(57)【要約】選択されたヒト患者における癌を治療するための組成物及び方法であって、抗ＥｒｂＢ３抗体（例えば、セリバンツマブ）と第２の抗癌治療薬との組み合わせを患者に投与することを含む方法が提供される。本明細書に開示された方法及び組成物によって治療される癌として、ヘレグリン（ＨＲＧ）陽性癌である癌が挙げられる。ヘレグリン（ＨＲＧ）陽性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を有する患者を治療する方法であって、２１日間の治療サイクルの１日目に１度、ｉ．３０００ｍｇの用量のセリバンツマブ、及びｉｉ．７５ｍｇ／ｍ２の用量のドセタキセル、からなる抗新生物療法を患者に投与して、患者のＮＳＣＬＣを治療すること、を含む、方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘレグリン（ＨＲＧ）陽性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を有する患者を治療する方法であって、２１日間の治療サイクルの１日目に１度、
ｉ．３０００ｍｇの用量のセリバンツマブ、及び
ｉｉ．７５ｍｇ／ｍ２の用量のドセタキセル、
からなる抗新生物療法を患者に投与して、患者のＮＳＣＬＣを治療すること、を含む、方法。
【請求項２】
前記癌が、ＲＮＡ  ｉｎ−ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＲＮＡ−ＩＳＨ）によって測定された場合にＨＲＧ  ｍＲＮＡに対して陽性であり、前記ＨＲＧ  ＲＮＡ−ＩＳＨが、≧１＋のスコアという結果になる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記癌が、定量ＲＴ−ＰＣＲによって測定された場合にＨＲＧに対して陽性である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記患者が、局所進行性及び／または転移性ＮＳＣＬＣのための少なくとも１つの全身療法に失敗している、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記患者が、局所進行性または転移性疾患のための３つ以下の全身療法で治療した後に進行しており、前記全身療法のうちの１つが、白金ベースのレジメンを含んでいた、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ドセタキセルが、セリバンツマブの投与の少なくとも３０分前に共投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記抗新生物療法が、静脈内投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記治療が、腫瘍のサイズの縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、安定疾患、全奏効率の増大、または病理学的完全奏効からなる群から選択される少なくとも１つの治療効果を奏する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記ＮＳＣＬＣが、ＥＧＦＲ野生型である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＮＳＣＬＣが、扁平上皮癌である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
ＨＲＧ陽性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣを有する患者を治療する方法であって、２１日間の治療サイクルの１日目に１度、
ｉ．３０００ｍｇの用量のセリバンツマブ、及び
ｉｉ．５００ｍｇ／ｍ２の用量のペメトレキセド、
からなる抗新生物療法を患者に投与して、患者のＮＳＣＬＣを治療すること、を含む、方法。
【請求項１２】
前記腫瘍が、ＲＮＡ  ｉｎ−ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＲＮＡ−ＩＳＨ）によって測定された場合にＨＲＧ  ｍＲＮＡに対して陽性であり、前記ＨＲＧ  ＲＮＡ−ＩＳＨが、≧１＋のスコアという結果になる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記癌が、定量ＲＴ−ＰＣＲによって測定された場合にＨＲＧに対して陽性である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記患者が、局所進行性及び／または転移性ＮＳＣＬＣのための少なくとも１つの全身療法に失敗している、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記患者が、局所進行性または転移性疾患のための２つ以下の全身療法で治療した後に進行しており、前記全身療法のうちの１つが、白金ベースのレジメンを含んでいた、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記ペメトレキセドが、セリバンツマブの投与の少なくとも３０分前に共投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
前記治療が、腫瘍のサイズの縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、安定疾患、全奏効率の増大、または病理学的完全奏効からなる群から選択される少なくとも１つの治療効果を奏する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＮＳＣＬＣが、ＥＧＦＲ野生型である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＮＳＣＬＣが、扁平上皮癌である、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
前記抗腫瘍療法が、静脈内投与される、請求項１１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、２０１５年４月１７日に出願された米国仮出願第６２／１４９，２７１号の利益を主張し、本明細書の一部を構成するものとしてその内容を援用する。
【背景技術】
【０００２】
非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）
世界的にみて、肺癌は、主な癌関連死亡原因の１つである。２０１４年だけでも新たに診断された症例は、２２４，４１０例と推定されており、すべての癌診断症例の約１３％を占めている。２００３年〜２００９年に診断された症例では、１年生存率と５年生存率は、それぞれ４３％と１７％であった（“Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｆａｃｔｓ  ａｎｄ  Ｆｉｇｕｒｅｓ  ２０１４”）。肺癌の８０％以上が、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）であり、これらのうちの約３分の２が進行期に診断されている。「第３世代」薬剤（パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、ビノレルビン、またはペメトレキセド）を用いる白金ベースの重複レジメンは、進行性ＮＳＣＬＣの治療のための世界的な標準治療薬と考えられている。しかしながら、このレジメンが適用された患者の３分の１だけに、初回治療で客観的反応が認められ、別の２０〜３０％は、疾患の安定に至る。残念なことに、それら患者のほとんどに、最終的には疾患の進行が認められている。
【０００３】
ＮＳＣＬＣの現在の治療法
難治性（再発性、すなわち、二次治療）進行性ＮＳＣＬＣの治療のために現在承認されている３つの薬剤は、ドセタキセル、ペメトレキセド、及びエルロチニブである。
【０００４】
ドセタキセル、商品名ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、ＤＯＣＥＣＡＤ（登録商標）、ＩＵＰＡＣ名称１，７β，１０β−トリヒドロキシ−９−オキソ−５β，２０−エポキシタックス−１１−エン−２α，４，１３α−トリイル４−アセタート２−ベンゾアート１３−｛（２Ｒ，３Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−ヒドロキシ−３−フェニルプロパノアート）は、典型的に、１０以上のサイクルで、３週間ごとに、１時間の点滴で投与する抗有糸分裂タキサン抗癌治療薬である。ＮＳＣＬＣの二次治療におけるドセタキセルの承認用量は、７５ｍｇ／ｍ２であり、３週間ごとに、１回、６０分にわたって静脈内投与する。ドセタキセルは、セリバンツマブを投与する前に投与すべきである。
【０００５】
ペメトレキセド、商品名ＡＬＩＭＴＡ（登録商標）、ＩＵＰＡＣ名称（２Ｓ）−２−｛［４−［２−（２−アミノ−４−オキソ−１，７−ジヒドロピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−５−イル）エチル］ベンゾイル］アミノ｝−グルタール酸）は、胸膜中皮腫及び非小細胞肺癌の治療のための現在承認されている葉酸代謝拮抗物質である。典型的に、２１日間の各サイクルの１日目に、１０分間にわたって、静脈内に、５００ｍｇ／ｍ２の用量で投与される。
【０００６】
卵巣癌
上皮性卵巣癌を含む卵巣癌は、原発性腹膜癌及び卵管癌とならんで、女性における主たる癌関連死亡原因である。卵巣癌は、初期段階では比較的無症状であるため、進行段階に達するまで診断を受けないでいることが多い。進行性卵巣癌の標準的な治療として、外科手術、それに続く、白金ベースの化学療法剤、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、及びサトラプラチンによる化学療法、または抗微小管剤、例えば、パクリタキセルによる化学療法などがある。卵巣癌を治療するために使用される他の薬物として、ベバシズマブ、カルボプラチン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ゲムシタビン、オラパリブ、及びトポテカンなどがある。標準的な治療法は、たいていは成功するが、多くの患者で、白金ベースのレジメンに対する抵抗性が認められて、この疾患の再発に至ることがよくある。
【０００７】
セリバンツマブ、抗ＥｒｂＢ３モノクローナル抗体治療薬
セリバンツマブ（旧名、ＭＭ−１２１またはＡｂ＃６）とは、ヒトモノクローナル抗ＥｒｂＢ３  ＩｇＧ２である。例えば、米国特許第７，８４６，４４０号、同第８，６９１，７７１号及び同第８，９６１，９６６号、同第８，８９５，００１号、米国特許公開第２０１１／００２７２９１号、同第２０１４／０１２７２３８号、同第２０１４／０１３４１７０号、及び同第２０１４／０２４８２８０号）、ならびに、国際公開番号ＷＯ／２０１３／０２３０４３、同第ＷＯ／２０１３／１３８３７１号、同第ＷＯ／２０１２／１０３３４１号、及び米国特許出願第１４／９６７，１５８号を参照されたい。
【０００８】
セリバンツマブは、高い特異性でヒトＥｒｂＢ３のエピトープに結合する組換えヒトＩｇＧ２  ｍＡｂである。ＩｇＧ２分子の完全な四量体構造は、鎖内及び鎖間ジスルフィド結合によって、一緒に保持された２つの重鎖（それぞれ４４５アミノ酸）、及び２つのλ軽鎖（それぞれ２１７アミノ酸）からなる。アミノ酸配列（下記参照）から、インタクトな非グリコシル化単量体ＩｇＧ２の１４３ｋＤａの分子量であると推定する。グリコシル化分析は、インタクトなグリコシル化セリバンツマブモノマーの分子量に対して約２．９ｋＤａ寄与しているものと考えられるセリバンツマブのＮ結合グリコシル化を実証する。インタクトなグリコシル化セリバンツマブの推定分子量である１４６ｋＤａは、質量分析によって実験的に決定された実際の分子量の０．２％以内である。セリバンツマブの等電点は、約８．６（等電点電気泳動法で測定した主要なアイソフォーム）である。
【０００９】
セリバンツマブは、静脈内注入によって（例えば、１時間にわたって）投与され、また、２０ｍＭヒスチジン、１５０ｍＭ塩化ナトリウムの水溶液において２５ｍｇ／ｍｌの濃度で、約６．５（６．２〜６．８の範囲）のｐＨで、２〜８℃で保存される、１０．１ｍｌのセリバンツマブを含有する、滅菌した、単回使用のバイアルに、透明な液体溶液として供給される。セリバンツマブは、配列番号７のアミノ酸配列を有する重鎖、及び配列番号８のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。セリバンツマブは、配列番号９及び１１に記載の核酸配列によってコードされる重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）をそれぞれ含む。セリバンツマブは、配列番号１０及び１２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬ領域をそれぞれ含む。セリバンツマブは、配列番号１（ＣＤＲＨ１）、配列番号２（ＣＤＲＨ２）、及び配列番号３（ＣＤＲＨ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列、ならびに、配列番号４（ＣＤＲＬ１）、配列番号５（ＣＤＲＬ２）、及び配列番号６（ＣＤＲＬ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３配列を含む。
【００１０】
治療成果の評価
ＮＳＣＬＣ、卵巣癌、原発性腹膜癌、及び卵管癌の治療成果を、腫瘍反応の標準的な尺度を用いて評価する。治療に対する標的病変（腫瘍）反応は、以下のように分類される。
【００１１】
完全奏効（ＣＲ）：すべての標的病変の消失。あらゆる病理学的リンパ節（標的または非標的に関係なく）は、短軸の減少が１０ｍｍ未満でなければならない。
部分奏効（ＰＲ）：ベースラインの直径の和を基準として、標的病変の直径の和が少なくとも３０％減少する。
【００１２】
進行性疾患（ＰＤ：研究での最小和を基準として、標的病変の直径の和が少なくとも２０％増加する（これには、研究での和が最小値である場合には、ベースラインの和が含まれる）。２０％の相対的な増加に加えて、和が、少なくとも５ｍｍの絶対増加を実証しなくてはならない。（注記：１つ以上の新しい病変の出現も進行とみなされる）。ならびに、
【００１３】
安定疾患（ＳＤ）：ＰＲの条件を満たす十分な収縮も、研究での最小和直径を基準として、ＰＤの条件を満たすに十分な増加も認められない。（注記：直径の和を５ｍｍ以上増加させない２０％以下の変化は、安定疾患として扱われる）。安定疾患の状態と判断するためには、最低でも６週間の間隔で、試験開始後少なくとも１回、安定疾患の基準を満たしていなければならない。
【００１４】
治療に対する非標的病変反応は、以下のように分類される。
完全奏効（ＣＲ）：すべての非標的病変の消失、及び腫瘍マーカーレベルの正常化。すべてのリンパ節は、非病理学的サイズ（１０ｍｍ未満の短軸）でなければならない。腫瘍マーカーが、最初は正常上限値を上回っている場合、完全な臨床的反応を考慮して、患者を正常化する必要がある。
【００１５】
非ＣＲ／非ＰＤ：１つ以上の非標的病変の持続、及び／または正常範囲を逸脱する腫瘍マーカーレベルの維持、ならびに、
【００１６】
進行性疾患（ＰＤ）：１つ以上の新しい病変の出現、及び既存の非標的病変の明白な進行のいずれかまたは両方。この文脈において、明らかな進行とは、単一の病変の増加ではなく、全体的な疾患状態の変化を意味するものでなくてはならない。
他の例示的な実証的反応
これらの方法で治療された患者は、ＮＳＣＬＣ、または卵巣癌、原発性腹膜癌、及び卵管癌のうちの少なくとも１つの兆候の改善を経験する可能性がある。反応はまた、測定可能な腫瘍病変の量、及び／またはサイズの減少によって測定され得る。測定可能な病変とは、ＣＴスキャン（ＣＴスキャンスライスの厚さが５ｍｍ未満）で＞１０ｍｍ、臨床検査による１０ｍｍのキャリパー測定、または胸部Ｘ線で＞２０ｍｍの少なくとも１つの寸法（最長直径が記録されるもの）として、正確に測定できるものとして定義される。非標的病変、例えば、病理学的リンパ節のサイズも、改善のために測定することができる。病変は、例えば、Ｘ線、ＣＴ、またはＭＲＩ画像を用いて測定することができる。顕微鏡検査、細胞学、または組織学を用いて、治療に対する反応性を評価することもできる。あるいは、測定可能な腫瘍が、奏効または安定疾患の基準を満たしている場合に、治療時に出現または増悪する滲出液は、腫瘍の進行を示すものと考えられるが、それは、滲出液の新生物起源の細胞学的確認がある場合のみに言えることである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１７】
【特許文献１】米国特許第７，８４６，４４０号明細書
【特許文献２】米国特許第８，６９１，７７１号明細書
【特許文献３】米国特許第８，９６１，９６６号明細書
【特許文献４】米国特許第８，８９５，００１号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２０１１／００２７２９１号明細書
【特許文献６】米国特許出願公開第２０１４／０１２７２３８号明細書
【特許文献７】米国特許出願公開第２０１４／０１３４１７０号明細書
【特許文献８】米国特許出願公開第２０１４／０２４８２８０号明細書
【特許文献９】国際公開第２０１３／０２３０４３号
【特許文献１０】国際公開第２０１３／１３８３７１号
【特許文献１１】国際公開第２０１２／１０３３４１号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
ＮＳＣＬＣ、卵巣癌、腹膜癌、及び卵管癌のための現在承認されている治療法は、幾つかの利点をもたらすが、とりわけ、進行性または転移性の疾患を有する患者については、まだまだ改善の余地がある。したがって、進行性ＮＳＣＬＣ、卵巣癌、原発性腹膜癌、及び卵管癌を有する患者に対するさらに効果的な治療が待望されている。本発明は、この必要性に呼応し、かつ、さらなる利益を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
選択されたヒト患者の癌を治療するための組成物及び方法であって、抗ＥｒｂＢ３抗体及び第２の抗癌治療薬の組み合わせを患者に投与することを含む方法が提供される。
【００２０】
癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、例えば、非扁平上皮ＮＳＣＬＣとし得るものであり、第２の抗癌治療薬は、例えば、ドセタキセル、またはペメトレキセドとし得るものであり、その組み合わせは、特定の臨床投薬レジメンに従って（すなわち、特定の投薬量で、かつ特定の投薬計画に従って）投与される（または投与のためのものである）。あるいは、癌は、卵巣癌（例えば、持続性、再発性、抵抗性、または難治性の卵巣癌）とし得るものであり、または癌は、原発性腹膜癌、または卵管癌とし得るものであり、及びこれらのそれぞれについて、第２の抗癌治療薬は、例えば、パクリタキセル、ゲムシタビン、イリノテカン、リポソームイリノテカン（例えば、ｎａｌ−ＩＲＩ）、またはリポソームドキソルビシン、例えば、ＤＯＸＩＬ（登録商標）を含み得る。ある実施形態において、癌は、有機白金製剤を用いた従前の治療をした後に進行した（すなわち、治療抵抗性である）局所的に進行性または転移性のＮＳＣＬＣである。ある実施形態において、ＮＳＣＬＣは、扁平上皮癌である。別の実施形態において、癌は、ＥＧＦＲ野生型である。
【００２１】
ある態様において、成人ヒト患者の癌を治療する方法が提供され、この方法は、配列番号１（ＣＤＲＨ１）、配列番号２（ＣＤＲＨ２）、及び配列番号３（ＣＤＲＨ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列、ならびに、配列番号４（ＣＤＲＬ１）、配列番号５（ＣＤＲＬ２）、及び配列番号６（ＣＤＲＬ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３配列を含む抗ＥｒｂＢ３抗体を患者に投与することを含み、抗ＥｒｂＢ３抗体は、患者の体重に関係なく、３０００ｍｇの最初の単回用量として投与される。ある実施形態において、最初の単回投与の後に、少なくとも１回の追加の単回投与が続き、その各々は、直前の投与の３週間後に投与され、及び患者の体重に関係なく、３０００ｍｇの投与量で投与される。
【００２２】
第２の態様において、ＮＳＣＬＣ腫瘍を有し、かつ、局所進行性または転移性疾患のための２つの全身療法だけで治療した後に進行が認められており、そのうちの１つは白金ベースの治療法が提供されている癌患者を治療する方法であって、その方法は、（１）配列番号１（ＣＤＲＨ１）、配列番号２（ＣＤＲＨ２）、及び配列番号３（ＣＤＲＨ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列、ならびに、配列番号４（ＣＤＲＬ１）、配列番号５（ＣＤＲＬ２）、及び配列番号６（ＣＤＲＬ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３配列を含む抗ＥｒｂＢ３抗体、ならびに、（２）ドセタキセルまたはペメトレキセドの各々の有効量を患者に対して投与することを含む。
【００２３】
第３の態様において、成人ヒト患者の癌を治療するための組成物が提供され、組成物は、配列番号１（ＣＤＲＨ１）、配列番号２（ＣＤＲＨ２）、及び配列番号３（ＣＤＲＨ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列、ならびに、配列番号４（ＣＤＲＬ１）、配列番号５（ＣＤＲＬ２）、及び配列番号６（ＣＤＲＬ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３配列を含み、組成物は、患者の体重に関係なく、３０００ｍｇの最初の単回用量として投与される。ある実施形態において、組成物は、患者の体重に関係なく、３０００ｍｇの最初の単回用量として投与されるためのものであり、少なくとも１回の追加の単回投与が続き、その各々は、直前の投与の３週間後に投与され、及び患者の体重に関係なく、３０００ｍｇの用量で投与される。
【００２４】
ある実施形態において、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。別の実施形態において、癌は、卵巣癌である。
【００２５】
ある実施形態において、患者は、局所進行性または転移性疾患のための２つの全身療法だけで治療をした後に進行が認められており、そのうちの１つは白金ベースの従前のレジメンであった。別の実施形態において、患者は、局所進行性または転移性疾患のための３つ以下の全身療法で治療をした後に進行が認められており、そのうちの１つは白金ベースの従前のレジメンであった。別の実施形態において、ヒト患者は、抗新生物療法（例えば、抗癌剤）を用いた従前の治療をした後に疾患の進行または再発後に治療される。別の実施形態において、ヒト患者は、抗新生物療法に失敗した後に治療される。別の実施形態において、癌は、抗新生物療法に対する耐性を獲得した癌として同定される。
【００２６】
上記したあらゆる態様の例示的な実施形態において、本明細書に開示した方法は、有効量の第２の抗癌治療剤を、抗ＥｒｂＢ３抗体と共に投与することをさらに含む。ある実施形態において、第２の抗癌治療薬は、ドセタキセルであり、及びドセタキセルの有効量は、７５ｍｇ／ｍ２である。別の実施形態において、第２の抗癌治療薬は、ペメトレキセドであり、有効量は、５００ｍｇ／ｍ２である。ある実施形態において、有効量のドセタキセルまたはペメトレキセドが、抗体を投与する少なくとも３０分前に共投与される。
【００２７】
第４の態様において、成人ヒト患者の癌を治療するための組成物が提供され、組成物は、配列番号１（ＣＤＲＨ１）、配列番号２（ＣＤＲＨ２）、及び配列番号３（ＣＤＲＨ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列、ならびに、配列番号４（ＣＤＲＬ１）、配列番号５（ＣＤＲＬ２）、及び配列番号６（ＣＤＲＬ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３配列を含み、組成物は、患者の体重に関係なく、３０００ｍｇの最初の単回用量として投与されるためのものである。ある実施形態において、組成物は、患者の体重に関係なく、３０００ｍｇの最初の単回用量として投与するためのものであり、少なくとも１回の追加の単回投与が続き、その各々は、直近の投与の３週間後に投与され、及び患者の体重に関係なく、３０００ｍｇの用量で投与される。別の実施形態において、組成物は、２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与するためのものである。ある実施形態において、卵巣癌は、持続性、再発性、耐性、または難治性の卵巣癌である。
【００２８】
第５の態様において、卵巣癌、原発性腹膜癌、または卵管癌を有する癌患者を治療する方法であって、その方法は、（１）配列番号１（ＣＤＲＨ１）、配列番号２（ＣＤＲＨ２）、及び配列番号３（ＣＤＲＨ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列、ならびに、配列番号４（ＣＤＲＬ１）、配列番号５（ＣＤＲＬ２）、及び配列番号６（ＣＤＲＬ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３配列を含む抗ＥｒｂＢ３抗体、ならびに、（２）パクリタキセル、イリノテカン、またはゲムシタビンの各々の有効量を患者に対して投与することを含む。
【００２９】
上記したあらゆる態様の例示的な実施形態において、抗ＥｒｂＢ３抗体は、セリバンツマブである。
【００３０】
ある実施形態において、本明細書に記載した治療方法は、セリバンツマブを、１つ以上の抗微生物剤（例えば、他の化学療法剤、他の抗癌剤、または他の低分子薬物）と組み合わせて、投与することを含む。
【００３１】
ある実施形態において、治療サイクル内で他の抗癌治療薬を３つ以下投与する。別の実施形態において、他の抗癌治療剤を２つ以下、治療サイクル内でセリバンツマブと組み合わせて投与する。別の実施形態において、他の抗癌治療剤を１つだけ、治療サイクル内でセリバンツマブと組み合わせて投与する。別の実施形態において、他の抗癌治療剤を、治療サイクル内でセリバンツマブと組み合わせて投与することはない。別の実施形態において、他の抗癌治療薬は、セリバンツマブの投与と同時に、または投与前、または投与後のいずれかで投与し得る。
【００３２】
本明細書に開示された方法及び組成物によって治療される癌として、ヘレグリン（ＨＲＧ）陽性癌である癌があり、任意で、ＨＲＧ陽性が、ＨＲＧ  ＲＮＡ−ＩＳＨアッセイ、または定量ＲＴ−ＰＣＲアッセイによって決定される。このようなアッセイにおいて、アッセイが、細胞あたり少なくとも１〜３個のドットを示し、細胞が患者の腫瘍試料に由来する場合には、試料は、陽性であると判定される。ある実施形態において、ＨＲＧ陽性は、ＦＤＡ承認試験に基づく。ある実施形態において、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。別の実施形態において、癌は、局所的に進行性または転移性である。別の実施形態において、患者は、局所的に進行性または転移性の疾患のための２つ以下の全身療法で治療した後に進行が認められており、そのうちの１つは白金ベースのレジメンを含む。
【発明の効果】
【００３３】
ある実施形態において、上記したあらゆる態様の組成物及び／または方法を含む癌の治療は、腫瘍のサイズの縮小、転移の減少、完全寛解、部分寛解、安定疾患、全奏効率の増大、または病理学的完全奏効からなる群から選択された少なくとも１つの治療効果をもたらす。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】ＮＳＣＬＣ細胞株のパネルにおいて増殖を誘導するインビトロにおけるヘレグリン（ＨＲＧ）の能力が、セリバンツマブに対するインビボにおける単剤応答の指標であることを示す。２５株のＥＧＦＲ野生型ＮＳＣＬＣ細胞株のうちの９株は、ＨＲＧに対して反応性である。それらは、３Ｄスフェロイド培養を用いてＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）（ＣＴＧ）によって測定したところ、外因的に添加されたＨＲＧに反応して細胞増殖の増大を示した。
【図２Ａ】図２Ａ〜２Ｄは、インビトロにおいてＨＲＧに反応する細胞は、インビボにおいてセリバンブに反応するが、インビトロにおいてＨＲＧに反応しない細胞株は、インビボにおいてセリバンツマブに反応しないことを示す４つのグラフである。ＨＲＧ反応性細胞株Ａ５４９（図２Ａ）、及びＨ３２２Ｍ（図２Ｂ）、ならびに、ＨＲＧ非反応性細胞株Ｈ４６０（図２Ｃ）、及びＨＯＰ−９２（図２Ｄ）を示す。経時的な腫瘍体積は、セリバンツマブ反応を示すものとして表される。
【図２Ｂ】図２Ａ〜２Ｄは、インビトロにおいてＨＲＧに反応する細胞は、インビボにおいてセリバンブに反応するが、インビトロにおいてＨＲＧに反応しない細胞株は、インビボにおいてセリバンツマブに反応しないことを示す４つのグラフである。ＨＲＧ反応性細胞株Ａ５４９（図２Ａ）、及びＨ３２２Ｍ（図２Ｂ）、ならびに、ＨＲＧ非反応性細胞株Ｈ４６０（図２Ｃ）、及びＨＯＰ−９２（図２Ｄ）を示す。経時的な腫瘍体積は、セリバンツマブ反応を示すものとして表される。
【図２Ｃ】図２Ａ〜２Ｄは、インビトロにおいてＨＲＧに反応する細胞は、インビボにおいてセリバンブに反応するが、インビトロにおいてＨＲＧに反応しない細胞株は、インビボにおいてセリバンツマブに反応しないことを示す４つのグラフである。ＨＲＧ反応性細胞株Ａ５４９（図２Ａ）、及びＨ３２２Ｍ（図２Ｂ）、ならびに、ＨＲＧ非反応性細胞株Ｈ４６０（図２Ｃ）、及びＨＯＰ−９２（図２Ｄ）を示す。経時的な腫瘍体積は、セリバンツマブ反応を示すものとして表される。
【図２Ｄ】図２Ａ〜２Ｄは、インビトロにおいてＨＲＧに反応する細胞は、インビボにおいてセリバンブに反応するが、インビトロにおいてＨＲＧに反応しない細胞株は、インビボにおいてセリバンツマブに反応しないことを示す４つのグラフである。ＨＲＧ反応性細胞株Ａ５４９（図２Ａ）、及びＨ３２２Ｍ（図２Ｂ）、ならびに、ＨＲＧ非反応性細胞株Ｈ４６０（図２Ｃ）、及びＨＯＰ−９２（図２Ｄ）を示す。経時的な腫瘍体積は、セリバンツマブ反応を示すものとして表される。
【図３Ａ】図３Ａ〜３Ｄは、９６時間後の多細胞株を用いた３Ｄスフェロイド増殖アッセイにおいて、５ｎＭ  ＨＲＧが、ドセタキセル（１１１ｎＭ、図３Ａ）、及びペメトレキセド（１１１１ｎＭ、図３Ｂ）に対する抵抗性を誘導することを示す４つのグラフである。図３Ｃ及び図３Ｄは、セリバンツマブ（１μΜ、「ＭＭ−１２１」）を用いた処理が、ドセタキセル（図３Ｃ）、及びペメトレキセド（図３Ｄ）に対するＮＳＣＬＣ細胞株（Ａ５４９、ＥＫＶＸ、Ｈ３５８、Ｈ３２２Ｍ、Ｃａｌｕ−３、Ｈ６６１、Ｈ４４１、Ｈ１３５５、Ｈ４３０）の感応性を復元する、ことを示している。
【図３Ｂ】図３Ａ〜３Ｄは、９６時間後の多細胞株を用いた３Ｄスフェロイド増殖アッセイにおいて、５ｎＭ  ＨＲＧが、ドセタキセル（１１１ｎＭ、図３Ａ）、及びペメトレキセド（１１１１ｎＭ、図３Ｂ）に対する抵抗性を誘導することを示す４つのグラフである。図３Ｃ及び図３Ｄは、セリバンツマブ（１μΜ、「ＭＭ−１２１」）を用いた処理が、ドセタキセル（図３Ｃ）、及びペメトレキセド（図３Ｄ）に対するＮＳＣＬＣ細胞株（Ａ５４９、ＥＫＶＸ、Ｈ３５８、Ｈ３２２Ｍ、Ｃａｌｕ−３、Ｈ６６１、Ｈ４４１、Ｈ１３５５、Ｈ４３０）の感応性を復元する、ことを示している。
【図３Ｃ】図３Ａ〜３Ｄは、９６時間後の多細胞株を用いた３Ｄスフェロイド増殖アッセイにおいて、５ｎＭ  ＨＲＧが、ドセタキセル（１１１ｎＭ、図３Ａ）、及びペメトレキセド（１１１１ｎＭ、図３Ｂ）に対する抵抗性を誘導することを示す４つのグラフである。図３Ｃ及び図３Ｄは、セリバンツマブ（１μΜ、「ＭＭ−１２１」）を用いた処理が、ドセタキセル（図３Ｃ）、及びペメトレキセド（図３Ｄ）に対するＮＳＣＬＣ細胞株（Ａ５４９、ＥＫＶＸ、Ｈ３５８、Ｈ３２２Ｍ、Ｃａｌｕ−３、Ｈ６６１、Ｈ４４１、Ｈ１３５５、Ｈ４３０）の感応性を復元する、ことを示している。
【図３Ｄ】図３Ａ〜３Ｄは、９６時間後の多細胞株を用いた３Ｄスフェロイド増殖アッセイにおいて、５ｎＭ  ＨＲＧが、ドセタキセル（１１１ｎＭ、図３Ａ）、及びペメトレキセド（１１１１ｎＭ、図３Ｂ）に対する抵抗性を誘導することを示す４つのグラフである。図３Ｃ及び図３Ｄは、セリバンツマブ（１μΜ、「ＭＭ−１２１」）を用いた処理が、ドセタキセル（図３Ｃ）、及びペメトレキセド（図３Ｄ）に対するＮＳＣＬＣ細胞株（Ａ５４９、ＥＫＶＸ、Ｈ３５８、Ｈ３２２Ｍ、Ｃａｌｕ−３、Ｈ６６１、Ｈ４４１、Ｈ１３５５、Ｈ４３０）の感応性を復元する、ことを示している。
【図４】ＴＣＧＡデータセットに基づいた異なる適応症にわたるＨＲＧ  ｍＲＮＡ発現レベルを示す一組のグラフである。
【図５Ａ】図５Ａ及び５Ｂは、ＭＭ−１２１−０１−１０１第ＩＩ相試験（図５Ａ）、及び市販の生検標本（図５Ｂ）の双方からのＮＳＣＬＣ組織サンプルにわたるＨＲＧ  ｍＲＮＡ発現を示す２つのグラフである。
【図５Ｂ】図５Ａ及び５Ｂは、ＭＭ−１２１−０１−１０１第ＩＩ相試験（図５Ａ）、及び市販の生検標本（図５Ｂ）の双方からのＮＳＣＬＣ組織サンプルにわたるＨＲＧ  ｍＲＮＡ発現を示す２つのグラフである。
【図６Ａ】図６Ａ〜６Ｃは、投与量及び投与間隔によって、体重に基づいた投薬レジメン、及び固定投薬レジメンについてのセリバンツマブの薬物動態を示す（四分位範囲及び異常値を示す）１組のボックス及びウィスカープロットである。図６Ａは、セリバンツマブの最高薬物濃度（Ｃｍａｘ、ｍｇ／Ｌ）を示し、図６Ｂは、セリバンツマブの最低薬物濃度（Ｃｍｉｎ、ｍｇ／Ｌ）を示し、及び図６Ｃは、セリバンツマブの平均薬物濃度（ＡｖｇＣｏｎｃ、ｍｇ／Ｌ）を示す。体重に基づいた用量及び固定用量は、ｙ軸に沿って示す。
【図６Ｂ】図６Ａ〜６Ｃは、投与量及び投与間隔によって、体重に基づいた投薬レジメン、及び固定投薬レジメンについてのセリバンツマブの薬物動態を示す（四分位範囲及び異常値を示す）１組のボックス及びウィスカープロットである。図６Ａは、セリバンツマブの最高薬物濃度（Ｃｍａｘ、ｍｇ／Ｌ）を示し、図６Ｂは、セリバンツマブの最低薬物濃度（Ｃｍｉｎ、ｍｇ／Ｌ）を示し、及び図６Ｃは、セリバンツマブの平均薬物濃度（ＡｖｇＣｏｎｃ、ｍｇ／Ｌ）を示す。体重に基づいた用量及び固定用量は、ｙ軸に沿って示す。
【図６Ｃ】図６Ａ〜６Ｃは、投与量及び投与間隔によって、体重に基づいた投薬レジメン、及び固定投薬レジメンについてのセリバンツマブの薬物動態を示す（四分位範囲及び異常値を示す）１組のボックス及びウィスカープロットである。図６Ａは、セリバンツマブの最高薬物濃度（Ｃｍａｘ、ｍｇ／Ｌ）を示し、図６Ｂは、セリバンツマブの最低薬物濃度（Ｃｍｉｎ、ｍｇ／Ｌ）を示し、及び図６Ｃは、セリバンツマブの平均薬物濃度（ＡｖｇＣｏｎｃ、ｍｇ／Ｌ）を示す。体重に基づいた用量及び固定用量は、ｙ軸に沿って示す。
【図７Ａ】図７Ａ〜７Ｃは、ヘレグリンが、化学療法の種類に関係なく、治療に対する耐性を媒介すること、及びセリバンツマブ（「ＭＭ−１２１」）との共投与が、この耐性を排除することを示すグラフのセットである。卵巣癌のマウスＯＶＣＡＲ８異種移植片モデルにおいて、単剤療法として単独で、またはセリバンツマブの固定用量を用いて、腫瘍担持マウスを、パクリタキセル（図７Ａ）、イリノテカン（図７Ｂ）、またはゲムシタビン（図７Ｃ）で治療した。いずれの場合も、パクリタキセル、イリノテカン、ゲムシタビン単独療法で治療された腫瘍は時間と共に進行し始めたが、化学療法剤をセリバンツマブと共投与したところ、この作用は大きく減退した。対照マウスには、ＰＢＳのみを与えた。
【図７Ｂ】図７Ａ〜７Ｃは、ヘレグリンが、化学療法の種類に関係なく、治療に対する耐性を媒介すること、及びセリバンツマブ（「ＭＭ−１２１」）との共投与が、この耐性を排除することを示すグラフのセットである。卵巣癌のマウスＯＶＣＡＲ８異種移植片モデルにおいて、単剤療法として単独で、またはセリバンツマブの固定用量を用いて、腫瘍担持マウスを、パクリタキセル（図７Ａ）、イリノテカン（図７Ｂ）、またはゲムシタビン（図７Ｃ）で治療した。いずれの場合も、パクリタキセル、イリノテカン、ゲムシタビン単独療法で治療された腫瘍は時間と共に進行し始めたが、化学療法剤をセリバンツマブと共投与したところ、この作用は大きく減退した。対照マウスには、ＰＢＳのみを与えた。
【図７Ｃ】図７Ａ〜７Ｃは、ヘレグリンが、化学療法の種類に関係なく、治療に対する耐性を媒介すること、及びセリバンツマブ（「ＭＭ−１２１」）との共投与が、この耐性を排除することを示すグラフのセットである。卵巣癌のマウスＯＶＣＡＲ８異種移植片モデルにおいて、単剤療法として単独で、またはセリバンツマブの固定用量を用いて、腫瘍担持マウスを、パクリタキセル（図７Ａ）、イリノテカン（図７Ｂ）、またはゲムシタビン（図７Ｃ）で治療した。いずれの場合も、パクリタキセル、イリノテカン、ゲムシタビン単独療法で治療された腫瘍は時間と共に進行し始めたが、化学療法剤をセリバンツマブと共投与したところ、この作用は大きく減退した。対照マウスには、ＰＢＳのみを与えた。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
本明細書では、セリバンツマブと、タキサン（例えば、ドセタキセル）、または葉酸代謝拮抗剤（例えば、ペメトレキセド）のいずれかとの組み合わせを使用して、ヒト患者での白金不応性ＮＳＣＬＣ（例えば、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣ）を効果的に治療する方法が提供される。Ｉ．患者選択
【００３６】
治療のために選択されたＮＳＣＬＣ患者は、局所進行性または転移性非小細胞肺癌の少なくとも１つ、しかし３つを超えない全身療法に失敗した成人患者であり、失敗した全身療法のうちの１つは、白金ベースの治療法（例えば、重複療法）でなくてはならない。別の態様において、ＮＳＣＬＣ患者は、以下の実施例に記載したように、ヘレグリン（ＨＲＧ）ｍＲＮＡに対して陽性である、とＲＮＡ−ＩＳＨアッセイによって評価された１つ以上のＮＳＣＬＣ腫瘍を有する。ある実施形態において、ＮＳＣＬＣ腫瘍は、ＨＲＧに対して陽性である、とＦＤＡ承認試験によって評価される。
【００３７】
別の態様において、本発明は、以前に抗新生物療法を受けていて、抗新生物療法に対する耐性が発達している、治療を必要とするヒト患者における癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）の有効な治療方法を提供する。例えば、ある実施形態において、本発明の方法は、セリバンツマブと、タキサン（例えば、ドセタキセル）、または葉酸代謝拮抗剤（例えば、ペメトレキセド）のいずれか、とを投与することによって、以前に抗新生物療法を受けていたヒト患者での癌を治療することを含む。
【００３８】
ＩＩ．併用療法
セリバンツマブは、タキサン（例えば、ドセタキセル）、または葉酸代謝拮抗剤（例えば、ペメトレキセド）と共に、ＮＳＣＬＣを有する選択された対象に共投与される。別の実施形態において、セリバンツマブは、パクリタキセル、イリノテカン、またはゲムシタビンと共に、卵巣癌、原発性腹膜癌、または卵管癌を有する選択された対象に共投与される。
【００３９】
「共投与」とは、セリバンツマブと、タキサン、または葉酸代謝拮抗剤との同時投与または連続投与のことを指す。連続投与の場合、セリバンツマブと、タキサン、または葉酸塩との双方が、治療を受けた患者の体内に同時に存在するように、十分に短い時間間隔で共投与をしなくてはならない。
【００４０】
ある実施形態において、セリバンツマブは、タキサンドセタキセルと共投与される。ドセタキセルは、乳癌、及びＮＳＣＬＣ（白金療法後）の治療のための単剤使用、ならびに、ホルモン不応性前立腺癌、ＮＳＣＬＣ（シスプラチンとの組み合わせ）、胃腺癌、及び頭頸部の扁平上皮癌の治療のための併用療法について承認がされている。ＮＳＣＬＣの治療のためのドセタキセルの承認された用量レジメンは、７５ｍｇ／ｍ２であり、３週間ごとに１回、１時間にわたって静脈内に投与される。
【００４１】
別の実施形態において、セリバンツマブは、商品名ＡＬＩＭＴＡ（登録商標）としても市販されている葉酸代謝拮抗物質のペメトレキセドと共投与される。ＡＬＩＭＴＡは、非扁平上皮細胞ＮＳＣＬＣ及び中皮腫の併用療法治療について承認がされている。ＡＬＩＭＴＡの推奨されている用量は、各２１日間のサイクルの１日目に、５００ｍｇ／ｍ２の用量で静脈内投与（ｉ．ｖ）である。併用療法レジメンにおいて毒性が認められれば、必要に応じて減量することができ、また、以後のサイクルで調整することもできる。
【００４２】
別の実施形態において、３つ以下の他の抗癌治療薬を、治療サイクル内で、セリバンツマブと組み合わせて投与する。別の実施形態において、２つ以下の他の抗癌治療剤を、治療サイクル内で、セリバンツマブと組み合わせて投与する。別の実施形態において、１つの他の抗癌治療剤だけを、治療サイクル内で、セリバンツマブと組み合わせて投与する。別の実施形態において、他の抗癌治療剤は、治療サイクル内で、セリバントブと組み合わせて投与しない。別の実施形態において、他の抗癌治療剤は、セリバンツマブの投与と同時に、またはその前後に投与され得る。
【００４３】
本明細書において使用される場合、「抗新生物剤」とは、ヒトにおける新生物、特に、癌腫、肉腫、リンパ腫、または白血病のような悪性（癌性）病変の発達または進行を阻害する機能的特性を有する薬剤を指す。転移の阻害は、しばしば、抗新生物剤の特性である。
【００４４】
ＩＩＩ．治療プロトコル
進行性または転移性ＮＳＣＬＣを有する選択された患者を、２１日間の治療サイクルの１日目に、少なくとも１度は治療する。第１の治療サイクルの前に、患者は、前処置レジメンを受ける。このレジメンは、今後の化学療法治療（例えば、ペメトレキセド、またはドセタキセル）に特異的であり、かつ、ペメトレキセドまたはドセタキセル関連毒性を緩和するように設計されている。ドセタキセルの前処置は、ドセタキセル投与の１日前から開始して、３日間、デキサメタゾンなどのコルチコステロイドの（例えば、１日２回、８ｍｇの）前投与を含む。ペメトレキセド前処理は、最初の２１日間のサイクルの開始の少なくとも７日前から開始して、低用量の経口葉酸製剤（または葉酸を含有するマルチビタミン）の前投与を含む。２１日間サイクルそれぞれの１日目に、セリバンツマブの投与の少なくとも３０分前に、患者は、ドセタキセル、またはペメトレキセドの標準用量を静脈内に受け入れる。次いで、セリバンツマブを、９０分（最初の２１日間サイクルの１日目）、または６０分（以後の２１日間サイクルの１日目）かけて静脈内に投与する。
【００４５】
本明細書において使用される場合、用語「固定用量」（別名、「フラット用量」または「フラット固定用量」）とは、患者の体重または体表面（ＢＳＡ）に関係なく、成人患者に投与される測定用量のことを指す。したがって、固定用量は、ｍｇ／ｋｇ（体重に基づいた）用量、またはｍｇ／ｍ２（ＢＳＡ）用量として提供されることはなく、むしろ、単回投与で成人患者に投与される薬剤の絶対量（例えば、抗ＥｒｂＢ３抗体のミリグラム）として表される。
【００４６】
ＩＶ．転帰
開示されたプロトコルに従って治療された患者は、標的病変に関して、ＣＲ、ＰＲ、またはＳＤを示し得る。別の実施形態において、そのように治療された患者は、腫瘍収縮、及び／または成長速度の低下、すなわち、腫瘍増殖の抑制を経験する。別の実施形態において、腫瘍細胞の増殖が、減退または阻害される。あるいは、以下に示した１つ以上が、治療に対する有益な反応を示すものといえる。癌細胞の数を減少させることができる。腫瘍の大きさを小さくすることができる。末梢器官への癌細胞の浸潤を、阻害、遅延、減速、または停止させることができる。腫瘍の転移を遅延または阻害することができる。腫瘍の増殖を阻害することができる。腫瘍の再発を予防または遅延させることができる。癌に関連する１つ以上の症状を、ある程度にまで緩和することができる。好ましい反応の他の兆候として、測定可能な腫瘍病変、または非標的病変の量、及び／またはサイズの減少がある。
【００４７】
Ｖ．キット及び単位剤形
外部容器（例えば、バッグ、クラムシェル、またはボックス）内に収容された内部容器（例えば、バイアル）に、前述した方法での使用のための治療有効単位投与形態（例えば、単回投与量）で、配列番号１（ＣＤＲＨ１）、配列番号２（ＣＤＲＨ２）、及び配列番号３（ＣＤＲＨ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列、ならびに、配列番号４（ＣＤＲＬ１）、配列番号５（ＣＤＲＬ２）、及び配列番号６（ＣＤＲＬ３）に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３配列を含む抗ＥｒｂＢ３抗体と、医薬として許容可能な担体とを含む組成物、を含むキットも提供される。任意で、抗ＥｒｂＢ３抗体は、セリバンツマブである。単位剤形は、典型的に、内部容器からの必要量の取り出しを容易ならしめるために、ある量の薬物、任意で、投与量よりも僅かに多い量（例えば、３０００ｍｇ）の薬物を含む。この投与量は、複数のバイアル、例えば、１２×１０．１ｍｌのバイアル、または６×２０ｍｌのバイアルを含み得る。キット内の各バイアルは、同じロット番号のものを含むようにすべきである。キットは、任意で、医療関係者（例えば、医師または看護師）が、そこに含有された抗体組成物（及びもしあれば、他の薬物）を、本明細書で教示した方法に従って、ＮＳＣＬＣ患者に対して投与することを可能ならしめるための、例えば、投与パラメータ及びスケジュールを含む指示書を備えることもできる。ある実施形態において、キットは、例えば、個別の容器に、任意で、単回投与単位剤形で、ドセタキセル、及び／またはペメトレキセドをさらに含む。キットは、医薬組成物を投与するために必要な希釈剤、器具、または装置、例えば、滅菌希釈剤、例えば、注射用の生理食塩水、またはデキストロース溶液のための１つ以上の容器、１つ以上のシリンジ（例えば、予め充填されたシリンジ）、カテーテル、皮下注射（ＩＶ）針、静脈内注射セットをさらに含み得る。
【００４８】
以下の実施例は単なる例示に過ぎず、よって、本開示に接した当業者にとって自明な程度の多数の変形及び等価物にまで、本開示の範囲が限定されるものと解釈すべきではない。
【００４９】
本明細書で引用したすべての特許、特許出願、及び文献は、本明細書の一部を構成するものとしてそれらの全内容を援用する。
【実施例】
【００５０】
方法
ヘレグリン（ＨＲＧ）ＲＮＡ−ＩＳＨは、以下の記載、ならびに、２０１４年１２月２９日に出願された係属中の国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０７２５９４号「Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  Ｐｒｏｆｉｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｗｉｔｈ  ＥｒｂＢ３  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ／ｏｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｉｅｓ」での実施例３の針生検分析を除いた記載に従って実施する。
【００５１】
ＲＮＡ−ＩＳＨアッセイ
このアッセイにあっては、ＦＦＰＥ腫瘍試料を、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（登録商標）（“ＡＣＤ”Ｈａｙｗａｒｄ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）ＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）アッセイに対して以下の変更を加えたものを用いて、ＨＲＧ  ＲＮＡレベルについてスコアを割り当てる。具体的には、細胞を透過処理し、ＨＲＧに特異的な一組のオリゴヌクレオチド「Ｚ」プローブ（例えば、米国特許第７，７０９，１９８号を参照されたい）とインキュベートする。「Ｚ」プローブを使用して、転写物あたり複数のプローブセットを用いることで、標準的なＩＳＨ法よりもアッセイの特異性が高まる。このアッセイで使用可能なＨＲＧプローブセットは、ＡＣＤ部品番号３１１１８１である。ＡＣＤによって調製される（また、ＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）アッセイで使用される）別のＨＲＧプローブセットは、配列番号４２のヌクレオチド４４２〜２９７７を含むＨＲＧ転写産物の１９１９塩基長領域を標的とし、かつ、１５個の別個のＨＲＧイソフォーム（α、β１、β１ｂ、β１ｃ、β１ｄ、β２，β２ｂ、β３，β３ｂ、γ、γ２、γ３、ｎｄｆ４３、ｎｄｆ３４ｂ、及びＧＧＦ２）も一緒に検出する、各々の長さが２５塩基である、６２個のプローブ（３１対）を含む。Ｚプローブインキュベーションの後、標的転写物に結合した一対の隣接するＺプローブに対してのみハイブリダイズすることができるプリアンプが加えられる。これにより、非特異的結合の増幅が最小限に抑えられる。次いで、プリアンプに対する配列特異的ハイブリダイゼーションに基づいて、幾つかの連続増幅ステップが実施され、続いて、腫瘍組織におけるＨＲＧ  ＲＮＡレベルの半定量的測定を可能にする酵素媒介発色検出を行う。
【００５２】
ステップ１：ＦＦＰＥ組織切片を、脱パラフィンし、前処理をして、内在性ホスファターゼ及びペルオキシダーゼをブロックし、かつ、ＲＮＡ結合部位を脱マスキングする。ステップ２：隣接する配列にて標的ＲＮＡに対して特異的にハイブリダイズする標的特異的なダブルＺプローブを適用する。ステップ３：プリアンプオリゴヌクレオチド、増幅オリゴヌクレオチド、最終ＨＲＰ結合オリゴヌクレオチド、及びＤＡＢを、連続的に適用して標的を検出する。ステップ４：光学顕微鏡を用いてスライドを視覚化し、病理学者がスコアを割り当てる。
【００５３】
アッセイに対してスコアを割り当てるために、４つの細胞株の基準組織マイクロアレイ（ＴＭＡ）を腫瘍試料と並行して染色する。これらの細胞株は、低レベルから高レベルに及ぶ異なるレベルのＨＲＧを発現する。次いで、病理学者は、基準ＴＭＡとの視覚的比較に基づいて、患者の試料にスコアを割り当てる。
【００５４】
１．試料調製及び染色
患者の試料調製及び病理学者の検討手順は、ｑＩＨＣアッセイと同様である。生検または外科的切除を行い次第に、患者の腫瘍試料を、即座に、固定剤（１０％中性緩衝ホルマリン）に、典型的に、２０〜２４時間、室温で、置く。次いで、試料を、７０％エタノールに移し、標準的な病院での手順に従って、パラフィンに包埋する。アッセイを行う前に、試料の４μｍ切片を調製し、正に帯電した７５×２５ｍｍのスライドガラス上に載せる。これらは、組織接着性を改善するために（６５℃で、１０〜３０分）加温し、組織保存のためにパラフィンに浸し、窒素下、室温で保存する。切片の１つは、所定のＨ＆Ｅ染色のために使用され、病理学者は、腫瘍の内容物、性質、及び臨床診断のために検討を行う。病理学者は、腫瘍、間質、及び壊死の領域を区別する。この検討の後、隣接または近傍の組織切片（Ｈ＆Ｅ切片の２０μｍ以内）を、アッセイのために使用する。
【００５５】
ＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）アッセイのための前処理液、標的プローブ、及び洗浄バッファーは、ＡＣＤから入手する。このアッセイは、手動で実施することができ、またはＶＥＮＴＡＮＡ自動染色装置（Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＸＴ）を使用して実施することもできる。手動のアッセイでは、ＨｙｂＥＺオーブン（ＡＣＤ）内部の金属スライドトレイで、４０℃のインキュベーションを行う。自動アッセイでは、インキュベーション温度は、自動染色装置が制御する。ＡＣＤソフトウェアを使用して、ＶＥＮＴＡＮＡ自動染色装置でＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）アッセイを実行する。
【００５６】
アッセイを開始するために、試料を、６５℃で、３０分間、加温して、パラフィンを除去し、キシレン（２×２０分）、及び１００％エタノール（２×３分）に、連続して浸漬する。空気乾燥後、組織を、内因性酵素（発色検出試薬でバックグラウンドを生成しうるホスファターゼ及びペルオキシダーゼ）をブロックするＰｒｅｔｒｅａｔ１溶液で覆い、室温で、１０分間、インキュベートし、次いで、ｄＨ２Ｏに浸して、２回濯ぐ。次いで、スライドを、沸騰しているＰｒｅｔｒｅａｔ２溶液で、１５分間、インキュベートして結合部位を脱マスクし、直ちにｄＨ２Ｏの容器へと移す。
【００５７】
ｄＨ２Ｏ（２×２分）に浸漬して洗浄した後、組織を、Ｐｒｅｔｒｅａｔ３溶液で覆い、ＨｙｂＥＺオーブンにて、４０℃で、３０分間、インキュベートする。Ｐｒｅｔｒｅａｔ３溶液は、プロテアーゼを含有しており、そのものは、タンパク質のＲＮＡ転写物を除去し、標的プローブを露出させる。ｄＨ２Ｏで２×２分のスライドを洗浄した後、組織を上記した１５個のアイソフォーム検出ＨＲＧ  ＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）プローブで覆う。一連の組織切片を、陽性対照プローブ（タンパク質ホスファターゼ１Ｂ（ＰＰ１Ｂ）ＡＣＤ部品番号３１３９０１）、陰性対照プローブ（細菌遺伝子ＤａｐＢ−ＡＣＤ部品番号３１００４３）、またはＨＲＧプローブと、一緒に、４０℃で、２時間、インキュベートする。Ａｍｐ１試薬とインキュベートする前に、スライドを、１×ＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）洗浄緩衝液で洗浄（２×２分）する。Ａｍｐ１インキュベーション条件（３０分、４０℃）は、ＲＮＡ転写物に結合した隣接するプローブ対にのみ結合することの方が好ましい。スライドを、ＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）洗浄緩衝液に浸漬して洗浄した後に、次の増幅試薬と一緒にインキュベートする。
【００５８】
シグナル増幅のために、次々に適用される試薬の各々は、先行する試薬に結合し、前のステップで存在するシグナルを増幅する。増幅ステップは、Ａｍｐ２（１５分、４０℃）、Ａｍｐ３（３０分、４０℃）、Ａｍｐ４（１５分、４０℃）、Ａｍｐ５（３０分、室温）、及びＡｍｐ６（１５分、室温）を含み得る。最終試薬であるＡｍｐ６は、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）にコンジュゲートすることができる。次いで、転写物を視覚化するために、スライドを、室温で、１０分間、ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）を含有するＡＣＤ染色試薬と一緒にインキュベートする。ｄＨ２Ｏで濯いで、発色現像を停止する。次いで、核を、希塩酸アンモニウムで青色にしたヘマトキシリンで対比染色する。Ｃｙｔｏｓｅａｌ非水性マウント培地（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、８３１２−４）でカバースリップする前に、染色したスライドを、８０％エタノール（２×５分）、１００％エタノール（２×５分）、及びキシレン（２×５分）に浸漬する。
【００５９】
２．バイオマーカー値の生成
生成されるバイオマーカー値は、病理学者のスコアの合成数である。アッセイを評点するために、４つの異なる細胞株のプラグを含むＴＭＡが、各染色操作に取り入れられる。細胞株プラグは、ＴＭＡを生成する前に調製する。準コンフルエント密度にまで培養された培養細胞を、トリプシン処理して回収し、ＰＢＳで濯ぎ、４℃で、１６〜２４時間、固定した後、ＰＢＳで濯ぎ、７０％エタノールに再懸濁する。次いで、細胞を、約１２，０００ｒｐｍで、１〜２分間、遠心分離して高密度細胞ペレットを生成させ、次いで、これらを、低融点アガロースでコーティングする。アガロースペレットを、４℃で、７０％エタノールに保存し、ＴＭＡを構築する前に、パラフィンに包埋する。
【００６０】
これらのアレイを、例えば、Ｍａｎｕａｌ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ａｒｒａｙｅｒ（ＭＴＡ−１、Ｂｅｅｃｈｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して構築し、０．６ｍｍパンチを利用して細胞ペレットの一部を取り出し、これを空のレシピエントパラフィンブロックに差し込む。病理学者は、ＴＭＡの画像を用いて、０（検出不能）〜４（高い）のスコアを割り当てる。病理学者は、腫瘍細胞の上位２つの集団について２つのスコアを割り当て、各集団の細胞の割合と共に、間質細胞の最上位集団についての１つのスコア（利用可能な場合）を割り当てる。したがって、例えば、患者試料は、３のスコアを有する２０％の腫瘍、２のスコアを有する４０％の腫瘍、及び２のスコアを有する６０％の間質を有し得る。標的プローブ（ＨＲＧ）、ならびに、陽性対照プローブ（ＰＰ１Ｂ）、及び陰性対照プローブ（ＤａｐＢ）に対してスコアを割り当てる。
【００６１】
実施例１：セリバンツマブは、ヘレグリン（ＨＲＧ）に反応する肺癌細胞株の増殖に対してインビトロ及びインビボにおいて単剤活性を示す
ＲＮＡ−ＩＳＨアッセイ、及びバイオマーカー分析は、上記したように実施される。これらの研究は、２５種類のＥＧＦＲ野生型ＮＳＣＬＣ細胞株のうちの９種類が、ＨＲＧに反応することを示しており、つまりは、３Ｄスフェロイド培養を利用するＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定したところ、外因的に添加されたＨＲＧに反応して、細胞増殖が活発になっていることを示している（図１）。
【００６２】
２つのＨＲＧ反応性細胞株、及び２つの非反応性細胞株を選択して、皮下マウス異種移植片におけるセリバンツマブの単剤活性を評価した。３日おきに（Ｑ３Ｄ）、３００μｇのセリバンツマブを、マウスに投与した。図２Ａ及び２Ｂに示すように、ＨＲＧ反応性細胞株（それぞれ、Ａ５４９及びＨ３２２Ｍ）は、インビボにおいて、単一剤のセリバンブラムに反応した。対照的に、インビトロにおいてＨＲＧに反応しなかったＨ４６０及びＨｏｐ９２は、インビボにおいてセリバンツマブに反応しなかった（それぞれ、図２Ｃ及び２Ｄ）。高い組織ＨＲＧ  ｍＲＮＡレベルが、セリバンツマブ反応性異種移植腫瘍において測定された。興味深いことに、自己分泌ＨＲＧシグナル伝達を示すヒトＨＲＧ  ｍＲＮＡと、間質由来傍分泌シグナル伝達を示すマウスＨＲＧ  ｍＲＮＡとの双方が、ＨＲＧ反応性腫瘍で観察された。これらのデータは、ＥＧＦＲ野生型ＮＳＣＬＣ細胞系のサブセットが、ＨＲＧに対して反応性であることと、これらの細胞系が、ＨＲＧの産生を惹起することと、組織でのＨＲＧの存在が、インビボにおいてのセリバンツマブ反応に必要であると考えられることと、を示し、さらには、ＨＲＧを発現していない腫瘍を有する患者を除外することを支持する。
【００６３】
実施例２：セリバンツマブ処理は、肺癌細胞株におけるペメトレキセド及びドセタキセルに対するＨＲＧ誘発耐性を克服することができる
図３Ａ〜３Ｄに示すように、９つの肺癌細胞株のパネルにおいて、ＨＲＧは、ペメトレキセド及びドセタキセルに対する耐性を誘導する。ＨＲＧ駆動ＥｒｂＢ３シグナル伝達は、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ経路を介した生存シグナル伝達を媒介し、及び細胞傷害性化学療法に無感応性を付与する一般的メカニズムとして関与している。図３Ａ及び３Ｂに示すように、ＨＲＧは、ＥＧＦＲ野生型ＮＳＣＬＣ細胞系のサブセットにおいて、ペメトレキセド及びドセタキセルに対する耐性を誘導する。増殖は、３Ｄスフェロイド培養物を利用する９つの細胞株のパネルについて、ＨＲＧの存在下または非存在下で測定した。全用量反応曲線が得られたが、それらの結果は、化学療法の単一の関連用量についてのみを示すものに過ぎない。ＨＲＧに対して最も反応性である細胞株のうちの３種において、ドセタキセルとペメトレキセドの双方による細胞生存率の阻害は、ＨＲＧを添加することで減退した。実際、化学療法剤の存在下でさえも、％阻害の陰性値で示されているように、ＨＲＧは増殖を誘導した。重要なことに、ＨＲＧに加えて、セリバンツマブを添加すると、ドセタキセル及びペメトレキセドの双方に対する感応性が、これらの細胞系において回復した（図３Ｃ及び３Ｄ）。
【００６４】
実施例３：ＮＳＣＬＣ組織試料におけるＨＲＧ  ｍＲＮＡ発現レベル
乳房及び卵巣癌における従前の無作為第ＩＩ相臨床試験由来の腫瘍試料の分析は、定量ＲＴ−ＰＣＲ（前述したＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０７２５９４に従った）で測定された場合に参照遺伝子と比較して、−５のＨＲＧ発現のＣＴレベルが、セリバンツマブ活性の閾値であることを示した。閾値以上（≧−５）のＨＲＧ発現を有する患者では、標準治療法と、セリバンツマブの共投与とで治療された患者において、ＰＦＳの増加が認められた。この閾値は、検出可能なＨＲＧをコードするＲＮＡの存在におおよそ対応するので、Ｔｈｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ；ｈｔｔｐ：／／ｃａｎｃｅｒｇｅｎｏｍｅ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）データセットを解析して、多種多様な固形腫瘍における検出可能なＨＲＧ発現の有病率を決定した（図４）。このデータは、ＮＳＣＬＣが、ＨＲＧ駆動ＥｒｂＢ３シグナル伝達が、特に一般的であるという指標であることを示唆している。
【００６５】
加えて、ＥＧＦＲ野生型ＮＳＣＬＣ（ＭＭ−１２１−０１−１０１）でのセリバンツマブの研究において登録された患者から得た治療前コア針生検でのＲＮＡ  ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＲＮＡ−ＩＳＨ）アッセイを利用して（ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０７２５９４にもしたがって）、ＨＲＧ発現を評価した。全体として、試料の５４％が１＋（すなわち、１〜３ドット／細胞（２０〜４０倍で視認可能）以上）を獲得していた（図５Ａ）。さらに、分析対象は広げられることとなり、Ｃｕｒｅｌｉｎｅ、Ｉｎｃ．（Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）から入手した別の５３種類の保存病変及び生検を分析した（図５Ｂ）。ＭＭ−１２１−０１−１０１肺研究での所見と比較して、＞１＋のスコアを有するＲＮＡ−ＩＳＨによるＨＲＧ  ｍＲＮＡの有病率は、４４〜５４％であり、また、セリバンツマブの添加に起因するＰＦＳの増大とも相関していた。
【００６６】
実施例４：ドセタキセルまたはペメトレキセドとの組み合わせのためのセリバンツマブ用量の決定
母集団薬物動態（ＰＫ）解析は、セリバンツマブの固定投与計画を使用することを支持している。
【００６７】
シミュレーションによる分析：最適な投薬レジメンを評価するために、集団分析を用いて、薬物動態パラメータのポイント推定値及び変動を推定し、体重との関係を含む変動の原因を評価した。得られた推定値を用いて、固定用量及び体重に基づいた投薬計画を比較した。固定投与戦略では、体重に基づいた投与量に、母集団の重量中央値（７２ｋｇ）を乗じて、次の５００ｍｇ（バイアルサイズ）に丸めたとものと仮定して、同等の投与量をシミュレーションする。シミュレーション結果は、固定用量及び体重に基づいた投薬レジメンの間での同等の変動性を示し、体重に基づいた投薬によるＰＫ変動が減少するという利点はないことを示唆している（１０ｍｇ／ｋｇと同等なだけの用量レジメンでは、次の５００ｍｇにまで用量が切り上げられるので、高濃度が予測される）。例えば、２０ｍｇ／ｋｇのＱ２Ｗの体重に基づいた用量、及び１．５ｇのＱ２Ｗに対応する固定用量は、最高、最低、及び平均の匹敵する定常状態濃度レベル及び変動性を有する。この結果は、クリアランスが重量に比例して小さくなった（すなわち、クリアランスと重量のｌｏｇ１０との間の推定比例が０．２０３であった）結果として説明することができる。この比例関係は、体重に基づいたレジメン（これは、クリアランスと体重のｌｏｇ１０との間の比例定数を仮定した）によって、体重の大きい患者に過剰投与される結果となる。
【００６８】
異なる用量間隔でシミュレーションされた薬物動態（平均及び最小薬物濃度）を比較することによって行われたシミュレーション研究は、３週間ごとのレジメンが最適であることを示す。３ｇのＱ３Ｗの用量レジメンは、１）４０ｍｇ／ｋｇのＱ３Ｗに匹敵する最高薬物濃度（Ｃｍａｘ）、２）同等の最低薬物濃度（Ｃｍｉｎ）〜２０ｍｇ／ｋｇのＱ２Ｗ、３）２０ｍｇ／ｋｇのＱ２Ｗ（従前のＮＳＣＬＣ試験で検討された用量）と２０ｍｇ／ｋｇのＱ１Ｗ（従前の卵巣及び乳癌研究で検討された用量）の間の平均定常状態濃度を有するものと予測している。したがって、このシミュレーション研究は、以前に研究された有効なセリバンツマブ用量（４０ｍｇ／ｋｇ負荷＋２０ｍｇ／ｋｇのＱ１Ｗまたは＋２０ｍｇ／ｋｇのＱ２Ｗ）から観察された曝露の範囲内で薬物動態レベルを維持しながらも、３ｇのＱ３Ｗのセリバンツマブ用量レジメンは、コンプライアンス及び簡便性を改善すべきであることを示唆している。負荷用量の寄与を評価するために、負荷用量の有無に関係なく、シミュレーションされた用量レジメンの濃度軌道を比較する。負荷用量は、最大で３ｇ（４０ｍｇ／ｋｇについての対応する固定用量）に制限されている。結果は、負荷用量の有無に関係なく、同等の薬物動態を示しており、したがって、負荷用量を用いない投与計画を支持する。
【００６９】
実験：セリバンツマブを用いた治療を受けた４９９名の患者の母集団薬物動態解析を用いて、セリバンツマブの薬物動態を評価した。セリバンツマブの第Ｉ相及び第ＩＩ相の双方の試験の４９２５データ点を解析した。これらの薬物動態データは、２区画モデルを用いて記述されており、推定パラメータを表１に示している。共変量の選択は、ベースラインの共変量（性別、人種、年齢、体重、予定用量、及び試験／適応症）と分布及びクリアランスの容量との間の潜在的な関係を評価した。結果は、体重、性別、及びクリアランスの間に有意な関係を示しており、最終的なパラメータ推定値を表１に示している。モデルは、クリアランス（ＣＬ）の対数と重量との間の比例関係を仮定しており、及び０．２０３の推定比例定数が得られた。体重とクリアランスとの間に関係が存在する場合、容量（Ｖ）と重量（ＷＴ）との間に有意な関係は観察されなかった。
【表１】
2018513155.tif 000002
【００７０】
体重に基づいた投薬の利点を評価するために、薬物動態を、体重に基づいた投薬レジメンと固定用量の投薬レジメンとを比較することによって、シミュレーション研究を行った。４９９名の患者の各々に由来するＰＫパラメータの事後推定値をシミュレーションに使用した。固定投与計画の模擬投与量は、最も近似している５００ｍｇ投与単位に切り上げることによって選択した。シミュレーション結果は、固定用量及び体重に基づいた投薬レジメンの双方に匹敵する変動性を示し、体重に基づいた投薬によるＰＫ変動の減少の利点がないことを示唆している（図６Ａ〜６Ｃ）。例えば、２０ｍｇ／ｋｇのＱ２Ｗという体重に基づいた用量、及び１．５ｇのＱ２Ｗという対応する固定用量は、最高、最低、及び平均の匹敵する定常状態濃度レベルと変動性を有する。結果は、ＣＬと体重の対数の推定比例が０．２０３であることから説明され、したがって、体重に基づくレジメン（ＣＬと体重の対数の比例定数を仮定した）は、体重の大きい患者を過量用量にする傾向がある。改善されたコンプライアンス及び簡便性のためのセリバンツマブ投薬レジメンの最適化を評価するために、シミュレーション薬物動態（平均及び最低薬物濃度）を異なる用量間隔で比較することによって、シミュレーション研究を行った。結果は、投与頻度を３週間ごとに１回が最適である可能性を示した。３０００ｍｇのＱ３Ｗでの用量レジメンは、１）体重に基づいた用量レジメン及び毎週のセリバンツマブの用量レジメンの負荷用量として、以前に使用された用量レベルである４０ｍｇ／ｋｇに匹敵する最高薬物濃度（Ｃｍａｘ）、２）１００ｍｇのエルロチニブと組み合わせたＮＳＣＬＣにおける従前のセリバンツマブ試験で使用された用量である２０ｍｇ／ｋｇのＱ２Ｗに匹敵する最低薬物濃度（Ｃｍｉｎ）、ならびに、３）化学療法と組み合わせて４０ｍｇ／ｋｇの負荷用量に従った、以前に研究されたセリバンツマブの通常用量である２０ｍｇ／ｋｇのＱ２Ｗと２０ｍｇ／ｋｇのＱ１Ｗとの間にある平均定常状態濃度、を有するものと考えられる。したがって、このシミュレーション研究は、以前に研究されたセリバンツマブ用量（４０ｍｇ／ｋｇ＋２０ｍｇ／ｋｇのＱ１Ｗ及び２０ｍｇ／ｋｇのＱ２Ｗ）から観察された曝露の範囲内で薬物動態レベルを維持しながらも、３０００ｍｇのＱ３Ｗのセリバンツマブ用量レジメンが、コンプライアンスを改善する可能性を有する、ことを示唆している。加えて、セリバンツマブを、ペメトレキセド、パクリタキセル、またはカバジタキセルの標準用量と共投与をした場合、ＭＴＤは同定されなかった。これらの研究では、セリバンツマブを、４０ｍｇ／ｋｇで化学療法剤（ペメトレキセド、パクリタキセル、またはカバジタキセル）の全用量と共投与し、続いて、２０ｍｇ／ｋｇの週用量を投与した。４０ｍｇ／ｋｇの負荷用量は、体重７５ｋｇの平均的患者に対する３０００ｍｇに相当する。このように、この研究のために提案された累積的セリバンツマブ用量、３０００ｍｇのセリバンブサイトのＱ３Ｗは、ペメトレキセドと組み合わせて以前に試験をしたセリバンツマブのための用量レジメンを超えない。
【００７１】
したがって、セリバンツマブは、以下の研究で概説した化学療法レジメンと同期して、２１日間のサイクルの各々の１日目に、３ｇ／３０００ｍｇの固定用量で投与する。
【００７２】
実施例５：ＮＳＣＬＣの治療のための研究デザイン
この研究は、無作為化した、非盲検で、国際的な、多施設での第ＩＩ相試験であって、局所進行性または転移性疾患の全身療法を２つだけを受けており、そのうちの一方が、白金ベースの重複療法である全身療法を受けた後も引き続いて進行しているＮＳＣＬＣの成人患者における試験である。
【００７３】
インフォームド・コンセント及び初期の適格基準の評価に署名をした後、すべての患者は、ＨＲＧ検査を行う中央検査施設に（研究ラボマニュアルに従った収集及び処理のための要件を満たす）組織試料を提供する。患者のＨＲＧ状態を正確に評価するために、組織試料の採取日と本研究のスクリーニングとの間に、全身療法を受けないことが重要である。適切な組織が入手できない場合、患者は、ＨＲＧ検査に必要な組織を得るために、微細針吸引生検（ＦＮＡ）またはコア針生検（ＣＮＢ）を受けなければならない。これらの手順では、組織の採取に伴う危険性を最小限にするために、容易に入手可能な腫瘍病変を選択するように要求されている。一般的な指針として、コア針生検、またはＦＮＡの選択された手技位置が、処置を行った施設で＞２％の重大な合併症率を示すような場合には、それは危険度の高い処置と考えられ、また、避けるべきである。中央検査室に組織試料が到着すると、研究者側には７日以内に結果が通知される。陽性のＨＲＧ状態を有する患者は、介入研究母集団に入ることができる。ＨＲＧの染色を示さない腫瘍を有する患者は、スクリーニング手順をさらに続けず、及び以下に概説する観察グループに入ることができる。
【００７４】
観察グループ
人口動態、疾患の特徴、及び以前の治療法を含むベースラインデータを収集する。加えて、その後に受けた抗癌治療法及び全生存期間（ＯＳ）に関するデータを収集する。患者は、自由に、あらゆる研究に参加し、あらゆる適切なケアを求めることができる。
【００７５】
介入グループ
すべてのスクリーニング手順が完了し、治療無作為化（ＨＲＧ陽性、介入グループ）についての適格性を決定するまでに、研究者は、現症及び病歴に基づいて、各患者に最も適した化学療法主剤（ドセタキセルまたはペメトレキセド）を選択しなければならない。患者は、Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ  Ｗｅｂ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＩＷＲＳ）を使用して、２：１の比率（実験治療群対比較治療群）で無作為化される。無作為化は、化学療法主剤（ドセタキセルまたはペメトレキセド）、及び局所進行性または転移性疾患のための従前の全身療法の数（１つまたは２つ）に基づいて層別化される。介入グループ内では、患者は、治療群Ａまたは治療群Ｂへと割り当てられる。
介入治療群Ａ（実験治療群）：
セリバンツマブ：２１日間のサイクルの１日目に、３０００ｍｇの固定用量（１２×１０．１ｍｌのバイアル；６×２０ｍｌのバイアル）を静脈内（ＩＶ）投与
ドセタキセル：２１日間のサイクルの１日目に、７５ｍｇ／ｍ２をＩＶ投与
または
セリバンツマブ：２１日間のサイクルの１日目に、３０００ｍｇの固定用量（１２×１０．１ｍｌのバイアル；６×２０ｍｌのバイアル）をＩＶ投与
ペメトレキセド：２１日間のサイクルの１日目に、５００ｍｇ／ｍ２をＩＶ投与
介入治療群Ｂ（対照治療群）：
ドセタキセル：２１日間のサイクルの１日目に、７５ｍｇ／ｍ２をＩＶ投与
または
ペメトレキセド：２１日間のサイクルの１日目に、５００ｍｇ／ｍ２をＩＶ投与
治療は、ランダム化を行って７日以内に開始しなくてはならない。研究者が進行性疾患または許容できない毒性を評価するまで、患者は治療を受けられるものと考えられる。腫瘍の評価は、６週間ごと（＋／−１週間）に、局所放射線科医によって測定及び記録され、ＲＥＣＩＳＴガイドライン（バージョン１．１）を用いて評価される。ＲＥＣＩＳＴ  １．１以外の理由で治療を中止した患者を含むすべての患者は、進行性疾患を評価し、治療を終えて６週間（＋／−１週間）の追加スキャンを行うべきである。加えて、二次的な有効性の客観性を確認するために、スキャンについての独立した中央判定が実施される。介入グループの患者のすべての画像は、この目的のために中央画像設備に提出され、画像規約に従って、独立した検査官によって評価される。患者が治療を終えた後、死亡または研究の終了のいずれか早い時点まで、生存情報及びその後の治療に関する情報は収集される。
【００７６】
セリバンツマブ＋ペメトレキセドの組み合わせについての安全性は確立されており、最大耐性用量（ＭＴＤ）に達しない標準用量で、タキサン（パクリタキセル及びカバジタキセル）と組み合わせて投与する。しかしながら、セリバンツマブとドセタキセルとの併用に関するデータがないため、１２番目の患者が、ドセタキセルまたはセリバンツマブ＋ドセタキセルへと無作為化され、かつ、１回の治療サイクルが完了した後に、この主剤への登録が一時的に停止され、次いで、治療責任医師、医療モニター、及びスポンサーの代表者によって、双方の治療群で新たに得られた安全性データを検討する。登録を続行する前に、ＤＭＣから追加の入力を収集し得る。ＤＭＣは、ＤＭＣ規約に従って、四半期ごとに、引き続き安全性データを監視する。
【００７７】
組み入れ基準
試験に組み入れるにあたって、すべての患者は、以下のものを有する／以下の者である、すなわち、細胞診または組織学的に確認されており、いずれかの転移性疾患（ステージＩＶ）を有するＮＳＣＬＣ、治癒的意図を伴う手術に耐えられないステージＩＩＩＢの疾患、最後の全身療法を行った後の放射線学的評価によって実証された、疾患の進行または再発性疾患の証拠、原発性または再発性疾患の管理のために、以前に、白金ベースの１つのレジメンを受けていたこと、治験責任医師の判断によって、３週間ごとに１回、意図された化学療法、ドセタキセルまたはペメトレキセドに対して臨床的に適格であること、直近の治療の完了後に収集された利用可能な最近の腫瘍検体、コア針生検または微細針吸引生検のいずれかに適した病変、１８歳以上、ならびに、インフォームド・コンセントを提供するか、またはそれに対処できる法的代理人が存在すること。
【００７８】
介入群に組み入れるにあたって、患者は、集中検査によって決定される≧１＋のスコアを有し、ヘレグリンのｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）試験で陽性を示す者、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従って測定可能な疾患を有する者、０または１のＥＣＯＧパフォーマンスステータス（ＰＳ）を示す者、臨床的に有意な異常がないままに、ＥＣＧのスクリーニングを受ける者、ＡＮＣが＞１，５００／μｌであり、血小板数が＞１００，０００／μｌであり、及びヘモグロビン＞９ｇ／ｄｌであることが証明された適切な骨髄予備能を有する者、ドセタキセルを受ける患者については、血清／血漿クレアチニンが、＜１．５×ＵＬＮであること、ペメトレキセドを受ける患者については、クレアチニンクリアランスが、≧４５ｍｌ／分であることが証明されている適切な腎機能を有している者、ペメトレキセドを受ける患者については、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）が、≦２．５×ＵＬＮ（肝転移が存在する場合、≦５×ＵＬＮであれば可能）である者、ドセタキセルを受ける患者については、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）が、≦１．５×ＵＬＮであり、アルカリホスファターゼ（ＡＰ）が、＜２．５ＵＬＮであり、及び血清／血漿総ビリルビンが、正常の検査範囲内にある者、とする。
【００７９】
妊娠の可能性のある女性、ならびに、父親になる能力を有する男性やそのパートナーは、試験期間中、及びドセタキセル／ペメトレキセドについてのラベル記載または施設ガイドラインに従って、最後の治験薬を投与してから９０日間、またはそれ以上の期間は、性交を避け、あるいは、効果的な避妊方法（効果的な避妊法は、経口避妊法または二重障壁法である）を使用する必要がある。
【００８０】
排除基準
患者は、上記したすべての組み入れ基準を満たし、かつ、以下の排除基準のいずれにも該当しない。
ａ）公知の未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）遺伝子再構成、またはＥＧＦＲ遺伝子のエクソン１９欠失またはエクソン２１（Ｌ８５８Ｒ）置換の存在
ｂ）妊娠中または授乳中
ｃ）骨髄保有領域の＞２５％に対する従前の放射線療法
ｄ）局所進行性疾患のために以前に全身抗癌剤レジメンを＞２回の回数受けた
●第ＩＩＩＢ期または第ＩＶ期の疾患の初回治療後に、ペメトレキセドを用いた維持療法は、１つの治療法として計数する
ｅ）進行性／転移性疾患のために、以前にドセタキセルを受けた患者は、ドセタキセル含有化学療法主剤は適切でない
ｆ）進行性／転移性疾患、及び／または維持療法のために、以前にペメトレキセドを受けた患者は、ペメトレキセド含有化学療法主剤は適切でない
ｇ）最近、下記のものを含めて、他の抗腫瘍療法を受けた
●本試験での最初の投与予定日の前、２８日以内または５半減期以内のいずれか短い方の期間内に投与された治験療法。
●本試験での最初に投与予定日の前、１４日以内に、放射線または他の標準的な全身療法、加えて（必要であれば）、そのような放射線からの実際のまたは予想される毒性を解消するための時間枠を含む
ｈ）ＣＴＣＡＥグレード３以上の末梢神経障害
ｉ）投薬の初日より前に解決されていない、スクリーニング訪問中の＞３８．５℃の予期せぬ発熱の存在。無作為化の前に発熱及び活動性感染が解消した場合、患者は適格となる。治験責任医師の裁量で、腫瘍発熱を有する患者でも登録され得る。
ｊ）症候性ＣＮＳ転移またはステロイドを必要とするＣＮＳ転移
ｋ）ドセタキセル主剤が考慮される患者のための強力なＣＹＰ３Ａ４阻害剤の使用。
ｌ）全身療法を必要とするあらゆる他の活動性悪性腫瘍
ｍ）完全ヒトモノクローナル抗体に対するＭＭ−１２１または従前の過敏症反応の成分のいずれかに対する公知の過敏症
ｎ）ドセタキセルまたはペメトレキセドに対する重度のアレルギー反応の病歴
ｏ）ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ（登録商標））８０またはアルギニンに対する公知の過敏症
ｐ）症候性鬱血性心不全、不安定狭心症、計画された初回投与から１年以内の急性心筋梗塞、または治療を必要とする不安定な心不整脈（心室性不整脈を含む）を含む臨床的に重篤な心臓疾患。
ｑ）抗生物質、抗ウイルス剤、または抗真菌剤をＩＶで必要とする制御不良の感染、公知のヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、または活性ＢまたはＣ感染。
ｒ）治験責任医師が判断したあらゆる他の理由で、本臨床試験に参加する候補者として適切ではない患者。
【００８１】
例６：セリバンツマブと化学療法剤との共投与は、卵巣癌マウス異種移植モデルにおける前記化学療法剤に対するＨＲＧ媒介性耐性を無効にする。
ｎｕ／ｎｕヌード、Ｃｒｌ：ＮＵ−Ｆｏｘｎ１ｎｕマウスに異種移植片として移植をしたヒト卵巣上皮癌ＯＶＣＡＲ８細胞（ＮＣＩ）を用いて、腫瘍担持マウスにおける、単独（すなわち、単独療法として）または併用のいずれかで、セリバンツマブ及び化学療法剤（例えば、イリノテカン、ゲムシタビン、またはパクリタキセル）の抗腫瘍効果を評価した。これらの異種移植研究において、マウスは、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから入手した。マウスは、温度と湿度が調節された個室に設置されたＴｅｃｎｉｐｌａｓｔ（登録商標）Ｉｎｄｉｖｕｄｕａｌｌｙ  Ｖｅｎｔｉｌａｔｅｄポリカーボネート（Ｍａｋｒｏｌｏｎ（登録商標））ケージ（ＩＶＣ）に収容され、食物と酸性化された水を自由に摂取できた。不完全成長因子Ｍａｔｒｉｇｅｌ（商標）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｃａｔ＃３５４２３０）及びＰＢＳで、１：１で混合した、８×１０６細胞／マウスの細胞懸濁液を、メスの４〜５週齢のｎｕ／ｎｕヌード、Ｃｒｌ：ＮＵ−Ｆｏｘｎ１ｎｕマウスの左脇腹に、皮下注射して与えた。無作為化に先駆けて、腫瘍を、２５０ｍｍ３にまで成長させた。
【００８２】
併用療法研究
併用療法の研究を行って、セリバンツマブ、イリノテカン塩酸塩、ゲムシタビン、及びパクリタキセルの固定用量の様々な組み合わせの効果を実証した。
【００８３】
マウスを、上記したように、無作為に、１０匹ずつ、８つのグループに分けた。５つのグループを、（１）セリバンツマブ（３００μｇ  Ｑ３Ｄ）、（２）イリノテカン塩酸塩（６．２５ｍｇ／ｋｇ  Ｑ７Ｄ）、（３）ゲムシタビン（２５ｍｇ／ｋｇ  Ｑ７Ｄ）、（４）パクリタキセル（１０ｍｇ／ｋｇ  Ｑ７Ｄ）、または（５）ＰＢＳ（Ｑ３Ｄ）単独（対照）の単剤のみを、腹腔内（ｉ．ｐ．）に投薬して治療をした。３つのグループは、（１）セリバンツマブとパクリタキセル、（２）セリバンテマブとイリノテカン塩酸塩、及び（３）セリバンツマブとゲムシタビンとの併用療法で治療をした。治療は、３週間続けた。腫瘍を、毎週２回測定し、腫瘍体積を計算した。
【００８４】
図７Ａ〜７Ｃ（セリバンツマブ（図中の「ＭＭ−１２１」）マウス用量；３００μｇ  Ｑ３Ｄ）に示したように、単一剤としてのセリバンツマブは、卵巣癌のこのモデルにおいて、インビボにおいて用量依存的に腫瘍増殖を有意に抑制した。さらに、イリノテカン塩酸塩、ゲムシタビン、及びパクリタキセル単独では、それぞれは、インビボにおいて腫瘍の増殖を阻害したが、セリバンツマブと、パクリタキセル（図７Ａ）、イリノテカン塩酸塩（図７Ｂ）、またはゲムシタビン（図７Ｃ）との併用治療は、個々の薬剤単体で観察された腫瘍成長阻害と比較して、腫瘍成長阻害に関する相加効果を示した。
【００８５】
注釈
本発明を、その特定の実施形態に関連して説明してきたが、さらなる変更が可能であり、また、本出願は、一般に、本発明の原理に従い、かつ、本開示からの逸脱も含めて、本発明が関連する当該技術分野で公知の慣例的な実施形態に属し、かつ、本明細書に記載の本質的特徴に対して適用され得る、本発明のあらゆる変形、使用、または調整を網羅することを意図している。本明細書に記載の米国、国際、または他の特許、または特許出願、または公報のありとあらゆる開示は、本明細書の一部を構成するものとして、それらの全内容を援用する。
【００８６】
配列の概要
【表２−１】
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【表２−２】
2018513155.tif 000004
【表２−３】
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【表２−４】
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【表２−５】
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【表２−６】
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【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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