(57)【要約】  本発明は、概して、生体分子を標識するために使用可能なクマリン系化合物、並びに、関連する合成方法及び試験方法に関する。該クマリン系化合物は、典型的には、核酸の自動合成に必要な条件にて、実質的な程度の分解又は変質を受けることなく残存し続ける。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造の化合物。
【化１】
2018505141.tif 000170
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【請求項２】
ｍは、０、１、２又は３であり、ｎは、１又は２であり、ｍは、１又は２であり、ｐは、０、１、２又は３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ３は、−Ｈ又は（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４は、−Ｈである、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５又は６員炭素環又は複素環を形成する、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
クマリン成分を含むオリゴヌクレオチドプローブを作製する方法であって、
１）固相合成法を用いてクマリン成分含有プローブを合成するステップであって、少なくとも１つのクマリン成分含有ヌクレオシド三リン酸をプローブに取り入れることを含む、ステップと、
２）２時間〜８時間の間に、濃アンモニア中にて５０℃〜７０℃の温度で前記プローブを固体支持体から取り去るステップと、
３）前記プローブを単離するステップであって、単離された前記プローブのクマリン成分が５．０％未満の程度にまで分解されている、ステップと
を含む、方法。
【請求項７】
前記クマリン成分含有ヌクレオシド三リン酸の前記クマリン成分は、以下の構造である、請求項６に記載の方法。
【化２】
2018505141.tif 000171
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
「リンカー」は、前記化合物のクマリン部位を前記化合物のヌクレオシド又はヌクレオシド三リン酸部位と接続する成分であり、
「ヌクレオシド三リン酸」とは、３つのリン酸に結合されたヌクレオシドをいう。
【請求項８】
前記単離されたプローブの前記クマリン成分は、２．５％未満の程度にまで分解されている、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記クマリン成分含有ヌクレオシド三リン酸の前記クマリン成分は、以下の構造である、請求項７に記載の方法。
【化３】
2018505141.tif 000172
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
「リンカー」は、前記化合物のクマリン部位と前記化合物のヌクレオシド又はヌクレオシド三リン酸部位とを接続する成分であり、
「ヌクレオシド三リン酸」とは、３つのリン酸に結合されたヌクレオシドをいう。
【請求項１０】
前記クマリン成分含有ヌクレオシド三リン酸の前記クマリン成分は、以下の構造である、請求項７に記載の方法。
【化４】
2018505141.tif 000173
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
「リンカー」は、前記化合物のクマリン部位を前記化合物のヌクレオシド又はヌクレオシド三リン酸部位と接続する成分であり、
「ヌクレオシド三リン酸」とは、３つのリン酸に結合されたヌクレオシドをいう。
【請求項１１】
前記クマリン成分含有ヌクレオシド三リン酸の前記クマリン成分は、以下の構造である、請求項７に記載の方法。
【化５】
2018505141.tif 000174
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈであり、
「リンカー」は、前記化合物のクマリン部位を前記化合物のヌクレオシド又はヌクレオシド三リン酸部位と接続する成分であり、
「ヌクレオシド三リン酸」とは、３つのリン酸に結合されたヌクレオシドをいう。
【請求項１２】
核酸標的配列を検出する方法であって、
（ａ）核酸標的配列を検出用核酸と接触させるステップであって、前記検出用核酸が少なくとも１０個のヌクレオチドを含み、前記ヌクレオチドの少なくとも１つがクマリン系蛍光物質に連結されており、前記ヌクレオチドの前記少なくとも１つが消光物質に連結されている、ステップと、
（ｂ）前記検出用核酸を前記核酸標的配列にハイブリダイズさせるステップであって、それによって前記検出用核酸の立体配座を変質させて、蛍光パラメータの変化を生じさせる、ステップと、
（ｃ）前記蛍光パラメータの前記変化を検出するステップであって、それによって前記核酸標的配列を検出するステップと
を含む、方法。
【請求項１３】
前記クマリン系蛍光物質は、以下の構造である、請求項１２に記載の方法。
【化６】
2018505141.tif 000175
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成する。
【請求項１４】
前記クマリン系蛍光物質は、以下の構造である、請求項１３に記載の方法。
【化７】
2018505141.tif 000176
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３である。
【請求項１５】
前記クマリン系蛍光物質は、以下の構造である、請求項１３に記載の方法。
【化８】
2018505141.tif 000177
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成する。
【請求項１６】
前記クマリン系蛍光物質は、以下の構造である、請求項１３に記載の方法。
【化９】
2018505141.tif 000178
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、生体分子を標識するために使用可能なクマリン系化合物、並びに、関連する合成方法及び試験方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
研究者達は、オリゴヌクレオチドを標識するためのクマリンの使用についての研究を続けている。研究者達は、そのような化合物の合成操作に関連する本質的な困難について、以下のように指摘している：「クマリン色素は、明るく発光する有機発蛍光物質を表すが、ＤＮＡ開裂および脱保護の間の典型的な強い塩基性条件下において安定ではない。そのため、これらの標識は、従来のホスホロアミダイト化学を用いてオリゴヌクレオチドに組み込むことができない。」 Berndl, S. et al. “Comparison of a Nucleosidic vs Non-Nucleosidic Postsynthetic ‘Click’ Modification of DNA with Base-Labile Fluorescent Probes（塩基不安定蛍光プローブを用いたDNAの合成後「クリック」修飾における、ヌクレオシド修飾と非ヌクレオシド修飾との比較）” Bioconjugate Chem. 2009, 20, 558-564.
【０００３】
クマリンは、「クリックケミストリー」及び活性化エステル化学を用いて、オリゴヌクレオチドに合成後に共役されている。対応するクマリンホスホロアミダイトを用いてクマリンをオリゴヌクレオチドに組み込んでいる例は、ほとんどない。例えば、ＵＳ２００４１９１７９６は、以下に示すような単独のクマリンホスホロアミダイト（構造１）について論述している：
【化１】
2018505141.tif 000002
【０００４】
ＷＯ１９９６０２８４３８は、いくつかのクマリンホスホロアミダイト（構造２〜５）について論述している。全ての場合において、ホスホロアミダイト部位は、クマリン芳香族環に付着している。対応するオリゴヌクレオチドの脱保護には、高温アンモニアが使用されている。
【化２】
2018505141.tif 000003
【化３】
2018505141.tif 000004
【化４】
2018505141.tif 000005
【化５】
2018505141.tif 000006
【０００５】
ＥＰ１８４２９２３は、色素標識されたヌクレオチド誘導体に関する。この参考文献は、メタンスルホニルアミノインドールを介してホスホロアミダイトに連結されたクマリンについて論述している。この試薬から調製されたオリゴヌクレオチドは、アンモニアを用いて室温で２時間脱保護された。この化合物である構造６は、RocheよりCyan 500として販売されている。
【化６】
2018505141.tif 000007
【０００６】
Kobertzらは、ソラレン系リボースホスホロアミダイト（構造７）について報告している（J. Am. Chem. Soc., 1997, 119 (25), pp 5960-5961）。 この参考文献は、このような化合物をＰＡＣ保護されたホスホロアミダイトと共に用いたオリゴヌクレオチドの調製について論述している。生成物は開裂されて、ＥｔＯＨ中１０％ＤＢＵにより室温で２４時間脱保護された。
【化７】
2018505141.tif 000008
【０００７】
Braunsらは、クマリン−Ｃ−リボシドホスホロアミダイト（構造８）について報告している（J. Am. Chem. Soc., 1999, 121 (50), pp 11644-11649）。支持体からの対応するオリゴヌクレオチドの開裂および脱保護は、２５℃で１６時間、濃ＮＨ４ＯＨで処理することによって達成された。
【化８】
2018505141.tif 000009
【０００８】
Ivanaらは、単独のクマリンホスホロアミダイト（構造９）について報告している（Collect. Czech. Chem. Commun. 2007, 72, 996-1004）。この参考文献は、ＤＮＡ合成の例について何ら論述していない。
【化９】
2018505141.tif 000010
【０００９】
Goguenらは、ホスホアミノ酸の調製における中間体としてのクマリンホスホロアミダイト（構造１０）の調製について報告している（J. Am. Chem. Soc., 2011, 133 (29), pp 11038-11041）。
【化１０】
2018505141.tif 000011
【００１０】
Mengeらは、核酸塩基を介してヌクレオチドホスホロアミダイトに連結されたクマリン（構造１１）の調製について報告している（Org. Lett., 2011, 13 (17), pp 4620-4623）。ホスホロアミダイトを用いて合成された対応するオリゴヌクレオチドは、室温でアンモニアを用いて開裂及び脱保護された。
【化１１】
2018505141.tif 000012
【００１１】
Sunらは、クリック共役におけるアルキン修飾クマリンホスホロアミダイト（構造１２）の使用について報告している（Bioconj. Chem. 2013, 24(7):1226-34）。
【化１２】
2018505141.tif 000013
【発明の概要】
【００１２】
ある態様では、本発明は、構造１４の化合物を提供する。
【化１３】
2018505141.tif 000014
整数ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０である。整数ｎは、０、１、２又は３である。整数ｏは、０、１、２又は３である。整数ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０である。
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００１３】
他の態様では、本発明は、以下の化合物を提供する。
【００１４】
以下の構造の化合物：
【化１４】
2018505141.tif 000015
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００１５】
ｍは、０、１、２又は３であり、ｎは、１又は２であり、ｏは、１又は２であり、ｐは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００１６】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００１７】
Ｘは、−ＮＨ２、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６である、上述の化合物。
【００１８】
以下の構造の化合物：
【化１５】
2018505141.tif 000016
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００１９】
ｍは、０、１、２又は３であり、ｎは、１又は２であり、ｏは、１又は２であり、ｐは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００２０】
Ｒ７及びＲ８は、−Ｈ又は（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される、上述の化合物。
【００２１】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００２２】
Ｘは、−ＮＨ２、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６である、上述の化合物。
【００２３】
以下の構造の化合物：
【化１６】
2018505141.tif 000017
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【００２４】
ｍは、０、１、２又は３であり、ｎは、１又は２であり、ｏは、１又は２であり、ｐは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００２５】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００２６】
Ｒ２４及びＲ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００２７】
以下の構造の化合物：
【化１７】
2018505141.tif 000018
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００２８】
ｍは、０、１、２又は３であり、ｎは、１又は２であり、ｏは、１又は２であり、ｐは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００２９】
Ｒ３は、−Ｈ又は（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００３０】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００３１】
以下の構造の化合物：
【化１８】
2018505141.tif 000019
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
ＥＷＧは、電子求引基である。
【００３２】
ｍは、０、１、２又は３であり、ｎは、１又は２であり、ｏは、１又は２であり、ｐは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００３３】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００３４】
以下の構造の化合物：
【化１９】
2018505141.tif 000020
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９及びＲ２０は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００３５】
ｍは、０、１、２又は３であり、ｎは、１又は２であり、ｏは、１又は２であり、ｐは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００３６】
Ｒ７及びＲ８は、−Ｈ及び（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される、上述の化合物。
【００３７】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００３８】
以下の構造の化合物：
【化２０】
2018505141.tif 000021
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【００３９】
ｍは、０、１、２又は３であり、ｎは、１又は２であり、ｏは、１又は２であり、ｐは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００４０】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００４１】
Ｒ２４及びＲ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００４２】
以下の構造の化合物：
【化２１】
2018505141.tif 000022
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して４、５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００４３】
ｍは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００４４】
Ｒ３は、−Ｈ又は（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００４５】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００４６】
以下の構造の化合物：
【化２２】
2018505141.tif 000023
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００４７】
ｍは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００４８】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００４９】
以下の構造の化合物：
【化２３】
2018505141.tif 000024
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００５０】
ｍは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００５１】
Ｒ７及びＲ８は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００５２】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００５３】
以下の構造の化合物：
【化２４】
2018505141.tif 000025
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【００５４】
Ｒ２４及びＲ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００５５】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００５６】
以下の構造の化合物：
【化２５】
2018505141.tif 000026
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ９は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００５７】
ｍは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００５８】
Ｒ３は、−Ｈ又は（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００５９】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００６０】
以下の構造の化合物：
【化２６】
2018505141.tif 000027
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ９は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ及びＣＨ３であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００６１】
ｍは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００６２】
Ｒ９は、−Ｈ又は−ＣＨ３である、上述の化合物。
【００６３】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００６４】
以下の構造の化合物：
【化２７】
2018505141.tif 000028
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｒ９は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００６５】
ｍは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００６６】
Ｒ９は、−Ｈ又は−ＣＨ３である、上述の化合物。
【００６７】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００６８】
以下の構造の化合物：
【化２８】
2018505141.tif 000029
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ９は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【００６９】
ｍは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００７０】
Ｒ９は、−Ｈ又は−ＣＨ３である、上述の化合物。
【００７１】
Ｒ２４及びＲ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００７２】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００７３】
以下の構造の化合物：
【化２９】
2018505141.tif 000030
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【００７４】
ｍは、０、１、２又は３である、上述の化合物。
【００７５】
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルである、上述の化合物。
【００７６】
Ｘは、−ＯＨ、−ＯＲ１１又は−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５である、上述の化合物。
【００７７】
以下の構造の化合物：
【化３０】
2018505141.tif 000031
ここで、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成する。
【００７８】
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３である、上述の化合物。
【００７９】
Ｒ３は、−Ｈ又は−ＣＨ３である、上述の化合物。
【００８０】
Ｒ４は、−Ｈである、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成する、上述の化合物。
【００８１】
Ｒ５は、−ＮＲ７Ｒ８である、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成する、上述の化合物。
【００８２】
Ｒ６は、−Ｈである、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成する、上述の化合物。
【００８３】
以下の構造の化合物：
【化３１】
2018505141.tif 000032
ここで、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成する。
【００８４】
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３である、上述の化合物。
【００８５】
Ｒ４は、−Ｈである、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成する、上述の化合物。
【００８６】
Ｒ５は、−ＮＲ７Ｒ８である、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成する、上述の化合物。
【００８７】
Ｒ６は、−Ｈである、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成する、上述の化合物。
【００８８】
クマリン成分を含むオリゴヌクレオチドプローブを作製する方法であって、以下のステップを含む、方法。
１）固相合成法を用いてオリゴヌクレオチドを合成するステップであって、それによって固体支持体結合オリゴヌクレオチドを提供する、ステップ。
２）前記固体支持体結合オリゴヌクレオチドを、ホスホロアミダイト成分を含むクマリン化合物と反応させるステップであって、それによってクマリン成分を含む固体支持体結合オリゴヌクレオチドプローブを提供するステップ。
３）２時間〜８時間の間に、濃アンモニア中にて５０℃〜７０℃の温度で前記プローブを固体支持体から取り去るステップ。
４）前記プローブを単離するステップであって、単離された前記プローブのクマリン成分が５．０％未満の程度にまで分解されている、ステップ。
【００８９】
前記単離されたプローブの前記クマリン成分は、２．５％未満の程度にまで分解されている、上述の方法。
【００９０】
前記ホスホロアミダイト成分を含むクマリン化合物は、以下の構造のものである、上述の方法：
【化３２】
2018505141.tif 000033
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
ｎは、１、２又は３であり、
ｏは、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−Ｏ−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ又は（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＰ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ（ここで、ａは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）であり、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００９１】
前記ホスホロアミダイト成分を含むクマリン化合物は、以下の構造のものである、上述の方法：
【化３３】
2018505141.tif 000034
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
ｎは、１、２又は３であり、
ｏは、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
Ｘは、−Ｏ−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ又は（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＰ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ（ここで、ａは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）であり、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００９２】
前記ホスホロアミダイト成分を含むクマリン化合物は、以下の構造のものである、上述の方法：
【化３４】
2018505141.tif 000035
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
ｎは、１、２又は３であり、
ｏは、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
Ｘは、−Ｏ−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ又は（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＰ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ（ここで、ａは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）であり、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【００９３】
前記ホスホロアミダイト成分を含むクマリン化合物は、以下の構造のものである、上述の方法：
【化３５】
2018505141.tif 000036
ここで、
ｍは、１、２、３、４又は５であり、
ｎは、１、２又は３であり、
ｏは、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
Ｘは、−Ｏ−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ又は（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＰ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ（ここで、ａは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）であり、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【００９４】
以下の構造のクマリン−ＣＰＧ化合物：
【化３６】
2018505141.tif 000037
ここで、前記クマリン成分は、以下の構造のものである：
【化３７】
2018505141.tif 000038
Ｒ１は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、ラジカル、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、ラジカル、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
前記クマリン成分は、Ｒ１又はＲ２のいずれかを介して前記クマリン−ＣＰＧ化合物に付着しており、
Ｚは、（ＣＨ２）ｘであり、ここで、ｘは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
リンカー１は、ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｙＯ（ＣＨ２）ｚ（ＣＯ）、ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｙＯ（ＣＨ２）ｚ（ＣＯ）から選択され、ここで、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、ｚは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
リンカー２は、ＮＨ（ＣＨ２）ａ及びＯ（ＣＨ２）ａから選択され、ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０である。
【００９５】
前記クマリン成分が以下の構造である、上述のクマリン−ＣＰＧ化合物：
【化３８】
2018505141.tif 000039
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３又はＣＨ（ＣＨ３）２である。
【００９６】
前記クマリン成分が以下の構造である、上述のクマリン−ＣＰＧ化合物：
【化３９】
2018505141.tif 000040
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ９は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３又はＣＨ（ＣＨ３）２である。
【００９７】
前記クマリン成分が以下の構造である、上述のクマリン−ＣＰＧ化合物：
【化４０】
2018505141.tif 000041
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３又はＣＨ（ＣＨ３）２である。
【００９８】
前記クマリン成分が以下の構造である、上述のクマリン−ＣＰＧ化合物：
【化４１】
2018505141.tif 000042
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒ９は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３又はＣＨ（ＣＨ３）２であり、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【００９９】
クマリン−ＣＰＧ化合物を作製する方法であって、以下のステップを含む方法。
ａ）以下の構造の第１クマリン系化合物を調製するステップ。
【化４２】
2018505141.tif 000043
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
ＬＧは、脱離基であり、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成する。
ｂ）前記第１クマリン系化合物を、以下の構造のアミンと反応させるステップであって、
【化４３】
2018505141.tif 000044
ここで、
Ｚは、（ＣＨ２）ｘであり、ここで、ｘは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ａは、（ＣＨ２）ｙであり、ここで、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
それによって、以下の構造の第２クマリン系化合物を提供する、ステップ。
【化４４】
2018505141.tif 000045
ｃ）前記第２クマリン系化合物を、以下の構造の第１リンカー基と反応させるステップ。
【化４５】
2018505141.tif 000046
ここで、
ＬＧは、第１脱離基であり、ＬＧ２は、第２脱離基であり、Ｄは、（ＣＨ２）ｘ（ｘは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）であり、Ｅは、（ＣＨ２）ｙ（ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）であり、
それによって、以下の構造の第３クマリン系化合物を提供する、ステップ。
【化４６】
2018505141.tif 000047
ｄ）前記第３クマリン系化合物を、求核剤で修飾されたＣＰＧと反応させるステップであって、
【化４７】
2018505141.tif 000048
それによって、クマリン−ＣＰＧ化合物を提供する、ステップ。
【０１００】
前記第１クマリン系化合物が以下の構造である、上述のクマリン−ＣＰＧ化合物を作製する方法。
【化４８】
2018505141.tif 000049
ＬＧは、脱離基であり、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３である。
【０１０１】
前記第１クマリン系化合物が以下の構造である、上述のクマリン−ＣＰＧ化合物を作製する方法。
【化４９】
2018505141.tif 000050
ＬＧは、脱離基であり、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択される、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環を形成する。
【０１０２】
前記第１クマリン系化合物が以下の構造である、上述のクマリン−ＣＰＧ化合物を作製する方法。
【化５０】
2018505141.tif 000051
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ＬＧは、脱離基であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【発明を実施するための形態】
【０１０３】
他に明記されない限り、本明細書及び特許請求の範囲にて使用される以下の用語は、以下に示す意味を有する。
【０１０４】
定義
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、一般に、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。全般的に、本明細書中で使用される命名法及び以下に記載される細胞培養、分子遺伝学、有機化学及び核酸化学及びハイブリダイゼーションにおける実験手順は、当技術分野において周知かつ一般的に使用されるものである。核酸及びペプチド合成には、標準技術が使用される。全般的に、酵素反応及び精製ステップは、製造業者の仕様書に従って実施される。本明細書全体を通じて提供される技術及び手順は、全般的に、当技術分野における従来の方法及び様々な一般的な参考書に従って行われる（全般的に、Sambrook et al. MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, 2d ed.
(1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.を参照のこと。これらの文献は、参照により本明細書に組み込まれる）。本明細書で使用される命名法及び分析化学における実験室手順、並びに以下に記載される合成有機化学は、当技術分野で周知で一般的に使用されているものである。化学合成及び化学分析には、標準的な技術又はその改変が使用される。
【０１０５】
本明細書にて使用される場合、「分析物」は、診断試験が実施される任意の化合物又は分子を意味する。分析物は、例えば、タンパク質、ペプチド、炭水化物、多糖類、糖タンパク質、ホルモン、受容体、抗原、抗体、ウイルス、基質、代謝産物、遷移状態類縁体、補助因子、阻害物質、薬物、色素、栄養素、成長因子等であり得るが、これらに限定されない。
【０１０６】
本明細書にて使用される場合、「エネルギー移動」は、励起基の励起状態エネルギーが、消光物質のような修飾基によって変更されるプロセスをいう。励起状態のエネルギー修飾基が消光基である場合には、蛍光基からの蛍光発光が減光（消光）させられる。エネルギー移動は、蛍光共鳴エネルギー移動又は直接エネルギー移動を介して起こり得る。これらの２つの場合における正確なエネルギー移動機構は、異なっている。本出願においてエネルギー移動について何らかの言及をする場合には、これらの機構的に異なる現象の全てが包含されることについて理解されるべきである。
【０１０７】
本明細書にて使用される場合、「エネルギー移動対」は、エネルギー移動に関与する任意の２つの分子をいう。典型的には、一方の分子は蛍光基として作用し、他方の分子は蛍光修飾基として作用する。本発明の好ましいエネルギー移動対は、本発明の蛍光基及び消光基を含む。この適用において、エネルギー移動対の個々の要素が同一であることについては、制限されない。必要とされるのは、個々の要素間の距離がある臨界量だけ変化した場合に、エネルギー移動対の全体としての分光的性質が測定可能なように変化することのみである。「エネルギー移動対」は、エネルギー移動が起こる複合体を形成する分子の群を示すために使用される。このような複合体は、例えば、互いに異なっていてもよい２つの蛍光基と１つの消光基、２つの消光基と１つの蛍光基、又は、複数の蛍光基と複数の消光基を含み得る。複数の蛍光基及び／又は複数の消光基がある場合には、個々の基は互いに異なっていてもよい。
【０１０８】
本明細書にて使用される場合、「蛍光修飾基」は、蛍光基からの蛍光発光を何らかの形で変化させることができる本発明の分子をいう。蛍光修飾基は、全般的に、エネルギー移動機構によってこのことを達成する。蛍光修飾基の独自性に応じて、蛍光発光は、減光、完全消光、増光、波長のシフト、極性のシフト及び蛍光寿命の変化を含むがこれらに限定されない多くの変更を受け得る。蛍光修飾基の一例としては、消光基が挙げられる。
【０１０９】
本明細書にて使用される場合、「消光基」は、蛍光基によって発光される光を少なくとも部分的に減光させ得る本発明の任意の蛍光修飾基をいう。この減光は、本明細書では「消光」と称される。したがって、消光基の存在下にて蛍光基に照射すると、発光シグナルは想定よりも強度が低下するか、完全に生じなくなる。消光は、典型的には、蛍光基と消光基との間のエネルギー移動を介して起こる。
【０１１０】
本明細書にて使用される場合、「核酸」は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、一本鎖、二本鎖又はより高度に凝集したハイブリダイゼーションモチーフ、及びその任意の化学修飾を意味する。修飾には、追加の電荷、分極率、水素結合、静電相互作用及び核酸リガンドベース又は核酸リガンドへの流動性を全体として導入する化学基を提供する修飾が含まれるが、これらに限定されない。このような修飾には、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、ホスホジエステル基修飾（例えば、ホスホロチオエート、メチルホスホネート）、２’位糖修飾、５位ピリミジン修飾、環外アミンにおける８位プリン修飾、４−チオウリジンの置換、５−ブロモ又は５−ヨード−ウラシルの置換、骨格修飾、メチル化や、イソ塩基、イソシチジン及びイソグアニジンのような異常塩基対形成の組み合わせ等が含まれるが、これらに限定されない。また、核酸には、例えば、ニトロインドールなどの非天然塩基も含まれ得る。また、修飾には、ＢＨＱ、フルオロフォア又は他の成分によるキャッピングのような３’及び５’修飾も含まれ得る。
【０１１１】
「ペプチド」は、モノマーがアミノ酸であってアミド結合を介して一緒に結合しているポリマーをいい、ポリペプチドとも称される。アミノ酸がα-アミノ酸である場合には、Ｌ−光学異性体又はＤ−光学異性体のいずれかが使用され得る。加えて、非天然アミノ酸、例えば、β−アラニン、フェニルグリシン及びホモアルギニンも含まれる。遺伝子にコードされていない一般的に遭遇するアミノ酸もまた、本発明において使用されてよい。本発明で使用される全てのアミノ酸は、Ｄ体またはＬ体のいずれであってもよい。全般的には、Ｌ体が好ましい。加えて、他のペプチド模倣体もまた、本発明において有用である。一般的な総説については、CHEMISTRY AND BIOCHEMISTRY OF AMINO ACIDS, PEPTIDES AND PROTEINS（アミノ酸、ペプチド及びタンパク質の化学および生化学）, B. Weinstein, eds., Marcel Dekker, New York, p. 267 (1983)中のSpatola, A. F.を参照のこと。
【０１１２】
「生物活性種」は、生体に投与された際に、その生体に影響を与える分子をいう。典型的な生物活性種には、医薬品、農薬、除草剤、成長調節剤等が含まれる。生物活性種には、小分子（すなわち、約１０００ダルトン未満）、オリゴマー、ポリマー等が包含される。また、核酸及びその類縁体、ペプチド及びその類縁体等も含まれる。
【０１１３】
本明細書では、用語「アルキル」は、分枝又は非分枝の、飽和又は不飽和の、一価及び二価の炭化水素基であって、全般的に約１〜３０個の炭素、好ましくは４〜２０個の炭素、より好ましくは６〜１８個の炭素を有するものを示すために使用される。アルキル基は、１〜６個の炭素原子を有する場合、「低級アルキル」と称される。好適なアルキル基には、例えば、１つ以上のメチレン基、メチン（methine）基及び／又はメチン（methyne）基を含む構造が含まれる。分枝鎖構造は、ｉ−プロピル、ｔ−ブチル、ｉ−ブチル、２−エチルプロピル等と同様の分枝モチーフを有する。本明細書にて使用される場合、該用語には、「置換アルキル」及び「環状アルキル」が包含される。用語（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルは、１〜８個の炭素原子を有するアルキルをいう。
【０１１４】
「置換アルキル」は、１つ以上の置換基を含む上記のアルキルをいい、該置換基としては、例えば、低級アルキル、アリール、アシル、ハロゲン（すなわち、アルキルハロ。例えば、ＣＦ３）、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシ、アルキルアミノ、アシルアミノ、チオアミド、アシルオキシ、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、メルカプト、チア、アザ、オキソ、飽和及び不飽和環状炭化水素の両方、複素環などが挙げられる。これらの基は、アルキル成分の任意の炭素又は置換基に付着していてもよい。加えて、これらの基は、アルキル鎖からぶら下がっていてもよく、アルキル鎖と一体となっていてもよい。
【０１１５】
本明細書では、用語「アリール」は、芳香族置換基を示すために使用される。芳香族置換基は、単一の芳香環であってもよく、共に縮合している、共有結合している又はジアゾ、メチレン若しくはエチレン部分のような共通基に連結している複数の芳香環であってもよい。一般的な連結基は、ベンゾフェノン中に含まれるようなカルボニルであってもよい。芳香族環には、とりわけフェニル、ナフチル、ビフェニル、ジフェニルメチル及びベンゾフェノンが含まれていてもよい。用語「アリール」には、「アリールアルキル」及び「置換アリール」が包含される。
【０１１６】
「置換アリール」は、１つ以上の置換基を含む上記のアリールをいい、該置換基としては、低級アルキル、アシル、ハロゲン、アルキルハロ（例えば、ＣＦ３）、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシ、アルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、フェノキシ、メルカプト、及び、芳香族環に縮合している、共有結合している又はジアゾ、メチレン若しくはエチレン部分のような共通基に連結している飽和及び不飽和環状炭化水素の両方が挙げられる。また、連結基は、シクロヘキシルフェニルケトンのようなカルボニルであってもよい。用語「置換アリール」には、「置換アリールアルキル」が包含される。
【０１１７】
本明細書では、用語「アリールアルキル」は、アリール基が本明細書で定義されるアルキル基によって別の基に付着している「アリール」のサブセットを示すために使用される。
【０１１８】
「置換アリールアルキル」は、置換アリール基が本明細書で定義されるアルキル基によって別の基に付着している「置換アリール」のサブセットを定義する。
【０１１９】
用語「アシル」は、ケトン置換基Ｃ（Ｏ）Ｒを記述するために使用される。ここで、Ｒは、本明細書で定義されるアルキル又は置換アルキル、アリール又は置換アリールである。
【０１２０】
本明細書では、用語「ハロゲン」は、フッ素、臭素、塩素及びヨウ素原子を示すために使用される。
【０１２１】
本明細書では、用語「ヒドロキシ」は、−ＯＨ基を示すために使用される。
【０１２２】
用語「アミノ」は−ＮＲＲ’に対して使用される。ここで、Ｒ及びＲ’は、独立してＨ、アルキル、アリール又はそれらの置換類縁体である。「アミノ」には、第二級及び第三級アミンを意味する「アルキルアミノ」並びにＲＣ（Ｏ）ＮＲ’基を記述する「アシルアミノ」が包含される。
【０１２３】
本明細書では、用語「アルコキシ」は、−ＯＲ基（ここで、Ｒは、アルキルである）又はその置換類縁体を示すために使用される。好適なアルコキシ基には、例えば、メトキシ、エトキシ、ｔ−ブトキシ等が含まれる。
【０１２４】
本明細書にて使用される場合、用語「アリールオキシ」は、酸素原子を介して別の基に直接連結される芳香族基を意味する。この用語には、「置換アリール」について上述したように、芳香族基が置換された「置換アリールオキシ」成分が包含される。例示的なアリールオキシ成分には、フェノキシ、置換フェノキシ、ベンジルオキシ、フェネチルオキシ等が含まれる。
【０１２５】
本明細書にて使用される場合、用語「アリールオキシアルキル」は、酸素原子を介して本明細書で定義されるアルキル基に付着した芳香族基を定義する。用語「アリールオキシアルキル」には、「置換アリール」について記述したように、芳香族基が置換された「置換アリールオキシアルキル」成分が包含される。
【０１２６】
本明細書にて使用される場合、用語「メルカプト」は、一般構造−Ｓ−Ｒの成分を定義する。ここで、Ｒは、本明細書で定義されるＨ、アルキル、アリール又は複素環である。
【０１２７】
用語「飽和環状炭化水素」は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル等のような基、及びこれらの構造の置換類縁体を意味する。これらの環状炭化水素は、単環構造又は多環構造であり得る。
【０１２８】
用語「不飽和環状炭化水素」は、シクロペンテン、シクロヘキセンのような少なくとも１つの二重結合を備えた一価の非芳香族基及びそれらの置換類縁体を記述するために使用される。これらの環状炭化水素は、単環構造又は多環構造であり得る。
【０１２９】
本明細書にて使用される場合、用語「ヘテロアリール」は、芳香族環の１つ以上の炭素原子が窒素、酸素又は硫黄のようなヘテロ原子によって置換されている芳香族環をいう。ヘテロアリールは、単独の芳香族環、複数の芳香族環又は１つ以上の非芳香族環に結合した１つ以上の芳香族環であり得る構造をいう。複数の環を有する構造では、これらの環は、共に縮合していてもよく、共有結合していてもよく、ジアゾ、メチレン若しくはエチレン部分のような共通基に連結していてもよい。共通連結基は、フェニルピリジルケトン中に含まれるようなカルボニルであってもよい。本明細書にて使用される場合、チオフェン、ピリジン、イソキサゾール、フタルイミド、ピラゾール、インドール、フランのような環又はこれらの環のベンゾ縮合類縁体は、用語「ヘテロアリール」によって定義される。
【０１３０】
「ヘテロアリールアルキル」は、本明細書で定義されるアルキル基がヘテロアリール基を別の基に連結する、「ヘテロアリール」のサブセットを定義する。
【０１３１】
「置換ヘテロアリール」は、ヘテロアリール核が１つ以上の官能基により置換された上記のヘテロアリールをいい、該官能基としては、低級アルキル、アシル、ハロゲン、アルキルハロ（例えば、ＣＦ３）、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシ、アルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、メルカプト等が挙げられる。したがって、チオフェン、ピリジン、イソオキサゾール、フタルイミド、ピラゾール、インドール、フランのような複素芳香環の置換類縁体又はこれらの環のベンゾ縮合類縁体は、用語「置換ヘテロアリール」によって定義される。
【０１３２】
「置換ヘテロアリールアルキル」は、本明細書で定義されるアルキル基がヘテロアリール基を別の基に連結する、上記のような「置換ヘテロアリール」のサブセットを示す。
【０１３３】
本明細書では、用語「複素環」は、１〜１２個の炭素原子及び環内の窒素、硫黄又は酸素から選択される１〜４個のヘテロ原子からなる単環又は複数の縮合環を有する１価の飽和又は不飽和非芳香族基を記述するために使用される。このような複素環としては、例えば、テトラヒドロフラン、モルホリン、ピペリジン、ピロリジン等が挙げられる。
【０１３４】
本明細書にて使用される場合、用語「置換複素環」は、複素環核が１つ以上の官能基により置換された上記の複素環をいい、該官能基としては、低級アルキル、アシル、ハロゲン、アルキルハロ（例えば、ＣＦ３）、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシ、アルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、メルカプト等が挙げられる。
【０１３５】
用語「複素環式アルキル」は、本明細書で定義されるアルキル基が複素環基を別の基に連結する、「複素環」のサブセットを定義する。
【０１３６】
化合物
ある態様では、本発明は、化合物に関する。
【０１３７】
ある一連の化合物は、以下の構造１３に示される： 
【化５１】
2018505141.tif 000052
ここで、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成する。
【０１３８】
別の一連の化合物は、以下の構造１４に示される： 
【化５２】
2018505141.tif 000053
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１３９】
別の一連の化合物は、以下の構造１５に示される： 
【化５３】
2018505141.tif 000054
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３である。
【０１４０】
別の一連の化合物は、以下の構造１６に示される： 
【化５４】
2018505141.tif 000055
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１４１】
別の一連の化合物は、以下の構造１７に示される： 
【化５５】
2018505141.tif 000056
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【０１４２】
別の一連の化合物は、以下の構造１８に示される： 
【化５６】
2018505141.tif 000057
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１４３】
別の一連の化合物は、以下の構造１９に示される： 
【化５７】
2018505141.tif 000058
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
ＥＷＧは、電子求引基である。
【０１４４】
別の一連の化合物は、以下の構造２０に示される： 
【化５８】
2018505141.tif 000059
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９及びＲ２０は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１４５】
別の一連の化合物は、以下の構造２１に示される： 
【化５９】
2018505141.tif 000060
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
ｎは、０、１、２又は３であり、
ｏは、０、１、２又は３であり、
ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【０１４６】
別の一連の化合物は、以下の構造２２に示される： 
【化６０】
2018505141.tif 000061
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して４、５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１４７】
別の一連の化合物は、以下の構造２３に示される： 
【化６１】
2018505141.tif 000062
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１４８】
別の一連の化合物は、以下の構造２４に示される： 
【化６２】
2018505141.tif 000063
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１４９】
別の一連の化合物は、以下の構造２５に示される： 
【化６３】
2018505141.tif 000064
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【０１５０】
別の一連の化合物は、以下の構造２６に示される： 
【化６４】
2018505141.tif 000065
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ９は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１５１】
別の一連の化合物は、以下の構造２７に示される： 
【化６５】
2018505141.tif 000066
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ９は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ及びＣＨ３であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１５２】
別の一連の化合物は、以下の構造２８に示される： 
【化６６】
2018505141.tif 000067
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｒ９は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１５３】
別の一連の化合物は、以下の構造２９に示される： 
【化６７】
2018505141.tif 000068
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ９は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２であり、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【０１５４】
別の一連の化合物は、以下の構造３０に示される： 
【化６８】
2018505141.tif 000069
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【０１５５】
別の一連の化合物は、以下の構造３１に示される： 
【化６９】
2018505141.tif 000070
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１５６】
別の一連の化合物は、以下の構造３２に示される： 
【化７０】
2018505141.tif 000071
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１５７】
別の一連の化合物は、以下の構造３３に示される： 
【化７１】
2018505141.tif 000072
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１５８】
別の一連の化合物は、以下の構造３４に示される： 
【化７２】
2018505141.tif 000073
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
破線は、任意の二重結合を表し、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【０１５９】
別の一連の化合物は、以下の構造３５に示される： 
【化７３】
2018505141.tif 000074
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１６０】
別の一連の化合物は、以下の構造３６に示される： 
【化７４】
2018505141.tif 000075
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１６１】
別の一連の化合物は、以下の構造３７に示される： 
【化７５】
2018505141.tif 000076
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択される、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成する。
【０１６２】
別の一連の化合物は、以下の構造３８に示される： 
【化７６】
2018505141.tif 000077
ここで、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ１は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｘは、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＲ１１、−ＮＨＲ１２、−ＮＲ１３Ｒ１４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１６、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１７、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２０Ｒ２１、−Ｎ３であり、
Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｒ１９、Ｒ２０及びＲ２１は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ａ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ（ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−Ｐ（ＮＲ２２Ｒ２３）ＯＣＨ２ＣＨ２−ＥＷＧ、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）−オリゴヌクレオチド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＣＣ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨ−［ヌクレオシド三リン酸］、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−ヌクレオシド、−（ＣＨ２）ｂＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｂ−［ヌクレオシド三リン酸］（ここで、ｂは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、
ＥＷＧは、電子求引基であり、
Ｒ２２及びＲ２３は、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２から独立して選択され、又は、Ｒ２２及びＲ２３は、共同して複素環を形成し、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈであり、
破線は、任意の二重結合を表す。
【０１６３】
別の一連の化合物は、以下の構造３９に示される： 
【化７７】
2018505141.tif 000078
ここで、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された４、５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
「リンカー」は、前記化合物のクマリン部位を前記化合物のヌクレオシド又はヌクレオシド三リン酸部位と接続する成分である。リンカーの非限定的な例は、−ＮＨＣＨ２ＣＣ−、−ＮＨ（ＣＨ２）ｂ−（ここで、ｂは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−ＮＨ（ＣＨ２）ｂＮＨ−（ここで、ｂは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−ＮＨＣＨＣＨ−、−ＮＨ（ＣＨ２）ｂ−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨＣＨ−（ここで、ｂは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）を含む。
【０１６４】
別の一連の化合物は、以下の構造４０に示される： 
【化７８】
2018505141.tif 000079
ここで、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された４、５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
「リンカー」は、前記化合物のクマリン部位を前記化合物のヌクレオシド又はヌクレオシド三リン酸部位と接続する成分である。リンカーの非限定的な例は、−ＮＨＣＨ２ＣＣ−、−ＮＨ（ＣＨ２）ｂ−（ここで、ｂは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−ＮＨ（ＣＨ２）ｂＮＨ−（ここで、ｂは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）、−ＮＨＣＨＣＨ−、−ＮＨ（ＣＨ２）ｂ−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨＣＨ−（ここで、ｂは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）を含む。
「ヌクレオシド三リン酸」とは、３つのリン酸に結合されたヌクレオシドをいう。
【０１６５】
別の一連の化合物は、以下の構造４１に示される： 
【化７９】
2018505141.tif 000080
ここで、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される。
【０１６６】
別の一連の化合物は、以下の構造４２に示される： 
【化８０】
2018505141.tif 000081
ここで、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される。
【０１６７】
別の一連の化合物は、以下の構造４３に示される： 
【化８１】
2018505141.tif 000082
ここで、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される。
【０１６８】
別の一連の化合物は、以下の構造４４に示される： 
【化８２】
2018505141.tif 000083
ここで、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される。
【０１６９】
別の一連の化合物は、以下の構造４５に示される： 
【化８３】
2018505141.tif 000084
ここで、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される。
【０１７０】
別の一連の化合物は、以下の構造４６に示される： 
【化８４】
2018505141.tif 000085
ここで、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される。
【０１７１】
別の一連の化合物は、以下の構造４７に示される： 
【化８５】
2018505141.tif 000086
ここで、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される。
【０１７２】
別の一連の化合物は、以下の構造４８に示される： 
【化８６】
2018505141.tif 000087
ここで、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択される。
【０１７３】
化合物の合成
Ａ．クマリン−３−カルボキサミド
式１０５のクマリン−３−カルボキサミドは、ピペリジンのような触媒存在下において、適切に置換された４−アミノ−２−ヒドロキシベンズアルデヒド１０１をマロン酸ジアルキル１０４及び適切に置換されたアミノアルコール１０３と反応させることによって調製される。式１０７のクマリン−３−カルボキサミドは、炭素環成分を含んでいるアミノアルコール１０６を使用することによって調製される。
【０１７４】
反応スキーム１
クマリン−３−カルボキサミドの調製
【化８７】
2018505141.tif 000088
【０１７５】
Ｂ．クマリン−３−アセトアミド
ＺｎＣｌ２、Ｈ２ＳＯ４又はＴＦＡのような適切な触媒の存在下において、適切に置換された３−アミノフェノール１０８をコハク酸アセチルジアルキル１０９と反応させることによって、クマリン−３−酢酸エステル１１０及びクマリン−３−酢酸１１１が生成される。クマリン−３−酢酸エステル１１０は、加水分解によってクマリン−３−酢酸１１１に変換される。
【０１７６】
反応スキーム２
クマリン−３−酢酸エステル及びクマリン−３−酢酸の調製
【化８８】
2018505141.tif 000089
【０１７７】
クマリン−３−アセトアミドは、クマリン−３−酢酸エステル１１０又はクマリン−３−酢酸１１１から出発して、複数の方法によって調製され得る。方法Ａでは、クマリン−３−酢酸エステル１１０を、炭素環成分を含んでいる適切に置換されたアミノアルコール１０３又はアミノアルコール１０６と直接反応させることによって、クマリン−３−アセトアミド１１２又は１１３が得られる。
【０１７８】
反応スキーム３
クマリン−３−アセトアミドの調製：方法Ａ
【化８９】
2018505141.tif 000090
【０１７９】
方法Ｂでは、クマリン−３−酢酸１１１を、ＮＨＳとＤＣＣ、ＥＤＣＩ、ＢＯＰのようなカップリング剤とを介して、又は、ＤＳＣ（炭酸ジコハク酸イミジル）のようなＮＨＳ部分を直接導入する試薬を用いて、ＮＨＳエステル１１４に変換する。ＮＨＳエステル１１４を、炭素環部分を含んでいる適切に置換されたアミノアルコール１０３又はアミノアルコール１０６と反応させることによって、クマリン−３−アセトアミド１１２又は１１３が得られる。
【０１８０】
反応スキーム４
クマリン−３−アセトアミドの調製：方法Ｂ
【化９０】
2018505141.tif 000091
【０１８１】
方法Ｃでは、クマリン−３−酢酸１１１を、ＤＣＣ、ＥＤＣＩ又はＢＯＰのようなカップリング剤を使用して、炭素環部分を含んでいる適切に置換されたアミノアルコール１０３又はアミノアルコール１０６と直接カップリングすることによって、クマリン−３−アセトアミド１１２又は１１３が得られる。
【０１８２】
反応スキーム５
クマリン−３−アセトアミドの調製：方法Ｃ
【化９１】
2018505141.tif 000092
【０１８３】
Ｃ．クマリン−３−（２−エタノール）
クマリン−３−（２−エタノール）１１５は、ＺｎＣｌ２、Ｈ２ＳＯ４又はＴＦＡのような適切な触媒の存在下において、適切な置換３−アミノフェノール１０８をα−アセチル−ブチロラクトンと反応させることによって調製される。この合成により、市販の試薬から一段階でホスホロアミダイト前駆体を容易に調製することが可能になる。
【０１８４】
反応スキーム６
クマリン−３−（２−エタノール）の調製
【化９２】
2018505141.tif 000093
【０１８５】
Ｄ．クマリンホスホロアミダイト
クマリン誘導体１０５，１０７，１１２，１１３又は１１５は、１Ｈ−テトラゾール又はエチルチオテトラゾールのような活性化剤の存在下において、３−（（ビス（ジイソプロピルアミノ）ホスフィノ）オキシ）プロパンニトリルと反応させることによって、クマリンホスホロアミダイトに変換される。
【０１８６】
反応スキーム７
クマリン−３−カルボキサミド及びクマリン−３−アセトアミド誘導体からのクマリンホスホロアミダイトの調製
【化９３】
2018505141.tif 000094
【化９４】
2018505141.tif 000095
【０１８７】
本発明により提供される別の一連の化合物は、プローブである。プローブには、例えば、標的種（例えば、受容体、酵素等）、標的種に対するリガンド（例えば、核酸、ペプチド等）、小分子（例えば、薬物、殺虫剤等）等が共役しているクマリン系蛍光物質（例えば、上記の構造１３〜４８）が含まれる。このプローブは、生体外（in vitro）及び生体内（in vivo）での用途に使用され得る。
【０１８８】
本発明の蛍光物質は、該蛍光物質を担体分子に付着させるために用いられる様々な合成条件下において、堅牢（robust）である。例えば、クマリン由来の蛍光物質の多くは、核酸の自動合成に必要な条件にて、実質的な程度の分解又は変質を受けることなく残存し続ける。これに対し、当該分野の多くで認識されるクマリン誘導体は、それらが結合しているキャリア分子を構築するために特別な条件を必要とするか、キャリア分子合成の完了後に付着される必要がある。プローブの合成がさらに複雑になると、合成の持続時間及びコストの両方が増加する。
【０１８９】
特定の場合において、本発明の蛍光物質が核酸の自動合成に含まれる場合、該蛍光物質の分解又は変化は、生成物の核酸の１０．０％未満である。他の場合には、該蛍光物質の分解又は変化は、生成物の核酸の５．０％未満、２．５％未満、１．０％未満又は０．５％未満である。
【０１９０】
本発明により提供される別の一連の化合物は、小分子プローブである。本発明のクマリン系蛍光物質は、小分子プローブの構成要素として使用することができる。好ましい設計では、小分子プローブは、本発明に係る蛍光物質又はそのような分子の前駆体と、消光物質とを含む。例示的な実施形態では、酵素のような試薬が、該小分子から消光物質、蛍光物質又はその両方を開裂して、調査中の系内に蛍光を生じさせる（例えば、Zlokarnik et al., Science 279: 84-88 (1998)を参照のこと）。
【０１９１】
本発明により提供される別の一連の化合物は、核酸プローブである。本発明のクマリン系蛍光物質は、核酸プローブとの共役において有用であり、例として５’−ヌクレアーゼアッセイ、鎖置換増幅（ＳＤＡ）、核酸配列ベース増幅（ＮＡＳＢＡ）、ローリングサークル増幅（ＲＣＡ）を含む様々なＤＮＡ増幅／定量化戦略における検出試薬の構成要素として使用可能であると共に、溶液相又は固相（例えば、アレイ）アッセイにおいて標的を直接検出することにも使用可能である。さらに、蛍光物質誘導核酸は、実質的に任意の様式のプローブで使用可能である。そのような様式には、例えば、分子ビーコン、Scorpionプローブ（商標）、Sunriseプローブ（商標）、立体配座支援プローブ、照光プローブ、インベーダー検出プローブ及びTaqManプローブ（商標）から選択される様式が含まれる。例として、以下を参照のこと：Cardullo, R., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85:8790-8794 (1988); Dexter, D. L., J. Chem. Physics, 21:836-850 (1953); Hochstrasser, R. A., et al., Biophysical Chemistry, 45:133-141 (1992); Selvin, P., Methods in Enzymology, 246:300-334 (1995); Steinberg, I., Ann. Rev. Biochem., 40:83-114 (1971); Stryer, L., Ann. Rev. Biochem., 47:819-846 (1978); Wang, G., et al., Tetrahedron Letters, 31:6493-6496 (1990); Wang, Y., et al., 元素分析：Chem., 67:1197-1203 (1995); Debouck, C., et al., Nature Genetics（補遺）, 21:48-50 (1999); Rehman, F. N., et al., Nucleic Acids Research, 27:649-655 (1999); Cooper, J. P., et al., Biochemistry, 29:9261-9268 (1990); Gibson, E. M., et al., Genome Methods, 6:995-1001 (1996); Hochstrasser, R. A., et al., Biophysical Chemistry, 45:133-141 (1992); Holland, P. M., et al., Proc Natl. Acad. Sci. USA, 88:7276-7289 (1991); Lee, L. G., et al., Nucleic Acids Rsch., 21:3761-3766 (1993); Livak, K. J., et al., PCR Methods and Applications, Cold Spring Harbor Press (1995); Vamosi, G., et al., Biophysical Journal, 71:972-994 (1996); Wittwer, C. T., et al., Biotechniques, 22:176-181 (1997); Wittwer, C. T., et al., Biotechniques, 22:130-38 (1997); Giesendorf, B. A. J., et al., Clinical Chemistry, 44:482-486 (1998); Kostrikis, L. G., et al., Science, 279:1228-1229 (1998); Matsuo, T., Biochemica et Biophysica Acta, 1379:178-184 (1998); Piatek, A. S., et al., Nature Biotechnology, 16:359-363 (1998); Schofield, P., et al., Appl. Environ. Microbiology, 63:1143-1147 (1997); Tyagi S., et al., Nature Biotechnology, 16:49-53 (1998); Tyagi, S., et al., Nature Biotechnology, 14:303-308 (1996); Nazarenko, I. A., et al., Nucleic Acids Research, 25:2516-2521 (1997); Uehara, H., et al., Biotechniques, 26:552-558 (1999); D. Whitcombe, et al., Nature Biotechnology, 17:804-807 (1999); Lyamichev, V., et al., Nature Biotechnology, 17:292 (1999); Daubendiek, et al., Nature Biotechnology, 15:273-277 (1997); Lizardi, P. M., et al., Nature Genetics, 19:225-232 (1998); Walker, G., et al., Nucleic Acids Res., 20:1691-1696 (1992); Walker, G. T., et al., Clinical Chemistry, 42:9-13 (1996); Compton, J., Nature, 350:91-92 (1991).
【０１９２】
本発明に係る消光物質及びクマリン系蛍光物質の両方を有するプローブが使用され得るか、又は、１つ以上の核酸が消光物質又は蛍光物質によって単独で標識され得る。本発明に係る蛍光物質により単独で標識された核酸がプローブである場合には、第１の核酸と第２の核酸との間の相互作用は、蛍光物質と核酸との間の相互作用を観察することにより、より好ましくは、蛍光物質の蛍光が第２の核酸に付着した消光物質によって消光されることを観察することにより、検出され得る。
【０１９３】
核酸の増幅、検出及び定量化を調査するために設計されたプローブにおいてそれらが全般的に有用であることに加えて、本蛍光物質は、現在既知の又は後に発見される実質的に任意の核酸プローブ様式において使用され得る。例えば、本発明のクマリン系蛍光物質は、Taqman（商標）プローブ（(Held et al., Genome Res. 6: 986-994 (1996), Holland et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 88: 7276-7280 (1991), Lee et al., Nucleic Acids Res. 21: 3761-3766 (1993)）、分子ビーコン（Tyagi et al., Nature Biotechnology 14:303-308 (1996), Jayasena et al., １９９９年１１月２３日に出願された米国特許第５，９８９，８２３号）、Scorpionプローブ（Whitcomb et al., Nature Biotechnology 17: 804-807 (1999)）、Sunriseプローブ（Nazarenko et al., Nucleic Acids Res. 25: 2516-2521 (1997)）、立体配座支援プローブ（Cook, R.,１９９９年６月９日に出願された米国仮特許出願第６０／１３８，３７６号）、ペプチド核酸（PNA）ベースの照光プローブ（Kubista et al., 国際公開第９７／４５５３９号）、二重鎖特異的DNA色素（Higuchi et al, Bio/Technology 10: 413-417 (1992), Wittwer et al, BioTechniques 22: 130-138 (1997)）等のようなプローブモチーフに組み込まれ得る。本消光物質が使用可能なこれら及び他のプローブモチーフは、NONISOTOPIC DNA PROBE TECHNIQUES, Academic Press, Inc. 1992において検討されている。
【０１９４】
本発明のプローブにおいて使用するための核酸は、任意の適切なサイズであり得る。該核酸は、好ましくは約１０〜約１００ヌクレオチド、より好ましくは約１０〜約８０ヌクレオチド、さらに好ましくは約２０〜約４０ヌクレオチドの範囲である。本発明の核酸プローブの正確な配列及び長さは、該核酸プローブが結合する対象の標的ポリヌクレオチドの性質に部分的に依存する。結合位置及び長さは、特定の実施形態にとって適切なアニーリング特性及び融解特性を達成するように変更されてもよい。このような設計選択を行うための指針は、当技術分野にて認識されている多くの参考文献中に発見され得る。
【０１９５】
好ましくは、核酸プローブの３’末端ヌクレオチドは、核酸ポリメラーゼによってブロックされる又は伸長不能にされる。このようなブロックは、ドナー又はアクセプター成分を核酸プローブの末端３’位に、直接的に又は連結成分によって付着させることにより、簡便に行われる。
【０１９６】
核酸には、ＤＮＡ、ＲＮＡ若しくはキメラ混合物、又は、それらの誘導体又は修飾された形態が含まれ得る。プローブ核酸及び標的核酸はいずれも、一本鎖、二本鎖、三本鎖等として存在し得る。さらに、核酸は、放射性標識、小溝結合剤、挿入剤、ドナー及び／又はアクセプター成分等のような他の基を備えた塩基成分、糖成分又はリン酸骨格において修飾され得る。
【０１９７】
例えば、核酸には、以下に限定されないが、５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−クロロウラシル、５−ヨードウラシル、ヒポキサンチン、キサンチン、４−アセチルシトシン、５−（カルボキシヒドロキシメチル）ウラシル、５−カルボキシメチルアミノメチル−２−チオウリジン、５−カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシル、β−Ｄ−ガラクトシルキトシン、イノシン、Ｎ６−イソペンテニルアデニン、１−メチルグアニン、１−メチルイノシン、２，２−ジメチルグアニン、２−メチルアデニン、２−メチルグアニン、３−メチルシトシン、５−メチルシトシン、Ｎ６−アデニン、７−メチルグアニン、５−メチルアミノメチルウラシル、５−メトキシアミノメチル−２−チオウラシル、β−Ｄ−マンノシルキトシン、５’−メトキシカルボキシメチルウラシル、５−メトキシウラシル、２−メチルチオ−Ｎ６−イソペンテニルアデニン、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ）、ウィブトキソシン、シュードウラシル、クレオシン、２−チオシトシン、５−メチル−２−チオウラシル、２−チオウラシル、４−チオウラシル、５−メチルウラシル、ウラシル−５−オキシ酢酸メチルエステル、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ）、５−メチル−２−チオウラシル、３−（３−アミノ−３−Ｎ２−カルボキシプロピル）ウラシル、（ａｃｐ３）ｗ、ニトロインドール及び２，６−ジアミノプリンを含む群から選択される少なくとも１つの修飾塩基成分が含まれ得る。
【０１９８】
別の実施形態では、核酸には、以下に限定されないが、アラビノース、２−フルオロアラビノース、キシルロース及びヘキソースを含む群から選択される少なくとも１つの修飾糖成分が含まれる。
【０１９９】
さらに別の実施形態では、核酸には、以下に限定されないが、ペプチド核酸ハイブリッド、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロアミドチオエート、ホスホロアミデート、ホスホロジアミデート、メチルホスホネート、アルキルホスホトリエステル及びホルムアセタール又はその類縁体を含む群から選択される少なくとも１つの修飾リン酸骨格が含まれる。
【０２００】
本発明のホスホジエステル連結核酸は、当技術分野にて既知の標準的な方法により合成され得る。そのような方法としては、例えば、市販のアミダイト化学を用いて、（例えば、P.E. Biosystemsより市販の）自動ＤＮＡ合成装置を使用する方法が挙げられる。修飾ホスホジエステル連結基を有する核酸は、当技術分野で既知の方法により合成され得る。例えば、ホスホロチオエート核酸は、Stein et al.の方法により合成されてもよく（Nucl. Acids Res. 16:3209 (1988)）、メチルホスホネート核酸は、制御された細孔ガラスポリマー支持体を使用することによって調製可能である（Sarin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85:7448-7451 (1988)）。ホスホジエステル連結核酸及び修飾ホスホジエステル連結核酸の両方を合成する他の方法は、当業者にとって明らかであろう。
【０２０１】
本発明の核酸プローブは、例えば、Ozaki et al., Nucleic Acids Research, 20: 5205-5214 (1992)や、Agrawal et al., Nucleic Acids Research, 18: 5419-5423 (1990)等の数多くのアプローチによって合成可能である。本発明の核酸プローブは、自動ＤＮＡ合成装置、例えば、P.E. Biosystems社（カリフォルニア州フォスターシティ）のモデル３９２又は３９４ＤＮＡ／ＲＮＡ合成装置上で、ホスホロアミダイト化学（例えば、以下に示す参考文献：Beaucage et al., Tetrahedron, 48: 2223-2311 (1992)、Molko et al.による米国特許第４，９８０，４６０号、Koster et al.による米国特許第４，７２５，６７７号、Caruthers et al.による米国特許第４，４１５，７３２号、第４，４５８，０６６号及び第４，９７３，６７９号の開示を参照）のような標準化学を用いて、簡便に合成される。ホスホロチオエート、ホスホラミデート等のような非天然骨格基を生じる代替化学もまた、使用され得る。
【０２０２】
自動核酸合成装置を利用して核酸を合成する場合、ドナー及びアクセプター成分は、好ましくは自動合成中に導入される。あるいは、これらの成分の１つ以上は、自動合成手順が開始される前又は後のいずれかに導入され得る。例えば、ドナー及び／又はアクセプター基は、所望の基で修飾された固体支持体を用いて、３’末端に導入され得る。加えて、ドナー及び／又はアクセプター基は、例えばホスホロアミダイトを含む基の誘導体により、５’末端に導入され得る。別の例示的な実施形態では、１つ以上のドナー及び／又はアクセプター基は、自動合成が完了した後に導入される。
【０２０３】
二重標識プローブでは、蛍光物質は、好ましくは少なくとも約１０ヌクレオチド、より好ましくは少なくとも約１５ヌクレオチドだけ消光物質から離間される。ドナー成分は、好ましくは、プローブの３’又は５’末端のヌクレオチドのいずれかに付着される。蛍光物質はまた、好ましくは、プローブの３’又は５’末端のヌクレオチドのいずれかに付着される。より好ましくは、ドナー及びアクセプター成分は、それぞれプローブの３’−及び５’−又は５’−及び３’−末端ヌクレオチドに付着され、また、内部に配置することも有用である。
【０２０４】
所望の核酸が合成されると、好ましくは、該核酸が該技術分野にて既知の方法により固体支持体上で合成されると共に存在する任意の保護基を除去するように処理された該固体支持体から、該核酸が開裂される（例えば、６０℃、５時間、濃アンモニア）。塩基感受性基が核酸に付着している実施形態（例えば、ＴＡＭＲＡ）では、脱保護は、より穏和な条件（例えば、ｔｅｒｔ−ブチルアミン／水１：３、８時間、７０℃）を使用することが好ましい。これらの条件下における脱保護は、迅速に脱保護アミダイト（例えば、ｄＣ−アセチル、ｄＧ−ｄｍｆ）を使用することよって促進される。
【０２０５】
支持体からの開裂及び脱保護に続いて、核酸は、クロマトグラフィー、抽出及びゲル精製を含む当技術分野にて既知の任意の方法により精製される。好ましい実施形態では、核酸は、ＨＰＬＣを用いて精製される。単離された核酸の濃度及び純度は、好ましくは、分光光度計において２６０ｎｍでの光学密度を測定することにより決定される。
【０２０６】
本発明によって提供される別の一連の化合物は、ペプチドプローブである。本発明の蛍光物質及び消光物質により標識されたペプチド、タンパク質及びペプチド核酸は、生体内（in vivo）及び生体外（in vitro）での酵素アッセイの両方において使用され得る。
【０２０７】
本発明によって提供される一連の材料は、クマリン系蛍光物質を固定化した固体支持体である。本発明の蛍光物質は、任意の有用な構成を有する実質的に任意のポリマー、生体分子及び固体又は半固体材料に固定化され得る。さらに、１つ以上の蛍光物質を含む任意の共役が、同様に固定化され得る。該支持体が固体又は半固体である場合には、核酸プローブを固定するのに好ましいタイプの支持体の例には、以下に限定されないが、制御された細孔ガラス、ガラスプレート、ポリスチレン、アビジン被覆ポリスチレンビーズ、セルロース、ナイロン、アクリルアミドゲル及び活性化デキストランが含まれる。これらの固体支持体は、化学的に安定であり、官能化が容易であると共に表面領域が明確であるため、好ましい。制御された細孔ガラス（ＣＰＧ、５００オングストローム、１０００オングストローム）及び非膨潤性高架橋ポリスチレン（１０００オングストローム）のような固体支持体が、特に好ましい。
【０２０８】
本発明によれば、固体支持体の表面は、本発明の蛍光物質又は本発明の蛍光物質を含んでいる種により官能化される。説明を明確にするため、以下の説明は、反応性蛍光物質を固体支持体に付着させることに焦点を合わせる。また、以下の説明は、反応性蛍光物質をその構造内に含んでいる種を固体支持体に付着させること、及び、この種及び反応性蛍光物質を他の分子及び構造に付着させることについても、広く関連する。
【０２０９】
蛍光物質は、好ましくは、蛍光物質上の反応基と、固体支持体の表面上の反応基又は固体支持体に付着したリンカーとの間に、結合を形成することによって固体支持体に付着され、それによって、固体支持体を１つ以上の蛍光物質により誘導体化する。反応性基の非限定的な例には、アミン、水酸基、カルボン酸、カルボン酸誘導体、アルケン、スルフヒドリル基、シロキサン等が含まれる。
【０２１０】
本発明により提供される一連の化合物は、核酸捕捉プローブである。ある実施形態では、本発明に係るクマリン系蛍光物質を含む固定化された核酸は、捕捉プローブとして使用される。核酸プローブは、例えば該プローブの３’又は５’末端ヌクレオチドを固体支持体に付着させることにより、固体支持体に直接付着させられ得る。しかしながら、より好ましくは、プローブは、リンカーによって固体支持体に付着される。リンカーは、プローブを固体支持体から離間させるのに役立つ。リンカーは、最も好ましくは長さ約５〜約３０原子の長さであり、より好ましくは長さ約１０〜約５０原子の長さである。
【０２１１】
さらに別の好ましい実施形態では、固体支持体は、プローブを調製する際の合成支持体としても使用される。固体支持体と核酸の最初の３’−単位との間のリンカーの長さ及び化学的安定性は、支持体に結合した核酸の効率的な合成及びハイブリダイゼーションに重要な役割を果たす。リンカーアームは、自動合成中に高い収率（９７％超）が達成され得るよう、十分に長くするべきである。必要とされるリンカーの長さは、使用される特定の固体支持体に依存する。例えば、高架橋ポリスチレンを固体支持体として使用する場合において、核酸の自動合成中に９７％超の収率を達成するには、通常は６原子リンカーであれば十分である。ＣＰＧを固体支持体として使用する場合において、自動合成中に高い収率（９７％超）を達成するには、リンカーアームは、好ましくは少なくとも２０原子の長さである。
【０２１２】
固体支持体上に固定化されたプローブのハイブリダイゼーションでは、全般的に、プローブが固体支持体から少なくとも３０原子、より好ましくは少なくとも５０原子だけ離間されることが必要とされる。この離間を達成するために、リンカーは、全般的に、リンカーと３’末端との間に位置するスペーサーを含む。核酸合成のために、リンカーアームは、通常、エステル結合によって３’末端の３’−ＯＨに付着される。該エステル結合は、塩基性試薬を用いて開裂可能であり、それによって固体支持体から核酸を遊離させ得る。
【０２１３】
当技術分野で既知の広く様々なリンカーが、核酸プローブを固体支持体に付着させるために使用されてもよい。リンカーは、固体支持体に付着したプローブへの標的配列のハイブリダイゼーションを有意に妨げない任意の化合物で形成されていてもよい。リンカーは、例えば、ホモポリマー核酸から形成されていてもよく、そのようなホモポリマー核酸は、自動合成によってリンカーに容易に付加され得る。あるいは、官能化ポリエチレングリコールのようなポリマーが、リンカーとして使用され得る。このようなポリマーは、標的核酸へのプローブのハイブリダイゼーションを有意に妨げないため、この場合はホモポリマー核酸よりも好ましい。ポリエチレングリコールは、市販されており、有機媒体及び水性媒体の両方に可溶であり、官能化が容易であり、また核酸合成条件下及び合成後の条件下において完全に安定であるため、特に好ましい。
【０２１４】
固体支持体、リンカー及びプローブ間の連結は、好ましくは、高温での塩基性条件下における塩基保護基の合成又は除去中に開裂されない。しかしながら、これらの連結は、様々な条件下にて開裂可能な基から選択され得る。この場合において好ましい連結の例には、カルバメート、エステル及びアミド連結が含まれる。
【０２１５】
本発明により提供される一連の材料は、アクリルアミド固定化プローブである。別の好ましい実施形態では、種は、アクリルアミドマトリクスのようなマトリクス内にあり、該種は、本発明に係るクマリン系蛍光物質を有する、又は、固定化された該種の存在が、蛍光物質を有するプローブを用いて確認される。好ましい実施形態では、該固定化は、Mosaic Technologies（マサチューセッツ州ケンブリッジ）によって発明及び商業化された「アクリダイト（acrydite）」法と組み合わせて行われる（Rehman et al., Nucleic Acids Research, 27: 649-655 (1999))を参照のこと）。アクリダイト法は、重合したポリアクリルアミドネットワーク内でのアルケン標識された捕捉プローブの固定化を可能にする。電気泳動条件下にて標的混合物が固定化されたプローブバンドを通過する場合、標的核酸は実質的に定量的に捕捉される。しかしながら、この事象の検出には、この場合第２のプローブが必要となる。ある実施形態では、蛍光物質及び／又は消光物質を有するプローブは、アクリルアミドマトリクス内に固定化された後、標的混合物と接触させられる。捕捉プローブとして蛍光プローブを使用することにより、標的混合物からのシグナルがリアルタイムで直接検出され得る。
【０２１６】
本発明により提供される化合物の集合は、マイクロアレイである。マイクロアレイには、固定化されたクマリン系蛍光物質、及びクマリン系蛍光物質により官能化された化合物（例えば、ペプチド、核酸、生物活性剤など）が含まれる。さらに、本発明は、蛍光物質により官能化されたプローブを用いてマイクロアレイを対応検査（interrogate）する方法を提供する。該固定化された種及び該プローブは、実質的に任意のタイプの分子から選択され、このような分子には、以下に限定されないが、小分子、ペプチド、酵素核酸等が含まれる。
【０２１７】
複数の固定化された核酸からなる核酸マイクロアレイは、ゲノム情報を生成するための重要なツールである（Debouck, C., et al., Nature Genetics（補遺）, 21:48-50 (1999)を参照のこと）。以下の説明は、核酸マイクロアレイと組み合わせた本発明による蛍光物質の使用に焦点を合わせる。この焦点は、例示的であることを意図されるものであって、本発明のこの態様を実施可能な材料の範囲を限定するものではない。
【０２１８】
別の好ましい実施形態では、本発明の化合物は、マイクロアレイ形式にて利用される。蛍光物質、又は蛍光物質を有する種は、それ自体がマイクロアレイの構成要素であり得るか、マイクロアレイの構成要素をスクリーニングするためのツールとして利用され得る。
【０２１９】
基板上にクマリン系プローブの整列アレイを作製する１つの方法は、「ドットブロット」アプローチである。この方法では、真空マニホールドによって、複数（例えば９６個）のプローブの水性サンプルが、直径３ミリメートルのウェルから基材へと移動させられる。該プローブは、多孔性膜をベーキングする又はＵＶ放射線に曝すことによって、該多孔性膜上に固定化される。この手順における一般的な変形としては、ウェルが非常に細長い楕円形を有する「スロットブロット」法が挙げられる。
【０２２０】
プローブの整列アレイを作製するのに使用される別の技術では、多孔質膜のような基材に試料のアレイを移動させるために、ウェル内に浸漬されたピンのアレイ、例えば９６ウェルのマイクロタイタープレートが使用される。あるアレイには、２２×２２ｃｍ領域内に９２１６個スポットのアレイを作製するために、膜を千鳥状にスポットするよう設計されたピンが含まれる。Lehrach, et al., HYBRIDIZATION FINGERPRINTING IN GENOME MAPPING AND SEQUENCING（ゲノムマッピング及び配列決定におけるハイブリダイゼーションフィンガープリント）, GENOME ANALYSIS, Vol. 1, Davies et al, Eds., Cold Springs Harbor Press, pp. 39-81 (1990)を参照のこと。
【０２２１】
プローブの整列アレイを作製する別の方法は、Pirrung et al.（米国特許第５，１４３，８５４号、１９９２年発行）及びFodor et al.（Science、251：767-773（1991））によって記載されたものと類似している。この方法は、粒子又は他の基材における種々別個の領域にて、異なるプローブを合成することを伴う。この方法は、好ましくは、（例えば、２０塩基未満の）比較的短いプローブ分子と共に使用される。関連する方法は、Southern et al.により記載されている（Genomics, 13: 1008-1017 (1992)）。
【０２２２】
Khrapko, et al., DNA Sequence, 1: 375-388 (1991)は、ＤＮＡをポリアクリルアミドの薄層上にスポットすることによって核酸マトリクスを作製する方法について記載している。スポッティングは、マイクロピペットを用いて手動で行われる。
【０２２３】
基板は、フォトリソグラフィ（Kleinfield et al., J. Neurosci. 8:4098-120 (1998)）、フォトエッチング、化学エッチング及びマイクロコンタクトプリンティング（Kumar et al., Langmuir 10:1498-511 (1994)）のような技法を用いて、パターン形成され得る。基板上にパターンを形成するための他の技術は、当業者にとって容易に明らかであろう。
【０２２４】
基板上のパターンのサイズ及び複雑さは、利用される技法の分解能及びパターンが意図される目的によってのみ制限される。例えば、マイクロコンタクトプリンティングを使用すると、基板上には２００ｎｍ程の小さな形態が積層される。Xia, Y., J. Am. Chem. Soc. 117:3274-75 (1995)を参照のこと。同様に、フォトリソグラフィを使用すると、1μm程の小さな形態を有するパターンが生成される。Hickman et al., J. Vac. Sci. Technol. 12:607-16 (1994)を参照のこと。本発明において有用なパターンには、ウェル、囲い、隔壁、凹部、入口、出口、通路、谷、回折格子等の形態を含むパターンが含まれる。
【０２２５】
現在好ましい実施形態では、パターン形成は、プローブを収容するための複数の隣り合うウェル、窪み又は穴を有する基板を生成するために使用される。全般的に、これらの基板形態のそれぞれは、起立した壁又は仕切りによって他のウェルから隔離されており、これらのウェルは容易には流体連通しない。したがって、特定のウェル内に配置された粒子、試薬又は他の物質は、該ウェル内に実質的に閉じ込められたままとなる。別の好ましい実施形態では、パターン形成は、デバイスを通過する通路の形成を可能にする。該通路によって、分析物又は他の物質は、デバイスに入ること及び／又はデバイスから出ることが可能になる。
【０２２６】
別の実施形態では、プローブは、それらを基板上に直接「印刷」することによって固定化されるか、代わりに「リフトオフ」技法が利用され得る。リフトオフ技法では、パターン形成されたレジストが基板上に配置されると共に、レジストに覆われていない領域にプローブが配置され、続いて、レジストが除去される。本発明の基板と共に使用するための適切なレジストは、当業者にとって既知である。例えば、Kleinfield et al., J. Neurosci. 8:4098-120 (1998)を参照のこと。フォトレジストを除去した後、第１のプローブとは異なる構造を有する第２のプローブが、最初にレジストによって覆われていた領域上にて、該基板に結合させられ得る。この技法を用いると、種々の特性を有するプローブのパターンを備えた基板が製造され得る。同様の基板構成は、所望の特性を有する層を基板上に直接マイクロプリントすることによって、到達可能である。Mrkish et al. Ann. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 25:55-78 (1996)を参照のこと。
【０２２７】
本発明によって提供される別の一連の物質は、ＣＰＧに固定化された化合物である。ここで、該化合物は、クマリン系成分（クマリン−ＣＰＧ化合物）を含む。
【０２２８】
ある場合には、クマリン−ＣＰＧ化合物は、構造５０のものである。
【化９５】
2018505141.tif 000096
ここで、該クマリン成分は、構造１５１のものである：
【化９６】
2018505141.tif 000097
構造１５１に関して、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、ラジカル、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ２は、−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０（ここで、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）からなる群より選択され、かつ、Ｒ９及びＲ１０は、ラジカル、−Ｈ、−ＣＨ２ＣＣＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｏＣＨ２ＣＣＨ、−ＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＣＨ２Ｎ３、−（ＣＨ２）ｘＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、（ここで、ｏは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｘは、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０、ｑは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）から独立して選択され、又は、Ｒ９及びＲ１０は、共同して水酸基で置換された５、６若しくは７員複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成する。
【０２２９】
構造１５０のクマリン成分は、Ｒ１又はＲ２のいずれかを介して前記クマリン−ＣＰＧ化合物に付着しており、Ｚは、（ＣＨ２）ｘであり、ここで、ｘは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０である。リンカー１及びリンカー２のようなリンカーは、任意の適切な構造であってもよい。多くの場合、リンカー１は、ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｙＯ（ＣＨ２）ｚ（ＣＯ）、ＮＨＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｙＯ（ＣＨ２）ｚ（ＣＯ）から選択され、ここで、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、ｚは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、また、リンカー２は、ＮＨ（ＣＨ２）ａ及びＯ（ＣＨ２）ａから選択され、ここで、ａは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０である。
【０２３０】
所定の場合には、構造１５０のクマリン成分は、構造１５２のものである：
【化９７】
2018505141.tif 000098
構造１５２に関して、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３である。
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３又はＣＨ（ＣＨ３）２である。
【０２３１】
所定の場合には、構造１５０のクマリン成分は、構造１５３のものである：
【化９８】
2018505141.tif 000099
構造１５３に関して、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３であり、
Ｒ９は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３又はＣＨ（ＣＨ３）２である。
【０２３２】
所定の場合には、構造１５０のクマリン成分は、構造１５４のものである：
【化９９】
2018505141.tif 000100
構造１５４に関して、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して５、６又は７員複素環を形成し、
Ｒ９は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３又はＣＨ（ＣＨ３）２である。
【０２３３】
所定の場合には、構造１５０のクマリン成分は、構造１５５のものである：
【化１００】
2018505141.tif 000101
構造１５５に関して、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、
Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、
Ｒ９は、Ｈ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３又はＣＨ（ＣＨ３）２であり、
Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、
Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【０２３４】
方法
方法の態様では、本発明は、クマリン成分を含むプローブを作製する方法を提供する。該方法は、１）固相合成法を用いてクマリン成分含有プローブを合成するステップと、２）２時間〜８時間の間に、濃アンモニア中にて５０℃〜７０℃の温度で前記プローブを固体支持体から取り去るステップと、３）前記プローブを単離するステップとを伴う。プローブを取り去った結果、単離された前記クマリン成分は、１０．０％未満の程度にまで分解される。典型的には、単離された前記クマリン成分は、５．０％未満、２．５％未満又は１．０％未満の程度にまで分解される。
【０２３５】
方法の態様では、本発明は、クマリン成分を含むプローブを作製する方法を提供する。該方法は、１）固相合成法を用いてクマリン成分含有プローブを合成するステップと、２）２時間〜８時間の間に、濃アンモニア中にて５０℃〜７０℃の温度で前記プローブを固体支持体から取り去るステップと、３）前記プローブを単離するステップとを伴う。プローブを取り去った結果、単離された前記クマリン成分は、１０．０％未満の程度にまで分解される。典型的には、単離された前記クマリン成分は、５．０％未満、２．５％未満又は１．０％未満の程度にまで分解される。
【０２３６】
方法の態様では、本発明は、クマリン成分を含むプローブを作製する方法を提供する。該方法は、１）固相合成法を用いてクマリン成分含有プローブを合成するステップと、２）４時間〜１２時間の間に、ｔｅｒｔ−ブチルアミン／水１：３中にて６０℃〜８０℃の温度で前記プローブを固体支持体から取り去るステップと、３）前記プローブを単離するステップとを伴う。プローブを取り去った結果、単離された前記クマリン成分は、１０．０％未満の程度にまで分解される。典型的には、単離された前記クマリン成分は、５．０％未満、２．５％未満又は１．０％未満の程度にまで分解される。
【０２３７】
方法の態様では、本発明は、試料が酵素を包含しているかどうかを決定する方法を提供する。該方法は、（ａ）試料を本発明のクマリン系蛍光物質を含むペプチド構造と接触させるステップと、（ｂ）前記蛍光物質を励起させるステップと、（ｃ）前記試料の蛍光特性を決定するステップであって、前記試料中における前記酵素の存在によって、前記蛍光特性に変化が生じる、ステップとを含む。
【０２３８】
好ましいペプチド構造は、ｉ）本発明のクマリン系蛍光物質である蛍光物質と、ｉｉ）消光物質と、ｉｉｉ）前記酵素の開裂認識部位とを含む。さらに、前記ペプチドは、好ましくは、蛍光物質が励起された際に、蛍光物質と消光物質との間のドナー−アクセプターエネルギー移動が可能になる立体配座にある。
【０２３９】
別の方法の態様では、本発明は、化合物が酵素の活性を変更しているかどうかを決定する方法を提供する。本発明の該態様における好ましい実施形態は、本発明の上述の態様に併せて列挙されたステップと、さらに（ｃ）前記試料の蛍光特性を決定するステップであって、前記試料中における前記酵素の前記活性によって、蛍光特性に変化が生じる、ステップとを含む。
【０２４０】
別の方法の態様では、本発明は、核酸標的配列を検出する方法を提供する。該方法は、（ａ）前記標的配列を検出用核酸と接触させるステップと、（ｂ）前記標的結合配列を前記標的配列にハイブリダイズさせるステップであって、それによって前記検出用核酸の配座を変質させて、蛍光パラメータの変化を生じさせる、ステップと、（ｃ）前記蛍光パラメータの前記変化を検出するステップであって、それによって前記核酸標的配列を検出するステップとを含む。
【０２４１】
ここに記載される方法では、他に明記されない限り、好ましい検出用核酸は、一本鎖標的結合配列を含む。該結合配列は、ｉ）本発明のクマリン系蛍光物質、及び、ｉｉ）消光物質を該結合配列に連結している。
【０２４２】
別の方法の態様では、本発明は、標的配列の増幅を検出する方法を提供する。該方法は、以下のステップを包む増幅反応の使用を含む：（ａ）前記標的配列と前記検出用核酸とをハイブリダイズさせるステップであって、前記検出用核酸は、一本鎖標的結合配列と、該標的結合配列に分子内で凝集した二次構造５’を含み、前記検出用配列の少なくとも一部は、前記標的配列へのハイブリダイゼーションが可能な一本鎖尾部を形成している、ステップ。（ｂ）ハイブリダイズした前記検出核酸をポリメラーゼを用いて前記標的配列上に伸長することにより検出用核酸伸長生成物を生成すると共に、該検出用核酸伸長生成物を前記標的配列から分離するステップ。（ｃ）プライマーを前記検出用核酸伸長生成物にハイブリダイズすると共に、プライマーをポリメラーゼを用いて伸長するステップであって、それによって前記分子内で凝集した二次構造を線形化すると共に蛍光パラメータの変化を生じさせる、ステップ。（ｄ）前記蛍光パラメータの前記変化を検出するステップであって、それによって前記標的配列を検出する、ステップ。
【０２４３】
別の方法の態様では、本発明は、試料が酵素を含んでいるかどうかを決定する方法を提供する。該方法は、（ａ）試料をペプチド構造と接触させるステップと、（ｂ）前記クマリン系蛍光物質を励起させるステップと、（ｃ）前記試料の蛍光特性を決定するステップであって、前記試料中における前記酵素の存在によって、前記蛍光特性に変化が生じる、ステップとを含む。
【０２４４】
本発明を実施するのに有用なペプチド構造は、以下の特徴を有する。ｉ）本発明のクマリン系蛍光物質である蛍光物質、ｉｉ）消光物質、及び、ｉｉｉ）前記酵素の開裂認識部位。
【０２４５】
別の方法の態様では、本発明は、クマリン−ＣＰＧ化合物を作製する方法を提供する。該方法は、以下のステップを含む：
構造１５６の第１クマリン系化合物を調製するステップ。
【化１０１】
2018505141.tif 000102
構造１５６に関して、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、ＬＧは、脱離基である。脱離基は、不均一結合開裂にて一対の電子と共に外れる分子断片である。脱離基は、アニオンまたは中性分子であり得るが、いずれの場合にも、脱離基は、結合の不均一開裂から生じる付加的な電子密度を安定化させることができる。脱離基の非限定的な例には、ハライド（例えば、Ｃｌ−）、酸素系アニオン（例えば、ＣＨ３ＣＯ２−、Ｃ４Ｈ４ＮＯ２−Ｏ−）、硫黄系アニオン（例えば、ＣＨ３Ｓ−）等が含まれる。
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成する。
前記第１クマリン系化合物を、構造１５７のアミンと反応させるステップ。
【化１０２】
2018505141.tif 000103
構造１５７に関して、
Ｚは、（ＣＨ２）ｘ（ｘは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）であり、Ａは、（ＣＨ２）ｙ（ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）である。
前記第１クマリン系化合物を構造１５７のアミンと反応させることによって、構造１５８の第２クマリン系化合物が提供される。
【化１０３】
2018505141.tif 000104
前記第２クマリン系化合物を、構造１５９の第１リンカー基と反応させるステップ。
【化１０４】
2018505141.tif 000105
構造１５９に関して、
ＬＧは、第１脱離基であり、ＬＧ２は、第２脱離基であり、Ｄは、（ＣＨ２）ｘ（ｘは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）であり、Ｅは、（ＣＨ２）ｙ（ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０）である。
構造１５８を構造１５９と反応させることによって、構造１６０の第３クマリン系化合物が提供される。
【化１０５】
2018505141.tif 000106
前記第３クマリン系化合物（構造１６０）を、求核剤で修飾されたＣＰＧ（構造１６１）と反応させることによって、クマリン−ＣＰＧ化合物を提供するステップ。
【化１０６】
2018505141.tif 000107
【０２４６】
クマリン−ＣＰＧ化合物を作製する方法に関して、特定の場合には、前記第１クマリン系化合物は、構造１６２のものである。
【化１０７】
2018505141.tif 000108
構造１６２に関して、
ＬＧは、脱離基であり、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、Ｒｘ及びＲｙは、独立してＨ又はＣＨ３である。
【０２４７】
クマリン−ＣＰＧ化合物を作製する方法に関して、特定の場合には、前記第１クマリン系化合物は、構造１６３のものである。
【化１０８】
2018505141.tif 000109
構造１６３に関して、
ＬＧは、脱離基であり、ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択される、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環を形成する。
【０２４８】
クマリン−ＣＰＧ化合物を作製する方法に関して、特定の場合には、前記第１クマリン系化合物は、構造１６４のものである。
【化１０９】
2018505141.tif 000110
構造１６４に関して、
ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、ＬＧは、脱離基であり、Ｒ２は、Ｈ又はＣＨ３であり、Ｒ２４は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルであり、Ｒ２５は、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル又はＣＨ２ＳＯ３Ｈである。
【０２４９】
別の方法の態様では、本発明は、クリックケミストリー（アルキンへのアジドの付加。典型的には、金属触媒によって媒介される）を用いて、第１分子を第２分子と共役させる方法であって、それによって本発明のクマリン系蛍光物質を少なくとも１つ含んでいるプローブを生成する方法を提供する。第１分子又は第２分子のいずれかは、アジド成分を含み、アジド成分を含まない第１又は第２分子は、アルキン成分を含む。本発明のクマリン系蛍光物質の該少なくとも１つは、第１分子及び／又は第２分子に由来して生じる。
【０２５０】
上述のクリックケミストリー法において使用されるアジドの非限定的な例には、構造１６５、構造１６６、構造１６７及び構造１６８が含まれる。
【化１１０】
2018505141.tif 000111
【化１１１】
2018505141.tif 000112
【化１１２】
2018505141.tif 000113
【化１１３】
2018505141.tif 000114
構造１６５〜１６８についての置換基及び変数は、以下のように定義される：ｍは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、ｎは、０、１、２又は３であり、ｏは、０、１、２又は３であり、ｐは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０であり、Ｒ２は、−Ｈ又は−ＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ３は、Ｒ４と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ４は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ４は、Ｒ５と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、
Ｒ５は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６若しくは７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成し、又は、Ｒ５は、Ｒ６と共同して５若しくは６員炭素環若しくは複素環（例えば、ピペリジニル）を形成し、又は、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、共同して５又は６員環を有する縮合炭素環又は複素環系を形成し、
Ｒ６は、−Ｈ、−ハロゲン、−ＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＣＨ、−ＣＮ、−ＮＯ２、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルチオ、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルコキシ、−ＮＲ７Ｒ８からなる群より選択され、ここで、Ｒ７及びＲ８は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換アルキルから独立して選択され、又は、Ｒ７及びＲ８は、共同して４、５、６又は７員複素環、（Ｃ１−Ｃ８）ヘテロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）置換ヘテロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリールを形成する。
【０２５１】
別の方法の態様では、本発明は、生体由来の試料中の酵素の活性量を決定する方法を提供する。該方法は、（ａ）酵素を含む試料とペプチド構造を含む化合物とを接触させるステップと、（ｂ）前記蛍光物質を励起させるステップと、（ｃ）前記試料の蛍光特性を決定するステップであって、前記試料中における前記酵素の活性によって、前記蛍光特性に変化が生じる、ステップとを含む。本発明の該態様において有用なペプチド構造は、すぐ上で説明したペプチド構造と実質的に同じである。
【実施例】
【０２５２】
実施例１
化合物２０１の調製
【化１１４】
2018505141.tif 000115
２−（７−（ジメチルアミノ）−４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−イル）酢酸メチル
マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに、３−ジメチルアミノフェノール（６６．３ｇ、４８３ｍｍｏｌ）、２−アセチルコハク酸ジメチル（８６．２ｇ、５３１ｍｍｏｌ）及び塩化亜鉛（９２．２ｇ、６７６ｍｍｏｌ）を投入した。該混合物を、２４時間の間１２０℃に加熱し、冷却した。該反応物全体を、ＤＣＭ（１．５Ｌ）と、濃ＨＣｌ（７０ｍＬ）を添加した水（４Ｌ）との間で分配した。各層を分離して、水相をＤＣＭ（１Ｌ×２回）で抽出した。有機相を併せて、水（４Ｌ×２回）で洗浄した。有機層を０．５Ｎ  ＫＯＨ（１Ｌ、５００ｍｌ×２回）で抽出して、これらの洗液を以下のクマリン酸抽出のために保存した。有機相を飽和食塩水（４Ｌ）により洗浄し、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、赤色半固体３１．０ｇを得た。ＩＰＡ（１５０ｍｌ）より再結晶することによって、化合物２０１を桃色固体として得た（１４．６ｇ、１１％収率）。ｍ．ｐ．１３０−１３２℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．００（６Ｈ，ｓ），３．８８（２Ｈ，ｓ），４．１０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），６．０５（１Ｈ，ｓ），６．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），６．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．８，９．２Ｈｚ），７．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１５Ｈ１７ＮＯ４の計算値：２７６．１２；実測値：２７６．１２  元素分析：Ｃ１５Ｈ１７ＮＯ４の計算値：Ｃ，６５．４４；Ｈ，６．２２；Ｎ，５．０９；実測値：Ｃ，６５．４９；Ｈ，６．１８；Ｎ，５．０８
【０２５３】
実施例２
化合物２０２の調製
【化１１５】
2018505141.tif 000116
２−アセチルコハク酸ジメチルの代わりに２−アセチルコハク酸ジエチルを用いて実施例１の手順に従い、それによって化合物２０２を明紫色固体として２４％収率で得た。ｍ．ｐ．１２５−１２７℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．００（６Ｈ，ｓ），３．８８（２Ｈ，ｓ），４．１０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），６．０５（１Ｈ，ｓ），６．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），６．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．８，９．２Ｈｚ），７．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１６Ｈ１９ＮＯ４の計算値：２９０．１４；実測値：２９０．１４  元素分析：Ｃ１６Ｈ１９ＮＯ４の計算値：Ｃ，６６．４２；Ｈ，６．６２；Ｎ，４．８４；実測値：Ｃ，６６．２５；Ｈ，６．５７；Ｎ，５．００
【０２５４】
実施例３
化合物２０３の調製
【化１１６】
2018505141.tif 000117
２−（７−（ジメチルアミノ）−４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−イル）酢酸
手順Ａ：実施例１からのアルカリ洗液を、ＡｃＯＨを用いて酸性化させた。固体を濾別して乾燥させ、それによって化合物２０３を桃色固体として得た（２５．２ｇ、２０％収率）。同様に、実施例２からのアルカリ洗液を、ＡｃＯＨを用いて酸性化させることによって、２０３を１１％収率で得た。
手順Ｂ：化合物２０２（４ｇ）を、マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコ内で、ＭｅＯＨ（２５ｍｌ）中に溶解させた。１０％ＫＯＨ／ＭｅＯＨ（２５ｍｌ）を添加して、反応物を室温で１８時間撹拌した。該混合物をＡｃＯＨを用いて酸性化させ、固体を濾別して乾燥させることによって、化合物２０３を桃色固体として得た（３．４３ｇ、９５％収率）。ｍ．ｐ．２０６−２０８℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．３１（３Ｈ，ｓ），３．０１（６Ｈ，ｓ），３．５２（２Ｈ，ｓ），６．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，９．２Ｈｚ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），１２．３４（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１４Ｈ１５ＮＯ４の計算値：２６２．１１，実測値：２６２．１１
【０２５５】
実施例４
化合物２０４の調製
【化１１７】
2018505141.tif 000118
２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）酢酸メチル
３−ジメチルアミノフェノールの代わりに８−ヒドロキシ−ジュロリジンを用いて実施例１の手順に従い、それによって、化合物２０４を淡黄褐色固体として得た（２８％収率）。ｍ．ｐ．１１７−１１９℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．８８（４Ｈ，ｍ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），２．２５（３Ｈ，ｓ），２．７１（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．２１（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），３．５８（２Ｈ，ｓ），３．５９（３Ｈ，ｓ），７．１５（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１９Ｈ２１ＮＯ４の計算値：３２７．１５，実測値：３２７．１５  元素分析：Ｃ１９Ｈ２１ＮＯ４の計算値：Ｃ，６９．７１；Ｈ，６．４７；Ｎ，４．２８；実測値：Ｃ，６９．５５；Ｈ，６．３８；Ｎ，４．２０
【０２５６】
実施例５
化合物２０５の調製
【化１１８】
2018505141.tif 000119
２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）酢酸
実施例４からのアルカリ洗液を、ＡｃＯＨを用いて酸性化させた。固体を濾別して乾燥させ、それによって化合物２０５を淡黄色固体として得た（２７％収率）。ｍ．ｐ．１８２−１８６℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．８９（４Ｈ，ｍ），２．２５（３Ｈ，ｓ），２．７３（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），３．２２（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．４７（２Ｈ，ｓ），７．１６（１Ｈ，ｓ），１２．４５（１Ｈ，ｖｅｒｙｂｒｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１８Ｈ１９ＮＯ４の計算値：３１４．１４，実測値：３１４．１４
【０２５７】
実施例６
化合物２０６の調製
【化１１９】
2018505141.tif 000120
２−（９−エチル−４，６，８，８−テトラメチル−２−オキソ−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）酢酸メチル
マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに，１−エチル−２，２，４−トリメチル−１，２−ジヒドロキノリン−７−オール臭化水素酸塩（１４．９ｇ、５０ｍｍｏｌ），２−アセチルコハク酸ジメチル（１８．８ｇ、１００ｍｍｏｌ）及び塩化亜鉛（１９．１ｇ、１４０ｍｍｏｌ）を投入した。該混合物を，２０時間の間１２５℃に加熱し，その後冷却した。該反応物全体を，ＤＣＭ（４００ｍＬ）と，濃ＨＣｌ（１０ｍＬ）を添加した水（６００ｍＬ）との間で分配した。各層を分離して，水相をＤＣＭ（３００ｍＬ×２回）で抽出した。有機相を併せて，水（６００ｍＬ×２回）及び飽和食塩水（８００ｍＬ）で洗浄し，ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ，濃縮することによって，暗緑色シロップを得た（１３．７ｇ、７７％収率）。この粗製物質を，０％〜２％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製して，緑色固体を得た（７．０ｇ、３９％収率）。ＩＰＡ（５０ｍｌ）より再結晶することによって，化合物２０６を黄色固体として得た（３．５４ｇ、２０％収率）。ｍ．ｐ．１０７−１０９℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），１．３４（６Ｈ，ｓ），１．９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ），２．３１（３Ｈ，ｓ），３．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），３．６０（２Ｈ，ｓ），３．６１（３Ｈ，ｓ），５．４０（１Ｈ，ｓ），６．３４（１Ｈ，ｓ），７．２１（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２１Ｈ２５ＮＯ４の計算値：３５６．１９，実測値：３５６．１９
【０２５８】
実施例７
化合物２０７の調製
【化１２０】
2018505141.tif 000121
２−（９−エチル−４，６，８，８−テトラメチル−２−オキソ−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）酢酸
クマリンエステル２０６（３ｇ、８．４４ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２０ｍｌ）中に溶解させて、１０％  ＫＯＨ／ＭｅＯＨ（２０ｍｌ）を添加した。室温で１４時間撹拌した後、酢酸（１．２ｍｌ）を添加して、該混合物を濃縮した。残渣を溶解させ、追加の酢酸（１．５ｍｌ）を添加することによってスラリーを形成した。該スラリーを、一晩の間４℃に保った。翌日、上清を暗色ゴム状塊からデカントした。該ゴム質をＤＣＭ（１００ｍｌ）中に溶解して、水（５０ｍｌ）及び飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、化合物２０７を茶黄色固体として得た（２．４４ｇ、８５％収率）。ｍ．ｐ．２２３−２２７℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），１．３４（６Ｈ，ｓ），１．９９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ），２．３１（３Ｈ，ｓ），３．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），３．５１（２Ｈ，ｓ），５．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），６．３９（１Ｈ，ｓ），７．２１（１Ｈ，ｓ），１２．３１（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２０Ｈ２３ＮＯ４の計算値：３４２．１７，実測値：３４２．１７
【０２５９】
実施例８
化合物２０８の調製
【化１２１】
2018505141.tif 000122
（３−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−９−エチル−４，８，８−トリメチル−２−オキソ−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−６−イル）メタンスルホン酸ナトリウム
（１−エチル−７−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１，２−ジヒドロキノリン−４−イル）メタンスルホン酸ナトリウム（２．１４ｇ、６．７０ｍｍｏｌ）を、アセチルコハク酸ジエチル（２．９０ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）及び塩化亜鉛（２．５６ｇ、１８．８ｍｍｏｌ）と、２０時間の間１２５℃で反応させた。該混合物を冷却させ、ＥｔＯＨを用いて摩砕した（４０ｍｌ×３回）。該ＥｔＯＨ洗液を濃縮し、それによって黒色残渣を得た（５．３５ｇ）。この粗製物質を、０〜１５％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物の分画を濃縮することによって、化合物２０８を暗色ゴム質として得た（４８２ｍｇ、１５％収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．１８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．３４（６Ｈ，ｓ），２．３１（３Ｈ，ｓ），３．１７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），３．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），３．５８（２Ｈ，ｓ），３．６１（３Ｈ，ｓ），４．０８（４Ｈ，重複ｍ），５．４８（１Ｈ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｓ），７．７７（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２２Ｈ２７ＮＯ７Ｓ（酸形態）の計算値：４５０．１６，実測値：４５０．１６
【０２６０】
実施例９
化合物２０９の調製
【化１２２】
2018505141.tif 000123
２−（７−（ジメチルアミノ）−４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−イル）酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル
化合物２０３（２０ｇ、７６．５ｍｍｏｌ）及びＮＨＳ（１０．６ｇ、９１．８ｍｍｏｌ）をマグネチックスターラーを備えた丸底フラスコ内で、ＤＭＦ（８００ｍｌ）中に溶解させた。ジシクロヘキシルカルボジイミド（２０．５ｇ、９９．５ｍｍｏｌ）を添加して、反応物を室温で４８時間の間撹拌した。該スラリーを濾別して、濾液を氷水（３Ｌ）中に撹拌しながら注ぎ入れた。沈殿物を濾別し、水で洗浄して乾燥させることによって、化合物２０６を淡黄塩固体として得た（３１．９ｇ、１２１％収率）。ＮＭＲによって、該物質が１８ｍｏｌ％のＤＣＵを含んでいることが示されたが、そのことは後の反応に影響を及ぼさなかった。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．３７（３Ｈ，ｓ），２．７９（４Ｈ，ｂｒｓ），３．０３（６Ｈ，ｓ），４．０１（２Ｈ，ｓ），６．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．８Ｈｚ），７．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ）
【０２６１】
実施例１０
化合物２１０の調製
【化１２３】
2018505141.tif 000124
２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル
化合物２０３の代わりに化合物２０５を用いて実施例９の手順に従い、それによって、化合物２１０を黄褐色固体として１１６％収率で得た。ＮＭＲによって、該物質が２５ｍｏｌ％のＤＣＵを含んでいることが示された。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．８８（４Ｈ，ｍ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．３２（３Ｈ，ｓ），２．７３（４Ｈ，ｍ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），２．７９（４Ｈ，ｂｒｓ），３．２４（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．９８（２Ｈ，ｓ），７．２２（１Ｈ，ｓ）
【０２６２】
実施例１１
化合物２１１の調製
【化１２４】
2018505141.tif 000125
２−（９−エチル−４，６，８，８−テトラメチル−２−オキソ−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル
クマリン酸２０７（２．０ｇ、５．８６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（３０ｍｌ）中にて炭酸Ｎ，Ｎ’−ジコハク酸イミジル（１．９５ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（９０９ｍｇ、７．０３ｍｍｏｌ）と反応させた。室温で４時間撹拌した後、該混合物を冷水（４００ｍｌ）中に注ぎ入れ、それによって黄色懸濁液を得た。該懸濁液を、一晩の間４℃に保った。吸引濾過することによって、黄色固体を得た。該黄色固体をＤＣＭ（４０ｍｌ）中に溶解して、水（２０ｍｌ）及び飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、化合物２１１をコハク色泡状物として得た（２．３２ｇ、９０％収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．３５（６Ｈ，ｓ），２．００（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．４Ｈｚ），２．３８（３Ｈ，ｓ），２．８０（４Ｈ，ｂｒｓ），３．４２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），４．００（２Ｈ，ｓ），５．４２（１Ｈ，ｓ），６．３４（１Ｈ，ｓ），７．２４（１Ｈ，ｓ）
【０２６３】
実施例１２
化合物２１２の調製
【化１２５】
2018505141.tif 000126
７−（ジメチルアミノ）−３−（２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン
化合物２１１（１５ｇ、３４．６ｍｍｏｌ）及び４−ヒドロキシ−ピペリジン（４．５５ｇ、４５ｍｍｏｌ）を、マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコ内で、ＤＭＦ（２００ｍｌ）中に溶解させた。室温で４時間撹拌した後、該フラスコを一晩の間４℃に保った。沈殿物を濾別し、ＤＭＦ（２５ｍｌ×２回），ＤＣＭ（２５ｍｌ×２回）で洗浄して乾燥させることによって、化合物２１２を白色固体として１２５％収率で得た。ＮＭＲによって、２６ｍｏｌ％のＤＣＵの存在が示された。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２４（３Ｈ，ｍ），１．３９（１Ｈ，ｍ），１．６９（３Ｈ，ｍ），２．２３（３Ｈ，ｓ），２．９０（１Ｈ，ｍ），３．０１（６Ｈ，ｓ），３．２５（１Ｈ，ｍ），３．４８（１Ｈ，ｍ），３．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），３．７０（１Ｈ，ｍ），３．８７（２Ｈ，ｍ），６．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．８Ｈｚ），７．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１９Ｈ２４Ｎ２Ｏ４の計算値：３４５．１８，実測値：３４５．１８
【０２６４】
実施例１３
化合物２１３の調製
【化１２６】
2018505141.tif 000127
２−（７−（ジメチルアミノ）−４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−イル）−Ｎ−（６−ヒドロキシヘキシル）アセトアミド
４−ヒドロキシピペリジンの代わりにアミノヘキサノールを用いて実施例１２の手順に従い、それによって、化合物２１３を乳白色固体として１００％収率で得た。ＮＭＲによって、該物質が１６ｍｏｌ％のＤＣＵを含んでいることが示された。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２４（４Ｈ，ｍ），１．３７（３Ｈ，ｍ），２．２８（３Ｈ，ｓ），３．０１（６Ｈ，ｓ），３．３７（２Ｈ，ｍ），４．３３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），６．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．８Ｈｚ），７．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２０Ｈ２８Ｎ２Ｏ４の計算値：３６１．２１，実測値：３６１．２１
【０２６５】
実施例１４
化合物２１４の調製
【化１２７】
2018505141.tif 000128
１０−（２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−９−メチル−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１１（５Ｈ）−オン
化合物２０９の代わりに化合物２１０を用いて実施例１２の手順に従い、それによって、化合物２１４を淡黄色固体として１１６％収率で得た。ＮＭＲによって、該物質が２５ｍｏｌ％のＤＣＵを含んでいることが示された。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２３（２Ｈ，ｍ），１．６８（２Ｈ，ｍ），１．８８（４Ｈ，ｍ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．１９（３Ｈ，ｓ），２．７４（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．２２（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．５７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），３．５７（１Ｈ，ｍ），３．７０（１Ｈ，ｍ），３．８６（２Ｈ，ｍ），７．１４（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２３Ｈ２８Ｎ２Ｏ４の計算値：３９７．２１，実測値：３９７．２１
【０２６６】
実施例１５
化合物２１５の調製
【化１２８】
2018505141.tif 000129
Ｎ−（６−ヒドロキシヘキシル）−２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）アセトアミド
４−ヒドロキシ−ピペリジンの代わりにアミノヘキサノールを用いて実施例１３の手順に従い、それによって、化合物２１５を淡黄色固体として９８％収率で得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２４（４Ｈ，ｍ），１．３８（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．８８（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），２．７３（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），３．００（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），３．２２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），３．３７（４Ｈ，ｍ），４．３２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ）７．１４（１Ｈ，ｓ），７．７６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２４Ｈ３２Ｎ２Ｏ４の計算値：４１３．２４，実測値：４１３．２４
【０２６７】
実施例１６
化合物２１６の調製
【化１２９】
2018505141.tif 000130
９−エチル−３−（２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４，６，８，８−テトラメチル−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−２−オン
化合物２１１（２．００ｇ、４．５６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中にてＨＯ−ピペリジン（５５４ｍｇ、５．４７ｍｍｏｌ）と室温で反応させた。２時間の後、該反応物を一晩の間４℃に保った。吸引濾過することによって、化合物２１６を淡黄色粉末として得た（８７２ｍｇ、４５％収率）。濾液に水（２０ｍｌ）を添加することによって、より多くの生成物を沈殿させた。吸引濾過することによって、追加の化合物２１６を得た（１．００ｇ、５２％収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），１．２２（２Ｈ，ｍ），１．３４（６Ｈ，ｓ），１．６８（２Ｈ，ｍ），１．７９（１Ｈ，ｍ），１．９９（３Ｈ，ｓ），２．２４（３Ｈ，ｓ），２．４４（２Ｈ，ｍ），２．５４（３Ｈ，ｓ），２．８９（１Ｈ，ｍ），２．９９（１Ｈ，ｍ），３．２６（１Ｈ，ｍ），３．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６Ｈｚ），３．４５（１Ｈ，ｍ），３．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６），３．７１（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），３．８６（２Ｈ，ｍ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．４Ｈｚ），６．３３（１Ｈ，ｓ），７．１９（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２５Ｈ３２Ｎ２Ｏ４の計算値：４２５．２４，実測値：４２５．２４
【０２６８】
実施例１７
化合物２１７の調製
【化１３０】
2018505141.tif 000131
７−（ジエチルアミノ）−３−（４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボニル）−２Ｈ−クロメン−２−オン
４−（ジエチルアミノ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒド（１０ｇ、５１．７ｍｍｏｌ）、マロン酸ジエチル（９．９５ｇ、６２．１ｍｍｏｌ）、４−ヒドロキシピペリジン（２６．２ｇ、２５９ｍｍｏｌ）、ピペリジン（５滴）及び酢酸（５滴）を、マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに添加した。該反応物を、４時間の間１００℃に加熱した。冷却後、該シロップを水（４００ｍｌ）中に注ぎ入れ、ＤＣＭ（２００ｍｌ×３回）で抽出した。有機層を水（３００ｍｌ×２回）、１Ｍクエン酸水溶液（３００ｍｌ×３回）及び飽和食塩水（５００ｍｌ）で洗浄した後、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、黄色泡状物１３．０ｇを得た。この粗製物質を、０〜５％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２１７を黄色泡状物として得た（１２．２ｇ、６８％収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１２（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．３５（２Ｈ，ｍ），１．７３（２Ｈ，ｍ），３．１２（２Ｈ，ｍ），３．４４（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），３．７１（１Ｈ，ｍ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），３．９７（１Ｈ，ｍ），４．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），６．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），６．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．８Ｈｚ），７．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），７．９２（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１９Ｈ２４Ｎ２Ｏ４の計算値：３４５．８１，実測値：３４５．８１
【０２６９】
実施例１８
化合物２１８の調製
【化１３１】
2018505141.tif 000132
７−（ジエチルアミノ）−Ｎ−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−カルボキサミド
４−ヒドロキシピペリジンの代わりにアミノエトキシエタノールを用いて実施例１７の手順に従い、それによって、化合物２１８を淡黄色固体として６５％収率で得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．１４（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．４９（１２Ｈ，ｍ），４．６０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），６．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），６．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，６．８Ｈｚ），７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．６７（１Ｈ，ｓ），８．７７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１８Ｈ２４Ｎ２Ｏ５の計算値：３４９．１８，実測値：３４９．１８
【０２７０】
実施例１９
化合物２１９の調製
【化１３２】
2018505141.tif 000133
Ｎ−（２−（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）−２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）アセトアミド
化合物２１１（２．０５ｇ、５ｍｍｏｌ）と２−（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）エトキシ）−エタンアミン（１．４２ｇ、６．５ｍｍｏｌ）とを、マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコ内でＤＭＦ（１５ｍｌ）中にて反応させた。室温で１８時間撹拌した後、該反応混合物を濃縮した。残渣をＤＣＭ（７５ｍｌ）中に溶解させ、１Ｎ ＨＣｌ（５０ｍｌ×２回）及び飽和食塩水（７５ｍｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、コハク色残渣を得た（２．５９ｇ）。この粗製物質を、０〜２％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２１９を淡橙色半固体として得た（１．８４ｇ、８５％収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．５５−１．９０（２Ｈ，ｍ），１．９７（４Ｈ，ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．４４（３Ｈ，ｓ），２．７９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），２．８８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），３．２５（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．３９（４Ｈ，ｑｕｉｎｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），３．５３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），３．５３（２Ｈ，ｓ），３．５５−３．８０（８Ｈ，ｍ），６．７２（１Ｈ，ｂｒｔ），７．０１（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２６Ｈ３５Ｎ５Ｏ６の計算値：５１４．２７，実測値：５１４．２７
【０２７１】
実施例２０
化合物２２０の調製
【化１３３】
2018505141.tif 000134
８−ヒドロキシ−１，２，３，５，６，７−ヘキサヒドロピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−９−カルボアルデヒド，（８−ヒドロキシ−ジュロリジン−９−カルボアルデヒド）
マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに、ＤＭＦ（１００ｍｌ）を投入し、氷浴中で０〜５℃まで冷却した。オキシ塩化リン（３９．５ｇ、２５７ｍｍｏｌ）を滴加して、該混合物を３０分の間撹拌した。ＤＭＦ（７５ｍｌ）中に溶解させた８−ヒドロキシ−ジュロリジン（３４ｇ、１８０ｍｍｏｌ）を滴加して、該混合物を徐々に室温まで温めた。該混合物を、油浴中で１時間の間、８５℃まで加熱した。室温まで冷却した後、該反応物を、氷（４００ｇ）中に撹拌しながら注ぎ入れた。一晩の間４℃に保った後、該固体を吸引濾過して、水（５０ｍｌ×４回）で洗浄した。該濾過ケーキをＤＣＭ（５００ｍｌ）中に溶解させて、該溶液を飽和炭酸水素ナトリウム（１００ｍｌ）で洗浄した。該水性洗液を、ＤＣＭ（５０ｍｌ）で抽出した。有機相を併せて、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、化合物２２０を淡緑色結晶固体として得た（３６．０ｇ、９２％収率）。ｍ．ｐ．７２−７３℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．９３（４Ｈ，ｍ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），２．６８（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．２７（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），６．８４（１Ｈ，ｓ），９．３７（１Ｈ，ｓ），１１．８１（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１３Ｈ１５ＮＯ２の計算値：２１８．１２，実測値：２１８．１２．
【０２７２】
実施例２１
化合物２２１の調製
【化１３４】
2018505141.tif 000135
１０−（４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボニル）−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１１（５Ｈ）−オン
４−（ジエチルアミノ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒドの代わりに化合物２２０を用いて実施例１７の手順に従い、それによって、化合物２２１を黄色固体として８２％収率で得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．６０（２Ｈ，ｂｒｓ），１．９２（２Ｈ，ｂｒｓ），１．９７（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），２．７５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），２．８７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５Ｈｚ），３．２２（１Ｈ，ｍ），３．３０（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），３．３６（１Ｈ，ｍ），３．６０（１Ｈ，ｍ），３．９５（１Ｈ，ｍ），４．１７（１Ｈ，ｍ），６．８８（１Ｈ，ｓ），７．７３，（１Ｈ，ｓ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２１Ｈ２４Ｎ２Ｏ４の計算値：３６９．１８，実測値：３６９．１８
【０２７３】
実施例２２
化合物２２２の調製
【化１３５】
2018505141.tif 000136
７−（ジメチルアミノ）−３−（２−ヒドロキシエチル）−４−メチル−２Ｈ−クロメン−２−オン
マグネチックスターラー及び還流凝縮器を備えた丸底フラスコに、３−ジメチルアミノフェノール（１０ｇ、７２．９ｍｍｏｌ）、α−アセチル−ブチロラクトン（１０．３ｇ、８０．２ｍｍｏｌ）、塩化亜鉛（１３．９ｇ、１０２ｍｍｏｌ）及び無水エタノール（１００ｍｌ）を投入した。該反応物を、２時間の間還流させた。冷却後、該反応物を濃縮して、１Ｎ
ＨＣｌ（１２０ｍｌ）を添加した水（６００ｍＬ）中に注ぎ入れた。該混合物を、ＤＣＭ（２００ｍｌ×３回）で抽出した。有機層を水（５００ｍｌ×２回）及び飽和食塩水（５００ｍｌ）で洗浄した後、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、赤褐色固体９．４０ｇを得た。この固体をＩＰＡ（２５ｍｌ）より再結晶することによって、化合物２２２を明黄褐色固体として得た（３．９６ｇ、２２％収率）。ｍ．ｐ．１４１−１４５℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．３４（３Ｈ，ｓ），２．６８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），２．９９（６Ｈ，ｓ），３．４７（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），４．６５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），６．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．８，９．２Ｈｚ），７．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１４Ｈ１７ＮＯ３の計算値：２４８．１３，実測値：２４８．１３  元素分析：Ｃ１４Ｈ１７ＮＯ３の計算値：Ｃ，６８．００；Ｈ，６．９３；Ｎ，５．６６；実測値：Ｃ，６７．７３，Ｈ，６．７４；Ｎ，５．８２．
【０２７４】
実施例２３
化合物２２３の調製
【化１３６】
2018505141.tif 000137
１０−（２−ヒドロキシエチル）−９−メチル−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１１（５Ｈ）−オン
３−ジメチル−アミノフェノールの代わりに８−ヒドロキシジュロリジンを用いて実施例２１の手順に従い、それによって、化合物２２３を黄褐色固体として３４％収率で得た。ｍ．ｐ．１４６−１４８℃  １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．８７（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．２９（３Ｈ，ｓ），２．６６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．７１（３Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．２０（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），３．４４（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），４．６２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），７．１１（１Ｈ，ｓ）．ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１８Ｈ２１ＮＯ３の計算値：３００．１６，実測値：３００．１６  元素分析：Ｃ１８Ｈ２１ＮＯ３の計算値：Ｃ，７２．２２；Ｈ，７．０７；Ｎ，４．６８；実測値：Ｃ，７１．８２；Ｈ，７．０７；Ｎ，４．７５
【０２７５】
実施例２４
化合物２２４の調製
【化１３７】
2018505141.tif 000138
２−シアノエチル（１−（２−（７−（ジメチルアミノ）−４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−イル）アセチル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに、化合物２１２（６ｇ、１４．０ｍｍｏｌ、８０％純度）及びＤＭＦ（５０ｍｌ）を投入した。該懸濁液に１Ｈ-テトラゾール（２９４ｍｇ、４．２ｍｍｏｌを添加し、その後にＤＭＦ（１５ｍｌ）中の３−（（ビス（ジイソプロピルアミノ）ホスフィノ）オキシ）−プロパンニトリル（５．０５ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）溶液を添加した。室温で１５時間の間撹拌した後、追加の３−（（ビス（ジイソプロピルアミノ）ホスフィノ）オキシ）プロパンニトリル（２．５２ｇ、８．４ｍｍｏｌ）を添加した。さらに１５時間の後、該溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（７００ｍｌ）中に注ぎ入れ、ＤＣＭ（２００ｍｌ×３回）で抽出した。有機相を、炭酸水素ナトリウム溶液（４００ｍｌ×２回）及び飽和食塩水（４００ｍｌ）で洗浄した。ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、その後に濃縮することによって、淡緑色シロップ１１．７ｇを得た。この粗製物質を、５０％〜１００％  ＤＣＭ／１％ＴＥＡを添加した石油エーテルを用いたアルミナ上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２２４を淡黄色固体として得た（４．５８ｇ、６０％収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．１９（１２Ｈ，ｍ），１．２５（６Ｈ，ｍ），１．４１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．６−１．９（５Ｈ，ｍ），２．４０（３Ｈ，ｍ），２．６４（２Ｈ，ｍ），３．０４（６Ｈ，ｓ），３．５−３．９（１０Ｈ，ｍ），４．１１（２Ｈ，ｍ）６．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），６．６２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．８Ｈｚ），７．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）  ３１Ｐ ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１４６．２０９，１４６．３９７  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２８Ｈ４１Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：５４５．２９，実測値：５４５．２９
【０２７６】
実施例２５
化合物２２５の調製
【化１３８】
2018505141.tif 000139
２−シアノエチル（１−（２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）アセチル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
化合物２１２の代わりに化合物２１４を用いて実施例２４の手順に従い、それによって、化合物２２５を黄色半固体として３８％収率で得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．１７−１．２５（１２Ｈ，ｍ），１．３０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．１６−２．０（４Ｈ，ｍ），１．９７（４Ｈ，ｍ），２．３６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ），２．６４（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），２．７８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），２．８８（２Ｈ，ｍ），３．２３（４Ｈ，ｍ），３．４−３．９（１０Ｈ，ｍ），７．０２（１Ｈ，ｓ）  ３１Ｐ ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１４６．１５９，１４６．３２９  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ３２Ｈ４５Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：５９７．３２，実測値：４９６．２０（Ｍ−ｉ−Ｐｒ２Ｎ）
【０２７７】
実施例２６
化合物２２６の調製
【化１３９】
2018505141.tif 000140
２−シアノエチル（１−（７−（ジエチルアミノ）−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−３−カルボニル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに、化合物２１７（８ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（７５ｍｌ）を投入した。１Ｈ-テトラゾール（４８８ｍｇ、７．０ｍｍｏｌ）を添加し、その後にＤＣＭ（２５ｍｌ）中の３−（（ビス（ジイソプロピルアミノ）ホスフィノ）オキシ）プロパンニトリル（８．４０ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）溶液を添加した。室温で１５時間の間撹拌した後、溶液を飽和炭酸水素ナトリウム（２５０ｍｌ×２回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、金色泡状物１２．７ｇを得た。この粗製物質を、５０％〜１００％  ＤＣＭ／１％ＴＥＡを添加した石油エーテルを用いたアルミナ上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２２６を金色シロップとして得た（１０．３ｇ、８１％収率）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．１−１．３（１８Ｈ，ｍ），１．７７（２Ｈ，ｍ），１．９２（２Ｈ，ｍ），２．６３（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．３５（１Ｈ，ｍ），３．４３（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），３．６２（３Ｈ，ｍ），３．７６（２Ｈ，ｍ），３．８３（２Ｈ，ｍ），４．１３（１Ｈ，ｍ），６．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．８，５．０Ｈｚ），７．２９（１Ｈ，ｍ），７．８１（１Ｈ，ｓ）  ３１Ｐ ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１４６．２０８，１４６．３８４  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２８Ｈ４１Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：５４５．２９，実測値：５４５．２９
【０２７８】
実施例２７
化合物２２７の調製
【化１４０】
2018505141.tif 000141
２−シアノエチル（１−（１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−カルボニル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
化合物２１７の代わりに化合物２２１を用いて実施例２６の手順に従い、それによって、化合物２２７を黄色泡状物として４０％収率で得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ０．９７（２Ｈ，ｂｒｓ），１．１４（１２Ｈ，ｍ），１．５５（２Ｈ，ｍ），１．７６（２Ｈ，ｍ），１．９７（４Ｈ，ｍ），２．７３（５Ｈ，ｍ），３．２６（４Ｈ，ｍ），３．４３（１Ｈ，ｍ），３．５７（１Ｈ，ｍ），３．７１（１Ｈ，ｍ），４．０６（１Ｈ，ｍ），７．０６（１Ｈ，ｓ），７．８４（１Ｈ，ｓ）  ３１Ｐ ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１４５．９８５  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ３０Ｈ４１Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：５６９．２９，実測値：５６９．２９
【０２７９】
実施例２８
化合物２２８の調製
【化１４１】
2018505141.tif 000142
２−シアノエチル（２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）エチル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
化合物２１７の代わりに化合物２２３を用いて実施例１８の手順に従い、それによって、化合物２２８を淡黄色ガラス状物として７２％収率で得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．１５（１２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．９８（４Ｈ，ｍ），２．３７（３Ｈ，ｓ），２．６０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），２．７９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），２．８８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．２３（４Ｈ，ｍ），３．５６（２Ｈ，ＨＨＨｍ），３．７７（４Ｈ，ｍ）７．０１（１Ｈ，ｓ）  ３１Ｐ ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１４７．５８１  ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２７Ｈ３８Ｎ３Ｏ４Ｐの計算値：５００．２７，実測値：３９９．１５（Ｍ−ｉ−Ｐｒ２Ｎ）
【０２８０】
実施例２９
クマリンホスホロアミダイト合成試薬により標識されたオリゴヌクレオチドの固相合成
アンモニア安定クマリン試薬（２２４，２２５又は２２８）について、Ａ、Ｃ及びＧの環外アミン基上における保護基は、それぞれ、ベンゾイル、アセチル及びジメチルホルムアミジンであった。アンモニア不安定クマリン（２２６又は２２７）について、Ａ、Ｃ及びＧは、フェノキシアセチル、アセチル及び４−イソプロピルフェノキシアセチルによって保護されていた。
【０２８１】
一般手順：Biosearch 8700又はExpedite NAS 8900自動ＤＮＡ合成装置において、クマリンホスホロアミダイト合成試薬で標識されたオリゴヌクレオチドを、シアノエチルホスホロアミダイトモノマーを用いて３’−グリコール酸ＣＰＧ（van der Laan, et. Al, Tetrahedron Lett. 38: 2252 (1997)）上に２００ｎｍスケールにて作製した。合成が完了した後、（ジクロロメタン中３％ジクロロ酢酸を用いて）５’ＤＭＴ基を除去し、合成カラムを乾燥アセトニトリルで洗浄した。
【０２８２】
クマリンをオリゴヌクレオチドにカップリングするため、クマリンホスホロアミダイト１００ｍｇをアセトニトリル又はＤＣＭ（１５００μｌ）中に溶解した。溶液の一部（５００μｌ）を、１ｍｌシリンジを用いてカラムに投与した。アセトニトリル（５００μｌ）中０．２５Ｍエチルチオテトラゾール又は０．４５Ｍ １Ｈ−テトラゾールを含有する付属シリンジを、カラムの他端に取り付けた。シリンジを用いて溶液をＣＰＧ上で混合し、１０分間放置させた。このプロセスを、残りのホスホロアミダイト溶液を用いてさらに２回繰り返した。カラムをＤＮＡ合成装置上に再配置し、アセトニトリルで洗浄した後、酸化剤溶液 （ＴＨＦ（７０％）：ピリジン（２０％）：水（１０％）混合液中０．０２Ｍヨウ素）で洗浄した。３０秒後、この溶液をアセトニトリルで洗浄し、各カラムの内容物を２ｍｌのバイアル内へと排出した。
【０２８３】
実施例３０
ＣＰＧ上でのオリゴヌクレオチドの開裂と脱保護
手順Ａ（クマリンホスホロアミダイト２２４，２２５又は２２８から調製したアンモニア安定オリゴヌクレオチドの場合）：ＣＰＧ上のオリゴヌクレオチドに、標準的なアンモニア脱保護（濃ＮＨ４ＯＨ１ｍｌ、６０℃、１〜２時間）を行った。ＣＰＧを濾別し、濾液を真空下で濃縮することによって、粗クマリンで標識されたオリゴヌクレオチドを得た。ＨＰＬＣ及びＬＣＭＳ分析のため、該試料を脱イオン水（１ｍｌ）に溶解した。スペクトル分析のため、該試料をｑＰＣＲ緩衝液に溶解した。
【０２８４】
手順Ｂ（クマリンホスホロアミダイト２２６又は２２７から調製したアンモニア不安定オリゴヌクレオチドの場合）：ＣＰＧ上のオリゴヌクレオチドを、５０ｍＭ Ｋ２ＣＯ３／ＭｅＯＨ１ｍｌにより一晩処理した。混合物をＡｃＯＨにより酸性化して、ＣＰＧを濾別し、濾液を真空下で濃縮することによって、粗クマリンで標識されたオリゴヌクレオチドを得た。ＨＰＬＣ及びＬＣＭＳ分析のため、該試料を脱イオン水（１ｍｌ）に溶解した。スペクトル分析のため、該試料をｑＰＣＲ緩衝液に溶解した。
【０２８５】
実施例３１
粗オリゴヌクレオチドの精製
修飾オリゴヌクレオチドを、分取カラムＲＰ−Ｃ１８（１０×１００ｍｍ、５μＭ、１３０Å、Ｘｂｒｉｄｇｅ）上でのＨＰＬＣにより、以下の条件を用いて精製した：Ａ）トリエチルアミン／酢酸緩衝液（５０ｍＭ）、Ｂ）アセトニトリル。グラジエント：０〜９５％Ｂ（１０分間）、流速：１０ｍＬ／分、ＵＶ／ｖｉｓ検出：２６０ｎｍ及び４００ｎｍ。
【０２８６】
実施例３２
オリゴヌクレオチド２３２の調製
【化１４２】
2018505141.tif 000143
実施例２９に記載されるように、５’ヒドロキシルにおいて化合物２２４で標識されたＤＮＡ断片３’−ＴＴＣＧＡＴＡＡＧＴＣＴＡＧＣ−５’を調製した。実施例３０の手順Ａに記載されるように、生成物２３２を支持体から開裂して脱保護した。ＭＳ（ＥＳＩ）：計算値：４９７３．４，実測値：４９７４．０  Ａｂｓ／Ｅｍ＝３８０／４８８ｎｍ（ｑＰＣＲ緩衝液中）
【０２８７】
実施例３３
オリゴヌクレオチド２３３の調製
【化１４３】
2018505141.tif 000144
実施例２９に記載されるように、５’ヒドロキシルにおいて化合物２２５で標識されたＤＮＡ断片３’−ＴＴＣＧＡＴＡＡＧＴＣＴＡＧＣ−５’を調製した。実施例３０の手順Ａに記載されるように、生成物２３３を支持体から開裂して脱保護した。ＭＳ（ＥＳＩ）：計算値：５０２６．５，実測値：５０２５．０  Ａｂｓ／Ｅｍ＝３９８／４９８ｎｍ（ｑＰＣＲ緩衝液中）
【０２８８】
実施例３４
オリゴヌクレオチド２３４の調製
【化１４４】
2018505141.tif 000145
実施例２９に記載されるように、５’ヒドロキシルにおいて化合物２２６で標識されたＤＮＡ断片３’−ＴＴＣＧＡＴＡＡＧＴＣＴＡＧＣ−５’を調製した。実施例３０の手順Ｂに記載されるように、生成物２３４を支持体から開裂して脱保護した。ＭＳ（ＥＳＩ）：計算値：４９７４．４，実測値：４９７４．０  Ａｂｓ／Ｅｍ＝４１８／４９０ｎｍ（ｑＰＣＲ緩衝液中）
【０２８９】
実施例３５
オリゴヌクレオチド２３５の調製
【化１４５】
2018505141.tif 000146
実施例２９に記載されるように、５’ヒドロキシルにおいて化合物２２７で標識されたＤＮＡ断片３’−ＴＴＣＧＡＴＡＡＧＴＣＴＡＧＣ−５’を調製した。実施例３０の手順Ｂに記載されるように、生成物２３５を支持体から開裂して脱保護した。ＭＳ（ＥＳＩ）：計算値：４９９７．４，実測値：４９９８．０  Ａｂｓ／Ｅｍ＝４３５／５０１ｎｍ（ｑＰＣＲ緩衝液中）
【０２９０】
実施例３６
オリゴヌクレオチド２３６の調製
【化１４６】
2018505141.tif 000147
実施例２９に記載されるように、５’ヒドロキシルにおいて化合物２２８で標識されたＤＮＡ断片３’−ＴＴＴＴＴＴＴＴＴＴ−５’を調製した。実施例３０の手順Ａに記載されるように、生成物２３６を支持体から開裂して脱保護した。ＭＳ（ＥＳＩ）：計算値：３３４１．１，実測値：３３４１．０
【０２９１】
結果
【表１】
2018505141.tif 000148
【０２９２】
実施例３７
化合物２３７の調製
【化１４７】
2018505141.tif 000149
Ｎ−（１−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−３−ヒドロキシプロパン−２−イル）−２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）アセトアミド
化合物２１０（５ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）を、マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコ内のＤＭＦ（２００ｍｌ）中セリノールＯＤＭＴ（６．００ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１０ｍｌ、７１．７ｍｍｏｌ）溶液を添加した。室温で７２時間の間撹拌した後、該反応物を真空下で濃縮し、それによって残渣を得た。残渣を、２％ピリジン／ＥｔＯＡｃを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２３７を得た（７．２ｇ、８６％収率）。
【０２９３】
実施例３８
化合物２３８の調製
【化１４８】
2018505141.tif 000150
２−（２−（３−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−２−（２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）アセトアミド）プロポキシ）−２−オキソエトキシ）酢酸
化合物２３７（５ｇ、７．２６ｍｍｏｌ）を、丸底フラスコ内のピリジン中に溶解して真空下で濃縮することにより、乾燥させた。ピリジン（２００ｍｌ）及びジグリコール酸無水物（５．００ｇ、４３．１ｍｍｏｌ）を添加した。室温で７２時間の間撹拌した後、追加のジグリコール酸無水物（５．００ｇ、４３．１ｍｍｏｌ）を添加した。該混合物をさらに２４時間の間撹拌して、真空下で濃縮した。残渣をＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解し、飽和ＫＨ２ＰＯ４溶液（２００ｍｌ）で洗浄して、乾燥させる（ＮａＳＯ４）と共に真空下で濃縮した。残渣を、５〜３０％ ＭｅＯＨ／２％ＴＥＡ及び２％ピリジンを含有したＤＣＭを用いたアルミナ上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２３８をＴＥＡ塩として得た（６．００ｇ、９１％収率）。
【０２９４】
実施例３９
化合物２３９の調製
【化１４９】
2018505141.tif 000151
２−（２−オキソ−２−（（３−ＣＰＧ−プロピル）アミノ）エトキシ）酢酸３−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−２−（２−（９−メチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）アセトアミド）プロピル
化合物２３８（３ｇ、３．３１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（７５ｍｌ）中に溶解した。ＢＯＰ（ヘキサフルオロリン酸（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム）（３ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）、ピリジン（１０ｍｌ）及びアミノプロピルＣＰＧ（１０ｇ、５００Å、１３０μｍｏｌ／ｇロード）を添加した。室温で１８時間の間静置した後、該ＣＰＧをＭｅＣＮ（１００ｍｌ×３回）でリンスした。Ｎ−メチルイミダゾール（ＴＨＦ中２３９Ｍ、５０ｍｌ）及び酢酸無水物（５０ｍｌ）を添加した。室温で１０分の間静置した後、該ＣＰＧをＭｅＣＮ（１００ｍｌ×２回）、ＭｅＯＨ（１００ｍｌ×２回）及びＤＣＭ（１００ｍｌ×２回）でリンスし、真空下で乾燥させることによって、最終誘導化ＣＰＧ２３９を得た。試料の脱トリチル化および比色定量化によって、３５μｍｏｌ／ｇＣＰＧのロードが示された。
【０２９５】
実施例４０
化合物２４０の調製
【化１５０】
2018505141.tif 000152
２−シアノエチル（１−（２−（９−エチル−４，６，８，８−テトラメチル−２−オキソ−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）アセチル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに、化合物２１６（２．１２ｇ、５．０ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（３０ｍＬ）を投入した。該懸濁液に、１Ｈ-テトラゾール（１９５ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を添加し、その後にＤＣＭ（５ｍＬ）中３−（（ビス（ジイソプロピルアミノ）ホスフィノ）オキシ）−プロパンニトリル（３．３２ｇ、１１ｍｍｏｌ）溶液を添加した。室温で３．５時間の間撹拌した後、追加の３−（（ビス（ジイソプロピルアミノ）ホスフィノ）オキシ）プロパンニトリル（２．００ｇ、６．６ｍｍｏｌ）を添加した。さらなる１５時間の後、該溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２５０ｍＬ）中に注ぎ入れて、ＤＣＭ（１００ｍｌ×３回）で抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２００ｍＬ×２回）及び飽和食塩水（３００ｍＬ）で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥し、その後に濃縮することによって、６．２０ｇの淡黄色シロップを得た。この粗製物質を、５０％〜１００％ ＤＣＭ／１％ＴＥＡを添加した石油エーテルを用いたアルミナ上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２４０を淡黄色シロップとして得た（１．７４ｇ、５６％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ３４Ｈ４９Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：６２４．３４，実測値：５２３．２２（Ｍ−ｉ−Ｐｒ２Ｎ）
【０２９６】
実施例４１
化合物２４１の調製
【化１５１】
2018505141.tif 000153
１−エチル−７−ヒドロキシ−２，２，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−カルボアルデヒド
１−エチル−２，２，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−オール（２１．９ｇ、１００ｍｍｏｌ）を、酢酸無水物（７０ｍＬ）中に溶解し、Ｎ２下にて２時間の間１００℃で加熱した。この溶液を濃縮した。該残渣に水（１５０ｍＬ）及びＤＣＭ（１００ｍＬ）を添加して、該混合物を３０分の間撹拌した。これらの層を分離した。水層を、さらにＤＣＭ（１５０ｍＬ×２回）で抽出した。有機抽出物を併せて、水（５００ｍＬ×２回）で洗浄し、飽和食塩水（５００ｍＬ）で洗浄して、乾燥（ＭｇＳＯ４）及び濃縮することによって、シロップを得た。ＰＯＣｌ３を、氷浴中で冷却されたＤＭＦ（６０ｍＬ）中にゆっくりと添加して、該混合物を３０分の間撹拌した。上記の該シロップをＤＭＦ（２５ｍＬ）中に溶解して、１０分にわたって該ＰＯＣｌ３／ＤＭＦ混合液に添加した。氷浴を取り除き、該反応物を室温で２時間の間撹拌した後、１時間の間１００℃に加熱した。該反応物を冷却して、氷（２５０ｇ）中に撹拌しながら注ぎ入れた。該混合物を、ＤＣＭ（２５０ｍＬ×２回）で抽出した。有機抽出物を併せて、水（５００ｍＬ）で洗浄し、飽和食塩水（５００ｍＬ）で洗浄して、乾燥（ＭｇＳＯ４）及び濃縮することによって、暗緑色シロップを得た（２８．２ｇ）。この粗製物質を、０％〜１％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２４１をコハク色シロップとして得た（２２．７ｇ、９２％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１５Ｈ２１ＮＯ２の計算値：２４７．１６，実測値：２４７．１６
【０２９７】
実施例４２
化合物２４２の調製
【化１５２】
2018505141.tif 000154
９−エチル−３−（４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボニル）−６，８，８−トリメチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−２−オン
化合物２４１（６．１８ｇ、２５ｍｍｏｌ）、マロン酸ジエチル（４．８１ｇ、３０ｍｍｏｌ）、４−ヒドロキシピペリジン（９．１０ｇ、９０ｍｍｏｌ）、ピペリジン（４滴）及び酢酸（４滴）を、マグネチックスターラーを備えたバイアルに添加した。該反応物を、３．５時間の間１００℃に加熱した。冷却後、該シロップを水（３００ｍＬ）中に注ぎ入れ、ＤＣＭ（１５０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相を水（２００ｍＬ×２回）、１Ｍクエン酸水溶液（２００ｍＬ×３回）及び飽和食塩水（３５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、暗コハク色泡状物８．１４ｇを得た。この粗製物質を、０％〜５％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２４２を金色泡状物として得た（６．５７ｇ、６６％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２３Ｈ３０Ｎ２Ｏ４の計算値：３９８．２２，実測値：３９８．２２
【０２９８】
実施例４３
化合物２４３の調製
【化１５３】
2018505141.tif 000155
２−シアノエチル（１−（９−エチル−６，８，８−トリメチル−２−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−カルボニル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに、化合物２４２（５．９８ｇ、１５ｍｍｏｌ）及びＭｅＣＮ（１００ｍＬ）を投入した。１Ｈ-テトラゾール（３１５ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）を添加し、その後にＭｅＣＮ（１０ｍＬ）中３−（（ビス（ジイソプロピルアミノ）ホスフィノ）オキシ）プロパンニトリル（５．４３ｇ、１８ｍｍｏｌ）溶液を添加した。室温で１５時間の間撹拌した後、該溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）中に注ぎ入れ、ＤＣＭ（１００ｍＬ×２回）で抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２００ｍＬ）及び飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥させ、その後に濃縮することによって、金色泡状物８．６６ｇを得た。この粗製物質を、５０％〜１００％ＤＣＭ／１％ＴＥＡを添加した石油エーテルを用いたアルミナ上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２４３を黄色粘性シロップとして得た（６．９０ｇ、７７％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ３２Ｈ４７Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：５９８．３３，実測値：５９８．３３
【０２９９】
実施例４４
化合物２４４の調製
【化１５４】
2018505141.tif 000156
２−（１，１，７，７，９−ペンタメチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）酢酸メチル
マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコに、３−１，１，７，７−テトラメチル−１，２，３，５，６，７−ヘキサヒドロピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−８−オール（２４．５ｇ、１００ｍｍｏｌ）、２−アセチルコハク酸ジメチル（３７．６ｇ、２００ｍｍｏｌ）及び塩化亜鉛（３８．２ｇ、２８０ｍｍｏｌ）を投入した。該混合物を４８時間の間１２０℃に加熱して、冷却した。該反応物全体を、ＤＣＭ（（５００ｍＬ）と、濃ＨＣｌ（３０ｍＬ）を添加した水（１Ｌ）との間で分配した。各層を分離して、水相をＤＣＭ（４００ｍＬ×３回）で抽出した。有機相を併せて、濃ＨＣｌ（３０ｍＬ）を添加した水（１Ｌ）、淡水（１Ｌ）及び飽和食塩水（１Ｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濃縮することによって、暗緑色シロップ３６．０ｇを得た。この粗製物質を、０％〜２％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって暗茶色シロップを得た。該暗茶色シロップをエーテル（４００ｍＬ）中に溶解し、０．５Ｎ ＫＯＨ（２００ｍＬ×２回、１００ｍＬ）で洗浄し、飽和食塩水（４００ｍＬ）で洗浄して、乾燥（ＭｇＳＯ４）及び濃縮することによって、暗茶色泡状物を得た（１９．４ｇ）。ＩＰＡ（３０ｍｌ）より再結晶することによって、化合物２４４を黄色粘性泡状物として得た（９．３３ｇ、２４％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２３Ｈ２９ＮＯ４の計算値：３８３．２１，実測値：３８３．２１
【０３００】
実施例４５
化合物２４５の調製
【化１５５】
2018505141.tif 000157
２−（１，１，７，７，９−ペンタメチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）酢酸
上記実施例４４からのシリカゲルカラム精製物を、１０％ＭｅＯＨ／１％ＡＣＯＨを添加したＤＣＭを用いてさらに溶出することにより、化合物２４５を暗緑色固体．として得た（５．００ｇ、１４％収率）。上記実施例４４からの塩基性抽出物を酸性化することにより、化合物２４５をさらに３．２０ｇ得た（３．２０ｇ、９％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２２Ｈ２７ＮＯ４の計算値：３６９．１９，実測値：３６９．１９
【０３０１】
実施例４６
化合物２４６の調製
【化１５６】
2018505141.tif 000158
２−（１，１，７，７，９−ペンタメチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル
化合物２４５（８．１０ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中炭酸Ｎ，Ｎ’−ジコハク酸イミジル（６．７４ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（３．２６ｇ、２５．２ｍｍｏｌ）と反応させた。室温で１５時間の間撹拌した後、該溶液を４０ｍＭ冷ＨＣｌ（１．３Ｌ）中に注ぎ入れた。吸引濾過することによって、黄色固体を得た。該黄色固体を水（５０ｍＬ×２回）で洗浄し、乾燥することによって、化合物２４６をコハク色固体として得た（８．７０ｇ、８５％収率）。
【０３０２】
実施例４７
化合物２４７の調製
【化１５７】
2018505141.tif 000159
１０−（２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−１，１，７，７，９−ペンタメチル−２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１１（５Ｈ）−オン
化合物２４６（７．００ｇ、１５ｍｍｏｌ）及び４−ヒドロキシ−ピペリジン（１．８２ｇ、１８ｍｍｏｌ）を、マグネチックスターラーを備えた丸底フラスコ内にてＤＭＦ（４０ｍＬ）中に溶解した。室温で２．５時間の間撹拌した後、該フラスコを一晩の間−２０℃に保った。沈殿物を濾別し、濾液を水（８００ｍＬ）中に注ぎ入れた。該混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ×４回）で抽出し、水（４００ｍＬ）で洗浄し、飽和食塩水（４００ｍＬ）で洗浄して、乾燥（ＭｇＳＯ４）及び濃縮することによって、黒色泡状物を得た（６．５６ｇ）。この粗製物質を、０％〜５％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、それによって化合物２４７を暗茶色泡状物として得た（３．９４ｇ、５８％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２７Ｈ３６Ｎ２Ｏ４の計算値：４５２．２７，実測値：４５２．２７
【０３０３】
実施例４８
化合物２４８の調製
【化１５８】
2018505141.tif 000160
２−シアノエチル（１−（２−（１，１，７，７，９−ペンタメチル−１１−オキソ−２，３，５，６，７，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］ピリド［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１０−イル）アセチル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
化合物２１６の代わりに化合物２４７（３．５０ｇ、７．７３ｍｍｏｌ）を用い、またＤＣＭの代わりにＭｅＣＮを用いて実施例４０の手順に従い、それによって、化合物２４８をコハク色シロップとして得た（４．７５ｇ、９４％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ３６Ｈ５３Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：６５２．３８，実測値：５５１．２６（Ｍ−ｉ−Ｐｒ２Ｎ）
【０３０４】
実施例４９
化合物２４９の調製
【化１５９】
2018505141.tif 000161
２−（４，６，８，８，９−ペンタメチル−２−オキソ−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）酢酸メチル
１−エチル−２，２，４−トリメチル−１，２−ジヒドロキノリン−７−オール臭化水素酸塩の代わりに１，２，２，４−テトラメチル−１，２−ジヒドロキノリン−７−オール（４３．２ｇ、２２８ｍｍｏｌ）を用いて実施例６の手順に従い、それによって、化合物２４９を黄色固体として得た（２６．２ｇ、３４％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２０Ｈ２３ＮＯ４の計算値：３４１．１６，実測値：３４１．１６
【０３０５】
実施例５０
化合物２５０の調製
【化１６０】
2018505141.tif 000162
２−（４，６，８，８，９−ペンタメチル−２−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）酢酸メチル
化合物２４９（８．５５ｇ、２５ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（２００ｍＬ）中に溶解した。トリエチルシラン（２９．１ｇ、２５０ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（５７．０ｇ、５００ｍｍｏｌ）を添加して、該混合物を１３時間の間還流させた。該反応物を冷却し、１Ｎ ＮａＯＨ（５００ｍＬ）、水（５００ｍＬ）及び飽和食塩水（５００ｍＬ）で洗浄した。乾燥（ＭｇＳＯ４）及び濃縮することによって、化合物２５０を淡黄褐色固体として得た（８．５９ｇ、１００％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２０Ｈ２５ＮＯ４の計算値：３４３．１８，実測値：３４３．１８
【０３０６】
実施例５１
化合物２５１の調製
【化１６１】
2018505141.tif 000163
２−（４，６，８，８，９−ペンタメチル−２−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）酢酸
化合物２０２の代わりに化合物２５０（６．８７ｇ、２０ｍｍｏｌ）を用いて実施例３の手順Ｂに従い、それによって、化合物２５１を黄色固体として得た（５．０９ｇ、７７％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１９Ｈ２３ＮＯ４の計算値：３２９．１６，実測値：３２９．１６
【０３０７】
実施例５２
化合物２５２の調製
【化１６２】
2018505141.tif 000164
２−（４，６，８，８，９−ペンタメチル−２−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）酢酸２，５−ジオキソピロリジン−１−イル
化合物２４５の代わりに化合物２５１（３．９５ｇ、１２ｍｍｏｌ）を用いて実施例４６の手順に従い、それによって、化合物２５２を黄色固体として得た（４．５６ｇ、８９％収率）。
【０３０８】
実施例５３
化合物２５３の調製
【化１６３】
2018505141.tif 000165
３−（２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−４，６，８，８，９−ペンタメチル−６，７，８，９−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−２−オン
化合物２１１の代わりに化合物２５２（４．００ｇ、９．３８ｍｍｏｌ）を用いて実施例１６の手順に従い、それによって、化合物２５３を黄褐色固体として得た（３．９０ｇ、１００％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２４Ｈ３２Ｎ２Ｏ４の計算値：４１２．２４，実測値：４１２．２４
【０３０９】
実施例５４
化合物２５４の調製
【化１６４】
2018505141.tif 000166
２−シアノエチル（１−（２−（４，６，８，８，９−ペンタメチル−２−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−イル）アセチル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
化合物２１６の代わりに化合物２５３（３．５０ｇ、８．４８ｍｍｏｌ）を用いて実施例４０の手順に従い、それによって、化合物２５４を金色泡状物として得た（３．９０ｇ、７５％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ３３Ｈ４９Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：６１２．３４，実測値：６１２．３４
【０３１０】
実施例５５
化合物２５５の調製
【化１６５】
2018505141.tif 000167
１−エチル−７−ヒドロキシ−２，２，４−トリメチル−１，２−ジヒドロキノリン−６−カルボアルデヒド
１−エチル−２，２，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−オールの代わりに１−エチル−２，２，４−トリメチル−１，２−ジヒドロキノリン−７−オール（２１．７ｇ、１００ｍｍｏｌ）を用いて実施例４１の手順に従い、それによって、化合物２５５を黒色シロップとして得た（１２．１ｇ、５０％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１５Ｈ１９ＮＯ２：２４５．１４の計算値，実測値：２４５．１４
【０３１１】
実施例５６
化合物２５６の調製
【化１６６】
2018505141.tif 000168
９−エチル−３−（４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボニル）−６，８，８−トリメチル−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−２−オン
化合物２４１の代わりに化合物２５５（８．５２ｇ、２９．７ｍｍｏｌ）を用いて実施例４２の手順に従い、それによって、化合物２５５を暗コハク色泡状物として得た（９．５２ｇ、５１％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２３Ｈ２８Ｎ２Ｏ４の計算値：３９６．２０，実測値：３９６．２０
【０３１２】
実施例５７
化合物２５７の調製
【化１６７】
2018505141.tif 000169
２−シアノエチル（１−（９−エチル−６，８，８−トリメチル−２−オキソ−８，９−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［３，２−ｇ］キノリン−３−カルボニル）ピペリジン−４−イル）ジイソプロピルホスホロアミダイト
化合物２４２の代わりに化合物２５６（２．９７ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を用いて実施例４３の手順に従い、それによって、化合物２５７を橙色泡状物として得た（３．６２ｇ、８０％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ３２Ｈ４５Ｎ４Ｏ５Ｐの計算値：５９６．３１，実測値：５９６．３１
【国際調査報告】
2018505141.tif 000179