(57)【要約】  本発明は、ＥＧＦＲ変異癌を治療する方法に関する。一実施形態において、癌は、腫瘍が、活性化ＥＧＦＲ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよびｅｘ１９ｄｅｌ）および／または獲得性／耐性「ゲートキーパー」Ｔ７９０Ｍ変異を持つ非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。
2018515544.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者におけるＮＳＣＬＣの治療での使用のための、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ）である化合物、またはその薬学的に許容される塩であって、前記ＮＳＣＬＣがＥＧＦＲエクソン２０挿入を持ち、
前記患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法中もしくはその後に進行したか、または
前記患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法に不耐性である、
化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
患者におけるＮＳＣＬＣの治療での使用のための、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ）である化合物、またはその薬学的に許容される塩であって、前記ＮＳＣＬＣが、１つまたは複数のＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ）を持ち、
前記患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法中もしくはその後に進行したか、または
前記患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法に不耐性である、
化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
前記ＮＳＣＬＣが、Ｌ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ  ＥＧＦＲ活性化変異を持つ、請求項２に記載の使用のための化合物。
【請求項４】
前記ＮＳＣＬＣが、獲得性Ｔ７９０Ｍ変異をさらに持つ、請求項１、２または３に記載の使用のための化合物。
【請求項５】
前記第３世代ＴＫＩが、オシメルチニブ（メレレチニブ）、ロシレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３またはＰＦ０６７４７７７５である、前記請求項のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項６】
前記第３世代ＴＫＩが、オシメルチニブ（メレレチニブ）である、請求項５に記載の使用のための化合物。
【請求項７】
前記患者が、（ｉ）１つもしくは複数の第１世代ＴＫＩ、および／または（ｉｉ）１つもしくは複数の第２世代ＴＫＩによる前治療を受けており、
前記患者が、このような療法中またはその後に進行した、
前記請求項のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項８】
前記第１世代ＴＫＩが、エルロチニブ、ゲフィチニブまたはイコチニブである、請求項７に記載の使用のための化合物。
【請求項９】
前記第２世代ＴＫＩが、アファチニブまたはダコミチニブである、請求項７または８に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
前記ＮＳＣＬＣが、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣである、前記請求項のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
患者における進行性または転移性ＮＳＣＬＣの治療での使用のための、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ）である化合物、またはその薬学的に許容される塩であって、前記ＮＳＣＬＣがｄｅ  ｎｏｖｏＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を示し、前記患者が、ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる任意の前治療を受けていない、化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
ＥＧＦＲエクソン２０挿入を持つ進行性または転移性ＮＳＣＬＣの治療での使用のための、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ）である化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
化合物Ａが、５０〜２５０ｍｇ範囲の用量で投与される、前記請求項のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１４】
化合物Ａが１日１回投与される、前記請求項のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１５】
化合物Ａの前記薬学的に許容される塩がメシル酸塩である、前記請求項のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１６】
患者におけるＮＳＣＬＣを治療する方法であって、前記ＮＳＣＬＣがいずれかのＥＧＦＲエクソン２０挿入を持つか、または前記ＮＳＣＬＣが１つまたは複数のＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ）を持ち、
前記方法が、治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を前記患者に投与することを含み、
前記患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法中もしくはその後に進行したか、または
前記患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法に不耐性である、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
背景技術
肺癌は、世界で最も一般的な癌であり、ＮＳＣＬＣは、肺癌症例のおよそ８５％を占める。西洋諸国においては、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者の１０〜１５％が、その腫瘍に上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）変異を示し、アジア諸国は、３０〜４０％と高い報告率を有する。優勢な発癌性ＥＧＦＲ変異（Ｌ８５８Ｒおよびｅｘ１９ｄｅｌ）は、ＥＧＦＲ  ＮＳＣＬＣの約９０％を占める。
【０００２】
古典的なＥＧＦＲ変異（Ｌ８５８ＲおよびＥｘ１９ｄｅｌ）に次いで、ＥＧＦＲエクソン２０挿入変異（Ｅｘ２０ｉｎｓ）は、患者におけるＥＧＦＲ変異全体の４〜１０％を占めることが示されており、古典的（Ｌ８５８Ｒおよびｅｘ１９ｄｅｌ）ＥＧＦＲ変異に次いで、３番目に大きいＥＧＦＲ変異患者集団である。ＥＧＦＲエクソン２０挿入変異は、ＥＧＦＲ２０重複変異を含む。
【０００３】
ＥＧＦＲ変異患者には、ファーストライン（first line）療法としてＥＦＧＲ阻害剤が投与される。しかし、多くの患者において、一般に１０〜１４か月以内に獲得性（acquired）耐性が生じる。第１世代ＴＫＩとも称される、第１世代可逆的ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）、例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブおよびイコチニブ（icotinib）で治療した原発性ＥＧＦＲ変異を持つＮＳＣＬＣ患者の最大５０％において、２次「ゲートキーパー」（secondary “gatekeeper”）Ｔ７９０変異が生じる。
【０００４】
第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、アファチニブおよびダコミチニブ）は、この耐性機構を克服しようとして開発された。これらは、ＥＧＦＲのＡＴＰ部位でシステイン７９７に共有結合する不可逆性の薬剤である。第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩは、前臨床モデルにおける活性化［Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌ］と獲得性Ｔ７９０Ｍ変異の両方に効力がある。しかし、その臨床的有効性は、おそらく、付随する野生型（ＷＴ）ＥＧＦＲの阻害に起因する深刻な有害作用により限定されることが証明されている。
【０００５】
このことは、ＷＴ  ＥＧＦＲを温存し（sparing）、さらに、活性化ＥＧＦＲ変異［Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌ］および獲得性Ｔ７９０Ｍに対して比較的同等の効果を有する第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩの開発につながった。したがって、第３世代ＥＦＧＲ  ＴＫＩ、例えば、ＡＺＤ９２９１（メレレチニブ、オシメルチニブとしても知られる）およびＣＯ−１６８６（ロシレチニブ）は、臨床開発に入ろうとしており、最初から大いに期待されている（例えば、“AZD9291 in EGFR Inhibitor-Resistant Non-Small-Cell Lung Cancer”, Hanne et al, N Engl J Med, 2015; 372; 1689-99および“Rociletinib in EGFR-Mutated Non-Small-Cell Lung Cancer”, Sequist et al, N Engl J Med, 2015; 372; 1700-9参照）。“ASP8273, a novel mutant-selective irreversible EGFR inhibitor, inhibits growth of non-small cell lung cancer (NSCLC) cells with EGFR activating and T790M resistance mutations “,Sakagami et al, AACR; Cancer Res 2014;74; 1728も参照。
【０００６】
メタンスルホン酸塩の形態で投与され得るＡＺＤ９２９１は、メレレチニブまたはオシメルチニブとしても知られており、構造式
【０００７】
【化１】
2018515544.tif 000003
の化合物Ｎ−（２−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］（メチル）アミノ］−４−メトキシ−５−［［４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）ピリミジン−２−イル］アミノ］フェニル］アクリルアミドであり、これはＰＣＴ明細書国際公開第２０１３／０１４４４８号パンフレットに記載されている。ＡＺＤ９２９１は、ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）による療法中またはその後に進行した、転移性上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）Ｔ７９０Ｍ変異陽性非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を有する患者の治療用に承認されている。
【０００８】
臭化水素酸塩の形態で投与され得るＣＯ−１６８６（ロシレチニブ）、Ｎ−（３−［［２−［［４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）−２−メトキシフェニル］アミノ］−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル］アミノ］フェニル）プロパ−２−エンアミドは、ＰＣＴ明細書国際公開第２０１２／０６１２９９号パンフレットに記載されている。ロシレチニブは、以下の構造式
【０００９】
【化２】
2018515544.tif 000004
を有する。
【００１０】
しかし、ＥＧＦＲ阻害剤による治療が、全生存期間の延長に明らかにつながるとは示されていない。また、現在、標的Ｅｘ２０ｉｎｓ変異に利用可能な有効な療法が存在せず、したがって満たされていない医学的必要性が存在する。したがって、ＥＧＦＲ変異ＮＳＣＬＣを有する患者に対する更なる治療選択肢が依然として必要とされている。
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩の使用に関する。化合物Ａの特に有用な塩は、そのメシル酸塩である。その内容が本明細書に参考として援用される、国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットには、化合物Ａ、その調製方法および化合物Ａを含む医薬組成物が記載されている。化合物Ａは以下の構造式
【００１２】
【化３】
2018515544.tif 000005
を有する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】化合物Ａ（ＥＧＦ８１６）を１日１回、１８日間経口投与することにより、３０ｍｇ／ｋｇで腫瘍増殖が阻害され、１００ｍｇ／ｋｇで顕著な腫瘍退縮（１８日目で−８１％）が達成されたところを示す図である。
【図２】動物の体重を週に２回測定した。ＥＧＦ８１６  ３０および１００ｍｇ／ｋｇ用量はいずれも良好に忍容された。１８日間の投与中、ＥＧＦ８１６  ３０ｍｇ／ｋｇでは体重減少がみられなかったが、ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ／ｋｇでは、対照と比較して、約４％の最大体重減少がみられたところを示す図である（図２）。
【図３】ＥＧＦＲキナーゼドメインに結合する化合物Ａ（即ち、ＥＧＦ８１６）、ＡＺＤ９２９１およびＣＯ−１６８６の空間的に重ね合わせたドッキングモデルを示す図である。空間モデルの上部２つの丸印は、ＡＺＤ９２９１およびＣＯ１６８６は広がっているが、ＥＧＦ８１６は広がっていない２つの領域を示している。図下部の他の丸印は、ＥＧＦ８１６は広がっているが、ＡＺＤ９２９１およびＣＯ１６８６は広がっていない、Ｃｙｓ７９７より下の領域を示している。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
発明の説明
化合物Ａは、ＷＴ  ＥＧＦＲを温存しながら、活性化および獲得性耐性変異（Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌおよびＴ７９０Ｍ）を選択的に阻害する、標的共有結合不可逆性ＥＧＦＲ阻害剤である（Jia et al, Cancer Res October 1, 2014 74; 1734参照）。化合物Ａは、臨床的に意義のある有効濃度で、ＷＴ  ＥＧＦＲの阻害を示さずに、ＥＧＦＲ変異（Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌおよびＴ７９０Ｍ）癌モデルにおいて顕著な有効性を示した（インビトロおよびインビボ）。化合物Ａは、ＥＧＦ８１６としても知られる。
【００１５】
化合物Ａは、第３世代ＴＫＩ（チロシンキナーゼ阻害剤）である。
【００１６】
化合物Ａは、インビボで幾つかのＥＧＦＲ活性化および耐性腫瘍モデルに強力な腫瘍退縮を示した。これらとしては、当該臨床背景を代表する、ＨＣＣ８２７（ｅｘ１９ｄｅｌ）、Ｈ３２５５（Ｌ８５８Ｒ）およびＨ１９７５（Ｌ８５８Ｒ、Ｔ７９０Ｍ）が挙げられる。すべてのモデルにおいて、化合物Ａは、用量依存的に腫瘍増殖を阻害し、良好に忍容される用量で、確立された腫瘍の退縮を達成した。
【００１７】
ＨＣＣ８２７（ｅｘ１９ｄｅｌ活性化変異）マウス異種移植モデルは、化合物Ａに対して高い感受性を示した。１日最低試験用量３ｍｇ／ｋｇでも、顕著な腫瘍退縮が達成された。効果は、臨床的に意義のある用量であるエルロチニブ６０ｍｇ／ｋｇに匹敵し、それにより臨床的に有効な用量で観察されたものに類似した自由な（free）血漿中曝露が得られた。化合物Ａは、非常に良好に忍容され、１００ｍｇ／ｋｇまでは体重減少が観察されなかったが、エルロチニブ１２０ｍｇ／ｋｇでは、顕著な体重減少（約１０％）がみられた。
【００１８】
Ｈ３２５５（Ｌ８５８Ｒ）マウス異種移植モデルにおいては、化合物Ａを３０ｍｇ／ｋｇで試験したところ、ビヒクルと比較して、体重への影響なしに、強力な腫瘍退縮が示された。
【００１９】
Ｈ１９７５（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ）マウスおよびラット異種移植モデルにおいては、顕著な腫瘍退縮が用量≧３０ｍｇ／ｋｇで達成された。重要なことに、化合物Ａは、第２世代不可逆的汎ＥＧＦＲ阻害剤アファチニブと比較して、優れた有効性と共に忍容性の大幅な改善を示した。
【００２０】
Ｅｘ２０＿Ｈ７３３＿Ｖ７７４ｉｎｓＮＰＨのＰＤＸモデルにおいては、化合物Ａは、成長の遅延と共に、忍容可能な用量でほぼ完全な退縮を示した。
【００２１】
インビトロデータと共に、このことは、化合物Ａが、良好に忍容される用量で当該患者由来の腫瘍細胞株に抗腫瘍活性を示し、公知のＥＧＦＲ主導型癌を有するヒトにおいて抗腫瘍活性を高めることが予測されることを示している。
【００２２】
現在利用可能なＥＧＦＲ阻害剤と比較して、化合物Ａは、副作用を低減しながら、発癌性ＥＧＦＲ変異患者での有効性を高め／維持すると予想される。さらに、化合物Ａは、メレレチニブおよび／またはロシレチニブ投与中に進行したＴ７９０Ｍ耐性患者に対して有効な療法を提供する可能性を有する。
【００２３】
驚くべきことに、ＷＴ  ＥＧＦＲの阻害剤について同様の作用様式および同様の最小活性を他の第３世代ＥＦＧＲ  ＴＫＩと共有しているにもかかわらず、化合物Ａは、他の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、ＡＺＤ９２９１およびＣＯ−１６８６）による治療に耐性を示す腫瘍を有する患者に有益であり得ることが発見された。化合物Ａの治療的有用性は、患者において良好な忍容性を示し得ることでもある。
【００２４】
したがって、化合物Ａは、ＡＺＤ９２９１による療法中またはその後に進行した患者に有益であり得る。
【００２５】
故に、本発明は上記に従って以下を提供する。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、そのメシル酸塩を前記対象に投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失（deletion）を持つ腫瘍を有すると判断される、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、そのメシル酸塩を前記対象に投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入を持つ腫瘍を有すると判断される、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該ＮＳＣＬＣ腫瘍が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持ち、該腫瘍が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブまたはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せに耐性を示す、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該ＮＳＣＬＣ腫瘍が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持ち、該腫瘍が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イコチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３、ＰＦ０６７４７７７５またはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せに耐性を示す、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持つ腫瘍を有すると判断され、
該対象が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブまたはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せによる療法にもはや反応しない、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持つ腫瘍を有すると判断され、該対象が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３、ＰＦ０６７４７７７５またはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せによる療法にもはや反応しない、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持つ腫瘍を有すると判断され、
（ａ）該対象が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブもしくはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せによる療法後に進行したか、ならびに／または（ｂ）該対象が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブもしくはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せに不耐性である、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持つ腫瘍を有すると判断され、
（ａ）該対象が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブもしくはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せによる療法後に進行したか、ならびに／または（ｂ）該対象が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３、ＰＦ０６７４７７７５もしくはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せに不耐性である、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を含む医薬組成物を投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持つ腫瘍を有すると判断され、（ａ）該対象が、メレレチニブおよび／もしくはロシレチニブによる療法後に進行したか、ならびに／または
（ｂ）該対象が、メレレチニブおよび／もしくはロシレチニブ、およびそれらの任意の組合せに不耐性である、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を含む医薬組成物を投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持つ腫瘍を有すると判断され、（ａ）該対象が、メレレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３またはＰＦ０６７４７７７５、およびそれらの任意の組合せによる療法後に進行したか、ならびに／または
（ｂ）該対象が、メレレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３、ＰＦ０６７４７７７５およびそれらの任意の組合せに不耐性である、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該腫瘍が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持ち、
該腫瘍が、メレレチニブおよび／またはロシレチニブに耐性を示す、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該腫瘍が、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持ち、
該腫瘍が、メレレチニブおよび／またはロシレチニブに耐性を示す、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、ａ．ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブまたはロシレチニブ、およびそれらの任意の組合せによる治療を受けた対象におけるＮＳＣＬＣの進行を監視するステップであって、該ＮＳＣＬＣの進行が、前記ＮＳＣＬＣが前記治療に耐性を示すことを示している、ステップと、
ｂ．化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を該対象に投与するステップとを含む方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、（ａ）ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３、ＰＦ０６７４７７７５またはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せによる治療を受けた対象におけるＮＳＣＬＣの進行を監視するステップであって、該ＮＳＣＬＣの進行が、前記ＮＳＣＬＣが前記治療に耐性を示すことを示している、ステップと、
（ｂ）化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を該対象に投与するステップとを含む方法。
【００２６】
本開示に従って、以下の実施形態も提供する：
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、そのメシル酸塩を投与するステップを含み、該対象が、「ｄｅ  ｎｏｖｏ」ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を持つ腫瘍を有すると判断される、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、そのメシル酸塩を前記対象に投与するステップを含み、該対象が、ＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ）および獲得性Ｔ７９０Ｍ変異を持つ腫瘍を有すると判断され、該対象が第１／第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療を受けた、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該ＮＳＣＬＣ腫瘍が、ＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよび／またはｅｘ１９ｄｅｌ）および獲得性ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を持ち、該腫瘍が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブまたはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せに耐性を示す、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該ＮＳＣＬＣ腫瘍が、ＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよび／またはｅｘ１９ｄｅｌ）および獲得性ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を持ち、該腫瘍が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３、ＰＦ０６７４７７７５またはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せに耐性を示す、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該対象が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブまたはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せによる療法にもはや反応しない、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該対象が、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３、ＰＦ０６７４７７７５またはロシレチニブおよびそれらの任意の組合せによる療法にもはや反応しない、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、該対象が、第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、メレレチニブおよびロシレチニブ、特に、メレレチニブ）による療法にもはや反応しない、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を投与するステップを含み、（ａ）該対象が、第１および／もしくは第２世代ＴＫＩ、例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、およびそれらの任意の組合せによる療法後に進行したか、ならびに／または（ｂ）該対象が、第３世代ＴＫＩ、例えば、メレレチニブもしくはロシレチニブ、およびそれらの任意の組合せ、特にメレレチニブ投与中に進行したか、および／もしくはそれに不耐性である、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を含む医薬組成物を、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを有する対象に投与するステップを含み、
該対象が、ＥＧＦＲ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌおよびＴ７９０Ｍ）を持つ腫瘍を有すると判断され、（ａ）該対象が、メレレチニブおよび／またはロシレチニブ、特にメレレチニブによる療法後に進行したか、ならびに／または
（ｂ）該対象が、メレレチニブおよび／もしくはロシレチニブ、およびそれらの任意の組合せに不耐性である、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩、例えば、メシル酸塩を、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを有する対象に投与するステップを含み、
該腫瘍が、ＥＧＦＲ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒ、ｅｘ１９ｄｅｌおよびＴ７９０Ｍ）を持ち、
該腫瘍が、メレレチニブおよび／またはロシレチニブ、特にメレレチニブに耐性を示す、方法。
−  それを必要とする対象における、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣを治療する方法であって、
ａ）ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）、メレレチニブまたはロシレチニブ、およびそれらの任意の組合せによる治療を受けた対象におけるＮＳＣＬＣの進行を監視するステップであって、該ＮＳＣＬＣの進行が、前記ＮＳＣＬＣが前記治療に耐性を示すことを示している、ステップと、
ｂ）化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を対象に投与するステップと
を含む方法。
【００２７】
本発明は、化合物Ａが、ＮＳＣＬＣに罹患している対象に特に有用であるという知見に基づくものである。
【００２８】
本発明は、化合物Ａが、以下の特徴の１つまたは複数を有する、転移性または局所進行性ＮＳＣＬＣを含むＮＳＣＬＣに罹患している対象に特に有用であるという知見に基づくものである：
−  承認ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ、アファチニブ）に不耐性であるか、および／またはこれらの薬物が適していない対象、
−  化合物Ａ以外のＥＧＦＲ  ＴＫＩによる療法後に進行した対象、
−  「ｄｅ  ｎｏｂｏ」ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を示す腫瘍を有し、ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる前治療を受けていない（即ち、ＥＧＦＲ  ＴＫＩについて治療未経験者である）対象、
−  ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持つ腫瘍、特にエクソン２０挿入を持つＮＳＣＬＣを有する対象、
−  ＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよび／またはｅｘ１９ｄｅｌ）を持つが、獲得性ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を持たない腫瘍を有し、第１世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブまたはイコチニブ）または第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、アファチニブまたはダコミチニブ）による１回の前治療中に進行した対象、
−  ＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ）および獲得性Ｔ７９０Ｍ変異を持つ腫瘍を有し、第１世代および／または第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療を受けたことがあり、第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、ＡＺＤ９２９１、ＣＯ−１６８６またはＡＳＰ８２７３）投与中に進行したか、またはそれに不耐性である対象。
【００２９】
本開示を通じて、ＮＳＣＬＣは、進行性ＮＳＣＬＣまたは転移性ＮＳＣＬＣを含むと理解されるべきである。進行性ＮＳＣＬＣは、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを指す。進行性ＮＳＣＬＣでは、ＮＳＣＬＣが、隣接する組織または離れたリンパ節に転移している。局所進行性ＮＳＣＬＣは、手術を含む根治的マルチモダリティ治療に適していない、ステージＩＩＩＢのＮＳＣＬＣと定義される。
【００３０】
転移性ＮＳＣＬＣは、ステージＩＶのＮＳＣＬＣを指す。転移性ＮＳＣＬＣでは、癌は身体の他の臓器に転移している。
【００３１】
ＥＧＦＲ変異状態は、当技術分野で利用可能な試験、例えば、ＱＩＡＧＥＮ  ｔｈｅｒａｓｃｒｅｅｎ（登録商標）ＥＧＦＲ試験または他のＦＤＡ承認試験により決定され得る。ｔｈｅｒａｓｃｒｅｅｎ  ＥＧＦＲ  ＲＧＱ  ＰＣＲキットは、ＥＧＦＲ癌遺伝子中の特異的変異を検出するためのＦＤＡ承認定性リアルタイムＰＣＲアッセイである。ＥＧＦＲ変異の徴候は、腫瘍試料の既存の局所データおよび試験から得ることができる。ＥＧＦＲ変異状態は、任意の利用可能な腫瘍組織から判断できる。
【００３２】
本明細書で使用する「治療する」、「治療している」または「治療」という用語は、疾患もしくは状態の症状を軽減、寛解もしくは改善するか、更なる症状を予防するか、症状の根本的代謝原因を改善もしくは予防するか、疾患もしくは状態を抑制するか、疾患もしくは状態の発症を阻止するか、疾患もしくは状態を緩和するか、疾患もしくは状態を退縮させるか、疾患もしくは状態により引き起こされた状態を緩和するか、または疾患もしくは状態の症状を予防的および／もしくは治療的のいずれかで抑える方法を指す。
【００３３】
さらに、一実施形態において、任意の疾患または障害、例えば、ＮＳＣＬＣ「を治療する」、「を治療している」または「の治療」という用語は、疾患または障害を改善する（即ち、疾患またはその臨床症状の少なくとも１つの発症を遅延もしくは阻止または低減する）ことを指す。別の実施形態において、「治療する」、「治療している」または「治療」は、患者が認識できないものを含む、少なくとも１つの身体的パラメーターを軽減または改善することを指す。さらに別の実施形態において、「治療する」、「治療している」または「治療」は、身体的（例えば、認識できる症状の安定化）、生理的（例えば、身体的パラメーターの安定化）のいずれかまたはその両方で、疾患または障害を調節することを指す。さらに別の実施形態において、「治療する」、「治療している」または「治療」は、疾患または障害の発現もしくは発症または進行を予防または遅延することを指す。
【００３４】
本明細書で使用する「第１世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ」という表現は、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イコチニブおよびそれらの任意の組合せを含む。
【００３５】
本明細書で使用する「第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ」という表現は、アファチニブ、ダコミチニブおよびそれらの任意の組合せを含む。
【００３６】
本明細書で使用する「第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ」という表現は、メレレチニブ、ロシレチニブおよびＡＳＰ８２７３ならびにそれらの任意の組合せを含む。第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩの他の例としては、ＨＭ６１７１３およびＰＦ０６７４７７７５が挙げられる。より好ましい第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩはメレレチニブ（ＡＺＤ９２９１）である。
【００３７】
「ｄｅ  ｎｏｖｏ」Ｔ７９０Ｍは、ＥＧＦＲを阻害することが知られているどの療法でも以前に治療を受けていないＮＳＣＬＣ患者におけるＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異の存在として定義される。これまでに、「ｄｅ  ｎｏｖｏ」Ｔ７９０Ｍ変異を持つＮＳＣＬＣ患者１人が、この試験のフェーズＩ部分（用量漸増）に登録された。この患者を、ＥＧＦ８１６  ２２５ｍｇで治療したところ、ベースラインから４１．５４％の腫瘍の減少がみられた。該試験を、少なくとも５か月間続けた。
【００３８】
癌に罹患している対象は、罹患している癌が進行した場合、１種もしくは複数の薬剤による療法中に進行したか、１種もしくは複数の薬剤による療法にもはや反応しないか、または１種もしくは複数の薬剤に不耐性であると定義される。癌の進行は、当技術分野で周知の方法により監視され得る。例えば、進行は、癌の視覚的検査法、例えば、Ｘ線、ＣＴスキャンもしくはＭＲＩといった手段により、または腫瘍バイオマーカー検出により監視され得る。例えば、癌の増殖の増大は、癌の進行を示している。癌、例えば、ＮＳＣＬＣまたは腫瘍の進行は、新しい腫瘍の検出もしくは転移の検出、または腫瘍収縮の停止により示され得る。腫瘍評価は、ＲＥＣＩＳＴ基準（Therasse et al 2000）、New Guidelines to Evaluate the Response to Treatment in Solid Tumors, Journal of National Cancer Institute, Vol. 92; 205-16および改定ＲＥＣＩＳＴ指針（version 1.1）（Eisenhauer et al 2009）European Journal of Cancer; 45:228-247に基づき行われ得る。
【００３９】
腫瘍進行は、治療開始後の時点間の腫瘍状態の比較により、または治療開始後の時点と当該治療開始前の時点との間の腫瘍状態の比較により決定され得る。
【００４０】
本明細書で使用する「有効量」または「治療有効量」という用語は、治療される疾患または状態の症状の１つまたは複数をある程度軽減する、本明細書に記載の投与される化合物の十分な量を指す。任意の個人の場合の適切な「有効」量は、用量漸増試験などの技術を用いて決定され得る。薬物の投与に関連して、「有効量」は、少なくとも統計的に有意な一部の患者に有益な効果、例えば、症状の改善、治癒、疾患負荷の軽減、腫瘍質量もしくは細胞数の減少、寿命の延長、生活の質の向上または特定の種類の疾患もしくは状態の治療に精通している医師により好ましいと一般に認識される他の効果をもたらす量を示す。
【００４１】
化合物Ａの用量は、５０〜２５０ｍｇの範囲、より好ましくは５０〜１５０ｍｇの範囲から選択され得る。本開示で引用される投与量または用量は、遊離塩基として計算される化合物Ａの薬物製品中に存在する量を示す。投与量は、化合物Ａ  ２５、５０、７５、１００、１５０および２００ｍｇであってよい。用量は、その遊離塩基として示して、原薬５０、７５および１００ｍｇから選択されることが好ましい。これらの用量が、有効性を喪失することなく、より良好に忍容され得るからである。
【００４２】
化合物Ａは、１日１回７５、１００、１５０、２００および２２５、３００および３５０ｍｇの投与量で投与され得る。化合物Ａは、好ましくは１日１回５０〜１５０ｍｇの投与量で投与され得る。より好ましくは、化合物Ａは、１日１回５０、７５、１００ｍｇまたは１５０ｍｇ、より好ましくは、１日１回５０、７５および１００ｍｇの投与量で投与され得る。
【００４３】
化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物は、国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに記載されている。化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩は、カプセル製剤または錠剤の形態の経口医薬組成物として投与され得る。
【００４４】
本出願を通じて引用する参照は、その全体が参考として本明細書に援用される。
実施例
【実施例１】
【００４５】
（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（ＥＧＦＲｉ）生化学アッセイ
ＩＣ５０測定
すべてのＥＧＦＲ生化学アッセイを、国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットに記載の通り行った。
【００４６】
生物学的結果
−  ９０分間のプレインキュベーションなしおよびありによる、ＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ）からの上記ＥＧＦＲ生化学アッセイから得た化合物ＡのＩＣ５０測定値は、各々０．００８μＭおよび＜０．００１μＭであった。
−  化合物Ａにおいて、Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０ＭおよびＬ８５８Ｒの組換えＮＩＨ／３Ｔ３細胞株におけるＥＧＦＲ標的調節から得た阻害ＩＣ５０測定値が、各々０．０１１μＭおよび０．０１５μＭであることが示されている。ＷＴについては、その値が、０．２５９μＭであった。
−  Ｈ１９７５（ＥＧＦＲ  Ｌ８５８／Ｔ７９０Ｍ）、Ｈ３２５５（ＥＧＦＲ  Ｌ８５８Ｒ）およびＨＥＫｎ（ＥＧＦＲ  ＷＴ）細胞株におけるＥＧＦＲ標的調節から得たＩＣ５０測定値は、各々０．０１３μＭ、０．０３０μＭおよび１．１８０μＭであった。
【実施例２】
【００４７】
化合物Ａのメシル酸塩およびメシル酸塩形態Ｂ（メシル酸三水和物の形態）
国際公開第２０１３／１８４７５７号パンフレットの実施例５で得た（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミド（１．０ｇ）を、５５℃まで加熱することによりアセトン（３０ｍＬ）に溶解し、溶液を形成した。メタンスルホン酸（３２５μＬ）をアセトン（５０ｍＬ）に添加し、メタンスルホン酸／アセトン（２２．２ｍＬ）を該溶液に０．０５ｍｌ／分で添加した。沈殿後、得られた懸濁液を０．５℃／分で室温まで冷却し、結晶をろ過により回収し、真空下４０℃で４時間乾燥した。回収した結晶（３００ｍｇ）を、５０℃まで加熱することによりアセトン／Ｈ２Ｏ（６ｍＬ；ｖ／ｖ＝９５／５）中に懸濁した。懸濁液を、１６時間スラリー化し続け、０．５℃／分で室温まで冷却した。結晶をろ過により回収し、真空下４０℃で４時間乾燥した。
【００４８】
（Ｒ，Ｅ）−Ｎ−（７−クロロ−１−（１−（４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エノイル）アゼパン−３−イル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）−２−メチルイソニコチンアミドメシル酸塩の構造を、示差走査熱量測定、Ｘ線粉末回折および元素分析により確認した。融点（１７０．１℃）。理論計算値：％Ｃ（５４．８）；％Ｈ（５．９）；％Ｎ（１４．２）；％Ｏ（１３．５）；％Ｓ（５．４）および％Ｃｌ（６．０）；Ｃ：Ｎ比３．８６。測定値：％Ｃ（５２．０）、％Ｈ（５．８）；％Ｎ（１３．３）；％Ｃｌ（５．９）、Ｃ：Ｎ比３．９１。化学量論値：１．０１。
【００４９】
さらに、結晶性メシル酸塩形態Ａ３００ｍｇを、５０℃まで加熱することによりアセトン／Ｈ２Ｏ（ｖ／ｖ＝９５／５）６ｍｌ中に懸濁して、結晶性メシル酸塩形態Ｂを調製した。懸濁液を、１６時間スラリー化し続け、次いで懸濁液を０．５℃／分で室温まで冷却させた。結晶をろ過により回収した後、真空下４０℃で４時間乾燥した。
【実施例３】
【００５０】
インビトロ細胞アッセイでのＥＧＦＲエクソン２０挿入モデルに対する化合物Ａ（ＥＧＦＲ）の効果
３．１  細胞株
ＮＩＨ−３Ｔ３  Ｅｘ２０＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＮＰＧ細胞（ＤＦＣＩから得た）を、ピューロマイシン２μｇ／ｍＬを補充した１０％ＦＢＳ／ＤＭＥＭ  Ｐ／Ｓ培地で維持した。組換えＢａＦ３細胞を、ピューロマイシン２μｇ／ｍＬを補充した１０％ＦＢＳ／ＲＭＰＩ  Ｐ／Ｓ培地で維持した。すべての細胞を、５％ＣＯ２、３７℃の加湿インキュベーター中で維持した。
【００５１】
完全長野生型ＥＧＦＲ  ｃＤＮＡを、クローニングベクターｐＣＲ４（ＬｉｆｅＴｅｃｈ）にサブクローン化し、テンプレートとして使用して、Ｅｘ２０ｉｎｓ変異Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＳＶＤおよびＶ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＡＳＶを部位特異的変異誘発キット（Ａｇｉｌｅｎｔ）を用いて生成した。シークエンス検証済み（sequence-verified）クローンを、エンドヌクレアーゼＸｈｏＩおよびＨｐａＩで二重消化し（double-digested）、同様に消化されたｐＭＳＣＶｐｕｒｏＬｕｃ発現ベクター（社内）にライゲートした。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、変異ＥＧＦＲ  ｐＭＳＣＶｐｕｒｏＬｕｃベクターおよびｐＥｃｏＰａｋウイルスパッケージングベクターで共トランスフェクトした。次いで、ウイルスベクターを含有する上清を用いて、ＩＬ−３依存性ＢａＦ３細胞に感染させた。ＩＬ−３の除去およびピューロマイシンの添加により、プールした変異ＥＧＦＲ発現ＢａＦ３クローンの最終選択が可能となった。
【００５２】
３．２  ＥＧＦＲ標的調節アッセイ
ＥＧＦＲ標的調節に対する化合物の有効性を評価するために、ホスホＥＧＦＲを、化合物で処理したＮＩＨ−３Ｔ３  Ｅｘ２０＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＮＰＧ細胞で測定した。これらの細胞を、３８４ウェル組織培養プレートにて１０００細胞／ウェル（１ウェルあたり２５μＬ）で５％ＦＢＳ／ＤＭＥＭに撒き、終夜置いた。１２点希釈曲線（最高最終濃度２０μＭ、ＤＭＳＯ中で３倍連続希釈）からの化合物を、５０ｎＬピンツール装置を用いて細胞に移し、５％ＣＯ２、３７℃の加湿インキュベーター中で３時間インキュベートした。培地を２０μＬまで排出した後、ホスファターゼおよびプロテアーゼ阻害剤を含む２Ｘリシスバッファー２０μＬを添加した。ＢＳＡで予めブロックした、ヤギ抗ＥＧＦＲ捕捉抗体で被覆したＥＬＩＳＡプレートに、２５μＬの一定分量を移した。ＨＲＰにコンジュゲートした、ウサギ抗ホスホＥＧＦＲ（Ｙ１１７３）、次いでヤギ抗ウサギＩｇＧで、活性ＥＧＦＲを検出した。プレートに、ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ  ＥＬＩＳＡ  Ｐｉｃｏ化学発光検出試薬を広げ、発光をＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダーで読み取った。
【００５３】
３．３  ＢａＦ３抗増殖アッセイ
化合物Ａの抗増殖活性を、２つの組換えＢａＦ３  ＥＧＦＲエクソン２０挿入株、Ｅｘ２０＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＳＶＤおよびＥｘ２０＿Ｖ７６９＿Ｄ７７０ｉｎｓＡＳＶで評価した。細胞を、３８４ウェル組織培養プレートにて１ウェルあたり５００細胞（１ウェルあたり２５μＬ）で１０％ＦＢＳ／ＲＰＭＩ  Ｐ／Ｓ培地に撒き、終夜置いた。１２点希釈曲線（最高最終濃度２０μＭ、ＤＭＳＯ中で３倍連続希釈）からの化合物を、５０ｎＬピンツール装置を用いて細胞に移し、５％ＣＯ２、３７℃の加湿インキュベーター中で４８時間インキュベートした。化合物での処理後、プレートに、Ｂｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅアッセイシステムを広げた。細胞プレートおよびＢｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）試薬を、室温まで平衡化し、次いでＢｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）１０μＬを各ウェルに添加した。プレートを手で混合し、ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダーで発光を測定する前に室温で５分間インキュベートさせた。
【００５４】
３．４  データ分析
生データをＬＤＤＢサーバーからアップロードし、各細胞株での化合物のＩＣ５０値を、非線形曲線フィッティング分析（non-linear curve fitting analysis）を用いて計算した。
【００５５】
３．５  結果
化合物Ａを、Ｅｘ２０＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＮＰＧ  ＮＩＨ−３Ｔ３細胞株の標的調節アッセイ、ならびにＥｘ２０＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＳＶＤおよびＥｘ２０＿Ｖ７６９＿Ｎ７７０ｉｎｓＡＳＶ  ＢａＦ３細胞株の増殖アッセイで試験した。Ｅｘ２０＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＮＰＧ、Ｅｘ２０＿Ｄ７７０＿Ｎ７７１ｉｎｓＳＶＤおよびＥｘ２０＿Ｖ７６９＿Ｎ７７１ｉｎｓＡＳＶでの化合物Ａの代表的なＩＣ５０値は、各々１４、７および１１ｎＭであり、表１に要約されている。
【００５６】
【表１】
2018515544.tif 000006
【００５７】
上に示すように、化合物Ａは、１桁から２桁のｎＭ効力で３つのＥＧＦＲ  Ｅｘ２０ｉｎｓ構築物すべてを強力に阻害する。ＡＺＤ９２９１およびＣＯ−１６８６は、エクソン２０挿入変異に対して効果がないことが報告された（“Discovery of a Mutant-Selective Covalent Inhibitor of EGFR that Overcomes T790M-Mediated Resistance in NSCLC”, Walter et al, Cancer Discov. 2013; 3: 1404および“AZD9291, an Irreversible EGFR TKI, Overcomes T790M-Mediated Resistance to EGFR Inhibitors in Lung Cancer:, Cross et al. Cancer Discov. 2014; 4: 1046参照）。
【実施例４】
【００５８】
ＥＧＦＲ  Ｅｘ２０＿Ｈ７７３＿Ｖ７７４ｉｎｓＮＰＨ変異を持つ皮下ＰＤＸ  ＮＳＣＬＣの癌モデルＬＵ０３８７での化合物Ａの抗腫瘍活性
ＥＧＦＲ  Ｅｘ２０＿Ｈ７７３＿Ｖ７７４ｉｎｓＮＰＨ変異を持つ皮下ＰＤＸ  ＮＳＣＬＣ癌モデルＬＵ０３８７での、ＥＧＦ８１６のインビボ有効性および忍容性を以下の通り調査した。
【００５９】
材料
ＢＡＬＢ／ｃ雌ヌードマウス（６〜８週間、体重およそ１８〜２２ｇ）を実験動物として使用した。
製剤ビヒクル：Ｈ２Ｏ中０．５％ＭＣ（メチルセルロース）０．５％Ｔｗｅｅｎ８０
【００６０】
保守条件
動物を実験室環境に慣らすため、動物の受け取りと腫瘍接種との間におよそ１週間の順化期間を与えた。ヌードマウスを、特別な病原体を含まない（pathogen-free）環境およびマイクロアイソレーターケージ（ケージ１つあたりマウス５匹）で維持した。すべてのケージ、寝床および水を使用前に滅菌した。食物および水を備えたケージを週に２回交換した。動物の室内環境および光周期に対する目標条件は以下の通りであった：
温度  ２３±３℃
湿度  ５０±２０％
光サイクル  １２時間の明期および１２時間の暗期
【００６１】
すべての動物は、標準的な認可された市販の研究室用食餌（laboratory diet）を自由に摂った。食餌中の汚染物質の最大許容濃度は製造業者により管理され、ルーチン的に分析された。ヒト消費に適したオートクレーブされた都市水道水を動物は自由に利用できた。食餌材料中には腫瘍増殖に影響を与え得る公知の汚染物質はなかったと考えられる。
【００６２】
ＬＵ０３８７皮下モデルの確立
選択されたヒト原発性肺癌組織（ＬＵ０３８７）を接種した播種マウスの腫瘍断片を採取し、ヌードマウスへの接種に使用した。各マウスには、腫瘍増殖のため、右脇腹に１つの腫瘍断片（直径２〜３ｍｍ）を皮下接種した。平均腫瘍サイズが、約２６２ｍｍ３に到達したとき、処置を開始した。各群はマウス１０匹からなる。
【００６３】
処置開始前、すべての動物を秤量し、腫瘍体積を測定した。腫瘍体積が、任意の所与の処置の有効性に影響を与え得るため、マウスはその腫瘍体積に基づき乱塊法を用いて群に割り当てた。これにより、すべての群が、ベースラインで同等であることが保証された。
【００６４】
試験設計
ＬＵ０３８７腫瘍を持つＢＡＬＢ／ｃ雌ヌードマウスを、平均腫瘍体積２６２ｍｍ３の４つの群（ｎ＝１群あたりマウス１０匹）に無作為化した。ＥＧＦ８１６またはＡＺＤ９２９１を０．５％ＭＣ、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０懸濁製剤に配合し、動物の体重の１０μＬ／ｇの投与容量で強制経口投与により投与した。忍容性に問題ない限り、各群の動物には、ビヒクルまたはＥＧＦ８１６  ３０、１００ｍｇ／ｋｇもしくはＡＺＤ９２９１  ２５ｍｇ／ｋｇのいずれかを１日１回、連続１８日間投与した後、２日間の休薬期間を与えた。全動物の腫瘍体積および体重を週に２回測定し、試験中記録した。
【００６５】
試験中、動物のケアおよび使用は、国際実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）の規定に従って行われた。データ分析
腫瘍体積および体重の測定
体重を週に２回測定し、体重変化％を（ＢＷ現在−ＢＷ開始）／（ＢＷ開始）×１００で計算した。データを、処置開始日からの体重変化パーセントで示す。
【００６６】
腫瘍サイズを週に２回評価した。腫瘍サイズをカリパス測定により決定した。腫瘍体積を式（長さ×幅×幅）／２で計算した。
【００６７】
腫瘍に対する処置／対照（Ｔ／Ｃ）値パーセントを、以下の式を用いて計算した：
ΔＴ＞０の場合、％Ｔ／Ｃ＝１００×ΔＴ／ΔＣ
ΔＴ＜０の場合、％退縮＝１００×ΔＴ／Ｔ開始
式中、
Ｔ＝試験最終日の薬物処置群の平均腫瘍体積、
ΔＴ＝試験最終日の薬物処置群の平均腫瘍体積−投与開始日の薬物処置群の平均腫瘍体積、
Ｔ開始＝投与開始日の薬物処置群の平均腫瘍体積、
Ｃ＝試験最終日の対照群の平均腫瘍体積、および
ΔＣ＝試験最終日の対照群の平均腫瘍体積−投与開始日の対照群の平均腫瘍体積。
【００６８】
全データは、平均値±平均の標準誤差（ＳＥＭ）で示されている。
【００６９】
統計的分析
データを一方向ＡＮＯＶＡにより評価した。データはすべてＳＰＳＳ１６．０で分析した。Ｐ＜０．０５は、統計的に有意であるとみなされる。薬物動態パラメーターを、ノンコンパートメント回帰分析（non-compartmental regression analysis）により計算した。
結果
【００７０】
方法
ＥＧＦ８１６およびＡＺＤ９２９１の抗腫瘍活性および忍容性をＬＵ０３８７マウスＰＤＸモデルで調査した。ビヒクル、ＥＧＦ８１６  ３０、１００ｍｇ／ｋｇ用量を、強制経口投与により１日１回、連続１８日間経口投与した。ＡＺＤ９２９１  ２５ｍｇ／ｋｇを、１日１回、連続１０日間経口投与し、忍容性の問題により２日間の休薬期間を与えた後、１３日目に投与を再開し、１８日目まで続けた。１８日目の有効性試験終了時、ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ／ｋｇ群およびＡＺＤ９２９１  ２５ｍｇ／ｋｇ群のマウス１０匹のうち４匹は、さらに３日間投与を続け、その後２１日目に投与を停止したとき、腫瘍の再増殖が観察された。
【００７１】
結果
ＥＧＦ８１６  ３０ｍｇ／ｋｇＱＤの経口投与により、４５％の腫瘍阻害が達成された。ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ／ｋｇでは、８１％の腫瘍退縮が得られ、ビヒクルと比較して顕著な抗腫瘍活性が達成された（ｐ＜０．０００１）。ＡＺＤ９２９１  ２５ｍｇ／ｋｇＱＤでも、腫瘍退縮２６％のビヒクルと比較して顕著な抗腫瘍活性が達成された（ｐ＜０．０００１）。
【００７２】
ＬＵ０３８７マウスＰＤＸモデルでのＥＧＦ８１６およびＡＺＤ９２９１の忍容性
動物の体重を週に２回測定した。ＥＧＦ８１６  ３０および１００ｍｇ／ｋｇ用量はいずれも良好に忍容された。１８日間の投与中、ＥＧＦ８１６  ３０ｍｇ／ｋｇでは、体重減少がみられず、ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ／ｋｇでは、対照と比較して、約４％の最大体重減少がみられた（図２）。反して、ＡＺＤ９２９１  ２５ｍｇ／ｋｇでは、１１日目に顕著な体重減少がみられ（−１３．２％）、このため１１日目に２日間の休薬期間を与えなければならなかった。しかし、休薬期間後、体重は回復し、薬物の再投与は忍容された。ＡＺＤ９２９１群の１４日目および１８日目の体重変化は、各々−４．７％および−６．９％であった。
【００７３】
ＥＧＦ８１６およびＡＺＤ９２９１の１日１回、２１日間の経口投与後のＬＵ０３８７マウスＰＤＸモデルでの再発までの時間
１８日目の有効性試験終了時、ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ／ｋｇ群およびＡＺＤ９２９１  ２５ｍｇ／ｋｇ群のマウス１０匹のうち４匹は、さらに３日間投与を続け、その後２１日目に投与を停止した。腫瘍の再増殖がこれらの２つの群で観察された。
【００７４】
２１日目での薬物処置の停止後、腫瘍は、ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ／ｋｇ群については腫瘍再増殖の徴候がみられる前の約１週間退縮したままであった。反して、ＡＺＤ９２９１（２５ｍｇ／ｋｇ）による処置の停止後、腫瘍は直ぐに再増殖した。
【００７５】
結果
ＥＧＦ８１６（化合物Ａ）は、良好に忍容され、全処置期間中、いずれの試験用量でも付随する顕著な体重減少はほとんどまたは全くなかった。ＥＧＦ８１６では、ＬＵ０３８７腫瘍保持マウスにおいて顕著な抗腫瘍活性が達成された。ＥＧＦ８１６の１日１回、１８日間の経口投与により、３０ｍｇ／ｋｇでは腫瘍増殖が阻害され、１００ｍｇ／ｋｇでは顕著な腫瘍退縮（１８日目で−８１％）が達成された（図１）。比較すると、ＥＧＦＲ臨床化合物ＡＺＤ９２９１  ２５ｍｇ／ｋｇは良好に忍容されず、深刻な体重減少がみられた。２日間の休薬期間を１１日目に与えなくてはならなかった。ＡＺＤ９２９１では、わずかな腫瘍退縮しか達成されなかった（１８日目で−２６％）。さらに、再発までの時間に関する試験（ＥＧＦ８１６  １００ｍｇ／ｋｇおよびＡＺＤ９２９１  ２５ｍｇ／ｋｇ用量群のマウス１０匹のうち４匹を後観察（post-monitor）した）では、２１日目にＥＧＦ８１６での処置を停止したとき、腫瘍は、緩やかな腫瘍再増殖がみられる前のさらに１週間ほぼ完全な退縮状態を維持した。対照的に、２１日目にＡＺＤ９２９１での処置を停止した直後に、腫瘍再増殖が観察された。
【００７６】
全体としては、ＥＧＦ８１６は、このモデルで良好な有効性および忍容性を示した（図１および２）。
【実施例５】
【００７７】
化合物Ａの結合様式のモデル化
図３は、ＥＧＦＲキナーゼドメインに結合する化合物Ａ（即ち、ＥＧＦ８１６）、ＡＺＤ９２９１およびＣＯ−１６８６の空間的に重ね合わせたドッキングを示している。モデル化は、公表ＷＴと変異体の共結晶構造を用いて、Ｇｌｉｄｅ（Schrodinger, Inc., New York, NY）で行われた。
【００７８】
ＡＴＰポケット内の空間充填（spatial filling）は、分子がタンパク質骨格とのＨ結合を介して相互作用している、３つの化合物についてはヒンジ領域で非常に酷似していることが分かる。しかし、分子の他の領域では予想外の違いがある（丸印で強調されている）。
【００７９】
したがって、ＡＺＤ９２９１またはＣＯ−１６８６による治療に耐性を示す腫瘍を有する患者は、化合物Ａによる治療に反応し得る。さらに、ＥＧＦ８１６の安全性プロファイルは、他の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩとは異なるとみなされた。したがって、これらの薬剤による治療に不耐性である患者では、ＥＧＦ８１６による治療が忍容され得る。
【００８０】
したがって、ＥＧＦＲ変異を持つ進行性ＮＳＣＬＣ患者における、化合物Ａに関する前臨床データおよび利用可能な臨床データ、ならびに他の第３世代ＥＧＦＲ阻害剤の公知の臨床活性に基づき、化合物Ａは、活性化ＥＧＦＲ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよびｅｘ１９ｄｅｌ）および／または獲得性／耐性「ゲートキーパー」Ｔ７９０Ｍ変異を持つＮＳＣＬＣ患者で顕著な抗腫瘍活性を有すると予想される。化合物Ａは、ＷＴ  ＥＧＦＲを温存しながら、他の第３世代ＴＫＩ、例えば、ＡＺＤ９２９１またはＣＯ−１６８６による治療を含む、現在利用可能な治療選択肢より良好に忍容されることもさらに予想される。有効性および安全性を考慮すると、化合物Ａによる治療は、反応の長期持続および患者の生活の質の向上につながるはずである。
【実施例６】
【００８１】
腫瘍が特異的ＥＧＦＲ変異を持つ局所進行性（ステージＩＩＩＢ）または転移性（ステージＩＶ）ＮＳＣＬＣを有する成人患者での単剤化合物Ａの有効性および安全性を評価するための臨床試験
本開示を通じて、進行性ＮＳＣＬＣは、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを指す。局所進行性ＮＳＣＬＣは、ステージＩＩＩＢのＮＳＣＬＣと定義され、手術を含む根治的マルチモダリティ治療に適していない。転移性ＮＳＣＬＣはステージＩＶのＮＳＣＬＣを指す。
【００８２】
この試験のフェーズＩ部分（用量漸増）は、最大の忍容される用量（ＭＴＤ）または推奨フェーズＩＩ用量（ＲＰ２Ｄ）を決定し、文書化されたＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を持つ局所進行性（ステージＩＩＩＢ）または転移性（ステージＩＶ）ＮＳＣＬＣを有する成人患者における単剤ＥＧＦ８１６の予備抗腫瘍活性を評価するために行われた。
【００８３】
この試験のフェーズＩＩ部分は、腫瘍が特異的ＥＧＦＲ変異を持つ局所進行性（ステージＩＩＩＢ）または転移性（ステージＩＶ）ＮＳＣＬＣを有する成人患者における単剤ＥＧＦ８１６の有効性および安全性を評価するために行われた。患者は、特異的ＥＧＦＲ変異、およびＥＧＦＲ  ＴＫＩ歴を含む過去の全身性抗腫瘍治療のライン数で定義されるように６つの平衡群に登録された。
−  １群の患者は、ＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよび／またはｅｘ１９ｄｅｌ）を持つ局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを有し、進行性ＮＳＣＬＣに対して何らかの全身性抗腫瘍治療を受けておらず、ＥＧＦＲ  ＴＫＩ治療を受ける資格がある、治療未経験患者である。
−  ２群の患者は、第１世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブまたはイコチニブ）または第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、アファチニブまたはダコミチニブ）による、一つかつ唯一の前治療中に進行した後、ＥＧＦＲ活性化変異および獲得性Ｔ７９０Ｍ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよび／またはｅｘ１９ｄｅｌ、Ｔ７９０Ｍ＋）を持つ局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを有する患者である。
−  ３群の患者は、「ｄｅ  ｎｏｖｏ」Ｔ７９０Ｍ変異を持つ局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを有する患者である（即ち、ＥＧＦＲ  ＴＫＩを含む、ＥＧＦＲを阻害することが知られている任意の薬剤による前治療なし）。注記すると、「ｄｅ  ｎｏｖｏ」Ｔ７９０Ｍ変異を持つＮＳＣＬＣ患者１人が、この試験のフェーズＩ部分（用量漸増）に登録された。この患者を、ＥＧＦ８１６  ２２５ｍｇで治療したところ、ベースラインから４１．５４％の腫瘍の減少がみられた。試験治療を少なくとも５か月間続けた。
−  ４群の患者は、ＥＧＦＲエクソン２０挿入または欠失を持つ局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを有する患者である。ＥＧＦＲエクソン２０挿入／欠失は、市販または治験用ＥＧＦＲ阻害剤、例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ネラチニブ、アファチニブおよびＰＦ００２９９８０４（ダコミチニブ）の臨床的に達成可能な（clinically achievable）用量に耐性を示す（Yasuda et al 2012）。この群の患者では、現在、満たされていない医学的必要性が高い。
−  ５群の患者は、第１世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブまたはイコチニブ）または第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、アファチニブまたはダコミチニブ）による、一つかつ唯一の前治療中に進行した後、ＥＧＦＲ活性化変異を持つが、獲得性Ｔ７９０Ｍ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよび／またはｅｘ１９ｄｅｌ、Ｔ７９０Ｍ−）を持たない、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを有する患者である。
−  ６群の患者は、第１／第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる前治療中に進行した後、ＥＧＦＲ活性化変異および獲得性Ｔ７９０Ｍ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ、Ｔ７９０Ｍ＋）を持つ局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣを有し、第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ（例えば、ＡＺＤ９２９１、ＣＯ−１６８６またはＡＳＰ８２７３）投与中に進行したか、またはそれに不耐性である患者である。
【００８４】
患者が、許容できない毒性、病勢進行（ＰＤ）を経験するまで、および／または試験担当医師の判断、患者の同意の撤回もしくは任意の他の理由により治療が停止されるまで、経口化合物Ａは、連続スケジュールで１日１回投与された。
【００８５】
ＥＧＦＲ変異（Ｌ８５８Ｒおよび／またはｅｘ１９ｄｅｌ、Ｔ７９０Ｍ＋）を持つ進行性ＮＳＣＬＣ患者でのこの試験の予備結果からは、他の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩ、例えば、ＡＺＤ９２９１およびＣＯ−１６８６に沿った、最低試験用量を含む異なる用量レベル（７５ｍｇ、１５０ｍｇ、２２５ｍｇおよび３５０ｍｇ）で化合物Ａの許容可能な安全性プロファイルおよび顕著な腫瘍活性が示された。５つの試験用量レベルの予備有効性結果からは、担当医師の評価により、評価可能患者４２人中２５人において全奏効率（ＯＲＲ）５９．５％が示された。
【００８６】
化合物Ａで治療したエクソン２０挿入変異を持つ患者３人の内２人は、第１評価で病勢進行を示し、１人は未確認の部分奏効（partial response）を有した。
【００８７】
ＥＧＦＲ変異を持つ進行性ＮＳＣＬＣ患者における、化合物Ａ（ＥＧＦ８１６）の前臨床データおよび他の第３世代ＥＧＦＲ阻害剤の公知の臨床活性に基づき、活性化ＥＧＦＲ変異（例えば、Ｌ８５８Ｒおよびｅｘ１９ｄｅｌ）および／または獲得性／耐性「ゲートキーパー」Ｔ７９０Ｍ変異を持つＮＳＣＬＣ患者において、化合物Ａは顕著な抗腫瘍活性を有すると予想される。ＥＧＦ８１６は、ＷＴ  ＥＧＦＲを温存しながら、現在利用可能な治療選択肢よりも良好に忍容されることもさらに予想される。有効性および安全性を考慮すると、ＥＧＦ８１６による治療は、反応の長期持続および患者の生活の質の向上につながるはずである。
【００８８】
したがって、以下の列挙実施形態を提供する
【００８９】
列挙実施形態
列挙実施形態１  それを必要とする対象における癌を治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を投与するステップを含み、
該癌が１つまたは複数の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療に耐性を示す、方法。
列挙実施形態２  癌が第１世代および／または第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療にも耐性を示す、列挙実施形態１に記載の方法。
列挙実施形態３  それを必要とする対象における癌を治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を投与するステップを含み、
該対象が１つまたは複数の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる療法中に進行しているか、またはそれにもはや反応しない、方法。
列挙実施形態４  それを必要とする対象における癌を治療する方法であって、
治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を投与するステップを含み、
該対象が１つまたは複数の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる療法に不耐性である、方法。
列挙実施形態５  第１世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩがエルロチニブ、ゲフィチニブおよびイコチニブから選択される、前記列挙実施形態のいずれか１つに記載の方法。
列挙実施形態６  第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩがアファチニブまたはダコミチニブから選択される、前記列挙実施形態のいずれか１つに記載の方法。
列挙実施形態７  第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩがメレレチニブ、ロシレチニブおよびＡＳＰ８２７３から選択される、前記列挙実施形態のいずれか１つに記載の方法。
列挙実施形態８  癌がＮＳＣＬＣである、前記列挙実施形態のいずれか１つに記載の方法。
列挙実施形態９  癌が局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣである、列挙実施形態８に記載の方法。
列挙実施形態１０  化合物Ａの薬学的に許容される塩がメシル酸塩である、前記列挙実施形態のいずれか１つに記載の方法。
列挙実施形態１１  ＮＳＣＬＣ、例えば、進行性ＮＳＣＬＣまたは転移性ＮＳＣＬＣのファースト、セカンドまたはサードライン治療としての使用のための化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩。
列挙実施形態１２  癌を治療する方法での使用のための化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩であって、該癌が１つまたは複数の第３世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療に耐性を示す、化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩。
列挙実施形態１３  癌が１つまたは複数の第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療にさらに耐性を示す、列挙実施形態１２に記載の使用のための化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩。
列挙実施形態１４  癌が１つまたは複数の第１世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療にさらに耐性を示す、癌を治療する方法での、列挙実施形態１２に記載の使用のための化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩。
列挙実施形態１５  癌が１つまたは複数の第１世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療にさらに耐性を示し、１つまたは複数の第２世代ＥＧＦＲ  ＴＫＩによる治療にさらに耐性を示す、癌を治療する方法での、列挙実施形態１２に記載の使用のための化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩。
【００９０】
以下の実施形態も提供される。
【００９１】
実施形態
実施形態１  患者におけるＮＳＣＬＣを治療する方法であって、該ＮＳＣＬＣが、いずれかのＥＧＦＲエクソン２０挿入を持ち、該方法が、治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を該患者に投与することを含み、
該患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法中もしくはその後に進行したか、または
該患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法に不耐性である、方法。
実施形態２  患者におけるＮＳＣＬＣを治療する方法であって、該ＮＳＣＬＣが、１つまたは複数のＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ）を持ち、
該方法が、治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を該患者に投与することを含み、
該患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法中もしくはその後に進行したか、または
該患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法に不耐性である、方法。
実施形態３  ＮＳＣＬＣがＬ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ活性化変異を持つ、実施形態２に記載の方法。
実施形態４  ＮＳＣＬＣが獲得性Ｔ７９０Ｍ変異をさらに持つ、実施形態３に記載の方法。
実施形態５  第３世代ＴＫＩが、オシメルチニブ（メレレチニブ）、ロシレチニブ、ＡＳＰ８２７３、ＨＭ６１７１３またはＰＦ０６７４７７７５である、前記実施形態のいずれか１つに記載の方法。
実施形態６  第３世代ＴＫＩが、オシメルチニブ（メレレチニブ）である、実施形態５に記載の方法。
実施形態７  患者が、１つもしくは複数の第１および／または１つもしくは複数の第２世代ＴＫＩによる前治療を受けており、このような療法中またはその後に進行した、前記実施形態のいずれか１つに記載の方法。
実施形態８  第１世代ＴＫＩが、エルロチニブ、ゲフィチニブまたはイコチニブである、実施形態７に記載の方法。
実施形態９  第２世代ＴＫＩが、アファチニブまたはダコミチニブである、実施形態７または８に記載の方法。
実施形態１０  ＮＳＣＬＣが、局所進行性または転移性ＮＳＣＬＣである、前記列挙実施形態のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１１  患者におけるｄｅ  ｎｏｖｏ  ＥＧＦＲ  Ｔ７９０Ｍ変異を示す進行性または転移性ＮＳＣＬＣを治療する方法であって、該方法が、治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を該患者に投与することを含み、該患者が、ＥＧＦＲ  ＴＫＩでの任意の前治療を受けていない、方法。
実施形態１２  患者におけるＥＧＦＲエクソン２０挿入を持つ進行性または転移性ＮＳＣＬＣを治療する方法であって、治療有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩を該患者に投与することを含む方法。
実施形態１３  化合物Ａが、５０〜２５０ｍｇの範囲の用量で投与される、前記実施形態のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１４  化合物Ａが、１日１回投与される、実施形態１３に記載の方法。
実施形態１５  患者における進行性または転移性ＮＳＣＬＣを治療する方法での使用のための、化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩であって、該ＮＳＣＬＣがＥＧＦＲエクソン２０挿入を持つ、化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩。
実施形態１６  患者におけるＮＳＣＬＣを治療する方法での使用のための、化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩であって、該ＮＳＣＬＣがＥＧＦＲエクソン２０挿入を持つか、または
該ＮＳＣＬＣが１つまたは複数のＥＧＦＲ活性化変異（例えば、Ｌ８５８Ｒまたはｅｘ１９ｄｅｌ）を持ち、
該患者が、化合物Ａ以外の第３世代ＴＫＩによるＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法中またはその後に進行した、
化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩。
【図１】
2018515544.tif 000007
【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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2018515544.tif 000011
2018515544.tif 000012