(57)【要約】本発明は、患者の、抗α４β７抗体による治療方法であって、その抗体療法の結果を予測することを含む方法を提供する。本発明は、抗α４β７抗体を含む療法に反応できる患者の特定に関する。
2018503618.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者の治療方法であって、
ａ）患者におけるベドリズマブの濃度を測定する工程であって、少なくとも２週間前に、前記患者に、ベドリズマブの誘導期投与レジメンを実施してある工程と、
ｂ）工程ａ）におけるベドリズマブの測定によって、低いクリアランスが示される前記患者を選択する工程と、
ｃ）前記選択した患者にベドリズマブを投与し、それによってＩＢＤを治療する工程と、
を含む前記方法。
【請求項２】
前記ベドリズマブの濃度が、血清中濃度である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記血清中濃度が、血清中トラフ濃度である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、前記患者を選択する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記濃度測定値を用いて、クリアランス速度を計算する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記クリアランス速度が０．２５Ｌ／日未満である場合に、前記患者を選択する、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
ＩＢＤ患者の治療方法であって、
ａ）前記ＩＢＤ患者にベドリズマブを２用量投与する工程であって、前記患者に１回目の用量を投与した約２週間後に、２回目の用量を投与する工程と、
ｂ）前記患者を選択する工程であって、前記２回目の用量の投与から少なくとも２週間後に割り出した場合に、前記患者の血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである工程と、
ｃ）前記選択した患者にベドリズマブを投与し、それによって、前記ＩＢＤ患者を治療する工程と、
を含む前記方法。
【請求項８】
ＩＢＤ患者の治療方法であって、
ａ）前記ＩＢＤ患者にベドリズマブを２用量投与する工程であって、前記患者に１回目の用量を投与してから約２週間後に、２回目の用量を投与する工程と、
ｂ）約４週間の期間を置く工程と、
ｃ）前記患者のベドリズマブの血清中濃度を測定する工程と、
ｄ）前記患者の血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、前記患者に、更なる用量のベドリズマブを１回以上投与する工程と、
を含む前記方法。
【請求項９】
前記患者の血清中濃度が、１２〜２５μｇ／ｍｌ、１５〜１７μｇ／ｍｌ、１７〜２５μｇ／ｍｌ、１２〜４０μｇ／ｍｌ及び１７〜４０μｇ／ｍｌからなる群から選択されている、請求項３または８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ベドリズマブの血清中濃度をサンドイッチＥＬＩＳＡアッセイによって測定する、請求項２、３、７または８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記患者が粘膜治癒をしている、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
内視鏡サブスコアを測定することを更に含み、３未満の内視鏡サブスコアで、ベドリズマブを継続する、請求項１、７または８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
２．５未満の内視鏡サブスコアで、ベドリズマブを継続する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
２未満の内視鏡サブスコアで、ベドリズマブを継続する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
ＳＥＳ−ＣＤを測定することを更に含み、ＳＥＳ−ＣＤスコア≦６で、ベドリズマブを継続する、請求項１、７または８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＳＥＳ−ＣＤスコアが≦４である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ＭａＲＩＡを測定することを更に含み、ＭａＲＩＡスコア＜１２で、ベドリズマブを継続する、請求項１、７または８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＭａＲＩＡスコアが＜７である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
便中カルプロテクチン濃度を測定することを更に含む、請求項１、７または８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
＜１５００μｇ／ｇの便中カルプロテクチン濃度で、ベドリズマブを継続する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記便中カルプロテクチンが、治療前の濃度の＜５０％に低下している場合に、ベドリズマブを継続する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
ＩＢＤ患者の治療方法であって、
ａ）前記ＩＢＤ患者にベドリズマブを２用量投与する工程であって、前記患者に１回目の用量を投与してから約２週間後に、２回目の用量を投与する工程と、
ｂ）前記患者を選択する工程であって、前記２回目の用量の投与から少なくとも２週間後に割り出した場合に、前記患者の便中カルプロテクチン濃度が＜１５００μｇ／ｇである工程と、
ｃ）前記選択した患者にベドリズマブを投与し、それによって、前記ＩＢＤ患者を治療する工程と、
を含む前記方法。
【請求項２３】
前記便中カルプロテクチンが、前記ベースラインの＜５０％に低下している場合に、ベドリズマブを継続する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法であって、
ａ）過去４カ月以内に、ベドリズマブを少なくとも２用量摂取してあるＩＢＤ患者から得た血清サンプル中のベドリズマブの濃度を測定する工程と、
ｂ）前記サンプル中の前記血清中濃度が、少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、ベドリズマブによる治療を継続する前記患者を特定する工程と、
を含む前記方法。
【請求項２５】
前記患者が、過去３カ月以内に、ベドリズマブを少なくとも２用量摂取してある、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記患者が、過去２カ月以内に、ベドリズマブを少なくとも２用量摂取してある、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
ＳＥＳ−ＣＤを測定することを更に含み、ＳＥＳ−ＣＤスコア≦６で、ベドリズマブを継続する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
ＭａＲＩＡを測定することを更に含み、ＭａＲＩＡスコア＜１２で、ベドリズマブを継続する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
前記ベドリズマブの血清中濃度をサンドイッチＥＬＩＳＡアッセイによって測定する、請求項２４に記載の方法。
【請求項３０】
前記患者が粘膜治癒をしている、請求項２４に記載の方法。
【請求項３１】
前記患者の内視鏡サブスコアが３未満である、請求項２４に記載の方法。
【請求項３２】
前記患者の内視鏡サブスコアが２未満である、請求項２４に記載の方法。
【請求項３３】
前記患者の内視鏡サブスコアが０〜２である、請求項２４に記載の方法。
【請求項３４】
ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法であって、
ａ）過去２カ月以内に、ベドリズマブを少なくとも１用量摂取してあるＩＢＤ患者から得た血清サンプル中のベドリズマブの濃度を測定する工程と、
ｂ）前記サンプル中の前記血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、ベドリズマブによる治療を継続する前記患者を特定する工程と、
を含む前記方法。
【請求項３５】
前記患者が、過去１カ月以内に、ベドリズマブを少なくとも１用量摂取してある、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
患者における炎症性腸疾患の寛解維持方法であって、前記患者が、過去２カ月内に、ベドリズマブを少なくとも１用量摂取してあり、
ａ）血清サンプルを前記患者から得ることと、
ｂ）前記サンプル中のベドリズマブの濃度を測定することと、
ｃ）前記濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、それ以降、８週間おきにベドリズマブを投与することと、
を含む前記方法。
【請求項３７】
前記患者の内視鏡サブスコアを測定することと、
前記患者が深い寛解状態である場合に、前記患者をベドリズマブで治療するのを継続することと、
を更に含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
前記内視鏡サブスコアが０〜１である場合に、前記患者が深い寛解状態であると判断し、ベドリズマブの摂取を継続させる、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
患者が報告する転帰スコアを割り出すことを更に含み、深い寛解状態の判断に、前記内視鏡サブスコアと、前記患者が報告する転帰スコアの両方が０〜１であることが含まれる、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
患者が報告する転帰が、直腸出血サブスコアを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
患者が報告する転帰が、排便頻度サブスコアを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
便中カルプロテクチン濃度を測定することを更に含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４３】
＜１５００μｇ／ｇの便中カルプロテクチン濃度で、ベドリズマブを継続する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記便中カルプロテクチンが、治療前の濃度の＜５０％に低下している場合に、ベドリズマブを継続する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法であって、
ａ）過去４カ月以内に、ベドリズマブを少なくとも２用量投与してあるＩＢＤ患者から得た生体サンプル中のベドリズマブのクリアランスを測定する工程と、
ｂ）前記患者における前記クリアランスが０．２５Ｌ／日未満である場合に、ベドリズマブによる治療を継続する前記患者を特定する工程と、
を含む前記方法。
【請求項４６】
抗ベドリズマブ抗体を測定することを更に含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
≦１２５の抗ベドリズマブ抗体力価によって、ベドリズマブによる治療を継続する前記患者を更に特定する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
アルブミン濃度を測定することを更に含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
アルブミン濃度＞３．２ｇ／ｄＬによって、ベドリズマブによる治療を継続する前記患者を更に特定する、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
便中カルプロテクチン濃度を測定することを更に含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項５１】
＜１５００μｇ／ｇの便中カルプロテクチン濃度で、ベドリズマブを継続する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記便中カルプロテクチンが、治療前の濃度の＜５０％に低下している場合に、ベドリズマブを継続する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）のヒト患者の治療方法であって、
ａ）ベドリズマブの２回目の用量の投与から４週間後の時点に、ベドリズマブの血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌであるＩＢＤを有するヒト患者を選択する工程であって、ベドリズマブの前記２回目の用量の投与の２週間前に、前記対象にベドリズマブの１回目の用量を投与してある工程と、
ｂ）前記ＩＢＤを有するヒト患者に、ベドリズマブを投与し、それによって、前記ＩＢＤを有するヒト患者を治療する工程と、
を含む前記方法。
【請求項５４】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）のヒト患者の、ベドリズマブによる治療に対する反応性のインビトロ判断方法であって、前記患者から得た血液サンプルを抗ベドリズマブ抗体と接触させることによって、前記血液サンプル中のベドリズマブ濃度を測定することを含み、
ベドリズマブの２回目の用量の投与から約４週間後に、前記サンプルを採取し、
ベドリズマブの前記２回目の用量の投与の２週間前に、前記対象にベドリズマブの１回目の用量を投与してあり、
前記血液サンプル中のベドリズマブ濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌであることによって、前記患者が、ベドリズマブによる治療に対する反応性を持つことが示され、前記血液サンプル中の濃度が８μｇ／ｍｌ未満であることによって、前記患者が、ベドリズマブによる治療に対する反応性を持たないことが示される、前記方法。
【請求項５５】
ベドリズマブの前記１回目の用量に、３００ｍｇのベドリズマブが含まれる、請求項５３または５４に記載の方法。
【請求項５６】
ベドリズマブの前記２回目の用量に、３００ｍｇのベドリズマブが含まれる、請求項５３または５４に記載の方法。
【請求項５７】
前記患者が、前記１回目の用量と前記２回目の用量を静脈内摂取している、請求項５３〜５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
ベドリズマブを前記患者に投与することを更に含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５９】
前記患者のＴＮＦブロッカーに対する反応が不十分であったか、前記患者がＴＮＦブロッカーに対する反応を喪失していたか、または前記患者がＴＮＦブロッカーに不耐であった、請求項５３〜５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者のコルチコステロイド非投与下寛解の実現方法であって、前記患者が、コルチコステロイドに依存していたとともに、前記方法が、
ａ）ベドリズマブの２回目の用量の投与から４週間後の時点に、ベドリズマブのクリアランスが低いＩＢＤを有するヒト患者を選択することであって、ベドリズマブの前記２回目の用量の投与の２週間前に、ベドリズマブの１回目の用量を前記対象に投与してあることと、
ｂ）ベドリズマブを前記ＩＢＤを有するヒト患者に投与することと、
ｃ）コルチコステロイドが投与されなくなるまで、漸減レジメンによって、コルチコステロイドの量を減らすことと、
を含み、
それによって、前記ＩＢＤ患者において、コルチコステロイド非投与下寛解を実現する、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、２０１４年１２月２４日に提出された米国特許仮出願第６２／０９６，６３６号、２０１５年２月１８日に提出された米国特許仮出願第６２／１１７，７５０号及び２０１５年３月１３日に提出された米国特許仮出願第６２／１３２，９１７号に基づく利益を主張するものである。上記の出願の内容の全体は、参照により、本明細書に援用される。
【背景技術】
【０００２】
例えば、潰瘍性大腸炎及びクローン病のような炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、胃腸管の炎症を伴う消耗性かつ進行性の疾患であり得る。ＩＢＤの治療には、抗炎症薬（コルチコステロイド及びスルファサラジンなど）、免疫抑制薬（６−メルカプトプリン、シクロスポリン及びアザチオプリンなど）、ならびに手術（結腸切除術など）が含まれている。Ｐｏｄｏｌｓｋｙ，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３２５：９２８−９３７（１９９１）及びＰｏｄｏｌｓｋｙ，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３２５：１００８−１０１６（１９９１）。疾患が進行すると、治療は、副作用の進行リスクとクオリティ・オブ・ライフの喪失に患者をさらすレジメンに進む。
【０００３】
インテグリン受容体は、炎症部位へのリンパ球の再循環と動員の両方を調節するために重要である（Ｃａｒｌｏｓ，Ｔ．Ｍ．ａｎｄ  Ｈａｒｌａｎ，Ｊ．Ｍ．，Ｂｌｏｏｄ，８４：２０６８−２１０１（１９９４））。ヒトα４β７インテグリンには、いくつかのリガンドがあり、そのうちの１つは、粘膜血管アドレシンＭＡｄＣＡＭ−１（Ｂｅｒｌｉｎ，Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  ７４：１８５−１９５（１９９３）、Ｅｒｌｅ，Ｄ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５３：５１７−５２８（１９９４））であり、ＭＡｄＣＡＭ−１は、腸間膜リンパ節の高内皮細静脈とパイエル板で発現する（Ｓｔｒｅｅｔｅｒ，Ｐ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３１：４１−４６（１９９８））。したがって、α４β７インテグリンは、腸管粘膜リンパ組織へのリンパ球遊走を仲介するホーミング受容体として機能する（Ｓｃｈｗｅｉｇｈｏｆｆｅｒ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：７１７−７２９（１９９３））。
【０００４】
マウスモノクローナル抗体Ａｃｔ−１（ｍＡｂ  Ａｃｔ−１）のような、ヒトα４β７インテグリンに対する抗体は、粘膜リンパ節の高内皮細静脈に存在する粘膜アドレシン細胞接着分子−１（ＭＡｄＣＡＭ−１）にα４β７インテグリンが結合するのを妨げる。Ａｃｔ−１は、Ｌａｚａｒｏｖｉｔｓ，Ａ．Ｉ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３３：１８５７−１８６２（１９８４）によって、ヒト破傷風トキソイド特異的Ｔリンパ球で免疫したマウスから初めて単離され、マウスＩｇＧ１／κ抗体であることが報告された。その後、Ｓｃｈｗｅｉｇｈｏｆｆｅｒ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：７１７−７２９（１９９３）によってこの抗体が解析されたことによって、この抗体が、α４β７インテグリンを選択的に発現するヒトメモリーＣＤ４＋Ｔリンパ球のサブセットに結合できることが示された。Ｅｎｔｙｖｉｏ（商標）ベドリズマブ（Ａｃｔ−１に由来する構造上の特徴を持つ抗α４β７インテグリンモノクローナル抗体（ｍＡｂ））は、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）とクローン病（ＣＤ）の治療に必要とされている。これらの傷害の治療におけるベドリズマブの活性を報告した研究（Ｆｅａｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ．ＮＥＪＭ  ３６９：６９９−７１０（２０１３）及びＳａｎｄｂｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ．ＮＥＪＭ  ３６９：７１１−７２１（２０１３））では、その傷害と従来療法の性質に応じて、様々なレベルの成功が示された。これらの研究は、長期にわたる研究であったとともに、患者が利用できる治療の選択肢の数が増え続けているので、治療の早い段階でベドリズマブ療法の恩恵を受けることができる患者を特定する必要がある。適切かつ正確な治療判断は、有効な疾患管理につながる。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、ベドリズマブなどの抗α４β７抗体を含む療法に反応できる患者の特定に関する。例えばベドリズマブによる治療の初期に、患者から、または患者の生体サンプルから測定した要因によって、患者が治療に反応する可能性が高いかを示す。
【０００６】
一態様では、薬物動態または薬力学的要因によって、患者が、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療に反応するかを示すことができる。治療用ｍＡｂのトラフ濃度が高いほど、効能が高いとされているので、ｍＡｂのクリアランスの決定因子を理解することによって、投与レジメンを最適化できる。出願者は、問題を特定し、ベドリズマブなどの抗α４β７抗体と、ＵＣ患者及びＣＤ患者における薬物動態的要因の特徴付けを行い、抗体のクリアランスなどの抗α４β７抗体の臨床上関連する決定因子を特定し、集団モデリングを用いて、薬物動態と薬力学との関係を説明した。
【０００７】
いくつかの実施形態では、薬物動態的要因は、平均血清中トラフ濃度である。別の実施形態では、薬物動態的要因は、治療用抗体のクリアランスである。一実施形態では、薬力学的要因は、α４β７インテグリンに結合している抗体の量である。別の実施形態では、薬力学的要因は、結合していないα４β７インテグリンの量である。
【０００８】
一実施形態では、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者の、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療方法は、ＩＢＤ患者に抗α４β７抗体を２用量投与することであって、１回目の用量を患者に投与してから約２週間後に、２回目の用量を投与することと、約４週間の期間を置くことと、患者の抗α４β７抗体の血清中濃度を測定することと、患者の上記抗体の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、患者に、更なる用量の抗α４β７抗体を１回以上投与することを含む。いくつかの実施形態では、時間を置く期間は、２週間または約２〜５週間である。一実施形態では、この方法は、ＩＢＤ患者にベドリズマブを２用量投与することであって、１回目の用量を患者に投与してから約２週間後に、２回目の用量を投与することと、約４週間の期間を置くことと、患者のベドリズマブの血清中濃度を測定することと、患者の上記抗体の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、患者に、更なる用量のベドリズマブを１回以上投与することを含む。いくつかの実施形態では、患者の抗α４β７抗体、例えばベドリズマブの血清中濃度は、少なくとも１０μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌまたは４０μｇ／ｍｌであってよい。一実施形態では、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブに反応する可能性が高い患者の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度は、１７μｇ／ｍｌ超、２５μｇ／ｍｌ超または３５μｇ／ｍｌ超である。別の実施形態では、患者の抗α４β７抗体、例えばベドリズマブの血清中濃度は、１２〜２５μｇ／ｍｌ、１５〜１７μｇ／ｍｌ、１７〜２５μｇ／ｍｌ、１２〜４０μｇ／ｍｌ及び１７〜４０μｇｍｌからなる群から選択してよい。
【０００９】
別の実施形態では、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者の、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療方法は、ＩＢＤ患者にベドリズマブを少なくとも１用量投与する工程と、少なくとも２週間の期間を置く工程と、患者のベドリズマブの血清中濃度を測定する工程と、患者の血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、患者に、更なる用量のベドリズマブを１回以上投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、時間を置く期間は、約２〜５週間である。
【００１０】
別の態様では、治療早期における臨床的指標によって、患者が、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療に反応するかを示すことができる。一実施形態では、患者は、粘膜治癒をしていることができる。別の実施形態では、患者は、深い寛解状態であることができる。一実施形態では、本発明の患者治療方法は、例えばＭａｙｏスコアから得られる内視鏡サブスコアを測定することを含むことができ、３未満の内視鏡スコアで、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブを継続する。この内視鏡スコアは、２．５未満、２未満、０〜２、１、１以下（≦１）または１未満（（＜１）であることができる。別の実施形態では、患者の治療方法は、クローン病活動性指標（ＣＤＡＩ）を測定することを含むことができる。別の実施形態では、患者の治療方法は、瘻孔の数、サイズまたは重症度を測定することを含むことができる。一実施形態では、内視鏡スコアは、クローン病単純内視鏡スコア（ＳＥＳ−ＣＤ）である。いくつかの実施形態では、ＳＥＳ−ＣＤは、０〜６の範囲、≦６、≦５または４以下（≦４）であることができる。いくつかの実施形態では、ＳＥＳ−ＣＤは、ベースラインから２５％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％または６５％低下している。一実施形態では、ＳＥＳ−ＣＤは、ベースラインから５０％低下している。いくつかの実施形態では、患者の治療方法は、消化管における潰瘍の量を測定することを含むことができる。いくつかの実施形態では、患者の治療方法は、粘膜治癒を測定することを含むことができる。粘膜治癒のいくつかの実施形態では、潰瘍が減少しているかまたは存在しない。
【００１１】
別の態様では、炎症の測定値によって、患者が、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療に反応するかを示すことができる。炎症の測定値としては、便中カルプロテクチンの量、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の量及びアルブミンの量が挙げられる。いくつかの実施形態では、この方法は、便中カルプロテクチン濃度を測定することを含む。１５００μｇ／ｇ未満の便中カルプロテクチン濃度で、抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続することができる。便中カルプロテクチン濃度は、１２５０μｇ／ｇ未満、１０００μｇ／ｇ未満、７５０μｇ／ｇ未満、５００μｇ／ｇ未満、４００μｇ／ｇ未満、３００μｇ／ｇ未満、２５０μｇ／ｇ未満、２００〜１２００μｇ／ｇ、３５０〜８００μｇ／ｇ、３００〜１０００μｇ／ｇ、＜５０μｇ／ｇ、＜１００μｇ／ｇ、＜１５０μｇ／ｇ、＜２００μｇ／ｇ、≦２５０〜４９９μｇ／ｇまたは５００〜９００μｇ／ｇであることができる。
【００１２】
いくつかの実施形態では、便中カルプロテクチンが、ベースライン、すなわち治療前の濃度の５０％未満に低下している場合、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続できる。便中カルプロテクチンは、ベースライン、すなわち治療前の濃度のの４５％未満、４０％未満、３５％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１０〜５５％、１０〜３０％、１５〜３５％、１５〜４５％もしくは２０〜４０％に低下していることができる。
【００１３】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されている方法は、アルブミン濃度を測定することを含む。３．２ｇ／ｄＬ超のアルブミン濃度によって、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続する患者を更に特定する。アルブミン濃度は、３．５ｇ／ｄＬ超、４．０ｇ／ｄＬ超、４．７ｇ／ｄＬ超、３．３〜５．０ｇ／ｄＬの範囲、３．５〜５．０ｇ／ｄＬの範囲、３．８〜５．０ｇ／ｄＬの範囲または４．０〜５．０ｇ／ｄＬの範囲であることができる。
【００１４】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されているように測定した要因が療法を継続するメリットがあるか示すとき、適宜に療法を継続するか、中止するか、停止するかまたは止める工程を更に含む治療方法に関する。
【００１５】
一実施形態では、抗α４β７抗体による治療を継続する患者の特定方法は、過去２カ月以内に、抗α４β７抗体を少なくとも１用量摂取した炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者から得た血清サンプル中の抗α４β７抗体の濃度を測定する工程と、そのサンプルの血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、抗α４β７抗体による治療を継続する患者を特定する工程を含む。患者は、過去１カ月以内に抗α４β７抗体を少なくとも１用量摂取してあってもよい。別の実施形態では、患者は、過去４カ月以内に、抗α４β７抗体を少なくとも２用量摂取してあり、上記の方法は、２回目の用量の投与から４週間後に、例えば、２週目における投与から４週間後に、サンプルの血清中濃度が、少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、抗α４β７抗体による治療を継続する患者を特定する。患者は、過去３カ月または過去２カ月以内に、抗α４β７抗体を少なくとも２用量摂取してあってよい。いくつかの実施形態では、患者の抗α４β７抗体の血清中濃度は、少なくとも１０μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌまたは４０μｇ／ｍｌであってよい。別の実施形態では、患者の抗α４β７抗体の血清中濃度は、１２〜２５μｇ／ｍｌ、１５〜１７μｇ／ｍｌ、１７〜２５μｇ／ｍｌ、１２〜４０μｇ／ｍｌ及び１７〜４０μｇ  ｍｌからなる群から選択してよい。
【００１６】
一実施形態では、ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法は、過去４カ月以内に、ベドリズマブを少なくとも２用量摂取した炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者から得た血清サンプル中のベドリズマブの濃度を測定する工程と、２回目の用量の投与から４週間後に、例えば２週目における投与から４週間後に、サンプルの血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、ベドリズマブによる治療を継続する患者を特定する工程を含む。患者は、過去３カ月または過去２カ月以内に、ベドリズマブを少なくとも２用量摂取してあってもよい。いくつかの実施形態では、患者のベドリズマブの血清中濃度は、少なくとも１０μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌまたは４０μｇ／ｍｌであってよい。別の実施形態では、患者のベドリズマブの血清中濃度は、１２〜２５μｇ／ｍｌ、１５〜１７μｇ／ｍｌ、１７〜２５μｇ／ｍｌ、１２〜４０μｇ／ｍｌ及び１７〜４０μｇ  ｍｌからなる群から選択してよい。
【００１７】
別の実施形態では、本発明は、ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法であって、過去２カ月以内にベドリズマブを少なくとも１用量摂取した炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者から得た血清サンプル中のベドリズマブの濃度を測定する工程と、そのサンプルの血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、ベドリズマブによる治療を継続する患者を特定する工程を含む方法に関する。患者は、過去１カ月以内にベドリズマブを少なくとも１用量摂取してあってもよい。いくつかの実施形態では、患者のベドリズマブの血清中濃度は、少なくとも１０μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌまたは４０μｇ／ｍｌであってよい。別の実施形態では、患者のベドリズマブの血清中濃度は、１２〜２５μｇ／ｍｌ、１５〜１７μｇ／ｍｌ、１７〜２５μｇ／ｍｌ、１２〜４０μｇ／ｍｌ及び１７〜４０μｇ  ｍｌからなる群から選択してよい。
【００１８】
別の態様では、治療の継続には、ＩＢＤの寛解を維持することが含まれる。
【００１９】
一実施形態では、本発明は、患者における炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の寛解の維持方法であって、その患者が、過去２カ月内に抗α４β７抗体を少なくとも１用量摂取してあり、その患者から血清サンプルを得ることと、そのサンプル中の抗α４β７抗体の濃度を測定することと、その濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、それ以降、８週間おきに抗α４β７抗体を投与することを含む方法に関する。いくつかの実施形態では、患者の抗α４β７抗体の血清中濃度は、少なくとも１０μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌまたは４０μｇ／ｍｌであってよい。別の実施形態では、患者の抗α４β７抗体の血清中濃度は、１２〜２５μｇ／ｍｌ、１５〜１７μｇ／ｍｌ、１７〜２５μｇ／ｍｌ、１２〜４０μｇ／ｍｌ及び１７〜４０μｇ  ｍｌからなる群から選択してよい。
【００２０】
一実施形態では、本発明は、患者における炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の寛解の維持方法であって、その患者が、過去２カ月内にベドリズマブを少なくとも１用量摂取してあり、その患者から血清サンプルを得ることと、そのサンプル中のベドリズマブの濃度を測定することと、その濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌである場合に、それ以降、８週間おきにベドリズマブを投与することを含む方法に関する。いくつかの実施形態では、患者のベドリズマブの血清中濃度は、少なくとも１０μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌまたは４０μｇ／ｍｌであってよい。別の実施形態では、患者のベドリズマブの血清中濃度は、１２〜２５μｇ／ｍｌ、１５〜１７μｇ／ｍｌ、１７〜２５μｇ／ｍｌ、１２〜４０μｇ／ｍｌ及び１７〜４０μｇ  ｍｌからなる群から選択してよい。
【００２１】
一態様では、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療の初期における患者の評価によって、患者が深い寛解状態であることが示される。一実施形態では、本発明は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者の、ベドリズマブによる治療方法であって、ベドリズマブを２用量供給することであって、その２回目の用量が、１回目の約２週間後であることと、約４週間置くことと、患者が深い寛解状態である場合に、患者をベドリズマブで治療するのを継続することであって、深い寛解状態を判断することが、その患者の内視鏡サブスコアを測定することを含むことを含む方法に関する。内視鏡サブスコアが０〜１である場合に、患者は深い寛解状態であると判断して、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブを摂取するのを継続できる。この方法は、患者が報告する転帰スコアを判断することを更に含むことができ、深い寛解状態の判断には、内視鏡サブスコアと、患者が報告する転帰スコアの両方が０〜１であることを含む。患者が報告する転帰スコアは、直腸出血サブスコアを含むことができる。患者が報告する転帰スコアは、排便頻度サブスコアを含むことができる。この方法は、便中カルプロテクチン濃度を測定することを更に含むことができる。１５００μｇ／ｇ未満の便中カルプロテクチン濃度で、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続できる。便中カルプロテクチン濃度は、１２５０μｇ／ｇ未満、１０００μｇ／ｇ未満、７５０μｇ／ｇ未満、５００μｇ／ｇ未満、４００μｇ／ｇ未満、３００μｇ／ｇ未満、２５０μｇ／ｇ未満、２００〜１２００μｇ／ｇ、３５０〜８００μｇ／ｇ、３００〜１０００μｇ／ｇ、＜５０μｇ／ｇ、＜１００μｇ／ｇ、＜１５０μｇ／ｇ、＜２００μｇ／ｇ、≦２５０〜４９９μｇ／ｇまたは５００〜９００μｇ／ｇであることができる。
【００２２】
いくつかの実施形態では、便中カルプロテクチンが、ベースライン、すなわち治療前の濃度の５０％未満に低下している場合に、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続できる。便中カルプロテクチンは、ベースライン、すなわち治療前の濃度の４５％未満、４０％未満、３５％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１０〜５５％、１０〜３０％、１５〜３５％、１５〜４５％または２０〜４０％に低下していることができる
【００２３】
一実施形態では、ベドリズマブの血清中トラフ濃度が、少なくとも２５μｇ／ｍｌ、少なくとも２７μｇ／ｍｌ、少なくとも３０μｇ／ｍｌ、少なくとも３２μｇ／ｍｌまたは少なくとも３４μｇ／ｍｌである場合に、ベドリズマブで治療した患者が深い寛解状態であり、ベドリズマブを投与するのを継続できる。
【００２４】
一態様では、本発明は、抗α４β７抗体による治療を継続する患者の特定方法であって、過去４カ月以内に抗α４β７抗体を少なくとも２用量投与した炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者から得た生体サンプル中の抗α４β７抗体のクリアランスを測定する工程と、その患者におけるクリアランスが０．２５Ｌ／日未満である場合に、抗α４β７抗体による治療を継続する患者を特定する工程を含む方法に関する。いくつかの実施形態では、患者は、過去２カ月以内に抗α４β７抗体を少なくとも１用量投与されているか、患者は、過去３カ月もしくは過去２カ月以内に抗α４β７抗体を少なくとも２用量投与されているか、または患者は、過去２カ月以内もしくは過去１カ月以内に抗α４β７抗体を少なくとも１用量投与されている。クリアランスは、０．２０Ｌ／日未満または０．１〜０．２Ｌ／日であってよい。
【００２５】
一態様では、本発明は、ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法であって、過去４カ月以内にベドリズマブを少なくとも２用量投与されている炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者から得た生体サンプル中のベドリズマブのクリアランスを測定する工程と、その患者におけるクリアランスが０．２５Ｌ／日未満である場合に、ベドリズマブによる治療を継続する患者を特定する工程を含む方法に関する。このクリアランスは、０．２０Ｌ／日未満または０．１〜０．２Ｌ／日であってよい。
【００２６】
いくつかの実施形態では、患者は、過去３カ月または過去２カ月以内にベドリズマブを少なくとも２用量投与されている。
【００２７】
別の態様では、本発明は、ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法であって、過去２カ月以内にベドリズマブを少なくとも１用量投与されている炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者から得た生体サンプル中のベドリズマブのクリアランスを測定する工程と、その患者におけるクリアランスが０．２５Ｌ／日未満である場合に、ベドリズマブによる治療を継続する患者を特定する工程を含む方法に関する。このクリアランスは、０．２０Ｌ／日未満または０．１〜０．２Ｌ／日であってよい。いくつかの実施形態では、患者は、過去１カ月以内にベドリズマブを少なくとも１用量投与されている。いくつかの実施形態では、患者は、過去１カ月以内にベドリズマブを少なくとも２用量投与されている。
【００２８】
本発明は更に、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療に反応する患者を特定するために、本明細書に記載の要因を測定するのに用いるアッセイに関する。いくつかの実施形態では、このアッセイは、循環抗α４β７抗体の薬物動態アッセイである。一実施形態では、このアッセイは、例えば、患者が罹患しているＩＢＤに反応するか、またはそのＩＢＤの反応もしくは寛解を維持する能力を予測するために、患者から得た血清サンプル中の抗α４β７抗体の高い陽性レベルまたは持続陽性レベル（少なくとも８μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌまたは４０μｇ／ｍｌなど）を測定してよい。一実施形態では、抗α４β７抗体の血清中濃度は、サンドイッチＥＬＩＳＡアッセイによって測定してよい。一実施形態では、抗α４β７抗体の血清中濃度は、抗体ブリッジングアッセイで測定してよい。
【００２９】
いくつかの実施形態では、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療に反応する患者を特定するために、本明細書に記載の要因を測定する際に用いるアッセイは、例えば循環リンパ球上のα４β７インテグリンに関する薬力学アッセイである。一実施形態では、低レベルまたは最低限のレベルの遊離α４β７インテグリン（１０％未満、７％未満、５％未満または３％未満の遊離α４β７インテグリンなど）によって、抗α４β７抗体の有効性を予測してよい。一実施形態では、遊離α４β７インテグリンは、α４β７インテグリンに結合しているＭＡｄＣＡＭの量によって測定してよい。別の実施形態では、遊離α４β７インテグリンは、α４β７インテグリンに結合している抗α４β７抗体の量によって測定してよい。
【００３０】
いくつかの実施形態では、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療に反応する患者を特定する目的で、本明細書に記載の要因を測定する際に使用するために、アッセイにより、抗α４β７抗体に対する免疫応答を測定する。一実施形態では、抗α４β７抗体に対する免疫応答が低いかまたは存在しないことによって、患者が罹患しているＩＢＤに反応するか、またはそのＩＢＤの反応もしくは寛解を維持する能力を予測してよい。
【００３１】
この方法は、便中カルプロテクチン濃度を測定することを更に含んでよい。１５００μｇ／ｇ未満の便中カルプロテクチン濃度で、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療を継続してよい。ベドリズマブのような抗α４β７抗体に反応する可能性が高い患者から得たサンプルでは、便中カルプロテクチン濃度は、１２５０μｇ／ｇ未満、１０００μｇ／ｇ未満、７５０μｇ／ｇ未満、５００μｇ／ｇ未満、４００μｇ／ｇ未満、３００μｇ／ｇ未満、２５０μｇ／ｇ未満、２００〜１２００μｇ／ｇ、３５０〜８００μｇ／ｇ、３００〜１０００μｇ／ｇ、＜５０μｇ／ｇ、＜１００μｇ／ｇ、＜１５０μｇ／ｇ、＜２００μｇ／ｇ、≦２５０〜４９９μｇ／ｇまたは５００〜９００μｇ／ｇであってよい。
【００３２】
いくつかの実施形態では、便中カルプロテクチンが、ベースライン、すなわち治療前の濃度の５０％未満に低下している場合に、ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療を継続できる。便中カルプロテクチンは、ベースライン、すなわち治療前の濃度の４５％未満、４０％未満、３５％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１０〜５５％、１０〜３０％、１５〜３５％、１５〜４５％または２０〜４０％に低下していることができる。
【００３３】
一態様では、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）のヒト患者の治療方法は、ベドリズマブの２回目の用量の投与から４週間後の時点に、ベドリズマブの血清中濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌであるＩＢＤを有するヒト患者を選択することであって、ベドリズマブの２回目の用量の投与の２週間前に、ベドリズマブの１回目の用量をその対象に投与してあることと、ベドリズマブをＩＢＤを有するヒト患者に投与し、それによって、ＩＢＤを有するヒト患者を治療することを含む。一実施形態では、ベドリズマブの１回目の用量は、３００ｍｇを含む。一実施形態では、ベドリズマブの２回目の用量は、３００ｍｇを含む。一実施形態では、患者に、１回目及び２回目の用量を静脈内投与してある。いくつかの実施形態では、患者は、ＴＮＦブロッカーに対して不十分な反応を示したか、ＴＮＦブロッカーに対する反応を喪失していたか、またはＴＮＦブロッカーに不耐であった。
【００３４】
本明細書に示されている一実施形態は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）のヒト患者の、ベドリズマブによる治療に対する反応性を判断するインビトロ法であって、その患者から得た血液サンプルを抗ベドリズマブ抗体と接触させることによって、その血液サンプル中のベドリズマブの濃度を測定することを含み、２回目の用量のベドリズマブを投与してから約４週間後に、そのサンプルを採取し、ベドリズマブの２回目の用量の投与の２週間前に、ベドリズマブの１回目の用量を対象に投与し、血液サンプル中のベドリズマブ濃度が少なくとも８μｇ／ｍｌであることによって、患者が、ベドリズマブによる治療に対する反応性を持つことが示され、血液サンプル中の濃度が８μｇ／ｍｌ未満であることによって、患者が、ベドリズマブによる治療に対する反応性を持たないことが示される。一実施形態では、この方法は、ベドリズマブを患者に投与することを更に含む。一実施形態では、ベドリズマブの１回目の用量は、３００ｍｇを含む。一実施形態では、ベドリズマブの２回目の用量は、３００ｍｇを含む。一実施形態では、患者に、１回目及び２回目の用量を静脈内投与してある。いくつかの実施形態では、患者は、ＴＮＦブロッカーに対する反応が不十分であったか、ＴＮＦブロッカーに対する反応を喪失していたか、またはＴＮＦブロッカーに不耐であった。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】ベドリズマブ３００ｍｇ（Ｑ４ＷもしくはＱ８Ｗ）またはプラセボによる維持治療中のＵＣ患者（ＧＥＭＩＮＩ１）とＣＤ患者（ＧＥＭＩＮＩ２）における、名目サンプリング時間に対するベドリズマブの血清中トラフ濃度の観察値の中央値（四分位範囲）を示している。誘導中（０週目及び２週目）に、全ての患者（プラセボグループの患者を含む）に対してベドリズマブ３００ｍｇを２回投与した。
【図２】ベドリズマブの集団薬物動態モデルの図である。Ｃｏｎｃは濃度、Ｋｍはミカエリス−メンテン定数、Ｖｍａｘは最大速度である。
【図３】ＵＣ患者及びＣＤ患者における最終的な集団薬物動態モデルから得た個々のベドリズマブ線形クリアランス（ＣＬＬ）推定値の分布を示している。
【図４】適合度プロットであり、ベドリズマブ濃度の観察値と、最終的な集団薬物動態モデルから得たベドリズマブ濃度の予測値を比較したものである。値は、黒丸で示されており、データを通じて黒色の破線の喪失傾向線が示されている。一致線（白色の実線）が基準として含まれている。
【図５】共変量がベドリズマブの線形クリアランス（ＣＬＬ）に及ぼす効果を示している。各ポイントは、共変量に応じて調節したベドリズマブＣＬＬの正規化サンプルのベイズ事後分布の中央値を、線は９５％確信区間（ＣＤＩ）を表している。基準個体は、体重７０ｋｇ、４０歳で、アルブミンレベルが４ｇ／ｄＬ、便中カルプロテクチンレベルが７００ｍｇ／ｋｇ、ＣＤＡＩスコアが３００（ＣＤ患者）、部分的Ｍａｙｏスコアが６（ＵＣ患者）であり、ＡＤＡ陰性で、併用療法の使用がなく、ＴＮＦ−αアンタゴニスト療法ナイーブである。アルブミン２．７ｇ／ｄＬは、ＧＥＭＩＮＩ１、２及び３の患者におけるベースラインアルブミンレベルの第６パーセンタイル、３．２ｇ／ｄＬは第１８パーセンタイル、３．７ｇ／ｄＬは第５０パーセンタイル、４．０ｇ／ｄＬは第７０パーセンタイル、４．２ｇ／ｄＬは第８５パーセンタイル、４．７ｇ／ｄＬは第９８．５パーセンタイルを表している。体重４０ｋｇは、ＧＥＭＩＮＩ１、２及び３の患者におけるベースライン体重値の第１．５パーセンタイル、６０ｋｇは第３０パーセンタイル、８０ｋｇは第７１パーセンタイル、１００ｋｇは第９２パーセンタイル、１２０ｋｇは第９８パーセンタイルを表している。垂直な黒線は、基準ポイント推定値に引かれており、網掛け領域は、臨床的非重要性の不確実性範囲を表すように選択された、基準ポイント推定値の±２５％である。
【図６】ＵＣ患者（ＧＥＭＩＮＩ１）における、誘導終了時（６週目）における、Ｍａｙｏ臨床内視鏡サブスコアによる個々のベドリズマブ線形クリアランス（ＣＬＬ）推定値を示している。中線は、中央値を表している。ボックス境界は、第２５パーセンタイルと第７５パーセンタイルを表している。ひげ（エラーバー）は、１．５×四分位範囲内の最高ポイントと最低ポイントを表している。個々の点は異常値を表している。
【図７】受容体（α４β７）飽和プロットであり、ＵＣ患者（ＧＥＭＩＮＩ１）とＣＤ患者（ＧＥＭＩＮＩ２）における、ＭＡｄＣＡＭ−１観察値と、ベドリズマブ濃度観察値の比較である。ベースラインデータは除外されている。
【図８】ＵＣ患者（ＧＥＭＩＮＩ１）とＣＤ患者（ＧＥＭＩＮＩ２）における、時間に対するＭＡｄＣＡＭ−１観察値を示している。
【図９】ベドリズマブの最終的な集団薬物動態モデルの適合度プロットであり、時間と集団予測ベドリズマブ濃度に対するＣＷＲＥＳＩと残差である。
【図１０】ベドリズマブの最終的な集団薬物動態モデル（誘導療法）の予測チェックを示している。
【図１１】ベドリズマブの最終的な集団薬物動態モデル（維持療法、４週間毎）の予測チェックを示している。
【図１２】ベドリズマブの最終的な集団薬物動態モデル（維持療法、８週間毎）の予測チェックを示している。
【図１３】ＭＡｄＣＡＭ−１の適合度モデルである。
【図１４】治療または反応状態ごとの６週目におけるベースラインカルプロテクチンの割合である。
【図１５】図１５Ａ〜Ｄは、６週目に深い寛解状態であった患者または深い寛解状態でなかった患者（定義１）における、５２週目時点の臨床転帰を示しており、図１５Ｅ及び１５Ｆは、ＨＲＱｏＬの結果を示している。
【図１６】図１６Ａ〜１６Ｄは、６週目に深い寛解状態であった患者または深い寛解状態でなかった患者（定義２）における、５２週目時点の臨床転帰を示しており、図１６Ｅ及び１６Ｆは、ＨＲＱｏＬの結果を示している。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
本発明は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者の、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療方法と、ベドリズマブのような抗体による治療を継続する患者の特定方法と、患者におけるＩＢＤの寛解状態の維持方法に関する。
【００３７】
ベドリズマブのような抗α４β７抗体による治療を受ける全ての炎症性腸疾患患者が、その治療に反応するわけではなく、治療に完全には反応しない患者もいる。これらの疾患の罹患率により、抗α４β７抗体療法に反応する患者と、反応しない患者を迅速に特定する必要がある。続いて、反応者に対しては、その療法を継続でき、非反応者に対しては、代わりの療法を開始できる。本願は、抗α４β７抗体による治療中の早い段階に、患者の抗α４β７抗体の血清中濃度及び／またはクリアランス速度を割り出し、それを用いて、治療に反応しており、追加用量の抗α４β７抗体に反応し続ける患者と、非反応者とを特定または選択できるという驚くべき発見に関する。
【００３８】
α４β７インテグリンに特異的に結合するヒト化モノクローナル抗体のベドリズマブは、中度〜重度の活動期潰瘍性大腸炎（ＵＣ）患者及びクローン病（ＣＤ）患者の治療に適応されている。ベドリズマブは、ナタリズマブ及び腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）アンタゴニストを含め、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の治療用に現在市販されている他の生物学的薬剤の作用機序とは異なる新しい腸管に選択的な作用機序を有する。ベドリズマブは、細胞表面に発現するα４β７に結合することによって、メモリー腸ホーミングＴリンパ球のサブセットと、内皮細胞に発現する粘膜アドレシン細胞接着分子−１（ＭＡｄＣＡＭ−１）との相互作用をブロックする。その結果、これらの細胞の炎症腸組織への遊走が阻害される。
【００３９】
ＵＣとＣＤの治療に用いられる他の治療用モノクローナル抗体の薬物動態は、すでに報告されている。抗薬剤抗体の存在、性別、体格、免疫抑制剤の併用、疾患のタイプ、アルブミン濃度及び全身性炎症の程度を含むいくつかの要因は、これらの抗体のクリアランスの加速と関連付けられている。更に、薬剤投与量とは対照的に、これらの薬剤の多くで、効能と暴露との一貫した関係が観察されており、薬剤のトラフ濃度が高いほど、効能が高くなっている。薬剤クリアランスの差は、この観察の重要な説明であり得る。したがって、治療用抗体におけるクリアランスの決定因子への理解を深めることにより、薬剤レジメンを最適化し得る。
【００４０】
過去の研究で、ベドリズマブの単回投与薬物動態、薬力学（α４β７受容体の飽和）、安全性及び忍容性を、０．２〜１０ｍｇ／ｋｇの投与範囲にわたり、健常なボランティアで調べた（静脈内［ＩＶ］注入）（非公開データ）。ベドリズマブの血清中濃度は、ピーク濃度に到達後、約１〜１０ｎｇ／ｍＬに達するまで、概ね双指数関数的に低下した。その後、濃度は、非線形的に低下したようであった。ベドリズマブの多回投与薬物動態と薬力学を、ＣＤ患者では０．５ｍｇ／ｋｇ及び２ｍｇ／ｋｇのＩＶ注入後、ＵＣ患者では２ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの注入後に調べた。ベドリズマブの薬物動態は、ＵＣ患者においては、２〜１０ｍｇ／ｋｇの投与範囲でＩＶ注入後、概ね線形であった。多回投与後、ベドリズマブの１回目の用量の投与後に、α４β７受容体の迅速かつほぼ完全な飽和が達成された。
【００４１】
ベドリズマブによる誘導・維持療法の効能と安全性は、、ＧＥＭＩＮＩ１試験（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ番号ＮＣＴ００７８３７１８）のＵＣ患者、ならびにＧＥＭＩＮＩ２試験（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ番号ＮＣＴ００７８３６９２）及びＧＥＭＩＮＩ３試験（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ番号ＮＣＴ０１２２４１７１）のＣＤ患者で示された。誘導・維持療法でのＵＣ患者及びＣＤ患者におけるベドリズマブの暴露と反応（効能）との関係は、他で示されてきている。
【００４２】
定義
本明細書で使用する場合、抗体の「トラフ」血清中濃度とは、次の投与の直前の濃度を指す。
【００４３】
「臨床的寛解」または「寛解」とは、本明細書で潰瘍性大腸炎の対象に関して用いる場合、完全Ｍａｙｏスコアが２ポイント以下で、個別のサブスコアに、１ポイントを超えるものがないことを指す。クローン病の「臨床的寛解」は、クローン病活動性指標（ＣＤＡＩ）スコアが１５０ポイント以下であることを指す。「ハーベイ・ブラッドショウ指標」（ＨＢＩ）は、データ収集目的で、ＣＤＡＩを簡易化したものである。この指標は、全体的な健康状態、腹痛、１日当たりの液状便数、腹部腫瘤、ヘマトクリット、体重、下痢を制御するための投薬及び合併症の存在を含む臨床パラメーターのみからなり、必要なのは、１日分の日誌の記入のみである。寛解を測定する方法として、磁気共鳴エンテログラフィ（ＭＲＥｎ）が評価されている。
【００４４】
「内視鏡寛解」とは、本明細書で使用する場合、内視鏡スコアが低い状態を指す。潰瘍性大腸炎における内視鏡スコアを評価するための方法の例は、軟性Ｓ状結腸鏡検査である。潰瘍性大腸炎における内視鏡スコアは、Ｍａｙｏサブスコアであることができる。クローン病における内視鏡スコアを評価するための方法の例は、大腸内視鏡検査である。クローン病における内視鏡スコアは、クローン病単純内視鏡スコア（ＳＥＳ−ＣＤ）であることができる。ＳＥＳ−ＣＤには、潰瘍のサイズ、潰瘍面の量、罹患面の量、消化管が狭窄しているか、及び消化管の狭窄の程度などの指標を含めることができる。
【００４５】
「臨床反応」とは、本明細書で潰瘍性大腸炎の対象に関して用いる場合、完全Ｍａｙｏスコアが３ポイント以上低下し、ベースラインから３０％低下すること（または、受診時に、完全Ｍａｙｏスコアを付けなかった場合には、部分的Ｍａｙｏスコアが２ポイント以上低下し、ベースラインから２５％以上低下すること）に、直腸出血サブスコアが１ポイント以上（≧１）低下するか、または絶対直腸出血スコアが１ポイント以下（≦１）であることを伴うことを指す。「臨床反応」とは、本明細書でクローン病の対象に関して用いる場合、ＣＤＡＩスコアがベースライン（０週目）から７０ポイント以上低下することを指す。「臨床反応」及び「反応」という単語は、例えば、いずれの形容詞も付されていない単独の状態では、本明細書においては同義的に用いる。
【００４６】
「内視鏡反応」とは、本明細書で使用する場合、内視鏡スコアがベースライン（例えば、スクリーニング時または最初の投与の直前）から低下した割合を指す。クローン病では、内視鏡反応は、クローン病単純内視鏡スコア（ＳＥＳ−ＣＤ）によって評価できる。
【００４７】
「ベースライン」は、本明細書で用いる場合、治療の１回目の投与前に測定されるパラメーター値を説明するものである。「ベースライン」とは、１回目の投与後まで変化がほとんど予測されず、１回目の投与後に得られる測定値を、このベースライン値と比較して、投与による変化を示すことができるときに、最初の治療の同日、前日、前週、すなわち、１回目の投与前の時点に得たサンプルの測定値を指すことができる。
【００４８】
「粘膜治癒」とは、本明細書で用いる場合、本明細書で潰瘍性大腸炎の対象に関して用いる場合、Ｍａｙｏ内視鏡サブスコアが１以下であることを指す。クローン病に関しては、「瘻孔治癒」により、瘻孔が閉鎖するかまたは消失する。クローン病の別の観点では、粘膜治癒とは、粘膜、例えば消化管の創傷の量または重症度の改善を指す。例えば、粘膜治癒とは、消化管における１つまたは２つ以上の潰瘍の量、サイズまたは重症度の低下を指すことができる。別の例では、粘膜治癒とは、壁厚、腸壁コントラストの増大、壁浮腫、潰瘍及び腸周囲血管増生からなる群から選択した１つ以上のパラメーターの低下を指す。このような粘膜治癒は、ＳＥＳ−ＣＤスコアまたは磁気共鳴活動性指標（ＭａＲＩＡ）スコアとして表すことができる。クローン病における完全粘膜治癒には、潰瘍がないことが含まれる。
【００４９】
「ＭａＲＩＡスコア」は、例えば、磁気共鳴エンテログラフィによって測定した場合の、結腸及び回腸末端（例えば、回腸、上行結腸、横行結腸、下行結腸、Ｓ字結腸及び直腸）の各セグメントの各種粘膜治癒パラメーターのスコアの和である。
【００５０】
「コルチコステロイド（ＣＳ）非投与下寛解」とは、本明細書で使用する場合、経口コルチコステロイドをベースラインで用いた患者のうち、コルチコステロイドの使用を停止したとともに、５２週目に臨床的寛解状態にある患者を指す。
【００５１】
「Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ−５  Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ（ＥＱ−５Ｄ）ビジュアルアナログスケール（ＶＡＳ）」とは、本明細書で使用する場合、患者において一般的健康関連クオリティ・オブ・ライフ（ＨＲＱＯＬ）を測定する目的で用いる有効な手段（ａｈｒｑ．ｇｏｖ／ｒｉｃｅ／ｅｑ５ｄｐｒｏｊ．ｈｔｍ、“Ｕ．Ｓ．Ｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＥｕｒｏＱｏｌ  ＥＱ−５Ｄ（商標）Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｔａｔｅｓ”、２０１２年８月８日にアクセス、Ｂａｓｔｉｄａ  ｅｔ  ａｌ．ＢＭＣ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １０：２６−（２０１０）、Ｋｏｎｉｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ＆Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  １４：１２０５−１２１５（２００２））である質問書を指し、移動性、セルフケア、日常の活動、痛み／不快感及び不安感／抑うつという５つの項目を含む。患者は、各項目について、現在抱えている健康問題のレベルを、「当てはまらない」、「どちらかというと当てはまる」または「非常に当てはまる」として選択し、それぞれ１、２または３にスコア化する。個々のスコアから、複合的なＥＱ−５Ｄスコアを計算して、全体的なＨＲＱＯＬを評価できる。ＥＱ−５Ｄビジュアルアナログスケール（ＶＡＳ）スコアは、２０ｃｍの視覚的な縦方向のスケールを用いて、全体的な健康状態を自分で採点するものであり、スコア０を最低とし、考え得る最高の健康状態を１００とする。ＥＱ−５ＤとＥＱ−５Ｄ  ＶＡＳは、多くの研究で、ＧＩ疾患患者においてＨＲＱＯＬを測定するための有効かつ信頼できる手段であることが示されている。ＥＱ−５Ｄスコアの≧０．３ポイントの低下は、患者のＨＲＱＯＬの臨床的に有意義な改善を表す。ＥＱ−５Ｄ  ＶＡＳスコアの７ポイント以上の向上は、患者のＨＲＱＯＬの臨床的に有意義な改善を表す。
【００５２】
「Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ」（（ＩＢＤＱ）質問書」（Ｉｒｖｉｎｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ＆Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  ２８：Ｓ２３−２７（１９９９））は、成人の炎症性腸疾患患者、潰瘍性大腸炎患者またはクローン病患者のクオリティ・オブ・ライフを評価するために使用するものであり、腸システム（１０個の質問）、情緒機能（１２個の質問）、社会的機能（５個の質問）及び全身的機能（５個の質問）という４つの分野のＨＲＱＯＬに関する３２個の質問を含む。患者は、過去２週間の症状とクオリティ・オブ・ライフを思い出すことを求められ、７ポイントのリッカート尺度で、各項目のランク付けを行う（スコアが高いほど、クオリティ・オブ・ライフクオリティ・オブ・ライフが高いとみなす）。各項目のスコアを合計することによって、合計ＩＢＤＱスコアを算出し、この合計ＩＢＤＱスコアは、３２〜２２４の範囲である。１７０超のＩＢＤＱ合計スコアは、寛解状態にある患者の健康関連クオリティ・オブ・ライフ（ＨＲＱｏＬ）の特徴である。
【００５３】
本明細書で使用する場合、「誘導療法」は、初期段階の療法であり、患者に対して、比較的集中的な治療剤投与レジメンを実施する。その治療剤、例えば抗体は、その薬剤に対して免疫寛容を誘導したり、または臨床反応を誘導して、疾患の症状を改善したりするなどの特定の目的に適する有効量の薬剤を迅速に与える方法で投与する（参照により、本明細書に援用される、ＷＯ２０１２／１５１２４７及びＷＯ２０１２／１５１２４８を参照されたい）。
【００５４】
本明細書で使用する場合、「維持療法」は、誘導療法の後のものであり、誘導療法によってもたらした反応を、安定レベルの治療剤、例えば抗体で継続させる方法で実施する。維持レジメンは、症状の再燃または疾患、例えばＩＢＤの再発を防ぐことができる（参照により、本明細書に援用される、ＷＯ２０１２／１５１２４７及びＷＯ２０１２／１５１２４８を参照されたい）。維持レジメンは、患者に利便性（例えば、簡潔な投与レジメンまたは受診頻度の低下）をもたらすことができる。
【００５５】
細胞表面分子「α４β７インテグリン」、すなわち「α４β７」は、α４鎖（ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ４）とβ７鎖（ＩＴＧＢ７）とのヘテロ二量体である。それぞれの鎖は、変わりのインテグリン鎖とヘテロ二量体を形成して、α４β１またはαＥβ７を形成できる。ヒトα４及びβ７遺伝子（ＧｅｎＢａｎｋ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ、メリーランド州ベセスダ）、それぞれＲｅｆＳｅｑ受託番号ＮＭ＿０００８８５及びＮＭ＿０００８８９）は、Ｂリンパ球及びＴリンパ球、特にメモリーＣＤ４＋リンパ球によって発現される。多くのインテグリンで典型的なように、α４β７は、休止状態または活性化状態のいずれでも存在できる。α４β７のリガンドとしては、血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）、フィブロネクチン及び粘膜アドレシン（ＭＡｄＣＡＭ（例えばＭＡｄＣＡＭ−１））が挙げられる。α４β７インテグリンは、粘膜アドレシン細胞接着分子−１（ＭＡｄＣＡＭ−１）（腸間膜リンパ節及びＧＩ粘膜の内皮に発現する）との接着相互作用を通じて、リンパ球のＧＩ粘膜及び腸管関連リンパ組織（ＧＡＬＴ）への輸送を仲介する。
【００５６】
「抗体」という用語は、本明細書では、最も広い意味で使用し、具体的には、完全長モノクローナル抗体、免疫グロブリン、ポリクローナル抗体、少なくとも２つの完全長抗体、例えばそれぞれ異なる抗原またはエピトープに対する抗体から形成される多特異性抗体（例えば、双特異性抗体）、ならびにヒト抗体、ヒト化抗体、及びヒト以外の種に由来する抗体を含む個別の抗原結合断片（ｄＡｂｓ、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）’２、Ｆａｂ’を含む）及び組み換え抗原結合体（モノボディ及びディアボディ）を網羅する。
【００５７】
「モノクローナル抗体」という用語は、本明細書で用いる場合、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、その集団を構成する個々の抗体は、モノクローナル抗体の生成中に発生し得る考え得る変異体（このような変異体は概して、少量で存在する）を除き、同一であり、及び／または同じエピトープに結合する。異なる決定因子（エピトープ）に対する様々な抗体を典型的には含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の１つの決定因子に対するものである。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体集団から得られたという、抗体の特徴を示しており、モノクローナル抗体をいずれかの特定の方法によって生成する必要があるものとして解釈すべきではない。例えば、本発明に従って用いるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）によって最初に説明されたハイブリドーマ法によって作製しても、組み換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）によって作製してもよい。「モノクローナル抗体」は、例えばＣｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）及びＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）に記載されている技法を用いて、ファージ抗体ライブラリーから単離してもよい。
【００５８】
抗体の「抗原結合断片」は少なくとも、抗α４β７抗体の重鎖及び／または軽鎖の可変領域を含む。例えば、ベドリズマブの抗原結合断片は、配列番号２のヒト化軽鎖配列の２０〜１３１番目のアミノ酸残基を含む。このような抗原結合断片の例としては、当該技術分野において知られているヒト化抗体のＦａｂ断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ及びＦ（ａｂ’）２断片が挙げられる。本発明のヒト化抗体の抗原結合断片は、酵素による切断または組み換え技法によって作製できる。例えば、パパインによる切断を用いてＦａｂ断片を、またはペプシンによる切断を用いてＦ（ａｂ’）２断片を生成できる。抗体は、天然の終止部位の上流に１つ以上の終止コドンが組み込まれた抗体遺伝子を用いて、様々なトランケート型で作製できる。例えば、Ｆ（ａｂ’）２断片の重鎖のＣＨＩドメインとヒンジ領域をコードするＤＮＡ配列を含むように、Ｆ（ａｂ’）２断片の重鎖をコードする組み換えコンストラクトを設計できる。一態様では、抗原結合断片は、α４β７インテグリンが、そのリガンドの１つ以上（例えば、粘膜アドレシンＭＡｄＣＡＭ（例えばＭＡｄＣＡＭ−１）、フィブロネクチン）に結合するのを阻害する。
【００５９】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」という用語は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を説明する目的で使用する。一態様では、ＦｃＲは、天然型配列のヒトＦｃＲである。別の態様では、ＦｃＲは、ＩｇＧ抗体に結合するＦｃＲ（γ受容体）であり、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩというサブクラスの受容体を含む（これらの受容体の対立遺伝子変異体及び選択的スプライシング体も含む）。ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）とＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれ、これらは、主にそれらの細胞質ドメインが異なる類似のアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、免疫受容体チロシンベース活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）をその細胞質ドメインに含む。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）をその細胞質ドメインに含む。（Ｍ．Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−２３４（１９９７）での考察を参照されたい。）ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９：４５７−９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ  ４：２５−３４（１９９４）及びｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３−４１（１９９５）で考察されている。今後同定されるものを含め、他のＦｃＲも、本明細書における「ＦｃＲ」という用語に含まれる。この用語には、母性ＩｇＧの胎児への移行（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））と、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）及びアルブミンの血清における存続の調節（Ｒａｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３３  Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ９−１７（２０１３）によって考察）を担う胎児性受容体ＦｃＲｎも含まれる。
【００６０】
「超可変領域」という用語は、本明細書で使用する場合、抗体のアミノ酸残基のうち、抗原の結合を担うとともに、各鎖の「可変ドメイン」で見られるアミノ酸残基を指す。超可変領域は概して、「相補性決定領域」、すなわち「ＣＤＲ」のアミノ酸残基（例えば、軽鎖可変ドメイン内の２４〜３４番目の残基（Ｌ１）、５０〜５６番目の残基（Ｌ２）及び８９〜９７番目の残基（Ｌ３）と、重鎖可変ドメイン内の３１〜３５番目の残基（Ｈ１）、５０〜６５番目の残基（Ｈ２）及び９５〜１０２番目の残基（Ｈ３）、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｒｓｄａ，  Ｍｄ．（１９９１））及び／または「超可変ループ」の残基（例えば、軽鎖可変ドメイン内の２６〜３２番目の残基（Ｌ１）、５０〜５２番目の残基（Ｌ２）及び９１〜９６番目の残基（Ｌ３）と、重鎖可変ドメイン内の２６〜３２番目の残基（Ｈ１）、５３〜５５番目の残基（Ｈ２）及び９６〜１０１番目の残基（Ｈ３）、Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））を含む。「フレームワーク領域」、すなわち「ＦＲ」残基は、この段落で定義した超可変領域残基以外の可変ドメイン残基である。超可変領域またはそのＣＤＲは、一方の抗体鎖から別の抗体鎖または別のタンパク質に移して、その得られる（複合）抗体または結合タンパク質に、抗原結合特異性を付与することができる。
【００６１】
「単離」抗体は、その天然の環境の成分から同定及び分離し、ならびに／または回収した抗体である。特定の実施形態では、抗体は、（１）ローリー法によって測定した場合に、タンパク質の９５重量％超、あるいは９９重量％超まで、（２）スピニングカップ配列決定装置の使用によって、少なくとも１５残基のＮ末端もしくは内部アミノ酸配列を得るのに十分な程度まで、または（３）ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、クマシーブルーもしくは銀染色を用いて、還元条件もしくは非還元条件まで、均質になるまで精製される。単離抗体には、組み換え細胞内のインサイチュー抗体が含まれる。その抗体の天然の環境の少なくとも１つの成分が存在しないことになるからである。しかしながら、通常、単離抗体は、少なくとも１つの精製工程によって調製される。
【００６２】
「治療」とは、治療的な処置と予防または防止対策の両方を指す。治療を必要とする個体には、すでに疾患に罹患している個体と、疾患またはその再発を予防すべき個体が含まれる。したがって、本発明における治療対象の患者は、疾患に罹患していると診断されていても、疾患に対する素因を有するかまたは疾患を罹患しやすくてもよい。「患者」及び「対象」という用語は、本明細書では同義的に使用する。
【００６３】
抗α４β７抗体によるＩＢＤの治療
一態様では、本発明は、対象におけるＩＢＤの治療方法であって、本明細書に記載の抗α４β７抗体を対象に、例えばヒトにおけるＩＢＤを治療するのに有効な量で投与することを含む方法に関する。そのヒト患者または対象は、成人（例えば１８歳以上）、思春期または小児であってよい。ＩＢＤを罹患している対象のＩＢＤを治療するために、本明細書に記載されているように、抗α４β７抗体を含む医薬組成物を使用することができる。
【００６４】
抗α４β７抗体は、α４鎖上（例えば、ヒト化ＭＡｂ２１．６（Ｂｅｎｄｉｇら、米国特許第５，８４０，２９９号）、β７鎖上（例えば、ＦＩＢ５０４もしくはヒト化誘導体（例えば、Ｆｏｎｇら、米国特許第７，５２８，２３６号））のエピトープ、またはα４鎖とβ７鎖との会合によって形成されるコンビナトリアルエピトープに結合できる。一態様では、この抗体は、α４β７複合体上のコンビナトリアルエピトープに結合するが、α４鎖とβ７鎖が相互に会合していなければ、α４鎖またはβ７鎖上のエピトープに結合しない。α４インテグリンとβ７インテグリンとの会合は、例えば、両方の鎖に存在する残基であって、併せてエピトープを構成する残基を近接させることによって、または一方の鎖、例えば、α４インテグリン鎖またはβ７インテグリン鎖上に、適切なインテグリンパートナーの非存在下またはインテグリン活性化の非存在下では、結合する抗体に接近できないエピトープ結合部位を立体構造的に暴露することによって、コンビナトリアルエピトープを作ることができる。別の態様では、抗α４β７抗体は、α４インテグリン鎖とβ７インテグリン鎖の両方に結合するので、α４β７インテグリン複合体に対して特異的である。このような抗体は、α４β７に結合できるが、例えば、α４β１には結合できず、及び／またはαＥβ７には結合できない。別の態様では、抗α４β７抗体は、Ａｃｔ−１抗体と同じまたは実質的に同じエピトープに結合する（Ｌａｚａｒｏｖｉｔｓ，Ａ．Ｉ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３（４）：１８５７−１８６２（１９８４）、Ｓｃｈｗｅｉｇｈｏｆｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１（２）：７１７−７２９，１９９３、Ｂｅｄｎａｒｃｚｙｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６９（１１）：８３４８−８３５４，１９９４）。マウスＡｃｔ−１モノクローナル抗体を産生するマウスＡＣＴ−１ハイブリドーマ細胞系は、ブダペスト条約に基づき、２００１年８月２２日に、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，４０  Ｌａｎｄｓｄｏｗｎｅ  Ｓｔｒｅｅｔ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓ．０２１３９，Ｕ．Ｓ．Ａ．，の代わりに、ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．２０１１０−２２０９，Ｕ．Ｓ．Ａ．に、受託番号ＰＴＡ−３６６３で寄託された。別の態様では、抗α４β７抗体は、米国特許出願公開第２０１０／０２５４９７５号に示されているＣＤＲを用いたヒト抗体またはα４β７結合タンパク質である。
【００６５】
一態様では、抗α４β７抗体は、α４β７がそのリガンド（例えば、粘膜アドレシン、例えば、ＭＡｄＣＡＭ（例えば、ＭＡｄＣＡＭ−１）、フィブロネクチン及び／または血管アドレシン（ＶＣＡＭ））の１つ以上に結合するのを阻害する。霊長類ＭＡｄＣＡＭが、ＰＣＴ公開第ＷＯ９６／２４６７３号（その教示の全体は、参照により、本明細書に援用される）に記載されている。別の態様では、抗α４β７抗体は、ＶＣＡＭの結合を阻害することなく、α４β７のＭＡｄＣＡＭ（例えばＭＡｄＣＡＭ−１）及び／またはフィブロネクチンへの結合を阻害する。
【００６６】
一態様では、治療で用いる抗α４β７抗体は、マウスＡｃｔ−１抗体のヒト化型である。ヒト化抗体の好適な調製方法は、当該技術分野において周知である。概して、ヒト化抗α４β７抗体は、マウスＡｃｔ−１抗体の３個の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ１（配列番号４）、ＣＤＲ２（配列番号５）及びＣＤＲ３（配列番号６）のＣＤＲ）と、好適なヒト重鎖フレームワーク領域とを含む重鎖を含むことになり、マウスＡｃｔ−１抗体の３個の軽鎖ＣＤＲ（ＣＤＲ１（配列番号７）、ＣＤＲ２（配列番号８）及びＣＤＲ３（配列番号９））と、好適なヒト軽鎖フレームワーク領域とを含む軽鎖も含むことになる。ヒト化Ａｃｔ−１抗体は、アミノ酸置換を含むかまたは含まない、コンセンサスフレームワーク領域を含むいずれかの好適なヒトフレームワーク領域を含むことができる。例えば、フレームワークアミノ酸の１つ以上を、別のアミノ酸（マウスＡｃｔ−１抗体における対応する位置のアミノ酸など）と置き換えることができる。ヒト定常領域またはその一部が存在する場合には、その領域は、対立遺伝子変異体を含め、ヒト抗体のκもしくはλ軽鎖及び／またはγ（例えば、γ１、γ２、γ３、γ４）、μ、α（例えば、α１、α２）、δもしくはε重鎖に由来することができる。エフェクター機能を調整する目的で、特定の定常領域（例えばＩｇＧ１）、その変異体または一部を選択することができる。例えば、変異させた定常領域（変異体）を融合タンパク質に導入して、Ｆｃ受容体への結合及び／または補体を固定する能力を最小限にすることができる（例えば、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＧＢ２，２０９，７５７Ｂ、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＷＯ  ８９／０７１４２、Ｍｏｒｇａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＷＯ９４／２９３５１，Ｄｅｃ．２２，１９９４を参照されたい）。Ａｃｔ−１抗体のヒト化型は、ＰＣＴ公開第ＷＯ９８／０６２４８号及びＷＯ０７／６１６７９（そのそれぞれの教示の全体は、参照により、本明細書に援用される）で説明された。
【００６７】
一態様では、抗α４β７抗体は、ベドリズマブである。ベドリズマブ（ＭＬＮ０００２、ＥＮＴＹＶＩＯ（商標）またはＫＹＮＴＥＬＥＳ（商標）ともいう）は、ヒトリンパ球インテグリンα４β７に対するヒト化免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｇ１  ｍＡｂである。ベドリズマブは、α４β７インテグリンに結合し、α４β７インテグリンがＭＡｄＣＡＭ−１に接着するのをアンタゴナイズし、その結果、腸ホーミング白血球のＧＩ粘膜への遊走を阻害する。ベドリズマブは、中度〜重度の活動期ＵＣまたはＣＤの成人患者のうち、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ブロッカーもしくは免疫調節剤との反応が不十分であったか、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ブロッカーもしくは免疫調節剤に対する反応を喪失していたか、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ブロッカーもしくは免疫調節剤に不耐であったか、コルチコステロイドとの反応が不十分であったか、コルチコステロイドに不耐であったか、またはコルチコステロイドへの依存性を示した患者に適応されるインテグリン受容体アンタゴニストである。ＵＣでは、ベドリズマブは、臨床反応を誘導及び維持し、臨床的寛解を誘導及び維持し、粘膜の内視鏡的外観を改善し、及び／またはコルチコステロイド非投与下寛解を実現するためのものである。ＣＤでは、ベドリズマブは、臨床反応をもたらし、臨床的寛解を実現し、及び／またはコルチコステロイド非投与下寛解を実現するためのものである。いくつかの実施形態では、コルチコステロイド非投与下寛解は、ベドリズマブによる治療の継続中に、漸減レジメンを通じて実現する。
【００６８】
別の態様では、治療で用いるヒト化抗α４β７抗体は、配列番号１の２０〜１４０番目のアミノ酸を含む重鎖可変領域と、配列番号２の２０〜１３１番目のアミノ酸または配列番号３の２１〜１３２番目のアミノ酸を含む軽鎖可変領域とを含む。所望される場合、好適なヒト定常領域（複数可）が存在することができる。例えば、ヒト化抗α４β７抗体は、配列番号１の２０〜４７０番目のアミノ酸を含む重鎖と、配列番号３の２１〜２３９番目のアミノ酸を含む軽鎖とを含むことができる。別の例では、ヒト化抗α４β７抗体は、配列番号１の２０〜４７０番目のアミノ酸を含む重鎖と、配列番号２の２０〜２３８番目のアミノ酸を含む軽鎖とを含むことができる。ベドリズマブのヒト化軽鎖（例えば、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｓｅｒｖｉｃｅ（ＣＡＳ、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ）登録番号９４３６０９−６６−３）であって、２個のマウス残基がヒト残基に置き換わっている軽鎖は、別のヒト化抗α４β７抗体ＬＤＰ−０２の軽鎖よりもヒト化されている。加えて、ＬＤＰ−０２は、ベドリズマブにおいてはやや親水性のヒドロキシル含有トレオニン１１４と、潜在的に内向きの疎水性バリン１１５残基と置き換えられている若干疎水性の柔軟なアラニン１１４と親水性部位（アスパルテート１１５）とを有する。
【００６９】
ヒト化抗α４β７抗体配列に対する更なる置換は、例えば、重鎖及び軽鎖フレームワーク領域に対する変異（配列番号１０の２番目の残基におけるイソロイシンのバリンへの変異、配列番号１０の４番目の残基におけるメチオニンのバリンへの変異、配列番号１１の２４番目の残基におけるアラニンのグリシンへの変異、配列番号１１の３８番目の残基におけるアルギニンのリシンへの変異、配列番号１１の４０番目の残基におけるアラニンのアルギニンへの変異、配列番号１１の４８番目の残基におけるメチオニンのイソロイシンへの変異、配列番号１１の６９番目の残基におけるイソロイシンのロイシンへの変異、配列番号１１の７１番目の残基におけるアルギニンのバリンへの変異、配列番号１１の７３番目の残基におけるトレオニンのイソロイシンへの変異、またはこれらのいずれかの組み合わせ、重鎖ＣＤＲのマウスＡｃｔ−１抗体のＣＤＲ（ＣＤＲ１（配列番号４）、ＣＤＲ２（配列番号５）及びＣＤＲ３（配列番号６））との置換、ならびに軽鎖ＣＤＲのマウスＡｃｔ−１抗体の軽鎖ＣＤＲ（ＣＤＲ１（配列番号７）、ＣＤＲ２（配列番号８）及びＣＤＲ３（配列番号９））との置換など）であることができる。
【００７０】
本発明は、第１の態様では、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者の、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療方法を提供する。この態様では、この方法は、患者の薬物動態要因を割り出すことを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、抗体のクリアランスが低い患者の治療を選択することを含む。この方法は、患者から得た生体サンプル、例えば、血液、血清、血漿、便、腸液、唾液、炎症性滲出液中の抗α４β７抗体の濃度を１度、例えば、その抗体を少なくとも１回事前投与してから少なくとも１週間後、２週間後、３週間後、４週間後、５週間後または６週間後に測定することを含む。この測定は、クリアランスの尺度（「低い」状態は、様々な方法によって定義される）と、本明細書に記載の、クリアランスの尺度を得る結果基準をもたらす。クリアランスの尺度は、サンプル中の抗α４β７抗体の濃度の測定に起因してよく、単独で用いても、本明細書に記載されているように、抗α４β７抗体が身体（例えば血液量）から排除される速度の計算で用いてもよい。この計算は、事前投与における抗α４β７抗体の量、患者の大きさ、血液量の大きさ、抗α４β７抗体の事前投与日と、測定用のサンプルを得る日との間の日数、または薬物動態モデル、例えば、本明細書に記載されているようなモデルからの知見に基づいてよい。いくつかの実施形態では、抗α４β７抗体の血清中濃度の測定は、クリアランスの指標であってよい。クリアランスは、薬力学的要因、臨床的要因、炎症もしくはは免疫応答要因のような他のパラメーターの影響を受けたり、または他のパラメーターによって更に示されたりすることがあり、他のパラメーターの測定を抗α４β７抗体の測定と組み合わせて用いてよい。クリアランスの尺度は、単独で、または１つ以上の他のパラメーターの測定と組み合わせて用いて、抗α４β７抗体による治療に対する反応を予測するか、抗α４β７抗体治療に反応している患者を特定するか、抗α４β７抗体によって更なる治療を行う患者を選択するか、または治療中における抗α４β７抗体の有効性をモニタリングしてよい。例えばサンプル採取時点の患者における抗α４β７抗体の低いクリアランスまたは十分な量によって、抗α４β７抗体の更なる投与が、ＩＢＤの治療効果をもたらすことが示される。いくつかの実施形態では、誘導の終了時に、低いクリアランスが示されるか、測定されるか、または算出される方法は、反応または寛解を維持し、コルチコステロイド非投与下寛解を実現し、粘膜の内視鏡的外観を改善するために、患者を更に治療することを更に含む。好ましくは、抗体のクリアランスが低い患者は、ａ）抗体、例えばベドリズマブのクリアランス速度が、約０．２５Ｌ／日未満、０．２０Ｌ／日未満、０．１〜０．２Ｌ／日、０．１５Ｌ／日未満もしくは０．１．Ｌ／日未満であること、ならびに／またはｂ）抗体、例えばベドリズマブの血清中濃度が、少なくとも８μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、１２μｇ／ｍｌ、１４μｇ／ｍｌ、１７μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌであるか、１２〜２５μｇ／ｍｌ、１５〜１７μｇ／ｍｌ、１７〜２５μｇ／ｍｌ、１２〜４０μｇ／ｍｌ及び１７〜４０μｇ  ｍｌの範囲であることによって特��付けてよい。
【００７１】
一実施形態では、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者の、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療方法は、２回目の用量のベドリズマブを摂取してから４週間後の時点に、ＩＢＤを有するかまたはＩＢＤに罹患している２人以上の患者のグループからＩＢＤを有するヒト患者を選択する工程を含み、ベドリズマブの１回目の用量は、２回目の用量の投与の２週間前に対象に投与し、血清中濃度が、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ、約１２μｇ／ｍｌ、約１４μｇ／ｍｌ、約１７μｇ／ｍｌ、約２０μｇ／ｍｌ、約２５μｇ／ｍｌ、約３０μｇ／ｍｌ、約３５μｇ／ｍｌまたは約４０μｇ／ｍｌである。具体的には、患者の血清中濃度は、約１２〜２５μｇ／ｍｌ、約１５〜１７μｇ／ｍｌ、約１７〜２５μｇ／ｍｌ、約１２〜４０μｇ／ｍｌまたは約１７〜４０μｇ／ｍｌであってよい。患者の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度は、１７μｇ／ｍｌ超、２５μｇ／ｍｌ超または３５μｇ／ｍｌ超であってよい。いくつかの実施形態では、患者は、血清中ベドリズマブの測定のためのサンプル採取の約２週間前、約３週間前、約４週間前、約５週間前または約６週間前に、ベドリズマブを事前摂取してある。このような患者を患者グループから選択したら、その患者にベドリズマブを投与して、ＩＢＤを治療する。
【００７２】
別の態様では、本発明は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）患者の、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療方法を提供する。いくつかの実施形態では、ベドリズマブを用いる方法は、ＩＢＤ患者にベドリズマブを２用量投与する工程であって、１回目の用量を患者に投与してから約２週間後に、２回目の用量を投与する工程と、少なくとも２週間、少なくとも３週間、約４週間または５週間の期間を置く工程と、患者のベドリズマブの血清中濃度を測定する工程と、患者の血清中濃度が、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ、約１２μｇ／ｍｌ、約１４μｇ／ｍｌ、約１７μｇ／ｍｌ、約２０μｇ／ｍｌ、約２５μｇ／ｍｌ、約３０μｇ／ｍｌ、約３５μｇ／ｍｌまたは約４０μｇ／ｍｌである場合に、患者に、更なる用量のベドリズマブを１回以上投与する工程を含む。患者の血清中濃度は、約１２〜２５μｇ／ｍｌ、約１５〜１７μｇ／ｍｌ、約１７〜２５μｇ／ｍｌ、約１２〜４０μｇ／ｍｌまたは約１７〜４０μｇ／ｍｌであってもよい。患者の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度は、１７μｇ／ｍｌ超、２５μｇ／ｍｌ超または３５μｇ／ｍｌ超であってよい。
【００７３】
あるいは、少なくとも１用量の抗α４β７抗体、例えばベドリズマブをＩＢＤ患者に投与し、少なくとも約２週間、または任意に応じて、２〜５週間の期間を置いてから、患者のベドリズマブの血清中濃度を測定し、患者の血清中濃度が、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ、約１２μｇ／ｍｌ、約１４μｇ／ｍｌ、約１７μｇ／ｍｌ、約２０μｇ／ｍｌ、約２５μｇ／ｍｌ、約３０μｇ／ｍｌ、約３５μｇ／ｍｌまたは約４０μｇ／ｍｌである場合に、患者に、更なる用量のベドリズマブを１回以上投与してもよい。患者の血清中濃度は、約１２〜２５μｇ／ｍｌ、約１５〜１７μｇ／ｍｌ、約１７〜２５μｇ／ｍｌ、約１２〜４０μｇ／ｍｌまたは約１７〜４０μｇ／ｍｌであってよい。患者の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度は、１７μｇ／ｍｌ超、２５μｇ／ｍｌ超または３５μｇ／ｍｌ超であってよい。
【００７４】
別の態様では、本発明は、ベドリズマブによる治療を継続する患者（例えば、粘膜治癒をしている患者）の特定方法を提供する。この方法は、過去４カ月以内（例えば、過去３カ月以内、過去２カ月以内）にベドリズマブを少なくとも２用量摂取したＩＢＤ患者から得た血清サンプル中のベドリズマブの濃度を測定する工程と、サンプルの血清中濃度が、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ、約１２μｇ／ｍｌ、約１４μｇ／ｍｌ、約１７μｇ／ｍｌ、約２０μｇ／ｍｌ、約２５μｇ／ｍｌ、約３０μｇ／ｍｌ、約３５μｇ／ｍｌまたは約４０μｇ／ｍｌである場合に、ベドリズマブによる治療を継続する患者を特定する工程を含んでよい。患者の血清中濃度は、約１２〜２５μｇ／ｍｌ、約１５〜１７μｇ／ｍｌ、約１７〜２５μｇ／ｍｌ、約１２〜４０μｇ／ｍｌまたは約１７〜４０μｇ／ｍｌであってよい。患者の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度は、１７μｇ／ｍｌ超、２５μｇ／ｍｌ超または３５μｇ／ｍｌ超であってよい。いくつかの実施形態では、患者は、血清中ベドリズマブの測定のためのサンプル採取の約４週間前に、ベドリズマブの最後の事前用量、例えば２回目の用量を摂取してある。別の実施形態では、患者は、血清中ベドリズマブの測定のためのサンプル採取の３〜８週間前に、最後の事前用量を摂取してある。
【００７５】
あるいは、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法は、過去１カ月または２カ月以内にベドリズマブを少なくとも１用量摂取したＩＢＤ患者から得た血清サンプル中のベドリズマブの濃度を測定する工程と、サンプルの血清中濃度が、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ、約１２μｇ／ｍｌ、約１４μｇ／ｍｌ、約１７μｇ／ｍｌ、約２０μｇ／ｍｌ、約２５μｇ／ｍｌ、約３０μｇ／ｍｌ、約３５μｇ／ｍｌまたは約４０μｇ／ｍｌである場合に、ベドリズマブによる治療を継続する患者を特定する工程を含んでよい。患者の血清中濃度は、約１２〜２５μｇ／ｍｌ、約１５〜１７μｇ／ｍｌ、約１７〜２５μｇ／ｍｌ、約１２〜４０μｇ／ｍｌまたは約１７〜４０μｇ／ｍｌであってよい。患者の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度は、１７μｇ／ｍｌ超、２５μｇ／ｍｌ超または３５μｇ／ｍｌ超であってよい。いくつかの実施形態では、患者は、血清中ベドリズマブの測定のためのサンプル採取の約２週間、約３週間、約４週間、約５週間または約６週間前に、ベドリズマブの事前用量を摂取してある。
【００７６】
あるいは、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブを少なくとも１用量、ＩＢＤ患者に投与してよく、少なくとも約２週間、または任意に応じて２〜５週間の期間を置いてから、患者のベドリズマブの血清中濃度を測定し、患者の血清中濃度が、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ、約１２μｇ／ｍｌ、約１４μｇ／ｍｌ、約１７μｇ／ｍｌ、約２０μｇ／ｍｌ、約２５μｇ／ｍｌ、約３０μｇ／ｍｌ、約３５μｇ／ｍｌまたは約４０μｇ／ｍｌである場合に、患者に、更なる用量のベドリズマブを１回以上投与する。患者の血清中濃度は、約１２〜２５μｇ／ｍｌ、約１５〜１７μｇ／ｍｌ、約１７〜２５μｇ／ｍｌ、約１２〜４０μｇ／ｍｌまたは約１７〜４０μｇ／ｍｌであってよい。患者の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度は、１７μｇ／ｍｌ超、２５μｇ／ｍｌ超または３５μｇ／ｍｌ超であってよい。
【００７７】
ベドリズマブは、静脈内注射、皮下注射または注入の１つ以上などのいずれかの好適な方法によって投与してよい。いくつかの実施形態では、ベドリズマブは、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１８０ｍｇ、３００ｍｇまたは６００ｍｇの用量で投与する。いくつかの実施形態では、ベドリズマブは、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇまたは５．０ｍｇ／ｋｇの用量で、１０８ｍｇ、２１６ｍｇ、１６０ｍｇまたは１６５ｍｇの用量で、例えば皮下投与する。ベドリズマブは、１日１回、週に１回、月に１回または年に１回投与してよい。ベドリズマブ投与レジメンには、初期、すなわち誘導期と、維持期があってよい。誘導期は、多量を１回または２回以上、例えば２回、３回または４回投与すること、または各投与間に長期間を置かずに（わずか１週間、２週間、３週間または４週間の投与間隔などで）投与することであってよい。例えば、誘導レジメンでは、２回投与してよく、そのうちの１回が０日目（０週目）、もう１回が２週目（１４日目）であってよい。維持期、例えばＩＢＤの寛解を維持するための維持期では、誘導期よりも少ない用量、または誘導期よりも長い間隔で投与してよい。いくつかの実施形態では、ベドリズマブを０週目、２週目及び６週目に投与してから（誘導）、それ以降は、４週間おきまたは８週間おきに投与する（維持）。他の療法に不応なＩＢＤ患者には、維持療法の開始前に、もっと長い誘導期間、例えば、８週間、１０週間または１２週間が必要となり得る。一実施形態では、ベドリズマブを０週目、２週目及び６週目に静脈内投与してから、それ以降は、８週間おきに静脈内投与する。いくつかの実施形態では、ベドリズマブを１回以上投与してから、少なくとも１カ月、少なくとも６カ月または少なくとも１年後に、再度ベドリズマブを１回以上投与する。いくつかの実施形態では、３００ｍｇのベドリズマブを０週目、２週目及び６週目に静脈内注入によって投与してから、それ以降は、４週間の間隔または８週間の間隔で投与してよい。いくつかの実施形態では、３００ｍｇのベドリズマブを０週目、２週目及び６週目に静脈内注入によって投与してから、２週間、３週間または４週間の間隔で、１０８ｍｇのベドリズマブを皮下投与してよい。抗α４β７インテグリン抗体を用いる治療方法は、米国特許公開第２００５／００９５２３８号、ＷＯ２０１２１５１２４８及びＷＯ２０１２／１５１２４７に記載されている。
【００７８】
いくつかの実施形態では、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法は、臨床的尺度を含んでよい。臨床的尺度は、粘膜治癒であってよい。ベースラインから低下した内視鏡スコア、例えば、ベースラインよりも２５％低いか、３５％低いか、４０％低いか、４５％低いか、５０％低いか、５５％低いか、６０％低いか、６５％低いかまたは７５％低い内視鏡スコアによって、粘膜治癒を示してもよい。潰瘍性大腸炎では、４未満、３未満、≦１または０〜２の内視鏡スコアが、治療を継続する患者を特定する助けとなり得る。クローン病では、粘膜治癒をしている患者、すなわち、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続する候補者は、内視鏡反応、内視鏡寛解、ＭａＲＩＡスコアの改善、潰瘍の軽減及び粘膜治癒パラメーター、例えばＭＲＥｎパラメーターの改善からなる群から選択した評価をされていてよい。一実施形態では、ＭａＲＩＡスコアは、各セグメントの計算値の和であり、各セグメントについて計算される和は、（１．５６×壁厚（ｍｍ））＋（０．０２×相対的コントラスト上昇値（ＲＣＥ）、例えば静脈内投与後のガドリニウムとのコントラスト）＋（５×浮腫）＋（１０×潰瘍））である。いくつかの実施形態では、内視鏡反応は、ＳＥＳ−ＣＤスコアがベースラインから約２５％低下、約４０％低下、約５０％低下、約６０％低下または約７５％低下することによって達成される。いくつかの実施形態では、内視鏡寛解は、≦６、≦５、≦４または≦３のＳＥＳ−ＣＤスコアによって達成される。いくつかの実施形態では、粘膜治癒は、＜１４、＜１３、＜１２、＜１１、＜１０、＜９、＜８、＜７、＜６、＜５または＜４のＭａＲＩＡスコアによって達成される。いくつかの実施形態では、潰瘍の軽減は、潰瘍のサイズの縮小、潰瘍面の割合の低下、罹患面の割合の低下及び消化管の狭窄の軽減からなる群から選択する。いくつかの実施形態では、潰瘍のサイズは、直径２ｃｍ未満、直径０．５〜２ｃｍ、直径０．１〜０．５ｃｍまたは直径＜０．２ｃｍである。いくつかの実施形態では、潰瘍面は、３０％未満、１０〜３０％、１０％未満または０である。いくつかの実施形態では、罹患面は、７５％未満、５０％〜７５％、５０％未満、２５％未満または非罹患状態である。いくつかの実施形態では、壁厚は、ベースラインから約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約２０％〜４０％または４５％超減少している。いくつかの実施形態では、腸壁コントラスト（ＲＣＥ）は、ベースラインから約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約２０％〜４０％または４０％超低下している。いくつかの実施形態では、壁浮腫は、ベースラインから約２５％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、７５％超または約７０％〜９０％軽減している。いくつかの実施形態では、腸周囲血管増生は、ベースラインから約２５％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約５０％〜７０％、約７５％または７５％超減少している。
【００７９】
一実施形態では、ベドリズマブに対する反応性を持つクローン病患者のＳＥＳ−ＣＤは、治療の開始から６週目、１０週目、１２週目、１４週目、２２週目または２６週目において、≦４である。一実施形態では、ベドリズマブに対する反応性を持つクローン病患者は、治療の開始から６週目、１０週目、１２週目、１４週目、２２週目または２６週目において、内視鏡反応を有しているか、またはＳＥＳ−ＣＤが≧５０％低下している。一実施形態では、ベドリズマブに対する反応性を持つクローン病患者は、治療の開始から６週目、１０週目、１２週目または１４週目において、臨床的寛解をしているか、またはＣＤＡＩスコアが≧７０もしくは≧１００ポイント低下している。一実施形態では、ベドリズマブに対する反応性を持つクローン病患者のＭａＲＩＡスコアは、全体において、または各セグメントベースで、治療の開始から６週目には＜１５、１０週目には＜１２、１２週目には＜１０または１４週目＜７である。一実施形態では、ベドリズマブに対する反応性を持つクローン病患者には、治療の開始から１４週目、２２週目または２６週目において、潰瘍がない。一実施形態では、ベドリズマブに対する反応性を持つクローン病患者には、治療の開始から１４週目、２２週目、２６週目または３０週目において、瘻孔がない。ベドリズマブに対する反応性を持つ患者は、治療を継続してよく、例えば、ベドリズマブによる維持レジメンを継続してよい。一実施形態では、維持レジメンは、２週間おきのベドリズマブの投与を含む。一実施形態では、維持レジメンは、４週間おきのベドリズマブの投与を含む。一実施形態では、維持レジメンは、６週間おきのベドリズマブの投与を含む。一実施形態では、維持レジメンは、８週間おきのベドリズマブの投与を含む。
【００８０】
別の態様では、本発明は、患者における炎症性腸疾患の寛解維持方法に関する。この患者は、過去２カ月、過去３カ月または過去４カ月内に、ベドリズマブを少なくとも１用量摂取してあってよい。この方法は、その患者から血清サンプルを得る工程と、そのサンプル中のベドリズマブの濃度を測定する工程と、その濃度が、少なくとも約８μｇ／ｍｌ、約１０μｇ／ｍｌ、約１２μｇ／ｍｌ、約１４μｇ／ｍｌ、約１７μｇ／ｍｌ、約２０μｇ／ｍｌ、約２５μｇ／ｍｌ、約３０μｇ／ｍｌ、約３５μｇ／ｍｌまたは約４０μｇ／ｍｌである場合、それ以降に、８週間おきにベドリズマブを投与する工程を含んでよい。患者の血清中濃度は、約１２〜２５μｇ／ｍｌ、約１５〜１７μｇ／ｍｌ、約１７〜２５μｇ／ｍｌ、約１２〜４０μｇ／ｍｌまたは約１７〜４０μｇ／ｍｌであってもよい。患者の血清中濃度、例えば血清中トラフ濃度は、１７μｇ／ｍｌ超、２５μｇ／ｍｌ超または３５μｇ／ｍｌ超であってもよい。いくつかの実施形態では、患者は、血清中ベドリズマブの測定のためのサンプル採取の約２週間、約３週間、約４週間、約５週間または約６週間前に、ベドリズマブの事前用量を摂取してある。
【００８１】
本発明の更に別の態様では、ＩＢＤ患者のベドリズマブによる治療の継続方法は、ベドリズマブを２用量供給する工程であって、その２回目の用量の投与が、１回目の約２週間後である工程と、約４週間置く工程と、患者が深い寛解状態である場合に、患者のベドリズマブによる治療を継続する工程を含む。深い寛解状態は、患者の内視鏡サブスコアを測定することによって判断してよく、内視鏡サブスコアが０〜１であることとして定義する。この方法は、患者が報告する転帰スコア（例えば、０〜１のサブスコア）を判断する工程を更に含んでよい。患者が報告する転帰は、直腸出血サブスコア（例えば０）及び／あるいは排便頻度サブスコア（例えば、低下もしくは変化なし、または０もしくは１）を含んでよい。
【００８２】
本発明は、ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法であって、過去４カ月以内（例えば、過去３カ月以内、過去２カ月以内）にベドリズマブを少なくとも２用量投与したＩＢＤ患者から得た生体サンプル中のベドリズマブのクリアランスを測定する工程と、その患者におけるクリアランスが、０．２５Ｌ／日未満、０．２０Ｌ／日未満または０．１〜０．２Ｌ／日である場合に、ベドリズマブによる治療を継続する患者を特定する工程を含む方法にも関する。この生体サンプルは、いずれかの生体サンプル、例えば、血清、血漿、唾液、尿または便であってよい。任意に応じて、この方法は、抗α４β７抗体を測定することを更に含んでよい。抗α４β７抗体、例えば抗ベドリズマブ抗体に対する免疫応答が低いかまたは存在しないこと、例えば、≦５０、≦１２５または≦５７５の力価によって、ベドリズマブによる治療を継続する患者を更に特定してよい。
【００８３】
患者が抗α４β７抗体による治療に反応するか、または患者の抗α４β７抗体による治療を継続するかの判断方法は、アルブミン濃度を測定することを更に含んでよい。治療用抗体による療法では、アルブミン濃度は、胎児性ＦｃＲに結合する能力のようなクリアランス活性の反映であることができる。血清中アルブミンレベルが低いケースでは、抗α４β７抗体のクリアランスは、高いことができる。その結果、血清中アルブミンレベルの高い患者は、抗α４β７抗体による治療に反応しないことがあり、または、抗α４β７抗体による治療に反応するまで時間がかかることがある。約３．０ｇ／ｄＬ超、約３．２ｇ／ｄＬ超、約４．０ｇ／ｄＬ超、約４．７ｇ／ｄＬ超、約５．０ｇ／ｄＬ超、３．３〜５．０ｇ／ｄＬの範囲、３．５〜５．０ｇ／ｄＬの範囲、３．８〜５．０ｇ／ｄＬの範囲または４．０〜５．０ｇ／ｄＬの範囲のアルブミン濃度によって、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療を継続する患者を更に特定してよい。アルブミン濃度の測定には、患者の体重の測定を伴ってもよい。高体重、例えば、９０ｋｇ超、１００ｋｇ超、１１０ｋｇ超または１２０ｋｇ超で、低アルブミンレベル、例えば、４．２ｇ／ｄＬ未満、４．０ｇ／ｄＬ未満、３．５ｇ／ｄＬ未満または３．２ｇ／ｄＬ未満の患者は、抗α４β７抗体のクリアランスが高いことがあるので、抗α４β７抗体による療法に反応しないことがあるか、または、治療の継続には、より多い用量またはより高い頻度での抗α４β７抗体の投与を必要とすることがある。
【００８４】
クリアランス、例えば、線形クリアランス、例えば、単位時間当たりに薬剤が排出された血液の量は、当業者に知られているいずれかの適切な手段によって算出／推定／抽出してよい。例えば、クリアランスは、集団アプローチまたはベイズ法、例えば、完全ベイズマルコフ連鎖モンテカルロ（ＭＣＭＣ）法によって推定してよい。線形クリアランスの薬物動態モデルを作成する方法の１つは、実施例に記載されている。血清中トラフ濃度、例えば、新たな投与を行う前、例えば、１日前、２日前、３日前、４日前、または最大で１週間前の抗α４β７抗体の血清中濃度、ピーク血清中濃度、１回以上のサンプル採取で測定した平均血清中濃度または濃度時間曲線下面積などの抗α４β７抗体暴露測定基準をモデルに入力して、クリアランスを割り出す。
【００８５】
あるいは、ベドリズマブによる治療を継続する患者の特定方法であって、ＩＢＤ患者から得た生体サンプル中のベドリズマブのクリアランスを測定する工程を含む方法は、過去１カ月または２カ月以内にベドリズマブを少なくとも１用量投与した患者で行うことができ、その患者におけるクリアランスが、０．２５Ｌ／日未満、０．２０Ｌ／日未満、０．１〜０．２Ｌ／日、０．１５Ｌ／日未満または０．１．Ｌ／日未満である場合に、ベドリズマブによる治療を継続する患者を特定する。生体サンプルは、いずれかの生体サンプル、例えば、血清、血漿、唾液、尿または便であってよい。
【００８６】
この方法は、内視鏡サブスコアを測定することを更に含んでよい。抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによる治療は、約３未満、約２．５未満、約２未満、約０〜２または１以下の内視鏡サブスコアで継続してよい。
【００８７】
好中球細胞質タンパク質のカルプロテクチンの便レベルは、潰瘍性大腸炎における内視鏡活性と相関する。典型的には、非罹患対象の便中カルプロテクチンレベルは、５０μｇ／ｇ未満となる。５０μｇ／ｇ超であるが、１５０μｇ／ｇ未満の便中カルプロテクチンレベルは、粘膜炎症の可能性のサインであり得、１５０μｇ／ｇ超の便中カルプロテクチンレベルは通常、活動性炎症のサインである。本明細書に記載されている方法は、便中カルプロテクチン濃度を測定することを更に含んでよい。便中カルプロテクチンのレベルが高いほど、再発リスクが高くなる。ベドリズマブによる治療は、１５００μｇ／ｇ未満、１２５０μｇ／ｇ未満、１０００μｇ／ｇ未満、７５０μｇ／ｇ未満、５００μｇ／ｇ未満、４００μｇ／ｇ未満、３００μｇ／ｇ未満、２５０μｇ／ｇ未満、２００〜１２００μｇ／ｇ、３５０〜８００μｇ／ｇ、３００〜１０００μｇ／ｇ、＜５０μｇ／ｇ、＜１００μｇ／ｇ、＜１５０μｇ／ｇ、＜２００μｇ／ｇ、≦２５０〜４９９μｇ／ｇまたは５００〜９００μｇ／ｇの便中カルプロテクチン濃度で継続してよい。あるいは、便中カルプロテクチンは、ベースライン、すなわち治療前の濃度の約５０％未満、４５％未満、４０％未満、３５％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１０〜５５％、１０〜３０％、１５〜３５％、１５〜４５％または２０〜４０％まで低下していてもよい。便サンプルにおける便中カルプロテクチンは、ＰＨＩＣＡＬテストキット（Ｃａｌｐｒｏ、ノルウェー、リサケル）を用いて測定することができる。
【００８８】
薬物動態アッセイ及び薬力学アッセイ
抗α４β７抗体、例えばベドリズマブの血清中濃度は、当業者に知られているいずれかの適切な手段によって測定してよい。一態様では、ベドリズマブの血清中濃度は、サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）アッセイによって測定する。別の態様では、薬力学アッセイの使用の際に、ＭＡｄＣＡＭ−１−Ｆｃのα４β７発現末梢血液細胞への結合が、血液中の抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによって阻害されることを、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブによるα４β７飽和の程度の尺度として用いる。
【００８９】
一実施形態では、血清中の抗α４β７抗体量は、薬物動態アッセイで測定することができる。マイクロタイタープレート、容器、またはビーズなどの固定化相を、抗α４β７抗体に特異的に結合する試薬でコーティングする。患者のサンプル、例えば血清（抗α４β７抗体を含むこともあれば、含まないこともある）と、固定化した試薬を接触させる。インキュベートと洗浄を行った後、コーティング試薬と複合化した抗α４β７抗体を、その捕獲抗体に結合する試薬と接触させ、例えば、西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）などの標識を用いて検出してよい。この結合試薬は、抗α４β７抗体のＦｃ部分に結合する抗ヒト抗体、例えば、ポリクローナルまたはモノクローナル抗体であってよい。３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）のようなＨＲＰ基質の添加により、例えば分光光度計によって測定できる着色のようなシグナルの蓄積を可能にできる。
【００９０】
いくつかの実施形態では、コーティング試薬は、抗α４β７抗体、例えば、その可変領域または１つ以上のＣＤＲ（重鎖ＣＤＲ３（配列番号６）など）を含む一部分に特異的に結合する抗イディオタイプ抗体である。このアッセイで用いる抗イディオタイプ抗α４β７抗体は、抗α４β７抗体のα４β７インテグリン結合部分に対して特異的であることができ、すなわち、その結合部分に結合できるが、抗α４β７抗体のＦｃ部分に対しては特異的ではなく、すなわち、そのＦｃ部分には結合しない。このアッセイで用いる抗イディオタイプ抗α４β７抗体は、抗α４β７抗体の重鎖及び／または軽鎖の可変領域、例えば、配列番号１の２０〜１４０番目のアミノ酸、配列番号２の２０〜１３１番目のアミノ酸及び配列番号３の２１〜１３２番目のアミノ酸からなる群から選択した領域に対して特異的であることができ、すなわち、その領域に結合できる。このアッセイで用いる抗イディオタイプ抗α４β７抗体は、抗α４β７抗体の抗原結合断片に対して特異的であることができ、すなわち、その抗原結合断片に結合できる。抗イディオタイプ抗体は、抗α４β７抗体またはそのα４β７インテグリン結合部分（１つ以上のＣＤＲを含む抗体断片など）を用いて、免疫プロセスから単離でき、組み換え法によって単離または生成されたものとして使用できる。いくつかの実施形態では、抗イディオタイプ抗α４β７抗体は、重鎖ＣＤＲ３（配列番号６）を含む免疫原に対して生起される。別の実施形態では、抗イディオタイプ抗α４β７抗体は、抗α４β７抗体の重鎖及び／または軽鎖の可変領域、例えば、配列番号１の２０〜１４０番目のアミノ酸、配列番号２の２０〜１３１番目のアミノ酸及び配列番号３の２１〜１３２番目のアミノ酸からなる群から選択した領域を含む免疫原に対して生起される。いくつかの実施形態では、抗イディオタイプ抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、抗イディオタイプ抗体のｓｃＦｖ断片をアッセイで用いる。別の実施形態では、完全な抗イディオタイプ抗体をアッセイで用いる。
【００９１】
抗イディオタイプ抗α４β７抗体の生成は、下記の一般的な方法で行うことができる。タンパク質、例えば、抗α４β７抗体、またはそのα４β７インテグリン結合部分もしくはこの部分を含む融合タンパク質で、好適な動物（例えば、マウス、ラット、ウサギまたはヒツジ）を免疫することは、注射用に調製した免疫原によって、反応を誘導する形で、例えば、アジュバント、例えば、完全フロイントアジュバントを用いて行うことができる。他の好適なアジュバントとしては、ＴＩＴＥＲＭＡＸ  ＧＯＬＤ（登録商標）アジュバント（ＣＹＴＲＸ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、カリフォルニア州ロサンゼルス）とミョウバンが挙げられる。重鎖のＣＤＲ（ＣＤＲ３など）を含む断片のような小ペプチド免疫原を、それよりも大きい分子（キーホールリンペットヘモシアニンなど）に結合できる。マウスに対して、数多くの部位、例えば、腹膜（ｉ．ｐ．）、尾根部もしくはフットパッド、または組み合わせた部位、例えば、ｉ．ｐ．と尾根部で、数多くの形式の注射、例えば、皮下注射、静脈内注射または筋内注射を行うことができる。ブースター注射は、同じまたは異なる免疫原を含むことができ、更に、アジュバント、例えば不完全フロイントアジュバントを含むことができる。概して、モノクローナル抗体が望ましい場合、不死化細胞系（例えば、ＳＰ２／０、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３などの骨髄腫細胞系またはヘテロミエローマ）に由来する好適な細胞を抗体産生細胞と融合することによって、ハイブリドーマを作製する。抗体産生細胞は、対象の抗原で免疫した動物の末梢血液、または好ましくは、脾臓もしくはリンパ節から得ることができる。抗体を産生する細胞は、好適な方法、例えば、ヒト抗体産生細胞とヘテロミエローマの融合、すなわちトリオーマ、またはエプスタインバーウイルスへの感染による、活性化ヒトＢ細胞の不死化を用いて作製できる。（例えば、米国特許第６，１９７，５８２号（Ｔｒａｋｈｔ）、Ｎｉｅｄｂａｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１７：２９９−３０４（１９９８）、Ｚａｎｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，１５６：２０５−２１５（１９９２）、Ｇｕｓｔａｆｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ，２：２６−３２（１９９１）を参照されたい。）融合または不死化した抗体産生細胞（ハイブリドーマ）は、選択培養条件を用いて単離でき、限界希釈によってクローニングできる。所望の特異性を持つ抗体を産生する細胞は、好適なアッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ（例えば、マイクロタイターウェルに固定化した免疫原を用いるもの）を用いて同定できる。
【００９２】
抗α４β７抗体または抗イディオタイプ抗α４β７抗体は、生細胞、例えば、培養細胞において、各鎖をコードする核酸配列を発現させることによって作製してよい。様々な宿主−発現ベクター系を用いて、本発明の抗体分子を発現させてよい。このような宿主−発現系は、対象のコード配列を生成させてから精製できるビヒクルを表しているが、適切なヌクレオチドコード配列で形質転換またはトランスフェクションすると、抗α４β７抗体をインサイチューで発現できる細胞も表している。このようなものとしては、抗体コード配列を含む組み換えバクテリオファージＤＮＡ、プラスミドＤＮＡまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターで形質転換した細菌（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のような微生物、抗体コード配列を含む組み換え酵母発現ベクターで形質転換した酵母（例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｐｉｃｈｉａ）、抗体コード配列を含む組み換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）に感染させた昆虫細胞系、組み換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス（ＣａＭＶ）、タバコモザイクウイルス（ＴＭＶ））で感染させたか、もしくは抗体コード配列を含む組み換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）で形質転換した植物細胞系、または哺乳動物細胞のゲノムに由来するプロモーター（例えば、メタロチオネインプロモーター）もしくは哺乳動物ウイルスに由来するプロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーター、ワクシニアウイルス７．５Ｋプロモーター）を含む組み換え発現コンストラクトを有する哺乳動物細胞系（例えば、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＢＨＫ細胞、２９３細胞、３Ｔ３細胞、ＮＳ０細胞）が挙げられるが、これらに限らない。例えば、ヒトサイトメガロウイルスに由来する主要前初期遺伝子プロモーターエレメントのようなベクターと併せた、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）のような哺乳動物細胞が、抗体に有効な発現系である（Ｆｏｅｃｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  ４５：１０１（１９８６）、Ｃｏｃｋｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ８：２（１９９０））。
【００９３】
細菌系では、発現させる抗体分子の意図する用途に応じて、多くの発現ベクターを有益に選択できる。例えば、抗体分子の医薬組成物の生成のために、このようなタンパク質を大量に産生させるときには、精製しやすい高レベルの融合タンパク質産物の発現を駆動するベクターが望ましいことがある。このようなベクターとしては、融合タンパク質が産生されるように、ｌａｃ  Ｚコード領域とインフレームで、抗体コード配列を個別にベクターにライゲーションできるＥ．ｃｏｌｉ発現ベクターｐＵＲ２７８（Ｒｕｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．２：１７９１（１９８３））、ｐＩＮベクター（Ｉｎｏｕｙｅ＆Ｉｎｏｕｙｅ，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１３：３１０１−３１０９（１９８５）、Ｖａｎ  Ｈｅｅｋｅ  ＆  Ｓｃｈｕｓｔｅｒ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２４：５５０３−５５０９（１９８９））などが挙げられるが、これらに限らない。ｐＧＥＸベクターを用いて、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）との融合タンパク質として、外来ポリペプチドを発現させてもよい。概して、このような融合タンパク質は、溶解性があり、マトリックスグルタチオン−アガロースビーズへ吸着及び結合させてから、遊離グルタチオンの存在下で溶離することによって、溶解細胞から容易に精製できる。ｐＧＥＸベクターは、トロンビンまたはＸａ因子プロテアーゼ切断部位を含むように設計されており、クローン化標的遺伝子産物をＧＳＴ部分から放出できるようになっている。昆虫系では、Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ  ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ核多角体病ウイルス（ＡｃＮＰＶ）をベクターとして用いて、外来遺伝子を発現させる。このウイルスは、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞で増殖する。抗体コード配列は、ウイルスの非必須領域（例えば、ポリヘドリン遺伝子）に個別にクローニングして、ＡｃＮＰＶプロモーター（例えば、ポリヘドリンプロモーター）の制御下に置いてよい。
【００９４】
別の実施形態では、コーティング試薬は、抗体のリガンド（ＭＡｄＣＡＭもしくはそのα４β７インテグリン結合断片、またはＭＡｄＣＡＭのα４β７−インテグリン結合断片を含む融合タンパク質であって、免疫グロブリンＧ定常ドメインのような、ＭＡｄＣＡＭ以外のタンパク質と融合しているタンパク質など）である。ＭＡｄＣＡＭ試薬と融合タンパク質の例は、ＰＣＴ公開ＷＯ９６２４６７３及び米国特許第７，８０３，９０４号（それらの教示の全体は、参照により、本明細書に援用される）に記載されている。
【００９５】
ＨＡＨＡアッセイ
ヒト抗抗α４β７抗体活性（ＨＡＨＡ）は、抗薬剤抗体（ＡＤＡ）、すなわち、抗α４β７抗体に特異的な抗体（抗ベドリズマブ抗体）を検出及び／または測定することによって割り出すことができる。例えば、スクリーニング及び力価測定アッセイ、確認アッセイ、ならびに中和アッセイを用いる数多くの選択肢がある。まず、例えば１：５及び１：５０の希釈度のスクリーニングサンプルにおいて、血清サンプルを測定できる。陽性サンプルを特異性に関して確認し、力価測定をし、抗α４β７抗体、例えばベドリズマブ活性を中和する能力に関して調べることができる。
【００９６】
スクリーニングアッセイでは、プレートを抗α４β７抗体でコーティングするブリッジングＥＬＩＳＡを利用できる。固定化した抗α４β７抗体は、試験サンプル中のＡＤＡを捕獲し、ビオチンにコンジュゲートした抗α４β７抗体に、そのＡＤＡを結合させ、西洋わさびペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）−標識ストレプトアビジンによってタグ付けしてから、ＴＭＢなどの酵素基質で検出する。例えば、Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘなどのマイクロプレートリーダーと、ＳＯＦＴＭＡＸ  Ｐｒｏ３．１．２などの解析ソフトウェアで測定した場合の陽性着色によって、サンプルにおけるＡＤＡの存在が示される。このアッセイのカットポイントは、例えば、ビオチン−アビジン−ＨＲＰベースのブリッジングアッセイでは、正常なヒト血清サンプルをネガティブコントロールとして用いることによって定めることができる。１０個のネガティブコントロール血清の平均吸光値をネガティブコントロールの標準偏差の１．６５倍に加えて、カットポイントを定めることができる。すなわち、カットポイントは、約５％の偽陽性率を可能にできる。１μｇ／ｍＬのベドリズマブの存在下では、低い力価反応は干渉されて、検出不可能になり得るが、１μｇ／ｍＬ超のベドリズマブ濃度では、高レベルの免疫原性が検出可能である。例えば、標準的なアッセイ感度は、０．５μｇ／ｍｌのベドリズマブの存在下においては、０．４４ｎｇ／ｍｌであることができるが、アッセイの感度は、１８０ｎｇ／ｍｌであることができる。これらの理由から、血清サンプルは、抗α４β７抗体の最後の用量の投与から４週間後超、８週間後超、１２週間後超または１６週間後超に採取できる。事前投与とサンプル採取との間の期間が長くなるほど、血清中薬剤レベルは典型的に、干渉レベル未満になり得る。
【００９７】
別のアッセイ方法では、ストレプトアビジンコーティングプレート、ストレプトアビジンコーティング容器に固定したビオチン標識抗α４β７抗体、ブリッジの固定化側用のビーズまたはマイクロタイタープレート、及びブリッジの逆側用の重金属（ルテニウム、オスミウムまたはレニウムなど）標識（例えば、スルホタグを介した標識）抗α４β７抗体を使用する。ブリッジ複合体は、段階的添加と、溶解の間または溶解時の洗浄によって、プレート上に構築でき、そのブリッジの両側を希釈血清サンプルと接触させてから、プレートに移す。この方法を用いるアッセイの一例の感度は、３．９０ｎｇ／ｍｌの抗抗α４β７抗体である。電気化学発光（ＥＣＬ）によって、例えば、Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｅｃｔｏｒ  Ｉｍａｇｅｒ  ６０００（メリーランド州ロックビル）で、重金属標識ブリッジ複合体、例えば、ルテニウム標識複合体を検出すると、ＨＲＰ法よりも感度が高くなり得、及び／または血清中の抗α４β７抗体の量に対する寛容性が高くなり得る。したがって、血清中薬剤レベルが低下した後の遅延サンプルを待つ必要性がなくなる。いくつかの実施形態では、酸、例えば、酢酸または低ｐＨグリシンで血清サンプルを前処理して、患者由来の抗抗α４β７抗体から抗α４β７抗体を放出してから、ブリッジング抗α４β７抗体と接触させると、血清中の薬剤からの干渉を軽減できる。例えば、血清に５μｇ／ｍｌのベドリズマブが存在する際には、標準的なアッセイ感度は、３．９０ｎｇ／ｍｌであり得るが、このアッセイの感度は、１０ｎｇ／ｍｌであり得る。
【００９８】
一実施形態では、患者から得た血清サンプル中の抗ベドリズマブ抗体を検出するアッセイは、標準的な希釈係数（１：５、１：２５、１：５０及び／または１：１２５など）によって血清を希釈することと、酢酸で処理することと、ビオチン標識ベドリズマブとルテニウム標識ベドリズマブとの間に、血清由来抗ベドリズマブ抗体とのブリッジを形成させるのに十分な時間、酸を中和するための高ｐＨ試薬（高濃度トリスバッファーなど）と、ビオチン標識ベドリズマブと、ルテニウム標識ベドリズマブと含むアッセイ組成物と、酸で処理した希釈サンプルとを合わせることと、その複合体をストレプトアビジンコーティングプレートに移すことと、プレートを洗浄して、抗体ブリッジによって複合体化されたルテニウムのみが存在するようにすることを含む。結合したルテニウム標識複合体の検出と、マイクロプレートリーダーでの電気化学発光によるサンプルの測定は、トリプロピルアミンなどのリード液を加え、電圧を印加して、抗体ブリッジを介してプレートに複合体化されたルテニウム標識を刺激することによって行うことができる。
【００９９】
最初のスクリーニングアッセイの後、過剰な非標識抗α４β７抗体を用いて特異性を確かめる確認アッセイで、サンプルを更に試験できる。確認された陽性サンプルは、ＨＡＨＡが抗α４β７抗体、例えばベドリズマブの細胞への結合を中和する能力に関して更に評価できる。免疫血清が標識ベドリズマブのα４β７インテグリン発現細胞系ＲＰＭＩ８８６６への結合を阻害する能力をフローサイトメトリーによって割り出すように、競合的フローサイトメトリーベースのアッセイを設計した。
【０１００】
その結果によって、陰性（陽性ＨＡＨＡサンプルはない）、陽性（少なくとも１つの陽性ＨＡＨＡサンプルがある）、一過性陽性（少なくとも１つの陽性ＨＡＨＡサンプルがあり、連続的な陽性ＨＡＨＡサンプルはない）及び持続性陽性（少なくとも２個以上の連続的な陽性ＨＡＨＡサンプルがある）という免疫原性状態の分類を示すことができる。陰性患者は、抗α４β７抗体に反応する可能性が高く、その抗体による治療を継続できる。持続性陽性患者は、抗α４β７抗体のクリアランスが高い可能性が高く、抗α４β７抗体治療に反応しないことがある。陽性患者は、抗α４β７抗体のクリアランスが高いことがあり、抗α４β７抗体に反応しないことがある。陽性患者は、抗α４β７抗体の追加の投与から２週間後、３週間後、４週間後、５週間後または６週間後に、追加の血清サンプルを採取して、持続性陽性なのか、一過性陽性なのか割り出すことができる。一過性陽性患者は、抗α４β７抗体による治療に反応する可能性が高く、これらの患者の治療は、継続することができる。
【０１０１】
免疫原性レベルの力価も割り出してよい。力価の分類には、≧５（低い）、≧５０、≧１２５、≧６２５及び≧３１２５（高い）が含まれる。陽性サンプルにおける力価の高い患者は、抗α４β７抗体のクリアランスが高いことがあり、抗α４β７抗体による治療に反応しないことがある。陽性サンプルにおける力価の低い患者は、抗α４β７抗体による治療に反応することがある。
【０１０２】
下記の実施例を参照することによって、本発明について更に深く理解するであろう。しかしながら、実施例は、本発明の範囲を限定するものとして解釈すべきではない。全ての引用文献及び引用特許は、参照により、本明細書に援用される。
【実施例】
【０１０３】
実施例１：薬物動態モデリングと薬力学モデリング
この実施例では、ＵＣ患者及びＣＤ患者におけるベドリズマブ療法の包括的な集団薬物動態解析及び薬力学解析を報告する。我々の目的は、（１）最長で５２週間、ベドリズマブ３００ｍｇを繰り返しＩＶ注入した患者におけるベドリズマブの薬物動態を特徴付け、（２）患者におけるベドリズマブのクリアランスの臨床上関連する決定因子を特定し、（３）ＭＡｄＣＡＭ−１を薬力学的評価項目として用いて、患者におけるベドリズマブの薬物動態と薬力学との関係を説明することであった。
【０１０４】
材料と方法
試験設計とサンプル採取
健常なボランティアにおける第１相試験、活動期ＵＣ患者における第２相試験（ＮＣＴ０１１７７２２８）、中度〜重度の活動期ＵＣ患者における第３相試験（ＧＥＭＩＮＩ１［ＮＣＴ００７８３７１８］）、ならびに中度〜重度の活動期ＣＤ患者における第２相試験及び第３相試験（ＧＥＭＩＮＩ２［ＮＣＴ００７８３６９２］及びＧＥＭＩＮＩ３  ［ＮＣＴ０１２２４１７１］）という５つの無作為化プラセボ対照臨床試験から得たベドリズマブの血清中濃度を用いて、解析を行った（表Ｓ１）。第２相試験と第３相試験の試験設計と臨床データは、すでに報告されている。全ての試験プロトコールと同意書は、試験現場で、企業内治験審査委員会または倫理委員会から承認を得たとともに、医薬品臨床試験の実施基準及びＤｅｃｌａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｅｌｉｎｓｋｉの原則に従って、試験を行った。全ての患者が、試験への参加前に、書面によるインフォームドコンセントを提出した。
【０１０５】
薬物動態解析、薬力学解析（ＭＡｄＣＡＭ−１）及び抗薬剤抗体（ＡＤＡ）解析のための血液サンプル採取時点の詳細は、表Ｓ１に示されている。第１相試験と第２相試験では、薬物動態及び薬力学用の広域サンプリングを用いたのに対し、第３相試験では、スパースサンプリングを使用した。ＧＥＭＩＮＩ３では、薬力学用サンプルは採取しなかった。
【０１０６】
【表１−１】
2018503618.tif 000003
【表１−２】
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【表１−３】
2018503618.tif 000005
【表１−４】
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【表１−５】
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【０１０７】
アッセイ
１：１００の希釈度における検出下限が０．００１２５μｇ／ｍＬで、サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて、ベドリズマブの血清中濃度を割り出した。アッセイの正確性は、変動係数（ＣＶ）が１０．１％、サンプル内精度が１．８％〜３．０％のＣＶ範囲、サンプル間精度が４．０％〜１６．０％のＣＶ範囲であった。
【０１０８】
末梢血清中のベドリズマブによるα４β７インテグリンの飽和を定量するために、ＭＡｄＣＡＭ−１−Ｆｃ結合干渉フローサイトメトリーアッセイを行った。この薬力学アッセイでは、ＭＡｄＣＡＭ−１−Ｆｃのα４β７発現末梢血液細胞への結合が、血液中のベドリズマブによって阻害されることを、ベドリズマブによるα４β７の飽和の程度の尺度として用いる［１］。Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（通称Ｔａｋｅｄａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｃｏ．）によって開発されたアッセイでは、サンプル内の全体的なばらつきが６％のＣＶであり、同一対象におけるばらつきが２０％のＣＶであったことが示された。
【０１０９】
有効なビオチン化ブリッジングＥＬＩＳＡと、２つの血清希釈液（１：５及び１：５０）を用いて、抗薬剤抗体（ＡＤＡ）、すなわち、抗α４β７抗体に特異的な抗体（抗ベドリズマブ抗体）の存在を割り出した。プレートを抗α４β７抗体でコーティングする。固定化した抗α４β７抗体が、試験サンプル中のＡＤＡを捕獲する。洗浄後、結合した複合体が、ビオチンにコンジュゲートした抗α４β７抗体を捕獲し、再度洗浄後、ＨＲＰ標識ストレプトアビジンを捕獲する。ＴＭＢ基質とともにインキュベートすると、陽性着色によって、サンプル中のＡＤＡの存在が示される。陽性とスクリーニングされた全てのサンプルを更に希釈して、標準的な技法を用いて、最終的なＡＤＡ力価を割り出した。両方のスクリーニング希釈液が陰性であった場合には、サンプルを陰性とみなした。いずれかの診察時に、その抗体が検出されたら、患者をＡＤＡに対して陽性として分類し、検出されなかった場合には、陰性として分類した。
【０１１０】
データの組み立て
投与、共変量及び薬物動態−薬力学データをマージし、Ｒ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．１０．１以上（www.r-project.org）を用いて、集団解析のためにフォーマットした。欠落していたベドリズマブ血清中濃度測定値、または付随の観察時点、投与時点、投与量もしくは投与間隔が不明か欠落していたいずれの値も、解析から除外した。ＭＡｄＣＡＭ−１測定値も同様に処理した。定量限界（ＢＬＱ）未満として報告された全てのベドリズマブサンプル（ｎ＝３１８９）は、集団薬物動態モデルの作成中には評価しなかった。ＢＬＱの観察物の半分超（ｎ＝１７２２）は、１回目のベドリズマブの投与の前に得たサンプルであった。
【０１１１】
集団薬物動態データセットに存在する共変量は、血清中Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、血清中アルブミン、便中カルプロテクチン、体重、疾患活動性（クローン病活動性指標［ＣＤＡＩ］、完全Ｍａｙｏスコア、部分的Ｍａｙｏスコア）、Ｍａｙｏ内視鏡サブスコア、年齢、性別、ＡＤＡの状態（陽性または陰性）、事前のＴＮＦ−αアンタゴニスト療法の状態（ナイーブまたは不適格）、肥満度指数（ＢＭＩ）、血清中グロブリン、診断（ＣＤまたはＵＣ）、リンパ球数及び併用療法の使用（メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリンまたはアミノサリシレート）であった。併用療法の開始日及び終了日をデータセットに投入して、併用治療の時間依存的効果を評価した。データが欠落した共変量は、残りの利用可能なデータ（例えば、残りの値の中央値）に基づき、様々な補完方法を用いて補完した。集団薬物動態データセットに存在する共変量には、１０％超の値が欠落しているものはなかった。
【０１１２】
集団薬物動態モデルの作成
非線形混合効果モデリングアプローチ（ＮＯＮＭＥＭ  ７，Ｖｅｒｓｉｏｎ  ７．２、ＩＣＯＮ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ、米国メリーランド州エリコットシティー）を用いて、反復測度に対する集団薬物動態解析を行った［１３］。η−ε間相互作用を考慮した条件付一次近似（ＦＯＣＥＩ）法と、広域サンプリングした第１相及び第２相データを用いて、ベイズ集団薬物動態モデルを作成した。続いて、ベースモデルから得られた結果を、フル共変量モデルにおいて、ＧＥＭＩＮＩ１、２及び３から得られる第３相疎データに適合させた集団薬物動態モデルパラメーターのサブセットに選択的に通知する事前情報として用いた。完全ベイズマルコフ連鎖モンテカルロ（ＭＣＭＣ）法を用いて、フル共変量モデルを第３相データに適合させた。推定の不確実性の尺度としての９５％ベイズ確信区間（ＣＤＩ）とともに、全てのパラメーター推定値を報告した。
【０１１３】
固定効果パラメーター（共変量係数及び構造モデルパラメーター）と変量効果パラメーターを含む集団パラメーターを推定した。フルブロック共分散行列とともに、線形クリアランス（ＣＬＬ）、中央コンパートメント分布容積（Ｖｃ）及び最大消失速度（Ｖｍａｘ）の指数関数的分散モデルを用いて、個人間変量効果分布をモデル化した一方で、残差変量効果は、比例モデルによって記述した。
【０１１４】
段階的な仮説検証ではなく、パラメーター推定を重視する共変量モデリングアプローチを集団薬物動態解析で実施した［１４］。まず、探索的グラフィック、科学的重要性及び機械的妥当性に基づき、事前定義した共変量パラメーターの関係を特定した。続いて、予測因子における相関または共線性を回避するように、注意して、フル共変量モデルを構築し、相関係数が約０．３５超の共変量を潜在的予測因子としては同時に含めなかった。フルモデルの構築は、対象の共変量効果の定量化をサポートするために、試験設計と共変量データの的確性を評価することによっても導いた。
【０１１５】
パラメーターの臨床的関連性に関する推定は、得られたパラメーター推定値と、フルモデルの推定精度（９５％ベイズＣＤＩ）の指標に基づいていた。薬物動態のばらつきの解釈のためのコンテクストを提供する効能関連の臨床評価項目の暴露−反応関係がない中では、典型的な集団値の±２５％超という共変量効果サイズを臨床的に有意義な変化として提示した。
【０１１６】
モデリング仮定には、薬物動態／薬力学（該当する場合）パラメーターの対数変換を含めた。生理学的関係が推測によって分からないこれらのケースでは、対数領域において加法モデルを用いて、連続共変量の効果をモデル化した一方で、カテゴリー共変量の効果を同様に記述した。
【数１】
2018503618.tif 000008
式中、モデルパラメーター（ＴＰＶ）の典型的な値は、ｍ個の個別の連続共変量（ｃｏｖ  ｍｉ）とｐ個の個別のカテゴリー共変量カテゴリーの関数として記述されており、θｎは、共変量が基準共変量値と等しい（ｃｏｖｍｉ＝ｒｅｆｍ）個体の典型的な対数変換薬物動態パラメーター値を記述する推定パラメーターであり、θ（ｍ＋ｎ）及びθ（ｐ＋ｍ＋ｎ）は、共変量とパラメーターとの関係の程度を記述する推定パラメーターである。
【０１１７】
最終的な集団薬物動態モデル及びパラメーター推定値を予測チェック方法によって調べた。この方法は、事後予測チェックと似ているが、パラメーターの不確実性は、個人間及び残差分散に対して無視可能であると仮定する。分位点−分位点プロットを用いて、オリジナルデータセットの５００個のモンテカルロシミュレーション複製データを、観察したベドリズマブデータセットにおける同じ暴露測定基準の分布と比較した。
【０１１８】
集団薬物動態−薬力学モデルの作成
非線形混合効果モデリングアプローチ（ＮＯＮＭＥＭ、Ｖｅｒｓｉｏｎ７．２）を用いて、反復測度に対する集団薬物動態−薬力学解析を行った。逐次的アプローチを用いて薬物動態−薬力学データをモデル化し、その際、集団薬物動態モデルから得た個々の予測ベドリズマブ血清中濃度を用いて、薬力学反応を駆動した。薬力学評価は、高レベルのα４β７インテグリン（ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯｈｉｇｈ）を発現するリンパ球によるＭＡｄＣＡＭ−１の結合の割合に基づいていた。直接効果シグモイドＥｍａｘモデルを選択して、ベドリズマブがＭＡｄＣＡＭ−１のα４β７への結合に対して及ぼす効果について、暴露と反応との関係を特徴付けた。形式的な共変量モデリングまたはモデル評価は行わなかった。
【０１１９】
結果
薬物動態解析集団
試験集団は、評価可能なベドリズマブ血清サンプル１８４２７個を提供した２５５４人の個体（第１相試験の８７人の健常なボランティア、第２相試験の４６人の患者（ＵＣ）、ならびに第３相のＧＥＭＩＮＩ１試験の８９１人の患者（ＵＣ）、ＧＥＭＩＮＩ２試験の１１１５人の患者（ＣＤ）、及びＧＥＭＩＮＩ３試験の４１５人試験の患者の（ＣＤ）を含む）から構成されていた。
【０１２０】
薬物動態解析集団のデモグラフィック及びその他の特徴が表１にまとめられている。解析集団は、年齢範囲が１８〜７８歳、ベースライン体重の範囲が２８〜１７０ｋｇの１２９０人の男性と１２６４人の女性から構成されていた。合わせて１５３０人の個体がＣＤ、９３７人がＵＣ、８７人が健常なボランティアであった。
【０１２１】
【表２−１】
2018503618.tif 000009
【表２−２】
2018503618.tif 000010
【０１２２】
ＧＥＭＩＮＩ１のＵＣ患者及びＧＥＭＩＮＩ２のＣＤ患者のベドリズマブの血清中トラフ濃度−時間の中央値（四分位範囲）プロファイルが図１に示されている。
【０１２３】
集団薬物動態モデリングの結果
ベイス薬物動態モデル
平行な線形消失と非線形消失を有する２コンパートメントモデルによって、ベドリズマブ薬物動態を記述した。２コンパートメントモデルにより、１コンパートメントモデルよりも適合度基準が有意に向上した。平行な線形消失と非線形消失のモデルの方が線形モデルよりも向上したからである。ベドリズマブの集団薬物動態モデルが、図２に図式的に示されている。
【０１２４】
共変量薬物動態モデル
体重とＢＭＩ、性別と体重、ＣＲＰとアルブミン、ＣＲＰと便中カルプロテクチン、ＣＲＰとグロブリン、アルブミンとグロブリン、完全Ｍａｙｏスコアと部分的Ｍａｙｏスコア、Ｍａｙｏ内視鏡サブスコアと完全Ｍａｙｏスコア、及びＭａｙｏ内視鏡サブスコアと部分的Ｍａｙｏスコアという共変量間に、強い相関関係が確認された。したがって、性別、ＣＲＰ、完全Ｍａｙｏスコア、Ｍａｙｏ内視鏡サブスコア、グロブリン及びＢＭＩをフル共変量モデルから除外した。以下で説明するように、集団薬物動態モデルが決定したら、探索的ポストホック形式で、性別、ＣＲＰ及び内視鏡サブスコアがベドリズマブの薬物動態に及ぼす効果を独立して評価した。
【０１２５】
体格の関数として、ベドリズマブ薬物動態の変化を示すために、体重を選択し、基準体重７０ｋｇの相対成長モデルを用いて記述した。アルブミン、便中カルプロテクチン、部分的Ｍａｙｏスコア、年齢及びＣＤＡＩスコアという他の連続共変量は、基準値（典型的には、データの観察中央値に近い値）によって正規化された関数として、モデルに組み込んだ。事前のＴＮＦ−αアンタゴニスト療法の状態、ＡＤＡの状態、併用療法の使用及びＩＢＤの診断というカテゴリー共変量は、各効果のオンオフスイッチとして機能する別個の二値（０，１）共変量を持つ関数としてモデルに組み込んだ。時間依存的共変量は、体重、アルブミン、便中カルプロテクチン及び併用療法の使用であった。ＵＣ患者とＣＤ患者に関する別個のＣＬＬパラメーターをモデル化することによって、ＩＢＤの診断が線形クリアランス（ＣＬＬ）に及ぼす効果を調べ、ＩＢＤの診断が中央コンパートメント分布容積（Ｖｃ）に及ぼす効果は、ＩＢＤをＶｃの予測因子として共変量モデルに含めることによって評価した。
【０１２６】
薬物動態モデルの最終結果
最終的な集団薬物動態モデルから得た典型的な薬物動態パラメーター及び分散パラメーター推定値、ならびに９５％ＣＤＩが、基準共変量値（表２の脚注に列挙されている）に関して、表２に示されている。
【０１２７】
【表３】
2018503618.tif 000011
【０１２８】
薬物動態パラメーター推定値と、重複している９５％ＣＤＩによって、ＵＣ患者とＣＤ患者において、ＣＬＬが同じであったことが示された。線形消失期のベドリズマブの半減期は、典型的な基準患者において２５．５日であり、個々の推定値は、１４．６〜３６．０日の範囲であった（第５及び第９５パーセンタイル）。分散パラメーター推定値は、中程度〜高程度の未解明の個人間ばらつきを示していた。ＣＬＬの典型的な値は、ＵＣ患者では０．１５９Ｌ／日、ＣＤ患者では０．１５５Ｌ／日であった。ＵＣ患者及びＣＤ患者におけるＣＬＬの個々の推定値は、図３に示されているように、広範囲に分布していた。比例残差分散推定値（このモデルにおける未解明の変量残差のばらつき）は、比較的小さかった。個人間分散と相関関係の推定値が、表Ｓ２に示されており、個人間変量効果の標準偏差及び縮減推定値が、表Ｓ３に示されている。
【０１２９】
【表４】
2018503618.tif 000012
【０１３０】
【表５】
2018503618.tif 000013
【０１３１】
最終的な集団薬物動態モデルから得た適合度プロットが、図４及び９に示されている。診断プロットによって、このフル共変量薬物動態モデルが、観察データと整合していたことと、系統的バイアスがあまり見られなかったことが示された。様々な共変量値を持つ基準個体におけるＣＬＬの相対的変化が、図５に示されている。共変量がＣＬＬに及ぼす効果の点推定値及び９５％ＣＤＩが、表Ｓ４に示されている。
【０１３２】
【表６】
2018503618.tif 000014
【０１３３】
概して、９５％ＣＤＩは狭く、各共変量がベドリズマブＣＬＬに及ぼす効果が明確に定義されたことを示している。アルブミン及び体重の効果のみが、代表的範囲の極値において、臨床的に有意義である可能性があった（２５％超の効果サイズ）。アルブミンレベルが４．７ｇ／ｄＬの患者の典型的なＣＬＬ値は、基準患者（アルブミン、４ｇ／ｄＬ）の約０．８倍、アルブミンレベルが３．２ｇ／ｄＬの患者は、約１．３倍であった（図５）。４０ｋｇの患者の典型的なＣＬＬ値は、基準患者（体重７０ｋｇ）の約０．８倍であった。体重範囲のもう一方の限界値では、１２０ｋｇの患者のＣＬＬは、基準患者よりも１．２倍高かった（図５）。血清中アルブミン濃度が４．０ｇ／ｄＬの１２０ｋｇの患者は、臨床的有意性について予め定めた基準よりも高いクリアランスを有する可能性が１９％であった。共変量値及びカテゴリーの代表的範囲にわたり評価したところ、便中カルプロテクチン、ＣＤＡＩスコア、部分的Ｍａｙｏスコア、年齢、事前のＴＮＦ−αアンタゴニスト療法の状態、ＡＤＡの状態及び併用療法の使用がベドリズマブＣＬＬに及ぼす効果は、臨床上関連するものではないとされた。共変量効果サイズが、典型的な基準値から±２５％未満であったからである（表Ｓ４）。加えて、これらの共変量効果の９５％ＣＤＩは通常狭く、無効果値を含んでいた。
【０１３４】
最終モデルから得た全ての共変量と推定値に固定した薬物動態パラメーター（個人間分散は、最推定した）によって、最終的な集団薬物動態モデルを再度実施し、性別がＣＬＬ及びＶｃに及ぼすあらゆる残りの効果を定量化した。この解析の結果により、ベドリズマブ薬物動態の他の予測因子に関して調節した後、女性患者では、男性患者と比べて、典型的なＣＬＬ値が約１０％低くなり、Ｖｃが約６％低くなることが示唆されている。しかしながら、これらの効果は、臨床上関連するものではないとされた。共変量効果サイズが、典型的な基準値（男性患者）から±２５％未満であったからである。性別効果を加えることによって、ＣＬＬでは約４．２％、Ｖｃでは６．０％の未解明の個人間ばらつきが説明された。
【０１３５】
最終的な集団薬物動態モデルを再度実施して、ＣＲＰがＣＬＬに及ぼすいずれかの残りの効果も推定した。結果によって、ベドリズマブ薬物動態の他の予測因子に関して調節した後、ＣＲＰがＣＬＬに及ぼす効果が、臨床上関連しないことが示唆された。０．４６〜９３ｍｇ／ｄＬのベースラインＣＲＰ値の範囲にわたって評価した（第２．５及び第９７．５パーセンタイルを観察した）ところ、共変量効果サイズが、典型的な基準値（ＣＲＰ、１１ｍｇ／ｄＬ）から、±２５％未満であったからである。ＣＲＰ効果を加えることによって、ＣＬＬにおける＜１％の未解明の個人間ばらつきが説明された。
【０１３６】
ＵＣ患者では、最終的な集団薬物動態モデルから得たＣＬＬの個々の推定値を、６週目における内視鏡サブスコアによってプロットすることによって、Ｍａｙｏ内視鏡サブスコアの効果を図によって評価した（図６）。この解析から、６週目（誘導治療の終了時）には、内視鏡サブスコアが３の患者は、内視鏡サブスコアが０の患者よりもＣＬＬが平均で２５％高かった。
【０１３７】
薬物動態モデル評価
予測チェック方法と、事後確率分布から抽出した９５％ベイズＣＤＩによって、最終的な集団薬物動態モデル及びパラメーター推定値を評価した。予測チェックの基本前提は、観察データセットから抽出したモデル及びパラメーターによって、元の観察データと同等のシミュレートデータを作成しなければならないことである。予測チェックプロットによって、観察データとシミュレートデータは、全体的によく一致していることが示された（図１０、１１及び１２）。９５％ベイズＣＤＩ（表２、Ｓ２及びＳ４）を評価することによって、パラメーター推定値の精度を評価した。全体的に、構造的薬物動態モデルパラメーター、共変量効果及び分散パラメーターは、精度が良好であると推定された。
【０１３８】
薬物動態−薬力学解析集団
ベドリズマブ集団薬物動態−薬力学データセットは、合計２４４２個の評価可能なＭＡｄＣＡＭ−１観察記録を提供した５９３人の個体から構成されていた。この解析集団は、２９７人のＵＣ患者と２９６人のＣＤ患者（第２相試験、ならびにＧＥＭＩＮＩ１及び２由来）から構成されていた。
【０１３９】
解析中、ＭＡｄＣＡＭ−１（ベドリズマブによってブロックされていない遊離α４β７受容体）の対数変換値をモデル化した。ＧＥＭＩＮＩ１及び２のＵＣ患者及びＣＤ患者における観察ＭＡｄＣＡＭ−１測定値（遊離α４β７受容体の割合）と観察ベドリズマブ血清中濃度をプロットしたものが、図７に示されている。ＧＥＭＩＮＩ１及び２のＵＣ患者及びＣＤ患者において、治療レジメンごとに、観察ＭＡｄＣＡＭ−１測定値と時間をプロットしたものが、図８に示されている。遊離α４β７受容体の割合は、１回目の投与後、直ちに低下し、ベドリズマブ３００ｍｇの反復ＩＶ注入中、維持された。
【０１４０】
薬物動態−薬力学モデリング結果
直接効果シグモイドＥｍａｘモデルを構造モデルとして選択して、以下のように、ベドリズマブの薬物動態と薬力学との関係を記述した。
【数２】
2018503618.tif 000015
式中、Ｅｏは、ベースラインのＭＡｄＣＡＭ−１の結合パーセントであり、Ｅｍａｘは、最大効果であり、Ｃｏｎｃは、ベドリズマブの血清中濃度であり、ＥＣ５０は、最大効果の半値におけるベドリズマブの血清中濃度であり、γは、ヒル係数、すなわち傾き係数である。
【０１４１】
ベースラインＭＡｄＣＡＭ−１阻害（Ｅ０）、最大効果（Ｅｍａｘ）、最大効果の半値におけるベドリズマブの血清中濃度（ＥＣ５０）及びヒル係数、すなわち傾き係数（γ）に関して、モデルをパラメーター化した。構造パラメーター推定値は、表３に示されており、十分な精度で推定した。プラセボ効果をモデル化しようと試みたが、推定された効果は、ごくわずかであった。明らかな効果がないことは、プラセボで治療した患者における観察ＭＡｄＣＡＭ−１データと整合していた。
【０１４２】
【表７−１】
2018503618.tif 000016
【表７−２】
2018503618.tif 000017
【０１４３】
ベースモデルにより、診断プロット（図１３）の目視確認によって判断したところ、データの妥当な記述が得られたが、モデル中、いくつかの欠陥が見られた。分散パラメーター推定値は、中程度〜高程度の未解明の個人間及び残差ばらつきを示しており、推定値は、Ｅ０では、ＣＶが４１．８％、Ｅｍａｘでは０．５５１（ＳＤロジスティック分布）、指数関数的残留誤差分散（σ２ｅｘｐ）では、ＣＶが７８．３％であった（表３）。
【０１４４】
考察
出願人は、健常なボランティア、ＵＣ患者及びＣＤ患者にＩＶ投与後に、同一の設計及びサンプル採取スケジュールによる臨床試験で集めたデータを用いて、ベドリズマブの集団薬物動態モデルを作成した。これらの設計の特徴により、ＵＣ患者とＣＤ患者のベドリズマブの体内動態及び薬物動態的ばらつきの直接比較が可能になった。これらの２つの疾患の間では、ベドリズマブの推定半減期に差がなく、その推定半減期は、２５．５日（１４．６〜３６．０日の範囲［第５パーセンタイルと第９５パーセンタイル］）であり、これは、ヒトＩｇＧ１（２５日）に典型的なものであるとともに、ＩｇＧ１タイプＡ２のモノクローナル抗体に典型的なものである。この半減期は実質的に、現在の生物学的なＩＢＤ治療剤の値よりも長い。臨床家は、薬剤への暴露を最小限にするのが望ましい状況において、ベドリズマブの比較的長い半減期を認識しているはずである。これに関連する例としては、治療中に腸管感染症を発現する患者、妊娠して、妊娠第三期に薬剤を摂取する女性が挙げられる。
【０１４５】
中央コンパートメントに由来する非線形経路（ＣＬＮＬ）及び線形経路（ＣＬＬ）による平行なクリアランスからなる２コンパートメント薬物動態モデルをベースモデルとして選択した。非線形消失は、ミカエリスメンテン型消失によって最も良く説明された。生理学的には、非線形経路は、受容体媒介エンドサイトーシスのような飽和可能な標的媒介機構によるクリアランスによると考えられている。これに対して、線形経路は、Ｆｃ媒介消失のように、治療濃度においては飽和不可能である成分を表している。平行な消失は、体内動態が標的への結合の影響を受け、このケースでは、α４β７インテグリンが循環Ｔリンパ球に影響を及ぼすモノクローナル抗体に典型的なものである。エファリズマブ、トシリズマブ及びセツキシマブにおいて、同様の効果が報告されている。これに対して、ＴＮＦ−αアンタゴニストの消失は、線形消失プロセスによって最も良く説明される。ＩＶ投与後、ＵＣまたは強直性脊椎炎患者におけるインフリキシマブの消失、及び関節リウマチ患者におけるゴリムマブの消失は、線形消失を有する２コンパートメントモデルに従う。ＴＮＦ−αは、可溶形態と膜結合形態の両方で存在し、ＩＢＤ患者において、異常に高濃度で、血清及び腸粘膜に存在する。炎症組織におけるＴＮＦ−αの局在化により、薬剤の血漿から標的部位への再分布が遅いために、標的の飽和が迅速に行われるのが難しくなることがある。したがって、治療濃度で標的の飽和を得るのが困難なことがある。更に、異なるコンパートメントにおけるＴＮＦ−α濃度のばらつきにより、薬剤が再分配され、ＴＮＦ−αアンタゴニストの薬物動態及び薬物動態と効能／安全性との関係に影響が及ぶ可能性がある。消失経路におけるこれらの違いの臨床上の意義は、現在のところ理解されていない。
【０１４６】
推定ベドリズマブＣＬＬ値は、静脈内投与される他のモノクローナル抗体の値と整合している。抗体のクリアランスがＩＢＤのタイプの影響を受け得ることを報告している執筆者もいるが、ＵＣ患者及びＣＤ患者におけるベドリズマブの薬物動態では、明らかな差は観察されなかった。最終的な薬物動態モデルから得られた結果によって、血清中アルブミン濃度が４ｇ／ｄＬである４０歳の７０ｋｇの患者におけるベドリズマブＣＬＬは、ＵＣ患者では０．１５９Ｌ／日、ＣＤ患者では０．１５５Ｌ／日であったことが示された。
【０１４７】
出願人は、内部及び外部共変量（体重、年齢、アルブミン、便中カルプロテクチン、ＣＤＡＩスコア、部分的Ｍａｙｏスコア、併用療法の使用、ＡＶＡの状態及び事前のＴＮＦ−αアンタゴニスト療法の状態）がベドリズマブＣＬＬに及ぼす瀬在的効果を評価した。極値のアルブミンと体重は、薬剤クリアランスに重要な効果を及ぼした。具体的には、アルブミン濃度が低下し、体重が増加すると、クリアランスが上昇した。７０ｋｇの患者では、３．２ｇ／ｄＬ未満のアルブミン濃度が、ベドリズマブのクリアランスの上昇と関連付けられ、この上昇は、臨床的有意性について予め定めた基準を上回っていた。集団薬物動態解析において、低いアルブミン濃度と他のモノクローナル抗体との同様の関連性が報告されている。この相互作用の機序は、完全には理解されていないが、腸、腎臓近位尿細管及び上気道の血管内皮、単球、マクロファージ、樹状細胞、肝細胞及び上皮細胞を含め、全身における多種多様な細胞と組織で発現するＦｃ受容体（ＦｃＲｎ）は、ＩｇＧとアルブミンの分子をタンパク質分解からサルベージして、中心循環系にリサイクルすることによって、ＩｇＧとアルブミンのホメオスタシスを促す。ＦｃＲｎの発現及び／または活性が低下すると、治療用抗体及びアルブミンを含むＩｇＧのサルベージ効率の低下により、アルブミン濃度が低下し、最終結果は、抗体のクリアランスの上昇と、このケースでは、血清中ベドリズマブ濃度の低下であると仮定されている。しかしながら、この仮説は、証明されていない。別の説明は、ＩＢＤ患者における消化管の炎症により、非従来経路の消失が生じ得る。具体的には、重症の大腸炎という設定では、患者は、大量のタンパク質が管腔から失われるタンパク質漏出性結腸疾患を発現し得る。したがって、アルブミンは、この経路を介する内因性ＩｇＧ及びモノクローナル抗体の喪失のサロゲートマーカーとして機能し得る。この仮説の裏付けは、インフリキシマブで治療した重症の大腸炎患者における観察（便中で、そのモノクローナル抗体が高濃度で確認された）に由来する。逆に、これらの患者では、血清中薬剤濃度は低かった。治療の成功は、この現象の解決と関連付けられた。便中ベドリズマブ濃度は、ＧＥＭＩＮＩ試験中測定されず、出願人は、この仮説を評価できなかった。
【０１４８】
確認された第２の重要な共変量は体重であり、体重は、ベドリズマブのクリアランスと正に相関していた。血清中アルブミン濃度が４．０ｇ／ｄＬである１２０ｋｇの患者は、臨床的有意性について予め定めた基準よりも高いクリアランスを有する可能性が１９％であった。体格の指標は、治療用モノクローナル抗体の薬物動態に影響を及ぼす共変量のうち、最も一般的に認められるものである。体重がベドリズマブの薬物動態に及ぼす影響は、他の治療用モノクローナル抗体の集団解析において報告されているものと整合している。
【０１４９】
他の潜在的な共変量がベドリズマブのクリアランスに及ぼす効果は、体重及びアルブミンよりも小さかった。炎症の強度は、他のモノクローナル抗体において、高い薬剤クリアランスの予測因子として確認されている。出願人の解析においては、Ｍａｙｏ内視鏡サブスコアが低いＵＣ患者の平均クリアランスは、内視鏡サブスコアが高い患者よりも低かった。しかしながら、これらの結果は、慎重に解釈しなければならない。粘膜治癒をしているＵＣ患者及びＣＤ患者では、ＴＮＦ−αアンタゴニストのトラフレベルが高くなることが報告されており、この関係は偶然ではなく、薬剤漏出性腸疾患と、粘膜治癒と、アルブミン濃度との関連性を反映するに過ぎない可能性が高くなるからである。
【０１５０】
炎症の強度は、他のモノクローナル抗体において、クリアランスの陽性予測因子として報告されている。既存の最終的な集団薬物動態モデルに存在する他の共変量（アルブミンなど）の効果を考慮後、ポストホック探索的解析によって、ベドリズマブのクリアランスにおける未解明のランダムなばらつきの予測因子として、ＣＲＰの効果を推定した。これらの結果によって、ＣＲＰがＣＬＬに及ぼす効果は、臨床上関連せず、ベドリズマブのＣＬＬの１％未満の未解明の個人間のばらつきを説明したことが示唆されている。これに対して、高いＣＲＰ濃度は、抗ＴＮＦ−αモノクローナル抗体のクリアランスの向上と強い関連がある。したがって、アルブミンとＣＲＰは強く相関していたので、アルブミンを組み込むことによって、ＣＲＰがベドリズマブＣＬＬに及ぼすいずれかの潜在的な効果は、既に考慮されていた。
【０１５１】
ＡＤＡの惹起が、インフリキシマブのクリアランスを上昇させることが報告されている。今回の解析では、ＡＤＡの存在が、ベドリズマブのクリアランスを１２％だけ上昇させると推定された。この小さい影響は、ＧＥＭＩＮＩ試験で観察されたＡＤＡの発現の低さによると思われる。しかしながら、これらの研究でＡＤＡに対して持続性陽性を示した少数の患者では、ベドリズマブトラフ濃度は、定量限界を下回った。モノクローナル抗体に対する患者の感作が、治療失敗の重大な原因であり、この点においては、ベドリズマブも例外ではないと出願人は考えている。
【０１５２】
今回の集団薬物動態解析では、疾患活動性、事前のＴＮＦ−αアンタゴニスト療法の状態、年齢（１８〜７８歳）及び併用薬の使用という共変量がベドリズマブの薬物動態に及ぼす臨床的に有意義な影響は示されなかった。事前のＴＮＦ−αアンタゴニスト療法の使用との関連性の欠如は、ベドリズマブで治療したＵＣ患者とＣＤ患者において、臨床的寛解または反応の可能性が高いことと関連していた。総合すると、これらの観察によって、事前のＴＮＦ−αアンタゴニスト療法の使用がベドリズマブの効能に及ぼす影響は、ベドリズマブＣＬＬに対するいずれの効果とも関係がないことが示唆されている。
【０１５３】
チオプリン及びメトトレキサートの同時投与が、トラフ濃度の上昇と薬剤クリアランスの低下と関連付けられるＩＢＤ患者及び関節リウマチ患者の両方において、チオプリン及びメトトレキサートがベドリズマブの薬物動態に影響を及ぼさないのは、ＴＮＦ−αアンタゴニストとは異なる。代謝拮抗剤が生物学的薬剤の濃度を上昇させる機序は、あまり理解されていないが、Ｆｃγの発現の調節が、考え得る説明である。例えば、メトトレキサートは、単球上のＦｃγ受容体とその他のＦｃ−受容体サブタイプをダウンレギュレートすることが知られている。更に、ＡＤＡの惹起を防ぐと、免疫媒介性の薬剤クリアランスを低下させることによって、薬剤暴露が増大する。併用薬がベドリズマブＣＬＬに及ぼす効果がない理由は、現在のところ理解されていない。感度解析を行って、Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ−Ｄｒｕｇ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ（ＰＫ  ＴＰＤＩ）Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐによって推奨されているように、ベドリズマブの集団薬物動態データセットにおける併用薬使用の比率が、薬剤相互作用のないことを検出するのに少なくとも８０％の指数を得るのに十分であったか確かめた。この解析によって、少なくとも８０％の指数を確保するためのサンプルサイズ要件をデータセットが満たしていたことが明らかになったとともに、ベドリズマブＣＬＬが、アザチオプリン、メルカプトプリン、メトトレキサートまたはアミノサリシレートの併用の影響を受けなかったことが確認された。
【０１５４】
興味深いことに、治療有効量以下とみなされるベドリズマブ濃度で、α４β７受容体の飽和が維持されたことから、受容体の飽和が、臨床効果のために必要ではあるが十分ではないのではないかという疑問が生じた。集団薬物動態−薬力学モデルから得たＥＣ５０推定値は、０．０９３μｇ／ｍＬであったことから、約１μｇ／ｍＬのベドリズマブ血清中濃度で完全飽和に達することが示唆された。暴露−効能結果によって、誘導時の１７μｇ／ｍＬ未満（ＵＣ患者）及び１５μｇ／ｍＬ未満（ＣＤ患者）のベドリズマブ濃度が、プラセボと同様の効能と関連付けられることが示された。この矛盾は、ＭＡｄＣＡＭ−１アッセイで、循環Ｔ−細胞においてα４β７飽和が測定されることによって説明されると思われ、または薬剤作用の発現が遅いことによると思われる。ＭＡｄＣＡＭ−１アッセイは、用量を考慮しておらず、用量選択には使用すべきではない。更に、組織コンパートメントにおける細胞間相互作用に対する効果と区別して、末梢血液におけるα４β７受容体ブロックの相対的な薬力学的寄与を評価するための試験が、研究の優先である。
【０１５５】
結論としては、ＵＣ患者及びＣＤ患者において、ベドリズマブの薬物動態−薬力学特性を特徴付ける集団モデルの作成は成功した。モデリング結果によって、ベドリズマブの典型的な薬物動態は、ＵＣ患者及びＣＤ患者で同様であったことが示唆された。アルブミンと体重が、ベドリズマブのクリアランスの重要な予測因子として確認されたが、これらの共変量の効果は、極値において臨床的に有意義とみなされたにすぎなかった。驚くべきことに、免疫抑制剤の同時投与には、ベドリズマブの薬物動態に対して、臨床上関連する影響がなかった。しかしながら、この所見は、ＴＮＦ−αアンタゴニストにおける免疫原性の阻止と、薬剤濃度の低下との十分に確立された関係とは対照的である。この解析は、ＵＣ患者及びＣＤ患者でベドリズマブによる固定投与を用いることを裏付けた。
【０１５６】
実施例２  便中カルプロテクチン評価
好中球細胞質タンパク質のカルプロテクチンの便中レベルは、炎症性腸疾患における炎症の内視鏡重症度と相関しており、＜５０μｇ／ｇは、非罹患集団に典型的な値であり、＞５０〜＜１５０μｇ／ｇは、粘膜炎症の可能性があり、＞１５０μｇ／ｇは、活動性炎症であり、高レベルは、再発リスクの向上と関連する。ここでの目的は、中度〜重度の活動期ＵＣの患者において、ＶＤＺによる誘導治療が、便中カルプロテクチンレベルを低下させるか判断することである。
【０１５７】
ＧＥＭＩＮＩ１第３相臨床試験の盲検誘導部の患者を、便中のｆＣａｌについて試験し、カルプロテクチンレベルに対する反応または寛解について調べた。便サンプルは、０週目と６週目に採取した。ＰｈｉＣａｌのカルプロテクチンキット（アッセイ感度：９ｎｇ／ｍｌの希釈サンプル）を用いて、ｆＣａｌレベルを測定した。
【０１５８】
治療または反応状態ごとの６週目におけるベースラインに対するカルプロテクチンの割合が、図１４に示されている。Ｐ値は、ウイルコクソンの順位和検定（両側）から、対数変換データに基づいて得たものである。ベースラインと６週目のカルプロテクチン値の両方がある患者のみが、この解析に含まれている。ＶＤＺで治療した患者では、ｆＣａｌの幾何平均が６９％低下し、ＰＢＯで治療した患者では、３２％低下したことが観察された（Ｐ＝０．００１１）。
【０１５９】
【表８】
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【０１６０】
ベースラインでは、平均ｆＣＡＬレベルは、ＰＢＯで治療した患者では２３７０μｇ／ｇ、ＶＤＺで治療した患者では、２５５２μｇ／ｇであった。
【０１６１】
誘導療法に反応した患者では、治療にかかわらず、ＦＣＡＬ濃度が低下した。ＵＣに対するＶＤＺ誘導療法は、６週目のｆＣａｌレベル（粘膜炎症のマーカー）をＰＢＯよりも有意に低下させた。反応と寛解の割合は、ベースラインｆＣａｌ濃度にかかわらず、ＶＤＺの方が高かった。
【０１６２】
実施例３  潰瘍性大腸炎における臨床転帰の予測因子としての６週目における深い寛解
深い寛解（内視鏡転帰と患者が報告する転帰の組み合わせ）は、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）患者に対する、新たに発生しつつある治療目標である。しかしながら、現在のところ、ＵＣ患者の深い寛解の評価については、標準化された定義は存在しない。６週目及び５２週目における深い寛解の評価項目の統計的に有意かつ臨床的に有意義な改善は、ＧＥＭＩＮＩ１集団で、内視鏡Ｍａｙｏサブスコアと患者が報告する転帰との様々な組み合わせを用いて、既に報告した。この実施例では、出願人は、ＧＥＭＩＮＩ１から得たデータのポストホック解析を用いて、ＶＤＺによる深い寛解が、ＵＣ患者における臨床転帰と健康関連クオリティ・オブ・ライフ（ＨＲＱｏＬ）の予測因子であるかを調べる。
【０１６３】
６週目または５２週目に深い寛解状態であった維持ＩＴＴ集団において、５２週目に、臨床及びＨＲＱｏＬの評価項目を評価した。
・臨床的寛解：完全Ｍａｙｏスコアが≦２ポイントであり、＞１ポイントの個別サブスコアがないこと
・粘膜治癒：Ｍａｙｏ内視鏡サブスコアが≦１であること
・コルチコステロイド（ＣＳ）非投与下寛解：ベースラインにおいて、経口ＣＳを用いていたが、ＣＳを停止した患者が、５２週目に臨床的寛解状態であること
Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ−５  Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ（ＥＱ−５Ｄ）ビジュアルアナログスケール（ＶＡＳ）：≧７ポイントの上昇は、臨床的に有意義な改善を表す
Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｂｏｗｅｌ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ（ＩＢＤＱ）合計スコア：＞１７０のスコアは、寛解状態の患者のＨＲＱｏＬの特徴を示している。５２週目における観察症例を用いて、臨床評価項目を解析し、ＨＲＱｏＬ評価項目では、最終観察繰越法を用いて、欠測患者を考慮した。
【０１６４】
【表９−１】
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【表９−２】
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【０１６５】
維持ＩＴＴ集団における全ての患者に、誘導中、ＶＤＺを２回投与し、深い寛解の度合いは、両方の定義を用いたところ、６週目（維持ベースライン）において、治療グループにわたって同程度であった。５２週目では、いずれの定義によっても、深い寛解状態であったＶＤＺ治療患者は、ＰＢＯ治療患者のほぼ３倍であった。
【０１６６】
５２週目に全ての臨床評価項目を満たした割合は、６週目において深い寛解状態であった患者（定義１または２）の方が、深い寛解でなかった患者よりも高く、その差は、ＶＤＺ  Ｑ４Ｗで最も大きかった。６週目において深い寛解状態であった患者は、ＶＤＺによる維持治療の方が、ＰＢＯによる治療よりも、臨床転帰が改善された（図１５Ａ〜１５Ｆ及び１６Ａ〜１６Ｆ）。定義１においては、ＰＢＯによる維持治療後の臨床的寛解は、６週目において深い寛解状態であった患者と、深い寛解でなかった患者において同程度であった。概して、５２週目に、ＨＲＱｏＬの臨床的に有意義な改善が報告された割合は、６週目において深い寛解状態であった（定義１または２）患者の方が、深い寛解でなかった患者よりも多かった。ＩＢＤＱ及びＥＱ−５Ｄ  ＶＡＳは、深い寛解状態であった患者であって、ＰＢＯで治療した患者と比べて、深い寛解状態であった患者であって、ＶＤＺで治療した患者の方が改善した。６週目において深い寛解状態でなかった患者においても、ＰＢＯに無作為に選ばれた患者よりも、ＶＤＺによる維持治療を行った患者の方が、臨床転帰とＨＲＱｏＬの結果が改善した割合が高かった。
【０１６７】
結論：いずれの定義を用いたときも、ＶＤＺで治療した患者の方が、ＰＢＯで治療した患者よりも、５２週目において深い寛解状態であった割合が高く、厳格でない方の定義２を用いた場合には、深い寛解状態と分類された患者が多かった。いずれの定義を用いた場合も、６週目において深い寛解状態であった患者の方が、６週目において深い寛解でなかった患者と比べて、５２週目において臨床及びＨＲＱｏＬの評価項目の大半を満たした割合が高かった。ＶＤＺで治療した患者の方が、ＰＢＯで治療した患者よりも、転帰が改善した。５２週目における深い寛解の実現は、治療グループにかかわらず、５２週目における臨床転帰とＨＲＱｏＬの結果の改善と一致した。これらの結果によって、更なる試験での深い寛解モニタリングを用いて、患者の転帰を予測できることが示唆されている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１５Ｄ】
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【図１５Ｅ】
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【図１５Ｆ】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１６Ｃ】
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【図１６Ｄ】
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【図１６Ｅ】
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【図１６Ｆ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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