(57)【要約】本開示は、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法であって、治療を必要とする前記対象に、治療的有効量の式ＩもしくはＩＩの化合物、
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またはその薬学的に許容可能な塩、異性体、互変異性体、もしくは重水素化形態を投与することを含む、方法。
【請求項２】
前記化合物が、式Ｉの化合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記化合物が、式ＩＩの化合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
野生型ＢＲＡＦを有する細胞における前記ＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるリン−ＥＲＫ（ｐＥＲＫ）の阻害を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記ＭＡＰＫ経路を活性化しないかまたは前記ＭＡＰＫ経路の発現を誘導しないことが、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
野生型ＢＲＡＦを有する細胞における前記ＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、細胞成長の刺激を予防する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
野生型ＢＲＡＦを有する細胞における前記ＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、皮膚新生物の刺激を予防する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
野生型ＢＲＡＦを有する細胞における前記ＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、他の悪性腫瘍の刺激を予防する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記治療的有効量の式Ｉが、薬学的に許容可能な賦形剤または担体を更に含む薬学的組成物中で投与される、請求項１〜２及び４〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記治療的有効量の式Ｉが、別の治療剤を更に含む薬学的組成物中で投与される、請求項１〜２及び４〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態が、黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、甲状腺未分化癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、胃癌、胆管細胞癌、バレット食道癌、頭頚部癌、肝細胞癌、ランゲルハンス細胞組織球症、消化管間質腫瘍、多発性骨髄腫、小児星細胞腫、多形黄色星細胞腫、慢性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病（ｂｉｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ  Ｂ  ｍｙｅｌｏｍｏｎｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性骨髄性白血病、有毛細胞白血病、母斑、エルドハイム・チェスター病、悪性末梢神経鞘腫瘍、炎症性及び自己免疫疾患、腱鞘巨細胞腫（ｔｅｎｏｓｙｎｏｖｉａｌ  ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌ  ｔｕｍｏｒ）、色素性絨毛性結節性滑膜炎、腱鞘巨細胞腫（ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌ  ｔｕｍｏｒ  ｏｆ  ｔｅｎｄｏｎ  ｓｈｅａｔｈ）、骨巨細胞腫、子宮頸癌、子宮内膜癌、胚細胞腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、筋周皮腫、後腎性腺腫、膵臓新生物、神経内分泌腫瘍、内分泌腫瘍、副腎腫瘍、副腎髄質腫瘍、耳下腺の嚢胞腺癌、多形膠芽細胞腫、胆管腺腫を含む胆管癌、胆管細胞癌、Ｂ細胞慢性リンパ増殖性疾患、樹状細胞肉腫、組織球性肉腫、またはリンパ腫である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態が、肝細胞癌、ランゲルハンス細胞組織球症、消化管間質腫瘍、多発性骨髄腫、小児星細胞腫、多形黄色星細胞腫、慢性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病、急性骨髄性白血病、有毛細胞白血病、または母斑である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態が、黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、甲状腺未分化癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、胃癌、胆管細胞癌、バレット食道癌、または頭頚部癌である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、エルドハイム・チェスター病である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、黒色腫である、請求項１〜１１または１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、転移性黒色腫である、請求項１〜１１または１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、大腸癌である、請求項１〜１１または１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、甲状腺乳頭癌である、請求項１〜１１または１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、甲状腺未分化癌である、請求項１〜１１または１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、卵巣癌である、請求項１〜１１または１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、非小細胞肺癌である、請求項１〜１１または１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、胃癌である、請求項１〜１１または１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、ランゲルハンス細胞組織球症である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、急性骨髄性白血病である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、多発性骨髄腫である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態が、悪性末梢神経鞘腫である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記ＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態が、小児星細胞腫である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異が、Ｖ６００Ｅ、Ｖ６００Ｋ、Ｖ６００Ｄ、Ｖ６００Ａ、Ｖ６００Ｇ、Ｖ６００Ｍ、及びＶ６００Ｒからなる群から選択される１種以上の変異である、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異が、Ｖ６００Ｅ変異及びＶ６００Ｋ変異を含む、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異が、Ｖ６００Ｅ変異を含む、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記対象に、以下の薬剤：アドゼレシン、アルトレタミン、ベンダムスチン、ビゼレシン、ブスルファン、カルボプラチン、カルボコン、カルモフール、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、エトグルシド、フォテムスチン、ヘプスルファム、イホスファミド、イムプロスルファン、イロフルベン、ロムスチン、マンノスルファン、メクロレタミン、メルファラン、ミトブロニトール、ネダプラチン、ニムスチン、オキサリプラチン、ピポスルファン、プレドニムスチン、プロカルバジン、ラニムスチン、サトラプラチン、セムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、チオテパ、トレオスルファン、トリアジコン、トリエチレンメラミン、四硝酸トリプラチン、トロホスファミド、ウラムスチン、アクラルビシン、アムルビシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エルサミトルシン、エピルビシン、イダルビシン、メノガリル、ミトマイシン、ネオカルジノスタチン、ペントスタチン、ピラルビシン、プリカマイシン、バルルビシン、ゾルビシン、アミノプテリン、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、デシタビン、フロキシウリジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、ネララビン、ペメトレキセド、アザチオプリン、ラルチトレキセド、テガフール−ウラシル、チオグアニン、トリメトプリム、トリメトレキサート、ビダラビン、アレムツズマブ、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、パニツムマブ、ペルツズマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、９０Ｙ−イブリツモマブチウキセタン、イピリムマブ、トレメリヌイマブ、アナストロゾール、アンドロゲン、ブセレリン、ジエチルスチルベストロール、エキセメスタン、フルタミド、フルベストラント、ゴセレリン、イドキシフェン、レトロゾール、ロイプロリド、マゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェン、トレミフェン、ＤＪ−９２７、ドセタキセル、ＴＰＩ  ２８７、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル、ＤＨＡ−パクリタキセル、テセタキセル、アリトレチノイン、ベキサロテン、フェンレチニド、イソトレチノイン、トレチノイン、デメコルシン、ホモハリントニン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、ビノレルビン、限定されないが、Ｎｅｏｖａｓｔａｔ、ＡＢＴ−５１０、２−メトキシエストラジオール、レナリドマイド、サリドマイド、アムサクリン、エドテカリン、エトポシド、リン酸エトポシド、エキサテカン、イリノテカン、ルカントン、ミトキサントロン、ピキサントロン、ルビテカン、テニポシド、トポテカン、９−アミノカンプトテシン、アキシチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、フラボピリドール、メシル酸イマチニブ、カボザンチニブ、ラパリニブ、モテサニブ二リン酸塩、ニロチニブ、セリシクリブ、ソラフェニブ、リンゴ酸スニチニブ、ＡＥＥ−７８８、ＢＭＳ−５９９６２６、７−ヒドロキシタウロスポリン、バタラニブ、ボルテゾミブ、ゲルダナマイシ���、ラパマイシン、イミキモド、インターフェロン−α、インターロイキン−２、３−アミノ−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾン、アルトラセンタン、アミノグルテチミド、アナグレリド、アスパラギナーゼ、ブリオスタチン−１、シレンジチド、エレスクロニオール、エリブリンメシル酸塩、イキサベピロン、ロニダミン、マソプロコール、ミトグアナゾン、オブリメルセン、スリンダク、テストラクトン、チアゾフリン、テムシロリムス、エベロリムス、デフォロリムス、ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｃｄｋ４阻害剤、Ａｋｔ阻害剤、Ｈｓｐ９０阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ファメシルトランスフェラーゼ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＢＥＴ阻害剤、ＡＳ７０３０２６、セルメチニブ、ＡＺＤ８３３０、ＢＩＸ０２１８８、ＰＤ１８４３５２、Ｄ−８７５０３、ＧＳ１  １２０２１２、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ３  １８０８８、ＰＤ９８０５９、ＰＤＥＡｌ  １９、またはＴＡＫ−７３３を含む抗血管新生薬のうちの１種以上を投与することを更に含む、請求項１〜９及び１１〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記別の治療剤が、アドゼレシン、アルトレタミン、ベンダムスチン、ビゼレシン、ブスルファン、カルボプラチン、カルボコン、カルモフール、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、エトグルシド、フォテムスチン、ヘプスルファム、イホスファミド、イムプロスルファン、イロフルベン、ロムスチン、マンノスルファン、メクロレタミン、メルファラン、ミトブロニトール、ネダプラチン、ニムスチン、オキサリプラチン、ピポスルファン、プレドニムスチン、プロカルバジン、ラニムスチン、サトラプラチン、セムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、チオテパ、トレオスルファン、トリアジコン、トリエチレンメラミン、四硝酸トリプラチン、トロホスファミド、ウラムスチン、アクラルビシン、アムルビシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エルサミトルシン、エピルビシン、イダルビシン、メノガリル、ミトマイシン、ネオカルジノスタチン、ペントスタチン、ピラルビシン、プリカマイシン、バルルビシン、ゾルビシン、アミノプテリン、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、デシタビン、フロキシウリジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、ネララビン、ペメトレキセド、アザチオプリン、ラルチトレキセド、テガフール−ウラシル、チオグアニン、トリメトプリム、トリメトレキサート、ビダラビン、アレムツズマブ、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、パニツムマブ、ペルツズマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、９０Ｙ−イブリツモマブチウキセタン、イピリムマブ、トレメリヌイマブ、アナストロゾール、アンドロゲン、ブセレリン、ジエチルスチルベストロール、エキセメスタン、フルタミド、フルベストラント、ゴセレリン、イドキシフェン、レトロゾール、ロイプロリド、マゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェン、トレミフェン、ＤＪ−９２７、ドセタキセル、ＴＰＩ  ２８７、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル、ＤＨＡ−パクリタキセル、テセタキセル、アリトレチノイン、ベキサロテン、フェンレチニド、イソトレチノイン、トレチノイン、デメコルシン、ホモハリントニン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、ビノレルビン、限定されないが、Ｎｅｏｖａｓｔａｔ、ＡＢＴ−５１０、２−メトキシエストラジオール、レナリドマイド、サリドマイド、アムサクリン、エドテカリン、エトポシド、リン酸エトポシド、エキサテカン、イリノテカン、ルカントン、ミトキサントロン、ピキサントロン、ルビテカン、テニポシド、トポテカン、９−アミノカンプトテシン、アキシチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、フラボピリドール、メシル酸イマチニブ、カボザンチニブ、ラパリニブ、モテサニブ二リン酸塩、ニロチニブ、セリシクリブ、ソラフェニブ、リンゴ酸スニチニブ、ＡＥＥ−７８８、ＢＭＳ−５９９６２６、７−ヒドロキシタウロスポリン、バタラニブ、ボルテゾミブ、ゲルダナマイシン、ラ���マイシン、イミキモド、インターフェロン−α、インターロイキン−２、３−アミノ−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾン、アルトラセンタン、アミノグルテチミド、アナグレリド、アスパラギナーゼ、ブリオスタチン−１、シレンジチド、エレスクロニオール、エリブリンメシル酸塩、イキサベピロン、ロニダミン、マソプロコール、ミトグアナゾン、オブリメルセン、スリンダク、テストラクトン、チアゾフリン、テムシロリムス、エベロリムス、デフォロリムス、ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｃｄｋ４阻害剤、Ａｋｔ阻害剤、Ｈｓｐ９０阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ファメシルトランスフェラーゼ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＢＥＴ阻害剤、ＡＳ７０３０２６、セルメチニブ、ＡＺＤ８３３０、ＢＩＸ０２１８８、ＰＤ１８４３５２、Ｄ−８７５０３、ＧＳ１  １２０２１２、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ３  １８０８８、ＰＤ９８０５９、ＰＤＥＡｌ  １９、またはＴＡＫ−７３３を含む抗血管新生薬である、請求項１０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年５月２２日に出願された米国仮出願第６２／１６５，８１３号に対する３５Ｕ．Ｓ．Ｃ§１１９（ｅ）の利益を請求するものであり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本開示は、概して、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
黒色腫の個別化治療において実質的な治療改善を提供するために、変異型Ｂ−Ｒａｆキナーゼ（ＢＲＡＦ）を遮断する薬剤を開発する努力が為されてきた。現在医学的に使用されている特定のＢＲＡＦ阻害剤の例には、ベムラフェニブ及びダブラフェニブが含まれる。ダブラフェニブは、客観的腫瘍反応を有することが示されてきた。更に、ベムラフェニブが、変異体ＢＲＡＦＶ６００黒色腫において全生存効果を有することが明示され、明確に文書化されてきた。ＢＲＡＦ阻害剤を使用する癌療法の臨床的有効性について、ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異を有する腫瘍におけるＭＡＰＫ経路出力の完全撤廃を達成することが望ましい。しかしながら、これらの第１世代ＢＲＡＦ阻害剤は、発癌性ＲＡＳまたは増加した受容体シグナル伝達を有するＭＡＰＫ経路を逆説的に活性化する。（ＢＲＡＦ）におけるＶ６００Ｅミスセンス変異は、ＭＡＰＫ経路の異常制御、無制御細胞増殖、及び腫瘍形成の開始につながる。ＡＴＰ競合性Ｂ−Ｒａｆ阻害剤は、Ｂ−Ｒａｆ変異体細胞におけるＭＡＰＫ経路を遮断する一方で、それらは野生型Ｂ−Ｒａｆキナーゼドメインへの配座変化を誘導し、Ｃ−Ｒａｆとのヘテロ二量体化につながり、ＭＡＰＫ経路の逆説的過剰活性化を引き起こす。ベムラフェニブは、ＢＲＡＦの変異体Ｖ６００Ｅ形態を好む一方で、野生型ＢＲＡＦへの結合は、ＢＲＡＦ／ＣＲＡＦヘテロ二量体を誘導することができ、ＥＲＫ１／２活性化をもたらす。ＥＲＫ１／２のこの「逆説的活性化」の負の結果には、角化棘細胞腫（ＫＡ）及び有棘細胞癌（ｃｕＳＣＣ）の進行につながる細胞増殖が含まれ、この進行は、これらのＢＲＡＦ阻害剤での療法の開始から数週間以内に起こることが観察されてきた。したがって、ＭＡＰＫシグナル伝達の逆説的活性化を回避し、それによりＥＲＫ１／２経路を阻害して、より少ない低重度の副作用を達成し、患者応答の安全性及び期間を改善する、新世代のＢＲＡＦＶ６００変異体阻害剤の必要性がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
例外的かつ予想外のレベルで、上流活性化事象を含む細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化することなく変異体ＲＡＦ細胞を阻害することが見出されたＢＲＡＦ阻害剤のクラスの新たな使用が開示される。本開示のＢＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦ点変異及び融合変異の両方を阻害することができる。したがって、本開示は、現在使用されている第１世代ＢＲＡＦ阻害剤に存在する障害を克服する。
【０００５】
具体的に、本開示は、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法であって、該対象に、治療的有効量の式ＩもしくはＩＩの化合物、
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またはその薬学的に許容可能な塩、異性体、互変異性体、もしくは重水素化形態を投与することを含む、方法に関する。
【０００６】
本開示の別の実施形態は、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法であって、該対象に、治療的有効量の式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、異性体、互変異性体、もしくは重水素化形態、及び薬学的に許容可能な賦形剤または担体を含む薬学的組成物を投与することを含む、方法に関する。
【０００７】
本開示の別の実施形態は、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法であって、該対象に、治療的有効量の式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、異性体、互変異性体、もしくは重水素化形態、及び別の治療剤を含む薬学的組成物を投与することを含む、方法に関する。
【０００８】
追加の実施形態は、以下の図面及び詳細な説明から、ならびに特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１（Ａ）】式ＩＩ（黒丸、最下線）及びベムラフェニブ（白丸、最上破線）が、ヒトＢＲＡＦＶ６００Ｅ黒色腫細胞ＣＯＬＯ８２９においてｐＥＲＫシグナル伝達を遮断する類似の効能を有することを示す。
【図１（Ｂ）】ＲＡＳ活性型ヒト黒色腫細胞株ＩＰＣ−２９８（ＮＲＡＳＱ６１Ｌ）において、ベムラフェニブ（白丸）が、ＭＡＰＫシグナル伝達を逆説的に活性化する一方で、式ＩＩ（黒丸）が、軽微なｐＥＲＫ増加を引き起こすことを示す。
【図２（Ａ）】式Ｉ（四角）が、ベムラフェニブ（線で示される丸）と比較して、Ｂ９細胞株においてｐＥＲＫを活性化しないことを示す。ベムラフェニブ平均ＥＣ５０＝０．５６μＭ（ｎ＝２６）、式Ｉ平均ＥＣ５０＝１０μＭ（ｎ＝１４）。
【図２（Ｂ）】式Ｉ（四角）が、ベムラフェニブ（丸）と比較して、Ｂ９細胞株においてｐＭＥＫを活性化しないことを示す。ベムラフェニブ平均ＥＣ５０＝０．５８８μＭ（ｎ＝２６）、式Ｉ平均ＥＣ５０＝１０μＭ（ｎ＝１４）。
【図２（Ｃ）】式Ｉ（四角）が、ベムラフェニブ（丸）と比較して、ＩＰＣ−２９８細胞株においてｐＥＲＫを活性化しないことを示す。ベムラフェニブ平均ＥＣ５０＝０．８４μＭ（ｎ＝２６）、式Ｉ平均ＥＣ５０＝１０μＭ（ｎ＝１４）。
【図２（Ｄ）】式Ｉ（四角）が、ベムラフェニブ（丸）と比較して、ＩＰＣ−２９８細胞株においてｐＭＥＫを活性化しないことを示す。ベムラフェニブ平均ＥＣ５０＝１．０１１μＭ（ｎ＝２６）、式Ｉ平均ＥＣ５０＝１０μＭ（ｎ＝１４）。
【図２（Ｅ）】式Ｉ（四角）が、ベムラフェニブ（丸）と比較して、ＨＣＴ１１６細胞株においてｐＥＲＫを活性化しないことを示す。ベムラフェニブ平均ＥＣ５０＝０．２８６μＭ（ｎ＝３）、式Ｉ平均ＥＣ５０＝１０μＭ（ｎ＝１）。
【図２（Ｆ）】式Ｉ（四角）が、ベムラフェニブ（丸）と比較して、ＨＣＴ１１６細胞株においてｐＭＥＫを活性化しないことを示す。ベムラフェニブ平均ＥＣ５０＝０．７６９μＭ（ｎ＝３）、式Ｉ平均ＥＣ５０＝１０μＭ（ｎ＝１）。
【図３】式Ｉが、３つの異種移植片（４つのＫＩＡＡ１５４９−ＢＲＡＦ融合のうちの３つを発現するＮＩＨ／３Ｔ３細胞）全ての成長を５０％以上阻害したことを示す。対照：丸、ＰＬＸ４７２０：四角、式Ｉ：三角。ｙ軸は、腫瘍体積を立法ミリメートルで示し、ｘ軸は、注入以降の日数を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
Ｉ．定義
本明細書で使用される場合、他に明確に示されない限り、以下の定義が適用される。
【００１１】
本明細書中で使用される場合、「治療する（ｔｒｅａｔ）」「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、「療法（ｔｈｅｒａｐｙ）」、「療法（ｔｈｅｒａｐｉｅｓ）」という用語、及び同様の用語は、材料、例えば、本明細書に記載の任意の１種以上の化合物を有効量で投与して、疾患または状態の１種以上の症候、すなわち、症状を予防、緩和、または改善すること、及び／または治療されている対象の生存を延長することを指す。
【００１２】
本文脈において、「治療的有効」または「有効量」という用語は、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその量が、投与される場合、治療されている疾患、障害、もしくは医学的状態の１種以上の症候を予防、緩和、または改善するため、及び／または治療されている対象の生存を延長させるために十分であるかもしくは有効であることを示している。治療的有効量は、化合物、疾患、障害、または状態及びその重症度、ならびに治療されるべき哺乳動物の年齢、体重などに依存して変化する。一般に、対象における好結果は、対象の体重１ｋｇ当たり約０．１〜約１０ｇの日用量で得られることが示されている。いくつかの実施形態では、日用量は、体重１ｋｇ当たり約０．１０〜１０．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約１．０〜３．０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約３〜１０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約３〜１５０ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約３〜１００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約１０〜１００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり約１０〜１５０ｍｇ、または体重１ｋｇ当たり約１５０〜１０００ｍｇの範囲である。投与量は、分割用量で最大１日４回、または持続放出形態で好都合に投与され得る。
【００１３】
本明細書で使用される場合、「非刺激」、「非活性化」、及び「非誘導」という用語は、ＭＡＰＫ（すなわち、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現）に関して式ＩまたはＩＩの化合物に適用される場合、ダブラフェニブ及びベムラフェニブなどの第１世代ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ阻害剤を用いて観察される刺激、活性化、及び誘導と比較して、より少ない刺激、より少ない活性化、及びより少ない誘導を指す。
【００１４】
本明細書で使用される場合、「固体形態」という用語は、治療目的で意図される動物対象への投与に好適である、薬学的活性化合物の固体調製物（すなわち、気体でも液体でもない調製物）を指す。本明細書で開示される式Ｉまたは式ＩＩの化合物は、それぞれ式Ｉ及び式ＩＩの固体形態を含むことが意図される。固体形態には、本化合物の任意の複合体（塩、共結晶、または非晶質複合体など）ならびに任意の多形体が含まれる。固体形態は、実質的結晶質または実質的に非晶質であり得る。固体形態は、直接投与され得るか、または改善された薬学的特性を有する好適な組成物の調製において使用され得る。例えば、固体形態は、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体または賦形剤を含む製剤中で使用され得る。
【００１５】
本明細書で使用される場合、「半結晶性」材料という用語は、１０％超の結晶度であるが、９０％以下の結晶度である材料を包含し、好ましくは「半結晶性」材料は、２０％超の結晶度であるが、８０％以下の結晶度である材料を包含する。本明細書で開示される式Ｉ及び式ＩＩの化合物は、式Ｉ及び式ＩＩの化合物の半結晶性形態を含むことが意図される。本開示の一実施形態では、化合物の固体形態の混合物、例えば非晶質及び結晶性固体形態の混合物を調製して、例えば「半結晶性」固体形態を提供することができる。そのような「半結晶性」固体形態は、当該技術分野において既知の方法によって、例えば非晶質固体形態を結晶性固体形態と所望の比で混合することによって調製することができる。場合によって、酸または塩基と混合された化合物は、非晶質複合体を形成し、半結晶性固体は、非晶質複合体中の化合物及び酸または塩基の化学量論を超過して、ある量の化合物成分を用いて調製され得、それにより結晶性形態の化合物を超過して、その化学量論に基づく量の非晶質複合体をもたらす。複合体の調製において使用される過剰化合物の量を調節して、所望の比の非晶質複合体対得られる固体形態の混合物中の結晶性化合物を提供することができる。例えば、酸または塩基及び化合物の非晶質複合体が、１：１の化学量論を有する場合、２：１モル比の化合物対酸または塩基で該複合体を調製することは、５０％非晶質複合体及び５０％結晶性化合物の固体形態をもたらすことになる。そのような固体形態の混合物は、例えば、結晶性成分と共に改善された生物製剤的特性を有する非晶質成分を提供することによって、製剤として有益であり得る。非晶質成分は、より容易に生物学的に利用可能であるが、結晶性成分は、遅延性の生物学的利用能を有する。そのような混合物は、活性化合物への急速かつ長期の暴露を提供し得る。
【００１６】
本明細書で使用される場合、「複合体」という用語は、固体形態の新たな化学種を形成または生成する、式Ｉまたは式ＩＩの化合物及び追加の分子種の組み合わせを指す。場合によって、この複合体は塩であってもよく、すなわち、追加の分子種は、化合物の酸基／塩基に対する酸／塩基対イオンを提供し、典型的な塩を形成する酸：塩基相互作用をもたらす。そのような塩形態は、典型的には、実質的に結晶性であるが、それらはまた部分的に結晶性、実質的に非晶質、または非晶質形態であり得る。場合によって、追加の分子種は、薬学的活性化合物と組み合わせて、非塩共結晶を形成する。すなわち、化合物及び分子種は、典型的な酸：塩基相互作用によって相互作用しないが、依然として実質的に結晶性の構造を形成する。共結晶は、化合物及び追加の分子種の塩から形成されてもよい。場合によって、複合体は、塩のような酸：塩基相互作用を含有し得る、実質的に非晶質の複合体であり、これは典型的な塩結晶を形成しないが、代わりに実質的に非晶質の固体、すなわち、そのＸ線粉末回折パターンが鋭いピークを呈しない（例えば、非晶質ハロを呈する）固体を形成する。
【００１７】
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、本明細書に記載の化合物で治療される生存している生物を指し、その生物には、ヒト、他の霊長類、スポーツ動物、畜牛などの商業的関心のある動物、ウマなどの牧場動物、またはイヌ及びネコなどのペットなどの任意の哺乳動物を含むがこれらに限定されない。
【００１８】
本明細書で使用される場合、「生物製剤的特性」という用語は、本開示の化合物または複合体の薬物動態作用を指し、対象への投与時の化合物の溶解、吸収、及び分配を含む。そのようにして、本開示の化合物のある特定の固体形態、例えば本開示の化合物の非晶質複合体は、活性化合物の改善された溶解及び吸収を提供することが意図され、典型的には、改善されたＣｍａｘ（すなわち、薬物の投与後の血漿中最大達成濃度）及び改善されたＡＵＣ（すなわち、薬物血漿濃度対薬物投与後の時間の曲線下面積）に反映される。
【００１９】
「薬学的に許容可能な」という用語は、示された材料が、治療されるべき疾患または状態及びそれぞれの投与経路を考慮して、合理的に慎重な医師がその材料を患者に投与することを回避させる特性を有しないことを示す。例えば、一般に、そのような材料は、例えば、注射物資用に本質的に無菌であることが必要とされる。
【００２０】
「投与する」という用語は、対象への経口投与、坐薬としての投与、局所接触、静脈内、腹腔内、筋肉内、病巣内、鼻腔内、もしくは皮下投与、または徐放デバイス、例えば小型浸透圧ポンプの埋め込みを指す。投与は、非経口及び経粘膜（例えば、頬側、舌下、口蓋、歯肉、鼻、膣、直腸、または経皮）を含む任意の経路による。非経口投与には、例えば、静脈内、筋肉内、動脈内、皮内、皮下、腹腔内、脳室内、及び頭蓋内が含まれる。他の送達形態には、リポソーム製剤、静脈内注射、経皮パッチなどの使用が含まれるが、これらに限定されない）。
【００２１】
式Ｉ及び式ＩＩの化合物は、各々非溶媒形態ならびに溶媒形態（水和形態を含む）で存在し得る。「水和物」は、水分子と溶質の分子またはイオンとの組み合わせによって形成される複合体を指す。「溶媒和物」は、溶媒分子と溶質の分子またはイオンとの組み合わせによって形成される複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、またはその両方の混合物であり得る。溶媒和物は、水和物を含むことを意味する。溶媒のいくつかの例には、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、及び水が含まれるが、これらに限定されない。一般に、溶媒和形態は、非溶媒和形態と同等であり、本開示の範囲内に包含される。本開示に従う使用のための式Ｉ及び式ＩＩ化合物は各々、多結晶または非晶質形態で存在してよい。一般に、全ての物理的形態は、本開示によって企図される用途にとって同等であり、本開示の範囲内にあることが意図される。
【００２２】
本文脈において、「治療的有効」または「有効量」という用語は、材料または材料の量が、疾患または医学的状態の１種以上の症候を予防、緩和、または改善するため、及び／または治療されている対象の生存を延長させるために有効であることを示している。治療的有効量は、化合物、疾患または状態及びその重症度、ならびに治療されるべき哺乳動物の年齢、体重などに依存して変化する。例えば、有効量は、有益なまたは所望の臨床結果をもたらすのに十分な量である。有効量は、単回投与で一度に、またはいくつかの投与で有効量を提供する分割量で提供され得る。有効量とみなされるであろうものの正確な決定は、各々の対象に個別的な要因（それらのサイズ、年齢、損傷、及び／または治療されている疾患または傷害、ならびに損傷が生じてからまたは疾患が開始してからの時間の量を含む）に基づき得る。当業者は、その技術において習慣的であるこれらの考慮に基づいて所与の対象のための有効量を決定することができる。
【００２３】
本文脈において、「相乗的に有効」または「相乗効果」という用語は、治療的に有効な２種以上の化合物が、組み合わせて使用される場合、単独で使用される各化合物の効果に基づいて予想される相加効果より改善された治療効果を提供することを示す。
【００２４】
本明細書で使用される場合、「調節すること」または「調節する」という用語は、生物学的活性、特にプロテインキナーゼなどの特定の生体分子に関連する生物学的活性を変化させる効果を指す。例えば、特定の生体分子の阻害剤は、酵素などの生体分子の活性を低下させることによって、その生体分子、例えば酵素の活性を調節する。そのような活性は、典型的には、例えば酵素に関する阻害剤の化合物の阻害濃度（ＩＣ５０）の観点から示される。
【００２５】
本明細書で使用される場合、「プロテインキナーゼ媒介疾患または状態」という用語は、プロテインキナーゼ（その任意の変異を含む）の生物学的機能が、疾患または状態の発症、経過、及び／または症状に影響を及ぼす、及び／またはプロテインキナーゼの調節が疾患または状態の発症、経過、及び／または症状を変化させる、その疾患または状態を指す。プロテインキナーゼ媒介疾患または状態は、阻害が治療的利益を提供する疾患または状態を含み、その場合、例えば、本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物のうちの１種以上を含むプロテインキナーゼ阻害剤（複数可）での治療により、その疾患もしくは状態に罹患しているかまたはその危険性がある対象に対して治療的利益を提供する。
【００２６】
本明細書で使用される場合、「ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態」または「ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異媒介疾患または状態」という用語は、Ｖ６００変異を有するＢＲＡＦキナーゼの生物学的機能が、疾患もしくは状態の発症、経過、及び／もしくは症状に影響を及ぼす、ならびに／またはＢＲＡＦの調節が、疾患または状態の発症、経過、及び／もしくは症状を変化させる、疾患または状態を指す。ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患もしくは状態、またはＢＲＡＦ  Ｖ６００変異媒介疾患もしくは状態には、阻害が治療的利益を提供する疾患または状態が含まれ、その場合、例えば、本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物のうちの１種以上を含むプロテインキナーゼ阻害剤（複数可）での治療により、その疾患もしくは状態に罹患しているかまたはその危険性がある対象に対して治療的利益を提供する。
【００２７】
本明細書で使用される場合、「ＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態」または「ＢＲＡＦ融合変異媒介疾患または状態」という用語は、融合変異を有するＢＲＡＦキナーゼの生物学的機能が、疾患もしくは状態の発症、経過、及び／もしくは症状に影響を及ぼす、ならびに／またはＢＲＡＦの調節が、疾患または状態の発症、経過、及び／もしくは症状を変化させる、疾患または状態を指す。ＢＲＡＦ融合変異関連疾患もしくは状態、またはＢＲＡＦ融合変異媒介疾患もしくは状態には、阻害が治療的利益を提供する疾患または状態が含まれ、その場合、例えば、本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物のうちの１種以上を含むプロテインキナーゼ阻害剤（複数可）での治療により、その疾患もしくは状態に罹患しているかまたはその危険性がある対象に対して治療的利益を提供する。
【００２８】
また、本明細書で使用される略語は、以下のようにそれぞれの意味を有する。
2018515570.tif 000004
【００２９】
ＩＩ．第１世代ＢＲＡＦ阻害剤の逆説的活性化
癌における活性化ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異（主にバリン−６００またはＢＲＡＦＶ６００のミスセンス置換）の同定（Ｄａｖｉｅｓ  ２００２）は、これらの悪性腫瘍の発病におけるＢＲＡＦについて機能的に重要な役割を支持する。ベムラフェニブ（Ｂｏｌｌａｇ  ２０１０、Ｆｌａｈｅｒｔｙ  ２０１０）及びダブラフェニブ（Ｓｔｅｌｌｗａｇｅｎ  ２０１１）を含む特定のＢＲＡＦ阻害剤は、客観的腫瘍反応（Ｓｏｓｍａｎ  ２０１２、Ｈａｕｓｃｈｉｌｄ  ２０１２）及びベムラフェニブの場合は変異体ＢＲＡＦＶ６００駆動型黒色腫における全生存的利益（Ｃｈａｐｍａｎ  ２０１１）の両方を明示した。ＢＲＡＦ阻害剤に基づく療法の臨床的有効性は、ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異を有する腫瘍におけるＭＡＰＫ経路出力の完全撤廃に依存する（Ｂｏｌｌａｇ  ２０１０）。しかしながら、第１世代ＢＲＡＦ阻害剤は、発癌性ＲＡＳを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を逆説的に活性化するか、または上流受容体シグナル伝達を上昇させた（Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ２０１０、Ｈｅｉｄｏｒｎ  ２０１０、Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ２０１０）。この活性化は、細胞増殖につながり得、時として治療の開始から数週間以内の有棘細胞癌（ｃｕＳＣＣ）及び角化棘細胞腫（ＫＡ）の出現と臨床的に関連付けられてきた（Ｓｕ  ２０１２、Ａｎｆｏｒｔｈ  ２０１２、Ｈａｕｓｃｈｉｌｄ  ２０１２、Ｈｕａｎｇ  ２０１２）。これらのＭＡＰＫ経路活性化誘導型腫瘍は、非特徴的に高いＲＡＳ変異の発生率を有する（Ｏｂｅｒｈｏｌｚｅｒ  ２０１２、Ｓｕ  ２０１２）。臨床試験におけるＢＲＡＦ阻害剤は、毒性の相対的欠失を示したが、逆説的活性化機序は、他のＲＡＳ駆動型癌の進行を加速させる場合があり、ＢＲＡＦ阻害剤治療中の原発性黒色腫の増加した発生率（Ｚｉｍｍｅｒ  ２０１２）及びＲＡＳ−変異体白血病の進行（Ｃａｌｌａｈａｎ  ２０１２）に関する最近の症例報告が、これを明示している。
【００３０】
ＢＲＡＦにおける変異の活性化は、ＲＡＳ活性化から独立してＭＡＰＫ経路シグナル伝達を構成的に促進することによって癌成長を促す。変異型ＢＲＡＦを遮断するための薬剤を開発する試みは、転移性黒色腫の個別化治療において劇的な治療的改善をもたらした。しかしながら、これらの薬剤の開発は、これらの標的療法の予想外の結果、すなわちある特定の癌の成長を刺激したこと（逆説的活性化）も明らかにした。これまでで最も一般的な副作用の例は、角化細胞を起源とする皮膚新生物（Ｒｏｂｅｒｔ  ２０１１）であり、ソラフェニブ（Ｌａｃｏｕｔｕｒｅ  ２００６）で最初に観察され、より最近ではベムラフェニブ（Ｆｌａｈｅｒｔｙ  ２０１０、Ｈｕａｎｇ  ２０１２）及びダブラフェニブ（Ｈａｕｓｃｈｉｌｄ  ２０１２）で観察された。致命的な転移性疾患の文脈において、角化棘細胞腫及び角化棘細胞腫様ｃｕＳＣＣなどの非悪性皮膚腫瘍の出現は、特に大部分の病巣が容易に特定され、除去されるため、許容可能であり得る。しかしながら、これらの二次悪性腫瘍の出現は、ＲＡＦ阻害剤の２つの対向する効果、すなわちそれらが治癒すると共に腫瘍を引き起こすことを強調する。構造的に多様なＡＴＰ競合ＲＡＦキナーゼ阻害剤は、経路がＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異によって活性化されるか、またはＲＡＳ変異もしくは受容体チロシンキナーゼ活性化などの上流事象によって活性化されるかに応じて、ＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路を阻害すると共に逆説的に活性化し得る（Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ２０１０、Ｈｅｉｄｏｒｎ  ２０１０、Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ２０１０）。
【００３１】
ＥＧＦＲシグナル伝達とＢＲＡＦ阻害剤誘導型皮膚発癌との間にも関連がある。ＭＡＰＫ経路応答遺伝子の発現の誘導は、ＥＧＦＲリガンドを誘導する。ベムラフェニブは、形質転換角化細胞における、ＡＲＥＧ、ＨＢ−ＥＧＦ、及びＴＧＦαを含むＥＧＦＲリガンドの発現を著しく誘導する。外因性ＥＧＦＲリガンドは、ベムラフェニブの成長刺激効果を要約するが、ＥＧＦＲ阻害剤はアンタゴナイズする。したがって、ＭＡＰＫ経路応答遺伝子の発現を誘導しない式Ｉまたは式ＩＩの化合物は、ＥＧＦＲリガンドを発現しない。ＥＧＦＲ、ならびにＰＤＧＦＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、及びＭＥＴを含む他のＲＴＫの代償性活性化は、黒色腫においてＢＲＡＦ阻害に対する後天的抵抗を引き起こすことが示されてきた（Ｎａｚａｒｉａｎ  ２０１０、Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ  ２０１０、Ｓｔｒａｕｓｓｍａｎ  ２０１２）。ＢＲＡＦ阻害剤に対するＢＲＡＦＶ６００Ｅ大腸癌の不応答性はまた、ＥＧＦＲのフィードバック活性化にも寄与していた（Ｃｏｒｃｏｒａｎ  ２０１２、Ｐｒａｈａｌｌａｄ  ２０１２）。したがって、式Ｉまたは式ＩＩの化合物は、黒色腫以外のＢＲＡＦ変異体癌、例えば甲状腺乳頭癌、大腸癌、及び他の癌を有する対象の治療において有利であり得る。
【００３２】
式Ｉ及び式ＩＩの化合物は、下記の実施例に明示されるとおり、第１世代のＢＲＡＦ阻害剤に関して満たされていない要求に対応する。これらの実施例は、式Ｉが、ＲＡＳ変異または受容体チロシンキナーゼ活性化を含有する細胞においてＭＡＰＫ経路を活性化することなく変異体ＢＲＡＦ細胞を阻害することを明示する。式Ｉ及び式ＩＩの化合物は各々、一桁のｎＭ  ＩＣ５０を有するが、他のキナーゼの活動に対して最小の効果を有する、最も一般的なＢＲＡＦＶ６００Ｅを含む変異型ＢＲＡＦキナーゼを選択的に阻害することも明示されている。ＭＡＰＫ経路阻害を経路活性化から分離することによって、式Ｉの化合物は、別個の改善した活性プロファイルを有する。
【００３３】
本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物の方法及び使用は、米国特許公開第２０１４／０１２８３７３号の選択発明である。特に式Ｉ及びＩＩの化合物は、各々非常に効能のあるＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異体阻害剤であり、特に強力なパラドックスブレーカーでもあり、この場合、式Ｉ及びＩＩは、第１世代ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異体阻害剤に典型的なＭＡＰＫ経路を活性化しない。したがって、式Ｉの化合物は、この点において非常に有利であり、様々な適応症に対して潜在的に有用であることが試験され、証明されてきた。
【００３４】
ＲＡＦ阻害剤で治療された患者からの有棘細胞腫瘍において一般的なものと同じＨＲＡＳ変異を発現する細胞モデルにおいて、第１世代ＲＡＦ阻害剤は、細胞のインビボ及びインビトロ成長を刺激し、ＥＧＦＲリガンドを含むＭＡＰＫ経路応答遺伝子の発現を誘導する。対照的に、式Ｉ及び式ＩＩのパラドックスブレーカーは、そのような効果を有していなかった。更に、式Ｉの化合物は、驚くべきことに、第１世代ＲＡＦ阻害剤に対する抵抗に関するいくつかの既知の機序を克服した。式Ｉまたは式ＩＩいずれかの化合物のこれらの有利な特性に基づいて、強化された耐容性、次に薬物投与量を得ることができる。
【００３５】
ＩＩＩ．実施形態
上流活性化事象を含む細胞において例外的かつ予想外のレベルで、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく、変異体ＲＡＦ細胞を阻害することが見出されたＢＲＡＦ阻害剤のクラスの新たな使用が開示される。したがって、本開示は、現在使用されている第１世代ＢＲＡＦ阻害剤に存在する障害を克服する。
【００３６】
具体的に、本開示は、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法であって、該対象に、治療的有効量の式ＩもしくはＩＩの化合物、
2018515570.tif 000005
またはその薬学的に許容可能な塩、異性体、互変異性体、もしくは重水素化形態を投与することを含む、方法に関する。
【００３７】
式Ｉの化合物（または「式Ｉ」は、（３Ｒ）−Ｎ−［３−［５−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル］−２，４−ジフルオロフェニル］−３−フルオロピロリジン−１−スルホンアミドとしても知られている。式ＩＩの化合物（または「式ＩＩ」）は、５−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）−３−［３−［［エチル（メチル）スルファモイル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−ベンゾイル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンとしても知られている。
【００３８】
いくつかの実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象の治療方法は、式Ｉの化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象の治療方法は、式ＩＩの化合物を投与することを含む。
【００３９】
別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるリン−ＥＲＫ（ｐＥＲＫ）の阻害を含む。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害を含む。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫの阻害が、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害が、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、皮膚新生物の刺激を予防する。別の実施形態では、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫの阻害が、皮膚新生物の刺激を予防する。別の実施形態では、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害が、皮膚新生物の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、他の悪性腫瘍の刺激を予防する。非限定例には、白血病または大腸癌が含まれる。
【００４０】
本開示の別の実施形態は、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法であって、該対象に、治療的有効量の式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、異性体、互変異性体、もしくは重水素化形態、及び薬学的に許容可能な賦形剤または担体を含む薬学的組成物を投与することを含む、方法に関する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫの阻害を含む。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害を含む。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦ細胞におけるｐＥＲＫの阻害が、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦ細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害が、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、皮膚新生物の刺激を予防する。別の実施形態では、ｐＥＲＫ野生型細胞の阻害が、皮膚新生物の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦ細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害が、皮膚新生物の刺激を予防する。
【００４１】
本開示の別の実施形態は、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態に罹患しているかまたはその危険性のある対象を、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導することなく治療する方法であって、該対象に、治療的有効量の式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、異性体、互変異性体、もしくは重水素化形態、及び別の治療剤を含む薬学的組成物を投与することを含む、方法に関する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、野生型ＢＲＡＦ細胞におけるｐＥＲＫの阻害を含む。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、野生型ＢＲＡＦ細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害を含む。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦ細胞におけるｐＥＲＫの阻害が、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦ細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害が、細胞成長の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦを有する細胞におけるＭＡＰＫ経路を活性化しないか、またはＭＡＰＫ経路遺伝子の発現を誘導しないことが、皮膚新生物の刺激を予防する。別の実施形態では、ＢＲＡＦ野生型細胞におけるｐＥＲＫの阻害が、皮膚新生物の刺激を予防する。別の実施形態では、野生型ＢＲＡＦ細胞におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫの阻害が、皮膚新生物の刺激を予防する。
【００４２】
ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異の非限定例には、Ｖ６００Ｅ、Ｖ６００Ｋ、Ｖ６００Ａ、Ｖ６００Ｇ、Ｖ６００Ｍ、及びＶ６００Ｒが含まれ、Ｖ６００Ｅ及びＶ６００Ｋは、一番目及び二番目に一般的である。組み換え酵素を使用する生化学アッセイにおいて、ＩＣ５０値は、式Ｉの化合物について３．５〜１４．２ｎＭの範囲であった。実施例３及び表１を参照されたい。
【００４３】
ＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態の非限定例には、小児星細胞腫が含まれる。
【００４４】
ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異は、全黒色腫の約半数において（Ｒａｊａｇｏｐａｌａｎ  ２００２）、多くの追加の癌、ならびに他種の疾患または状態において起こる。以下のＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異関連疾患または状態は、本明細書に記載の式Ｉの化合物の方法及び使用に企図される。
【００４５】
ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態の非限定例には、黒色腫（転移性黒色腫、ステージ３Ａ黒色腫、ステージ３Ｂ黒色腫、ステージ３Ｃ黒色腫、及び皮膚色素沈着黒色腫を含む）、大腸癌（結腸直腸腺腫を含む）（Ｃｏｈｅｎ  ２００３）、甲状腺乳頭癌（Ｆｕｋｕｓｈｉｍａ  ２００３、Ｋｉｍｕｒａ  ２００３、Ｘｕ  ２００３）、甲状腺未分化癌（Ｘｕ  ２００３）、重度卵巣癌（Ｎｉｋｉｆｏｒｏｖａ  ２００３）、非小細胞肺癌（Ｓｉｎｇｅｒ  ２００３）、胃癌（Ｂｒｏｓｅ  ２００２）、胆管細胞癌（Ｌｅｅ  ２００３）、バレット食道癌（Ｔａｎｎａｐｆｅｌ  ２００３）、及び頭頚部癌（Ｓｏｍｍｅｒｅｒ  ２００４、Ｗｅｂｅｒ  ２００３）が含まれる。ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異癌連癌の他の非限定例には、肝細胞癌（Ｃｏｌｏｍｂｉｎｏ  ２０１２）、ランゲルハンス細胞組織球症（Ｂａｄａｌｉａｎ−Ｖｅｒｙ  ２０１０）、消化管間質腫瘍（Ａｇａｒａｍ  ２００８）、多発性骨髄腫（Ｃｈａｐｍａｎ  ２０１１）、小児星細胞腫（大半がＢＲＡＦ重複を含有する）（Ｊｏｎｅｓ  ２００８、Ｐｆｉｓｔｅｒ  ２００８、Ｓｉｅｖｅｒｔ  ２００９）、多形黄色星細胞腫（Ｄｉａｓ−Ｓａｎｔａｇａｔａ  ２０１１、Ｓｃｈｉｎｄｌｅｒ  ２０１１）、慢性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病（ｂｉｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ  Ｂ  ｍｙｅｌｏｍｏｎｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性骨髄性白血病、及び有毛細胞白血病（Ｔｉａｃｃｉ  ２０１１）が含まれる。ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌の他の非限定例には、良性及び悪性末梢神経鞘腫瘍などの末梢神経鞘腫瘍が含まれる（Ｓｅｒｒａｎｏ  ２０１３）。ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異はまた、一般にメラニン形成細胞に由来し、休止状態であるため良性の異形病巣である、母斑においても非常に頻繁である（Ｐｏｌｌｏｃｋ  ２００３）。ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、エルドハイム・チェスター病においても起こる。
【００４６】
他のＢＲＡＦ  ６００Ｖ関連状態または障害には、炎症性及び自己免疫疾患（関節リウマチなど）（Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１３  Ｏｃｔ；５５（３−４）：２４７−５２）、腱鞘巨細胞腫（ｔｅｎｏｓｙｎｏｖｉａｌ  ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌ  ｔｕｍｏｒ）、色素性絨毛性結節性滑膜炎、腱鞘巨細胞腫（ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌ  ｔｕｍｏｒ  ｏｆ  ｔｅｎｄｏｎ  ｓｈｅａｔｈ）、骨巨細胞腫、子宮頸癌（Ｇｙｎｅｃｏｌ  Ｏｎｃｏｌ．２００７  Ｊｕｎ；１０５（３）：６６２−６）、子宮内膜癌（Ｆａｍ  Ｃａｎｃｅｒ．２０１４  Ｍａｒ；１３（１）：１〜１２）、胚細胞腫瘍（Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２００９  Ｍａｙ  １；２７（１３）：２１２９−３６）、前立腺癌（Ｇｅｎｅｓ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ  Ｃａｎｃｅｒ．２０１２  Ｎｏｖ；５１（１１）：１０１４−２３）、膀胱癌（Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１５  Ｍａｒ  １２．ｐｉｉ：ｍｏｌｃａｎｒｅｓ．０６８９．２０１４）、筋周皮腫（Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．２０１４  Ｊｕｌ  ２５；１０６（８））、後腎性腺腫（Ａｍ  Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｐａｔｈｏｌ．２０１５  Ａｐｒ；３９（４）：５４９−５７）、膵臓新生物（Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ．２０１４  Ｍａｒ；２３２（４）：４２８−３５）、神経内分泌腫瘍（Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ．２００５  Ｆｅｂ；１２３（２）：２５６−６０）、内分泌腫瘍（Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｌａｔ  Ｃａｎｃｅｒ．２００４  Ｄｅｃ；１１（４）：８５５−６０）、副腎腫瘍（Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｌａｔ  Ｃａｎｃｅｒ．２００９  Ｊｕｎ；１６（２）：５６５−７２）、副腎髄質腫瘍、耳下腺の嚢胞腺癌（Ｓｐｒｉｎｇｅｒｐｌｕｓ．２０１３  Ｄｅｃ  １８；２：６７９．ｄｏｉ：１０．１１８６／２１９３−１８０１−２−６７９）、多形膠芽細胞腫（Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｓｕｒｇ  Ｏｎｃｏｌ．２０１５  Ｍａｒ  １１；１３：１００）、胆管腺腫を含む胆管癌（Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２０１５  Ｊａｎ；６１（１）：４０３−５）、胆管細胞癌、Ｂ細胞慢性リンパ増殖性疾患（Ｂｌｏｏｄ．２０１２  Ｊａｎ  ５；１１９（１）：１８８−９１）、樹状細胞肉腫（Ａｎｎ  Ｄｉａｇｎ  Ｐａｔｈｏｌ．２０１５  Ｊｕｎ；１９（３）：１１３−６）、組織球性肉腫、及びリンパ腫（例えば、Ｒｉｃｈｔｅｒ症候群、非ホジキンリンパ腫）（Ｃｅｌｌ．２０１５  Ａｐｒ  ９；１６１（２）：３１９−３２）が含まれる。
【００４７】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態は、黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、甲状腺未分化癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、胃癌、胆管細胞癌、バレット食道癌、頭頚部癌、肝細胞癌、ランゲルハンス細胞組織球症、消化管間質腫瘍、多発性骨髄腫、小児星細胞腫、多形黄色星細胞腫、慢性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病（ｂｉｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ  Ｂ  ｍｙｅｌｏｍｏｎｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性骨髄性白血病、有毛細胞白血病、母斑、エルドハイム・チェスター病、炎症性及び自己免疫疾患（関節リウマチなど）、腱鞘巨細胞腫、色素性絨毛性結節性滑膜炎、腱鞘巨細胞腫、骨巨細胞腫、子宮頸癌、子宮内膜癌、胚細胞腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、筋周皮腫、後腎性腺腫、膵臓新生物、神経内分泌腫瘍、内分泌腫瘍、副腎腫瘍、副腎髄質腫瘍、耳下腺の嚢胞腺癌、多形膠芽細胞腫、胆管腺腫を含む胆管癌、胆管細胞癌、Ｂ細胞慢性リンパ増殖性疾患、樹状細胞肉腫、組織球性肉腫、またはリンパ腫である。
【００４８】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異またはＢＲＡＦ融合変異関連疾患または状態は、黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、甲状腺未分化癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、胃癌、胆管細胞癌、バレット食道癌、頭頚部癌、肝細胞癌、ランゲルハンス細胞組織球症、消化管間質腫瘍、多発性骨髄腫、小児星細胞腫、多形黄色星細胞腫、慢性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病、急性骨髄性白血病、有毛細胞白血病、母斑、エルドハイム・チェスター病、炎症性及び自己免疫疾患（関節リウマチなど）、腱鞘巨細胞腫、色素性絨毛性結節性滑膜炎、腱鞘巨細胞腫、骨巨細胞腫、子宮頸癌、子宮内膜癌、胚細胞腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、筋周皮腫、後腎性腺腫、膵臓新生物、神経内分泌腫瘍、内分泌腫瘍、副腎腫瘍、副腎髄質腫瘍、耳下腺の嚢胞腺癌、多形膠芽細胞腫、胆管腺腫を含む胆管癌、胆管細胞癌、Ｂ細胞慢性リンパ増殖性疾患、樹状細胞肉腫、組織球性肉腫、またはリンパ腫である。
【００４９】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態は、転移性黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、甲状腺未分化癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、胃癌、胆管細胞癌、バレット食道癌、エルドハイム・チェスター病、または頭頚部癌である。別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態は、転移性黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、甲状腺未分化癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、胃癌、胆管細胞癌、バレット食道癌、エルドハイム・チェスター病、または頭頚部癌である。
【００５０】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または障害は、肝細胞癌、ランゲルハンス細胞組織球症、消化管間質腫瘍、多発性骨髄腫、小児星細胞腫、多形黄色星細胞腫、慢性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病、急性骨髄性白血病、有毛細胞白血病、または母斑である。
【００５１】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または障害は、炎症性及び自己免疫疾患（関節リウマチなど）、腱鞘巨細胞腫、色素性絨毛性結節性滑膜炎、腱鞘巨細胞腫、骨巨細胞腫、子宮頸癌、子宮内膜癌、胚細胞腫瘍、前立腺癌、膀胱癌、筋周皮腫、後腎性腺腫、膵臓新生物、神経内分泌腫瘍、内分泌腫瘍、副腎腫瘍、副腎髄質腫瘍、耳下腺の嚢胞腺癌、多形膠芽細胞腫、胆管腺腫を含む胆管癌、胆管細胞癌、Ｂ細胞慢性リンパ増殖性疾患、樹状細胞肉腫、組織球性肉腫、またはリンパ腫である。
【００５２】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または障害は、癌である。別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異関連癌は、転移性黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、甲状腺未分化癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、胃癌、胆管細胞癌、バレット食道癌、または頭頚部癌である。別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異関連癌は、転移性黒色腫、皮膚色素沈着黒色腫、大腸癌、甲状腺乳頭癌、甲状腺未分化癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、胃癌、胆管細胞癌、バレット食道癌、または頭頚部癌である。
【００５３】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、肝細胞癌、ランゲルハンス細胞組織球症、消化管間質腫瘍、多発性骨髄腫、小児星細胞腫、多形黄色星細胞腫、慢性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病、急性骨髄性白血病、有毛細胞白血病、または母斑である。
【００５４】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態は、エルドハイム・チェスター病である。
【００５５】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、黒色腫である。
【００５６】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、転移性黒色腫である。
【００５７】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、皮膚色素沈着黒色腫である。
【００５８】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、末梢神経鞘腫瘍である（悪性及び良性末梢神経鞘腫瘍を含む）。
【００５９】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、悪性末梢神経鞘腫瘍（ＭＰＮＳＴ）である。
【００６０】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、大腸癌である。
【００６１】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、結腸直腸腺癌である。
【００６２】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、甲状腺乳頭癌である。
【００６３】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、甲状腺未分化癌である。
【００６４】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、卵巣癌である。
【００６５】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、非小細胞肺癌である。
【００６６】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、胃癌である。
【００６７】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、胆管細胞癌である。
【００６８】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、バレット食道癌である。
【００６９】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、頭頚部癌である。
【００７０】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、肝細胞癌である。
【００７１】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、ランゲルハンス細胞組織球症である。
【００７２】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、消化管間質腫瘍である。
【００７３】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、多発性骨髄腫である。
【００７４】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、小児星細胞腫である。
【００７５】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、多形黄色星細胞腫である。
【００７６】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、慢性骨髄性白血病である。
【００７７】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、急性骨髄単球性白血病である。
【００７８】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病である。
【００７９】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、急性骨髄性白血病である。
【００８０】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、有毛細胞白血病である。
【００８１】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連癌は、母斑である。
【００８２】
別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態は、別の実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異関連疾患または状態は、虚血発作、脳血管虚血、多発脳梗塞性認知症、頭部損傷、脊髄損傷、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、認知症、老年舞踏病、ハンチントン病、腫瘍疾患、腫瘍疾患に伴う合併症、化学療法誘導型低酸素症、消化管間質腫瘍、前立腺腫瘍、肥満細胞腫、イヌ肥満細胞腫、急性骨髄性白血病、急性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、多発性骨髄腫、黒色腫、肥満細胞症、神経膠腫、神経膠芽腫、星状細胞腫、神経芽腫、肉腫、神経内分泌起源の肉腫、平滑筋肉腫、肺癌、乳癌、膵臓癌、結腸癌、肝細胞癌、腎臓癌、女性生殖路癌、有棘細胞癌、上皮内癌、リンパ腫、組織球性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ＭＥＮ２症候群、神経線維腫症、シュワン細胞新生物、骨髄異形成症候群、白血病、腫瘍血管新生、甲状腺癌、肝臓癌、骨癌、皮膚癌、脳癌（小児脳腫瘍及びＢＲＡＦ融合脳腫瘍を含む）、中枢神経系癌、膵臓癌、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、乳癌、大腸癌、膀胱癌、前立腺癌、消化管癌、子宮内膜癌、卵管癌、精巣癌、卵巣癌、神経障害起源の疼痛、炎症起源の疼痛、急性疼痛、慢性疼痛、片頭痛、心血管病、心不全、心肥大、血栓、血栓性微小血管障害症候群、アテローム硬化症、再灌流傷害、虚血、心血管虚血、肝虚血、炎症、多発性嚢胞腎疾患、加齢性黄斑変性、関節リウマチ、アレルギー性鼻炎、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、全身性紅斑性狼瘡、シェーグレン症候群、ヴェグナー肉芽腫症、乾癬、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーブス病、重症筋無力症、多発性硬化症、変形性関節症、子宮内膜症、皮膚の傷、組織の傷、血管再狭窄、線維性障害、過好酸球増加症、ＣＮＳ炎症、膵炎、腎炎、アトピー性皮膚炎、肝炎、免疫不全疾患、重症複合免疫不全、臓器移植拒絶反応、移植片対宿主疾患、腎疾患、前立腺疾患、糖尿病性腎症、腎硬化症、糸球体腎炎、間質性腎炎、ループス腎炎、前立腺肥大症、慢性腎不全、尿細管壊死、糖尿病関連腎合併症、関連腎肥大、１型糖尿病、２型糖尿病、代謝症候群、肥満、脂肪肝、インスリン抵抗性、高血糖症、脂肪分解肥満、感染、ヘリコバクターピロリ感染、インフルエンザウイルス感染、熱、敗血症、肺疾患、慢性閉塞性肺疾患、急性呼吸不全症候群、喘息、アレルギー、気管支炎、気腫、肺線維症、遺伝性発達疾患、ヌーナン症候群、クルーゾン症候群、尖頭合指症Ｉ型、ファイファー症候群、ジャクソン・ワイス症候群、コステロ症候群、膜皮骨症候群、多発性黒子症候群、心膜皮骨症候群、神経堤症候群、心血管、骨、腸、皮膚、毛髪、または内分泌疾患を引き起こす異常、骨構造障害または石灰化、骨粗鬆症、増加した骨折の危険性、高カルシウム血症、骨転移、グレーブス病、ヒルシュスプルング病、リンパ浮腫、選択的Ｔ細胞欠陥、Ｘ連鎖無ガンマグロブリン血症、糖尿病性網膜症、脱毛症、勃起不全、及び結節性硬化症からなる群から選択される。
【００８３】
いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、１種以上のＢＲＡＦ  Ｖ６００変異であり得る。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ｅ、Ｖ６００Ｋ、Ｖ６００Ｄ、Ｖ６００Ａ、Ｖ６００Ｇ、Ｖ６００Ｍ、及びＶ６００Ｒからなる群から選択される１種以上の変異である。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ｅ及びＶ６００Ｋ変異を含む。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ｅ変異を含む。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ｋ変異を含む。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ｄ変異を含む。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ａ変異を含む。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ｇ変異を含む。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ｍ変異である。いくつかの実施形態では、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異は、Ｖ６００Ｒ変異を含む。
【００８４】
ＩＶ．代替化合物形態または誘導体
本明細書における使用に企図される式Ｉまたは式ＩＩの化合物は、多くの異なる形態または誘導体で存在してよく、全てが本開示の範囲内である。代替形態または誘導体には、例えば、（ａ）互変異性体、異性体（立体異性体及び位置異性体を含む）、及びラセミ混合物、（ｂ）薬学的に許容可能な塩、ならびに（ｃ）固体形態（異なる結晶形態、多形または非晶質固体を含む、その水和物及び溶媒和物、ならびに他の形態を含む）が含まれる。
【００８５】
Ａ．互変異性体、立体異性体、及び位置異性体
いくつかの化合物は、互変異性を呈し得ることが理解される。そのような場合、本明細書に提供される化学式は、考えられる互変異性形態のうちの１つのみを明確に描く。したがって、本明細書に提供される化学式は、描かれる化合物の任意の互変異性形態を表すことが意図され、単に化学式の図面によって描かれる特定の互変異性形態に限定されるものではないことを理解すべきである。
【００８６】
同様に、本開示に従う使用に企図される化合物は、立体異性体として存在し得る。すなわち、共有結合された原子と同じ原子接続性を有するが、原子の空間配向が異なる。例えば、化合物は、１つ以上のキラル中心を含有する、光学立体異性体であり得るため、２つ以上の立体異性形態（例えば、エナンチオマーまたはジアステレオマー）で存在し得る。故に、そのような化合物は、単一立体異性体（すなわち、他の立体異性体を本質的に含まない）、ラセミ化合物、ならびに／またはエナンチオマー及び／もしくはジアステレオマーの混合物として存在し得る。別の例として、立体異性体には、二重結合の隣接した炭素上の置換基のシス−またはトランス−配向などの幾何異性体が含まれる。そのような単一立体異性体、ラセミ化合物、及びそれらの混合物は全て、本開示の範囲内であることが意図される。別途指定されない限り、そのような立体異性形態は全て、本明細書に提供される式に含まれる。
【００８７】
いくつかの実施形態では、本開示に従う使用に企図されるキラル化合物は、少なくとも８０％の単一異性体（６０％エナンチオマー過剰（「ｅ．ｅ．」）もしくはジアステレオマー過剰（「ｄ．ｅ．」））または少なくとも８５％（７０％ｅ．ｅ．もしくはｄ．ｅ．）、９０％（８０％ｅ．ｅ．もしくはｄ．ｅ．）、９５％（９０％ｅ．ｅ．もしくはｄ．ｅ．）、９７．５％（９５％ｅ．ｅ．もしくはｄ．ｅ．）、または９９％（９８％ｅ．ｅ．もしくはｄ．ｅ．）を含有する形態である。当業者によって一般に理解されるとおり、１つのキラル中心を有する光学的に純粋な化合物は、２つの考えられるエナンチオマーのうちの１つから本質的になる（すなわち、エナンチオマー的に純粋である）化合物であり、複数のキラル中心を有する光学的に純粋な化合物は、ジアステレオマー的に純粋かつエナンチオマー的に純粋であるものである。いくつかの実施形態では、化合物は、光学的に純粋な形態で存在し、そのような光学的に純粋な形態は、当該技術分野において既知の方法によって（例えば、再結晶化技術、キラル合成技術（光学的に純粋な出発物質からの合成を含む）、及びキラルカラムを使用するクロマトグラフィー的分離によって）調製及び／または単離される。
【００８８】
Ｂ．薬学的に許容可能な塩
別途指定されない限り、本明細書における化合物の仕様には、そのような化合物の薬学的に許容可能な塩が含まれる。故に、本明細書に記載される化合物は、薬学的に許容可能な塩の形態であり得るか、または薬学的に許容可能な塩として製剤化され得る。企図される薬学的に許容可能な塩形態には、モノ、ビス、トリス、テトラキスなどが含まれるが、限定されない。薬学的に許容可能な塩は、それらが投与される量及び濃度で非毒性である。そのような塩の調製は、それがその生理学的効果を発揮するのを妨げることなく、化合物の物理的特徴を変化させることによって、薬理学的使用を促進し得る。物理特性の有用な変化には、融点を低下させて経粘膜投与を促進すること、及び可溶度を高めてより高濃度の薬物の投与を促進することが含まれる。本開示の化合物は、十分に酸性、十分に塩基性、または両方の官能基を有してよく、したがって多くの無機または有機塩基、ならびに無機及び有機酸のうちのいずれかと反応させて、薬学的に許容可能な塩を形成することができる。
【００８９】
薬学的に許容可能な塩には、酸付加塩、例えば塩化物、臭化物、ヨウ化物、塩酸塩、酢酸塩、フェニル酢酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸才雄、安息香酸塩、２−フェノキシ安息香酸塩、２−アセトキシ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、重炭酸塩、ブチン−１，４二酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、カプロン酸塩、カプリル酸塩、クロロ安息香酸塩、ケイ皮酸塩、クエン酸塩、デカン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、グルコン酸塩、グルカル酸塩、グルクロン酸塩、グルコース−６−リン酸塩、グルタミン酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、イセチオン酸塩、イソ酪酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、フェニル酪酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、メチルマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、イソニコチン酸塩、オクタン酸塩、オレイン酸塩、オキサル酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、一水素リン酸塩、二水素リン酸塩、オルトリン酸塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、２−ホスホグリセリン酸塩、３−ホスホグリセリン酸塩、フタル酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、プロピオール酸塩、ピルビン酸塩、キナ酸塩、サリチル酸塩、４−アミノサリチル酸塩、セバシン酸塩、ステアリン酸塩、スベル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、スルファミン酸塩、スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（すなわち、ベシル酸塩）、エタンスルホン酸塩（すなわち、エシル酸塩）、エタン−１，２−ジスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（すなわち、イセチオン酸塩）、メタンスルホン酸塩（すなわち、メチル酸塩）、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩（すなわち、ナプシル酸塩）、プロパンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩（すなわち、トシル酸塩）、キシレンスルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、酒石酸塩、及びトリフルオロ酢酸塩を含有するものなどが含まれる。これらの薬学的に許容可能な酸付加塩は、適切な対応する酸を使用して調製され得る。
【００９０】
カルボン酸またはフェノールなどの酸性官能基が存在する場合、薬学的に許容可能な塩には、ベンザチン、クロロプロカイン、コリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ｔ−ブチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ′−ジベンジルエチレンジアミン、メグルミン、ヒドロキシエチルピロリジン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジン、プロカイン、アルミニウム、カルシウム、銅、鉄、リチウム、マグネシウム、マンガネーゼ、カリウム、ナトリウム、亜鉛、アンモニウム、及びモノ−、ジ−、もしくはトリ−アルキルアミン（例えば、ジエチルアミン）を含有するものなどの塩基性付加塩、またはＬ−ヒスチジン、Ｌ−グリシン、Ｌ−リシン、及びＬ−アルギニンなどのアミノ酸から誘導された塩も含まれる。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，Ｖｏｌ．２，ｐ．１４５７，１９９５を参照されたい。これらの薬学的に許容可能な塩基付加塩は、適切な対応する塩基を使用して調製され得る。
【００９１】
薬学的に許容可能な塩は、標準技術によって調製され得る。例えば、化合物の遊離塩基形態は、適切な酸を含有する水性溶液または水性−アルコール溶液などの好適な溶媒に溶解され、次いで溶液を蒸発させることによって単離され得る。別の実施例において、塩は、有機溶媒中で遊離塩基及び酸を反応させることによって調製され得る。特定の化合物が酸である場合、所望の薬学的に許容可能な塩は、任意の好適な方法、例えば、適切な無機または有機塩基での遊離酸の処理によって調製することができる。
【００９２】
Ｃ．他の化合物形態
固体である薬剤の場合、本開示に従う使用のために企図される化合物及び塩が、異なる結晶もしくは多形形態で存在し得るか、または共結晶として製剤化され得るか、または非晶質形態であり得るか、またはそれらの任意の組み合わせ（例えば、部分的に結晶性、部分的に非晶質、もしくは多形体の混合物）であり得ることは、当業者によって理解され、それらの全てが、本開示及び特定の化学式の範囲内であることが意図される。塩は、酸／塩基付加によって形成される、すなわち、関心対象の化合物の遊離塩基または遊離酸は、それぞれ対応する付加塩基または付加酸との酸／塩基反応を形成し、イオン電荷相互作用をもたらすが、共結晶は、中性化合物間に形成される新たな化学種であり、化合物及びそれと同じ結晶構造の追加の分子種をもたらす。
【００９３】
場合によって、本開示に従う使用のために企図される化合物は、酸または塩基と複合され、アンモニウム、ジエチルアミン、エタノールアミン、エチレンジアミン、ジエタノールアミンｔ−ブチルアミン、ピペラジン、メグルミンなどの塩基付加塩；酢酸塩、アセチルサリチル酸塩、ベシル酸塩、カムシル酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルタル酸塩、塩酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、硝酸塩、オキサル酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、及びトシル酸塩などの酸付加塩；ならびにアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、またはバリンなどのアミノ酸が含まれる。本開示の化合物を酸または塩基と複合することにおいて、典型的な塩または共結晶などの結晶性材料ではなく、好ましくは非晶質複合体が形成される。場合によって、複合体の非晶質形態は、スプレー乾燥、ローラー圧縮などの機械化学的方法、または酸もしくは塩基と混合された親化合物のマイクロ波照射などの追加の処理によって促進される。そのような方法には、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）及びメタクリル酸コポリマー（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）Ｌ１００−５５）が含まれるが、これらに限定されないイオン及び／または非イオンポリマー系の付加が含まれてもよく、これが複合体の非晶質性を更に安定させる。そのような非晶質複合体は、いくつかの利点を提供する。例えば、遊離塩基に対する融点の低下は、ホットメルト押出などの追加の処理を促進し、化合物の生物製剤的特性を更に改善する。また非晶質複合体は、容易に砕けやすく、固体をカプセルまたは錠剤形態に装填するために改善された圧縮性を提供する。
【００９４】
追加として、化学式は、特定された構造の水和または溶媒和、ならびに非水和または非溶媒和形態を網羅することが意図される。例えば、特定された化合物は、水和及び非水和形態の両方を含む。溶媒和物の他の例には、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、またはエタノールアミンなどの好適な溶媒と組み合わせて構造を含む。
【００９５】
Ｖ．複合療法
いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載される疾患または状態のうちのいずれかの治療を、それを必要とする動物対象において行う方法を提供し、該方法は、有効量の式ＩまたはＩＩの化合物を、該疾患または状態のための１種以上の他の療法と組み合わせて対象に投与することを含む。
【００９６】
Ａ．別の薬剤と併せた式ＩまたはＩＩ
いくつかの実施形態では、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物、または式Ｉもしくは式ＩＩの化合物を含む薬学的組成物は、別の治療剤と共に投与され得る。いくつかの実施形態では、別の治療剤は、アドゼレシン、アルトレタミン、ベンダムスチン、ビゼレシン、ブスルファン、カルボプラチン、カルボクオン、カルモフール、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、エトグロシド、フォテムスチン、ヘプスルファム、イホスファミド、イムプロスルファン、イロフルベン、ロムスチン、マンノスルファン、メクロレタミン、メルファラン、ミトブロニトール、ネダプラチン、ニムスチン、オキサリプラチン、ピポスルファン、プレドニムスチン、プロカルバジン、ラニムスチン、サトラプラチン、セムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、チオテパ、トレオスルファン、トリアジクオン、トリエチレンメラミン、四硝酸トリプラチン、トロホスファミド、及びウラムスチンを含むがこれらに限定されないアルキル化剤；アクラルビシン、アムルビシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エルサミトルシン、エピルビシン、イダルビシン、メノガリル、マイトマイシン、ネオカルチノスタチン、ペントスタチン、ピラルビシン、プリカマイシン、バルルビシン、及びゾルビシンを含むがこれらに限定されない抗生物質；アミノプテリン、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、デシタビン、フロクスウリジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、ネララビン、ペメトレキセド、アザチオプリン、ラルチトレキセド、テガフール−ウラシル、チオグアニン、トリメトプリム、トリメトレキサート、及びビダラビンを含むがこれらに限定されない代謝拮抗剤；アレムツズマブ、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、パニツムマブ、ペルツズマブ、リツキシマブ、ブレンツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、９０Ｙイブリツモマブチウキセタン、イピリムマブ、及びトレメリムマブを含むがこれらに限定されない免疫療法；アナストロゾール、アンドロゲン、ブセレリン、ジエチルスチルベストロール、エキセメスタン、フルタミド、フルベストラント、ゴセレリン、イドキシフェン、レトロゾール、ロイプロリド、マゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェン、及びトレミフェンを含むがこれらに限定されないホルモンまたはホルモンアンタゴニスト；ＤＪ−９２７、ドセタキセル、ＴＰＩ２８７、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル、ＤＨＡ−パクリタキセル、及びテセタキセルを含むがこれらに限定されないタキサン；アリトレチノイン、ベキサロテン、フェンレチニド、イソトレチノイン、及びトレチノインを含むがこれらに限定されないレチノイド；デメコルシン、ホモハリングトニン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、及びビノレルビンを含むがこれらに限定されないアルカロイド；ＡＥ−９４１（ＧＷ７８６０３４、Ｎｅｏｖａｓｔａｔ）、ＡＢＴ−５１０、２−メトキシエストラジオール、レナリドマイド、及びサリドマイドを含むがこれらに限定されない抗血管形成剤；アムサクリン、ベロテカン、エドテカリン、エトポシド、エトポシドホスフェート、エキサテカン、イリノテカン（また、活性代謝物ＳＮ−３８（７−エチル１０−ヒドロキシカンプトテシン））、ルカンソン、ミトキサントロン、ピキサントロン、ルビテカン、テニポシド、トポテカン、及び９−アミノカンプトテシンを含むがこれらに限定されないトポイソメラーゼ阻害剤、アキシチニブ（ＡＧ０１３７３６）、ダサチニブ（ＢＭＳ３５４８２５）、エルロチニブ、ゲフィチニブ、フラボピリドール、イマチニブ、メシレート、ラパチニブ、モテサニブジホスフェート（ＡＭＧ７０６）、ニロチニブ（ＡＭＮ１０７）、セリシクリブ、ソラフェニブ、スニチニブマレート、ＡＥＥ−７８８、ＢＭＳ−５９９６２６、ＵＣＮ−０１（７−ヒドロキシスタウロスポリン）、及びバタラニブを含むがこれらに限定されないキナーゼ阻害剤；ボルテゾミブ、ゲルダナマイシン、及びラパマイシンを含むがこれらに限定されない標的シグナル伝達阻害剤、イミキモド、インターフェロン−α、及びインターロイキン−２を含むがこれらに限定されない生物学的応答調節剤；ならびに、３−ＡＰ（３−アミノ−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾン）、アルトラセンタン、アミノグルテチミド、アナグレリド、アスパラギナーゼ、ブリオスタチン−１、シレンギチド、エレスクロモル、エリブリンメシレート（Ｅ７３８９）、イキサベピロン、ロニダミン、マソプロコール、ミトグアナゾン、オブリメルセン、スリンダック、テストラクトン、チアゾフリン、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、テムシロリムス、エベロリムス、デフォロリムス）、ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えば、ＢＫＭ１２０、ＢＥＺ２３５、ＧＤＣ−０９４１、ＸＬ１  ７、ＸＬ７６５）、Ｃｄｋ４阻害剤（例えば、ＰＤ−３３２９９１）、Ａｋｔ阻害剤、Ｈｓｐ９０阻害剤（例えば、タネスピマイシン）、及びファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（例えば、チピファルニブ）を含むがこれらに限定されない他の化学療法剤；ＥＫ阻害剤（例えば、ＡＳ７０３０２６、ＡＺＤ６２４４（セルメチニブ）、ＡＺＤ８３３０、ＢＩＸ０２１８８、ＣＩ  １０４０（ＰＤ１８４３５２）、Ｄ−８７５０３、ＧＳ１  １２０２１２  （ＪＴＰ−７４０５７）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ３  １８０８８、ＰＤ９８０５９、ＰＤＥＡｌ  １９（ＢＡＹ  ８６９７６６）、ＴＡＫ−７３３）であり得る。別の実施形態では、癌の治療方法は、有効量の本明細書に記載される任意の１種以上の化合物（複数可）を含む組成物を、カペシタビン、５−フルオロウラシル、カルボプラチン、ダカルバジン、ゲフィチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、ＳＮ−３８、テモゾロミド、ビンブラスチン、ベバシズマブ、セツキシマブ、インターフェロン−α、インターロイキン−２、またはエルロチニブから選択される化学療法剤と組み合わせて対象に投与することを含む。
【００９７】
いくつかの実施形態では、別の治療剤は、以下の薬剤：アドゼレシン、アルトレタミン、ベンダムスチン、ビゼレシン、ブスルファン、カルボプラチン、カルボコン、カルモフール、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、エトグルシド、フォテムスチン、ヘプスルファム、イホスファミド、イムプロスルファン、イロフルベン、ロムスチン、マンノスルファン、メクロレタミン、メルファラン、ミトブロニトール、ネダプラチン、ニムスチン、オキサリプラチン、ピポスルファン、プレドニムスチン、プロカルバジン、ラニムスチン、サトラプラチン、セムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、チオテパ、トレオスルファン、トリアジコン、トリエチレンメラミン、四硝酸トリプラチン、トロホスファミド、ウラムスチン、アクラルビシン、アムルビシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エルサミトルシン、エピルビシン、イダルビシン、メノガリル、ミトマイシン、ネオカルジノスタチン、ペントスタチン、ピラルビシン、プリカマイシン、バルルビシン、ゾルビシン、アミノプテリン、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、デシタビン、フロキシウリジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、ネララビン、ペメトレキセド、アザチオプリン、ラルチトレキセド、テガフール−ウラシル、チオグアニン、トリメトプリム、トリメトレキサート、ビダラビン、アレムツズマブ、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、パニツムマブ、ペルツズマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、９０Ｙ−イブリツモマブチウキセタン、イピリムマブ、トレメリヌイマブ、アナストロゾール、アンドロゲン、ブセレリン、ジエチルスチルベストロール、エキセメスタン、フルタミド、フルベストラント、ゴセレリン、イドキシフェン、レトロゾール、ロイプロリド、マゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェン、トレミフェン、ＤＪ−９２７、ドセタキセル、ＴＰＩ  ２８７、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル、ＤＨＡ−パクリタキセル、テセタキセル、アリトレチノイン、ベキサロテン、フェンレチニド、イソトレチノイン、トレチノイン、デメコルシン、ホモハリントニン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、ビノレルビン、抗血管新生薬（Ｎｅｏｖａｓｔａｔが含まれるが、これに限定されない）、ＡＢＴ−５１０、２−メトキシエストラジオール、レナリドマイド、サリドマイド、アムサクリン、エドテカリン、エトポシド、リン酸エトポシド、エキサテカン、イリノテカン、ルカントン、ミトキサントロン、ピキサントロン、ルビテカン、テニポシド、トポテカン、９−アミノカンプトテシン、アキシチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、フラボピリドール、メシル酸イマチニブ、カボザンチニブ、ラパリニブ、モテサニブ二リン酸塩、ニロチニブ、セリシクリブ、ソラフェニブ、リンゴ酸スニチニブ、ＡＥＥ−７８８、ＢＭＳ−５９９６２６、７−ヒドロキ���タウロスポリン、バタラニブ、ボルテゾミブ、ゲルダナマイシン、ラパマイシン、イミキモド、インターフェロン−α、インターロイキン−２、３−アミノ−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾン、アルトラセンタン、アミノグルテチミド、アナグレリド、アスパラギナーゼ、ブリオスタチン−１、シレンジチド、エレスクロニオール、エリブリンメシル酸塩、イキサベピロン、ロニダミン、マソプロコール、ミトグアナゾン、オブリメルセン、スリンダク、テストラクトン、チアゾフリン、テムシロリムス、エベロリムス、デフォロリムス、ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｃｄｋ４阻害剤、Ａｋｔ阻害剤、Ｈｓｐ９０阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ファメシルトランスフェラーゼ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＢＥＴ阻害剤、ＡＳ７０３０２６、セルメチニブ、ＡＺＤ８３３０、ＢＩＸ０２１８８、ＰＤ１８４３５２、Ｄ−８７５０３、ＧＳ１  １２０２１２、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ３  １８０８８、ＰＤ９８０５９、ＰＤＥＡｌ  １９、またはＴＡＫ−７３３のうちの１種以上であり得る。
【００９８】
別の態様では、本開示は、癌の治療を、それを必要とする対象において、有効量の式ＩまたはＩＩの化合物を、１種以上の好適な化学療法剤と共に対象に投与することによって行う方法を提供する。一実施形態では、１種以上の好適な化学療法剤は、アドゼレシン、アルトレタミン、ベンダムスチン、ビゼレシン、ブスルファン、カルボプラチン、カルボクオン、カルモフール、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、エトグロシド、フォテムスチン、ヘプルファム、イホスファミド、インプロスルファン、イロフルベン、ロムスチン、マンノスルファン、メクロレタミン、メルファラン、ミトブロニトール、ネダプラチン、ニムスチン、オキサリプラチン、ピポスルファン、プレドニムスチン、プロカルバジン、ラニムスチン、サトラプラチン、セムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、チオテパ、トレオスルファン、トリアジクオン、トリエチレンメラミン、四硝酸トリプラチン、トロホスファミド、及びウラムスチンを含むがこれらに限定されないアルキル化剤；アクラルビシン、アムルビシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エルサミトルシン、エピルビシン、イダルビシン、メノガリル、マイトマイシン、ネオカルチノスタチン、ペントスタチン、ピラルビシン、プリカマイシン、バルルビシン、及びゾルビシンを含むがこれらに限定されない抗生物質；アミノプテリン、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、デシタビン、フロクスウリジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、ネララビン、ペメトレキセド、ラルチトレキセド、テガフール−ウラシル、チオグアニン、トリメトプリム、トリメトレキサート、及びビダラビンを含むがこれらに限定されない代謝拮抗剤；インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）阻害剤を含む免疫療法、免疫チェックポイント阻害剤、例えばＰＤ−１阻害剤（ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ピジリズマブなど）またはＰＤ−Ｌ１阻害剤（ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、もしくはＭＳＢ００１０７１８Ｃなど）、アレムツズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、パニツムマブ、ペルツズマブ、リツキシマブ、ブレンツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、９０Ｙイブリツモマブチウキセタン、イピリムマブ、トレメリムマブ、及び抗ＣＴＬＡ−４抗体を含むがこれらに限定されない抗体療法；アナストロゾール、アンドロゲン、ブセレリン、ジエチルスチルベストロール、エキセメスタン、フルタミド、フルベストラント、ゴセレリン、イドキシフェン、レトロゾール、ロイプロリド、マゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェン、及びトレミフェンを含むがこれらに限定されないホルモンまたはホルモンアンタゴニスト；ＤＪ−９２７、ドセタキセル、ＴＰＩ２８７、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル、ＤＨＡ−パクリタキセル、及びテセタキセルを含むがこれらに限定されないタキサン；アリトレチノイン、ベキサロテン、フェンレチニド、イソトレチノイン、及びトレチノインを含むがこれらに限定されないレチノイド；デメコルシン、ホモハリングトニン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、及びビノレルビンを含むがこれらに限定されないアルカロイド；ＡＥ−９４１（ＧＷ７８６０３４、Ｎｅｏｖａｓｔａｔ）、ＡＢＴ−５１０、２−メトキシエストラジオール、レナリドマイド、及びサリドマイドを含むがこれらに限定されない抗抗血管形成剤；アムサクリン、ベロテカン、エドテカリン、エトポシド、エトポシドホスフェート、エキサテカン、イリノテカン（また、活性代謝物ＳＮ−３８（７−エチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン））、ルカンソン、ミトキサントロン、ピキサントロン、ルビテカン、テニポシド、トポテカン、及び９−アミノカンプトテシンを含むがこれらに限定されないトポイソメラーゼ阻害剤；アキシチニブ（ＡＧ０１３７３６）、ダサチニブ（ＢＭＳ３５４８２５）、エルロチニブ、ゲフィチニブ、フラボピリドール、イマチニブ、メシレート、ラパチニブ、モテサニブジホスフェート（ＡＭＧ７０６）、ニロチニブ（ＡＭＮ１０７）、セリシクリブ、ソラフェニブ、スニチニブマレート、ＡＥＥ−７８８、ＢＭＳ−５９９６２６、ＵＣＮ−０１（７−ヒドロキシスタウロスポリン）、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、セルメチニブ、及びバタラニブを含むがこれらに限定されないキナーゼ阻害剤；ボルテゾミブ、ゲルダナマイシン、及びラパマイシンを含むがこれらに限定されない標的シグナル伝達阻害剤；イミキモド、インターフェロン−α、及びインターロイキン−２を含むがこれらに限定されない生物学的応答調節剤、ならびに、３−ＡＰ（３−アミノ−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾン）、アルトラセンタン、アミノグルテチミド、アナグレリド、アスパラギナーゼ、ブリオスタチン−１、シレンギチド、エレスクロモル、エリブリンメシレート（Ｅ７３８９）、イキサベピロン、ロニダミン、マソプロコール、ミトグアナゾン、オブリメルセン、スリンダック、テストラクトン、チアゾフリン、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、ＩＮＫ２８、ＡＺＤ８０５５、シロリムス、テムシロリムス、エベロリムス、デフォロリムス）、ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えば、ＢＥＺ２３５、ＧＤＣ−０９４１、ＸＬ１４７、ＸＬ７６５）、Ｃｄｋ４阻害剤（例えば、ＰＤ−３３２９９１）、Ａｋｔ阻害剤、Ｈｓｐ９０阻害剤（例えば、ゲルダナマイシン、ラジシコール、タネスピマイシン）、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（例えば、チピファルニブ）、及びアロマターゼ阻害剤（アナストロゾール  レトロゾール  エキセメスタン）を含むがこれらに限定されない他の化学療法剤から選択される。本明細書に記載される方法及び使用の別の実施形態では、式ＩまたはＩＩの化合物は、カペシタビン、５−フルオロウラシル、カルボプラチン、ダカルバジン、ゲフィチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、ＳＮ−３８、テモゾロミド、ビンブラスチン、ベバシズマブ、セツキシマブ、インターフェロン−α、インターロイキン−２、またはエルロチニブから選択される化学療法剤と組み合わせて投与される。別の実施形態では、化学療法剤はＭｅｋ阻害剤である。例示的���Ｍｅｋ阻害剤には、トラメチニブ、コビメチニブ、ＡＳ７０３０２６、ＡＺＤ６２４４（セルメチニブ）、ＡＺＤ８３３０、ＢＩＸ０２１８８、ＣＩ−１０４０（ＰＤ１８４３５２）、ＧＳＫ１１２０２１２（ＪＴＰ−７４０５７）、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ３１８０８８、ＰＤ９８０５９、ＲＤＥＡ１１９（ＢＡＹ８６９７６６）、ＴＡＫ−７３３、及びＵ０１２６−ＥｔＯＨが含まれるがこれらに限定されない。別の実施形態では、化学療法剤はチロシンキナーゼ阻害剤である。例示的なチロシンキナーゼ阻害剤には、ＡＥＥ７８８、ＡＧ−１４７８（チルホスチンＡＧ−１４７８）、ＡＧ−４９０、アパチニブ（ＹＮ９６８Ｄ１）、ＡＶ−４１２、ＡＶ−９５１（チボザニブ）、アキシチニブ、ＡＺＤ８９３１、ＢＩＢＦ１１２０（バルガテフ）、ＢＩＢＷ２９９２（アファチニブ）、ＢＭＳ７９４８３３、ＢＭＳ−５９９６２６、ブリバニブ（ＢＭＳ−５４０２１５）、ブリバニブアラニネート（ＢＭＳ−５８２６６４）、セジラニブ（ＡＺＤ２１７１）、クリソファン酸（クリソファノール）、クレノラニブ（ＣＰ−８６８５６９）、ＣＵＤＣ−１０１、ＣＹＣ１１６、ドビチニブ二乳酸（ＴＫＩ２５８二乳酸）、Ｅ７０８０、エルロチニブ塩酸塩（タルセバ、ＣＰ−３５８７７４、ＯＳＩ−７７４、ＮＳＣ−７１８７８１）、フォレチニブ（ＧＳＫ１３６３０８９、ＸＬ８８０）、ゲフィチニブ（ＺＤ−１８３９またはＩｒｅｓｓａ）、イマチニブ（グリベック）、イマチニブメシレート、Ｋｉ８７５１、ＫＲＮ６３３、ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ）、リニファニブ（ＡＢＴ−８６９）、マシチニブ（マシベット、ＡＢ１０１０）、ＭＧＣＤ−２６５、モテサニブ（ＡＭＧ−７０６）、ＭＰ−４７０、ムブリチニブ（ＴＡＫ１６５）、ネラチニブ（ＨＫＩ−２７２）、ＮＶＰ−ＢＨＧ７１２、ＯＳＩ−４２０（デスメチルエルロチニブ，ＣＰ−４７３４２０）、ＯＳＩ−９３０、パゾパニブＨＣｌ、ＰＤ−１５３０３５ＨＣｌ、ＰＤ１７３０７４、ペリチニブ（ＥＫＢ−５６９）、ＰＦ２９９８０４、ポナチニブ（ＡＰ２４５３４）、ＰＰ１２１、ＲＡＦ２６５（ＣＨＩＲ−２６５）、Ｒａｆ２６５誘導体、レゴラフェニブ（ＢＡＹ７３−４５０６）、ソラフェニブトシレート（ネクサバール）、スニチニブマレート（ステント）、テラチニブ（ＢＡＹ５７−９３５２）、ＴＳＵ−６８（ＳＵ６６６８）、バンデタニブ（ザクティマ）、バタラニブ二塩酸塩（ＰＴＫ７８７）、ＷＺ３１４６、ＷＺ４００２、ＷＺ８０４０、ＸＬ−１８４（カボザンチニブ）、ＸＬ６４７、ＥＧＦＲｓｉＲＮＡ、ＦＬＴ４ｓｉＲＮＡ、ＫＤＲｓｉＲＮＡ、メトホルミン、ＰＰＡＲアゴニスト（ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、インデグリタザル）及びＤＰＰ４阻害剤（シタグリプチン、ビルダグリプチン、サクサグリプチン、デュトグリプチン、ゲミグリプチン、アログリプチン）などの抗糖尿病薬が含まれるがこれらに限定されない。別の実施形態では、薬剤は、ＢＥＴ阻害剤（ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、及び／またはＢＲＤＴなど）。別の実施形態では、その薬剤はＥＧＦＲ阻害剤である。例示的なＥＧＦＲ阻害剤に���、ＡＥＥ−７８８、ＡＰ−２６１１３、ＢＩＢＷ−２９９２（Ｔｏｖｏｋ）、ＣＩ−１０３３、ＧＷ−５７２０１６、Ｉｒｅｓｓａ、ＬＹ２８７４４５５、ＲＯ−５３２３４４１、Ｔａｒｃｅｖａ（エルロチニブ、ＯＳＩ−７７４）、ＣＵＤＣ−１０１、セツキシマブ、及びＷＺ４００２が含まれるがこれらに限定されない。別の実施形態では、本開示は、癌の治療を、それを必要とする対象において、有効量の式ＩまたはＩＩの化合物を、トポイソメラーゼ阻害剤（イリノテカンなど）及びＥＧＦＲ阻害剤（セツキシマブなど）と共に対象に投与することによって行う方法を提供する。
【００９９】
いくつかの実施形態では、別の治療剤は、以下の薬剤：アドゼレシン、アルトレタミン、ベンダムスチン、ビゼレシン、ブスルファン、カルボプラチン、カルボクオン、カルモフール、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、ダカルバジン、エストラムスチン、エトグロシド、フォテムスチン、ヘプルファム、イホスファミド、インプロスルファン、イロフルベン、ロムスチン、マンノスルファン、メクロレタミン、メルファラン、ミトブロニトール、ネダプラチン、ニムスチン、オキサリプラチン、ピポスルファン、プレドニムスチン、プロカルバジン、ラニムスチン、サトラプラチン、セムスチン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、チオテパ、トレオスルファン、トリアジクオン、トリエチレンメラミン、四硝酸トリプラチン、トロホスファミド、ウラムスチン、アクラルビシン、アムルビシン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エルサミトルシン、エピルビシン、イダルビシン、メノガリル、マイトマイシン、ネオカルチノスタチン、ペントスタチン、ピラルビシン、プリカマイシン、バルルビシン、ゾルビシン、アミノプテリン、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、デシタビン、フロクスウリジン、フルダラビン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、ネララビン、ペメトレキセド、ラルチトレキセド、テガフール−ウラシル、チオグアニン、トリメトプリム、トリメトレキサート、ビダラビン、（ＩＤＯ）阻害剤、ＰＤ−１阻害剤、ＰＤ−Ｌ１阻害剤、アレムツズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ガリキシマブ、ゲムツズマブ、パニツムマブ、ペルツズマブ、リツキシマブ、ブレンツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、９０Ｙイブリツモマブチウキセタン、イピリムマブ、トレメリムマブ、抗ＣＴＬＡ−４抗体、アナストロゾール、アンドロゲン、ブセレリン、ジエチルスチルベストロール、エキセメスタン、フルタミド、フルベストラント、ゴセレリン、イドキシフェン、レトロゾール、ロイプロリド、マゲストロール、ラロキシフェン、タモキシフェン、トレミフェン、タキサン、レチノイド、アルカロイド、抗血管形成剤、トポイソメラーゼ阻害剤、アキシチニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、フラボピリドール、イマチニブ、メシレート、ラパチニブ、モテサニブジホスフェート、ニロチニブ、セリシクリブ、ソラフェニブ、スニチニブマレート、ＡＥＥ−７８８、ＢＭＳ−５９９６２６，７−ヒドロキシスタウロスポリン、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、セルメチニブ、バタラニブ、ボルテゾミブ、ゲルダナマイシン、ラパマイシン、イミキモド、インターフェロン−γ、インターロイキン−２、３−アミノ−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾン、アルトラセンタン、アミノグルテチミド、アナグレリド、アスパラギナーゼ、ブリオスタチン−１、シレンジチド、エレスクロモル、エリブリンメシル酸塩、イキサベピロン、ロニダミン、マソプロコール、ミトグアナゾン、オブリメルセン、スリンダク、テストラクトン、チアゾフリン、ＩＮＫ２８、ＡＺＤ８０５５、シロ���ムス、テムシロリムス、エベロリムス、デフォロリムス、ＢＥＺ２３５、ＧＤＣ−０９４１、ＸＬ１４７、ＸＬ７６５、ＰＤ−３３２９９１、Ａｋｔ  阻害剤、ゲルダナマイシン、ラジシコール、タネスピマイシン、チピファルニブ、アナストロゾール  レトロゾール  エキセメスタン、トラメチニブ、コビメチニブ、ＡＳ７０３０２６、セルメチニブ、ＡＺＤ８３３０、ＢＩＸ  ０２１８８、ＰＤ１８４３５２、ＧＳＫ１１２０２１２、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ３１８０８８、ＰＤ９８０５９、ＢＡＹ  ８６９７６６、ＴＡＫ−７３３、Ｕ０１２６−ＥｔＯＨ、ＡＥＥ７８８、チルホスチン、ＡＧ−４９０、アパチニブ、ＡＶ−４１２、チボザニブ、アキシチニブ、ＡＺＤ８９３１、バルガテフ、アファチニブ、ＢＭＳ７９４８３３、ＢＭＳ−５９９６２６、ブリバニブ、ブリバニブアラニネート、セジラニブ、クリソファン酸、クレノラニブ、ＣＵＤＣ−１０１、ＣＹＣ１１６、ドビチニブ二乳酸、Ｅ７０８０、エルロチニブ塩酸塩、フォレチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、イマチニブメシラート、Ｋｉ８７５１、ＫＲＮ  ６３３、ラパチニブ、リニファニブ、マシチニブ、ＭＧＣＤ−２６５、モテサニブ、ＭＰ−４７０、ムブリチニブ、ネラチニブ、ＮＶＰ−ＢＨＧ７１２、デスメチルエルロチニブ、ＯＳＩ−９３０、パゾパニブＨＣｌ、ＰＤ−１５３０３５  ＨＣｌ、ＰＤ１７３０７４、ペリチニブ、ＰＦ２９９８０４、ポナチニブ、ＰＰ１２１、ＲＡＦ２６５、レゴラフェニブ、ソラフェニブトシレート、スニチニブマレート、テラチニブ、ＴＳＵ−６８、バンデタニブ、バタラニブ二塩酸塩、ＷＺ３１４６、ＷＺ４００２、ＷＺ８０４０、カボザンチニブ、ＸＬ６４７、ＥＧＦＲ  ｓｉＲＮＡ、ＦＬＴ４  ｓｉＲＮＡ、ＫＤＲ  ｓｉＲＮＡ、抗糖尿病薬、ＰＰＡＲアゴニスト、ＤＰＰ４阻害剤、ＢＥＴ阻害剤、またはＥＧＦＲ阻害剤のうちの１種以上であり得る。
【０１００】
いくつかの実施形態では、別の治療剤は、ブロモドメイン阻害剤であり得る。ブロモドメイン（例えば、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、及び／またはＢＲＤＴなどのＢＥＴタンパク質）の阻害剤は、とりわけ、細胞増殖障害、癌、慢性自己免疫、炎症状態を含むブロモドメインの異常発現に関連する疾患の治療に有用であり得る。ＢＥＴ阻害剤の非限定例には、ＧＳＫ１２１０１５１Ａ及びＧＳＫ５２５７６２が含まれる。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、別の治療剤は、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤であり得る。ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣ阻害剤）は、細胞周期停止、分化、及び／またはアポトーシスを誘導することによって培養下及びインビボで腫瘍細胞の増殖を阻害する細胞増殖抑制剤である。ＨＤＡＣ阻害剤は、ヒストン及び／または転写因子などの非ヒストンタンパク質のアセチル化／脱アクチル化を調節することを介して、癌遺伝子または腫瘍抑制因子の発現変化の誘導によってそれらの抗腫瘍効果を発揮する。ヒストンアセチル化及び脱アセチル化は、クロマチントポロジーの変性及び遺伝子転写の調節において重要な役割を果たす。ＨＤＡＣ阻害剤の非限定例には、ボリノスタット、ロミデプシン、キダミド、パノビノスタット、ベリノスタット、バルプロ酸、モセチノスタット、アべキシノスタット、エンチノスタット、レスミノスタット、ギビノスタット、及びキシノスタットが含まれる。ＨＤＡＣ阻害剤は、気分安定剤及び抗てんかん剤として精神医学及び神経学において広く使用されている。これの一例は、商品名Ｄｅｐａｋｅｎｅ、Ｄｅｐａｋｏｔｅ、及びＤｉｖａｌｐｒｏｅｘで薬物として市場に出されているバルプロ酸である。ＨＤＡＣ阻害剤はまた、アルツハイマー病及びハンチントン病などの神経変性疾患用の緩和剤として使用されている。
【０１０２】
Ｂ．別の療法と併せた式ＩまたはＩＩ
いくつかの実施形態では、本開示は、癌の治療を、それを必要とする対象において、有効量の式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその組成物を、癌の治療に有効な１種以上の他の療法または医学的処置と組み合わせて対象に投与することによって行う方法を提供する。他の療法または医学的処置には、好適な抗癌療法（例えば、薬物療法、ワクチン療法、遺伝子療法、光力学療法）または医学的手順（例えば、手術、放射線治療、温熱療法加熱、骨髄または幹細胞移植）が含まれる。一実施形態では、１種以上の好適な抗癌療法または医学的処置は、化学療法剤（例えば、化学療法薬物）での治療、放射線治療（例えば、Ｘ線、γ線、もしくは電子、陽子、中性子、またはα粒子線）、温熱療法加熱（例えば、マイクロ波、超音波、高周波アブレーション）、ワクチン療法（例えば、ＡＦＰ遺伝子肝細胞癌ワクチン、ＡＦＰアデノウイルスベクターワクチン、ＡＧ−８５８、同種異系ＧＭ−ＣＳＦ分泌乳癌ワクチン、樹状細胞ペプチドワクチン）、遺伝子療法（例えば、Ａｄ５ＣＭＶ−ｐ５３ベクター、ＭＤＡ７をコードするアデノベクター、アデノウイルス５−腫瘍壊死因子アルファ）、光力学療法（例えば、アミノレブリン酸、モテキサフィンルテチウム）、腫瘍溶解性ウイルスもしくは細菌性療法、手術、または骨髄及び幹細胞移植から選択される。所定の実施形態では、本開示は、癌の治療を、それを必要とする対象において、有効量の本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物を対象に投与し、本明細書に記載の放射線治療を別々にまたは同時に適用することによって行うこと方法を提供する。一実施形態では、本開示は、癌の治療を、それを必要とする対象において、有効量の本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物を対象に投与し、続いて放射線治療（例えば、Ｘ線、γ線、または電子線、陽子線、中性子線、もしくはα粒子線）によって行うこと方法を提供する。別の実施形態では、本開示は、癌の治療を必要とする対象において、放射線治療（例えば、Ｘ線、γ線、または電子線、陽子線、中性子線、もしくはα粒子線）を対象に適用し、続いて有効量の本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩを対象に投与することによって癌を治療するための方法を提供する。更に別の実施形態では、本開示は、癌の治療を、それを必要とする対象において、本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物と、放射線治療（例えば、Ｘ線、γ線、または電子線、陽子線、中性子線、もしくはα粒子線）とを同時に施すことによって行うこと方法を提供する。
【０１０３】
ＶＩ．キット
別の態様では、本開示は、式ＩもしくはＩＩの化合物、または本明細書に記載されるそれらの組成物を含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、化合物または組成物は、例えば、バイアル、ボトル、フラスコに包装され、これらは更に、例えば、箱、封筒、または袋に包装され得る。化合物または組成物は、哺乳動物、例えば、ヒトへの投与のために、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）または同様の規制当局によって承認されている。化合物または組成物は、ＢＲＡＦプロテインキナーゼ媒介疾患または状態のために、哺乳動物、例えば、ヒトへの投与が承認されている。本開示のキットは、化合物または組成物がＢＲＡＦプロテインキナーゼ媒介疾患または状態のために、哺乳動物、例えば、ヒトへの投与に好適であり、承認されているという用途及び／または他の症状のための指示書を含む。化合物または組成物は、単位容量または単回容量形態、例えば、単回容量丸薬、カプセルなどに包装される。
【０１０４】
ＶＩＩ．製剤及び投与
本明細書に記載の方法及び使用は、典型的にはヒト対象のための療法に使用される。しかしながら、それらはまた、他の動物対象における類似または同一の症状を治療するために使用され得る。本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物は、注射（すなわち、静脈内、腹腔内、皮下、及び筋肉内を含む非経口）、経口、経皮、経粘膜、直腸、または吸入を含む異なる経路によって投与され得る。そのような剤形は、化合物が標的細胞に達することを可能にすべきである。他の要因は、その技術において良く知られており、毒性、及びその化合物または組成物がその効果を発揮するのを遅らせる剤形などの考慮を含む。技術及び製剤は、一般に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，２００５（参照により本明細書に組み込まれる）に見出され得る。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、本開示の方法で使用される組成物は、フィラー、バインダー、崩壊剤、流動促進剤、潤滑剤、錯化剤、可溶化剤、及び界面活性剤などの薬学的に許容可能な担体または賦形剤を含み、これらは特定の経路によって化合物の投与を容易にするために選択され得る。担体の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、例えば、ラクトース、グルコース、またはスクロース、デンプンの種類、セルロース誘導体、ゼラチン、脂質、リポソーム、ナノ粒子などが含まれる。担体にはまた、例えば、注射用水（ＷＦＩ）、生理食塩水、デキストロース溶液、ハンクス溶液、リンガー溶液、植物油、鉱物油、動物油、ポリエチレングリコール、液体パラフィンなどの無菌溶液を含む、溶媒としてのまたは懸濁液用の生理学的に適合性の液体が含まれる。賦形剤にはまた、例えば、コロイド状二酸化ケイ素、シリカゲル、タルク、ケイ酸マグネシウム、ケイ酸カルシウム、アルミノケイ酸ナトリウム、三ケイ酸マグネシウム、粉末セルロース、マクロ結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロース、架橋ナトリウムカルボキシメチルセルロース、安息香酸ナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、フマル酸ステアリルナトリウム、シロイド（ｓｙｌｏｉｄ）、ステアロウェットＣ、酸化マグネシウム、デンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセリル、ジベヘン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセリル、水素化植物油、水素化綿実油、ヒマシ種油、鉱物油、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００またはＰＥＧ４０００−８０００）、ポリオキシエチレングリコール、ポロキサマー、ポビドン、クロスポビドン、クロスカルメロースナトリウム、アルギン酸、カゼイン、メタクリル酸ジビニルベンゼンコポリマー、ドキュセートナトリウム、シクロデキストリン（例えば、２−ヒドロキシプロピル−デルタ−シクロデキストリン）、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート８０）、セトリミド、ＴＰＧＳ（ｄ−アルファ−トコフェリルポリエチレングリコール１０００スクシネート）、ラウリル硫酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリエチレングリコールエーテル、ポリエチレングリコールのジ−脂肪酸エステル、またはポリオキシアルキレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンエステルＴｗｅｅｎ（登録商標））、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、オレイン酸、ステアリン酸、またはパルミチン酸などの脂肪酸からのソルビタン脂肪酸エステル、マンニトール、キシリトール、ソルビトール、マルトース、ラクトース、ラクトース一水和物、またはスプレードライラクトース、スクロース、フルクトース、リン酸カルシウム、二塩基性リン酸カルシウム、三塩基性リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、デキストレート、デキストラン、デキストリン、デキストロース、酢酸セルロース、マルトデキストリン、シメチコン、ポリデキストロセム、キトサン、ゼラチン、ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、ＨＰＣ（ヒドロキシプロピルセルロース）、ヒドロキシエチルセルロースなどが含まれ得る。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、経口投与が使用され得る。経口使用のための薬学的調製物は、カプセル、錠剤、ならびにシロップ剤、エリキシル剤、及び濃縮ドロップなどの液体調製物などの従来の経口剤形に製剤化され得る。本明細書に記載の式ＩまたはＩＩの化合物は、固体賦形剤と組み合わせてよく、任意に得られた混合物を粉砕し、所望により好適な助剤を添加した後に、顆粒の混合物を処理して、例えば、錠剤、被覆錠剤、硬カプセル、軟カプセル、溶液（例えば、水性、アルコール性、または油性溶液）などを得る。好適な賦形剤は、特に、ラクトース、グルコース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖などの充填剤、セルロース調製物、例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）、及び／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ：ポビドン）、ヒマワリ油、オリーブ油、またはタラ肝油などの植物油及び動物油を含む油性賦形剤である。経口投与製剤はまた、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、もしくはアルギン酸、またはアルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤、タルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、グリセロールまたはソルビトールなどの可塑剤、スクロース、フルクトース、ラクトース、またはアスパルテームなどの甘味剤、ペパーミント、ウィンターグリーン油、またはチェリー香味料などの天然または人工の香味剤、または異なる用量または組み合わせの特定または特性化に使用され得る染料または顔料を含有し得る。好適なコーティングを有する糖衣錠コアも提供される。この目的のため、例えば、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、及び／または二酸化チタン、ラッカー溶液、及び好適な有機溶媒または溶媒混合物を任意に含有し得る濃縮糖溶液が使用され得る。
【０１０７】
経口的に使用することができる薬学的調製物には、ゼラチンから作製されるプッシュフィットカプセル（「ジェルキャップ」）、ならびにゼラチン及びグリセロールまたはソルビトールなどの可塑剤から作製される密封軟カプセルが含まれる。プッシュフィットカプセルは、ラクトースなどの充填剤、デンプンなどの結合剤、及び／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、及び任意に安定剤と混合して活性成分を含有し得る。軟カプセルにおいて、式Ｉまたは式ＩＩの化合物などの活性成分は、脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコールなどの好適な液体に溶解または懸濁され得る。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、注射（非経口投与）は、例えば、筋肉内、静脈内、腹腔内、及び／または皮下で使用され得る。注射用の本明細書に記載の式ＩまたはＩＩの化合物は、無菌液体溶液、好ましくは生理食塩水、ハンクス溶液、またはリンガー溶液などの生理学的に適合性の緩衝液または溶液で製剤化され得る。分散液はまた、グリセロール、プロピレングリコール、エタノール、液体ポリエチレングリコール、トリアセチン、及び植物油などの非水性溶液で調製され得る。溶液はまた、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどの保存剤を含有し得る。また、本明細書に記載の式ＩまたはＩＩの化合物は、例えば、凍結乾燥形態を含む固体形態で製剤化され、使用前に再溶解または懸濁され得る。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、経粘膜、局所、または経皮投与が使用され得る。本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物のそのような製剤では、浸透されるべき障壁に適切な浸透剤が使用される。そのような浸透剤は、その技術で一般に知られており、例えば、経粘膜投与の場合、胆汁酸塩及びフシジン酸誘導体を含む。また、浸透を促進するために洗浄剤が使用され得る。経粘膜投与は、例えば、鼻スプレーまたは座薬（直腸または膣）を介し得る。局所投与用の本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物の組成物は、その技術で知られている適切な担体の選択によって、油、クリーム、ローション、軟膏などとして製剤化され得る。好適な担体には、植物油または鉱物油、白色ワセリン（白色軟パラフィン）、分枝鎖脂肪または油、動物性脂肪、及び高分子量アルコール（Ｃ１２より大きい）が含まれる。いくつかの実施形態では、担体は活性成分が可溶性であるように選択される。乳化剤、安定剤、保湿剤、及び抗酸化剤、ならびに所望により色または香りを付与する薬剤も含み得る。局所適用用のクリームは、好ましくは、鉱物油、自己乳化蜜蝋、及び水の混合物であって、少量の溶媒（例えば、油）に溶解した活性成分が混合された混合物から製剤化され得る。また、経皮手段による投与は、有効成分及び任意にその技術で知られている１種以上の担体または希釈剤が含浸された包帯などの経皮パッチまたは包帯剤を含み得る。経皮送達システムの形態で投与するためには、用量投与は、用量投薬計画を通して断続的よりも連続的であろう。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、式ＩもしくはＩＩの化合物、またはそれらの組成物は、吸入剤として投与される。本明細書に記載の式ＩまたはＩＩの化合物は、乾燥粉末または好適な溶液、懸濁液、もしくはエアロゾルとして製剤化され得る。粉末及び溶液は、その技術で知られている好適な添加剤を用いて製剤化され得る。例えば、粉末はラクトースまたはデンプンなどの好適な粉末基剤を含み得、溶液はプロピレングリコール、無菌水、エタノール、塩化ナトリウム、及び他の添加剤、例えば、酸、アルカリ、及び緩衝塩を含み得る。そのような溶液または懸濁液は、スプレー、ポンプ、アトマイザー、またはネブライザーなどを介して吸入することによって投与され得る。本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物はまた、他の吸入療法と組み合わせて使用されてもよく、その吸入療法は、例えば、プロピオン酸フルチカゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、トリアムシノロンアセトニド、ブデソニド、及びフロ酸モメタゾンなどのコルチコステロイド；アルブテロール、サルメテロール、及びフォルモテロールなどのβアゴニスト；臭化イプラトロピウムまたはチオトロピウムなどの抗コリン作用薬；トレプロスチニル及びイロプロストなどの血管拡張剤；ＤＮＡアーゼなどの酵素；治療用タンパク質；免疫グロブリン抗体；一本鎖または二本鎖ＤＮＡまたはＲＮＡ、ｓｉＲＮＡなどのオリゴヌクレオチド；トブラマイシンなどの抗生物質；ムスカリン受容体アンタゴニスト、ロイコトリエンアンタゴニスト；サイトカインアンタゴニスト；プロテアーゼ阻害剤；クロモリンナトリウム；ネドクリルナトリウム；及びクロモグリク酸ナトリウムである。
【０１１１】
投与される式ＩまたはＩＩの量は、化合物活性（インビトロ、例えば、化合物ＩＣ５０ｖｓ標的、または動物有効性モデルにおけるインビボ活性）、動物モデルにおける薬物動態学的結果（例えば、生物学的半減期またはバイオアベイラビリティ）、対象の年齢、サイズ及び体重、ならびに対象に関連する障害などの要因を考慮して標準的手順によって決定され得る。これら及び他の因子の重要性は当業者によく知られている。一般に、投与量は、治療されている対象１ｋｇ当たり約０．０１〜５０ｍｇ、また約０．１〜２０ｍｇの範囲である。複数回投与を使用してよい。
【０１１２】
本明細書に記載の式ＩまたはＩＩの化合物は、同じ疾患を治療するための他の治療と組み合わせて使用され得る。そのような組み合わせでの使用は、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物及び１種以上の他の治療剤を異なる時間に投与すること、または式Ｉもしくは式ＩＩの化合物及び１種以上の他の治療を共投与することを含む。いくつかの実施形態では、本開示の化合物のうちの１種以上または組み合わせて使用される他の治療剤について用量を変更してよい。例えば、当業者によく知られている方法によって、使用される単独の化合物または治療に対しての投与量の低減である。
【０１１３】
式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、異性体、互変異性体、もしくは重水素化形態は、別の化学療法剤もしくは薬物、または同じ疾患を治療するための本明細書に記載されるキナーゼ阻害剤と組み合わせて使用されてもよい。そのような組み合わせは、固定された用量組成物であり得るか、もしくは異なる時間に投与され得るか、または式ＩもしくはＩＩの化合物と別の薬剤、薬物、もしくはキナーゼ阻害剤の同時または別々の共投与であり得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される式ＩまたはＩＩの化合物について投与量を変更してよい。例えば、当業者によく知られている方法によって、使用される単独の化合物対して投与量を低減または増加して安全性及び／または有効性を向上させる。
【０１１４】
組み合わせでの使用は、他の療法、薬物、医学的処置などとの使用を含み、他の療法または処置は、本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物とは異なる時間に（例えば、時間内（例えば、１、３、４〜２４時間）などのより短い時間内、またはより長い時間内（例えば、１〜２日、２〜４日、４〜７日、１〜４週間）、または本明細書に記載の式ＩまたはＩＩ化合物と同時に投与され得ると理解される。組み合わせでの使用はまた、他の療法または処置の前後の短い時間内またはより長時間内に投与される本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物と一緒に、１回またはまれに施される手術などの療法または医学的処置との使用を含む。いくつかの実施形態では、本開示は、異なる投与経路または同じ投与経路によって送達される本明細書に記載の式ＩまたはＩＩの化合物及び１種以上の他の薬物治療薬の送達を提供する。任意の投与経路についての組み合わせでの使用は、投与した場合に治療的活性を維持する手法で２種の化合物が化学的に連結された製剤を含む任意の製剤で、同じ投与経路で一緒に送達される本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物及び１種以上の他の薬物療法剤の送達を含む。一態様では、他の薬物療法は本明細書に記載の式Ｉまたは式ＩＩの化合物と共に投与され得る。共投与による組み合わせでの使用は、化学的に結合した化合物の共製剤または製剤の投与、または同じもしくは異なる経路で投与される互いに短い時間内（例えば、１時間以内、２時間以内、３時間以内、または最大２４時間以内）での別々の製剤中の２種以上の化合物の投与を含む。
【０１１５】
別個の製剤の共投与には、１つの装置、例えば、同じ吸入装置、同じシリンジなどを介した送達による共投与、または互いに短時間内の別々の装置からの投与が含まれる。同じ経路で送達される本明細書に記載の式ＩまたはＩＩの化合物及び１種以上の追加の薬物療法剤の共製剤には、１つの製剤中に組み合わされた別個の化合物、または化学的に結合しているが依然としてそれらの生物学的活性を維持するように改変された化合物を含む、１つの装置によって投与することができるように一緒になった材料の調製物が含まれる。そのような化学的に結合した化合物は、インビボで実質的に維持された連結部を有してよく、またはその連結がインビボで分解されて２種の活性成分を分離してもよい。
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Ｋｉｍｕｒａ，Ｅ．Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｈｉｇｈ  ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｎｃｅｒ：ｇｅｎｅｔｉｃ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｆｏｒ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＲＥＴ／ＰＴＣ−ＲＡＳ−ＢＲＡＦ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  ｐａｐｉｌｌａｒｙ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６３，１４５４−１４５７  （２００３）．
Ｌａｃｏｕｔｕｒｅ  ＭＥ，Ｄｅｓａｉ  ａ，Ｓｏｌｔａｎｉ  Ｋ，Ｐｅｔｒｏｎｉｃ−Ｒｏｓｉｃ  Ｖ，Ｌａｕｍａｎｎ  ａ  Ｅ，Ｒａｔａｉｎ  ＭＪ，ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｃｔｉｎｉｃ  ｋｅｒａｔｏｓｅｓ  ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ  ｔｏ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｗｉｔｈ  ｓｏｒａｆｅｎｉｂ，ａ  ｍｕｌｔｉｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ−ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ．Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２００６  Ｎｏｖ；３１（６）：７８３−７８５．
Ｌｅｅ，Ｓ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ．ＢＲＡＦ  ａｎｄ  ＫＲＡＳ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２２，６９４２−６９４５  （２００３）．
Ｎａｚａｒｉａｎ  Ｒ，Ｓｈｉ  Ｈ，Ｗａｎｇ  Ｑ，Ｋｏｎｇ  Ｘ，Ｋｏｙａ  ＲＣ，Ｌｅｅ  Ｈ，ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｌａｎｏｍａｓ  ａｃｑｕｉｒｅ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  Ｂ−ＲＡＦ（Ｖ６００Ｅ）ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｂｙ  ＲＴＫ  ｏｒ  Ｎ−ＲＡＳ  ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ，２０１０  Ｄｅｃ  １６；４６８（７３２６）：９７３−９７７．
Ｎｉｋｉｆｏｒｏｖａ，Ｍ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ  ａｒｅ  ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ  ｔｏ  ｐａｐｉｌｌａｒｙ  ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ａｎｄ  ａｎａｐｌａｓｔｉｃ  ｏｒ  ｐｏｏｒｌｙ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ａｒｉｓｉｎｇ  ｆｒｏｍ  ｐａｐｉｌｌａｒｙ  ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．８８，５３９９−５４０４  （２００３）．
Ｏｂｅｒｈｏｌｚｅｒ  Ｐ  ａ，Ｋｅｅ  Ｄ，Ｄｚｉｕｎｙｃｚ  Ｐ，Ｓｕｃｋｅｒ  Ａ，Ｋａｍｓｕｋｏｍ  Ｎ，Ｊｏｎｅｓ  Ｒ，ｅｔ  ａｌ．ＲＡＳ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ａｒｅ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｔｕｍｏｒｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１２  Ｊａｎ  ２０；３０（３）：３１６−３２１．
Ｐｆｉｓｔｅｒ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．ＢＲＡＦ  ｇｅｎｅ  ｄｕｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ａ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ＭＡＰＫ  ｐａｔｈｗａｙ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｌｏｗ−ｇｒａｄｅ  ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａｓ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１８，１７３９−１７４９  （２００８）．
Ｐｏｌｌｏｃｋ，Ｐ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｈｉｇｈ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｎｅｖｉ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．３３，１９−２０  （２００３）．
Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ＰＩ，Ｐｅｒｓａｕｄ  Ｙ，Ｊａｎａｋｉｒａｍａｎ  Ｍ，Ｋｏｎｇ  Ｘ，Ｎｇ  Ｃ，Ｍｏｒｉｃｅａｕ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｂｅｒｒａｎｔｌｙ  ｓｐｌｉｃｅｄ  ＢＲＡＦ（Ｖ６００Ｅ）．Ｎａｔｕｒｅ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ；  ２０１１  Ｄｅｃ  １５；４８０（７３７７）：３８７−３９０．
Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ＰＩ，Ｚｈａｎｇ  Ｃ，Ｂｏｌｌａｇ  Ｇ，Ｓｈｏｋａｔ  ＫＭ，Ｒｏｓｅｎ  Ｎ．ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｅ  ＲＡＦ  ｄｉｍｅｒｓ  ａｎｄ  ＥＲＫ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ｉｎ  ｃｅｌｌｓ  ｗｉｔｈ  ｗｉｌｄ−ｔｙｐｅ  ＢＲＡＦ．Ｎａｔｕｒｅ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ；  ２０１０  Ｍａｒ  １８；４６４（７２８７）：４２７−４３０．
Ｐｒａｈａｌｌａｄ  Ａ，Ｓｕｎ  Ｃ，Ｈｕａｎｇ  Ｓ，Ｄｉ  Ｎｉｃｏｌａｎｔｏｎｉｏ  Ｆ，Ｓａｌａｚａｒ  Ｒ，Ｚｅｃｃｈｉｎ  Ｄ，ｅｔ  ａｌ．Ｕｎｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ  ｏｆ  ｃｏｌｏｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｏ  ＢＲＡＦ（Ｖ６００Ｅ）ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｆｅｅｄｂａｃｋ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＥＧＦＲ．Ｎａｔｕｒｅ．２０１２  Ｍａｒ  １；４８３（７３８７）：１００−１０３．
Ｒａｊａｇｏｐａｌａｎ，Ｈ．ｅｔ  ａｌ．Ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ：ＲＡＦ／ＲＡＳ  ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  ｍｉｓｍａｔｃｈ−ｒｅｐａｉｒ  ｓｔａｔｕｓ．Ｎａｔｕｒｅ  ４１８，９３４  （２００２）．
Ｒｏｂｅｒｔ  Ｃ，Ａｒｎａｕｌｔ  Ｊ−Ｐ，Ｍａｔｅｕｓ  Ｃ．ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１１  Ｍａｒ；２３（２）：１７７−１８２．
Ｓｃｈｉｎｄｌｅｒ，Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  １，３２０  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ  ｔｕｍｏｒｓ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｈｉｇｈ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ  ｉｎ  ｐｌｅｏｍｏｒｐｈｉｃ  ｘａｎｔｈｏａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａ，ｇａｎｇｌｉｏｇｌｉｏｍａ  ａｎｄ  ｅｘｔｒａ−ｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ  ｐｉｌｏｃｙｔｉｃ  ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａ．Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．１２１，３９７−４０５  （２０１１）．
Ｓｅｒｒａｎｏ  Ｃ，ｅｔ  ａｌ．ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ  ａｎｄ  ＫＲＡＳ  Ｇ１２Ｓ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｎｅｒｖｅ  ｓｈｅａｔｈ  ｔｕｍｏｕｒｓ．Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０１３  Ｆｅｂ；  ６２（３）：４９９−５０４．
Ｓｉｅｖｅｒｔ，Ａ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｄｕｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ７ｑ３４  ｉｎ  ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  ｌｏｗ−ｇｒａｄｅ  ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａｓ  ｄｅｔｅｃｔｅｄ  ｂｙ  ｈｉｇｈ−ｄｅｎｓｉｔｙ  ｓｉｎｇｌｅ−ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ−ｂａｓｅｄ  ｇｅｎｏｔｙｐｅ  ａｒｒａｙｓ  ｒｅｓｕｌｔｓ  ｉｎ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ＢＲＡＦ  ｆｕｓｉｏｎ  ｇｅｎｅ．Ｂｒａｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ．１９，４４９−４５８  （２００９）．
Ｓｉｎｇｅｒ，Ｇ．ｅｔ  ａｌ．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ＢＲＡＦ  ａｎｄ  ＫＲＡＳ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｌｏｗ−ｇｒａｄｅ  ｏｖａｒｉａｎ  ｓｅｒｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｊ．Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．９５，４８４−４８６  （２００３）．
Ｓｏｍｍｅｒｅｒ，Ｆ．ｅｔ  ａｌ．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  ａｎｄ  ＫＲＡＳ２  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂａｒｒｅｔｔ’ｓ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２３，５５４−５５８  （２００４）．
Ｓｏｓｍａｎ  ＪＡ，Ｋｉｍ  ＫＢ，Ｓｃｈｕｃｈｔｅｒ  Ｌ，Ｇｏｎｚａｌｅｚ  Ｒ，Ｐａｖｌｉｃｋ  ＡＣ，Ｗｅｂｅｒ  ＪＳ，ｅｔ  ａｌ．Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  ＢＲＡＦ  Ｖ６００−ｍｕｔａｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｖｅｍｕｒａｆｅｎｉｂ．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０１２  Ｆｅｂ  ２３；３６６（８）：７０７−７１４．
Ｓｔｅｌｌｗａｇｅｎ  ＪＣ，Ａｄｊａｂｅｎｇ  ＧＭ，Ａｒｎｏｎｅ  ＭＲ，Ｄｉｃｋｅｒｓｏｎ  ＳＨ，Ｈａｎ  Ｃ，Ｈｏｒｎｂｅｒｇｅｒ  ＫＲ，ｅｔ  ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｏｔｅｎｔ  Ｂ−ＲａｆＶ６００Ｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｎ  ａｒｙｌｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ  ｈｅａｄｇｒｏｕｐ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｌｔｄ；  ２０１１  Ａｕｇ  １；２１（１５）：４４３６−４４４０．
Ｓｔｒａｕｓｓｍａｎ  Ｒ，Ｍｏｒｉｋａｗａ  Ｔ，Ｓｈｅｅ  Ｋ，Ｂａｒｚｉｌｙ−Ｒｏｋｎｉ  Ｍ，Ｑｉａｎ  ＺＲ，Ｄｕ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．Ｔｕｍｏｕｒ  ｍｉｃｒｏ−ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ  ｅｌｉｃｉｔｓ  ｉｎｎａｔｅ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ＨＧＦ  ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ．２０１２  ４８７：５００−５０４．
Ｓｕ，Ｆ．，Ｖｉｒｏｓ，Ａ．，Ｍｉｌａｇｒｅ，Ｃ．，Ｔｒｕｎｚｅｒ，Ｋ．，Ｂｏｌｌａｇ，Ｇ．，Ｓｐｌｅｉｓｓ，Ｏ．，Ｒｅｉｓ−Ｆｉｌｈｏ，Ｊ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．（２０１２）．ＲＡＳ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｓｑｕａｍｏｕｓ−ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ＢＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ，３６６（３），２０７−１５．
Ｔａｎｎａｐｆｅｌ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＢＲＡＦ  ｇｅｎｅ  ｉｎ  ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｉｎ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｇｕｔ  ５２，７０６−７１２  （２００３）．
Ｔｉａｃｃｉ，Ｅ．ｅｔ  ａｌ．ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｈａｉｒｙ−ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６４，２３０５−２３１５  （２０１１）．
Ｔｓａｉ，Ｊ．，Ｌｅｅ，Ｊ．Ｔ．，Ｗａｎｇ，Ｗ．，Ｚｈａｎｇ，Ｊ．，Ｃｈｏ，Ｈ．，Ｍａｍｏ，Ｓ．，Ｂｒｅｍｅｒ，Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．（２００８）．Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ａ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  Ｂ−Ｒａｆ  ｋｉｎａｓｅ  ｗｉｔｈ  ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｔｉｍｅｌａｎｏｍａ  ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ，１０５（８），３０４１−６．
Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ  Ｊ，Ｖｕｌｔｕｒ  Ａ，Ｌｅｅ  ＪＴ，Ｓｏｍａｓｕｎｄａｒａｍ  Ｒ，Ｆｕｋｕｎａｇａ−Ｋａｌａｂｉｓ  Ｍ，Ｃｉｐｏｌｌａ  ＡＫ，ｅｔ  ａｌ．Ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＢＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ａ  ＲＡＦ  ｋｉｎａｓｅ  ｓｗｉｔｃｈ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｃａｎ  ｂｅ  ｏｖｅｒｃｏｍｅ  ｂｙ  ｃｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＭＥＫ  ａｎｄ  ＩＧＦ−１Ｒ／ＰＩ３Ｋ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ．Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｉｎｃ．；  ２０１０  Ｄｅｃ  １４；１８（６）：６８３−６９５．
Ｗｅｂｅｒ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＢＲＡＦ  ｇｅｎｅ  ｉｎ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｅａｄ  ａｎｄ  ｎｅｃｋ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２２，４７５７−４７５９  （２００３）．
Ｘｕ，Ｘ．，Ｑｕｉｒｏｓ，Ｒ．Ｍ．，Ｇａｔｔｕｓｏ，Ｐ．，Ａｉｎ，Ｋ．Ｂ．＆  Ｐｒｉｎｚ，Ｒ．Ａ．Ｈｉｇｈ  ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  ｇｅｎｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐａｐｉｌｌａｒｙ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ａｎｄ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６３，４５６１−４５６７  （２００３）．
Ｚｉｍｍｅｒ  Ｌ，Ｈｉｌｌｅｎ  Ｕ，Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ  Ｅ，Ｌａｃｏｕｔｕｒｅ  ＭＥ，Ｂｕｓａｍ  Ｋ，Ｃａｒｖａｊａｌ  ＲＤ，ｅｔ  ａｌ．Ａｔｙｐｉｃａｌ  ｍｅｌａｎｏｃｙｔｉｃ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｎｅｗ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｍｅｌａｎｏｍａｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ＢＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２０１２  ３０：２３７５−２３８３．
【実施例】
【０１１６】
本開示に関連する実施例を以下に記載する。ほとんどの場合、代替技術が使用され得る。実施例は、例証的であることが意図され、本開示の範囲を限定または制限しない。
【０１１７】
実施例１：式Ｉ及び式ＩＩの化合物は、ベムラフェニブ及びダブラフェニブと比較して、ＲＡＳ変異体細胞株におけるｐＥＲＫを活性化しない。
ベムラフェニブを含む化合物、式Ｉの化合物、及び式ＩＩの化合物を、リン−ＥＲＫ１／２（Ｔ２０２／Ｙ２０４、ｐＥＲＫ）の化合物誘導による変化について、細胞株のパネルに対してスクリーニングした。各化合物について、活性化からのｐＥＲＫ阻害の分離（「ＥＲＫ経路阻害指数」または「ＥＰＩＩ」と呼ばれる）を、３種のＲＡＳ細胞株（マウスｃｕＳＣＣ細胞株Ｂ９、ヒト黒色腫細胞株ＩＰＣ−２９８、及びヒト大腸癌細胞株ＨＣＴ１１６、表１）における化合物の平均ｐＥＲＫ活性ＥＣ５０と、２種のＢＲＡＦＶ６００Ｅ黒色腫細胞株（Ａ３７５及びＣＯＬＯ８２９、表１）における化合物の平均ｐＥＲＫ阻害ＩＣ５０との比として表した。
【０１１８】
ベムラフェニブ及びダブラフェニブのＥＰＩＩは、それぞれ１１及び４であった。式Ｉ及び式ＩＩの化合物は、ＢＲＡＦＶ６００ＥにおいてｐＥＲＫを強力に阻害したが、本質的に、試験した濃度において、ＲＡＳ変異体細胞株におけるｐＥＲＫ活性化を示さなかった（表１及び図１（Ｂ））。ヒトＳＣＣ細胞株Ａ４３１及びヒト乳腺癌細胞株ＳＫＢＲ３は、ＲＡＳに供給する上流シグナルによって（それぞれＥＧＦＲ及びＨＥＲ２の過剰発現を通じて）ＭＡＰＫ経路活性化を達成したため、これらの細胞においても式ＩＩの化合物を評価した。ベムラフェニブとは異なり、式ＩＩの化合物は、これらの細胞においてｐＥＲＫレベルを増加しなかった。
【０１１９】
１．インビトロ及びインビボ研究
Ａ．生化学アッセイ及びカイノーム選択性プロファイリング
インビトロＲＡＦキナーゼ活性を、Ｔｓａｉら（２００８）に記載されるとおり、ビオチニル化基質ペプチドのリン酸化を測定することによって決定した。式ＩＩを、２８７キナーゼのパネルに対して、１μＭの濃度で二重に試験した。５０％超阻害されたキナーゼを、ＩＣ５０決定によって追跡した。２８７キナーゼは、カイノーム系統樹の全ての主要枝を表す。２８７キナーゼの阻害スクリーニングを、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，ＷＩ，ＵＳＡ）ＳｅｌｅｃｔＳｃｒｅｅｎ（商標）プロファイリングサービス、ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ（ＣＡ，ＵＳＡ）ＫＩＮＯＭＥＳｃａｎ（商標）サービス、及びＲｅａｃｔｉｏｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（ＰＡ，ＵＳＡ）Ｋｉｎａｓｅ  ＨｏｔＳｐｏｔ（商標）サービスにおいて、相補的パネルとしての契約下で行った。
【０１２０】
Ｂ．細胞培養、ｐＥＲＫアッセイ、成長阻害、及びＥＧＦＲシグナル伝達アッセイ
Ｂ９細胞株は、Ａｌｌａｎ  Ｂａｌｍａｉｎ（カリフォルニア大学、Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）から入手した。ＳＫ−ＭＥＬ−２３９及びＳＫ−ＭＥＬ−Ｃ３細胞株は、Ｄａｖｉｄ  Ｓｏｌｉｔ  ａｎｄ  Ｎｅａｌ  Ｒｏｓｅｎ（Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｓｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ＵＳＡ）から入手した。ＩＰＣ−２９８細胞株は、ＤＳＭＺ（Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から入手した。全ての他の細胞株は、ＡＴＣＣから入手した。化合物希釈を、１００％ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）中で行い、これらの滴定を、細胞に付加するときに培養培地中で５００倍希釈し、最終０．２％  ＤＭＳＯ濃度にした。
【０１２１】
リン−ＥＲＫ  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）アッセイ：ＥＲＫリン酸化の程度を、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）アッセイを使用して決定し、Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４におけるＥＲＫ１／２リン酸化の増加は、ドナー及びアクセプターＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ビーズを近接させ、定量化のためのシグナルを生成した。ＥＲＫ１／２のリン酸化に対する化合物処理の効果を決定するために、細胞を、９６ウェルプレートに播種し、溶解前に化合物の８点滴定で１時間、３７℃で処理した。ｐＥＲＫを検出するために、細胞溶解物を、ストレプトアビジンでコーティングしたＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ドナービーズ、抗マウスＩｇＧ  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）アクセプタービーズ、ビオチニル化抗ＥＲＫ１／２ウサギ抗体、及びＴｈｒ２０２及びＴｙｒ２０４上でリン酸化されたときにＥＲＫ１／２のみを認識するマウス抗体で培養した。ビオチニル化ＥＲＫ１／２抗体は、ストレプトアビジンでコーティングされたＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ドナービーズ及びＥＲＫ１／２（そのリン酸化状態にかかわらず）の両方に結合し、リン−ＥＲＫ１／２抗体は、アクセプタービーズ、及びＴｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４においてリン酸化されたＥＲＫ１／２に結合する。Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４におけるＥＲＫ１／２リン酸化の増加は、ドナー及びアクセプターＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ビーズを近接させ、ＥｎＶｉｓｉｏｎリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）上で定量化され得るシグナルを生成する。ＥＲＫリン酸化の阻害は、ＤＭＳＯ対照と比較してシグナルの喪失をもたらす。
【０１２２】
リン−ＥＲＫイムノブロット分析：標準技術によってウェスタンブロットを行い、Ｏｄｙｓｓｅｙ赤外線走査装置（Ｌｉ−ＣＯＲ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）上で分析した。以下の抗体、ｐＥＲＫ１／２（Ｔ２０２／Ｙ２０４）及びＥＲＫ１／２（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を使用した。
【０１２３】
成長阻害アッセイ：細胞を、３０００細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに播種し、一晩付着させた。化合物をＤＭＳＯに溶解し、３倍希釈して８点滴定を創出し、細胞に付加した。７２時間のインキュベーション後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して細胞生存性を調べた。
【０１２４】
式ＩＩは、同じアッセイにおけるベムラフェニブのＩＣ５０（それぞれ０．３３μＭ、０．６９μＭ、及び０．２５μＭ）と同等の、それぞれ０．１７μＭ、０．５３μＭ、及び０．１６μＭのＩＣ５０を有するＢＲＡＦＶ６００Ｅを発現する、２種の前述の黒色腫細胞株（Ａ３７５及びＣＯＬＯ８２９）ならびに追加のヒト大腸癌細胞株ＣＯＬＯ２０５のインビトロ成長を阻害した。
2018515570.tif 000006
【０１２５】
図１（Ａ）に示されるとおり、式ＩＩ（黒丸、最下線）及びベムラフェニブ（白丸、最上破線）は、ヒトＢＲＡＦＶ６００Ｅ黒色腫細胞ＣＯＬＯ８２９においてｐＥＲＫシグナル伝達を遮断する類似の効能を示す。
【０１２６】
図１（Ｂ）は、ＲＡＳ活性型ヒト黒色腫細胞株ＩＰＣ−２９８（ＮＲＡＳＱ６１Ｌ）において、ベムラフェニブ（白丸）が、ＭＡＰＫシグナル伝達を逆説的に活性化する一方で、式ＩＩ（黒丸）は、軽微なｐＥＲＫ増加を引き起こすことを示す。
【０１２７】
これらの結果に基づいて、式Ｉ及びＩＩの化合物は、治療的濃度で、正常な組織においてＭＡＰＫ経路に影響を及ぼすと予想されない（逆説的活性化または阻害のいずれか）。ｐＥＲＫ曲線は、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）アッセイを使用して生成した。平均±標準偏差、ｎ＝５独立実験。
【０１２８】
実施例２：式Ｉの化合物は、ＢＲＡＦＶ６００変異体細胞においてＭＥＫ及びＥＲＫリン酸化を阻害し、ＮＲＡＳ変異体細胞において逆説的ＭＡＰＫ経路活性化を呈しない
ＭＥＫ及びＥＲＫキナーゼは、成長する細胞においてＲＡＳ／ＲＡＦの下流で作用する。それらの触媒活性は、特定の残基におけるリン酸化と密接に関連している。ＭＥＫは、セリン２１７及び２２１においてＲＡＦキナーゼによってリン酸化され、増加したＭＥＫ酵素活性をもたらす。ＭＥＫは続いて、トレオニン２０２及びチロシン２０４においてＥＲＫをリン酸化し、ＥＲＫ触媒活性を誘導する。Ｖ６００において変異したＢＲＡＦを発現する細胞株は、高レベルのＭＥＫ及びＥＲＫ両方のリン酸化を呈する。第１世代ＲＡＦ阻害剤（例えば、ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）は、ＢＲＡＦ−Ｖ６００変異体細胞において、ＭＥＫ及びＥＲＫリン酸化及び活性の阻害を呈する（Ｔｓａｉ  ２００８、Ｂｏｌｌａｇ  ２０１０）。しかしながら、これらの阻害剤はまた、変異体ＲＡＳまたは高レベルの構成的に活性な成長因子受容体を発現する細胞において、ＭＥＫ及びＥＲＫの逆説的活性化を呈する（Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ２０１０、Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ２０１０）。これは特に、ベムラフェニブで治療された患者における有棘細胞癌の発達の観点から関心事である（Ｓｕ  ２０１２）。式Ｉの化合物は、ＢＲＡＦ−Ｖ６００変異体細胞においてＭＥＫ及びＥＲＫリン酸化を阻害する能力を保持する一方で、ＲＡＳ変異体細胞における経路の逆説的活性化を回避する、「パラドックスブレーカー」化合物として驚くべき活性を有することが見出された。この実施例は、式Ｉの化合物のこれらの特定の特徴を明示する。
【０１２９】
細胞におけるＥＲＫ及びＭＥＫリン酸化に対する式Ｉの化合物の効果を決定するために、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）技術を使用するアッセイが確立された。変異体ＢＲＡＦ−Ｖ６００を発現する細胞（例えば、Ａ３７５、ＣＯＬＯ８２９、ＳＫ−ＭＥＬ−３、ＨＴ−２９）において、ＢＲＡＦの構成的触媒活性は、下流エフェクターＥＲＫ及びＭＥＫの増加したリン酸化レベルをもたらす。ＢＲＡＦ−Ｖ６００の阻害は、これらの細胞におけるＥＲＫ及びＭＥＫリン酸化の阻害をもたらす。変異型ＲＡＳを発現する細胞（例えば、Ｂ９及びＩＰＣ−２９８）において、第１世代ＲＡＦ阻害剤（例えば、ベムラフェニブ）での処理は、ＥＲＫ及びＭＥＫの増加したリン酸化をもたらすが、式Ｉは、この逆説的活性化を呈しなかった。
【０１３０】
ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）技術を使用し、式Ｉが細胞におけるＥＲＫ及びＭＥＫのリン酸化に影響を及ぼす能力を定量的に測定した。化合物での処理に続いて、細胞を溶解し、溶解物の試料をアッセイプレートに移した。溶解物を、総ＥＲＫ／ＭＥＫに対して配向された抗体であって、ＥＲＫ／ＭＥＫ、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）抗マウスＩｇＧアクセプタービーズ、及びストレプトアビジンドナービーズ上の特定のリン酸化部位を認識する抗体と混合した。６８０ｎｍでのレーザー光によるドナービーズの励起時に、一重項酸素が生成された。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）アクセプタービーズが近接していない限り、この一重項酸素を急冷し、この場合、近接シグナルは５８０ｎｍで測定され得る。リン酸化ＥＲＫ／ＭＥＫの存在下で、非常に強力な近接シグナルが存在する。ＢＲＡＦ−Ｖ６００阻害剤は、ＢＲＡＦエフェクターＥＲＫ及びＭＥＫのリン酸化の減少を通じて、ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅを発現する細胞（例えば、Ａ３７５）におけるこの近接シグナルの減少に影響を及ぼす。追加として、式Ｉは、ベムラフェニブとは対照的に、変異体ＲＡＳ（例えば、Ｂ９及びＩＰＣ−２９８）を発現する細胞において、近接シグナルの増加を呈しなかった。
１．材料及び方法
Ａ．試薬
１．細胞株
Ａ３７５黒色腫、ホモ接合性ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１６１９（商標）
ＣＯＬＯ８２９黒色腫、ヘテロ接合性ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１９７４（商標）
ＨＴ−２９結腸直腸腺癌、ヘテロ接合性ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−３８（商標）
ＳＫ−ＭＥＬ−３黒色腫、ヘテロ接合性ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−６９（商標）
Ｂ９有棘細胞癌、ＨＲＡＳ−Ｑ６１Ｌを発現する。Ａｌｌａｎ  Ｂａｌｍａｉｎ，Ｐｈ．Ｄ．（カリフォルニア大学、Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ）から受領
ＩＰＣ−２９８黒色腫、ＮＲＡＳ−Ｑ６１Ｌを発現する。ＤＳＭＺ  ＃ＡＣＣ  ２５１
Ａ４３１有棘細胞癌、高レベルのＥＧＦＲ、野生型ＢＲＡＦ＆ＲＡＳを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１５５５（商標）
ＨＣＴ１１６大腸癌、高レベルのＥＧＦＲ、ＫＲＡＳ−Ｇ１３Ｄ、野生型ＢＲＡＦを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＣＬ−２４７（商標）
２．細胞培養培地
Ａ３７５＆Ａ４３１ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）、ＡＴＣＣ  ＃３０−２００２  １０％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
Ｂ９ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０３１３−０３９  １０％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％  Ｌ−グルタミン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃２５０３０−０８１  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
ＣＯＬＯ８２９＆ＩＰＣ−２９８  ＲＰＭＩ培地  １６４０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１１８７５−１１９  １０％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
ＳＫ−ＭＥＬ−３  ＭｃＣｏｙの５Ａ（改変）培地、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１６６００−１０８  １５％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
ＨＣＴ１１６＆ＨＴ−２９  ＭｃＣｏｙの５Ａ（改変）培地、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１６６００−１０８  １０％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
３．緩衝液
細胞溶解緩衝液（１０倍）使用前にＨ２Ｏで１倍に希釈されたＣｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＃９８０３
ＡｌｐｈａＬＩＳＡイムノアッセイ緩衝液（１０倍）使用前にＨ２Ｏで１倍に希釈されたＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＃ＡＬ０００Ｆ
４．抗体
ｐ４４／４２  ＭＡＰＫ（Ｅｒｋ１／２）（１３７Ｆ５）ウサギ（ビオチニル化）ドナー抗体  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＃５０１３  最終濃度＝１．２５ｎＭ
リン−ｐ４４／４２  ＭＡＰＫ（Ｅｒｋ１／２）（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）（Ｅ１０）マウスアクセプター抗体  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＃９１０６  最終濃度＝０．１７ｎＭ
リン−ＭＥＫ１／２（Ｓｅｒ２１７／２２１）（４１Ｇ９）ウサギ（ビオチニル化）ドナー抗体  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＃３９５８  最終濃度＝０．６２５ｎＭ
ＭＥＫ１／２（Ｌ３８Ｃ１２）マウスアクセプター抗体  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＃４６９４  最終濃度＝０．０５ｎＭ
５．検出試薬
ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）マウスＩｇＧ検出キット、１０，０００アッセイ点  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＃６７６０６０６Ｍ  最終濃度＝２０μｇ／ｍＬ
Ｂ．方法
１．アッセイの前日に、５０，０００細胞を、５０μＬ容量の９６ウェル組織培養物で処理したプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ＃３６１０）の各ウェルに播種した。細胞を３７℃で一晩インキュベートした。
２．化合物をＤＭＳＯ中で５００倍の最終濃度に希釈した。各化合物を、ＤＭＳＯ中１：３の希釈を使用して、８点滴定として播種した。最大濃度は約５ｍＭであった。
３．１μＬの化合物を、９６ウェルポリプロピレンプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ＃３３６３）の各ウェルに付加した。Ａ３７５、ＣＯＬＯ８２９、ＳＫ−ＭＥＬ−３、ＨＣＴ１１６、及びＨＴ−２９の場合、高対照はＤＭＳＯであり、低対照は１０μＭ  ＰＬＸ４７２０（ＣＡＳ  Ｎｏ．９１８５０５−８４−７）であった。Ｂ９及びＩＰＣ−２９８の場合、高対照は３．３３μＭ  ＰＬＸ４７２０であり、低対照はＤＭＳＯであった。
４．２４９μＬの成長培地を化合物に付加し、それらを２５０倍に希釈した。
５．５０μＬの希釈化合物を、５０μＬの細胞中に移し、５００倍の最終化合物希釈にした（最大濃度は、典型的に１０μＭである）。化合物を、細胞で１時間、３７℃でインキュベートした。
６．培地を吸引し、細胞を５０μＬの氷冷１倍細胞溶解緩衝液に溶解した。プレートを氷上で５分間インキュベートして、細胞を完全に溶解させた。
７．１倍ＡｌｐｈａＬＩＳＡイムノアッセイ緩衝液中のビオチニル化ドナー抗体、アクセプター抗体、及び抗マウスＩｇＧ  ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）アクセプタービーズの混合物を調製した。
８．５μＬの溶解物を、３８４ウェルアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＃６００５３５９）に移した。５μＬの抗体及びアクセプタービーズの混合物を付加した。プレートを回転させた。
【０１３１】
ＥＲＫ／ＭＥＫリン酸化及び成長アッセイは、式Ｉが、ＳＫ−ＭＥＬ−２３９親及びベムラフェニブ抵抗性Ｃ３細胞株の両方において、ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅの強力な阻害剤であることを決定するのに十分なデータをもたらす。特に、図２（Ａ）〜２（Ｆ）は、ベムラフェニブとは対照的に、式ＩがＲＡＳ変異体細胞株におけるｐＥＲＫ及びｐＭＥＫレベルを増加させないことを明示する。
【０１３２】
実施例３：式Ｉによる様々なＢＲＡＦ  Ｖ６００変異体タンパク質の阻害
ＢＲＡＦタンパク質を、キナーゼドメインを包含するＮ末端Ｈｉｓタグ付け断片として、Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ  Ｉｎｃ．において昆虫細胞中で生成した。Ｖ６００Ａ、Ｖ６００Ｇ、またはＶ６００Ｍ変異を含有するＢＲＡＦ（Ｓ４３２〜Ｒ７２６）をコードする構成体、及びＶ６００Ｅ、Ｖ６００Ｋ、またはＶ６００Ｒ変異を含有する構成体ＢＲＡＦ（Ｄ４４８〜Ｋ７２３）を使用した。
【０１３３】
ＢＲＡＦ
ＢＲＡＦ、ＧＳＴタグを有するＮ末端において融合された残基Ｌ４１６〜Ｈ７６６は、昆虫細胞において生成し、ＢＲＡＦは、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅから購入した（カタログ番号１４−５３０）。
【０１３４】
ＣＲＡＦ
ＣＲＡＦ、Ｙ３４０／３４１の二重リン酸化を模倣するＹ３４０Ｄ及びＹ３４１Ｄ活性化置換基を含有する残基Ｑ３０７〜Ｆ６４８は、ＧＳＴタグを有するＮ末端において融合して、昆虫細胞中で生成し、ＣＲＡＦは、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅから購入した（カタログ番号１４−３５２）。
【０１３５】
ビオチニル化−ＭＥＫ１
ＭＥＫ１、ＧＳＴタグを有するＮ末端において、及び１６アミノ酸ビオチニル化タグを有するＣ末端において融合された変異Ｋ９７Ａを無効にするキナーゼを含有する残基Ｍ１〜Ｖ３９３は、Ｐｌｅｘｘｉｋｏｎ  ＩｎｃにおいてＥ．ｃｏｌｉ中で生成した。
【０１３６】
キナーゼ緩衝液
５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５  ５０ｍＭ  ＮａＣｌ  ２ｍＭ  ＭｇＣｌ２  １ｍＭ  ＭｎＣｌ２  １ｍＭ  ＤＴＴ  ０．０１％  ＮＰ−４０
停止／検出緩衝液
【０１３７】
５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５  １００ｍＭ  ＥＤＴＡ  ０．０２％  ＢＳＡ抗リン−ＭＥＫ１（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＃９１２１）ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（商標）ドナー及びアクセプタービーズ（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ＃６７６０６１７）
１．方法
１）ＤＭＳＯ中の試験化合物を連続希釈し、１μＬ／ウェルで３８４ウェルアッセイプレートに播種した。
２）キナーゼ緩衝液中の１５μＬ／ウェルのＲＡＦ酵素及びビオチニル化−ＭＥＫ１基質を付加した。
３）キナーゼ緩衝液中の４μＬのＡＴＰ（５００μＭ）を付加した。
４）最終ＤＭＳＯは約５％であった。ＲＡＦ酵素及びＭＥＫ１の濃度を、各アッセイについて以下の表２に列挙する。これらの条件下で、酵素を基質で飽和させた。ＡＴＰは１００μＭにおいてであった。
2018515570.tif 000007
５）短い遠心沈殿の後に、プレートをほぼ室温で４０〜５０分間インキュベートした。
６）最終ＥＤＴＡ２０ｍＭの５μＬの停止緩衝液、抗リン−ＭＥＫ１  １：２，５００、ドナー／アクセプタービーズ３μｇ／ｍＬを添加した。
７）短い遠心沈殿の後に、プレートを室温で約３時間インキュベートした。
８）プレートを、Ｅｎｖｉｓｉｏｎマルチラベルプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）上で読み取った。
【０１３８】
ＩＣ５０値を、表３において以下に示す。
【０１３９】
２．結果
式Ｉは、Ｖ６００Ｅ及び全ての他の試験した非Ｖ６００Ｅ変異体ＢＲＡＦタンパク質に対して強力な阻害を及ぼす（表３）。また、野生型ＢＲＡＦ及び活性化ＣＲＡＦのキナーゼ活性も阻害する（表３）。
2018515570.tif 000008
【０１４０】
実施例４：野生型ＢＲＡＦ、ＢＲＡＦＶ６００Ｅ、及びＢＲＡＦＶ６００Ｋ細胞株を発現する細胞株における式Ｉの化合物の効能（ＩＣ５０、μＭ）細胞株
式Ｉの化合物によるＢＲＡＦＶ６００Ｅ駆動型腫瘍細胞増殖の選択阻害は、ＢＲＡＦ野生型対立遺伝子の存在下または非存在下で、変異型ＢＲＡＦ遺伝子を有する細胞のパネルにおいて測定した。ベムラフェニブ阻害に対して比較的抵抗性であったＢＲＡＦＶ６００Ｅ変異体細胞株も含めた。活性型ＢＲＡＦタンパク質の阻害を通じた式Ｉの化合物による作用の選択機序を明示するために、ＢＲＡＦにおいて変異を欠き、ＫＲＡＳ変異によって形質転換される主要細胞、または代替発癌遺伝子を含めた。要約すると、式Ｉの化合物は、変異体活性型ＢＲＡＦタンパク質を有する細胞株（Ｖ６００Ｅ）の成長の強力かつ選択的な阻害剤である。式Ｉの化合物はまた、ベムラフェニブ阻害に対して抵抗性である細胞（ＨＴ−２９）も阻害した。変異型ＫＲＡＳ対立遺伝子または他の非ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異経路を有していた細胞の増殖が影響されなかったため、式Ｉの選択性は維持された。
【０１４１】
増殖に対する式Ｉの効果を決定するために、各々ＢＲＡＦＶ６００Ｅ変異を発現する、黒色腫細胞（Ａ３７５及びＣＯＬＯ８２９）ならびに大腸癌細胞（ＣＯＬＯ２０５、ＨＴ−２９）を使用する成長アッセイを確立した。野生型ＢＲＡＦを超える選択性を示すために、成長アッセイにおいていくつかのＢＲＡＦ野生型細胞株（Ｋ５６２、ＮＯＭＯ−１、ＭＶ−４−１１、及びＭＬ−２）も調べた。成長アッセイは、Ｐｒｏｍｅｇａ  ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光細胞生存性アッセイを実装し、細胞試料中に存在するＡＴＰの量に比例する発光読出値を付与する。ＡＴＰレベルが生細胞の数と直接相関するため、発光シグナルを使用して、関心対象の細胞株の増殖を遮断する式Ｉの効能を決定することができる。
１．材料及び方法
Ａ．試薬
１．細胞株
Ａ３７５黒色腫、ホモ接合性ＢＲＡＦＶ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１６１９（商標）
ＣＯＬＯ８２９黒色腫、ヘテロ接合性ＢＲＡＦＶ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１９７４（商標）
ＣＯＬＯ２０５結腸直腸腺癌、ヘテロ接合性ＢＲＡＦＶ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＣＬ−２２２（商標）
ＨＴ−２９結腸直腸腺癌、ヘテロ接合性ＢＲＡＦＶ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−３８（商標）
Ｋ５６２慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ染色体を発現する、ＢＣＲ−ＡＢＬを創出する９；２２染色体配座を発現する。野生型ＢＲＡＦ及びＫＲＡＳも発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＣＬ−２４３（商標）
ＭＬ−２急性単球性白血病、活性型ＫＲＡＳ−Ａ１４６Ｔ及び野生型ＢＲＡＦを発現する。ＤＳＭＺ  ＃ＡＣＣ１５
ＭＶ−４−１１二重表現型Ｂ骨髄単球性白血病、ＦＬＴ−３  ＩＴＤ、野生型ＢＲＡＦ、及び野生型ＫＲＡＳを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−９５９１（商標）
ＮＯＭＯ−１急性骨髄性白血病、活性型ＫＲＡＳ−Ｇ１３Ｄ、及び野生型ＢＲＡＦを発現する。ＤＳＭＺ  ＃ＡＣＣ５４２
ＳＫ−ＭＥＬ−３黒色腫、ヘテロ接合性ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅを発現する。ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−６９（商標）
２．細胞培養培地
Ａ３７５＆ＣＯＬＯ８２９ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）、ＡＴＣＣ  ＃３０−２００２  １０％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
ＣＯＬＯ２０５＆ＮＯＭＯ−１＆ＭＬ−２  ＲＰＭＩ培地  １６４０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１１８７５−１１９  １０％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
ＨＴ−２９  ＭｃＣｏｙの５Ａ（改変）培地、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１６６００−１０８  １０％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
Ｋ５６２＆ＭＶ−４−１１  Ｉｓｃｏｖｅ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ＃１６６００−１０８
１０％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
ＳＫ−ＭＥＬ−３  ＭｃＣｏｙの５Ａ（改変）培地、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１６６００−１０８  １５％ウシ胎児血清、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０４３８−０２６  １％ペニシリン−ストレプトマイシン、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１５１４０−１２２
３．培養プレート
Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）９６ウェルクリアＶ底ポリプロピレン非処理マイクロプレート、２５／バッグ、蓋無し、非無菌（製品＃３３６３）
Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）９６ウェルフラットクリア底白色ポリスチレンＴＣ処理マイクロプレート、個別包装、蓋付き、無菌（製品＃３６１０）
４．検出試薬
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存性アッセイ、Ｐｒｏｍｅｇａ＃Ｇ７５７３
Ｂ．方法
１．３，０００細胞を、細胞株Ａ３７５、ＣＯＬＯ２０５、ＣＯＬＯ８２９、ＨＴ−２９、及びＳＫ−ＭＥＬ−３について各ウェルに播種した。２５，０００細胞を、細胞株Ｋ５６２、ＭＬ−２、ＭＶ−４−１１、及びＮＯＭＯ−１について、９６ウェル組織培養処理プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  ＃３６１０）の各ウェルに５０μＬの量で播種した。細胞を３７℃で一晩インキュベートした。
２．各試験化合物を、ＤＭＳＯ中１：３の希釈を使用して、８点滴定として播種した。最大濃度は約５ｍＭであった。ＤＭＳＯ及び式Ｉの試験化合物を、成長培地中で１：２５０に希釈する。
３．５０μＬの希釈化合物を、５０μＬの細胞中に移し、５００倍の最終化合物希釈にした（最大濃度は、典型的に１０μＭであり、ＤＭＳＯ濃度は、０．２％である）。細胞を、５％  ＣＯ２中３７℃で３日間、ＤＭＳＯ／化合物でインキュベートした。
４．Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ発光アッセイ試薬を室温にし、製品マニュアルに指示されるとおり再構成した。細胞培養物もまた、約２０〜３０分間室温にした。２５μＬ量の再構成したＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬を細胞に付加し、混合物を室温で約１０分間インキュベートして細胞の溶解を保証した。
５．発光をＴｅｃａｎ  Ｓａｆｉｒｅプレートリーダー上で測定した。
【０１４２】
２．結果
結果を以下の表４に要約する。
2018515570.tif 000009
【０１４３】
式Ｉの化合物は、ヘテロ接合性（ＣＯＬＯ２０５、ＣＯＬＯ８２９、ＨＴ−２９）及びホモ接合性ＢＲＡＦＶ６００Ｅ（Ａ３７５）発現細胞株において強力な阻害剤であった。特に、上記の結果は、式Ｉが、２種の黒色腫細胞株（Ａ３７５及びＣＯＬＯ８２９）ならびにＢＲＡＦＶ６００Ｅを発現する追加の大腸癌細胞株ＣＯＬＯ２０５及びＨＴ２９のインビトロ成長を阻害したことを明示する。式Ｉの選択性は、ＢＲＡＦ野生型細胞株Ｋ５６２、ＭＬ−２、ＮＯＭＯ−１、及びＭＶ−４−１１における阻害の欠失によって明らかに明示される。
【０１４４】
実施例５：ＫＩＡＡ１５４９−ＢＲＡＦ融合を安定して発現するＮＩＨ／３Ｔ３細胞は、ＰＬＸ４７２０の存在下で加速した腫瘍成長を示すが、式Ｉは、ＢＲＡＦ融合異種移植片の成長を阻害する
ＫＩＡＡ１５４９−ＢＲＡＦ融合を安定して発現するＮＩＨ／３Ｔ３（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１６５８（商標））細胞（融合−１、融合−２、融合−３、及び融合−４）を、バルブ／ｃ  ｎｕ／ｎｕマウスの横腹に注入した。腫瘍成長をカリパーで測定した。以下の式：体積＝１／２・長さ・幅２を使用して、楕円体腫瘍体積を計算した。
【０１４５】
４種のＫＩＡＡ１５４９−ＢＲＡＦ融合のうちの３種を発現するＮＩＨ／３Ｔ３細胞は、ＰＬＸ４７２０（ＣＡＳ  Ｎｏ．９１８５０５−８４−７、ＰＬＸ４７２０は、Ｔｓａｉら（２００８）に記載されるとおり合成され得る）食餌を投与した免疫無防備状態のバルブ／ｃ  ｎｕ／ｎｕマウスの横腹に注入したとき、インビボで抵抗性及び増加した腫瘍成長を明示した。式Ｉの化合物は、全３種の異種移植片（４つのＫＩＡＡ１５４９−ＢＲＡＦ融合のうちの３つを発現するＮＩＨ／３Ｔ３細胞）の成長を５０％以上阻害した（図３、ｙ軸は、腫瘍体積を立方ミリメートルで示し、ｘ軸は、注入以降の日数である）。これらのデータは、式Ｉの化合物が、小児星細胞腫を特徴とするＫＩＡＡ１５４９−ＢＲＡＦ融合を良好に標的とし得ることを示唆し、ＢＲＡＦ融合媒介型癌におけるこの化合物の適用に対する支持を提供する。
【０１４６】
実施例６：式Ｉ及び式ＩＩの化合物の合成例
全ての溶媒及び試薬は、商業的供給源から入手されたとおりに使用した。開始材料は、商業的供給源から購入するか、または文献に報告される方法に従って調製した。感気または感湿試薬を伴う反応を、窒素雰囲気下で実行した。ＮＭＲスペクトルを、Ｏｘｆｏｒｄ  ＡＳ４００磁石を備えるＡｇｉｌｅｎｔ  ４００ＭＨｚ  ＭＲ  ＤＤ２分光計システムを用いて重水素化溶媒中で記録した。化学シフトは、δ単位として表され、残基１Ｈ溶媒シグナルと称される。全てのカップリング定数（Ｊ）は、Ｈｅｒｔｚで報告される（ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｍ＝多重項、ｂｒ＝広範なピーク、ｄｄ＝二重項の二重項、ｄｄｄ＝二重項の二重項の二重項、ｄｍ＝多重項の二重項）。質量スペクトル分析純度は、逆モードで操作するＳｈｉｍａｄｚｕ  ２０Ａ  ＨＰＬＣシステムに連結されたＳｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣＭＳ−２０２０分光計を用いて測定した。分析純度は、最終化合物について９５％超であり、以下の高性能液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）方法を使用して決定した。緩衝液Ａ：５％アセトニトリル、９５％水、０．０１％ギ酸、緩衝液Ｂ：９５％アセトニトリル、５％水、０．０１％ギ酸、Ｓｉｌｉａ  Ｃｈｒｏｍ  ＸＤＢ  Ｃ１８、５μｍ、２．１×５０ｍｍ、６分で５〜９５％  Ｂ、１．０ｍＬ／分、２２０ｎｍ及び２５４ｎｍ、ＥＳＩポジティブ、３００〜８００ａｍｕ。
【０１４７】
２，６−ジフルオロ−３−ニトロベンゾイルクロリドの合成２，６−ジフルオロ−３−ニトロ安息香酸（２００ｇ、０．９８５ｍｏｌ）を、塩化チオニル（７３７ｍＬ、１０．２ｍｏｌ）に付加し、反応液を８０℃で１６時間撹拌した後、室温に冷却させた。揮発物を減圧下で除去し、得られる油をトルエンに溶解した。トルエンを減圧下で除去した。トルエンの付加及び除去を数回繰り返して、表題の化合物を次のステップで直接使用される油として得た（２１８ｇ）。
【０１４８】
（２，６−ジフルオロ−３−ニトロフェニル）（５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メタノンの合成ニトロメタン（１６４０ｍＬ）中の５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１６０ｇ、０．６５６ｍｏｌ）及び塩化アルミニウム（５２５ｇ、３．９４ｍｏｌ）を、室温で１時間撹拌した。次いで、ニトロメタン（１６４０ｍＬ）中の２，６−ジフルオロ−３−ニトロベンゾイルクロリド（２１８ｇ、０．９８５ｍｍｏｌ）を付加し、混合物を５０℃で４日間加熱した。０℃に冷却した後、反応液をメタノール（１．５Ｌ）の滴下添加により急冷して、沈殿物を得た。混合物を水（２Ｌ）で希釈し、濾過した。粗生成物をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで滴定し、濾過して、表題の化合物を次のステップで直接使用される褐色固体として得た（２８１ｇ）。
【０１４９】
（３−アミノ−２，６−ジフルオロフェニル）（５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メタノンの合成酢酸エチル（１０．９Ｌ）及びテトラヒドロフラン（１０．９Ｌ）中の（２，６−ジフルオロ−３−ニトロフェニル）（５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メタノン（２８１ｇ、６５６ｍｍｏｌ）に、塩化錫（ＩＩ）二水和物（５１７ｇ、２．７２ｍｏｌ）を少量ずつ、６０℃で加熱しながら付加した。反応混合物を、この温度で一晩保持した。室温に冷却した後、反応混合物を５０％飽和水性重炭酸ナトリウム（１：１水及び飽和水性重炭酸ナトリウム）で急冷し、Ｃｅｌｉｔｅで濾過して、ケークを酢酸エチルで洗浄した。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した後、減圧下で濃縮して粗生成物を得て、これをメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで滴定し、濾過して表題の化合物を褐色固体として得た（２１６ｇ、５４１ｍｍｏｌ、収率８３％、純度約８５％）。
【０１５０】
（３−アミノ−２，６−ジフルオロフェニル）（５−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メタノンの合成ジオキサン（９３０ｍＬ）及び水（４６５ｍＬ）中の（３−アミノ−２，６−ジフルオロフェニル）（５−ヨード−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メタノン（９３ｇ、２３３ｍｍｏｌ）、２−シクロプロピル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリミジン（２２９ｇ、４６６ｍｍｏｌ、純度約５０％）、炭酸カリウム（９７ｇ、７００ｍｍｏｌ）、及び［１，１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（１９．０ｇ、２３．３ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で数時間加熱した。冷却時に、この反応混合物を水で希釈し、テトラヒドロフラン及び酢酸エチルの混合物で抽出した。有機層を分離し、減圧下で濃縮して粗生成物を得て、これをジクロロメタン／メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで滴定し、濾過し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで洗浄して表題の化合物を褐色固体として得た（７１ｇ、収率７８％）。
【０１５１】
５−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）−３−［３−［［エチル（メチル）スルファモイル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−ベンゾイル］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（式ＩＩ）の合成ピリジン（１３７５ｍＬ）中の（３−アミノ−２，６−ジフルオロフェニル）（５−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メタノン（５３．８ｇ、１３８ｍｍｏｌ）に、エチル（メチル）スルファモイルクロリド（６５．０ｇ、４１２ｍｍｏｌ）を付加し、反応物を６５℃で一晩加熱した。揮発物を減圧下で除去し、残渣を水と酢酸エチル／テトラヒドロフランとに分割した。有機層を減圧下で濃縮して粗生成物を得て、これをシリカゲルの上に装填した乾燥させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、０〜１０％メタノール／ジクロロメタン（２回）で溶出した後、酢酸エチル（１回）で溶出した。所望の生成物を含有する分画を貯留し、減圧下で濃縮した。結果として得られる固体をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで滴定し、濾過して、表題の化合物を白色固体として得た（２１ｇ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）１３．０７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、９．７１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、９．０３（ｓ，２Ｈ）、８．７６（ｓ，１Ｈ）、８．６８（ｓ，１Ｈ）、８．１９（ｓ，１Ｈ）、７．５９（ｄｄｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，９．０Ｈｚ，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７（ｄｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１２（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、２．７４（ｓ，３Ｈ）、２．２９（ｍ，１Ｈ）、１．０９（ｍ，４Ｈ）、０．９５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ：５１３．３  （Ｍ＋Ｈ＋）。
【０１５２】
（３Ｒ）−Ｎ−［３−［５−（２−シクロプロピルピリミジン−５−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボニル］−２，４−ジフルオロ−フェニル］−３−フルオロ−ピロリジン−１−スルホンアミド（式Ｉ）の合成この材料は、エチル（メチル）スルファモイルクロリドの代わりに（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−スルホニルクロリドを使用して、式ＩＩに類似する方法で調製した。生成物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、凍結乾燥後に表題の化合物を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）１３．０５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、９．８４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、９．０１（ｓ，２Ｈ）、８．７３（ｓ，１Ｈ）、８．６７（ｓ，１Ｈ）、８．１５（ｓ，１Ｈ）、７．６２（ｄｄｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，９．０Ｈｚ，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．２６（ｄｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．２９（ｄｍ，Ｊ＝５１．６Ｈｚ（Ｈ−Ｆ），１Ｈ）、３．４３（ｄｍ，２Ｈ）、３．３３（ｍ，２Ｈ）、２．２７（ｍ，１Ｈ）、２．０４（ｍ，２Ｈ）、１．０６（ｍ，４Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ：５４２．９（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０１５３】
本明細書で引用される全ての特許及び他の参照文献は、本開示が関係する当業者の技術レベルの表示であり、いかなる表及び図面を含めて、各参照文献が参照によりその全体が個別に組み込まれていたかのように、参照によりそれら全体が組み込まれる。
【０１５４】
当業者であれば、本開示が、述べられる目標及び利点、ならびにそれに固有のものを得るために良好に適応されることを容易に理解するであろう。現在好ましい実施形態の代表として本明細書に記載される方法、変型、及び組成物は、例示的であり、本開示の範囲に対する限定として意図されない。本開示の趣旨に包含される、そこでの変更及び他の使用は、当業者に想到され、特許請求の範囲によって定義される。
【０１５５】
本明細書で例証的に説明される本開示は、本明細書で具体的に開示されていないいかなる要素（複数可）、限定（複数可）の非存在下で適切に実施され得る。故に、例えば、本明細書における各例において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」、及び「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」という用語のうちのいずれかは、他の２つの用語のいずれかと置き換えることができる。故に、本開示の実施形態について、これらの用語のうちの１つを使用して、本開示は、これらの用語のうちの１つが、これらの用語のうちの別のものと置き換えられる別の実施形態も含む。各実施形態において、これらの用語は、それらの確立された意味を有する。故に、例えば、一実施形態は、一連のステップを「含む」方法を包含し得、別の実施形態は、同じステップ「から本質的になる」方法を包含し、第３の実施形態は、同じステップ「からなる」方法を包含する。用いられてきた用語及び表現は、限定ではなく説明の目的で使用され、図示及び説明される特徴のいかなる相当物またはその部分も除いて、そのような用語及び表現の使用において意図はないが、様々な修正が、請求される本開示の範囲内で可能であると認識される。故に、本開示は、好ましい実施形態及び任意の特徴によって具体的に開示されてきたが、本明細書に開示される概念の修正及び変型は、当業者によって行われ得ること、ならびにそのような修正及び変型が、添付の特許請求の範囲によって定義されるとおり、本開示の範囲内であると考えられることが理解されるべきである。
【０１５６】
更に、本開示の特徴または態様が、マーカッシュ群または代替例の他の分類に関して説明される場合、当業者は、本開示がまた、それによりマーカッシュ群または他の群の任意の個別のメンバーまたはメンバーの下位群に関して説明されることを認識するであろう。
【０１５７】
また別途指示されない限り、様々な数値が実施形態について提供される場合、追加の実施形態は、ある範囲の終点として任意の２つの異なる値を取ることによって説明される。そのような範囲もまた、記載される開示の範囲内である。
【０１５８】
故に、追加の実施形態は、本開示の範囲内であり、以下の特許請求の範囲内である。
【図１（Ａ）】
2018515570.tif 000011
【図１（Ｂ）】
2018515570.tif 000012
【図２（Ａ）】
2018515570.tif 000013
【図２（Ｂ）】
2018515570.tif 000014
【図２（Ｃ）】
2018515570.tif 000015
【図２（Ｄ）】
2018515570.tif 000016
【図２（Ｅ）】
2018515570.tif 000017
【図２（Ｆ）】
2018515570.tif 000018
【図３】
2018515570.tif 000019
【国際調査報告】
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2018515570.tif 000021
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