(57)【要約】  本発明は、生地を洗濯する方法、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素の使用、およびデオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）活性を有する酵素を含む洗剤組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
バイオフィルムおよび／またはタンパク質性汚れで汚れた生地を洗濯する方法であって、以下：
ａ）ＤＮａｓｅ活性を有する酵素、プロテアーゼおよび界面活性剤を含む洗浄液と前記生地を接触させるステップ；ならびに
ｂ）任意選択で前記生地をすすぐステップ
を含み、
ここで、ＤＮａｓｅ活性を有する前記酵素および前記プロテアーゼが、前記生地からバイオフィルムを低減および／または除去することができる、方法。
【請求項２】
前記ポリペプチドが、細菌または真菌起源のものである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＤＮａｓｅ活性を有する前記酵素が、以下：配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、および配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素からなる群から選択される、請求項１〜２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
前記プロテアーゼが、以下：
ａ）配列番号７の成熟型ポリペプチドの位置：９、１５、４３、６８、７６、９９、１０１、１６７、１７０、１９４  ２０５、２０６、２０９、２１７、２１８、２２２、２４５  ２６１および２６２に対応する１つまたは複数の位置に改変を含む酵素変異体であり、ここで、各改変は、独立して置換、欠失または挿入であり、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７の前記成熟型ポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する；または
ｂ）配列番号８のアミノ酸配列に対応する酵素である；または
ｃ）配列番号８の成熟型ポリペプチドのＳ８５Ｎから選択される置換を含む酵素変異体であり、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有する；または
ｄ）配列番号９のアミノ酸配列に対応する酵素である；または
ｅ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｆ）前記置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｇ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｈ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｉ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の位置：１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｊ）プロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記変異体はプロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｋ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］、Ｘ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｌ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、前記置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記プロテアーゼが、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ
である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
ＤＮａｓｅ活性を有する前記酵素が、配列番号１のポリペプチドと少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、前記プロテアーゼは、配列番号７の下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む酵素変異体である、請求項３または４に記載の方法。
【請求項６】
バイオフィルムおよび／またはタンパク質性汚れで汚れた生地の洗濯を目的とする、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素およびプロテアーゼの使用であって、ここで、ＤＮａｓｅ活性を有する前記酵素および前記プロテアーゼは、洗浄サイクルの間に、前記生地からバイオフィルムを低減および／または除去することができる、使用。
【請求項７】
前記生地が、少なくとも２０％のポリエステルを含む、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記再付着が防止および／または低減される、請求項６〜７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】
前記生地の白色度が向上する、請求項６〜８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０】
前記洗濯後に前記生地に存在するバイオフィルムの量が減少する、請求項６〜９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１】
ＤＮａｓｅ活性を有する前記ポリペプチドが、以下：配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、および配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素からなる群から選択される、請求項６〜１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２】
前記プロテアーゼが、以下：
ａ）配列番号７の成熟型ポリペプチドの位置：９、１５、４３、６８、７６、９９、１０１、１６７、１７０、１９４  ２０５、２０６、２０９、２１７、２１８、２２２、２４５  ２６１および２６２に対応する１つまたは複数の位置に改変を含む酵素変異体であり、ここで、各改変は、独立して置換、欠失または挿入であり、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７の前記成熟型ポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する；
ｂ）配列番号８のアミノ酸配列に対応する酵素である；
ｃ）配列番号８の成熟型ポリペプチドのＳ８５Ｎから選択される置換を含む酵素変異体であり、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有する；または
ｄ）配列番号９のアミノ酸配列に対応する酵素である；または
ｅ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｆ）前記置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｇ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｈ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｉ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の位置：１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；または
ｊ）プロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記変異体はプロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｋ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］、Ｘ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｌ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、前記置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記プロテアーゼは、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ
である、請求項６〜１１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１３】
デオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）活性を有する酵素、プロテアーゼ、少なくとも１７％（ｗ／ｗ）のアニオン性界面活性剤および少なくとも１１％（ｗ／ｗ）のアニオン性界面活性剤並びにビルダーを含む洗剤組成物。
【請求項１４】
ＤＮａｓｅ活性を有する前記酵素が、以下：配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、および配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素からなる群から選択される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記プロテアーゼが、以下：
ａ）配列番号７の成熟型ポリペプチドの位置：９、１５、４３、６８、７６、９９、１０１、１６７、１７０、１９４  ２０５、２０６、２０９、２１７、２１８、２２２、２４５  ２６１および２６２に対応する１つまたは複数の位置に改変を含む酵素変異体であり、ここで、各改変は、独立して置換、欠失または挿入であり、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７の前記成熟型ポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する；
ｂ）配列番号８のアミノ酸配列に対応する酵素である；
ｃ）配列番号８の成熟型ポリペプチドのＳ８５Ｎから選択される置換を含む酵素変異体であり、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有する；または
ｄ）配列番号９のアミノ酸配列に対応する酵素である；または
ｅ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｆ）前記置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｇ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｈ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼであって、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｉ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の位置：１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；または
ｊ）プロテアーゼ変異体であって、前記変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記変異体はプロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｋ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］、Ｘ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記変異体は、プロテアーゼ活性を有し、前記変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｌ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示される前記プロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、前記置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、前記位置は、配列番号７の位置に対応し、前記プロテアーゼは、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ
である、請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表の参照
本出願は、コンピュータ読み取り可能な形態の配列表を含んでおり、これは本明細書において参照により援用される。
【０００２】
本発明は、生地を洗濯する方法、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素とプロテアーゼの使用、およびデオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）活性を有する酵素とプロテアーゼを含む洗剤組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
長年にわたり、シャツおよびブラウスなどの洗濯品目が、時間が経つにつれ段々と灰色になることは公知の問題であった。いくつかの細菌は、生地（衣服）に付着して生地にバイオフィルムを形成する。細菌の存在は、洗濯品目が粘着性になり、これによって汚れが粘着性の部分に付着することを意味する。この汚れは、市販の洗剤組成物によって除去し難いことが判明している。さらに、非常に汚れた洗濯品目をあまり汚れていない洗濯品目と一緒に洗浄すると、洗浄液中に存在する汚れが、バイオフィルムに付着する傾向がある。その結果、洗濯品目は、洗浄前よりも洗浄後の方が「汚れ」、白さを失い、しかも灰色化する。
【０００４】
国際公開出願：ＰＣＴ／ＥＰ２０１５／０５７８８３号明細書は、生地の洗濯に真菌由来のＤＮａｓｅが使用される洗濯方法を開示する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、バイオフィルムおよび／またはタンパク質性汚れで汚れた生地を洗濯する方法に関し、この方法は、以下：
ａ）ＤＮａｓｅ活性を有する酵素、プロテアーゼおよび界面活性剤を含む洗浄液と生地を接触させるステップ；および
ｂ）任意選択で生地をすすぐステップ
を含み、
ここで、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素およびプロテアーゼは、生地からバイオフィルムを低減および／または除去することができる。
【０００６】
本発明は、さらに、バイオフィルムおよび／またはタンパク質性汚れで汚れた生地の洗濯を目的とする、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素およびプロテアーゼの使用にも関し、ここで、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素およびプロテアーゼは、洗浄サイクルの間に、生地からバイオフィルムを低減および／または除去することができる。加えて、本発明は、デオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）活性を有する酵素、プロテアーゼ、少なくとも１７％（ｗ／ｗ）のアニオン性界面活性剤および少なくとも１１％（ｗ／ｗ）のアニオン性界面活性剤並びにビルダーを含む洗剤組成物に関する。
【０００７】
定義
細菌（性）：本発明に関連して、ポリペプチド（酵素、例えば、ＤＮＡｓｅ）に関して「細菌（性）」という用語は、細菌のゲノムによりコードされ、従って、そのゲノムから直接誘導可能なポリペプチドを指し、ここで、このような細菌は、例えば、組換えＤＮＡ技術によりゲノム中にコード配列を導入するなどによって、前記ポリペプチドをコードするように遺伝子修飾されていない。従って、本発明に関連して、「細菌性ＤＮＡｓｅ」または「細菌供給源から得られるＤＮＡｓｅ活性を有するポリペプチド」または「細菌起源のポリペプチド」は、細菌種のゲノムによりコードされ、従って、そのゲノムから直接誘導可能なＤＮＡｓｅを指し、ここで、細菌種は、前記ＤＮＡｓｅをコードする組換えＤＮＡを導入する遺伝子修飾に付されていない。従って、ＤＮＡｓｅ活性を有する細菌性ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、細菌種の遺伝的背景に天然に存在する配列である。このような配列によりコードされるＤＮＡｓｅ活性を有する細菌性ポリペプチドは、野生型ＤＮＡｓｅ（または親ＤＮＡｓｅ）と呼ばれる場合もある。別の態様では、本発明は、ＤＮａｓｅ活性を有するポリペプチドを提供し、ここで、前記ポリペプチドは、細菌性ＤＮａｓｅと実質的に相同性である。本発明に関連して、「実質的に相同性」という用語は、選択した細菌性ＤＮａｓｅのアミノ酸配列と少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、さらに好ましくは少なくとも９５％、さらにまた好ましくは少なくとも９６％、９７％、９８％、最も好ましくは少なくとも９９％同一のＤＮａｓｅ活性を有するポリペプチドを示す。
【０００８】
バイオフィルム：バイオフィルムは、細胞が、互いに付着しているか、または生地、食器類もしくは硬質表面、または別の種類の表面などの表面上に付着している、いずれかの微生物群である。こうした付着細胞は、多くの場合、細胞外高分子物質（ＥＰＳ）の自己生成マトリックス内に包埋されている。バイオフィルムＥＰＳは、一般に、細胞外ＤＮＡ、タンパク質、および多糖から構成された高分子凝集塊である。バイオフィルムは、生存または非生存表面上に形成し得る。バイオフィルム内で増殖する微生物細胞は、同じ生物の浮遊細胞とは生理学的に異なり、浮遊細胞は、対照的に、液体媒体中に浮遊または泳動し得る単細胞である。
【０００９】
バイオフィルム内に生存する細菌は、通常フィルムの高密且つ保護された環境によって、これらの細菌が多様な方法で協同および相互作用することが可能になるため、同じ種の浮遊細菌とは極めて異なる特性を有する。このような環境の１つの利点は、高密度の細胞外マトリックスおよび細胞の外層が集団の内部を保護するために、洗剤および抗生物質に対する耐性が増大することである。
【００１０】
洗濯の際、細菌を産生するバイオフィルムは、以下の種から見出すことができる：アシネトバクター属（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．）、アエロミクロビウム属（Ａｅｒｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ  ｓｐ．）、ブレバンジモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、ミクロバクテリウム属（Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐ．）、ミクロコッカス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｕｔｅｕｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、およびステノトロホモナス属（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）。
【００１１】
コード配列：「コード配列」という用語は、ポリペプチドのアミノ酸配列を直接規定するポリヌクレオチドを意味する。コード配列の境界は、一般に、オープンリーディングフレームによって決定されるが、これは、ＡＴＧ、ＧＴＧ、またはＴＴＧなどの開始コドンで開始し、ＴＡＡ、ＴＡＧ、またはＴＧＡなどの終止コドンで終了する。コード配列は、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、合成ＤＮＡ、またはこれらの組合せのいずれであってもよい。
【００１２】
洗剤成分：「洗剤成分」という用語は、本明細書では、洗剤組成物に使用することができる化学物質の種類を意味するものとして定義される。洗剤成分の例としては、アルカリ、界面活性剤、ヒドロトロープ、ビルダー、コビルダー、キレート剤もしくはキレート化剤、漂白剤系もしくは漂白剤成分、ポリマー、布地色相剤、布地コンディショナ、起泡増進剤、セッケン泡抑制剤、分散剤、移染防止剤、蛍光漂白剤、香料、光学増白剤、殺菌剤、殺カビ剤、汚染物懸濁剤、汚染物遊離ポリマー、再付着防止剤、酵素抑制剤もしくは安定化剤、酵素活性化剤、酸化防止剤、ならびに溶解剤がある。
【００１３】
洗剤組成物：「洗剤組成物」という用語は、生地などの洗浄しようとする生地から不要な化合物を除去する上で有用な組成物を指す。洗剤組成物は、家庭用クリーニングおよび業務用クリーニングの両方の用途で、例えば、生地をクリーニングするために用いることができる。この用語は、特定のタイプの所望のクリーニング組成物および製品の形態（例えば、液体、ゲル、粉末、顆粒、ペースト、またはスプレー組成物）のために選択されるあらゆる材料／化合物を包含し、限定されないが、洗剤組成物（例えば、液体および／または固体洗濯洗剤ならびにデリケート用洗剤；布地フレッシュナ；布地柔軟剤；ならびに生地および洗濯プレスポッター／前処理剤）を包含する。本発明の酵素を含有する以外に、洗剤製剤は、１種または複数種の別の酵素（例えば、プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、セルラーゼ、エンドグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチンリアーゼ、キサンタナーゼ、ペルオキシダーゼ、ハロペルオキシゲナーゼ、カタラーゼおよびマンナナーゼ、もしくはこれらの任意の混合物）、ならびに／または洗剤組成物、例えば、界面活性剤、ビルダー、キレート剤もしくはキレート化剤、漂白剤系もしくは漂白剤成分、ポリマー、布地コンディショナ、起泡増進剤、セッケン泡抑制剤、染料、香料、色あせ防止剤、光学増白剤、殺菌剤、殺カビ剤、汚染物懸濁剤、腐食防止剤、酵素抑制剤もしくは安定化剤、酵素活性化剤、トランスフェラーゼ、加水分解酵素、酸化還元酵素、青み付け剤および蛍光性染料、酸化防止剤、および溶解剤を含有してもよい。
【００１４】
ＤＮａｓｅ：「ＤＮａｓｅ」という用語は、ＤＮＡ骨格において、ホスホジエステル結合の加水分解切断を触媒することにより、ＤＮＡを分解するＤＮａｓｅ活性を有するポリペプチドを意味する。本発明の対象のために、ＤＮａｓｅ活性は、アッセイＩに記載する手順に従って決定される。本発明の一実施形態では、ポリペプチドのＤＮＡｓｅ活性は、配列番号１の成熟型ポリペプチド、配列番号２に示される配列を含むか、もしくはそれから構成される酵素、配列番号３に示される配列を含むか、もしくはそれから構成される酵素、配列番号４の成熟型ポリペプチドを含むか、もしくはそれから構成される酵素、配列番号５の成熟型ポリペプチドを含むか、もしくはそれから構成される酵素、または配列番号６の成熟型ポリペプチドを含むか、もしくはそれから構成される酵素のＤＮａｓｅ活性に対して、少なくとも１０５％、例えば、少なくとも１１０％、少なくとも１２０％、少なくとも１３０％、少なくとも１４０％、少なくとも１６０％、少なくとも１７０％、少なくとも１８０％、または少なくとも２００％である。
【００１５】
酵素洗浄力有益性：本明細書において、「酵素洗浄力有益性」という用語は、酵素を伴わない同一の洗剤と比して、酵素が洗剤に追加し得る有利な効果として定義される。酵素によりもたらされることが可能である重要な洗浄力有益性は、洗浄および／またはクリーニング後に視認可能な汚染物がないかほとんどないしみ除去（再付着防止とも呼ばれる効果である）、洗浄プロセスで遊離した汚染物の再付着の防止または低減（白色化とも呼ばれる効果である）、元々は白色であったが反復的な使用および洗浄の後に灰色がかったもしくは黄色がかった外観となってしまった生地の白色度の完全なまたは部分的な回復である。触媒によるしみ除去もしくは汚染物の再付着防止に直接関係はしない、生地の取り扱いによる有益性（ｔｅｘｔｉｌｅ  ｃａｒｅ  ｂｅｎｅｆｉｔ）もまた酵素洗浄力有益性に重要である。このような生地の取り扱いによる有益性の例は、一の布地から他の布地へ、もしくは、同一の布地の他の部分への移染の防止もしくは低減（移染防止または逆汚染防止とも呼ばれる効果である）；ピル性を低減するための布地表面からの突出繊維もしくは破断繊維の除去、または、既に存在しているピルもしくは毛羽の除去（抗ピルとも呼ばれる効果である）；布地柔軟性の向上；布地の色の清澄化；および、布地もしくは衣服の繊維中に詰まった粒状の汚染物の除去である。酵素漂白はさらなる酵素洗浄力有益性であり、ここで、触媒活性は、一般に、過酸化水素もしくは他の過酸化物などの漂白成分の形成を触媒するために用いられる。
【００１６】
真菌（性）：本発明に関連して、ポリペプチド（酵素、例えば、ＤＮＡｓｅなど）に関して「真菌（性）」という用語は、真菌のゲノムによってコードされ、従ってそのゲノムから直接誘導可能なポリペプチドを指し、こうした真菌は、例えば、組換えＤＮＡ技術によりゲノムにコード配列を導入することによって、前記ポリペプチドをコードするように遺伝改変されていない。そのため、本発明に関連して、「真菌性ＤＮＡｓｅ」または「真菌供給源から得られるＤＮＡｓｅ活性を有するポリペプチド」または「真菌起源であるポリペプチド」という用語は、真菌種のゲノムによってコードされ、従ってそのゲノムから直接誘導可能なＤＮＡｓｅを指し、この真菌種は、前記ＤＮＡｓｅをコードする組換えＤＮＡを導入する遺伝子改変に付されていない。従って、ＤＮＡｓｅ活性を有する真菌ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、真菌種の遺伝的背景に天然に存在する配列である。こうした配列によりコードされるＤＮＡｓｅ活性を有する真菌性ポリペプチドも、野生型ＤＮＡｓｅ（または親ＤＮＡｓｅ）と呼ばれることがある。別の態様では、本発明は、ＤＮａｓｅ活性を有するポリペプチドを提供し、ここで、前記ポリペプチドは、真菌性ＤＮａｓｅと実質的に相同性である。本発明に関連して、「実質的に相同性である」という用語は、選択した真菌性ＤＮａｓｅのアミノ酸配列と、少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、さらに好ましくは少なくとも９６％、９７％、９８％、および最も好ましくは少なくとも９９％同一であるＤＮａｓｅ活性を有するポリペプチドを表す。
【００１７】
宿主細胞：「宿主細胞」という用語は、本発明のポリヌクレオチドを含む核酸構築物または発現ベクターによる形質転換、形質移入、形質導入等などに対する感受性を有するあらゆる細胞型を意味する。「宿主細胞」という用語は、複製の最中に生じる突然変異のために、親細胞と同じではない親細胞のあらゆる子孫を包含する。
【００１８】
単離された：「単離された」という用語は、自然界においては生じない形態または環境にある物質を意味する。単離された物質の非限定的な例としては、（１）いずれかの非天然物質、（２）限定されないが、自然界において関連している天然構成成分の１種または複数種もしくは全てから少なくとも部分的に取り出されたいずれかの酵素、変異体、核酸、タンパク質、ペプチドもしくは補因子を含むいずれかの物質；（３）自然界に見出される物質に対して人為的に修飾されたいずれかの物質；または（４）自然界で関連する他の成分に対して物質量の増加により修飾されたいずれかの物質（例えば、宿主細胞における組換え産生；物質をコードする遺伝子の複数のコピー；ならびに、物質をコードする遺伝子と自然界で関連するプロモータよりも強力なプロモータの使用）が挙げられる。単離された物質は、発酵ブロスサンプル中に存在してもよく；例えば、本発明のポリペプチドを発現するように、宿主細胞を遺伝子改変してもよい。宿主細胞からの発酵ブロスは、単離されたポリペプチドを含み得る。
【００１９】
洗濯する：「洗濯する」という用語は、家庭での洗濯および業務用洗濯の両方に関し、本発明のクリーニングまたは洗剤組成物を含む溶液で生地を処理する工程を意味する。洗濯工程は、例えば、家庭用または業務用洗浄機を用いて実施することもできるし、または手で実施することもできる。
【００２０】
成熟型ポリペプチド：「成熟型ポリペプチド」という用語は、Ｎ末端プロセシング、Ｃ末端切断、グリコシル化、リン酸化等などの翻訳およびいずれかの翻訳後修飾の後に、その最終形態にあるポリペプチドを意味する。一実施形態において、成熟型ポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸３８〜２４３であり、配列番号１のアミノ酸１〜２２は、シグナルペプチドであり、また、配列番号１のアミノ酸２３〜３７は、プロペプチドである。同じポリヌクレオチドによって発現された宿主細胞が、２つのさらに異なる成熟型ポリペプチド（すなわち、異なるＣ末端および／またはＮ末端アミノ酸を含む）の混合物を産生しうることは当分野において公知である。さらに、異なる宿主細胞は、ポリペプチドを異なる様式でプロセシングするため、あるポリヌクレオチドを発現する１宿主細胞は、同じポリヌクレオチドを発現する別の宿主細胞と比較して、異なる成熟型ポリペプチド（例えば、異なるＣ末端および／またはＮ末端アミノ酸を有する）を産生し得ることも当分野において公知である。一実施形態では、成熟型ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２（例えば、配列番号１のアミノ酸３８〜２４３、または配列番号２のアミノ酸１〜２０６、又は配列番号３のアミノ酸１〜２０４）の２０６個以下（２０４個など）の連続するアミノ酸残基、または２０４個以下のアミノ酸残基（例えば、配列番号１のアミノ酸４０〜２４３）を含有する。別の実施形態では、成熟型ポリペプチドは、配列番号２または配列番号３に示されるアミノ酸配列から構成される。また別の実施形態では、成熟型ポリペプチドは、配列番号４の連続するアミノ酸残基１８〜２０５を含むか、またはそれから構成される。一実施形態では、成熟型ポリペプチドは、配列番号５の連続するアミノ酸残基３４〜１４２を含むか、またはそれから構成される。実施形態では、成熟型ポリペプチドは、配列番号６の連続するアミノ酸残基２７〜１３６を含むか、またはそれから構成される。
【００２１】
核酸構築物：「核酸構築物」という用語は、一本鎖または二本鎖いずれかの核酸分子を意味し、これは、天然の遺伝子から単離されるか、もしくは、そうでなければ自然に存在しないであろう様式で核酸のセグメントを含有するよう修飾されるか、または、合成物であり、これは、１つまたは複数の制御配列を含む。
【００２２】
生地：「生地」という用語は、ヤーン、ヤーン中間物、繊維、不織布材料、天然材料、合成材料などのいずれかの生地材料、およびその他いずれかの生地材料、これらの材料から製造される布地、ならびに布地から製造される製品（例えば、衣服および他の物品）を意味する。生地または布地は、ニット、織物、デニム、不織物、フェルト、ヤーンおよびタオル地の形態であってよい。生地は、綿、亜麻／リンネル、ジュート、ラミー、サイザルもしくはコイアを含む天然セルロース系材料、または、ビスコース／レーヨン、酢酸セルロース繊維（三細胞性）、リオセルもしくはこれらのブレンドを含む人工セルロース系材料（例えば、木材パルプ由来のもの）などのセルロース系材料であってよい。生地または布地はまた、ウール、ラクダ、カシミヤ、モヘア、ウサギおよび絹などの天然ポリアミドなどの非セルロース系材料、または、ナイロン、アラミド、ポリエステル、アクリル、ポリプロピレンおよびスパンデックス／エラスタンなどの合成ポリマー、または、これらのブレンド、ならびに、セルロース系および非セルロース系繊維のブレンドであってよい。ブレンドの例は、綿および／またはレーヨン／ビスコースと、ウール、合成繊維（例えば、ポリアミド繊維、アクリル繊維、ポリエステル繊維、ポリ塩化ビニル繊維、ポリウレタン繊維、ポリウレア繊維、アラミド繊維）、および／またはセルロース含有繊維（例えば、レーヨン／ビスコース、ラミー、亜麻／リンネル、ジュート、酢酸セルロース繊維、リオセル）などの１種または複数種の随伴材料とのブレンドである。布地は、例えば、汚れた家庭ランドリーなどの従来の可洗ランドリーであってよい。布地または衣服という用語が用いられる場合、より広義の生地という用語も含むものとする。本発明に関連して、「生地」という用語は、布地も包含する。
【００２３】
変異体：「変異体」という用語は、１つまたは複数（例えば、数個）の位置に改変（すなわち、置換、挿入および／または欠失）を含む、親酵素と同じ活性を有するポリペプチド／酵素を意味する。置換とは、ある位置のアミノ酸の異なるアミノ酸による置き換えを意味し；欠失とは、ある位置のアミノ酸の除去を意味し；また、挿入とは、ある位置のアミノ酸に隣接し、この直後に続く１アミノ酸を付加することを意味する。本発明に関連して、同定されたＤＮＡｓｅの変異体は、親の酵素活性、すなわち、ＤＮＡ骨格におけるホスホジエステル結合の加水分解切断を触媒する能力（デオキシリボヌクレアーゼ活性）を有する。一実施形態では、変異体のデオキシリボヌクレアーゼ活性は、親ＤＮＡｓｅに対して増加し、例えば、デオキシリボヌクレアーゼ活性を有する酵素の成熟型ポリペプチドは、配列番号１の成熟型ポリペプチドを含むか、もしくはそれから構成される酵素、配列番号２に示される配列を含むか、もしくはそれから構成される酵素、配列番号３に示される配列を含むか、もしくはそれから構成される酵素、配列番号４の成熟型ポリペプチドを含むか、もしくはそれから構成される酵素、配列番号５の成熟型ポリペプチドを含むか、もしくはそれから構成される酵素、または配列番号６の成熟型ポリペプチドを含むか、もしくはそれから構成される酵素からなる群から選択される。
【００２４】
洗浄液：「洗浄液」という用語は、水と少なくとも１種の界面活性剤（任意選択で、他の洗剤成分、例えば、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素以外で、且つ生地の洗濯に使用される酵素を含有する）の溶液または混合物を意味することが意図される。
【００２５】
洗浄性能：洗浄性能を測定する１つの方法は、デルタ酵素性能値（ΔＲｅｍ酵素値）である：「デルタ酵素再発光（ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ）値」は、本明細書において、４６０ｎｍでの反射率または再発光測定の結果として定義される。１枚の同色の布切れ、好ましくは反復洗浄から得られた布切れをバックグラウンドとして用いて、布切れを測定する。各布切れタイプを代表する布切れを、洗浄前に測定する。デルタ酵素再発光は、酵素が存在する洗剤で洗浄された布切れの再発光値から、酵素が存在しない洗剤で洗浄された類似布切れの再発光値を差し引いたものである。
【００２６】
洗浄性能を測定する別の方法は、色差（Ｃｏｌｏｒ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ）（Ｌ値）を使用して実施する：Ｌａｂ色空間は、明度について大きさＬの反対色空間である。Ｌ値、Ｌ＊は、Ｌ＊＝０で最も暗く、Ｌ＊＝１００で最も明るい。本発明に関連して、Ｌ値も色差と呼ばれる。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
本発明者らは、驚くことに、プロテアーゼと組み合わせて、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素で生地を洗浄すると、バイオフィルムの低減／除去、白色度の維持、ならびに汚れの再付着の抑制に関して予想外の優れた結果が得られることを見出した。これらの効果は、ポリエステルおよび綿のブレンドを含む生地についてさらに顕著である。
【００２８】
ポリエステルおよび綿は、衣類としての生地に一般的に使用される材料である。ポリエステルと他の材料のブレンドも一般的に使用されている。従って、これらの生地に好適な洗剤組成物が市販されていることは重要である。
【００２９】
本発明の方法は、バイオフィルムおよび／またはタンパク質性汚れで汚れた生地を洗濯する方法に関し、この方法は、以下：
ａ）ＤＮａｓｅ活性を有する酵素、プロテアーゼおよび界面活性剤を含む洗浄液と生地を接触させるステップ；および
ｂ）任意選択で生地をすすぐステップ
を含み、
ここで、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素およびプロテアーゼは、生地からバイオフィルムを低減および／または除去することができる。
【００３０】
洗浄性能は、アッセイＩＩに記載されているように、再発光値を測定することによって評価される。ＤＮａｓｅ活性を有する酵素をプロテアーゼと一緒に用いる本発明の方法および／または組成物によって、生地の白色度が向上する。綿およびポリエステルを含む生地に酵素の組合せを使用する場合、白色度はさらに向上する（実施例１）。
【００３１】
さらに、本発明者らは、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素をプロテアーゼと組み合わせて使用すると、生地に存在するバイオフィルムの量が減少することも見出した。バイオフィルムに対するＤＮａｓｅの効果は、プロテアーゼが存在する場合、プロテアーゼなしの場合よりもさらに高い。この効果は、綿とポリエステルの両方を含む生地でさらに顕著である。
【００３２】
洗濯生地に存在するバイオフィルムは、例えば、以下の種：アシネトバクター属（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．）、アエロミクロビウム属（Ａｅｒｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ  ｓｐ．）、ブレバンジモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、ミクロバクテリウム属（Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐ．）、ミクロコッカス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｕｔｅｕｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、およびステノトロホモナス属（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）などの多くの種に見出すことができる。本発明者らは、ブレバンジモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）により生成されたバイオフィルムが、ポリエステルを含まない生地よりもポリエステルを含む生地から多量に除去されることを見出した。この効果は、ＤＮａｓｅをプロテアーゼと一緒に添加すると、さらに顕著である。本発明の一実施形態では、洗浄しようとする生地に存在するバイオフィルムは、例えば他のバイオフィルム生成種と一緒に、ブレバンジモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）からのバイオフィルムを含む。
【００３３】
洗浄液中の酵素の濃度は、典型的に、例えば、０．００００８〜１００の範囲、０．０００１〜１００の範囲、０．０００２〜１００の範囲、０．０００４〜１００の範囲、０．０００８〜１００の範囲、０．００１〜１００ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、０．０１〜１００ｐｐｍ酵素タンパク質、好ましくは０．０５〜５０ｐｐｍ酵素タンパク質、より好ましくは０．１〜５０ｐｐｍ酵素タンパク質、より好ましくは０．１〜３０ｐｐｍ酵素タンパク質、さらに好ましくは０．５〜２０ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、ならびに最も好ましくは０．５〜１０ｐｐｍ酵素タンパク質など、０．００００４〜１００ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲である。
【００３４】
往々にして洗濯生地の洗浄に関連する１つの問題は、再付着であり、この場合、洗濯生地に付着した汚れが、洗浄中に生地から放出され、別の洗濯生地の上か、または同じ生地の別の箇所に再付着する。本発明は、生地への再付着を防止および／または低減する。
【００３５】
本発明の一実施形態では、デオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）活性を有する酵素、プロテアーゼ、少なくとも１７％（ｗ／ｗ）のアニオン性界面活性剤および少なくとも１１％（ｗ／ｗ）のアニオン性界面活性剤並びにビルダーを含む新規の洗剤組成物が使用される。
【００３６】
本発明の一実施形態は、（ａ）デオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）活性を有する１種または複数種の酵素、（ｂ）１種または複数種のプロテアーゼ、および任意選択で（ｃ）少なくとも５％、例えば、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％（ｗ／ｗ）の１種または複数種のアニオン性界面活性剤、任意選択で（ｄ）少なくとも５％、例えば、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％（ｗ／ｗ）の１種または複数種のノニオン性界面活性剤、ならびに／または任意選択で少なくとも１０％、例えば、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも４５％（ｗ／ｗ）の１種または複数種のビルダーを含む洗剤組成物に関する。
【００３７】
ノニオン性界面活性剤は、以下：アルコールエトキシレート（ＡＥまたはＡＥＯ）、アルコールプロポキシレート、プロポキシル化脂肪族アルコール（ＰＦＡ）、エトキシル化および／またはプロポキシル化脂肪酸アルキルエステルなどのアルコキシル化脂肪酸アルキルエステル、アルキルフェノールエトキシレート（ＡＰＥ）、ノニルフェノールエトキシレート（ＮＰＥ）、アルキルポリグリコシド（ＡＰＧ）、アルコキシル化アミン、脂肪酸モノエタノールアミド（ＦＡＭ）、脂肪酸ジエタノールアミド（ＦＡＤＡ）、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＥＦＡＭ）、プロポキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＰＦＡＭ）、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、ならびにグルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（グルカミド、ＧＡ、もしくは脂肪酸グルカミド、ＦＡＧＡ）からなる群から選択することができる。
【００３８】
洗剤組成物は、さらに、以下：硫酸塩およびスルホン酸塩、例えば、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＬＡＳ）、ＬＡＳの異性体、分岐アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＢＡＢＳ）、フェニルアルカンスルホン酸塩、α−オレフィンスルホン酸塩（ＡＯＳ）、オレフィンスルホン酸塩、アルケンスルホン酸塩、アルカン−２，３−ジイルビス（硫酸塩）、ヒドロキシアルカンスルホン酸塩およびジスルホン酸塩、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）などの硫酸アルキル（ＡＳ）、脂肪族アルコール硫酸塩（ＦＡＳ）、第１級アルコール硫酸塩（ＰＡＳ）、アルコールエーテル硫酸塩（アルコールエトキシ硫酸塩または脂肪族アルコールエーテル硫酸塩としても知られるＡＥＳまたはＡＥＯＳまたはＦＥＳ）、第２級アルカンスルホン酸塩（ＳＡＳ）、パラフィンスルホン酸塩（ＰＳ）、スルホン酸エステル、スルホン化脂肪酸グリセロールエステル、スルホン酸メチルエステル（ＭＥＳ）をはじめとするα−スルホ脂肪酸メチルエステル（α−ＳＦＭｅまたはＳＥＳ）、アルキル−またはアルケニルコハク酸、ドデセニル／テトラデセニルコハク酸（ＤＴＳＡ）、アミノ酸の脂肪酸誘導体、スルホコハク酸または脂肪酸の塩のジエステルおよびモノエステル（セッケン）、ならびにこれらの組合せからなる群から選択されるアニオン性界面活性剤を含む。
【００３９】
好ましい実施形態では、洗剤組成物は、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＬＡＳ）、α−オレフィンスルホン酸塩（ＡＯＳ）および硫酸アルキル（ＡＳ）からなる群から選択される界面活性剤を含む。
【００４０】
本発明に従って用いられる洗剤組成物または洗浄液は、さらに、以下：ヘミセルロース、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、マンナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、βグルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、クロロフィラーゼ、アミラーゼ、ペルヒドロラーゼ、ペルオキシダーゼおよびキサンタナーゼからなる群から選択される１種または複数種の酵素を含んでもよい。
【００４１】
洗剤組成物において、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、洗剤組成物グラム当たり少なくとも０．００２ｍｇの酵素、例えば、少なくとも０．００４ｍｇの酵素、少なくとも０．００６ｍｇの酵素、少なくとも０．００８ｍｇの酵素、少なくとも０．０１ｍｇの酵素、少なくとも０．１ｍｇのタンパク質、少なくとも１ｍｇのタンパク質、少なくとも１０ｍｇのタンパク質、少なくとも２０ｍｇのタンパク質、少なくとも３０ｍｇのタンパク質、少なくとも４０ｍｇのタンパク質、少なくとも５０ｍｇのタンパク質、少なくとも６０ｍｇのタンパク質、少なくとも７０ｍｇのタンパク質、少なくとも８０ｍｇのタンパク質、少なくとも９０ｍｇのタンパク質、少なくとも１００ｍｇのタンパク質、例えば洗剤組成物グラム当たり８０〜１００ｍｇのタンパク質などに対応する量で存在すべきである。従って、洗剤組成物は、少なくとも０．００００８％の酵素、好ましくは、少なくとも０．００２％、０．００３％、０．００４％、０．００５％、０．００６％、０．００８％、０．０１％、０．０２％、０．０３％、０．０５％、０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％または１．０％の酵素を含み得る。
【００４２】
一実施形態では、本発明は、１つまたは複数の別の洗剤成分と組み合わせた、本発明の洗剤組成物に関する。別の成分の選択は、当業者の技量の範囲内であり、以下に記載する例示的な非限定的成分をはじめとする通常の成分を含む。
【００４３】
プロテアーゼは、プロテアーゼからなる群から選択することができ、ここで、プロテアーゼは、以下：
ａ）配列番号７の成熟型ポリペプチドの以下の位置：９、１５、４３、６８、７６、９９、１０１、１６７、１７０、１９４、２０５、２０６、２０９、２１７、２１８、２２２、２４５、２６１および２６２に対応する１つまたは複数の位置に改変を含む酵素変異体であり、ここで、各改変は、独立して置換、欠失または挿入であり、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号７の成熟型ポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する；
ｂ）配列番号８のアミノ酸配列に対応する酵素である；
ｃ）配列番号８の成熟型ポリペプチドのＳ８５Ｎから選択される置換を含む酵素変異体であり、ここで、変異体は、プロテアーゼ活性を有する；または
ｄ）配列番号９のアミノ酸配列に対応する酵素である。
【００４４】
一実施形態では、酵素変異体は、配列番号７の以下の位置：Ｓ９Ｅ、Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｓ９９Ｇ、Ｓ９９Ａ、Ｓ１０１Ｅ、Ｓ１０１Ｎ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｖ２０５Ｉ、Ｑ２０６Ｌ、Ｙ２０９Ｗ、Ｌ２１７Ｄ、Ｌ２１７Ｑ、Ｎ２１８Ｄ、Ｍ２２２Ｓ、Ｑ２４５Ｒ、Ｎ２６１Ｗ、Ｌ２６２Ｅ  Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐ、Ｓ９９ＳＥおよびＳ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６８Ａ＋Ｎ２１８Ｄ＋Ｑ２４５Ｒからなる群から選択される１つまたは複数の置換を含み、ここで、酵素変異体は、配列番号７に示されるポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する。本発明の好ましい実施形態では、酵素変異体は、配列番号７の下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む。
【００４５】
一実施形態では、プロテアーゼは、配列番号７の以下の位置：９、１５、４３、６８、７６、９９、１０１、１６７、１７０、１９４、２０５、２０６、２０９、２１７、２１８、２２２、２４５、２６１および２６２に対応する１つまたは複数の位置に改変を含むプロテアーゼ変異体であり、ここで、各改変は、独立して置換、欠失または挿入であり、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号８に示されるポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する。
【００４６】
一実施形態では、プロテアーゼは、配列番号７の以下：Ｓ９Ｅ、Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｓ９９Ｇ、Ｓ９９Ａ、Ｓ１０１Ｅ、Ｓ１０１Ｎ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｖ２０５Ｉ、Ｑ２０６Ｌ、Ｙ２０９Ｗ、Ｌ２１７Ｄ、Ｌ２１７Ｑ、Ｎ２１８Ｄ、Ｍ２２２Ｓ、Ｑ２４５Ｒ、Ｎ２６１Ｗ、Ｌ２６２Ｅ  Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐ、Ｓ９９ＳＥおよびＳ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６８Ａ＋Ｎ２１８Ｄ＋Ｑ２４５Ｒからなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であり、ここで、これらの位置は、配列番号７に対応し、変異体は、配列番号８に示されるポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する。改変Ｓ９９ＳＥは、９９位（配列番号７の９９に対応する）後のアミノ酸Ｇｌｕ（Ｅ）の挿入を意味する。本発明では、位置は、以下に記載するように、配列番号７に従って番号付けされる。
【００４７】
本発明の好ましい実施形態では、酵素変異体は、下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含み、ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、プロテアーゼは、配列番号８と少なくとも８０％の配列同一性を有する。
【００４８】
プロテアーゼは、好ましくは、配列番号８に示されるバチルス・レンツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｎｔｕｓ）プロテアーゼまたは配列番号７に示されるバチルス・アミロリケニファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｃｈｅｎｉｆａｃｉｅｎｓ）プロテアーゼの変異体である。プロテアーゼ変異体は、好ましくは、配列番号８または配列番号７と少なくとも８０％の配列同一性を有する。
【００４９】
本発明において、ＤＮａｓｅと一緒に用いられるプロテアーゼは、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であってもよく、ここで、前記プロテアーゼ変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有する。本発明のＤＮａｓｅと組み合わせて用いられるプロテアーゼは、配列番号７または配列番号８に示されるプロテアーゼの変異体であってもよい。本発明の一態様では、プロテアーゼ変異体は、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に改変を含み、ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応する。好ましくは、１つまたは複数の位置の改変は、Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］およびＸ２６２［Ｅ，Ｄ］から選択され、ここで、位置は、配列番号７の位置に対応し、変異体は、配列番号８に示されるポリペプチドまたは配列番号７に示されるポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する。括弧内のアミノ酸は、代替物である。本発明のプロテアーゼは、前駆体、すなわち、好ましくは配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼ、またはそれに対して少なくとも８０％を有するプロテアーゼである、親プロテアーゼと比較して、下記の置換のいずれかを含み、ここで、配置される置換は、以下：
（ａ）Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
（ｂ）Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
（ｃ）Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
（ｄ）Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
（ｅ）Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
（ｆ）Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
（ｇ）Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
（ｈ）Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
（ｉ）Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
（ｊ）Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
（ｋ）Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
（ｌ）Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
（ｍ）Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
（ｎ）Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
（ｏ）Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
（Ｐ）Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
（ｑ）Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
（ｒ）Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
（ｓ）Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
（ｔ）Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
（ｕ）Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
（ｖ）Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
（ｗ）Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
（ｘ）Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
（ｙ）Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、
（ｚ）Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、変異体は、配列番号７、配列番号８に示されるポリペプチド、または配列番号９に示されるポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する。
【００５０】
Ｘは、親に存在するアミノ酸を表し、これは、選択される親に応じて任意のアミノ酸であってよい。プロテアーゼ変異体は、（ａ）から（ｚ）に列記される置換セットの任意の組合せを含んでよい。置換セットは、本発明に関して、プロテアーゼが、少なくとも、例えば、Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒのセット内の置換を含むことを意味する。当業者には、プロテアーゼが別の置換を含んでもよく；好ましくは、プロテアーゼ変異体が、例えば、配列番号７、配列番号８、または配列番号９の配列のいずれかなどの親と少なくとも８０％の配列同一性を有することは明らかである。
【００５１】
プロテアーゼ変異体のアミノ酸位置／残基の番号付け
別に記載されていなければ、本明細書で使用されるアミノ酸番号付けは、スブチラーゼＢＰＮ’（ＢＡＳＢＰＮ）配列のそれに対応する。ＢＰＮ’の配列のさらに詳しい説明については、配列番号２またはＳｉｅｚｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｎｇ．４（１９９１）７１９−７３７を参照されたい。
【００５２】
本出願に関連して、置換は、配列番号７に示されるポリペプチドの位置に対応する位置で、配列番号８に示されるプロテアーゼに存在するアミノ酸によって示す場合がある。本発明に記載される有利な効果、例えば、バイオフィルム低減の改善を取得する目的でＤＮａｓｅと共に変異体を好適にするのに、様々な親プロテアーゼが適している。当業者には、置換されたアミノ酸、すなわち前述のアミノ酸は、変異体が配列番号８とは異なる親から作成された場合、配列番号８のアミノ酸とは異なり得る。これは、任意のアミノ酸を表すＸによって示すことができ、これは、その位置にある任意の本来のアミノ酸が置換され得ることを示している。例えば、Ｘ９Ｅは、Ｅ以外の９位の任意のアミノ酸残基がＥで置換されていることを意味する。
【００５３】
本発明の一実施形態では、プロテアーゼは、配列番号８と１００％の同一性を有する。本発明の一実施形態では、プロテアーゼは、配列番号７と１００％の同一性を有する。
【００５４】
ＤＮａｓｅ活性を有する酵素またはデオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）は、ＤＮＡ骨格におけるリン酸ジエステル結合の加水分解開裂を触媒し、このようにしてＤＮＡを分解する任意の酵素である。ＤＮａｓｅ活性を有するポリペプチド、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素、およびＤＮａｓｅという用語は、置き換え可能に用いられる。
【００５５】
本発明によれば、細菌または真菌供給源から取得可能なＤＮａｓｅを使用することができる。こうした例では、真菌から取得可能なＤＮａｓｅが使用される。特に、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）から取得可能なＤＮａｓｅが好ましく；特に、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）から取得可能なＤＮａｓｅが好ましい。本発明の一実施形態では、デオキシリボヌクレアーゼ活性を有する酵素は、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）由来のＳ１ヌクレアーゼではない。
【００５６】
本発明で使用されるＤＮａｓｅは、好ましくは、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）から得られる、配列番号１のアミノ酸３８〜２４３として示される、配列番号２の成熟型ポリペプチドを含む。ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、例えば、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）から得ることができる。
【００５７】
本発明の一態様は、配列番号１の成熟型ポリペプチドと、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、ＤＮａｓｅ活性を有する、単離された酵素に関する。一態様では、酵素は、配列番号１の成熟型ポリペプチドと、最大１０アミノ酸、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸だけ異なる。
【００５８】
本発明で使用されるＤＮａｓｅは、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）から得られる、配列番号２のアミノ酸３８〜２４３として示される配列番号２の成熟型ポリペプチドを含む。ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、例えば、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）から得ることができる。本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、特許請求の範囲に記載されるポリペプチドである。
【００５９】
本発明の一態様は、配列番号２の成熟型ポリペプチドに対して、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、ＤＮａｓｅ活性を有する、単離されたポリペプチドに関する。一態様では、本酵素は、配列番号２の成熟型ポリペプチドと、１０以下、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸だけ異なる。
【００６０】
本発明で使用されるＤＮａｓｅは、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）から得られる、配列番号３のアミノ酸１〜２０４として示される配列番号３の成熟型ポリペプチドを含む。ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、例えば、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）から得ることができる。本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、特許請求の範囲に記載されるポリペプチドである。
【００６１】
一実施形態では、本発明は、配列番号３の成熟型ポリペプチドと、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、ＤＮａｓｅ活性を有する、単離されたポリペプチドに関する。一態様では、ポリペプチドは、配列番号３の成熟型ポリペプチドと、最大１０アミノ酸、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸だけ異なる。
【００６２】
本発明で使用されるＤＮａｓｅは、トリコデルマ・ハルジアヌム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）から得られる、配列番号４のアミノ酸１８〜２０５として示される配列番号４の成熟型ポリペプチドを含む。ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、トリコデルマ属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、例えば、トリコデルマ・ハルジアヌム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）から得ることができる。本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、特許請求の範囲に記載されるポリペプチドである。
【００６３】
一実施形態では、本発明は、配列番号４の成熟型ポリペプチドと、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、ＤＮａｓｅ活性を有する、単離された酵素に関する。一態様では、ポリペプチドは、配列番号４の成熟型ポリペプチドと、最大１０アミノ酸、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸だけ異なる。
【００６４】
本発明で使用されるＤＮａｓｅは、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）から得られる、配列番号５のアミノ酸３４〜１４２として示される配列番号５の成熟型ポリペプチドを含む。ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、例えば、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）から得ることができる。本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、特許請求の範囲に記載されるポリペプチドである。
【００６５】
一実施形態では、本発明は、配列番号５の成熟型ポリペプチドと、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、ＤＮａｓｅ活性を有する、単離されたポリペプチドに関する。一態様では、ポリペプチドは、配列番号５の成熟型ポリペプチドと、最大１０アミノ酸、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸だけ異なる。
【００６６】
本発明で使用されるＤＮａｓｅは、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）から得られる、配列番号６のアミノ酸２７〜１３６として示される配列番号６の成熟型ポリペプチドを含む。ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、例えば、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）から得ることができる。本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、特許請求の範囲に記載されるポリペプチドである。
【００６７】
一実施形態では、本発明は、配列番号６の成熟型ポリペプチドに対して、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、ＤＮａｓｅ活性を有する、単離されたポリペプチドに関する。一態様では、本ポリペプチドは、配列番号６の成熟型ポリペプチドと、１０以下、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸だけ異なる。
【００６８】
本発明の酵素は、配列番号１のアミノ酸配列もしくはその対立遺伝子変異体を含むか、または、これから構成されるのが好ましく；あるいは、ＤＮａｓｅ活性を有するその断片である。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号１の成熟型ポリペプチドを含むか、または、これから構成される。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸３８〜２４３を含むか、または、これから構成される。
【００６９】
本発明の酵素は、配列番号２のアミノ酸配列もしくはその対立遺伝子変異体を含むか、または、これから構成されることが好ましく；あるいは、ＤＮａｓｅ活性を有するその断片である。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号２の成熟型ポリペプチドを含むか、または、これから構成される。他の態様において、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸１〜２０６を含むか、または、これから構成される。
【００７０】
本発明の酵素は、配列番号３のアミノ酸配列もしくはその対立遺伝子変異体を含むか、または、これから構成されることが好ましく；あるいは、ＤＮａｓｅ活性を有するその断片である。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号３の成熟型ポリペプチドを含むか、または、これから構成される。他の態様において、ポリペプチドは、配列番号３のアミノ酸１〜２０４を含むか、または、これから構成される。
【００７１】
本発明の酵素は、配列番号４のアミノ酸配列もしくはその対立遺伝子変異体を含むか、または、これから構成されるのが好ましく；あるいは、ＤＮａｓｅ活性を有するその断片である。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号４の成熟型ポリペプチドを含むか、または、これから構成される。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸１８〜２０５を含むか、または、これから構成される。
【００７２】
本発明の酵素は、配列番号５のアミノ酸配列もしくはその対立遺伝子変異体を含むか、または、これから構成されるのが好ましく；あるいは、ＤＮａｓｅ活性を有するその断片である。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号５の成熟型ポリペプチドを含むか、または、これから構成される。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号５のアミノ酸３８〜２４０を含むか、または、これから構成される。
【００７３】
本発明の酵素は、配列番号６のアミノ酸配列もしくはその対立遺伝子変異体を含むか、または、これから構成されるのが好ましく；あるいは、ＤＮａｓｅ活性を有するその断片である。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号６の成熟型ポリペプチドを含むか、または、これから構成される。別の態様では、ポリペプチドは、配列番号６のアミノ酸２７〜１３６を含むか、または、これから構成される。
【００７４】
本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、配列番号１のポリペプチドと少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、プロテアーゼは、配列番号７の下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む酵素変異体である。
【００７５】
本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、配列番号１に示されるポリペプチドと少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％の配列同一性を有し、プロテアーゼは、以下：
（ａ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｂ）置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｄ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｅ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０位に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体はプロテアーゼ活性を有し、プロテアーゼ変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；
（ｆ）プロテアーゼ変異体であって、変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、変異体はプロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｇ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］およびＸ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；ならびに
（ｈ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、プロテアーゼが、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ
からなる群から選択される。
【００７６】
本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、配列番号４に示されるポリペプチドと少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％の配列同一性を有し、プロテアーゼは、以下：
（ａ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｂ）置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｄ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼであって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ；
（ｅ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０位に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体はプロテアーゼ活性を有し、プロテアーゼ変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；
（ｆ）プロテアーゼ変異体であって、変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、変異体はプロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ；
（ｇ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］およびＸ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；ならびに
（ｈ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、プロテアーゼが、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％の配列同一性を有するプロテアーゼ
からなる群から選択される。
【００７７】
一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、配列番号５に示されるポリペプチドと少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％の配列同一性を有し、プロテアーゼは、以下：
（ａ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｂ）置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｄ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼであって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ；
（ｅ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０位に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体はプロテアーゼ活性を有し、プロテアーゼ変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；
（ｆ）プロテアーゼ変異体であって、変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、変異体はプロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｇ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］およびＸ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；ならびに
（ｈ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、プロテアーゼが、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％の配列同一性を有するプロテアーゼ
からなる群から選択される。
【００７８】
本発明の一実施形態では、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素は、配列番号６に示されるポリペプチドと少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％の配列同一性を有し、プロテアーゼは、以下：
（ａ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｂ）置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｄ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼであって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ；
（ｅ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０位に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体はプロテアーゼ活性を有し、プロテアーゼ変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；
（ｆ）プロテアーゼ変異体であって、変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、変異体はプロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｇ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］およびＸ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；ならびに
（ｈ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、プロテアーゼが、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％の配列同一性を有するプロテアーゼ
からなる群から選択される。
【００７９】
さらに、本発明は、前述のポリペプチドと実質的に相同性のＤＮａｓｅポリペプチド、ならびにその種ホモログ（パラログまたはオーソログ）も提供する。「実質的に相同性の」という用語は、本明細書の用法では、配列番号１のアミノ酸配列、配列番号２のアミノ酸配列、配列番号３のアミノ酸配列、配列番号４のアミノ酸配列、配列番号５のアミノ酸配列、配列番号６のアミノ酸配列、またはＤＮａｓｅ活性を有するその断片、またはそのオーソログもしくはパラログと、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、さらに好ましくは少なくとも９７％、最も好ましくは少なくとも９９％またはそれ以上同一であるポリペプチドを示す。
【００８０】
別の実施形態において、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５または配列番号６のＤＮａｓｅは、１つまたは複数の（例えば、数個）の位置に置換、欠失および／または挿入を含む。別の実施形態では、配列番号３のＤＮａｓｅは、１つまたは複数の（例えば、数個）の位置に置換、欠失および／または挿入を含む。一実施形態では、配列の成熟型ポリペプチドに導入されるアミノ酸置換、欠失および／または挿入の数は、１０以下、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、または９である。アミノ酸変異は、副次的な性質のものであってもよく、すなわち、タンパク質の折り畳みおよび／もしくは活性に顕著に影響しない保存的アミノ酸置換もしくは挿入；典型的には１〜３０アミノ酸の小さな欠失；アミノ−末端メチオニン残基などの小さなアミノ−もしくはカルボキシル−末端伸長；２０〜２５個以下の残基の小さなリンカーペプチド；あるいは、正味電荷、またはポリヒスチジン配列、抗原性エピトープもしくは結合性ドメインなどの他の機能を変化させることによって精製を促進させる小さな伸長であってもよい。
【００８１】
保存的置換の例は、塩基性アミノ酸（アルギニン、リシンおよびヒスチジン）、酸性アミノ酸（グルタミン酸およびアスパラギン酸）、極性アミノ酸（グルタミンおよびアスパラギン）、疎水性アミノ酸（ロイシン、イソロイシンおよびバリン）、芳香族アミノ酸（フェニルアラニン、トリプトファンおよびチロシン）、ならびに低分子アミノ酸（グリシン、アラニン、セリン、スレオニンおよびメチオニン）の群に含まれる。特異活性を概して改変しないアミノ酸置換は当技術分野において公知であり、例えば、Ｈ．Ｎｅｕｒａｔｈ  ａｎｄ  Ｒ．Ｌ．Ｈｉｌｌ，１９７９，Ｉｎ，Ｔｈｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに記載されている。一般的な置換は、Ａｌａ／Ｓｅｒ、Ｖａｌ／Ｉｌｅ、Ａｓｐ／Ｇｌｕ、Ｔｈｒ／Ｓｅｒ、Ａｌａ／Ｇｌｙ、Ａｌａ／Ｔｈｒ、Ｓｅｒ／Ａｓｎ、Ａｌａ／Ｖａｌ、Ｓｅｒ／Ｇｌｙ、Ｔｙｒ／Ｐｈｅ、Ａｌａ／Ｐｒｏ、Ｌｙｓ／Ａｒｇ、Ａｓｐ／Ａｓｎ、Ｌｅｕ／Ｉｌｅ、Ｌｅｕ／Ｖａｌ、Ａｌａ／ＧｌｕおよびＡｓｐ／Ｇｌｙである。
【００８２】
あるいは、アミノ酸変異は、ポリペプチドの物理化学的特性が改変されるような性質のものである。例えば、アミノ酸変異によって、ポリペプチドの熱安定性の向上、基質特異性の改変、至適ｐＨの変化などをもたらし得る。
【００８３】
ポリペプチドにおける必須アミノ酸は、部位特異的突然変異誘発またはアラニン走査突然変異誘発（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ，１９８９，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：１０８１−１０８５）などの当技術分野において公知である手法に従って同定することができる。後者の技術では、単一のアラニン突然変異が分子中のすべての残基に導入され、得られたミュータント分子をＤＮａｓｅ活性についてテストすることにより、分子の活性に重要なアミノ酸残基を同定する。また、Ｈｉｌｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：４６９９−４７０８を参照のこと。酵素の活性部位または他の生物学的相互作用は、推定上の接触部位アミノ酸の突然変異と併用した、核磁気共嗚、結晶構造解析、電子回折または光親和性標識などの技術によって判定される、構造の物理的分析によって決定することもできる。例えば、ｄｅ  Ｖｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５５：３０６−３１２；Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：８９９−９０４；Ｗｌｏｄａｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３０９：５９−６４を参照のこと。必須アミノ酸のアイデンティティーは、関連ポリペプチドとのアラインメントから推測することもできる。
【００８４】
単一もしくは複数のアミノ酸置換、欠失、および／または挿入は、Ｒｅｉｄｈａａｒ−Ｏｌｓｏｎ  ａｎｄ  Ｓａｕｅｒ，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４１：５３−５７；Ｂｏｗｉｅ  ａｎｄ  Ｓａｕｅｒ，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：２１５２−２１５６；国際公開第９５／１７４１３号パンフレット；または、国際公開第９５／２２６２５号パンフレットにより開示されているものなどの公知の突然変異誘発方法、組換え法、および／またはシャッフリング法、これに続く関連するスクリーニング法を用いて行い、テストすることができる。用いることができる他の方法としては、エラープローンＰＣＲ、ファージディスプレイ（例えば、Ｌｏｗｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３０：１０８３２−１０８３７；米国特許第５，２２３，４０９号明細書；国際公開第９２／０６２０４号パンフレット）、および領域特異的突然変異誘発（Ｄｅｒｂｙｓｈｉｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｇｅｎｅ  ４６：１４５；Ｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ＤＮＡ  ７：１２７）が挙げられる。
【００８５】
突然変異誘発／シャッフリング法は、宿主細胞によって発現されたクローン化突然変異誘発ポリペプチドの活性を検出するために、高スループット自動スクリーニング法と組み合わせることができる（Ｎｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １７：８９３−８９６）。活性ポリペプチドをコードする突然変異誘発ＤＮＡ分子は、宿主細胞から回収可能であり、技術分野における標準的な方法を用いて迅速に配列決定することが可能である。これらの方法によって、ポリペプチドにおける個別のアミノ酸残基の重要性を迅速に判定することが可能になる。
【００８６】
ポリペプチドは、１つのポリペプチドの一領域が、別のポリペプチドの一領域のＮ−末端またはＣ−末端で融合したハイブリッドポリペプチドであってもよい。
【００８７】
ポリペプチドは、別のポリペプチドが本発明のポリペプチドのＮ−末端またはＣ−末端で融合した融合ポリペプチドまたは切断可能な融合ポリペプチドであってもよい。融合ポリペプチドは、別のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを本発明のポリヌクレオチドに融合させることにより生成される。融合ポリペプチドを生成する技術は、当技術分野において公知であり、それらがフレーム中に収まり、且つ、融合ポリペプチドの発現が、同一のプロモータおよびターミネータの制御下にあるように、ポリペプチドをコードするコード配列を連結するステップを含む。融合ポリペプチドはまた、翻訳後に融合ポリペプチドが形成されるインテインテクノロジーを用いて構築してもよい（Ｃｏｏｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，ＥＭＢＯ  Ｊ．１２：２５７５−２５８３；Ｄａｗｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６６：７７６−７７９）。
【００８８】
融合ポリペプチドは、２つのポリペプチドの間に切断部位をさらに含むこともできる。融合タンパク質が分泌される際に、この部位が切断されて、２つのポリペプチドを遊離させる。切断部位の例としては、これらに限定されないが、以下：Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｊ．Ｉｎｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３：５６８−５７６；Ｓｖｅｔｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７６：２４５−２５１；Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ−Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６３：３４８８−３４９３；Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １３：４９８−５０３；および、Ｃｏｎｔｒｅｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：３７８−３８１；Ｅａｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２５：５０５−５１２；Ｃｏｌｌｉｎｓ−Ｒａｃｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １３：９８２−９８７；Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ６：２４０−２４８；ならびに、Ｓｔｅｖｅｎｓ，２００３，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｗｏｒｌｄ  ４：３５−４８に開示されている部位が挙げられる。
【００８９】
界面活性剤
洗剤組成物は、１種または複数種の界面活性剤を含み、そのうち少なくとも１種の界面活性剤は、アニオン性である。他の界面活性剤は、アニオン性および／またはノニオン性および／または半極性および／または両イオン性、またはこれらの混合物であってもよい。特定の実施形態において、洗剤組成物は、１種または複数種のノニオン性界面活性剤および１種または複数種のアニオン性界面活性剤の混合物を含む。界面活性剤は、典型的には、約０．１重量％〜６０重量％、例えば、約１％〜約４０％、または約３％〜約２０％、または約３％〜約１０％などのレベルで存在する。界面活性剤は所望のクリーニング用途に基づいて選択され、当分野において公知であるいずれかの従来の界面活性剤を含み得る。
【００９０】
含まれる場合、洗剤は、通常、約１重量％〜約４０重量％のアニオン性界面活性剤、例えば、約５％〜約１５％、または約１５％〜約２０％、または約２０％〜約２５％を含む、約５％〜約３０％のアニオン性界面活性剤を含有するであろう。アニオン性界面活性剤の非限定的な例としては、硫酸塩およびスルホン酸塩、特に、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＬＡＳ）、ＬＡＳの異性体、分岐アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＢＡＢＳ）、フェニルアルカンスルホン酸塩、α−オレフィンスルホン酸塩（ＡＯＳ）、オレフィンスルホン酸塩、アルケンスルホン酸塩、アルカン−２，３−ジイルビス（硫酸塩）、ヒドロキシアルカンスルホン酸塩およびジスルホン酸塩、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）などの硫酸アルキル（ＡＳ）、脂肪族アルコール硫酸塩（ＦＡＳ）、第１級アルコール硫酸塩（ＰＡＳ）、アルコールエーテル硫酸塩（アルコールエトキシ硫酸塩または脂肪族アルコールエーテル硫酸塩としても知られるＡＥＳまたはＡＥＯＳまたはＦＥＳ）、第２級アルカンスルホン酸塩（ＳＡＳ）、パラフィンスルホン酸塩（ＰＳ）、スルホン酸エステル、スルホン化脂肪酸グリセロールエステル、スルホン酸メチルエステル（ＭＥＳ）を含むα−スルホ脂肪酸メチルエステル（α−ＳＦＭｅまたはＳＥＳ）、アルキル−またはアルケニルコハク酸、ドデセニル／テトラデセニルコハク酸（ＤＴＳＡ）、アミノ酸の脂肪酸誘導体、スルホコハク酸または脂肪酸（セッケン）の塩のジエステルおよびモノエステル、ならびにこれらの組み合わせが挙げられる。
【００９１】
含まれる場合、洗剤は、通常、約０．２重量％〜約４０重量％、例えば約０．５％〜約３０％、特に約１％〜約２０％、約３％〜約１０％、例えば、約３％〜約５％、約８％〜約１２％、または約１０％〜約１２％などのノニオン性界面活性剤を含有するであろう。ノニオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルコールエトキシレート（ＡＥまたはＡＥＯ）、アルコールプロポキシレート、プロポキシル化脂肪族アルコール（ＰＦＡ）、エトキシル化および／またはプロポキシル化脂肪酸アルキルエステルなどのアルコキシル化脂肪酸アルキルエステル、アルキルフェノールエトキシレート（ＡＰＥ）、ノニルフェノールエトキシレート（ＮＰＥ）、アルキルポリグリコシド（ＡＰＧ）、アルコキシル化アミン、脂肪酸モノエタノールアミド（ＦＡＭ）、脂肪酸ジエタノールアミド（ＦＡＤＡ）、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＥＦＡＭ）、プロポキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＰＦＡＭ）、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、または、グルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（グルカミド、ＧＡ、もしくは脂肪酸グルカミド、ＦＡＧＡ）、ならびに商品名ＳＰＡＮおよびＴＷＥＥＮで入手可能な生成物、ならびにこれらの組み合わせが挙げられる。
【００９２】
含まれる場合、洗剤は、通常、約０重量％〜約４０重量％の半極性界面活性剤を含有するであろう。半極性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルジメチルアミンオキシド、Ｎ−（ココアルキル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミンオキシドおよびＮ−（獣脂−アルキル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミンオキシド、ならびにこれらの組み合わせなどのアミンオキシド（ＡＯ）が挙げられる。
【００９３】
含まれる場合、洗剤は、通常、約０重量％〜約４０重量％の両性イオン性界面活性剤を含有するであろう。両性イオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルジメチルベタイン、スルホベタイン、およびこれらの組み合わせなどのベタインが挙げられる。
【００９４】
ビルダーおよびコビルダー
洗剤組成物は、約０〜６５重量％、例えば、約５％〜約５０％などの洗剤ビルダーもしくはコビルダー、またはこれらの混合物を含有してもよい。ビルダーおよび／またはコビルダーは、特に、ＣａおよびＭｇと共に水溶性錯体を形成するキレート化剤であってもよい。洗剤に用いられる、当分野で公知のいずれのビルダーおよび／またはコビルダーを使用してもよい。ビルダーの非限定的な例としては、ゼオライト、二リン酸塩（ピロリン酸塩）、三リン酸ナトリウム（ＳＴＰまたはＳＴＰＰ）などの三リン酸塩、炭酸ナトリウムなどの炭酸塩、メタケイ酸ナトリウムなどの可溶性ケイ酸塩、層状ケイ酸塩（例えば、Ｈｏｅｃｈｓｔ製ＳＫＳ−６）、２−アミノエタン−１−オール（ＭＥＡ）、ジエタノールアミン（ＤＥＡ、また、２，２’−イミノジエタノール−１−オールとしても知られる）、トリエタノールアミン（ＴＥＡ、また、２，２’，２’’−ニトリロトリエタノール−１−オールとしても知られる）などのエタノールアミン、および、（カルボキシメチル）イヌリン（ＣＭＩ）、ならびにこれらの組み合わせが挙げられる。
【００９５】
洗剤組成物はまた、約０〜５０重量％、例えば、約５％〜約３０％などの洗剤コビルダーを含有してもよい。洗剤組成物は、コビルダーを単独で含んでも、または、例えばゼオライトビルダーといったビルダーと組み合わせて含んでもよい。コビルダーの非限定的な例としては、ポリ（アクリル酸）（ＰＡＡ）またはコポリ（アクリル酸／マレイン酸）（ＰＡＡ／ＰＭＡ）などのポリアクリレートのホモポリマーまたはそのコポリマーが挙げられる。さらに非限定的な例としては、クエン酸塩、アミノカルボン酸塩、アミノポリカルボン酸塩およびホスホン酸塩などのキレート剤、ならびにアルキル−またはアルケニルコハク酸が挙げられる。別の具体例としては、２，２’，２’’−ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、イミノジコハク酸（ＩＤＳ）、エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジコハク酸（ＥＤＤＳ）、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、グルタミン酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＧＬＤＡ）、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰＡ）、ジエチレントリアミンペンタキス（メチレンホスホン酸）（ＤＴＭＰＡもしくはＤＴＰＭＰＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸（ＥＤＧ）、アスパラギン酸−Ｎ−一酢酸（ＡＳＭＡ）、アスパラギン酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＡＳＤＡ）、アスパラギン酸−Ｎ−モノプロピオン酸（ＡＳＭＰ）、イミノジコハク酸（ＩＤＡ）、Ｎ−（２−スルホメチル）アスパラギン酸（ＳＭＡＳ）、Ｎ−（２−スルホエチル）アスパラギン酸（ＳＥＡＳ）、Ｎ−（２−スルホメチル）−グルタミン酸（ＳＭＧＬ）、Ｎ−（２−スルホエチル）−グルタミン酸（ＳＥＧＬ）、Ｎ−メチルイミノ二酢酸（ＭＩＤＡ）、α−アラニン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（α−ＡＬＤＡ）、セリン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＳＥＤＡ）、イソセリン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＩＳＤＡ）、フェニルアラニン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＰＨＤＡ）、アントラニル酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＡＮＤＡ）、スルファニル酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＳＬＤＡ）、タウリン−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＴＵＤＡ）およびスルホメチル−Ｎ，Ｎ−二酢酸（ＳＭＤＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’−三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、ジエタノールグリシン（ＤＥＧ）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰ）、アミノトリス（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）、ならびにこれらの組み合わせおよびこれらの塩が挙げられる。さらなるビルダーおよび／またはコビルダーの例は、例えば、国際公開第０９／１０２８５４号パンフレット、米国特許第５９７７０５３号明細書に開示されている。
【００９６】
ゼオライト
好ましいクラスのゼオライトは、「中間」ケイ酸塩／アルミン酸塩として特性決定される。中間ゼオライトは、約１０未満のＳｉＯｘ／Ａ１０ｚモル比を特徴とする。好ましくは、Ｓｉ０２／Ａ１０２モル比は、約２〜約１０の範囲である。中間体ゼオライトは、「ハイ」ゼオライトに比して利点を有し得る。ハイゼオライトに比べて、中間ゼオライトはアミン臭に対してより高い親和性を有し、これらは、表面積が大きいために臭気吸収に対してより重量効率的であると共に、耐湿性で、しかも水中でより多くの臭気吸収能を維持する。本発明での使用に好適な非常に多様な中間ゼオライトは、ＰＱ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎからＶａｌｆｏｒ（登録商標）ＣＰ３０１−６８、Ｖａｌｆｏｒ（登録商標）ＣＰ３００−６３、Ｖａｌｆｏｒ（登録商標）ＣＰ３００−３５、およびＶａｌｆｏｒ（登録商標）ＣＰ３００−５６として、ならびにＣｏｎｔｅｋａからゼオライトのＣＢＶ１００（登録商標）シリーズとして市販されている。
【００９７】
Ｔｈｅ  Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎおよびＵＯＰからＡｂｓｅｎｔｓ（登録商標）およびＳｍｅｌｌｒｉｔｅ（登録商標）の商品名で市販されているゼオライト材料も好ましい。このような材料は、イオウ含有臭気、例えば、チオール、メルカプタンの制御のために、中間ゼオライトよりも好ましい。表面に噴霧される組成物中の臭気制御剤としてゼオライトを使用する場合、ゼオライト材料は、好ましくは、約１０ミクロン未満の粒度を有し、組成物の約１重量％未満のレベルで組成物中に存在する。
【００９８】
漂白系
洗剤は、０〜３０重量％、例えば、約１％〜約２０％などの漂白系を含有してもよい。洗剤に用いられる、当分野で公知のいずれの漂白系を使用してもよい。好適な漂白系成分としては、漂白触媒、光漂白剤、漂白活性化剤、過炭酸ナトリウム、過ホウ酸ナトリウムおよび過酸化水素−尿素（１：１）などの過酸化水素の供給源、事前に形成した過酸、ならびにこれらの混合物が挙げられる。好適な事前に形成した過酸としては、これらに限定されないが、ペルオキシカルボン酸および塩、ジペルオキシジカルボン酸、ペルイミド酸（ｐｅｒｉｍｉｄｉｃ  ａｃｉｄ）および塩、過イミド酸および塩、ペルオキシ一硫酸および塩、例えば、Ｏｘｏｎｅ（登録商標）、ならびに、これらの混合物が挙げられる。漂白系の非限定的な例としては、ペルオキシド系漂白系が挙げられ、これは、例えば、過ホウ酸（通常は一水和物または四水和物）、過炭酸、過硫酸、過リン酸、過ケイ酸のナトリウム塩などのアルカリ金属塩を含む無機塩を、過酸−形成性漂白活性化剤と組み合わせて含み得る。本明細書において漂白活性化剤という用語は、過酸化水素と反応して、過加水分解（ｐｅｒｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ）により、過酸を形成する化合物を意味する。このようにして形成された過酸は、活性化された漂白剤を構成する。本明細書で用いる好適な漂白活性化剤は、エステル、アミド、イミドまたは無水物のクラスに属するものを含む。好適な例は、テトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）、ナトリウム４−［（３，５，５−トリメチルヘキサノイル）オキシ］ベンゼン−１−スルホン酸塩（ＩＳＯＮＯＢＳ）、４−（ドデカノイルオキシ）ベンゼン−１−スルホン酸塩（ＬＯＢＳ）、４−（デカノイルオキシ）ベンゼン−１−スルホン酸塩、４−（デカノイルオキシ）安息香酸塩（ＤＯＢＳもしくはＤＯＢＡ）、４−（ノナノイルオキシ）ベンゼン−１−スルホン酸塩（ＮＯＢＳ）、および／または国際公開第９８／１７７６７号パンフレットに開示されているものである。対象の漂白活性化剤の特定のファミリーが欧州特許第６２４１５４号明細書に開示されており、そのファミリーにおいて、クエン酸アセチルトリエチル（ＡＴＣ）が特に好ましい。ＡＴＣまたは短鎖トリグリセリド様トリアセチンは、環境にやさしいという利点を有する。さらに、クエン酸アセチルトリエチルおよびトリアセチンは、貯蔵に際して生成物における良好な加水分解安定性を有しており、これは効果的な漂白活性化剤である。最後に、ＡＴＣは、過加水分解反応中に放出されたクエン酸塩がビルダーとして機能し得るため、多機能性である。あるいは、漂白系は、例えば、アミド、イミド、またはスルホンタイプの過酸を含み得る。漂白系はまた、６−（フタルイミド）ペルオキシヘキサン酸（ＰＡＰ）などの過酸を含んでもよい。漂白系はまた、漂白触媒を含んでいてもよい。一部の実施形態において、漂白剤成分は、以下の式を有する有機触媒：
【化１】
2018536391.tif 000002
（ｉｉｉ）およびこれらの混合物
（式中、各Ｒ１は、独立して、９〜２４個の炭素を含有する分岐アルキル基または１１〜２４個の炭素を含有する直鎖アルキル基であり、好ましくは、各Ｒ１は、独立して、９〜１８個の炭素を含有する分岐アルキル基または１１〜１８個の炭素を含有する直鎖アルキル基であり、より好ましくは、各Ｒ１は、独立して、２−プロピルヘプチル、２−ブチルオクチル、２−ペンチルノニル、２−ヘキシルデシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イソノニル、イソデシル、イソトリデシルおよびイソペンタデシルからなる群から選択される）
からなる群から選択される有機触媒であってもよい。他の例示的な漂白系は、例えば、国際公開第２００７／０８７２５８号パンフレット、国際公開第２００７／０８７２４４号パンフレット、国際公開第２００７／０８７２５９号パンフレット、欧州特許第１８６７７０８号明細書（ビタミンＫ）、および国際公開第２００７／０８７２４２号パンフレットに記載されている。好適な光漂白剤は、例えばスルホン化亜鉛またはアルミニウムフタロシアニンであってよい。
【００９９】
漂白成分は、漂白触媒、特に、有機漂白触媒以外に、過酸の供給源を含むのが好ましい。過酸の供給源は、（ａ）事前形成された過酸；（ｂ）好ましくは漂白活性化剤と組み合わせた、過炭酸、過ホウ酸または過硫酸塩（過酸化水素の供給源）；ならびに（ｃ）ペルヒドロラーゼ酵素、および生地処理ステップ中に水の存在下、ｉｎ  ｓｉｔｕで過酸を形成するエステルから選択してよい。
【０１００】
ポリマー
洗剤は、０．５〜５％、２〜５％、０．５〜２％または０．２〜１％などの０〜１０重量％のポリマーを含有する。洗剤において用いられる技術分野において公知であるいずれかのポリマーが利用され得る。ポリマーは、上記のとおりコビルダーとして機能し得、または、再汚染防止、繊維保護、汚染物遊離、移染防止、油脂クリーニングおよび／または消泡特性をもたらし得る。いくつかのポリマーは、上記の特性を２つ以上および／または下記のモチーフを２つ以上有している場合がある。例示的なポリマーとしては、（カルボキシメチル）セルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）、ポリ（エチレングリコール）またはポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＧ）、エトキシル化ポリ（エチレンイミン）、カルボキシメチルイヌリン（ＣＭＩ）、および、ＰＡＡなどのポリカルボキシレート、ＰＡＡ／ＰＭＡ、ポリ−アスパラギン酸、および、ラウリルメタクリレート／アクリル酸コポリマー、疎水性修飾ＣＭＣ（ＨＭ−ＣＭＣ）およびシリコーン、テレフタル酸とオリゴマー系グリコールとのコポリマー、ポリ（エチレンテレフタレート）とポリ（オキシエテンテレフタレート）とのコポリマー（ＰＥＴ−ＰＯＥＴ）、ＰＶＰ、ポリ（ビニルイミダゾール）（ＰＶＩ）、ポリ（ビニルピリジン−Ｎ−オキシド）（ＰＶＰＯまたはＰＶＰＮＯ）、ならびに、ポリビニルピロリドン−ビニルイミダゾール（ＰＶＰＶＩ）が挙げられる。さらに例示的なポリマーとしては、スルホン化ポリカルボキシレート、ポリエチレンオキシドおよびポリプロピレンオキシド（ＰＥＯ−ＰＰＯ）およびジクアタニウムエトキシスルフェートが挙げられる。他の例示的なポリマーは、例えば、国際公開第２００６／１３０５７５号パンフレットに開示されている。上記のポリマーの塩もまた予期される。
【０１０１】
布地色調剤
本発明の洗剤組成物はまた、染料または顔料などの布地色調剤を含んでいてもよく、これは、洗剤組成物に配合された場合に、前記布地が前記洗剤組成物を含む洗浄液と接触させられる際に布地に付着し、これにより、可視光の吸収／反射を介して前記布地の色合いを変えることが可能である。蛍光性白色化剤は少なくともいくらかの可視光を放つ。対照的に、布地色調剤は、可視光スペクトルの少なくとも一部分を吸収することで表面の色合いを変える。好適な布地色調剤としては、染料および染料−クレイ複合体が挙げられ、また、顔料もまた挙げられ得る。好適な染料としては、微小分子染料および高分子染料が挙げられる。好適な微小分子染料としては、例えば国際公開第２００５／０３２７４号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７５号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７６号パンフレットおよび欧州特許第１８７６２２６号明細書（本明細書において参照により援用される）に記載されている、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｂｌｕｅ、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｒｅｄ、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｖｉｏｌｅｔ、Ａｃｉｄ  Ｂｌｕｅ、Ａｃｉｄ  Ｒｅｄ、Ａｃｉｄ  Ｖｉｏｌｅｔ、Ｂａｓｉｃ  Ｂｌｕｅ、Ｂａｓｉｃ  ＶｉｏｌｅｔおよびＢａｓｉｃ  Ｒｅｄ、または、これらの混合物の染料索引（Ｃ．Ｉ．）分類に属する染料からなる群から選択される微小分子染料が挙げられる。洗剤組成物は、約０．００００３重量％〜約０．２重量％、約０．００００８重量％〜約０．０５重量％またはさらには約０．０００１重量％〜約０．０４重量％の布地色調剤を含むことが好ましい。組成物は、０．０００１重量％〜０．２重量％の布地色調剤を含み得、これは、組成物が単位用量ポーチの形態である場合に特に好ましい場合がある。好適な色調剤はまた、例えば、国際公開第２００７／０８７２５７号パンフレット、および国際公開第２００７／０８７２４３号パンフレットに開示されている。
【０１０２】
酵素
洗剤添加剤、ならびに洗剤組成物は、例えばラッカーゼ、および／またはペルオキシダーゼといった、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼなどの１種または複数種の追加の酵素を含み得る。
【０１０３】
一般に、選択された酵素の特性は、選択された洗剤と適合性であるべきであり（すなわち、至適ｐＨ、他の酵素成分および非酵素成分との適合性など）、また、酵素は有効量で存在すべきである。
【０１０４】
セルラーゼ：
好適なセルラーゼは、細菌性または真菌性由来のものを含む。化学的に修飾されたミュータントまたはタンパク質改変ミュータントが含まれる。好適なセルラーゼとしては、例えば、米国特許第４，４３５，３０７号明細書、米国特許第５，６４８，２６３号明細書、米国特許第５，６９１，１７８号明細書、米国特許第５，７７６，７５７号明細書および国際公開第８９／０９２５９号パンフレットに開示されている、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、ミセリオフトラ・テルモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）およびフザリウム・オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）から産生される真菌セルラーゼといった、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、フザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、チエラビア属（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）、アクレモニウム属（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）由来のセルラーゼが挙げられる。
【０１０５】
特に好適なセルラーゼは、色の取り扱いに関する有益性を有するアルカリ性または中性セルラーゼである。このようなセルラーゼの例は、欧州特許第０，４９５，２５７号明細書、欧州特許第０，５３１，３７２号明細書、国際公開第９６／１１２６２号パンフレット、国際公開第９６／２９３９７号パンフレット、国際公開第９８／０８９４０号パンフレットに記載されているセルラーゼである。他の例は、国際公開第９４／０７９９８号パンフレット、欧州特許第０，５３１，３１５号明細書、米国特許第５，４５７，０４６号明細書、米国特許第５，６８６，５９３号明細書、米国特許第５，７６３，２５４号明細書、国際公開第９５／２４４７１号パンフレット、国際公開第９８／１２３０７号パンフレットおよび国際公開第９９／００１５４４号パンフレットに記載されているものなどのセルラーゼ変異体である。
【０１０６】
他のセルラーゼは、国際公開第２００２／０９９０９１号パンフレットの配列番号２の１位〜７７３位のアミノ酸配列に対して少なくとも９７％同一性の配列を有するエンド−β−１，４−グルカナーゼ酵素、またはファミリー４４キシログルカナーゼ（国際公開第２００１／０６２９０３号パンフレットの配列番号２の４０位〜５５９位のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％同一性の配列を有するキシログルカナーゼ酵素である）。
【０１０７】
市販されているセルラーゼとしては、Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ（商標）、およびＣａｒｅｚｙｍｅ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、Ｃａｒｅｚｙｍｅ  Ｐｒｅｍｉｕｍ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ  Ｃｌａｓｓｉｃ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、Ｃｅｌｌｕｓｏｆｔ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、Ｗｈｉｔｅｚｙｍｅ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、Ｃｌａｚｉｎａｓｅ（商標）およびＰｕｒａｄａｘ  ＨＡ（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．）およびＫＡＣ−５００（Ｂ）（商標）（花王株式会社）が挙げられる。
【０１０８】
プロテアーゼ：
本発明の組成物は、１種以上のプロテアーゼを含んでもよく、追加の好適なプロテアーゼは、細菌、真菌、植物、ウイルスまたは動物起源、例えば、植物もしくは微生物起源のものを含む。微生物起源が好ましい。化学的に修飾されたミュータントまたはタンパク質改変ミュータントが含まれる。これは、セリンプロテアーゼまたはメタロプロテアーゼなどのアルカリ性プロテーゼであってよい。セリンプロテアーゼは、例えば、Ｓ１ファミリー、例えば、トリプシン、またはスブチリシンなどのＳ８ファミリーのものであってよい。メタロプロテアーゼは、例えば、ファミリーＭ４などからのサーモリシン、またはＭ５、Ｍ７もしくはＭ８ファミリーのものなどの他のメタロプロテアーゼであってよい。
【０１０９】
「スブチラーゼ」という用語は、Ｓｉｅｚｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｎｇ．４（１９９１）７１９−７３７およびＳｉｅｚｅｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ６（１９９７）５０１−５２３による、セリンプロテアーゼのサブグループを指す。セリンプロテアーゼは、活性部位にセリンを有することを特徴とするプロテアーゼのサブグループであり、これは、基質と一緒に共有結合付加体を形成する。スブチラーゼは、６つの下位区分、すなわち、スブチリシンファミリー、サーミターゼ（Ｔｈｅｒｍｉｔａｓｅ）ファミリー、プロテイナーゼＫ（Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  Ｋ）ファミリー、ランチビオチック（Ｌａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ）ペプチダーゼファミリー、ケキシン（Ｋｅｘｉｎ）ファミリーおよびピロリシン（Ｐｙｒｏｌｙｓｉｎ）ファミリーにさらに分類することができる。
【０１１０】
スブチラーゼの例は、米国特許第７２６２０４２号明細書および国際公開第０９／０２１８６７号パンフレットに記載されている、例えば、バチルス・レンツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｎｔｕｓ）、バチルス・アルカロフィルス（Ｂ．ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ）およびバチルス・ギブソニ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇｉｂｓｏｎｉｉ）などのバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）から得られるもの、ならびに国際公開第８９／０６２７９号パンフレットに記載されているスブチリシン・レンツス（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ  ｌｅｎｔｕｓ）、スブチリシン（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ）Ｎｏｖｏ、スブチリシン（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ）Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、スブチリシン（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ）ＢＮＰ’、スブチリシン（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ）３０９、スブチリシン（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ）１４７およびスブチリシン（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ）１６８、ならびに（国際公開第９３／１８１４０号パンフレット）に記載されているプロテアーゼＰＤ１３８である。その他の有用なプロテアーゼの例は、国際公開第９２／１７５１７７号パンフレット、国際公開第０１／０１６２８５号パンフレット、国際公開第０２／０２６０２４号パンフレットおよび国際公開第０２／０１６５４７号パンフレットに記載されているものであり得る。トリプシン様プロテアーゼの例は、トリプシン（例えば、ブタまたはウシ由来）、ならびに国際公開第８９／０６２７０号パンフレット、国際公開第９４／２５５８３号パンフレットおよび国際公開第０５／０４０３７２号パンフレットに記載されているフザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）プロテアーゼ、ならびに国際公開第０５／０５２１６１号パンフレットおよび国際公開第０５／０５２１４６号パンフレットに記載されているセルモナス（Ｃｅｌｌｕｍｏｎａｓ）から得られるキモトリプシンプロテアーゼである。
【０１１１】
別の好ましいプロテアーゼは、国際公開第９５／２３２２１号パンフレットに記載されているバチルス・レンツス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｅｎｔｕｓ）ＤＳＭ５４８３からのアルカリ性プロテーゼ、ならびに国際公開第９２／２１７６０号パンフレット、国際公開第９５／２３２２１号パンフレット、欧州特許第１９２１１４７号明細書および欧州特許第１９２１１４８号明細書に記載されているその変異体である。
【０１１２】
メタロプロテアーゼの例は、国際公開第０７／０４４９９３号明細書（Ｇｅｎｅｎｃｏｒｔ  Ｉｎｔ．）に記載されている中性メタロプロテアーゼ、例えば、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）から得られるものなどである。
【０１１３】
有用なプロテアーゼの例は、国際公開第９２／１９７２９号パンフレット、国際公開第９６／０３４９４６号パンフレット、国際公開第９８／２０１１５号パンフレット、国際公開第９８／２０１１６号パンフレット、国際公開第９９／０１１７６８号パンフレット、国際公開第０１／４４４５２号パンフレット、国際公開第０３／００６６０２号パンフレット、国際公開第０４／０３１８６号パンフレット、国際公開第０４／０４１９７９号パンフレット、国際公開０７／００６３０５号パンフレット、国際公開第１１／０３６２６３号パンフレット、国際公開第１１／０３６２６４号パンフレットに記載されている変異体であって、特に、ＢＰＮ’番号付けを用いて、以下の１つまたは複数の位置に置換を伴う変異体である：３、４、９、１５、２７、３６、５７、６８、７６、８７、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０６、１１８、１２０、１２３、１２８、１２９、１３０、１６０、１６７、１７０、１９４、１９５、１９９、２０５、２０６、２１７、２１８、２２２、２２４、２３２、２３５、２３６、２４５、２４８、２５２および２７４。より好ましいスブチラーゼ変異体は、次の突然変異を有し得る：Ｓ３Ｔ、Ｖ４Ｉ、Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｋ２７Ｒ，＊３６Ｄ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｎ８７Ｓ，Ｒ、＊９７Ｅ、Ａ９８Ｓ、Ｓ９９Ｇ，Ｄ，Ａ、Ｓ９９ＡＤ、Ｓ１０１Ｇ，Ｍ，Ｒ  Ｓ１０３Ａ、Ｖ１０４Ｉ，Ｙ，Ｎ、Ｓ１０６Ａ、Ｇ１１８Ｖ，Ｒ、Ｈ１２０Ｄ，Ｎ、Ｎ１２３Ｓ、Ｓ１２８Ｌ、Ｐ１２９Ｑ、Ｓ１３０Ａ、Ｇ１６０Ｄ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｇ１９５Ｅ、Ｖ１９９Ｍ、Ｖ２０５Ｉ、Ｌ２１７Ｄ、Ｎ２１８Ｄ、Ｍ２２２Ｓ、Ａ２３２Ｖ、Ｋ２３５Ｌ、Ｑ２３６Ｈ、Ｑ２４５Ｒ、Ｎ２５２Ｋ、Ｔ２７４Ａ（ＢＰＮ’番号付けを用いて）。
【０１１４】
好適な市販されているタンパク分解酵素としては、次の商品名：Ａｌｃａｌａｓｅ（登録商標）、Ｄｕｒａｌａｓｅ（商標）、Ｄｕｒａｚｙｍ（商標）、Ｒｅｌａｓｅ（登録商標）、Ｒｅｌａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｐｒｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｐｏｌａｒｚｙｍｅ（登録商標）、Ｋａｎｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｏｖｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｎｅｕｔｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）およびＥｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）で販売されているもの、ならびに次の商品名：Ｍａｘａｔａｓｅ（登録商標）、Ｍａｘａｃａｌ（登録商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  Ｐｒｉｍｅ（登録商標）、Ｐｒｅｆｅｒｅｎｚ（商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  ＭＡ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  Ｏｘ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ  ＯｘＰ（登録商標）、Ｐｕｒａｍａｘ（登録商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｆｆｅｃｔｅｎｚ（商標）、ＦＮ２（登録商標）、ＦＮ３（登録商標）、ＦＮ４（登録商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（登録商標）、Ｏｐｔｉｃｌｅａｎ（登録商標）およびＯｐｔｉｍａｓｅ（登録商標）（Ｄａｎｉｓｃｏ／ＤｕＰｏｎｔ）、Ａｘａｐｅｍ（商標）（Ｇｉｓｔ−Ｂｒｏｃａｓｅｓ  Ｎ．Ｖ．）、ＢＬＡＰ（米国特許第５３５２６０４号明細書の図２９に示される配列）およびその変異体（Ｈｅｎｋｅｌ  ＡＧ）、およびＫＡＰ（バチルス・アルカロフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）スブチリシン）（花王株式会社から）で販売されているものが挙げられる。
【０１１５】
リパーゼおよびクチナーゼ：
好適なリパーゼおよびクチナーゼは、細菌または真菌由来のものを含む。化学的に修飾されたミュータント酵素またはタンパク質改変ミュータント酵素が含まれる。例としては、欧州特許第２５８０６８号明細書および欧州特許第３０５２１６号明細書に記載されている、テルモマイセス属（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）由来、例えば、Ｔ．ラヌギノスス（Ｔ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ）（以前はフミコラ・ラヌギノサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）と命名されていた）由来のリパーゼ；例えば、Ｈ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）といったフミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）由来のクチナーゼ（国際公開第９６／１３５８０号パンフレット）、例えば、Ｐ．アルカリゲネス（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）またはＰ．シュードアルカリアルカリゲネス（Ｐ．ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）（欧州特許第２１８２７２号明細書）、Ｐ．セパシア（Ｐ．ｃｅｐａｃｉａ）（欧州特許第３３１３７６号明細書）、シュードモナス属（Ｐ．ｓｐ．）ＳＤ７０５株（国際公開第９５／０６７２０号パンフレットおよび国際公開第９６／２７００２号パンフレット）、Ｐ．ウィスコンシネンシス（Ｐ．ｗｉｓｃｏｎｓｉｎｅｎｓｉｓ）（国際公開第９６／１２０１２号パンフレット）といったシュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）（これらの一部は、現在、バークホルデリア属（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）と改名されている）株由来のリパーゼ；ＧＤＳＬタイプのストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）リパーゼ（国際公開第１０／０６５４５５号パンフレット）、イネいもち病菌（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ  ｇｒｉｓｅａ）（国際公開第１０／１０７５６０号パンフレット）、シュードモナス・メンドシナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）由来のクチナーゼ（米国特許第５，３８９，５３６号明細書）、サーモビフィダ・フスカ（Ｔｈｅｒｍｏｂｉｆｉｄａ  ｆｕｓｃａ）由来のリパーゼ（国際公開第１１／０８４４１２号パンフレット）、ジェオバシラス・ステアロサーモフィラス（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）リパーゼ（国際公開第１１／０８４４１７号パンフレット）、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のリパーゼ（国際公開第１１／０８４５９９号パンフレット）、ならびにストレプトマイセス・グリセウス （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）（国際公開第１１／１５０１５７号パンフレット）およびストレプトマイセス・プリスチナエスピラリス（Ｓ．ｐｒｉｓｔｉｎａｅｓｐｉｒａｌｉｓ）（国際公開第１２／１３７１４７号パンフレット）由来のリパーゼが挙げられる。
【０１１６】
他の例は、欧州特許第４０７２２５号明細書、国際公開第９２／０５２４９号パンフレット、国際公開第９４／０１５４１号パンフレット、国際公開第９４／２５５７８号パンフレット、国際公開第９５／１４７８３号パンフレット、国際公開第９５／３０７４４号パンフレット、国際公開第９５／３５３８１号パンフレット、国際公開第９５／２２６１５号パンフレット、国際公開第９６／００２９２号パンフレット、国際公開第９７／０４０７９号パンフレット、国際公開第９７／０７２０２号パンフレット、国際公開第００／３４４５０号パンフレット、国際公開第００／６００６３号パンフレット、国際公開第０１／９２５０２号パンフレット、国際公開第０７／８７５０８号パンフレットおよび国際公開第０９／１０９５００号パンフレットに記載のものなどのリパーゼ変異体である。
【０１１７】
好ましい市販されているリパーゼ酵素としては、Ｌｉｐｏｌａｓｅ（商標）、Ｌｉｐｅｘ（商標）；Ｌｉｐｏｌｅｘ（商標）およびＬｉｐｏｃｌｅａｎ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）、Ｌｕｍａｆａｓｔ（当初、Ｇｅｎｅｎｃｏｒから市販）およびＬｉｐｏｍａｘ（当初、Ｇｉｓｔ−Ｂｒｏｃａｄｅｓから市販）が挙げられる。
【０１１８】
また別の例は、アシルトランスフェラーゼまたはペルヒドロラーゼと呼ばれこともあるリパーゼ、例えば、カンディダ・アンタークティカ（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）リパーゼＡとの相同体を有するアシルトランスフェラーゼ（国際公開第１０／１１１１４３号パンフレット）、マイコバクテリウム・スメグマチス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｍｅｇｍａｔｉｓ）由来のアシルトランスフェラーゼ（国際公開第０５／５６７８２号パンフレット）、ＣＥ  ７ファミリー由来のペルヒドロラーゼ（国際公開第０９／６７２７９号パンフレット）、ならびに、Ｍ．スメグマチス（Ｍ．ｓｍｅｇｍａｔｉｓ）ペルヒドロラーゼの変異体、特に、Ｈｕｎｔｓｍａｎ  Ｔｅｘｔｉｌｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  Ｐｔｅ  Ｌｔｄ製の商品Ｇｅｎｔｌｅ  Ｐｏｗｅｒ  Ｂｌｅａｃｈに使用されているＳ５４Ｖ変異体（国際公開第１０／１０００２８号パンフレット）である。
【０１１９】
アミラーゼ：
本発明の酵素と一緒に用いることができる、好適なアミラーゼは、α−アミラーゼまたはグルコアミラーゼであってよく、細菌または真菌由来のいずれであってもよい。化学的に修飾されたミュータントまたはタンパク質改変ミュータントが含まれる。アミラーゼとしては、例えば、英国特許第１，２９６，８３９号明細書にさらに詳細に記載されているバチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）の特殊な系統といった、例えばバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）から得られるα−アミラーゼが挙げられる。
【０１２０】
好適なアミラーゼとしては、国際公開第９５／１０６０３号パンフレットに記載の配列番号２を有するアミラーゼ、またはその配列番号３に対して９０％配列同一性を有する変異体が挙げられる。好ましい変異体は、国際公開第９４／０２５９７号パンフレット、国際公開第９４／１８３１４号パンフレット、国際公開第９７／４３４２４号パンフレットおよび国際公開第９９／０１９４６７号パンフレットの配列番号４に記載の変異体、例えば、以下の１つまたは複数の位置に置換を伴う変異体である：１５、２３、１０５、１０６、１２４、１２８、１３３、１５４、１５６、１７８、１７９、１８１、１８８、１９０、１９７、２０１、２０２、２０７、２０８、２０９、２１１、２４３、２６４、３０４、３０５、３９１、４０８、および４４４。
【０１２１】
別の好適なアミラーゼとして、国際公開第０２／０１０３５５号パンフレットに記載の配列番号６を有するアミラーゼ、または配列番号６に対して９０％配列同一性を有する変異体が挙げられる。配列番号６の好ましい変異体は、１８１位および１８２位に欠失を有し、１９３位に置換を有するものである。
【０１２２】
好適な他のアミラーゼは、国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットに記載の配列番号６に示されるバチルス・アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）から得られるα−アミラーゼの残基１〜３３と、国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットに記載の配列番号４に示されるＢ．リケニホルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）α−アミラーゼの残基３６〜４８３を含むハイブリッドα−アミラーゼまたはそれらの９０％配列同一性を有する変異体である。このハイブリッドα−アミラーゼの好ましい変異体は、以下の１つまたは複数の位置に置換、欠失もしくは挿入を伴う変異体である：Ｇ４８、Ｔ４９、Ｇ１０７、Ｈ１５６、Ａ１８１、Ｎ１９０、Ｍ１９７、Ｉ２０１、Ａ２０９およびＱ２６４。国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットに記載の配列番号６に示されるＢ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）から得られるα−アミラーゼの残基１〜３３と、配列番号４の残基３６〜４８３を含むハイブリッドα−アミラーゼの最も好ましい変異体は、以下の置換を有するものである：
Ｍ１９７Ｔ；
Ｈ１５６Ｙ＋Ａ１８１Ｔ＋Ｎ１９０Ｆ＋Ａ２０９Ｖ＋Ｑ２６４Ｓ；または
Ｇ４８Ａ＋Ｔ４９Ｉ＋Ｇ１０７Ａ＋Ｈ１５６Ｙ＋Ａ１８１Ｔ＋Ｎ１９０Ｆ＋Ｉ２０１Ｆ＋Ａ２０９Ｖ＋Ｑ２６４Ｓ。
【０１２３】
好適なさらに別のアミラーゼは、国際公開第９９／０１９４６７号パンフレットに記載の配列番号６を有するアミラーゼまたは配列番号６に対して９０％配列同一性を有するその変異体である。配列番号６の好ましい変異体は、以下の１つまたは複数の位置に置換、欠失もしくは挿入を伴う変異体である：Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｈ１８３、Ｇ１８４、Ｎ１９５，Ｉ２０６、Ｅ２１２、Ｅ２１６およびＫ２６９。特に好ましいアミラーゼは、Ｒ１８１およびＧ１８２位、またはＨ１８３およびＧ１８４位に欠失を有するものである。
【０１２４】
用いることができる別のアミラーゼは、国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号１、配列番号３、配列番号２もしくは配列番号７を有するもの、または配列番号１、配列番号２、配列番号３もしくは配列番号７に対して９０％配列同一性を有する変異体である。配列番号１、配列番号２、配列番号３もしくは配列番号７の好ましい変異体は、国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号２を番号付けに用いて、以下の１つまたは複数の位置に置換、欠失もしくは挿入を伴う変異体である：１４０、１８１、１８２、１８３、１８４、１９５、２０６、２１２、２４３、２６０、２６９、３０４および４７６。より好ましい変異体は、１８１、１８２、１８３および１８４から選択される２つの位置、例えば、１８１および１８２、１８２および１８３に欠失を有するものである。配列番号１、配列番号２もしくは配列番号７の最も好ましい変異体は、１８３および１８４位における欠失と、１４０、１９５、２０６、２４３、２６０、３０４および４７６の１つまたは複数の位置に置換を有するものである。
【０１２５】
用いることができる他のアミラーゼは、国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０を有するアミラーゼ、または国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２に対して９０％配列同一性を有するその変異体、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０に対して９０％配列同一性を有する変異体である。国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０の好ましい変異体は、以下の１つまたは複数の位置に置換、欠失もしくは挿入を伴う変異体である：１７６、１７７、１７８、１７９、１９０、２０１、２０７、２１１および２６４。
【０１２６】
さらに別の好適なアミラーゼは、国際公開第０９／０６１３８０号パンフレットの配列番号２を有するアミラーゼまたはその配列番号２に対して９０％配列同一性を有する変異体である。配列番号２の好ましい変異体は、Ｃ末端の切断および／または以下の１つまたは複数の位置に置換、欠失もしくは挿入を伴う変異体である：Ｑ８７、Ｑ９８、Ｓ１２５、Ｎ１２８、Ｔ１３１、Ｔ１６５、Ｋ１７８、Ｒ１８０、Ｓ１８１、Ｔ１８２、Ｇ１８３、Ｍ２０１、Ｆ２０２、Ｎ２２５、Ｓ２４３、Ｎ２７２、Ｎ２８２、Ｙ３０５、Ｒ３０９、Ｄ３１９、Ｑ３２０、Ｑ３５９、Ｋ４４４およびＧ４７５。配列番号２のより好ましい変異体は、以下の１つまたは複数の位置：Ｑ８７Ｅ，Ｒ、Ｑ９８Ｒ、Ｓ１２５Ａ、Ｎ１２８Ｃ、Ｔ１３１Ｉ、Ｔ１６５Ｉ、Ｋ１７８Ｌ、Ｔ１８２Ｇ、Ｍ２０１Ｌ、Ｆ２０２Ｙ、Ｎ２２５Ｅ，Ｒ、Ｎ２７２Ｅ，Ｒ、Ｓ２４３Ｑ，Ａ，Ｅ，Ｄ、Ｙ３０５Ｒ、Ｒ３０９Ａ、Ｑ３２０Ｒ、Ｑ３５９Ｅ、Ｋ４４４ＥおよびＧ４７５Ｋにおける置換、ならびに／または以下の位置：Ｒ１８０および／もしくはＳ１８１またはＴ１８２および／もしくはＧ１８３における欠失を伴うものである。配列番号２の最も好ましいアミラーゼ変異体は、以下の置換：
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ；
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｆ２０２Ｙ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｄ３１９Ｔ＋Ｇ４７５Ｋ；
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ；または
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｔ１３１Ｉ＋Ｔ１６５Ｉ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ
を有するものであり、変異体は、Ｃ末端切断されており、任意選択で、２４３位の置換ならびに／または１８０位および／もしくは１８１位の欠失をさらに含む。
【０１２７】
他の好適なアミラーゼは、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットに記載の配列番号１２を有するα−アミラーゼまたは配列番号１２に対して少なくとも９０％配列同一性を有する変異体である。好ましいアミラーゼ変異体は、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットに記載の配列番号１２の以下の１つまたは複数の位置に置換、欠失もしくは挿入を伴う変異体である：Ｒ２８、Ｒ１１８、Ｎ１７４；Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｄ１８３、Ｇ１８４、Ｇ１８６、Ｗ１８９、Ｎ１９５、Ｍ２０２、Ｙ２９８、Ｎ２９９、Ｋ３０２、Ｓ３０３、Ｎ３０６、Ｒ３１０、Ｎ３１４；Ｒ３２０、Ｈ３２４、Ｅ３４５、Ｙ３９６、Ｒ４００、Ｗ４３９、Ｒ４４４、Ｎ４４５、Ｋ４４６、Ｑ４４９、Ｒ４５８、Ｎ４７１、Ｎ４８４。特に好ましいアミラーゼは、Ｄ１８３およびＧ１８４の欠失を有し、且つ、次の置換：Ｒ１１８Ｋ、Ｎ１９５Ｆ、Ｒ３２０ＫおよびＲ４５８Ｋを有する変異体、ならびに以下：Ｍ９、Ｇ１４９、Ｇ１８２、Ｇ１８６、Ｍ２０２、Ｔ２５７、Ｙ２９５、Ｎ２９９、Ｍ３２３、Ｅ３４５およびＡ３３９の群から選択される１つまたは複数の位置に置換をさらに有する変異体であり、これらの位置に置換をさらに有する変異体が最も好ましい。
【０１２８】
他の例は、国際公開第２０１１／０９８５３１号パンフレット、国際公開第２０１３／００１０７８号パンフレットおよび国際公開第２０１３／００１０８７号パンフレットに記載されているものなどのアミラーゼ変異体である。
【０１２９】
市販されているアミラーゼは、Ｄｕｒａｍｙｌ（商標）、Ｔｅｒｍａｍｙｌ（商標）、Ｆｕｎｇａｍｙｌ（商標）、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ（商標）、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ  Ｐｌｕｓ（商標）、Ｎａｔａｌａｓｅ（商標）、Ｌｉｑｕｏｚｙｍｅ  ＸおよびＢＡＮ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓから）、ならびにＲａｐｉｄａｓｅ（商標）、Ｐｕｒａｓｔａｒ（商標）／Ｅｆｆｅｃｔｅｎｚ（商標）、ＰｏｗｅｒａｓｅおよびＰｒｅｆｅｒｅｎｚ  Ｓ１００（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．／ＤｕＰｏｎｔから）である。
【０１３０】
ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ：
本発明のペルオキシダーゼは、国際生化学分子生物学連合（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｕｎｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ）（ＩＵＢＭＢ）の命名委員会（Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）により記載されている酵素分類ＥＣ１．１１．１．７に含まれるペルオキシダーゼ酵素、またはそれから得られる、ペルオキシダーゼ活性を呈示するあらゆるいずれかの断片である。
【０１３１】
好適なペルオキシダーゼは、植物、細菌または真菌由来のものを含む。化学的に修飾されたミュータントまたはタンパク質改変ミュータントが含まれる。有用なペルオキシダーゼの例としては、例えば、ウシグソヒトヨタケ（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅａ）といったヒトヨタケ属（Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ）由来のペルオキシダーゼ（欧州特許第１７９，４８６号明細書）、ならびに、国際公開第９３／２４６１８号パンフレット、国際公開第９５／１０６０２号パンフレットおよび国際公開第９８／１５２５７号パンフレットに記載されているものなどのその変異体が挙げられる。
【０１３２】
本発明のペルオキシダーゼはまた、クロロペルオキシダーゼ、ブロモペルオキシダーゼなどのハロペルオキシダーゼ酵素、およびクロロペルオキシダーゼまたはブロモペルオキシダーゼ活性を呈示する化合物も含む。ハロペルオキシダーゼは、ハロゲン化物イオンに対する特異性に従って分類される。クロロペルオキシダーゼ（ＥＣ１．１１．１．１０）は、塩化物イオンからの次亜塩素酸塩の形成を触媒する。
【０１３３】
一実施形態では、本発明のハロペルオキシダーゼは、クロロペルオキシダーゼである。好ましくは、ハロペルオキシダーゼは、バナジウムペルオキシダーゼ、すなわち、バナジン酸塩含有ハロペルオキシダーゼである。本発明の好ましい方法において、バナジン酸塩含有ハロペルオキシダーゼは、塩化物イオンの供給源と組み合わせる。
【０１３４】
ハロペルオキシダーゼは、多種の真菌、特に、暗色線菌科（ｄｅｍａｔｉａｃｅｏｕｓ  ｈｙｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓ）の真菌群、例えば、Ｃ．フマゴ（Ｃ．ｆｕｍａｇｏ）などのカルダリオマイセス属（Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ）、アルテルナリア属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）、例えば、Ｃ．ベルクローサ（Ｃ．ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ）およびＣ．イナエクアリス（Ｃ．ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）などのクルブラリア属（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ）、ドレクスレラ属（Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ）、ウロクラジウム属（Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ）およびボトリチス属（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）から単離されている。
【０１３５】
ハロペルオキシダーゼはまた、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、例えば、Ｐ．ピロシニア（Ｐ．ｐｙｒｒｏｃｉｎｉａ）およびストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、例えば、Ｓ．オーレオファシエンス（Ｓ．ａｕｒｅｏｆａｃｉｅｎｓ）などの細菌からも単離されている。
【０１３６】
好ましい実施形態では、ハロペルオキシダーゼは、クルブラリア属（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ  ｓｐ．）、特に、クルブラリア・ベルクローサ（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ  ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ）およびクルブラリア・イナエクアリス（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ  ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）、例えば、国際公開第９５／２７０４６号パンフレットに記載のＣ．イナエクアリス（Ｃ．ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）ＣＢＳ１０２．４２；または国際公開第９７／０４１０２号パンフレットに記載のＣ．ベルクローサ（Ｃ．ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ）ＣＢＳ１４７．６３もしくはＣ．ベルクローサ（Ｃ．ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ）ＣＢＳ４４４．７０；または国際公開第０１／７９４５９号パンフレットに記載のドレクスレラ・ハルトレビイ（Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ  ｈａｒｔｌｅｂｉｉ）、国際公開第０１／７９４５８号パンフレットに記載のデンドリフィエラ・サリナ（Ｄｅｎｄｒｙｐｈｉｅｌｌａ  ｓａｌｉｎａ）、国際公開第０１／７９４６１号パンフレットに記載のファエオトリココニス・クロタラリエ（Ｐｈａｅｏｔｒｉｃｈｏｃｏｎｉｓ  ｃｒｏｔａｌａｒｉｅ）、または国際公開第０１／７９４６０号パンフレットに記載のジェニクロスポリウム属（Ｇｅｎｉｃｕｌｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｓｐ．）から得ることができる。
【０１３７】
本発明のオキシダーゼは、特に、酵素分類ＥＣ１．１０．３．２に含まれるいずれかのラッカーゼ酵素、またはそれから得られる、ラッカーゼ活性を呈示するいずれかの断片、または類似の活性を呈示する化合物、例えば、カテコールオキシダーゼ（ＥＣ１．１０．３．１）、ｏ−アミノフェノールオキシダーゼ（ＥＣ１．１０．３．４）、またはビリルビンオキシダーゼ（ＥＣ１．３．３．５）である。
【０１３８】
好ましいラッカーゼ酵素は、微生物由来の酵素である。酵素は、植物、細菌または真菌（糸状真菌および酵母を含む）から得ることができる。
【０１３９】
真菌由来の好適な例としては、以下の株：アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、ニューロスポラ属（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）、例えば、Ｎ．クラッサ（Ｎ．ｃｒａｓｓａ）、ポドスポラ属（Ｐｏｄｏｓｐｏｒａ）、ボトリチス属（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）、コリビア属（Ｃｏｌｌｙｂｉａ）、ツリガネタケ属（Ｆｏｍｅｓ）、レンチヌス（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ）、ヒラタケ属（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ）、カワラタケ属（Ｔｒａｍｅｔｅｓ）、例えば、フルイカワラタケ（Ｔ．ｖｉｌｌｏｓａ）およびカワラタケ（Ｔ．ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、リゾクトニア属（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）、例えば、Ｒ．ソラニ（Ｒ．ｓｏｌａｎｉ）、ヒヨタケ属（Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ）、例えば、ウシグソヒトヨタケ（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅａ）、ササクレヒトヨタケ（Ｃ．ｃｏｍａｔｕｓ）、ヒメヒトヨタケ（Ｃ．ｆｒｉｅｓｉｉ）、およびヒメヒガサヒトヨタケ（Ｃ．ｐｌｉｃａｔｉｌｉｓ）、ナヨタケ属（Ｐｓａｔｈｙｒｅｌｌａ）、例えば、イタチタケ（Ｐ．ｃｏｎｄｅｌｌｅａｎａ）、ヒカゲタケ属（Ｐａｎａｅｏｌｕｓ）、例えば、ワライタケ（Ｐ．ｐａｐｉｌｉｏｎａｃｅｕｓ）、ミセリオフトラ属（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ）、例えば、Ｍ．サーモフィラ（Ｍ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）、シタリジウム属（Ｓｃｈｙｔａｌｉｄｉｕｍ）、例えば、Ｓ．サーモフィルム（Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）、ポリポルス属（Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ）、例えばＰ．ピンシツス（Ｐ．ｐｉｎｓｉｔｕｓ）、フレビア属（Ｐｈｌｅｂｉａ）、例えば、Ｐ．ラジアータ（Ｐ．ｒａｄｉａｔａ）（国際公開第９２／０１０４６号パンフレット）、またはコリオルス属（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ）、例えば、Ｃ．ヒルスツス（Ｃ．ｈｉｒｓｕｔｕｓ）（ＪＰ第２２３８８８５号公報）から得られるラッカーゼが挙げられる。
【０１４０】
細菌由来の好適な例としては、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の株から得られるラッカーゼが挙げられる。
【０１４１】
ヒトヨタケ属（Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ）またはミセリオフトラ属（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ）由来のラッカーゼ；特に、国際公開第９７／０８３２５号パンフレットに開示のウシグソヒトヨタケ（Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ  ｃｉｎｅｒｅａ）から得られるラッカーゼ；または国際公開第９５／３３８３６号パンフレットに開示のミセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）が好ましい。
【０１４２】
洗剤酵素は、１種または複数種の酵素を含有する個別の添加剤を加えることにより、または、これらの酵素のすべてを含む複合添加剤を加えることにより、洗剤組成物に含まれていてもよい。本発明の洗剤添加剤（すなわち、個別の添加剤または複合添加剤）は、例えば、粒質物、液体、スラリーなどとして配合されることが可能である。好ましい洗剤添加剤配合物は、粒質物、特に非発塵性粒質物、液体、特に安定化された液体またはスラリーである。
【０１４３】
非発塵性粒質物は、例えば、米国特許第４，１０６，９９１号明細書および米国特許第４，６６１，４５２号明細書に開示のとおり生成され得、任意により、技術分野において公知である方法によりコーティングされてもよい。ワックス状コーティング材の例は、１０００〜２００００の平均モル重量を有するポリ（エチレンオキシド）生成物（ポリエチレングリコール、ＰＥＧ）；１６〜５０個のエチレンオキシドユニットを有するエトキシル化ノニルフェノール；アルコールが１２〜２０個の炭素原子を含有し、および、１５〜８０個のエチレンオキシドユニットが存在するエトキシル化脂肪族アルコール；脂肪族アルコール；脂肪酸；ならびに、脂肪酸のモノ−およびジ−およびトリグリセリドである。流動床技術による用途に対して好適なフィルム形成性コーティング材の例は英国特許第１４８３５９１号明細書に記載されている。液体酵素調製物は、例えば、確立された方法に従って、プロピレングリコールなどのポリオール、糖質または糖質アルコール、乳酸またはホウ酸を添加することにより安定化され得る。保護された酵素は、欧州特許第２３８，２１６号明細書に開示されている方法に従って調製され得る。
【０１４４】
他の材料
洗剤において用いられる技術分野において公知であるいずれかの洗剤成分もまた利用され得る。他の任意の洗剤成分としては、単独もしくは組み合わせで、耐食剤、収縮防止剤、再汚染防止剤、しわ防止剤、殺菌剤、バインダ、腐食抑制剤、崩壊剤／分解剤、染料、酵素安定化剤（ホウ酸、ホウ酸塩、ＣＭＣ、および／または、プロピレングリコールなどのポリオールを含む）、クレイを含む布地コンディショナ、充填材／加工助剤、蛍光性白色化剤／光学増白剤、起泡増進剤、起泡（セッケンの泡）調節剤、香料、汚染物−懸濁剤、軟化剤、セッケン泡抑制剤、色あせ防止剤、および、ウィッキング剤が挙げられる。洗剤において用いられる技術分野において公知であるいずれかの処方成分が利用され得る。このような処方成分の選択は十分に当業者の技能の範囲内である。
【０１４５】
分散剤−本発明の洗剤組成物はまた、分散剤を含有することが可能である。特に粉末洗剤が分散剤を含んでいてもよい。好適な水溶性有機材料としては、ホモ−またはコポリマー酸またはその塩が挙げられ、ここで、ポリカルボン酸は、２個以下の炭素原子によって相互に分離された少なくとも２つのカルボキシルラジカルを含む。好適な分散剤は、例えば、Ｐｏｗｄｅｒｅｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ｓｅｒｉｅｓ  ｖｏｌｕｍｅ  ７１，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．に記載されている。
【０１４６】
汚染物遊離ポリマー−本発明の洗剤組成物はまた、綿およびポリエステル系布地などの布地からの汚染物の除去、特にポリエステル系布地からの疎水性汚染物の除去を補助する１種または複数種の汚染物遊離ポリマーを含み得る。汚染物遊離ポリマーは、例えば、ノニオン性またはアニオン性テレフタレート系ポリマー、ポリビニルカプロラクタムおよび関連するコポリマー、ビニルグラフトコポリマー、ポリエステルポリアミドであり得る（例えばＣｈａｐｔｅｒ  ７，Ｐｏｗｄｅｒｅｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ｓｅｒｉｅｓ  ｖｏｌｕｍｅ  ７１，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．を参照のこと）。他のタイプの汚染物遊離ポリマーは、コア構造と、このコア構造に結合した複数のアルコキシレート基とを含む両親媒性アルコキシル化油脂クリーニングポリマーである。コア構造は、国際公開第２００９／０８７５２３号パンフレット（本明細書において参照により援用されている）に詳述されているとおり、ポリアルキレンイミン構造またはポリアルカノールアミン構造を含み得る。さらに、ランダムグラフトコポリマーは、好適な汚染物遊離ポリマーである。好適なグラフトコポリマーは、国際公開第２００７／１３８０５４号パンフレット、国際公開第２００６／１０８８５６号パンフレットおよび国際公開第２００６／１１３３１４号パンフレット（本明細書において参照により援用されている）により詳細に記載されている。他の汚染物遊離ポリマーは、欧州特許第１８６７８０８号明細書または国際公開第２００３／０４０２７９号パンフレット（共に本明細書において参照により援用されている）に記載されているものなどの変性セルロース誘導体などの特に置換セルロース系構造といった置換多糖類構造である。好適なセルロース系ポリマーとしては、セルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、セルロースアミドおよびこれらの混合物が挙げられる。好適なセルロース系ポリマーとしては、アニオン性変性セルロース、ノニオン性変性セルロース、カチオン性変性セルロース、両性イオン性変性セルロース、および、これらの混合物が挙げられる。好適なセルロース系ポリマーとしては、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシルエチルセルロース、ヒドロキシルプロピルメチルセルロース、エステルカルボキシメチルセルロースおよびこれらの混合物が挙げられる。
【０１４７】
再汚染防止剤−本発明の洗剤組成物としてはまた、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリオキシエチレンおよび／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アクリル酸のホモポリマー、アクリル酸とマレイン酸とのコポリマー、ならびに、エトキシル化ポリエチレンイミンなどの１種または複数種の再汚染防止剤が挙げられ得る。上記の汚染物遊離ポリマーに記載のセルロース系ポリマーは、再汚染防止剤としても機能し得る。再付着防止剤は、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素とは異なる。
【０１４８】
レオロジー改質剤
本発明の洗剤組成物は、粘度降下剤とは異なる、１種または複数種のレオロジー改質剤、構造化剤（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｎｔ）または増粘剤を含んでもよい。粘度降下剤は、液体洗剤組成物の水性液体マトリックスにせん断減粘性を付与する、非ポリマー性結晶、ヒドロキシ−機能材料、ポリマー性レオロジー改質剤からなる群から選択される。洗剤のレオロジーおよび粘性は、例えば、欧州特許第２１６９０４０号明細書に示すように、当分野で公知の方法により、改変および調節することができる。
【０１４９】
その他の好適な補助材としては、これらに限定されないが、収縮防止剤、しわ防止剤、殺菌剤、バインダ、キャリア、染料、酵素安定化剤、布地軟化剤、充填材、起泡調節剤、ヒドロトロープ、香料、顔料、セッケン泡抑制剤、溶剤、液体洗剤用構造化剤、および／または、構造弾性化剤が挙げられる。
【０１５０】
洗剤生成物の配合物
本発明の洗剤組成物は、例えば、バー、均質な錠剤、２つ以上の層を有する錠剤、１つまたは複数のコンパートメントを有するポーチ、通常のもしくは圧縮された粉末、顆粒、ペースト、ゲル、または、通常の、圧縮もしくは濃縮液体といったいずれかの簡便な形態であってよい。
【０１５１】
ポーチは、単一または複数のコンパートメントとして構成されることが可能である。例えば水との接触に先だってポーチから組成物が漏れ出るような組成物の漏れが防止される、組成物の保持に好適であれば如何なる形態、形状および材料のものであることも可能である。ポーチは、内部容積を有する水溶性フィルム製のものである。前記内部容積は、ポーチのコンパートメントに分離されていることが可能である。好ましいフィルムは、フィルムまたはシートに形成される好ましくはポリマーである高分子材料である。好ましいポリマー、コポリマーまたはその誘導体は、ポリアクリレート、および、水溶性アクリレートコポリマー、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ナトリウムデキストリン、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マルトデキストリン、ポリメタクリレート、最も好ましくはポリビニルアルコールコポリマーおよびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）から選択される。好ましくは、フィルム中のポリマーのレベルは、例えばＰＶＡで少なくとも約６０％である。好ましい平均分子量は、典型的には約２０，０００〜約１５０，０００であろう。フィルムはまた、ポリアクチドおよびポリビニルアルコール（ＭｏｎｏＳｏｌ  ＬＬＣ，Ｉｎｄｉａｎａ，ＵＳＡから市販されている商品名Ｍ８６３０で知られている）などの加水分解により分解性で、水溶性ポリマーのブレンドと、グリセロール、エチレングリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールおよびこれらの混合物などの可塑剤とを含むブレンド組成物から成るものであってよい。ポーチは、水溶性フィルムにより分離された固体ランドリークリーニング組成物または部分成分および／または液体クリーニング組成物または部分成分を含んでいることが可能である。液体成分用のコンパートメントは、固形分を含有するコンパートメントとは組成が異なっていることが可能である：米国特許出願公開第２００９／００１１９７０  Ａ１号明細書。
【０１５２】
洗剤処方成分は、水溶性ポーチ中のコンパートメントにより、または、錠剤の異なる層中において相互に物理的に分離されていることが可能である。これにより、成分間の負の保管相互作用を防止することが可能である。コンパートメントの各々の異なる溶解プロファイルはまた、洗浄溶液中における選択された成分の溶解を遅延させることが可能である。
【０１５３】
単位用量にない液体またはゲル洗剤は、水性であり得、典型的には、最大で約７０％の水、最大で約６５％の水、最大で約５５％の水、最大で約４５％の水、最大で約３５％の水などの少なくとも２０重量％および最大で９５％の水を含有し得る。特に限定されないが、アルカノール、アミン、ジオール、エーテルおよびポリオールを含む他のタイプの液体が、水性液体またはゲル中に含まれていてもよい。水性液体またはゲル洗剤は０〜３０％の有機溶剤を含有していてもよい。
【０１５４】
液体またはゲル洗剤は非水性であってもよい。
【０１５５】
固形洗濯石鹸
本発明のＤＮａｓｅは、固形洗濯石鹸に添加して、ランドリー、布地および／または生地の手洗いのために用いることができる。「固形洗濯石鹸」と言う用語は、洗濯石鹸、固形石鹸、複合化粧石鹸、合成化粧石鹸および洗剤石鹸を含む。固形石鹸の種類は一般に、それらが含有する界面活性剤の種類が異なり、固形洗濯石鹸と言う用語は、脂肪酸由来の石鹸および／または合成石鹸を含むものを包含する。固形洗濯石鹸は、室温で固体の物理的形態をしており、液体、ジェルまたは粉末ではない。固形と言う用語は、時間が経過しても有意に変化しない物理的形態として定義する。すなわち、固形物（例えば、固形洗濯石鹸）が容器内に配置されていれば、固形物が変化して、それが配置されている容器を充填することはない。固形洗濯石鹸は、典型的に、棒状であるが、丸や楕円形などの別の形状をしていてもよい。
【０１５６】
固形洗濯石鹸は、１つまたは複数の酵素、ペプチドアルデヒド（またはハイドロサルファイト付加物もしくはヘミアセタール付加物）などのプロテアーゼ阻害剤、ホウ酸、ホウ酸塩、ホウ砂および／またはフェニルボロン酸誘導体、例えば、４−ホルミルフェニルホウ酸、１種または複数種の石鹸もしくは合成界面活性剤、グリセリンなどのポリオール、脂肪酸、クエン酸、酢酸および／もしくはギ酸などのｐＨ制御化合物、ならびに／または一価カチオンおよび有機アニオンの塩を含みうるが、ここで、一価カチオンは例えば、Ｎａ＋、Ｋ＋もしくはＮＨ４＋であってよく、また、有機アニオンは、例えば、ギ酸塩、酢酸塩、クエン酸塩もしくは乳酸塩であってよく、従って、一価カチオンと有機アニオンの塩は、例えば、ギ酸ナトリウムであってよい。
【０１５７】
固形洗濯石鹸はまた、ＥＤＴＡおよびＨＥＤＰのような錯化剤、香料および／または別の種類の充填材、界面活性剤、例えば、アニオン系合成界面活性剤、ビルダー、ポリマー系汚れ放出剤、洗剤キレート剤、安定剤、充填材、染料、着色剤、移染防止剤、アルコキシル化ポリカーボネート、泡抑制剤、組織化剤、結合剤、浸出剤、漂白活性化剤、泥汚れ除去剤、再付着防止剤、ポリマー系分散剤、増白材、布柔軟剤、香料および／または当分野では公知のその他の化合物を含んでもよい。
【０１５８】
固形洗濯石鹸は、限定するものではないが、ミキサー、プロッダー（ｐｌｏｄｄｅｒ）（例えば、２段式真空プロッダー）、押出機、カッター、ロゴスタンパー、冷却トンネルおよびラッピング装置などの従来の固形洗濯石鹸製造設備において処理してよい。本発明は、いずれかの単一の方法で固形洗濯石鹸を製造することに限定されない。本発明のプレミックスを工程の様々な段階で石鹸に添加してもよい。例えば、石鹸、ＤＮａｓｅ、任意選択で１種または複数種の別の酵素、プロテアーゼ阻害剤、ならびに一価カチオンと有機アニオンの塩を含有するプレミックスを調製した後、混合物をプロッド（ｐｌｏｄ）する。ＤＮａｓｅと任意選択の別の酵素は、例えば、液状で、プロテアーゼ阻害剤と同時に添加してもよい。混合ステップおよびプロッドステップ以外に、この方法は、粉砕、押出、切断、スタンピング、冷却および／またはラッピングのステップをさらに含んでもよい。
【０１５９】
複合顆粒（ｃｏ−ｇｒａｎｕｌｅ）状の酵素の配合物
ＤＮａｓｅは、例えば、１種または複数種の酵素を組み合わせた複合顆粒といた顆粒として配合してもよい。その場合、各酵素は、より多くの顆粒中に存在して、洗剤中への酵素のより均質な分布を確実にするであろう。これはまた、様々な粒径による多種酵素の物理的分離も抑制する。洗剤業界用の多酵素複合顆粒を生成する方法は、ＩＰ．ｃｏｍ開示ＩＰＣＯＭ０００２００７３９Ｄに開示されている。
【０１６０】
複合顆粒の使用による酵素の配合の別の例が、国際公開第２０１３／１８８３３１号パンフレットに開示されており、これは、（ａ）多酵素複合顆粒；（ｂ）１０ｗｔ未満のゼオライト（無水物基準）；および（ｃ）１０ｗｔ未満のリン酸塩（無水物基準）を含む洗剤組成物に関し、ここで、前記酵素複合顆粒は、１０〜９８重量％の水分シンク（ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｉｎｋ）成分を含み、組成物は、さらに、２０〜８０重量％の洗剤水分シンク（ｍｏｉｓｔｕｒｅ  ｓｉｎｋ）成分を含む。国際公開第２０１３／１８８３３１号パンフレットはまた、表面、好ましくは布地表面を処理および／またはクリーニングする方法にも関し、この方法は、（ｉ）前記表面を特許請求の範囲に記載され、また、本明細書に記載される水性洗浄液中の洗剤組成物と接触させるステップ、（ｉｉ）表面をすすぎ、および／または乾燥させるステップを含む。
【０１６１】
多酵素複合顆粒は、ＤＮａｓｅと、（ａ）第１洗浄用リパーゼ、クリーニング用セルラーゼ、キシログルカナーゼ、ペルヒドロラーゼ、ペルオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、ラッカーゼおよびこれらの混合物からなる群から選択される１種または複数種の酵素；ならびに（ｂ）以下：ヘミセルラーゼ、プロテーゼ、ケア用セルラーゼ、セロビオースデヒドロゲナーゼ、キシラナーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、マンナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、リケナーゼ、グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、アミラーゼ、およびこれらの混合物からなる群から選択される１種または複数種の酵素を含んでもよい。
【０１６２】
本発明は、以下のパラグラフにまとめる：
１．バイオフィルムおよび／またはタンパク質性汚れで汚れた生地を洗濯する方法であって、以下：
ａ）ＤＮａｓｅ活性を有する酵素、プロテアーゼおよび界面活性剤を含む洗浄液と生地を接触させるステップ；および
ｂ）任意選択で生地をすすぐステップ
を含み、
ここで、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素およびプロテアーゼが、生地からバイオフィルムを低減および／または除去することができる、方法。
【０１６３】
２．生地が少なくとも２０％のポリエステルを含む、パラグラフ１に記載の方法。
【０１６４】
３．生地が、少なくとも２５％のポリエステル、少なくとも３０％のポリエステル、少なくとも３５％のポリエステル、少なくとも４０％のポリエステル、少なくとも４５％のポリエステル、少なくとも５０％のポリエステル、少なくとも５５％のポリエステル、少なくとも６０％のポリエステルまたは少なくとも６５％のポリエステルを含む、パラグラフ１または２のいずれかに記載の方法。
【０１６５】
４．汚れの再付着が防止および／または低減される、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１６６】
５．生地の白色度が向上する、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１６７】
６．洗濯後に生地に存在するバイオフィルムの量が減少する、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１６８】
７．バイオフィルムが、ブレバンジモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）により、またはその一部がブレバンジモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）により生成される、パラグラフ６に記載の方法。
【０１６９】
８．洗浄液が、さらに、以下：ヘミセルロース、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、マンナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、βグルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、クロロフィラーゼ、アミラーゼ、ペルヒドロラーゼ、ペルオキシダーゼおよびキサンタナーゼからなる群から選択される１種または複数種の酵素を含む、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１７０】
９．ステップｂ）が、水またはコンディショナを含む水で生地をすすぐステップを含む、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１７１】
１０．ＤＮａｓｅ活性を有する酵素が、動物、植物、微生物起源のものである、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１７２】
１１．ポリペプチドが、細菌または真菌起源のものである、パラグラフ１０に記載の方法。
【０１７３】
１２．ＤＮａｓｅ活性を有する酵素が、以下：配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、および配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素からなる群から選択される、パラグラフ１０〜１１のいずれかに記載の方法。
【０１７４】
１３．酵素が、配列番号１のアミノ酸配列、配列番号２のアミノ酸配列、配列番号３のアミノ酸配列、配列番号４のアミノ酸配列、配列番号５のアミノ酸配列または配列番号６のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、パラグラフ１２に記載の方法。
【０１７５】
１４．酵素が、配列番号１のアミノ酸配列、配列番号２のアミノ酸配列または配列番号３のアミノ酸配列と、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、パラグラフ１３に記載の方法。
【０１７６】
１５．プロテアーゼが、以下：
ａ）配列番号７の成熟型ポリペプチドの位置：９、１５、４３、６８、７６、９９、１０１、１６７、１７０、１９４、２０５、２０６、２０９、２１７、２１８、２２２、２４５、２６１および２６２に対応する１つまたは複数の位置に改変を含む酵素変異体であり、ここで、各改変は、独立して置換、欠失または挿入であり、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号７の成熟型ポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する；
ｂ）配列番号８のアミノ酸配列に対応する酵素であり；
ｃ）配列番号８の成熟型ポリペプチドのＳ８５Ｎから選択される置換を含む酵素変異体であり、ここで、変異体は、プロテアーゼ活性を有する；または
ｄ）配列番号９のアミノ酸配列に対応する酵素である、
先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１７７】
１６．プロテアーゼが、配列番号７の以下：Ｓ９Ｅ、Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｓ９９Ｇ、Ｓ９９Ａ、Ｓ１０１Ｅ、Ｓ１０１Ｎ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｖ２０５Ｉ、Ｑ２０６Ｌ、Ｙ２０９Ｗ、Ｌ２１７Ｄ、Ｌ２１７Ｑ、Ｎ２１８Ｄ、Ｍ２２２Ｓ、Ｑ２４５Ｒ、Ｎ２６１Ｗ、Ｌ２６２Ｅ  Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐ、Ｓ９９ＳＥおよびＳ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６８Ａ＋Ｎ２１８Ｄ＋Ｑ２４５Ｒからなる群から選択される１つまたは複数の置換を含む酵素変異体であり、ここで、プロテアーゼ酵素は、以下：
（ａ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｂ）置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；
（ｄ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼであって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ；
（ｅ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０位に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体はプロテアーゼ活性を有し、プロテアーゼ変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；
（ｆ）プロテアーゼ変異体であって、変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、変異体はプロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；
（ｇ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］およびＸ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；ならびに
（ｈ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、プロテアーゼが、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ
からなる群から選択されるプロテアーゼのいずれかである、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１７８】
１７．酵素変異体が、配列番号７の下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む、パラグラフ１６に記載の方法。
【０１７９】
１８．ＤＮａｓｅ活性を有する酵素が、配列番号１のポリペプチドと少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、プロテアーゼは、配列番号７の下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む酵素変異体である、パラグラフ１７に記載の方法。
【０１８０】
１９．洗浄液中の酵素の濃度が、例えば、０．００００８〜１００の範囲、０．０００１〜１００の範囲、０．０００２〜１００の範囲、０．０００４〜１００の範囲、０．０００８〜１００の範囲、０．００１〜１００ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、０．０１〜１００ｐｐｍ酵素タンパク質、０．０５〜５０ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、０．１〜５０ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、０．１〜３０ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、０．５〜２０ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、または０．５〜１０ｐｐｍ酵素タンパク質など、０．００００４〜１００ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲である、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１８１】
２０．洗浄液が、パラグラフ３８〜５４に記載の洗剤組成物を含む、先行するパラグラフのいずれかに記載の方法。
【０１８２】
２１．バイオフィルムおよび／またはタンパク質性汚れで汚れた生地の洗濯を目的とする、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素およびプロテアーゼの使用であって、ここで、ＤＮａｓｅ活性を有する酵素およびプロテアーゼは、洗浄サイクルの間に、生地からバイオフィルムを低減および／または除去することができる、使用。
【０１８３】
２２．生地が、少なくとも２０％のポリエステルを含む、パラグラフ２１に記載の使用。
【０１８４】
２３．生地が、少なくとも２５％のポリエステル、少なくとも３０％のポリエステル、少なくとも３５％のポリエステル、少なくとも４０％のポリエステル、少なくとも４５％のポリエステル、少なくとも５０％のポリエステル、少なくとも５５％のポリエステル、少なくとも６０％のポリエステルまたは少なくとも６５％のポリエステルを含む、パラグラフ２１〜２２のいずれかに記載の使用。
【０１８５】
２４．生地が、５０％のポリエステルと５０％の綿を含む、パラグラフ２３に記載の使用。
【０１８６】
２５．再付着が防止および／または低減される、先行する使用パラグラフのいずれかに記載の使用。
【０１８７】
２６．生地の白色度が向上する、先行する使用パラグラフのいずれかに記載の使用。
【０１８８】
２７．洗濯後に生地に存在するバイオフィルムの量が減少する、先行する使用パラグラフのいずれかに記載の使用。
【０１８９】
２８．バイオフィルムが、ブレバンジモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）により、または一部がブレバンジモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）により生成される、先行する使用パラグラフのいずれかに記載の使用。
【０１９０】
２９．ＤＮａｓｅ活性を有する酵素が、動物、植物、微生物起源のものである、先行する使用パラグラフのいずれかに記載の使用。
【０１９１】
３０．ポリペプチドが、細菌または真菌起源のものである、パラグラフ２９に記載の使用。
【０１９２】
３１．ＤＮａｓｅ活性を有するポリペプチドが、以下：配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、および配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素からなる群から選択される、パラグラフ３０に記載の使用。
【０１９３】
３２．ポリペプチドが、配列番号１のポリペプチド、配列番号２のポリペプチド、配列番号３のポリペプチド、配列番号４のポリペプチド、配列番号５のポリペプチドまたは配列番号６のポリペプチドと、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、パラグラフ３１に記載の方法。
【０１９４】
３３．プロテアーゼが、以下：
ａ）配列番号７の成熟型ポリペプチドの位置：９、１５、４３、６８、７６、９９、１０１、１６７、１７０、１９４  ２０５、２０６、２０９、２１７、２１８、２２２、２４５  ２６１および２６２に対応する１つまたは複数の位置に改変を含む酵素変異体であり、ここで、各改変は、独立して置換、欠失または挿入であり、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号７の成熟型ポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する；
ｂ）配列番号８のアミノ酸配列に対応する酵素である；
ｃ）配列番号８の成熟型ポリペプチドのＳ８５Ｎから選択される置換を含む酵素変異体であり、ここで、変異体は、プロテアーゼ活性を有する；または
ｄ）配列番号９のアミノ酸配列に対応する酵素である；または
ｅ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｆ）置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｇ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｈ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｉ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の位置：１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；または
ｊ）プロテアーゼ変異体であって、変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、変異体はプロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、且つ未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｋ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］、Ｘ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｌ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、プロテアーゼが、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％、且つ未満の配列同一性を有するプロテアーゼ
である、先行する使用パラグラフのいずれかに記載の使用。
【０１９５】
３４．酵素変異体が、配列番号７の以下：Ｓ９Ｅ、Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｓ９９Ｇ、Ｓ９９Ａ、Ｓ１０１Ｅ、Ｓ１０１Ｎ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｖ２０５Ｉ、Ｑ２０６Ｌ、Ｙ２０９Ｗ、Ｌ２１７Ｄ、Ｌ２１７Ｑ、Ｎ２１８Ｄ、Ｍ２２２Ｓ、Ｑ２４５Ｒ、Ｎ２６１Ｗ、Ｌ２６２Ｅ  Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋  Ａ１９４Ｐ、Ｓ９９ＳＥおよびＳ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６８Ａ＋Ｎ２１８Ｄ＋Ｑ２４５Ｒからなる群から選択される１つまたは複数の置換を含む、パラグラフ３３に記載の使用。
【０１９６】
３５．酵素変異体が、配列番号７の下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む、パラグラフ３４に記載の使用。
【０１９７】
３６．ＤＮａｓｅ活性を有する酵素が、配列番号１のポリペプチドと少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、プロテアーゼは、配列番号７の下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む酵素変異体である、パラグラフ３５に記載の使用。
【０１９８】
３７．パラグラフ３８〜５４に記載の洗剤組成物が用いられる、パラグラフ２１〜３６のいずれかに記載の使用。
【０１９９】
３８．デオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）活性を有する酵素、プロテアーゼ、少なくとも１７％（ｗ／ｗ）のアニオン性界面活性剤および少なくとも１１％（ｗ／ｗ）のアニオン性界面活性剤並びにビルダーを含む洗剤組成物。
【０２００】
３９．ノニオン性界面活性剤が、以下：アルコールエトキシレート（ＡＥまたはＡＥＯ）、アルコールプロポキシレート、プロポキシル化脂肪族アルコール（ＰＦＡ）、エトキシル化および／またはプロポキシル化脂肪酸アルキルエステルなどのアルコキシル化脂肪酸アルキルエステル、アルキルフェノールエトキシレート（ＡＰＥ）、ノニルフェノールエトキシレート（ＮＰＥ）、アルキルポリグリコシド（ＡＰＧ）、アルコキシル化アミン、脂肪酸モノエタノールアミド（ＦＡＭ）、脂肪酸ジエタノールアミド（ＦＡＤＡ）、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＥＦＡＭ）、プロポキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＰＦＡＭ）、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、ならびにグルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（グルカミド、ＧＡ、もしくは脂肪酸グルカミド、ＦＡＧＡ）からなる群から選択される、パラグラフ３８に記載の組成物。
【０２０１】
４０．アニオン性界面活性剤が、以下：直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＬＡＳ）、ＬＡＳの異性体、分岐アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＢＡＢＳ）、フェニルアルカンスルホン酸塩、α−オレフィンスルホン酸塩（ＡＯＳ）、オレフィンスルホン酸塩、アルケンスルホン酸塩、アルカン−２，３−ジイルビス（硫酸塩）、ヒドロキシアルカンスルホン酸塩およびジスルホン酸塩、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）などの硫酸アルキル（ＡＳ）、脂肪族アルコール硫酸塩（ＦＡＳ）、第１級アルコール硫酸塩（ＰＡＳ）、アルコールエーテル硫酸塩（ＡＥＳまたはＡＥＯＳまたはＦＥＳ、第２級アルカンスルホン酸塩（ＳＡＳ）、パラフィンスルホン酸塩（ＰＳ）、スルホン酸エステル、スルホン化脂肪酸グリセロールエステル、α−スルホ脂肪酸メチルエステル（α−ＳＦＭｅまたはＳＥＳ）スルホン酸メチルエステル（ＭＥＳ）、アルキル−またはアルケニルコハク酸、ドデセニル／テトラデセニルコハク酸（ＤＴＳＡ）、アミノ酸の脂肪酸誘導体、スルホコハク酸または脂肪酸（セッケン）の塩のジエステルおよびモノエステルからなる群から選択される、パラグラフ３８に記載の組成物。
【０２０２】
４１．組成物が、さらに、以下：ヘミセルロース、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、マンナーゼ、リアーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、βグルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、クロロフィラーゼ、アミラーゼ、ペルヒドロラーゼ、ペルオキシダーゼおよびキサンタナーゼからなる群から選択される１種または複数種の酵素を含む、先行する組成物パラグラフのいずれかに記載の組成物。
【０２０３】
４２．組成物が、アミラーゼまたはリアーゼから選択される１種または複数種の酵素を含む、パラグラフ３１に記載の組成物。
【０２０４】
４３．ＤＮａｓｅ活性を有する酵素が、動物、植物、微生物起源のものである、先行する組成物パラグラフのいずれかに記載の組成物。
【０２０５】
４４．ポリペプチドが、細菌または真菌起源のものである、先行する組成物パラグラフのいずれかに記載の組成物。
【０２０６】
４５．ＤＮａｓｅ活性を有する酵素が、以下：配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素、および配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも６０％の配列同一性を有する酵素からなる群から選択される、パラグラフ４４に記載の組成物。
【０２０７】
４６．酵素が、配列番号１のポリペプチド、配列番号２のポリペプチド、配列番号３のポリペプチド、配列番号４のポリペプチド、配列番号５のポリペプチドまたは配列番号６のポリペプチドと、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有する、パラグラフ４５に記載の組成物。
【０２０８】
４７．プロテアーゼが、以下：
ａ）配列番号７の成熟型ポリペプチドの位置：９、１５、４３、６８、７６、９９、１０１、１６７、１７０、１９４  ２０５、２０６、２０９、２１７、２１８、２２２、２４５、２６１および２６２に対応する１つまたは複数の位置に改変を含む酵素変異体であり、ここで、各改変は、独立して置換、欠失または挿入であり、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号７の成熟型ポリペプチドと少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する；または
ｂ）配列番号８のアミノ酸配列に対応する酵素である；または
ｃ）配列番号８の成熟型ポリペプチドのＳ８５Ｎから選択される置換を含む酵素変異体であり、ここで、変異体は、プロテアーゼ活性を有する；または
ｄ）配列番号９のアミノ酸配列に対応する酵素である；または
ｅ）配列番号８に示されるアミノ酸配列を含むか、または配列番号７に示されるアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｆ）置換Ｓ８７Ｎを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置は、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｇ）配列番号９のアミノ酸配列を含むプロテアーゼ；または
ｈ）下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、これらの位置が、ＢＰＮ’（配列番号７）の位置に対応し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｉ）国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１の１７１、１７３、１７５、１７９、または１８０位に対応する１つまたは複数の位置に置換を含むプロテアーゼ変異体であって、変異体は、国際公開第２００４／０６７７３７号パンフレットの配列番号１と少なくとも７５％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ変異体；または
ｊ）プロテアーゼ変異体であって、変異体は、好ましくは、３、９、２２、４３、６１、６２、７６、１０１、１０３、１０４、１２０、１２８、１８５、１８８、１９１、１９４、２０５、２０６、２０９、２１６、２１７、２１８、２３２、２４５、２５６、２５９、２６１および２６２からなるリストから選択される１つまたは複数の位置に修飾を含み、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、変異体はプロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％、且つ未満の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｋ）Ｘ３Ｖ、Ｘ９［Ｅ，Ｒ］、Ｘ２２［Ｒ，Ａ］、Ｘ４３Ｒ、Ｘ６１［Ｅ，Ｄ］、Ｘ６２［Ｅ，Ｄ］、Ｘ７６［Ｄ］、Ｘ８７Ｎ、Ｘ１０１［Ｅ，Ｇ，Ｄ，Ｎ，Ｍ］、Ｘ１０３Ａ、Ｘ１０４Ｉ、Ｘ１１８［Ｖ，Ｒ］、Ｘ１２０Ｖ、Ｘ１２８［Ａ，Ｌ，Ｓ］、Ｘ１２９Ｑ、Ｘ１３０Ａ、Ｘ１６０Ｄ、Ｘ１８５［Ｅ，Ｄ］、１８８［Ｅ，Ｄ］、Ｘ１９１Ｎ、Ｘ１９４Ｐ、Ｘ２０５Ｉ、Ｘ２０６Ｌ、Ｘ２０９Ｗ、Ｘ２１６Ｖ、Ｘ２１７［Ｑ，Ｄ，Ｅ］、Ｘ２１８［Ｄ，Ｅ，Ｓ］、Ｘ２３２Ｖ、Ｘ２４５Ｒ、Ｘ２４８Ｄ、Ｘ２５６［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２５９［Ｅ，Ｄ］、Ｘ２６１［Ｅ，Ｄ，Ｗ］、Ｘ２６２［Ｅ，Ｄ］からなる群から選択される１つまたは複数の置換を含むプロテアーゼ変異体であって、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、変異体は、プロテアーゼ活性を有し、変異体は、配列番号７または配列番号８と少なくとも８０％の配列同一性を有する、プロテアーゼ変異体；または
ｌ）前駆体、すなわち親プロテアーゼと比較して、下記の置換セットのいずれかを有するプロテアーゼであって、これは、好ましくは、配列番号７、配列番号８、配列番号９に示されるプロテアーゼまたはそれと少なくとも８０％を有するプロテアーゼから選択され、置換セットが、以下：
ｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２１８Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉ．Ｘ９Ｒ＋Ｘ１５Ｔ＋Ｘ６８Ａ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｉｉｉ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｉｖ．Ｘ６１Ｄ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｖ．Ｘ６１Ｅ＋Ｘ１９４Ｐ＋Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２６１Ｄ、
ｖｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉ．Ｘ８７Ｎ＋Ｘ１０１Ｍ＋Ｘ１１８Ｖ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｖｉｉｉ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ８７Ｒ＋Ｘ１１８Ｒ＋Ｘ１２８Ｌ＋Ｘ１２９Ｑ＋Ｘ１３０Ａ、
ｉｘ．Ｘ２２Ａ＋Ｘ６２Ｄ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ１８８Ｄ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ、
ｘｉ．Ｘ２２Ｒ＋Ｘ１０１Ｇ＋Ｘ２３２Ｖ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ１５６Ｄ、
ｘｉｉｉ．Ｘ１０３Ａ＋Ｘ１０４Ｉ＋Ｘ２６１Ｅ、
ｘｉｖ．Ｘ６２Ｄ＋Ｘ２４５Ｒ、
ｘｖ．Ｘ１０１Ｎ＋Ｘ１２８Ａ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｑ、
ｘｖｉｉ．Ｘ１０１Ｅ＋Ｘ２１７Ｄ、
ｘｖｉｉｉ．Ｘ９Ｅ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｉｘ．Ｘ７６Ｄ＋Ｘ４３Ｒ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘ．Ｘ２０５Ｉ＋Ｘ２０６Ｌ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉ．Ｘ１８５Ｅ＋Ｘ１８８Ｅ＋Ｘ２０５Ｉ、
ｘｘｉｉ．Ｘ２５６Ｄ＋Ｘ２６１Ｗ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｉｉｉ．Ｘ１９１Ｎ＋Ｘ２０９Ｗ、
ｘｘｉｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｅ、
ｘｘｖ．Ｘ２６１Ｅ＋Ｘ２６２Ｄ、および
ｘｘｖｉ．Ｘ１６７Ａ＋Ｘ１７０Ｓ＋Ｘ１９４Ｐ
からなる群から選択され、
ここで、これらの位置は、配列番号７の位置に対応し、プロテアーゼが、好ましくは、配列番号７、８または９と少なくとも８０％、１００％未満の配列同一性を有するプロテアーゼ
である、先行する組成物パラグラフのいずれかに記載の組成物。
【０２０９】
４８．酵素変異体が、配列番号７の以下：Ｓ９Ｅ、Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｓ９９Ｇ、Ｓ９９Ａ、Ｓ１０１Ｅ、Ｓ１０１Ｎ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｖ２０５Ｉ、Ｑ２０６Ｌ、Ｙ２０９Ｗ、Ｌ２１７Ｄ、Ｌ２１７Ｑ、Ｎ２１８Ｄ、Ｍ２２２Ｓ、Ｑ２４５Ｒ、Ｎ２６１Ｗ、Ｌ２６２Ｅ  Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋  Ａ１９４Ｐ、Ｓ９９ＳＥおよびＳ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６８Ａ＋Ｎ２１８Ｄ＋Ｑ２４５Ｒからなる群から選択される１つまたは複数の置換を含む、パラグラフ４７に記載の組成物。
【０２１０】
４９．酵素変異体が、下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む、パラグラフ４８に記載の組成物。
【０２１１】
５０．ＤＮａｓｅ活性を有する酵素が、配列番号１のポリペプチドと９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有し、プロテアーゼは、配列番号７の下記の置換：Ｙ１６７Ａ＋Ｒ１７０Ｓ＋Ａ１９４Ｐを含む酵素変異体である、パラグラフ４９に記載の組成物。
【０２１２】
５１．組成物が、液体洗剤、粉末洗剤または顆粒洗剤である、先行する組成物パラグラフのいずれかに記載の組成物。
【０２１３】
５２．組成物が、バー、均質錠剤、２つ以上の層を有する錠剤、１つまたは複数のコンパートメントを有するポーチ、通常または圧縮粉末、顆粒、ペースト、ゲル、または通常、圧縮もしくは濃縮液体である、先行する組成物パラグラフのいずれかに記載の組成物。
【０２１４】
５３．組成物が、洗剤組成物グラム当たり少なくとも０．００２ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも０．００４ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも０．００６ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも０．００８ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも０．０１ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも０．１ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも１ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも１０ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも２０ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも３０ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも４０ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも５０ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも６０ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも７０ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも８０ｍｇの酵素タンパク質、少なくとも９０ｍｇの酵素タンパク質または少なくとも１００ｍｇの酵素タンパク質を含む、先行する組成物パラグラフのいずれかに記載の組成物。
【０２１５】
５４．組成物が、洗剤組成物グラム当たり８０〜１００ｍｇの範囲で酵素タンパク質を含む、先行する組成物パラグラフのいずれかに記載の組成物。
【０２１６】
アッセイおよび洗剤組成物
洗剤組成物
以下に挙げる洗剤組成物を本発明の酵素と組み合わせて使用することができる。
【０２１７】
Ｔｉｄｅ  Ｆｒｅｅ  ａｎｄ  Ｇｅｎｔｌｅ（液体）
水、アルコールエトキシ硫酸ナトリウム、プロピレングリコール、ボラックス、エタノール、直鎖アルキルベンゼンスルホンナトリウム塩、ポリエチレンイミンエトキシレート、ジエチレングリコール、トランス硫酸化およびエトキシル化ヘキサメチレンジアミン、アルコールエトキシレート、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、ＭＥＡ塩、ギ酸ナトリウム、アルキル硫酸ナトリウム、ＤＴＰＡ、アミンオキシド、ギ酸カルシウム、ジアミノスチルベンジスルホン酸二ナトリウム、アミラーゼ、プロテアーゼ、ジメチコンおよびベンズイソチアゾリノン。
【０２１８】
Ａｒｉｅｌ  Ｃｏｌｏｒ  ａｎｄ  Ｓｔｙｌｅ
水、Ｃ１０〜１３アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、プロピレングリコール、パーム核脂肪酸ナトリウム、Ｃ１４〜１５パレス（Ｐａｒｅｔｈ）−ｎ、Ｃ１２〜１４パレス−７、ＭＡＥドデシルベンゼンスルホン酸塩、ナトリウムＣ１２〜１５パレス硫酸、ラウレス硫酸ナトリウム、四級化硫酸化エトキシル化ヘキサメチレンジアミン、クメンスルホン酸ナトリウム、ＰＥＧ／酢酸ビニルのコポリマー、香料、ギ酸ナトリウム、水添ヒマシ油、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸ナトリウム、ＰＥＧ／ＰＰＧ−１０／２プロピルヘプチルエーテル、ソルビトール、エタノールアミン、シトロネロール、トリプロピレングリコール、プロテアーゼ、ゲラニオール、水酸化ナトリウム、α−イソメチルイオノン、塩化カルシウム、アミラーゼ、ベンズイソチアゾリノン、リアーゼ、ジメチコン、メチルイソチアゾリノン、塩化ナトリウム、着色剤、ヒドロキシエチルセルロース、ジメチコノール、ＰＥＧ−２ステアリン酸塩。
【０２１９】
Ｂｉｏｔｅｘ  ｂｌａｃｋ（液体）
５〜１５％アニオン性界面活性剤を、＜５％ノニオン性界面活性剤、香料、酵素、ＤＭＤＭおよびヒダントイン。
【０２２０】
ＷＦＫ  ＩＥＣ−Ａモデル洗剤の組成物（粉末）
成分：直鎖アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム８．８％、エトキシル化脂肪族アルコールＣ１２〜１８（７  ＥＯ）４．７％、ナトリウムセッケン３．２％、消泡ＤＣ２−４２４８Ｓ３．９％、ケイ酸アルミニウムナトリウムゼオライト４Ａ  ２８．３％、炭酸ナトリウム１１．６％、アクリル酸およびマレイン酸からのコポリマーのナトリウム塩（Ｓｏｋａｌａｎ  ＣＰ５）２．４％、ケイ酸ナトリウム３．０％、カルボキシメチルセルロース１．２％、Ｄｅｑｕｅｓｔ  ２０６６  ２．８％、光学増白剤０．２％、硫酸ナトリウム６．５％、プロテアーゼ０．４％。
【０２２１】
モデル洗剤Ａの組成物（液体）
成分：１２％ＬＡＳ、１１％ＡＥＯ  Ｂｉｏｓｏｆｔ  Ｎ２５−７（ＮＩ）、７％ＡＥＯＳ（ＳＬＥＳ）、６％ＭＰＧ（モノプロピレングリコール）、３％エタノール、３％ＴＥＡ、２．７５％ココアセッケン、２．７５％ダイズセッケン、２％グリセロール、２％水酸化ナトリウム、２％クエン酸ナトリウム、１％ナトリウムホルミエート（ｆｏｒｍｉａｔｅ）、０．２％ＤＴＭＰＡおよび０．２％ＰＣＡ（パーセンテージは全てｗ／ｗである）
【０２２２】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｓｍａｌｌ  ＆  Ｍｉｇｈｔｙの組成物（液体）
成分：１５〜３０％のアニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、５〜１５％のセッケン、＜５％のポリカルボキシレート、香料、ホスホン酸塩、光学増白剤。
【０２２３】
Ｐｅｒｓｉｌ  ２  ｉｎ  １  ｗｉｔｈ  Ｃｏｍｆｏｒｔ  Ｐａｓｓｉｏｎ  Ｆｌｏｗｅｒ  Ｐｏｗｄｅｒ
硫酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ベントナイト、炭酸ナトリウム過酸化水素化物、ケイ酸ナトリウム、ゼオライト、水、クエン酸、ＴＡＥＤ、Ｃ１２〜１５パレス（Ｐａｒｅｔｈ）−７、ステアリン酸、香料、ナトリウムアクリル酸／ＭＡコポリマー、セルロースゴム、加工トウモロコシデンプン、塩化ナトリウム、エチドロン酸四ナトリウム、カルシウムナトリウムＥＤＴＭＰ、アニリノモルホリノトリアジニルアミノスチルベンゼンスルホン酸二ナトリウム、重炭酸ナトリウム、フェニルプロピルエチルメチコン、ブチルフェニルメチルプロピオナール、ステアリン酸グリセリル、炭酸カルシウム、ポリアクリル酸ナトリウム、α−イソメチルイオノン、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、セルロース、プロテアーゼ、リモネン、ＰＥＧ−７５、二酸化チタン、デキストリン、スクロース、ポリアリールスルホン酸ナトリウム、ＣＩ１２４９０、ＣＩ４５１００、ＣＩ４２０９０、チオ硫酸ナトリウム、ＣＩ６１５８５。
【０２２４】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｐｏｗｄｅｒ
スクロース、ソルビトール、ケイ酸アルミニウム、ポリオキシメチレンメラミン、ポリアリールスルホン酸ナトリウム、ＣＩ６１５８５、ＣＩ４５１００、リパーゼ、アミラーゼ、キサンタンゴム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ＣＩ１２４９０、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、ＣＩ４２０９０、マンナナーゼ、ＣＩ１１６８０、エチドロン酸、四ナトリウムＥＤＴＡ。
【０２２５】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔａｂｌｅｔｓ
炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム過酸化水素化物、重炭酸ナトリウム、ゼオライト、水、ケイ酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、セルロース、ＴＡＥＤ、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ヘミセルロース、リグニン、ラウリルグルコシド、ナトリウムアクリル酸／ＭＡコポリマー、ベントナイト、塩化ナトリウム、香料、エチドロン酸四ナトリウム、硫酸ナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、ジメチコン、アニリノモルホリノトリアジニルアミノスチルベンゼンスルホン酸二ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸、トリメチルシロキシケイ酸、炭酸カルシウム、セルロース、ＰＥＧ−７５、二酸化チタン、デキストリン、プロテアーゼ、加工トウモロコシデンプン、スクロース、ＣＩ１２４９０、ポリアリールスルホン酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アミラーゼ、カオリン。
【０２２６】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｃｏｌｏｕｒ  Ｃａｒｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｐｏｗｄｅｒ
スブチリシン、イミダゾリジノン、ヘキシルシンナマル、スクロース、ソルビトール、ケイ酸アルミニウム、ポリオキシメチレンメラミン、ＣＩ６１５８５、ＣＩ４５１００、リパーゼ、アミラーゼ、キサンタンゴム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ＣＩ１２４９０、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、ＣＩ４２０９０、マンナナーゼ、ＣＩ１１６８０、エチドロン酸、四ナトリウムＥＤＴＡ。
【０２２７】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｃｏｌｏｕｒ  Ｃａｒｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔａｂｌｅｔｓ
重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、ゼオライト、水、ケイ酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、セルロースゴム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ラウリルグルコシド、塩化ナトリウム、ナトリウムアクリル酸／ＭＡコポリマー、香料、チオグリコール酸ナトリウム、ＰＶＰ、硫酸ナトリウム、エチドロン酸四ナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、ジメチコン、ベントナイト、ドデシルベンゼンスルホン酸、トリメチルシロキシケイ酸、炭酸カルシウム、セルロース、ＰＥＧ−７５、二酸化チタン、デキストリン、プロテアーゼ、加工トウモロコシデンプン、スクロース、チオ硫酸ナトリウム、アミラーゼ、ＣＩ７４１６０、カオリン。
【０２２８】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｄｕａｌ  Ａｃｔｉｏｎ  Ｃａｐｓｕｌｅｓ  Ｂｉｏ
ＭＥＡ−ドデシルベンゼンスルホン酸塩、ＭＥＡ−水添ヤシ脂肪酸塩、Ｃ１２〜１５パレス−７、ジプロピレングリコール、水、エチドロン酸四ナトリウム、ポリビニルアルコール、グリセリン、アジリジン、エトキシル化ホモポリマー、プロピレングリコール、香料、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸ナトリウム、ソルビトール、ＭＥＡ−硫酸塩、エタノールアミン、スブチリシン、グリコール、ブチルフェニルメチルプロピオナール、ボロン酸、（４−ホルミルフェニル）、ヘキシルシンナマル、リモネン、リナルール、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、α−イソメチルイオノン、ゲラニオール、アミラーゼ、ポリマーブルー着色剤（Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｂｌｕｅ  Ｃｏｌｏｕｒａｎｔ）、ポリマーイエロー着色剤（Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｃｏｌｏｕｒａｎｔ）、タルク、塩化ナトリウム、ベンズイソチアゾリノン、マンナナーゼ、安息香酸デナトニウム。
【０２２９】
Ｐｅｒｓｉｌ  ２  ｉｎ  １  ｗｉｔｈ  Ｃｏｍｆｏｒｔ  Ｓｕｎｓｈｉｎｙ  Ｄａｙｓ  Ｐｏｗｄｅｒ
硫酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ベントナイト、炭酸ナトリウム過酸化水素化物、ケイ酸ナトリウム、ゼオライト、水、クエン酸、ＴＡＥＤ、Ｃ１２〜１５パレス−７、香料、ステアリン酸、ナトリウムアクリル酸／ＭＡコポリマー、セルロースゴム、加工トウモロコシデンプン、塩化ナトリウム、エチドロン酸四ナトリウム、カルシウムナトリウムＥＤＴＭＰ、アニリノモルホリノトリアジニルアミノスチルベンゼンスルホン酸二ナトリウム、重炭酸ナトリウム、フェニルプロピルエチルメチコン、ブチルフェニルメチルプロピオナール、ステアリン酸グリセリル、炭酸カルシウム、ポリアクリル酸ナトリウム、ゲラニオール、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、セルロース、プロテアーゼ、ＰＥＧ−７５、二酸化チタン、デキストリン、スクロース、ポリアリールスルホン酸ナトリウム、ＣＩ１２４９０、ＣＩ４５１００、ＣＩ４２０９０、チオ硫酸ナトリウム、ＣＩ６１５８５。
【０２３０】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｓｍａｌｌ  ＆  Ｍｉｇｈｔｙ  ２  ｉｎ  １  ｗｉｔｈ  Ｃｏｍｆｏｒｔ  Ｓｕｎｓｈｉｎｙ  Ｄａｙｓ
水、Ｃ１２〜１５パレス−７、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、プロピレングリコール、水添ヤシ脂肪酸ナトリウム、トリエタノールアミン、グリセリン、ＴＥＡ−水添ヤシ脂肪酸ナトリウム、香料、塩化ナトリウム、ポリクオタニウム−１０、ＰＶＰ、ポリマーピンク着色剤（Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｐｉｎｋ  Ｃｏｌｏｕｒａｎｔ）、硫酸ナトリウム、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、ブチルフェニルメチルプロピオナール、スチレン／アクリレートコポリマー、ヘキシルシンナマル、シトロネロール、オイゲノール、ポリビニルアルコール、酢酸ナトリウム、イソプロピルアルコール、ポリマーイエロー着色剤（Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｃｏｌｏｕｒａｎｔ）、ラウリル硫酸ナトリウム。
【０２３１】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｓｍａｌｌ  ＆  Ｍｉｇｈｔｙ  Ｂｉｏ
水、ＭＥＡ−ドデシルベンゼンスルホン酸塩、プロピレングリコール、ラウレス硫酸ナトリウム、Ｃ１２〜１５パレス−７、ＴＥＡ−水添ヤシ脂肪酸塩、ＭＥＡ−クエン酸塩、エトキシル化アジリジンホモポリマー、ＭＥＡ−エチドロン酸塩、トリエタノールアミン、香料、アクリレートコポリマー、ソルビトール、ＭＥＡ−硫酸塩、亜硫酸ナトリウム、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、ブチルフェニルメチルプロピオナール、スチレン／アクリレートコポリマー、シトロネロール、硫酸ナトリウム、ペプチド、塩、発酵（工程）からの糖、スブチリシン、グリセリン、ボロン酸、（４−ホルミルフェニル）、ゲラニオール、ペクチン酸リアーゼ、アミラーゼ、ラウリル硫酸ナトリウム、マンナナーゼ、ＣＩ４２０５１。
【０２３２】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｓｍａｌｌ  ＆  Ｍｉｇｈｔｙ  Ｃａｐｓｕｌｅｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
ＭＥＡ−ドデシルベンゼンスルホン酸塩、ＭＥＡ−水添ヤシ脂肪酸塩、Ｃ１２〜１５パレス−７、ジプロピレングリコール、水、グリセリン、ポリビニルアルコール、香料、エトキシル化アジリジンホモポリマー、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸ナトリウム、プロピレングリコール、ソルビトール、ＭＥＡ−硫酸塩、エタノールアミン、スブチリシン、グリオール、ブチルフェニルメチルプロピオナール、ヘキシルシンナマル、デンプン、ボロン酸、（４−ホルミルフェニル）、リモネン、リナルール、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、α−イソメチルイオノン、ゲラニオール、アミラーゼ、タルク、ポリマーブルー着色剤（Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｂｌｕｅ  Ｃｏｌｏｕｒａｎｔ）、塩化ナトリウム、ベンズイソチアゾリノン、安息香酸デナトニウム、ポリマーイエロー着色剤（Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｃｏｌｏｕｒａｎｔ）、マンナナーゼ。
【０２３３】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｓｍａｌｌ  ＆  Ｍｉｇｈｔｙ  Ｃａｐｓｕｌｅｓ  Ｃｏｌｏｕｒ  Ｃａｒｅ
ＭＥＡ−ドデシルベンゼンスルホン酸塩、ＭＥＡ−水添ヤシ脂肪酸塩、Ｃ１２〜１５パレス−７、ジプロピレングリコール、水、グリセリン、ポリビニルアルコール、香料、エトキシル化アジリジンホモポリマー、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸ナトリウム、プロピレングリコール、ＭＥＡ−硫酸塩、エタノールアミン、ＰＶＰ、ソルビトール、ブチルフェニルメチルプロピオナール、スブチリシン、ヘキシルシンナマル、デンプン、リモネン、リナルール、ボロン酸、（４−ホルミルフェニル）、α−イソメチルイオノン、ゲラニオール、タルク、ポリマーブルー着色剤（Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｂｌｕｅ  Ｃｏｌｏｕｒａｎｔ）、安息香酸デナトニウム、ポリマーイエロー着色剤（Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｃｏｌｏｕｒａｎｔ）。
【０２３４】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｓｍａｌｌ  ＆  Ｍｉｇｈｔｙ  Ｃｏｌｏｕｒ  Ｃａｒｅ
水、ＭＥＡ−ドデシルベンゼンスルホン酸塩、プロピレングリコール、ラウレス硫酸ナトリウム、Ｃ１２〜１５パレス−７、ＴＥＡ−水添ヤシ脂肪酸塩、ＭＥＡ−クエン酸塩、エトキシル化アジリジンホモポリマー、ＭＥＡ−エチドロン酸塩、トリエタノールアミン、香料、アクリレートコポリマー、ソルビトール、ＭＥＡ−硫酸塩、亜硫酸ナトリウム、グリセリン、ブチルフェニルメチルプロピオナール、シトロネロール、硫酸ナトリウム、ペプチド、塩、発酵（工程）からの糖、スチレン／アクリレートコポリマー、スブチリシン、ボロン酸、（４−ホルミルフェニル）、ゲラニオール、ペクチン酸リアーゼ、アミラーゼ、ラウリル硫酸ナトリウム、マンナナーゼ、ＣＩ６１５８５、ＣＩ４５１００。
【０２３５】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｓｍａｌｌ  ＆  Ｍｉｇｈｔｙの組成物（液体）
成分：１５〜３０％のアニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、５〜１５％のセッケン、＜５％のポリカルボキシレート、香料、リン酸塩、光学増白剤。
【０２３６】
Ｐｅｒｓｉｌ  Ｍｅｇａｐｅｒｌｓの組成物（粉末）
成分：１５〜３０％の下記成分：アニオン性界面活性剤、酸素系漂白剤およびゼオライト、５％未満の下記成分：ノニオン性界面活性剤、ホスホン酸塩、ポリカルボキシレート、セッケン、その他の成分：香料、ヘキシルシンナマル、サリチル酸ベンジル、リナロール、光学増白剤、酵素およびシトロネロール。
【０２３７】
ＨＥＹ  ＳＰＯＲＴ  ＴＥＸ  ＷＡＳＨ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ
水、ドデシルベンゼンスルホンサウーレ（ｄｏｄｅｃｙｌｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎｓａｅｕｒｅ）、ラウレス−１１、ｐｅｇ−７５ラノリン、プロピレングリコール、変性アルコール、ダイズカリウム（ｐｏｔａｓｓｉｕｍ  ｓｏｙａｔｅ）、水酸化カリウム、ココアンホジ酢酸二ナトリウム、エチレンジアミン三酢酸ココサルキル（ｃｏｃｏｓａｌｋｙｌ）アセトアミド、香料、リシノール酸亜鉛、塩化ナトリウム、ベンズイソチアゾリノン、メチルイソチアゾリノン、ｃｉ１６２５５、ベンジルアルコール。
【０２３８】
Ａｒｉｅｌ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｗｈｉｔｅ  ＆  Ｃｏｌｏｒの組成物、液体洗剤組成物
水、アルコールエトキシ硫酸塩、アルコールエトキシレート、アミノオキシド、クエン酸、Ｃ１２〜１８抜頭（ｔｏｐｐｅｄ）パーム核脂肪酸、プロテアーゼ、グリコシダーゼ、アミラーゼ、エタノール、１，２−プロパンジオール、ギ酸ナトリウム、塩化カルシウム、水酸化ナトリウム、シリコーン乳剤、トランス−硫酸化ＥＨＤＱ（成分は、降順で記載する）。
【０２３９】
Ａｒｉｅｌ  Ａｃｔｉｌｉｆｔの組成物（液体）
成分：５〜１５％アニオン性界面活性剤；＜５％ノニオン性界面活性剤、ホスホン酸塩、セッケン；酵素、光学増白剤、ベンズイソチアゾリノン、メチルイソチアゾリノン、香料、α−イソメチルイオノン、シトロネロール、ゲラニオール、リナロール。
【０２４０】
Ａｒｉｅｌ  Ａｃｔｉｌｉｆｔの組成物（粉末）
成分：１５〜３０％アニオン性界面活性剤；＜５％ノニオン性界面活性剤、ホスホン酸塩、ポリカルボキシレート、ゼオライト；酵素、香料、ヘキシルシンナマル。
【０２４１】
モデル洗剤Ｔの組成物（粉末）
成分：１１％ＬＡＳ、２％ＡＳ／ＡＥＯＳ、２％セッケン、３％ＡＥＯ、１５．１５％炭酸ナトリウム、３％ケイ酸ナトリウム、１８．７５％ゼオライト、０．１５％キレート剤、２％クエン酸ナトリウム、１．６５％ＡＡ／ＭＡコポリマー、２．５％ＣＭＣおよび０．５％ＳＲＰ（パーセンテージは全てｗ／ｗである）。
【０２４２】
モデル洗剤Ｘの組成物（粉末）
成分：１６．５％のＬＡＳ、１５％のゼオライト、１２％の二ケイ酸ナトリウム、２０％の炭酸ナトリウム、１％のソカラン、３５．５％の硫酸ナトリウム（パーセンテージは全てｗ／ｗである）。
【０２４３】
Ｔｉｄｅ  Ｌｉｑｕｉｄ，Ｏｒｉｇｉｎａｌ：
成分：直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、プロピレングリコール、クエン酸、水酸化ナトリウム、ボラックス、エタノールアミン、エタノール、アルコール硫酸塩、ポリエチレンイミンエトキシレート、ナトリウム脂肪酸、ジクオタニウムエトキシ硫酸塩、プロテアーゼ、ジエチレングリコール、ラウレス−９、アルキルジメチルアミンオキシド、芳香剤、アミラーゼ、ジアミノスチルベンジスルホン酸二ナトリウム、ＤＴＰＡ、ギ酸ナトリウム、ギ酸カルシウム、ポリエチレングリコール４０００、マンナナーゼ、Ｌｉｑｕｉｔｉｎｔ（商標）Ｂｌｕｅ、ジメチコン。
【０２４４】
Ｔｉｄｅ  Ｃｏｌｄｗａｔｅｒ  Ｌｉｑｕｉｄ、Ｆｒｅｓｈ  Ｓｃｅｎｔ：
水、アルコールエトキシ硫酸塩、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、ジエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノールアミン、クエン酸、ボラックス（Ｂｏｒａｘ）、硫酸アルコール、水酸化ナトリウム、ポリエチレンイミン、エトキシレート、ナトリウム脂肪酸、エタノール、プロテアーゼ、ラウレス−９、ジクオタニウムエトキシ硫酸塩、ラウラミンオキシド、ナトリウムクメン、スルホン酸塩、芳香剤、ＤＴＰＡ、アミラーゼ、二ナトリウム、ジアミノスチルベン、ジスルホン酸塩、ギ酸ナトリウム、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、ギ酸カルシウム、ポリエチレングリコール４０００、マンナナーゼ、ペクチナーゼ、Ｌｉｑｕｉｔｉｎｔ（商標）Ｂｌｕｅ、ジメチコン。
【０２４５】
Ｌｉｑｕｉｄ  Ｔｉｄｅ  Ｐｌｕｓ  Ｂｌｅａｃｈ  Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ（商標），Ｖｉｖｉｄ  Ｗｈｉｔｅ  ａｎｄ  Ｂｒｉｇｈｔ，Ｏｒｉｇｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｅａｎ  Ｂｒｅｅｚｅ：
水、アルコールエトキシ硫酸ナトリウム、アルキル硫酸ナトリウム、ＭＥＡクエン酸塩、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、ＭＥＡ塩、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、ポリエチレンイミン  エトキシレート、エタノール、ナトリウム脂肪酸、エタノールアミン、ラウラミンオキシド、ボラックス、ラウレス−９、ＤＴＰＡ、クメンスルホン酸ナトリウム、ギ酸ナトリウム、ギ酸カルシウム、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、ナトリウム塩、硫酸アルコール、水酸化ナトリウム、ジクオタニウムエトキシ硫酸塩、芳香剤、アミラーゼ、プロテアーゼ、マンナナーゼ、ペクチナーゼ、ジアミノスチルベンジスルホン酸二ナトリウム、ベンズイソチアゾリノン、Ｌｉｑｕｉｔｉｎｔ（商標）Ｂｌｕｅ、ジメチコン、ジプロピルエチルテトラアミン。
【０２４６】
Ｔｉｄｅ  Ｓｉｍｐｌｙ  Ｃｌｅａｎ  ＆  Ｆｒｅｓｈ：
水、アルコールエトキシ硫酸ナトリウム、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩ナトリウム／ＭＥＡ塩、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、ギ酸ナトリウム、エタノール、ボラックス、ナトリウム脂肪酸、芳香剤、ラウラミンオキシド、ＤＴＰＡ、ポリエチレンアミンエトキシレート、ギ酸カルシウム、ジアミノスチルベンジスルホン酸二ナトリウム、ジメチコン、テトラミン、Ｌｉｑｕｉｔｉｎｔ（商標）Ｂｌｕｅ。
【０２４７】
Ｔｉｄｅ  Ｐｏｄｓ，Ｏｃｅａｎ  Ｍｉｓｔ，Ｍｙｓｔｉｃ  Ｆｏｒｅｓｔ，Ｓｐｒｉｎｇ  Ｍｅａｄｏｗ：
直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、Ｃ１２〜１６パレス−９、プロピレングリコール、アルコールエトキシ硫酸塩、水、ポリエチレンイミンエトキシレート、グリセリン、脂肪酸塩、ＰＥＧ−１３６ポリ酢酸ビニル、エチレンジアミンジコハク酸塩、モノエタノールアミンクエン酸塩、亜硫酸水素ナトリウム、ジエチレントリアミン五酢酸ナトリウム、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、ギ酸カルシウム、マンナナーゼ、エキシログルカナーゼ、ギ酸ナトリウム、水添ヒマシ油、ナタラーゼ、色素、テルマミル、スブチリシン、ベンズイソチアゾリン、香料。
【０２４８】
Ｔｉｄｅ  ｔｏ  Ｇｏ：
脱イオン水、ジプロピレングリコールブチルエーテル、アルキル硫酸ナトリウム、過酸化水素、エタノール、硫酸マグネシウム、アルキルジメチルアミンオキシド、クエン酸、水酸化ナトリウム、トリメトキシ安息香酸、芳香剤。
【０２４９】
Ｔｉｄｅ  Ｓｔｒａｉｎ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｌｉｑｕｉｄ：
水、アルキルエトキシレート、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、過酸化水素、ジクオタニウムエトキシ硫酸塩、エタノールアミン、ジスチリルビフェニルジスルホン酸二ナトリウム、テトラブチルエチリジンビスフェノール、Ｆ＆ＤＣ  Ｙｅｌｌｏｗ  ３、芳香剤。
【０２５０】
Ｔｉｄｅ  Ｓｔｒａｉｎ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｐｏｗｄｅｒ：
過炭酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、アルミノケイ酸ナトリウム、ノナノイルオキシベンゼンスルホン酸塩、ポリアクリル酸ナトリウム、水、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ＤＴＰＡ、ポリエチレングリコール、パルミチン酸ナトリウム、アミラーゼ、プロテアーゼ、加工デンプン、Ｆ＆ＤＣ  Ｂｌｕｅ  １、芳香剤。
【０２５１】
Ｔｉｄｅ  Ｓｔｒａｉｎ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｐｒｅ  Ｔｒｅａｔｅｒ  Ｓｐｒａｙ：
水、アルキルエトキシレート、ＭＥＡホウ酸塩、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、プロピレングリコール、ジクオタニウムエトキシ硫酸塩、塩化カルシウム酵素、プロテアーゼ、エタノールアミン、ベンズイソチアゾリノン、アミラーゼ、クエン酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、芳香剤。
【０２５２】
Ｔｉｄｅ  ｔｏ  Ｇｏ  Ｓｔａｉｎ  Ｅｒａｓｅｒ：
水、アルキルアミンオキシド、ジプロピレングリコールフェニルエーテル、過酸化水素、クエン酸、エチレンジアミンジコハク酸ナトリウム塩、アルキル硫酸ナトリウム、芳香剤。
【０２５３】
Ｔｉｄｅ  ｂｏｏｓｔ  ｗｉｔｈ  Ｏｘｉ：
重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、過炭酸ナトリウム、アルコールエトキシレート、塩化ナトリウム、マレイン酸／アクリリル酸コポリマー、ノナノイルオキシベンゼンスルホン酸塩、硫酸ナトリウム、着色剤、ジエチレントリアミン五酢酸ナトリウム塩、水和アルミノケイ酸塩（ゼオライト）、ポリエチレングリコール、アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、デンプン、水、芳香剤。
【０２５４】
Ｕｌｔｒａ  Ｔｉｄｅ  Ｆｒｅｅ  Ｐｏｗｄｅｒｅｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ：
炭酸ナトリウム、アルミノケイ酸ナトリウム、硫酸アルキル、硫酸ナトリウム、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、水、ポリアクリル酸ナトリウム、ケイ酸塩、エトキシレート、過炭酸ナトリウム、ポリエチレングリコール４０００、プロテアーゼ、ジアミノスチルベンジスルホン酸二ナトリウム、シリコーン、セルラーゼ。
【０２５５】
洗浄アッセイ
Ｔｅｒｇ−Ｏ−ｔｏｍｅｔｅｒ（ＴＯＭ）洗浄アッセイ
Ｔｅｒｇ−Ｏ−Ｍｅｔｅｒ（ＴＯＭ）は、１２以下の異なる洗浄条件を同時にテストするために適用することができる中規模モデル洗浄システムである。ＴＯＭは、基本的に、大きな温度制御ウォーターバスであり、その中に浸漬させた１２個以下の開放金属ビーカを備える。各ビーカは、１つの小さなトップローダ式洗浄機を構成し、実験の間、それらの各々は、特定の洗剤／酵素系の溶液と、その性能をテストする対象の汚れた布地および汚れていない布地を含有する。機械的ストレスは、回転攪拌アームによってもたらされ、このアームは、各ビーカ内の液体を攪拌する。ＴＯＭビーカには蓋がないので、洗浄中のオンライン情報のためにＴＯＭ実験およびアッセイ中にサンプルを抜き取ることが可能である。
【０２５６】
ＴＯＭモデル洗浄システムは、主に、米国またはＬＡ／ＡＰ洗浄条件での洗剤および酵素の中規模テストに使用されている。ＴＯＭ実験において、汚れに対するバラストの比や洗浄液に対する布地の比などの係数は、変動し得る。このように、ＴＯＭは、ＡＭＳＡおよびミニ洗浄などの小規模実験と、トップローダ式洗浄機を用い、より多くの時間がかかる実物実験とをつなげる役割を果たす。
【０２５７】
設備：１２個のスチール製ビーカと、６００または１２００ｍＬの洗剤溶液容量を有するビーカにつき１つの回転アームとを備えるウォーターバス。温度範囲は、５〜８０℃である。ウォーターバスには、脱イオン水を充填しなければならない。回転速度は、７０〜１２０ｒｐｍ／分以下に設定することができる。Ｔｅｒｇ−Ｏ−Ｔｏｍｅｔｅｒの温度を設定し、ウォーターバス内の回転を開始する。温度が調節される（誤差は、＋／−０．５℃）のを待つ。
【０２５８】
ビーカは全て清浄であり、以前のテスト材料を一切含まないものとする。
【０２５９】
所望の量の洗剤、温度および水硬度を有する洗浄溶液をバケツ中に調製する。１０分間の磁気攪拌の間に洗剤を溶解させる。洗浄溶液は、調製後３０〜６０分以内に使用すべきである。
【０２６０】
Ｌａｕｎｄｅｒ−Ｏ−Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）モデル洗浄システム
Ｌａｕｎｄｅｒ−Ｏ−Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）は、２０以下の異なる洗浄条件を同時にテストするために適用することができる中規模モデル洗浄システムである。ＬＯＭは、基本的に、大きな温度制御ウォーターバスであり、その内部に、回転する２０個の密閉された金属ビーカを備える。各ビーカは、１つの小さな洗浄機を構成し、実験の間、各々が、テストしようとする特定の洗剤／酵素系の溶液を、テスト対象の汚れた布地および汚れていない布地と一緒に含む。機械的ストレスは、ウォーターバス内で回転させるビーカにより、ならびにビーカ内に金属ボールを導入することによりもたらされる。
【０２６１】
ＬＯＭモデル洗浄システムは、主に、欧州洗浄条件での洗剤および酵素の中規模テストに使用されている。ＬＯＭ実験において、汚れに対するバラストの比や洗浄液に対する布地の比などの係数は、変動し得る。従って、ＬＯＭは、ＡＭＳＡおよびミニ洗浄などの小規模実験と、フロントローダ式洗浄機を用い、より多くの時間がかかる実物実験とをつなげる役割を果たす。
【０２６２】
酵素アッセイ
アッセイＩ
ＤＮａｓｅ活性のテスト
ＤＮａｓｅ活性をＤＮａｓｅ  Ｔｅｓｔ  Ａｇａｒ  ｗｉｔｈ  Ｍｅｔｈｙｌ  Ｇｒｅｅｎ（ＢＤ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ，ＵＳＡ）で決定したが、これは、供給業者のマニュアルに従って調製した。手短には、２１ｇの寒天を５００ｍｌの水に溶解させた後、１２１℃で１５分間オートクレーブ処理した。オートクレーブ処理した寒天をウォーターバス中で４８℃に温度調節した後、２０ｍｌの寒天をペトリ皿に注ぎ込み、室温でのインキュベーションｏ／ｎにより凝固させた。凝固した寒天プレート上に、５μｌの酵素溶液を添加し、班点状の酵素溶液周辺の無色領域としてＤＮａｓｅ活性を観察した。
【０２６３】
アッセイＩＩ
洗浄性能は、デルタ再発光値（ΔＲｅｍ）として表す。洗浄し、すすいだ後、布切れを平らに伸ばして、室温で一晩空気乾燥させた。洗浄は全て、洗浄の翌日に評価した。非常に小さいアパーチャを有するＭａｃｂｅｔｈ  Ｃｏｌｏｒ  Ｅｙｅ  ７０００反射分光光度計を用いて、布切れの光反射率の評価を実施した。計測は、入射光においてＵＶなしで実施し、４６０ｎｍでの再発光を抽出した。未洗浄および洗浄済布切れに対して計測を実施した。計測しようとするテスト布切れを同じ種類および色の別の布切れ（対の布切れ）の上に置いた。ビーカ毎に各種類のただ１つの布切れで、反復洗浄からの布切れをこのように使用した。個々の布切れについての再発光値は、洗浄済布切れの再発光値から未洗浄布切れの再発光値を減じることによって算出した。汚れた布切れの各セットについての総洗浄性能は、個々のΔＲｅｍの合計として計算した。
【０２６４】
酵素効果の算出は、酵素を用いて洗浄された布切れの測定値を取得し、各汚れについて酵素なしで洗浄して得られた測定値を減じることによって実施する。総酵素性能は、個々のΔＲｅｍ酵素の合計として計算する。
【実施例】
【０２６５】
実施例
洗濯特異的細菌株の単離
ランドリーから単離したブレブンディモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）の１株を本実施例で使用した。  ブレブンディモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ）種を試験中に単離し、試験では、１５、４０および６０℃でそれぞれ洗浄した後、ランドリー中の細菌多様性を調べた。試験は、デンマークの家庭から収集したランドリーについて行った。各々の洗浄について、２０ｇのランドリー品目（ティータオル、タオル、皿拭き用ふきん、よだれ掛け、Ｔシャツ脇部分、Ｔシャツ襟部分、ソックス）を４：３：２：２：１：１：１の範囲で使用した。洗浄は、１５、４０および６０℃でＬａｕｎｄｒ−Ｏ−Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）により実施した。１５および４０℃での洗浄の場合、Ａｒｉｅｌ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｗｈｉｔｅ  ＆  Ｃｏｌｏｒを使用し、６０℃で洗浄の場合にはＷＦＫ  ＩＥＣ−Ａ＊モデル洗剤を使用した。Ａｒｉｅｌ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｗｈｉｔｅ  ＆  Ｃｏｌｏｒは、５．１ｇを計量し、水道水を１０００ｍｌまで添加した後、５分間攪拌することにより調製した。ＷＦＫ  ＩＥＣ−Ａ＊モデル洗剤（ＷＦＫ  Ｔｅｓｔｇｅｗｅｂｅ  ＧｍｂＨから入手可能である）は、５ｇを計量し、水道水を１３００ｍｌまで添加した後、１５分間攪拌することにより調製した。洗浄は、１５、４０および６０℃でそれぞれ１時間ずつ実施した後、１５℃の水道水で２０分間のすすぎを２回行った。
【０２６６】
１５、４０および６０℃でそれぞれ洗浄した後直ちにランドリーを取り出した。２０ｇのランドリーに、ストマッカーバッグ中で、０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ（１．０６４０４；Ｍｅｒｋ，Ｄａｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を０．５％（ｗ／ｗ）ｔｗｅｅｎ  ８０と共に１：１０希釈を達成するように添加した。中間の速度で２分間ストマッカー（Ｓｔｏｍａｃｈｅｒ）を用いて、混合物を均質化した。均質化後、１０倍希釈物を０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ中で調製した。３０℃で好気的に５〜７日間インキュベートしたトリプシンダイズ寒天（Ｔｒｙｐｔｏｎｅ  Ｓｏｙａ  Ａｇａｒ）（ＴＳＡ）（ＣＭ０１２９，Ｏｘｏｉｄ，Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ，Ｈａｍｐｓｈｉｒｅ，ＵＫ）上で細菌を数えた。酵母およびカビの増殖を抑制するために、０．２％ソルビン酸（３５９７６９，Ｓｉｇｍａ）および０．１％シクロヘキシミド（１８０７９；Ｓｉｇｍａ）を添加した。細菌コロニーを計数可能なプレートから選択して、ＴＳＡ上で２回再ストリークすることにより精製した。長期貯蔵のために、精製済み単離物を−８０℃の２０％（ｗ／ｖ）グリセロールを含有するＴＳＢ（４９７７９；Ｓｉｇｍａ）中で保存した。
【０２６７】
バイオフィルム布切れの調製
本試験では、ブレブンディモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）の１株を使用した。トリプトンソイ寒天（Ｔｒｙｐｔｏｎｅ  Ｓｏｙａ  Ａｇａｒ）（ＴＳＡ）（ｐＨ７．３）（ＣＭ０１３１；Ｏｘｏｉｄ  Ｌｔｄ．，Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ，ＵＫ）上に３０℃で２〜５日間事前に培養した。単一のコロニーから、ループ一杯分（ｌｏｏｐ−ｆｕｌｌ）を１０ｍＬのＴＳＢ（トリプトンソイ（Ｔｒｙｐｔｏｎｅ  Ｓｏｙａ）ブロス、Ｏｘｏｉｄ）に移した後、振盪（２４０ｒｐｍ）しながら、３０℃で１日かけてインキュベートした。増殖後、遠心分離（Ｓｉｇｍａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ  ６Ｋ１５）（２１℃、３０００ｇで、７分）によりブレブンディモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）をペレット化してから、水で２倍希釈した１０ｍＬのＴＳＢに再懸濁させた。分光光度計（ＰＯＬＡＲｓｔａｒ  Ｏｍｅｇａ（ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈ，Ｏｒｔｅｎｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて、６００ｎｍでの光学密度（ＯＤ）を計測した。水で２倍希釈した新鮮なＴＳＢに０．０３のＯＤ６００ｎｍまで接種してから、２０ｍＬをペトリ皿（直径８．５ｃｍ）に添加し、そこに、寸法５ｃｍ×５ｃｍの綿（ＷＦＫ  １０Ａ）、ポリエステル−綿（ＷＦＫ  ２０Ａ、６５％ポリエステル、３５％綿）またはポリエステル（ＷＦＫ  ３０Ａ）のいずれかの布切れを配置した。インキュベーション（振盪（１００ｒｐｍ）しながら、１５℃で２４時間）後、布切れを０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌで２回すすいだ。
【０２６８】
洗浄実験
１２％ＬＡＳ、１１％ＡＥＯ  Ｂｉｏｓｏｆｔ  Ｎ２５−７（ＮＩ）、７％ＡＥＯＳ（ＳＬＥＳ）、６％ＭＰＧ、３％エタノール、３％ＴＥＡ（トリエタノールアミン）、２．７５％ココアセッケン、２．７５％ダイズセッケン、２％グリセロール、２％水酸化ナトリウム、２％クエン酸ナトリウム、１％ナトリウムホルミエート（ｆｏｒｍｉａｔｅ）、０．２％ＤＴＭＰＡおよび０．２％ＰＣＡ（パーセンテージは全てｗ／ｗである）を含有するモデル洗剤Ａ３．３３ｇ／ｌを、硬度１５°ｄＨ（Ｃａ：Ｍｇ：ＮａＨＣＯ３４：１：１．５）中に溶解させることによって、モデル洗剤Ａ洗浄液（１００％）を調製した。ＴＯＭビーカに、モデル洗剤Ａ洗浄液（１０００ｍｌ）を、続いて、顔料汚れ（Ｐｉｇｍｅｎｔｓｃｈｍｕｔｚ  ０９Ｖ，ｗｆｋ，Ｋｒｅｆｅｌｄ，Ｇｅｒｍａｎｙ）（０．３５ｇ／Ｌ）を添加した。ＤＮａｓｅを用いる洗浄では、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）ＤＮａｓｅ（０．０１ｐｐｍ）を添加した。プロテアーゼを用いて洗浄する場合には、リカナーゼ（１ｐｐｍ）を添加した。ブレブンディモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）を含む、５枚のすすぎ済布切れと、混合生地（総重量１０ｇ）をＴＯＭビーカに添加し、３０℃、１１０ｒｐｍで３０分間洗浄を実施した。洗浄後、ブレブンディモナス属（Ｂｒｅｖｕｎｄｉｍｏｎａｓ  ｓｐ．）を含む布切れを水道水で２回すすいだ後、ろ紙上で一晩乾燥させた。非常に小さいアパーチャを有するＭａｃｂｅｔｈ  Ｃｏｌｏｒ  Ｅｙｅ  ７０００反射分光光度計を用いて、布切れの光反射率の評価（ＲＥＭ）を実施した。計測は、入射光においてＵＶなしで実施し、４６０ｎｍでの再発光を抽出した。
【０２６９】
【表１】
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【０２７０】
【表２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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