(57)【要約】  本明細書では、アンジェルマン症候群および／またはプラダー・ウィリー症候群を処置する方法であって、処置を必要とする対象に有効量のＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む方法が提供される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
アンジェルマン症候群またはプラダー・ウィリー症候群を処置する方法であって、かかる処置を必要とする対象に治療有効量のＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む方法。
【請求項２】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、Ｔ型カルシウムチャネルを選択的に標的とするカルシウムチャネルアンタゴニストである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが小分子である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが抗体である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがｓｉＲＮＡである、請求項１から３に記載の方法。
【請求項６】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．１を選択的に標的とする、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．２を選択的に標的とする、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．３を選択的に標的とする、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
細胞の膜電位が約−６０ｍＶから約−３０ｍＶの範囲、例えば約−４０ｍＶであるとき、前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、前記細胞でＴ型カルシウムチャネルをアンタゴナイズする、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、ミベフラジル、ＭＫ−８９９８、ジルチアゼム、ニフェジピン、ニトレンジピン、ニモジピン、ニルジピン、ニグルジピン、ニカルジピン、ニソルジピン、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、リオシジン、ガロパミル、ベラパミル、チアパミル、ピモジド、チオリダジン、ＮＮＣ５５−０３９６、ＴＴＬ−１１７７、アナンダミド、ピモジド、ペンフルリドール、クロピモジド、フルスピリレン、ハロペリドール、ドロペリドール、ベンペリドール、トリペリドール、メルペロン、レンペロン、アザペロン、ドンペリドン、アントラフェニン、アリピペラゾール、シプロフロキサシン、ダピプラゾール、ドロプロピジン、エトペリドン、イトラコナゾール、ケトコナゾール、レボドロプロピジン、メピプラゾール、ナフトピジル、ネファゾドン、ニアプラジン、オキシペルチン、ポサコナゾール、トラゾドン、ウラピジル、ベスナリノン、マニジピン、ニルバジピン、ベニジピン、エホニジピン、フルナリジン、アナンダミド、ロメリジン、フェニトイン、ゾニサミド、Ｕ−９２０３２、テトラロール、ミベフラジル、ＮＮＣ５５−０３９６、ＴＴＡ−Ａ２、ＴＴＡ−Ａ８、ＴＴＡ−Ｐ１、４−アミノメチル−４−フルオロピペリジン（ＴＴＡ−Ｐ２）、ＴＴＡ−Ｑ３、ＴＴＡ−Ｑ６、ＭＫ−５３９５、ＭＫ−６５２６、ＭＫ−８９９８、Ｚ９４１、Ｚ９４４、フェンスクシミド、メスクシミド、デスメチルメトスクシミド、エホニジピン、トリメタジオン、ジメタジオン、ＡＢＴ−６３９、ＴＴＬ−１１７７、ＫＹＳＯ５０４４、ニッケルおよびクルトキシン、ならびにそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、ミベフラジル、ＭＫ−８９９８、エホニジピン、ＴＴＬ−１１７７およびニッケル、ならびにそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、ミベフラジルまたはＭＫ−８９９８である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
疾患がアンジェルマン症候群である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
疾患がプラダー・ウィリー症候群である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記処置が、前記対象で少なくとも１つの神経症状を低減または改善することを含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記神経症状が、活動過多、異常な睡眠パターン、発作、ジストニアおよび運動失調の１つまたは複数を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記処置が、前記対象の発作の頻度を減少させることを含む、請求項１から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記処置が、前記対象の発作の重症度を低下させることを含む、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記処置が、前記対象のジストニアの頻度を減少させることを含む、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記処置が、前記対象のジストニアの重症度を低下させることを含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記処置が、前記対象の運動失調の頻度を減少させることを含む、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記処置が、前記対象の運動失調の重症度を低下させることを含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記処置が、前記対象における認知を改善するかまたは認知障害を減少させることを含む、請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記処置が、前記対象における記憶を改善するかまたは記憶障害を減少させることを含む、請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記処置が、前記対象における注意を改善するかまたは注意欠陥を減少させることを含む、請求項１から２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記処置が、前記対象の肥満を減少させることを含む、請求項１から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記処置が、前記対象の体重増加の量または速度を減少させることを含む、請求項１から２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記処置が、前記対象の体重を減少させることを含む、請求項１から２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記処置が、前記対象の空腹感を減少させるかまたは満腹感を増加させることを含む、請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記選択的Ｔ型カルシウムチャネル調節物質が実質的に血液脳関門を通過する、請求項１から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記選択的Ｔ型カルシウムチャネル調節物質が実質的に血液脳関門を通過しない、請求項１から２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記対象に更なる治療薬を投与することを更に含む、請求項１から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記更なる治療薬が更なるＴ型カルシウムチャネル阻害剤である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記更なる治療薬が抗痙攣剤である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
物理療法、作業療法、コミュニケーション療法および行動療法からなる群から選択される更なる療法を行うことを更に含む、請求項１から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
それを必要とする対象におけるＣａＭＫＩＩ自己リン酸化に関連する疾患または障害を処置する方法であって、前記対象にＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む方法。
【請求項３７】
前記疾患または障害がアンジェルマン症候群である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記疾患または障害がプラダー・ウィリー症候群である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、Ｔ型カルシウムチャネルを選択的に標的とするカルシウムチャネルアンタゴニストである、請求項３６から３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが小分子である、請求項３６から３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが抗体である、請求項３６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがｓｉＲＮＡである、請求項３６から４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．１を選択的に標的とする、請求項３６から４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．２を選択的に標的とする、請求項３６から４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．３を選択的に標的とする、請求項３６から４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
細胞の膜電位が約−６０ｍＶから約−３０ｍＶの範囲、例えば約−４０ｍＶであるとき、前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、前記細胞でＴ型カルシウムチャネルをアンタゴナイズする、請求項３６から４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
それを必要とする対象における肥満を処置する方法であって、前記対象にＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む方法。
【請求項４８】
前記処置が、前記対象の体重を減少させることを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記処置が、前記対象の体重増加の量または速度を減少させることを含む、請求項４７または４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記処置が、前記対象の体重を減少させることを含む、請求項４７から４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記処置が、前記対象の空腹感を減少させるかまたは満腹感を増加させることを含む、請求項４７から５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、Ｔ型カルシウムチャネルを選択的に標的とするカルシウムチャネルアンタゴニストである、請求項４７から５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが小分子である、請求項４７から５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５４】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが抗体である、請求項４７から５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５５】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがｓｉＲＮＡである、請求項４７から５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．１を選択的に標的とする、請求項４７から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．２を選択的に標的とする、請求項４７から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＣａＶ３．３を選択的に標的とする、請求項４７から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
細胞の膜電位が約−６０ｍＶから約−３０ｍＶの範囲、例えば約−４０ｍＶであるとき、前記Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、前記細胞でＴ型カルシウムチャネルをアンタゴナイズする、請求項４７から５８のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、参照により全開示内容が本明細書に組み込まれる、２０１５年１０月２２日に出願の米国仮特許出願第６２／２４５，０３８号の利益を主張する。
【０００２】
技術分野
本開示は、医薬化合物を投与することによる疾患の処置に関する。具体的には、本開示は、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することによる、アンジェルマン症候群およびプラダー・ウィリー症候群の処置に関する。
【背景技術】
【０００３】
アンジェルマン症候群は、遺伝子の父性コピーのインプリントを通じたサイレンシングによる、母性遺伝の第１５番染色体上の遺伝子の欠失または不活性化に起因する遺伝病である。当該症候群は、知性および発達上の障害、睡眠障害、発作、ぎくしゃくした挙動、ならびに頻繁な笑いまたは微笑みを伴う幸せな態度によって特徴付けられる。アンジェルマン症候群の影響を受ける人数は男性と女性で同等であり、一般集団のうちの約１５，０００分の１の疾患率である。
【０００４】
アンジェルマン症候群は、最も一般には第１５番染色体の母親由来領域の欠失による損失により生じるが、その領域の片親性ダイソミー、転座または一遺伝子変異によっても生じる。アンジェルマン症候群にとって決定的であると理解されている染色体の領域においては、母親由来であるか父親由来であるかにより特定の遺伝子の発現が非常に異なり、それはＤＮＡメチル化を通じた性特異的な後成的インプリンティングに起因する。正常な個体においては、ユビキチン経路の一部である遺伝子ＵＢＥ３Ａ母性対立遺伝子が発現し、父性対立遺伝子は発育過程の脳にいて特異的にサイレンシングを受ける。母性由来部分が喪失または変異するとき、アンジェルマン症候群が生じる。父性由来部分が喪失または変異する場合、関連する症候群（プラダー・ウィリー症候群）が生じる。
【０００５】
アンジェルマン症候群をもたらす最も一般的な遺伝的障害は、インプリントされた父性の脳領域のＵＢＥ３Ａの発現の欠如を生じさせる、染色体領域１５ｑ１１〜１３の約４メガベースの母性部分の欠失である。ＵＢＥ３ＡはＥ６−ＡＰユビキチンリガーゼをコードする。母性のＵＢＥ３Ａを発現しないマウスは、海馬依存的な文脈的恐怖条件付けを伴う学習パラダイムにおける海馬記憶形成の欠如を含む重度の機能障害を示す。海馬領域ＣＡ１の長期シナプス可塑性の維持もインビトロで阻害される。
【０００６】
アンジェルマン症候群の症候としては、機能的に重度の発育遅延、言語機能障害（最小限の言語使用または言語使用不能）、運動およびバランスの障害（足取りの運動失調および／または四肢の震えを含む）、頻繁な笑い／微笑み、外観上幸せそうな態度、興奮し易い人格（しばしば手をバタバタさせる挙動を示す）、運動過剰的な行動、ならびに集中力の欠如が挙げられる。頻繁に観察される症状（８０％またはそれ超のケース）としては、頭囲の遅れた不相応な成長、発作および異常な脳波（ＥＥＧ）が挙げられる。ＥＥＧにおいて、前頭部誘導における最も目立つ非常に大規模な振幅の２〜３Ｈｚのリズム、対称な４〜６Ｈｚの高電圧のリズム、ならびに後頭部誘導におけるスパイクおよびシャープな波により中断される、眼閉鎖と関係する３〜６Ｈｚの活動、の３つの異なった発作間パターンがアンジェルマン症候群で見られる。更に、アンジェルマン症候群と関連して生じる症状のうち、約２０〜８０％のケースとして、後頭部扁平、後頭動脈溝、舌突出、摂食障害、上顎前突（prognathia）、大きな口（wide mouth）、流涎、おしゃぶり行動（mouthing behavior）、色素脱失症、極度に活動性の下肢深部腱反射、熱に対する感覚過敏、異常な睡眠パターン、水に対する感応、異常な摂食関連の行動、肥満、脊柱側弯症および便秘が挙げられる。癲癇は典型的には３歳までにアンジェルマン症候群を有する患者８５％で生じる一方、１歳までに発作を示す患者は２５％未満に留まる。発作のタイプとしては、異型欠神、全般化強直性間代性発作、強直性発作およびミオクローヌス発作が挙げられる。一部の患者は、複数のタイプの発作を示す。
【０００７】
アンジェルマン症候群に対する治療法は、現在存在しない。アンジェルマン症候群は、複数の種類の発作をもたらしうるため、癲癇を処置するための適切な鎮痙性の薬物投与の選択は困難となりうる。アンジェルマン症候群は睡眠パターンに影響を及ぼすため、メラトニンが睡眠促進に用いられる場合がある。また規則的な便通を促すために穏やかな緩下薬がしばしば用いられる。薬物投与以外に、物理療法が、関節の可動性改善および関節の硬化防止に用いられる。言語聴覚療法が、コミュニケーション問題への対処に一般的に用いられる。
【０００８】
Ｔ型カルシウムチャネルは膜脱分極の間に開口する低電圧活性化型カルシウムチャネルであり、活動電位または脱分極シグナル後に細胞へのカルシウム流入を媒介する。心筋および平滑筋内に存在することが知られているＴ型カルシウムチャネルは、更に、中枢神経系内の多くのニューロン細胞にも存在する。Ｔ型カルシウムチャネル（一過性開口型カルシウムチャネル）は、より陰性側の膜電位によって活性化される能力、それらの単一チャネルコンダクタンスの小ささ、および、Ｌ型カルシウムチャネルを標的とする従来のカルシウムチャネルアンタゴニスト薬に対するそれらの非反応性により、Ｌ型カルシウムチャネル（長時間作用性カルシウムチャネル）とは異なっている。
【０００９】
Ｔ型カルシウムチャネルは、小規模な膜脱分極の後で開口する。Ｔ型カルシウムチャネルは、主にニューロンおよび心筋細胞の機能に関連して研究されており、癲癇や心機能不全などの過興奮性障害との関係が知られている。電位開口型カルシウムチャネルは、非興奮性細胞では一般的に発現しないが、Ｔ型カルシウムチャネルが非興奮性系列の癌細胞で発現することを示す証拠が存在する。
【００１０】
Ｔ型カルシウムチャネルは、小規模な膜脱分極により活性化、不活性化され、また遅い非活性化速度を示す。ゆえに、これらのチャネルは低膜電位で脱分極電流を担い、細胞の「ウインドウ」電流（window current）を媒介することができるが、この電流は低膜電位または静止膜電位における、活性化と定常状態不活性化との間での電圧の重なり範囲内で生じる。Ｔ型カルシウムチャネルは、ウインドウ電流を非刺激または静止膜電位に維持することができ、それにより、不活性化されない一部のチャネルによる持続的なカルシウム内向き流を可能にする。ウインドウ電流の媒介により、非刺激または静止細胞条件下で、ニューロンなどの電気的な発火細胞および非興奮性組織の両方における、Ｔ型カルシウムチャネルによる細胞内カルシウムレベルの制御が可能となる。
【００１１】
電位開口型カルシウムチャネルは、幾つかのサブユニットから構成される。α１サブユニットは、チャネルの膜貫通孔を形成する主なサブユニットである。α１サブユニットはまた、カルシウムチャネルのタイプを決定する。あるタイプのカルシウムチャネルのみに存在するβ、α２δおよびγサブユニットは、チャネルにおける第２の役割を果たす補助サブユニットである。α１サブユニットは４つのドメイン（Ｉ〜ＩＶ）から構成され、各ドメインが６つの膜貫通部分（Ｓ１〜Ｓ６）を含み、各ドメインのＳ５およびＳ６セグメント間の疎水性ループがチャネルの孔を形成する。Ｔ型カルシウムチャネルのサブタイプは、表１に示すような特定のα１サブユニットによって定義される。
【００１２】
【表１】
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【００１３】
Ｃａ２＋／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ（カルモジュリンキナーゼＩＩまたはＣａＭＫＩＩ）は、Ｃａ２＋／カルモジュリン複合体によって制御されるセリン／スレオニン特異的プロテインキナーゼである。ＣａＭＫＩＩは、２８のアイソフォームを有し、多くのシグナリングカスケードに関係し、学習および記憶の調節物質である場合があり、また心筋細胞におけるホメオスタシスおよび再吸収、上皮における塩化物イオン輸送、陽性Ｔ細胞の選択およびＣＤ８  Ｔ細胞活性化において役割を果たしうる。ＣａＭＫＩＩの誤制御は、アルツハイマー病、アンゲルマン症候群および心臓の不整脈をもたらす場合がある。ＣａＭＫＩＩはまた、長期増強（ＬＴＰ）、すなわち記憶のプロセスに関与しうる活性化シナプスを強化する分子的プロセスに関連しており、したがって、記憶形成にとって重要であると考えられる。
【００１４】
カルシウムおよびカルモジュリンに対するＣａＭＫＩＩ酵素の感受性は、可変的および自己会合ドメインにより左右される。最初に、当該酵素は、カルシウム／カルモジュリン複合体と結合することにより活性化され、それはスレオニン２８６部位のリン酸化、および触媒ドメインの活性化をもたらす。活性化された後、カルシウムおよびカルモジュリンが高レベルで蓄積すると、自己リン酸化が生じ、それによりＣａＭＫＩＩ酵素の持続的な活性化が生じうる。ホロ酵素が環構造で累積することにより、これらの環の近接した位置関係により隣接するＣａＭＫＩＩ酵素のリン酸化が可能となり、それにより自己リン酸化が強化される。スレオニン２８６残基の脱リン酸化により、ＣａＭＫＩＩが不活性化される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明の開示は、アンジェルマン症候群またはプラダー・ウィリー症候群を処置する方法を提供する。方法は、かかる処置を必要とする対象に治療有効量のＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む。また、アンジェルマン症候群またはプラダー・ウィリー症候群を処置するための、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストの使用も提供される。本開示はまた、アンジェルマン症候群またはプラダー・ウィリー症候群を処置するための医薬の製造におけるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストの使用を提供する。
【００１６】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｔ型カルシウムチャネルを選択的に標的とするカルシウムチャネルアンタゴニストである。
【００１７】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは小分子である。
【００１８】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは抗体である。
【００１９】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはｓｉＲＮＡである。
【００２０】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．１を選択的に標的とする。
【００２１】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．２を選択的に標的とする。
【００２２】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．３を選択的に標的とする。
【００２３】
幾つかの実施形態では、細胞の膜電位が約−６０ｍＶから約−３０ｍＶの範囲、例えば約−４０ｍＶであるとき、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、細胞でＴ型カルシウムチャネルをアンタゴナイズする。
【００２４】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ミベフラジル、ジルチアゼム、ニフェジピン、ニトレンジピン、ニモジピン、ニルジピン、ニグルジピン、ニカルジピン、ニソルジピン、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、リオシジン、ガロパミル、ベラパミル、チアパミル、ピモジド、チオリダジン、ＮＮＣ５５−０３９６、ＴＴＬ−１１７７、アナンダミド、ピモジド、ペンフルリドール、クロピモジド、フルスピリレン、ハロペリドール、ドロペリドール、ベンペリドール、トリペリドール、メルペロン、レンペロン、アザペロン、ドンペリドン、アントラフェニン、アリピペラゾール、シプロフロキサシン、ダピプラゾール、ドロプロピジン、エトペリドン、イトラコナゾール、ケトコナゾール、レボドロプロピジン、メピプラゾール、ナフトピジル、ネファゾドン、ニアプラジン、オキシペルチン、ポサコナゾール、トラゾドン、ウラピジル、ベスナリノン、マニジピン、ニルバジピン、ベニジピン、エホニジピン、フルナリジン、アナンダミド、ロメリジン、フェニトイン、ゾニサミド、Ｕ−９２０３２、テトラロール（tetralol）、ミベフラジル、ＮＮＣ５５−０３９６、ＴＴＡ−Ａ２、ＴＴＡ−Ａ８、ＴＴＡ−Ｐ１、４−アミノメチル−４−フルオロピペリジン（ＴＴＡ−Ｐ２）、ＴＴＡ−Ｑ３、ＴＴＡ−Ｑ６、ＭＫ−５３９５、ＭＫ−６５２６、ＭＫ−８９９８、Ｚ９４１、Ｚ９４４、エトスクシミド、フェンスクシミド、メスクシミド（mesuximide）、デスメチルメトスクシミド（desmethylmethsuximide）、エホニジピン、トリメタジオン、ジメタジオン、ＡＢＴ−６３９、ＴＴＬ−１１７７、ＫＹＳＯ５０４４、ニッケルおよびクルトキシン（kurtoxin）、ならびにそれらの組合せからなる群から選択される。
【００２５】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ミベフラジル、エホニジピン、ＴＴＬ−１１７７およびニッケル、ならびにそれらの組合せからなる群から選択される。
【００２６】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはミベフラジルである。
【００２７】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＭＫ−８９９８である。
【００２８】
幾つかの実施形態では、疾患はアンジェルマン症候群である。
【００２９】
幾つかの実施形態では、疾患はプラダー・ウィリー症候群である。
【００３０】
幾つかの実施形態では、処置は、活動過多、異常な睡眠パターン、発作および運動失調の１つまたは複数でありうる神経症状を低減または改善することを含む。
【００３１】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の発作の頻度を減少させることを含む。
【００３２】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の発作の重症度を低下させることを含む。
【００３３】
幾つかの実施形態では、処置は、対象のジストニアの頻度を減少させることを含む。
【００３４】
幾つかの実施形態では、処置は、対象のジストニアの重症度を低下させることを含む。
【００３５】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の運動失調の頻度を減少させることを含む。
【００３６】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の運動失調の重症度を低下させることを含む。
【００３７】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の振戦（例えば四肢の震え）の頻度を減少させることを含む。
【００３８】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の振戦（例えば四肢の震え）の重症度を低下させることを含む。
【００３９】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の運動失調の重症度を低下させることを含む。
【００４０】
幾つかの実施形態では、処置は、対象における認知を改善するかまたは認知障害を減少させることを含む。
【００４１】
幾つかの実施形態では、処置は、対象における記憶を改善するかまたは記憶障害を減少させることを含む。
【００４２】
幾つかの実施形態では、処置は、対象における注意を改善するかまたは注意欠陥を減少させることを含む。
【００４３】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の肥満を減少させることを含む。
【００４４】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の体重増加の量または速度を減少させることを含む。
【００４５】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の体重を減少させることを含む。
【００４６】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の空腹感を減少させるかまたは満腹感を増加させることを含む。
【００４７】
幾つかの実施形態では、選択的なＴ型カルシウムチャネル調節物質は、実質的に血液脳関門を通過する。他の実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネル調節物質は、血液脳関門を実質的に通過しない。
【００４８】
幾つかの実施形態では、処置は、対象に更なる治療薬を投与することを含み、その治療薬は例えば、更なるＴ型カルシウムチャネル阻害剤または抗痙攣剤でありうる。
【００４９】
幾つかの実施形態では、処置は、更なる療法を行うことを含み、その療法は例えば、物理療法、作業療法、コミュニケーション療法および行動療法からなる群から選択されうる。
【００５０】
本開示は、ＣａＭＫＩＩ自己リン酸化を伴う疾患または障害を処置する方法を提供する。方法は、かかる処置を必要とする対象に治療有効量のＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む。また、ＣａＭＫＩＩ自己リン酸化を伴う疾患または障害を処置するための、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストの使用も提供される。本開示はまた、ＣａＭＫＩＩ自己リン酸化を伴う疾患または障害を処置するための医薬の製造におけるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストの使用を提供する。
【００５１】
幾つかの実施形態では、疾患または障害はアンジェルマン症候群またはプラダー・ウィリー症候群である。
【００５２】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｔ型カルシウムチャネルを選択的に標的とするカルシウムチャネルアンタゴニストである。
【００５３】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは小分子である。
【００５４】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは抗体である。
【００５５】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはｓｉＲＮＡである。
【００５６】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．１を選択的に標的とする。
【００５７】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．２を選択的に標的とする。
【００５８】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．３を選択的に標的とする。
【００５９】
幾つかの実施形態では、細胞の膜電位が約−６０ｍＶから約−３０ｍＶの範囲、例えば約−４０ｍＶであるとき、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、細胞でＴ型カルシウムチャネルをアンタゴナイズする。
【００６０】
また、それを必要とする対象における肥満を処置する方法であって、対象にＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む方法が提供される。
【００６１】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の体重を減少させることを含む。
【００６２】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の体重増加の量または速度を減少させることを含む。
【００６３】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の体重を減少させることを含む。
【００６４】
幾つかの実施形態では、処置は、対象の空腹感を減少させるかまたは満腹感を増加させることを含む。
【００６５】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｔ型カルシウムチャネルを選択的に標的とするカルシウムチャネルアンタゴニストである。
【００６６】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは小分子である。
【００６７】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは抗体である。
【００６８】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはｓｉＲＮＡである。
【００６９】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．１を選択的に標的とする。
【００７０】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．２を選択的に標的とする。
【００７１】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．３を選択的に標的とする。
【００７２】
幾つかの実施形態では、細胞の膜電位が約−６０ｍＶから約−３０ｍＶの範囲、例えば約−４０ｍＶであるとき、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、細胞でＴ型カルシウムチャネルをアンタゴナイズする。
【００７３】
本明細書に記載のものと類似するかまたは同等の方法および材料が、本発明の実施または試験に使用できるが、適切な方法および材料については後述する。本明細書に記載の全ての刊行物、特許出願、特許および他の参考文献は、参照によりそれらの全開示内容が組み込まれる。参考文献の最初のページ番号のみが引用される場合には、その参照はその文献の全ページに及ぶことを理解すべきである。不一致が生じた場合には、定義を含め、本明細書が優先する。更に、材料、方法および実施例は例示のみを目的とし、限定を目的とするものではない。
【００７４】
本発明の他の特徴および効果は、以下の詳細な説明、および特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００７５】
【図１】ミベフラジル（１０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ）またはＭＫ−８９９８（別名「ＣＸ−８９９８」）（１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ）による処置を受けたＵＢＥ３／１２９ｓｖマウスを用いた聴原性癲癇試験の結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００７６】
本発明の開示は、Ｔ型電位開口型カルシウムチャネルがアンジェルマン症候群に関係していることを記載する。本発明の開示は更に、Ｔ型電位開口型カルシウムチャネルの調節がアンジェルマン症候群およびプラダー・ウィリー症候群などの関連する状態の処置にとって効果的でありうることを記載する。
【００７７】
いかなる理論にも拘束されないが、本明細書に記載の、ミベフラジルなどのＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｃａ２＋／カルモジュリン複合体により制御され、様々なシグナリングカスケードに関係するセリン−スレオニン特異的プロテインキナーゼであるＣａ２＋／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ（すなわちＣａＭＫＩＩ）の阻害的な自己リン酸化を阻害することができる。ニューロン脱分極は、ＣａＭＫＩＩ自己リン酸化のレベルを上昇させ、また細胞外カルシウムのキレート化はベースのＣａＭＫＩＩ自己リン酸化を強力に減少させ、サイトゾル画分における全ＣａＭＫＩＩのレベルを上昇させる。ミベフラジル（５μＭ）またはＮｉＣｌ２（１００μＭ）によるＴ型カルシウムチャネルの阻害が、ＣａＭＫＩＩαのスレオニン自己リン酸化を、それぞれ３７％または３５％と顕著に減少させ、線状体におけるベースのＣａＭＫＩＩα活性化および自己リン酸化が、Ｔ型カルシウムチャネル阻害剤を通じたカルシウム流入により少なくとも部分的に支えられることが示唆される旨、示されている。Pasek et al., Mol. Cell. Neurosci., 2015, 68. 234-43。
【００７８】
ＣａＭＫＩＩの制御不全は、限定されないがアンジェルマン症候群、プラダー・ウィリー症候群、脳虚血およびアルツハイマー病などの神経障害を伴い、ＣａＭＫＩＩ自己リン酸化のベースレベルの維持にはＴ型カルシウムチャネル活性が必要であることが見出されている。Ｔ型カルシウムチャネルのブロックにより、カルシウムとＣａｍＫＩＩとの結合がブロックでき、阻害性自己リン酸化を低下させ、それによりＣａｍＫＩＩの更なる活性化および有効な治療効果の提供が可能になると考えられる。
【００７９】
したがって、本願は、ＣａＭＫＩＩの自己リン酸化を阻害でき、および／またはＴ型カルシウムチャネルを阻害できる、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストを提供するものであり、それにより、アンジェルマン症候群などのＣａＭＫＩＩの制御不全を伴う障害の処置に有用となる。
【００８０】
Ｉ．定義
特に定義されない限り、本明細書で用いられる全ての専門および科学用語は、本開示の属する分野の当業者によって一般的に理解されているのと同じ意味を有する。
【００８１】
「例えば」および「〜など」の用語ならびにその文法的に同等の用語については、特に明確に記載されない限り、「限定されないが」のフレーズが後に続くものと解釈される。
【００８２】
単数形の「１つの」（a/anおよびthe）には、特に明記されない限りその複数形が包含される。
【００８３】
「約」という用語は、「およそ」（例えば、示される数値のプラスマイナスおよそ１０％）を意味する。
【００８４】
「小分子」という用語は、約１０００またはそれ未満の分子量の有機化合物を意味する。
【００８５】
処置の対象としての「対象」という用語は、例えばヒトなどの哺乳動物を含むあらゆる動物を意味する。
【００８６】
「治療有効量」というフレーズは、研究者、獣医師、医師または他の臨床医により、組織、系、動物、個体またはヒトにおいて検討される生物学的または医薬的反応を誘発する活性化合物または医薬品の量を指す。
【００８７】
「処置すること」または「処置」という用語は、（１）疾患を予防すること；例えば、疾患、状態または障害の体質を有しうるが、疾患の病理または症候を未だ経験しないかまたは示さない個体において当該疾患、状態または障害を予防すること；（２）疾患を阻害すること；例えば、疾患、状態または障害の病理または症候を経験しているかまたは示している個体において、当該疾患、状態または障害を阻害すること（すなわち、病理および／または症候の更なる進行を抑制すること）；ならびに（３）疾患を改善すること；例えば疾患、状態または障害の病理または症候を経験しているかまたは示している個体において、疾患の重症度を低下させるか、または疾患の１つもしくは複数の症状を低減もしくは軽減することなど、当該疾患、状態または障害を改善すること（すなわち、病理および／または症候を好転させること）の１つまたは複数を指す。
【００８８】
「Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニスト」という用語は、例えば、チャネルへの結合、またはさもなければその活性の阻害もしくはブロックを通じて、あるいはＴ型カルシウムチャネルの発現を低下させることを通じて、Ｔ型カルシウムチャネルの活性を低下させる物質を指す。
【００８９】
「薬学的に許容できる」というフレーズは、本明細書では、堅実な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答または他の問題もしくは合併症がなく、妥当な利益／危険率に相応する、ヒトおよび動物の組織に接触させる使用に適する化合物、材料、組成物および／または剤形を指すものとして用いられる。
【００９０】
念のために述べると、別々の実施形態の文脈において記載される本発明の特定の特徴は、１つの実施形態中において組合せでも提供されうると認められる。言い換えると、簡潔に述べると、１つの実施形態の文脈で記載される本発明の様々な特徴は、別々に、またはいかなる適切なサブコンビネーションにおいても提供できる。
【００９１】
以下の略語および記号が、本発明の開示において用いられる場合がある：ＣａＭＫＩＩ（カルシウム／カルモジュリン依存性プロテインキナーゼＩＩ）；ＤＮＡ（デオキシリボ核酸）；ｄｓＲＮＡ（二本鎖ＲＮＡ）；ｇ（グラム）；ＩＣ５０（最大に対する半数阻害濃度）；ｋｇ（キログラム）；ｍｇ（ミリグラム）；ｍＲＮＡ（メッセンジャーＲＮＡ）；ＲＮＡ（リボ核酸）；ＲＮＡｉ（ＲＮＡ干渉）；ｓｉＲＮＡ（小分子干渉ＲＮＡ）；ｗｔ（重量）。
【００９２】
ＩＩ．処置方法
本明細書では、それを必要とする対象におけるＣａＭＫＩＩの制御不全、Ｔ型カルシウムチャネルの制御不全、またはＣａＭＫＩＩの制御不全およびＴ型カルシウムチャネルの制御不全の組合せを伴う疾患を処置する方法が提供される。対象には、マウス、ラット、他の齧歯動物、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ウマ、霊長類およびヒトが含まれうる。幾つかの実施形態では、対象はヒトである。幾つかの実施形態では、処置は、ＣａＭＫＩＩの制御不全を伴う神経症状を低減または改善することを含む。幾つかの実施形態では、神経症状は、精神遅滞、認知機能不全、長期増強の悪化（例えばアンジェルマン症候群、プラダー・ウィリー症候群またはアルツハイマー病と関連する悪化）、および運動失調からなる群から選択される。幾つかの実施形態では、方法は、治療有効量の、本明細書に記載されるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストまたはその薬学的に許容できる塩を、ＣａＭＫＩＩの阻害的自己リン酸化のブロックするために、それを必要とする対象に投与することを含む。
【００９３】
本発明の開示は更に、それを必要とする対象におけるアンジェルマン症候群およびプラダー・ウィリー症候群から選択される疾患を処置する方法を提供する。幾つかの実施形態では、方法は、処置を必要とする対象に、治療有効量の、本明細書に記載のＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む。幾つかの実施形態では、疾患はアンジェルマン症候群である。幾つかの実施形態では、疾患はプラダー・ウィリー症候群である。
【００９４】
幾つかの実施形態では、処置は、アンジェルマン症候群またはプラダー・ウィリー症候群を伴う神経症状を低減または改善することを含む。神経症状には、限定されないが、活動過多、異常な睡眠パターン、発作および運動失調のいずれか１つまたは複数が含まれうる。幾つかの実施形態では、神経症状は発作を含む。本明細書で用いられる用語「発作」は、限定されないが、欠神発作（例えば定型および異型欠神）、アトニー発作、生理的発作、群発発作、偶発性発作、ドラベ症候群（すなわち乳児重症ミオクロニー癲癇、またはＳＭＥＩ）、焦点性発作（すなわち部分発作）、二次性全般化を伴う焦点性発作、二次性全般化間代性発作を伴う焦点性発作、点頭てんかん、ミオクローヌス発作、強直性発作および強直性間代性発作のいずれか１つまたは複数を含み、それらのいずれか１つまたは複数でありうる。
【００９５】
幾つかの実施形態では、処置される対象は活動過多を含む症状を有する。幾つかの実施形態では、処置される対象は異常な睡眠パターンを含む症状を有する。幾つかの実施形態では、処置される対象は、上記で定義されるタイプの発作のいずれか１つまたは複数を含む症状を有する。幾つかの実施形態では、処置される対象は運動失調を含まない症状を有する。幾つかの実施形態では、処置される対象は異常な睡眠パターンを含まない症状を有する。幾つかの実施形態では、処置される対象は、発作を含まないか、または、異型欠神発作、定型欠神、アトニー発作、生理的発作、群発発作、偶発性発作、ドラベ症候群、焦点性発作（二次性全般化または二次性全般化間代性発作の有無を問わない）、点頭てんかん、ミオクローヌス発作、強直性発作または強直性間代性発作の１つまたは複数を含まない症状を有する。
【００９６】
また、それを必要とする対象における肥満を処置する方法であって、対象にＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することを含む方法が提供される。幾つかの実施形態では、処置は、対象の体重を減少させることを含む。幾つかの実施形態では、処置は、対象の体重増加の量または速度を減少させることを含む。幾つかの実施形態では、処置は、対象の体重を減少させることを含む。幾つかの実施形態では、処置は、対象の空腹感を減少させるかまたは満腹感を増加させることを含む。
【００９７】
処置は、特定の化合物を有効用量で投与することにより実施できる。ヒトにおける適切な用量の例としては、約１ｍｇから約２０００ｍｇ、例えば、約１ｍｇから約２０００ｍｇ、約２ｍｇから約２０００ｍｇ、約５ｍｇから約２０００ｍｇ、約１０ｍｇから約２０００ｍｇ、約２０ｍｇから約２０００ｍｇ、約５０ｍｇから約２０００ｍｇ、約１００ｍｇから約２０００ｍｇ、約１５０ｍｇから約２０００ｍｇ、約２００ｍｇから約２０００ｍｇ、約２５０ｍｇから約２０００ｍｇ、約３００ｍｇから約２０００ｍｇ、約４００ｍｇから約２０００ｍｇ、約５００ｍｇから約２０００ｍｇ、約１０００ｍｇから約２０００ｍｇ、約１ｍｇから約１０００ｍｇ、約２ｍｇから約１０００ｍｇ、約５ｍｇから約１０００ｍｇ、約１０ｍｇから約１０００ｍｇ、約２０ｍｇから約１０００ｍｇ、約５０ｍｇから約１０００ｍｇ、約１００ｍｇから約１０００ｍｇ、約１５０ｍｇから約１０００ｍｇ、約２００ｍｇから約１０００ｍｇ、約２５０ｍｇから約１０００ｍｇ、約３００ｍｇから約１０００ｍｇ、約４００ｍｇから約１０００ｍｇ、約５００ｍｇから約１０００ｍｇ、約１ｍｇから約５００ｍｇ、約２ｍｇから約５００ｍｇ、約５ｍｇから約５００ｍｇ、約１０ｍｇから約５００ｍｇ、約２０ｍｇから約５００ｍｇ、約５０ｍｇから約５００ｍｇ、約１００ｍｇから約５００ｍｇ、約１５０ｍｇから約５００ｍｇ、約２００ｍｇから約５００ｍｇ、約１ｍｇから約２５０ｍｇ、約２ｍｇから約２５０ｍｇ、約５ｍｇから約２５０ｍｇ、約１０ｍｇから約２５０ｍｇ、約２０ｍｇから約２５０ｍｇ、約５０ｍｇから約２５０ｍｇ、約１００ｍｇから約２５０ｍｇ、約１ｍｇから約１００ｍｇ、約２ｍｇから約１００ｍｇ、約５ｍｇから約１００ｍｇ、約１０ｍｇから約１００ｍｇ、約２０ｍｇから約１００ｍｇ、約５０ｍｇから約１００ｍｇの投与量範囲が挙げられる。用量は、例えば約１ｍｇ、約２ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１５００ｍｇまたは約２０００ｍｇでありうる。用量は、約２０００ｍｇ未満、約１５００ｍｇ未満、約１０００ｍｇ未満、約５０００ｍｇ未満、約４００ｍｇ未満、約２５０ｍｇ未満、約２００ｍｇ未満、約１５０ｍｇ未満、約１００ｍｇ未満、約５０ｍｇ未満、約２０ｍｇまたは約１０ｍｇ未満でありうる。各用量は、１日１回、１日２回、１日３回もしくは１日４回、または１日１回未満の周期で投与される用量でありうる。各用量はまた、小児患者への投与用と同等の（スケールの）用量を、成人に投与する用量であってもよい。
【００９８】
用量は、約１００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ、５００ｎｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ、約２μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ、約２０μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ、もしくは約５００μｇ／ｍＬ、約１０００μｇ／ｍＬ、または、これらの数値間の範囲、またはそれはこれらの数値より少ない濃度の血漿中レベル（例えば定常状態または最大レベル）を提供する用量でありうる。
【００９９】
幾つかの実施形態では、処置は約１週間またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約２週間またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約３週間またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約４週間またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約８週間またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約１２週間、もしくは約１３週間、またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約２４週間、もしくは約２６週間、またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約６カ月間またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約１２カ月間またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約１８カ月間またはそれよりも長く継続される。幾つかの実施形態では、処置は約２４カ月間またはそれよりも長く継続される。
【０１００】
ＩＩＩ．Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニスト
本明細書に記載の方法のいずれか、またはその実施形態のいずれかで用いられるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、後述するＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストの１つまたは複数でありうる。
【０１０１】
Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、処置される対象がヒトであるとき、ヒトＴ型カルシウムチャネルのアンタゴニストでありうる。
【０１０２】
Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、小分子でありうる。本発明で提供される方法で用いられうる小分子のＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストの例としては、限定されないが、ミベフラジル、ジルチアゼム、ニフェジピン、ニトレンジピン、ニモジピン、ニルジピン、ニグルジピン、ニカルジピン、ニソルジピン、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、リオシジン、ガロパミル、ベラパミル、チアパミル、ピモジド、チオリダジン、ＮＮＣ５５−０３９６、ＴＴＬ−１１７７、アナンダミド、ベンザゼピン誘導体、ジフェニルブチルピペリジン誘導体（例えばピモジド、ペンフルリドール、クロピモジドおよびフルスピリレン）、ブチロフェノン誘導体（例えばハロペリドール、ドロペリドール、ベンペリドール、トリペリドール、メルペロン、レンペロン、アザペロンおよびドンペリドン）、およびフェニルピペラジン誘導体（例えばアントラフェニン、アリピプラゾール、シプロフロキサシン、ダピプラゾール、ドロプロピジン、エトペリドン、イトラコナゾール、ケトコナゾール、レボドロプロピジン、メピプラゾール、ナフトピジル、ネファゾドン、ニアプラジン、オキシペルチン、ポサコナゾール、トラゾドン、ウラピジルおよびベスナリノン）、ジヒドロピリジン誘導体（例えばマニジピン、ニルバジピン、ベニジピンおよびエホニジピン）、フルナリジン、アナンダミド、ロメリジン、フェニトイン、ゾニサミド、Ｕ−９２０３２、テトラロール、テトラロール誘導体（例えばミベフラジル）、ミベフラジル誘導体（例えばＮＮＣ５５−０３９６ジヒドロクロライド）、ＴＴＡ−Ａ２、ＴＴＡ−Ａ８、ＴＴＡ−Ｐ１、４−アミノメチル−４−フルオロピペリジン（ＴＴＡ−Ｐ２）、ＴＴＡ−Ｑ３、ＴＴＡ−Ｑ６、ＭＫ−５３９５、ＭＫ−６５２６、ＭＫ−８９９８、Ｚ９４１、Ｚ９４４、スクシンイミド鎮痙剤の誘導体（例えばエトスクシミド、フェンスクシミドおよびメトスクシミドとしても知られているメスクシミド、（α）−メチル−（α）−フェニル−スクシンイミドとしても知られているＮ−デスメチルメトスクシミド）、およびエホニジピン（例えば（Ｒ）−エホニジピン）、トリメタジオン、ジメタジオン、ＡＢＴ−６３９、ＴＴＬ−１１７７、ＫＹＳＯ５０４４、クルトキシンが挙げられる。Ｔ型カルシウムチャネル阻害剤のいずれも、薬学的に許容できる塩の形態とすることができる。特定のＴ型カルシウムチャネル阻害剤の構造を以下に示す：
【０１０３】
【化１】
2018535208.tif 000004
【０１０４】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネル小分子調節物質は、Giordanetto et al, "T-type calcium channels inhibitors: a patent review," Expert Opin. Ther. Pat., 2011, 21, 85-101に列記される、各々の全内容が参照により組み込まれる特許明細書および特許出願公開明細書、例えば国際公開第２００４／０３５０００号パンフレット、国際公開第９３／０４０４７号パンフレット、国際公開第２００６／０９８９６９号パンフレット、国際公開第２００９／００９０１５号パンフレット、国際公開第２００７／００２３６１号パンフレット、国際公開第２００７／００２８８４号パンフレット、国際公開第２００７／１２０７２９号パンフレット、国際公開第２００９／０５４９８２号パンフレット、国際公開第２００９／０５４９８３号パンフレット、国際公開第２００９／０５４９８４号パンフレット、米国特許出願公開第２００９／０２７０４１３号明細書、国際公開第２００８／１１０００８号パンフレット、国際公開第２００９／１４６５３９号パンフレット、国際公開第２００９／１４６５４０号パンフレット、米国特許第８１３３９９８号明細書、国際公開第２０１０／０８３２６４号パンフレット、国際公開第２００６／０２３８８１号パンフレット、国際公開第２００６／０２３８８３号パンフレット、国際公開第２００５／００７１２４号パンフレット、国際公開第２００５／００９３９２号パンフレット、米国特許出願公開第２００５／２４５５３５号明細書、国際公開第２００７／０７３４９７号パンフレット、国際公開第２００７／０７８５２号パンフレット、国際公開第２００８／０３３４４７号パンフレット、国際公開第２００８／０３３４５６号パンフレット、国際公開第２００８／０３３４６０号パンフレット、国際公開第２００８／０３３４６４号パンフレット、国際公開第２００８／０３３４６５号パンフレット、国際公開第２００８／０５０２００号パンフレット、国際公開第２００８／１１７１４８号パンフレット、国際公開第２００９／０５６９３４号パンフレット、欧州特許第１５６８６９５号明細書、国際公開第２００８／００７８３５号パンフレット、韓国特許第７５４３２５号明細書、米国特許第７３１９０９８号明細書、米国特許出願公開第２０１０／０００４２８６号明細書、欧州特許第１７５７５９０号明細書、韓国特許出願公開第２００９／０４４９２４号明細書、米国特許出願公開第２０１０／０９４００６号明細書、国際公開第２００９／０３５３０７号パンフレット、米国特許出願公開第２００９／０３２５９７９号明細書、韓国特許第７５７５８３１７号明細書、国際公開第２００８／０１８６５５号パンフレット、米国特許出願公開第２００８／０２９３７８６号明細書および米国特許出願公開第２０１０／００５６５４５号明細書などに記載されたものからなる群から選択されうる。
【０１０５】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは小分子である。幾つかの実施形態では、小分子は１０００もしくはそれ未満の分子量、例えば約９００もしくはそれ未満、約８００もしくはそれ未満、約７００もしくはそれ未満、約６００もしくはそれ未満、約５００もしくはそれ未満、約４００もしくはそれ未満の分子量、または、約１００から約５００、約２００から約５００、約２００から約４００、約３００から約４００もしくは約３００から約５００の範囲の分子量を有する。
【０１０６】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、選択的なＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストである。本文脈における「選択的」とは、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが、Ｌ型、Ｎ型、Ｐ型、Ｑ型および／またはＲ型カルシウムチャネルのいずれか１つまたは複数などの、他のタイプのカルシウムチャネル、例えばＬ型カルシウムチャネルと比較し、より強力にＴ型カルシウムチャネルをアンタゴナイズすることを意味する。選択性は、例えば、Ｔ型カルシウムチャネルを阻害する際の化合物のＩＣ５０を、他のタイプのカルシウムチャネルを阻害する際のＩＣ５０と比較することにより測定でき、Ｔ型チャネルを阻害するためのＩＣ５０が他のタイプのカルシウムチャネルを阻害するためのＩＣ５０より低い場合、化合物は、選択的であるとみなされる。０．１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１０倍（またはそれ超）の選択性を意味する。０．０１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１００倍（またはそれ超）の選択性を意味する。０．００１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１０００倍（またはそれ超）の選択性を意味する。幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｔ型カルシウムチャネルに対して、Ｌ型、Ｎ型、Ｐ型、Ｑ型および／またはＲ型カルシウムチャネルのいずれか１つまたは複数などの他のタイプのカルシウムチャネル、例えばＬ型カルシウムチャネルと比較し、１０倍もしくはそれ超、１００倍もしくはそれ超または１０００倍もしくはそれ超の選択性を有する。
【０１０７】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、フェンスクシミド、メトスクシミド、メチルｌ−フェニル−スクシンイミド、エホニジピンのＲ異性体、トリメタジオン、ジメタジオン、ミベフラジル、ＴＴＡ−Ａ２、ＴＴＡ−Ａ８、ＴＴＡ−Ｐ１、ＴＴＡ−Ｐ２、ＴＴＡ−Ｑ３、ＴＴＡ−Ｑ６、ＭＫ−５３９５、ＭＫ−６５２６、ＭＫ−８９９８、Ｚ９４１、Ｚ９４４、ＡＢＴ−６３９、ＴＴＬ−１１７７、ＫＹＳＯ５０４４、ＮＣ５５−０３９６ジヒドロクロライド、クルトキシンまたはその誘導体からなる群から選択される選択的なＴ型カルシウムチャネル阻害剤である。
【０１０８】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ミベフラジル、エホニジピン、ＴＴＬ−１１７７、ニッケル、およびそれらの組合せからなる群から選択される。
【０１０９】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはミベフラジルである。
【０１１０】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＭＫ−５３９５である。
【０１１１】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＭＫ−６５２６である。
【０１１２】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＭＫ−８９９８である。
【０１１３】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＺ９４４である。
【０１１４】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはエトスクシミド以外でありうる。
【０１１５】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｔ型カルシウムチャネルの孔ブロッカーとして作用しない分子でありうる。Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、例えばＴ型カルシウムチャネルのアロステリック阻害剤でありうる。
【０１１６】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ＮａＶ１．１、ＮａＶ１．２、ＮａＶ１．３、ＮａＶ１．４、ＮａＶ１．５、ＮａＶ１．６、ＮａＶ１．７、ＮａＶ１．８もしくはＮａＶ１．９αサブユニット、および／またはＮａＶβ１、ＮａＶβ２、ＮａＶβ３、ＮａＶβ４サブユニットを有するナトリウムチャネルなどの、１つまたは複数のナトリウムチャネルに実質的に影響を及ぼさないものでありうる。Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ナトリウムチャネルの阻害と比較し、Ｔ型カルシウムチャネルに対して選択的でありえ、例えば、（例えばＫｉに換算して表すとき）少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも１００倍、少なくとも５００倍または少なくとも１０００倍の選択性を有する。Ｔ型カルシウムチャネル阻害剤は、視床皮質のニューロンにおける非不活性化ナトリウム電流を実質的に減少させない、例えば、約２０％もしくはそれ未満、約１０％もしくはそれ未満、約５％もしくはそれ未満、約２％もしくはそれ未満または約１％もしくはそれ未満で不活性化ナトリウム電流を減少させるものでありうる。
【０１１７】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、カルシウム活性化型カリウムチャネル（ＢＫチャネル、ＳＫチャネル、ＩＫチャネル）、内向き整流カリウムチャネル（ＲＯＭＫ、ＧＰＣＲ制御型、ＡＴＰ感受性型）、直列ポアドメインカリウムチャネル（ＴＷＩＫ（ＴＷＩＫ−１、ＴＷＩＫ−２、ＫＣＮＫ７）、ＴＲＥＫ（ＴＲＥＫ−１、ＴＲＥＫ−２、ＴＲＡＡＫ）、ＴＡＳＫ（ＴＡＳＫ−１、ＴＡＳＫ−３、ＴＡＳＫ−５）、ＴＡＬＫ（ＴＡＳＫ−２、ＴＡＬＫ−１、ＴＡＬＫ−２）、ＴＨＩＫ（ＴＨＩＫ−１、ＴＨＩＫ−２）、ＴＲＥＳＫ）、または電位開口型カリウムチャネル（ｈＥＲＧ、ＫｖＬＱＴ）などの１つまたは複数のカリウムチャネルに実質的に影響を及ぼさないものでありうる。Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、カリウムチャネルの阻害と比較し、Ｔ型カルシウムチャネルに対して選択的でありえ、例えば、（例えばＫｉに換算して表すとき）少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも１００倍、少なくとも５００倍または少なくとも１０００倍の選択性を有する。
【０１１８】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ＧＡＢＡＡ受容体、ＧＡＢＡＡ−ρサブクラス（ＧＡＢＡＣ）受容体またはＧＡＢＡＢ受容体などの１つまたは複数のＧＡＢＡ受容体に実質的に影響を及ぼさないものでありうる。幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、例えばα−サブユニット（ＧＡＢＲＡ１、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＡ３、ＧＡＢＲＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＡＢＲＡ６）、β−サブユニット（ＧＡＢＲＢ１、ＧＡＢＲＢ２、ＧＡＢＲＢ３）、γ−サブユニット（ＧＡＢＲＧ１、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＢＲＧ３）、δ−サブユニット（ＧＡＢＲＤ）、ε−サブユニット（ＧＡＢＲＥ）、π−サブユニット（ＧＡＢＲＰ）、θ−サブユニット（ＧＡＢＲＱ）、特にＧＡＢＡＲＡ５、ＧＡＢＲＢ３およびＧＡＢＲＧ５などのＧＡＢＡＡ受容体の１つまたは複数のサブユニットに実質的に影響を及ぼさないものでありうる。Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ＧＡＢＡ受容体の阻害と比較し、Ｔ型カルシウムチャネルに対して選択的でありえ、例えば、（例えばＫｉまたは結合親和性に換算して表すとき）少なくとも２倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも１００倍、少なくとも５００倍または少なくとも１０００倍の選択性を有する。
【０１１９】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ヒトなどの動物への投与後に、以下の副作用または有害事象の１つまたは複数を生じさせないものでありうる：肝損傷、動物の肝臓の形態的変化、動物の肝臓の機能的変化、腎障害、動物の腎臓の形態的変化、動物の腎臓の機能的変化、全身性エリテマトーデス、自殺志向、自殺行為、自殺念慮、自殺リスク増加、鬱の発症または悪化、異常な情緒または行動の変化、出産時欠損、アレルギー反応。
【０１２０】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、動物への投与後に、以下の副作用または有害事象の１つまたは複数を生じさせないものでありうる：胃腸系の有害事象（例えば摂食障害、漠然とした異常亢進、悪心嘔吐、痙攣、上腹部および腹部の疼痛、体重減少、下痢、歯肉肥大ならびに舌の腫大）；白血球減少、無顆粒球症、汎血球減少などの造血系の有害事象（骨髄抑制および好酸球増加の有無は問わない）；神経学的反応、感覚的反応または精神医学的もしくは心因性変調を含む、神経系の有害事象（例えば嗜眠状態、頭痛、眩暈感、多幸感、しゃっくり、過敏性、活動過多、嗜眠、疲労、運動失調、錯乱、睡眠障害、夜驚、集中力の欠如、攻撃性、妄想性精神病、性欲亢進、または明白な自殺意図を伴う悪化した鬱状態）；皮膚病理学的徴候を含む外皮系の有害事象（例えばじんま疹、スティーブンス・ジョンソン症候群、全身性エリテマトーデス、そう痒性紅斑性の発疹および多毛）；近視などの特殊感覚器官の有害事象；ならびに、性器出血または顕微鏡的血尿などの尿生殖器系の有害事象。
【０１２１】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは抗体である。抗体の調製のための様々な方法が当分野で公知である。Antibodies: A Laboratory Manual, CSH Press, Eds., Harlow, and Lane (1988)；Harlow, Antibodies, Cold Spring Harbor Press, NY (1989)を参照。例えば、抗体は、患者から単離された細胞を丸ごと含むサンプルで適切な哺乳動物の宿主を免疫することにより調製することができる。抗体は、本明細書に記載のモノクローナル抗体の作製を含む細胞培養技術によって、または組換え抗体の製造を可能にするために、適切な細菌細胞もしくは哺乳動物細胞宿主に抗体遺伝子をトランスフェクションすることによって製造できる。
【０１２２】
幾つかの実施形態では、抗体はモノクローナル抗体である。「モノクローナル抗体」は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体であり、すなわち、当該集団を構成する抗体は、少ない量で存在しうる天然に生じる突然変異を除き同一である。
【０１２３】
幾つかの実施形態では、本発明で提供される抗体は、組換え法により製造できる。幾つかの実施形態では、抗体は「ヒト化」またはヒト抗体である。「ヒト化」またはヒト抗体は、また製造することもでき、治療の状況での使用が好ましい。マウスおよび他の非ヒト抗体をヒト化する方法は、非ヒト抗体配列の１つまたは複数を対応するヒト抗体配列で置換することによりなされ、また当該方法は周知である。例えば、Jones et al., Nature, 1986, 321, 522-25；Riechmann et al., Nature, 1988, 332, 323-27；Verhoeyen et al., Science, 1988, 239, 1534-36、Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, 89, 4285；およびSims et al., J. Immunol., 1993, 151, 2296を参照。これらのヒト化抗体は、齧歯目の抗ヒト抗体分子に対する望ましくない免疫学的応答を最小化するよう設計され、それにより、ヒト受容者へのそれらの部分の治療的適用の期間および効果が制限される。したがって、本明細書に記載の治療方法で用いられる好ましい抗体は、完全なヒト抗体であるか、または高い親和性を有するが対象における抗原性が低いかもしくは存在しない、ヒト化抗体である。
【０１２４】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはオリゴヌクレオチド阻害剤である。オリゴヌクレオチド阻害剤の例としては、限定されないが、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ＲＮＡｉ、ｄｓＲＮＡ、ｓｉＲＮＡおよびリボザイムが挙げられる。幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはｓｉＲＮＡである。本明細書で用いられる「アンチセンスオリゴヌクレオチド」とは、通常化学的に修飾された、一本鎖のＤＮＡまたはＲＮＡの伸長体を指し、その配列（３’−５’）はｍＲＮＡ分子のセンス配列と相補的である。アンチセンス分子は、ＲＮＡ／ＤＮＡデュプレックスを形成することによって、効果的に遺伝子発現を阻害する。アンチセンスとは、メッセンジャーＲＮＡに沿ってリボソームが移動する能力を物理的にブロックすることや、ｍＲＮＡがサイトゾル中で分解される速度を高めることを含む様々な機序による作用であると理解されている。
【０１２５】
ＤＮＡｓｅによる分解を回避するため、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、化学的に修正されうる。例えば、ホスホロチオネートオリゴデオキシヌクレオチドは、ＤＮＡの非架橋ホスホリル酸素の１つを硫黄部分で置換することにより安定化し、ヌクレアーゼによる分解が防止される。アンチセンスオリゴヌクレオチドの安定性増加は、参照により組み込まれる米国特許第６４５１９９１号明細書および米国特許出願公開第２００３／０１５８１４３号明細書に概して記載のような、２−メトキシエチル（ＭＯＥ）置換された骨格を有する分子を用いても実施できる。このように、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、修飾されることにより、同じ配列の未修飾オリゴヌクレオチドと比較し、インビボでの安定性が強化されうる。修飾は、例えば（２’−Ｏ−２−メトキシエチル）修飾であってもよい。オリゴヌクレオチドは全体的にホスホロチオネート骨格を有してもよく、ヌクレオチド１〜４および１８〜２１の糖部分は２’−Ｏ−メトキシエチル修飾を有してもよく、その他のヌクレオチドは２’−デオキシヌクレオチドであってもよい。
【０１２６】
アンチセンスオリゴヌクレオチドが効果を発揮するために、その標的配列の相補配列と１００％の同一性を有する必要がないことは、当分野で理解されている。アンチセンスオリゴヌクレオチドはしたがって、標的配列の相補配列と少なくとも約７０％同一である配列を有しうる。一実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的配列の相補配列と少なくとも約８０％同一である配列を有しうる。他の実施形態では、それらは、幾つかの塩基のギャップまたはミスマッチを考慮に入れ、標的配列の相補配列と少なくとも約９０％同一であるか、または少なくとも約９５％同一である配列を有する。同一性は、例えばウィスコンシン大学のＣｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ（ＧＣＧ）のソフトウェアであるＢＬＡＳＴＮプログラムを用いて決定できる。
【０１２７】
本発明に係るアンチセンスオリゴヌクレオチドは、典型的には７から１００ヌクレオチド長の間である。一実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約７から約５０ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体を含む。別の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約７から約３５ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体を含む。他の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約１２から約３５ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体、また約１５から約２５ヌクレオチドまたはヌクレオチド類似体を含む。
【０１２８】
本発明に係るオリゴヌクレオチド阻害剤は、その配列が前記遺伝子の一部に対応するような、目的の遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ分子であってもよい。本発明で用いられるＲＮＡ分子は一般的に、ＲＮＡ部分と、若干の更なる部分（例えばデオキシリボヌクレオチド部分）とを含む。
【０１２９】
本発明の開示は更に、Ｔ型カルシウムチャネルを含むタンパク質などの、目的のタンパク質をコードするｍＲＮＡを特異的に標的とするリボザイムオリゴヌクレオチド調節物質を包含する。リボザイムは酵素活性を有するＲＮＡ分子であり、その活性により、当該リボザイムが、ヌクレオチド配列特異的な方法で、繰り返し他の別個のＲＮＡ分子を切断することを可能にする。そのような酵素的ＲＮＡ分子は実質的にいかなるｍＲＮＡ転写産物も標的とすることができ、効果的な切断がインビトロで実施できる。Kim et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1987, 84, 8788；Haseloff et al., Nature, 1988, 334, 585；Cech, JAMA, 1988, 260, 3030；およびJefferies et al., Nucleic Acids Res., 1989, 17, 1371。
【０１３０】
典型的に、リボザイムは、近接する位置に保持される２つの部分、すなわち、標的ｍＲＮＡ配列と相補的な配列を有するｍＲＮＡ結合部分と、当該標的ｍＲＮＡを切断するよう作用する触媒部分とを含む。リボザイムは、最初に、リボザイムの標的ｍＲＮＡとの結合部分を通じて、相補的塩基対形成により標的ｍＲＮＡを認識し、結合する作用を示す。その標的と特異的に結合した後、リボザイムは標的ｍＲＮＡの切断を触媒する。そのような戦略的な切断により、コードされたタンパク質の合成を導く標的ｍＲＮＡの能力を無効化する。そのｍＲＮＡ標的と結合し、切断した後、当該リボザイムは放出され、また繰り返し新たな標的ｍＲＮＡ分子と結合し、切断することができる。
【０１３１】
幾つかの実施形態では、選択的なＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、実質的に血液脳関門を通過する。
【０１３２】
幾つかの実施形態では、選択的なＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、血液脳関門を実質的に通過しない。
【０１３３】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｔ型カルシウムチャネルを選択的に標的とするカルシウムチャネルアンタゴニストである。幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、本明細書に記載の小分子である。
【０１３４】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．１を選択的に標的とする。幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．２を選択的に標的とする。幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストはＣａＶ３．３を選択的に標的とする。この文脈における「選択的」とは、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが別のタイプのカルシウムチャネルよりも、あるタイプのＴ型カルシウムチャネルをより強力にアンタゴナイズすること、例えば、ＣａＶ３．２またはＣａＶ３．３またはその両方よりもＣａＶ３．１を強力にアンタゴナイズ、ＣａＶ３．１またはＣａＶ３．３またはその両方よりもＣａＶ３．２を強力にアンタゴナイズ、ＣａＶ３．１またはＣａＶ３．２またはその両方よりもＣａＶ３．３を強力にアンタゴナイズすることを意味する。選択性は、例えば、あるタイプのＴ型カルシウムチャネルを阻害する際の化合物のＩＣ５０を、他のタイプのＴ型カルシウムチャネルを阻害する際のＩＣ５０と比較することにより測定でき、あるタイプのＴ型チャネルを阻害するためのＩＣ５０が他のタイプのＴ型カルシウムチャネルを阻害するためのＩＣ５０より低い場合、化合物は、選択的であるとみなされる。０．１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１０倍（またはそれ超）の選択性を意味する。０．０１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１００倍（またはそれ超）の選択性を意味する。０．００１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１０００倍（またはそれ超）の選択性を意味する。幾つかの実施形態では、ＣａＶ３．１、ＣａＶ３．２またはＣａＶ３．３に対する選択性は、１０倍もしくはそれ超、１００倍もしくはそれ超または１０００倍もしくはそれ超である。
【０１３５】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、例えばＮａＶ１．１、ＮａＶ１．２、ＮａＶ１．３、ＮａＶ１．４、ＮａＶ１．５、ＮａＶ１．６、ＮａＶ１．７、ＮａＶ１．８もしくはＮａＶ１．９αサブユニット、および／またはＮａＶβ１、ＮａＶβ２、ＮａＶβ３、ＮａＶβ４サブユニットを有するナトリウムチャネルなどのナトリウムチャネルよりも、Ｔ型カルシウムチャネル（例えばＣａＶ３．１、ＣａＶ３．２および／またはＣａＶ３．３）を選択的に標的とする。Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、ナトリウムチャネルの阻害と比較し、Ｔ型カルシウムチャネルに対して選択的でありうる。選択性は、例えば、１つまたは複数のタイプのＴ型カルシウムチャネルを阻害する際の化合物のＩＣ５０を、１つまたは複数のタイプのナトリウムチャネルを阻害する際のそのＩＣ５０と比較することにより測定でき、Ｔ型カルシウムチャネルを阻害する際のＩＣ５０が、ナトリウムチャネルを阻害する際のＩＣ５０より低い場合、化合物は選択的であるとみなされる。０．１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１０倍（またはそれ超）の選択性を意味する。０．０１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１００倍（またはそれ超）の選択性を意味する。０．００１（またはそれ未満）のＩＣ５０比は、１０００倍（またはそれ超）の選択性を意味する。幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルに対する選択性は、１０倍もしくはそれ超、１００倍もしくはそれ超または１０００倍もしくはそれ超である。
【０１３６】
Ｔ型カルシウムチャネルを阻害する化合物の効果は、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストが阻害するＴ型カルシウムチャネルの状態によって変化しうる。Ｔ型カルシウムチャネルは、細胞膜の電位によって異なる状態を示す場合がある。本明細書に記載の方法に効果的であるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストには、膜電位が約−６０ｍＶから約−３０ｍＶの範囲、例えば好ましくは約−４０ｍＶであるときに、Ｔ型カルシウムチャネルをブロックするＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストが含まれうる。「約−６０から約−３０ｍＶの範囲」の膜電位には、−７０ｍＶから−２０ｍＶの範囲、または−６５ｍＶから−２５ｍＶの範囲の膜電位が含まれえ、また例えば約−４０ｍＶから約−３０ｍＶ、約−５０ｍＶから約−３０ｍＶ、約−７０ｍＶから約−３０ｍＶ、約−５０ｍＶから約−４０ｍＶ、約−６０ｍＶから約−４０ｍＶ、約−７０ｍＶから約−４０ｍＶ、約−６０ｍＶから約−５０ｍＶ、および約−７０から約−５０ｍＶの膜電位の範囲、ならびに約−３０ｍＶ、約−４０ｍＶ、約−５０ｍＶおよび約−６０ｍＶも包含されうる。幾つかの実施形態では、本明細書に記載の方法に効果的であるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストには、膜電位が約−１００ｍＶから約−８０ｍＶの範囲、例えば好ましくは約−９０ｍＶであるときにＴ型カルシウムチャネルをブロックするＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストが含まれうる。「約−１００から約−８０ｍＶの範囲」の膜電位には、−１１０ｍＶから−７０ｍＶの範囲、または−１０５ｍＶから−７５ｍＶの範囲の膜電位が含まれえ、また、例えば約−１００ｍＶから約−８０ｍＶ、約−９０ｍＶから約−８０ｍＶおよび約−１００ｍＶから約−９０ｍＶの膜電位の範囲、ならびに約−１００ｍＶ、約−９０ｍＶおよび約−８０ｍＶも包含されうる。
【０１３７】
いかなる理論にも拘束されないが、本明細書に記載の方法に効果的であるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストには、膜電位が約−６０ｍＶから約−３０ｍＶの範囲、例えば−４０ｍＶであるときにＴ型カルシウムチャネルを、膜電位が約−１００ｍＶから約−８０ｍＶの範囲、例えば約−９０ｍＶであるときのＴ型カルシウムチャネルのブロックと比較して選択的にブロックするＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストが含まれうると考えられる。
【０１３８】
効果的であるＴ型チャネル阻害剤は、膜電位が約−４０ｍＶであるときのＴ型カルシウムチャネルを阻害するためのＩＣ５０で、すなわち約１０μＭもしくはそれ未満、例えば、約１μＭもしくはそれ未満、約５００ｎＭもしくはそれ未満、約１００ｎＭもしくはそれ未満、約５０ｎＭもしくはそれ未満、約１０ｎＭもしくはそれ未満、約５ｎＭもしくはそれ未満、または約１ｎＭもしくはそれ未満で、Ｔ型カルシウムチャネルを阻害しうる。効果的であるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、約−９０ｍＶの膜電位におけるＴ型カルシウムチャネルの阻害と比較し、選択的に、約−４０ｍＶの膜電位においてＴ型カルシウムチャネルを阻害しうる。例えば、約−４０ｍＶの膜電位においてＴ型カルシウムチャネルを選択的に阻害するＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストのＩＣ５０の、約−９０ｍＶの膜電位におけるＴ型カルシウムチャネルの阻害時のそれに対する比率は、約１：２またはそれ未満、例えば約１：５またはそれ未満、約１：１０またはそれ未満、約１：２０またはそれ未満、約１：５０またはそれ未満、約１：１００またはそれ未満、約１：５００またはそれ未満、約１：１０００またはそれ未満でありうる。幾つかの実施形態では、約−９０ｍＶのＴ型カルシウムチャネルの阻害と比較し、約−４０ｍＶのＴ型カルシウムチャネルを阻害する選択性は、２倍もしくはそれ超、５倍もしくはそれ超、１０倍もしくはそれ超、１００倍もしくはそれ超、または１０００倍もしくはそれ超である。
【０１３９】
効果的であるＴ型チャネル阻害剤は、膜電位が約−９０ｍＶであるときのＴ型カルシウムチャネルを阻害するためのＩＣ５０で、すなわち約１０μＭまたはそれ未満、例えば、約１μＭもしくはそれ未満、約５００ｎＭもしくはそれ未満、約１００ｎＭもしくはそれ未満、約５０ｎＭもしくはそれ未満、約１０ｎＭもしくはそれ未満、約５ｎＭもしくはそれ未満、または約１ｎＭもしくはそれ未満で、Ｔ型カルシウムチャネルを阻害しうる。効果的であるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、約−４０ｍＶの膜電位におけるＴ型カルシウムチャネルの阻害と比較し、選択的に、約−９０ｍＶの膜電位においてＴ型カルシウムチャネルを阻害しうる。例えば、約−９０ｍＶの膜電位においてＴ型カルシウムチャネルを選択的に阻害するＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストのＩＣ５０の、約−４０ｍＶの膜電位におけるＴ型カルシウムチャネルの阻害時のそれに対する比率は、約１：２またはそれ未満、例えば約１：５またはそれ未満、約１：１０またはそれ未満、約１：２０またはそれ未満、約１：５０またはそれ未満、約１：１００またはそれ未満、約１：５００またはそれ未満、約１：１０００またはそれ未満でありうる。幾つかの実施形態では、約−４０ｍＶのＴ型カルシウムチャネルの阻害と比較し、約−９０ｍＶのＴ型カルシウムチャネルを阻害する選択性は、２倍もしくはそれ超、５倍もしくはそれ超、１０倍もしくはそれ超、１００倍もしくはそれ超、または１０００倍もしくはそれ超である。
【０１４０】
全ての化合物およびその薬学的に許容できる塩は、水および溶媒などの他の物質と共に存在することができ（例えば水和物と溶媒和化合物）、または単離されうる。幾つかの実施形態では、本発明で提供される化合物またはその薬学的に許容できる塩は、実質的に単離されている。「実質的に単離されている」とは、化合物が、それが形成されたかまたは検出された環境から、少なくとも部分的にまたは実質的に分離されていることを意味する。部分的な分離としては、例えば、本発明で提供される化合物が富化された組成物を挙げることができる。実質的な分離としては、本発明で提供される化合物またはその塩を、重量ベースで少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％または少なくとも約９９％含有する組成物を挙げることができる。化合物およびそれらの塩を単離する方法は、当分野ではルーチンである。
【０１４１】
本明細書で用いられる「薬学的に許容できる塩」とは、親化合物中の既存の酸または塩基部分が、その塩の形に変換されることによって修飾された、開示された化合物の誘導体を指す。薬学的に許容できる塩の例としては、限定されないが、アミンなどの塩基性残基の無機または有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリまたは有機塩などが挙げられる。本願の薬学的に許容できる塩としては、例えば無毒性の無機または有機酸から形成される、親化合物の従来の無毒性の塩が挙げられる。本願の薬学的に許容できる塩は、従来の化学的方法によって、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から合成することができる。通常、そのような塩は、これらの化合物の遊離の酸または塩基の形態と、これの化学量論量の適切な塩基または酸とを、水、または有機溶媒、またはそれら２つの混合液中で、反応させることにより調製でき、通常、エーテル、酢酸エチル、アルコール（例えばメタノール、エタノール、イソプロパノールまたはブタノール）またはアセトニトリルなどの非水性媒体が好ましい。適切な塩のリストは、Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418およびJournal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977)に見出される。塩形態の調製方法は、例えばHandbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Wiley-VCH, 2002に記載されている。
【０１４２】
ＩＶ．併用療法
アンジェルマン症候群またはプラダー・ウィリー症候群の処置のために、１つまたは複数の更なる治療薬が、本発明で提供される化合物との組合せで使用できる。更なる治療薬の例としては、限定されないが、カルシウムチャネルアンタゴニスト（Ｌ型およびＴ型アンタゴニストを含む）、抗痙攣剤、ＧＡＢＡ（Ａ）受容体アゴニストおよび陽性アロステリック調節物質、または遺伝子治療もしくは遺伝子再活性化療法（Bailus et al., The prospect of molecular therapy for Angelman syndrome and other monogenic neurologic disorders, BMC Neuroscience, 2014, 15, 76）が挙げられる。
【０１４３】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストによる処置は、アンジェルマン症候群またはプラダー・ウィリー症候群を処置するための更なる薬物がない場合にも提供することができる。幾つかの実施形態では、処置は、１つのＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストで実施できる。幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストによる処置は、抗痙攣剤がない場合に提供することができる。
【０１４４】
１つまたは複数の更なる医薬品を、同じ投与計画または異なる投与計画を使用して、同時にまたは経時的に、患者に投与することができ、それは使用する特定の組合せおよび処方する医師の判断により決定される。
【０１４５】
カルシウムチャネルアンタゴニストの例としては、限定されないが、本明細書に記載のＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストおよびＬ型カルシウムチャネルアンタゴニストが挙げられる。幾つかの実施形態では、更なるカルシウムチャネルアンタゴニストは、本発明で提供されるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストから選択される。幾つかの実施形態では、更なるカルシウムチャネルアンタゴニストはＬ型カルシウムチャネルアンタゴニストである。幾つかの実施形態では、更なるカルシウムチャネルアンタゴニストはＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストである。幾つかの実施形態では、更なるカルシウムチャネルアンタゴニストは、ミベフラジル、ＭＫ−５３９５、ＭＫ−６５２６、ＭＫ−８９９８およびＺ９４４からなる群から選択されるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストである。幾つかの実施形態では、更なるカルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストおよびＬ型カルシウムチャネルアンタゴニストである。幾つかの実施形態では、更なるカルシウムチャネルアンタゴニストは、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニスト、またはＡＣＴ−２８０７７、ミベフラジルおよびＴＴＬ−１１７７からなる群から選択されるＬ型カルシウムチャネルアンタゴニストである。幾つかの実施形態では、更なるカルシウムチャネルアンタゴニストはミベフラジルである。
【０１４６】
抗痙攣剤の例としては、限定されないが、アセタゾラミド、カルバマゼピン、クロバザム、クロナゼパム、エスリカルバゼピン酢酸塩、エトスクシミド、ガバペンチン、ラコサミド、ラモトリジン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル（perampanel）、ピラセタム、フェノバルビタール、フェニトイン、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、バルプロエート（例えばバルプロ酸ナトリウム）、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、ビガバトリンおよびゾニサミドが挙げられる。
【０１４７】
ＧＡＢＡ（Ａ）受容体アゴニストの例としては、ガボキサドール、バマルゾール、γ−アミノ酪酸、ガバミド（gabamide）、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、ガボキサドール、イボテン酸、イソグバシン（isoguvacine）、イソニペコチン（isonipecotic）酸、ムシモール、フェニブット（phenibut）、ピカミロン（picamilon）、プロガビド、キスカルアミン（quisqualamine）、ＳＬ７５１０２およびチオムシモールが挙げられる。
【０１４８】
ＧＡＢＡ（Ａ）受容体の陽性アロステリック調節物質の例としては、エバメクチン（例えばアイバメクチン）、バルビツール剤（例えばフェノバルビタール）、ベンゾジアゼピン（例えばアジナゾラム、アルプラゾラム、ベンタゼパム、ブレタゼニル、ブロマゼパム、ブロチゾラム、カマゼパム、クロルジアゼポキシド、シナゼパム（cinazepam）、シノラゼパム、クロバザム、クロナゼパム、クロナゾラム（clonazolam）、クロラゼペート、クロチアゼパム、クロキサゾラム、デロラゼパム、ジアゼパム、ジクラゼパム（diclazepam）、エスタゾラム、カルフルゼプ酸エチル、エチゾラム、ロフラゼプ酸エチル、フルブロマゼパム（flubromazepam）、フルブロマゾラム（flubromazolam）、フルニトラゼパム（flunitrazepam）、フルラゼパム（flurazepam）、フルタゾラム、フルトプラゼパム、ハラゼパム、ケタゾラム、ロプラゾラム、ロラゼパム、ロルメタゼパム（lormetazepam）、メダゼパム、メキサゾラム、ミダゾラム、ニフォキシパム（nifoxipam）、ニメタゼパム（nimetazepam）、ニトラゼパム、ノルジアゼパム、オキサゼパム、フェナゼパム（phenazepam）、ピナゼパム、プラゼパム、プレマゼパム、ピラゾラム（pyrazolam）、クアゼパム、リルマザフォン（rilmazafone）、テマゼパム、チエナルプラゾラム（thienalprazolam）、テトラゼパムおよびトリアゾラム）、臭化物（例えば臭化カリウム、カルバメート（例えばメプロバメート、カリソプロドール（carisoprodol））、クロラローゼ、クロルメザノン、クロメチアゾール（clomethiazole）、ジヒドロエルゴリン（例えばエルゴロイド（ジヒドロエルゴトキシン））、エタゼピン、エチホキシン、イミダゾール（例えばエトミデート）、カバラクトン（ｋａｖａに存在）、ロレクレゾール、神経刺激性ステロイド（例えばアロプレグナノロン、ガナキソロン）、非ベンゾジアゼピン（例えばザレプロン、ゾルピデム、ゾピクロン、エスゾピクロン）、ペトリクロラール（petrichloral）、フェノール類（例えばプロポフォール）、ピペリジンジオン（例えばグルテチミド、メチプリロン）、プロパニジド（propanidid）、ピラゾロピリジン（例えばエタゾラート）、キナゾリノン（例えばメタクアロン）、頭蓋冠成分、スチリペントール、スルホニルアルカン（例えばスルホンメタン、テトロナール（tetronal）、トリオナール（trional））、およびカノコソウ成分（例えば吉草酸、バレリン（valerenic）酸）が挙げられる。
【０１４９】
幾つかの実施形態では、療法は単独療法として実施できる。幾つかの実施形態では、療法は、更なる鎮痙性の療法がない場合に実施できる。療法は、本セクションに記載の更なる薬剤のいずれかがない場合に実施できる。例えば、療法は、アセタゾラミド、カルバマゼピン、クロバザム、クロナゼパム、エスリカルバゼピン酢酸塩、エトスクシミド、ガバペンチン、ラコサミド、ラモトリジン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル、ピラセタム、フェノバルビタール、フェニトイン、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、バルプロエート（例えばバルプロ酸ナトリウム）、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、ビガバトリンまたはゾニサミドなどの更なる鎮痙剤がない場合に実施できる。
【０１５０】
遺伝子再活性化療法は、ＵＢＥ３Ａの父性（または母性）コピーを活性化させる化合物投与を含む。その例としては、トポテカン、イリノテカン、エトポシドおよびデクスラゾキサンなどのトポイソメラーゼ阻害剤（トポイソメラーゼＩおよびＩＩ阻害剤を含む）、ならびにHuang et al., "Topoisomerase inhibitors unsilence the dormant allele of Ube3a in neurons", Nature, 2011, 481, 185-89によって同定された他の化合物が挙げられる。
【０１５１】
幾つかの実施形態では、本明細書で提供されるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストと組み合わせて使用できる１つまたは複数の更なる療法としては、限定されないが、物理療法、作業療法、コミュニケーション療法および行動療法が挙げられる。幾つかの実施形態では、本明細書で提供されるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストと組み合わせて使用できる１つまたは複数の更なる治療薬および１つまたは複数の更なる療法としては、物理療法、作業療法、コミュニケーション療法および行動療法からなる群から選択されるものが挙げられる。
【０１５２】
Ｖ．医薬組成物
本明細書に記載の方法で用いられるＴ型カルシウムチャネル阻害剤は、医薬組成物の形態で投与することができる。このように、本発明の開示は、特許請求される処置方法、または本明細書に記載の状態を処置するため医薬の製造に使用される、Ｔ型カルシウムチャネル阻害剤と少なくとも１つの薬学的に許容できる担体とを提供する。これらの組成物は、製薬分野で公知の方法で調製することができ、種々の経路により投与することができる。投与は、局所投与（経皮、表皮、眼内、ならびに鼻腔内、膣内および直腸内送達を含む経粘膜を含む）、肺内投与（例えば、ネブライザーなどによる粉末またはエアゾールの吸入または注入、気管内または鼻腔内）、経口または非経口投与であってもよい。非経口投与としては、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内または注入もしくは点滴、あるいは頭蓋内（例えばクモ膜下または脳室内）投与が挙げられる。非経口投与は、単回ボーラス投与の形態であってもよく、または連続灌流ポンプによるものであってもよい。局所投与用の医薬組成物および製剤としては、経皮パッチ、軟膏、ローション剤、クリーム、ゲル、ドロップ、坐薬、スプレー、液剤および粉末剤が挙げられうる。従来の医薬用担体、水性、粉末性もしくは油性のベース剤、増粘剤などが必要となり、または望ましい場合もある。
【０１５３】
この医薬組成物は、１つまたは複数の薬学的に許容できる担体（賦形剤）との組合せで、有効成分としてのＴ型カルシウムチャネル阻害剤（薬学的に許容できる塩の形態であってもよい）を含有する。幾つかの実施形態では、組成物は局所投与に適する。本発明の組成物の調製の際、有効成分は典型的には、賦形剤と混合されるか、賦形剤により希釈されるか、またはカプセル、サシェ、ペーパーもしくは他の容器などの形態で、かかる担体中に充填される。賦形剤が希釈剤として用いられるとき、それは固形状、半固形状または液状の材料であってもよく、それは有効成分のビヒクル、担体または媒体として機能する。このように、組成物は、錠剤、ピル、粉末、ロゼンジ、サシェ、カシェ、エリキシル、懸濁液、エマルジョン、溶液、シロップ、エアゾール（固形状または液体媒体中）、例えば最大１０重量％の活性化合物を含有する軟膏、軟質および硬質ゼラチンカプセル、坐薬、無菌の注射液ならびに無菌包装粉末の形態とすることができる。
【０１５４】
製剤を調製する際に、Ｔ型カルシウムチャネル阻害剤は、他の成分と組み合わせる前に、適切な粒径とするために粉砕することができる。活性化合物が実質的に不溶性である場合、２００メッシュ未満の粒径に粉砕することができる。活性化合物が実質的に水溶性である場合、粒径は、粉砕により、製剤中で実質的に同一の分布（例えば約４０メッシュ）となるように調整できる。
【０１５５】
本発明の化合物は、錠剤の形成、および他の剤形とするのに適する粒径を得るため、湿式ミリングなどの公知の粉砕処理を使用して粉砕してもよい。本発明の化合物の微細粉末化（ナノ粒子化）調製物を、当分野で公知のプロセスによって調製することができる。
【０１５６】
幾つかの適切な賦形剤の例としては、ラクトース、ブドウ糖、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、澱粉、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギネート、トラガカントゴム、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップおよびメチルセルロースが挙げられる。製剤は更に、潤滑剤（例えばタルク、ステアリン酸マグネシウムおよびミネラルオイル）、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、保存料剤（例えばヒドロキシ安息香酸のメチルおよびプロピルエステル）、甘味料、ならびに香料を含むことができる。
【０１５７】
幾つかの実施形態では、医薬組成物は、ケイ化結晶性セルロース（ＳＭＣＣ）と、本明細書に記載の少なくとも１つの化合物またはその薬学的に許容できる塩を含む。幾つかの実施形態では、ケイ化結晶性セルロースは、重量ベースで、約９８％の結晶性セルロースと約２％の二酸化ケイ素とを含む。
【０１５８】
幾つかの実施形態では、組成物の製造に湿式造粒プロセスが用いられる。幾つかの実施形態では、組成物の製造に乾式造粒プロセスが用いられる。
【０１５９】
組成物は、各投薬単位が約５から約１，０００ｍｇ（１ｇ）、より一般的には約１００ｍｇから約５００ｍｇの有効成分を含有する単位投与形態で製剤化することができる。幾つかの実施形態では、各投薬単位は約１０ｍｇの有効成分を含有する。幾つかの実施形態では、各投薬単位は約５０ｍｇの有効成分を含有する。幾つかの実施形態では、各投薬単位は約２５ｍｇの有効成分を含有する。「単位投与形態」という用語は、ヒト対象および他の哺乳動物のための単回投与に適する、物理的に分割された単位を指し、各単位は、適切な医薬賦形剤との組合せで、望ましい治療効果を得るために算出された所定量の活性物質を含有する。
【０１６０】
医薬組成物を製剤化するのに用いられる成分は、高純度で、潜在的に有害な混入物を実質的に含まない（例えば、少なくとも国内の食品グレード、一般には少なくとも分析グレード、より典型的には少なくとも医薬グレードである）。特にヒトが摂取する場合、組成物は、好ましくは米国食品医薬品局の関連規則において定義される医薬品製造品質管理基準に従い製造または製剤化される。例えば適切な製剤は無菌で、および／または、実質的に等張で、および／または、米国食品医薬品局の全ての医薬品製造品質管理基準に完全準拠したものでありうる。
【０１６１】
活性化合物は、広範囲な投薬量にわたり有効でありうるが、通常は治療有効量で投与される。しかしながら、実際に投与される化合物の量は、処置を受ける状態、選択された投与経路、投与される実際の化合物、個々の患者の年齢、体重および反応、患者の症状の重症度などの関連する状況に応じて、医師により決定されることが理解されるであろう。
【０１６２】
本発明の化合物の治療的投薬量は、例えば、処置がなされる際の特定の使用、化合物の投与方法、患者の健康状態および処方する医師の判断により変化しうる。医薬組成物中の本発明の化合物の比率または濃度は、投薬量、化学的特性（例えば疎水性）および投与経路などの多くの要因に応じて変化しうる。例えば、本発明の化合物は、非経口投与の場合、当該化合物を約０．１〜約１０％（ｗ／ｖ）で含有する生理的緩衝水溶液として提供されうる。幾つかの典型的な用量範囲は、１日当たり約１μｇ／ｋｇから約１ｇ／ｋｇ体重である。幾つかの実施形態では、用量範囲は、１日当たり約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ体重である。投薬量は、そのような変動要因、疾患の重症度、特定の患者の全体的な健康状態、選択される化合物の相対的な生物学的有効性、賦形剤の組成および投与経路に依存する傾向を有する。有効用量は、インビトロまたは動物におけるモデル試験系に由来する用量反応曲線から推定できる。ヒトの場合の有効用量は、例えば約１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１１０ｍｇ、１２０ｍｇ、１２５ｍｇ、１３０ｍｇ、１４０ｍｇ、１５０ｍｇ、１６０ｍｇ、１７０ｍｇ、１８０ｍｇ、１９０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、７００ｍｇ、８００ｍｇ、９００ｍｇまたは１０００ｍｇでありうる。用量は、例えば１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与されうる。
【０１６３】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがミベフラジルであるとき、ミベフラジルは例えば約０．１ｍｇ、０．３ｍｇ、１ｍｇ、３ｍｇ、５ｍｇ、１５ｍｇ、１０ｍｇまたは３０ｍｇの用量で投与できる。用量は、例えば１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与されうる。
【０１６４】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＭＫ−５３９５であるとき、ＭＫ−５３９５は例えば約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与できる。用量は、例えば１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与されうる。
【０１６５】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＭＫ−６５２６であるとき、ＭＫ−６５２６は例えば約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与できる。用量は、例えば１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与されうる。
【０１６６】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＭＫ−８９９８であるとき、ＭＫ−８９９８は例えば約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与できる。用量は、例えば１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与されうる。
【０１６７】
幾つかの実施形態では、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストがＺ９４４であるとき、Ｚ９４４は例えば約０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与できる。用量は、例えば１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与されうる。
【０１６８】
錠剤などの固形組成物を調製する場合、主要な有効成分を医薬賦形剤と混合し、本発明の化合物の均一な混合物を含有する固形状の予備処方組成物を形成させる。これらの予備処方組成物が均一であるとは、典型的には、有効成分が組成物全体に均一に分散していることで、組成物が等しく有効な単位投与形態（例えば錠剤、ピルおよびカプセル）に容易に再分割できる状態のことを指す。この固形状の予備処方剤を、次に、例えば本発明の有効成分を約０．１から約１０００ｍｇで含有する、上記のタイプの単位投与形態に再分割する。
【０１６９】
本発明の化合物および組成物を経口投与用または注入用に配合できる溶液形態としては、水溶液、適切に風味付けしたシロップ、水中または油中懸濁液、ならびに綿実油、胡麻油、ヤシ油または落花生油などの食用油で風味付けしたエマルジョン、ならびにエリキシルおよび同様の薬学的ビヒクルが挙げられる。
【０１７０】
吸入またはガス注入用の組成物としては、薬学的に許容できる水性もしくは有機溶媒、またはその混合物中の溶液および懸濁液、ならびに粉末が挙げられる。液状または固形状の組成物は、上記のような適切な薬学的に許容できる賦形剤を含有してもよい。幾つかの実施形態では、組成物は、局所的または全身的効果を得るために経口または鼻呼吸経路で投与される。組成物は、不活性ガスの使用により霧状にすることができる。霧状にされた溶液は、ネブライザーから直接呼吸してもよく、または、ネブライザーをマスク、テントもしくは間欠的陽圧呼吸装置に取り付けることができる。溶液、懸濁液または粉末状の組成物は、適切な方法で、製剤を送達する装置から経口的に、または鼻腔内に投与することができる。
【０１７１】
局所用製剤は、１つまたは複数の担体を含有することができる。幾つかの実施形態では、軟膏は、水と、例えば、流動パラフィン、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、プロピレングリコール、白色ワセリンなどから選択される１つまたは複数の疎水性担体とを含有することができる。クリーム状の担体組成物は、グリセロールおよび１つまたは複数の他の成分（例えばグリセリンモノステアレート、ＰＥＧ−グリセリンモノステアレートおよびセチルステアリルアルコール）と組み合わせた水ベースの組成とすることができる。ゲルは、イソプロピルアルコールおよび水を使用し、適宜他の成分（例えばグリセロール、ヒドロキシエチルセルロースなど）と組み合わせて製剤化することができる。幾つかの実施形態では、局所用製剤は、本発明の化合物を少なくとも約０．１、少なくとも約０．２５、少なくとも約０．５、少なくとも約１、少なくとも約２または少なくとも約５重量％含有する。
【０１７２】
患者に投与される化合物または組成物の量は、投与する物質や、予防または療法などの投与目的、患者の状態、投与方法などにより変化する。治療的な使用では、組成物は疾患およびその合併症の症状を除去するか、または少なくとも部分的に軽減するのに十分な量で、既に疾患に罹患する患者に投与することができる。有効用量は、処置を行おうとする疾患の状態、ならびに、疾患の重症度、患者の年齢、体重および全般的状態などの要因を踏まえた主治医の判断などに応じて変化する。
【０１７３】
患者に投与される組成物は、上記の医薬組成物の形態とすることができる。これらの組成物は、従来の滅菌法により滅菌することができ、または濾過滅菌してもよい。水溶液は包装してそのまま使用するか、または凍結乾燥することができ、当該凍結乾燥した調製物を、投与前に滅菌した水性担体と合わせる。化合物の調製物のｐＨは、典型的には３から１１の間、より好ましくは５から９、最も好ましくは７から８である。上記の賦形剤、担体または安定化剤の適宜の使用により、製薬塩が形成されることが理解されよう。
【０１７４】
本明細書に記載の方法で用いられるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニストの治療的投薬量は、例えば、処置がなされる際の特定の使用、化合物の投与方法、患者の健康状態および処方する医師の判断により変化しうる。医薬組成物中の本発明の化合物の比率または濃度は、投薬量、化学的特性（例えば疎水性）および投与経路などの多くの要因に応じて変化しうる。例えば、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストは、非経口投与の場合、当該化合物を約０．１〜約１０％（ｗ／ｖ）で含有する生理的緩衝水溶液として提供されうる。幾つかの典型的な用量範囲は、１日当たり約１μｇ／ｋｇから約１ｇ／ｋｇ体重である。幾つかの実施形態では、用量範囲は、１日当たり約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ体重である。投薬量は、疾患または障害のタイプおよび進行度などの変動要因、特定の患者の全体的な健康状態、選択される化合物の相対的な生物学的有効性、賦形剤の組成ならびに投与経路に依存する傾向を有する。有効用量は、インビトロまたはインビボにおけるモデル試験系に由来する用量反応曲線から推定できる。
【実施例】
【０１７５】
本発明を下記の実施例で更に記載するが、それは特許請求の範囲で定義される本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例１】
【０１７６】
アンジェルマン症候群を有する患者の処置
精神的障害および頻繁な不規則な挙動（例えば発作、手のばたつかせ）を特徴とするアンジェルマン症候群の一患者を対象とする。患者に、本発明で提供されるＴ型カルシウムチャネルアンタゴニスト（例えばミベフラジル、エホニジピン、ＴＴＬ−１１７７、ニッケルなど）を治療有効量で、単独または他の療法との組合せで投与する。Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストを十分な投薬量で投与した後（例えば一回の投与後、または一連の投与後）、患者の脳活動をモニターする（例えば脳波測定（ＥＥＧ）を使用）。患者の脳活動は、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニストによる処置前の患者の脳活動と比較し、アンジェルマン症候群に特徴的な脳活動における顕著な改善を示している。患者は、知的および発達的な障害、睡眠障害、発作およびぎくしゃくした挙動を含む他の症状の改善を示す可能性もある。
【実施例２】
【０１７７】
アンジェルマンモデルマウスのインビボ試験
アンジェルマン症候群のモデルマウスにおける行動的および生理的欠陥ならびに癲癇に対する、２つの化合物、すなわちミベフラジルおよびＭＫ−８９９８の効果を測定するため、３つ試験を個別に実施した。当該試験は、聴原性癲癇試験（試験１、Ｔｌ）、運動／行動試験バッテリー（試験２、Ｔ２）および長期増強測定（ＬＴＰ、試験３、Ｔ３）であった。各試験の完了により、この試験におけるミベフラジルまたはＭＫ−８９９８効果の定量的結果が提供された。全３件の試験で、マウスを２つの別々の群に分けた。すなわち、以下の表２に示すように試験１のための群１と、試験２および３のための群２とし、各群は６つのサブ群ａ〜ｆからなる。
【０１７８】
全ての行動実験および電気生理的実験において、雌のＵｂｅ３ａｍ−／ｐ＋  ＫＯマウス（すなわちＡＳマウス）と野生型の雄とを交配させ、Ｆ１雑種１２９Ｓ２−Ｃ５７ＢＬ／６のバックグラウンドを有するヘテロ接合ＡＳマウス同腹仔コントロールを作製した。癲癇試験では、ＡＳマウスを１２９Ｓ２／ＳｖＰａｓＣｒｌバックグラウンドのコントロールと交配させる。全体でマウスの２つの群が必要となる：癲癇試験のための群１（表２、群１ａ〜ｆ）、ならびに行動試験バッテリーおよび電気生理的試験のための群２（表２、群２ａ〜ｆ）。各群は、２つのコントロールサブ群を含む６つのサブ群からなる：標準的な食餌を与えられる野生型（ａ）およびＡＳ変異体（ｂ）マウス、ならびに薬物が添加された食餌を与えられる４つのサブ群（ミベフラジル（ｃ〜ｄ）およびＭＫ−８９９８（ｅ〜ｆ）群、それぞれ２つの異なる濃度）。試験／サブ群で用いたマウス数を表２に示すが、電気生理的試験では５〜７匹のマウス／サブ群、癲癇試験では１０匹のマウス／サブ群および行動試験バッテリーでは１２〜１５匹のマウス／サブ群の範囲である。成体の雄および雌マウス（８週齢未満）を全ての実験で用いた。
【０１７９】
【表２】
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【０１８０】
ミベフラジルおよびＭＫ−８９９８を、マウスが５ｇの食餌／日で摂食するという仮定に基づき、様々な異なる用量（例えば１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ）で試験した。両方の薬物は、仔（Ｐ２１、サブ群ｃ〜ｆ）を離乳した後に食餌と一緒に投与を開始した。コントロールマウス（サブ群ａおよびｂ）には標準的な食餌を与えた。
【０１８１】
アンジェルマン症候群（ＡＳ）マウスモデルにおける、癲癇に対するミベフラジルおよびＭＫ−８９９８の効果（試験１）
ＡＳ変異体マウス、野生型およびＡＳ変異体マウスを、出産後の２１日目（Ｐ２１）から成体期まで、標準的な食餌（群ＩａおよびＩｂ）または薬物が添加された食餌（群Ｉｃ〜ｆ）を与え、維持した。８週齢（Ｐ５６）において、全てのマウスを、聴原性の発作の発生に関して試験した。この試験の結果は、癲癇を経験したマウス／サブ群の数（または％）で示した。標準的な食餌を与えられた大部分（９０％超）のＡＳ変異体マウス（群Ｉｂ）は、癲癇を経験すると予想された。対照的に、標準的な食餌を与えられた野生型マウス（群Ｉａ）では、発作を示すと予想されなかった（１５％未満）（例えばSilva-santos et al., J. Clin. Invest., 2015, 125(5), 2069-2076を参照）。試験１のプロトコルの概要を以下に示す：
【０１８２】
１．発作の評価：（１２９Ｓ２／ＳｖＰａｓＣｒｌ  ×  ＡＳマウス）
ａ．９匹のマウス／群
ｂ．６つの群（以下の通り）：
ｉ．ビヒクル：野生型
ｉｉ．ミベフラジル（経口胃管による強制摂取）
１．  １０ｍｇ／ｋｇ
２．  ４０ｍｇ／ｋｇ
ｉｉｉ．ＭＫ−８９９８（経口胃管による強制摂取）
１．  １０ｍｇ／ｋｇ
２．  ３０ｍｇ／ｋｇ
３．  ６０ｍｇ／ｋｇ
ｃ．処置スケジュール：ベースライン癲癇試験  →  ７日間の処置を開始、Ｐ５６→癲癇試験
ｄ．結果：聴原性の癲癇を経験したマウスの％
【０１８３】
第一に、ミベフラジルまたはＭＫ−８９９８による処置の前にマウスを癲癇試験に供した。マウスを次に、７日間経口胃管による強制摂取によりミベフラジルまたはＭＫ−８９９８を用いて処置し、その後癲癇試験に供した。マウスに以下の通りの投薬を行った：群１：ミベフラジル１０ｍｇ／ｋｇおよび４０ｍｇ／ｋｇ；ＭＫ−８９９８：１０ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇ。群２：ミベフラジル１０ｍｇ／ｋｇおよび４０ｍｇ／ｋｇ；ＭＫ−８９９８：１０ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇ。聴原性の癲癇試験の結果を図１に示す。
【０１８４】
その結果、予想外にも、ＭＫ−８９９８は用量依存的に発作を排除し、６０ｍｇ／ｋｇの処置を受けた動物の約８０％で発作が完全に排除されることを示す。しかしながら、図１に示されるデータには見かけの反応が記載されておらず、図１には発作のない動物の数のみが記録されるため、処置による効果がなかったことを示すわけではない点に注意すべきである。動物における発作回数の減少または発作の重症度の低下は見られたが、図１に示されるデータでは未だ発作が記録されている。
【０１８５】
ミベフラジルまたはＭＫ−８９９８または他のＴ型カルシウムチャネル阻害剤による処置を受ける、発作を起こしやすい動物では、発作回数の減少または発作の重症度の低下、またはその両方が示されると予想される。
【０１８６】
試験２：ＡＳマウスの行動的欠陥に対するミベフラジルおよびＭＫ−８９９８の効果
ＡＳ変異体マウスが強い表現型を示す（Silva-santos et al., J. Clin. Invest., 2015, 125(5), 2069-2076）、ロータロッド、オープンフィールド、大理石の覆い隠し、営巣および強制的水泳試験を含む確立された運動協調性および行動試験のバッテリーを行う。この試験バッテリーでは、１２〜１５匹のマウス／サブ群からなる群（６つのサブ群、表２を参照）を、一群の７２〜９０匹のマウスとして試験する。繁殖および試験のキャパシティ限界のため、この群を７〜８匹のマウス／サブ群からなる２つのバッチ（４２〜４８匹のマウス／バッチ）に分割する。両方のバッチのマウスを、同じ運動／行動試験のバッテリーに供し、両群から得た結果を併合して統計的検出力に到達させる。各試験（例えばロータロッド）の後、定量化可能な結果（測定値）をサブ群ごとに得る。試験２のプロトコルの概要を以下に示す：
【０１８７】
２．行動評価：ヘテロ接合型ＡＳマウス（雄の野生型  ×  雌のＵｂｅ３ａｍ−／ｐ＋  ＫＯマウス）
ａ．１２〜１５匹のマウス／群
ｂ．６つの群（以下の通り）：
ｉ．ビヒクル：野生型
ｉｉ．ビヒクル：ヘテロ接合型ＡＳマウス
ｉｉｉ．ミベフラジル
１．  １０ｍｇ／ｋｇ
２．  ４０ｍｇ／ｋｇ
ｉｖ．ＭＫ−８９９８
１．  ３０ｍｇ／ｋｇ
２．  ６０ｍｇ／ｋｇ
ｃ．処置スケジュール：６週間の試験期間で２つのバッチの試験を完了させる。
ｄ．評価および結果：
ｉ．加速度ロータロッド：潜時（ｓ）
ｉｉ．大理石の覆い隠し：覆い隠されない大理石の数
ｉｉｉ．オープンフィールド試験：路程（ｍ）
ｉｖ．営巣：使用した材料（％）
ｖ．強制的水泳試験：浮動時間（％）。
【０１８８】
試験３：ＡＳマウスのシナプス可塑性の欠陥に対するミベフラジルおよびＭＫ−８９９８の効果
次に、ＡＳ変異体マウスにおける長期増強（ＬＴＰ）欠陥に対する、ミベフラジルおよびＭＫ−８９９８の効果を試験する。この実験では、試験２に供されたマウスを使用できる。ＬＴＰは、５〜７匹のマウス／サブ群で測定する。必要な場合、マウスの数を（例えば第２のマウスのバッチから）増やすこともできる。試験３のプロトコルの概要を以下に示す：
【０１８９】
３．長期増強評価：ヘテロ接合型ＡＳマウス（雄の野生型  ×  雌のＵｂｅ３ａｍ−／ｐ＋  ＫＯマウス）
ａ．６〜７匹のマウス／群
ｂ．６つの群（以下の通り）：
ｉ．ビヒクル：野生型
ｉｉ．ビヒクル：ヘテロ接合型ＡＳマウス
ｉｉｉ．ミベフラジル
１．  １０ｍｇ／ｋｇ
２．  ４０ｍｇ／ｋｇ
ｉｖ．ＭＫ−８９９８
１．  ３０ｍｇ／ｋｇ
２．  ６０ｍｇ／ｋｇ
ｃ．処置スケジュール：１日当たり２匹のマウス、計５週間
ｄ．結果：
ｉ．野生型マウスのＬＴＰ誘導および表現（ベースラインに対する％）
ｉｉ．ＡＳマウスにおける、薬物によるＬＴＰ欠陥のレスキュー可能性（ベースラインに対する％）
【０１９０】
他の実施形態
本発明を、「発明の詳細な説明」に関連して記載したが、上記の記載は、あくまで例示を意図するものであり、本発明の範囲を限定することを目的とするものではなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって定義されると理解すべきである。本発明の多くの実施形態を記載した。しかしながら、本発明の技術思想および範囲から逸脱することなく、様々な修飾をなしうることが理解されよう。したがって、他の側面、効果、実施形態および修飾も、以下の特許請求の範囲内に含まれる。
【図１】
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【国際調査報告】
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