ），２．２７（１Ｈ，ｄｔ），３．２８（３Ｈ，ｓ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ），３．５３−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．７１（３Ｈ，ｓ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），３．８０−３．８６（１Ｈ，ｍ），３．８７−３．９２（１Ｈ，ｍ），４．１３（２Ｈ，ｄｔ），４．３７（１Ｈ，ｄｔ），４．８１（１Ｈ，ｓ），５．４７（１Ｈ，ｄｔｔ），５．９７（１Ｈ，ｔ），６．１３−６．２３（１Ｈ，ｍ），６．３８−６．４５（１Ｈ，ｍ），６．８７（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），７．６４（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．１５（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１５．
【０１２６】
実施例１１（ａ）および１１（ｂ）
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１６】
2018535986.tif 000018
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１００ｍｇ、０．３８ミリモル）および２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（中間体４４、１９１ｍｇ、０．６８ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（３．５ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ、０．５７ミリモル）およびＨＡＴＵ（１７３ｍｇ、０．４６ミリモル）の添加前５分間撹拌し、次に室温で一晩撹拌した。粗混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭに抽出した（５０ｍＬ×２）。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、オレンジガム状物を得て、それを分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。所望される質量を含有する画分を結合させ、蒸発させ、５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、黄色固体を得た。ジアステレオ異性体の混合物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ２カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分での溶出剤としてＥｔＯＨ／ＭｅＯＨの５０／５０混合物を使用）により分離し、次を得た。
【０１２７】
第１溶出異性体の実施例１１（ａ）  ２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（９．１ｍｇ，４．５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ２．２８（１Ｈ，ｄｄ），２．３５−２．４７（１Ｈ，ｍ），３．４８（３Ｈ，ｓ），３．５６−３．７１（２Ｈ，ｍ），３．７３−３．８３（４Ｈ，ｍ），３．８７（１Ｈ，ｄｄ），４．５２（１Ｈ，ｓ），４．８４（１Ｈ，ｓ），６．２５（１Ｈ，ｓ），６．５６（１Ｈ，ｄｄ），６．７１−６．７６（１Ｈ，ｍ），６．８９−６．９５（２Ｈ，ｍ），７．１１（１Ｈ，ｄｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５２６．
【０１２８】
第２溶出異性体の実施例１１（ｂ）  ２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１０．２ｍｇ５．１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ２．２０−２．３１（１Ｈ，ｍ），２．３５−２．４７（１Ｈ，ｍ），３．４７（３Ｈ，ｓ），３．５６−３．７８（３Ｈ，ｍ），３．８０（３Ｈ，ｓ），３．８４−３．９３（１Ｈ，ｍ），４．５０（１Ｈ，ｓ），４．８４（１Ｈ，ｓ），６．１４（１Ｈ，ｓ），６．５７（１Ｈ，ｄ），６．７３（１Ｈ，ｓ），６．９２（２Ｈ，ｄ），７．１２（１Ｈ，ｄｄ），８．４９（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５２６．
【０１２９】
実施例１２（ａ）および１２（ｂ）
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１７】
2018535986.tif 000019
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体６、０．１１ｇ、０．３８９ミリモル）および［２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセチル］オキシリチウム（中間体２４、０．１２ｇ、０．４６６ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．３４ｍＬ、１．９４３ミリモル）、およびＨＡＴＵ（０．４ｍＬ、０．３８９ミリモル）の添加前５分間、次に室温で２時間撹拌した。粗混合物を、５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を結合させ、蒸発させ、１ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出し、ジアステレオ異性体の混合物をオフホワイト固体として得た（９８ｍｇ）。ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分での１００％ＭｅＯＨ）により分離し、次を得た。
【０１３０】
第１溶出異性体の実施例１２（ａ）  ２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（３４ｍｇ，１８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）２．００−２．１１（１Ｈ，ｍ），２．３０（１Ｈ，ｄｔ），２．４１（３Ｈ，ｓ），３．２５（３Ｈ，ｓ），３．４５（１Ｈ，ｄｄ），３．４９−３．６２（４Ｈ，ｍ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ），４．０４（２Ｈ，ｔ），４．２８−４．４１（２Ｈ，ｍ），４．８６（１Ｈ，ｓ），６．４０（１Ｈ，ｄ），６．５５（１Ｈ，ｓ），６．７７（１Ｈ，ｄ），６．８２（１Ｈ，ｄ），７．１５（１Ｈ，ｔ），７．２２（１Ｈ，ｄ），７．６２（１Ｈ，ｄ），１２．０６（１Ｈ，ｓ）；  ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１１．
【０１３１】
第２溶出異性体の実施例１２（ｂ）  ２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（３８ｍｇ，１９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）２．０５（１Ｈ，ｄｔ），２．２７（１Ｈ，ｄｔ），２．４２（３Ｈ，ｓ），３．２５（３Ｈ，ｓ），３．４６（１Ｈ，ｄｄ），３．５−３．６１（４Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．０４（２Ｈ，ｔ），４．２８−４．４１（２Ｈ，ｍ），４．８５（１Ｈ，ｓ），６．３９（１Ｈ，ｄｄ），６．５５（１Ｈ，ｓ），６．７７（１Ｈ，ｄ），６．８２（１Ｈ，ｄ），７．１５（１Ｈ，ｔ），７．２２（１Ｈ，ｄ），７．５８（１Ｈ，ｄ），１２．０９（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１１．
【０１３２】
実施例１３（ａ）および１３（ｂ）
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１８】
2018535986.tif 000020
２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセチル］オキシリチウム（中間体２４、０．１２ｇ、０．４７５ミリモル）およびＮ２−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１２、０．１３ｇ、０．４７５ミリモル）を丸底フラスコ中で秤量した。ＤＭＦ（３ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０．１５ｇ、１．１８７ミリモル）、次いでＨＡＴＵ（０．１８ｇ、０．４７５ミリモル）を添加し、得られた溶液をＮ２下、室温で１５時間撹拌しておいた。反応混合物をＳＣＸカートリッジに添加し、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を低圧下で蒸発させ、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。所望される質量を含有する画分を低圧下で蒸発させ、ジアステレオ異性体の混合物をオレンジガム状物として得た。ジアステレオ異性体を分取キラルＨＰＬＣ（Ｌｕｘ  Ｃ１カラム、５μｍ、２１ｍｍ×２５０ｍｍ、２１ｍＬ／分での０．１％ＮＨ３を含有する２０：８０のヘプタン：ＥｔＯＨの溶出剤）により分離し、次を得た。
【０１３３】
第１溶出異性体の実施例１３（ａ）  ２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（５５．２ｍｇ，１６．５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０９（１Ｈ，ｓ），２．３０（１Ｈ，ｄ），３．２４（３Ｈ，ｓ），３．２９（３Ｈ，ｓ），３．５３−３．９０（６Ｈ，ｍ），４．０３（２Ｈ，ｔｔ），４．２７−４．４２（２Ｈ，ｍ），４．８６（１Ｈ，ｓ），６．４０（１Ｈ，ｄｄｄ），６．５５（１Ｈ，ｓ），６．７４−  ６．８０（１Ｈ，ｍ），７．１５（１Ｈ，ｔ），７．７０（１Ｈ，ｄ），８．３２（１Ｈ，ｄ），８．６１（１Ｈ，ｄ），１２．１７（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４９８．
【０１３４】
第２溶出異性体の実施例１３（ｂ）  ２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（５４．２ｍｇ，１３．７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  １．９８−２．０８（１Ｈ，ｍ），２．１９−２．２８  （１Ｈ，ｍ），３．１８（３Ｈ，ｓ），３．２２（３Ｈ，ｓ），３．４７−３．８４（６Ｈ，ｍ），３．９３−４．０２（２Ｈ，ｍ），４．２１−４．３６（２Ｈ，ｍ），４．８０（１Ｈ，ｓ），６．３４（１Ｈ，ｄｄｄ），６．４９（１Ｈ，ｓ），６．６７−６．７４（１Ｈ，ｍ），７．０９（１Ｈ，ｔ），７．６４（１Ｈ，ｄ），８．２６（１Ｈ，ｄ），８．５５（１Ｈ，ｄ），１２．１１（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４９８．
【０１３５】
実施例１４（ａ）および１４（ｂ）
（２Ｓ）−２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化１９】
2018535986.tif 000021
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１２、０．０６ｇ、０．２３２ミリモル）、［２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−アセチル］オキシリチウム（中間体２１、０．０６ｇ、０．２３２ミリモル）を丸底フラスコ中で秤量した。ＤＭＦ（２ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ、０．５７９ミリモル）、次いでＨＡＴＵ（０．０９ｇ、０．２３２ミリモル）を添加し、得られた溶液を室温で１５時間撹拌しておいた。反応混合物をＳＣＸカートリッジに添加し、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を低圧下で蒸発させ、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。溶媒を低圧下で除去し、ジアステレオ異性体の混合物をクリーム状固体として得た。ジアステレオ異性体をキラル分取ＨＰＬＣ（Ａｍｙ  Ｃカラム、５μｍ、２０ｍｍ×２５０ｍｍ、２１ｍＬ／分での０．１％ＮＨ３を含有する２０：８０のヘプタン：ＥｔＯＨの溶出剤）により分離し、次を得た。
【０１３６】
第１溶出異性体の実施例１４（ａ）  ２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（２２．１ｍｇ，１８．９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０２−２．１２（１Ｈ，ｍ），２．２３−２．３４（１Ｈ，ｍ），３．２９（３Ｈ，ｓ），３．７７（４Ｈ，ｓ），４．２０−４．４２（５Ｈ，ｍ），４．８９（１Ｈ，ｓ），６．４９−６．５７（１Ｈ，ｍ），６．６７（１Ｈ，ｔ），６．８６−６．９２（１Ｈ，ｍ），７．２２（１Ｈ，ｔ），７．６７（１Ｈ，ｄ），８．３２（１Ｈ，ｄ），８．６１（１Ｈ，ｄ），１２．１９（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０４．
【０１３７】
第２溶出異性体の実施例１４（ｂ）  ２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（２０．８ｍｇ，１７．８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０２−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．２４−２．３５（１Ｈ，ｍ），３．２９（３Ｈ，ｓ），３．７７（４Ｈ，ｓ），４．２０−４．４２（５Ｈ，ｍ），４．８９（１Ｈ，ｓ），６．５０−６．５６（１Ｈ，ｍ），６．６５−６．６９（１Ｈ，ｍ），６．８６−６．９１（１Ｈ，ｍ），７．２２（１Ｈ，ｔ），７．６９（１Ｈ，ｄ），８．３１（１Ｈ，ｄ），８．６１（１Ｈ，ｄ），１２．１９（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５０４．
【０１３８】
実施例１５（ａ）および１５（ｂ）
（２Ｓ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化２０】
2018535986.tif 000022
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１２、０．０５ｇ、０．１７ミリモル）、［２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−アセチル］オキシリチウム（中間体１７、０．０４ｇ、０．１７ミリモル）を丸底フラスコ中で秤量した。ＤＭＦ（２ｍＬ）およびＨＡＴＵ（０．０６ｇ、０．１７ミリモル）、次いでＤＩＰＥＡ（０．０７ｍＬ、０．４２６ミリモル）を添加し、得られた溶液を室温で１５時間撹拌しておいた。反応混合物をＳＣＸカートリッジに添加し、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を低圧下で蒸発させ、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。溶媒を低圧下で除去し、ジアステレオ異性体の混合物をクリーム状固体として得た。ジアステレオ異性体を分取キラルＨＰＬＣ（Ａｍｙ−Ｃカラム、５μｍ、２０ｍｍ×２５０ｍｍ、２１ｍＬ／分での０．１％ＮＨ３を含有する２０：８０のヘプタン：ＥｔＯＨの溶出剤）により分離し、次を得た。
【０１３９】
第１溶出異性体の実施例１５（ａ）  ２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１７．９ｍｇ，２１．７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０４−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．２３−２．３５（１Ｈ，ｍ），３．２８（３Ｈ，ｓ），３．４７−  ３．９４（６Ｈ，ｍ），４．０６−４．２０（２Ｈ，ｍ），４．３５（１Ｈ，ｓ），４．８４（１Ｈ，ｓ），５．５５（１Ｈ，ｔｔ），６．３９−６．４６（１Ｈ，ｍ），６．５８（１Ｈ，ｔ），６．８０（１Ｈ，ｄｔ），７．１６（１Ｈ，ｔ），７．６２（１Ｈ，ｓ），８．３１（１Ｈ，ｄ），８．６０（１Ｈ，ｄ），１２．１８（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４８６．
【０１４０】
第２溶出異性体の実施例１５（ｂ）  ２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１９ｍｇ，２３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０３−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．２３−２．３４（１Ｈ，ｍ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．５０−３．９３（６Ｈ，ｍ），４．０８−４．２１（２Ｈ，ｍ），４．３６（１Ｈ，ｓ），４．８７（１Ｈ，ｓ），５．３８−５．５８（１Ｈ，ｍ），６．４１−６．４６（１Ｈ，ｍ），６．５８（１Ｈ，ｔ），６．７７−６．８３（１Ｈ，ｍ），７．１７（１Ｈ，ｔ），７．６８（１Ｈ，ｄ），８．３２（１Ｈ，ｄ），８．６１（１Ｈ，ｄ），１２．１８（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４８６．
【０１４１】
実施例１６（ａ）および１６（ｂ）
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化２１】
2018535986.tif 000023
ＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ、０．５６８ミリモル）を、ＤＭＦ（３ｍＬ）中、２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−酢酸（中間体２８、０．１３ｇ、０．５６８ミリモル）およびＮ２−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１２、０．１５ｇ、０．５６８ミリモル）に添加した。ＨＡＴＵ（０．２２ｇ、０．５６８ミリモル）を溶液に添加し、反応混合物を窒素下、室温で２４時間撹拌しておいた。溶媒を低圧下で除去し、暗いオレンジ油を得て、それをＤＣＭに溶解し、シリカ上に吸収させ、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ１〜１０％）により精製した。純粋画分を結合させ、溶媒を低圧下で除去し、暗いオレンジ油を得て、それを分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）によりさらに精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を結合させ、低圧下で蒸発させ、２ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させて乾燥し、ジアステレオ異性体の混合物をオフホワイト泡状物として得た（１３２ｍｇ）。ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、５μｍ、２０ｍｍ×２５０ｍｍ、２１ｍＬ／分でのジエタノールアミン修飾因子を含有する溶出剤ＭｅＯＨ）により分離した。分離したジアステレオ異性体ＤＣＭに溶解し、水で洗浄し、有機層を蒸発させ、次を得た。
【０１４２】
第１溶出異性体の実施例１６（ａ）  ２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（２３．２ｍｇ，８．６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  ２．０９（１Ｈ，ｄ）２．３０（１Ｈ，ｄｄ），３．３０（３Ｈ，ｄ），３．７４（６Ｈ，ｓ），３．５５−３．９１（４Ｈ，ｍ），４．３８（１Ｈ，ｓ），４．８９（１Ｈ，ｓ），６．４７（１Ｈ，ｔ），６．６４（２Ｈ，ｄ），７．７１（１Ｈ，ｄ），８．３２（１Ｈ，ｄ），８．６１（１Ｈ，ｄ），１２．１７（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４７２．
【０１４３】
第２溶出異性体の実施例１６（ｂ）  ２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（２８．３ｍｇ，１０．５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  ２．１２（１Ｈ，ｓ），２．３１（１Ｈ，ｄ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．６０−３．７３（３Ｈ，ｍ），３．７７（６Ｈ，ｓ），３．８０−３．８９（１Ｈ，ｍ），４．４０（１Ｈ，ｓ），４．９２（１Ｈ，ｓ），６．５０（１Ｈ，ｔ），６．６７（２Ｈ，ｄ），７．７３（１Ｈ，ｄ），８．３５（１Ｈ，ｄ），８．６４（１Ｈ，ｄ），１２．１９（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４７２．
【０１４４】
実施例１７（ａ）および１７（ｂ）
（２Ｓ）−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化２２】
2018535986.tif 000024
２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−酢酸（中間体４７、０．１４ｇ、０．５７ミリモル）およびＮ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、０．１５ｇ、０．５７ミリモル）を丸底フラスコ中で秤量した。ＤＭＦ（３ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（０．１８ｇ、１．４２４ミリモル）、次いでＨＡＴＵ（０．２２ｇ、０．５７ミリモル）を添加し、得られた溶液をＮ２下、室温で３時間撹拌しておいた。溶媒を低圧下で除去した。残留ガム状物をＤＣＭに溶解し、シリカ上に吸収させ、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ１〜８％）により精製した。低圧下での純粋画分蒸発により、黄色ガム状物を得て、それを分取キラルＳＦＣ（Ａｍｙ−Ｃカラム、５μｍ、２０ｍｍ×２５０ｍｍ、修飾因子として４０％ＮＨ３を含有する溶出剤ＭｅＯＨ／ＣＯ２。流速は２１０ｎｍの波長で５０ｍＬ／分であった）により分離し、次を得た。
【０１４５】
第１溶出異性体の実施例１７（ａ）  ［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（２３ｍｇ，８．２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  １．１９（３Ｈ，ｔ），２．０２−２．１０（１Ｈ，ｍ），２．２１−２．３６（１Ｈ，ｍ），３．３７−３．６３（５Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．４０−４．３６（１Ｈ，ｍ），５．１２（１Ｈ，ｓ），６．８７（１Ｈ，ｄｄ），７．１６（１Ｈ，ｄｄ），７．２５（１Ｈ，ｔ），７．２８−７．２９（１Ｈ，ｍ），７．３０−７．３８（２Ｈ，ｍ），７．４５（１Ｈ，ｔ），７．７２（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．２７（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４９２．
【０１４６】
第２溶出異性体の実施例１７（ｂ）  ［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（０．０２５ｇ、８．９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  １Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  １．１９（３Ｈ，ｔ），２．０３−２．１０（１Ｈ，ｍ），２．２４−２．３２（１Ｈ，ｍ），３．３８−３．６２（５Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．３６−４．４０（１Ｈ，ｍ），５．１２（１Ｈ，ｓ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ），７．１６（１Ｈ，ｔ），７．２４（１Ｈ，ｔ），７．２６−７．３８（３Ｈ，ｍ），７．４５（１Ｈ，ｔ），７．７２（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．２７（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４９２．
【０１４７】
実施例１８（ａ）および１８（ｂ）
（２Ｓ）−２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化２３】
2018535986.tif 000025
ＨＡＴＵ（５２０ｍｇ、１．３７ミリモル）を、Ｎ２下、２１℃でＤＭＦ（８ｍＬ）中、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、３００ｍｇ、１．１４ミリモル）、２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］酢酸（中間体４８、３０４ｍｇ、１．３７ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．１９８ｍＬ、１．１４ミリモル）に添加した。得られた溶液を２１℃で２時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いるイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物をＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させた。粗生成物をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ中ＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３０〜１５％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、固体を得た。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  ＯＢＤ  Ｃ１８カラム、５μｍ、３０ｍｍ×１００ｍｍ）により精製した。１％ＮＨ４ＯＨを含有する水およびＭｅＣＮの減少する極性の混合物を移動相として用いた。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、生成物をジアステレオ異性体の混合物として得た。ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１２０ｍＬ／分での５０／５０のＭｅＯＨ／ＩＰＡ）により分離し、次を得た。
【０１４８】
第１溶出異性体の実施例１８（ａ）  ２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（４５ｍｇ，８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．１２（１Ｈ，ｔｄ），２．２３−２．４０（１Ｈ，ｍ），３．３８（３Ｈ，ｓ），３．４６−３．６９（３Ｈ，ｍ），３．７４−３．８６（１Ｈ，ｍ），４．２６−４．３５（１Ｈ，ｍ），４．４１−４．５０（１Ｈ，ｍ），４．６５（２Ｈ，ｄｄｄ），４．９０−５．１１（３Ｈ，ｍ），６．９１（１Ｈ，ｄｄ），７．２７−７．４９（４Ｈ，ｍ），７．５７（１Ｈ，ｓ），７．７０（１Ｈ，ｄ），８．５３（１Ｈ，ｄｄ），１２．２４（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４６８．
【０１４９】
第２溶出異性体の実施例１８（ｂ）  ２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（３８ｍｇ，７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ２．１２（１Ｈ，ｔｄ），２．２３−２．４０（１Ｈ，ｍ），３．３８（３Ｈ，ｓ），３．４６−３．６９（３Ｈ，ｍ），３．７４−３．８６（１Ｈ，ｍ），４．２６−４．３５（１Ｈ，ｍ），４．４１−４．５０（１Ｈ，ｍ），４．６５（２Ｈ，ｄｄｄ），４．９０−５．１１（３Ｈ，ｍ），６．９１（１Ｈ，ｄｄ），７．２７−７．４９（４Ｈ，ｍ），７．５７（１Ｈ，ｓ），７．７０（１Ｈ，ｄ），８．５３（１Ｈ，ｄｄ），１２．２４（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４６８．
【０１５０】
実施例１９（ａ）および１９（ｂ）
（２Ｓ）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド
【化２４】
2018535986.tif 000026
ＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ、０．８５ミリモル）、ＨＡＴＵ（２６０ｍｇ、０．６８ミリモル）および２−エトキシ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（中間体５１、１８０ｍｇ、０．６８ミリモル）を、ＤＭＦ（４ｍＬ）中Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、１５０ｍｇ、０．５７ミリモル）の溶液に添加した。混合物を室温で１８時間撹拌した。次にこれを水（５ｍＬ）で希釈し、次にＤＣＭ（１０ｍＬ）で抽出し、蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（ＸＢｒｉｄｇｅ  ＯＢＤ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速は２５ｍＬ／分であった）により精製した。減少する極性比率の、０．３ｍＬ／ＬのＮＨ４ＯＨを含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を蒸発させ、ＳＣＸカートリッジに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、真空で乾燥し、生成物をジアステレオ異性体の混合物として得た。次にジアステレオ異性体をＨＰＬＣ（Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、５μｍ、２０ｍｍ×２５０ｍｍ、ＮＨ３修飾因子を含有するＭｅＯＨ、２１ｍＬ／分）により分離し、次を得た。
【０１５１】
第１溶出異性体の実施例１９（ａ）  ２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド（４６ｍｇ，１６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  １．１９（３Ｈ，ｔ），１．９７−２．１５（１Ｈ，ｍ），２．１８−２．３６（１Ｈ，ｍ），３．４０−３．６５（５Ｈ，ｍ），３．６５−３．８１（１Ｈ，ｍ），４．３２−４．４６（１Ｈ，ｍ），５．１７（１Ｈ，ｓ），６．８７（１Ｈ，ｄｄ），７．２８−７．４０（２Ｈ，ｍ），７．４０−７．５９（３Ｈ，ｍ），７．７４（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．３２（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１０．
【０１５２】
第２溶出異性体の実施例１９（ｂ）  ２−エトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アセトアミド（３９ｍｇ，１４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  １．１９（３Ｈ，ｔ），２．０６（１Ｈ，ｍ），２．２０−２．３５（１Ｈ，ｍ），３．３９−３．６３（５Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｍ），４．３４−４．４４（１Ｈ，ｍ），５．１７（１Ｈ，ｓ），６．８８（１Ｈ，ｄｄ），７．２８−７．４１（２Ｈ，ｍ），７．４２−７．５８（３Ｈ，ｍ），７．７３（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄ），１２．３２（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１０．
【０１５３】
実施例２０（ａ）および２０（ｂ）
（２Ｒ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｓ）−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化２５】
2018535986.tif 000027
ＤＩＰＥＡ（０．１２ｍＬ、０．７１ミリモル）、ＨＡＴＵ（２１６ｍｇ、０．５６８ミリモル）および２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−酢酸（中間体５２、０．１３ｇ、０．４７４ミリモル）を、ＤＭＦ（４ｍＬ）中、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、０．１２ｇ、０．４７４ミリモル）の溶液に添加した。混合物を室温で１８時間撹拌した。次にこれを水（５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中に抽出し、蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を、ＳＣＸカートリッジに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させた。その材料を分取ＨＰＬＣ（ＸＢｒｉｄｇｅ  ＯＢＤ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、流速２５ｍＬ／分）により再精製した際、不純物もさらに認められた。減少する極性比率の０．３ｍＬ／ＬのＮＨ４ＯＨを含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ジアステレオ異性体の混合物を分取キラルＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ２カラム、２０μｍ、５０ｍｍ×２５０ｍｍ、１１０ｍＬ／分での溶出剤ＭｅＯＨ）により分離し、次を得た。
【０１５４】
第１溶出異性体の実施例２０（ａ）  ２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１８．４ｍｇ，７．５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２２℃）２．０６（１Ｈ，ｄｑ），２．２８（１Ｈ，ｄｔ），３．３４（３Ｈ，ｓ），３．４５−３．６０（３Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄ），４．３４−４．４２（１Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｓ），６．８７（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），７．５１−７．５７（２Ｈ，ｍ），７．６０−７．６９（２Ｈ，ｍ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ），１２．３５（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１４．
【０１５５】
第２溶出異性体の実施例２０（ｂ）  ２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド（１９．２ｍｇ，７．９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２２℃）２．０７（１Ｈ，ｄｄ），２．２８（１Ｈ，ｄｔ），３．４９（１Ｈ，ｄ），３．５３−３．６０（２Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），４．３３−４．４３（１Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｓ），６．８７（１Ｈ，ｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），７．５２−７．５７（２Ｈ，ｍ），７．６３（１Ｈ，ｄ），７．６８（１Ｈ，ｄ），８．４８（１Ｈ，ｄ），１２．３５（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋５１４．
【０１５６】
実施例２１（ａ）および２１（ｂ）
（２Ｓ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化２６】
2018535986.tif 000028
ＨＡＴＵ（４３３ｍｇ、１．１４ミリモル）を、窒素下、２１℃でＤＭＦ（８ｍＬ）中、２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−酢酸（中間体２８、２１５ｍｇ、０．９５ミリモル）、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、２５０ｍｇ、０．９５ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．３３２ｍＬ、１．９０ミリモル）に添加した。得られた溶液を２１℃で２時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物を１Ｍ  ＮＨ３／ＭｅＯＨを用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、粗生成物を得た。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーにより精製した（溶出勾配０〜１２％のＤＣＭ中１Ｍ  ＮＨ３／ＭｅＯＨ）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ベージュ泡状物を得た。ＬＣＭＳは、９％の化学不純物を示した。粗生成物をフラッシュシリカクロマトグラフィーによりさらに精製した（溶出勾配０〜８％のＤＣＭ中ＭｅＯＨ）。純粋画分を蒸発させて乾燥し、生成物をジアステレオ異性体の混合物として得た（１８０ｍｇ）。
【０１５７】
ジアステレオ異性体を分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｃ  Ｃ４カラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ、１００％ＭｅＯＨ、１２０ｍＬ／分）により分離した。分離したジアステレオ異性体をＤＣＭに溶解し、水で洗浄し、有機層を蒸発させ、次を得た。
【０１５８】
第１溶出異性体としての実施例２１（ａ）（固体、７４ｍｇ、１６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，２７℃）δ  ２．０６（１Ｈ，ｍ），２．２１−２．３８（１Ｈ，ｍ），３．３０（９Ｈ，ｄ），３．４１−３．６２（３Ｈ，ｍ），４．２８−４．４７（１Ｈ，ｍ），４．８７（１Ｈ，ｓ），６．４６（１Ｈ，ｔ），６．６３（２Ｈ，ｓ），６．８５（１Ｈ，ｄ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ），７．６５（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．１３（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４７２．
【０１５９】
第２溶出異性体としての実施例２１（ｂ）（固体、７５ｍｇ、１７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，２７℃）δ  ２．０６（１Ｈ，ｍ），２．２１−２．３８（１Ｈ，ｍ），３．３０（９Ｈ，ｄ），３．４１−３．６２（３Ｈ，ｍ），４．２８−４．４７（１Ｈ，ｍ），４．８７（１Ｈ，ｓ），６．４６（１Ｈ，ｔ），６．６３（２Ｈ，ｓ），６．８５（１Ｈ，ｄ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ），７．６５（１Ｈ，ｄ），８．４７（１Ｈ，ｄｄ），１２．１３（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４７２．
【０１６０】
実施例２２（ａ）および２２（ｂ）
（２Ｓ）−２−エトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミドおよび（２Ｒ）−２−エトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］アセトアミド
【化２７】
2018535986.tif 000029
ＨＡＴＵ（０．１３ｇ、０．３３２ミリモル）およびＮ２−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体１、０．０７ｇ、０．２７６ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．０７ｍＬ、０．４１４ミリモル）および２−エトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］酢酸リチウム（中間体５６、０．０７ｇ、０．２７６ミリモル）の添加前５分間撹拌し、次に室温で一晩撹拌しておいた。粗混合物を５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させ、不純生成物をオレンジガム状物として得て、それを分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、２５ｍＬ／分）により精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。所望される質量を含有する画分を結合させ、蒸発させ、５ｇのＳＣＸカラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３で溶出した。溶媒を真空で除去し、ジアステレオ異性体の混合物を得て、それを１２０ｍＬ／分で５０／５０のＥｔＯＨ／ＭｅＯＨでの分取キラルＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ４カラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１６１】
第１溶出異性体としての実施例２２（ａ）（固体、２１．４ｍｇ、１５％）。
【０１６２】
第２溶出異性体としての実施例２２（ｂ）（固体、２０．４ｍｇ、１４％）。
【０１６３】
さらなる実施例
以下の実施例の化合物を、上の実施例に類似する様式で調製した。
【０１６４】
【表１】
2018535986.tif 000030
【０１６５】
【表２】
2018535986.tif 000031
【０１６６】
【表３】
2018535986.tif 000032
【０１６７】
実施例４５（ａ）および４５（ｂ）
（２Ｓ）−３−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−フェニル−プロパンアミドおよび（２Ｒ）−３−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−フェニル−プロパンアミド
【化２８】
2018535986.tif 000033
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（中間体６、０．１１ｇ、０．３８９ミリモル）および３−メトキシ−２−フェニル−プロパン酸（０．０８ｇ、０．４３３ミリモル）を、Ｎ２下、室温でＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。混合物を、ＤＩＰＥＡ（０．３４ｍＬ、１．９４３ミリモル）、およびヘキサフルオロリン酸Ｎ−［（ジメチルアミノ）（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イルオキシ）メチリデン］−Ｎ−メチルメチルアミニウム、ＨＡＴＵ（０．４ｍＬ、０．３６１ミリモル）の添加前５分間撹拌し、次に室温で一晩静置状態にした。粗混合物を５ｇのＳＣＸ−２カラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。純粋画分を結合させ、溶媒を低圧下で除去し、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＳｕｎＦｉｒｅ  Ｃ１８カラム、５μｍ、５０ｍｍ×１９ｍｍ、２５ｍＬ／分の流速）によりさらに精製した。減少する極性比率の０．１％ギ酸を含有する水およびＭｅＣＮを移動相として用いた。純粋画分を結合させ、低圧下で蒸発させ、ＳＣＸ−２カラムに通過させ、ＭｅＯＨで洗浄し、次にＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮＨ３で溶出した。塩基性画分を蒸発させて乾燥し、ジアステレオ異性体の混合物を淡黄色固体として得た。ジアステレオ異性体を、１２０ｍＬ／分で溶出剤としてＭｅＣＮ／ＭｅＯＨの９５／５混合物を用いる分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｏｎｅｘ  Ｌｕｘ  Ｃ１カラム、２０μｍのシリカ、５０ｍｍの直径、２５０ｍｍの長さ）により分離した。所望される化合物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、次を得た。
【０１６８】
第１溶出異性体の実施例４５（ａ）  ３−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−フェニル−プロパンアミド（３１．７ｍｇ，２０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）１．９５−２．１２（１Ｈ，ｍ），２．２１−２．３５（１Ｈ，ｍ），２．４２（３Ｈ，ｓ），３．２６（３Ｈ，ｓ），３．４−３．６３（４Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ），３．９８（１Ｈ，ｔ），４．１２（１Ｈ，ｄｄ），４．３１−４．４３（１Ｈ，ｍ），６．８２（１Ｈ，ｄ），７．１５−７．４６（６Ｈ，ｍ），７．６２（１Ｈ，ｄ），１２．１８（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４４０
【０１６９】
第２溶出異性体の実施例４５（ｂ）  ３−メトキシ−Ｎ−［５−［［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］アミノ］−１，３，４−チアジアゾール−２−イル］−２−フェニル−プロパンアミド（２８．３ｍｇ，１８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）１．９９−２．１２（１Ｈ，ｍ），２．２−２．３６（１Ｈ，ｍ），２．４１（３Ｈ，ｓ），３．２６（３Ｈ，ｓ），３．３９−３．６２（４Ｈ，ｍ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ），３．９８（１Ｈ，ｔ），４．１２（１Ｈ，ｄｄ），４．３１−４．４２（１Ｈ，ｍ），６．８２（１Ｈ，ｄ），７．１７−７．４６（５Ｈ，ｍ），７．６２（１Ｈ，ｄ），１２．１９（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋４４０．
【０１７０】
さらなる実施例
以下の実施例の化合物を、上の実施例に類似する様式で調製した。
【０１７１】
【表４】
2018535986.tif 000034
【０１７２】
【表５】
2018535986.tif 000035
【０１７３】
【表６】
2018535986.tif 000036
【０１７４】
中間体１
Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン
【化２９】
2018535986.tif 000037
１Ｌの丸底フラスコ内に、ＤＭＦ（４００ｍＬ）中の（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−アミンジヒドロクロリド（中間体２、１０．５ｇ、４４．２９ミリモル）、５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（７．９４ｇ、４４．１０ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（１７．０７ｇ、１３２．０８ミリモル）の溶液を入れた。溶液を８０℃で４時間撹拌した。得られた混合物を真空で濃縮した。粗生成物をエタノール／ＥｔＯＡｃからの再結晶化により精製し、Ｎ’−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミンを淡黄色固体として得た（１１ｇ、９４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ２．０４（１Ｈ，ｔｄ），２．２２−２．３１（１Ｈ，ｍ），３．４３−３．６２（３Ｈ，ｍ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ），４．２８（１Ｈ，ｄｑ），６．２７（２Ｈ，ｓ），６．８６（１Ｈ，ｄｄ），７．０７（１Ｈ，ｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ），８．４８（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６４．２８．
【０１７５】
中間体１はまた、以下の代替手順に従って大規模に調製した。
（Ｒ）−１−（ピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（中間体３、遊離塩基形態、２５．５ｇ、１５０．６３ミリモル）および５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（２９．８ｇ、１６５．７０ミリモル）をＤＩＰＥＡ（３９．４ｍＬ、２２５．９５ミリモル）とともに、４５℃でＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中スラリーとして撹拌した。スラリーを２０℃に冷却し、固体を真空濾過により単離した。５０ｍＬのＭｅＯＨをフィルターケーキの置換洗浄として用い、次にそれを４０℃の真空乾燥器内で一晩乾燥させた。中間体１（３２．９ｇ、８３％）を自由流動性ベージュ粉末として得た。
【０１７６】
中間体２
（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−アミンジヒドロクロリド
【化３０】
2018535986.tif 000038
１Ｌの丸底フラスコ内に、ジオキサン（２００ｍＬ）中、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体４、２０ｇ、７５．６６ミリモル）および濃縮ＨＣｌ（１００ｍＬ）の溶液を入れた。溶液を室温で３０分間撹拌した。得られた混合物を真空で濃縮した。粗生成物を１：２の比でＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃから再結晶化した。これにより、（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−アミンジヒドロクロリドをオフホワイト固体として得た（１３．４ｇ，７５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２６℃）δ  ２．２５−２．４３（２Ｈ，ｍ），３．６６−３．７４（１Ｈ，ｍ），３．７８−３．９０（３Ｈ，ｍ），４．０２−４．１０（１Ｈ，ｍ），７．７５（１Ｈ，ｄ），７．９４（１Ｈ，ｄｄ），８．６６（１Ｈ，ｄ），８．７７−８．９８（３Ｈ，ｂｒｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１６５．
【０１７７】
中間体３（遊離塩基形態）を以下の手順に従って調製した。ピリジン（４００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−クロロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体５、２０ｇ、１０７．３８ミリモル）を、炭素上パラジウム水酸化物（Ｐｅａｒｌｍａｎ触媒、２７．５ｇ、２５．８４ミリモル）およびＭｅＯＨ（１３７５ｍＬ）中１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（３１．０ｍＬ、２７６．１３ミリモル）と混合した。次に反応混合物を６５℃に９０分間加熱した。完全な変換が認められると、反応物を冷却して環境温度に戻し、触媒を濾過により除去した。次に、ＭｅＯＨ中３Ｍ  ＨＣｌ（１８４ｍＬ、５５２．２７ミリモル）を反応混合物に負荷し、溶液を６５℃に１時間加熱した。完全な変換が認められると、反応溶液を冷却して環境温度に戻し、１０×５０ｇのＳＣＸカラムに通過させた（それはＭｅＯＨで予備溶出した）。化合物を、ＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてＳＣＸから放出させた。得られた溶液をトルエン（１Ｌ）で希釈し、回転蒸発を介して乾燥するまで濃縮し、自由流動性固体を得た。（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−アミンを、遊離塩基として９７％ｗ／ｗの強度で単離した。
【０１７８】
中間体４
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］カルバメート
【化３１】
2018535986.tif 000039
２Ｌの丸底フラスコ内に、ＭｅＯＨ（８００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−クロロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体５、２３ｇ、７６．９８ミリモル）および炭素上パラジウム（２ｇ）の溶液を入れた。系を水素ガスでパージし、維持した。得られた溶液を室温で４時間撹拌した。固体を濾過除去した。得られた混合物を真空で濃縮し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−ピリダジン−３−イルピロリジン−３−イル］カルバメート（２０ｇ、８４％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２４℃）δ  １．４４（９Ｈ，ｓ），２．２５−２．３５（２Ｈ，ｍ），３．４８−３．５６（１Ｈ，ｍ），３．７０−４．１０（３Ｈ，ｍ），４．３５−４．４２（１Ｈ，ｍ），７．２６−７．３２（１Ｈ，ｍ），７．７０−７．７５（１Ｈ，ｍ），８．５３−８．５５（１Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６５．
【０１７９】
中間体５
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−クロロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート
【化３２】
2018535986.tif 000040
１Ｌの丸底フラスコ内に、ピリジン（４００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−ピロリジン−３−イル］カルバメート（２０ｇ、１０７．３８ミリモル）および３，６−ジクロロピリダジン（１６ｇ、１０７．４０ミリモル）の溶液を入れた。得られた溶液を加熱し、一晩還流させた。得られた混合物を真空で濃縮した。粗生成物を、１：３の比でのエタノール／Ｅｔ２Ｏからの再結晶化により精製し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−クロロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（２３ｇ、７２％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  １．４５（９Ｈ，ｓ），２．０２（１Ｈ，ｄｑ），２．３１（１Ｈ，ｔｄ），３．４１（１Ｈ，ｄｄ），３．５４−３．７０（２Ｈ，ｍ），３．７８（１Ｈ，ｄｄ），４．３７（１Ｈ，ｓ），４．７６（１Ｈ，ｓ），６．６１（１Ｈ，ｄ），７．１７（１Ｈ，ｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２９９．
【０１８０】
中間体６
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン
【化３３】
2018535986.tif 000041
５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（９１２ｍｇ、５．０７ミリモル）、（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（中間体７、８６０ｍｇ、４．８３ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（０．９２４ｍＬ、５．３１ミリモル）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解した。反応物を１００℃に１時間加熱し、次に室温で一晩放置した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物をＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、粗生成物を得た。これをＤＣＭ／ＭｅＯＨに溶解し、シリカに吸着させ、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜２０％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（３５０ｍｇ，２６％）を褐色ガム状物として得た。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２７８．
【０１８１】
中間体７
（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン
【化３４】
2018535986.tif 000042
トリフルオロ酢酸（１２ｍＬ）を、窒素下、２１℃でＤＣＭ（６０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体８、２．１ｇ、７．５４ミリモル）に添加した。得られた溶液を２１℃で２時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物をＭｅＯＨ中７Ｍ  ＮＨ３を用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（１．６ｇ、１１９％）を、時間とともに凝固する黄色油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２７℃）δ  １．５６−１．８（１Ｈ，ｍ），２．０４（１Ｈ，ｍ），２．３９（３Ｈ，ｓ），３．０７（１Ｈ，ｍ），３．３７−３．４３（１Ｈ，ｍ），３．４７−３．６６（３Ｈ，ｍ），４．０８（１Ｈ，ｓ），６．７３（１Ｈ，ｄ），７．１９（１Ｈ，ｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１７９．
【０１８２】
中間体８
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート
【化３５】
2018535986.tif 000043
ＤＩＰＥＡ（８．４９ｍＬ、４８．６２ミリモル）、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−ピロリジン−３−イル］カルバメート（３．６２ｇ、１９．４５ミリモル）、３−クロロ−６−メチルピリダジン（２．５ｇ、１９．４５ミリモル）およびｎ−ブタノール（３０ｍＬ）の混合物を１３０℃で１２時間撹拌し、次に週末にかけて冷却放置した。反応混合物を蒸発させ、粗生成物をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ中ＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３０〜１０％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−メチルピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（２．１ｇ、３８．８％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２７℃）δ  １．３９（９Ｈ，ｓ），１．８８（１Ｈ，ｍ），２．１４（１Ｈ，ｍ），２．４０（３Ｈ，ｓ），３．２３（１Ｈ，ｍ），３．３７−３．４５（１Ｈ，ｍ），３．４７−３．５８（１Ｈ，ｍ），３．６１（１Ｈ，ｍ），３．９９−４．２（１Ｈ，ｍ），６．７７（１Ｈ，ｄ），７．２０（２Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２７９．
【０１８３】
中間体９
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン
【化３６】
2018535986.tif 000044
ＤＩＰＥＡ（３．４８ｍＬ、１９．９６ミリモル）を、室温で無水ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（１．７９７ｇ、９．９８ミリモル）および（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（中間体１０、２ｇ、１０．９８ミリモル）に添加した。得られた溶液を８０℃で４時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物をＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン（２．９ｇ、１０３％）を褐色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  １．９０−２．１２（１Ｈ，ｍ），２．２３（１Ｈ，ｄｔｄ），３．４２（１Ｈ，ｄｄ），３．４７−３．６１（２Ｈ，ｍ），３．６９（１Ｈ，ｄｄ），４．２５（１Ｈ，ｄｑ），６．２５（２Ｈ，ｓ），７．０４（１Ｈ，ｄ），７．１４（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２８２．
【０１８４】
中間体１０
（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン
【化３７】
2018535986.tif 000045
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体１１、６ｇ、２１．２５ミリモル）を、２５℃でＤＣＭ（７０ｍＬ）およびＴＦＡ（１４．００ｍＬ）に添加した。得られた溶液を２５℃で４時間撹拌した。粗生成物を、ＳＣＸカラムを用いてイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。所望される生成物をＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３を用いてカラムから溶出し、純粋画分を蒸発させて乾燥し、（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（２．０ｇ、５２％）を淡黄色ガム状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  １．５５−１．８３（１Ｈ，ｍ），１．９８−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．８９−３．１４（１Ｈ，ｍ），３．２９−３．４３（１Ｈ，ｍ），３．５４（３Ｈ，ｄｄｔ），７．０６（１Ｈ，ｄｄ），７．３０（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１８３．
【０１８５】
中間体１１
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート
【化３８】
2018535986.tif 000046
３，６−ジフルオロピリダジン（６．０６ｇ、５２．２１ミリモル）、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−ピロリジン−３−イル］カルバメート（９．７２ｇ、５２．２１ミリモル）、ＤＩＰＥＡ（２２．８０ｍＬ、１３０．５３ミリモル）およびｎ−ブタノール（１４０ｍＬ）の混合物を１３０℃で１０時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（７５０ｍＬ）で希釈し、水（１５０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させ、粗生成物を得た。次にこれをＤＣＭに溶解し、粗生成物をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ３０〜６５％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（６−フルオロピリダジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（１５ｇ、１０２％）をクリーム状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  １．４６（９Ｈ，ｓ），１．９１−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．３２（１Ｈ，ｄｑ），３．４０（１Ｈ，ｄｄ），３．５６−３．７２（２Ｈ，ｍ），３．７８（１Ｈ，ｄｄ），４．３７（１Ｈ，ｓ），４．７０（１Ｈ，ｓ），６．７８（１Ｈ，ｄｄ），６．９８（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２８３．
【０１８６】
中間体１２
Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミン
【化３９】
2018535986.tif 000047
５−ブロモ−１，３，４−チアジアゾール−２−アミン（１．３１ｇ、７．２６４ミリモル）および（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（中間体１３、１．２ｇ、７．２６４ミリモル）を、Ｎ２下、室温で、ＤＭＦ（１５ｍＬ）中で結合させた。混合物を室温で一晩撹拌した。次にそれを蒸発させて乾燥し、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ中２Ｎ  ＮＨ３５〜１０％）により精製し、Ｎ２−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］−１，３，４−チアジアゾール−２，５−ジアミンをベージュ泡状物として得た（１．７ｇ、８８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  １．８０−１．８５（１Ｈ，ｍ），１．９８−２．０５（１Ｈ，ｍ），３．４０（４Ｈ，ｂｒｓ），４．０３（１Ｈ，ｂｒｓ），６．０９（２Ｈ，ｓ），６．８８（１Ｈ，ｄ），８．１０（１Ｈ，ｄ），８．３８（１Ｈ，ｄ）．
【０１８７】
中間体１３
（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン
【化４０】
2018535986.tif 000048
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（中間体１４、２．３９ｇ、９．０１ミリモル）をＤＣＭ（２０ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）の混合物に溶解し、溶液を低圧下で蒸発させる前に室温で１時間静置しておいた。残渣をＭｅＯＨに溶解し、２０ｇのＳＣＸカートリッジに通過させ、ＭｅＯＨ、次いでＭｅＯＨ中３Ｎ  ＮＨ３を流し、生成物を取り出した。溶媒を低圧下で蒸発させ、（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−アミン（１．４６０ｇ、９８％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２７℃）δ  １．８０−１．９２（１Ｈ，ｍ），２．１８−２．２９（１Ｈ，ｍ），３．４５（１Ｈ，ｓ），３．６−４．０１（４Ｈ，ｍ），８．１３（１Ｈ，ｄ），８．５０（１Ｈ，ｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋１６６．
【０１８８】
中間体１４
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート
【化４１】
2018535986.tif 000049
３−メチルスルファニル−１，２，４−トリアジン（中間体１５、１．５ｇ、１１．８０ミリモル）、およびｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−ピロリジン−３−イル］カルバメート（２．６４ｇ、１４．１５ミリモル）をエタノール（１２ｍＬ）に溶解し、マイクロ波管内に密封した。反応物をマイクロ波反応器内で１００℃に２４時間加熱し、室温に冷却した。ＬＣ／ＭＳは、６１％の生成物および３４％の未反応トリアジンを示した。さらに、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−ピロリジン−３−イル］カルバメート（０．５２ｇ）を添加し、マイクロ波下、１００℃での加熱を１５時間継続した。ＬＣ／ＭＳは、７６％の生成物および１８％の未反応トリアジンを示した。溶媒を低圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃおよび水性重炭酸ナトリウム間で分配した。水層を新しいＥｔＯＡｃで再抽出し、結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させた。粗生成物をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ０〜８０％）により精製した。関連画分を蒸発させ、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−（１，２，４−トリアジン−３−イル）ピロリジン−３−イル］カルバメート（２．３９０ｇ、７６％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２７℃）δ  １．４６（９Ｈ，ｓ），１．９６−２．０７（１Ｈ，ｍ），２．２６−２．３７（１Ｈ，ｍ），３．５５（１Ｈ，ｓ），３．７５（２Ｈ，ｓ），３．９０（１Ｈ，ｓ），４．３９（１Ｈ，ｓ），４．６９（１Ｈ，ｓ），８．１４（１Ｈ，ｄ），８．５３（１Ｈ，ｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ−  ［Ｍ−Ｈ］−  ２６４．
【０１８９】
中間体１５
３−メチルスルファニル−１，２，４−トリアジン
【化４２】
2018535986.tif 000050
氷／水（４００ｍＬ）中、メチルヒドラジンカルビミドチオエートヨウ化水素酸塩（中間体１６、７．５ｇ、３２．１８ミリモル）の溶液を、０℃に冷却した氷／水（４００ｍＬ）中、４０％オキサルアルデヒド（１４．７０ｍＬ、１２８．７１ミリモル）、および重炭酸ナトリウム（６．７６ｇ、８０．４５ミリモル）の撹拌溶液に添加した。得られた溶液を０℃で５時間撹拌し、次にＤＣＭ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。抽出物を結合させ、１Ｍクエン酸（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発させ、３−メチルスルファニル−１，２，４−トリアジン（３．６０ｇ、８８％）を黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２７℃）δ  ２．６８（３Ｈ，ｓ），８．３８（１Ｈ，ｄ），８．９４（１Ｈ，ｄ）．
【０１９０】
中間体１６
ヒドラジンカルビミドチオエートヨウ化水素酸塩
【化４３】
2018535986.tif 000051
ヨードメタン（０．６２３ｍＬ、１０．００ミリモル）を、エタノール（１０ｍＬ）中のヒドラジンカルボチオアミド（０．９１１ｇ、１０ミリモル）に添加した。得られた混合物を７０℃で３０分間撹拌した。反応物を室温に冷却しておいた。次に、反応混合物をナイロンフィルターカップを通して濾過した。次に、得られた固体をＥｔ２Ｏで洗浄し、真空で一晩乾燥し、メチルヒドラジンカルビミドチオエートヨウ化水素酸塩（１．８１０ｇ、７８％）を白色固体として得て、それをさらに精製せずに用いた。
【０１９１】
中間体１７
［２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−アセチル］オキシリチウム
【化４４】
2018535986.tif 000052
２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（中間体１８、０．２６ｇ、１．０３４ミリモル）および水酸化リチウム一水和物（０．０７ｇ、１．５５２ミリモル）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）および水（２ｍＬ）の混合物に溶解した。反応物を室温で２時間撹拌した。次にそれを蒸発させ、週末にかけて真空で乾燥し、［２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−アセチル］オキシリチウムを白色固体として得た（２７０ｍｇ，１００％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２７℃）δ  ３．３５（３Ｈ，ｓ），４．０８−３．９１（２Ｈ，ｍ），４．２９（２Ｈ，ｄｄｄ），４．４２（１Ｈ，ｓ），５．７８−５．５６（１Ｈ，ｍ），６．５０（１Ｈ，ｄｄｄ），６．６８（１Ｈ，ｔ），６．９３（１Ｈ，ｄｔ），７．２５（１Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２４０．
【０１９２】
中間体１８
２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル
【化４５】
2018535986.tif 000053
トルエン（２０ｍＬ）中の２−（３−ブロモフェニル）−２−メトキシ酢酸メチル（中間体１９、５００ｍｇ、１．９３ミリモル）および３−フルオロアゼチジン塩酸塩（２１５ｍｇ、１．９３ミリモル）の混合物に、Ｒｕｐｈｏｓパラジウム（ＩＩ）塩化フェネチルアミン（５８．３ｍｇ、０．０７ミリモル）、ジシクロヘキシル（２’，６’−ジイソプロポキシ−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）ホスフィン（２９．７ｍｇ、０．０６ミリモル）および炭酸セシウム（２．２０ｍｇ、６．７５ミリモル）を添加した。反応物に窒素を約５分間散布し、次に窒素下で一晩撹拌しながら９０℃に加熱した。反応物を、ＥｔＯＡｃおよび水で希釈する前、室温に冷却した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を低圧下で蒸発させた。ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ０〜２５％）により精製した。生成物を含有する画分を低圧下で蒸発させ、２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（３３０ｍｇ，６７％）を油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ３．４０（３Ｈ，ｓ），３．７２（３Ｈ，ｓ），３．９０−４．０２（２Ｈ，ｍ），４．１９（２Ｈ，ｄｄｄ），４．７１（１Ｈ，ｓ），５．３０−５．５１（１Ｈ，ｍ），６．４４（１Ｈ，ｄｄｄ），６．５４−６．５６（１Ｈ，ｍ），６．８３（１Ｈ，ｄ），７．２１（１Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２５４．
【０１９３】
中間体１９
２−（３−ブロモフェニル）−２−メトキシ酢酸メチル
【化４６】
2018535986.tif 000054
ナトリウム（０．３４５ｇ、１５．００ミリモル）をＮ２下で乾燥ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解し、この溶液に、乾燥ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中、２−ブロモ−２−（３−ブロモフェニル）酢酸メチル（中間体２０、４．２ｇ、１３．６４ミリモル）の溶液を添加した。反応混合物を、４０℃で２時間加熱し、次に低圧下で蒸発させた。残渣を水性塩化アンモニウム溶液で処理し、混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）で抽出した。結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、粗生成物を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ０〜１２％）により精製した。生成物を含有する画分を蒸発させて乾燥し、２−（３−ブロモフェニル）−２−メトキシ酢酸メチル（２．９５ｇ、８３％）を油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ３．４２（３Ｈ，ｓ），３．７４（３Ｈ，ｓ），４．７３（１Ｈ，ｓ），７．２４（１Ｈ，ｔ），７．３６−７．３９（１Ｈ，ｍ），７．４７（１Ｈ，ｄｄｄ），７．６１（１Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＴＯＦ  ＭＳ  ＥＩ＋２５７．９８８０．
【０１９４】
中間体２０
２−ブロモ−２−（３−ブロモフェニル）酢酸メチル
【化４７】
2018535986.tif 000055
四塩化炭素（５０ｍＬ）下の２−（３−ブロモフェニル）酢酸メチル（４ｇ、１７．４６ミリモル）およびＮＢＳ（３．２６ｇ、１８．３３ミリモル）および（Ｅ）−２，２’−（ジアゼン−１，２−ジイル）ビス（２−メチルプロパンニトリル）（０．１４３ｇ、０．８７ミリモル）の混合物を加熱し、４時間還流し、次に室温に冷却した。固体を濾過除去し、廃棄し、濾液を低圧下で蒸発させた。ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中０〜５％ＥｔＯＡｃ）により精製した。生成物を含有する画分を低圧下で蒸発させ、２−ブロモ−２−（３−ブロモフェニル）酢酸メチル（４．２ｇ、７８％）を油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ３．８０（３Ｈ，ｓ），５．２８（１Ｈ，ｓ），７．２１−７．２６（１Ｈ，ｍ），７．４５−７．４８（１Ｈ，ｍ），７．４８−７．５（１Ｈ，ｍ），７．７０（１Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＴＯＦ  ＭＳ  ＥＩ＋３０５．８８９１．
【０１９５】
中間体２１
［２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−アセチル］オキシリチウム
【化４８】
2018535986.tif 000056
２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（中間体２３、０．０８ｇ、０．２９５ミリモル）および水酸化リチウム一水和物（０．０１ｇ、０．３５４ミリモル）をメタノール（３ｍＬ）および水（２ｍＬ）の混合物に溶解した。反応物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を、低圧下で蒸発させ、週末にかけて真空乾燥器内で乾燥し、［２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−アセチル］オキシリチウムを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ３．１９（３Ｈ，ｓ），４．２４−４．１７（４Ｈ，ｍ），６．４２−６．３５（１Ｈ，ｍ），６．５７（１Ｈ，ｓ），６．８２（１Ｈ，ｄ），７．０９（１Ｈ，ｔ）．
【０１９６】
中間体２２
２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸
【化４９】
2018535986.tif 000057
ＭｅＯＨ（４ｍＬ）中、２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸塩（中間体２３、２７０ｍｇ、１．００ミリモル）の溶液を、水（２ｍＬ）中、水酸化リチウム一水和物（８４ｍｇ、１．９９ミリモル）の溶液で処理し、混合物を室温で２時間撹拌した。ＭｅＯＨを低圧下で蒸発させ、水層を鹹水（２ｍＬ）で希釈し、酢酸で中和し、２−メチルテトラヒドロフラン（４×５ｍＬ）で抽出した。結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸（１３０ｍｇ，５０．８％）をガム状物として得た。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２５８．
【０１９７】
中間体２３
２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル
【化５０】
2018535986.tif 000058
トルエン（２０ｍＬ）中の２−（３−ブロモフェニル）−２−メトキシ酢酸メチル（中間体１９、４７３ｍｇ、１．８３ミリモル）および３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（２３６ｍｇ、１．８３ミリモル）の混合物に、Ｒｕｐｈｏｓパラジウム（ＩＩ）塩化フェネチルアミン（５５．２ｍｇ、０．０７ミリモル）、ジシクロヘキシル（２’，６’−ジイソプロポキシ−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）ホスフィン（２８．１ｍｇ、０．０６ミリモル）および炭酸セシウム（２．０８ｇ、６．３９ミリモル）を添加した。反応物にＮ２を約５分間散布し、次にＮ２下で一晩撹拌しながら９０℃に加熱した。反応物を、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）で希釈する前、室温に冷却した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を低圧下で蒸発させた。ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ０〜２０％）により精製した。生成物を含有する画分を低圧下で蒸発させ、２−［３−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（２８０ｍｇ，５７％）を油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ３．６２（３Ｈ，ｓ），４．２５（４Ｈ，ｔ），４．８２（１Ｈ，ｓ），６．５１−６．５６（２Ｈ，ｍ），６．７９（１Ｈ，ｄ），７．１９−７．２５（１Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２７２．
【０１９８】
中間体２４
［２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］アセチル］オキシリチウム
【化５１】
2018535986.tif 000059
２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］酢酸メチル（中間体２６、０．２４ｇ、０．８８６ミリモル）および水酸化リチウム一水和物（０．０６ｇ、１．３２９ミリモル）を、メタノール（５ｍＬ）および水（２ｍＬ）の混合物に溶解した。反応物を室温で２時間撹拌し、次に低圧下で蒸発させ、週末にかけて真空で乾燥した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ２．９６（３Ｈ，ｓ），３．０３（３Ｈ，ｓ），３．３７−３．２６（２Ｈ，ｍ），３．８０（２Ｈ，ｄｄ），４．０１（１Ｈ，ｓ），４．０９（１Ｈ，ｔｔ），６．０６（１Ｈ，ｄｄ），６．２５（１Ｈ，ｔ），６．４９（１Ｈ，ｄｔ），６．８３（１Ｈ，ｔ）．
【０１９９】
中間体２５
２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］酢酸
【化５２】
2018535986.tif 000060
ＭｅＯＨ（７ｍＬ）中、２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］酢酸メチル（中間体２６、４５０ｍｇ、１．６１ミリモル）の溶液を、水（３ｍＬ）中、水酸化リチウム一水和物（１３５ｍｇ、３．２２ミリモル）の溶液で処理し、混合物を室温で一晩撹拌した。ＭｅＯＨを低圧下で蒸発させ、水性残渣をエーテルで抽出した。水層を酢酸で酸性化し、固体塩化ナトリウムで処理して飽和溶液を得て、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］酢酸（２３６ｍｇ，５８．３％）をガム状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ３．２３（３Ｈ，ｓ），３．２６（３Ｈ，ｓ），３．５１−３．５９（２Ｈ，ｍ），３．９７−４．０６（２Ｈ，ｍ），４．２６−４．３４（１Ｈ，ｍ），４．５９（１Ｈ，ｓ），６．３８（１Ｈ，ｄｄ），６．４３（１Ｈ，ｓ），６．６９（１Ｈ，ｄ），７．１３（１Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２５２．
【０２００】
中間体２６
２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］酢酸メチル
【化５３】
2018535986.tif 000061
トルエン（２０ｍＬ）中、２−（３−ブロモフェニル）−２−メトキシ酢酸メチル（中間体１９、５２４ｍｇ、２．０２ミリモル）および３−メトキシアゼチジン塩酸塩（２５０ｍｇ、２．０２ミリモル）の混合物に、Ｒｕｐｈｏｓパラジウム（ＩＩ）塩化フェネチルアミン（６１．１ｍｇ、０．０７ミリモル）、ジシクロヘキシル（２’，６’−ジイソプロポキシ−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）ホスフィン（３１．２ｍｇ、０．０７ミリモル）および炭酸セシウム（２３０７ｍｇ、７．０８ミリモル）を添加した。反応物に窒素を約５分間散布し、次に窒素下で一晩撹拌しながら９０℃に加熱した。反応物を、ＥｔＯＡｃおよび水で希釈する前、室温に冷却した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を低圧下で蒸発させた。ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ０〜２５％）による精製により、２−メトキシ−２−［３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］酢酸メチル（４５０ｍｇ，８４％）を油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３９（３Ｈ，ｓ），３．６８−３．７４（５Ｈ，ｍ），４．０７−４．１３（２Ｈ，ｍ），４．２９−４．３６（１Ｈ，ｍ），４．７０（１Ｈ，ｓ），６．４３（１Ｈ，ｄｄｄ），６．５１−６．５４（１Ｈ，ｍ），６．７９（１Ｈ，ｄ），７．１９（１Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６６．
【０２０１】
中間体２７
２−エトキシ−２−（３−メトキシフェニル）酢酸
【化５４】
2018535986.tif 000062
０℃でエタノール（４０ｍＬ）中、３−メトキシベンズアルデヒド（５．０ｇ、３６．７２ミリモル）およびブロモホルム（３．８５ｍＬ、４４．０６ミリモル）の撹拌混合物に、エタノール（６０ｍＬ）中、水酸化カリウム（１１．３３ｇ、２０１．９８ミリモル）の溶液を１時間かけて液滴添加した。添加の完了後、混合物を室温で一晩撹拌放置した。形成された沈殿物を濾過により除去し、濾液を蒸発させ、ペーストを得て、それを水（１００ｍＬ）に取り込ませ、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。次に水相を２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、薄茶色油を得た。これをシリカ上に吸収させ、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ５％）により精製し、２−エトキシ−２−（３−メトキシフェニル）酢酸（３．１ｇ、４０％）を薄茶色油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２１℃）δ  １．２８（３Ｈ，ｔ），２．０９（１Ｈ，ｓ），３．６４−３．５２（２Ｈ，ｍ），３．８１（３Ｈ，ｓ）４．８６（１Ｈ，ｓ），６．８９（１Ｈ，ｄｄｄ），６．９９（１Ｈ，ｍ），７．０３（１Ｈ，ｍ），７．２９（１Ｈ，ｔ）．ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ−Ｈ］−２０９．
【０２０２】
中間体２８
２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−酢酸
【化５５】
2018535986.tif 000063
ＭｅＯＨ（８０ｍＬ）中、水酸化カリウム（９．７９ｇ、１７４．４３ミリモル）の溶液を、０℃でＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中、３，５−ジメトキシベンズアルデヒド（５．２７ｇ、３１．７１ミリモル）およびブロモホルム（３．３３ｍＬ、３８．０６ミリモル）の撹拌混合物に２時間かけて少しずつ添加した。次に、混合物を室温に温めておき、一晩撹拌放置した。固体を低圧下で濾過し、ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）ですすいだ。濾液を蒸発させて濃厚白色ペーストにし、次に水（１５０ｍＬ）に再溶解した。これをＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）で洗浄し、水性部分を２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化した。水相をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で抽出した。結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−メトキシ−酢酸を黄色ガム状物として得た（５．００ｇ，７０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２７℃）δ  ３．７２（９Ｈ，ｓ），４．６８（１Ｈ，ｓ），６．４５（１Ｈ，ｓ），６．５２（２Ｈ，ｓ）．
【０２０３】
中間体２９
３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロパン酸
【化５６】
2018535986.tif 000064
３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロピオン酸エチル（中間体３０、０．３ｇ、１．２５９ミリモル）を水（５ｍＬ）に懸濁し、水酸化リチウム（０．３ｇ、１２．５９ミリモル）で処理し、次に６０℃で３時間加熱した。反応混合物を室温に冷却しておいた。水性物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で抽出し、有機物を廃棄した。水性物を１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ＝１に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、無色ガム状物を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜１００％）により精製した。所望される化合物を含有する画分を結合させ、蒸発させ、３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロパン酸（８８ｍｇ，３３％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ３．２５（ｓ，３Ｈ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ），３．７４（３Ｈ，ｓ），３．８８−３．７６（２Ｈ，ｍ），６．９３−６．８０（３Ｈ，ｍ），７．３２−７．１７（１Ｈ，ｍ），１２．５１（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２１１．
【０２０４】
中間体３０
３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロピオン酸エチル
【化５７】
2018535986.tif 000065
丸底フラスコ内、ＭｅＣＮ（２ｍＬ）中、３−ヒドロキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロピオン酸エチル（中間体３１、０．３８ｇ、１．６９５ミリモル）の溶液に、酸化銀（０．５ｇ、２．１４ミリモル）を添加した。溶液を０℃に冷却し、ヨードメタン（０．１７ｍＬ、２．６７６ミリモル）で処理した。反応混合物を、暗所、室温で２．５日間撹拌しておいた。ＬＣＭＳ分析によると、一部が生成物であるが主に出発物質であることが示された。さらに、０．５３ｍＬのヨードメタンおよび０．１５ｇの酸化銀を添加し、撹拌を２４時間継続した。さらに７日間撹拌放置したことから、反応はさらに進行していた。ＬＣＭＳ分析によると、完全な変換が示された。混合物をセライトを通して濾過し、溶媒を低圧下で除去した。残渣をシリカに吸着させ、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜４０％）により精製した。適切な画分を低圧下で蒸発させ、３−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロピオン酸エチルを無色油として単離した（０．３ｇ、７４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２１℃）δ  １．２３（３Ｈ，ｔ），３．３７（３Ｈ，ｓ），３．５８（１Ｈ，ｄｄ），３．８０（３Ｈ，ｓ），３．８４（１Ｈ，ｄｄ），３．９７（１Ｈ，ｔ），４．２４−４．０８（２Ｈ，ｍ），６．８２（１Ｈ，ｄｄｄ），６．９５−６．８５（２Ｈ，ｍ），７．２３（１Ｈ，ｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２３９．
【０２０５】
中間体３１
３−ヒドロキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロピオン酸エチル
【化５８】
2018535986.tif 000066
２−（３−メトキシフェニル）酢酸エチル（１．０ｇ、５．１４９ミリモル）を、炭酸水素ナトリウム（０．０２ｇ、０．２５７ミリモル）を有する丸底フラスコ中で秤量した。ＤＭＳＯ（８ｍＬ）、次いでパラホルムアルデヒド（０．３９ｍＬ、５．１４９ミリモル）を添加した。得られた懸濁液を室温で２４時間撹拌しておき、次に反応物を６０℃で３時間加熱し、無色溶液を得た。反応混合物を冷却し、水（１００ｍＬ）で希釈し、０．５Ｍ  ＨＣｌで中和した。水性物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、低圧下で蒸発させ、無色油を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜５０％）により精製した。溶媒を低圧下で除去し、３−ヒドロキシ−２−（３−メトキシフェニル）プロピオン酸エチルを無色油として得た（０．３８ｇ、３３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２１℃）δ  １．２３（３Ｈ，ｔ），２．２６（１Ｈ，ｓ），３．８６−３．７６（５Ｈ，ｍ），４．２８−４．０６（３Ｈ，ｍ），６．８９−６．７９（３Ｈ，ｍ），７．３０−７．２２（１Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２２５．
【０２０６】
中間体３２
２−メトキシ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化５９】
2018535986.tif 000067
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中、水酸化カリウム（１．８５１ｇ、３３．００ミリモル）の溶液を、０℃でＭｅＯＨ（５．００ｍＬ）中、３−（トリフルオロメトキシ）ベンズアルデヒド（１．１４１ｇ、６ミリモル）およびブロモホルム（０．６３０ｍＬ、７．２０ミリモル）の撹拌混合物に２時間かけて少しずつ添加した。次に、混合物を室温に温めておき、一晩撹拌放置した。反応混合物中に白色沈殿物が形成した。ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）を用いてフィルターケーキをすすぎながら、固体を低圧下で濾過除去した。濾液を蒸発させて濃厚白色ペーストにし、次に水（５０ｍＬ）に再溶解した。次にこれをＥｔ２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。水相をｐＨ＝２に酸性化し（約５ｍＬの２Ｍ  ＨＣｌ溶液）、次にＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）中に抽出した。結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、無色油を得た。粗生成物をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ１０〜５０％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、２−メトキシ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸（０．８３２ｇ、５５％）を無色油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，３０℃）δ  ３．４７（３Ｈ，ｓ），４．８１（１Ｈ，ｓ），７．２０−７．２４（１Ｈ，ｍ），７．３３（１Ｈ，ｓ），７．３７−７．４６（２Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ−Ｈ］−２４９．４．
【０２０７】
中間体３３
２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−酢酸
【化６０】
2018535986.tif 000068
０℃でエタノール（１５ｍＬ）中、３，５−ジメトキシベンズアルデヒド（２．１６ｍＬ、１５．０４ミリモル）およびブロモホルム（１．５８ｍＬ、１８．０５４ミリモル）の撹拌混合物に、エタノール（３０ｍＬ）中、水酸化カリウム（４．６４ｇ、８２．７４７ミリモル）の溶液を３０分かけて液滴添加した。添加の完了後、混合物を撹拌放置し、室温に一晩温めた。翌朝、沈殿物を濾過により除去した。濾液を蒸発させ、ペーストを得て、それを水（７５ｍＬ）に取り込ませ、ＥｔＯＡｃ（２×７５ｍＬ）で抽出した。次に水相を２Ｎ  ＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化した。それをＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発させ、粗生成物を得た。ＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜５％）により精製した。純粋画分を結合させ、低圧下で蒸発させ、２−（３，５−ジメトキシフェニル）−２−エトキシ−酢酸をオレンジガム状物として得た（２．４６ｇ、６８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２５℃）δ  １．１５（３Ｈ，ｔ），３．３７−３．４２（１Ｈ，ｍ），３．４８−３．５５（１Ｈ，ｍ），３．７３（６Ｈ，ｓ），４．７８（１Ｈ，ｓ），６．２９（１Ｈ，ｓ），６．５３（１Ｈ，ｓ），６．５４（１Ｈ，ｓ），１２．７６（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ−Ｈ］−２３９．
【０２０８】
中間体３４
２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸
【化６１】
2018535986.tif 000069
２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（中間体３５、２５０ｍｇ、０．８８ミリモル）を水（１．５ｍＬ）に懸濁し、水酸化リチウム（４２ｍｇ、１．７７ミリモル）で処理し、４０℃で２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却しておき、ＭｅＯＨを低圧下で蒸発させた。水相を鹹水（５ｍＬ）で希釈し、飽和水性クエン酸の添加によりｐＨ＝５に調整した。水性物を、５％ＭｅＯＨを含有するＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。結合した有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過した。水性物を、ギ酸の添加によりｐＨ＝３にさらに酸性化し、次にＥｔＯＡｃ（４×１０ｍＬ）で再抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を結合させ、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ抽出物と結合させ、次に低圧下で蒸発させた。ガム状残留物をＥｔ２Ｏから２倍に濃縮し、２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸（２２１ｍｇ，９３％）を淡黄色ガラス状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２１℃）δ  ３．３３（３Ｈ，ｓ），３．４１（３Ｈ，ｓ），３．８０−３．８３（２Ｈ，ｍ），４．１９−４．２３（２Ｈ，ｍ），４．２９−４．３３（１Ｈ，ｍ），４．６８（１Ｈ，ｓ），６．５０（１Ｈ，ｄｄ），６．７５（１Ｈ，ｄｄｄ），６．９４（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２７０．１．
【０２０９】
中間体３５
２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル
【化６２】
2018535986.tif 000070
２−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸メチル（中間体３６、６００ｍｇ、２．１７ミリモル）を、シュバシール、Ｎ２流入口および還流コンデンサーを備えた３首丸底フラスコで秤量した。フラスコにＮ２を５分間流し、次に３−メトキシアゼチジン塩酸塩（０．２７ｇ、２．１７ミリモル）および炭酸セシウム（２．４７ｇ、７．５８ミリモル）を添加した。別々のフラスコにおいて、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２，６−ジ−イソ−プロポキシビフェニル、（Ｒｕｐｈｏｓ、０．０４ｇ、０．０８７ミリモル）およびＲｕｐｈｏｓ  Ｐｄ  Ｇ２（０．０６ｇ、０．０７７ミリモル）を乾燥トルエンに溶解した。溶液を、ニードルを通じてＮ２で５分間脱気し、次にシュバシールを通じて３首丸底フラスコ内の他の試薬に添加した。反応混合物を９０℃で２０時間加熱した。反応混合物を室温に冷却しておき、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）で希釈した。有機層を収集し、水性物をＥｔＯＡｃのさらなる一部（２０ｍＬ）で洗浄した。有機物を鹹水（５０ｍＬ）で洗浄し、分離し、低圧下で蒸発させた。残渣をＦＣＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル中ＥｔＯＡｃ０〜７０％）により精製した。純粋画分を結合させ、低圧下で蒸発させ、２−［４−フルオロ−３−（３−メトキシアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（１３６ｍｇ，２２％）を無色油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２１℃）δ  ３．３３（３Ｈ，ｓ），３．３８（３Ｈ，ｓ），３．７２（３Ｈ，ｓ），３．７８−３．８３（２Ｈ，ｍ），４．１９−４．２３（２Ｈ，ｍ），４．２９−４．３３（１Ｈ，ｍ），４．６７（１Ｈ，ｓ），６．５５（１Ｈ，ｄｄ），６．７５（１Ｈ，ｄｄｄ），６．９２（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２８４．０．
【０２１０】
中間体３６
２−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸メチル
【化６３】
2018535986.tif 000071
ナトリウム（９３ｍｇ、４．０５ミリモル）を、Ｎ２下でＭｅＯＨ（１２ｍＬ）に溶解した。ＭｅＯＨ（３ｍＬ）中、２−ブロモ−２−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）酢酸メチル（中間体３７、１．２０ｇ、３．６８ミリモル）の溶液を添加し、反応混合物を４０℃に２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、低圧下で蒸発させた。残渣を飽和ＮＨ４Ｃｌ（水性）（１０ｍＬ）で処理し、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。結合した有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させた。残渣をＦＣＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル中ＥｔＯＡｃ０〜１０％）により精製した。純粋画分を結合させ、低圧下で蒸発させ、２−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸メチル（６１６ｍｇ，６０％）を無色油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２１℃）δ  ３．４２（３Ｈ，ｓ），３．７４（３Ｈ，ｓ），４．７３（１Ｈ，ｓ），７．１２（１Ｈ，ｔ），７．３７（１Ｈ，ｄｄｄ），７．６７（１Ｈ，ｄｄ）．
【０２１１】
中間体３７
２−ブロモ−２−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）酢酸メチル
【化６４】
2018535986.tif 000072
四塩化炭素（５０ｍＬ）中、２−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）酢酸メチル（５．０ｇ、２０．２４ミリモル）の溶液を調製し、Ｎ−ブロモサクシニミド（３．７８ｇ、２１．２５ミリモル）、次いで２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）（０．１７ｇ、１．０１ミリモル）を添加した。反応物を加熱して４時間還流し、室温に冷却しておいた。沈殿物を濾過除去し、溶液を低圧下で蒸発させた。粗製残渣をＦＣＣ（ＳｉＯ２、石油エーテル中ＥｔＯＡｃ０〜１０％）により精製した。純粋画分を結合させ、低圧下で蒸発させ、２−ブロモ−２−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）酢酸メチル（５．３０ｇ、８０％）を無色油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２１℃）δ  ３．８１（３Ｈ，ｓ），５．２８（１Ｈ，ｓ），７．１２（１Ｈ，ｔ），７．４９（１Ｈ，ｄｄｄ），７．７８（１Ｈ，ｄｄ）．
【０２１２】
中間体３８
２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸リチウム
【化６５】
2018535986.tif 000073
水酸化リチウム（９９．８６ｍｇ、４．１６ミリモル）を水（１０ｍＬ）およびメタノール（３３ｍＬ）に懸濁し、２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（中間体３９、５６５ｍｇ、２．０８ミリモル）で処理し、窒素下、４５℃で２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却しておき、ＭｅＯＨおよび水を、乾燥器内で１日間真空で乾燥する前に低圧下で除去した。これにより、２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸リチウムを得た（０．６０ｇ、７５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ３．１８（３Ｈ，ｓ），３．９５−３．５０（３Ｈ，ｍ），４．１８−４．１１（１Ｈ，ｍ），４．２１（１Ｈ，ｓ），５．５８−５．３２（１Ｈ，ｍ），６．６０（１Ｈ，ｄｄ），６．７７−６．７０（１Ｈ，ｍ），６．９６−６．８８（１Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６３．１．
【０２１３】
中間体３９
２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル
【化６６】
2018535986.tif 000074
シュバシール、マグネチックスターラーバー、窒素流入口および還流コンデンサーを備えた２首丸底フラスコ内に、Ｒｕｐｈｏｓ  Ｐｄ  Ｇ１メチル−ｔ−ブチルエーテル付加体（０．１６ｇ、０．１９３ミリモル）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２，６−ジイソプロポキシビフェニル、（Ｒｕｐｈｏｓ、０．０９ｇ、０．１９３ミリモル）、３−フルオロアゼチジン塩酸塩（０．５ｇ、４．４６１ミリモル）および炭酸セシウム（４．２４ｇ、１３．０１ミリモル）を添加し、フラスコに窒素ガスを５分間流し、次に別々の丸底フラスコ内に、２−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸メチル（中間体３６、１．０３ｇ、３．７１７ミリモル）を入れた。フラスコにシュバシールを装備し、トルエン（２５ｍＬ）を窒素下で添加した。得られた溶液を５分間、窒素をそれを通じて通気することにより脱気し、次にそれを、他の試薬を含有する２首丸底フラスコに窒素下で添加した。反応混合物を９０℃で４８時間加熱し、次に室温に冷却しておき、低圧下で蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）間で分配した。水層をＥｔＯＡｃのさらなる一部（２００ｍＬ）で抽出した。有機物を結合させ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、低圧下で蒸発させ、淡褐色油を得て、それをＥｔＯＡｃに溶解し、シリカ上に吸収させ、次にフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜１００％で溶出した。適切な画分の蒸発により、２−［４−フルオロ−３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル、（５６５ｍｇ，３３％）を淡黄色液体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ３．２８（３Ｈ，ｓ），３．６３（３Ｈ，ｓ），４．０２−３．８４（２Ｈ，ｍ），４．３１−４．１７（２Ｈ，ｍ），４．８４（１Ｈ，ｓ），５．５７−５．３１（１Ｈ，ｍ），６．６２−６．５３（１Ｈ，ｍ），６．７９−６．７１（１Ｈ，ｍ），７．０７（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２７１．２．
【０２１４】
中間体４０
２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−酢酸リチウム
【化６７】
2018535986.tif 000075
水酸化リチウム（０．０２ｇ、０．９３２ミリモル）を水（１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（３ｍＬ）に懸濁し、２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（中間体４１、０．１３ｇ、０．４６６ミリモル）で処理した。混合物をＮ２下で４５℃に２時間加熱した。次にそれを室温に冷却しておき、溶媒を真空で３日間乾燥する前に低圧下で除去し、２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−酢酸リチウムを得た（１３７ｍｇ，１０１％）。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６９．３．
【０２１５】
中間体４１
２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル
【化６８】
2018535986.tif 000076
丸底フラスコ内に、２−（３−ブロモ−５−メトキシ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸メチル（中間体４２、０．３ｇ、１．０３８ミリモル）を入れた。フラスコにシュバシールを装備し、トルエン（６．５ｍＬ）をＮ２下で添加した。得られた溶液を５分間、Ｎ２をそれを通じて通気することにより脱気した。シュバシール、マグネチックスターラーバー、窒素流入口および還流コンデンサーを備えた２首丸底フラスコ内に、Ｒｕｐｈｏｓ  Ｐｄ  Ｇ１メチル−ｔ−ブチルエーテル付加体（０．０４ｇ、０．０５４ミリモル）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２，６−ジイソプロポキシビフェニル、（Ｒｕｐｈｏｓ、０．０３ｇ、０．０５４ミリモル）、３−フルオロアゼチジン塩酸塩（０．１４ｇ、１．２４５ミリモル）および炭酸セシウム（１．１８ｇ、３．６３２ミリモル）を添加した。フラスコに、シュバシールを通じてトルエン中、２−（３−ブロモ−５−メトキシ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸メチル（０．３ｇ、１．０３８ミリモル）の脱気溶液の添加前、Ｎ２を５分間流した。反応混合物を、９０℃で４８時間加熱し、次に室温に冷却しておき、低圧下で蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）間で分配した。水層をＥｔＯＡｃのさらなる一部（２００ｍＬ）で抽出した。有機物を結合させ、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、淡褐色油を得て、それをＥｔＯＡｃに溶解し、シリカ上に吸収させた。それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜５０％）により精製した。適切な画分の蒸発により、２−［３−（３−フルオロアゼチジン−１−イル）−５−メトキシ−フェニル］−２−メトキシ−酢酸メチル（１３２ｍｇ，４２％）を淡黄色液体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ３．２７（３Ｈ，ｓ），３．６２（３Ｈ，ｓ），３．７１（３Ｈ，ｓ），３．７８−３．９６（２Ｈ，ｍ），４．０５−４．２１（２Ｈ，ｍ），４．７７（１Ｈ，ｓ），５．３５−５．５７（１Ｈ，ｍ），５．９８（１Ｈ，ｓ），６．０５（１Ｈ，ｓ），６．２９（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２８３．３．
【０２１６】
中間体４２
２−（３−ブロモ−５−メトキシ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸メチル
【化６９】
2018535986.tif 000077
２−（３−ブロモ−５−メトキシ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸（中間体４３、２．７７ｇ、１０．０６ミリモル）をＭｅＯＨ（３０ｍＬ）に溶解し、濃硫酸（０．１７ｍＬ、２．０１４ミリモル）で処理し、次に６５℃に２時間加熱した。混合物を室温に冷却し、蒸発させ、次に水（５ｍＬ）、次いで飽和水性重炭酸ナトリウム（２０ｍＬ）で希釈した。水性物を、ＤＣＭ、次いでＥｔＯＡｃ中に抽出した。結合した有機物を蒸発させ、粗製材料をＦＣＣ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜４０％）により精製した。生成物を含有する画分を蒸発させ、２−（３−ブロモ−５−メトキシ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸メチルを得た（１．２ｇ、４１％）。（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，３０℃）δ  ３．３１  （ｓ，３Ｈ），３．６５（３Ｈ，ｓ），３．７８（３Ｈ，ｓ），４．９４（１Ｈ，ｓ），６．９０−６．９５（１Ｈ，ｍ），７．１１−７．１４（１Ｈ，ｍ），７．１５（１Ｈ，ｄｄ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２９０．
【０２１７】
中間体４３
２−（３−ブロモ−５−メトキシ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸
【化７０】
2018535986.tif 000078
０℃でメタノール（１５ｍＬ）中、水酸化カリウム（２．８７ｇ、５１．１５ミリモル）およびブロモホルム（０．９８ｍＬ、１１．１６ミリモル）の撹拌混合物に、メタノール（６０ｍＬ）中、３−ブロモ−５−メトキシ−ベンズアルデヒド（０．７５ｍＬ、９．３０１ミリモル）の懸濁液を１０分間かけて添加した。添加後、混合物を、一晩で室温に温まるように撹拌放置した。次に、反応混合物をＤＣＭ（６０ｍＬ）で処理し、沈殿物を濾過により除去した。濾液を蒸発させ、ペーストを得て、それを水（２００ｍＬ）に取り込ませ、ＤＣＭ（２００ｍＬ）で抽出した。次に水相を２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２に酸性化し、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。結合した有機物を低圧下で蒸発させ、クロマトグラフにかけた（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ０〜３０％−シクロヘキサン）。生成物を含有する画分を蒸発させ、２−（３−ブロモ−５−メトキシ−フェニル）−２−メトキシ−酢酸を得た（０．８４ｇ、３３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ３．３０（ｓ，３Ｈ）３．７７（ｓ，３Ｈ），４．７８（ｓ，１Ｈ），６．９４−６．９１（ｍ，１Ｈ），７．１４−７．１０（ｍ，２Ｈ），１３．０４（ｓ，１Ｈ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２７５．１．
【０２１８】
中間体４４
２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化７１】
2018535986.tif 000079
０℃でＭｅＯＨ（１ｍＬ）中、３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）ベンズアルデヒド（中間体４５、０．１５ｇ、０．６８１ミリモル）およびブロモホルム（０．０７ｍＬ、０．８１ミリモル）の撹拌混合物に、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中、水酸化カリウム（０．２０７ｇ、３．７５ミリモル）の溶液を３０分かけて液滴添加した。混合物を撹拌し、室温に一晩温めた。得られた沈殿物を濾過により除去した。濾液を蒸発させ、ペーストを得て、それを水（１００ｍＬ）に取り込ませ、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出し、未反応アルデヒドを除去した。次に水相を２Ｎ塩酸でｐＨ＝２に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、粗生成物を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ０〜１０％）により精製し、２−メトキシ−２−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸を黄色固体として得た（１９１ｍｇ，３４％）。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２８０．
【０２１９】
中間体４５
３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）ベンズアルデヒド
【化７２】
2018535986.tif 000080
ＤＣＭ（１８ｍＬ）中、［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］メタノール（中間体４６、３３０ｍｇ、１．４９ミリモル）の撹拌溶液に、活性化二酸化マンガン（６４６ｍｇ、７．４３ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出し、鹹水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、粗生成物を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜５０％）により精製し、３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）ベンズアルデヒドを（０．１５ｇ、４５％）無色油として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  ３．８３（３Ｈ，ｓ），７．２４−７．２７（１Ｈ，ｍ），７．３９−７．４２（１Ｈ，ｍ），７．４６−７．４８（１Ｈ，ｍ），９．９４（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２２２．
【０２２０】
中間体４６
［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］メタノール
【化７３】
2018535986.tif 000081
窒素下、０℃でＴＨＦ（１０ｍＬ）中、３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）安息香酸（０．５０ｇ、２．１２ミリモル）の撹拌溶液に、水素化アルミニウムリチウム（ＴＨＦ中１Ｍ、２．３３ｍＬ、２．３３ミリモル）を１０分かけて液滴添加した。反応混合物を撹拌し、窒素下で室温に３時間温めた。反応混合物を水（１０ｍＬ）、次いで２Ｎ  ＮａＯＨ（３０ｍＬ）溶液で希釈し、形成された塩を濾過により除去した。濾液をＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、粗生成物を得て、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜５０％）により精製し、［３−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］メタノール（０．３３ｇ、６７％）を白色固体として得た。ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２２２．
【０２２１】
中間体４７
２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−酢酸
【化７４】
2018535986.tif 000082
０℃でエタノール（４０ｍＬ）中、３−（ジフルオロメトキシ）ベンズアルデヒド（２．０ｇ、１１．６１９ミリモル）およびブロモホルム（１．２２ｍＬ、１３．９４ミリモル）の撹拌混合物に、エタノール（２０ｍＬ）中、水酸化カリウム（３．５９ｇ、６３．９０ミリモル）の溶液を１時間かけて液滴添加した。添加後、混合物を撹拌放置し、室温に一晩温めた。沈殿物を濾過により除去し、濾液を低圧下で蒸発させ、ペーストを得て、それを水（１００ｍＬ）に取り込ませ、ＥｔＯＡｃ（２×７５ｍＬ）で抽出した。次に水相を２Ｍ  ＨＣｌでｐＨ＝１に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（２×７５ｍＬ）で抽出した。結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させ、薄茶色油を得て、それをＦＣＣ（ＳｉＯ２、９５：５のシクロヘキサン：ＥｔＯＡｃ＋０．１％ギ酸が８：２のＥｔＯＡｃ：シクロヘキサン＋０．１％ギ酸に増加）により精製した。適切な画分を低圧下で蒸発させ、２−［３−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−２−エトキシ−酢酸を無色油として得た（１．８ｇ、６２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，２１℃）δ  １．２９（３Ｈ，ｔ），３．４９−３．７０（２Ｈ，ｍ），４．８９（１Ｈ，ｓ），６．５２（１Ｈ，ｔ），７．０７−７．１５（１Ｈ，ｍ），７．２１−７．２６（１Ｈ，ｍ），７．２８−７．３５（１Ｈ，ｍ），７．３４−７．４１（１Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ−［Ｍ−Ｈ］−２４５．
【０２２２】
中間体４８
２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］酢酸
【化７５】
2018535986.tif 000083
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中、水酸化カリウム（１．４２７ｇ、２５．４３ミリモル）の溶液を、０℃でＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中、３−（オキセタン−３−イル）ベンズアルデヒド（中間体４９、７５０ｍｇ、４．６２ミリモル）およびブロモホルム（０．４８５ｍＬ、５．５５ミリモル）の撹拌混合物に２時間かけて少しずつ添加した。次に混合物を室温に温めておき、一晩撹拌放置した。固体を低圧下で濾過し、固体をＭｅＯＨ（１５ｍＬ）ですすいだ。濾液を蒸発させて濃厚白色ペーストにし、次に水（１５０ｍＬ）に再溶解した。これをＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）で洗浄し、次に２ＭでｐＨ＝２に酸性化した。水相をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）中に抽出し、結合した有機物を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、低圧下で蒸発させ、２−メトキシ−２−［３−（オキセタン−３−イル）フェニル］酢酸を無色油として得て（１．０ｇ、９７％）、それをさらに精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ３．３１（３Ｈ，ｓ），４．１８−４．３５（１Ｈ，ｍ），４．５８（２Ｈ，ｍ），４．７７（１Ｈ，ｓ），４．９４（１Ｈ，ｍ），７．２２−７．５７（４Ｈ，ｍ）．
【０２２３】
中間体４９
３−（オキセタン−３−イル）ベンズアルデヒド
【化７６】
2018535986.tif 000084
酸化マンガン（ＩＶ）（１４．３０ｇ、１６４．４３ミリモル）を、窒素下、２１℃でＤＣＭ（７０ｍＬ）中の（３−（オキセタン−３−イル）フェニル）メタノール（中間体５０、１．５ｇ、８．２２ミリモル）に添加した。得られた混合物を２１℃で１６時間撹拌した。次に反応物をセライトを通して濾過し、ＤＣＭで洗浄し、蒸発させてガム状物にした。粗生成物をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ１０〜６０％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、３−（オキセタン−３−イル）ベンズアルデヒド（８００ｍｇ，６０％）を無色ガム状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ４．２１−４．５１（１Ｈ，ｍ），４．６４（２Ｈ，ｍ），４．９８（２Ｈ，ｍ），７．６０（１Ｈ，ｔ），７．７４（１Ｈ，ｄ），７．７９−７．８５（１Ｈ，ｄ），７．９４（１Ｈ，ｓ），１０．０３（１Ｈ，ｓ）．
【０２２４】
中間体５０
（３−（オキセタン−３−イル）フェニル）メタノール
【化７７】
2018535986.tif 000085
水素化アルミニウムリチウム（ＴＨＦ中１Ｍ、１．９４ｍＬ、１．９５ミリモル）を、窒素下、０℃でＴＨＦ（１０ｍＬ）中の３−（オキセタン−３−イル）安息香酸ナトリウム（３００ｍｇ、１．５０ミリモル）に液滴添加した。得られた混合物を０℃で２０分間、次いで２５℃で１８時間撹拌した。有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させる前、５％水性ＨＣｌを添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出し、２Ｍ水性Ｎａ２ＣＯ３溶液で洗浄した。粗生成物をＦＣＣ（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ５０〜１００％、次いでＥｔＯＡｃ中ＭｅＯＨ中１Ｍ  ＮＨ３１０％）により精製した。純粋画分を蒸発させて乾燥し、（３−（オキセタン−３−イル）フェニル）メタノール（１４０ｍｇ，５７％）を無色ガム状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ，３０℃）δ  ４．２０（１Ｈ，ｍ），４．５１（２Ｈ，ｄ），４．６２（２Ｈ，ｍ），４．９５（２Ｈ，ｍ），５．１６（１Ｈ，ｔ），７．１７−７．２９（２Ｈ，ｍ），７．３１−７．４１（２Ｈ，ｍ）．
【０２２５】
中間体５１
２−エトキシ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸
【化７８】
2018535986.tif 000086
０℃でエタノール（１５ｍＬ）中、水酸化カリウム（１．６２ｇ、２８．９３ミリモル）およびブロモホルム（０．５５ｍＬ、６．３１ミリモル）の撹拌混合物に、エタノール（３０ｍＬ）中、３−（トリフルオロメトキシ）ベンズアルデヒド（０．７５ｍＬ、５．２６ミリモル）の溶液を緩徐に１０分間かけて添加した。添加後、混合物を撹拌放置し、室温に一晩温めた。沈殿物を濾過により除去した。濾液を蒸発させ、ペーストを得て、それを水（２００ｍＬ）に取り込ませ、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出した。これにより乳剤を形成し、次に水相を２Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）で酸性化し、分離した。次にそれをＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）でさらに抽出した。結合した有機物を低圧下で蒸発させ、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜５０％）により精製した。純粋画分を結合させ、低圧下で蒸発させ、２−エトキシ−２−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸を得た（６９０ｍｇ，４９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，２１℃）δ  １．１６（３Ｈ，ｔ），３．３８−３．５０（１Ｈ，ｍ），３．５３−３．６６（１Ｈ，ｍ），４．９９（１Ｈ，ｓ），７．２８−７．３９（２Ｈ，ｍ），７．４５（１Ｈ，ｄ），７．５３（１Ｈ，ｔ），１３．０４（１Ｈ，ｓ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６５．
【０２２６】
中間体５２
２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−酢酸
【化７９】
2018535986.tif 000087
水酸化リチウム（０．０２ｇ、０．９ミリモル）を水（１ｍＬ）およびメタノール（３ｍＬ）に懸濁し、２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−酢酸エチル（中間体５３、０．１３ｇ、０．４５ミリモル）で処理し、４５℃で２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却しておき、ＭｅＯＨを低圧下で除去した。水相を鹹水（２０ｍＬ）で希釈し、ギ酸の添加によりｐＨ３に調整し、次にＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。結合したＥｔＯＡｃ抽出物を鹹水（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を低圧下で除去し、２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−酢酸を得た（０．１２７ｇ、１０５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６，２５℃）δ  ３．４７（３Ｈ，ｓ），４．７８（１Ｈ，ｓ），７．２３（１Ｈ，ｄｄ），７．３７−７．４６（２Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２６８．９８．
【０２２７】
中間体５３
２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−酢酸エチル
【化８０】
2018535986.tif 000088
Ｎ２下の丸底フラスコ内にナトリウム（０．０４ｇ、１．６６ミリモル）を添加し、メタノール（１２ｍＬ）を乾燥させた。この溶液に、Ｎ２下でメタノール（３ｍＬ）中、２−ブロモ−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル（中間体５４、０．５ｇ、１．５１ミリモル）を添加した。反応混合物を４０℃で２時間加熱した。溶媒を低圧下で除去し、残留ガム状物を飽和塩化アンモニウム溶液（５０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）間で分配した。水層をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）のさらなる一部で抽出した。有機物を結合させ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を低圧下で除去した。残留油を、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、シクロヘキサン中、１００％シクロヘキサンから１５％ＥｔＯＡｃで溶出した。適切な画分の蒸発により、２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−２−メトキシ−酢酸エチルを得た（０．１２７ｇ，２８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６，２５℃）δ  １．２３（３Ｈ，ｔ），３．４４（３Ｈ，ｓ），４．１２−４．２８（２Ｈ，ｍ），４．７４（１Ｈ，ｄ），７．２０（１Ｈ，ｄｄ），７．３９（１Ｈ，ｄｄｄｄ），７．４２−７．４８  （ｍ，１Ｈ）．
【０２２８】
中間体５４
２−ブロモ−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル
【化８１】
2018535986.tif 000089
２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル（中間体５５、０．６５ｇ、２．５７８ミリモル）およびＮ−ブロモサクシニミド（４．０８ｇ、２２．９１９ミリモル）を丸底フラスコ中で秤量し、四塩化炭素（６ｍＬ）中、２，２−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）、（ＡＩＢＮ、０．０２ｇ、０．１２９ミリモル）を添加した。反応物を加熱し、４時間還流し、室温に冷却しておいた。沈殿物を濾過除去し、溶液をシリカで処理し、低圧下で蒸発させ、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、シクロヘキサン中、３０％ＥｔＯＡｃに漸増する１００％シクロヘキサンで溶出した。適切な画分を低圧下で蒸発させ、２−ブロモ−２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチルを淡黄色油として得た（１．１ｇ、１２９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ６，２５℃）δ  ３．８１（３Ｈ，ｓ），５．２９（１Ｈ，ｓ），７．１７−７．２４（１Ｈ，ｍ，），７．４６−７．５２（１Ｈ，ｍ），７．５３−７．５９（１Ｈ，ｍ）．
【０２２９】
中間体５５
２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチル
【化８２】
2018535986.tif 000090
４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル酢酸（１．０ｇ、４．１９９ミリモル）をメタノール（１０ｍＬ）に懸濁し、硫酸（０．０７ｍＬ、０．８４ミリモル）で処理し、４５℃で２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却しておき、メタノールを低圧下で除去した。残渣を鹹水（２０ｍＬ）で希釈し、次にＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。結合したＥｔＯＡｃ抽出物を鹹水（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を低圧下で除去し、２−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］酢酸メチルを得た（０．６５ｇ，６１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ３．６３（３Ｈ，ｓ），３．７８（２Ｈ，ｓ），７．３３−７．３９（１Ｈ，ｍ），７．４２−７．５３（２Ｈ，ｍ）．ｍ／ｚ：ＥＳ＋［Ｍ＋Ｈ］＋２５３．
【０２３０】
生物検定
本明細書に記載の化合物の効果を測定するため、以下のアッセイ：ａ）ＧＬＳ酵素効力アッセイ；ｂ）ＧＬＳ細胞効力アッセイ；ｃ）ＧＬＳ細胞増殖アッセイを用いた。アッセイの説明に際して、一般に次のことが言える。
ｉ．以下の略称：ＣＯ２＝二酸化炭素；ＤＭＥＭ＝ダルベッコ変法イーグル培地；ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド；ＥＤＴＡ＝エチレンジアミン四酢酸；ＥＧＴＡ＝エチレングリコールテトラ酢酸；ＦＣＳ＝  胎児子ウシ血清；ｈ＝時間；ＮＢＳ＝非結合表面；ＳＤＳ＝ドデシル硫酸ナトリウム；ＴＲＩＳ＝トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、を用いている。
ｉｉ．ＩＣ５０値を、Ｇｅｎｅｄａｔａのスマートフィッティングモデルを用いて算出した。ＩＣ５０値は、生物学的活性の５０％を阻害する試験化合物の濃度であった。
【０２３１】
アッセイａ）：ＧＬＳ酵素効力アッセイ
化合物がインビトロでＧＬＳ１に結合し、ＧＬＳ１の活性を阻害する能力を測定するため、グルタミン酸オキシダーゼ／ＡｍｐｌｅｘＲｅｄ共役アッセイを用いた。大腸菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）中で発現される６Ｈｉｓタグ化ＧＬＳタンパク質（アミノ酸６３〜６６９）を精製し、一定分量を−８０℃で貯蔵した。ＧＬＳ１を２×作業濃度に希釈し、室温でインキュベートし、四量体／二量体型が定常状態に達することを可能にした。アッセイ測定は、５０ｍＭトリス（ｐＨ７．８）、１００ｍＭ  ＮａＰＯ４、ｐＨ７．８、０．００１％ｖ／ｖのツイーン２０を含む緩衝液中で実施した。精製した組換えＧＬＳ１タンパク質をアッセイ緩衝液で１２ｎＭに希釈し、室温で３０分間予備インキュベートした。試験化合物を１００％ＤＭＳＯでの希釈により調製し、１２点濃度応答における正確な用量範囲および適切な容量（２．５〜６０ｎｌ）を得て、Ｌａｂｃｙｔｅ  Ｅｃｈｏ  ５５５アコースティックディスペンサーを用いて３８４ウェルマイクロアッセイプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒの製品コード７８４９００）に分注した。ＤＭＳＯ濃度を、ＤＭＳＯ溶液の戻し充填により２％で維持した。次に、希釈したＧＬＳ１タンパク質（１２ｎＭ）３μＬを、ＢｉｏＲａｐｔｒ自動ディスペンサー（Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて各ウェルに分注し、室温で１５分間インキュベートした。次に、アッセイ緩衝液で希釈した１００ｍＭのグルタミン３μＬを添加し、反応物を室温で６０分間インキュベートした。次に、１００ｍＭトリス（ｐＨ７．５）中、４５μＭの６−（２−ブロモエチニル）−２，３−ジメチル−キナゾリン−４−オン、７５μＭのＡｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ、０．３７５単位／ｍＬの西洋わさびペルオキシダーゼ、０．１２単位／ｍＬのグルタミン酸オキシダーゼの添加により反応を停止させた。暗所、室温で３０分後、５３５／５９０ｎｍの光学フィルターを用いてのＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎでプレートを読み取り、生データをＧｅｎｅｄａｔａを用いて分析し、ＩＣ５０値を得た。また、アッセイ成分に対する非特異的効果を除外するため、６Ｈｉｓタグ化ＧＬＳタンパク質およびグルタミンをアッセイ緩衝液と交換する場合のアッセイのアーチファクトバージョンを用いた。
【０２３２】
アッセイｂ）：ＧＬＳ細胞効力アッセイ
化合物を、細胞のＧＬＳ活性をそれらが阻害する可能性について、細胞のグルタミン酸枯渇を測定するＰＣ３共役アッセイの使用により評価した。試験化合物を１００％ＤＭＳＯでの希釈により調製し、１２点濃度応答における正確な用量範囲および適切な容量（５〜１２０ｎｌ）を得て、Ｌａｂｃｙｔｅ  Ｅｃｈｏ  ５５５アコースティックディスペンサーを用いて３８４ウェルマイクロアッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇの製品コード３７１２）に分注した。ＤＭＳＯ濃度を、ＤＭＳＯ溶液の戻し充填により０．３％で維持した。ＰＣ３細胞を、フェノールを含まないＤＭＥＭ、１０％透析ＦＣＳ、２ｍＭグルタミンで成長させ、トリプシン処理による分散後、分注した化合物を含有する３８４ウェルアッセイプレート内に直接的に増殖培地４０μｌ中、５．６×１０３個の細胞／ウェルで蒔いた。３７℃、５％ＣＯ２で６時間のインキュベーション後、増殖培地を吸引し、１０ｍＭトリス（ｐＨ７．４）、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＮａＦ、２０ｍＭ  Ｎａ４Ｐ２Ｏ７、２ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４、１％トリトンＸ１００、１０％グリセロール、０．１％ＳＤＳおよび０．５％デオキシコール酸塩を含有する緩衝液１５μｌに細胞を溶解した。次に、細胞可溶化物４μｌを３８４ウェルＮＢＳプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇの製品コード３５７５）に移し、３５μｌの２７．５μＭ  Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ、０．１３７５Ｕ／ｍＬの西洋わさびペルオキシダーゼ、０．０４４Ｕ／ｍＬのグルタミン酸オキシダーゼ、１００ｍＭトリス（ｐＨ７．５）を添加した。暗所、室温で３０分後、５３５／５９０ｎｍの光学フィルターを用いてＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎでプレートを読み取り、生データを専売ソフトウェアを用いて分析し、ＩＣ５０値を得た。
【０２３３】
アッセイｃ）：ＧＬＳ細胞増殖アッセイ
化合物が細胞成長を阻害する能力を、３８４ウェルプレートＮＣＩ−Ｈ１７０３細胞増殖アッセイを用いて測定した。ＮＣＩ−Ｈ１７０３細胞を、フェノールレッドを含まないＲＰＭＩ１６４０、１０％ＦＣＳおよび２ｍＭグルタミンで成長させ、クリアボトム３８４ウェルアッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇの製品コード３７１２）内に増殖培地４０μｌ中、７５０細胞／ウェルの密度で播種し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。試験化合物を１００％ＤＭＳＯでの希釈により調製し、１２点濃度応答における正確な用量範囲および適切な容量（５〜１２０ｎｌ）を得て、蒔いた細胞を含有するアッセイプレート内に直接的に分注した。ＤＭＳＯ濃度を、ＤＭＳＯ溶液の戻し充填により０．３％で維持した。プレートを３７℃、５％ＣＯ２で５日間インキュベートし、Ｓｙｔｏｘグリーンおよびサポニンを各最終濃度が２μＭおよび０．２５％になるまで添加し、分析前に６時間インキュベートした。４８８ｎｍの励起および放射用のＦＩＴＣフィルターセット（５００〜５３０ｎｍ）を用いてＡｃｕｍｅｎ  ｅＸ３（ＴＴＰ  Ｌａｂｔｅｃｈ）でプレートを読み取った。ＩＣ５０値を、ＧｅｎｅＤａｔａソフトウェア分析を用いて、０日目成長の最大阻害に対するカーブフィッティングを行うことにより算出した。
【０２３４】
アッセイａ）〜ｃ）からの結果を表１に示す。
【０２３５】
【表７】
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【０２３６】
【表８】
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【０２３７】
【表９】
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【国際調査報告】
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