(57)【要約】本開示は、急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）および慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を含めた、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）のための処置においてＳｙｋ阻害化合物を利用する方法であって、以下の式（Ｉ）および（ＩＩ）からなる群から選択される化合物の使用を含む方法を提供する。ヒト酵素の最も大きなファミリーであるタンパク質キナーゼは、５００種を優に超えるヒトタンパク質を包含する。脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）は、チロシンキナーゼのＳｙｋファミリーのメンバーであり、初期のＢ細胞の発生ならびに成熟したＢ細胞の活性化、シグナル伝達、および生存の制御因子である。2018513173.tif 000044
2018513173.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトにおいて移植片対宿主病を処置するための方法であって、それを必要とする該ヒトに、薬学的有効量の、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物：
【化１７】
2018513173.tif 000036
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化１８】
2018513173.tif 000037
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式Ｉの示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］からなる群から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法。
【請求項２】
ＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに、薬学的有効量の、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物：
【化１９】
2018513173.tif 000038
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化２０】
2018513173.tif 000039
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式Ｉの示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］からなる群から選択される化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法。
【請求項３】
前記化合物が、
【化２１】
2018513173.tif 000040
または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
前記化合物が、６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記化合物が、（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記化合物が、２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記化合物が、２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記化合物が、−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記ＧＶＨＤが急性移植片対宿主病である、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記ＧＶＨＤが慢性移植片対宿主病である、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
投与することを必要とする前記ヒトに、移植片対宿主病の処置に有用な、薬学的有効量の１種または複数種の追加の薬剤を投与することをさらに含む、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
移植片対宿主病の処置に有用な前記１種または複数種の追加の薬剤が、プレドニゾン、メチルプレドニゾン、経口の非吸収性コルチコステロイド、例えば、ブデソニドまたはベクロメタゾンジプロピオネート、免疫モジュレーター、例えば、シクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、チロミゾール、イムチオール、抗胸腺細胞グロブリン、抗ＴＮＦ薬剤、アザチオプリン、イノシン５’−モノホスフェートデヒドロゲナーゼ阻害剤、アゾジアカルボニド、ビスインドリルマレイミドＶＩＩＩ、ブレキナール、クロラムブシル、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、コルチコステロイド、シクロホスファミド、デオキシスペルグアリン、デキサメタゾン、グルココルチコイド、レフルノミド、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、メチルプレドニゾロン、ミゾリビン、ミゾリビン一リン酸、ムロモナブＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、ＯＫＴ３、ｒｈｏ（Ｄ）免疫グロビン、ビタミンＤ類似体（ＭＣ１２８８）、ダクリズマブ、インフリキシマブ、リツキシマブ、トシリズマブ  アレムツズマブ、メトトレキセート、抗胸腺細胞グロブリン、デニロイキンジフチトクス、Ｃａｍｐａｔｈ−１Ｈ、ケラチノサイト成長因子、アバタセプト、レメステムセル−Ｌ  スベロイルアニリドヒドロキサム酸、ペントスタチン、サリドマイド、イマチニブメシレート、シクロホスファミド、フルダラビン、ＯＫＴ３、メルファラン、チオペタ、ならびにリンパ球免疫グロブリン、抗胸腺細胞、およびグロブリンの群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物：
【化２２】
2018513173.tif 000041
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化２３】
2018513173.tif 000042
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式Ｉの示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置のための医薬の製造における使用。
【請求項１６】
前記化合物が、
【化２４】
2018513173.tif 000043
または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
前記化合物が、６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１８】
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１９】
前記化合物が、（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２０】
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２１】
前記化合物が、２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２２】
前記化合物が、２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２３】
前記化合物が、−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２４】
前記ＧＶＨＤが急性移植片対宿主病である、請求項１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２５】
前記ＧＶＨＤが慢性移植片対宿主病である、請求項１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２６】
請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、ＧＶＨＤの処置における該剤形の使用のための指示を含有する添付文書とを含むキット。
【請求項２７】
請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、ＧＶＨＤを処置するのに有用な別の医薬品の、少なくとも１種の単位剤形とを含む、請求項２６に記載のキット。
【請求項２８】
前記化合物が、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項２６または２７のいずれかに記載のキット。
【請求項２９】
前記化合物が、式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項２６または２７のいずれかに記載のキット。
【請求項３０】
移植片対宿主病の処置に有用な前記少なくとも１種の追加の薬剤が、プレドニゾン、メチルプレドニゾン、経口の非吸収性コルチコステロイド、例えば、ブデソニドまたはベクロメタゾンジプロピオネート、免疫モジュレーター、例えば、シクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、チロミゾール、イムチオール、抗胸腺細胞グロブリン、抗ＴＮＦ薬剤、アザチオプリン、イノシン５’−モノホスフェートデヒドロゲナーゼ阻害剤、アゾジアカルボニド、ビスインドリルマレイミドＶＩＩＩ、ブレキナール、クロラムブシル、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、コルチコステロイド、シクロホスファミド、デオキシスペルグアリン、デキサメタゾン、グルココルチコイド、レフルノミド、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、メチルプレドニゾロン、ミゾリビン、ミゾリビン一リン酸、ムロモナブＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、ＯＫＴ３、ｒｈｏ（Ｄ）免疫グロビン、ビタミンＤ類似体（ＭＣ１２８８）、ダクリズマブ、インフリキシマブ、リツキシマブ、トシリズマブ  アレムツズマブ、メトトレキセート、抗胸腺細胞グロブリン、デニロイキンジフチトクス、Ｃａｍｐａｔｈ−１Ｈ、ケラチノサイト成長因子、アバタセプト、レメステムセル−Ｌ  スベロイルアニリドヒドロキサム酸、ペントスタチン、サリドマイド、イマチニブメシレート、シクロホスファミド、フルダラビン、ＯＫＴ３、メルファラン、チオペタ、ならびにリンパ球免疫グロブリン、抗胸腺細胞、およびグロブリンの群から選択される、請求項２７、２８、または２９のいずれかに記載のキット。
【請求項３１】
前記化合物が、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項２７、２８、２９、または３０のいずれかに記載のキット。
【請求項３２】
前記化合物が式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項２７、２８、２９、または３０のいずれかに記載のキット。
【請求項３３】
前記化合物が、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４のそれぞれがＨである式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物が、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】
前記化合物が、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＨであり、Ｒ４がメチルである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がＨであり、Ｒ４がメチルである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）および慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を含めた、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）に対する処置において、Ｓｙｋ阻害化合物を利用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
ヒト酵素の最も大きなファミリーであるタンパク質キナーゼは、５００種を優に超えるヒトタンパク質を包含する。脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）は、チロシンキナーゼのＳｙｋファミリーのメンバーであり、初期のＢ細胞の発生ならびに成熟したＢ細胞の活性化、シグナル伝達、および生存の制御因子である。
【０００３】
劇症移植片対宿主病としても公知の急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）は一般的に、同種異系造血幹細胞移植後最初の１００日以内に症状が現れ、一般的に、皮膚、肝臓、粘膜、および胃腸管に対する選択的損傷を特徴とする。慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）は、同種異系造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）のレシピエントに生じる。ＧＶＨＤは、それが移植の１００日超後に生じた場合慢性と考えられるが、ｃＧＶＨＤの態様は１００日の時点より前に現れ、ａＧＶＨＤの要素と重複することもある。米国内では、この疾患の累積発生率は移植した患者の３５〜７０％であり、年間発生件数は約３，０００〜５，０００件であり、年間有病数は約１０，０００件である。ｃＧＶＨＤは処置するのが難しく、ｃＧＶＨＤを有さない人々と比較してより悪い転帰と関連する。現在の標準治療は、多くの場合、カルシニューリン阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、ミコフェノール酸モフェチル、またはリツキシマブと組み合わせた全身性コルチコステロイドを含めて、様々な手法を含む。処置にもかかわらず、奏効率は不十分であり（４０〜５０％）、ｃＧＶＨＤに伴って、重篤な感染症などの深刻な病的状態が生じ、生活の質が損なわれる；５年死亡率は３０〜５０％である（Ｂｌａｚａｒら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １２巻、４４３〜４５８頁、２０１２年６月）。
【０００４】
ヒトおよび動物モデルは、異常なＢリンパ球のシグナル伝達および生存がｃＧＶＨＤの病因において重要であることを実証した。ＳＹＫ阻害剤（ホスタマチニブ−Ｓａｒａｎｔｏｐｏｕｌｏｓら、Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｂｌｏｏｄ  ａｎｄ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２１巻（２０１５年）Ｓ１１〜Ｓ１８頁）およびＢＴＫ阻害剤（イブルチニブ−Ｎａｋａｓｏｎｅら、Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．−２０１５年３月２７日）を含めた、Ｂ細胞を標的とする薬物は、異常なＧＶＨＤ  Ｂ細胞集団の機能および頻度をｅｘ  ｖｉｖｏで選択的に減少させることが示されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｂｌａｚａｒら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １２巻、４４３〜４５８頁、２０１２年６月
【非特許文献２】Ｓａｒａｎｔｏｐｏｕｌｏｓら、Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｂｌｏｏｄ  ａｎｄ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２１巻（２０１５年）Ｓ１１〜Ｓ１８頁
【非特許文献３】Ｎａｋａｓｏｎｅら、Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｈｅｍａｔｏｌ．−２０１５年３月２７日
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
ａＧＶＨＤおよびｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤの処置のための新規の方法、医薬組成物、およびレジメンに対する必要性が依然として存在する。
【０００７】
したがって、本開示は、急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）および慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を含めた、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を処置するための方法においてＳｙｋ阻害剤として機能する化合物を提供し、この方法は、それを必要とするヒトに、薬学的有効量のＳｙｋ阻害剤を投与することを含む。Ｓｙｋ阻害化合物、Ｓｙｋ阻害剤化合物、およびＳｙｋ阻害剤という用語は、本明細書で使用される場合同義語であることが理解されている。
【０００８】
ヒトにおいてｃＧＶＨＤを処置するこれらの方法において独立して使用することができるＳｙｋ阻害化合物の例として、以下の構造：
【化１】
2018513173.tif 000003
からなる群から選択されるもの、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶が挙げられ、式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化２】
2018513173.tif 000004
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式Ｉの示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、エントスプレチニブで処理したヒトｃＧＶＨＤおよび非ｃＧＶＨＤのＢ細胞において認められたアポトーシス誘導についての生の値を表している。
【００１０】
【図２】図２は、エントスプレチニブで処理したヒトｃＧＶＨＤのＢ細胞における増大したアポトーシスについての値を表している。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
一実施形態は、ヒトにおいて移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を処置するための方法であって、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の式（ＩＩ）の化合物：
【化３】
2018513173.tif 000005
または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供し、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、上で定義されたとおりである。式（ＩＩ）の化合物の調製は、ＵＳ２０１５／０１７５６１６Ａ１（Ｂｌｏｍｇｒｅｎら）において確かめることができる。
【００１２】
別の実施形態は、ヒトにおいて急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）を処置するための方法であって、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の、上で定義されたような式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。
【００１３】
さらなる実施形態は、ヒトにおいて慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を処置するための方法であって、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の、上で定義されたような式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。
【００１４】
式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶に関する処置の方法、医薬組成物、または治療用レジメンについての言及を含む、本明細書の実施形態についての各言及の範囲内で、各実施形態には、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４のそれぞれがＨであり、Ｒ１が上で定義されたとおりであるさらなる実施形態が存在することが理解されている。
【００１５】
式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶に関する処置の方法、医薬組成物、または治療用レジメンについての言及を含む本明細書の実施形態についての各言及の範囲内で、各実施形態には、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨであり、Ｒ１が上で定義されたとおりであるさらなる実施形態が存在することが理解されている。
【００１６】
式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶に関する処置の方法、医薬組成物、または治療用レジメンについての言及を含む本明細書の実施形態についての各言及の範囲内で、各実施形態には、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＨであり、Ｒ４がメチルであり、Ｒ１が上で定義されたとおりであるさらなる実施形態が存在することが理解されている。
【００１７】
式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶に関する処置の方法、医薬組成物、または治療用レジメンについての言及を含む本明細書の実施形態についての各言及の範囲内で、各実施形態には、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨであり、Ｒ１が上で定義されたとおりであるさらなる実施形態が存在することが理解されている。
【００１８】
式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶に関する処置の方法、医薬組成物、または治療用レジメンについての言及を含む本明細書の実施形態についての各言及の範囲内で、各実施形態には、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨであり、Ｒ１が上で定義されたとおりであるさらなる実施形態が存在することが理解されている。
【００１９】
式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶に関する処置の方法、医薬組成物、または治療用レジメンについての言及を含む本明細書の実施形態についての各言及の範囲内で、各実施形態には、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がＨであり、Ｒ４がメチルであり、Ｒ１が上で定義されたとおりであるさらなる実施形態が存在することが理解されている。
【００２０】
式（ＩＩ）の化合物に関する処置の方法、医薬組成物、または治療用レジメンについての言及を含む本明細書の実施形態についての各言及の範囲内で、それぞれの中には、式（ＩＩ）の化合物が、個々に、
６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｚｎ）−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン；
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン；
（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール；
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン；
２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール；
２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール；または
２−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール；
または薬学的に許容されるその塩もしくは（ｏｆ）共結晶を含む、別個の処置、医薬組成物、または治療用レジメンが存在することが理解されている。
【００２１】
本明細書で開示されている式（ＩＩ）の範囲内の化合物の具体例を含めて、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物に関する処置の方法、医薬組成物、キット、レジメン、および他の使用を含む、本明細書で開示されている実施形態のそれぞれに対して、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは（ｏｆ）共結晶についての言及はまた、このような化合物の薬学的に許容されるエステル、薬学的に許容される溶媒和物、水和物、異性体（光学異性体、ラセミ体、またはこれらの他の混合物を含む）、互変異性体、同位体、多形、および薬学的に許容されるプロドラッグも含むことが理解されている。
【００２２】
別個の実施形態は、ヒトにおいて移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を処置するための方法であって、それを必要とするヒトに、構造：
【化４】
2018513173.tif 000006
を有する、薬学的有効量の６−（１Ｈ−インダゾール−６−イル）−Ｎ−（４−モルホリノフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（式Ｉ）または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。上記式Ｉの化合物はまた、エントスプレチニブまたはＧＳ−９９７３と呼ばれることもある。
【００２３】
別の実施形態は、ヒトにおいて急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）を処置するための方法であって、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の６−（１Ｈ−インダゾール−６−イル）−Ｎ−（４−モルホリノフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（式Ｉ）、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。
【００２４】
さらなる実施形態は、ヒトにおいて慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を処置するための方法であって、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の６−（１Ｈ−インダゾール−６−イル）−Ｎ−（４−モルホリノフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（式Ｉ）、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。
【００２５】
一実施形態は、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶：
【化５】
2018513173.tif 000007
の、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置のための医薬の製造における使用を提供し、式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化６】
2018513173.tif 000008
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式Ｉの示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである。
【００２６】
追加の実施形態は、ａＧＶＨＤおよびｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに投与することを含み、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の６−（１Ｈ−インダゾール−６−イル）−Ｎ−（４−モルホリノフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（式Ｉ）、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。よって、追加の実施形態は、ａＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに投与することを含み、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の６−（１Ｈ−インダゾール−６−イル）−Ｎ−（４−モルホリノフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（式Ｉ）、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。よって、追加の実施形態は、ｃＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに投与することを含み、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の６−（１Ｈ−インダゾール−６−イル）−Ｎ−（４−モルホリノフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（式Ｉ）、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。式（Ｉ）の化合物の使用を含む、本明細書に記載されている実施形態のそれぞれの範囲内で、式（Ｉ）の化合物がメシル酸塩として使用されるさらなる実施形態が存在する。式（Ｉ）の化合物の使用を含む、本明細書に記載されている実施形態のそれぞれの範囲内で、式（Ｉ）の化合物がビスメシレートとして使用されるさらなる実施形態が存在する。式（Ｉ）の化合物の使用を含む、本明細書に記載されている実施形態のそれぞれの範囲内で、式（Ｉ）の化合物が本明細書に記載されている形態３のビスメシレートとして使用されるさらなる実施形態が存在する。式（Ｉ）の化合物の使用を含む、本明細書に記載されている実施形態のそれぞれの範囲内で、式（Ｉ）の化合物が本明細書に記載されている形態７のビスメシレートとして使用されるさらなる実施形態もまた存在する。形態３および形態７を含む式（Ｉ）の化合物のメシル酸塩は、その内容が参考として本明細書に援用されている、Ｅｌｆｏｒｄら、米国特許出願公開第２０１５／００３８５０５Ａ１号によって教示されている。
【００２７】
別の実施形態は、ａＧＶＨＤおよびｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに、薬学的有効量の式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。実施形態は、ａＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに、薬学的有効量の式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。別の実施形態は、ｃＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに、薬学的有効量の式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法を提供する。
【００２８】
別の実施形態は、ヒトにおいて、ａＧＶＨＤおよびｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤを処置する方法であって、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ヒトにおいて、ａＧＶＨＤおよびｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤを処置するのに有用な、薬学的有効量の別の薬剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。さらなる実施形態は、ヒトにおいてａＧＶＨＤを処置する方法であって、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ヒトにおいてａＧＶＨＤを処置するのに有用な、薬学的有効量の別の薬剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。別の実施形態は、ヒトにおいてｃＧＶＨＤを処置する方法であって、それを必要とするヒトに、薬学的有効量の式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ヒトにおいてｃＧＶＨＤを処置するのに有用な、薬学的有効量の別の薬剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。ＧＶＨＤを処置するのに有用な薬剤として、免疫抑制剤、抗増殖剤（例えば、抗生剤）、抗炎症剤、鎮痛剤などが挙げられる。
【００２９】
別の実施形態は、ａＧＶＨＤおよびｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに、薬学的有効量の薬学的有効量の式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ヒトにおいて、ａＧＶＨＤおよびｃＧＶＨＤを含めたＧＶＨＤを処置するのに有用な、薬学的有効量の別の薬剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。
【００３０】
別の実施形態は、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントにおいてａＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、ヒトに、薬学的有効量の薬学的有効量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ａＧＶＨＤを処置するのに有用な、薬学的有効量の別の薬剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。
【００３１】
別の実施形態は、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントにおいてｃＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、ヒトに、薬学的有効量の薬学的有効量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ｃＧＶＨＤを処置するのに有用な、薬学的有効量の別の薬剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。
【００３２】
別の実施形態は、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントにおいてａＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、ヒトに、薬学的有効量の薬学的有効量の式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ａＧＶＨＤを処置するのに有用な、薬学的有効量の別の薬剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。
【００３３】
別の実施形態は、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントにおいてｃＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、ヒトに、薬学的有効量の薬学的有効量の式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ｃＧＶＨＤを処置するのに有用な、薬学的有効量の別の薬剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。
【００３４】
本明細書での方法において、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態と組み合わせることができる薬剤の例として、ステロイド、例えば、プレドニゾンおよびメチルプレドニゾン、経口の非吸収性コルチコステロイド、例えば、ブデソニドまたはベクロメタゾンジプロピオネート、免疫モジュレーター、例えば、シクロスポリン（Ｎｅｏｒａｌ（登録商標）、Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ（登録商標））、タクロリムス（Ｐｒｏｇｒａｆ（登録商標））、シロリムス（Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標））、ミコフェノール酸モフェチル（ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標））、チロミゾール、イムチオール、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、抗ＴＮＦ剤、アザチオプリン（または他のイノシン５’−モノホスフェートデヒドロゲナーゼ阻害剤）、アゾジアカルボニド（ａｚｏｄｉａｃａｒｂｏｎｉｄｅ）、ビスインドリルマレイミドＶＩＩＩ、ブレキナール、クロラムブシル、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、コルチコステロイド、シクロホスファミド、デオキシスペルグアリン、デキサメタゾン、グルココルチコイド、レフルノミド、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）、メトトレキセート、メチルプレドニゾロン、ミゾリビン、ミゾリビン一リン酸、ムロモナブＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、ＯＫＴ３、プレドニゾン、シロリムス、ラパマイシン、ｒｈｏ（Ｄ）免疫グロビン（ｒｈｏ  （Ｄ）  ｉｍｍｕｎｅ  ｇｌｏｂｉｎ）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、ビタミンＤ類似体（例えば、ＭＣ１２８８）、など、モノクローナル抗体、例えば、ダクリズマブ（Ｚｅｎａｐａｘ（登録商標））、インフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標））、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）、ＭａｂＴｈｅｒａ（登録商標）、またはＺｙｔｕｘ（登録商標））、トシリズマブ（Ａｃｔｅｍｒａ（登録商標））、およびアレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標））、メトトレキセート、抗胸腺細胞グロブリン（ウサギＡＴＧ、Ｔｈｙｍｏｇｌｏｂｕｌｉｎ（登録商標））、デニロイキンジフチトクス（Ｏｎｔａｋ（登録商標））、Ｃａｍｐａｔｈ−１Ｈ、ケラチノサイト成長因子（ＫＧＦ）、アバタセプト（Ｏｒｅｎｃｉａ（登録商標））、レメステムセル−Ｌ（Ｐｒｏｃｈｙｍａｌ（登録商標））、スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、ペントスタチン（デオキシコホルマイシン、Ｎｉｐｅｎｔ（登録商標））、サリドマイド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ（登録商標））、イマチニブメシレート（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））、シクロホスファミド、フルダラビン、ＯＫＴ３（Ｍｕｒｏｍｏｒａｂ  ＣＯ３（登録商標）、Ｏｒｔｈｏｃｌｏｎｅ（登録商標））、メルファラン、チオペタ（ｔｈｉｏｐｅｔａ）、ならびにＡＴＧＡＭ（登録商標）（リンパ球免疫グロブリン、抗胸腺細胞、グロブリン［ウマ］無菌溶液）が挙げられる。
【００３５】
上記に参照した方法は、ＧＶＨＤの処置を必要とするヒトに、薬学的有効量の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態を、ＧＶＨＤを処置するのに有用な１種または複数種の追加の薬剤と組み合わせて投与することを含み得ることを理解されたい。例えば、薬学的有効量の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶形態は、薬学的有効量の１種または複数種のステロイド、例えば、プレドニゾン、メチルプレドニゾン、ブデソニドまたはベクロメタゾンジプロピオネート、および薬学的有効量の免疫モジュレーター、例えば、シクロスポリン（Ｎｅｏｒａｌ（登録商標）、Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ（登録商標））、タクロリムス（Ｐｒｏｇｒａｆ（登録商標））、シロリムス（Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標））、またはミコフェノール酸モフェチル（ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標））の投与と組み合わせることができる。
【００３６】
併用療法またはレジメンにおいて個々にまたは組み合わせて投与される薬剤のそれぞれは、初期用量で投与し、次いで、時間の経過と共に医療専門家によりこれを減少させてより低い有効用量に到達することができることもまた理解されている。例えば、本明細書の組合せおよびレジメンにおいて、全身性グルココルチコステロイド（コルチコステロイド）、例えば、プレドニゾンおよびメチルプレドニゾンは、約１〜２ｍｇ／ｋｇ／日の用量でヒト患者に投与し得る。ｍＴＯＲ薬剤の初期の１日用量は、シロリムス２〜４０ｍｇを１日１回与え、エベロリムス０．２５〜１ｍｇを１日２回与えることを含む。カルシニューリン薬剤の初期の１日用量は、タクロリムス約０．０２５〜０．２ｍｇ／ｋｇ／日およびシクロスポリン約２．５〜９ｍｇ／ｋｇ／日を含む。ミコフェノール酸モフェチル（ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標））は、初期の１日用量約２５０〜３，０００ｍｇ／日で投与し得る。これらの薬剤のそれぞれは、造血細胞移植後、本明細書中に記載されているような、薬学的有効量のＳｙｋ阻害剤と組み合わせて投与し得る。本明細書の異なる実施形態では、ＧＶＨＤを処置するのに有用な薬剤は、このような処置を必要とするヒトに、例えば、局所用軟膏剤もしくはクリーム剤の形態で、または点眼製剤で局所的に投与し得る。
【００３７】
急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）および慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を含めた、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置のための医薬の製造における、式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の使用もまた提供される。急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）および慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を含めた、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置のための医薬の製造における、式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の使用もまた提供される。
【００３８】
本明細書に記載されている方法および併用療法において使用することができる式（Ｉ）の化合物の形態の例として、その内容が参考として本明細書に援用されているＵ．Ｓ．２０１５／００３８５０５およびＷＯ２０１５／０１７４６０に記載されているものを含めて、当技術分野で公知のものが挙げられる。このような形態は、式（Ｉ）の化合物のビスメシレート形態、もしくはその水和物を含み、多形形態３および多形形態７を含む。利用されるＳｙｋ化合物が式（Ｉ）の化合物、エントスプレチニブである、処置の方法、医薬組成物、キット、レジメン、および他の使用に関して本明細書に記載されている実施形態のそれぞれの範囲内には、式（Ｉ）の化合物が多形形態３のビスメシレート形態であるさらなる実施形態が存在する。利用されるＳｙｋ化合物が式（Ｉ）の化合物、エントスプレチニブである、処置の方法、医薬組成物、キット、レジメン、および他の使用に関して本明細書に記載されている実施形態のそれぞれにおいて、式（Ｉ）の化合物が多形形態７のビスメシレート形態であるさらなる実施形態もまた存在する。
【００３９】
定義
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」とは、生物学的にまたは他の点で有害ではない材料を指し、例えば、材料は、任意の重大な望ましくない生物学的作用を引き起こすことなく、またはそれが含有されている組成物の他の構成成分のいずれかと有害な方式で相互作用することなく、患者に投与される医薬組成物に組み込むことができる。薬学的に許容されるビヒクル（例えば、キャリア、アジュバント、および／または他の添加剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ））は好ましくは、毒物試験および製造試験の必要とされる基準を満たし、ならびに／または米国食品医薬品局により作成されたＩｎａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅに含まれている。
【００４０】
「薬学的に許容される塩」として、例えば、無機酸との塩および有機酸との塩が挙げられる。塩の例として、塩酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、スルフィン酸塩、硝酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メシル酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエチルスルホン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、およびアルカン酸塩（例えば、酢酸塩、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ、式中、ｎは０〜４である）を挙げることができる。加えて、本明細書に記載されている化合物が酸付加塩として得られた場合、酸性塩の溶液を塩基性化することによって遊離塩基を得ることができる。逆に、生成物が遊離塩基である場合、適切な有機溶媒に遊離塩基を溶解し、塩基化合物から酸付加塩を調製するための従来の手順に従い、溶液を酸で処理することによって、付加塩、特に薬学的に許容される付加塩を生成することができる。当業者であれば、非毒性の薬学的に許容される付加塩を調製するために使用することができる様々な合成法を認識している。
【００４１】
「有効量」、「薬学的有効量」、および「治療有効量」という用語は、疾患を処置するために被験体に投与された場合、疾患に対するこのような処置を実行するのに十分である化合物の量を含めた、所望の生物学的または医学的応答を引き出すのに有効であり得る量を指す。有効量は、化合物、疾患およびその重症度、ならびに処置すべき被験体の年齢、体重などに応じて異なる。有効量は、ある範囲の量を含むことができる。薬学的有効量は、他の薬剤と組み合わせた場合有効である薬剤の量を含む。
【００４２】
「処置」または「処置する」とは、臨床結果を含めた有益なまたは所望の結果を得るための手法である。有益なまたは所望の臨床結果は、以下のうちの一つまたは複数を含み得る：
（ｉ）疾患から結果として生じるもう１種の症状を低減させること；
（ｉｉ）疾患の程度を縮小させること、および／または疾患を安定化させること（例えば、疾患の悪化を遅延させること）；
（ｉｉｉ）疾患の拡散を遅延させること；
（ｉｖ）疾患の開始もしくは再発および／または疾患の進行を遅延させるまたは遅くすること；
（ｖ）病態を回復させることおよび／または疾患の寛解をもたらすこと（部分的または全体に関わらず）および／または疾患を処置するのに必要とされる１種もしくは複数種の他の薬物療法の用量を低減させること；
（ｖｉ）生活の質を高めること、ならびに／あるいは
（ｖｉｉ）生存を長引かせること。
【００４３】
疾患または状態の発生を「遅延させる」とは、疾患または状態の発生を引き延ばす、妨害する、遅くする、遅滞させる、安定化する、および／または延ばすことを意味する。この遅延は、処置されている疾患もしくは状態、および／または被験体の履歴に応じて、時間の長さを変化させることであってよい。疾患または状態の発生を「遅延させる」方法とは、本方法を使用しない場合と比較して、所与の時間枠における疾患もしくは状態の発生の確率を減少させ、そして／または所与の時間枠での疾患もしくは状態の程度を減少させる方法である。このような比較は、通常、統計学的に有意な数の被験体を使用した臨床研究に基づく。疾患または状態の発生は、標準的方法、例えば、規定通りの健康診断、マンモグラフィー、画像化、またはバイオプシーなどを使用して検出可能であり得る。発生はまた、最初に検出不能であり得る疾患または状態の進行を指すこともでき、出現、再発、および開始を含む。
【００４４】
本明細書に記載されている方法における使用のため、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶は、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶、および少なくとも１種の薬学的に許容されるビヒクルを含む医薬組成物中に存在し得る。薬学的に許容されるビヒクルは、薬学的に許容されるキャリア、アジュバントおよび／または他の添加剤を含んでもよく、他の成分は、これらが製剤の他の成分と相容性があり、そのレシピエントに有害でない限り、薬学的に許容されるとみなすことができる。
【００４５】
本明細書に記載されている、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の医薬組成物は、任意の従来の方法、例えば、混合、溶解、造粒、糖衣錠の作製、粉砕、乳化、封入、エントラッピング、メルトスピニング、スプレー乾燥、または凍結乾燥プロセスを使用して製造することができる。最適な医薬製剤は、投与経路および所望の投薬量に応じて当業者により決定することができる。このような製剤は、投与された薬剤の物理的状態、安定性、ｉｎ  ｖｉｖｏでの放出速度、およびｉｎ  ｖｉｖｏでのクリアランス速度に影響を及ぼす可能性がある。処置している状態に応じて、これらの医薬組成物を製剤化し、全身的または局在的に投与することができる。
【００４６】
「キャリア」という用語は、賦形剤、崩壊剤、沈殿阻害剤、界面活性剤、流動促進剤、結合剤、滑沢剤および他の添加剤ならびに化合物と共に投与されるビヒクルを指す。キャリアは一般に本明細書およびまた「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」Ｅ．Ｗ．  Ｍａｒｔｉｎ著に記載されている。キャリアの例として、以下に限定されないが、モノステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸アルミニウム、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスポビドン、イソステアリン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシオクタコサニルヒドロキシステアレート、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース、ラクトース一水和物、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、微結晶性セルロース、ポロキサマー１２４、ポロキサマー１８１、ポロキサマー１８２、ポロキサマー１８８、ポロキサマー２３７、ポロキサマー４０７、ポビドン、二酸化ケイ素、コロイド状二酸化ケイ素、シリコーン、シリコーン接着剤４１０２、およびシリコーン乳剤が挙げられる。しかし、医薬組成物に対して選択されるキャリア、および組成物中のこのようなキャリアの量は、製剤方法に応じて異なり得る（例えば、乾式造粒製剤、固体分散製剤）ことを理解すべきである。
【００４７】
「賦形剤」という用語は一般に、送達前に目的の化合物を希釈するために使用される物質を指す。賦形剤はまた、化合物を安定化する役目を果たすことができる。賦形剤の例として、デンプン、糖類、二糖、スクロース、ラクトース、多糖、セルロース、セルロースエーテル、ヒドロキシプロピルセルロース、糖アルコール、キシリトール、ソルビトール、マルチトール、微結晶性セルロース、カルシウムまたは炭酸ナトリウム、ラクトース、ラクトース一水和物、リン酸水素カルシウム、セルロース、圧縮可能な糖（ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｂｌｅ  ｓｕｇａｒ）、第二リン酸カルシウム脱水物、マンニトール、微結晶性セルロース、および第三リン酸カルシウムを挙げることができる。
【００４８】
「崩壊剤」という用語は一般に、固体調製物への添加により、投与後のその分裂または崩壊を促進し、その急速な溶解を可能にするために、できるだけ効率的に活性成分を放出することを可能にする物質を指す。崩壊剤の例として、トウモロコシデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、微結晶性セルロース、修飾コーンデンプン、カルボキシメチルナトリウムデンプン、ポビドン、アルファ化デンプン、およびアルギン酸を挙げることができる。
【００４９】
「沈殿阻害剤」という用語は一般に、過飽和溶液からの活性剤の沈殿を予防または阻害する物質を指す。沈殿阻害剤の一つの例として、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）が挙げられる。
【００５０】
「界面活性剤」という用語は一般に、活性剤の湿潤化を改善するまたは活性剤の溶解度を改善することができる、液体と固体の間の表面張力を低下させる物質を指す。界面活性剤の例として、ポロキサマーおよびラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。
【００５１】
「流動促進剤」という用語は一般に、錠剤圧縮中の流動特性を改善し、抗固化効果を生じさせるための錠剤およびカプセル剤製剤に使用される物質を指す。流動促進剤の例として、コロイド状二酸化ケイ素、タルク、ヒュームドシリカ、デンプン、デンプン誘導体、およびベントナイトを挙げることができる。
【００５２】
「結合剤」という用語は一般に、粘着性部分および離散性部分を一つに維持するために、キャリアの活性成分と不活性成分を一つに結合するのに使用することができる任意の薬学的に許容されるフィルムを指す。結合剤の例として、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポビドン、コポビドン、およびエチルセルロースを挙げることができる。
【００５３】
「滑沢剤」という用語は一般に、粉末ブレンドに加えることによって、錠剤化または封入プロセスの間に、圧縮した粉末塊が機器に固着するのを予防する物質を指す。滑沢剤は、型からの錠剤の押し出しを補助し、粉末流を改善することができる。滑沢剤の例として、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、シリカ、脂肪、ステアリン酸カルシウム、ポリエチレングリコール、ステアリルフマル酸ナトリウム、またはタルク、および、例えば、ラウリン酸、オレイン酸、およびＣ８／Ｃ１０脂肪酸を含む脂肪酸などの可溶化剤を挙げることができる。
【００５４】
本明細書に提供されている方法において、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶、またはその医薬組成物は、その意図する目的を達成するための治療有効量で投与される。治療有効量の決定は、特に本明細書に提供されている詳細な開示を考慮して、十分に当業者の能力内である。一部の実施形態（ＧＶＨＤを処置する方法）では、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の治療有効量は、（ｉ）ＧＶＨＤの重症度を減少させる；（ｉｉ）ＧＶＨＤの症状の発症を遅くする；（ｉｉｉ）レシピエントの体内でのＧＶＨＤ症状の拡散を阻害し、遅滞させ、ある程度遅くさせ、好ましくは停止させる；（ｉｖ）ＧＶＨＤの症状の出現および／もしくは再発を遅延させる；ならびに／または（ｖ）ＧＶＨＤに関連する症状の１種もしくは複数種をある程度緩和することができる。様々な実施形態では、量は、ａＧＶＨＤおよびｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤの症状の１種または複数種を回復させる、和らげる、少なくする、および／または遅延させるのに十分である。
【００５５】
治療有効量は、処置されている被験体、および疾患または状態、被験体の体重および年齢、疾患または状態の重症度、ならびに投与する様式に応じて異なってもよく、それは、当業者により容易に決定することができる。
【００５６】
本明細書に提供されている方法において、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の投薬レジメンは、例えば、適応症、投与経路、および状態の重症度に応じて異なってよい。投与経路に応じて、適切な用量は、体重、体表面積、または器官サイズに従い計算することができる。最終的投薬レジメンは、良好な医療行為に鑑みて、薬物の作用を改変する様々な因子、例えば、化合物の比活性、病態の本質（ｉｄｅｎｔｉｔｙ）および重症度、被験体の応答性、被験体の年齢、状態、体重、性別、および食生活、ならびに任意の感染の重症度を考慮しながら、主治医により決定される。考慮に入れることができる追加の因子として、投与の時間および頻度、薬物併用、反応感受性、および治療に対する耐性／応答が挙げられる。本明細書中に記述されている製剤のいずれかが関与する処置に対して適当な用量のさらなる精密化は、特に開示された投薬情報およびアッセイ、ならびにヒト治験において観察された薬物動態データの観点から、過度の実験なしに熟練した医師により慣用的に行われる。適当な用量は、用量反応データと一緒に、体液または他の試料中の薬剤の濃度を決定するための確立したアッセイの使用を介して確かめることができる。
【００５７】
選択された製剤および投与経路は、個々の被験体、被験体において処置される状態の性質、および一般的に、担当専門医（ａｔｔｅｎｄｉｎｇ  ｐｒａｃｔｉｔｉｏｎｅｒ）の判断に適合させることができる。
【００５８】
式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の薬学的有効量または治療有効量は、所望の処置エンドポイントを達成するために、単回用量または複数回用量で提供され得る。本明細書で使用される場合、「用量」とは、被験体（例えば、ヒト）が各回に摂取する活性成分（例えば、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶）の総量を指す。例えば、上に記載されている経口投与のための投与用量は、１日１回（ＱＤ）、１日２回（ＢＩＤ）、１日３回、１日４回、または１日４回超投与することができる。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の用量は、１日１回投与される。一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の用量は、１日２回投与される。
【００５９】
一部の実施形態では、ヒト被験体に対する、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の例示的な用量は、約１ｍｇ〜約５０００ｍｇ、約１ｍｇ〜約４０００ｍｇ、約１ｍｇ〜約３０００ｍｇ、約１ｍｇ〜約２０００ｍｇ、約２ｍｇ〜約２０００ｍｇ、約５ｍｇ〜約２０００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２０００ｍｇ、約１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約２ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約５ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約５５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約６５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約７００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約８００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約８５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約９００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約９５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約２ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約７５ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約５００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約５５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約６００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約６５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約７００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２ｍｇ〜約５００ｍｇ、約５ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約５００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２ｍｇ〜約４００ｍｇ、約５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２ｍｇ〜約３００ｍｇ、約５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約７５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約２ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約５ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約５０ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約７５ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２ｍｇ〜約２００ｍｇ、約５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１８０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約２ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約５ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約２ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約２ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約５ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、約２ｍｇ〜約１００ｍｇ、約５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約６０ｍｇ〜約１００ｍｇ、または約７５ｍｇ〜約１００ｍｇであってよい。
【００６０】
一部の実施形態では、ヒト被験体に対する、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の例示的な用量は、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５５０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８５０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９５０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１４００ｍｇ、約１６００ｍｇ、約１８００ｍｇ、約２０００ｍｇ、約２２００ｍｇ、約２４００ｍｇ、約２６００ｍｇ、約２８００ｍｇ、約３０００ｍｇ、約３２００ｍｇ、約３４００ｍｇ、約３６００ｍｇ、約３８００ｍｇ、約４０００ｍｇ、約４２００ｍｇ、約４４００ｍｇ、約４６００ｍｇ、約４８００ｍｇ、または約５０００ｍｇであってよい。
【００６１】
他の実施形態では、提供される方法は臨床効力が達成される用量の式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することによって、または効力が維持できるレベルになるまで、用量を一定量ずつ（ｂｙ  ｉｎｃｒｅｍｅｎｔｓ）減少させることによって、被験体（例えば、ヒト）を継続して処置することを含む。一部の実施形態では、提供される方法は、被験体（例えば、それを必要とするヒト）に最初の１日用量である５０ｍｇ〜約５００ｍｇの（ｏｒ）式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶、あるいは代替の実施形態では、１００ｍｇ〜１０００ｍｇの式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与し、その後の１日用量の式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を、少なくとも６日にわたり投与することを含み、その後の１日用量は各々、２５ｍｇ〜３００ｍｇ、または５０ｍｇ〜約４００ｍｇ増量される。したがって、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の用量は、臨床効力が達成されるまで一定量ずつ増加させることができることもまた理解されるべきである。用量を増加させるために、約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、または約１２５ｍｇ、または約１５０ｍｇ、または約２００ｍｇ、または約２５０ｍｇ、または約３００ｍｇの増加量を使用することができる。用量は、毎日、１日おきに、週２回、週３回、週４回、週５回もしくは週６回、または週１回増加させることができる。式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の初期用量は、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、または５００ｍｇから選択することができ、各々１日１回、２回、または３回投与される。
【００６２】
投薬の頻度は、薬物動態学的パラメーターである投与される化合物、投与経路、および処置される特定の疾患に依存する。投薬の用量および頻度もまた、薬物動態学的および薬力学的、ならびに毒性および治療効率データに依存し得る。例えば、式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶についての薬物動態学的および薬力学的情報は、前臨床のｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ研究を介して収集し、その後、治験の過程中にヒトで確認することができる。したがって、本明細書において提供されている方法に使用されている式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶に対して、治療有効用量は、最初に生化学的および／または細胞ベースのアッセイから推定することができる。次いで、投薬量は、Ｓｙｋ発現または活性をモジュレートする望ましい循環濃度範囲を達成するように、動物モデルにおいて公式化され得る。ヒト研究が行われるにつれて、様々な疾患および状態に対する適当な投薬量レベルおよび処置期間に関するさらなる情報が現れる。
【００６３】
式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の毒性および治療効力は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％に対して致命的な用量）およびＥＤ５０（集団の５０％において治療的に有効な用量）を決定するための、細胞培養物または実験動物における標準的な薬学的手順により決定することができる。有毒性効果および治療効果との間の用量比率は、「治療指数」であり、これは通常、比率ＬＤ５０／ＥＤ５０として表現される。大きな治療指数を示す化合物、すなわち、中毒量が有効用量より実質的に高い化合物が好ましい。このような細胞培養アッセイおよび追加の動物研究から得られたデータは、ヒトでの使用のために一連の投薬量を公式化するのに使用され得る。このような化合物の用量は、ほとんどまたは全く毒性を含まないＥＤ５０を含む、循環濃度の範囲内にあることが好ましい。
【００６４】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を含む組成物（例えば、製剤および単位投薬量を含む）を調製し、適当な容器内に配置し、指示される状態の処置のために標識され得る。したがって、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の単位剤形と、化合物の使用のための指示を含んでいるラベルとを含む容器などの製造物品もまた提供される。一部の実施形態では、製造物品は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の単位剤形と、少なくとも１種の薬学的に許容されるビヒクルとを含む容器である。製造物品は、本開示において提供されている医薬組成物を含有する、ビン、バイアル、アンプル、単回使用の使い捨てアプリケーターなどであってよい。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成することができ、一態様ではまた、容器上に、または容器に付随したラベルを含み、それは、がんまたは炎症性の状態の処置における使用のための指示を示す。活性成分は、化学的および物理的安定性を改善することが可能な任意の材料、例えば、アルミ箔バッグなどの中にパッケージングすることができることを理解すべきである。一部の実施形態では、ラベル上に示された疾患または状態は、例えば、がんの処置を含むことができる。
【００６５】
別の実施形態は、ａＧＶＨＤおよび／またはｃＧＶＨＤの処置を含めた、ヒトにおけるＧＶＨＤの処置のための医薬キットであって、薬学的有効量の式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩、共結晶、エステル、溶媒和物、水和物、異性体、互変異性体、同位体、多形、もしくはプロドラッグ、ならびにａＧＶＨＤおよび／またはｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤの処置における式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物の使用のための指示を含む医薬キットを提供する。例えば、キットは、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、ａＧＶＨＤおよび／またはｃＧＶＨＤを含めた、ＧＶＨＤの処置における組成物の使用のための指示を含有する添付文書とを含むことができる。一部の実施形態では、キットは、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、少なくとも１種の薬学的に許容されるビヒクルと、これらの使用のための指示とを含む。他の実施形態では、キットは、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、本明細書に記載されているものなど、ＧＶＨＤを処置するのに有用な別の医薬品の、少なくとも１種の単位剤形と、これらの使用のための指示とを含む。
【００６６】
合成
式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶は、当技術分野で公知の方法により調製することができることを理解されたい。例えば、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶、およびそれを含む医薬製剤は、米国特許第８，７４８，６０７号および同第８，４５０，３２１号、Ｊ．  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．、５７巻、９号、３８５６〜３８７３頁、ＵＳ２０１５／００３８５０４、ならびにＵＳ２０１５／００３８５０５で開示された方法により調製することができる。
【００６７】
本開示の化合物は、本明細書で開示されている方法、ならびに本明細書の開示および当技術分野で周知の方法を考慮すれば明らかであるその所定の修正を使用して調製することができる。本明細書での教示に加えて、従来および周知の合成法を使用することができる。式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の合成は、以下の実施例に記載されているように達成することができる。入手可能であれば、試薬を、例えば、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈまたは他の化学薬品供給業者から商業的に購入することができる。
【００６８】
一般合成
本開示による式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の典型的な実施形態は、以下に記載されている一般反応スキームを使用して合成することができる。本明細書の記載を考慮すると、出発材料を、同様の構造を有する他の材料で置き換えて一般スキームを変更することによって、それに対応して異なる生成物をもたらすことができることは明らかである。以下の合成の記述は、対応する生成物を得るためにどのように出発材料として異なるものを用い得るかについての多くの例を提供するためのものである。置換基が定義されている所望の生成物を考慮すると、必要な出発材料は一般に精査により決定することができる。出発材料は通常の商業的供給源から得るか、または公開された方法を使用して合成される。本開示の実施形態である化合物を合成するために、合成する化合物の構造の精査により、各置換基として如何なるものを用いるかが分かる。本明細書の実施例を考慮すれば、最終生成物が何かによって、単純な精査プロセスにより必要な出発材料が如何なるものかが全般的に明らかとなる。
【００６９】
合成反応パラメーター
式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶は、例えば、以下の一般的方法および手順を使用して、容易に入手できる出発材料から調製することができる。典型的なまたは好ましいプロセス条件（すなわち、反応の温度、時間、反応物質のモル比、溶媒、圧力など）が与えられた場合、別段明示されない限り、他のプロセス条件もまた使用することができることを認識されたい。最適な反応条件は、使用される特定の反応物質または溶媒と共に変わり得るが、このような条件は、慣用的な最適化手順により当業者が決定できる。
【００７０】
さらに、当業者には明らかなように、ある特定の官能基が所望しない反応を受けるのを阻止するために従来の保護基が必要であり得る。様々な官能基に対する適切な保護基、ならびに特定の官能基を保護および脱保護するための適切な条件は当技術分野で周知である。例えば、多くの保護基は、Ｔ．  Ｗ．  ＧｒｅｅｎｅおよびＧ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ（１９９９年）Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、およびその中に引用された参考文献に記載されている。
【００７１】
さらに、本開示の化合物はキラル中心を含有し得る。したがって、所望する場合、このような化合物は、純粋な立体異性体として、すなわち、個々のエナンチオマーとしてまたは立体異性体が富化された混合物として、調製または単離することができる。全てのこのような立体異性体（および富化混合物）は、他に指摘されていない限り、本開示の範囲内に含まれる。純粋な立体異性体（または富化混合物）は、例えば、当技術分野で周知の光学活性な出発材料または立体選択的試薬を使用して調製することができる。代わりに、このような化合物のラセミ混合物は、例えば、キラルカラムクロマトグラフィー、キラル分割剤などを使用して分離することができる。
【００７２】
以下の反応のための出発材料は一般に公知の化合物であるか、または公知の手順または明らかなその修飾により調製することができる。例えば、出発材料の多くは、商業的供給業者、例えば、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ、ＵＳＡ）などから入手可能である。その他は、標準的な参考書、例えば、Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、１〜１５巻（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ，  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、１９９１年）、Ｒｏｄｄ’ｓ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、１〜５巻および補遺（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９８９年）ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ、１〜４０巻（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ，  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、１９９１年）、Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ，  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、第５版、２００１年）、およびＬａｒｏｃｋ’ｓ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ（ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｉｎｃ．、１９８９年）などに記載されている手順または明らかなその修飾により調製することができる。
【００７３】
「溶媒」、「不活性な有機溶媒」または「不活性溶媒」という用語は、これらと共に記載されている反応の条件下で不活性な溶媒を指す（例えば、ベンゼン、トルエン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）、ジメチルホルムアミド（「ＤＭＦ」）、クロロホルム、塩化メチレン（またはジクロロメタン）、ジエチルエーテル、メタノール、ピリジンなどを含む）。逆の指定がない限り、本開示の反応に使用されている溶媒は不活性有機溶媒であり、反応は不活性ガス下、好ましくは窒素下で行われる。
【００７４】
「ｑ．ｓ．」という用語は、述べられている機能を達成する、例えば、溶液を所望の容量（すなわち、１００％）にするのに十分な量を加えることを意味する。
【００７５】
以下の実施例は、式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の調製および試験に関する本開示の実施形態を実証するために含まれている。以下に続く実施例に開示されている技術は、本開示の実施において十分に機能することが本発明者により発見された技術を代表しており、したがって、その実施に対して好ましいモードを構成すると考えることができることは当業者により認識されるべきである。しかし、当業者であれば、本開示に照らして、本開示の精神および範囲から逸脱することなく、開示された特定の実施形態において多くの変更を行うことができ、類似のまたは同様の結果を依然として得ることができることを認識すべきである。
【００７６】
【表Ａ−１】
2018513173.tif 000009
【表Ａ−２】
2018513173.tif 000010
【表Ａ−３】
2018513173.tif 000011
【表Ａ−４】
2018513173.tif 000012
【表Ａ−５】
2018513173.tif 000013
【実施例】
【００７７】
共通中間体の調製
中間体１．０１．ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＩＶおよびｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル（６−（トリブチルスタンニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）カルバメートＶの調製
【化７】
2018513173.tif 000014
【００７８】
１−（４−ニトロフェニル）−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジンＩ：５００ｍＬ丸底フラスコ内で、１−（オキセタン−３−イル）ピペラジン（３．０２ｇ、２１．２６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５．８７ｇ、４２．５２ｍｍｏｌ）、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（３．００ｇ、２１．２６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３３ｍＬ）中で合わせ、窒素下、１００℃で一晩撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出し、無水炭酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮した。ソニケーターを使用して残渣を最少量のＤＣＭに溶解させ、ヘキサンと共に砕いた。沈殿物を濾過し、ヘキサンで洗浄し、乾燥させることによって、表題化合物Ｉを得た。
【００７９】
４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）アニリンＩＩ：水素添加容器内で、１−（４−ニトロフェニル）−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジンＩ（４．７０ｇ、１７．８５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２６ｍＬ）およびＤＣＭ（５ｍＬ）にできるだけ多く溶解させた。Ｐｄ／Ｃ（１０％）（２．８５ｇ、２．６８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を窒素下で保存した。４５ＰＳＩで、Ｐａｒｒ水素化装置上で反応物を振盪させた。１５分後、反応物を４５ＰＳＩに完全に再充填し、もう１時間振盪した。材料をセライトで濾過し、２５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで洗浄し、濃縮することによって、表題化合物ＩＩを得た。
【００８０】
６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＩＩＩ：４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）アニリンＩＩ（２．００ｇ、８．５７ｍｍｏｌ）に、ヒューニッヒベース（３．２９ｍＬ）および６，８−ジブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（２．３７ｇ、８．５７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４３ｍＬ）中で加えた。反応物を圧力管内で、８５℃で一晩撹拌した。材料を飽和した炭酸水素ナトリウムでクエンチし、ＤＣＭ（１２０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせ、水で洗浄し（１２０ｍＬ×３）、無水炭酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。１２０ｇのＩｓｃｏカラムを使用して粗材料を精製し、０〜６０％（１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）の段階的勾配を使用して溶離させた。所望の画分を合わせ、濃縮することによって、表題化合物ＩＩＩを得た。
【００８１】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＩＶ：６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＩＩＩ（１０００ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１０１６．７２ｍｇ、４．６６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（２１．３４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１．０１ｍｌ）中で撹拌し、６５℃で３時間還流させた。反応物を１００ｍＬのＤＣＭで希釈し、Ｈ２Ｏ（×３）で洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗材料を最少量のＤＣＭに溶解させ、予め充填したシリカローダーにロードし、２０カラム容量にわたって、０〜３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用して、４０ｇカラムから溶離させた。所望の画分を合わせ、濃縮することによって、表題化合物を得た。この化合物は実施例２に使用されている。
【００８２】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル（６−（トリブチルスタンニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）カルバメートＶ：３５０ｍＬのｐ管内で、ｔｅｒｔ−ブチル６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＩＶ（８１５０ｍｇ、１５．３９ｍｍｏｌ）、１，１，１，２，２，２−ヘキサブチルジスタンナン（１１．６７ｍｌ、２３．０９ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（８８９．４３ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、およびヨウ化テトラブチルアンモニウム（５６８６．０３ｍｇ、１５．３９ｍｍｏｌ）をジオキサン（６２ｍｌ）中で合わせ、１１０℃に一晩加熱した。ＬＣＭＳによると、いずれの出発材料も残存しなかった。反応物をセライト上に吸収させ、５０〜６０カラム容量にわたって、０〜１０〜２０〜３０〜１００％（５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ−Ｈｅｘ）勾配を使用し、１０〜１５カラム容量については５０％を保持して、１６０ｇのアルミナカラムから溶離させ、表題化合物Ｖを得た。この化合物は実施例１および２に使用されている。
【００８３】
中間体１．０２．調製物ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモ−５−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸ
【化８】
2018513173.tif 000015
【００８４】
６−メチルピラジン−２−アミンＶＩ：無水塩化亜鉛（ＩＩ）（２６．３ｇ、１９３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に、０℃で、１時間にわたり、ジエチルエーテル（１２９ｍＬ）中３Ｍのメチルマグネシウムブロミドを滴下して加えた。次いで、［１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン］ニッケル（ＩＩ）クロリド（２．０８ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温まで温めた。上記混合物に、６−クロロ−２−アミノピラジン（５．００ｇ、３８．６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液を加え、窒素雰囲気下、還流で６時間反応物を撹拌した。この後、混合物を室温に冷却し、次いで０℃に冷却し、飽和水性アンモニウムクロリド（５０ｍＬ）で慎重にクエンチした。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を濾過し、濾液を減圧下で濃縮することによって、粗製の６−メチルピラジン−２−アミンＶＩを得た。これを、精製なしで次のステップで使用した。1H  NMR  (400MHz,  CDCl3)  δ:  7.63  (s,  1H),  7.53  (s,  1H),  4.96  (bs,  2H),  2.16  (s,  3H).
【００８５】
３，５−ジブロモ−６−メチルピラジン−２−アミンＶＩＩ：６−メチルピラジン−２−アミンＶＩ（２．００ｇ、１８．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に、１０℃で、１５分間にわたり、Ｎ−ブロモスクシンイミド（６．７０ｇ、３７．６ｍｍｏｌ）を少しずつ加え、撹拌しながら、混合物を室温まで温めた。２時間後、反応物を減圧下で濃縮し、生成した残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、勾配、ヘキサンからＥｔＯＡｃ）で精製することによって、３，５−ジブロモ−６−メチルピラジン−２−アミンＶＩＩを得た。1H  NMR  (400MHz,  CDCl3)  δ:  4.93  (bs,  2H),  2.38  (s,  3H).
【００８６】
６，８−ジブロモ−５−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピラジンＶＩＩＩ：２−ブロモ−１，１−ジエトキシエタン（３．２１ｍＬ、２０．７ｍｍｏｌ）および４８％水性臭化水素酸（１．０ｍＬ）の混合物を、還流させながら２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、気体の発生が停止するまで炭酸水素ナトリウムで処理した。混合物を濾過し、濾液をエタノール（１５ｍＬ）で希釈した。この混合物に、３，５−ジブロモ−６−メチルピラジン−２−アミンＶＩＩ（３．００ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を還流させながら１６時間撹拌した。この後、反応物を室温に冷却し、約１０ｍＬの容量まで減圧下で濃縮した。懸濁物を濾過し、フィルターケーキを冷エタノール（５ｍＬ）で洗浄した。次いで、フィルターケーキを水（５０ｍＬ）に入れ、炭酸カリウムでｐＨを約８に調節した。生成した懸濁物を濾過し、フィルターケーキを真空下で一定の重量まで乾燥させることによって、６，８−ジブロモ−５−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピラジンＶＩＩＩを得た。1H  NMR  (400MHz,  CDCl3)  δ:  7.90  (s,  1H),  7.72  (s,  1H),  2.74  (s,  3H).
【００８７】
６−ブロモ−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＩＸ：中間体実施例１．０１において、６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＩＩＩを調製するための記載されている方法を使用して、化合物ＩＸを６，８−ジブロモ−５−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピラジンＶＩＩＩから調製した。
【００８８】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモ−５−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸ：中間体実施例１．０１において、ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＩＶを調製するための記載されている方法を使用して、化合物Ｘを６−ブロモ−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＩＸから調製した。この化合物は実施例４に使用されている。
【００８９】
実施例１〜７の合成
（実施例１）
６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｚｎ）−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（１）の調製
【化９】
2018513173.tif 000016
【００９０】
２−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−６−ブロモ−３−クロロピラジンＸＩ：６−ブロモ−３−クロロピラジン−２−アミン（２０００ｍｇ、９．５９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４８ｍｌ）に溶解させ、これに続いてトリエチルアミン（３．９９ｍｌ、２８．７８ｍｍｏｌ）、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４１８８．１２ｍｇ、１９．１９ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（８７．９１ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を溶解させた。反応物を室温で一晩撹拌させた。粗材料を水で洗浄し、乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗材料を最少量のＤＣＭに溶解させ、２５ｇの事前に充填されているシリカローダーにロードし、０〜３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用して４０ｇのカラムから溶離させた。表題化合物ＸＩを単離し、ＬＣＭＳおよびＮＭＲで特定した。生成物はモノおよびビスｂｏｃ保護した材料のミックス、主にＮＭＲで観察されたようにビスｂｏｃ保護されたものであった。
【００９１】
ｔｅｒｔ−ブチルｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（６−（８−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）−３−クロロピラジン−２−イル）カルバメートＸＩＩ：１，４−ジオキサン（１１．２７ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル（６−（トリブチルスタンニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）カルバメートＶ（１０００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、２−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−６−ブロモ−３−クロロピラジンＸＩ（５５２ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）、およびＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（１４２．７７ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）に１４０℃で２０分間マイクロ波照射した。反応物をセライトに吸収させ、２０カラム容量にわたって、０〜１０〜１００％（３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）を使用して、４０ｇ  Ｇｏｌｄ  Ｉｓｃｏカラムから溶離させた。画分３４〜３９を収集し、濃縮した。ＮＭＲに従い、表題化合物ＸＩＩを特定し、単離した。
【００９２】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＩＩＩ：マイクロ波バイアル内で、ｔｅｒｔ−ブチルｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（６−（８−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）−３−クロロピラジン−２−イル）カルバメートＸＩＩ（３００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、メチルボロン酸（７９４．３９ｍｇ、１３．２７ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（５１．１２ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、および２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（０．４４ｍｌ）をＤＭＥ（１．７７ｍｌ）中で合わせ、１５０℃で２０分間マイクロ波照射した。２５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭおよび水を使用して反応物の後処理を行った。有機層を合わせ、乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗材料をシリカにロードし、４５カラム容量にわたって、０〜５〜１５〜２５〜５０％（３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）を使用して、４０ｇのＧｏｌｄカラムから溶離させた。所望の画分を濃縮し、少量生成物としてのｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＩＩＩ、および所望の最終化合物１を分離できない混合物（合計２０８ｍｇ）として得て、ＴＦＡ反応を施した。
【００９３】
６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（１）：ｔｅｒｔ−ブチル６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＩＩＩ（４８ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）および６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（１，１６０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．５ｍｌ）溶液に、ＴＦＡ（０．１６ｍｌ、２．１５ｍｍｏｌ）を加えた。追加のＴＦＡ（０．４８ｍｌ、６．５ｍｍｏｌ）を反応混合物に加えて、反応の完了を確実にした。次いで、反応物を０℃に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチし、次いでＤＣＭ（５ｍｌ×３）で抽出し、合わせた有機層を水（５ｍｌ×２）、ブライン（５ｍｌ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮することによって、粗生成物を得た。粗材料をシリカに吸収させ、０〜１５〜２５〜４０〜１００％（３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）を使用して２４ｇのＧｏｌｄ  Ｉｓｃｏカラムから溶離させた。所望の画分を合わせ、濃縮することによって、所望の化合物を得た。LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  458.22.    1H  NMR  (300  MHz,  d6-DMSO)  δ:  9.48  (s,  1H),  8.54  (s,  1H),  8.41  (s,  1H),8.11  (s,  1H),  7.95  (d,  2H),  7.6  (s,1H),  6.98  (d,  2H),  6.2  (s,  2H),  4.58-4.45  (dt,  4H),  3.3  (m,  1H),  3.14  (t,  4H),  2.50-2.4  (dt,4H),  2.33  (s,  1H).
代わりに、化合物ＸＩＩをこのステップに直接取り込み、同様に脱保護することによって、５−クロロピラジン置換類似体を得ることができた。
【００９４】
（実施例２）
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（２）の調製
【化１０】
2018513173.tif 000017
【００９５】
２−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−６−ブロモピラジンＸＩＶ：６−ブロモピラジン−２−アミン（５ｇ、２８．７ｍｍｏｌ）と二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２５．０９ｇ、１１４．９４ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＣＭ（１０ｍｌ）を加え、これに続いてＤＭＡＰ（０．３５１ｇ、２９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を５５℃に、１時間加熱し、室温に冷却し、反応物を水とＤＣＭで分配し、シリカゲル上で精製し、濃縮することによって、２−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−６−ブロモピラジンＸＩＶを得た。ＬＣＭＳ−ＥＳＩ＋（ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］＋：３７４．１４。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ）  δ：  ８．８４（ｄ，  ２Ｈ），  １．３９  （ｓ，  １８Ｈ）．
【００９６】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＶＩ−化学反応Ａ経路：ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル（６−（トリブチルスタンニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）カルバメートＶ（２１５ｍｇ、０．２９１ｍｍｏｌ）を、２−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−６−ブロモピラジンＸＩＶ（２１７．５８ｍｇ、０．５８１ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３０．６１ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）および１，４−ジオキサン（５ｍｌ）と合わせた。反応混合物をマイクロ波反応器内で、１２０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を飽和したＫＦでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出し、シリカゲル上で精製し、ＥｔＯＡｃで溶出した。所望の画分を合わせ、濃縮することによって、１００ｍｇ（４６％収率）のｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＶＩを得た。LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  744.4.  1H  NMR  (300  MHz  d6-DMSO)  δ:  9.37  (s,  1H),  9.18  (s,  1H),  8.77  (s,  1H),  8.33  (d,  1H),  7.87  (d,  1H),  7.28-7.25  (d,  2H),  6.92-6.89  (d,  2H),  4.55-4.41  (m,  4H),  3.4  (m,1H),  3.14-3.11  (m,4H),  2,37-2.34  (m,  4H),  1.37  (s,  18H),  1.3  (s,  9H).
【００９７】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＶＩ−化学反応Ｂ経路：ステップ１：乾燥した２５０ｍＬ丸底フラスコに、２−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−６−ブロモピラジンＸＩＶ（１．０ｇ、１．０ｅｑｕｉｖ、２．６７ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（７９０ｍｇ、８．０２ｍｍｏｌ、３．０ｅｑｕｉｖ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（７５０ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ、１．１ｅｑｕｉｖ）、Ｐｄ（ｄｂａ）（１７１ｍｇ、０．１８７ｍｍｏｌ、０．０７ｅｑｕｉｖ）およびＸ−ｐｈｏｓ（１２８ｍｇ、０．２６７ｍｍｏｌ、０．１ｅｑｕｉｖ）を加え、これに続いて１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）を加え、溶液を５分間超音波処理し、次いでＮ２気体で５分間パージした。次いで、内容物を有するフラスコをＮ２雰囲気下に配置し、１１０℃で９０分間加熱した。ピナコールボロネートへの完全な変換がＬＣＭＳにより達成されたらすぐに、反応物を熱から外し、室温まで冷却した。冷却されたら、反応の内容物を、セライトを通して濾過し、フィルターケーキを３×２０ｍＬのＥｔＯＡｃで洗浄した。次いで、生成した溶液を深赤橙色のシロップになるまで濃縮することによって、Ｎ，Ｎ−ビスＢｏｃ６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラジン−２−アミンＸＶを得た。これを次のステップで直接使用した。
【００９８】
ステップ２：新たに形成されたＮ，Ｎ−ビスＢｏｃ６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラジン−２−アミンＸＶ（１００％変換に基づくと２．６７ｍｍｏｌ、臭化物に基づいて２．０ｅｑｕｉｖ）を２０Ｍｌの１，２−ジメトキシエタンに溶解させ、この溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＩＶ（７０７ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑｕｉｖ）、Ｎａ２ＣＯ３（２８３ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ、２．０ｅｑｕｉｖ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１５５ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ、０．１ｅｑｕｉｖ）および水（１０ｍＬ）を加え、Ｎ２気体を使用して溶液を５分間脱気した。次いで、反応物をＮ２雰囲気下に配置し、１１０℃で９０分間加熱した。ＬＣＭＳは、臭化物出発材料の完全な消費を示し、反応物を熱から外し、室温に冷却した。反応物を１００ｍＬの水および１００ｍＬの２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで希釈し、有機層を回収し、１×飽和ＮａＨＣＯ３、１×飽和ブラインで抽出し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。次いで、溶液を濾過し、橙赤色の固体になるまで濃縮した。次いで、試料を温ＭｅＯＨ中でスラリー化し、超音波処理し、次いで濾過し、２×２０ｍＬの冷ＭｅＯＨで洗浄し、次いでクリーム色の固体を高真空下（ｏｎ  ｈｉ−ｖａｃｕｕｍ）で一晩乾燥させることによって、９０５ｍｇのｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＶＩを生成した。
【００９９】
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（２）：ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＶＩ（２００ｍｇ、０．２６９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍｌ）溶液に、ＴＦＡ（０．５ｍｌ、６．５７８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で１６時間撹拌し、飽和した炭酸水素ナトリウムを加え、ＥｔＯＡＣで抽出し、シリカゲル上で精製し、５％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、２０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで溶出した。所望の画分を合わせ、濃縮することによって、表題化合物２を得た。LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  444.2.    1H  NMR  (300  MHz  d6-DMSO)  δ:  9.5  (s,1H),  8.588  (s,  1H),  8.47  (s,  1H),  8.12  (d,  1H),  7.95-7.92  (d,  2H),  7.88  (s,  1H),  7.62  (s,  1H),  6.99-6.96  (d,  2H),  6.46  (s,  2H),  4.57-4.53  (m,  2H),  4.48-4.44  (m,  2H),  3.43  (m,  1H),  3.15-3.12  (m,  4H),  2.41-2.38  (m,  4H).
【０１００】
（実施例２）
代替の合成
【化１１】
2018513173.tif 000018
【０１０１】
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル｛６−［８−（｛４−［４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル］ピラジン−２−イル｝イミドジカルボネート
７２０Ｌ反応器に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモピラジン−２−イル）イミドジカルボネート（１８．５ｋｇ、１．４１ｅｑｕｉｖ、４９モル）、ビス（ピナコラト）ジボロン（１３．８ｋｇ、１．５６ｅｑｕｉｖ、５４モル）、カリウムプロピオネート（１１．９ｋｇ、３．０２ｅｑｕｉｖ、１０６モル）、およびビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−ジメチルアミノフェニル）ホスフィン）ジクロロパラジウム（１．０７ｋｇ、０．００４３ｅｑｕｉｖ、１．５モル）を加え、これに続いて脱気したトルエン（１７３Ｌ）を加えた。混合物を脱気し、次いで、反応がＵＰＬＣにより完了したとみなされるまで（０％ｔｅｒｔ−ブチル２−（（６−ブロモピラジン−２−イル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−オキソ酢酸）、６５℃で加熱した。完了したら、反応物を２３℃に冷却した。冷却されたら、６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（１５．０ｋｇ、１．００ｅｑｕｉｖ、３５モル）を加え、混合物を脱気した。水（５４Ｌ）および炭酸カリウム（２０．６ｇ、４．２６ｅｑｕｉｖ、１４９モル）を使用して調製した、脱気した炭酸カリウム水溶液を次いで反応混合物に加え、反応器の内容物を脱気した。反応がＵＰＬＣにより完了したとみなされるまで（１％６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン）、反応器の内容物を６５℃で加熱した。完了したら、反応物を２４℃に冷却した。
【０１０２】
冷却した混合物を濃縮し、次いでジクロロメタン（３００Ｌ）で希釈し、１９００Ｌ反応器に移し、ジクロロメタン（５７Ｌ）ですすいだ。Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（３．８ｋｇ）を充填し、混合物を１５時間撹拌した。次いで、水（１３５Ｌ）を加え、混合物を濾過し、ジクロロメタン（６８Ｌ）ですすいだ。有機層を回収し、水（６８Ｌ）および塩化ナトリウム（７．５ｋｇ）を使用して調製したブライン溶液で洗浄した。
【０１０３】
生成した有機層を研磨濾過し、次いで濃縮し、温度を３１℃に保ちながらｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（８９．９ｋｇ）をゆっくりと充填した。内容物を０℃に冷却し、熟成させ、次いで濾過し、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３２．７ｋｇ）ですすぎ、４０℃で乾燥させることによって、１７．２ｋｇのジ−ｔｅｒｔ−ブチル｛６−［８−（｛４−［４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル］ピラジン−２−イル｝イミドジカルボネートを得た。
LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  644.3.  1H  NMR  (400  MHz,  CDCl3)  δ:  9.43  (s,  1H),  8.58  (s,  1H),  8.53  (s,  1H),  8.02  (s,  1H),  7.84  (m,  2H),  7.63  (d,  1H),  7.61  (d,  1H),  7.04  (m,  2H),  4.71  (m,4H),  3.59  (m,1H),  3.27  (m,  4H),  2.55  (m,  4H),  1.46  (s,  18H).
【０１０４】
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート（実施例２）
水（１２部）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル｛６−［８−（｛４−［４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル］フェニル｝アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル］ピラジン−２−イル｝イミドジカルボネート（２２５ｇ、０．３５モル、１モル当量）のスラリーに、硫酸（３．１部、６．９９モル、２０モル当量）の水（５部）溶液を加えた。反応物を約４０℃に加熱し、この温度で約４時間撹拌し、この時点で反応が完了したとみなされる。反応混合物を約２２℃に冷却し、アセトン（３部）を入れ、炭酸ナトリウム（４．１部、８．７５モル、２５．０モル当量）の水（１５部）溶液を加えた。生成したスラリーを濾過し、湿性ケーキを水で少しずつ（４×１部）洗浄し、次いでｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（４部）で洗浄した。湿性ケーキ（実施例２遊離塩基）を約６０℃で乾燥させた。２−プロパノール（２．３部）中の乾燥させた実施例２の遊離塩基のスラリーに、コハク酸（単離した実施例２の遊離塩基に基づく：０．４３部、１．６モル当量）の２−プロパノール（１５部）溶液を加えた。生成したスラリーを約４０℃に加熱し、この温度で約２時間撹拌し、次いで約２２℃に冷却し、これに続いて約１６時間撹拌した。スラリーを約２２℃で濾過し、湿性ケーキを２−プロパノール（５部）で洗浄し、約６０℃で乾燥させることによって、生成物を得た。
LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  620.65.    1H  NMR  (400  MHz  d6-DMSO)  δ:  12.2  (broad  s,1.5H),  9.58  (s,  1H),  8.63  (s,  1H),  8.50  (s,  1H),  8.15  (s,  1H),  7.95  (d,  2H),  7.90  (s,  1H),  7.64  (s,  1H),  7.00  (d,  2H),  6.50  (s,  2H),  4.52  (dd,  4H),  3.45  (m,  1H),  3.19  (m,  4H),  2.40  (m,  10H).
【０１０５】
（実施例３）
（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール（３）の調製
【化１２】
2018513173.tif 000019
【０１０６】
（Ｒ）−（４−（４−（（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノールＸＶＩＩ：冷却器を備えた２５０ｍＬ丸底フラスコ内に、６，８−ジブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（２０００ｍｇ、７．２２ｍｍｏｌ）を入れ、３０ｍＬのイソプロパノールを加え、これに続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．５２ｍｌ、１４．４４ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−（４−（４−アミノフェニル）モルホリン−２−イル）メタノール（１５０４．１２ｍｇ、７．２２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を一晩加熱還流した（油浴９５℃）。反応物を冷却し、沈殿物を濾取し、イソプロパノールで洗浄し、これに続いてヘキサンで洗浄することによって、所望の化合物ＸＶＩＩを得た。
【０１０７】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）メチル）モルホリノ）フェニル）カルバメートＸＶＩＩＩ：２５０ｍＬ丸底フラスコ内に、（Ｒ）−（４−（４−（（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノールＸＶＩＩ（２．８０ｇ、６．９ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＣＭを加え、これに続いてトリエチルアミン（２．９ｍＬ、２．１ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（６３ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）および二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（３．８ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を一晩撹拌し、次いでＤＣＭおよび水で希釈し、分離し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗材料をクロマトグラフィー：ＩＳＣＯ  ４０ｇシリカ（２５ｇシリカローダーを備え、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）で精製し、化合物ＸＶＩＩＩを得た。
【０１０８】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）メチル）モルホリノ）フェニル）（６−（トリブチルスタンニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）カルバメートＸＩＸ：実施例の中間体１．０１の類似の方法に従い、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）メチル）モルホリノ）フェニル）カルバメートＸＶＩＩＩを反応させることによって、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）メチル）モルホリノ）フェニル）（６−（トリブチルスタンニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）カルバメートＸＩＸを得た。
【０１０９】
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）メチル）モルホリノ）フェニル）カルバメートＸＸ：実施例２に記載されているような化学反応Ａの類似の方法に従い、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）メチル）モルホリノ）フェニル）（６−（トリブチルスタンニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）カルバメートＸＩＸを、２−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−６−ブロモピラジンＸＩＶと反応させることによって、所望の化合物（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）メチル）モルホリノ）フェニル）カルバメートＸＸを得た。
【０１１０】
（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール（３）：ＤＣＭ中（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（２−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）オキシ）メチル）モルホリノ）フェニル）カルバメートＸＸ（４６０ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を丸底フラスコに加え、ＴＦＡ（１．２９ｍｌ、１６．８５ｍｍｏｌ）を加えた。約５時間の撹拌後、反応は部分的に完了した。追加の１０当量のＴＦＡを加え、一晩撹拌し、次いで減圧下で濃縮した。１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ（約１００ｍＬ）および飽和水性炭酸水素ナトリウムを加え、１５分間撹拌し、分離し、約１００ｍＬの１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、真空下で乾燥させた。生成した固体をＤＣＭと共に摩砕し、濾過により固体を収集し、真空下で乾燥させることによって、化合物３を得た。LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  419.2.    1H  NMR  (300  MHz  d6-DMSO)  δ:  9.57  (s,  1H),  8.59  (s,  1H),  8.47  (s,  1H),  8.13  (d,  J  =  1.2  Hz,  1H),  8.06  -  7.90  (m,  2H),  7.87  (s,  1H),  7.62  (d,  J  =  1.1  Hz,  1H),  7.05  -  6.93  (m,  2H),  6.49  (s,  2H),  4.78  (t,  J  =  5.8  Hz,  1H),  3.98  -  3.87  (m,  1H),  3.71  -  3.36  (m,  7H),  2.63  (td,  J  =  11.7,  3.4  Hz,  1H),  2.37  (dd,  J  =  12.1,  10.5  Hz,  1H).
化合物の対応する（Ｓ）異性体、またはラセミ混合物を、（Ｓ）−（４−（４−アミノフェニル）モルホリン−２−イル）メタノールまたは（４−（４−アミノフェニル）モルホリン−２−イル）メタノールのラセミ混合物を第１のステップでそれぞれ使用して、同様に調製する。
【０１１１】
（実施例４）
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（４）の調製
【化１３】
2018513173.tif 000020
【０１１２】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）−５−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＸＩ：実施例２に記載されている化学反応Ｂの方法に従い、ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモ−５−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸをＸＶと反応させることによって、所望の化合物ＸＸＩを得た。
【０１１３】
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（４）：実施例２に記載されている類似の方法により、化合物ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）−５−メチルイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＸＩを脱保護することによって、所望の化合物４を得た。LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  458.32.    1H  NMR  (300  MHz,  d6-DMSO)  δ:  9.28  (s,  1H),  8.28  (s,  1H),  8.04  (s,  1H),  7.89  (d,  2H),  7.83  (s,  1H),  7.7  (s,1H),  6.91  (d,  2H),  6.46  (s,  2H),  4.6-4.4  (dt,  4H),  3.43  (m,  1H),  3.1  (t,  4H),  2.49  (s,3H),  2.4  (t,4H).
【０１１４】
（実施例５）
２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール（５）の調製
【化１４】
2018513173.tif 000021
【０１１５】
２−（２−（２−フルオロ−５−ニトロフェノキシ）エトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランＸＸＩＩ：ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の２−フルオロ−５−ニトロフェノール（４ｇ、２５ｍｍｏｌ）、２−（２−ブロモエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（４．４ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（４．２ｇ  ３０ｍｍｏｌ）の混合物を５０℃で１６時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏで希釈した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をＨ２Ｏ（ＤＭＦを除去するために５×）およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。生成した残渣を、１００％ヘキサン−１：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃの勾配で溶出するカラムクロマトグラフィーＩＳＣＯ  Ｒｆ（４０ｇカラム）で精製することによって、２−（２−（２−フルオロ−５−ニトロフェノキシ）エトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランＸＸＩＩを得た。
【０１１６】
１−（４−ニトロ−２−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジンＸＸＩＩＩ：ＮＭＰ（６ｍＬ）中の２−（２−（２−フルオロ−５−ニトロフェノキシ）エトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランＸＸＩＩ（１５５０ｍｇ、５．４３ｍｍｏｌ）、１−（オキセタン−３−イル）ピペラジン（７７２ｍｇ、５．４３ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１１２６．４１ｍｇ、８．１５ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で８時間撹拌した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、Ｈ２Ｏ（ＮＭＰを除去するために５×）およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。生成した残渣を、１００％ＤＣＭ−６０：３５：５ＤＣＭ：Ｅｔ２Ｏ：ＭｅＯＨの勾配で溶出するカラムクロマトグラフィーＩＳＣＯ  Ｒｆ（２４ｇカラム）で精製することによって、１−（４−ニトロ−２−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジンＸＸＩＩＩを得た。
【０１１７】
４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）アニリンＸＸＩＶ：５００ｍＬ  Ｐａｒｒ水素添加ビンの中で、エタノール（５０ｍＬ）中の１−（４−ニトロ−２−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）−４−（オキセタン−３−イル）ピペラジンＸＸＩＩＩ（２１００ｍｇ、５．１ｍｍｏｌ）の懸濁物に、１０％Ｐｄ／Ｃ（５０％湿性、３９０ｍｇ乾燥重量）を加えた。ビンから気体を排気し、気圧５０ｐｓｉまで水素気体を充填し、Ｐａｒｒ水素添加装置上で、室温で２時間振盪した。反応混合物を濾過し、エタノールで洗浄した。濾液を真空中で濃縮することによって、４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）アニリンＸＸＩＶを得た。
【０１１８】
６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２イル）オキシ）エトキシ）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＸＸＶ：４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）アニリンＸＸＩＶ（６１９ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）および６，８−ジブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（６０１ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）のＩＰＡ（１５ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．９５ｍｌ、５．４３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１１０℃で１６時間撹拌した。この後、ＤＣＭ（１０ｍＬ）および飽和水性ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）を加えた。水層を分離し、ＤＣＭ（２×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。生成した残渣を、１００％ＤＣＭ−６０：３５：５ＤＣＭ：Ｅｔ２Ｏ：ＭｅＯＨの勾配で溶出するカラムクロマトグラフィーＩＳＣＯ  Ｒｆ（２４ｇカラム）で精製することによって、６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＸＸＶを得た。
【０１１９】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）カルバメートＸＸＶＩ：中間体実施例１．０１（ＩＩＩからＩＶへの変換）に記載されている類似の方法に従い、６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＸＸＶ（１．２ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を反応させることによって、ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）カルバメートＸＸＶＩを得た。
【０１２０】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）カルバメートＸＸＶＩＩ：実施例２に記載されている化学反応Ｂの方法に従い、ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）カルバメートＸＸＶＩをＸＶと反応させることによって、所望の化合物ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）カルバメートＸＸＶＩＩを得た。
【０１２１】
２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール（５）：実施例２に記載されている類似の方法により、化合物ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）カルバメートＸＸＶＩＩ（３１３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を脱保護することによって、２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール（５）を得た。LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  504.3.    1H  NMR  (300  MHz,  d6-DMSO)  δ:  9.52  (s,  1H),  8.61  (s,  1H),  8.51  (s,  1H),  8.14  (d,  J  =  1.1  Hz,  1H),  7.89  (s,  1H),  7.81  (d,  J  =  2.3  Hz,  1H),  7.74  -  7.60  (m,  2H),  6.90  (d,  J  =  8.6  Hz,  1H),  6.47  (s,  2H),  5.74  (s,  1H),  4.86  -  4.76  (m,  1H),  4.50  (dt,  J  =  25.6,  6.3  Hz,  4H),  4.04  (t,  J  =  5.1  Hz,  2H),  3.73  (q,  J  =  5.1  Hz,  2H),  3.51  -  3.42  (m,  1H),  3.02  (s,  4H),  2.40  (s,  4H).
【０１２２】
（実施例６）
２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール（６）の調製
【化１５】
2018513173.tif 000022
【０１２３】
オキセタン−３−カルボアルデヒドＸＸＶＩＩＩ：撹拌子を備えた丸底フラスコに、オキセタン−３−イルメタノール（２．００ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解させ、デス−マーチンペルヨージナン（１０．６７ｇ、２８．３８ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。固体を、セライトを通して濾過し、ＤＣＭ（３ｍＬ×５）で洗浄した。濾液を除去し、真空中で濃縮し、生成した粗製のオキセタン−３−カルボアルデヒドＸＸＶＩＩＩを次のステップで直接使用した。
【０１２４】
１−（４−ニトロフェニル）−４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジンＸＸＩＸ：撹拌子を備えた丸底フラスコに、オキセタン−３−カルボアルデヒドＸＸＶＩＩＩ（０．９７７ｇ、１１．３５ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の１−（４−ニトロフェニル）ピペラジン（１．１８ｇ、５．６８ｍｍｏｌ）、およびＤＣＭ（２ｍＬ）中のＨＯＡｃ（１．７０ｇ、２８．３８ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２４．０６ｇ、１１３．０５ｍｍｏｌ）を加えた。生成した混合物を室温で２時間撹拌した。大部分の揮発性物質を真空中で除去した。ＤＣＭ（２００ｍＬ）を加え、これに続いてＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２０ｍＬ）を加え、生成した混合物を２０分間撹拌した。有機相を分離し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２０ｍＬ×３）、ブライン（２０ｍＬ×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で除去した。残渣をシリカゲルカラム（ＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝０：１００から５：９５から２５：７５）に通すことによって、所望の化合物ＸＸＩＸを得た。
【０１２５】
４−（４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジン−１−イル）アニリンＸＸＸ：撹拌子を備えた丸底フラスコに、１−（４−ニトロフェニル）−４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジンＸＸＩＸ（３．２０ｇ、１１．５４ｍｍｏｌ）、エタノール（６０ｍＬ）および水（６０ｍＬ）を加えた。鉄（４．５１ｇ、８０．７７ｍｍｏｌ）およびアンモニウムクロリド（４．３２ｇ、８０．７７ｍｍｏｌ）の添加に続いて、反応混合物を８０℃で１時間加熱し、次いでセライトを通して濾過し、ＤＣＭ（５ｍＬ×５）で洗浄した。生成した濾液をＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（２０ｍＬ×２）、ブライン（２０ｍＬ×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。所望の４−（４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジン−１−イル）アニリンＸＸＸが得られた。
【０１２６】
６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＸＸＸＩ：撹拌子を備えた密閉管に、４−（４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジン−１−イル）アニリンＸＸＸ（１．１９ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）、６，８−ジブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（１．３３ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）、イソプロパノール（２４．１ｍＬ）、およびジイソプロピルエチルアミン（１．３７ｇ、１０．５８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１００℃で一晩加熱した。大部分の溶媒を真空中で除去し、ＤＣＭ（２００ｍＬ）を混合物に加えた。溶液をＨ２Ｏ（２０ｍＬ×２）、ブライン（２０ｍＬ×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で除去した。生成した残渣をシリカゲルカラム（ＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝５：９５）に通すと、薄赤色の固体が所望の化合物ＸＸＸＩ、０．６９２ｇとして得られた。
【０１２７】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（１−（オキセタン−３−イルメチル）ピペリジン−４−イル）フェニル）カルバメートＸＸＸＩＩ：撹拌子を備えた丸底フラスコに、６−ブロモ−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンＸＸＸＩ（５６０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（１１ｍＬ）、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４１４．４ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（６４０．５ｍｇ、６．３３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で一晩加熱した。ＤＣＭ（２００ｍＬ）を加え、生成した溶液を水（２０ｍＬ×２）、ブライン（２０ｍＬ×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で除去した。カラムクロマトグラフィーにより、黄色の固体として所望の化合物ＸＸＸＩＩを得た。
【０１２８】
ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＸＸＩＩＩ：撹拌子を備えた丸底フラスコに、ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＸＸＩＩ（１５０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）、ＤＭＥ（２．３ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ビスＢｏｃ６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラジン−２−アミンＸＶ（２５５．８ｍｇ、０．６０７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１６．０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１．０Ｎ、０．９１ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）、およびＤＭＥ（２ｍＬ）を加えた。混合物を７５℃で２加熱し、次いでＤＣＭ（２００ｍＬ）を加え、生成した混合物を水（３０ｍＬ×３）、ブライン（３０ｍＬ×１）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で除去した。シリカゲルカラムでの精製（ＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝５：９５）によって、所望の化合物ＸＸＸＩＩＩを得た。
【０１２９】
２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール（６）：ｔｅｒｔ−ブチル（６−（６−（ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イルメチル）ピペラジン−１−イル）フェニル）カルバメートＸＸＸＩＩＩ（２５０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（９４０．３ｍｇ、８．２５ｍｍｏｌ）を加えた。生成した混合物を室温で一晩撹拌した。さらなるＴＦＡ（７５２．２ｍｇ、６．６０ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩撹拌した。大部分の溶媒を真空中で除去し、ＤＣＭ（２００ｍＬ）およびＮａＨＣＯ３飽和水溶液（３０ｍＬ）を加え、生成した混合物を３０分間撹拌した。有機相を分離し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（２０ｍＬ×４）、ブライン（２０ｍＬ×１）で洗浄した。水相をＤＣＭ（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２０ｍＬ×１）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中除去した。粗材料をＩＳＣＯカラム、ＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝０：１００から５：９５から７．５：９２．５から２５：７５で精製することによって、所望の化合物を溶出した。二つの化合物が得られたが、最初の化合物はオキセタン化合物であり、他方の化合物は所望の化合物６である。LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  476.    1H  NMR  (300  MHz,  d6-DMSO)  δ:  9.51  (s,  1  H),  8.60  (s,  1  H),  8.49  (s,  1  H),  8.14  (d,  J  =  1.5  Hz,  1  H),  7.95  (d,  J  =  9  Hz,  2  H),  7.90  (s,  1  H),  7.64  (s,  1  H),  6.99  (d,  J  =  9  Hz,  2  H),  6.48  (s,  2  H),  4.51  (broad  S,  2  H),  3.43  (d,  J  =  6  Hz,  4  H),  3.12  (broad  m,  4  H),  2.54  (broad  m,  4  H),  2.34  (d,  J  =  7.2  Hz,  2  H),  1.83  (m,  1  H).
【０１３０】
（実施例７）
２−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール（７）の調製
【化１６】
2018513173.tif 000023
【０１３１】
ｔｅｒｔ−ブチルｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（６−（８−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）−３−クロロピラジン−２−イル）カルバメートＸＸＸＩＶ：還流冷却器を備えたフラスコに、ｔｅｒｔ−ブチル（６−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）カルバメートＸＸＶＩ（実施例５に記載のとおり調製）（３５２ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、２−（ビス−ｂｏｃ−アミノ）−３−クロロ−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラジン（化合物ＸＶを調製するための実施例２で使用した方法と類似の方法で調製）（５００ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１．６ｍＬ、Ｈ２Ｏ中１Ｍ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）４（３０ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）およびＤＭＥ（４．８ｍＬ）を入れた。混合物を１時間加熱還流した。反応物を室温に冷却し、ＤＣＭおよびＨ２Ｏで希釈した。水層を分離し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。生成した残渣を１００％ＤＣＭ−１００％６０／３５／５ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ／ＭｅＯＨの勾配で溶出する、カラムクロマトグラフィーＩＳＣＯ  Ｒｆ（４ｇカラム）で精製し、適当な画分を合わせ、濃縮することによって、所望の化合物ｔｅｒｔ−ブチルｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（６−（８−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）−３−クロロピラジン−２−イル）カルバメートＸＸＸＩＶを得た。
【０１３２】
ｔｅｒｔ−ブチルｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（６−（８−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）−３−メチルピラジン−２−イル）カルバメートＸＸＸＶ：マイクロ波バイアルに、ｔｅｒｔ−ブチルｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（６−（８−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）−３−クロロピラジン−２−イル）カルバメートＸＸＸＩＶ（２５８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、メチルボロン酸（５０３ｍｇ、８．４ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（０．８ｍＬ、Ｈ２Ｏ中１Ｍ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）４（３２ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）およびＤＭＥ（２．５ｍＬ）を入れた。混合物を１５０℃で２０分間加熱した。反応物を室温に冷却し、ＤＣＭおよびＨ２Ｏで希釈した。水層を分離し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。生成した残渣を、１００％ＤＣＭ−１００％７５／１８／７ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ／ＭｅＯＨの勾配で溶出するカラムクロマトグラフィーＩＳＣＯ  Ｒｆ（４ｇカラム）で精製することによって、所望の化合物ｔｅｒｔ−ブチルｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（６−（８−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）−３−メチルピラジン−２−イル）カルバメートＸＸＸＶを得た。
【０１３３】
２−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール（７）：ｔｅｒｔ−ブチルｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（６−（８−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（２−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）フェニル）アミノ）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−６−イル）−３−メチルピラジン−２−イル）カルバメートＸＸＸＶ（１６５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．２ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１．１ｍＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。反応物を９：１ＤＣＭ：ＭｅＯＨおよびＨ２Ｏで希釈した。水層を分離し、９：１ＤＣＭ：ＭｅＯＨで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。生成した残渣を、１００％７５／１８／７ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ／ＭｅＯＨ−１００％７０／２０／１０ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ／ＭｅＯＨの勾配で溶出するカラムクロマトグラフィーで精製することによって、所望の化合物２−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール（７，５６ｍｇ、５９％）を得た。LCMS-ESI+  (m/z):  [M+H]+:  518.2.      1H  NMR  (300  MHz,  d6-DMSO)  δ:  9.49  (s,  1H),  8.56  (s,  1H),  8.44  (s,  1H),  8.13  (d,  J  =  1.1  Hz,  1H),  7.85  -  7.66  (m,  2H),  7.62  (d,  J  =  1.1  Hz,  1H),  6.90  (d,  J  =  8.6  Hz,  1H),  6.25  (s,  2H),  4.87  -  4.77  (m,  1H),  4.50  (dt,  J  =  25.2,  6.3  Hz,  4H),  4.04  (t,  J  =  5.1  Hz,  2H),  3.74  (q,  J  =  5.2  Hz,  2H),  3.51  -  3.39  (m,  1H),  3.10  -  2.95  (m,  4H),  2.45  -  2.35  (m,  4H),  2.34  (s,  3H).代わりに、化合物ＸＸＸＩＶは、直接このステップに送り、同様に脱保護することによって、５−クロロピラジン置換類似体を得ることができた。
【０１３４】
モノメシレートおよびスクシネート形態
本明細書の実施例２の化合物のモノメシレート（ＭＳＡ）およびスクシネート形態のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）分析を、銅放射線（Ｃｕ  Ｋα、λ＝１．５４１８Å）を使用して、回折計（ＰＡＮａｎａｌｙｔｉｃａｌ  ＸＰＥＲＴ−ＰＲＯ、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂ．Ｖ．、Ａｌｍｅｌｏ、Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）で行った。ゼロバックグランドプレートを備えたアルミニウムホルダーの中央に粉末状試料を堆積させることによって、分析のために試料を調製した。４５ｋＶの電圧および４０ｍＡのアンペア数で発生器を作動させた。使用したスリットは、Ｓｏｌｌｅｒ０．０２ｒａｄ．、抗分散１．０°、および発散であった。試料回転速度は２秒であった。２〜４０°２θでスキャンを実施した。データ分析をＸ’Ｐｅｒｔ  Ｈｉｇｈｓｃｏｒｅバージョン２．２ｃ（ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂ．Ｖ．、Ａｌｍｅｌｏ、Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）およびＸ’Ｐｅｒｔデータビューアーバージョン１．２ｄ（ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂ．Ｖ．、Ａｌｍｅｌｏ、Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）で実施した。以下のような機器設定を使用して、モノＭＳＡ  形態Ｉ＆ＩＩに対するＸＲＰＤパターンを得た。４５ＫＶ、４０ｍＡ、Ｃｕ  Ｋα、λ＝１．５４１８Å、スキャン範囲２〜４０°、ステップサイズ０．０１６７°、カウンティング時間：１５．８７５ｓ。以下のような機器設定を使用して、スクシネート形態Ｉ＆ＩＩに対するＸＲＰＤパターンを得た。４５ＫＶ、４０ｍＡ、Ｃｕ  Ｋα、λ＝１．５４１８Å、スキャン範囲２〜４０°、ステップサイズ０．００８４°、カウンティング時間：９５．２５０ｓ。
【０１３５】
実施例２の化合物のモノメシレート（ＭＳＡ）およびスクシネート形態の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを、７６２０ＡＳ試料交換器を有するＶａｒｉａｎ  ４００−ＭＲ  ４００ＭＨｚ機器で収集した。デフォルトプロトンパラメーターは以下のとおりである。スペクトル幅：１４から−２ｐｐｍ（６３９７．４Ｈｚ）；リラクゼーション遅延：１秒；捕捉時間：２．５５５９秒；スキャンまたは繰返しの回数：８；温度：２５Ｃ。別段明示されない限り、試料はジメチルスルホキシド−ｄ６中で調製した。ＭＮｏｖａソフトウエアを使用してオフライン分析を行った。
【０１３６】
（実施例８）
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態Ｉ
室温で、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン（実施例２）を、１１容量のアセトン／Ｈ２Ｏ（３６：６４ｖｏｌ．％）に、１モル当量のメタンスルホン酸（ＭＳＡ）と共に溶解させることによって、メタンスルホン酸（ＭＳＡ）塩形態Ｉを調製した。次いで、溶液に１９容量のアセトンを１時間にわたり入れ、反応器の内容物を室温で一晩撹拌した。
【０１３７】
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態ＩのＸＲＰＤ分析を上に記載されているように行い、以下の表のピークを有する、ＵＳ２０１５／０１７５６１６Ａ１（Ｂｌｏｍｇｒｅｎら）の図１に認められる回折パターンが得られた。
【表Ｂ】
2018513173.tif 000024
【０１３８】
一実施形態では６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態Ｉは、ＸＲＰＤピーク１９．７（１９．６６０６）、１７．３（１７．２７４６）、１７．９（１７．８９７１）、２１．６（２１．６３０６）、および２５．８（２５．７８０５）で特徴付けることができる。さらなる実施形態では６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態Ｉは、ＸＲＰＤピーク１９．７（１９．６６０６）、１７．３（１７．２７４６）、１７．９（１７．８９７１）、および２１．６（２１．６３０６）で特徴付けることができる。別の実施形態では６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態Ｉは、ＸＲＰＤピーク６．０、６．２、８．６、および９．６で特徴付けることができる。
【０１３９】
上に記載されているように行われた６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノＭＳＡ塩形態ＩのＮＭＲ分析から以下が得られた：
1H  NMR  (400  MHz,  DMSO-d6)  δ  10.57  (s,  1H),  9.60  (s,  1H),  8.62  (s,  1H),  8.47  (s,  1H),  8.17  (d,  J  =  1.2  Hz,  1H),  8.03  -  7.96  (m,  2H),  7.90  (s,  1H),  7.69  (d,  J  =  1.2  Hz,  1H),  7.09  (d,  J  =  9.0  Hz,  2H),  4.78  (p,  J  =  8.0  Hz,  4H),  4.49  (m,  1H),  4.00  -  2.8  (m,  10H),  2.32  (s,  3H).
【０１４０】
（実施例９）
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態ＩＩ
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノＭＳＡ塩形態Ｉ（実施例８）を真空オーブン内で、約４０℃でＮ２パージを用いて乾燥させることによって、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノＭＳＡ塩形態ＩＩを調製した。
【０１４１】
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態ＩＩのＸＲＰＤ分析を上に記載されているように行い、以下の表のピークを有する、ＵＳ２０１５／０１７５６１６Ａ１（Ｂｌｏｍｇｒｅｎら）の図５に認められる回折パターンが得られた。
【表Ｃ】
2018513173.tif 000025
【０１４２】
一実施形態では６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態ＩＩは、ＸＲＰＤピーク１７．３（１７．２６９８）、２５．１（２５．１３８４）、２０．４（２０．４４２３）、１９．６（１９．５７３２）、および１８．５（１８．５２６４）で特徴付けることができる。追加の実施形態では、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態ＩＩは、ＸＲＰＤピーク１７．３（１７．２６９８）、２５．１（２５．１３８４）、２０．４（２０．４４２３）、および１９．６（１９．５７３２）で特徴付けることができる。別の実施形態では６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノメシレート形態ＩＩは、ＸＲＰＤピーク６．１、６．９、１１．０、および１３．６で特徴付けることができる。
【０１４３】
上に記載されているように行われた６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンモノＭＳＡ塩形態ＩＩのＮＭＲ分析から以下が得られた：
1H  NMR  (400  MHz,  DMSO-d6)  δ  9.61  (s,  1H),  8.63  (s,  1H),  8.47  (s,  1H),  8.19  (d,  J  =  1.2  Hz,  1H),  8.02  -  7.95  (m,  2H),  7.91  (s,  1H),  7.72  (d,  J  =  1.2  Hz,  1H),  7.13  -  7.06  (m,  2H),  4.85  -  4.72  (m,  4H),  4.53  -  4.45  (m,  1H),  4.30  -  2.75  (m,  10H),  2.34  (s,  3H).
【０１４４】
（実施例１０）
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態Ｉ
最初にＴＨＦ中に１．６モル当量のコハク酸を溶解させ、次いでこの酸性溶液を６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンに充填することによって、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態Ｉを調製した。次いで、磁気撹拌棒を用いて、この材料を室温で一晩撹拌した。
【０１４５】
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態ＩのＸＲＰＤ分析を上に記載されているように行い、以下の表のピークが得られた。
【表Ｄ】
2018513173.tif 000026
【０１４６】
一実施形態では６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態Ｉは、ＸＲＰＤピーク１６．５、２４．５、１７．７、２８．４、および２１．８で特徴付けることができる。別の実施形態では６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態Ｉは、ＸＲＰＤピーク１６．５、２４．５、８．０および８．３で特徴付けることができる。
【０１４７】
上に記載されているように行われた６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態ＩのＮＭＲ分析から以下が得られた：
1H  NMR  (400  MHz,  DMSO-d6)  δ  12.12  (s,  2H),  9.48  (s,  1H),  8.59  (s,  1H),  8.48  (s,  1H),  8.12  (d,  J  =  1.1  Hz,  1H),  7.97  -  7.86  (m,  3H),  7.62  (d,  J  =  1.1  Hz,  1H),  7.01  -  6.94  (m,  2H),  6.45  (s,  2H),  4.55  (t,  J  =  6.5  Hz,  2H),  4.46  (t,  J  =  6.1  Hz,  2H),  3.49  -  3.38  (m,  1H),  3.13  (t,  J  =  4.9  Hz,  4H),  2.40  (s,  10H).
【０１４８】
ＩＰＡ、アセトン、および２−ＭｅＴＨＦを溶媒として使用して、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態Ｉを調製するためのプロセスもまた繰り返した。
【０１４９】
（実施例１１）
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態ＩＩ
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン遊離塩基に１０．０部の２−プロパノールを充填し、これに続いて急速に撹拌してスラリーを形成した。２−プロパノール（１５部）中のコハク酸（０．４３部、１．６モル当量）の別の溶液を周囲温度で調製し、スラリーに加えた。次いで、生成したスラリーを周囲温度で約１日撹拌した。２−プロパノール（３部）中のコハク酸（０．０９部、０．３モル当量）の別の溶液をスラリーに加え、生成したスラリーを周囲温度で約２日間撹拌した。２−プロパノール（８部）中のコハク酸（０．２７部、１．０モル当量）の追加の溶液を周囲温度で調製し、スラリーに加え、生成したスラリーを約２日間撹拌した。次いで、内容物の温度を４０℃に調節し、スラリーを約２時間撹拌した。次いで、内容物を周囲温度に戻し、約１６時間撹拌した。次いで、生成したスラリーを濾過し、２−プロパノール（７．０部）ですすぎ、６０℃で乾燥させた。
【０１５０】
６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態ＩＩのＸＲＰＤ分析を上に記載されているように行い、以下の表のピークが得られた。
【表Ｅ】
2018513173.tif 000027
【０１５１】
一実施形態では６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態ＩＩは、ＸＲＰＤピーク２５．０（２４．９８２１）、１６．３（１６．３１８６）、２２．０（２１．９５２）、７．９（７．８９５８）、および７．６（７．５８２８）で特徴付けることができる。さらなる実施形態では、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態ＩＩは、ＸＲＰＤピーク２５．０（２４．９８２１）、１６．３（１６．３１８６）、７．９（７．８９５８）、および７．６（７．５８２８）で特徴付けることができる。
【０１５２】
上に記載されているように行われた６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミンスクシネート形態ＩＩのＮＭＲ分析から以下が得られた：
1H  NMR  (400  MHz,  DMSO-d6)  δ  12.13  (s,  2H),  9.48  (s,  1H),  8.58  (s,  1H),  8.47z  (s,  1H),  8.12  (d,  J  =  1.1  Hz,  1H),  7.97  -  7.86  (m,  3H),  7.62  (d,  J  =  1.1  Hz,  1H),  7.02  -  6.94  (m,  2H),  6.45  (s,  2H),  4.55  (t,  J  =  6.5  Hz,  2H),  4.46  (t,  J  =  6.0  Hz,  2H),  3.44  (p,  J  =  6.3  Hz,  1H),  3.17  -  3.10  (m,  4H),  2.40  (s,  10H),  1.02  (d,  J  =  6.1  Hz,  2H).
【０１５３】
生物学的実施例
（実施例１２）
高生産性Ｓｙｋ生化学的アッセイ
ＫｉｎＥＡＳＥ（Ｃｉｓｂｉｏ）、時間分解蛍光共鳴エネルギー移動法（ＴＲ−ＦＲＥＴ）イムノアッセイを使用して、Ｓｙｋ活性を測定した。このアッセイでは、ＸＬ６６５標識したペプチド基質のリン酸化をＳｙｋ−触媒する。ユウロピウムコンジュゲートホスホ−チロシンに特異的な抗体は、生成したリン酸化ペプチドに結合する。２ステップエンドポイントアッセイにおいて、ユウロピウムをドナーとして用い、ＸＬ６６５をアクセプターとして用いて、リン酸化ペプチドの形成をＴＲ−ＦＲＥＴで定量した。手短に言えば、ＤＭＳＯで連続的に希釈された試験化合物を、Ｅｃｈｏ５５０アコースティックリキッドディスペンサー（Ｌａｂｃｙｔｅ（登録商標））を使用して、Ｃｏｒｎｉｎｇの白色の低容量非結合３８４ウェルプレートに送達した。Ｍｕｌｔｉ−Ｆｌｏ（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用してＳｙｋ酵素および基質をアッセイプレートに分配した。５μＬの標準的反応混合物は、反応物緩衝液（５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．０、０．０２％ＮａＮ３、０．１％ＢＳＡ、０．１ｍＭオルトバナジン酸塩、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．０２５％ＮＰ−４０）中の２０μＭ  ＡＴＰ、１μＭビオチン化ペプチド、０．０１５ｎＭのＳｙｋを含有した。室温で３０分間のインキュベーション後、５μＬのＳｔｏｐ  ａｎｄ  Ｄｅｔｅｃｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（十分なＥＤＴＡを含有する５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．０検出緩衝液中の１：２００ユウロピウムクリプテート標識した抗リン酸化ペプチド抗体溶液および１２５ｎＭのストレプトアビジン（ｓｔｒｅｐａｖｉｄｉｎ）−ＸＬ６６５トレイサー）を加えた。次いで、このプレートを室温で１２０分間さらにインキュベートし、３４０ｎｍ／６１５ｎｍ／６６５ｎｍでの励起／発光／ＦＲＥＴ発光をそれぞれ用いて、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ  ２１０３  Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌｅｄリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用して読み取りを行った。６１５ｎｍおよび６６５ｎｍ発光波長での蛍光強度を比（６６５ｎｍ／６１５ｎｍ）として表現した。阻害率を以下の通り計算した。
％阻害＝１００×（比試料−比０％阻害）／（比１００％阻害−比０％阻害）
式中、０．１％ＤＭＳＯ（０％阻害）は陰性対照であり、１μＭ  Ｋ２５２ａ（１００％阻害）を陽性対照として使用した。実施例１〜７の化合物の活性が以下の表に提供されており、これらは、化合物が５０ｎＭ未満のＩＣ５０を有するＳｙｋ阻害剤であることを実証している。
【表Ｆ】
2018513173.tif 000028
【０１５４】
（実施例１３）
３８４−ウェルＨＴＢＳ全血ＣＤ６３好塩基球アッセイ
ヒト全血好塩基球細胞アッセイ（２５％血液）におけるＣＤ６３の発現により測定される好塩基球の活性化の減少に関してＳｙｋ活性を評価した。Ｆｌｏｗ  ＣＡＳＴキット（Ｂｕｈｌｍａｎｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  ＡＧ、Ｂａｓｅｌｓｔｒａｓｓｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して、軽微な修正付きで製造業者により提供されたプロトコルに従い、ヒト全血中の好塩基球活性化を測定した。ヘパリン中の新鮮なヒト全血を収集し、同じ日に送った（ＡｌｌＣｅｌｌｓ、Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ、ＣＡ）。全血試料をＤＭＳＯ（最終１％）またはＤＭＳＯ中の段階希釈した化合物のいずれかと共に３７℃で６０分間インキュベートした。抗ＦｃｅＲＩ  ｍＡｂを使用して好塩基球を活性化し、抗ＣＤ６３−ＦＩＴＣおよび抗ＣＣＲ３−ＰＥで、３７℃で２０分間染色した（１ウェル当たり：５０μＬの全血を１１３μＬの刺激緩衝液、８．５μＬの抗ＦｃｅＲＩ  ｍＡｂ、８．５μＬのＡｂ染色ＣＣＲ３−ＰＥ／ＣＤ６３−ＦＩＴＣと混合した）。細胞を１０００×ｇで１８分間遠心分離し、１５０μＬ／ウェルの上清を除去した。赤血球を溶解させ、２回の細胞の溶解：１５０μＬ／ウェルの１×溶解緩衝液を用いて細胞ペレットを再度懸濁させ、室温で１０分間インキュベートし、１２００ｒｐｍで５分間遠心分離することで細胞ペレットを収集することにより細胞を固定した。即時のフローサイトメトリー分析または４℃での一晩のインキュベーション、これに続くフローサイトメトリー分析のいずれかのために、細胞を１５０μＬ／ウェルの洗浄緩衝液で２回洗浄し、最終的な容量である７５μＬ／ウェルの洗浄緩衝液中に再度懸濁させた。脱顆粒（好塩基球活性化）を、ＣＣＲ３陽性細胞上のＣＤ６３表面発現により検出した。ゲーティングした好塩基球集団内のＣＤ６３陽性細胞の百分率を決定し、ＤＭＳＯ（陰性対照）および対照化合物（陽性対照）に対して正規化した。実施例１〜７の化合物の活性が以下の表に提供され、これは、２００ｎＭ未満のＥＣ５０で、化合物が好塩基球の活性化の減少に有効であることを実証している。
【表Ｇ】
2018513173.tif 000029
【０１５５】
（実施例１４）
動力学的溶解度
ｐＨ７．４のリン酸緩衝液中での化合物の動力学的溶解度を評価した。試験する化合物を１０ｍＭの濃度でジメチルスルホキシド中に溶解させた。ストック試料、３μｌをｐＨ７．４のリン酸緩衝液２９７μｌで希釈した（ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｄ８６６２）、全モル濃度は０．１４９ＭおよびｐＨ７．４３である）。次いで、振盪しながら、試料を３７℃で２４時間インキュベートし、遠心分離し、アリコートにし、公知の標準的濃度である０．１ｍＭと比較して試験した。実施例１〜７の化合物の動力学的溶解度が以下の表に提供されており、これは、化合物がｐＨ７．４で９０μＭ超の動力学的溶解度を有することを実証している。
【表Ｈ】
2018513173.tif 000030
【０１５６】
（実施例１５）
ヒト肝細胞安定性アッセイ
Ｌ／ｈｒ／ｋｇ単位の予測肝細胞クリアランスとして化合物のヒト血球安定性を評価した。試験する化合物を２００μＭに希釈した（４μｌの１０ｍＭ  ＤＭＳＯストックを１９６μｌのＡＣＮ：Ｈ２Ｏ（５０：５０）に入れた）。プロプラノロールを陽性対照として使用し、肝細胞が無いだけの緩衝液を０％対照として使用した。これらは、４μｌを８９１μｌのＫＨＢ緩衝液（Ｉｎ  ＶｉｔｒｏＧＲＯカタログ番号Ｚ９９０７４）でさらに希釈することによって、２×投薬溶液を得た。２４ウェルプレートの各ウェルに対して、２５０μｌの２×投薬溶液を２５０μｌの肝細胞（１ウェル当たり、１×１０６生存細胞／ｍｌ）を有する各ウェルに加えるか、または対照試料用のＫＨＢを加えて、インキュベーションの間の最終化合物濃度である１μＭを達成した。最終的な溶媒濃度は０．０１％ＤＭＳＯおよび０．２５％ＡＣＮであった。培養物プレートをロッカーに配置し、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートした。試料を０、１、３、および６時間の時点で収集した。ＬＣ−ＭＳ法を使用して、検量線に対して親化合物の損失を決定した。実施例１〜７の化合物の活性が以下の表に提供されており、これは、約０．１２Ｌ／ｈｒ／ｋｇまたはそれ未満の肝細胞クリアランスを示している。
【表Ｉ】
2018513173.tif 000031
【０１５７】
（実施例１６）
公知のＳｙｋ阻害剤との比較
実施例８〜１１のアッセイを使用して、本明細書中に記載されているような化合物を、当技術分野で公知の化合物と比較した。実施例１〜７の化合物を、以前に記載された化合物と比較しているデータが以下の表に提供されている。これらの結果から、公知の化合物と比較して、改善されたＳｙｋおよびＣＤ６３活性、改善された動力学的溶解度（少なくとも約９倍高い溶解性）および肝細胞クリアランス（約２分の１以下であるクリアランス）を有する本明細書中に記載されているような化合物は、Ｓｙｋ阻害剤として望ましいことが明白である。よって、改善されたＳｙｋおよびＣＤ６３阻害活性と、改善された動力学的溶解度およびクリアランスとの組合せにより、改善された薬物動態特性を有する、本明細書中に記載されているような疾患を処置するのに有効と予想される化合物が得られる。
【表Ｊ−１】
2018513173.tif 000032
【表Ｊ−２】
2018513173.tif 000033
【０１５８】
（実施例１７）
アポトーシスアッセイ
エントスプレチニブ（式Ｉ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１０ｍＭストックとして調製した。使用前に、エントスプレチニブを、−２０℃で０．７５ｍＬのポリプロピレンチューブ内で凍結した１０ｍＭ  ＤＭＳＯストックから解凍した。
【表Ｋ】
2018513173.tif 000034
【０１５９】
活動性慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を有する３人の被験体および不活動性（ｉｎａｃｔｉｖｅ）ｃＧＶＨＤを有する３人の被験体からの生存可能に凍結した末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、１０％ＦＢＳ、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ペニシリン／ストレプトマイシン、および１．０〜０．００７８μＭの濃度の範囲の２倍段階希釈のＧＳ−９９７３を補充した１１０μｌのＲＰＭＩ−１６４０培地に、９６−ウェルプレートの１ウェル当たり１×１０６個のＢ細胞をプレーティングした。未処理のＰＢＭＣについては、ＤＭＳＯ（エントスプレチニブストック溶液を作製するために使用した賦形剤）を単独で、１．０μＭエントスプレチニブ処理群についての体積と同体積で、その培養物中で使用した。次いで、細胞を３７℃および５％ＣＯ２で４８時間インキュベートし、収集し、以下に記載されているように、フローサイトメトリー分析によりアポトーシスＢ細胞の頻度について評価した。
【０１６０】
フローサイトメトリー分析−培養したＰＢＭＣを、ＦＡＣＳ洗浄バッファ（２％ＦＢＳを含有するＰＢＳ）中で洗浄し、次いで、Ｆｃブロックを含有するＦＡＣＳ洗浄液（ヒトＴｒｕＳｔａｉｎ  ＦｃＸ（商標）Ｆｃ受容体ブロッキング溶液、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ製）中に推奨する濃度で再懸濁させた。氷上での１５分間のインキュベーション後、細胞をＰａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅ（商標）コンジュゲート抗ヒトＣＤ１９抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ，Ｉｎｃ．）でさらに３０分間染色し、次いで冷ＰＢＳ中で洗浄し、これに続いて、製造業者の指示に従い、アネキシンＶ結合バッファ（アネキシンＶアポトーシス検出キット−ＡＰＣ、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ．）で２回目の洗浄を行った。次いで、細胞を、ＡＰＣコンジュゲートアネキシンＶを含有するアネキシンＶ結合バッファ中に再懸濁させ、暗所で、室温で１５分間インキュベートした。最後に、細胞を冷アネキシンＶ結合バッファで洗浄し、７−ＡＡＤ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を含有する冷アネキシンＶ結合バッファ中に再懸濁させ、氷上で保持し、直ちにＦＡＣＳＣａｎｔｏ（商標）フローサイトメーターで分析した。ＦｌｏｗＪｏソフトウエア（バージョンＸ）を使用してフローサイトメトリーデータファイルを分析して、Ｂ細胞を同定し、アネキシンＶおよび７−ＡＡＤ染色に基づき、アポトーシス細胞の頻度を決定した。
【０１６１】
患者試料の各セットに対して、各濃度のエントスプレチニブにより誘導したＢ細胞アポトーシスを、以下の比：％アネキシンＶ＋／７−ＡＡＤ−Ｂ細胞（エントスプレチニブで処理）／％アネキシンＶ＋／７−ＡＡＤ−Ｂ細胞（未処理）により決定した。次いで、両側、対応のないスチューデントｔ検定（ＧｒａｐｈＰａｄプリズムソフトウエア、バージョン５）を使用して、活動性ｃＧＶＨＤ群と不活動性ｃＧＶＨＤ群との間のアポトーシスＢ細胞の比を比較する統計分析を実施した。活動性ｃＧＶＨＤ  Ｂ細胞におけるエントスプレチニブアポトーシス誘導活性についてのＥＣ５０を決定するためのグラフィックディスプレイおよび曲線フィット分析を、ＧｒａｐｈＰａｄプリズムソフトウエア（ＧｒａｐｈＰａｄソフトウエア、Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）を使用して実施した。
【０１６２】
結果
活動性ｃＧＶＨＤを有する３人の被験体およびｃＧＶＨＤを有さない３人のＨＳＣＴ被験体からの生存可能に凍結したＰＢＭＣを解凍し、ＥＮＴＯの２倍段階希釈物と共に１．０〜０．００７８μＭの濃度範囲にわたり、４８時間インキュベートした。Ｂ細胞のアポトーシスを測定し、フローサイトメトリーにより定量した。データ（表１）は各被験体試料に対して図１に示されており、エントスプレチニブがｃＧＶＨＤを有する被験体から得たＢ細胞のアポトーシスを引き起こしたことを実証している。ｃＧＶＨＤを有する１人の被験体では、Ｂ細胞は低レベルのベースラインアポトーシスを有しており、エントスプレチニブが、Ｂ細胞アポトーシスにおいて用量依存性増加を引き起こした。他の２人のｃＧＶＨＤ被験体からの試料はｉｎ  ｖｉｔｒｏでＢ細胞アポトーシスのより高いベースラインレベルを有していたが、エントスプレチニブでの処理はＢ細胞アポトーシスの増加も引き起こした。３人のドナーからの平均の結果は、ビヒクル対照と比較して、Ｂ細胞アポトーシスにおける平均増大倍率として図２においてグラフにより示されている。データは、１２５ｎＭ以上のＥＮＴＯでの処理は、ｃＧＶＨＤを有さない被験体からの試料と対比して、ｃＧＶＨＤ試料におけるＢ細胞アポトーシスの統計学的に有意な用量依存性の増加を引き起こしたことを実証している。
【０１６３】
図１は、４８時間の間に示された、ＥＴＮＯ（７．８ｎＭ〜１．０μＭ）で処理した、ｃＧＶＨＤを有する被験体（白丸）およびｃＧＶＨＤを有さない被験体（黒丸）由来のＰＢＭＣについての値を表している。アポトーシスＢ細胞は、ＣＤ１９＋アネキシンＶ＋７ＡＡＤ−細胞として定義された。
【０１６４】
図２は、４８時間の間に示された、ＥＮＴＯ（７．８ｎＭ〜１μＭ）で処理された、ｃＧＶＨＤを有さない被験体（ｎ＝３、黒の四角）およびｃＧＶＨＤを有する被験体（ｎ＝３、黒丸）由来のヒトＰＢＭＣにおけるアポトーシスを表している。アポトーシスＢ細胞はＣＤ１９＋アネキシンＶ＋７ＡＡＤ−細胞として定義され、ビヒクル単独で処理した試料に対するアポトーシス誘導倍率がプロットされている。統計値は、ｃＧＶＨＤを有する被験体と、ｃＧＶＨＤを有さない被験体との間の変化倍率としての差である。
【表１】
2018513173.tif 000035
【０１６５】
本明細書全体にわたり、様々な特許、特許出願および他の種類の公報（例えば、学術誌論文）が参照されている。これにより、本明細書で引用された全ての特許、特許出願、および公報の開示は、あらゆる目的で、これらの全体が参考として本明細書に援用される。
【図１】
2018513173.tif 000045
【図２】
2018513173.tif 000046
【手続補正書】
【提出日】平成29年12月13日(2017.12.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトにおいて移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を処置するための組成物であって、薬学的有効量の、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物：
【化１７】
2018513173.tif 000047
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化１８】
2018513173.tif 000048
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式（ＩＩ）の示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］からなる群から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を含む組成物。
【請求項２】
ＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための組成物であって、薬学的有効量の、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物：
【化１９】
2018513173.tif 000049
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化２０】
2018513173.tif 000050
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式（ＩＩ）の示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］からなる群から選択される化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を含み、該組成物は、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項３】
前記化合物が、
【化２１】
2018513173.tif 000051
または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４】
前記化合物が、６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
前記化合物が、（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
前記化合物が、２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
前記化合物が、２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
前記化合物が、−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１または２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＧＶＨＤが急性移植片対宿主病である、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１２】
前記ＧＶＨＤが慢性移植片対宿主病である、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、移植片対宿主病の処置に有用な、薬学的有効量の１種または複数種の追加の薬剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
移植片対宿主病の処置に有用な前記１種または複数種の追加の薬剤が、プレドニゾン、メチルプレドニゾン、経口の非吸収性コルチコステロイド、例えば、ブデソニドまたはベクロメタゾンジプロピオネート、免疫モジュレーター、例えば、シクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、チロミゾール、イムチオール、抗胸腺細胞グロブリン、抗ＴＮＦ薬剤、アザチオプリン、イノシン５’−モノホスフェートデヒドロゲナーゼ阻害剤、アゾジアカルボニド、ビスインドリルマレイミドＶＩＩＩ、ブレキナール、クロラムブシル、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、コルチコステロイド、シクロホスファミド、デオキシスペルグアリン、デキサメタゾン、グルココルチコイド、レフルノミド、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、メチルプレドニゾロン、ミゾリビン、ミゾリビン一リン酸、ムロモナブＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、ＯＫＴ３、ｒｈｏ（Ｄ）免疫グロビン、ビタミンＤ類似体（ＭＣ１２８８）、ダクリズマブ、インフリキシマブ、リツキシマブ、トシリズマブ  アレムツズマブ、メトトレキセート、抗胸腺細胞グロブリン、デニロイキンジフチトクス、Ｃａｍｐａｔｈ−１Ｈ、ケラチノサイト成長因子、アバタセプト、レメステムセル−Ｌ  スベロイルアニリドヒドロキサム酸、ペントスタチン、サリドマイド、イマチニブメシレート、シクロホスファミド、フルダラビン、ＯＫＴ３、メルファラン、チオペタ、ならびにリンパ球免疫グロブリン、抗胸腺細胞、およびグロブリンの群から選択される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物：
【化２２】
2018513173.tif 000052
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化２３】
2018513173.tif 000053
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式（ＩＩ）の示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置のための医薬の製造における使用。
【請求項１６】
前記化合物が、
【化２４】
2018513173.tif 000054
または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
前記化合物が、６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１８】
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１９】
前記化合物が、（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２０】
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２１】
前記化合物が、２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２２】
前記化合物が、２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２３】
前記化合物が、−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１５に記載の使用。
【請求項２４】
前記ＧＶＨＤが急性移植片対宿主病である、請求項１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２５】
前記ＧＶＨＤが慢性移植片対宿主病である、請求項１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、または２３のいずれかに記載の使用。
【請求項２６】
請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、ＧＶＨＤの処置における該剤形の使用のための指示を含有する添付文書とを含むキット。
【請求項２７】
請求項１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、ＧＶＨＤを処置するのに有用な別の医薬品の、少なくとも１種の単位剤形とを含む、請求項２６に記載のキット。
【請求項２８】
前記化合物が、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項２６または２７のいずれかに記載のキット。
【請求項２９】
前記化合物が、式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項２６または２７のいずれかに記載のキット。
【請求項３０】
移植片対宿主病の処置に有用な前記少なくとも１種の追加の薬剤が、プレドニゾン、メチルプレドニゾン、経口の非吸収性コルチコステロイド、例えば、ブデソニドまたはベクロメタゾンジプロピオネート、免疫モジュレーター、例えば、シクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、チロミゾール、イムチオール、抗胸腺細胞グロブリン、抗ＴＮＦ薬剤、アザチオプリン、イノシン５’−モノホスフェートデヒドロゲナーゼ阻害剤、アゾジアカルボニド、ビスインドリルマレイミドＶＩＩＩ、ブレキナール、クロラムブシル、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、コルチコステロイド、シクロホスファミド、デオキシスペルグアリン、デキサメタゾン、グルココルチコイド、レフルノミド、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、メチルプレドニゾロン、ミゾリビン、ミゾリビン一リン酸、ムロモナブＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、ＯＫＴ３、ｒｈｏ（Ｄ）免疫グロビン、ビタミンＤ類似体（ＭＣ１２８８）、ダクリズマブ、インフリキシマブ、リツキシマブ、トシリズマブ  アレムツズマブ、メトトレキセート、抗胸腺細胞グロブリン、デニロイキンジフチトクス、Ｃａｍｐａｔｈ−１Ｈ、ケラチノサイト成長因子、アバタセプト、レメステムセル−Ｌ  スベロイルアニリドヒドロキサム酸、ペントスタチン、サリドマイド、イマチニブメシレート、シクロホスファミド、フルダラビン、ＯＫＴ３、メルファラン、チオペタ、ならびにリンパ球免疫グロブリン、抗胸腺細胞、およびグロブリンの群から選択される、請求項２７、２８、または２９のいずれかに記載のキット。
【請求項３１】
前記化合物が、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項２７、２８、２９、または３０のいずれかに記載のキット。
【請求項３２】
前記化合物が式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項２７、２８、２９、または３０のいずれかに記載のキット。
【請求項３３】
前記化合物が、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４のそれぞれがＨである式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項３４】
前記化合物が、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項３５】
前記化合物が、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＨであり、Ｒ４がメチルである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項３６】
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項３７】
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の組成物。
【請求項３８】
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がＨであり、Ｒ４がメチルである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、請求項１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
したがって、本開示は、急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）および慢性移植片対宿主病（ｃＧＶＨＤ）を含めた、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を処置するための方法においてＳｙｋ阻害剤として機能する化合物を提供し、この方法は、それを必要とするヒトに、薬学的有効量のＳｙｋ阻害剤を投与することを含む。Ｓｙｋ阻害化合物、Ｓｙｋ阻害剤化合物、およびＳｙｋ阻害剤という用語は、本明細書で使用される場合同義語であることが理解されている。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
ヒトにおいて移植片対宿主病を処置するための方法であって、それを必要とする該ヒトに、薬学的有効量の、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物：
【化１７】
2018513173.tif 000055
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化１８】
2018513173.tif 000056
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式Ｉの示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］からなる群から選択される化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法。
（項目２）
ＧＶＨＤの症状の発症を阻害するための方法であって、同種異系造血幹細胞を移植するヒトレシピエントに、薬学的有効量の、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物：
【化１９】
2018513173.tif 000057
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化２０】
2018513173.tif 000058
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式Ｉの示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］からなる群から選択される化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶を投与することを含む方法。
（項目３）
前記化合物が、
【化２１】
2018513173.tif 000059
または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１または２のいずれかに記載の方法。
（項目４）
前記化合物が、６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１または２のいずれかに記載の方法。
（項目５）
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１または２のいずれかに記載の方法。
（項目６）
前記化合物が、（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１または２のいずれかに記載の方法。
（項目７）
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１または２のいずれかに記載の方法。
（項目８）
前記化合物が、２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１または２のいずれかに記載の方法。
（項目９）
前記化合物が、２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１または２のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記化合物が、−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１または２のいずれかに記載の方法。
（項目１１）
前記ＧＶＨＤが急性移植片対宿主病である、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のいずれかに記載の方法。
（項目１２）
前記ＧＶＨＤが慢性移植片対宿主病である、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のいずれかに記載の方法。
（項目１３）
投与することを必要とする前記ヒトに、移植片対宿主病の処置に有用な、薬学的有効量の１種または複数種の追加の薬剤を投与することをさらに含む、項目１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２のいずれかに記載の方法。
（項目１４）
移植片対宿主病の処置に有用な前記１種または複数種の追加の薬剤が、プレドニゾン、メチルプレドニゾン、経口の非吸収性コルチコステロイド、例えば、ブデソニドまたはベクロメタゾンジプロピオネート、免疫モジュレーター、例えば、シクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、チロミゾール、イムチオール、抗胸腺細胞グロブリン、抗ＴＮＦ薬剤、アザチオプリン、イノシン５’−モノホスフェートデヒドロゲナーゼ阻害剤、アゾジアカルボニド、ビスインドリルマレイミドＶＩＩＩ、ブレキナール、クロラムブシル、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、コルチコステロイド、シクロホスファミド、デオキシスペルグアリン、デキサメタゾン、グルココルチコイド、レフルノミド、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、メチルプレドニゾロン、ミゾリビン、ミゾリビン一リン酸、ムロモナブＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、ＯＫＴ３、ｒｈｏ（Ｄ）免疫グロビン、ビタミンＤ類似体（ＭＣ１２８８）、ダクリズマブ、インフリキシマブ、リツキシマブ、トシリズマブ  アレムツズマブ、メトトレキセート、抗胸腺細胞グロブリン、デニロイキンジフチトクス、Ｃａｍｐａｔｈ−１Ｈ、ケラチノサイト成長因子、アバタセプト、レメステムセル−Ｌ  スベロイルアニリドヒドロキサム酸、ペントスタチン、サリドマイド、イマチニブメシレート、シクロホスファミド、フルダラビン、ＯＫＴ３、メルファラン、チオペタ、ならびにリンパ球免疫グロブリン、抗胸腺細胞、およびグロブリンの群から選択される、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物：
【化２２】
2018513173.tif 000060
［式（ＩＩ）中、
Ｒ１は、
【化２３】
2018513173.tif 000061
からなる群から選択され、ここで、＊は、Ｒ１が結合している、式Ｉの示されたフェニル環の炭素原子を示し、
Ｒ２はＨまたは２−ヒドロキシエトキシルであり、
Ｒ３はＨまたはメチルであり、
Ｒ４はＨまたはメチルである］または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、ヒトにおける移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置のための医薬の製造における使用。
（項目１６）
前記化合物が、
【化２４】
2018513173.tif 000062
または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１５に記載の使用。
（項目１７）
前記化合物が、６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１５に記載の使用。
（項目１８）
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１５に記載の使用。
（項目１９）
前記化合物が、（Ｒ）−（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）モルホリン−２−イル）メタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１５に記載の使用。
（項目２０）
前記化合物が、６−（６−アミノピラジン−２−イル）−５−メチル−Ｎ−（４−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１５に記載の使用。
（項目２１）
前記化合物が、２−（５−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１５に記載の使用。
（項目２２）
前記化合物が、２−（（４−（４−（（６−（６−アミノピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−イル）メチル）プロパン−１，３−ジオール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１５に記載の使用。
（項目２３）
前記化合物が、−（５−（（６−（６−アミノ−５−メチルピラジン−２−イル）イミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−８−イル）アミノ）−２−（４−（オキセタン−３−イル）ピペラジン−１−イル）フェノキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１５に記載の使用。
（項目２４）
前記ＧＶＨＤが急性移植片対宿主病である、項目１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、または２３のいずれかに記載の使用。
（項目２５）
前記ＧＶＨＤが慢性移植片対宿主病である、項目１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、または２３のいずれかに記載の使用。
（項目２６）
項目１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、ＧＶＨＤの処置における該剤形の使用のための指示を含有する添付文書とを含むキット。
（項目２７）
項目１に記載の式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶の、１種または複数種の単位剤形と、ＧＶＨＤを処置するのに有用な別の医薬品の、少なくとも１種の単位剤形とを含む、項目２６に記載のキット。
（項目２８）
前記化合物が、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目２６または２７のいずれかに記載のキット。
（項目２９）
前記化合物が、式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目２６または２７のいずれかに記載のキット。
（項目３０）
移植片対宿主病の処置に有用な前記少なくとも１種の追加の薬剤が、プレドニゾン、メチルプレドニゾン、経口の非吸収性コルチコステロイド、例えば、ブデソニドまたはベクロメタゾンジプロピオネート、免疫モジュレーター、例えば、シクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、チロミゾール、イムチオール、抗胸腺細胞グロブリン、抗ＴＮＦ薬剤、アザチオプリン、イノシン５’−モノホスフェートデヒドロゲナーゼ阻害剤、アゾジアカルボニド、ビスインドリルマレイミドＶＩＩＩ、ブレキナール、クロラムブシル、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、コルチコステロイド、シクロホスファミド、デオキシスペルグアリン、デキサメタゾン、グルココルチコイド、レフルノミド、メルカプトプリン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、メチルプレドニゾロン、ミゾリビン、ミゾリビン一リン酸、ムロモナブＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、ＯＫＴ３、ｒｈｏ（Ｄ）免疫グロビン、ビタミンＤ類似体（ＭＣ１２８８）、ダクリズマブ、インフリキシマブ、リツキシマブ、トシリズマブ  アレムツズマブ、メトトレキセート、抗胸腺細胞グロブリン、デニロイキンジフチトクス、Ｃａｍｐａｔｈ−１Ｈ、ケラチノサイト成長因子、アバタセプト、レメステムセル−Ｌ  スベロイルアニリドヒドロキサム酸、ペントスタチン、サリドマイド、イマチニブメシレート、シクロホスファミド、フルダラビン、ＯＫＴ３、メルファラン、チオペタ、ならびにリンパ球免疫グロブリン、抗胸腺細胞、およびグロブリンの群から選択される、項目２７、２８、または２９のいずれかに記載のキット。
（項目３１）
前記化合物が、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目２７、２８、２９、または３０のいずれかに記載のキット。
（項目３２）
前記化合物が式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目２７、２８、２９、または３０のいずれかに記載のキット。
（項目３３）
前記化合物が、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４のそれぞれがＨである式（ＩＩ）の化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
（項目３４）
前記化合物が、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
（項目３５）
前記化合物が、Ｒ２がＨであり、Ｒ３がＨであり、Ｒ４がメチルである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
（項目３６）
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
（項目３７）
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がメチルであり、Ｒ４がＨである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
（項目３８）
前記化合物が、Ｒ２が２−ヒドロキシエトキシルであり、Ｒ３がＨであり、Ｒ４がメチルである式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩もしくは共結晶である、項目１、２、１１、１２、１３、または１４のいずれかに記載の方法。
【国際調査報告】
2018513173.tif 000063
2018513173.tif 000064
2018513173.tif 000065