(57)【要約】  本明細書では酸化デキストラン化合物を含む組成物が開示される。酸化デキストラン化合物は、水性条件下でデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程によって生成される。
2018513249.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
酸化デキストラン化合物を含む組成物であって、前記酸化デキストラン化合物は、水性条件下でデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程によって生成され、
前記デキストランは、
（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含み、
前記デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は約５０，０００，０００〜２００，０００，０００Ｄａであり、前記デキストランのｚ平均旋回半径は約２００〜２８０ｎｍである組成物。
【請求項２】
前記デキストランは、
（ｉ）１位および６位で連結した約８９．５〜９０．５重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．４〜０．９重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．３〜０．５重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約８．０〜８．３重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．７〜１．４重量％のグルコースを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記デキストランは、分岐鎖構造内で一緒に連結した鎖を含み、前記鎖は長さが類似であり、実質的にα−１，６−グルコシド結合を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記鎖の平均長は、約１０〜５０モノマー単位である、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記デキストランは、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記デキストランは、過ヨウ素酸化合物と接触させられる、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記デキストランは、最初に過ヨウ素酸化合物と接触させられ、その後にＮ−オキソアンモニウム塩と接触させられる、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記Ｎ−オキソアンモニウム塩は、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物は、家庭用製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品または食品である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物は、洗剤組成物であり、さらに前記組成物は好ましくは家庭用製品である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
酸化デキストラン化合物を生成する方法であって、
（ａ）水性条件下でデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程であって、
前記デキストランは、
（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含み；
前記デキストランの前記重量平均分子量（Ｍｗ）は約５０，０００，０００〜２００，０００，０００Ｄａであり、前記デキストランの前記ｚ平均旋回半径は約２００〜２８０ｎｍである；
前記デキストランは、前記Ｎ−オキソアンモニウム塩、過ヨウ素酸化合物および／または過酸化物化合物によって酸化され、これにより酸化デキストラン化合物が生成される工程、および
（ｂ）任意選択的に、前記酸化デキストラン化合物を単離する工程を含む方法。
【請求項１２】
（Ｉ）前記デキストランは、前記過ヨウ素酸化合物と接触させられる、または
（ＩＩ）前記デキストランは、最初に過ヨウ素酸化合物と接触させられ、その後にＮ−オキソアンモニウム塩と接触させられる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記Ｎ−オキソアンモニウム塩は、
（Ｉ）ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩、または
（ＩＩ）４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含み；
任意選択的に、前記ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩もしくは４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩は、水性条件下でＴＥＭＰＯを含む作用物質を酸化させる工程によって提供される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力を増加させる方法であって、
請求項１１に記載の方法にしたがって生成された酸化デキストラン化合物を水性組成物と接触させる工程であって、前記水性組成物の前記ビルダーおよび／または再付着防止能力が前記酸化デキストラン化合物によって、接触させる工程の前の前記水性組成物の前記ビルダーおよび／または再付着防止能力に比較して増加する工程を含む方法。
【請求項１５】
材料を処理する方法であって、
１つの材料を請求項１１に記載の方法にしたがって生成された酸化デキストラン化合物を含む水性組成物と接触させる工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、参照により本明細書に全体として組み込まれる米国仮特許出願第６２／１４２，６４９号明細書（２０１５年４月３日出願）の利益を主張するものである。
【０００２】
本開示は、多糖類誘導体の分野に含まれる。例えば、本開示は、酸化デキストラン化合物およびそれらの調製方法に関する。
【０００３】
電子的に提出された配列表の参照
配列表の正式な写しは、１６４キロバイトのサイズを有して本明細書と同時に提出される、２０１６年３月に作成された２０１６０３１７＿ＣＬ６４２２ＷＯＰＣＴ＿ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇＳＴ２５．ｔｘｔのファイル名を備えるＡＳＣＩＩフォーマットの配列表としてＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出される。このＡＳＣＩＩフォーマット文献に含有される配列表は、本明細書の一部であり、これにより全体として参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００４】
微生物の酵素合成または遺伝子操作を使用して新規な構造の多糖類を見つけたいという要望に駆られて、研究者らは、生分解性であって再生可能な起源の供給原料から経済的に製造できる多糖類を見いだしてきた。そのような多糖類ファミリーの１つは、α−グリコシド結合によって連結されたグルコースモノマーを含むポリマーであるα−グルカンである。
【０００５】
デキストランは、α−１，３−結合によって直鎖に連結された周期的な側鎖（分岐鎖）を備えるα−１，６−結合グルコースモノマーの鎖を一般に含む、複雑な分岐状α−グルカンの１ファミリーを表す（非特許文献１）。デキストランの生成は、典型的には細菌（例えば、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種もしくはストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種）を用いるスクロースの発酵を通して実施されるが、このときスクロースはデキストラン重合のためのグルコース源として機能する（非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４）。デキストランは水への溶解度が高いことを前提に数種の用途（例えば、アジュバント、安定剤）において使用されるが、この高溶解度は親水コロイド用途における増粘剤としてのそれらの一般的有用性にマイナスの影響を及ぼす可能性がある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｉｏａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ３３：５７３０−５７３９
【非特許文献２】Ｎａｅｓｓｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８０：８４５−８６０
【非特許文献３】Ｓａｒｗａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．４：３７９−３８６
【非特許文献４】Ｏｎｉｌｕｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｆｏｏｄ  Ｒｅｓ．Ｊ．２０：１６４５−１６５１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、新規なデキストランポリマーおよびそれらの誘導体を開発することには関心が高い。例えば本明細書に現在開示した化合物などのこれらのタイプの化合物は、様々な用途において潜在的な有用性を有する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
１つの実施形態では、本開示は、酸化デキストラン化合物を含む組成物であって、酸化デキストラン化合物は、水性条件下でデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程によって生成され、デキストランは、（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含み、デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は約５０，０００，０００〜２００，０００，０００Ｄａであり、デキストランのｚ平均旋回半径は約２００〜２８０ｎｍである組成物に関する。
【０００９】
また別の実施形態では、デキストランは、（ｉ）１位および６位で連結した約８９．５〜９０．５重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．４〜０．９重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．３〜０．５重量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約８．０〜８．３重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．７〜１．４重量％のグルコースを含む。
【００１０】
また別の実施形態では、デキストランは、分岐鎖構造内で一緒に連結した鎖を含み、このとき鎖は長さが類似であり、実質的にα−１，６−グルコシド結合を含む。鎖の平均長は、別の実施形態では、約１０〜５０モノマー単位である。
【００１１】
また別の実施形態では、デキストランは、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物である。
【００１２】
また別の実施形態では、デキストランは、過ヨウ素酸化合物と接触させられる。
【００１３】
また別の実施形態では、デキストランは、最初に過ヨウ素酸化合物と接触させられ、その後にＮ−オキソアンモニウム塩と接触させられる。
【００１４】
また別の実施形態では、Ｎ−オキソアンモニウム塩は、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含む。Ｎ−オキソアンモニウム塩は、また別の実施形態では、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含む。
【００１５】
また別の実施形態では、デキストランは、過酸化物化合物と接触させられる。過酸化物化合物は、また別の実施形態では、過酸化水素であってよい。
【００１６】
また別の実施形態では、本組成物は、家庭用製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品または食品である。本組成物は、また別の実施形態では、洗剤組成物である。洗剤組成物は、好ましくは、例えば家庭用製品である。
【００１７】
また別の実施形態では、本開示は、酸化デキストラン化合物を生成するための方法に関する。本方法は、水性条件下でデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程であって、このときデキストランは、Ｎ−オキソアンモニウム塩、過ヨウ素酸化合物および／または過酸化物化合によって酸化され、それにより酸化デキストラン化合物を生成する工程を含む。そのような方法において使用されるデキストランは、例えば上記の実施形態におけるように本明細書に開示したデキストランであってよい。本方法によって生成された酸化デキストラン化合物は、任意選択的に単離することができる。
【００１８】
本方法のまた別の実施形態では、デキストランは、過ヨウ素酸塩と接触させられる。また別の実施形態では、デキストランは、最初に過ヨウ素酸化合物と接触させられ、その後にＮ−オキソアンモニウム塩と接触させられる。
【００１９】
本方法のまた別の実施形態では、Ｎ−オキソアンモニウム塩は、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含む。Ｎ−オキソアンモニウム塩は、また別の実施形態では、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含むことができる。また別の実施形態では、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩もしくは４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩は、本方法において水性条件下でＴＥＭＰＯを含む作用物質を酸化させる工程によって提供される。ＴＥＭＰＯを含む作用物質は、また別の実施形態では、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯである。
【００２０】
本方法のまた別の実施形態では、デキストランは、過酸化物化合物と接触させられる。過酸化物化合物は、また別の実施形態では、過酸化水素であってよい。
【００２１】
また別の実施形態では、本方法の水性条件は、酸性または塩基性である。
【００２２】
また別の実施形態では、本開示は、増加したビルダーおよび／または再付着防止能力を有する水性組成物を調製する方法に関する。本方法は、本開示にしたがって生成された酸化デキストラン化合物を水性組成物と接触させる工程であって、水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力が酸化デキストラン化合物によって、接触させる工程の前に存在していた水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力に比較して増加する工程を含む。
【００２３】
また別の実施形態では、本開示は、材料を処理する方法に関する。本方法は、１つの材料を本明細書に開示した１つの酸化デキストラン化合物を含む水性組成物と接触させる工程を含む。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】１００ｇ／Ｌのスクロースおよび０７６８ｇｔｆ（配列番号１）を含むグルコシルトランスフェラーゼ反応によるスクロース消費のＨＰＬＣ分析を示す図である。実施例２を参照されたい。
【図２Ａ】枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において２９１９ｇｔｆ（配列番号５）を発現させるために使用されたプラスミドｐＺＺＨＢ５８３のマップを示す図である。実施例３を参照されたい。
【図２Ｂ】枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において２９１８ｇｔｆ（配列番号９）を発現させるために使用されたプラスミドｐＺＺＨＢ５８２のマップを示す図である。実施例４を参照されたい。
【図２Ｃ】枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）を発現させるために使用されたプラスミドｐＺＺＨＢ５８４のマップを示す図である。実施例５を参照されたい。
【図２Ｄ】枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において２９２１ｇｔｆ（配列番号１７）を発現させるために使用されたプラスミドｐＺＺＨＢ５８４のマップを示す図である。実施例６を参照されたい。
【図３】市販で入手できるデキストランスクラーゼを含む反応によるスクロース消費のＨＰＬＣ分析を示す図である。実施例７を参照されたい。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
【表１】
2018513249.tif 000003
【００２６】
【表２】
2018513249.tif 000004
【００２７】
本明細書に引用される全ての特許文献および非特文献の開示は、それらの全体が参照により本明細書に援用される。
【００２８】
他に特に開示しない限り、本明細書で使用する用語「１つの」は、参照した特徴の１つ以上（つまり、少なくとも１つ）を含むことが意図されている。
【００２９】
存在する場合、全ての範囲は、他に特に明記される場合を除いて、包括的および結合可能である。例えば、「１〜５」の範囲が記載された場合、記載された範囲は、「１〜４」、「１〜３」、「１〜２」、「１〜２および４〜５」、「１〜３および５」などを含むと解釈すべきである。
【００３０】
本明細書の用語「グルカン」は、グリコシド結合の１つのタイプであるグルコシド結合によって連結されているＤ−グルコースモノマーの多糖を意味する。本明細書の「α−グルカン」は、構成成分のＤ−グルコースモノマーがα−Ｄ−グルコースモノマーであるグルカンを意味する。
【００３１】
用語「デキストラン」、「デキストランポリマー」、「デキストラン化合物」などは、本明細書では互換的に使用され、主としてα−１，３−結合によって連結された側鎖（分岐鎖）を備える、実質的に（大部分が）α−１，６−結合グルコースモノマーの鎖を一般に含む複雑な分枝状α−グルカンを意味する。本明細書の用語「ゲル化デキストラン」は、本明細書に開示した１つ以上のデキストランが、（ｉ）酵素的デキストラン合成中、および任意選択的に、（ｉｉ）そのように合成されたデキストランが単離され（例えば、＞９０％純粋）、その後水性組成物中に配置されると、粘性溶液もしくはゲル様組成物を形成する能力に関する。
【００３２】
本明細書のデキストラン「長鎖」は、「実質的に［もしくは大部分が］α−１，６−グルコシド結合」を含むことができるが、これは一部の態様ではそれらが少なくとも約９８．０％のα−１，６−グルコシド結合を有し得ることを意味する。本明細書のデキストランは、一部の態様では、「分枝鎖構造」（分枝状構造）を含むことができる。この構造内では、長鎖は、おそらく反復方法で、他の長鎖から分岐する（例えば、長鎖は他の長鎖からの分岐鎖であってよく、これは順にその分岐鎖自体が他の長鎖からの分岐鎖であってよく、と続く）ことが企図されている。この構造内の長鎖は、分岐鎖構造内の全長鎖の少なくとも７０％の長さ（ＤＰ［重合度］）が分岐鎖構造の全長鎖の平均長の±３０％内であることを意味する「長さが類似」であってよいことは企図されている。
【００３３】
一部の実施形態におけるデキストランは、典型的には長さが１〜３つのグルコースモノマーであり、デキストランポリマーの全グルコースモノマーの約１０％未満を含む、長鎖から分岐している「短鎖」をさらに含むことができる。そのような短鎖は、典型的にはα−１，２−、α−１，３−および／またはα−１，４−グルコシド結合を含む（一部の態様では、長鎖内に少ないパーセンテージのそのような非α−１，６結合もまた存在する可能性があると考えられる）。
【００３４】
用語「グリコシド結合（ｌｉｎｋａｇｅ）」、「グリコシド結合（ｂｏｎｄ）」などは、本明細書では互換的に使用され、１つの炭水化物分子を別の炭水化物分子に結合させる共有結合を意味する。用語「グルコシド結合（ｌｉｎｋａｇｅ）」、「グルコシド結合（ｂｏｎｄ）」などは、本明細書では互換的に使用され、２つのグルコース分子間のグリコシド結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，６−グルコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１および６を通してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，３−グルコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１および３を通してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，２−グルコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１および２を通してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，４−グルコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１および４を通してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書では、「α−Ｄ−グルコース」は、「グルコース」と呼ぶことになる。本明細書に開示した全グルコシド結合は、他に特に明記された場合を除いて、α−グルコシド結合である。
【００３５】
本明細書の「１位および６位で連結したグルコース（グルコースモノマー）」は、２つの隣接グルコースモノマーを備える各グルコシド結合にグルコースモノマーの炭素１および６だけが含まれているデキストランのグルコースモノマーを意味する。この定義は同様に、各結合内に含まれている異なる炭素位置を適宜に考慮に入れると、（ｉ）「１位および３位で連結した」、および（ｉｉ）「１位および４位で連結した」グルコースに当てはまる。
【００３６】
本明細書の「１位、３位および６位で連結したグルコース（グルコースモノマー）」は、３つの隣接グルコースモノマーを備える各グルコシド結合にグルコースモノマーの炭素１、３および６が含まれているデキストランのグルコースモノマーを意味する。１位、３位および６位でのみ連結したグルコースは、分岐点である。この定義は同様に、各結合内に含まれている異なる炭素位置を適宜に考慮に入れると、（ｉ）１位、２位および６位、および（ｉｉ）１位、４位および６位、で連結したグルコースに当てはまる。
【００３７】
本明細書でのグルコースの位置（グルコース炭素位置）１位、２位、３位、４位および６位は、下記の構造：
【化１】
2018513249.tif 000005
に描出したように、当分野において公知である。
【００３８】
本明細書のデキストランのグリコシド結合プロファイルは、当分野において公知の任意の方法を使用して決定できる。例えば、結合プロファイルは、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法（例えば、１３Ｃ  ＮＭＲまたは１Ｈ  ＮＭＲ）を使用する方法を用いて決定できる。使用できるこれらや他の方法は、参照により本明細書に組み込まれるＦｏｏｄ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｓ．Ｗ．Ｃｕｉ，Ｅｄ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ３，Ｓ．Ｗ．Ｃｕｉ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，Ｔａｙｌｏｒ  ＆  Ｆｒａｎｃｉｓ  Ｇｒｏｕｐ  ＬＬＣ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，２００５）に開示されている。
【００３９】
本明細書の用語「スクロース」は、α−１，２−グリコシド結合によって連結されたα−Ｄ−グルコース分子およびβ−Ｄ−フルクトース分子から構成される非還元型二糖を意味する。スクロースは、グラニュー糖として一般に知られている。
【００４０】
本明細書のデキストラン化合物の「分子量」は、数平均分子量（Ｍｎ）または重量平均分子量（Ｍｗ）として表すことができ、それらの単位はＤａもしくはｇ／モルである。または、分子量は、ＤＰｗ（重量平均重合度）またはＤＰｎ（数平均重合度）として表すこ
とができる。これらの分子量測定値を計算するためには、当分野では、例えば、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）またはゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）を用いるなどの様々な手段が知られている。
【００４１】
本明細書の用語「慣性半径」（Ｒｇ）は、デキストランの平均半径を意味し、分子の重心からデキストラン分子の成分（原子）の根二乗平均として計算される。Ｒｇは、例えば、オングストロームもしくはナノメートル（ｎｍ）単位で表示することができる。本明細書のデキストランの「ｚ平均慣性半径」は、光散乱法（例えば、ＭＡＬＳ）を使用して測定されるデキストランのＲｇを意味する。ｚ平均Ｒｇを測定するための方法は公知であり、本明細書で適宜に使用できる。例えば、ｚ平均Ｒｇは、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７５３１０７３号明細書、米国特許出願公開第２０１０／０００３５１５号明細書および同第２００９／００４６２７４号明細書、Ｗｙａｔｔ（Ａｎａｌ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  ２７２：１−４０）およびＭｏｒｉ  ａｎｄ  Ｂａｒｔｈ（Ｓｉｚｅ  Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ，１９９９）に開示されたように測定することができる。
【００４２】
用語「グルコシルトランスフェラーゼ酵素」、「ｇｔｆ酵素」、「ｇｔｆ酵素触媒」、「ｇｔｆ」、「グルカンスクラーゼ」などは、本明細書では互換的に使用される。本明細書のｇｔｆ酵素の活性は、生成物であるグルカンおよびフルクトースを作成するための基質スクロースの反応を触媒する。デキストラン（１つのタイプのグルカン）を生成するｇｔｆ酵素は、さらにデキストランスクラーゼと呼ぶこともできる。ｇｔｆ反応の他の生成物（副生成物）は、グルコース（このときグルコースはグルコシル−ｇｔｆ酵素中間複合体から加水分解される）および例えばロイクロースなどの様々な可溶性オリゴ糖（例えば、ＤＰ２〜ＤＰ７）を含むことができ、グルコシルトランスフェラーゼ酵素の野生型形は、一般に（Ｎ末端からＣ末端方向に）シグナルペプチド、可変ドメイン、触媒ドメインおよびグルカン結合ドメインを含有する。本明細書のｇｔｆは、ＣＡＺｙ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−Ａｃｔｉｖｅ  ＥｎＺｙｍｅｓ）データベース（Ｃａｎｔａｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３７：Ｄ２３３−２３８，２００９）によると、グリコシドヒドロラーゼファミリー７０（ＧＨ７０）の下に分類される。
【００４３】
用語「グルコシルトランスフェラーゼ触媒ドメイン」および「触媒ドメイン」は、本明細書では互換的に使用され、グルコシルトランスフェラーゼ酵素にグルカン生成活性を提供するグルコシルトランスフェラーゼ酵素のドメインに関する。
【００４４】
用語「ｇｔｆ反応」、「ｇｔｆ反応溶液」、「グルコシルトランスフェラーゼ反応」、「酵素反応」、「デキストラン合成反応」、「デキストラン反応」などは、本明細書では互換的に使用され、グルコシルトランスフェラーゼ酵素によって実施される反応に関する。本明細書で使用される「ｇｔｆ反応」は、一般に、スクロースおよび水ならびに任意選択的に他の成分を含む溶液中に少なくとも１つの活性グルコシルトランスフェラーゼ酵素を最初に含む反応を意味する。ｇｔｆ反応中にそれが開始された後にあってよい他の成分には、フルクトース、グルコース、例えばロイクロースなどの可溶性オリゴ糖（例えば、ＤＰ２〜ＤＰ７）およびデキストラン生成物が含まれる。それは、水、スクロースおよびグルコシルトランスフェラーゼ酵素を接触させる工程が実施されるｇｔｆ反応中にある。本明細書で使用する用語「好適なｇｔｆ反応条件下」は、グルコシルトランスフェラーゼ酵素活性を介してスクロースからデキストランへの変換を支持するｇｔｆ反応条件を意味する。本明細書のｇｔｆ反応は、天然型ではない。
【００４５】
本明細書で使用する「コントロール」ｇｔｆ反応は、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３または配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含んでいないグルコシルトランスフェラーゼを使用する反応を意味することができる。コントロール反応溶液の他の特徴（例えば、スクロース濃度、温度、ｐＨ、時間）の全ては、それが比較される反応と同一であってよい。
【００４６】
ｇｔｆ反応の「乾燥固体率」は、ｇｔｆ反応中の糖全部に対する重量％を意味する。ｇｔｆ反応の乾燥固体率は、例えば、反応を調製するために使用されるスクロースの量に基づいて計算できる。
【００４７】
本明細書のｇｔｆ反応によるデキストランの「収率」は、反応において変換させられるスクロース基質の重量のパーセンテージとして表示されるデキストラン生成物の重量を表す。例えば、反応溶液中の１００ｇのスクロースが生成物に変換させられ、１０ｇの生成物がデキストランである場合、デキストランの収率は１０％となるであろう。この収率計算は、デキストランに向かう反応の選択性の尺度であると見なすことができる。
【００４８】
用語「ポリヌクレオチド」、「ポリヌクレオチド配列」および「核酸配列」は、本明細書では互換的に使用される。これらの用語は、ヌクレオチド配列などを包含する。ポリヌクレオチドは、一本鎖もしくは二本鎖であり、任意選択的に合成、非天然もしくは改変ヌクレオチド塩基を含有するＤＮＡもしくはＲＮＡのポリマーであっってよい。ポリヌクレオチドは、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、合成ＤＮＡまたはそれらの混合物の内の１つ以上のセグメントから構成されてよい。
【００４９】
ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド配列に関して本明細書で使用する用語「配列同一性」もしくは「同一性」は、特定の比較ウィンドウにわたって最高一致について整列させた場合に同一である、２つの配列内の核酸塩基もしくはアミノ酸残基に関する。したがって、「配列同一性のパーセンテージ」もしくは「同一性率（％）」は、比較ウィンドウにわたって２つの最適に整列された配列を比較することによって決定される数値を意味するが、このとき比較ウィンドウ内のポリヌクレオチドもしくはポリペプチド配列の部分は、２つの配列の最適整列のための参照配列（付加もしくは欠失を含まない）と比較して付加もしくは欠失（すなわち、ギャップ）を含む可能性がある。パーセンテージは、マッチした位置の数を生じさせるために両方の配列内で同一の核酸塩基もしくはアミノ酸残基が発生する位置の数を決定し、マッチした位置の数を比較ウィンドウ内の位置の総数で割り、配列同一性のパーセンテージを得るためにその結果に１００を掛けることによって計算される。ＤＮＡ配列とＲＮＡ配列との間の配列同一性を計算する場合に、ＤＮＡ配列のＴ残基がＲＮＡ配列のＵ残基と整列すると「同一」であると見なせると理解されるであろう。第１および第２ポリヌクレオチドの相補率を決定するためには、例えば、（ｉ）第１ポリヌクレオチドと第２ポリヌクレオチドの相補配列（またはその逆）との同一性率、および／または（ｉｉ）正準ワトソン＆クリック塩基対を作り出すであろう第１および第２ポリヌクレオチド間の塩基のパーセンテージを決定することによってこれを得ることができる。
【００５０】
例えば、本明細書に開示したポリヌクレオチド配列（ＢＬＡＳＴＮアルゴリズム）またはポリペプチド配列（ＢＬＡＳＴＰアルゴリズム）の２つ以上の間の同一性率を測定するためには、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）ウェブサイトでオンラインで利用できるＢａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ（ＢＬＡＳＴ）アルゴリズムを使用することができる。または、配列間の同一性率は、Ｃｌｕｓｔａｌアルゴリズム（例えば、ＣｌｕｓｔａｌＷ、ＣｌｕｓｔａｌＶもしくはＣｌｕｓｔａｌ−Ｏｍｅｇａ）を使用して実施することができる。Ｃｌｕｓｔａｌアラインメント法を使用する複数のアラインメントのためには、デフォルト値はＧＡＰ  ＰＥＮＡＬＴＹ＝１０およびＧＡＰ  ＬＥＮＧＴＨ  ＰＥＮＡＬＴＹ＝１０に対応する可能性がある。Ｃｌｕｓｔａｌ法を使用したタンパク質配列のペアワイズアラインメントおよび同一性率の計算のためのデフォルトパラメーターは、ＫＴＵＰＬＥ＝１、ＧＡＰ  ＰＥＮＡＬＴＹ＝３、ＷＩＮＤＯＷ＝５およびＤＩＡＧＯＮＡＬＳ  ＳＡＶＥＤ＝５であってよい。核酸については、これらのパラメーターは、ＫＴＵＰＬＥ＝２、ＧＡＰ  ＰＥＮＡＬＴＹ＝５、ＷＩＮＤＯＷ＝４およびＤＩＡＧＯＮＡＬＳ  ＳＡＶＥＤ＝４であってよい。または依然として、配列間の同一性率は、ＢＬＯＳＵＭマトリックス（例えば、ＢＬＯＳＵＭ６２）を使用して例えばＧＡＰ  ＯＰＥＮ＝１０、ＧＡＰ  ＥＸＴＥＮＤ＝０．５、ＥＮＤ  ＧＡＰ  ＰＥＮＡＬＴＹ＝ｆａｌｓｅ、ＥＮＤ  ＧＡＰ  ＯＰＥＮ＝１０、ＥＮＤ  ＧＡＰ  ＥＸＴＥＮＤ＝０．５などのパラメーターを用いるＥＭＢＯＳＳアルゴリズム（例えば、ニードル）を使用して実施することができる。
【００５１】
様々なポリペプチドアミノ酸配列およびポリヌクレオチド配列は、本明細書では所定の実施形態の特徴として開示されている。本明細書に開示した配列と少なくとも約７０〜８５％、８５〜９０％もしくは９０％〜９５％同一であるこれらの配列の変異体を使用できる。または、変異アミノ酸配列もしくはポリヌクレオチド配列は、本明細書に開示した配列と少なくとも７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有することができる。変異アミノ酸配列もしくはポリヌクレオチド配列は、本明細書に開示した配列と同一の機能／活性または本明細書に開示した配列の約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の機能／活性を有することができる。
【００５２】
用語「酸化デキストラン化合物」、「酸化デキストラン誘導体」、「酸化デキストラン」などは、本明細書では互換的に使用される。本明細書の酸化デキストラン化合物は、デキストランのグルコースモノマー単位の１つ以上のヒドロキシル基の酸化の結果として生じる化合物である。この酸化は、これらのヒドロキシル基のそれぞれを独立してアルデヒド、ケトンまたはカルボキシル基に変換させることができる。デキストランは、本明細書では、例えば、水性条件下でそれを１つ以上の酸化剤（ｏｘｉｄｉｚｉｎｇ／ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔｓ）（例えば、Ｎ−オキソアンモニウム塩、過ヨウ素酸化合物および／または過酸化物化合物）と接触させる工程によって酸化させることができる。本明細書に開示した酸化デキストランは、さらに所望であれば、例えば、参照によりそれらの全部が本明細書に組み込まれるカナダ国公開特許公報第２０２８２８４号明細書および同第２０３８６４０号明細書、ならびに米国特許第４９８５５５３号明細書、同第２８９４９４５号明細書、同第５７４７６５８号明細書および同第７５９５３９２号明細書に開示された方法などの他の酸化法の適用によって調製することもできる。
【００５３】
本明細書で使用する用語「酸化（された）」は、それから電子が除去されている化合物、または化合物内の原子を特徴とする。本明細書のデキストラン内のグルコースモノマー単位（６位）内（例えば、その中でグルコースがα−１，２−、α−１，３−またはα−１，４−グルコシド結合によって連結される可能性がある側鎖内）の第１級アルコール基（Ｒ−ＣＨ２−ＯＨ）の炭素は、アルデヒド（Ｒ−ＣＨＯ）またはカルボン酸（Ｒ−ＣＯＯＨ）に酸化させることができる。本明細書のデキストラン内のグルコースモノマー単位内の第２級アルコール基（Ｒ１Ｒ２ＣＨ−ＯＨ）の炭素は、ケトン（Ｒ１Ｒ２ＣＨ＝ＯＨ）に酸化させることができる。または、本明細書のデキストラン内のグルコースモノマー単位内の第２級アルコール基（Ｒ１Ｒ２ＣＨ−ＯＨ）は、アルデヒドもしくはカルボン酸基に酸化させることができ、その場合は、デキストランのグルコースモノマー環基が開環される（すなわち、もはや環状ではない）。
【００５４】
本明細書の「デキストランの酸化剤」（および類似の用語）は、例えば、Ｎ−オキソアンモニウム塩、過ヨウ素酸化合物および／または過酸化物化合物を含むことができる。
【００５５】
用語「Ｎ−オキソアンモニウム塩」および「オキソアンモニウム塩」は、本明細書では互換的に使用される。本明細書のＮ−オキソアンモニウム塩は、下記の構造：
【化２】
2018513249.tif 000006
（式中、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ同一もしくは異なる有機基（例えば、直鎖もしくは分岐状炭素鎖）を表し、Ｘ−は、対イオンである）に関する。または、Ｒ１およびＲ２は、それぞれが、その場合にはＮ＋が環状構造の一部である、Ｎ＋に結合した同一基の一部であってよい。環状構造を有するＮ−オキソアンモニウム塩（すなわち、環状Ｎ−オキソアンモニウム塩）の本明細書での１つの例は、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩である。
【００５６】
本明細書の「ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩」は、下記の構造：
【化３】
2018513249.tif 000007
（式中、各Ｍｅはメチル基を表し、Ｘ−は対イオンである）に関する。
ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含むＮ−オキソアンモニウム塩の１つの例は、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩である。
【００５７】
用語「４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩」、「４−アシミド（ａｃｉｍｉｄｏ）−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩」などは、本明細書では互換的に使用される。本明細書の「４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩」は、下記の構造：
【化４】
2018513249.tif 000008
（式中、各Ｍｅはメチル基を表し、Ｘ−は対イオンである）に関する。
【００５８】
本明細書の「ＴＥＭＰＯを含む作用物質」は、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）を含む作用物質／化合物を意味する。ＴＥＭＰＯは、下記の構造：
【化５】
2018513249.tif 000009
を有する。ＴＥＭＰＯを含む作用物質の例は、ＴＥＭＰＯ自体および４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯである。
「４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ」（または、「４−アシミド−ＴＥＭＰＯ」とも呼ばれる）は、下記の構造：
【化６】
2018513249.tif 000010
を有する。
【００５９】
ＴＥＭＰＯを含む作用物質は、その対応するＮ−オキソアンモニウム塩に酸化させることができる。例えば、ＴＥＭＰＯは、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩に酸化させることができ、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯは、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩に酸化させることができる。したがって、「Ｎ−オキソアンモニウム塩の前駆体」、例えばＴＥＭＰＯもしくは４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯは、本明細書に開示した酸化反応においてＮ−オキソアンモニウム塩を提供するために使用できる。
【００６０】
用語「過ヨウ素酸塩」、「過ヨウ素酸化合物」などは、本明細書では互換的に使用され、一価アニオンＩＯ−を含有する過ヨウ素酸の塩を意味する。本明細書の過ヨウ素酸塩の１つの例は、過ヨウ素酸ナトリウム（例えば、メタ過ヨウ素酸ナトリウム［ＮａＩＯ４］）である。
【００６１】
用語「過酸化物」、「過酸化物化合物」などは、本明細書では互換的に使用され、酸素−酸素（Ｏ−Ｏ）単結合もしくは過酸化物アニオン（Ｏ２−２）を含有する化合物を意味する。Ｏ−Ｏ基は、過酸化物基（ペルオキソ基）と呼ばれる。過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）は、本明細書の過酸化化合物の１つの例である。
【００６２】
用語「酸化反応」、「酸化反応調製物」、「酸化反応組成物」などは、本明細書では互換的に使用され、水性条件下での少なくともデキストランおよびＮ−オキソアンモニウム塩、過ヨウ素酸塩および／または過酸化物を含む反応を意味する。本明細書の反応調製物は、典型的には、本明細書に開示したデキストランおよび酸化デキストラン化合物が水性組成物中で可溶性であることを前提に、溶液として始まって終了する。酸化反応は、デキストランのグルコースモノマー単位の１つ以上のヒドロキシル基を酸化し、それにより酸化デキストラン化合物を産生するためのＮ−オキソアンモニウム塩、過ヨウ素酸塩および／または過酸化物のために好適な条件（例えば、時間、温度、ｐＨ）下で実施される。
【００６３】
用語「水性条件」、「水性反応条件」、「水性状況」、「水性系」などは、本明細書では互換的に使用される。本明細書の水性条件は、例えば、その中では溶媒の少なくとも約６０重量％が水である溶液もしくは混合液を意味する。本明細書の酸化反応は、水性条件下で実施することができる。水性条件は、例えば、酸性または塩基性であってよい。
【００６４】
用語「酸性」、「酸性条件」、「酸性水性条件」などは、本明細書では互換的に使用される。本明細書の酸性条件は、例えば、ｐＨが５．５以下の溶液もしくは混合液を意味することができる。酸性条件は、例えば、溶液もしくは混合液に酢酸および／または酢酸塩を添加することなどによる、当分野において公知の任意の手段によって調製することができる。
【００６５】
用語「塩基性」、「塩基性条件」、「塩基性水性条件」、「アルカリ性」などは、本明細書では互換的に使用される。本明細書の塩基性条件は、例えば、ｐＨが８．５以下の溶液もしくは混合液を意味することができる。塩基性条件は、例えば、溶液もしくは混合液に水酸化ナトリウムを添加することなどによる、当分野において公知の任意の手段によって調製することができる。
【００６６】
本明細書の「水性組成物」は、例えば、少なくとも約１０重量％の水を含む液体成分を有する。水性組成物の例には、例えば、混合液、溶液、分散液（例えば、コロイド状分散液）、懸濁液およびエマルジョンが含まれる。所定の実施形態における水性組成物は、（ｉ）水性組成物中（すなわち、溶液中）に溶解している、または（ｉｉ）水性組成物中に溶解していない（例えば、コロイド状分散液として存在する）酸化デキストランを含む。
【００６７】
本明細書で使用する用語「コロイド状分散液」は、分散相および分散媒を有する異種系に関するが、すなわち、顕微鏡的に分散した不溶性粒子（例えば、本明細書の酸化デキストランの一部の形態）が、別の物質（例えば、水もしくは水溶液などの水性組成物）全体に懸濁させられる。本明細書のコロイド状分散液の例は、親水コロイドである。例えば親水コロイドなどのコロイド状分散液の粒子は、本開示の所定の酸化デキストラン化合物を含むことができる。用語「分散剤（ｄｉｓｐｅｒｓａｎｔ）」および「分散剤（ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ａｇｅｎｔ）」は、分散液の形成および／または安定化を促進する物質を意味するために本明細書では互換的に使用される。
【００６８】
用語「親水コロイド」および「ヒドロゲル」は、本明細書では互換的に使用される。親水コロイドは、水もしくは水溶液が分散媒であるコロイド系を意味する。
【００６９】
本明細書の「水溶液」は、溶媒が水を含む溶液を意味する。水溶液は、本明細書の所定の態様では分散剤として機能できる。所定の実施形態における酸化デキストラン化合物は、水溶液中で溶解、分散または混合することができる。
【００７０】
本明細書で使用する用語「粘度」は、それが流動するのを誘発する傾向を示す力に流体または水性組成物が抵抗する程度の尺度を意味する。本明細書で使用できる粘度の様々な単位には、ｃＰ（センチポアズ）およびＰａ・ｓ（パスカル秒）が含まれる。１ポアズは、０．１００ｋｇ・ｍ−１・ｓ−１もしくは１ｍＰａ・ｓに等しい。したがって、本明細書で使用する用語「粘度改質剤」および「粘度改質剤」などは、流体もしくは水性組成物の粘度を改変／改質できる任意の物質を意味する。
【００７１】
本明細書で使用する用語「剪断減粘性挙動」は、剪断速度の上昇につれた水性組成物の粘度の低下を意味する。本明細書で使用する用語「剪断増粘性挙動」は、剪断速度の上昇につれた水性組成物の粘度の増加を意味する。本明細書の「剪断速度」は、水性組成物に進行性剪断変形が適用される速度を意味する。剪断変形は、例えば、回転方向に適用することができる。
【００７２】
本明細書で使用する水性組成物のビルダー能力および／または再付着防止能力を増加させる方法に関する用語「接触させる工程」は、結果として水性組成物を本明細書に開示した少なくとも１つの酸化デキストラン化合物を一緒にさせる任意の行動を意味する。接触させる工程は、例えば、混合する、振とうする、またはホモジナイゼーションなどの当技術分野において公知の任意の手段によって実施できる。
【００７３】
用語「織物」、「生地」、「布」などは、本明細書では、天然および／または化学繊維の網状組織を有する織布を意味するために互換的に使用される。そのような繊維は、例えば、撚り糸もしくは編み糸の形態にあってよい。
【００７４】
本明細書の「織物ケア組成物」は、任意の方法で織物を処理するために好適な任意の組成物である。そのような組成物の例には、洗濯用洗剤および織物柔軟剤が含まれる。
【００７５】
用語「ヘビーデューティ洗剤」、「万能洗剤」などは、任意の温度で白色および着色繊維製品の標準的洗濯のために有用な洗剤を意味するために互換的に使用される。用語「ローデューティ洗剤」、「細繊維洗剤」などは、例えばビスコース、ウール、シルク、マイクロファイバーまたは特別なケアを必要とする他の繊維などのデリケートな織物のケアのために有用な洗剤を意味するために本明細書では互換的に使用される。「特別なケア」は、例えば、過剰の水、低撹拌および／または漂白なしを使用する条件を含むことができる。
【００７６】
本明細書の「洗剤組成物」は、典型的には少なくとも１つの界面活性剤（洗剤化合物）および／または少なくとも１つのビルダーを含んでいる。本明細書の「界面活性剤」は、その中に物質が溶解させられた液体の表面張力を低下させる傾向を示す物質を意味する。界面活性剤は、例えば、洗剤、湿潤剤、乳化剤、発泡剤および／または分散剤として作用することができる。
【００７７】
本明細書の用語「ビルダー」、「ビルダー剤」などは、例えば、カルシウムカチオンおよびマグネシウムカチオンなどの硬水カチオンと錯体形成できる例えば酸化デキストランなどの組成物を意味する。そのような錯体形成は、カチオンによる水不溶性塩の形成を防止すると考えられる。任意の特定の理論によって拘束することを意図するものではないが、本明細書の酸化デキストランは、カチオン封鎖（キレート化）またはカチオン交換を通してビルダー活性を組織化すると考えられる。クリーニング用途の洗剤組成物の状況では、それに添加されるビルダーは、典型的には、洗剤組成物中に存在する界面活性剤の洗浄効率を増強または維持することができる。用語「ビルダー能力」、「ビルダー活性」などは、本明細書では互換的に使用され、水性組成物が水性組成物中に存在する１つ以上のビルダー（例えば、酸化デキストラン）によって付与される特徴を示す能力を意味する。
【００７８】
本明細書の用語「再付着防止剤」、「汚れ再付着防止剤」、「灰色化防止剤」などは、汚れが取り除かれた後にこれらの汚れが洗濯用洗浄水中の布地に再付着しないようにすることに役立ち、このため洗濯物の灰色化／脱色を防止する物質を意味する。再付着防止剤は、洗浄水中に分散した汚れをそのまま維持するのを助けることによって、および／または織物表面上への汚れの付着を遮断することによって機能できる。
【００７９】
本明細書の「口腔ケア組成物」は、歯（複数の歯）の表面および／または歯肉表面などの口腔内の軟質もしくは硬質表面を処理するために好適な任意の組成物である。
【００８０】
本明細書の用語「吸着」は、物質の表面への化合物（例えば、本明細書では酸化デキストラン）の接着を意味する。
【００８１】
用語「セルラーゼ」、「セルラーゼ酵素」などは、セルロース内のβ−１，４−Ｄ−グルコシド結合を加水分解し、それによりセルロースを部分的もしくは完全に分解させる酵素を意味するために互換的に使用される。または、セルロースは、例えば「β−１，４−グルカナーゼ」と呼ぶことができ、エンドセルラーゼ活性（ＥＣ３．２．１．４）、エキソセルラーゼ活性（ＥＣ３．２．１．９１）またはセロビアーゼ活性（ＥＣ３．２．１．２１）を有する可能性がある。「セルロース」は、β−１，４−結合Ｄ−グルコースモノマー単位の直鎖を有する不溶性多糖を意味する。
【００８２】
用語「体積によるパーセント」、「体積パーセント」、「体積％」、「ｖ／ｖ％」などは、本明細書では互換的に使用される。溶液中の溶質の体積によるパーセントは、式：［（溶質の体積）／（溶液の体積）］×１００％を使用して決定できる。
【００８３】
用語「重量によるパーセント」、「重量パーセンテージ（ｗｔ％）」、「重量−重量パーセンテージ（％ｗ／ｗ）」などは、本明細書では互換的に使用される。重量パーセントは、物質が組成物中、混合物中、溶液中に含まれる際の質量を基準とする物質の百分率を示す。
【００８４】
本明細書で使用する用語「増加した」は、それに対して増加した量もしくは活性が比較されている量もしくは活性より少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１
８％、１９％、２０％、５０％、１００％もしくは２００％以上である量もしくは活性に関する可能性がある。用語「増加した」、「上昇した」、「増強された」、「より多い」、「改良された」などは、本明細書では互換的に使用される。
【００８５】
本明細書で使用する用語「単離（された）」は、完全もしくは部分的に精製されている材料（例えば、酸化デキストラン）を意味する。本開示の酸化デキストラン化合物は、合成の人工化合物である。そのような化合物は、（ｉ）自然には発生しない、および／または（ｉｉ）自然には発生しない特性を有すると考えられる。
【００８６】
新規なデキストランポリマーおよびそれらの酸化誘導体を開発することには関心が高い。例えば本明細書に現在開示した化合物などのこれらのタイプの化合物は、様々な用途において潜在的な有用性を有する。
【００８７】
本開示の実施形態は、水性条件下でデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程によって生成された酸化デキストラン化合物を含む組成物であって、デキストランは、
（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；
（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコース；および
（ｖｉ）約０．００２５〜約３．０の少なくとも１つの有機基との置換度（ＤｏＳ）を含み、
デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は約５０，０００，０００〜２００，０００，０００Ｄａであり、デキストランのｚ平均旋回半径は約２００〜２８０ｎｍである組成物に関する。
【００８８】
したがって、酸化デキストランが開示される。有意には、そのような化合物は、典型的には水性組成物中に可溶性であり、例えば、洗剤組成物にビルダー活性および／または再付着防止活性を提供するために使用できる。
【００８９】
本明細書の酸化デキストラン化合物は、デキストランのグルコースモノマー単位の１つ以上のヒドロキシル基の酸化の結果として生じる化合物である。そのような酸化は、例えば、デキストランの構成グルコースモノマー単位の全部、または少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％（もしくは６０％〜１００％の間の任意の整数）において発生する可能性がある。
【００９０】
本明細書のデキストランのグルコースモノマー単位の第１級アルコール基で発生する酸化は、ヒドロキシル基をアルデヒドもしくはカルボキシル基へ変換させると考えられる。典型的には、強化された酸化状態（例えば、増加した酸化反応時間および／またはＮ−オキソアンモニウム塩の量）は、第１級アルコール基からカルボキシル基への変換をもたらす可能性があるが、他方より弱い酸化条件は第１級アルコール基からアルデヒド基への変換をもたらす可能性がある。本明細書に開示したデキストランの構造を前提にして、第１級アルコール基での酸化事象はその大部分がα−１，２−、α−１，３−および／またはα−１，４−グリコシド結合を含む可能性がある側鎖内で発生すると企図されている（そのような連結したグルコース単位は、第１級アルコール基を表す第６位のヒドロキシル基を有するであろう。本明細書のデキストランの主鎖のグルコース単位は、大部分がα−１，６−結合であり、このため第６位では少数のヒドロキシル基（すなわち、数個もしくは０個の第１級アルコール基）を有する、または有していない。
【００９１】
本明細書のデキストランのグルコースモノマー単位の第２級アルコール基で発生する酸化は、ヒドロキシル基をケトン、アルデヒドもしくはカルボキシル基へ変換させると考えられる。典型的には、強化された酸化状態（例えば、増加した酸化反応時間および／またはＮ−オキソアンモニウム塩の量）は、第２級アルコール基からカルボキシル基への変換をもたらす可能性がある。より弱い酸化条件は、第２級アルコール基から、どちらもカルボキシル基ほどは酸化されないアルデヒド基もしくはケトン基への変換を生じさせる可能性がある。
【００９２】
デキストランのグルコースモノマー単位の第２級アルコール基からアルデヒド基もしくはカルボン酸基への酸化は、グルコースモノマー環を開環するであろう（すなわち、グルコース単位はもはや環状ではないであろう）。そのような開環は、炭素−炭素結合の切断に起因するであろう。デキストランの第２級アルコール基からアルデヒド基および／またはカルボキシル基への酸化は、例えば、その中でデキストランの構成グルコースモノマー環単位の全部もしくは少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％もしくは９０％（または５０％〜１００％の間の任意の整数）が開環されている酸化デキストラン生成物を生成する可能性がある。一般に、酸化によってより多くのグルコースモノマー環単位が開環されるにつれて、酸化生成物の分子量は、開環事象によるポリマー分裂（切断）の機会が増加するので減少する。
【００９３】
本明細書では、酸化デキストラン化合物は、例えば、本明細書に開示したデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩と接触させる工程によって生成される。所定の実施形態では、Ｎ−オキソアンモニウム塩は、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含む。そのようなＮ−オキソアンモニウム塩の例には、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩自体（構造ＩＩ）および４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩（構造ＩＩＩ）が含まれる。構造ＩＩは、構造ＩＩＩ内に含まれる。
【００９４】
構造ＩＩおよびＩＩＩが環状であることに注目すると、本明細書のＮ−オキソアンモニウム塩は、「環状Ｎ−オキソアンモニウム塩」（または「環状オキソアンモニウム塩」）であってよい。本明細書の環状Ｎ−オキソアンモニウム塩は、下記の構造：
【化７】
2018513249.tif 000011
（式中、Ｍｅはメチル基を表し、Ｘ−は対イオンであり、Ｒは、水素（Ｈ）、アセトアミド基（−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ３）、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、メトキシ（−ＯＣＨ３）、シアノ（−ＣＮ）、オキソ（＝Ｏ）、ホスホノオキシ［−Ｏ−ＰＯ（ＯＨ）２］、アセトキシ（−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ３）、ベンゾイルオキシ、アセトアミド、マレイミドまたはイソチオシアナト基である）によって表すことができる。構造ＶＩ内のＲがＨである場合は、環状Ｎ−オキソアンモニウム塩がＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩であることは理解されるであろう。ＲがＨ以外の成分である構造ＶＩの例は、炭素４位で置換されている（構造ＶＩ内のＮ＋は、環内で１位である）ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を表す。例えば、Ｒがアセトアミド基である場合は、構造ＶＩの環状Ｎ−オキソアンモニウム塩は、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩である。したがって、例えば、本明細書のＮ−オキソアンモニウム塩は、炭素４位で置換を有するＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩（このとき、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩の環内のＮ＋は、１位である）であってよい。
【００９５】
ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩は、所定の実施形態では、ＴＥＭＰＯを含む作用物質をその中でＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩がデキストランと接触させられる水性条件下で酸化させる工程によって提供することができる。ＴＥＭＰＯを含む作用物質は、構造ＩＶを含む作用物質／化合物である。ＴＥＭＰＯを含む作用物質の例は、ＴＥＭＰＯ自体（構造ＩＶ）および４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ（構造Ｖ）である。ＴＥＭＰＯを含む作用物質の他の例は、下記の構造：
【化８】
2018513249.tif 000012
（式中、Ｍｅはメチル基を表し、Ｒは、水素（Ｈ）、アセトアミド基（−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ３）、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アミノ（−ＮＨ２）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、メトキシ（−ＯＣＨ３）、シアノ（−ＣＮ）、オキソ（＝Ｏ）、ホスホノオキシ［−Ｏ−ＰＯ（ＯＨ）２］、アセトキシ（−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ３）、ベンゾイルオキシ、アセトアミド、マレイミドまたはイソチオシアナト基である）によって表すことができる。これらの作用物質のそれぞれは、構造ＶＩによって表されるように、水性条件下でそれを１つ以上の酸化剤と接触させる工程によって、その対応するオキソアンモニウム塩に変換させることができる。したがって、構造ＶＩは、さらにＮ−オキソアンモニウム塩の前駆体であると見なすことができる。ＴＥＭＰＯおよび例えば上記（例えば、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ）などのその誘導体は、環状ニトロキシル化合物の例である。したがって、環状ニトロキシル化合物は、本明細書のＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を提供するために使用できる。
【００９６】
ＴＥＭＰＯを含む作用物質は、本明細書の水性条件下で、その作用物質を１つ以上の「酸化剤（ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔｓ）」（または「酸化剤（ｏｘｉｄａｎｔ）」）と接触させる工程によって、その対応するオキソアンモニウム塩に酸化させることができる。この接触させる工程は、デキストランがＮ−オキソアンモニウム塩と接触させられる同一水性条件下で実施することができる。一部の実施形態では、デキストランを酸化させるための本明細書の反応は、最初に、水性条件下で、少なくともデキストラン、ＴＥＭＰＯを含む作用物質（例えば、構造ＶＩＩ）および１つ以上の酸化剤を含むように調製できる。酸化剤は、ＴＥＭＰＯを含む作用物質をその対応するオキソアンモニウム塩（例えば、構造ＶＩ）に変換させることができ、これは順にデキストランを酸化させることができる。
【００９７】
酸化剤の非限定的例には、１つ以上の「無機酸化剤（ｉｎｏｒｇａｎｉｃ  ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔｓ）」（または「無機酸化剤（ｉｎｏｒｇａｎｉｃ  ｏｘｉｄａｎｔ）」）が含まれる。本明細書の無機酸化剤は、例えばＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩などのオキソアンモニウム塩ではないが、それはそのような化合物が有機成分（例えば、構造Ｉ〜ＩＩＩを意味する）を含有するからである。ＴＥＭＰＯを含む作用物質をその対応するオキソアンモニウム塩に変換させるために使用できる酸化剤の例には、１つ以上のハライト（例えば、亜塩素酸塩、例えば亜塩素酸ナトリウム［ＮａＣｌＯ２］）もしくはハイポハライト（例えば、次亜塩素酸塩、例えば次亜塩素酸ナトリウム［ＮａＣｌＯ］）が含まれる。ＴＥＭＰＯを含む作用物質をその対応するオキソアンモニウム塩に変換させるために使用できる（無機または有機）酸化剤の他の例には、１つ以上のハロゲン化物塩、例えば、ＫＣｌ、ＫＢｒ、ＮａＣｌ、ＮａＢｒもしくはＮａＩ；ハイポハライト、例えば、ＮａＯＢｒ；金属、例えば、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩＩ）もしくはＣｕ（ＩＩ）；ＫＭｎＯ４；Ｍｎ（ＯＡｃ）３；Ｍｎ２Ｏ３；ＭｎＯ２；Ｍｎ（ＮＯ３）２；ＭｇＣｌ２；Ｍｇ（ＯＡｃ）２；またはＣｕ（ＮＯ３）２；二酢酸ヨードベンゼン［ＰｈＩ（ＯＡｃ）２］；Ｃａ（ＣｌＯ）２；ｔ−ＢｕＯＣｌ；ＣｕＣｌ−Ｏ２；ＮａＢｒＯ２；Ｃｌ２；Ｂｒ２；およびトリクロロイソシアヌル酸が含まれる。
【００９８】
酸化デキストラン化合物は、本明細書では、例えば、本明細書に開示したデキストランを少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物と接触させる工程によって生成することができる。過ヨウ素酸化合物は、例えば、金属過ヨウ素酸塩（例えば、過ヨウ素酸ナトリウムもしくは過ヨウ素酸カリウム）であってよい。過ヨウ素酸化合物は、一部の態様では、メタ過ヨウ素酸塩（例えば、ＮａＩＯ４）もしくはオルト過ヨウ素酸塩であってよい。過ヨウ素酸化合物を用いてデキストランを酸化させるための条件は、参照により全体が本明細書に開示される米国特許第３０８６９６９号明細書、同第６８００７５３号明細書、同第５７４７６５８号明細書および／または同第６６３５７５５明細書、および／または例えば、下記の実施例１０および１１に開示した条件にしたがうことができる。
【００９９】
本明細書の一部の態様では、酸化デキストラン化合物は、最初にデキストランを過ヨウ素酸化合物と接触させる工程、その後に過ヨウ素酸塩酸化デキストランをＮ−オキソアンモニウム塩と接触させる工程によって生成される。そのような連続的酸化処理は、本明細書に開示したいずれか、例えば下記の実施例１１の方法にしたがうことができる。
【０１００】
本明細書では、デキストラン化合物は、例えば、デキストランを少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程によって生成することができる。過酸化物化合物は、例えば、過酸化水素であってよい。一部の態様では、過酸化物化合物は、無機過酸化物化合物または有機過酸化物化合物であってよい。本明細書の好適な過酸化物化合物には、さらに、例えば、ナトリウムもしくはカルシウムが好ましいカチオンである過ホウ酸塩一水和物、過ホウ酸塩四水和物、過炭酸塩、アルカリ過硫酸塩、過ケイ酸塩および過クエン酸塩ならびにウレアもしくはアミン酸化物の過酸化水素付加化合物が含まれる。
【０１０１】
本明細書の一部の態様では、酸化デキストラン化合物は、最初にデキストランを過酸化物化合物と接触させる工程、その後に過酸化物酸化デキストランをＮ−オキソアンモニウム塩と接触させる工程によって生成される。
【０１０２】
所定の実施形態におけるデキストランは、キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）の非存在下で過酸化物化合物と接触させることができるが、他の実施形態では任意選択的にキレート剤が存在してよい。
【０１０３】
水性条件は、デキストランを酸化させるための本明細書に開示した反応において使用される。本明細書の水性条件は、その中では溶媒の少なくとも約６０重量％が水である溶液もしくは混合液を意味する。または、本明細書の水性条件は、例えば、少なくとも約６５、７０、７５、８０、８５、９０もしくは９５重量％（または６０〜９５重量％の間のいずれかの整数値）の水である。本明細書の水性条件は、バッファー、例えば好適な濃度およびそのバッファーによって提供されるｐＨ範囲に基づいて選択される酸性、中性もしくはアルカリ性バッファーを含むことができる。バッファーの例には、クエン酸、酢酸、ＫＨ２ＰＯ４、ＣＨＥＳおよびホウ酸塩が含まれる。
【０１０４】
本明細書の酸性条件は、例えば、５．５以下のｐＨを有する酸性であってよい。または、ｐＨは、例えば、約２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０もしくは５．５であってよい。酸性条件は、例えば、溶液もしくは混合液に酢酸および／または酢酸塩を添加することなどによる、当分野において公知の任意の手段によって調製することができる。例えば、酢酸ナトリウムバッファー（酢酸バッファー）（ｐＨ４〜５）（例えば、０．２〜０．３Ｍ溶液）は、酸性条件を提供することができる。
【０１０５】
本明細書の酸性条件は、例えば、８．５以上のｐＨを有する塩基性であってよい。または、ｐＨは、例えば、約８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５もしくは１２であってよい。塩基性条件は、例えば、溶液もしくは混合液にアルカリ性水酸化物（例えば、水酸化ナトリウム）を添加することなどによる、当分野において公知の任意の手段によって調製することができる。
【０１０６】
本明細書のデキストランは、酸化反応において、例えば、反応の約または少なくとも約０．１、０．２５、０．５、０．７５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１もしくは１２重量％で含めることができる。デキストランは、過ヨウ素酸化合物、過酸化物化合物、ＴＥＭＰＯおよび／または酸化剤（ＴＥＭＰＯを含む作用物質をその対応するオキソアンモニウム塩に変換させる）を含む作用物質が水性条件に加えられる前または後に水性条件に混合または溶解させることができる。これらの特定実施形態における酸化剤は、例えば、亜塩素酸ナトリウムおよび／または次亜塩素酸ナトリウムであってよい。
【０１０７】
ＴＥＭＰＯを含む作用物質、例えばＴＥＭＰＯおよび／または４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯは、本明細書の酸化反応中に、例えば、反応の約または少なくとも約０．０５、０．０７５、０．１、０．２５、０．５、０．７５、１もしくは２重量％で含めることができる。所定の実施形態では、ＴＥＭＰＯを含む作用物質は、その中でデキストランが既に混合もしくは溶解されている反応に加えることができる。そのような添加は、酸化剤が反応に加えられる前、後、加えられる時点に行われてよい。
【０１０８】
酸化剤、例えば亜塩素酸ナトリウム、臭化ナトリウムおよび／または次亜塩素酸ナトリウムは、本明細書の反応において、例えば、反応の約または少なくとも約０．１、０．２５、０．５、０．７５、１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５もしくは５０重量％で含めることができる。所定の実施形態では、酸化剤は、その中でデキストランが既に混合もしくは溶解されている反応に加えることができる。
【０１０９】
所定の実施形態における酸化反応は、最初に、バッファー溶液（例えば、ｐＨが約４〜５である酢酸ナトリウムバッファー）または他の溶液（ｐＨが約１０．５〜１１．５である水酸化ナトリウム溶液）中に溶解させたデキストラン、ＴＥＭＰＯを含む作用物質（例えば、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ）および１つ以上の酸化剤（例えば、亜塩素酸ナトリウム、臭化ナトリウムおよび／または次亜塩素酸ナトリウム）を含有していてよい。任意選択的に、この特定の反応を調製する際には追加の成分が全く含まれない。
【０１１０】
酸化デキストラン化合物を生成するために酸化させることのできる本明細書のデキストランは、（ｉ）１位および６位でのみ連結した約８７〜９３重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位でのみ連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位でのみ連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位でのみ連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含んでいてよい。所定の実施形態では、デキストランは、（ｉ）１位および６位でのみ連結した約８９．５〜９０．５重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位でのみ連結した約０．４〜０．９重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位でのみ連結した約０．３〜０．５重量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位でのみ連結した約８．０〜８．３重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．７〜１．４重量％のグルコースを含むことができる。
【０１１１】
一部の態様におけるデキストランは、１位および６位でのみ連結した約８７、８７．５、８８、８８．５、８９、８９．５、９０、９０，５、９１、９１．５、９２もしくは９３重量％のグルコースを含むことができる。一部の例では、１位および６位でのみ連結した約８７〜９２．５、８７〜９２、８７〜９１．５、８７〜９１、８７〜９０．５、８７〜９０、８７．５〜９２．５、８７．５〜９２、８７．５〜９１．５、８７．５〜９１、８７．５〜９０．５、８７．５〜９０、８８〜９２．５、８８〜９２、８８〜９１．５、８８〜９１、８８〜９０．５、８８〜９０、８８．５〜９２．５、８８．５〜９２、８８．５〜９１．５、８８．５〜９１、８８．５〜９０．５、８８．５〜９０、８９〜９２．５、８９〜９２、８９〜９１．５、８９〜９１、８９〜９０．５、８９〜９０、８９．５〜９２．５、８９．５〜９２、８９．５〜９１．５、８９．５〜９１もしくは８９．５〜９０．５重量％のグルコースが存在してよい。
【０１１２】
一部の態様におけるデキストランは、１位および３位でのみ連結した約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１もしくは１．２重量％のグルコースを含むことができる。一部の例では、１位および３位でのみ連結した約０．１〜１．２、０．１〜１．０、０．１〜０．８、０．３〜１．２、０．３〜１．０、０．３〜０．８、０．４〜１．２、０．４〜１．０、０．４〜０．８、０．５〜１．２、０．５〜１．０、０．５〜０．８、０．６〜１．２、０．６〜１．０もしくは０．６〜０．８重量％のグルコースが存在してよい。
【０１１３】
一部の態様におけるデキストランは、１位および４位でのみ連結した約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６もしくは０．７重量％のグルコースを含むことができる。一部の例では、１位および４位でのみ連結した約０．１〜０．７、０．１〜０．６、０．１〜０．５、０．１〜０．４、０．２〜０．７、０．２〜０．６、０．２〜０．５、０．２〜０．４、０．３〜０．７、０．３〜０．６、０．３〜０．５もしくは約０．３〜０．４重量％のグルコースが存在してよい。
【０１１４】
一部の態様におけるデキストランは、１位、３位および６位でのみ連結した約７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５もしくは８．６重量％のグルコースが存在してよい。一部の例では、１位、３位および６位でのみ連結した約７．７〜８．６、７．７〜８．５、７．７〜８．４、７．７〜８．３、７．７〜８．２、７．８〜８．６、７．８〜８．５、７．８〜８．４、７．８〜８．３、７．８〜８．２、７．９〜８．６、７．９〜８．５、７．９〜８．４、７．９〜８．３、７．９〜８．２、８．０〜８．６、８．０〜８．５、８．０〜８．４、８．０〜８．３、８．０〜８．２、８．１〜８．６、８．１〜８．５、８．１〜８．１、８．１〜８．３もしくは８．１〜８．２重量％のグルコースが存在してよい。
【０１１５】
一部の態様におけるデキストランは、（ａ）１位、２位および６位または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６もしくは１．７重量％のグルコースを含むことができる。一部の例では、（ａ）１位、２位および６位または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．４〜１．７、０．４〜１．６、０．４〜１．５、０．４〜１．４、０．４〜１．３、０．５〜１．７、０．５〜１．６、０．５〜１．５、０．５〜１．４、０．５〜１．３、０．６〜１．７、０．６〜１．６、０．６〜１．５、０．６〜１．４、０．６〜１．３、０．７〜１．７、０．７〜１．６、０．７〜１．５、０．７〜１．４、０．７〜１．３、０．８〜１．７、０．８〜１．６、０．８〜１．５、０．８〜１．４、０．８〜１．３重量％のグルコースが存在してよい。
【０１１６】
一部の態様におけるデキストランの結合プロファイルは、本明細書に開示した任意のプロトコルにしたがって決定することができる。好適な結合決定プロトコルの例は、実施例９に開示したプロトコルに類似または同一であってよい。例えば、約５〜３０分間（例えば、１０分間）にわたり約７０〜９０℃（例えば、８０℃）で反応を加熱することによって非活性化されている０７６８ｇｔｆ酵素反応は、１２〜１４ｋＤａ（キロダルトン）のＭＷＣＯを備える透析チュービング（例えば、再生セルロース製）（例えば、Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ（登録商標）４透析チュービング、製品番号１３２７０６、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）内に配置される。非活性化反応は、次に約４〜１０日間（例えば、７日間）にわたり約２０〜２５℃（室温）で大量の水（例えば、３〜５Ｌ）に対して透析される；この水は、透析中は毎日交換することができる。デキストラン生成物は、次に（ｉ）透析非活性化反応を反応体積の約１〜２倍（１．５倍）量の１００％メタノールと混合することにより沈降させ、（ｉｉ）同一体積の１００％メタノールを用いて少なくとも２回洗浄し、（ｉｉｉ）（任意選択的に真空下の）約４０〜５０℃（例えば、４５℃）で乾燥させる。無水デキストランの溶解可能量は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ）もしくはＤＭＳＯ／５％のＬｉＣｌ中に溶解させ、その後に全ての遊離ヒドロキシル基を（例えば、ＮａＯＨ／ＤＭＳＯスラリー、その後にヨードメタンの連続的添加によって）メチル化する。メチル化デキストランは次に（例えば、塩化メチレン中で）抽出し、約１１０〜１２５℃（例えば、１２０℃）でトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液を使用してモノマー単位に加水分解する。ＴＦＡはその後蒸発させ、重水素化ホウ素ナトリウムを使用して還元的開環を実施する。グリコシド結合を加水分解することにより作成されたヒドロキシル基は、次に約４０〜６０℃（例えば、５０℃）の温度で塩化アセチルおよびＴＦＡを用いて処理することによってアセチル化する。次に、誘導体化試薬を蒸発させ、生じたメチル化／アセチル化モノマーをアセトニトリル中で復元させる；この調製物を適切なカラム（例えば、ビスシアノプロピルシアノプロピルフェニルポリシロキサン）を使用するＧＣ／ＭＳによって分析する。メチルおよびアセチル官能基の相対ポジショニングは、公表データベースと比較できる特有の保持時間指数および質量スペクトルを種に提供する。この方法で、モノマー単位の誘導体は、各モノマーがデキストランポリマー内で最初にどのように連結されたのかを示す。
【０１１７】
本明細書の酸化デキストラン化合物を生成するために使用されるデキストランは、相互から反復して分岐する長鎖（大多数または全部がα−１，６−結合を含有する）が存在する分枝状構造（例えば、長鎖は、順にそれ自体が他の長鎖から分岐することができ、さらにそれ自体が他の長鎖から分離できるなどの、他の長鎖からの分岐鎖であってよい）を有することは企図されている。分岐鎖構造は、さらに長鎖からの短枝を含んでいてよい；これらの短鎖は、大部分が例えばα−１，３および−１，４結合を含むと考えられる。デキストラン中の分岐点は、他の長鎖から分岐している長鎖からであろうと、または長鎖から分岐している短鎖からであろうと、α−１，６結合内に含まれるグルコースからのα−１，３、−１，４または−１，２結合を含むと思われる。平均すると、一部の態様ではデキストラン分岐鎖の全分岐点の約２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、１５〜３５％、１５〜３０％、１５〜２５％、１５〜２０％、２０〜３５％、２０〜３０％、２０〜２５％、２５〜３５％もしくは２５〜３０％が長鎖に分岐する。大多数（＞９８％もしくは９９％）または全部の他の分岐点が短鎖に分岐する。
【０１１８】
デキストラン分岐鎖構造の長鎖は、一部の態様では長さが類似の場合がある。長さが類似であるとは、分岐鎖構造内の全長鎖の少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％もしくは９０％の長さ（ＤＰ）が分岐鎖構造の全長鎖の平均長の±１５％（または１０％、５％）の範囲内にあることを意味する。一部の態様では、長鎖の平均長（ｍｅａｎ  ｌｅｎｇｔｈもしくはａｖｅｒａｇｅ  ｌｅｎｇｔｈ）は、約１０〜５０ＤＰ（すなわち、１０〜５０グルコースモノマー）である。例えば、長鎖の平均個別長は、約１０、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、３０、３５、４０、４５、５０、１０〜５０、１０〜４０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１５〜５０、１５〜４０、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜５０、２０〜４０、２０〜３０もしくは２０〜２５ＤＰの可能性がある。
【０１１９】
所定の実施形態におけるデキストラン長鎖は、実質的にα−１，６−グルコシド結合および少量（２．０％未満）のα−１，３−および／またはα−１，４−グルコシド結合を含むことができる。例えば、デキストラン長鎖は、約または少なくとも約９８％、９８．２５％、９８．５％、９８．７５％、９９％、９９．２５％、９９．５％、９９．７５％もしくは９９．９％のα−１，６−グルコシド結合を含むことができる。所定の実施形態におけるデキストラン長鎖は、α−１，４−グルコシド結合を含んでいない（すなわち、そのような長鎖は、大部分がα−１，６結合および少量のα−１，３結合を有する）。これとは逆に、一部の実施形態におけるデキストラン長鎖は、α−１，３−グルコシド結合を含んでいない（すなわち、そのような長鎖は、大部分がα−１，６結合および少量のα−１，４結合を有する）。上記の実施形態の任意のデキストラン長鎖は、例えば、さらにα−１，２−グルコシド結合を含まない場合がある。さらに一部の態様では、デキストラン長鎖は、１００％のα−１，６−グルコシド結合を含むことができる（他の鎖から分岐するためにそのような長鎖によって使用される結合を除く）。
【０１２０】
一部の態様におけるデキストランの短鎖は、長さが１〜３グルコースモノマーであり、デキストランポリマーの全グルコースモノマーの約５〜１０％未満を含んでいる。本明細書の短鎖の少なくとも約９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは全部は、長さが１〜３グルコースモノマーである。デキストランの短鎖は、例えば、デキストランの全グルコースモノマーの約１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％もしくは１％未満を含む可能性がある。
【０１２１】
一部の態様におけるデキストランの短鎖は、α−１，２−、α−１，３−および／またはα−１，４−グルコシド結合を含むことができる。短鎖は、全部を（個別的にではなく）一緒に検討した場合、（ｉ）これらの結合の全３つ、または（ｉｉ）例えば、α−１，３−およびα−１，４−グルコシド結合を含んでいてよい。本明細書のデキストランの短鎖は、デキストランの他の短鎖に関して異種（すなわち、結合プロファイルにおける一部の変動を示す）または同種（すなわち、類似もしくは同一結合プロファイルを共有する）であってよい。
【０１２２】
所定の実施形態における酸化デキストラン化合物を生成するために使用されるデキストランは、約または少なくとも約５０，０００，０００、５５，０００，０００、６０，０００，０００、６５，０００，０００、７０，０００，０００、７５，０００，０００、８０，０００，０００、８５，０００，０００、９０，０００，０００、９５，０００，０００、１００，０００，０００、１０５，０００，０００、１１０，０００，０００、１１５，０００，０００、１２０，０００，０００、１２５，０００，０００、１３０，０００，０００、１３５，０００，０００、１４０，０００，０００、１４５，０００，０００、１５０，０００，０００、１５５，０００，０００、１６０，０００，０００、１６５，０００，０００、１７０，０００，０００、１７５，０００，０００、１８０，０００，０００、１８５，０００，０００、１９０，０００，０００、１９５，０００，０００もしくは２００，０００，０００（または５０，０００，０００〜２００，０００，０００の間のいずれかの整数）（またはこれらの数値中の２つの数値間のいずれかの範囲）のＭｗを有することができる。デキストランのＭｗは、例えば、約５０，０００，０００〜２００，０００，０００、６０，０００，０００〜２００，０００，０００、７０，０００，０００〜２００，０００，０００、８０，０００，０００〜２００，０００，０００、９０，０００，０００〜２００，０００，０００、１００，０００，０００〜２００，０００，０００、１１０，０００，０００〜２００，０００，０００、１２０，０００，０００〜２００，０００，０００、５０，０００，０００〜１８０，０００，０００、６０，０００，０００〜１８０，０００，０００、７０，０００，０００〜１８０，０００，０００、８０，０００，０００〜１８０，０００，０００、９０，０００，０００〜１８０，０００，０００、１００，０００，０００〜１８０，０００，０００、１１０，０００，０００〜１８０，０００，０００、１２０，０００，０００〜１８０，０００，０００、５０，０００，０００〜１６０，０００，０００、６０，０００，０００〜１６０，０００，０００、７０，０００，０００〜１６０，０００，０００、８０，０００，０００〜１６０，０００，０００、９０，０００，０００〜１６０，０００，０００、１００，０００，０００〜１６０，０００，０００、１１０，０００，０００〜１６０，０００，０００、１２０，０００，０００〜１６０，０００，０００、５０，０００，０００〜１４０，０００，０００、６０，０００，０００〜１４０，０００，０００、７０，０００，０００〜１４０，０００，０００、８０，０００，０００〜１４０，０００，０００、９０，０００，０００〜１４０，０００，０００、１００，０００，０００〜１４０，０００，０００、１１０，０００，０００〜１４０，０００，０００、１２０，０００，０００〜１４０，０００，０００、５０，０００，０００〜１２０，０００，０００、６０，０００，０００〜１２０，０００，０００、７０，０００，０００〜１２０，０００，０００、８０，０００，０００〜１２０，０００，０００、９０，０００，０００〜１２０，０００，０００、１００，０００，０００〜１２０，０００，０００、１１０，０００，０００〜１２０，０００，０００、５０，０００，０００〜１１０，０００，０００、６０，０００，０００〜１１０，０００，０００、７０，０００，０００〜１１０，０００，０００、８０，０００，０００〜１１０，０００，０００、９０，０００，０００〜１１０，０００，０００、１００，０００，０００〜１１０，０００，０００、５０，０００，０００〜１００，０００，０００、６０，０００，０００〜１００，０００，０００、７０，０００，０００〜１００，０００，０００、８０，０００，０００〜１００，０００，０００、９０，０００，０００〜１００もしくは９５，０００，０００〜１０５，０００，０００であってよい。
【０１２３】
所定の実施形態において酸化デキストラン化合物を生成するために使用されるデキストランは、約２００〜２８０ｎｍのｚ平均旋回半径（Ｒｇ）を有することができる。例えば、ｚ平均Ｒｇは、約２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５もしくは２８０ｎｍ（または２００〜２８０ｎｍの間の任意の整数）であってよい。他の例として、ｚ平均Ｒｇは、約２００〜２８０、２００〜２７０、２００〜２６０、２００〜２５０、２００〜２４０、２００〜２３０、２２０〜２８０、２２０〜２７０、２２０〜２６０、２２０〜２５０、２２０〜２４０、２２０〜２３０、２３０〜２８０、２３０〜２７０、２３０〜２６０、２３０〜２５０、２３０〜２４０、２４０〜２８０、２４０〜２７０、２４０〜２６０、２４０〜２５０、２５０〜２８０、２５０〜２７０もしくは２５０〜２６０ｎｍであってよい。
【０１２４】
一部の態様におけるデキストランのＭｗおよび／またはｚ平均Ｒｇは、実施例９に開示したプロトコルと類似または同一のプロトコルにしたがって測定できる。例えば、本明細書のＭｗおよび／またはｚ平均Ｒｇは、１５０〜２５０ｐｐｍ（例えば、約２００ｐｐｍ）のＮａＮ３を備える０．０５〜１．０Ｍ（例えば、約０．０７５Ｍ）のＴｒｉｓ（ヒドロキシメチル）アミノメタンバッファー中に０．４〜０．６ｍｇ／ｍＬ（例えば、約０．５ｍｇ／ｍＬ）で０７６８ｇｔｆによって生成されたデキストランを最初に溶解させることによって測定できる。無水デキストランの溶媒和は、４５〜５５℃（例えば、約５０℃）で１２〜１８時間振とうすることによって達成できる。生じたデキストラン溶液は、３基のオンライン検出器：示差屈折計（例えば、Ｗａｔｅｒｓ  ２４１４屈折率検出器）、準弾性光散乱（ＱＥＬＳ）検出器（例えば、Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ製のＱＥＬＳ検出器）を装備したマルチアングル光散乱（ＭＡＬＳ）光度計（例えば、Ｈｅｌｅｏｓ（商標）−２  １８−角度  マルチアングルＭＡＬＳ光度計）および示差毛細管粘度計（例えば、Ｗｙａｔｔ製のＶｉｓｃｏＳｔａｒ（商標）示差毛細管粘度計と結合された分離モジュール（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ製のＡｌｌｉａｎｃｅ（商標）２６９５分離モジュール）を含む好適なフローインジェクション・クロマトグラフィー装置内に進入することができた。インジェクションピークからデキストランのポリマーピークを分離するためには、２基の好適なサイズ排除カラム（例えば、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ製のＡＱＵＡＧＥＬ−ＯＨ  ＧＵＡＲＤカラム）を使用できるが、このとき移動相はサンプル溶媒（上記）と同一であってよく、流量は約０．２ｍＬ／分であってよく、インジェクション量は約０．１  ｍＬであってよく、カラム温度は約３０℃であってよい。好適なソフトウェアをデータ収集のため（例えば、Ｗａｔｅｒｓ製のＥｍｐｏｗｅｒ（商標）バージョン３ソフトウェア）およびマルチ検出器データ整理のため（Ｗｙａｔｔ製のＡｓｔｒａ（商標）バージョン６ソフトウェア）に使用できる。例えば、ＭＡＬＳデータはＭｗおよびｚ平均Ｒｇを提供することができ、ＱＥＬＳデータはｚ平均流体力学半径を提供できる。
【０１２５】
それから本明細書の酸化デキストラン化合物を製造できるデキストランは、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３もしくは配列番号１７と１００％同一、または少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一であるアミノ酸配列を含む、またはそのアミノ酸配列からなる（およびｇｔｆ活性を有する）グルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物であってよい。配列番号１（もしくは関連配列）を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素の非限定的例には、配列番号２と１００％同一である、または少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一であるアミノ酸配列を含む、またはそのアミノ酸配列からなる（およびｇｔｆ活性を有する）グルコシルトランスフェラーゼ酵素が含まれる。デキストランの生成は、例えば、本明細書に開示したｇｔｆ反応を用いて遂行できる。本発明の詳細な説明（例えば、分子量、結合および分岐プロファイル）において開示したデキストランは、任意選択的に、配列番号１もしくは２（または少なくとも９０％同一［上記］である関連配列）を含む、またはそれからなるグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物であると特徴付けることができる。一部の他の態様では、グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、配列番号６、１０、１４もしくは１８によってコードされたアミノ酸配列の分泌部分（すなわち、除去されたシグナルペプチド）と１００％同一である、または少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一であるアミノ酸配列を含む、またはそれらからなる。
【０１２６】
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、例えば細菌もしくは真菌などの様々な微生物起源由来であってよい。細菌性グルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種もしくはワイセラ（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）種由来の酵素である。ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種の例には、Ｓ．ソブリナス（ｓｏｂｒｉｎｕｓ）、Ｓ．ダウネイ（Ｓ．ｄｏｗｎｅｉ）、Ｓ．サルバリウス（Ｓ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、Ｓ．デンチロウセッティ（Ｓ．ｄｅｎｔｉｒｏｕｓｅｔｔｉ）、Ｓ．ミュータンス（Ｓ．ｍｕｔａｎｓ）、Ｓ．オラリス（Ｓ．ｏｒａｌｉｓ）、Ｓ．ガロリティクス（Ｓ．ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）およびＳ．サングイニス（Ｓ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）が含まれる。ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種の例には、Ｌ．シュードメゼンテロイデス（Ｌ．ｐｓｅｕｄｏｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、Ｌ．アメリビオスム（Ｌ．ａｍｅｌｉｂｉｏｓｕｍ）、Ｌ．アルゲンチナム（Ｌ．ａｒｇｅｎｔｉｎｕｍ）、Ｌ．カルノスム（Ｌ．ｃａｒｎｏｓｕｍ）、Ｌ．シトレウム（Ｌ．ｃｉｔｒｅｕｍ）、Ｌ．クレモリス（Ｌ．ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、Ｌ．デキストラニカム（Ｌ．ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ）およびＬ．フルクトサム（Ｌ．ｆｒｕｃｔｏｓｕｍ）が含まれる。ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種の例には、Ｌ．フェルメンタム（Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）、Ｌ．アシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｌ．デルブレキィ（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、Ｌ．ヘルベチカス（Ｌ．ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、Ｌ．サリバリウス（Ｌ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、Ｌ．カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、Ｌ．クルバタス（Ｌ．ｃｕｒｖａｔｕｓ）、Ｌ．プランタラム（Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、Ｌ．サケイ（Ｌ．ｓａｋｅｉ）、Ｌ．ブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、Ｌ．ブフネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）およびＬ．ロイテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）が含まれる。ワイセラ（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）種の例には、Ｗ．シバリア（Ｗ．ｃｉｂａｒｉａ）、Ｗ．コンフサ（Ｗ．ｃｏｎｆｕｓａ）、Ｗ．ハロトレランス（Ｗ．ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｗ．ヘレニカ（Ｗ．ｈｅｌｌｅｎｉｃａ）、Ｗ．カンドレリ（Ｗ．ｋａｎｄｌｅｒｉ）、Ｗ．キムチイ（Ｗ．ｋｉｍｃｈｉｉ）、Ｗ．コーリエンシス（Ｗ．ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、Ｗ．マイナー（Ｗ．ｍｉｎｏｒ）、Ｗ．パラメゼンテロイデス（Ｗ．ｐａｒａｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、Ｗ．ソリ（Ｗ．ｓｏｌｉ）およびＷ．サイランデンシス（Ｗ．ｔｈａｉｌａｎｄｅｎｓｉｓ）が含まれる。一部の態様におけるグルコシルトランスフェラーゼは、Ｌ．メゼンテロイデス（Ｌ．ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来ではない；したがって一部の態様では、酸化デキストラン化合物を生成するために使用されるデキストランは、ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）グルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物ではない。
【０１２７】
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、本明細書に開示したアミノ酸配列のいずれか、およびさらにＮ末端および／またはＣ末端上に１〜３００個（または例えば［１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５もしくは５０］の間のいずれかの整数）の残基を含むものであってよい。そのような追加の残基は、それにグルコシルトランスフェラーゼ酵素が由来する対応する野生型配列由来であってよい、または例えば、（Ｎ末端もしくはＣ末端のいずれかでの）エピトープタグもしくは（Ｎ末端での）異種シグナルペプチドなどの異種配列であってよい。
【０１２８】
本明細書のデキストランを生成するために使用されるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、典型的にはＮ末端シグナルペプチドが欠如する成熟形にある。本明細書の成熟グルコシルトランスフェラーゼ酵素を生成するための発現系は、細胞外分泌を指令するようにＮ末端シグナルペプチドをコードする配列をさらに含む酵素をコードするポリヌクレオチドを使用することができる。そのような実施形態におけるシグナルペプチドは、分泌工程中に酵素から切断される。シグナルペプチドは、グルコシルトランスフェラーゼに対して天然または異種のいずれであってもよい。本明細書において有用なシグナルペプチドの例は、細菌（例えば、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）などのバシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種）または真菌種由来のシグナルペプチドである。細菌性シグナルペプチドの例は、例えばバシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種由来のａｐｒＥシグナルペプチドである（例えば、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＶｏｇｔｅｎｔａｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒ．Ｐｕｒｉｆ．５５：４０−５２を参照されたい）。
【０１２９】
配列番号１、配列番号５、配列番号９、配列番号１３および配列番号１７は、Ｎ末端シグナルペプチドが欠如している成熟グルコシルトランスフェラーゼ酵素の例である。これらや関連アミノ酸配列はメチオニン残基からは始まらないので、シグナルペプチドを使用せずに（例えば酵素が細胞内で発現し、細胞溶解物から入手される発現系を用いて）これらの酵素のいずれかを発現する場合は、好ましくはＮ末端開始メチオニンが（直接的または例えばエピトープなどの介在異種アミノ酸配列を介して）付加されることは理解されるであろう。
【０１３０】
所定の実施形態におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、当分野において公知の任意の手段によって生成できる。例えば、グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、例えば微生物異種発現系などの異種発現系内で組換え技術により生成することができる。異種発現系の例には、細菌性（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、例えば、ＴＯＰ１０、ＭＧ１６５５もしくはＢＬ２１  ＤＥ３；バシラス種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）、例えば枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）および真核性（例えば、酵母、例えばピチア種（Ｐｉｃｈｉａ  ｓｐ．）およびサッカロミセス種（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）発現系が含まれる。
【０１３１】
本明細書に開示したグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、任意の精製状態（例えば、純粋もしくは非純粋）で使用することができる。例えば、グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、その使用前に精製および／または単離されてよい。非純粋であるグルコシルトランスフェラーゼ酵素の例には、細胞溶解物の形態にあるものが含まれる。細胞溶解物もしくは抽出物は、その酵素を異種発現させるために使用される細菌（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）から調製することができる。例えば、細菌は、Ｆｒｅｎｃｈプレッシャーセルを使用して崩壊させられてよい。また別の実施形態では、細菌は、ホモジナイザー（例えば、ＡＰＶ、Ｒａｎｎｉｅ、Ｇａｕｌｉｎ）を用いてホモジナイズされてよい。グルコシルトランスフェラーゼ酵素は、典型的にはこれらのタイプの調製物中に可溶性である。本明細書の細菌性細胞溶解物、抽出物もしくはホモジネートは、スクロースからデキストランを生成するための反応中で約０．１５〜０．３（ｖ／ｖ）％で使用することができる。
【０１３２】
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素の活性は、当分野において公知の任意の方法を使用して決定できる。例えば、グルコシルトランスフェラーゼ酵素活性は、スクロース（約５０ｇ／Ｌ）、デキストランＴ１０（約１ｍｇ／ｍＬ）およびリン酸カリウムバッファー（約ｐＨ６．５、５０ｍＭ）を含有する反応中で、還元糖（フルクトースおよびグルコース）の生成を測定することによって決定できるが、このとき溶液は約２２〜２５℃で約２４〜３０時間保持される。還元糖は、約１ＮのＮａＯＨおよび約０．１％の塩化トリフェニルテトラゾリウムを含有する混合物に０．０１ｍＬの反応を加え、次に約５分間にわたりＯＤ４８０ｎｍでの吸光度の増加を監視することによって測定できる。さらに例えば、本明細書のｇｔｆ０７６８（配列番号１を含む）などの１単位の酵素は、１００ｇ／Ｌのスクロースを用いて、２６℃、ｐＨ６．５で１時間にわたり１ｇのスクロースを消費するために必要とされる酵素の量であると定義できる。
【０１３３】
本明細書の酸化デキストラン化合物は、グルコシルトランスフェラーゼ反応に含まれるようなグルコシルトランスフェラーゼの生成物であるデキストランから引き出すことができる。本明細書のｇｔｆ反応の温度は、所望であれば、制御できる。所定の実施形態では、温度は、約５℃〜約５０℃である。所定の他の実施形態における温度は、約２０℃〜約４０℃である。または、温度は、約２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９もしくは４０℃であってよい。本明細書のｇｔｆ反応の温度は、当分野において公知の様々な手段を使用して維持することができる。例えば、温度は、所望の温度に設定した空気浴もしくは水浴インキュベーター内に反応を含有する容器を配置することによって維持することができる。
【０１３４】
本明細書のｇｔｆ反応中のスクロースの初期濃度は、約２０ｇ／Ｌ〜９００ｇ／Ｌ、２０ｇ／Ｌ〜４００ｇ／Ｌ、７５ｇ／Ｌ〜１７５ｇ／Ｌもしくは５０ｇ／Ｌ〜１５０ｇ／Ｌであってよい。スクロースの初期濃度は、例えば、約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、５０〜１５０、７５〜１２５、９０〜１１０、５０〜５００、１００〜５００、２００〜５００、３００〜５００、４００〜５００、５０〜４００、１００〜４００、２００〜４００、３００〜４００、５０〜３００、１００〜３００、２００〜３００、５０〜２００、１００〜２００もしくは５０〜１００ｇ／Ｌ（または２０〜９００ｇ／Ｌの間のいずれかの整数）であってよい。「スクロースの初期濃度」は、全ての反応成分（少なくとも、水、スクロース、ｇｔｆ酵素）が加えられた直後のｇｔｆ反応中のスクロース濃度を意味する。
【０１３５】
所定の実施形態におけるｇｔｆ反応のｐＨは、約４．０〜約８．０の間であってよい。または、ｐＨは、約４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５もしくは８．０であってよい。ｐＨは、リン酸塩、ｔｒｉｓ、クエン酸塩もしくはそれらの組み合わせを含むがそれらに限定されない好適なバッファーの添加もしくは組み込みによって調整または制御することができる。ｇｔｆ反応中のバッファー濃度は、例えば、０ｍＭ〜約１００ｍＭまたは約１０、２０もしくは５０ｍＭであってよい。
【０１３６】
本明細書のｇｔｆ反応は、例えば、任意選択的に撹拌もしくは軌道振とうによってかき混ぜることができる。そのようなかき混ぜは、例えば、約５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、５０〜１５０、６０〜１４０、７０〜１３０、８０〜１２０もしくは９０〜１１０ｒｐｍであってよい。
【０１３７】
反応中のｇｔｆ酵素の濃度は、例えば、少なくとも約１５、２０、２５、３０、３５もしくは４０Ｕ／Ｌであってよい。一部の態様では、１５〜３５、１５〜３０、１５〜２５、２０〜３５、２０〜３０、２０〜２５、２５〜３５、２５〜３０もしくは３０〜３５Ｕ／Ｌのグルコシルトランスフェラーゼを使用することができる。
【０１３８】
本明細書のｇｔｆ反応は、完了するために約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１８、２４、３０、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１８〜３０、２０〜２８もしくは２２〜２６時間を要する可能性がある。反応時間は、例えば、反応において使用されるスクロースおよびｇｔｆ酵素の量などの特定のパラメーターに依存する可能性がある。
【０１３９】
グルコシルトランスフェラーゼ反応を規定する本明細書に記載の特徴の全部は、適宜に結合することができる。単純に１つの例として、０７６８ｇｔｆ（配列番号１もしくはその関連配列を含む）を使用する反応は、最初に９０〜１１０ｇ／Ｌ（例えば、約１００ｇ／Ｌ）のスクロース、ｐＨ６．０〜７．０（例えば、約ｐＨ６．５）で１０〜３０ｍＭ（例えば、約２０ｍＭ）のリン酸カリウムバッファーおよび２０〜３０Ｕ／Ｌ（例えば、約２５Ｕ／Ｌ）の酵素を含有することができる。そのような反応は、２４〜２８℃（例えば、約２６℃）で５０〜１５０ｒｐｍ（例えば、約１００ｒｐｍ）で振とうしながら約２０〜２８時間（例えば、約２４時間）にわたり保持することができる。
【０１４０】
さらに追加の実施形態では、下記の実施例に開示したｇｔｆ反応を実施するための条件は、それから本明細書の酸化デキストラン化合物を引き出すことのできるデキストランを調製するために使用できる。
【０１４１】
本明細書のデキストラン化合物を含む組成物は、非水性（例えば、無水組成物）であってよい。そのような実施形態の例には、粉末、顆粒、マイクロカプセル、フレークまたは粒状物質の任意の他の形態が含まれる。他の例には、例えば、ペレット、バー、カーネル、ビーズ、タブレット、スティックもしくは他の凝集体などのより大きな組成物が含まれる。本明細書の非水性もしくは無水組成物は、典型的にはその中に含まれた３、２、１、０．５もしくは０．１重量％未満の水を有する。非水性もしくは無水組成物中の本明細書のデキストランの量は、例えば、約または少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５もしくは９９．９重量％であってよい。本明細書の非水性組成物は、例えば、家庭用製品、パーソナルケア製品、医薬製品、工業製品もしくは食品の形態にあってよい。
【０１４２】
所定の実施形態では、酸化デキストラン化合物を含む組成物は、検出可能な量の粘度を備える、または備えない水性組成物であってよい。酸化デキストランを含む水性組成物は、一部の態様では、約または少なくとも約３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５もしくは５０ｃＰ（または３〜５０ｃＰの間の任意の整数）の粘度を有する可能性があると考えられる。本明細書の水性組成物の例には、水性混合液、コロイド状分散液（例えば、親水コロイド）および水溶液が含まれる。
【０１４３】
粘度は、約３℃〜約１１０℃（または３〜１１０℃の間のいずれかの整数）のいずれかの温度で本明細書の水性組成物を用いて測定できる。または、粘度は、例えば、約４℃〜３０℃または約２０℃〜２５℃の間の温度で測定できる。粘度は、大気圧（約７６０トル）または任意の他のより高いもしくは低い圧力で測定できる。
【０１４４】
本明細書の水性組成物の粘度は、粘度計もしくは流動計を使用して、または当分野において公知の任意の他の手段を使用して測定できる。そのような実施形態における粘度は、例えば、約０．１〜１，０００ｒｐｍ（毎分回転数）の回転剪断速度で測定できる。他の例では、粘度は、約１０、６０、１５０、２５０もしくは６００ｒｐｍの回転剪断速度で測定できる。
【０１４５】
本明細書に開示した水性組成物のｐＨは、例えば、約２．０〜約１２．０の間であってよい。または、ｐＨは、例えば、約２．０、３．０、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、１０．０、１１．０、１２．０；もしくは５．０〜約１２．０の間；または約４．０〜８．０の間；または約５．０〜８．０の間であってよい。
【０１４６】
本明細書の水性組成物は、少なくとも約１０重量％の水を有する溶媒を含むことができる。他の実施形態では、溶媒は、例えば、約または少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０もしくは１００重量％（または１０〜１００重量％の間のいずれかの整数）の水である。
【０１４７】
本明細書のデキストラン化合物は、例えば、約または少なくとも約０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．２、１．４、１．６、１．８、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９もしくは９０重量％の重量％で水性組成物中に存在することができる。
【０１４８】
本明細書の水性組成物は、酸化デキストラン化合物に加えて他の成分を含むことができる。例えば、水性組成物は、例えばナトリウム塩（例えば、ＮａＣｌ、Ｎａ２ＳＯ４）などの１つ以上の塩を含むことができる。塩の他の非限定的例には、（ｉ）アルミニウム、アンモニウム、バリウム、カルシウム、クロム（ＩＩもしくはＩＩＩ）、銅（ＩもしくはＩＩ）、鉄（ＩＩもしくはＩＩＩ）、水素、鉛（ＩＩ）、リチウム、マグネシウム、マンガン（ＩＩもしくはＩＩＩ）、水銀（ＩもしくはＩＩ）、カリウム、銀、ストロンチウムナトリウム、スズ（ＩＩもしくはＩＶ）または亜鉛カチオン、および（ｉｉ）酢酸、ホウ酸、臭素酸、臭化、炭酸、塩素酸、塩化、亜塩素酸、クロム酸、シアナミド、シアン化、重クロム酸、リン酸二水素、フェリシアン化、フェロシアン化第二鉄、フッ化、炭酸水素、リン酸水素、硫酸水素、硫化水素、亜硫酸水素、水素化、水酸化、次亜塩素酸、ヨウ素酸、ヨウ化、硝酸、窒化、亜硝酸、シュウ酸、酸化、過塩素酸、過マンガン酸、過酸化、リン酸、リン化、亜リン酸、ケイ酸、スズ酸、亜スズ酸、硫酸、硫化、亜硫酸、酒石酸もしくはチオシアン酸塩アニオンが含まれる。したがって、例えば、上記の（ｉ）からのカチオンおよび上記の（ｉｉ）からのアニオンを有する任意の塩が水性組成物中に存在してよい。塩は、例えば、約０．０１〜約１０．００（もしくは０．０１〜１０．００の間のいずれかの１００分の１増分）の重量％で本明細書の水性組成物中に存在してよい。
【０１４９】
本明細書の組成物は、任意選択的に１つ以上の活性酵素を含有することができる。好適な酵素の非限定的例には、プロテアーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、脂肪分解酵素（例えば、金属脂肪分解酵素）、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ（例えば、アリールエステラーゼ、ポリエステラーゼ）、ペルヒドロラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ（例えば、コリンオキシダーゼ）、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、メラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、メタロプロテイナーゼ、アマドリアーゼ、グルコアミラーゼ、アラビノフラノシダーゼ、フィターゼ、イソメラーゼ、トランスフェラーゼおよびアミラーゼが含まれる。酵素が含まれる場合、酵素は、例えば、（例えば、純粋酵素タンパク質として計算して）約０．０００１〜０．１重量％（例えば、０．０１〜０．０３重量％）の活性酵素で本明細書の組成物中に含まれてよい。
【０１５０】
本明細書のセルラーゼは、エンドセルラーゼ活性（ＥＣ３．２．１．４）、エキソセルラーゼ活性（ＥＣ３．２．１．９１）もしくはセロビアーゼ活性（ＥＣ３．２．１．２１）を有することができる。本明細書のセルラーゼは、セルラーゼ活性を維持するための好適な条件下で活性を有する「活性セルラーゼ」である；そのような好適な条件を決定することは、当技術分野の技術の範囲内に含まれる。セルロースを分解できることに加えて、所定の実施形態におけるセルラーゼは、さらにセルロースエーテル誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースを分解することもできる。セルラーゼに対して安定性ではないと予想されるセルロースエーテル誘導体の例は、米国特許第７０１２０５３号明細書、同第７０５６８８０号明細書、同第６５７９８４０号明細書、同第７５３４７５９号明細書および同第７５７６０４８号明細書に開示されている。
【０１５１】
本明細書のセルラーゼは、例えば細菌もしくは真菌などの任意の微生物起源由来であってよい。化学修飾されたセルラーゼもしくはタンパク質組換え技術により作成された突然変異体セルラーゼが含まれる。好適なセルラーゼには、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）属、フミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、チエラビア（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）属およびアクレモニウム（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）属が含まれるが、それらに限定されない。他の例として、セルラーゼは、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、マイセリオフソラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）もしくはフザリウム・オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）に由来してよい；これらや他のセルラーゼは、参照により本明細書に全部が組み込まれる米国特許第４４３５３０７号明細書、同第５６４８２６３号明細書、同第５６９１１７８号明細書、同第５７７６７５７号明細書および同第７６０４９７４号明細書に開示されている。典型的なトリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）セルラーゼは、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第４６８９２９７号明細書、同第５８１４５０１号明細書、同第５３２４６４９号明細書および国際公開第９２／０６２２１号パンフレットならびに同第９２／０６１６５号パンフレットに開示されている。典型的なバシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属セルラーゼは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６５６２６１２号明細書に開示されている。例えば上記のいずれかなどのセルラーゼは、好ましくはＮ末端シグナルペプチドが欠如する成熟形にある。本明細書において有用な市販で入手できるセルラーゼにはＣＥＬＬＵＺＹＭＥ（登録商標）およびＣＡＲＥＺＹＭＥ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  Ａ／Ｓ）；ＣＬＡＺＩＮＡＳＥ（登録商標）およびＰＵＲＡＤＡＸ（登録商標）ＨＡ（ＤｕＰｏｎｔ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）ならびにＫＡＣ−５００（Ｂ）（登録商標）（Ｋａｏ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）が含まれる。
【０１５２】
１つ以上のセルラーゼは、本明細書に開示した組成物を調製する場合に１つの成分として直接的に加えることができる。または、１つ以上のセルラーゼは、本明細書に開示した組成物中に間接的に（意図せずに）提供される可能性がある。例えば、セルラーゼは、組成物を調製するために使用される非セルラーゼ酵素調製物中に存在することによって本明細書の組成物中に提供することができる。その中にセルラーゼがそれに間接的に提供されている組成物中のセルラーゼは、例えば、約０．１〜１０ｐｐｂ（例えば、１ｐｐｍ未満）で存在することができる。セルロースをベースとする化合物の代わりに酸化デキストラン化合物を使用することによって、本明細書の組成物の企図された利点は、酸化デキストラン化合物の所望の効果がそのバックグラウンドのセルラーゼ活性によって無効化されるという懸念を持たずに、バックグラウンドのセルラーゼ活性を有する可能性がある非セルラーゼ酵素調製物を使用できることにある。
【０１５３】
所定の実施形態におけるセルラーゼは、熱安定性であってよい。セルラーゼの熱安定性は、ある時間（例えば、約３０〜６０分間）にわたり高温（例えば、約６０〜７０℃）へ曝露させた後にこの酵素が活性を保持する能力を意味する。セルラーゼの熱安定性は、その時間中に規定条件下でセルラーゼ活性の半分が失われる分、時間もしくは日で与えられるその半減期（ｔ１／２）によって測定できる。
【０１５４】
所定の実施形態におけるセルラーゼは、広範囲のｐＨ値（例えば、約７．０〜約１１．０などの中性もしくはアルカリ性ｐＨ）まで安定性である可能性がある。そのような酵素は、そのようなｐＨ条件下で規定時間（例えば、少なくとも約１５分間、３０分間もしくは１時間）にわたり安定性を保持できる。
【０１５５】
本明細書の組成物中には、少なくとも１つ、２つまたはそれ以上のセルラーゼが含まれてよい。その中で織物が処理される水性組成物中のセルラーゼの有効濃度は、当業者であれば容易に決定できる。織物ケア加工では、セルラーゼは、その中で織物が処理される水性組成物（例えば、洗浄液）中に、最少約０．０１〜０．１ｐｐｍの全セルラーゼタンパク質、または約０．１〜１０ｐｐｂ（例えば、１ｐｐｍ未満）の全セルラーゼタンパク質から最大約１００、２００、５００、１，０００、２，０００、３，０００、４，０００もしくは５，０００ｐｐｍの全セルラーゼタンパク質の濃度で存在してよい。
【０１５６】
本明細書の酸化デキストラン化合物は、セルラーゼによる分解に対してほとんどもしくは完全に安定性（耐性）であると考えられる。例えば、１つ以上のセルラーゼによる本明細書の酸化デキストラン化合物の分解率は、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％もしくは１％未満、または０％であると考えられる。そのような分解率は、例えば、ある期間（例えば、約２４時間）にわたるセルラーゼを用いた処理の前後の酸化デキストランの分子量を比較することによって決定することができる。
【０１５７】
所定の実施形態における水性組成物は、剪断減粘性挙動もしくは剪断増粘性挙動のいずれかを有すると考えられる。剪断減粘性挙動は、剪断速度の上昇につれた水性組成物の粘度の低下として観察され、他方剪断増粘性挙動は、剪断速度の上昇につれた水性組成物の粘度の増加として観察される。本明細書の水性組成物の剪断減粘性挙動もしくは剪断増粘性挙動の修飾は、水性組成物への酸化デキストラン化合物の混合に起因する可能性がある。したがって、本明細書の１つ以上の酸化デキストラン化合物は、一部の態様では、その流動学的プロファイルを修飾する（すなわち、水性液、水溶液または混合液の流動特性を修飾する）ために水性組成物に加えることができる。さらに、一部の態様では、その粘度を修飾するために、水性組成物に１つ以上の酸化デキストラン化合物を加えることができる。
【０１５８】
本明細書の水性組成物の流動学的特性は、回転剪断速度を（例えば、約０．１ｒｐｍから約１，０００ｒｐｍへ）増加させながら粘度を測定することによって観察できる。例えば、水性組成物の剪断減粘性挙動は、回転剪断速度が約１０ｒｐｍから６０ｒｐｍへ、１０ｒｐｍから１５０ｒｐｍへ、１０ｒｐｍから２５０ｒｐｍへ、６０ｒｐｍから１５０ｒｐｍへ、６０ｒｐｍから２５０ｒｐｍもしくは１５０ｒｐｍから２５０ｒｐｍへ増加するにつれて、粘度における約または少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％もしくは９５％（または５％〜９５％の間の任意の整数）の粘度（ｃＰ）の低下として観察できる。また別の例として、水性組成物の剪断増粘性挙動は、回転剪断速度が約１０ｒｐｍから６０ｒｐｍへ、１０ｒｐｍから１５０ｒｐｍへ、１０ｒｐｍから２５０ｒｐｍへ、６０ｒｐｍから１５０ｒｐｍへ、６０ｒｐｍから２５０ｒｐｍもしくは１５０ｒｐｍから２５０ｒｐｍへ増加するにつれて、粘度における約または少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、１２５％、１５０％、１７５％もしくは２００％（または５％〜２００％の間の任意の整数）の粘度（ｃＰ）の増加として観察できる。
【０１５９】
本明細書に開示した水性組成物は、例えば下記に記載した製品のいずれかなどの家庭用製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品もしくは食品の形態にあってよい、および／またはそれらに含まれていてよい。本明細書の酸化デキストラン化合物は、これらのタイプの製品の１つ以上において、任意選択的に、ビルダー剤および／または再付着防止剤として使用できる。一部には製品の用途に依存するそのような使用は、当業者であれば、特に本明細書に開示した実施形態の一部を参照すれば企図することができる。他の実施形態では、本明細書の酸化デキストラン化合物は、これらの製品の１つ以上では増粘剤として使用される場合があると考えられる。そのような増粘剤は、所望であれば、参照により本明細書に全体として組み込まれる米国特許第８５４１０４１号明細書に開示されている増粘剤などの１つ以上の他のタイプの増粘剤と結び付けて使用されてよい。
【０１６０】
本明細書のパーソナルケア製品には、特別には限定はされないが、例えば、スキンケア組成物、化粧品組成物、抗真菌組成物および抗菌組成物が含まれる。本明細書のパーソナルケア製品は、例えば、ローション、クリーム、ペースト、鉱油、軟膏、ポマード、ジェル、リキッド、これらの組み合わせなどの形態にあってよい。本明細書に開示したパーソナルケア製品は、所望であれば、少なくとも１つの有効成分を含むことができる。有効成分は、一般に、意図された薬理学的効果を誘発する成分であると認識されている。本明細書のパーソナルケア製品は、所定の実施形態におけるパーソナルケア洗浄用途において使用できる。
【０１６１】
所定の実施形態では、スキンケア製品は、水分不足に関連する皮膚のダメージに対処するために皮膚に適用することができる。スキンケア製品は、さらに皮膚の視覚的外観に対処するため（例えば、鱗状、ひび割れおよび／または赤みがかった皮膚の外観を減らすため）および／または皮膚の触感（例えば、皮膚の滑らかさおよび繊細さを改良しながら皮膚の粗さおよび／または乾燥度を減らすため）にも使用できる。スキンケア製品は、典型的には、化粧効果を提供しながら、皮膚の病気を治療もしくは予防するため、または皮膚に保湿効果を提供するための少なくとも１つの有効成分、例えば、酸化亜鉛、ワセリン、白色ワセリン、鉱油、タラ肝油、ラノリン、ジメチコン、硬質脂肪、ビタミンＡ、アラントイン、カラミン、カオリン、グリセリンもしくはコロイド状オートミールおよびこれらの組み合わせを含んでいてよい。スキンケア製品は、１つ以上の天然保湿要素、例えば、セラミド、ヒアルロン酸、グリセリン、スクアラン、アミノ酸、コレステロール、脂肪酸、トリグリセリド、リン脂質、グリコスフィンゴ脂質、ウレア、リノール酸、グリコサミノグリカン、ムコ多糖、乳酸ナトリウムもしくはピロリドンカルボン酸ナトリウムが含むことができる。スキンケア製品に含むことのできる他の成分には、制限なく、グリセリド、杏仁油、キャノーラ油、スクアラン、スクアレン、ココナツ油、コーン油、ホホバ油、ホホバワックス、レシチン、オリーブ油、ベニバナ油、ゴマ油、シアバター、大豆油、甘扁桃油、ヒマワリ油、ティーツリー油、シアバター、パーム油、コレステロール、コレステロールエステル、ワックスエステル、脂肪酸およびオレンジ油が含まれる。
【０１６２】
本明細書のパーソナルケア製品は、例えば、さらにメーキャップ、リップスティック、マスカラ、ルージュ、ファンデーション、ブラシ、アイライナー、リップライナー、リップグロス、他の化粧品、サンスクリーン、サンブロック、マニキュア液、ネイルコンディショナー、バスジェル、シャワージェル、ボディソープ、洗顔料、リップバーム、スキンコンディショナー、コールドクリーム、保湿剤、ボディースプレー、石鹸、ボディスクラブ、スクラブ剤、収れん剤、スクラッフィングローション、脱毛剤、パーマネント液、ふけ防止製剤、制汗組成物、デオドラント、シェービング製品、プレシェーブ製品、アフターシェーブ製品、クレンジング剤、スキンジェル、リンス、歯磨き組成物、練り歯磨きもしくはマウスウォッシュの形態にあってもよい。
【０１６３】
一部の態様におけるパーソナルケア製品は、ヘアケア製品であってよい。本明細書のヘアケア製品の例には、シャンプー、ヘアコンディショナー（リーブインもしくはリンスアウト）、クリームリンス、ヘアダイ、ヘアカラーリング製品、ヘアシャイン製品、ヘアセラム、毛髪縮れ防止製品、毛髪枝毛修復製品、ムース、ヘアスプレーおよびスタイリングジェルが含まれる。ヘアケア製品は、一部の実施形態では、リキッド、ペースト、ジェル、固体もしくは粉末の形態にあってよい。本明細書に開示したヘアケア製品は、典型的には、ヘアケア製品を調製するために一般に使用される下記の成分；アニオン性界面活性剤、例えばポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム；カチオン性界面活性剤、例えば、塩化ステアリルトリメチルアンモニウムおよび／または塩化ジステアリルトリメチルアンモニウム；非イオン性界面活性剤、例えばグリセリルモノステレアレート、ソルビタンモノパルミテートおよび／またはポリオキシエチレンセチルエーテル；湿潤剤、例えばプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、ソルビトール、ピログルタミン酸塩、アミノ酸および／またはトリメチルグリシン；炭化水素、例えば液体パラフィン、ペトロラタム、固形パラフィン、スクアランおよび／またはオレフィンオリゴマー；高級アルコール、例えばステアリルアルコールおよび／またはセチルアルコール；過脂肪剤；ふけ防止剤；消毒剤；抗炎症剤；生薬；水様性ポリマー、例えばメチルセルロース、ヒドロキシセルロースおよび／または部分脱アセチル化キチン；防腐剤、例えばパラベン；紫外線吸収剤；パール化剤；ｐＨ調整剤；香水および顔料の内の１つ以上を含む。
【０１６４】
本明細書の医薬製品は、例えば、エマルジョン、リキッド、エリキシル、ジェル、懸濁剤、液剤、クリームもしくは軟膏の形態にあってよい。さらに、本明細書の医薬製品は、本明細書に開示したパーソナルケア製品のいずれかの形態、例えば抗菌もしくは抗真菌組成物の形態にあってよい。医薬製品は、医薬上許容される担体、希釈剤および／または医薬上許容される塩の内の１つ以上をさらに含むことができる。本明細書に開示した酸化デキストラン化合物は、さらにカプセル剤、カプセル材、錠剤コーティング中および医薬および薬剤用の賦形剤中に使用することもできる。
【０１６５】
本明細書の食品の非限定的例には、野菜パテ、肉パテおよび大豆パテ；再形成海産物；再形成チーズスティック；クリームスープ；グレービーおよびソース；サラダ用ドレッシング；マヨネーズ；オニオンリング；ジャム、ゼリーおよびシロップ；パイフィリング；ポテト製品、例えばフレンチフライおよび成形フライ；揚げ物、パンケーキ／ワッフルおよびケーキ用の生地；ペットフード；菓子類（キャンディ）；飲料；冷菓；アイスクリーム；培養乳製品、例えばカッテージチーズ、ヨーグルト、チーズおよびサワークリーム；ケーキアイシングおよびグレーズ；ホイップ状トッピング；イースト菌使用および不使用の焼成製品；バーなどが含まれる。
【０１６６】
所定の実施形態では、本明細書の酸化デキストラン化合物は、食料品または任意の他の摂取可能な物質（例えば、経腸医薬製剤）中に所望の増粘度および／または分散度を提供する量で含まれてよい。例えば、製品中の酸化デキストラン化合物の濃度もしくは量は、約０．１〜３重量％、０．１〜４重量％、０．１〜５重量％もしくは０．１〜１０重量％であってよい。
【０１６７】
本明細書の家庭用および／または工業製品は、例えば、ドライウォールテープ接合化合物；モルタル；グラウト；セメントプラスター；スプレープラスター；セメントスタッコ；接着剤；ペースト；壁／天井結着剤；テープキャスティング、押出成形、射出成形および陶磁器用の結合剤および加工助剤；殺虫剤、除草剤および肥料用のスプレー接着剤および懸濁化／分散助剤；織物ケア剤、例えば織物柔軟剤および洗濯用洗剤；食器用洗剤、硬質表面洗浄剤；空気清浄剤；ポリマーエマルジョン；ゲル剤、例えば水性ゲル；界面活性剤溶液；塗料、例えば水性塗料；保護コーティング；接着剤；シーラントおよびコーキング剤；インク類、例えば水性インク；金属工作液；または電気めっき、リン酸塩処理、亜鉛めっきおよび／または一般金属洗浄作業において使用されるエマルジョンベースの金属洗浄液の形態にあってよい。本明細書の家庭用製品もしくは工業製品は、所定の実施形態においてはクリーニング用途において使用することができ、したがって例えば、洗剤組成物中に含めることができる。
【０１６８】
本明細書に開示した酸化デキストラン化合物は、パーソナルケア製品、医薬製品、家庭用製品、工業製品もしくは食品に下記の物理的特性：増粘性、凍結／解凍安定性、潤滑性、保湿および水分放出、質感、稠度、保形性、乳化性、結合性、懸濁性、分散性、ゲル化、低下した鉱物硬さの内の１つ以上を提供するために有用であると考えられる。製品中の酸化デキストラン化合物の濃度もしくは量の例は、例えば、上記に提供した重量％のいずれかであってよい。
【０１６９】
本明細書の食品は、例えば、菓子類の形態にあってよい。本明細書の菓子類は、甘くするために１つ以上の糖類（例えば、スクロース、フルクトース、デキストロース）を含有することができる、またはさもなければ無糖であってよい。
【０１７０】
本明細書の菓子類の例には、ボイルドシュガー（ハードボイルドキャンディ［すなわち、ハードキャンディ］、ドラジェ、ジェリーキャンディ、ガム、カンゾウ、チューズ、キャラメル、タフィー、ファッジ、チューインガム、バブルガム、ヌガー、噛みでのあるペースト、ハラワ（ｈａｌａｗａ）、タブレット、ロゼンジ、アイシング、フロスティング、プディングおよびジェル（例えば、フルーツジェル、ゼラチンデサート）が含まれる。菓子類の他の例には、例えばマシュマロなどの発泡菓子類および焼成菓子類が含まれる。
【０１７１】
本明細書の菓子類は、任意選択的に任意の（例えば、バー、キャンディ、ボンボン、トリュフ、レンズ豆）形態にあるチョコレートを用いて調製することができる。菓子類は、例えば、チョコレート、シュガーコート、砂糖煮コート、グレーズコートおよび／またはフィルムコートでコーティングすることができる。フィルムコーティング法は、典型的には、菓子類の表面に乾燥後には保護フィルムとなるフィルム形成液体組成物を塗布する工程を含む。このフィルムコーティングは、例えば、菓子類に含有される有効成分を保護する；菓子類自体を水分、衝撃および／または脆砕性から保護する；および／または菓子類に魅力的な視覚的特性（例えば、輝き、一様な色、滑らかな表面）を付与するために機能する。
【０１７２】
所定の実施形態では、菓子類には、液体、ペースト状、固体状もしくは粉末状であるフィリングを充填することができる。本明細書の酸化デキストラン化合物は、その場合には化合物が充填される菓子成分内に任意選択的に含まれるようなフィリング内に含まれてよい。
【０１７３】
本明細書の菓子類は、任意選択的に、糖を含まず、典型的にはその代りに１つ以上の人工甘味料および／または非糖甘味料（任意選択的に、ノンカロリーの）（例えば、アスパルテーム、サッカリン、ＳＴＥＶＩＡ、ＳＵＣＲＡＬＯＳＥ）を有する無糖である。所定の実施形態における無糖菓子類は、糖の代わりに１つ以上のポリオール（例えば、エリトリトール、グリセロール、ラクチトール、マンニトール、マルチトール、キシリトール）、可溶性繊維および／またはタンパク質を含むことができる。
【０１７４】
本明細書の食品は、例えば、ペットフードの形態にあってよい。本明細書のペットフードは、例えば、イヌもしくはネコ（または任意の他の伴侶動物）などの飼育動物のための食品であってよい。所定の実施形態におけるペットフードは、飼育動物に以下の：必要栄養量、トリート（例えば、ドッグビスケット）、栄養補助食品の内の１つ以上を提供する。ペットフードの例には、ドライペットフード（例えば、穀粒、粗挽き穀粒）、セミモイスト組成物、ウェットペットフード（例えば、缶入りペットフード）またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。ウェットペットフードは、典型的には６５％を超える含水率を有する。セミモイストペットフードは、典型的には、２０〜６５％の含水率を有し、例えば、プロピレングリコール、ソルビン酸カリウムおよび微生物増殖（細菌およびカビ）を防止する成分などの保湿剤を含むことができる。ドライペットフードは、典型的には、２０％未満の含水率を有し、その加工処理は、通常は押出、乾燥および／または焼成を含む。ペットフードは、任意選択的に、グレービー、ヨーグルト、粉末、懸濁液、チューもしくはトリート（例えば、ビスケット）の形態にあってよい；これらの組成物は全部、所望であれば、さらにペットフード補助食品として使用することができる。ペットトリートは、例えば、セミモイストのチュワブルトリート；ドライトリート；チュワブルボーン；焼成、押出もしくは型抜トリート；またはコンフェクショントリートであってよい。その中に本明細書の酸化デキストラン化合物を添加できるペットフード組成物／調製物の例には、参照により本明細書に全部が組み込まれる米国特許出願公開第２０１３／０２８０３５２号明細書および同第２０１０／０１５９１０３号明細書ならびに米国特許第６９７７０８４号明細書の中に開示されているものが含まれる。
【０１７５】
本明細書に開示した組成物は、織物ケア組成物の形態にあってよい。本明細書の織物ケア組成物は、手洗い、洗濯機洗浄および／または他の目的、例えば織物の浸漬および／または前処理などの他の目的のために使用できる。織物ケア組成物は、例えば、洗濯用洗剤；織物コンディショナー、任意の洗濯用製品、リンス用製品もしくは乾燥機添加製品；単位用量もしくはスプレーの形態を取ることができる。液体形にある織物ケア組成物は、本明細書に開示した水性組成物の形態にあってよい。他の態様では、織物ケア組成物は、乾燥形、例えば顆粒状洗剤もしくは乾燥機添加用織物柔軟剤シートなどの乾燥形であってよい。本明細書の織物ケア組成物の他の非限定的例には、顆粒状もしくは粉末状の万能もしくは強力洗浄剤；液体形、ジェル形もしくはペースト形の万能もしくは強力洗浄剤；液体もしくは乾燥の細（例えば、繊細）繊維用洗剤；例えば漂白用添加物、「ステイン・スティック」もしくは前処理剤などのクリーニング補助剤；基質負荷製品、例えばドライワイプもしくはウェットワイプ、パッドもしくはスポンジ；スプレーおよびミストが含まれる。
【０１７６】
本明細書の洗剤組成物は、例えば、粉末、顆粒、ペースト、バー、単位用量もしくは液体などの任意の有用な形態にあってよい。液体洗剤は、典型的には、約７０重量％までの水および０重量％〜約３０重量％の有機溶媒を含有する水性であってよい。液体洗剤は、さらにまた水を約３０重量％しか含有していないコンパクトジェルの形態にあってよい。
【０１７７】
本明細書の洗剤組成物は、１つ以上の界面活性剤を含み、このとき界面活性剤は、非イオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤、両性イオン性界面活性剤、半極性非イオン性界面活性剤およびそれらの混合物から選択される。一部の実施形態では、界面活性剤は、洗剤組成物の重量で約０．１重量％〜約６０重量％の濃度で存在するが、また別の実施形態では濃度は約１重量％〜約５０重量％であり、さらにまた別の実施形態では、濃度は約５重量％〜約４０重量％である。洗剤は、通常は０重量％〜約５０重量％のアニオン性界面活性剤、例えば直鎖状アルキルベンゼンスルホン酸塩（ＬＡＳ）、α−オレフィンスルホン酸塩（ＡＯＳ）、アルキル硫酸塩（高級アルコール硫酸エステル塩）（ＡＳ）、アルコールエトキシサルフェート（ＡＥＯＳもしくはＡＥＳ）、第二級アルカンスルホネート（ＳＡＳ）、α−スルホ脂肪酸メチルエステル、アルキル−もしくはアルケニルコハク酸または石鹸を含有するであろう。さらに、洗剤組成物は、任意選択的に０重量％〜約４０重量％の非イオン性界面活性剤、例えば、（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第９２／０６１５４号パンフレットに記載されている）アルコールエトキシレート（ＡＥＯもしくはＡＥ）、カルボキシル化アルコールエトキシレート、ノニルフェノールエトキシレート、アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミン、脂肪酸モノエタノールアミドもしくはポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミドを含有することができる。
【０１７８】
本明細書の洗剤組成物は、典型的には、１つ以上の洗剤ビルダーもしくはビルダー系を含む。例えば、１つ以上の酸化デキストラン化合物はビルダーとして含むことができる。一部の態様では、酸化デキストランは、その中で例えば本明細書に開示したいずれかなどの１つ以上の追加のビルダーと一緒に使用されるコビルダーとして含むことができる。少なくとも１つのビルダーを組み込んでいる一部の態様では、クリーニング組成物は、本組成物の重量で少なくとも約１重量％、約３重量％〜約６０重量％もしくはいっそう約５重量％〜約４０重量％のビルダーを含む。ビルダーには、（本明細書の酸化デキストランに加えて）アルカリ金属、ポリリン酸塩のアンモニウム塩およびアルカノールアンモニウム塩、アルカリ金属ケイ酸塩、アルカリ土類およびアルカリ金属炭酸塩、アルミノケイ酸塩、ポリカルボキシレート化合物、エーテルヒドロキシポリカルボキシレート、マレイン酸無水物とエチレンもしくはビニルメチルエーテルとのコポリマー、１，３，５−トリヒドロキシベンゼン−２，４，６−トリスルホン酸およびカルボキシメチルオキシコハク酸、ポリ酢酸の様々なアルカリ金属、アンモニウムおよび置換アンモニウム塩、例えばエチレンジアミン四酢酸およびニトリロ三酢酸ならびにポリカルボキシレート、例えばメリット酸、コハク酸、クエン酸、オキシジコハク酸、ポリマレイン酸、ベンゼン１，３，５−トリカルボン酸、カルボキシメチルオキシコハク酸およびそれらの可溶性塩が含まれるがそれらに限定されない。実際に、本開示の様々な実施形態では、任意の好適なビルダーが利用されることが企図されている。洗剤ビルダーもしくは錯化剤の追加の例には、ゼオライト、二リン酸塩、三リン酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＭＰＡ）、アルキルコハク酸もしくはアルケニルコハク酸、可溶性ケイ酸塩もしくは層状ケイ酸塩（例えば、ＨｏｅｃｈｓｔからのＳＫＳ−６）が含まれる。
【０１７９】
一部の実施形態では、ビルダーは、水溶性硬質イオン錯体（例えば、金属イオン封鎖ビルダー）、例えばクエン酸塩およびポリリン酸塩（例えば、トリポリリン酸ナトリウムおよびトリポリリン酸ナトリウム六水和物、トリポリリン酸カリウムならびに混合トリポリリン酸ナトリウムおよびカリウムなど）を形成する。任意の好適なビルダーは、当技術分野において公知のビルダーも含めて本開示において利用されることが企図されている（例えば、欧州特許第２１００９４９号明細書を参照されたい）。
【０１８０】
一部の実施形態では、好適なビルダーは、リン酸塩ビルダーおよび非リン酸塩ビルダーを含むことができる。一部の実施形態では、ビルダーはリン酸塩ビルダーである。一部の実施形態では、ビルダーは、非リン酸塩ビルダーである。ビルダーは、本組成物の重量で０．１重量％〜８０重量％もしくは５重量％〜６０重量％または１０重量％〜５０重量％の濃度で使用できる。一部の実施形態では、本生成物は、リン酸塩ビルダーと非リン酸塩ビルダーとの混合物を含む。好適なリン酸塩ビルダーには、ナトリウム塩を含むこれらの化合物のアルカリ金属塩を含む、一リン酸塩、二リン酸塩、トリポリリン酸塩もしくオリゴマーポリリン酸塩が含まれる。一部の実施形態では、ビルダーは、トリポリリン酸ナトリウム（ＳＴＰＰ）であってよい。さらに、本組成物は、炭酸塩および／またはクエン酸塩、好ましくは中性ｐＨ組成物を達成するのに役立つクエン酸塩を含むことができる。他の好適な非リン酸塩ビルダーには、ポリカルボン酸ならびにそれらの部分もしくは完全中和塩のホモポリマーおよびコポリマー、モノマーポリカルボン酸およびヒドロキシカルボン酸およびそれらの塩が含まれる。一部の実施形態では、上記の化合物の塩には、アンモニウムおよび／またはアルカリ金属塩、すなわち、ナトリウム塩を含むリチウム、ナトリウムおよびカリウム塩が含まれる。好適なポリカルボン酸には、非環式、脂環式、複素環式および芳香族カルボン酸が含まれるが、このとき一部の実施形態では、それらはそれぞれの場合に相互から、一部の例では２個以下の炭素原子によって相互から分離できる少なくとも２つのカルボキシル基を含有することができる。
【０１８１】
本明細書の洗剤組成物は、少なくとも１つのキレート剤を含むことができる。好適なキレート剤には、銅、鉄および／またはマンガンキレート剤およびそれらの混合物が含まれるがそれらに限定されない。少なくとも１つのキレート剤が使用される実施形態では、本組成物は、本組成物の重量で約０．１重量％〜約１５重量％またはいっそう約３．０重量％〜約１０重量％のキレート剤を含む。
【０１８２】
本明細書の洗剤組成物は、少なくとも１つの沈着助剤を含むことができる。好適な沈着助剤には、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリカルボキシレート、防汚ポリマー、例えばポリテレフタル酸、粘土、例えばカオリナイト、モンモリロナイト、アタパルジャイト、イライト、ベントナイト、ハロイサイトおよびそれらの混合物が含まれるがそれらに限定されない。
【０１８３】
本明細書の洗剤組成物は、１つ以上の染料移動阻害剤を含むことができる。好適なポリマー染料移動阻害剤には、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドンおよびＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドンおよびポリビニルイミダゾールのコポリマーまたはそれらの混合物が含まれるがそれらに限定されない。追加の染料移動阻害剤には、マンガンフタロシアニン、ペルオキシダーゼ、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドンおよびＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドンおよびポリビニルイミダゾールのコポリマーおよび／またはそれらの混合物が含まれる；そのキレート剤の例には、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）；ジエチレントリアミンペンタメチレンリン酸（ＤＴＰＭＰ）；ヒドロキシエタン二リン酸（ＨＥＤＰ）；エチレンジアミンＮ，Ｎ’−ジコハク酸（ＥＤＤＳ）；メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）；ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）；プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）；２−ヒドロキシピリジン−Ｎ−オキシド（ＨＰＮＯ）；またはメチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）；グルタミン酸Ｎ，Ｎ−二酢酸（Ｎ，Ｎ−ジカルボキシメチルグルタミン酸四ナトリウム塩（ＧＬＤＡ）；ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）；４，５−ジヒドロキシ−ｍ−ベンゼンジスルホン酸；クエン酸およびそれらの任意の塩；Ｎ−ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）、Ｎ−ヒドロキシエチルグリシン（ＤＨＥＧ）、エチレンジアミンテトラプロピオン酸（ＥＤＴＰ）および単独または上記のいずれかと組み合わせて使用できるそれらの誘導体が含まれる。少なくとも１つの染料移動阻害剤が使用される実施形態では、本明細書の組成物は、本組成物の重量で約０．０００１重量％〜約１０重量％、約０．０１重量％〜約５重量またはいっそう約０．１重量％〜約３重量％を含んでいてよい。
【０１８４】
本明細書の洗剤組成物は、ケイ酸塩を含むことができる。これらの実施形態の一部では、ケイ酸ナトリウム（例えば、二ケイ酸ナトリウム、メタケイ酸ナトリウムおよび／または結晶性フィロケイ酸塩）が利用される。一部の実施形態では、ケイ酸塩は、本組成物の重量で約１重量％〜約２０重量％の濃度で存在する。一部の実施形態では、ケイ酸塩は、本組成物の重量で約５重量％〜約１５重量％の濃度で存在する。
【０１８５】
本明細書の洗剤組成物は、分散剤を含むことができる。好適な水溶性有機材料には、その中でポリカルボン酸が２個以下の炭素原子で相互から分離された少なくとも２つのカルボキシル基を含む、ホモポリマー酸もしくはコポリマー酸またはそれらの塩が含まれるがそれらに限定されない。
【０１８６】
本明細書の洗剤組成物は、追加して１つ以上の酵素を含むことができる。酵素の例には、任意の組み合わせでプロテアーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、脂肪分解酵素（例えば、金属脂肪分解酵素）、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ（例えば、アリールエステラーゼ、ポリエステラーゼ）、ペルヒドロラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ（例えば、コリンオキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ）、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、メタロプロテイナーゼ、アマドリアーゼ、グルコアミラーゼ、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、ガラクトシダーゼ、ガラクタナーゼ、カタラーゼ、カラゲナーゼ、ヒアルロニダーゼ、ケラチナーゼ、ラクターゼ、リグニナーゼ、ペルオキシダーゼ、ホスファターゼ、ポリガラクツロナーゼ、プルラナーゼ、ラムノガラクトウロナーゼ、タンナーゼ、トランスグルタミナーゼ、キシログルカナーゼ、キシロシダーゼ、メタロプロテアーゼ、アラビノフラノシダーゼ、フィターゼ、イソメラーゼ、トランスフェラーゼおよび／またはアミラーゼが含まれる。
【０１８７】
一部の実施形態では、洗剤組成物は、それぞれが本組成物の重量で約０．００００１重量％〜約１０重量％の濃度にある１つ以上の（例えば、本明細書で開示したいずれかの）酵素および残余のクリーニング補助材料を含むことができる。一部の他の実施形態では、洗剤組成物は、さらに各酵素を本組成物の重量で約０．０００１重量％〜約１０重量％、約０．００１重量％〜約５重量％、約０．００１重量％〜約２重量％または約０．００５重量％〜約０．５重量％の濃度で含むことができる。
【０１８８】
本明細書の洗剤組成物中に含めることのできる酵素は、従来型の安定化剤、例えば、プロピレングリコールもしくはグリセロールなどのポリオール；糖もしくは糖アルコール；乳酸；ホウ酸もしくはホウ酸誘導体（例えば、芳香族ホウ酸エステル）を使用して安定化することができる。
【０１８９】
所定の実施形態における洗剤組成物は、１つ以上のポリマーを含んでいてよい。好適なポリマーの例には、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリカルボキシレート、例えば、ポリアクリレート、マレイン酸／アクリル酸コポリマーおよびメタクリル酸／アクリル酸ラウリルコポリマーが含まれる。
【０１９０】
本明細書の洗剤組成物は、漂白系を含有していてよい。例えば、漂白系は、Ｈ２Ｏ２起源、例えば過酸形成漂白活性化剤、例えばテトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）もしくはノナノイルオキシベンゼンスルホネート（ＮＯＢＳ）と結合することのできる、過ホウ酸塩もしくは過炭酸塩を含むことができる。または、漂白系は、ペルオキシ酸（例えば、アミド、イミドもしくはスルホンタイプのペルオキシ酸）を含んでいてよい。またはさらに、漂白系は、例えば国際公開第２００５／０５６７８３号パンフレットに記載された系などのペルヒドロラーゼを含む酵素的漂白系であってよい。
【０１９１】
本明細書の洗剤組成物は、さらに、従来型の洗剤成分、例えば、織物コンディショナー、粘土、発泡増強剤、石鹸泡抑制剤、防錆剤、汚れ懸濁化剤、汚れ再付着防止剤、染料、殺菌剤、曇り防止剤、蛍光増白剤もしくは香料も含んでいてよい。本明細書の洗剤組成物の（使用濃度にある水溶液中で測定した）ｐＨは、通常は中性もしくはアルカリ性（例えば、約７．０〜約１１．０のｐＨ）である。
【０１９２】
酸化デキストランは、所望であれば、例えば織物ケア組成物などの洗剤組成物中の再付着防止剤および／または粘土質汚れ除去剤として含めることができる（そのような作用物質は、任意選択的に所定の態様における白色維持剤であると特徴付けることができる）。本明細書の他の好適な再付着防止剤および／または粘土質汚れ除去剤の例には、ポリエトキシ両性イオン性界面活性剤、アクリル酸もしくはメタクリル酸とアクリル酸もしくはメタクリル酸−酸化エチレン凝縮体との水溶性コポリマー（例えば、米国特許第３７１９６４７号明細書）、セルロース誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースおよびヒドロキシプロピルセルロース（例えば、米国特許第３５９７４１６号明細書および同第３５２３０８８号明細書）ならびに非イオン性アルキルポリエトキシ界面活性剤、ポリエトキシアルキル第４級カチオン性界面活性剤および脂肪酸アミド界面活性剤（例えば、米国特許第４２２８０４４号明細書）が含まれる。他の好適な再付着防止剤および／または粘土質汚れ除去剤の非限定的例は、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第４５９７８９８号明細書および同第４８９１１６０号明細書ならびに国際公開第９５／３２２７２号パンフレットに開示されている。
【０１９３】
本明細書に開示した目的に適合させることのできる洗剤組成物の特定の形態は、例えば、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２００９０２０９４４５Ａ１号明細書、同第２０１０００８１５９８Ａ１号明細書、同第７００１８７８Ｂ２号明細書、欧州特許第１５０４９９４Ｂ１号明細書、国際公開第２００１０８５８８８Ａ２号パンフレット、同第２００３０８９５６２Ａ１号パンフレット、同第２００９０９８６５９Ａ１号パンフレット、同第２００９０９８６６０Ａ１号パンフレット、同第２００９１１２９９２Ａ１号パンフレット、同第２００９１２４１６０Ａ１号パンフレット、同第２００９１５２０３１Ａ１号パンフレット、同第２０１００５９４８３Ａ１号パンフレット、同第２０１００８８１１２Ａ１号パンフレット、同第２０１００９０９１５Ａ１号パンフレット、同第２０１０１３５２３８Ａ１号パンフレット、同第２０１１０９４６８７Ａ１号パンフレット、同第２０１１０９４６９０Ａ１号パンフレット、同第２０１１１２７１０２Ａ１号パンフレット、同第２０１１１６３４２８Ａ１号パンフレット、同第２００８０００５６７Ａ１号パンフレット、同第２００６０４５３９１Ａ１号パンフレット、同第２００６００７９１１Ａ１号パンフレット、同第２０１２０２７４０４Ａ１号パンフレット、欧州特許第１７４０６９０Ｂ１号明細書、国際公開第２０１２０５９３３６Ａ１号パンフレット、米国特許第６７３０６４６Ｂ１号明細書、国際公開第２００８０８７４２６Ａ１号パンフレット、同第２０１０１１６１３９Ａ１号パンフレットおよび同第２０１２１０４６１３Ａ１号パンフレットに開示されている。
【０１９４】
本明細書の洗濯用洗剤組成物は、任意選択的に強力（万能）洗濯用洗剤組成物であってよい。典型的な強力洗濯用洗剤組成物は、アニオン性洗浄性界面活性剤（１群の直鎖もしくは分岐鎖もしくはランダム鎖の置換もしくは未置換アルキルスルフェート、アルキルスルホネート、アルコキシル化アルキルスルフェート、アルキルホスフェート、アルキルホスホネート、アルキルカルボキシレートおよび／またはそれらの混合物から選択される）および任意選択的に非イオン性界面活性剤（１群の直鎖もしくは分岐鎖もしくはランダム鎖の置換もしくは未置換アルコキシル化アルキルアルコール、例えば、Ｃ８〜Ｃ１８エトキシル化アルキルアルコールおよび／またはＣ６〜Ｃ１２アルキルフェノールアルコキシレートから選択される）を含む洗浄性界面活性剤（１０重量／重量％〜４０重量／重量％）を含み、ここで、アニオン性洗浄性界面活性剤（６．０〜９の親水性指数（ＨＩｃ）を備える）対非イオン性洗浄性界面活性剤の重量比は１：１より大きい。好適な洗浄性界面活性剤にはさらに、カチオン性洗浄性界面活性剤（１群のアルキルピリジニウム化合物、アルキル第４級アンモニウム化合物、アルキル第４級ホスホニウム化合物、アルキル三元スルホニウム化合物および／またはそれらの混合物から選択される）；両性イオン性および／または両性洗浄性界面活性剤（１群のアルカノールアミンスルホ−ベタインから選択される）；両性界面活性剤；半極性非イオン性界面活性剤ならびにそれらの混合物が含まれる。
【０１９５】
本明細書の洗剤、例えば強力洗濯用洗剤組成物は、任意選択的に、両親媒性アルコキシル化グリース洗浄ポリマー（１群の分岐鎖親水性および疎水性を有するアルコキシル化ポリマー、例えば０．０５重量％〜１０重量％の範囲内にあるアルコキシル化ポリアルキレンイミンから選択される）および／またはランダムグラフトポリマー（典型的には不飽和Ｃ１〜Ｃ６カルボン酸、エーテル、アルコール、アルデヒド、ケトン、エステル、糖単位、アルコキシ単位、マレイン酸無水物、飽和ポリアルコール、例えばグリセロールならびにそれらの混合物からなる群から選択されるモノマーを含む親水性骨格を含む）；ならびにＣ４〜Ｃ２５アルキル基、ポリプロピレン、ポリブチレン、飽和Ｃ１〜Ｃ６モノ−カルボン酸のビニルエステル、アクリル酸もしくはメタクリル酸のＣ１〜Ｃ６アルキルエステルおよびそれらの混合物からなる群から選択される疎水性側鎖からなる界面活性増強性ポリマーを含んでいてよい。
【０１９６】
例えば強力洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤は、任意選択的に、追加のポリマー、例えば防汚ポリマー（非イオン性で末端キャップされたポリエステル、例えばＳＲＰ１などのランダムもしくはブロック構造にあるサッカライド、ジカルボン酸、ポリオールおよびそれらの組み合わせから選択される少なくとも１つのモノマー単位を含むポリマー、ランダムもしくはブロック構造にあるエチレンテレフタレートをベースとするポリマーおよびそれらのコポリマー、例えばＲＥＰＥＬ−Ｏ−ＴＥＸ  ＳＦ、ＳＦ−２  ＡＮＤ  ＳＲＰ６、ＴＥＸＣＡＲＥ  ＳＲＡ１００、ＳＲＡ３００、ＳＲＮ１００、ＳＲＮ１７０、ＳＲＮ２４０、ＳＲＮ３００  ＡＮＤ  ＳＲＮ３２５、ＭＡＲＬＯＱＵＥＳＴ  ＳＬが含まれる）を含むことができ、本明細書の再付着防止剤（０．１重量％〜１０重量％）には、５００〜１００，０００Ｄａの範囲内の分子量のカルボキシレートポリマー、例えばアクリル酸、マレイン酸（もしくはマレイン酸無水物）、フマル酸、イタコン酸、アコニット酸、メサコン酸、シトラコン酸、メチレンマロン酸およびそれらの任意の混合物、ビニルピロリドン、ビニルピロリドンホモポリマーおよび／またはポリエチレングリコールから選択される少なくとも１つのモノマーを含むポリマー；ならびにポリマーカルボキシレート（例えば、マレエート／アクリレートランダムコポリマーもしくはポリアクリレートホモポリマー）が含まれる。
【０１９７】
例えば強力洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤には、任意選択的に、さらに飽和もしくは不飽和脂肪酸、好ましくは飽和もしくは不飽和Ｃ１２〜Ｃ２４脂肪酸（０重量％〜１０重量％）；本明細書に開示した沈着助剤（それらの例には、多糖類、セルロースポリマー、ポリジアリルジメチルアンモニウムハロゲン化物（ＤＡＤＭＡＣ）およびランダムもしくはブロック構造にあるＤＡＤ  ＭＡＣとビニルピロリドン、アクリルアミド、イミダゾール、イミダゾリウムハロゲン化物およびそれらの混合物とのコポリマー、カチオン性グアールガム、カチオン性デンプン、カチオン性ポリアクリルアミドおよびそれらの混合物が含まれる）が含まれる。
【０１９８】
例えば強力洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤はさらに、任意選択的に、その例には、マンガンフタロシアニン、ペルオキシダーゼ、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ−オキシドポリマー、Ｎ−ビニルピロリドンおよびＮ−ビニルイミダゾールのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドンおよびポリビニルイミダゾールのコポリマーおよび／またはそれらの混合物が含まれる染料移動阻害剤、その例にはエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミンペンタメチレンホスホン酸（ＤＴＰＭＰ）、ヒドロキシ−エタンジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、エチレンジアミンＮ，Ｎ’−ジコハク酸（ＥＤＤＳ）、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、プロピレンジアミン四酢酸（ＰＤＴＡ）、２−ヒドロキシピリジン−Ｎ−オキシド（ＨＰＮＯ）もしくはメチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、グルタミン酸Ｎ，Ｎ−二酢酸（Ｎ，Ｎ−ジカルボキシメチルグルタミン酸四ナトリウム塩（ＧＬＤＡ）、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、４，５−ジヒドロキシ−ｍ−ベンゼンジスルホン酸、クエン酸およびそれらの任意の塩、Ｎ−ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）、Ｎ−ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＥＩＤＡ）、ジヒドロキシエチルグリシン（ＤＨＥＧ）、エチレンジアミンテトラプロピオン酸（ＥＤＴＰ）およびそれらの誘導体が含まれるキレート剤を含んでいてよい。
【０１９９】
例えば強力洗濯用洗剤組成物などの本明細書の洗剤は、任意選択的に、シリコンもしくは脂肪酸をベースとする石鹸泡抑制剤；ぼかし染料（ｈｕｅｉｎｇ  ｄｙｅｓ）、カルシウムカチオンおよびマグネシウムカチオン、視覚的シグナル伝達成分、消泡剤（０．００１重量％〜約４．０重量％）および／またはジグリセリドおよびトリグリセリド、エチレングリコールジステアレート、微結晶セルロース、マイクロファイバーセルロース、バイオポリマー、キサンタンガム、ゲランガムおよびそれらの混合物からなる群から選択される構造物質／増粘剤（０．０１重量％〜約５重量％）を含むことができる。そのような構造物質／増粘剤は、所定の実施形態では、洗剤に含まれる１つ以上の酸化デキストラン化合物に追加されるであろう。構造物質は、構造剤と呼ぶこともできる。
【０２００】
本明細書の洗剤は、例えば、強力乾燥／固体洗濯用洗剤組成物の形態にあってよい。そのような洗剤は、（ｉ）洗浄性界面活性剤、例えば本明細書に開示した任意のアニオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意の非イオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意のカチオン性洗浄性界面活性剤、本明細書に開示した任意の両性イオン性および／または両性洗浄性界面活性剤およびそれらの混合物；（ｉｉ）ビルダー、例えば任意の無リンビルダー（例えば、０重量％〜１０重量％未満の範囲内のゼオライトビルダー）、任意のリン酸塩ビルダー（例えば、０重量％〜１０重量％未満の範囲内のトリポリリン酸ナトリウム）、クエン酸、クエン酸塩およびニトリロ三酢酸、任意のケイ酸塩（例えば、０重量％〜１０重量％未満の範囲内のケイ酸ナトリウムもしくはカリウムまたはメタケイ酸ナトリウム）；任意の炭酸塩（例えば、０重量％〜８０重量％未満の範囲内の炭酸ナトリウムおよび／または重炭酸ナトリウム）およびそれらの混合物；（ｉｉｉ）漂白剤、例えば光漂白剤（例えば、スルホン化亜鉛フタロシアニン、スルホン化アルミニウムフタロシアニン、キサンテン染料およびそれらの混合物）、任意の疎水性もしくは親水性漂白活性化剤（例えば、ドデカノイルオキシベンゼンスルホネート、デカノイルオキシベンゼンスルホネート、デカノイルオキシ安息香酸もしくはそれらの塩、３，５，５−トリメチルヘキサノイルオキシベンゼンスルホネート、テトラアセチルエチレンジアミン−ＴＡＥＤ、ノナノイルオキシベンゼンスルホネート−ＮＯＢＳ、ニトリルクアットおよびそれらの混合物）、過酸化水素の任意の起源（例えば、その例には過ホウ酸塩、過炭酸塩、過硫酸塩、過リン酸塩もしくは過ケイ酸塩のモノもしくはテトラハイドレートナトリウム塩が含まれる無機ペルハイドレート塩）、任意の予備形成親水性および／または疎水性過酸（例えば、過カルボン酸および塩、過炭酸および塩、過イミド酸および塩、ペルオキソ一硫酸および塩ならびにそれらの混合物）；および／または（ｉｖ）任意の他の成分、例えば漂白触媒（例えば、その例にはイミニウムカチオンおよびポリイオン、イミニウム両性イオン、改質アミン、改質アミンオキシド、Ｎ−スルホニルイミン、Ｎ−ホスホニルイミン、Ｎ−アシルイミン、チアジアゾールジオキシド、ペルフルオロイミン、環状糖ケトンおよびそれらの混合物が含まれるイミン系漂白増強剤）ならびに金属含有漂白触媒（例えば亜鉛もしくはアルミニウムなどの補助金属カチオンおよび例えばＥＤＴＡ、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）などの金属イオン封鎖剤と一緒に、銅、鉄、チタン、ルテニウム、タングステン、モリブデンもしくはマンガンカチオン）を含んでいてよい。
【０２０１】
本明細書に開示した組成物は、食器用洗剤組成物の形態にあってよい。食器用洗剤の例には、自動食器洗い機用洗剤（典型的には、食器洗い機で使用される）および手洗い食器用洗剤が含まれる。食器洗い機用洗剤組成物は、例えば、本明細書に開示した任意の乾燥もしくは液体／水性形にあってよい。食器用洗剤の所定の実施形態に含むことのできる成分には、例えば、リン酸塩；酸素系もしくは塩素系漂白剤；非イオン性界面活性剤；アルカリ塩（例えば、メタケイ酸塩；アルカリ金属水酸化物、炭酸ナトリウム）；本明細書に開示した任意の活性酵素；防錆剤（例えば、ケイ酸ナトリウム）；消泡剤；陶磁器からの艶や文様の除去を緩徐化するための添加物；香料；凝固防止剤（顆粒状洗剤中）；デンプン（錠剤ベースの洗剤中）；ゲル化剤（液体／ジェルベースの洗剤中）；および／または砂（粉末状洗剤）の内の１つ以上が含まれる。
【０２０２】
例えば自動食器洗い機用洗剤もしくは液体食器用洗剤などの食器用洗剤は、（ｉ）０〜１０重量％の範囲内の量で存在する任意のエトキシル化非イオン性界面活性剤、アルコキシル化アルコール界面活性剤、エポキシキャップされたポリ（オキシアルキル化）アルコールもしくはアミンオキシド界面活性剤を含む非イオン性界面活性剤；（ｉｉ）酸化デキストランおよび任意のリン酸塩ビルダー（例えば、一リン酸塩、二リン酸塩、トリポリリン酸塩、他のオリゴマーポリリン酸塩、トリポリリン酸ナトリウム−ＳＴＰＰ）、任意の無リンビルダー（例えば、メチル−グリシン二酢酸［ＭＧＤＡ］およびそれらの塩もしくは誘導体、グルタミン酸−Ｎ，Ｎ−二酢酸［ＧＬＤＡ］およびそれらの塩もしくは誘導体、イミノジコハク酸（ＩＤＳ）およびそれらの塩もしくは誘導体、カルボキシメチルイヌリンおよびそれらの塩もしくは誘導体、ニトリロ三酢酸［ＮＴＡ］、ジエチレントリアミン五酢酸［ＤＴＰＡ］、Ｂ−アラニン二酢酸［Ｂ−ＡＤＡ］およびそれらの塩を含むアミノ酸ベースの化合物）、ポリカルボン酸およびそれらの部分もしくは完全中和塩のホモポリマーおよびコポリマー、０．５重量％〜５０重量％の範囲内のモノマーポリカルボン酸およびヒドロキシカルボン酸およびそれらの塩または０．１重量％〜約５０重量％の範囲内のスルホン化／カルボキシル化ポリマーを含む約５〜６０重量％の範囲内のビルダー；（ｉｉｉ）０．１重量％〜約１０重量％の範囲内の乾燥助剤（例えば、任意選択的にまた別の３〜６つの官能基  −  典型的には重縮合を誘導する酸、アルコールもしくはエステル官能基を備えるモノマーと一緒にポリエステル、特にアニオン性ポリエステル、特に反応性環状炭酸塩およびウレアタイプのポリカーボネート−、ポリウレタン−および／またはポリウレア−ポリオルガノシロキサン化合物もしくはそれらの前駆体化合物）；（ｉｖ）約１重量％〜約２０重量％の範囲内のケイ酸塩（例えば、ケイ酸ナトリウムもしくはカリウム、例えば二ケイ酸ナトリウム、メタケイ酸ナトリウムおよび結晶性フィロケイ酸塩）；（ｖ）無機漂白剤（例えば、過ホウ酸塩、過炭酸塩、過リン酸塩、過硫酸塩および過ケイ酸塩などのペルハイドレート塩）および／または有機漂白剤（例えば、ジアシル−およびテトラアシルペルオキシド、特にジペルオキシドデカン二酸およびジペルオキシヘキサデカン二酸などの有機ペルオキシ酸）；（ｖｉ）漂白活性化剤（例えば、０．１重量％〜約１０重量％の範囲内の有機過酸前駆体）および／または漂白触媒（例えば、マンガントリアザシクロノナンおよび関連錯体；Ｃｏ、Ｃｕ、ＭｎおよびＦｅビスピリジルアミンおよび関連錯体；およびペンタミンコバルト（ＩＩＩ）酢酸塩および関連錯体）；（ｖｉｉ）約０．１重量％〜５重量％の範囲内の金属ケア剤（例えば、ベンザトリアゾール、金属塩および錯体および／またはケイ酸塩）；および／または（ｖｉｉｉ）自動食器洗い機用洗剤組成物１グラム当たり約０．０１〜５．０ｍｇの範囲内の活性酵素を含む本明細書に開示した任意の活性酵素ならびに酵素安定化剤成分（例えば、オリゴ糖、多糖および無機二価金属塩）を含むことができる。
【０２０３】
極めて多数の市販で入手できる洗剤調製物は、本明細書に開示した酸化デキストラン化合物を含むために適応させることができると考えられる。例には、ＰＵＲＥＸ（登録商標）ＵＬＴＲＡＰＡＣＫＳ（Ｈｅｎｋｅｌ）、ＦＩＮＩＳＨ（登録商標）ＱＵＡＮＴＵＭ（Ｒｅｃｋｉｔｔ  Ｂｅｎｃｋｉｓｅｒ）、ＣＬＯＲＯＸ（商標）２  ＰＡＣＫＳ（Ｃｌｏｒｏｘ）、ＯＸＩＣＬＥＡＮ  ＭＡＸ  ＦＯＲＣＥ  ＰＯＷＥＲ  ＰＡＫＳ（Ｃｈｕｒｃｈ  ＆  Ｄｗｉｇｈｔ）、ＴＩＤＥ（登録商標）ＳＴＡＩＮ  ＲＥＬＥＡＳＥ、ＣＡＳＣＡＤＥ（登録商標）ＡＣＴＩＯＮＰＡＣＳおよびＴＩＤＥ（登録商標）ＰＯＤＳ（商標）（Ｐｒｏｃｔｅｒ  ＆  Ｇａｍｂｌｅ）が含まれる。
【０２０４】
本明細書に開示した組成物は、例えば、口腔ケア組成物の形態にあってよい。口腔ケア組成物の例には、何らかの形態の口腔ケア（例えば、虫歯［う食］、歯肉炎、歯垢、歯石および／または歯周疾患の治療または予防）を提供する歯磨き剤、練り歯磨き、洗口液、口内洗浄剤、チューインガム、可食ストリップおよび歯磨きクリーム／ジェルが含まれる。口腔ケア組成物はさらに、舌の表面、硬口蓋および軟口蓋、頬粘膜、歯茎および歯の表面を含む口腔内のあらゆる軟質もしくは硬質表面を含む「口腔面」を治療するためであってもよい。本明細書の「歯の表面」は、例えば、天然歯の表面または歯冠、キャップ、充填物、ブリッジ、義歯もしくは歯科インプラントを含む人工歯列の硬質表面である。
【０２０５】
本明細書の口腔ケア組成物は、例えば、約０．０１〜１５．０重量％（例えば、約０．１〜１０重量％もしくは約０．１〜５．０重量％、約０．１〜２．０重量％）の本明細書に開示した１つ以上の酸化デキストラン化合物を含むことができる。口腔ケア組成物中に含まれる１つ以上の酸化デキストラン化合物は、時には、その中で組成物に所望の稠度および／または口当たりを付与するために有用な可能性がある増粘剤および／または分散剤として用意することができる。本明細書の口腔ケア組成物中には、例えばカルボキシビニルポリマー、カラゲナン（例えば、Ｌ−カラゲナン）、天然ゴム（例えば、カラヤゴム、キサンタンゴム、アラビアゴム、トラガントゴム）、コロイド状ケイ酸アルミニウムマグネシウムもしくはコロイド状シリカなどの１つ以上の他の増粘剤もしくは分散剤もまた用意することができる。一部の実施形態では、酸化デキストランは、ビルダーとして含めることができる。
【０２０６】
本明細書の口腔ケア組成物は、例えば、練り歯磨きもしくは他の歯磨き剤であってよい。本明細書のそのような組成物ならびに任意の他の口腔ケア組成物は、追加して、制限なく、う食予防薬、抗微生物剤もしくは抗菌剤、抗結石剤もしくは歯石防止剤、界面活性剤、研磨剤、ｐＨ修飾剤、発泡調節剤、保湿剤、フレーバラント、甘味料、顔料／着色剤、ホワイトニング剤および／または他の好適な成分の内の１つ以上を含むことができる。１つ以上の酸化デキストラン化合物を加えることのできる口腔ケア組成物の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２００６／０１３４０２５号明細書、同第２００２／００２２００６号明細書および同第２００８／００５７００７号明細書に開示されている。
【０２０７】
本明細書のう食予防薬は、経口的に許容できるフッ化物イオンの起源であってよい。フッ化物イオンの好適な起源には、例えば、フッ化物、モノフルオロリン酸塩およびフルオロケイ酸塩ならびにオラフルール（Ｎ’−オクタデシルトリメチレンジアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’−ｔｒｉｓ（２−エタノール）−ジヒドロフルオリド）を含むアミンフッ化物が含まれる。う食予防薬は、例えば、組成物に総計約１００〜２０，０００ｐｐｍ、約２００〜５，０００ｐｐｍもしくは約５００〜２，５００ｐｐｍのフッ化物イオンを提供する量で存在することができる。その中でフッ化ナトリウムがフッ化物イオンの唯一の起源である口腔ケア組成物中では、約０．０１〜５．０重量％、約０．０５〜１．０重量％もしくは約０．１〜０．５重量％のフッ化ナトリウムが組成物中に存在することができる。
【０２０８】
本明細書の口腔ケア組成物に使用するために好適な抗微生物剤もしくは抗菌剤には、例えば、フェノール化合物（例えば、４−アリルカテコール；ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル、例えばベンジルパラベン、ブチルパラベン、エチルパラベン、メチルパラベンおよびプロピルパラベン；２−ベンジルフェノール；ブチル化ヒドロキシアニソール；ブチル化ヒドロキシトルエン；カプサイシン；カルバクロール；クレゾール；オイゲノール；グアイアコール；ハロゲン化ビスフェノール系、例えば、ヘキサクロロフェンおよびブロモクロロフェン；４−ヘキシルレゾルシノール；８−ヒドロキシキノリンおよびそれらの塩；サリチル酸エステル、例えば、サリチル酸メンチル、サリチル酸メチルおよびサリチル酸フェニル；フェノール；ピロカテコール；サリチルアニリド；チモール；ハロゲン化ジフェニルエーテル化合物、例えば、トリクロサンおよびトリクロサン一リン酸）、銅（ＩＩ）化合物（例えば、塩化銅（ＩＩ）、フッ化銅（ＩＩ）、硫酸銅（ＩＩ）および水酸化銅（ＩＩ））、亜鉛イオン源（例えば、酢酸亜鉛、クエン酸亜鉛、グルコン酸亜鉛、グリシン酸亜鉛、酸化亜鉛および硫酸亜鉛）、フタル酸およびそれらの塩（例えば、フタル酸マグネシウム一カリウム）、ヘキセチジン、オクテニジン、サンギナリン、塩化ベンズアルコニウム、臭化ドミフェン、塩化アルキルピリジニウム（例えば、塩化セチルピリジニウム、塩化テトラデシルピリジウム、Ｎ−テトラデシル−４−エチルピリジウムクロリド）、ヨウ素、スルホンアミド、ビスビグアニド（例えば、アレキシジン、クロルヘキシジン、ジグルコン酸クロルヘキシジン）、ピペリジノ誘導体（例えば、デルモピノール、オクタピノール）、マグノリア抽出物、グレープシード抽出物、ローズマリー抽出物、メントール、ゲラニオール、シトラール、オイカプリトール、抗生物質（例えば、オウグメンチン、アモキシリン、テトラサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、メトロニダゾール、ネオマイシン、カナマイシン、クリンダマイシン）および／または参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５７７６４３５号明細書に開示された任意の抗菌剤が含まれる。１つ以上の抗微生物剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中に例えば、約０．０１〜１０重量％（例えば、０．１〜３重量％）で存在することができる。
【０２０９】
本明細書の口腔ケア組成物に使用するために好適な抗結石剤もしくは歯石防止剤には、例えば、リン酸塩およびポリリン酸塩（例えば、ピロリン酸塩）、ポリアミノプロパンスルホン酸（ＡＭＰＳ）、クエン酸亜鉛三水和物、ポリペプチド（例えば、ポリアスパラギン酸およびポリグルタミン酸）、ポリオレフィンスルホネート、ポリオレフィンホスフェート、ジホスホネート（例えば、アザシクロアルカン−２，２−ジホスホネート、例えばアザシクロヘプタン−２，２−ジホスホン酸）、Ｎ−メチルアザシクロペンタン−２，３−ジホスホン酸、エタン−１−ヒドロキシ−１，１−ジホスホン酸（ＥＨＤＰ）、エタン−１−アミノ−１，１−ジホスホネートおよび／またはホスホノアルカンカルボン酸およびそれらの塩（例えば、それらのアルカリ金属塩およびアンモニウム塩）が含まれる。有用な無機リン酸塩およびポリリン酸塩には、例えば、一塩基性、二塩基性および三塩基性リン酸ナトリウム、トリポリリン酸ナトリウム、テトラポリリン酸、モノ−、ジ−、トリ−およびテトラ−ナトリウムピロリン酸、ピロリン酸二水素二ナトリウム、トリメタリン酸ナトリウム、ヘキサメタリン酸ナトリウムまたはそのナトリウムがカリウムもしくはアンモニウムで置換されているこれらのいずれかが含まれる。所定の実施形態における他の有用な抗結石剤には、アニオン性ポリカルボキシレートポリマー（例えば、アクリル酸、メタクリル酸およびマレイン酸無水物のポリマーもしくはコポリマー、例えばポリビニルメチルエーテル／マレイン酸無水物コポリマー）が含まれる。さらに他の有用な抗結石剤には、金属イオン封鎖剤、例えばヒドロキシカルボン酸（例えば、クエン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸およびシュウ酸ならびにそれらの塩）およびアミノポリカルボン酸（例えば、ＥＤＴＡ）が含まれる。１つ以上の抗結石剤もしくは歯石防止剤は、任意選択的に、本明細書に口腔ケア組成物中で、例えば、約０．０１〜５０重量％（例えば、約０．０５〜２５重量％もしくは約０．１〜１５重量％）で存在してよい。
【０２１０】
本明細書の口腔ケア組成物において使用するために好適な界面活性剤は、例えば、アニオン性、非イオン性もしくは両性であってよい。好適なアニオン性界面活性剤には、制限なく、Ｃ８〜２０アルキル硫酸塩、Ｃ８〜２０脂肪酸のスルホン化モノグリセリド、サルコシン酸塩およびタウリン酸塩の水溶性塩が含まれる。アニオン性界面活性剤の例には、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホン酸ココナッツモノグリセリドナトリウム、ラウリルサルコシン酸ナトリウム、ラウリルイソエチオン酸ナトリウム、ラウレスカルボン酸ナトリウムおよびドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウムが含まれる。好適な非イオン性界面活性剤の例には、制限なく、ポロキサマー、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、脂肪アルコールエトキシレート、アルキルフェノールエトキシレート、第３級アミン酸化物、第３級ホスフィン酸化物およびジアルキルスルホキシドが含まれる。好適な両性界面活性剤には、制限なく、アミノ基を有するＣ８〜２０脂肪族第２級および第３級アミンの誘導体、例えば、カルボン酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、リン酸塩もしくはホスホン酸塩が含まれる。好適な両性界面活性剤の１つの例は、ココアミドプロピルベタインである。１つ以上の界面活性剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、
約０．０１〜１０重量％（例えば、約０．０５〜５．０重量％もしくは約０．１〜２．０重量％）の総量で存在する。
【０２１１】
本明細書の口腔ケア組成物に使用するために好適な研磨剤は、例えば、シリカ（例えば、シリカゲル、ケイ酸、沈降シリカ）、アルミナ、不溶性リン酸塩、炭酸カルシウムおよび樹脂製研磨剤（例えば、ウレアホルムアルデヒド縮合生成物）を含んでいてよい。本明細書の研磨剤として有用な不溶性リン酸塩の例は、オルトリン酸塩、ポリメタリン酸塩およびピロリン酸塩であり、オルトリン酸二カルシウム二水和物、ピロリン酸カルシウム、β−カルシウムピロリン酸塩、リン酸三カルシウム、ポリメタリン酸カルシウムおよび不溶性ポリメタリン酸ナトリウムが含まれる。１つ以上の研磨剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中で、例えば、約５〜７０重量％（例えば、約１０〜５６重量％もしくは約１５〜３０重量％）の総量で存在する。所定の実施形態における研磨剤の平均粒径は、約０．１〜３０ミクロン（例えば、約１〜２０ミクロンもしくは約５〜１５ミクロン）である。
【０２１２】
所定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つのｐＨ修飾剤を含んでいてよい。そのような作用物質は、組成物のｐＨを約２〜１０（例えば、約２〜８、３〜９、４〜８、５〜７、６〜１０もしくは７〜９）のｐＨ範囲へ酸性化するため、より塩基性にするため、または緩衝するために選択できる。本明細書で有用なｐＨ修飾剤の例には、制限なく、カルボン酸、リン酸およびスルホン酸；酸性塩（例えば、クエン酸一ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、マレイン酸一ナトリウム）；アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化ナトリウム、炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウム、重炭酸塩、セスキ炭酸塩）；ホウ酸塩；ケイ酸塩；リン酸塩（例えば、リン酸一ナトリウム、リン酸三ナトリウム、ピロリン酸塩）；およびイミダゾールが含まれる。
【０２１３】
本明細書の口腔ケア組成物に使用するために好適な発泡調節剤は、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であってよい。約２００，０００〜７，０００，０００（例えば、約５００，０００〜５，０００，０００もしくは約１，０００，０００〜２，５００，０００）の平均分子量を有するＰＥＧを含む高分子量ＰＥＧは好適である。１つ以上のＰＥＧは、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中に、例えば、約０．１〜１０重量％（例えば、約０．２〜５．０重量％もしくは約０．２５〜２．０重量％）の総量で存在する。
【０２１４】
所定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つの保湿剤を含んでいてよい。所定の実施形態における保湿剤は、多価アルコール、例えば、グリセリン、ソルビトール、キシリトールまたは低分子量ＰＥＧであってよい。最も好適な保湿剤は、さらにまた本明細書の甘味料として機能することができる。１つ以上の保湿剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中に、例えば、約１．０〜７０重量％（例えば、約１．０〜５０重量％、約２〜２５重量％もしくは約５〜１５重量％）の総量で存在する。
【０２１５】
天然もしくは人工甘味料は、本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含んでいてよい。好適な甘味料の例には、デキストロース、スクロース、マルトース、デキストリン、転化糖、マンノース、キシロース、リボース、フルクトース、レブロース、ガラクトース、コーンシロップ（例えば、高果糖コーンシロップもしくはコーンシロップ固体）、部分加水分解デンプン、加水分解デンプン加水分解物、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルチトール、イソマルト、アスパルテーム、ネオテーム、サッカリンおよびそれらの塩、ジペプチドをベースとする強力甘味料およびシクラミン酸塩が含まれる。１つ以上の甘味料は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中に、例えば、約０．００５〜５．０重量％の総量で存在する。
【０２１６】
天然もしくは人工フレーバラントは、本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含まれてよい。好適なフレーバラントの例には、バニリン；セージ；マヨラマ；オランダセリ油；スペアミント油；シナモン油；ウィンターグリーン油（サリチル酸メチル）；ペパーミント油；チョウジ油；ベイ油；アニス油；ユーカリ油；カンキツ油；果実油；精油、例えば、レモン、オレンジ、ライム、グレープフルーツ、アプリコット、バナナ、グレープ、リンゴ、ストロベリー、チェリーもしくはパイナップル由来の精油；マメもしくはナッツ由来のフレーバー、例えば、コーヒー、ココア、コーラ、ピーナッツもしくはアーモンド；ならびに吸着およびカプセル封入フレーバラントが含まれる。本明細書のフレーバラントにさらに含まれるのは、口腔内に芳香および／または冷却もしくは加温効果を含む他の感覚効果を提供する成分である。そのような成分には、制限なく、メントール、酢酸メンチル、乳酸メンチル、ショウノウ、ユーカリ油、オイカプリトール、アネトール、オイゲノール、カッシア、オキサノン、Ｉｒｉｓｏｎｅ（登録商標）、プロペニルグアイエトール、チモール、リナロール、ベンズアルデヒド、シンナムアルデヒド、Ｎ−エチル−ｐ−メンタン−３−カルボキサミド、Ｎ，２，３−トリメチル−２−イソプロピルブタンアミド、３−（１−メントキシ）−プロパン−１，２−ジオール、シンナムアルデヒドグリセロールアセタール（ＣＧＡ）およびメトングリセロールアセタール（ＭＧＡ）が含まれる。１つ以上のフレーバラントは、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中に、例えば、約０．０１〜５．０重量％（例えば、約０．１〜２．５重量％）の総量で存在する。
【０２１７】
所定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つの重炭酸塩を含んでいてよい。アルカリ金属重炭酸塩、例えば、重炭酸ナトリウムもしくはカリウムおよび重炭酸アンモニウムなどを含む任意の経口的に許容される重炭酸塩を使用できる。１つ以上の重炭酸塩は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中に、例えば、約０．１〜５０重量％（例えば、約１〜２０重量％）の総量で存在する。
【０２１８】
所定の実施形態における口腔ケア組成物は、少なくとも１つのホワイトニング剤を含んでいてよい。好適なホワイトニング剤は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第８５４０９７１号明細書に開示されたいずれかなどのペルオキシド化合物である。本明細書の好適な着色剤には、顔料、染料、レーキおよび例えばパール化剤などの特定の光沢もしくは反射性を付与する作用物質が含まれる。本明細書で有用な着色剤の特定の例には、タルク；マイカ；炭酸マグネシウム；炭酸カルシウム；ケイ酸マグネシウム；ケイ酸アルミニウムマグネシウム；シリカ；二酸化チタン；酸化亜鉛；赤色、黄色、褐色および黒色酸化鉄；フェロシアン化鉄ナトリウム；マンガンバイオレット；ウルトラマリン；チタン化マイカ；およびオキシ塩化ビスマスが含まれる。１つ以上の着色剤は、任意選択的に、本明細書に開示した口腔ケア組成物中に、例えば、約０．００１〜２０重量％（例えば、約０．０１〜１０重量％もしくは約０．１〜５．０重量％）の総量で存在する。
【０２１９】
本明細書の口腔ケア組成物中に任意選択的に含めることのできる追加の成分には、例えば、１つ以上の（上記の）酵素、ビタミン類および抗接着剤を含むことができる。本明細書で有用なビタミン類の例には、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＢ５および葉酸が含まれる。好適な抗接着剤の例には、ソルブロール、フィシンおよびクオラムセンシング阻害剤が含まれる。
【０２２０】
本開示はさらに、増加したビルダーおよび／または再付着防止能力を有する水性組成物を調製する方法に関する。本方法は、本明細書に開示した少なくとも１つの酸化デキストラン化合物を水性組成物と接触させる工程であって、水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力が酸化デキストラン化合物によって、接触させる工程の前に存在していた水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力に比較して増加する工程を含む。再付着防止能力の増加は、一部の実施形態では、さらに粘土除去能力の増加を指す。
【０２２１】
本方法における水性組成物は、本明細書に開示した任意の水性組成物、例えば、家庭用製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品または食品であってよい。好適な家庭用製品の例には、織物ケア製品、例えば洗濯用洗剤および織物柔軟剤および食器用洗剤が含まれる。好適なパーソナルケア製品品目の例には、ヘアケア製品（例えば、シャンプー、コンディショナー）、歯磨き組成物（例えば、練り歯磨き、マウスウォッシュ）およびスキンケア製品（例えば、ハンドソープもしくはボディソープ、ローション、化粧品）が含まれる。
【０２２２】
一部の実施形態では、本方法における水性組成物は、洗剤および／または界面活性剤組成物である。本明細書のそのような組成物は、例えば本開示のいずれかなどの少なくとも１つの洗剤／界面活性剤成分を、例えば、約０．０１〜１０重量％（例えば、約０．０５〜５．０重量％もしくは約０．１〜２．０重量％）で含むことができる。当業者であれば、例えば所定の家庭用製品（例えば、洗濯用洗剤、食器用洗剤）およびパーソナルケア製品（例えば、ハンド／ボディソープ、歯磨き剤）、特に洗浄用途において使用される製品などの洗剤／界面活性剤を含む組成物の例を構成する本明細書に開示した様々な製品の全てを認識できるであろう。
【０２２３】
水性組成物を本明細書の１つ以上の酸化デキストラン化合物と接触させる工程は、水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力を増加させることができる。この増加は、接触させる工程の前の水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力と比較して、例えば、少なくとも約１％、５％、１０％、２５％、５０％、１００％、５００％もしくは１，０００％（または１％〜１，０００％の間の任意の整数）の増加であってよい。ビルダーおよび／または再付着防止能力の増加は、例えば、本方法によって（すなわち、接触させる工程の後に）得られた水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力を本方法の前（すなわち、接触させる工程の前）に存在していた水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力と比較することによって決定できる。または、酸化デキストランと接触させられないが、他の点では試験組成物と同一内容物を含有するコントロール水性組成物を使用することができる。
【０２２４】
本明細書に開示した主題を使用して達成される再付着防止能力／粘土除去能力の程度は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第４５９７８９８号明細書の開示にしたがって測定できる。例えば、再付着防止の比較は、７グレインの硬水および９５°Ｆの温度を使用する５ポットの自動小型洗濯機（ＡＭＷ）中で実施することができる。試験見本を１０分間洗浄し、２分間にわたり７５°Ｆの水（７グレインの硬水）を用いて２回すすぎ洗う。ＡＭＷポットにはそれぞれ６Ｌの水を充填し、その後に試験対象の洗剤組成物（コントロールまたはさらに酸化デキストラン［例えば、２０ｐｐｍ］を含有する）を加え、２分間にわたり撹拌する。バックグラウンドの汚れ混合物（２００ｐｐｍの人工的な身体の汚れ、１００ｐｐｍの電気掃除機のごみおよび２００ｐｐｍの粘土質汚れ）を次に加え、さらに３分間撹拌する。次に３片の５インチ四方の試験見本（ポリエステル５０％／綿５０％のＴシャツ材料）を２片の綿８０％／ポリエステル２０％製タオル地および２片のポリエステル１００％のメリヤス生地の１１インチ四方の材料見本と一緒に加える。この時点に、１０分間の洗浄サイクルを開始する。すすぎサイクルの後に、試験見本をミニ乾燥機内で乾燥させる。次にガードナー白色度測定計示度（Ｌ、ａおよびｂ）を３片の試験見本について決定する。次に、再付着防止性能（ＡＲＤ）は次の方程式：ＡＲＤ＝（７（Ｌ２）−４０（Ｌ）（ｂ））／７００にしたがって計算する。３片の試験見本についてのＡＲＤ値の平均値を出す。酸化デキストランを含有する洗剤組成物の再付着防止性能の改良は、コントロール組成物に比較したＡＲＤ値における差として測定される。再付着防止の程度を決定するまた別の例として、そのような再付着防止の程度は、一部には、下記の実施例（吸着試験）の項に開示した手法にしたがって計測することができる。
【０２２５】
本明細書に開示した主題を使用して達成される増加したビルダー能力の程度は、下記の任意の数の方法にしたがって測定できる。例えば、酸化デキストラン化合物によって達成される増加したビルダー能力は、それに化合物が水性組成物にアルカリ性を供給する、またはアルカリ性を維持するために水性組成物を緩衝する程度を決定することによって推定できる。また別の例として、酸化デキストラン化合物によって達成される増加したビルダー能力は、その化合物が水性組成物中の高度を低下させる（酸化デキストランが硬水カチオンを封鎖もしくはキレート化することによってこの特徴を達成できると考えられる）および／または懸濁液中の汚れを除去するために役立つ（この特徴は、典型的には織物ケア組成物に当てはまる）程度を決定することによって推定できる。また別の例として、増加したビルダー能力は、下記の実施例に開示した方法（カルシウム分散能力）にしたがって決定することができる。
【０２２６】
水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力を増加させるための方法における接触させる工程は、当分野において公知の任意の手段によって水性組成物中で本明細書に開示したいずれかの酸化デキストラン化合物を混合もしくは溶解させることによって実施できる。例えば、混合もしくは溶解させる工程は、手動で、または機械（例えば、工業用ミキサーもしくはブレンダー、オービタルシェーカー、撹拌板、ホモジナイザー、超音波処理器、ビーズミル）を用いて実施できる。混合もしくは溶解させる工程は、所定の実施形態では、ホモジナイゼーション工程を含むことができる。ホモジナイゼーション（ならびに任意の他のタイプの混合する工程）は、酸化デキストランを水性組成物と混合する必要に応じて、約５〜６０、５〜３０、１０〜６０、１０〜３０、５〜１５もしくは１０〜１５秒間（または５〜６０秒間の間の任意の整数）以上の時間にわたって実施することができる。ホモジナイザーは、例えば、約５，０００〜３０，０００ｒｐｍ、１０，０００〜３０，０００ｒｐｍ、１５，０００〜３０，０００ｒｐｍ、１５，０００〜２５，０００ｒｐｍもしくは２０，０００ｒｐｍ（または５，０００〜３０，０００ｒｐｍの間の任意の整数）で使用することができる。
【０２２７】
本明細書の酸化デキストラン化合物を水性組成物と混合または水性組成物中に溶解させた後、生じた水性組成物は濾過されてもよい、または濾過されなくてもよい。例えば、ホモジナイゼーション工程を用いて調製した水性組成物は、濾過されても濾過されなくてもよい。
【０２２８】
酸化デキストランを含む水性組成物の成分が水性組成物を形成するために一緒にされる順序は、重要ではないと思われる。例えば、酸化デキストランは、１つ以上の他の成分が添加されるのと同時に１つの成分として加えることができる。したがって、酸化デキストランを水性組成物と接触させる工程の特徴は、酸化デキストランが最終またはほぼ最終調製水性組成物に加えられる実施形態だけに関することは意図されていない。
【０２２９】
本開示は、さらに材料を処理する方法に関する。本方法は、１つの材料を本明細書に開示した少なくとも１つの酸化デキストラン化合物を含む水性組成物と接触させる工程を含む。
【０２３０】
本明細書の接触させる方法において水性組成物と接触させられる材料は、所定の実施形態では、織物を含むことができる。本明細書の織物は、天然繊維、合成繊維、半合成繊維またはそれらの任意の組み合わせを含むことができる。本明細書の半合成繊維は、化学的に誘導体化されている天然型材料を使用して生成されるが、その１つの例はレーヨンである。本明細書の織物タイプの非限定的例には、（ｉ）セルロース繊維、例えば綿（例えば、ブロードクロス、キャンバス、シャンブレー、シェニール、チンツ、コーデュロイ、クレトン、ダマスク、デニム、フランネル、ギンガム、ジャガード、ニット、マテラーゼ、オックスフォード、パーケール、ポプリン、プリッス、サテン、シャーサッカー、シアー、テリークロス、ツイル、ベルベット）、レーヨン（例えば、ビスコース、モーダル、リオセル）、リネンおよびＴｅｎｃｅｌ（登録商標）；（ｉｉ）タンパク質性繊維、例えばシルク、ウールおよび関連哺乳動物繊維；（ｉｉｉ）合成繊維、例えばポリエステル、アクリル、ナイロンなど；（ｉｖ）ジュート、亜麻、ラミー、コイア、カポック、サイザル、ヘネケ、アバカ、ヘンプおよびサンヘンプ由来の植物性長繊維；ならびに（ｖ）（ｉ）〜（ｉｖ）の織物の任意の組み合わせから製造された織物が含まれる。織物タイプ（例えば、天然および合成）の組み合わせを含む織物には、例えば、綿繊維およびポリエステルの両方を備える織物が含まれる。本明細書の１つ以上の織物を含有する材料／製品には、例えば、衣類、カーテン、厚手のカーテン、掛け布、カーペット、ベッド用リネン、バス用リネン、テーブルクロス、スリーピングバッグ、テント、車の内装材などが含まれる。天然および／または合成繊維を含む他の材料には、例えば、不織布、詰め物、紙および発泡体が含まれる。
【０２３１】
織物と接触させられる水性組成物は、例えば、織物ケア組成物（例えば、洗濯用洗剤、織物柔軟剤）であってよい。したがって、所定の実施形態における処理方法は、その中で織物ケア組成物を使用する場合は織物ケア法もしくは洗濯法であると見なすことができる。本明細書の織物ケア組成物は、下記の織物ケアの利点（すなわち、表面直接効果）：しわ除去、しわ取り、防しわ性、織物摩耗減少、織物耐摩耗性、織物のけば立ち減少、織物の寿命延長、織物のカラー維持、織物の退色減少、染料移動の減少、織物の色復元、織物の汚れ減少、織物の防汚、織物の形状保持、織物の平滑性増強、織物上への汚れ再付着防止、洗濯物の灰色化防止、織物の風合／手触りの向上および／または縮み減少のうちの１つ以上を達成することが企図されている。
【０２３２】
本明細書の織物ケア法もしくは洗濯法を実施するための条件（例えば、時間、温度、洗浄／すすぎ量）の例は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第１９９７／００３１６１号パンフレットおよび米国特許第４７９４６６１号明細書、同第４５８０４２１号明細書および同第５９４５３９４号明細書に開示されている。他の例では、織物を含む材料は、本明細書の水性組成物と：（ｉ）少なくとも約５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０もしくは１２０分間にわたり；（ｉｉ）少なくとも約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０もしくは９５℃（例えば、洗濯洗浄もしくはすすぎのためには；約１５〜３０℃の「低」温、約３０〜５０℃の「中」温、約５０〜９５℃の「高」温）で；（ｉｉｉ）約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１もしくは１２のｐＨ（例えば、約２〜１２もしくは約３〜１１のｐＨ範囲）で；（ｉｖ）少なくとも約０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５もしくは４．０重量％の塩（例えば、ＮａＣｌ）濃度で；または（ｉ）〜（ｉｖ）の任意の組み合わせで接触させることができる。
【０２３３】
織物ケア法もしくは洗濯法における接触させる工程は、例えば、洗浄工程、浸漬工程および／またはすすぎ洗い工程のいずれかを含むことができる。さらにまた別の実施形態における材料もしくは織物を接触させる工程は、例えば、有効量の本明細書の酸化デキストラン化合物を織物もしくは材料と、当技術分野において公知の任意の手段、溶解する、混合する、振とうする、スプレーする、処理する、浸漬する、フラッシュ洗浄する、上もしくは中に注入する、結合する、塗装する、コーティングする、塗布する、添加する、および／または連絡させる工程によって実施できる。さらにまた別の実施形態では、接触させる工程は、表面直接効果を提供するために織物を処理するために使用できる。本明細書で使用する用語「織物の風合」もしくは「手触り」は、物理的、生理学的、心理学的、社会的またはそれらの任意の組み合わせであってよい織物に対する個人の触覚感覚反応を意味する。１つの実施形態では、織物風合は、相対風合値を測定するためのＰｈａｂｒＯｍｅｔｅｒ（登録商標）システム（Ｎｕ  Ｃｙｂｅｒｔｅｋ，Ｉｎｃ．Ｄａｖｉｓ，ＣＡから入手できる）を使用して測定されてよい（米国繊維化学者・色彩技術者協会（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｅｘｔｉｌｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｏｒｉｓｔｓ：ＡＡＴＣＣ）（ＡＡＴＣＣ  ｔｅｓｔ  ｍｅｔｈｏｄ，“２０２−２０１２，Ｒｅｌａｔｉｖｅ  Ｈａｎｄ  Ｖａｌｕｅ  ｏｆ  Ｔｅｘｔｉｌｅｓ：Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｔｈｏｄ”））。
【０２３４】
織物を含む材料を処理する所定の実施形態では、水性組成物の酸化デキストラン化合物成分は、織物に吸着する。この特徴は、本明細書の酸化デキストラン化合物を本明細書に開示した織物ケア組成物中の（それらの汚れ分散効果に加えて）再付着防止剤および／または灰色化防止剤として有用にさせると考えられる。本明細書の再付着防止剤もしくは灰色化防止剤は、汚れが取り除かれた後に洗浄水中の衣類に汚れが再付着しないようにするのに役立つ。さらに、本明細書の１つ以上の酸化デキストラン化合物の織物への吸着は、その織物の機械的特性を強化することも企図されている。
【０２３５】
本明細書の織物への酸化デキストラン化合物の吸着は、比色定量技術（例えば、どちらも参照により本明細書に組み込まれるＤｕｂｏｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９５６，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．２８：３５０−３５６；Ｚｅｍｌｊｉｃ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｌｅｎｚｉｎｇｅｒ  Ｂｅｒｉｃｈｔｅ  ８５：６８−７６）または当分野において公知の任意の他の方法を使用して測定できる。
【０２３６】
上記の処理方法において接触させることのできる他の材料には、食器用洗剤（例えば、自動食器洗い機用洗剤もしくは手洗い食器用洗剤）を用いて処理できる表面が含まれる。そのような材料の例には、陶磁器材料、陶器、金属、ガラス、プラスチック（例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレンなど）および木材から製造された食器、眼鏡、ポット、鍋、グラタン皿、調理器具および平皿類（本明細書では集合的に「食卓用食器」と呼ぶ）の表面が含まれる。したがって、所定の実施形態における処理方法は、例えば、食器洗浄法もしくは食卓用食器洗浄法であると見なすことができる。本明細書の食器洗浄法もしくは食卓用食器洗浄法を実施するための条件（例えば、時間、温度、洗浄量）の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第８５７５０８３号明細書に開示されている。他の例では、食卓用食器製品は、本明細書の水性組成物と、例えば織物を含む材料と接触させることに関して上記に開示した条件のいずれかなどの好適な一連の条件下で接触させることができる。
【０２３７】
上記の処理方法において接触させることができる他の材料には、口腔表面、例えば舌、硬口蓋および軟口蓋、頬粘膜、歯肉および歯の表面（例えば、天然歯もしくは歯冠、キャップ、充填物、ブリッジ、義歯もしくは歯科インプラントなどの義歯の硬質表面）を含む口腔内の任意の軟質もしくは硬質表面などの口腔表面が含まれる。したがって、所定の実施形態における処理方法は、例えば、口腔ケア法もしくは歯科ケア法であると見なすことができる。口腔表面を本明細書の水性組成物と接触させるための条件（例えば、時間、温度）は、そのような接触を行う意図された目的のために好適なはずである。処理方法において接触させることのできる他の表面には、さらに、例えば皮膚、毛髪もしくは爪などの外皮系の表面が含まれる。
【０２３８】
したがって、本開示の所定の実施形態は、本明細書の酸化デキストラン化合物を含む材料（例えば、織物）に関する。そのような材料は、例えば、本明細書に開示した材料処理方法にしたがって生成することができる。材料は、その化合物が材料の表面に吸着される、さもなければ接触させられる場合には、所定の実施形態では酸化デキストラン化合物を含んでいてよい。
【０２３９】
本明細書の材料を処理する方法の所定の実施形態は、さらに、材料が水性組成物と接触させられた後に乾燥させられる乾燥させる工程を含んでいる。乾燥させる工程は、接触させる工程の直後に、または接触させる工程に続く可能性がある１つ以上の追加の工程（例えば、本明細書の水性組成物中での洗浄後に、水中で、すすぎ洗いされた後に織物を乾燥させる工程）に続いて実施することができる。乾燥させる工程は、例えば風乾させる工程（例えば、約２０〜２５℃）または、例えば、少なくとも約３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１７０、１７５、１８０もしくは２００℃などの温度で、当技術分野において公知の数種の手段のいずれかによって実施できる。本明細書の乾燥させられている材料は、典型的にはその中に含まれた３、２、１、０．５もしくは０．１重量％未満の水を有する。織物は、任意選択的に乾燥させる工程を実施するために好ましい材料である。
【０２４０】
本明細書の処理方法において使用される水性組成物は、本明細書に開示した任意の水性組成物であってよい。したがって、水性組成物の酸化デキストラン成分は、本明細書に開示したいずれかであってよい。水性組成物の例には、洗剤（例えば、洗濯用洗剤もしくは食器用洗剤）および例えば練り歯磨きなどの歯磨き剤が含まれる。
【０２４１】
本開示は、さらに酸化デキストラン化合物を生成するための方法に関する。本方法は、水性条件下でデキストランを（ｉ）少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、（ｉｉ）少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または（ｉｉｉ）少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程であって、このときデキストランは、Ｎ−オキソアンモニウム塩、過ヨウ素酸化合物および／または過酸化物化合によって酸化され、それにより酸化デキストラン化合物を生成する工程を含む。本方法において使用されるデキストランは、本明細書に開示したデキストランであってよい。本方法によって生成された酸化デキストラン化合物は、任意選択的に単離することができる。
【０２４２】
酸化法の所定の実施形態におけるＮ−オキソアンモニウム塩は、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含むことができる。そのようなＮ−オキソアンモニウム塩の例には、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩自体（構造ＩＩ）および４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩（構造ＩＩＩ）が含まれる。本明細書のＮ−オキソアンモニウム塩は、例えば、環状Ｎ−オキソアンモニウム塩であってよい。環状Ｎ−オキソアンモニウム塩は、所定の実施形態では、構造（ＶＩ）（上記）によって表される。本明細書に開示した方法におけるＮ−オキソアンモニウム塩は、炭素４位で置換を有するＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩（このとき、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩の環内のＮ＋は、１位である）であってよい。
【０２４３】
ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩は、酸化法において、例えば、ＴＥＭＰＯを含む作用物質をその中でＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩がデキストランと接触させられる水性条件下で酸化させる工程によって提供することができる。ＴＥＭＰＯを含む作用物質は、構造ＩＶを含む作用物質／化合物である。ＴＥＭＰＯを含む作用物質の例は、ＴＥＭＰＯ自体（構造ＩＶ）および４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ（構造Ｖ）である。ＴＥＭＰＯを含む作用物質の他の例は、構造ＶＩＩ（上記）によって表すことができる。これらの作用物質のそれぞれは、構造ＶＩによって表されるように、それを水性条件内で１つ以上の酸化剤と接触させる工程によって、対応するオキソアンモニウム塩に変換させることができる。ＴＥＭＰＯおよび例えば上記（例えば、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ）などのその誘導体が環状ニトロキシル化合物の例であることを前提にすると。環状ニトロキシル化合物は、本明細書のＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を提供するために使用できる。
【０２４４】
ＴＥＭＰＯを含む作用物質は、その作用物質を１つ以上の「酸化剤（ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔｓ）」（もしくは「酸化剤（ｏｘｉｄａｎｔ）」）と接触させる工程によって、酸化法の水性条件下でその対応するオキソアンモニウム塩に酸化させることができる。この接触させる工程は、デキストランがＮ−オキソアンモニウム塩と接触させられる同一水性条件下で実施することができる。一部の実施形態では、デキストランを酸化させるための本明細書の反応は、最初に、水性条件下で、少なくともデキストラン、ＴＥＭＰＯを含む作用物質（例えば、構造ＶＩＩ）および１つ以上の酸化剤を含むように調製できる。酸化剤は、ＴＥＭＰＯを含む作用物質を対応するオキソアンモニウム塩（例えば、構造ＶＩ）に変換させることができ、これは順にデキストランを酸化させる。
【０２４５】
本明細書に開示した酸化法において使用するための酸化剤の非限定的例には、１つ以上の「無機酸化剤（ｉｎｏｒｇａｎｉｃ  ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔｓ）」（もしくは「無機酸化剤（ｉｎｏｒｇａｎｉｃ  ｏｘｉｄａｎｔ）」）が含まれる。ＴＥＭＰＯを含む作用物質を本方法の水性条件下でその対応するオキソアンモニウム塩に変換させるために使用できる酸化剤の例には、１つ以上のハライト（例えば、亜塩素酸塩、例えば亜塩素酸ナトリウム［ＮａＣｌＯ２］）もしくはハイポハライト（例えば、次亜塩素酸塩、例えば次亜塩素酸ナトリウム［ＮａＣｌＯ］）が含まれる。酸化剤（無機または有機）の他の例には、１つ以上のハロゲン化物塩、例えば、ＫＣｌ、ＫＢｒ、ＮａＣｌ、ＮａＢｒもしくはＮａＩ；ハイポハライト、例えば、ＮａＯＢｒ；金属、例えば、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩＩ）もしくはＣｕ（ＩＩ）；ＫＭｎＯ４；Ｍｎ（ＯＡｃ）３；Ｍｎ２Ｏ３；ＭｎＯ２；Ｍｎ（ＮＯ３）２；ＭｇＣｌ２；Ｍｇ（ＯＡｃ）２；またはＣｕ（ＮＯ３）２；二酢酸ヨードベンゼン［ＰｈＩ（ＯＡｃ）２］；Ｃａ（ＣｌＯ）２；ｔ−ＢｕＯＣｌ；ＣｕＣｌ−Ｏ２；ＮａＢｒＯ２；Ｃｌ２；Ｂｒ２；およびトリクロロイソシアヌル酸が含まれる。
【０２４６】
水性条件は、デキストランを酸化させるための方法において使用される。本方法における水性条件は、例えば、その中では溶媒の少なくとも約６０重量％が水である溶液もしくは混合液を意味する。または、水性条件は、例えば、少なくとも約６５、７０、７５、８０、８５、９０もしくは９５重量％（または６０〜９５重量％の間のいずれかの整数値）の水であってよい。本明細書の水性条件は、バッファー、例えば好適な濃度およびそのバッファーによって提供されるｐＨ範囲に基づいて選択される酸性、中性もしくはアルカリ性バッファーを含むことができる。バッファーの例には、クエン酸、酢酸、ＫＨ２ＰＯ４、ＣＨＥＳおよびホウ酸塩が含まれる。
【０２４７】
本明細書の酸化法の水性条件は、酸性（例えば、５．５以下のｐＨ）であってよい。または、ｐＨは、約２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０もしくは５．５であってよい。酸性条件は、例えば、溶液もしくは混合液に酢酸および／または酢酸塩を添加することなどによる、当分野において公知の任意の手段によって調製することができる。例えば、酢酸ナトリウムバッファー（酢酸バッファー）（ｐＨ４〜５）（例えば、０．２〜０．３Ｍの溶液）は、酸性条件を提供することができる。
【０２４８】
本明細書の酸化法の水性条件は、例えば、８．５以上のｐＨを有する塩基性であってよい。または、ｐＨは、例えば、約８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５もしくは１２であってよい。塩基性条件は、例えば、溶液もしくは混合液にアルカリ性水酸化物（例えば、水酸化ナトリウム）を添加することなどによる、当分野において公知の任意の手段によって調製することができる。
【０２４９】
酸化法の所定の実施形態における過ヨウ素酸化合物は、例えば、金属過ヨウ素酸塩（例えば、過ヨウ素酸ナトリウムもしくは過ヨウ素酸カリウム）であってよい。過ヨウ素酸化合物は、一部の態様では、メタ過ヨウ素酸塩（例えば、ＮａＩＯ４）またはオルト過ヨウ素酸塩であってよい。過ヨウ素酸化合物を用いてデキストランを酸化させるための条件は、参照により全体が本明細書に開示される米国特許第３０８６９６９号明細書、同第６８００７５３号明細書、同第５７４７６５８号明細書および／または同第６６３５７５５明細書、および／または例えば、下記の実施例１０および１１に開示した条件にしたがうことができる。典型的には、過ヨウ素酸塩を使用する反応は、過ヨウ素酸塩水溶液中にデキストランを提供する工程を含む。反応中の過ヨウ素酸塩の濃度は、例えば、約１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０重量％であってよい。過ヨウ素酸塩を含む本明細書の反応の温度は、例えば、約１８℃〜約４０℃（例えば、室温）であってよい。所定の実施形態では、過ヨウ素酸塩を含む反応は、約１〜７２時間（例えば、約５時間または約４８時間）進行することができる。
【０２５０】
本明細書の酸化法の一部の態様では、酸化デキストラン化合物は、最初にデキストランを過ヨウ素酸化合物と接触させる工程、その後にデキストラン（すなわち、過ヨウ素酸塩酸化デキストラン）をＮ−オキソアンモニウム塩と接触させる工程によって生成される。そのような連続的酸化処理は、本明細書に開示した方法のいずれか、例えば下記の実施例１１にしたがうことができる。過ヨウ素酸塩酸化デキストランは、任意選択的に、それをＮ−オキソアンモニウム塩と接触させる工程の前に過ヨウ素酸塩反応から（例えば、アルコール沈降法によって）最初に単離することができる。
【０２５１】
本明細書の酸化法の所定の実施形態における過酸化物化合物は、例えば、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）であってよい。一部の態様では、過酸化物化合物は、無機過酸化物化合物または有機過酸化物化合物であってよい。本明細書の好適な過酸化物化合物には、さらに、例えば、ナトリウムもしくはカルシウムが好ましいカチオンである過ホウ酸塩一水和物、過ホウ酸塩四水和物、過炭酸塩、アルカリ過硫酸塩、過ケイ酸塩および過クエン酸塩ならびにウレアもしくはアミン酸化物の過酸化水素付加化合物が含まれる。
【０２５２】
デキストランを過酸化物化合物で酸化させるための条件は、例えば、下記の実施例１４に開示した条件にしたがうことができる。典型的には、過酸化物（例えば、Ｈ２Ｏ２）を使用する反応は、デキストランを過酸化物水溶液中に提供する工程を含む。反応中の過酸化物の量は、例えば、約１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０重量％であってよいが、このときそのような重量％は、反応中に存在するデキストランの量に比したものである。本明細書の過酸化物化合物を使用する反応は、一部の実施形態では、中性ｐＨ（例えば、ｐＨ６〜８）を有していてよい。過酸化物を含む反応の温度は、例えば、約１１０℃〜約１４０℃（例えば、約１２１℃）であってよい。そのような上昇した反応温度を達成する工程は、例えばオートクレーブもしくは他の高圧装置を用いて提供できるような圧力の適用を含む可能性があることは理解されるであろう。所定の実施形態では、過酸化物を含む反応は、約３０分間〜約１２０分間（例えば、約６０分間）進行することができる。
【０２５３】
本明細書の酸化法の一部の態様では、酸化デキストラン化合物は、最初にデキストランを過酸化物化合物と接触させる工程、その後に過酸化物酸化デキストランをＮ−オキソアンモニウム塩と接触させる工程によって生成される。
【０２５４】
本明細書に開示した酸化法の所定の実施形態におけるデキストランは、キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）の非存在下で過酸化物化合物と接触させることができるが、他の実施形態ではキレート剤が任意選択的に存在してよい。
【０２５５】
デキストランは、酸化反応の水性条件下で、例えば、約または少なくとも約０．１、０．２５、０．５、０．７５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１もしくは１２重量％で含めることができる。デキストランは、過ヨウ素酸化合物、過酸化物化合物および／またはＴＥＭＰＯおよび／または酸化剤（ＴＥＭＰＯを含む作用物質をその対応するオキソアンモニウム塩に変換させる）を含む作用物質が水性条件に加えられる前または後に水性条件で混合または溶解させることができる。これらの特定実施形態における酸化剤は、例えば、亜塩素酸ナトリウム、臭化ナトリウムおよび／または次亜塩素酸ナトリウム（または本明細書に列挙した任意の他の酸化剤）であってよい。
【０２５６】
ＴＥＭＰＯを含む作用物質、例えばＴＥＭＰＯおよび／または４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯは、本方法の水性条件下で、例えば、約または少なくとも約０．０５、０．０７５、０．１、０．２５、０．５、０．７５、１もしくは２重量％で含めることができる。所定の実施形態では、ＴＥＭＰＯを含む作用物質は、その中でデキストランが既に混合もしくは溶解されている水性条件に加えることができる。そのような添加は、酸化剤が水性条件に加えられる前、後、加えられる時点に行われてよい。
【０２５７】
酸化剤、例えば亜塩素酸ナトリウム、臭化ナトリウムおよび／または次亜塩素酸ナトリウム（または本明細書に列挙した任意の他の酸化剤）は、本方法の水性条件に、例えば、約または少なくとも約０．１、０．２５、０．５、０．７５、１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５もしくは５０重量％で含めることができる。所定の実施形態では、酸化剤は、その中でデキストランが既に混合もしくは溶解されている水性条件に加えることができる。
【０２５８】
本明細書に開示した酸化法の所定の実施形態における水性条件は、最初はバッファー液（例えば、ｐＨが約４〜５である酢酸ナトリウムバッファー）中にデキストラン、ＴＥＭＰＯを含む作用物質（例えば、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ）および／または１つ以上の酸化剤（例えば、亜塩素酸ナトリウムおよび／または次亜塩素酸ナトリウム）を含有していてよい。任意選択的に、これらの特定の水性条件を調製する際には追加の成分は全く含まれない。これらの特定の水性条件は、約２４〜９６時間（例えば、約４８時間）にわたり約１８℃〜約４０℃（例えば、室温）の温度で維持することができる。
【０２５９】
本明細書に開示した方法の所定の実施形態における水性条件は、最初に、塩基性溶液（例えば、ｐＨが約１０．５〜１１．５である水酸化ナトリウム溶液）中に、デキストラン、ＴＥＭＰＯを含む作用物質（例えば、４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ）および／または１つ以上の酸化剤（例えば、臭化ナトリウムおよび／または次亜塩素酸ナトリウム）を含有していてよい。任意選択的に、これらの特定の水性条件を調製する際には追加の成分が全く含まれない。これらの特定の水性条件は、約０．５〜５時間（例えば、約１時間）にわたり約１８℃〜約４０℃（例えば、室温）の温度で維持することができる。
【０２６０】
デキストランは、例えば、混合する工程によって水性条件下で少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物、過酸化物化合物および／またはＮ−オキソアンモニウム塩と接触させることができる。混合する工程は、手動混合、オーバーヘッド式ミキサーを使用して混合する工程、磁気攪拌棒を使用する工程、または振とうする工程によって実施できる。そのような混合する工程は、デキストラン、ＴＥＭＰＯ（および／または過ヨウ素酸化合物もしくは過酸化物化合物）を含む作用物質および１つ以上の酸化剤を水性条件にそれぞれを加える間および／または加えた後に実施できる。上述したように、そのような水性条件は、ＴＥＭＰＯを含む作用物質と１つ以上の酸化剤との間の接触を可能にし、それによりＴＥＭＰＯを含む作用物質をその対応するＮ−オキソアンモニウム塩に変換させる。このＮ−オキソアンモニウム塩は、次にデキストランに接触させて酸化させることができる。
【０２６１】
本明細書のデキストランが少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、過酸化物および／または過ヨウ素酸塩と水性条件下で接触させられる期間は、例えば、少なくとも約０．５、１、４、８、１２、１６、２０、２４、２８、３２、３６、４０、４４、４８、７２もしくは９６時間（または１〜９６時間の間の任意の整数値）であってよい。反応は、所定の実施形態では、約０．５〜５時間（例えば、約１時間）または２４〜９６時間（例えば、約４８時間）にわたって維持できる。デキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、過酸化物および／または過ヨウ素酸と水性条件下で接触させる時間は、例えば、各反応成分が水性条件において溶解および／または混合された後の時点から測定することができる。
【０２６２】
本明細書に開示した方法の水性条件の温度は、所定の実施形態（例えば、過ヨウ素酸塩および／またはＮ−オキソアンモニウム塩を使用する場合）では、約１８℃〜約４０℃（または１８〜４０℃の間の任意の整数値）であってよい。本方法の所定の実施形態における水性条件は、約２０〜２５℃の温度で維持することができる。水性条件の温度は、水性条件下で各反応成分が溶解および／または混合されている時間から反応が完了するまで維持することができる。任意選択的に、それに各反応成分が加えられる初期水性条件は、反応のために保持される温度であってよい。
【０２６３】
任意選択的に、本明細書の反応は、加熱する工程を用いて、または用いずに、不活性ガス雰囲気下で維持することができる。本明細書で使用する用語「不活性ガス」とは、例えば本明細書の反応を調製するために開示した条件などの１組の所定の条件下で化学反応に曝されることのないガスを意味する。
【０２６４】
酸性もしくは塩基性水性条件が使用される酸化反応が完了すると、反応のｐＨは任意選択的に中和することができる。酸性反応の中和は、１つ以上の塩基（例えば、アルカリ性水酸化物、例えば水酸化ナトリウム）を使用して実施することができる。塩基性反応の中和は、１つ以上の酸（例えば、無機酸、例えば塩酸）を使用して実施することができる。本明細書で使用する用語「中性ｐＨ」は、実質的に酸性でも塩基性でもないｐＨ（例えば、約６〜８、または約６．０、６．２、６．４、６．６、６．８、７．０、７．２、７．４、７．６、７．８もしくは８．０のｐＨ）を意味する。
【０２６５】
本明細書の酸化反応において生成された酸化デキストラン化合物は、任意選択的に単離することができる。そのような生成物は、最初に反応の水性条件から沈降させることができる。沈降は、過剰量（例えば、反応体積の少なくとも２〜３倍）のアルコール（例えば、１００％もしくは９５％の濃度）、例えばエタノールもしくはイソプロパノールを反応に加えることによって実施できる。沈降した生成物は、次にろ過用漏斗、遠視分離機、加圧ろ過機または固体からの液体の除去を可能にする当分野において公知の任意の他の方法もしくは装置を使用して単離できる。例えば、真空ろ過を使用すると、酸化デキストラン生成物を単離することができる。単離化合物は、例えば真空乾燥法、風乾法またはフリーズドライ法などの当分野において公知の任意の方法を使用して乾燥させることができる。
【０２６６】
本明細書の酸化反応において生成された酸化デキストラン化合物は、任意選択的に、沈降後に、化合物を容易には溶解させない液体を用いて１回以上洗浄することができる。例えば、酸化デキストランは、（洗浄のために溶解度の欠如が所望の場合は）その中の酸化化合物の溶解度に依存して、アルコール、アセトン、芳香族化合物またはこれらの任意の組み合わせを用いて、洗浄することができる。一般に、酸化デキストラン化合物を洗浄するためには、例えばアルコールなどの有機溶媒（例えば、９５〜１００％）を含む溶媒が好ましい。酸化デキストラン化合物は、例えば、アルコール（例えば、メタノールもしくはエタノール）を含有する水溶液を用いて１回以上洗浄することができる。
【０２６７】
上記の酸化反応のいずれも、本明細書で生成された酸化デキストラン化合物をその後の修飾のための出発材料として使用して繰り返すことができる。例えば、過ヨウ素酸塩酸化されているデキストランは、また別の過ヨウ酸塩酸化ラウンドまたは例えばＮ−オキソアンモニウム塩などのまた別の作用物質を用いた酸化にかけることができる。
【０２６８】
本明細書のデキストランは、任意選択的に本開示によって酸化される前に前処理形で提供できる可能性がある。前処理形の例は、本明細書に開示した主題の実施形態において使用されたもの以外の酸化剤を用いて処理されているデキストランである。したがって、本明細書の所定の態様におけるデキストランは、前酸化形で提供できる可能性がある。所定の実施形態におけるそのような前酸化材料がある量の酸化されていない無傷デキストランポリマーを含むであろうことは企図されている。前酸化デキストランは、例えば、参照によりそれらの全部が本明細書に組み込まれるカナダ国公開特許公報第２０２８２８４号明細書および同第２０３８６４０号明細書ならびに米国特許第４９８５５５３号明細書、同第２８９４９４５号明細書、同第５７４７６５８号明細書および同第７５９５３９２号明細書に開示された酸化法の適用によって調製することもできる。
【０２６９】
酸化デキストラン生成物の構造および分子量は、例えばＮＭＲ分光法およびサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）などの当分野において公知の様々な物理化学的分析法を使用して決定することができる。
【０２７０】
本明細書に開示したデキストランの実施形態のいずれも、例えば、酸化反応において使用できる。デキストランは、酸化反応を調製する一部の態様において、乾燥形（例えば、粉末、フレーク）、湿性形（例えば、水溶液）または酸化反応を調製するための任意の他の好適な形態で提供することができる。また別の例として、デキストランは、少なくともデキストラン、水、フルクトースおよびグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含有する本明細書に開示したデキストラン合成反応（ｇｔｆ反応）の形態で提供することができる。
【０２７１】
本明細書に開示された組成物および方法の非限定的例には以下が含まれる：
１．  酸化デキストラン化合物を含む組成物であって、酸化デキストラン化合物は、水性条件下でデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程によって生成され、デキストランは、
（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜重０．７量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および
（ｖ）
（ａ）１位、２位および６位、または
（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含み、
デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は約５０，０００，０００〜２００，０００，０００Ｄａであり、デキストランのｚ平均旋回半径は約２００〜２８０ｎｍである組成物。２．  デキストランは、（ｉ）１位および６位で連結した約８９．５〜９０．５重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．４〜０．９重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．３〜０．５重量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約８．０〜８．３重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．７〜１．４重量％のグルコースを含む実施形態１の組成物。
３．  デキストランは、分岐鎖構造内で一緒に連結した鎖（長鎖）を含み、その鎖は長さが類似であり、実質的にα−１，６−グルコシド結合を含む、実施形態１または２の組成物。
４．  鎖の平均長は、約１０〜５０モノマー単位である、実施形態３に記載の組成物。
５．  デキストランは、配列番号１、配列番号２、配列番号５、配列番号９、配列番号１３もしくは配列番号１７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むグルコシルトランスフェラーゼ酵素の生成物である、実施形態１、２、３または４の組成物。
６．  デキストランは、過ヨウ素酸化合物と接触させられる、実施形態１、２、３、４または５の組成物。
７．  デキストランは、最初に過ヨウ素酸化合物と接触させられ、その後にＮ−オキソアンモニウム塩と接触させられる、実施形態１、２、３、４または５の組成物。
８．  Ｎ−オキソアンモニウム塩は、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含む、実施形態１、２、３、４、５または７の組成物。
９．  組成物は、家庭用製品、パーソナルケア製品、工業製品、医薬製品または食品である、実施形態１〜８のいずれか１つの組成物。
１０．  組成物は、洗剤組成物であり、さらに組成物は好ましくは家庭用製品である、実施形態９の組成物。
１１．  酸化デキストラン化合物を生成する方法であって、（ａ）水性条件下でデキストランを少なくとも１つのＮ−オキソアンモニウム塩、少なくとも１つの過ヨウ素酸化合物および／または少なくとも１つの過酸化物化合物と接触させる工程であって、デキストランは、（ｉ）１位および６位で連結した約８７〜９３重量％のグルコース；（ｉｉ）１位および３位で連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；（ｉｉｉ）１位および４位で連結した約０．１〜重０．７量％のグルコース；（ｉｖ）１位、３位および６位で連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位で連結した約０．４〜１．７重量％のグルコースを含み、デキストランの重量平均分子量（Ｍｗ）は約５０，０００，０００〜２００，０００，０００Ｄａであり、デキストランのｚ平均旋回半径は約２００〜２８０ｎｍである；デキストランは、Ｎ−オキソアンモニウム塩、過ヨウ素酸化合物および／または過酸化物化合物によって酸化され、これにより酸化デキストラン化合物が生成される工程、および（ｂ）任意選択的に、酸化デキストラン化合物を単離する工程を含む方法。
１２．  （Ｉ）デキストランは、過ヨウ素酸化合物と接触させられる、または（ＩＩ）デキストランは、最初に過ヨウ素酸化合物と接触させられ、その後にＮ−オキソアンモニウム塩と接触させられる、実施形態１１の方法。
１３．  Ｎ−オキソアンモニウム塩は、（Ｉ）ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩、または（ＩＩ）４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩を含み、任意選択的に、ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩もしくは４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯオキソアンモニウム塩が水性条件下でＴＥＭＰＯを含む作用物質を酸化させる工程によって提供される、実施形態１１または１２の方法。
１４．  水性組成物のビルダー能力および／または再付着防止能力を増加させる方法であって、実施形態１１〜１３のいずれか１つまたは実施形態１〜８のいずれか１つで言及した方法によって生成された酸化デキストラン化合物を水性組成物と接触させる工程であって、水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力が接触させる工程前の水性組成物のビルダーおよび／または再付着防止能力と比較して酸化デキストラン化合物によって増加させられる工程を含む方法。
１５．  材料を処理する方法であって、１つの材料を（ｉ）実施形態１１〜１３のいずれか１つの方法によって生成された、または（ｉｉ）実施形態１〜８のいずれか１つにおいて言及された酸化デキストラン化合物を含む水性組成物と接触させる工程を含む方法。
【実施例】
【０２７２】
本開示を実施例１〜６および８〜１４においてより詳細に例示する。これらの実施例は、本明細書の所定の好ましい態様を示しているが、例示するためにだけ提供されていると理解すべきである。上記の考察およびこれらの実施例から、当業者であれば、本発明の本質的な特徴を確証することができ、本明細書に開示した実施形態の精神および範囲から逸脱することなく、様々な使用および条件に適応させるために本明細書に開示した実施形態を様々な変化や修飾を加えることができる。
【０２７３】
一般方法
枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）中のグルコシルトランスフェラーゼ酵素のクローニングおよび発現
実施例３〜６において使用した各グルコシルトランスフェラーゼは、以下のように調製した。
【０２７４】
ｇｔｆ酵素をコードするプラスミド（枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｓｔｉｌｉｓ）からのｇｔｆ発現および分泌を許容するｐＺＺＨＢ５８２、ｐＺＺＨＢ５８３、ｐＺＺＨＢ５８４もしくはｐＺＺＨＢ５８５；例えば、図２Ａ〜Ｄを参照されたい）は、Ｉｌｌｕｓｔｒａ  ＴｅｍｐｌｉＰｈｉ（登録商標）１００増幅キット（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、ＮＪ）を使用して増幅させた。コンピテント枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞（ΔｓｐｏＩＩＥ、ΔａｐｒＥ、ΔｎｐｒＥ、ｄｅｇＵＨｙ３２、ΔｓｃｏＣ、ΔｎｐｒＢ、Δｖｐｒ、Δｅｐｒ、ΔｗｐｒＡ、Δｍｐｒ、ΔｉｓｐＡ、Δｂｐｒ）は、増幅産物を用いて形質転換させた。細胞は、５ｐｐｍのクロラムフェニコールを補給したルリア（Ｌｕｒｉａ）寒天プレート上で平板培養した。形質転換プレートからのコロニーは、５ｍＬのＬＢ培地中に接種して３７℃で一晩インキュベートした。次に各培養からのアリコート（２５〜５０μＬ）は、５ｐｐｍのクロラムフェニコールを補給した３０ｍＬのＧｒａｎｔ’ｓ  ＩＩ培地を含有する２５０ｍＬの振とうフラスコに移し、２４時間にわたり振とう（２８０ｒｐｍ）しながら３０℃でインキュベートした。細胞は、１時間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心分離することによって採取した。上清は、分泌されたｇｔｆ生成物についてＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分析し、次に計２０時間にわたり２０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．５）を含有する溶液に対して３回透析した。透析したサンプルは、５０ｍＬの円錐形遠心管１本に付き２５ｍＬずつで等分し、遠心管は約１時間にわたり−８０℃である角度に配置した。サンプルがいったん凍結したら、遠心管の蓋を取り外し、高ゲージ針を用いて５〜１０回穿刺したＰＡＲＡＦＩＬＭに取り替えた。ＰＡＲＡＦＩＬＭで被覆した凍結サンプルは、ＦｒｅｅＺｏｎｅ（登録商標）Ｆｒｅｅｚｅ  Ｄｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｌａｂｃｏｎｃｏ  Ｃｏｒｐ．，Ｋａｎｓａｓ  Ｃｉｔｙ，ＭＯ）内で製造業者の取扱説明書にしたがって凍結乾燥した。
【０２７５】
グルコシルトランスフェラーゼ酵素のストック液
酵素ストック液は、各ｇｔｆのために１０ｍＬの分子グレードのＨ２Ｏを、凍結乾燥酵素粉末を含有する各５０ｍＬの円錐形遠心管内に加えることによって作成した。
【０２７６】
実施例１
大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）内でのグルコシルトランスフェラーゼ（０７６８）の発現および粗活性酵素溶解物の生成
本実施例は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）内での成熟グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）発現菌株の粗細胞溶解物が生成され、スクロースの存在下でのゲル生成物形成活性を証明した。
【０２７７】
１，４８４個のアミノ酸を有する推定上のＹＧリピート含有ヒドロラーゼ（ＧＥＮＢＡＮＫ内でＧＩ番号３３９４８０７６８下に分類されたが、現在はＧＩ番号４９７９６４６５９を有する）は、全ゲノムショットガンシーケンシングによってロイコノストック・シュードメセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｐｓｅｕｄｏｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）菌株ＫＣＴＣ３６５２から同定された。この推定グルコシルトランスフェラーゼ（本明細書ではｇｔｆ０７６８と称する）は、グルカン結合ドメインを含有するグリコシルヒドロラーゼのＧＨ７０ファミリーに属する。ｇｔｆ０７６８のＮ末端３７アミノ酸セグメントは、ＳＩＧＮＡＬＰ  ４．０プログラム（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ８：７８５−７８６）によって酵素のシグナルペプチドであると推定された。ｇｔｆ０７６８の成熟形は、配列番号１によって表される。
【０２７８】
ｇｔｆ０７６８の細菌発現のためのプラスミドを構築するために、シグナルペプチドを使用せずにｇｔｆの成熟形をコードするＤＮＡ配列は、ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ  ＵＳＡ  Ｉｎｃ．（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）によって構築した。合成配列は、ｐＥＴ２３Ｄ＋ベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ（登録商標）；Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ，Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）のＮｈｅＩおよびＨｉｎｄＩＩＩ部位内にサブクローニングした。この構築物によってコードされた０７６８ｇｔｆ（配列番号２）は、ｇｔｆ０７６８の野生型成熟（予測）形（配列番号１）は、Ｎ末端で開始メチオニンおよび３個の追加アミノ酸（Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ）およびＣ末端で６個のヒスチジン残基を含んでいた（すなわち、配列番号１は配列番号２の中に含まれる）。プラスミド構築物を配列確認し、アンピシリン選択を行って大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＢＬ２１  ＤＥ３宿主細胞内に形質転換させると、発現菌株ＥＣ００５２が生じた。
【０２７９】
ＥＣ００５２の細胞および空のｐＥＴ２３Ｄ＋ベクターだけを含有するコントロール菌株は、１００μｇ／ｍＬのアンピシリンを加えたＬＢ培地中で約０．５のＯＤ６００へ増殖させ、次に３時間にわたり３７℃で１ｍＭのＩＰＴＧを用いて誘導した、または２３℃で一晩誘導した。この誘導期間後、細胞を１０分間にわたり４，０００×ｇでの遠心分離によって収集し、ＰＢＳバッファー（ｐＨ６．８）中に再懸濁させた。細胞は次に１４，０００ｐｓｉ（約９６．５３ＭＰａ）でフレンチプレスを２回通過させることによって溶解させ、その後に細胞残屑を２０分間にわたる１５，０００×ｇでの遠心分離によってペレット化した。各粗細胞溶解物の上清を等分して約８０℃で凍結させた。
【０２８０】
ＥＣ００５２細胞由来の粗細胞溶解物の活性は、スクロースとの反応によってチェックした。コントロール反応は、空ベクターを含有する細胞から調製された細胞溶解物を用いて同様に構成した。各スクロース反応は、１００ｇ／Ｌのスクロース、１０ｍＭのクエン酸ナトリウム（ｐＨ５）および１ｍＭのＣａＣｌ２を備える１０％（ｖ／ｖ）の細胞溶解物を使用して構成した。数時間にわたる３７℃での反応のインキュベーション後、デキストランであると考えられるゲル様生成物が、その中にＥＣ００５２細胞溶解物が加えられていた試験管内で形成された。コントロール反応中では、ゲル様生成物は形成されなかった。ＨＰＬＣ分析は、ＥＣ００５２細胞溶解物を含有する反応中ではスクロースが消費されるが、コントロール反応中では消費されないことを確証した。この結果は、ＥＣ００５２粗細胞溶解物が活性ｇｔｆ０７６８酵素を発現すること、およびこのｇｔｆが高粘性を有するデキストラン生成物を生成することを示唆した。
【０２８１】
したがって、水、スクロースおよび配列番号１を含む酵素を含む反応はデキストランであると考えられるゲル化生成物を合成した。この結果は、ｇｔｆ０７６８がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。この生成物は、本明細書に開示した酸化デキストランを調製するために使用できる。
【０２８２】
実施例２
スクロースとＧｔｆ０７６８との反応およびゲル化デキストラン反応生成物の分析
本実施例では、実施例１に提供した結果を補足する、水、スクロースおよびｇｔｆ０７６８を含むまた別の反応について記載する。さらに、本実施例は、ｇｔｆ０７６８によって合成されたゲル化生成物の、この生成物がデキストランの１つのタイプであることを証明しているグリコシド結合分析を提供する。
【０２８３】
ｇｔｆ反応を調製するための試薬：
−  スクロース（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ−９３７８）。
−  リン酸ナトリウムバッファーストック（２００ｍＭ）（ｐＨ５．５）：リン酸ナトリウム一塩基性一水和物（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ９６３８）およびリン酸ナトリウムに塩基性七水和物（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ９３９０）を適宜に使用して２５０ｍＬの水溶液を調製する。
−  Ｇｔｆ０７６８酵素溶液（実施例１で調製した細胞溶解物）。
【０２８４】
３種のｇｔｆ反応の条件：
２．７２ｇのリン酸ナトリウムバッファーストック（ｐＨ５．５）、１００ｇ／Ｌのスクロースおよび２ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する１，０００ｍＬの反応を調製した。この反応を２６℃で２０時間撹拌すると粘性になった。ｇｔｆ酵素は、反応を１０分間にわたり８０℃で加熱することによって脱活性化した。次に粘性生成物を沈降させるために、非活性化粘性反応を３Ｌの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成されたので、これを次に濾過し、１２０ｍＬの１００％メタノールを用いた４回の洗浄を実施した。固体生成物を７２時間にわたりオーブン内の真空下の室温で乾燥させた。
【０２８５】
１．９７ｇのリン酸ナトリウムバッファー、３００ｇ／Ｌのスクロースおよび１．４５ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する７２５ｍＬの反応を調製した。この反応を２６℃で２０時間撹拌すると粘性になった。ｇｔｆ酵素は、この反応混合物にメタノールを加えることによって非活性化した。粘性生成物を沈降させるために、次に非活性化反応を３Ｌの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成されるので、これを次に濾過し、１２０ｍＬの１００％メタノールを用いた４回の洗浄を実施した。固体生成物を７２時間にわたりオーブン内の真空下の室温で乾燥させた。
【０２８６】
０．５４４ｇのリン酸ナトリウムバッファー、４００ｇ／Ｌのスクロースおよび０．４ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する２００ｍＬの反応を調製した。この反応を２６℃で２０時間撹拌すると粘性になった。ｇｔｆ酵素は、この反応混合物にメタノールを加えることによって非活性化した。粘性生成物を沈降させるために、次に非活性化反応を３Ｌの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成されるので、これを次に濾過し、１２０ｍＬの１００％メタノールを用いた４回の洗浄を実施した。固体生成物を７２時間にわたりオーブン内の真空下の室温で乾燥させた。
【０２８７】
０．５４４ｇのリン酸ナトリウムバッファー、８００ｇ／Ｌのスクロースおよび０．４ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する２００ｍＬの反応を調製した。この反応を２６℃で２０時間撹拌すると粘性になった。ｇｔｆ酵素は、この反応混合物にメタノールを加えることによって非活性化した。粘性生成物を沈降させるために、次に非活性化反応を３Ｌの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成されたので、これを次に濾過し、１２０ｍＬの１００％メタノールを用いた４回の洗浄を実施した。固体生成物を７２時間にわたりオーブン内の真空下の室温で乾燥させた。
【０２８８】
各反応のサンプル（１００μＬ）をそれぞれ０、２、４および１８時間後に取り出した。ｇｔｆ酵素は、各サンプル中で１０分間にわたり８０℃で加熱することによって非活性化した。次に各サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心分離し、その後に反応中のスクロース消費を測定するためにＨＰＬＣ分析のために２００μＬの上清を使用した。各サンプルを分析するために次のＨＰＬＣ条件を適用した：カラム（ＡＭＩＮＥＸ  ＨＰＸ−８７Ｃ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９５）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器。サンプルのＨＰＬＣ分析は、０７６８ｇｔｆ反応中の実質的なスクロース消費を示した（図１、１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応）（このスクロース消費は、市販起源から得られたデキストランスクラーゼを使用して反応中で観察されたスクロース消費より有意に速く発生した−実施例７を参照されたい）。
【０２８９】
さらにＨＰＬＣを使用して、１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応の他の生成物を分析した。ポリマー収率は、反応中に残留した全部の他の糖類の量を出発スクロースの量から減じることによって逆算した。逆算した数は、粘性生成物乾燥重量分析と一致していた。スクロース、ロイクロース、グルコースおよびフルクトースは、ＨＰＸ−８７Ｃカラムを備えるＨＰＬＣ（上述したＨＰＬＣ条件）によって定量した。ＤＰ２〜７二糖類は、次の条件：カラム（ＡＭＩＮＥＸ  ＨＰＸ−４２Ａ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９７）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器を用いるＨＰＬＣによって定量した。これらのＨＰＬＣ分析は、０７６８ｇｔｆ反応のグルコシル含有糖生成物が９１％のポリマー生成物、１％のグルコース、６．５％のロイクロースおよび１．５％のＤＰ２〜７オリゴ糖から構成されることを指示した。
【０２９０】
１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応のゲル化ポリマー生成物のグリコシド結合プロファイルは、１３Ｃ  ＮＭＲによって決定した。上記のように調製した乾燥ポリマー（２５〜３０ｍｇ）は、５０℃で攪拌しながら３重量％のＬｉＣｌを含有する１ｍＬの重水素化ＤＭＳＯ中に溶解させた。ガラスピペットを使用して、０．８ｍＬの調製物を５ｍｍのＮＭＲチューブ内に移した。定量的１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、２６０４１．７Ｈｚのスペクトル窓を使用して、１２５．７６ＭＨｚのスペクトル周波数で、クリオプローブを装備したＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）５００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光計を使用して獲得した。ｗａｌｔｚデカップリングを使用する逆ゲーテッドデカップリングパルス配列は、０．６２９秒間の捕捉時間、５秒間のパルス間遅延時間および６，０００パルスとともに使用した。タイムドメインデータは、２．０Ｈｚの指数的乗法を使用して変換させた。
【０２９１】
ＮＭＲの結果は、ゲル化ポリマー生成物が約９０％のα−１，６−グルコシド結合、約４〜５％のα−１，３−グルコシド結合ならびに約５〜６％のα−１，４およびα−１，２グルコシド結合を含むことを指示した。ポリマー生成物の主鎖は、大部分はα−１，６−グルコシド結合を含み、さらに極めて少量のα−１，３およびα−１，４グルコシド結合も含むと思われた。他のα−１，３およびα−１，４グルコシド結合ならびにα−１，２−グルコシド結合の全部は、主鎖ではない分岐鎖内にあると思われた。そこでゲル化生成物は、ゲル化デキストランであると思われる。
【０２９２】
現在は、ｇｔｆ０７６８によって生成されたデキストランの結合プロファイルを本明細書で決定するために、異なるプロトコル（上記の１３Ｃ  ＮＭＲ手法ではない）が推奨されている。このプロトコルについて、本実施例に開示した結合プロファイルに類似する結合プロファイルを示している下記の実施例９において開示する。
【０２９３】
１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応のゲル化デキストラン生成物の数平均分子量（Ｍｎ）および重量平均分子量（Ｍｗ）は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定した。上記で調製した乾燥ポリマーは、１００℃で一晩振とうしながらＤＭＡｃおよび５％のＬｉＣｌ（０．５ｍｇ／ｍＬ）中に溶解させた。使用したクロマトグラフィーシステムは、３基のオンライン検出器：Ｗａｔｅｒｓ製の示差屈折計２４１０、Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）製のＨｅｌｅｏｓ（商標）８＋マルチアングル光散乱測光計およびＷｙａｔｔ製のＶｉｓｃｏＳｔａｒ（商標）示差毛細管式粘度計と結合したＷａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）製のＡｌｌｉａｎｃｅ（商標）２６９５分離モジュールであった。ＳＥＣのために使用したカラムは、Ｓｈｏｄｅｘ（日本国）製の４基のスチレン−ジビニルベンゼンカラムおよびポリマー分散の低分子量領域での解像度を改良するための２基のＫＤ−８０２およびＫＤ−８０１カラムである線形ＫＤ−８０６Ｍであった。移動相は０．１１％のＬｉＣｌを含むＤＭＡｃであった。使用したクロマトグラフィー条件は、カラムおよび検出器区画内で５０℃、サンプルおよびインジェクター区画内で４０℃、０．５ｍＬ／分の流量および１００μＬのインジェクション量であった。データ整理のために使用したソフトウェアパッケージは、Ｗａｔｅｒｓ製のＥｍｐｏｗｅｒ（商標）バージョン３（広域グルカンポリマー標準物質を用いた較正）およびＷｙａｔｔ製のＡｓｔｒａ（登録商標）バージョン６（カラム較正を用いる三重検出法）であった。この手法から、ゲル化デキストラン生成物が２，２２９，４００のＭｎおよび５，３６５，７００のＭｗを有すると決定された。
【０２９４】
現在は、ｇｔｆ０７６８によって生成されたデキストランの分子量を本明細書で決定するために（上記のＳＥＣ手法ではない）異なるプロトコルが推奨されている。このプロトコルは、本実施例で開示した分子量より２桁以上大きな分子量を示している、下記の実施例９において開示する。
【０２９５】
したがって、水、スクロースおよび配列番号１を含む酵素を含む反応は、生成物の優勢α−１，６グルコシド結合プロファイルによって決定されるように、ゲル化デキストラン生成物を合成した。下記の実施例８は、この生成物の粘度対所定の市販で入手できるデキストランの粘度の比較について開示している。さらに実施例９は、配列番号１を含むｇｔｆ酵素を用いたデキストランのまた別の生成について、収率、分子量およびこのデキストランの結合分析とともに開示している。本実施例で生成されたデキストランは、本明細書に開示した酸化デキストランを調製するために使用できる。
【０２９６】
実施例３
グルコシルトランスフェラーゼ（２９１９）の発現およびゲル化デキストラン生成物を生成するためのそれらの使用
本実施例は、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での成熟ワイセラ・シバリア（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ  ｃｉｂａｒｉａ）グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。さらに、本実施例は、この酵素が、使用された場合に水およびスクロースを含有する反応であるデキストランのようなゲル化生成物を生成することを証明する。
【０２９７】
グルコシルトランスフェラーゼ遺伝子であるＷｃｉＧｔｆ１は、ワイセラ・シバリア（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ  ｃｉｂａｒｉａ）ＫＡＣＣ１１８６２から同定された。この遺伝子の核酸配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＮＺ＿ＡＥＫＴ０１００００３５．１の２３３１５〜２７６６１位）は配列番号３に規定されており、配列番号４のタンパク質配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＺＰ＿０８４１７４３２）をコードする。ＷｃｉＧｔｆ１タンパク質（配列番号４）のＮ末端には、ＳＩＧＮＡＬＰ  ４．０プログラム（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ８：７８５−７８６）によって予測されるように２６個のアミノ酸のシグナルペプチドがある。これは、ＷｃｉＧｔｆ１（配列番号４）が分泌タンパク質であることを指示している。ＷｃｉＧｔｆ１タンパク質のこの成熟分泌形は、本明細書では２９１９ｇｔｆと呼ばれ、配列番号５に規定されている。
【０２９８】
２９１９ｇｔｆをコードするヌクレオチド配列を枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での発現のために最適化した。最適化配列（配列番号６）は、Ｇｅｎｅｒａｙ（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）によって合成され、プラスミドｐ２ＪＭ１０３ＢＢＩ内に挿入されると（Ｖｏｇｔｅｎｔａｎｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒ．Ｐｕｒｉｆ．５５：４０−５２）、プラスミドｐＺＺＨＢ５８３が生じた（図２Ａ）。プラスミドｐＺＺＨＢ５８３は、（ｉ）枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での異種タンパク質（この場合には２９１９ｇｔｆ）分泌を指令するために使用されるａｐｒＥシグナル配列、（ｉｉ）分泌を促進するためのＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、および（ｉｉｉ）２９１９ｇｔｆ（配列番号５）をコードする配列に機能的に連結したａｐｒＥプロモーターを含有する（ｉ〜ｉｉｉは、アミノ−カルボキシ方向に一緒に融合される）。
【０２９９】
プラスミドｐＺＺＨＢ５８３は、２９１９ｇｔｆの発現および精製のために枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞内に形質転換された（一般方法を参照されたい）。
【０３００】
２９１９ｇｔｆ（配列番号５）の活性は、１００ｇ／Ｌのスクロース、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）および６．２５ｍＬの酵素ストックを含む室温の２５０ｍＬ反応中で決定した。反応は、４８時間にわたり室温で振とう（１５０ｒｐｍ）しながら実施した。
【０３０１】
サンプル（１００μＬ）は、それぞれ０、１、３、５、２４および４８時間後の時点に反応から取り出した。酵素は、各サンプルを１０分間にわたり８０℃で加熱することによって非活性化した。サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心した。ＨＰＬＣ分析のために上清（２００μＬ）を使用した。
【０３０２】
ｇｔｆ反応中のロイクロース、グルコースおよびフルクトースの濃度は、８５℃にサーモスタット調節されたカラム区画内に配置されたＡＭＩＮＥＸ  ＨＰＸ−８７Ｃカラム（３００×７．８ｍｍ）および屈折率検出器を装備したＡｇｉｌｅｎｔ  １２６０クロマトグラフィーシステムを用いて実施したＨＰＬＣを用いて決定した。ＨＰＬＣ溶出は、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ（登録商標）水を０．６ｍＬ／分で用いて実施した。スクロース、ロイクロース、グルコースおよびフルクトースは、対応する標準物質との比較によって同定した。それらの濃度は、ピーク面積標準曲線に基づいて計算した。スクロースは、反応終了時までにほぼ完全に消費された。粘性デキストラン生成物とは別に、２９１９ｇｔｆ（配列番号５）は、主にフルクトース（約５０％）ならびに少量のロイクロース（約５％）およびグルコース（約１％）を生成した。
【０３０３】
ｇｔｆ反応中のオリゴ糖（ＤＰ２〜ＤＰ７）の濃度は、８５℃にサーモスタット調節されたカラム区画内に配置されたＡＭＩＮＥＸ  ＨＰＸ−４２Ａカラム（３００×７．８ｍｍ）および屈折率検出器を装備したＡｇｉｌｅｎｔ  １２６０クロマトグラフィーシステムを用いて実施したＨＰＬＣを用いて決定した。ＨＰＬＣ溶出は、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ（登録商標）水を０．６ｍＬ／分で用いて実施した。オリゴ糖の形成は、対応する標準物質との比較によって同定した。オリゴ糖の濃度は、標準曲線に基づいてピーク面積から計算した。２９１９ｇｔｆ（配列番号５）は、反応の終了時までに少量のＤＰ２〜ＤＰ７オリゴ糖（約３％）を生成した。
【０３０４】
したがって、水、スクロースおよび配列番号５を含む酵素を含む反応は、デキストランポリマーであると考えられるゲル化生成物を合成した。この生成物は、本明細書に開示した酸化デキストランを調製するために使用できる。実験結果は、ｇｔｆ２９１９がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。
【０３０５】
実施例４
グルコシルトランスフェラーゼ（２９１８）の発現およびゲル化デキストラン生成物を生成するためのそれらの使用
本実施例は、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での成熟ラクトバシラス・ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。さらに、本実施例は、この酵素が、使用された場合に水およびスクロースを含有する反応であるデキストランのようなゲル化生成物を生成することを証明する。
【０３０６】
グルコシルトランスフェラーゼ遺伝子であるＬｆｅＧｔｆ１は、ラクトバシラス・ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）から同定された。この遺伝子の核酸配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＹ６９７４３３．１の６１８〜５００９位）は配列番号７に規定されており、配列番号８のタンパク質配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＡＵ０８００８）をコードする。ＬｆｅＧｔｆ１タンパク質（配列番号８）のＮ末端には、ＳＩＧＮＡＬＰ  ４．０プログラムによって予測されるように３７個のアミノ酸のシグナルペプチドがある。これは、ＬｆｅＧｔｆ１（配列番号８）が分泌タンパク質であることを指示している。ＬｆｅＧｔｆ１タンパク質のこの成熟分泌形は、本明細書では２９１８ｇｔｆと呼ばれ、配列番号９に規定されている。
【０３０７】
２９１８ｇｔｆをコードするヌクレオチド配列を枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での発現のために最適化した。最適化配列（配列番号１０）は、Ｇｅｎｅｒａｙ（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）によって合成され、プラスミドｐ２ＪＭ１０３ＢＢＩ内に挿入されると、プラスミドｐＺＺＨＢ５８２が生じた（図２Ｂ）。プラスミドｐＺＺＨＢ５８２は、（ｉ）枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での異種タンパク質（この場合には２９１８ｇｔｆ）分泌を指令するために使用されるａｐｒＥシグナル配列、（ｉｉ）分泌を促進するためのＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、および（ｉｉｉ）２９１８ｇｔｆ（配列番号９）をコードする配列に機能的に連結したａｐｒＥプロモーターを含有する（ｉ〜ｉｉｉは、アミノ−カルボキシ方向に一緒に融合される）。
【０３０８】
プラスミドｐＺＺＨＢ５８２は、２９１８ｇｔｆの発現および精製のために枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞内に形質転換された（一般方法を参照されたい）。
【０３０９】
２９１８ｇｔｆ（配列番号９）の活性は、１００ｇ／Ｌのスクロース、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）および６．２５ｍＬの酵素ストックを含む室温の２５０ｍＬ反応中で決定した。反応は、６日間にわたり室温で振とう（１５０ｒｐｍ）しながら実施した。
【０３１０】
サンプル（１００μＬ）は、それぞれ０、１、３、５、２４、４８および１４４時間後の時点に反応から取り出した。酵素は、各サンプルを１０分間にわたり８０℃で加熱することによって非活性化した。サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心した。ＨＰＬＣ分析のために上清（２００μＬ）を使用した。
【０３１１】
ｇｔｆ反応中のスクロース、ロイクロース、グルコース、フルクトースおよびオリゴ糖（ＤＰ２〜ＤＰ７）の濃度は、実施例３に記載したＨＰＬＣ手法を用いて決定した。スクロースは、反応終了時までにほぼ完全に消費された。粘性デキストラン生成物とは別に、２９１８ｇｔｆ（配列番号９）は、主にフルクトース（約５０％）および少量のロイクロース（約５％）およびグルコース（約１％）を生成した。２９１８ｇｔｆ（配列番号９）は、少量のＤＰ２〜ＤＰ７オリゴ糖（約１％）を生成した。
【０３１２】
したがって、水、スクロースおよび配列番号９を含む酵素を含む反応は、デキストランポリマーであると考えられるゲル化生成物を合成した。この生成物は、本明細書に開示した酸化デキストランを調製するために使用できる。実験結果は、ｇｔｆ２９２０がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。
【０３１３】
実施例５
グルコシルトランスフェラーゼ（２９２０）の発現およびゲル化デキストラン生成物を生成するためのそれらの使用
本実施例は、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での成熟ストレプトコッカス・ソブリヌス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｏｂｒｉｎｕｓ）グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。さらに、本実施例は、この酵素が、使用された場合に水およびスクロースを含有する反応であるデキストランのようなゲル化生成物を生成することを証明する。
【０３１４】
グルコシルトランスフェラーゼ遺伝子であるＳｓｏＧｒｆ４は、ストレプトコッカス・ソブリヌス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｏｂｒｉｎｕｓ）Ｂ１３Ｎから同定された。この遺伝子の核酸配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＹ９６６４９０の１９８〜４７１８位）は配列番号１１に規定されており、配列番号１２のタンパク質配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＡＸ７６９８６）をコードする。ＳｓｏＧｔｆ４タンパク質（配列番号１２）のＮ末端には、ＳＩＧＮＡＬＰ  ４．０プログラムによって予測されるように４１個のアミノ酸のシグナルペプチドがある。これは、ＳｓｏＧｔｆ４（配列番号１２）が分泌タンパク質であることを指示している。ＳｓｏＧｒｆ４タンパク質のこの成熟分泌形は、本明細書では２９２０ｇｔｆと呼ばれ、配列番号１３に規定されている。
【０３１５】
２９２０ｇｔｆをコードするヌクレオチド配列を枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での発現のために最適化した。最適化配列（配列番号１４）は、Ｇｅｎｅｒａｙ（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）によって合成され、プラスミドｐ２ＪＭ１０３ＢＢＩ内に挿入されると、プラスミドｐＺＺＨＢ５８４が生じた（図２Ｃ）。プラスミドｐＺＺＨＢ５８４は、（ｉ）枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での異種タンパク質（この場合には２９２０ｇｔｆ）分泌を指令するために使用されるａｐｒＥシグナル配列、（ｉｉ）分泌を促進するためのＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、および（ｉｉｉ）２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）をコードする配列に機能的に連結したａｐｒＥプロモーターを含有する（ｉ〜ｉｉｉは、アミノ−カルボキシ方向に一緒に融合される）。
【０３１６】
プラスミドｐＺＺＨＢ５８４は、２９２０ｇｔｆの発現および精製のために枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞内に形質転換された（一般方法を参照されたい）。
【０３１７】
２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）の活性は、１００ｇ／Ｌのスクロース、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）および６．２５ｍＬの酵素ストックを含む室温の２５０ｍＬ反応中で決定した。反応は、６日間にわたり室温で振とう（１５０ｒｐｍ）しながら実施した。
【０３１８】
サンプル（１００μＬ）は、それぞれ０、１、３、５、２４、４８、７２および１４４時間後の時点に反応から取り出した。酵素は、各サンプルを１０分間にわたり８０℃で加熱することによって非活性化した。サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心した。ＨＰＬＣ分析のために上清（２００μＬ）を使用した。
【０３１９】
ｇｔｆ反応中のスクロース、ロイクロース、グルコース、フルクトースおよびオリゴ糖（ＤＰ２〜ＤＰ７）の濃度は、実施例３に記載したＨＰＬＣ手法を用いて決定した。スクロースは、反応終了時までにほぼ完全に消費された。粘性デキストラン生成物とは別に、２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）は、主にフルクトース（約５０％）、ロイクロース（約２０％）および少量のグルコース（約３％）を生成した。２９２０ｇｔｆ（配列番号１３）は、少量のＤＰ２〜ＤＰ７オリゴ糖（約１％）を生成した。
【０３２０】
したがって、水、スクロースおよび配列番号１３を含む酵素を含む反応は、デキストランポリマーであると考えられるゲル化生成物を合成した。この生成物は、本明細書に開示した酸化デキストランを調製するために使用できる。実験結果は、ｇｔｆ２９２０がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。
【０３２１】
実施例６
グルコシルトランスフェラーゼ（２９２１）の発現およびゲル化デキストラン生成物を生成するためのその使用
本実施例は、枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での成熟ストレプトコッカス・ダウネイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｄｏｗｎｅｉ）グルコシルトランスフェラーゼ（ｇｔｆ）酵素の発現について記載する。さらに、本実施例は、この酵素が、使用された場合に水およびスクロースを含有する反応であるデキストランのようなゲル化生成物を生成することを証明する。
【０３２２】
グルコシルトランスフェラーゼ遺伝子であるＳｄｏＧｔｆ７は、ストレプトコッカス・ダウネイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｄｏｗｎｅｉ）ＭＦｅ２８から同定された。この遺伝子の核酸配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＡＢ４７６７４６の１６〜２３７５位）は配列番号１５に規定されており、配列番号１６のタンパク質配列（ＧＥＮＢＡＮＫアクセッション番号ＺＰ＿０８５４９９８７．１）をコードする。ＳｄｏＧｔｆ７タンパク質（配列番号１６）のＮ末端には、ＳＩＧＮＡＬＰ  ４．０プログラムによって予測されるように４４個のアミノ酸のシグナルペプチドがある。これは、ＳｄｏＧｔｆ７タンパク質（配列番号１６）が分泌タンパク質であることを指示している。ＳｄｏＧｔｆ７タンパク質のこの成熟分泌形は、本明細書では２９２１ｇｔｆと呼ばれ、配列番号１７に規定されている。
【０３２３】
２９２１ｇｔｆをコードするヌクレオチド配列を枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での発現のために最適化した。最適化配列（配列番号１８）は、Ｇｅｎｅｒａｙ（Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ）によって合成され、プラスミドｐ２ＪＭ１０３ＢＢＩ内に挿入されると、プラスミドｐＺＺＨＢ５８５が生じた（図２Ｄ）。プラスミドｐＺＺＨＢ５８５は、（ｉ）枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）内での異種タンパク質（この場合には２９２１ｇｔｆ）分泌を指令するために使用されるａｐｒＥシグナル配列、（ｉｉ）分泌を促進するためのＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ、および（ｉｉｉ）２９２１ｇｔｆ（配列番号１７）をコードする配列に機能的に連結したａｐｒＥプロモーターを含有する（ｉ〜ｉｉｉは、アミノ−カルボキシ方向に一緒に融合される）。
【０３２４】
プラスミドｐＺＺＨＢ５８５は、２９２１ｇｔｆの発現および精製のために枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）細胞内に形質変換された（一般方法を参照されたい）。
【０３２５】
２９２１ｇｔｆ（配列番号１７）の活性は、１００ｇ／Ｌのスクロース、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ５．５）および６．２５ｍＬの酵素ストックを含む室温の２５０ｍＬ反応中で決定した。反応は、８日間にわたり室温で振とう（１５０ｒｐｍ）しながら実施した。
【０３２６】
サンプル（１００μＬ）は、反応開始時ならびにそれぞれ１、２、３、６、７および８日間後に反応から取り出した。酵素は、各サンプルを１０分間にわたり８０℃で加熱することによって非活性化した。サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心した。ＨＰＬＣ分析のために上清（２００μＬ）を使用した。
【０３２７】
ｇｔｆ反応中のスクロース、ロイクロース、グルコース、フルクトースおよびオリゴ糖（ＤＰ２〜ＤＰ７）の濃度は、実施例３に記載したＨＰＬＣ手法を用いて決定した。第８日に反応中に約４３％のスクロースが残留した。粘性デキストラン生成物とは別に、２９２１ｇｔｆ（配列番号１７）は、主にフルクトース（約３１％）、ロイクロース（約６％）およびグルコース（約３％）を生成した。ＤＰ２〜ＤＰ７オリゴ糖の明白な生成は観察されなかった。
【０３２８】
したがって、水、スクロースおよび配列番号１７を含む酵素を含む反応は、デキストランポリマーであると考えられるゲル化生成物を合成した。この生成物は、本明細書に開示した酸化デキストランを調製するために使用できる。実験結果は、ｇｔｆ２９２１がグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する可能性が高いことを証明した。
【０３２９】
実施例７（比較例）
市販で入手できるデキストランスクラーゼを使用したデキストランの生成
本実施例は、水およびスクロースを含む反応中で市販で入手できるデキストランスクラーゼを使用したデキストランの合成について記載する。これで生成されたデキストランは、実施例８において、実施例１〜６で合成されたゲル化デキストラン生成物に比較して分析した。
【０３３０】
デキストランスクラーゼ反応を調製するための試薬：
−  スクロース（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ−９３７８）。４００ｇ／Ｌのストック液を調製した。
−  リン酸ナトリウムバッファーストック（２００ｍＭ）（ｐＨ５．５）：リン酸ナトリウム一塩基性一水和物（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ９６３８）およびリン酸ナトリウムに塩基性七水和物（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ９３９０）を適宜に使用して２５０ｍＬの水溶液を調製する。
−  ロイコノストック・メゼンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）由来のデキストランスクラーゼ、凍結乾燥粉末、≧１００単位／ｍｇのタンパク質（Ｓｉｇｍａ社製品番号Ｄ９９０９）。
【０３３１】
２０ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ５．５）、１１０ｇ／ＬのスクロースおよびＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製の１０単位のデキストランスクラーゼを含有する５０ｍＬの反応を調製した。反応を調製する最後にデキストランスクラーゼを加えた。反応は、１２５ｍＬのキャップ付き振とうフラスコ内で７日間にわたり２６℃で振とう（１００ｒｐｍ）しながら実施した。反応のサンプル（１００μＬ）をそれぞれ０、３、６、２４、４８および１６８時間後に取り出した。デキストランスクラーゼは、１０分間にわたり８０℃で加熱することによって各サンプル中で非活性化した。次に各サンプルを水で１０倍に希釈し、５分間にわたり１４，０００ｒｐｍで遠心分離し、その後に反応中のスクロース消費を測定するためにＨＰＬＣ分析のために２００μＬの上清を使用した。
【０３３２】
各サンプルを分析するために次のＨＰＬＣ条件を適用した：カラム（ＡＭＩＮＥＸ  ＨＰＸ−８７Ｃ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９５）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器。サンプルのＨＰＬＣ分析は、デキストランスクラーゼ反応中のスクロース消費を指示した（図３）。市販のデキストランスクラーゼによるスクロース消費率がｇｔｆ０７６８のスクロース消費率と比較してはるかに緩徐であったことは注目に値する（実施例２）。詳細には、ｇｔｆ０７６８は反応時間の約１７〜１８時間後に大部分のスクロースを消耗したが（図１）、市販のデキストランスクラーゼは同一期間内には約２０％のスクロースしか消耗せず、全部もしくは大部分のスクロースを消耗するのに約１６８時間を要した。
【０３３３】
さらにＨＰＬＣを使用して、反応の他の生成物を分析した。デキストラン収率は、反応中に残留した全ての他の糖類の量を出発スクロースの量から減じることによって逆算した。逆算した数は、デキストラン乾燥重量分析と一致していた。スクロース、ロイクロース、グルコース、フルクトースおよびＤＰ２〜７二糖類は、実施例２に記載したようにＨＰＬＣによって定量した。これらのＨＰＬＣ分析は、市販のデキストランスクラーゼ反応の糖生成物が４９％のデキストラン、０．３％のスクロース、４４％のフルクトース、１％のグルコース、５％のロイクロースおよび１％のＤＰ２〜７オリゴ糖から構成されることを指示した。
【０３３４】
本実施例で生成されたデキストランは、実施例８において、実施例１〜６で合成されたゲル化デキストラン生成物に比較して分析した。
【０３３５】
実施例８
デキストランサンプルの粘度
本実施例では、実施例１〜７で生成されたデキストランポリマーの粘度、ならびに市販起源から得られたデキストランの粘度を測定することについて記載する。粘度測定は、様々な剪断速度で実施した。
【０３３６】
デキストランポリマーサンプルは、実施例１〜７に記載したように調製した。詳細には、酵素反応を実施し、その後にポリマーをメタノール沈降させ、メタノール（１００％）で４回洗浄し、その後に乾燥させた。各サンプルの溶液（２重量％および／または３重量％）は、適切な量のポリマーを脱イオン（ＤＩ）水に加えることによって調製した。各調製物は、次にポリマーが十分に溶液中に存在するようになるまで卓上型ボルテックスミキサーを使用して混合した。これらのサンプルのそれぞれは、（下記の）表２および表３において「ＰＰＴ後」（沈降後）と呼ぶ。ＴＣＩ  Ａｍｅｒｉｃａから得たデキストラン（Ｍｗ＝９５６，９７８）（Ｐｏｒｔｌａｎｄ，ＯＲ；カタログ番号Ｄ００６１）の２重量％溶液は同様に調製した；このデキストランは、下記では「市販デキストラン」と呼ぶ。
【０３３７】
各ポリマー溶液の様々な剪断速度での粘度を決定するために、各溶液は、温度を２０℃で一定に保持している間に粘度計を使用して様々な剪断速度を受けさせた。さらに、実施例１〜７に記載した酵素反応のそれぞれから沈降させずに直接的に得られたポリマーサンプルに様々な剪断速度を受けさせた（表２および３において「ＰＰＴ前」と呼ぶ）。剪断速度は、０〜１０ｒｐｍに増加する勾配プログラムを用いて増加させ、剪断速度は３０秒間毎に０．１７（１／秒）ずつ増加させた。この実験の結果は、表２に列挙した。
【０３３８】
【表３】
2018513249.tif 000013
【０３３９】
ポリマーサンプルは、さらに温度を２０℃で一定に保持している間に粘度計を使用して様々なより高い剪断速度も受けさせた。剪断速度は、１０〜２５０ｒｐｍに増加する勾配プログラムを用いて増加させ、剪断速度は２０秒間毎に７．３６（１／秒）ずつ増加させ
た。この実験の結果は、表３に列挙した。
【０３４０】
【表４】
2018513249.tif 000014
【０３４１】
これらのデータは、配列番号１を含むグルコシルトランスフェラーゼのデキストラン生成物の溶液が、市販で得られたデキストランおよび市販で得られたデキストランスクラーゼのデキストラン生成物の粘度に比較して、大多数の場合に沈降および再溶媒和後にさえ増加した粘度を示すことができることを証明している。この観察所見はさらに、配列番号５、９、１３もしくは１７を含むグルコシルトランスフェラーゼの各ポリマー生成物に当てはまると思われる。
【０３４２】
さらに、表２〜３に基づくと、ｇｔｆ０７６８反応内のスクロースの量が８００ｇ／Ｌから１００ｇ／Ｌへ減少するにつれてデキストラン生成物の粘度は増加すると思われることも注目に値する。詳細には、表３は、それぞれ８００および４００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応のデキストラン生成物について（１４．１１ｒｐｍ／２重量％の負荷で）５．４４ｃＰおよび４９．８９ｃＰの粘度を指示し、表２は、１００ｇ／Ｌのスクロースを含む反応のデキストラン生成物について（ｇｔｆ０７６８、２重量％の負荷）約９５７ｃＰ（１４．１１ｒｐｍの回転で指数的に外挿した）の粘度を指示する可能性がある。この結果は、デキストラン生成物の粘度が反応に最初に提供されるスクロースの濃度を修飾することによって制御できることを示唆している。
【０３４３】
実施例９
ｇｔｆ０７６８により合成されたデキストランのまた別の生成および分析
本実施例は、実施例２に加えて、水、スクロースの量およびｇｔｆ０７６８を含むまた別の反応について記載する。さらに、本実施例は、ｇｔｆ０７６８によって合成されたゲル化生成物の追加の結合分析および分子量分析を提供し、この生成物がデキストランの１つのタイプであることを証明する。
【０３４４】
ｇｔｆ反応を調製するための試薬：
−  スクロース（Ｓｉｇｍａ製品番号Ｓ−９３７８）。
−  リン酸ナトリウムバッファーストック（１Ｍ、ｐＨ６．５、Ｔｅｋｎｏｖａカタログ番号Ｓ０２７６）。
−  Ｇｔｆ０７６８酵素溶液（実施例１において調製した細胞溶解物）。
【０３４５】
Ｇｔｆ反応条件：
２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー（バッファーは１Ｍストック（ｐＨ６．５）からのｄｄＨ２Ｏを用いて希釈した）、１００ｇ／Ｌのスクロースおよび０．１ｍＬのｇｔｆ０７６８酵素溶液を含有する５０ｍＬの反応を調製した。この反応を１００ｒｐｍで２６℃のインキュベーターシェーカー内（Ｉｎｎｏｖａ，Ｍｏｄｅｌ  ４０００）で４３時間にわたり振とうした；反応は、約２４時間後に粘性になった。
【０３４６】
ｇｔｆ酵素は、反応を１０分間にわたり８０℃で加熱することによって非活性化した。粘性生成物を沈降させるために、次に非活性化粘性反応を７５ｍＬの１００％メタノールと混合した。白色沈降物が形成された。上清を注意深くデカントした後に、白色沈降物は７５ｍＬの１００％メタノールを用いて２回洗浄した。固体生成物を４８時間にわたり４５℃のオーブン内の真空下で乾燥させた。
【０３４７】
反応のサンプル（１ｍＬ）をそれぞれ０、０．５、１、２および２４時間後に取り出した。ｇｔｆ酵素は、各サンプル中で１０分間にわたり８０℃で加熱することによって非活性化した。各サンプルは次に、無菌水を用いて１０倍に希釈した。５００μＬの希釈サンプルを遠心管フィルター（ＳＰＩＮ−Ｘ、０．４５μｍのナイロン、２．０ｍＬのポリプロピレンチューブ、Ｃｏｓｔａｒ製品番号８１７０）中に移し、卓上遠心分離機内で１２，０００ｒｐｍで６０分間遠心し、その後にＨＰＬＣ分析のために２００μＬの貫流量を使用して反応中のスクロース消費率を測定した。各サンプルを分析するために次のＨＰＬＣ条件を適用した：カラム（ＡＭＩＮＥＸ  ＨＰＸ−８７Ｃ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９５）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器。サンプルのＨＰＬＣ分析は、０７６８ｇｔｆ反応中の実質的なスクロース消費を指示した。
【０３４８】
さらにＨＰＬＣを使用して、反応の他の生成物を分析した。ポリマー収率は、反応中に残留した全部の他の糖類の量を出発スクロースの量から減じることによって逆算した。逆算した数は、粘性生成物乾燥重量分析と一致していた。スクロース、ロイクロース、グルコースおよびフルクトースは、ＨＰＸ−８７Ｃカラムを備えるＨＰＬＣ（上述したＨＰＬＣ条件）によって定量した。ＤＰ２〜７オリゴ糖類は、次の条件：カラム（ＡＭＩＮＥＸ  ＨＰＸ−４２Ａ炭水化物カラム、３００×７．８ｍｍ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ、製品番号１２５−００９７）、溶離液（水）、流量（０．６ｍＬ／分）、温度（８５℃）、屈折率検出器を用いるＨＰＬＣによって定量した。これらのＨＰＬＣ分析は、０７６８ｇｔｆ反応のグルコシル含有糖生成物が９２．３％のポリマー生成物、１．３％のグルコース、５．０％のロイクロースおよび１．４％のＤＰ２〜７オリゴ糖から構成されることを指示した。
【０３４９】
上記の反応の乾燥デキストラン粉末生成物のサンプル（約０．２ｇ）を分子量分析のために使用した。分子量は、３基のオンライン検出器：Ｗａｔｅｒｓ製の示差屈折計２４１４、Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）製の準弾性光散乱（ＷＥＬＳ）検出器を備えるＷｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ  Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）製のＨｅｌｅｏｓ（商標）２  １８−アングルマルチアングル光散乱（ＭＡＬＳ）測光計およびＷｙａｔｔ製のＶｉｓｃｏＳｔａｒ（商標）示差毛細管式粘度計と結合したＷａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）製のＡｌｌｉａｎｃｅ（商標）２６９５分離モジュールを使用するフローインジェクションクロマトグラフィー法によって決定した。乾燥デキストラン粉末は、２００ｐｐｍのＮａＮ３を含有する水性Ｔｒｉｓ（Ｔｒｉｓ［ヒドロキシメチル］アミノエタン）バッファー（０．０７５Ｍ）中に０．５ｍｇ／ｍＬで溶解させた。デキストランの溶解は、５０℃で一晩振とうすることによって達成した。Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ）からの２基のＡＱＵＡＧＥＬ−ＯＨ  ＧＵＡＲＤカラムを使用してインジェクションピークからデキストランポリマーのピークを分離した。この手法についての移動ベース（ｍｏｂｉｌｅ  ｂａｓｅ）はデキストラン溶媒と同一であり、流量は０．２ｍＬ／分であり、インジェクション量は０．１ｍＬであり、カラム温度は３０℃であった。データ収集のためにはＷａｔｅｒｓ製のＥｍｐｏｗｅｒ（商標）バージョン３のソフトウェアを使用し、マルチ検出器データ整理のためにはＡｓｔｒａ（商標）バージョン６のソフトウェアを使用した。この研究から、デキストランポリマー生成物が１．０２２（±０．０２５）×１０８ｇ／モル（すなわち、大まかに１００，０００，０００Ｄａ）の重量平均分子量（ＭＡＬＳ分析から）、２４３．３３（±０．４２）ｎｍのｚ平均旋回半径（ＭＡＬＳ分析から）および２１５ｎｍのｚ平均流体力学半径（ＱＥＬＳ分析から）を有すると決定された。さらにＱＥＬＳ分析から、デキストランが約０．２５９の粒径分布（ＰＳＤ）の標準偏差を有することも決定されたが、これはデキストランが流体力学的サイズに関して多分散性である可能性が高いことを示している。
【０３５０】
グリコシド結合分析のためには、反応時間が２４時間であった（反応が粘性になった）ことを除いて、本実施例において上述したように５０ｍＬのｇｔｆ反応を調製した。ｇｔｆ酵素は、反応を１０分間にわたり８０℃で加熱することによって非活性化した。次に非活性化粘性反応を再生セルロース製の１２〜１４ｋＤａの分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）を備える頑丈な透析チュービング（Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ（登録商標）４透析チュービング、製品番号１３２７０６、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）中に配置し、室温で１週間にわたり４Ｌのフィルター水に対して透析した。透析中、水は毎日交換した。次に透析粘性反応を沈降させ、本実施例で上述したように乾燥させた。ＧＣ／ＭＳ結合分析のために約０．２ｇの乾燥粉末を提出した。
【０３５１】
結合分析は、本明細書に参照により組み込まれるＰｅｔｔｏｌｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎａｔｕｒｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ７：１５９０−１６０７）によって記載された方法にしたがって実施した。手短には、乾燥デキストランサンプルをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）もしくはＤＭＳＯ中の５％の塩化リチウム中に溶解させ、次に全遊離ヒドロキシル基を水酸化ナトリウム／ＤＭＳＯスラリー、その後にヨードメタンの連続的添加によってメチル化した。メチル化ポリマーは次に塩化メチレン中で抽出し、１２０℃でトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液を使用してモノマー単位に加水分解した。ＴＦＡは次にサンプルから蒸発させ、還元的開環は重水素化ホウ素ナトリウムを使用して実施し、これはさらに重水素原子を用いて還元末端を標識化した。グリコシド結合を加水分解することにより作成されたヒドロキシルは、次に５０℃の温度で塩化アセチルおよびＴＦＡを用いて処理することによってアセチル化した。最後に、誘導体化試薬を蒸発させ、生じたメチル化／アセチル化モノマーをアセトニトリル中で再構成し、ビスシアノプロピルシアノプロピルフェニルポリシロキサンカラムを使用する質量分析法を用いるガスクロマトグラフィー（ＧＣ／ＭＳ）によって分析した。メチルおよびアセチル官能基の相対ポジショニングは、重水素標識とともに、公表データベースと比較できる特有の保持時間指数および質量スペクトルを有する種を生み出した。この方法で、モノマー単位の誘導体は、各モノマーがデキストランポリマー内で最初にどのように連結されたのか、およびモノマーが分岐点であるかどうかを指示した。これらのサンプルを分析した結果（デキストランは最初にＤＭＳＯもしくはＤＭＳＯ／５％のＬｉＣｌ中に溶解させた）は、表４に提供した。
【０３５２】
【表５】
2018513249.tif 000015
【０３５３】
一般に、表４の結果は、上記で分析したデキストラン生成物が、
（ｉ）１位および６位でのみ連結した約８７〜９３重量％のグルコース；
（ｉｉ）１位および３位でのみ連結した約０．１〜１．２重量％のグルコース；
（ｉｉｉ）１位および４位でのみ連結した約０．１〜０．７重量％のグルコース；
（ｉｖ）１位、３位および６位でのみ連結した約７．７〜８．６重量％のグルコース；および
（ｖ）（ａ）１位、２位および６位、または（ｂ）１位、４位および６位でのみ連結した約０．４〜１．７重量％のグルコース
を含むことを指示している。この情報および一部の他の研究（データは示していない）に基づくと、この生成物は、相互から反復して分岐する（平均）長さが約２０ＤＰの長鎖（大多数または全部のα−１，６−結合を含有する）（例えば、長鎖は、順にそれ自体が他の長鎖から分岐することができ、さらにそれ自体が他の長鎖から分離できるなどの、他の長鎖からの分岐鎖であってよい）が存在する分岐鎖構造であることが企図されている。分岐鎖構造は、さらに長鎖からの短枝を含むと思われる；これらの短鎖は、長さが１〜３ＤＰおよび大部分が例えばα−１，３およびα−１，４結合を含むと考えられる。デキストラン中の分岐点は、他の長鎖から分岐している長鎖からであろうと、または長鎖から分岐している短鎖からであろうと、α−１，６結合内に含まれるグルコースからのα−１，３、−１，４または−１，２結合を含むと思われる。デキストランの全分岐点の大まかに２５％は、長鎖に分岐した。
【０３５４】
したがって、水、スクロースおよび配列番号１を含む酵素を含む反応は、生成物の高Ｍｗおよび優勢α−１，６グルコシド結合プロファイルによって決定されるように、極めて大きなゲル化デキストラン生成物を合成した。本実施例で生成されたデキストランは、本明細書に開示した酸化デキストラン化合物を調製するために使用できる。
【０３５５】
実施例１０
室温での酸化デキストランの調製
本実施例では、過ヨウ素酸化合物を使用して室温に保持された反応中で酸化デキストランを生成する工程について記載する。本実施例では実施例２に開示したデキストラン生成物を使用したが、下記の酸化法では実施例９のデキストラン生成物も同様に使用することができる。
【０３５６】
実施例２において生成したデキストラン３ｇは、温度監視のための熱電温度計、ゴム栓および磁気攪拌棒を装備した容量５００ｍＬのエルレンマイヤーフラスコ内で磁気攪拌棒を使用して１００ｍＬの脱イオン（ＤＩ）水中に溶解させた。この調製物に６．９ｇの過ヨウ素酸ナトリウムを加え、これを次に室温（２０〜２５℃）で４８時間撹拌した。この反応は、１５ｇのエチレングリコールの添加によって停止させた。溶解した固体を沈殿させるために、過剰のメタノールを加えた。次に固体材料（過ヨウ素酸塩酸化デキストラン、サンプル製品番号２４０）は、真空濾過によって収集し、９５％エタノールを用いて洗浄し、真空下で乾燥させた。
【０３５７】
したがって、酸化デキストランを調製し、室温に維持した反応から単離した。過ヨウ素酸化合物をこれらの反応における酸化剤として使用した。
【０３５８】
実施例１１
２段階反応工程を使用する室温での酸化デキストランの調製
本実施例では、室温に保持された２段階反応工程を使用する酸化デキストランの製造について記載する。最初の酸化は、過ヨウ素酸化合物を用いて実施し、その後にＮ−オキソアンモニウム塩を用いて第２回酸化を実施した。本実施例では実施例２に開示したデキストラン生成物を使用したが、下記の酸化法では実施例９のデキストラン生成物も同様に使用することができる。
【０３５９】
４．７ｇの過ヨウ素酸ナトリウムは、温度監視のための熱電温度計、ゴム栓および磁気攪拌棒を装備した容量５００ｍＬのエルレンマイヤーフラスコ内で４１．９ｇのＤＩ水中に溶解させた。実施例２で生成した５ｇの（４５ｇのＤＩ水に溶解させた）デキストランをこの調製物に加え、これを次に室温（２０〜２５℃）で５時間撹拌した。この反応は、１１ｇのエチレングリコールの添加によって停止させた。溶解した固体を沈殿させるために、過剰のメタノールを加えた。固体材料（過ヨウ素酸塩酸化デキストラン）は、次に真空濾過によって収集し、９５％エタノールを用いて洗浄し、真空下で乾燥させた。
【０３６０】
１ｇの（上記で調製した）過ヨウ素酸塩酸化デキストランは、温度監視のための熱電温度計、ゴム栓および磁気攪拌棒を装備した容量５００ｍＬのエルレンマイヤーフラスコ内で１００ｍＬの酢酸ナトリウムバッファー（１００ｍＬの５％の酢酸中に溶解させ、水酸化ナトリウムを用いてｐＨ４．６に調整した１．６４ｇの酢酸ナトリウム）に加えた。次にこの調製物に亜塩素酸ナトリウム（０．６８ｇ）および４−アセトアミド−ＴＥＭＰＯ（０．０９６ｇ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を加えた。次にこの調製物に次亜塩素酸ナトリウム（０．７４ｇ）を加え、これを次に室温（２０〜２５℃）で４８時間撹拌した。この反応は過剰量のエタノールを添加することによって停止させ、それにより固体の酸化デキストラン生成物を沈殿させた。このようにして形成された固体（サンプル製品番号１７３）を真空濾過によって収集し、エタノール（９５％）を用いて４回洗浄し、２０〜２５℃の真空下で乾燥させた。
【０３６１】
室温での追加の２段階反応は、様々な反応条件を使用して実施し（表５）、それによりサンプル生成物２４５を調製した。
【０３６２】
【表６】
2018513249.tif 000016
【０３６３】
したがって、酸化デキストランを調製し、室温に維持した２段階酸化反応から単離した。過ヨウ素酸化合物およびＮ−オキソアンモニウム塩は、これらの反応における酸化剤として使用した。
【０３６４】
実施例１２
酸化デキストランはビルダー活性を有する
本実施例では、酸化デキストランがビルダー活性を有するかどうかについての試験を開示する。この活性は、水性条件下での酸化デキストラン材料のカルシウム分散能力を測定することによって決定した。
【０３６５】
各アッセイのために、酸化デキストラン（実施例１０〜１１において調製）は、磁気攪拌棒を使用する撹拌により１００ｍＬの水中に溶解させた。溶解した酸化デキストランの正確な質量を記録し、その後に４．５％の水酸化ナトリウムを使用してｐＨを８に調整した。この溶液に２％の炭酸ナトリウム１０ｇを加え、（必要であれば）次に水酸化ナトリウムを使用してｐＨを１１に調整した。溶液の濁度は、濁度計を使用して測定した。４．４％の酢酸カルシウム溶液は、ガラス製ビュレットを使用して酸化デキストラン溶液中に、各添加後に濁度測定のために取り出したサンプルを用いて滴定した。溶液の透過率（％）が低下した時点に、そのような低下は、酸化デキストランがもはや炭酸カルシウムを分散させないことを指示した。アッセイ中に添加された酢酸カルシウムの量を使用して、酸化デキストランのカルシウム分散能力を決定した。酸化デキストランの各サンプルのカルシウム分散能力は、表６に列挙した。
【０３６６】
【表７】
2018513249.tif 000017
【０３６７】
酸化デキストランの各サンプルは、このアッセイにおける炭酸カルシウムの沈殿を遅延させる能力を示し、それにより酸化デキストランがビルダー能力を有することを指示した。そのようなビルダー能力は、例えば織物ケア組成物におけるように、ビルダーの使用から利益が得られる様々な用途において有用であると企図されている。
【０３６８】
実施例１３
様々な織物上の酸化デキストランの吸着
本実施例は、例えば上記で製造したような、本明細書の酸化デキストランの様々なタイプの織物への吸着度を試験できる方法について開示する。
【０３６９】
最初に、織物表面への酸化デキストランの吸着の相対レベルを決定するために有用であろう較正曲線を作成した。
【０３７０】
公知の濃度（ｐｐｍ）の溶液は、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｒｅｄ  ８０およびトルイジンブルーＯ染料を使用して作成した。これらの溶液の吸光度は、５２０もしくは６２０ｎｍのいずれかでＬＡＭＯＴＴＥ  ＳＭＡＲＴ２比色計を使用して測定した。吸光度情報は、織物サンプルに曝露させた溶液の染料濃度を決定するために使用できるようにプロットした。各較正曲線の濃度および吸光度は、表７および８に提供した。
【０３７１】
【表８】
2018513249.tif 000018
【０３７２】
【表９】
2018513249.tif 000019
【０３７３】
これらの較正曲線は、例えば下記の方法にしたがうことによるなどの、織物表面への酸化デキストランの吸着の相対レベルを決定するために有用な可能性がある。
【０３７４】
脱イオン水中の酸化デキストラン化合物の０．０７重量％または０．２５重量％の溶液を作成した。各溶液は、様々な濃度の化合物を含むいくつかのアリコートに分割した（表９）。ｐＨを修飾するために、例えば酸（希塩酸）もしくは塩基（水酸化ナトリウム）またはＮａＣｌ塩などの他の成分を加えた。
【０３７５】
【表１０】
2018513249.tif 000020
【０３７６】
４つの異なる織物タイプ（クレトン、ポリエステル、６５：３５のポリエステル／クレトン、晒し木綿）を０．１７ｇの細片に裁断した。各細片は、４８ウエルの細胞培養プレート内の２ｍＬウエル内に配置した。各織物サンプルは、１ｍＬの上記の化合物溶液それぞれに曝露させた（表９）（各織物試験に化合物を含まないコントロール溶液を含めた）。織物サンプルは、化合物溶液中に少なくとも３０分間にわたり入れておいた。織物サンプルを化合物溶液から取り出し、未結合化合物を除去するために少なくとも１分間にわたりＤＩ水中ですすぎ洗った。織物サンプルは、次に６０℃で一定の乾燥が達成されるまで少なくとも３０分間乾燥させた。織物サンプルを乾燥させた後に計量し、清潔な４８ウエルの細胞培養プレート内の２ｍＬウエル内に個別に配置した。次に織物サンプルを１ｍＬの２５０ｐｐｍのＤｉｒｅｃｔ  Ｒｅｄ  ８０染料溶液または２５０ｐｐｍのトルイジンブルー染料に曝露させた。サンプルは、少なくとも１５分間にわたり染料溶液中に放置した。各織物サンプルを染料溶液から取り出し、その後に染料溶液を１０倍に希釈した。
【０３７７】
希釈溶液の吸光度は、コントロールサンプルと比較して測定した。織物に吸着した酸化デキストラン化合物の相対尺度は、適切に、Ｄｉｒｅｃｔ  Ｒｅｄ  ８０および／またはトルイジンブルー染料に対して作成された較正曲線に基づいて計算した。詳細には、コントロール（化合物に曝露させていない織物）と比較した酸化化合物に曝露させた織物サンプルについてのＵＶ吸光度の差は、織物に吸着した化合物の相対尺度を表した。ＵＶ吸光度におけるこの差は、さらに、較正曲線（すなわち、ＵＶ吸光度は染料ｐｐｍに変換される）を使用して計算される、織物に結合した（コントロールに結合した染料の量に比した）染料の量として表示することもできよう。正の数はコントロール織物に結合した染料の量に対して過剰である染料量を表すが、他方、負の数はコントロール織物に結合した染料量より少ない染料量を表す。正の数は、酸化デキストラン化合物が織物表面に吸着したことを反映するであろう。
【０３７８】
このアッセイは、酸化デキストランが様々な塩およびｐＨ条件下で様々なタイプの織物に吸着できることを証明するであろうと考えられる。この吸着は、酸化デキストラン化合物が織物ケア用洗剤において（例えば、再付着防止剤として）有用であることを示唆するであろう。
【０３７９】
実施例１４
過酸化物を用いたデキストランの酸化
本実施例は、過酸化物化合物を含む反応内で酸化デキストランを生成できる方法について記載する。詳細には、過酸化水素は、本明細書に開示したデキストランを酸化させるために使用することができた。
【０３８０】
３．６ｇのデキストランを２５０ｍＬのガラス製反応容器内で１１６．４ｍＬのＤＩ水に加え、ｐＨ７．０に調整した。次に、デキストラン含量に基づいて、過酸化水素の３重量／重量％の添加を達成するために、この調製物に３６０ｍｇの３０％の過酸化水素を加えた。この調製物を完全に混合し、ガラス製反応容器内に密封し、１２１℃で６０分間にわたりオートクレーブ滅菌した。この反応をこの処理後に室温に冷却させると、酸化デキストランを含むことが企図されている。
【０３８１】
したがって、酸化デキストランは、過酸化物化合物を含有する反応から調製して単離することができる。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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