(57)【要約】【課題】本発明は、皮膚上のダークスポット(dark spots)の美容処理のための方法および装置に関する。【解決手段】前記装置は、低温流体のレザーバ（２）と、前記レザーバの内部から放出ノズル（１０）へ向かって、ノズル（９）を介して下流に前記低温流体を通過させるためのソレノイドバルブ（７）とを備え、前記ソレノイドバルブ（７）は、０．１秒まで、事前に定めた特定の時間で開かれることを可能にする電子時間調節システム（４）と関連し、および前記ノズル（９）は、低温流体の流れを制限するための手段を装備している。【選択図】図１
2018505760.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚の色素沈着過度を有する被験者の手、顔、四肢または胸に位置された皮膚上のダークスポットの少なくとも１つを除去するために設計された、皮膚上のダークスポットの美容処理であって、
選択的にメラノサイトに作用するために、連続して２〜１０秒間、−４℃〜−１５℃の皮膚温度を引き起こすよう、低温流体を被処理領域に噴霧する適用工程で構成される、美容処理。
【請求項２】
請求項１に記載の美容処理であって、２〜１０秒間の全適用中において、前記スポット上の前記皮膚温度が−４℃〜−１５℃の間にある、美容処理。
【請求項３】
請求項１または２に記載の美容処理であって、前記低温流体は、−２０℃〜−６５℃の沸点を有する流体から選ばれる、美容処理。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の美容処理であって、前記低温流体が最大の初期圧力１０バールで輸送される、美容処理。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の美容処理であって、前記低温流体がジフルオロエタン（１５２Ａ）である、美容処理。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の美容処理であって、前記低温流体がテトラフルオロエタン（１３４Ａ）である、美容処理。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の美容処理であって、前記領域上における、前記低温流体の適用期間が、２〜４秒間である、美容処理。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の美容処理であって、低温流体を、１つのスポット当たり単回適用することからなる、美容処理。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の美容処理であって、被験者の皮膚上の低温流体の適用が、３０ｍｍ2未満の領域に制限されている、美容処理。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の美容処理を実行するための装置であって、
低温流体のレザーバ（２）と、前記レザーバの内部から放出ノズル（１０）へ向かって、ノズル（９）を介して下流に前記低温流体を通過させるためのソレノイドバルブ（７）とを備え、
前記ソレノイドバルブ（７）は、０．１秒まで、事前に定めた特定の時間で開かれることを可能にする電子時間調節システム（４）と関連し、および
前記ノズル（９）は、低温流体のフローを制限するための手段を備えている、装置。
【請求項１１】
請求項１０に記載の装置であって、前記ノズルは疎水性で、非熱導体材料から作られる、装置。
【請求項１２】
請求項１０または１１に記載の装置であって、前記ノズル（９）は、少なくとも１つの本体（９１、９２、９３）で構成され、前記本体は、少なくとも１つの内部の導路を備え、前記導路は、流体の流量を制限する手段であり、長さ３〜１２ｍｍおよび内径０．１５〜３．５ｍｍである、装置。
【請求項１３】
請求項１０から１２のいずれか一項に記載の装置であって、前記ノズルは、少なくとも１つの中間シール（Ｊ１、Ｊ２）を押し込むことにより積み重ねて組み立てられた２つの本体（９２、９３）で構成され、それらの導路が直列に同軸で接続されている、装置。
【請求項１４】
請求項１２または１３の装置であって、前記内部の導路が、軸性で、円柱−円錐形である、装置。
【請求項１５】
請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の装置であって、前記本体（９１、９２、９３）はくぼみをそれぞれ備え、上部（９２ａ、９３ａ）および底部（９２ｄ、９３ｄ）で、密閉する継ぎ目（Ｊ１、Ｊ２）を受ける、装置。
【請求項１６】
請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の装置であって、本体（９２、９３）は、それぞれ２つの内部導路を備え、それぞれの内部導路は、上流側の導路（９２ｂ、９３ｂ）が少なくとも部分的に円錐形であり停留チャンバを形成し、前記上流側の導路より小径の円筒状の導路（９２ｃ、９３ｃ）において下流側で開口する、装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚上のダークスポット(dark spots)の美容処理のための方法に関し、皮膚色素沈着過度(hyperpigmentation)に苦しむ人の、手（hands）、顔、四肢(limbs)または胸の上の前記ダークスポットを除去することを目的とし、また前記方法を適用するための装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
メラニン形成(melanogenesis)は、皮膚色の源で、メラノサイトと呼ばれる特殊な細胞によって起こり、メラニンの発生およびその結果生じる局所的な暗色部分を増加させる外部要因によって影響を受ける。メラニン形成によって、皮膚上に、ダークスポットが形成される。
【０００３】
ダークスポット（黒子（lentigines）、光線過敏性皮膚炎（actinic dermatitis））は、３０歳代に（時に青春期に）現われ、それらは主として手、顔および胸に位置する。特に、ダークスポットは太陽への過剰な露出に起因する。皮膚老化とは、太陽への皮膚露出の結果顕れるすべてを指し、例えば、しみ、たるみ、しわ、しわが寄った外観および皮膚乾燥を意味する。皮膚老化では、以下のものがスポット状に生じ得る：
−  日焼けによるスポット（sun spots）または「そばかす(freckles)」（その数および強度は紫外光への露出につれて増加する）；
−  太陽に過度に露出された領域の太陽性の黒子；
−  過染色症（異常な着色）例えば、肝斑または黒皮症(melasma)（その強度は紫外線ＡおよびＢへの接触と直接的に関係する）；
−  香水によって引き起こされた光感作に起因する「香水皮膚炎」。
【０００４】
本質的な皮膚老化により衰退し、それにより皮膚のたるみ、乾燥および着色異常がもたらされる。主な色素異常は、５０歳ごろに発生する、皮膚の露光部、より明確には手の甲および時々顔に発生する老年性黒子である。小さく滑らかで平らなダークスポットであり、直径数ミリメートルから数センチメートルの範囲である。予後は常に良性である。これらのスポットは、さらに炎症またはホルモンの不均衡により高齢者に発達し得る。
これらのスポットは、色素沈着過度の強度に依存して、多かれ少なかれ審美的であると考えられる。本来の原因はほとんど知られていない。生理学の研究により、以下について一層調査が進展している：（１）メラニン合成の増加、（２）メラノソームから角化細胞までのメラニンの移動の加速、および最終的に（３）皮膚表面へのメラノサイトのより速いマイグレーション。
【０００５】
処理手段としては、以下の２つが可能である：色素沈着過度の低減、またはメラニンまたは過度に着色された組織の破壊。
【０００６】
色素沈着過度は、薬理作用と脱色剤（生理学的影響に作用する）によって減少させ得る。例えば、以下を述べることができる：ハイドロキノンモノメチルエーテル、メキノール、トレチノインまたはコウジ酸。これら薬剤では、処理期間が長く、また、適用方法は限定的である（１日当たり複数回適用）。したがって、コンプライアンスは低い。さらに、本来的な原因が処理されていないため、再発リスクは非常に高い。患者は在宅で処理を行なうことが可能である。また、皮膚科医の支援は必要ではない。二次的な副作用としては、主として局所的な炎症反応、活性成分へのアレルギー反応および所定の活性成分による灼熱感が挙げられる。
【０００７】
局所用ステロイドは、特に密封法(occlusive dressing)の下で適用された時、所定の色素が除去される可能性を有する。局所用ステロイドはハイドロキノンクリーム剤の中で使用される。この処方は、効能を高めるよりというよりも、調製に起因する刺激を減少させるために行われる。ハイドロキノンモノベンジルエーテルは特に回避されるべき薬剤である。すなわち、ハイドロキノンモノベンジルエーテルは強力すぎるため使いにくい。また、治療部位から離れた場所に、しばしば脱色を生ずる。過去に、ハイドロキノンモノベンジルエーテルは決定的な白斑黒皮症を伴う深刻な化粧品事故を起こした。健康な皮膚領域の脱色を行うために、開業医の中には、いまだに広範囲な白斑処理の中でハイドロキノンモノベンジルエーテルを使用する者がある。但し、この場合、ハイドロキノンモノベンジルエーテルは、濃度５〜２０％で、且つ数か月間にわたり１日当たり２回の塗布を必要とする。さらに、この生成物は刺激性またはアレルゲン性の可能性がある。
【０００８】
メラニン、より一般には過度に着色された組織は、皮膚科医によって実行される寒冷療法(cryotherapy)に基づいて破壊される。すなわち、医療従事者により被処理表面へ冷気が適用される。この従来的古典的な医療従事者による施術では、寒冷レベルまたは寒冷温度下での暴露時間を制御できない。
確かに、皮膚科医は、一般に−１９６℃の液体窒素などの極めて低温のガスを噴霧するためにシリンダを使用する。そして、低温ガスシリンダの開口は、機械的に引き起されるため、低温ガスのフローおよび噴霧時間を正確に制御することはできない。慣例として、医者は、処理するべき現象のタイプに基づいて、冷気の適用時間を決めているが、精密さはない。
慣例では、液体窒素は、尋常性疣贅に対して１０秒間の１回適用、足底いぼに対して２０〜３０秒間の２回適用、および日光性黒子に対して５秒間の１回適用が行われている。冷気の適用期間および適用する極低温のレベルの精度不足および制御不足は、処理間での大きな相違を生じ、そして、再現性が全体的に不足し、その結果、有効性が大きく変化する。
さらに、液体窒素（−１９６℃）の使用は、第二度熱傷を引き起こす。その結果、差別化することなく処理された組織中の細胞全体の壊死を生じて、後遺症として瘢痕化させ、低色素沈着のリスクを増加させ、さらに施用に伴う疼痛を生じる。
他の技術としては、ピーリングおよびマイクロダーマブレーション（これらでは除去はできないが、表面的に、ダークスポットの色を薄める）や、およびさらに、寒冷療法と同じ欠点を有するレーザー療法が挙げられる。
【０００９】
従来の寒冷療法は光線性黒子（actinic lentigo）のような所定の皮膚障害に対して使用される。このような技術は冷気を適用するために使用される機器に依存して、非常に変動的である。皮膚科医は、主として破壊するべき表面（被破壊面）に、液体窒素を噴霧する。スプレーは開閉自在であり、窒素が円錐形ネオプレンに注入されてもよい。円錐形ネオプレンのサイズは、被処理域に適している。この方法の後、しばしば処理領域の掻爬が行われ、組織学的検査のためのサンプルをとることができ、より正確に外延の境界が決定され、結果を最適化する。１回または複数回（一般に２回）の凍結融解サイクルが、このようにして実行される。
【００１０】
別の方法としては、そのサイズがターゲット表面に適した、閉鎖したクライオデス(cryodes)による液体窒素の適用が挙げられる。針、熱電対またはインピーダンス測定を使用して、内部組織温度をコントロールすることは可能であるが、これらは系統的に使用されない。目標領域周囲の凍結輪(freezing halo)の存在、および凍結・融解の回数が、組織破壊を評価するために使用される。これは、多数の病変を治療するために使用することができ、比較的単純で外来で行われる施術であるが、抗凝血薬使用患者のために用いることはできない。冷却壊死は数週間にわたり展開されるため、ドレッシング材(dressing)を変更する必要がある。その結果、着色不足による皮膚色異常後遺症あるいは過度に着色された皮膚色異常後遺症を生じさせる可能性がある。
【００１１】
ダークスポットが大量か、非常に大きい場合、液体窒素による処理は激しすぎる。そのため、例えば、ドライアイスまたはＮ2０を使用することが望ましい。
【００１２】
特許文献１（米国特許７，９６３，９５９）は、ＣＦＣを含む様々な流体を、寒冷療法に使用して、多くの皮膚領域を処理するために、画像取得システムによってガイドされた自動装置を記載している。この装置は医療機関での使用が意図される。
【００１３】
特許出願である特許文献２（ＦＲ  ２  ８８５  ０５９）および特許文献３（ＦＲ  ２  ８８５  ５３９）は、ノズルおよび放出ノズルによって、皮膚の被処理域上に適用するために、低温流体をエアロゾルで供給して使用されるマニュアル装置を記載している。機械的なタイマーにより、接触時間が制御される。これらの装置は、病院あるいは医療環境以外での治療を可能にするように設計されている。しかしながら、流体のフロー管理および適用時間は、実際上制御されず、信頼性が低く、再現することが困難であることが分かっている。確かに、装置自体の構造（多くの構成要素）、さまざまな構成要素の相互作用や機械的・熱的耐性、および装置の設計された方法などの要因のため、低温流体の適用を再現することは困難である。すなわち、これらの適用では、再現性が不足するため、ある試行から次の試行において、処理域の局所的な瞬間温度が著しく変化する。また、やけどおよび広範囲な壊死を主なリスクとして有するため、この種の装置は、期待された安全性および効果を提供するものではない。
【００１４】
さらに、先行技術の装置を実施すると、非選択的な細胞溶解を起しうる。すなわち、これらの装置は、処理部位の組織の全細胞集団の壊死を生じさせ、この壊死は、すべての細胞集団（メラノサイト、ケラチノサイト、繊維芽細胞など）について画一的である。すなわち、先行技術の装置の本質的な性質または操作のメカニズムおよび実施性では、所定の領域上の低温流体の適用量および適用時間を、正確に管理あるいは制御することができない。その結果、全治療部位一帯について、所望の温度レベルを正確に管理あるいは制御することができない。組織に対して実際に適用される温度の範囲が広範囲であるので、この方法は、存在している細胞集団に対する低温細胞選択的な作用（cryo-cyto-selective action）を発揮できない。しかしながら、低温−選択作用は、他の細胞集団に作用せずに、細胞の所与の集団（例えばメラノサイトのみ）に特に発揮される作用である。したがって、先行技術の装置は、１つの細胞集団（例えばメラノサイト）にしか作用しない。低温−選択作用は、細胞上で適用される温度の非常に正確なコントロールを要求し、最低可能温度だけではなく、温度変化の速度論(kinetics)上での制御を要求する。すなわち、所定の細胞集団の冷気に対する反応が他の集団の反応とは異なるので、所定の温度範囲内かつ所定の速度論に従って冷気を適用すると、他の集団に影響せずに、細胞溶解現象を引き起こすことにより、所与の細胞集団に対して作用することが可能である。細胞−選択的な結果を得る寒冷療法は、低温細胞選択的な作用また低温細胞選択性と呼ばれる。
【００１５】
今まで、当業者は低温細胞選択性に精通しておらず、時間の長さしか考慮に入れていなかったので、当業者は画一的な局所細胞壊死を研究するのみであった。その結果、当業者は、美容のための細胞選択的な低温作用を得る手段を考慮せず、さらには想像することすらできなかった。さらに、そのような装置は外来患者に対して使用可能でなく、目標領域に達するのに十分な最適温度を、非常に正確に自動制御するよう実施しすることは、簡単または安定してできるものではなかった。
【００１６】
さらに、低温流体が発射される場合、公知の従来の低温装置では、ノズル近傍内の水蒸気が突然凍結されるため、氷で覆われ、目詰まりするという問題を生じる。これらの問題は、ノズルに今まで使用された非疎水性材料の性質によって悪化する。
相当な長さにわたって非常に小さい直径を有するノズルは、機械強度を理由として、一般に金属で作られているため、この目詰まり現象は特に顕著である。
その結果、流体のフローの時間調節を可能にする現在の低温装置のノズルでは、遅延手段の実行を妨害するのは、上流の冷気保持および誘導の物理現象である。なぜなら、現在の低温装置のノズルでは、機械的（スプリング、カムなど）、または電子的（ソレノイドバルブなど）であれ、これらはすべて低温に非常に敏感であるためである。
【００１７】
さらに、当業者は、冷却液流体の動力および範囲を調節する技術的な問題に直面する。確かに、加圧容器を使用する場合、冷却液の出力を決定するバルブを開閉するためにレバーを動かさなければならない。適用の時間は１回の噴霧と次の噴霧とで大きく変動し、その結果、冷気の投与量を制御することができない。最終的に、フローを変更するためにノズルのねじを変更しても、一度変わると、前のフローの位置を見つけることができない。
【００１８】
これらの問題は、低温流体の分配に非常に深刻な影響を及ぼし、その結果、処理された組織について得られた温度速度論に非常に深刻な影響を及ぼす。既存の装置では、選択的な細胞−クライオジェニック処理による美容上の効果のみをもたらすことは、現在不可能である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１９】
【特許文献１】米国特許７，９６３９５９
【特許文献２】ＦＲ  ２  ８８５  ０５９
【特許文献３】ＦＲ  ２  ８８５  ５３９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
現在使用される技術と製品を考慮して、本発明は以下を提供することにより先行技術によって上げられた技術的問題を解決することを目指す：
−  色を減少させることではなく、ダークスポットの完全な除去、
−  速効性を得ること、
−  １回の適用によるダークスポットの除去、
−  皮膚に跡を形成せず、冷気の適用中、および適用後に疼痛と赤みをもたらさずに、望まれる結果を得ること、
−  低温装置の電子的または機械的な時間調節システムのいかなる妨害も回避して、ノズルによる霜および／または冷気の誘導についてのすべてのリスクを除去すること、
−  冷却液のフローの制限および制御をすること、
−  所定の時間（温度速度論）にわたり、皮膚の表面で達成し維持するための温度レベルを完全にマスターすること、
−  装置が簡単で安定して使用できること。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
この目的のため、本発明は請求項１による美容処理方法を提供する。
【００２２】
本発明による処理は適切なクライオジェニック処理によって細胞選択的な作用を発生させる。本発明では、選択的な細胞−低温作用または低温細胞選択性とは、他の細胞集団に影響せず、目的とされる組織の細胞集団に対して、冷却剤が選択的に作用するという事実を意味する。本発明による美容処理方法では、表皮において、角質層と基底層のレベル（真皮・表皮接合部）の間に位置するメラノサイト（色素細胞）に対して、制御されたレベルの冷気のみが作用する。上皮角質層を有する表皮は皮膚の最表層部である。したがって、この表面的な作用は、ケラチノサイト（角化細胞）を破壊せずに生じる。
【００２３】
本発明は請求項１０による方法を実施するための細胞選択的な低温装置（クライオジェニック装置）を提供する。
本発明で、この方法と装置を実行する方法は他の請求項によって定義される。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
本発明の他の特性および利点は、添付の図面に関して、以下の記載を読むことについて明らかになるだろう。それらは、次のように説明される：
【００２５】
【図１】図１は、本発明による細胞選択的な低温装置の一実施態様の長手方向における概略断面図である；
【図２】図２は、図１による装置により得られた熱的影響を示す実験のグラフである；
【図３】図３は、本発明による細胞選択的な低温装置の他の実施態様の長手方向における概略断面図である；
【図４Ａ】図４Ａは、本発明の装置の中で使用され得る、改良ノズルの一変形態様についての拡大断面図を表わす；
【図４Ｂ】図４Ｂは、本発明の装置の中で使用され得る、改良ノズルの一変形態様についての拡大断面図を表わす；
【図４Ｃ】図４Ｃは、本発明の装置の中で使用され得る、改良ノズルの一変形態様についての拡大断面図を表わす；
【図５】図５は、図３の装置の中で使用されるノズルの一変形態様の長手方向における概略拡大断面図を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
寒冷療法(cryotherapy)は、冷気が１０秒以上適用される場合、被処理者が６４％の割合で痛みを感じる方法である。冷気が１０秒未満で適用される場合、患者の４４％は痛みを知覚しない。適用の時間が短いほど、痛みは少ない。しかしながら、そのような場合、患者の３０％に奏功するのみであるので、冷気への低度接触は、効能を著しく減少させる。冷気の適用時間が、処理の効能、および痛みの強度に直接的な影響を与えることは明らかである。
【００２７】
組織の冷却は物理的状態の変化に結びつき、そして、冷気適用条件によって、組織の保持、または組織の変化が生じる。本発明で適用される熱的衝撃とは、最小時間で非常に大きく温度を低下させることである。この工程では、極めて迅速に凍結処理が実行され、続いて、冷気の作用を存続させるための緩慢な加温が実行される。急激な温度低下により、組織が凝結される前であっても、細胞内水分のミクロ結晶（微結晶）化が引き起こされる。これらの微結晶により、膜変質（membrane alterations）、構造蛋白質および酵素の変性、イオンの過度の濃縮が引き起こされ、これらの状態は全て細胞に対する悪影響を生じる。加熱時における過多の水の再結晶はさらに細胞融解を増加させる。通常の状態では、皮膚の温度は約３４℃である。この温度を、最小の時間で最大に低下させなければならない。
【００２８】
メラノサイトは真皮−表皮接合部に位置し、４期の間に成熟して、皮膚の表面（すなわち表皮の浅葉）へ移動する。これらのメラノサイトはメラノソーム（メラニンを含む小胞）を含んでいる。メラノソームの成熟およびメラニン濃縮がメラノサイト内に生じ、その後、メラノソームはメラノサイトの樹状突起へ、そして角化細胞へ輸送され、角化細胞組織にメラノソームは取り込まれる。メラノソームは、細胞の核の上方に位置し、ＵＶ放射から核を保護する。その後、酵素はメラノソームを分解する。放出されたメラニンは、角質層の落屑によって表皮の表面で除去されるとともに、リンパ経路によって真皮中で除去される。
【００２９】
色素沈着過度は、メラノソーム中での活性増加によるメラニン形成障害に起因する。また、時には有棘層の角化細胞において色素がより広範囲な移動すること、または真皮中のメラニンの蓄積にも起因する。その結果、基底層レベルに位置する、ハイパーメラノサイトーシスを形成する。ハイパーメラノサイトーシスは、メラノサイトの数の増加、またはメラノサイトによるメラニン合成の増加により特徴づけられる。この場合、重要な細胞、すなわち標的細胞はメラノサイトである。しかしながら、ＵＶ放射から表皮組織を保護するため、角化細胞は影響されてはならない。
【００３０】
表皮の厚さは、目的とする領域に応じて変化し、顔の皮膚上の０．０２ｍｍから足の底部上の５ｍｍまで変化する。表皮の平均厚さは０．１ｍｍである。手（手の甲）においては、メラノサイトが皮膚の表面から０．１ｍｍに位置する。
【００３１】
冷気に暴露された表皮では、０℃〜−４℃の間の温度にさらされる場合、メラノサイトは生存可能な状態を維持する。−４℃〜−７℃の間では、色素を含む顆粒の溶解現象、すなわちメラニンを含んでいるメラノソームの溶解現象が観察される。続いて、メラノサイト中のメラニン、および基底層近くの表皮の深葉中の角化細胞内のメラニンに対する酵素による消化がはじまる。−７℃〜−３０℃の間で、メラノサイトの消失が観察され、それを下回る温度では、メラノサイトは再び現われない（脱色障害）。角化細胞の破壊は、−２０℃未満の温度で、高度に分化したメラノサイト集団の著しい破壊とともに生じる。
【００３２】
本発明は、−４℃〜−１５℃で、好ましくは−５℃〜−１２℃での美容処理で、角化細胞へ深刻な損害を与えることなく、メラノサイトによる色素沈着過度に対して美容処理の効能が生じることを示すものである。好ましくは、皮膚に適用される冷気は、メラノサイトとメラニンに細胞−選択的に作用するために、２〜１０秒間、−５℃〜−１２℃の温度を生成するべきである。したがって、細胞−選択性（すなわちクライオジェニック処理による細胞選択性）の原理によると、２〜１０秒間、−５℃〜−１２℃の間の温度の流体を適用すると、角化細胞を破損せずに、メラニンとメラノサイトに作用することができる。したがって、メリット（−５℃〜−１２℃の間のメラニンおよびメラノサイトに対する作用）とリスク（−２０℃未満で起こる角化細胞の破壊）の間のバランスは良好であり、本発明では、美容処理の使用での高い安全性および悪影響（疼痛と瘢痕）の不在が両立している。
【００３３】
所定の冷却液の水凝結特性は他のものより明白である。これは、ジメチルエーテル（いぼを処理するために所定の生成物の中で使用される低温流体）の場合に該当する。この混合物がフォームラバーのノズルに入ると、周囲の大気と冷たいフォームラバーとが接触することにより、空気中の水蒸気が凝結する。系統的に(systematically)、水滴が形成されるのを観察することができる。ノズルが空気中にとどまる場合、水滴は、直ちにノズルの表面で凍る。この流体は皮膚上で、液体の形式でより長くとどまる。流体はノズルの中に閉じ込められて、ゆっくり蒸発する。このノズルが皮膚に適用される場合、所定の量の水が、治療部位上で付着する。この湿気によって痛みは増大する。しかしながら、ジフルオロエタン（コード１５２Ａ）は非常に速く蒸発するため、冷気が皮膚に対して、より速く入り込むことを可能にする。すみやかな蒸発速度、および直接皮膚に接触しない噴霧により、水の凝結およびその「幽閉」を回避することができる。ジフルオロエタン（１５２Ａ）を選択した理由は、−２５℃の沸点、２０℃での５．３バールの蒸気圧および蒸発の低い潜熱（１６０ＫＪ／ｋｇ）にあり、高い揮発性を有する液体を製造でき、有効な冷気を提供する間、皮膚上に水滴が形成されるのを予防するとともに、その結果発生する痛みを予防する。
【００３４】
皮膚がその表面上で適用された冷気の源に曝される場合、皮膚ではその温度が迅速に低下する。この場合、皮膚上に直接接触しないジフルオロエタン流を適用すると、毎秒約１０〜２０℃の表面温度の変化を生ずる。その結果、熱が失われて、組織の温度を、約３４℃から、約−５℃〜−１２℃（すなわち、約４０℃の違い）へと、２秒をやや超える時間内で、実際上２．５〜３秒以内で下げることができる。
本発明の代替実施態様では、ガス１３４Ａ（すなわちテトラフルオロエタン）を使用する。
【００３５】
温度変化は、皮膚の複数の層を貫いて毎秒０．５〜１ｍｍの速度で変化する。
その結果、冷気によって生成された基底層の温度は、約０．２秒の時間差で、皮膚の表面温度と等しくなる。
これらの条件では、１秒未満で、基底層中のメラノサイトの温度は皮膚表面の温度と同一となる。約３秒間低温流体を噴霧する場合、それは、所望の結果を得るための最適の時間となる。
【００３６】
好ましい実施態様では、前記方法は、自動時間調節式（３秒間に事前にセットされる）でジフルオロエタン（１５２Ａ）の指向性散布器を使用して実行される。主要な構成要素を下記に述べる。
【００３７】
図１および３に示されるように、前記装置の構成要素はケーシング１に囲まれる。このケーシングは、圧力約６バールおよび最高１０バール下で、低温流体（好ましくは１５２Ａ、任意で１３４Ａ（テトラフルオロエタン））のカートリッジ２を含んでいる。カートリッジ２は、流体がカートリッジ内部から外へ放出されることを可能にする軸８によって、ソレノイドバルブ７に接続される。装置が安静位にある場合、軸８により、流体はソレノイドバルブ７の上流のチャンバに入れられる。ケーシング１は例えば電池３の形で動力源を含んでいる。動力源はスイッチ５によって電子時間調節システム４に接続される。それにより、前もって決定した時間、ソレノイドバルブ７中の流体が通過可能となる。解除ボタン６により、電子タイマー４、さらにはソレノイドバルブ７が始動する。ソレノイドバルブ７の下流に、ノズル９が配置される。これは、図１および図３の中の２つの変形態様により図示される。このユニットにより、前もって定めた時間（例えば３秒間）、０．１秒の精度でノズルによって低温流体が放出され、正確で再現可能な投与量を提供することが可能になる。ソレノイドバルブの時間調節の精度は、選択的な低温−細胞作用を安全にするため、そして、角化細胞に対して有害な温度に達しない観点から求められる。
【００３８】
好ましくは、軸８の末端（カートリッジ２の内部に噛み込む）には、長手方向の辺縁に存在する複数の空隙部を有する共軸（同軸）のソケット（図示せず）が装備されており、加圧下で低温流体の通過を可能にする。
これらの空隙部は、カートリッジ２が上の位置（頭を下げる）となるように装置が垂直に置かれる場合に、流動性のものを通過させるように設計されている。
安全上の理由で、この構成により、他の位置で装置が使用されるのが防止される。さらに、これにより、他人の助けがない場合でも、もう一方の手を単に使用するだけで、手のダークスポット上に対して、上から下への拡散により装置を使用することが容易となるよう最適化される。
【００３９】
ノズル９はケーシング１の外部で配置されたノズル１０内部に通じている。ノズル１０（図１に示される実施態様において円錐形である）は、冷たい流体（ガス状態）のフローと標的皮膚領域との接触を可能にする開口を有するコネクター１１を終端として有する。前記開口は、存在し得る黒色腫と間違うリスクをなくすため、美容的な手順で処理することができる最も広範囲な黒子の直径に相当する領域を有してもよい。前記開口は、例えば、直径６ｍｍの円形を有していてもよい。したがって、皮膚スポットは１回の適用で処理されてもよい。ノズルの円錐形、その長さ（約３５ｍｍ）、側面の開口および先端は、組織の特定の領域に流体が集中して散布されることを目的として設計されている。
【００４０】
図１に示された実施態様では、低温流体は、カートリッジ２および軸８（ここで出口直径は３〜４ｍｍであってもよい）から、ソレノイドバルブ７（その入出口直径は、０．１５ｍｍ〜０．２５ｍｍまで様々であってもよい）へ、連続的に通過する。
低温流体は、所定の長さ（１０〜３０ｍｍの範囲であってもよい）に沿ったソレノイドバルブ７のチャンバ内に進む。
ソレノイドバルブの出口では、低温流体はノズル９の開口を通過する。ノズル９では、流体の通路長は３〜１２ｍｍの範囲であり、内径は０．１５〜３．５ｍｍである。ノズル９は、極低熱伝導率を有するまたは有しない、疎水性材料からなる１つまたは複数の同一の構成要素を組立てたものであってもよい。
このノズルは、長く、特に細長い（narrow）構成要素からなり、前記流体は大気圧へ放出されて拡張する前、または被処理皮膚領域に隣接する領域へ放出されて拡張する前に、ノズルにおいて流体が流れる。正確には、この拡張は低温効果をもたらす吸熱現象である。
このノズルにより、低温流体の初期速度を落とすことができ、本発明によって提供される美容上の注意によって定められた温度と時間の適切な条件で、皮膚の領域上に噴霧される冷たい液体突出し（projection of the cold liquid）を促進する。
【００４１】
本発明では、ノズル９の直径、長さおよび形状の変化は、顕著にガスのフローに影響を及ぼすことが分かった。また、ソレノイドバルブ７の開放時間への適応と組み合わせてこれらを変化させることにより、処理された皮膚領域の表面温度に対して、主な役割を担わせることができる。
特に好ましい実施態様によると、ノズルは、内径０．１５〜３．５ｍｍの通路長（流体路長）３〜１２ｍｍと、ソレノイドバルブの開口時間３秒と組み合わせた場合、組織の処理域に対する有効な低温細胞選択的な作用に結びつく温度範囲を提供する。
【００４２】
図２は、本発明のノズル９を有する場合（Ａ）、およびノズル９を有しない場合（Ｂ）の、ソレノイドバルブの開口の３秒後の皮膚表面の温度を示しており、上記の内容を説明する。角化細胞に有害な温度となるので、ノズルが欠如すると、低温細胞選択的な行為のための温度範囲を提供することはできない。
【００４３】
さらに、本発明は、ソレノイドバルブ７から下流において、低温流体のフローに対する抵抗を増加させるために特定のノズルを定める。この特定のノズルにより、一方では、凍結現象を回避でき、かつ流体の放出のための手段を保護できるために、特にソレノイドバルブの時間調節システムの電子的または機械的な構成要素を、低温から隔離することができ、他方では、フローの動力を制限することができる。
図４Ａから４Ｃは、本発明による改良ノズルの変形例を示す。
【００４４】
図４Ａに示されるノズル９は、上流円形くぼみ（upstream circular cavity）９１ａが上部に作られる一体型円筒状本体９１で構成される。
本体９１の高さは４〜１２ｍｍ、好ましくは１０．５０ｍｍであり、また、約１２ｃｍの外径を有している。その一方でくぼみ９１ａは浅めの深さ（約０．４０ｍｍ）および約８ｍｍの内径を有している。
このくぼみは、厚さがくぼみ９１ａの深さに概略的に相当する、環状のシール（例えば、図５の中のＪ１）を受けるために作られる。
くぼみ９１ａは下流に伸び、本体内で流体通過用の円筒状の軸性の導路９１ｂにつながる。ここで導路９１ｂの内径は３．５ｍｍであり、長さは８〜９ｍｍである。
相対的な寸法を考慮して、導路９１ｂは、流体の一時的な保持および蓄積用のチャンバを形成し、その結果、フローを遅くすることができる。その後、流体は、導路９１ｂと比較して非常に小さな直径（０．１５〜０．２５ｍｍ）を有する軸性の通路９１ｃを通り、次いでノズル１０（その長さは好ましくは０．３〜２．４ｍｍである）を通って、下方へ、そして処理される皮膚領域の方へ連続的に外部へと放出される。
導路９１ｂでは、ソレノイドバルブ７を経た流体の流れは少なくとも部分的に液体である。この理由としては、拡張がまだ単に部分的で、導路の壁に対するソレノイドバルブ７から放出され、噴霧された流体の流れの衝撃に起因する乱流にさらされるためである。この乱流型により、また、流体のフローを遅らせるのに有用である。
【００４５】
本発明中のノズルの別の変形態様は図５に関連して図４Ｂによって図示される。くぼみ９２ａは、くぼみ９１ａのように、厚さがこのくぼみの深さに実質的に相当する、環状のシール（図５中のＪ１、Ｊ２）を受けるために作られる。
しかしながら、図４Ａの導路９１ｂと異なり、軸性の導路９２ｂは上流の入り口直径２〜３ｍｍで、長さ３〜５ｍｍの円錐形である。
導路９２ｂは、非常に小さな直径（０．１５〜０．２５ｍｍ）および非常に短い長さ（０．３〜２．４ｍｍ、好ましくは０．５ｍｍ）を有する軸性の通路９２ｃへと伸びる。通路９２ｃは、下流側の外部である、共軸のくぼみ９２ｄの内部中心へ続いている。くぼみ９２ｄは上部のくぼみ９２ａと同一形状であり、また同一の環状のシールを受けるために作られる（図５を参照）。
図４ｃは、本発明のさらに別の変形態様であるノズル９を示す。このノズル９では、内部の軸性の導路９３ｂは円錐台状で、上流部の入り口直径２．０〜３．０ｍｍ、およびより下流側部分の内径１．０〜２．０ｍｍを有している。導路９３ｂは、図４Ｂの通路９２ｃと同一の形状を有する通路９３ｃを経て、より下流のくぼみ９３ｄへ続いている。
【００４６】
ソレノイドバルブ７のよりよい熱遮断力を保証するために、特に、ノズル９の下流に直ちに入る流体の低温に関して、時間的遅延を提供する電子的または機械的なシステムを保証するために、本発明では、極低熱伝導率を有してまたは有さない疎水性材料、例えば、ＰＴＦＥ、ＰＦＡ、ＰＯＭ、またはＰＯＭおよびＰＴＦＥの混合物でノズルの本体を形成してもよい。すなわち、これらの材料は、吸収によっても吸着によっても水滴を保持せず、その結果、ノズルが氷衣する（icing）リスクを除去する。
さらに、これらの材料が熱的に絶縁しているので、電子的または機械的にかかわらず、誤動作を回避して、時間調節システムを保護できる。
好ましくは、ノズル本体は、疎水性で熱的に非伝導性のプラスチックの成型物により形成されてもよい。
【００４７】
図５は、図４Ｂに示されるような２つの本体９２を一連に組み立て、接続することにより作られた本発明のノズルの一変形態様を示す。
しかしながら、本発明の範囲から外れることなく、異なる寸法および外形の２つの本体、特に図４Ａから４Ｃによって図示された変形態様による組立て品および流体の接続を提供することが可能である。
２つの本体９２の各々は、図４Ｂに図示されるように、円筒状で、円形の上流のくぼみ９２ａを有している。くぼみ９２ａは、図４Ａのくぼみ９１ａと同じ形状であり、少なくとも１つの環状のシールＪ１、Ｊ２が収容される。
２つの本体９２の直径は、図４Ａの中の本体９１のように約１２ｍｍであり、それぞれの高さは４．５〜５．５ｍｍである。
２つの本体９２は、ケーシング１２の上流の区画１２ａの内部で継ぎ目Ｊ（上部のＪ１および中間のＪ２のそれぞれ）を覆うように積み重ねられ、共軸で互いに対して組み立てられ、ケーシング１２の寸法はこの目的のための設計されている。
ノズル９の少なくとも２つの本体９２における、連続した導路９２ｂ、９２ｃは、ソレノイドバルブ７から下流に向かって低温流体のフローを制限し、および／または遅らせて、それと同時に、突然の過度の拡張（皮膚適用領域上に氷衣および低温をもたらす）を回避する。
好ましい実施態様によれば、導路９２ｃの直径は０．１７ｍｍ以上であり、高さは０．５〜０．９ｍｍ、好ましくは０．５ｍｍである。
【００４８】
好ましくは、ケーシング１２はハウジング１（図１および図３）と一体型で作られ、より下の部分に作られた下流の区画１２ｂを介して、コリメーターを形成する末端部（チップ）１１と通じるノズル１０に接続される。
【００４９】
図３および図５は、ノズル１０およびチップ１１を、ノズル９のケーシング１２へ接続する方法を示す。
一変形態様によると、解放可能な接続（例えば差し込み式による）を提供することができ、および／またはケーシング１２上のノズル１０の高さが調整可能（例えばねじ方式による）であってもよく、それにより、チップの位置を調節し、処理される目標領域に対する低温流体の濃度を調節することができる。
【００５０】
図３に示される変形態様では、末端部１１は、皮膚領域上に流体を集中して適用するための中央の開口１１ａを有する穿孔されたシェルとして設計されている。
このシェルの外側壁は穿孔され、また、シェルの辺縁部は、ノズル１０の下流部分の辺縁の端にわたって折り曲げられている。
本発明は、処理方法を実施するための以下の実施例により、さらに詳細に述べられるだろう。
【実施例】
【００５１】
［細胞選択的なクライオジェニック処理による本発明の美容処理方法の実施例］
研究は上述する装置を立証するために行なわれた。研究では、手の甲にダークスポットを有する被験者に対して低温ガス１５２Ａを適用した。研究は４人の被験者（２人の男性および２人の女性：ＪＭＰＡＴ、ＣＤＥＮ、ＡＭＡＨ、およびＹＰＨＩＬ）を含み、それぞれ５０歳、５７歳、５９歳および５５歳であった。低温ガスの適用期間は３秒と定められた。
被験者は次の特徴を有していた：
−  ＪＭＰＡＴ：右手の人差し指の近くに、非常に目立つダークスポットの存在。
−  ＣＤＥＮ：右手の人差し指と小指の間に、目立つダークスポットの存在。
−  ＡＭＡＨ：右手上に、２つの大きなダークスポットの存在。
−  ＹＰＨＩＬ：右手上に、ほとんど触れそうな２つのダークスポットの存在。
実験結果によると、本装置では、１つのスポット当たり３秒間スプレーを１度行った後に、ダークスポットを除去をすることが示された。すなわち、処理されたダークスポットは、１回処理した２〜３週間後にすべての被験者で全体的に消えた。研究において登録された被験者のうちの何人かは、彼らの手の甲にある他の同類のダークスポットについて、皮膚科医によって既に処理を行っていた。皮膚科医の処理は、窒素またはジメチルエーテルによる従来の寒冷療法の適用であった。
被験者は皮膚科医による処理中には鋭痛を感じたが、皮膚科医による処理とは異なり、本発明中の装置により低温冷気を皮膚表面へ適用した場合は、痛みを引き起こさなかった。さらに、瘢痕の形成または低色素沈着へ結びつき得る主な炎症および組織破壊が存在しない点は注目される。
これらの観察は、装置が、実際に低温細胞選択による美容的な効果を提供することを立証する。一方で、窒素またはジメチルエーテルを用いた従来の寒冷療法では、皮膚科医の医療管理の下で実行されたが、本発明のような結果を提供しなかった。低温細胞選択的な作用を発揮できる本装置は、組織がすべて壊死することによる破壊、または角化細胞の破壊を引き起こさないため、皮膚科医の診療所で行なわれるような窒素を用いた従来の寒冷療法で観察された現象（炎症、激痛、瘢痕化、低色素沈着）を引き起こさない。
【００５２】
ジフルオロエタンのカートリッジを含む細長い散布器を図１に示したが、皮膚の特定の領域に適用する（焦点を合わせる）ことが可能であり、あらかじめセットされた、または調整可能な時間調節制御手段を装備している、−２０℃〜−６５℃の沸点および１〜５００ＫＪ／ｋｇの間の蒸発潜熱を有する低温流体の任意の散布装置が、本発明に該当するであろう。
【００５３】
上述したように、本発明は、角化細胞ではなくメラノサイトに対して低温細胞選択的な作用を得るための、皮膚組織の美容処理のための方法を提供する。既に述べたように、低温細胞選択的な作用または低温細胞選択性とは、少なくとも１つの他の細胞または他の細胞集団に作用することなく、ある組織の細胞集団に対して作用する選択作用を指す。
本発明は他の組織中で他のタイプの細胞集団に適用しうる。細胞集団との用語は、その最も広い意味に理解され、すなわち同じ特性を有している細胞の集合であり、例えば、すべての起源、原核生物または真核生物の、ヒト、動物または植物の細胞種、細胞系統、幹細胞が該当する。
さらに、本発明の方法は、さらに細胞の構成要素に適用されてもよく、すなわち、細胞小器官に適用されてもよく、例えば、メラノソーム、核小体、核、リボソーム、小胞、小胞体、ゴルジ、細胞骨格、ミトコンドリア、液胞、細胞質ゾル、リソソーム、中心体および原形質膜を含み、これらに限定されない。
上述される本発明の方法は、ある細胞集団、構造または標的生物のために有害な温度範囲を決定できる一方で、その範囲において、別の集団または周囲の組織が、顕著な形、または許容できない形で影響されないのであれば、同様に適用することが可能である。
【図１】
2018505760.tif 000003
【図２】
2018505760.tif 000004
【図３】
2018505760.tif 000005
【図４Ａ】
2018505760.tif 000006
【図４Ｂ】
2018505760.tif 000007
【図４Ｃ】
2018505760.tif 000008
【図５】
2018505760.tif 000009
【国際調査報告】
2018505760.tif 000010
2018505760.tif 000011
2018505760.tif 000012
2018505760.tif 000013
2018505760.tif 000014
2018505760.tif 000015
2018505760.tif 000016
2018505760.tif 000017
2018505760.tif 000018
2018505760.tif 000019