(57)【要約】変異型ＩＤＨ２酵素の阻害剤とＤＮＡ脱メチル化剤とを併用してＩＤＨ２変異を有する患者の癌を治療するための方法及び組成物を提供する。【選択図】図１
2018535951.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
変異型イソクエン酸デヒドロゲナーゼ２（ＩＤＨ２）阻害剤及びＤＮＡ脱メチル化剤を被験者に投与することを含む血液悪性腫瘍の治療方法であって、前記変異型ＩＤＨ２阻害剤が、以下の式：
【化１】
2018535951.tif 000017
を有する２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、もしくは多形体（化合物１）であり、前記血液悪性腫瘍が、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする悪性腫瘍である、前記治療方法。
【請求項２】
前記ＩＤＨ２変異が、ＩＤＨ２  Ｒ１４０ＱまたはＲ１７２Ｋ変異である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫またはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記悪性腫瘍が急性骨髄性白血病である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記急性骨髄性白血病が、新たに診断される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
変異型イソクエン酸デヒドロゲナーゼ２（ＩＤＨ２）阻害剤及びＤＮＡ脱メチル化剤を被験者に投与することを含む固形腫瘍の治療方法であって、前記変異型ＩＤＨ２阻害剤が、以下の式：
【化２】
2018535951.tif 000018
を有する２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、もしくはその多形体（化合物１）であり、前記固形腫瘍が、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、前記治療方法。
【請求項７】
化合物１の用量が約２０〜２０００ｍｇ／日である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
化合物１の用量が約５０〜５００ｍｇ／日である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
化合物１の用量が約５０ｍｇ／日である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
化合物１の用量が約１００ｍｇ／日である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
化合物１の用量が約２００ｍｇ／日である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＤＮＡ脱メチル化剤がアザシチジンである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記アザシチジンの用量が約５０〜約５００ｍｇ／ｍ２である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記アザシチジンの用量が約５０〜約２００ｍｇ／ｍ２である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記アザシチジンの用量が約５０ｍｇ／ｍ２である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記アザシチジンの用量が約６０ｍｇ／ｍ２である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記アザシチジンの用量が約７５ｍｇ／ｍ２である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
化合物１及びアザシチジンを同時に投与する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
化合物１及びアザシチジンを連続的に投与する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、もしくはその多形体、及びアザシチジンを含む、医薬組成物。
【請求項２１】
前記悪性腫瘍が急性骨髄性白血病であり、前記方法が請求項２０に記載の組成物を患者に投与することを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項２２】
血液悪性腫瘍の治療方法で使用するための変異型イソクエン酸デヒドロゲナーゼ２（ＩＤＨ２）阻害剤であって、前記方法が、前記変異型ＩＤＨ２阻害剤及びＤＮＡ脱メチル化剤を被験者に投与することを含み、前記変異型ＩＤＨ２阻害剤が、以下の式：
【化３】
2018535951.tif 000019
を有する２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、もしくは多形体（化合物１）であり、前記血液悪性腫瘍が、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする悪性腫瘍である、前記阻害剤。
【請求項２３】
前記ＩＤＨ２変異が、ＩＤＨ２  Ｒ１４０ＱまたはＲ１７２Ｋ変異である、請求項２２に記載の使用のための変異型ＩＤＨ２阻害剤。
【請求項２４】
前記悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫またはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物である、請求項２２または２３に記載の使用のための変異型ＩＤＨ２阻害剤。
【請求項２５】
前記悪性腫瘍が急性骨髄性白血病である、請求項２２〜２４に記載の使用のための変異型ＩＤＨ２阻害剤。
【請求項２６】
前記急性骨髄性白血病が、新たに診断される、請求項２５に記載の使用。
【請求項２７】
固形腫瘍の治療方法で使用するための変異型ＩＤＨ２阻害剤であって、前記方法が、前記変異型ＩＤＨ２阻害剤及びＤＮＡ脱メチル化剤を被験者に投与することを含み、前記変異型ＩＤＨ２阻害剤が、以下の式：
【化４】
2018535951.tif 000020
を有する２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、もしくはその多形体（化合物１）であり、前記固形腫瘍が、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、前記阻害剤。
【請求項２８】
化合物１の用量が約２０〜２０００ｍｇ／日であり；好ましくは約５０〜５００ｍｇ／日；好ましくは約５０ｍｇ／日；好ましくは約１００ｍｇ／日；または好ましくは約２００ｍｇ／日である、請求項２０〜２７に記載の使用のための変異型ＩＤＨ２阻害剤。
【請求項２９】
前記ＤＮＡ脱メチル化剤がアザシチジンであり；好ましくは、アザシチジンの用量が約５０〜約５００ｍｇ／ｍ２であり；好ましくは約５０〜約２００ｍｇ／ｍ２；好ましくは約５０ｍｇ／ｍ２；好ましくは約６０ｍｇ／ｍ２；または好ましくは約７５ｍｇ／ｍ２である、請求項２２〜２８に記載の使用のための変異型ＩＤＨ２阻害剤。
【請求項３０】
化合物１及びアザシチジンを同時に投与するか；または化合物１及びアザシチジンを連続的に投与する、請求項２２〜２９に記載の使用のための変異型ＩＤＨ２阻害剤。
【請求項３１】
２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、もしくはその多形体、及びアザシチジンを含む、医薬組成物。
【請求項３２】
前記悪性腫瘍が急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）であり、前記方法が、請求項３５に記載の医薬組成物を患者に投与することを含む、請求項３１に記載の使用のための変異型ＩＤＨ２阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１５年１０月１５日に出願された米国仮特許出願第６２／２４２，２１８号の優先権の利益を主張するものであり、その開示は、その全体を参照として本明細書に援用する。
本明細書では、血液悪性腫瘍及び固形腫瘍を治療するための併用療法を提供する。一実施形態では、治療は、ＩＤＨ２阻害剤及びＤＮＡ脱メチル化剤による治療を含む。
【背景技術】
【０００２】
イソクエン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＤＨ）は、イソクエン酸から２−オキソグルタル酸（すなわち、α−ケトグルタル酸）への酸化的脱カルボキシル化を触媒する。これらの酵素は２つの異なるサブクラスに属し、そのうちの１つは電子受容体としてＮＡＤ（＋）を、他方はＮＡＤＰ（＋）を利用する。５種のイソクエン酸デヒドロゲナーゼ：ミトコンドリアマトリックスに局在する３種のＮＡＤ（＋）依存性イソクエン酸デヒドロゲナーゼ、ならびに一方がミトコンドリア型及び他方が主に細胞質ゾル型である２種のＮＡＤＰ（＋）依存性イソクエン酸デヒドロゲナーゼが報告されている。各ＮＡＤＰ（＋）依存性アイソザイムはホモ二量体である。
【０００３】
ＩＤＨ２（イソクエン酸脱水素酵素２（ＮＡＤＰ＋）、ミトコンドリア型）は、ＩＤＨ；ＩＤＰ；ＩＤＨＭ；ＩＤＰＭ；ＩＣＤ−Ｍ；またはｍＮＡＤＰ−ＩＤＨとしても知られている。この遺伝子によってコードされるタンパク質は、ミトコンドリアで見出されるＮＡＤＰ（＋）依存性イソクエン酸脱水素酵素である。それは中間代謝及びエネルギー生産において役割を果たす。このタンパク質は、ピルビン酸デヒドロゲナーゼ複合体と緊密に会合または相互作用し得る。ヒトＩＤＨ２遺伝子は、アミノ酸４５２のタンパク質をコードする。ＩＤＨ２のヌクレオチド及びアミノ酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＭ＿００２１６８．２及びＮＰ＿００２１５９．２にそれぞれ見出すことができる。ヒトＩＤＨ２のヌクレオチド及びアミノ酸配列は、例えば、Ｈｕｈらによって登録（ＮＯＶ−１９９２）されたＥＭＢＬ／ＧｅｎＢａｎｋ／ＤＤＢＪデータベース；及びＭＧＣ  Ｐｒｏｊｅｃｔ  Ｔｅａｍ，Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．１４：２１２１−２１２７（２００４）にも記載されている。
【０００４】
非変異体、例えば野生型のＩＤＨ２は、イソクエン酸からα−ケトグルタル酸（α−ＫＧ）への酸化的脱カルボキシル化を触媒し、それにより、例えばフォワード反応においてＮＡＤ＋（ＮＡＤＰ＋）をＮＡＤＨ（ＮＡＤＰＨ）に還元する：
イソクエン酸＋ＮＡＤ＋（ＮＡＤＰ＋）→α−ＫＧ＋ＣＯ２＋ＮＡＤＨ（ＮＡＤＰＨ）＋Ｈ＋。
【０００５】
特定の癌細胞に存在するＩＤＨ２の変異は、この酵素に、α−ケトグルタル酸からＲ（−）−２−ヒドロキシグルタル酸（２ＨＧ）へのＮＡＰＨ依存性の還元を触媒する新しい能力を付与することが見出されている。２ＨＧは野生型ＩＤＨ２によって形成されることはない。２ＨＧの産生は、癌の形成及び進行に寄与すると考えられている（Ｄａｎｇ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ４６２：７３９−４４，２００９）。
【０００６】
体細胞性のＩＤＨ２変異は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）及び骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を含む固形及び血液腫瘍ならびに前悪性疾患の疾患群において生じる。ＡＭＬ患者集団の約１５％にＩＤＨ２遺伝子変異が含まれており、この変異は腫瘍性代謝産物２ＨＧの産生を引き起こし、２ＨＧの蓄積はＤＮＡ脱メチル化表現型を生じるＤＮＡデメチラーゼの１０−１１遺伝子転座（ＴＥＴ）群を阻害する。ＤＮＡメチル化の増大は、ＡＭＬの分化阻害及び増殖を招く（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４０：６２２−６２６，２０１３）。
【０００７】
ＩＤＨ２変異型酵素の選択的阻害剤の開発は、ＩＤＨ２変異を有するＡＭＬ患者に治療効果をもたらす可能性を提供している。臨床において、芽細胞集団の減少と分化した機能的血液細胞というベネフィットを伴う好適な奏効があった。しかしながら、全体的に良好な奏効ではあっても、患者に遺伝的負荷は存在する。したがって、ＩＤＨ２変異を有する癌を治療するための改善された療法が必要とされている。
【０００８】
概要
一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤とＤＮＡ脱メチル化剤とを被験者に併用投与することによって血液悪性腫瘍を治療する方法を、本明細書において提供する。
【０００９】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫もしくはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物などの血液悪性腫瘍の治療方法であって、被験者に治療有効量の２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、もしくは多形体（化合物１）と、ＤＮＡ脱メチル化剤とを投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【００１０】
一実施形態では、ＤＮＡ脱メチル化剤はシチジン類似体である。
【００１１】
一実施形態では、本明細書において提供する方法で有用なシチジン類似体には、５−アザシチジン（アザシチジン）、５−アザデオキシシチジン（デシタビン）、シタラビン、プソイドイソシチジン、ゲムシタビン、ゼブラリン、ＦＣｄＲ、エムトリバ、５，６−ジヒドロ−５−アザシチジン及びプロカインが含まれるが、これらに限定されない。一実施形態では、シチジン類似体は、デシタビンまたはアザシチジンである。一実施形態では、シチジン類似体はアザシチジンである。
【００１２】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫もしくはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物などの血液悪性腫瘍の治療方法であって、被験者に治療有効量の化合物１とアザシチジンとを投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【００１３】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫もしくはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物などの血液悪性腫瘍の治療方法であって、被験者に治療有効量の化合物１とシチジン類似体とを含む医薬組成物を投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【００１４】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫もしくはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物などの血液悪性腫瘍の治療方法であって、被験者に治療有効量の化合物１とアザシチジンとを含む医薬組成物を投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【００１５】
いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍は、進行性の血液悪性腫瘍である。
【００１６】
いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍はＡＭＬである。いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍は、新たに診断されたＡＭＬである。いくつかの実施形態では、血液悪性腫瘍は、再発性及び／または難治性ＡＭＬである。
【００１７】
いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍はＭＤＳである。いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍は、ハイリスクＭＤＳである。
【００１８】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、神経膠腫、黒色腫、軟骨肉腫、または胆管癌などの固形腫瘍の治療方法であって、被験者に治療有効量の化合物１とＤＮＡ脱メチル化剤とを投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【００１９】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、神経膠腫、黒色腫、軟骨肉腫、または胆管癌などの固形腫瘍の治療方法であって、被験者に治療有効量の化合物１とアザシチジンとを投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【００２０】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、神経膠腫、黒色腫、軟骨肉腫、または胆管癌などの固形腫瘍の治療方法であって、被験者に治療有効量の化合物１とシチジン類似体とを含む医薬組成物を投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【００２１】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、神経膠腫、黒色腫、軟骨肉腫、または胆管癌などの固形腫瘍の治療方法であって、被験者に治療有効量の化合物１とアザシチジンとを含む医薬組成物を投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【００２２】
一実施形態では、治療有効量の化合物１とシチジン類似体とを含む医薬組成物を本明細書において提供する。
【００２３】
一実施形態では、治療有効量の化合物１とアザシチジンとを含む医薬組成物を本明細書において提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】セクションＡは、以下の連続処置：アザシチジンでの３日間の前処置（ＱＤｘ３）、続いて化合物１での１週間の処置、及びエリスロポエチン（ＥＰＯ）＋化合物１での１週間の処置のための化合物１とアザシチジン（ＡＺＡ）の併用スケジュール及び投薬パラダイムを示す。細胞を１８日目に採取し、分化及び細胞死をモニタリングするための様々なエンドポイントアッセイに供した。セクションＢは、以下の同時処置：アザシチジンと化合物１の７日間の併用処置、続いてアザシチジン、化合物１及びＥＰＯによる７日間の処置のための化合物１とアザシチジンの併用スケジュール及び投薬パラダイムを示す。細胞を１４日目に採取し、分化及び細胞死をモニタリングするための様々なエンドポイントアッセイに供した。
【００２５】
【図２Ａ】アザシチジンと化合物１の連続使用による分化マーカーへの併用効果を示す。ヘモグロビン形成についてペレットを１８日目に観察した（ｉ）。処置した細胞をｑＲＴ−ＰＣＲ（ｉｉ）及びＨＢＧ  ｑＲＴ−ＰＣＲ（ｉｉｉ）に供した。
【図２Ｂ】アザシチジンと化合物１の同時使用による分化マーカーへの併用効果を示す。ヘモグロビン形成についてペレットを１４日目に観察した（ｉ）。処置した細胞をｑＲＴ−ＰＣＲ（ｉｉ）及びＨＢＧ  ｑＲＴ−ＰＣＲ（ｉｉｉ）に供した。
【００２６】
【図３】幹細胞マーカーに対するアザシチジン及び化合物１の併用効果を示す。連続スケジュール及び同時スケジュールについて、フローサイトメトリー分析を実施した。造血前駆細胞（ＣＤ３４＋／ＣＤ３８＋）（ｉ）及び幹細胞（ＣＤ３４＋／ＣＤ３８−）（ｉｉ）集団をＤＭＳＯ＋ＥＰＯに対して正規化し、プロットした。単一の薬剤としてのＡＺＡまたは化合物１に比べて、併用することによって相加効果を上回ることを示す赤いフォントとともに、集団の割合減少の値を示す。
【００２７】
【図４】細胞死マーカーに対するアザシチジン及び化合物１の併用効果を示す。連続（１８日目）及び同時（１４日目）投薬スケジュールについて、アネキシンＶ及び７−ＡＡＤフローサイトメトリー分析を実施した。集団をＤＭＳＯ＋ＥＰＯに対して正規化し、アネキシンＶ＋及び／または７−ＡＡＤ＋の割合の倍率変化をプロットした。
【００２８】
【図５】リアルタイム増殖（ｉ）及び（ｉｉｉ）ならびにアポトーシス（ｉｉ）及び（ｉｖ）（ＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｚｏｏｍ）に対する、アザシチジンと化合物１の連続使用による併用効果を示す。ＴＦ−１  Ｒ１４０Ｑ細胞を、１μＭのＱＤｘ３アザシチジンを含むフラスコ中で、バルクで前処理し、次に１０、３及び０．３μＭの化合物１濃度及びカスパーゼ３／７色素（Ｅｓｓｅｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから入手）でプレーティングし、ＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｚｏｏｍ上で最大１０４時間、リアルタイムの増殖及びアポトーシスをモニタリングした。
【００２９】
【図６】リアルタイム増殖（ｉ）及び（ｉｉｉ）ならびにアポトーシス（ｉｉ）及び（ｉｖ）（ＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｚｏｏｍ）に対する、アザシチジンと化合物１の同時使用による併用効果を示す。ＴＦ−１  Ｒ１４０Ｑ細胞を、アザシチジン（１及び０．３μＭ）ならびに化合物１（１μＭ）の組合せとともにプレーティングし、ＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｚｏｏｍ上で最大１０４時間、リアルタイムの増殖及びアポトーシスを画像化した。
【００３０】
【図７】早期（４日目）に促進された分化に対する、アザシチジンと化合物１の連続使用による併用効果を示す。
【００３１】
【図８】ＣＤ３４及びＣＤ３８マーカーのプロファイリングに対する、アザシチジンと化合物１の併用効果を示す。連続（ｉ）（図８Ａ）及び同時（ｉｉ）（図８Ｂ）スケジュールについて、ＣＤ３４及びＣＤ３８フローサイトメトリーを実施した。
【００３２】
【図９】アネシシンＶ／７−ＡＤＤプロファイリングに対する、アザシチジンと化合物１の併用効果を示す。細胞を、連続（ｉ）（図９Ａ）及び同時（ｉｉ）（図９Ｂ）スケジュールで行うアネキシンＶ／７−ＡＤＤフローサイトメトリーに供した。
【００３３】
【図１０】化合物１の形態１のＸ線粉末回折図（ＸＰＲＤ）である。
【００３４】
【図１１】化合物１の形態２のＸ線粉末回折図（ＸＰＲＤ）である。
【００３５】
【図１２】化合物１の形態３のＸ線粉末回折図（ＸＰＲＤ）である。
【００３６】
【図１３】化合物１の形態４のＸ線粉末回折図（ＸＰＲＤ）である。
【００３７】
【図１４】化合物１の形態５のＸ線粉末回折図（ＸＰＲＤ）である。
【００３８】
【図１５】化合物１の形態６のＸ線粉末回折図（ＸＰＲＤ）である。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
詳細な説明
以下の説明または図面に示す構成要素の構築及び配置の詳細は、限定することを意図するものではない。本発明を実施するための他の実施形態及び異なる方法が明白に含まれる。また、本明細書中で使用する表現及び用語は、説明のためのものであって、限定するものとみなすべきではない。本明細書中の「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、または「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ）」、及びそれらの変形の使用は、その後に列挙するアイテム及びその均等物ならびに追加のアイテムを包含することを意味する。
【００４０】
［定義］
用語「変異型ＩＤＨ２阻害剤」または「ＩＤＨ２変異体（複数可）阻害剤」とは、分子、例えば、ポリペプチド、ペプチド、もしくは小分子（例えば、１，０００ダルトン未満の分子）、またはアプタマーを意味し、ＩＤＨ２変異体サブユニットに結合し、例えば二量体、例えば変異型ＩＤＨ２サブユニットのホモ二量体または変異型及び野生型サブユニットのヘテロ二量体の形成を阻害することにより、新規活性を阻害する。いくつかの実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤の非存在下での活性に比べて、新規活性の阻害は、少なくとも約６０％、７０％、８０％、９０％、９５％または９９％である。一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤は化合物１である。
【００４１】
用語「２ＨＧレベルの上昇」とは、変異型ＩＤＨ２対立遺伝子を保有していない被験者よりも、変異型ＩＤＨ２対立遺伝子を保有している被験者において、１０％、２０％、３０％、５０％、７５％、１００％、２００％、５００％またはそれ以上多くの２ＨＧが存在することを意味する。用語「２ＨＧレベルの上昇」は、細胞内、腫瘍内、腫瘍を含む器官内、または体液内の２ＨＧの量を指す場合がある。
【００４２】
用語「体液」とは、胎児を取り囲む羊水、房水、血液（例えば、血漿）、血清、脳脊髄液、耳垢、糜粥、カウパー腺液、女性射精液、間質液、リンパ液、母乳、粘液（例えば、鼻漏、痰）、胸水、膿、唾液、皮脂、精液、血清、汗、涙、尿、膣分泌物、または嘔吐物のうちの１つ以上を含む。
【００４３】
用語「阻害する」または「予防する」には、完全及び部分的阻害及び予防の両方が含まれる。阻害剤は、意図する標的を完全にまたは部分的に阻害し得る。
【００４４】
用語「被験者」は、ヒト及び非ヒト動物を含むことを意図する。例示的なヒト被験者として、障害、例えば、本明細書に記載の障害を有するヒト患者（患者と称される）または正常な被験者が挙げられる。本発明の一態様の用語「非ヒト動物」は、すべての脊椎動物、例えば非哺乳類（ニワトリ、両生類、爬虫類など）及び哺乳類、例えば非ヒト霊長類、家畜及び／または農業上有用な動物、例えばヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタなどを含む。
【００４５】
用語「治療する」とは、疾患／障害（例えば、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、もしくはリンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫）などの進行した血液悪性腫瘍）の発生もしくは進行を低減、抑制、減弱、縮小、抑止、もしくは安定化するか、疾患／障害の重篤度を緩和するか、または疾患／障害に関連する症状を改善することを意味する。
用語「骨髄異形成症候群」とは、血液の細胞成分（赤血球、白血球（リンパ球以外）及び血小板（またはそれらの前駆細胞である巨核球）のうちの１つ以上の産生異常を特徴とする血液学的状態を指す。
用語「再発」とは、治療後に、ＡＭＬを含む癌が寛解した患者が、再び癌細胞を有するようになる状況を指す。
用語「難治性または耐性」とは、集中治療後であっても、患者が、体内に残存する癌細胞を有する状況を指す。
障害を治療するのに有効な、薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、またはその多形体を含む化合物の量、または「治療有効量」または「治療有効用量」とは、障害を有する被験者を、そのような治療の非存在下で予想される以上に、治癒、軽減、緩和または改善する際の、被験者への単回または複数回用量の投与に有効な、薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、またはその多形体を含む、化合物の量を指す。
白血病、特にＡＭＬの治療に対する奏効は、ＡＭＬの国際ワーキンググループ奏効基準に基づいて評価することができる（Ｃｈｅｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｒｅｖｉｓｅｄ  ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  ｆｏｒ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，  ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｒｉｔｅｒｉａ，  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｕｔｃｏｍｅｓ，ａｎｄ  ｒｅｐｏｒｔｉｎｇ  ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ．  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ２００３；２１（２４）：４６４２−９）。
【表１】
2018535951.tif 000003
キーワード：ＡＭＬ＝急性骨髄性白血病；ＣＲ＝完全寛解；ＥＭＤ＝髄外疾患；ＩＷＧ＝国際ワーキンググループ；ＮＡ＝該当なし
【００４６】
ＭＤＳについては、骨髄異形成における修正国際ワーキンググループ（ＩＷＧ）奏効基準に基づいて治療に対する奏効を評価することができる（Ｃｈｅｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  ２００６；１０８：４１９−４２５）
ＭＤＳの自然経過を変更するための修正国際ワーキンググループ奏効基準
【表２】
2018535951.tif 000004
2018535951.tif 000005
ＩＷＧ奏効基準に対する削除は示していない。
ヘモグロビンをｇ／ｄＬからｇ／Ｌに変換するには、ｇ／ｄＬを１０倍する。
ＭＤＳは骨髄異形成症候群を示す；Ｈｇｂ、ヘモグロビン；ＣＲ、完全寛解；ＨＩ、血液学的改善；ＰＲ、部分寛解；ＦＡＢ、Ｆｒｅｎｃｈ−Ａｍｅｒｉｃａｎ−Ｂｒｉｔｉｓｈ；ＡＭＬ、急性骨髄性白血病；ＰＦＳ、無増悪生存；ＤＦＳ、無病生存。
＊異形成の変化は、正常範囲の異形成の変化を考慮する必要がある（変更点）。４１
†ＩＷＧ奏効基準に対する変更点。
‡いくつかの状況では、プロトコール療法は、４週間の期間より前にさらなる治療（例えば、地固め、維持）の開始を必要とする場合がある。そのような患者は、治療開始時点で適合する奏効カテゴリーに含めることができる。反復化学療法コース中の一時的な血球減少は、前回のコースを上回るカウント数に回復する限りにおいては、奏効の持続性を阻むものとみなすべきではない。
血液学的改善のための修正国際ワーキンググループ奏効基準
【表３】
2018535951.tif 000006
ＩＷＧ奏効基準に対する削除は示していない。
ヘモグロビンレベルをｇ／ｄＬからｇ／Ｌに変換するには、ｇ／ｄＬを１０倍する。
Ｈｇｂはヘモグロビンを示す；ＲＢＣ、赤血球；ＨＩ、血液学的改善。
＊前処置は、≧１週間離した（変更点）少なくとも２回の測定の平均をカウントしている（輸血に影響を受けない）。
†ＩＷＧ奏効基準に対する変更点
‡急性感染、反復化学療法（変更点）、消化管出血、溶血などの別の説明がなされない場合。個々の奏効パターンだけでなく、２種類の赤血球及び血小板の奏効を全体として報告することが推奨される。
【００４７】
【００４８】
【００４９】
【００５０】
【００５１】
【００５２】
【００５３】
【００５４】
【００５５】
【００５６】
【００５７】
【００５８】
【００５９】
【００６０】
【００６１】
【００６２】
【００６３】
【００６４】
【００６５】
【００６６】
【００６７】
【００６８】
【００６９】
【００７０】
【００７１】
【００７２】
【００７３】
【００７４】
【００７５】
【００７６】
【００７７】
【００７８】
【００７９】
【００８０】
【００８１】
【００８２】
【００８３】
【００８４】
【００８５】
【００８６】
【００８７】
【００８８】
【００８９】
【００９０】
【００９１】
【００９２】
【００９３】
【００９４】
【００９５】
【００９６】
【００９７】
【００９８】
【００９９】
【０１００】
本明細書中で使用する場合、ＥＣＯＧステータスとは、米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）のパフォーマンスステータスのことを指し（Ｏｋｅｎ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ．  Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  １９８２；５（６）：６４９−６５５）、これを以下に示す：
【表４】
2018535951.tif 000007
【０１０１】
一実施形態では、有効量の本明細書に記載の化合物を投与することを含む、患者の米国東海岸癌臨床試験グループのパフォーマンスステータス（ＥＣＯＧ）を改善するための方法を本明細書で提供する。
【０１０２】
さらなる癌治療剤に関して本明細書中で使用する用語「併用投与する」とは、本明細書において提供する化合物とともに追加の癌治療剤を、単一の剤形（例えば、化合物及び上記第二の治療薬を含有する組成物）の一部として、または別個の複数の剤形として投与し得ることを意味する。あるいは、本明細書において提供する化合物の投与の前に、連続して、または後に、さらなる癌治療剤を投与してもよい。そのような併用療法処置では、本明細書において提供する化合物及び第二の治療薬（複数可）の両方を、従来の方法によって投与する。本明細書において提供する化合物及び第二の治療薬の両方を含む組成物を被験者へ投与することは、治療コースの間の別の時点において、前記被験者に同じ治療薬、任意の他の第二の治療薬または本明細書において提供する任意の他の化合物を別個に投与することを必ずしも排除するものではない。追加の癌治療に関して本明細書中で使用する用語「併用投与する」とは、追加の癌治療を、本明細書において提供する化合物の投与の前に、連続して、同時に、または後に行い得ることを意味する。
【０１０３】
用語「ＤＮＡ脱メチル化剤」とは、メチル基のＤＮＡへの転移を阻害する物質を指す。一実施形態では、ＤＮＡ脱メチル化剤はシチジン類似体である。
【０１０４】
本明細書中で言及する用語「シチジン類似体」とは、シチジン類似体の遊離塩基、またはその塩、溶媒和物、水和物、共結晶、複合体、プロドラッグ、前駆体、代謝産物、及び／または誘導体を包含することを意図する。特定の実施形態では、本明細書で言及するシチジン類似体は、シチジン類似体の遊離塩基、またはその塩、溶媒和物、水和物、共結晶または複合体を包含する。特定の実施形態では、本明細書で言及するシチジン類似体は、シチジン類似体の遊離塩基、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物を包含する。
【０１０５】
本明細書中で使用する用語「他の立体異性体を実質的に含まない」とは、１つ以上の選択した立体中心で、少なくとも約６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の選択した立体化学を有する化合物で富化した調製物を意味する。
【０１０６】
用語「富化した」とは、少なくとも指定した割合の調製物が、１つ以上の選択した立体中心で選択した立体化学を有する化合物であることを意味する。
【０１０７】
用語「結晶性の」とは、高度に規則的な化学構造を有する固体を指す。特に、結晶性の化合物１は、化合物１の１つ以上の単結晶形態として製造してもよい。本願の目的のために、用語「結晶形」、「単結晶形」及び「多形体」は同義語であり；この用語は、異なる特性（例えば、異なるＸＲＰＤパターン及び／または異なるＤＳＣスキャン結果）を有する結晶を区別する。用語「多形体」は、疑似多形体を含み、これらは、一般的には物質の異なる溶媒和物であり、したがってその性質は互いに異なる。したがって、化合物１のそれぞれの異なる多形体及び疑似多形体は、本明細書においては明確な単結晶形態であると考えられる。
【０１０８】
用語「実質的に結晶性の」とは、少なくとも特定の重量％の結晶性であり得る形態を指す。特定の重量％とは、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．９％、または１０％〜１００％の任意の百分率である。いくつかの実施形態では、実質的に結晶質とは、少なくとも７０％の結晶性である化合物１を指す。他の実施形態では、実質的に結晶性とは、少なくとも９０％の結晶性である化合物１を指す。
【０１０９】
用語「単離された」とは、化合物の少なくとも特定の重量％の特定の結晶形態であり得る形態を指す。特定の重量％とは、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．９％、または９０％〜１００％の任意の百分率である。
【０１１０】
用語「溶媒和物または溶媒和物の」とは、本発明の結晶形を含む化合物と１つ以上の溶媒分子との物理的会合を意味する。この物理的会合には、水素結合が含まれる。特定の場合には、溶媒和物は、例えば、１つ以上の溶媒分子を結晶性固体の結晶格子に組み込む場合に単離することができる。「溶媒和物または溶媒和物の」は、溶液相及び単離可能な溶媒和物の両方を包含する。代表的な溶媒和物として、例えば、水和物、エタノラートまたはメタノラートが挙げられる。
【０１１１】
用語「水和物」とは、溶媒分子が所定の化学量論量で存在するＨ２Ｏである溶媒和物であり、例えば、半水和物、一水和物、二水和物、または三水和物を含む場合がある。
【０１１２】
用語「混合物」は、混合物の相状態（例えば、液体または液体／結晶）にかかわらず、混合物の組合せ要素を指すために用いる。
【０１１３】
用語「シーディング」は、再結晶または結晶化を開始させるための結晶性物質の添加を指すために用いる。
【０１１４】
用語「貧溶媒」は、その結晶形を含む化合物が難溶性である溶媒を指すために用いる。
【０１１５】
用語「薬学的に許容可能な担体またはアジュバント」とは、本発明の一態様の化合物とともに被験者に投与してもよく、その薬理学的活性を破壊せず、治療量の化合物を送達するのに十分な用量で投与する場合に非毒性である担体またはアジュバントを指す。
【０１１６】
本明細書中で使用する用語「薬学的に許容可能な塩」とは、その用語が指す化合物の非毒性の酸または塩基付加塩を指す。薬学的に許容可能な塩の例は、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９７７，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  Ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  Ｓａｌｔｓ．”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．Ｖｏｌ．６６，ｐｐ．１−１９に記載されている。
【０１１７】
用語「約（ａｂｏｕｔ）」とは、およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）、ほぼ（ｉｎ  ｔｈｅ  ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ）、大まかに（ｒｏｕｇｈｌｙ）、または大体（ａｒｏｕｎｄ）を意味する。用語「約」を数値範囲とともに使用する場合、この用語はその数値範囲の上及び下の境界を拡張することによってその範囲を変更する。一般に、用語「約」は、本明細書においては、示す値の上下の数値を１０％の分散で変更するために使用する。
【０１１８】
化合物
一実施形態では、化合物１は、以下の式：
【化１】
2018535951.tif 000008
を有する２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、もしくは多形体である。
【０１１９】
化合物１は、１つ以上の同位体置換を含む場合もある（「同位体置換体」）。例えば、Ｈは、１Ｈ、２Ｈ（Ｄまたは重水素）、及び３Ｈ（Ｔまたはトリチウム）を含む任意の同位体形態であってもよく；Ｃは、１２Ｃ、１３Ｃ、及び１４Ｃを含む任意の同位体形態であってもよく；Ｏは、１６Ｏ及び１８Ｏを含む任意の同位体形態であってもよい；などである。例えば、化合物１を、少なくとも約６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のＨ、Ｃ及び／またはＯの特定の同位体形態で富化する。
【０１２０】
特定の実施形態では、化合物１を複数の互変異性体形態で表してもよく、そのような場合、本発明の一態様は、単一の互変異性体形態（例えば、ケト−エノール互変異性体）のみを表し得る場合であっても、本明細書に記載する化合物のすべての互変異性体を含む。そのような化合物１の異性体はすべて本明細書に明示的に含まれる。化合物１の合成は、２０１３年７月２５日に公開された米国公開出願ＵＳ−２０１３−０１９０２８７−Ａ１に記載されており、その全体を参照として本明細書に援用する。
【０１２１】
化合物１の対応する塩、例えば薬学的に許容可能な塩を調製し、精製し、及び／または取り扱うことが好都合または望ましい場合がある。薬学的に許容可能な塩の例は、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９７７，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  Ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  Ｓａｌｔｓ．”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．Ｖｏｌ．６６，ｐｐ．１−１９に記載されている。
【０１２２】
例えば、化合物１がアニオン性であるか、またはアニオン性であり得る官能基を有する（例えば、−ＮＨ−が−Ｎ−−であり得る）場合、塩を適切なカチオンで形成してもよい。適切な無機カチオンの例として、Ｎａ＋及びＫ＋などのアルカリ金属イオン、Ｃａ２＋及びＭｇ２＋などのアルカリ土類カチオン、及びＡｌ３＋などの他のカチオンが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。いくつかの好適な置換アンモニウムイオンの例は：エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、及びトロメタミン、ならびにリジン及びアルギニンなどのアミノ酸由来のものである。一般的な第四級アンモニウムイオンの例は、Ｎ（ＣＨ３）４＋である。
【０１２３】
化合物１がカチオン性であるか、またはカチオン性であり得る官能基を有する（例えば、−ＮＨＲが−ＮＨ２Ｒ＋であり得る）場合、塩を適切なアニオンで形成してもよい。適切な無機アニオンの例として、以下の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸、及び亜リン酸に由来するものが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。
【０１２４】
適切な有機アニオンの例として、以下の有機酸：２−アセチオキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、及び吉草酸由来のものが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。一実施形態では、化合物１は、２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オールのメシル酸塩を含む。好適な高分子有機アニオンの例として、以下の高分子酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロース由来のものが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。
【０１２５】
したがって、本明細書において提供する方法及び医薬組成物において使用するための化合物１は、化合物１それ自体、ならびにその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、または多形体を含む。化合物１の代謝産物は、特許出願公開ＷＯ２０１５／００６５９２に開示されており、前記文献はその全体を参照として本明細書に援用する。本明細書において提供する化合物１を、適切な官能性を付加することによって修飾し、プロドラッグに変換して、選択した生物学的特性、例えば、特定の組織への標的化などを高めてもよい。そのような修飾（すなわち、プロドラッグ）は、当該技術分野において公知であり、所定の生物学的区画（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系）への生物学的浸透を高め、経口利用可能性を高め、溶解性を高めて注射によって投与できるようにし、代謝を変化させ、及び排泄率を変化させるものを含む。プロドラッグの例として、エステル（例えば、リン酸塩、アミノ酸（例えばバリン）エステル）、カルバミン酸塩及び他の薬学的に許容可能な誘導体が挙げられ、被験者への投与の際に活性化合物を提供することができる。
【０１２６】
化合物１は、様々な固体形態で存在し得ることが見出されている。一実施形態では、純粋な結晶形態を含む固体形態を本明細書において提供する。別の実施形態では、溶媒和形態及び非晶形を含む固体形態を本明細書において提供する。本開示は、化合物１の特定の固体形態を提供する。特定の実施形態では、本開示は、本明細書に記載する形態の化合物１を含む組成物を提供する。提供する組成物のいくつかの実施形態では、化合物１は、１つ以上の固体形態の混合物として存在し；提供する組成物のいくつかの実施形態では、化合物１は、単一の形態で存在する。
【０１２７】
一実施形態では、化合物１は、単結晶形態、または本明細書に記載の単結晶形態のいずれか１つである。化合物１の結晶形の合成は、２０１５年２月５日に公開された国際出願公開ＷＯ２０１５／０１７８２１及び２０１５年２月４日に出願された米国仮出願第６１／１１２，１２７号に記載されており、両文献はその全体を参照として本明細書に援用する。また、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体もしくは希釈剤を含む医薬組成物；及び化合物１を提供し、この場合化合物１は単結晶形であるか、または本明細書に記載の結晶形のいずれか１つである。また、医薬組成物を調製するための化合物１の使用も提供し、この場合化合物１は、単結晶形態または本明細書に記載の単結晶形態のいずれか１つである。
【０１２８】
本明細書において、化合物１の結晶形を記載するための特性情報の分類を提供する。しかしながら、そのような特定の形態が所与の組成物に存在することを決定するために、すべてのそのような情報が当業者にとって必要になるわけではないが、当業者が特定の形態の存在を確立するのに十分であると認識するであろう特性情報の任意の部分を使用して特定の形態の決定を達成することができること、例えば、そのような特定の形態が存在することを当業者が認識するのに単一の識別ピークでさえも十分であり得ることを理解すべきである。
【０１２９】
一実施形態では、化合物１の少なくとも特定の重量％が結晶性である。特定の重量％は、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．９％、または１０％〜１００％の任意の百分率であってもよい。化合物１の特定の重量％が結晶性である場合、化合物１の残りは化合物１の非晶形である。結晶性の化合物１の非限定的な例は、化合物１の単結晶形態または異なる単結晶形態の混合物を含む。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも７５重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも８０重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも８３重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも８５重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも８７重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも９０重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも９３重量％の結晶性である。いくつかの他の実施形態では、化合物１は少なくとも９５重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも９７重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は、少なくとも９９重量％の結晶性である。
【０１３０】
別の実施形態では、結晶性化合物１の特定の重量％は、特定の単結晶形態または単結晶形態の組合せである。特定の重量％は、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．９％、または１０％〜１００％の任意の百分率であってもよい。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも７５重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は少なくとも８０重量％の結晶性である。いくつかの実施形態では、化合物１は、少なくとも８３重量％の単結晶形態である。いくつかの実施形態では、化合物１は、少なくとも８５重量％の単結晶形態である。いくつかの実施形態では、化合物１は、少なくとも８７重量％の単結晶形態である。いくつかの実施形態では、化合物１は、少なくとも９０重量％の単結晶形態である。いくつかの実施形態では、化合物１は、少なくとも９３重量％の単結晶形態である。いくつかの他の実施形態では、化合物１は、少なくとも９５重量％の単結晶形態である。いくつかの実施形態では、化合物１は、少なくとも９７重量％の単結晶形態である。いくつかの実施形態では、化合物１は、少なくとも９９重量％の単結晶形態である。
【０１３１】
化合物１の以下の説明において、本発明の実施形態は、本明細書中に記載するような１つ以上の特性を特徴とする化合物１の特定の結晶形態を参照して記載する場合がある。結晶形態を特徴付ける記述を使用して、結晶性の化合物１中に存在し得る異なる結晶形態の混合物を記載する場合がある。しかしながら、化合物１の特定の結晶形態はまた、特定の結晶形態を参照することに関連して、またはそれに関係なく、本明細書に記載の結晶形態の１つ以上によって特徴付けてもよい。
【０１３２】
以下に示す詳細な説明及び例示的な実施例によって、結晶形態をさらに説明する。表１〜６に記載のＸＲＰＤピークは、データを取得するために使用する機器に応じて±０．２°の幅で変動し得る。表１〜６に記載するＸＲＰＤピークの強度は、１０％の幅で変動し得る。
【０１３３】
形態１
一実施形態では、化合物１の単結晶形態である形態１を、図１０に示すＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、及びＣｕＫα線を用いて得られる表１に示すデータによって特徴付ける。特定の実施形態では、表１に示すように、多形体を、図１０から得られる１つ以上のピークによって特徴付けることができる。例えば、多形体を、表１に示す１つまたは２つまたは３つまたは４つまたは５つまたは６つまたは７つまたは８つまたは９つのピークによって特徴付けることができる。
表１
【表５】
2018535951.tif 000009
【０１３４】
別の実施形態では、形態１を、８．９、１３．０、１８．９、２３．８、及び２８．１°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。別の実施形態では、形態１を、８．９、１８．９、及び２３．８°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。
【０１３５】
形態２
一実施形態では、化合物１の単結晶形態である形態２を、図１１に示すＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、及びＣｕＫα線を用いて得られる表２に示すデータによって特徴付ける。特定の実施形態では、表２に示すように、多形体を、図１１から得られるピークの１つ以上によって特徴付けることができる。例えば、多形体を、表２に示す１つまたは２つまたは３つまたは４つまたは５つまたは６つまたは７つまたは８つまたは９つのピークによって特徴付けることができる。
表２
【表６】
2018535951.tif 000010
【０１３６】
別の実施形態では、形態２を、１２．７、１７．１、１９．２、２３．０、及び２４．２°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。別の実施形態では、形態２を、１２．７、１９．２、及び２４．２°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。
【０１３７】
形態３
一実施形態では、化合物１の単結晶形態である形態３を、図１２に示すＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、及びＣｕＫα線を用いて得られる表３に示すデータによって特徴付ける。特定の実施形態では、表３に示すように、多形体を、図１２から得られる１つ以上のピークによって特徴付けることができる。例えば、多形体を、表３に示す１つまたは２つまたは３つまたは４つまたは５つまたは６つまたは７つまたは８つまたは９つのピークによって特徴付けることができる。
表３
【表７】
2018535951.tif 000011
【０１３８】
別の実施形態では、形態３を、６．８、１０．６、１３．６、１４．２、及び１９．２°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。別の実施形態では、形態３を、１０．６、１４．２、及び１９．２°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。
【０１３９】
形態４
一実施形態では、化合物１の単結晶形態である形態４を、図１３に示すＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、及びＣｕＫα線を用いて得られる表４に示すデータによって特徴付ける。特定の実施形態では、表４に示すように、多形体を、図１３から得られる１つ以上のピークによって特徴付けることができる。例えば、多形体を、表４に示す１つまたは２つまたは３つまたは４つまたは５つまたは６つまたは７つまたは８つまたは９つのピークによって特徴付けることができる。
表４
【表８】
2018535951.tif 000012
【０１４０】
別の実施形態では、形態４を、７．２、１３．６、１８．５、１９．３、２１．９、及び２３．５°の２θ角で特定されるピークによって特徴付けることができる。別の実施形態では、形態４を、１３．６、１８．５、及び２３．５°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。
【０１４１】
形態５
一実施形態では、化合物１の単結晶形態である形態５を、図１４に示すＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、及びＣｕＫα線を用いて得られる表５に示すデータによって特徴付ける。特定の実施形態では、表５に示すように、多形体を、図１４から得られる１つ以上のピークによって特徴付けることができる。例えば、多形体を、表５に示す１つまたは２つまたは３つまたは４つまたは５つまたは６つまたは７つまたは８つまたは９つのピークによって特徴付けることができる。
表５
【表９】
2018535951.tif 000013
【０１４２】
別の実施形態では、形態５を、６．４、８．４、９．８、１７．８、及び１９．７°の２θ角度で同定されるピークによって特徴付けることができる。別の実施形態では、形態５を、８．４°及び９．８°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。
【０１４３】
形態６
一実施形態では、化合物１の単結晶形態である形態６を、図１５に示すＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、及びＣｕＫα線を用いて得られる表６に示すデータによって特徴付ける。特定の実施形態では、表６に示すように、多形体を、図１５から得られる１つ以上のピークによって特徴付けることができる。例えば、多形体を、表６に示す１つまたは２つまたは３つまたは４つまたは５つまたは６つまたは７つまたは８つのピークによって特徴付けることができる。
表６
【表１０】
2018535951.tif 000014
【０１４４】
別の実施形態では、形態６を、８．１、１４．１、１６．４、１７．３、２０．５、及び２４．１°の２θ角で同定されるピークによって特徴付けることができる。別の実施形態では、形態６を、８．１、１６．４、１７．３、及び２４．１°の２θ角度で同定されるピークによって特徴付けることができる。
【０１４５】
［ＤＮＡ脱メチル化剤］
一実施形態では、本明細書において提供する方法は、１つ以上のＤＮＡ脱メチル化剤の投与または併用投与を含む。一実施形態では、ＤＮＡ脱メチル化剤はシチジン類似体である。特定の実施形態では、シチジン類似体はアザシチジンである）か、または５−アザ−２′−デオキシシチジン（デシタビン）である。特定の実施形態では、シチジン類似体はアザシチジンである。特定の実施形態では、シチジン類似体は、５−アザ−２′−デオキシシチジン（デシタビン）である。特定の実施形態では、シチジン類似体は、例えば：１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン（シタラビンまたはａｒａ−Ｃ）；プソイドイソシチジン（ｐｓｉ  ＩＣＲ）；５−フルオロ−２′−デオキシシチジン（ＦＣｄＲ）；２′−デオキシ−２′，２′−ジフルオロシチジン（ゲムシタビン）；５−アザ−２′−デオキシ−２′，２′−ジフルオロシチジン；５−アザ−２′−デオキシ−２′−フルオロシチジン；１−β−Ｄ−リボフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノン（ゼブラリン）；２′，３′−ジデオキシ−５−フルオロ−３′−チアシチジン（エムトリバ）；２′−シクロシチジン（アンシタビン）；１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−５−アザシトシン（ファザラビンまたはａｒａ−ＡＣ）；６−アザシチジン（６−アザ−ＣＲ）；５，６−ジヒドロ−５−アザシチジン（ｄＨ−ａｚａ−ＣＲ）；Ｎ４−ペンチルオキシ−カルボニル−５′−デオキシ−５−フルオロシチジン（カペシタビン）；Ｎ４−オクタデシル−シタラビン；またはエライジン酸シタラビンである。特定の実施形態では、シチジン類似体は、シチジンまたはデオキシシチジンに構造的に関連し、シチジンまたはデオキシシチジンの作用を機能的に模倣及び／または拮抗する任意の化合物を含む。
【０１４６】
特定の実施形態では、例示的なシチジン類似体は、以下に示す構造を有する：
【化２】
2018535951.tif 000015
。
【０１４７】
本明細書において提供する方法で使用するためのシチジン類似体は、本明細書中で参照するか、または文献中で利用可能な合成方法及び手順を用いて調製してもよい。例えば、アザシチジン及びデシタビンを合成するための特定の方法は、例えば、米国特許第７，０３８，０３８号及びその中に記載されている文献に開示されており、これらの各々は、参照として本明細書に援用する。本明細書において提供する方法において使用するための他のシチジン類似体は、例えば、当該分野で公知の手順を用いて調製してもよく、または商業的供給元から購入してもよい。一実施形態では、本明細書において提供する方法で使用するためのシチジン類似体は、特定の固体形態（例えば、非晶形または結晶形態）で調製してもよい。例えば、２００５年５月８日に発行された米国特許第６，８８７，８５５号及び２００５年９月１３日に発行された米国特許第６，９４３，２４９号を参照されたい。これらはいずれも、参照としてその全体を本明細書に援用する。
【０１４８】
一実施形態では、本明細書において提供する方法で使用するシチジン類似体は、遊離塩基、またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物である。一実施形態では、遊離塩基または薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物は固体である。別の実施形態では、遊離塩基または薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物は、非晶形の固体である。さらに別の実施形態では、遊離塩基または薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物は、結晶形態の固体である。例えば、特定の実施形態は、固体形態のアザシチジン及びデシタビンを提供し、これらは、例えば、米国特許第６，８８７，８５５号；第６，９４３，２４９号；第７，０３８，０３８号；第７，０７８，５１８号；第７，１９２，７８１号；第７，７７２，１９９号及び米国特許出願公開第２００５／０２７６７５号に記載される方法に従って調製することができ、これらの文献の各々は、参照としてその全体を本明細書に援用する。他の実施形態では、固体形態のアザシチジン及びデシタビンは、当該分野で公知の他の方法を用いて調製することができる。
【０１４９】
一実施形態では、本明細書において提供する方法で使用するシチジン類似体は、シチジン類似体の薬学的に許容可能な塩であり、例えば、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、硫酸水素塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、１，２−エタンジスルホン酸塩（エジシル酸塩）、エタンスルホン酸塩（エシル酸塩）、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩（メシル酸塩）、２−ナフタレンスルホン酸塩（ナプシル酸塩）、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パルモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、またはウンデカン酸塩が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。
【０１５０】
アザシチジンは、４−アミノ−１−β−Ｄ−リボフラノシル−ｓ−トリアジン−２（１Ｈ）−オンであり、ＶＩＤＡＺＡ（登録商標）（Ｃｅｌｇｅｎｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）としても知られている。その実験式はＣ８Ｈ１２Ｎ４Ｏ５であり、分子量は２４４である。アザシチジンは、アセトン、エタノール及びメチルケトンに不溶性の白色〜オフホワイトの固体であり；エタノール／水（５０／５０）、プロピレングリコール及びポリエチレングリコールにわずかに溶解し；水、水飽和オクタノール、５％デキストロース／水、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、生理食塩水及び５％Ｔｗｅｅｎ８０／水に控えめに溶解し、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に可溶である。
【０１５１】
ＶＩＤＡＺＡ（登録商標）は、より高リスクのＭＤＳ患者の治療のために承認されている。これは、皮下注射用の懸濁液として再構成するか、または静脈内注入用のさらに希釈した溶液として再構成するために、滅菌形態で供給される。ＶＩＤＡＺＡ（登録商標）のバイアルは、１００ｍｇのアザシチジン及び１００ｍｇのマンニトールを滅菌凍結乾燥粉末として含有する。承認された投与スケジュールは、２８日間の治療サイクルのうちの連続７日間における１日２回の皮下注射または１日１回の静脈内注入である。
【０１５２】
経口アザシチジンは、低リスク骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）患者において効果的かつ安全である。一実施形態では、ＭＤＳ患者及びＡＭＬ患者に使用する用量は、長期投与（２８日間の治療サイクルのうちの１４日または２１日）に基づいて１日１回３００ｍｇである。一実施形態では、経口アザシチジンの開始用量は１２０ｍｇであり、最大耐量は４８０ｍｇである。
【０１５３】
デシタビンは、４−アミノ−１−（２−デオキシ−β−Ｄ−エリスロ−ペントフラノシル）−１，３，５−トリアジン−２（１Ｈ）オンであり、ＤＡＣＯＧＥＮ（登録商標）としても知られている。その実験式はＣ８Ｈ１２Ｎ４Ｏ４であり、分子量は２２８．２１である。デシタビンは、明白色〜ほぼ白色の粉末であり、エタノール／水（５０／５０）、メタノール／水（５０／５０）及びメタノールにわずかに可溶であり；水に控えめに溶解し、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に可溶である。
【０１５４】
ＤＡＣＯＧＥＮ（商標）は、骨髄異形成症候群の患者の治療のために承認されている。それは、注射用の白色滅菌凍結乾燥粉末として透明な無色ガラスバイアル中に供給される。単回用量として各々２０ｍＬであり、ガラスバイアルには、５０ｍｇのデシタビン、６８ｍｇの第一リン酸カリウム（リン酸二水素カリウム）及び１１．６ｍｇの塩酸ナトリウムが含まれる。
【０１５５】
組成物及び投与経路
一実施形態では、治療有効量の変異型ＩＤＨ２阻害剤及びＤＮＡ脱メチル化剤を含む医薬組成物を本明細書において提供する。一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤は化合物１である。
【０１５６】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を本明細書において提供する。
【０１５７】
一実施形態では、化合物１とアザシチジンを１つの組成物として製剤化する。別の実施形態では、化合物１とアザシチジンを別々の組成物として製剤化する。
【０１５８】
一実施形態では、本明細書において提供する方法で利用する化合物は、被験者に投与する前に、薬学的に許容可能な担体またはアジュバントとともに薬学的に許容可能な組成物中に製剤化してもよい。別の実施形態では、そのような薬学的に許容可能な組成物は、本明細書に記載のものを含む疾患または疾患の症状の調節を達成するのに有効な量のさらなる治療薬をさらに含む。
【０１５９】
本発明の一態様の医薬組成物に使用してもよい薬学的に許容可能な担体、アジュバント及びビヒクルとして、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネートなどの自己乳化薬物送達システム（ＳＥＤＤＳ）、Ｔｗｅｅｎまたは他の類似のポリマー送達マトリックスなどの医薬剤形で使用する界面活性剤、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、緩衝物質、例えば、リン酸、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコール及び羊毛脂が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。α−、β−、及びγ−シクロデキストリンなどのシクロデキストリン、もしくは２−及び３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含むヒドロキシアルキルシクロデキストリンなどの化学修飾誘導体、または他の可溶化誘導体もまた、本明細書に記載の化合物１の送達を高めるために効果的に使用してもよい。
【０１６０】
一実施形態では、医薬組成物は、化合物１及び賦形剤を含む。一実施形態では、化合物１及び賦形剤を含む医薬組成物は経口投与用である。一実施形態では、賦形剤は、希釈剤、結合剤、崩壊剤、湿潤剤、安定剤、流動促進剤、及び／または潤滑剤である。一実施形態では、賦形剤は希釈剤である。一実施形態では、賦形剤は結合剤である。一実施形態では、賦形剤は崩壊剤である。一実施形態では、賦形剤は湿潤剤である。一実施形態では、賦形剤は安定剤である。一実施形態では、賦形剤は流動促進剤である。一実施形態では、賦形剤は潤滑剤である。
【０１６１】
一実施形態では、希釈剤は微結晶セルロースである。
【０１６２】
一実施形態では、結合剤はヒドロキシプロピルセルロースである。
【０１６３】
一実施形態では、崩壊剤はデンプングリコール酸ナトリウムである。
【０１６４】
一実施形態では、湿潤剤はラウリル硫酸ナトリウムである。
【０１６５】
一実施形態では、安定剤は酢酸コハク酸ヒプロメロースである。
【０１６６】
一実施形態では、流動促進剤はコロイド状二酸化ケイ素である。
【０１６７】
一実施形態では、潤滑剤はステアリン酸マグネシウムである。
【０１６８】
一実施形態では、医薬組成物は、化合物１及び／またはアザシチジンならびに賦形剤を含む。一実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンならびに賦形剤を含む医薬組成物は、経口投与用である。
【０１６９】
化合物１及び／またはアザシチジンの経口送達様式として、錠剤、カプセル、カプレット、溶液、懸濁液、及びシロップが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではなく、カプセル化してもしなくてもよい複数の顆粒、ビーズ、散剤またはペレットを含んでもよい。そのような様式はまた、本明細書においては、化合物１及び／またはアザシチジンを含有する「薬物コア」と呼称する場合がある。
【０１７０】
本明細書の特定の実施形態は、錠剤またはカプセルである固体経口剤形を提供する。特定の実施形態では、製剤は、化合物１及び／またはアザシチジンを含む錠剤である。特定の実施形態では、製剤は、化合物１及び／またはアザシチジンを含むカプセルである。特定の実施形態では、本明細書において提供する錠剤またはカプセルは、場合により、例えば流動促進剤、希釈剤、潤滑剤、着色剤、崩壊剤、造粒剤、結合剤、ポリマー、及びコーティング剤などの１つ以上の賦形剤を含む。特定の実施形態では、製剤は、即時放出錠剤である。特定の実施形態では、製剤は、例えば実質的に胃の中で活性医薬成分（ＡＰＩ）を放出する徐放錠剤である。特定の実施形態では、製剤は硬ゼラチンカプセルである。特定の実施形態では、製剤は軟ゼラチンカプセルである。特定の実施形態では、カプセルはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）カプセルである。特定の実施形態では、製剤は即時放出カプセルである。特定の実施形態では、製剤は、例えば実質的に胃内でＡＰＩを放出する即時放出または徐放カプセルである。特定の実施形態では、製剤は、投与後に実質的に口中で溶解する迅速崩壊錠剤である。特定の実施形態では、本明細書の実施形態は、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、悪性腫瘍を治療するための医薬組成物を調製するための化合物１及び／またはアザシチジンの使用を包含し、この場合経口投与用に組成物を調製する。
【０１７１】
本明細書の特定の実施形態は、製剤を経口投与する被験者（例えばヒト）において、特定のＡＵＣ値（例えば、ＡＵＣ（０−ｔ）またはＡＵＣ（０−∞））を達成する化合物１及び／またはアザシチジンを含む医薬製剤（例えば、即時放出経口製剤及び／またはＡＰＩを実質的に胃内で放出する製剤）を提供する。特定の実施形態は、少なくとも約２５ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約７５ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約２００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約２５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約３００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約３５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ少なくとも約４００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約４５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約５００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約５５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約６００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約６５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約７００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約７５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約８００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約８５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ少なくとも約９００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約９５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１０００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１１００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１２００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１３００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１４００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１５００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１６００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１７００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１８００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約１９００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約２０００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、少なくとも約２２５０ｎｇ−ｈｒ／ｍＬ、または少なくとも約２５００ｎｇ−ｈｒ／ｍＬのＡＵＣ値を達成する経口製剤を提供する。特定の実施形態では、ＡＵＣ測定は、投与後の動物またはヒトボランティアの血液試料から得られる時間−濃度の薬物動態特性から得られる。
【０１７２】
本明細書の特定の実施形態は、製剤を経口投与する被験者において、特定の最大血漿濃度（「Ｃｍａｘ」）を達成する化合物１及び／またはアザシチジンを含む医薬製剤（例えば、即時放出経口製剤及び／またはＡＰＩを実質的に胃内で放出する製剤）を提供する。特定の実施形態は、少なくとも約２５ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約７５ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約２００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約２５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約３００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約３５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約４００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約４５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約５００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約５５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約６００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約６５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約７００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約７５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約８００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約８５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約９００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約９５０ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１０００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１１００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１２００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１３００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１４００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１５００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１６００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１７００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１８００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約１９００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約２０００ｎｇ／ｍＬ、少なくとも約２２５０ｎｇ／ｍＬ、または少なくとも約２５００ｎｇ／ｍＬの化合物１及び／またはシチジン類似体のＣｍａｘを達成する経口製剤を提供する。
【０１７３】
本明細書の特定の実施形態は、製剤を経口投与する被験者において、特定の時間で最大血漿濃度（「Ｔｍａｘ」）を達成する化合物１及び／またはアザシチジンを含む医薬製剤（例えば、即時放出経口製剤及び／またはＡＰＩを実質的に胃内で放出する製剤）を提供する。特定の実施形態は、約１０分未満、約１５分未満、約２０分未満、約２５分未満、約３０分未満、約３５分未満、約４０分未満、約４５分未満、約５０分未満、約５５分未満、約６０分未満、約６５分未満、約７０分未満、約７５分未満、約８０分未満、約８５分未満、約９０分未満、約９５分未満、約１００分未満、約１０５分未満、約１１０分未満、約１１５分未満、約１２０分未満、約１３０分未満、約１４０分未満、約１５０分未満、約１６０分未満、約１７０分未満、約１８０分未満、約１９０分未満、約２００分未満、約２１０分未満、約２２０分未満、約２３０分未満、または約２４０分未満のシチジン類似体のＴｍａｘを達成する経口製剤を提供する。特定の実施形態では、Ｔｍａｘ値は、製剤を経口投与する時点から測定する。
【０１７４】
本明細書の特定の実施形態は、化合物１及び／またはアザシチジンを含み、腸溶コーティングを有する経口剤形を提供する。特定の実施形態は、孔を有する透過性または部分的透過性（例えば、「漏出性」）腸溶性コーティングを提供する。特定の実施形態では、透過性または部分透過性腸溶コーティング錠剤は、化合物１及び／またはアザシチジンを実質的に胃内で、即時放出様式で放出する。
【０１７５】
経口投与する際に、例えば実質的に胃内で放出させるための、化合物１及び／またはアザシチジンの吸収及び／または有効な送達を最大化するように設計した剤形を本明細書において提供する。したがって、本明細書の特定の実施形態は、経口投与する際に、例えば、実質的に胃内でＡＰＩを即時放出させるように設計した医薬賦形剤を用いた化合物１及び／またはアザシチジンの固体経口剤形を提供する。特定の即時放出製剤は、特定の量の化合物１及び／またはアザシチジンならびに場合により１種以上の賦形剤を含む。特定の実施形態では、製剤は、即時放出錠剤または即時放出カプセル（例えば、ＨＰＭＣカプセルなど）であってもよい。
【０１７６】
本明細書において提供する化合物１及び／またはアザシチジン（例えば、実質的に胃内でＡＰＩを放出する即時放出経口製剤及び／または製剤）を含む、本明細書において提供する製剤の製造方法を本明細書において提供する。特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤は、例えば、関連する教科書に記載されているように、医薬製剤分野の当業者に公知の従来の方法を用いて調製してもよい。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，（２０００）；Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，（１９９９）；Ｇｉｂｓｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ（２００１）参照。
【０１７７】
特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤（例えば、即時放出経口製剤、実質的に胃内でＡＰＩを放出する製剤、または実質的に口中で溶解する迅速崩壊製剤）は、特定の量の化合物１及び／またはアザシチジンを含む。特定の実施形態では、製剤中の化合物１及び／またはアザシチジンの特定の量は、例えば、約１０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約６０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約８０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１４０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１６０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１８０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２４０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２６０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２８０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３４０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３６０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３８０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４４０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４６０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４８０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約５００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約６００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約７００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約８００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約９００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１０００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１１００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１３００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１４００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１５００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１６００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１７００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１８００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１９００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２０００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２１００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２３００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２４００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２５００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３０００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４０００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約５０００ｍｇである。
【０１７８】
特定の実施形態では、製剤は、錠剤であり、錠剤は、標準的な当該技術分野で認識されている錠剤処理手順及び装置を使用して製造する。特定の実施形態では、錠剤を形成する方法は、化合物１及び／またはアザシチジンを単独で、または１つ以上の賦形剤、例えば担体、添加剤、ポリマーなどとの組合せで含む粉末、結晶及び／または顆粒状組成物の直接圧縮である。特定の実施形態では、直接圧縮の代替として、湿式造粒法または乾式造粒法を用いて錠剤を調製してもよい。特定の実施形態では、錠剤は、湿性のまたは他の取り扱いが容易な材料から出発して、圧縮ではなく成形する。特定の実施形態では、圧縮及び造粒技術を使用する。
【０１７９】
特定の実施形態では、製剤はカプセルであり、当該技術分野で認識されている標準的なカプセル処理手順及び装置を使用してカプセルを製造してもよい。特定の実施形態では、軟ゼラチンカプセルを調製してもよく、その内部でカプセルは、化合物１及び／またはシチジン類似体及び植物油の混合物または非水性の水混和性物質、例えばポリエチレングリコールなどを含む。特定の実施形態では、化合物１及び／またはシチジン類似体の顆粒を、固体粉末担体、例えば、ラクトース、サッカロース、ソルビトール、マンニトール、ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプン、アミロペクチン、セルロース誘導体、またはゼラチンとの組合せで含有する硬ゼラチンカプセルを調製してもよい。特定の実施形態では、硬質ゼラチンカプセルのシェルは、ゼラチン及びグリセロールなどの少量の可塑剤を含むカプセル組成物から調製してもよい。特定の実施形態では、ゼラチンの代替物として、カプセルシェルは炭水化物材料製であってもよい。特定の実施形態では、カプセル組成物は、必要に応じて、ポリマー、着色剤、着香剤及び乳白剤をさらに含む場合がある。特定の実施形態では、カプセルはＨＰＭＣを含む。
【０１８０】
特定の実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンの製剤を、アザシチジンの有意な加水分解を引き起こさない水性溶媒を用いて調製する。特定の実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンの製剤は、製剤中のアザシチジンの有意な加水分解を引き起こさない水性溶媒を用いて薬物コアにコーティングを施した錠剤である。特定の実施形態では、薬物コアのコーティング用の溶媒として水を使用する。特定の実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンの経口剤形は、水性溶媒を用いて薬物コアに塗布したフィルムコーティングを含む錠剤である。特定の実施形態では、フィルムコーティング用の溶媒として水を使用する。特定の実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンを含有する錠剤を、医薬組成物の分解を伴わない水性溶媒を用いてフィルムコーティングする。特定の実施形態では、医薬組成物の分解を伴わないフィルムコーティング溶媒として、水を使用する。特定の実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンならびに水性フィルムコーティングを有する経口剤形は、経口送達の際に即時薬物放出をもたらす。特定の実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンならびに水性フィルムコーティングを有する経口剤形は、経口投与の際に上部胃腸管、例えば胃へ薬物を徐放する。特定の実施形態では、水性フィルムコーティングを有する錠剤は、ＡＰＩとして化合物１及び／またはアザシチジンを含む。
【０１８１】
特定の実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンを実質的に胃内で放出するアザシチジンの経口投与のための徐放医薬製剤であって、ａ）特定の量の化合物１及び／またはアザシチジン；ｂ）化合物１及び／またはアザシチジンの実質的に上部胃腸管、例えば胃における放出を制御するための薬剤放出調節成分；ならびにｃ）場合により１種以上の賦形剤、を含む徐放医薬製剤を本明細書において提供する。特定の実施形態では、化合物１及び／またはアザシチジンを含む経口剤形は、医薬組成物及び任意の賦形剤を含む薬物コアを含む徐放錠剤またはカプセル剤として調製する。場合により、「シールコート」または「シェル」を塗布する。特定の実施形態では、本明細書において提供する化合物１及び／またはアザシチジンを含む本明細書で提供する製剤は、治療有効量の化合物１及び／またはアザシチジン、経口投与する際に実質的に胃内において化合物１及び／またはアザシチジンの放出を調節する薬物放出調節成分、ならびに場合により１つ以上の賦形剤を含む徐放錠剤またはカプセルである。
【０１８２】
特定の実施形態は、ポリマーマトリックスである薬物放出調節成分を提供し、これは、胃液への曝露の際に膨潤して製剤の胃内滞留をもたらすとともに、化合物１及び／またはアザシチジンの実質的に胃内におけるポリマーマトリックスからの持続放出をもたらす。特定の実施形態では、そのような製剤は、製剤中に、化合物１及び／またはアザシチジンを適切なポリマーマトリックスに組み込むことによって調製してもよい。そのような製剤の例は、当該技術分野で公知である。例えば、Ｓｈｅｌｌらの米国特許出願公開第２００２／００５１８２０号（出願番号０９／９９０，０６１）；Ｓｈｅｌｌらの米国特許公開第２００３／００３９６８８号（出願番号１０／０４５，８２３）；Ｇｕｓｌｅｒらの米国特許公開第２００３／０１０４０５３号（出願番号１０／０２９，１３４）を参照されたく、各々の文献はその全体を参照として本明細書に援用する。
【０１８３】
特定の実施形態では、薬物放出調節成分は、薬物含有コアを取り囲むシェルを含む場合があり、シェルは、例えば、化合物１及び／またはアザシチジンがコアから拡散できるようにするとともに、胃液への曝露の際に膨潤して胃内に滞留する大きさに変化することにより製剤の胃内滞留を促進することによって、化合物１及び／またはアザシチジンをコアから放出させる。特定の実施形態では、そのような製剤は、まず、化合物１及び／またはアザシチジンならびに１つ以上の賦形剤の混合物を圧縮して薬物コアを形成し、薬物コア全体に別の粉末混合物を圧縮してシェルを形成するか、適切な材料で作られたカプセルシェルで薬物コアを取り囲むことによって調製してもよい。そのような製剤の例は、当該技術分野で公知である。Ｂｅｒｎｅｒらの米国特許公開第２００３／０１０４０６２号  出願番号１０／２１３，８２３）を参照されたく、前記文献はその全体を参照として本明細書に援用する。
【０１８４】
特定の実施形態では、本明細書において提供する医薬製剤は、化合物１及び／またはアザシチジン、ならびに任意に「薬物コア」を形成するための１つ以上の賦形剤を含む。任意の賦形剤として、例えば当該技術分野で公知の、例えば、希釈剤（増量剤）、潤滑剤、崩壊剤、充填剤、安定剤、界面活性剤、保存剤、着色剤、香味剤、結合剤、賦形剤担体、流動促進剤、浸透促進賦形剤、可塑剤などが挙げられる。当業者であれば、いくつかの物質は、医薬組成物において２つ以上の目的を果たすことを理解するであろう。例えば、いくつかの物質は、圧縮後に錠剤を一緒に保持するのに役立つ結合剤であるとともに、標的送達部位に達すると錠剤を壊すのに役立つ崩壊剤でもある。賦形剤の選択及び使用量の選択は、当該技術分野で利用可能な標準的な手順及び参考作業の経験及び考察に基づいて、製剤化する科学者によって容易に決定され得る。
【０１８５】
特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤は、１つ以上の結合剤を含む。結合剤は、例えば、錠剤に凝集性を付与するために使用してもよく、したがって圧縮後に錠剤が損なわれないことを保証する。好適な結合剤として、デンプン（トウモロコシデンプン及びアルファ化デンプンを含む）、ゼラチン、糖類（スクロース、グルコース、デキストロース及びラクトースを含む）、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ワックス、ならびに天然及び合成ガム、例えば、アラビアゴム・アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、セルロースポリマー（ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロースなどを含む）、ビーガム、カルボマー（例えばカルボポール）、ナトリウム、デキストリン、グアーガム、水添植物油、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、マルトデキストリン、ポリメタクリレート、ポビドン（例えば、コリドン、プラスドン）、微結晶セルロースなどが挙げられるが、これらに限定されない。結合剤としてはまた、例えば、アラビアゴム、寒天、アルギン酸、カラギーナン、酢酸フタル酸セルロース、セラトニア、キトサン、粉砂糖、コポビドン、デキストレート、デキストリン、デキストロース、エチルセルロース、ゼラチン、ベヘン酸グリセリル、グアーガム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルデンプン、ヒプロメロース、イヌリン、ラクトース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、マルトデキストリン、マルトース、メチルセルロース、ポロキサマー、ポリカルボフィル、ポリデキストロース、ポリエチレンオキシド、ポリメチルアクリレート、ポビドン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、デンプン、アルファ化デンプン、ステアリン酸、スクロース、及びゼインが挙げられる。結合剤は、薬物コアに対して、適切に決定する場合、薬物コアの約２％ｗ／ｗ；薬物コアの約４％ｗ／ｗ、薬物コアの約６％ｗ／ｗ、薬物コアの約８％ｗ／ｗ、薬物コアの約１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約１２％ｗ／ｗ、薬物コアの約１４％ｗ／ｗ、薬物コアの約１６％ｗ／ｗ、薬物コアの約１８％ｗ／ｗ、薬物コアの約２０％ｗ／ｗ、薬物コアの２２％ｗ／ｗ、薬物コアの約２４％ｗ／ｗ、薬物コアの約２６％ｗ／ｗ、薬物コアの約２８％ｗ／ｗ、薬物コアの約３０％ｗ／ｗ、薬物コアの約３２％ｗ／ｗ、薬物コアの約３４％ｗ／ｗ、薬物コアの約３６％ｗ／ｗ、薬物コアの約３８％ｗ／ｗ、薬物コアの約４０％、薬物コアの約４２％ｗ／ｗ、薬物コアの約４４％ｗ／ｗ、薬物コアの約４６％ｗ／ｗ、薬物コアの約４８％ｗ／ｗ、薬物コアの約５０％ｗ／ｗ、薬物コアの約５２％ｗ／ｗ、薬物コアの約５４％ｗ／ｗ、薬物コアの約５６％ｗ／ｗ、薬物コアの約５８％ｗ／ｗ、薬物コアの約６０％ｗ／ｗ、薬物コアの約６２％ｗ／ｗ、薬物コアの約６４％ｗ／ｗ、薬物コアの約６６％ｗ／ｗ；薬物コアの約６８％ｗ／ｗ、薬物コアの約７０％ｗ／ｗ、薬物コアの約７２％ｗ／ｗ、薬物コアの約７４％ｗ／ｗ、薬物コアの約７６％ｗ／ｗ、薬物コアの約７８％ｗ／ｗ、薬物コアの約８０％ｗ／ｗ、薬物コアの約８２％ｗ／ｗ、薬物コアの約８４％ｗ／ｗ、薬物コアの８６％ｗ／ｗ、薬物コアの約８８％ｗ／ｗ、薬物コアの約９０％ｗ／ｗ、薬物コアの約９２％ｗ／ｗ、薬物コアの約９４％ｗ／ｗ、薬物コアの約９６％ｗ／ｗ、薬物コアの約９８％ｗ／ｗ、またはそれ以上の量であり得る。特定の実施形態では、特定の結合剤の適切な量は、当業者が決定する。
【０１８６】
特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤は、１つ以上の希釈剤を含む。希釈剤を用いて、例えば、実用的なサイズの錠剤を最終的に提供するために容積を増加させてもよい。好適な希釈剤として、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、セルロース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、微結晶セルロース（例えばＡＶＩＣＥＬ）、ミクロファインセルロース、アルファ化デンプン、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、砂糖、デキストレート、デキストリン、デキストロース、第二リン酸カルシウム二水和物、第三リン酸カルシウム、カオリン、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、マルトデキストリン、マンニトール、ポリメタクリレート（例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ）、塩化カリウム、塩化ナトリウム、ソルビトール及びタルクなどが挙げられる。希釈剤としてはまた、例えば、アルギン酸アンモニウム、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸セルロース、圧縮糖、粉砂糖、デキストレート、デキストリン、デキストロース、エリスリトール、エチルセルロース、フルクトース、フマル酸、パルミトステアリン酸グリセリル、イソマルト、カオリン、ラシトール、ラクトース、マンニトール、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、マルトデキストリン、マルトース、中鎖トリグリセリド、微結晶セルロース、微結晶ケイ化セルロース、パワードセルロース、ポリデキストロース、ポリメチルアクリレート、シメチコン、アルギン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ソルビトール、デンプン、アルファ化デンプン、スクロース、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、タルク、トラガント、トレハロース、及びキシリトールなども挙げられる。希釈剤は、錠剤またはカプセルの所望の容量を得るために計算した量で使用してもよく；特定の実施形態では、希釈剤を、重量／重量で、薬物コアの約５％以上、約１０％以上、約１５％以上、約２０％以上、約２２％以上、約２４％以上、約２６％以上、約２８％以上、約３０％以上、約３２％以上、約３４％以上、約３６％以上、約３８％以上、約４０％以上、約４２％以上、約４４％以上、約４６％以上、約４８％以上、約５０％以上、約５２％以上、約５４％以上、約５６％以上、約５８％以上、約６０％以上、約６２％以上、約６４％以上、約６８％以上、約７０％以上、約７２％以上、約７４％以上、約７６％以上、約７８％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、または約９５％以上；薬物コアの約１０％〜約９０％ｗ／ｗ；薬物コアの約２０％〜約８０％ｗ／ｗ；薬物コアの約３０％〜約７０％ｗ／ｗ；薬物コアの約４０％〜約６０％ｗ／ｗの量で使用する。特定の実施形態では、適切な量の特定の希釈剤は、当業者が決定する。
【０１８７】
特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤は、１つ以上の潤滑剤を含む。潤滑剤は、例えば、錠剤製造を容易にするために使用してもよく；好適な潤滑剤の例として、例えば、植物油、例えば、ピーナッツ油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及びカカオ植物油、グリセリン、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ならびにステアリン酸が挙げられる。特定の実施形態では、ステアリン酸塩は、存在する場合、薬物含有コアのおよそ２重量％以下に相当する。潤滑剤のさらなる例として、例えば、ステアリン酸カルシウム、モノステアリン酸グリセリン、ベヘン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセリル、ラウリル硫酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、ミリスチン酸、パルミチン酸、ポロキサマー、ポリエチレングリコール、安息香酸カリウム、安息香酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、ステアリン酸、タルク、及びステアリン酸亜鉛が挙げられる。特定の実施形態では、潤滑剤はステアリン酸マグネシウムである。特定の実施形態では、潤滑剤は、薬物コアに対して、薬物コアの約０．２％ｗ／ｗ、薬物コアの約０．４％ｗ／ｗ、薬物コアの約０．６％ｗ／ｗ、薬物コアの約０．８％ｗ／ｗ、薬物コアの約１．０％ｗ／ｗ、薬物コアの約１．２％ｗ／ｗ、薬物コアの約１．４％ｗ／ｗ、薬物コアの約１．６％ｗ／ｗ、薬物コアの約１．８％ｗ／ｗ、薬物コアの約２．０％ｗ／ｗ、薬物コアの約２．２％ｗ／ｗ、薬物コアの約２．４％ｗ／ｗ、薬物コアの約２．６％ｗ／ｗ、薬物コアの約２．８％ｗ／ｗ、薬物コアの約３．０％ｗ／ｗ、薬物コアの約３．５％ｗ／ｗ、薬物コアの約４％ｗ／ｗ、薬物コアの約４．５％ｗ／ｗ、薬物コアの約５％ｗ／ｗ、薬物コアの約６％ｗ／ｗ、薬物コアの約７％ｗ／ｗ、薬物コアの約８％ｗ／ｗ、薬物コアの約１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約１２％ｗ／ｗ、薬物コアの約１４％ｗ／ｗ、薬物コアの約１６％ｗ／ｗ、薬物コアの約１８％ｗ／ｗ、薬物コアの約２０％ｗ／ｗ、薬物コアの約２５％ｗ／ｗ、薬物コアの約３０％ｗ／ｗ、薬物コアの約３５％ｗ／ｗ、薬物コアの約４０％ｗ／ｗ、薬物コアの約０．２％ｗ／ｗ〜１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約０．５％〜約５％ｗ／ｗ、または薬物コアの約１％〜約３％ｗ／ｗの量で存在する。特定の実施形態では、特定の潤滑剤の適切な量は、当業者が決定する。
【０１８８】
特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤は、１つ以上の崩壊剤を含む。崩壊剤は、例えば、錠剤の崩壊を容易にするために使用してもよく、例えば、デンプン、粘土、セルロース、アルギン、ゴムまたは架橋ポリマーであってもよい。崩壊剤としてはまた、例えば、アルギン酸、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム（例えば、ＡＣ−ＤＩ−ＳＯＬ、ＰＲＩＭＥＬＬＯＳＥ）、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン（例えば、ＫＯＬＬＩＤＯＮ、ＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ）、グアーガム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、メチルセルロース、微結晶セルロース、ポラクリリンカリウム、粉末セルロース、アルファ化デンプン、アルギン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム（例えば、ＥＸＰＬＯＴＡＢ）及びデンプンが挙げられる。さらなる崩壊剤として、例えば、アルギン酸カルシウム、キトサン、ドキュセートナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、及びポビドンが挙げられる。特定の実施形態では、崩壊剤は、薬物コアに対して、薬物コアの約１％ｗ／ｗ、薬物コアの約２％ｗ／ｗ、薬物コアの約３％ｗ／ｗ、薬物コアの約４％ｗ／ｗ、薬物コアの約５％ｗ／ｗ、薬物コアの約６％ｗ／ｗ、薬物コアの約７％ｗ／ｗ、薬物コアの約８％ｗ／ｗ、薬物コアの約９％ｗ／ｗ、薬物コアの約１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約１２％ｗ／ｗ、薬物コアの約１４％ｗ／ｗ、薬物コアの約１６％ｗ／ｗ、薬物コアの約１８％ｗ／ｗ、薬物コアの約２０％ｗ／ｗ、薬物コアの約２２％ｗ／ｗ、薬物コアの約２４％ｗ／ｗ、薬物コアの約２６％ｗ／ｗ、薬物コアの約２８％ｗ／ｗ、薬物コアの約３０％ｗ／ｗ、薬物コアの約３２％ｗ／ｗ、薬物コアの約３２％ｗ／ｗ超、薬物コアの約１％〜約１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約２％〜約８％ｗ／ｗ、薬物コアの約３％〜約７％ｗ／ｗ、または薬物コアの約４％〜約６％ｗ／ｗの量で存在する。特定の実施形態では、特定の崩壊剤の適切な量は、当業者が決定する。
【０１８９】
特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤は、１つ以上の安定剤を含む。例えば、酸化反応を含む薬剤分解反応を阻害または遅延させるために、安定剤（吸収促進薬とも呼ばれる）を使用してもよい。安定剤として、例えば、ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００サクシネート（ビタミンＥ  ＴＰＧＳ）、アカシア、アルブミン、アルギン酸、ステアリン酸アルミニウム、アルギン酸アンモニウム、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、ベントナイト、ブチルヒドロキシトルエン、アルギン酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、カルシウムカルボキシメチルセルロース、カラギーナン、セラトニア、コロイド状二酸化ケイ素、シクロデキストリン、ジエタノールアミン、エデト酸塩、エチルセルロース、パルミトステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリン、グアーガム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒプロメロース、転化糖、レシチン、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、モノエタノールアミン、ペクチン、ポロキサマー、ポリビニルアルコール、アルギン酸カリウム、ポラクリリンカリウム、ポビドン、没食子酸プロピル、プロピレングリコール、アルギン酸プロピレングリコール、ラフィノース、酢酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、ソルビトール、ステアリルアルコール、スルホブチル−ｂ−シクロデキストリン、トレハロース、白蝋、キサンタンガム、キシリトール、黄蝋、及び酢酸亜鉛が挙げられる。特定の実施形態では、安定剤は、薬物コアに対して、薬物コアの約１％ｗ／ｗ、薬物コアの約２％ｗ／ｗ、薬物コアの約３％ｗ／ｗ、薬物コアの約４％ｗ／ｗ、薬物コアの約５％ｗ／ｗ、薬物コアの約６％ｗ／ｗ、薬物コアの約７％ｗ／ｗ、薬物コアの約８％ｗ／ｗ、薬物コアの約９％ｗ／ｗ、薬物コアの約１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約１２％ｗ／ｗ、薬物コアの約１４％ｗ／ｗ、薬物コアの約１６％ｗ／ｗ、薬物コアの約１８％ｗ／ｗ、薬物コアの約２０％ｗ／ｗ、薬物コアの約２２％ｗ／ｗ、薬物コアの約２４％ｗ／ｗ、薬物コアの約２６％ｗ／ｗ、薬物コアの約２８％ｗ／ｗ、薬物コアの約３０％ｗ／ｗ、薬物コアの約３２％ｗ／ｗ、薬物コアの約１％〜約１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約２％〜約８％ｗ／ｗ、薬物コアの約３％〜約７％ｗ／ｗ、または薬物コアの約４％〜約６％ｗ／ｗの量で存在する。特定の実施形態では、特定の安定剤の適切な量は、当業者が決定する。
【０１９０】
特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤は、１つ以上の流動促進剤を含む。流動促進剤は、例えば、粉末組成物もしくは顆粒の流動特性を改善するために、または投与の精度を改善するために使用してもよい。流動促進剤として機能し得る賦形剤として、例えば、コロイド状二酸化ケイ素、三ケイ酸マグネシウム、粉末セルロース、デンプン、第三リン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、粉末セルロース、コロイド状二酸化ケイ素、ケイ酸マグネシウム、三ケイ酸マグネシウム、二酸化ケイ素、デンプン、第三リン酸カルシウム、及びタルクが挙げられる。特定の実施形態では、流動促進剤は、薬物コアに対して、薬物コアの約１％ｗ／ｗ未満、薬物コアの約１％ｗ／ｗ、薬物コアの約２％ｗ／ｗ未満、薬物コアの約３％ｗ／ｗ、薬物コアの約４％ｗ／ｗ、薬物コアの約５％ｗ／ｗ、薬物コアの約６％ｗ／ｗ、薬物コアの約７％、薬物コアの約８％ｗ／ｗ、薬物コアの約９％ｗ／ｗ、薬物コアの約１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約１２％ｗ／ｗ、薬物コアの約１４％ｗ／ｗ、薬物コアの約１６％ｗ／ｗ、薬物コアの約１８％ｗ／ｗ、薬物コアの約２０％ｗ／ｗ、薬物コアの約２２％ｗ／ｗ、薬物コアの約２４％ｗ／ｗ、薬物コアの約２６％ｗ／ｗ、薬物コアの約２８％ｗ／ｗ、薬物コアの約３０％ｗ／ｗ、薬物コアの約３２％ｗ／ｗ、薬物コアの約１％〜約１０％ｗ／ｗ、薬物コアの約２％〜約８％ｗ／ｗ、薬物コアの約３％〜約７％ｗ／ｗ、または薬物コアの約４％〜約６％ｗ／ｗの量で存在する。特定の実施形態では、特定の流動促進剤の適切な量は、当業者が決定する。
【０１９１】
特定の実施形態では、本明細書において提供する製剤は、１つ以上の透過促進剤（例えば、浸透性増大剤とも呼ばれる）を含む。特定の実施形態では、透過促進剤は、胃腸壁（例えば、胃）を通るアザシチジンの取り込みを促進する。特定の実施形態では、透過促進剤は、血流に入るアザシチジンの速度及び／または量を変化させる。特定の実施形態では、ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００サクシネート（ビタミンＥ  ＴＰＧＳ）を透過促進剤として使用する。特定の実施形態では、例えば当該技術分野で公知の任意の透過促進剤を含む１つ以上の他の適切な透過促進剤を使用する。
【０１９２】
一実施形態では、本明細書において提供する医薬組成物は、経口、非経口、吸入スプレーにより、局所的に、直腸内、鼻内、頬側、膣内または移植リザーバーを介して、好ましくは経口投与または注射による投与によって投与してもよい。一実施形態では、医薬組成物は、任意の従来の非毒性の薬学的に許容可能な担体、アジュバントまたはビヒクルを含み得る。いくつかの場合では、薬学的に許容可能な酸、塩基または緩衝液を用いて製剤のｐＨを調節し、製剤化した化合物またはその送達形態の安定性を高めてもよい。本明細書において使用する非経口という用語は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑膜内、胸骨内、くも膜下腔内、病巣内及び頭蓋内注射または注入技術を含む。
【０１９３】
一実施形態では、本明細書において提供する医薬組成物は、例えば、滅菌注射用の水性または油性懸濁液などの滅菌注射用製剤の形態であってもよい。この懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ８０など）及び懸濁化剤を用いて、当該技術分野で公知の技術によって製剤化してもよい。滅菌注射用製剤は、非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤または溶媒中の滅菌注射溶液または懸濁液、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液であってもよい。使用し得る許容可能なビヒクル及び溶媒としては、マンニトール、水、リンガー溶液及び等張性塩化ナトリウム溶液が挙げられる。さらに、滅菌不揮発性油は、溶媒または懸濁媒体として従来から使用されている。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含む任意の低刺激性の固定油を使用してもよい。オレイン酸及びそのグリセリド誘導体のような脂肪酸は、オリーブ油またはヒマシ油のような天然の薬学的に許容可能な油、特にそのポリオキシエチル化型において、注射剤の調製に有用である。これらの油性溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコール希釈剤もしくは分散剤、またはエマルジョン及び／または懸濁液のような薬学的に許容可能な剤形の製剤に一般的に使用されるカルボキシメチルセルロースもしくは同様の分散剤を含む場合がある。他の一般的に使用される界面活性剤、例えばＴｗｅｅｎまたはＳｐａｎ、及び／または薬学的に許容可能な固体、液体または他の剤形の製造に一般的に使用される他の同様の乳化剤またはバイオアベイラビリティーエンハンサーも、製剤化を目的として使用してもよい。
【０１９４】
一実施形態では、本明細書において提供する医薬組成物はまた、直腸投与のための坐剤の形態で投与してもよい。これらの組成物は、本発明の一態様の化合物と、室温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸で溶融して活性成分を放出する適切な非刺激性賦形剤とを混合することによって調製することができる。そのような材料として、カカオバター、蜜ろう及びポリエチレングリコールが挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。
【０１９５】
本明細書において提供する医薬組成物の局所投与は、所望の治療が局所塗布によって容易にアクセス可能な領域または器官を含む場合に有用である。皮膚に局所的に塗布するために、医薬組成物を、担体に懸濁または溶解した活性成分を含有する適切な軟膏とともに製剤化するべきである。本発明の一態様の化合物の局所投与のための担体として、鉱油、液化石油、白油、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス及び水が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。あるいは、医薬組成物は、適切な乳化剤を用いて担体に懸濁または溶解した活性化合物を含有する適切なローションまたはクリームで製剤化することができる。好適な担体として、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水が挙げられるが、必ずしもこれらに限定するものではない。本明細書において提供する医薬組成物はまた、直腸坐剤製剤または適切な浣腸製剤によって、下部腸管に局所塗布してもよい。局所的経皮パッチもまた、本明細書に含まれる。
【０１９６】
一実施形態では、本明細書において提供する医薬組成物を、点鼻液または鼻腔吸入によって投与してもよい。そのような組成物は、医薬製剤分野で周知の技術によって調製し、ベンジルアルコールまたは他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティを高めるための吸収促進剤、フルオロカーボン、及び／または当該技術分野で公知の他の可溶化剤または分散剤を用いて、生理食塩水中の溶液として調製してもよい。
【０１９７】
本明細書において提供する組成物が、化合物１とアザシチジンの組合せを含む場合、化合物１及びアザシチジンの両方は、通常、単剤療法レジメンで投与する用量の約１〜１００％、より好ましくは約５〜９５％の用量レベルで存在すべきである。アザシチジンは、本発明の一態様の化合物から、複数回投与計画の一部として別々に投与してもよい。あるいは、アザシチジンは、単一組成物中で化合物１と一緒に混合した単一剤形の一部であってもよい。
【０１９８】
一実施形態では、本明細書において提供する組成物は、例えば、注射により、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、もしくは皮下へ；または経口、口腔内、鼻内、経粘膜、局所的に、眼科用薬剤において、もしくは吸入によって、約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の用量で、あるいは１ｍｇ〜１０００ｍｇ／用量で、４〜１２０時間ごとに、または特定の薬物の必要性に応じて、投与することができる。本明細書における方法は、所望の、または記載する効果を達成するための化合物または化合物組成物の有効量の投与を企図する。一実施形態では、医薬組成物を、１日あたり約１〜約６回、あるいは連続注入で投与する。そのような投与は、慢性または急性療法として使用することができる。単一剤形を製造するために担体材料と組み合わせてもよい活性成分の量は、治療する宿主及び特定の投与様式に応じて様々に異なる。一般的な製剤は、約５％〜約９５％の活性化合物を含有する（ｗ／ｗ）。あるいは、そのような製剤は、約２０％〜約８０％の活性化合物を含有する。
【０１９９】
上記に列挙した用量よりも低いまたは高い用量が必要とされる場合がある。特定の被験者の具体的な用量及び治療計画は、使用する特定の化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、排出速度、薬物の組合せ、疾患、病態または症状の重症度及び経過、疾患、病態または症状に対する被験者の性向等の様々な要因、及び治療する医師の判断に依存する。
【０２００】
被験者の病態が改善した場合、必要に応じて、本明細書において提供する化合物、組成物または合剤の維持用量を投与してもよい。続いて、用量もしくは投与頻度またはその両方を、症状の関数として、症状が所望のレベルまで軽減された場合にその改善した病態が維持されるレベルまで低下させてもよい。しかしながら、被験者は、疾患症状の再発時には、長期間の断続的な治療を必要とする場合がある。
【０２０１】
［使用方法］
一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤とＤＮＡ脱メチル化剤を併用して被験者に投与することによる血液悪性腫瘍の治療方法を本明細書において提供する。いくつかのそのような実施形態において、血液悪性腫瘍は、進行性の血液悪性腫瘍である。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍はＡＭＬである。いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍は、新たに診断されたＡＭＬである。
【０２０３】
一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤とＤＮＡ脱メチル化剤を併用して被験者に投与することによる再発性または難治性ＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤とＤＮＡ脱メチル化剤を併用して被験者に投与することによる、再発性ＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤とＤＮＡ脱メチル化剤を併用して被験者に投与することによる、難治性ＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍はＭＤＳである。一実施形態では、ＭＤＳは、以下の障害：不応性貧血（ＲＡ）；環状鉄芽球を伴うＲＡ（ＲＡＲＳ）；芽球増加を伴うＲＡ（ＲＡＥＢ）；多血球系異形成を伴う不応性血球減少症（ＲＣＭＤ）、単一血球系統の異形成を伴う不応性血球減少症（ＲＣＵＤ）；分類不可能な骨髄異形成症候群（ＭＤＳ−Ｕ）；単離された（５ｑ）染色体欠失異常に関連する骨髄異形成症候群、治療関連骨髄新生物及び慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）から選択される。
【０２０５】
一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤とＤＮＡ脱メチル化剤を併用して被験者に投与することによるＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２０６】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は不応性貧血（ＲＡ）である。
【０２０７】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は、環状鉄芽球を伴うＲＡ（ＲＡＲＳ）である。
【０２０８】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は、芽球増加を伴うＲＡ（ＲＡＥＢ）である。
【０２０９】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は、多血球系異形成を伴う不応性血球減少症（ＲＣＭＤ）である。
【０２１０】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は、単一血球系統の異形成を伴う不応性血球減少症（ＲＣＵＤ）である。
【０２１１】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は、分類不可能な骨髄異形成症候群（ＭＤＳ−Ｕ）である。
【０２１２】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は、単離された（５ｑ）染色体欠失異常に関連する骨髄異形成症候群である。
【０２１３】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は、治療関連骨髄新生物である。
【０２１４】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）である。
【０２１５】
一実施形態では、ＭＤＳは低リスクＭＤＳ及び高リスクＭＤＳから選択される。
【０２１６】
特定の実施形態では、低リスクＭＤＳ及び高リスクＭＤＳは、最も一般的には芽球の割合、細胞遺伝学的リスク群、及び血球減少に基づくが、年齢、全身状態、輸血の必要性、及び他の臨床的（及びますます分子的な）要因も含む場合がある予後システムによって決定する。
【０２１７】
特定の実施形態では、高リスクＭＤＳを有する患者は、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｅｇｎｏｓｔｉｃ  Ｓｃｏｒｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＩＰＳＳ）カテゴリーのＩｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ−２及びＨｉｇｈ群に分類され、主として、ＩＰＳＳ−Ｒ群のＶｅｒｙ  Ｈｉｇｈ、Ｈｉｇｈ、及び、場合によりＩｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅに対応し、これは多くの場合、芽球増加を伴う不応性貧血の世界保健機関（ＷＨＯ）組織学分類の亜型である（ＲＡＥＢ）−１及びＲＡＥＢ−２に相当し、全生存期間中央値は＜２年であることが予想される。高リスクＭＤＳ（ＩＮＴ−２／Ｈｉｇｈ  ＩＰＳＳまたはＨｉｇｈ／Ｖｅｒｙ  ｈｉｇｈ  ＩＰＳＳ−Ｒスコア）を有する患者は、ＡＭＬへの進行の確率がそれぞれ３３％〜４５％であり、介入なしでの約１２か月の生存期間中央値を有する（Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｏｐｏｓａｌ  ｆｏｒ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  （ＩＷＧ）  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｉａ．  Ｂｌｏｏｄ  ２００６；１０８（２）：４１９−２５  １９９７）。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、治療する血液悪性腫瘍は、高リスクＭＤＳである。
【０２１９】
一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤とＤＮＡ脱メチル化剤を併用して被験者に投与することによる固形腫瘍の治療方法を本明細書において提供する。
【０２２０】
一実施形態では、変異型ＩＤＨ２阻害剤は化合物１である。一実施形態では、化合物１は、その薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、互変異性体、立体異性体、同位体置換体、プロドラッグ、代謝産物、または多形体を包含する。
【０２２１】
一実施形態では、ＤＮＡ脱メチル化剤はアザシチジンである。
【０２２２】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫またはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物などの進行性の血液悪性腫瘍の治療方法であって、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【０２２３】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とするＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２２４】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする新規に診断されたＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２２５】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする再発性または難治性ＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２２６】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とするＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２２７】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする高リスクＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２２８】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫またはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物などの進行性の血液悪性腫瘍の治療方法であって、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。一実施形態では、化合物１の単結晶形態は、９０％〜１００％の任意の割合の純度である。
【０２２９】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とするＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３０】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする新たに診断されたＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３１】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする再発性または難治性ＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３２】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とするＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３３】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする高リスクＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３４】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫またはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物などの進行性の血液悪性腫瘍の治療方法であって、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。
【０２３５】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とするＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３６】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする新たに診断されたＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３７】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする再発性または難治性ＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３８】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とするＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２３９】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする高リスクＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２４０】
一実施形態では、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫（例えば、Ｔ細胞リンパ腫またはＢ細胞リンパ腫）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫（ＡＩＴＬ）または芽球性形質細胞様樹状細胞新生物などの進行性の血液悪性腫瘍の治療方法であって、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む治療方法を本明細書において提供する。一実施形態では、化合物１の単結晶形態は、９０％〜１００％の任意の割合の純度である。
【０２４１】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とするＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２４２】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする再発性または難治性ＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２４３】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする新規に診断されたＡＭＬの治療方法を本明細書において提供する。
【０２４４】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とするＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２４５】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、ＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする高リスクＭＤＳの治療方法を本明細書において提供する。
【０２４６】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、神経膠腫、黒色腫、軟骨肉腫、胆管癌、肉腫、または非小細胞肺癌などの固形腫瘍の治療方法を本明細書において提供する。
【０２４７】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを被験者に投与することを含む、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、神経膠腫、黒色腫、軟骨肉腫、胆管癌、肉腫、または非小細胞肺癌などの固形腫瘍の治療方法を本明細書において提供する。一実施形態では、化合物１の単結晶形態は、９０％〜１００％の任意の割合の純度である。
【０２４８】
一実施形態では、治療有効量の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、神経膠腫、黒色腫、軟骨肉腫、胆管癌、肉腫、または非小細胞肺癌などの固形腫瘍の治療方法を本明細書において提供する。
【０２４９】
一実施形態では、治療有効量の単結晶形態の化合物１及びアザシチジンを含む医薬組成物を被験者に投与することを含む、それぞれＩＤＨ２の変異型対立遺伝子の存在を特徴とする、神経膠腫、黒色腫、軟骨肉腫、胆管癌、肉腫、または非小細胞肺癌などの固形腫瘍の治療方法を本明細書において提供する。一実施形態では、化合物１の単結晶形態は、９０％〜１００％の任意の割合の純度である。
【０２５０】
一実施形態では、治療する悪性腫瘍はＩＤＨ２の変異型対立遺伝子を特徴とし、ＩＤＨ２変異は、被験者内で、α−ケトグルタル酸からＲ（−）−２−ヒドロキシグルタル酸へのＮＡＰＨ依存性の還元を触媒する新規能力を酵素に付与する。本実施形態の一態様では、変異型ＩＤＨ２はＲ１４０Ｘ変異を有する。本実施形態の別の態様では、Ｒ１４０Ｘ変異はＲ１４０Ｑ変異である。本実施形態の別の態様では、Ｒ１４０Ｘ変異はＲ１４０Ｗ変異である。本実施形態の別の態様では、Ｒ１４０Ｘ変異はＲ１４０Ｌ変異である。本実施形態の別の態様では、変異型ＩＤＨ２はＲ１７２Ｘ変異を有する。本実施形態の別の態様では、Ｒ１７２Ｘ変異はＲ１７２Ｋ変異である。本実施形態の別の態様では、Ｒ１７２Ｘ変異はＲ１７２Ｇ変異である。
【０２５１】
悪性腫瘍は、細胞試料を配列決定して、ＩＤＨ２のアミノ酸１４０及び／または１７２の変異（例えば、存在する変化したアミノ酸）の存在及び特定の性質を決定することによって分析することができる。
【０２５２】
理論に拘泥するものではないが、出願人らは、αケトグルタル酸からＲ（−）−２−ヒドロキシグルタル酸へのＮＡＰＨ依存性の還元を触媒する新しい酵素の能力を付与するＩＤＨ２の変異型対立遺伝子、特にＩＤＨ２のＲ１４０Ｑ及び／またはＲ１７２Ｋ変異が、細胞の性質または体内における位置に関係なく、すべてのタイプの癌のサブセットを特徴付けることを見出した。したがって、本明細書において提供する化合物、組成物及び方法は、そのような活性を付与するＩＤＨ２の変異型対立遺伝子、特にＩＤＨ２  Ｒ１４０Ｑ及び／またはＲ１７２Ｋ変異の存在を特徴とする任意のタイプの癌の治療に有用である。
【０２５３】
一実施形態では、悪性腫瘍は、診断または治療の時点で、少なくとも３０、４０、５０、６０、７０、８０または９０％の腫瘍細胞がＩＤＨ２変異、特にＩＤＨ２  Ｒ１４０Ｑ、Ｒ１４０Ｗ、もしくはＲ１４０Ｌ及び／またはＲ１７２ＫもしくはＲ１７２Ｇ変異を保有している腫瘍である。
【０２５４】
一実施形態では、悪性腫瘍の治療の有効性を、被験者における２ＨＧのレベルを測定することによってモニタリングする。一般的には、２ＨＧのレベルを治療前に測定し、この場合化合物１の使用に対して上昇したレベルが示される。上昇したレベルが確定すると、治療の経過中及び／または終了後に２ＨＧのレベルを測定して効力を確定する。特定の実施形態では、２ＨＧのレベルを、治療の経過中及び／または終了後にのみ測定する。治療の過程及び治療後の２ＨＧのレベルの低下は、有効性の指標である。同様に、２ＨＧレベルが治療の経過中またはその後に上昇しないという判定もまた、有効性の指標である。一般的には、腫瘍及び／または他の癌関連病変の数及びサイズの減少、被験者の健康全般の改善、ならびに悪性腫瘍の有効性と関連している他のバイオマーカーの変化などの悪性腫瘍の治療の有効性の他の周知の測定と一緒に２ＨＧ測定を利用する。
【０２５５】
２ＨＧは試料中でＬＣ／ＭＳにより検出することができる。試料を８０：２０でメタノールと混合し、３，０００ｒｐｍで２０分間、４℃で遠心分離する。得られた上清を回収し、２−ヒドロキシグルタレートレベルを評価するためのＬＣ−ＭＳ／ＭＳの前に−８０℃で保存することができる。様々な異なる液体クロマトグラフィー（ＬＣ）分離方法を使用することができる。注入した代謝産物標準溶液で最適化したＭＳパラメータを用いて、多重反応モニタリング（ＭＲＭ）モードで作動する三連四重極型質量分析計へ陰性エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ、−３．０ｋＶ）することによって、各方法をカップリングすることができる。代謝産物は、以前に報告された方法（Ｌｕｏ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ  Ａ  １１４７，１５３  ６４，２００７）の変法に従って、水性移動相中のイオン対形成剤としての１０ｍＭトリブチルアミンを用いる逆相クロマトグラフィーによって、分離することができる。１つの方法は、ＴＣＡ代謝産物の分割を可能にし：ｔ＝０，５０％Ｂ；ｔ＝５，９５％Ｂ；ｔ＝７，９５％Ｂ；ｔ＝８，０％Ｂであり、式中、Ｂは１００％メタノールの有機移動相を示す。別の方法は、２−ヒドロキシグルタレートに特異的であり、５０％Ｂから９５％Ｂ（上記で定義した緩衝液）への５分間にわたる速い直線勾配で実行する。上記のように、Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｈｙｄｒｏ−ＲＰ、１００ｍｍ×２ｍｍ、粒子サイズ２．１μｍ（Ｐｈｅｎｏｍｏｎｅｘ）をカラムとして使用することができる。代謝産物は、ピーク面積と既知の濃度の純粋な代謝産物標準とを比較することによって定量することができる。例えば、Ｍｕｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２６，１１７９  ８６，２００８に記載されているように、１３Ｃグルタミンからの代謝物フラックス試験を実行することができる。
【０２５６】
一実施形態では、２ＨＧを直接的に評価する。
【０２５７】
別の実施形態では、分析方法を実施する過程で形成する２ＨＧの誘導体を評価する。一例として、そのような誘導体は、ＭＳ分析で形成される誘導体であり得る。誘導体は、塩付加物、例えばＮａ付加物、水和変異体、または塩付加物、例えばＭＳ分析で形成した例えばＮａ付加物でもある水和変異体を含むことができる。
【０２５８】
別の実施形態では、２ＨＧの代謝誘導体を評価する。例として、２ＨＧ、例えばＲ−２ＨＧと相関するであろうグルタル酸塩またはグルタミン酸塩などの２ＨＧの存在の結果として増強もしくは上昇するか、または低下する種が挙げられる。
【０２５９】
例示的な２ＨＧ誘導体として、以下に提供する化合物またはその塩付加物のような脱水誘導体が挙げられる：
【化３】
2018535951.tif 000016
。
【０２６０】
２ＨＧは、遺伝性代謝障害２−ヒドロキシグルタル酸尿症において蓄積することが知られている。この疾患は、２ＨＧをα−ＫＧに変換する酵素である２−ヒドロキシグルタレートデヒドロゲナーゼの欠損によって引き起こされる（Ｓｔｒｕｙｓ，Ｅ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．  Ａｍ  Ｊ  Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅｔ  ７６，３５８−６０（２００５））。２−ヒドロキシグルタレートデヒドロゲナーゼ欠損症を有する患者は、ＭＲＩ及びＣＳＦ分析による評価によると、２ＨＧを脳に蓄積させ、白質脳症を発症し、さらに脳腫瘍を発症するリスクが高い（Ａｇｈｉｌｉ，Ｍ．，Ｚａｈｅｄｉ，Ｆ．＆Ｒａｆｉｅｅ，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ  ９１，２３３−６（２００９）；Ｋｏｌｋｅｒ，Ｓ．，Ｍａｙａｔｅｐｅｋ，Ｅ．＆Ｈｏｆｆｍａｎｎ，Ｇ．Ｆ．Ｎｅｕｒｏｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ  ３３，２２５−３１（２００２）；Ｗａｊｎｅｒ，Ｍ．，Ｌａｔｉｎｉ，Ａ．，Ｗｙｓｅ，Ａ．Ｔ．＆Ｄｕｔｒａ  Ｆｉｌｈｏ，Ｃ．Ｓ．Ｊ  Ｉｎｈｅｒｉｔ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓ  ２７，４２７−４８（２００４））。さらに、２ＨＧの脳内レベルの上昇は、ＲＯＳレベルの増加につながり（Ｋｏｌｋｅｒ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １６，２１−８（２００２）；Ｌａｔｉｎｉ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １７，２０１７−２２（２００３））、潜在的に癌リスクの増加に寄与する。２ＨＧがＮＭＤＡ受容体作動薬として作用する能力は、この効果に寄与し得る（Ｋｏｌｋｅｒ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １６，２１−８（２００２））。２ＨＧはまた、酵素を利用してグルタミン酸及び／またはαＫＧを競合的に阻害することによって、細胞に対して毒性である場合がある。これらには、アミノ酸及び核酸生合成のためのグルタミン酸窒素の利用を可能にするトランスアミナーゼ、ならびにＨｉｆ１−αレベルを調節するαＫＧ依存性プロリルヒドロキシラーゼが含まれる。
【０２６１】
したがって、別の実施形態によれば、被験者に化合物１及びアザシチジンを投与することによる、被験者における２−ヒドロキシグルタル酸尿症、特にＤ−２−ヒドロキシグルタル酸尿症の治療方法を提供する。
【０２６２】
本明細書に記載の治療方法は、化合物１及びアザシチジンでの治療の前及び／またはその後の様々な評価段階をさらに含むことができる。
【０２６３】
一実施形態では、化合物１及びアザシチジンによる治療の前及び／または後に、本方法は、悪性腫瘍の増殖、サイズ、重量、侵襲性、病期及び／または他の表現型を評価する工程をさらに含む。
【０２６４】
一実施形態では、化合物１及びアザシチジンによる治療の前及び／または後に、本方法は、悪性腫瘍のＩＤＨ２遺伝子型を評価する工程をさらに含む。これは、ＤＮＡ配列決定、免疫分析、及び／または２ＨＧの存在、分布またはレベルの評価などの、当該技術分野における通常の方法によって達成してもよい。
【０２６５】
一実施形態では、化合物１及びアザシチジンによる治療の前及び／または後に、本方法は、被験者の２ＨＧレベルを測定する工程をさらに含む。これは、分光分析、例えば、磁気共鳴に基づく分析、例えば、ＭＲＩ及び／またはＭＲＳ測定、血清または脊髄液分析などの体液の試料分析、または外科用物質の分析、例えば、質量分析によって達成してもよい。
【０２６６】
一実施形態では、化合物１とアザシチジンを同時に投与する。一実施形態では、化合物１とアザシチジンを連続的に投与する。
【０２６７】
一実施形態では、治療する疾患及び被験者の病態に応じて、化合物１を、経口、非経口（例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内、ＣＩＶ、大槽内への注射もしくは注入、皮下注射、またはインプラント）、吸入、鼻腔、膣、直腸、舌下、または局所（例えば、経皮または局所）投与経路によって投与してもよい。化合物１は、単独でまたは１つ以上の活性薬剤（複数可）と一緒に、各投与経路に適した、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、アジュバント及びビヒクルとともに適切な投薬単位で製剤化してもよい。
【０２６８】
一実施形態では、本明細書において提供する方法で投与する化合物１の量は、例えば、約５ｍｇ／日〜約２，０００ｍｇ／日の範囲であってもよい。一実施形態では、この範囲は、約１０ｍｇ／日〜約２，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は約２０ｍｇ／日〜約２，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約５０ｍｇ／日〜約１，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約１００ｍｇ／日〜約１，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約１００ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は約１５０ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約１５０ｍｇ／日〜約２５０ｍｇ／日である。特定の実施形態では、特定の用量は、例えば、約１０ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約２０ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約５０ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約７５ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約１００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約１２０ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約１５０ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約２００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約２５０ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約３００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約３５０ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約４００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約４５０ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約５００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約６００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約７００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約８００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約９００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約１，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約１，２００ｍｇ／日である。一実施形態では、用量は約１，５００ｍｇ／日である。特定の実施形態では、特定の用量は、例えば、最大約１０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約７５ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１２０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約３００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約３５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約４００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約４５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約５００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約６００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約７００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約８００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約９００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１，２００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１，５００ｍｇ／日である。
【０２６９】
一実施形態では、本明細書において提供する医薬組成物または剤形中の化合物１の量は、例えば、約５ｍｇ〜約２，０００ｍｇの範囲であってもよい。一実施形態では、この範囲は約１０ｍｇ〜約２，０００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は、約２０ｍｇ〜約２，０００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約５０ｍｇ〜約１，０００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は、約５０ｍｇ〜約５００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約５０ｍｇ〜約２５０ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約１００ｍｇ〜約５００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約１５０ｍｇ〜約５００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇである。特定の実施形態では、特定の量は、例えば、約１０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約７５ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約５００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約６００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約７００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約８００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約９００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１，０００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１，２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１，５００ｍｇである。特定の実施形態では、特定の量は、例えば、最大約１０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約７５ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約２５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約３００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約３５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約４００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約４５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約５００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約６００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約７００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約８００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約９００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１，０００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１，２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１，５００ｍｇである。
【０２７０】
一実施形態では、化合物１は、例えば、単回ボーラス注射、または経口錠剤もしくは丸剤などの単回用量として；または経時的に、例えば、経時的な連続注入もしくは経時的な分割ボーラス投与などで送達することができる。一実施形態では、必要な場合、例えば患者が安定した疾患または退行を経験するまで、または患者が疾患の進行または容認できない毒性を経験するまで、化合物１を反復して投与することができる。安定な疾患またはその欠如は、当該技術分野で公知の方法、例えば、患者の症状の評価、身体検査、Ｘ線、ＣＡＴ、ＰＥＴ、またはＭＲＩスキャンを用いて画像化した腫瘍の視覚化、及び他の一般に受け入れられている評価様式などによって判定する。
【０２７１】
特定の実施形態では、化合物１を周期的に患者に投与する（例えば、１週間にわたる連日投与、次いで最大３週間の投与を行わない休止期間）。サイクリング療法は、一定期間活性剤を投与し、続いて一定期間休薬し、この連続投与を繰り返すことを含む。サイクリング療法は、耐性の発達を低下させ、副作用を回避もしくは低減し、及び／または治療の有効性を改善することができる。
【０２７２】
一実施形態では、本明細書において提供する方法は、化合物１を、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０回、または４０回を上回るサイクルで投与することを含む。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約３である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約４である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約５である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約６である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約７である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約８である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約９である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１０である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１１である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１２である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１３である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１４である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１５である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１６である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１７である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１８である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１９である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２０である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２１である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２２である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２３である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２４である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２５である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２６である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２７である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２８である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約２９である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約３０である。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約３０サイクルより大きい。
【０２７３】
特定の実施形態では、治療サイクルは、それを必要とする被験者に、複数日（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４日、または１４日超）にわたって投与する化合物１の複数回投与、場合により、その後の治療投薬休暇（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８日、または２８日超）を含む。
【０２７４】
一実施形態では、治療する疾患及び被験者の病態に応じて、アザシチジンを、経口、非経口（例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内、ＣＩＶ、大槽内への注射もしくは注入、皮下注射、またはインプラント）、吸入、鼻腔、膣、直腸、舌下、または局所（例えば、経皮または局所）投与経路によって投与してもよい。アザシチジンは、単独でまたは化合物１及び／または１つ以上の活性薬剤（複数可）と一緒に、各投与経路に適した、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、アジュバント及びビヒクルとともに適切な投薬単位で製剤化してもよい。
【０２７５】
一実施形態では、アザシチジンを、例えば、静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）または経口経路によって投与する。本明細書の特定の実施形態は、アザシチジンと、化合物１及び／または１つ以上の追加の活性薬剤との併用投与を提供して、それを必要とする被験者における相乗的治療効果を提供する。併用投与する活性薬剤（複数可）は、本明細書に記載の癌治療剤であってもよい。特定の実施形態では、併用投与する活性薬剤（複数可）は、ＩＤＨ２の阻害剤であってもよい。特定の実施形態では、併用投与する薬剤（複数可）は、例えば、経口または注射（例えば、ＩＶまたはＳＣ）によって投与してもよい。
【０２７６】
特定の実施形態では、治療サイクルは、それを必要とする被験者に、複数日（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４日、または１４日超）にわたって投与するアザシチジンの複数回投与、場合によりその後の治療投薬休暇（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８日または２８日超）を含む。本明細書において提供する方法の適切な投与量には、例えば、治療有効量及び予防有効量が含まれる。例えば、特定の実施形態では、本明細書において提供する方法において投与するアザシチジンの量は、例えば、約５０ｍｇ／ｍ２／日〜約２，０００ｍｇ／ｍ２／日の範囲であってもよい。特定の実施形態では、アザシチジンの量は、約１００ｍｇ／ｍ２／日〜約１，０００ｍｇ／ｍ２／日である。特定の実施形態では、アザシチジンの量は、約１００ｍｇ／ｍ２／日〜約５００ｍｇ／ｍ２／日である。特定の実施形態では、アザシチジンの量は、約５０ｍｇ／ｍ２／日〜約５００ｍｇ／ｍ２／日である。特定の実施形態では、アザシチジンの量は、約５０ｍｇ／ｍ２／日〜約２００ｍｇ／ｍ２／日である。特定の実施形態では、アザシチジンの量は、約５０ｍｇ／ｍ２／日〜約１００ｍｇ／ｍ２／日である。特定の実施形態では、アザシチジンの量は、約５０ｍｇ／ｍ２／日〜約７５ｍｇ／ｍ２／日である。特定の実施形態では、アザシチジンの量は、約１２０ｍｇ／ｍ２／日〜約２５０ｍｇ／ｍ２／日である。特定の実施形態では、特定の用量は約５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約６０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約７５ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約８０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約１００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約１２０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約１４０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約１５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約１８０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約２００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約２２０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約２４０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約２５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約２６０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約２８０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約３００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約３２０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約３５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約３８０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約４００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約４５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は約５００ｍｇ／ｍ２／日である。特定の実施形態では、特定の用量は最大約１００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１２０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１４０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１８０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２２０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２４０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２６０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２８０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約３００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約３２０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約３５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約３８０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約４００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約４５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約５００ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約７５０ｍｇ／ｍ２／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１０００ｍｇ／ｍ２／日である。
【０２７７】
一実施形態では、本明細書において提供する方法で投与するアザシチジンの量は、例えば、約５ｍｇ／日〜約２，０００ｍｇ／日の範囲であってもよい。一実施形態では、この範囲は、約１０ｍｇ／日〜約２，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約２０ｍｇ／日〜約２，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約５０ｍｇ／日〜約１，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約１００ｍｇ／日〜約１，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約１００ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約１５０ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日である。一実施形態では、この範囲は、約１５０ｍｇ／日〜約２５０ｍｇ／日である。特定の実施形態では、特定の用量は約１０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約２０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約７５ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約１００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約１２０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約１５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約２００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約２５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約３００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約３５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約４００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約４５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約５００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約６００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約７００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約８００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約９００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約１，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約１，２００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は約１，５００ｍｇ／日である。特定の実施形態では、特定の用量は最大約１０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約７５ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１２０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約２５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約３００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約３５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約４００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は、最大約４５０ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約５００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約６００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約７００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約８００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約９００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１，０００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１，２００ｍｇ／日である。一実施形態では、特定の用量は最大約１，５００ｍｇ／日である。
【０２７８】
一実施形態では、本明細書において提供する医薬組成物または剤形中のアザシチジンの量は、例えば、約５ｍｇ〜約２，０００ｍｇの範囲であってもよい。一実施形態では、この範囲は約１０ｍｇ〜約２，０００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は、約２０ｍｇ〜約２，０００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約５０ｍｇ〜約１，０００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は、約５０ｍｇ〜約５００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約５０ｍｇ〜約２５０ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約１００ｍｇ〜約５００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約１５０ｍｇ〜約５００ｍｇである。一実施形態では、この範囲は約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇである。特定の実施形態では、特定の量は約１０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約７５ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約２５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約３５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約４５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約５００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約６００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約７００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約８００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約９００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１，０００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１，２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は約１，５００ｍｇである。特定の実施形態では、特定の量は最大約１０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約７５ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１２０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約２５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約３００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約３５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約４００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約４５０ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約５００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約６００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約７００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約８００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約９００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１，０００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１，２００ｍｇである。一実施形態では、特定の量は最大約１，５００ｍｇである。
【０２７９】
一実施形態では、アザシチジンは、例えば、単回ボーラス注射、または経口錠剤もしくは丸剤などの単回用量として；または経時的に、例えば、経時的な連続注入もしくは経時的な分割ボーラス投与などで送達することができる。一実施形態では、必要な場合、例えば患者が安定した疾患または退行を経験するまで、または患者が疾患の進行または容認できない毒性を経験するまで、アザシチジンを反復して投与することができる。安定な疾患またはその欠如は、当該技術分野で公知の方法、例えば、患者の症状の評価、身体検査、Ｘ線、ＣＡＴ、ＰＥＴ、またはＭＲＩスキャンを用いて画像化した腫瘍の視覚化、及び他の一般に受け入れられている評価様式などによって判定する。
【０２８０】
一実施形態では、アザシチジンは、１日１回投与するか、または１日２回、１日３回、及び１日４回などの１日あたり複数回の用量に分割することができる。一実施形態では、投与は、連続的（すなわち、連日または毎日）、断続的、例えば周期的（すなわち、薬物を投与しない休止日、休止週または休止月を含む）であり得る。一実施形態では、アザシチジンを、一定期間、連日、例えば、１日１回、または１日１回より多く投与する。一実施形態では、アザシチジンを、少なくとも７日間連続して投与する。いくつかの実施形態では、アザシチジンを最大５２週にわたって投与する。一実施形態では、アザシチジンを断続的に投与、すなわち規則的または不規則な間隔で停止及び開始する。一実施形態では、アザシチジンを１週間に１〜６日間投与する。一実施形態では、アザシチジンを１日おきに投与する。一実施形態では、アザシチジンを周期的に投与する（例えば、休止期間を挟みつつ、一定期間、毎日または連日にわたって投与する）。一実施形態では、アザシチジンを、２〜８週間連続して毎日投与し、その後に最大１週間の投与のない休止期間を設けるか；または、例えば１週間にわたって毎日投与し、次いで最大３週間の投与のない休止期間を設ける）。
【０２８１】
一実施形態では、投与頻度は約１日１回〜約１か月に１回の範囲である。一実施形態では、アザシチジンを１日１回投与する。別の実施形態では、アザシチジンを１日２回投与する。さらに別の実施形態では、アザシチジンを１日３回投与する。さらに別の実施形態では、アザシチジンを１日４回投与する。一実施形態では、アザシチジンを１日おきに１回投与する。一実施形態では、アザシチジンを週２回投与する。一実施形態では、アザシチジンを週１回投与する。一実施形態では、アザシチジンを２週間に１回投与する。一実施形態では、アザシチジンを３週間に１回投与する。一実施形態では、アザシチジンを４週間に１回投与する。
【０２８２】
一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、１日〜６か月間投与する。一実施形態では、アザシチジンを１週間〜３か月間投与する。一実施形態では、アザシチジンを１週間〜４週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを１週間〜３週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを１週間〜２週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約１週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約２週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを１日１回、約３週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約４週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約６週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約９週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約１２週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約１５週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約１８週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約２１週間投与する。一実施形態では、アザシチジンを、１日１回、約２６週間投与する。特定の実施形態では、アザシチジンを断続的に投与する。特定の実施形態では、アザシチジンを、約５０ｍｇ／ｍ２／日〜約２，０００ｍｇ／ｍ２／日の量で断続的に投与する。特定の実施形態では、アザシチジンを連続的に投与する。特定の実施形態では、アザシチジンを、約５０ｍｇ／ｍ２／日〜約１，０００ｍｇ／ｍ２／日の量で連続的に投与する。
【０２８３】
特定の実施形態では、アザシチジンを、周期的に患者に投与する（例えば、１週間にわたる連日投与、次いで、最大３週間の投与を行わない休止期間）。サイクリング療法は、一定期間活性剤を投与し、続いて一定期間休薬し、この連続投与を繰り返すことを含む。サイクリング療法は、耐性の発達を低下させ、副作用を回避もしくは低減し、及び／または治療の有効性を改善することができる。
【０２８４】
一実施形態では、本明細書において提供する方法は、アザシチジンを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０回、または４０回を上回るサイクルで投与することを含む。一実施形態では、一群の患者に投与するサイクルの中央値は約１である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２である。一実施形態では、サイクルの中央値は約３である。一実施形態では、サイクルの中央値は約４である。一実施形態では、サイクルの中央値は約５である。一実施形態では、サイクルの中央値は約６である。一実施形態では、サイクルの中央値は約７である。一実施形態では、サイクルの中央値は約８である。一実施形態では、サイクルの中央値は約９である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１０である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１１である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１２である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１３である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１４である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１５である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１６である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１７である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１８である。一実施形態では、サイクルの中央値は約１９である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２０である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２１である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２２である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２３である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２４である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２５である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２６である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２７である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２８である。一実施形態では、サイクルの中央値は約２９である。一実施形態では、サイクルの中央値は約３０である。一実施形態では、サイクルの中央値は約３０サイクルより大きい。
【０２８５】
一実施形態では、アザシチジンを、本明細書において提供する用量で、７日間の治療期間及び２１日間の休薬期間からなる２８日間の周期で患者に投与する。一実施形態では、アザシチジンを、本明細書において提供する用量で、１日目〜７日目の各日に、患者に投与し、次いで、８日目〜２８日まで、アザシチジンの投与を行わない休薬期間を設ける。一実施形態では、アザシチジンを周期的に患者に投与し、各サイクルは７日間の治療期間、その後の２１日間の休薬期間からなる。特定の実施形態では、アザシチジンを、約５０、約６０、約７０、約７５、約８０、約９０、または約１００ｍｇ／ｍ２／日の用量で７日間患者に投与し、続いて２１日間の休止期間を設ける。一実施形態では、アザシチジンを静脈内投与する。一実施形態では、アザシチジンを皮下投与する。
【０２８６】
他の実施形態では、アザシチジンを、周期的に経口投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約１週間、単回投与または分割投与で連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約２週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約３週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約４週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約５週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約６週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約８週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約１０週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約１５週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約２０週間、連日投与する。投与に続いて、約１日〜約１０週間の休薬期間を設ける。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約１週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約２週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約３週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約４週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約５週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約６週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約８週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約１０週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約１５週間のサイクリング治療を企図する。一実施形態では、本明細書において提供する方法は、約２０週間のサイクリング治療を企図する。いくつかの実施形態では、アザシチジンを、単回投与または分割投与で、約１週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約２週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約３週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約４週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約５週間、連日投与する。一実施形態では、アザシチジンを、約６週間、連日投与する。一実施形態では、約１、３、５、７、９、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、２９、または３０日間の休薬期間。いくつかの実施形態では、休薬期間は１日である。いくつかの実施形態では、休薬期間は３日間である。いくつかの実施形態では、休薬期間は７日間である。いくつかの実施形態では、休薬期間は１４日間である。いくつかの実施形態では、休薬期間は２８日間である。投薬周期の頻度、数及び長さは、増加または減少させることができる。
【０２８７】
一実施形態では、化合物１を１日１回、経口投与する。一実施形態では、化合物１を、各２８日サイクルの１〜２８日目に投与する。一実施形態では、５０ｍｇの化合物１を１日１回、経口投与する。別の実施形態では、１００ｍｇの化合物１を１日１回、経口投与する。さらに別の実施形態では、２００ｍｇの化合物１を１日１回、経口投与する。一実施形態では、アザシチジンを７日間、皮下投与する。一実施形態では、アザシチジンを、各２８日サイクルの１〜７日目に投与する。一実施形態では、７５ｍｇ／ｍ２／日のアザシチジンを、各２８日サイクルの１〜７日目に投与する。
【実施例】
【０２８８】
実施例１．  ＡＭＬ細胞におけるＥＰＯ分化に対する化合物１及びアザシチジンの併用効果
細胞株
ＩＤＨ２／Ｒ１４０Ｑ対立遺伝子または空ベクター対照ＴＦ−１／ｐＬＶＸを過剰発現する改変型ＴＦ−１赤白血病細胞において、細胞分化、細胞増殖及び細胞死の測定値を評価した（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４０：６２２−６２６，２０１３）。ＨＥＰＥＳ及びＬ−グルタミン（Ｌｏｎｚａ  １２−１１５Ｆ）、１０％ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ  ＳＨ３００８８．０３）、Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １５０７０−０６３）、Ｇ４１８：終濃度５００μｇ／ｍｌ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １０１３１−０２７）；ＧＭ−ＣＳＦ：終濃度５ｎｇ／ｍｌ（Ｒ＆Ｄ  ２１５−ＧＭ−０５０）を含有するＲＰＭＩ中で細胞を増殖させた。新たに増殖した細胞のみを用いた。細胞を継代するたびに培地に新鮮なＧ４１８及びＧＭ−ＣＳＦを加えた。細胞をペレット化し、新鮮な培地に再懸濁するか、１０ｍｌの新鮮な培地に２ｍｌの細胞を加えることにより、２〜３日ごとに培地を交換した。細胞を化合物で処理する場合、細胞をペレット化して培地を交換し、化合物の適切な濃度を確保した。
【０２８９】
化合物溶液の調製
化合物１はＤＭＳＯ中の１０ｍＭストック溶液として得られた。このストックを２０μｌのバッチとして等分し、−２０℃で保存した。ランニングストックを解凍し、室温で暗所に保ち、進行中の実験に使用した。
【０２９０】
アザシチジンを４℃でデシケーター中に保持した。必要な量をメトラーで覆われた秤量天秤で計量し、ＲＮａｓｅ及びＤＮａｓｅフリー水で再構成して１０ｍＭのランニングストックを得た。溶液を３０μｌのバッチとして等分し、−２０℃で保存した。６か月ごとに新鮮なストックを調製した。１０ｍＭのアザシチジンバイアルを各実験について解凍し、使用後に捨てた。
【０２９１】
各化合物の１００μｌストックを、１０μｌの１０ｍＭストックを９９０μｌの培地に加えることによって調製した。この１００倍ストックから、所要の最終濃度とするために必要な量を細胞に加えた。
【０２９２】
アッセイ
エリスロポエチン（ＥＰＯ）分化アッセイ
Ｆ１／ｐＬＶＸ及びＴＦ１  ＩＤＨ２／Ｒ１４０Ｑ細胞（１００，０００細胞／ｍｌ）を化合物１、アザシチジンまたはその組合せで７日間前処理し（培地を２日ごとに交換した）、ＰＢＳで洗浄して残留ＧＭ−ＣＳＦを除去した。細胞を化合物１の存在下または非存在下でＥＰＯ（２ユニット／ｍｌ）を用いて分化誘導した。誘導を７日間継続し、細胞ペレットを採取し、ヘモグロビン形成量（血液系への分化の代用指標）について画像化した。
【０２９３】
ＨＢＧ及びＫＬＦ１  ｑＰＣＲ
ＲＮＡ  ｅａｓｙキット（Ｑｉａｇｅｎから入手）により細胞からＲＮＡを単離した。５００ｎｇのＲＮＡを使用してｃＤＮＡを作製し、これをリアルタイムｑＰＣＲに供し、胎児ヘモグロビン（ＨＢＧ）及びＫＬＦ−１遺伝子発現を検出した。ＲＮＡ  ｅａｓｙキットはＱｉａｇｅｎから入手した。ｃＤＮＡはＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ  ＶＩＬＯキット（Ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）から作製した。ＴａｑｍａｎプローブはＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから入手した。
【０２９４】
造血幹細胞及び芽球含有量の測定（ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＦＡＣＳ）
細胞を１０×ＢＳＡ中でブロックし、ＭＡＣＳリンス溶液で１５分間、１×濃度に希釈した（染色緩衝液、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）。上清を遠心分離によって除去した。１０μｌの抗ＣＤ３４  ＦＩＴＣ及び抗ＣＤ３８  ＡＰＣ抗体（それぞれ染色緩衝液中）を添加した。マウスＩｇＧ２ａ  ＦＩＴＣ及びＩｇＧ２ａ  ＡＰＣをアイソタイプ対照として用いた。細胞を暗所で１０分間染色し、溶液を遠心分離して上清を除去し、細胞を染色緩衝液３００μｌに再懸濁し、蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）へ進行する。
【０２９５】
結果
ＥＰＯ誘導分化の促進
細胞分化、細胞増殖及び細胞死の測定値を、図１に示すｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＥＰＯ分化アッセイ及び用量スケジュールパラダイムを用いて、ＴＦ１−Ｒ１４０Ｑ細胞において評価した。細胞を、ビヒクル、アザシチジン単独、化合物１単独、またはアザシチジンと化合物１の組合せで処理した。連続スケジュールでは、化合物１を添加する前に細胞をアザシチジンで３日間前処理した。同時スケジュールでは、アッセイを通して細胞をアザシチジンと化合物１で同時処理した。
【０２９６】
両スケジュールは、ヘモグロビン形成、ＫＬＦ１（Ｋｒｕｐｐｅｌ様因子１）及びＨＢＧ（ヘモグロビン遺伝子Ａ／Ｂ）ＲＮＡレベルの分化エンドポイントについて同様の傾向を示した（図２）。連続スケジュールでは、０．２μＭ及び１．０μＭ濃度の細胞ペレットの赤色の増加によって示されるように、化合物１単独では用量依存的にヘモグロビン産生が増加した。アザシチジン単独では、細胞ペレットの色にほとんどまたはまったく影響を及ぼさなかったが；しかしながら、アザシチジンと化合物１の併用では、着色／ヘモグロビン形成は化合物１単独よりも顕著に大きかった（図２Ａｉ）。
【０２９７】
分化マーカーＫＬＦ１及びＨＢＧのＲＮＡ発現の用量依存的増加が、両方の単剤において観察された。アザシチジンと化合物１とを連続的に併用した場合、これらのパラメータは、相加的に増加するか、または相加的増大より大きく増加した（図２Ａｉｉ、ｉｉｉ）。例えば、単剤としての化合物１（０．２μＭ）及びアザシチジン（０．３μＭ）は、ＨＢＧ遺伝子発現においてそれぞれ２４１倍及び９２倍の増加を示したが（図２Ａ、ｉｉｉ）、一方、アザシチジン（０．３μＭ）と化合物１（０．２μＭ）の併用によって、５３０倍の増加が得られ、これは単剤の倍増率の足し合せよりも１５９％高い（図２Ａ、ｉｉｉ）。アザシチジンと化合物１との連続的な併用はまた、より迅速な血液ヘモグロビン形成によって証明されるように、ＥＰＯ誘導分化へ至るまでの全治療期間を短縮した。化合物１を単剤として用いた場合、細胞の赤色の増加を観察するために７日間が必要であったが、このヘム産生の増加は、薬剤を併用した場合には、ＥＰＯ後４日目において視覚的に明らかであった（図７）。
【０２９８】
ヘモグロビン形成（図２Ｂｉ）、ＫＬＦ１発現（図２Ｂｉｉ）及びＨＢＧ発現（図２Ｂｉｉｉ）における同様の結果が、同時投与レジメンで観察された。化合物１単独（０．２及び１μＭ）の場合、ＥＰＯ分化の際にヘモグロビン産生が用量依存的に増加した。アザシチジン単独でも、０．１及び０．３μＭの濃度でヘモグロビン産生が増加したが、細胞ペレットサイズの減少によって証明されるように、細胞死は１μＭで生じた。アザシチジンと化合物１の併用効果は、単剤よりも顕著に大きな着色／ヘモグロビン形成をもたらした（図２Ｂｉ）。
【０２９９】
単剤としてのアザシチジン及び化合物１によって、分化マーカーＫＬＦ１及びＨＢＧのＲＮＡ発現における用量依存的な増加が観察され、アザシチジンと化合物１との同時併用によって、ＲＮＡ発現の、相加的または相加的増加よりも大きな増加が得られた（図２Ｂｉｉ、ｉｉｉ）。例えば、単剤としての化合物１（０．２μＭ）及びアザシチジン（１μＭ）は、それぞれＨＢＧ遺伝子発現に対し、２．５倍及び７．１倍の増加を示したが（図２Ｂｉｉｉ）、一方、アザシチジン（１μＭ）と化合物１（０．２μＭ）を併用した場合、１１．３倍の増加が得られ、これは単剤の倍増率の足し合わせよりも１２１％高かった（図２Ｂｉｉｉ）。
【０３００】
造血前駆細胞及び幹細胞の欠乏の促進
造血幹（ＣＤ３４＋／ＣＤ３８−）及び前駆（ＣＤ３４＋／ＣＤ３８＋）細胞集団を、ＥＰＯ分化アッセイの終了時に定量した（図３及び８）。単剤としてのアザシチジン及び化合物１のいずれによっても、ＣＤ３４＋／ＣＤ３８＋（図３ｉ）及びＣＤ３４＋／ＣＤ３８−（図３ｉｉ）細胞集団は減少した。アザシチジンと化合物１の併用によって、相加的、または相加的よりも大きな減少が得られた。例えば、単剤としての化合物１（０．２μＭ）及びアザシチジン（０．１μＭ）により、連続治療で造血前駆細胞（ＣＤ３４＋／ＣＤ３８＋）がそれぞれ３２％及び７％減少したが、一方、アザシチジン（０．１μＭ）と化合物１（０．２μＭ）の併用により、造血前駆細胞集団が６４％減少した（図３ｉ）。
【０３０１】
単剤としての化合物１（０．２μＭ）及びアザシチジン（０．１μＭ）は、連続または同時治療レジメンによって造血幹細胞集団に対して効果を示さなかった（＜１０％減少）（図３ｉｉ）が、同じ濃度でのそれらの併用により、連続及び同時治療の両方で造血幹細胞集団が２０％減少した（図３ｉｉ）。
【０３０２】
これらのデータは、白血病性幹細胞及びＴＦ１−Ｒ１４０Ｑ細胞の前駆細胞集団の欠乏に対して、化合物１及びアザシチジンの組合せの相加効果よりも大きい効果を示している。
【０３０３】
細胞死の促進
ＥＰＯ分化アッセイの終わりにアネキシンＶ／７−ＡＡＤフローサイトメトリーを介して細胞死を分析した（図４及び９）。連続投与スケジュール計画では、単剤による細胞死の誘導（アネキシンＶ＋及び／または７ＡＡＤ＋）はなかった（＜２倍）。同時投与スケジュール計画では、単剤としてのアザシチジン及び化合物１により、アネキシンＶ＋及び／または７ＡＡＤ＋細胞の割合がそれぞれ３．４倍及び３．５倍（用量濃度にわたる平均値）増加した。連続または同時治療レジメンのいずれかを使用する薬剤の併用では、細胞死の促進はなかった。
【０３０４】
ＩｎｃｕＣｙｔｅ  Ｚｏｏｍを用いてリアルタイム細胞死分析を行った（図５及び図６）。１〜１０μＭの濃度では、化合物１は細胞増殖に影響を及ぼさなかったが、一方、アザシチジン（１μＭ）では増殖が減少し、アポトーシスが増加した（図５ｉ対図５ｉｉｉ；図５ｉｉ対図５ｉｖ）。両方の薬剤による連続治療は、アザシチジン単独で単独で観察されたもの以上に増殖をさらに減少させたり、アポトーシスを増加させたりすることはなかった（図５ｉｉｉ、５ｉｖ）。
【０３０５】
アザシチジン（０．３μＭ）と化合物１（１μＭ）との同時併用は、細胞増殖に影響を与えなかった（図６ｉ）が、単剤に比べて細胞の死滅は増加した（１０４時間において７７％の増加）（図６ｉｉ）。これらの濃度でのいずれかの単剤による細胞死の誘導がないことを考慮すると、薬剤の併用による細胞死の増加は顕著である。アザシチジン（１μＭ）と化合物１（１μＭ）の併用では、単剤に比べて、増殖は減少し（１０４時間で３２％の減少）（図６ｉｉｉ）アポトーシスは増加した（１０４時間で９５％の増加）（図６ｉｉｉ、６ｉｖ）。要約すると、単剤としての化合物１は、カスパーゼ３／７細胞死の尺度に影響を及ぼさなかったが、同時併用の用量スケジュール計画は、アザシチジンの単剤効果を増強した。
【０３０６】
総じてこれらの結果は、ＡＺＡと化合物１とを併用してＩＤＨ２変異型ＡＭＬ患者、より詳細にはＩＤＨ２Ｒ１４０Ｑ変異型ＡＭＬ患者に恩恵をもたらすための新規併用パラダイムを示している。このメカニズムに基づいて、その併用を他のＩＤＨ２Ｒ１４０Ｑ変異型の癌に変換することができる。
【０３０７】
実施例２．  イソクエン酸脱水素酵素（ＩＤＨ）変異体標的化療法＋アザシチジンの２つの併用の第１ｂ／２相非盲検無作為化試験：集中的導入化学療法を受ける候補者ではない、それぞれＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を有する新たに診断された急性骨髄性白血病を有する被験者における、経口化合物２＋皮下アザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジン
［適応症］：集中的導入化学療法（ＩＣ）を受ける候補者ではない、ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を有する新たに診断された急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する１８歳以上の患者の治療。
【０３０８】
主要な目的−第１ｂ相（用量漸増段階）
【０３０９】
［主目的］
【０３１０】
集中的ＩＣを受け入れる候補者ではない、ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異をそれぞれ有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者において、経口（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（２−クロロフェニル）−２−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）アミノ）−２−オキソエチル）−１−（４−シアノピリジン−２−イル）−Ｎ−（５−フルオロピリジン−３−イル）−５−オキソピロリジン−２−カルボキサミド）（以下、化合物２）＋皮下（ＳＣ）アザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジンの併用治療の安全性及び忍容性を評価すること。
【０３１１】
ＳＣアザシチジンと一緒に投与する場合の、経口化合物２及び経口化合物１の推奨される第２相用量（ＲＰ２Ｄ）を確立すること。
【０３１２】
［副次的目的］
【０３１３】
集中的ＩＣを受ける候補者ではない、ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異をそれぞれ有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者における、経口化合物２＋ＳＣアザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジンの併用治療の予備的効果を評価すること。
【０３１４】
第２相（無作為化段階）
【０３１５】
［主目的］
【０３１６】
集中的ＩＣを受ける候補者ではない、ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異をそれぞれ有する新規に診断された被験者における、ＳＣアザシチジンに比べての、経口化合物２＋ＳＣアザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジンの併用治療の有効性を評価すること。
【０３１７】
［副次的目的］
【０３１８】
ＳＣアザシチジンとともに投与した場合の経口化合物２及び経口化合物１の安全性を評価すること。
【０３１９】
併用投与する場合の、経口化合物２、化合物１、及びＳＣアザシチジンの薬物動態（ＰＫ）を特徴づけること。
【０３２０】
骨髄及び血漿試料中の２−ヒドロキシグルタレート（２−ＨＧ）レベルの抑制を伴うＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物２及び経口化合物１のＰＫ及びＰＤの関連性を評価すること。
【０３２１】
健康関連の生活の質（ＨＲＱｏＬ）の転帰について、ＳＣアザシチジン単独で投与する場合に比べての、ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物２及び経口化合物１の効果を評価すること。
【０３２２】
［治験のデザイン］
【０３２３】
この第１ｂ／２相の治験は、それぞれＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を有する新規に診断されたＡＭＬを有する被験者における経口化合物２＋ＳＣアザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジンの安全性及び有効性を評価するための、非盲検、無作為化、多施設治験である。研究対象集団は、集中的ＩＣを受ける候補者ではない被験者からなる。この治験は、第１ｂ相用量漸増段階及び第２相無作為化段階を含む。
【０３２４】
［第１ｂ相用量決定段階］
【０３２５】
第１ｂ相は、経口化合物２及び経口化合物１とＳＣアザシチジンとの併用の安全性及び忍容性を評価して、ＳＣアザシチジンと併用投与した場合のこれらの２つの薬剤のＲＰ２Ｄを定義するための非盲検、用量決定試験である。経口化合物２＋ＳＣアザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジンレジメンの予備臨床活性もまた評価する。
【０３２６】
第１ｂ相段階は３つの期間：１）スクリーニング；２）治療；及び３）追跡調査からなる。
【０３２７】
被験者のスクリーニング手順は、治験治療開始前２８日以内のスクリーニング期間中に行う。ＩＤＨ変異を有するＡＭＬの診断は、骨髄液及び／または末梢血試料の病理学及びＩＤＨ遺伝子変異試験の両方のローカル判定に基づく。登録に適格な被験者は、合併症の存在、パフォーマンスステータスの低下、または他の要因などにより、治験責任医師の判断に基づいて集中的ＩＣを受ける候補者であってはならない。ＩＤＨ１変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者を、経口化合物２＋ＳＣアザシチジン群に割り当て、ＩＤＨ２変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者を、経口化合物１＋ＳＣアザシチジン群に割り当てる。被験者を、ＩＤＨ１及びＩＤＨ２の二重変異に関連するＡＭＬであると診断する稀な事例では、経口化合物２または化合物１治療群への割り当ては、共同研究者及び医療モニターの決定に基づいて行い、原資料に記録する。
【０３２８】
治療期間中、標準的な３＋３デザインを使用する。必要に応じて、医療モニター、リード安全医師、生物統計学者、その他の機能分野の代表者または指名者からなる投与判定チーム（ＤＲＴ）、ならびにすべての現場の治験責任医師及び／または指名者（被験薬を投与された被験者を有する現場での）は、各用量レベルのサイクル１中に被験者が経験したすべての有害事象（ＡＥ）をレビューし、ＳＣアザシチジンと併用投与した場合の経口化合物２または化合物１の最大耐量（ＭＴＤ）を超過したかどうかを判定する。経口化合物２の１つの用量レベル（１日５００ｍｇ）及び経口化合物１の２つの用量レベル（１日１００ｍｇ及び１日２００ｍｇ）を評価する予定である。経口化合物２については１日５００ｍｇ未満、及び化合物１については１日１００ｍｇ未満の用量レベルを、ＳＣアザシチジンと併用してのこれらの用量のＭＴＤ超過がサイクル１中に認められる場合に、評価する。投与中断／遅延及び用量減少を用いて、毒性を管理してもよい。被験者は、疾患の憎悪／再発、治験治療に耐えられなくなるまで、または被験者が何らかの理由で治験治療の中止を希望するまで、治験治療を受けてもよい。治療に対する奏効は、修正国際ワーキンググループ（ＩＷＧ）ＡＭＬ奏効基準（Ｃｈｅｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ２００３；２１（２４）：４６４２−９）に従って、治験責任医師が評価する。血液学的改善（ＨＩ）は、ＩＷＧ骨髄異形成症候群ＨＩ基準（Ｃｈｅｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｌｏｏｄ  ２００６；１０８（２）：４１９−２５）に従って評価する。治験治療を中止する場合、被験者は最終投与評価を受けることになる。治療中止の理由は、電子症例報告書（ｅＣＲＦ）のページ及び原資料に記録する。
【０３２９】
追跡調査の同意を撤回する以外の理由で治験治療を中止したすべての被験者に対しては、ＡＥ、併用医薬、併用療法、輸血、医療資源利用、奏効、血液学的改善、その後のＡＭＬ治療、及び生存についての評価を継続する。
【０３３０】
追跡調査の同意の撤回または病状悪化以外の何らかの理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、治験の追跡調査期間中、病状が悪化するまで奏効に関して評価を継続する。
【０３３１】
追跡調査の同意を撤回する以外の理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、その後のＡＭＬ治療、及び生存について評価を継続する。
【０３３２】
本治験は、ハーモナイゼーション国際会議（ＩＣＨ）の優良臨床試験基準（ＧＣＰ）ガイドラインに従って実施する。
【０３３３】
［第２相無作為化段階］
【０３３４】
第２相段階は、非盲検無作為化試験であり、奏効率（ＯＲＲ）、無再発生存期間（ＥＦＳ）、及び形態学的な完全寛解（ＣＲ）を評価するために、ＳＣアザシチジン単独に対する、経口化合物２及び経口化合物１とＳＣアザシチジンとの併用の有効性を評価する。
【０３３５】
第２相段階はまた、３つの期間：１）スクリーニング；２）治療；３）追跡試験からなる。
【０３３６】
第１ｂ相と同様に、被験者のスクリーニング手順は、治験開始２８日前のスクリーニング期間中に行うが、ＡＭＬの診断は登録のためにローカルで行い、その後の中央判定に基づいて確認する。ＩＤＨ変異は、骨髄液及び／または末梢血の両方の試料を用いて、中央判定で評価する。登録に適格な被験者は、合併症の有無、パフォーマンスステータスの低下、または他の要因により、治験責任医師の判断に基づいて集中的ＩＣを受診する候補者ではない被験者である。
【０３３７】
適格性の判定の後、ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者を、３つの群のうちの１つに対して２：１の比率で無作為化する。ＩＤＨ１変異を有する被験者を無作為化して、経口化合物２＋ＳＣアザシチジン（群１）対ＳＣアザシチジン（群３）を２：１の比率で投与し；ＩＤＨ２変異を有する被験者を無作為化して、経口化合物１＋ＳＣアザシチジン（群２）対ＳＣアザシチジン（群３）を２：１の比率で投与する。群１と２では、最低５０人の被験者を無作為化し、群３では最低２５人のＩＤＨ１と２５人のＩＤＨ２（群３では合計５０人の被験者）を無作為化する（全群で合計１５０人の被験者）。被験者を、ＩＤＨ１及びＩＤＨ２の二重変異に関連するＡＭＬと診断する稀な事例では、経口化合物２または化合物１治療群への無作為化は、治験責任医師及び医療モニターの決定に基づいて行う。
【０３３８】
被験者を、細胞遺伝学によって層別化する（より良好または中程度の、それに対して不十分な細胞遺伝学的リスク）。
【０３３９】
治験治療は無作為化と同じ日に開始する。治験治療中の評価には、有効性、安全性、ＨＲＱｏＬ、医療資源利用、薬物動態、薬力学、及び相関研究が含まれる。
【０３４０】
治験中に収集したすべての骨髄液及び／または生検、末梢血塗抹及び細胞遺伝学の遡及的な中央判定を、被験者の治療について盲検化した人員によって行う。中央評価は統計分析に用いる。中央評価と局所評価との間の不一致は、第三者のレビュワーが裁定し、裁定した評価を統計分析に用いる。
【０３４１】
治療及びＨＩに対する奏効は、それぞれ、修正ＩＷＧ  ＡＭＬ奏効基準（Ｃｈｅｓｏｎ，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ２００３；２１（２４）：４６４２−９）及びＩＷＧ骨髄異形成症候群ＨＩ基準（Ｃｈｅｓｏｎ，ｅｔ  ａｌ，Ｂｌｏｏｄ  ２００６；１０８（２）：４１９−２５）に従い、盲検化独立奏効評価委員会（ＩＲＡＣ）によって治験責任医師が遡及的に評価する。
【０３４２】
治験治療中の毒性を管理し、及び／または治療奏効を増大させるために、投薬中断、投薬遅延または投薬量の変更を行ってもよい。及び
【０３４３】
治験の併用群における被験者に対する化合物２、化合物１、またはアザシチジンの中断は許容される。治験責任医師の評価において、被験者が臨床的有用性を示し続け、治験治療を継続するための治験実施計画書が指定するすべての基準を満たす場合、被験者は、単剤の化合物２、化合物１、またはアザシチジンでの治療を継続してもよい。被験者が進行性疾患を有しているか、または代替療法を受ける場合、治験治療を中止する。
【０３４４】
被験者を中止する決定は、治験依頼者によって遅延させられたり拒否されたりすることはなく、依然として治療する医師がその責任を負う。しかしながら、被験者を中止する前に、治験責任医師が医療モニターに連絡し、検討及び討議するために適切な補足文書を提出することが推奨される。
【０３４５】
治験治療の少なくとも１回の投与を受けたすべての被験者は、治験治療の中止時に最終投与（ＥＯＴ）評価を受けるべきである。中止の理由は、電子症例報告書（ｅＣＲＦ）のページ及び原資料に記録する。
【０３４６】
追跡調査の同意を撤回する以外の理由で治験治療を中止したすべての被験者に対しては、ＡＥ、併用医薬、併用療法、輸血、医療資源利用、奏効、血液学的改善、その後のＡＭＬ治療、及び生存についての評価を継続する。
【０３４７】
追跡調査の同意の撤回または病状悪化以外の何らかの理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、治験の追跡調査期間中、病状が悪化するまで奏効に関して評価を継続する。
【０３４８】
追跡調査の同意を撤回する以外の理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、その後のＡＭＬ治療、及び生存について評価を継続する。
【０３４９】
本治験は、ハーモナイゼーション国際会議（ＩＣＨ）の優良臨床試験基準（ＧＣＰ）に従って実施する。
【０３５０】
［治験期間］
【０３５１】
治験の全期間は、およそ６０か月であると予想され、第１ｂ相及び第２相の、リクルート、スクリーニング、治療、及び追跡調査を含む。リクルートは、第１ｂ相では７か月、第２相では１７か月を要すると予想される。単一の被験者について、治験の第１ｂ相セグメントの予測期間は、最大２８日のスクリーニング期間を含めておよそ１３か月であり、治験の第２相セグメントの予測期間は、最大２８日のスクリーニング期間を含めておよそ２５か月である。
【０３５２】
治験終了とは、治療後の追跡調査を完了するための最後の被験者の最後の訪問の日付、または治験実施計画書の中で予め指定されている、主要、二次的、及び／または探索的分析に必要な最後の被験者からの最後のデータポイントの受信日のうちのいずれか遅いほうの日付と定義される。
【０３５３】
治験は、完全な検出力に必要な量のＥＦＳ事象が生じるまで継続する。
【０３５４】
［治験治療］
【０３５５】
化合物２及び化合物１は、各２８日サイクルの１〜２８日目に１日１回（ＱＤ）経口投与する。被験者には、毎日±４時間のほぼ同じ時間帯に服用するように指示する必要がある。各用量を１杯の水で摂取し、可能な限り短時間で摂取すべきである。被験者には、錠剤全体を飲み込み、錠剤を噛むことはしないように指示すべきである。化合物２または化合物１の投与の２時間前及び１時間後には、絶食が必要である。絶食中も水の摂取は可能である。
【０３５６】
第１ｂ相及び第２相の両方の間、各２８日間の治療サイクルの１日目から開始する７日間、アザシチジンをＳＣ投与する。第２相段階の間、アザシチジン単独群に無作為化した被験者に、各２８日サイクルの７日間、７５ｍｇ／ｍ２／日のアザシチジンをＳＣ投与する。すべての無作為化被験者には、それらの治療を中止しない限り、治験終了まで２８日ごとに７日間、７５ｍｇ／ｍ２／日のアザシチジンをＳＣ投与する。さらに、被験者は、治験責任医師の裁量に応じて、抗生物質及び輸血を含む、必要に応じた最良の支援ケアを受けてもよい。７日間の投薬期間中に２回以下の投与を逃した場合、被験者が７日間の治療のすべてを受けるように投薬を継続すべきである。７日間の投薬期間中に３日以上を逃した場合、治験責任医師は治験依頼者に連絡すべきであり、投薬の決定はケースバイケースで行う。
【０３５７】
［第１ｂ相：］
【０３５８】
第１ｂ相は３＋３デザインを使用する。化合物２については、１つの用量レベルを、登録する３人の被験者について検討する。コホート１に対しては、１日１回５００ｍｇの経口化合物２、及び各２８日サイクルの各サイクルの１日目から開始する７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンで惹起する。コホート１の２人以上の被験者がコホート１において用量制限毒性（ＤＬＴ）を有する場合、コホート−１を、１日１回２５０ｍｇで、及び各２８日サイクルの７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンで検討する。
【０３５９】
化合物１については、２つの用量レベルを検討する。コホート１は、１日１回１００ｍｇの経口化合物１、及び各２８日サイクルの各サイクルの１日目から開始する７日間の７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンで惹起する。ＤＬＴが観察されない場合、ＤＲＴによってＲＰ２Ｄを確認し、１００ｍｇ用量を治験の第２相セグメントの開始用量として用いる。コホート２に対する用量漸増も、１日１回２００ｍｇの経口化合物１、及び各２８日サイクルの各サイクルの１日目から開始する７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンで惹起し、この用量レベルでの併用の忍容性を調べる。コホート１において２人以上の被験者がＤＬＴを有する場合、１日１回５０ｍｇの経口化合物１、及び各２８日サイクルの各サイクルの１日目から開始する７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンでコホート−１を調べる。
【０３６０】
ＤＲＴは、１サイクル後の各被験者のすべての毒性を評価し、個々の被験者に対して更なる用量変更が必要かどうかを判定する。
【０３６１】
［第２相：］
【０３６２】
化合物２の併用群：
【０３６３】
ＩＤＨ１変異を有する被験者に、各２８日サイクルの１〜２８日目におけるＱＤのＲＰ２Ｄの化合物２＋各２８日サイクルの７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンを経口投与する。
【０３６４】
化合物１の併用群：
【０３６５】
ＩＤＨ２変異を有する被験者に、各２８日サイクルの１〜２８日目におけるＱＤのＲＰ２Ｄの化合物１＋各２８日サイクルの７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンを経口投与する。
【０３６６】
アザシチジン単独群：
【０３６７】
ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異のいずれかを有する被験者に、各２８日サイクルの７日間に７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンを投与する。
【０３６８】
［主要有効性評価の概要］
【０３６９】
有効性
【０３７０】
連続血液及び骨髄サンプリングを使用して、サイクル２で開始する治療に対する奏効を判定する。奏効は、第１ｂ相の間にローカルで評価する。第２相では、奏効をローカルで評価し、報告された血液検査値、末梢血塗抹、骨髄液及び／または生検、ならびに細胞遺伝学に基づく修正ＩＷＧ基準に従って中央判定で確認する。
【０３７１】
再発または憎悪の前に治験治療を中止する被験者は、再発または憎悪が確認されるまで毎月の現場訪問を履行する。再発または憎悪のために治験治療を中止している被験者については、毎月の追跡調査を、現場訪問または電話で行うことができる。被験者は、死亡するか、追跡不能となるか、さらなるデータ収集に対する同意を撤回するか、または治験終了まで追跡する。
【０３７２】
［他の重要な評価の概要］
【０３７３】
安全性
【０３７４】
安全性評価としては、有害事象、身体検査、米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータス、バイタルサイン、心エコー検査（ＥＣＨＯ）または心電同期マルチゲート収集（ＭＵＧＡ）スキャン、心電図（ＥＣＧ）、心臓マーカー、尿検査、凝固、血液学、血清化学、輸血、妊娠検査（妊娠可能性のある女性（ＦＣＢＰ）のみ）、及び併用薬または併用療法が挙げられる。
【０３７５】
化合物２及び化合物１の血漿ＰＫ／ＰＤ
【０３７６】
化合物２／化合物１及びアザシチジン併用のＰＫ特性は、第２相セグメントにおける化合物２／化合物１及びアザシチジン併用の血漿濃度及びＰＫパラメータによって評価する。２−ＨＧの血漿濃度は、化合物２または化合物１の血漿濃度との経時的な関連性で評価する。
【０３７７】
研究製品の管理
【０３７８】
経口化合物２及び化合物１は、各治療サイクルの１日目に分配し、各治療サイクルの完了後に報告する。
【０３７９】
アザシチジンは、治験現場要員がＳＣ投与する。調製及び投薬を含むすべてのＩＰの正確な記録を、被験者のＣＲＦ及び原資料の適切なセクションで行う。
【０３８０】
［統計的方法］
【０３８１】
［第１ｂ相段階：］
【０３８２】
第１ｂ相における統計解析は、本質的に主として記述的である。素因、人口統計学的及びベースラインの疾患特性、安全性、ＰＫ、ＰＤ、ならびに臨床活性パラメータについての集計を作成する。分類データを頻度分布（被験者の数と割合）でまとめ、連続データを記述統計（平均、標準偏差、中央値、最小値、及び最大値）でまとめる。適切な場合には、データを用量レベルで、及び総合的にまとめる。
【０３８３】
［第２相：］
【０３８４】
第２相における全奏効率（ＯＲＲ）の主要有効性エンドポイントは、修正ＩＷＧ  ＡＭＬ奏効基準に従って、ＣＲ、ＣＲｐ、形態学的白血病細胞消失［ＭＬＦＳ］、ＣＲｉ、及びＰＲの奏効を含む。ＯＲＲにおける治療差は、ＩＴＴ集団におけるフィッシャーの正確確率検定を用いて試験する。この試験は、経口化合物２＋ＳＣアザシチジンと、それに対してＩＨＤ１またはＩＤＨ２変異を有し、アザシチジン単剤治療に対して無作為化した被験者を含むプールしたアザシチジン単剤治療群のＯＲＲ、ならびに経口化合物１＋ＳＣアザシチジンと、それに対して別個にプールしたアザシチジン単剤治療群のＯＲＲの比較のための中心的なｐ値を提供する。
【０３８５】
経口化合物２＋ＳＣアザシチジン群の５０人のＩＤＨ１被験者、経口化合物１＋ＳＣアザシチジン群の５０人のＩＤＨ２被験者、及びアザシチジン単剤治療群（プールしたアザシチジン単剤治療）における５０人のＩＤＨ１またはＩＤＨ２被験者の組合せを用いて、最大１５０人の被験者を本治験において無作為化する。比較は、経口化合物２＋ＳＣアザシチジンと、それに対してプールしたアザシチジン単剤治療、及び化合物１＋アザシチジンと、それに対してプールしたアザシチジン単剤治療について別々に行う。
【０３８６】
［組み入れ基準］
被験者は、治験に登録するために以下の基準を満たさなければならない：
【０３８７】
同意説明文書（ＩＣＦ）に署名する時点で被験者は≧１８歳である。
【０３８８】
治験関連の評価／手順を実施する前に、被験者は、ＩＣＦを理解し、自発的に署名しなければならない。
【０３８９】
被験者は、治験訪問スケジュール及び他の治験実施計画書の要件に厭わずに従うことができる。
【０３９０】
被験者は、ＷＨＯ分類に従って、未治療のＡＭＬ、一次的（すなわち新規）または二次的（ＭＤＳもしくは骨髄増殖性新生物の進行（［ＭＰＮ］、または治療関連の）ＡＭＬを有し、骨髄において≧２０％の白血病性芽球を有し：ＩＤＨ１またはＩＤＨ２遺伝子変異（Ｒ１３２、Ｒ１４０、またはＲ１７２）を有し；承認されたローカル検査を使用して、第１相の適格性を確認してもよいが、誰が集中的ＩＣを受ける候補者ではないかを治験責任医師が評価することによって；中央検査を行って第２相の適格性を確認しなければならない。
【０３９１】
被験者は、０、１または２の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスを有する。
【０３９２】
被験者は、以下のように定義される適切な器官機能を有する：白血病器官の関与のために考慮されない限り、血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ／血清グルタミン酸オキソ酢酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）≦３×ＵＬＮ；血清総ビリルビン＜１．５×ＵＬＮ。効果のない赤血球形成、ギルバート症候群（例えば、ＵＧＴ１Ａ１の遺伝子変異）、または白血病性器官の関与に起因する可能性がある場合、より高いレベルが許容可能である；血清クレアチニン＜２×ＵＬＮまたはＣｏｃｋｒｏｆｔ−Ｇａｕｌｔ糸球体濾過率（ＧＦＲ）推定値：（１４０−年齢）×（体重ｋｇ）×（女性の場合は０．８５）／７２×血清クレアチニン、に基づいてクレアチニンクリアランス＞３０ｍＬ／分。
【０３９３】
連続骨髄吸引／生検に同意する。
【０３９４】
以下の条件を満たす妊娠可能性のある女性（ＦＣＢＰ）は参加してもよい：スクリーニング時及び治験中、及び最後の治験治療後の４か月間（カナダでは最後のアザシチジン投与後の６か月間）、性交を避けるか、または少なくとも２つの有効な避妊法（経口、注射、パッチ、もしくは移植可能なホルモン避妊薬；卵管結紮；子宮内避妊器具；殺精子薬を用いた合成二重バリア避妊法；またはパートナーの精管切除）を使用することに同意することを条件とし；及びスクリーニング時にヒト絨毛性ゴナドトロピン（β−ｈＣＧ）妊娠試験（感度が少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬ）の陰性血清βサブユニットを有し；及び治療期間中の治験治療開始前７２時間以内にβｈＣＧ妊娠試験（感度が少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬ）において陰性血清または尿（ローカルな規制の下での治験責任医師の裁量）を有する（７２時間の時間枠内で実施する場合には、治療期間中の治験治療の開始前の試験として、スクリーニング血清妊娠検査を用いることができる点に留意されたい）。
【０３９５】
妊娠可能性のある女性パートナーを有する男性被験者は、スクリーニング及び治験の経過中、性交を避けるか、または少なくとも２つの有効な避妊方法（例えば、殺精子剤を含む合成コンドームなど）を使用することに同意しなければならず、治験の経過中及び最後の治験治療後の４か月間（カナダでは最後のアザシチジンの投与後の６か月間）、子作りを避けるべきである。
【０３９６】
［除外基準］
【０３９７】
以下のいずれかに該当する場合、被験者を登録から除外する：
【０３９８】
形態学、免疫表現型、分子アッセイ、または核型に基づいて、被験者が急性前骨髄球性白血病を有している疑いがあるか、または証明されている。
【０３９９】
被験者が、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）続発性のＡＭＬを有する。
【０４００】
被験者が、ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異に標的化した薬剤投与を受けている。
【０４０１】
被験者が、ＡＭＬに対する全身抗癌療法、ＨＳＣＴ、または放射線療法を以前に受けている。白血球（ＷＢＣ）のカウント数が＞３０×１０９／Ｌの被験者において、白血球増加症の調節のための治験治療開始前にヒドロキシ尿素が許容される点に留意されたい（ただし、アザシチジンの投与前及び投与後７２時間以内にヒドロキシ尿素を投与すべきではない）。続発性ＡＭＬ（例えば、ＭＤＳまたはＭＰＮ）を有する被験者については、前癌に対する治療は排除するものではなく；完全な治療情報をＣＲＦ内に収集する。
【０４０２】
被験者が、ＭＤＳに対するアザシチジンまたはデシタビンによる前治療を受けている。
【０４０３】
被験者が、中枢神経系（ＣＮＳ）白血病を有するか、または有すると疑われる。脳脊髄液の評価は、スクリーニング中に白血病によるＣＮＳ関与が疑われる場合にのみ必要である。
【０４０４】
被験者が、制御不能な出血、低酸素症またはショックを伴う肺炎、及び／または播種性血管内凝固のような、直ちに生命を脅かす重篤な白血病の合併症を有する。
【０４０５】
治験治療の開始前６か月以内に、被験者が、ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）クラスＩＩＩまたはＩＶうっ血性心不全；急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）；及び／または脳卒中；または治験治療の開始前２８日以内に得られた心エコー検査（ＥＣＨＯ）もしくは心電同期マルチゲート収集（ＭＵＧＡ）スキャンによる左心室駆出率（ＬＶＥＦ）＜４０％を含む有意な活動性心疾患を有する。
【０４０６】
治験治療の開始前の１年間以上、疾患がない場合以外で、被験者が、ＭＤＳ、ＭＰＮ、またはＡＭＬ以外の悪性腫瘍の既往歴を有する。しかしながら、以下の病歴／同時条件を有する被験者は許容される：皮膚の基底または扁平上皮細胞癌；子宮頸部上皮内癌；乳房の上皮内癌；前立腺癌の付随的な組織学的所見（腫瘍、節、転移の臨床病期分類システムを用いたＴ１ａまたはＴ１ｂ）。
【０４０７】
被験者が、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）もしくはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に対する能動的感染、またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に対する能動的ウイルス感染を有するか、または血清陽性であることが既知である
【０４０８】
被験者が、嚥下障害、短腸症候群、胃不全麻痺、または経口投与した薬物の摂取または胃腸吸収を制限する他の病態を有することが既知である
【０４０９】
被験者が、管理不良高血圧（収縮期血圧［ＢＰ］＞１８０ｍｍＨｇまたは拡張期ＢＰ＞１００ｍｍＨｇ）を有する
【０４１０】
被験者が狭い治療範囲を有する以下の高感度ＣＹＰ基質薬物療法を受けている場合、治験治療の開始前に少なくとも５半減期の他の薬物に移行できない限り、被験者を治験から除外する：フェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ９）、Ｓ−メフェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ１９）、チオリダジン（ＣＹＰ２Ｄ６）、テオフィリン、及びチザニジン（ＣＹＰ１Ａ２）。
【０４１１】
被験者が、乳癌耐性タンパク質（ＢＣＲＰ）トランスポーター感受性基質ロスバスタチンを服用しており；治験治療の開始前に少なくとも５半減期の他の薬物に移行できない限り、被験者を治験対象から除外すべきである
【０４１２】
被験者が、管理不良の全身的な真菌性、細菌性、またはウイルス性の能動感染を有する（適切な抗生物質、抗ウイルス療法、及び／または他の治療によっても改善することのない感染に関連する進行中の徴候／症状として定義される）。
【０４１３】
被験者が、治験治療のいずれかの成分に対する過敏症を有することが既知であるか、またはその疑いがある。
【０４１４】
被験者が、治験治療の開始前に半減期≧５以内の他の薬物に移行できない場合、ＱＴ間隔を延長することが知られている薬物を服用している。（同等の薬物が利用できない場合、ＱＴｃを厳密に監視する）
【０４１５】
被験者が、スクリーニング時に、ＱＴｃ間隔（すなわち、フリデリシア補正［ＱＴｃＦ］）≧４５０ｍｓであるか、またはＱＴ延長もしくは不整脈事象（すなわち、心不全、低カリウム血症、ＱＴ間隔延長症候群の家族歴）のリスクを高める他の要因を有する。
【０４１６】
妊娠または授乳中の女性被験者。
【０４１７】
被験者が治験に参加することを妨げるであろう任意の重大な医学的病態、臨床検査異常、または精神疾患を、被験者が有する。
【０４１８】
被験者が治験に参加する場合に被験者を容認できないリスクにさらす臨床検査異常の存在を含む任意の病態を、被験者が有する。
【０４１９】
被験者が、治験からのデータを解釈する能力を混乱させる任意の病態を有する。
【０４２０】
特定の実施形態では、例えば本明細書において提供する臨床試験実施計画書を受け入れて化合物１及びアザシチジンで治療するＡＭＬ患者は、治療奏効を示す。いくつかの実施形態では、治療奏効は、修正ＩＷＧ  ＡＭＬ奏効基準に従って、完全奏効（ＣＲ）、形態学的白血病細胞消失（ＭＬＦＳ）、好中球回復の不完全（ＣＲｉ）を伴う形態学的完全寛解、血小板回復の不完全（ＣＲｐ）を伴う形態学的完全寛解、または部分寛解（ＰＲ）である。いくつかの実施形態では、治療奏効は、ＩＷＧ  ＭＤＳ  ＨＩ基準による、血液学的改善、例えば、好中球奏効（Ｈｉ−Ｎ）、血小板奏効（ＨＩ−Ｐ）、及び／またはエリスロイド奏効（ＨＩ−Ｅ）の改善である。特定の実施形態では、本明細書において提供する方法における化合物１及びアザシチジンで治療するＡＭＬ患者は、無再発生存期間（ＥＦＳ）、奏効期間、ＨＲＱｏＬ及び／または全生存期間の改善を示す。
【０４２１】
実施例３．  イソクエン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＤＨ）変異体標的化療法＋アザシチジンの２つの併用の第１ｂ／２相非盲検無作為化試験：集中的誘導化学療法を受ける候補者ではない、それぞれＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を保有する新規に診断された急性骨髄性白血病を有する被験者における経口化合物２＋皮下アザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジン
［適応症］：集中的誘導化学療法（ＩＣ）を受ける候補者ではない、ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を有する新たに診断された急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する１８歳以上の患者の治療。
【０４２２】
主要な目的−第１ｂ相用量決定段階
【０４２３】
［主目的］
【０４２４】
・集中的ＩＣを受ける候補者ではない、それぞれＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者において、皮下（ＳＣ）アザシチジンとともに投与する場合の経口化合物２の、及びＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物１の併用治療の安全性及び忍容性を評価すること。
【０４２５】
ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の、経口化合物２及び経口化合物１の推奨される併用用量（ＲＣＤ）を確立すること。
【０４２６】
［副次的目的］
【０４２７】
集中的ＩＣを受ける候補者ではない、それぞれＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者において、ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物２の、及びＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物１の併用治療の予備的有効性を評価すること。
【０４２８】
第１ｂ相化合物２の拡張段階
【０４２９】
［主目的］
【０４３０】
集中的ＩＣを受ける候補者ではない、ＩＤＨ１変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者において、ＳＣアザシチジンとともに投与する経口化合物２の併用治療の安全性及び忍容性を評価すること。
【０４３１】
［副次的目的］
【０４３２】
集中的ＩＣを受ける候補者ではない、ＩＤＨ１変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者において、ＳＣアザシチジンとともに投与する経口化合物２の併用治療の予備的有効性を評価すること。
【０４３３】
ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物２の薬物動態（ＰＫ）を特徴付けること。
【０４３４】
第２相（化合物１の無作為化段階）
【０４３５】
［主目的］
【０４３６】
集中的ＩＣを受ける候補者ではない、ＩＤＨ２変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者において、ＳＣアザシチジン単独に対する、ＳＣアザシチジンとともに投与する経口化合物１の有効性を評価すること。
【０４３７】
［副次的目的］
【０４３８】
ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物１の安全性を評価すること。
【０４３９】
ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物１のＰＫを特徴付けること。
【０４４０】
健康関連の生活の質（ＨＲＱＯＬ）の転帰に関して、ＳＣアザシチジン単独に対する、ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の経口化合物１の効果を評価すること。
【０４４１】
［治験デザイン］
【０４４２】
この第１ｂ／２相の治験は、それぞれＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者における経口化合物２＋ＳＣアザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジンの安全性及び有効性を評価するための非盲検無作為化多施設治験である。研究対象集団は、集中的ＩＣを受ける候補者ではない被験者からなる。本治験は、第１ｂ相用量決定及び化合物２拡張段階及び第２相無作為化段階を含む。
【０４４３】
［第１ｂ相用量決定段階］
【０４４４】
第１ｂ相は、ＳＣアザシチジンとともに投与する経口化合物２及び経口化合物１の安全性及び忍容性を評価し、ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の、これら２剤のＲＣＤを規定するための非盲検用量決定試験である。経口化合物２＋ＳＣアザシチジン及び経口化合物１＋ＳＣアザシチジンレジメンの予備臨床活性も評価する。
【０４４５】
第１ｂ相段階は、３つの期間：１）スクリーニング；２）治療；３）追跡調査からなる。
【０４４６】
被験者のスクリーニング手順は、治験治療開始前２８日以内のスクリーニング期間中に行う。ＩＤＨ変異を有するＡＭＬの診断は、骨髄液及び／または末梢血試料の血液病理学及びＩＤＨ遺伝子変異試験の両方のローカル判定に基づく。登録に適格な被験者は、合併症の有無、パフォーマンスステータスの低下、または他の要因により、治験責任医師の判断に基づいて集中的ＩＣを受診する候補者であってはならない。ＩＤＨ１変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者は、経口化合物２＋ＳＣアザシチジン群に割り当て、ＩＤＨ２変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者は、経口化合物１＋ＳＣアザシチジン群に割り当てる。被験者を、ＩＤＨ１及びＩＤＨ２の二重変異に関連するＡＭＬであると診断する稀な事例では、経口化合物２または化合物１治療群への割り当ては、共同研究者及び医療モニターの決定に基づいて行い、原資料に記録する。
【０４４７】
治療期間中、標準的な３＋３デザインを使用する。必要に応じて、Ｃｅｌｇｅｎｅ医療モニター、Ｃｅｌｇｅｎｅリード安全医師、Ｃｅｌｇｅｎｅ生物統計学者、その他のＣｅｌｇｅｎｅ機能分野の代表者または指名者からなる投与判定チーム（ＤＲＴ）、ならびにすべての現場の治験責任医師及び／または指名者（被験薬を投与された被験者を有する現場での）は、各用量レベルのサイクル１中に被験者が経験したすべての有害事象（ＡＥ）をレビューし、ＳＣアザシチジンと併用投与した場合の経口化合物２または化合物１の最大耐量（ＭＴＤ）を超過したかどうかを判定する。経口化合物２の１つの用量レベル（１日５００ｍｇ）及び経口化合物１の２つの用量レベル（１日１００ｍｇ及び１日２００ｍｇ）を評価する予定である。経口化合物２については１日５００ｍｇ未満、及び化合物１については１日１００ｍｇ未満の用量レベルを、ＳＣアザシチジンと併用してのこれらの用量のＭＴＤ超過がサイクル１中に認められる場合に、評価する。投与中断／遅延及び用量減少を用いて、毒性を管理してもよい。被験者は、疾患の憎悪／再発、治験治療に耐えられなくなるまで、または被験者が何らかの理由で治験治療の中止を希望するまで、治験治療を受けてもよい。治療に対する奏効は、修正国際ワーキンググループ（ＩＷＧ）ＡＭＬ奏効基準（Ｃｈｅｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｒｅｖｉｓｅｄ  ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  ｆｏｒ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｒｉｔｅｒｉａ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｕｔｃｏｍｅｓ，  ａｎｄ  ｒｅｐｏｒｔｉｎｇ  ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ．  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ２００３；２１（２４）：４６４２−９に従って、治験責任医師が評価する。
【０４４８】
新たに診断されたＡＭＬを有する被験者における血液学的改善（ＨＩ）もまた、ＩＷＧ骨髄異形成症候群ＨＩ基準に従って評価する（Ｃｈｅｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｒｏｐｏｓａｌ  ｆｏｒ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  （ＩＷＧ）  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｉａ．Ｂｌｏｏｄ  ２００６；１０８（２）：４１９−２５）。治験治療を中止する場合、被験者は最終投与評価を受けることになる。治療中止の理由は、電子症例報告書（ｅＣＲＦ）のページ及び原資料に記録する。
【０４４９】
追跡調査の同意を撤回する以外の理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、ＡＥ、併用医薬、併用療法、輸血、医療資源利用、奏効、血液学的改善、その後のＡＭＬ治療、及び生存についての評価を継続する。
【０４５０】
追跡調査の同意の撤回または病状悪化以外の何らかの理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、治験の追跡調査期間中、病状が悪化するまで奏効に関して評価を継続する。
【０４５１】
追跡調査の同意を撤回する以外の理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、その後のＡＭＬ治療、及び生存について評価を継続する。
【０４５２】
本治験は、ハーモナイゼーション国際会議（ＩＣＨ）の優良臨床試験基準（ＧＣＰ）ガイドラインに従って実施する。
【０４５３】
［第１ｂ相化合物１の拡張段階］
【０４５４】
ＩＤＨ１変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する約１５人の被験者の第１ｂ相拡大コホートを化合物２の併用に登録する。化合物２の拡張に登録した被験者には、化合物２＋アザシチジンをＲＣＤで投与する。
【０４５５】
［第２相化合物２無作為化段階］
【０４５６】
第２相段階は、全奏効率（ＯＲＲ）及び無再発生存期間（ＥＦＳ）を評価するために、ＳＣアザシチジン単独に対する、ＳＣアザシチジンとともに投与する経口化合物１の有効性を評価する非盲検無作為化試験である。
【０４５７】
第２相段階はまた、３つの期間：１）スクリーニング；２）治療；３）追跡調査からなる。
【０４５８】
第１ｂ相と同様に、被験者スクリーニング手順は、治験開始前２８日以内のスクリーニング期間中に行うが、ＡＭＬの診断は、登録のためにローカルで行い、その後の中央病理診断に基づいて遡及的に確認する。ＩＤＨの変異状態はローカルで評価し、ローカルでの検査能力のない現場については紹介研究室を特定する。骨髄液及び末梢血試料は、変異状態を遡及的に確認するために、関連試料とともに中央検査室に送らなければならない。治験への組込みはローカルのＩＤＨ試験に基づくことができる。登録に適格な被験者は、合併症の有無、パフォーマンスステータスの低下、または他の要因により、治験責任医師の判断に基づいて集中的ＩＣを受ける候補者ではない被験者である。
【０４５９】
適格性の判定の後、ＩＤＨ２変異を有する新たに診断されたＡＭＬを有する被験者を無作為化し、経口化合物１＋ＳＣアザシチジン（群１）対ＳＣアザシチジン単独（群２）を２：１の比率で受けさせる。群１には最低６６人の被験者が含まれ、群２には最低３３人の被験者が含まれる（両群に合計９９人の被験者）。
【０４６０】
ＷＨＯ分類に従って、一次的（すなわち新規）または二次的（骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）もしくは骨髄増殖性新生物［ＭＰＮ］の進行、または治療関連の）ＡＭＬによって、被験者を層別化する。
【０４６１】
治験治療は、無作為化の３日以内に開始する。治験治療中の評価には、有効性、安全性、ＨＲＱｏＬ、医療資源利用、薬物動態、薬力学、及び相関研究が含まれる。
【０４６２】
第１ｂ相及び第２相の両方において、スクリーニング中に収集したすべての骨髄液及び／または生検ならびに末梢血塗抹の遡及的中央病理診断を、被験者の治療に対して盲検化した人員によって行い、適格性を確認する。治験開始後に採取した骨髄液（ＢＭＡ）及び／または生検ならびに末梢血塗抹は、ローカル及び中央病理診断の両方で利用可能でなければならない。遡及的中央病理診断では、ＢＭＡ、末梢血塗抹、及び実施する場合には骨髄生検（ＢＭＢ）を含む各々の骨髄採取時点ごとに一組の複製スライドが必要となる。中央病理診断は、治験治療に対して盲検化した人員によって行う。
【０４６３】
治療及びＨＩに対する奏効は、それぞれ、修正ＩＷＧ  ＡＭＬ奏効基準（Ｃｈｅｓｏｎ，２００３）及びＩＷＧ骨髄異形成症候群ＨＩ基準（Ｃｈｅｓｏｎ，２００６）に従って、治験責任医師が評価する。
【０４６４】
治験治療中の毒性を管理し、及び／または治療奏効を増大させるために、投薬中断、投薬遅延または投薬量の変更を行ってもよい。
【０４６５】
治験の併用群における被験者に対する化合物２、化合物１、またはアザシチジンの中断は許容される。治験責任医師の評価において、被験者が臨床的有用性を示し続け、治験治療を継続するための治験実施計画書が指定するすべての基準を満たす場合、被験者は、単剤の化合物２、化合物１、またはアザシチジンでの治療を継続してもよい。被験者が進行性疾患を有しているか、または代替療法を受ける場合、治験治療を中止する。
【０４６６】
被験者を中止する決定は、治験依頼者によって遅延させられたり拒否されたりすることはなく、依然として治療する医師がその責任を負う。しかしながら、被験者を中止する前に、治験責任医師が医療モニターに連絡し、検討及び討議するために適切な補足文書を提出することが推奨される。
【０４６７】
治験治療の少なくとも１回の投与を受けたすべての被験者は、治験治療の中止時に最終投与（ＥＯＴ）評価を受けるべきである。中止の理由は、電子症例報告書（ｅＣＲＦ）のページ及び原資料に記録する。
【０４６８】
追跡調査の同意を撤回する以外の理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、ＡＥ、併用医薬、併用療法、輸血、医療資源利用、奏効、血液学的改善、その後のＡＭＬ治療、及び生存についての評価を継続する。
【０４６９】
追跡調査の同意の撤回または病状悪化以外の何らかの理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、治験の追跡調査期間中、病状が悪化するまで奏効に関して評価を継続する。
【０４７０】
追跡調査の同意を撤回する以外の理由で治験治療を中止するすべての被験者に対しては、その後のＡＭＬ治療、及び生存について評価を継続する。
【０４７１】
本治験は、ハーモナイゼーション国際会議（ＩＣＨ）の優良臨床試験基準（ＧＣＰ）に従って実施する。
【０４７２】
［治験期間］
【０４７３】
治験の全期間は、およそ６０か月であると予想され、第１ｂ相及び第２相の、リクルート、スクリーニング、治療、及び追跡調査を含む。単一の被験者について、治験の第１ｂ相セグメントの予測期間は、最大２８日のスクリーニング期間を含めておよそ１３か月であり、治験の第２相セグメントの予測期間は、最大２８日のスクリーニング期間を含めておよそ３０か月である。
【０４７４】
治験終了とは、治療後の追跡調査を完了するための最後の被験者の最後の訪問の日付、または治験実施計画書の中で予め指定されている、主要、二次的、及び／または探索的分析に必要な最後の被験者からの最後のデータポイントの受信日のうちのいずれか遅いほうの日付と定義される。
【０４７５】
［治験治療］
【０４７６】
化合物２及び化合物１は、各２８日サイクルの１〜２８日目に１日１回（ＱＤ）経口投与する。被験者には、毎日±６時間のほぼ同じ時間帯に服用するように指示する必要がある。各用量を１杯の水で摂取し、可能な限り短時間で摂取すべきである。被験者には、錠剤全体を飲み込み、錠剤を噛むことはしないように指示すべきである。化合物１の投与の２時間前及び１時間後には、絶食が必要である。絶食中も水の摂取は可能である。化合物２の投与に絶食は必要ない。
【０４７７】
第１ｂ相及び第２相の両方の間、各２８日間の治療サイクルの１日目から開始する７日間、アザシチジンをＳＣ投与する。第１ｂ相の化合物２の拡張段階では、ＡＭＬ及びＩＤＨ１変異を有する被験者には、治験登録前にＡＭＬの治療のためにわずか１サイクルのアザシチジンを投与してもよい。アザシチジンとともに投与する化合物２のサイクル１は、アザシチジンの治験前サイクルの開始から２８日以内に与えなければならない。
【０４７８】
第２相段階の間、アザシチジン単独群に無作為化した被験者に、各２８日サイクルの７日間、７５ｍｇ／ｍ２／日のアザシチジンをＳＣ投与する。すべての無作為化被験者には、それらの治療を中止しない限り、治験終了まで２８日ごとに７日間、７５ｍｇ／ｍ２／日のアザシチジンをＳＣ投与する。さらに、被験者は、治験責任医師の裁量に応じて、抗生物質及び輸血を含む、必要に応じた最良の支援ケアを受けてもよい（利用可能な製剤化、調製、貯蔵条件［例えば、冷蔵］、承認された適応症、既知の予防策、警告、及び最良の支援ケアの有害反応についての詳細は、現地の処方情報及び現地の治療ガイドライン参照；（最新版の処方情報を参照されたい）。７日間の投薬期間中に２回以下の投与を逃した場合、被験者が７日間の治療のすべてを受けるように投薬を継続すべきである。７日間の投薬期間中に３日以上を逃した場合、治験責任医師は治験依頼者に連絡すべきであり、投薬の決定はケースバイケースで行う。
【０４７９】
［第１ｂ相（用量決定及び化合物２の拡張）段階：］
【０４８０】
第１ｂ相の用量決定は３＋３デザインを使用する。化合物２については、１つの用量レベルを、登録する３人の被験者について検討する。コホート１は、１日１回５００ｍｇの経口化合物２、及び各２８日サイクルの各サイクルの１日目から開始する７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンで惹起する。コホート１の２人以上の被験者がサイクル１において用量制限毒性（ＤＬＴ）を有する場合、コホート−１を、１日１回２５０ｍｇの化合物２で、及び各２８日サイクルの７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンで検討する。ＤＲＴによるＲＣＤの告知に際して、さらなる安全性評価及びＰＫサンプリングのために、最大１５人の患者の拡大コホートをＲＣＤに登録する。
【０４８１】
化合物１については、２つの用量レベルを検討する。コホート１は、１日１回１００ｍｇの経口化合物１、及び各２８日サイクルの各サイクルの１日目から開始する７日間の７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンで惹起する。ＤＬＴが観察されない場合、ＤＲＴによってＲＣＤを確認し、１００ｍｇ用量を治験の第２相の開始用量として用いる。コホート２に対する用量漸増も、１日１回２００ｍｇの経口化合物１、及び各２８日サイクルの各サイクルの１日目から開始する７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンで惹起し、この用量レベルでの化合物１＋ＳＣアザシチジンの忍容性を調べる。コホート１において２人以上の被験者がＤＬＴを有する場合、１日１回５０ｍｇの経口化合物１、及び各２８日サイクルの各サイクルの１日目から開始する７日間における７５ｍｇ／ｍ２／日ＳＣのアザシチジンでコホート−１を調べる。
【０４８２】
ＤＲＴは、１サイクル後の各被験者のすべての毒性を評価し、個々の被験者に対して更なる用量変更が必要かどうかを判定する。
【０４８３】
［第２相化合物１無作為化段階：］
【０４８４】
化合物１＋アザシチジン群（群１）：
【０４８５】
ＩＤＨ２変異を有する被験者に、ＲＣＤの化合物１を各２８日サイクルの１〜２８日目にＱＤ経口で、＋７５ｍｇ／ｍ２／日のアザシチジンを各２８日サイクルの７日間、ＳＣ投与する。
【０４８６】
アザシチジン群（群２）：
【０４８７】
ＩＤＨ２変異を有する被験者に、各２８日サイクルのうちの７日間、７５ｍｇ／ｍ２／日のアザシチジンをＳＣ投与する。
【０４８８】
［主要有効性評価の概要］
【０４８９】
有効性
【０４９０】
連続血液及び骨髄サンプリングを使用して、サイクル２で開始する治療に対する奏効を判定する。奏効は、両方の相において、中央判定で報告される血液検査値、末梢血塗抹、骨髄液及び／または生検に基づく修正ＩＷＧ基準に従ってローカルで評価する。第２相の被験者においては、最小残存病変のフローサイトメトリー測定によって測定する奏効の探索的評価も行う。現場では、骨髄採取時に、中央血液学用の末梢血を採取して送付する必要がある。
【０４９１】
遡及的病理診断を実施する。遡及的中央病理診断では、ＢＭＡ、末梢血塗抹、及び実施する場合にはＢＭＢを含む、各々の骨髄採取時点ごとに一連の複製スライドが必要となる。中央病理診断は、治験治療に対して盲検化した人員によって行う。
【０４９２】
中央病理診断のための骨髄液（及び／または生検）ならびに末梢血塗抹のスライドを提出するための指示書は、Ｓｔｕｄｙ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ及び／またはＳｔｕｄｙ  Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌに提供されている。
【０４９３】
再発または憎悪の前に治験治療を中止する被験者は、再発または憎悪が確認されるまで毎月の現場訪問を履行する。再発または憎悪のために治験治療を中止している被験者については、毎月の追跡調査を、現場訪問または電話で行うことができる。被験者は、死亡するか、追跡不能となるか、さらなるデータ収集に対する同意を撤回するか、または治験終了まで追跡する。
【０４９４】
［他の重要な評価の概要］
【０４９５】
安全性
【０４９６】
安全性評価としては、有害事象、身体検査、米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータス、バイタルサイン、心エコー検査（ＥＣＨＯ）または心電同期マルチゲート収集（ＭＵＧＡ）スキャン、心電図（ＥＣＧ）、心臓マーカー、尿検査、凝固、血液学、血清化学、輸血、妊娠検査（妊娠可能性のある女性（ＦＣＢＰ）のみ）、及び併用薬または併用療法が挙げられる。
【０４９７】
化合物２及び化合物１の血漿ＰＫ／ＰＤ
【０４９８】
ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の化合物２のＰＫ特性は、第１ｂ相拡張セグメントにおける化合物２の血漿濃度及びＰＫパラメータによって評価する。２−ＨＧの血漿濃度は、化合物２の血漿濃度との経時的な関連性で評価する。
【０４９９】
ＳＣアザシチジンとともに投与する場合の化合物１のＰＫ特性は、第２相セグメントにおける化合物１の血漿濃度及びＰＫパラメータによって評価する。２−ＨＧの血漿濃度は、化合物１の血漿濃度との経時的な関連性で評価する
【０５００】
研究製品の管理
【０５０１】
経口化合物２及び化合物１は、各治療サイクルの１日目に分配し、各治療サイクルの完了後に報告する。
【０５０２】
アザシチジンは、治験現場要員がＳＣ投与する。すべてのＩＰ投与の正確な記録を、被験者のｅＣＲＦ及び原資料の適切なセクションで行う。
【０５０３】
［統計的方法］
【０５０４】
［第１ｂ相（用量決定及び化合物２の拡張）段階：］
【０５０５】
第１ｂ相における統計解析は、本質的に主として記述的である。素因、人口統計学的及びベースラインの疾患特性、安全性、ＰＫ、ＰＤ、ならびに臨床活性パラメータについての集計を作成する。分類データを頻度分布（被験者の数と割合）でまとめ、連続データを記述統計（平均、標準偏差、中央値、最小値、及び最大値）でまとめる。適切な場合には、データを用量レベルで、及び総合的にまとめる。
【０５０６】
［第２相化合物１無作為化段階：］
【０５０７】
第２相における全奏効率（ＯＲＲ）の主要有効性エンドポイントは、修正ＩＷＧ  ＡＭＬ奏効基準に従って、ＣＲ、ＣＲｐ、Ｃｒｉ、形態学的白血病細胞消失（ＭＬＦＳ）、及びＰＲの奏効を含む。ＯＲＲにおける治療差は、ＩＴＴ集団におけるカイ２乗検定を用いて試験する。この試験は、経口化合物１＋ＳＣアザシチジンと、それに対するアザシチジン単剤治療群のＯＲＲの比較のための中心的なｐ値を提供する。
【０５０８】
本治験において、およそ９９名の被験者を、経口化合物１＋ＳＣアザシチジン群での６６名のＩＤＨ２被験者、及びＳＣアザシチジン単剤治療群での３３名のＩＤＨ２被験者で無作為化する。アザシチジン単剤治療群で３０％のＯＲＲ、経口化合物１＋ＳＣアザシチジン群で５０％のＯＲＲと仮定すると、この設計サンプルサイズ（化合物１＋ＳＣアザシチジン群での６６、及びアザシチジン単剤治療群での３３）は、７５％のパワーを提供し、タイプＩエラー率０．２（両側）でＯＲＲの２０％の差異を検出する。
【０５０９】
［組み入れ基準］
被験者は、治験に登録するために以下の基準を満たさなければならない：
【０５１０】
同意説明文書（ＩＣＦ）に署名する時点で被験者は≧１８歳である。
【０５１１】
治験関連の評価／手順を実施する前に、被験者は、ＩＣＦを理解し、自発的に署名しなければならない。
【０５１２】
被験者は、治験訪問スケジュール及び他の治験実施計画書の要件に厭わずに従うことができる。
【０５１３】
被験者は、ＷＨＯ分類に従って新たに診断された一次的（すなわち新規）または二次的（ＭＤＳもしくは骨髄増殖性新生物［ＭＰＮ］の進行、または治療関連の）ＡＭＬを有し、骨髄において≧２０％の白血病性芽球を有し：
【０５１４】
ＩＤＨ１またはＩＤＨ２遺伝子変異（Ｒ１３２、Ｒ１４０、またはＲ１７２）を有する
【０５１５】
ＩＤＨ変異状態をローカルで評価する；ローカルでのテスト機能のない現場の場合、紹介ラボを特定する
【０５１６】
誰が集中的ＩＣを受ける候補者ではないかを治験責任医師が評価することによって
【０５１７】
被験者は、０、１または２の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスを有する。
【０５１８】
被験者は、以下のように定義される適切な器官機能を有する：
【０５１９】
白血病器官の関与のために考慮されない限り、血清アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ／血清グルタミン酸オキソ酢酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ／ＳＧＯＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ／ＳＧＰＴ）≦３×ＵＬＮである。
【０５２０】
血清総ビリルビンが＜１．５×ＵＬＮである。効果のない赤血球形成、ギルバート症候群（例えば、ＵＧＴ１Ａ１の遺伝子変異）については標準の上限値の≦３倍、または白血病性器官の関与に起因する可能性がある場合、より高いレベルが許容可能である。
【０５２１】
血清クレアチニンが＜２×ＵＬＮであるか、またはＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｉｅｔ  ｉｎ  Ｒｅｎａｌ  Ｄｉｓｅａｓｅ（ＭＤＲＤ）糸球体濾過率（ＧＦＲ）に基づくクレアチニンクリアランスが□３０ｍＬ／分である：
【０５２２】
ＧＦＲ（ｍＬ／分／１．７３ｍ２）＝１７５×（Ｓｃｒ）−１．１５４×（年齢）−０．２０３×（０．７４２、女性の場合）×（１．２１２、アフリカ系米国人の場合）
【０５２３】
連続骨髄吸引／生検に同意する。
【０５２４】
以下の条件を満たす妊娠可能性のある女性（ＦＣＢＰ）＊は参加してもよい：
【０５２５】
スクリーニング時及び治験中、及び最後の治験治療後の４か月間、性交について真の禁欲＊＊を遂行するか、または排卵の阻害に関連する非常に有効な避妊法（例えば、併用［エストロゲン及びプロゲストゲンを含む］もしくはプロゲストゲンのみ、経口、注射、膣内、パッチ、または移植可能なホルモン避妊薬；両側卵管閉塞法；子宮内避妊器具；子宮内ホルモン放出システム；もしくは男性パートナーの殺菌［パートナーの精管切除は非常に有効な避妊法であるが、但し、パートナーはＦＣＢＰ治験参加者の唯一の性的パートナーであり、かつ精管切除したパートナーは外科的成功の医学的評価を受けていることを条件とする点に留意されたい］）を使用することへの同意；及び
【０５２６】
スクリーニング時にヒト絨毛性ゴナドトロピン（β−ｈＣＧ）妊娠試験（感度が少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬ）の陰性血清βサブユニットを有し；及び
【０５２７】
治療期間中の治験治療開始前７２時間以内にβｈＣＧ妊娠試験（感度が少なくとも２５ｍＩＵ／ｍＬ）において陰性血清または尿（ローカルな規制の下での治験責任医師の裁量）を有する（７２時間の時間枠内で実施する場合には、治療期間中の治験治療の開始前の試験として、スクリーニング血清妊娠検査を用いることができる点に留意されたい）。
【０５２８】
妊娠可能な妊娠していない女性パートナーを有する男性被験者は、スクリーニング時及び治験の経過中、性交について真の禁欲を遂行するか、または有効な避妊方法（上記のような）を使用することに同意しなければならず、治験の経過中及び最後の治験治療後の４か月間（カナダでは最後のアザシチジンの投与後の６か月間）、パートナーとの子作りを避けるべきである。
【０５２９】
さらに、男性被験者は、アザシチジンでの治療中、及び最後のアザシチジン投与後、少なくとも４か月間、コンドームを使用することに同意しなければならない。
【０５３０】
［除外基準］
【０５３１】
以下のいずれかに該当する場合、被験者を登録から除外する。
【０５３２】
形態学、免疫表現型、分子アッセイ、または核型に基づいて、被験者が急性前骨髄球性白血病を有している疑いがあるか、または証明されている。
【０５３３】
被験者が、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）続発性のＡＭＬを有する。
【０５３４】
被験者が、ＩＤＨ１またはＩＤＨ２変異に標的化した薬剤投与を受けている。
【０５３５】
被験者が、ＡＭＬに対する全身抗癌療法、ＨＳＣＴ、または放射線療法を以前に受けている。留意点：白血球増加症を有する被験者において、末梢白血病芽球の調節のための登録前にヒドロキシ尿素が許容される（ただし、アザシチジンの投与前及び投与後７２時間以内にヒドロキシ尿素を投与すべきではない）。続発性ＡＭＬ（例えば、ＭＤＳまたはＭＰＮ）を有する被験者については、前癌に対する治療は排除するものではなく；完全な治療情報をＣＲＦ内に収集する。ＡＰＬが疑われる場合についての、すべてのトランスレチノイン酸（ＡＴＲＡ）の使用は、治験実施計画書の治療開始前に中止する限りにおいては排除するものではない。
【０５３６】
被験者が、アザシチジンを用いた１サイクルより多くの前治療を受けているか、またはＭＤＳに対するデシタビンを用いた前治療を受けている。
【０５３７】
分類：現在第１サイクル（７日間）のアザシチジンを受けている新たに診断されたＡＭＬを有する被験者を、治験のためにスクリーニングすることができる。治験においては、アザシチジンとともに投与する化合物１または化合物２によるサイクル１は、アザシチジン予備研究の開始の２８日（±３日）後に開始しなければならない。
【０５３８】
被験者が、中枢神経系（ＣＮＳ）白血病を有するか、または有すると疑われる。脳脊髄液の評価は、スクリーニング中に白血病によるＣＮＳ関与が疑われる場合にのみ必要である。
【０５３９】
被験者が、制御不能な出血、低酸素症またはショックを伴う肺炎、及び／または播種性血管内凝固のような、直ちに生命を脅かす重篤な白血病の合併症を有する。
【０５４０】
治験治療の開始前６か月以内に、被験者が、ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）クラスＩＩＩまたはＩＶうっ血性心不全；急性冠動脈症候群（ＡＣＳ）；及び／または脳卒中；または治験治療の開始前２８日以内に得られた心エコー検査（ＥＣＨＯ）もしくは心電同期マルチゲート収集（ＭＵＧＡ）スキャンによる左心室駆出率（ＬＶＥＦ）＜４０％を含む有意な活動性心疾患を有する。
【０５４１】
治験治療の開始前の１年間以上、疾患がない場合以外で、被験者が、ＭＤＳ、ＭＰＮ、またはＡＭＬ以外の悪性腫瘍の既往歴を有する。しかしながら、以下の病歴／同時条件を有する被験者は許容される：
【０５４２】
皮膚の基底または扁平上皮細胞癌
【０５４３】
子宮頸部上皮内癌
【０５４４】
乳房の上皮内癌
【０５４５】
前立腺癌の付随的な組織学的所見（腫瘍、節、転移の臨床病期分類システムを用いたＴ１ａまたはＴ１ｂ）
【０５４６】
被験者が、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）もしくはＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に対する能動的感染、またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に対する能動的ウイルス感染を有するか、または血清陽性であることが既知である
【０５４７】
被験者が、嚥下障害、短腸症候群、胃不全麻痺、または経口投与した薬物の摂取または胃腸吸収を制限する他の病態を有することが既知である
【０５４８】
被験者が、管理不良高血圧（収縮期血圧［ＢＰ］＞１８０ｍｍＨｇまたは拡張期ＢＰ＞１００ｍｍＨｇ）を有する
【０５４９】
被験者が狭い治療範囲を有する以下の高感度ＣＹＰ基質薬物療法を受けている場合、治験治療の開始前に少なくとも５半減期の他の薬物に移行できない限り、被験者を治験から除外する：フェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ９）、Ｓ−メフェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ１９）、チオリダジン（ＣＹＰ２Ｄ６）、テオフィリン、及びチザニジン（ＣＹＰ１Ａ２）。
【０５５０】
被験者が、乳癌耐性タンパク質（ＢＣＲＰ）トランスポーター感受性基質ロスバスタチンを服用しており；治験治療の開始前に少なくとも５半減期の他の薬物に移行できない限り、被験者を治験対象から除外すべきである。
【０５５１】
被験者が、管理不良の全身的な真菌性、細菌性、またはウイルス性の能動感染を有する（適切な抗生物質、抗ウイルス療法、及び／または他の治療によっても改善することのない感染に関連する進行中の徴候／症状として定義される）。
【０５５２】
被験者が、治験治療のいずれかの成分に対する過敏症を有することが既知であるか、またはその疑いがある。
【０５５３】
被験者が、治験治療の開始前に半減期≧５以内の他の薬物に移行できない場合、ＱＴ間隔を延長することが知られている薬物を服用している。（同等の薬物が利用できない場合、ＱＴｃを厳密に監視する）
【０５５４】
被験者が、スクリーニング時に、ＱＴｃ間隔（すなわち、フリデリシア補正［ＱＴｃＦ］）≧４５０ｍｓであるか、またはＱＴ延長もしくは不整脈事象（すなわち、心不全、低カリウム血症、ＱＴ間隔延長症候群の家族歴）のリスクを高める他の要因を有する。
【０５５５】
妊娠または授乳中の女性被験者。
【０５５６】
被験者が治験に参加することを妨げるであろう任意の重大な医学的病態、臨床検査異常、または精神疾患を、被験者が有する。
【０５５７】
被験者が治験に参加する場合に被験者を容認できないリスクにさらす臨床検査異常の存在を含む任意の病態を、被験者が有する。
【０５５８】
被験者が、治験からのデータを解釈する能力を混乱させる任意の病態を有する。
【０５５９】
実施例４：２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オールの合成
実施例４、工程１：６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸の調製  
ジエチルエーテル（４．３２Ｌ）及びヘキサン（５．４０Ｌ）をＮ２雰囲気下で反応容器に加え、−７５℃〜−６５℃まで冷却した。−６５℃未満、Ｎ２雰囲気下で、ｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍヘキサン中３．７８Ｌ）を滴下した後、ジメチルアミノエタノール（３２７．４５ｇ、３．６７ｍｏｌ）を滴下し、１０分後、２−トリフルオロメチルピリジン（３６０ｇ、２．４５ｍｏｌ）を滴下した。約２．０〜２．５時間、温度を−６５℃未満に維持しながら、反応物をＮ２下で撹拌した。粉砕したドライアイス上にＮ２下で反応混合物を注ぎ、次いで撹拌しながら（約１．０〜１．５時間）０〜５℃の温度にした後、水（１．８Ｌ）を添加した。反応混合物を５〜１０分間撹拌し、５〜１０℃に温めた。混合物がｐＨ１．０〜２．０に達するまで６Ｎ  ＨＣｌ（９００ｍＬ）を滴下し、次いで混合物を５〜１０℃で１０〜２０分間撹拌した。２５〜３５℃において反応混合物を酢酸エチルで希釈し、次いでブライン溶液で洗浄した。反応物を濃縮し、ｎ−ヘプタンですすぎ、次いで乾燥して、６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸を得た。
【０５６０】
実施例４、工程２：６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸メチルエステルの調製。メタノールを反応容器に窒素雰囲気下で加えた。６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸（１５０ｇ、０．７８５ｍｏｌ）を加え、周囲温度で溶解させた。塩化アセチル（６７．７８ｇ、０．８６３ｍｏｌ）を４５℃未満の温度で滴下した。反応混合物を約２〜２．５時間、６５〜７０℃で維持し、次いで真空下で３５〜４５℃で濃縮し、２５〜３５℃に冷却した。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣ０３溶液ですすぎ、次いでブライン溶液ですすいだ。混合物を真空下で３５〜４５℃で濃縮し、２５〜３５℃に冷却し、次いでｎ−ヘプタンですすぎ、真空下、３５〜４５℃で濃縮し、次いで脱気して褐色固体を取得し、これをｎ−ヘプタンですすぎ、２５〜３５℃で１０〜１５分間撹拌した。懸濁液を撹拌しながら−４０〜−３０℃に冷却し、濾過し、乾燥させて、６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸メチルエステルを得た。
【０５６１】
実施例４、工程３：６−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−１Ｈ−１，３，５−トリアジン−２，４−ジオンの調製。１Ｌの無水エタノールをＮ２雰囲気下で反応容器に入れ、Ｎ２雰囲気下、５０℃未満で金属ナトリウム（１１．２ｇ、０．４８８ｍｏｌ）を分割して加えた。反応物を５〜１０分間攪拌し、次いで５０〜５５℃に加熱した。乾燥ビウレット（１２．５ｇ、０．１２２ｍｏｌ）をＮ２雰囲気下、５０〜５５℃の温度で反応容器に加え、１０〜１５分間攪拌した。５０〜５５℃に維持しながら、６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸メチルエステル（５０．０ｇ、０．２４４ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を加熱還流し（７５〜８０℃）、１．５〜２時間維持し、次いで３５〜４０℃に冷却し、真空下４５〜５０℃で濃縮した。水を加え、混合物を減圧下で濃縮し、３５〜４０℃に冷却し、さらに水を加え、混合物を０〜５℃に冷却した。６ＮのＨＣｌをゆっくり添加することによってｐＨを７〜８に調整し、固体を沈殿させ、これを遠心分離し、水ですすぎ、再び遠心分離した。６−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−１Ｈ−１，３，５−トリアジン−２，４−ジオンの灰白色から淡褐色の固体を６００ｍｍＨｇの圧力下、５０℃〜６０℃で８〜１０時間真空乾燥し、６−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−１Ｈ−１，３，５−トリアジン−２，４−ジオンを得た。
【０５６２】
実施例４、工程４：２，４−ジクロロ−６−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−１，３，５−トリアジンの調製。２０〜３５℃でＰＯＣｌ３（１７５．０ｍＬ）を反応容器に入れ、６−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−１Ｈ−１，３，５−トリアジン−２，４−ジオン（３５．０ｇ、０．１３５５ｍｏｌ）を５０℃未満で分割して加えた。反応混合物をＮ２ガスでパージして５〜２０分間脱気した。五塩化リン（１１２．８６ｇ、０．５４２ｍｏｌ）を５０℃未満で撹拌しながら添加し、得られたスラリーを加熱還流し（１０５〜１１０℃）、３〜４時間維持した。反応混合物を５０〜５５℃に冷却し、５５℃未満で濃縮し、次いで２０〜３０℃に冷却した。反応混合物を酢酸エチルですすぎ、酢酸エチル層を、撹拌及び温度を１０℃未満に維持しながら冷水（温度約５℃）にゆっくりと加えた。混合物を１０〜２０℃の温度で３〜５分間攪拌し、酢酸エチル層を回収した。反応混合物を炭酸水素ナトリウム溶液ですすぎ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。この物質を真空下、４５℃未満で２〜３時間乾燥させて、２，４−ジクロロ−６−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−１，３，５−トリアジンを得た。
【０５６３】
実施例４、工程５：４−クロロ−６−（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−（２−（トリフルオロメチル）−ピリジン−４−イル）−１，３，５−トリアジン−２−アミンの調製。ＴＨＦ（１３５ｍＬ）と２，４−ジクロロ−６−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−１，３，５−トリアジン（２７．０ｇ、０．０９１５ｍｏｌ）の混合物を２０℃〜３５℃で反応容器に加え、４−アミノ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（１６．３１ｇ、０．１００６ｍｏｌ）及び炭酸水素ナトリウム（１１．５２ｇ、０．１３７２ｍｏｌ）を加えた。得られたスラリーを２０〜２４時間、加熱還流（７５〜８０℃）した。反応物を３０〜４０℃に冷却し、ＴＨＦを減圧下、４５℃未満で蒸発させた。反応混合物を２０〜３５℃に冷却し、酢酸エチル及び水ですすぎ、酢酸エチル層を回収し、０．５ＮのＨＣｌ及びブライン溶液ですすいだ。有機層を真空下、４５℃未満で濃縮し、次いでジクロロメタン及びヘキサンですすぎ、濾過し、ヘキサンで洗浄し、真空下、４５〜５０℃で５〜６時間乾燥させて、４−クロロ−６−（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−（２−（トリフルオロメチル）−ピリジン−４−イル）−１，３，５−トリアジン−２−アミンを得た。
【０５６４】
実施例４、工程６：２−メチル−１−（４−（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）−６−（２−（トリフルオロメチル）−ピリジン−４−イルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イルアミノ）プロパン−２−オールの調製。ＴＨＦ（２９０ｍＬ）、４−クロロ−６−（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−（２−（トリフルオロメチル）−ピリジン−４−イル）−１，３，５−トリアジン−２−アミン（２９．０ｇ、０．０６８９３ｍｏｌ）、炭酸水素ナトリウム（８．６８ｇ、０．１０３３ｍｏｌ）、及び１，１−ジメチルアミノエタノール（７．３７ｇ、０．０８２７１ｍｏｌ）を２０〜３５℃で反応容器に加えた。得られたスラリーを１６〜２０時間、加熱還流（７５〜８０℃）した。反応物を３０〜４０℃に冷却し、ＴＨＦを減圧下、４５℃未満で蒸発させた。反応混合物を２０〜３５℃に冷却し、酢酸エチル及び水ですすぎ、酢酸エチル層を回収した。有機層を真空下、４５℃未満で濃縮し、次いでジクロロメタン及びヘキサンですすぎ、濾過し、ヘキサンで洗浄し、真空下、４５〜５０℃で８〜１０時間乾燥させて、２−メチル−１−（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）−６−（２−（トリフルオロメチル）−ピリジン−４−イルアミノ）−１，３，５−トリアジン−２−イルアミノ）プロパン−２−オールを得た。
【０５６５】
実施例５：２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オールメタンスルホネートの調製：
アセトン（４３５．０ｍＬ）及び２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール（８７．０ｇ、０．１８４ｍｏｌ）を２０〜３５℃で反応容器に加えた。別の容器で、撹拌しながら冷（０〜４℃）アセトン（１９１．４ｍＬ）にメタンスルホン酸を１０分間かけて添加してメタンスルホン酸溶液を調製した。ミクロンフィルターを通過させながら、新たに調製したメタンスルホン酸溶液を反応混合物に滴下した。得られたスラリーをヌッチェフィルターで濾過し、アセトンで洗浄した。濾過した物質を、真空を用いて３０〜４０分間乾燥して、２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ］−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オールメタンスルホネートを得た。
【０５６６】
実施例６：２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オールメタンスルホネートの形態３の合成
形態３への結晶化は以下の塩形成によって達成した：１）結晶化装置にアセトン（５００ｍｌ、４．１７ｖｏｌ）を入れ、次いで混合物を１０分間攪拌し（５５０ｒｐｍ）、２）２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オール（１２０．０ｇ、２５３．５ｍｍｏｌ）を、固形チャージャーを介して結晶化装置に４５分間かけて充填し；３）固形チャージャーをアセトン（１００ｍｌ、０．８３ｖｏｌ）ですすぎ；４）反応物を攪拌し（５５０ｒｐｍ）、３５℃に加熱して透明な溶液を得て（１０分で）、５）ＭＳＡ／アセトン溶液（０．３ｍｏｌ／Ｌ、１８．１ｍｌ、３．８ｍｌ／分）の第１の部分（２％）を、ピストンポンプを介して５分間にわたって添加し、次いでポンプのパイプラインをアセトン（５ｍｌ、０．０４ｖｏｌ）で洗浄し、６）溶液を透明に保ちながら、混合物を３５℃で１０〜１５分間エージングさせ、７）２−メチル−１−［（４−［６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］−６−｛［２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル］アミノ｝−１，３，５−トリアジン−２−イル）アミノ］プロパン−２−オールメタンスルホネートシード（実施例２で生成したように２．４ｇ、２ｗｔ％）を透明な溶液に加え、８）ＭＳＡ／アセトン溶液（０．３ｍｏｌ／Ｌ、４４４ｍｌ、３．７ｍｌ／分）の第２の部分（４９％）を２時間にわたって加え、９）混合物を３５℃で３０分間エージングさせ、１０）ＭＳＡ／アセトン溶液（０．３ｍｏｌ／Ｌ、４４４ｍｌ、７．４ｍｌ／分）の第３の部分（４９％）を１時間にわたって加え、１１）混合物を３５℃で２時間エージングさせ、１２）混合物を１時間、２０℃まで冷却し、１３）混合物を濾過し、ケーキをアセトンで洗浄し（２４０ｍｌで２回）、１７）ならびに３０℃で真空乾燥し；形態３の結晶を得た。
【０５６７】
このようにいくつかの実施形態のいくつかの態様を記載してきたが、当業者であれば、様々な変更、修正、及び改良を容易に思い付くであろうことを理解されたい。そのような変更、修正、及び改良は、本開示の一部であることが意図され、本発明の趣旨及び範囲内に含まれることが意図される。したがって、上記の記載及び図面は単なる例示に過ぎない。
【図１】
2018535951.tif 000021
【図２Ａ】
2018535951.tif 000022
【図２Ｂ】
2018535951.tif 000023
【図３】
2018535951.tif 000024
【図４】
2018535951.tif 000025
【図５】
2018535951.tif 000026
【図６】
2018535951.tif 000027
【図７】
2018535951.tif 000028
【図８Ａ−１】
2018535951.tif 000029
【図８Ａ−２】
2018535951.tif 000030
【図８Ｂ−１】
2018535951.tif 000031
【図８Ｂ−２】
2018535951.tif 000032
【図９Ａ−１】
2018535951.tif 000033
【図９Ａ−２】
2018535951.tif 000034
【図９Ｂ−１】
2018535951.tif 000035
【図９Ｂ−２】
2018535951.tif 000036
【図１０】
2018535951.tif 000037
【図１１】
2018535951.tif 000038
【図１２】
2018535951.tif 000039
【図１３】
2018535951.tif 000040
【図１４】
2018535951.tif 000041
【図１５】
2018535951.tif 000042
【国際調査報告】
2018535951.tif 000043
2018535951.tif 000044
2018535951.tif 000045